TWI872173B

TWI872173B - ((2s)-3-([1,1'-聯苯]-4-基)-2-((羥基((1r)-1-(((1-(異丁醯氧基)乙氧基)羰基)胺基)乙基)磷醯基)甲基)丙醯基)-l-丙胺酸的二鈉鹽的工業製備方法

Info

Publication number: TWI872173B
Application number: TW109143943A
Authority: TW
Inventors: 哈維博拉斯; 亞倫普萊爾; 古雷姆格拉奇; 羅伯特法內里; 趙信軍
Original assignee: 香港商智騰大中華區有限公司
Priority date: 2019-12-11
Filing date: 2020-12-11
Publication date: 2025-02-11
Also published as: EP4073080B1; ZA202205454B; US20230041504A1; JP7675079B2; EP4073080A1; FR3104581A1; BR112022009690A2; US12391710B2; FR3104581B1; IL293793A; MX2022007205A; CA3157968A1; JP2023505577A; IL293793B2; WO2021116617A1; CN114787171B; IL293793B1; KR20220113439A; TW202136279A; CN114787171A

Abstract

本發明係有關於一種用於具有下列化學式(E)的((2S)-3-([1,1'-聯苯]-4-基)-2-((((R)-1-胺基乙基)(羥基)磷醯基)甲基)丙醯基)-L-丙胺酸從(S)-1-苯乙胺經由一種多步驟合成的工業製備方法：

本發明係有關於一種用於具有下列化學式(I)的((2S)-3-([1,1'-聯苯]-4-基)-2-((羥基((1R)-1-(((1-(異丁醯氧基)乙氧基)羰基)胺基)乙基)磷醯基)甲基)丙醯基)-L-丙胺酸之二鈉鹽從諸如上面所界定的化合物(E)在兩個額外步驟中的工業製備方法：

本發明亦有關於一種用於本發明之該具有化學式(E)的化合物之工業製備方法的中間產物之非鏡像異構物的濃化之方法。

Description

((2S)-3-([1,1'-聯苯]-4-基)-2-((羥基((1R)-1-(((1-(異丁醯氧基)乙氧基)羰基)胺基)乙基)磷醯基)甲基)丙醯基)-L-丙胺酸的二鈉鹽的工業製備方法

發明領域

本發明係有關於一種用於從(S)-1-苯乙胺來製備((2S)-3-([1,1'-聯苯]-4-基)-2-((羥基((1R)-1-(((1-(異丁醯氧基)乙氧基)羰基)胺基)乙基)磷醯基)甲基)丙醯基)-L-丙胺酸的二鈉鹽之新穎工業方法。

發明背景

((2S)-3-([1,1'-聯苯]-4-基)-2-((羥基((1R)-1-(((1-(異丁醯氧基)乙氧基)羰基)胺基)乙基)磷醯基)甲基)丙醯基)-L-丙胺酸的二鈉鹽，亦即被指定為具有下列化學式的化合物(I)，係為((2S)-3-([1,1'-聯苯]-4-基)-2-((((R)-1-胺基乙基)(羥基)磷醯基)甲基)丙醯基)-L-丙胺酸胺基次磷酸[在本案的詳細說明中被指定為化合物(E)]之一前驅藥：

該化合物(E)是中性胺基肽酶(neutral aminopeptidase,NAP)和腦啡肽酶(neprilysin,NEP)的一種選擇性雙重抑制劑(selective double inhibitor)]。

化合物(I)已為Bonnard等人在Pharmacol.Res.Perspect.,2015,3(2),e00116中予以描述為具有一重要的鎮痛效用。

化合物(I)及其作為一種鎮痛劑的用途首次被描述於專利申請案WO 2010/010106中。被例證於這件申請案中的方法使得能夠從二苯甲胺鹽酸鹽在4個步驟中來製備((R)-1-(((苄氧基)羰基)胺基)乙基)次磷酸(示範例1，步驟3)。這個次磷酸下一步在6個額外步驟中與2-([1,1'-聯苯]-4-基甲基)丙烯酸反應而供予化合物(I)。這個合成方法在最終的步驟下明顯地需要冷凍乾燥。

與該合成特別有關聯的技術方面，特別是冷凍乾燥、當量的數目、某些難處理的試劑的使用和/或這個製程當中所涉及的純化技術，使得要將WO 2010/010106中所描述的合成途徑轉置成為工業規模係為不可能的。特別地：- 如在Baylis et al,J.Chem.Soc.,Perkin trans.I 1984,p.2846-2853的刊物中所描述的，就該方法的第2個步驟所得到的消旋化合物之一個採用(R)-甲苄基胺的化學解析之步驟(參見示範例1，步驟3)強烈地衝擊這個步驟的產率，至少有一半的產物被損失(86%的正確立體異構物被回收，這代表50%的起始消旋混合物，亦即這個步驟的正確立體異構物之一總產率是43%)；- 一個皂化作用的步驟亦被進行(參見示範例3，步驟2)。這個特別的反應要在工業規模上實施是有困難的，明顯地是因為被產生的相當大數量之苄醇使得分離是困難的，並且引入重要雜質之形成；- 為了去保護以供予示範例3之步驟2中所描述的化合物，一個在強酸性介質(配於乙酸中的HBr 33%)中的去保護是必要的。這個去保護需要重大數量之腐蝕酸，難以移除；- 一個在矽膠管柱上的純化，俾以移除步驟3的副產物(4-硝基苯酚)而因此供予示範例3之步驟3中所描述的化合物；- 在一個倒數第二個步驟的期間當中將示範例3之步驟4的化合物去保護以供予示範例4的化合物之必要性，該示範例4的化合物下一步將會在最後步驟的期間當中被鹽化，俾以供予化合物(I)；- 此外，這個合成需要使用二苯甲胺來作為起始產物，這對於原料的成本具有一個非常必然性的衝擊。

有關於一個大規模有機合成的發展之一重要目標是要找出可以完美地轉置成為工業條件的合成方法。在這方面，該合成的不同參數可予以最佳化，諸如特別是諸等溶劑，為了成為可容易回收的，優選地揮發性越低越好；以及所使用的溫度，優選地落在一可容易達到的溫度範圍內。亦為有利的是：不相同的中間產物和產物之純化可以一種容易的方式以及在相容於大規模的條件下來予以進行。最後，優選地，該等反應的混合物和產物被分離而且係為熱安定的。

優良製造規範(GMP)已就可被投藥給人類或動物的藥品之製備來予以定義。GMP指引需要一個用於製造的品質方，因而允許企業來最小化或者消除污染、混淆和錯誤的事故。

就本案發明人所知，迄今還不曾有使得合成化合物(I)成為可能的工業方法被描述過。因此，存在有一個需要來發展出一種用於合成化合物(I)的方法，該方法可被容易地而且有效地調適到工業規模，特別是一種當中沒有使用到毒性溶劑、管柱層析術和冷凍乾燥的方法。此外，將會是有趣的是：這個合成方法使得要減少步驟的數目以及關聯性原料的成本成為可能。

發明的說明

本發明係有關於一種用於具有下列化學式(I)的((2S)-3-([1,1'-聯苯]-4-基)-2-((羥基((1R)-1-(((1-(異丁醯氧基)乙氧基)羰基)胺基)乙基)磷醯基)甲基)丙醯基)-L-丙胺酸之二鈉鹽的工業製備方法：

其中記號(1R)和(2S)係指定在該分子當中它們所指出的該等原子的位置還有它們的絕對組態。記號*係指明一個手性碳原子。

本發明的方法包括下列的連續步驟：(1)具有下列化學式(A)的化合物之製備：

藉由：(1a)位於一極性質子性溶劑中的(S)-1-苯乙胺與一含有次磷酸H₃PO₂之水溶液和乙醛在一個莫耳當量[相對於(S)-1-苯乙胺，多了或少了0.1當量]的鹽酸之存在下的反應，接著(1b)從步驟(1a)而形成的鹽類使用氧化丙烯的處理，接著(1c)使用一極性質子性的結晶化以及該具有化學式(A)的化合物藉由過濾之回收，(2)具有下列化學式(B)的化合物之製備：

藉由：(2a)衍生自步驟(1)之該具有化學式(A)的化合物與(2-(4-聯苯)甲基)丙烯酸的苄基酯在一含有三甲基矽基基團的來源之存在下的反應，接著(2b)該具有化學式(B)的化合物藉由下列的回收：(2b.1)使用一由非極性非質子性溶劑與水所構成的混合物之結晶化並接而過濾，或(2b.2)在丙酮中的研製、過濾以及濾液的蒸發，(3)具有下列化學式(C)的化合物之製備：

其中P’是一個具有胺官能的保護基團，藉由：(3a)在相對於該具有化學式(B)的化合物之重量係為10重量%的Pd/C之存在下，該具有化學式(B)的化合物在氫氣氛之下的氫解，接著(3b)從步驟(3a)而形成的胺使用一個保護基團P’之保護以及該具有化學式(C)的化合物之回收，(4)具有下列化學式(E)的化合物之製備：

藉由： (4a)該具有化學式(C)的化合物與(L)-丙胺酸的三級丁基酯之胜肽偶合以及具有下列化學式(D)的化合物之回收：

(4b)位在N-端位置的保護基團P’與位在C-端位置的三級丁基基團之去保護以及該具有化學式(E)的化合物之回收，(5)具有下列化學式(F)的化合物之製備：

藉由該具有化學式(E)的化合物與醯氧基烷基羰基N-羥基琥珀醯亞胺在一鹼之存在下的反應，接著(6)該具有化學式(I)的化合物的回收，藉由在一弱鹼之一鈉鹽的存在下、於一非極性非質子性溶劑中的沉澱。

本發明的另一個目的係有關於一種用於具有化學式(E)的((2S)-3-([1,1'-聯苯]-4-基)-2-((((1R)-1-胺基乙基)(羥基)磷醯基)甲基)丙醯基)-L-丙胺酸的工業製備方法，其包括諸如上面所定義的連續步驟(1)至(4)。

本發明亦有關於一種用於本發明之具有化學式(E)的化合物之工業製備方法的中間產物之非鏡像異構物的濃化之方法。

本發明的另一個目的係有關於諸如上面所定義的具有化學式(B)的合成中間產物。

發明的詳細說明

在以下的說明中，除非另有提及，所有的百分比係以莫耳百分比來予以表示。

本發明係有關於一種用於具有化學式(E)的((2S)-3-([1,1'-聯苯]-4-基)-2-((((1R)-1-胺基乙基)(羥基)磷醯基)甲基)丙醯基)-L-丙胺酸以及進一步的具有化學式(I)的((2S)-3-([1,1'-聯苯]-4-基)-2-((羥基((1R)-1-(((1-(異丁醯氧基)乙氧基)羰基)胺基)乙基)磷醯基)甲基)丙醯基)-L-丙胺酸之二鈉鹽的工業製備之多步驟合成(multi-step synthesis)。

“本發明的第一備選方案”指定這樣的備選方案：根據該備選方案，該具有化學式(B)的化合物之合成涉及步驟(2b.1)的進行，有利地直接跟隨在步驟(2a)之後。步驟(2b.2)因此未被進行。根據這個備選方案，衍生自步驟(2b)的該具有化學式(B)的化合物具有一光學純度(2S/2R)係大於或相等於95/5。這個鏡像異構物的濃化接下來在用於化合物(C)、(D)和(E)之合成的步驟(3)與(4)的每一者之過程中係為守恆的。因此，根據這個第一備選方案，化合物(B)、(C)、(D)和(E)之每一者係對應於諸如被表示於對應的化學式中的非鏡像異構物，具有一嚴格大於95%(更加優選地大於99%)之非鏡像異構物過量。

“本發明的第二備選方案”指定這樣的備選方案：根據該備選方案，該具有化學式(B)的化合物之合成涉及步驟(2b.2)的進行，有利地直接跟隨在步驟(2a)之後。步驟(2b.1)因此未被進行。根據這個備選方案，衍生自步驟(2b)的該具有化學式(B)的化合物具有一光學純度(2S/2R)係嚴格大於50/50並且低於或相等於95/5，特別是被包括在51/49和60/40之間。根據這個第二備選方案，為了提高化合物(C)和(E)的每一者之非鏡像異構物過量，非鏡像異構物的濃化步驟可在步驟(3)與(4)的每一者之後來予以進行。

根據本發明，除非另有提及，化合物(A)、(F)和(I)係對應於諸如被表示於對應的化學式中的鏡像異構物或非鏡像異構物，具有一有利地嚴格大於95%(更加優選地大於99%)之鏡像異構物的或非鏡像異構物過量。

應予以注意的是：術語“鏡像異構物過量”或“非鏡像異構物過量”跟術語“光學純度”和“手性純度”是可互換的。就本發明的意義來說，“光學純度(XR/XS)大於Y/Z”被用來表示：位在位置X中的原子是一個手性中心，該手性中心被發現有Y%係呈R型以及有Z%係呈S型。

就本發明的意義來說，“光學純度XR/XS嚴格大於50/50”被用來表示：該鏡像異構物XR被發現在比例上係嚴格大於該鏡像異構物XS。

就本發明的意義來說，“濃鹽酸”被用來表示：一種鹽酸的水溶液，它包含有按重量計介於33%和37%之間的鹽酸，優選地它按重量百分比計係為一個37%的濃縮液。

就本發明的意義來說，“三甲基矽基基團的來源”被用來表示：一種能夠提供一個或多個具有化學式-Si(CH₃)₃的三甲基矽基(TMS)基團的化學化合物。換言之，當它與另一個化合物相反應時，該TMS來源化合物可傳送一個或多個TMS基團給該化合物。這些TMS來源化合物一般地被使用作為用TMS基團來保護諸如羥基或胺的官能基之試劑。TMS來源化合物的示範例係為N,O-雙(三甲基矽基)乙醯胺(BSA)、氯化三甲基矽(TMSCl)、三氟甲磺酸三甲基矽酯(TMSOTf)以及六甲基二矽氮烷(HMDS)。

就本發明的意義來說，“室溫”被用來表示：一個被包括在15℃和30℃之間的溫度，優選地介於18℃和25℃之間。

除非另有提及，詞語“當量”在本案說明中係指1個莫耳當量。

就本發明的意義來說，“保護基團”被用來表示：一個使得要保護一反應性化學官能來對抗非所欲的反應成為可能的基團，諸如被描述於T.W.Greene,“Protective Groups In Organic synthesis”,(John Wiley & Sons,New York (1981))以及Harrison et al.“Compendium of Synthetic Organic Methods”,Vols.1 to 8(J.Wiley & sons,1971 to 1996)的基團。

就本發明的意義來說，“部分消旋化”被用來表示一個所謂的“純質”鏡像異構物[也就是說具有一為至少95%(優選地至少99%)之鏡像異構物過量]成為一由同一化合物的兩個鏡像異構物所構成的混合物之轉換，該兩個鏡像異構物係呈不相等的數量(相較於另一者，具有一個多數鏡像異構物)，有別於一個當中的兩個鏡像異構物將要被發現係呈相同數量的全消旋化(然後被指定為一個消旋混合物)。

在本發明中，表述“位在第2個碳上”意指根據IUPAC表示法被標記在位置2中的碳，諸如被表示於上面化學式(B)、(C)、(D)、(E)、(F)和(I)中的，帶有甲基-聯苯基團。

下面的縮寫被使用於本發明的說明中：Bn：苄基，HPLC：高效能液相層析術，TMS：三甲基矽基，BSA：N,O-雙(三甲基矽基)乙醯胺，TMSOTf：三氟甲磺酸三甲基矽酯，HMDS：六甲基二矽氮烷，MTBE：甲基三級丁基醚，THF：四氫呋喃，DMF：二甲基甲醯胺，Boc：三級丁氧羰基，CBz：苄氧基羰基，TBTU：2-(1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基胺鎓四氟硼酸鹽， HATU：(二甲基胺基)-N,N-二甲基(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)甲亞胺鎓六氟磷酸鹽，BOP：苯并三唑-1-基氧基三(二甲基胺基)鏻六氟磷酸鹽，PyBOP：苯并三唑-1-基氧基三吡咯啶基鏻六氟磷酸鹽，HOBt：羥基苯并三唑，DCC：二環己基碳二亞胺，EDC：1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳二亞胺，DIPEA：二異丙基乙基胺，Pd/C：鈀/碳。

用於具有化學式(E)的化合物之製備的方法

本發明之一目的係有關於一種用於具有下列化學式(E)的((2S)-3-([1,1'-聯苯]-4-基)-2-((((R)-1-胺基乙基)(羥基)磷醯基)甲基)丙醯基)-L-丙胺酸之工業製備方法：

包括下列步驟：

步驟(1)：化合物(A)的合成，藉由(S)-1-苯乙胺與一含有次磷酸H₃PO₂之水溶液以及乙醛在1個莫耳當量的濃鹽酸之存在下的反應，接而為氧化丙烯的處理；步驟(2)：具有化學式(B)的化合物之合成，藉由該具有化學式(A)的化合物與(2-(4-聯苯)甲基)丙烯酸的苄基酯之反應，步驟(3)：具有化學式(C)的化合物之合成，藉由該具有化學式(B)的化合物在Pd/C的存在下之氫解以及所形成的胺使用基團P’的保護；步驟(4)：具有化學式(E)的化合物之合成，藉由該具有化學式(C)的化合物與(L)-丙胺酸之三級丁基酯的胜肽偶合，接而為該保護基團的去保護。

步驟(1)

該具有化學式(A)的化合物已在刊物Hamilton et al.,Tet.Lett.,1995,36,4451-4454之內被引述，在一個胺基-膦酸的一般合成當中，但是在該刊物中未被當作一個示範例來予以描述。就本案發明人所知，該具有化學式(A)的化合物因此事先不曾被特徵化。這個刊物的作者指出：就這個特別的示範例，所使用的反應條件“供予一個深色溶液，無產物可從中被分離出”。這個刊物描述一種水解-氧化過程俾便用來合成α-胺基膦酸而不是有如本發明中的胺基次磷酸。它亦指出：位在有機磷化合物的胺官能上的保護基團藉由氫解之移除可能是有問題的。

本案發明人已經以一令人驚訝的方式而發現：1個當量的HCl在步驟(1a)的期間當中的使用使得要避免反應混合物的降解成為可能。1個當量的HCl(多了或少了0.1當量)之存在係為本發明的合成之一本質參數。沒有它的存在，降解被觀察到。

本發明的方法之步驟(1)包括諸如被描述於上面以及下面圖解(diagram)之中的步驟(1a)至(1c)。

在該申請案WO 2010/010106中，被意欲要與(2-(4-聯苯)甲基)丙烯酸的苄基酯來反應的(1R)(1-苄氧基羰基胺基-乙基)-次磷)酸手性前驅物係於4個步驟中經由消旋次磷酸在(R)(+)α-甲苄基胺的存在下之一解析而被獲得，具有一為28%的總產率(參見示範例1)。藉由消旋化合物在(R)(+)α-甲苄基胺的存在下之再結晶化的解析步驟特別地要為這個不良的總產率來負責，因為根據定義，對應於非所欲的鏡像異構物之50%產物沒有被回收。此外，這種類型的手性解析到工業規模的轉置沒有使得要改善該產率成為可能。

在本發明中，手性係在合成開始之時藉由起始試劑，亦即步驟(1a)中的(S)-1-苯乙胺，而被直接地誘發。被使用於本發明中的(S)-1-苯乙胺是一種具有一為至少98%(優選地99%)的手性純度之商業上可獲得的產物(例如，由Sigma-Aldrich所出售的)。根據本發明，一種具有一為至少90%的手性純度之(S)-1-苯乙胺也可以被用來引入手性。

在一極性質子性溶劑中，在相對於(S)-1-苯乙胺的數量係為1個莫耳當量的鹽酸之存在下，(S)-1-苯乙胺與次磷酸H₃PO₂之一水溶液以及無水乙醛(也就是說化學純度大於或相等於99%)來反應。

被使用於步驟(1a)中的鹽酸有利地對應於一個濃鹽酸水溶液，它特別地使得要避免反應混合物之稀釋成為可能。優選地，這個溶液是按重量計37%濃鹽酸。

根據一個被偏好的具體例，步驟(1a)的極性質子性溶劑係選自於醇類，諸如甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇、三級丁醇以及此等的混合物。優選地，它是乙醇。

優選地，步驟(1a)首先包括將該鹽酸溶液(有利地是濃縮的)加入至一個配於諸如上面所定義的極性質子性溶劑中的(S)-1-苯乙胺溶液中，接著第二步，將該次磷酸溶液加入至含有(S)-1-苯乙胺與鹽酸的混合物中，以及最後、第三步，將無水乙醛加入至含有(S)-1-苯乙胺、鹽酸與次磷酸的混合物中。

有利地，該水性次磷酸溶液按重量計係為一個50%溶液。有利地，相對於(S)-1-苯乙胺，該次磷酸係呈被包括在1與2當量之間的數量(優選地係介於1.1與1.5當量之間，更加優選地係處在1.1當量)來予以加入。

相對於(S)-1-苯乙胺，乙醛優選地係呈被包括在1與2當量之間的數量(優選地係介於1.2與1.5當量之間，更加優選地係處在1.2當量)來予以加入。典型地，無水乙醛被使用。

在一個有利的具體例中，在該濃鹽酸溶液與該次磷酸溶液的加入期間當中，該(S)-1-苯乙胺的溶液係處在一被包括在-5℃與5℃之間的溫度下，優選地係處在0℃下。

所形成的反應混合物被攪拌歷經一充分的時間，而使得(S)-1-苯乙胺的轉化係大於或相等於90%。反應的監測特別地可藉由HPLC來予以確保。優選地，這個時間係被包括在1小時與8小時之間，優選地係介於3小時與6小時之間，更加優選地係介於3小時與4小時之間。該攪拌有利地係在所使用的溶劑之沸點(多了或少了5℃)下來予以進行。

步驟(1a)優選地係在惰性氣氛下來予以進行，例如在氮氣或氬氣氣氛下。

在步驟(1b)中，氧化丙烯被加入至從步驟(1a)而形成的該反應混合物。因此，步驟(1b)典型地包括下列連續步驟：(1b.1)氧化丙烯至衍生自步驟(1a)的反應混合物的加入並且獲得一懸浮液， (1b.2)衍生自步驟(1b.1)的懸浮液之攪拌，(1b.3)藉由衍生自步驟(1b.2)的懸浮液之過濾來回收一固體。

相對於(S)-1-苯乙胺，氧化丙烯有利地係呈被包括在1與4當量之間的數量(優選地係介於1.5與3當量之間，更加優選地係為2當量)來予以加入。這個加入優選地係在一被包括在0℃與15℃之間的溫度(特別是10℃)下來予以進行。所形成的混合物典型地被攪拌歷經一段被包括在5小時與25小時之間的時間，優選地介於8小時與18小時之間，特別是介於10小時與14小時之間，特別是在室溫之下。

一固體在步驟(1b)結束之時藉由過濾來予以回收。該固體接下來藉由在一極性質子性溶劑中的懸浮而被結晶化。典型地，它是相同於那個被使用於步驟(1a)中的溶劑。

有利地，該結晶化步驟(1c)包括下列連續步驟：(1c.1)衍生自步驟(1b)的該固體在一極性質子性溶劑中的稀釋，該極性質子性溶劑優先地選自於醇類，諸如甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇、三級丁醇以及此等的混合物，有利地是乙醇，(1c.2)冷卻從步驟(1c.1)而形成的混合物至一被包括在10℃與20℃之間的溫度，(1c.3)化合物(A)在過濾與乾燥之後的回收，特別是在真空下。

在一個特別的具體例中，化合物(A)在步驟(1b)結束之時藉由過濾來予以直接回收而不需要有步驟(1c)。

在另一個具體例中，步驟(1c)選擇性地被重複，特別是一次。

在另一個特別的具體例中，衍生自步驟(1b)的該固體係使用一極性質子性溶劑來予以清洗接而被乾燥，特別是在真空下，俾以供予一含有該具有化學式(A)的化合物之第一部分。根據這個具體例，衍生自步驟(1b)的過濾之濾液被濃縮，特別是在真空下，俾以供予一濕潤的漿體，根據上面所述的步驟(1c.1)至(1c.3)該濕潤的漿體本身被結晶化。

相較於WO 2010/010106中所描述的方法[其中被意欲要與(2-(4-聯苯)甲基)丙烯酸的苄基酯來反應之手性前驅物(1R)(1-苄氧基羰基胺基-乙基)-次磷)酸係在4個反應步驟之後被獲得，具有一為28%的總產率]，根據本發明，被意欲要與(2-(4-聯苯)甲基)丙烯酸的苄基酯來反應之次磷酸的手性前驅物衍生物係在一個反應中被獲得，具有一為38至40%的平均產率。

在步驟(1)結束之時被獲得的該具有化學式(A)的化合物具有一光學純度(1R/1S)係大於95/5，優選地大於96/4，更加優選地大於97/3，甚至更加優選地大於98/2，甚至更加優選地大於99/1。

步驟(2)

本發明的方法之步驟(2)包括諸如被描述於上面以及下面圖解中的步驟(2a)和(2b)。

在步驟(2a)中，衍生自步驟(1)之該具有化學式(A)的化合物因此在一個三甲基矽基基團的來源之存在下與(2-(4-聯苯)甲基)丙烯酸的苄基酯反應。有利地，這個三甲基矽基基團的來源係選自於N,O-雙(三甲基矽基)乙醯胺(BSA)、氯化三甲基矽(TMSCl)、TMS三氟甲磺酸酯(TMSOTf)和六甲基二矽氮烷(HMDS)，優選地它是N,O-雙(三甲基矽基)乙醯胺(BSA)。為使該磷原子係為要與(2-(4-聯苯)甲基)丙烯酸的苄基酯之丙烯酸官能反應的唯一原子，該三甲基矽基基團的來源使得要在該具有化學式(A)的化合物之二級胺與羥基官能上引入TMS基團成為可能。

該(2-(4-聯苯)甲基)丙烯酸的苄基酯係根據被描述於該申請案WO 2010/010106中的方法(參見示範例2)(使用Organic Synthesis Coll.Vol.3p.337中所描述的操作程序)而被獲得。

優選地，步驟(2a)首先包括該具有化學式(A)的化合物與該(2-(4-聯苯)甲基)丙烯酸的苄基酯的混合，接著第二步是將該三甲基矽基基團的來源加入至該混合物。

有利地，相對於該具有化學式(A)的化合物，該三甲基矽基基團的來源係呈被包括在2與6當量之間的數量(優選地係介於3與4.5當量之間，更加優選地係為3.2當量)來予以加入。根據本發明，被使用的該三甲基矽基基團的來源(典型地BSA)之數量因此被限制，這就成本以及沒有反應的試劑之數量或者由這樣的數量所產生的雜質之移除而言係為有利的，而不像該申請案WO 2010/010106(在該案中，BSA被使用作為溶劑而因此係呈大量過量)。

相對於該具有化學式(A)的化合物，該(2-(4-聯苯)甲基)丙烯酸的苄基酯優選地係呈被包括在1與2當量之間的數量(優選地係介於1與1.5當量之間，更加優選地係為1當量)來予以加入。

包含有該具有化學式(A)的化合物、該(2-(4-聯苯)甲基)丙烯酸的苄基酯與該三甲基矽基基團的來源之反應混合物被攪拌歷經一充分的時間，而使得該具有化學式(A)的化合物的轉化係大於或相等於90%。反應的監測特別地可藉由HPLC來予以確保。優選地，這個時間係被包括在1小時與8小時之間，優選地係介於3小時與6小時之間，更加優選地係介於3小時與4小時之間。該攪拌有利地係於一被包括在40℃和120℃之間(優選地介於60℃和100℃之間，更加優選地介於75℃和85℃之間)的溫度下來予以進行。

步驟(2a)優選地係在惰性氣氛下來予以進行，例如在氮氣或氬氣氣氛下。

該具有化學式(B)的化合物接下來在步驟(2b)的期間當中被回收。

根據本發明的一個第一備選方案，步驟(2b)對應於結晶化的步驟(2b.1)。根據這個備選方案，步驟(2a)因此有利地被步驟(2b.1)直接跟隨在後。在這個第一備選方案中，步驟(2b.2)沒有被進行。

結晶化的步驟(2b.1)典型地包括下列連續步驟：(2b.1.1)冷卻衍生自步驟(2a)的反應混合物至一被包括在20℃和40℃之間的溫度，(2b.1.2)使用一含有非極性非質子性溶劑與水的混合物來稀釋該反應混合物以及一懸浮液的形成，(2b.1.3)藉由衍生自步驟(2b.1.2)的該懸浮液之過濾與乾燥(特別是在真空下)來回收該具有化學式(B)的化合物。

根據這個備選方案，該具有化學式(B)的化合物因此在一含有非極性非質子性溶劑與水的混合物中結晶。該非極性非質子性溶劑特別地係選自於下列之中：烴類(諸如己烷、庚烷)、醚類[諸如二乙醚、二異丙醚、甲基三級丁基醚(MTBE)與四氫呋喃(THF)]，以及此等的混合物。特別地它是MTBE。步驟(2b.1.2)的結晶化溶劑因此優選地是一個MTBE/水混合物，特別是呈5/3的比例。

水在該反應混合物中的存在使得要去保護該等TMS官能成為可能。在該沉澱步驟之前，溶液中的化合物(B)沒有被濃化或被稍微地濃化以非鏡像異構物(1R,2S)。藉由¹³P NMR來予以測量，位在第2個碳上的該等非鏡像異構物(1R,2S/1R,2R)之比例係為例如60/40。

在步驟(2b.1.2)的期間當中，在一含有非極性非質子性溶劑與極性溶劑之混合物中的稀釋之後的該反應混合物被攪拌歷經一充分的時間，而使得化合物(B)沉澱，這個時間典型地被包括在2小時與24小時之間，優選地是12小時。

在所描述的該等條件中，步驟(2b.1.2)的結晶化係為非鏡像選擇性的(diastereoselective)，這表示：相較於非鏡像異構物(1R,2R)，具有組態(1R,2S)之所欲求的非鏡像異構物呈一多數方式來沉澱。在步驟(2)結束之時所獲得的該具有化學式(B)的化合物因此大多數係為具有組態(1R,2S)。

就本發明的意義來說，“大多數”或“呈多數方式”被用來表示：相較於該非鏡像異構物(1R,2R)，該非鏡像異構物(1R,2S)係呈嚴格大於50%之比例被獲得。

根據本發明的一個第一備選方案，衍生自步驟(2b.1)的該具有化學式(B)的化合物在該第2個碳(2S/2R)上具有一光學純度係大於95/5，優選地大於96/4，更加優選地大於97/3，甚至更加優選地大於98/2，甚至更加優選地大於99/1。

根據本發明，衍生自與該(2-(4-聯苯)甲基)丙烯酸的苄基酯的反應之該具有化學式(B)的化合物係以一為54%的平均產率被獲得。相較於該申請案WO 2010/010106(參見示範例3，步驟1)中所描述的衍生自與該(2-(4-聯苯)甲基)丙烯酸的苄基酯之反應的化合物之結晶化步驟的79%，假定在步驟(2a)結束之時所獲得的位在該第2個碳(2S/2R)上之非鏡像異構物比值係為大約60/40，該結晶化步驟(2b.1)的平均產率係為大約90%。

根據本發明的一個第二備選方案，步驟(2b)對應於步驟(2b.2)。因此，步驟(2a)有利地被步驟(2b.2)直接跟隨在後。在這個第二備選方案中，步驟(2b.1)沒有被進行。

步驟(2b.2)典型地包括下列連續步驟：(2b.2.1)衍生自步驟(2a)的該反應混合物之蒸發以及一固體之回收，(2b.2.2)衍生自步驟(2b.2.1)的該固體在丙酮中的研製、過濾以及位在該濾液中的該具有化學式(B)的化合物藉由蒸發之回收。

典型地，衍生自步驟(2b.2.1)的該固體對應於具有化學式(B)之所謂的“原始”化合物，也就是說在該第2個碳(2S/2R)上具有一光學純度係有利地嚴格大於50/50並且低於或相等於95/5，典型地被包括在51/49和70/30之間，特別是57/43。

步驟(2b.2.2)對應於一為該具有化學式(B)的化合物之非鏡像異構物的濃化之步驟。

根據一個被偏好的具體例，步驟(2b.2.2)的研製被進行歷經一被包括在30分鐘與2小時之間的期間，典型地歷經1小時。該步驟的溫度特別地是相等於室溫。

在這個研製步驟的期間當中，該具有組態(1R,2R)的非鏡像異構物呈一多數方式來沉澱，而該所欲求的具有組態(1R,2S)的非鏡像異構物在該濾液中呈一多數方式被回收。

典型地，在步驟(2b.2.2)結束之時，在該濾液中被獲得之該具有化學式(B)的化合物在該第2個碳(2S/2R)上具有一光學純度被包括在70/30和90/10之間，優選地介於80/20和90/10之間，特別是81/19。

步驟3

本發明的方法之步驟3包括諸如被描述於上面以及下面圖解中的步驟(3a)和(3b)。

步驟(3a)係在於在碳上鈀(Pd/C)之存在下的氫解，而使得要將存在於該具有化學式(B)的化合物上之苄基基團與1-苯基乙基基團去保護成為可能。在該申請案WO 2010/010106中，3-[(2-苄氧基羰基-3-聯苯-4-基-丙基)-羥基-膦醯]丁酸的苄基酯之苄基基團與羧基苄基基團的去保護係藉由在一重要數量的氫氧化鈉之存在下的皂化作用來完成的(參見示範例3，步驟2)。但是，這個皂化作用要在工業規模上實施是有困難的，因為被產生的苄醇之數量創造出一個三相介質，這使得反應中間產物的分離是困難的，而且可能產生呈必然數量的雜質。

根據本發明，藉由氫解的去保護不產生苄基醇而是可以容易地移除之副產物(諸如甲苯和乙苯)，藉由在減壓下的蒸發，而因此證明更適合於在工業規模上的合成。

根據本發明之該苄基基團與該1-苯基乙基基團的連續去保護被例證於下面圖解中：

其中X⁺表示一個衍生自所使用的鹼之相對離子。

有利地，步驟(3a)包括下列連續步驟：(3a.1)一包含有該具有化學式(B)的化合物位於一質子性溶劑或一由質子性溶劑所構成的混合物中的懸浮液之製備，(3a.2)將一鹼加入至在步驟(3a.1)所製備的該懸浮液， (3a.3)相對於該具有化學式(B)的化合物之重量，將按重量計為10%的Pd/C加入至從步驟(3a.2)而形成的該懸浮液，並且以H₂沖洗所形成的反應混合物，(3a.4)過濾以及濃縮該反應混合物。

根據一個被偏好的具體例，步驟(3a.1)係在一質子性溶劑來予以進行，該質子性溶劑係選自於下列之中：水、乙酸、醇類(諸如甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇、異丁醇和三級丁醇)，以及此等的混合物。優選地，它是一種水/醇混合物，特別是水/乙醇。

有利地，步驟(3a.2)中的該鹼係選自於三乙胺、三甲胺、二異丙基乙基胺、氫氧化鈉(NaOH)、氫氧化鉀(KOH)、氫氧化鋰(LiOH)、氫氧化鋇(Ba(OH)₂)、氫氧化鈣(Ca(OH)₂)以及氫氧化銫(Cs(OH)₂)之中，優選地它是氫氧化鈉，特別是1N氫氧化鈉。

根據一個被偏好的具體例，在該強鹼的加入期間當中，衍生自步驟(3a.1)的該懸浮液係處在一被包括在-10℃和10℃之間(優選地介於-5℃和5℃之間，更加優選地是0℃)的溫度下來予以進行。

相對於該具有化學式(B)的化合物，該強鹼有利地係呈被包括在1與2當量之間的數量(優選地係介於1與1.5當量之間，更加優選地係為1當量)來予以加入至衍生自步驟(3a.1)的該懸浮液。

從步驟(3a.2)而形成的該混合物典型地在室溫下予以攪拌歷經一充分的期間以便觀察到完全的溶化，特別是歷經一被包括在1小時與5小時之間的時間。

在Pd/C加入至該反應混合物之後，該混合物在以H₂予以沖洗之前有利地以氮氣或氬氣來予以沖洗。

根據一個具體例，從步驟(3a.3)而形成的該反應混合物係在一被包括在15℃和40℃之間(優選地介於20℃和30℃之間)的溫度下被攪拌歷經一被包括在15小時與30小時之間(優選地介於18小時與25小時之間，更加優選地是18小時)的時間。這個攪拌典型地係在一為1巴(bar)的H₂之壓力下來予以進行。

在一個特別的具體例中，在一用以將該苄基基團去保護但是在該苯基乙基基團的去保護發生之前的充分時間之後，從步驟(3a.3)而形成的該反應混合物之攪拌被停止。在這個情況下，該胺官能保持著被該苯基乙基基團所保護，而步驟(3b)是沒有必要的。

在步驟(3a.4)期間當中，該反應混合物被過濾以移除Pd/C。該濾液接下來被濃縮，例如在真空下，俾以移除一部分的該溶劑，特別是該醇。

在文獻(諸如舉例來說Baylis et al,J.Chem.Soc.,Perkin trans.I 1984,p.2846-2853的刊物)中記載：次磷酸是一種Pd催化劑毒。那就是為什麼如WO 2010/010106中所描述的，接著有需要使用大量數量的Pd/C來供示範例4(PL265)的合成，在該示範例4中有按重量計為50%的10% Pd/C被使用。這些大量數量有時候導致該P-C鍵結的氫化。就本發明而言，為了該具有化學式(C)的化合物之合成，使用一諸如前面對於步驟(3a.2)所描述的鹼來控制鹼性pH值使得能夠只使用按重量計為10%的Pd/C。

步驟(3b)係在於使用一個被標記為P’的保護基團來保護位在衍生自步驟(3a)的該反應中間產物上之一級胺官能。這個保護作用係根據那些熟習本領域技藝者所詳知的方法來予以完成。

根據一個被偏好的具體例，該保護步驟(3b)係在鹼性介質中來予以進行，優選地係藉由一諸如NaOH、LiOH、KOH、Ba(OH)₂、Ca(OH)₂或CsOH的強鹼之加入。特別地，該反應的pH值係被包括在10和11之間。一個太酸的pH值可能導致極性雜質的形成，而一高於11的pH值可降解使得要引入該保護基團P’成為可能的該試劑。

有利地，該基團P’係選自於由苄氧基羰基(CBz)和三級丁氧羰基 (Boc)基團所構成的群組中，該等基團各別地導致具有下列化學式(C-a)和(C-b)的化合物：

該CBz基團特別地係使用對應的氯化物CBzCl而被引入到該具有化學式(B)的化合物之上。該Boc基團特別地係使用酸酐Boc₂O而被引入到該具有化學式(B)的化合物之上。

根據本發明，該具有化學式(C)的化合物係以一被包括在50%和85%之間的產率被獲得。特別地，該具有化學式(C-a)的化合物係以一為73%的平均產率被獲得，而該具有化學式(C-b)的化合物係以一為84%的平均產率被獲得。

根據本發明之諸如上面所述的該第一備選方案，也就是說諸如上面所述的步驟(3a)和(3b)係根據該第一備選方案來予以進行，而於步驟(3a)中使用一個係在步驟(2b.1)之後所得到並且具有一大於95/5的光學純度(2S/2R)之具有化學式(B)的化合物。直接在步驟(3b)之後所得到的具有組態(1R,2S)之該具有化學式(C)的化合物在該第2個碳(2S/2R)上具有一光學純度係大於95/5，優選地大於96/4，更加優選地大於97/3，甚至更加優選地大於98/2，甚至更加優選地大於99/1。

根據本發明的這個第一備選方案，該具有化學式(C)的化合物特別地係以一被包括在70%和85%之間的產率被獲得。特別地，該具有化學式(C-a) 的化合物係以一為73%的平均產率被獲得，而該具有化學式(C-b)的化合物係以一為84%的平均產率被獲得。

根據這個第一備選方案，該具有化學式(C)的化合物在步驟(3b)結束之時被回收並且沒有純化也沒有其他中間步驟即直接地被使用於隨後的步驟(4)中。

根據本發明的一個第二備選方案，諸如上面所述的步驟(3a)和(3b)被進行，而於步驟(3a)中使用一個具有化學式(B)的化合物，它係在步驟(2b.2)結束之時被獲得並且在該第2個碳(2S/2R)上具有一光學純度係嚴格大於50/50並且低於95/5(典型地介於70/30與90/10之間，特別是81/19)。

根據這個第二備選方案，該具有化學式(C)的化合物之一非鏡像異構物的濃化步驟跟隨在步驟(3b)之後被進行。因此，本發明的方法可直接地跟隨在步驟(3b)之後包括下列額外步驟(3c)：(3c)該具有化學式(C)的化合物在一個水/MTBE混合物中被研製接著被過濾以及被乾燥。

根據一個被偏好的具體例，步驟(3c)的研製被進行歷經一被包括在30分鐘和2小時之間的期間，典型地歷經1小時。該步驟的溫度特別地是相等於室溫。

步驟(3c)期間當中的該水/MTBE混合物按體積計的比例典型地係被包括在1/5和1/1之間，優選地是3/5。

典型地，根據本發明的該第二備選方案，在步驟(3c)結束之時所獲得的該具有化學式(C)的化合物在該第2個碳(2S/2R)上具有一光學純度係被包括在80/20和99/1之間，優選地係介於90/10和95/5之間，特別是93/7。根據本發明的這個第二備選方案，該具有化學式(C)的化合物係以一為大約53%的產率被獲得。

步驟4

本發明的方法之步驟4包括諸如被描述於上面以及下面圖解中的步驟(4a)和(4b)。

有利地，步驟(4a)包括下列連續步驟：(4a.1)將該(L)-丙胺酸的三級丁基酯以及一胜肽偶合劑加入至一包含有被溶解於DMF或一THF/DMF混合物中的該具有化學式(C)的化合物之溶液，(4a.2)將一鹼加入至從步驟(4a.1)而形成的反應混合物，(4a.3)具有下列化學式(D)的化合物之回收：

其中P’係為諸如上面所定義的或者對應於一個苯基乙基基團。

在步驟(4a.1)被引入的該胜肽偶合劑典型地係選自於下列之中：TBTU、HATU、EDC、HOBt、BOP、PyBOP、DCC，以及此等的組合。

步驟(4a.1)優選地係在室溫下來予以進行。當一THF/DMF混合物在步驟(4a.1)期間當中被使用時，它優選地按體積計係為一個1/1混合物。

在步驟(4a.2)被引入的該鹼優選地係選自於下列之中：三乙胺、二異丙基乙基胺(DIPEA)以及2,2,6,6-四甲基哌啶，優選地它是DIPEA。

根據一個被偏好的具體例，在該鹼於步驟(4a.2)的加入期間當中，衍生自步驟(4a.1)的該反應混合物係處在一被包括在0℃與15℃之間(優選地介於5℃與10℃之間)的溫度下。該溫度在該鹼的加入期間當中(通常係為放熱的) 被維持。

根據一個有利的具體例，從步驟(4a.2)而形成的該反應混合物被攪拌歷經一充分的時間，而使得該具有化學式(C)的化合物之轉化係大於或相等於95%。該反應的監測特別地係藉由HPLC來予以確保。優選地，在一被包括在0℃與15℃之間(優選地介於5℃與10℃之間)的溫度下，這個時間被包括在30分鐘與2小時之間，優選地介於30分鐘與1小時之間，更加優選地歷經45分鐘。

在那些熟習本領域技藝者所詳知的酸性-鹼性清洗、在有機相中的萃取以及過濾的操作之後，該具有化學式(D)的化合物被回收。

以一個被偏好的方式，該具有化學式(D)的化合物係對應於下列化合物(D-a)和(D-b)：

該具有化學式(D)的化合物係以一被包括在60%和90%之間的產率被獲得。

該基團P’的去保護之步驟(4b)優選地係在惰性氣氛下來予以進行，例如在氮氣或氬氣氣氛下。

在一個特別的具體例中，當P’是一個CBz基團之時，步驟(4b)包括下列連續步驟：

(4b.1)具有下列化學式的化合物(D-a)與HBr在乙酸中的反應，接著

(4b.2)使用一選自於乙酸乙酯、乙酸異丙酯、醚類以及此等的混合物之中的溶劑之沉澱，以及藉由過濾來回收該具有化學式(E)的化合物。

以一個被偏好的方式，步驟(4b.1)包括下列連續步驟：(4b.1.1)該具有化學式(D-a)的化合物與乙酸的混合，(4b.1.2)呈一配於乙酸中的HBr之溶液的形式之氫溴酸的加入，(4b.1.3)攪拌所形成的混合物歷經一充分的時間，而使得該具有化學式(D-a)的化合物之轉化係大於或相等於95%。

相對於化合物(D-a)，氫溴酸HBr優選地係呈被包括在6與10當量之間(優選地介於6與8當量之間，更加優選地是6當量)的數量被加入。一個大於10當量的氫溴酸之數量在濃縮期間當中導致該產物的部分消旋化。一為6當量的最小量係為必要的，而使得去保護係為全部的。相比之下，在該申請案WO 2010/010106(參見示範例3，步驟2)中使用配於乙酸中的HBr之去保護的類似步驟使用了28當量的HBr。被使用於本發明的數量明顯地使得殘留的酸更容易移除，特別是藉由蒸發。

在一個被偏好的具體例中，在氫溴酸的加入期間當中，從步驟(4b.1.1)而形成的該混合物係處在一被包括在5℃與20℃之間(優選地介於10℃與15℃之間)的溫度下。該溫度在HBr的加入期間當中以及在步驟(4b.1.3)期間當中被維持在20℃以下，優選地係介於15℃與20℃之間。一高於20℃的溫度將會導致所形成的產物之部分消旋化。

從步驟(4b.1.2)而形成的該反應混合物被攪拌歷經一充分的時間，而使得(S)-1-苯乙胺的轉化係大於或相等於95%。該反應的監測特別地係藉由HPLC來予以確保。優選地，這個時間被包括在2小時與8小時之間，優選地介於3小時與6小時之間，更加優選地介於5小時與6小時之間。

步驟(4b.2)中的醚類優選地係選自於下列之中：二異丙醚、四氫呋喃、甲基三級丁基醚、二

、二乙醚、石油醚，以及此等的混合物。

優選地，步驟(4b.2)中的該溶劑對應於二異丙醚。

在另一個特別的具體例中，當P’是一個Boc基團，步驟(4b)包括下列連續步驟：

(4b.1’)具有下列化學式的化合物(D-b)與甲酸的反應而導致一油：

(4b.2’)從步驟(4b.1’)而形成的該油在一非極性非質子性溶劑中的研製以及藉由過濾來回收該具有化學式(E)的化合物。

以一個被偏好的方式，步驟(4b.1’)包括下列連續步驟：(4b.1’.1)該具有化學式(D-b)的化合物與甲酸的混合，(4b.1’.2)在一被包括在40℃與60℃之間(優選地係為50℃)的溫度下來攪拌所形成的溶液歷經一被包括在1小時與4小時之間的時間(優選地是歷經2小時)，(4b.1’.3)濃縮該溶液，特別是在真空下，直到一油被獲得。

在步驟(4b.1’.1)中，相對於該具有化學式(D-b)的化合物，甲酸優選地係呈被包括在20與40當量之間(優選地介於20與30當量之間，更加優選地是26當量)的數量被加入。被使用的甲酸典型地係為一含有按體積計88%甲酸的水溶液。

甲酸具有不是非常酸性的以及不是非常腐蝕性的優點並且可被容易地移除，它因此特別地適合於在工業規模上的合成。

以一個有利的方式，步驟(4b.2’)中的該非極性非質子性溶劑係選自於下列之中：己烷、庚烷、二異丙醚、MTBE以及此等的混合物，優選地它是MTBE。

該具有化學式(E)的化合物典型地係以一被包括在90%和95%之間的產率被獲得。

根據本發明之諸如上面所述的該第一備選方案，涉及步驟(2b.1)的進行，在該第一備選方案中步驟(2b.2)與(3c)沒有被進行，而且根據該第一備選方案，諸如上面所述的步驟(4a)與(4b)被進行同時在步驟(4a)中使用該具有化學式(C)的化合物係衍生自步驟(3b)並且在該第2個碳(2S/2R)上具有一光學純度係大於95/5(優選地大於96/4，更加優選地大於97/3，甚至更加優選地大於98/2，甚至更加優選地大於99/1)。根據這個第一備選方案，具有組態(1R,2S,L-Ala)的該具有化學式(D)的化合物在該第2個碳(2S/2R)上具有一光學純度係大於95/5(優選地大於96/4，更加優選地大於97/3，甚至更加優選地大於98/2，甚至更加優選地大於99/1)，而具有組態(1R,2S,L-Ala)的該具有化學式(E)的化合物也在該第2個碳(2S/2R)上具有一光學純度係大於95/5(優選地大於96/4，更加優選地大於97/3，甚至更加優選地大於98/2，甚至更加優選地大於99/1)。

根據本發明之一諸如上面所述的第二備選方案，涉及步驟(2b.2)以及該額外步驟(3c)的進行，在該第二備選方案中步驟(2b.1)因此沒有被進行，以及在該第二備選方案中諸如上面所述的步驟(4a)與(4b)被進行同時在步驟(4a)中使用一個具有化學式(C)的化合物係衍生自步驟(3c)並且在該第2個碳(2S/2R)上具有一光學純度係嚴格大於50/50並且低於或相等於95/5(優選地被包括在 90/10和95/5之間，特別是93/7)。根據這個第一備選方案，具有組態(1R,2S,L-Ala)的該具有化學式(D)的化合物具有一被包括在80/20和99/1之間(優選地介於90/10和95/5之間)的光學純度。

根據這個第二備選方案，一個用於該具有化學式(E)的化合物之非鏡像異構物的濃化之額外步驟跟隨在步驟(4b)之後被進行。因此，本發明的方法可直接地跟隨在步驟(4b)之後包括下列額外步驟(4c)：(4c)該具有化學式(E)的化合物在二氯甲烷中被研製。

根據一個被偏好的具體例，步驟(4c)的研製被進行歷經一被包括在30分鐘與2小時之間的期間，典型地歷經1小時。該步驟的溫度別地是相等於室溫。

典型地，在步驟(4c)結束之時所獲得的該具有化學式(E)的化合物在該第2個碳(2S/2R)上具有一被包括在90/10和99/1之間(特別是94/6)的光學純度。

用於一具有化學式(I)的化合物之製備的方法

本發明的另一個目的係有關於一種用於具有下列化學式(I)的((2S)-3-([1,1'-聯苯]-4-基)-2-((羥基((1R)-1-(((1-(異丁醯氧基)乙氧基)羰基)胺基)乙基)磷醯基)甲基)丙醯基)-L-丙胺酸之二鈉鹽的工業製備方法：

包括下列步驟：

步驟(1)至(4)：諸如先前所述，步驟(5)：該具有化學式(F)的化合物之合成，藉由該具有化學式(E)的化合物與醯氧基烷基羰基N-羥基琥珀醯亞胺在一鹼之存在下的反應；步驟(6)：該具有化學式(I)的化合物的回收，藉由在一弱鹼之一鈉鹽的存在下於一非極性非質子性溶劑中的沉澱。

該具有化學式(I)的化合物之工業製備方法因此包括諸如上面所定義的連續步驟(1)至(4)(根據上述的該第一和第二備選方案之中的一者或另一者)，以及直接地跟隨在步驟(4)之後，於下面被更詳細地報導的步驟(5)和(6)。

步驟5

諸如下面圖解中所描述的，根據本發明的步驟5包括該具有化學式(E)的化合物與醯氧基烷基羰基N-羥基琥珀醯亞胺在一鹼之存在下的反應，俾以導致該具有化學式(F)的化合物：

步驟(5)有利地包括下列連續步驟：(5a)在一極性非質子性溶劑中，該具有化學式(E)的化合物與醯氧基烷基羰基N-羥基琥珀醯亞胺在一鹼之存在下的反應，(5b)使用一非質子性非極性溶劑的結晶化以及該有化學式(F)的化合物藉由過濾之回收。

以一個被偏好的方式，步驟(5a)包括下列連續步驟：(5a.1)該具有化學式(E)的化合物在一極性非質子性溶劑中的溶解，(5a.2)將醯氧基烷基羰基N-羥基琥珀醯亞胺加入至從步驟(5a.1)而形成的溶液，(5a.3)將該鹼加入至從步驟(5a.2)而形成的溶液。

該具有化學式(E)的化合物與醯氧基烷基羰基N-羥基琥珀醯亞胺(CAS 860035-3-10-5)的反應產生如同副產物的N-羥基琥珀醯亞胺，容易地藉由水性清洗來予以移除。該醯氧基烷基基團的引入不需要藉由矽膠管柱(不大適合於在工業規模上的合成)的純化，而不像該申請案WO 2010/010106中所述的合成(產生4-硝基苯酚而因此需要在矽膠上的純化)。

在步驟(5a.1)中，該具有化學式(E)的化合物的溶解優選地係在室溫下來予以進行。

該極性非質子性溶劑特別地係選自於下列之中：DMF、DMSO、丙酮以及乙酸乙酯，優選地它是DMF。

有利地，相對於該具有化學式(E)的化合物，醯氧基烷基羰基N-羥基琥珀醯亞胺係呈被包括在1與2當量之間(優選地介於1與1.5當量之間，更加優選地是1當量)的數量被加入至從步驟(5a.1)而形成的溶液。

優選地，在醯氧基烷基羰基N-羥基琥珀醯亞胺的加入期間當中，從步驟(5a.1)而形成的溶液係處在一被包括在0℃與15℃之間(優選地介於5℃與10℃之間)的溫度下。

在步驟(5a.3)期間當中被引入的該鹼特別地係選自於下列之中：三乙胺、二異丙基乙基胺(DIPEA)以及2,2,6,6-四甲基哌啶，特別是三乙胺。

在該鹼的加入期間當中，反應混合物的溫度被維持在一低於15℃的溫度下，優選為介於10℃與15℃之間。

優選地，相較於該具有化學式(E)的化合物，該鹼係呈被包括在1與4當量之間(優選地介於2與3當量之間，特別是介於2與2.5當量之間)的數量被加入至從步驟(5a.2)而形成的溶液。

從步驟(5a.3)而形成的反應混合物被攪拌歷經一充分的時間，而使得該具有化學式(F)的化合物之轉化係大於或相等於95%。該反應的監測特別地係藉由HPLC來予以確保。優選地，這個時間係被包括在1小時與8小時之間，優選地係介於4小時與6小時之間，更加優選地係介於4小時與5小時之間。該攪拌有利地係於一被包括在10℃和20℃之間(優選地介於15℃和20℃之間)的溫度下來予以進行。

那些熟習本領域技藝者所詳知的酸性-鹼性清洗(特別是酸性)以及在有機相中的萃取之操作可以在步驟(5a)和(5b)之間來予以進行。

被使用於步驟(5b)中的結晶化之該非極性非質子性溶劑典型地係選自於下列之中：烴類(諸如己烷、庚烷)、醚類[諸如二乙醚、二異丙醚、甲基三級丁基醚(MTBE)與四氫呋喃(THF)]，以及此等的混合物。特別地，它是二異丙醚。

典型地，該結晶化係在室溫下來予以進行。

以一個特別有利的方式，在步驟(5b)之前，一極性非質子性溶劑(諸如DMF、DMSO、丙酮、乙酸乙酯、乙酸異丙酯以及此等的混合物，優選為乙酸乙酯或乙酸異丙酯，特別是乙酸異丙酯)被加入至從步驟(5b)而形成的該混合物，這使得要引發該結晶化成為可能。根據這個具體例，在該反應混合物的攪拌歷經一被包括在30分鐘與1小時之間的期間(優選為30分鐘)之後，典型地在室溫下，該極性非質子性溶劑被移除了80%(多了或少了5%)，例如藉由在真空下的濃縮，而所形成的殘留物被混合以諸如上面所定義的該非極性非質子性結晶化溶劑。

具有組態(1R,2S,L-Ala)的該具有化學式(F)的化合物有利地在該第2個碳(2S/2R)上具有一光學純度係大於或相等於95/5(優選地大於96/4，更加優選地大於97/3，甚至更加優選地大於98/2，甚至更加優選地大於99/1)。

該具有化學式(F)的化合物典型地係以一為89%的平均產率被獲得。

步驟(6)

步驟(6)係對應於該具有化學式(F)的化合物藉由鈉的鹽化(salification)，俾以導致該具有化學式(I)的二鈉鹽。

一弱鹼的鈉鹽具有離子化羥基官能以及提供鈉相對離子以獲得該具有化學式(I)的鹽之任務。一弱鹼的鈉鹽優選地係為碳酸氫鈉。

有利地，相對於該具有化學式(F)的化合物，一弱鹼的鈉鹽係呈被包括在2加或減0.2當量之間的數量被加入。

根據一個被偏好的具體例，步驟(6)包括下列連續步驟：(6a)該具有化學式(F)的化合物在一與水可互溶並且具有一低沸點的溶劑(諸如醚類，特別是THF或二

，優選地是THF)中的溶解， (6b)將水以及一弱鹼之一鈉鹽加入至從步驟(6a)而形成的溶液，(6c)步驟(6a)的該溶劑之消除，特別是藉由在真空下的濃縮，(6d)一對於使該具有化學式(I)的化合物沉澱是有用的非極性非質子性溶劑之加入，(6e)該具有化學式(I)的化合物藉由過濾與乾燥的回收。

從步驟(6b)而形成的該混合物被攪拌歷經一段被包括在15分鐘與1小時之間的時間，優選地這個時間是30分鐘。當碳酸氫鈉被使用作為鈉離子來源時，該混合物被攪拌歷經一充分的時間，而使得由碳酸氫鈉的加入所造成的氣體釋放消失。這個氣體釋放係由在NaHCO₃與該具有化學式(F)的化合物之反應期間當中的CO₂之形成所造成。

優選地，為了藉由共沸蒸餾來移除水，跟隨在步驟(6c)之後以及在步驟(6d)之前，數個THF的加入-移除之操作被進行。

優選地，步驟(6d)的該非極性非質子性溶劑係選自於醚類之中，特別是選自於二異丙醚和二乙醚之中。更加優選地，它是二異丙醚。

以一個被偏好的方式，步驟(6d)係呈兩個階段來予以進行。首先，1/4容積的該非極性非質子性溶劑被加入至從步驟(6c)而形成的該殘留物，接著所形成的混合物被濃縮，特別是在真空下，俾以移除有機相。其次，剩餘的3/4容積的該非極性非質子性溶劑被加入至從第一次濃縮而形成的該殘留物。在予以過濾之前，所形成的懸浮液典型地被攪拌歷經一被包括在30分鐘與2小時之間的時間(優選地是1小時)，特別是在室溫下。

具有組態(1R,2S,L-Ala)的該具有化學式(I)的化合物有利地在該第2個碳(2S/2R)上具有一光學純度係大於或相等於95/5，優選地大於96/4，更加優選地大於97/3，甚至更加優選地大於98/2，甚至更加優選地大於99/1。

該具有化學式(I)的化合物典型地係以步驟(6)之一為91%的平均產率被獲得。

根據本發明，該具有化學式(I)的化合物因此係藉由在一非質子性非極性溶劑中的沉澱而被獲得，而非藉由如WO 2010/010106中所描述的冷凍乾燥，冷凍乾燥不大適合於在工業規模上的合成。

用於非鏡像異構物的濃化之方法

該非鏡像異構物的濃化方法係在於對具有化學式(B)、(C)與(E)的該等化合物之每一者進行一個非鏡像異構物的濃化，當這些在該第2個碳(2S/2R)上具有一光學純度係低於或相等於95/5之時。要這麼做，當具有化學式(B)、(C)與(E)的該等化合物在該第2個碳(2S/2R)上具有一光學純度係低於或相等於95/5之時，在諸如上面所述的步驟(2)、(3)與(4)的每一者來予以進行一個在一合適溶劑中的研製步驟。

因此，根據本發明之涉及一用於非鏡像異構物的濃化之方法的用於該具有化學式(E)的化合物之製備的方法係諸如上面所述的從一具有化學式(B)之所謂的“原始”化合物[對應於上面所述之衍生自步驟(2b.2.1)的該固體並且在該第2個碳(2S/2R)上具有一嚴格大於50/50並且低於或相等於95/5(典型地介於51/49和60/40之間，特別是57/43)的光學純度]來予以進行，該涉及一非鏡像異構物的濃化方法之用於該具有化學式(E)的化合物之製備的方法包括下列步驟：(2b.2.2)衍生自步驟(2b.2.1)的該固體在丙酮中的研製，過濾，以及位於濾液中的該具有化學式(B)的化合物藉由蒸發的回收，(3c)跟隨在諸如上面所述的步驟(3b)之後，該具有化學式(C)的化合物在一水/MTBE混合物中的研製，接著過濾以及乾燥，(4c)跟隨在諸如上面所述的(4b)之後，該具有化學式(E)的化合物在二氯甲烷中的研製，接著過濾以及乾燥。

典型地，在步驟(2b.2.2)結束之時所獲得之該具有化學式(B)的化合物在該第2個碳(2S/2R)上具有一被包括在70/30和90/10之間(優選地介於80/20和90/10之間，特別是81/19)的光學純度。

典型地，在步驟(3c)結束之時所獲得之該具有化學式(C)的化合物在該第2個碳(2S/2R)上具有一被包括在80/20和99/1之間(優選地介於90/10和95/5之間，特別是93/7)的光學純度。

典型地，在步驟(4c)結束之時所獲得之該具有化學式(E)的化合物在該第2個碳(2S/2R)上具有一被包括在90/10和99/1之間(特別是94/6)的光學純度。

根據一個被偏好的具體例，步驟(2c)、(3c)和(4c)的研製被進行歷經一被包括在30分鐘與2小時之間的期間，典型地歷經1小時。該等步驟的溫度特別地是相等於室溫。

在根據本發明之涉及一用於非鏡像異構物的濃化方法之用於該具有化學式(E)的化合物之製備的方法中，諸如上面所述的步驟(2b.1)沒有被進行而且被步驟(2b.2)取代。

當該等化合物(B)、(C)和(D)在各別的步驟(2c)、(3c)和(4c)結束之時係以一在該第2個碳(2S/2R)上具有一大於95/5的光學純度被獲得之時，這些研製步驟(2b.2.2)、(3c)和(4c)沒有被進行。

具有化學式(B)的化合物

本發明亦有關於具有組態(1R,2S)之具有下列化學式(B)的化合物：

示範例

下面的示範例使得要例證本發明成為可能但卻沒有限制它。下面的縮寫已被使用：

[1R-[(1S-苯基乙基)胺基]乙基]-次磷酸(化合物A)

濃HCl(8.14g；1當量)然後一個50% H₃PO₂水溶液(12.1g；1.1當量)被連續地加入至一個被冷卻於冰中的含有配於EtOH(40mL,4體積)中的(S)-1-苯乙胺(10g；82.5毫莫耳)之溶液。在一使用N₂的沖洗之後，無水乙醛(4.36g；1.2當量)被加入。該混合物被加熱以便在80℃下迴流。在3小時之後，該混合物藉由HPLC來予以分析：如果該胺成為化合物(A)的轉化係低於90%，那麼0.2當量的乙醛被加入，而該混合物再次被送去進行迴流歷經1小時。該溶液接下來被冷卻至10℃，利用氧化丙烯(9.57g；2當量)予以處理，並且被留置以回復到室溫。

該懸浮液在20℃下被攪拌過夜然後予以過濾。該固體以EtOH(5mL；0.5體積)來予以清洗然後在真空下被乾燥以供予一個白色固體(第一級，產率：20.5%；1R/1S=98/2)。濾液以iBuOAc(10體積以便與水來形成一個共沸液)來予以稀釋，接著予以濃縮成為一濃白色漿體，以EtOH(4體積)予以稀釋，在20℃下予以攪拌歷經1小時。該第二級被過濾，以EtOH(5mL；0.5體積)來予以清洗接著被乾燥以供予一個白色固體(產率：17.8%,1R/1S=92/8)，這供予一為38-40%的總產率以及一光學純度(1R/1S)>95/5。

NMR(DMSO D6+TFA),¹H(400MHz)：1.27(dd,3H,CH₃)；1.57(d,3H,NCHCH₃)；3.06(m,1H)；4.72(m,1H,NCH)；6.33以及7.72(2s,1H,PH)；7.44(m,3H,arom)以及7.55(m,2H,arom)。³¹P 19.91(0.02 P)；20.89(0.98 P)。

[(1S)-1-[[(IR)-1-[[(2S)-3-苄氧基-3-側氧-2-[(4-苯基苯基)甲基]丙基]-羥基-磷醯基]乙基]胺基]乙基]化合物(B)

N,O-雙(三甲基矽基)乙醯胺(BSA)(10.67g；3.2當量)被加入至位在一個以N₂予以沖洗的反應器中的化合物(A)(3.5g；16.4毫莫耳；1當量)以及(2-(4-聯苯)甲基)丙烯酸的苄基酯(5.38g；1當量)。濃懸浮液從40℃(最小攪拌能力)被加熱至80℃(在75℃下完全的溶化)然後被攪拌歷經3小時。該溶液藉由HPLC來予以分析(轉化>90/10)，接著被冷卻至20-40℃並且以MTBE(20體積)和H₂O(3.5mL；12當量，放熱反應)來予以稀釋。一個懸浮液在數小時之內形成。這個被攪拌歷經至少2至3個小時(優選地是過夜，緩慢的沉澱)。該懸浮液被過濾並且被乾燥以供予一個具有組態(1R,2S)的白色固體(5.11g；產率：54%；(2S/2R)=96/4)。

NMR(DMSO D6+TFA)¹H(400MHz)：d 1.24(dd,3H,C(2)CH₃)；1.54(d,3H,NCHCH₃)；1.91以及2.18(2m,2H,C(4)H₂)；2.89(m,1H,C(2)H)；3.0(m,2H,C(5)CH₂)；3.09(m,1H,C(5)H)；4.71(m,1H,NCH)；5.0(m,2H,OCH₂Bn)； 7.15-7.66(m,19H,arom)。³¹P 39.61(0.96 P；2S非鏡像異構物)以及39.87(0.04 P；2R非鏡像異構物)。

(2S)-2-[[[(1R)-1-(苄氧基羰基胺基)乙基]-羥基-磷醯基]甲基]-3-(4-苯基苯基)丙酸(化合物C-a)

1N NaOH(2.77mL；1當量)被加入至被冷卻於一冰浴中的一個含有配於EtOH(22.5mL；15體積)與H₂O(18mL；12體積)中的化合物(B)(1.5g；2.77毫莫耳)之懸浮液(pH值被監測以供參考，<11)。該混合物在室溫下被攪拌直到完全的溶化。10% Pd/C(0.15g；按重量計相對於化合物(B)係為10%以及50%濕潤)被加入。該反應混合物以N₂接而為H₂來予以沖洗(3個循環vac/N₂，然後3個循環vac/H₂)，並且在1巴的H₂下、於20-30℃下予以攪拌歷經18小時。pH值被記錄以供參考(pH值係在7-8的等級)。該反應混合物在0.45μm上予以過濾然後被部分地濃縮以移除EtOH。1N NaOH(2.77mL；1當量，pH>10)然後CbzCl(0.472g；1當量)然後1N NaOH(2.77mL；1當量)被加入，而該混合物在室溫下被攪拌歷經2小時。該反應藉由HPLC而為定量的，在酸性-鹼性清洗之後的該化合物係照這樣而被使用於隨後的步驟(0.975g；產率：73%；(2S/2R)=95/5)。

NMR(DMSO D6+TFA)¹H(400MHz)：d 1.21(dd,3H,C(2)-CH₃),1.75以及1.98(2 m,1H+1H,C(4)H₂)；2.89-3.02(m,3H,C(5)H以及C(5)-CH₂)；3.76(m,1H,C(2)H)；5.03(m,2H,OCH₂Bn)；7.25-7.63(m,15H,arom以及NH)。³¹P 45.04(0.05 P,2R非鏡像異構物)以及45.70(0.95 P,2S非鏡像異構物)。

[(1R)-1-(苄氧基羰基胺基)乙基]-[(2S)-3-[[(1S)-2-三級丁氧基-1-甲基-2-側氧-乙基]胺基]-3-側氧-2-[(4-苯基苯基)甲基]丙基]次磷酸(化合物D-a)

配於8.4L的DMF中的1.685kg的化合物(C-a)在室溫(20~25℃)予以攪拌直到一個半透明溶液被獲得，然後763g(4.2莫耳)的H-Ala-OtBu.HCl以及3372g(10.5莫耳)的TBTU在室溫下被加入。該混合物被冷卻至~5℃，並且2263g(17.5莫耳)的DIEPA被加入，同時將溫度維持在5~10℃下。在加入之後，該混合物在5~10℃下被攪拌歷經45分鐘。8.4L的乙酸乙酯還有10L的一個1N HCl水溶液在5℃下被加入。該混合物在室溫下被攪拌歷經10分鐘。水相以乙酸乙酯(1 x 8.4L)來予以萃取，而有機相被合併並且以一個10%水性NaHCO₃溶液(3 x 6L)、3L的一個1N HCl溶液以及3L的鹽水來予以清洗。在有機相中被沉澱的該產物在攪拌之下於8L的乙酸乙酯中被加熱至45~50℃直到一個半透明溶液被獲得。在其冷卻之後，該正確非鏡像異構物藉由連續沉澱而呈一白色固體形式被獲得(1.314kg)(產率：62%；藉由HPLC，100%純度)。

NMR(DMSO D6+TFA)¹H(400MHz)：d 1.17(m,C(2)CH₃,3H)；1.22(d,3H,C(8)H₃)；1.36(s,9H,tBu)；1.61以及1.93(2m,1H+1H,C(4)H₂)；2.79(m,1H,C(5)H)；2.98(m,2H,C(5)CH₂)；3.72(m,1H,C(2)H)；4,11(m,1H,C(8)H)；5,01(m,2H,OCH₂Bn)；7.25-7.63(m,15H,arom以及N(1)H)以及8.29(d,1H,N(7)H)。³¹P 45.95(0.96 P,2S非鏡像異構物)以及46.22(0.04 P,2R非鏡像異構物)。

((2S)-3-([1,1'-聯苯]-4-基)-2-((((R)-1-胺基乙基)(羥基)磷醯基)甲基)丙醯基)-L-丙胺酸(化合物E(PL254.HBr))

1250g(2.054莫耳)的化合物(D-a)在氮氣流下於2.5L的乙酸中被混合。該混合物在室溫(15~20℃)下被攪拌直到所有的固體被溶解，接著予以冷卻至10~15℃，而2.99kg(33%,12.32莫耳的HBr)之一配於乙酸中的HBr溶液被緩慢地加入，同時將溫度維持在16~20℃下。在超過5小時的加入同時藉由HPLC來監測該反應的進展之後，該混合物在真空下、於18~20℃下被濃縮以移除大約400~500mL的乙酸，並且6L的乙酸乙酯被加入。該混合物在室溫(15~20℃)下被攪拌歷經30分鐘然後予以過濾以分離出該固體產物。這個係以乙酸乙酯(3 x 2L)和二異丙醚(1 x 3L)來予以清洗，然後在35℃下、於一空氣流下予以乾燥過夜，俾以供予950g的固體產物(產率：92.7%；HPLC純度：99.5%)。

NMR(DMSO D6+TFA)：¹H(400MHz)d 1.22(dd,3H,C(2)CH₃)；1.30(d,3H,C(8)H₃)；1.64以及2.19(2m,1H+1H,C(4)H₂)；2.74(m,1H,C(5)H)；3.06(m,2H,C(5)CH₂)；3.26(m,1H,C(2)H)；4.23(m,1H,C(8)H)；7.36(m,3H,arom)；7.45(m,2H,arom)；7.60(d,2H,arom)；7.66(d,2H,arom)；7.70(m,9H,arom)；8.07(br s,3H,N(1)H₃ ⁺)以及8.53(d,1H,N(9)H)。³¹P 41.51(0.98P,2S非鏡像異構物)以及42.13(0.02 P,2R非鏡像異構物)。

HPLC純度(254nm,Kromasil C18.250mm x 4.6mm,5μm)H₂O(0.01% TFA)-CH₃CN(0.01% TFA)90/10在兩分鐘期間當中，接著10/90在14分鐘之內以及10/90在4分鐘期間當中：99.5%；t_R 10.31以及11.25分鐘。

(2S)-2-[[[(1R)-1-(三級丁氧羰基胺基)乙基]-羥基-磷醯基]甲基]-3-(4-苯基苯基)丙酸(化合物C-b)

1N NaOH(2.2mL；1當量)被加入至被冷卻於一冰浴中的一個含有配於EtOH(15mL,15體積)和H₂O(12mL,12體積)中的化合物(B)(1g 2.21毫莫耳；2R/2S 4/96)之懸浮液。該混合物在室溫下被攪拌直到完全的溶化。10% Pd/C(0.15g；按重量計相對於化合物(B)係為10%以及50%濕潤)被加入。該反應混合物以N₂接而為H₂來予以沖洗(3個循環vac/N₂，然後3個循環vac/H₂)，並且在1巴的H₂下、於20-30℃下予以攪拌歷經18小時。pH值被記錄以供參考(pH值係在7-8的等級)。該反應混合物在0.45μm上予以過濾。1N NaOH(2.2mL,1當量)、Boc₂O(0.5g,1當量)然後1N NaOH(2.2mL,1當量)被連續地加入。該混合物在室溫下被攪拌歷經2小時，然後被部分地濃縮以移除EtOH。水相以1N HCl予以處理直到高達pH<1(0.655g；3當量)。該懸浮液以iBuOAc(1.28g；5當量)予以處理並且被混合歷經2小時以供予該固體。該固體被過濾然後在減壓下被乾燥以供予化合物(C-b)(0.837g,84%)。

NMR(DMSO D6+TFA)：¹H(400MHz)d 1.17(m,3H,C(2)-CH₃)；1.36(s,9H,tBu)；1.71以及1.97(2m,1H+1H,C(4)H₂)；2.9-3.1(m,3H,C(5)H以及C(5)-CH₂)；3.70(m,1H,C(2)H)；7.01(d,1H,NH)；7.27(d,2H,arom)；7.34(m,1H,arom)；7.45(m,2H,arom)；7.57(d,2H,arom)以及7.64(d,2H,arom)。³¹P 46.4(2S只有非鏡像異構物被測得)。

[(1R)-1-(三級丁氧羰基胺基)乙基]-[(2S)-3-[[(1S)-2-三級丁氧基-1-甲基-2-側氧-乙基]胺基]-3-側氧-2-[(4-苯基苯基)甲基]丙基]次磷酸(化合物D-b)

TBTU(0.862g；3當量)然後DIPEA(0.578g,5當量)被連續地加入至化合物(C-b)(0.4g；0.895毫莫耳)以及該鹽HCl。在0℃下配於DMF(2mL,5體積)中的AlaOtBu(0.195g；1.2當量)。該反應混合物被攪拌歷經1小時，然後AcOEt(5mL,10體積)和1N HCl(2.55mL；2.85當量)被加入，而該混合物被留置以回復到室溫。水相以iBuOAc(2 x 2mL,2 x 5體積)予以萃取。有機相被合併並且以10% NaHCO₃(3 x 2mL,3 x 5體積)、1N HCl(2mL,5體積)和10% NaCl(2mL,5體積)來予以清洗，然後在減壓下予以濃縮和乾燥以供予呈一固體形式的化合物(D-b)(0.356g；0.62毫莫耳；69%)。

NMR(DMSO D6+TFA)：¹H(400MHz)d 1.13(m,C(2)CH₃,3H)；1.23(d,3H,C(8)H₃)；1.36(br s,18H,2 x tBu)；1.59以及1.91(2m,1H+1H,C(4)H₂)；2.8(m,1H,C(5)H)；3.0(m,2H,C(5)CH₂)；3.65(m,1H,C(2)H)；4.11(m,1H,C(8)H)；6.80(d,1H,N(1)H)；7.31以及7.34(m,3H,arom)；7.45(m,2H,arom)；7.54(d,2H,arom)；7.62(d,2H,arom)以及8.30(d,1H,N(7)H)。³¹P 46.5(2S只有非鏡像異構物被測得)。

((2S)-3-([1,1'-聯苯]-4-基)-2-((((R)-1-胺基乙基)(羥基)磷醯基)甲基)丙醯基)-L-丙胺酸(化合物E(PL254))

88% HCO₂H(1mL,12體積)被加入至化合物(D-b)(85mg；0.148毫莫耳)。該溶液在攪拌下被加熱至50℃歷經2小時然後被濃縮以供予一油，該油在MTBE(2mL,24體積)中被研製。該產物被過濾接著在減壓下被乾燥以供予化合物(E)(58mg,94%)。

NMR(DMSO D6+TFA)：¹H(400MHz)d 1.22(dd,3H,C(2)CH₃)；1.30(dd,3H,C(8)H₃)；1.64以及2.18(2m,1H+1H,C(4)H₂)；2.73(m,1H,C(5)H)；3.06(m,2H,C(5)CH₂)；3.25(m,1H,C(2)H)；4.23(m,1H,C(8)H)；7.30-7.70(m,9H,arom)；8.08(br s,3H,N(1)H₃ ⁺)以及8.52(d,1H,N(9)H)。³¹P 41.2(2S 1只有非鏡像異構物被測得)。

HPLC純度(254nm,Kromasil C18,250mm x 4.6mm,5μm)H₂O(0.01% TFA)-CH₃CN(0.01% TFA)90/10歷經2分鐘，接著10/90在14分鐘內以及10/90歷經4分鐘：97.70%；t_R：10.29分鐘。

化合物(E)藉由在不同步驟期間當中的連續濃化之合成

以一例如衍生自諸如上面所述的步驟(2b.2.1)之“原始”化合物(B)(2S/2R)57/43來起始，已被顯示的是：要在不同步驟期間當中來濃化所欲求的非鏡像異構物是有可能的。

化合物(B)(2S/2R：81/19)

該“原始”化合物(B)(2S/2R)57/43被懸浮於iBuOAc(50mL,5體積)和水(50mL,5體積)中並且予以攪拌歷經2小時。該懸浮液被過濾以供予一個濕潤濾餅(12克)。該固體以丙酮(50mL,5體積)予以處理並且被懸浮於過濾器上歷經數分鐘，接著被過濾、在真空下被乾燥以供予不正確非鏡像異構物(1R,2R)(1.26g，產率24%，比值2R/2S ³¹P 79/21)。該濾液被濃縮至乾以供予呈固體形式之該正確非鏡像異構物(B)(3.18g，產率60%，(2S/2R)：81/19)。

NMR D6 DMSO+TFA,³¹P 39.37(0.81 P，非鏡像異構物2S)以及39.60(0.19 P，非鏡像異構物2R)。

化合物(C-b)(2S/2R：93/7)

1N NaOH(4.43mL；1當量)被加入至被冷卻於一冰浴中的一個含有配於EtOH(30mL,15體積)和H₂O(15mL,7.5體積)中的先前所獲得的化合物(B)(2g；4.43毫莫耳；2S/2R 81/19)之懸浮液。該混合物在室溫下被攪拌直到完全的溶化。10% Pd/C(0.20g；按重量計相對於化合物(B)係為10%以及50%濕潤)被加入。該反應混合物以N₂接而為H₂來予以沖洗(3個循環vac/N₂，然後3個循環vac/H₂)，並且在1巴的H₂下、於20-30℃下予以攪拌歷經18小時。pH值被記錄以供參考(pH值係在7-8的等級)。該反應混合物在0.45μm上予以過濾。1N NaOH(4.4mL,1當量)、Boc₂O(1.05g,1當量)然後1N NaOH(4.4mL,1當量)被連續地加入。該混合物在室溫下被攪拌歷經2小時，然後被部分地濃縮以移除EtOH。水相以MTBE(10mL,5體積)接著以IN HCl(1.75mL,4當量)來予以清洗。有機相被分開來並予以濃縮至乾以供予一個固體。這個被懸浮於MTBE(10mL,5體積)和H₂O(0.24mL,3體積)中歷經1小時。該懸浮液被過濾然後在真空下被乾燥以供予化合物(C-b)(1.05g，產率53%，2S/2R=93/7)。

NMR D6 DMSO+TFA,³¹P 46.20(非鏡像異構物2R；0.07P)以及46.37(非鏡像異構物2S；0.93P)。

化合物(D-b)(2S/2R 92/8)

TBTU(1.96g；3當量)接著DIPEA(1.316g,5當量)被連續地加入至先前所獲得之化合物(C-b)(0.91g；2.04毫莫耳)以及該鹽HCl。在0℃下配於DMF(5mL,5體積)中的AlaOtBu(0.44g；1.2當量)。該反應混合物被攪拌歷經1小時，然後EtOAc(5mL,5體積)和1N HCl(6mL；3當量)被加入，而該混合物被留置以回復到室溫。水相以EtOAc(4mL,2體積)來予以萃取。有機相被合併然後以 10% NaHCO₃(3 x 4mL,3 x 2體積)、1N HCl(4mL,2體積)以及10% NaCl(4mL,2體積)來予以清洗。該溶液在真空下被濃縮以及被乾燥以供予呈固體形式的化合物(C-b)(1.058g，1.84毫莫耳，產率90%，2S/2R=92/8)。

NMR D6 DMSO+TFA,³¹P 46.56(0.92 P，非鏡像異構物2S)以及46.88(0.08 P，非鏡像異構物2R)。

化合物(E)(2S/2R 93/7)

88% HCO₂H(5mL,12體積)被加入至先前所獲得的化合物(D-b)(1.06；1.84毫莫耳)。該溶液在攪拌下被加熱至50℃歷經2小時然後被濃縮以供予一油，該油在MTBE(8mL,8體積)中被研製。該混合物在真空下被濃縮和乾燥以供予化合物(E)(0.62g，產率80%，(2S/2R)：93/7)。

NMR D6 DMSO+TFA,³¹P 41.33(非鏡像異構物2S；0.93P)以及41.97(非鏡像異構物2R；0.07P)。

當化合物(E)(0.5g)被懸浮於CH₂Cl₂(4mL,8體積)中，它被攪拌歷經1小時。該薄懸浮液被過濾並且在真空下被乾燥以提供化合物(E)(0.45mg，產率72%，(2S/2R)：94/6)。

HPLC(254nm,Kromasil C18,250mm x 4.6mm,5μm)H₂O(0.01% TFA)-CH₃CN(0.01% TFA)90/10歷經2分鐘，接著10/90在14分鐘內以及10/90歷經4分鐘)純度98.2%；t_R：10.31分鐘。

((2S)-3-([1,1'-聯苯]-4-基)-2-((羥基((1R)-1-(((1-(異丁醯氧基)乙氧基)羰基)胺基)乙基)磷醯基)甲基)丙醯基)-L-丙胺酸(化合物F)

900g(1.8莫耳)的化合物(E)被溶化於2.7L的DMF中，而該混合物在室溫(15~20℃)下被攪拌直到一個半透明溶液被獲得。這個接下來被冷卻至5~10℃，而492.4g(1.8莫耳)的醯氧基烷基羰基N-羥基琥珀醯亞胺呈一個部分被加入，而該混合物在5~10℃下被攪拌直到一個半透明溶液被獲得。382.3g(3.79 莫耳)的三乙胺被緩慢地加入，同時將溫度維持在低於15℃。在加入之後，該混合物在15~20℃下被攪拌歷經4小時，同時藉由HPLC來監測該反應。4.5L的乙酸乙酯被加入，而該混合物被冷卻至5~10℃以加入一個1N HCl水溶液，俾以緩慢地將pH值調整至2至3，同時將溫度維持在低於25℃(特別注意：大約2.2L的一個1N HCl水溶液被使用)。3.2L的水被加入並且該混合物在室溫下被攪拌歷經10分鐘。產物的有機相被分開來，而水相以乙酸乙酯(1 x 4.5L)來予以萃取。該等有機相被混合並且以水(4 x 3.6L)和鹽水(1 x 3.6L)來予以清洗。該有機相在減壓下、於40~45℃下被濃縮，俾以移除大約90%的乙酸乙酯。2.7L的乙酸乙酯被加入至殘留物，而該混合物在45~50℃下被攪拌歷經30分鐘。該混合物在真空下、於40~45℃下被濃縮，俾以移除大約80%的乙酸乙酯。2.7公升的二異丙醚被加入至殘留物，而該混合物被繼續來予以濃縮以趕走剩餘的乙酸乙酯。9L的二異丙醚接著被加入，而該混合物在室溫(~20℃)下被攪拌歷經1小時。該固體產物被分離出並且在空氣流下、於30~35℃下被乾燥過夜，俾以供予925g的化合物(F)，呈一淺黃色(light yellow)固體的形式(HPLC純度98.1%)。

((2S)-3-([1,1'-聯苯]-4-基)-2-((羥基((1R)-1-(((1-(異丁醯氧基)乙氧基)羰基)胺基)乙基)磷醯基)甲基)丙醯基)-L-丙胺酸的雙鈉鹽(化合物(I))

136.27g(0.24mol)的化合物(F)被溶化於683mL的THF中，而該混合物在室溫(15~25℃)下被攪拌直到一個半透明溶液被獲得。137mL的水被加入至該溶液，接下來在N₂下、於室溫(15~25℃)下予以過濾，然後碳酸氫鈉(39.71g)在室溫(15~25℃)下被加入。該混合物在室溫(15~25℃)下被攪拌歷經至少30分鐘，直到氣體釋放的消失。該溶液在減壓下、於20~25℃下被濃縮。一包含該殘留物藉由1.0L的THF之稀釋然後在減壓下、於20~25℃下的濃縮之操作被進行數次，俾以移除水。1.4L的二異丙醚被加入至該殘留物。該懸浮液在機械攪拌下、於15~25℃下被攪拌歷經1小時，然後所獲得的固體被過濾、被清洗然後被乾燥，俾以供予133.9g的化合物(I)，呈一灰白色固體的形式(產率：91%；HPLC純度：98.6%)。

Claims

一種用於具有下列化學式(E)的((2S)-3-([1,1'-聯苯]-4-基)-2-((((R)-1-胺基乙基)(羥基)磷醯基)甲基)丙醯基)-L-丙胺酸的工業製備方法：
包括下列步驟：(1)具有下列化學式(A)的化合物之製備：
藉由：(1a)位於一極性質子性溶劑中的(S)-1-苯乙胺與一含有次磷酸H₃PO₂之水溶液和乙醛在相對於(S)-1-苯乙胺為1個莫耳當量的鹽酸之存在下的反應，接著(1b)從步驟(1a)而形成的鹽類使用氧化丙烯的處理，接著(1c)使用一極性質子性的結晶化以及該具有化學式(A)的化合物藉由過濾之回收，(2)具有下列化學式(B)的化合物之製備：
藉由：(2a)衍生自步驟(1)之該具有化學式(A)的化合物與(2-(4-聯苯)甲基)丙烯酸的苄基酯在一含有三甲基矽基基團的來源之存在下的反應，接著(2b)該具有化學式(B)的化合物藉由下列的回收：(2b.1)使用一由非極性非質子性溶劑與水所構成的混合物之結晶化並接而過濾，或(2b.2)在丙酮中的研製、過濾以及濾液的蒸發，(3)具有下列化學式(C)的化合物之製備：
其中P’是一個具有胺官能的保護基團，藉由：(3a)在相對於該具有化學式(B)的化合物之重量係為10重量%的Pd/C之存在下，該具有化學式(B)的化合物在氫氣氛之下的氫解，接著(3b)從步驟(3a)而形成的胺使用一個保護基團P’之保護以及該具有化學式(C)的化合物之回收，(4)具有下列化學式(E)的化合物之製備：
藉由：(4a)該具有化學式(C)的化合物與(L)-丙胺酸的三級丁基酯之胜肽偶合以及具有下列化學式(D)的化合物之回收：
(4b)位在N-端位置的保護基團P’與位在C-端位置的三級丁基基團之去保護以及該具有化學式(E)的化合物之回收。
根據請求項1的方法，特徵在於：在步驟(1a)和(1c)中，該極性質子性溶劑係選自於醇類。
根據請求項1或2的方法，特徵在於：在步驟(2b)中，該非極性非質子性溶劑是MTBE。
根據請求項1或2的方法，特徵在於：步驟(3a)包括下列連續步驟：(3a.1)一包含有該具有化學式(B)的化合物位於一質子性溶劑或一由質子性溶劑所構成的混合物中的懸浮液之製備，(3a.2)將一鹼加入至在步驟(3a.1)所製備的該懸浮液，(3a.3)相對於該具有化學式(B)的化合物之重量，將按重量計為10%的Pd/C加入至從步驟(3a.2)而形成的該懸浮液，並且以H₂沖洗所形成的反應混合物，(3a.4)過濾以及濃縮該反應混合物。
根據請求項1或2的方法，特徵在於：該保護步驟(3b)係在鹼性介質中來予以進行。
根據請求項5的方法，特徵在於：P’係選自於由CBz和Boc基團所構成的群組。
根據請求項1或2的方法，特徵在於：步驟(4a)包括下列連續步驟： (4a.1)將(L)-丙胺酸的三級丁基酯以及一胜肽偶合劑加入至一包含有被溶解於DMF或一THF/DMF混合物中的該具有化學式(C)的化合物之溶液，(4a.2)將一鹼加入至從步驟(4a.1)而形成的反應混合物，(4a.3)具有如請求項1中所界定之化學式(D)的化合物之回收。
一種用於具有下列化學式(I)的((2S)-3-([1,1'-聯苯]-4-基)-2-((羥基((1R)-1-(((1-(異丁醯氧基)乙氧基)羰基)胺基)乙基)磷醯基)甲基)丙醯基)-L-丙胺酸之二鈉鹽的工業製備方法：
包括如根據請求項1至7之中任何一項所界定的步驟(1)至(4)，以及直接跟隨在步驟(4)之後的下列連續步驟(5)和(6)：(5)具有下列化學式(F)的化合物之製備：
藉由該具有化學式(E)的化合物與醯氧基烷基羰基N-羥基琥珀醯亞胺在一鹼之存在下的反應，(6)該具有化學式(I)的化合物的回收，藉由在一弱鹼之一鈉鹽的存在下、於一非極性非質子性溶劑中的沉澱。
根據請求項8的方法，特徵在於：步驟(5)包括下列連續步驟： (5a)在一極性非質子性溶劑中，該具有化學式(E)的化合物與醯氧基烷基羰基N-羥基琥珀醯亞胺在一鹼之存在下的反應，(5b)使用一非質子性非極性溶劑的結晶化以及該有化學式(F)的化合物藉由過濾之回收。
一種具有下列化學式(B)的化合物：