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WO2012026346A1 - 細胞保護剤 - Google Patents

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WO2012026346A1
WO2012026346A1 PCT/JP2011/068424 JP2011068424W WO2012026346A1 WO 2012026346 A1 WO2012026346 A1 WO 2012026346A1 JP 2011068424 W JP2011068424 W JP 2011068424W WO 2012026346 A1 WO2012026346 A1 WO 2012026346A1
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WO
WIPO (PCT)
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lactic acid
cytoprotective agent
cells
culture supernatant
streptococcus thermophilus
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PCT/JP2011/068424
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直樹 伊澤
智子 倉澤
俊郎 曽根
勝由 千葉
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Yakult Honsha Co Ltd
Original Assignee
Yakult Honsha Co Ltd
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Publication date
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Priority to CN201180033686.9A priority patent/CN103118687B/zh
Priority to JP2012530623A priority patent/JPWO2012026346A1/ja
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    • A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/52—Stabilizers
    • A61K2800/522—Antioxidants; Radical scavengers

Definitions

  • the present invention relates to a cytoprotective agent, and more particularly to a cytoprotective agent containing a low molecular fraction in a culture supernatant of lactic acid bacteria belonging to Streptococcus thermophilus as an active ingredient.
  • the culture supernatant of lactic acid bacteria that is, the culture obtained by inoculating lactic acid bacteria in a medium mainly composed of milk contains a component having an effect as a skin external preparation.
  • the culture supernatant of lactic acid bacteria has an antioxidant effect and a photoprotective effect (Patent Document 1, Non-Patent Documents 1 and 2).
  • the wrinkle formation inhibitory action of this thing is known (patent document 2), and it is also known that there exists a component which has a cell proliferation action in a lactic acid bacteria extract (patent document 3).
  • the active ingredients contained in the culture supernatant are expected to vary widely, and in order to be used as active ingredients in cosmetics and external preparations, they are particularly active depending on the purpose. Since it is advantageous to select and use a part, research on lactic acid bacteria culture supernatants and lactic acid bacteria extracts has been advanced, and detection of components having more excellent effects has been demanded.
  • an object of the present invention is to find a novel and useful component from the culture supernatant of lactic acid bacteria and to provide an effective utilization method of the component.
  • the present inventor has examined the active ingredients contained in various lactic acid bacteria culture supernatants, and found excellent cell protection in the low molecular fraction of the lactic acid bacteria culture supernatants belonging to Streptococcus thermophilus.
  • the present invention was completed by finding that a substance having an effect exists.
  • the present invention provides a cytoprotective agent comprising a low molecular fraction in the culture supernatant of lactic acid bacteria belonging to Streptococcus thermophilus as an active ingredient.
  • the present invention also provides a skin external preparation containing the cytoprotective agent.
  • the present invention provides a method for protecting skin cells, which comprises applying a low molecular fraction in a culture supernatant of lactic acid bacteria belonging to Streptococcus thermophilus on the skin for the purpose of protection. .
  • the cytoprotective agent of the present invention even when cells such as skin are exposed to hydroxy radicals or the like, the cells can be protected from this, and the number of cells and the excess cells that are subsequently generated are reduced. Without causing production, it is possible to prevent thickening of the skin, inflammation of the skin, dryness of the skin, formation of wrinkles due to dryness, decrease in elasticity, generation and exacerbation of spots.
  • FIG. 2 is a drawing showing the results of HPLC of the dialysate obtained in Example 1.
  • 2 is a drawing showing the results of HPLC of the dialysate obtained in Example 2.
  • a, b and c are the same as above.
  • the low molecular fraction of the lactic acid bacteria culture supernatant which is an active ingredient of the cytoprotective agent of the present invention, is produced by culturing lactic acid bacteria belonging to Streptococcus thermophilus in a medium and removing solids from the obtained culture.
  • the obtained lactic acid bacteria culture supernatant is further subjected to ultrafiltration and the like, and a fraction having a molecular weight of 20,000 Da or less is collected.
  • the lactic acid bacteria belonging to Streptococcus thermophilus used here include Streptococcus thermophilus YIT2001 strain (FERM BP-7538, date of deposit: January 31, 2001), Streptococcus thermophilus. (Streptococcus thermophilus) YIT2084 strain (FERM BP-10879, deposit date: August 18, 2006) and the like can be used, and these can be used alone or in plural.
  • these strains belonging to Streptococcus thermophilus can be found at the National Institute of Advanced Industrial Science and Technology, Patent Biological Depositary Center (Japan, 1-1-1 Higashi 1-chome, Tsukuba City, Ibaraki Prefecture, Japan, postal code 305-8565). It has been deposited.
  • animal milk such as human milk, cow milk, goat milk, dairy products such as skim milk, reduced milk from milk powder or skim milk powder, cream, etc.
  • dairy products such as skim milk, reduced milk from milk powder or skim milk powder, cream, etc.
  • processed soybean products such as soy milk, but it is desirable that the medium is mainly composed of milk.
  • these media may be separately mixed with commonly used components for the purpose of supplementing nutrient sources in the cultivation of lactic acid bacteria.
  • examples of such substances include yeast extracts, chlorella extracts, vitamins A, vitamins B, vitamins C, vitamins E, etc., proteolysates containing various peptides, amino acids, salts of calcium, magnesium, etc. Can be mentioned.
  • Cultivation of lactic acid bacteria belonging to Streptococcus thermophilus using the medium may be carried out according to a conventional method.
  • a culture temperature of 30 ° C. to 45 ° C., more preferably 37 ° C. to 42 ° C., for 1 hour
  • the culture time is ⁇ 48 hours, more preferably 4 hours to 24 hours.
  • other culture conditions at this time include standing, stirring, shaking, aeration, and the like, and a method suitable for culture may be appropriately selected from these.
  • the lactic acid bacteria culture supernatant used in the present invention can be obtained by removing solids from the lactic acid bacteria culture obtained as described above according to conventional methods such as filtration and centrifugation. Moreover, the low molecular fraction of the lactic acid bacteria culture supernatant can be obtained by removing those having a molecular weight greater than 20,000 Da from the lactic acid bacteria culture supernatant by a conventional method of ultrafiltration or gel filtration.
  • the cytoprotective agent of the present invention thus obtained can be added to cells before or during exposure to a damaging substance such as hydrogen peroxide, thereby suppressing a decrease in the number of cells due to damaging substance exposure.
  • a damaging substance such as hydrogen peroxide
  • the details of the mechanism of the cytoprotective effect are unclear, since the effect is exhibited even when the cytoprotective agent of the present invention does not coexist with the cell at the time of exposure to the damaging substance, the cell of the present invention is exhibited. It is considered that one of the mechanisms is that the protective agent imparts damage resistance to the cell itself.
  • the above-mentioned damaging substances are not particularly limited, and active oxygen such as hydroxy radical, hydrogen peroxide, singlet oxygen, superoxide and the like can be mentioned.
  • active oxygen such as hydroxy radical, hydrogen peroxide, singlet oxygen, superoxide and the like can be mentioned.
  • Various damage factors such as exposure to ultraviolet rays, radiation or mutagenic substances, stress, and smoking, which induce a decrease in the number of cells, are also included in the damaged substances.
  • the cells to be targeted by the cytoprotective agent of the present invention are not particularly limited as long as they are biological cells that may be exposed to a damaging substance.
  • epidermal cells dendritic cells, fibroblasts, mast cells, Examples include plasma cells, Langerhans cells, vascular endothelial cells and the like. Among these, it can be suitably used for skin cells, particularly fibroblasts.
  • Streptococcus thermophilus YIT2001 strain and Streptococcus thermophilus YIT2084 strain are cultures having a wrinkle formation inhibitory action in the aforementioned Patent Document 2. Identical to that used to obtain the supernatant. However, the culture supernatant used in Patent Document 2 is obtained by culturing lactic acid bacteria, adding trichloroacetic acid (TCA) to precipitate, and further adding ethanol.
  • TCA trichloroacetic acid
  • the culture supernatant of patent document 2 does not contain protein. It is a polysaccharide having an average molecular weight of about 900,000.
  • culture supernatant low molecular fraction the low molecular fraction of the culture supernatant of lactic acid bacteria belonging to Streptococcus thermophilus of the present invention (hereinafter referred to as “culture supernatant low molecular fraction”) does not undergo TCA precipitation as will be described later.
  • culture supernatant low molecular fraction those having a molecular weight of 20,000 Da or less are collected, so it is clear that they are low molecular weights, and are different from those of Patent Document 2 in terms of constituent components and their molecular weights. .
  • the cytoprotective agent of the present invention uses the above-mentioned culture supernatant low molecular fraction as an active ingredient, and the culture supernatant low-molecular fraction used removes a part having a molecular weight exceeding 20,000 Da from the culture supernatant of lactic acid bacteria.
  • the product can be used as it is, as a concentrated or diluted liquid, or as a powder that is dried by means such as spray drying or freeze drying.
  • the cytoprotective agent of the present invention can be blended with an external preparation composition for skin such as cosmetics, pharmaceuticals, and quasi drugs.
  • the skin external preparation composition can be produced according to a conventional method.
  • the cytoprotective agent of the present invention can be used for purified water, a lotion base, a cream base, an emulsion base, etc. An appropriate amount may be dissolved or dispersed as much as possible.
  • Examples of more specific skin external preparation compositions include basic cosmetics such as lotions, emulsions, various creams, packs, and cosmetics, shampoos, rinses, treatments, hair tonics, hair liquids, hair creams, hair milks, etc. Products for hair, bath cosmetics such as bath additives, makeup cosmetics such as foundations, lipsticks, mascaras and eye shadows, sunscreens and the like.
  • the blending amount of the low molecular fraction of the culture supernatant as a cytoprotective agent in these external preparations for skin is not particularly limited, and may be determined according to the dosage form and use of the cytoprotective agent to be used. However, when the low molecular fraction of the culture supernatant is used as it is, it is 0.01 to 100% by mass, particularly preferably about 0.1 to 90% by mass, more preferably 1 to 20% by mass. is there. When the low molecular fraction of the culture supernatant is used after drying, the blending amount is 0.001 to 10% by mass, particularly preferably about 0.01 to 9% by mass, more preferably 0.1 to 2%. % By mass.
  • the skin external preparation composition can contain optional components that are usually blended in skin external preparations.
  • optional components include surfactants, oils, alcohols, humectants, thickeners, preservatives, antioxidants, chelating agents, pH adjusters, fragrances, dyes, UV absorbers / scatterers, powders Vitamins, amino acids, water-soluble polymers, foaming agents, pigments, plant extracts, animal-derived components, seaweed extracts, various drugs, additives, water, and the like.
  • the cytoprotective agent of the present invention contains a low molecular fraction of culture supernatant of lactic acid bacteria with experience as an active ingredient, it can also be incorporated into various foods and drinks.
  • an appropriate auxiliary agent to the above-mentioned culture supernatant low molecular fraction, it is edible by using conventional means to form into an edible form, for example, granular, granular, tablet, capsule, paste, etc.
  • It can also be used for various foods, for example, processed foods such as ham and sausage, fishery processed foods such as kamaboko and chikuwa, bread, confectionery, etc., water, fruit juice, milk, refreshing You may add and use for drinks, such as a drink.
  • Example 1 A -80 ° C. storage strain of Streptococcus thermophilus YIT2084 was inoculated with 1 platinum ear in MRS medium (Difco) in a 2 mL test tube, and statically cultured overnight at 40 ° C. Next, this culture was inoculated to 1% in 2 mL of 10% non-fat dry milk aqueous solution (10% skim milk (Difco)), and then statically cultured overnight at 40 ° C. did.
  • pre-culture was performed in the same manner, and this pre-culture was inoculated at 1% in 100 mL of a main culture medium (3% non-fat dry milk aqueous solution) and left to stand at 40 ° C. for 24 hours.
  • a main culture medium 3% non-fat dry milk aqueous solution
  • the cultured bacterial solution was centrifuged at 8,000 ⁇ g for 15 minutes at 4 ° C. to remove the precipitate.
  • the obtained precipitate removal liquid was subjected to ultrafiltration at 4 ° C. and 3000 ⁇ g for 1 hour using Centricut Mini V-20 (fractionated molecular weight 20,000 Da; Kurashiki Boseki) to obtain 10 mL of permeate 1 It was.
  • the obtained permeate 1 was freeze-dried, dissolved in 50 mM NaCl, and then subjected to HPLC under the following conditions. The result is shown in FIG. From the results of HPLC, it was revealed that the average molecular weight of the permeate 1 was 300 Da.
  • Example 2 10 mL of permeate 2 was obtained in the same manner as in Example 1 except that Streptococcus thermophilus YIT2084 was replaced with Streptococcus thermophilus YIT2001.
  • This permeate 2 was also subjected to HPLC in the same manner as in Example 1 to obtain the results shown in FIG.
  • the average molecular weight of this permeate 2 was found to be 300 Da.
  • Example 3 Cell exposure test using hydrogen peroxide 1.3 ⁇ 10 4 mouse skin-derived fibroblasts 3T3 were seeded in a 96-well plate and cultured in a D-MEM medium containing 10% FBS at 37 ° C. for 24 hours in a 5% CO 2 atmosphere.
  • the medium was again removed, washed twice with PBS, H 2 O 2 and FeSO 4 were added to final concentrations of 400 ⁇ M and 5 ⁇ M, respectively, and the cells were cultured at 37 ° C. for 6 hours in a 5% CO 2 atmosphere.
  • the unexposed group was cultured under the same conditions after adding only PBS.
  • the permeates 1 and 2 had a high absorbance at 590 nm depending on the concentration, and had a cell-protecting action. Further, when the ratio of cell survival in the case of hydrogen peroxide exposure to hydrogen peroxide non-exposed (none) in Table 1 is compared with the permeate 1, it is 1.04 times, and the number of cells is also affected by hydrogen peroxide exposure. Was not decreasing.
  • Example 4 Hydrogen peroxide removal action To 50 ⁇ M H 2 O 2 solution were added Permeate 1 and Permeate 2 and dilutions obtained by diluting them with PBS, 2, 4 and 8 times, respectively, and incubated at 37 ° C. for 30 minutes to determine the H 2 O 2 concentration. It was measured. The results are shown in Table 2.
  • Example 5 Preparation of lotion: A lotion was prepared with the following composition. In the preparation method, (7) and (6) were mixed, and (1) to (5) were added thereto and stirred sufficiently to obtain a lotion. The permeate 1 used the culture supernatant low molecular fraction as it was.
  • Example 6 Emulsion preparation An emulsion was prepared with the following composition. In the preparation method, (7), (8) and (10) are added to (11) and heated, and (1) to (6) are added and emulsified at 80 ° C., and then (9) is added. In addition, the mixture was stirred and cooled to room temperature to obtain an emulsion. The permeate 1 used the culture supernatant low molecular fraction as it was.
  • Example 7 Cream preparation A cream was prepared with the following composition. In the preparation method, (9), (10), (12) and (13) are added to (14) and heated, and (1) to (8) are added at 80 ° C. to emulsify, and then (11) was added and stirred, and cooled to room temperature to obtain a cream. As the permeate 1, the low molecular fraction of the culture supernatant was used as it was.
  • the cytoprotective agent of the present invention has a function of protecting cells from damaging substances such as hydrogen peroxide, as shown in the above examples. And if the cells are protected and the number of cells is maintained, sufficient formation of intercellular lipid occurs, and since the barrier function of the stratum corneum is enhanced, water loss is suppressed, the water content is increased, and rough skin is improved. Is done. In addition, since the number of cells decreases with aging, anti-aging action can be expected by the cytoprotective agent of the present invention.
  • the cytoprotective agent of the present invention since the cytoprotective agent of the present invention has an effect of protecting cells from a damaging substance such as hydrogen peroxide, it can be used as a useful formulation component of a skin external preparation or cosmetic.
  • the low molecular fraction in the culture supernatant of lactic acid bacteria belonging to Streptococcus thermophilus which is an active ingredient of the above-mentioned cytoprotective agent, protects cells from damaging substances as described above. It is possible to protect skin cells by applying to the skin, for example, the epidermis or dermis including the stratum corneum and the basal layer.

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Abstract

　乳酸菌の培養上清中から新規で有用な成分を見出し、その成分の有効な利用方法を提供することを目的とする。当該方法は、ストレプトコッカス・サーモフィルスに属する乳酸菌の培養上清中の低分子画分を有効成分とする細胞保護剤である。

Description

細胞保護剤
　本発明は、細胞保護剤に関し、更に詳細には、ストレプトコッカス・サーモフィルスに属する乳酸菌の培養上清中の低分子画分を有効成分とする細胞保護剤に関する。
　乳酸菌の培養上清、すなわち主に乳を主成分とする培地に乳酸菌を接種して得られた培養物中に、皮膚外用剤としての効果を有する成分が含まれていることが報告されている。例えば、乳酸菌の培養上清が抗酸化作用や光防御作用を有することが報告されている（特許文献１、非特許文献１および２）。また、このもののシワ形成抑制作用が知られており（特許文献２）、更には、乳酸菌抽出物中に、細胞増殖作用を有する成分があることも知られている（特許文献３）。
　しかしながら、乳酸菌は種類も多いため、その培養上清に含まれる有効成分も多岐にわたることが予想され、また、化粧料や外用剤の有効成分として利用するには、目的に応じ、特に活性の高い部分を選択して利用することが有利であるため、乳酸菌培養上清や乳酸菌抽出物についてより研究を進め、より優れた効果を有する成分の検出が求められている。
特開昭５８－１９８５８４ ＷＯ２００８／０２６３１８ 特許第３１７２５９９
日本香粧品科学会第７回学術学会講演要旨，５９，１９８２ 日本香粧品科学会第８回学術学会講演要旨，２１０，１９８３
　従って本発明の課題は、乳酸菌の培養上清中から新規で有用な成分を見出し、その成分の有効な利用方法を提供することである。
　本発明者は、種々の乳酸菌培養上清について、これに含まれる有効成分について検討を行っていたところ、ストレプトコッカス・サーモフィルスに属する乳酸菌の培養上清の低分子画分中に、優れた細胞保護効果を有する物質が存在することを見出し、本発明を完成した。
　すなわち本発明は、ストレプトコッカス・サーモフィルスに属する乳酸菌の培養上清中の低分子画分を有効成分とする細胞保護剤を提供するものである。
　また、本発明は、前記細胞保護剤を含有する皮膚外用剤を提供するものである。
　更に本発明は、ストレプトコッカス・サーモフィルスに属する乳酸菌の培養上清中の低分子画分を、保護を目的とする皮膚上に適用することを特徴とする皮膚細胞の保護方法を提供するものである。
　本発明の細胞保護剤によれば、皮膚等の細胞がヒドロキシラジカル等に曝露された場合であっても、これから細胞を保護することができ、細胞数の減少とこれに引き続いて生じる過剰な細胞生産を起こすことなく、皮膚の肥厚や、皮膚の炎症、皮膚の乾燥、乾燥によるシワ形成、弾力性の低下、シミの発生および増悪を防ぐことができる。
実施例１で得た透析液のＨＰＬＣの結果を示す図面である。図中、ａは分子量１０，０００Ｄａの位置を、ｂは分子量３４２Ｄａの位置を、ｃは分子量１８０Ｄａの位置をそれぞれ示す。 実施例２で得た透析液のＨＰＬＣの結果を示す図面である。図中、ａ、ｂおよびｃは上記と同じ。
　本発明の細胞保護剤の有効成分である乳酸菌培養上清の低分子画分は、ストレプトコッカス・サーモフィルスに属する乳酸菌を、培地で培養し、得られた培養物から固形物を除去することにより製造された乳酸菌培養上清を更に限外ろ過等に付し、分子量２０，０００Ｄａ以下の画分を採取することにより得られる。
　ここで用いられるストレプトコッカス・サーモフィルスに属する乳酸菌としては、ストレプトコッカス・サーモフィルス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）ＹＩＴ２００１株（ＦＥＲＭ　ＢＰ－７５３８、寄託日：平成１３年（２００１年）１月３１日）、ストレプトコッカス・サーモフィルス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）ＹＩＴ２０８４株（ＦＥＲＭ　ＢＰ－１０８７９、寄託日：２００６年８月１８日）等が挙げられ、それらを単独で、または複数で用いることができる。なお、これらのストレプトコッカス・サーモフィルスに属する乳酸菌株は、独立行政法人産業技術総合研究所　特許生物寄託センター（日本国　茨城県つくば市東１丁目１番地１　中央第６（郵便番号３０５－８５６６））に寄託されている。
　このストレプトコッカス・サーモフィルスに属する乳酸菌を培養する培地としては、人乳、牛乳、山羊乳等の獣乳や、脱脂乳、粉乳や脱脂粉乳からの還元乳、クリーム等の乳製品が好適なものとして挙げられ、また、豆乳等の大豆加工品を用いることも可能であるが、乳を主成分とする培地であることが望ましい。なお、これらは、そのまま培地として使用してもよく、また、必要に応じて適当な濃度に希釈して使用しても良い。
　更に、これらの培地には、乳酸菌の培養において栄養源を補う目的で、一般的に用いられる成分を別途配合してもよい。このようなものとしては、酵母エキス、クロレラエキス、ビタミンＡ、ビタミンＢ類、ビタミンＣ、ビタミンＥ等のビタミン類や、各種ペプチド類を含むタンパク分解物、アミノ酸類、カルシウム、マグネシウム等の塩類が挙げられる。
　前記培地を用いたストレプトコッカス・サーモフィルスに属する乳酸菌の培養は、常法に従って行えば良く、その培養の一例としては、３０℃～４５℃、より好ましくは３７℃～４２℃の培養温度、１時間～４８時間、より好ましくは、４時間～２４時間の培養時間が挙げられる。なお、このときの他の培養条件としては、静置、攪拌、振盪、通気等が挙げられ、これらから培養に適した方法を適宜選択して行えばよい。
　本発明に用いる乳酸菌培養上清は、上記の如くして得られた乳酸菌培養物から、ろ過、遠心分離等の常法に従って固形物を除去することにより得られる。また、乳酸菌培養上清の低分子画分は、乳酸菌培養上清から限外ろ過やゲルろ過の常法により分子量２０，０００Ｄａより大きいものを除去することにより得ることができる。
　このようにして得られた本発明の細胞保護剤は、過酸化水素等の損傷物質の曝露前あるいは曝露中に細胞に付加することにより、損傷物質曝露による細胞数の低下を抑制することができるが、損傷物質の曝露前から付加すると効果的に細胞数の低下を予防できるため、損傷物質の曝露前から細胞に付加することが好ましい。
　また上記細胞保護効果のメカニズムの詳細は不明であるが、損傷物質曝露時に本発明の細胞保護剤が細胞と共存していない場合であってもその効果が発揮されることから、本発明の細胞保護剤により、細胞自体に損傷に対する耐性が付与されることもメカニズムの一つと考えられる。
　上記損傷物質は特に制限されないが、ヒドロキシラジカル、過酸化水素、一重項酸素、スーパーオキシド等の活性酸素が挙げられる。また細胞数の低下が誘発される紫外線、放射線または変異原性物質等の曝露、ストレス、喫煙といった様々な損傷要因も損傷物質に含まれる。
　また本発明の細胞保護剤の対象となる細胞は、損傷物質に曝露される可能性がある生体細胞であれば特に制限はないが、例えば表皮細胞、樹状細胞、線維芽細胞、肥満細胞、形質細胞、ランゲルハンス細胞、血管内皮細胞等が挙げられる。この中でも皮膚細胞、特に線維芽細胞に好適に用いることができる。
　なお、本発明で用いるストレプトコッカス・サーモフィルスに属する乳酸菌の例として、前記のようにストレプトコッカス・サーモフィルスＹＩＴ２００１株およびストレプトコッカス・サーモフィルスＹＩＴ２０８４株は、前出特許文献２において、シワ形成抑制作用を有する培養上清を得るのに使用されたものと同一である。しかしながら、特許文献２で用いる培養上清は、乳酸菌の培養後、トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）を加えて沈殿させ、更にエタノールを加えることで得られたものである。
　そして、ＴＣＡ沈殿を行うことでタンパク質が除去され、更にエタノール抽出で主に多糖類が得られ、かつ低分子成分が除去されるから、特許文献２の培養上清は、タンパク質が含まれておらず、かつ平均分子量が９０万程度の多糖類である。
　これに対し、本願発明のストレプトコッカス・サーモフィルスに属する乳酸菌の培養上清の低分子画分（以下、「培養上清低分子画分」という）は、後記するようにＴＣＡ沈殿を行わないのでタンパク質も存在し、かつ、分子量２０，０００Ｄａ以下のものを採取しているので、低分子のものであることは明らかであって、構成成分およびその分子量の点において特許文献２のものとは相違する。
　本発明の細胞保護剤は、上記の培養上清低分子画分を有効成分とし、使用される培養上清低分子画分としては、乳酸菌の培養上清から分子量２０，０００Ｄａを越える部分を除去したものをそのまま或いは、濃縮または希釈した液状物として、またはこれを噴霧乾燥や凍結乾燥等の手段により乾燥した粉末状物として使用することができる。
　また、本発明の細胞保護剤は、これを化粧品、医薬品、医薬部外品等の皮膚外用剤組成物に配合することができる。この皮膚外用剤組成物の製造は、常法に従って行うことができ、例えば、精製水や化粧水基剤、クリーム基剤、乳液基剤等に本発明の細胞保護剤を所望の作用効果を発揮できる程度に適量溶解若しくは分散させればよい。
　より具体的な皮膚外用剤組成物の例としては、化粧水、乳液、各種クリーム、パック、美容液等の基礎化粧料、シャンプー、リンス、トリートメント、ヘアトニック、ヘアリキッド、ヘアクリーム、ヘアミルク等の頭髪用製品、入浴剤等の浴用化粧品、ファンデーション、口紅、マスカラ、アイシャドウ等のメーキャップ化粧品、日焼け止め等を挙げることができる。
　これら皮膚外用剤組成物への、細胞保護剤としての培養上清低分子画分の配合量は、特に限定されるものではなく、使用する細胞保護剤の剤型や用途に応じて決めればよいが、好ましくは、培養上清低分子画分をそのまま使用する場合は、０．０１～１００質量％であり、特に好ましくは０．１～９０質量％程度、さらに好ましくは１～２０質量％である。また培養上清低分子画分を乾燥させて使用する場合の配合量は、０．００１～１０質量％であり、特に好ましくは０．０１～９質量％程度、さらに好ましくは０．１～２質量％である。
　また、上記皮膚外用剤組成物には、必須成分である本発明の細胞保護剤の他に、通常、皮膚外用剤に配合される任意成分を配合することができる。このような任意成分としては、界面活性剤、油分、アルコール類、保湿剤、増粘剤、防腐剤、酸化防止剤、キレート剤、ｐＨ調整剤、香料、色素、紫外線吸収・散乱剤、粉体、ビタミン類、アミノ酸類、水溶性高分子、発泡剤、顔料、植物抽出物、動物由来成分、海藻抽出物、各種薬剤、添加剤、水等を挙げることができる。
　また更に、本発明の細胞保護剤は、食経験のある乳酸菌の培養上清低分子画分を有効成分としていることから、各種飲食品にも配合することもできる。例えば前記培養上清低分子画分に、適当な助剤を添加した後、慣用の手段を用いて食用に適した形態、例えば、顆粒状、粒状、錠剤、カプセル、ペーストなどに成形して食用に供してもよく、また各種の食品、例えば、ハム、ソーセージなどの食肉加工食品、かまぼこ、ちくわなどの水産加工食品、パン、菓子などに添加して使用したり、水、果汁、牛乳、清涼飲料などの飲料に添加して使用しても良い。
　次に実施例を挙げ、本発明を更に詳しく説明するが、本発明はこれら実施例に何ら制約されるものではない。
実　施　例　１
　ストレプトコッカス・サーモフィルスＹＩＴ２０８４の－８０℃保存菌株を、２ｍＬ試験管中のＭＲＳ培地（Ｄｉｆｃｏ）中に１白金耳植菌し、４０℃で一晩静置培養した。次に、この培養物を、２ｍＬの１０％脱脂粉乳水溶液（１０％スキムミルク（Ｄｉｆｃｏ））中に１％となるよう植菌した後、４０℃で一晩静置培養を行い、前々培養とした。
　更に同様に前培養を行い、この前培養物を本培養培地（３％脱脂粉乳水溶液）１００ｍＬに１％で植菌し、４０℃で２４時間静置培養した。
　培養後の菌液を、４℃、８，０００×ｇで１５分間遠心分離し、沈殿物を除去した。得られた沈殿物除去液を、セントリカットミニＶ－２０（分画分子量２０，０００Ｄａ；倉敷紡績）を用い、４℃、３０００×ｇで１時間限外ろ過を行なって透過液１を１０ｍＬ得た。
　得られた透過液１を凍結乾燥し、これを５０ｍＭ　ＮａＣｌに溶解後、下記条件でＨＰＬＣを行った。この結果を図１に示す。ＨＰＬＣの結果から、上記透過液１の平均分子量は、３００Ｄａであることが明らかになった。
　［　ＨＰＬＣ条件　］
　　　装　置：　Ｗａｔｅｒｓ－６００Ｅ
　　　検出器：　ＩＳＩ　ＲＩ－９８０
　　　カラム：　ＳｈｏｄｅｘＳＵＧＡＲ　ＫＳ－８０４
　　　カラム温度：　８０℃
　　　移動相：　５０ｍＭ　ＮａＣｌ
　　　フローレート：　１ｍＬ／分
　　　注入量：　１０μＬ
実　施　例　２　
　ストレプトコッカス・サーモフィルスＹＩＴ２０８４を、ストレプトコッカス・サーモフィルスＹＩＴ２００１に代える以外は実施例１と同様にして透過液２を１０ｍＬ得た。
　この透過液２についても実施例１と同様にしてＨＰＬＣを行い、図２の結果を得た。この透過液２の平均分子量は、３００Ｄａであることが明らかになった。
実　施　例　３
　　　過酸化水素を利用した細胞の曝露試験：
　マウス皮膚由来線維芽細胞３Ｔ３を９６穴プレートに１．３×１０４個播種し、１０％ＦＢＳを含むＤ－ＭＥＭ培地中、５％ＣＯ２雰囲気下、３７℃で２４時間培養した。
　培養後、培地を取り除き、ＰＢＳで２回洗浄した後、Ｄ－ＭＥＭ培地（１００μＬ）に交換した。透過液１および透過液２、並びにこれをそれぞれＰＢＳを用いて２倍に希釈した液の各１０μＬをプレート穴に添加し、５％ＣＯ２雰囲気下、３７℃で２４時間培養した。上記透過液は乳酸菌の培養上清から分子量２０，０００Ｄａを越える部分を除去したものをそのまま使用した。
　再度培地を取り除き、ＰＢＳで２回洗浄した後Ｈ２Ｏ２およびＦｅＳＯ４をそれぞれの終濃度が４００μＭおよび５μＭとなるように添加し、５％ＣＯ２雰囲気下、３７℃で６時間培養した。なお、非曝露群は、ＰＢＳのみを加えた後、同一条件で培養した。
　最後に、細胞をクリスタルバイオレットを用いて染色し、５９０ｎｍの吸光度を生細胞数の指標とした。なお、対照として透過液を用いず、ＰＢＳのみのものを利用した。この結果を、表１に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
　上記のように、透過液１および２は、濃度依存的に５９０ｎｍの吸光度が高くなっており、細胞保護作用を有することが明らかになった。また、表１での過酸化水素非曝露（なし）に対する過酸化水素曝露の場合の細胞生存の割合を対比すると、透過液１では、１．０４倍であり、過酸化水素曝露によっても細胞数が減少していなかった。
実　施　例　４
　　　過酸化水素除去作用：
　５０μＭのＨ２Ｏ２液に、それぞれ透過液１および透過液２並びにそれらをＰＢＳで２、４および８倍希釈した希釈液を加え、３７℃で３０分インキュベートした後のＨ２Ｏ２濃度を測定した。この結果を表２に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000002
　この結果から、透過液１および透過液２の過酸化水素に対する作用はほぼ同様であった。
このことから前記実施例３で見られた透過液１の効果は、過酸化水素の消去等によるものでなく、他のメカニズムによるものであることが示唆された。
実　施　例　５
　　　化粧水の調製：
　下記組成で、化粧水を調製した。なお、調製方法は、（７）と（６）を混合して、これに（１）～（５）を加えて十分に攪拌して化粧水を得た。透過液１は培養上清低分子画分をそのまま使用した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000003
実　施　例　６
　　　乳液の調製：
　下記組成で、乳液を調製した。なお、調製方法は、（１１）に（７）、（８）及び（１０）を加えて加温し、８０℃で（１）～（６）を加えて乳化し、その後、（９）を加えて攪拌し、室温まで冷却して乳液を得た。透過液１は培養上清低分子画分をそのまま使用した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000004
実　施　例　７
　　　クリームの調製：
　下記組成で、クリームを調製した。なお、調製方法は、（１４）に（９）、（１０）、（１２）及び（１３）を加えて加温し、８０℃で（１）～（８）を加えて乳化し、その後、（１１）を加えて攪拌し、室温まで冷却してクリームを得た。透過液１は培養上清低分子画分をそのまま使用した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000005
　本発明の細胞保護剤は、上記実施例で示されるように、過酸化水素等の損傷物質から細胞を保護する働きを有するものである。そして、細胞が保護され、細胞数が維持されれば十分な細胞間脂質の形成が起こり、角層のバリア機能が充実するために水分損失が抑制され、水分含量が増加し、肌荒れ等が改善される。また、老化と共に細胞数が減少するので、本発明の細胞保護剤により抗老化作用も期待できる。
　このように、本発明の細胞保護剤は、過酸化水素等の損傷物質から細胞を保護する効果を有するため、皮膚外用剤や化粧品の有用な配合成分として利用できるものである。
　また、上記細胞保護剤の有効成分であるストレプトコッカス・サーモフィルスに属する乳酸菌の培養上清中の低分子画分は、上記のように損傷物質から細胞を保護する作用を有するので、これを保護しようとする皮膚上、例えば角層、基底層などを含む表皮や真皮等に適用することで、皮膚細胞を保護することが可能となる。
 

Claims (12)

  1. 　ストレプトコッカス・サーモフィルスに属する乳酸菌の培養上清中の低分子画分を有効成分とする細胞保護剤。
  2. 　低分子画分が、乳酸菌培養上清を限外ろ過またはゲルろ過することにより得られるものである請求項１記載の細胞保護剤。
  3. 　低分子画分の分子量が、２０，０００Ｄａ以下である請求項１または２記載の細胞保護剤。
  4. 　ストレプトコッカス・サーモフィルスに属する乳酸菌が、ストレプトコッカス・サーモフィルスＹＩＴ２００１株（ＦＥＲＭ　ＢＰ－７５３８）またはストレプトコッカス・サーモフィルスＹＩＴ２０８４株（ＦＥＲＭ　ＢＰ－１０８７９）である請求項１ないし３の何れかの項記載の細胞保護剤。
  5. 　細胞への損傷物質曝露時の細胞数低下を抑制する請求項１ないし４の何れかの項記載の細胞保護剤。
  6. 　損傷物質が活性酸素である請求項５記載の細胞保護剤。
  7. 　損傷物質がヒドロキシラジカルである請求項５記載の細胞保護剤。
  8. 　請求項１ないし７の何れかの項記載の細胞保護剤を含有する皮膚外用剤。
  9. 　化粧品である請求項８記載の皮膚外用剤。
  10. 　ストレプトコッカス・サーモフィルスに属する乳酸菌の培養上清中の低分子画分を、保護を目的とする皮膚上に適用することを特徴とする皮膚細胞の保護方法。
  11. 　損傷物質曝露時の細胞数低下を抑制することを特徴とする請求項１０記載の皮膚細胞の保護方法。
  12. 　細胞保護剤を製造するためのストレプトコッカス・サーモフィルスに属する乳酸菌の培養上清中の低分子画分の使用。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105358165A (zh) * 2013-07-05 2016-02-24 株式会社益力多本社 戊糖素生成抑制剂
JP2020079236A (ja) * 2018-11-12 2020-05-28 有限会社バイオ研 皮膚塗布用の皮膚創傷治癒促進組成物、その製造方法、及び創傷被覆材
JP2021050176A (ja) * 2019-09-26 2021-04-01 株式会社ヤクルト本社 毛髪ダメージ軽減剤
JP2021147356A (ja) * 2020-03-19 2021-09-27 株式会社ヤクルト本社 皮膚細胞の活性化用組成物及び皮膚外用剤

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105063211B (zh) * 2015-08-13 2018-10-30 黑龙江省绿色食品科学研究院 一种快速评价乳酸菌缓解细胞氧化损伤能力的方法及应用

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS58198584A (ja) 1982-05-14 1983-11-18 Yakult Honsha Co Ltd 抗酸化剤
JPH10140154A (ja) * 1996-11-08 1998-05-26 Seiren Co Ltd 抗酸化剤
JPH11323328A (ja) * 1998-05-15 1999-11-26 Yakult Honsha Co Ltd 生体内抗酸化剤
JP3172599B2 (ja) 1992-10-16 2001-06-04 株式会社コーセー 細胞賦活剤
JP2004024004A (ja) * 2002-06-14 2004-01-29 Mode International Co Ltd 発酵組成物及び該発酵組成物を含有する抗酸化性組成物
JP2006069969A (ja) * 2004-09-02 2006-03-16 Yukihiro Hirose 活性酸素除去機能を有する生体機能調整剤およびそれを含有する化粧用組成物及飲食品用組成物
WO2008026318A1 (fr) 2006-08-30 2008-03-06 Kabushiki Kaisha Yakult Honsha Agent anti-ride

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4938664A (en) 1989-11-13 1990-07-03 Carrier Corporation Oil reclaim system
KR100478928B1 (ko) 1996-11-08 2005-08-18 세이렌가부시끼가이샤 세리신또는세리신가수분해물을유효성분으로하는비의약용항산화제,화장품,식품변색방지제,음식물,심근경색치료제,동맥경화치료제,당뇨병치료제,암치료제,또는뇌줄중치료제
JP4689060B2 (ja) * 2001-03-01 2011-05-25 ビオフェルミン製薬株式会社 免疫賦活組成物
US20070128303A1 (en) * 2004-02-06 2007-06-07 The University Of Chicago Anti-inflammatory, cytoprotective factor derivable from a probiotic organism
EP1736537A1 (en) * 2005-06-22 2006-12-27 OrganoBalance GmbH Methods and means for protecting the skin against pathogenic microorganisms
US20100086520A1 (en) * 2006-12-01 2010-04-08 Organobalance Gmbh Compositions, Kits and Uses For Protecting The Skin Against Pathogenic Microorganisms
ES2417132T3 (es) * 2006-12-19 2013-08-06 Basf Se Usos y métodos para prevenir y/o tratar caries causadas por mutans Streptococci
EP2095820A4 (en) * 2006-12-26 2012-01-11 Meiji Dairies Corp FERMENTED MILK FOR IMPROVEMENT AND / OR TREATMENT OF THE SKIN AND METHOD OF MANUFACTURING THEREOF

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS58198584A (ja) 1982-05-14 1983-11-18 Yakult Honsha Co Ltd 抗酸化剤
JP3172599B2 (ja) 1992-10-16 2001-06-04 株式会社コーセー 細胞賦活剤
JPH10140154A (ja) * 1996-11-08 1998-05-26 Seiren Co Ltd 抗酸化剤
JPH11323328A (ja) * 1998-05-15 1999-11-26 Yakult Honsha Co Ltd 生体内抗酸化剤
JP2004024004A (ja) * 2002-06-14 2004-01-29 Mode International Co Ltd 発酵組成物及び該発酵組成物を含有する抗酸化性組成物
JP2006069969A (ja) * 2004-09-02 2006-03-16 Yukihiro Hirose 活性酸素除去機能を有する生体機能調整剤およびそれを含有する化粧用組成物及飲食品用組成物
WO2008026318A1 (fr) 2006-08-30 2008-03-06 Kabushiki Kaisha Yakult Honsha Agent anti-ride

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
See also references of EP2609927A4 *
SUSUMU ITO ET AL.: "Bio Keshohin", JOURNAL OF THE TOYAKU, vol. 10, no. 10, 1988, pages 13 - 19 *
THE 7TH ANNUAL MEETING OF JAPANESE COSMETIC SCIENCE SOCIETY, 1982
THE 8TH ANNUAL MEETING OF JAPANESE COSMETIC SCIENCE SOCIETY, 1983

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105358165A (zh) * 2013-07-05 2016-02-24 株式会社益力多本社 戊糖素生成抑制剂
US20160166622A1 (en) * 2013-07-05 2016-06-16 Kabushiki Kaisha Yakult Honsha Pentosidine production inhibitor
JP2020079236A (ja) * 2018-11-12 2020-05-28 有限会社バイオ研 皮膚塗布用の皮膚創傷治癒促進組成物、その製造方法、及び創傷被覆材
JP7045671B2 (ja) 2018-11-12 2022-04-01 有限会社バイオ研 皮膚塗布用の皮膚創傷治癒促進組成物、その製造方法、及び創傷被覆材
JP2021050176A (ja) * 2019-09-26 2021-04-01 株式会社ヤクルト本社 毛髪ダメージ軽減剤
JP2023184700A (ja) * 2019-09-26 2023-12-28 株式会社ヤクルト本社 乳酸菌発酵物を利用した毛髪ダメージ軽減剤
JP2021147356A (ja) * 2020-03-19 2021-09-27 株式会社ヤクルト本社 皮膚細胞の活性化用組成物及び皮膚外用剤
JP7544498B2 (ja) 2020-03-19 2024-09-03 株式会社ヤクルト本社 皮膚細胞の活性化用組成物及び皮膚外用剤

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