WO2005110450A1

WO2005110450A1 - 医薬組成物及び治療方法

Info

Publication number: WO2005110450A1
Application number: PCT/JP2005/008944
Authority: WO
Inventors: Naoki Aikawa; Seitaro Fujishima; Kazuhiko Sekine
Original assignee: Keio University
Current assignee: Keio University
Priority date: 2004-05-17
Filing date: 2005-05-17
Publication date: 2005-11-24
Anticipated expiration: 2006-11-17
Also published as: CA2566877A1; EP1752159A1; EP1752159A4; JPWO2005110450A1

Abstract

　本発明は、IL-18の新しい作用の発見に基づき、IL-18を含有し、ＳＩＲＳ（systemic inflammatory response syndrome; 全身性炎症反応症候群）等の炎症性疾患を予防、改善又は治療するための医薬組成物及び治療方法を提供することを目的とする。炎症性疾患に対し、低下した血漿中又は肝臓のいずれかにおけるインターロイキン１８濃度を、正常値以上に上昇させない量のIL-18を含有する本発明の医薬組成物を投与することで、インターフェロンγに非依存にＳＩＲＳなどの炎症性疾患を予防、改善又は治療できる。

Description

明細書

医薬組成物及び治療方法

技術分野

[0001] 本発明は、炎症性疾患を予防、改善又は治療するための医薬組成物及び治療方法に関する。

背景技術

[0002] インターロイキン 18(interleukinl8又は IL-18)は、グラム陽性桿菌である

Propionibacterium acnes (P. acnes)加熱死菌を前投与したマウスに少量のリポ多糖（ LPS)を静注した時に血中に出現するインターフェロン γ (IFN γ又は interferon γ )産生誘導因子として発見された。 IFN yは、マクロファージゃ NK細胞を活性ィ匕させることで、細胞免疫作用を亢進し、細菌など病原体の感染に対する抵抗性を上昇させる。現在では、 IL-18は CD8細胞や NK細胞や TH-1細胞を活性ィ匕することにより、 IFN y産生を誘導することが明らかになつている。

[0003] IL-18は、多くのサイト力インと異なり、正常時においても低レベルの発現が認められる。しかし、病原体 (ウィルス、原核生物、真核生物)による感染に対しては、発現が増大し、病原体に対する抵抗性を細胞に与える。例えば、マウスに HSVを感染させる前に IL-18を投与しておくことにより、マウスの生存率が著しく改善される。また、 IL-18の投与は、真菌のタリプトコックス症の Cryptococcus neoformansの増殖を抑制し、カンジダ感染に抵抗性を与える。さらに、マウスを抗 IL-18抗体で処理すると、細胞内微生物である Salmonella typhimuriumに対する抵抗性が損なわれる力逆に、有毒株の Salmonellaを致死量感染させたマウスに IL-18を投与すると、組織中の細菌数が減り、致死性が減少する（オッペンハイム（Joost J. Oppenheim)、フェルドマン（ Marc Feldmann)、ドウラム（Scott K. Durum)編、「サイト力イン'リファレンス：宿主防御におけるサイト力イン及び他のメデイエ一ターの概論（Cytokine Reference: A し ompendium of cytokines and Other Mediators of Host Defense)、 (米国)、 /'カア^ ックプレス（Academic Press)、 2000年、 p.338- 350」）。 IL- 18は、 IFN γ以外のサイトカインゃケモカインを誘導することが知られており、その中には、炎症性サイト力インである IL-8、 TNF、 IL-6が含まれている。また、 IL- 18ノックアウトマウスは、炎症性サイトカインを誘導する LPS投与に耐性を有することから、 IL-18は LPSが誘導する炎症性サイト力インに必須の因子であることがわかる。

発明の開示

発明が解決しょうとする課題

[0004] 以上のように、 IL- 18は免疫反応のメディエーターとして知られ、炎症性サイト力インの誘導に重要な役割を有すると考えられていた。

[0005] し力しながら、本発明者により、炎症を抑制するという IL-18の新たな作用が発見された。そこで、本発明は、この IL-18の新たな作用の発見に基づき、 IL-18を含有し、 s丄 RS (systemic inflammatory response syndrome :全身'性炎 ¾E反 ^ 正候群ノ等の炎症性疾患を予防、改善又は治療するための医薬組成物及び治療方法を提供することを目的とする。

課題を解決するための手段

[0006] IL-18は、正常時にも低レベルの発現が認められる。本発明者らは、重篤な熱傷を負った際、 IL-18の発現レベルが低下すること、及び、重症な熱傷を負ったマウスに、少量の IL-18を投与したところ、生存率に著しい改善が見られることを見出した。そのマウス力単離した脾臓細胞は、培養条件下で LPSに反応して炎症性サイト力インを分泌するが、 IL- 18投与マウスでは、その分泌が抑制されることを見出し、本発明の完成に至った。

[0007] 本発明にかかる医薬組成物は、炎症性疾患を予防、改善又は治療するための医薬組成物であって、インターロイキン 18を含有することを特徴とする。前記炎症性疾患が SIRSや sepsis syndromeや敗血症であってもよい。前記炎症性疾患が SIRSに続発する急性肺傷害又は多臓器不全であってもよい。また、インターフェロン γに非依存的に作用してもよい。

[0008] また、前記医薬組成物の治療対象である前記炎症性疾患は、肝臓におけるインタ一ロイキン 18濃度を低下させるものであってもよい。この場合、本発明にかかる医薬組成物は、前記炎症性疾患において低下した肝臓におけるインターロイキン 18濃度を、正常値以上に上昇させないのが好ましい。ここで正常値とは、健常人における測定値のことで、通常ある程度の範囲を有する。

[0009] 本発明に力かる治療方法は、炎症性疾患を羅患した患者に、有効量の IL-18を投与することを特徴とする。前記炎症性疾患が SIRSや sepsis syndromeや敗血症であつてもょヽ。前記炎症性疾患が SIRSに続発する急性肺傷害又は多臓器不全であつてもよい。また、インターフェロン γに非依存的に作用してもよい。

[0010] また、前記治療方法の対象である前記炎症性疾患は、血漿中又は肝臓の!/、ずれかにおけるインターロイキン 18濃度を低下させるものであってもよい。この場合、前記炎症性疾患において低下した血漿中又は肝臓のいずれかにおけるインターロイキン 18濃度を、正常値以上に上昇させな、のが好ま U、。

[0011] 本発明にかかる治療方法は、炎症性疾患に羅患したヒト又はヒト以外の脊椎動物個体を治療するための治療方法であって、前記脊椎動物個体に対し、インターロイキン 18を含有する医薬組成物を投与することを特徴とする。前記炎症性疾患は、血漿中又は肝臓のいずれかにおけるインターロイキン 18濃度を低下させるものであつてもよい。また、前記炎症性疾患において低下した血漿中又は肝臓のいずれかにおけるインターロイキン 18濃度を、正常値以上に上昇させな、量の前記インターロイキン 18を含有する医薬組成物を投与することが好ましい。

[0012] = =関連文献とのクロスリファレンス = =

なお、本願は、 2004年 5月 17日付けで出願した日本国特願 2004-145971号に基づく優先権を主張する。この文献を本明細書に援用する。

図面の簡単な説明

[0013] [図 1]本発明の一実施例において、対照群と熱傷群の各マウス群における肝臓と肺における IL-18含有量を熱傷処理以後の時間の経過とともに示したグラフである。

[図 2]本発明の一実施例において、ヒトにおける血漿中の IL-18含有量を熱傷後の時間の経過とともに示したグラフである。

[図 3]本発明の一実施例において、対照群、非投与群、 IL- 18投与群の各マウス群における LPS投与後の生存率を時間の経過とともに示したグラフである。

[図 4]本発明の一実施例において、対照群、非投与群、 IL- 18投与群の各マウス群における LPS投与後の肺の組織切片像である。 [図 5]本発明の一実施例において、 in vitroで、対照群、非投与群、 IL-18投与群の各マウス群から単離した脾臓細胞を抗 CD3抗体によって刺激した場合の様々なサイト力インの分泌量を示した図である。

[図 6]本発明の一実施例において、 in vitroで、対照群、非投与群、 IL-18投与群の各マウス群から単離した脾臓細胞を LPSによって刺激した場合の様々なサイト力インの分泌量を示した図である。

[図 7]本発明の一実施例において、対照群、非投与群、 IL- 18投与群の各マウス群における LPS投与後の肺のサイト力インの分泌量を示した図である。

発明を実施するための最良の形態

[0014] 以下、上記知見に基づき完成した本発明の実施の形態を、実施例を挙げながら詳細に説明する。実施の形態及び実施例に特に説明がない場合には、 J. Sambrook, E. F. Fntsch & T. Maniatis (Ed.), Molecular cloning, a laboratory manual (3rd edition), Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harbor, New York (2001); F. M. Ausubel, R. Brent, R. E. Kingston, D. D. Moore, J.G. beidman, J. A. Smith, K. Struhl (Ed.), Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons Ltd.などの標準的なプロトコール集に記載の方法、あるいはそれを修飾したり、改変した方法を用いる。また、市販の試薬キットや測定装置を用いている場合には、特に説明が無い場合、それらに添付のプロトコールを用いる。

[0015] なお、本発明の目的、特徴、利点、及びそのアイデアは、本明細書の記載により、当業者には明らかであり、本明細書の記載から、当業者であれば、容易に本発明を再現できる。以下に記載された発明の実施の形態及び具体的な実施例などは、本発明の好まし、実施態様を示すものであり、例示又は説明のために示されて、るのであって、本発明をそれらに限定するものではない。本明細書で開示されている本発明の意図並びに範囲内で、本明細書の記載に基づき、様々な改変並びに修飾ができることは、当業者にとって明らかである。

[0016] = = =本発明が対象とする疾病 = = =

本発明の医薬組成物は、 IL-18を含有し、炎症性疾患を予防、改善又は治療するための医薬組成物である。 [0017] 炎症性疾患の例として、 SIRS (全身性炎症反応症候群）が挙げられる。これは 1991 年にアメリカの胸部疾患学会と集中治療学会によって共同で定義された炎症反応の概念であり、以下の 4項目のうち 2項目以上を満たす場合を SIRSとする。 1)体温 38 °C以上、又は 36°C以下、 2)脈拍 90/分以上、 3)呼吸数 20/分、又は PaCOく 32

2 torr、 4)白血球 12,000/mm³以上、又は 4,000/mm³以下、又は未熟型 10%以上。 SI RSは、外傷、熱傷、膝炎、侵襲の強い術後など感染を伴わない全身性炎症と、感染を伴つ全身'性炎；!正、 sepsis syndrome)に分類れる。さらに、 sepsis syndromeには、血中に細菌の感染が見られるもの (敗血症）とそれ以外に分類される。本発明の医薬組成物は、これら全ての炎症性疾患を治療対象としうる。

[0018] 例えば、重症の熱傷では、患部が細菌に感染し、増殖した細菌が血中に入り敗血症に至る。敗血症は、急性肺傷害 (ALI : Acute Lung Injury)の原因となり、さらに、多臓器不全 (MODS :Multi Organ Dyslunction Syndrome)に至ることもある。本発明の医薬組成物は、抗炎症作用を発揮することにより、こうした重篤な傷害も治療対象としうる。

[0019] 重症の熱傷、敗血症、急性肺傷害などでは、血漿中又は肝臓における IL-18濃度の減少を伴うことが、発明者らの研究によって明らかになった。これらの疾患に IL-18 を投与しても、炎症を引き起こす刺激に対して脾臓細胞カゝら分泌される IFN yの濃度は上昇しない。従って、これらの疾患に対しての IL- 18の投与は、 IFN y非依存的に炎症を抑制する効果があると考えられる。しかし、過度の投与は、 IFN yを誘導することが考えられるので、正常時の IL- 18のレベル以上に増加させな!/、ように IL-18を投与することが好ましい。

[0020] = = =本発明にかかる医薬品の形状及び投与方法 = = =

IL-18又はその薬理学的に許容される塩をヒトに投与する場合には、例えば、 1日あたり約 8mg/kg (体重）の投与量で、 1回又は数回に分けて静脈内投与するとよいが、その投与量や投与回数は、症状、年齢、投与方法などにより適宜変更しうる。

[0021] IL-18及びその薬理学的に許容される塩は、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤、塗布剤などの製剤にして、経口投与してもよいし、直接患部に塗布してもよいし、注射剤、坐剤などの製剤にして、腹腔内、静脈内、動脈内、筋肉内、皮下などへの注射により非経口投与することもできる。また、液状にして、皮膚、粘膜、患部などに塗布したりスプレーしたりしてもよぐ鼻粘膜やのど粘膜などから吸入してもよ、。

[0022] 製剤中の IL-18又はその薬理学的に許容される塩 (有効成分)の含有率は、 1〜90 重量％の間で変動させることができる。例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤などの形態をとる場合には、有効成分を 5〜80重量％含有させるのが好ましい。シロップ剤などの液剤の場合には、有効成分を 1〜30重量％含有させるのが好ましい。さらに、非経口投与する注射剤の場合には、有効成分を 1〜10重量％含有させるのが好ましい。

[0023] IL-18及びその薬理学的に許容される塩の製剤化は、賦形剤 (乳糖、白糖、ブドウ糖、マン-トールなどの糖類、バレイショ、コムギ、トウモロコシなどのデンプン、炭酸カルシウム、硫酸カルシウム、炭酸水素ナトリウムなどの無機物、結晶セルロースなど

)、結合剤（デンプンのり液、アラビアゴム、ゼラチン、アルギン酸ナトリウム、メチルセルロース、ェチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ヒドロキシプロピルセルロース、カルメロースなど）、滑沢剤（ステアリン酸マグネシウム、タルク、水素添加植物油、マクロゴール、シリコーン油）、崩壊剤（デンプン、寒天、ゼラチン末、結晶セルロース、 CMC 'Na、 CMC 'Ca、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、ァルギン酸ナトリウムなど)、矯味矯臭剤 (乳糖、白糖、ブドウ糖、マン-トール、芳香性精油類など)、溶剤 (注射用水、滅菌精製水、ゴマ油、ダイズ油、トウモロコシ油、オリーブ油、綿実油など）、安定剤（窒素、二酸化炭素などの不活性ガス、 EDTA、チォグリコール酸などのキレート剤、亜硫酸水素ナトリウム、チォ硫酸ナトリウム、 L-ァスコルビン酸、ロンガリットなどの還元物質など）、保存剤 (パラォキシ安息香酸エステル、クロロブタノール、ベンジルアルコール、フエノール、塩化ベンザルコ -ゥムなど）、界面活性剤（水素添加ヒマシ油、ポリソルベート 80、 20など）、緩衝剤（タエン酸、酢酸、リン酸のナトリウム塩、ホウ酸など）、希釈剤などの製剤添加物を用いて、公知の方法で行われる。

[0024] なお、 IL- 18の薬理学的に許容される塩としては、例えば、第 4級アンモ-ゥム塩などの有機塩、あるいはアルカリ金属などの金属塩を用いることができる力これらに制限されるものではない。実施例

[0025] ヒト及びヒト以外の脊椎動物において、熱傷を起因とする炎症性疾患に対しての免疫反応及び IL-18の投与効果を確認するため、以下の実験を行った。

[0026] <実施例 1 > 熱傷マウスモデルの作製

7週令の雄の Balb/cマウス（体重 23〜28グラム）をかごに入れ、約一週間自由に水と餌を与えた。その後、対照群、熱傷群に分けた。マウスは実験の一日前 (Day 0)にペントバルビタール麻酔（50mg/kg)下にて背の部分の毛を剃った。翌日 (Day 1)、全てのマウスにエーテル麻酔をし、熱傷群のマウスに対しては、毛を剃った背の部分に 5秒間熱蒸気を当て、体全体の表面積の約 15%の全層熱傷を負わせた。対照群のマウスは、熱蒸気には曝さなかった。その後、全てのマウスはただちに 4mlの生理食塩水で意識を回復させた。

[0027] く実施例 2> 肺及び肝臓における IL-18濃度及び IL-12濃度の測定

IL-12は、 IL- 18とともに、 Th-1細胞分ィ匕に関与する Th-1サイト力インに分類されるサイト力インである。重傷の熱傷の後のこれら Th-1サイト力インの動態を調べるため、実施例 1に従って作製した熱傷群及び対照群のマウスの肺及び肝臓における IL-18 及び IL-12の含有量を測定した。

[0028] 熱傷処理の 24時間後、腹腔内にペントバルビタールを投与してマウスを麻酔し、肺及び肝臓を切除した。取り出した肺及び肝臓に対し、それらの 10又は 50倍重量の P BS (リン酸緩衝生理食塩水)を加えてホモゲナイズし、遠心分離した後、上清を回収した。 IL- 18及び IL- 12に対し、 ELISAキット（BDバイオサイエンス社）を用いたサンドィツチ ELISA法によって、肺及び肝臓の上清に含まれる各サイト力イン濃度を決定した。その結果を図 1に示す。なお、サイト力イン濃度は、分散分析 (ANOVA)後、 Scheffe の比較テストを用いることにより、比較した (有意差は pく 0.05で判定した。以下のサイト力イン濃度の比較も同様。）。

[0029] 肺における Th-1サイト力インの濃度は、肝臓における濃度より、はるかに低力つた。

熱傷群のマウスの肝臓においては、 IL- 18の含有量は特に 7日目において著しく低下し、 IL-12の濃度は 11日目まで一様に低下していた。このように、重傷の熱傷の後は、肝臓において、 Th-1サイト力インの濃度が低下することが明らかになった。 [0030] く実施例 3 > ヒトにおける熱傷後の IL-18濃度測定

ヒトにおける IL-18濃度の熱傷後の変化を観察するため、重症の熱傷を負ったヒトの血漿中の IL-18濃度を熱傷後いくつかの時点で測定し、熱傷後 1日目、 2— 3日目、 6 —8日目、 9— 11日目の分割群に分類した。測定は、実施例 2と同様に ELISAキット（ BDバイオサイエンス社)を用いて行った。なお、各分割群で測定した複数の IL- 18濃度の測定値力も分割群毎の平均値を算出した。各分割群における IL-18濃度は、この平均値を用い、分散分析後、 Fisherの PLSD法を用いて統計処理を行った (有意差は p〈0.05で判定した)。

[0031] 図 2に示すように、熱傷後、 2— 3日目に IL- 18濃度が有意に減少し、 6— 8日目にはその減少のピークに達する。この IL-18濃度の動態は、実施例 2の熱傷群マウスの肝臓における IL-18含有量の変化と同一である。このようして、ヒトにおいても熱傷後は IL-18濃度が減少することを確認した。

[0032] く実施例 4 >エンドトキシン処理後の生存率に対する IL-18投与の効果

実施例 2及び 3の結果より、熱傷後の Th-1サイト力インの濃度の低下力重傷の熱傷を起因とする敗血症や急性肺傷害などの炎症性疾患に重要な関わりがある可能性が考えられた。そこで、熱傷後のマウスにエンドトキシン (LPS)を投与することにより急性の炎症を生じさせた炎症モデルマウスを用い、 LPS投与による生存率を指標として、少量の IL-18の投与の効果を調べた。

[0033] 実施例 1に従って作製した熱傷群のマウスを、 IL-18投与群と非投与群に分け、

IL- 18投与群のマウスには、熱傷後 10日間、 1日おきに組み換え IL- 18(MBL社) 0.2 μ gを投与し、非投与群には、なにも投与しなかった。熱傷処理の 11日目（Dayl2)に、 3 つのグループの全てのマウスに対し、 LPS 3mg/kg体重 (Escherichia coli0111:B4 endotoxin; Sigma社)を含有した生理食塩水 lOml/kg体重を静脈投与し、炎症を誘導した。その後、 72時間まで、 12時間おきに各グループの生存個体を調べた。図 3はその結果を示したグラフである。なお、グループ間の生存率は、 Wilcoxon-Gehan検定によって比較した (有意差は pく 0.05で判定した)。

[0034] 熱傷 72時間後に、対照群の生存率は 100%で、非投与群は 42. 9%であるのに対し、 IL-18投与群では 91. 7%であった。このように、非投与群の生存率は、対照群に比べてかなり低下しているが、 IL-18の投与はその生存率を著しく改善することが明らカゝになった。

[0035] このことから、 IL-18は抗炎症作用を有することが示され、敗血症を含む全身性炎症反応症候群などの炎症性疾患を予防、改善又は治療する医薬組成物として有用であると考えられる。

[0036] く実施例 5 > 肺水腫に対する IL-18投与の効果

実施例 4の炎症モデルマウスにおいて、肺を切除し、上肺葉を 4%ホルムアルデヒド溶液で固定し、ノラフィン切片を作製して、へマトキシリン—ェォシンで染色し、病理検査を行った。図 4に示すように、対照群 (図 4A)に比べ、非投与群（図 4B)においては、重度の肺水腫 (severe pulmonary edema)が誘導され、好中球が増加していた。これは、急性肺傷害と同様の病態であり、そのモデルとなりうる。一方、 IL-18投与群（図 4C)では、これら肺水腫や好中球の増加といった症状の改善が観察された。

[0037] このことから、 IL-18の投与は SIRSに続発する急性肺傷害や多臓器不全などの疾患を予防、改善又は治療するのに有用であると考えられる。

[0038] <実施例 6 > 活性化脾臓細胞によるサイト力インの分泌

本実施例では、実施例 4の炎症モデルマウスカゝら脾臓細胞を単離し、培養条件下において抗 CD3抗体又は LPSを投与することで、脾臓細胞を活性化し、分泌されるサイト力インの量を測定した。脾臓細胞を抗 CD3抗体で刺激すると、 T細胞を通じて免疫反応が活性化され、脾臓細胞を LPSで刺激すると、主にマクロファージが活性化され、炎症性サイト力インが分泌される。

[0039] まず、取り出した脾臓を細分ィ匕して 5%胎児牛血清 (FCS)を含有した RPMI 1640に入れ、ナイロンメッシュでろ過した。混入した赤血球を溶血させるため、 0.84%赤血球除去用塩ィ匕アンモ-ゥム溶液で処理した。遠心分離した後、脾臓細胞を RPMI 1640/5%FCSに再懸濁させ、 1 μ g/mLの抗 CD3抗体（MAb clone 145- 2C11、 BDバイォサイエンス社）又は 10 g/mLの LPSを添カ卩して、 5%CO、 37°Cで、 24時間又は

2

48時間培養した。培養上清に対し、 ELISAキット (BDバイオサイエンス社)を用いて、炎症性サイト力インである TNF a及び MIP- 2、 Th- 1サイト力インである IFN γ、 Th- 2サイト力インである IL-4及び IL-10の各濃度を測定した。 [0040] 抗 CD3抗体で脾臓細胞を刺激した場合（図 5)、対照群に比べ、非投与群では、炎症性サイト力イン、 Th-1サイト力イン、 Th-2サイト力インの分泌量は全て低下した。 IL-18投与群においても、それらサイト力イン分泌量は低下している。以上より、 IL-18 は T細胞の活性ィ匕によるサイト力インの分泌の低下に関与できないことがわかる。

[0041] 一方、 LPSで脾臓細胞を刺激した場合（図 6)、非投与群では炎症性サイト力インの分泌量は増加する一方、 Th-1サイト力インの分泌量は著しく低下し、 Th-2サイトカイ

、ても検出できず)。 IL-18投与群では、非投与群に比べ、炎症性サイト力インの一つ MIP-2が減少し、 Th-2サイト力インである IL-10は非投与群よりさらに増加した。このことは、 IL-18が、サイト力インのレベルで抗炎症作用を有していることを示す。また、 IFN yの分泌量は増加しないことから、個体に対する IL-18投与の効果は、 IFN yに非依存的であり、従来知られていた病原体の感染に対する IL-18増強の際の IL-18の効果とはメカニズムが異なると考えられる。

[0042] く実施例 7 > エンドトキシン処理後のサイト力インの分泌

実施例 4の結果により、 IL-18の投与が炎症モデルマウスの生存率を著しく改善することが明らかになった。そこで、 IL- 18が炎症モデルマウスにおけるサイト力インの分泌量とどのような関係にある力調べるために以下の実験を行った。

[0043] 本実施例では、実施例 4において LPSを投与してから 12時間経った炎症モデルマウスの肺を単離し、その 10又は 50倍重量の PBS (リン酸緩衝生理食塩水)を加えてホモゲナイズし、遠心分離した後、上清を回収した。 TNF a、 IFN y , IL-4、 IL-10, IL-12、 IL-18, MIP-2に対し、 ELISAキット（BDバイオサイエンス社または和光純薬ェ業株式会社)を用いたサンドイッチ ELISA法によって、肺の上清に含まれる各サイト力イン濃度を決定した。その結果を図 7に示す。なお、サイト力イン濃度は、分散分析 (ANOVA)後、 Scheffeの比較テストを用いることにより、比較した (有意差は pく 0.05で判定した。）。

[0044] 図 7に示すように、非投与群における炎症性サイト力イン、 Th-1サイト力イン、 Th-2 サイト力インの全ての分泌量は、対照群に比べ、著しく増加した。これに対して、 IL-18投与群は、炎症性サイト力イン (TNF aおよび MIP-2)の分泌量を有意に低下させた。従ってこのことは、 IL-18がサイト力インのレベルで抗炎症作用を有していることを示す。

産業上の利用可能性

本発明は、 IL- 18を含有し、 SIRS等の炎症性疾患を予防、改善又は治療するための医薬組成物を提供する。

Claims

請求の範囲

[I] 炎症性疾患を予防、改善又は治療するための医薬組成物であって、インターロイキン 18(Interleukin-18又は IL-18)を含有することを特徴とする医薬組成物。

[2」目 iJ C炎 ¾E†fe矢患が SIRS (systemic inflammatory response syndrome:全身'性炎症反応症候群)であることを特徴とする請求項 1に記載の医薬組成物。

[3] 前記炎症性疾患力 epsis syndromeであることを特徴とする請求項 2に記載の医薬組成物。

[4] 前記炎症性疾患が敗血症であることを特徴とする請求項 3に記載の医薬組成物。

[5] 前記炎症性疾患が SIRSに続発する急性肺傷害又は多臓器不全であることを特徴とする請求項 1に記載の医薬組成物。

[6] インターフェロン γ (Interferon- γ又は IFN- γ )に非依存的に作用することを特徴とする請求項 1に記載の医薬組成物。

[7] 前記炎症性疾患は、血漿中又は肝臓におけるインターロイキン 18濃度を低下させることを特徴とする請求項 1に記載の医薬組成物。

[8] 前記炎症性疾患において低下した血漿中又は肝臓におけるインターロイキン 18濃度を、正常値以上に上昇させないことを特徴とする請求項 7に記載の医薬組成物。

[9] 炎症性疾患に羅患したヒト以外の脊椎動物個体を治療するための治療方法であつて、

前記脊椎動物個体に対し、インターロイキン 18を含有する医薬組成物を投与することを特徴とする治療方法。

[10] 前記炎症性疾患は、血漿中又は肝臓のいずれかにおけるインターロイキン 18濃度を低下させることを特徴とする請求項 9に記載の治療方法。

[II] 前記炎症性疾患において低下した血漿中又は肝臓のいずれかにおけるインター口ィキン 18濃度を、正常値以上に上昇させな、量の前記インターロイキン 18を含有する医薬組成物を投与することを特徴とする請求項 10に記載の治療方法。