TWI869398B

TWI869398B - 治療癌症之方法

Info

Publication number: TWI869398B
Application number: TW109115453A
Authority: TW
Inventors: 加文本內特; 吉莉恩朗福德; 彼得朴; 喬安娜拉赫登蘭塔
Original assignee: 英商拜西克爾德有限公司
Priority date: 2019-05-10
Filing date: 2020-05-08
Publication date: 2025-01-11
Also published as: EP3965757A1; JP2022531939A; US20240199742A1; CA3139035A1; CN113993537A; US20230025971A1; TW202108165A; WO2020229803A1; IL287907A; SG11202112452WA; US20200354456A1; US11414488B2; AU2020273615A1

Abstract

本發明係關於一種治療患者之癌症之方法。

Description

治療癌症之方法

本發明係關於雙環毒素結合物BT1718或其醫藥學上可接受之鹽與檢查點抑制劑組合用於治療癌症之用途。本發明亦提供醫藥學上可接受之組合物，其包含BT1718或其醫藥學上可接受之鹽及檢查點抑制劑。

MT1-MMP為直接藉由降解若干其組分及間接藉由活化原MMP2而在細胞外基質重塑中起重要作用的跨膜金屬蛋白酶。MT1-MMP對腫瘤血管生成至關重要(Sounni等人(2002) FASEB J. 16(6), 555-564)且在多種實體腫瘤上過度表現。因此，在研發用於治療癌症之MT1-MMP之抑制劑方面仍存在高度未滿足的需求。

目前已發現，相較於單一藥劑治療中之每一者，BT1718或其醫藥學上可接受之鹽與檢查點抑制劑之組合大大地改良抗腫瘤活性。因此，在一個態樣中，本發明提供一種組合物，其包含BT1718或其醫藥學上可接受之鹽及檢查點抑制劑。

在另一態樣中，本發明提供一種用於治療患者之癌症之方法，其包含向患者投與治療有效量之BT1718或其醫藥學上可接受之鹽及檢查點抑制劑。

相關申請案之交叉參考

本申請案根據35 U.S.C. § 119(e)主張2019年5月10日申請之美國臨時申請案第62/846,064號的權益，其全部內容以全文引用之方式併入本文中。 1. 本發明之某些實施例之描述 ：

已發現，相較於單一藥劑治療中之每一者，BT1718或其醫藥學上可接受之鹽與檢查點抑制劑之組合對抗腫瘤活性展現出出人意料且極大的改良。舉例而言，相較於單一藥劑治療中之每一者，BT1718及抗PD-1抗體組合大大地提高肺癌模型之存活率(參見例如實例2)。另外，相較於乳癌腺癌模型之單一療法，BT1718及抗PD-1抗體組合展現出增加的抗腫瘤活性(參見例如實例3)。此外，BT1718及抗CTLA-4抗體組合展現出強效的抗腫瘤活性：結腸癌模型中之完全消退、存活及免疫記憶增強(參見例如實例4)。

因此，在一個態樣中，本發明提供一種用於治療患者之癌症之方法，其包含向患者投與治療有效量之BT1718或其醫藥學上可接受之鹽及檢查點抑制劑。

在一些實施例中，本發明提供一種BT1718或其醫藥學上可接受之鹽在製造用於治療癌症之藥劑中的用途，其中藥劑與檢查點抑制劑組合使用。

在一些實施例中，以約3-46 mg/m² 之劑量投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，以約3-13 mg/m² 、約14-24 mg/m² 、約25-35 mg/m² 或約36-46 mg/m² 之劑量投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，以約9-36 mg/m² 、約9-30 mg/m² 、約9-24 mg/m² 或約9-18 mg/m² 之劑量投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，以約9 mg/m² 之劑量投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，以約14.4 mg/m² 之劑量投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，以約18.6 mg/m² 之劑量投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，以約19.2 mg/m² 之劑量投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。

在一些實施例中，以一週1-4次之頻率投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，以一週一次之頻率投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，以一週2、3或4次之頻率投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，以每1.5週一次之頻率投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，以每2週一次之頻率投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，以每2.5週一次之頻率投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，以每3週一次之頻率投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，以每4週一次之頻率投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。

在一些實施例中，針對約1-4週之治療期投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，針對約5-8週之治療期投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，針對約9-12週之治療期投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，針對約13-20週之治療期投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，針對約21-28週之治療期投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，針對約4、8、12、16、20、24或28週之治療期投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，針對約30週或更長之治療期投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。

在一些實施例中，藉由靜脈內快速注射向患者投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，藉由靜脈內輸注向患者投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，BT1718或其醫藥學上可接受之鹽之靜脈內輸注為約5-10分鐘輸注。在一些實施例中，BT1718或其醫藥學上可接受之鹽之靜脈內輸注為約10-20分鐘輸注。在一些實施例中，BT1718或其醫藥學上可接受之鹽之靜脈內輸注為約20-40分鐘輸注。在一些實施例中，BT1718或其醫藥學上可接受之鹽之靜脈內輸注為約45或50或55分鐘輸注。在一些實施例中，BT1718或其醫藥學上可接受之鹽之靜脈內輸注為約1小時輸注。在一些實施例中，BT1718或其醫藥學上可接受之鹽之靜脈內輸注為約1-1.5小時輸注。在一些實施例中，BT1718或其醫藥學上可接受之鹽之靜脈內輸注為約1.5-2小時輸注。在一些實施例中，BT1718或其醫藥學上可接受之鹽之靜脈內輸注為約2-3小時輸注。在一些實施例中，BT1718或其醫藥學上可接受之鹽之靜脈內輸注為超過3小時輸注。

以根據FDA建議或批准之給藥方案投與檢查點抑制劑。在一些實施例中，以約1-20 mg/kg之劑量投與檢查點抑制劑。在一些實施例中，以約1-5 mg/kg、約6-10 mg/kg、約11-15 mg/kg或約16-20 mg/kg之劑量投與檢查點抑制劑。在一些實施例中，以約1-10 mg/kg、約5-15 mg/kg或約10-20 mg/kg之劑量投與檢查點抑制劑。在一些實施例中，以約2、3、4、5、6、7、8、9或10 mg/kg之劑量投與檢查點抑制劑。在一些實施例中，以約11、12、13、14、15、16、17、18、19或20 mg/kg之劑量投與檢查點抑制劑。在一些實施例中，以一週1-4次之頻率投與檢查點抑制劑。在一些實施例中，以一週一次之頻率投與檢查點抑制劑。在一些實施例中，以一週2、3或4次之頻率投與檢查點抑制劑。在一些實施例中，以每1.5週一次之頻率投與檢查點抑制劑。在一些實施例中，以每2週一次之頻率投與檢查點抑制劑。在一些實施例中，以每2.5週一次之頻率投與檢查點抑制劑。在一些實施例中，以每3週一次之頻率投與檢查點抑制劑。在一些實施例中，以每4週一次之頻率投與檢查點抑制劑。在一些實施例中，針對約1-4週之治療期投與檢查點抑制劑。在一些實施例中，針對約9-12週、約13-20週、約21-28週或約29-36週之治療期投與檢查點抑制劑。在一些實施例中，針對約36週或更長之治療期投與檢查點抑制劑。在一些實施例中，藉由靜脈內注射向患者投與檢查點抑制劑。在一些實施例中，藉由靜脈內輸注向患者投與檢查點抑制劑。在一些實施例中，檢查點抑制劑之靜脈內輸注為約5-10分鐘輸注。在一些實施例中，檢查點抑制劑之靜脈內輸注為約10-20分鐘或約20-40分鐘輸注。在一些實施例中，檢查點抑制劑之靜脈內輸注為約30、40、45、50、55或60分鐘輸注。在一些實施例中，檢查點抑制劑之靜脈內輸注為約1-1.5小時、約1.5-2小時或約2-3小時輸注。

在一些實施例中，包含BT1718或其醫藥學上可接受之鹽的藥劑選自如本發明之實例中所展示之BT17118調配物。在一些實施例中，包含BT1718或其醫藥學上可接受之鹽的藥劑進一步包含組胺酸。在一些實施例中，包含BT1718或其醫藥學上可接受之鹽及組胺酸的藥劑呈約pH 7。在一些實施例中，包含BT1718或其醫藥學上可接受之鹽的藥劑進一步包含蔗糖。在一些實施例中，包含BT1718或其醫藥學上可接受之鹽的藥劑進一步包含約10% w/v蔗糖。在一些實施例中，包含BT1718或其醫藥學上可接受之鹽的藥劑進一步包含水。在一些實施例中，本發明提供一種藥劑，其包含BT1718或其醫藥學上可接受之鹽、組胺酸、蔗糖及水，其中藥劑呈約pH 7。在一些實施例中，本發明提供一種藥劑，其包含BT1718或其醫藥學上可接受之鹽、組胺酸、蔗糖及水，其中藥劑呈約pH 6.6。在一些實施例中，藥劑包含濃度為約0.48 mg/ml之BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，藥劑包含濃度為約0.62 mg/ml之BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，藥劑包含濃度為約0.96 mg/ml之BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。

在一些實施例中，檢查點抑制劑選自如本文所描述之彼等。

在一些實施例中，癌症選自如本文所描述之彼等。 2. 化合物及定義：

BT1718 (或BT17BDC-18)具有下文所展示之結構。在2015年10月29日申請之WO 2016/067035中詳細描述BT1718之製備，其全部內容特此以引用之方式併入本文中。

如本文所使用，術語「醫藥學上可接受之鹽」係指在合理醫學判斷之範疇內，適用於與人類及低等動物之組織接觸而無異常毒性、刺激、過敏反應及類似者且與合理的效益/風險比相稱的彼等鹽。醫藥學上可接受之鹽為此項技術中所熟知。舉例而言，S. M. Berge等人在J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19中詳細描述醫藥學上可接受之鹽，該文獻以引用之方式併入本文中。本發明化合物之醫藥學上可接受之鹽包括衍生自適合無機及有機酸及鹼之彼等鹽。醫藥學上可接受之無毒酸加成鹽之實例為與無機酸(諸如鹽酸、氫溴酸、磷酸、硫酸及過氯酸)或與有機酸(諸如乙酸、草酸、順丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、丁二酸或丙二酸)或藉由使用此項技術中所使用之其他方法(諸如離子交換)形成的胺基之鹽。其他醫藥學上可接受之鹽包括己二酸鹽、海藻酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬胺酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、檸檬酸鹽、環戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙烷磺酸鹽、甲酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、葡糖酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基-乙烷磺酸鹽、乳糖酸鹽、乳酸鹽、月桂酸鹽、月桂基硫酸鹽、蘋果酸鹽、順丁烯二酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、特戊酸鹽、丙酸鹽、硬脂酸鹽、丁二酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫代氰酸鹽、對甲苯磺酸鹽、十一烷酸鹽、戊酸鹽及類似者。

衍生自適當鹼之鹽包括鹼金屬鹽、鹼土金屬鹽、銨鹽及N⁺ (C_1-4 烷基)₄ 鹽。代表性鹼金屬鹽或鹼土金屬鹽包括鈉鹽、鋰鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽及其類似鹽。在適當時，其他醫藥學上可接受之鹽包括無毒性銨、四級銨及使用諸如鹵離子、氫氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、低碳烷基磺酸根及芳基磺酸根之相對離子形成的胺陽離子。

除非另外陳述，否則本文所描繪之結構亦意謂包括結構之所有異構(例如，對映異構、非對映異構及幾何異構(或構形異構))形式；例如，各不對稱中心之R及S構型、Z及E雙鍵異構體以及Z及E構形異構體。因此，本發明化合物之單一立體化學異構體以及對映異構、非對映異構及幾何異構(或構形異構)混合物在本發明之範疇內。除非另外陳述，否則本發明化合物之所有互變異構形式均在本發明之範疇內。另外，除非另外陳述，否則本文所描繪之結構亦意謂包括僅在存在一或多個經同位素增濃之原子的方面不同的化合物。舉例而言，包括氫由氘或氚置換或碳由¹³ C或¹⁴ C增濃之碳置換、具有本發明結構之化合物在本發明之範疇內。此類化合物適用作例如分析工具、生物分析中之探針或根據本發明之治療劑。在某些實施例中，所提供之化合物之彈頭部分R¹ 包含一或多個氘原子。

如本文所使用，術語「約」係指在既定值之20%內。在一些實施例中，術語「約」係指在既定值之20%、19%、18%、17%、16%、15%、14%、13%、12%、11%、10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%或1%內。

如本文所使用，術語「mg/kg」係指服用藥物之個體每公斤體重的藥物之毫克數。如藉由FDA指南所提供，動物中以mg/kg計之劑量可轉化成以mg/m² 計之對應人類等效劑量(Human Equivalent Dose；HED)。舉例而言，小鼠中之劑量與HED之間的轉化如下展示：

小鼠劑量(mg/kg)	人類等效劑量(mg/m² )
2.4	7.2
3.0	9.0
4.8	14.4
6.4	19.2
10.0	30.0

3. 醫藥學上可接受之組合物

根據一些實施例，本發明提供一種醫藥組合物，其包含BT1718或其醫藥學上可接受之鹽及檢查點抑制劑。在一些實施例中，本發明提供一種用於治療癌症之醫藥組合物，其包含BT1718或其醫藥學上可接受之鹽及檢查點抑制劑。

在一些實施例中，組合物包含醫藥學上可接受之載劑、佐劑或媒劑。術語「醫藥學上可接受之載劑、佐劑或媒劑」係指不破壞與其一起調配之化合物之藥理學活性的無毒載劑、佐劑或媒劑。可用於本發明之組合物中的醫藥學上可接受之載劑、佐劑或媒劑包括(但不限於)離子交換劑；氧化鋁；硬脂酸鋁；卵磷脂；血清蛋白，諸如人類血清白蛋白；緩衝物質，諸如磷酸鹽；甘胺酸；山梨酸；山梨酸鉀；飽和植物脂肪酸、水、鹽或電解質之偏甘油酯混合物，諸如硫酸魚精蛋白、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽、膠態二氧化矽、三矽酸鎂、聚乙烯吡咯啶酮、基於纖維素之物質、聚乙二醇、羧甲基纖維素鈉、聚丙烯酸酯、蠟、聚乙烯-聚環氧丙烷-嵌段聚合物、聚乙二醇及羊毛脂。

如本文所使用之術語「患者」意謂動物，較佳為哺乳動物且最佳為人類。

本發明之組合物可經口、非經腸、藉由吸入噴霧、局部、經直腸、經鼻、經頰、經陰道或經由植入式貯器投與。如本文中所使用之術語「非經腸」包括皮下、靜脈內、肌肉內、關節內、滑膜內、胸骨內、鞘內、肝內、病灶內及顱內注射或輸注技術。在一些實施例中，經口、腹膜內或靜脈內投與組合物。本發明組合物之無菌可注射形式可為水性或油性懸浮液。此等懸浮液可根據此項技術中已知之技術使用適合的分散劑或濕潤劑及懸浮劑來調配。無菌可注射製劑亦可為於無毒非經腸可接受之稀釋劑或溶劑中之無菌可注射溶液或懸浮液，例如於1,3-丁二醇中之溶液。在可接受之媒劑及溶劑中，可採用的為水、林格氏溶液(Ringer's solution)及等張氯化鈉溶液。另外，無菌不揮發性油習知地用作溶劑或懸浮介質。

出於此目的，可採用任何溫和的不揮發性油，包括合成單甘油酯或二甘油酯。脂肪酸(諸如油酸及其甘油酯衍生物)適用於製備可注射劑，天然醫藥學上可接受之油(諸如橄欖油或蓖麻油，尤其以其聚氧乙烯化形式)亦然。此等油溶液或懸浮液亦可含有長鏈醇稀釋劑或分散劑，諸如羧甲基纖維素或常用於調配醫藥學上可接受之劑型(包括乳液及懸浮液)之類似分散劑。其他常用界面活性劑(諸如Tween、Span及其他乳化劑)或常用於製造醫藥學上可接受之固體、液體或其他劑型之生物可用性增進劑亦可用於調配之目的。

本發明之醫藥學上可接受之組合物可以任何經口可接受之劑型經口投藥，包括(但不限於)膠囊、錠劑、水性懸浮液或溶液。在用於經口使用之錠劑的情況下，常用之載劑包括乳糖及玉米澱粉。亦通常添加潤滑劑，諸如硬脂酸鎂。對於以膠囊形式經口投藥，適用之稀釋劑包括乳糖及乾燥玉米澱粉。當需要水性懸浮液用於經口使用時，使活性成分與乳化劑及懸浮劑組合。視需要，亦可添加某些甜味劑、調味劑或著色劑。

替代地，本發明之醫藥學上可接受之組合物可以用於直腸投藥之栓劑形式投藥。此等栓劑可藉由將藥劑與適合的非刺激性賦形劑混合來製備，該賦形劑在室溫下為固體但在直腸溫度下為液體且因此將在直腸中融化以釋放藥物。此類材料包括可可脂、蜂蠟及聚乙二醇。

本發明之醫藥學上可接受之組合物亦可局部投藥，尤其當治療目標包括藉由局部施用容易達到之區域或器官(包括眼睛、皮膚或低位腸道之疾病)時。用於此等區域或器官中之每一者的適合局部調配物易於製備。

用於低位腸道之局部施用可以直腸栓劑調配物(參見上文)形式或以適合灌腸調配物形式實現。亦可使用局部經皮貼片。

對於局部施用而言，所提供之醫藥學上可接受之組合物可以含有懸浮或溶解於一或多種載劑中之活性組分的適合軟膏形式調配。用於本發明化合物之局部投藥的載劑包括(但不限於)礦物油、液體石蠟脂、白石蠟脂、丙二醇、聚氧化烯、聚氧丙烯化合物、乳化蠟及水。替代地，所提供之醫藥學上可接受之組合物可以含有懸浮或溶解於一或多種醫藥學上可接受之載劑中之活性組分的適合洗劑或乳膏形式調配。適合的載劑包括(但不限於)礦物油、脫水山梨糖醇單硬脂酸酯、聚山梨醇酯60、十六酯蠟、十六醇十八醇、2-辛基十二醇、苄醇及水。

對於眼科使用而言，可將所提供的醫藥學上可接受之組合物調配為具有或不具有防腐劑(諸如苯紮氯銨)的於等張pH經調整之無菌鹽水中之微米尺寸化懸浮液，或較佳為於等張pH經調整之無菌鹽水中的溶液。替代地，對於眼科使用而言，醫藥學上可接受之組合物可以軟膏(諸如石蠟脂)形式調配。

本發明之醫藥學上可接受之組合物亦可藉由經鼻氣霧劑或吸入劑來投藥。此類組合物係根據醫藥調配技術中熟知之技術製備，且可採用苄醇或其他適合的防腐劑、增強生物可用性之吸收促進劑、氟碳化物及/或其他習知增溶劑或分散劑製備為於鹽水中之溶液。

本發明之醫藥學上可接受之組合物亦可經調配以用於經口投藥。此類調配物可在存在或不存在食物之情況下投藥。在一些實施例中，本發明之醫藥學上可接受之組合物在不存在食物之情況下投藥。在其他實施例中，本發明之醫藥學上可接受之組合物與食物一起投藥。

亦應理解，任何特定患者之特定劑量及治療方案將視多種因素而定，該等因素包括所用特定化合物之活性、年齡、體重、一般健康、性別、膳食、投藥時間、排泄率、藥物組合及治療醫師之判斷及所治療之特定疾病之嚴重強度。本發明化合物在組合物中之量亦將視組合物中之特定化合物而定。 4. 治療癌症之方法

根據一些實施例，本發明提供一種治療患者之癌症之方法，其包含向患者投與治療有效量之BT1718或其醫藥學上可接受之鹽及檢查點抑制劑。

在一些實施例中，本發明提供一種BT1718或其醫藥學上可接受之鹽與檢查點抑制劑組合用於治療癌症之用途。

在一些實施例中，癌症為肺癌。在一些實施例中，肺癌為met-擴增之鱗狀NSCLC、具有野生型EGFR之鱗狀細胞NSCLC或表現T790M EGFR之肺腺癌。

在一些實施例中，本發明提供一種治療患者肺癌之方法，其包含向患者投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽及抗PD1抗體。在一些實施例中，以一週2次之頻率，以9 mg/m² 之劑量投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，以一週2次之頻率，以30 mg/m² 之劑量投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，以一週一次之頻率，以14.4 mg/m² 之劑量投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，以如本文所描述之劑量及頻率投與抗PD1抗體。在一些實施例中，藉由如本文所描述之iv注射或iv輸注投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽及/或抗PD1抗體。

在一些實施例中，癌症為乳癌。在一些實施例中，乳癌為三陰性乳癌。在一些實施例中，乳癌為基底樣三陰性乳癌。

在一些實施例中，本發明提供一種治療患者乳癌之方法，其包含向患者投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽及抗PD1抗體。在一些實施例中，以一週一次之頻率，以14.4 mg/m² 之劑量投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，以一週一次之頻率，以18.6 mg/m² 之劑量投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，以如本文所描述之劑量及頻率投與抗PD1抗體。在一些實施例中，藉由如本文所描述之iv注射或iv輸注投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽及/或抗PD1抗體。

在一些實施例中，癌症為結腸癌。在一些實施例中，癌症為結腸直腸腺癌。在一些實施例中，結腸直腸腺癌為高pgp表現之結腸直腸腺癌。

在一些實施例中，本發明提供一種治療患者結腸癌之方法，其包含向患者投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽及抗CTLA4抗體。在一些實施例中，以一週一次之頻率，以19.2 mg/m² 之劑量投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，以如本文所描述之劑量及頻率投與抗CTLA4抗體。在一些實施例中，藉由如本文所描述之iv注射或iv輸注投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽及/或抗CTLA4抗體。

在一些實施例中，癌症為胃癌。在一些實施例中，胃癌為FGFR擴增之胃癌。

在一些實施例中，癌症為頭頸癌。在一些實施例中，頭頸癌為鼻中隔鱗狀細胞癌。

在一些實施例中，癌症為肉瘤。在一些實施例中，肉瘤為纖維肉瘤。在一些實施例中，纖維肉瘤為N-ras突變/IDH1突變軟組織肉瘤(soft tissue sarcoma；STS)。

在一些實施例中，癌症為膀胱癌。在一些實施例中，膀胱癌選自由以下組成之群：基底膀胱癌、p53樣膀胱癌及管腔型膀胱癌。

在一些實施例中，癌症為子宮內膜癌。在一些實施例中，子宮內膜癌選自由以下組成之群：MMR-D子宮內膜癌、POLE EDM子宮內膜癌、p53 WT子宮內膜癌、p53異常子宮內膜癌、I型子宮內膜癌、II型子宮內膜癌、癌瘤、癌肉瘤、子宮內膜樣腺癌、漿液性癌、透明細胞癌、黏液性癌、混合或未分化性癌、混合漿液性及子宮內膜樣癌、混合漿液性及低級子宮內膜樣癌及未分化性癌。

在一些實施例中，癌症為食道癌。在一些實施例中，食道癌選自由以下組成之群：腺癌(EAC)、鱗狀細胞癌(ESCC)、染色體不穩定性(CIN)食道癌、埃-巴二氏病毒(EBV)食道癌、基因組穩定(GS)食道癌及微隨體不穩定性(MSI)食道癌。

在一些實施例中，癌症為神經膠母細胞瘤。在一些實施例中，神經膠母細胞瘤選自由以下組成之群：原神經神經膠母細胞瘤、神經神經膠母細胞瘤、典型神經膠母細胞瘤及間質神經膠母細胞瘤。

在一些實施例中，癌症為間皮瘤。在一些實施例中，間皮瘤選自由以下組成之群：胸膜間皮瘤、腹膜間皮瘤、心包間皮瘤、上皮樣間皮瘤、肉瘤樣間皮瘤、雙相間皮瘤及惡性間皮瘤。

在一些實施例中，癌症為多發性骨髓瘤。在一些實施例中，多發性骨髓瘤選自由以下組成之群：超二倍體多發性骨髓瘤、非超二倍體多發性骨髓瘤、細胞週期素D易位多發性骨髓瘤、MMSET易位多發性骨髓瘤、MAF易位多發性骨髓瘤及未分類的多發性骨髓瘤。

在一些實施例中，癌症為卵巢癌。在一些實施例中，卵巢癌選自由以下組成之群：透明細胞卵巢癌、子宮內膜樣卵巢癌、黏液性卵巢癌、高級漿液性卵巢癌及低級漿液性卵巢癌。

在一些實施例中，癌症為胰臟癌。在一些實施例中，胰臟癌選自由以下組成之群：鱗狀胰臟癌、胰臟祖細胞胰臟癌、免疫原性胰臟癌及異常分化之內分泌外分泌(ADEX)胰臟癌。

在一些實施例中，癌症為前列腺癌。在一些實施例中，前列腺癌選自由以下組成之群：AZGP1 (亞型I)前列腺癌、MUC1 (亞型II)前列腺癌及MUC1 (亞型III)前列腺癌。

在一些實施例中，檢查點抑制劑為抗PD1抗體。在一些實施例中，抗PD1抗體選自納武單抗(nivolumab) (抗PD-1抗體，Opdivo®，Bristol-Myers Squibb)；帕博利珠單抗(pembrolizumab) (抗PD-1抗體，Keytruda®，Merck)；德瓦魯單抗(durvalumab) (抗PD-L1抗體，Imfinzi®，AstraZeneca)；及阿特珠單抗(atezolizumab) (抗PD-L1抗體，Tecentriq®，Genentech)。

在一些實施例中，檢查點抑制劑為抗CTLA-4抗體。在一些實施例中，抗CTLA-4抗體為伊匹單抗(ipilimumab) (抗CTLA-4抗體，Yervoy®，Bristol-Myers Squibb)。

在一些實施例中，本發明提供一種治療患者之癌症之方法，其包含以約3 mg/kg之劑量向患者投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽，且以約10 mg/kg之劑量投與檢查點抑制劑。在一些實施例中，以一週兩次之頻率投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽及檢查點抑制劑中之每一者。在一些實施例中，以每3天一次之頻率投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽及檢查點抑制劑中之每一者。

在一些實施例中，本發明提供一種治療患者之癌症之方法，其包含以約10 mg/kg之劑量向患者投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽且以約10 mg/kg之劑量投與檢查點抑制劑。在一些實施例中，以一週兩次之頻率投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽及檢查點抑制劑中之每一者。在一些實施例中，以每3天一次之頻率投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽及檢查點抑制劑中之每一者。

在一些實施例中，本發明提供一種治療患者之癌症之方法，其包含以約4.8 mg/kg之劑量向患者投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽且以約10 mg/kg之劑量投與檢查點抑制劑。在一些實施例中，以一週一次之頻率投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽且以一週兩次之頻率投與檢查點抑制劑。在一些實施例中，以一週一次之頻率投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽且以每3天一次之頻率投與檢查點抑制劑。

在一些實施例中，本發明提供一種治療患者之癌症之方法，其包含以約6.2 mg/kg之劑量向患者投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽且以約10 mg/kg之劑量投與檢查點抑制劑。在一些實施例中，以一週一次之頻率投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽且以一週兩次之頻率投與檢查點抑制劑。在一些實施例中，以一週一次之頻率投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽且以每3天一次之頻率投與檢查點抑制劑。

在一些實施例中，本發明提供一種治療患者之癌症之方法，其包含以約6.4 mg/kg之劑量含向患者投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽且以約10 mg/kg之劑量投與檢查點抑制劑。在一些實施例中，以一週一次之頻率投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽且以一週兩次之頻率投與檢查點抑制劑。在一些實施例中，以一週一次之頻率投與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽且以每3天一次之頻率投與檢查點抑制劑。例示性癌症

在一些實施例中，癌症為實體腫瘤。在一些實施例中，癌症與MT1-MMP相關。在一些實施例中，癌症為高MT1-MMP表現。舉例而言，Adley等人已報導MT1-MMP在卵巢之透明細胞癌中具有高表現量(Adley等人「Expression of Membrane Type 1 Matrix Metalloproteinase (MMP-14) in Epithelial Ovarian Cancer: High Level Expression in Clear Cell Carcinoma」Gynecol Oncol. 2009年2月；112(2): 319-324)。

在一些實施例中，癌症為前列腺癌。在一些實施例中，前列腺癌選自由以下組成之群：AZGP1 (亞型I)前列腺癌、MUC1 (亞型II)前列腺癌及MUC1 (亞型III)前列腺癌。BT1718 及檢查點抑制劑之共同投藥

BT1718或其醫藥學上可接受之鹽可與檢查點抑制劑分開投藥，作為多個給藥方案之部分。替代地，BT1718或其醫藥學上可接受之鹽及檢查點抑制劑可一起混合於單一組合物中。若作為多個給藥方案投藥，則BT1718或其醫藥學上可接受之鹽及檢查點抑制劑可同時、依序或在一段時間內相互投藥，例如在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23或24小時內彼此投藥。在一些實施例中，BT1718或其醫藥學上可接受之鹽及檢查點抑制劑在相隔大於24小時內作為多個給藥方案投藥。

如本文所使用，術語「組合(combination/combined)」及相關術語係指同時或依序投與根據本發明之治療劑。舉例而言，BT1718或其醫藥學上可接受之鹽可與檢查點抑制劑同時或依序以單獨單位劑型投藥或以單一單位劑型一起投藥。因此，本發明提供一種單一單位劑型，其包含BT1718或其醫藥學上可接受之鹽、檢查點抑制劑及視情況選用之醫藥學上可接受之載劑、佐劑或媒劑。

可與載劑材料組合以產生單一劑型的BT1718或其醫藥學上可接受之鹽及檢查點抑制劑的量將視所治療之宿主及特定投藥模式而變化。較佳地，應調配本發明之組合物以使得可投與劑量介於0.01 - 100毫克/公斤體重/天之間的本發明之化合物。

BT1718或其醫藥學上可接受之鹽及檢查點抑制劑可協同地作用。因此，BT1718或其醫藥學上可接受之鹽及檢查點抑制劑於此類組合物中的量可低於僅利用治療劑之單一療法中所需要的量。

本發明之組合物中存在的檢查點抑制劑之量可不超過將正常在包含其作為唯一活性劑之組合物中所投與的量。較佳地，本發明所揭示之組合物中的檢查點抑制劑之量將範圍介於包含藥劑作為唯一治療活性劑之組合物中正常存在的量之約50%至100%。在一些實施例中，以作為單一療法正常投與的量之約50%、約55%、約60%、約65%、約70%、約75%、約80%、約85%、約90%或約95%之劑量投與檢查點抑制劑。如本文所使用，片語「正常投與」意謂FDA批准之治療劑根據FDA標籤插頁批准用於給藥的量。

本發明之醫藥組合物亦可併入至用於包覆可植入醫療裝置(諸如假體、人工瓣膜、血管移植物、支架及導管)之組合物中。血管支架例如已用於克服再狹窄(損傷後血管壁再變窄)。然而，使用支架或其他可植入裝置之患者具有凝塊形成或血小板活化之風險。可藉由用包含激酶抑制劑之醫藥學上可接受之組合物預包覆該裝置來預防或減輕此等非所需作用。用本發明化合物包覆之可植入裝置為本發明之另一實施例。 5. 例示性檢查點抑制劑

如本文所使用之術語「檢查點抑制劑」係指適用於防止癌細胞避開患者之免疫系統的藥劑。抗腫瘤免疫破壞之主要機制中之一者稱為「T細胞耗竭」，其由長期暴露於引起抑制受體之上調的抗原引起。此等抑制性受體用作免疫檢查點以便防止不受控制之免疫反應。

PD-1及諸如細胞毒性T淋巴球抗原4 (CTLA-4)、B及T淋巴球衰減因子(BTLA；CD272)、T細胞免疫球蛋白及黏蛋白結構域-3 (Tim-3)、淋巴球活化基因-3 (Lag-3；CD223)及其他受體之共抑制受體常常稱為檢查點調節因子。其充當使細胞外資訊指示細胞週期進程及其他胞內信號傳導過程是否應該進行的分子「守門因子」。

在一些實施例中，檢查點抑制劑為針對PD-1之抗體。PD-1與計劃性細胞死亡1受體(PD-1)結合以預防受體與抑制性配體PDL-1結合，因此超越腫瘤抑制宿主抗腫瘤免疫反應之能力。

在一個態樣中，檢查點抑制劑為生物治療劑或小分子。在另一態樣中，檢查點抑制劑為單株抗體、人類化抗體、全人類抗體、融合蛋白或其組合。在另一態樣中，檢查點抑制劑抑制選自以下之檢查點蛋白：CTLA-4、PDL1、PDL2、PD1、B7-H3、B7-H4、BTLA、HVEM、TIM3、GAL9、LAG3、VISTA、KIR、2B4、CD160、CGEN-15049、CHK 1、CHK2、A2aR、B-7家族配體或其組合。在一額外態樣中，檢查點抑制劑與選自以下之檢查點蛋白之配體相互作用：CTLA-4、PDL1、PDL2、PD1、B7-H3、B7-H4、BTLA、HVEM、TIM3、GAL9、LAG3、VISTA、KIR、2B4、CD160、CGEN-15049、CHK 1、CHK2、A2aR、B-7家族配體或其組合。在一態樣中，檢查點抑制劑為免疫刺激劑、T細胞生長因子、介白素、抗體、疫苗或其組合。在另一態樣中，介白素為IL-7或IL-15。在一特定態樣中，介白素為糖基化之IL-7。在一額外態樣中，疫苗為樹突狀細胞(DC)疫苗。

檢查點抑制劑包括以統計學上顯著之方式阻斷或抑制免疫系統之抑制路徑的任何藥劑。此類抑制劑可包括小分子抑制劑或可包括結合且阻斷或抑制免疫檢查點受體的抗體或其抗原結合片段或結合且阻斷或抑制免疫檢查點受體配體的抗體。可靶向以進行阻斷或抑制之說明性檢查點分子包括(但不限於) CTLA-4、PDL1、PDL2、PD1、B7-H3、B7-H4、BTLA、HVEM、GAL9、LAG3、TIM3、VISTA、KIR、2B4 (屬於分子之CD2家族且表現於所有NK、γδ及記憶CD8⁺ (αβ) T細胞上)、CD160 (亦稱作BY55)、CGEN-15049、CHK 1及CHK2激酶、A2aR及各種B-7家族配體。B7家族配體包括(但不限於) B7-1、B7-2、B7-DC、B7-H1、B7-H2、B7-H3、B7-H4、B7-H5、B7-H6及B7-H7。檢查點抑制劑包括抗體或其抗原結合片段、其他結合蛋白、生物治療劑或小分子，其結合且阻斷或抑制以下中之一或多者之活性：CTLA-4、PDL1、PDL2、PD1、BTLA、HVEM、TIM3、GAL9、LAG3、VISTA、KIR、2B4、CD 160及CGEN-15049。說明性檢查點抑制劑包括曲美單抗(Tremelimumab) (CTLA-4阻斷抗體)、抗OX40、PD-L1單株抗體(抗B7-H1；MEDI4736)、MK-3475 (PD-1阻斷劑)、納武單抗(抗PD1抗體)、CT-011 (抗PD1抗體)、BY55單株抗體、AMP224 (抗PDL1抗體)、BMS-936559 (抗PDL1抗體)、MPLDL3280A (抗PDL1抗體)、MSB0010718C (抗PDL1抗體)及伊匹單抗(抗CTLA-4檢查點抑制劑)。檢查點蛋白配體包括(但不限於) PD-L1、PD-L2、B7-H3、B7-H4、CD28、CD86及TIM-3。

在某些實施例中，檢查點抑制劑選自PD-1拮抗劑、PD-L1拮抗劑及CTLA-4拮抗劑。在一些實施例中，檢查點抑制劑選自由以下組成之群：納武單抗(Opdivo®)、伊匹單抗(Yervoy®)及帕博利珠單抗(Keytruda®)。在一些實施例中，檢查點抑制劑選自納武單抗(抗PD-1抗體，Opdivo®，Bristol-Myers Squibb)；帕博利珠單抗(抗PD-1抗體，Keytruda®，Merck)；伊匹單抗(抗CTLA-4抗體，Yervoy®，Bristol-Myers Squibb)；德瓦魯單抗(抗PD-L1抗體，Imfinzi®，AstraZeneca)；及阿特珠單抗(抗PD-L1抗體，Tecentriq®，Genentech)。

在一些實施例中，檢查點抑制劑選自由以下組成之群：蘭利珠單抗(lambrolizumab) (MK-3475)、納武單抗(BMS-936558)、皮立珠單抗(pidilizumab) (CT-011)、AMP-224、MDX-1105、MEDI4736、MPDL3280A、BMS-936559、伊匹單抗、利瑞路單抗(lirlumab)、IPH2101、帕博利珠單抗(Keytruda®)及曲美單抗。

在一些實施例中，檢查點抑制劑為REGN2810 (Regeneron)，一種在患有基底細胞癌(NCT03132636)、NSCLC (NCT03088540)、皮膚鱗狀細胞癌(NCT02760498)、淋巴瘤(NCT02651662)及黑素瘤(NCT03002376)之患者中測試之抗PD-1抗體；皮立珠單抗(CureTech)，亦稱為CT-011，一種與PD-1結合在臨床試驗中用於瀰漫性大B細胞淋巴瘤及多發性骨髓瘤之抗體；阿維魯單抗(avelumab) (Bavencio®，Pfizer/Merck KGaA)，亦稱為MSB0010718C，一種在臨床試驗中用於非小細胞肺癌、梅克爾細胞癌(Merkel cell carcinoma)、間皮瘤、實體腫瘤、腎癌、卵巢癌、膀胱癌、頭頸癌及胃癌之全人類IgG1抗PD-L1抗體；或PDR001 (Novartis)，一種與PD-1結合在臨床試驗中用於非小細胞肺癌、黑素瘤、三陰性乳癌及晚期或轉移性實體腫瘤的抑制性抗體。曲美單抗(CP-675,206；Astrazeneca)為已在針對多種適應症之臨床試驗中進行研究的針對CTLA-4之全人類單株抗體，該等適應症包括：間皮瘤、結腸直腸癌、腎癌、乳癌、肺癌及非小細胞肺癌、胰管腺癌、胰臟癌、生殖細胞癌、頭頸部鱗狀細胞癌、肝細胞癌、前列腺癌、子宮內膜癌、肝臟中之轉移癌、肝癌、大B細胞淋巴瘤、卵巢癌、宮頸癌、轉移性多形性甲狀腺癌、尿道上皮癌、輸卵管癌、多發性骨髓瘤、膀胱癌、軟組織肉瘤及黑素瘤。AGEN-1884 (Agenus)為在針對晚期實體腫瘤(NCT02694822)之1期臨床試驗中進行研究的抗CTLA4抗體。

在一些實施例中，檢查點抑制劑為含有蛋白質-3的T細胞免疫球蛋白黏蛋白之抑制劑(TIM-3)。可用於本發明中之TIM-3抑制劑包括TSR-022、LY3321367及MBG453。TSR-022 (Tesaro)為在實體腫瘤(NCT02817633)中進行研究之抗TIM-3抗體。LY3321367 (Eli Lilly)為在實體腫瘤(NCT03099109)中進行研究之抗TIM-3抗體。MBG453 (Novartis)為在晚期惡性病(NCT02608268)中進行研究之抗TIM-3抗體。

在一些實施例中，檢查點抑制劑為具有Ig及ITIM結構域的T細胞免疫受體之抑制劑，或TIGIT，一種在某些T細胞及NK細胞上之免疫受體。可用於本發明中之TIGIT抑制劑包括BMS-986207 (Bristol-Myers Squibb)，一種抗TIGIT單株抗體(NCT02913313)；OMP-313M32 (Oncomed)；及抗TIGIT單株抗體(NCT03119428)。

在一些實施例中，檢查點抑制劑為淋巴球活化基因-3 (LAG-3)之抑制劑。可用於本發明中之LAG-3抑制劑包括BMS-986016及REGN3767及IMP321。BMS-986016 (Bristol-Myers Squibb) (一種抗LAG-3抗體)在神經膠母細胞瘤及神經膠質肉瘤(NCT02658981)中進行研究。REGN3767 (Regeneron)亦為抗LAG-3抗體且在惡性病(NCT03005782)中進行研究。IMP321 (Immutep S.A.)為LAG-3-Ig融合蛋白，在黑素瘤(NCT02676869)、腺癌(NCT02614833)及轉移性乳癌(NCT00349934)中進行研究。

可用於本發明中之檢查點抑制劑包括OX40促效劑。臨床試驗中研究之OX40促效劑包括：PF-04518600/PF-8600 (Pfizer)，一種轉移性腎癌(NCT03092856)及晚期癌症及腫瘤(NCT02554812；NCT05082566)中之促效性抗OX40抗體；GSK3174998 (Merck)，一種1期癌症試驗(NCT02528357)中之促效性抗OX40抗體；MEDI0562 (Medimmune/AstraZeneca)，一種晚期實體腫瘤(NCT02318394及NCT02705482)中之抗OX40抗體；MEDI6469，一種患有結腸直腸癌(NCT02559024)、乳癌(NCT01862900)、頭頸癌(NCT02274155)及轉移性前列腺癌(NCT01303705)之患者中的促效性抗OX40抗體(Medimmune/AstraZeneca)；以及BMS-986178 (Bristol-Myers Squibb)，一種晚期癌症(NCT02737475)中之促效性抗OX40抗體。

可用於本發明中之檢查點抑制劑包括CD137 (亦稱作4-1BB)促效劑。臨床試驗中研究之CD137促效劑包括：烏圖木單抗(utomilumab) (PF-05082566，Pfizer)，一種瀰漫性大B細胞淋巴瘤(NCT02951156)及晚期癌症及腫瘤(NCT02554812及NCT05082566)中之促效性抗CD137抗體；烏瑞魯單抗(urelumab) (BMS-663513，Bristol-Myers Squibb)，一種黑素瘤及皮膚癌(NCT02652455)以及神經膠母細胞瘤及神經膠質肉瘤(NCT02658981)中之促效性抗CD137抗體。

可用於本發明中之檢查點抑制劑包括CD27促效劑。臨床試驗中研究之CD27促效劑包括：瓦里木單抗(varlilumab) (CDX-1127，Celldex Therapeutics)，一種頭頸部鱗狀細胞癌、卵巢癌、結腸直腸癌、腎細胞癌及神經膠母細胞瘤(NCT02335918)、淋巴瘤(NCT01460134)以及神經膠質瘤及星形細胞瘤(NCT02924038)中之促效性抗CD27抗體。

可用於本發明中之檢查點抑制劑包括糖皮質激素誘導之腫瘤壞死因子受體(GITR)促效劑。臨床試驗中研究之GITR促效劑包括：TRX518 (Leap Therapeutics)，一種惡性黑素瘤及其他惡性實體腫瘤(NCT01239134及NCT02628574)中之促效性抗GITR抗體；GWN323 (Novartis)，一種實體腫瘤及淋巴瘤(NCT 02740270)中之促效性抗GITR抗體；INCAGN01876 (Incyte/Agenus)，一種晚期癌症(NCT02697591及NCT03126110)中之促效性抗GITR抗體；MK-4166 (Merck)，一種實體腫瘤(NCT02132754)中之促效性抗GITR抗體；及MEDI1873 (Medimmune/AstraZeneca)，一種晚期實體腫瘤(NCT02583165)中之具有人類IgG1 Fc結構域之促效性六聚GITR-配體分子。

可用於本發明中之檢查點抑制劑包括誘導性T細胞共刺激因子(ICOS，亦稱為CD278)促效劑。臨床試驗中研究之ICOS促效劑包括：MEDI-570 (Medimmune)，一種淋巴瘤(NCT02520791)中之促效性抗ICOS抗體；GSK3359609 (Merck)，一種1期(NCT02723955)中之促效性抗ICOS抗體；JTX-2011 (Jounce Therapeutics)，一種1期(NCT02904226)中之促效性抗ICOS抗體。

可用於本發明中之檢查點抑制劑包括殺傷IgG樣受體(KIR)抑制劑。臨床試驗中研究之KIR抑制劑包括：利瑞路單抗(lirilumab) (IPH2102/BMS-986015，Innate Pharma/Bristol-Myers Squibb)，一種白血病(NCT01687387、NCT02399917、NCT02481297、NCT02599649)、多發性骨髓瘤(NCT02252263)及淋巴瘤(NCT01592370)中之抗KIR抗體；骨髓瘤(NCT01222286及NCT01217203)中之IPH2101 (1-7F9，Innate Pharma)；以及IPH4102 (Innate Pharma)，一種與長胞質尾區之三個結構域結合的淋巴瘤(NCT02593045)中之抗KIR抗體(KIR3DL2)。

可用於本發明中之檢查點抑制劑包括CD47與信號調節蛋白α (SIRPa)之間的相互作用之CD47抑制劑。臨床試驗中研究之CD47/SIRPa抑制劑包括：ALX-148 (Alexo Therapeutics)，一種與CD47結合且防止CD47/SIRPa介導之信號傳導的1期(NCT03013218)中之(SIRPa)之拮抗性變體；TTI-621 (SIRPa-Fc，Trillium Therapeutics)，一種1期臨床試驗(NCT02890368及NCT02663518)中的藉由連接SIRPa之N端CD47結合域與人類IgG1之Fc結構域而產生、藉由結合人類CD47而起作用且預防其遞送其「不許吞噬(do not eat)」信號至巨噬細胞的可溶性重組融合蛋白；CC-90002 (Celgene)，一種白血病(NCT02641002)中之抗CD47抗體；以及結腸直腸贅瘤及實體腫瘤(NCT02953782)、急性骨髓白血病(NCT02678338)及淋巴瘤(NCT02953509)中之Hu5F9-G4 (Forty Seven，Inc.)。

可用於本發明中之檢查點抑制劑包括CD73抑制劑。臨床試驗中研究之CD73抑制劑包括MEDI9447 (Medimmune)，一種實體腫瘤(NCT02503774)中之抗CD73抗體；及BMS-986179 (Bristol-Myers Squibb)，一種實體腫瘤(NCT02754141)中之抗CD73抗體。

可用於本發明中之檢查點抑制劑包括干擾素基因蛋白刺激因子(STING，亦稱為跨膜蛋白173或TMEM173)之促效劑。臨床試驗中研究之STING之促效劑包括：MK-1454 (Merck)，一種淋巴瘤(NCT03010176)中之促效性合成環狀二核苷酸；及ADU-S100 (MIW815，Aduro Biotech/Novartis)，一種1期(NCT02675439及NCT03172936)中之促效性合成環狀二核苷酸。

可用於本發明中之檢查點抑制劑包括CSF1R抑制劑。臨床試驗中研究之CSF1R抑制劑包括：吡昔替尼(pexidartinib) (PLX3397，Plexxikon)，一種結腸直腸癌、胰臟癌、轉移性及晚期癌症(NCT02777710)以及黑素瘤、非小細胞肺癌、頭頸部鱗狀細胞癌、胃腸基質瘤(GIST)及卵巢癌(NCT02452424)中之CSF1R小分子抑制劑；及IMC-CS4 (LY3022855，Lilly)，一種胰臟癌(NCT03153410)、黑素瘤(NCT03101254)及實體腫瘤(NCT02718911)中之抗CSF-1R抗體；及BLZ945 (4-[2((1R,2R)-2-羥基環己基胺基)-苯并噻唑-6-基氧基]-吡啶-2-羧酸甲基醯胺，Novartis)，一種晚期實體腫瘤(NCT02829723)中之CSF1R之經口有效抑制劑。

可用於本發明中之檢查點抑制劑包括NKG2A受體抑制劑。臨床試驗中研究之NKG2A受體抑制劑包括莫納珠單抗(monalizumab) (IPH2201，Innate Pharma)，一種頭頸贅瘤(NCT02643550)及慢性淋巴球性白血病(NCT02557516)中之抗NKG2A抗體。

在一些實施例中，檢查點抑制劑選自納武單抗、帕博利珠單抗、伊匹單抗、阿維魯單抗、德瓦魯單抗、阿特珠單抗或皮立珠單抗。

實例

以下實例說明上文所描述之本發明；然而其不意欲以任何方式限制本發明之範疇。本發明之醫藥化合物、組合及組合物之有利效果亦可藉由熟習相關技術者所已知之其他測試模型來確定。實例 1 ： BT1718單獨或與抗PD-1抗體組合在C57BL/6小鼠中在治療3LL同基因型模型時之活體內功效測試研究目標

研究之目標為評估BT1718單獨或與抗PD-1抗體組合在C57BL/6小鼠中在治療皮下3LL同基因型模型時之活體內抗腫瘤功效。實驗設計 表 1.1. 實驗設計

組	n	I/O	劑量 (mg/kg)	頻率	化合物	劑量 (mg/kg)	頻率
1	6	媒劑	-	biw*2週	媒劑	-	biw*2週
2	6	媒劑	-	biw*2週	BT1718	3	biw*2週
3	6	媒劑	-	biw*2週	BT1718	10	biw*2週
4	6	aPD-1	10	biw*2週	媒劑	-	biw*2週
5	6	aPD-1	10	biw*2週	BT1718	3	biw*2週
6	6	aPD-1	10	biw*2週	BT1718	10	biw*2週

材料動物

物種：小家鼠

品系：C57BL/6小鼠

年齡：6-10週

性別：雌性

體重：18-22 g

動物數目：36隻加備用收容條件

在恆定溫度及濕度下，將動物放在通風籠中，各籠3隻動物。

溫度：20~26℃。

濕度：40-70%。

籠：由聚碳酸酯製成。尺寸為300 mm × 180 mm × 150 mm。墊料材料為玉米芯，每週更換兩次。

飲食：在整個研究期間動物自由獲取輻射滅菌之乾燥顆粒食物。

水：動物自由獲取無菌飲用水。

籠標識：各籠之標識標籤含有以下資訊：動物數目、性別、品系、接收日期、治療、研究編號、組號及治療起始日期。

動物標識：藉由耳部寫碼來標記動物。測試及陽性對照物品

產品標識：BT1718

物理描述：凍乾粉

封裝及儲存條件：在-80℃下儲存

產品標識：抗PD-1抗體

物理描述：液體

濃度：11.5 mg/ml

封裝及儲存條件：在-80℃下儲存實驗方法及程序 細胞培養

在空氣中在5% CO₂ 之氛圍中，在37℃下，在補充有10%熱滅活胎牛血清之培養基中，將3LL腫瘤細胞活體外維持為單層培養物。藉由胰蛋白酶-EDTA處理將腫瘤細胞常規地每週兩次繼代培養。將採集在指數生長期中生長之細胞且計數以用於腫瘤接種。腫瘤接種

使各小鼠在右側腹處皮下接種於0.1 ml PBS中之3LL腫瘤細胞(1 × 10⁶ 個)以用於腫瘤發育。將動物隨機分組且在平均腫瘤體積達至約105 mm³ 時開始治療以用於功效研究。各組中之測試物品投藥及動物數目展示於實驗設計表(表 1.1 )中。測試物品調配物製備

測試物品	濃度(mg/ml)	調配物	緩衝液
媒劑1	--	25 mM組胺酸pH 7，10%蔗糖	--
媒劑2	--	20 mM組胺酸pH 5，5%蔗糖	--
BT1718	1.0	將10 mg BT1718添加至10 ml緩衝液中，音波處理且振盪以確保溶液澄清	25 mM組胺酸pH 7，10%蔗糖
0.3	將900 μl 1.0 mg/ml BT1718添加至2.1 ml緩衝液中，振盪以確保溶液澄清
0.1	將300 μl 1.0 mg/ml BT1718添加至2.7 ml緩衝液中，振盪以確保溶液澄清
PD-1	1	將348 μl 11.5 mg/ml PD-1添加至3.652 ml緩衝液中，振盪以確保溶液澄清	20 mM組胺酸pH 5，5%蔗糖

觀察結果

根據實驗室動物照護評估及鑑定協會(Association for Assessment and Accreditation of Laboratory Animal Care；AAALAC)之指南進行研究中的與動物處理、照護及治療相關之所有程序。在常規監測時，每天檢查動物之腫瘤生長及治療對正常行為之任何影響，諸如活動能力、食物及水之攝取(僅藉由觀察)、體重增加/減輕(每天量測體重)、眼睛/毛髮纏結及協定中陳述之任何其他異常影響。基於各亞組內動物之數目來記錄死亡及所觀察到的臨床症狀。腫瘤量測及終點

主要終點係看腫瘤生長是否可延遲或小鼠是否可治癒。使用測徑規在兩個維度中每週三次量測腫瘤尺寸，且以mm³ 計使用公式：V = 0.5a ×b ² 表示體積，其中a 及b 分別為腫瘤之長徑及短徑。接著使用腫瘤尺寸來計算T/C值。T/C值(以百分比計)為抗腫瘤有效性之指示；T及C分別為在既定日的經治療組及對照組之平均體積。

對各組使用公式：TGI (%) = [1-(Ti-T0)/(Vi-V0)] ×100來計算TGI；Ti為在既定日的治療組之平均腫瘤體積，T0為在治療開始日的治療組之平均腫瘤體積，Vi為在與Ti相同日的媒劑對照組之平均腫瘤體積，且V0為在治療開始日的媒劑組之平均腫瘤體積。統計分析

各組在各時間點處之腫瘤體積均提供彙總統計資料，包括平均值及平均值之標準誤差(SEM)。

對最終劑量後最佳治療時間點處獲得之資料進行組間腫瘤體積差異之統計分析。

進行單因子ANOVA以比較各組之間的腫瘤體積，且當獲得顯著的F-統計量(治療方差與誤差方差之比率)時，藉由Games-Howell測試進行各組之間的比較。使用Prism分析所有資料。將P ＜ 0.05視為在統計學上顯著的。結果

體重曲線描繪於圖 1 中。

腫瘤生長曲線展示於圖 2 中。腫瘤體積 追蹤

攜帶3LL之雌性C57BL/6小鼠中平均腫瘤體積隨時間之變化展示於表 1.2 中。表 1.2. 腫瘤體積 追蹤 隨時間之變化

組	治療	開始治療後的天數
0	3	7	10	14	17	21
1	媒劑，ip ，biw + 媒劑，iv ，biw	96±9	170± 14	474± 44	825± 105	2001± 289
2	媒劑，ip ，biw +BT1718 ，3mpk ，iv ，biw	96±7	167± 29	320± 71	396± 79	612± 133	968± 211	1177± 196
3	媒劑，ip ，biw +BT1718 ，10mpk ，iv ，biw	96±6	134± 17	141± 18	128± 16	132±26	129± 33	104± 41
4	PD-1 ，10mpk ，ip ，biw + 媒劑，iv ，biw	96±6	175± 14	470± 87	672± 161	1549± 423
5	PD-1 ，10mpk ，ip ，biw +BT1718 ，3mpk ，iv ，biw	96±9	148± 17	196± 31	237±68	265±78	311± 93	447± 136
6	PD-1 ，10mpk ，ip ，biw +BT1718 ，10mpk ，iv ，biw	96±6	133± 13	133± 35	104±29	69±21	45± 17	36±13

腫瘤生長抑制分析

基於開始治療後第14天之腫瘤體積量測來計算3LL同基因型模型中BT1718及抗PD-1抗體之腫瘤生長抑制速率。表 1.3. 腫瘤生長抑制分析 (T/C 及 TGI)

組	治療	腫瘤體積(mm³ )^a	T/C^b (%)	TGI (%)	P 值( 相對於媒劑)	P 值( *相對於單一組)*
1	媒劑，ip ，biw+ 媒劑，iv ，biw	2001±289	--	--	--
2	媒劑，ip ，biw +BT1718 ，3mpk ，iv ，biw	612±133	30.6	72.9	p ＜0.001
3	媒劑，ip ，biw +BT1718 ，10mpk ，iv ，biw	132±26	6.6	98.1	p ＜0.001
4	PD-1 ，10mpk ，ip ，biw + 媒劑，iv ，biw	1549±423	77.4	23.7	p ＞0.05
5	PD-1 ，10mpk ，ip ，biw +BT1718 ，3mpk ，iv ，biw	265±78	13.2	91.2	p ＜0.001	P＜0.05
6	PD-1 ，10mpk ，ip ，biw +BT1718 ，10mpk ，iv ，biw	69±21	3.4	101.4	p ＜0.001	P＞0.05

a.平均值± SEM。 b.藉由用經治療組之組平均腫瘤體積除以對照組之組平均腫瘤體積(T/C)來計算腫瘤生長抑制。概述及論述

在此研究中，評估BT1718單獨或與抗PD-1抗體組合在C57BL/6小鼠中在3LL同基因型模型中之活體內抗腫瘤功效。所量測之體重展示於圖 1 中。所有治療組在不同時間點之腫瘤體積展示於表 1.2 及表 1.3 及圖 2 中。

經媒劑治療之小鼠之平均腫瘤體積在開始治療後第14天達至2001 mm³ 。2/6之小鼠對抗PD-1抗體治療展示顯而易見的反應，而4/6小鼠不展示任何反應。3 mg/kg及10 mg/kg之BT1718產生劑量依賴型抗腫瘤效果，在612 mm³ (TGI=72.9%，p＜0.001)及132 mm³ (TGI=98.1%，p＜0.001)處量測腫瘤。抗PD-1抗體與3 mg/kg及10 mg/kg之BT1718組合進一步改良了BT1718之治療效果，且分別在265 mm³ (TGI = 91.2%，p ＜ 0.001相對於媒劑；p ＜ 0.05相對於BT1718 3 mg/kg)及69 mm³ (TGI = 101.4%，p ＜ 0.001相對於媒劑；p ＞ 0.05相對於BT1718 10 mg/kg)處量測腫瘤。

在此研究中，所有小鼠良好地維持其體重。實例 2 ：測試物品在治療3LL (LLC)同基因型模型時之活體內功效研究研究目的

項目之目標為評估測試物品在C57BL/6J小鼠中在治療3LL (LLC)同基因型模型時之活體內治療功效。研究設計

細胞培養： 在空氣中在5% CO₂ 之氛圍中，在37℃下，將3LL腫瘤細胞維持於補充有10%熱滅活胎牛血清之培養基中。將常規地每週兩次繼代培養腫瘤細胞。將採集在指數生長期中生長之細胞且計數以用於腫瘤接種。

動物： C57BL/6J，雌性，6-8週，稱重大約18-22 g。

腫瘤接種： 使各小鼠在右側腹皮下接種3LL腫瘤細胞(2 × 10⁶ 個)以用於腫瘤發育。將動物隨機分組且將在平均腫瘤體積達至約80-100 mm³ 時開始治療。各組中之測試物品投藥及動物數目展示於以下實驗設計表中。

實驗設計。

組	治療	劑量(mg/kg)	N	給藥途徑	時間表
1	媒劑	-	10	iv	biw*4週
2	BT1718	4.8	10	iv	qw*4週 (2週單次劑量+ 2週含抗PD1之組合)
3	抗PD-1	10	10	ip	biw*4週 (2週單次劑量+ 2週含BT1718之組合)
4	BT1718 +抗PD-1	4.8 + 10	10	iv + ip	qw4週+biw4週

注意： ●IV/IP 注射： 各小鼠之注射體積為10 ml/kg。 ●延長觀察： 治療28天後第2、3、4組延長2週 ●時間表變化： 當媒劑組TV達至2000 mm³ (第一次給藥後約2週)時，第2、3組將添加有抗PD-1或BT1718

動物收容： 為了使動物適應實驗室環境，在動物到達與腫瘤接種之間將允許大約一週之環境適應期。將小鼠維持於特定無病原體環境中且維持於單獨的通風籠(每籠5隻小鼠)中。所有籠子、墊料及水將在使用之前進行滅菌。在小鼠房中工作時，研究者將穿著實驗室外套及乳膠或乙烯手套。各籠將清楚地標記有指示動物數目、性別、品系、接收日期、治療、研究編號、組號及治療起始日期的籠卡。帶有食物及水之籠將一週更換兩次。動物房環境及光照期之目標條件將如下：溫度 20~26℃濕度 40~70%光週期 12小時亮及12小時暗

飲食材料： 所有動物將自由獲取標準認證之商業實驗室飲食。藉由製造商控制且常規地分析飲食中之污染物之最大容許濃度。動物將可隨意獲得適合於人類攝取之高壓滅菌城市自來水。認為飲食材料中不存在可影響腫瘤生長之已知污染物。

組之分配： 在開始治療之前，將所有動物稱重且量測腫瘤體積。由於腫瘤體積可能影響任何給定治療之有效性，因此根據小鼠腫瘤體積使用隨機區組設計將其分配至各組中。此確保所有組在基線處係可比較的。

觀察結果 ：在此研究中涉及動物照護及使用之協定及任何修正或程序將由機構動物護理及使用委員會(Institutional Animal Care and Use Committee；IACUC)審查及批准。在研究期間，將根據實驗室動物照護評估及鑑定協會(AAALAC)之規定進行動物之照護及使用。在接種之後，將檢查動物之罹病率及死亡率。在常規監測時，將檢查動物腫瘤生長及治療對正常行為之任何影響，諸如活動能力、食物及水之攝取、眼睛/毛髮纏結及任何其他異常影響。將基於各亞組內動物之數目來記錄死亡及所觀察到之臨床症狀。

腫瘤體積 將以mm³ 計使用公式：V = 0.5 a × b² 表示，其中a及b分別為腫瘤之長徑及短徑。

終止：

1) 體重減輕： 任何在任一天展現20%體重減輕之動物將經人道地殺死或將聯繫獸醫人員。

2) 腫瘤負荷： 腫瘤負荷不應超過動物體重之10%。當媒劑對照組之平均腫瘤體積達至2,000 mm³ 之值時，將終止研究，犧牲所有動物。

潰瘍：若出現腫瘤潰瘍，則將適用以下程序： ● 根據臨床症狀，將每週至少3次監測患有潰瘍腫瘤之動物，頻率逐漸增加，直至每天監測。 ● 未結痂之潰瘍腫瘤應用適當的傷口清洗溶液(例如，Novalsan)進行清洗。抗生素乳膏僅在由獸醫人員指導時施加至潰瘍/病變。

若病變，則安樂死之準則包括： ● 1週內不癒合或形成痂。 ● 直徑大於5 mm。 ● 變成空穴。 ● 產生感染跡象(諸如存在膿)或出血，或動物是否展示不適跡象(例如，過度舔舐及直接啃咬部位)或系統性疾病跡象(昏睡、活動減少、食物攝取減少、身體狀況下降或體重減輕)。聯繫獸醫人員以論述任何可能的例外狀況。

3) 臨床症狀 ：若發現動物為瀕死的，則必須將其安樂死(除非由IACUC基於適當充調整授予特定許可，其必須包括於協定中且提供增加的支持性護理，諸如溫熱的SQ液體、動物旁邊的飲食凝膠食物杯，以便其可接觸食物、溫熱襯墊上之籠以供補充熱量等。注意：瀕死狀況指示動物不大可能存活)。對於關於此等終點之問題，請聯繫獸醫人員。

罹病率之臨床實例可包括： ● 駝背。 ● 持續側臥且對處理或其他刺激缺乏反應。 ● 嚴重器官或系統衰竭之跡象。 ● 消瘦。 ● 低溫症。 ● CNS缺陷：抽搐。 ● 呼吸：快速呼吸率、呼吸困難、咳嗽、羅音。 ● GI：腹瀉持續＞2天，黃疸。

任何展現上述臨床問題之動物將藉由CO₂ 人道地犧牲。若發生意外死亡，則將不進行屍檢。

動物數目：27隻小鼠加備用注意： ● 對於功效或耐受性/MTD研究，入選動物之嚴重臨床觀察結果及體重減輕(BWL)將記錄在資料更新檔案中，將該等檔案每週三次發送至研究PI，第一次量測之超過10%、15%及20%的BWL將以不同顏色標記。 ● 應向籠提供飲食凝膠，該籠收容任何大於10% BWL之動物。

測試物品之資訊

BT1718：凍乾粉末；封裝及儲存條件：-80℃。

媒劑及 TA 之調配：

化合物	濃度(mg/ml)	調配物
媒劑	-	25 mM組胺酸，10%蔗糖，pH 7
BT1718	0.48	用組胺酸緩衝液溶解粉末
抗PD-1抗體	1	用鹽水稀釋PD-1 Ab

抗腫瘤活性及存活率百分比展示於圖 3 中。相較於單一藥劑治療中之每一者，BT1718/檢查點抑制劑組合組中之存活率大大地提高。實例 3 ： BT17BDC-18單獨及與抗mPD-1組合在雌性C57BL/6小鼠中對所確定原位E0771鼠類乳癌之功效評估

此研究之目的為評估BT17BDC-18單獨及與抗mPD-1組合在雌性C57BL/6小鼠中對所確定原位E0771鼠類乳癌之抗癌活性。測試劑及媒劑

BT17BDC-18 ：物理描述：透明無色溶液；濃度：0.96 mg/ml；儲存條件：-80℃

媒劑：25 mM組胺酸/10%蔗糖於水中；

高劑量調配物0.62 mg/ml；調配物pH：6.6；調配物描述：透明無色溶液；劑量體積：0.2 ml/20 g；儲存：在調配之後即時給藥注意： ● 第2組及第6組以6.2 mg/kg給藥 ● 第3組及第7組以4.8 mg/kg給藥 ● 為製備6.2 mg/kg劑量之BT17BDC-18，藉由將2.125 ml之媒劑添加至3.875 ml之0.96 mg/ml儲備溶液中來稀釋0.96 mg/ml儲備溶液以獲得0.62 mg/ml溶液 ● 為製備4.8 mg/kg劑量之BT17BDC-18，用媒劑1:1稀釋0.96 mg/ml儲備溶液以獲得0.48 mg/ml溶液。

太平洋紫杉醇： 白色吸濕性粉末；儲存：-20℃；媒劑：10% EtOH/10% Cremaphor/80%鹽水；高劑量調配物：1.5 mg/ml；調配物pH：5.5；調配物描述：透明無色溶液；儲存：在調配之後即時給藥；劑量體積：0.2 ml/20 g。

抗小鼠 PD-1 ( 純系： RMP1-14) ：物理描述：透明無色溶液；濃度：7.24 mg/ml；儲存：4℃，避光；媒劑：磷酸鹽緩衝鹽水(PBS)；高劑量調配物：1 mg/ml；調配物：pH 7.3；調配物描述：透明無色溶液；儲存：4℃；劑量體積：0.2 ml/20 g。動物及飼養

此實驗中進行之所有程序均遵照國立衛生研究院(National Institutes of Health；NIH)之適用法律、法規及指南及MI Bioresearch之動物照護及使用委員會之批准進行。MI Bioresearch為AAALAC認可的機構。

物種	小鼠
品系	C57BL/6小鼠(C57BL/6J)	性別	雌性
植入時之年齡	6-7週	研究/總數	76/152
飲食	Teklad 2918.15嚙齒動物飲食	水	隨意
補充劑	NA	禁食	NA
環境適應	9天	收容	創新的一次性通風籠，在Biobubble®清潔房內部帶有玉米芯墊料
動物/籠子	4隻小鼠	光週期	12/12 h
溫度	70±2℉	濕度	30-70%
ID方法	耳部穿孔	稱重頻率	3×/週
量測頻率	3×/週	平均體重(D15)	19.2 g (組平均值範圍，18.5-19.6 g)

最小體重 (D15)	16.6 g	手術	NA
分期	105 mm³ ( 組平均值範圍， 102-107mm³ ) ，第 15 天	安樂死	腫瘤體積＞2000 mm³ ，或委託人要求研究終止 ( 第 60 天 )
屍檢	是	健康檢查	每天
說明	第 9 組在分期時不包括於腫瘤體積中，因為該組之入選準則不同。添加第 9 組以供樣本收集， 6 個腫瘤＜ 250 mm³ 且另外 6 個腫瘤＞ 500 mm³ 。

細胞製備 / 植入

模型	E0771	組織類型	鼠類乳癌
植入類型	細胞
培養基	經1 mM丙酮酸鈉、10 mM HEPES緩衝液、2.8 ml 45%葡萄糖(1.25 g)及1% GlutaMAX (Gibco)改質且補充有10%非熱滅活胎牛血清(FBS)及1×青黴素/鏈黴素/L-麩醯胺酸(PSG)的RPMI 1640培養基	解離溶液	0.25%胰蛋白酶/2.21 mM EDTA/HBSS
途徑	原位	位置	乳房脂肪墊#4
接種體	1.0E+06排除錐蟲之細胞	植入培養基	無血清RPMI 1640培養基
基質膠	NA	注射體積	50 µL
成活力 ( 前 )	94%	成活力 ( 後 )	91%
註解	經由吸入異氟醚/氧氣對小鼠進行輕度麻醉且在植入前48小時使用電動剪刀刮掉植入部位上方之毛髮。亦對小鼠進行輕度麻醉以供腫瘤植入。

治療

基於腫瘤負荷之測徑規評估，將所有小鼠分選至研究組中。分配小鼠以確保所有組之平均腫瘤負荷均在研究群體之總體平均腫瘤負荷之10%內。

組	N	治療	劑量	ROA	方案	治療天數
1	8	媒劑對照	0.2 ml/20g	IV	Q7D×4	第 15 、 22 、 29 及 36 天
2	8	BT17BDC-18	6.2 mg/kg	IV	Q7D×4	第 15 、 22 、 29 及 36 天
3	8	BT17B DC-18	4.8 mg/kg	IV	Q7D×4	第 15 、 22 、 29 及 36 天
4	8	太平洋紫杉醇	15 mg/kg	IV	Q7D×4	第 15 、 22 、 29 及 36 天
5	8	抗mPD-1	10 mg/kg	IP	(Q3D×2 ；2天停藥)×2	第 15 、 18 、 21 及 24 天
6	8	BT17BDC-18+抗mPD-1	6.2 mg/kg +10 mg/kg	IV + IP	Q7D×4 + (Q3D×2；2天停藥)×2	第 15 、 22 、 29 及 36 天 + 第 15 、 18 、 21 及 24 天
7	8	BT17BDC-18+抗mPD-1	4.8mg/kg + 10 mg/kg	IV + IP	Q7D×4 + (Q3D×2；2天停藥)×2	第 15 、 22 、 29 及 36 天 + 第 15 、 18 、 21 及 24 天
8	8	太平洋紫杉醇+抗mPD-1	15 mg/kg + 10 mg/kg	IV + IP	Q7D×4 + (Q3D×2；2天停藥)×2	第 15 、 22 、 29 及 36 天 + 第 15 、 18 、 21 及 24 天
9	12	未治療	NA	NA	NA	NA

取樣

組	動物	組織	時間Pts	產品	描述
9	1-12	腫瘤	腫瘤體積＜250 mm³ 且＞500 mm³	腫瘤破裂冷凍或FFPE 嵌段	6 個腫瘤以小尺寸 (＜ 250 mm³ ) 收集且其他 6 個腫瘤以大尺寸 (＞ 500 mm³ ) 收集並處理。
註解	根據各腫瘤範圍，將 3 個腫瘤置放於 10% NBF 中，固定 24-48 小時且接著加工成 FFPE 嵌段。將其他 3 個腫瘤在液氮中速凍且在 -80 ℃ 下儲存。 ( 參見附錄 9)

藥理學及成像終點

資料類型	方法	主要終點1	主要終點2	主要終點3
藥理學	測徑規	進展時間	中值ΔT/ΔC (第36天)	CR%、PR%及TFS%
標度及臨床觀察	治療相關體重變化(%)	治療相關死亡(%)

結果

腫瘤生長/一般觀察結果/對照

在治療之第一天，實驗中之所有組之平均估計腫瘤負荷為105 mm³ ，且實驗中之所有組均良好匹配(組平均值範圍，102-107 mm³ )。在療法開始時，所有動物稱重至少16.6 g。第一次治療時之平均組體重亦良好匹配(組平均值範圍，18.5-19.6 g)。選擇2000 mm³ 之腫瘤負荷以供藉由進展時間(安樂死/死亡時間)來評估功效。

在對照組中，進展之中值時間為22.3天，且中值腫瘤體積倍增時間為4.9天。對照動物在治療方案期間經歷1.7 g (9.5%)的平均體重增加。對照組中不存在自發消退。用於此研究之植入的細胞之所有氫硫乙酸鹽培養物之細菌污染總量為陰性。

所有的此資訊與歷史標準及實驗一致，其判定為在技術上令人滿意且資料適合於評估。詞彙表

第0天-植入腫瘤之當天(不要與治療之第1天混淆，其始終相對於第0天指示)。

治療相關死亡(%)-若在最後一次治療期間或之後兩週內發現動物死亡或在瀕死條件下安樂死，且腫瘤負荷小於對照組中最小致死腫瘤之一半，且僅當動物在屍檢時未展示感染之跡象、機械給藥外傷或其他顯而易見的發病原因，則假定動物經歷治療相關死亡。在相同時段期間因其他原因(取樣、意外外傷等)安樂死之動物不包括在此計算內。此名稱意謂幫助鑑別可經歷藥物誘導之毒性的動物，但其不直接暗示因果關係(組毒性參數)。

治療相關體重變化-此為根據組平均體重計算之組終點。對於特定環境，計算方式不同，如下： ○ 若(在治療之第一天與最終治療後兩週之間的任一點處)平均組體重下降超過2%，則報導最大體重減輕，即使在治療期間體重最終反彈至淨體重增加。在反彈至淨增加之特定情況下，在結果章節中充分地記錄恢復情況。 ○ 若平均組體重在任一點處下降不超過2%，則體重變化報導為治療之第一天時與治療結束後兩週之日期的體重之間的差異。 ○ 應注意治療之持續時間可因組而變化，因此直接比較體重增加(特定言之)需要考慮此點。 ○ 當出現體重減輕時，在通常具有腫瘤進展誘導之體重減輕的模型中，多個因素影響體重變化。為評定測試劑對體重減輕之貢獻，可使用淨治療相關體重減輕。根據研究中觀察到之功效程度，此以兩種不同方式進行。 ▪ 當功效不明顯時，藉由自研究之治療組每天的平均體重減輕減去對照組的平均體重減輕來計算淨體重減輕。 ▪ 當觀察到功效時，對照組與治療組之間可出現大大不同的腫瘤負荷。當此出現時，藉由標準化腫瘤負荷來計算淨體重減輕。吾等藉由構建對照組平均腫瘤負荷相對於對照組平均體重減輕之曲線，使用可供用於對照組之所有體重資料來進行此點。(通常最容易使用腫瘤負荷相對於體重減輕之對數/線性曲線。)在任何既定研究日，藉由在對照組參考曲線上查找治療組之平均腫瘤負荷且讀取因腫瘤負荷所致之暗示/預期體重減輕來估計治療組之淨體重減輕。接著自治療組之平均體重減輕減去此值來產生治療組當天之淨體重減輕。接著所計算淨體重減輕用於估計藥物之耐受性。功效 ● ΔC及ΔT-為各個小鼠終點，對各小鼠之進行如下計算： ΔT = T_t -T₀ 及ΔC = C_t -C₀ ，其中T_t 及T₀ 分別為在時間t或在開始給藥時的經治療小鼠之腫瘤負荷。ΔC反映對照小鼠之類似計算。 ● 中值ΔT/ΔC-為組終點。其針對各治療日計算為：結果表示為%。當中值ΔT/ΔC為負(中值治療腫瘤負荷消退)時，不報導中值ΔT/ΔC且替代地報導中值消退%。 ● 消退%-為組終點。其指示中值腫瘤體積相對於基線減少的百分比。其計算為： ● 評估尺寸之時間(Time to Evaluation Size；TES) - TES為各個小鼠終點，且其以自腫瘤植入日起之天數表示。其為腫瘤負荷達至指定值所耗費之時間，且其可由評估腫瘤負荷(測徑規量測、BLI、解剖學成像等)之任何方法來計算。其藉由排除所選擇腫瘤負荷之兩個最接近資料點之間的對數-線性內插來計算。其中：

D _𝐸𝑆 =TES _𝑖 -達至評估尺寸之日

D _h -達至第一量測值大於ES 之日

D _𝑙 -達至ES 之前的最後一次量測之日

𝑉 _h -第D _h 天之腫瘤體積

𝑉_𝑙 -D _𝑙 時之腫瘤體積

ES -評估尺寸

進展時間(Time to Progression；TP)-進展時間為壽命之替代物、研究時間或壽命。其用於涉及IACUC授權之因動物過度腫瘤負荷而對其進行安樂死之研究(即使動物在其他方面表現正常)。所指定之腫瘤負荷極限為腫瘤模型依賴性的。TP資料僅作為傳統壽命資料藉由卡普蘭邁耶方法(Kaplan Meier methods)分析。各個動物之進展時間為治療開始與該動物死亡或所需安樂死之間的天數。(第一次治療日為整個研究中第一次治療日，且並不特定於所討論之組。)當因過度腫瘤負荷(通常＞2000 mm³ ，但與模型相關)而提示安樂死時，自腫瘤負荷極限任一側上相鄰資料點之間的對數-線性內插(而非自安樂死之實際日)計算安樂死天數。此將所有動物置於相同條件下，且移除可能延遲安樂死(其可能因取樣而發生，或週末及假期)之影響。將因預定取樣或與疾病進展或療法不相關之其他原因而安樂死之動物不包括在此計算內。使用組中值進展時間來計算進展時間增量% (ITP%)。應注意壽命及進展時間為相互排斥的終點且無法用於同一研究中。另外，TES及TP不相同，即使各自選擇的評估尺寸相同。其不同之處在於TP包括在研究期間(非外來原因)死亡而從未達至所選擇ES之動物，藉此呈現治療性結果之更均衡描述。

進展時間增量% (ITP%) - ITP%為組終點。其計算為：

腫瘤倍增時間(Td) - Td為個體及組參數，通常表示為組之中值Td。其以天數為單位量測。Td可由任何類型之體積資料(測徑規量測值、BLI信號等)計算。出於QC目的，計算腫瘤生長曲線之指數部分的QC。不包括在任何停滯期期間及在遵循岡伯茲晚期階段(Gompertzian advanced stage)中之資料點。典型腫瘤負荷極限在100與1000 mm³ 之間，但實際選擇為資料驅使的。由腫瘤負荷相對於天數之對數/線性曲線的最小平方最佳擬合來計算各小鼠之Td為：

在罕見的時刻，將中值Td用作功效之潛在指標。因此，在認為反映療法反應時段的規定天數範圍內，其計算為各組之中值。

腫瘤消退

完全消退(CR) -若在第一次治療後動物腫瘤負荷之任一點減小至不可量測的體積，則認為其完全消退。吾人之定則將小於5 mm之任何腫瘤量測值記錄為「0」。CR必須維持至少2個連續量測值。此與NCI的定則一致且反映此類量測值除了在彼等小尺寸下量測之生物學的不確定之外的固有及不可接受的較高機械誤差。(個別功效參數)

部分消退-若動物腫瘤負荷在第一次治療時減小至小於腫瘤負荷之一半，則認為其部分消退。PR必須維持至少2個連續量測值以用於測徑規驅動研究。(對於BLI驅動研究，由於量測之動態範圍及成像之間通常較長的間隔，免除所要求之確認。)PR列表排除CR，因此獲得CR之動物亦不視為PR。(個別功效參數)

無腫瘤存活者(Tumor-free Survivor；TFS) - TFS為(1)存活直至研究終止，及(2)在研究終止時無確切可量測之疾病跡象的任何動物。在研究期間某一點處無腫瘤，但接著在研究結束前出於取樣或其他目的而實行安樂死的小鼠不視為TFS。將其排除在TFS%計算外。TFS狀態不暗示「治癒」。資料

相較於單一療法，含有抗PD-1抗體之BT1718產生增加的抗腫瘤活性。在治療之後的腫瘤體積追蹤展示於圖 4 中。

總體而言，所有治療方案均為耐受的。媒劑對照組以及單一藥劑太平洋紫杉醇組(15 mg/kg)中均存在兩例死亡。將此等死亡視為非特異性死亡，屍檢觀察結果類似於在患有晚期疾病之小鼠中觀察到的結果。然而，治療無法完全排除死亡原因。在媒劑對照組中，注射後立即發生一例死亡且可能為技術給藥錯誤。

用6.2 mg/kg或4.8 mg/kg之BT17BDC-18進行單一藥劑治療為適度有效的，使進展時間增加10.5天(47.1%)及6.6天(29.4%)且第36天中值ΔT/ΔC值分別為38%及72%。用BT17BDC-18進行治療並未產生任何消退或任何無腫瘤存活者。

用10 mg/kg之抗mPD-1進行治療為無效的，使進展時間增加0.2天(0.7%)且第36天中值ΔT/ΔC值為121%。藉由用抗mPD-1治療產生之活性與MI Bioresearch之歷史資料一致。

用6.2 mg/kg或4.8 mg/kg之BT17BDC-18與10 mg/kg之抗mPD-1組合進行治療比任一單一藥劑治療稍微更有效，使進展時間增加13.2天(59.0%)及7.7天(34.5%)且第36天中值ΔT/ΔC值分別為27%及54%。組合治療各自產生12.5% (1/8)之完全消退發生率。6.2 mg/kg之BT17BDC與抗mPD-1之組合亦產生12.5% (1/8)之無腫瘤存活者發生率。

用15 mg/kg之太平洋紫杉醇進行治療為輕度活性的，使進展時間增加4.0天(17.9%)且第36天中值ΔT/ΔC值為94%。

用15 mg/kg之太平洋紫杉醇與10 mg/kg之抗mPD-1組合進行治療產生與單獨使用太平洋紫杉醇類似的活性，使進展時間增加3.5天(15.5%)且第36天中值ΔT/ΔC值為94%。實例 4 ： BT1718及抗CTLA4在BALB/C小鼠中在治療CT-26同基因型模型時之活體內功效研究研究目標

研究之目標為評估BT1718及抗CTLA4在BALB/c小鼠中在CT-26同基因型模型中之活體內抗腫瘤功效。實驗設計

組	治療	n	劑量 (mg/kg)	給藥體積(µL/g)	給藥途徑	時間表
1	媒劑	10	--	10	Iv	qw×2週
2	BT1718	10	6.4	10	Iv	qw×3週
3	抗CTLA4	10	10	10	Ip	biw×4週
4	BT1718+抗CTLA4	10	6.4 + 10	10	Iv + ip	qw+biw 4×週

*第3組及第4組之小鼠在4週的治療之後保持監測，且在第62天用CT-26細胞再攻擊免疫系統。材料： 動物及收容條件 功效部分之動物

物種：小家鼠

品系：BALB/C

年齡：6-8週(功效)、17-20週(再攻擊)

性別：雌性

體重：18-22 g (功效)、25-30 g (再攻擊)

動物數目：40隻小鼠加備用再攻擊對照組之動物

第5組

物種：小家鼠

品系：BALB/c

年齡：19-21週

性別：雌性

體重：22-26 g

動物數目：10隻小鼠

第6組

物種：小家鼠

品系：BALB/c

年齡：11-12週

性別：雌性

體重：21-25 g

動物數目：10隻小鼠收容條件

在恆定溫度及濕度下，將動物放在個別通風籠中，各籠5隻動物。

溫度：20~26℃

濕度40-70%。

水：動物自由獲取無菌飲用水。

動物標識：藉由耳部寫碼來標記動物。測試物品

產品標識：BT1718

物理描述：凍乾粉末

分子量：3511.38

純度：97.70%

封裝及儲存條件：在-80℃下儲存

產品標識：抗CTLA4

物理描述：8.71 mg/ml

封裝及儲存條件：在4℃下儲存實驗方法及程序 細胞培養

在空氣中在5% CO₂ 之氛圍中，在37℃下，將CT-26細胞維持於補充有10%熱滅活胎牛血清之培養基中。常規地每週兩次繼代培養腫瘤細胞。收集在指數生長期中生長之細胞且計數以用於腫瘤接種。腫瘤接種

使各小鼠在右側腹皮下處接種於0.1 mL PBS中之CT-26腫瘤細胞(3.0 × 10⁵ 個)以用於腫瘤發育。當平均腫瘤體積達至66 mm³ 時，將動物隨機分組。各組中之測試物品投藥及動物數目展示於實驗設計表中。

在4週治療及約4週監測之後，使第3組及第4組中之小鼠在左側腹皮下處接種於0.1 mL PBS中之CT-26腫瘤細胞(3.0 × 10⁵ 個)以用於免疫系統再攻擊。使各小鼠在右側腹皮下處接種腫瘤片段(30 mm³ )以用於腫瘤發育。當平均腫瘤體積達至164 mm³ 時，開始治療。

測試物品	濃度 (mg/mL)	調配物
媒劑	-	25 mM組胺酸10%蔗糖pH 7
抗CTLA4	1	用5.31 ml PBS稀釋689 μl 8.71 mg/ml抗CTLA-4
BT1718	0.64	在34 ml His-緩衝液*中溶解22.3 mg BT1718
*His-緩衝液：25 mM組胺酸10%蔗糖pH 7

觀察結果

根據由機構動物護理及使用委員會(IACUC)批准之指南，遵循實驗室動物照護評估及鑑定協會(AAALAC)之指南進行研究中的與動物處理、照護及治療相關之所有程序。在常規監測時，每天檢查動物之腫瘤生長及治療對正常行為之任何影響，諸如活動能力、食物及水之攝取(僅藉由觀察)、體重增加/減輕、眼睛/毛髮纏結及協定中陳述之任何其他異常影響。基於各亞組內動物之數目來記錄死亡及所觀察到的臨床症狀。腫瘤量測及終點

主要終點係看腫瘤生長是否可延遲或小鼠是否可治癒。使用測徑規在兩個維度中每週三次量測腫瘤體積，且以mm³ 計使用公式：V = 0.5 a × b² 表示體積，其中a及b分別為腫瘤及長徑及短徑。接著使用腫瘤尺寸來計算T/C值。T/C值(以百分比計)為抗腫瘤有效性之指示；T及C分別為在既定日的經治療組及對照組之平均體積。

對各組使用公式：TGI (%) = [1-(T_i -T₀ )/(V_i -V₀ )] ×100來計算TGI；T_i 為在既定日的治療組之平均腫瘤體積，T₀ 為在治療開始日的治療組之平均腫瘤體積，V_i 為在與T_i 相同日的媒劑對照組之平均腫瘤體積，且V₀ 為在治療開始日的媒劑組之平均腫瘤體積。統計分析

進行單因子ANOVA以比較各組之間的腫瘤體積，且當獲得顯著的F-統計量(治療方差與誤差方差之比率)時，藉由Games-Howell測試進行各組之間的比較。T檢驗用於比較2個組之間的差異。使用GraphPad 5.0分析所有資料。將P ＜ 0.05視為在統計學上顯著的。

結果

治療之後的腫瘤體積追蹤展示於圖 5 中。

攜帶CT26腫瘤之雌性BALB/c小鼠在治療期間的平均腫瘤體積追蹤展示於表 4. 1 中。表 4.1 . 腫瘤體積 追蹤 隨時間之變化

	第 1 組	第 2 組	第 3 組	第 4 組
天數	媒劑， qw	BT1718 ， 6.4 mpk ， qw	抗 CTLA4 ， 10 mpk ， biw	BT1718+ 抗 CTLA4
0	66±8	66±7	66±8	66±7
3	211±22	216±28	208±20	208±28
5	373±43	361±52	318±34	290±43
7	581±64	499±73	399±52	341±56
10	993±120	740±95	487±75	369±68
12	1433±181	848±124	461±84	269±58
14	2090±281	1101±170	468±94	250±62
17		1364±212	439±117	168±48
19		1730±284	430±130	132±45
21		2198±367	421±156	97±32
24			447±190	66±24
26			554±249	61 ±25
28			659±316	62±26

腫瘤生長抑制分析

基於開始治療後第14天之腫瘤體積量測來計算CT-26同基因型模型中BT1718及抗CTLA4抗體之腫瘤生長抑制速率。表 4.2. 腫瘤生長抑制分析

組	治療	腫瘤體積 (mm³ )^a	T/C^b (%)	TGI (%)	P 值 ( 相對於媒劑 )	P 值 ( 相對於組合 )
1	媒劑， qw	2090±281	--	--	--	--
2	BT1718 ， 6.4 mpk ， qw	1101±170	52.7	48.9	p ＜0.001	p ＜0.001
3	抗 CTLA4 ， 10 mpk ， biw	468±94	22.4	80.1	p ＜0.001	p ＜0.05
4	BT1718+ 抗 CTLA4	250±62	12.0	90.9	p ＜0.001	-

再攻擊

第3組及第4組之小鼠在4週的治療之後保持監測，且在第62天用CT-26細胞再攻擊免疫系統。細胞再植入後的腫瘤生長展示於圖 5 中。

結果概述及論述

在此研究中，評估BT1718及抗CTLA4在CT-26同基因型模型中之治療功效。在不同時間點處之所有治療組之所量測體重及腫瘤體積展示於圖 5 及表 4. 1 以及表 4.2 中。

在開始治療後第14天經媒劑治療之小鼠之平均腫瘤體積達至2090 mm³ 。6.4 mg/kg，qw之BT1718 (TV=1101 mm³ ，TGI=48.9%，p＜0.001)產生顯而易見的抗腫瘤活性。10 mg/kg，biw單獨之抗CTLA4抗體(TV=468 mm³ ，TGI=80.1%，p＜0.001)單獨或與BT1718 (TV=250 mm³ ，TGI=90.9%，p＜0.001)組合產生有效的抗腫瘤活性。

BT1718及抗CTLA4抗體之組合進一步改良BT1718 6.4 mg/kg (p＜0.001)或抗CTLA4抗體(p＜0.05) 10 mg/kg作為單一療法之抗腫瘤效果。

第3組中之4個腫瘤及第4組中之8個腫瘤藉由治療完全根除且不展示任何復發，用CT26細胞再攻擊彼等小鼠中之免疫系統。結果，在第3組及第4組中，在抗CTLA4 Ab單獨或與BT1718治療組合之後，無小鼠出現腫瘤，而對照組中100%的小鼠出現腫瘤。

所有組中之動物良好地保持體重。實例 5 ： BT1718/抗PD-1轉錄研究研究目標

研究之目標為研究活體內BT1718及抗PD-1之組合效果之機制。生成一組資料來探究在同基因型LLC腫瘤模型中對BT1718、抗PD1及其組合之反應的分子變化。觀察到之轉錄變化指示增強的藉由將BT1718與抗PD1組合而引發之抗腫瘤免疫。轉錄變化指示I型IFN反應、癌細胞抗原之釋放、癌症抗原呈遞及T細胞激活及活化以及免疫細胞浸潤至腫瘤中。

用媒劑iv、BT1718 4.8 mg/kg iv、抗PD-1 10 mg/kg ip或BT1718及抗PD-1之組合的單一劑量治療攜帶LLC腫瘤之C75Bl/6小鼠(n=5)。在給藥後24及48 h收集腫瘤，且藉由奈米串使用包括750個基因之nCounter小鼠泛癌症IO 360面板來分析RNA，該等基因覆蓋腫瘤、腫瘤微環境及免疫反應界面處之關鍵路徑。nSolver軟體用於資料分析。儘管經媒劑治療之腫瘤之轉錄概況具高可變性，但當BT1718與PD-1結合時，免疫調節之增強為明顯的。

資料及分析展示於圖6至圖8中。總體而言，對BT1718與抗PD1之組合效應的轉錄分析指示藉由將雙環毒素結合物BT1718與抗PD-1抗體組合，早期時間點處之免疫調節增加。基於資料，奈米串分析提供一種可藉由流式細胞量測術或組織切片之多工免疫螢光法分析來產生的在腫瘤組織(腫瘤細胞、腫瘤浸潤性免疫細胞及在一般腫瘤微環境中)中產生藥物效果之全面視圖的更經濟的方式。

圖 1 描繪在對攜帶3LL腫瘤之C57BL/6小鼠進行BT1718及PD-1治療之後的體重變化。資料點表示組平均體重。誤差條表示平均值之標準誤差(SEM)。

圖 2 描繪在向攜帶3LL腫瘤之C57BL/6小鼠投與BT1718及PD-1之後的腫瘤體積追蹤。資料點表示組平均值，誤差條表示平均值之標準誤差(SEM)。

圖 3 描繪在向攜帶3LL腫瘤之C57BL/6J小鼠投與BT1718及PD-1之後的腫瘤體積追蹤及存活率百分比(定義為腫瘤體積之20倍增加)。資料點表示組平均值，誤差條表示平均值之標準誤差(SEM)。相較於單一藥劑治療中之每一者，BT1718/檢查點抑制劑組合組中之存活率大大地提高。

圖 4 描繪在向攜帶原位E0771鼠類乳癌之C57BL/6小鼠投與BT1718、太平洋紫杉醇(paclitaxel)及PD-1之後的腫瘤體積追蹤。資料點表示組平均值，誤差條表示平均值之標準誤差(SEM)。用6.2 mg/kg或4.8 mg/kg之BT1718與10 mg/kg之抗PD-1組合進行治療比任一單一藥劑治療稍微更有效，從而使進展時間增加13.2天(59.0%)及7.7天(34.5%)。組合治療使得各BT1718/抗PD-1組合組之完全消退之發生率為12.5% (1/8)。觀察到太平洋紫杉醇或aPD-1作為單一藥劑或以組合形式之不良反應。

圖 5 描繪在向攜帶CT-26腫瘤之BALB/c小鼠投與BT1718及抗CTLA4之後的腫瘤體積追蹤及存活率百分比(定義為腫瘤體積之20倍增加)及在細胞再接種之後的腫瘤再生長之百分比。資料點表示組平均值，誤差條表示平均值之標準誤差(SEM)。8/10患有CT26同基因型腫瘤之小鼠在BT1718/aCTLA-4治療之後(4/10在aCTLA-4之後)為完全反應者，且拒絕隨後植入CT26-細胞。

圖 6 描繪功能增濃分析指示用BT1718/PD-1組合治療的動物之腫瘤中T細胞相關標記(Th1細胞、耗竭CD8細胞、細胞毒性細胞、T細胞、CD8 T細胞)的增加。此等變化在48 h時間點處變得顯而易見。GSVA得分係指基因組變化分析。

圖 7 描繪當根據抗癌免疫功能標註轉錄物時，功能增濃分析指示在用BT1718/PD-1組合治療的動物中免疫細胞對腫瘤之定位、骨髓細胞活性、T細胞對癌細胞之識別、T細胞引發及活化、癌症抗原呈遞及癌細胞之殺滅的增加。亦藉由組合治療增加NK細胞活性信號。出乎意料地，癌細胞抗原釋放之信號隨組合治療而減少。此等變化在48 h時間點處變得顯而易見。彩色寫碼係指與圖6中相同的GSVA得分。對於免疫細胞對腫瘤之定位、骨髓細胞活性、NK細胞活性及癌細胞抗原之釋放，經調整p＜0.1 (在48 h時，PD1/組合)。對於NK細胞活性，經調整p＜0.05 (在48 h時，CTR/組合)。

圖 8 描繪轉錄物之功能及路徑標註指示若干不同組織功能之調節。可在24 h時間點處觀察到抗PD-1在誘導細胞介素及趨化因子信號傳導中之活性，而BT1718之單一療法活性在48 h時變得顯而易見，細胞毒性及IFN信號傳導以及基質重塑及癌轉移之信號增加。在48 h時間點處可再次觀察到回應於組合治療之轉錄信號變化。此等包括免疫細胞黏著及遷移、淋巴隔室、抗原呈遞及共刺激信號傳導之增加。藉由轉錄信號之變化指示刺蝟信號傳導、血管生成及Wnt信號傳導中之信號減少。彩色寫碼係指與圖6中相同的GSVA得分。對於細胞毒性，經調整p＜0.05 (在48 h時，CTR/BT1718)。

Claims

一種BT1718或其醫藥學上可接受之鹽及/或檢查點抑制劑之用途，其係用於製備治療患者之癌症之藥劑，其中BT1718或其醫藥學上可接受之鹽係用於與該檢查點抑制劑組合使用，或其中該檢查點抑制劑係用於與BT1718或其醫藥學上可接受之鹽組合使用，其中：(a)該癌症為乳癌，及，該檢查點抑制劑為抗PD1抗體；或(b)該癌症為結腸癌，及，該檢查點抑制劑為抗CTLA4抗體。
如請求項1之用途，其中，對於(a)，BT1718或其醫藥學上可接受之鹽係以14.4mg/m²之劑量投與。
如請求項1之用途，其中，對於(a)，BT1718或其醫藥學上可接受之鹽係以18.6mg/m²之劑量投與。
如請求項1至3中任一項之用途，其中，對於(a)，BT1718或其醫藥學上可接受之鹽係以一週一次之頻率投與。
如請求項1至3中任一項之用途，其中，對於(a)，該抗PD1抗體係選自納武單抗(nivolumab)、帕博利珠單抗(pembrolizumab)、德瓦魯單抗(durvalumab)及阿特珠單抗(atezolizumab)。
如請求項1之用途，其中，對於(b)，BT1718或其醫藥學上可接受之鹽係以19.2mg/m²之劑量投與。
如請求項1或6之用途，其中，對於(b)，BT1718或其醫藥學上可接受之鹽係以一週一次之頻率投與。
如請求項1或6用途，其中，對於(b)，該抗CTLA4抗體係選自伊匹單抗(ipilimumab)及曲美單抗(tremelimumab)。
如請求項1至3或6中任一項之用途，其中BT1718或其醫藥學上可接受之鹽及該檢查點抑制劑係藉由靜脈內輸注投與。
如請求項1至3或6中任一項之用途，其中該BT1718或其醫藥學上可接受之鹽及該檢查點抑制劑係同時、依序或在一段時間內相互投與。
如請求項1之用途，其中該藥劑進一步包含組胺酸。
如請求項1之用途，其中該藥劑進一步包含蔗糖。
如請求項1之用途，其中該藥劑為在約pH 7下包含BT1718或其醫藥學上可接受之鹽、組胺酸、蔗糖及水之調配物。