UA80992C2 - Kahalaide antitumoral compound, use thereof and process for the preparation - Google Patents

Description

Опис винаходу

Даний винахід пов'язаний з новими протипухлинними сполуками кахалаліду, зокрема, з аналогами 2 кахалаліду Є, де аліфатична 5-метилгексанова кислота заміщена 4-метилгексановою кислотою, фармацевтичними композиціями, що містять їх, і їх застосуванням як протипухлинних, антивірусних, протигрибкових агентів і при лікуванні псоріазу.

Сполуки кахалаліду являють собою пептиди, виділені з гавайських морських травоїдних видів молюска ЕЇПузіа гиїТезсепз і його корму, зеленої водорості Вгуорзіз. зр. Кахалаліди А-Е описані у |Наттап еї аї., 9). Ат. Спет. 70 ос, 1993, 115, 5825-5826).

Кахалаліди А-б описані у |Натапп, М. еї аЇ., У. Огуд. Спет, 1996, 61, 6594-6600: "Капаїаїїдев: Біоасіїме реріїдез їтот а тагіпе тоїЇІШ8К ЕПІузіа гиТезсепз апа їїз аіда! аієеї Вгуорвів взр.").

Кахалаліди Н і у описані у ІЗспецег Р. У. ей аїЇ, 9. Маї Ргод. 1997, 60, 562-567: "Го асусіїс капаїа|їїдез їтот пе засодіоззап тоїїШ8К ЕПІувіа гитевзсепв"|. 12 Кахалалід О описаний у І(Зспецег Р. у). еї аїЇ., 9. Маї. Ргод. 2000, 63(1) 152-4: А пем/ дерзіреріїде їот їІе засодіоззап тоїІШвК ЕПІувіа огпайа апа пе дгееп аЇда Вгуорзів зресіев").

У зв'язку з кахалалідом К |див. публікацію Кап, У. еї аї., У. Маї. Ргод. 1999 62(8) 1169-72: "КапНаїаїйде

КІ: А пему сусіїс Оерзірерііде їтот (Пе памаїап дгееп аЇда Бгуорзіз зресіев").

Що стосується пов'язаних з ним публікацій, хдив. також Соеї еї аїЇ., Тейгапедгоп, 1999, 55; 7739-7746: "Те арвоїше віегеоспептівігу ої КапПаїарйде ЕЕ"; АїІрегісіо0, Б. ей а). Тейапедгооп ІеЦег5, 2000, 41, 9765-9769: "Капаїайде В. бЗупіпезів ої а паїйшга! сусіодерзіреріїде"; Весето ей а). 9. Спет. ЕсоїЇ. 2001, 27(11), 2287-99: "Спетіса! дегепзез ої (пе загсодіоззап тоїІив5К ЕПІувзіа гитезсепз апа їїз пові Ада Бгуорвів зр...

Серед кахалалідних сполук кахалалід Е є найбільш багатообіцяючим через його протипухлинну активність.

Він має складну структуру, що включає в себе шість амінокислот в циклічній частині і екзоциклічний ланцюжок з с семи амінокислот з кінцевою групою з жирної кислоти. Про його активність проти клітинних культур іп мйго (3 клітин А-549 легеневої карциноми людини і клітин НТ-29 кишкової карциноми людини повідомлялося в Іпублікації

ЕР 610078). Було також показано, що кахалалід Е має противірусні і протигрибкові властивості.

У передклінічних дослідженнях іп мімо було показано, що максимально переносима доза (МПД) однократної болюсної в/в ін'єкції кахалаліду Е у самиць мишей становить 280мкг/кг. Незважаючи на те, що однократні дози сч трохи вищі за МПД в/в були виключно токсичні, так що у тварин виявлялися ознаки нейротоксичності, що Ге»! закінчувались смертельним виходом, дозу в 280мкг/кг кахалаліду Е можна було вводити повторно, за схемою п'ять введень по одному введенню в день, без будь-яких ознак гострої токсичності. |Див. ЗиркКо, Р. еї аї., Ме.

Ргосеєдіпоз ої (Ше 1999 ААСК МСІ ЕОКТС Іпіегтайопа!| Сопіегепсе, абзігасі 315: "Ргесіїпісаї рпнаппасоюду «3 зіцадіез мйп їШпе тагіпе пайгаї! ргодисі Капаїаїїде ЕЕ". 3о У |Міжнародній заявці МУО 0236145) описані фармацевтичні композиції, що містять кахалалід Р, і нові со варіанти застосування цієї сполуки в лікуванні раку - ця публікація у всій своїй повноті включена в даний опис у вигляді посилання.

У Міжнародній заявці УУХО 03330121, від дати подачі якої вимагається пріоритет за даною заявкою, описане « клінічне застосування сполук кахалаліду в онкології, і ця публікація також у всій своїй повноті включена в З 70 даний опис у вигляді посилання. с У Іпатенті Великобританії ЗВ 0304367), від дати подачі якого також вимагається пріоритет за даною

Із» заявкою, описане застосування сполук кахалаліду при лікуванні псоріазу і споріднених до нього сполук, і ця публікація також у всій своїй повноті включена в даний опис у вигляді посилання.

Синтез і цитотоксичні активності природних і синтетичних сполук кахалаліду описані в Міжнародній заявці 495 до 0158934), яка у всій своїй повноті включена в даний опис у вигляді посилання. У |документі УМО 0158934) бо описаний синтез кахалаліду Е, а також сполук із подібною структурою, в яких кінцевий ланцюг з жирної кислоти ав | замінений іншими жирними кислотами.

Як і раніше відчувається необхідність в створенні нових протипухлинних сполук, зокрема, додаткових сполук іш кахалаліду з поліпшеними властивостями.

Те) 20 Автори винаходу несподівано виявили, що одна із сполук-аналогів кахалаліду має досить перспективну активність і виявляє підвищену протипухлинну дію на моделях іп мімо. із Даний винахід пов'язаний із сполукою формули 1:

Ф) іме) 60 б5

9 М. о

Мн

М о. АМН но о ни

С о н о НН о Мн о о

МН чн са нн о

Не-о юр а М нн

Формула 1 і її фармацевтично прийнятними солями, проліками, таутомерами і сольватами.

Така сполука відповідає кахалаліду Е з 4-метилгексановим ланцюгом у вигляді кінцевої жирної кислоти, і надалі в даному описі буде позначатися як 4-метилгексановий КЕ.

У переважному втіленні даний винахід пов'язаний із сполукою, що містить (45)-метилгексанову кислоту, що має формулу 2:

М см нь о х о

А вн зд

Го) но Мн с у

К о нь с в чн о о оз о р Мн

Мн | М (о) я нн о о ни мн г) но о о ло, 2 «

Формула 2 о, :з» і її фармацевтично прийнятними солями, пролінами, таутомерами і сольватами. Така сполука буде надалі в даному описі позначатися як (45)-метилгексановий КЕ. 15 Даний винахід пов'язаний з фармацевтичною композицією, що містить визначену вище сполуку і со фармацевтично прийнятний носій, наповнювач або розріджувач.

Даний винахід додатково пов'язаний зі способом лікування будь-якої тварини, особливо людини, ураженої (ав) злоякісною пухлиною або псоріазом, причому цей спосіб включає в себе введення ураженому захворюванням со індивіду терапевтично ефективної кількості сполуки, що визначається вище.

Даний винахід може бути використаний, зокрема, для лікування пацієнтів з рефрактерними злоякісними (Се) пухлинами, які відрізняються незадовільною реакцією на інші терапевтичні впливи. Зокрема, композиції згідно з "з винаходом можуть бути використані після того як були використані інші види хіміотерапії, які не мали належної дії.

Даний винахід направлений, зокрема, на лікування пацієнтів, уражених злоякісною пухлиною переміхурової ря залози, злоякісною пухлиною молочної залози, гепатоцелюлярною карциномою, меланомою, злоякісною пухлиною ободової і прямої кишки, злоякісною пухлиною нирки, злоякісною пухлиною яєчника, злоякісною

ГФ) пухлиною МЗС. (карцинома легень), злоякісною пухлиною епітелію, злоякісною пухлиною підшлункової залози і 7 пухлинами, для яких характерна підвищена експресія онкогену Нег2г/пеи.

У іншому аспекті даний винахід направлений на застосування визначеної вище сполуки для виробництва во лікарського засобу. У переважному втіленні, вказаний лікарський засіб призначений для лікування злоякісної пухлини, псоріазу, вірусної інфекції або грибкової інфекції.

Даний винахід додатково пов'язаний з наборами, що включають в себе роздільні контейнери, що містять фармацевтичну композицію, яка містить визначену вище сполуку і відновлюючий агент. Способи відновлення також забезпечуються даним винаходом. в Даний винахід направлений також на спосіб отримання визначеної вище сполуки. У способі отримання переважно використовується як вихідна сполука 4-метилгексанова кислота. У переважному втіленні,

4-метилгексанова кислота являє собою (45)-метилгексанову кислоту. У найбільш переважному втіленні цей спосіб являє собою твердофазний синтез.

Автори винаходу ідентифікували аналоги кахалаліду Е, які проявляють значно більш поліпшену активність в порівнянні з кахалалідом РЕ. Як показано в порівняльних прикладах, 4-метилгексановий кахалалід Е нез'ясованим чином проявляє поліпшену ефективність на іп мімо моделях злоякісних пухлин. Це представляється ще більш несподіваним з точки зору малих структурних відмінностей між 4-метилгексановим кахалалідом ЕК і

Бб-метилгексановим кахалалідом ЕК.

Сполукою згідно з винаходом є кахалалід Е з ланцюгом 4-метилгексанової жирної кислоти замість 7/0 5-метилгексанової,. що має структуру відповідно до формули 1: 8 М о

МН

М а! Мн но М о о т н о НК о Мн о о

МН нн са о н ню-о юр а М н с 2 о

Формула 1

Зокрема, є переважним, щоб ця сполука мало стереохімію, що визначається формулою 2:

М. сч

Нам 9 І Фу

А ох

М о но Мн-Ш (о) с о гЯ Ге) не о з о нн. о баня со

У 4 нн мн |. м я Нн о нн « - с ю «у о р. ч о н і "» і

Формула 2 (ее) о Проте, сполуки згідно з винаходом мають асиметричні центри, і, отже, існують в різних енантіомерних і діастереомерних формах. Даний винахід пов'язаний із застосуванням всіх оптичних ізомерів і стереоізомерів ік сполук згідно з винаходом і їх сумішей, а також з фармацевтичними композиціями, що містять їх, і зі способами со 20 лікування, в яких вони використовуються.

Для зручності автори винаходу посилаються на сполуки згідно з винаходом, а саме на сполуки 1 і 2, як на г» сполуки 4-метилгексилкахалаліду ЕР, або сполуки 4-мегексКЕ. Переважно сполуки 4-мегексКЕ згідно з винаходом є сполуками, які у великій мірі вільні, по суті вільні або повністю вільні від інших сполук кахалаліду.

Наприклад, сполука 4-мегексКЕ згідно з винаходом переважно вільна від кахалаліду Є, що має 22 Б5-метилгексильний бічний ланцюг. Зокрема, 4-мегексКЕ згідно винаходу переважно містить найбільше 2595, 1095,

ГФ) Боб, 295, 190 або 0,595, або менш ніж 0,595 будь-якого іншого кахалаліду, особливо кахалаліду Р. В близькому аспекті, 4-мегексКЕ згідно з винаходом забезпечується по суті в чистому вигляді. Така сполука 4-мегексКЕ, в о деякій мірі вільна від інших кахалалідів, особливо підходить для фармацевтичних композицій і способів лікування згідно з винаходом. 60 Даний винахід включає в себе сполуки згідно з винаходом і їх фармацевтично прийнятні солі, в яких один або більше атомів водню, вуглецю або інших атомів заміщені їхніми ізотопами. Такі сполуки можуть бути використані як засоби для наукових досліджень і діагностики при вивченні метаболізму і фармакокінетики, а також в аналізах зв'язування.

У даному описі сполуки згідно з винаходом, включаючи сполуки формули 1 і 2, визначаються як сполуки, які бо включають в себе також і фармацевтично прийнятні похідні або проліки. "тхармацевтично прийнятне похідне або проліки" означає будь-яку фармацевтично прийнятну сіль, складний ефір, сіль складного ефіру або інше похідне сполуки згідно з винаходом, яке при введенні реципієнту здатне забезпечити (прямо або непрямо) сполуку згідно з винаходом або його метаболіт або залишок. Особливо переважними похідними і проліками є такі, які збільшують біодоступність сполук згідно з винаходом, коли такі сполуки вводяться пацієнту (наприклад, додаючи сполуці, що вводиться перорально, властивість підвищеної абсорбції в крові), поліпшують доставку батьківської сполуки до конкретного біологічного компартменту, підвищують розчинність, створюючи можливість введення шляхом ін'єкції, змінюють метаболізм або змінюють швидкість екскреції.

Солі сполук згідно з винаходом включають в себе адитивні солі, отримані з азоту в сполуці формули 1 або 7/0 2. Терапевтична активність, як визначено в даному описі, пов'язана з фрагментом, отриманим із сполуки згідно з винаходом, а ідентичність компонента, що залишився, не так важлива, хоч для терапевтичних і профілактичних цілей переважно, щоб він був фармацевтично прийнятним для пацієнта. Приклади фармацевтично прийнятних кислотно-адитивних солей включають в себе такі кислотно-адитивні солі, які отримані з мінеральних кислот, таких хлористоводнева, бромистоводнева, фосфорна, метафосфорна, азотна і сірчана кислоти, органічних /5 Кислот, таких як винна, оцтова, трифтороцтова, лимонна, яблучна, молочна, фумарова, бензойна, гліколева, глюконова, янтарна і метансульфонова і арилсульфонова, наприклад пара-толуолсульфонова, кислоти.

Переважною сіллю є сіль трифтороцтової кислоти.

Сполуки згідно з винаходом можуть бути отримані відповідно до синтетичних процесів, описаних в

Іміжнародній заявці УУХО 01589341, наприклад, при додаванні відповідної (5) або (К) 4-метилгексанової кислоти замість Б5-метилгексанової в прикладі З (міжнародної заявки УУО 0158934). Отже, даний винахід розповсюджується також на спосіб отримання сполуки формули 1 або 2. В цьому способі як вихідний матеріал використовується 4-метилгексанова кислота. Найбільш переважним вихідним матеріалом є (45)-метилгексанова кислота. Спосіб синтезу переважно являє собою спосіб твердофазного синтезу. Додаткові подробиці синтезу наведені в прикладах. с

Спосіб згідно з винаходом може бути здійснений она основі вихідних матеріалів в енантіо-, стереоконтрольованому і швидкому режимі, з використанням переваг методології твердофазного синтезу, де і) протягом всіх операцій синтезу молекула в конструкції пов'язана з нерозчинною підкладкою.

Фармацевтичні композиції сполук згідно з винаходом можуть бути адаптовані для будь-якого бажаного шляху введення, наприклад, перорального (включаючи букальне або під'язичне), ректального, назального, місцевого с

Зо (включаючи букальне, під'язичне або трансдермальне), вагінального або парентерального (включаючи підшкірне, внутрішньом'язове, внутрішньовенне або внутрішньодермальне) шляхів введення. Такі композиції Ме можуть бути отримані будь-яким способом, відомим в галузі фармації, наприклад, шляхом асоціації активного Ге! інгредієнту з носієм (носіями) або наповнювачем (наповнювачами).

Переважні фармацевтичні композиції сполук згідно з винаходом включають в себе рідину (розчини, суспензії о або емульсії) з відповідним складом для внутрішньовенного введення, і вони можуть містити сполуки в чистому со вигляді або в комбінації з будь-яким носієм або іншими фармацевтично активними сполуками. Подальшим путівником в зв'язку з фармацевтичними композиціями може служити міжнародна заявка УМО 0236145), яка у всій її повноті включена в даний опис у вигляді посилання.

Таким чином, комбінація неіонної поверхнево-активної речовини і органічної кислоти є прийнятною для «

Використання з агентом-наповнювачем для отримання ліофілізованої форми сполуки згідно з винаходом, з с прийнятної для відновлення. Відновлення переважно проводять шляхом змішування емульсифікуючого солюбілізатора, алканолу і води. ;» Ліофілізовані композиції переважно включають в себе в основному наповнювач, наприклад, щонайменше 9095 або щонайменше 9595 агента-наповнювача. Приклади агентів-нсаповнювачів добре відомі і включають в себе сахарозу і маніт. Можуть бути використані також і інші агенти-наповнювачі.

Го! Неіїонною поверхнево-активною речовиною в ліофілізованій композиції переважно є складний ефір сорбітану, більш переважно - складний ефір поліетиленсорбітану, такий як поліоксіетиленсорбітаналканоат, зокрема, о поліоксіетиленсорбітанмоноолеат, наприклад, полісорбат-80. Неіонна поверхнево-активна речовина звичайно

Ге) становить невеликий відсоток композиції, наприклад, від О до 595 композиції, наприклад, від 2 до З або 495

Композиції. ік Органічною кислотою в складі ліофілізованої композиції звичайно є аліфатична кислота, переважно

Із гідроксикарбонова кислота, а більш переважно - гідроксиполікарбонова кислота, зокрема, лимонна кислота.

Органічна кислота звичайно становить невеликий відсоток композиції, наприклад, від О до 595 композиції, наприклад, від 2 до З або 495 композиції.

Кількість сполуки згідно з винаходом в складі ліофілізованої композиції звичайно складає менше за 195 або частіше менше ніж 0,195 суміші. Прийнятна кількість міститься в межах від 50 до 200Омкг, наприклад, приблизно

Ф) 10Омкг на 100мг композиції. ка Емульсифікуючий солюбілізатор для відновлюючого агента в прийнятному випадку містить складний ефір поліетиленгліколю, особливо складний ефір жирної кислоти, більш переважно - ПЕГ-олеат, такий як бо ПЕГ-олеат-З5. Емульсифікуючий солюбілізатор в прийнятному випадку складає від 0 до 1095 поновлюючого агента, звичайно приблизно від З до 795, наприклад, приблизно 595. Алаканол звичайно є етанолом, який в прийнятному випадку складає від 0 до 1095 відновлюючого агента, звичайно приблизно від З до 795, наприклад, приблизно 595. Іншу частину відновлюючого агента складає вода, і в результаті отримують відновлений розчин, підходящий для внутрішньовенної ін'єкції. 65 Подальше розбавлення відновленого розчину 0,995 фізіологічним розчином може бути зроблене для інфузії кахалалідної сполуки. Відповідне для інфузії обладнання переважно включає в себе скляний контейнер, який є переважнішим поліетиленового. Трубки переважно повинні бути зроблені з сілікону.

Далі, переважний відновлюючий агент складає від 2 до 795, наприклад, приблизно 595, емульсифікуючого солюбілізатора; від 2 до 795, наприклад, приблизно 595, спирту; а решта - вода.

Композиції можуть бути представлені в контейнерах з одиничною дозою або в контейнерах з багаторазовою дозою, наприклад, закритих ампулах і флаконах, і можуть зберігатися в заморожено-висушеному (ліофілізованому) стані, потребуючи лише додаткового стерильного рідкого носія, наприклад, води для ін'єкцій, що використовується безпосередньо перед вживанням.

Таким чином, даний винахід додатково пов'язаний з наборами, що включають в себе окремі контейнери, що 7/0 містять ліофілізовану композицію і відновлювальний агент. Опис способів відновлення також включений в набір.

Введення сполук або композицій згідно з винаходом проводиться шляхом внутрішньовенної інфузії. Час інфузування може досягати 72 годин, більш переважно від 1 до 24 годин, найбільш переважно або приблизно 1 година, або приблизно З години. Особливо переважними є короткі часи інфузування, які дозволяють здійснювати терапевтичний вплив без необхідності перебування хворого в госпіталі протягом нічного часу. Однак у разі необхідності інфузія може приблизно продовжуватися протягом 24 годин і навіть довше.

Робиться циклічне введення, в переважному способі введення пацієнтам проводять внутрішньовенну інфузію сполуки згідно з винаходом в перший тиждень кожного циклу, потім в інший час в рамках циклу пацієнтам дають час для відновлення. Переважна тривалість кожного циклу складає або 1, або 3, або 4 тижні; у разі необхідності можуть застосовуватися множинні цикли. У альтернативному протоколі дозування сполуки згідно з го винаходом вводять, наприклад, приблизно протягом 1 години протягом 5 днів підряд протягом З тижнів. Як варіанти можуть бути прописані й інші схеми.

У випадку необхідності вдаються до відстрочення дози або зниження доз і зміни схеми введення, в залежності від толерантності індивідуального пацієнта до лікування, зокрема, зниження доз рекомендується хворим, у яких рівні трансаміназ або лужної фосфатази в сироватці вищі за норму. сч

У одному з аспектів даного винаходу забезпечується спосіб лікування людини, ураженої злоякісною пухлиною, що включає в себе введення вказаному хворому сполуки згідно з винаходом в дозі нижче за і) 1200мкг/м /день, переважно нижче за 93ЗОмкг/м?/день, а більш переважно нижче за 8б0Омкг/м/день. Відповідною дозою є щонайменше З20мкг/м/день. Переважною є доза в інтервалі від 400 до о9б0Омкг/м/день, переважно від 500 до 8О0Омкг/м/день, більш переважно від 600 до 75О0мкг/м/день. Особливо переважними є дози приблизно с від 650 до 700мкг/м2/день. Фо

У наступному аспекті даного винаходу пропонується спосіб лікування людини, ураженої злоякісною пухлиною, що включає в себе введення вказаному хворому сполуки згідно з винаходом щодня протягом 5 днів в Ме дозі нижче 9ЗОмкг/м2/день, після чого слідує період відновлення, що складає від 1 до 4 тижнів, протягом ав якого сполуки кахалаліду хворому не вводять. Доза переважно становить 650-75Омкг/м "/день, більш переважно со 5. приблизно 700мкг/м"/день. Час інфузії переважно складає між 1 і 24 годинами, більш переважно - між 1 із годинами. Особливо переважним є час інфузії що становить приблизно 1 годину або приблизно З години.

Період, що залишається, переважно становить 2-3 тижні, більш переважно - приблизно 2 тижні.

Даний винахід також забезпечує спосіб лікування людини, ураженої злоякісною пухлиною, що включає в себе « введення вказаному хворому сполуки згідно з винаходом щотижня в дозі нижче 80Омкг/м"/день. Доза переважно з с становить 600-700мкг/м2/день, більш переважно - б5Омкг/м2/день. Час інфузії переважно складає від 1 до 24 ц годин, більш переважно - від 1 до З годин. Особливо переважним є час інфузії, що становить приблизно 1 "» годину.

Незважаючи на наведене вище орієнтовне дозування, точна підбірка дозування сполуки буде варіювати в залежності від конкретної композиції, способу введення і з урахуванням конкретної ситуації, пов'язаної з (ее) станом самого хворого і пухлини, які зазнають лікування. Повинні братися до уваги і інші чинники, такі як вік, вага тіла, стать, дієта, час введення, швидкість виведення, стан хворого, комбінація лікарських засобів, о реакція чутливості і тяжкість захворювання. Введення може здійснюватись в безперервному режимі або ж (Се) періодично, в рамках максимально переносимої дози.

Даний винахід особливо направлений на лікування пацієнтів, уражених злоякісною пухлиною переміхурової ї-о залози, злоякісною пухлиною молочної залози, гепатоцелюлярною карциномою, меланомою, злоякісною

Кз пухлиною прямої кишки, злоякісною пухлиною нирки, злоякісною пухлиною яєчника, карциномою легень МЗС, злоякісною пухлиною епітелію, злоякісною пухлиною підшлункової залози, пухлинами, які в надлишку експресують оонкоген Негг/пеш. У найбільш переважному варіанті воно направлене на лікування гепатоцелюлярної злоякісної пухлини, меланоми, злоякісної пухлини молочної залози і злоякісної пухлини передміхурової залози. о Даний винахід також відноситься до способу лікування шкірного захворювання, що включає в себе ко гіперпроліферацію дермальних клітин у ссавців, де вказаний спосіб включає в себе введення вказаному ссавцеві ефективної, нетоксичної кількості сполуки згідно з винаходом. Переважно, якщо шкірним захворюванням є бо псоріаз. Даний винахід переважно направлений на лікування хворої людини, ураженої псоріазом, особливо, тяжкою формою псоріазу.

Сполуки і композиції згідно з винаходом можуть бути використані і в поєднанні з іншими лікарськими засобами для забезпечення комбінованої терапії. Вказані інші лікарські засоби можуть становити частину однієї і тієї ж композиції або ж можуть бути представлені у вигляді окремої композиції для одночасного введення або 65 Ж роздільного введення в різний час. Тотожність іншого лікарського засобу не є особливо лімітованою, хоч комбінації з іншими хіміотерапевтичними, гормональними засобами і антитілами повинні враховуватися.

Кількості сполуки згідно з винаходом і іншого фармацевтично активного агента або агентів і відносні часи введення повинні бути відпрацьовані з метою досягнення бажаного ефекту комбінованої терапії.

Приклади

Приклад 1: отримання (45)-метилгексанового КЕ

Основні процедури і початкові стадії процесу відповідають таким, описаним в |міжнародній заявці УМО 0158934). (45)-МеНех-О-МаІ-ТИКІВи)-МаІ-Ю-МаІ-О-Рго-Огп(Вос)-О-аПйо-Пе-О-аПо-Типг(МаІ-АПос)-О-аПо-Пе-О-МаІ-О-Ти

СіІ-полімерна смола: 70 Етос-групу видаляли, і до вказаного вище пептидил-полімеру послідовно додавали Етос-МаІ-ОН (678мг, 2ммоль, 4еквів.), Етос-ТикцВи)-ВІН (992мг, 2,5ммоль, беквів.), Етос-О-Маі-ОН (678мг, 2ммоль, 4еквів.) і (45)-МеНех-ОН (195мг, 1,5ммоль, Зеквів.) (приклад 3) з використанням ОІРСОЇ (23Змкл на 1,5ммоль і Зеквів.;

ЗіОмкл на 2ммоль і 4еквів.; і З88мкл на 2,5ммоль, беквів.) і НОВІ (230мг на 1,5ммоль і Зеквів.; ЗО7мг на 2ммоль і 4еквів.; і З95мг, 2,5ммоль, беквів.) протягом УОхв. У всіх випадках через ООхв. зв'язування нінгідриновий тест був негативним. Видалення Етос-групи і промивання проводили, як описано в розділі Сепегаї

Ргоседигев. (45)-МеНех-О-МаІ-ТИКІВО)-МаІ-О-МаІ-О-Рго-Огп(Вос)-О-аПо-Пе-О-аПйо- Ти М аІ-2-ОпрЬ-РПпе-АїйПос)-О-аПо-Пе-О -МаІ-О-ТиСіІ-полімерна смола:

АШПос-групу видаляли за допомогою Ра(РРЕ з)4 (58мг, О,О5ммоль, О,Теквів.) в присутності РИБІіНз (617мкл, ммоль, 1Оеквів.) в атмосфері Аг, а АїПос-Рпе-2-0ОпЬ-ОН (66ббмг, 2ммоль, 4еквів.) Її НОАЇ (27Змг, 2ммоль, деквів.) розчиняли в ОМЕ (1,25мл) і додавали до пептидил-полімерної смоли, потім додавали СІРСОІ (З31Омкл, 2ммоль, 4еквів.), і суміш перемішували протягом 5 годин, коли нінгідриновий тест був негативним.

Після промивання з використанням ОМЕ і СН Сі» аліквоту пептидил-полімерної смоли обробляли сумішшю

ТФО-Н2О (1:99) протягом хв, і отриманий продукт охарактеризовували з використанням методу МАІОІ-ТОР-М5, (ду розраховуючи для СввНі46М414О24, 1736,18. Отримано: т/2 1758,67 МАМА", 1774,62 16182 |МКІ". (45)-МеНех-О-МаІ-ТАИКІВО)-МаІ-О-МаІ-О-Рго-Огп(Вос)-О-аІПо-Пе-О-аПйо- Ти МаІ-2-Опр-Рпе-Н)-О-аПо-Пе-О-МаІ-ОН: і9)

Після промивання з використанням ЮОМЕ і СН 25Сі5, АІПос-групу видаляли за допомогою Ра(РРИ з3)4 (58мг,

О,О5ммоль, О,Теквів.) в присутності РиБзІіІНз (617мкл, 5ммоль, 1Оеквів.) в атмосфері Аг. Захищений пептид відщеплювали від полімерної смоли за допомогою суміші ТФО-СНоСІ» (1:99) (5хЗОсек). Фільтрат збирали на НО Ге (4дмл), і НО частково видаляли на роторному випарнику. Потім додавали АСМ для розчинення твердої речовини, що утворилася в процесі видалення Н 20, і розчин ліофілізували, отримуючи 63У9мг (З87мкмоль, вихід 7790) Ф вказаної в заголовку сполуки із ступенем чистоти 29590, що підтверджено методом НРІ С (Кондиція А, (р 10,5хв). (Ге) (45)-МеНех-О-МаІ-Тп-МаІ-О-МаІ-О-Рго-Огп-О-аПо-Пе-цикло(О-аПо-Тиг-О-аПо-Пе-О-МаІ-Рпе-2-ОпЬ-Ма|)-(45)м етилгексановий КЕ о

Захищений пептид (приклад 6) (б3Омг, З87мкмоль) розчиняли в СН Сі» (390мл, 1мМ), і НОВІ (237мг, с 1,55ммоль) розчиняли в мінімальному об'ємі ОМЕ для розчинення НОВІ, додавали ОІЕА (20Змкл, 1,1бммоль,

Зеквів.) і ОІРСОЇ (24Омкл, 1,55ммоль, еквів.). Суміш залишали на мішалці протягом 1 години, потім результат виконання стадії циклізації контролювали методом НРІ С. Розчинник видаляли шляхом випаровування в умовах « зниженого тиску. Захищений циклічний пептид розчиняли в суміші ТФО-Н 20 (19:11, 8Бмл), і суміш, що 70 утворилася залишали на мішалці протягом 1 години. Розчинник видаляли шляхом випаровування в умовах - с зниженого тиску, і додавали діоксан (ЗОмл), і розчинник видаляли шляхом випаровування в умовах зниженого ц тиску (цей процес повторювали тричі), потім додавали НО (4Омл), і здійснювали ліофілізацію. Грубий продукт ,» очищали методом НРІС (Кготавії Св 5мкм, 205х5Омм), ізократично 4495 ацетонітрилу (ї0,05906 ТФО) у воді (ї0,0595 ТФО), 55мл/годину, детектували при 22Онм, отримуючи вказаний в заголовку продукт (192мг, 0/1Зммоль, вихід 2695, 92,395). МАГОІ-ТОЕ-М5, розраховуючи для С75Н424М44Оч46, 14779. со Отримано: т/2 1500,12 |М--Ма!", 1515,97 ІМАКІ". о Спектр "Н-ЯМР (2,5мМ; 500МГЦц, НгО-020 (9:1) цієї сполуки вказаний в таблиці І). се) о 50

Ко)

Ф) іме) 60 б5 дув ра и 3 Бкеба їжвй 13.19 бд, УСНІ ї п ШИН ВИН він І ПН

І? аПе-еї Ва; Я 587 000 ов, ОС ю ж й ШЕ Тб,йе щЩесве у ши ль

Цянввеї Що СЕ шия зас ше тн т аю т ПИЙ жін й ВИМНИЙ ПОН Власій т реак кот й яке ід, Що 8, ба. Й Б, 0 їх Ш т, СВ й:

ПНО аск я МИ НИЄ НН, 1 Ву, З тб й, БАН Я о, рас | зей, В. ЯАщіу Ї І ! в ни З р и и ев І БИВЄ фушесю ( 251 | ! ! Б. о и о б-аііо-тію й 1,8 їді 13,18 1180 ай; їббк С ї ге В см з0 : що й т. дютдек . . й й Я я 00001; 5 ам ща дев Ф 35 | Ба ве ШЩКІ І! В! І со век 00000 ТЕВВ, їде | ки ре Пот я сну 40 ентерит КИ ноті с ніде Ше Ж ту «Ж «21 фбнетх т жо йо с ах ов ее ит р уосрев ре та 5,3, 1, їм, В-бЯ», 1585 45. : 1 і щи ни и со | і ! 1, СН) х 8,83 не о ве о | Ще Існауи ВиБІ (ІН; ми ВОЮ (г) реф чненех 01500000 1866 1раУ57 (БО); аейбк наОю о" 1 ГО тей бухта (дно Вона Яе

ТН-ЯМР-спектроскопію (ІН, МОЕБУ, ТОС5У при (278К)) проводили на установці Магап Опйу Ріиз (500МГЦ).

Хімічні зсуви (4) виражені в частинах на мільйон у бік зменшення відносно тетраметилсилану (ТМ5). Константи

ГФ) зв'язування виражені в Герцах. кю Приклад 2: отримання (4К)-метилгексанового КЕ

Експериментальні процедури проводилися, як в прикладі 1, починаючи з 1г полімерної смоли, з єдиним виключенням, що на відповідній стадії (45)-МехНех був замінений на (4К)-МехНех. Отриманий продукт (22Омг, 60 О5ммоль, 3095, 92,3956 чистоти) був охарактеризований за допомогою Е5-М5, С75Н4124М44Оч1в, 1477,9.

Отримано: т/2 1499,07 |Ма-Ма!", 1514,94 МКГ.

Приклад З: Цитотоксична активність іп мйго

Метою даних досліджень є припинення росту культури пухлинних клітин "іп міго" шляхом безперервного ря контакту цих клітин із зразком, що тестується.

БЗНЕ СОТнЯЄ миша о йантнна Війна. лімфоїлна небпуйзмі

І Жби ЮСТЛЯЗ подйни о ЛеНЮЮМІХ ерйтроленююх

АВ ОбІ,185 люшиню 0 орбж жарнинома 0 пепбн» зю ВЕМЕНОВ НІВ Звнннома злошкісна меленою

НТР НТВОЄ одини обо нантия вденонкривнома

Тоо Об» понеекої жін; т ММоїюю людина: Жовстякники аденокарцинома 500 ЄсСі955 жединя- зверни: зленекардинома з ; спін ши

Тд-тжу НТВЖІ йюідння Вфост: Жаерцинома. ЕВОСНВН,

Тиса ЄКС.А1740 0 пжодина. Жеростита пленНОКирНИнОМи й простати; І с кндрогониивохг

Бк. НІВ зводина рецепторами:

МОЛОЧНОЇ залози; д й Некм/авай;, (тотенральна. (о) (о) (ав)

З5 я « с з (ог) (ав) (се) со 20

І» 25 о ко 60 бо

МБА-МВ-О3І НІТВОЮ шедино моноюни залози Вденохвиинома

МАН а диван ких

ОУсава тва. яєчник аденокарцинома яєчника. нера АР. Обех «ОДИН пнашмати ее. (8) матЕн; що

Щ резвлентнини: Ф ен

Д-ЯЮВ ВТВ-Я. людини нирки харцинома нирки Ф

ВАМО-Ї бВІСІЯбЮ людних підшлункова епітеліоїдна о зе | звилози Жерцинома со

Різновид колориметричного аналізу з використанням реакції сульфородаміну В (ЗКВ) був адаптований для кількісного вимірювання росту клітин та їх життєздатності (відповідно до технології, описаної РПїйїр ЗкКепап, « 2 а|. (1990), Мем/ соіогітейіс суїююхісну аззау г апіісапсег агод зсгеепіпо, у. Май). Сапсег Іпві.,, 82: 1107-1112). з с У цьому способі аналізу використовують 96-ямкові культуральні мікропланшети діаметром Умм (РЕаїгсіоїй, 1988; Мозтапп, 1983). Більшість клітинних ліній отримана з Американської Колекції Типових Культур (АТСС), ;» утвореної з різних типів ракових клітин людини.

Клітини підтримували в культуральному середовищі КРМІ 1640, 1095 РВ5, збагаченому 0,1г/л пеніциліну і 45. бАг/л стрептоміцинсульфату, а потім інкубували при 372С в атмосфері 595 СО» і 9895 вологості. Для проведення о експериментів клітини збирали з субконфлюентних культур за допомогою трипсину і перед посівом ресуспендували їх в свіжому середовищі. о Клі І 96- і і мі 5 х103 клі і 195 ітини висівали в ямкові культуральні мікропланшети, по 5 х клітин на ямку, в аліквоти з мкл (Се) середовища, і залишали їх, даючи їм прикріпитися до поверхні планшета в умовах росту в культуральному со 50 середовищі, що не містить лікарського засобу, протягом 18 годин. Потім додавали зразки Івипробовуваної сполуки) в аліквотах по 5мкл в кількостях, що варіюювали від 10 до 10 мкг/мл, розчинених в ОМЗО/ЕЮН/РВЗ

Ко) (0,5:0,5:99). Після 48-годинної експозиції протипухлинний ефект вимірювали, використовуючи метод ЗКВ: клітини фіксували шляхом додавання 5Омкл холодної 5095 (вага/об'єм) трихлороцтової кислоти (ТХО) і інкубували протягом 60 хвилин при 42. Планшети промивали деіонізованою водою і сушили. Сто мікролітрів розчину ЗКВ (0,495 вага/об'єм в 195 оцтовій кислоті) додавали в кожну ямку мікропланшета і інкубували протягом о 10 хвилин при кімнатній температурі. Незв'язаний ЗКВ видаляли шляхом промивання 195 оцтовою кислотою.

Планшети сушили на повітрі, і зв'язаний барвник солюбілізували Трис-буфером. Оптичні густини зчитували на ю автоматичному спектрофотометричному пристрої для зчитування планшетів при одній довжині хвилі в 49Онм.

На основі даних, отриманих в трьох паралельній ямках, обчислювали величини середніх значень ч/- 50. 60 Були обчислені деякі параметри, що характеризують відповіді клітин: (зІ-інгібування росту, ТО|-загальне інгібування росту (цитостатичний ефект) і | С-клітинна загибель (цитотоксичний ефект).

Результати приведені в таблиці ІІ, істотних відмінностей між наведеними сполуками не відмічається: б5 зЕ

Павле й Дині по вістняності (моли) жнива рНИ ОО, сч ож зве оТНЕи фен о Ф » їй оо ВИ Слива ниви їх з з з» 00000 ГЕ МВ обо фен о ШИ с не янесися о 50

Ко)

Ф) іме) бо б5

ГВАМСНЯ 180 13,8 В-06 16, Явно 14, йбв-06 ! 51 ох: І В Се: ИН снення св в д-р - Кат нні ЖЕО - сс тн вн а ніде Жан

І сеї рас раднЕт ТИНИ

І ее феревиєви БЖ ЯН зх |ЖОМО- Гет5О лАБИЕОТ кате аввЕнОу ! ооо Гекеовної 00000 ТбтЧЕНОї 0000 фйреенО6є

ТЕсеб яння 7 уааеиює БИ | о

Приклад 4: токсичність іп мйго

З метою встановлення цитотоксичності вказаних лікарських засобів відносно нормальних клітин с використовували 96-ямкові планшети, засіяні з щільністю по 5000 клітин на ямку клітинами нормальних клітинних б» ліній, встановлених відповідно до вказівок АТСС: АМІ -12, нормальні клітини печінки миші, і МКК-52Е, нормальні клітини нирки щура. Після висівання клітин в кожному планшеті їх витримували протягом ночі перед додаванням Ге) лікарського засобу, що тестується. До кожної ямки (100мкл середовища) додавали 1Омкл лікарського засобу в о середовищі в різних концентраціях (в кінцевій концентрації 1 х10719-0,01мг/мл), а потім інкубували протягом ночі при 372С в присутності 595 СО». Всі експерименти повторювали щонайменше З рази, причому в кожному 00 експерименті використовували по дві паралельні проби. Через 24 години здійснювали аналіз МТЗ (водний

СеїІТіег 96), відповідно до інструкцій виробника (РКОМЕСА) (для всіх типів клітин). Життєздатність клітин (мітохондріальну активність) визначали шляхом ферментативного перетворення формазанового субстрату. «

Як видно з результатів, наведених в таблиці І, істотних відмінностей між сполуками 5-метилгексанового

КЕ і (45)-метилгексанового КЕ не спостерігається. о) ч » Таблиця ЇЇ , Печінка ДІМ ІСво (мкм)|Нирка МАКІСво (мкМ) (ее) о Приклад 5: МПД іп мімо у миші СО-І і у безтимусних тварин

Максимально переносиму дозу визначали у мишей СО-І і у безтимусних мишей (обох статей) для кожного (се) лікарського засобу після однократного введення болюсу і після 5 щоденних введень дози. Результати наведені в о 50 таблиці ІМ, де істотних відмінностей між сполуками 5-метилгексанового КЕ і (45)-метилгексанового КЕ не спостерігається.

Ко)

Таблиця ІМ 00 метипеюовновия ке|овуметилеювновий ке

Самці мишей СО-І Болюс МПД о бо

Приклад 6: ефективність іп мімо при ксенотрансплантації молочної залози (5003) бБ Ефективність 5-метилгексанового КЕ і (45)-метилгексанового КЕ, кожен з яких вводили в кількості трьох чвертей від максимально переносимей дози (МПД), вивчали у безтимусних самиць мишей, яким після ксенотрансплантації молочної залози внутрішньовенно (в/в) вводили протягом п'яти днів підряд (тобто в режимі

ОО х5) болюсні ін'єкції (дні 0-4). Сполуки застосовували у вигляді свіхоприготовлених запаяних в ампули розчинів в складі з носієм (кремофор-ЕЇ "етанол/вода (5:5:90)). Кожну добову дозу (в режимі ОЮОх5) вводили

Внутрішньовенно в об'ємі 0,2мл розчину для ін'єкцій на 20 грамів ваги тварини.

Оцінка власне розміру пухлини в групах, оброблених відповідним чином, відносно контрольної групи, якій вводили носій (тобто 95 АТ/АС), показала, що найнижче (оптимальне) значення досягалось на день З після початку введення лікарського засобу у всіх групах. Крім того, за допомогою попарного статистичного аналізу (з використанням непараметричного методу Мапп-МУпііпеу) вдалося з'ясувати, що існує значна різниця в 70 ефективності між двома вказаними сполуками, що є досить несподіваним з тієї точки зору, що ці сполуки мають дуже подібну структуру, а також в світлі результатів, наведених в попередніх прикладах.

На основі описаних тут досліджень ефективності і проведених раніше експериментів на токсичність (приклад 4) терапевтичний показник щонайменше 1,33 (1хХМПД/0,75хМПД, доза, при якій лікарський засіб є токсичним/дозу, при якій лікарський засіб є ефективним) може бути затверджений для сполуки 75 (45)-метилгексановий КР. Крім того, ще одним пов'язаним з цим біологічним результатом виявилось те, що протипухлинний ефект (45)-метилгексанового КЕ відносно молочної залози був більш тривалим, ніж відносно трансплантатів передміхурової залози (приклад 7), при одній і тій самій відносній дозі МПД. Резюмуючи, можна стверджувати, що (45)-метилгексановий КЕ безперечно є більш потужним ізомером відносно трансплантатів молочної залози, а тривалість його біологічної дії дає підстави вважати, що він має більш тривалий вплив на пухлини такого типу. 00000011 доза (мок) Власне розмір пухлини, ммо, пе в АТАС.

Жентоль 11111611 рою сч о

Приклад 7: ефективність іп мімо при ксенотрансплантації передміхурової залози (5003)

Ефективність однакової дози кожного з 5-метилгексанового КЕ і (45)-метилгексанового КЕ вивчали у СМ безтимусних самців мишей, яким після ксенотрансплантації передміхурової залози внутрішньовенно (в/в) вводили протягом п'яти днів підряд (тобто в режимі ОО х5) болюсні ін'єкції (дні 0-4). Сполуки застосовували у б вигляді свіжоприготовлених запаяних в ампули розчинів в складі з носієм |кремофор-ЕЇ /"етанол/вода (5:5:90)|. Ге)

Кожну добову дозу (в режимі ОЮОх5) вводили внутрішньовенно в об'ємі 0,2мл розчину для ін'єкцій на 20 грамів о ваги тварини.

Оцінка власне розміру пухлини в групах, оброблених відповідним чином, відносно контрольної групи, якій (ее) вводили носій (тобто 95 АТ/АС), показала, що найнижче (оптимальне) значення досягалося на день З після початку введення лікарського засобу у всіх групах. Крім того, за допомогою попарного статистичного аналізу (з використанням непараметричного методу Мапп-МУпіїпеу) вдалося з'ясувати, що істотно більша ефективність « досягалася з допомогою (45)-метилгексанового КЕ в дозі 262мкг/кг/день. На основі описаних тут досліджень ефективності і проведених раніше експериментів на токсичність (приклад 4) терапевтичний показник т с щонайменше 1,33 (1ХМПД/О,75хМПД, доза, при якій лікарський засіб є токсичним/дозу, при якій лікарський "» засіб є ефективним) може бути затверджений для сполуки (45)-метилгексановий КЕ. Результати наведені нижче " в таблиці МІ. со 00001011 доза (мк Власне розмір пухлини, мм, пело гів АТС. о кит 00000016 що о 50

Приклад 8: протипухлинна активність аналогів кахалаліду ЕР, що досліджується на порожнистих волокнах з

Із використанням панелі ліній пухлинних клітин людини

Протипухлинна активність аналогів кахалаліду Е, що обговорювалась вище, була перевірена на системі порожнистих волокон (НЕ) за допомогою панелі ліній пухлинних клітин людини, а саме клітин 5К-Нер-1 (гепатоми), Нерб2 (гепатоклітинної карциноми), Рапс-1 (підшлункової залози) і Ме!І-28 (меланоми). Пухлинні о клітини людини були інкапсульовані в порожнисті волокна іп мійго, а потім імплантовані безтимусним мишам-самицям іп мімо. іме) Дози 5-метилгексанового КЕ і (45)-метилгексанового КЕ підбирали на основі попередніх МПД-експериментів, проведених на безтимусних мишах, внаслідок яких було вибране дозування 325мкг/кг/день (див. приклад 5). 60 П'ять днів підряд дозу вводили внутрішньоочеревинно (в/о) в об'ємі О,2мл розчину для ін'єкцій на 20 грамів ваги тварини.

Загалом сполука КЕ-4(5)-Меї проявляє статистично значущу протипухлинну активність проти клітин гепатоми (підшкірно, п/ш), гепатоклітинної карциноми (як підшкірно, так і внутріпшьочеревинно), підшлункової залози (внутрішньочеревинно) і виявляє тенденцію у бік значущості ефекту (тобто Р-0,059) при підшкірному введенні 65 при пухлині підшлункової залози і меланомі. На відміну від цієї сполуки, КЕ-5-Меї активний відносно меншої кількості типів пухлин, а саме тільки відносно пухлин підшлункової залози (як підшкірно, так і внутрішньочеревинно) і меланоми (підшкірно), але не відносно всіх типів раку печінки, які були протестовані.

Нижче в таблиці наведені сумарні результати, які ясно показують відмінності між цими сполуками. о

Claims (21)

Формула винаходу

1. Сполука формули Формула рму. НМ (8) (8) М МН сч щі 6) н 9 МН в) МН о М (8) 5-5 ся Н (8) о о МН щі а (22) МН ден МН о Н а г) о х Но ї с о 2 но с М ч о н и? і її фармацевтично прийнятні солі, складні ефіри та солі складних ефірів, таутомери і сольвати. (ее)

2. Сполука за п. 1, яка являє собою о (45)-МеНех-О-Ма!1-І-Тиг-І -МаІ-О-МаІ-О-Рго-ІЇ -Огп-О- а/о-Пе-цикло(О-а/о- Тиг-О- айо-Пе-О-Ма1І-І-Рпе-2-ОпЬ-І -Маї) і її фбармацевтично прийнятні солі, складні ефіри та солі складних ефірів, таутомери і сольвати. (се)

3. Сполука за п. 1, яка являє собою со 50 (45)-МеНех-О-Ма!-І-Тиг-Ї -МаІ-Ю-МаІ-О-Р го-І -Огп-О- а/о-Пе-цикло(О-алйо- Тиг-О- а/о-Пе-О-Ма!-І-Рпе-2-ОПпЬБ-І -Маї) і її фармацевтично прийнятні солі. Що)

4. Сполука за будь-яким з пунктів 1-3, яка містить щонайбільше 25 90 будь-якого іншого кахалаліду.

5. Сполука за будь-яким з пунктів 1-3, яка містить щонайбільше 10 95 будь-якого іншого кахалаліду.

6. Сполука за будь-яким з пунктів 1-3, яка містить щонайбільше 5 90 будь-якого іншого кахалаліду.

7. Сполука за будь-яким з пунктів 1-3, яка містить щонайбільше 2 95 будь-якого іншого кахалаліду.

о 8. Сполука за будь-яким з пунктів 1-3, яка містить щонайбільше 1 90 будь-якого іншого кахалаліду.

9. Сполука за будь-яким з пунктів 1-3, яка містить щонайбільше 0,5 95 будь-якого іншого кахалаліду. ко

10. Сполука за будь-яким з пунктів 1-3, яка містить менше ніж 0,5 95 будь-якого іншого кахалаліду.

11. Сполука за будь-яким з пунктів 4-10, де іншим кахалалідом є кахалалід ЕР, який має 5-метилгексильний 60 бічний ланцюг.

12. Сполука, визначена в будь-якому з пунктів 1-3, яка є сполукою, по суті, в чистому вигляді.

13. Фармацевтична композиція, яка містить сполуку, визначену у будь-якому з пунктів 1-12, і фармацевтично прийнятний носій, наповнювач або розріджувач.

14. Спосіб лікування будь-якого ссавця, переважно людини, ураженого злоякісною пухлиною, який включає в 65 себе введення ураженому індивіду терапевтично ефективної кількості сполуки, визначеної у будь-якому з пунктів 1-12.

15. Спосіб за пунктом 14, де ссавцем є людина.

16. Спосіб за пунктом 15, де пацієнт уражений стійкою формою злоякісної пухлини, яка не дає сприятливої відповіді на інші види терапії.

17. Спосіб за пунктом 15, де злоякісна пухлина вибрана із злоякісної пухлини передміхурової залози, злоякісної пухлини молочної залози, гепатоклітинної карциноми, меланоми, злоякісної пухлини прямої кишки, злоякісної пухлини нирки, злоякісної пухлини яєчника, карциноми легень МЗС, злоякісної пухлини епітелію, злоякісної пухлини підшлункової залози і пухлин, які експресують в підвищеній кількості онкоген Негг/пеи.

18. Застосування сполуки, визначеної у будь-якому з пунктів 1-12, у виробництві лікарського засобу. 70

19. Застосування сполуки, визначеної у будь-якому з пунктів 1-12, у виробництві лікарського засобу для лікування злоякісної пухлини.

20. Набір, що включає в себе окремі контейнери, які містять фармацевтичну композицію, що включає в себе сполуку, визначену у будь-якому з пунктів 1-12, і відновлювальний агент.

21. Спосіб одержання сполуки, визначеної у будь-якому з пунктів 1-3, твердофазним синтезом, де як вихідну 7/5 сполуку використовують 4-метилгексанову кислоту або (45)-метилгексанову кислоту. Офіційний бюлетень "Промислова власність". Книга 1 "Винаходи, корисні моделі, топографії інтегральних мікросхем", 2007, М 19, 26.11.2007. Державний департамент інтелектуальної власності Міністерства освіти і науки України. с щі 6) с (о) (о) «в) г)

- . и? (ее) («в) се) се) Ко) іме) 60 б5