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TWI793439B - 抗ｃｄ７３抗體及其應用 - Google Patents

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TWI793439B
TWI793439B TW109128447A TW109128447A TWI793439B TW I793439 B TWI793439 B TW I793439B TW 109128447 A TW109128447 A TW 109128447A TW 109128447 A TW109128447 A TW 109128447A TW I793439 B TWI793439 B TW I793439B
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甘馨
單茜茜
戎一平
何云
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大陸商和鉑醫藥（上海）有限責任公司
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Abstract

本申請涉及一種分離的抗原結合蛋白，包括以下一種或多種特性：a.能夠以相當高的親和力結合人CD73和食蟹猴的CD73；b.能夠抑制CD73的5’外切核苷酸酶活性；c.能夠調節CD73的內化；d.能夠促進T細胞增殖；e.血清中濃度相對穩定；以及f.能夠抑制腫瘤生長和/或腫瘤細胞增殖。此外，本申請也提供了一種製備所述的分離的抗原結合蛋白的方法以及所述的分離的抗原結合蛋白在預防、緩解和/或治療腫瘤中的藥物用途。

Description

抗CD73抗體及其應用
本申請涉及生物醫藥領域，具體的涉及一種抗CD73抗體及其應用。
白血球分化抗原73，CD73，也稱為5'-核苷酸酶，是人體中由NT5E基因編碼的酶。CD73為由兩個相同的70-kD亞基組成的二聚體，由一個糖基磷脂醯肌醇連接到質膜的外表面。
CD73將細胞外的單磷酸核苷酸(AMP)脫磷酸化，產生腺苷。癌組織中細胞外腺苷的積累構成腫瘤免疫逃逸的重要機制。另外，腫瘤來源的腺苷藉由腺苷酸環化酶活化的A2A受體很大程度上抑制浸潤的效應T細胞(Ohta等人，(2006)Proc Natl Acad Sci USA 103：13132-13137)。研究表明CD73在多種腫瘤細胞表面高表現，包括白血病、膀胱癌、神經膠質瘤、成膠質細胞瘤、卵巢癌、黑色素瘤、前列腺癌、甲狀腺癌、食道癌和乳腺癌(Jin等人，Cancer Res 2010；70：2245-55和Stagg等人，PNAS 2010；107：1547-52)。
已經證明CD73調節腫瘤細胞上的細胞-細胞和細胞-基質相互作用，CD73的表現和活性也與減少的T-細胞反應有關，並與耐藥性有關。另一個問題是通常稱為CD73抑制劑的抗體可能無法藉由調節CD73的5'核苷酸外切酶活 性來發揮作用。據報導一種抗體7G2(mlgG2同種型，Life Technologies)抑制CD73，但是該抗體在流式細胞術中不結合細胞表面CD73，或至多僅以非常低的親和力結合。另一種結合CD73的抗體，選殖株AD2(小鼠IgG1同種型)據報導能引起受體聚集和內在化，但是對酶活性的影響最小。然而另一種試劑1E9(小鼠IgG3同種型，聖克魯斯生物技術有限公司)可獨立於酶促抑制而促進T細胞訊號轉導。據報導，還有一種mAb，4G4(IgG1同種型，Novus Biologicais)能誘導CD73從T細胞表面脫落。在使用重組CD73的試驗中，僅一種試劑，盡管沒有被進一步特徵化，但據報導具有部分阻斷酶促作用的能力(Sachsenmeier等人.(2012)J.Biomed.Screening 17：993-998)，後來被定義為能誘導細胞內化的抗體(Rust等人，(2013)Mol.Cancer 12；11)。另外，一個更複雜因素是，文獻中描述的抗體通常為具有能夠被Fcγ受體結合能力的鼠同種型，這使得難以將任何潛在的阻斷作用與Fc媒介的作用分開。與Fcγ受體結合的抗CD73抗體可以例如調節表現CD73的腫瘤細胞(可能還有表現CD73的免疫抑制細胞)的耗竭(例如，藉由ADCC)，和/或可以誘導炎性細胞激素的產生，而不是任何真正的阻斷作用。因此，盡管對標靶CD73研究的興趣很大，但大部分有效的抗CD73抗體的特性仍有待確定。
需要開發針對CD73的新檢驗方法和抗體，以將其作為新型治療靶標的潛能。
本申請涉及一種分離的抗原結合蛋白，包括以下一種或多種特性：a.能夠以相當高的親和力結合人CD73和食蟹猴的CD73；b.能夠抑制CD73的5’ 外切核苷酸酶活性；c.能夠調節CD73的內化；d.能夠解除腺苷對T細胞增殖抑制作用；e.血清中濃度相對穩定；以及f.能夠抑制腫瘤生長和/或腫瘤細胞增殖。此外，本申請也提供了一種製備該分類的抗原結合蛋白的方法以及該抗原結合蛋白在預防、減輕和/或治療腫瘤中的藥物用途。
一方面，本申請提供了一種分離的抗原結合蛋白，包括以下一種或多種特性：a.能夠以相當高的親和力同時結合人CD73和食蟹猴CD73；b.能夠抑制CD73的5’外切核苷酸酶活性；c.能夠調節CD73的內化；d.能夠解除腺苷對T細胞增殖抑制作用；e.保持血清中相對穩定濃度至少15天；以及f.能夠抑制腫瘤生長和/或腫瘤細胞增殖。
在某些實施方式中，該分離的抗原結合蛋白包括來自於SEQ ID NO：168所示抗體重鏈可變區VH的HCDR1、HCDR2和/或HCDR3區中的任一個。
在某些實施方式中，該分離的抗原結合蛋白包括來自於SEQ ID NO：169所示抗體輕鏈可變區VL的LCDR1、LCDR2和/或LCDR3區中的任一個。
某些實施方式中，該分離的抗原結合蛋白包括抗體或抗原結合片段。
在某些實施方式中，該抗原結合片段包括Fab、Fab'、F(ab)2、Fv片段、F(ab')2、scFv、di-scFv和/或dAb。
在某些實施方式中，該抗體選自單株抗體、嵌合抗體、人源化抗體和全人源抗體。
在某些實施方式中，該抗原結合蛋白包含來自於SEQ ID NO：152所示的重鏈可變區VH的HCDR1、HCDR2和/或HCDR3區中的任一個。
在某些實施方式中，該VH包含SEQ ID NO：96、104、105、106和107中任一個所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該分離的抗原結合蛋白包含來自於SEQ ID NO：151所示的輕鏈可變區VL的LCDR1、LCDR2和/或LCDR3區中的任一個。
在某些實施方式中，該VL包含SEQ ID NO：111和115任一個所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該HCDR3包含SEQ ID NO：154所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該HCDR3包含SEQ ID NO：35、38和39中任一個所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該HCDR2包含SEQ ID NO：153所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該HCDR2包含SEQ ID NO：18、23和24中任一個所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該HCDR1包含SEQ ID NO：7所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該分離的抗原結合蛋白，包含重鏈可變區VH，其中該VH包含SEQ ID NO：152所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該VH包含SEQ ID 96、104、105、106和107中任一個所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該分離的抗原結合蛋白包含抗體重鏈HC，該HC包含SEQ ID NO：124、132、133、134、和135中任一個所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該LCDR3包含SEQ ID NO：78所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該LCDR2包含SEQ ID NO：66所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該LCDR1包含SEQ ID NO：55所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該分離的抗原結合蛋白包含輕鏈可變區VL，其中該VL包含SEQ ID NO：151所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該VL包含SEQ ID NO：111和115中任一個所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該分離的抗原結合蛋白包含抗體輕鏈LC，該LC包含SEQ ID NO：139和143中任一個所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該分離的抗原結合蛋白包含來自於SEQ ID NO：156所示的重鏈可變區VH的HCDR1、HCDR2和/或HCDR3區中的任一個。
在某些實施方式中，該VH包含SEQ ID NO：95、99、100、101、102和103中任一個所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該分離的抗原結合蛋白包含來自於SEQ ID NO：155所示的輕鏈可變區VL的LCDR1、LCDR2和/或LCDR3區中的任一個。
在某些實施方式中，該VL包含SEQ ID NO：110、114、118、119、120、121和122中任一個所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該HCDR3包含SEQ ID NO：34所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該HCDR2包含SEQ ID NO：158所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該HCDR2選自包含SEQ ID NO：17、21和22中任一個所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該HCDR1包含SEQ ID NO：6所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該分離的抗原結合蛋白，包含重鏈可變區VH，其中該VH包含SEQ ID NO：156所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該VH包含SEQ ID NO：95、99、100、101、102和103中任一個所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該抗原結合蛋白包含抗體重鏈HC，其中該HC包含SEQ ID NO：123、127、128、129、130和131中任一個所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該LCDR3包含SEQ ID NO：157所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該LCDR3包含SEQ ID NO：77、81、84、85、86、87和88中任一個所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該LCDR2包含SEQ ID NO：65所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該LCDR1包含SEQ ID NO：54所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該分離的抗原結合蛋白包含輕鏈可變區VL，其中該VL包含SEQ ID NO：155所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該VL包含SEQ ID Nos：110、114、118、119、120、121和122中任一個所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該分離的抗原結合蛋白包含抗體輕鏈LC，其中該LC包含SEQ ID NO：138、142、146、147、148、149和150任一項所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該分離的抗原結合蛋白包含來自於SEQ ID NO：108所示的重鏈可變區VH的HCDR1HCDR2和/或HCDR3區中任一個。
在某些實施方式中，該分離的抗原結合蛋白包含來自於SEQ ID NO：116所示的輕鏈可變區VL的LCDR1，LCDR2和/或LCDR3區中任一個。
在某些實施方式中，該HCDR3包含SEQ ID NO：40所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該HCDR2包含SEQ ID NO：25所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該HCDR1包含SEQ ID NO：10所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該分離的抗原結合蛋白包含重鏈可變區VH，該VH包含SEQ ID NO：108所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該分離的抗原結合蛋白包含抗體重鏈HC，該HC包含SEQ ID NO：136所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該LCDR3包含SEQ ID NO：82所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該LCDR2包含SEQ ID NO：69所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該LCDR1包含SEQ ID NO：58所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該分離的抗原結合蛋白包含輕鏈可變區VL，該VL包含SEQ ID NO：116所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，該分離的抗原結合蛋白包含抗體輕鏈LC，該LC包含SEQ ID NO：144所示的胺基酸序列。
另一方面，本申請提供了編碼該分離的抗原結合蛋白的一種或多種分離的核酸分子。
另一方面，本申請提供可包含該一種或多種分離的核酸分子的一種或多種載體。
另一方面，本申請提供了包括該一種或多種分離的核酸分子、該一種或多種載體的細胞。
另一方面，本申請提供了製備該分離的抗原結合蛋白的方法，包括在使得該分離的抗原結合蛋白表現的條件下，培養該細胞。
另一方面，本申請提供了一種醫藥組成物，包含分離的抗原結合蛋白，一種或多種分離的核酸分子，一種或多種載體，細胞，以及任選地藥學上可接受的載體。
另一方面，本申請提供了該分離的抗原結合蛋白，該一種或多種核酸分子，該一種或多種載體，該細胞和/或該醫藥組成物在製備藥物中的用途，該藥物用於預防、緩解和/或治療腫瘤。
在某些實施方式中，該腫瘤包括固態腫瘤和/或血液腫瘤。
另一方面，本申請提供了預防、緩解和/或治療腫瘤的方法，該方法包括向有需要的受試者施用本申請的分離的抗原結合蛋白。
在某些實施方式中，該腫瘤包括固態腫瘤和/或血液腫瘤。
另一方面，本申請提供了抑制CD73的5'-核苷酸酶活性的方法，包括施用本申請的分離的抗原結合蛋白。
另一方面，本申請提供了調節CD73內化的方法，包括施用本申請的分離的抗原結合蛋白。
另一方面，本申請提供了用該分離的抗原結合蛋白，該一種或多種核酸分子，該一種或多種載體，該細胞和/或該醫藥組成物製備藥物的用途，該藥物用於該藥物用於預防、緩解和/或治療腫瘤。
在某些實施方式中，該腫瘤包括固態腫瘤和/或血液腫瘤。
另一方面，本申請提供了一種預防、緩解和/或治療腫瘤的方法，包括向有需要的受試者施用本申請的分離的抗原結合蛋白。
本領域技術人員能夠從下文的詳細描述中容易地洞察到本申請的其它方面和優勢。下文的詳細描述中僅顯示和描述了本申請的示例性實施方式。將會被認知的是，本申請能夠具有其他不同的實施例，並且其若干細節能夠在各種明顯的方面進行修改，所有這些都不脫離本公開。相應地，圖式和說明書本質上應被認為是說明性的，而不是限制性的。
[參引合併]
本說明書中提及的所有出版物，專利和專利申請都以相同的程度藉由引用併入本文，就如同每個單獨的出版物，專利或專利申請被明確地並單獨地指出藉由引用併入一樣。
本發明的新穎特徵在所附的申請專利範圍中具體闡述。藉由參考下面的詳細說明，可以更好地理解本發明的特徵和優點，該詳細說明闡述了採用本發明原理的說明性實施例以及圖式，其中：
圖1A和1B示出的是流式檢測(FACS)抗體和CHO-K1-hCD73細胞株結合。
圖2示出的是流式檢測(FACS)抗體與HEK293-cynoCD73細胞株結合。
圖3示出的是是流式檢測(FACS)抗體和CHO-K1-hCD73細胞株結合。
圖4示出的是流式檢測(FACS)抗體和CHO-K1-hCD73細胞株結合。
圖5A和5B示出的是流式檢測(FACS)抗體與CHO-K1-hCD73細胞株結合。
圖6A和6B示出的是抗體抑制基於細胞的CD73酶活性。
圖7A、7B、8A和8B示出的是不同時間處理的抗體抑制可溶性CD73酶活性。
圖9A、9B、10和11示出的是抗體的內化活性。
圖12A、12B、13A和13B示出的是抗體在原始T細胞增殖實驗測定中的結果。
圖14A、14B和14C示出的是各抗體的血清濃度-時間曲線PK結果。
圖15A、15B、16A和16B示出的是抗體在體內抑制腫瘤生長活性，其中，A：腫瘤體積；B：體重。
圖17示出的是CD73+PR000846復合物(y軸上的正值)和單獨的CD73(y軸上的負值)之間的氘攝取差異。
圖18-20示出的是在包含區域1、2、3的肽中，氘的相對攝入量(道爾頓的質量變化)根據氘暴露時間的函數。
圖21示出的是CD73與PR000846結合的表位分析結果。
盡管本文已經示出和描述了本發明的各種實施例，但對於本領域技術人員顯而易見的是，這些實施例僅以示例的方式提供。在不脫離本發明的情況下，本領域技術人員可以想到許多變化，改變和替代。應當理解，可以採用本文所述的本發明的實施方案的各種替代方案。
非上下文另外明確指出，否則本文所用的單數形式“一個”，“一種”和“該”通常包括複數形式。
如本文所用，術語“CD73”也稱為5’外切核苷酸酶，通常是指能夠將細胞外核苷5’單磷酸轉化為核苷，即單磷酸腺苷(AMP)轉化為腺苷的酶(核苷酸酶)。CD73的主要功能是將細胞外核苷酸(例如5'-AMP)轉化為高度免疫抑制分子腺苷。術語“CD73”包括細胞天然表現的CD73的任何變體或同功型。 CD73或其任何變體和同功型可以從天然表現它們的細胞或組織中分離，或者可以使用本領域中熟知的技術和/或本文所述的技術重組產生。相應地，本文所述的抗原結合蛋白可以與人以外的物種(例如食蟹猴CD73)交叉反應。或者，抗體可以對人CD73具有專一性，並且可以不與其他物種表現出任何交叉反應性。人CD73的胺基酸序列在GenBank中以登錄號AAH65937.1(5'-核苷酸酶，胞膜)，NP_002517(同功型1前蛋白)或NP_001191742(同功型2前蛋白)顯示。
如本文所用，術語“Tab1”或PR002078通常是指抗CD73抗體。Tab1的重鏈胺基酸序列如SEQ ID NO.137所示，Tab1的輕鏈胺基酸序列如SEQ ID NO.145所示。
如本文所用，術語“Tab2”或PR000752通常是指抗CD73抗體。Tab2的重鏈胺基酸序列如SEQ ID NO.126所示，Tab2的輕鏈胺基酸序列如SEQ ID NO.141所示。
如本文所用，術語“Tab3”或PR000690通常是指抗CD73抗體。Tab3的重鏈胺基酸序列如SEQ ID NO.125所示，Tab2的輕鏈胺基酸序列如SEQ ID NO.140所示。
如本文所用，術語“內在化”是指與分子從細胞的細胞外表面轉移至細胞的細胞內表面的過程相關的分子，生化和細胞事件。該過程尤其可以涉及細胞外分子(例如激素，抗體和有機小分子)、膜相關分子(例如細胞表面受體)和與細胞外分子結合的膜相關分子的復合物(例如，與跨膜受體結合的配體或與膜相關分子結合的抗體)的內化；
如本文所用，術語“抗原結合蛋白”通常是指包含與抗原結合的部分以及任選地允許抗原結合部分獲得促進與抗原結合蛋白與抗原結合的構象 的支架或框架部分的蛋白質。抗原結合蛋白的實例包括抗體，抗體片段(例如，抗體的抗原結合部分)，抗體衍生物和抗體類似物。抗原結合蛋白可以具有例如天然存在的免疫球蛋白的結構。“免疫球蛋白”是四聚體分子。在天然存在的免疫球蛋白中，每個四聚體由兩對相同的多肽鏈組成，每對具有一條輕鏈(LC)和一條重鏈(HC)。每條鏈的胺基末端部分包括約100至110個或更多胺基酸的可變區，主要負責抗原辨識。每條鏈的羧基末端部分定義一個恆定區，主要負責效應子功能。人類輕鏈被分類為κ或λ輕鏈。重鏈分類為μ、δ、γ、α或ε，並將抗體的同種型分別定義為IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。天然存在的免疫球蛋白鏈的可變區呈現的一般結構是四個相對保守的框架區(FR)由三個高度可變區(又叫互補決定區或CDR)連接。從N端到C端，輕鏈和重鏈均包含域FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3和FR4。
如本文所用，術語“CDR”通常指抗原結合蛋白的互補決定區胺基酸序列，是免疫球蛋白重鏈和輕鏈的高度變異區。在免疫球蛋白的可變部分中有三個重鏈和三個輕鏈CDR(或CDR區)。對於本領域技術人員而言顯而易見的是，存在用於CDR序列的各種編號系統，例如Chothia(Chothia等人(1989)Nature 342：877-883)，Kabat(Kabat等人，免疫學的蛋白質序列，美國國立衛生研究院，貝塞斯達，馬裏蘭州(1987和1991))。Chothia編號系統用於編號本公開的抗體中的殘基。
Figure 109128447-A0202-12-0014-1
其中，Laa-Lbb可以指從抗體N端開始，第aa位至第bb位的胺基酸序列；例如，L24-L34可以指從抗體輕鏈從第24位至第34位的胺基酸序列；
術語“分離的”當用於核酸或蛋白時，表示核酸或蛋白質基本不含在自然狀態下與其相關的其他細胞成分。
如本文所用，術語“KD”或“KD”，通常是指解離常數，一種特定類型的平衡常數，用於測量較大的對象可逆地分離(解離)為較小成分的傾向，就像當復合物分解成其成分分子時一樣。解離常數是締合常數的倒數。在抗體結合抗原的特定情況下，通常術語親和常數是指締合常數。
如本文所用，術語“抗原結合蛋白”通常指免疫球蛋白分子的一部分。抗原結合片段可以包含一個輕鏈和具有單個抗原結合位置的重鏈的一部分。可以藉由木瓜蛋白酶消化免疫球蛋白分子獲得抗原結合片段。例如，抗原結合可以由重鏈和輕鏈各自的一個恆定域和一個可變域組成。可變結構域可以在免疫球蛋白分子的胺基末端包含互補位(抗原結合位置)，該互補位包括一組互 補決定區。木瓜蛋白酶可用於將免疫球蛋白分子切割成兩個Fab片段和一個Fc片段。胃蛋白酶在鉸鏈區下方切割，因此形成F(ab')2片段和pFc'片段。二價的F(ab)2或F(ab')2片段具有兩個藉由二硫鍵連接的抗原結合區。F(ab)2或F(ab')2片段的還原產生2個單價Fab或Fab'片段，它們具有可與其他分子結合的遊離巰基。
如本文所用，術語“Fv片段”通常是指由IgG和IgM類抗體的酶促切割制成的最小片段。
如本文所用，術語“ScFv”通常是指單鏈抗體片段。ScFv可以是重組的單鏈多肽分子，其中抗體的輕鏈和重鏈可變區直接或藉由肽接頭連接。
如本文所用，術語“全人源化抗體”通常指具有完全人胺基酸序列來源的抗體區域的抗體，其中藉由使用基因修飾的小鼠或藉由結合篩選的抗體工程方法在體內進行抗原專一性的選擇。
如本文所用，術語“一個或多個分離的核酸分子”通常是指從其天然環境分離或人工合成的任意長度的核苷酸的聚合形式，該核苷酸是脫氧核糖核苷酸或核糖核苷酸或其類似物。
如本文所用，術語“一種或多種載體”通常是指可以將編碼蛋白質的多核苷酸插入並表現的核酸媒介物。載體中攜帶的遺傳物質元件可以藉由用載體轉化，轉導或轉染宿主細胞而在宿主細胞中表現。載體的實例包括：質體、噬菌粒、黏粒、人工染色體(例如酵母人工染色體(YAC)、細菌人工染色體(BAC)或P1衍生的人工染色體(PAC))、噬菌體(例如λ噬菌體或M13噬菌體)和動物病毒。載體可包含多種控制表現的元件，包括啟動子序列、轉錄起始序列、增強子序列、選擇元件和報告基因。另外，載體還可以包含複製起點。載體也可能包含有助於其進入細胞的成分，例如病毒顆粒、脂質體或蛋白質殼，但不僅限於這些物質。
如本文所用，術語“細胞”通常是指可用於攜帶本申請的一種或多種載體，或用於表現或產生本申請的抗體，抗原結合片段或其變體的細胞。本申請的細胞可以是宿主細胞。該細胞可以是原核細胞，例如大腸桿菌和枯草芽孢桿菌；或者真菌細胞，例如酵母細胞或曲黴細胞；昆蟲細胞，例如S2果蠅細胞或Sf9；或另一種細胞，例如CHO細胞、COS細胞、NSO細胞或其他適合抗體表現的細胞。
如本文所用，術語“能夠表現的條件”通常是指能夠表現本公開的分離的抗原結合蛋白的條件。在一些實施方案中，這種條件可以包括但不限於培養時間，溫度和培養基，並且可以取決於細胞類型並且可以由熟練的技術人員容易地確定。
分離的抗原結合蛋白
在一方面，本公開提供了分離的抗原結合蛋白，其可以能夠以相當的結合親和力結合人CD73和食蟹猴CD73。如本文所用，術語“相當的結合親和力”通常是指抗體的兩個結合親和力的比率為約0.01nM至約100nM，例如約0.02nM至約50nM、約0.05nM至約30nM、約0.1nM至約20nM、約0.1nM至約10nM、約0.2nM至約10nM、約0.5nM至約3nM。抗體和CD73的結合親和力可以使用CD73穩轉細胞株(例如CHO-K1細胞株)來測評，例如在FACS分析中。
分離的抗原結合蛋白能夠抑制CD73的5’外切核苷酸酶活性。分離的抗原結合蛋白可抑制CD73媒介的腺苷的產生，即抑制CD73媒介的AMP分解代謝為腺苷。可以藉由測試抗體直接或間接阻斷AMP轉化為腺苷的能力來評估。在某些情況下，分離的抗原結合蛋白可以抑制基於細胞的CD73的活性。可以藉由建構穩定表現CD73的細胞株，例如CHO-K1細胞株來測量。例如，分離的抗原結 合蛋白可以如實施例中所述，以約0.01nM至約100nM，例如約0.02nM至約50nM、約0.001nM至約10nM、約0.001nM至約1nM、從約0.01nM至約0.5nM、從約0.01nM至約0.3nM、從約0.05nM至約0.25nM的濃度抑制基於細胞的CD73的50%的5'外核苷酸酶活性。在另一種情況下，分離的抗原結合蛋白可抑制可溶性重組CD73的活性。例如，藉由定量酶促產物無機磷酸酯，分離的抗原結合蛋白可引起AMP向腺苷的轉化率至少降低40%、AMP向腺苷的轉化率至少降低50%、AMP向腺苷的轉化率至少降低60%、AMP向腺苷的轉化率至少降低70%、或AMP向腺苷的轉化率至少降低90%。
分離的抗原結合蛋白可能能夠媒介CD73內化。在某些情況下，可以藉由用流式細胞術測量CD73在細胞表面例如NCI-H292上的殘留來評估內化的百分比。例如，在與抗體溫育4小時後，約40%至約99%(例如，約40%至約90%、約40%至約80%、約40%至約70%、約40%至約60%、約40%至約55%、或約50%)CD73被內化到細胞內。在另一種情況下，可以藉由如實例中該內在化套組來測量內在化。與抗體培養3天後，CHO-K1表面的CD73被內化，抗體媒介的CD73內化的最大水準可能為至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或更多，取決於抗體的濃度。
分離的抗原結合蛋白的活性也可以在間接測定中測量其調節淋巴細胞活性的能力，例如緩解AMP媒介的淋巴細胞活性抑制能力或引起淋巴細胞增殖的能力。在某些情況下，可以藉由間接測定法評估分離的抗原結合蛋白調節淋巴細胞增殖的能力。淋巴細胞可以是T細胞，包括輔助性T細胞(例如，CD4+T細胞)。例如，可以使用FACS進行分析。
分離的抗原結合蛋白在血清中可具有相對穩定的濃度至少15天。如本文所用，“相對穩定”通常是指與參考濃度(例如，抗體的血清中的初始濃度)相比，血清中抗體的濃度變化不超過50%。抗體在血清中的穩定性可以藉由藥代動力學分析來確定。例如，如PK分析中所述，本公開的分離的抗原結合蛋白的t1/2為約15天。
在本申請中，抗原結合蛋白可以包含來自SEQ ID NO：152的VH的至少一個HCDR。
本申請中，抗原結合蛋白可包含來自SEQ ID NO：152的重鏈可變區VH的HCDR3，並且該HCDR3可包含如SEQ ID NO：154所示的胺基酸序列：X1X2QWGSRLDY(SEQ ID NO.154)；其中，X1=D或E；X2=G或A。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在某些情況下，與抗原結合蛋白的DGQWGSRLDY的HCDR3相比，HCDR3可以包含至少一個選自以下的胺基酸取代：X1和X2處的胺基酸取代，其中X1處的胺基酸可以被E取代，X2的胺基酸可以被A取代。
例如，HCDR3可包含如SEQ ID NO：35、38和39中任一個所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可以包含來自SEQ ID NO：152的重鏈可變區VH的HCDR2，並且該HCDR2可以包含如SEQ ID NO.153：WYX3X4SF(SEQ ID NO.153)所示的胺基酸序列；其中X3=D或E；X4=G或A。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
例如，HCDR2可包含如SEQ ID NO：18、23和24中任一個所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含來自SEQ ID NO：152的重鏈可變區VH的HCDR1，並且HCDR1可包含如SEQ ID NO.7：GFTFSDY(SEQ ID NO.7)所示的胺基酸序列。例如可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含H-FR1，H-FR1的C端直接或間接連接至該HCDR1的N端，並且H-FR1可包含如：SEQ ID NO.2：QVQLVESGGGVAQPGRSLSLSCAAS(SEQ ID NO.2)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可以包含H-FR2，H-FR2位於該HCDR1和該HCDR2之間，並且H-FR2可以包含如SEQ ID NO.12：GMHWVRQAPGKGLEWVALIWVRQAPGKGLEWVA(SEQ ID NO.12)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可以包含H-FR3，H-FR3位於該HCDR2和該HCDR3之間，並且H-FR3可以包含如SEQ ID NO：28：EYYADSVKGRFSISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVR(SEQ ID NO.28)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含H-FR4，該H-FR4的N端直接或間接連接至該HCDR3的C端，並且H-FR4可包含胺基酸SEQ ID NO.43：WGQGTLVTVSS(SEQ ID NO.43)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含VH，並且VH可包含SEQ ID NO.152：QVQLVESGGGVAQPGRSLSLSCAASGFTFSDYGMHWVRQAPGKGLEWVALIWY X54X55SFEYYADSVKGRFSISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVRX99X100QWGSRLDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO.152)所示的胺基酸序列；其中，X54=D或E；X55=G或A；X99=D或E；X100=G或A。例如，可以根據Chothia定義來確定序列。
例如，VH可包含如SEQ ID NO：96、104、105、106和107中任一個所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含抗體重鏈恆定區，並且抗體重鏈恆定區包含人IgG恆定區。在某些情況下，人IgG恆定區可以衍生自人IgG1恆定區。例如，抗體重鏈恆定區可以包含SEQ ID NO.167：
Figure 109128447-A0202-12-0020-3
(SEQ ID NO.167)所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可以包含抗體重鏈(HC)，並且HC包含如SEQ ID NO.162所示的胺基酸序列。例如，HC可以包含SEQ ID NO：124、132、133、134和135中任一個所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可以包含來自SEQ ID NO：151的VL的至少一個LCDR。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含來自SEQ ID NO：152的重鏈可變區VH的LCDR3，並且LCDR3可包含如SEQ ID NO.78：QQRSNWIFT(SEQ ID NO.78)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含來自SEQ ID NO.152的重鏈可變區VH的LCDR2，並且LCDR2可包含SEQ ID NO.66：DASNRAT(SEQ ID NO.66)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可以包含來自SEQ ID NO.152的重鏈可變區VH的LCDR1，並且LCDR1可以包含如SEQ ID NO.55：RASQSVSRYLA(SEQ ID NO.55)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含L-FR1，L-FR1的C端直接或間接連接至該LCDR1的N端，並且L-FR1可包含胺基酸SEQ ID NO.48：X1IVX4TQSPATLSLSPGERATLSC(SEQ ID NO.48)所示的胺基酸序列；其中，X1=K或E；X4=M或L。例如，可以根據Chothia定義來確定序列。
在某些情況下，與如SEQ ID NO.47所示的抗原結合蛋白的L-FR1相比，L-FR1可包含至少一個選自以下的胺基酸取代：X1和/或X4，其中X1上的胺基酸可以被取代為E，並且X4上的胺基酸可以被取代為L。
例如，L-FR1可以包含如SEQ ID NO：48和51中任一個所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可以包含L-FR2，L-FR2位於該LCDR1和該LCDR2之間，並且L-FR2可以包含如SEQ ID NO.61： WYQQKPGQAPRLLIY(SEQ ID NO.61)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可以包含L-FR3，L-FR3位於該LCDR2和該LCDR3之間，並且L-FR3可以包含如SEQ ID NO.72：GIPARFSGSGSGTGTTLTISSLEPEDFAVYYC(SEQ ID NO.72)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含L-FR4，該L-FR4的N端直接或間接連接至該LCDR3的C端，並且L-FR4可包含如SEQ ID NO.90：FGPGTKVDIK(SEQ ID NO.90)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可以包含VL，並且VL可以包含如SEQ ID NO.151：X1IVX4TQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSRYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWIFTFGPGTKVDIK(SEQ ID NO.151)所示的胺基酸序列，其中，X1=K或E；X4=M或L。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
例如，VL可包含如SEQ ID NO：111和115中任一個所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含抗體輕鏈恆定區，並且抗體輕鏈恆定區包含人Igκ恆定區。例如，抗體輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166：：RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQES VTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ ID NO：166)所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可以包含抗體輕鏈(LC)，並且LC包含如SEQ ID NO.159.示的胺基酸序列。例如，LC可包含SEQ ID NO：139和143中任一個所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可以包含HCDR1-3。HCDR1可包含如SEQ ID NO.7所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.153所示的胺基酸序列，並且HCDR3可包含如SEQ ID NO.154所示的胺基酸序列。
在某些實施方式中，抗原結合蛋白可包含HCDR1-3。HCDR1可包含如SEQ ID NO.7所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.18、23、24任一個所示的胺基酸序列，並且HCDR3可包含如SEQ ID NO.35、38和39中任一個所示的胺基酸序列。
例如，抗原結合蛋白的HCDR1可包含如SEQ ID NO.7所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.18所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.35所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白的HCDR1可包含如SEQ ID NO.7所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.23所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.38所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白的HCDR1可包含如SEQ ID NO.7所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.23所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.39所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白的HCDR1可包含如SEQ ID NO.7所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.24所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.38所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白的HCDR1可包含如SEQ ID NO.7所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.24所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.39所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含LCDR1-3。LCDR1可包含如SEQ ID NO.55所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.66所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.78所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含H-FR1-4。H-FR1可包含如SEQ ID NO.2所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.12所示的胺基酸序列，H-FR3可包含胺基酸序列SEQ ID NO.28所示的胺基酸序列，並且H-FR4可包含如SEQ ID NO.43所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可以包含L-FR1-4。L-FR1可包含如SEQ ID NO.48所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.61所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.72所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.90所示的胺基酸序列。
在某些情況下，L-FR1可包含如SEQ ID NO：51所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO：61所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO：72所示的胺基酸序列，並且L-FR4可包含如SEQ ID NO.90所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含HCDR1-3和LCDR1-3。HCDR1可包含如SEQ ID NO.7所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.153所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.154所示的胺基酸序列；LCDR1可包含如SEQ ID NO.55所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.66所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.78所示的胺基酸序列。
在某些情況下，抗原結合蛋白的HCDR1可包含如SEQ ID NO.7所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.18，23和24中任一各所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.35所示的胺基酸序列；LCDR1可包含如SEQ ID NO.55所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.66所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.78所示的胺基酸序列。
例如，該抗原結合蛋白的HCDR1可包含如SEQ ID NO.7所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.18所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.35所示的胺基酸序列；LCDR1可包含如SEQ ID NO.55所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.66所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.78所示的胺基酸序列。
又例如，該抗原結合蛋白的HCDR1可包含如SEQ ID NO.7所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.23所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.38所示的胺基酸序列；LCDR1可包含如SEQ ID NO.55所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.66所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.78所示的胺基酸序列。
在本申請中，該抗原結合蛋白可包含H-FR1-4和L-FR1-4。H-FR1可包含如SEQ ID NO.2所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.12所示的 胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.28所示的胺基酸序列，並且H-FR4可包含如SEQ ID NO.43所示的胺基酸序列。L-FR1可包含如SEQ ID NO.48所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.61所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.72所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.90所示的胺基酸序列。
在某些情況下，H-FR1可包含如SEQ ID NO.2所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.12所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.28所示的胺基酸序，並且H-FR4可包含如SEQ ID NO.43所示的胺基酸序列。L-FR1可包含如SEQ ID NO.51所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.61所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.72所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.90所示的胺基酸序列。
在本申請中，該抗原結合蛋白可包含VH和VL。VH可包含如SEQ ID NO：152所示的胺基酸序列，VL可包含如SEQ ID NO：151所示的胺基酸序列。
在某些情況下，該VH可包含如SEQ ID NO：96、104、105、106和107中任一個所示的胺基酸序列，該VL可包含如SEQ ID NO：111和115中任一個所示的胺基酸序列。
在某些情況下，該VH可包含如SEQ ID NO：96所示的胺基酸序列，該VL可包含如SEQ ID NO：111所示的胺基酸序列。
在某些情况下，該VH可包含如SEQ ID NO：104所示的胺基酸序列，該VL可包含如SEQ ID NO：111所示的胺基酸序列。
在某些情况下，該VH可包含如SEQ ID NO：105所示的胺基酸序列，該VL可包含如SEQ ID NO：111所示的胺基酸序列。
在某些情况下，該VH可包含如SEQ ID NO：106所示的胺基酸序列，該VL可包含如SEQ ID NO：111所示的胺基酸序列。
在某些情况下，該VH可包含如SEQ ID NO：107所示的胺基酸序列，該VL可包含如SEQ ID NO：111所示的胺基酸序列。
在某些情况下，該VH包含如SEQ ID NO：96所示的胺基酸序列，該VL可包含如SEQ ID NO：115所示的胺基酸序列。
在某些情况下，該VH可包含如SEQ ID NO：104所示的胺基酸序列，該VL可包含如SEQ ID NO：115所示的胺基酸序列。
在某些情况下，該VH可包含如SEQ ID NO：105所示的胺基酸序列，該VL可包含如SEQ ID NO：115所示的胺基酸序列。
在某些情况下，該VH可包含如SEQ ID NO：106所示的胺基酸序列，該VL可包含如SEQ ID NO：115所示的胺基酸序列。
在某些情况下，該VH可包含如SEQ ID NO：107所示的胺基酸序列，該VL可包含如SEQ ID NO：115所示的胺基酸序列。
在本申請中，該抗原結合蛋白可包含重鏈恆定區和輕鏈恆定區。重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO：167所示的胺基酸序列，輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO：166所示的胺基酸序列。
在本申請中，該抗原結合蛋白可包含重鏈恆定區和輕鏈恆定區。重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO：162所示的胺基酸序列，輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO：159所示的胺基酸序列。
在某些情況下，該HC包含如SEQ ID NO：124、132、133、134和135中任一個所示的胺基酸序列，該LC可包含如SEQ ID NO：139和143中任一個所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.7所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.153所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.154所示的胺基酸序列。H-FR1可包含如SEQ ID NO.2所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.12所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.28所示的胺基酸序列，並且H-FR4可包含如SEQ ID NO.33所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.152所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.162所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.55所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.66所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.78所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.48所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.61所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.72所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.90所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.151所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.159所示的胺基酸序列。
在某些情況下，該抗原結合蛋白可包含HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.7所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.18、23和24中任一個所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO ID NO.35、38和39中任一個所示的胺基酸序 列。H-FR1可包含如SEQ ID NO.2所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.12所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.28所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.43所示的胺基酸序列。VH可包含如SEQ ID NO.96、104、105、106和107任一個所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.124、132、133、134和135中任一個所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.55所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.66所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.78所示的胺基酸序列。L-FR1可包含如SEQ ID NO.48和51所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.61所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.72所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.90所示的胺基酸序列。VL可包含SEQ ID NO.111和115所示的胺基酸序列，輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列，LC可包含如SEQ ID NO.139和143所示的胺基酸序列。
例如，抗原結合蛋白可包含與抗體PR000506相同的HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.7所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.18所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.35所示的胺基酸序列；H-FR1可包含如SEQ ID NO.2所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.12所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.28所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.43所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.96所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.124所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.55所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.66所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.78 所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.47所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.61所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.72所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.90所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.111所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.139所示的胺基酸序列。
例如，抗原結合蛋白可包含與抗體PR000843相同的HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.7所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.23所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.38所示的胺基酸序列；H-FR1可包含如SEQ ID NO.2所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.12所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.28所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.43所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.104所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.132所示的胺基酸序列。並且VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.55所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.66所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.78所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.47所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.61所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.72所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.90所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.111所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.139所示的胺基酸序列。
例如，抗原結合蛋白可包含與抗體PR000844相同的HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.7所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.23所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.39所示的胺基酸序列；H-FR1可包含如SEQ ID NO.2所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.12所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.28所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.43所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.105所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.133所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.55所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.66所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.78所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.48所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.61所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.72所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.90所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.111所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.139所示的胺基酸序列。
例如，抗原結合蛋白可包含與抗體PR000845相同的HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.7所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.24所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.38所示的胺基酸序列；H-FR1可包含如SEQ ID NO.2所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.12所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.28所示的胺基酸序列，並且H-FR4可包含如SEQ ID NO.43所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.106所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.134所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.55所示的胺基酸 序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.66所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.78所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.48所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.61所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.72所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.90所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.111所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.139所示的胺基酸序列。
例如，抗原結合蛋白可包含與抗體PR000846相同的HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.7所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.24所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.39所示的胺基酸序列；H-FR1可包含如SEQ ID NO.2所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.12所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.28所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.43所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.107所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.135所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.55所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.66所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.78所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.48所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.61所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.72所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.90所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.111所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.139所示的胺基酸序列。
例如，抗原結合蛋白可包含與抗體PR000847相同的HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.7所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.23所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.38所示的胺基酸序列；H-FR1可包含如SEQ ID NO.2所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.12所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.28所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.43所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.104所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.132所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.55所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.66所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.78所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.51所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.61所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.72所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.90所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.115所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.143所示的胺基酸序列。
例如，抗原結合蛋白可包含與抗體PR000848相同的HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.7所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.23所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.39所示的胺基酸序列；H-FR1可包含如SEQ ID NO.2所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.12所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.28所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.43所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.105所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.133所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.55所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.66所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.78所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.51所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.61所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.72所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.90所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.115所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.143所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白可包含與抗體PR000849相同的HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.7所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.24所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.38所示的胺基酸序列；H-FR1可包含如SEQ ID NO.2所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.12所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.28所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.43所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.106所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.134所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.55所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.66所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.78所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.51所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.61所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.72所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.90所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.115所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.143所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白可包含與抗體PR000850相同的HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.7所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.24所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.39所示的胺基酸序列；H-FR1可包含如SEQ ID NO.2所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.12所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.28所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.43所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.107所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.135所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.55所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.66所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.78所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.51所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.61所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.72所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.90所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.115所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.143所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白可包含與抗體PR000851相同的HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.7所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.18所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.35所示的胺基酸序列；H-FR1可包含如SEQ ID NO.2所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.12所示的胺基酸序列，H-FR3可包 含如SEQ ID NO.28所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.43所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.96所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.124所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.55所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.66所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.78所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.48所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.61所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.72所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.90所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.115所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.143所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含來自SEQ ID NO：156的VH的至少一個HCDR。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含來自SEQ ID NO：156的重鏈可變區VH的HCDR3，並且該HCDR3可包含如SEQ ID NO.34：GGDLLTGPNAFDI(SEQ ID NO.34)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含來自SEQ ID NO：156的重鏈可變區VH的HCDR2，並且該HCDR2可包含如SEQ ID NO.158：WYX3X4SK(SEQ ID NO.158)所示的胺基酸序列；其中，X3=D或E；X4=G或A。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
例如，HCDR2可包含如SEQ ID NO：17、21和22中任一個所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含來自SEQ ID NO：156的重鏈可變區VH的HCDR1，並且HCDR1可包含如SEQ ID NO.6：GFTFSSY(SEQ ID NO.6)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含H-FR1，H-FR1的C端直接或間接連接至該HCDR1的N端，並且H-FR1可包含如SEQ ID NO.1：QVQVVESGGGVVQPGRSLRLSCAAS(SEQ ID NO.1)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含H-FR2，H-FR2位於該HCDR1和該HCDR2之間，並且H-FR2可包含如SEQ ID NO.11：DMHWVRQAPGKGLEWVAST(SEQ ID NO.11)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可以包含H-FR3，H-FR3位於該HCDR2和該HCDR3之間，並且H-FR3可包含如SEQ ID NO.27：KYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLKMNSLRGDDTAVYYCAK(SEQ ID NO.27)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含H-FR4，該H-FR4的N端直接或間接連接至該HCDR3的C端，並且H-FR4可包含如SEQ ID NO.42：WGQGTMVTVSS(SEQ ID NO.42)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含VH，並且VH可包含SEQ ID NO.156：QVQX4VESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYDMHWVRQAPGKGLEWVASTWY X5X6SKKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLX7MNSLRX8X9DTAVYYCAKGGDLLTGPNAFDIWGQGTMVTVSS(SEQ ID NO.156)所示的胺基酸序列。其中，X4=L或V，X5=D或E；X6=G或A；X7=K或Q；X8=G或A；X9=D或E。例如，可以根據Chothia定義來確定序列。
例如，VH可包含如SEQ ID NO：95、99、100、101、102和103中任一個所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含抗體重鏈恆定區，並且抗體重鏈恆定區包含人IgG恆定區。在某些情況下，人IgG恆定區可以衍生自人IgG1恆定區。例如，抗體重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167：
Figure 109128447-A0202-12-0038-5
Figure 109128447-A0202-12-0038-6
(SEQ ID NO.167)所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可以包含抗體重鏈(HC)，並且HC包含如SEQ ID NO.161所示的胺基酸序列。例如，HC可包含如SEQ ID NO：123、127、128、129、130和131中任一個所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含來自SEQ ID NO：155的VL的至少一個LCDR。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含來自SEQ ID NO：156的重鏈可變區VH的LCDR3，並且LCDR3可包含如SEQ ID NO.157：QQYDX5YX6NT(SEQ ID NO.157)所示的胺基酸序列；其中，X5=M，N，Q，S或T；X6=E，K，S。例如，可以根據Chothia定義來確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含來自SEQ ID NO：156的重鏈可變區VH的LCDR2，並且LCDR2可包含SEQ ID NO.65：KASSLES(SEQ ID NO.65)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含來自SEQ ID NO：156的重鏈可變區VH的LCDR1，並且LCDR1可包含如SEQ ID NO.54：RASQSISSWLA(SEQ ID NO.54)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含L-FR1，L-FR1的C端直接或間接連接至該LCDR1的N端，並且L-FR1可包含如SEQ ID NO.47：DIQMTQSPSTLSASVGDRVTITC(SEQ ID NO.47)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含L-FR2，L-FR2位於該LCDR1和該LCDR2之間，並且L-FR2可以包含如SEQ ID NO.60：WYQQKPGKAPKLLIY(SEQ ID NO.60)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可以包含L-FR3，L-FR3位於該LCDR2和該LCDR3之間，並且L-FR3可以包含如SEQ ID NO.71：GVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYC(SEQ ID NO.71)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含L-FR4，該L-FR4的N端直接或間接連接至該LCDR3的C端，並且L-FR4可包含如SEQ ID NO.89：FGQGTKLEIK(SEQ ID NO.89)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可以包含VL，並且VL可以包含SEQ ID NO.155：DIQMTQSPSTLSASVGDRVTITCRASQSISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYKASSLESGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYDX1YX4NTFGQGTKLEIK(SEQ ID NO.155)所示的胺基酸序列：其中，X1=M、N、Q、S或T；X4=E、K或S。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
例如，VL可包含如SEQ ID NO：110、114、118、119、120、121和122中任一個所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含抗體輕鏈恆定區，並且抗體輕鏈恆定區包含人Igκ恆定區。例如，抗體輕鏈恆定區可包含SEQ ID NO.166：RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ ID NO：166)所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含抗體輕鏈(LC)，並且LC包含如SEQ ID NO.160所示的胺基酸序列。例如，LC可包含如SEQ ID NO：138、142、146、147、148、149和150中任一個所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含HCDR1-3。HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.158所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列。
在某些情況下，抗原結合蛋白可包含HCDR1-3。HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.17、21、22中任一個所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列。
例如，抗原結合蛋白的HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.17所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白的HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可以包含如SEQ ID NO.21所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白的HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.22所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含LCDR1-3。LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.157所示的胺基酸序列。
例如，抗原結合蛋白的LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.77所示的胺基酸序列。
例如，抗原結合蛋白的LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.81所示的胺基酸序列。
例如，抗原結合蛋白的LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.84所示的胺基酸序列。
例如，抗原結合蛋白的LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.85所示的胺基酸序列。
例如，抗原結合蛋白的LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.86所示的胺基酸序列。
例如，抗原結合蛋白的LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.87所示的胺基酸序列。
例如，抗原結合蛋白的LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.88所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含H-FR1-4。H-FR1可包含如SEQ ID NO.164所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.11所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.165所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.42所示的胺基酸序列。
例如，H-FR1可包含如SEQ ID NO：1所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO：11所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO：27所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO：42所示的胺基酸序列。
例如，H-FR1可包含如SEQ ID NO：3所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO：11所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO：31所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO：42所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含L-FR1-4。L-FR1可包含如SEQ ID NO.47所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.60所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.71中所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.89所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含HCDR1-3和LCDR1-3。HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.158所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.157所示的胺基酸序列。
在某些情況下，抗原結合蛋白的HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.17、21和22中任一個所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO：77、81、84、85、86、87和88中任一個所示的胺基酸序列。
例如，抗原結合蛋白的HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.17所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；抗原結合蛋白的LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.77所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白的HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.17所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；抗原結合蛋白的LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.81所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白的HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.21所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；抗原結合蛋白的LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.77所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白的HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.22所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；抗原結合蛋白的LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.77所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白的HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.22所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；抗原結合蛋白的LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.81所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白的HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.22所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；抗原結合蛋白的LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.84所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白的HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.22所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；抗原結合蛋白的LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.85所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白的HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.22所示的胺基酸序列，HCDR3可包含SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；抗原結合蛋白的LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.86所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白的HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.22所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；抗原結合蛋白的LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示 的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.87所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白的HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.22所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；抗原結合蛋白的LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.88所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含H-FR1-4和L-FR1-4。H-FR1可包含如SEQ ID NO.164所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.11所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.165所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.42所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.47所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.60所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.71所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.89所示胺基酸序列。
在某些情況下，H-FR1可包含如SEQ ID NO.1和3所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.11所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.27和31所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.42所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.47所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.60所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.71所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.89所示胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含VH和VL。VH可包含如SEQ ID NO：156所示的胺基酸序列，VL可包含如SEQ ID NO：155所示的胺基酸序列。
在某些情況下，VH可包含如SEQ ID NO：95、99、100、101、102和103中任一個所示的胺基酸序列，VL可包含如SEQ ID NO：110、114、118、119、120、121和122中任一個所示的胺基酸序列。
在某些情況下，VH可包含如SEQ ID NO：95所示的胺基酸序列，VL可包含如SEQ ID NO：110所示的胺基酸序列。
在某些情況下，VH可包含如SEQ ID NO：99所示的胺基酸序列，VL可包含如SEQ ID NO：110所示的胺基酸序列。
在某些情況下，VH可包含如SEQ ID NO：100所示的胺基酸序列，VL可包含如SEQ ID NO：110所示的胺基酸序列。
在某些情況下，VH可包含如SEQ ID NO：101所示的胺基酸序列，VL可包含如SEQ ID NO：110所示的胺基酸序列。
在某些情況下，VH可包含如SEQ ID NO：102所示的胺基酸序列，VL可包含如SEQ ID NO：110所示的胺基酸序列。
在某些情況下，VH可包含如SEQ ID NO：103所示的胺基酸序列，VL可包含如SEQ ID NO：110所示的胺基酸序列。
在某些情況下，VH可包含如SEQ ID NO：95所示的胺基酸序列，VL可包含如SEQ ID NO：114所示的胺基酸序列。
在某些情況下，VH可包含如SEQ ID NO：100所示的胺基酸序列，VL可包含如SEQ ID NO：114所示的胺基酸序列。
在某些情況下，VH可包含如SEQ ID NO：102所示的胺基酸序列，VL可包含如SEQ ID NO：114所示的胺基酸序列。
在某些情況下，VH可包含如SEQ ID NO：103所示的胺基酸序列，VL可包含如SEQ ID NO：114所示的胺基酸序列。
在某些情況下，VH可包含如SEQ ID NO：102所示的胺基酸序列，VL可包含如SEQ ID NO：118所示的胺基酸序列。
在某些情況下，VH可包含如SEQ ID NO：102所示的胺基酸序列，VL可包含如SEQ ID NO：119所示的胺基酸序列。
在某些情況下，VH可包含如SEQ ID NO：102所示的胺基酸序列，VL可包含如SEQ ID NO：120所示的胺基酸序列。
在某些情況下，VH可包含如SEQ ID NO：102所示的胺基酸序列，VL可包含如SEQ ID NO：121所示的胺基酸序列。
在某些情況下，VH可包含如SEQ ID NO：102所示的胺基酸序列，VL可包含如SEQ ID NO：122所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含重鏈恆定區和輕鏈恆定區。重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO：167所示的胺基酸序列，輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO：47所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含重鏈(HC)和輕鏈(LC)。HC可包含如SEQ ID NO：161所示的胺基酸序列，LC可包含如SEQ ID NO：160所示的胺基酸序列。
在某些情況下，HC可包含如SEQ ID NO：123、127、128、129、130和131中任一個所示的胺基酸序列，LC可包含如SEQ ID NO：138、142、146、147、148、149和150中任一個所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.158所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；H-FR1可包含如SEQ ID NO.164所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.11所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.27所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.42所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.156所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.161所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.77所示的胺基酸序列。L-FR1可包含如SEQ ID NO.47所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.60所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.71所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.89所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.155所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.160所示的胺基酸序列。
在某些情況下，抗原結合蛋白可包含HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.17、21、22中任一個所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列。H-FR1可包含如SEQ ID NO.1和3中任一個該胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.11所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.27所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.42所示的胺基酸序列：VH可包含如SEQ ID NO：95、99、100、101、102和103中任一 個所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.123、127、128、129、130和131中任一個所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.77所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.47所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.60所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.71所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.89所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.10、114、118、119、120、121和122中任一個所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.47所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.138、142、146、147、148、149和150中任一個所示的胺基酸序列。
例如，抗原結合蛋白可包含與抗體PR000497相同的HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.17所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；H-FRI可包含如SEQ ID NO.1所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.11所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.27所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.42所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.95所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.123所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.77所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.47所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.60所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.71所示的胺基 酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.89所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.110所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.138所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白可包含與抗體PR000815相同的HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.21所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；H-FR1可包含如SEQ ID NO.1所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.11所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.27所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.42所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.99所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.127所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.77所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.47所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.60所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.71所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.89所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.110所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.138所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白可包含與抗體PR000816相同的HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.22所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；H-FR1可包含如SEQ ID NO.1所 示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.11所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.27所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.42所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.100所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.128所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.77所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.47所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.60所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.71所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.89所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.110所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.138所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白可包含與抗體PR000817相同的HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.21所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；H-FR1可包含如SEQ ID NO.3所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.11所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.31所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.42所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.101所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.129所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.77所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.47所示的胺基酸序列，L-FR2可包 含如SEQ ID NO.60所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.71所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.89所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.110所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.138所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白可包含與抗體PR000818相同的HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.22所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；H-FR1可包含如SEQ ID NO.3所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.11所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.31所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.42所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.102所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.130所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.77所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.47所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.60所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.71所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.89所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.110所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.138所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白可包含與抗體PR000819相同的HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.17所示的胺基酸序列， HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；H-FR1可包含如SEQ ID NO.3所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.11所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.31所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.42所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.103所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.131所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可以包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.77所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.47所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.60所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.71所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.89所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.110所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.138所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白可包含與抗體PR000820相同的HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.17所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；H-FR1可包含如SEQ ID NO.1所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.11所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.27所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.42所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.95所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.123所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.81 所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.47所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.60所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.71所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.89所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.114所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.142所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白可包含與抗體PR000822相同的HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.22所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；H-FR1可包含如SEQ ID NO.1所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.11所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.27所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.42所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.100所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.128所示的胺基酸序列。VL可以包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.81所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.47所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.60所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.71所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.89所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.114所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.142所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白可包含與抗體PR000824相同的HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.22所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；H-FR1可包含如SEQ ID NO.3所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.11所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.31所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.42所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.102所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.130所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.81所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.47所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.60所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.71所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.89所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.114所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.142所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白可包含與抗體PR000825相同的HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.17所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；H-FR1可包含如SEQ ID NO.3所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.11所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.31所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.42所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.103所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.131所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列， LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.81所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.47所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.60所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.71所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.89所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.114所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.142所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白可包含與抗體PR000832相同的HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.22所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；H-FR1可包含如SEQ ID NO.3所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.11所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.31所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.42所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.102所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.130所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.84所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.47所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.60所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.71所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.89所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.118所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.146所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白可包含與抗體PR000833相同的HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.22所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；H-FR1可包含如SEQ ID NO.3所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.11所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.31所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.42所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.102所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.130所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.85所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.47所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.60所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.71所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.89所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.119所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.146所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白可包含與抗體PR000834相同的HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.22所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；H-FR1可包含如SEQ ID NO.3所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.11所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.31所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.42所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.102所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.130所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.86所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.47所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.60所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.71所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.89所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.120所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.148所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白可包含與抗體PR000835相同的HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.22所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；H-FR1可包含如SEQ ID NO.3所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.11所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.31所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.42所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.102所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.130所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.87所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.47所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.60所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.71所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.89所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.121所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.149所示的胺基酸序列。
又例如，抗原結合蛋白可包含與抗體PR000836相同的HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FRI-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.22所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列；H-FR1可包含如SEQ ID NO.3所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.11所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.31所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.42所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.102所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.130所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.88所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.47所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.60所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.71所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.89所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.122所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.150所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含來自SEQ ID NO：108的VH的至少一個HCDR。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含來自SEQ ID NO：108的重鏈可變區VH的HCDR3，並且該HCDR3可包含如SEQ ID NO.40：ERSSSFYYYYGMDV(SEQ ID NO.40)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含來自SEQ ID NO：108的重鏈可變區VH的HCDR2，並且該HCDR2可包含如SEQ ID NO.25：WYDGSN(SEQ ID NO.25)所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含來自SEQ ID NO：108的重鏈可變區VH的HCDR1，並且該HCDR1可包含如SEQ ID NO.10：GFTFYSY(SEQ ID NO.10)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含H-FR1，H-FR1的C末端直接或間接連接至該HCDR1的N末端，並且H-FR1可包含如SEQ ID NO.3：QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAAS(SEQ ID NO.3)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含H-FR2，H-FR2位於該HCDR1和該HCDR2之間，並且H-FR2可包含如SEQ ID NO.15：GMHWVRQTPGKGLEWVALI(SEQ ID NO.15)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含H-FR3，H-FR3位於該HCDR2和該HCDR3之間，並且H-FR3可包含如SEQ ID NO.32：NYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAT(SEQ ID NO.32)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含H-FR4，該H-FR4的N端直接或間接連接至該HCDR3的C端，並且H-FR4可包含如SEQ ID NO.45：WGQGTTVTVSS(SEQ ID NO.45)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含VH，且VH可包含如SEQ ID NO.108：QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFYSYGMHWVRQTPGKGLEWVALIWYDGSNNYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATERSSSFYYYYGMDVWGQGTTVTVSS(SEQ ID NO.108)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含抗體重鏈恆定區，並且抗體重鏈恆定區包含人IgG恆定區。在某些情況下，人IgG恆定區可以衍生自人IgG1恆定區。例如，抗體重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167：
Figure 109128447-A0202-12-0062-9
Figure 109128447-A0202-12-0062-10
(SEQ ID NO.167)所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含抗體重鏈(HC)，HC包含如SEQ ID NO.136所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含來自SEQ ID NO：116的VL的至少一個LCDR。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含來自SEQ ID NO：108的重鏈可變區VH的LCDR3，LCDR3可包含如SEQ ID NO.82：QQLNSYPYT(SEQ ID NO.82)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含來自SEQ ID NO：108的重鏈可變區VH的LCDR2，並且LCDR2可包含SEQ ID NO.69：AASTLQS(SEQ ID NO.69)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含來自SEQ ID NO：108的重鏈可變區VH的LCDR1，並且LCDR1可包含如SEQ ID NO.58：RASQGISSYLA(SEQ ID NO.58)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含L-FR1，L-FR1的C端直接或間接連接至該LCDR1的N端，並且L-FR1可包含如SEQ ID NO.52：DIQLTQSPSFLSTSVGDRVTITC(SEQ ID NO.52)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含L-FR2，L-FR2位於該LCDR1和該LCDR2之間，並且L-FR2可包含如SEQ ID NO.60：WYQQKPGKAPKLLIY(SEQ ID NO.60)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含L-FR3，L-FR3位於該LCDR2和該LCDR3之間，並且L-FR3可包含如SEQ ID NO.75：GVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYC(SEQ ID NO.75)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含L-FR4，該L-FR4的N端直接或間接連接至該LCDR3的C端，並且L-FR4可包含如SEQ ID NO.93： FGQGTELEIK(SEQ ID NO.93)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含VL，VL可包含如SEQ ID NO.116：DIQLTQSPSFLSTSVGDRVTITCRASQGISSYLAWYQQKPGKAPKLLIYAASTLQSGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCQQLNSYPYTFGQGTELEIK(SEQ ID NO.116)所示的胺基酸序列。例如，可以根據Chothia定義確定序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含抗體輕鏈恆定區，並且抗體輕鏈恆定區包含人Igκ恆定區。例如，抗體輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166：RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ ID NO：166)所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含抗體輕鏈(LC)，並且LC包含如SEQ ID NO.144所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含HCDR1-3。HCDR1可包含如SEQ ID NO.10所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.25所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.40所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含LCDR1-3。LCDR1可包含如SEQ ID NO.58所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.69所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.82所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含H-FR1-4。H-FR1可包含如SEQ ID NO.3所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.15所示的胺基酸序列，H- FR3可包含如SEQ ID NO.32所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.45所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含L-FR1-4。L-FR1可包含如SEQ ID NO.52所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.60所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.75所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.93所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含HCDR1-3和LCDR1-3。HCDR1可包含如SEQ ID NO.10所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.25所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.40所示的胺基酸序列；LCDR1可包含如SEQ ID NO.58所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.69所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.82所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含H-FR1-4和L-FR1-4。H-FR1可包含如SEQ ID NO.3所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.15所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.32所示胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.45所示的胺基酸序列。L-FR1可包含如SEQ ID NO.52所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.60所示的胺基酸序列，L-FR3可包如SEQ ID NO.75所示的含胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.93所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含VH和VL。VH可包含如SEQ ID NO：108所示的胺基酸序列，VL可包含如SEQ ID NO：116所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含重鏈恆定區和輕鏈恆定區。重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO：167所示的胺基酸序列，輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO：166所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含重鏈(HC)和輕鏈(LC)。HC可包含如SEQ ID NO：136所示的胺基酸序列，LC可包含如SEQ ID NO.144所示的胺基酸序列。
在本申請中，抗原結合蛋白可包含HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.10所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.25所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.40所示的胺基酸序列；H-FRI可包含如SEQ ID NO.3所示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.15所示的胺基酸序列，H-FR3可包含SEQ ID NO.32所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.45所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.108所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.136所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FRI-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.58所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.69所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.82所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.52所示的胺基酸序列，L-FR2可包含SEQ ID NO.60所示的胺基酸序列，L-FR3可包含SEQ ID NO.75所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.93所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.116所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.144所示的胺基酸序列。
例如，抗原結合蛋白可包含與抗體PR001408相同的HC和LC。HC可包含VH和重鏈恆定區。VH可包含HCDR1-3和H-FR1-4，HCDR1可包含如SEQ ID NO.10所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.25所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.40所示的胺基酸序列。H-FR1可包含如SEQ ID NO.3所 示的胺基酸序列，H-FR2可包含如SEQ ID NO.15所示的胺基酸序列，H-FR3可包含如SEQ ID NO.32所示的胺基酸序列，H-FR4可包含如SEQ ID NO.45所示的胺基酸序列；VH可包含如SEQ ID NO.108所示的胺基序列；重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.167所示的胺基酸序列；HC可包含如SEQ ID NO.136所示的胺基酸序列。VL可包含LCDR1-3和L-FR1-4，LCDR1可包含如SEQ ID NO.58所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.69所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.82所示的胺基酸序列；L-FR1可包含如SEQ ID NO.52所示的胺基酸序列，L-FR2可包含如SEQ ID NO.60所示的胺基酸序列，L-FR3可包含如SEQ ID NO.75所示的胺基酸序列，L-FR4可包含如SEQ ID NO.93所示的胺基酸序列；VL可包含如SEQ ID NO.116所示的胺基酸序列；輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO.166所示的胺基酸序列；LC可包含如SEQ ID NO.144所示的胺基酸序列。
特定抗-CD73抗體
在本申請中，抗原結合蛋白可以與某特定抗CD73抗體競爭結合CD73。在一些實施方案中，本申請的抗原結合蛋白可包含抗體，該抗體包含與特定抗CD73抗體相同的胺基酸序列。
在某些實施方式中，特定抗CD73抗體可包含來自SEQ ID NO：152的重鏈可變區VH的至少一個HCDR區和來自SEQ ID NO：151的輕鏈可變區VL的至少一個LCDR區。
在本申請中，特定抗CD73抗體可包含HCDR1-3。HCDR1可包含如SEQ ID NO.7所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.153所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.154所示的胺基酸序列。在某些情況下，特定抗 CD73抗體可包含LCDR1-3。LCDR1可包含如SEQ ID NO.55所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.66所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.78所示的胺基酸序列。
在本申請中，特定抗CD73抗體可以包含VH和VL。VH可包含如SEQ ID NO：152所示的胺基酸序列，VL可包含如SEQ ID NO：151所示的胺基酸序列。
在本申請中，特定抗CD73抗體可包含重鏈恆定區和輕鏈恆定區。重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO：167所示的胺基酸序列，輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO：166所示的胺基酸序列。
在本申請中，特定抗CD73抗體可包含重鏈(HC)和輕鏈(LC)。HC可包含如SEQ ID NO：162所示的胺基酸序列，LC可包含如SEQ ID NO：159所示的胺基酸序列。
在某些情況下，特定抗CD73抗體可包含來自SEQ ID NO：156的重鏈可變區VH的至少一個HCDR和來自SEQ ID NO：155的輕鏈可變區VL的至少一個LCDR。
在本申請中，特定抗CD73抗體可包含HCDR1-3。HCDR1可包含如SEQ ID NO.6所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.158所示的胺基酸序列，HCDR3可包含SEQ ID NO.34所示的胺基酸序列。在某些情況下，特定抗CD73抗體可包含LCDR1-3。LCDR1可包含如SEQ ID NO.54所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.65所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.157所示的胺基酸序列。
在本申請中，特定抗CD73抗體可包含VH和VL。VH可包含如SEQ ID NO：156所示的胺基酸序列，VL可包含如SEQ ID NO：155所示的胺基酸序列。
在本申請中，特定抗CD73抗體可包含重鏈恆定區和輕鏈恆定區。重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO：167所示的胺基酸序列，輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO：166所示的胺基酸序列列。
在某些情況下，特定抗CD73抗體可包含重鏈(HC)和輕鏈(LC)。HC可包含如SEQ ID NO：161所示的胺基酸序列，LC可包含如SEQ ID NO：160所示的胺基酸序列。
在某些情況下，特定抗CD73抗體可包含來自SEQ ID NO：108的重鏈可變區VH的至少一個HCDR區和來自SEQ ID NO：116的輕鏈可變區VL的至少一個LCDR區。
在本申請中，特定抗CD73抗體可包含HCDR1-3。HCDR1可包含如SEQ ID NO.10所示的胺基酸序列，HCDR2可包含如SEQ ID NO.25所示的胺基酸序列，HCDR3可包含如SEQ ID NO.40所示的胺基酸序列。在某些實施方式中，特定抗CD73抗體可包含LCDR1-3。LCDR1可包含如SEQ ID NO.58所示的胺基酸序列，LCDR2可包含如SEQ ID NO.69所示的胺基酸序列，LCDR3可包含如SEQ ID NO.82所示的胺基酸序列。
在本申請中，特定抗CD73抗體可以包含VH和VL。VH可包含如SEQ ID NO：108所示的胺基酸序列，VL可包含如SEQ ID NO：116所示的胺基酸序列。
在本申請中，特定抗CD73抗體可包含重鏈恆定區和輕鏈恆定區。重鏈恆定區可包含如SEQ ID NO：167所示的胺基酸序列，輕鏈恆定區可包含如SEQ ID NO：166所示的胺基酸序列。
在本申請中，特定抗CD73抗體可包含重鏈(HC)和輕鏈(LC)。HC可包含如SEQ ID NO：136所示的胺基酸序列，LC恆定區可包含如SEQ ID NO：144所示的胺基酸序列。
本公開的抗原結合蛋白還可以包括與其具有基本相同的功能/特性的同源物或其變體。在某些實施方式中，同源物或變體可以是與抗原結合蛋白至少有一個胺基酸不同的多肽。例如，同源物或變體可以是在抗原結合蛋白基礎上進行了一個或多個(例如1-50、1-40、1-30、1-20、1-15、1-14、1-13、1-12、1-11、1-10、1-9、1-8、1-7、1-6、1-5、1-4、1-3或1-2個)胺基酸的添加，缺失或取代獲得的多肽。
在某些情況下，可以藉由胚系化和PTM去除操作進一步優化抗原結合蛋白。術語“胚系化”是指將抗體的超體細胞突變逆轉為相應胚系序列的過程。術語“PTM去除”是指使PTM基序突變以降低序列不穩定性風險的過程。
在哺乳動物細胞中表現的蛋白質中廣泛觀察到轉譯後修飾(PTM)，這可能導致了分子的不穩定性和異質性。為了減少序列不穩定性，可以藉由突變去除PTM基序。PTM去除位置可以是異構化基序，例如CDR中的DG。在一些情況下，PTM去除位置可包括一個或多個選自HCDR中的D54、G55、D99和/或G100的位置。在某些情況下，D54中的PTM去除可以是D54E。在某些情況下，G55中的PTM去除可以是G55A。在某些情況下，D99中的PTM去除可以是D99E。在某些情況下，G100中的PTM去除可以是G100A。
PTM去除後的抗體可以具有相似或更高的化學穩定性或生物活性。在某些情況下，去除PTM後的抗體可能具有相似或更高的結合親和力、酶活 性、T細胞活化活性、腫瘤抑制活性和/或血清穩定性。例如，PTM去除抗體(例如，PR000844、PR000846)與PTM抗體(例如，PR000506)具有相當的結合親和力。
某些情況下，同源物或變體可以是與抗原結合蛋白具有至少80%序列相同性的多肽。例如，同源物或變體可以是與抗體或抗原結合蛋白具有至少具有80%(例如，至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)的序列相同性的多肽。
如對本文所鑒定的多肽序列進行表述的上下文中所用，術語“序列相同性百分比(%)”通常是指在比對序列後，查詢序列中胺基酸殘基或核苷酸與第二參考多肽序列或其部分中相同的殘基所占百分比，必要時引入空位(GAPS)以實現最大序列相同性百分比，並且不考慮任何保守取代作為序列相同性的一部分。用於確定胺基酸/核苷酸序列相同性百分比的比對可以藉由本領域已知的各種方式來實現，例如，使用可公開獲得的計算機軟體，例如BLAST，BLAST-2，ALIGN，NEEDLE或Megalign(DNASTAR)。本領域技術人員可以確定用於測量比對的合適參數，包括在所比較的序列的全長上實現最大比對所需的任何算法。相同性百分比可以在整個確定的多肽/多核苷酸序列的長度上測定，或者可以在較短的長度上，例如在從較大的確定的多肽/多核苷酸序列中獲得的片段的長度上測定。應當理解，在表、圖式或序列表中，本文所示的序列所支持的任何片段長度可用於作為可測量相同性百分比的長度。
核酸，載體和細胞
在另一方面，本申請提供了編碼分離的抗原結合蛋白的一種或多種分離的核酸分子。
分離的核酸可以包含一種或多種核酸分子，每種核酸分子編碼抗原結合蛋白。例如，分離的核酸可以包含至少兩種核酸分子，其中一種編碼抗體重鏈或其片段，而另一種編碼抗體輕鏈或其片段。
分離的一種或多種核酸可以使用本領域眾所周知的重組技術合成。例如，分離的一種或多種核酸可以用自動化DNA合成儀合成。標準的重組DNA和分子選殖技術記載於文獻Sambrook J.,Fritsch,E.F.和Maniatis,T.Molecular Cloning：A Laboratory Manual；Cold Spring Harbor Laboratory Press：Cold Spring Harbor,(1989)(Maniatis)和T.J.Silhavy,M.L.Bennan，和L.W.Enquist,Experiments with Gene Fusions,Cold Spring Harbor Laboratory,Cold Spring Harbor,N.Y.(1984)和Ausubel,F.M.等人.,Current Protocols in Molecular Biology,pub.by Greene Publishing Assoc.和Wiley-Interscience(1987).簡言之，目標核酸可以從基因組DNA片段，cDNA和RNA製備，所有這些都可以直接從細胞中萃取或藉由各種擴增方法重組產生，包括但不限於PCR和RT-PCR。
核酸的直接化學合成通常涉及將3'封阻和5'封阻的核苷酸單體順序添加到生長的核苷酸聚合物鏈的末端5'-羥基上，其中每次加成是藉由在所加單體(通常是磷衍生物，例如磷酸三酯、亞磷醯胺等)的3’-位置進行生長鏈末端5’-羥基的親核攻擊而實現的。例如參見，Matteuci等人，Tet.Lett.521：719(1980)；美國專利4,500,707，Caruthers等人；和美國專利5,436,327和5,700,637，Southern et等人。
在另一方面，本公開提供了一種或多種載體，其包含一個或多個分離的核酸分子。
載體可以是任何線性核酸、質體、噬菌粒、黏粒、RNA載體、病毒載體等。病毒載體的非限制性實例可包括逆轉錄病毒，腺病毒和腺相關病毒。在一些實施方案中，載體是表現載體，例如質體。
表現載體可能適用於特定類型的宿主細胞，而不適用於其他宿主細胞。例如，可以將表現載體引入宿主生物中，然後監測宿主生物的活力和載體中所含任何基因/多核苷酸的表現。
表現載體還可包含一種或多種可選擇的標記基因，其在表現後賦予一種或多種表型性狀，其可用於選擇或以其他方式鑒定攜帶表現載體的宿主細胞。真核細胞的合適選擇標記的非限制性例子包括二氫葉酸還原酶和新黴素抗性。
目標載體可以藉由多種已建立的技術穩定地或瞬時地轉入宿主細胞。例如，一種方法涉及氯化鈣處理，其中藉由鈣沈澱物引入表現載體。其他鹽，例如磷酸鈣，也可以按照類似的步驟使用。另外，可以使用電穿孔(即，施加電流以增加細胞對核酸的滲透性)技術。轉化方法的其他實例包括顯微註射，DEAE葡聚糖媒介的轉化和在乙酸鋰存在下的熱激。脂質復合物，脂質體和樹狀聚合物也可以用於轉染宿主細胞。
在另一方面，本申請提供了一種細胞(例如，分離的細胞，例如宿主細胞)，其包含本申請的一種或多種分離的核酸分子或本申請的一種或多種載體。細胞可以表現本申請的抗原結合蛋白。該細胞可以是真核細胞或原核細胞。合適的細胞可被本申請的核酸或載體轉化或轉染，並用於表現和/或分泌抗原結合蛋白。例如，細胞可以是HEK293細胞、其他細菌宿主細胞、酵母細胞或各種更高級的真核細胞。
另一方面，本公開提供了一種產生本公開的抗原結合蛋白的方法，包括在能夠表現抗原結合蛋白的條件下培養本公開的細胞。該方法任選地可以進一步包括收獲本公開的抗原結合蛋白。
醫藥組成物，用途和方法
在另一方面，本公開提供了醫藥組成物，其包含分離的抗原結合蛋白、一個或多個核酸分子、一個或多個載體、和/或細胞，以及藥學上可接受的載體。
如本文所用，“藥學上可接受的載體”包括任何和所有的防腐劑、濕潤劑、乳化劑和分散劑。可以藉由滅菌程序以及藉由添加各種抗菌和抗真菌劑，例如對羥基苯甲酸酯，三氯第三丁醇，苯酚山梨酸等來防止微生物的存在。還可在組成物中添加等滲劑，例如糖、氯化鈉等。此外，可藉由添加延遲吸收的試劑例如單硬脂酸鋁和明膠來延長可注射藥物形式的吸收。
醫藥組成物通常必須在生產和儲存條件下是無菌的和穩定的。可以將組成物配製為溶液、微乳劑、脂質體或其他適合高藥物濃度的有序結構。載體可以是溶劑或分散介質，其包含例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液體聚乙二醇等)及其合適的混合物。如，可以藉由使用諸如卵磷脂的包衣，在分散液的情況下藉由維持所需的粒徑以及藉由使用表面活性劑來維持適當的流動性。在許多情況下，較佳在組成物中包括等滲劑，例如糖，多元醇如甘露醇、山梨醇或氯化鈉。可藉由在組成物中添加延遲吸收的試劑例如單硬脂酸鹽和明膠來實現可註射組成物的延長吸收。
本文公開的醫藥組成物可以包括用於治療癌症的其他化合物、藥物和/或藥劑。這種化合物、藥物和/或藥劑可以包括例如刺激對給定癌癥的免疫 反應的化學療法藥物，小分子藥物或抗體。在一些情況下，醫藥組成物可以包括例如在聯合療法部分中列出的一種或多種試劑。例如，聯合療法可以包括本文所述的抗CD73抗體與至少一種其他抗癌和/或T細胞刺激(例如，活化)劑的組合。可在聯合療法中使用的治療劑的實例在下文關於本文該抗體的用途的部分中進行更詳細地描述。
分離的抗原結合蛋白和/或醫藥組成物可以用於預防、減輕和/或治療腫瘤。腫瘤為固態腫瘤和/或血液腫瘤。
在另一方面，本公開進一步提供了一種用於腫瘤的方法，該方法包括預防、緩解和/或治療腫瘤，該方法包括向有此需要的受試者施用分離的抗原結合蛋白，從而治療該受試者，例如，從而抑制或減少了腫瘤的生長和/或使腫瘤消退。分離的抗原結合蛋白可單獨用於抑制癌性腫瘤的生長。或者，分離的抗原結合蛋白可以與本領域已知的另一種試劑例如其他免疫原性試劑，標準癌症治療或其他抗體結合使用。因此，本申請提供了用於例如藉由抑制受試者中的腫瘤細胞的生長來預防，緩解和/或治療腫瘤的方法，其包括向受試者施用治療有效量的本文所述的抗原結合蛋白或其抗原結合部分。
本公開還公開了如下實施例：
1.該分離的抗原結合蛋白，其具有下述性質中的一種或多種：
a.能夠以相當的親和力結合人CD73和食蟹猴的CD73；
b.能夠抑制CD73的5’外切核苷酸酶活性；
c.能夠媒介CD73的內化；
d.能夠促進T細胞增殖；
e.保持血清中相對穩定濃度至少15天；以及
f.能夠抑制腫瘤生長和/或腫瘤細胞增殖。
2.實施方案1的分離的抗原結合蛋白，其包含來自SEQ ID NO：152的重鏈可變區VH的至少一個HCDR區。
3.實施方案1-2中任一項的分離的抗原結合蛋白，其包含來自SEQ ID NO：152的重鏈可變區VH的HCDR3。
4.實施方案1-3中任一項的分離的抗原結合蛋白，其包含來自SEQ ID NO：152的重鏈可變區VH的HCDR2。
5.實施方案1-4中任一項的分離的抗原結合蛋白，其包含來自SEQ ID NO：152的重鏈可變區VH的HCDR1。
6.實施方案1-5中任一項的分離的抗原結合蛋白，其中該VH包含SEQ ID NO：96、104、105、106和107中任一個所示的胺基酸序列。
7.實施方案1-6中任一項的分離的抗原結合蛋白，其包含來自SEQ ID NO：151的輕鏈可變區VL的至少一個LCDR區。
8.實施方案1-7中任一項的分離的抗原結合蛋白，其包含來自SEQ ID NO：151的輕鏈可變區VL的LCDR3。
9.實施方案1-8中任一項的分離的抗原結合蛋白，其包含來自SEQ ID NO：151的輕鏈可變區VL的LCDR2。
10.實施方案1-9中任一項的分離的抗原結合蛋白，其包含來自SEQ ID NO：151的輕鏈可變區VL的LCDR1。
11.實施方案1-10中任一項的分離的抗原結合蛋白，其中該VL包含SEQ ID NO：111和115中任一個所示的胺基酸序列。
12.實施方案1-11中任一項的分離的抗原結合蛋白，其包含抗體或其抗原結合片段。
13.實施方案12的分離的抗原結合蛋白，其中該抗原結合片段包含Fab，Fab’，F(ab)2，Fv片段，F(ab’)2，scFv，di-scFv和/或dAb。
14.實施方案1-13中任一項的分離的抗原結合蛋白，其中該抗體選自單株抗體，嵌合抗體，人源化抗體和全人源抗體。
15.實施方案3-14中任一項的分離的抗原結合蛋白，其中該HCDR3包含SEQ ID NO：35、38和39中任一個所示的胺基酸序列。
16.實施方案4-15中任一項的分離的抗原結合蛋白，其中該HCDR2包含SEQ ID NO：18、23和24中任一項所示的胺基酸序列。
17.實施方案1-16中任一項的分離的抗原結合蛋白，其包含輕鏈可變區VL，其中該抗原結合蛋白的該VL包含框架區L-FR1，L-FR2，L-FR3和L-FR4。
18.實施方案17的分離的抗原結合蛋白，其中該L-FR1的C端直接或間接連接至該LCDR1的N端，並且該L-FR1包含如SEQ ID NO：163所示的胺基酸序列。
19.實施方案17-18中任一項的分離的抗原結合蛋白，其中該L-FR1包含如SEQ ID NO：48和51中任一個所示的胺基酸序列。
20.實施方案17-19中任一項的分離的抗原結合蛋白，其中該L-FR2位於該LCDR1和該LCDR2之間，並且該L-FR2包含如SEQ ID NO：61所示的胺基酸序列。
21.實施方案17-20中任一項的分離的抗原結合蛋白，其中該L-FR3位於該LCDR2和該LCDR3之間，並且該L-FR3包含如SEQ ID NO：72所示的胺基酸序列。
22.實施方案17-21中任一項的分離的抗原結合蛋白，其中該L-FR4的N-末端直接或間接連接至該LCDR3的C-末端，並且該L-FR4包含如SEQ ID NO：90所示的胺基酸序列。
23.實施方案1-22中任一項的分離的抗原結合蛋白，其中該抗原結合蛋白的該VL包含如SEQ ID NO：151所示的胺基酸序列。
24.實施方案1-23中任一項的分離的抗原結合蛋白，其中該抗原結合蛋白的該VL包含如SEQ ID NO：111和115中任一個所示的胺基酸序列。
25.實施方案1-24中任一項的分離的抗原結合蛋白，其包含抗體輕鏈恆定區，並且該抗體輕鏈恆定區包含人Igκ恆定區。
26.實施方案25的分離的抗原結合蛋白，其中該抗體輕鏈恆定區包含如SEQ ID NO：166所示的胺基酸序列。
27.實施方案1-26中任一項的分離的抗原結合蛋白，其包含抗體輕鏈LC，並且該LC包含如SEQ ID NO：159所示的胺基酸序列。
28.實施方案1-27中任一項的分離的抗原結合蛋白，其包含抗體輕鏈LC，並且該LC包含SEQ ID NO：139和143中任一項所示的胺基酸序列。
29.實施方案1-28中任一項的分離的抗原結合蛋白，其中包含重鏈可變區VH，其中該抗原結合蛋白的VH包含框架區H-FR1，H-FR2，H-FR3和H-FR4。
30.實施方案29的分離的抗原結合蛋白，其中該H-FR1的C末端直接或間接連接至該HCDR1的N末端，並且該H-FR1包含如SEQ ID NO：2所示的胺基酸序列。
31.實施方案29-30中任一項的分離的抗原結合蛋白，其中該H-FR2位於該HCDR1和該HCDR2之間，並且該H-FR2包含如SEQ ID NO：12所示的胺基酸序列。
32.實施方案29-31中任一項的分離的抗原結合蛋白，其中該H-FR3位於該HCDR2和該HCDR3之間，並且該H-FR3包含如SEQ ID NO：28所示的胺基酸序列。
33.實施方案29-32中任一項的分離的抗原結合蛋白，其中該H-FR4的N-末端直接或間接連接至該HCDR3的C-末端，並且該H-FR4包含如SEQ ID NO：43所示的胺基酸序列。
34.實施方案1-33中任一項的分離的抗原結合蛋白，其中該抗原結合蛋白的VH包含如SEQ ID NO：152所示的胺基酸序列。
35.實施方案1-34中任一項的分離的抗原結合蛋白，其中該抗原結合蛋白的VH包含如SEQ ID NO：96、104、105、106和107中任一個所示的胺基酸序列。
36.實施方案1-35中任一項的分離的抗原結合蛋白，其包含抗體重鏈恆定區，並且該抗體重鏈恆定區包含人IgG恆定區。
37.實施方案1-36中任一項的分離的抗原結合蛋白，其包含抗體重鏈恆定區，並且該抗體重鏈恆定區包含人IgG1恆定區。
38.實施方案37的分離的抗原結合蛋白，其中該抗體重鏈恆定區包含如SEQ ID NO：167所示的胺基酸序列。
39.實施方案1-38中任一項的分離的抗原結合蛋白，其包含抗體重鏈HC，並且該HC包含如如SEQ ID NO：162所示的胺基酸序列。
40.實施方案1-39中任一項的分離的抗原結合蛋白，其包含抗體重鏈HC，並且該HC包含如SEQ ID NO：124、132、133、134和135中任一個所示的胺基酸序列。
41.一種或多種分離的核酸分子，其編碼1-40中任一項實施方案的該分離的抗原結合蛋白。
42.一種或多種載體，包含實施方案41的該分離的一種或多種分離的核酸分子。
43.一種細胞，其包含該分離的實施方案41的核酸分子或分子，或該實施方案42的一種或多種載體。
44.一種產生實施方案1-40中任一項的分離的抗原結合蛋白的方法，其包括在能夠表現實施方案1-40中任一項的分離的抗原結合蛋白的條件下培養實施方案43的細胞。
45.一種醫藥組成物，其包含實施方案1-40中任一項的分離的抗原結合蛋白，實施方案41的一個或多個核酸分子，實施方案42的一種或多種載體和/或實施方案43的細胞，和任選地，藥學上可接受的佐劑。
46.實施方案1-40中任一項的該分離的抗原結合蛋白，實施方案41的該分離的一種或多種核酸分子，實施方案42的該一種或多種載體，實施方案43的細胞和/或實施方案45的該醫藥組成物的用於生產預防，減輕和/或治療腫瘤的藥物。
47.實施方案46的用途，其中該腫瘤包括固態腫瘤和/或血液腫瘤。
48.一種預防，緩解和/或治療腫瘤的方法，其包括向有需要的受試者施用實施方案1-40中任一項的分離的抗原結合蛋白。
實施例
提出以下實施例以向本領域普通技術人員提供關於如何實現和使用本發明的完整公開和說明，無意於限制發明人認為的範圍，也不旨在表示以下實驗是發明全部或僅有的實驗。已經盡力確保所使用的數字(例如量，溫度等)的準確性，但是一些實驗誤差和偏差仍應當被考慮。除非另有說明，否則份是重量 份，分子量是重均分子量，溫度是攝氏度，壓力是大氣壓或接近大氣壓。可以使用標準縮寫，例如bp，鹼基對；kb，千鹼基；pl，皮升；s或sec；分鐘；h或hr，小時；aa，胺基酸；nt，核苷酸；i.m.，肌肉內(ly)；i.p.，腹膜內(ly)；s.c.，皮下注射等等。
實施例1：抗CD73抗體的產生
免疫
在使用Harbor H2L2小鼠的免疫中，將CD73蛋白用作免疫原以產生抗CD73抗體。藉由皮下註射和腹膜內注射，與佐劑一起使用(Sigma，S6322)給每隻小鼠第一次加強用50μg蛋白質，隨後加強用25μg蛋白質。每兩週進行這種免疫，共6次。最終免疫是藉由經腹膜內註射用PBS稀釋的免疫原進行的。使用ELISA和FACS測試針對人CD73的血清效價。在指定的時間點，對小鼠血清進行採樣並滴定以進行ELISA和FACS分析，以測試與CD73或CD73穩定細胞株的結合。在蛋白免疫組的老鼠中觀察到良好的血清效價。
融合瘤
使用細胞融合發生器(BEX-LF301)，藉由基於電場的電穿孔器，將從免疫小鼠中分離的小鼠脾細胞與小鼠骨髓瘤細胞株SP2/0(ATCC，CRL-1581)融合，以獲得融合瘤。通常在融合後9-14天，在各個孔中篩選人抗CD73抗體。融合瘤亞選殖後，選擇對CD73表現出良好結合活性的單株38H6進行測序。鑒定並獲得重鏈可變區和輕鏈可變區。然後合成重鏈可變區和輕鏈可變區，並分別選殖到編碼人IgG1恆定區的質體和編碼人Igκ區的質體中。。
實施例2 抗體生產和純化
使用PEI(Polyscience，24885)將編碼目標抗體的重組質體瞬時共轉染到HEK293-6E或293-F細胞培養物中。30μg質體與120μL PEI在室溫下混合並培養15分鐘。接下來，將混合物逐滴加入以1×106細胞/毫升的濃度懸浮於Opti-MEM的293細胞中。轉染後，將細胞在37℃、5%CO2的條件下，以120rpm震盪培養箱培養。在第6-7天收集的細胞培養上清液用於純化。
在轉染後6-7天藉由離心和過濾收獲含有目標抗體的上清液。使單株抗體藉由rProtein A(GE，17-1279-02)預裝管柱(Bio-Rad，7311550)進行純化。藉由將0.2mL rProtein A樹脂裝填到一個管柱中，然後用10管柱體積的ddH2O和10管柱體積的PBS沖洗來製備Protein A管柱。將細胞培養上清液過管柱，然後用10倍管柱體積的PBS洗滌。然後用8倍管柱體積的洗脫緩衝液(Thermo，21004)洗脫蛋白質，並在洗脫後立即與640μL的中和緩衝液(1M Tris-HCl，pH 9.0；Teknova，T1090)進行混合。在濃縮器(Millipore，UFC903024)中，藉由3800rpm(Eppendorf，5810R)4℃離心，將緩衝液與DPBS進行500倍以上的交換，最後濃縮至合適的體積。純化的抗CD73抗體的濃度藉由在280nm(NanoDrop)處的UV吸光度確定。藉由SEC-HPLC和SDS-PAGE測定抗體純度。重組抗體PR000506被成功表現並純化用於特徵化。
實施例3 抗體工程
抗CD73抗體PR000506的VH和VL序列藉由胚系化和PTM去除操作進行了進一步優化。
在胚系化程序中，抗體VH或VL序列首先藉由例如NCBI/Ig-BLAST的算法比對到最接近的人類胚系序列，然後將框架區的具有不同於胚系序列的殘基反轉為胚系序列中的對應殘基。然後藉由成熟的分子生物學技術重組產生胚系化後的由序列變體組成的抗體。
在哺乳動物細胞中表現的蛋白質中廣泛觀察到轉譯後修飾(PTM)。除了抗體中保守的PTM位置(例如IgG1抗體CH2結構域上的N-糖基化保守位置)外，在抗體抗原結合位置(即CDR區)內發生的其他PTM位置可能會降低抗原結合活性或降低化學穩定性。例如，脫醯胺或異構化可以使分子變得不穩定和異質化。為了減少序列不穩定性，可以藉由突變去除PTM基序。查找VH或VL序列的PTM基序，例如異構化基序(例如DG)。然後將“熱點”殘基(例如，DG基序中的D或G)突變為胚系序列中的對應殘基或具有類似生物物理特性的其他殘基。然後，藉由成熟的分子生物學技術重組產生由PTM去除後的序列變體組成的抗體。
表2顯示了PR000506，PR000497和PR001408的序列分析結果。表3顯示了PR000506藉由胚系化和PTM去除設計的變體。抗CD73抗體的胺基酸序列示於表4，其中PR000815-PR000820，PR000822，PR000824，PR000825和PR003832-PR003836是從PR000497衍生的PTM去除的抗體。PR002078是Tab1，PR000752是Tab2，PR000690是Tab3。
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實施例4抗CD73抗體與CD73的結合
藉由流式細胞術特徵化抗體與穩轉細胞系中表達的人CD73和猴CD73結合。將細胞與各種濃度的抗體(最高濃度為50nM，8個點，稀釋系數3)一起培養，然後在4℃培養1小時。用PBS洗滌兩次，然後加入二抗山羊抗人IgG(H+L)(Thermo fisher，A11013)，在4℃孵育30分鐘。藉由FACS機器(BD FACS CantoII)讀取螢光強度。用GraphPad Prism 5擬合並計算抗原抗體結合的螢光強度中位平均值和抗體濃度的關系圖，並計算結合EC50。結果示於圖1-5和表5-8
圖1和圖3顯示了抗CD73抗體與CHO-K1-hCD73穩轉細胞株的結合活性。表5和表6顯示了PTM去除抗體針對CHO-K1-hCD73穩轉細胞株的EC50。表7顯示了PTM去除抗體的EC50與PR000506的EC50的比例。圖2顯示了抗CD73抗體與HEK293-cynoCD73穩轉細胞株的結合活性。表8顯示了PTM去除抗體針對HEK293-cynoCD73穩轉細胞株的EC50。圖4和圖5顯示了抗CD73抗體對CHO-K1- hCD73穩轉細胞株的結合活性。結果表明所有抗體與基於細胞的CD73具有相當高的親和力。
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Figure 109128447-A0202-12-0087-16
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Figure 109128447-A0305-02-0090-1
實施例5 抗CD73抗體對5’核苷酸外切酶的抑制作用
5.1 抗CD73抗體抑制基於細胞的CD73酶活性
藉由在體外實驗中，在CHO-K1-hCD73穩轉細胞系中，測定抗體對CD73催化的AMP水解為腺苷的抑制程度來確定抗CD73抗體的功能活性。藉由胰蛋白酶-EDTA消化細胞，然後1000rpm離心5分鐘，將細胞重新懸浮於無血清的F12K培養基中，使用細胞計數器(Thermofisher，CountessTM II自動細胞計數器)對細胞計數，然後以每100ul 5000個細胞的濃度接種至96孔平盤(corning，3599)，並向平盤中加入4倍稀釋的抗體(8個濃度點，用無血清培養基1：5稀釋)，在37℃下孵育30分鐘。然後將50μl 4×AMP(終濃度為200μM)加入盤中，然後在37℃下孵育1小時。將盤子以1500rpm離心3分鐘，然後將50μl培養物上清液轉移至黑色96孔盤(PerkinElmer，6005225)中，然後加入2×ATP(終濃度為65μM)。按照制造商的說明添加100μl/孔的Cell Titer-Glo(PROMEGA，G7573)，並藉由PE Enspire工作站讀取記錄發光值。阻斷活性用下式計算：阻斷%=[(最大發光值-樣品發光值)/(最大發光值-最小發光值)]×100
注意：在最大發光孔中加入AMP，ATP與細胞。最小發光孔中添加了AMP，ATP，無細胞。
藉由GraphPad Prism分析制作EC 50圖。結果顯示在圖6中。圖6A-6B顯示了抗CD73抗體對CHO-K1表面的CD73酶活性的抑制。表9和表10顯示了抗體與CHO-K1-hCD73穩轉細胞系結合EC50。可以看出，所有抗體都具有阻斷細胞表面的CD73酶活性的能力。並且PR000506的阻斷活性優於Tab1。
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5.2抗CD73抗體抑制可溶性CD73酶的活性
使用孔雀石綠測定法測量可溶性重組CD73活性，在384孔板(Corning，3799)中加入12.5μl用實驗緩衝液配置的1nM重組CD73蛋白和12.5μl用實驗緩衝液配置的1nM抗體，測定緩衝液成分為25mM Tris pH 7.5，5mM MgCl2、0.005%Tween-20，室溫孵育1小時。加入25μl的AMP(最高濃度200μM，用測定緩衝液中按1：2稀釋8個濃度點)，並將樣品在室溫下培養15分鐘。按照製造商的說明，使用孔雀綠測定法測定無機磷酸鹽的濃度。利用PE Envision工作站記錄在620nm處的光密度值。藉由GraphPad Prism分析作圖。結果顯示在圖7和圖8中。可以看出，所有抗體均具有阻斷可溶性CD73的酶活性並抑制CD73使AMP脫去腺苷的能力。
實施例6 藉由抗CD73抗體內化CD73
6.1流式細胞術檢測抗體媒介的CD73內化試驗
將NCI-H292細胞在50nM抗體或陰性對照同種型IgG1的存在下於37℃溫育4小時或30分鐘。用PBS洗滌平盤兩次，然後向同型對照孔IgG1中加入50nM 100μl抗體，將平盤在4℃培養1小時，用PBS洗滌平盤兩次。吸出洗滌緩衝液，並每孔加入100μl含二抗山羊抗人IgG(H+L)(Thermofisher，A-21445)的FACS緩衝液。在4℃下培養30分鐘。用PBS洗滌平盤兩次，並用100μl PBS懸浮細胞。然後用FACS Machine(BD FACS CantoII)讀取中值螢光強度，藉由以下公式計算表面殘留%=[抗體4h/(同種型4h+抗體)]×100
結果顯示在圖9A和圖11中。本申請的抗體可以在4小時後媒介CD73內在化。
6.2 內化套組檢測抗體媒介的CD73內化試驗
藉由胰蛋白酶-EDTA消化細胞CHO-K1-hCD73，然後以1000rpm離心5分鐘，將細胞重新懸浮於含10%FBS的F12K培養基中。使用細胞計數器(Thermofisher，Countess TM II自動細胞計數器)進行細胞計數，然後以每90μl 5000個細胞接種到96孔平黑TC盤(PerkinElmer，6005225)中。在37℃，5%CO2的培養箱中培養過夜。將10×稀釋的抗體(最高濃度10nM，6個濃度點，用完全的F12K培養基1：5稀釋)加入平盤中，製備濃度為50μg/ml的Hu-zap緩衝液(50×)。加入2μl到孔中，最終濃度為1μg/ml。在5%CO2培養箱中於37℃培養3天。按照製造商的說明添加100ul/孔的Cell Titer-Glo(PROMEGA，G7573)。並藉由PE Enspire工作站記錄發光。結果藉由CD73內化%計算。注意：對照孔僅是接種的細胞後並用培養基補至與抗體孔相同的體積。藉由GraphPad Prism分析制圖。
結果顯示在圖9B和圖10中。本申請的抗體可以在3天後媒介CD73內化抑制細胞的生長。
實施例7 抗體抑制AMP媒介的CD4+T細胞增殖抑制試驗
7.1 從新鮮的人PBMC中分離出CD4+T細胞
藉由在4℃下以300×g離心10分鐘，將PBMC用預冷的PBS洗滌兩次。丟棄上清液，並將細胞懸浮在20ml預冷的PBS中。用細胞計數儀確定細胞數和細胞活率，然後以300×g離心7分鐘。完全棄去上清液。按照製造商的方案(Miltenyi，130-045-101)分離CD4+T細胞。
7.2 CFSE標記
即用即配CellTraceTM儲備溶液(Invitrogen，C34554)，藉由向一小瓶CellTraceTM試劑(組分A)中添加適量的DMSO(組分B)並充分混合，在預熱的(37℃)磷酸鹽緩衝鹽水(PBS)或其他不含蛋白質的緩衝液中稀釋CellTraceTM DMSO儲備溶液(5mM)至1μM(5000倍)，按照製造商的說明標記細胞。
7.3 T細胞活化和擴增
使用溫的完全培養基將來自每個供體的CD4+T細胞洗滌兩次，並以每毫升2×106個細胞的量懸浮。免疫磁珠人T細胞活化劑CD3/CD28(life，11131D)以1×106/ml懸浮。以1：1的比例混合細胞和免疫磁珠。加入100μl/孔的細胞和珠子混合物到96孔平底盤中。
7.4 加入4×抗體
加入4×抗體50μl，抗體濃度：6個點(最高濃度為20nM，用RPMI1640完全培養基按1/10比例稀釋6個點)。在37℃，5%CO2下培養平盤30分鐘。
7.5 加入4×AMP
加入50μL的4×AMP(Sigma)(終濃度為650μM或800μM)，將平盤在37℃，5%CO2下培養96h。
7.6 流式細胞儀分析
在350g離心5分鐘使細胞沈澱，用200μlPBS洗滌壹次，最後用200μl PBS重新懸浮細胞，在BD FACS Canto II上進行流式細胞術分析。沒有添加AMP(僅珠子)孔的CFSE CD4+T細胞用於辨識經歷細胞分裂的細胞。
結果顯示在圖12和圖13中。抗體可以解除AMP媒介的CD4+T細胞增殖的抑制。抑制效果呈現出劑量依賴的方式。
實施例8 PK分析
8.1塗佈孔盤
用PBS將抗原CD73稀釋至5μg/mL。以50μL/孔加入ELISA盤。密封盤子並在4℃下培養過夜。用300μl洗滌緩衝液洗滌平盤3次。加入200μl/孔的封閉緩衝液，並在室溫下培養1-3小時。用300μl洗滌緩衝液洗滌盤子3次。
8.2製備標準品，質控品，測試樣品和樣品培養
標準品：用5%混合小鼠血清1：2稀釋標準品。八個標準品的濃度範圍為50至0.391ng/mL。靈敏度為0.391ng/mL。質控品製備：在5%混合小鼠血清中製備兩組質控品。HQC(40ng/mL)，MQC(10ng/mL)和LQC(2ng/mL)。樣品製備：首先將所有血清樣品在實驗稀釋液中稀釋20倍。在5%混合小鼠血清中進行進一步的稀釋。將50μL標準液，質控品和樣品添加到ELISA盤中。將盤密封並在37℃下培養約1小時。
8.3 檢測試劑反應
用300μl洗滌緩衝液洗滌盤3次。製備結合HRP的檢測抗體工作溶液：將抗體溶液以1：5000的比例稀釋在實驗稀釋液中。按100μl/孔將檢測抗體工作溶液添加到測定盤中。將盤子密封並在37℃下培養30分鐘。
8.4 受質反應和讀盤
用300μl洗滌緩衝液洗滌盤子3次。準備TMB工作溶液：使用前將受質置於室溫30分鐘。混合等體積的受質A和受質B。加入100μl/孔的預混合TMB受質，並在室溫下培養約6分鐘。添加100μL/孔的ELISA終止溶液。混勻並使用SpectraMax M2在450/630nm波長讀取數值。使用Soft Max Pro GxP做數據處理。使用系數為1/y的4-PL模型擬合標準曲線。
圖14A和表11顯示了PR000506在雌性C57BL/6小鼠中以5mg/kg的IV劑量給藥後的抗體濃度-時間曲線(N=6/時間點)。圖14B和表12示出了PR000846在雌性C57BL/6小鼠中以10mg/kg的IV劑量給藥後的抗體濃度-時間曲線(N=3/時間點)。血清中PR000506的t1/2為17.4天，PR000846為18.1天。圖14C和表13示出了PR000497在雌性C57BL/6小鼠中以5mg/kg的IV劑量給藥後的抗體濃度-時間曲線(N=6/時間點)。
Figure 109128447-A0305-02-0095-2
Figure 109128447-A0202-12-0094-22
Figure 109128447-A0202-12-0094-23
實施例9 體內腫瘤抑制
在第0天、用NCI-H292細胞和PBMCs皮下接種NCG小鼠獲得腫瘤模型。荷瘤小鼠分為以下幾組：同種型對照組，tab1組，PR000506組，Tab3組，PR000846組和PR000497組。在每組中，每週兩次，連續3週用10mpk劑量的抗體治療小鼠。在選定的時間測量腫瘤的體積和小鼠體重
結果顯示在圖15和16中。可以看出，抗CD73抗體具有抑制腫瘤生長的作用。
實施例10測定PR000846結合的CD73的表位
在該實施例中，藉由氫氘交換質譜法(HDX-MS)確定了抗CD73抗體PR000846與CD73結合的表位，並且藉由對CD73重組蛋白的丙胺酸突變掃描確認了該表位的關鍵胺基酸。
氫氘交換質譜(HDX-MS)
藉由Genechem(吉凱基因)進行HDX-MS實驗，方法如以下文獻所述(Park IH等人.,J.Chem.Inf.Model.；55(9)：1914-1925(2015)；Chalmers MJ，等人，Anal.Chem.；78(4)：1005-14(2006))。在4℃下過夜培養製備抗體抗原複合物，使用1：1的莫耳比。
取2μl的0.5mg/ml重組人CD73蛋白(Novoprotein，C446)，分別加入2ul PBS或2μl等莫耳當量的待測抗體，然後添加到36μl的D2O緩衝液中。在室溫下進行30s、120s、600s、1800s、7200s交換後，加入40μL 4℃預冷的Quench Buffer(0.5M TCEP,4M鹽酸胍，pH=2.5)混勻中止反應。樣品經Pepsin在線酶切柱酶切後，用LC-MS進行氫氘交換數據採集。色譜梯度同覆蓋率測試。氫氘交換數據分析：用ProteomeDiscoverer2.1進行肽段文庫構建，採用HDExaminer進行氫氘交換數據分析。
圖17-20描述了氫氘交換MS(HDX-MS)分析的結果，表明CD73和CD73+PR000846氫氘交換實驗中各個肽段氘吸收值的差異。
圖17：每個數據點指示CD73+PR000846復合物(y軸上的正值)和單獨的CD73(y軸上的負值)之間的氘攝取差異。垂直條表示整個暴露時間-點的攝取 差異之和。水準軸對應於從N-至C-末端(從左至右)分析的肽。比較遊離的和復合的CD73之間的交換動力學，發現當結合PR000846時，位於sCD73的N-末端結構域內的3個區域(區域1：aa115-164；區域2：aa168-191；區域3：aa222-254)減少了氘的吸收量。
圖18-20所示，在區域1、2、3的肽中，氘的相對攝入量(道爾頓的質量變化)在不同時間點的變化。為了使包含顯示氫交換變化的序列區域變窄從而可以預測表位，比較了重疊肽的相對質量變化。例如，在區域2中，跨越168-186位的肽段顯示出氘差異交換，而跨越168-181位的肽段沒有差異。因此，可以推斷出182上游的殘基沒有被氘差異標記。從而推斷出PR000846結合CD73的這3個肽段區域可縮小為(胺基酸(aa)132-146(YLPYKVGDEVVG)和182-189(KTLNVNKI)和240-254(IVTSDDGRKVPVVQA))，表現出氘的吸收降低。
實施例10 CD73的丙胺酸點突變
為了獲得更精確的表位圖譜，對CD73的這3個區域進行丙胺酸點突變掃描。正對CD73的這3個區域進行丙胺酸點突變構建質粒，轉染HEK293細胞並表達。然後使用ELISA檢測CD73丙胺酸點突變體與抗體的結合，確認抗原結合表位的關鍵胺基酸，如下：包被0.5ug/ml的抗His抗體(Vendor TransGen，HT501-02)，在37℃下用3%牛奶PBS封閉2小時，加入100ul CD73突變體上清液，在37℃下孵育30分鐘，重復3次使CD73突變體上清液的結合飽和；然後在37℃下加入系列稀釋的PR000846(起始濃度為100nM)1h；加入抗CD73抗體與0.5%封閉緩衝液1：5000，然後在37℃孵育1h；用PBST(0.05%Tween 20)洗滌3次，加入100ul TMB(KPL)，在室溫下孵育約5min，然後加入50ul終止溶液。用讀板器讀取每個孔的吸光度(450nm處的光密度)。
圖21和22：ELISA結合數據顯示區域1中的K136、V137、L138、D142、E143、V144以及區域2中的K180、V186、N187、K188以及第3區域中或附近的Y223、P238、I240是CD73結合PR000846的主要表位殘基。並且區域1中的V137，D142是關鍵表位殘基。N185是CD73與MEDI9447(TAB1)結合的關鍵表位殘基，但不是CD73與PR000846結合的表位殘基。
盡管在此已經示出和描述了本發明的較佳實施例，但是對於本領域技術人員顯而易見的是，這些實施例僅以示例的方式提供。不應將本發明限制於說明書內提供的特定實例。盡管己經參考前述說明書描述了本發明，但是本文中的實施例的描述和圖式並不意味著以限制性的意義來解釋。在不脫離本發明的情況下，本領域技術人員現在將想到許多變化，改變和替換。此外，應當理解，本發明的所有方面不限於本文所闡述的具體描述，構造或相對比例，其取決於各種條件和變量。應當理解，本文所述的本發明的實施方案的各種替代方案可以用於實施本發明。因此，可以預期的是，本發明還將涵蓋任何這樣的替代，修改，變化或等同形式。以下申請專利範圍定義了本發明的範圍，並且由此涵蓋了這些申請專利範圍的範圍內的方法和結構及其等同物。
<110> 大陸商和鉑醫藥(上海)有限責任公司(HARBOUR BIOMED(SHANGHAI)CO.,LTD.)
<120> 抗CD73抗體及其應用(ANTI-CD73 ANTIBODY AND APPLICATION THEREOF)
<130> 0113-PA-006TW
<140> TW109128447
<141> 2020-08-20
<150> PCT/CN2019/101837
<151> 2019-08-21
<160> 169
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 25
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000497 HFWR1 Chothia,PR000815 HFWR1 Chothia,PR000816 HFWR1 Chothia
<400> 1
Figure 109128447-A0305-02-0100-3
<210> 2
<211> 25
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000506 HFWR1 Chothia,PR000843 HFWR1 Chothia,PR000844 HFWR1 Chothia
<400> 2
Figure 109128447-A0305-02-0100-4
<210> 3
<211> 25
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000690 HFWR1 Chothia,PR000817 HFWR1 Chothia,PR000818 HFWR1 Chothia
<400> 3
Figure 109128447-A0202-12-0099-26
<210> 4
<211> 25
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000752 HFWR1 Chothia
<400> 4
Figure 109128447-A0202-12-0099-27
<210> 5
<211> 25
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR002078 HFWR1 Chothia
<400> 5
Figure 109128447-A0202-12-0099-28
<210> 6
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000497 HCDR1 Chothia,PR000815 HCDR1 Chothia,PR000816 HCDR1 Chothia
<400> 6
Figure 109128447-A0202-12-0099-29
<210> 7
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000506 HCDR1 Chothia,PR000843 HCDR1 Chothia,PR000844 HCDR1 Chothia
<400> 7
Figure 109128447-A0202-12-0100-33
<210> 8
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000690 HCDR1 Chothia
<400> 8
Figure 109128447-A0202-12-0100-32
<210> 9
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000752 HCDR1 Chothia
<400> 9
Figure 109128447-A0202-12-0100-31
<210> 10
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR001408 HCDR1 Chothia
<400> 10
Figure 109128447-A0202-12-0100-30
<210> 11
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000497 HFWR2 Chothia,PR000815 HFWR2 Chothia,PR000816 HFWR2 Chothia
<400> 11
Figure 109128447-A0202-12-0101-34
<210> 12
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000506 HFWR2 Chothia,PR000843 HFWR2 Chothia,PR000844 HFWR2 Chothia
<400> 12
Figure 109128447-A0202-12-0101-35
<210> 13
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000690 HFWR2 Chothia
<400> 13
Figure 109128447-A0202-12-0101-36
<210> 14
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000752 HFWR2 Chothia
<400> 14
Figure 109128447-A0202-12-0102-39
<210> 15
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR001408 HFWR2 Chothia
<400> 15
Figure 109128447-A0202-12-0102-38
<210> 16
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR002078 HFWR2 Chothia
<400> 16
Figure 109128447-A0202-12-0102-37
<210> 17
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000497 HCDR2 Chothia,PR000819 HCDR2 Chothia,PR000820 HCDR2 Chothia
<400> 17
Figure 109128447-A0202-12-0103-40
<210> 18
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000506 HCDR2 Chothia,PR000851 HCDR2 Chothia
<400> 18
Figure 109128447-A0202-12-0103-41
<210> 19
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000690 HCDR2 Chothia
<400> 19
Figure 109128447-A0202-12-0103-42
<210> 20
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000752 HCDR2 Chothia
<400> 20
Figure 109128447-A0202-12-0103-43
<210> 21
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000815 HCDR2 Chothia,PR000817 HCDR2 Chothia
<400> 21
Figure 109128447-A0202-12-0103-44
Figure 109128447-A0202-12-0104-45
<210> 22
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000816 HCDR2 Chothia,PR000818 HCDR2 Chothia,PR000822 HCDR2 Chothia
<400> 22
Figure 109128447-A0202-12-0104-534
<210> 23
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000843 HCDR2 Chothia,PR000844 HCDR2 Chothia,PR000847 HCDR2 Chothia
<400> 23
Figure 109128447-A0202-12-0104-47
<210> 24
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000845 HCDR2 Chothia,PR000846 HCDR2 Chothia,PR000849 HCDR2 Chothia
<400> 24
Figure 109128447-A0202-12-0104-48
<210> 25
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR001408 HCDR2 Chothia
<400> 25
Figure 109128447-A0202-12-0104-49
<210> 26
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR002078 HCDR2 Chothia
<400> 26
Figure 109128447-A0202-12-0105-52
<210> 27
<211> 41
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000497 HFWR3 Chothia,PR000815 HFWR3 Chothia,PR000816 HFWR3 Chothia
<400> 27
Figure 109128447-A0202-12-0105-51
<210> 28
<211> 41
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000506 HFWR3 Chothia,PR000843 HFWR3 Chothia,PR000844 HFWR3 Chothia
<400> 28
Figure 109128447-A0202-12-0105-50
<210> 29
<211> 41
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000690 HFWR3 Chothia
<400> 29
Figure 109128447-A0202-12-0106-53
<210> 30
<211> 41
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000752 HFWR3 Chothia
<400> 30
Figure 109128447-A0202-12-0106-54
<210> 31
<211> 41
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000817 HFWR3 Chothia,PR000818 HFWR3 Chothia,PR000819 HFWR3 Chothia
<400> 31
Figure 109128447-A0202-12-0106-55
Figure 109128447-A0202-12-0107-58
<210> 32
<211> 41
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR001408 HFWR3 Chothia
<400> 32
Figure 109128447-A0202-12-0107-57
<210> 33
<211> 41
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR002078 HFWR3 Chothia
<400> 33
Figure 109128447-A0202-12-0107-56
<210> 34
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000497 HCDR3 Chothia,PR000815 HCDR3 Chothia,PR000816 HCDR3 Chothia
<400> 34
Figure 109128447-A0202-12-0108-59
<210> 35
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000506 HCDR3 Chothia,PR000851 HCDR3 Chothia
<400> 35
Figure 109128447-A0202-12-0108-60
<210> 36
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000690 HCDR3 Chothia
<400> 36
Figure 109128447-A0202-12-0108-61
<210> 37
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000752 HCDR3 Chothia
<400> 37
Figure 109128447-A0202-12-0108-62
<210> 38
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000843 HCDR3 Chothia,PR000845 HCDR3 Chothia,PR000847 HCDR3 Chothia
<400> 38
Figure 109128447-A0202-12-0109-66
<210> 39
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000844 HCDR3 Chothia,PR000846 HCDR3 Chothia,PR000848 HCDR3 Chothia
<400> 39
Figure 109128447-A0202-12-0109-65
<210> 40
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR001408 HCDR3 Chothia
<400> 40
Figure 109128447-A0202-12-0109-64
<210> 41
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR002078 HCDR3 Chothia
<400> 41
Figure 109128447-A0202-12-0109-63
<210> 42
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000497 HFWR4 Chothia,PR000690 HFWR4 Chothia,PR000815 HFWR4 Chothia
<400> 42
Figure 109128447-A0202-12-0110-67
<210> 43
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000506 HFWR4 Chothia,PR000843 HFWR4 Chothia,PR000844 HFWR4 Chothia
<400> 43
Figure 109128447-A0202-12-0110-68
<210> 44
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000752 HFWR4 Chothia
<400> 44
Figure 109128447-A0202-12-0110-69
<210> 45
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR001408 HFWR4 Chothia
<400> 45
Figure 109128447-A0202-12-0110-70
<210> 46
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR002078 HFWR4 Chothia
<400> 46
Figure 109128447-A0202-12-0110-71
Figure 109128447-A0202-12-0111-311
<210> 47
<211> 23
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000497 LFWR1 Chothia,PR000815 LFWR1 Chothia,PR000816 LFWR1 Chothia
<400> 47
Figure 109128447-A0202-12-0111-310
<210> 48
<211> 23
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000506 LFWR1 Chothia,PR000843 LFWR1 Chothia,PR000844 LFWR1 Chothia
<400> 48
Figure 109128447-A0202-12-0111-309
<210> 49
<211> 23
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000690 LFWR1 Chothia
<400> 49
Figure 109128447-A0202-12-0111-308
<210> 50
<211> 23
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000752 LFWR1 Chothia
<400> 50
Figure 109128447-A0202-12-0112-312
<210> 51
<211> 23
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000847 LFWR1 Chothia,PR000848 LFWR1 Chothia,PR000849 LFWR1 Chothia
<400> 51
Figure 109128447-A0202-12-0112-313
<210> 52
<211> 23
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR001408 LFWR1 Chothia
<400> 52
Figure 109128447-A0202-12-0112-314
<210> 53
<211> 22
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR002078 LFWR1 Chothia
<400> 53
Figure 109128447-A0202-12-0113-318
<210> 54
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000497 LCDR1 Chothia,PR000815 LCDR1 Chothia,PR000816 LCDR1 Chothia
<400> 54
Figure 109128447-A0202-12-0113-535
<210> 55
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000506 LCDR1 Chothia,PR000843 LCDR1 Chothia,PR000844 LCDR1 Chothia
<400> 55
Figure 109128447-A0202-12-0113-316
<210> 56
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000690 LCDR1 Chothia
<400> 56
Figure 109128447-A0202-12-0113-315
<210> 57
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000752 LCDR1 Chothia
<400> 57
Figure 109128447-A0202-12-0114-319
<210> 58
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR001408 LCDR1 Chothia
<400> 58
Figure 109128447-A0202-12-0114-320
<210> 59
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR002078 LCDR1 Chothia
<400> 59
Figure 109128447-A0202-12-0114-321
<210> 60
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000497 LFWR2 Chothia,PR000815 LFWR2 Chothia,PR000816 LFWR2 Chothia
<400> 60
Figure 109128447-A0202-12-0114-322
<210> 61
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000506 LFWR2 Chothia,PR000843 LFWR2 Chothia,PR000844 LFWR2 Chothia
<400> 61
Figure 109128447-A0202-12-0115-326
<210> 62
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000690 LFWR2 Chothia
<400> 62
Figure 109128447-A0202-12-0115-325
<210> 63
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000752 LFWR2 Chothia
<400> 63
Figure 109128447-A0202-12-0115-324
<210> 64
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR002078 LFWR2 Chothia
<400> 64
Figure 109128447-A0202-12-0115-323
<210> 65
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000497 LCDR2 Chothia,PR000815 LCDR2 Chothia,PR000816 LCDR2 Chothia
<400> 65
Figure 109128447-A0202-12-0116-327
<210> 66
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000506 LCDR2 Chothia,PR000843 LCDR2 Chothia,PR000844 LCDR2 Chothia
<400> 66
Figure 109128447-A0202-12-0116-328
<210> 67
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000690 LCDR2 Chothia
<400> 67
Figure 109128447-A0202-12-0116-329
<210> 68
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000752 LCDR2 Chothia
<400> 68
Figure 109128447-A0202-12-0116-330
<210> 69
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR001408 LCDR2 Chothia
<400> 69
Figure 109128447-A0202-12-0117-334
<210> 70
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR002078 LCDR2 Chothia
<400> 70
Figure 109128447-A0202-12-0117-333
<210> 71
<211> 32
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000497 LFWR3 Chothia,PR000815 LFWR3 Chothia,PR000816 LFWR3 Chothia
<400> 71
Figure 109128447-A0202-12-0117-332
<210> 72
<211> 32
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000506 LFWR3 Chothia,PR000843 LFWR3 Chothia,PR000844 LFWR3 Chothia
<400> 72
Figure 109128447-A0202-12-0117-331
<210> 73
<211> 32
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000690 LFWR3 Chothia
<400> 73
Figure 109128447-A0202-12-0118-335
<210> 74
<211> 32
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000752 LFWR3 Chothia
<400> 74
Figure 109128447-A0202-12-0118-336
<210> 75
<211> 32
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR001408 LFWR3 Chothia
<400> 75
Figure 109128447-A0202-12-0118-337
<210> 76
<211> 32
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR002078 LFWR3 Chothia
<400> 76
Figure 109128447-A0202-12-0119-341
<210> 77
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000497 LCDR3 Chothia,PR000815 LCDR3 Chothia,PR000816 LCDR3 Chothia
<400> 77
Figure 109128447-A0202-12-0119-340
<210> 78
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000506 LCDR3 Chothia,PR000843 LCDR3 Chothia,PR000844 LCDR3 Chothia
<400> 78
Figure 109128447-A0202-12-0119-339
<210> 79
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000690 LCDR3 Chothia
<400> 79
Figure 109128447-A0202-12-0119-338
<210> 80
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000752 LCDR3 Chothia
<400> 80
Figure 109128447-A0202-12-0120-342
<210> 81
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000820 LCDR3 Chothia,PR000822 LCDR3 Chothia,PR000824 LCDR3 Chothia
<400> 81
Figure 109128447-A0202-12-0120-343
<210> 82
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR001408 LCDR3 Chothia
<400> 82
Figure 109128447-A0202-12-0120-344
<210> 83
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR002078 LCDR3 Chothia
<400> 83
Figure 109128447-A0202-12-0120-345
<210> 84
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR003832 LCDR3 Chothia
<400> 84
Figure 109128447-A0202-12-0121-349
<210> 85
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR003833 LCDR3 Chothia
<400> 85
Figure 109128447-A0202-12-0121-348
<210> 86
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR003834 LCDR3 Chothia
<400> 86
Figure 109128447-A0202-12-0121-347
<210> 87
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR003835 LCDR3 Chothia
<400> 87
Figure 109128447-A0202-12-0121-346
<210> 88
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR003836 LCDR3 Chothia
<400> 88
Figure 109128447-A0202-12-0122-350
<210> 89
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000497 LFWR4 Chothia,PR000815 LFWR4 Chothia,PR000816 LFWR4 Chothia
<400> 89
Figure 109128447-A0202-12-0122-351
<210> 90
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000506 LFWR4 Chothia,PR000843 LFWR4 Chothia,PR000844 LFWR4 Chothia
<400> 90
Figure 109128447-A0202-12-0122-352
<210> 91
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000690 LFWR4 Chothia
<400> 91
Figure 109128447-A0202-12-0122-353
<210> 92
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000752 LFWR4 Chothia
<400> 92
Figure 109128447-A0202-12-0122-354
Figure 109128447-A0202-12-0123-355
<210> 93
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR001408 LFWR4 Chothia
<400> 93
Figure 109128447-A0202-12-0123-356
<210> 94
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR002078 LFWR4 Chothia
<400> 94
Figure 109128447-A0202-12-0123-357
<210> 95
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000497 VH,PR000820 VH
<400> 95
Figure 109128447-A0202-12-0123-358
Figure 109128447-A0202-12-0124-359
<210> 96
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000506 VH,PR000851 VH
<400> 96
Figure 109128447-A0202-12-0124-360
<210> 97
<211> 121
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000690 VH
<400> 97
Figure 109128447-A0202-12-0125-362
<210> 98
<211> 120
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000752 VH
<400> 98
Figure 109128447-A0202-12-0125-361
Figure 109128447-A0202-12-0126-363
<210> 99
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000815 VH
<400> 99
Figure 109128447-A0202-12-0126-364
Figure 109128447-A0202-12-0127-365
<210> 100
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000816 VH,PR000822 VH
<400> 100
Figure 109128447-A0202-12-0127-366
<210> 101
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000817 VH
<400> 101
Figure 109128447-A0202-12-0128-368
<210> 102
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000818 VH,PR000824 VH,PR003832 VH,PR003833 VH,PR003834 VH,PR003
<400> 102
Figure 109128447-A0202-12-0128-367
Figure 109128447-A0202-12-0129-369
<210> 103
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000819 VH,PR000825 VH
<400> 103
Figure 109128447-A0202-12-0129-370
Figure 109128447-A0202-12-0130-372
<210> 104
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000843 VH,PR000847 VH
<400> 104
Figure 109128447-A0202-12-0130-373
<210> 105
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000844 VH,PR000848 VH
<400> 105
Figure 109128447-A0202-12-0130-371
Figure 109128447-A0202-12-0131-374
<210> 106
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000845 VH,PR000849 VH
<400> 106
Figure 109128447-A0202-12-0131-375
Figure 109128447-A0202-12-0132-377
<210> 107
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000846 VH,PR000850 VH
<400> 107
Figure 109128447-A0202-12-0132-376
<210> 108
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR001408 VH
<400> 108
Figure 109128447-A0202-12-0133-378
<210> 109
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR002078 VH
<400> 109
Figure 109128447-A0202-12-0133-379
Figure 109128447-A0202-12-0134-381
<210> 110
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000497 VL,PR000815 VL,PR000816 VL,PR000817 VL,PR000818 VL,PR000
<400> 110
Figure 109128447-A0202-12-0134-380
Figure 109128447-A0202-12-0135-382
<210> 111
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000506 VL,PR000843 VL,PR000844 VL,PR000845 VL,PR000846 VL
<400> 111
Figure 109128447-A0202-12-0135-383
<210> 112
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000690 VL
<400> 112
Figure 109128447-A0202-12-0135-384
Figure 109128447-A0202-12-0136-386
<210> 113
<211> 106
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000752 VL
<400> 113
Figure 109128447-A0202-12-0136-385
<210> 114
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000820 VL,PR000822 VL,PR000824 VL,PR000825 VL
<400> 114
Figure 109128447-A0202-12-0137-387
<210> 115
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000847 VL,PR000848 VL,PR000849 VL,PR000850 VL,PR000851 VL
<400> 115
Figure 109128447-A0202-12-0137-388
Figure 109128447-A0202-12-0138-390
<210> 116
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR001408 VL
<400> 116
Figure 109128447-A0202-12-0138-389
<210> 117
<211> 110
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR002078 VL
<400> 117
Figure 109128447-A0202-12-0139-391
<210> 118
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR003832 VL
<400> 118
Figure 109128447-A0202-12-0139-392
Figure 109128447-A0202-12-0140-394
<210> 119
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR003833 VL
<400> 119
Figure 109128447-A0202-12-0140-393
<210> 120
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR003834 VL
<400> 120
Figure 109128447-A0202-12-0141-395
<210> 121
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR003835 VL
<400> 121
Figure 109128447-A0202-12-0141-396
Figure 109128447-A0202-12-0142-398
<210> 122
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR003836 VL
<400> 122
Figure 109128447-A0202-12-0142-397
<210> 123
<211> 452
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000497 HC,PR000820 HC
<400> 123
Figure 109128447-A0202-12-0143-399
Figure 109128447-A0202-12-0144-400
Figure 109128447-A0202-12-0145-401
<210> 124
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000506 HC,PR000851 HC
<400> 124
Figure 109128447-A0202-12-0145-402
Figure 109128447-A0202-12-0146-403
Figure 109128447-A0202-12-0147-404
<210> 125
<211> 451
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000690 HC
<400> 125
Figure 109128447-A0202-12-0147-405
Figure 109128447-A0202-12-0148-406
Figure 109128447-A0202-12-0149-407
<210> 126
<211> 450
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000752 HC
<400> 126
Figure 109128447-A0202-12-0149-408
Figure 109128447-A0202-12-0150-409
Figure 109128447-A0202-12-0151-410
<210> 127
<211> 452
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000815 HC
<400> 127
Figure 109128447-A0202-12-0151-411
Figure 109128447-A0202-12-0152-412
Figure 109128447-A0202-12-0153-413
<210> 128
<211> 452
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000816 HC,PR000822 HC
<400> 128
Figure 109128447-A0202-12-0153-414
Figure 109128447-A0202-12-0154-415
Figure 109128447-A0202-12-0155-416
<210> 129
<211> 452
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000817 HC
<400> 129
Figure 109128447-A0202-12-0156-417
Figure 109128447-A0202-12-0157-418
Figure 109128447-A0202-12-0158-419
<210> 130
<211> 452
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000818 HC,PR000824 HC,PR003832 HC,PR003833 HC,PR003834 HC,PR003
<400> 130
Figure 109128447-A0202-12-0158-420
Figure 109128447-A0202-12-0159-421
Figure 109128447-A0202-12-0160-422
<210> 131
<211> 452
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000819 HC,PR000825 HC
<400> 131
Figure 109128447-A0202-12-0160-423
Figure 109128447-A0202-12-0161-424
Figure 109128447-A0202-12-0162-425
<210> 132
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000843 HC,PR000847 HC
<400> 132
Figure 109128447-A0202-12-0162-426
Figure 109128447-A0202-12-0163-427
Figure 109128447-A0202-12-0164-428
<210> 133
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000844 HC,PR000848 HC
<400> 133
Figure 109128447-A0202-12-0164-429
Figure 109128447-A0202-12-0165-430
Figure 109128447-A0202-12-0166-431
<210> 134
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000845 HC,PR000849 HC
<400> 134
Figure 109128447-A0202-12-0166-432
Figure 109128447-A0202-12-0167-433
Figure 109128447-A0202-12-0168-434
<210> 135
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000846 HC,PR000850 HC
<400> 135
Figure 109128447-A0202-12-0169-435
Figure 109128447-A0202-12-0170-436
Figure 109128447-A0202-12-0171-437
<210> 136
<211> 453
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR001408 HC
<400> 136
Figure 109128447-A0202-12-0171-438
Figure 109128447-A0202-12-0172-439
Figure 109128447-A0202-12-0173-440
<210> 137
<211> 447
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR002078 HC
<400> 137
Figure 109128447-A0202-12-0173-441
Figure 109128447-A0202-12-0174-442
Figure 109128447-A0202-12-0175-443
<210> 138
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000497 LC,PR000815 LC,PR000816 LC,PR000817 LC,PR000818 LC,PR000
<400> 138
Figure 109128447-A0202-12-0175-444
Figure 109128447-A0202-12-0176-445
<210> 139
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000506 LC,PR000843 LC,PR000844 LC,PR000845 LC,PR000846 LC
<400> 139
Figure 109128447-A0202-12-0176-446
Figure 109128447-A0202-12-0177-447
<210> 140
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000690 LC
<400> 140
Figure 109128447-A0202-12-0177-448
Figure 109128447-A0202-12-0178-449
<210> 141
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000752 LC
<400> 141
Figure 109128447-A0202-12-0179-450
<210> 142
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000820 LC,PR000822 LC,PR000824 LC,PR000825 LC
<400> 142
Figure 109128447-A0202-12-0180-451
Figure 109128447-A0202-12-0181-452
<210> 143
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000847 LC,PR000848 LC,PR000849 LC,PR000850 LC,PR000851 LC
<400> 143
Figure 109128447-A0202-12-0181-453
Figure 109128447-A0202-12-0182-454
<210> 144
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR001408 LC
<400> 144
Figure 109128447-A0202-12-0182-455
Figure 109128447-A0202-12-0183-456
<210> 145
<211> 216
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR002078 LC
<400> 145
Figure 109128447-A0202-12-0183-457
Figure 109128447-A0202-12-0184-458
<210> 146
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR003832 LC
<400> 146
Figure 109128447-A0202-12-0184-459
Figure 109128447-A0202-12-0185-460
<210> 147
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR003833 LC
<400> 147
Figure 109128447-A0202-12-0185-461
Figure 109128447-A0202-12-0186-462
<210> 148
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR003834 LC
<400> 148
Figure 109128447-A0202-12-0186-463
Figure 109128447-A0202-12-0187-464
<210> 149
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR003835 LC
<400> 149
Figure 109128447-A0202-12-0188-465
Figure 109128447-A0202-12-0189-466
<210> 150
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR003836 LC
<400> 150
Figure 109128447-A0202-12-0189-467
Figure 109128447-A0202-12-0190-469
<210> 151
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000506；PR000843；PR000844；PR000845；PR000846；PR000847；PR000848；PR000849；PR000850；PR000851
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
<223> Xaa=Glu或Lys
<220>
<221> misc_feature
<222> (4)..(4)
<223> Xaa=Leu或Met
<400> 151
Figure 109128447-A0202-12-0190-468
Figure 109128447-A0202-12-0191-470
<210> 152
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000506；PR000851；PR000843；PR000847；PR000844；PR000848；PR000845；PR000849；PR000846；PR000850
<220>
<221> misc_feature
<222> (54)..(54)
<223> Xaa=Asp或Glu
<220>
<221> misc_feature
<222> (55)..(55)
<223> Xaa=Ala或Gly
<220>
<221> misc_feature
<222> (99)..(99)
<223> Xaa=Asp或Glu
<220>
<221> misc_feature
<222> (100)..(100)
<223> Xaa=Ala或Gly
<400> 152
Figure 109128447-A0202-12-0191-471
Figure 109128447-A0202-12-0192-472
<210> 153
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000506；PR000851；PR000843；PR000844；PR000847；PR000848；PR000845；PR000846；PR000849；PR000850
<220>
<221> misc_feature
<222> (3)..(3)
<223> Xaa=Asp或Glu
<220>
<221> misc_feature
<222> (4)..(4)
<223> Xaa=Ala或Gly
<400> 153
Figure 109128447-A0202-12-0192-473
<210> 154
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000506；PR000851；PR000843；PR000845；PR000847；PR000849；PR000844；PR000846；PR000848；PR000850
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
<223> Xaa=Asp或Glu
<220>
<221> misc_feature
<222> (2)..(2)
<223> Xaa=Ala或Gly
<400> 154
Figure 109128447-A0202-12-0192-474
<210> 155
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000497；PR000815；PR000816；PR000817；PR000818；PR000819；PR000820；PR000822；PR000824；PR000825；PR003832；PR003833；PR003834；PR003835；PR003836
<220>
<221> misc_feature
<222> (93)..(93)
<223> Xaa=Met,Asn,Gln,Ser或Thr
<220>
<221> misc_feature
<222> (95)..(95)
<223> Xaa=Glu,Lys或Ser
<400> 155
Figure 109128447-A0202-12-0193-475
<210> 156
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000819；PR000825；PR000818；PR000824；PR003832；PR003833；PR003834；PR003835；PR003836；PR000817；PR000816；PR000822；PR000815； PR000497；PR000820
<220>
<221> misc_feature
<222> (4)..(4)
<223> Xaa=Leu或Val
<220>
<221> misc_feature
<222> (54)..(54)
<223> Xaa=Asp或Glu
<220>
<221> misc_feature
<222> (55)..(55)
<223> Xaa=Ala或Gly
<220>
<221> misc_feature
<222> (82)..(82)
<223> Xaa=Lys或Gln
<220>
<221> misc_feature
<222> (88)..(88)
<223> Xaa=Ala或Gly
<220>
<221> misc_feature
<222> (89)..(89)
<223> Xaa=Asp或Glu
<400> 156
Figure 109128447-A0202-12-0194-476
Figure 109128447-A0202-12-0195-477
<210> 157
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000497；PR000815；PR000816；PR000817；PR000818；PR000819；PR000820；PR000822；PR000824；PR000825；PR003832；PR003833；PR003834；PR003835；PR003836
<220>
<221> misc_feature
<222> (5)..(5)
<223> Xaa=Met,Asn,Gln,Ser或Thr
<220>
<221> misc_feature
<222> (7)..(7)
<223> Xaa=Glu,Lys或Ser
<400> 157
Figure 109128447-A0202-12-0195-478
<210> 158
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000497；PR000819；PR000820；PR000825；PR000815；PR000817；PR000816；PR000818；PR000822；PR000824；PR003832；PR003833；PR003834；PR003835；PR003836
<220>
<221> misc_feature
<222> (3)..(3)
<223> Xaa=Asp或Glu
<220>
<221> misc_feature
<222> (4)..(4)
<223> Xaa=Ala或Gly
<400> 158
Figure 109128447-A0202-12-0195-479
<210> 159
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000847；PR000848；PR000849；PR000850；PR000851；PR000506；PR000843；PR000844；PR000845；PR000846
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
<223> Xaa=Glu或Lys
<220>
<221> misc_feature
<222> (4)..(4)
<223> Xaa=Leu或Met
<400> 159
Figure 109128447-A0202-12-0196-480
Figure 109128447-A0202-12-0197-481
<210> 160
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000497；PR000815；PR000816；PR000817；PR000818；PR000819；PR000820；PR000822；PR000824；PR000825；PR003832；PR003833；PR003834；PR003835；PR003836
<220>
<221> misc_feature
<222> (93)..(93)
<223> Xaa=Met,Asn,Gln,Ser或Thr
<220>
<221> misc_feature
<222> (95)..(95)
<223> Xaa=Glu,Lys或Ser
<400> 160
Figure 109128447-A0202-12-0197-482
Figure 109128447-A0202-12-0198-483
<210> 161
<211> 452
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000497；PR000820；PR000815；PR000816；PR000822；PR000817；PR000818；PR000824；PR003832；PR003833；PR003834；PR003835；PR003836；PR000819；PR000825
<220>
<221> misc_feature
<222> (4)..(4)
<223> Xaa=Leu或Val
<220>
<221> misc_feature
<222> (54)..(54)
<223> Xaa=Asp或Glu
<220>
<221> misc_feature
<222> (55)..(55)
<223> Xaa=Ala或Gly
<220>
<221> misc_feature
<222> (82)..(82)
<223> Xaa=Lys或Gln
<220>
<221> misc_feature
<222> (88)..(88)
<223> Xaa=Ala或Gly
<220>
<221> misc_feature
<222> (89)..(89)
<223> Xaa=Asp或Glu
<400> 161
Figure 109128447-A0202-12-0199-484
Figure 109128447-A0202-12-0200-485
Figure 109128447-A0202-12-0201-486
<210> 162
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000497；PR000825；PR000815；PR000819；PR000816；PR000820；PR000817；PR000822；PR000818；PR000824
<220>
<221> misc_feature
<222> (54)..(54)
<223> Xaa=Asp或Glu
<220>
<221> misc_feature
<222> (55)..(55)
<223> Xaa=Ala或Gly
<220>
<221> misc_feature
<222> (99)..(99)
<223> Xaa=Asp或Glu
<220>
<221> misc_feature
<222> (100)..(100)
<223> Xaa=Ala或Gly
<400> 162
Figure 109128447-A0202-12-0201-487
Figure 109128447-A0202-12-0202-488
Figure 109128447-A0202-12-0203-489
<210> 163
<211> 23
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000847；PR000848；PR000849；PR000850；PR000851；PR000506；PR000843；PR000844；PR000845；PR000846
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
<223> Xaa=Glu或Lys
<220>
<221> misc_feature
<222> (4)..(4)
<223> Xaa=Leu或Met
<400> 163
Figure 109128447-A0202-12-0204-491
<210> 164
<211> 25
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000497；PR000820；PR000815；PR000816；PR000822；PR000817；PR000818；PR000824；PR003832；PR003833；PR003834；PR003835；PR003836；PR000819；PR000825
<220>
<221> misc_feature
<222> (4)..(4)
<223> Xaa=Leu或Val
<400> 164
Figure 109128447-A0202-12-0204-490
<210> 165
<211> 41
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> PR000497；PR000820；PR000815；PR000816；PR000822；PR000817；PR000818；PR000824；PR003832；PR003833；PR003834；PR003835；PR003836；PR000819；PR000825
<220>
<221> misc_feature
<222> (25)..(25)
<223> Xaa=Lys或Gln
<220>
<221> misc_feature
<222> (31)..(31)
<223> Xaa=Ala或Gly
<220>
<221> misc_feature
<222> (32)..(32)
<223> Xaa=Asp或Glu
<400> 165
Figure 109128447-A0202-12-0205-492
<210> 166
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 輕鏈恆定區
<400> 166
Figure 109128447-A0202-12-0205-493
Figure 109128447-A0202-12-0206-494
<210> 167
<211> 330
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 重鏈恆定區
<400> 167
Figure 109128447-A0202-12-0206-495
Figure 109128447-A0202-12-0207-496
<210> 168
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> VH
<220>
<221> misc_feature
<222> (4)..(4)
<223> Xaa=Leu或Val
<220>
<221> misc_feature
<222> (12)..(12)
<223> Xaa=Ala或Val
<220>
<221> misc_feature
<222> (19)..(19)
<223> Xaa=Arg或Ser
<220>
<221> misc_feature
<222> (30)..(30)
<223> Xaa=Ser或Tyr
<220>
<221> misc_feature
<222> (31)..(31)
<223> Xaa=Asp或Ser
<220>
<221> misc_feature
<222> (33)..(33)
<223> Xaa=Asp或Gly
<220>
<221> misc_feature
<222> (40)..(40)
<223> Xaa=Ala或Thr
<220>
<221> misc_feature
<222> (50)..(50)
<223> Xaa=Leu或Ser
<220>
<221> misc_feature
<222> (51)..(51)
<223> Xaa=Ile或Thr
<220>
<221> misc_feature
<222> (54)..(54)
<223> Xaa=Asp或Glu
<220>
<221> misc_feature
<222> (55)..(55)
<223> Xaa=Ala或Gly
<220>
<221> misc_feature
<222> (57)..(57)
<223> Xaa=Phe,Lys或Asn
<220>
<221> misc_feature
<222> (58)..(58)
<223> Xaa=Glu,Lys或Asn
<220>
<221> misc_feature
<222> (69)..(69)
<223> Xaa=Ser或Thr
<220>
<221> misc_feature
<222> (82)..(82)
<223> Xaa=Lys或Gln
<220>
<221> misc_feature
<222> (88)..(88)
<223> Xaa=Ala或Gly
<220>
<221> misc_feature
<222> (89)..(89)
<223> Xaa=Asp或Glu
<220>
<221> misc_feature
<222> (97)..(97)
<223> Xaa=Ala或Val
<220>
<221> misc_feature
<222> (98)..(98)
<223> Xaa=Lys,Arg或Thr
<220>
<221> misc_feature
<222> (99)..(99)
<223> Xaa=Asp,Glu或Gly
<220>
<221> misc_feature
<222> (100)..(100)
<223> Xaa=Ala,Gly或Arg
<220>
<221> misc_feature
<222> (101)..(101)
<223> Xaa=Asp,Gln或Ser
<220>
<221> misc_feature
<222> (102)..(102)
<223> Xaa=Leu,Ser或Trp
<220>
<221> misc_feature
<222> (103)..(103)
<223> Xaa=Gly,Leu或Ser
<220>
<221> misc_feature
<222> (104)..(104)
<223> Xaa=Phe,Ser或Thr
<220>
<221> misc_feature
<222> (105)..(105)
<223> Xaa=Gly,Arg或Tyr
<220>
<221> misc_feature
<222> (106)..(106)
<223> Xaa=Leu,Pro或Tyr
<220>
<221> misc_feature
<222> (107)..(107)
<223> Xaa=Asp,Asn或Tyr
<220>
<221> misc_feature
<222> (108)..(108)
<223> Xaa=Ala或Tyr
<220>
<221> misc_feature
<222> (109)..(109)
<223> Xaa=Phe,Gly或Trp
<220>
<221> misc_feature
<222> (110)..(110)
<223> Xaa=Asp,Gly或Met
<220>
<221> misc_feature
<222> (111)..(111)
<223> Xaa=Asp,Ile或Gln
<220>
<221> misc_feature
<222> (112)..(112)
<223> Xaa=Gly,Val或Trp
<220>
<221> misc_feature
<222> (113)..(113)
<223> Xaa=Gly,Thr或Trp
<220>
<221> misc_feature
<222> (114)..(114)
<223> Xaa=Gly,Leu或Gln
<220>
<221> misc_feature
<222> (115)..(115)
<223> Xaa=Gly,Gln或Val
<220>
<221> misc_feature
<222> (116)..(116)
<223> Xaa=Gly或Thr
<220>
<221> misc_feature
<222> (117)..(117)
<223> Xaa=Met,Thr或Val
<220>
<221> misc_feature
<222> (118)..(118)
<223> Xaa=Ser,Thr或Val
<220>
<221> misc_feature
<222> (119)..(119)
<223> Xaa=Ser,Thr或Val
<220>
<221> misc_feature
<222> (120)..(120)
<223> Xaa=Thr,Val或缺失
<220>
<221> misc_feature
<222> (121)..(121)
<223> Xaa=Ser,Val或缺失
<220>
<221> misc_feature
<222> (122)..(122)
<223> Xaa=Ser或缺失
<220>
<221> misc_feature
<222> (123)..(123)
<223> Xaa=Ser或缺失
<400> 168
Figure 109128447-A0202-12-0211-497
Figure 109128447-A0202-12-0212-498
<210> 169
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> VL
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
<223> Xaa=Asp,Glu或Lys
<220>
<221> misc_feature
<222> (3)..(3)
<223> Xaa=Gln或Val
<220>
<221> misc_feature
<222> (4)..(4)
<223> Xaa=Leu或Met
<220>
<221> misc_feature
<222> (9)..(9)
<223> Xaa=Ala或Ser
<220>
<221> misc_feature
<222> (10)..(10)
<223> Xaa=Phe或Thr
<220>
<221> misc_feature
<222> (13)..(13)
<223> Xaa=Ala,Leu或Thr
<220>
<221> misc_feature
<222> (15)..(15)
<223> Xaa=Pro或Val
<220>
<221> misc_feature
<222> (17)..(17)
<223> Xaa=Asp或Glu
<220>
<221> misc_feature
<222> (19)..(19)
<223> Xaa=Ala或Val
<220>
<221> misc_feature
<222> (21)..(21)
<223> Xaa=Ile或Leu
<220>
<221> misc_feature
<222> (22)..(22)
<223> Xaa=Ser或Thr
<220>
<221> misc_feature
<222> (28)..(28)
<223> Xaa=Gly或Ser
<220>
<221> misc_feature
<222> (29)..(29)
<223> Xaa=Ile或Val
<220>
<221> misc_feature
<222> (31)..(31)
<223> Xaa=Arg或Ser
<220>
<221> misc_feature
<222> (32)..(32)
<223> Xaa=Trp或Tyr
<220>
<221> misc_feature
<222> (42)..(42)
<223> Xaa=Lys或Gln
<220>
<221> misc_feature
<222> (46)..(45)
<223> Xaa=Lys或Arg
<220>
<221> misc_feature
<222> (50)..(50)
<223> Xaa=Ala,Asp或Lys
<220>
<221> misc_feature
<222> (53)..(53)
<223> Xaa=Asn,Ser或Thr
<220>
<221> misc_feature
<222> (54)..(54)
<223> Xaa=Leu或Arg
<220>
<221> misc_feature
<222> (55)..(55)
<223> Xaa=Ala,Glu或Gln
<220>
<221> misc_feature
<222> (56)..56)
<223> Xaa=Ser或Thr
<220>
<221> misc_feature
<222> (58)..(58)
<223> Xaa=Ile或Val
<220>
<221> misc_feature
<222> (60)..(60)
<223> Xaa=Ala或Ser
<220>
<221> misc_feature
<222> (70)..(70)
<223> Xaa=Asp或Glu
<220>
<221> misc_feature
<222> (79)..(79)
<223> Xaa=Glu或Gln
<220>
<221> misc_feature
<222> (81)..(81)
<223> Xaa=Asp或Glu
<220>
<221> misc_feature
<222> (85)..(85)
<223> Xaa=Thr或Val
<220>
<221> misc_feature
<222> (91)..(91)
<223> Xaa=Leu,Arg或Tyr
<220>
<221> misc_feature
<222> (92)..(92)
<223> Xaa=Asp,Asn或Ser
<220>
<221> misc_feature
<222> (93)..(93)
<223> Xaa=Met,Asn,Gln,Ser或Thr
<220>
<221> misc_feature
<222> (94)..(94)
<223> Xaa=Trp或Tyr
<220>
<221> misc_feature
<222> (95)..(95)
<223> Xaa=Ile,Lys,Pro或Ser
<220>
<221> misc_feature
<222> (96)..(96)
<223> Xaa=Phe,Asn或Tyr
<220>
<221> misc_feature
<222> (100)..(100)
<223> Xaa=Pro或Gln
<220>
<221> misc_feature
<222> (103)..(103)
<223> Xaa=Glu或Lys
<220>
<221> misc_feature
<222> (104)..(104)
<223> Xaa=Leu或Val
<220>
<221> misc_feature
<222> (105)..(105)
<223> Xaa=Asp或Glu
<400> 169
Figure 109128447-A0202-12-0215-499
Figure 109128447-A0202-12-0216-500

Claims (17)

  1. 一種結合CD73的分離的抗原結合蛋白，其包含來自於SEQ ID NO：168所示抗體重鏈可變區VH的HCDR1、HCDR2和/或HCDR3區中的任一個抗體重鏈可變區VH的HCDR1、HCDR2和HCDR3區，以及抗體輕鏈可變區VL的LCDR1、LCDR2和LCDR3區；；其中，該LCDR1的胺基酸序列如SEQ ID NO：55所示、該LCDR2的胺基酸序列如SEQ ID NO：66所示、該LCDR3的胺基酸序列如SEQ ID NO：78所示、該HCDR1的胺基酸序列如SEQ ID NO：7所示、該HCDR2的胺基酸序列如SEQ ID NO：18所示，且該HCDR3的胺基酸序列如SEQ ID NO：35所示；或該LCDR1的胺基酸序列如SEQ ID NO：55所示、該LCDR2的胺基酸序列如SEQ ID NO：66所示、該LCDR3的胺基酸序列如SEQ ID NO：78所示、該HCDR1的胺基酸序列如SEQ ID NO：7所示、該HCDR2的胺基酸序列如SEQ ID NO：23所示，且該HCDR3的胺基酸序列如SEQ ID NO：38所示；或該LCDR1的胺基酸序列如SEQ ID NO：55所示、該LCDR2的胺基酸序列如SEQ ID NO：66所示、該LCDR3的胺基酸序列如SEQ ID NO：78所示、該HCDR1的胺基酸序列如SEQ ID NO：7所示、該HCDR2的胺基酸序列如SEQ ID NO：23所示，且該HCDR3的胺基酸序列如SEQ ID NO：39所示；或該LCDR1的胺基酸序列如SEQ ID NO：55所示、該LCDR2的胺基酸序列如SEQ ID NO：66所示、該LCDR3的胺基酸序列如SEQ ID NO：78所示、該HCDR1的胺基酸序列如SEQ ID NO：7所示、該HCDR2的胺基酸序列如SEQ ID NO：24所示，且該HCDR3的胺基酸序列如SEQ ID NO：38所示；或該LCDR1的胺基酸序列如SEQ ID NO：55所示、該LCDR2的胺基酸序列如SEQ ID NO：66所示、該LCDR3的胺基酸序列如SEQ ID NO：78所示、該HCDR1的 胺基酸序列如SEQ ID NO：7所示、該HCDR2的胺基酸序列如SEQ ID NO：24所示，且該HCDR3的胺基酸序列如SEQ ID NO：39所示。
  2. 如請求項1所述的結合CD73的分離的抗原結合蛋白，其包括抗體或其抗原結合片段。
  3. 如請求項1所述的結合CD73的分離的抗原結合蛋白，該抗原結合片段包括Fab、Fab'、F(ab)2、Fv片段、F(ab')2、scFv和/或di-scFv。
  4. 如請求項1所述的結合CD73的分離的抗原結合蛋白，其中選擇該抗體來自嵌合抗體、人源化抗體和完全人源抗體。
  5. 如請求項1至4中任一項所述的結合CD73的分離的抗原結合蛋白，其包含重鏈可變區VH，其中該VH的胺基酸序列如SEQ ID 96、104、105、106和107中任一個所示。
  6. 如請求項1至4中任一項所述的結合CD73的分離的抗原結合蛋白，其包含抗體重鏈HC，該HC的胺基酸序列如SEQ ID NO：124、132、133、134、和135中任一個所示。
  7. 如請求項1至4中任一項所述的結合CD73的分離的抗原結合蛋白，其包含輕鏈可變區VL，其中該VL的胺基酸序列如SEQ ID NO：111和115中任一個所示。
  8. 如請求項1至4中任一項所述的結合CD73的分離的抗原結合蛋白，其包含抗體輕鏈LC，該LC包含SEQ ID NO：139和143中任一個所示的胺基酸序列。
  9. 一種分離的核酸分子，其編碼如請求項1至8中任一項所述的結合CD73的分離的抗原結合蛋白。
  10. 一種載體，其包含如請求項9所述的分離的核酸分子。
  11. 一種細胞，其包含如請求項9所述的分離的核酸分子或如請求項10所述的載體。
  12. 一種製備如請求項1至8中任一項所述的結合CD73的分離的抗原結合蛋白的方法，該方法包括在使得如請求項1至中任一項所述的結合CD73的分離的抗原結合蛋白表現的條件下，培養如請求項11所述的細胞。
  13. 一種醫藥組成物，其包含如請求項1至8中任一項所述的結合CD73的分離的抗原結合蛋白、如請求項9所述的分離的核酸分子、如請求項10所述的載體、和/或如請求項11所述的細胞，以及任選地藥學上可接受的載體。
  14. 一種如請求項1至8中任一項所述的結合CD73的分離的抗原結合蛋白、如請求項9所述的核酸分子、如請求項10所述的載體、如請求項11所述的細胞和/或如請求項13所述的醫藥組成物在製備藥物中的用途，該藥物用於緩解和/或治療腫瘤。
  15. 如請求項14所述的用途，其中該腫瘤包括固態腫瘤和/或血液腫瘤。
  16. 一種非診斷治療目的抑制CD73的5’外切核苷酸酶活性的方法，該方法包括施用如請求項1至8中任一項所述的結合CD73的分離的抗原結合蛋白。
  17. 一種非診斷治療目的調節CD73內化的方法，該方法包括施用如請求項1至8中任一項所述的非診斷治療目的分離的抗原結合蛋白。
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Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11312783B2 (en) 2017-06-22 2022-04-26 Novartis Ag Antibody molecules to CD73 and uses thereof
PE20221409A1 (es) 2020-01-03 2022-09-20 Incyte Corp Anticuerpos anti-cd73 y usos de estos
CA3166536A1 (en) 2020-01-03 2021-07-08 Incyte Corporation Cd73 inhibitor and a2a/a2b adenosine receptor inhibitor combination therapy
WO2022242758A1 (zh) * 2021-05-21 2022-11-24 百奥泰生物制药股份有限公司 抗cd73抗体及其应用
CN117337306A (zh) 2021-05-28 2024-01-02 和铂医药(上海)有限责任公司 靶向pd-l1和cd73的特异性结合蛋白
KR20250004779A (ko) 2022-04-13 2025-01-08 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 Trop-2 발현 암을 치료하기 위한 병용 요법
CN116903744B (zh) * 2022-08-12 2024-03-08 南京蓬勃生物科技有限公司 抗cd73抗体或其抗原片段及其应用
EP4572772A1 (en) 2022-08-17 2025-06-25 Capstan Therapeutics, Inc. Conditioning for in vivo immune cell engineering
US12311033B2 (en) 2023-05-31 2025-05-27 Capstan Therapeutics, Inc. Lipid nanoparticle formulations and compositions
CN119303103A (zh) * 2023-07-11 2025-01-14 清华大学 一种抗体偶联物及其应用
WO2025076127A1 (en) 2023-10-05 2025-04-10 Capstan Therapeutics, Inc. Constrained ionizable cationic lipids and lipid nanoparticles
WO2025076113A1 (en) 2023-10-05 2025-04-10 Capstan Therapeutics, Inc. Ionizable cationic lipids with conserved spacing and lipid nanoparticles
WO2025137640A1 (en) 2023-12-22 2025-06-26 Gilead Sciences, Inc. Azaspiro wrn inhibitors
WO2025179294A2 (en) 2024-02-22 2025-08-28 Capstan Therapeutics, Inc. Immune engineering amplification
WO2025217454A2 (en) 2024-04-11 2025-10-16 Capstan Therapeutics, Inc. Ionizable cationic lipids and lipid nanoparticles
WO2025217452A1 (en) 2024-04-11 2025-10-16 Capstan Therapeutics, Inc. Constrained ionizable cationic lipids and lipid nanoparticles

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TW201905001A (zh) * 2017-06-22 2019-02-01 瑞士商諾華公司 針對cd73的抗體分子及其用途

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2016131950A1 (en) * 2015-02-20 2016-08-25 Innate Pharma Cd73 blockade
DK3204417T3 (da) * 2014-10-10 2020-10-12 Innate Pharma Cd73-blokering
LT3218406T (lt) * 2014-11-10 2021-06-25 Medimmune Limited Surišančios molekulės, specifiškos cd73 ir jų panaudojimas
WO2016075176A1 (en) * 2014-11-11 2016-05-19 Medimmune Limited Therapeutic combinations comprising anti-cd73 antibodies and a2a receptor inhibitor and uses thereof
DK3221363T3 (da) * 2014-11-21 2020-08-10 Bristol Myers Squibb Co Antistoffer mod cd73 og anvendelser deraf
US11130817B2 (en) * 2015-10-12 2021-09-28 Innate Pharma CD73 blocking agents
EP3387442A4 (en) * 2015-12-09 2019-05-08 Corvus Pharmaceuticals, Inc. HUMANIZED ANTI-CD73 ANTIBODIES
EP3481869A4 (en) * 2016-07-11 2020-02-26 Corvus Pharmaceuticals, Inc. ANTI-CD73 ANTIBODIES
CN110072891A (zh) * 2016-12-13 2019-07-30 安斯泰来制药株式会社 抗人cd73抗体
SI3383916T1 (sl) * 2017-01-24 2022-06-30 I-Mab Biopharma Us Limited Protitelesa proti-CD73 in njihove uporabe
US20210107989A1 (en) * 2017-04-04 2021-04-15 Corvus Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating cd73hi tumors
EP3630830A1 (en) * 2017-05-23 2020-04-08 Helmholtz Zentrum München - Deutsches Forschungszentrum für Gesundheit und Umwelt (GmbH) Novel cd73 antibody, preparation and uses thereof
SG11202002192QA (en) * 2017-10-06 2020-04-29 Innate Pharma Restoration of t cell activity via the cd39/cd73 axis
CN110003332B (zh) * 2018-01-05 2021-05-11 上海原能细胞医学技术有限公司 Cd137抗体及其应用

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TW201905001A (zh) * 2017-06-22 2019-02-01 瑞士商諾華公司 針對cd73的抗體分子及其用途

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
期刊 Mikkel G Terp et al., Anti-human CD73 monoclonal antibody inhibits metastasis formation in human breast cancer by inducing clustering and internalization of CD73 expressed on the surface of cancer cells. The Journal of Immunology. 191(8): doi: 10.4049/jimmunol.1301274. 2013 Oct 15; Epub 2013 Sep 16. 4165-4173.
期刊 Steven Rust et al., Combining phenotypic and proteomic approaches to identify membrane targets in a 'triple negative' breast cancer cell type. Molecular Cancer. 12:11. doi: 10.1186/1476-4598-12-11. 2013 Feb 13; p1-11;期刊 Mikkel G Terp et al., Anti-human CD73 monoclonal antibody inhibits metastasis formation in human breast cancer by inducing clustering and internalization of CD73 expressed on the surface of cancer cells. The Journal of Immunology. 191(8): doi: 10.4049/jimmunol.1301274. 2013 Oct 15; Epub 2013 Sep 16. 4165-4173. *

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