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TWI903241B - 一種帶有高穩定性親水連接單元的奧瑞他汀類藥物及其偶聯物 - Google Patents

一種帶有高穩定性親水連接單元的奧瑞他汀類藥物及其偶聯物

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TWI903241B
TWI903241B TW112137420A TW112137420A TWI903241B TW I903241 B TWI903241 B TW I903241B TW 112137420 A TW112137420 A TW 112137420A TW 112137420 A TW112137420 A TW 112137420A TW I903241 B TWI903241 B TW I903241B
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drug conjugate
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pharmaceutically acceptable
ligand
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TW202421203A (zh
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朱義
萬維李
卓識
賴偉榮
楊秀娟
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美商西雅圖免疫公司
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Abstract

本發明涉及醫藥技術領域，涉及一種帶有高穩定性親水連接單元的奧瑞他汀類藥物及其偶聯物。特別地，本發明涉及一種配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物、其製備方法和用途。本發明還涉及一種連接子‑藥物化合物或其異構物、內消旋體、外消旋體、鏡像異構物或其混合物形式，或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物，其製備方法和用途。

Description

一種帶有高穩定性親水連接單元的奧瑞他汀類藥物及其偶聯物
本發明涉及醫藥技術領域，特別涉及配體-藥物偶聯物、連接子-藥物化合物、其製備方法和用途。
抗體藥物偶聯物(Antibody-Drug Conjugates，ADCs)作為一類新型標靶治療藥物，結合了抗體的高選擇性和細胞毒藥物高活性的優點，具有“高效低毒”的優勢，已成為腫瘤標靶治療的研究熱點。近年來，ADCs發展迅猛，已發展至第三代，目前已有13個ADCs藥物被批准上市，分別是Mylotarg、Adcetris、Kadcyla、Besponsa、Lumoxiti、Polivy、Enhertu、Padcev、Trodelvy、Blenrep、Zynlonta、愛地希和Tivdak，200多個ADCs進入臨床試驗。ADCs在腫瘤標靶治療領域正發揮著越來越重要的作用。
抗體藥物偶聯物(antibody-drug conjugates，ADCs)由三個部分組成：高特異性和親和力的抗體(mAb)、高穩定性的接頭(linker)和高效的小分子細胞毒藥物(payload/warhead，彈頭)。 ADCs的抗體部分最常用IgG1，其彈頭部分一般都是作用於微管、DNA或RNA的細胞毒藥物，如美登素類、奧瑞他汀類、卡奇黴素、喜樹鹼類、吡咯并苯并二氮雜卓和毒傘肽等，其接頭主要有兩大類，一類是可裂解的接頭，另一類是不可裂解的接頭。
奧瑞他汀類(Auristatins)是一類微管蛋白抑制劑，其可阻斷微管蛋白與GTP結合並阻斷微管與長春鹼結合位址的結合，從而誘導細胞凋亡，抑制腫瘤生長。目前，MMAE(US6884869)和MMAF(US7498298)是最常用的ADC彈頭，兩者均是基於海兔毒素10(Dolastatin 10)改構得到的五肽。MMAE和MMAF均展現出很好的抗腫瘤活性，但由於缺乏選擇性以及治療指數不高等因素，導致其不能以單藥應用於臨床。然而，MMAE和MMAF的高細胞毒性使其成為ADC的理想彈頭。MMAE/MMAF在ADC領域已有廣泛應用，目前已有5個以MMAE為彈頭和1個以MMAF為彈頭的ADC藥物上市，分別為Adcetris、Polivy、Padcev、愛地希、Tivdak和Blenrep。然而，這些以奧瑞他汀類為毒素的ADC存在一些不足，如以MMAE為毒素的ADC存在神經毒性(周圍神經病變)和血液毒性(血小板減少和中性顆粒細胞減少)等不良反應，以MMAF為毒素的ADC則存在眼毒性等，安全性有待提高。另外，這些ADCs使用的linker大都為VClinker，DAR最高為4，這是因為 VClinker疏水性較強，然而，高DAR容易導致ADC沉澱和聚集，故不能提高其DAR，增強藥效。
進一步地，目前以MMAE為彈頭的ADC，大多是從MMAE的N端的仲胺引入linker，從MMAE的羥基上引入linker的實例較少，僅有Seagen、丹麥技術大學、Mersana和上海新理念公司報導過。
Seagen在其專利申請US2005009751A1中，將MMAE類似物Auristatin E的羥基進行酯化反應後再引入帶有腙鍵的linker，該類帶有酯鍵和腙鍵的linker在人血漿中不穩定，會發生一定程度的水解，導致部分脫靶毒性(參見Nat Biotechnol.2003 Jul；21(7)：778-84)。Seagen在其專利CN105813653中，在MMAE的羥基中引入自消除基團──伸甲基烷氧基胺基甲酸酯(methylene alkoxy carbamate,MAC)後，再引入β-葡糖醛酸糖苷類linker，雖然帶有該類linker的ADC在人血漿中的穩定性較好，但其彈頭釋放涉及到β-葡糖醛酸糖苷酶(β-Glucuronidase)的催化及後續的自消除過程，相對較複雜。
丹麥技術大學在其專利申請WO2020260597A1中，在MMAE類似物的羥基上引入linker的方式同Seagen類似，也是進行酯化反應後再引入linker，但引入linker後其酯鍵較難被酶水解，不易釋放出彈頭。Mersana在其專利申請CN110234357A中， 從MMAE類似物的羥基引入linker的方式同Seagen類似，引入酯鍵或碳酸酯結構，但酯鍵較難被酶水解，而碳酸酯血漿穩定性較差，會降低藥效。上海新理念公司在其專利申請CN106279352A中，在MMAE類似物的羥基上引入胺基甲酸酯後，再引入Mc-Vc-PAB linker，這種胺基甲酸酯在血漿中穩定性較差，有潛在的脫靶風險。
因此，開發出新的引入linker的方式，得到具有更高安全性和有效性的奧瑞他汀類ADC藥物具有非常重要的臨床意義。
本發明所要解決的一個技術問題，在於探索發現更優的抗腫瘤奧瑞他汀類ADC藥物，使其具有更高的安全性、有效性，更好地滿足臨床需求。
本發明將奧瑞他汀或其衍生物從羥基位址與酶切胜肽單元透過胺基伸甲基結構連接，形成相應的linker-payload，可以使ADC的DAR值提高到8，在高載藥下親水性更好、高載藥值下血漿穩定性更好，藥效方面更有優勢。同陽性藥(例如以Vc-MMAE為linker-payload的ADC)相比，使用更低的劑量即可達到同等腫瘤抑制效果，MTD有所提高，且神經毒性和血液毒性降低。由此，本申請提供了以下發明：
在第一方面，本申請提供了如通式I所示的配體-藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物， 其中：Ab為配體單元，選自抗體、抗體片段、標靶蛋白或Fc-融合蛋白；M為與Ab連接的連接單元；A選自由2-7個胺基酸構成的胜肽殘基，其中，任選地，所述胺基酸各自獨立地被一個或多個取代基所取代，所述取代基選自：氘原子、鹵素、羥基、氰基、胺基、硝基、烷基、取代烷基、烷氧基、環烷基、取代環烷基；W表示如式(i)所示的胺基伸甲基氧結構單元： 其中：左側波浪線表示式(i)中氮原子與A的連接位址，右側波浪線表示式(i)中氧原子與藥物D的連接位址，氧原子為藥物D與W的共用基團；R1、R2和R3各自獨立地選自氫原子、氘原子、烷基和取代烷基；p選自1-20的整數或小數(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20)；並且 藥物D為具有式D所示結構的奧瑞他汀，或其異構物、內消旋體、外消旋體、鏡像異構物或其混合物形式，或其藥學上可接受的鹽， 其中：R4、R5各自獨立地選自氫原子、氘原子、烷基和氘代烷基，或者R4、R5相連形成以下結構：-(CR11R12)n-B-(CR13R14)m-，其中R11、R12、R13和R14選自氫原子、氘原子、烷基和氘代烷基；B選自O、NR15、CR16R17，其中R15、R16、R17選自氫原子、氘原子和烷基；n和m分別選自0-8的整數(例如0、1、2、3、4、5、6、7、8)；與R4和R5鍵合的氮原子與-(CR11R12)n-B-(CR13R14)m-一起形成環；R6、R7、R8、R9各自獨立地選自氫原子、氘原子、鹵素、疊氮基、烷基和NR18R19，或者R6、R7、R8、R9之中的任意兩個基團與所鍵合的原子一起形成環烷基，餘下的兩個基團各自獨立地選自氫原子、鹵素、疊氮基、烷基和NR18R19，其中R18、R19選自氫原子、烷基； R10選自芳基、雜芳基，所述的芳基或雜芳基任選地被一個或多個取代基所取代，所述取代基選自：氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、胺基、硝基；式D中的波浪線表示藥物D結構中1位氧原子與W的連接位址，所述氧原子為藥物D與W的共用基團。
在某些實施方案中，R4、R5各自獨立地選自氫原子、C1-C4烷基。
在某些實施方案中，R4、R5相連形成以下結構：-(CH2)2-B-(CH2)2-，B選自O、NH，與R4和R5鍵合的氮原子與-(CH2)2-B-(CH2)2-一起形成環。
在某些實施方案中，式D中的R6、R7、R8、R9各自為氫原子。
在某些實施方案中，式D中R6、R7、R8、R9中的一個選自鹵素、疊氮基、胺基，其餘的三個各自為氫。
在某些實施方案中，式D中R6、R7、R8、R9之中的任意兩個基團與其所鍵合的原子一起形成環丙基，餘下的兩個基團各自獨立地為氫原子。
在某些實施方案中，式D中的R10為苯基，任選地，所述苯基被一個或多個所述取代基所取代。在某些實施方案中，所述取代基選自胺基、硝基。
在某些實施方案中，藥物D非限制性地選自以下化合物：
在上述實施方案中，藥物D透過羥基與W相連。
在某些實施方案中，連接單元M包含馬來醯亞胺。在這些實施方案中，所述配體-藥物偶聯物在易水解條件下可以發生水 解，水解部位即為連接單元的馬來醯亞胺部分。當配體中包含多個連接子-藥物時，隨水解程度不同，可出現以下情形：馬來醯亞胺完全不水解，即馬來醯亞胺均為閉環形式；馬來醯亞胺不完全水解，即部分馬來醯亞胺為閉環形式，而另一部分馬來醯亞胺為開環形式或；馬來醯亞胺完全水解，即馬來醯亞胺均為開環形式或
因此，當ADC中同時存在多個含馬來醯亞胺基團的連接單元M(即，Ab連接有多個含馬來醯亞胺基團的藥物-連接子)時，這些馬來醯亞胺基團可以均為閉環形式、部分為開環形式或者全部為開環形式。
上述馬來醯亞胺的各結構式中，左側波浪線表示到Ab的連接位址，右側波浪線表示到M中的其他結構。
在某些實施方案中，所述配體-藥物偶聯物具有式Ia所示的結構：
其中：Z選自-C1-C10伸烷基-、-C3-C8碳環-、-伸芳基-、-C1-C10伸烷基-伸芳基-、-伸芳基-C1-C10-伸烷基-、-C1-C10伸烷基-(C3-C8碳環)-、-(C3-C8碳環)-C1-C10伸烷基-、3-8員雜環-、-C1-C10伸烷基-(3-8員雜環)-、-(3-8員雜環)-C1-C10伸烷基-、-(CH2CH2O)r-、-(CH2CH2O)r-CH2-或，其中X選自-C1-C10伸烷基-、-C3-C8碳環-、-伸芳基-、-C1-C10伸烷基-伸芳基-、-伸芳基-C1-C10-伸烷基-、-C1-C10伸烷基-(C3-C8碳環)-、-(C3-C8碳環)-C1-C10伸烷基-、-3-8員雜環-、-C1-C10伸烷基-(3-8員雜環)-、-(3-8員雜環)-C1-C10伸烷基-、-(CH2CH2O)r-、-(CH2CH2O)r-CH2；Y為親水結構，選自羧基、磷酸、聚磷酸、亞磷酸、磺酸、亞 磺酸或聚乙二醇(PEG)；所述雜環各自獨立地包含選自N、O、S的1-3個原子；所述-C1-C10伸烷基-、-C3-C8碳環-、雜環各自獨立地被一個或者多個取代基所取代，所述取代基選自氘原子、鹵素、羥基、氰基、硝基、胺基、烷基、雜烷基、取代烷基、烷氧基、羧基或環烷基；中的左側波浪線表示到馬來醯亞胺上N的連接位址，右側波浪線表示到羰基的連接位址；r選自1-10之間的整數(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10)；q選自1-8之間的整數(例如1、2、3、4、5、6、7、8)；n1、n2、n3獨立地選自0~20之間的整數或小數，n1、n2、n3不同時為0，且n1+n2+n3 20，例如1n1+n2+n3 2，或7n1+n2+n3 8。
在某些實施方案中，n1、n2、n3獨立地選自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20(例如0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7、7.1、 7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9或10)。
在某些實施方案中，式I或式Ia中的A選自苯丙胺酸(F)、甘胺酸(G)、纈胺酸(V)、離胺酸(K)、丙胺酸(A)、瓜胺酸、絲胺酸(S)、麩胺酸(E)或者天冬胺酸(D)中的2-7個胺基酸形成的多肽殘基。
在某些實施方案中，A為由2-4個選自苯丙胺酸和甘胺酸的胺基酸形成的胜肽殘基。在某些實施方案中，A為甘胺酸-甘胺酸-苯丙胺酸-甘胺酸組成的四肽殘基。
在某些實施方案中，Z選自-C1-C10伸烷基-，例如-C4-C6伸烷基-，例如-C5伸烷基-。
在某些實施方案中，Z為，其中，q選自1-8之間的整數(例如1、2、3、4、5、6、7、8)，例如1。
在某些實施方案中，R1、R2和R3各自獨立地選自氫原子、氘原子、烷基、鹵代烷基、氘代烷基和羥烷基。
在某些實施方案中，R1、R2和R3同時為氫原子或氘原子。
在某些實施方案中，R1、R2和R3同時為氫原子。在某些實施方案中，所述配體-藥物偶聯物具有如式Ib所示的結構，
在某些實施方案中，所述配體-藥物偶聯物具有如式Ic所示的結構，
Ac為具有式c所示結構的親水結構單元：
Ac透過胺基官能基與式Ic中已標示的2位伸甲基碳相連，X、Y如上文所定義。
在某些實施方案中，所述Ac選自甘胺酸、(D/L)丙胺酸、(D/L)亮胺酸、(D/L)異亮胺酸、(D/L)纈胺酸、(D/L)苯丙胺酸、(D/L)脯胺酸、(D/L)色胺酸、(D/L)絲胺酸、(D/L)酪胺酸、(D/L)半胱胺酸、(D/L)胱胺酸、(D/L)精胺酸、(D/L)組胺酸、(D/L)蛋胺酸、(D/L)天冬醯胺、(D/L)穀胺醯胺、(D/L)蘇胺酸、(D/L)天冬胺酸、(D/L)麩胺酸、天然或非天然胺基酸衍生物或以下結構，
本發明的配體-藥物偶聯物非限制性地可以選自以下結構：
其中，2位掌性碳的構型為R型或S型。
在第二方面，本申請提供了如式II所示的連接子-藥物化合物，或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物，
其中：Z、A、R1、R2、R3、R4、R5、R11、R12、R13、R14、B、R15、R16、R17、n、m、R6、R7、R8、R9、R18、R19、R10如上文任一項所定義。
在某些實施方案中，所述連接子-藥物化合物具有式IIa所示的結構，
在某些實施方案中，所述連接子-藥物化合物具有式IIb所示的結構，
其中，Ac為具有式c所示結構的親水結構單元：
其中，X、Y如上文所定義，Ac透過-NH-與式IIb中已標示的2位伸甲基碳相連。
本發明的連接子-藥物化合物非限制性地可以選自以下結構：
其中，2位掌性碳的構型為R型或S型。
本發明中，配體單元Ab可以選自抗體、抗體片段或蛋白，其中所述抗體選自鼠源抗體、兔源抗體、噬菌體展示來源抗體、酵母展示來源抗體、嵌合抗體、人源化抗體、全人源抗體、抗體片段、雙特異性抗體及多特異性抗體。
在某些實施方案中，所述抗體為單株抗體，非限制性地選自：抗EGFRvIII抗體、抗PD-1抗體、抗PD-L1抗體、抗DLL-3抗體、抗PSMA抗體、抗CD70抗體、抗MUC16抗體、抗ENPP3抗體、抗TDGF1抗體、抗ETBR抗體、抗MSLN抗體、抗TIM-1抗體、抗LRRC15抗體、抗LIV-1抗體、抗CanAg/AFP抗體、抗claudin 18.2抗體、抗Mesothelin抗體、抗HER2(ErbB2)抗體、抗EGFR抗體、抗c-MET抗體、抗SLITRK6抗體、抗KIT/CD117抗體、抗STEAP1抗體、抗SLAMF7/CS1抗體、抗NaPi2B/SLC34A2抗體、抗GPNMB抗體、抗HER3(ErbB3)抗體、抗MUC1/CD227抗體、抗AXL抗體、抗CD166抗體、抗B7-H3(CD276)抗體、抗PTK7/CCK4抗體、抗PRLR抗體、抗EFNA4抗體、抗5T4抗體、 抗NOTCH3抗體、抗Nectin 4抗體、抗Trop2抗體、抗CD142抗體、抗CA6抗體、抗GPR20抗體、抗CD174抗體、抗CD71抗體、抗EphA2抗體、抗LYPD3抗體、抗FGFR2抗體、抗FGFR3抗體、抗FRα抗體、抗CEACAMs抗體、抗GCC抗體、抗Integrin Av抗體、抗CAIX抗體、抗P-cadherin抗體、抗GD3抗體、抗Cadherin 6抗體、抗LAMP1抗體、抗FLT3抗體、抗BCMA抗體、抗CD79b抗體、抗CD19抗體、抗CD33抗體、抗CD56抗體、抗CD74抗體、抗CD22抗體、抗CD30抗體、抗CD37抗體、抗CD47抗體、抗CD138抗體、抗CD352抗體、抗CD25抗體或抗CD123抗體。
在某些實施方案中，所述抗體為抗Trop2抗體。在某些實施方案中，所述抗體由輕鏈和重鏈組成，所述輕鏈包含CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，其胺基酸序列分別如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3所示。在某些實施方案中，所述重鏈包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3，其胺基酸序列分別如SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6所示。
在某些實施方案中，所述輕鏈包含胺基酸序列為SEQ ID NO：7的輕鏈可變區。在某些實施方案中，所述輕鏈還包含胺基酸序列為SEQ ID NO：8的輕鏈恆定區。在某些實施方案中，所述輕鏈的胺基酸序列為SEQ ID NO：9。
在某些實施方案中，所述輕鏈包含胺基酸序列為SEQ ID NO：10的輕鏈可變區。在某些實施方案中，所述輕鏈還包含胺基酸序列為SEQ ID NO：11的輕鏈恆定區。在某些實施方案中，所述輕鏈的胺基酸序列為SEQ ID NO：12。
在某些實施方案中，所述重鏈包含胺基酸序列為SEQ ID NO：13的重鏈可變區。在某些實施方案中，所述重鏈還包含胺基酸序列為SEQ ID NO：14的重鏈恆定區。在某些實施方案中，所述重鏈的胺基酸序列為SEQ ID NO：15。
在某些實施方案中，所述抗體為抗Trop2抗體。在某些實施方案中，所述抗體由輕鏈和重鏈組成，所述輕鏈包含CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，其核酸編碼序列分別如SEQ ID NO：16、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：18所示。在某些實施方案中，所述重鏈包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3，其核酸編碼序列分別如SEQ ID NO：19、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：21所示。
在某些實施方案中，所述輕鏈包含核酸編碼序列為SEQ ID NO：22的輕鏈可變區。在某些實施方案中，所述輕鏈還包含核酸編碼序列為SEQ ID NO：23的輕鏈恆定區。在某些實施方案中，所述輕鏈的核酸編碼序列為SEQ ID NO：24。
在某些實施方案中，所述輕鏈包含核酸編碼序列為SEQ ID NO：25的輕鏈可變區。在某些實施方案中，所述輕鏈還 包含核酸編碼序列為SEQ ID NO：26的輕鏈恆定區。在某些實施方案中，所述輕鏈的核酸編碼序列為SEQ ID NO：27。
在某些實施方案中，所述重鏈包含核酸編碼序列為SEQ ID NO：28的重鏈可變區。在某些實施方案中，所述重鏈還包含核酸編碼序列為SEQ ID NO：29的重鏈恆定區。在某些實施方案中，所述重鏈的核酸編碼序列為SEQ ID NO：30。
在某些實施方案中，所述抗體為抗Trop2抗體。在某些實施方案中，所述抗體由輕鏈和重鏈組成，所述輕鏈包含CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，其胺基酸序列分別如SEQ ID NO：31、SEQ ID NO：32、SEQ ID NO：33所示。在某些實施方案中，所述重鏈包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3，其胺基酸序列分別如SEQ ID NO：34、SEQ ID NO：35、SEQ ID NO：36所示。
在某些實施方案中，所述輕鏈包含胺基酸序列為SEQ ID NO：37的輕鏈可變區。在某些實施方案中，所述輕鏈還包含胺基酸序列為SEQ ID NO：38的輕鏈恆定區。在某些實施方案中，所述輕鏈的胺基酸序列為SEQ ID NO：39。
在某些實施方案中，所述重鏈包含胺基酸序列為SEQ ID NO：40的重鏈可變區。在某些實施方案中，所述重鏈還包含胺基酸序列為SEQ ID NO：41的重鏈恆定區。在某些實施方案中，所述重鏈的胺基酸序列為SEQ ID NO：42。
在某些實施方案中，所述抗體為抗Trop2抗體。在某些實施方案中，所述抗體由輕鏈和重鏈組成，所述輕鏈包含CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，其核酸編碼序列分別如SEQ ID NO：43、SEQ ID NO：44、SEQ ID NO：45所示。在某些實施方案中，所述重鏈包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3，其核酸編碼序列分別如SEQ ID NO：46、SEQ ID NO：47、SEQ ID NO：48所示。
在某些實施方案中，所述輕鏈包含核酸編碼序列為SEQ ID NO：49的輕鏈可變區。在某些實施方案中，所述輕鏈還包含核酸編碼序列為SEQ ID NO：50的輕鏈恆定區。在某些實施方案中，所述輕鏈的核酸編碼序列為SEQ ID NO：51。
在某些實施方案中，所述重鏈包含核酸編碼序列為SEQ ID NO：52的重鏈可變區。在某些實施方案中，所述重鏈還包含核酸編碼序列為SEQ ID NO：53的重鏈恆定區。在某些實施方案中，所述重鏈的核酸編碼序列為SEQ ID NO：54。
本發明涉及的部分序列的資訊提供於表1中。
在第三方面，本申請還提供了本發明的配體-藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物，或本發明的連接子-藥物化合物或其異構物、內消旋體、外消旋體、鏡像異構物或其混合物形式，或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物用於製備藥物的用途，所述藥物用於治療或預防腫瘤。
在某些實施方案中，所述腫瘤選自固態腫瘤或非固態腫瘤，例如乳腺癌、卵巢癌、子宮頸癌、子宮癌、前列腺癌、腎癌、尿道癌、膀胱癌、肝癌、胃癌、子宮內膜癌、唾液腺癌、食道癌、肺癌、結腸癌、直腸癌、結直腸癌、骨癌、皮膚癌、甲狀腺癌、胰腺癌、黑色素瘤、神經膠質瘤、神經母細胞瘤、多形性膠質細胞瘤、肉瘤、淋巴瘤和白血病。
在第四方面，本申請還提供了一種藥物組成物，其包含有效量的本發明的配體-藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物，或本發明的連接子-藥物化合物或其異構物、內消旋體、外消旋體、鏡像異構物或其混合物形式，或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物，以及藥學上可接受的載劑、稀釋劑或賦形劑。
在第五方面，本申請還提供了一種治療或預防腫瘤的方法，包括給有此需要的受試者施用有效量的本發明的配體-藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物，或本發明的連接子-藥物化合物或其異構物、內消旋體、外消旋體、鏡像異構物或其混合 物形式，或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。在某些實施方案中，所述受試者為哺乳動物，例如人。
在第六方面，本申請還提供了本發明的連接子-藥物化合物或其異構物、內消旋體、外消旋體、鏡像異構物或其混合物形式，或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物用於製備配體-藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物的用途。在某些實施方案中，所述配體-藥物偶聯物選自本發明的配體-藥物偶聯物。
在第七方面，本申請還提供了製備本發明的配體-藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物的方法，所述方法包括：透過還原的抗體或者其抗原結合片段與本發明的連接子-藥物化合物或其異構物、內消旋體、外消旋體、鏡像異構物或其混合物形式，或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物進行偶聯反應，得到所述配體-藥物偶聯物。可以透過硫醇類還原劑(例如三(2-羧乙基)膦(TCEP))對抗體或者其抗原結合片段進行還原。
術語定義
除非另有限定，本文所用的所有技術和科學術語均與本發明所屬領域普通技術人員的通常理解一致。雖然也可採用與本發明所述相似或等同的任何方法和材料實施或測試本發明，但本發明描述了優選的方法的材料。描述和要求保護本發明時，依據以下定義使用下列術語。
當本發明中使用商品名時，申請人旨在包括該商品名產品的製劑、該商品名的非專利藥和活性藥物部分。
除非有相反陳述，在說明書和申請專利範圍中使用的術語具有下述含義。
術語“配體”是與標的部分特異性結合的標靶劑。所述配體能夠特異性結合至細胞組分或結合至其他感興趣的標的分子。標的部分或標的通常在細胞表面上。在一些方面中，配體的作用是將藥物單元遞送至配體單元與之相互作用的特定標靶細胞群。配體包括但不限於蛋白質、多肽和胜肽，以及非蛋白質如醣。合適的配體單元包括，例如，抗體，例如全長(完整)抗體及其抗原結合片段。在配體單元是非抗體標靶試劑的實施方式中，其可以是胜肽或多肽，或非蛋白質分子。這類標靶試劑的示例包括干擾素、淋巴激素、激素、生長因子和集落刺激因子、維生素、營養轉運分子、或任何其他細胞結合分子或物質。在一些實施方式中，連接子共價連接至配體的硫原子。在一些方面中，硫原子是半胱胺酸殘基的硫原子，其形成抗體的鏈間二硫鍵。在另一方面中，硫原子是已經導入配體單元的半胱胺酸殘基的硫原子，其形成抗體的鏈間二硫鍵。在另一方面中，硫原子是透過例如定點誘變或化學反應導入配體單元的半胱胺酸殘基的硫原子。
術語“藥物”是指細胞毒性藥物，即，能在腫瘤或癌症細胞內具有較強破壞其正常生長的能力的分子。細胞毒性藥物原則上在足夠高的濃度下都可以殺死腫瘤細胞，但是由於缺乏特異性，在殺傷腫瘤或癌症細胞的同時，也會導致正常細胞的凋亡，容易導致嚴重的副作用。
術語“配體-藥物偶聯物”，指配體透過穩定的連接單元與藥物相連形成的分子。在本發明中“配體-藥物偶聯物”優選為抗體-藥物偶聯物(Antibody drug conjugate,ADC)，指把單株抗體或者功能性的抗體片段或者具有標靶性的蛋白等透過穩定的連接單元與細胞毒性藥物相連。
術語“抗體”或“功能性的抗體片段”在其所屬的範圍內，包括抗體結構的任何部分。這一單元可以結合、反應性關聯或者絡合一個受體、抗原或者標靶細胞群體具有的其它受體單元。抗體可以是任何蛋白或蛋白類分子，它可以結合、絡合或者與待治療或生物改造的細胞群體的一部分發生反應。
本發明的抗體包括但不限於鼠源抗體、嵌合抗體、人源化抗體和全人源抗體，優選人源化抗體和全人源抗體。
本發明所用胺基酸三字母代碼和單字母代碼如J.boil.Chem.1968,243,3558.中所述。
術語“天然胺基酸”指可由生物合成的胺基酸。天然胺基酸一般情況下是L-型的，但也有少數例外，比如甘胺酸，包括天然的和生物體合成的。
術語“非天然胺基酸”指只能透過人工方法合成的胺基酸。
術語“烷基”指飽和脂肪族烴基團，其為包含1至20個碳原子的直鏈或支鏈基團，優選含有1至12個碳原子的烷基，更優選含有1至10個碳原子的烷基，最優選含有1至6個或1至4個碳原子的烷基。非限制性實例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2,3-二甲基戊基、2,4-二甲基戊基、2,2-二甲基戊基、3,3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,3-二甲基己基、2,4-二甲基己基、2,5-二甲基己基、2,2-二甲基己基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己 基、2-甲基-3-乙基己基、2,2-二乙基戊基、正癸基、3,3-二乙基己基、2,2-二乙基己基，及其各種支鏈異構物等。更優選的是含有1至6個(例如1至4個)碳原子的低級烷基，非限制性實施例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基可以在任何可使用的連接點上被取代，所述取代基優選為一個或多個以下基團，其獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環烷基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、氧代基。
術語“取代烷基”指烷基中的氫被取代基團取代，除非文中另有說明，烷基的取代基可以是選自下組的一種或多種基團：-鹵素、-OR’、-NR’R”、-SR’、-SiR’R”R'''、-OC(O)R’、-C(O)R’、-CO2R’、-CONR’R”、-OC(O)NR’R”、-NR”C(O)R’、-NR’-C(O)NR”R'''、-NR”C(O)2R’、-NH-C(NH2)=NH、-NR’C(NH2)=NH、-NH-C(NH2)=NR’、-S(O)R’、-S(O)2R’、- S(O)2NR’R”、-NR’S(O)2R”、-CN和-NO2，取代基數量為1至(2m’+1)，其中m’為該基團中碳原子的總數，例如1、2、3、4、5或6。R’、R”和R'''各自地指代氫、C1-8烷基、芳基、由1-3個鹵素取代的芳基、由1-3個鹵素取代的C1-8烷基、C1-8烷氧基或C1-8硫代烷氧基、或未取代的芳基-C1-4烷基。R’和R”連接於同一個氮原子時，它們可與該氮原子一起形成3-，4-，5-，6-或7-員環。例如，-NR’R”包括1-吡咯烷基和4-嗎啉基。
術語“雜烷基”指烷基上的一個或多個碳被N、O或S取代形成的基團。
術語“環烷基”指飽和或部分不飽和的單環或多環環狀烴基，環烷基的環包含3至20個碳原子，優選包含3至12個碳原子，更優選包含3至10個碳原子，最優選包含3至8個碳原子。單環環烷基的非限制性實例包括環丙基、環丁基、環戊基、環戊烯基、環己基、環己烯基、環己二烯基、環庚基、環庚三烯基、環辛基等；多環環烷基包括螺環、稠環和橋環的環烷基。
術語“烷氧基”指-O-(烷基)和-O-(環烷基)，其中烷基或環烷基的定義如上所述。烷氧基的非限制性實例包括：甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、環丙氧基、環丁氧基、環戊氧基、環己氧基。烷氧基可以是任選取代的或非取代的，當被取代時，取代基優選為一個或多個以下基團，其獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷 氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環烷基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基。
術語“雜環”指飽和或部分不飽和的單環或多環環狀烴，其包含3至20個環原子，其中一個或多個(例如1、2、3或4個)環原子為選自氮、氧或S(O)m(其中m是0、1或2)的雜原子，其餘環原子為碳。優選包含3至12個環原子，其中1~4個是雜原子；更優選包含3至10個或3至8個環原子。單環雜環基的非限制性實例包括吡咯烷基、呱啶基、呱嗪基、嗎啉基、硫代嗎啉基、高呱嗪基等。多環雜環基包括螺環、稠環和橋環的雜環基。
術語“芳基”指具有共軛的π電子體系的6至14員全碳單環或稠合多環(即共享毗鄰碳原子對的環)基團，優選為6-10員，例如苯基。芳基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基可以為以下一個或多個基團，非限制性地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、氘原子、巰基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環烷基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基或雜環烷硫基。
術語“雜芳基”包括5-8員單環雜芳基和8-12員稠雜芳基。
術語“5-8員單環雜芳基”是指含有5-8個環原子(其中至少一個環原子為雜原子，例如氮原子、氧原子或硫原子)的具有芳香性的單環環狀基團。任選地，環狀結構中的環原子(例如碳原子、氮原子或硫原子)可以被氧代。“5-8員單環雜芳基”包括例如“5-7員單環雜芳基”、“5-6員單環雜芳基”、“5-6員單環含氮雜芳基”、“6員單環含氮雜芳基”等，所述的“含氮雜芳基”中的雜原子至少含有一個氮原子，例如，僅包含1個或2個氮原子，或者，包含一個氮原子和其他的1個或2個雜原子(例如氧原子和/或硫原子)，或者，包含2個氮原子和其他的1個或2個雜原子(例如氧原子和/或硫原子)。“5-8員單環雜芳基”的具體實例包括但不僅限於呋喃基、噻吩基、吡咯基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基、噁唑基、異噁唑基、噁二唑基、咪唑基、吡唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基、1,3,4-噁二唑基、吡啶基、2-吡啶酮基、4-吡啶酮基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基、1,2,3-三嗪基、1,3,5-三嗪基、1,2,4,5-四嗪基、氮雜環庚三烯基、1,3-二氮雜環庚三烯基、氮雜環辛四烯基等。
術語“8-12員稠雜芳基”是指由兩個或兩個以上環狀結構彼此共用兩個相鄰的原子所形成的、含有8-12個環原子(其中至少一個環原子為雜原子，例如氮原子、氧原子或硫原子)的、不飽和的具有芳香性的環狀結構。任選地，環狀結構中的環原子(例如碳原 子、氮原子或硫原子)可以被氧代。“8-12員稠雜芳基”包括“8-10員稠雜芳基”，“8-9員稠雜芳基”等；具體實例包括但不限於：吡咯并吡咯、吡咯并呋喃、吡唑并吡咯、吡唑并噻吩、呋喃并噻吩、吡唑并噁唑、苯并呋喃基、苯并異呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、異吲哚基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、吲唑基、苯并三唑基、喹啉基、2-喹啉酮基、4-喹啉酮基、1-異喹啉酮基、異喹啉基、吖啶基、菲啶基、苯并噠嗪基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、嘌呤基、萘啶基等。
術語“鹵代烷基”指被一個或多個鹵素取代的烷基，其中烷基如上所定義。
術語“氘代烷基”指被一個或多個氘原子取代的烷基，其中烷基如上所定義。
術語“羥基”指-OH基團。
術語“鹵素”指氟、氯、溴或碘。
術語“胺基”指-NH2。
術語“硝基”指-NO2。
術語“衍生物”是指具有與化合物相似的化學結構但還含有至少一個化合物中不存在的化學基團和/或缺少至少一個化合物中存在的化學基團的物質。衍生物所比較的化合物被稱為“母體” 化合物。通常，“衍生物”可在一個或多個化學反應步驟中由母體化合物產生。
術語“藥學上可接受的鹽”指的是，化合物(例如，藥物，連接子-藥物化合物或配體-藥物偶聯物)的藥學上可接受的有機或無機鹽。該化合物或偶聯物可含有至少一個胺基或羧基，並且因此可與相應的酸或鹼形成加成鹽。示例性的鹽包括但不限於：硫酸鹽、三氟乙酸鹽、檸檬酸鹽、乙酸鹽、草酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、酸性磷酸鹽、異煙酸鹽、乳酸鹽、水楊酸鹽、酸性檸檬酸鹽、酒石酸鹽、油酸鹽、單寧酸鹽、泛酸鹽、酒石酸氫鹽、抗壞血酸鹽、水楊酸鹽、甲酸鹽、苯甲酸鹽、麩胺酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽，鉀鹽、鈉鹽等。
術語“溶劑化物”指本發明中的連接子-藥物化合物或配體-藥物偶聯物與一種或多種溶劑分子形成的，溶劑分子包括但不限於水、乙醇、乙腈、異丙醇、DMSO、乙酸乙酯等。
術語“藥物組成物”是指含有一種或多種本發明所述化合物或其生理學上/可藥用的鹽或前體藥物與其它化學組分的混合物，以及其它組分例如生理學上/可藥用的載劑和/或賦形劑。藥物組成物的目的時促進對生物體的給藥，有利於活性成分的吸收進而發揮生物活性。
術語“載劑”是指能改變藥物進入人體的方式和在體內的分佈、控制藥物的釋放速度並將藥物輸送至標的的體系。藥物載體釋放和標靶系統能夠減少藥物降解及損失，降低副作用，提高生物利用度。
術語“賦形劑”是指在藥物製劑中除主藥以外的附加物或佐劑。如片劑中的黏合劑、填充劑、崩解劑、潤滑劑；半固體製劑軟膏劑、霜劑中的基質備份；液體製劑中的防腐劑、抗氧化劑、矯味劑、芳香劑、助溶劑、乳化劑、增透劑、滲透壓調節劑、著色劑等均可稱為賦形劑。
術語“稀釋劑”或“填充劑”，主要用於增加製劑的重量和/或體積。稀釋劑的加入不僅保證一定的體積大小，而且減少主要成分的劑量偏差，改善藥物的壓縮成型性等。
有益效果
本發明提供了一種帶有高穩定性親水連接單元的奧瑞他汀類藥物偶聯物，所述偶聯物透過帶有高穩定性親水連接單元的胺基甲基與羥基形成醚鍵引入linker，其能攜帶多個毒素，具有良好的血漿穩定性，良好的水溶性、均一性和安全性，能夠特異性地結合腫瘤細胞中高表現的受體，並在腫瘤細胞內釋放出毒素，具有良好的抗腫瘤活性，可用於預防或治療腫瘤等疾病。
圖1為化合物LP-1a的LC-MS譜圖。
圖2為VcMMAE的LC-MS譜圖。
圖3為ADC-1-1a的SEC-HPLC檢測結果。
圖4為ADC-2-1a的SEC-HPLC檢測結果。
圖5為ADC-1-2a的SEC-HPLC檢測結果。
圖6為ADC-2-2a的SEC-HPLC檢測結果。
圖7為被還原過後的抗體TR005的輕鏈質譜檢測結果。
圖8和圖9為被還原過後的ADC-2-1a的輕鏈質譜檢測結果。
具體實施方式
下面結合具體實施例，進一步闡述本發明，應理解，這些實施例只用於說明本發明，而不用於限制本發明的範圍。下列實施例中未註明具體條件的試驗方法，通常按照常規條件或按照製造廠商所建議的條件。除非另外說明，否則所有的百分數、比例、比率、或份數按重量計。除非另行定義，文中所使用的所有專業和科學用於與本領域熟練人員所熟悉的意義相同。此外，任何與所記載內容相似或均等的方法及材料皆可應用於本發明方法中。文中所述的較佳實施方法與材料僅作示範之用。
本發明下列實施例中採用的通用步驟是：
通用步驟A
偶聯製備ADC
將通過初步的純化後單體率大於95%的抗體分子，使用超濾離心管換液至含有EDTA的磷酸鹽緩衝液中，濃度10mg/mL。加入10倍於抗體莫耳分子數的TCEP，室溫下反應6h。打開抗體鏈間二硫鍵，並用Ellman方法測定游離巰基數，判斷二硫鍵是否全部打開。然後加入10倍於抗體莫耳分子數的payload，室溫下反應6h。反應結束後，使用截留分子量為30KDa的超濾離心管換液至PBS中，並去除未偶聯的payload得偶聯ADC(DAR=8)。
通用步驟B
定點偶聯製備ADC
將通過初步的純化後單體率大於95%的抗體分子，使用超濾離心管換液至含有EDTA的磷酸鹽緩衝液中，濃度10mg/mL。加入8倍於抗體莫耳分子數的TCEP，室溫下反應3h。使用超濾離心管換液至pH6.5的磷酸緩衝液中，再加入8倍於抗體莫耳分子數的DHAA(脫氫抗壞血酸)，室溫下反應3h。然後加入5倍於抗體莫耳分子數的payload，室溫下反應3h。反應結束後，使用截留分子量為30KDa的超濾離心管換液至PBS中，並去除未偶聯的payload得定點偶聯ADC(DAR=2)。
通用步驟C
反相高效液相層析(RP-HPLC)檢測DAR
配製RP-HPLC流動相
RP流動相A：0.1%TFA水溶液，RP流動相B：0.1%TFA乙腈溶液。
用樣品稀釋液將待測樣品及對應的抗體對照稀釋到1mg/mL，每98μl稀釋好的樣品中加入2μl DTT儲液，同時配製98μl樣品稀釋液加2μl DTT儲液的空白對照，各樣品混勻後，於65℃金屬浴中加熱30min。將處理後的樣品14000rpm離心5分鐘或者用0.22μm濾器過濾以去除樣品中大顆粒，並將內插管放於樣品瓶中蓋好蓋子。
將裝好樣品的樣品瓶放於樣品板上，按照《UPLC使用標準操作規程》設置各樣品對應的位置、樣品加載體積、樣品加載針數和樣品加載方法。層析管柱型號為Proteomix RP-1000(4.6*100mm,5μm)，Sepax。
檢測波長為214nm和280nm。樣品操作方法編輯如下：
通用步驟D
SEC檢測抗體單體率
配製SEC流動相50mM PB+300mM NaCl+200mM Arg，IPA=95：5，調節pH=6.5(各縮寫含義如下：PB：磷酸鹽緩衝溶液，Arg：精胺酸，IPA：異丙醇)。將樣品稀釋到濃度在1~2mg/ml範圍間，再將樣品用14000rpm離心5分鐘或者用0.22μm濾器過濾以去除樣品中大顆粒。將樣品瓶放於樣品板上，按照《UPLC使用標準操作規程》設置各樣品對應的位置、樣品加載體積、樣品加載針數和樣品加載方法。層析管柱型號為：XBridge BEH SEC，200A，1.7μm，4.6*150mm，Waters。
設定檢測波長為214nm和280nm，編輯樣品操作方法為：
通用步驟E
疏水性相互作用層析(HIC)測定
使用疏水相互作用層析(HIC)來進行對ADC的分析。通過0-100%流動相B(MPB)洗提，其中流動相A(MPA)由1.5M硫 酸銨和0.025M磷酸鈉組成，並且MPB由0.025M的磷酸鈉、25%異丙醇組成。樣品加載量約為20μg，梯度洗提在15分鐘完成。檢測波長為280nm，疏水性越強的樣品越晚出峰。
通用步驟F
血漿穩定性研究
取一定量的ADC樣品，加入到已去除IgG的人血漿中，每種ADC重複三管，放置37℃水浴中培育，分別培育0天、3天、7天和21天後，取出ADC樣品，每管加入ProteinA(MabSelectSuReTMLX Lot：#10257475GE)，取PBS洗滌過的100μl垂直混合儀晃動吸附2h，經過洗滌洗提步驟，獲得培育後的ADC。對培育特定時間的ADC樣品進行RP-HPLC檢測。判定樣品的血漿穩定性。
實施例1化合物1的合成
於50mL單口圓底燒瓶中依次加入化合物Auristatin E(826mg,1.128mmol,1.0eq)，ki-1(831.4mg,2.256mmol,2.0eq，合成方法參照CN111686259A中化合物1的合成)，醋酸鋅(414.2mg,5.64mmol,2.0eq)和甲苯(15mL)，置換氮氣3次，115℃迴流反應4h，停止反應，冷卻至室溫，過濾，濾液減壓濃縮， 反相製備管柱純化，凍乾得白色固體(605mg，51.55%)。LC-MS m/z(ES+)：[M+H]+：1041.3。
實施例2化合物3的合成
於10mL EP管中依次加入Z-Gly-Gly-Phe-OH(240mg,0.581mmol,1.0eq)，HATU(264mg,0.697mmol,1.2eq)，HOBt(94mg,0.697mmol,1.2eq)，和DMF(2mL)，室溫攪拌備用。
另取25mL單口圓底燒瓶中依次加入化合物1(605mg,0.581mmol,1.0eq)和DMF(8mL)，室溫攪拌溶解後，加入DBU(95.6μL,0.64mmol,1.1eq)，室溫反應0.5h，TLC監控，原料消失，產生化合物2，然後將上述混合液中加至此瓶中，再加入DIEA(96μL,0.581mmol,1.0eq)。室溫反應1h，HPLC監控。反應結束後，經反相製備管柱純化得白色固體產物(487mg，69.08%)。LC-MS m/z(ES+)：[M+H]+：1213.6。
實施例3化合物5的合成
於25mL單口圓底燒瓶中依次加入化合物3(487mg,0.402mmol,1.0eq),5%Pd/C(48.7mg)和DMF(5mL)，氫氣置換3次後，室溫反應1h，HPLC監控反應，原料消失，產生一新峰，為化合物4，記為反應液。
另取25mL單口瓶中加入ki-2(176mg,0.442mmol,1.1eq合成方法參照CN108452321A)，五氟苯酚(81mg,0.442mmol,1.1eq)，DCC(91mg,0.442mmol,1.1eq)和DMF(3mL)，室溫反應30min，TLC監控，反應結束得到ki-3，記為反應液。
然後把反應液過濾到新的25mL單口圓底燒瓶中，冰水浴下加入DIEA(73μL,0.442mmol,1.1eq)，的反應液濾液，加完後升至室溫反應1h，HPLC監控反應，將反應液過濾，濾液在冰浴攪拌下加入到含有化合物4的反應液中，然後加入，撤去冰浴，室溫反應1h，HPLC監控。反應液直接經反相製備純化， 製備液凍乾，得到白色固體產物(320mg，54.53%)。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：730.4。
實施例4 化合物LP-1a的合成
將化合物5(100mg,0.0685mmol,1.0eq)溶於10mL乾燥二氯甲烷，4mL TFA，室溫反應3h，HPLC監控。反應結束後，減壓濃縮除去溶劑，經反相製備管柱純化，凍乾製備液，得白色固體產物(21mg，29.78%)。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：652.4。LC-MS譜圖見圖1。
實施例5 化合物6的合成
100mL單口瓶中加入MMAE(2.0g,2.79mmol，1.0eq)，(Boc)2O(1.21g,5.57mmol，2.0eq)，DCM(20mL)溶清，冰水浴下加入TEA(563mg,5.57mmol，2.0eq)，加完後升至室溫反應72h，TLC監控，原料MMAE反應完。後處理：反應液減壓濃縮後，經管柱層析純化(洗提劑：DCM/MeOH=20/1)得到白色固體(2.28g，100%)。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：818.4。
實施例6 化合物7的合成
100mL單口瓶中依次加入化合物6(2.28g,2.79mmol，1.0eq)，ki-1(2.05g,5.57mmol，2.0eq)，醋酸鋅(1.02g,5.57mmol，2.0eq)，甲苯(30mL)溶解，N2置換3次後，N2保護下升至115℃反應4h，停止反應，冷卻至室溫，過濾，濾液減壓濃縮，反相製備管柱純化，製備液凍乾得到白色固體產物(1.071g，34%)。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1126.4。
實施例7化合物9的合成
於50mL單口瓶中加入化合物7(900mg,0.8mmol,1.0eq)和DMF(9mL)，攪拌溶清後，冰水浴下滴加DBU(134mg,0.88mmol,1.1eq)，加完後升至室溫反應30min。TLC監控，反應結束，記為反應液； 另取50mL單口瓶中加入Z-Gly-Gly-Phe-OH(364mg,0.88mmol,1.1eq)，HATU(365mg,0.96mmol,1.2eq),HOBt(129.7mg,0.96mmol,1.2eq)和DMF(7mL)溶清後，冰水浴下依次滴加反應液，DIEA(103.4mg,0.8mmol,1.0eq)，加完後升至室溫反應1h，HPLC監控反應。反應液經反相製備純化，製備液凍乾得到白色固體(960mg，92.4%)。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1299.6。
實施例8化合物11的合成
於50mL單口瓶中加入化合物10(960mg,0.74mmol,1.0eq),5%Pd/C(960mg)和DMF(10mL)，H2置換3次後，室溫反應1h，HPLC監控反應，記為反應液；另取25mL單口瓶中加入ki-2(322.7mg,0.81mmol,1.1eq)，DCC(167mg,0.81mmol,1.1eq)和DMF(5mL)溶清後，冰水浴下加入五氟苯酚(149mg,0.81mmol,1.1 eq)，加完後升至室溫反應30min，TLC監控反應，反應完，得到ki-3，記為反應液。
將反應液過濾至50mL單口瓶中，冰水浴下加入DIEA(105mg,0.81mmol,1.1eq)，的反應液濾液，加完後升至室溫反應1h，HPLC監控反應。反應液經反相製備純化，製備液凍乾，得到白色固體(895mg，78.5%)。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：773.4。
實施例9化合物LP-2a的合成
將化合物12(400mg,0.259mmol，1.0eq)溶於20mL乾燥二氯甲烷，8mL TFA，室溫反應3h，HPLC監控。反應結束後，減壓濃縮除去溶劑，粗產物經反相製備管柱純化，製備液凍乾，得到白色固體(248mg，74%)，LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：645.3。
實施例10VcMMAE的合成
於25mL圓底燒瓶中，加入MMAE(120mg，0.167mmol，1.0eq)和MC-VC-PAB-PNP(186mg，0.25mmol，1.5 eq)，用DMF(5mL)溶解後，依次加入HOBt(27.1mg,0.20mmol,1.2eq)和吡啶(1mL)，室溫下攪拌過夜，HPLC監控。反應結束後，粗產物經反相製備管柱純化，製備液凍乾，得到白色固體(158.3mg，72%)，LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：659.0。LC-MS譜圖見圖2。
實施例11化合物13的合成
參照實施例5的合成方法，以化合物12(參照專利CN106279352中化合物17的合成)為原料合成化合物13。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：873.6
實施例12 化合物14的合成
參照實施例6的合成方法，以化合物13和ki-1為原料合成化合物14。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1180.7。
實施例13化合物16的合成
參照實施例7的合成方法，以化合物14為原料合成化合物16。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1353.9。
實施例14化合物18的合成
參照實施例8的合成方法，以化合物16為原料合成化合物18。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1600.9。
實施例15 化合物LP-3a的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物18為原料合成化合物LP-3a。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1344.7。
實施例16化合物23的合成
參照實施例10的合成方法，以化合物12和MC-VC-PAB-PNP為原料合成化合物19。LC-MS m/z(ES+)：[M+H]+：1371.8。
實施例17化合物21的合成
參照實施例5的合成方法，以化合物20(參照專利US2017014524A1合成)為原料合成化合物21。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：933.6。
實施例18化合物22的合成
參照實施例6的合成方法，以化合物21和ki-1為原料合成化合物22。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1241.7。
實施例19化合物24的合成
參照實施例7的合成方法，以化合物22為原料合成化合物24。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1414.8。
實施例20化合物26的合成
參照實施例8的合成方法，以化合物24為原料合成化合物26。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1660.9。
實施例21化合物27(LP-3sa)的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物26為原料合成化合物27(LP-3sa)。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1304.7。
實施例22化合物29的合成
參照實施例5的合成方法，以化合物28(參照專利US2017014524A1合成)為原料合成化合物29。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：847.6。
實施例23化合物30的合成
參照實施例6的合成方法，以化合物29和ki-1為原料合成化合物30。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1155.7。
實施例24化合物32的合成
參照實施例7的合成方法，以化合物30為原料合成化合物32。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1328.8。
實施例25化合物34的合成
參照實施例8的合成方法，以化合物32為原料合成化合物34。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1574.9。
實施例26 化合物LP-4a的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物34為原料合成化合物LP-4a。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1318.7。
實施例27化合物36的合成
參照實施例5的合成方法，以化合物35(參照專利US20210346523A1合成)為原料合成化合物36。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：863.5。
實施例28化合物37的合成
參照實施例6的合成方法，以化合物36和ki-1為原料合成化合物37。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1171.7。
實施例29化合物39的合成
參照實施例7的合成方法，以化合物37為原料合成化合物39。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1344.7。
實施例30化合物41的合成
參照實施例8的合成方法，以化合物39為原料合成化合物41。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1590.9。
實施例31化合物LP-5a的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物41為原料合成化合物LP-5a。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1334.7。
實施例32化合物43的合成
參照實施例6的合成方法，以化合物42(參照專利US20210346523A1中化合物17的合成)和ki-1為原料合成化合物43。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1085.6。
實施例33化合物45的合成
參照實施例7的合成方法，以化合物43為原料合成化合物45。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1258.7。
實施例34化合物47的合成
參照實施例8的合成方法，以化合物45為原料合成化合物47。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1504.8。
實施例35化合物LP-6a的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物47為原料合成化合物LP-6a。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1348.7。
實施例36 化合物49的合成
參照實施例6的合成方法，以化合物48(參照專利CN106279352中化合物6的合成)和ki-1為原料合成化合物49。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1082.6。
實施例37化合物51的合成
參照實施例7的合成方法，以化合物49為原料合成化合物51。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1255.7。
實施例38化合物53的合成
參照實施例8的合成方法，以化合物51為原料合成化合物53。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1501.8。
實施例39化合物LP-7a的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物53為原料合成化合物LP-7a。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1345.7。
實施例40化合物63的合成
參照實施例5的合成方法，以化合物54(參照專利CN113121639A中化合物1的合成)為原料合成化合物55。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：830.6。
實施例41化合物56的合成
參照實施例6的合成方法，以化合物55和ki-1為原料合成化合物56。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1138.7。
實施例42化合物58的合成
參照實施例7的合成方法，以化合物56為原料合成化合物58。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1311.8。
實施例43化合物60的合成
參照實施例8的合成方法，以化合物58為原料合成化合物60。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1557.9。
實施例44化合物LP-8a的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物60為原料合成化合物LP-8a。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1301.7。
實施例45化合物62的合成
參照實施例6的合成方法，以化合物61(參照專利CN113121639A中化合物1的合成)和ki-1為原料合成化合物62。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1052.6。
實施例46化合物63的合成
參照實施例7的合成方法，以化合物61為原料合成化合物63。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1225.7。
實施例47化合物65的合成
參照實施例8的合成方法，以化合物63為原料合成化合物65。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1471.8。
實施例48 化合物LP-9a的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物65為原料合成化合物LP-9a。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1315.7。
實施例49 化合物66的合成
於50mL單口瓶中加入化合物9(960mg,0.74mmol,1.0eq),5%Pd/C(960mg)和DMF(10mL)，H2置換3次後，室溫反應1h，HPLC監控反應，反應完成，記為反應液；將反應液過濾至50mL單口瓶中，冰水浴下依次加入MCOSU(274mg,0.89mmol,1.2eq)和DIEA(105mg,0.81mmol,1.1eq)，加完後升至室溫反應1h，HPLC監控反應。反應液經反相製備純化，製備液凍乾，得到白色固體(847.5mg，84.3%)。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1358.2。
實施例50化合物LP-10的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物66為原料合成化合物LP-10。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：630.0。
實施例51化合物LP-11的合成
參照實施例49的合成方法，以化合物3為原料合成化合物LP-11。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1272.8。
實施例52化合物67的合成
參照實施例49的合成方法，以化合物28為原料合成化合物67。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1473.9。
實施例53化合物LP-12的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物67為原料合成化合物LP-12。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1273.8。
實施例54化合物68的合成
參照實施例49的合成方法，以化合物36為原料合成化合物68。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1387.8。
實施例55化合物LP-13的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物68為原料合成化合物LP-13。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1287.8。
實施例56化合物69的合成
參照實施例49的合成方法，以化合物39為原料合成化合物69。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1403.8。
實施例57 化合物LP-14的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物69為原料合成化合物LP-14。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1303.7。
實施例58化合物LP-15的合成
參照實施例49的合成方法，以化合物45為原料合成化合物LP-15。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1403.8。
實施例59化合物LP-16的合成
參照實施例49的合成方法，以化合物51為原料合成化合物LP-16。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1314.8。
實施例60化合物70的合成
參照實施例49的合成方法，以化合物58為原料合成化合物70。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1370.8。
實施例61化合物LP-17的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物70為原料合成化合物LP-17。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1270.8。
實施例62化合物LP-18的合成
參照實施例49的合成方法，以化合物63為原料合成化合物LP-18。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：12848。
實施例63化合物71的合成
於50mL單口瓶中加入化合物9(960mg,0.74mmol,1.0eq),5%Pd/C(960mg)和DMF(10mL)，H2置換3次後，室溫反應1h，HPLC監控反應，反應完成，記為反應液；將反應液過濾至50mL單口瓶中，冰水浴下依次加入化合物M6 (512.5mg,0.74mmol,1.0eq，化合物M6參照CN113827736中化合物M6的合成)和DIEA(105mg,0.81mmol,1.1eq)，加完後升至室溫反應1h，HPLC監控反應。反應液經反相製備純化，製備液凍乾，得到白色固體(860mg，70%)。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1660.1。
實施例64化合物LP-19a的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物71為原料合成化合物LP-19a。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：674.4。
實施例65化合物72的合成
參照實施例63的合成方法，以化合物3為原料合成化合物72。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：783.5。
實施例66化合物LP-20a的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物72為原料合成化合物LP-20a。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：681.4。
實施例67化合物73的合成
參照實施例63的合成方法，以化合物24為原料合成化合物73。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：888.5。
實施例68化合物LP-21a的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物73為原料合成化合物LP-21a。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1362.7。
實施例69化合物74的合成
參照實施例63的合成方法，以化合物32為原料合成化合物74。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：845.1。
實施例70化合物LP-22a的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物74為原料合成化合物LP-22a。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1376.8。
實施例71化合物75的合成
參照實施例63的合成方法，以化合物39為原料合成化合物75。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：853.1。
實施例72化合物LP-23a的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物75為原料合成化合物LP-23a。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1392.7。
實施例73化合物76的合成
參照實施例63的合成方法，以化合物45為原料合成化合物76。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：810.1。
實施例74化合物LP-24a的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物76為原料合成化合物LP-24a。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1406.8。
實施例75化合物77的合成
參照實施例63的合成方法，以化合物51為原料合成化合物77。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：808.5。
實施例76化合物LP-25a的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物77為原料合成化合物LP-25a。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1403.8。
實施例77化合物78的合成
參照實施例63的合成方法，以化合物58為原料合成化合物78。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：836.5。
實施例78化合物LP-26a的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物78為原料合成化合物LP-26a。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1359.7。
實施例79化合物79的合成
參照實施例63的合成方法，以化合物63為原料合成化合物79。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：793.5。
實施例80化合物LP-27a的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物79為原料合成化合物LP-27a。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1373.8。
實施例81化合物80的合成
於50mL單口瓶中加入化合物9(960mg,0.74mmol,1.0eq),5%Pd/C(960mg)和DMF(10mL)，H2置換3次後，室溫反應1h，HPLC監控反應，反應完成，記為反應液；將反應液過濾至50mL單口瓶中，冰水浴下依次加入化合物M8(497.7mg,0.74mmol,1.0eq，化合物M8參照CN113827736中化合物M8的合成)和DIEA(105mg,0.81mmol,1.1eq)，加完後升至室溫反應1h，HPLC監控反應。反應液經反相製備純化， 製備液凍乾，得到白色固體(918mg，75%)。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：827.5。
實施例82化合物LP-28a的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物80為原料合成化合物LP-28a。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：671.4。
實施例83化合物81的合成
參照實施例81的合成方法，以化合物3為原料合成化合物81。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：784.5。
實施例84化合物LP-29a的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物81為原料合成化合物LP-29a。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：678.4。
實施例85化合物82的合成
參照實施例81的合成方法，以化合物24為原料合成化合物82。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：885.0。
實施例86化合物LP-30a的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物82為原料合成化合物LP-30a。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：678.9。
實施例87化合物83的合成
參照實施例81的合成方法，以化合物32為原料合成化合物83。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：842.0。
實施例88化合物LP-31a的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物83為原料合成化合物LP-31a。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：685.9。
實施例89化合物84的合成
參照實施例81的合成方法，以化合物39為原料合成化合物84。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：850.1。
實施例90化合物LP-32a的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物84為原料合成化合物LP-32a。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：693.9。
實施例91化合物85的合成
參照實施例81的合成方法，以化合物45為原料合成化合物85。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：806.9。
實施例92化合物LP-33a的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物85為原料合成化合物LP-33a。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：700.9。
實施例93化合物86的合成
參照實施例81的合成方法，以化合物51為原料合成化合物86。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：805.5。
實施例94化合物LP-34a的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物86為原料合成化合物LP-34a。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：699.4。
實施例95化合物87的合成
參照實施例81的合成方法，以化合物58為原料合成化合物87。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：833.5。
實施例96化合物LP-35a的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物87為原料合成化合物LP-35a。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：677.4。
實施例97化合物88的合成
參照實施例81的合成方法，以化合物63為原料合成化合物88。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：790.5。
實施例98化合物LP-36a的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物88為原料合成化合物LP-36a。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：670.4。
實施例99 化合物89的合成
參照實施例49的合成方法，以化合物16為原料合成化合物89。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：707.4。
實施例100化合物LP-37的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物89為原料合成化合物LP-37。LC-MSm/z(ES+)：[M+H]+：1313.8。
實施例101化合物90的合成
參照實施例63的合成方法，以化合物16為原料合成化合物90。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：858.0。
實施例102化合物LP-38a的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物90為原料合成化合物LP-38a。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：701.9。
實施例103化合物91的合成
參照實施例81的合成方法，以化合物16為原料合成化合物91。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：855.0。
實施例104化合物LP-39a的合成
參照實施例9的合成方法，以化合物91為原料合成化合物LP-39a。LC-MSm/z(ES+)：[M/2+H]+：698.9。
實施例105抗體藥物偶聯物ADC-1-1a的製備
ADC-1-1a的製備是相應的linker-payload(LP-1a，其結構如LP-1的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到，TR000的序列資訊見表1。SEC-HPLC檢測結果見圖3。
實施例106 抗體藥物偶聯物ADC-2-1a的製備
ADC-2-1a的製備是相應的linker-payload(LP-2a，其結構如LP-2的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。SEC-HPLC檢測結果見圖4。
實施例107抗體藥物偶聯物ADC-C-1a的製備
ADC-C-1a的製備是化合物VcMMAE按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例108 抗體藥物偶聯物ADC-3-1a的製備
ADC-3-1a的製備是相應的linker-payload(LP-10)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例109抗體藥物偶聯物ADC-4-1a的製備
ADC-4-1a的製備是相應的linker-payload(LP-37)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例110抗體藥物偶聯物ADC-5-1a的製備
ADC-5-1a的製備是相應的linker-payload(LP-16)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例111抗體藥物偶聯物ADC-6-1a的製備
ADC-6-1a的製備是相應的linker-payload(LP-11)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例112抗體藥物偶聯物ADC-7-1a的製備
ADC-7-1a的製備是相應的linker-payload(LP-12)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例113抗體藥物偶聯物ADC-8-1a的製備
ADC-8-1a的製備是相應的linker-payload(LP-13)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例114抗體藥物偶聯物ADC-9-1a的製備
ADC-9-1a的製備是相應的linker-payload(LP-14)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例115抗體藥物偶聯物ADC-10-1a的製備
ADC-10-1a的製備是相應的linker-payload(LP-15)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例116抗體藥物偶聯物ADC-11-1a的製備
ADC-11-1a的製備是相應的linker-payload(LP-17)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例117抗體藥物偶聯物ADC-12-1a的製備
ADC-12-1a的製備是相應的linker-payload(LP-18)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例118抗體藥物偶聯物ADC-13-1a的製備
ADC-13-1a的製備是相應的linker-payload(LP-3a，其結構如LP-3的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例119抗體藥物偶聯物ADC-14-1a的製備
ADC-14-1a的製備是相應的linker-payload(LP-7a，其結構如LP-7的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例120抗體藥物偶聯物ADC-15-1a的製備
ADC-15-1a的製備是相應的linker-payload(LP-3sa，其結構如LP-3s的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例121抗體藥物偶聯物ADC-16-1a的製備
ADC-16-1a的製備是相應的linker-payload(LP-4a，其結構如LP-4的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例122抗體藥物偶聯物ADC-17-1a的製備
ADC-17-1a的製備是相應的linker-payload(LP-5a，其結構如LP-5的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例123抗體藥物偶聯物ADC-18-1a的製備
ADC-18-1a的製備是相應的linker-payload(LP-6a，其結構如LP-6的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例124抗體藥物偶聯物ADC-19-1a的製備
ADC-19-1a的製備是相應的linker-payload(LP-8a，其結構如LP-8的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例125抗體藥物偶聯物ADC-20-1a的製備
ADC-20-1a的製備是相應的linker-payload(LP-9a，其結構如LP-9的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例126抗體藥物偶聯物ADC-21-1a的製備
ADC-21-1a的製備是相應的linker-payload(LP-28a，其結構如LP-28的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例127抗體藥物偶聯物ADC-22-1a的製備
ADC-22-1a的製備是相應的linker-payload(LP-29a，其結構如LP-29的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例128抗體藥物偶聯物ADC-23-1a的製備
ADC-23-1a的製備是相應的linker-payload(LP-30a，其結構如LP-30的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例129抗體藥物偶聯物ADC-24-1a的製備
ADC-24-1a的製備是相應的linker-payload(LP-31a，其結構如LP-31的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例130抗體藥物偶聯物ADC-25-1a的製備
ADC-25-1a的製備是相應的linker-payload(LP-32a，其結構如LP-32的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例131抗體藥物偶聯物ADC-26-1a的製備
ADC-26-1a的製備是相應的linker-payload(LP-33a，其結構如LP-33的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例132抗體藥物偶聯物ADC-27-1a的製備
ADC-27-1a的製備是相應的linker-payload(LP-35a，其結構如LP-35的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例133抗體藥物偶聯物ADC-28-1a的製備
ADC-28-1a的製備是相應的linker-payload(LP-36a，其結構如LP-36的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例134抗體藥物偶聯物ADC-29-1a的製備
ADC-29-1a的製備是相應的linker-payload(LP-39a，其結構如LP-39的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例135抗體藥物偶聯物ADC-30-1a的製備
ADC-30-1a的製備是相應的linker-payload(LP-34a，其結構如LP-34的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例136抗體藥物偶聯物ADC-31-1a的製備
ADC-31-1a的製備是相應的linker-payload(LP-19a，其結構如LP-19的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例137抗體藥物偶聯物ADC-35-1a的製備
ADC-35-1a的製備是相應的linker-payload(LP-22a，其結構如LP-22的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例138抗體藥物偶聯物ADC-39-1a的製備
ADC-39-1a的製備是相應的linker-payload(LP-26a，其結構如LP-26的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例139抗體藥物偶聯物ADC-45-1a的製備
ADC-45-1a的製備是相應的linker-payload(LP-20a，其結構如LP-20的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例140抗體藥物偶聯物ADC-48-1a的製備
ADC-48-1a的製備是相應的linker-payload(LP-27a，其結構如LP-27的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體TR000製備得到。
實施例141抗體藥物偶聯物ADC-1-2a的製備
ADC-1-2a的製備是相應的linker-payload(LP-1a，其結構如LP-1的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到，TR005的序列資訊見表1。SEC-HPLC檢測結果見圖5。
實施例142 抗體藥物偶聯物ADC-2-2a的製備
ADC-2-2a的製備是相應的linker-payload(LP-2a，其結構如LP-2的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。SEC-HPLC檢測結果見圖6。
實施例143抗體藥物偶聯物ADC-C-2a的製備
ADC-C-2a的製備是化合物VcMMAE按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例144 抗體藥物偶聯物ADC-3-2a的製備
ADC-3-2a的製備是相應的linker-payload(LP-10)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例145抗體藥物偶聯物ADC-4-2a的製備
ADC-4-2a的製備是相應的linker-payload(LP-37)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例146抗體藥物偶聯物ADC-5-2a的製備
ADC-5-2a的製備是相應的linker-payload(LP-16)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例147抗體藥物偶聯物ADC-6-2a的製備
ADC-6-2a的製備是相應的linker-payload(LP-11)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例148抗體藥物偶聯物ADC-7-2a的製備
ADC-7-2a的製備是相應的linker-payload(LP-12)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例149抗體藥物偶聯物ADC-8-2a的製備
ADC-8-2a的製備是相應的linker-payload(LP-13)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例150抗體藥物偶聯物ADC-9-2a的製備
ADC-9-2a的製備是相應的linker-payload(LP-14)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例151抗體藥物偶聯物ADC-10-2a的製備
ADC-10-2a的製備是相應的linker-payload(LP-15)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例152抗體藥物偶聯物ADC-11-2a的製備
ADC-11-2a的製備是相應的linker-payload(LP-17)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例153抗體藥物偶聯物ADC-12-2a的製備
ADC-12-2a的製備是相應的linker-payload(LP-18)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例154抗體藥物偶聯物ADC-13-2a的製備
ADC-13-2a的製備是相應的linker-payload(LP-3a，其結構如LP-3的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例155抗體藥物偶聯物ADC-14-2a的製備
ADC-14-2a的製備是相應的linker-payload(LP-7a，其結構如LP-7的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例156抗體藥物偶聯物ADC-15-2a的製備
ADC-15-2a的製備是相應的linker-payload(LP-3sa，其結構如LP-3s的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例157抗體藥物偶聯物ADC-16-2a的製備
ADC-16-2a的製備是相應的linker-payload(LP-4a，其結構如LP-4的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例158抗體藥物偶聯物ADC-17-2a的製備
ADC-17-2a的製備是相應的linker-payload(LP-5a，其結構如LP-5的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例159抗體藥物偶聯物ADC-18-2a的製備
ADC-18-2a的製備是相應的linker-payload(LP-6a，其結構如LP-6的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例160抗體藥物偶聯物ADC-19-2a的製備
ADC-19-2a的製備是相應的linker-payload(LP-8a，其結構如LP-8的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例161抗體藥物偶聯物ADC-20-2a的製備
ADC-20-2a的製備是相應的linker-payload(LP-9a，其結構如LP-9的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例162抗體藥物偶聯物ADC-21-2a的製備
ADC-21-2a的製備是相應的linker-payload(LP-28a，其結構如LP-28的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例163抗體藥物偶聯物ADC-22-2a的製備
ADC-22-2a的製備是相應的linker-payload(LP-29a，其結構如LP-29的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例164抗體藥物偶聯物ADC-23-2a的製備
ADC-23-2a的製備是相應的linker-payload(LP-30a，其結構如LP-30的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例165抗體藥物偶聯物ADC-24-2a的製備
ADC-24-2a的製備是相應的linker-payload(LP-31a，其結構如LP-31的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例166抗體藥物偶聯物ADC-25-2a的製備
ADC-25-2a的製備是相應的linker-payload(LP-32a，其結構如LP-32的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例167抗體藥物偶聯物ADC-26-2a的製備
ADC-26-2a的製備是相應的linker-payload(LP-33a，其結構如LP-33的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例168抗體藥物偶聯物ADC-27-2a的製備
ADC-27-2a的製備是相應的linker-payload(LP-35a，其結構如LP-35的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例169抗體藥物偶聯物ADC-28-2a的製備
ADC-28-2a的製備是相應的linker-payload(LP-36a，其結構如LP-36的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例170抗體藥物偶聯物ADC-29-2a的製備
ADC-29-2a的製備是相應的linker-payload(LP-39a，其結構如LP-39的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例171抗體藥物偶聯物ADC-30-2a的製備
ADC-30-2a的製備是相應的linker-payload(LP-34a，其結構如LP-34的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例172抗體藥物偶聯物ADC-31-2a的製備
ADC-31-2a的製備是相應的linker-payload(LP-19a，其結構如LP-19的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例173抗體藥物偶聯物ADC-35-2a的製備
ADC-35-2a的製備是相應的linker-payload(LP-22a，其結構如LP-22的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例174抗體藥物偶聯物ADC-39-2a的製備
ADC-39-2a的製備是相應的linker-payload(LP-26a，其結構如LP-26的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例175抗體藥物偶聯物ADC-45-2a的製備
ADC-45-2a的製備是相應的linker-payload(LP-20a，其結構如LP-20的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例176抗體藥物偶聯物ADC-48-2a的製備
ADC-48-2a的製備是相應的linker-payload(LP-27a，其結構如LP-27的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟B的方法與抗Trop2抗體TR005製備得到。
實施例177抗體藥物偶聯物ADC-1-3a的製備
ADC-1-3a的製備是相應的linker-payload(LP-1a，其結構如LP-1的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到，hu7F11的序列資訊見表2。
實施例178 抗體藥物偶聯物ADC-2-3a的製備
ADC-2-3a的製備是是相應的linker-payload(LP-2a，其結構如LP-2的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例179抗體藥物偶聯物ADC-C-3a的製備
ADC-C-3a的製備是化合物VcMMAE按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例180抗體藥物偶聯物ADC-3-3a的製備
ADC-3-3a的製備是相應的linker-payload(LP-10)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例181抗體藥物偶聯物ADC-4-3a的製備
ADC-4-3a的製備是相應的linker-payload(LP-37)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例182抗體藥物偶聯物ADC-5-3a的製備
ADC-5-3a的製備是相應的linker-payload(LP-16)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例183抗體藥物偶聯物ADC-6-3a的製備
ADC-6-3a的製備是相應的linker-payload(LP-11)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例184抗體藥物偶聯物ADC-7-3a的製備
ADC-7-3a的製備是相應的linker-payload(LP-12)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例185抗體藥物偶聯物ADC-8-3a的製備
ADC-8-3a的製備是相應的linker-payload(LP-13)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例186抗體藥物偶聯物ADC-9-3a的製備
ADC-9-3a的製備是相應的linker-payload(LP-14)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例187抗體藥物偶聯物ADC-10-3a的製備
ADC-10-3a的製備是相應的linker-payload(LP-15)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例188抗體藥物偶聯物ADC-11-3a的製備
ADC-11-3a的製備是相應的linker-payload(LP-17)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例189抗體藥物偶聯物ADC-12-3a的製備
ADC-12-3a的製備是相應的linker-payload(LP-18)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例190抗體藥物偶聯物ADC-13-3a的製備
ADC-13-3a的製備是相應的linker-payload(LP-3a，其結構如LP-3的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例191抗體藥物偶聯物ADC-14-3a的製備
ADC-14-3a的製備是相應的linker-payload(LP-7a，其結構如LP-7的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例192抗體藥物偶聯物ADC-15-3a的製備
ADC-15-3a的製備是相應的linker-payload(LP-3sa，其結構如LP-3s的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例193抗體藥物偶聯物ADC-16-3a的製備
ADC-16-3a的製備是相應的linker-payload(LP-4a，其結構如LP-4的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例194抗體藥物偶聯物ADC-17-3a的製備
ADC-17-3a的製備是相應的linker-payload(LP-5a，其結構如LP-5的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例195抗體藥物偶聯物ADC-18-3a的製備
ADC-18-3a的製備是相應的linker-payload(LP-6a，其結構如LP-6的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例196抗體藥物偶聯物ADC-19-3a的製備
ADC-19-3a的製備是相應的linker-payload(LP-8a，其結構如LP-8的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例197抗體藥物偶聯物ADC-20-3a的製備
ADC-20-3a的製備是相應的linker-payload(LP-9a，其結構如LP-9的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例198抗體藥物偶聯物ADC-21-3a的製備
ADC-21-3a的製備是相應的linker-payload(LP-28a，其結構如LP-28的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例199抗體藥物偶聯物ADC-22-3a的製備
ADC-22-3a的製備是相應的linker-payload(LP-29a，其結構如LP-29的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例200抗體藥物偶聯物ADC-23-3a的製備
ADC-23-3a的製備是相應的linker-payload(LP-30a，其結構如LP-30的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例201抗體藥物偶聯物ADC-24-3a的製備
ADC-24-3a的製備是相應的linker-payload(LP-31a，其結構如LP-31的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例202抗體藥物偶聯物ADC-25-3a的製備
ADC-25-3a的製備是相應的linker-payload(LP-32a，其結構如LP-32的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例203抗體藥物偶聯物ADC-26-3a的製備
ADC-26-3a的製備是相應的linker-payload(LP-33a，其結構如LP-33的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例204抗體藥物偶聯物ADC-27-3a的製備
ADC-27-3a的製備是相應的linker-payload(LP-35a，其結構如LP-35的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例205抗體藥物偶聯物ADC-28-3a的製備
ADC-28-3a的製備是相應的linker-payload(LP-36a，其結構如LP-36的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例206抗體藥物偶聯物ADC-29-3a的製備
ADC-29-3a的製備是相應的linker-payload(LP-39a，其結構如LP-39的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例207抗體藥物偶聯物ADC-30-3a的製備
ADC-30-3a的製備是相應的linker-payload(LP-34a，其結構如LP-34的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例208抗體藥物偶聯物ADC-31-3a的製備
ADC-31-3a的製備是相應的linker-payload(LP-19a，其結構如LP-19的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例209抗體藥物偶聯物ADC-35-3a的製備
ADC-35-3a的製備是相應的linker-payload(LP-22a，其結構如LP-22的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例210抗體藥物偶聯物ADC-39-3a的製備
ADC-39-3a的製備是相應的linker-payload(LP-26a，其結構如LP-26的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例211抗體藥物偶聯物ADC-45-3a的製備
ADC-45-3a的製備是相應的linker-payload(LP-20a，其結構如LP-20的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例212抗體藥物偶聯物ADC-48-3a的製備
ADC-48-3a的製備是相應的linker-payload(LP-27a，其結構如LP-27的結構式所示，其中，2位掌性碳的構型為S型)按照通用步驟A的方法與抗Trop2抗體hu7F11製備得到。
實施例213反相高效液相層析(RP-HPLC)檢測ADC的DAR
經通用步驟C的反相高效液相層析測定，相應ADC的平均藥物/抗體比DAR如下表2所示，對於ADC-C-1a、ADC-C-2a、ADC-C-3a，其DAR=n，除此之外的其餘ADC，DAR=n1+n2+n3。
實施例214 SEC檢測ADC單體率
透過通用步驟D可得出各ADC的聚集程度，SEC-HPLC峰圖見圖3-圖6，數據總結如下表所示，ADC-1-1a、ADC-2-1a、ADC-1-2a和ADC-2-2a的單體率均大於95%，聚集和降解程度低。
實施例215疏水性相互作用層析(HIC)測定
按照通用步驟A將IgG1抗體全部還原到每抗體8硫醇後，透過疏水作用層析對每抗體8個藥物的從羥基引入酸性穩定接頭的ADC(ADC-1-1a和ADC-2-1a)和傳統接頭ADC-C-1a(即MC-VC-PAB-MMAE)進行進一步分離純化，並按照通用步驟E，用疏水性相互作用層析HIC對ADC分析。具有更大疏水性，或更大數量的藥物/分子的ADC在更晚的保留時間洗提。實驗結果如下表所示，從羥基引入酸性穩定接頭的ADC-1-1a和ADC-2-1a在HIC中具有相對較短的保留時間，而從胺基引入MC-VC-PAB接頭的ADC-C-1a具有最長的保留時間。實驗結果表明，從羥基引入酸性穩定接頭的ADC-1-1a和ADC-2-1a具有更好的親水性。
實施例216體外血漿穩定性
按通用步驟F進行ADC的血漿穩定性研究，結果如下表所示，實驗結果表明，在毒素的羥基上引入酸性穩定接頭的ADC在血漿培育過程中幾乎沒有損失藥物，而經典的MC接頭ADC(ADC- C-1a)在培育72h後DAR降低非常顯著。實驗結果證明，在毒素的羥基上引入酸性穩定接頭可顯著提高ADC藥物血漿穩定性。
實施例217 ADC的水解分析
採用超高效液相串聯高分辨質譜儀(UPLC-MS)對ADC-2-1a進行輕重鏈分子量檢測，根據輕重鏈分子量的變化情況來對ADC-2-1a的水解情況進行表徵。
樣品準備：取ADC-2-1a 100μg，按照每50μg蛋白加入1M DTT溶液4μL的比例分別加入1M DTT 2μL，混勻並短暫離心(10~20s)後於室溫下放置20min，即得。
儀器：WatesAcquity UPLC H-Class，Wates Xevo G2-XS QTof with UNIFI；層析管柱：Sepax RP-1000,4.6*100mm,5μm 1000Å
柱溫：60℃
RP流動相A：0.05%TFA水溶液，RP流動相B：0.05%TFA乙腈溶液
檢測波長280nm，樣品操作方法編輯如下：
樣品加載量：1mg/mL，10μL，即20μg；質譜掃描設置：低質量端(m/z)：500；高質量端(m/z)：4000；檢測範圍：1000-3500Da；輸出範圍：20000-120000Da。
圖7為被還原過後的抗體的輕鏈質譜檢測結果，圖8和圖9為被還原過後的ADC-2-1a的輕鏈質譜檢測結果。可知抗體TR000輕鏈(LC)的分子量為23372.7721Da。由於化合物13的分子量為1289.5400Da，其開環水解產物的分子量為1307.5550Da。故當一個抗體連接8個藥物時，其一條輕鏈偶聯1個化合物，在未發生水解的情況下，其理論分子量為24662.3121Da。如圖8和圖9所示，實際檢測到ADC的輕鏈的分子量包括24663.0000Da、 24680.0000Da，其中24680.0000Da與理論分子量相差17.6879Da。當ADC的輕鏈發生水解且水解1個馬來醯亞胺時，其理論分子量為24680.3271Da，與實測值比，相對偏差在儀器的誤差範圍內，推測ADC-2-1a發生了部分水解，導致分子量增加了近18Da。由此可知，ADC中的馬來醯亞胺基團既有開環形式，又有閉環形式。
實施例218 ADC抗腫瘤細胞活性測試
DMEM培養基、RMPI1640培養基購自源培生物、胎牛血清購自ExCellBio公司。人皮膚鱗癌細胞系A431(Trop2陽性表現細胞)、人原位胰腺腺癌細胞系BxPC-3(Trop2陽性表現細胞)、人胃癌細胞系NCI-N87(Trop2陽性表現細胞)和人結腸癌細胞系SW620(陰性對照細胞)均購於ATCC(American type culture collection)，並採用文獻推薦的方法進行培養，所用測試ADC為ADC-1-1a、ADC-2-1a、ADC-C-1a、ADC-1-2a、ADC-2-2a、ADC-C-2a。CellTiter 96® AQueous One Solution Cell Proliferation Assay購買自Promega。
取對數生長期的人皮膚鱗癌細胞系A431、人原位胰腺腺癌細胞系BxPC-3、人胃癌細胞系NCI-N87和人結腸癌細胞系SW620。接種一定數目的腫瘤細胞系於96孔盤中，向細胞中加入梯度稀釋的受試抗體及對應的ADC藥物，處理5天，利用MTS檢測細胞活力，透過計算IC50評價受試抗體及ADC對腫瘤細胞系的抑制效 果。ADC藥物起始濃度為500nM，稀釋倍數為7倍，共8個濃度點，處理5天。最終算法按照存活率=(實驗組-空白)/(對照組-空白組)×100%，隨後利用Graph Pad Prism擬合曲線，計算半數抑制濃度(IC50)。
P<0.05，差異具有統計學意義。
經過以上ADC細胞活性測試，本發明所述的ADC藥物，在多個Trop2陽性腫瘤細胞系中均表現出良好的抗腫瘤活性，具有極大的臨床應用價值。
實施例56 ADC體內藥效測試
本發明中建立了A431荷瘤小鼠模型，以評價ADC的體內藥效。以3×106 A431細胞透過皮下注射到4~6周鼠齡的BALB/c裸鼠右側，待小鼠腫瘤平均大小生長至140~150mm3，隨機分組，每組5隻，在第0,7,14,21天分別給予空白對照(緩衝溶液空白)、抗體藥物偶聯物ADC-1-1a、ADC-2-1a、ADC-C-1a、ADC-1-2a、ADC-2-2a和ADC-C-2a，均以2mg/kg劑量進行靜脈 給藥。腫瘤體積測量數據顯示為測量時腫瘤平均體積，同時記錄小鼠體重變化情況，用以觀察ADC藥物的體內初步毒性。結果如下表所示，由表可知，在payload相同的情況下，高DAR的ADC-1-1a、ADC-2-1a和ADC-C-1a相比其低DAR的ADC-1-2a、ADC-2-2a和ADC-C-2a具有更強的腫瘤抑制效果，其中ADC-2-1a的腫瘤抑制效果最強。而在DAR基本相同的情況下，從羥基引入酸性穩定接頭的ADC-1-1a和ADC-2-1a相比使用MC-VC-PAB接頭的ADC-C-1a具有更強的腫瘤抑制效果。另一方面，可以看到，所有給藥組小鼠的體重均無明顯變化，這說明ADC-1-1a、ADC-2-1a、ADC-C-1a、ADC-1-2a、ADC-2-2a和ADC-C-2a均無明顯毒性。
上述結果表明，從羥基引入酸性穩定接頭的ADC相比使用MC-VC-PAB接頭的ADC具有更好的體內抗腫瘤活性，使用更低的劑量即可達到同等腫瘤抑制效果。由於本發明的ADC以較低的使用劑量即可達到良好的抗腫瘤效果，並且具有改善的血液穩定性，因此血液毒性和神經毒性更低。
可以理解的是，以上關於本發明的具體描述，僅用於說明本發明而並非受限於本發明實施例所描述的技術方案，本領域的普通技術人員應當可以理解，仍然可以對本發明進行修改或等同替換，以達到相同的技術效果；上述修改或等同替換都在本發明的保護範圍之內。
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Claims (44)

  1. 一種配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，所述配體‑藥物偶聯物具有式Ia所示的結構：其中：Ab為配體單元，選自抗體、抗體片段，Z選自-C1-C10伸烷基-或，其中X選自-C1-C10伸烷基-；Y為親水結構，選自羧基、磷酸、聚磷酸、亞磷酸、磺酸、亞磺酸或聚乙二醇(PEG)；所述-C1-C10伸烷基-任選地被一個或者多個取代基所取代，所述取代基選自氘原子、鹵素、羥基、氰基、硝基、胺基、-C1-C6烷基、-C1-C6雜烷基、-C1-C6烷氧基、羧基；中的左側波浪線表示到馬來醯亞胺上N的連接位址，右側波浪線表示到羰基的連接位址；q選自1-8之間的整數；A選自由2‑7個胺基酸構成的胜肽殘基；其中，任選地，所述胺基酸各自獨立地被一個或多個取代基所取代，所述取代基選自：氘原子、鹵素、羥基、氰基、硝基、-C1-C6烷基、-C1-C6烷氧基；R1、R2和R3各自獨立地選自氫原子、氘原子、-C1-C6烷基、鹵代-C1-C6烷基、氘代-C1-C6烷基和-C1-C6羥烷基；R4、R5各自獨立地選自氫原子、氘原子、-C1-C6烷基和氘代-C1-C6烷基，或者R4、R5相連形成以下結構：-(CH2)2-B-(CH2)2-，B選自O、NH，與R4和R5鍵合的氮原子與-(CH2)2-B-(CH2)2-一起形成環;R6、R7、R8、R9各自獨立地選自氫原子、氘原子、鹵素、疊氮基、-C1-C6烷基和NR18R19，或者R6、R7、R8、R9之中的任意兩個基團與所鍵合的原子一起形成環烷基，餘下的兩個基團各自獨立地選自氫原子、鹵素、疊氮基、-C1-C6烷基和NR18R19，其中R18、R19選自氫原子、-C1-C6烷基；R10選自6-10員芳基、5-12員雜芳基，所述的芳基或雜芳基任選地被一個或多個取代基所取代，所述取代基選自：氫原子、鹵素、-C1-C6烷基、-C1-C6烷氧基、胺基、硝基；n1、n2、n3獨立地選自0~20之間的整數或小數，n1、n2、n3不同時為0，且n1+n2+n3≤20。
  2. 如請求項1的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，A選自苯丙胺酸(F)、甘胺酸(G)、纈胺酸(V)、離胺酸(K)、丙胺酸(A)、瓜胺酸、絲胺酸(S)、麩胺酸(E)或者天冬胺酸(D)中的2‑7個胺基酸形成的多肽殘基。
  3. 如請求項2的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，，A為由2-4個選自苯丙胺酸和甘胺酸的胺基酸形成的胜肽殘基。
  4. 如請求項3的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，A為甘胺酸‑甘胺酸‑苯丙胺酸‑甘胺酸組成的四肽殘基。
  5. 如請求項1的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，Z選自-C4-C6伸烷基-或Z為，其中，q選自1-8之間的整數。
  6. 如請求項5的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，Z為-C5伸烷基-。
  7. 如請求項1的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，R1、R2和R3同時為氫原子或氘原子。
  8. 如請求項7的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，R1、R2和R3同時為氫原子。
  9. 如請求項1的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，所述配體‑藥物偶聯物具有如式Ib所示的結構，。
  10. 如請求項1的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，所述配體‑藥物偶聯物具有如式Ic所示的結構，其中，Ac為具有式c所示結構的親水結構單元：Ac透過胺基官能基與式Ic中已標示的2位伸甲基碳相連，X、Y如請求項1所定義。
  11. 如請求項10的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，所述Ac選自甘胺酸、(D/L)丙胺酸、(D/L)亮胺酸、(D/L)異亮胺酸、(D/L)纈胺酸、(D/L)苯丙胺酸、(D/L)脯胺酸、(D/L)色胺酸、(D/L)絲胺酸、(D/L)酪胺酸、(D/L)半胱胺酸、(D/L)胱胺酸、(D/L)精胺酸、(D/L)組胺酸、(D/L)蛋胺酸、(D/L)天冬醯胺、(D/L)穀胺醯胺、(D/L)蘇胺酸、(D/L)天冬胺酸、(D/L)麩胺酸、天然或非天然胺基酸衍生物或以下結構，、、、、、、、或。
  12. 如請求項1的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，所述配體‑藥物偶聯物選自以下結構：、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、或；其中，2位掌性碳的構型為R型或S型。
  13. 如請求項1的配體-藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，其特徵在於：所述配體單元 Ab 選自抗體、抗體片段，其中所述抗體選自鼠源抗體、兔源抗體、噬菌體展示來源抗體、酵母展示來源抗體、嵌合抗體、人源化抗體、全人源抗體、抗體片段、雙特異性抗體及多特異性抗體。
  14. 如請求項13的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，其特徵在於：所述抗體為單株抗體，非限制性地選自：抗EGFRvIII抗體、抗PD‑1抗體、抗PD‑L1抗體、抗DLL‑3抗體、抗PSMA抗體、抗CD70抗體、抗MUC16抗體、抗ENPP3抗體、抗TDGF1抗體、抗ETBR抗體、抗MSLN抗體、抗TIM‑1抗體、抗LRRC15抗體、抗LIV‑1抗體、抗CanAg/AFP抗體、抗claudin 18.2抗體、抗Mesothelin抗體、抗HER2(ErbB2)抗體、抗EGFR抗體、抗c‑MET抗體、抗SLITRK6抗體、抗KIT/CD117抗體、抗STEAP1抗體、抗SLAMF7/CS1抗體、抗NaPi2B/SLC34A2抗體、抗GPNMB抗體、抗HER3(ErbB3)抗體、抗MUC1/CD227抗體、抗AXL抗體、抗CD166抗體、抗B7‑H3(CD276)抗體、抗PTK7/CCK4抗體、抗PRLR抗體、抗EFNA4抗體、抗5T4抗體、抗NOTCH3抗體、抗Nectin 4抗體、抗Trop2抗體、抗CD142抗體、抗CA6抗體、抗GPR20抗體、抗CD174抗體、抗CD71抗體、抗EphA2抗體、抗LYPD3抗體、抗FGFR2抗體、抗FGFR3抗體、抗FRα抗體、抗CEACAMs抗體、抗GCC抗體、抗Integrin Av抗體、抗CAIX抗體、抗P‑cadherin抗體、抗GD3抗體、抗Cadherin 6抗體、抗LAMP1抗體、抗FLT3抗體、抗BCMA抗體、抗CD79b抗體、抗CD19抗體、抗CD33抗體、抗CD56抗體、抗CD74抗體、抗CD22抗體、抗CD30抗體、抗CD37抗體、抗CD47抗體、抗CD138抗體、抗CD352抗體、抗CD25抗體或、抗CD123抗體或上述靶點的任意組合抗體。
  15. 如請求項1的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，所述抗體為抗Trop2抗體。
  16. 如請求項15的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，所述抗體由輕鏈和重鏈組成，所述輕鏈包含CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，其胺基酸序列分別如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3所示。
  17. 如請求項16的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，所述重鏈包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3，其胺基酸序列分別如SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6所示。
  18. 如請求項15的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，所述輕鏈包含胺基酸序列為SEQ ID NO：7的輕鏈可變區。
  19. 如請求項18的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，所述輕鏈還包含胺基酸序列為SEQ ID NO：8的輕鏈恆定區。
  20. 如請求項19的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，所述輕鏈的胺基酸序列為SEQ ID NO：9。
  21. 如請求項15的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，所述輕鏈包含胺基酸序列為SEQ ID NO：10的輕鏈可變區。
  22. 如請求項21的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，所述輕鏈還包含胺基酸序列為SEQ ID NO：11的輕鏈恆定區。
  23. 如請求項22的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，所述輕鏈的胺基酸序列為SEQ ID NO：12。
  24. 如請求項16的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，所述重鏈包含胺基酸序列為SEQ ID NO：13的重鏈可變區。
  25. 如請求項24的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，所述重鏈還包含胺基酸序列為SEQ ID NO：14的重鏈恆定區。
  26. 如請求項25的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，所述重鏈的胺基酸序列為SEQ ID NO：15。
  27. 如請求項15的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，所述抗體由輕鏈和重鏈組成，所述輕鏈包含CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，其胺基酸序列分別如SEQ ID NO：31、SEQ ID NO：32、SEQ ID NO：33所示。
  28. 如請求項27的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，所述重鏈包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3，其胺基酸序列分別如SEQ ID NO：34、SEQ ID NO：35、SEQ ID NO：36所示。
  29. 如請求項27的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，所述輕鏈包含胺基酸序列為SEQ ID NO：37的輕鏈可變區。
  30. 如請求項29的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，所述輕鏈還包含胺基酸序列為SEQ ID NO：38的輕鏈恆定區。
  31. 如請求項30的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，所述輕鏈的胺基酸序列為SEQ ID NO：39。
  32. 如請求項27-31任一項的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，所述重鏈包含胺基酸序列為SEQ ID NO：40的重鏈可變區。
  33. 如請求項32的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，所述重鏈還包含胺基酸序列為SEQ ID NO：41的重鏈恆定區。
  34. 如請求項33的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，所述重鏈的胺基酸序列為SEQ ID NO：42。
  35. 一種如式II所示的連接子‑藥物化合物，或其內消旋體、外消旋體、鏡像異構物或其混合物形式，或其藥學上可接受的鹽，其中：Z、A、R1、R2、R3、R4、R5、B、R15、R16、R17、n、m、R6、R7、R8、R9、R10如請求項1-11任一項所定義。
  36. 如請求項35的連接子‑藥物化合物，或其內消旋體、外消旋體、鏡像異構物或其混合物形式，或其藥學上可接受的鹽，所述連接子‑藥物化合物具有式IIa所示的結構，。
  37. 如請求項35的連接子‑藥物化合物，或其內消旋體、外消旋體、鏡像異構物或其混合物形式，或其藥學上可接受的鹽，所述連接子‑藥物化合物具有式IIb所示的結構，其中，Ac為具有式c所示結構的親水結構單元：其中，X、Y如請求項1所定義，Ac透過-NH-與式IIb中已標示的2位伸甲基碳相連；2位掌性碳的構型為R型或S型。
  38. 如請求項35-37任一項的連接子‑藥物化合物，或其內消旋體、外消旋體、鏡像異構物或其混合物形式，或其藥學上可接受的鹽，所述連接子‑藥物化合物選自以下結構：、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、 或；其中，2位掌性碳的構型為R型或S型。
  39. 一種請求項1-34任一項的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，或請求項35-38任一項的連接子‑藥物化合物或其內消旋體、外消旋體、鏡像異構物或其混合物形式，或其藥學上可接受的鹽用於製備藥物的用途，所述藥物用於治療或預防腫瘤。
  40. 如請求項39的用途，所述腫瘤選自固態腫瘤或非固態腫瘤。
  41. 如請求項40的用途，所述腫瘤選自乳腺癌、卵巢癌、子宮頸癌、子宮癌、前列腺癌、腎癌、尿道癌、膀胱癌、肝癌、胃癌、子宮內膜癌、唾液腺癌、食道癌、肺癌、結腸癌、直腸癌、結直腸癌、骨癌、皮膚癌、甲狀腺癌、胰腺癌、黑色素瘤、神經膠質瘤、神經母細胞瘤、多形性膠質細胞瘤、肉瘤、淋巴瘤和白血病。
  42. 一種藥物組成物，其包含有效量的請求項1-34任一項的配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽，或請求項35-38任一項的連接子‑藥物化合物或其內消旋體、外消旋體、鏡像異構物或其混合物形式，或其藥學上可接受的鹽，以及藥學上可接受的載劑、稀釋劑或賦形劑。
  43. 一種請求項35-38任一項的連接子‑藥物化合物或其內消旋體、外消旋體、鏡像異構物或其混合物形式，或其藥學上可接受的鹽用於製備配體‑藥物偶聯物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物的用途。
  44. 如請求項43的用途，所述配體-藥物偶聯物選自請求項1-34任一項的配體‑藥物偶聯物。
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