WO2010058679A1 - 骨折修復促進剤 - Google Patents

Abstract

　外力、疲労、病気による骨折において、骨折部位の修復を促進させる物質およびその製造方法、その骨折修復促進剤を配合する飲食品、飼料等の骨折修復促進製品を提供する。乳又は乳由来の原料を陽イオン交換樹脂に接触させて塩基性タンパク質を吸着させ、この樹脂に吸着した画分を塩濃度0.1M～1.0Mの溶出液で溶出して得られる乳由来塩基性タンパク質画分を有効成分として骨折修復促進剤を製造する。

Description

骨折修復促進剤

　本発明は、骨折修復促進剤及びその製造方法、骨折修復促進剤を配合した飲食品、飼料に関する。本発明の骨折修復促進剤は骨折部位の修復反応である炎症、軟骨形成あるいは骨膜下の骨形成、血管新生、骨リモデリングと多段階の反応を促進する作用を有する。したがって、本発明の骨折修復促進剤は骨折の治療に有用である。

　近年、人口の高齢化に伴い骨粗鬆症や骨折といった骨に関わるリスクは増加する傾向にある。骨組織においては、骨芽細胞による骨形成と破骨細胞による骨吸収が絶えずバランス良く働いているが、これらのバランスが保たれず、骨吸収に傾いた結果表面化する疾病が骨粗鬆症である。特に、高齢の女性では閉経後にはエストロゲンの分泌が欠乏するため骨を吸収する破骨細胞の働きが優勢となる。骨粗鬆症の予防には骨量が保たれるような対策をとる必要がある。骨粗鬆症における骨量の低下や骨折発症率を緩和するための医薬としてビタミンＤ製剤等が開示されている。
　しかし、前述のビタミンＤ製剤は高齢者を対象とした試験で、ビタミンＤが充足している人にとっては、骨折の治癒の助けになるという証拠はないという主張もある（例えば、非特許文献１、非特許文献２参照）。また、骨折の治癒は炎症、仮骨の形成、仮骨中の軟骨細胞のコラーゲン産生、血管新生、骨リモデリングという過程を経て起こる。一方で骨の形成は骨芽細胞の働きによって行われ、骨折治癒過程の一端を担っているのみである。骨芽細胞の分化、増殖に作用する因子としては、ｃｂｆａ−１、ＦＧＦ−１、ＦＧＦ−２、乳由来塩基性タンパク質画分等が挙げられる（例えば、特許文献１、非特許文献３参照）。しかし、骨折部位の修復は、血管や神経も含む骨組織における複雑な反応である。よって、単に骨芽細胞を介して骨の形成を促進するだけでは複雑な反応系である骨折の治癒という過程を促進させうる作用を持つかどうかは不明である。例えば、ＦＧＦ−２は骨芽細胞の増殖については促進する作用があるものの、骨芽細胞の分化および軟骨細胞におけるコラーゲンの産生に対しては負に制御する（例えば、非特許文献４参照）。
特開平８−１５１３３１号公報 Ｐａｕｌ　Ｌｉｐｓ　ｅｔ　ａｌ，Ｖｉｔａｍｉｎ　Ｄ　ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｆｒａｃｔｕｒｅ　ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ　ｉｎ　ｅｌｄｅｒｌｙ　ｐｅｒｓｏｎｓ　ａ　ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ，ｐｌａｃｅｂｏ−ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｔｒｉａｌ，Ａｎｎａｌｓ　ｏｆ　Ｉｎｔｅｒｎａｌ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１５　Ｆｅｂ，１９９６，１２４（４）ｐ．４００−４０６ Ｍ．Ｌａｗ　ｅｔ　ａｌ．，Ｖｉｔａｍｉｎ　Ｄ　ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ　ｏｆ　ｆｒａｃｔｕｒｅｓ　ａｎｄ　ｆａｌｌｓ：ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ａ　ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ　ｔｒｉａｌ　ｉｎ　ｅｌｄｅｒｌｙ　ｐｅｏｐｌｅ　ｉｎ　ｒｅｓｉｄｅｎｔｉａｌ　ａｃｃｏｍｍｏｄａｔｉｏｎ．Ａｇｅ　Ａｇｅｉｎｇ，１　Ｓｅｐ，２００６，３５（５）ｐ．４８２−４８６ Ｆｒｅｄｅｒｉｃ　Ｓｈａｐｉｒｏ，Ｂｏｎｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｒｅｌａｔｉｏｎ　ｔｏ　ｆｒａｃｔｕｒｅ　ｒｅｐａｉｒ．Ｔｈｅ　ｒｏｌｅ　ｏｆ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｏｓｔｅｏｂｌａｓｔｓ　ａｎｄ　ｓｕｒｆａｃｅ　ｏｓｔｅｏｂｌａｓｔｓ．Ｅｕｒｏｐｅａｎ　Ｃｅｌｌｓ　ａｎｄ　Ｍａｔｅｒｉａｌｓ，Ｖｏｌ．１５　２００８，ｐ．５３−７６ Ｔａｋａｓｈｉ　Ｓｈｉｍｏａｋａ　ｅｔ　ａｌ．，Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｏｓｔｅｏｂｌａｓｔ，Ｃｈｏｎｄｒｏｃｙｔｅ，ａｎｄ　ＯｓｔｅｏｃｌａｓｔＦｕｎｃｔｉｏｎｓ　ｂｙ　Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ　Ｇｒｏｗｔｈ　Ｆａｃｔｏｒ（ＦＧＦ）−１８　ｉｎ　Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｗｉｔｈ　ＦＧＦ−２　ａｎｄ　ＦＧＦ−１０．Ｔｈｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｖｏｌ．２７７，Ｎｏ．９．Ｍａｒｃｈ　１，２００２，ｐ．７４９３−７５００

　骨が外力に耐えきれずに骨折が引き起こされると引き続いて骨折部位の炎症、仮骨の形成、血管新生、骨リモデリングという過程を経て骨折部位の修復がおこる。このように、骨折部位の修復は、血管や神経も含む骨組織における複雑な反応である。よって、単に骨芽細胞を介して骨の形成を促進するだけでは複雑な反応系である骨折の治癒という過程を促進させうる作用を持つかどうかは不明であり、前述の医薬等を投与したとしても骨折の回復は早まらない可能性がある。つまり、上述した物質は、あくまでも骨を形成するといった部分での薬理作用であり、骨折修復の一連の反応が促進されるかどうかは明らかではない。それ故に、骨形成作用があっても軟骨細胞のコラーゲン産生作用等、骨折修復に関わる作用を合わせ持たないと骨折治癒の助けにはならない。
　骨折の治療は、単純骨折の場合は器具を用いて骨折箇所を固定し、骨の転位がある場合には牽引や手術による整復術によって正常な位置に戻した上で、少なくとも３週間から１月という一定期間の固定と安静を保つことが一般的に行われている。このように骨折の治癒には時間を要することから、よりよい骨折修復促進剤により骨折の治癒を促進し、固定や安静を保たなければならない期間を短縮することが患者の負担を軽減し、医療費の削減にもつながる。現状では経口により簡便に摂取できる骨折修復促進剤は存在せず、骨折患者や医療の立場からも広く求められている。

　本発明者らは、骨折の修復促進におけるこれらの問題点を鑑み、広く食品素材に含まれている骨折修復促進作用を示す物質について、鋭意探索を進めたところ、乳由来の塩基性タンパク質画分あるいはその塩基性タンパク質画分をペプシンやパンクレアチン等のタンパク質分解酵素で分解して得られる塩基性ペプチド画分が、経口により骨折修復を促進できることを見出した。そして、この塩基性タンパク質画分やペプチド画分を骨折修復の促進剤や骨折修復促進飲食品や飼料の有効成分として利用できることを見出し、本発明を完成するに至った。
　したがって、本発明は、摂取することで骨折部位の修復を早める骨折修復促進剤及びその製造方法、骨折修復促進剤を配合した飲食品、飼料を提供することを課題とする。

　したがって、本発明は、下記の構成のいずれかからなる発明である。
（１）乳由来の塩基性タンパク質画分を有効成分とする骨折修復促進剤。
（２）乳由来の塩基性タンパク質画分が、そのアミノ酸組成中に塩基性アミノ酸を１５重量％以上含有している画分である（１）記載の骨折修復促進剤。
（３）（１）又は（２）に記載の乳由来の塩基性タンパク質画分をタンパク質分解酵素で分解して得られる塩基性ペプチド画分を有効成分とする骨折修復促進剤。
（４）前記タンパク質分解酵素がペプシン、トリプシン及びキモトリプシンよりなる群から選択される少なくとも１種のタンパク質分解酵素である（３）記載の骨折修復促進剤。
（５）前記タンパク質分解酵素がペプシン、トリプシン及びキモトリプシンよりなる群から選択される少なくとも１種のタンパク質分解酵素とパンクレアチンである（３）記載の骨折修復促進剤。
（６）（１）~（５）のいずれかに記載の乳由来の塩基性タンパク質画分又は塩基性ペプチド画分を配合した飲食品。
（７）（１）~（５）のいずれかに記載の乳由来の塩基性タンパク質画分又は塩基性ペプチド画分を配合した飼料。
（８）乳又は乳由来の原料を陽イオン交換樹脂に接触させて塩基性タンパク質を吸着させ、この樹脂に吸着した画分を塩濃度０．１Ｍ~１．０Ｍの溶出液で溶出して得られる乳由来塩基性タンパク質画分を有効成分とする骨折修復促進剤の製造方法。
（９）乳又は乳由来の原料を陽イオン交換樹脂に接触させて塩基性タンパク質を吸着させ、この樹脂に吸着した画分を塩濃度０．１Ｍ~１．０Ｍの溶出液で溶出し、得られる乳由来塩基性タンパク質画分をタンパク質分解酵素で分解して得られる塩基性ペプチド画分を有効成分とする骨折修復促進剤の製造方法。
（１０）前記タンパク質分解酵素がペプシン、トリプシン及びキモトリプシンよりなる群から選択される少なくとも１種のタンパク質分解酵素である（９）記載の骨折修復促進剤の製造方法。
（１１）前記タンパク質分解酵素がペプシン、トリプシン及びキモトリプシンよりなる群から選択される少なくとも１種のタンパク質分解酵素とパンクレアチンである（９）記載の骨折修復促進剤の製造方法。

　本発明の骨折修復促進剤は、骨折部位において骨折修復作用が顕著であり、外力、病気、疲労による骨折の治療に有用である。また、本発明の骨折修復促進剤は、経口により簡便に摂取することができる。なお、本発明の骨折修復促進剤は、乳由来であり、安心して摂取することができる。

塩基性タンパク質画分非投与群（ＣＴＲＬ）及び１％投与群のマウス骨折モデルの軟Ｘ線像（術後４週）を示した写真である。（試験例５） マウス骨折モデルのμＣＴ像を示した写真である。（試験例５） 骨の靭性を表す総エネルギーを示した図である。（試験例５）

　本発明の骨折修復促進剤の特徴は、乳由来の塩基性タンパク質画分あるいは塩基性タンパク質画分をタンパク質分解酵素で分解して得られる塩基性ペプチド画分を有効成分とする。この乳由来の塩基性タンパク質画分は、牛乳、人乳、山羊乳、羊乳等哺乳類の乳から得られるものであり、また、この塩基性ペプチド画分は、乳由来の塩基性タンパク質画分にタンパク質分解酵素を作用することにより得られ、骨折部位の修復促進作用を有する。これらの作用に基づき骨折の治療を早めることができる。

　この骨折修復促進剤の有効成分として用いられる乳由来塩基性タンパク質画分は、次の性質を有している。
　１）Ｓｏｄｉｕｍ　Ｄｏｄｅｃｙｌ　Ｓｕｌｆａｔｅ　Ｐｏｌｙａｃｒｙｌａｍｉｄ　Ｇｅｌ　Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）によると分子量３，０００~８０，０００の範囲の数種のタンパク質よりなる。
　２）９５重量％以上がタンパク質であって、その他少量の脂肪、灰分を含む。
　３）タンパク質は主としてラクトフェリン及びラクトパーオキシダーゼよりなる。
　４）タンパク質のアミノ酸組成は、リジン、ヒスチジン、アルギニン等の塩基性アミノ酸を１５重量％以上含有する。

　このような塩基性タンパク質画分は、例えば、脱脂乳や乳清等の乳原料を陽イオン交換樹脂と接触させて塩基性タンパク質を吸着させ、この樹脂に吸着した塩基性タンパク質画分を０．１Ｍ~１．０Ｍの塩濃度の溶出液で溶出、この溶出画分を回収し、逆浸透（ＲＯ）膜や電気透析（ＥＤ）法等により脱塩及び濃縮し、必要に応じて乾燥することにより得ることができる。
　また、乳由来の塩基性タンパク質画分を得る方法としては、乳又は乳由来の原料を陽イオン交換体に接触させて塩基性タンパク質を吸着させた後、この陽イオン交換体に吸着した塩基性タンパク質画分を、ｐＨ５を越え、イオン強度０．５を越える溶出液で溶出して得る方法〔特開平５−２０２０９８号公報〕、アルギン酸ゲルを用いて得る方法〔特開昭６１−２４６１９８号公報〕、無機の多孔性粒子を用いて乳清から得る方法〔特開平１−８６８３９号公報〕、硫酸化エステル化合物を用いて乳から得る方法〔特開昭６３−２５５３００号公報〕等が知られており、本発明では、このような方法で得られた塩基性タンパク質画分を用いることができる。

　また、乳由来の塩基性ペプチド画分は、塩基性タンパク質画分と同様のアミノ酸組成を有しており、例えば、上記の方法で得られた乳由来の塩基性タンパク質画分にペプシン、トリプシン、キモトリプシン等のタンパク質分解酵素を作用させ、さらに必要に応じ、パンクレアチン等のタンパク質分解酵素を作用させることにより、平均分子量４，０００以下のペプチド組成物として得ることができる。

　本発明の骨折修復促進剤を投与するに際しては、有効成分の乳由来の塩基性タンパク質画分あるいは塩基性ペプチド画分をそのままの状態で用いることもできるが、常法に従い、粉末剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、ドリンク剤等に製剤化して使用することができる。さらには、これらの塩基性タンパク質画分や塩基性ペプチド画分は、比較的熱に対して安定なので、乳由来の塩基性タンパク質あるいは塩基性ペプチド画分を含む原料を通常行われるような条件で加熱殺菌することも可能である。

　本発明の骨折修復促進剤の投与量は、年齢、治療効果及び病態等により異なるが、１日１０~５００ｍｇ程度摂取すれば良い。また、この必要量を確保できるように飲食品、飼料に配合できれば良い。なお、本発明の塩基性タンパク質画分や塩基性ペプチド画分には、ラットによる急性毒性は認められなかった。また、本発明の塩基性タンパク質画分や塩基性ペプチド画分は、吸収性の良好なカルシウム塩と共に経口摂取させることが望ましい。このような吸収性の良好なカルシウム塩としては、塩化カルシウム、炭酸カルシウム、乳酸カルシウム、卵殻、牛乳由来カルシウム含有物等を挙げることができる。

　以下に実施例及び試験例を示し、本発明について詳細に説明するが、これらは単に例示するのみであり、本発明はこれらによって何ら限定されるものではない。

　陽イオン交換樹脂のスルホン化キトパール（富士紡績株式会社製）４００ｇを充填したカラム（直径５ｃｍ×高さ３０ｃｍ）を脱イオン水で十分洗浄した後、このカラムに未殺菌脱脂乳４０リットル（ｐＨ６．７）を流速２５ｍｌ／ｍｉｎで通液した。通液後、このカラムを脱イオン水で十分洗浄し、０．９８Ｍ塩化ナトリウムを含む０．０２Ｍ炭酸緩衝液（ｐＨ７．０）で樹脂に吸着した塩基性タンパク質画分を溶出した。そして、この溶出液を逆浸透（ＲＯ）膜により脱塩して、濃縮した後、凍結乾燥して粉末状の塩基性タンパク質画分２１ｇを得た。この塩基性タンパク質画分はそのまま本発明の骨折修復促進剤として利用することができる。

〔試験例１〕
　実施例１で得られた塩基性タンパク質画分について、ソジウムドデシルサルフェート−ポリアクリルアミド（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）電気泳動により測定したところ、分子量は３，０００~８０，０００の範囲に分布していた。

〔試験例２〕
　実施例１で得られた塩基性タンパク質画分について、成分組成を分析した。その結果を表１に示す。この表に示すとおり、この画分のほとんどはタンパク質である。

〔試験例３〕
　実施例１で得られた塩基性タンパク質画分について、そのタンパク質組成を分析した。その結果を表２に示す。この塩基性タンパク質画分には、４０重量％以上のラクトフェリン及びラクトパーオキシダーゼが含まれている。

〔試験例４〕
　実施例１で得られた塩基性タンパク質画分について、６Ｎ塩酸で１１０℃、２４時間加水分解した後、アミノ酸分析装置（Ｌ−８５００型、日立製作所製）でそのアミノ酸組成を分析した。その結果を表３に示す。この塩基性タンパク質画分には、アミノ酸組成中１５重量％以上の塩基性アミノ酸が含まれている。

　陽イオン交換樹脂のＳＰトーヨーパール（東ソー株式会社製）３０ｋｇを充填したカラム（直径１００ｃｍ×高さ１０ｃｍ）を脱イオン水で十分洗浄した後、このカラムに１２１℃で３０秒間加熱殺菌したチーズホエー３ｔ（ｐＨ６．２）を流速１０リットル／ｍｉｎで通液した。通液後、このカラムを脱イオン水で十分洗浄し、０．９Ｍ塩化ナトリウムを含む０．１Ｍクエン酸緩衝液（ｐＨ５．７）で樹脂に吸着した塩基性タンパク質画分を溶出した。そして、この溶出液を電気透析（ＥＤ）法により脱塩し、濃縮した後、凍結乾燥して粉末状の塩基性タンパク質画分１８３ｇを得た。この塩基性タンパク質画分はそのまま本発明の骨折修復促進剤として利用することができる。

　カラギーナンよりなる酸性多糖類ゲルをビーズ状に加工し（特開昭６１−２４６１９８号公報）、５０Ｋｇを充填したカラム（直径１００ｃｍ×高さ２０ｃｍ）を脱イオン水で十分洗浄した。このカラムに脱脂乳３，０００リットル（ｐＨ６．７）を流速２５ｍｌ／分で通液した。通液後、このカラムを脱イオン水で十分洗浄し、１．５Ｍ塩化ナトリウムを含む０．０２Ｍ炭酸緩衝液（ｐＨ７．０）で樹脂に吸着した塩基性タンパク質画分を溶出した。そして、この溶出液を逆浸透（ＲＯ）膜により脱塩して、濃縮した後、凍結乾燥して粉末状の塩基性タンパク質画分粉末１３６ｇを得た。この塩基性タンパク質画分はそのまま本発明の骨折修復促進剤として利用することができる。

　実施例１で得られた塩基性タンパク質画分５０ｇを蒸留水１０リットルに溶解した後、ペプシン（関東化学製）を２％濃度となるよう添加し、３７℃で１時間撹拌しながら加水分解した。次いで、水酸化ナトリウム溶液でｐＨ６．８に中和後、１％パンクレアチン（シグマ社製）を添加し、３７℃で２時間反応させた。反応後、８０℃で１０分間加熱処理して酵素を失活させた後、塩基性ペプチド画分４８．３ｇを得た。この塩基性ペプチド画分はそのまま本発明の骨折修復促進剤として利用することができる。

　実施例２で得られた塩基性タンパク質画分４０ｇを蒸留水８リットルに溶解した後、トリプシン（関東化学製）を２％濃度となるよう添加し、３７℃で１時間撹拌しながら加水分解した。次いで、水酸化ナトリウム溶液でｐＨ６．６に中和後、１％パンクレアチン（シグマ社製）を添加し、３７℃で２時間反応させた。反応後、８０℃で１０分間加熱処理して酵素を失活させた後、塩基性ペプチド画分３８．６ｇを得た。この塩基性ペプチド画分はそのまま本発明の骨折修復促進剤として利用することができる。

〔試験例５〕
（動物実験）
　実施例１で得られた塩基性タンパク質画分を用いて動物実験を行った。
　実験には６週齢の雄性マウス（Ｃ３Ｈ／ＨｅＪ）を用いた。ジエチルエーテルで吸入麻酔後、ペントバルビタールを腹腔内に投与、麻酔下に処置をおこなった。マウスの左脛骨前面を剃毛、消毒し、１５ｍｍの切開を入れ、鈍的に剥離し脛骨を露出、膝蓋靱帯より５ｍｍ下方で、ダイヤモンドディスクを用いて、脛骨を長軸に直交するように切断し、骨折を作製した。整復後、２５Ｇの注射針を髄腔内へ刺入し固定を行った。筋肉及び皮膚は４−０絹糸で縫合した。右脛骨は骨折を施さずに髄腔に注射針を刺入し、偽手術群とした。手術後覚醒したのを確認し、塩基性タンパク質画分の投与を開始した。非投与群（ＣＴＲＬ）、０．１６５％投与群、１％投与群の３群として実験を行った。塩基性タンパク質画分は、経口で、かつ、飲料水に溶かした形態で投与した。腐敗を防ぐため、塩基性タンパク質画分は２日毎に新しいものと交換した。
　骨折修復の評価は術後４週で、深麻酔時にマウスを灌流固定し、ソフトＸ線（Ｓｏｆｔｅｘ，Ｔｏｋｙｏ）にて撮影、その後μＣＴを撮影し、骨折の回復状態を評価した。
　なお、生体力学的分析は、電子計測制御式精密万能材料試験機（オートグラフ）を用い、４週後の脛骨の機械的強度を測定した。測定項目は、総エネルギー（靭性：破壊に至るまでの抵抗、応力ひずみ曲線の全面積）を評価した。

　結果を図１~図３に示した。
　図１には、塩基性タンパク質画分非投与群（ＣＴＲＬ）及び１％投与群のマウス骨折モデルの軟Ｘ線像（術後４週）を示した。
　図１の結果から、塩基性タンパク質画分投与群の方が、骨折線周囲の骨の密度が高いことが明らかとなった。

　図２には、マウス骨折モデルのμＣＴ像を示した。
　高いＢＭＤ（Ｂｏｎｅ　Ｍｉｎｅｒａｌ　Ｄｅｎｓｉｔｙ）値を示すエリアを暖色で、低いＢＭＤ値を示すエリアを寒色で示した。骨折部位は白矢印で示した箇所である。塩基性タンパク質画分投与群では骨折部位周辺が高いＢＭＤを示しており、骨折の修復が明らかに促進される傾向にあった。

　図３には、骨の靭性を表す総エネルギーを示した。
　塩基性タンパク質画分非投与群（ＣＴＲＬ）に比べて、塩基性タンパク質画分の投与により、総エネルギーが上昇することが明らかとなった。また、塩基性タンパク質画分１％投与群では、有意に高い値を示した。
　よって、塩基性タンパク質画分を投与した群は、非投与群に比べて骨折の修復が促進されていることが明らかとなった。
　なお、実験結果は示さなかったが、実施例４及び実施例５で得られた塩基性ペプチド画分を用いた場合も同様の効果が認められた。

　表４に示した組成で各成分を混合し、加圧成型して、実施例１で得られた乳由来塩基性タンパク質画分を配合した骨折修復促進作用を有する錠剤を調製した。

　表５に示した組成で各成分を混合し、容器に充填した後、加熱殺菌して、実施例２で得られた乳由来塩基性タンパク質画分を配合した骨折修復促進作用を有する飲料を調製した。

　表６に示した組成で各成分を混合し、容器に充填した後、加熱殺菌して、実施例１で得られた乳由来塩基性タンパク質画分を配合した骨折修復促進作用を有するゼリーを調製した。

　表７に示した組成で各成分を混合し、乳化温度８５℃で乳化して、実施例１で得られた乳由来塩基性タンパク質画分を配合した骨折修復促進作用を有するプロセスチーズを調製した。

　表８に示した組成で各成分を混合し、ドウを作成した後、焙焼して実施例２で得られた乳由来塩基性タンパク質画分を配合した骨折修復促進作用を有するビスケットを調製した。

　表９に示した組成で各成分を混合し、実施例１で得られた乳由来塩基性タンパク質画分を配合した骨折修復促進作用を有するイヌ飼育用飼料を調製した。

Claims (11)

1. 　乳由来の塩基性タンパク質画分を有効成分とする骨折修復促進剤。
2. 　前記乳由来の塩基性タンパク質画分が、そのアミノ酸組成中に塩基性アミノ酸を１５重量％以上含有している画分である請求項１記載の骨折修復促進剤。
3. 　請求項１又は２に記載の乳由来の塩基性タンパク質画分をタンパク質分解酵素で分解して得られる塩基性ペプチド画分を有効成分とする骨折修復促進剤。
4. 　前記タンパク質分解酵素がペプシン、トリプシン及びキモトリプシンよりなる群から選択される少なくとも１種のタンパク質分解酵素である請求項３記載の骨折修復促進剤。
5. 　前記タンパク質分解酵素がペプシン、トリプシン及びキモトリプシンよりなる群から選択される少なくとも１種のタンパク質分解酵素とパンクレアチンである請求項３記載の骨折修復促進剤。
6. 　請求項１乃至５のいずれかに記載の乳由来の塩基性タンパク質画分又は塩基性ペプチド画分を配合した飲食品。
7. 　請求項１乃至５のいずれかに記載の乳由来の塩基性タンパク質画分又は塩基性ペプチド画分を配合した飼料。
8. 　乳又は乳由来の原料を陽イオン交換樹脂に接触させて塩基性タンパク質を吸着させ、この樹脂に吸着した画分を塩濃度０．１Ｍ~１．０Ｍの溶出液で溶出して得られる乳由来塩基性タンパク質画分を有効成分とする骨折修復促進剤の製造方法。
9. 　乳又は乳由来の原料を陽イオン交換樹脂に接触させて塩基性タンパク質を吸着させ、この樹脂に吸着した画分を塩濃度０．１Ｍ~１．０Ｍの溶出液で溶出し、得られる乳由来塩基性タンパク質画分をタンパク質分解酵素で分解して得られる塩基性ペプチド画分を有効成分とする骨折修復促進剤の製造方法。
10. 　前記タンパク質分解酵素がペプシン、トリプシン及びキモトリプシンよりなる群から選択される少なくとも１種のタンパク質分解酵素である請求項９記載の骨折修復促進剤の製造方法。
11. 　前記タンパク質分解酵素がペプシン、トリプシン及びキモトリプシンよりなる群から選択される少なくとも１種のタンパク質分解酵素とパンクレアチンである請求項９記載の骨折修復促進剤の製造方法。

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