TWI779941B - 沙巴蛇草之萃取方法及其萃取物用於治療骨質疏鬆、神經退化性疾病、骨骼肌萎縮及促進傷口癒合之用途 - Google Patents
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Abstract
本發明係提供一種沙巴蛇草之萃取方法及其萃取物用於治療骨質疏鬆、神經退化性疾病、骨骼肌萎縮及促進傷口癒合之用途。沙巴蛇草透過乙醇水溶液進行萃取濃縮，粗萃取物以乙酸乙酯及水進行液液層析萃取，得到第一水層及乙酸乙酯層；進一步將取得之第一水層再以正丁醇進行液液層析分層萃取濃縮，得到正丁醇層萃取物(或稱第一萃取物)以及第二水層(或稱第二萃取物)；另將乙酸乙酯層以乙醇水溶液及正己烷進行液液分層萃取濃縮，得到乙醇水溶液層萃取物(或稱第三萃取物)及正己烷層萃取物(或稱第四萃取物)。
Description
本發明係關於一種沙巴蛇草之萃取物及其藥理活性，具體而言，本發明係關於一種沙巴蛇草之萃取物及其用於治療骨質疏鬆、神經退化性疾病、骨骼肌萎縮及傷口癒合之用途。
沙巴蛇草(Clinacanthus nutans)是東南亞傳統草藥，民間用以治療多種疾病並已有相當研究證實其生物活性。
骨質疏鬆(Osteoporosis)是指由蝕骨細胞主導之骨吸收作用大於造骨細胞主導之骨生成作用的一種失衡現象，最後導致骨微結構的破壞及骨密度降低。台灣已邁入高齡化社會。骨質疏鬆是高齡人口常有的疾病，因骨質疏鬆造成骨折後更常伴隨其他疾病的產生。因此，有效預防及改善老年人骨質疏鬆將可有助於老年人的健康照護，更可降低健保醫療及長期照護的支出。
神經退化性疾病(neurodegenerative disease)係指神經細胞因為遺傳、內分泌或年齡等原因使神經細胞發生退化，使患者的行為能力或認知、智力衰減的疾病，例如老年失智症(又稱為阿茲海默症；Alzheimer’s disease)和帕金森氏症；Parkinson’s disease)為常見的神經退化性疾病之一。阿茲海默症和帕金森氏症的罹病人口最多，帶給家庭與社會上的壓力也最大，若能預防或治療阿茲海默症和帕金森氏症，則有助於減輕對老年人照護的負擔。
在人類平均壽命不斷延長的現在，被稱為現代文明病的癌症患者人數也不斷增加，依照癌症類型不同，可以採用手術或是化學療法來進行治療，而化學療法通常在治療過程中引起不適的副作用。其中，骨骼肌萎縮是關鍵問題之一，因為它會使患者變得虛弱，最終導致生活質量下降，並增加患者的死亡率和發病率。若有辦法減緩或治療化學療法後造成的骨骼肌萎縮，則有望提升患者術後的生活品質，並且降低復發的機率。
此外，在各種手術後均會在患者身體留下傷口，若能促進傷口癒合，亦可以降低感染併發症等的發生機率，並且可以降低術後護理的負擔。
綜上所述，為了降低台灣醫護的負擔以及照護所需的成本，需要能夠治療骨質疏鬆、神經退化性疾病、骨骼肌萎縮以及促進傷口癒合的產品。
鑒於上述目的，本發明係提供一種沙巴蛇草萃取物之製備方法，包含：以乙醇水溶液對沙巴蛇草進行萃取，取萃取液進行濃縮得到粗萃取物；將該粗萃取物加入乙酸乙酯及水進行液液分配萃取，得到一第一水層及一乙酸乙酯層；進一步將該第一水層，加入正丁醇進行液液分配萃取，兩萃取分離層
濃縮後，得到一正丁醇層萃取物(或稱第一萃取物)及一第二水層萃取物(或稱第二萃取物)；乙酸乙酯層萃取液進行濃縮後，加入乙醇水溶液及正己烷進行液液分配萃取，兩萃取分離層進一步濃縮後，得到一乙醇水溶液層萃取物(或稱第三萃取物)及一正己烷層萃取物(或稱第四萃取物)。
本發明進一步提供分別包含依前述製備方法中獲得沙巴蛇草的第一萃取物、第二萃取物、第三萃取物、第四萃取物，其用於製備治療骨質疏鬆、神經退化性疾病、骨骼肌萎縮及促進傷口癒合之藥物的用途。
藉由上述方式所製得的沙巴蛇草萃取物可以用於製備治療骨質疏鬆、神經退化性疾病、骨骼肌萎縮及促進傷口癒合之藥物，藉此可以降低台灣醫護的負擔以及照護所需的成本。
以下包含附圖說明以提供對本發明的進一步理解，並且其被併入並構成本說明書的一部分，附圖示出了本發明的例示性實施例，並且與說明書一起用於解釋本發明構思。
圖1係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的製備流程。
圖2係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的不同濃度的第三萃取物針對MC3T3-E1細胞株的細胞存活率及ALP活性試驗的結果。
圖3係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的不同濃度的第四萃取物針對MC3T3-E1細胞株的細胞存活率及ALP活性試驗的結果。
圖4係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的不同濃度的第三萃取物針對RAW 264.7細胞株的細胞存活率及TRAP活性試驗的結果。
圖5係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的不同濃度的第四萃取物針對RAW 264.7細胞株的細胞存活率及TRAP活性試驗的結果。
圖6係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的第三、第四萃取物針對RAW 264.7細胞株進行TRAP(+)多核蝕骨細胞的染色照片。
圖7係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的第一至第四萃取物針對抗神經發炎活性的測試結果。
圖8係為APPsw/PSEN1dE9(APP/PS1)基因轉殖鼠驗證沙巴蛇草萃取物第二萃取物的抗阿茲海默氏症之實驗流程。
圖9係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的第二萃取物的抗阿茲海默症試驗結果。
圖10係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的第二萃取物的衰老實驗的實驗流程。
圖11係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的第二萃取物的衰老實驗的小鼠挖掘能力實驗結果。
圖12係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的第二萃取物的衰老實驗中小鼠海馬迴中的齒迴內側的區域的DCX+量化圖。
圖13係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的第二萃取物的衰老實驗中小鼠海馬迴中的齒迴內側的區域的BrdU+量化圖。
圖14係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的第四萃取物進行骨骼肌細胞毒性試驗的流程圖。
圖15係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的第四萃取物進行針對骨骼肌萎縮的動物試驗的流程圖。
圖16係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的第四萃取物針對骨骼肌萎縮的動物實驗的結果。
圖17係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的第三萃取物的離體內皮細胞移動實驗的結果。
圖18係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的第三萃取物的動物創傷實驗的結果。
在以下描述中，出於解釋的目的，闡述了許多具體細節以便提供對本發明的各種例示性實施例或實現的透徹理解。然而，顯而易見的是，可以在沒有這些具體細節的情況下或者利用一個或多個等效配置來實踐各種例示性實施例。此外，各種例示性實施例可以是不同的，但不必是排他的。例如，在不脫離本發明構思的情況下，可以在另一例示性實施例中使用或實現例示性實施例的特定形狀、配置和特性。
除非另外定義，否則本文使用的所有術語(包含技術和科學術語)具有與本發明所屬領域具有通常知識者通常理解的含義相同的含義。例如在常用詞典中定義的術語，應被解釋為具有與相關領域中它們的含義一致的含義，並且不應以理想化或過於正式的意義來解釋，除非在此明確定義。
本文中所述的數值範圍可以包含在該範圍內的具有相同數值精確度的所有子範圍。例如，範圍「1.0至10.0」可以包含最小值1.0及最大值10.0之間的所有子範圍，也就是具有等同於或大於1.0的最小值及等同於或小於10.0的最大值，例如，2.4至7.6。任何本文所述的最大數值限制可以包含所有較低的
數值限制，且本說明書中所述的所有最小數值限制可以包含所有較高的數值限制。相應的，申請人保留修改本說明書(包含申請專利範圍)的權利，以明確列舉包含在本文明確敘述的範圍內的任何子範圍。所有的這些範圍係為在本說明書中固有的描述。
沙巴蛇草萃取物的製備
請參考圖1，圖1係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的製備流程。
依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物可以透過以下製備方法獲得，包含：以乙醇水溶液對沙巴蛇草進行萃取，取萃取液進行濃縮得到粗萃取物；將該粗萃取物加入乙酸乙酯及水進行液液分配萃取，得到一第一水層及一乙酸乙酯層；進一步將該第一水層，加入正丁醇進行液液分配萃取，兩萃取分離層濃縮後，得到一正丁醇層萃取物(或稱第一萃取物)及一第二水層萃取物(或稱第二萃取物)；乙酸乙酯層萃取液進行濃縮後，加入乙醇水溶液及正己烷進行液液分配萃取，兩萃取分離層進一步濃縮後，得到一乙醇水溶液層萃取物(或稱第三萃取物)及一正己烷層萃取物(或稱第四萃取物)。
接下來透過實施例針對依據上述方法製得的第一至第四萃取物的性質進行測試，以證明其所具備的效果。
一、造骨細胞分化分析
此實施例中採用造骨細胞(老鼠前骨芽細胞株MC3T3-E1細胞株)進行造骨細胞分化分析。
實驗步驟包含：MC3T3-E1細胞株(1x104cells/well in 96-well plate)培養在96孔盤，經1天培養，更換培養在含有5mg/ml抗壞血酸(ascorbic acid)、1
mM甘油磷酸鈉(sodium glycerophosphate)的MEM培養基中，之後分別加入不同濃度(5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL)的沙巴蛇草萃取物(第三萃取物(90%乙醇劃分層)、第四萃取物(正己烷劃分層)，並且設置未添加的控制組，以及β-甘油磷酸酯(B-GP)作為對照組。在進行5天的培養後將培養基去除，以冰PBS清洗後，加入0.01%SDS處理30分鐘，再加入磷酸對硝基苯酚溶液(pNPP)溶液反應30分鐘，加入3N NaOH中止反應。以波長405nm下之吸光值測定 硝基苯酚(nitrophenol)的釋放量來測定鹼性磷酸酶(ALP)活性，以作為造骨細胞分化指標。
同時，也以MTT試驗進行同樣的萃取物樣本的細胞存活率測試。
結果如圖2及圖3所示。圖2係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的不同濃度的第三萃取物針對MC3T3-E1細胞株的細胞存活率及ALP活性試驗的結果。圖3係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的不同濃度的第四萃取物針對MC3T3-E1細胞株的細胞存活率及ALP活性試驗的結果。
由圖2及圖3中的結果可知，第三、第四萃取物對造骨細胞的存活率均高於控制組，可知第三、第四萃取物可以促進造骨細胞生長。而在ALP試驗中，可以看出不同濃度的第三、第四萃取物的ALP測定值均高於控制組及B-GP組，且在統計上有顯著差異。也就是說，依劇本實施例的沙巴蛇草的第三、第四萃取物皆可以非常顯著的刺激造骨細胞的分化。
二、蝕骨細胞生成分析
此實施例中採用巨噬細胞(RAW 264.7細胞)進行蝕骨細胞生成分析。
實驗步驟包含：首先對RAW 264.7細胞株進行培養1天後，加入RANKL誘使RAW 264.7細胞株分化成蝕骨細胞，並在加入核因子κ-B配體受體
致活劑(RANKL)的同時，加入不同濃度(5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL)沙巴蛇草萃取物(第三萃取物(90%甲醇劃分層)、第四萃取物(正己烷劃分層))進行處理，培養3天後移除培養液，以3.7%甲醛(formaldehyde)處理10分鐘，使細胞固定於盤底，再以75%乙醇(alcohol)處理1分鐘，加強固定細胞，放入烘箱烘乾後，在避光的情況下，加入TRAP溶液(10mM Na2C4H4O6、3mM p-nitro phenyl phosphate)振搖，以進行反應，待反應時間到時，將TRAP溶液吸到0.1N的NaOH之中以中止反應，測量波長410nm之吸光值，此吸光值即為總TRAP活性。另外，在細胞固定並烘乾之後，加入TRAP染劑(5mg Naphthol AS-MX phosphate、30mg Fast Red Violet LB Salt、0.5mg Dimethylformamide、10mM Na2C4H4O6、50ml H2O)，震搖20分鐘後移除染劑，被染色之TRAP蛋白可用光學顯微鏡拍照，計算多核(數目≧5)細胞數，表細胞融合程度。根據此總TRAP活性測試以及TRAP染色觀察結果以此作為蝕骨細胞分化指標。同時，也以MTT試驗進行同樣的萃取物樣本的細胞存活率測試。
結果如圖4至圖6所示。圖4係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的不同濃度的第三萃取物針對RAW 264.7細胞株的細胞存活率及TRAP活性試驗的結果。圖5係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的不同濃度的第四萃取物針對RAW 264.7細胞株的細胞存活率及TRAP活性試驗的結果。圖6係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的不同濃度的第三、第四萃取物針對RAW 264.7細胞株進行TRAP(+)多核蝕骨細胞的染色照片，上方為加入前，下方為加入3天後的照片。
結果顯示沙巴蛇草第三萃取物及第四萃取物兩者皆可以非常顯著抑制蝕骨細胞的生成並且呈現劑量依賴性。
三、抗神經發炎
此實施例中採用初級培養小鼠大腦皮質混合膠細胞來檢驗抗神經發炎活性。
實驗步驟包含：
1.微小膠細胞培養：新生皮層微小膠細胞的原始培養物將在出生後第5天從Sprague Dawley大鼠幼崽的大腦皮層中製備。簡單地說，將5天大的幼鼠用乙醚麻醉並斷頭處死。從大腦皮層製備原代混合神經膠質細胞，並在含有10%FBS的DMEM/F12培養基中保存5天。用補充有B27的Neurobasal培養基作為替代培養基，孵育11天或直至微小膠細胞分支。混合膠細胞培養用萃取物(100μg/ml)處理2小時，然後用100ng/ml LPS處理22小時，取培養基進行亞硝酸鹽的測定。
2.亞硝酸鹽的測定：通過將培養基與等體積的Griess試劑(0.05%N-(1-萘基)-乙二胺二鹽酸鹽，0.5%磺醯胺和1.25%磷酸)一起孵育來測量亞硝酸鹽含量(一氧化氮NO釋放)。孵育後，使用以亞硝酸鈉(NaNO2)為標準的酶標儀在540nm波長處檢測光密度。
實驗結果如圖7所示。圖7係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物(100g/ml)的第一至第四萃取物(正丁醇劃分層、第二水劃分層、乙醇劃分層及正己烷劃分層)針對抗神經發炎活性的測試結果。一氧化氮(NO)的生成量可以推定炎症的強度。
從圖7可知，第一萃取物(丁醇劃化分層)、第二萃取物(第二水劃分層)及第三萃取物(乙醇層)具有抗神經發炎活性，其抑制LPS-刺激引發之一氧化氮生成達77%、56%和55%。
四、抗阿茲海默氏症活性
此實施例利用APPsw/PSEN1dE9(APP/PS1)基因轉殖鼠驗證沙巴蛇草萃取物的抗阿茲海默氏症活性。實驗採用的動物為APP/PS1基因轉殖鼠(8週)，體重為25~30公克。飼養環境：人工照明週期為每日十二小時(07：00~19：00)，溫度控制在24±1℃，濕度55-65%，食物及飲水充份供應。動物分2組：控制組、第二萃取物組，各組6隻，劑量為100mg/kg。處理28天後，完成築巢測試。施打BrdU一周後犧牲小鼠、收集腦、肝與血液分析其病理變化。
圖8係為APPsw/PSEN1dE9(APP/PS1)基因轉殖鼠驗證沙巴蛇草萃取物的第二萃取物的抗阿茲海默氏症之實驗流程。接著參考圖9，圖9係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的第二萃取物的抗阿茲海默症試驗結果。處理組和控制組之間的顯著差異由*，p<0.05；**，p<0.01表示。如圖9所示，築巢試驗結果發現第二萃取物可以改善小鼠之築巢分數與未撕碎巢片(圖9的A)。第二萃取物也可以減少類澱粉瘢與膠細胞簇數目(圖9的B)。但第二萃取物無法促進海馬迴神經元新生(圖9的C)。由以上結果得知，第二萃取物在APP/PS1基因轉殖鼠的活性是在減少類澱粉瘢與膠細胞簇數目，但不是在促進海馬迴神經元新生。
五、抗老化活性
請參考圖10、圖11。圖10係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的第二萃取物的衰老實驗的實驗流程。圖11係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的第二萃取物的衰老實驗的小鼠挖掘能力實驗結果。
此實施例C57BL/6J小鼠分4組(1對照組(4公)、1.誘導組(施打D-半乳糖、4公)和2.藥物處理組(一組施打D-半乳糖+第二萃取物300mg/kg、4公，另一組施打D-半乳糖+第二萃取物100mg/kg、4公)，n=8)。誘導組和藥物處理組在6
週齡時開始施打D-半乳糖(頸背部皮下注射每日1次，連續8週)。藥物處理組在7週齡時給予載體或第二萃取物(300mg/kg以及100mg/kg)(餵食，每週5次，連續7週)。在12週齡時進行築巢行為能力試驗，最後在連續施打BrdU 7天後犧牲小鼠。
結果如圖11所示，數據為平均值±標準差(n=4)。透過不成對的兩尾學生t檢驗來分析參數數據統計藥物與D-半乳糖組間結果：##,p<0.01；透過不成對的兩尾學生t檢驗來分析參數數據統計D-半乳糖組與空白對照組間結果：**,p<0.01。施打第二萃取物(300mg/kg)對D-半乳糖誘導的衰老小鼠之挖掘能力有顯著提升，而施打第二萃取物(100mg/kg)對D-半乳糖誘導的衰老小鼠之挖掘能力略有提升。可知第二萃取物具備抗老化的能力。
六、D-半乳糖誘導的衰老小鼠之海馬迴中神經元新生
本實施例D-半乳糖誘導的衰老小鼠餵食載體和第二萃取物(100mg/kg；300mg/kg)。犧牲前連續七天注射BrdU(50mg/Kg/天)，然後犧牲，取大腦切片進行組織免疫螢光染色。使用BrdU抗體偵測第二型神經祖細胞(Type2 neural progenitor)，並且使用神經元遷移蛋白(doublecortin,DCX)抗體偵測新生神經元。
圖12係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的第二萃取物的衰老實驗中小鼠海馬迴中的齒迴內側的區域的DCX+量化圖。圖13係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的第二萃取物的衰老實驗中小鼠海馬迴中的齒迴內側的區域的BrdU+量化圖。數據透過不成對的兩尾學生t檢驗來分析參數數據統計藥物與D-半乳糖組間結果：#,p<0.05；透過不成對的兩尾學生t檢驗來分析參數數據統計D-半乳糖組與空白對照組間結果：*,p<0.05。
從圖12、圖13可知，餵食第二萃取物可以顯著提升D-半乳糖老化鼠新生神經元的數量，也能提升第二型神經祖細胞的數量。
結合上述實驗三至實驗六，可以發現沙巴蛇草萃取物的第二萃取物具備抗神經發炎、抗阿茲海默症以及因能促進老化模式鼠海馬迴神經元新生以達到之抗老化效果。
七、抗骨骼肌萎縮
本實施例透過容易分化成肌小管的小鼠成肌細胞C2C12建立肌小管毒性檢測平台，用以進行藥物篩選，流程圖如圖14所示。
利用這個平台，我們發現沙巴蛇草的第四萃取物(正己烷劃分層)在100μg/ml的濃度下對肌小管無毒。然而，用40μM順鉑處理2天的肌管的存活率只有約60%。順鉑(cisplatin)(40μM)和沙巴蛇草的第四萃取物(100μg/ml)共同處理後，存活率大大增加到約90%，表明沙巴蛇草的第四萃取物對順鉑引起的肌管毒性有保護作用。
沙巴蛇草的第四萃取物的保護作用也在體內實驗進行了評估。動物實驗的設計遵循之前描述的程序(Chiou等，2018)，動物體內實驗的方案如圖15所示，圖15係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的第四萃取物進行針對骨骼肌萎縮的動物試驗的流程圖。簡單地說，8週齡的Balb/c小鼠來自國家實驗動物中心。小鼠被隨機安置並習慣兩週。順鉑，從Sigma公司購得，溶解在生理鹽水中，每次都是使用前製備。小鼠腹腔注射順鉑(2mg/kg)或載體(生理鹽水)5天，隨後休息9天，再重複給藥5天。從第1周到實驗結束，沙巴蛇草的第四萃取物被混合到飼料中。每週監測一次小鼠的體重和食物攝入量評估小鼠的身體表現。
動物實驗結果如圖16所示，圖16係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的第四萃取物針對骨骼肌萎縮的動物實驗的結果，包含對順鉑誘導的惡性小鼠的影響(A)體重變化、(B)食物攝入量、(C)強迫游泳試驗及(D)握力試驗。a和b分別表示與假藥(sham)和順鉑相比，P值小於0.05。順鉑誘發了化療引起的惡病質症狀，包括小鼠的體重下降、食欲降低和身體活動減少。沙巴蛇草的第四萃取物沒有改善體重下降(圖16A)和食物攝入(圖16B)。然而，在強迫游泳試驗(圖16C)和握力試驗(圖16D)中，發現沙巴蛇草的第四萃取物可以提高順鉑處理的小鼠的身體活動耐力和保持前肢肌肉力量。這些結果表明，沙巴蛇草的第四萃取物可以潛在地減輕癌症化療引起的肌肉萎縮。
八、促進傷口癒合
本實施例包含兩部分，包含離體內皮細胞移動試驗及動物創傷試驗。離體內皮細胞移動試驗步驟包含：將內皮細胞株培養在24孔盤中，並放上ibidi Culture-Insert 2來創造等距寬度的傷口，等到細胞長滿貼覆後移除Insert並加藥，繼續培養8小時觀察不同時間點細胞移動面積的改變。於不同時間利用光學顯微鏡在10倍物鏡下拍照，細胞移動的面積再利用image J軟體計算，並算出每小時移動速率(移動面積/小時)與對照組的倍數比。
動物創傷試驗步驟包含：六周大的C57BL/6小鼠將其背上除毛後，利用外科手術取樣器在背部做出5mm的傷口，將沙巴蛇草萃取物的第三萃取物(乙醇劃分層)與卡波普(carbopol)混合成軟膏，每天塗敷在傷口處，並拍照確認傷口大小，再利用image J軟體計算傷口面積變化，算出比例。
結果如圖17、圖18所示。圖17係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的第三萃取物的離體內皮細胞移動實驗的結果。圖18係為依據本發明實施例的沙巴蛇草萃取物的第三萃取物的動物創傷實驗的結果。
從圖17可以看出，沙巴蛇草萃取物的第三萃取物(乙醇劃分層)1μg/ml可以增加細胞移動能力。利用移動面積計算，增加移動速率大約1.5倍。而在圖18動物創傷實驗的結果中，發現1%沙巴蛇草藥膏敷料可以促進傷口癒合，同時切片染色(Masson stain)顯示可以增加肌纖維細胞增生(紅色染色增加)，促進傷口的癒合。
綜上所述，沙巴蛇草萃取物可以用於製備治療骨質疏鬆、神經退化性疾病、骨骼肌萎縮及促進傷口癒合之藥物，藉此可以降低台灣醫護的負擔以及照護所需的成本。
Claims (1)
- 一種沙巴蛇草萃取物之用途，係用於製備治療阿茲海默症及抗老化之藥物，其中該沙巴蛇草萃取物係為如下述製備方法所萃取而得之第二水層萃取物(或稱第二萃取物)：以乙醇水溶液對沙巴蛇草進行萃取，取萃取液進行濃縮得到粗萃取物；將該粗萃取物加入乙酸乙酯及水進行液液分配萃取，得到一第一水層及一乙酸乙酯層；進一步將該第一水層，加入正丁醇進行液液分配萃取，兩萃取分離層濃縮後，得到一第二水層萃取物(或稱第二萃取物)。
Priority Applications (1)
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Applications Claiming Priority (1)
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| TW110144641A TWI779941B (zh) | 2021-11-30 | 2021-11-30 | 沙巴蛇草之萃取方法及其萃取物用於治療骨質疏鬆、神經退化性疾病、骨骼肌萎縮及促進傷口癒合之用途 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
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| TWI779941B true TWI779941B (zh) | 2022-10-01 |
| TW202322839A TW202322839A (zh) | 2023-06-16 |
Family
ID=85475835
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| TW110144641A TWI779941B (zh) | 2021-11-30 | 2021-11-30 | 沙巴蛇草之萃取方法及其萃取物用於治療骨質疏鬆、神經退化性疾病、骨骼肌萎縮及促進傷口癒合之用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| TW (1) | TWI779941B (zh) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| TW201427935A (zh) * | 2013-01-11 | 2014-07-16 | Univ Kaohsiung Medical | 毒殺癌細胞之榼藤醯胺類化合物及其製備方法 |
| CN104042653A (zh) * | 2014-02-28 | 2014-09-17 | 黄丹民 | 一种含有总黄酮和总皂苷的提取物及其制备方法与应用 |
| CN107550954A (zh) * | 2017-09-18 | 2018-01-09 | 广州中医药大学 | 鳄嘴花在制备治疗或预防神经损伤药物中的应用及药物 |
-
2021
- 2021-11-30 TW TW110144641A patent/TWI779941B/zh active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| TW201427935A (zh) * | 2013-01-11 | 2014-07-16 | Univ Kaohsiung Medical | 毒殺癌細胞之榼藤醯胺類化合物及其製備方法 |
| CN104042653A (zh) * | 2014-02-28 | 2014-09-17 | 黄丹民 | 一种含有总黄酮和总皂苷的提取物及其制备方法与应用 |
| CN107550954A (zh) * | 2017-09-18 | 2018-01-09 | 广州中医药大学 | 鳄嘴花在制备治疗或预防神经损伤药物中的应用及药物 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 期刊 , AA Azam, et al., "Effects of Clinacanthus nutans leaf extract on lipopolysaccharide-induced neuroinflammation in rats: A behavioral and 1H NMR-based metabolomics study", Avicenna J Phytomed, 9(2), 2019: 164~186. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| TW202322839A (zh) | 2023-06-16 |
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