WO2015056798A1

WO2015056798A1 - ヒドロキサム酸誘導体

Info

Publication number: WO2015056798A1
Application number: PCT/JP2014/077749
Authority: WO
Inventors: 一高島; 剛毒島; 知子石坂
Original assignee: Taisho Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Taisho Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2013-10-18
Filing date: 2014-10-17
Publication date: 2015-04-23
Anticipated expiration: 2016-04-18
Also published as: JP2016210682A; TW201602064A

Abstract

　本発明の課題は、緑膿菌をはじめとするグラム陰性細菌及びその薬剤耐性菌に対して強い抗菌活性を有し、医薬品として有用な新規化合物を提供することである。　本発明は、式［１］で表されるＮ－ヒドロキシ－２－｛［４－（７－ヒドロキシヘプタ－１，３－ジイン－１－イル）ベンゾイル］（メチル）アミノ｝－Ｎ'，２－ジメチルプロパンジアミド又はその薬学的に許容される塩を提供する。

Description

ヒドロキサム酸誘導体

　本発明は、グラム陰性細菌及びその薬剤耐性菌に対して抗菌活性を有する新規なヒドロキサム酸誘導体に関する。また、本発明は、ヒドロキサム酸誘導体を含有する医薬組成物又は抗菌剤に関する。

　グラム陰性細菌には、グラム陽性細菌には存在しない脂質二重層からなる外膜が存在する。したがって、薬剤透過性の問題からグラム陽性細菌と比較して、グラム陰性細菌は強い薬剤抵抗性を有する傾向にある。また、グラム陰性細菌は複数の薬剤排出蛋白を持つことが知られている。非特許文献１には、薬剤排出蛋白も薬剤抵抗性に関与していることが開示されている。さらに、外膜の主要な構成成分の一つであるリポポリサッカライド（ＬＰＳ）は、エンドトキシンとして毒性に大きく関与している。

　グラム陰性細菌の中でも、特に緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）は各種の抗菌薬に自然耐性を示す傾向が強いことが知られている。緑膿菌は自然環境や生活環境中に広く常在するが、健常者には通常病原性を示さない弱毒細菌である。しかし、重篤な基礎疾患を持つ患者や、移植等により免疫抑制剤を使用するいわゆるコンプロマイズドホストといわれる患者、医療用カテーテルや気管挿管、外科手術等の医療行為を行っている患者に対しては、緑膿菌は敗血症等の重篤な急性感染症を引き起こす病原菌となる。それゆえに、緑膿菌は日和見感染症や院内感染症の重要な起因細菌の一つである。
　近年、医療現場において、本来緑膿菌に効果が期待される第３世代セフェム系薬、カルバペネム系薬、又はアミノ配糖体系薬等に耐性を獲得した緑膿菌がしばしば臨床分離されている（非特許文献２）。また、前記３系統薬全てに耐性を獲得した多剤耐性緑膿菌も分離されている（非特許文献３）。
　多剤耐性緑膿菌に感染すると有用な薬剤がほとんどないことから、多剤耐性緑膿菌は、難治性の感染症疾患の起因菌として世界的に大きな問題となっている。そこで、新規作用機序を有する薬剤の開発が切望されている。

　ＵＤＰ－３－Ｏ－アシル－Ｎ－アセチルグルコサミンデアセチラーゼ（ＬｐｘＣ）は、外膜の構成成分であるＬＰＳの疎水性アンカーであるリピドＡの合成を担う酵素である。リピドＡ生合成は１０段階の反応からなる。ＬｐｘＣはその生合成反応の第２段階を触媒し、ＵＤＰ－３－Ｏ－アシル－Ｎ－アセチルグルコサミンのアセチル基を離脱させる（非特許文献４）。リピドＡは外膜形成に必須な成分であり、結果的にグラム陰性細菌の生存に必須である（非特許文献５）。
　すなわち、ＬｐｘＣは、リピドＡ生合成過程において律速となる重要な酵素の一つであり、リピドＡ生合成に必須な酵素である。したがって、ＬｐｘＣの活性を阻害する薬剤は、緑膿菌を含むグラム陰性細菌に対して、特に従来薬剤と異なる作用機序を有することから薬剤耐性緑膿菌に対して有効な抗菌剤になり得ることが強く期待される。

　ＬｐｘＣ阻害剤として、アミド構造を有する阻害剤が特許文献１～１１及び非特許文献６～１３に開示されている。
　これらの中で、マロン酸アミド骨格を有する化合物として、特許文献５には、マロン酸アミド骨格及びジエチニル構造を有する化合物が開示されている。
　また、特許文献９には、ヒドロキシエチル基をジエチニル末端部分に有する化合物２３５が開示されている。

国際公開第２００４／０６２６０１号国際公開第２００７／０６９０２０号国際公開第２００８／１５４６４２号国際公開第２０１０／０３１７５０号国際公開第２０１１／１３２７１２号国際公開第２０１２／１５４２０４号国際公開第２０１３／０３９９４７号国際公開第２０１３／１７００３０号国際公開第２０１３／１７０１６５号国際公開第２０１４／１４２２９８号国際公開第２０１４／１６５０７５号

Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ（２００２）Ｍａｒ　１，３４，ｐ．６３４－６４０．Ｊ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．（２００３）Ｊａｎ　１４，５１，ｐ．３４７－３５２．Ｊｐｎ．Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ（２００６），５９（５），ｐ．３５５－３６３．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．（１９９５）Ｄｅｃ　２２，２７０，ｐ．３０３８４－３０３９１．Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．（１９８７），１６９，ｐ．５４０８－５４１５Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２００２），４５，ｐ３１１２－３１２９．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ（２００７），１０４，ｐ１８４３３－１８４３８．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．（２０１１），１８，ｐ３８－４７．Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２０１１），１９，ｐ８５２－８６０．Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．（２０１１），２１，ｐ１１５５－１１６１．ＣｕｒｒｅｎｔＭｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２０１２），１９，ｐ２０３８－２０５０．Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．（２０１３），２３，ｐ２３６２－２３６７．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２０１３），５６，ｐ６９５４－６９６６．

　しかしながら、特許文献５で開示されている化合物は全て、芳香族環又はシクロプロピル基といった環構造をジエチニル末端部分に有している。特許文献５には、直鎖アルキル構造をジエチニル末端部分に有する化合物は開示されていない。また、特許文献５には、ヒドロキシ基をジエチニル末端部分に持つ化合物も開示されていない。

　本発明の課題は、緑膿菌をはじめとするグラム陰性細菌及びその薬剤耐性菌に対して強い抗菌活性を有し、医薬品として有用な新規化合物を提供することである。

　本発明者らは鋭意研究を進めた結果、ジエチニル末端部分に３－ヒドロキシプロピル基を有する、下記式［１］

で表されるＮ－ヒドロキシ－２－｛［４－（７－ヒドロキシヘプタ－１，３－ジイン－１－イル）ベンゾイル］（メチル）アミノ｝－Ｎ’，２－ジメチルプロパンジアミドが上記課題を解決し得ることを見出し、本発明を完成した。

　本発明は、以下のとおりである。
（１）
　式［１］

で表されるＮ－ヒドロキシ－２－｛［４－（７－ヒドロキシヘプタ－１，３－ジイン－１－イル）ベンゾイル］（メチル）アミノ｝－Ｎ’，２－ジメチルプロパンジアミドである化合物又はその薬学的に許容される塩。
（２）
　式［２］

で表される（２Ｓ）－Ｎ－ヒドロキシ－２－｛［４－（７－ヒドロキシヘプタ－１，３－ジイン－１－イル）ベンゾイル］（メチル）アミノ｝－Ｎ’，２－ジメチルプロパンジアミドである化合物又はその薬学的に許容される塩。
（３）
　前記（１）又は（２）に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を含有する医薬組成物。
（４）
　前記（１）又は（２）に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を含有する抗菌剤。

　本発明の新規なヒドロキサム酸誘導体は、緑膿菌をはじめとするグラム陰性細菌及びその薬剤耐性菌に強い抗菌活性を有する。

　以下、本発明を実施するための形態について以下詳細に説明する。なお、本発明は、以下の実施形態に限定されるものではなく、その要旨の範囲内で種々変形して実施することができる。

　本発明において、「薬学的に許容される塩」とは、細菌感染症の化学療法及び予防において使用される塩を意味する。
　「薬学的に許容される塩」としては、例えば、酢酸、プロピオン酸、酪酸、ギ酸、トリフルオロ酢酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、ステアリン酸、コハク酸、エチルコハク酸、マロン酸、ラクトビオン酸、グルコン酸、グルコヘプトン酸、安息香酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、２－ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、パラトルエンスルホン酸（トシル酸）、ラウリル硫酸、リンゴ酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、アジピン酸、システイン、Ｎ－アセチルシステイン、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、ヨウ化水素酸、ニコチン酸、シュウ酸、ピクリン酸、チオシアン酸、ウンデカン酸、アクリル酸ポリマー及びカルボキシビニルポリマー等の酸との塩、モルホリン及びピペリジン等の有機アミンとの塩、並びにアミノ酸との塩などが挙げられる。
　「薬学的に許容される塩」としては、無機塩基との塩であってもよい。無機塩基との塩としては、例えば、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩及びカルシウム塩などが挙げられる。

　本発明の化合物（以下、「本発明の化合物」とは、式［１］で表される化合物、式［２］で表される化合物又はそれらの薬学的に許容される塩である場合を含む意味で用いる。）は、水和物を形成していてもよく、溶媒和物を形成していてもよい。本発明の化合物が水和物又は溶媒和物を形成する場合、それらも本発明の範囲内に含まれる。
　本発明の化合物が「溶媒和物」を形成する場合の「溶媒」とは特に示さない限り、例えば極性溶媒（例えば、メタノール、エタノール、１－プロパノール、２－プロパノール及びブタノール等のアルコール系溶媒並びに酢酸エチル等）、不活性溶媒（例えば、クロロホルム及び塩化メチレン等のハロゲン化炭化水素系溶媒、ジエチルエーテル、イソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン及びジオキサン等のエーテル系溶媒、ジメチルホルムアミド及びジメチルアセトアミド等のアミド系溶媒、ジメチルスルホキシド及びアセトニトリル等の非プロトン性溶媒、トルエン等の芳香族炭化水素類並びにヘキサン及びシクロヘキサン等の炭化水素類など）、２－ブタノン及びアセトンなどを意味する。
　「溶媒」としては、ここに例示した溶媒の混合溶媒であってもよい。

　本発明において、「抗菌剤」とは、グラム陽性細菌やグラム陰性細菌といった細菌に作用してその生育を抑制又は殺菌する能力を持つ物質を意味する。菌の繁殖を抑えたり、一部の菌を殺してその数を減少させたりするようなものでもよい。
　グラム陽性細菌としては、例えば、ブドウ球菌属（黄色ブドウ球菌及び表皮ブドウ球菌等）、連鎖球菌属（化膿連鎖球菌、Ｂ群連鎖球菌及び肺炎球菌等）、腸球菌属（エンテロコッカス・フェカーリス及びエンテロコッカス・フェシウム等）などが挙げられる。
　グラム陰性細菌としては、例えば、シュードモナス属（緑膿菌等）、大腸菌属（大腸菌等）、クレブシエラ属（肺炎桿菌及びクレブシエラ・オキシトカ等）、ヘモフィルス属（インフルエンザ菌及びパラインフルエンザ菌等）、ボルデテラ属（百日咳菌及び気管支敗血症菌等）、セラチア属（セラチア・マルセッセンス等）、プロテウス属（プロテウス・ブルガリス及びプロテウス・ミラビリス等）、エンテロバクター属（エンテロバクター・エアロジェネシス及びエンテロバクター・クロアカ等）、カンピロバクター属（カンピロバクター・ジェジュニ等）、シトロバクター属（シトロバクター・フレウンディ等）、プロビデンシア属（プロビデンシア・スチュアーティ等）、ステノトロフォモナス属（ステノトロフォモナス・マルトフィリア等）、ビブリオ属（腸炎ビブリオ及びコレラ菌等）、モルガネラ属（モルガネラ・モルガニ等）、サルモネラ属（チフス菌及びパラチフス菌等）、シゲラ属（赤痢菌等）、アシネトバクター属（アシネトバクター・バウマニー及びアシネトバクター・カルコアセチカス等）、レジオネラ属（レジオネラ・ニューモフィラ等）、バクテロイデス属（バクテロイデス・フラジリス等）、ナイセリア属（淋菌及び髄膜炎菌等）、モラキセラ属（モラキセラ・カタラーリス等）、クラミジア属（クラミジア・トラコマティス及びクラミジア・シッタシー等）及びヘリコバクター属（ヘリコバクター・ピロリ等）などが挙げられる。本発明の化合物はグラム陰性細菌への抗菌剤として好ましく使用することができる。

　本発明の下記式［１］

で表されるＮ－ヒドロキシ－２－｛［４－（７－ヒドロキシヘプタ－１，３－ジイン－１－イル）ベンゾイル］（メチル）アミノ｝－Ｎ’，２－ジメチルプロパンジアミドには光学異性体が存在しうるが、式［１］で表される化合物には、それら光学異性体及び光学異性体の混合物が含まれる。医薬組成物や抗菌剤は、特定の光学異性体を含有してもよいし、光学異性体の混合物、とりわけラセミ体を含有してもよい。
　本発明には、式［１］で表される化合物及びその薬学的に許容される塩が含まれ、式［１］で表される化合物及びその薬学的に許容される塩の結晶多形も含まれる。

　本発明の好ましい光学異性体は、下記式［２］

で表される（２Ｓ）－Ｎ－ヒドロキシ－２－｛［４－（７－ヒドロキシヘプタ－１，３－ジイン－１－イル）ベンゾイル］（メチル）アミノ｝－Ｎ’，２－ジメチルプロパンジアミドである。
　本発明には、式［２］で表される化合物及びその薬学的に許容される塩が含まれ、式［２］で表される化合物及びその薬学的に許容される塩の結晶多形も含まれる。

　本発明の化合物は、一つ又は二つ以上の医薬的に許容される担体、賦形剤又は希釈剤と組み合せて医薬組成物とすることができる。
　上記担体、賦形剤及び希釈剤として、例えば、水、乳糖、デキストロース、フラクトース、ショ糖、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、デンプン、ガム、ゼラチン、アルギネート、ケイ酸カルシウム、リン酸カルシウム、セルロース、水シロップ、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、アルキルパラヒドロキシベンゾソルベート、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、グリセリン及び各種油（ゴマ油、オリーブ油及び大豆油等）などが挙げられる。
　医薬組成物には、上記担体、賦形剤又は希釈剤に必要に応じて一般に使用される増量剤、結合剤、崩壊剤、ｐＨ調整剤、溶解剤及び着香剤等の添加剤を混合してもよい。
　医薬組成物は、常用の製剤技術によって錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤、粉剤、液剤、乳剤、懸濁剤、軟膏剤、注射剤（筋肉内注射剤及び静脈内注射剤を含む）、点滴静注剤及び皮膚貼付剤等の経口又は非経口用医薬として調製することができる。

　本発明の化合物は、成人患者に対して３０～３０００ｍｇ、好ましくは１００～１５００ｍｇを１日１回又は数回に分けて非経口又は経口で投与することが可能である。好ましい投与形態は、点滴静脈内注射又は静脈内注射であり、より好ましい投与形態は点滴静脈内注射である。投与量は治療対象となる疾病の種類、患者の年齢、体重及び症状などに応じて、適宜増減することが可能である。また、本発明の化合物は、他の薬剤との組み合わせで使用することも可能である。

　以下に、実施例及び試験例により本発明をさらに詳細に説明する。本発明はこれらの実施例によって何ら限定されるものではない。特に、本発明における化合物１の合成法は以下の方法に限定されず、各工程の順序を入れ替える、官能基の保護・脱保護を経るなど、当業者に周知の方法を用いて合成することもできる。

　ＭＳ（マススペクトル）はＬＣＭＳ－ＩＴ－ＴＯＦ　（Ｓｈｉｍａｄｚｕ）の装置にて測定した。イオン化法としては、ＥＳＩ（Ｅｌｅｃｔｒｏｓｐｒａｙ　Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ、エレクトロスプレーイオン化）法又は、ＥＳＩとＡＰＣＩ（Ａｔｍｏｓｐｈｅｒｉｃ　Ｐｒｅｓｓｕｒｅ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ、大気圧化学イオン化）法とのデュアルイオン化法を用いた。データは実測値（ｆｏｕｎｄ）を記載した。通常、分子イオンピークが観測されるが、水酸基（－ＯＨ）を有する化合物の場合、フラグメントピークとしてＨ_２Ｏが脱離したピークが観測されることもある。塩の場合は、通常、フリー体の分子イオンピーク若しくはフラグメントイオンピークが観測される。

　高速液体クロマトグラフィーマススペクトル（ＬＣＭＳ）は、以下の条件を用いた。
測定機械：Ａｇｉｌｅｎｔ社　Ａｇｉｌｅｎｔ１２９０及びＡｇｉｌｅｎｔ社　Ａｇｉｌｅｎｔ６１３０
カラム：Ｗａｔｅｒｓ社　Ａｃｑｕｉｔｙ　ＵＰＬＣ^(R) 　ＣＳＨ^ＴＭ　Ｃ１８　１．７μｍ　２．１ｘ５０ｍｍ
イオン化法：電子衝撃イオン化法ＥｌｅｃｔｒｏｎＳｐｒａｙＩｏｎｉｚａｔｉｏｎ：ＥＳＩ）
溶媒：Ａ液；０．１％ぎ酸含有水、Ｂ液；０．１％ぎ酸含有アセトニトリル
（条件１）
流速：０．８ｍＬ／ｍｉｎ
グラジエント：０分（Ａ液／Ｂ液＝８０／２０）、１．２分（Ａ液／Ｂ液＝８０／２０）、１．４分（Ａ液／Ｂ液＝１／９９）
（条件２）
流速：０．８ｍＬ／ｍｉｎ（０分－１．２分）、１．０ｍＬ／ｍｉｎ（１．２分－１．３８分）
グラジエント：０分（Ａ液／Ｂ液＝９５／５）、１．２分（Ａ液／Ｂ液＝５０／５０）、１．３８分（Ａ液／Ｂ液＝３／９７）

　ＮＭＲスペクトルはプロトンＮＭＲを示し、内部基準としてテトラメチルシランを用いて、δ値をｐｐｍで示した。
　ＯＨ型シリカゲルクロマトグラフィー及びＮＨ型シリカゲルクロマトグラフィーにおける担体は、グレースジャパン株式会社製ＲＥＶＥＬＥＲＩＳ^ＴＭなどのパックドカラムを用いた。フェーズセパレーターは、バイオタージ株式会社製のものを用いた。

　実施例中の略号を以下に示す。
ＡｃＯＥｔ：酢酸エチル
ＣｕＩ：ヨウ化銅
ＩＰＥ：ジイソプロピルエーテル
ＭｅＯＨ：メタノール
ＮＢＳ：Ｎ－ブロモコハク酸イミド
ＰｄＣｌ_２（ＰＰｈ_３）_２：ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド
スーパースティブルパラジウム：トリス｛トリス［３，５－ビス（トリフルオロメチル）フェニル］ホスフィン｝パラジウム
ｐ－ＴｓＯＨ・Ｈ_２Ｏ：ｐ－トルエンスルホン酸一水和物
ＴＥＡ：トリエチルアミン
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ｓ：シングレット
ｂｒ．ｓ．：ブロードシングレット（幅広いシングレット）
ｍ：マルチプレット

実施例１
（２Ｓ）－Ｎ－ヒドロキシ－２－｛［４－（７－ヒドロキシヘプタ－１，３－ジイン－１－イル）ベンゾイル］（メチル）アミノ｝－Ｎ’，２－ジメチルプロパンジアミド（化合物１）

（１）窒素雰囲気下、特許文献５（国際公開第２０１１／１３２７１２号）に記載の方法で得られた（２Ｓ）－２－［（４－ヨードベンゾイル）（メチル）アミノ］－Ｎ，２－ジメチル－Ｎ’－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イルオキシ）プロパンジアミド（１９．２ｇ）のＴＨＦ（２００ｍＬ）懸濁液に室温でＣｕＩ（０．２９９ｇ）、ＰｄＣｌ_２（ＰＰｈ_３）_２（０．５５１ｇ）及びＴＥＡ（１０．９ｍＬ）を加えた。その後、トリメチルシリルアセチレン（５．０１ｇ）を５分間かけて加え、室温で２時間撹拌した。反応混合物をＮＨ型シリカゲル（クロロホルム／ＭｅＯＨ＝９５／５）でろ過、濃縮して得られた残渣をＯＨ型シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＡｃＯＥｔ＝１００／０→０／１００）で精製して得られた淡橙色固体をＩＰＥで洗浄、乾燥して（２Ｓ）－Ｎ，２－ジメチル－２－（メチル｛４－［（トリメチルシリル）エチニル］ベンゾイル｝アミノ）－Ｎ’－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イルオキシ）プロパンジアミド（１７．６ｇ、無色固体、９７％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ／ＡＰＣＩ　ｄｕａｌ）：ｍ／ｚ＝４８２（Ｍ＋Ｎａ）^＋，４５８（Ｍ－Ｈ）^－
¹H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 0.26 (9H, s), 1.48 - 1.90 (6H m), [1.80], 1.81 (3H , s), 2.82 - 2.87 (3H, m), [3.13], 3.15 (3H, s), 3.50 - 3.69 (1H, m), 3.82 - 4.05 (1H, m), 4.92 - 5.01 (1H, m), 7.41 - 7.48 (2H, m), 7.48 - 7.54 (2H, m), [6.99], 7.62 (1H, br. s.), [10.06], 10.47 (1H, s)

（２）実施例１－（１）で得られた化合物（１７．１ｇ）のＭｅＯＨ（２５０ｍＬ）溶液に氷冷下で炭酸カリウム（５．１４ｇ）を加え、同温で５０分間撹拌後、室温に昇温して１時間撹拌した。反応混合物を、飽和塩化アンモニウム水溶液（１．０Ｌ）とクロロホルム（１．０Ｌ）の混合物に加えて有機層を分離し、水層をクロロホルム（０．５Ｌ）で抽出した。合わせた有機層を、乾燥（無水硫酸マグネシウム）、ろ過、濃縮して得られた粗精製物をＯＨ型シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＡｃＯＥｔ＝８０／２０→０／１００）で精製して得られた淡橙色固体をＩＰＥで洗浄、乾燥して（２Ｓ）－２－［（４－エチニルベンゾイル）（メチル）アミノ］－Ｎ，２－ジメチル－Ｎ’－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イルオキシ）プロパンジアミド（１２．４ｇ、無色固体、８６％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ／ＡＰＣＩ　ｄｕａｌ）：ｍ／ｚ＝４１０（Ｍ＋Ｎａ）^＋，３８６（Ｍ－Ｈ）^－
¹H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.49 - 1.91 (6H, m), [1.80], 1.81 (3H, s), 2.83 - 2.87 (3H, m), 3.12 - 3.19 (1H, m), [3.14], 3.16 (3H, s), 3.53 - 3.69 (1H, m), 3.83 - 4.05 (1H, m), 4.93 - 5.01 (1H, m), 7.44 - 7.51 (2H, m), 7.52 - 7.57 (2H, m), [6.98], 7.62 (1H, br. s.), [10.06], 10.47 (1H, s)

（３）ＮＢＳ（６．６２ｇ）とトリフルオロ酢酸銀（３４２ｍｇ）のアセトン（５０ｍＬ）混合物に氷冷下で、実施例１－（２）で得られた化合物（１２．０ｇ）のアセトン（１５０ｍＬ）混合物を滴下し、同温で１．５時間撹拌した。反応混合物を飽和重曹水（６００ｍＬ）に加えて０．５時間撹拌後、クロロホルム（６００ｍＬ）を加えて不溶物をろ過し、有機層を分離した。水層をクロロホルム（１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を、乾燥（無水硫酸マグネシウム）、ろ過、濃縮した。得られた残渣に水（５００ｍＬ）を加えた懸濁液を１．５時間撹拌後、ろ過、洗浄（水、５００ｍＬ）した。得られた淡橙色固体をクロロホルム（５００ｍＬ）に溶解した。得られたクロロホルム溶液を水（２００ｍＬ）で洗浄し、乾燥（無水硫酸マグネシウム）、ろ過、濃縮した。得られた淡橙色固体をＯＨ型シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／ＭｅＯＨ＝１００／０→９０／１０）で精製後、再結晶（ＡｃＯＥｔ／ＩＰＥ）して（２Ｓ）－２－｛［４－（ブロモエチニル）ベンゾイル］（メチル）アミノ｝－Ｎ，２－ジメチル－Ｎ’－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イルオキシ）プロパンジアミド（８．０２ｇ、５６％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ／ＡＰＣＩ　ｄｕａｌ）：ｍ／ｚ＝４８８（Ｍ＋Ｎａ）^＋，４６４（Ｍ－Ｈ）^－
¹H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.46 - 1.90 (6H, m), [1.80], 1.81 (3H, s), 2.82 - 2.87 (3H, m), [3.14], 3.16 (3H, s), 3.52 - 3.68 (1H, m), 3.82 - 4.04 (1H, m), 4.92 - 5.01 (1H, m), 7.42 - 7.53 (4H, m), [6.97], 7.61 (1H, br. s.), [10.05], 10.47 (1H, s)

（４）スーパースティブルパラジウム（６８２ｍｇ）及びＣｕＩ（６１ｍｇ）のアセトニトリル溶液（４０ｍＬ）にペント－４－イン－１－オール（１．１９ｍＬ）及びＴＥＡ（２．７０ｍＬ）のアセトニトリル（３０ｍＬ）溶液を加え、実施例１－（３）で得られた化合物（３．０ｇ）のアセトニトリル溶液（４０ｍＬ）を滴下し、窒素雰囲気下、室温で４時間した。反応液を減圧下濃縮し、得られた残留物をNH型シリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム／ＭｅＯＨ＝１００／０→９０／１０）、ＯＨ型シリカゲルクロマトグラフィー（ＡｃＯＥｔ／ＭｅＯＨ＝１００／０）及びＯＨ型シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／ＡｃＯＥｔ＝５０／５０→０／１００）にて精製して、（２Ｓ）－２－｛［４－（７－ヒドロキシヘプタ－１，３－ジイン－１－イル）ベンゾイル］（メチル）アミノ｝－Ｎ，２－ジメチル－Ｎ’－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イルオキシ）プロパンジアミド（１．６９ｇ、黄色泡状物、５６％）を得た。
ＬＣＭＳ保持時間：０．８５分（条件１）
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝４６８（Ｍ－Ｈ）^－
¹H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.75 - 1.90 (2H, m), [1.80], 1.81 (3H, s), 2.46 - 2.56 (2H, m), 2.81 - 2.89 (3H, m), [3.14], 3.17 (3H, s), 3.52 - 3.60 (1H, m), 3.61 - 3.69 (1H, m), 3.75 - 3.82 (2H, m), 3.82 - 3.91 (1H, m), 3.96 - 4.05 (1H, m), 4.91 - 5.03 (1H, m), 7.42 - 7.55 (4H, m), [6.97], 7.62 (1H, br. s.), [10.04], 10.46 (1H, br. s.)

（５）実施例１－（４）で得られた化合物（１．６９ｇ）のＭｅＯＨ（３０ｍＬ）溶液にｐ－ＴｓＯＨ・Ｈ_２Ｏ（３４３ｍｇ）を加え、室温で１時間攪拌した。反応液を氷冷後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（２ｍＬ）及び水（４０ｍＬ）を加え、クロロホルム／ＴＨＦ／ＭｅＯＨ＝７５／１５／１０で抽出した（４０ｍＬ×６回）。水層に塩化ナトリウムを飽和するまで加え、クロロホルム／ＴＨＦ／ＭｅＯＨ＝７５／１５／１０で再度抽出し（４０ｍＬ×６回）、フェーズセパレーターにて有機層を分け減圧下留去した。得られた残留物をＯＨ型シリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム／ＭｅＯＨ＝９９／１→９０／１０）にて精製して、（２Ｓ）－Ｎ－ヒドロキシ－２－｛［４－（７－ヒドロキシヘプタ－１，３－ジイン－１－イル）ベンゾイル］（メチル）アミノ｝－Ｎ’，２－ジメチルプロパンジアミド（化合物１、１．１４ｇ、黄色泡状物、８２％）を得た。
ＬＣＭＳ保持時間：１．００分（条件２）
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝３８４（Ｍ－Ｈ）^－
¹H NMR (600 MHz, CD₃OD) δ ppm 1.73 - 1.81 (2H, m), 1.76 (3H, s), 2.46 - 2.51 (2H, m), 2.78 (3H, s), 3.13 (3H, s), 3.63 - 3.68 (2H, m), 7.49 - 7.59 (4H, m)

　本発明化合物の作用は以下の試験により確認された。

試験例１　抗菌活性評価試験
　最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）測定はＣＬＳＩ（クリニカル　アンド　ラボラトリー　スタンダーズ　インスティテュート）標準法に準じ、下記に示す微量液体希釈法を用いた。
　Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ　ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌｉａ　ＡＴＣＣ３３１５２については、ＢＣＹＥ寒天培地で７２時間培養した被検菌体を掻き取り、マクファーランド０．５相当に懸濁し、得られた懸濁液を１０倍に希釈して接種菌液とした。接種菌液０．００５ｍＬを、被検化合物を含む、ＢＹＥα培地に接種し、３５℃にて７２時間培養した。
　Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ　ｉｎｆｌｕｅｎｚａ　ＡＴＣＣ４３０９５については、チョコレートＩＩ寒天培地で２４時間培養した被検菌体を掻き取り、マクファーランド０．５相当に懸濁し、得られた懸濁液を１０倍に希釈して接種菌液とした。接種菌液０．００５ｍＬを、被検化合物を含む、ＨＴＭ培地に接種し、３５℃にて２２時間培養した。
　上述の菌株以外の菌株については、ハートインフュージョン寒天培地で１晩培養した被検菌体を掻き取り、マクファーランド０．５相当に懸濁し、得られた懸濁液を１０倍に希釈して接種菌液とした。接種菌液０．００５ｍＬを、被検化合物を含む、カチオン調整ミューラーヒントン培地、または終濃度が５％となるようにヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）を添加したカチオン調整ミューラーヒントン培地に接種し、３５℃にて１８時間培養した。菌の発育が肉眼的に認められない最小の薬剤濃度をもってＭＩＣとした。
　化合物１の試験結果を表１に示した。

試験例２　感受性分布試験
　緑膿菌３０株及び肺炎桿菌２７株の臨床分離株の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）を測定し、９０％の菌株の発育を阻止したＭＩＣをＭＩＣ_９０として算出した。各臨床分離株のＭＩＣ測定は試験例１で示したものと同様に行った。
　化合物１のＭＩＣ_９０は、緑膿菌では２μｇ／ｍＬであり、肺炎桿菌では４μｇ／ｍＬであった。

試験例３　感染動物における薬理効果試験
　細菌として、緑膿菌ＴＳ８８株（臨床分離株）を用いた。ハートインフュージョン寒天培地で１晩培養した菌体を掻き取り、生理食塩液に懸濁してマクファーランド３.５相当となるように調製した。得られた懸濁液を３ｗ／ｖ％ムチン含有生理食塩液にて約６ｘ１０^５ＣＦＵ／ｍＬとなるよう希釈し、接種菌液とした。マウス（ＩＣＲ系、雄性、４．５週齢）に接種菌液０．５ｍＬを腹腔内接種して感染させ、接種１時間後に化合物１（６．２５ｍｇ／ｋｇ）又は媒体（１１ｗ／ｖ％β－シクロデキストリンスルホブチルエーテルナトリウム塩（カプチゾル：登録商標、Ｌｉｇａｎｄ社））を静脈内投与した。
　化合物１投与群での接種３日後における生存率は１００％（８例中８例生存）、媒体投与群での生存率は０％（８例全例死亡）であった。

試験例４　麻酔下モルモット心血管系に対する安全性薬理試験
　化合物１の０（対照）及び１５０ｍｇ／ｋｇを５０分間で麻酔下モルモットに静脈内持続投与（５ｍＬ／ｋｇ／５０ｍｉｎ）し、心電図に対する影響を検討した。対照群には、１１％カプチゾル（登録商標、Ｌｉｇａｎｄ社）（ｐＨ９）を同様に投与した。人工呼吸及びペントバルビタール麻酔下において、心電計を用いて四肢標準誘導（第ＩＩ誘導）心電図を測定し、試験物質投与開始１５分前から投与終了３０分後まで５分間隔で解析を実施した。Ｂａｚｅｔｔ式（ＱＴｃＢ＝ＱＴ／√ＲＲ）を用いて補正ＱＴｃＢを求め、ベースライン値［試験物質の投与前３ポイント（－１５、－１０及び－５分）の平均値］からの変化率（ΔＱＴｃＢ）を算出した。
　化合物１の投与終了時のΔＱＴｃＢは＋２．０％、最大で＋３．２％（投与開始後４０分）であり（対照群：－２．８～－１．１％）、ＱＴｃＢについて被験物質投与による明らかな影響は認められなかった。化合物１は安全性にも優れることが確認できた。

　本発明の新規なヒドロキサム酸誘導体は、緑膿菌をはじめとするグラム陰性細菌及びその薬剤耐性菌に強い抗菌活性を有し、医薬品として利用することができる。

Claims

　式［１］

で表されるＮ－ヒドロキシ－２－｛［４－（７－ヒドロキシヘプタ－１，３－ジイン－１－イル）ベンゾイル］（メチル）アミノ｝－Ｎ’，２－ジメチルプロパンジアミドである化合物又はその薬学的に許容される塩。
　式［２］

で表される（２Ｓ）－Ｎ－ヒドロキシ－２－｛［４－（７－ヒドロキシヘプタ－１，３－ジイン－１－イル）ベンゾイル］（メチル）アミノ｝－Ｎ’，２－ジメチルプロパンジアミドである化合物又はその薬学的に許容される塩。
　請求項１又は２に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を含有する医薬組成物。
　請求項１又は２に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を含有する抗菌剤。