[go: up one dir, main page]

TWI488662B - 基於血纖維蛋白元與硫酸化多醣的製劑 - Google Patents

基於血纖維蛋白元與硫酸化多醣的製劑 Download PDF

Info

Publication number
TWI488662B
TWI488662B TW098142392A TW98142392A TWI488662B TW I488662 B TWI488662 B TW I488662B TW 098142392 A TW098142392 A TW 098142392A TW 98142392 A TW98142392 A TW 98142392A TW I488662 B TWI488662 B TW I488662B
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
fibrin clot
heparin
sulfated
fibrinogen
fibrin
Prior art date
Application number
TW098142392A
Other languages
English (en)
Other versions
TW201032838A (en
Inventor
Michael Dockal
Friedrich Scheiflinger
Hans Christian Hedrich
Witsch Klaus Tschetschko
Andreas Goppelt
Original Assignee
Baxter Int
Baxter Healthcare Sa
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Baxter Int, Baxter Healthcare Sa filed Critical Baxter Int
Publication of TW201032838A publication Critical patent/TW201032838A/zh
Application granted granted Critical
Publication of TWI488662B publication Critical patent/TWI488662B/zh

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/36—Blood coagulation or fibrinolysis factors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L24/00—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices
    • A61L24/04—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices containing macromolecular materials
    • A61L24/10—Polypeptides; Proteins
    • A61L24/106—Fibrin; Fibrinogen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/70—Web, sheet or filament bases ; Films; Fibres of the matrix type containing drug
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L15/00—Chemical aspects of, or use of materials for, bandages, dressings or absorbent pads
    • A61L15/16—Bandages, dressings or absorbent pads for physiological fluids such as urine or blood, e.g. sanitary towels, tampons
    • A61L15/42—Use of materials characterised by their function or physical properties
    • A61L15/44—Medicaments
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L24/00—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices
    • A61L24/04—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices containing macromolecular materials
    • A61L24/043—Mixtures of macromolecular materials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L33/00—Antithrombogenic treatment of surgical articles, e.g. sutures, catheters, prostheses, or of articles for the manipulation or conditioning of blood; Materials for such treatment
    • A61L33/06—Use of macromolecular materials
    • A61L33/08—Polysaccharides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P41/00—Drugs used in surgical methods, e.g. surgery adjuvants for preventing adhesion or for vitreum substitution
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2400/00—Materials characterised by their function or physical properties
    • A61L2400/04—Materials for stopping bleeding

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Surgery (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

基於血纖維蛋白元與硫酸化多醣的製劑
本發明係關於一種包含血纖維蛋白元與硫酸化多醣之製劑、由其獲得之血纖維蛋白凝塊樣結構、止血貼片，及使用上述者之方法。
基於血纖維蛋白元之組織黏著劑可用於無縫及/或有縫支撐式接合人類或動物組織或器官部分以封閉傷口、止血及促進傷口癒合。其作用模式係基於以下事實：即用型液體組織黏著劑中所含之(可溶性)血纖維蛋白元可由凝血酶轉化為(不溶性)血纖維蛋白。在液體組織黏著劑中亦可包括因子XIII，其中因子XIII在凝血酶作用下被活化為因子XIIIa。該因子XIIIa使所形成之血纖維蛋白交聯，形成可提高組織黏著劑之有效性的高分子量聚合物。所需之凝血酶活性可來源於欲黏著之組織(傷口表面)或可在封閉過程中以含凝血酶及Ca2+ 離子之溶液之形式添加至組織黏著劑中。基於血纖維蛋白元之組織黏著劑可自AT-B-359 653、AT-B-359 652及AT-B-369 990中得知。除血纖維蛋白元及因子XIII以外，其亦可含有其他蛋白質，諸如纖維結合蛋白及白蛋白及視情況選用之抗生素製劑。US5,962,405(Seelich；Immuno AG)揭示呈凍乾形式或由超低溫冷凍液體製劑所產生之形式(超低溫冷凍型)的儲存穩定性血纖維蛋白元製劑，該等形式可快速且以簡單方式復原及液化，形成即用型血纖維蛋白元及/或組織黏著劑溶液。該等製劑由Baxter Healthcare公司(CA,USA)以血纖維蛋白封閉劑(Fibrin Sealant)出售。
止血貼片(諸如由膠原蛋白製成之止血貼片)可在各種外科程序中用於封閉組織及控制出血。其可與組織黏著劑(諸如血纖維蛋白膠)之塗層一起使用。或者，可利用由塗有凝血酶及血纖維蛋白元之膠原蛋白海綿製成之止血貼片，諸如或(Nycomed)。
血纖維蛋白封閉劑及止血貼片可允許安全止血、封閉物良好地黏著於傷口及/或組織區域、高強度黏著及/或傷口封閉、黏著劑可在傷口癒合過程中被完全再吸收，且可具有促進傷口癒合之性質。儘管如此，通常有必要使所封閉之組織部分固持在所要位置數分鐘以確保凝固之血纖維蛋白封閉劑牢牢黏著於周圍組織。促進血纖維蛋白凝塊形成及/或強化血纖維蛋白凝塊結構之化合物可改良血纖維蛋白封閉劑及止血貼片。舉例而言，強化之凝塊將不易發生血纖維蛋白溶解並將較為穩定且持續較長時間。
本說明書中對先前公開之文獻的列舉或論述不應視為承認該文獻為現有技術之一部分或為一般常識。
在第一態樣中，本發明提供一種包含血纖維蛋白元與硫酸化多醣之製劑，其呈單組分組成物形式或呈包含血纖維蛋白元及硫酸化多醣作為獨立組分之分裝部分之套組形式。
在第二態樣中，本發明提供一種血纖維蛋白凝塊樣結構，其可由包含以下步驟之方法獲得：
(a)　提供呈溶液形式之本發明之製劑；
(b)　提供呈視情況含有凝血酶之獨立組分形式或呈與本發明之硫酸化多醣組分一起、視情況含有凝血酶之溶液形式的含陽離子溶液；
(c)　視情況提供凝血酶溶液；及
(d)　同時或按任何順序相繼混合(a)及(b)及視情況選用之(c)以便獲得血纖維蛋白凝塊樣結構。
在第三態樣中，本發明提供一種止血貼片，其包含：
(1)　載體，及
(2)　至少一種為硫酸化多醣之止血劑，其中若該載體為硫酸化多醣，則其不為與該止血劑相同之硫酸化多醣。
在第四態樣中，本發明提供一種雙組分注射器系統，其包含：
(a)　於第一筒中之如技術方案1之單組分組成物，及
(b)　於第二筒中之含陽離子製劑以及視情況選用之凝血酶；或
(a′)於第一筒中之如技術方案1之獨立的硫酸化多醣及含陽離子製劑以及視情況選用之凝血酶，及
(b`)　於第二筒中之血纖維蛋白元製劑。
在第五態樣中，本發明提供本發明之製劑、本發明之血纖維蛋白凝塊樣結構或本發明之貼片用於增強止血的用途。
在第六態樣中，本發明提供本發明之製劑、本發明之血纖維蛋白凝塊樣結構或本發明之貼片用於傷口癒合的用途。
在第七態樣中，本發明提供本發明之製劑、本發明之血纖維蛋白凝塊樣結構或本發明之貼片用作藥物傳遞系統的用途。
在第八態樣中，本發明提供一種組織封閉或組織黏合之方法，該方法包含在傷口表面上施用本發明之製劑、本發明之血纖維蛋白凝塊樣結構或本發明之貼片。
在第一態樣中，本發明提供一種包含血纖維蛋白元與硫酸化多醣之製劑，其呈單組分組成物形式或呈包含血纖維蛋白元及硫酸化多醣作為獨立組分之分裝部分之套組形式。
血纖維蛋白元製劑在先前技術中眾所周知。血纖維蛋白元製劑典型地為凍乾製劑或冷凍溶液。適合之製劑可如US 5,962,405中所述製備，US 5,962,405揭示用於增加血纖維蛋白元溶解性、降低經超低溫冷凍之濃縮血纖維蛋白元及/或組織黏著劑溶液之液化溫度以及其在室溫下之黏度的物質。該等物質包括苯、吡啶、哌啶、嘧啶、嗎啉、吡咯、咪唑、吡唑、呋喃、噻唑、嘌呤化合物或維生素類、核酸鹼基類、核苷類或核苷酸類，其含量按血纖維蛋白元公克數計較佳為0.03 mmol至3 mmol，最佳為0.07 mmol至1.4 mmol。該等物質例如為苯甲酸、對胺基苯甲酸(維生素H')、對胺基水楊酸、羥基苯甲酸、羥基水楊酸苯丙胺酸、普魯卡因(procaine)、煙酸、菸鹼醯胺、吡啶甲酸、維生素B6 (吡哆醇)、羥基吡啶、吡啶二羧酸、吡啶磺酸、哌啶羧酸酯、嘧啶、巴吡妥酸(barbituric acid)、尿嘧啶、尿核苷、磷酸尿核苷、胸腺嘧啶、胞嘧啶、胞嘧啶核苷、羥基嘧啶、噻胺(維生素B1 )、嗎啉、吡咯啶酮、咪唑、組胺酸、乙內醯脲、吡唑二羧酸、非那宗(phenazone)、腺苷、磷酸腺苷、肌苷、磷酸鳥苷、α-糠酸(呋喃-2-甲酸)、抗壞血酸(維生素C)及黃嘌呤核苷。尤佳物質為組胺酸及菸鹼醯胺。在組織黏著劑溶液中具有效用之其他組分，諸如關於本發明之第一態樣所論述的彼等組分可包括於血纖維蛋白元製劑中。
若血纖維蛋白元製劑為凍乾的，則其必須加以復原。此典型地係藉由添加水(典型地為添加注射用水)或溶液來達成。該溶液可提供適用的溶質，諸如抑肽酶，其為一種血纖維蛋白溶解抑制劑。可進行加熱及/或攪動或攪拌以促進組織黏著劑溶液之復原。當血纖維蛋白元製劑為冷凍的時，典型的是加熱製劑使其解凍，於是其變成組織黏著劑溶液。然而，在解凍期間或解凍後，可向血纖維蛋白元製劑中添加其他物質。
適合之血纖維蛋白元溶液及其製造方法描述於US 5,962,405中。即用型血纖維蛋白元溶液一般每毫升含有60-120 mg血纖維蛋白元。血纖維蛋白元組分可視情況進一步含有因子XIII及視情況選用之纖維結合蛋白或少量在傷口癒合過程中可有利之血纖維蛋白溶酶元。亦可視情況包括血纖維蛋白溶酶元活化劑抑制劑及血纖維蛋白溶酶抑制劑，諸如抑肽酶、α2 -血纖維蛋白溶酶抑制劑、α2 -巨球蛋白及其類似物。該等組分一般視情況包括於血纖維蛋白元溶液中。血纖維蛋白元溶液一般不含有自由鈣離子，因為該等離子可能會引起殘餘之微量凝血酶元活化，且因此引起提前之不希望有的凝結現象。典型的是在組織黏著劑溶液中包括鈣螯合劑以錯合殘餘鈣離子。適合包括呈生理學上可接受之鹽形式的檸檬酸鹽作為此類試劑，諸如檸檬酸三鈉。因此，即用型血纖維蛋白元溶液一般每毫升含有70-120 mg血纖維蛋白元、視情況選用之0.5-50 U因子XIII、視情況選用之0.5至15 mg纖維結合蛋白、0至150 μg血纖維蛋白溶酶元及0至20,000 KIU抑肽酶，較佳為含有1,000至15,000 KIU抑肽酶。例示性組織黏著劑溶液為血纖維蛋白封閉劑(Baxter Healthcare公司,CA)之封閉劑蛋白質溶液，其包含67-106 mg/ml人血纖維蛋白元、2250-3750 KIU/ml抑肽酶血纖維蛋白溶解抑制劑、人類白蛋白、25 mmol/l檸檬酸三鈉、組胺酸、菸鹼醯胺、聚山梨醇酯80及注射用水。
如本文所使用之術語「多醣(polysaccharide)」係指包含多個(亦即兩個或兩個以上)共價鍵聯之醣殘基的聚合物。鍵聯可為天然或非天然的。天然鍵聯包括例如醣苷鍵，而非天然鍵聯可包括例如酯、醯胺或肟鍵聯部分。多醣可具有寬泛的平均分子量(MW)值範圍內之任何分子量，但一般為至少約300道爾頓。舉例而言，多醣之分子量可為至少約500、1000、2000、4000、6000、8000、10,000、20,000、30,000、50,000、100,000、500,000道爾頓或甚至更高。多醣之分子量可利用高效尺寸排阻層析法測定。多醣可具有直鏈或分支鏈結構。多醣可包括由較大多醣降解(例如水解)所產生之多醣片段。降解可由熟習此項技術者已知之各種方式中的任一種來達成，該等方式包括用酸、鹼、熱或酶處理多醣來得到降解之多醣。多醣可以化學方式來改變且可具有變體，包括(但不限於)硫酸化、多硫酸化、酯化及甲基化形式。
原則上，多醣之單醣組分上的任何自由羥基均可經硫酸化修飾以產生潛在適用於本發明之實施的硫酸化多醣。舉例而言，該等硫酸化多醣可包括(但不限於)硫酸化黏多糖(D-葡萄胺糖及D-葡糖醛酸殘基)、卡德蘭(curdlan)(羧甲基醚、硫酸氫鹽、羧基甲基化卡德蘭)(Sigma-Aldrich)、硫酸化裂褶菌多醣(sulfated schizophyllan)(Itoh等人,(1990) Int. J. Immunopharmacol. 12:225-223；Hirata等人,(1994) Pharm. Bull. 17:739-741)、硫酸化葡萄糖胺聚糖、硫酸化多醣-肽聚糖複合物、硫酸化烷基麥芽寡醣(Katsuraya等人,(1994)Carbohydr Res. 260:51-61)、硫酸支鏈澱粉、N-乙醯基-肝素(NAH)(Sigma-Aldrich)、N-乙醯基-脫-O-硫酸化肝素(NA-de-o-SH)(Sigma-Aldrich)、脫-N-硫酸化肝素(De-NSH)(Sigma-Aldrich)及脫-N-硫酸化乙醯基化肝素(De-NSAH)(Sigma-Aldrich)。
硫酸化多醣作為一類之特徵在於在動物及人類中生物活性過多且具有通常有利的耐受性分布。該等多陰離子分子通常源自植物及動物組織且涵蓋寬泛範圍之亞類，包括肝素、葡萄糖胺聚糖、岩藻糖膠、角叉菜膠、戊聚糖多硫酸酯及硫酸皮膚素或硫酸葡聚醣(Toida等人,(2003) Trends in Glycoscience and Glycotechnology 15:29-46)。已報導了分子量較低、異質程度較小且以化學方式合成之硫酸化多醣，且其已達到藥物開發之各階段(Sinay(1999) Nature 398:377-378；Orgueira等人,(2003) Chemistry 9:140-169；Williams等人,(1998) Gen. Pharmacol. 30:337-341)。
製劑適合為每毫克血纖維蛋白元包含0.01 μg至5000 μg硫酸化多醣。製劑典型地為每毫克血纖維蛋白元包含0.01、0.02、0.05、0.10、0.15、0.25、0.5、1、2、5、10、20、50、100、200或300 μg硫酸化多醣。
在第二態樣中，本發明提供一種血纖維蛋白凝塊樣結構，其可由包含以下步驟之方法獲得：
(a)　提供呈溶液形式之本發明之製劑；
(b)　提供呈視情況含有凝血酶之獨立組分形式或呈與本發明之硫酸化多醣組分一起、視情況含有凝血酶之溶液形式的含陽離子溶液；
(c)　視情況提供凝血酶溶液；及
(d)　同時或按任何順序相繼混合(a)及(b)及視情況選用之(c)以便獲得血纖維蛋白凝塊樣結構。
陽離子為至少二價，較佳來自由鈣、鎂、鋇及鍶組成之群，最佳為鈣，例如CaCl2 。
可藉由混合(同時或按任何順序相繼混合)血纖維蛋白元溶液、硫酸化多醣溶液、含陽離子(例如鈣離子)溶液以及視情況選用之凝血酶溶液以便形成血纖維蛋白凝塊樣結構來獲得血纖維蛋白凝塊樣結構。
亦可藉由混合(同時或按任何順序相繼混合)含血纖維蛋白元及硫酸化多醣之溶液、含陽離子(例如鈣離子)溶液以及視情況選用之凝血酶溶液以便形成血纖維蛋白凝塊樣結構來獲得血纖維蛋白凝塊樣結構。
亦可藉由混合(同時或按任何順序相繼混合)血纖維蛋白元溶液、硫酸化多醣及含陽離子(例如鈣離子)溶液以及視情況選用之凝血酶溶液以便形成血纖維蛋白凝塊樣結構來獲得血纖維蛋白凝塊樣結構。
亦可藉由混合(同時或按任何順序相繼混合)血纖維蛋白元溶液、硫酸化多醣溶液(該兩種溶液呈獨立的溶液形式或呈一種溶液形式)及凝血酶以及含陽離子(例如鈣)溶液以便形成血纖維蛋白凝塊樣結構來獲得血纖維蛋白凝塊樣結構。
凝血酶可以凍乾製劑或冷凍溶液形式提供。凍乾製劑可藉由在進行或不進行加熱及/或攪動/攪拌之情況下添加水或溶液來復原。典型地在凍乾物中，或在用於復原凝血酶製劑之溶液中包括呈生理學上可接受之鹽形式之鈣離子。典型的是解凍冷凍溶液以提供凝血酶溶液，但在解凍期間或解凍後可添加諸如CaCl2 之其他物質。
凝血酶溶液典型地包含鈣離子，適合為CaCl2 ，較佳濃度為36-44 μmol/mL。
含所需凝血酶活性之凝血酶溶液可來源於欲封閉之組織(傷口表面)，或其可以外源性方式添加。在此項技術中已知適合之外源性凝血酶溶液。雖然用於形成血纖維蛋白封閉劑之凝血酶溶液之最佳凝血酶濃度視臨床適應症而定，但典型地在1 IU/ml至1000 IU/ml範圍內。現今，將含凝血酶溶液之凝血酶活性與根據定義每安瓿具有110 IU之第二國際標準相比較(Whitton等人,Thromb Haemost 2005;93: 261-6)。可利用數種用於分析凝血酶活性之檢定，包括以凝塊為基礎及顯色之測試(Gaffney及Edgell,Thromb Haemost 1995;74: 900-3)。為達成快速止血，使用引起幾乎瞬時凝塊之高凝血酶濃度。實例為血纖維蛋白封閉劑(Baxter Healthcare公司,CA)之凝血酶溶液，其包含400-625 IU/ml之人凝血酶；及及血纖維蛋白封閉劑(Omrix)之凝血酶溶液，該溶液之人凝血酶活性為1000 IU/ml。若意欲使用血纖維蛋白封閉劑作為黏膠(例如在整容或重建外科手術中)，則使用較低凝血酶濃度以便在凝塊出現之前留出更多時間給外科醫師來操作。對於該等適應症，在許多國家之市面上出售含有4 IU/ml凝血酶之血纖維蛋白封閉劑變體。在過去，具有低得多的凝血酶濃度(低於1 IU/ml)之血纖維蛋白封閉劑並不實用，此係因為凝血時間將會太長。然而，當根據本發明之第一態樣包括硫酸化多醣時，使用具有諸如1 IU/ml之低凝血酶濃度的凝血酶溶液可能切實可行。凝血酶溶液及其製造方法揭示於US 5,714,370(Eibl及Linnau；Immuno AG)中。在本發明之第一態樣之方法中，典型地在凝血酶溶液中提供鈣離子。雖然典型地以CaCl2 提供鈣離子，但除CaCl2 以外或作為CaCl2 之另一選擇，可使用其他可溶性且生理學上相容之鈣鹽(諸如乳酸鈣及/或葡萄糖酸鈣)。凝血酶溶液中之鈣濃度典型地為約40 mM。舉例而言，血纖維蛋白封閉劑(Baxter Healthcare公司,CA)含有36-44 mM CaCl2 。典型的是在混合之前加熱凝血酶溶液及組織黏著劑溶液，典型的是加熱至37℃。
本發明之製劑可以局部製劑形式使用。「局部製劑(topical preparation)」意謂可在個體之特定部位(典型地為組織或傷口表面)形成血纖維蛋白凝塊樣結構。為達成此效果，在局部部位混合在陽離子(例如鈣)存在下包含血纖維蛋白元及硫酸化多醣之溶液與視情況選用之凝血酶溶液，或在外部將其混合，隨後在凝塊形成完成之前引入局部部位。後者之一實例為如在WO 96/22115(Baxter International Healthcare,IL)中，當使用血纖維蛋白凝塊作為黏膠將交聯之血纖維蛋白之自撐式薄片樣物質黏著於某一部位以阻止或減少術後黏著之形成時。不必在將薄片樣物質引入局部部位之前完全形成凝塊，或該物質不會黏著於該部位。由本發明之第一態樣之方法於原位形成的凝塊可能用作外科手術中之止血佐劑，該等外科手術包括心肺繞道術及由腹部鈍傷或穿透傷所造成之脾損傷之治療；或用作結腸吻合術閉合中之佐劑。
血纖維蛋白凝塊樣結構可例如用作黏著細胞(尤其哺乳動物細胞)之培養的基底，用於增強止血或用於黏合或封閉組織。
在第三態樣中，本發明提供一種止血貼片，其包含：
(1)　載體，及
(2)　至少一種為硫酸化多醣之止血劑，其中若該載體為硫酸化多醣，則其不為與該止血劑相同之硫酸化多醣。
載體為諸如選自由膠原蛋白、明膠、血纖維蛋白元、血纖維蛋白及多醣或其衍生物或混合物組成之群的生物相容性物質。較佳使用膠原蛋白或其衍生物。
多醣包括例如纖維素及其衍生物，諸如甲基纖維素、羧甲基纖維素、氧化纖維素、幾丁質、幾丁聚糖、軟骨素、玻尿酸、澱粉等。
術語「衍生物(derivative)」包括已以化學或物理方式(例如以熱處理)修飾之物質。
硫酸化多醣之存在量較佳為每平方公分止血貼片之活性表面20 ng至3 mg。
硫酸化多醣可存在於止血貼片之活性表面上或分布於止血貼片之基體內部。
止血貼片可在其活性表面上進一步包含凝血酶及血纖維蛋白元。
「止血貼片(hemostatic patch)」意謂視情況包含一或多種當施用於傷口表面時可促進止血之止血劑的載體。根據本發明，止血貼片包含為硫酸化多醣之止血劑。「止血劑(hemostatic agent)」意謂可促進止血之藥劑，例如抗纖維蛋白溶解劑或凝塊促進劑。雖然載體典型地為固體，但或者可為凝膠。適合之載體描述於US 6,733,774 B2(Stimmeder；Nycomed Pharma AS)及US 7,399,483 B2(Stimmeder；Nycomed Pharma AS)中，且包括膠原蛋白海綿及由生物可降解聚合物製成之或體，該等生物可降解聚合物諸如聚玻尿酸、聚羥基酸(例如乳酸、乙醇酸、羥基丁酸)、纖維素或明膠。該等載體典型地具有可撓性，密度為1-10 mg/cm3 且彈性模數為5-100 N/cm2 。尤佳載體在施用後約4至6個月內酶促降解，從而免除對用外科手術來移除的需要。載體典型地呈纖維(包括微纖維)、織物、發泡體或凝膠形式。載體可為硫酸化多醣，諸如硫酸化纖維素。然而，其可能為與為硫酸化多醣之止血劑相同的硫酸化多醣。
根據本發明之第三態樣，若載體包含硫酸化多醣，則其適合地不為與止血劑相同之硫酸化多醣。
經塗佈之載體之製備可基本上由以下組成：製備活性成分之懸浮液、均勻分布該懸浮液於載體上、乾燥經塗佈之載體直至形成固體組成物或凝膠/使活性成分固定於載體上。該懸浮液典型地包含平均直徑為25-100 μm之粒子。硫酸化多醣之懸浮液典型地係於有機溶劑中製備。均勻分布懸浮液於載體上之方法揭示於US 5,942,278(Hagedorn等人,Nycomed Arzneimittel GmbH,DE)中。US 6,733,774 B2中揭示一種用血纖維蛋白元及凝血酶塗佈載體之方法。熟習此項技術者可容易地調適該等方法以獲得包含硫酸化多醣之止血貼片。
或者，可使硫酸化多醣與止血貼片之纖維(諸如氧化之纖維素薄片)共價鍵聯。在此項技術中熟知進行該共價鍵聯之方式。舉例而言，US 2004/0101546(Gorman及Pendharkar)描述止血劑與氧化之經醛改質之纖維素貼片的共價鍵聯。
作為塗佈於止血貼片表面之另一選擇或除此以外，亦可使硫酸化多醣分布於整個止血貼片中。舉例而言，可將固體載體浸泡在硫酸化多醣之溶液中，接著乾燥。或者，可將硫酸化多醣之溶液或懸浮液與單體溶液組合，隨後發生聚合以形成整個內部均勻地分布有硫酸化多醣之固體載體。舉例而言，可在pH 2-3下使硫酸化多醣與酸溶性膠原蛋白一起溶解。在中和後，形成由膠原蛋白纖維網狀結構組成之膠原蛋白凝膠，在該凝膠液相中含有硫酸化多醣。在冷凍乾燥膠原蛋白凝膠後，獲得一種包含海綿狀膠原蛋白墊之止血貼片，該墊內含有均勻分布之硫酸化多醣。酸溶性膠原蛋白單體之製備及其在中性pH值下之沈澱及凍乾描述於US 6,773,699(Tissue Adhesive Technologies公司)中。膠原蛋白膜綜述於Bunyaratavej P及Wang HL(2001) J. Periodontol. 72:215-29中。
一種替代載體為WO96/22115(Delmotte及Krack；Baxter International Healthcare,IL)中揭示的交聯之血纖維蛋白之自撐式薄片樣物質。該類載體典型地係用作內部創傷性病變治療中之生物-機械障壁，尤其用於預防作為術後併發症之黏著形成。當載體根據本發明之第九態樣含有硫酸化多醣時，其可具有止血性質。
硫酸化多醣之存在可增加止血貼片之止血效能。如本文所述，硫酸化多醣可促進血纖維蛋白產生，且因此可促進傷口表面處之凝塊形成。血纖維蛋白元及凝血酶可在傷口表面處獲得，或可以外源性方式添加。硫酸化多醣之存在量適合藉由促進凝血酶介導之血纖維蛋白產生來影響血纖維蛋白凝塊之形成。該止血貼片比無硫酸化多醣但具有其他類似組成之止血貼片有效於促進止血。止血貼片之止血效能可相對於動物之實驗性傷口來測試，諸如根據US 6,733,774 B2中描述之測試。舉例而言，可在對狗進行脾切開及刺穿或前肝葉尖端切除後48小時進行屍體檢驗，且藉由大體觀察(gross observation)及組織學檢查來尋找繼發性出血之跡象。止血貼片可施用於豬之實驗性脾病變處，且量測出血停止之時間。
硫酸化多醣典型地存在於止血貼片之活性表面上，其量典型地為20 ng/cm2 至3 mg/cm2 ，典型地為0.2至300 μg/cm2 ，例如3至300 μg/cm2 。舉例而言，可用硫酸化多醣塗佈載體。硫酸化多醣典型地呈固體形式並被均勻地分布且固定於載體上。
或者，硫酸化多醣分布於止血貼片之基體內，其量典型地為每平方公分止血貼片之活性表面20 ng至3 mg，典型地為0.2至300 μg/cm2 ，例如3至300 μg/cm2 。止血貼片之「基體(matrix)」為終止於活性表面之載體的一部分或數部分。若基體之深度為1 cm，則硫酸化多醣之存在量典型地為每立方公分基體20 ng至3 mg。若基體之深度為1 mm，則硫酸化多醣之存在量典型地為每立方公分基體200 ng至30 mg。
應瞭解，硫酸化多醣可分布於止血貼片之基體中，且亦可存在於活性表面上。在此情況下，合併於活性表面上及合併於基體中之硫酸化多醣典型地為每平方公分活性表面20 ng至3 mg，且典型地為0.2至300 μg/cm2 ，例如3至300 μg/cm2 。
止血貼片可能不含除硫酸化多醣以外的可促進止血之藥劑。或者，其可含有一或多種其他活性劑，例如抗纖維蛋白溶解劑或可促進凝塊形成之藥劑。在一項較佳具體實例中，止血貼片之活性表面進一步包含凝血酶及血纖維蛋白元。凝血酶之存在量適合為1.0-5.5 IU/cm2 ，較佳為約2.0 IU/cm2 ，且血纖維蛋白元之存在量為2-10 mg/cm2 ，較佳為4.3-6.7 mg/cm2 。US 6,733,774 B2中揭示一種製造包含凝血酶及血纖維蛋白元之止血貼片的方法。
在另一態樣中，本發明提供一種組織封閉或組織黏合之方法，該方法包含在傷口表面上施用本發明之第三態樣之止血貼片。
在另一態樣中，本發明提供一種實現止血之方法，該方法包含在漏血區域上施用本發明之第三態樣之止血貼片。
本發明之止血貼片適用於止血、組織黏合及組織封閉，尤其適用於胃腸系統(諸如食道、胃、小腸、大腸、直腸)、實質性器官(諸如肝、脾、胰、腎、肺、腎上腺、甲狀腺及淋巴結)之外科手術介入；心血管外科手術；胸外科手術(包括對氣管、支氣管或肺進行之外科手術)；耳鼻喉(ENT)區域之外科手術介入，包括牙科手術；婦科、泌尿科、骨科(例如骨鬆質切除術)及急疹外科手術；神經外科手術；淋巴、膽及腦脊髓(CSF)瘻管；及胸部及肺部外科手術期間之漏氣。因此，本發明亦係關於本發明之第九態樣之止血貼片用於上述目的的用途。另外，止血貼片可實質上不透液體的，從而使其高度適用於高度出血之器官(諸如肝及脾)之手術中，且適用於例如胃腸通道之外科手術。本發明之止血貼片典型地應在出血不能用習用方法控制時或在該等方法將會產生不利結果時施用。
在另一態樣中，本發明提供一種製造本發明之止血貼片的方法，該方法包含用硫酸化多醣塗佈載體及/或將硫酸化多醣分布於載體內部。適合之方法如上所述。
在第四態樣中，本發明提供一種雙組分注射器系統，其包含：
(a)　於第一筒中之如技術方案1之單組分組成物，及
(b)　於第二筒中之含陽離子製劑以及視情況選用之凝血酶；或
(a′)於第一筒中之如技術方案1之獨立的硫酸化多醣及含陽離子製劑以及視情況選用之凝血酶，及
(b`)　於第二筒中之血纖維蛋白元製劑。
在另一態樣中，本發明提供一種注射器，其包含於一個筒中之凝血酶溶液、於第二筒中之含血纖維蛋白元溶液及於第三筒中之硫酸化多醣溶液以及於凝血酶或硫酸化多醣溶液中之鈣離子。
在第五態樣中，本發明提供本發明之製劑、本發明之血纖維蛋白凝塊樣結構或本發明之貼片用於增強止血的用途。
在第六態樣中，本發明提供本發明之製劑、本發明之血纖維蛋白凝塊樣結構或本發明之貼片用於傷口癒合的用途。
在第七態樣中，本發明提供本發明之製劑、本發明之血纖維蛋白凝塊樣結構或本發明之貼片用作藥物傳遞系統的用途。
在第八態樣中，本發明提供一種組織封閉或組織黏合之方法，該方法包含在傷口表面上施用本發明之製劑、本發明之血纖維蛋白凝塊樣結構或本發明之貼片。
在另一態樣中，本發明提供一種經根據本發明方法於試管內形成之凝塊塗佈的試管內表面。該試管內表面可用作黏著細胞(尤其哺乳動物細胞)之培養的基底。
US 2006/134093(Ronfard；DFB Pharmaceuticals公司,US)揭示由血纖維蛋白元與凝血酶之混合物形成之細胞培養物的血纖維蛋白細胞撐體。血纖維蛋白細胞撐體可用於製備諸如角質細胞之細胞的培養物、以重構組織形式回收該培養物及輸送該培養物。重構組織尤其適合用作皮膚移植物。本發明之第七態樣及第八態樣之凝塊及試管內表面可如US 2006/134093中所揭示來使用。適合之表面可由以下組成：由一或多種以下物質(聚酯、PTFE或聚胺基甲酸酯)製成之合成膜；由一或多種生物可降解聚合物(例如玻尿酸、聚乳酸或膠原蛋白)製成之合成膜；或聚矽氧或凡士林紗布敷料；或適用於傷口敷料之任何其他物質。
在本發明之任何態樣中，硫酸化多醣較佳為非抗凝血的硫酸化多醣(non-anticoagulant sulfated polysaccharide，NASP)。如本文所使用之「NASP」係指在稀釋凝血酶元時間(dilute prothrombin time，dPT)或活化部分凝血活酶時間(activated partial thromboplastin time，aPTT)凝血檢定中所展現之抗凝血活性不超過未分化肝素(分子量範圍為8,000至30,000道爾頓；平均為18,000道爾頓)之莫耳抗凝血(凝血時間在統計上有顯著增加)活性的三分之一且較佳為小於後者之十分之一的硫酸化多醣。NASP可自天然來源(例如褐藻、樹皮、動物組織)純化及/或修飾而來或可重新合成且其分子量可在100道爾頓至1,000,000道爾頓之範圍內。作為預防措施，希望與不為NASP之硫酸化多醣相比，活體內抗凝血效應之傾向減小，此係因為由此可使抗凝血效應對患者之任何風險降至最小。在任何情況下，血纖維蛋白封閉劑及止血貼片僅意欲用於局部使用，且因此硫酸化多醣滲入血液系統中應為逐步的，從而使任何不想要的抗凝血效應降至最低。因此，可使用尤其低濃度之具有抗凝血效應之硫酸化多醣。
NASP為「非抗凝血劑(non-anticoagulant)」，因為其在所研究之濃度範圍內不會顯著增加凝血時間。具有潛在NASP活性之硫酸化多醣包括(但不限於)葡萄糖胺聚糖(GAG)；肝素樣分子，包括N-乙醯基肝素(Sigma-Aldrich,St. Louis,Mo.)及N-去硫酸肝素(Sigma-Aldrich)；類硫酸鹽(sulfatoid)；多硫酸化寡醣(Karst等人,(2003) Curr. Med. Chem. 10:1993-2031；Kuszmann等人,(2004) Pharmazie. 59:344-348)；硫酸軟骨素(Sigma-Aldrich)；硫酸皮膚素(Celsus Laboratories Cincinnati,Ohio)；岩藻糖膠(Sigma-Aldrich)；戊聚糖多硫酸酯(PPS)(Ortho-McNeil Pharmaceuticals,Raritan,N.J.)；硫酸岩藻哌喃(Katzman等人,(1973) J. Biol. Chem. 248:50-55)；及新穎的類硫酸鹽，諸如GM1474(Williams等人,(1998) General Pharmacology 30:337)；及SR 80258A(Burg等人,(1997) Laboratory Investigation 76:505)及新穎類肝素，及其類似物。NASP可自天然來源(例如褐藻、樹皮、動物組織)純化及/或修飾而來或可重新合成且其分子量可在100道爾頓至1,000,000道爾頓之範圍內。具有潛在NASP活性之其他化合物包括過碘酸鹽氧化之肝素(POH)(Neoparin公司,San Leandro,Calif.)、以化學方式硫酸化之昆布醣(laminarin)(CSL)(Sigma-Aldrich)、以化學方式硫酸化之褐藻酸(CSAA)(Sigma-Aldrich)、以化學方式硫酸化之果膠(CSP)(Sigma-Aldrich)、硫酸葡聚醣(DXS)(Sigma-Aldrich)、肝素源性寡醣(HDO)(Neoparin公司,San Leandro,Calif.)。
較佳NASP為岩藻糖膠及戊聚糖多硫酸酯。岩藻糖膠為主要由岩藻糖之硫酸化酯組成且具有可變之分支度的多醣。鍵聯可主要為α(1→2)或α(1→3)。亦可存在α(1→4)鍵聯。岩藻糖酯主要在位置4及/或2及/或3處經硫酸化。單硫酸化岩藻糖佔主導，但亦可存在去硫酸岩藻糖。除硫酸化岩藻糖酯外，岩藻糖膠亦可含有非硫酸化岩藻糖、D-木糖、D-半乳糖、糖醛酸、葡糖醛酸或一種以上上述者之組合。F-岩藻糖膠>95%由岩藻糖之硫酸化酯組成，而U-岩藻糖膠約20%為葡糖醛酸。
本發明亦提供一種製備血纖維蛋白凝塊之方法，該方法包含在鈣離子及硫酸化多醣存在下混合包含血纖維蛋白元之組織黏著劑溶液與凝血酶溶液。
硫酸化多醣之存在尤其引起血纖維蛋白凝塊之凝塊不透明性增加。
在一較佳態樣中，該方法適用於血纖維蛋白凝塊之局部製劑。
在一較佳態樣中，組織黏著劑溶液包含硫酸化多醣，該硫酸化多醣於在混合該組織黏著劑溶液與凝血酶溶液後所形成之組成物中的濃度例如在1.2 μg/ml與20 mg/ml之間，諸如在0.6 μg/ml與10mg/ml之間。
在一較佳態樣中，組織黏著劑溶液及凝血酶溶液各於多筒注射器之獨立的注射器筒中提供。
本發明亦提供一種包含硫酸化多醣之血纖維蛋白元製劑。
血纖維蛋白元製劑較佳為如下製劑，其中包含血纖維蛋白元製劑之組織黏著劑溶液能夠在37℃下在與等體積的每毫升包含4 IU凝血酶及40 μmol CaCl2 之溶液混合後不超過10分鐘內形成血纖維蛋白凝塊。
本發明之血纖維蛋白元製劑較佳每毫克血纖維蛋白元包含0.01 μg至300 μg硫酸化多醣。
本發明亦提供一種包含硫酸化多醣之凝血酶製劑。
凝血酶製劑較佳為如下製劑，其中包含凝血酶製劑之凝血酶溶液能夠在37℃下在與等體積組織黏著劑溶液混合後不超過10分鐘內引起包含50 mg/ml血纖維蛋白元之組織黏著劑溶液形成血纖維蛋白凝塊，其中任一溶液包含鈣離子，凝血酶製劑較佳為每國際單位凝血酶包含1.2 ng至20 mg硫酸化多醣。
在另一態樣中，本發明之血纖維蛋白元製劑或凝血酶製劑為凍乾製劑或冷凍溶液。
本發明亦提供一種注射器，其於一個筒中包括包含本發明之血纖維蛋白元製劑的組織黏著劑溶液。
該注射器較佳包含另一筒，該筒包含凝血酶溶液。
在另一態樣中，本發明提供一種注射器，其包含於一個筒中之凝血酶溶液、於第二筒中之組織黏著劑溶液及於第三筒中之硫酸化多醣溶液。
本發明亦提供一種凝塊，其係根據上述方法形成。
本發明進一步提供經根據本發明方法形成之凝塊塗佈的試管內(in vitro )表面。
本發明亦提供
-　一種組織封閉或組織黏合之方法，該方法包含在傷口表面上施用本發明之止血貼片；
-　一種實現止血之方法，該方法包含在漏血區域上施用本發明之止血貼片；
-　一種製造本發明之止血貼片的方法，該方法包含用硫酸化多醣塗佈載體及/或將硫酸化多醣分布於載體內部；
-　硫酸化多醣在止血貼片(例如本發明貼片)中提供止血功能之用途，
以上製劑、以上貼片及用於以上方法及用途中之硫酸化多醣較佳為非抗凝血的硫酸化多醣(NASP)。
將在以下實施例中進一步說明本發明，但本發明不受該等實施例之任何限制。
實施例1：
令人驚訝的是，吾人已觀察到在高血纖維蛋白元濃度下在岩藻糖膠及Ca2+ 離子存在下，可快速形成肉眼可見的凝膠樣聚集體。所有該三種化合物均為獲得該等自我組合之聚集體所必需。在50 mg/ml之血纖維蛋白元濃度下所獲得之物質的稠度隨岩藻糖膠及Ca2+ 離子濃度之增加自輕微乳濁至凝塊樣外觀變化(圖1)。在實驗中，首先將0.5 ml具有指定濃度之岩藻糖膠的Tisseel VH S/D封閉劑蛋白質溶液置放於24孔細胞培養板之各孔中。添加0.5 ml CaCl2 溶液以獲得圖1中指示之最終濃度且快速與血纖維蛋白元溶液混合。評估所獲得之混合物之濁度及稠度。在50 mg/ml之恆定血纖維蛋白元濃度下，混合物之濁度隨岩藻糖膠或戊聚糖多硫酸酯之濃度增加而增加。然而，該增加具有很強的Ca2+ 離子依賴性。其在1 mM Ca2+ 濃度下幅度較低，但在20 mM Ca2+ 濃度下很明顯。在高濃度之岩藻糖膠/戊聚糖多磷酸鹽及Ca2+ 下所獲得之混合物為凝膠樣且黏著於細胞培養板之壁上，而在低濃度下所獲得之彼等混合物具有黏性流體之稠度。為獲得凝膠樣物質，岩藻糖膠/戊聚糖多硫酸酯與Ca2+ 離子之濃度均必需較高。在較高濃度之岩藻糖膠/戊聚糖多硫酸酯及Ca2+ 離子下所獲得之混合物缺乏均質性可由由於因自我組合而太快凝固所引起的不良混合及混入空氣氣泡來解釋。
實施例2：
利用掃描電子顯微法(SEM)分析實施例1中在最高濃度之岩藻糖膠/戊聚糖多硫酸酯及Ca2+ 離子下所獲得之凝膠樣物質(圖1A、B及C之右上方)的結構。在37℃下1.5小時之凝塊形成時間後，將凝塊轉移至由2.5%戊二醛於0.1二甲胂酸鹽緩衝液(pH 7.3)中之混合物組成的固定溶液中。凝塊與固定溶液之重量比為1:10。在4℃下12小時後，用0.1 M二甲胂酸鹽緩衝液(pH 7.3)使用與之前相同之重量比洗滌凝塊3次。在含0.5%四氧化鋨之1%亞鐵氰化鉀中進行後固定(post-fixation) 2小時。以蒸餾水洗滌凝塊且用2.2-二甲氧基丙烷脫水。將樣品轉移至丙酮中且在液氮中破碎。用六甲基二矽氮烷以化學方式乾燥樣品，固著於短柱上且用鈀金合金塗佈。所獲得之影像顯示於圖2中。顯然，由血纖維蛋白元、岩藻糖膠/戊聚糖多硫酸酯及Ca2+ 離子之組合所獲得之新穎凝膠樣物質與圖5A中所示之血纖維蛋白凝塊相比具有極其不同之組織結構。在以將三種化合物聚集在一起為開始之快速且自發的自我組合過程中，形成具有黏著小泡之三維結構。
實施例3：
由於對岩藻糖膠與Ca2+ 離子組合與血纖維蛋白元一起形成凝膠樣物質所觀察到之性質，故可製備基於膠原蛋白之止血墊。其所體現的觀點為膠原蛋白墊中所含之該等添加劑可與血液血纖維蛋白元相互作用，且因此增強膠原蛋白墊之止血性質。用含有泡葉藻(A. nodosum)低分子量岩藻糖膠及CaCl2 之溶液浸泡2 mm厚之膠原蛋白海綿(Matristypt，Dr. Suwelack,Germany)，且冷凍乾燥。浸泡溶液含有使得在冷凍乾燥後該墊中泡葉藻低分子量岩藻糖膠濃度為0.3 mg/cm2 且CaCl2 濃度為0.9 mg/cm2 之濃度的各成份。在兔止血模型中施用該墊來評估其止血性質。以每公斤體重1000 IU使兔肝素化。藉由用研磨旋轉工具磨損肝囊來設置圓形出血區域(直徑1.8 cm)。用上述墊處理該傷口。將乾墊施用於出血傷口上。藉助於經生理食鹽水浸泡之紗布將墊壓在傷口上2分鐘。作為對照組，以相同之方式將Matristypt施用於同一動物之另一肝葉上。對第二動物重複操作該等實驗。在兩隻動物中結果相同，且一隻動物之結果示範性顯示於圖3中。由圖3可觀察到，浸入含有岩藻糖膠及CaCl2 之膠原蛋白墊中之血液看起來比對照組暗。此可由各成份之作用在墊中引起較快的凝血來解釋。
實施例4：
在凝血酶催化之血纖維蛋白凝塊形成期間，岩藻糖膠對濁度之動力學之影響增大，且另外，使用稀血纖維蛋白封閉劑Tisseel VH S/D(Baxter)作為血纖維蛋白元基質來證實所獲得之凝塊之最終濁度。按1/20稀釋Tisseel VH S/D封閉劑蛋白質溶液(對應於5 mg/ml之血纖維蛋白元濃度)且調節岩藻糖膠濃度至20 μM(戊聚糖多硫酸酯、泡葉藻(Ascophyllum nodosum)低分子量)、2 μM(墨角藻(Fucus vesiculosus))及0.2 μM(泡葉藻高分子量、海帶(Laminaria japonica))。在96孔微板之各孔中混合100 μl該等稀Tisseel VH S/D溶液(含有血纖維蛋白元、纖維結合蛋白及因子XIII)與100 μl含有40 mM CaCl2 之0.25 IU/ml凝血酶溶液(Baxter)。在630 nm下記錄對在混合後1.5小時之時間內37℃下凝塊形成期間濁度增加之量測結果。結果顯示於圖4中。觀察到，一些岩藻糖膠以及戊聚糖多硫酸酯可加速凝血酶催化之凝塊形成反應且影響血纖維蛋白凝塊之形成，同時濁度增加。
實施例5：
血纖維蛋白凝塊之濁度增加與「粗」凝塊(亦即纖維直徑增加之血纖維蛋白凝塊)相關(Oenick MD Studies on fibrin polymerization and fibrin structure-a retrospective. Biophys Chem. 2004年12月20日;112(2-3):187-92)。
如實施例4中所述製備有來自墨角藻之岩藻糖膠及無岩藻糖膠之血纖維蛋白凝塊。如實施例2中所述進行用於SEM之樣品之製備。
實 施例6：
已開發一種研究凝血酶介導之血纖維蛋白形成及硫酸化多醣對該過程之影響的檢定。簡言之，在含有血纖維蛋白元之溶液中藉由添加凝血酶來開始凝塊形成，接著進行分光光度測定。405 nm下之吸光度可指示凝塊之不透明性，該不透明性視血纖維蛋白凝塊之數量及/或品質而定。
向96孔微量板(聚苯乙烯，平底；Greiner Bio-One GmbH,Kremsmuenster,Austria)之各孔中添加55 μl以稀釋緩衝液(25 mM Hepes pH 7.35，175 mM NaCl，2.5 mM CaCl2 ，5 mg/ml HSA)稀釋之人血纖維蛋白元(血纖維蛋白溶酶元，纖維結合蛋白，因子XIII缺乏，American Diagnostica公司,Stamford,CT,USA)。血纖維蛋白元於100μl檢定體積中之最終濃度為2.5 mg/ml。向混合物中添加以稀釋緩衝液稀釋之10 μl硫酸化多醣測試樣品(或單獨稀釋緩衝液)，且在37℃下在微量板培育箱中培育15分鐘。藉由添加35 μL以稀釋緩衝液稀釋且預熱至37℃之預熱人凝血酶(Enzyme Research Laboratories,South Bend,IN,USA)(或單獨稀釋緩衝液)來開始血纖維蛋白凝塊形成。立即將微量板轉移至預熱(37℃)之微量板讀取器(Safire2TM 微量板讀取器；Tecan Trading AG,CH)中，接著在405 nm下對凝塊形成讀數歷時60分鐘，每30秒讀一次。在各時間點，藉由減去僅含血纖維蛋白元之孔之讀數來校正各樣品孔之吸光度讀數。
在最初實驗中，凝血酶之濃度自0.1 nM變化至8 nM，且檢定中不包括硫酸化多醣。405 nm下之吸光度最初快速增加，但在約20分鐘與30分鐘之間達到平線值(plateau)。記錄各凝血酶濃度之60分鐘時之A405 。結果顯示於下表1中。
凝血酶之濃度為0至0.5 nM時，凝血酶濃度與60分鐘時之A405 之間存在近似線性的關係。進一步增加凝血酶濃度不會引起60分鐘時之A405 可比性增加。因此，選擇0.5 nM凝血酶之濃度進一步進行實驗。
實施例7：
根據實施例6中描述之方法，檢驗不同濃度之6種硫酸化多醣各自對凝血酶介導之血纖維蛋白凝塊形成的影響。硫酸化多醣之詳情列於下表2中。
在該實驗中，凝血酶濃度為0.5 nM，且在60分鐘時記錄A405 。對於所測試之各多醣，低濃度一般對60分鐘時之A405 幾乎無影響。提高濃度一般引起60分鐘時之A405 大幅增加。觀察到該增加時之濃度在不同多醣之間不同。舉例而言，來自海帶之岩藻糖膠在100 nM下引起60分鐘時之A405 大幅增加。與此相反，雖然戊聚糖聚硫酸鈉在100 nM下之影響可忽略不計，但在10000 nM下具有較大影響。結果顯示於下表3中。
雖然硫酸化多醣可刺激血纖維蛋白凝塊形成時之奈莫耳濃度在寬範圍內變化，但引起檢定中之60分鐘時之A405 與無硫酸化多醣存在下之檢定相比至少加倍的微克/毫升濃度在不同多醣之間大致相當。結果顯示於下表4中。
高濃度之硫酸化多醣(亦即在約50-100 μg/ml範圍內)一般在0.5 nM之凝血酶濃度下引起凝塊不透明性增加，該增加大於實施例6中藉由使用8 nM凝血酶所觀察到之增加。因此，結果表明凝塊不透明性(及因此之血纖維蛋白產生及/或凝塊品質)可用硫酸化多醣以不能藉由增加凝血酶濃度來模擬之方式來提高。
實施例8：
在血纖維蛋白封閉劑中可包括硫酸化多醣以便改進凝血酶依賴性血纖維蛋白產生。可藉由包括硫酸化多醣而改質之適合的血纖維蛋白封閉劑為來自Baxter Healthcare公司(CA,USA)之血纖維蛋白封閉劑。其為本發明之最佳具體實例。
藉由在37℃下使用加熱及攪拌裝置(諸如)以常用方式將封閉劑蛋白質濃縮物溶解於血纖維蛋白溶解抑制劑溶液中來配製封閉劑蛋白質溶液。然而，在封閉劑蛋白質濃縮物或血纖維蛋白溶解抑制劑溶液中可包括一定量的硫酸化多醣，以便於封閉劑蛋白質溶液中之最終濃度在100 μg/ml至200 μg/ml範圍內。以常用方式在CaCl2 溶液中復原凝血酶製備凝血酶溶液。將各溶液抽入注射器之兩個注射器體中之一個中，以待使用。可以其他方法製備血纖維蛋白封閉劑，以待使用，例如可以冷凍之預填充注射器形式將其儲存且加以解凍，以待使用。適於製備血纖維蛋白封閉劑之任何方法均為適當的。
備用之血纖維蛋白封閉劑可由保健專業人員例如用於控制出血。在自注射器排出期間混合溶液後，硫酸化多醣將以100 μg/ml至200 μg/ml範圍內之濃度存在於混合物中以便改進血纖維蛋白產生。可將血纖維蛋白封閉劑以薄層形式施用於乾傷口表面上，且保持或固定封閉部分於所要的位置約3至5分鐘。
血纖維蛋白封閉劑可用於血纖維蛋白封閉劑適合之任何適應症。舉例而言，其可用作外科手術中的止血佐劑，該等外科手術包括心肺繞道術及由腹部鈍傷或穿透傷所造成之脾損傷之治療。或者，其可用作結腸吻合術閉合中之佐劑。
作為在封閉劑蛋白質溶液組分中包括硫酸化多醣之另一選擇，可在凝血酶溶液中包括硫酸化多醣。
血纖維蛋白封閉劑通常含有抑肽酶來阻止提前血纖維蛋白溶解。然而，一些個體對抑肽酶過敏。有可能在血纖維蛋白封閉劑中包括硫酸化多醣且省去抑肽酶在該等個體中之使用。硫酸化多醣介導之血纖維蛋白產生之增加或凝塊品質之改進可使得沒必要使用抑肽酶。
實施例9：
在止血貼片內可包括硫酸化多醣以便改進凝血酶依賴性血纖維蛋白產生。
舉例而言，可將WO 96/22115(Delmotte及Krack;Baxter International Healthcare,IL)中所揭示之交聯血纖維蛋白的自撐式薄片樣物質浸泡在濃度典型地為100 μg/ml至200 μg/ml之硫酸化多醣溶液中。使血纖維蛋白薄片在無菌條件下乾燥且儲存以備用。接著可由外科醫師使用血纖維蛋白薄片藉由將該血纖維蛋白薄片施用於傷口表面來處理內部創傷性病變(諸如脾病變)，視情況在血纖維蛋白薄片與傷口表面之間存在血纖維蛋白封閉劑層。硫酸化多醣將促進凝塊形成，因此減少出血，且血纖維蛋白薄片防止發生黏著。
圖1：在 恆定血纖維蛋白元濃度(50 mg/ml)及各種濃度之岩藻糖膠及Ca2+ 離子下所獲得之凝塊樣聚集體之濁度及外觀。
圖2： 由血纖維蛋白元、岩藻糖膠/戊聚糖多硫酸酯及Ca2+ 離子之混合物獲得之凝膠樣物質的超微結構(ultrastucture)。濃度：血纖維蛋白元，50 mg/ml；Ca2+ ，20 mM；戊聚糖多硫酸酯(A)，200 μM；泡葉藻低分子量岩藻糖膠(B)，200 μM；墨角藻岩藻糖膠(C)，20 μM。線條表示5 μm。
圖3： 與純膠原蛋白墊(Matristypt)(A)相比，含泡葉藻岩藻糖膠/CaCl2 之膠原蛋白墊(B)在肝表面磨損模型中對肝素化兔子之止血效應。在將墊施用於出血傷口後15分鐘，拍取照片。
圖4：在 血纖維蛋白凝塊形成期間岩藻糖膠對濁度之影響。在凝塊形成期間之濃度：血纖維蛋白元(稀Tisseel VH S/D)：2.5 mg/ml；凝血酶：0.125 IU/ml。PPS-戊聚糖多硫酸酯，10 μM；FAN-泡葉藻岩藻糖膠，低分子量：10 μM，高分子量：0.1 μM；FLJ-海帶岩藻糖膠，0.1 μM；FFV-墨角藻岩藻糖膠，1 μM。
Tisseel VHS/D　PPS　泡葉藻岩藻糖膠/低分子量
-----泡葉藻岩藻糖膠/高分子量　海帶岩藻糖膠　墨角藻岩藻糖膠
圖5： 由未添加岩藻糖膠(A)及添加1 μM墨角藻岩藻糖膠(B)之稀Tisseel VHS/D血纖維蛋白封閉劑獲得之血纖維蛋白凝塊的掃描電子顯微圖。
濃度：血纖維蛋白元：2.5 mg/ml；凝血酶：0.125 IU/ml。

Claims (30)

  1. 一種血纖維蛋白凝塊樣結構，其包含血纖維蛋白元、硫酸化多醣及陽離子，其中所包含之血纖維蛋白元之量為50mg/mL或50mg/mL以上，且其中所包含之硫酸化多醣之量對於每mg之血纖維蛋白元為0.01μg至300μg硫酸化多醣。
  2. 如申請專利範圍第1項之血纖維蛋白凝塊樣結構，其可由包含以下步驟之方法獲得：(a)提供呈溶液形式之包含血纖維蛋白元及硫酸化多醣的製劑，其中所包含之血纖維蛋白元之量為60至120mg/mL，(b)提供含陽離子溶液，(c)混合(a)及(b)以獲得血纖維蛋白凝塊樣結構。
  3. 如申請專利範圍第1項之血纖維蛋白凝塊樣結構，其可由包含以下步驟之方法獲得：(a)提供包含血纖維蛋白元的製劑，其中所包含之血纖維蛋白元之量為60至120mg/mL，(b)提供包含陽離子及硫酸化多醣的溶液，(c)混合(a)及(b)以獲得血纖維蛋白凝塊樣結構。
  4. 如申請專利範圍第1項之血纖維蛋白凝塊樣結構，其可由包含以下步驟之方法獲得：同時或按任何順序相繼混合血纖維蛋白元溶液(其中所包含之血纖維蛋白元之量為60至120mg/mL)、硫酸化多醣溶液以及含陽離子溶液以形成血纖維蛋白凝塊樣結構。
  5. 如申請專利範圍第1項之血纖維蛋白凝塊樣結構，其中該硫酸化多醣係選自由以下者所組成之群組：葡萄糖胺聚糖(glycosaminoglycan,GAG)；肝素樣分子；類硫酸鹽(sulfatoid)；多硫酸化寡醣；硫酸軟骨素；硫酸皮膚素；岩藻糖膠(fucoidan)；戊聚糖多硫酸酯(PPS)；硫酸岩藻哌喃(fucopyranon sulfate)；類肝素；過碘酸鹽氧化之肝素(POH)；硫酸化之昆布醣(laminarin)(SL)；硫酸化之褐藻酸(SAA)；硫酸化之果膠(SP)；硫酸葡聚醣(DXS)及肝素源性寡醣(HDO)。
  6. 如申請專利範圍第2項之血纖維蛋白凝塊樣結構，其中該硫酸化多醣係選自由以下者所組成之群組：葡萄糖胺聚糖(GAG)；肝素樣分子；類硫酸鹽；多硫酸化寡醣；硫酸軟骨素；硫酸皮膚素；岩藻糖膠；戊聚糖多硫酸酯(PPS)；硫酸岩藻哌喃；類肝素；過碘酸鹽氧化之肝素(POH)；硫酸化之昆布醣(SL)；硫酸化之褐藻酸(SAA)；硫酸化之果膠(SP)；硫酸葡聚醣(DXS)及肝素源性寡醣(HDO)。
  7. 如申請專利範圍第3項之血纖維蛋白凝塊樣結構，其中該硫酸化多醣係選自由以下者所組成之群組：葡萄糖胺聚糖(GAG)；肝素樣分子；類硫酸鹽；多硫酸化寡醣；硫酸軟骨素；硫酸皮膚素；岩藻糖膠；戊聚糖多硫酸酯(PPS)；硫酸岩藻哌喃；類肝素；過碘酸鹽氧化之肝素(POH)；硫酸化之昆布醣(SL)；硫酸化之褐藻酸(SAA)；硫酸化之果膠(SP)；硫酸葡聚醣(DXS)及肝素源性寡醣(HDO)。
  8. 如申請專利範圍第4項之血纖維蛋白凝塊樣結構，其 中該硫酸化多醣係選自由以下者所組成之群組：葡萄糖胺聚糖(GAG)；肝素樣分子；類硫酸鹽；多硫酸化寡醣；硫酸軟骨素；硫酸皮膚素；岩藻糖膠；戊聚糖多硫酸酯(PPS)；硫酸岩藻哌喃；類肝素；過碘酸鹽氧化之肝素(POH)；硫酸化之昆布醣(SL)；硫酸化之褐藻酸(SAA)；硫酸化之果膠(SP)；硫酸葡聚醣(DXS)及肝素源性寡醣(HDO)。
  9. 如申請專利範圍第5項之血纖維蛋白凝塊樣結構，其中肝素樣分子係選自N-乙醯基肝素及N-去硫酸肝素。
  10. 如申請專利範圍第6項之血纖維蛋白凝塊樣結構，其中肝素樣分子係選自N-乙醯基肝素及N-去硫酸肝素。
  11. 如申請專利範圍第7項之血纖維蛋白凝塊樣結構，其中肝素樣分子係選自N-乙醯基肝素及N-去硫酸肝素。
  12. 如申請專利範圍第8項之血纖維蛋白凝塊樣結構，其中肝素樣分子係選自N-乙醯基肝素及N-去硫酸肝素。
  13. 如申請專利範圍第1至12項中任一項之血纖維蛋白凝塊樣結構，其中陽離子係選自由以下者所組成之群組：鈣、鎂、鋇及鍶。
  14. 如申請專利範圍第13項之血纖維蛋白凝塊樣結構，其中該陽離子為鈣。
  15. 如申請專利範圍第13項之血纖維蛋白凝塊樣結構，其中該陽離子為CaCl2 之形式。
  16. 如申請專利範圍第1至12項中任一項之血纖維蛋白凝塊樣結構，其係用於促進止血。
  17. 如申請專利範圍第13項之血纖維蛋白凝塊樣結 構，其係用於促進止血。
  18. 如申請專利範圍第14項之血纖維蛋白凝塊樣結構，其係用於促進止血。
  19. 如申請專利範圍第15項之血纖維蛋白凝塊樣結構，其係用於促進止血。
  20. 如申請專利範圍第1至12項中任一項之血纖維蛋白凝塊樣結構，其係用於傷口癒合。
  21. 如申請專利範圍第13項之血纖維蛋白凝塊樣結構，其係用於傷口癒合。
  22. 如申請專利範圍第14項之血纖維蛋白凝塊樣結構，其係用於傷口癒合。
  23. 如申請專利範圍第15項之血纖維蛋白凝塊樣結構，其係用於傷口癒合。
  24. 如申請專利範圍第1至12項中任一項之血纖維蛋白凝塊樣結構，其係用作藥物遞送系統。
  25. 如申請專利範圍第13項之血纖維蛋白凝塊樣結構，其係用作藥物遞送系統。
  26. 如申請專利範圍第14項之血纖維蛋白凝塊樣結構，其係用作藥物遞送系統。
  27. 如申請專利範圍第15項之血纖維蛋白凝塊樣結構，其係用作藥物遞送系統。
  28. 一種提供如申請專利範圍第1至27項中任一項之血纖維蛋白凝塊樣結構之方法，其包含以下步驟：(a)提供呈溶液形式之包含血纖維蛋白元及硫酸化多 醣的製劑，其中所包含之血纖維蛋白元之量為60至120mg/mL，(b)提供含陽離子的溶液，(c)混合(a)及(b)以獲得血纖維蛋白凝塊樣結構。
  29. 一種提供如申請專利範圍第1至27項中任一項之血纖維蛋白凝塊樣結構之方法，其包含以下步驟：(a)提供包含血纖維蛋白元的製劑，其中所包含之血纖維蛋白元之量為60至120mg/mL，(b)提供包含陽離子及硫酸化多醣的溶液，(c)混合(a)及(b)以獲得血纖維蛋白凝塊樣結構。
  30. 一種提供如申請專利範圍第1至27項中任一項之血纖維蛋白凝塊樣結構之方法，其包含以下步驟：同時或按任何順序相繼混合血纖維蛋白元溶液(其中所包含之血纖維蛋白元之量為60至120mg/mL)、硫酸化多醣溶液以及含陽離子溶液以形成血纖維蛋白凝塊樣結構。
TW098142392A 2008-12-11 2009-12-11 基於血纖維蛋白元與硫酸化多醣的製劑 TWI488662B (zh)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US12180808P 2008-12-11 2008-12-11

Publications (2)

Publication Number Publication Date
TW201032838A TW201032838A (en) 2010-09-16
TWI488662B true TWI488662B (zh) 2015-06-21

Family

ID=42035771

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW098142392A TWI488662B (zh) 2008-12-11 2009-12-11 基於血纖維蛋白元與硫酸化多醣的製劑

Country Status (13)

Country Link
US (1) US9566364B2 (zh)
EP (1) EP2358402A2 (zh)
JP (1) JP5746041B2 (zh)
KR (1) KR101678241B1 (zh)
CN (1) CN102307600B (zh)
AR (1) AR081227A1 (zh)
AU (1) AU2009324297B2 (zh)
BR (1) BRPI0922524B8 (zh)
CA (1) CA2746257C (zh)
CO (1) CO6400200A2 (zh)
MX (1) MX2011006255A (zh)
TW (1) TWI488662B (zh)
WO (1) WO2010066869A2 (zh)

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011025957A2 (en) * 2009-08-28 2011-03-03 Ecole Polytechnique Federal De Lausanne Tg-aprotinin fusion proteins and matrices thereof
US10022410B2 (en) 2010-12-22 2018-07-17 Ethicon, Inc. Hemostatic preparation containing an extract of golden moss
US9446166B2 (en) * 2013-01-24 2016-09-20 Ethicon, Inc. Fibrin sealant compositions with chemical crosslinking
IL230151A0 (en) 2013-12-24 2014-09-30 Omrix Biopharmaceuticals Ltd One-component fibrin glue containing a polymerization inhibitor
IL231792A0 (en) 2014-03-27 2014-08-31 Omrix Biopharmaceuticals Ltd Device and method for the preparation and administration of one-component fibrin glue
CN105147722A (zh) * 2015-09-17 2015-12-16 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 硫酸化白芨多糖的新用途及一种治疗眼表损伤的制剂
KR20180027126A (ko) * 2016-09-06 2018-03-14 (주)한국비엠아이 가교화 히알루론산 유도체 매트릭스가 포함된 지혈 조성물
USD918654S1 (en) 2019-06-06 2021-05-11 Sharkninja Operating Llc Grill plate
SE1950885A1 (en) * 2019-07-11 2021-01-12 Faelker Knut Treatment of patients undergoing antiplatelet medication experiencing acute bleeding complications during / after surgery
CN111760066B (zh) * 2020-06-09 2022-03-04 北京化工大学 一种止血凝胶及其制备方法和应用
CN115785478B (zh) * 2022-10-12 2023-08-22 浙江大学 一种双网络纤维蛋白凝胶及其制备方法和应用
KR102565364B1 (ko) 2023-04-04 2023-08-09 김재열 자가골 회복 촉진용 조성물을 포함하는 서방성 국소 약물전달체 및 이를 포함하는 약학적 조성물

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6056970A (en) * 1998-05-07 2000-05-02 Genzyme Corporation Compositions comprising hemostatic compounds and bioabsorbable polymers

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AT3699B (zh) 1899-08-14 1901-03-26 Gilbert Wright
AT359652B (de) 1979-02-15 1980-11-25 Immuno Ag Verfahren zur herstellung eines gewebekleb- stoffes
AT359653B (de) 1979-02-15 1980-11-25 Immuno Ag Verfahren zur herstellung eines gewebekleb- stoffes
SE9101853D0 (sv) * 1991-06-17 1991-06-17 Jonas Wadstroem Improved tissue ashesive
AT398079B (de) 1991-11-04 1994-09-26 Immuno Ag Präparation mit thrombinaktivität sowie verfahren zu ihrer herstellung
US5942278A (en) 1993-03-31 1999-08-24 Nycomed Arzneimittel Gmbh Process for the production of a material for sealing and healing wounds
JPH11502431A (ja) 1995-01-16 1999-03-02 バクスター インターナショナル インコーポレイテッド 手術後の癒着を防止するための架橋化フィブリンの自己支持シート様材料
DE19617369A1 (de) 1996-04-30 1997-11-06 Immuno Ag Lagerstabile Fibrinogen-Präparate
US6733774B2 (en) 2001-01-25 2004-05-11 Nycomed Pharma As Carrier with solid fibrinogen and solid thrombin
US7052713B2 (en) 2001-02-13 2006-05-30 Nycomed Pharma As Carrier with solid fibrinogen and solid thrombin
US6773699B1 (en) 2001-10-09 2004-08-10 Tissue Adhesive Technologies, Inc. Light energized tissue adhesive conformal patch
US20040101546A1 (en) 2002-11-26 2004-05-27 Gorman Anne Jessica Hemostatic wound dressing containing aldehyde-modified polysaccharide and hemostatic agents
US20040126881A1 (en) 2002-09-06 2004-07-01 Vincent Ronfard Fibrin cell supports and methods of use thereof
PL1748781T3 (pl) * 2004-05-27 2013-05-31 Baxter Int Sposoby do leczenia zaburzeń związanych z krwawieniem z zastosowaniem siarczanowanych polisacharydów
BRPI0618216A2 (pt) * 2005-11-02 2011-08-23 Aeris Therapeutics Inc complexos de policátion-poliánion, composições e métodos de uso dos mesmos
CN1788802A (zh) * 2005-12-14 2006-06-21 温州医学院 促创伤修复生物海绵材料及其制备方法
CN100404080C (zh) * 2006-03-24 2008-07-23 清华大学 一种基于仿生过程的水凝胶快速成形工艺方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6056970A (en) * 1998-05-07 2000-05-02 Genzyme Corporation Compositions comprising hemostatic compounds and bioabsorbable polymers

Also Published As

Publication number Publication date
TW201032838A (en) 2010-09-16
US9566364B2 (en) 2017-02-14
MX2011006255A (es) 2012-01-20
CA2746257C (en) 2018-01-16
US20100166834A1 (en) 2010-07-01
AU2009324297B2 (en) 2013-12-05
JP5746041B2 (ja) 2015-07-08
CN102307600A (zh) 2012-01-04
BRPI0922524B8 (pt) 2021-06-22
CN102307600B (zh) 2015-11-25
CO6400200A2 (es) 2012-03-15
EP2358402A2 (en) 2011-08-24
BRPI0922524A2 (pt) 2020-08-11
AU2009324297A2 (en) 2011-08-04
WO2010066869A2 (en) 2010-06-17
WO2010066869A3 (en) 2010-12-02
KR101678241B1 (ko) 2016-11-21
KR20110106345A (ko) 2011-09-28
AR081227A1 (es) 2012-07-18
AU2009324297A1 (en) 2011-07-21
CA2746257A1 (en) 2010-06-17
BRPI0922524B1 (pt) 2021-01-12
JP2012511548A (ja) 2012-05-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI488662B (zh) 基於血纖維蛋白元與硫酸化多醣的製劑
RU2369408C2 (ru) Гемостатическая композиция, включающая гиалуроновую кислоту
US10076590B2 (en) Modified starch material of biocompatible hemostasis
EP2203053B1 (en) Modified starch material of biocompatible hemostasis
JP2008505132A5 (zh)
GB2393120A (en) Compositions for wound treatment
JPH06508363A (ja) 組織治療用組成物
EP2914245A2 (en) Improvements on tissue sealant for use in non-compressible hemorrhage
Logun et al. Expanding hydrophobically modified chitosan foam for internal surgical hemostasis: Safety evaluation in a murine model
Cheng et al. Processing, characterization and hemostatic mechanism of a ultraporous collagen/ORC biodegradable composite with excellent biological effectiveness
Kumar et al. Biopolymers as topical haemostatic agents: current trends and technologies
Bodek et al. Research Article Evaluation of Microcrystalline Chitosan and Fibrin Membranes as Platelet-Derived Growth Factor-BB Carriers with Amoxicillin

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Annulment or lapse of patent due to non-payment of fees