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WO2006082771A1 - １‐アミノシクロプロパンカルボン酸等を主成分とする脳卒中又は脳卒中後遺症の予防用又は治療用薬剤 - Google Patents

１‐アミノシクロプロパンカルボン酸等を主成分とする脳卒中又は脳卒中後遺症の予防用又は治療用薬剤 Download PDF

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WO2006082771A1
WO2006082771A1 PCT/JP2006/301416 JP2006301416W WO2006082771A1 WO 2006082771 A1 WO2006082771 A1 WO 2006082771A1 JP 2006301416 W JP2006301416 W JP 2006301416W WO 2006082771 A1 WO2006082771 A1 WO 2006082771A1
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WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
stroke
acc
group
sequelae
control group
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/JP2006/301416
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English (en)
French (fr)
Inventor
Torao Ishida
Ming Gao
Xuxiang Zhu
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
JURIDICAL PERSON SUZUKA UNIVERSITY OF MEDICAL SCIENCE
Original Assignee
JURIDICAL PERSON SUZUKA UNIVERSITY OF MEDICAL SCIENCE
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
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Publication date
Application filed by JURIDICAL PERSON SUZUKA UNIVERSITY OF MEDICAL SCIENCE filed Critical JURIDICAL PERSON SUZUKA UNIVERSITY OF MEDICAL SCIENCE
Publication of WO2006082771A1 publication Critical patent/WO2006082771A1/ja
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Ceased legal-status Critical Current

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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C229/00—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C229/46—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino or carboxyl groups bound to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton
    • C07C229/48—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino or carboxyl groups bound to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton with amino groups and carboxyl groups bound to carbon atoms of the same non-condensed ring
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
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    • A—HUMAN NECESSITIES
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    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
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    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/02—Systems containing only non-condensed rings with a three-membered ring

Definitions

  • the present invention relates to a novel agent for preventing or treating stroke or stroke sequelae.
  • Patent Document 1 treatment of thrombotic symptoms in atherosclerotic stroke with thromboxane A2 synthesis inhibitor (Patent Document 1), prevention of recurrence of stroke at a dose that does not lower blood pressure (Patent Document 2), NR2B subtype selective NMDA reception Stroke treatment combining somatic antagonists with various drugs (Patent Document 3), Stroke preventive agent containing phosphatidylcholine as an active ingredient (Patent Document 4), Peroxidation containing phofen as an active ingredient is reduced Preventive stroke (patent document 5), stroke preventive agent containing xanthine as an active ingredient (patent document 6), stroke preventive agent by improving hypertension symptoms containing dioxanecyclo [3, 3, 0] octane derivative as an active ingredient ( Patent literature 7) etc. are published.
  • Patent literature 7 Patent literature 7
  • 1-aminocyclopropane carboxylic acid also known as alpha-aminocyclopropane carbo Acid (English name: l-aminocyclopropanecarboxylic 'acid; hereinafter abbreviated as ACC;) is a natural substance extracted from concentrated fruit juice (Non-Patent Document 1) and is an odorless, water-soluble white crystalline substance.
  • a type of growth regulator that has one amino group, one carboxylic acid, and one three-membered ring.
  • ACC can be obtained from synthetic methods (Patent Document 8, Non-Patent Documents 2-4) as well as plant extraction methods.
  • ACC is a plant growth-regulating action, ethanol consumption action (Non-patent Document 5), as well as the strykinin-insensitive glycine receptor site of N-methyl-D-aspartate (hereinafter abbreviated as NMDA) receptor complex.
  • NMDA N-methyl-D-aspartate
  • ACC suppresses degeneration of hippocampal nerves induced by NMDA (Non-patent Document 8), protects spinal nerves against NMDA toxicity (Non-patent Document 9), and improves memory through NMDA receptors (Patent Document) 9)
  • Non-patent Document 8 The ability to prevent neuropathy caused by focal ischemia, extensive ischemia, and spinal cord ischemia Long-term administration of ACC reduces the expression of NMDA receptor messenger RNA and reduces the efficacy (Non-patent Document 10).
  • ACC acts on NMDA receptors to protect but not sustain nerves and does not prevent or treat stroke or stroke sequelae.
  • Patent Document 1 Japanese Patent Laid-Open No. 2003-26660
  • Patent Document 2 Japanese Patent Laid-Open No. 2002-370981
  • Patent Document 3 Japanese Patent Laid-Open No. 2002-332095
  • Patent Document 4 Japanese Unexamined Patent Publication No. 2000-239168
  • Patent Document 5 Japanese Patent Laid-Open No. 11-228396
  • Patent Document 6 Japanese Patent Laid-Open No. 10-182469
  • Patent Document 7 JP-A-8-268887
  • Patent Document 8 Japanese Patent Laid-Open No. 7-278077
  • Patent Document 9 JP-A-8-510990
  • Non-Patent Document 1 F. Burroughs, Nature, 1957 179 ⁇ 360
  • Non-Patent Document 2 A. Connors et al., J. Chem. Soc. 1960, page 2129
  • Non-Patent Document 3 E. Bunuel et al., Synlett. 1992 7-7 579
  • Non-Patent Document 4 X. Zhu et al., Synthetic Communication 1998 28-17, 3159
  • Non-patent document 5 BA McMillen et al., Brain-Res. Bull. 2004 64-3, 279
  • Non-patent document 6 R. Trullas et al., Pharmacol. Biochem. Behav. 1989 34-2 31
  • Non-Patent Document 7 R. Nahum-Levy et al., Molecular Pharmacology 1989 56 ⁇ 12 07
  • Non-Patent Document 8 A. Zapata et al., Neuroreport. 1996 7-2 397
  • Non-Patent Document 9 Y. Lin et al., Eur. J. Pharmacol. 1996 318-2 2-3 pages 491
  • Non-Patent Document 10 S. Bovetto et al., Am. Soc. For-Pharmacol. Exp. Therap. 1997 293 ⁇ 3 1503
  • An object of the present invention is to provide a new agent for preventing or treating stroke or sequelae of stroke.
  • the inventors of the present invention compared the effects of ACC on the antihypertensive effect of blood pressure, the incidence of stroke, the severity of sequelae of stroke, major organs, and lifespan in comparison with control rats using ACC.
  • the present invention was completed as a result of various further studies based on this result.
  • the present invention is directed to "ACC and prodrugs thereof, and pharmaceutically acceptable salts thereof, in response to the problem of" providing new drugs for preventing or treating stroke or sequelae of stroke ".
  • a pharmacological agent for preventing or treating stroke or sequelae of stroke comprising a selected compound as a main component.
  • the drug of the present invention is useful as a drug for preventing or treating stroke or stroke sequelae.
  • the present invention is a novel drug for preventing or treating stroke or sequelae of stroke.
  • the main components of the drug of the present invention are ACC and prodrugs thereof, and pharmaceutically acceptable salts and hydrate powers thereof.
  • the ACC can be a natural substance or a synthetic product. Natural ACC is contained in pears, apple juice, etc. Power ACC obtained by extraction from pear apple juice concentrated by the method described in Non-Patent Document 1 mentioned above is found in various other fruits. Because it is included, it can also be extracted from other fruits.
  • the synthetic ACC the force obtained by the method described in Non-Patent Documents 2 to 4 described above, and those synthesized by other methods can be used. Among various synthesis methods, the method described in Non-Patent Document 4 can synthesize ACC in a high yield under mild reaction conditions using easily obtainable materials. desirable.
  • cyclopropane-1,1-dicarboxylic acid (hereinafter abbreviated as Compound 1) is obtained from jetylmalonic acid and 1,2-dibromoethane.
  • Acetic anhydride, concentrated sulfuric acid and acetone are added to compound 1 to obtain spiro- [2,5] -5,7-dioxa-6,6-dimethyloctane-4,8 dione (hereinafter abbreviated as compound 2).
  • Compound 2 is decomposed with hydrazine to give 1-hydrazinocarbocyclopropane-1-carboxylic acid (hereinafter abbreviated as Compound 3).
  • ACC is obtained by the Curtius rearrangement of 1-azidocarbonylcyclopropane-1-force rubonic acid (hereinafter abbreviated as Compound 4) produced by treating Compound 3 with hydrochloric acid followed by sodium nitrate. Many companies sell ACC. Commercially available ACC can also be used. As shown in the examples, ACC has acute toxicity LD50 6.81 g Z kilogram, body weight, food utilization rate, blood image, biochemistry, organs and other subacute toxicity especially bone marrow micronucleus rate, malformation rate, mutagen, There is no toxicity that can be administered to humans without special toxicity that affects reproduction, etc.
  • the prodrug of ACC may be any as long as it is pharmaceutically acceptable as long as it is converted to ACC by hydrolysis or the like.
  • Examples of such prodrugs include, but are not limited to, methyl ester derivatives or ethyl ester derivatives at the carboxyl group in the ACC molecule, and acetyl derivatives at the amino group in the ACC molecule. It may be synthesized in the future.
  • ACC salt and ACC prodrug salt are limited to pharmaceutically acceptable salts. It is.
  • pharmaceutically acceptable salts include alkali metal salts such as sodium and potassium, alkaline earth metal salts such as magnesium and calcium, and ammonia such as ammonium and tetramethylammonium. Salts, organic acid salts such as triethylamine, lysine and arginine, and acid addition salts with mineral acids such as hydrochloric acid, hydrobromic acid and sulfuric acid, but are not limited thereto. Any salt that can be synthesized in the future may be used as long as it is pharmaceutically acceptable as long as it is pharmaceutically acceptable.
  • ACC hydrates include ACC (H20), ACC (H20) 2, ACC (H20) 3, ACC (H20) 4, AC C (H20) 5, ACC (H20) 6, ACC (H20) 7, ACC (H20) 8 is mentioned.
  • Examples of hydrates of ACC salts include ACC ⁇ HC1 (H20).
  • the main component of the medicament for preventing or treating stroke or sequelae of stroke of the present invention is a non-high molecular weight molecule, it is administered orally or parenterally (suppository, intramuscular, subcutaneous, intravenous, intracerebral, etc. ) Can be administered. Even if the main component is a prodrug of ACC, the prodrug is activated in the body, so it is not necessary to activate the prodrug in advance.
  • binder examples include polyvinyl alcohol, polyvinyl ether, ethyl cellulose, methinorescenellose, gum arabic, tragacanth, gelatin, shellac, hydroxypropyl cellulose, hydroxypropyl starch, and polyvinylpyrrolidone.
  • Examples of the disintegrant include starch, agar, ungelatinized, crystalline cellulose, calcium carbonate, sodium hydrogen carbonate, calcium citrate, dextran, and pectin.
  • Examples of the lubricant include magnesium stearate, talc, polyethylene darcol, silica, hydrogenated vegetable oil, and the like.
  • As the colorant those permitted to be added to pharmaceuticals can be used.
  • Examples of flavoring agents include cocoa powder, noh, katsu brain, Perfume acid, hearth oil, dragon brain, cinnamon powder, etc. can be used. These tablets may be appropriately coated on the granules by sugar coating, gelatin coating, etc. if necessary.
  • an isotonic solution such as glucose or physiological saline, a pH adjuster, a buffer, an antioxidant and other stabilizers, a preservative and the like are added.
  • the injection should be subcutaneous, intramuscular, intravenous and intracerebral.
  • the injection may be a solid preparation or a preparation for daily use by freezing and drying after storing the solution in a container.
  • One dose may be stored in a container, and multiple doses may be stored in the same container.
  • the dose of the agent for preventing or treating stroke or sequelae of the present invention varies depending on the dosage form such as oral preparation, suppository, subcutaneous injection, intramuscular injection, intravenous injection, intracerebral injection and the like.
  • the dosage form such as oral preparation, suppository, subcutaneous injection, intramuscular injection, intravenous injection, intracerebral injection and the like.
  • adults are usually administered in daily doses of 0.01 to: LOOO milligrams, preferably 0.1 to 100 milligrams, and 1 dose is given in 1 to 1 doses or divided into 2 to 4 doses. .
  • the dose may be adjusted according to age and symptoms.
  • Example 4 Twenty healthy males and females weighing 19 to 22 grams were divided into 5 groups per group and 4 groups of males and females.
  • the ACC hydrochloride monohydrate obtained in Example 4 was 1.00, 2. 15, 4, 64, and 10.0 (gram Z kilogram body weight) were administered by oral gavage with a sonde (in order, 1.00 group, 2.15 group, 4.64 group, 10.0 group).
  • a sonde in order, 1.00 group, 2.15 group, 4.64 group, 10.0 group.
  • groups 1.00, 2.15, and 4.64 both male and female groups were deadly.
  • group 10.0 5 of 5 animals died within 30 minutes after oral gavage. Calculations showed that LD50 was 6.81 grams / kilogram for both males and females.
  • white blood cell count is female strength S 15.87 ⁇ 3. 35, 16.31 ⁇ 4.27, 14.83 ⁇ 3.76, 17.17 ⁇ 4.00 (10 9th power Z liter), male power s 18.38 ⁇ 3.69, 18.39 ⁇ 3.24, 18.94 ⁇ 4.01, 16.54 ⁇ 1.67 (10 to the 9th power Honoré), Rinno ball ⁇
  • female force S respectively 83.4, 83.7, 81.4, 84.2 (0/0)
  • Yuryoku S their respective 87.3, 88.6, 86.5, 86.3 ( Neutrophils, female strength 15.7, 15.8, 18.0, 15.2 (%), male strength 12.5, 11.0, 13.3, 13.4 (%) and other white blood cells, respectively.
  • GPT is female force respectively 54 . 1 ⁇ 5.69, 64. 5 ⁇ 11. 33, 51. 1 ⁇ 6. 23, 4 5. 2 ⁇ 4.87 ( international units ⁇ liters), Yuryoku s respectively 58.4 ⁇ 5. 17, 58. 7 ⁇ 0. 33, 5 2.8 ⁇ 5.07, 60.4 ⁇ 4.43 (international unit Z liters), serum total protein is 82.5 ⁇ 3.50, 90.9 ⁇ 5.53, 80.9 ⁇ 2.
  • Example 4 25 healthy males and females weighing 25-30 grams each were divided into 5 groups, 5 males and 5 females, and the ACC hydrochloride monohydrate obtained in Example 4 was 0.0, 1. 25, 2.50, 5.00 (gram Z kilogram) and ethyl methanesulfonate 0.08 (gram Z kilogram) in 24 hour intervals. Group 0, 1.25, 2.50, 5.00, and MSE0.08) 6 hours later, the bone marrow of the sternum was removed and stained to examine the micronucleus rate. 0, 0, 1.25, 2.50, 5.00, MSEO.08 / J hemorrhoids rate is female force S, respectively 2.2, 1.4, 1.4, 1.
  • ACC hydrochloride monohydrate obtained in Example 4 was added by 5000, 1000, 200, 40, 8, and 0 microgram per petri dish, and Salmonella 4 strain TA 97a was added to the medium.
  • TA98, TA100, and TA102 were separately inoculated and cultured at 37 degrees Celsius for 48 hours, and the number of colonies of mutant bacteria was counted.
  • a positive control group a medium supplemented with 5 micrograms of the mutagen mitomycin C and 1.5 micrograms of NaN3 was used. Compared to the control group to which no drug was administered, the ACC hydrochloride monohydrate group had no statistically significant difference in the number of mutant colonies.
  • the positive control group to which mitomycin C or NaN3 was administered had a statistically significant difference in the range of P 0.01.
  • the weight gain was 100.4 ⁇ 28.59, 90.2 ⁇ 20.74, 84.9 ⁇ 24.57, 95.3 ⁇ 14.31 (gram).
  • the mortality rates were 0.00, 0.93, 0.98, and 0.00 (%), respectively.
  • the sternum deletion rates reflecting fetal development were 49.02, 45.28, 47.92, and 39.62 (%), respectively.
  • the following is a group in which 2.5% ACC hydrochloride monohydrate solution is injected by intraperitoneal injection of rats at a ratio of 50 mg Z kilogram body weight once daily, 5 times a week.
  • the group that measures cerebral blood flow etc. is the B-ACC group
  • the group that administers the same amount of distilled water by intraperitoneal injection into rats is the control group
  • the group that measures cerebral blood flow etc. of rats under the same administration conditions B-control group During the experiment, they were bred with free intake of solid SP material and tap water.
  • the “Basic Guidelines for Animal Experiments in the Physiological Field” established by the Physiological Society of Japan were followed.
  • Example 11 once a week, the rats were warmed for 10 minutes in a 38 ° C warmer before and after drug administration at the above temperature / humidity room at 11am and 5pm. After adaptation, the systolic phase was performed using the Softron non-invasive automatic blood pressure measuring device (BP-98A) (manufactured by Softron Co., Ltd.) by the tail-cuff method without anesthesia. Blood pressure, diastolic blood pressure and heart rate were measured three times, and the mean and standard deviation were calculated and expressed as mean standard error. The presence or absence of significant difference was examined by t-test.
  • BP-98A Softron non-invasive automatic blood pressure measuring device
  • the systolic blood pressure immediately after the start of administration of ACC hydrochloride monohydrate obtained in Example 4, 1 week, 2 weeks, 3 weeks, and 4 weeks after administration was 150.69 ⁇ 11.2 for the control group, 175.38 ⁇ 10.5, 199.58 ⁇ 18.2, 207.50 ⁇ 17.5, 213.61 ⁇ 11.3 (millimeter Hg), ACC group power 144.77 ⁇ 11.1, 153.33 ⁇ 11.7 (* 3), 175.58 ⁇ 15.2 (* 3), 194.41 ⁇ 14.4 (*), 198.52 ⁇ 16.7 (* 2) (mm Hg), and the diastolic blood pressure was 107.19 ⁇ 11.7, 124.27 ⁇ 10.2, 140.77 ⁇ 17.0, 147.72 ⁇ 8.69, 149.61 ⁇ 13.68 in the control group, respectively.
  • the blood pressure was significantly lower at 1, 2, 3, and 4 weeks after the start of administration compared to the control group.
  • the blood pressure increase was suppressed ( ⁇ ⁇ 0.001, 0.001, 0.05, 0.01).
  • diastolic blood pressure the ACC group showed significantly lower values than the control group at 1 and 2 weeks after the start of administration ( ⁇ ⁇ 0.05 and ⁇ ⁇ 0.005, respectively), but there was a significant difference at 3 and 4 weeks.
  • the power was not recognized.
  • the heart rate there was no significant difference between the ACC group and the control group at each week.
  • Example 12 after blood pressure and heart rate measurement 4 weeks after the start of ACC hydrochloride monohydrate administration, the rats were placed in a metabolic cage and collected for 24 hours. Concerning 24-hour excretion in control group and ACC group, ⁇ 02 / ⁇ 03 by Griess method, creatinine by alkaline picrin method, Na, K and C1 by ion electrode method, Mg by xylidyl-blue method, Ca by OCPC method Measured by N02 / N03 in control group and ACC group are 8.68 ⁇ 3.26 and 4.92 ⁇ 2.07 (*) (micro monore) for j jet, creatinine is 38.75 ⁇ 7.92 and 35.87 ⁇ 8.22 (milligram / decilit nore) for river page, Na is j jet 0.267 ⁇ 0.086 and 0.396 ⁇ 0.06 (water 2) (millimeter equivalent), K is 0.590 ⁇ 0.17 and 0.669 ⁇ 0.13 (millimeter equivalent) in Kawasega, C1 is 0.222
  • N02ZN03 in urine was significantly lower than P ⁇ 0.05 (*), compared with the control group, and urinary Na and C1 were P ⁇ 0.005 (* 2) and P ⁇ 0.05, respectively. The value was significantly high within the range of (*). There was no significant difference between creatine in AC C group and K, Mg, Ca compared with control group.
  • NO02 / N03 which is a metabolite of NO, reflects the amount of NO excreted. NO, especially NO from eNOS is strong It is a powerful vasodilator. On the other hand, NO derived from N0, especially nN0S and iNOS, acts as a neuron-damaging substance.
  • N0S inhibitors reduce the extent of brain tissue damage in stroke.
  • the low N02ZN03 level in the ACC group seems to have reduced stroke, reduced brain damage, and extended life span in SHR-SP rats by reducing NO.
  • the blood pressure lowering effect of ACC hydrochloride monohydrate appears to be related to other blood pressure regulators that have a weak relationship with NO.
  • the amount of Na and C1 excretion was significantly higher in the ACC group than in the control group, because both groups were bred on the same diet, so it was possible to exert a blood pressure lowering effect by promoting NaCl excretion and preventing Na water retention. It is thought that there is sex.
  • Example 13 the urine was collected for 24 hours, then fasted for 24 hours, ether anesthetized, and blood was collected from the abdominal artery.
  • the blood albumin in the control group and ACC group were 2.31 ⁇ 0.18 and 2.33 ⁇ 0.15 (gram / decirit nore), respectively, and the anolebumin / globin ratio was 0.61 ⁇ 0.02 and 0. 6 1 ⁇ 0. 03 (calculated value), GOT is 476. 9 ⁇ 178.1 and 532. 2 ⁇ 175.7 (unit / liter), GPT is 115.
  • gamma-gnoletoleminoretranspeptidase is 1.86 ⁇ 0.90 and 3.17 ⁇ 0.775 (* 2) (unit / liter) , Urea nitrogen in order 20.43 ⁇ 2.82 and 19.50 ⁇ 4.32 (milligram Z deciliter), creatinine in the j jet 0.37 ⁇ 0.08 and 0.35 ⁇ 0.06 (milligram / decirit nore ), Na on the river pages 148.0 ⁇ 7.02 and 153.5 ⁇ 10.8 (mm equivalent / Lit Nore), K on the j jet 6.36 ⁇ 1.37 and 6.75 ⁇ 0.67 (Milli equivalent / Little Nore), Ca is 10.95 ⁇ 1.00 and 10.17 ⁇ 2.69 (Milligram / Decirit Nore), and C1 is 104.0 ⁇ 5.90 107.
  • angiotensin 2 is in the river page 207.2 ⁇ 20.4 and 150.2 ⁇ 81.32 (picogram / millilitre) value Got.
  • Blood albumin reflecting the nutritional status, albumin / golobulin ratio, and GOT, GPT, urea nitrogen, and Creathun, which represent liver and kidney function, all had no significant difference between the control group and the ACC group. The effects of salt monohydrate on the nutritional status and liver and kidney function are considered to be minimal.
  • Gamma GTP level was significantly higher in the ACC group than in the control group within the range of P ⁇ 0.001 (* 2), but within the normal range, it is unlikely to be a side effect of ACC hydrochloride monohydrate. .
  • the angiotensin 1 transferase and angiotensin 2 values in the ACC group tended to decrease. This may contribute to the blood pressure drop of ACC hydrochloride monohydrate.
  • Example 12 the incidence of stroke on the 100th day after administration of ACC hydrochloride monohydrate, the severity of the sequelae of stroke, and the survival status were observed and analyzed. Rats that died were dissected on the same day and pathologically examined for the presence of stroke lesions. The experimental data were expressed as mean standard error. The presence or absence of significant difference was examined by t-test.
  • Example 15 the severity was determined based on the behavioral neurological symptoms of the rat, and the score was evaluated. The following evaluation criteria were used. Sensation (painfulness, etc.) 1 point of hypersensitivity, one-limbed paralysis Power can walk independently, 2 points can be eaten voluntarily on the cage lid, there is one-limbed paralysis There were 3 points for the difficulty of voluntary walking, eating only the food in the cage, and 4 points for death. The ACC group had 4 points compared to the control group, and the ACC group significantly reduced the sequelae of stroke compared to the control group.
  • Example 11 on the 30th day after drug administration, continuous measurement and two-dimensional measurement of cerebral blood flow was performed using the laser-Doppler method on two rats in the B-ACC group and the B-control group. Measurements were made.
  • the rat scalp was incised under anesthesia, the skull was exposed, and the cerebral blood flow of the rat was measured using the laser power imaging device PiM2 (Risu Power Company, Sweden) manufactured by Rishiki. .
  • the presence or absence of significant difference was examined by t-test.
  • Continuous and two-dimensional measurements were performed using the laser Doppler method, and values of ACC group 1.464 ⁇ 0.22 and control group 1.144 people 0.30 (P ⁇ 0. 05) were obtained. This result shows that the cerebral blood flow situation of rats in the ACC group was improved from that in the control group.
  • the contents of the Japan 'Stroke' scale questionnaire are as follows.
  • Japan ' Koma' scale [Awakened without stimulating] 9 points for normality, clearness for general consciousness, 8 points for unclearness, 7 6 points for your name, your name, and your date of birth, 5 points to open your eyes easily with a normal call, 5 points to open your eyes by shaking your loud voice or body 4 points, pain ⁇ Simultaneously repeat the call while applying 3 points to barely open eyes, [not awakening even if stimulated, state] 2 points to move away from painful stimuli, painful stimulus In this case, 1 point is used to drive the limbs or frown, and 0 point is not to respond to pain stimulation. 9 points are classified as A, 8-3 points are classified as B, and 2-points are classified as C.
  • Patients with sequelae of stroke are diagnosed according to the stroke motor dysfunction severity scale and grouped by severity.
  • One group is divided into two groups: the ACC group that receives ACC hydrochloride monohydrate and the non-administered control group.
  • the ACC group that receives ACC hydrochloride monohydrate
  • the non-administered control group In both groups, perform the same rehabilitation according to the severity of the serious injury, and regularly perform a scoring scale for the severity of motor impairment.
  • the effect of ACC hydrochloride monohydrate on preventing or treating stroke sequelae is measured based on the difference in the severity of stroke motor dysfunction between the control group and the ACC group.
  • the contents of the Stroke Motor Dysfunction Severity Scale are as follows.
  • a constant of 14.60 is added to the cumulative value of each category above, and if the value is positive, it is determined that there is sequelae of stroke. From the difference in the severity of stroke motor dysfunction between the control group and the ACC group, the effect of preventing or treating stroke sequelae of ACC hydrochloride monohydrate can be measured.
  • the drug of the present invention can be used as a preventive or therapeutic agent for stroke or stroke sequelae.

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Abstract

【課題】新しい脳卒中又は脳卒中後遺症の予防用又は治療用薬剤を提供すること。 【解決手段】１‐アミノシクロプロパンカルボン酸及びそのプロドラッグ、ならびに薬学的に許容することのできるそれらの塩およびそれらの水和物から選ばれる化合物を主成分とする脳卒中又は脳卒中後遺症の予防用又は治療用薬剤を開発した。例えば、１‐アミノシクロプロパンカルボン酸塩酸塩一水和物は、急性毒性の１００分の１以下の５０ミリグラム／キログラム投与により、脳卒中発症を９割抑え、脳卒中発症の場合も、その後遺症は軽い。

Description

明 細 書
1 -アミノシクロプロパンカルボン酸等を主成分とする脳卒中又は脳卒中後 遺症の予防用又は治療用薬剤
技術分野
[0001] 本発明は、新しい脳卒中又は脳卒中後遺症の予防用又は治療用薬剤に関する。
背景技術
[0002] 平成 13年度の厚生労働省の統計によれば、介護を要する 65歳以上の高齢者 94,75 0人に対し、介護が必要になった主な原因の 1位は脳卒中等脳血管疾患 24,749人、 2位は骨折 11,744人、 3位は痴呆 10,659人であり、脳卒中等脳血管疾患が飛びぬけ て多い。脳卒中又は脳卒中後遺症の予防用又は治療用薬剤の開発が強く望まれる 高齢者の高血圧症患者、糖尿病患者、高脂血症患者は脳卒中を起こしやすい。そ こで、脳卒中又は脳卒中後遺症の予防として、脳卒中又は脳卒中後遺症の原因たる 高血圧症を降圧剤で、糖尿病を抗糖尿病剤で、高脂血症を抗脂血剤で管理する方 法が取られて 、るが、脳卒中又は脳卒中後遺症の発生を十分には防 ヽで 、な 、。 そこで、種々のアプローチに脳卒中又は脳卒中後遺症の予防用又は治療用薬剤 の開発研究が行われている。例えば、トロンボキサン A2合成阻害剤によるァテローム 動脈硬化性脳卒中の血栓症状の治療 (特許文献 1)、血圧を低下させない用量で脳 卒中の再発防止剤（特許文献 2)、 NR2Bサブタイプ選択的 NMDA受容体アンタゴ 二ストを種々の薬剤と組み合わせる脳卒中治療法 (特許文献 3)、ホスファチジルコリ ンを有効成分とする脳卒中予防剤 (特許文献 4)、ァホェンを有効成分とする過酸ィ匕 物を減少させることによる脳卒中予防剤 (特許文献 5)、キサンチンを有効成分とする 脳卒中予防剤 (特許文献 6)、ジォキサンシクロ [3, 3, 0]オクタン誘導体を有効成分 とする高血圧症状の改善による脳卒中予防剤 (特許文献 7)等が公表されている。し かし、未だ十分ではなぐ新しい脳卒中又は脳卒中後遺症の予防用又は治療用薬 剤の開発が望まれている。
[0003] 一方、 1 -アミノシクロプロパンカルボン酸、別名アルファ-アミノシクロプロパンカルボ ン酸（英語名： l— aminocyclopropanecarboxylic 'acid。以下、略称 ACCで表す 。；)は濃縮果物汁より抽出した天然物質 (非特許文献 1)で、無臭'水溶性の白色結晶 体であり、植物成長調節剤の 1種で、 1個のアミノ基と 1個のカルボン酸と 1個の 3員環 を有する。 ACCは、植物抽出法の他、合成法 (特許文献 8、非特許文献 2— 4)からも 得られる。
ACCは、植物成長調節作用、エタノール消費作用（非特許文献 5)の他、 N-メチル -D-ァスパラギン酸 (以下、 NMDAと略称する。）受容体複合体のストリキニン非感受 性グリシン受容体部位の部分ァゴ-ストであり（非特許文献 6)、かつ、グルタミン酸受 容体部位のアンタゴ-ストである（非特許文献 7)。 ACCは、 NMDAにより誘導される 海馬神経の変性を抑え (非特許文献 8)、 NMDA毒性に対し脊髄神経を保護し (非 特許文献 9)、 NMDA受容体を介して記憶を改良し (特許文献 9)、病巣虚血、広範 囲虚血及び脊髄虚血による神経障害を予防する力 ACCの長期投与により NMDA 受容体のメッセンジャー RNAの発現が減少し、薬効が減少する（非特許文献 10)。 従って、 ACCは NMDA受容体に作用して神経を保護するが持続せず、脳卒中又 は脳卒中後遺症を予防又は治療しないと思われた。
以下に先行文献を特許文献と非特許文献に分けて表示する。
特許文献 1：特開 2003 - 26660号公報
特許文献 2 :特開 2002— 370981号公報
特許文献 3：特開 2002— 322095号公報
特許文献 4:特開 2000— 239168号公報
特許文献 5：特開平 11― 228396号公報
特許文献 6：特開平 10— 182469号公報
特許文献 7：特開平 8 - 268887号公報
特許文献 8：特開平 7— 278077号公報
特許文献 9：特開平 8— 510990号公報
非特許文献 1 :し F. Burroughs, Nature, 1957年 179卷 360頁
非特許文献 2 : A. Connorsら、 J. Chem. Soc. 1960年 2129頁
非特許文献 3 :E. Bunuelら、 Synlett. 1992年 7卷 579頁 非特許文献 4 : X. Zhuら、 Synthetic Communication 1998年 28卷 17号 3159頁 非特許文献 5 : B. A. McMillenら、 Brain -Res. Bull. 2004年 64卷 3号 279頁 非特許文献 6 : R. Trullasら、 Pharmacol. Biochem. Behav. 1989年 34卷 2号 31
3頁
非特許文献 7 :R. Nahum-Levyら、 Molecular ' Pharmacology 1989年 56卷 12 07頁
非特許文献 8 :A. Zapataら、 Neuroreport. 1996年 7卷 2号 397頁
非特許文献 9 :Y. Linら、 Eur. J. Pharmacol. 1996年 318卷 2- 3号 491頁 非特許文献 10 : S. Bovettoら、 Am. Soc. for - Pharmacol. Exp. Therap. 1997 年 293卷 3号 1503頁
発明の開示
発明が解決しょうとする課題
[0005] 本発明の目的は、新しい脳卒中又は脳卒中後遺症の予防用又は治療用薬剤を提 供することにある。
課題を解決するための手段
[0006] そこで、今回、発明者等は ACCを用いて脳卒中易発症ラット SHRSPにおける血圧 の降圧作用、脳卒中発症率、脳卒中後遺症の重傷度、主要臓器及び寿命への影響 を対照ラットと比較検討し、 ACCが脳卒中易発症ラット SHRSPの脳卒中又は脳卒中 後遺症の予防又は治療に著しい効果があることを確認し、この結果を基に更に種々 研究した結果、本発明を完成した。
[0007] すなわち、本発明は、「新しい脳卒中又は脳卒中後遺症の予防用又は治療用薬剤 を提供する」という課題に対し、「ACC及びそのプロドラッグ、ならびに薬学的に許容 することのできるそれらの塩およびそれらの水和物力 選ばれる化合物を主成分とす る脳卒中又は脳卒中後遺症の予防用又は治療用薬剤」を提供する。
発明の効果
[0008] 本発明の薬剤は、脳卒中又は脳卒中後遺症の予防用又は治療用薬剤として有用 である。 発明を実施するための最良の形態
[0009] 本発明は新しい脳卒中又は脳卒中後遺症の予防用又は治療用薬剤の発明である 。本発明の薬剤の主成分は ACC及びそのプロドラッグ、ならびに薬学的に許容する ことのできるそれらの塩およびそれらの水和物力 選ばれる化合物である。
[0010] ACCは、天然物質も合成品も使用可能である。天然の ACCは洋ナシやリンゴジュ ース等に含まれており、前述の非特許文献 1に記載の方法により濃縮した洋ナシゃリ ンゴジュースより抽出して得られる力 ACCは他の種々の果物に含まれているので、 他の果物力 抽出したものも使用可能である。合成の ACCは前述の非特許文献 2— 4に記載の方法により得られる力 他の方法で合成したものも使用可能である。種々 の合成法の中、非特許文献 4に記載されている方法は、容易に得られる材料を用い 、温和な反応条件で高収率で ACCを合成可能であるため、大量合成の場合に特に 望ましい。例えば、ジェチルマロン酸と 1, 2-ジブロモェタンよりシクロプロパン- 1, 1 - ジカルボン酸 (以下、化合物 1と略称する。）を得る。化合物 1に無水酢酸、濃硫酸と アセトンを加えてスピロ- [2, 5] -5, 7-ジォキサ -6, 6-ジメチルオクタン- 4, 8ジオン（ 以下、化合物 2と略称する。）を得る。化合物 2をヒドラジン分解して 1 -ヒドラジノカルボ -ルシクロプロパン- 1 -カルボン酸 (以下、化合物 3と略称する。）を得る。化合物 3を 塩酸処理後硝酸ナトリウム処理して生じた 1 -アジドカルボニルシクロプロパン- 1 -力 ルボン酸 (以下、化合物 4と略称する。）のクルチウス転位により ACCを得る。 ACCは 多くの会社が市販している。市販している ACCも使用可能である。 ACCは実施例に 示す様に急性毒性 LD50が 6. 81グラム Zキログラム、体重、食物利用率、血液像、 生化学、臓器等亜急性毒性は特になぐ骨髄小核率、奇形率、変異原、生殖等に影 響を与える特殊毒性もなぐヒトへの投与を躊躇する毒性は認められない。
[0011] ACCのプロドラッグは加水分解等分解を受けて ACCに成るものであれば、薬学的 に許容することのできる限り、どのようなものでもよい。当該プロドラッグの一つとして A CC分子中のカルボキシル基でのメチルエステル誘導体又はェチルエステル誘導体 や ACC分子中のアミノ基でのァセチル誘導体等が挙げられる力 それらに限らない 。将来合成されるものでも差し支えない。
[0012] ACCの塩及び ACCのプロドラッグの塩は薬学的に許容することのできる塩に限ら れる。薬学的に許容することのできる塩としては、例えば、ナトリウム、カリウム等のァ ルカリ金属塩、マグネシウム、カルシウム等のアルカリ土類金属塩、アンモ-ゥム、テト ラメチルアンモ -ゥム等のアンモ-ゥム塩、トリエチルァミン、リジン、アルギニン等の 有機ァミンの塩、塩酸、臭化水素酸、硫酸等鉱酸との酸付加塩等が挙げられるが、そ れらに限らない。薬学的に許容することのできる塩であればよぐ薬学的に許容する ことのできる限り、将来合成される有機化合物との塩でも差し支えない。
[0013] ACC及びそのプロドラッグの水和物、薬学的に許容することのできる ACCの塩及 びそのプロドラッグの塩の水和物も本発明の主成分として用いることができる。 ACC の水和物としては ACC (H20)、 ACC (H20) 2、 ACC (H20) 3、 ACC (H20) 4、 AC C (H20) 5、 ACC (H20) 6、 ACC (H20) 7、 ACC (H20) 8が挙げられる。 ACCの塩 の水和物としては ACC · HC1 (H20)等が挙げられる。
[0014] 本発明の脳卒中又は脳卒中後遺症の予防用又は治療用薬剤は、主成分が非高 分子であることから、経口投与又は非経口投与 (坐薬、筋肉内、皮下、静脈内、脳内 など）のいずれでも投与できる。主成分が ACCのプロドラッグの場合も、体内で当該 プロドラッグが活性ィ匕するので、当該プロドラッグを予め活性ィ匕しておく必要はな 、。
[0015] 経口用製剤を調製する場合、賦形剤、さらに必要に応じて、抗酸化剤、結合剤、崩 壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味矯臭剤などを加えた後、常法により、錠剤、被服錠剤、 顆粒剤、カプセル剤、溶液剤、シロップ剤、エリキシル剤、油性又は水性の懸濁液剤 などとする。賦形剤としては、例えば、乳糖、コーンスターチ、白糖、ブドウ糖、ソルビ ット、結晶セル一ロスなどが挙げられる。結合剤としては、例えば、ポリビニルアルコー ル、ポリビニルエーテル、ェチルセルロース、メチノレセノレロース、アラビアゴム、トラガ ント、ゼラチン、シェラック、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ 、ポリビニルピロリドンなどが挙げられる。
[0016] 崩壊剤としては、例えば、デンプン、寒天、ゼラチン未、結晶セルロース、炭酸カル シゥム、炭酸水素ナトリウム、クェン酸カルシウム、デキストラン、ぺクチンなどが挙げ られる。滑沢剤としては、例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレンダリ コール、シリカ、硬化植物油などが挙げられる。着色剤としては、医薬品に添加するこ とが許可されているものが使用できる。矯味矯臭剤としては、ココア末、ノ、ッカ脳、芳 香酸、ハツ力油、竜脳、桂皮末などが使用できる。これらの錠剤は、顆粒剤には、糖 衣、ゼラチン衣、その他必要により適宜コーティングしてもよい。
[0017] 注射剤を調製する場合、必要により、グルコースや生理的食塩水等の等調液、 pH 調整剤、緩衝剤、抗酸化剤及びその他の安定化剤、保存剤などを添加し、常法によ り、皮下、筋肉内、静脈内、脳内注射剤とする。注射剤は、溶液を容器に収納後、凍 結乾燥などによって、固形製剤として、用事調製の製剤としてもよい。また、一投与量 を容器に収納してもよぐまた、多投与量を同一の容器に収納してもよい。溶液の場 合、酸素や湿気を遮断する方がよい。そのため、場合によってはアンプル型の容器 に入れ、空気を抜くか、窒素ガス等で空気を置換しておく方がよい。公知の方法でよ い。
[0018] 本発明の脳卒中又は脳卒中後遺症の予防用又は治療用薬剤の投与量は、経口 剤、坐薬、皮下注射剤、筋肉内注射剤、静脈内注射剤、脳内注射剤等剤型によって 異なるが、ヒトの場合、成人 1日当たり通常 0. 01〜： LOOOミリグラム、好ましくは、 0. 1 〜 100ミリグラムの範囲で、 1曰量を 1曰 1回、あるいは 2〜4回に分けて投与する。な お、年齢、症状により適宜増減する。
以下、実施例により本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に 限定されるものではない。なお、 ACCの毒性試験、薬効試験に関し、急性毒性試験、 亜急性毒性試験、催奇性毒性試験、変異原性試験、繁殖性試験中の白血球、リン ノ 、好中数、ヘモグロビン、 GOT,血清総蛋白、アルブミン、トリグリセリド、コレステロ ール、グルコース、尿素、小核率、精子奇形率、復帰変異菌、死胎率、胎児体重，身 長 ·尾長、胸骨欠失率、等の分析は株式会社日本実権医学研究等毒性試験受託会 社がルーチンに受託分析し、尿中 N02ZN03、クレアチュン、 Na、 K、 Ca、 Cl、 Mg、 血中アルブミン、グロブリン、 GOT、 GTP、ガンマ-ダルタミルトランスぺプチダーゼ、尿 素窒素、クレアチュン、 Na、 K、 Ca、 Cl、 Mg、アンギオテンシン 1転換酵素、アンギオテ ンシン 2等分析はシオノギ 'バイオメディカル'ラボラトリーズ等臨床検査受託会社が ルーチンに受託分析して 、る。
実施例 1
[0019] 摂氏 0度で氷塩の浴槽中で 24ミリリットルの無水酢酸に 26グラムの化合物 1をカロえ 、攪拌により懸濁しつつ、 98%の濃硫酸 0. 8ミリリットルと 20ミリリットルのアセトンを 1 滴ずつ加えた。不溶物が溶け、透明な溶液になった。この溶液を氷塩浴槽中で更に 1時間攪拌した後に、冷蔵庫に入れ、 1晚放置した。翌日にこの溶液を 300ミリリット ルの氷水で希釈した。生じた結晶をろ過で分離し、 300ミリリットルの氷水で 2回洗浄 し、第 1番目の結晶を得た。ろ液と洗浄液を合わせ、飽和炭酸水素ナトリウムで PH5 にまで中和し、生じた結晶をろ過で分離し、少量の氷水で 2回洗浄し、第 2番目の結 晶を得た。ろ液を 50ミリリットルのエーテルで 3回抽出し、エーテル層を分離し、蒸発 させ、第 3番目の結晶を得た。第 1番目力 第 3番目までの結晶嫌め、乾燥し、 29 グラムの結晶を得た。融点 (摂氏 61— 63度）とシクロへキサンとアセトン（3 : 1容量比） で展開した薄層クロマトグラフのアールエフ値 (0. 34)より、この結晶が化合物 2であ ることを確認した。
実施例 2
[0020] 実施例 1で得られた化合物 2の 17グラムを室温 (摂氏 21— 25度)で無水エタノール 100ミリリットルに懸濁し、その懸濁液に 10グラムの 85%ヒドラジン水和物と無水エタ ノール 10ミリリットルの混合溶液を 1滴ずつ加えた。不溶物が溶け、透明な溶液にな つた。この透明溶液を室温で 4晚放置した。溶液中の化合物 2が消失したことを実施 例 1に記載の薄層クロマトグラフで確認した。溶液を蒸発させ、生じた白 、針状結晶 を吸引ポンプでろ過し、結晶を少量の無水エタノールで洗浄し、乾燥した。 14. 4ダラ ムの乾燥結晶を得た。融点 (摂氏 150— 152度）とエタノールで展開した薄層クロマト グラフのアールエフ値 (0. 5)より、この結晶が化合物 3であることを確認した。
実施例 3
[0021] 実施例 2で得られた化合物 3の 5グラムを室温で水 10ミリリットルに溶解し、その溶 液に 36— 38%の濃塩酸 5ミリリットルをカ卩え、 15グラムの砕いた氷とエーテル 20ミリリ ットルの中に注ぎ、攪拌して不溶物を懸濁した。氷塩の浴槽中で懸濁液を攪拌しつ つ、 34. 5%の亜硝酸ナトリウム水溶液 5. 7ミリリットルを 1滴ずつゆつくりと添カ卩した。 不溶物が溶け、透明な溶液になった。この透明溶液を更に 20分間攪拌した。操作中 混合液の温度は摂氏 0度力もマイナス 5度の間で維持した。エーテル層を分離した。 水層を冷却したエーテル 10ミリリットルで 2回抽出した。得られた 3つのエーテル溶液 を合わせ、無水塩ィ匕カルシウム上で 15分間乾燥させた。乾燥させたエーテルを摂氏 40度の浴槽中のフラスコに入ったベンゼン 30ミリリットル中に 1時間かけて移した。ベ ンゼン溶液中のエーテルと窒素を室温で蒸発させた。エーテルと窒素を蒸発させた ベンゼン溶液に 36— 38%の濃塩酸 12ミリリットルを振動させながら 1滴ずつ加えた。 ベンゼンと炭酸ガスを減圧で除いた。残った溶液を水で希釈し、濃塩酸で PHを 1〖こ 調節し、エタノールと水で再結晶させ、室温で減圧で乾燥させた。 2. 5グラムの乾燥 結晶を得た。融点 (摂氏 215— 220度）と nブタノールと酢酸と水 (6 : 2 : 2容量比）で 展開した薄層クロマトグラフのアールエフ値（0. 42)、赤外線スペクトル IR(KBr) (30 50、 3050— 2800、 2640— 2440、 2100、 1650—1540、 1410、 1635cm— 1)、 プロトン核磁気共鳴スペクトル 1H-NMR(CF3C00Dゝ 79. 542MHz) (1. 83 (s, 2H )、 1. 95 (s, 2H)ppm)、質量スペクトル MS(mZz, EI) 101 (M + )、 83、 56、 55、 5 4、 38、 36、 28、元素分析（C31. 06、 H6. 48、 N8. 97、 C122. 79)より、この結晶 力 SACCの塩酸塩 1水和物 C4H10C1NO3であることを確認した。
実施例 4
[0022] 実施例 1から 3と同様な操作で ACC塩酸塩 1水和物を 450グラム合成した。これを 用いて「食品安全性毒理学評価程序和方法」に準拠して、急性毒性試験、亜急性毒 性試験、小核試験、変異原性試験、生殖に及ぼす影響試験等を行った。
実施例 5
[0023] 体重 19— 22グラムの健康なマウス雌雄 20匹ずつを 1群 5匹、雌雄各 4群に分け、 実施例 4で得られた ACC塩酸塩 1水和物を 1. 00、 2. 15、 4. 64、 10. 0 (グラム Zキ ログラム体重)ずつゾンデで経口より強制投与 (順に 1. 00群、 2. 15群、 4. 64群、 1 0. 0群とする。）し、 7日間観察し、急性毒性を調べた。 1. 00群、 2. 15群、 4. 64群 は雌雄いずれの群も死なな力つた。 10. 0群は強制経口投与後 30分以内に 5匹中 5 匹が死亡した。計算により LD50は雌雄とも 6. 81グラム/キログラムになった。
実施例 6
[0024] 体重 90— 120グラムの健康な SDラット雌雄 40匹ずつを 1群 10匹、雌雄各 4群に分 け、実施 f列 4で得られた ACC塩酸塩 1水禾ロ物を毎日 0. 0、 0. 125、 0. 25、 0. 50 (グ ラム Zキログラム体重)ずつ 30日間ゾンデで経口より強制投与 (各群を順に 0. 0群、 0. 125群、 0. 25群、 0. 50群とする。）し、 30日間観察し、亜急性毒性を調べた。 4 週目の 0.0群、 0. 125群、 0. 25群、 0. 50群の体重は、雌力それぞれ 194.0±15 .44、 188.0±19. 24、 191.4±12.89、 199. 5±16. 78 (グラム）、雄力それぞ れ 257.0±18. 31、 254.4±37. 52、 265.0±19. 75、 260.6 ±24. 12(グラ ム）、食物利用率（体重増量 Z摂取量）は、雌がそれぞれ 21. 99±4. 28、 20. 98士 3. 28、 21.43±3. 26、 21.00±2. 23 (%)、雄力それぞれ 28.61±2.41、 28. 90±7. 12、 30. 58±2. 52、 31.05±5. 11 (%)、ヘモグロビン量は、雌力それぞ れ 14. 29±0. 76、 14. 93±0. 91、 14. 76±0.68、 14.06±0.67(グラム Zデ シリットル;)、雄力それぞれ 14.67±1.43、 14. 13±1.42、 14. 17±0.85、 14. 66±0.66 (グラム Zデシリットル）、白血球数は、雌力 Sそれぞれ 15. 87±3. 35、 16 . 31±4. 27、 14. 83±3. 76、 17. 17±4.00 (10の 9乗個 Zリットル）、雄力 sそれ ぞれ 18. 38±3.69、 18. 39±3. 24、 18. 94±4.01、 16. 54±1.67(10の 9乗 偶/リットノレ）、リンノ 球 ίま、雌力 Sそれぞれ 83.4、 83. 7、 81.4、 84. 2(0/0)、雄力 Sそ れぞれ 87. 3、 88.6、 86. 5、 86. 3(%)、好中球は、雌力それぞれ 15. 7、 15.8、 18.0、 15. 2(%)、雄力それぞれ 12. 5、 11.0、 13. 3、 13.4(%)、その他の白血 球 ίま、雌力 Sそれぞれ 0. 9、 0. 5、 0.6、 0.6(0/0)、雄力 Sそれぞれ 0. 2、 0.4、 0. 2、 0 . 3(%)、 GPTは、雌力それぞれ 54. 1±5.69、 64. 5±11. 33、 51. 1±6. 23、 4 5. 2±4.87 (国際単位 Ζリットル）、雄力 sそれぞれ 58.4±5. 17、 58. 7±0. 33、 5 2. 8±5.07、 60.4±4.43 (国際単位 Zリットル）、血清総蛋白量は、雌がそれぞ れ 82. 5±3. 50、 90. 9±5. 53、 80. 9±2. 33、 83. 5±4.40(グラム Zリットル） 、雄力 Sそれぞれ 74. 1±3.84、 72. 3±3. 13、 73.0±4. 14、 73. 1±3. 90(グラ ム Zリットル）、アルブミンは、雌力 Sそれぞれ 39. 1±0.88、 39. 2±1.03、 39.0士 0. 67、 39. 1±1. 29 (グラム Zリットル）、雄力 sそれぞれ 36. 6±1. 58、 35. 8±0. 92、 36. 1±0. 99、 36.0±1.05 (グラム/リットノレ）、トリグリセリド ίま、雌力それぞ れ 0.87±0. 22、 0. 95±0. 15、 0.65±0.08、 0.89±0. 25 (ミジモノレ/リツ卜ノレ )、雄力 Sそれぞれ 1. 16±0.49、 1.41±0. 50、 1.00±0. 21、 1.62±0. 54(ミリ モノレ/リットノレ）、コレステロ一ノレ ίま、雌力 Sそれぞれ 2. 52±0. 34、 2.43±0. 34、 2 . 86±0. 35、 1. 97±0. 29 (ミリモル Ζリットル）、雄力それぞれ 2. 24±0. 32、 1. 98 ±0. 18、 1. 96±0. 16、 2. 08±0. 32 (ミジモノレ/リツ卜ノレ）、グノレ =fースは、雌 力 sそれぞれ 4. 76±0. 50、 4. 89±0. 87、 4. 53±0. 39、 5. 19± 1. 06 (ミリモル Zリツ卜ル）、雄力 sそれぞれ 4. 48±0. 58、 4. 29±0. 63、 4. 50±0. 57、 4. 62士 0. 42 (ミリモル Zリットル）、尿素は、雌力 Sそれぞれ 7. 02± 1. 12、 6. 90±0. 81、 6 . 99±0. 65、 7. 96± 1. 13 (ミリモル Zリットル）、雄力 sそれぞれ 5. 80±0. 51、 5. 75 ±0. 51、 4. 87±0. 43、 5. 25±0. 61 (ミリモル Zリットル）、肝体比は、雌力 sそ れぞれ 4. 20±0. 37、 4. 34±0. 15、 4. 21 ±0. 34、 3. 82±0. 54 (%)、雄カそ れぞれ 3. 99±0. 34、 3. 97±0. 37、 3. 98±0. 16、 4. 00±0. 15 (%) ,腎体比 は、雌力それぞれ 0. 79±0. 08、 0. 80±0. 03、 0. 81 ±0. 05、 0. 83±0. 06 ( %)、雄力 Sそれぞれ 0. 83±0. 09、 0. 80±0. 04、 0. 82±0. 04、 0. 85±0. 05 ( %)であった。即ち、薬剤を投与しない対照群に比較し、どの薬剤投与群も体重、食 物利用率、ヘモグロビン、白血球数、白血球中のリンパ球と好中球とその他の白血球 の割合、 GPT、血清総蛋白質、血清アルブミン、トリグリセリド、コレステロール、ダルコ ース、尿素、肝体比、腎体比のいずれについても統計的有意差はな力つた。
実施例 7
[0025] 体重 25— 30グラムの健康なマウス雌雄 25匹ずつを 1群 5匹、雌雄各 5群に分け、 実施例 4で得られた ACC塩酸塩 1水和物を 0. 0、 1. 25、 2. 50、 5. 00 (グラム Zキロ グラム）、メタンスルホン酸ェチルを 0. 08 (グラム Zキログラム）ずつ 24時間間隔で 2 回強帘 IJ経口投与（各群を川頁に 0. 0群、 1. 25群、 2. 50群、 5. 00群、 MSE0. 08群と する。）し、その 6時間後に胸骨の骨髄を取り出し、染色して小核率を調べた。 0. 0群 、 1. 25群、 2. 50群、 5. 00群、 MSEO. 08群の/ Jヽ核率は、雌力 Sそれぞれ 2. 2、 1. 4 、 1. 4、 1. 8、 34. 2 (千分率）、雄力それぞれ 1. 6、 1. 8、 1. 8、 1. 6、 33. 2 (千分 率)であった。薬剤を投与しない対照群に比較し、どの ACC塩酸塩 1水和物投与群も 骨髄小核率に統計的有意差はな力つた。メタンスルホン酸ェチルを投与する陽性対 照群は雌雄共に Pく 0. 01の範囲で統計的有意差があった。
実施例 8
[0026] 体重 20— 25グラムの健康な雄マウス 50匹を 1群 10匹、 5群に分け、実施例 4で得 られた ACC塩酸塩 1水和物を 0、 1. 25、 2. 50、 5. 00 (グラム Zキログラム体重）、マ イトマイシン Cを 0. 002 (グラム Zキログラム体重)ずつ 5日間強制経口投与 (各群を 川頁に 0. 0群、 1. 25群、 2. 50群、 5. 00群、 MMC0. 002群とする。）し、その 35曰後 に両側の睾丸力も精子を採取し、精子奇形率を調べた。 0. 0群、 1. 25群、 2. 50群 、 5. 00群、 MMC0. 002群の精子奇形率は、それぞれ 1. 58、 1. 40、 1. 36、 1. 48 、 6. 10 (%)であった。薬剤を投与しない対照群に比較し、どの ACC塩酸塩 1水和物 投与群も精子奇形率に統計的有意差はなかった。マイトマイシン Cを投与する陽性 対照群は Pく 0. 01の範囲で統計的有意差があった。
実施例 9
[0027] Ames試験をするために、実施例 4で得られた ACC塩酸塩 1水和物をシャーレ当たり 5000、 1000、 200、 40、 8、 0マイクログラムずつ添加し培地にサルモネラ菌 4株 TA 97a, TA98、 TA100、 TA102を別々に接種し、摂氏 37度で 48時間培養し、変異菌 のコロニーの出現数を数えた。陽性対照群として変異原剤マイトマイシン Cを 5マイク ログラム、 NaN3を 1. 5マイクログラム添加した培地を用いた。薬剤を投与しない対照 群に比較し、どの ACC塩酸塩 1水和物投与群も変異菌のコロニーの出現数に統計的 有意差はな力つた。マイトマイシン C又は NaN3を投与する陽性対照群は Pく 0. 01の 範囲で統計的有意差があった。
実施例 10
[0028] 体重 200— 250グラムの健康な未交配の雌の SDラット 60匹を 1群 12匹、 5群に分 け、受精させた。受精後 7日目から 16日目の間、毎日実施例 4で得られた ACC塩酸 塩 1水和物を 0. 0、0. 125、 0. 25、 0. 50 (グラム Zキログラム体重）ずつ投与（各群 を順に。. 0群、 0. 125群、 0. 25群、 0. 50群とする。）し、受精後 20日目に受胎率 を調べた。 0. 0群、 0. 125群、 0. 25群、 0. 50群の受胎率は順に 75. 00、 75. 00 、 91. 67、 83. 33 (%)であった。受精日及び受精 20日後の体重を測定した。体重 増 ίま川頁に 100. 4± 28. 59、 90. 2± 20. 74、 84. 9 ± 24. 57、 95. 3± 14. 31 (グ ラム）であった。死胎率は順に 0. 00、 0. 93、 0. 89、 0. 00 (%)であった。胎児の発 育程度を反映する胸骨欠失率は順に 49. 02、 45. 28、 47. 92、 39. 62 (%)であつ た。薬剤を投与しない対照群に比較し、どの ACC塩酸塩 1水和物投与群の受胎率、 受精後の体重増、死胎率、胸骨欠失率にも統計的有意差はな力つた。胎児の体重、 身長、尾長に関しても対照群に比較し、統計的有意差はな力つた。
実施例 11
[0029] 4週齢雄 SHR-SPZlzmラットを京都にある SHR等疾患モデル動物利用研究会よ り入手後、室温を摂氏 22±1度、湿度を 60±10%、照明時間を 6時から 18時まで 1 2時間に設定した飼育室で 1週間予備飼育した。体重増加が順調で、一般状態に異 常の認められなかったラット 40匹の血圧及び体重を測定し、このラット 40匹を 10匹 ずつ 4群に群間で血圧、体重の差のないように分けた。以下、毎日 1回、週 5回、 2.5 %の ACC塩酸塩 1水和物溶液を 50ミリグラム Zキログラム体重の割合でラットの腹腔 内に注射で投与する群を ACC群、同じ投与条件でラットの脳血流量等を測定する群 を B-ACC群、同量の蒸留水をラットの腹腔内に注射で投与する群を対照群、同じ投 与条件でラットの脳血流量等を測定する群を B-対照群とした。実験期間は固体 SP司 料と水道水を自由に摂取させて飼育した。動物実験の取扱いに関しては、日本生理 学会の定める「生理学領域における動物実験に関する基本指針」に従った。
実施例 12
[0030] 実施例 11において、毎週 1回、前述の温度 *湿度の部屋で午前 11時力 午後 5時 までで、薬剤投与前後にラットを摂氏 38度の加温器中で 10分間加温させ、順応した 後、無麻酔下でティル-カット（tail-cuff)法によりソフトロン（Softron)非観血式自動 血圧測定装置 (BP-98A) (株式会社ソフトロン製)を用いて、収縮期血圧、拡張期血 圧と心拍数を 3回測定し、平均値と標準偏差を計算し、平均値士標準誤差で表した。 有意差の有無を t-検定により調べた。
実施例 4で得られた ACC塩酸塩 1水和物の投与開始直前、投与開始 1週間後、 2 週間後、 3週間後、 4週間後の収縮期血圧は、対照群がそれぞれ 150.69±11.2、 175.38±10.5、 199.58±18.2、 207.50±17.5、 213.61±11.3(ミリメー トル Hg)であり、 ACC群力それぞれ 144.77±11.1、 153.33±11.7(*3)、 175 .58±15.2(*3)、 194.41±14.4(*)、 198.52±16.7(*2) (ミリメートル H g)であり、弛緩期血圧は、対照群がそれぞれ 107.19±11.7、 124.27±10.2、 140.77±17.0、 147.72±8.69、 149.61±13.68 (ミリメートル Hg)であり、 A CC群力それぞれ 104.22±13.1、 111.33±11.7(*)、 124.05±9.6(*2) 、 146.22±10.3、 150.11 ±10.5 (ミリメートノレ Hg)であり、 、拍数 ίま、対照群力 それぞれ 359.83±32.5、 384.05±40.8、 349.80±25.8、 359.66±19. 0、 349.58±22.6 (回数 Ζ分）であり、 ACC群力それぞれ 371.30±27.0、 356 .22±29.3、 348.88±29.8、 359.36±22.6、 354.61±28.3(回数 Ζ分） であった。なお、対照群と比較して Ρ<0.05、 Ρ<0.01、 Ρ<0.001の範囲で有意 差があった ACC群の値はそれぞれ（*)、（* 2)、（ * 3)印で示した。
収縮期血圧は ACC群と対照群ともに投与 4週目まで上昇した力 ACC群では、対 照群と比較して投与開始後 1、 2、 3、 4週目において血圧は有意な低値を示し、血圧 上昇抑制効果を示した（それぞれ Ρ<0.001、 0.001、 0.05、 0.01)。拡張期血 圧について投与開始後 1、 2週目において ACC群は対照群に比べ有意に低値を示 したが（それぞれ Ρ<0.05、 Ρ<0.005)、 3と 4週目においては有意な差が認めら れな力つた。心拍数については、各週目において ACC群と対照群の間に有意な差 が認められな力つた。
実施例 13
実施例 12において、 ACC塩酸塩 1水和物投与開始 4週間後の血圧と心拍数測定 後に、ラットを代謝ケージに入れ、 24時間採尿を行った。対照群と ACC群の 24時間 排泄量に関し、 Ν02/Ν03を Griess法により、クレアチニンをアルカリピクリン法により 、 Naと Kと C1をイオン電極法により、 Mgをキシリジル -ブルー法により、 Caを OCPC法に より測定した。対照群と ACC群の N02/N03は j噴に 8.68±3.26と 4.92±2.07 ( *) (マイクロモノレ）、クレアチニンは川頁に 38.75±7.92と 35.87±8.22(ミリグラム /デシリットノレ）、 Naは j噴に 0.267±0.086と 0.396±0.06(水 2) (ミリ等量）、 Kは 川頁に 0.590±0. 17と 0.669±0. 13 (ミリ等量）、 C1は j噴に 0.222±0.07と 0.31 9±0.08(*) (ミリ等量）、 Mgは川頁に 1.61±0.80と 1.74±0.63(ミリ等量）、 Ca は順に 0.20±0.08と 0.29±0.11 (ミリ等量)の値を得た。 ACC群は対照群に比 ベ、尿中の N02ZN03が P〈0.05(*)の範囲ないで、有意に低値を示し、尿中 Naと C1はそれぞれ P〈0.005 ( * 2)と P〈0.05 ( * )の範囲内で有意に高値を示した。 AC C群のクレアチンと K、 Mg、 Caは、対照群に比べ有意な差は無力つた。 NOの代謝産 物である N02/N03は NOの排泄量を反映している。 NO、特に eNOS由来の NOは強 力な血管拡張物質である。一方、 N0、特に nN0S、 iNOS由来の NOは神経細胞の障 害物質として働いている。三種 N0Sの阻害剤が脳卒中の脳組織障害程度を軽減さ せる。 ACC群の N02ZN03低値は NOを減少させることにより SHR-SPラットの脳卒中 発症予防や脳障害軽減、寿命を延長させたと思われる。しがし、 ACC塩酸塩 1水和 物の降血圧作用は NOとの関係が薄ぐその他の血圧調節物質と関与すると思われ る。 Na、 C1の排泄量は ACC群が対照群より有意に高いことは、両群とも同じ餌で飼育 したので、 NaClの排泄を促進、 Na水貯留を防ぐことにより降血圧作用を発揮した可能 '性があると考えられる。
実施例 14
実施例 13において 24時間採尿後、 24時間絶食させ、エーテル麻酔し、腹動脈より 採血を行った。血中アルブミンは BCG法により、アルブミン/グロビン比は計算により 、 GOTと GPTは UV法により、ガンマ-ダルタミルトランスぺプチダーゼは比色法により 、尿素窒素は UV法により、クレアチュンはアルカリピクリン法により、 Naと Kはイオン電 極法により、 Caは OCPC法により、 C1はイオン電極法により、 Mgはキシリジル -ブルー 法により、アンジォテンシン 1転移酵素は笠原法により、アンジォテンシン 2は RIA' DC C法により測定した。対照群と ACC群の血中アルブミンは順に 2. 31 ±0. 18と 2. 33 ±0. 15 (グラム/デシリットノレ）、ァノレブミン/グロビン比は j噴に 0. 61 ±0. 02と 0. 6 1 ±0. 03 (計算値）、 GOTは川頁に 476. 9± 178. 1と 532. 2± 175. 7 (単位/リット ノレ）、 GPTは j噴に 115. 6±43. 9と 126. 5±68. 2 (単位/リットノレ）、ガンマ-グノレタ ミノレトランスぺプチダーゼは j噴に 1. 86±0. 90と 3. 17±0. 75 ( * 2) (単位/リット ル）、尿素窒素は順に 20. 43± 2. 82と 19. 50±4. 32 (ミリグラム Zデシリットル）、 クレアチニンは j噴に 0. 37±0. 08と 0. 35±0. 06 (ミリグラム/デシリットノレ）、 Naは 川頁に 148. 0± 7. 02と 153. 5± 10. 8 (ミリ等量/リットノレ）、 Kは j噴に 6. 36± 1. 37 と 6. 75±0. 67 (ミリ等量/リットノレ）、 Caは j噴に 10. 95± 1. 00と 10. 17± 2. 69 (ミ リグラム/デシリットノレ）、 C1は川頁に 104. 0± 5. 90と 107. 3±8. 82 (ミリ等量/リット ノレ）、 Mgは川頁に 3. 34±0. 45と 2. 85±0. 51 (ミリグラム/デシリットノレ）、アンジ才テ ンシン 1転移酵素は順に 28. 47± 10. 3と 25. 53± 2. 5 (単位 Zリットル）、アンジォ テンシン 2は川頁位 207. 2± 210. 4と 150. 2±81. 32 (ピコグラム/ミリリットノレ）の値 を得た。栄養状態を反映する血中アルブミン、アルブミン/ゴロブリン比及び、肝、腎 機能を表す GOT、 GPTや尿素窒素、クレアチュンは全て対照群と ACC群の間に有意 な差が無力つたため、 ACC塩酸塩 1水和物の栄養状態、肝腎機能への影響が少な いと考えられる。ガンマ GTP値について ACC群が対照群より P〈0. 001 ( * 2)の範囲 内で有意に高値を示したが、正常範囲内であるので、 ACC塩酸塩 1水和物の副作用 と考えにくい。また、血中 Na、 Cl、 K、 Ca、 Mg値について、 ACC群と対照群の間に有 意な差が示されな力つたことは、 ACC塩酸塩 1水和物が血中電解質のバランスに影 響が無いことを示す。対照群に比べ、 ACC群のアンジォテンシン 1転移酵素、アンジ ォテンシン 2値が低下の傾向が見られた。これは ACC塩酸塩 1水和物の降血圧の一 因の可能 ¾がある。
実施例 15
[0033] 実施例 12において、 ACC塩酸塩 1水和物投与後 100日目の脳卒中の発症率と脳 卒中後遺症の重傷度及び生存状況を観察し、分析した。死亡したラットを当日に解 剖し、脳卒中病変の有無を病理検査した。実験データは平均値士標準誤差で表し た。有意差の有無を t-検定により調べた。
投与 100日まで、行動神経症状 (過敏性、痛覚過敏性、四肢の麻痺等)の観察から 脳卒中症状を示していた個体数はそれぞれ ACC群 2匹、対照群 10匹であった。 AC C塩酸塩 1水和物投与により脳卒中発症を抑制することが示された。投与 100日まで の生存個体数に関しては、 ACC群は 79日目に 1匹死亡した。これに対して対照群 o曰目に 3匹、 75曰目に 2匹、 80曰目に 1匹、 82曰目に 3匹、 85曰目に 1匹、計 10匹の死亡が認められた。 ACC塩酸塩 1水和物投与による延命効果が確認できた（ Pく 0.01)。死亡した個体についての解剖肉眼的所見は対照群の全例に大脳皮質下 と大脳基底核に梗塞巣とその周囲の瀰漫性脳浮腫および出血巣を認めたのに対し 、 ACC群ではこの病理変化が軽力つた。
実施例 16
[0034] 実施例 15において、ラットの行動神経症状により重症度の判定を行い、点数を付き て評価した。以下の評価基準を用いた。感覚 (痛覚等)過敏を 1点、片肢体マヒがある 力 自主的に歩け、ケージ蓋上の餌が自主的に食べられるを 2点、片肢体マヒが存 在し、自主的歩きが困難、ケージ内の餌しかを食べられないを 3点、死亡を 4点とした 。対照群 40点に対し、 ACC群は 4点であり、対照群に比較して ACC群は有意に脳卒 中後遺症を軽減した。
実施例 17
[0035] 実施例 11において、薬剤投与後の 30日目に、 B-ACC群と B-対照群の 2群のラッ トにレーザー ·ドッブラ法を用いて脳血流量の連続的測定と 2次元的測定を行なった 。測定方法としては麻酔下においてラット頭皮を切開し、頭蓋骨を露出させ、リス力社 のレーザ一.トップラー血流画像装置 PiM2 (リス力社、スウェーデン)を用いてラットの 脳血流量を測定した。有意差の有無を t-検定により調べた。レーザードッブラ法を用 いて連続的測定と二次元的測定を行い、 ACC群 1. 464±0. 22、対照群 1. 144士 0. 30 (P< 0. 05)の値を得た。この結果は ACC群ラットの脳血流状況が対照群のラ ットより改善されたことを示している。
実施例 18
[0036] 高血圧症、糖尿病、高脂血症、心疾患、一過性能虚血発作等脳卒中発症の危険 因子の大き 、患者で治験に参加を希望する人に対し、本治験により得られる可能性 のある効果と危険性、及びいつでも治験参加を撤回でき、撤回により不利に扱わな い旨が書かれた文書を渡して、かつ口頭でも説明した上で、それでも参加を希望す る患者に対し、事前に治験倫理委員会の承認を得る治験プロトコールに従い、基礎 治療の上に ACC塩酸塩 1水和物投与を行う ACC群と基礎治療だけを行う対照群に 2 群する。患者の症状を毎日ジャパン 'ストローク 'スケール調査票に従い、点数を記入 し、調査票に書かれた規則に従って計算された計算値で脳卒中の発症を診断し、対 照群と ACC群の脳卒中発症率の差から、 ACC塩酸塩 1水和物の脳卒中予防効果を 測定できる。
ジャパン 'ストローク 'スケール調査票の内容は以下の通りである。
1.意識: a)または b)
a)グラスゴゥ ·コマ ·スケール： [開眼]自発的に開眼するを 4点、呼びかけにより開眼 するを 3点、痛み刺激により開眼するを 2点、全く開眼しないを 1点、 [言語]見当識良 好を 5点、混乱した会話を 4点、不適切な言葉を 3点、理解不能の応答を 2点、反応 なしを 1点、 [運動]命令に従うを 6点、疼痛に適切に反応を 5点、屈曲逃避を 4点、異 常屈曲反応を 3点、伸展反応を 2点、反応なしを 1点とし、 [開眼]と [言語]と [運動]の 合計が 15点を A、 14— 7点を B、 6— 3点を Cと分類する。
b)ジャパン 'コマ 'スケール： [刺激しなくても覚醒している状態]全く正常を 9点、大 体意識清明だが、今一つはっきりしないを 8点、時 '人'場所がわ力もないを 7点、自 分の名前、生年月日が言えないを 6点、 [刺激すると覚醒している状態]普通の呼び かけで容易に開眼するを 5点、大きな声または体を揺さぶることにより開眼するを 4点 、痛み ·刺激を加えつつ呼びかけを繰り返すとかろうじて開眼するを 3点、 [刺激しても 覚醒しな 、状態]痛み刺激に対しはら 、のける様な動作をするを 2点、痛み刺激で少 し手足を動力したり顔をしかめるを 1点、痛み刺激に全く反応しないを 0点とし、 9点を A、 8-3点を B、 2-点を Cと分類する。
分類の値 (A= 7. 74、B= 15. 47、 = 23. 21)を累計に用いる。
2.言語：口頭命令で拳をつくる、時計を見せて時計といえる、サクラを繰り返して言 える、住所'家族の名前が上手に言える: 4Z4を A、 3Z4又は 2Z4を B、 1/4又は 0 Z4を Cと分類し、分類の値 (A= l. 74、 B = 2. 95、 C=4. 42)を累計に用いる。
3.無視:線分二等分試験正常を A、線分二等分試験で半側空間無視を B、麻痺に 気が付力な!、ある！/、は一側の空間を無視した行動をするを Cと分類し、分類の値 (A =0. 42、 B = 0. 85、 C = l. 27)を累計【こ用!ヽる。
4.視野欠損または半盲：同名性の視野欠損または半盲なしを A、同名性の視野欠 損または半盲ありを Bと分類し、分類の値 (A=0. 45、 B=0. 91)を累計に用いる。
5.眼球運動障害:なしを A、側方視が自由にできないを B、眼球に偏位したままで 反対側へ側方視できないを Cと分類し、分類の値 (A=0. 84、 B= l. 68、 C = 2. 53 )を累計に用いる。
6.瞳孔異常:瞳孔異常なしを A、片側の瞳孔異常ありを B、両側の瞳孔異常ありを C と分類し、分類の値 (A= l. 03、 B = 2. 06、 C = 3. 09)を累計に用いる。
7.顔面麻痺:なしを A、片側の鼻唇が浅いを B、安静時に口角が下垂しているをじと 分類し、分類の値 (A=0. 31、 B = 0. 62, C = 0. 93)を累計【こ用 ヽる。
8.足底反射:正常を A、いずれとも言えないを B、病的反射ありを Cと分類し、分類 の値 (A=0. 08、B = 0. 15、C = 0. 23)を累計【こ用!ヽる。
9.感覚系：正常を A、何らかの軽い感覚障害があるを B,はっきりした感覚障害があ るを Cと分類し、分類の値 (A=— 0. 15、B=— 0. 29、C= 0. 44)を累計に用いる
10.運動系：
10- 1.手:正常を A、親指と小指で輪をつくる、またはそばに置いたコップが持てる を B、指は動くが物がつかめない、または全く動かないを Cと分類し、分類の値 (A=0 . 33、 B = 0. 66、 C = 0. 99)を累計【こ用!ヽる。
10-2.腕:正常を A、肘を伸ばしたまま腕を挙上できる、または肘を屈曲すれば腕 を挙上できるを B、腕はある程度動くが持ち上げられない、または全く動かないをじと 分類し、分類の値 (A=0. 66、B= 1. 31、C = 1. 97)を累計に用いる。
10-3.下肢手:正常を A、膝を伸ばしたまま下肢を挙上できる、または自力で膝立 てが可能を B、下肢は動くが膝立てはできない、または全く動力ないを Cと分類し、分 類の値 (A= l. 15、B = 2. 31、C = 3. 46)を累計に用いる。
上記各分類の値の累計から定数 14. 71を差引いた値がプラスの場合は脳卒中発 症と判断する。対照群と ACC群の脳卒中発症の頻度の差から、 ACC塩酸塩 1水和物 の脳卒中予防または治療効果を測定できる。
実施例 19
脳卒中後遺症がある患者を脳卒中運動機能障害重傷度スケールに従い、診断し、 重傷度別に群分けをする。一つの群を ACC塩酸塩 1水和物を投与する ACC群と投 与しない対照群に 2群する。両群とも重傷度に合わせた同じリハビリを行い、定期的 に脳卒中運動機能障害重傷度スケール採点を行う。対照群と ACC群の脳卒中運動 機能障害重傷度の差から、 ACC塩酸塩 1水和物の脳卒中後遺症予防または治療効 果を測定する。
脳卒中運動機能障害重傷度スケールの内容は以下の通りである。
1.顔面麻痺:なしを A、ありを Bと分類し、分類の値 (A=— 1. 27、 B= l. 27)を累 計に用いる。
2.嚥下障害：なしを A、時にむせることがあるを B、チューブ 'フィーディングが必要 を Cと分類し、分類の値 (A=—4. 93、 B= -0. 89、 C = 5. 82)を累計に用 、る。
3.腕:肘を伸ばしたまま腕を挙上できるを A、肘を屈曲すれば腕を挙上できるを B、 重力に抗して運動できないを Cと分類し、分類の値 (A=— 0. 97、 B=— 0. 09、 C = 1. 06)を累計に用いる。
4.手:正常を A、そばに置いたコップが持てるを B、物がつかめないを Cと分類し、 分類の値 (A=— 1. 26、B=—0. 16、C = 1. 42)を累計に用いる。
5.下肢近位筋：臥位で検査し正常を A、膝立て可能を B、膝立て不能を Cと分類し 、分類の値 (A=— 1. 04、 B = 0. 14、 C = 0. 89)を累計に用いる。
6.足関節:座位で検査し、座位がとれない場合は臥位の筋力から推定し、爪先を 上げられるを A、爪先を上げられないを Bと分類し、分類の値 (A=— 0. 52、 B = 0. 5 2)を累計に用いる。
7.複合運動：ベッド上仰臥位力 ベッド脇で立位になるまでの一連の動作で、べッ ド脇に立てるを A、ベッドに座れるを B、座れないを Cと分類し、分類の値 (A=— 1. 2 4、B=—0. 39、C = 1. 63)を累計【こ用!ヽる。
8.歩行:補助具なしに歩けるを A、補助具ないしは介護者があれば歩けるを B、自 力では歩けないを Cと分類し、分類の値 (A=— 3. 63、 B=— 0. 45、 C=4. 08)を 累計に用いる。
上記各分類の値の累計に定数 14. 60を加え値がプラスの場合は脳卒中後遺症あ りと判断する。対照群と ACC群の脳卒中運動機能障害重傷度の差から、 ACC塩酸塩 1水和物の脳卒中後遺症予防または治療効果を測定できる。
産業上の利用可能性
本発明の薬剤は、脳卒中又は脳卒中後遺症の予防剤又は治療剤として、利用可 能性がある。

Claims

請求の範囲
1 -アミノシクロプロパンカルボン酸及びそのプロドラッグ、ならびに薬学的に許容す ることのできるそれらの塩およびそれらの水和物力 選ばれる化合物を主成分とする 脳卒中又は脳卒中後遺症の予防用又は治療用薬剤。
請求項 1に記載する脳卒中予防用又は治療用薬剤。
PCT/JP2006/301416 2005-02-02 2006-01-30 １‐アミノシクロプロパンカルボン酸等を主成分とする脳卒中又は脳卒中後遺症の予防用又は治療用薬剤 Ceased WO2006082771A1 (ja)

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Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH08510990A (ja) * 1993-01-11 1996-11-19 アメリカ合衆国 グリシンｎｍｄａレセプター複合体の機能的アンタゴニストによる認識の改良方法
JP2000508318A (ja) * 1996-04-10 2000-07-04 コザチュク、ウォルター、イー 神経細胞の保護方法
WO2002078670A1 (en) * 2001-03-02 2002-10-10 Neuron Therapeutics, Inc. Neuroprotectants formulations and methods
US20020193285A1 (en) * 2001-03-02 2002-12-19 Hesson David P. Neuroprotectants formulations and methods
CN1631361A (zh) * 2004-12-29 2005-06-29 朱旭祥 α－环丙氨酸在制备治疗心脑血管疾病药物中的应用

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH08510990A (ja) * 1993-01-11 1996-11-19 アメリカ合衆国 グリシンｎｍｄａレセプター複合体の機能的アンタゴニストによる認識の改良方法
JP2000508318A (ja) * 1996-04-10 2000-07-04 コザチュク、ウォルター、イー 神経細胞の保護方法
WO2002078670A1 (en) * 2001-03-02 2002-10-10 Neuron Therapeutics, Inc. Neuroprotectants formulations and methods
US20020193285A1 (en) * 2001-03-02 2002-12-19 Hesson David P. Neuroprotectants formulations and methods
CN1631361A (zh) * 2004-12-29 2005-06-29 朱旭祥 α－环丙氨酸在制备治疗心脑血管疾病药物中的应用

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BOVETTO S. ET AL.: "Chronic Administration of a Glycine Partial Agonist Alters the Expression of N-Methyl-D-aspartate Receptor Subunit mRNAs", THE JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND EXPERIMENTAL THERAPEUTICS, vol. 283, no. 3, 1997, pages 1503 - 1508, XP003000723 *
CARTER A.J.: "Many Agents That Antagonize the NMDA Receptor-Channel Complex in Vivo Also Cause Disturbances of Motor Coordination", THE JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND EXPERIMENTAL THERAPEUTICS, vol. 269, no. 2, 1994, pages 573 - 580, XP003000724 *
KONDO ET AL.: "Dubutsu Model ni Okeru ACPC no Nosotchu Hassho Yobo ni Kansuru Kenkyu", NOSOTCHU, vol. 27, no. 1, 2005, pages 172, XP003000721 *
MUIR K.W. ET AL.: "Clinical Experience With Excitatory Amino Acid Antagonist Drugs", STROKE, vol. 26, 1995, pages 503 - 513, XP000565881 *
VON LUBITZ D.K.J.E. ET AL: "A novel treatment of global cerebral ischaemia with a glycine partial agonist", EUROPEAN JOURNAL OF PHARMACOLOGY, vol. 219, 1992, pages 153 - 158, XP003000722 *

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