WO2006003731A1

WO2006003731A1 - 高分子ミセル型ｍｒｉ造影剤

Info

Publication number: WO2006003731A1
Application number: PCT/JP2005/000058
Authority: WO
Inventors: Masayuki Yokoyama; Teruo Okano; Emiko Nakamura
Original assignee: Kanagawa Academy of Science and Technology
Current assignee: Kanagawa Academy of Science and Technology
Priority date: 2004-07-05
Filing date: 2005-01-06
Publication date: 2006-01-12
Anticipated expiration: 2007-01-05
Also published as: JPWO2006003731A1; US20080241073A1; JP4758346B2

Abstract

血液中を長期間に渡って安定に循環して固形がんにターゲティングし、しかも明確ながんの画像を得ることのできる核磁気共鳴画像造影剤が開示されている。核磁気共鳴画像造影剤は、内部コアにガドリニウム（Ｇｄ）原子を含有し、そして外部シェルが親水性ポリマー鎖セグメントを含んでなる高分子ミセルであって、生体内で固形がん組織もしくは部位に送達され、その内部に集積された後に高分子ミセル構造を解離しうる高分子ミセル、を有効成分とする。

Description

明細書

高分子ミセル型 MRI造影剤

技術分野

[0001] 本発明は、核磁気共鳴画像造影剤に関し、より具体的には、ガドリニウム (Gd)内包高分子ミセルを有効成分とする造影剤に関する。

背景技術

[0002] がんに対する療法は外科療法、放射線療法、化学療法の 3つに大別される。各療法の進歩によって、有効率 ·治癒率は向上を続けているものの、がん発生率の上昇に追いつけずに、死亡率の増加を許しているのが現状である。これらの療法に共通しているのは、がんが早期に発見されれば治療成績は大きく向上することである。よつて診断技術の進歩はがん死亡率低下に大きく貢献できる。

[0003] がんの診断技術には、採取した細胞の組織学的診断、血液の生化学的検査、画像診断等がある。画像診断は、 X線 CT、核磁気共鳴画像 (Magnetic Resonance Imaging,以下、 MRIと略す)、超音波画像などがあるが、その中で、 MRIは X線などの被爆がなく非侵襲性であり、 X線 CTに次ぐ解像度が得られることなどが特長である。

[0004] この MRIの診断精度を上昇させる目的で、 MRI造影剤が用いられて!/、る。 MRI造影剤を血液内に投与した後に、 MRIの撮影を行う。この MRI造影剤として頻繁に用 V、られて、るのは Gd原子を配位した低分子キレートイ匕合物である。この様な錯体または複合体の代表例は商品名 Magnevistの下に市販されて!、る Gd— DTP Aである (DTPAとは低分子キレート化剤のジエチレントリアミン五酢酸であり、 1分子の DTP Aが Gdl原子を配位している）。このキレート化剤中の Gd原子は周辺に存在する水分子の水素原子に働きかけて、その T1 (縦緩和時間）を短縮させる。 MRI測定の際に種々の装置パラメーターを適切に設定することで、この短縮した T1を有する水分子をその他の水分子と画像上で明確に区別することが可能となる。よって、この T1短縮効果のおかげて、 MRI画像上で高いコントラストを与えることができる。 Gd— DTP Aは主に血液をコントラスト高く映し出すことで、ガン組織の異常血管形成を明瞭にすることで画像診断に役立てている。よって、 Gd— DTPAそれ自体は固形ガンなどに選択性があるわけではない。また、 Gd— DTPAは低分子であるために血管から組織への浸透が速、ので、造影剤が生体に注入された後すぐに MRI造影を開始しなければならない。たとえば患者が急に気分が悪くなつて 2時間ほど休息するような場合には、 MRI造影は造影剤の注入力もやり直さねばならな、。

[0005] 以上のような低分子 MRI造影剤の弱点を補い、さらに性能の高い造影剤の開発を目指して、 MRI造影効果のある Gd原子を高分子に結合させる研究が 1980年代から行われてきた。これらの研究は、主として、高分子の性質によって造影剤が固形がんなどに夕ーゲティングされ、標的に選択的な MRI画像が得られ、疾患のより正確な診断に役立て得ることを可能にすることを目的とし、さらには、高分子造影剤は血管から組織に拡散する速度が低分子造影剤よりも遅いことを利用し、投与後に適切な造影ができる時間範囲を広くし、患者及び医師の両方にとって MRI診断がより容易なものとすることを目的としている。

[0006] この高分子化 MRI造影剤の代表例としては、天然の高分子であるアルブミンや多糖誘導体や合成のポリ（L-リジン)誘導体を用いたものなどがある。より具体的には、以下の 3つの例を挙げることができる。 Wikstromらは、アルブミンにキレート剤 DTP Aを複数結合させそれに Gd原子を配位させた MRI造影剤を報告してヽる（非特許文献 1参照。 ) o Gd原子が高分子物質のアルブミンに結合することにより、 Gd原子あたりの T1を短縮能力（緩和能という）は低分子の Gd— DTPAに比べて約 4倍に増加して、る。これは Gd原子が高分子物質に結合することで Gd原子の動きが規制されるために、緩和能が上昇するものと理解されている。この緩和能の上昇は、高分子 MR I造影剤の特長の 1つである。また、 Corotらは多糖のカルボキシメチルデキストランにキレート剤である DOTA (テトラァザシクロドデカン四酢酸)を結合させ、それに Gdを配位させた高分子 MRI造影剤を報告している (非特許文献 2参照)。この例でも高分子化することにより、 T1の緩和能は上昇し、対応する低分子 MRI造影剤である DOT A— Gdの 3. 4に対し、高分子化したものでは 10. 6と 3倍程になっている。この研究例ではラットに投与したときの血漿中濃度変化も観察している。静脈内投与後 30分で、投与量の 40%より少し多、量が血漿中に存在したと報告されて、る。対応する低分子の造影剤 DOTA— Gdに比べると約 5倍高い濃度である力固形がんにターゲティングまたは送達するためには、これでも血液循環性は不足していると考えられる。

[0007] 高分子の構造を最適化し、血液中を長期間に渡って安定に循環し、固形がんへの選択的ターゲティング (またはデリバリー）をもっとも良く達成し得た研究例は、 Weissl ederらによるものである（非特許文献 3参照)。彼らは、ポリ（L リジン）にポリエチレングリコール鎖を結合させた高分子をキヤリヤーに用いることで、 DTPAに配位した Gd を、血液中を長期間渡って安定に循環して固形がんにターゲテイングすることに成功している（150g程度の体重のラットに投与 24時間後の、固形がんへの蓄積量が約 1 . 5%doseZgであった)。し力し、この場合でも明確ながんの画像を得ることに成功していない。

[0008] 非特許文献 1 : Investigative Radiology, 24, 609— 615 (1989)

非特許文献 2 : Acta Radiologia, 38, supplement 412, 91—99 (1997) 非特許文献 3 : Drug Targeting, 4, 321—330 (1997)

発明の開示

発明が解決しょうとする課題

[0009] 本発明の目的は、血液中を長期間に渡って安定に循環して固形がんにターゲティングし、し力も明確ながんの画像を得ることのできる造影剤を提供することにある。課題を解決するための手段

[0010] 本願の発明者らは、例えば、 Weisslederらによる造影剤系の使用に際して、必ずしも明確ながん画像が得られな、のは、がん組織のみではなく正常組織の血管までも高いコントラストになってしまうことに、主たる原因が存在すると推測した。より具体的には、一般に、高分子物質が血流からがん組織に移行する速度は遅いため、大量の高分子をがん組織に移行させるためには、長、時間血液を循環させて移行する機会が多く得られるように造影剤系を設計する必要があり、他方、カゝような造影剤系はがん組織に充分ターゲティングされた時点でもなお正常の血管中に多量の造影剤が残っていて、正常組織とがん組織との大きな信号強度の差が得られない状態となると推察した。

[0011] このような推察に基づいて、本発明者らは Gd—高分子コンジュゲートが、がん組織または部位で解離しやすいが、正常の血管の血流中ではある程度安定に Gd原子をブロックした状態を維持しうる Gd—高分子コンジュゲートを提供すべく研究してきた。その結果、ある一定の Gd内包高分子ミセルが上記目的を達成できることを見出した

[0012] こうして、本発明によれば、内部コアにガドリニウム (Gd)原子を含有し、そして外部シェルが親水性ポリマー鎖セグメントを含んでなる高分子ミセルであって、生体内で固形がん組織もしくは部位に送達され、その内部に集積された後に高分子ミセル構造を解離しうる高分子ミセルが提供され、力かる高分子ミセルを有効成分として含んでなる MRI造影剤が提供される。

[0013] 好ましい態様の本発明としては、前記の高分子ミセルカ親水性ポリマー鎖セグメントと側鎖にカルボキシル基及びキレート化剤残基を有するポリマー鎖セグメントとを含んでなるブロックコポリマーと、該ブロックコポリマーに配位したガドリニウム原子と、ポリアミンとから形成されるものが挙げられる。

[0014] さらに好ましい態様の本発明としては、前記のブロックコポリマー力ポリ（エチレングリコール) block ポリ（ァスパラギン酸）であって、ァスパラギン酸の反復単位の 5 一 30%にキレート化剤残基が導入されており、そして該ブロックコポリマーに Gd原子が配位した形態にある高分子ミセル及びその MRI造影剤としての使用も挙げられる

[0015] また、別の態様の本発明として、該高分子ミセルを形成できる特定のブロックコポリマーも提供される。

発明の効果

[0016] 本発明によれば、上記のごとき高分子ミセルを MRI造影剤に使用することにより、正常組織内の血管と固形がん組織における水の T1緩和能力を明確に区別できる。つまり、本発明に従う、高分子ミセル (高分子が数百分子程度会合して形成する、内部コアと外部シェルの 2層構造力も構成されており、さらにコア部に Gd原子が配位している。）というナノサイズのキヤリヤーシステム力 MRI画像でのコントラストを作り出す Gd原子を固形がん局所に選択的に運搬 (ターゲティング)することで、従来の MRI がん診断システムでは得られな力つた、微小がんを明確に描き出すことを可能とする。なお、 Gd原子は、その周辺に存在する水分子の水素原子に働きかけて、その Tl ( 縦緩和時間）を短縮させる。この T1短縮により MRI画像上に高いコントラストがもたらされる。

[0017] 理論に拘束されるものでないが、本発明の高分子ミセルはなぜ固形がんにターゲティングでき、そして本発明の高分子ミセルはなぜ固形がん組織に高い MRIコントラストをもたらすかについては、次のように理解されている。固形がん組織を構成する血管は、高分子やナノサイズの微粒子に対する透過性が異常に亢進していて、かつ正常の組織では血液力移行してきた高分子物質の排出経路であるリンパ毛細管が欠落するという特性を有する。このような特性によって、高分子やナノサイズの微粒子はがん組織に選択的に集積、つまりターゲテイングされる。このような効果は、 EPR効果 (Enhanced Permeability and Retention effect)として知られている（Mat sumura, Y. et al., Cancer Res., 46, 6387— 6392 (1986)参照）。 EPR効果を示すにはその表面が細胞に接着しない性質の高分子やナノサイズであればよぐがん細胞に対する特異抗体などを必要としな、ことが大きな特長である。この効果によつて、正常組織に比べて 3— 10倍の濃度でがん組織に夕ーゲティングできることが様々な例で示されている。例えば、抗がん剤を固形がんにターゲテイングしたものとして、本発明者でもある横山、岡野らが開発した、抗がん剤アドリアマイシンを内包した高分子ミセルシステムが挙げられる（M. Yokoyama, et al., J. Drug Targeting, 7 (3) , 171— 186 (1999)参照。）。

[0018] 固形がんを MRI画像上で選択的に高いコントラストを与える工夫は、上述のターゲティング効果の他にもう一つある。それはミセル構造の形成'解離に基づく T1短縮能の変化である。血液中の循環を通して高分子ミセルの固形がんへのデリバリーの概念図を図 1に示す。図 1に示されるように、血液循環中に高分子ミセル構造を形成している間は、 Gd原子はミセルの内部コアにあって外側の水分子からは隔離されているので、水分子の T1を短縮する能力を充分に発揮することができない。つまり、高分子ミセル構造が維持されている場合は MRIコントラストの上昇は起こらない。他方、がん組織にターゲテイングされた高分子ミセルは徐々に Gd結合ブロックコポリマーと正荷電ポリマーに解離する。この解離した状態では、 Gd原子は水分子に近づくことができるので、 T1短縮能を発揮してがん組織の高いコントラストを与える。さらに、高分子に結合している Gd原子は、高分子によって動きが制限される効果によって、 Gd原子一個あたりの T1短縮能が遊離の Gdそれ自体よりも 2— 3倍に増加することが知られている。仮に血液循環中にミセル構造が解離しても、腎臓のろ過作用によって解離したブロックコポリマーは、速やかに尿中に排出されてしまうので、血液に高いコントラストを与えることはない。一方、がん組織では解離した Gd配位ブロックコポリマーでも組織中に保持されるには充分な大きさであり、その結果、長い時間がん組織にとどまって高い MRIコントラストをもたらし続けるものと解される。

図面の簡単な説明

[0019] [図 1]本発明の高分子ミセルの血液中の循環を通して固形がんへのデリバリーの概念図である。

[図 2]本発明の高分子ミセルの好ましい 1例の製造方法及び構造を模式的に示す概念図である。

発明を実施するための最良の形態

[0020] 以下、本発明の各構成についてさらに詳細に説明する。本発明に従う、高分子ミセルは、水性媒体中で、ポリマー分子が数百程度会合して形成する分子集合体であつて、内部コアと外部シェルの 2層構造力も構成されており、さらにコア部に Gd原子が配位している。該高分子ミセルは、生体内（例えば、ヒトを初めとする哺乳動物における）で固形がん組織もしくは部位に送達しそして集積されるものであるから、ナノサイズ、例えば、直径が lOnm— lOOnm程度の超微粒子の形態にある。本発明にいう、「固形がん組織に集積された後に高分子ミセル構造を解離しうる」挙動は、例えば、固形がん組織の in vitroモデルとなりうる、血中の食塩濃度より高い食塩濃度の水溶旅中で高分子ミセルが解離する力否力を測定することにより確認できる。

[0021] 力うな高分子ミセルを形成する高分子は、親水性ポリマー鎖セグメントと、 Gdに配位できる側鎖を有するポリマー鎖とを含んでなるブロックコポリマーであって、ポリアミンの存在下の水性媒体中で上記のようなナノサイズの超微粒子たる高分子ミセルを形成し、そして、例えば固形がん組織中で高分子ミセル構造を解離 (dissociation) することができるものであれば、如何なる種類のブロックコポリマーであってもよい。したがって、ブロックコポリマーは外部シェルを形成する親水性ポリマー鎖セグメントは、本発明の目的に沿うものであれば、如何なる水溶性ポリマーに由来するものであつてもよい。しかし限定されるものでないが、ブロックコポリマーはポリエチレングリコール、ポリ（ビュルアルコール）およびポリ（ビュルピロリドン）に由来するポリマー鎖セグメントを含む。同様に、ブロックコポリマーのもう一方のセグメントである、 Gdに配位して Gdを固定できる内部コアを形成するポリマー鎖セグメントは、効果的に Gdに配位できる側鎖を有するポリマー由来のものであって、本発明の目的に沿うものであればその種類を問わない。このようなポリマー鎖セグメントの具体的なものとしては、ポリ（ァスパラギン酸）、ポリ（グルタミン酸）、ポリ（アクリル酸)およびポリ (メタクリル酸）に由来するセグメントであって、反復単位中のカルボキシル基の一定のものにキレートイ匕残基が導入されたセグメントを挙げることができる。

力べして、本願発明で使用することのできるブロックコポリマーの具体的なものとしては、ポリエチレングリコール block ポリ（ァスパラギン酸）、ポリエチレングリコール b lock ポリ（グルタミン酸）、ポリエチレングリコール block ポリ（アクリル酸）、ポリエチレングリコール block ポリ（メタクリル酸）、ポリ（ビュルアルコール) block ポリ（ァスパラギン酸）、ポリ（ビュルアルコール) block ポリ（ァスパラギン酸）、ポリ（ビ- ルアルコール) block ポリ（グルタミン酸）、ポリ（ビュルアルコール) block ポリ（アクリル酸）、ポリ（ビュルアルコール) block ポリ（メタクリル酸）、ポリ（ビュルピロリドン） block ポリ（ァスパラギン酸）、ポリ（ビュルピロリドン) block ポリ（グルタミン酸 )、ポリ（ビュルピロリドン) block ポリ（アクリル酸）およびポリ（ビュルピロリドン) bio ck ポリ（メタクリル酸）力なる群より選ばれるブロックコポリマーのカルボキシル基を介して、必要によりリンカ一も介して、キレート化剤の残基が共有結合したものを挙げることができる。なお、これらのブロックコポリマーは、ポリマー主鎖のいずれかまたは両末端が、他の機能的な分子、例えば、抗体、抗原、ハプテン、等を結合し得るように修飾されているものも包含する概念として使用している（後述する式中の X基参照）。キレート化剤残基が未結合のブロックコポリマーは、それ自体既知のものが多ぐかりに新規なものであっても、それ自体既知の方法、例えば、ポリ（アミノ酸)セグメントを有するブロックコポリマーにあっては、米国特許第 5, 449, 513号明細書 (特開平 6— 107565号公報に対応する）に記載の方法にしたがって、そしてポリ（メタ）アクリル酸セグメントを有するものにあっては、 K. Matyjaszawski et al., Chem. Rev., 1 01 , 2921— 2990 (2001)に記載の Atomic Transfer Radical Polymerizatio nにより得ることができる。

[0023] ブロックコポリマー中の、ポリエチレングリコール部のような親水性ポリマー鎖セグメントの分子量は 2000— 2万程度が好ましぐ 4000— 12000程度がさらに好ましい。

[0024] リンカ一の具体的なものとしては、 - NH(CH ) - NH (nは 1

2 n 一 6の整数）、すなわち、ェチレンジァミン（一 NHCH CH NH—）、へキサメチレンジァミン（一 NH (CH ) NH—）

2 2 2 6 等、が挙げられる。

[0025] キレート化剤残基は、本発明の目的に沿うものである限り、限定されるものでないが

、ジエチレントリアミン五酢酸（DTP A)、テトラァザシクロドデカン（DOTA)、 1, 4, 7 —トリス（カルボキシメチル)—10— (2，ーヒドロキシプロピル)— 1, 4, 7, 10—テトラァザシクロドデカン (D03A)等力もなる群より選ばれるキレート化剤に由来する残基であることができる。なお、言うまでもなぐキレート化剤は、ガドリニウム原子をキレートできるように、キレートに必要な基以外の部分で上記リンカ一又は酸素原子に結合される

[0026] なお、リンカ一を介してキレート化残基を結合する場合、キレート化残基が結合されずに残るリンカ一の割合はできるだけ少ないことが好ましぐ遊離のリンカ一の割合は、全リンカ一に対して 1/2以下が好ましぐさらに好ましくは 1/3以下である。

[0027] 本発明で好ましく使用することのできるブロックコポリマーとしては、それぞれキレート化剤残基が一定のカルボキシル基に導入されたポリエチレングリコール block—ポリ（ァスパラギン酸）、ポリエチレングリコール block ポリ（グルタミン酸）を挙げることができる力これらを例に、さらに詳細に説明する。

[0028] これらのブロックコポリマーは、より具体的には下記の式（1 )、（1 )、（1 )、（

A-1 A-2 B-1

1 )、（1 )、（1 )、（1 )又は（1 )で表される。 [0029] [化 1]

(ュ A

X-(OCH₂CH₂^(CH₂)~Y"{COCHNH; _f

COOR

( 1 E- 2^

X-(OCH₂CH₂) {CH₂) Y^-{NHCHCO†^ Z

CH₂

COOR

―】）

(lc

X

- (CH₂) Y~ (NHCHCO-) ~ 2

CH₂

CH₂COOR

(1_D ）

X- C^CH^ (CH₂) Y^ (COCH₂CH₂CHNH

COOR

X-(OCH₂CH₂)^(CH₂)7Y-(NHCHCH_£CH₂CO ^-Z

COOR

[0030] 上記各式中、 Xは水素原子、 C Cアルキル、ヒドロキシー C Cアルキル、ァセタ

1 6 1 6

ールもしくはケタール化ホルミル C— Cアルキル、アミノー C Cアルキルまたはべ

1 6 1 6

ンジル基を表し；

Zは水素原子もしくはヒドロキシ、 C— Cアルキルもしくは C Cアルキルォキシ、フェニルー C Cアルキルもしくはフエ-ルー C Cアルキルォキシ、 C Cアルキルフ

1 4 1 4 1 4 ェ-ルもしくは C Cアルキルフエ-ルォキシ、 C Cアルコキシカルボ-ル、フエ-

1 4 1 6

ルー C Cアルコキシカルボ-ル、 C Cアルキルアミノカルボ-ル、またはフエ-ル

1 4 1 6

—C Cアルキルアミノカルボ-ル基を表し；

1 4

nは lO— 10, 000の整数であり、

sは O— 6の整数であり、

ORは、 0H、リンカ一（好ましくは、 NHCH CH NH )またはリンカ

2 2 2 一一キレートイ匕剤残基〔好ましくは、

-NHCH CH NHCOCH (HOOCH―)— NCH CH N (CH CH COOH)— C

2 2 2 2 2 2 2 2

H CH N—（CHCHCOOH) 〕を表し、ここで、キレート化残基は p + qの総数の 5—

2 2 2

30%であり、

pおよび qは、相互に独立して 1一 300の整数であり、

Y¹は NH—または R^a—（CH ) R^b を表し、ここで R^aは OCO、 OCONH

2 r 、 NHC

0、 NHCONH、 COOまたは CONHを表し、 R^bは NHまたは Oを表し、そして Y²は C Oまたは R^C—(CH ) R^d—を表し、ここで R^cは OCO

2 r 、 OCONH、 NHCO、 NHCO

NH、 COOまたは CONHを表し、 R^dは COを表し、そして rは 1一 6の整数を表す。なお、キレートイ匕剤残基の数力 ¾ + qの総数の 5— 30%であるから、当然ながら p + qは 4以上である。

[0031] また、ブロックコポリマーとしては、下記式 (2)に示されるものも好ましく用いることができる。

[0032] [化 2]

X ~ OCH，CH，¾^OCOCH，CH ~ (CH₂ fC)_m-Y (2 )

COOR

(ただし、 Xは水素原子、 C— Cアルキル、ヒドロキシー C— Cアルキル、ァセタールも

1 6 1 6

しくはケタール化ホルミル C— Cアルキル、アミノー C— Cアルキルまたはべンジル

1 6 1 6

基； R¹は水素原子又はメチル基; Yは水素原子、 OH, Br, OR², CN、 OCOR², NH ,

2

NHR²又は N(R ) (R²は、を示す）； mは 4一 600の整数； ORは 0H、リンカ一またはリンカ一—キレート化剤残基を表し、ここで、キレートイ匕残基は mの 5— 30%である）。

[0034] このようなキレート化剤残基を担持するブロックコポリマーは、本発明に従う、高分子ミセルを形成するブロックコポリマーとして好ましく使用でき、し力も本発明者の知る限りでは、従来技術文献未載の化合物である。したがって、本発明に従えば、上記の式 (1 )、（1 )、（1 )、（1 )、（1 )、（1 )、（1 )又は（1 )で表されるキレ

A-1 A-2 B-1 B-2 C一 1 C— 2 D— 1 D— 2

一ト化剤残基を担持するブロックコポリマーも提供される。

[0035] 本発明に関して使用する C Cアルキルまたは C Cアルキルォキシ等の基中の

1 6 1 6

アルキル部分は、炭素原子数が 1一 6のアルキルであり、メチル、ェチル、 n プロピル、 iso プロピル、 n—ブチル、 tert—ブチル、 n—へキシル等を意味する。また、本明細書で用いる式中の結合またはリンカ一は、示されている方向性を以つて各基またはセグメントもしくはブロックを結合または連結して、るものと理解されて、る。

[0036] 上記のキレート化剤残基を有するブロックコポリマーは、都合よくは、例えば次の反応スキームに準じて製造でき、次いで Gdに配位させることができる。なお、下記の反応スキームは、好ましいブロックコポリマーの一例の製造方法を示している力他のブロックコポリマーも同様な方法により製造することができる。また、下記反応スキームの各工程自体は、当業者が化学常識に基づいて容易に実施することができ、また、下記実施例に条件を詳細に記載して、るので、実施例の記述に準じて容易に実施することがでさる。

反]^スキーム：

3]

以ではァスパラギン酸残基を α —アミドとアミドを区別せずに (Asp) と表す。

COOH

となる

[0038] [化 4]

よって、 CH3 - OCH2CH2)_; CH2NH ^ As )_m

CH3 OCH2CH2 CH2NH ^Asp)_m

PEG-P(Asp-ED) COR,

R] = OHまたは NHCH2CH2NH2

PEG-P(Asp-ED-DTPA) COR2

PEG-P(Asp-ED-DTPA-Gd)

[0039] 高分子ミセルの形成: 上記のようにして得られる Gd担持ブロックコポリマーとポリアミンとを、ブロックコポリマーのカルボキシル基 (-COOH)対ポリアミンのアミノ基 (一 NH )の比が 1： 5— 5： 1

2

、好ましくは 1 : 2— 2 : 1となるよう調節した混合水溶液を調製し、必要により pHを 6. 5 一 7. 5に調節した後、室温で、必要により加温もしくは冷却し、数分乃至数時間攪拌し、分画分子量 1, 000の透析膜を使用して蒸留水に対して透析することにより高分子ミセルを調製できる。混合水溶液は、必要により、水混和性の有機溶媒、例えば、ジメチルスルホキシド（DMSO)、 N, Nジメチルホルムアミド（DMF)、ェチルアルコール等をカ卩えてもよい。本発明で使用するポリアミンは、上記のブロックコポリマーと高分子ミセルを形成することができるものであれば如何なる種類、如何なる分子量であってもよい。限定されるものでないが、好ましく使用できるポリアミンとしては、ポリ（L リシン）、ポリ（D—リシン）、ポリ（Lーァノレギニン）、ポリ（D—ァノレギニン）、キトサン、スペルミン、スペルミジン、ポリアリルァミン、プロタミン等を挙げることができる。そして、力ようなポリアミンの分子量は、 500— 50, 000のものが好ましく使用できる。

[0040] 図 2に、以上で説明した高分子ミセルの製造方法及び構造の好ましい 1例を模式的に示す。

[0041] こうして得られる高分子ミセルは、上述した作用効果を奏し、該作用効果は、上記のように図 1に模式的に示されて、る。

[0042] 以下、具体例を挙げ、さらに本発明を具体的に説明する力これらは本発明の理解を容易にする目的で提供するものである。

[0043] 実施例 1：キレート化剤残基を有するブロックコポリマーの製造

(1)アルカリ加水分解

ポリエチレングリコール block ポリ（ 13一べンジル Lーァスパルテート）（以下、 PE G— PBLAと略記する。）のポリエチレングリコールの分子量が 5, 000で j8—べンジル Lーァスパルテートの重合度力 4のもの 1. 00gを取り、 0. 5Nの水酸化ナトリウム水溶液を j8—べンジル Lーァスパルテートユニットに対し 3. 0倍モル等量カ卩えて、室温で 15分程攪拌した。溶液が透明になったところで、 6N塩酸を |8—べンジル Lーァスパルテートユニットに対し 10倍モル等量カ卩えた。その後、この混合液を 0. 1N塩酸、次いで蒸留水中で透析した。最後に凍結乾燥して、ポリエチレングリコール block— ポリ（ァスパラギン酸）（以下、 PEG-P (Asp)と略記する。）を得た。このアルカリ加水分解によって、ポリエチレングリコール block ポリ（ァスパラギン酸）のポリ（ァスパラギン酸)部分の主鎖の約 75%が |8—アミドィ匕すること、およびブロックコポリマーの主鎖の分解が起こらな、ことが確認されて、る。

[0044] 以上と同様の手順により下記の表 1に示す 3種の PEG— P (Asp)を得た。

[0045] [表 1]

表 1 PEG-P (Asp)ブロックコポリマーの合成ァスパラギン酸

Run コード P E G分子重（Asp)ユニット数

5000-26 000 26

2 5000-44 000 44

3 12000-26 000 26

4 12000-49 000 49

[0046] (2)エチレンジァミン（ED)ユニットの結合

PEG— P (Asp)のポリエチレングリコールの分子量が 5, 000でァスパラギン酸のュニット数力 ^s44のもの 391mgを取り、ジメチルスルホキシド 7. 8mLに溶解し、 N— Boc —エチレンジァミン 144mgと水溶性カルボジイミド 166mgをカ卩えて室温で 4時間攪拌した。反応溶液を分画分子量 1, 000の透析膜を用いて、蒸留水に対して透析し、凍結乾燥でポリマーを回収した。次に、このポリマーをトリフルォロ酢酸に溶かし、 0°Cで 1時間攪拌することで Boc基を脱離させた。その後、反応溶液を分画分子量 1, 000 の透析膜を用いて、蒸留水に対して透析し、凍結乾燥でポリマーを回収した。ェチレンジァミンユニットの導入数は¹ H— NMR測定により求め、 16であった。

[0047] 以上と同様の手順により表 2に示す 10種の PEG— P (Asp— ED)を得た。

[0048] [表 2] 表² PEG-P (Asp-ED)ブロックコポリマ一の合成

Asp

Run コード P E G分子量ュニット数 (ED)ュニット数

1 5000-26-5 5， 000 26 5

2 5000-44-9 5, 000 44 9

3 5000-44- 13 5， 000 44 13

4 5000-44- 16 5， 000 44 16

5 5000-44-22 5, 000 44 22

6 12000-26-6 12, 000 26 6

7 12000-26-7 12, 000 26 7

8 12000-26- 10 12, 000 26 10

9 12000-49- 13 12, 000 49 13

10 12000-49- 19 12, 000 49 19

[0049] (3) DTPA (ジエチレントリアミン五酢酸）ユニットの結合

PEG— P (Asp-ED) 5000— 44 9 (表 2の run2) lOOmgをジメチルスルホキシドに溶かし、エチレンジァミン残基に対して 1. 5倍モル等量のトリェチルァミンと 5倍モル等量の DTPA無水物を加え、室温で 1日攪拌した。得られた溶液を水に対して透析し、凍結乾燥した。得られた DTP A導入ブロックコポリマー（PEG— P (Asp— ED— DT PA) )の DTP Aユニットの導入数は¹ H— NMR測定により求め、 6であった。

[0050] 以上と同様の手順により表 3に示す 9種の PEG— P (Asp— ED— DTPA)を得た。

[0051] [表 3]

表 3 PEG-P(Asp-ED-DTPA)ブロックコポリマーの合成

Asp ED DTPA

Run コ一ド P E G分子量ュニット数ュニット数ュニット数

1 5000-26-5-4 5, 000 26 5 4

2 5000-44-9-5 5， 000 44 9 5

3 5000-44-9-6 5, 000 44 9 6

4 5000-44-9-7 5, 000 44 9 7

5 5000-44-16-7 5， 000 44 16 7

6 5000-44-16-9 5, 000 44 16 9

7 12000-26-6-4 12, 000 26 6 4

8 12000-26-7-5 12, 000 26 7 5

9 12000-26-10-4 12, 000 26 10 4

[0052] 実施例 2 : Gd (ガドリニウム原子）の結合 PEG— P (Asp— ED— DTP A) 5000—44—16—9 (表 3の run6)20mgを蒸留水 1.5m Lに溶かし、 DTP A残基の 2. 0モル等量の Gdを GdCl水溶液として加え、 15分室温

3

で攪拌した。ブロックコポリマーのカルボキシル基と等モル等量の EDTA (エチレンジアミン四酢酸)を加えて 10分攪拌した後、分画分子量 1, 000の透析膜を用いて、蒸留水に対して透析し、凍結乾燥でポリマーを回収した。 Gdの導入量は ICP (Inducti vely Coupled Plasma)発光分析装置を用いて決定したところ、 7と求まった。

[0053] 以上と同様の手順により表 4に示す 17種の PEG— P (Asp-ED-DTPA-Gd)を得た。

[0054] [表 4]

表 4 PEG-P( Asp-ED-DTPA-Gd )ブロックコポリマーの合成

Asp ED DTPA Gd

Run コード P E G分子量ュニット数：ニット数：ュニット数：ェニット^:

1 5000-26-5-4-4 5, 000 26 5 4 4

2 5000-26-5-4-3 5, 000 26 5 4 3

3 5000-26-5-4-2 5, 000 26 5 4 2

4 5000-44-9-5-3 5, 000 44 9 5 3

5 5000-44-9-6-7 5, 000 44 9 6 7

6 5000-44-9-7-15 5, 000 44 9 7 15

7 5000-44-16-7-4 5, 000 44 16 7 4

8 5000-44-16-9-6 5, 000 44 16 9 6

9 5000-44-16-9-7 5, 000 44 16 9 7

10 12000-26-6-4-5 12, 000 26 6 4 5

11 12000-26-6-4-4 12, 000 26 6 4 4

12 12000-26-6-4-2 12, 000 26 6 4 2

13 12000-26-7-5-6 12, 000 26 7 5 6

14 12000-26-10-4-6 12, 000 26 10 4 6

15 12000-26-10-4-4 12, 000 26 10 4 4

16 12000-26-10-4-3 12, 000 26 10 4 3

17 12000-26-10-4-2 12, 000 26 10 4 2

[0055] 実施例 3 :ブロックコポリマーとポリカチオンポリマーによる高分子ミセル形成

PEG— P (Asp-ED-DTPA-Gd)とポリカチオンポリマーを別々に 0. 5Mの NaCl 水溶液に溶かし、 pHを 6. 8-7. 2に調整した。この両液を同量混合し室温で 15分攪拌した後、分画分子量 1, 000の透析膜を用いて、蒸留水に対して透析した。得られた溶液と PEG— P (Asp-ED-DTPA-Gd)の 2倍希釈溶液につ!、て、以下の測定を行った。

[0056] (1)ゲルパーミエーシヨンクロマトグラフィー

(2)動的光散乱 (3) 一 NMRによる水の Tl (縦緩和時間）の測定

a)まず、ゲルパーミエーシヨンクロマトグラフィーによってミセル構造形成の確認を行つた o

[0057] 表 5に平均分子量 15, 000のポリアリルァミンと PEG— P (Asp— ED— DTP A— Gd) ブロックコポリマーを混合した結果を示す。ブロックコポリマーの流出体積は 6. 2mL より大きぐまたポリアリルァミンの流出体積は 10mLである。よって、 6. 2mLより小さな流出体積が得られれば、高分子ミセル構造が形成していることがわかる。表 5に示すように、 2種類のブロックコポリマーを各々荷電比 0. 5, 1. 0, 2. 0でポリアリルアミンと混合したところ、いずれの場合も流出体積は 6. 2mLより小さぐミセル構造が形成して、ることがわ力つた。 Run2の高分子ミセルの平均粒径を動的光散乱測定装置で計測したところ 55nmであった。また、試した荷電比の中ではいずれのブロックコポリマーの場合も荷電比 2. 0の場合力もっとも流出体積が小さぐもっとも安定なミセル構造ができていた。そこで以下の検討は荷電比 2. 0で行った。

[0058] [表 5]

表 5 PEG P (Asp ED DTPA Gci)とポリアリルァミン（ΡΛΑ) からのミセル形成

PEG- P (Asp- ED DTPA- Gd) 荷電比ゲル濾過クロマトダラフィ一

^Run の構造（コード） -NH 2/-C00H 流出体積（mL)

1 5000-44- 16-9-7 0. 5 4. 0

2 5Ο00-Ί4- ] 6-9-7 ! , 0 5. 6

3 5000-44- 16-9-7 2. 0 3. 3 A 5000-44-9-5-3 0. 5 Ί. 5

5 5000 44-9- 5 - 3 〖. 0 5. 5

6 5000- 1-9-5-3 2. 0 4. 2

[0059] b)次に、ブロックコポリマーとポリカチオン力成る高分子ミセルが標的組織 '臓器にターゲティングされた後、徐々にミセル構造を解離させて、標的組織'臓器で緩和能を増加させることができるかのモデル実験を行った。

[0060] PEG— P (Asp— ED— DTP A— Gd) 5000— 44— 16— 7— 4と平均分子量 15, 000のポリアリルアミン力成る高分子ミセルに血液中の濃度より 3倍以上高い濃度の 0. 5 Mの NaClを添カ卩して、室温で約 15分経過した後ゲルパーミエーシヨンクロマトグラフィーを測定した。下記の表 6に示すように、 0. 5, 1. 0, 2. 0のいずれの荷電比においても NaCl添加前は流出体積が 5. 0-5. 7mLの範囲にあって高分子ミセル形成を示していたもの力 NaCl添加後は流出体積が 10— l lmLと大きくなつた。これは、 NaCl添カ卩によって高分子ミセル構造が解離したことを示す。この事実は生体内の N aClを主とするイオンによって本発明に従う高分子ミセルのミセル構造が徐々に解離するということも示す。

[0061] [表 6]

表 6 Ρ - Ρ (Λί -ί¾- ί)ΤΡΛ- Gd)とポリアリルアミン（ΡΛΛ) 力'ら成るミセル構造の塩による解離

ゲル滤過クマトグラフィ一流出体積 (ml)

PEC-P (Asp-ED-OTPA-Gd) 荷電比

^Ru" の ffi.ift f つ一ト'） -ΝΊ! 2AC00H Na 添加前 C1添加後

1 5000-44-16-7-1 0. 5 5. 0 1 1

2 5Ο00-44- Ϊ 6-7-4 J , 0 5. 7 ] 0

3 5000-44- 16-7-4 2. 0 5. 6 10

[0062] 下記の表 7には 2種類のポリカチオン（ポリアリルァミンとプロタミン）を用いて PEG— P (Asp— ED— DTP A— Gd)との高分子ミセルを形成させることでの、緩和能 (R1)の変化をまとめた。緩和能 (R1)は式 1によって得られる値で、これが大きいほど Gdl原子あたりの水の縦緩和時間（T1)を短縮させる能力が高いことを示し、 MRI画像上での高、コントラストを得ることができる。

[0063] 表 7の Runlで示すように、分子量 15, 000のポリアリルァミンと高分子ミセルを形成すると、ブロックコポリマー単独（すなわち高分子ミセルを形成していない状態)よりも 30%程度緩和能 R1が小さくなつた。ブロックコポリマー組成の違う run2では、ミセル形成によって緩和能がより大きく変化した。ポリカチオンとして天然の塩基性ペプチドであるプロタミンを用いた run3, 4の場合には、大きな緩和能の変化がみられ、ミセル形成に伴って緩和能が run3の場合には約 lZl5、run4の場合には 1Z5となった。以上より、高分子ミセル構造の形成 '解離に伴って緩和能を大きく変化させ得るという、高分子ミセル MRI造影剤の基本設計が実証されたこととなる。

[0064] [数 1] 式 1 緩和能の定義 T , ：造影剤存在下での水の縦緩和時間（s)

τ ^s :水の縦緩和時間（造影剤非存在下）（s)

― R】 ' tGd]

T i R i ：緩和能（隱。1 . ' り

[Gd] ：造影剤中に含まれる Gd原子の濃度 (mmol )

[0065] [表 7]

表 7 高分子ミセル形成による緩和能（R 1 ) の変化

- 1 - 1 緩和能（Rl) (mmol

PEG- P (Asp- ED- DTPA- Gd) ブロックコポリ '

Run

の構造（コード）ポリカチオン高分子ミセル形成後単独

12000-26-10-4-2 ポリアリルアミン 6. 1 4. 4 5000-44-9-7-15 ポリアリルアミン 9. 3 1.

12000-26-7-5-6 プロタミン 6. 5 0. 42 5000-44-9-6-7 プロタミン 18 3. 6

[0066] 実施例 4 : ブロックコポリマーの組成の緩和能 R1に及ぼす影響

ブロックコポリマーの組成の緩和能 R1に及ぼす影響を表 8にまとめた。 3種の PEG- P(Asp- ED- DTPA)にそれぞれ、 Gdの結合数を変えたものについて pHが 2.8— 4.8の酸性と、 pHが 6.9— 7.3の中性での緩和能 R1を測定した。どの Runでも酸性よりも中性での緩和能 R1が小さくなつた。また、同じ PEG- P(Asp-ED-DTPA)を用いて結合 Gd数を変えると、結合 Gd数が多い方が緩和能 R1が大きくなることがわ力つた。（それぞれ Runl— 3、 Run4— 6、 Run7— 9)また、 Runl— 3と Run4— 6を比べるとエチレンジァミン（ED)基の結合数の少ない Run4— 6の方力緩和能 R1が大きくなることがわかった。さらに、ポリエチレングリコール鎖の長さが異なる Run4— 6と Run7— 9を比べると、ポリエチレングリコール鎖の長さが短い Run7— 9が高い緩和能 R1を示すことがわかった

[0067] [表 8]

表 8 高分子組成よる緩和能（R 1) の変化緩和能 R1 (mmoL . —s¹ )( 括弧内は pH)

PEG-P (Asp-ED-DTPA-Gd)

Run

の構造（コード）酸性側中性側

1 12000-26-10-4-6 12 (3.8) 6.8 (6.9)

2 12000-26-10-4-4 11 (2.8) 6.5 (7.0)

3 12000-26-10-4-3 5.5 (4.8) 4.0 (7.0)

4 12000-26-6-4-5 16 (4.4) 8.2 (7.3)

5 12000-26-6-4-4 10 (3.8) 7.7 (7.2)

6 12000-26-6-4-2 5.9 (3.8) 5.7 (7.3)

7 5000-26-5-4-4 16 (3.6) 14 (7.2)

8 5000-26-5-4-3 10 (3.5) 11 (7.0)

9 5000-26-5-4-2 6.7 (4.2) 7.3 (7.0) 産業上の利用可能性

本発明によれば、正常組織内の血管と固形がん組織における水の T1緩和能力を明確に区別できる造影剤が提供される。したがって、本発明は造影剤の製造業、造影剤を使用する医療診断業で利用できる。

Claims

請求の範囲

[1] 内部コアにガドリニウム (Gd)原子を含有し、そして外部シェルが親水性ポリマー鎖セグメントを含んでなる高分子ミセルであって、生体内で固形がん組織もしくは部位に送達され、その内部に集積された後に高分子ミセル構造を解離しうる高分子ミセル、を有効成分とする核磁気共鳴画像造影剤。

[2] 高分子ミセルカ親水性ポリマー鎖セグメントと側鎖にカルボキシル基及びキレートィ匕剤残基を有するポリマー鎖セグメントとを含んでなるブロックコポリマーと、該ブロックコポリマーに配位したガドリニウム原子と、ポリアミンとから形成される請求項 1記載の造影剤。

[3] ブロックコポリマーがポリエチレングリコール block ポリ（ァスパラギン酸）、ポリエチレングリコール block ポリ（グルタミン酸）、ポリエチレングリコール block ポリ（アクリル酸）、ポリエチレングリコール block ポリ（メタクリル酸）、ポリ（ビュルアルコール) block ポリ（ァスパラギン酸）、ポリ（ビュルアルコール) block ポリ（ァスパラギン酸）、ポリ（ビュルアルコール) block ポリ（グルタミン酸）、ポリ（ビュルアルコール) block ポリ（アクリル酸）、ポリ（ビュルアルコール) block ポリ（メタクリル酸）、ポリ（ビュルピロリドン) block ポリ（ァスパラギン酸）、ポリ（ビュルピロリドン) bloc k ポリ（グルタミン酸）、ポリ（ビュルピロリドン) block ポリ（アクリル酸）およびポリ（ビ -ルピロリドン) block ポリ（メタクリル酸)力なる群より選ばれる少なくとも 1種のブロックコポリマーのカルボキシル基を介して、必要によりリンカ一も介して、キレートイ匕剤の残基が共有結合したものである請求項 2記載の造影剤。

[4] ブロックコポリマー力ポリ（エチレングリコール) block ポリ（ァスパラギン酸）であつて、ァスパラギン酸の反復単位の 5— 30%にキレート化剤残基が導入されている、請求項 3記載の造影剤。

[5] ブロックコポリマーが、下記の式（1 )、（1 )、（1 )、（1 )、（1 )、（1 )、

A-1 A-2 B-1 B-2 C— 1 C— 2

(1 )又は（1 )で表されるブロックコポリマーから成る群より選ばれる少なくとも 1種

D-l D-2

である請求項 1又は 2記載の造影剤。

[化 1] (ュ A )

X (OCH₂CH₂^(CH₂)~Y"{COCHNH-) ~ Z

COOR

、上 E- 2^

X-(OCH₂CH₂) {CH₂) Y^-{NHCHCO†^ Z

CH₂

COOR

―】）

X- (OCH₂CH₂)^- (CH) Y- (COCHNH^ "-" -" 2

CH₂

COOR

(lc ）

X -

(CH₂) Y~ (NHCHCO- ~ 2

CH₂

CH₂COOR

(1_D ）

X- C^CH^ (CH₂) Y^ (COCH₂CH₂CHNH

COOR

X-(OCH₂CH₂)^(CH₂)7Y-(NHCHCH_£CH₂CO ^-Z

COOR

(上記各式中、 Xは水素原子、 C Cアルキル、ヒドロキシー C Cアルキル、ァセタ

1 6 1 6

ンジル基を表し；

Zは水素原子もしくはヒドロキシ、 C— Cアルキルもしくは C Cアルキルォキシ、フ

1 6 1 6

ェニルー C Cアルキルもしくはフエ-ルー C Cアルキルォキシ、 C Cアルキルフェ-ルもしくは C Cアルキルフエ-ルォキシ、 C Cアルコキシカルボ-ル、フエ-

1 4 1 6

—C Cアルキルアミノカルボ-ル基を表し；

1 4

nは 10— 10, 000の整数であり、

sは O— 6の整数であり、

ORは、 0H、リンカ一またはリンカ一一キレート化剤残基を表し、ここで、キレートイ匕残基は p + qの総数の 5— 30%であり、

pおよび qは、相互に独立して 1一 300の整数であり、

Y¹は NH—または R^a—（CH ) R^b を表し、ここで R^aは OCO

2 r 、 OCONH、 NHC

2 r 、 OCONH、 NHCO、 NHCO

NH、 COOまたは CONHを表し、 R^dは COを表し、そして rは 1一 6の整数を表す） [6] ブロックコポリマー力下記の式 (2)で表される請求項 1又は 2記載の造影剤。

[化 2]

1 6 1 6

基； R¹は水素原子又はメチル基; Yは水素原子、 0H、 Br、 OR², CN、 OCOR², NH

2、

NHR²又は N(R ) (R²は、水素原子、 C— Cアルキル、ヒドロキシー C— Cアルキル、ァ

2 2 1 6 1 6

セタールもしくはケタール化ホルミル C Cアルキル、アミノー C Cアルキルまた

1 6 1 6

はベンジル基を示す）； mは 4一 600の整数； ORは 0H、リンカ一またはリンカ一—キレ一ト化剤残基を表し、ここで、キレートイ匕残基は mの 5— 30%である）。

[7] 前記リンカ一が NHCH CH NHであり、前記リンカ

2 2 2 一一キレート化剤残基が、

-NHCH CH NHCOCH (H00CH―)— NCH CH N(CH CH C〇〇H)— CH CH

2 2 2 2 2 2 2 2 2 2

N- (CHCHCOOH)である請求項 5又は 6記載の造影剤。

2

[8] 前記キレート化剤が、ジエチレントリアミン五酢酸、テトラァザシクロドデカン及び 1, 4, 7—トリス（カルボキシメチル)—10— (2，ーヒドロキシプロピル)— 1, 4, 7, 10—テトラァザシクロドデカン力成る群より選ばれる少なくとも 1種である請求項 2ないし 7のいずれ力 1項に記載の造影剤。

前記ポリアミンが、ポリ（L-リシン）、ポリ（D-リシン）、ポリ（L-アルギニン）、ポリ（D- アルギニン）、キトサン、スペルミン、スペルミジン、ポリアリルアミン及びプロタミンから成る群より選ばれる少なくとも 1種である請求項 2ないし 8のいずれ力 1項に記載の造影剤。

下記の式 (1 )、（1 )、（1 )、（1 )、（1 )、（1 )、（1 )又は (1 )で

A-l A-2 B-1 B-2 C— 1 C— 2 D— 1 D-2 表されるブロックコポリマー。

[化 3]

(ュ A )

X (OCH₂CH₂^(CH₂)~Y"{COCHNH-) ~ Z

COOR

、上 E- 2^

X-(OCH₂CH₂) {CH₂) Y^-{NHCHCO†^ Z

CH₂

COOR

―】）

X- (OCH₂CH₂)^- (CH) Y- (COCHNH^ "-" -" 2

CH₂

COOR

(lc ）

X -

(CH₂) Y~ (NHCHCO- ~ 2

CH₂

CH₂COOR

(1_D ）

X- C^CH^ (CH₂) Y^ (COCH₂CH₂CHNH

COOR

X-(OCH₂CH₂)^(CH₂)7Y-(NHCHCH_£CH₂CO ^-Z

COOR

1 6 1 6

ンジル基を表し；

1 6 1 6

1 4 1 6

—C Cアルキルアミノカルボ-ル基を表し；

1 4

nは 10— 10, 000の整数であり、

sは O— 6の整数であり、

pおよび qは、相互に独立して 1一 300の整数であり、

Y¹は NH—または R^a—（CH ) R^b を表し、ここで R^aは OCO

2 r 、 OCONH、 NHC

2 r 、 OCONH、 NHCO、 NHCO

NH、 COOまたは CONHを表し、 R^dは COを表し、そして rは 1一 6の整数を表す） [11] 下記の式 (2)で表されるブロックコポリマー。

[化 4]

1 6 1 6

2、

2 2 1 6 1 6

1 6 1 6

[12] 前記リンカ一が NHCH CH NHであり、前記リンカ基が、

2 2 2 一一キレート化剤残

-NHCH CH NHCOCH (H00CH―)— NCH CH N(CH CH C〇〇H)— CH CH

2 2 2 2 2 2 2 2 2 2

N- (CHCHCOOH)である請求項 10又は 11記載のブロックコポリマー。