TWI776985B - 卡琪花蒂瑪萃取物用於提升皮膚彈性、強度或穩定性的用途 - Google Patents
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Abstract
本發明提供一種卡琪花蒂瑪萃取物用於提升轉谷氨醯胺酶(Transglutaminase,TGM)基因、角蛋白(Keratin,KRT)基因、水通道蛋白(Aquaporin,AQP)基因、聚角蛋白微絲(Filaggrin,FLG)基因、母抗Dpp同源物(Mothers against decapentaplegic homolog,SMAD)基因、葡萄糖腦苷酯酶(Glucocerebrosidase,GBA)基因、及玻尿酸合成酶(Hyaluronan synthase,HAS)基因表現量的用途，並能有效減少皮膚皺紋、減少皮膚黑色素及減少皮膚水分散失。其中該卡琪花蒂瑪萃取物係卡琪花蒂瑪以水、醇、或醇水混合物之溶劑所萃取而得。
Description
本發明係關於一卡琪花蒂瑪萃取物之用途，尤其是一種卡琪花蒂瑪萃取物用於提升TGM基因、KRT基因、AQP基因、FLG基因、SMAD基因、GBA基因、及HAS基因的表現量。
表皮層為皮膚的最外層，由外往內依序為角質層、顆粒層、有棘層及基底層，表皮層主要由基底層中未分化之圓柱型角質細胞持續向上進行分化形成，此過程稱為角質化。角質細胞內含水量高，隨著細胞向上代謝分化，角質細胞形狀會逐漸變成扁平狀，且細胞核及胞器開始退化萎縮，並在角質層形成不具細胞核與胞器之死細胞。表皮層的主要功能為使皮膚保水，並形成皮膚屏障以抵禦各種外來傷害，其中表皮層最外層由一弱酸性的皮脂膜以及如磚牆結構的角質層所構成，此屏障能鎖住皮膚的水分和油脂、抵抗皮膚表面病菌入侵，及對抗外界異物及紫外光等傷害，對人體有非常重要的保護作用。
表皮層中的角質層，其角質細胞雖然為死細胞，但其主要成分為角蛋白(keratin)，角蛋白能吸收水分使皮膚保持濕潤，角質細胞也會分泌如玻尿酸等物質作為細胞間質，以維持表皮層皮膚屏障之結構完整，以防止皮膚水分散失及形成完整防護。當皮膚接觸過冷或過熱之環境以及照射紫外光等刺激，會導致角質細胞無法維持正常的代謝循環，且皮膚保水能力也會下降，並
導致皮膚表皮層屏障受損，讓皮膚變得粗糙、乾燥脫屑、脆弱易受刺激、敏感泛紅，因此角質層的健康與保水能力對於抵禦外來傷害著實非常重要。
另外，近年來，為達到人們努力追求皮膚白皙及斑點減少的需求，市面上不斷開發出各種抑制黑色素形成或淡化斑點之美白產品，然而，該些產品為訴求達到特殊效果，而加入過多致癌的化學物質或環境荷爾蒙，使消費者在不知情的狀況下使用會傷害皮膚影響健康的成分。
綜合上面所述，因應講求天然健康的現代趨勢，為改善因角質細胞受損及保水能力下降，導致皮膚變得脆弱、易敏的問題，開發一種能有效使角質細胞分泌更多保濕因子，並維持角質細胞排列、維持角質層結構完整，以提升皮膚屏障功能，並同時兼顧皮膚美白訴求之綜合皮膚保健組合物，著實有其必要性。
緣此，本發明之一目的在提供一種卡琪花蒂瑪萃取物用於製備提升轉谷氨醯胺酶(Transglutaminase,TGM)基因、角蛋白(Keratin,KRT)基因、水通道蛋白(Aquaporin,AQP)基因、聚角蛋白微絲(Filaggrin,FLG)基因、母抗Dpp同源物(Mothers against decapentaplegic homolog,SMAD)基因、葡萄糖腦苷酯酶(Glucocerebrosidase,GBA)基因、及/或玻尿酸合成酶(Hyaluronan synthase,HAS)基因表現量之組合物的用途，其中該卡琪花蒂瑪萃取物係以一溶劑萃取一卡琪花蒂瑪所獲得，該溶劑為水、醇、或醇水混合物；其中該組合物是一醫藥品、一食品或一保養品。
本發明之另一目的在提供一種卡琪花蒂瑪萃取物用於製備美化皮膚外觀之組合物的用途，其中該卡琪花蒂瑪萃取物係以一溶劑萃取一卡琪花蒂瑪所獲得，該溶劑為水、醇、或醇水混合物；其中該組合物是一醫藥品、一食品或一保養品。
在本發明之一實施例中，該溶劑與該卡琪花蒂瑪之重量比為5-20：1-5，且該萃取溫度係50℃-100℃。
在本發明之又一實施例中，該TGM基因係轉谷氨醯胺酶1(Transglutaminase 1,TGM1)基因；該KRT基因係包含角蛋白1(Keratin1,KRT1)基因、角蛋白10(Keratin10,KRT10)基因及角蛋白14(Keratin14,KRT14)基因；該AQP基因係水通道蛋白3(Aquaporin 3,AQP3)基因；SMAD基因係母抗Dpp同源物(Mothers against decapentaplegic homolog 1,SMAD1)基因；且該HAS基因包含玻尿酸合成酶2(Hyaluronan synthase 2,HAS2)基因及玻尿酸合成酶3(Hyaluronan synthase 3,HAS3)基因，且該卡琪花蒂瑪萃取物的濃度為至少0.125mg/mL。
在本發明之另一實施例中，該美化皮膚外觀係減少皮膚皺紋、減少皮膚黑色素及/或減少皮膚水分散失，且該卡琪花蒂瑪萃取物的濃度為至少0.125mg/mL。
本發明之卡琪花蒂瑪萃取物，能有效提升TGM1基因、KRT1基因、KRT10基因、KRT14基因、AQP3基因、FLG基因、SMAD1基因、GBA基因、HAS2基因、及HAS3基因的表現量，並能有效減少皮膚皺紋、減少皮膚黑色素及減少皮膚水分散失，具有以提高皮膚TGM基因、KRT基因、AQP基因、FLG基因、SMAD基因、GBA基因、及HAS基因的表現、及皮膚抗皺、美白、保濕之功效，以使皮膚形成更多保濕因子，並維持角質層結構完整，提升皮膚屏障功能。因此，本發明之卡琪花蒂瑪萃取物可用於製備提升皮膚TGM基因、KRT基因、AQP基因、FLG基因、SMAD基因、GBA基因、及HAS基因表現量及美化皮膚外觀之組合物的用途，且該組合物是一醫藥品、一食品或一保養品，可藉由口服、皮膚塗抹等方式給予一個體。
以下將進一步說明本發明的實施方式，下述所列舉的實施例係用以闡明本發明，並非用以限定本發明之範圍，任何熟習此技藝者，在不脫離本發明之精神和範圍內，當可做些許更動與潤飾，因此本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。
圖1係為本發明之卡琪花蒂瑪萃取物提升TGM基因、KRT基因、AQP基因、FLG基因、SMAD基因、GBA基因、及HAS基因表現量之效果的長條圖。* p<0.05；** p<0.01；*** p<0.001。
圖2係為本發明之卡琪花蒂瑪萃取物減少皮膚皺紋之效果的長條圖。* p<0.05。
圖3係為本發明之卡琪花蒂瑪萃取物減少皮膚黑色素之效果的長條圖。* p<0.05；# p<0.05。
圖4係為本發明之卡琪花蒂瑪萃取物減少皮膚水分散失之效果的長條圖。* p<0.05。
本文中所使用數值為近似值，所有實驗數據皆表示在20%的範圍內，較佳為在10%的範圍內，最佳為在5%的範圍內。
使用Excel軟體進行統計分析。數據以平均值±標準差(SD)表示，個此之間的差異以學生t檢驗(student's t-test)分析。
依據本發明，卡琪花蒂瑪(Labisia Pumila)係為報春花科(Primulaceae)之多年生草本植物，英文名為Kacip Fatimah，原產於馬來西亞，卡琪花蒂瑪翻譯自馬來文Kacip fatimah。卡琪花蒂瑪生長在矮叢中，具有單生
或很少分枝的莖以及細毛狀的根，其葉呈長圓形下面有細毛，長約20-40公分，花序為棕色，長約5-6公分。卡琪花蒂瑪可用於改善經痛及治療胃脹氣。
如本文中所使用的，用語「卡琪花蒂瑪萃取物」意為卡琪花蒂瑪與溶劑以1-5：5-20(w/w)比例經一特定時間與溫度萃取而得。
如本文中所使用的，用語「美化皮膚外觀」意指預防、減緩人類皮膚外觀之老化現象，例如：例如：皺紋的產生及失去彈性等；提高人類皮膚外觀之白皙透亮程度，例如：減少皮膚黑色素含量與產生等；及/或提高人類皮膚保濕及含水量，例如：減少皮膚水分散失等。評量實現此目的之程度將根據熟悉此項技術者已知之諸多因素來決定，諸如消費者的全身狀態、年齡、性別等。
依據本發明，醫藥品可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成一適合於非經腸道地(parenterally)或局部地(topically)投藥的劑型，這包括，但不限於：注射品(injection)[例如，無菌的水性溶液(sterile aqueous solution)或分散液(dispersion)]、無菌的粉末(sterile powder)、外部製劑(external preparation)以及類似之物。
依據本發明，醫藥品可進一步包含有一被廣泛地使用於藥物製造技術之醫藥上可接受的載劑(pharmaceutically acceptable carrier)。例如，該醫藥上可接受的載劑可包含一或多種選自於下列的試劑：溶劑(solvent)、緩衝液(buffer)、乳化劑(emulsifier)、懸浮劑(suspending agent)、分解劑(decomposer)、崩解劑(disintegrating agent)、分散劑(dispersing agent)、黏結劑(binding agent)、賦形劑(excipient)、安定劑(stabilizing agent)、螯合劑(chelating agent)、稀釋劑(diluent)、膠凝劑(gelling agent)、防腐劑(preservative)、潤濕劑(wetting agent)、潤滑劑(lubricant)、吸收延遲劑(absorption delaying agent)、脂質體(liposome)以
及類似之物。有關這些試劑的選用與數量是落在熟習此項技術之人士的專業素養與例行技術範疇內。
依據本發明，該醫藥上可接受的載劑包含有一選自於由下列所構成之群組中的溶劑：水、生理鹽水(normal saline)、磷酸鹽緩衝生理鹽水(phosphate buffered saline,PBS)、含有醇的水性溶液(aqueous solution containing alcohol)以及它們的組合。
依據本發明，該醫藥品可以一選自於由下列所構成之群組中的非經腸道途徑(parenteral routes)來投藥：皮下注射(subcutaneous injection)、表皮內注射(intraepidermal injection)、皮內注射(intradermal injection)以及病灶內注射(intralesional injection)。
依據本發明，醫藥品可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成一適合於局部地施用於皮膚上的外部製劑(external preparation)，這包括，但不限於：乳劑(emulsion)、凝膠(gel)、軟膏(ointment)、乳霜(cream)、貼片(patch)、擦劑(liniment)、粉末(powder)、氣溶膠(aerosol)、噴霧(spray)、乳液(lotion)、乳漿(serum)、糊劑(paste)、泡沫(foam)、滴劑(drop)、懸浮液(suspension)、油膏(salve)以及繃帶(bandage)。
依據本發明，該外部製劑是藉由將本發明的醫藥品與一為熟習此項技藝者所詳知的基底(base)相混合而被製備。
依據本發明，該基底可包含有一或多種選自於下列的添加劑(additives)：水、醇(alcohols)、甘醇(glycol)、碳氫化合物(hydrocarbons)[諸如石油膠(petroleum,jelly)以及白凡士林(white petrolatum,)]、蠟(wax)[諸如石蠟(paraffin)以及黃蠟(yellow wax)]、保存劑(preserving agents)、抗氧化劑(antioxidants)、界面活性劑(surfactants)、吸收增強劑(absorption enhancers)、安定劑(stabilizing agents)、膠凝劑(gelling agents)[諸如卡波普®974P
(carbopol®974P)、微結晶纖維素(microcrystalline cellulose)以及羧基甲基纖維素(carboxymethylcellulose)]、活性劑(active agents)、保濕劑(humectants)、氣味吸收劑(odor absorbers)、香料(fragrances)、pH調整劑(pH adjusting agents)、螯合劑(chelating agents)、乳化劑(emulsifiers)、閉塞劑(occlusive agents)、軟化劑(emollients)、增稠劑(thickeners)、助溶劑(solubilizing agents)、滲透增強劑(penetration enhancers)、抗刺激劑(anti-irritants)、著色劑(colorants)以及推進劑(propellants)等。有關這些添加劑的選用與數量是落在熟習此項技術之人士的專業素養與例行技術範疇內。
依據本發明，保養品可進一步包含有一被廣泛地使用於保養品製造技術之可接受的佐劑(acceptable adjuvant)。例如，該可接受的佐劑可包含有一或多種選自於下列的試劑：溶劑、膠凝劑、活性劑、防腐劑、抗氧化劑、遮蔽劑(screening agent)、螯合劑、界面活性劑、染色試劑(coloring agent)、增稠劑(thickening agent)、填料(filler)、香料以及氣味吸收劑。有關這些試劑的選用與數量是落在熟習此項技術之人士的專業素養與例行技術範疇內。
依據本發明，保養品可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成一適合於護膚(skincare)或化妝(makeup)的形式，這包括，但不限於：水性溶液(aqueous solution)、水-醇溶液(aqueous-alcohol solution)或油性溶液(oily solution)、呈水包油型(oil-in-water type)、油包水型(water-in-oil type)或複合型之乳劑、凝膠、軟膏、乳霜、面膜(mask)、貼片、貼布(pack)、擦劑、粉末、氣溶膠、噴霧、乳液、乳漿、糊劑、泡沫、分散液、滴劑、慕斯(mousse)、防曬油(sunblock)、化妝水(tonic water)、粉底(foundation)、卸妝產品(makeup remover products)、肥皂(soap)以及其他身體清潔產品(body cleansing products)等。
依據本發明，保養品亦可與一或多種選自於下列之已知活性的外用劑(external use agents)一起合併使用：美白劑(whitening agents)[諸如維生素A
酸(tretinoin)、兒茶素(catechin)、麴酸、熊果苷以及維生素C]、保濕劑、抗發炎劑(anti-inflammatory agents)、殺菌劑(bactericides)、紫外線吸收劑(ultraviolet absorbers)、植物萃取物(plant extracts)[諸如蘆薈萃取物(aloe extract)]、皮膚營養劑(skin nutrients)、麻醉劑(anesthetics)、抗痘劑(anti-acne agents)、止癢劑(antipruritics)、止痛劑(analgesics)、抗皮膚炎劑(antidermatitis agents)、抗過角化劑(antihyperkeratolytic agents)、抗乾皮膚劑(anti-dry skin agents)、抗汗劑(antipsoriatic agents)、抗老化劑(antiaging agents)、抗皺劑(antiwrinkle agents)、抗皮脂溢出劑(antiseborrheic agents)、傷口治療劑(wound-healing agents)、皮質類固醇(corticosteroids)以及激素(hormones)。有關這些外用劑的選用與數量是落在熟習此項技術之人士的專業素養與例行技術範疇內。
依據本發明，食品產品可被當作食品添加物(food additive)，藉由習知方法於原料製備時添加，或是於食品的製作過程中添加，而與任一種可食性材料配製成供人類與非人類動物攝食的食品產品。
依據本發明，食品產品的種類包括但不限於：飲料(beverages)、發酵食品(fermented foods)、烘培產品(bakery products)、健康食品(health foods)以及膳食補充品(dietary supplements)。
本發明提供一種卡琪花蒂瑪萃取物用於製備提升TGM基因、KRT基因、AQP基因、FLG基因、SMAD基因、GBA基因、及HAS基因以及美化皮膚外觀的用途，本發明之卡琪花蒂瑪萃取物係以一溶劑萃取一卡琪花蒂瑪所獲得，該溶劑為水、醇、或醇水混合物，其可用於提升TGM1基因、KRT1基因、KRT10基因、KRT14基因、AQP3基因、FLG基因、SMAD1基因、GBA基因、HAS2基因、及HAS3基因的表現、及皮膚抗皺、皮膚美白與皮膚保濕。
同時，本發明用於製備提升TGM基因、KRT基因、AQP基因、FLG基因、SMAD基因、GBA基因、及HAS基因表現量及美化皮膚外觀之組合物，
亦可包含一有效量之卡琪花蒂瑪萃取物及一醫藥上可接受之載體，該組合物係一醫藥品、一食品或一保養品。
以下將詳細說明本發明卡琪花蒂瑪萃取物之詳細萃取方法，與該卡琪花蒂瑪萃取物於調控皮膚角質細胞中TGM1基因、KRT1基因、KRT10基因、KRT14基因、AQP3基因、FLG基因、SMAD1基因、GBA基因、HAS2基因、及HAS3基因表現量之測試、以及減少皮膚皺紋、減少皮膚黑色素及減少皮膚水分散失之測試，以證實該卡琪花蒂瑪萃取物對於提升TGM基因、KRT基因、AQP基因、FLG基因、SMAD基因、GBA基因、及HAS基因的表現、及皮膚抗皺、皮膚美白與皮膚保濕之效果。
在本發明一實施例中，將卡琪花蒂瑪整株清洗，取洗淨後之卡琪花蒂瑪整株由一萃取溶劑進行萃取，該萃取溶劑係為水、醇、或醇水混合物，其中較佳為水，卡琪花蒂瑪與萃取溶劑以1-5：5-20之重量比混合，在溶劑中進行萃取0.5-3小時後。萃取後冷卻至室溫，將該粗萃取物經由0.45-0.2micron之濾網過濾以獲得濾液。最後，將該濾液於45-70℃進行減壓濃縮，以得到本發明之卡琪花蒂瑪萃取物。
本發明以人類初代皮膚角質細胞(human primary epidermal keratinocytes,HPEK)進行本發明之卡琪花蒂瑪萃取物調控轉谷氨醯胺酶1(Transglutaminase 1,TGM1)基因、角蛋白1(Keratin1,KRT1)基因、角蛋白10(Keratin10,KRT10)基因及角蛋白14(Keratin14,KRT14)基因、水通道蛋白3(Aquaporin 3,AQP3)基因、聚角蛋白微絲(Filaggrin,FLG)基因、母抗Dpp同源物
(Mothers against decapentaplegic homolog,SMAD)基因、葡萄糖腦苷酯酶(Glucocerebrosidase,GBA)基因、玻尿酸合成酶2(Hyaluronan synthase 2,HAS2)基因、及玻尿酸合成酶3(Hyaluronan synthase 3,HAS3)基因表現量之分析。該人類初級皮膚角質細胞購自CELLnTEC公司(瑞士)編號HPEK-50，將該細胞培養於無血清之角質細胞培養液(keratinocyte-SFM)(Gibco公司，編號為#10724-011，美國)。
將人類初代角質細胞分成五組：(1)僅含有細胞培養液作用24小時之控制組(2)加入0.25mg/mL本發明之卡琪花蒂瑪萃取物作用6小時的實驗組(3)加入0.125mg/mL本發明之卡琪花蒂瑪萃取物作用6小時的實驗組、(4)加入0.25mg/mL本發明之卡琪花蒂瑪萃取物作用24小時的實驗組、以及(5)加入0.125mg/mL本發明之卡琪花蒂瑪萃取物作用24小時的實驗組；其中本實施例之卡琪花蒂瑪萃取物係以水進行萃取。接著將角質細胞以細胞裂解液(RB buffer，購自Geanaid公司，臺灣，Cat No.RBD300-DG)回收細胞後，使用RNA萃取試劑套組(購自Geneaid公司，台灣，Lot No.FC24015-G)分別收集兩組細胞內之RNA，接著利用SuperScript® III反轉錄酶(購自Invitrogene公司，美國，編號18080-051)以2000ng之萃取RNA為模板並以引子產生mRNA反轉錄之相應cDNA產物，接著利用ABI StepOnePlusTM Real-Time PCR system(Thermo Fisher Scientific公司，美國)，以及KAPA SYBR FAST(購自Sigma公司，美國，編號38220000000)將兩組反轉錄後產物分別以表一之組合引子進行定量即時反轉錄聚合酶連鎖反應(quantitative real-time reverse transcription polymerase chain reaction)試驗，條件為95℃反應1秒，60℃反應20秒，總共40個迴圈。用以定量TGM1基因、KRT1基因、KRT10基因、KRT14基因、AQP3基因、FLG基因、SMAD1基因、GBA基因、HAS2基因、及HAS3基因之mRNA表現量，其中定量數值係取由閾值循環數(Ct)，而目標基因的mRNA相對量係推導自方程式
，其中△Ct=Ct目標基因-CtACTB(β-肌動蛋白，beta-actin)，再利用Excel軟體進行非成
對單尾student t-test以決定變異係數與是否在統計上具有顯著差異(*p值<0.05；**p值<0.01；***p值<0.001)。
本發明之卡琪花蒂瑪萃取物提升TGM1基因、KRT1基因、KRT10基因、KRT14基因、AQP3基因、FLG基因、SMAD1基因、GBA基因、HAS2基因、及HAS3基因表現量之結果如圖1所示。先前研究指出TGM會使角質化細胞之細胞膜與結構蛋白間形成強力鍵結，並能增加表皮層的強度與穩定性；KRT會形成角蛋微絲，而FLG會幫助角蛋白微絲組裝成堅固的網絡，為皮膚提供強度和彈性；AQP則會加角質細胞內水的通透性，以提高角質細胞的含水量；SMAD是一種訊號傳遞因子與調控膠原蛋白表現相關；GBA則與維持角質結構完整有關；HAS會促進角質細胞分泌玻尿酸的能力，並使皮膚角質層結構完整且提升皮膚屏障功能，能使皮膚保水力提升，其中提升AQP基因及HAS基因的表現量，特別是HAS基因，能夠有效使角質細胞分泌更多保濕因子。
人類初代角質細胞經本發明之卡琪花蒂瑪萃取物處理後，能有效提高TGM1基因表現量最高至2.7倍、提高KRT1基因表現量最高至4.4倍、提高KRT10基因表現量最高至1.1倍、提高KRT14基因表現量最高至1.2倍、提高AQP3基因表現量最高至1.7倍、提高FLG基因表現量最高至1.2倍、提高SMAD1基因表現量最高至1.1倍、提高GBA基因表現量最高至1.6倍、提高HAS2基因表現量最高至2.1倍、提高HAS3基因表現量最高至1.6倍。此結果顯示本發明之卡琪花蒂瑪萃取物能有效提升TGM1基因、KRT1基因、KRT10基因、KRT14基因、AQP3基因、FLG基因、SMAD1基因、GBA基因、HAS2基因、及HAS3基因的表現量，能使皮膚角質分泌更多保濕因子，並維持角質細胞排列、維持角質層結構完整，以提升皮膚屏障功能。
為證實本發明之卡琪花蒂瑪萃取物於減少皮膚皺紋之功效，首先，製備添加2%本發明之卡琪花蒂瑪萃取物之卡琪花蒂瑪面膜；以及不含本發
明之卡琪花蒂瑪萃取物的面膜作為控制組，其中該面膜中含有精華液成分皆為水、馨鲜酮、己二醇、1,3-丁二醇、三仙膠、增稠劑以及三乙醇胺，且本實施例之卡琪花蒂瑪萃取物係以水進行萃取。接著，募集8位受試者，每位受試者於每日早晚清洗完臉部後，將控制組面膜、含本發明之卡琪花蒂瑪萃取物的面膜，分別使用於左右半臉之皮膚15分鐘後取下，並以指腹稍加按摩促進吸收，於使用前與使用後4週以VISIA皮膚檢測儀(CIS-VISIA.7 VISIA Complexion Analysis System，Canfield scientific，美國，序號V71214)進行皮膚紋路檢測，使用高解析單眼相機搭配三種光源(全光域波長、紫外光及偏光波域的光源)，拍攝臉部肌膚並取得清晰圖檔後，利用專業軟體進行紋路分析。
本發明之卡琪花蒂瑪萃取物於減少皮膚皺紋之結果如圖2所示。使用含本發明之卡琪花蒂瑪萃取物之面膜後，比使用前顯著減少了皮膚皺紋20.8%；同時，高達87.5%之受試者於使用後有明顯地改善；而使用未含本發明之卡琪花蒂瑪萃取物之控制組僅減少7.3%。此結果顯示本發明之卡琪花蒂瑪萃取物能有效減少皮膚皺紋，具有顯著的皮膚抗皺之功效。
為證實本發明之卡琪花蒂瑪萃取物於減少皮膚黑色素之功效，首先，製備添加2%本發明之卡琪花蒂瑪萃取物之卡琪花蒂瑪面膜；以及不含本發明之卡琪花蒂瑪萃取物的面膜作為控制組，其中該面膜中含有精華液成分皆為水、馨鲜酮、己二醇、1,3-丁二醇、三仙膠、增稠劑以及三乙醇胺，且本實施例之卡琪花蒂瑪萃取物係以水進行萃取。接著，募集8位受試者，每位受試者於每日早晚清洗完臉部後，將控制組面膜、含本發明之卡琪花蒂瑪萃取物的面膜，分別使用於左右半臉之皮膚15分鐘後取下，並以指腹稍加按摩促進吸收，於使用前與使用後4週以CK Cutometer® dual MPA 580多探頭膚質分析儀(CK
electronic，德國)進行皮膚黑色素指數之膚質檢測，其中係利用光譜吸收的原理，配合MX18探頭測定與黑色素相關之特定波長的色光(綠光源：568nm+/-3nm、紅光源：660nm±-3nm、紅外光源：880nm±-10nm)在人體皮膚上的反射量，並經由黑色素對特定波長的吸收量以定義皮膚膚色，計算出皮膚中黑色素的相對含量。以使用前黑色素數值為100%，相對於施使用前所得出之百分比，為使用後之改善狀況百分比。
本發明之卡琪花蒂瑪萃取物於減少皮膚黑色素之結果如圖3所示。使用含本發明之卡琪花蒂瑪萃取物之面膜後，比使用前顯著減少了黑色素指數3.6%，控制組則反而上升1.3%，二者間具有顯著的差異；同時，高達87.5%之受試者於使用含本發明之卡琪花蒂瑪萃取物之面膜後有明顯地改善。此結果顯示本發明之卡琪花蒂瑪萃取物能有效減少皮膚黑色素含量，具有顯著的皮膚美白之功效。
為證實本發明之卡琪花蒂瑪萃取物於減少皮膚水分散失之功效，首先，製備添加2%本發明之卡琪花蒂瑪萃取物之卡琪花蒂瑪面膜；以及不含本發明之卡琪花蒂瑪萃取物的面膜作為控制組，其中該面膜中含有精華液成分皆為水、馨鲜酮、己二醇、1,3-丁二醇、三仙膠、增稠劑以及三乙醇胺，且本實施例之卡琪花蒂瑪萃取物係以水進行萃取。接著，募集8位受試者，每位受試者於每日早晚清洗完臉部後，將控制組面膜、含本發明之卡琪花蒂瑪萃取物的面膜，分別使用於左右半臉之皮膚15分鐘後取下，並以指腹稍加按摩促進吸收，於使用前與使用後4週以CK Cutometer® dual MPA 580多探頭膚質分析儀(CK electronic，德國)進行進行皮膚水分散失(TEWL)之膚質檢測，其中係使用兩端開放的圓柱形中空探頭，在皮膚表面形成相對穩定的偵測環境，透過探
頭內兩組溫度、濕度感測器，測量近表皮(約1公分內)從角質層散失出的水分，以探頭中上下兩組感測器的溫度和濕度不同所形成之水蒸氣壓梯度，並帶入菲克定律(Fick’s law)來計算TEWL值(單位以g/hm2表示)。以使用前TEWL值為100%，相對於使用前所得出之百分比，為使用後之改善狀況百分比。
本發明之卡琪花蒂瑪萃取物於減少皮膚水分散失之結果如圖4所示。使用含本發明之卡琪花蒂瑪萃取物之面膜後，比使用前顯著減少了水分喪失14.5%，控制組僅減少了5.2%。此結果顯示本發明之卡琪花蒂瑪萃取物能有效減少皮膚水分散失，具有顯著的皮膚保濕之功效。
綜上所述，本發明之卡琪花蒂瑪萃取物，能有效提升TGM1基因、KRT1基因、KRT10基因、KRT14基因、AQP3基因、FLG基因、SMAD1基因、GBA基因、HAS2基因、及HAS3基因的表現量，並能有效減少皮膚皺紋、減少皮膚黑色素及減少皮膚水分散失，具有以提高皮膚TGM基因、KRT基因、AQP基因、FLG基因、SMAD基因、GBA基因、及HAS基因的表現、及皮膚抗皺、美白、保濕之功效，以使皮膚形成更多保濕因子，並維持角質層結構完整，提升皮膚屏障功能。因此，本發明之卡琪花蒂瑪萃取物可用於製備提升皮膚TGM基因、KRT基因、AQP基因、FLG基因、SMAD基因、GBA基因、及HAS基因表現量及美化皮膚外觀之組合物的用途，且該組合物是一醫藥品、一食品或一保養品，可藉由口服、皮膚塗抹等方式給予一個體。
<110> 大江生醫股份有限公司
<120> 卡琪花蒂瑪萃取物用於提升皮膚彈性、強度或穩定性的用途
<130> 107B0403-I1
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Claims (9)
- 一種卡琪花蒂瑪萃取物用於製備一提升皮膚彈性、強度或穩定性的組合物的用途，其中該卡琪花蒂瑪萃取物係以一溶劑萃取一卡琪花蒂瑪所獲得，且該溶劑為水。
- 如請求項1所述之用途，其中該組合物係透過增加皮膚表皮層的強度與穩定性以達到該提升皮膚屏障功能。
- 如請求項2所述之用途，其中該組合物係透過提升轉谷氨醯胺酶(Transglutaminase,TGM)基因表現量以達到該增加皮膚表皮層的強度與穩定性之功能。
- 如請求項2所述之用途，其中該組合物係透過維持皮膚角質結構完整組合物以達到該提升皮膚屏障功能。
- 如請求項2所述之用途，其中該組合物係透過提升葡萄糖腦苷酯酶(Glucocerebrosidase,GBA)、角蛋白(Keratin,KRT)、玻尿酸合成酶(Hyaluronan synthase,HAS)基因表現量、及/或聚角蛋白微絲(Filaggrin,FLG)基因表現量以達到該維持皮膚角質結構完整之功能。
- 如請求項1所述之用途，其中該卡琪花蒂瑪萃取物係以一溶劑萃取一卡琪花蒂瑪0.5-3小時所獲得。
- 如請求項1所述之用途，其中該卡琪花蒂瑪萃取物的濃度為至少0.125mg/mL。
- 如請求項1所述之用途，其中該卡琪花蒂瑪萃取物係於50℃-100℃下進行萃取。
- 如請求項1所述之用途，其中該組合物是一醫藥品、一食品或一保養品。
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|---|---|---|---|
| GD4A | Issue of patent certificate for granted invention patent |