TWI612969B

TWI612969B - 穿心蓮有機溶劑萃取物之活性成分組成物及其於降血糖之應用

Info

Publication number: TWI612969B
Application number: TW105102191A
Authority: TW
Inventors: 林郁進; 張靜雯
Original assignee: 科鼎國際有限公司
Priority date: 2016-01-25
Filing date: 2016-01-25
Publication date: 2018-02-01
Also published as: TW201726155A

Abstract

本發明係關於一種穿心蓮(Andrographis paniculata，AP)之有機溶劑萃取物，包括將穿心蓮之乾燥莖之乙醇粗萃取物以乙醇、正己烷、正丁醇與乙酸乙酯等有機溶劑進行萃取、濃縮及乾燥而得。本發明之穿心蓮有機溶劑萃取物包含具有降血糖藥理活性的成分(active ingredient, APai)，主要包含230 - 400 mg/g穿心蓮內酯（Andrographolides, A）、50 - 90 mg/g新穿心蓮內酯(Neoandrographolide, NA)及20 - 50 mg/g去氧去氫穿心蓮內酯(14-deoxy-11,12- dehydrogen-andrographolide, DDA)，可用於製備降血糖藥物。

Description

穿心蓮有機溶劑萃取物之活性成分組成物及其於降血糖之應用

本發明係關於具有降血糖功效之穿心蓮有機溶劑萃取物活性成分組成物。更特別地，本發明係關於包含具有降血糖活性成分(active ingredient, APai)之穿心蓮有機溶劑萃取物，主要包含穿心蓮內酯、新穿心蓮內酯及去氧去氫穿心蓮內酯。

穿心蓮（Andrographis paniculata ）是爵床科多年生草本植物。莖細長而深綠色，稜角處有縱溝和翼膜。莖的橫截面四方形。葉是披針形，無毛。中國、印度、東南亞和臺灣等地有廣泛栽培。氣輕微、味道極苦且持久。在馬來西亞，穿心蓮被稱為「Hempedu Bumi」，即是“地球膽汁”之意，也是傳統醫藥中味道最苦的植物之一。在中醫藥的五行學說中認為苦入心，而穿心蓮只要你含入一小片它的葉子，馬上可以感受到，那種刻骨銘心的苦，像是直入你的心中，故名『穿心蓮』。

穿心蓮的藥用部位是乾燥莖與葉子，穿心蓮葉含二萜內酯化合物：去氧穿心蓮內酯(Deoxyandrographolide) 0．1 ％以上，穿心蓮內酯(Andrographolide) l.5％以上，新穿心蓮內酯(Neoandrographolide) 0．2％以上，及高穿心蓮內酯(Homoandrographolide)，潘尼內酯 (Panicolide)。還含有穿心蓮烷(Andrographan)，穿心蓮酮(Andrographon)，穿心蓮甾醇（Andrographosterin)，β-谷甾醇-D-葡萄糖甙等。根部除了含有穿心蓮內酯之外，還含有5-羥基-7， 8，2"，3"-四甲氧基黃酮(Mono-o-methylwithtin)、5-羥基-7，8，2"-三甲氧基黃酮 (Andrographin)、5，2"-二羥基-7，8-二甲氧基黃酮(Panicolin)、芹菜素-7，4"-二甲醚 (Apigenin-7，4"-dimethyl ether)、a1-谷甾醇和 KH₂ PO₄ 等。全草尚含 l4-去氧-11-氧化穿心蓮內酯醋(14-Deoxy-ll-oxoandrographolide)、14-去氧-11，12-二去氫穿心蓮內酯 (14-Deoxy-ll，12-didehydroandrographolide)。另據初步分析，還含有甾醇皂甙、糖類及縮合鞣質等酚類物質。又從葉、嫩枝、胚軸、根部和胚芽所得的癒合組織，經培養分離，可得到三種倍半萜內酯化合物：欖核蓮內酯A、B和C (Pa－niculides A、B、C)。

穿心蓮水萃取物(AP_HE )及穿心蓮內酯（Andrographolides, A）已被發表具有降血糖、降血脂、抗菌、抗發炎及抗癌等功能。其中穿心蓮內酯已知具有祛熱解毒，消炎止痛的功效，對細菌性、病毒性上呼吸道感染(急、慢性扁桃腺炎及咽喉腫痛)及細菌性痢疾、胃腸炎有特殊療效(Md. Sanower Hossain等人，The Scientific World Journal 2014:1-28, 2014)。中華民國專利I355933已描述一種作為腫瘤壞死因子（TNF-α）拮抗劑之穿心蓮內酯及其藥學組成物。另外，已有利用穿心蓮內酯作為活性成分，製作一以治癒傷口及/或美白皮膚的醫藥組合物(中華民國專利201524532)。

糖尿病(Diabetes mellitus, DM) 為一種人體將葡萄糖（糖類）轉換成能量的方式出現變化的疾病，其特徵在於伴隨著脂肪和蛋白質代謝紊亂的高血糖症。微血管和糖尿病的大血管並發症包括心血管疾病，失明，腎功能衰竭和外週神經損傷，是發病率和死亡的主要原因[H.T. Li, XD WU, AK Daveyet al ., 2011.]。

糖尿病有兩類，包括第I型糖尿病（胰島素依賴型糖尿病, IDDM) 及第II型糖尿病（非-胰島素依賴型糖尿病, NIDDM)。第II型糖尿病特徵在於周邊胰島素抗性及胰島素的分泌不足[S.E. Kahn, 2003 ]。通常，該疾病的出現是由於β細胞之胰島素分泌漸進性失能，以克服對該激素的敏感性降低[SE Kahn, 2001; M. Prentki 與 C.J. Nolan, 2006.]。此會導致高血糖症，而可能反過來又對β細胞產生有害作用[R.P. Robertson, 2004]。.

雖然已有文獻報導，在大白鼠實驗中，穿心蓮內酯(andrographolide)可以降低血糖濃度，並在胰島素缺乏時提高對血糖的利用率(Yu BC等人, Planta Med. 69(12):1075-9, 2003；Zhang XF, Tan BK., Clin Exp Pharmacol Physiol. 27(5-6):358-63, 2000)。然而，尚未有關於穿心蓮有機溶劑萃取物中具有降血糖功效之活性組合物已被發表。

而本發明係以穿心蓮乾燥莖中所含之具有降血糖活性的有機溶劑萃取物為目標，分析其中的指標化合物：穿心蓮內酯（Andrographolides, A）、新穿心蓮內酯(Neoandrographolide, NA)、及去氧去氫穿心蓮內酯(14-deoxy-11,12- dehydrogen-andrographolide , DDA)之含量，進而完成本發明包含具有降血糖藥理活性的成分(active ingredient, APai)之穿心蓮有機溶劑萃取物。

於是，本發明之一方面係關於，一種包含降血糖藥理活性成分(active ingredient, APai)之穿心蓮有機溶劑萃取物，主要包含230 - 400 mg/g穿心蓮內酯（Andrographolides, A）、50 - 90 mg/g新穿心蓮內酯(Neoandrographolide, NA)及20 - 50 mg/g去氧去氫穿心蓮內酯(14-deoxy-11,12- dehydrogen-andrographolide , DDA)。於本發明之一較佳具體實施態樣，所述之穿心蓮有機溶劑萃取物主要包含180 - 380 mg/g穿心蓮內酯、40 - 85 mg/g新穿心蓮內酯及16 - 45 mg/g去氧去氫穿心蓮內酯。

於本發明之一些具體實施態樣，所述之穿心蓮有機溶劑萃取物包含80-99%之活性成分(APai)。於本發明之一項具體實施態樣，所述之穿心蓮有機溶劑萃取物包含95-99%之活性成分(APai)。

於本發明之一些具體實施態樣，所述之穿心蓮有機溶劑萃取物活性成分(APai)包含230 - 450 mg/g穿心蓮內酯（Andrographolides, A）、50 - 90 mg/g新穿心蓮內酯(Neoandrographolide, NA)及20 - 60 mg/g去氧去氫穿心蓮內酯(14-deoxy-11,12- dehydrogen-andrographolide , DDA)。於本發明之一項較佳具體實施態樣，所述之穿心蓮有機溶劑萃取物活性成分(APai)包含230 - 280 mg/g穿心蓮內酯、50 - 70 mg/g新穿心蓮內酯及20 - 40 mg/g去氧去氫穿心蓮內酯。

於本發明之一些具體實施態樣，所述之穿心蓮有機溶劑萃取物包含99-100%穿心蓮有機溶劑萃取物活性成分(APai)，其中所述之活性成分(APai)包含25%-40%穿心蓮內酯、5%-9%新穿心蓮內酯及2%-5%去氧去氫穿心蓮內酯。於本發明之一項具體實施態樣，所述之穿心蓮有機溶劑萃取物包含25-30%穿心蓮內酯、6-8%新穿心蓮內酯及3-4%去氧去氫穿心蓮內酯。

本發明之另一方面，係關於一種具有降血糖藥理活性之組成物，包含所述之穿心蓮有機溶劑萃取物，其特徵在於包含23%-40%穿心蓮內酯、5%-9%新穿心蓮內酯及2%-5%去氧去氫穿心蓮內酯。

於本發明之一些具體實施態樣，所述之組成物為一醫藥組成物。於本發明之其他具體實施態樣，所述之所述之組成物為一保健食品組成物。

本發明之另一方面，係關於一種用於調控糖尿病患者血糖之醫藥組成物，包含所述之穿心蓮有機溶劑萃取物及醫藥上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。

於本說明書中所稱的“穿心蓮有機溶劑萃取物”係指，穿心蓮乾燥莖之乙醇粗萃取物進一步以乙醇、正己烷、正丁醇與乙酸乙酯等有機溶劑進行萃取、濃縮及乾燥而得者。經由活性測試及分析，本發明之穿心蓮有機溶劑萃取物包含具有降血糖活性成分(active ingredient, APai)。

本發明之其他特色及優點將於下列實施範例中被進一步舉例與說明，而該實施範例僅作為輔助說明，並非用於限制本發明之範圍。

實施例一、 穿心蓮有機溶劑萃取物之製備

將穿心蓮乾燥莖(4.0 kg)切碎，並於迴流下以60升乙醇萃取兩次。將組合之萃取物於減壓下進行濃縮，而得到乾燥的粗萃取物(產率8.75%)。將前述之乙醇粗萃取物依序使用下列有機溶劑及萃取條件：乙醇(95%)在室溫下萃取36-72小時共5-7次、正己烷(100%)在室溫下萃取12-36小時共4-7次、正丁醇(100%)在室溫下萃取12-48小時共7-10次、乙酸乙酯(100%)在室溫下萃取12-36小時共7-10次，透過系統分離法進行連續萃取與分離，之後將所得之有機萃取物利用減壓濃縮機及烘箱進行濃縮與乾燥，取得萃取物粉末，即本發明之穿心蓮有機溶劑萃取物活性成分(APai)。

實施例二、 穿心蓮有機溶劑萃取物之活性成分(active ingredient, APai)組成物的指標化合物含量分析

進一步利用二溶劑-HPLC分析系統，測定本發明穿心蓮有機溶劑萃取物活性成分組成物(APai)之主要組成物質的含量，溶劑A為100%乙腈，溶劑B為0.25%甲酸，分析條件如下述： 1. 移動相(Mobil phase) 起始條件為31%溶劑B，0-12分鐘改變成35%溶劑B，12-23分鐘改變成35%溶劑B，23-28分鐘改變成31%溶劑B，28-38分鐘改變成31%溶劑B。使用Shimadzu Class VP^TM 軟體進行整合與校正。透過高峰面積與線性回歸進行評估。 2. 管柱：LiChrospher^® C18, 5 μm, (250 X 4.6 mm, 5 mm) 3. 流速：1 mL / min 4. UV偵測：210, 232 and 254 nm，使用SPD-M10AVP photodiode array detector (Japan) 5. 注射體積：20 μL

接著進行檢量線的製作，定量活性成分組合物中A, NA及DDA之含量。藉由配置標準物工作溶液(10 - 300 µg/mL)及內在標準物工作溶液，來訂出檢量曲線(Calibration curve)數據。透過繪製標準物對內在標準物之高峰面積比例圖，來建構檢量曲線。準確度以日內(intra-day)及日間(inter-day) RSD表示。標準物之日內及日間RSD是分別於同一天及連續三天進行分析得到，每次實驗包含三重複組。檢出極限(LOD)係測定為對應於信號對雜訊比為3:1之標準物含量。定量極限(LOQ)係測定為能夠以可接受之精確度及正確度，在具有信號對雜訊比為至少10之實驗條件下得到的最低標準物濃度。

圖1所示為混合標準物溶液於210、232及254 nm下測得之重疊層析圖譜。A、NA及DDA標準物之滯留時間(retention time)分別為6.13、11.83及18.68 min，而卡巴氮平(內在標準物)之滯留時間為10.03 mA、NA及DDA標準物係於232、210及210 nm呈現最大吸光值。因此，A標準物的線性度、精確度及回收率係於232 nm下進行計算；而NA及DDA標準物的線性度、精確度及回收率係於210 nm下進行計算。此等選擇的吸光值亦應用於卡巴氮平(內在標準物)之吸光值。

經由注射八種濃度(10 - 300 µg/20 µL)之含有A、NA及DDA的標準物工作溶液，來評估標準曲線之線性度。將高峰面積與濃度進行最小平方線性回歸分析，以計算校準方程式和相關判定係數。單獨A標準物於濃度範圍20 - 300 µg/20 µL內獲得的線性度為0.9990 ± 0.0003，或者以A標準物對內在標準物之鋒面積比與相關判定係數獲得的線性度為0.9948 ± 0.0009。單獨NA 標準物於濃度範圍20 - 300 µg/20 µL內獲得的線性度為0.9986 ± 0.0002，或者以NA標準物對內在標準物之鋒面積比與相關判定係數獲得的線性度為0.9939 ± 0.0012。單獨DDA標準物於濃度範圍20 - 300 µg/20 µL內獲得的線性度為0.9956 ± 0.0020，或者以DDA標準物對內在標準物之鋒面積比與相關判定係數獲得的線性度為0.9988 ± 0.0004。

中間精確度可呈現出實驗室偏差，以日內及日間偏差表示。於同一天(日內)及於不同天(日間)進行A、NA及DDA標準物之八種濃度(10 - 300 μg/20 μL)判定，並以相對標準偏差百分比(% RSD)或變異係數表示(CV)。結果顯示，對於A標準物之日內及日間分析的% RSD係落在0.54 - 9.21範圍內；對於NA標準物之日內及日間分析的% RSD係落在0.54 - 8.03範圍內；而對於DDA標準物之日內及日間分析的% RSD係落在1.00 - 14.97範圍內。

該方法的準確性是從回收率研究確定。預分析樣品中摻入了三種不同濃度的A、NA及DDA標準物，然後將混合物以建議的方法進行分析。結果得知，A標準物之回收率範圍介於96.93 - 100.23%，而計算A標準物之平均回收百分比值為98.41 ± 1.68%。NA標準物之回收率範圍介於97.03 - 102.14%，而計算NA標準物之平均回收百分比值為99.64 ± 2.55%。DDA標準物之回收率範圍介於97.09 - 105.23%，而計算DDA標準物之平均回收百分比值為100.92 ± 4.40%。

藉由比對由光二極體列陣偵測儀得到之標準物與樣本的高峰光譜及純度，確定相對應於存在APai中之A、NA與DDA的高峰。圖1顯示本發明穿心蓮有機溶劑萃取物活性組成於210、232及254 nm下的HPLC多重層析圖譜。存在APai中A、NA 及DDA之含量計算結果如下表1所示。因此，穿心蓮內酯(A)含量為235.10±1.64 mg/g；新穿心蓮內酯(NA)含量為52.31±4.62 mg/g；去氧去氫穿心蓮內酯(DDA)含量為22.68±1.13 mg/g。本實例提供之分析數值，會因所採收之穿心蓮來源、產地及產季而有所變化，但經由以下的藥理活性實驗證明，本發明萃取方法所得之穿心蓮有機溶劑萃取物活性成分具有降血糖功效。表 1. 存在APai中A、NA 及DDA之含量

實施例三、 穿心蓮有機溶劑萃取物活性成分組成物對於 鏈佐黴素STZ-誘導之第II型 糖尿病鼠之血糖調控功效評估

雄性ICR小鼠(19-21 g)係購自台灣BioLASCO Co., Ltd。小鼠餵養於環球科技大學之動物中心，溫度調控於22 ± 2℃，相對濕度55 ± 5%且於實驗前一周施予12小時光照/12小時黑暗週期。對於第II型糖尿病鼠之誘導，係將菸鹼醯胺(Sigma, Saint Louis, MO, USA)食鹽水溶液(210 mg/kg b.w.)以腹膜內注射入小鼠，經15分鐘後將於使用前溶解於檸檬酸鹽緩衝液(pH 4.5)之鏈佐黴素(STZ) (Sigma, 180 mg/kg b. w., i.p.注射)投藥給該小鼠。對照組係接受該二種載劑者。於實驗期間，每週一次記錄實驗動物之食物攝取量及體重。本發明穿心蓮有機溶劑萃取物活性成分組成物APai之投藥量為：E10組: APai 10 mg/kg ; E20組: APai 20 mg/kg ; E40組: APai 40 mg/kg ; E80組: APai 80 mg/kg。其中為如前述實施例一所製備得之穿心蓮有機溶劑萃取物活性成分組成物，經Tween 20溶解後調整成0.5%甲基纖維素(CMC)溶液。臨床觀察

每天至少進行兩次觀察動物之身體狀況，每次觀察的時間間隔不少於6小時，以確定動物的健康或死亡狀態。每天至少一次觀察試驗動物之臨床病徵，記錄試驗動物所表現出的毒性作用，包括該等毒性作用的開始時間及過程。試驗結束後，將存活的小鼠犧牲；之後進行屍體解剖，採取血液樣本進行血清生化分析。

由臨床觀察之結果顯示，本發明之穿心蓮有機溶劑萃取物活性成分組成物APai (E10、E20、E40、E80 mg/kg)可降低因菸鹼醯胺-鏈佐黴素誘導第II型糖尿病小鼠的飲水量(圖2A)。且APai (E10、E20、E40、E80 mg/kg)能夠降低因菸鹼醯胺-鏈佐黴素誘導第II型糖尿病小鼠的飲食量(圖2B)。表示本發明之可減輕糖尿病小鼠的臨床病徵。口服葡萄糖耐受性試驗 ( OGTT)

進行口服葡萄糖耐受性試驗，來評估周邊葡萄糖利用率。將糖尿病小鼠斷食16小時，同時記錄體重。在投藥本發明之穿心蓮有機溶劑萃取物活性成分組成物APai (E10、E20、E40、E80 mg/kg) 30分鐘後，於給予葡萄糖之前採集血液樣本測定樣本中的血糖濃度，此為0 min血糖值。給予葡萄糖(2 g/kg) 30、60、90及120分鐘後，採集血液樣本測定樣本中的血糖濃度。

圖3之結果顯示，給予STZ會明顯提升處理組小鼠之血糖值，與正常小鼠(Sham)組比較，在0.5、1、1.5及2小時有顯著的差異。

APai可改善STZ的傷害作用，尤其在1.5及2小時的血糖有顯著的差異，隨著APai劑量的升高(10、20、40 mg/kg)，降低血糖的效果越益明顯，但升高劑量的80 mg/kg時，效果變差。

而圖4之血糖監測結果顯示，給予STZ明顯升高空腹血糖，與Sham比較時，在0, 7, 14, 21 及28天的血糖值有顯著的差異。APai (E20、E40、E80 mg/kg)可降低菸鹼醯胺-鏈佐黴素所誘導第II型糖尿病小鼠血液血糖值升高現象，其中以E40 mg/kg連續投藥28天的效果最佳。糖化血色素(HbA1c) 分析

「糖化血色素」(HbA1c)是指人體血液中的紅血球含有血色素，當血液中的葡萄糖進入紅血球，和血紅素結合後，就形成糖化血色素。一般紅血球平均壽命為120天，葡萄糖附在血色素上不容易脫落，因此檢查血中糖化血色素的濃度，可以反應體內最近2-3個月的血糖控制情況。HbA1C 與血糖的最大差別在於血糖值只代表抽血當時的血糖狀態，而較長時期的血糖控制情形，則須靠 HbA1C 來反映。HbA1C 是偵測早期糖尿病的優良指標，這些患者的病情較輕，原本稍微偏高的血糖在飢餓一段時間後常掉回正常範圍，因此空腹測定血糖時，經常遺漏這類患者，然而 HbA1C 卻無此缺點2009年美國糖尿病學會提出以「糖化血色素」＞=6.5%作為糖尿病診斷標準，因此「糖化血色素」除了當作糖尿病的血糖追蹤指標以外，也是新的診斷工具。HbA1C (醣化血色素，glycated hemoglobin) 近幾年已被廣泛應用於需要監控血糖值的糖尿病患者，它可反應採血前一個月左右的血糖控制狀況，並可用來監督血糖控制的情形，還可作為調整藥量的依據。

於是，本實驗針對糖尿病小鼠在未接受及接受不同劑量APi投藥下，檢測其血液中糖化血色素(HbA1c)含量。圖5之結果顯示，STZ明顯升高HbA1c，與Sham比較時，有顯著的差異。投藥APai (E10, E20, E40, E80 mg/kg)可降低菸鹼醯胺-鏈佐黴素所誘導第II型糖尿病小鼠血液中HbA1c升高現象，其中以E40 mg/kg連續投藥28天的效果最佳。

綜合以上之實驗結果，本發明之穿心蓮有機溶劑萃取物活性成分組成物具有減輕由菸鹼醯胺-鏈佐黴素所誘導第II型糖尿病的病癥，且能有效調控糖尿病鼠之血糖，尤其以40 mg/kg之劑量所達到的效果最為顯著。因此，本發明之穿心蓮有機溶劑萃取物活性成分組成物可用於研發製造天然降血糖藥物或保健食品。

無

圖1為混合標準物溶液於、及下測得之多重層析圖譜，圖中標示穿心蓮內酯（A）、新穿心蓮內酯(NA)及去氧去氫穿心蓮內酯(DDA)之吸收高峰位置。

圖2係顯示各種劑量(E20, E40, E80 mg/kg)之本發明穿心蓮有機溶劑萃取物APai對於菸鹼醯胺-鏈佐黴素誘導第II型糖尿病小鼠的飲水量(A)及飲食量(B)的影響。

圖3係顯示各種劑量(E20, E40, E80 mg/kg)之本發明穿心蓮有機溶劑萃取物APai對於菸鹼醯胺-鏈佐黴素誘導第II型糖尿病小鼠之口服葡萄糖耐受性試驗的影響。各數值以平均值± SEM表示。^## P ＜ 0.01係相較於正常動物組(Sham組)。* P ＜ 0.05, ** P ＜ 0.01, *** P＜ 0.001係相較於STZ誘導處理組。

圖4係顯示各種劑量(E20, E40, E80 mg/kg)之本發明穿心蓮有機溶劑萃取物APai對於菸鹼醯胺-鏈佐黴素誘導第II型糖尿病小鼠在28-天重複口服投藥之血糖值的影響。各數值以平均值± SEM表示。^## P ＜ 0.01,^## P ＜ 0.001係相較於正常動物組(Sham組)。* P ＜ 0.05, ** P ＜ 0.01, *** P＜ 0.001係相較於STZ誘導處理組。

圖5係顯示各種劑量(E20, E40, E80 mg/kg)之本發明穿心蓮有機溶劑萃取物APai對於菸鹼醯胺-鏈佐黴素誘導第II型糖尿病小鼠在28-天重複口服投藥之HbA1c值的影響。各數值以平均值± SEM表示。^## P ＜ 0.01係相較於正常動物組(Sham組)；* P ＜ 0.05, ** P ＜ 0.01係相較於STZ誘導處理組。

Claims

一種製備包含降血糖活性成分(active ingredient,APai)之穿心蓮乾燥莖有機溶劑萃取物的方法，其特徵在於包含：(1)將穿心蓮乾燥莖於迴流下以乙醇萃取兩次得到乙醇粗萃取物；(2)將步驟(1)之乙醇粗萃取物依次使用乙醇(95%)、正己烷(100%)、正丁醇(100%)和乙酸乙酯(100%)進行萃取與分離得到有機萃取物；及(3)將步驟(2)之有機萃取物經濃縮與乾燥而得到穿心蓮乾燥莖有機溶劑萃取物粉末，其中包含降血糖活性成分包含230-400mg/g穿心蓮內酯(Andrographolides,A)、50-90mg/g新穿心蓮內酯(Neoandrographolide,NA)及20-50mg/g去氧去氫穿心蓮內酯(14-deoxy-11,12-dehydrogen-andrographolide,DDA)。
如請求項1所述之製備方法，其中該穿心蓮乾燥莖有機溶劑萃取物包含95-99%之該降血糖理活性成分(APai)。
如請求項2所述之製備方法，其特徵在於該穿心蓮乾燥莖有機溶劑萃取物包含25-30%穿心蓮內酯、6-8%新穿心蓮內酯及3-4%去氧去氫穿心蓮內酯。
如請求項1所述之製備方法，其中該穿心蓮乾燥莖有機溶劑萃取物包含99-100%之降血糖活性成分(APai)，且其中該降血糖活性成分包含23%-40%穿心蓮內酯、5%-9%新穿心蓮內酯及2%-5%去氧去氫穿心蓮內酯。
一種如請求項1之製備方法所得之穿心蓮乾燥莖有機溶劑萃取粉末用於製備降低第II型糖尿病患者血糖的組成物之用途。
如請求項5所述之用途，其中該組成物為一用於降低第二型糖尿病患者血糖的醫藥組成物，進一步包含醫藥上可接受的載劑、稀釋劑或賦形劑。
如請求項5所述之用途，其中該組成物係用於製備一保健食品組成物。
一種包含如請求項1之製備方法所得之降血糖活性成分之組成物，其中降血糖活性成分包含230-400mg/g穿心蓮內酯(Andrographolides,A)、50-90mg/g新穿心蓮內酯(Neoandrographolide,NA)及20-50mg/g去氧去氫穿心蓮內酯(14-deoxy-11,12-dehydrogen-andrographolide,DDA)。