WO2000018444A1

WO2000018444A1 - Compositions de materiaux de reparation des os/os artificiels

Info

Publication number: WO2000018444A1
Application number: PCT/JP1999/005343
Authority: WO
Inventors: Haruhiko Makino; Takashi Nakamura; Hirohumi Kato; Tetsuo Hoshino
Original assignee: Takeda Chemical Industries Ltd
Current assignee: Takeda Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1998-09-30
Filing date: 1999-09-29
Publication date: 2000-04-06
Anticipated expiration: 2001-03-30
Also published as: CN1321094A; AU5998799A; KR20010075476A; EP1120122A1; CA2345791A1

Description

T JP99/05343

1

明細書

骨修復材 ·人工骨組成物技術分野

本発明は、自然骨と骨修復材 *人工骨との結合増強作用を有する骨修復材，人ェ骨組成物に関する。背景技術

骨移植は、組織移植の中でも最も高頻度に行われる移植である。臨床上、外傷に起因した骨の欠損、骨折の遷延治癒や偽関節あるいは骨腫瘍を切除した後などに施行される。従来より、生体における骨移植術としては、患者自身の骨を用いた自家骨移植が汎用されているが、この自家骨移植に用いる自家骨には、量的制限があり、また、骨の採取と移植の 2回手術を要するので、患者に苦痛を与える。この自家骨移植の欠点を補うために、金属、セラミックスなどの人工骨が開発され使用されている。移植骨の役割は、骨形成作用の促進と力学的支持性の獲得であるが、人工骨を用いた場合力学的支持性は十分であるが、骨形成作用の促進は期待できない。

このような状況のもと、骨移植後に、自然骨の欠損部の修復を誘導しかつ自然骨と人工骨との結合を強固にし得る優れた骨修復材 ·人工骨組成物の開発が求められている。発明の開示

本発明者らは、かかる技術背景のもとに、骨移植後に、自然骨の欠損部の修復を誘導しかつ自然骨と人工骨との結合を強固にし得る骨修復材 ·人工骨組成物の開発を目的とし、鋭意検討した結果、骨修復材もしくは人工骨にベンゾチォビランもしくはべンゾチェピン誘導体を混和または被覆することにより、骨移植後の自然骨の欠損部の修復を誘導しかつ自然骨と人工骨との結合を強固にすることを見出し、これに基づいてさらに研究した結果、本発明を完成した。

すなわち、本発明は、

( 1 ) ベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体を骨修復材もしくは人工骨に混和または被覆してなる組成物、

(2) ベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体が、骨 ·軟骨形成促進作用を有する化合物である上記（1) 項記載の組成物、

(3) 骨修復材もしくは人工骨が、金属、セラミックス材料、高分子化合物または蛋白材料である上記（1) 項記載の組成物、

(4) 骨修復材もしくは人工骨が、セラミックス材料である上記（1) 項記載の組成物、

(5) ベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体が、徐放性に製剤化されたものである上記（1) 項記載の組成物、

）

[式中、環 Aは置換されていてもよいベンゼン環を、 Rは水素原子または置換されていてもよい炭化水素基を、 Bはエステル化またはアミド化されていてもよいカルボキシ基を、 Xは一 CH(〇H)—または一CO—を、 kは 0または 1を、 k— は 0、 1または 2を示す。 ] で表わされる化合物またはその塩である上記（1) 項記載の組成物、

(7) 環 Aは、ハロゲン原子、。アルキル基、。アルコキシ基、式： _0— (CH₂)n— O— （式中、 nは 1〜3の整数を示す）で表されるアルキレンジォキシ基および C i— i。アルキルチオ基から選ばれる 1または 2個の置換基で置換されていてもよいベンゼン環であり、 Rは、水素原子、アルキル基またはフエニル基であり、 Bは、式：一 CON(R （R²) (式中、 R¹は水素原子 /

3

または ^— _{1 ()}アルキル基を、 R²はハロゲン、 ^— ₆アルコキシ、モノ—またはジ— アルコキシホスホリル、モノーまたはジ— C ^₆アルコキシホスホリル -C_1→アルキル（ジ— C _ ₆アルコキシにおけるジアルキルは、一緒になって C アルキレン基となっていてもよい）もしくは C^— ₆アルコキシカルボ二ルで置換されていてもよいフエニルまたはフエ二ルーアルキル基を、それぞれ示す。）で表わされる基である上記（6) 項記載の組成物、

(8) 式（I) で表わされる化合物またはその塩が、式

〔式中、 R³はアルキル基を示し、 R および R⁵はそれぞれ〇卜₆アルキル基を示すか、または一緒になつてアルキレン基を示す。〕で表わされる光学活性化合物またはその塩である上記（6) 項記載の組成物、

(9)式（II)で表わされる化合物またはその塩が、 (2R, 4 S)- (-) -N- [4 —(ジエトキシホスホリルメチル）フエニル]一 1， 2, 4, 5—テトラヒドロー 4一メチルー 7, 8—メチレンジォキシ一 5—ォキソ一 3—べンゾチェピン一 2—力ルボキサミドまたはその塩である上記（8) 項記載の組成物、

(10) (1)ベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体：（2)骨修復材もしくは人工骨が、重量比で、約 1 ： 1〜 100である上記（1) 項記載の組成物、

(1 1) 上記（1) に記載の組成物を製造するための、ベンゾチォピランもしくはべンゾチェピン誘導体の使用、

(12) ベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体を有効成分とする、人ェ骨と自然骨との結合増強剤、および

(13) 上記（12) に記載の結合増強剤を製造するための、ベンゾチォピラン

'誘導体の使用、を提供するものである。

本発明の組成物において用いられるべ：

体は、医薬として用いることのできるものであればいずれでもよい。これら誘導体としては、骨 ·軟骨形成促進作用を有する化合物が好ましい。

該ベンゾピランもしくはベンゾチェピン誘導体としては、前記した式（I ) で示される化合物またはその塩が特に好ましい。

前記式（I ) において、環 Aで示される置換されたベンゼン環における置換基としては、例えば、ハロゲン原子、ニトロ基、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよい水酸基、置換されていてもよいメルカブト基、置換されていてもよいアミノ基、ァシル基、モノーまたはジーァルコキシホスホリル基、ホスホノ基、置換されていてもよいァリール基、置換されていてもよいァラルキル基または置換されていてもよい芳香族複素環基が用いられ、これらの置換基は同一または異なって 1ないし 4個、好ましくは 1ないし 2個、ベンゼン環上に置換していてもよい。

該「ハロゲン原子」としては、例えばフッ素、塩素、臭素、ヨウ素等が用いられる。

該「置換されていてもよいアルキル基」におけるアルキル基としては、好ましくは炭素数 1〜 1 0のアルキル基（例えばメチル、ェチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、 sec-ブチル、 t er t-ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、へキシル、ヘプチル、ォクチル、ノニルまたはデシル等）、炭素数 3〜 7のシクロアルキル基（例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロへキシルまたはシクロへプチル等）等が用いられ、これらは、例えばハロゲン原子（例、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素等）、水酸基、炭素数 1〜6のアルコキシ基（例、メトキシ、エトキシ、プロボキシ、ブトキシ、へキシルォキシ等）、モノーまたはジー C i— 6アルコキシホスホリル基（例えば、メトキシホスホリル、エトキシホスホリル、ジメトキシホスホリル、ジエトキシホスホリルなど）、ホスホノ基等で 1 〜 3個置換されていてもよい。

置換されたアルキル基の具体例としては、例えばトリフルォロメチル、トリフルォロェチル、トリクロロメチル、ヒドロキシメチル、 2—ヒドロキシェチル、メトキシェチル、 1—メトキシェチル、 2—メトキシェチル、 2 , 2—ジエトキシェチル、 2—ジエトキシホスホリルェチル、ホスホノメチル等が挙げられる。

該「置換されていてもよい水酸基」における置換された水酸基としては、例えばアルコキシ基、アルケニルォキシ基、ァラルキルォキシ基、ァシルォキシ基、ァリ一ルォキシ基等が用いられる。

該「アルコキシ基」としては、好ましくは炭素数 1〜 1 0のアルコキシ基（例、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、 t er i-ブトキシ、ぺンチルォキシ、へキシルォキシ、ヘプチルォキシまたはノニルォキシ等）、炭素数 4〜 6のシクロアルコキシ基（例、シクロブトキシ、シクロベントキシまたはシクロへキシルォキシ等）等が用いられる。該「ァルケニルォキシ基」としては、好ましくは炭素数 2〜 1 0のアルケニルォキシ基、例えばァリルォキシ、クロチルォキシ、 2—ペンテニルォキシ、 3 —へキセニルォキシ、 2―シクロペンテニルメトキシまたは 2—シクロへキセニルメトキシ等が用いられる。該「ァラルキルォキシ基」としては、好ましくは炭素数 6〜 1 9のァラルキルォキシ基、さらに好ましくは炭素数？〜 1 4のァリール一炭素数 1〜 4のアルキルォキシ基（例、ベンジルォキシ、フエネチルォキシ等）が用いられる。該「ァシルォキシ基」としては、好ましくはアルカノィルォキシ基、例えば炭素数 2〜 1 0のアルカノィルォキシ基（例、ァセチルォキシ、プロピオニルォキシ、 n -プチリルォキシ、へキサノィルォキシ等）が用いられる。該「ァリールォキシ基」としては、好ましくは炭素数 6〜 1 4のァリールォキシ基（例，フエノキシ、ビフエニルォキシ等）が用いられる。これらの基はさらに、例えば前記したと同様のハロゲン原子、水酸基、炭素数 1〜 6のアルコキシ基、モノーまたはジー C — ₆アルコキシホスホリル基、ホスホノ基等で 1〜 3個置換されていてもよい。置換された水酸基の具体例としては、例えばトリフルォロメトキシ、 2 , 2 , 2—トリフルォロエトキシ、ジフルォロメトキシ、 2—メトキシエトキシ、 4一クロ口ベンジルォキシ、 2—（3 , 4—ジメトキシフエニル）エトキシ等が挙げられる。

該「置換されていてもよいメルカプト基」における置換されたメルカプト基としては、例えばアルキルチオ基、ァラルキルチオ基、ァシルチオ基等が用いられる。該「アルキルチオ基」としては、好ましくは炭素数 1〜 1 0のアルキルチオ基（例、メチルチオ、ェチルチオ、プロピルチオ、ブチルチオ、ペンチルチオ、へキシルチオ、へプチルチオ、ノニルチオ等）、炭素数 4〜 6のシクロアルキルチオ基（例、シクロプチルチオ、シクロべンチルチオ、シクロへキシルチオ等）等が用いられる。該「ァラルキルチォ基」としては、好ましくは炭素数 7〜 1 9のァラルキルチオ基、さらに好ましくは炭素数 6〜 1 4のァリール一炭素数 1〜4のアルキルチオ基、例えばべンジルチオまたはフエネチルチオ等が用いられる。該「ァシルチォ基」としては、好ましくはアルカノィルチオ基、例えば炭素数 2〜1 0 のアルカノィルチオ基（例、ァセチルチオ、プロピオ二ルチオ、 n-ブチリルチオ、へキサノルチオ等）が用いられる。これらの基はさらに例えば、前記したと同様のハロゲン原子、水酸基、炭素数 1〜 6のアルコキシ基、モノ—またはジー C卜₆アルコキシホスホリル基、ホスホノ基等で 1〜3個置換されていてもよい。置換されたメルカプト基の具体例としては、例えばトリフルォロメチルチオ、 2 , 2 , 2—トリフルォロェチルチオ、 2—メトキシェチルチオ、 4—クロ口べンジルチオ、 3 , 4—ジクロロベンジルチォ、 4一フルォロベンジルチオ、 2— ( 3 , 4—ジメトキシフエ二ル）ェチルチォ等が挙げられる。

該「置換されていてもよいアミノ基」における置換されたァミノ基の置換基としては、前記したと同様の炭素数 1〜 1 0のアルキル基、炭素数 2 〜 1 0のアルケニル基（例、ァリル、ビニル、 2 —ペンテン一 1—ィル、 3 一ペンテン一 1—ィル、 2—へキセン一 1 一ィル、 3—へキセン— 1ーィル、 2—シクロへキセニル、 2—シクロペンテニル、 2 _メチル _ 2—プ口ペン一 1 _ィル、 3 —メチルー 2—ブテン— 1ーィル等）、炭素数 6〜 1 4のァリール基（例、フエニル、ナフチル等）または炭素数 7〜 1 9のァラルキル基（例、ベンジル、フエネチル等）が 1または、同一または異なつて 2個用いられ、これらの置換基は前記したと同様のハロゲン原子、炭素数 1〜 6のアルコキシ基、モノ—またはジー C i— eアルコキシホスホリル基、ホスホノ基等で置換されていてもよい。

置換されたァミノ基の具体例としては、例えばメチルァミノ、ジメチルァミノ、ェチルァミノ、ジェチルァミノ、ジブチルァミノ、ジァリルアミノ、シクロへキシルァミノ、フエニルァミノまたは N—メチルー N—フエニルアミノ、 N—メチルー N— ( 4—クロ口ベンジル）ァミノ、 N, N—ジ（2 ーメトキシェチル）ァミノ等が挙げられる。

該「ァシル基」としては、有機カルボン酸ァシル基または炭素数 1〜 6 の炭化水素基 [例、 C i— ₆アルキル（例、メチル、ェチル、 n-プロピル、へキシル等）、フエニル等] を有するスルホン酸ァシル基等が用いられる。該「有機カルボン酸ァシル基」としては、例えばホルミル、炭素数 1〜 1 0のアルキル一力ルポニル基（例、ァセチル、プロピオニル、プチリル、バレリル、ビバロイル、へキサノィル、ォクタノィル、シクロブタンカルポニル、シクロへキサンカルボニル、シクロヘプタンカルポニル等）、炭素数 2〜 1 0のアルケニル—カルボニル基（例、クロトニル、 2—シクロへキセンカルボ二ル等）、炭素数 6〜 1 4のァリール—カルボニル基（例、ベンゾィル等）、炭素数 7〜 1 9のァラルキル一カルボニル基（例、ベンジルカルボニル、ベンズヒドリルカルボニル等）、 5または 6員芳香族複素環カルボニル基（例、ニコチノィル、 4 一チアゾリルカルボニル等）、 5または 6員芳香族複素環ァセチル基（例、 3—ピリジルァセチル、 4一 8

チアゾリルァセチル等）が用いられる。該「炭素数 1 6の炭化水素基を有するスルホン酸ァシル基」としては、例えばメタンスルホニル、ェ夕ンスルホニル等が用いられる。これらの基はさらに置換基、例えば前記したと同様のハロゲン原子、水酸基、炭素数 1 6のアルコキシ基、アミノ基等で 1 3個置換されていてもよい。ァシル基の具体例としては、例えばトリフルォロアセチル、トリクロロアセチル、 4一メ卜キシブチリル、 3 ーシクロへキシルォキシプロピオニル、 4—クロ口べンゾィル、 3 , 4—ジメトキシベンゾィル等が挙げられる。

該「モノ—またはジーアルコキシホスホリル基」としては、例えばメトキシホスホリル、エトキシホスホリル、プロポキシホスホリル、イソプロポキシホスホリル、ブトキシホスホリル、ペンチルォキシホスホリル、へキシルォキシホスホリル等のモノ— C ₆アルコキシホスホリル基、例えばジメトキシホスホリル、ジエトキシホスホリル、ジプロポキシホスホリル、ジイソプロポキシホスホリル、ジブ卜キシホスホリル、ジペンチルォキシホスホリル、ジへキシルォキシホスホリル等のジ— C ₆アルコキシホスホリル基等が用いられる。好ましくはジ— Cュ_ ₆アルコキシ基、例えばジメトキシホスホリル、ジエトキシホスホリル、ジプロポキシホスホリル、ジィソプロポキシホスホリル、エチレンジォキシホスホリル、ジブ卜キシホスホリル等が用いられる。

該「置換されていてもよいァリール基」におけるァリール基としては、好ましくは炭素数 6 1 4のァリール基、例えばフエニル、ナフチル、ァントリル等が用いられ、これらは前記したと同様の炭素数 1 1 0のアルキル基、ハロゲン原子、水酸基、炭素数 1 6のアルコキシ基等で 1 3 個置換されていてもよい。置換されたァリール基の具体例としては、例えば 4一クロ口フエニル、 3 , 4—ジメトキシフエニル、 4—シクロへキシルフエニル、 5 , 6 , 7 , 8 —テトラヒドロー 2 —ナフチル等が挙げられる。該「置換されていてもよいァラルキル基」におけるァラルキル基として JP99/05343

9

は、好ましくは炭素数 7〜 1 9のァラルキル基、例えばベンジル、ナフチルェチル、トリチル等が用いられ、芳香環上に前記した炭素数 1〜 1 0のアルキル基、ハロゲン原子、水酸基、炭素数 1〜 6のアルコキシ基等で 1 〜 3個置換されていてもよい。置換されたァラルキル基の具体例としては、例えば 4—クロ口ベンジル、 3 , 4—ジメ卜キシベンジル、 4ーシクロへキシルベンジル、 5 , 6 , 7 , 8—テトラヒドロー 2—ナフチルェチル等が挙げられる。

該「置換されていてもよい芳香族複素環基」における芳香族複素環基としては、好ましくは窒素原子、酸素原子またはノ及び硫黄原子を 1 〜4個有する 5〜 6員芳香族複素環基、例えばフリル、チェニル、イミダゾリル、チアゾリル、ォキサゾリル、チアジアゾリル等が用いられ、これらの基は前記した炭素数 1〜 1 0のアルキル基、ハロゲン原子、水酸基、炭素数 1 〜 6のアルコキシ等で 1〜 3個置換されていてもよい。

2個のアルキル基がベンゼン環 A上で互いに隣接して置換されている場合、互いに連結して式：一（C H ₂ ) m— 〔式中、 mは 3〜 5の整数を示す〕で表わされるアルキレン基（例、卜リメチレン、テトラメチレン、ペン夕メチレン等）を形成してもよく、 2個のアルコキシ基が互いに隣接して置換されている場合、式：一 0 _ ( C H ₂ ) n—0— 〔式中、 nは :！〜 3の整数を示す〕で表されるアルキレンジォキシ基（例、メチレンジォキシ、ェチレンジォキシ、トリメチレンジォキシ等）を形成してもよい。このような場合は、ベンゼン環の炭素原子とともに 5〜 7員環が形成される。

前記式（I) において、 Rは水素原子または置換されていてもよい炭化水素基を示す。

Rで示される「置換されていてもよい炭化水素基」における炭化水素基としては、アルキル基（好ましくは、炭素数 1〜 1 0のアルキル基、例えば、メチル、ェチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソプチル、 sec ーブチル、 t er卜ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、へキシル等が挙げられる。）、前記したと同様のアルケニル基（好ましくは炭素数 2〜 1 0のアルケニル基）、さらに、それぞれ前記したと同様の、ァリール基（好ましくは炭素数 6〜 1 4のァリール基）、ァラルキル基（好ましくは炭素数 7〜 1 9のァラルキル）等が用いられる。炭化水素基上の置換基としては、 5〜 6員芳香族複素環基（例、フリル、チェニル、イミダゾリル、チアゾリル、ォキサゾリル、チアジアゾリル等）、前記したと同様のハロゲン原子、前記したと同様のジ— Cい ₆アルコキシホスホリル基、ホスホノ基等が用いられる。

前記式（I) において、 Bはエステル化またはアミド化されていてもよいカルボキシル基を示す。

Bで示される「エステル化されていてもよいカルボキシル基」におけるエステル化されたカルボキシル基としては、例えばアルコキシカルボニル基、好ましくはアルコキシカルボニル基（例、メトキシカルボニル、エトキシカルポニル、プロポキシカルボニル、ブトキシカルボ二ル等）、ァリールォキシカルボニル基、好ましくは C ₆— ₁₄ァリールォキシカルボ二ル基（例、フエノキシカルボニル等）、ァラルキルォキシカルポニル基、好ましくは C ₇— _{1 9}7ラルキルォキシカルボニル基（例、ベンジルォキシカルポニル等）等が用いられる。

Bで示される「アミド化されていてもよい力ルポキシル基」におけるァミド化されたカルボキシル基は、好ましくは、式：— C ON iR ¹) (R ²) 〔式中、 R R ²はそれぞれ水素原子、置換されていてもよい炭化水素基または置換されていてもよい 5〜 7員複素環基を示す。〕で表される置換されていてもよい力ルバモイル基が挙げられる。

R R²で示される「置換されていてもよい炭化水素基」における炭化水素基としては、アルキル基、好ましくは炭素数 1〜 1 0のアルキル基（例、メチル、ェチル、プロピル、イソプロピル、プチル、イソブチル、 sec-ブチル、 tert-プチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、へキシル、ヘプチル、ォクチル、ノニル、デシル等）、アルケニル基、好ましくは炭素数 2〜 1 0のアルケニル基（例、ァリル、ビエル、 2—ペンテン一 1一ィル、 3—ペンテン一 1—ィル、 2—へキセン— 1—ィル、 3—へキセン一 1—ィル、 2—シクロへキセニル、 2—シクロペンテニル、 2—メチル — 2—プロペン— 1一ィル、 3—メチルー 2—ブテン一 1—ィル等）、ァリール基、好ましくは炭素数 6〜 1 4のァリール基（例、フエニル、ナフチル、アン卜リル等）、ァラルキル基、好ましくは炭素数 7〜 1 9のァラルキル基（例、ベンジル、ナフチルェチル、トリチル等）等が用いられ、これらの炭化水素基は、例えば（i)ハロゲン原子（例、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素等）、（ii)水酸基、（iii)炭素数 1〜 6のアルコキシ基（例、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、 tert-ブトキシ、ペンチルォキシ、へキシルォキシ等）、（iv)炭素数 1〜 6のアルキル基（例、メチル、ェチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、 sec-ブチル、 tert -ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、へキシル等）で置換されていてもよいアミノ基（例、ァミノ、メチルァミノ、ェチルァミノ、ジメチルァミノ、ジェチルァミノ、ジプロピルアミノ等）、（V)ァシル基（例、炭素数 1〜 1 0のアルカノィル基等）で置換されたァミノ基（例、ァセチルァミノ、プロピオニルァミノ、ベンゾィルァミノ等）、（vi)炭素数 1〜 6のアルキル基で置換されていてもよい力ルバモイル基（例、力ルバモイル、メチルカルバモイル、ジメチルカルバモイル、ジェチルカルバモイル等）、 (vii) Cい ₆アルコキシカルボニル基（例、メトキシカルボニル、ェトキシカルボニル、プロポキシカルポニル等）、（viii)モノーまたはジ―ァルコキシホスホリル基〔例、モノーまたはジー Cェ— 6アルコキシホスホリル基（例えば、ジメトキシホスホリル、ジエトキシホスホリル、エチレンジォキシホスホリル等）等〕、（ix)モノーまたはジーアルコキシホスホリルアルキル基〔例、モノーまたはジ— C — ₆アルコキシホスホリルー C i— ₃ アルキル基（例、メトキシホスホリルメチル、エトキシホスホリルメチル、メ卜キシホスホリルェチル、ェ卜キシホスホリルェチル、ジメトキシホスホリルメチル、ジェトキシホスホリルメチル、ジメトキシホスホリルェチル、ジェトキシホスホリルェチル等）等〕、（X)式

— CH₂P<ノ⁰ \メ CH₂)_P

U 。〔式中、 pは 2ないし 4の整数〕

(xi)ホスホノ基、（xii)芳香族複素環基（前記と同意義）等で 1〜 3個置換されていてもよい。

R R²で示される「置換されていてもよい 5〜 7員複素環基」における 5〜 7員複素環基としては、例えば 1個の硫黄原子、窒素原子または酸素原子を含む 5~ 7員複素環基、 2〜4個の窒素原子を含む 5〜 6員複素環基、 1〜 2個の窒素原子および 1個の硫黄原子または酸素原子を含む 5 〜 6員複素環基が用いられ、これらの複素環基は 2個以下の窒素原子を含む 6員環、ベンゼン環または 1個の硫黄原子を含む 5員環と縮合していてもよい。該「置換されていてもよい 5〜 7員複素環基」が有していてもよい置換基としては、前記 R¹および R²で示される「置換されていてもよい炭化水素基」の炭化水素基が有していてもよい置換基と同様のものが 1ないし 4個用いられる。

R R²で示される 5〜 7員複素環基の好ましい例としては、例えば 2 一ピリジル、ピリミジル、ピラジニル、ピリダジニル、ピラゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、ォキサゾリル、テトラゾリル、チアジアゾリル、ォキサジァゾリル、トリアジニル、トリァゾリル、チェニル、ピロリル、ピロリニル、フリル、ピロリジニル、ベンゾチェ二ル、インドリル、イミダゾリジニル、ピペリジル、ピペリジノ、ピペラジニル、モルホリニル、モルホリノ、ピリド [2， 3— d]ピリミジル、ベンゾピラニル、 1 , 8—ナフチリジル、キノリル、チエノ [2, 3— b]ピリジル等が挙げられる。 1^と1^ ²は、互いに連結して式： — N (R i) (R ²) が 5〜 7員環を形成していてもよく、このような環としては、例えばモルホリン、チオモルホリン、ピぺリジン、ホモピぺラジン、ピぺラジン、ピロリジン、ピロリン、ピラゾリン、イミダゾリン、イミダゾリジン、チアゾリジン、ァゼピン等が挙げられる。

R ¹および R ²で示される「置換されていてもよい炭化水素基」の好ましい例である置換されたアルキル基の具体例としては、例えばトリフルォロメチル、トリフルォロェチル、ジフルォロメチル、トリクロロメチル、 2 —ヒドロキシェチル、 2—メトキシェチル、 2—エトキシェチル、 2, 2— ジメトキシェチル、 2, 2—ジエトキシェチル、 2—ピリジルメチル、 3 _ ピリジルメチル、 4一ピリジルメチル、 2—（2—チェニル）ェチル、 3— (3 一フリル）プロピル、 2—モルホリノエチル、 3—ピロリルプチル、 2—ピベリジノエチル、 2 — (N， N—ジメチルァミノ）ェチル、 2—（N—メチル一 N—ェチルァミノ）ェチル、 2—（N, N—ジイソプロピルァミノ）ェチル、 5— (N， N—ジメチルァミノ）ペンチル、 N, N—ジメチルカルバモイルェチル、 N， N—ジメチルカルバモイルペンチル、エトキシカルボニルメチル、ィソプロポキシカルボニルェチル、 tert—ブトキシカルボニルプロピル、 2—ジェトキシホスホリルェチル、 3—ジプロポキシホスホリルプロピル、 4—ジブトキシホスホリルプチル、エチレンジォキシホスホリルメチル、 2—ホスホノエチル、 3—ホスホノプロピル等、置換されたァラルキル基の具体例としては、例えば 4一クロ口ベンジル、 3—（2—フルオロフェニル）プロピル、 3—メトキシベンジル、 3 , 4—ジメトキシフエネチル、 4 一ェチルベンジル、 4一（3— トリフルォロメチルフエニル）ブチル、 4— ァセチルァミノベンジル、 4ージメチルアミノフエネチル、 4ージェトキシホスホリルベンジル、 2 —（4ージプロポキシホスホリルメチルフエ二ル）ェチル等、置換されたァリール基の具体例としては、例えば 4—クロ口フエニル、 4—シクロへキシルフェニル、 5, 6, 7， 8—テトラヒドロー 2 —ナフチル、 3—トリフルォロメチルフエニル、 4—ヒドロキシフエニル、

3 , 4 , 5 —卜リメトキシフエ二ル、 6—メトキシー 2 —ナフチル、 4一（4 一クロ口ベンジルォキシ）フエニル、 3， 4—メチレンジォキシフエニル、 4 - ( 2 , 2 , 2 —トリフルォロェトキシ）フエニル、 4—プロピオニルフエニル、 4ーシクロへキサンカルボエルフェニル、 4ージメチルァミノフエニル、 4一べンゾィルァミノフエニル、 4ージエトキシカルバモイルフエニル、 4— t er t—ブトキシカルボニルフエニル、 4ージエトキシホスホリルフエ二ル、 4 —ジエトキシホスホリルメチルフエニル、 4一（2—ジエトキシホスホリルェチル）フエニル、 2—ジエトキシホスホリルメチルフエ二ル、 3—ジエトキシホスホリルメチルフエニル、 4ージプロポキシホスホリルフエニル、 4一（2 —ホスホノエチル）フエニル、 4 一ホスホノメチルフエニル、 4 一ホスホノフエニル等、置換された 5〜 7員複素環基の具体例としては、例えば 5 —クロロー 2 —ピリジル、 3—メトキシー 2—ピリジル、 5—メチルー 2 —ベンゾチアゾリル、 5 —メチル— 4 —フエニル— 2—チアゾリル、 3 —フエ二ルー 5 —イソォキサゾリル、 4一（4 一クロ口フエ二ル）— 5—メチルー 2ーォキサゾリル、 3—フエ二ルー 1 , 2 , 4—チアジアゾ—ルー 5 —ィル、 5—メチルー 1 , 3 , 4—チアジアゾールー 2— ィル、 5 —ァセチルアミノー 2 —ピリミジル、 3 —メチル _ 2 —チェニル、

4 , 5—ジメチル— 2 —フラニル、 4ーメチルー 2 —モルホリニル等が挙げられる。

前記のうち、環 Aは好ましくは同一または異なって、ハロゲン原子、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよい水酸基、置換されていてもよいメルカプト基またはおよび置換されていてもよいアミノ基の 1またはそれ以上、より好ましくは 1または 2個で置換されていてもよいベンゼン環である。

より好ましい環 Aとしては、同一または異なって、ハロゲン原子、炭素数 1 〜 1 0 (さらに好ましくは炭素数 1〜 5 ) のアルキル基、炭素数 1〜 1 0 (さらに好ましくは炭素数 1〜 5) のアルコキシ基、式： — O—（CH 2)n—0— 〔式中、 nは 1〜3の整数を示す〕で表されるアルキレンジォキシ基または/および炭素数 1〜 1 0 (さらに好ましくは炭素数 1〜 5) のアルキルチオ基の 1または 2個で置換されていてもよいベンゼン環である。環 Aの特に好ましい例としては、式： — 0— (CH₂)n—0— 〔式中、 n は 1〜 3の整数を示す〕で表されるアルキレンジォキシ基で隣接する炭素原子が置換されたベンゼン環である。

Rは水素原子、卜 ₆アルキル基（例えば、メチル、ェチル等）またはフェニル基が好ましい。

Bは、例えばアルコキシ一力ルポニル基および式：一 CONiR CR²) 〔式中、 R R²はそれぞれ水素原子、置換されていてもよい炭化水素基または置換されていてもよい 5〜7員複素環基を示す〕で表される基などが好ましい。

R¹および R ²の好ましい例は、 R ¹が水素原子または炭素数 1〜 1 0のァルキル基（例、メチル、ェチル、プロピル等）で、 R ²がハロゲン（例、フッ素、塩素、臭素等）、アルコキシ（例、メトキシ、エトキシ等）、モノーまたはジーアルコキシホスホリル（例、ジメトキシホスホリル、ジエトキシホスホリルなどのモノーまたはジ— C アルコキシホスホリル等）、モノーまたはジーアルコキシホスホリルアルキル（例、ジメトキシホスホリルメチル、ジェトキシホスホリルメチルなどのモノ—またはジー C丄— ₆アルコキシホスホリルー C アルキルなど）（ジー C アルコキシにおけるジアルキルは、一緒になつて C卜 ₆アルキレン基となっていてもよい）または C アルコキシカルボニル（例、メトキシカルボニル、エトキシカルポニル等）で置換されていてもよいフエニルまたはフエ二ルー C , — ₃アルキル基、あるいはフエニル基で置換されていてもよい 1または 2個の窒素原子あるいは 1個の窒素原子と 1個の硫黄原子をもつ 5または 6員環複素環基（例、ピリジル等）である。 R¹および R ²のより好ましい例としては、 R¹が水素原子で、 R²がモノ —またはジー C i— ₆アルコキシホスホリルー C i_₃アルキルで置換されたフエニル基（例、 4ージエトキシホスホリルメチルフエニル等）である。前記式（I) において、 Xは一 CH(OH)—または一 CO—を示し、好ましくは、一CO—である。

前記式（I) において、 kは 0または 1、 k ' は 0、 1または 2を示し、好ましくは kが 1で、 k ' が 0の場合である。

化合物（I) のさらに好ましい例としては、例えば式（II)

〔式中、 R³は C卜 ₆アルキル基を示し、 R⁴および R ⁵はそれぞれ C ァルキル基を示すか、または一緒になつて C アルキレン基を示す〕で表される光学活性ベンゾチェピン誘導体が挙げられる。

前記式（II) において、 R³、 R⁴および R⁵で示される — ₆アルキル基」としては、例えばメチル、ェチル、プロピル、イソプロピル、プチル、イソブチル、 sec—ブチル、 tert—ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、へキシル等のアルキル基が挙げられ、好ましくは、炭素数 1ないし 4のアルキル基が挙げられる。 R ⁴および R ⁵は一緒になつて、 C i— e アルキレン基を形成してもよく、この場合例えば、

は

〔式中、 ρは 2ないし 4の整数を示す。〕で表すことができる。

R³、 R⁴および R⁵としては、例えばそれぞれメチル、ェチル等の炭素数 1ないし 4のアルキル基等が好ましい。

化合物（Π) は、（2 R. 4 S) 配位の光学活性体であって、（2 S. 4 R) 配位の化合物を実質的に含まず、光学純度が 1 0 0 %に近いほど好ましいものである。

化合物（Π) の特に好ましい例としては、例えば（2 R, 4 S)- (-) -N 一〔4 _ (ジェトキシホスホリルメチル）フエニル〕一 1, 2, 4, 5—テトラヒドロ一 4—メチル一 7, 8ーメチレンジォキシ一 5—ォキソー 3—ベンゾチェピン— 2—カルボキサミド（以下、化合物 Aと称することもある）またはその塩である。化合物 Aの構造は、次の式で示される。

本発明の組成物で用いられるベンゾチォピランもしくはべンゾチェピン誘導体、好ましくは、骨 ·軟骨形成促進作用を有するベンゾチォピランもしくはべンゾチェピン誘導体の塩は、好ましくは薬理学的に許容される塩が用いられる。薬理学的に許容される塩としては、無機塩基との塩、有機塩基との塩、無機酸との塩、有機酸との塩または塩基性若しくは酸性アミノ酸との塩等が用いられる。ベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体の塩を形成させ得る塩としては、無機塩基としては、アル力リ金属（例、ナトリウム、カリウム等）、アルカリ土類金属（例、カルシウム、マグネシゥム等）力 ί、有機塩基としては、例えばトリメチルァミン、トリェチルァミン、ピリジン、ピコリン、 Ν, Ν—ジベンジルエチレンジァミン、ジェ夕ノールァミン等が、無機酸としては、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、リン酸、硝酸、硫酸等が、有機酸としては、ギ酸、酢酸、トリフルォロ酢酸、シユウ酸、酒石酸、フマール酸、マレイン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、 p—トルエンスルホン酸、クェン酸等が、塩基性または酸性アミノ酸としては、例えばアルギニン、リジン、ァスパラギン酸、グル夕ミン酸等が用いられる。

本発明の組成物に用いられるベンゾチォピランもしくはべンゾチェピン誘導体またはその塩は、例えば、特開平 3 - 2 3 2 8 8 0号公報（ョ一口ッパ特許出願公開公報第 3 7 6 1 9 7号公報）、特開平 4— 3 6 4 1 7 9 号公報（ヨーロッパ特許出願公開公報第 4 6 0 4 8 8号公報）、特開平 8 - 2 3 1 5 6 9号公報（ヨーロッパ特許出願公開公報第 7 1 9 7 8 2号公報）に記載された方法と同一の方法、これらと類似の方法またはこれらに準じた方法により製造することができる。

本発明組成物において用い

導体は、徐放性に製剤化されたものが好ましい。

該徐放性製剤としては、例えば、

導体と生体内分解性高分子重合物とを含有する組成物が挙げられる。

ベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体と生体内分解性高分子重合物とを含有する徐放性製剤は、自体公知の方法、例えば、特開平 9一 2 6 3 5 4 5 号公報に記載の方法、またはこれに準ずる方法により製造することができる。好適な生体内分解性高分子重合物としては、水に難溶または不溶で成形性を有し、治療のための一定期間内に生体内で分解するいわゆる生体内分解型の高分子重合物が挙げられる。その具体例としては、例えば脂肪酸ポリエステル〔例、 —ヒドロキシカルボン酸類（例、乳酸、グリコール酸、 2—ヒドロキシ酪酸、 2 ーヒドロキシ吉草酸、 2—ヒドロキシ _ 3—メチル酪酸、 2—ヒドロキシカプロン酸、 2—ヒドロキシイソカブロン酸、 2—ヒドロキシカプリル酸等）、ヒドロキシジカルボン酸類（例、リンゴ酸等）、ヒドロキシトリカルボン酸類（例、リンゴ酸等）、乳酸力プロラクトン、バレロラクトン等の 1種以上の重合物、共重合物、あるいはこれらの混合物〕、およびその誘導体（例、ポリ乳酸、ポリダリコール酸及びポリエチレングリコールのブロック重合物等）、ポリ— α—シァノアクリル酸エステル、ポリアルキレンォキサレート類（例、ポリトリメチレンォキサレート、ポリテトラメチレンォキサレート等）、ポリオルソエステル、ポリオルソカーボネート、ポリカーボネート類（例、ポリエチレンカーボネート、ポリエチレンプロピレンカーボネート等）、ポリアミノ酸類（例、ポリーア一ベンジル— L一グルタミン酸、ポリ—Lーァラニン、ポリーア —メチル—L一グルタミン酸等）、ヒアルロン酸エステル類、ポリスチレン、ポリメタアクリル酸、ァクリル酸とメタアクリル酸との共重合物、ポリアミノ酸、デキンステアレート、ェチルセルロース、ァセチルセルロース、ニトロセルロース、無水マレイン酸系共重合物、コラーゲン、ゼラチン、フイブリン、ヒドロキシアパタイト等が用いられる。

これらの生体内分解性高分子重合物は 1種の単一重合物でもよく、また 2種以上の共重合物、あるいは単なる混合物でもよい。重合の形式はランダム、ブロック、グラフ卜の何れでもよい。

生体内分解性高分子重合物の好ましい例は、例えば脂肪族ポリエステル等である。特に、例えば α—ヒドロキシカルボン酸類の 1種以上から合成された重合物、共重合物が生体内分解性および生体適合性の観点から好ましく、具体的には乳酸、グリコール酸、 2—ヒドロキシ酪酸、 2—ヒドロキシ吉草酸等の 1種以上から合成された共重合物、またはこれらの混合物が使用される。

生体内分解性共重合物は、公知の方法、例えば特開昭 6 1 - 2 8 5 2 1号公報に記載の方法、またはそれに準ずる方法により製造される。

前記ひーヒドロキシカルボン酸類は D—体、 L—体、および D、 L—体のいずれでもよいが、 D、 L—体が好ましい。

前記 α—ヒドロキシカルボン酸類の単一重合物の例としては乳酸、ダリコール酸、 2—ヒドロキシ酪酸等の単一重合物が挙げられ、該 α—ヒドロキシカルボン酸類としては乳酸が好ましい。ひーヒドロキシカルボン酸類の共重合物の例としてはグリコール酸と他の α—ヒドロキシカルボン酸類との共重合物が挙げられ、例えばひーヒドロキシカルボン酸類としては乳酸、 2—ヒドロキシ酪酸等が好ま CT/JP99/05343

20

しい。具体的には、例えば乳酸ーグリコール酸共重合物、 2 ヒドロキシ酪酸一グリコ一ル酸共重合物等、好ましくは乳酸ーグリコ一ル酸共重合物等が用いられる。

これらの生体内分解性高分子重合物の重量平均分子量は約 2， 000ないし約 800, 000のものが好ましく、より好ましくは約 5, 000ないし約 200, 000の範囲から選定される。

乳酸単一重合物（以下、ポリ乳酸と称することもある）において、その重量平均分子量は約 5, 000から約 100， 000のものが好ましい。さらに好ましくは約 6, 000から約 50, 000である。ポリ乳酸は、公知の製造方法、例えば特開昭 6 1 - 2852 1号公報に記載の方法、またはそれに準ずる方法に従って合成できる。

乳酸ーグリコール酸共重合物において、その乳酸とグリコール酸との組成比は約 100Z0から約 50Z50 (W/W) が好ましく、特に約 90ノ 10から 50ノ

50 (W/W) が好ましい。乳酸ーグリコール酸共重合物の重量平均分子量は約 5, 000から約 100, 000が好ましレ^さらに好ましくは約 8、 000から 50 ,

000である。乳酸ーグリコール酸共重合物は、公知の製造方法、例えば特開昭

6 1 -2852 1号公報に記載の方法、またはそれに準ずる方法に従って合成できる。該共重合体は無触媒脱水重縮合で合成された物が好ましい。

2—ヒドロキシ酪酸—グリコール酸共重合物において、グリコール酸が約 40 から約 70モル％、残りが 2—ヒドロキシ酪酸である場合が好ましい。 2—ヒドロキシ酪酸ーグリコ一ル酸共重合物の重量平均分子量は、約 5, 000から約 10 0, 000が好ましい。さらに好ましくは約 8, 000力ら約 50, 000である。 2—ヒドロキシ酪酸一グリコール酸共重合物は、公知の製造方法、例えば特開昭 6 1 - 2852 1号公報に記載の方法に従って合成できる。該共重合体は無触媒脱水重縮合で合成された物が好ましい。

前記した 2—ヒドロキシ酪酸ーグリコ一ル酸共重合物は、さらにポリ乳酸と混合して使用してもよい。 2—ヒドロキシ酪酸—グリコール酸共重合物とポリ乳酸とを混合して使用する場合、その混合比は例えば約 10Z90から約 90/10 (重量％)である。混合比はさらに好ましくは約 25/75から約 75/25 (重量％) である。

重量平均分子量は、ゲルパーミエ一シヨンクロマトグラフィー（GPC) で測定したポリスチレン換算の分子量をいう。測定は、 GPCカラム KF 804LX 2 (昭和電工製）、 R Iモニター L一 3300 (日立製作所製）を使用し、移動相としてクロ口ホルムを用いることができる。

生体内分解性高分子重合物の使用量は、ベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体例えば化合物（I) またはその塩の薬理活性の強さと、生体内分解性高分子重合物からの薬物放出の速度および期間等によって変えることができ、例えば当該生理活性物質に対して約 0. 2ないし 10, 000倍（重量比）の量で用いられ、好ましくは約 1ないし 1， 000倍（重量比）、さらに好ましくは約 1ないし 100倍（重量比）の量で用いるのがよい。

ベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体例えば化合物（I) またはその塩を生体内分解性高分子化合物に含有せしめる方法は常法により実施することができ、例えば、ベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体例えば化合物 ( I ) またはその塩を生体内分解性重合物に分散させマイクロカプセル化またはマイクロスフェア化する方法、あるいはあらかじめ一定の形に成型した中空の生体内分解性重合物内部に充填する等によって製造される。具体的には、例えば水中乾燥法、相分離法、噴霧乾燥法あるいはこれらに準ずる方法などが挙げられる。前記製造法によって得られる本発明製剤の形状は、例えば微粒子状、球状、棒状、針状、ペレット状、フィルム状、クリーム状等が挙げられるが、目的を達する限り特に限定されない。

本明細書中、微粒子状の医薬組成物を、マイクロカプセルまたはマイクロスフィァと称することもある。

以下に、マイクロカプセルを製造する場合の製造方法について記述する。

(1) 水中乾燥法（o/w法）本方法においては、まず生体内分解性重合物の有機溶媒溶液を作製する。本方法に使用する有機溶媒は、沸点が 1 2 0 °C以下であることが好ましい。該有機溶媒としては、例えば八ロゲン化炭化水素（例、ジクロロメタン、クロ口ホルム、クロロェタン、ジクロロェタン、トリクロロェタン、四塩化炭素等）、脂肪族ェステル（例、酢酸ェチル、酢酸ブチル等）、エーテル類（例、ェチルエーテル、イソプロピルエーテル等）、芳香族炭化水素（例、ベンゼン、トルエン、キシレンなど）等が挙げられる。これらは 2種以上適宜の割合で混合して用いてもよい。有機溶媒は、好ましくはジクロロメタン、ァセトニトリルである。有機溶媒は、好ましくはジクロロメタンである。生体内分解性重合物の有機溶媒溶液中の濃度は、生体内分解性重合物の分子量、有機溶媒の種類などによって異なるが、一般的には約 0. 0 1〜約 8 0 % (w/w)から選ばれる。好ましくは約 0. 1〜約 7 0 % (w/w) 、さらに好ましくは約 1〜約 6 0 % (w/w) である。

このようにして得られた生体内分解性重合物の有機溶媒溶液中に、ベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体例えば化合物（ I ) またはその塩を必要により凍結乾燥あるいは真空乾燥した後、添加し溶解させる。この際、ベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体例えば化合物（ I ) またはその塩の添加量は、薬物の種類、軟骨破壊抑制 ·形成促進における作用機作および効果の持続時間等により異なるが、生体内分解性高分子重合物の有機溶媒溶液中の濃度として、約 0 , 0 0 1 %〜約 9 0 % (w/w) 、好ましくは約 0. 0 1 %〜約 8 0 % (w/w) 、さらに好ましくは約 0. 1〜5 0 % (w/w) である。

次いで、このようにして調製された有機溶媒溶液をさらに水相中に加えて、夕一ビン型撹拌機などを用いて o Zwェマルジヨンを形成させる。この際の水相体積は一般的には油相体積の約 1倍〜約 1 0 , 0 0 0倍から選ばれる。さらに好ましくは、約 2倍〜約 5 , 0 0 0倍から選ばれる。特に好ましくは、約 5倍〜約 2， 0 0 0倍から選ばれる。

前記外相の水相中に乳化剤を加えてもよい。該乳化剤は、一般的に安定な 0 / wェマルジヨンを形成できるものであれば何れでもよい。乳化剤としては、例えばァニオン性界面活性剤、非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、カルボキシメチルセルロース、レシチン、ゼラチン、ヒアルロン酸などが挙げられる。これらは適宜組み合わせて使用してもよい。外水相中の乳化剤の濃度は、好ましくは約 0 . 0 0 1 %〜約 2 0 % (w/w) である。さらに好ましくは約 0 . 0 1 %〜約 1 0 % (w/w) 、特に好ましくは約 0 . 0 5 %〜約 5 % (w/w) である。

油相の溶媒の蒸発には、通常用いられる方法が採用される。該方法としては、プロペラ型撹拌機、あるいはマグネチックス夕一ラー等で撹拌しながら常圧もしくは徐々に減圧して行うか、ロータリーエバポレーターなどを用いて、真空度を調節しながら行う。このようにして得られたマイクロカプセルは遠心分離法あるレ ^は濾過して分取した後、マイクロ力プセルの表面に付着しているベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体例えば化合物（I ) またはその塩、乳化剤などを、例えば水またはヘプタン等で数回繰り返し洗浄した後、再び、蒸留水などに分散して凍結乾燥する。洗浄中の粒子同士の凝集を防ぐために、凝集防止剤〔例、マンニトール、ラクトール、ブドウ糖、デンプン類（例、コーンスターチ等）などの水溶性糖類、グリシン、ァラニン等のアミノ酸類、ゼラチン、フイブリン、コラーゲン等の蛋白質等〕を加えてもよい。

前記した ο Zw法においては、ベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体例えば化合物（ I ) またはその塩を生体内分解性重合物の有機溶媒溶液中に分散させる方法、すなわち s Z o Zw法によりマイクロカプセルを製造してもよい。

( 2 ) 水中乾燥法（wZ o Zw法）

本方法においては、まず水にベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体例えば化合物（I ) またはその塩を前記の濃度になるように溶解または分散し、これに必要であれば蛋白質（例、ゼラチン等）、海草類（例、寒天等）、多糖類 (例、アルギン酸等）、合成高分子物質（例、ポリビニールアルコール等）あるいは塩基性アミノ酸（例、アルギニン、リジン等）等の薬物保持物質を加えて溶解もしくは懸濁し、内水相とする。これらの内水相中には、ベ：しくはべンゾチェピン誘導体例えば化合物（I ) またはその塩またはその塩の安定性、溶解性を保っための p H調整剤として、酢酸、シユウ酸、クェン酸などの有機酸、炭酸、リン酸等の無機酸、水酸化ナトリウム等のアルカリ金属水酸化物、アルギニン、リジン等の塩基性アミノ酸及びそれらの塩（例、酢酸、シユウ酸、クェン酸などの有機酸、炭酸、リン酸、塩酸などの無機酸等との塩）などを添加してもよい。また、さらにベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体例えば化合物（ I ) またはその塩の安定化剤として、蛋白質（例、アルブミン、ゼラチンなど）、デンプン誘導体（例、デキストリン、プルラン等）、有機酸（例、クェン酸など）、エチレンジァミン四酢酸アルカリ金属塩（例、エチレンジアミン四酢酸ナトリウム等）、亜硫酸水素アルカリ金属塩（例、亜硫酸水素ナトリウム等）、合成高分子物質（例、ポリエチレングリコール等）などを添加してもよい。あるいは保存剤として、一般に用いられるパラォキシ安息香酸エステル類（例、メチルパラベン、プロピルパラベン等）、ベンジルアルコール、クロロブタノ一ル、チメロサールなどを添加してもよい。この際、ベンゾチォピランもしくはべンゾチェピン誘導体例えば化合物（I ) またはその塩の添加量は、薬物の種類、軟骨破壊抑制 ·形成促進における作用機作および効果の持続時間等により異なる力内水相中の濃度として、約 0. 0 0 1 %〜約 9 0 % (W/W) 、好ましくは約 0. 0 1 %〜約 8 0 % (W/W) 、さらに好ましくは約 0. ；！〜 5 0 % (W/W) である。このようにして得られた内水相液を、生体内分解性高分子重合物を含む溶液 (油相）中に加え、次いで乳化操作を行い、 wZ oエマルシヨンをつくる。該乳化操作は、公知の分散法、例えば、断続振とう法、プロペラ型撹拌機或いはタービン型撹拌機などのミキサーによる方法、コロイドミル法、ホモジナイザー法、超音波照射法等が用いられる。前記生体内分解性高分子重合物を含む溶液（油相）は、生体内分解性高分子物質を有機溶媒中に溶解した物が用いられる。該溶媒としては、沸点が約 1 2 0 °C以下で、かつ水と混和しない性質の物であればよく、例えばハロゲン化炭化水素（例、ジクロロメタン、クロ口ホルム、クロロェタン、ジクロロェタン、トリクロロェタン、四塩化炭素等）、脂肪族エステル（例、酢酸ェチル、酢酸ブチル等）、エーテル類（例、ェチルェ一テル、イソプロピルェ一テル等）、芳香族炭化水素（例、ベンゼン、トルエン、キシレンなど）等が挙げられる。これらは 2種以上適宜の割合で混合して用いてもよい。洗浄中の粒子同士の凝集を防ぐために、凝集防止剤〔例、マンニトール、ラク ] ル、ブドウ糖、デンプン類（例、コーンスターチ等）などの水溶性糖類、グリシン、ァラニン等のアミノ酸類、ゼラチン、フイブリン、コラーゲン等の蛋白質等〕を加えてもよい。

ついでこのようにして製造された wZ oエマルシヨンをさらに水相中に加えて、 wZ o Zwエマルションを製造し、油相溶媒を蒸発させマイクロカプセルを製造する。具体的操作は前記（1 ) に準ずる。

( 3 ) 相分離法

本方法においては、前記 wZ oエマルシヨンに撹拌下、コアセルべーシヨン剤を徐々に加え、生体内分解性高分子重合物を、析出、固化させる。コアセルべ一シヨン剤としては、生体内分解性高分子重合物の溶媒に混和する高分子系、鉱物油系または、植物油系の化合物で、マイクロカプセル化用重合物を溶解しない物であればよく、例えば、シリコン油、植物油脂（例、ゴマ油、大豆油、コーン油、綿実油、ココナツ油、アマ二油等）、鉱物油、炭化水素類（例、 n—へキサン、 n—ヘプタン等）などが挙げられる。これらは 2種以上混合して用いてもよい。このようにして得られたマイクロカプセルは、濾過して分取した後、ヘプタン等により繰り返し洗浄し、コアセルべーシヨン剤を除去する。さらに、水中乾燥法と同様の方法で遊離薬物の除去、溶媒の脱離を行う。

洗浄中の粒子同士の凝集を防ぐために、凝集防止剤〔例、マンニトール、ラクトール、ブドウ糖、デンプン類（例、コーンスターチ等）などの水溶性糖類、グリシン、ァラニン等のアミノ酸類、ゼラチン、フイブリン、コラーゲン等の蛋白質等〕を加えてもよい。

( 4 ) 噴霧乾燥法

本方法によりマイクロカプセルを製造する場合には、前記 w/ oエマルシヨンを、ノズルを用いてスプレードライヤー装置（噴霧乾燥機）の乾燥室内へ噴霧し、きわめて短時間に微粒化液滴内の有機溶媒及び水を揮発させマイクロカプセルを調製する。ノズルとしては、二液体ノズル型、圧力ノズル型、回転ディスク型等がある。このとき、所望により、 w/ oエマルシヨンの噴霧と同時にマイクロ力プセルの凝集防止を目的として、前述の凝集防止剤の水溶液を別ノズルより噴霧する事も有効である。このようにして得られたマイクロカプセルは、必要があれば加温し、減圧下でマイクロカプセル中の水分及び溶媒の除去をより完全に行う。マイクロカプセルの粒子径は、例えば平均粒子径として約 0. 1〜約 3 0 0 m の範囲が挙げられる。好ましくは、約 1〜1 5 0 m、さらに好ましくは、約 2〜 1 0 0 mの範囲の粒子径である。

マイクロカプセルを無菌製剤にするには、製造全工程を無菌にする方法、ガンマ線で滅菌する方法、防腐剤を添加する方法等が挙げられるが、特に限定されない。

前記したマイクロ力プセル以外にも、適当な方法でベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体例えば化合物（I ) またはその塩を分散させた生体内分解性高分子重合物を溶解し、球状、棒状、針状、ペレット状等に成形してもよい。更には、ベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体例えば化合物（I ) またはその塩を分散させた生体内分解性高分子重合物を、例えば特開平 6— 2 3 4 6 5 6号公報に記載の夕一ボカウンタージエツトミル粉砕機や超音波ジエツト粉砕機を用いた方法等で適当な大きさの粒径に粉砕してもよい。具体的には、例えば生体内分解性高分子重合物の有機溶媒中に、ベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体例えば化合物（ I ) またはその塩を添加し溶解させる。次いで真空乾燥して得られた固溶体を粗粉砕して篩濾し、さらに脱溶媒後、超音波ジェット粉砕機を用いて制御された粒径に粉砕する。

上記徐放性への製剤化は、マイクロカプセルとするのが好ましい。

本発明の組成物に用いる骨修復材もしくは人工骨としては、公知の整形外科用生体材料、例えば、金属材料、セラミックス材料、高分子材料、蛋白材料またはこれらの複合材料力挙げられる。なかでも、金属材料、セラミックス材料、高分子材料が好ましい。また、骨修復材としては、骨補填材と称されるものであってもよい。

上記金属材料としては、例えば、チタン、チタン合金、ステンレス、コバルト —クロム合金等が挙げられる。

上記セラミックス材料としては、例えば、アルミナセラミック、単結晶アルミナセラミック、ジルコ二アセラミック等のバイオイナ一ト ·セラミックス、バイォグラス（Hench 等、 Biomei Master. Sy即.， 2_, 1 17 (1972))、水酸ァパ夕イト（青木ら、セラミックス， 469 (1975))、アパタイトーゥオラストナイト（AW) —ガラス（Bull. Inst. Chem. Res. Kyoto Uni. , 60, 260 (1982))、 TCPセラミックス（Ca₃ (P0₄) ₂) 等のバイオァクティブ ·セラミックスが挙げられる。

上記高分子材料としては、例えば、ポリメチルメタクリレート（PMMA)、高密度ポリエチレン（HDP)、シリコンラバー、テフロン、ポリエステル、ポリ乳酸、 PVAハイド口ゲル等が好適なものとして挙げられる。

上記蛋白材料としては、例えば、コラーゲン、フイブリン、キチン、キトサン等が挙げられる。

本発明の組成物に用いる骨修復材もしくは人工骨としては、セラミックス材料が好ましく、なかでもアパタイト一ウォラストナイト（AW) —ガラスが力学的強度が高い点および生体活性が優れている点で特に好ましい。

本発明の組成物は、哺乳動物（例えば、ヒト、マウス、ラット、ゥサギ、ィヌ、ネコ、ゥシ、ゥマ、ブ夕など）の骨欠損症の治療に、あるいは骨移植における骨結合剤として適用することができる。本発明の組成物は、低毒性であり、安全に用いることができる。

本発明の組成物は、ベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体 [以下、本化合物と称することもある。]またはその塩あるいはこれらを徐放性製剤化したものを上記の骨修復剤もしくは人工骨に混和または被覆して調製することができる。

該混和は、骨修復剤もしくは人工骨が意図する骨欠損部に充填、移植等された際、当該局所において本化合物またはその塩が欠損部の生体組織に放出され得るようになされ、具体的には、骨修復剤もしくは人工骨に混合、練合、付着または含有させることによってなされる。例えば人工骨を用いる場合は、上記のごとき混和に適した表面性状 ·表面構造を有するのが好ましい。その例として、表面をポーラスにすることが挙げられる。このポーラスに形成する方法には公知の方法、例えば同質の材料よりなる顆粒を 2層結合させて顆粒間に空隙を作る方法、連続した金属繊維を 2層に不規則に結合させる方法等を用いることができる。

該被覆は、本化合物またはその塩を骨修復材もしくは人工骨に、通常用いられる方法で、塗布あるいはコーティングすることにより行われる。塗布あるいはコ一ティングする方法としては、本化合物またはその塩を、適当な分散剤、結合剤、希釈剤など（例えば、コラーゲン、生理食塩水、クェン酸溶液、酢酸溶液、ハイドロォキシアパタイト、フイブリンまたはこれらの混合液など）に分散させ、これを骨修復剤もしくは人工骨に塗布または含浸し、乾燥させることによって行うことができる。

本発明の組成物を哺乳動物に適用する場合、以下の方法を選択することができる。

すなわち、 ①ベンゾチォピランもしくはべンゾチェピン誘導体またはその塩あるいはこれらを徐放性製剤化したものを骨修復剤もしくは人工骨へ混和または被覆して本発明の組成物を予め調製し、これを骨欠損部に充填することによる適用、 ②予め局所に充填された骨修復剤もしくは人工骨周辺へベンゾチォピランもしくはべンゾチェピン誘導体またはその塩あるいはこれらを徐放性製剤化したものを注射投与して、生体内で混和または被覆せしめることによる適用、 ③手術時等に充填された骨修復剤もしくは人工骨の周辺、あるいはこれらと自然骨との間隙へベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体またはその塩あるいはこれらを徐放性製剤化したものを投与して混和または被覆せしめる適用である。上記②および③の適用では、ベンゾチォピランもしくはべンゾチェピン誘導体またはその塩あるいはこれらを徐放性製剤化したものが、骨修復剤もしくは人工骨と自然骨との結合を促進し、増強させる結合増強剤としても作用する。

上記②の注射投与による適用を行なうためには、ベンゾチォピランもしくはべンゾチェピン誘導体またはその塩あるいはこれらを徐放性製剤化したものを、通常注射剤に用いられる無菌の水性液または油性液に溶解、懸濁または乳化して水溶液を調製する。

注射用の水性液としては生理食塩水、等張液などが挙げられ、必要により適当な懸濁化剤、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、非イオン性界面活性剤などと併用してもよい。油性液としては、ゴマ油、大豆油、コーン油などの植物油が挙げられる。

注射剤を製造する際には、さらに、分散剤（例、 Tween 8 0、 H C〇一 6 0等の界面活性剤、カルポキシメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ヒアルロン酸等の多糖類、ポリソルベー卜等）、保存剤（例、メチルパラベン、プロピルパラベン等）、等張化剤（例、塩化ナトリウム、マンニ] ル、ソルビトール、ブドゥ糖等）、緩衝剤（例、炭酸カルシウム等）、 P H調整剤（例、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム等）等と共に水性懸濁剤とすることにより、実用的な注射用製剤を製造してもよい。

上記植物油あるいはこれにレシチンなどのリン脂質を混合したもの、あるいは中鎖脂肪酸トリグリセリド（例、ミグリオール 8 1 2等）と共に分散して油性懸濁剤として実際に使用できる注射剤としてもよい。安息香酸ベンジル、ベンジルアルコ一ルなどの溶解補助剤を併用してもよい。

調製された注射液は通常適当なアンプルに充填される。

上記③の適用を行なうには、本化合物またはその塩は、適当な分散剤、結合剤、希釈剤など（例えば、コラーゲン、生理食塩水、クェン酸溶液、酢酸溶液、ハイドロォキシアパタイト、フイブリンまたはこれらの混合液など）に分散させ、これを骨修復剤もしくは人工骨に塗布または含浸させることによって付着または含有させることができる。

本発明の組成物を適用する際、生理的に許容される分散媒、結合剤、希釈剤、骨再生に有効な他の（例えばカルシウム）などと混合して調製し、宿主の骨欠損部に移植される人工骨固定化剤とその骨欠損部との間隙に充填するように用いることもできる。

ベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体と骨修復材もしくは人工骨とを混和または被覆してなる本発明の組成物における両者の比率としては、（1)ベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体：（2)骨修復材もしくは人工骨が、重量比で、約 1 ： 1〜 100であるの力好ましく、さらに、重量比で、約 1 ： 1〜 30がさらに好ましい。

ベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体は、宿主の骨欠損部に移植される人工骨を、その欠損部に充分強固に固定するに足る有効量で用いられる。該有効量としては例えば、上記充填される部分の単位面積当り、 l〜 1000mg /cm², 好ましくは 10〜： L 0 Omg/cm²程度である。

本発明の組成物の成人（体重 5 O kgとして）への一日あたりの投与量は、ベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体の量として約 0. 1~1 O Omg、好ましくは約 1〜5 Omgとなる量である。発明を実施するための最良の形態

実施例

以下に参考例および実施例を挙げて、本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。

以下で用いられた化合物 Aは、（2R, 4S)—（―）一 N— [4— (ジエトキシホスホリルメチル）フエ二ル]— 1, 2, 4, 5—テトラヒドロ— 4—メチル一7, 8— メチレンジォキシ一 5—ォキソ— 3—べンゾチェピン一 2—カルボキサミドであり、特開平 8— 231569号公報に記載の方法で製造されたものを用いた。次の〔表 1〕に示す処方で乳酸ーグリコール酸共重合物〔以下、「PLGA」と称することがある。乳酸ーグリコール酸の組成比（モル％) 及び GPC測定による重量平均分子量は〔表 1〕に示すとおりである。〕及び乳酸単一重合物（以下、

「PLA」と称することがある。）のジクロルメタン溶液を調製する（以下、「溶液 A」と称することがある）。同様に、化合物 AO. 1 g及びジクロルメタン 1. 0mlから溶液を調製する（以下、「溶液 B」と称することがある）。溶液 Aおよび溶液 Bを均一に混合し、あらかじめ 1 5°Cに調節した〔表 1〕に記載した容量の 0. 1 %ポリビニルアルコール（EG— 40、日本合成化学株式会社製）水溶液

(PVA溶液）に注入し、タービン型ホモミキサーを用い、 Υ, Ο Ο ΟΓΡΙΙΓΤΟΖ Wエマルションとする。この OZWエマルシヨンを室温で 3時間撹拌してジクロルメタンを発揮させ、油相を固化させ、遠心分離器（0 5 PR_ 22、日立製作所製）を用いて 2, 00 0 rpmで捕集する。これを再び蒸留水に分散後、さらに遠心分離を行い、遊離薬物等を洗浄する。捕集されるマイクロカプセルは少量の蒸留水を加えて再分散し、凍結乾燥する。

[表 1]

マイク溶液 Λ

口カブボリ - 組成比重量平均ボリマ— ジクロロ PVA液量

セル (モル ¾) 分子 S 重量 (g) メタン（ml) (ml)

No.

1 PLGA 75/25 10500 2.4 2.5 400

2 PLGA 75/25 6500 2 1.0 400

3 PLGA 75/25 17100 2.4 1.5 400

4 PLA 100/0 12000 2.4 2.0 800

5 PLGA 90/10 20000 2.4 2.0 400

6 PLGA 85/15 12100 2.4 2.0 800 参考例 2

0. 55 gの PLGA (乳酸ーグリコール酸組成比 85 : 15、重量平均分子 j 14, 000) と 4.45 gの化合物 Aを 8mLのジクロルメタンに溶解して油層を調製した。この溶液を 80 OmLの 0. 1 %PVA溶液に急速に注入して oZw エマルシヨンとした。さらに室温で 3時間攪拌しジクロルメタンを揮発し、マイクロカプセルを固化し、遠心分離器で捕集した。蒸留水で洗浄した後、 0. ら gのマンニットを添加し、少量の蒸留水で懸濁し、凍結乾燥を行なった。得られたマイク口カプセルをさらに 42でで真空乾燥して、残存するジクロルメタンを完全に除去した。

参考例 3

乳酸一バレロラクトン共重合物（PLV 2500ML, 多木化学株式会社製）、またはグリコール酸—力プロラクトン共重合物（PGC 2500MG、多木化学株式会社製）約 8 gを遠沈管にいれ水浴中約 50°Cで加温し、化合物（A) 約 8 Omgをそれぞれに混合し、均一に分散して軟膏状製剤を得る。冷所において保存する。

参考例 4

参考例 1で得られる 50 Omgのマイクロカプセル No. 1をティシ一ル（日本臓器製薬株式会社製）用フイブリノ一ゲン液 2本に均一に分散し、ティシール用トロンビン液 2本を徐々に添加する。次いで速やかにプラスチック製注射筒に吸入し、 37°Cで 30分静置して固化させる。固化後注射筒先端より押し出し、力ミソリで切断して体積約 200 のペレットを製造する。

実施例 1

参考例 2に記載の方法で製造されたマイクロカプセル 10 Omg (化合物 Aを 1 Omg含む）を平均 15 X 10 X 2mmのァパタイトーウォラストナイト含有ガラスセラミック（以下、「AW— GC：」と略称する。） 0. 9 gに混合し、混合物を日本白色家兎の一側の脛骨骨幹端部に埋入した。

他側の脛骨骨幹端部には、コントロールとして、上記と同様の AW— GCプレート 0. 9 gに PL G A製のマイクロカプセル 10 Omg (化合物 Aは含有されていない。）を混合したものを埋入した。埋入後、家兎を 3群に分け、第 1群を 4週後に、第 2群を 8週後に、第 3群を 1 6週後にそれぞれ屠殺し、引き剥がし試験（detaching test) を行い、骨とプレートの結合力を測定した。結果を [表 2] に示す。

[表 ^] 引き剥がし試験による結合力（Kgf mean ± SD)

* p < 0.005 vs 対照

ステューデント丁一テス卜による。

上記 [表 2] に示した引き剥がし試験の結果から明らかな如く、 4週、 8週、 1 6週の各時点において、化合物 A併用群がコントロール群より有意に大きい結合力を示した（Pぐ 0. 0 0 5)。

このことから、骨と AW—GCプレート間においては、本発明の組成物により、強度が機械的に増強されていることが分かる。産業上の利用可能性

本発明の骨修復材 ·人工骨組成物は、例えば、自然骨と骨修復材 ·人工骨との結合増強作用を有し、骨修復材および人工骨 '人工関節の自然骨への固定を速やかにかつ強固にさせる。

したがって、本発明の骨修復材，人工骨組成物は、骨欠損部位への骨修復剤として、および人工骨の移植手術、あるいは、人工関節置換手術における骨結合剤として有用である。

Claims

請求の範囲

1. ベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体を骨修復材もしくは人工骨に混和または被覆してなる組成物。

2. ベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体が、骨 ·軟骨形成促進作用を有する化合物である請求項 1記載の組成物。

3. 骨修復材もしくは人工骨が、金属、セラミックス材料、高分子化合物または蛋白材料である請求項 1記載の組成物。

4. 骨修復材もしくは人工骨が、セラミックス材料である請求項 1記載の組成物。

5. ベ：導体が、徐放性に製剤化されたものである請求項 1記載の組成物。

6. ベ. '誘導体が、式

[式中、環 Aは置換されていてもよいベンゼン環を、 Rは水素原子または置換されていてもよい炭化水素基を、 Bはエステル化またはアミド化されていてもよいカルボキシ基を、 Xは一 CH(OH)—または一 CO—を、 kは 0または 1を、 k' は 0、 1または 2を示す。 ] で表わされる化合物またはその塩である請求項 1記載の組成物。

7. 環 Aは、ハロゲン原子、 _{1 ()}アルキル基、（：ぃ^アルコキシ基、式：— 0_(CH₂)n—〇一（式中、 nは 1〜3の整数を示す）で表されるアルキレンジォキシ基および C卜。アルキルチオ基から選ばれる 1または 2個の置換基で置換されていてもよいベンゼン環であり、 Rは、水素原子、（^ アルキル基またはフエニル基であり、 Bは、式：一 CONiR¹) (R²) (式中、 R¹は水素原子または。アルキル基を、 R²はハロゲン、アルコキシ、モノ—またはジ一（^_₆アルコキシホスホリル、モノーまたはジー — 6アルコキシホスホリルー Ci— ₃アルキル（ジー C^— ₆アルコキシにおけるジアルキルは、一緒になつて

—₆アルキレン基となっていてもよい）もしくは Ci— eアルコキシ力ルポ二ルで置換されていてもよいフエニルまたはフエニル— ^ アルキル基を、それぞれ示す。）で表わされる基である請求項 6記載の組成物。

8. 式（I) で表わされる化合物またはその塩が、式

〔式中 > R³は。卜₆アルキル基を示し、 R⁴および R⁵はそれぞれアルキル基を示すか、または一緒になつてアルキレン基を示す。〕で表わされる光学活性化合物またはその塩である請求項 6記載の組成物。

9. 式（II) で表わされる化合物またはその塩が、（2R, 4 S)- (-) -N- [4 —(ジエトキシホスホリルメチル）フエニル]一 1, 2, 4, 5—テトラヒドロー 4一メチルー 7， 8—メチレンジォキシ— 5—ォキソ一 3—ベンゾチェピン一 2—力ルポキサミドまたはその塩である請求項 8記載の組成物。

10. (1)ベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体：（2)骨修復材もしくは人工骨が、重量比で、約 1 ： 1〜100である請求項 1記載の組成物。

11. 請求項 1に記載の組成物を製造するための、ベンゾチォピランもしくはべンゾチェピン誘導体の使用。

12. ベンゾチォピランもしくはベンゾチェピン誘導体を有効成分とする、人工骨と自然骨との結合増強剤。

13. 請求項 12に記載の結合増強剤を製造するための、ベ：

くはべンゾチェピン誘導体の使用。