TWI885324B

TWI885324B - 環己烯酮化合物之結晶形

Info

Publication number: TWI885324B
Application number: TW112104474A
Authority: TW
Inventors: 重野和彥; 中村浩之
Original assignee: 日商大鵬藥品工業股份有限公司
Priority date: 2022-02-09
Filing date: 2023-02-08
Publication date: 2025-06-01
Also published as: WO2023153422A1; US20250178998A1; MX2024009899A; CN118984818A; EP4477642A1; AU2023218670A1; KR20240144990A; TW202342414A; JPWO2023153422A1; CA3251404A1

Abstract

本揭示之目的在於提供一種穩定性優異、製造面較佳之3-(15-甲氧基十五基)-2,4,4-三甲基環己-2-烯-1-酮的結晶形。本揭示提供一種結晶形，其在粉末X光繞射圖譜(CuKα)中，在繞射角(2θ±0.2°)為7.0°、14.0°、17.5°、19.5°、21.0°、23.7°及24.8°處具有特徵性波峰。

Description

環己烯酮化合物之結晶形

[關聯申請案之相互參照] 本申請案主張基於2022年2月9日提出申請之日本國特許出願第2022-019058號說明書(其揭示整體透過參照而援引至本說明書中)的優先權。本揭示有關一種有用於作為醫藥品之原料藥之環己烯酮化合物的結晶形及含有該結晶形的醫藥組成物。

神經退化性疾病依其所病變之神經部位，大致區別成中樞性與末梢性。中樞性神經之代表性疾病有阿茲海默症、肌萎縮性側索硬化症、腦脊髓損傷等。另一方面，末梢性神經遭受病變之代表性疾病有神經病變性疼痛、感覺遲鈍等的知覺神經病變與伴隨便秘、排尿障礙等的自律神經病變。神經退化性疾病中病理狀態的發病機制為各式各樣，然可認為是發生神經突之退化、萎縮及/或神經細胞死亡。針對該等疾病，現狀是缺乏從根本上改善神經病變的治療藥。

專利文獻1揭示，3-(15-羥基十五基)-2,4,4-三甲基環己-2-烯-1-酮顯示出神經生長促進作用，作為失智症等的腦疾病預防/治療用醫藥是有用的；專利文獻2揭示，該化合物作為排尿障礙治療劑是有用的。然而，3-(15-羥基十五基)-2,4,4-三甲基環己-2-烯-1-酮在通常的處方中，藥物動力並不充分(專利文獻3)。

又，一般而言，化合物在作為醫藥品之有效活性成分或原料藥使用時，為了穩定保持品質及/或容易保管管理，化合物之化學上及物理學上的穩定性是必要的。

[先行技術文獻] [專利文獻] 專利文獻1：國際公開WO99/08987號公報專利文獻2：國際公開WO2002/066024號公報專利文獻3：國際公開WO2013/147072號公報

[發明欲解決之課題] 本揭示之課題在於提供一種具有優異神經突生長作用之新穎化合物。又，進一步，本揭示之目的在於提供該新穎化合物的穩定形結晶形，其有用於作為醫藥品之有效成分或原料藥。

[用以解決課題之手段] 為解決前述課題而一再全心探討，結果發現，以下式(I)表示之新穎環己烯酮化合物具有神經生長促進作用(神經突生長作用及/或使有突起細胞之比例增加的作用)，有用於作為用以治療包含神經退化性疾病在內之透過促進神經生長來改善之疾病、疼痛及/或下泌尿道障礙的醫藥；

[化學式1]

(化學名：3-(15-甲氧基十五基)-2,4,4-三甲基環己-2-烯-1-酮 (以下亦稱為化合物「(I)」))。進一步發現，化合物(I)存在3種結晶形(I型結晶、II型結晶、III型結晶)，該等結晶形之吸濕性低，具有優異的固體穩定性。

即，本揭示提供以下[1]～[15]。

[1] 一種3-(15-甲氧基十五基)-2,4,4-三甲基環己-2-烯-1-酮之結晶形，是在粉末X光繞射圖譜(CuKα)中，具有選自繞射角(2θ±0.2°)為7.0°、14.0°、17.5°、19.5°、21.0°、23.7°及24.8°之至少3個以上波峰。

[2] 如[1]記載之結晶形，其在粉末X光繞射圖譜(CuKα)中，在繞射角(2θ±0.2°)為7.0°、14.0°、17.5°、19.5°、21.0°、23.7°及24.8°處具有波峰。

[3] 如[1]或[2]記載之結晶形，其粉末X光繞射圖譜與記載於圖1者實質相同。

[4] 如[1]~[3]中任一項記載之結晶形，其在示差掃瞄熱量測定(DSC測定)中，具有波峰溫度為35℃左右的吸熱波峰。

[5] 一種醫藥組成物，含有如[1]~[4]中任一項記載之結晶形。

[6] 一種3-(15-甲氧基十五基)-2,4,4-三甲基環己-2-烯-1-酮之結晶形，是在粉末X光繞射圖譜(CuKα)中，具有選自繞射角(2θ±0.2°)為6.1°、11.4°、12.5°、15.1°、19.4°及24.0°之至少5個以上波峰。

[7] 如[6]記載之結晶形，其在粉末X光繞射圖譜(CuKα)中，在繞射角(2θ±0.2°)為6.1°、11.4°、12.5°、15.1°、19.4°及24.0°處具有波峰。

[8] 如[6]或[7]記載之結晶形，其粉末X光繞射圖譜與記載於圖3者實質相同。

[9] 如[6]~[8]中任一項記載之結晶形，其在示差掃瞄熱量測定(DSC測定)中，具有波峰溫度(峰頂值)為34℃左右的吸熱波峰。

[10] 一種醫藥組成物，含有如[6]~[9]中任一項記載之結晶形。

[11] 一種3-(15-甲氧基十五基)-2,4,4-三甲基環己-2-烯-1-酮之結晶形，是在粉末X光繞射圖譜(CuKα)中，具有選自繞射角(2θ±0.2°)為11.2°、12.4°、14.1°、14.9°、18.8°及19.4°之至少5個以上波峰。

[12] 如[11]記載之結晶形，其在粉末X光繞射圖譜(CuKα)中，在繞射角(2θ±0.2°)為11.2°、12.4°、14.1°、14.9°、18.8°及19.4°處具有波峰。

[13] 如[11]或[12]記載之結晶形，其粉末X光繞射圖譜與記載於圖5者實質相同。

[14] 如[11]~[13]中任一項記載之結晶形，其在示差掃瞄熱量測定(DSC測定)中，具有波峰溫度(峰頂值)為34℃左右的吸熱波峰。

[15] 一種醫藥組成物，含有如[11]~[14]中任一項記載之結晶形。

依本揭示，可提供一有用於作為具有神經生長促進作用之化合物的上述化合物(I)。又，可提供上述化合物(I)，其有用於作為具有優異藥物動力及/或排尿機能之改善作用之化合物。又，本揭示之化合物(I)是新穎化合物，其結晶形、化合物(I)之穩定形結晶、及其製法目前仍是未知。本揭示中，例如從操作性(更低的吸濕性)及/或品質管理性等觀點來看，化合物(I)之結晶形(I型結晶、II型結晶、III型結晶)優於其他結晶形，故為使用該化合物作為醫藥品用原料藥時之有用形態。

又，本揭示之I型結晶、II型結晶及III型結晶之殘留溶劑是在ICH指南中醫藥品殘留溶劑指南所定的基準值以下，作為醫藥品是安全的。

本說明書，關於單數形(a、an、the等)，除了本說明書有另外明文記載或上下文明顯矛盾的情況外，是包含單數與複數。除非明確記載並非如此，本說明書中單純記載「化合物(I)」時，意指3-(15-甲氧基十五基)-2,4,4-三甲基環己-2-烯-1-酮，且是用於包含「非晶質體」及「結晶」任一意義。

該化合物(I)可例如依照記載於下述合成例1之方法來合成，然並不受限於該方法。

本說明書中，「結晶」、「非晶質體」之用語是以本揭示所屬醫藥技術領域中的通常意義來使用。本說明書中，用語「結晶」，與用於本說明書中的相關用語，例如「結晶形」、「結晶形態」，可互換使用。又，本說明書中，用語「非晶質」，與用於本說明書中的相關用語，例如「非晶質體」、「非晶質形態」，可互換使用。

本揭示之結晶，可利用再結晶化、結晶化、蒸餾及管柱色層分析法等周知的分離純化技術來單離及純化。

在用於本說明書中且未另外明確說明下，用語「結晶」及用於本說明書中之相關用語，在用於描述化合物、物質、修飾、材料、成分或生成物時，意指化合物、物質、修飾、材料、成分或生成物利用X光繞射確認時，實質上是結晶。例如，參照Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 第21版, Lippincott, Williams and Wilkins, Baltimore, MD(2005)；美國藥典、第23版、1843-1844(1995)。

在用於本說明書中且未另外明確說明下，用語「結晶形態」及本說明書中之相關用語意指結晶之固體形態。結晶形態可舉單一成分結晶形態及複數成分結晶形態，可任意而無限定，可包含共晶、鹽(包含製藥上容許之鹽)、多形體、溶劑合物、水合物、及/或其他分子複合物。在特定之實施形態，物質之結晶形態可實質上不含非晶質形態及/或其他結晶形態。在特定之實施形態，物質之結晶形態，以重量基準計，可含有約0.1、0.5、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、25、30、35、40、45或小於50%的1種以上非晶質形態及/或其他結晶形態。

用語「共晶」，意指本技術領域眾所皆知之源自多數共晶形成物質之分子複合物。與鹽不同，共晶典型上不含共晶形成物質與藥物之間的氫轉移，而是在結晶結構中之共晶形成物質與化合物(I)之間含有氫鍵、芳香環堆積、或分散力等分子間相互作用。

在用於本說明書中且未另外明確說明下，用語「多形體」、「多形形態」及本說明書中之相關用語，意指由實質上相同分子、分子群及/或離子所構成之2種以上的結晶形態。結晶形態彼此不同，與此同理，不同的多形體可具有不同的物性，例如，熔點、熔解熱、溶解度、溶解特性及/或振動圖譜(作為晶格中之分子及/或離子之配置或構形(conformation)之結果)等。物性的差異有時會影響儲藏穩定性、壓縮性及密度(在製劑化及製品製造時是重要的)、及溶解速度(在生物利用度上是重要因子)等藥學參數。穩定性的差異會因化學反應性上的變化(例如，投予劑形是由某一多形體構成時，相較於由別的多形體構成的情況，顯示出更快速變色這種氧化上差異)或機械變化(例如，動力學上較佳之多形體一旦變質成熱動態學上較穩定的多形體，則儲藏中錠劑會崩壞)或者兩者(例如，某一多形體之錠劑在高濕度下較容易分解)而產生。針對可溶性/溶解性差異之結果，在極端的情況下，有時一部分的固體遷移會損害效力；在另一極端情況下，有時會產生毒性。再加上，物性在加工時可能是重要的(例如，某一多形體有比較容易形成溶劑合物的可能性，或可能難以過濾及洗淨以去除雜質，且粒子形狀及尺寸分布在多形體彼此間有可能不同)。

在用於本說明書中且未另外明確說明下，用語「非晶質」、「非晶質形態」及用於本說明書中之相關用語，意指該物質、成分或生成物利用X光繞射確認時，實質上不是結晶。特別是，用語「非晶質形態」是說明不規則的固體形態，亦即，缺乏長距離下之結晶秩序的固體形態。

用語「製藥上容許之鹽」，意指可自本技術領域眾所皆知之各種有機及無機相對離子衍生出的鹽。製藥上容許之鹽對於動物或人類之攝取來說可以是安全的。

關於用以確認結晶形態及非晶質形態特性的技術，並無限定，可舉熱重量分析(TGA)、示差掃瞄熱量測定(DSC)、X光粉末繞射(XRPD)、單結晶X光繞射、振動分光法、例如紅外(IR)及拉曼分光法、固體及溶液核磁共振(NMR)分光法、光學顯微鏡觀察、熱載台光學顯微鏡觀察、掃描型電子顯微鏡觀察(SEM)、電子束結晶學及定量分析、粒徑分析(PSA)、表面積分析、溶解度測定、溶解測定、原子分析及卡耳費雪分析。特徴性單位晶格參數並無限定，可使用以單晶繞射及粉末繞射為首之X光繞射及中子繞射等1種以上的技術來確認。作為用以解析粉末繞射數據之有用技術，可舉瑞特維德精算法(Rietveld refinement)等的輪廓精算法(profile refinement)，其可用來解析，例如，含有2種以上固相之樣品中的與單一相相關的繞射波峰。作為用以解析粉末繞射數據之其他有用方法，可舉單位晶格指數化，該方法可讓習於此藝者從含有結晶粉末之樣品確認單位晶格參數。

此外，粉末X光繞射圖案，在數據之性質上，認定結晶之同一性時，繞射角及整體圖案可能是重要的。粉末X光繞射圖案之相對強度因結晶成長之方向、粒子大小、測定條件等多少會變動，因此不應嚴格解讀。

從各種圖案獲得之數值，因其結晶成長之方向、粒子大小、測定條件等，有時多少會產生誤差。因此，本說明書中，粉末X光繞射圖案中繞射角(2θ)之數值可在±0.2°程度之範圍內有測定誤差。

又，示差掃瞄熱量測定(DSC測定)曲線中的吸熱波峰，因每1分鐘之升溫幅度、試料純度等，有時測定溫度會變化。本說明書中，DSC測定溫度值中的「左右」如此用語，意指該值之±2、3、4或5℃以內的溫度值。

在本揭示的一實施形態中，化合物(I)之I型結晶，例如，具有圖1所示粉末X光繞射圖譜(CuKα)，又，具有圖2所示示差掃瞄熱量測定(DSC測定)曲線。

在此，化合物(I)之I型結晶之粉末X光繞射圖譜(CuKα)中的特徴性波峰，就繞射角(2θ±0.2°)而言，可舉7.0°、14.0°、17.5°、19.5°、21.0°、23.7°及24.8°。

有關本揭示之化合物(I)的I型結晶，是具有選自上述波峰之至少3個以上波峰的結晶形，宜為具有選自上述波峰之至少5個以上波峰的結晶形，特別宜為上述波峰皆有的結晶形。

又，化合物(I)之I型結晶之示差掃瞄熱量測定(DSC測定)曲線中的吸熱波峰可舉例如：在33℃~37℃左右、宜在34℃~36℃左右、較佳在35℃左右。

有關本揭示之結晶形態有時會因上述實施形態之組合而被賦予特徴，該等並不相互矛盾。例如，結晶形態有時會因X光繞射圖案之上述波峰及利用DSC測定之上述吸熱波峰之組合而被賦予特徴。

在一實施態樣，本說明書中所揭結晶形態可包含在空間上具有規則性原子配置的複數結晶(結晶多形體)，且可產生不同的物理化學特性。在一實施態樣，本說明書中所揭結晶形態可為含有結晶多形體的混合物。

在一實施形態，本說明書中所揭化合物(I)之結晶形態可為物理上及/或化學上的純粹。在一特定實施形態，本說明書中所揭化合物之結晶形態可為至少約100、99、98、97、96、95、94、93、92、91、90、89、88、87、86、85、84、83、82、81或80%物理上及/或化學上的純粹。在一部分之實施形態，本說明書中所揭化合物之結晶形態是實質上的純粹。在用於本說明書中且未另外明確說明下，「實質上純粹」的樣品，例如，實質上不含其他固體形態及/或其他化合物且含有特定結晶形態或非晶質形態的樣品，在特定之實施形態中，會含有約25%、20%、15%、10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%、1%、0.75%、0.5%、0.25%或小於0.1重量%之1種以上其他固體形態及/或其他化合物。

在一部分之實施形態，本說明書中所揭化合物(I)之結晶形態，在約25、30、35℃及約65、70、75、80或85%相對濕度下暴露約1、2、3、4、5、6、7、8、12、16、24、36、48、60、72、84、96、108、120、132、144、或156週以上，且約160、156、150、138、126、114、102、90、78、66、54、42、30、24、18、12或6週以下之條件下時，是穩定的。該條件可為封閉條件或開放條件。在用於本說明書中時，所謂「封閉」條件可意指在穩定性實驗中，收納樣品的瓶子的蓋子是關著或密閉；並且，「開放」條件可意指蓋子是打開的。在一實施形態，本說明書中所揭化合物(I)之結晶形態在約25℃及約60%相對濕度下暴露約4週之條件下時，是穩定的。在一部分之實施形態，該條件是封閉條件。亦即，本說明書中所揭化合物之結晶形態顯示出長期間下的優異儲藏穩定性。在本說明書中，「穩定」意指與當初的雜質量相比，雜質的增加為約1.0、0.5、0.3、0.1、0.05、或0.01%以下。穩定性亦可透過例如，X光繞射圖案在(2θ±0.2°)下，維持當初波峰之10、20、30、40、50、60、70、80、或90%以上來顯示。

又，本揭示之結晶形態可為溶劑合物(例如，水合物等)，亦可為非溶劑合物。經同位素(例如：氘、3H、14C、35S、125I等)等標記之化合物亦包含在本說明書中記載之化合物或其製藥學上容許之鹽。

在本揭示之一實施形態中，化合物(I)之I型結晶可利用包含例如下述步驟之方法來獲得：步驟(i-1)，將化合物(I)添加於溶劑I-1中並溶解之步驟，及步驟(i-2)，將溶劑I-2添加至步驟(i-1)獲得的化合物(I)溶液中並攪拌，使化合物(I)結晶化之步驟。在該實施形態中，溶劑I-1可舉例如：甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、丙酮等。

在步驟(i-1)中，化合物(I)之添加量並無特別限定，可例如，對10mL之溶劑I-1，以質量計，添加0.1~20g、且宜添加0.5~5g的化合物(I)。步驟(i-1)中的溫度可依使用之溶劑適宜設定，可設定在20℃~溶劑沸點之間。

在該實施形態中，溶劑I-2可舉例如，水等。關於溶劑I-1與溶劑I-2之使用比例(v/v)，例如，對10ml之溶劑I-1，可設溶劑I-2為0~50ml、且宜為0~20ml。步驟(i-2)之結晶化中的溫度可依使用之溶劑適宜設定，可設定在-20℃至30℃之間。

又，亦可在同時添加溶劑I-1與溶劑I-2並進行加熱溶解之後，進行冷卻攪拌使化合物(I)結晶化。

步驟(i-2)之結晶化中的攪拌，可因應溶劑量、反應釜的大小等，適宜使用攪拌機、攪拌葉片、磁攪拌器等來進行。攪拌速度通常為1~1200rpm，且宜為10~600rpm。

又，如上述獲得之I型結晶，其化合物(I)之化學純度為90%以上，並可利用高效液相層析法(HPLC)來測定。較佳是化合物(I)之化學純度為95%以上的I型結晶，更佳是99%以上為I型結晶。

化合物(I)之I型結晶只要是含有I型結晶即可，且可為I型結晶之單一結晶亦可為含有其之外之結晶的多形混合物。較佳是90重量%以上為I型結晶，更佳是95%以上為I型結晶。

在本揭示的一實施形態中，化合物(I)之II型結晶，例如，具有圖3所示粉末X光繞射圖譜(CuKα)，又，具有圖4所示示差掃瞄熱量測定(DSC測定)曲線。

在此，化合物(I)之II型結晶之粉末X光繞射圖譜(CuKα)中的特徴性波峰，就繞射角(2θ±0.2°)而言，可舉6.1°、11.4°、12.5°、15.1°、19.4°及24.0°。

有關本揭示之化合物(I)之II型結晶，是具有選自上述波峰之至少5個以上波峰的結晶，且特別宜為上述波峰皆有的結晶。

又，化合物(I)之II型結晶之示差掃瞄熱量測定(DSC測定)曲線中的吸熱波峰可舉例如：在32℃~36℃左右、宜在33℃~35℃左右、較佳在34℃左右。

在本揭示之一實施形態中，化合物(I)之II型結晶可利用包含例如下述步驟之方法來獲得：步驟(ii-1)，將化合物(I)添加於溶劑II中並溶解之步驟，及步驟(ii-2)，冷卻步驟(ii-1)獲得的化合物(I)溶液，使化合物(I)結晶化之步驟。在該實施形態中，溶劑II可舉例如，乙腈。

在步驟(ii-1)中，化合物(I)之添加量並無特別限定，可例如，對10mL之溶劑II，以質量計，添加1~4g、且宜添加1.5~3.5g的化合物(I)。步驟(ii-1)中的溫度可適宜設定，可設定在15~40℃之間。步驟(ii-2)之結晶化中的溫度可設定在-10~5℃。較佳是從步驟(ii-1)之溫度冷卻至小於3℃，並維持在小於3℃的溫度下。

步驟(ii-2)之結晶化亦可在攪拌下進行。此時，可因應溶劑量、反應釜的大小等，適宜使用攪拌機、攪拌葉片等來進行。又，攪拌操作亦可例如透過使反應容器振盪等來進行。攪拌速度通常為1~600rpm，且宜為10~100rpm。

又，如上述獲得之II型結晶，其化合物(I)之化學純度為90%以上，並可利用高效液相層析法(HPLC)來測定。較佳是化合物(I)之化學純度為95%以上的II型結晶，更佳是99%以上為II型結晶。

化合物(I)之II型結晶只要是含有II型結晶即可，且可為II型結晶之單一結晶亦可為含有其之外之結晶的多形混合物。較佳是90重量%以上為II型結晶，更佳是95%以上為II型結晶。

在本揭示的一實施形態中，化合物(I)之III型結晶，例如，具有圖5所示粉末X光繞射圖譜(CuKα)，又，具有圖6所示示差掃瞄熱量測定(DSC測定)曲線。

在此，化合物(I)之III型結晶之粉末X光繞射圖譜(CuKα)中的特徴性波峰，就繞射角(2θ±0.2°)而言，可舉11.2°、12.4°、14.1°、14.9°、18.8°及19.4°。

有關本揭示之化合物(I)之III型結晶，是具有選自上述波峰之至少5個以上波峰的結晶，且特別宜為上述波峰皆有的結晶。

又，化合物(I)之III型結晶之示差掃瞄熱量測定(DSC測定)曲線中的吸熱波峰可舉例如：32℃~36℃左右、宜為33℃~35℃左右、較佳為34℃左右。

在本揭示之一實施形態中，化合物(I)之III型結晶可利用包含例如下述步驟之方法來獲得：步驟(iii-1)，將化合物(I)之II型結晶添加於溶劑III-1中並攪拌之步驟，步驟(iii-2)，從以上述步驟(iii-1)獲得之化合物(I)懸浮液，回收化合物(I)之固體的步驟。在該實施形態中，溶劑III-1可舉甲醇與水之混合溶劑。使用甲醇與水之混合溶劑時，其使用比例(v/v)，例如，對100ml之甲醇，可設水為1~15ml、且宜為5~11ml。

在步驟(iii-1)中，化合物(I)之II型結晶之添加量並無特別限定，可例如，對10mL之溶劑III-1，以質量計，添加1~5g、且宜添加1.5~2.5g的化合物(I)。步驟(iii-1)中的溫度可依使用之溶劑適宜設定，可設定在0~8℃之間。

步驟(iii-2)中的回收方法可廣泛使用在本揭示所屬技術領域中所可使用的方法，可舉過濾、利用有機溶劑之洗淨、減壓乾燥等。

步驟(iii-1)之中的攪拌，可因應溶劑量、反應釜的大小等，適宜使用攪拌機、攪拌葉片、磁攪拌器等來進行。攪拌速度通常為1~600rpm，且宜為10~300rpm。

又，如上述獲得之III型結晶，其化合物(I)之化學純度為90%以上，並可利用高效液相層析法(HPLC)來測定。較佳是化合物(I)之化學純度為95%以上的III型結晶，更佳是99%以上為III型結晶。

化合物(I)之III型結晶只要是含有III型結晶即可，且可為III型結晶之單一結晶亦可為含有其之外之結晶的多形混合物。較佳是90重量%以上為III型結晶，更佳是95%以上為III型結晶。

如後述實施例所示，有關本揭示之化合物(I)的I型結晶、II型結晶及III型結晶之吸濕性皆低，且皆具有優異的固體穩定性(保存穩定性等)。醫藥品之原料藥、及醫藥品中之有效成分具備固體穩定性不論在工業上的操作、還是維持品質上，皆是重要的。

又，用於製造醫藥品之溶劑有時會有毒性，從安全性的觀點來看，希望製造步驟所殘留之溶劑是盡可能的少，化合物(I)之I型結晶、II型結晶及III型結晶不含有ICH(日美EU國際醫藥法規協和會)指南之規範值以上的殘留溶劑。

因此，有關本揭示之化合物(I)之I型結晶、II型結晶及III型結晶具有作為醫藥品或醫藥品原料藥必要之優異性質。

有關本揭示之化合物(I)之I型結晶、II型結晶及III型結晶具有優異的神經突生長作用，例如，透過神經突生長作用及/或使有突起細胞比例增加之作用等的作用，有用於作為用以治療包含神經退化性疾病在內之透過促進神經生長來改善之疾病、疼痛及/或下泌尿道障礙的醫藥品。

在使用化合物(I)之I型結晶、II型結晶及/或III型結晶作為醫藥時，可粉碎或不粉碎該I型結晶、II型結晶及/或III型結晶，並因應預防或治療目的採用各種投予形態，該形態可為例如：錠劑、膠囊劑、顆粒劑、細粒劑、散劑、乾燥糖漿劑等口服劑，及栓劑、吸入劑、點鼻劑、軟膏劑、貼附劑、注射劑等非口服劑之任一；且宜利用於口服劑。該等醫藥組成物可使用藥學上容許之載劑，並利用習於此藝者周知慣用之製劑方法來製造。

藥學上之載劑可使用在製劑素材方面慣用之各種有機或無機載劑物質，可作為固態製劑中之賦形劑、結合劑、崩壞劑、潤滑劑、包衣劑來摻合，可作為液狀製劑中之溶劑、助溶劑、懸浮劑、等張劑、緩衝劑、無痛劑等來摻合。又，亦可視需要使用防腐劑、抗氧化劑、著色劑、甘味劑、穩定劑等製劑添加物。

賦形劑可舉：乳糖、白糖、D-甘露糖醇、澱粉、結晶纖維素、矽酸鈣等。

結合劑可舉：羥丙基纖維素、甲基纖維素、聚乙烯吡咯啶酮、飴粉、羥丙甲纖維素等。

崩壞劑可舉：羧甲基澱粉鈉(starch glycolate sodium)、羧甲基纖維素鈣(carmellose calcium)、交聯羧甲基纖維素鈉(croscarmellose sodium)、交聯聚維酮(crospovidone)、低取代度羥丙基纖維素、部分α化澱粉等。

潤滑劑可舉：滑石、硬脂酸鎂、蔗糖脂肪酸酯、硬脂酸、硬脂醯反丁烯二酸鈉等。

包衣劑可舉：乙基纖維素、胺基烷基甲基丙烯酸酯共聚物RS、羥丙甲纖維素、白糖等。

溶劑可舉：水、丙二醇、生理食鹽水。

助溶劑可舉：聚乙二醇、乙醇、α-環糊精、Macrogol 400、聚山梨醇酯80等。

懸浮劑可舉：卡拉膠、結晶纖維素・羧甲基纖維素鈉、聚氧乙烯氫化蓖麻油。

等張劑可舉：氯化鈉、甘油、氯化鉀等。

pH調節劑/緩衝劑可舉：檸檬酸鈉、鹽酸、乳酸、磷酸、磷酸二氫鈉等。

無痛劑可舉：普羅卡因鹽酸鹽、利多卡因等。

防腐劑可舉：對羥基苯甲酸乙酯、甲酚、苯扎氯銨(benzalkonium chloride)等。

抗氧化劑可舉：亞硫酸鈉、抗壞血酸、天然微生素E等。

著色劑可舉：氧化鈦、三氧化二鐵、食用藍色1號、葉綠素銅等。

矯味/氣味改善劑可舉：阿斯巴甜、糖精、三氯蔗糖、l-薄荷醇、薄荷香料(mint flavor)等。

穩定劑可舉：焦亞硫酸鈉、EDTA鈉、異抗壞血酸、氧化鎂、二丁基羥基甲苯等。

調製口服用固態製劑時，可對化合物(I)之I型結晶、II型結晶及/或III型結晶添加賦形劑，且視需要添加結合劑、崩壞劑、潤滑劑、著色劑、矯味/氣味改善劑等之後，以常法製造錠劑、被覆錠劑、顆粒劑、散劑、膠囊劑等。

各投予單位形態中應摻合之化合物(I)之I型結晶、II型結晶及/或III型結晶之量會因要適用其之患者的症狀或因其劑形等而不一定，然一般在每一投予單位形態上，在口服劑宜設為約0.05~1000mg、在注射劑宜設為約0.1~500mg、在栓劑或外用劑宜設為約1~1000mg。

又，具有各投予形態之藥劑的化合物(I)之I型結晶、II型結晶及/或III型結晶的每1日投予量會因患者之症狀、體重、年齡、性別等而異，無法一概決定，通常，成人(體重50kg)每1日設為約0.05~5000mg、宜為0.1~1000mg即可，且宜將其進行1日1次或分成2~3次左右來投予。

[實施例] 以下將舉實施例來更具體說明本揭示，然本揭示並未因該等而受到任何限定。本揭示雖已透過實施例而充分說明，但當可理解，習於此藝者仍有可能進行各種變更及/或修飾。因此，只要此種變更及/或修飾未超脫本揭示之範圍，其等亦包含在本揭示之中。

實施例所使用之各種試劑，在無特別記載下，是使用市售品。NMR圖譜是使用AL400(400MHz；日本電子(JEOL))，在重溶劑中含有四甲基矽烷時，是使用四甲基矽烷作為內部基準來測定，除此之外的情況，是使用殘存於NMR溶劑中的非氘化質子波峰作為內部基準來測定，全δ值以ppm顯示。

縮寫之意思顯示於下。 s：單峰 t：三峰 m：多重峰 CDCl ₃：重氯仿

粉末X光繞射測定粉末X光繞射是將適量試驗物質視需要以瑪瑙製研缽輕輕粉碎，之後，再依照以下任一試驗條件來測定。

裝置：PANalytical製EMPYREAN 反射法(集中法) 靶：Cu X光管電流：40mA X光管電壓：45kV 掃描範圍：2θ=5.0~40.0° 間距：2θ=0.0131° 平均時間/間距：8.670s 掃描速度：0.0015°/s 發散狹縫：1° 散射狭縫：2.0　mm 受光狹縫：8.0　mm

內含數據處理之裝置的操作，是依照各裝置所指示的方法及順序。

此外，從各種圖譜獲得之數值，因其結晶成長之方向、粒子大小、測定條件等，有時多少會有變動。因此，不應嚴格的解釋該等數值。

示差掃瞄熱量測定(DSC測定) DSC測定是依照以下試驗條件來測定。

裝置：METTER TOLEDO製DSC1 STAR System 試料：約1mg 試料容器：鋁製升溫範圍：25~290℃ 升溫速度：10℃/min. 環境氣體：氮氮氣流量：50mL/min. 內含數據處理之裝置的操作，是依照各裝置所指示的方法及順序。

後述之3-(15-羥基十五基)-2,4,4-三甲基環己-2-烯-1-酮有時亦顯示為化合物A。

合成例1 3-(15-甲氧基十五基)-2,4,4-三甲基環己-2-烯-1-酮(化合物(I))之合成

對tert-丁氧基鈉48.1g之四氫呋喃550mL溶液，在冰冷下，滴下3-(15-羥基十五基)-2,4,4-三甲基環己-2-烯-1-酮72.9g之四氫呋喃150mL溶液，並攪拌30分鐘。對反應溶液添加碘甲烷56.8g之四氫呋喃50mL溶液，並在冰冷下攪拌0.5小時、在室溫下攪拌1.5小時。在冰冷下，對反應溶液添加飽和氯化銨溶液，利用乙酸乙酯萃取，以水、飽和食鹽水洗淨，並以無水硫酸鈉乾燥。濾去乾燥劑後，將進行減壓蒸餾去除所獲得之殘渣以矽膠管柱色層分析法(乙酸乙酯/己烷)純化，獲得標題化合物61.5g。

實施例1 製造化合物(I)之I型結晶對化合物(I)1.00g添加甲醇4mL與水3mL，並加熱攪拌，之後，放冷攪拌到室溫。濾取析出之固體，在室溫下減壓乾燥，藉此獲得892mg之標記結晶。所得化合物之 ¹H-NMR圖譜如下。 NMR(CDCl3) δppm 1.15 (s, 6H), 1.20-1.48 (m, 24H), 1.50-1.63 (m, 2H), 1.75 (s, 3H), 1.75-1.85 (m, 2H), 2.13-2.24 (m, 2H), 2.45 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.33 (s, 3H), 3.36 (t, J = 6.8 Hz, 2H).

粉末X光繞射圖譜(CuKα)顯示於圖1。

又，特徴性繞射角如下。特徴性繞射角(2θ±0．2°)： 7.0°、14.0°、17.5°、19.5°、21.0°、23.7°及24.8°(CuKα)

又，I型結晶之示差掃瞄熱量測定(DSC)之結果如下。示差掃瞄熱量曲線：顯示於圖2。示差掃瞄熱量曲線中之吸熱波峰(峰頂值)：35℃左右

實施例2 製造化合物(I)之II型結晶對化合物(I)1000mg添加乙腈4mL，並溶解。將其冰冷、濾取析出物、回收固體，並在室溫下減壓乾燥約45分，藉此獲得747.0mg的標記結晶。

粉末X光繞射圖譜(CuKα)顯示於圖3。

又，特徴性繞射角如下。特徴性繞射角(2θ±0．2°)： 6.1°、11.4°、12.5°、15.1°、19.4°及24.0°(CuKα)

又，II型結晶之示差掃瞄熱量測定(DSC)之結果如下。示差掃瞄熱量曲線：顯示於圖4。示差掃瞄熱量曲線中之吸熱波峰(峰頂值)：34℃左右

實施例3 製造化合物(I)之III型結晶對以實施例2獲得之化合物(I)之II型結晶650mg添加甲醇/水混液(9:1 v/v)3.25mL，在4℃下攪拌懸浮液約100分，之後進行濾取、回收固體，並在室溫下減壓乾燥約25分。對該固體500mg添加甲醇/水混液(9:1 v/v)2.5mL，在4℃下攪拌懸浮液約19小時，之後進行濾取、回收固體，並在室溫下減壓乾燥約25分，藉此獲得335.6mg之標記結晶。

粉末X光繞射圖譜(CuKα)顯示於圖5。

又，特徴性繞射角如下。特徴性繞射角(2θ±0．2°)： 11.2°、12.4°、14.1°、14.9°、18.8°及19.4°

又，III型結晶之示差掃瞄熱量測定(DSC)之結果如下。示差掃瞄熱量曲線：顯示於圖6。示差掃瞄熱量曲線中之吸熱波峰(峰頂值)：34℃左右

試驗例1 固體穩定性試驗將以實施例1~3獲得之化合物(I)之I型結晶、II型結晶及III型結晶保存4週，並評價此時的固體穩定性。保存條件：25℃/60%RH(封閉系統) 保存期間：4週保存量：約25mg 保存容器：玻璃瓶

化合物(I)之純度及類似物質量(除化合物(I)之外，檢測出之物質的量)之變化，是量秤約1mg試料，使之溶解於乙腈2mL中，正確量取該液5μL，並依以下方法、利用HPLC來進行分析。此外，內含數據處理之裝置的操作，是依照各裝置所指示的方法及順序。管柱：股份有限公司YMC製 YMC-Triart C8 (4.6×150mm、3μm) UV檢測：248nm 管柱溫度：40℃ 流量：1mL/分樣品冷卻器：25℃ 樣品濃度：0.5 mg/mL 移動相A：水/乙腈(1：1 v/v)混液移動相B：乙腈梯度顯示於表1。

[表1]

結果顯示於以下表2。

[表2]

如表2所示，化合物(I)之I型結晶、II型結晶及III型結晶皆幾乎沒有純度變化。又，在化合物(I)之I型結晶、II型結晶及III型結晶上，皆亦幾乎沒有觀察到類似物質的增加。確認了化合物(I)之I型結晶、II型結晶及III型結晶皆是極為穩定的結晶。

試驗例2 動態水分吸脫附試驗將以實施例1~3獲得之化合物(I)之I型結晶、II型結晶及III型結晶保存4週，並進行此時的水分吸脫附試驗。水分吸脫附試驗是依照以下條件來測定。將約10mg試料填充於専用的石英製管(holder)，在以下條件下，連續測定並記錄試料在各濕度下的重量。此外，內含數據處理之裝置的操作，是依照各裝置所指示的方法及順序。裝置：VTI SA＋(TA Instruments公司製) 乾燥溫度：25℃ 升溫速度：1℃/min 乾燥之平衡：在不超過120分之範圍內，確認不會5分鐘便減少0.01wt%；測定溫度：25℃ 加濕之平衡：在不超過120分之範圍內，確認不會5分鐘便增加0.01wt%；相對濕度計畫(program)：一次上升5%RH直到5~95%RH、一次降低5%RH直到95%RH~5%RH 該等試驗所得之在測定條件範圍下的重量變化顯示於圖7~圖9。

如圖7~9所示，得知化合物(I)之I型結晶、II型結晶及III型結晶在水分吸脫附試驗中，在95%的相對濕度下，皆幾乎沒有吸濕性。

因此，化合物(I)之I型結晶、II型結晶及III型結晶之吸濕性低，在醫藥品之開發候補化合物當中，以品質穩定之醫藥品之工業生產的觀點來看，可說是優異的。

又，化合物(I)之I型結晶、II型結晶及III型結晶，如上述，穩定性高，另一方面，將該等結晶與羥丙甲基纖維素、二甲基亞碸(DMSO)等兩親化合物一起添加到水中，藉此可調製化合物(I)之藥劑懸浮液或藥劑溶液。

試驗例3 藥物動態量秤必要量之化合物(I)，以0.5%羥丙甲基纖維素調製藥劑懸浮液。將各組大鼠之數量設為2隻，使用口服注入器(sonde)將各個藥劑懸浮液口服投予至雄性大鼠(Crl:CD(SD))(本化合物之投予量為10mg/kg)。使用注射筒及注射針在各採血點(投予後0.5、1、2、4、8及24小時)於頸靜脈進行採血(抗凝固劑為肝素鈉)。將採取好之血液利用離心分離(13000rpm、2分、4℃)調製血漿，進行去蛋白處理，之後，將血漿中之化合物濃度以LC/MS/MS(LCMS-8040(shimadzu)或API4000(AB SCIEX)、LC:30-A, 20-A系列(shimadzu)或Waters Acquity (waters))進行測定。除了使用化合物A取代化合物(I)之外，與上述相同的來進行藥劑懸浮液之調製、投予，以及化合物濃度之測定。結果顯示表3。

如表3所示，可確認相較於化合物A，化合物(I)之藥物血中濃度-時間曲線下面積AUC提升了1900倍以上、最高血中濃度C _max提升了1100倍。因此顯示出，相較於已知化合物之化合物A，化合物(I)具有預想外之優異藥物動態。

[表3]

試驗例4　糖尿病(DM)模式大鼠中之藥效評價為了探討在糖尿病模式中化合物之效果，參考Saitoh等人的方法(European Journal of Pharmacology 501(2004)143-149)，利用膀胱內壓檢查法(cystometry)來解析膀胱機能。

調製使鏈脲佐菌素(STZ)在檸檬酸緩衝液(0.1 M citric acid、pH4.2)溶解為32.5mg/mL的STZ溶液，透過在SD大鼠進行腹腔內投予(65mg/kg)，引發DM模式。此外，在sham大鼠則是進行檸檬酸緩衝液處置取代STZ溶液，除此之外，其餘進行相同的操作。

在製作模式之隔日、4週後，透過在清醒條件下於尾靜脈進行採血，測定血糖值。血糖值測定是使用Antsense III[股份有限公司堀場製作所]。此外，將模式製作隔日及4週後之血糖值為300mg/dL以上之個體判定為DM模式成立，並用於之後的操作。

受測物質(化合物A、(I))之投予是從模式製作隔日開始。將Vehicle或化合物投予液以早晚1日2次、10mL/kg之容量，進行4週口服投予。在受測物質最終投予之隔日，將大鼠在異氟醚麻醉下進行開腹，從膀胱頂部插入膀胱內壓測定用之導管(PE-90, Becton Dickinson and Company)。閉腹後，將大鼠放入保定籠，自異氟醚麻醉解除起並放置30分以上的時間後，皮下投予胺基甲酸酯溶液(0.8g/kg)。

於插入膀胱之導管的另一端，透過三方活栓連接壓力轉換器(DX-360、日本光電工業股份有限公司)與輸液泵(TE-331S、TERUMO股份有限公司)。將生理食鹽水持續注入膀胱內(infusion rate：12 mL/hr))時之膀胱內壓以壓力轉換器及多頻道生理記錄儀(polygraph；AP-641G、日本光電工業股份有限公司)來測定，並透過PowerLab (ML866、AD Instruments)連續記錄(sampling rate: 20/sec)於電腦。又，使用設置在保定籠正下方的電子天平[GX-200、股份有限公司A&D]自動測定排尿量，並透過PowerLab連續記錄(sampling rate 20/sec)於電腦。排尿機能參數之記錄及解析是使用PowerLab専用解析軟體Chart 5　(ver. 5.5.6、AD Instruments)來進行。

胺基甲酸酯麻醉後，立刻實施約1.5小時的生理食鹽水膀胱內持續注入(infusion rate：3 mL/hr)，以適應膀胱內壓檢查環境。在適應膀胱內壓檢查環境後，實施利用膀胱內壓檢查(infusion rate：12mL/hr)進行的排尿機能測定(膀胱內壓、排尿量、殘尿量)。

如圖10所示，得知相較於化合物A，化合物(I)顯示出顯著的藥效。

試驗例5 神經生長促進作用之測定為了評價神經生長促進作用，參考Topalli等人的方法(Brain Research 1030 (2004) 116-124)，解析neurite bearing assay(有突起細胞比例)及neurite length assay(神經突長)。

以含有10% fetal bovine serum之DMEM培養基將ND3神經細胞株(European Collection of Authenticated Cell Cultures)播種(0.6×10 ⁴cells/1 mL)到24孔盤。24小時後，去除已播種細胞之培養基，於細胞添加下述溶液：將經二甲基亞碸(DMSO)連續稀釋之化合物(I)，以含有0.1% bovine serum albumin之DMEM調整成DMSO終濃度為0.1%的溶液(評價以duplicate進行)。添加6小時後，分析有突起細胞比例(具有比細胞體之直徑還長之突起的細胞數/總細胞數)及每1細胞之神經突長。又，除了使用化合物A取代化合物(I)之外，進行與上述相同的試驗。此外，總細胞數、有突起細胞比例、及每1細胞之神經突長的解析是使用MetaMorph Neurite Outgrowth Application Module(Molecular devices Japan股份有限公司)。細胞數是表示，將添加有DMSO之孔的細胞數設為1時的相對細胞數(表4、5)。表5顯示，各試驗中以3-(15-甲氧基十五基)-2,4,4-三甲基環己-2-烯-1-酮(化合物(I))之最大活性為1時之化合物A的相對活性。此外，進行複數次試驗，並顯示其平均值。又，採用細胞數為0.5以上之數據。因此，當細胞數小於0.5時，每1細胞之突起長及有突起細胞比例是表記為「-」。

如表4所示，化合物(I)在添加1~100μM時，相對細胞數是0.5以上。

[表4]

如表5所示，確認了相較於化合物A，化合物(I)具有優異的神經生長促進作用。

[表5]

(無)

圖1顯示實施例1所得化合物(I)之I型結晶的粉末X光繞射圖譜(CuKα)(縱軸表示強度(counts)、横軸表示繞射角(2θ))。圖2顯示實施例1所得化合物(I)之I型結晶的示差掃瞄熱量測定(DSC測定)曲線。圖3顯示實施例2所得化合物(I)之II型結晶的粉末X光繞射圖譜(CuKα)(縱軸表示強度(counts)、横軸表示繞射角(2θ))。圖4顯示實施例2所得化合物(I)之II型結晶的示差掃瞄熱量測定(DSC測定)曲線。圖5顯示實施例3所得化合物(I)之III型結晶的粉末X光繞射圖譜(CuKα)(縱軸表示強度(counts)、横軸表示繞射角(2θ))。圖6顯示實施例3所得化合物(I)之III型結晶的示差掃瞄熱量測定(DSC測定)曲線。圖7顯示實施例1所得化合物(I)之I型結晶的水分吸脫附等溫線。圖8顯示實施例2所得化合物(I)之II型結晶的水分吸脫附等溫線。圖9顯示實施例3所得化合物(I)之III型結晶的水分吸脫附等溫線。圖10為各組中殘尿量之圖表。數值表示平均±S.E.。各組之n數從左到右為10、10、12及12。*：p＜0.05，依據Dunnett檢定，對Vehicle顯示出顯著差異；N.S.：依據Dunnett檢定，對Vehicle沒有顯示出顯著差異；#：p＜0.05，依據Student t檢定，對化合物(I)顯示出顯著差異；##：p＜0.01，依據Student t檢定，對Vehicle顯示出顯著差異。

(無)

Claims

一種3-(15-甲氧基十五基)-2,4,4-三甲基環己-2-烯-1-酮之結晶形，是在粉末X光繞射圖譜(CuKα)中，具有選自繞射角(2θ±0.2°)為7.0°、14.0°、17.5°、19.5°、21.0°、23.7°及24.8°之至少3個以上波峰。
如請求項1之結晶形，其在粉末X光繞射圖譜(CuKα)中，在繞射角(2θ±0.2°)為7.0°、14.0°、17.5°、19.5°、21.0°、23.7°及24.8°處具有波峰。
如請求項1或2之結晶形，其粉末X光繞射圖譜與記載於圖1者實質相同。
如請求項1或2之結晶形，其在示差掃瞄熱量測定(DSC測定)中，具有波峰溫度為35℃左右的吸熱波峰。
一種醫藥組成物，含有如請求項1或2之結晶形。