WO2002020470A1

WO2002020470A1 - T-butoxycarbonylaminoethylamine for the synthesis of pna monomer units, amino acid derivatives, intermediates thereof, and processes for productions of them

Info

Publication number: WO2002020470A1
Application number: PCT/JP2001/007696
Authority: WO
Inventors: Hisafumi Ikeda; Isao Saito; Yushin Nakamura
Original assignee: Applied Biosystems Japan Ltd
Current assignee: Applied Biosystems Japan Ltd
Priority date: 2000-09-05
Filing date: 2001-09-05
Publication date: 2002-03-14
Anticipated expiration: 2003-03-05
Also published as: US20080167491A1; JP3765573B2; EP1318142B1; US20040039224A1; DE60127848D1; EP1318142A4; US20050187402A1; EP1318142A1; US7351852B2; US6919476B2; DK1318142T3; JPWO2002020470A1; DE60127848T2

Description

PNAモノマ一ュニヅト合成のための t—ブトキシカルボニルアミノエチルアミン、アミノ酸誘導体およびその中間体並びにそれらの製造方法技術分野

本発明は、ァミノ酸誘導体およびその合成中間体である t—プトキシカルボ二ルアミノエチルァミンの製造方法に関し、より詳しくは、 Boc型PNAを合成明

するためのモノマーュニヅトゃ B 0 c型機能性分子導入アミノ酸誘導体等を合成する際の塩墓、機能性分子導入用基体と田して好適に用いられるアミノ酸誘導体およびその合成中間体である t一ブトキシカルボニルアミノエチルァミンの製造方法に関する。背景技術

下式（I)

(式中、 R ¹は水素原子または炭素数 1〜 5の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基を意味する。以下、同じ。）で示されるアミノ酸誘導体は、 Boc型PNA を合成するためのモノマーュニットゃ B o c型機能性分子導入アミノ酸誘導体等を合成する際の塩基、機能性分子導入用基体として多岐に渡る用途を有する。特に、 PNA (Peptide Nucleic Acid;ペプチド核酸）は、図 1に示すように、 DN A等の天然の核酸の糖リン酸骨格を N-(2-aminoethyl) glycine骨格に変換した構造を有し、天然の核酸に比べて二重鎖形成能および塩基配列認識能が高く、さらに生体内ヌクレアーゼゃプロテア一ゼに安定であるため、アンチセンス分子として遺伝子治療への応用が検討されており、近年注目を集めている。 PNAの上記の特徴は、天然の核酸の糖リン酸骨格が中性条件で負電荷を有するため、相補鎖間で静電的な反発が生じるのに対し、電荷を有さない N-(2-aminoethyl) glycine 骨格を有する PN Aにおいては、相補鎖間で静電的な反発が生じないことによる。

PNAの合成は、 DNAまたは RNAを構成する 4種の塩基（A、 T (U)、 Cおよび G) のいずれかを導入したアミノ酸（特にグリシン）誘導体（モノマーユニット）を、目的とする塩基配列に従って、通常の固相ペプチド合成法を用いて順次結合していくことにより行われる。 PN Aを合成するためのモノマーュニヅトには、図 2 (Bは塩基を表す。）に示すように、 11100型と800型の2 種があるが、モノマーユニットの合成方法が確立されており、 PNAオリゴマーを合成するのに一般的な DN A自動合成機を利用することができる Fmo c型の使用が現在主流となっている。しかしながら、 B 0 c型モノマーユニットを使用して PN Aを合成する場合には、 Fmoc型を用いる場合とは異なる塩基性条件に不安定な機能性分子を PN Aに導入できるという利点があるため、 B o c型モノマ一ュニヅトを使用した PN A合成法の確立が急務となっている。

Bo c型モノマーュニヅトを使用した PN A合成法の確立を妨げる障害の一つとして、塩基を導入する前のモノマーユニット、すなわち塩基導入用基体として用いる式 Iで示される B o c型ァミノ酸誘導体の簡便かつ安価な合成法が確立されていないことが挙げられる。また、式 Iのアミノ酸誘導体は、塩基の代わりに他の機能性分子を導入するための機能性分子導入用基体としても用途を有するため、その簡便かつ安価な合成法が確立されれば、機能性分子導入アミノ酸誘導体の合成も容易になる。

式 Iのアミノ酸誘導体の合成法は、通常、エチレンジァミンを出発物質とし、その一方の窒素原子に t—プトキシカルボニル基（Boc) を導入する工程と、他方の窒素原子に— CHR¹— COOHを導入する工程を含む。

エチレンジァミンの一方の窒素原子に B 0 cを導入して t—ブトキシカルボ二ルアミノエチルァミンを得る方法としては、例えば①エチレンジァミンに無水 t 一ブトキシカルボン酸を、クロ口ホルム、メタノール、ジォキサン等の反応溶媒中で直接反応させる方法（J.Med.Chem.，38(22),4433-8;1995、 Bull. Korean Chem. Soc" 15(12), 1025-7; 1994、 Eur. J.Med.Chem.,26 ( 9 ),915-20;1991、 Synth. Commun. 20(16) , 2559-64; 1990、 Aust. J. Chem., 39(3)， 447-55; 1986)、

誦および、 ②無水 t—ブトキシカルボン酸を活性エステル体に変換し、次いでェチレンジァミンと反応させる方法（特閧平 11— 012234号公報）

が報告されている。

また、 t一ブトキシカルボニルアミノエチルァミンに一 CHR¹— CO OHを導入して式 Iのアミノ酸誘導体を得る方法としては、 t—ブトキシカルボニルァミノェチルァミンの保護されていない窒素原子にベンジル基を導入し、 ③プロモ酢酸べンジルエステルと反応させた後、接触還元する方法が報告されている（J. Org. Chem., 62(2), 411-416; 1997)。

0

H

N v 、0H

H さらに、一方の窒素原子に一 CHR¹— CO OHを導入したエチレンジァミン誘導体の他方の窒素原子に B o cを導入して式 Iのアミノ酸誘導体を得る方法として、 ④ N— ( 2—アミノエチル）グリシンに無水 tープトキシカルボン酸を反応させる方法が報告されている (Heimer, E. P.; Gallo-Torres, H. E. ； Felix, A. M. ； Ahmad, M.； Lambros, T. J.； Scheidl, F.; Meienhofer, J.，Int. J. Pept. Protein Res. 23 (2),203-211,1984) 。

しかしながら、 t—ブトキシカルボニルアミノエチルァミンを製造する方法として、 ①の方法では、比較的収率良く目的物を得ることができるものの、ジ—

( t—ブトキシカルボニルァミノ）エチレンと t一ブトキシカルボン酸が副生成物として生じ、クロ口ホルム、メタノール、ジォキサン等の反応溶媒中に存在する。そのため、分配抽出操作や分配クロマトグラフィーが必要となり、 t—ブトキシカルボニルァミノェチルアミンを効率よく大量かつ安価に製造するのは困難である。

また、 ②の方法は、副生成物としてジー（t—ブトキシカルボニルァミノ）ェチレンが生じないという利点を有するものの、多段階反応であるため約 6 0 %と総収率が低く、また、用いた試薬を分配クロマトグラフィーにより除去しなければならないため、 ①の方法と同様に、 t—ブトキシカルボニルアミノエチルアミンを効率よく大量かつ安価に製造するのは困難である。

したがって、 ①および②の方法とも、 t—ブトキシカルボニルアミノエチルァミンを工業的に製造する方法としては適さないものである。

また、 t—プトキシカルボニルアミノエチルアミンから式 Iのアミノ酸誘導体を得る方法として、 ③の方法は、多段階反応であること、また、分液抽出操作が必要であることにより、工業的な製造には適さない。

さらに、式ェのアミノ酸誘導体を得る方法として、 ④の方法は、分配クロマトグラフィ一による精製が不要であるという利点はあるものの、収率が 6 0 %前後と低く、工業的な製造には適さない。すなわち、式 Iのアミノ酸誘導体合成の効率の低さなどに起因して、光機能性 P N A分子を得る効率的な方法は確立されていない。したがって、式 Iのアミノ酸誘導体を効率よく得る方法、および式 Iのアミノ酸誘導体を用いた場合より高効率な光機能性 P NA分子の合成を可能にするァミノ酸誘導体の開発が求められている。発明の開示

本発明はかかる状況に鑑みてなされたものであり、その目的とするところは、煩雑な操作を要さないとともに収率が良く、かつ大量生産への応用が容易な、式 Iのァミノ酸誘導体およびその合成中間体である t —ブトキシカルポニルァミノェチルァミンの製造方法を提供すること、ならびに、式 I Vで示される、新規なァミノ酸誘導体、その合成中間体およびそれらの製造方法を提供することにある。

本発明者らは、前記の課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、その解決手段を見出し、本発明を完成するに至った。

すなわち、本発明は、下記一般式（I )

( I )

(式中、 R ¹は水素原子または炭素数 1 5の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基を意味する。）

で示されるアミノ酸誘導体の製造方法であって、下記一般式（I I )

0

Bocゝ八 > /X (n) (式中、 R¹は前記と同様の意味を有し、 R²は炭素数 1〜4の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基を意味する。）で示される化合物を加水分解することにより一般式（I) で示されるアミノ酸誘導体を得る工程を含む、前記製造方法に関する。

また、本発明は、一般式（I I) で示される化合物の加水分解が、水酸化アルカリ金属塩水溶液によってなされることを特徴とする、前記の製造方法に関する

さらに本発明は、カウン夕一カチオンとしてピリジニゥムイオンを用いた陽ィオン交換クロマトグラフィーにてアル力リ金属イオンを除去する工程をさらに含むことを特徴とする、前記の製造方法に関する。

またさらに、本発明は、アルカリ金属が、リチウム、ナトリウムまたは力リウムであることを特徴する、前記の製造方法に関する。

また本発明は、一般式（I I) で示される化合物が、 t—ブトキシカルボニルアミノエチルァミンと下記一般式（I I I)

(式中、： ¹および R²は前記と同様の意味を有する。）

で示される化合物との反応により得られたものであることを特徴とする、前記のの製造方法に関する。

そして本発明は、 t—ブトキシカルボニルアミノエチルァミンが、エチレンジァミンと無水 t—ブトキシカルボン酸との反応により得られたものであることを特徴とする、前記の製造方法に関する。

そしてさらに、本発明は、エチレンジァミンと無水 t—ブトキシカルボン酸との反応が、テトラヒドロフラン中でなされることを特徴とする、前記の製造方法に関する。

また、本発明は、一般式（I) 、（I I) および（I I I) で示される化合物において、 R ¹が水素原子であり、： R ²がェチル基であることを特徴とする、前記の製造方法に関する。

さらに本発明は、一般式（I ) で示されるアミノ酸誘導体が B o c型 P NAモノマ一ュニヅト合成のための塩基導入用基体であることを特徴とする、前記の製造方法に関する。

またさらに本発明は、前記の製造方法の、 B o c型 P N Aモノマーュニットの製造における使用に関する。

さらに本発明は、 t—ブトキシカルボニルァミノェチルァミンの製造方法であつて、エチレンジァミンと無水 t—プトキシカルボン酸とをテトラヒドロフラン中で反応させることを特徴とする、前記製造方法に関する。

また、本発明は、一般式（I V)

(式中、 R ¹は水素原子または炭素数 1〜 5の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基、 nは 1〜1 1のいずれかの整数を意味する。）

で示される、アミノ酸誘導体に関する。

さらに、本発明は、一般式（V)

(式中、 R ¹および nは、前記と同様の意味を有する。）

で示される、前記一般式（I V) で示されるアミノ酸誘導体の中間体に関する, また、本発明は、一般式（V I )

(式中、： R ¹および nは、前記と同様の意味を有し、 R ²は炭素数 1〜4の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基を意味する。）

で示される、前記一般式（I V) で示されるアミノ酸誘導体の中間体に関する。さらに、本発明は、一般式（I V) で示されるアミノ酸誘導体の製造方法であつて、一般式（V) で示される化合物を得る工程を含む、前記製造方法に関する。

また、本発明は、一般式（V) で示される化合物の還元が、触媒としてパラジゥム力一ボンを含むメタノール溶液中で行われることを特徴とする、前記の製造方法に関する。

さらに、本発明は、般式（V I ) で示される化合物を加水分解することによつて、式（V) で示される化合物を得る工程をさらに含むことを特徴とする、前記の製造方法に関する。

また、本発明は、一般式（V I ) で示される化合物の加水分解が、水酸化アルカリ金属塩水溶液によってなされることを特徴とする、前記の製造方法に関する。

さらにまた、本発明は、カウン夕一カチオンとしてピリジニゥムイオンを用いた陽イオン交換クロマトグラフィーにてアル力リ金属イオンを除去する工程をさらに含むことを特徴とする、前記の製造方法に関する。

そして、本発明は、一般式（V I ) で示される化合物が、下記一般式（V I υ

(式中、 nは前記と同様の意味を有する。）

で示されるベンジルォキシカルボニル— ω—アミノ酸および一般式（I I) で示される化合物との反応により得られたものであることを特徴とする、前記の製造方法に関する。

そして、本発明は、一般式（ I I ) および（ I V)〜（ V I I ) のいずれかで示される化合物において、； R¹が水素原子であり、 R²がェチル基であり、 ηが 1 であることを特徴とする、前記の製造方法に関する。

そしてさらに、本発明は、一般式（IV) で示されるアミノ酸誘導体が、 Bo c型 PNAモノマ一ュニヅト合成のための塩基導入用基体であることを特徴とする、前記の製造方法に関する。

さらに、本発明は、一般式（I I) で示される化合物が、エチレンジァミンから製造された t—ブトキシカルボニルアミノエチルァミンと一般式（I I I) で示される化合物との反応により得られたものであることを特徴とする、前記の製造方法に関する。

また、本発明は、一般式（V) で示される化合物の製造方法であって、一般式 (VI) で示される化合物を加水分解することによって、一般式（V) で示される化合物を得る工程を含むことを特徴とする、前記製造方法に関する。

また、本発明は、一般式（VI) で示される化合物の製造方法であって、一般式（VI I) で示されるベンジルォキシカルボニル— ω—アミノ酸および一般式 (I I) で示される化合物との反応によって、一般式 (VI) で示される化合物を得る工程を含むことを特徴とする、前記製造方法に関する。

さらにまた、本発明は、前記一般式（IV) で示される化合物の、：60(3型？ ΝΑモノマーュニットの製造における使用に関する。

またさらに、本発明は、前記一般式（V) で示される化合物の、 Boc型 ΡΝ Aモノマーュニヅトの製造における使用に関する。

そして、本発明は、前記一般式（VI) で示される化合物の、：600型？八モノマ一ュニットの製造における使用に関する。

一般式（I V) で示される化合物には予めリンカ一が結合しているため汎用性に富んでおり、活性エステル体を当該化合物と反応させることによって、 1工程で目的とする P NAモノマーユニットが得られる。したがって、本発明による式 ( I V) で示される化合物によれば、従来法より少ない合成工程数によって光機能性分子を P N Aモノマーュニヅト化することもできるため、当該化合物は比較的高価な光機能性分子を対象とする場合にとくに有効である。

一方、スルホン酸クロリド系および立体障害が大きい光機能性分子等の P N A モノマ一化は、一般式（I ) で示される化合物を用いることによって行われる。したがって、本発明によれば、多種多様な機能性 P N Aモノマーを合成することができる。図面の簡単な説明

図 1— 1は天然の核酸と、図 1 — 2はべプチド核酸の構造を比較して示す説明図である。

図 2は、 F m o c型および B o c型モノマ一ュニヅトを比較して示す説明図でめる。

それそれの図において、 1は糖リン酸骨格を、 2は N-(2-aminoethyl) glycine 骨格をそれそれ示す。発明を実施するための形態

以下に本発明の実施の態様をさらに詳細に記述する。

本発明においては、以下に示す工程にて、式（I ) で示されるアミノ酸誘導体を製造する。

(I) 最初の工程は、エチレンジァミンに無水 t—ブトキシカルボン酸を、テトラヒドロフラン（THF) を溶媒として使用して、試薬を用いることなく直接反応させ、 t—ブトキシカルボニルアミノエチルァミンを製造する工程である。

+Boc-0H

H

THFを溶媒として用いることにより、ジ一（t—ブトキシカルボニルアミノ）エチレンを副生成物として生じることなく、 98%という高収率で t一ブトキシカルボニルアミノエチルアミンを得ることができる。副生成物として生じる t—ブトキシカルボン酸は、大過剰に存在するエチレンジァミンと、 THFに不溶の塩を形成して反応系から除外されるため、分配クロマトグラフィーによる精製は不要である。したがって、高収率で簡易に t—ブトキシカルボニルアミノエチルァミンを製造することができ、さらに、分配クロマトグラフィーによる精製が不要であるため、大量生産への応用が容易である。さらに、過剰に存在するエチレンジァミンおよび溶媒として用いた THFは、精留後、再使用できるため、資源を有効に活用しつつ、生産コストの低減を図ることができる。尚、上記の反応において、反応条件は窒素気流下、室温であることが好ましい。

次の工程は、 t—ブトキシカルボニルアミノエチルァミンと、式（I I I) で示されるエステル体との反応により一般式（I I) で示される化合物を製造する工程である。

上記の反応において、溶媒はクロ口ホルムおよび THF等を用いることができるが、塩化メチレンを用いることが好ましい。また、触媒としては、 3級アミン、とくにトリエチルァミンおよびジィソプロピルェチルァミン等を好適に用いることができる。反応条件は、窒素気流下室温とすることが好ましい。

式（I I I) で示されるエステル体の R¹の種類により、最終生成物である式 ( I ) で示されるアミノ酸誘導体がいずれのァミノ酸の誘導体となるかが決まるが、 R¹の種類によっては立体障害により上記の反応の収率が低下する。したがつて、 R¹は好ましくは水素または炭素数 1〜5、より好ましくは水素または炭素数 1〜 4の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基であり、さらに好ましくは水素、メチル基またはェチル基である。また、 R ²は、次反応で加水分解を行うという理由により、炭素数 1〜4の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基であることが好ましいが、より好ましくはメチル基、ェチル基、 n—プロピル基またはィソプロピル基であり、さらに好ましくはェチル基である。

次の工程は、式（I I ) で示される化合物を加水分解することにより式（I ) で示されるアミノ酸誘導体を製造する工程である。

(Π) 加水分解は、水酸化ァリ力リ金属塩水溶液にて行うことが好ましい。アル力リ金属としては、リチウム、ナトリウムまたはカリウムが好ましく、ナトリウムがとくに好ましい。また、加水分解の条件は、氷冷下または室温とすることが好ましい。

上記反応により、式（I ) で示されるアミノ酸誘導体はナトリウム塩の形で得られるが、ナトリゥムイオンは陽イオン交換クロマトグラフィーで容易に除くことができる。尚、 t —ブトキシカルボ二ル基は陽イオン交換樹脂に不安定であるため、収率低下を防ぐ観点より、カウン夕一カチオンとして、プロトンの代わりにピリジニゥムイオンを用いた陽イオン交換クロマトグラフィーにてアル力リ金属イオンを除去することが好ましい。

この工程は、加水分解という簡易な一段階反応であり、かつ大量生産への適用が困難なカラムクロマトグラフィーによる精製を要しないため、高収率で式

( I ) で示されるアミノ酸誘導体を製造することができ、さらに工業的生産への応用が容易である。

本発明の t—ブトキシカルボニルァミノェチルァミンおよびアミノ酸誘導体の製造方法は、アルカリ条件を使用しないものである。一方、核酸を構成する塩基を除く機能性分子にはアルカリ条件に不安定なものが多い。したがって、本発明の製造方法は、機能性分子導入用基体として使用する目的でァミノ酸誘導体を製造する場合にも好適に用いられる。

本発明の式（IV) で示されるアミノ酸誘導体は、前記一般式（I I) で示される化合物を用いて、以下に示す工程によって製造される。

(V)

第一の工程は、下記のように、一般式（I I) で示される化合物 ^B 。PNA— OR²に一般式（VI I) で示されるベンジルォキシカルボ二ルー ω—アミノ酸を、ジメチルホルムアミド（DMF) などを溶媒として使用し、トリェチルアミンを用いて反応させ、一般式（VI) で示されるベンジルォキシカルボ二ルー ω 一アミノ酸一 ^B°^CPN Α— OR ²を製造する工程である。

溶媒 DMF、化合物（II) (VII) 及び EDCI由来生成物はすべて分液操作によって目的物（VI) と分離可能である。理論的には目的物（VI) のみが有機層に残るのでカラムによる精製を必要としないが、念のため精製した。この方法により定量的に目的物を得ることができた。

次の工程は、一般式（VI) で示されるベンジルォキシカルボニル— ω—アミノ酸一 ^Β°。ΡΝΑ— OR²を加水分解することによって、一般式（V)で示されるベンジルォキシカルボ二ルー ω—アミノ酸一 ^B°^ePNA— 0Hを製造する工程である。

(VI) W 加水分解は、水酸化ァリカリ金属塩水溶液にて行うことが好ましい。アルカリ金属としては、リチウム、ナトリウム又はカリウムが好ましく、ナトリウムがとくに好ましい。また、加水分解の条件は、氷冷下又は室温とすることが好ましい。

続いて、最終工程である、一般式（V) で示される化合物を還元することによつて一般式（I V) で示される化合物を得る工程が行われる,

この工程は、触媒としてパラジウムカーボンを含むメタノール溶液中において好適に行われる。

化合物 (V I ) から（I V) を合成する方法としては、（V) を経由する方法が唯一の方法である。例えば下図のように（VI) を先に接触還元すると、中間体を経て環状化合物になってしまう。

、NH

BocHN'

上記反応により、式（I V) で示されるアミノ酸誘導体はナトリウム塩の形で得られるが、ナトリウムイオンは陽イオン交換クロマトグラフィーで容易に除くことができる。なお、 t—ブトキシカルボ二ル基は陽イオン交換樹脂に不安定であるため、収率低下を防ぐ観点より、カウン夕一カチオンとして、プロトンの代わりにピリジニゥムィォン.を用いた陽ィオン交換ク口マトグラフィ一にてアル力リ金属ィオンを除去することが好ましい。

この工程は、加水分解という簡易な一段階反応であり、かつ大量生産への適用が困難なカラムクロマトグラフィーによる精製を要しないため、高収率で式（I V) で示されるアミノ酸誘導体を製造することができ、さらに工業的生産への応用が容易である。

本発明のアミノ酸誘導体の製造方法は、アル力リ条件を使用しないものである。一方、核酸を構成する塩基を除く機能性分子にはアルカリ条件に不安定なものが多い。したがって、本発明の製造方法は、機能性分子導入用基体として使用する目的でアミノ酸誘導体を製造する場合にも好適に用いられる。

式（V I ) で示されるエステル体の R ¹の種類および nの値により、最終生成物である式（I V ) で示されるアミノ酸誘導体がいずれのアミノ酸の誘導体となるかが決まる。

R ¹の種類によっては立体障害により上記の反応の収率が低下する。したがつて、 R ¹は好ましくは水素又は炭素数 1〜 5、より好ましくは水素又は炭素数 1 〜4の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基であり、さらに好ましくは水素、メチル基又はェチル基である。また、 R ²は、次反応で加水分解を行うという理由により、炭素数 1 ~ 4の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基であることが好ましいが、より好ましくはメチル基、ェチル基、 n—プロピル基又はイソプロピル基であり、さらに好ましくはェチル基である。

また、 nが異なる一般式（I V) を合成するためには、対応するべンジルォキシカルボ二ルー ω—アミノ酸を用いればよい。一般的には、 η = 1〜1 1までのベンジルォキシカルボニル一 ω—ァミノ酸が市販されているので容易に入手可能である。それらの名称は、以下に示すとおりである。

n 上段：一般名

下段：示性式

n = 1 -Benzyloxycar oonylglycme

Z-NH"CH₂-C00H

n = 2 "Benzyloxycarbonyl" β■ alanine

Z-NH-(CH₂)₂"COOH

n = 3 N"Benzyloxycarbonyl"4-aminobutanoic Acid

Z-NH-(CH₂)₃-COOH

n = 4 N"Benzyloxycarbonvl"5■ aminopeiitaiioic Acid

n = 5 N^_Benzyloxycarboiivl"6"aiiiiiiocaproic Acid

n = 6 N^_Benzyloxycarbonyl^_7"aminolieptanoic Acid

Z-NH-(CH₂)e-COOH

n = 7 N-Benzyloxycarbonyl^_8^_aminooctanoic Acid

n = 8 JM -Benzyloxycarbonyl-9-aminononanoic Acid

Z-NH-(CH₂)_s-COOH

n = 9 N-Benzyloxycarbonyl- 10-aminodecanoic Acid

Z-NH-(CH₂)₉-COOH

n = 1 0 N-Benzyloxycarbonyl - 11 -aminoundecanoic Acid

n = 1 1 N-Benzyloxycarbonyl-12-aminododecanoic Acid

Z-NH-(CH₂)n-COOH これらのうち、 n = 1である Z—グリシンは、特に好適に用いることができる o 一般に PNAは DNAとのハイプリヅドを期待しているので立体的に DN Aに類似している誘導体化が望ましい。 ω—アミノ酸をリンカ一として利用する場合、この点を考慮して Ζ—グリシンが最適である。

(実施例）

本願発明を実施例を用いてさらに詳細に説明するが、本願発明はこれら実施例に限定されものではない。

(実施例 1) t—ブトキシカルボニルアミノエチルァミンの製造

： πチレンジァミン（ 90. 2 g 1. 5 Omo 1) の THF溶液（600ml ) に無水 t—ブトキシカルボン酸（32. 7 g、 0. 15mo l) の THF溶液

(40 Oml) を 1時間かけて滴下し、さらに室温で 15時間攪拌した。次に、上清を傾瀉し 60°Cで減圧蒸留した。残渣を THFに再度溶解し、 MgS0₄で乾燥後濾過し、濾液を濃縮することにより、無色オイルとして t—ブトキシカルボニルアミノエチルァミン、 23. 7 gを得た。収率は 98%であった。

(実施例 2) ^Β∞ΡΝΑ-ΟΗの合成

t一ブトキシカルボニルアミノエチルァミンを、ブロモ酢酸ェチルエステルと反応させて得られた ethyl N- (2 -Bocaminoethyl) glycinate (^B0C PNA-OEt; 4. 52 g、 18. 4mmo 1) の THF溶液（5ml) に 2規定水酸化ナトリウム水溶液（10ml、 2 Ommo 1) を零度で滴下し、次いで反応液を室温で 15時間攪抻した。これを直接陽イオン交換カラムクロマトグラフィー（DOWEX 5 0WX 8、 pyridinium form) に付し、水で溶出した。溶出液を減圧濃縮し、さらに真空乾燥することにより、白色粉末として N- ( 2 - Bocaminoethyl ) glycine (^B0C PNA-OH)3. 85 gを得た。収率は 96%であった。

(実施例 3 ) Z-gly-B NA-OEtの合成

Benzyioxycarbonylglycine (Z-giycine; 6.75 g, 33 mmol) と ethylN- (2 -am inoethyDglycine (4.06 g， 17 mmol) のジメチルホルムアミド溶液（DMF; 25 mL) にトリェチルァミン（TEA; 4.78 mL， 35 mmol) を加えて 0 °Cで撹拌した o これに、 l-e hyl-3-(3-dimeth laminopropyl)carboaiimide

-19- i¾iれた用紙 (規則 91》 (EDCI; 6.79 g, 35 mmol) を加えて 0 °Cで 2時間、さらに室温で 1 5時間撹拌した。反応液に酢酸ェチル（EtOAc; 300 mL) を加え、これを 5%炭酸水素ナトリウム水溶液（NaHCO₃; 300 mL x 3) · 5 %クェン酸水溶液（300 mL x 3) ·飽和食塩水溶液（300 mL X 3) の順番に洗浄し、 EtOAc層を無水硫酸マグネシゥム（MgSO₄) で乾燥後濾過し、濾液を濃縮した。残渣をシリカゲル力ラムクロマトグラフィー（ 3% MeOH/dichloromethane ) に付し、 Z-gly-^B∞PNA-OEtを無色オイルとして定量的に得た。 ¾ NMR (CDC1,) δ 7.4- 7.2 (m, 5 H), 5.77 (brt) and 5.68 (brt) (1 H), 5.39 (brs) and 4.97 (brs) (1 H), 5.27 (s) and 5.09 (s) (2 H)₃ 4.19 (m, 2 H), 4.07 (s)and 3.91 (s) (2 H)， 4.01 (s, 2 H)， 3.51 (brs) and 3.40 (brs) (2 H), 3.34 (brs) and 3.25 (brs) (2 H), 1.40 (s, 9 H), 1.26 (t, J= 7.2 Hz, 3 H); ¹³C NMR (CDCL) δ 169.71 and 169.31 (d), 169.20 and 168.79 (d)， 156.11 and 155.85 (d), 13 6.39 and 136.32 (d)， 128.44, 128.27, 127.98, 127.90， 79.80 and 79.37 (d), 66.86 and 66.77 (d)， 62.05 and 61.58 (d)， 49.43 and 48.73 (d), 48.5 2 and 48.05 (d)， 42.49 and 42.34 (d), 38.48, 28.27, 14.03; FABMS m/z 438

[(M+H ].

(実施例 4) Z-gly-^B。TNA-OHの合成

Z-gly-^Bo NA-OEt (4.0 g, 9.2 mmol) のテトラヒドロフラン溶液（20 mL) に 1規定水酸化リチウム水溶液（20 mL, 20 mmol) を 0°Cで滴下し、反応液を 0 °Cで 1時間撹拌した。反応終了後、反応液をを直接陽イオン交換カラムクロマトグラフィ一（DOWEX 50W X 8, pyridinium form) に付し、 MeOHで溶出した。溶出液を減圧濃縮し、さらに真空乾燥することにより、無色オイルとして Z-gly^BoTNA-OH (3.09 g, 82%) を得た。 ¾ N R (DMSO- め δ 7.4-7.2 (m， 5 H), 6.84 (brt) and 6.73 (brt) (1 H), 5.03 (s， 2 H), 4.11 (brs) and 3.94 (brs) (2 H)， 3.92 (brs) and 3.77 (brs) (2 H)， 3.33 (brs) and 3.29 (brs) (2 H)， 3.09 (brs) and 3.02 (brs) (2 H), 1.37 (s₃ 9 H); ¹³C NMR (DMSO -d6) d 171.07 and 170.02 (d), 169.39 and 169.07 (d), 156.42 (brd)₅ 155.70 and 155.61 (d), 137.14, 128.35， 127.77, 127.67, 78.04 and 77 .76 (d)， 65.38, 48.99, 47.43 and 46.70 (d)， 41.92 and 41.52 (d)， 38 .13 and 37.81 (d), 28.23; FABMS m/z 410 [(M+H)⁺j; HRMS (FAB" calcd for C₁₉H₂₈0₇N₃ [(M+H)⁺] 410.1849， observed 410.1926.

(実施例 5 ) Gly- ^B»。PNA- OHの合成

Z-gly- ^BMPNA- OH (4.09 g, 10 龍 ol) の MeOH溶液（20 mL) にパラジウム力 —ボン（5% Pd/C; 100 g) を加えて室温で接触水素還元を行った。反応終了後セライトろ過した。濾液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ一（5% MeOH/dichloromethane) に付し、白色粉末として Gly-^B°^c PNA-0H (2.08 g, 75%) を得た。 Ή NMR (DMSO-^) d 3.72 (brs) and 3.69

(brs) (2 H)， 3.58 (brs) and 3.54 (brs) (2 H)， 3.3-3.2 (m， 2 H)， 3. 06 (brs) and 2.94 (brs) (2 H); FABMS m/z 276 [(M+H)'].

(実施例 6 ) Dabcyl-Gly- ^B。TNA- OHの合成

Gly-^BiCPNA-0H (100 mg， 0.39 誦 ole) の dimethylformamide溶液 (10 mL) に dabcyl - hydroxy sue c in imide ester (145 m ₃ 0.40 讓 ole) と triethyl amine (60 JLLI, 0.45 腿 ole) を順番に加え、室温で 1 5時間撹拌した。反応終了後減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（0 - 4 % eOH/dichloromethane) に付し、赤褐色粉末として Dabcy卜 Gly- ^B°^£PNA-0H (184 mg₃ 90%) を得た。 'Η NMR (DMSO- め d 8.18 (d, J = 7 Hz, 2 H)， 7.91 (d, J = 7 Hz, 2 H)， 7.88 (d, J = 7 Hz, 2 H), 6.77 (d, J = 7 Hz , 2 H), 5.76 (s) and 5.30 (s) (2 H)， 4.22 (brs) and 4.05 (brs) (2 H )， 3.73 (brs) and 3.49 (brs) (2 H)， 3.47 (brs) and 3.29 (brs) (2

-21- 訂正された用紙 (規則 9i) H), 1.26 (s, 9 H) ; FABMS m/z 527 [ (M+H)⁺] . 産業上の利用可能性

本発明の製造方法は、煩雑な操作を要さないとともに高収率で t一ブトキシカルポニルアミノエチルアミンおよび B o c型アミノ酸誘導体を合成でき、さらに大量生産への応用が容易である。したがって、 t—プトキシカルボニルアミノエチルァミンおよび B 0 c型アミノ酸誘導体の工業的合成に好適に用いることができ、 B o c型モノマ一ュニヅトを使用した P N A合成法の確立および機能性分子を導入した B o c型アミノ酸誘導体の工業的合成、およびそれを用いた P NAモノマ一ュニヅトの工業的合成等の産業において利用することができる。

Claims

請求の範囲下記一般式（Ί)

(式中、 R ¹は水素原子または炭素数 1〜 5の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基を意味する。）

で示されるアミノ酸誘導体の製造方法であって、

一般式（I I)

(式中、 R¹は前記と同様の意味を有し、 R ²は炭素数 1〜4の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基を意味する。）で示される化合物を加水分解することにより一般式（I) で示されるアミノ酸誘導体を得る工程を含む、前記製造方法。

2. 一般式（I I) で示される化合物の加水分解が、水酸化アルカリ金属塩水溶液によってなされることを特徴とする、請求項 1に記載の製造方法。

3. カウン夕一力チオンとしてピリジニゥムイオンを用いた陽イオン交換クロマトグラフィ一にてアル力リ金属イオンを除去する工程をさらに含むことを特徴とする、請求項 2に記載の製造方法。

4. アルカリ金属が、リチウム、ナトリウムまたはカリウムであることを特徴する、請求項 2または 3に記載の製造方法。

5. 一般式（I I) で示される化合物が、 t—ブトキシカルボニルアミノエチルァミンと下記一般式（I I I)

(式中、 R¹および R²は前記と同様の意味を有する。）

で示される化合物との反応により得られたものであることを特徴とする、請求項 1〜 4のいずれかに記載の製造方法。

6. t—ブトキシカルボニルアミノエチルァミンが、エチレンジァミンと無水 t 一ブトキシカルボン酸との反応により得られたものであることを特徴とする、請求項 5に記載の製造方法。

7. エチレンジァミンと無水 t一ブトキシカルボン酸との反応が、テトラヒドロフラン中でなされることを特徴とする、請求項 6に記載の製造方法。

8. —般式（I)、（I I) および（I I I) で示される化合物において、 R¹ が水素原子であり、 R ²がェチル基である請求項 1〜 7のいずれかに記載の製造方法。

9. 一般式（I) で示されるアミノ酸誘導体が B o c型 PN Aモノマ一ュニヅト合成のための塩基導入基体であることを特徴とする、請求項 1〜 8のいずれかに記載の製造方法。

10. 請求項 1〜 9のいずれかに記載の製造方法の、 80 (3型？八モノマーュニヅトの製造における使用。

11. t一ブトキシカルボニルアミノエチルァミンの製造方法であって、ェチレンジァミンと無水 t—ブトキシカルボン酸とをテトラヒドロフラン中で反応させることを特徴とする、前記製造方法。

12. 一般式（IV)

(式中、； R ¹は水素原子または炭素数 1〜 5の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基、 nは 1〜11のいずれかの整数を意味する。）

で示される、アミノ酸誘導体。

13. 一般式（V)

(式中、： R ¹は水素原子または炭素数 1〜 5の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基、 nは 1〜11のいずれかの整数を意味する。）

で示される、請求項 12に記載の一般式（IV) で示されるアミノ酸誘導体の中間体。

14. 一般式（VI)

(式中、 R ¹は水素原子または炭素数 1〜 5の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基、 R ²は炭素数 1〜4の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基、 nは 1~1 1のいずれかの整数を意味する。）

15. 下記一般式（IV)

(式中、 R ¹水素原子または炭素数 1 5の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基、 nは 1 11の整数を表す。）

で示されるアミノ酸誘導体の製造方法であって、一般式（V)

(式中、 R¹および nは前記と同様の意味を有する。）

'で示される化合物を還元することによって、一般式（IV) で示される化合物を得る工程を含む、前記製造方法。

16. —般式（V) で示される化合物の還元が、触媒としてパラジウムカーボンを含むメタノール溶液中で行われることを特徴とする、請求項 15に記載の製造方法。

17. 一般式（VI)

(式中、 R¹および nは前記と同様の意味を有し、 R²は炭素数 4の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基を意味する。）で示される化合物を加水分解することによって、式（V) で示される化合物を得る工程をさらに含むことを特徴とする、請求項 16に記載の製造方法。

18. —般式（VI) で示される化合物の加水分解が、水酸化アルカリ金属塩水溶液によってなされることを特徴とする、請求項 17に記載の製造方法。

19. カウン夕一カチオンとしてピリジニゥムイオンを用いた陽イオン交換クロマトグラフィ一にてアル力リ金属イオンを除去する工程をさらに含むことを特徴とする、請求項 18に記載の製造方法。

20. アルカリ金属が、リチウム、ナトリウムまたはカリウムであることを特徴する、請求項 18または 19に記載の製造方法。

21. 一般式（VI) で示される化合物が、下記一般式（VI I)

(式中、 nは前記と同様の意味を有する。）

で示されるベンジルォキシカルボ二ルー ω—アミノ酸および一般式（I I) (_H)

(式中、 R¹および R²は前記と同様の意味を有する。）

で示される化合物との反応により得られたものであることを特徴とする、請求項 17〜20のいずれかに記載の製造方法。

22. 一般式（ Iェ）および（ I V) 〜（V I I ) のいずれかで示される化合物において、 R¹が水素原子であり、 R ²がェチル基であり、 nが 1であることを特徴とする、請求項 15〜21のいずれかに記載の製造方法。

23. —般式（IV) で示されるアミノ酸誘導体が、 Bo c型PNAモノマ一ュニヅト合成のための塩基導入用基体であることを特徴とする、請求項 15〜2 2のいずれかに記載の製造方法。

24. 一般式（I I) で示される化合物が、エチレンジァミンから製造された t —ブトキシカルボニルアミノエチルァミンと一般式（I I I)

(式中、 R ¹は水素原子または炭素数 1〜 5の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基、 R ²は炭素数 1〜4の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基、 nは 1〜1 1のいずれかの整数を意味する。）

で示される化合物との反応により得られたものであることを特徴とする、請求項 2 1〜2 3のいずれかに記載の製造方法。

2 5 . 一般式（V )

(式中、 R ¹は水素原子または炭素数 1〜 5の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基、は炭素数 1〜4の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基、 nは 1 ~ 1 1のいずれかの整数を意味する。）

で示される化合物の製造方法であって、一般式（V I )

(式中、 R ¹は水素原子または炭素数 1〜 5の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基、 H²は炭素数 1 4の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基、 nは 1 1 1のいずれかの整数を意味する。）

で示される化合物を加水分解することによって、一般式（V) で示される化合物を得る工程を含むことを特徴とする、前記製造方法。

26. 一般式（VI)

(式中、 R ¹は水素原子または炭素数 1 ~ 5の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基、 R ²は炭素数 1 4の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基、 nは 1~1 1のいずれかの整数を意味する。）

で示される化合物の製造方法であって、一般式（VI I)

(式中、 nは 1 11のいずれかの整数を意味する。）

で示されるベンジルォキシカルボニル— ω—アミノ酸および一般式（I I)

(式中、 R ¹は水素原子または炭素数 1 5の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基、 R ²は炭素数 1 4の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基を意味する。）

で示される化合物との反応によって、一般式（VI) で示される化合物を得るェ程を含むことを特徴とする、前記製造方法。

27. 請求項 12に記載の、一般式（IV) で示される化合物の、 Boc型PN Aモノマーュニットの製造における使用。

28. 請求項 13に記載の、一般式（V) で示される化合物の、 Boc型PNA モノマーュニヅトの製造における使用。

29. 請求項 14に記載の、一般式（VI) で示される化合物の、 Boc型 PN Aモノマーュニッ卜の製造における使用。

補正書の請求の範囲

[2002年 2月 1 8日（1 8. 02. 02)

出願当初の請求の範囲 1—27は補正された；出願当初の請求の範囲

28， 29は取り下げられた。（7頁） ] 下記一般式（ I )

で示されるァミノ酸誘導体の製造方法であって、

一般式（I I)

(式中、 R¹は前記と同様の意味を有し、 R²は炭素数 1〜4の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基を意味する。）で示される化合物の水酸化アル力リ金属塩水溶液による加水分解、およびカウン夕一カチオンとしてピリジニゥムイオンを用いた陽イオン交換クロマトグラフィ一によるアル力リ金属イオンの除去によつて、一般式（I) で示されるアミノ酸誘導体を得る工程を含む、前記製造方法。

2. アルカリ金属が、リチウム、ナトリウムまたはカリウムであることを特徴する、請求項 1に記載の製造方法。

3. —般式（I I) で示される化合物が、 t一ブトキシカルボニルアミノエチルァミンと下記一般式（I I I)

31

鏞正された用紙 (条約第 19条) (式中、 R¹および R²は前記と同様の意味を有する。）

で示される化合物との反応により得られたものであることを特徴とする、請求項 1〜 2のいずれかに記載の製造方法。

4. t—ブトキシカルボニルアミノエチルァミンが、エチレンジァミンと無水 t ープトキシカルボン酸との反応により得られたものであることを特徴とする、請求項 3に記載の製造方法。

5. エチレンジァミンと無水 t—ブトキシカルボン酸との反応が、テトラヒドロフラン中でなされることを特徴とする、請求項 4に記載の製造方法。

6. 一般式（1)、 (I I) および（I I I) で示される化合物において、 R¹ が水素原子であり、 R²がェチル基である請求項 1〜 5のいずれかに記載の製造方法。

7. 一般式（I) で示されるアミノ酸誘導体が B o c型 PNAモノマーュニット合成のための塩基導入基体であることを特徴とする、請求項 1〜 6のいずれかに記載の製造方法。

8. 請求項 1〜 7のいずれかに記載の製造方法の、 B o c型 PNAモノマーュニヅトの製造における使用。

9. t—ブトキシカルボニルアミノエチルァミンの製造方法であって、エチレンジァミンと無水 t—ブトキシカルボン酸とをテトラヒドロフラン中で反応させることを特徴とする、前記製造方法。

10. 一般式（IV)

(IV)

(式中、 R ¹ほ水素原子または炭素数 1〜 5の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基、 nは 1〜 11のいずれかの整数を意味する。）

で示される、アミノ酸誘導体。

11. 一般式（V)

32

鏞正された用紙 (条約第 19条)

(式中、 R¹は水素原子または炭素数 1〜 5の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基、 nは 1〜 11のいずれかの整数を意味する。）

で示される、請求項 10に記載の一般式（IV) で示されるアミノ酸誘導体の中間体。

12. —般式（VI)

13. 下記一般式（IV)

(式中、 R ¹水素原子または炭素数 1〜 5の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル

33

鏞正された用紙 (条約第 19条) 基、 nは 1〜11の整数を表す。）

(式中、： R¹および nは前記と同様の意味を有する。）

で示される化合物を還元することによって、一般式（IV) で示される化合物を得る工程を含む、前記製造方法。

14. 一般式（V) で示される化合物の還元が、触媒としてパラジウムカーボンを含むメタノール溶液中で行われることを特徴とする、請求項 13に記載の製造方法。

15. 一般式（VI)

(式中、： R¹および nは前記と同様の意味を有し、 11²は炭素数1〜4の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基を意味する。）

で示される化合物を加水分解することによって、式（V) で示される化合物を得る工程をさらに含むことを特徴とする、請求項 14に記載の製造方法。

16. 一般式（VI) で示される化合物の加水分解が、水酸化アルカリ金属塩水

34

鏞正された用紙 (条約第 19条) 溶液によってなされることを特徴とする、請求項 15に記載の製造方法。

17. カウン夕一カチオンとしてピリジニゥムイオンを用いた陽イオン交換クロマトグラフィ一にてアルカリ金属イオンを除去する工程をさらに含むことを特徴とする、請求項 16に記載の製造方法。

18. アルカリ金属が、リチウム、ナトリウムまたはカリウムであることを特徴する、請求項 16または 17に記載の製造方法。

19. 一般式（VI) で示される化合物が、下記一般式（VI I)

(式中、 nは前記と同様の意味を有する。）

Η

BocHN, ゾ¹^ 1、_0R2 (_H)

(式中、 R¹およびは前記と同様の意味を有する。）

で示される化合物との反応により得られたものであることを特徴とする、請求項 15〜18のいずれかに記載の製造方法。

20. 一般式（I I)および（I V)〜（VI I) のいずれかで示される化合物において、 R¹が水素原子であり、 R²がェチル基であり、 ηが 1であることを特徴とする、請求項 13〜19のいずれかに記載の製造方法。

21. —般式（IV) で示されるアミノ酸誘導体が、；600型？八モノマ一ュニット合成のための塩基導入用基体であることを特徴とする、請求項 13〜2 0のいずれかに記載の製造方法。

22. —般式（I I) で示される化合物が、エチレンジァミンから製造された t 一ブトキシカルボニルアミノエチルァミンと一般式（I I I)

35

鏞正された用紙 (条約第 19条) (式中、 R ¹は水素原子または炭素数 1〜 5の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基、 R ²は炭素数 1〜4の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基、 nは 1〜1 1のいずれかの整数を意味する。）

で示される化合物との反応により得られたものであることを特徴とする、請求項 1 9〜2 1のいずれかに記載の製造方法。

2 3 . 一般式（V)

(式中、： R ¹は水素原子または炭素数 1〜 5の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基、 R ²は炭素数 1〜4の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基、 nは 1〜1 1のいずれかの整数を意味する。）

で示される化合物の製造方法であって、一般式（V I )

(式中、 R ¹は水素原子または炭素数 1〜 5の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基、 R ²は炭素数 1〜4の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基、 nは 1〜 1 1のいずれかの整数を意味する。）

36

鏞正された用紙 (条約第 19条)

24. 一般式（VI)

(式中、 R ¹は水素原子または炭素数 1〜 5の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基、 R²は炭素数 1〜4の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基、 nは 1〜1 1のいずれかの整数を意味する。）

で示される化合物の製造方法であって、一般式（VI I)

(式中、 nは 1〜11のいずれかの整数を意味する。）

(Π)

(式中、 R ¹は水素原子または炭素数 1〜 5の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基、 R ²は炭素数 1〜4の直鎖状若しくは分枝鎖状のアルキル基を意味する。）で示される化合物との反応によって、一般式（VI) で示される化合物を得るェ程を含むことを特徴とする、前記製造方法。

25. 請求項 10に記載の、一般式（IV) で示される化合物の、：600型卩 Aモノマ一ュニヅトの製造における使用。

26. 請求項 11に記載の、一般式（V) で示される化合物の、：60。型？モノマーュニヅトの製造における使用。

27. 請求項 12に記載の、一般式（VI) で示される化合物の、；800型卩 Aモノマーュニヅ卜の製造における使用。

37

鏞正された用紙 (条約第 19条)