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TWI399362B - 經取代之聯苯基羧酸及其衍生物 - Google Patents

經取代之聯苯基羧酸及其衍生物 Download PDF

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TWI399362B
TWI399362B TW096114160A TW96114160A TWI399362B TW I399362 B TWI399362 B TW I399362B TW 096114160 A TW096114160 A TW 096114160A TW 96114160 A TW96114160 A TW 96114160A TW I399362 B TWI399362 B TW I399362B
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TW096114160A
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Francis Wilson
Alison Reid
Valerie Reader
Richard John Harrison
Mihiro Sunose
Remedios Hernadez-Perni
Jeremy Major
Cyrille Boussard
Kathryn Smelt
Jess Taylor
Adeline Leformal
Andrew Cansfield
Svenja Burckhardt
Chih Yung Ho
Yan Zhang
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Cellzome Ltd
Ortho Mcneil Janssen Pharm
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Description

經取代之聯苯基羧酸及其衍生物
本發明係關於具有通式(I)之化合物，其A、X、R1 －R4 如下定義，及/或其鹽或酯。
而且，本發明係關於該化合物於治療阿茲海莫氏症(Alzheimer’s disease)上之用途，及其於調控γ－分泌酶(secretase)活性之用途。
阿茲海莫氏症(AD)為造成記憶、認識力及行為穩定性喪失之一種漸進性神經變性失調。AD困擾著6－10%超過65歲之人口及超過50%以上之85歲人口，其為痴呆之主要原因，且為次於心血管疾病及癌症之第三大主要死亡原因。現今對於AD並無法有效治療，在美國毎年關於AD之總淨損失超過1千億美元。
然而，AD並無簡單的病因，其與某些風險因子有關，包括(1)年齡、(2)家族史(3)及頭部損傷；其他因子包括環境毒物及教育程度低。特定週邊及大腦皮質之神經病理學損傷包括高磷酸化微管聚合蛋白(tau protein)組成之細胞內神經纖維糾結，與澱粉樣蛋白β(澱粉樣斑)之纖維聚集細胞外沉澱。澱粉樣斑之主要成分為不同長度之澱粉樣β(A－β或Aβ)胜肽，其之變異體，Aβ1－42－胜肽(Aβ－42)相信為澱粉樣形成之主要引發劑。其他變異體為Aβ1－40－胜肽(Aβ－40)。澱粉樣β為前驅蛋白質，β澱粉樣前驅蛋白質(β－APP或APP)之蛋白水解產物。
AD之家庭性、早發性體染色體顯性形式已與在β－澱粉樣前驅蛋白質(β－APP或APP)及在早老素(presenilin)蛋白質1及2中之錯義變異相連結。在一些病患中，AD之晚發形式與載脂蛋白E(ApoE)基因之特定等位基因有關，且與最近於α2－巨球蛋白中之變異的發現有關，其可至少與30%之AD人口相關聯。儘管此異質性，所有形式之AD呈現相似之病理學之觀察結果。遺傳學上之分析已提供對於AD邏輯治療之最佳線索。至今所發現，所有之變異影響澱粉樣基因胜肽之製造的量或質，已知為Aβ－胜肽(Aβ)，特別是Aβ42，且AD之“澱粉樣級聯假說(amyloid cascade hypothesis)”已獲得有力證實(Tanziand Bertram,2005,Cell 120,545)。Aβ胜肽形成與AD病狀間可能之聯結突顯了對於Aβ製造機制較佳理解及有力地保證治療達到調控Aβ濃度的需求。
Aβ胜肽之釋放藉由至少二種蛋白水解活性調控，其與各於Aβ胜肽之N端(Met－Asp鍵)及C端(殘基37－42)之β－及γ－分泌酶剪切有關。在分泌路徑，有證據證實β－分泌酶先剪切，導致分泌s－APPβ(sβ)，並保留11 kDa膜結合羧基終端片段(CTF)。後者被相信為經由γ－分泌酶剪切之後提高Aβ胜肽。較長之同種型Aβ42之量，在特定蛋白質(早老素)中攜帶某些變異之病患中被選擇性增加，且這些變異已與早發性家族性阿茲海莫氏症有關。因此，許多研究人員相信Aβ42為阿茲海莫氏症發病之主要病因。
現今已更為清楚，γ－分泌酶活性並不能歸咎於單一特定蛋白質，而事實上與不同蛋白質之集合有關。γ－分泌酶活性存在於含至少四種成分之多蛋白質複合物：早老素(PS)異二聚物、納卡斯楚因(nicastrin)、aph－1及pen－2。PS異二聚物由經前驅蛋白質之內蛋白水解所生成之胺基－及羧基終端PS片段組成，二個催化位置之天冬胺酸位於此異二聚物之交介面。最近已被提出納卡斯楚因作為γ－分泌酶－基質之受體。其他γ－分泌酶成員之功能並不知道，但其全為活性所需要(Steiner,2004.Curr.Alzheimer Research 1(3)：175－181)。
因此，雖然第二剪切步驟之分子機制至今仍無從理解，γ－分泌酶－複合物已成為研究治療阿茲海莫氏症之化合物的最初目標。
不同的策略已被提議於阿茲海莫氏症中用於針對γ－分泌酶，範圍為直接針對催化位置、研發基質－特定抑制劑及γ－分泌酶活性調節劑(Marjaux et al.,2004.Drug Discovery Today：Therapeutic Strategies,Volume 1,1－6)。因此，不同的化合物被敘述具有分泌酶作為標的(Larner,2004.Secretases as therapeutics targets in Alzheimer’s disease：patents 2000－2004.Expert Opin.Ther.Patents 14,1403－1420.)。
實際上，此發現最近經由於γ－分泌酶上某些NSAIDs所顯示之效果的生物化學研究所證實(Weggen et al(2001)Nature 414,6860,212及WO 01/78721及US 2002/0128319；Morihara et al(2002)J.Neurochem.83,1009；Eriksen(2003)J.Clin.Invest.112,440)。對於使用NSAIDs於預防或治療AD潛在性限制為其抑制Cox酶之活性，可導致非所欲之副作用，及其低的CNS滲透性(Peretto et al.,2005,J.Med.Chem.48,5705－5720)。
因此，對於調控γ－分泌酶活性之新穎化合物有強烈之需求，藉以開啟治療阿茲海莫氏症之新途徑。
本發明之目的在提供此化合物。
該目的可經由具有通式(I)之化合物而達成， 其中A為O、S或NH，X為一鍵或－CR5 R6 基，其中R5 及R6 各選自下列所組成之群組：H、選自CH3 、C2 H5 、i－C3 H7 、n－C3 H7 、i－C4 H9 、n－C4 H9 、sec－C4 H9 、tert－C4 H9 之烷基；選自C2 H3 、i－C3 H5 、n－C3 H5 、n－C4 H7 、i－C4 H7 、sec－C4 H7 之烯基；其中於任何烷基或烯基之一或多個H原子可選擇被一或多個取代基取代，該取代基各選自OH、F、Cl、Br、I及CF3 所組成之群組；或R5 、R6 可共同與其相連結之碳原子一起形成具有3至6個C－原子之飽和或未飽和、經取代或未經取代之環，且其環中可包含一或多個N、S或O之雜原子，且若多於一個雜原子存在，則該雜原子可為相同或相異；R1 、R2 、R3 及R4 各選自下列所組成之群組：H；F；Cl；Br；I；CN；OH；C(O)N(R7 R8 )；S(O)2 R7 ；SO2 N(R7 R8 )；S(O)N(R7 R8 )；N(R7 )S(O)2 R8 ；N(R8 )S(O)R8 ；S(O)2 R7 ；N(R7 )S(O)2 N(R8 R8a )；SR7 ；N(R7 R8 )；N(R7 )C(O)R8 ；N(R7 )C(O)N(R8 R8a )；N(R7 )C(O)OR8 ；OC(O)N(R7 R8 )；C(O)R7 ；經取代或未經取代之C1 －C4 －烷基及經取代或未經取代之C1 －C4 －烷氧基，且其中C1 －C4 －烷基與C1 －C4 －烷氧基之取代基選自F、Cl、Br、I、CF3 ；R7 、R8 、R8a 各選自下列所組成之群組：H；C1 －C4 －烷基；雜環；及C3－7 環烷基，其中C1 －C4 －烷基；雜環；及C3－7 環烷基可選擇經一或多個選自F、Cl、Br、I及CF3 之取代基取代；Y為羧基－C(O)OH或經取代或未經取代之四唑基；R9 及R10 各選自下列所組成之群組：H、F及CF3 ；及其溶劑合物、水合物、酯類及醫藥可接受性鹽類。
本文中所使用“經取代”一詞包括部份及全部取代，取代基可為飽和或未飽和。
在R5 及R6 為環之一部份的情況，該環可經C1 －C4 －烷基或OH、F、Cl、Br、I及CF3 取代。
酯類為根據式(I)之羧基，其之H以有機殘基R7a 置換者，適當的有機殘基為熟悉技術者所知。較佳之R7a 包括下列：未經取代或至少單取代之烷基，較佳為C1 －C10 烷基、烯基，較佳為C2 －C10 －烯基、炔基，較佳為C3 －C10 炔基，及未經取代或至少單取代、飽和或未飽和、具有3至6個C－原子之非芳族或芳族環，且環中可含一或多個選自N、S或O之雜原子，且若多於一個雜原子存在，則該雜原子可為相同或相異。該取代基選自下列所組成之群組：鹵素、烷基、烯基、炔基、N、S、O、羧基、磺醯基等，且其可進一步被取代。
通用之芳族基實例包括例如苯基之芳基及雜芳基，該芳基及雜芳基可經取代，較佳經上述之取代基取代。
在本發明其他具體例中：A為O或NH；X為－CR5 R6 ，其中R5 及R6 各選自下列所組成之群組：H、CH3 、C2 H5 、i－C3 H7 、n－C3 H7 、i－C4 H9 、n－C4 H9 、sec－C4 H9 及tert－C4 H9 ；其中於任何烷基之一或多個H原子可選擇被一或多個取代基取代，該取代基各選自OH、F、Cl、Br及I所組成之群組；或R5 、R6 可共同與其相連結之碳原子一起形成環丙基環；R1 、R2 、R3 及R4 各選自下列所組成之群組：H、OH、C(1－4) 烷基、C(1－4) －烷氧基、N(CH3 )2 、－SO2 CH3 、CN、OCF3 、－C(O)CH3 、OCH3 、CF3 、F及Cl；其中該C(1－4) 烷基與C(1－4) 烷氧基各經選擇以一、二或三個選自I、Br、F及Cl所組成之群組的取代基取代；Y為CO2 H；R9 及R10 各選自下列所組成之群組：H、F及CF3 ；及其溶劑合物、水合物、酯類及醫藥可接受性鹽類。
在本發明其他具體例中：A為O或NH；X為－CR5 R6 ，其中R5 及R6 為H、CH3 、C2 H5 、i－C3 H7 、n－C3 H7 、i－C4 H9 、n－C4 H9 、sec－C4 H9 或tert－C4 H9 ；R1 、R2 、R3 及R4 各選自下列所組成之群組：H、OH、C(1－4) 烷基、C(1－4) －烷氧基、－N(CH3 )2 、－SO2 CH3 、CN、OCF3 、－C(O)CH3 、OCH3 、CF3 、F及Cl；其中該C(1－4) 烷基與C(1－4) 烷氧基各經選擇以一、二或三個選自I、Br、F及Cl所組成之群組的取代基取代；Y為CO2 H；R9 及R10 各選自下列所組成之群組：H、F及CF3 ；及其溶劑合物、水合物、酯類及醫藥可接受性鹽類。
在本發明其他具體例中：A為O或NH；X為－CR5 R6 ，其中R5 及R6 為H、CH3 、C2 H5 、i－C3 H7 、n－C3 H7 、i－C4 H9 、n－C4 H9 、sec－C4 H9 或tert－C4 H9 ；Y為CO2 H；R1 及R2 各選自下列所組成之群組：CF3 、H、F、Cl、OCH3 、C(1－4) 烷基及CN；R3 及R4 各選自下列所組成之群組：H、CF3 、F及Cl；R9 為H或F；R10 為H；及其溶劑合物、水合物、酯類及醫藥可接受性鹽類。
在本發明之另一具體例中，該目的可經由具有通式(I＊ )之化合物而達成， 其中A為O、S或NH，X為一鍵或－CR5 R6 基，其中R5 及R6 各選自下列所組成之群組：H、選自CH3 、C2 H5 、i-C3 H7 、n-C3 H7 、i-C4 H9 、n-C4 H9 、sec-C4 H9 、tert-C4 H9 之烷基；選自C2 H3 、i-C3 H5 、n-C3 H5 、n-C4 H7 、i-C4 H7 、sec-C4 H7 之烯基；其中於任何烷基或烯基之一或多個H原子可選擇被一或多個取代基取代，該取代基各選自OH、F、Cl、Br、I及CF3 所組成之群組；或R5 、R6 為具有3至6個C-原子之飽和或未飽和、經取代或未經取代之環的一部份，且其環中可包含一或多個N、S或O之雜原子，且若多於一個雜原子存在，則該雜原子可為相同或相異；R1 、R2 、R3 及R4 各選自下列所組成之群組：H；F；Cl；Br；I；CN；OH；C(O)N(R7 R8 )；S(O)2 R7 ；SO2 N(R7 R8 )；S(O)N(R7 R8 )；N(R7 )S(O)2 R8 ；N(R8 )S(O)R8 ；S(O)2 R7 ；N(R7 )S(O)2 N(R8 R8a )；SR7 ；N(R7 R8 )；N(R7 )C(O)R8 ；N(R7 )C(O)N(R8 R8a )；N(R7 )C(O)OR8 ；OC(O)N(R7 R8 )；C(O)R7 ；經取代或未經取代之C1 -C4 -烷基及經取代或未經取代之C1 -C4 -烷氧基，且其中C1 -C4 -烷基與C1 -C4 -烷氧基之取代基選自F、Cl、Br、I、CF3 ；R7 、R8 、R8a 各選自下列所組成之群組：H；C1 -C4 -烷基；雜環；及C3-7 環烷基，其中C1 -C4 -烷基；雜環；及C3-7 環烷基可選擇經一或多個選自F、Cl、Br、I及CF3 之取代基取代；Y為羧基-C(O)OH或經取代或未經取代之四唑基；及/或其鹽類或酯類。
本文中所使用“經取代”一詞包括部份及全部取代，取代基可為飽和或未飽和。
在R5 及R6 為環之一部份的情況，該環可經C1 -C4 -烷基或OH、F、Cl、Br、I及CF3 取代。
酯類為根據式(I)之羧基，其之H以有機殘基R7a 置換者，適當的有機殘基為熟悉技術者所知。較佳之R7a 包括下列：未經取代或至少單取代之烷基，較佳為C1 －C10 烷基、烯基，較佳為C2 －C10 －烯基、炔基，較佳為C3 －C10 炔基，及未經取代或至少單取代、飽和或未飽和、具有3至6個C－原子之非芳族或芳族環，且環中可含一或多個選自N、S或O之雜原子，且若多於一個雜原子存在，則該雜原子可為相同或相異。該取代基選自下列所組成之群組：鹵素、烷基、烯基、炔基、N、S、O、羧基、磺醯基等，且其可進一步被取代。
通用之芳族基實例包括例如苯基之芳基及雜芳基，該芳基及雜芳基可經取代，較佳經上述之取代基取代。
“C1 －C4 －烷基”一詞意指甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基及第三丁基。
“C3－7 環烷基”或“C3－7 環烷基環”意指具有3－7個碳原子之環烷基鏈，例如環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環己烯基、環庚基。環烷基之碳上毎一個氫可以取代基置換。
“雜環基”或“雜環”意指環戊烷、環己烷或環庚烷環，其可含多至最大數量之雙鍵(芳族或非芳族環，為完全、部份或未飽和)，其中至少一碳原子，多至4個碳原子經雜原子置換，該雜原子選自下列所組成之群組：硫(包括－S(O)－、－S(O)2 －)、氧及氮(包括＝N(O)－)，且其中該環經由碳或氮原子連結至其餘之分子。雜環之實例包括，但不限於呋喃、噻吩、吡咯、吡咯啉、咪唑、咪唑啉、吡唑、吡唑啉、唑、唑啉、異唑、異唑啉、噻唑、噻唑啉、異噻唑、異噻唑啉、噻二唑、噻二唑啉、四氫呋喃、四氫噻吩、吡咯啶、咪唑啶、吡唑啶、唑啶、異唑啶、噻唑啶、異噻唑啶、噻二唑啶、環丁碸、哌喃、二氫哌喃、四氫哌喃、咪唑啶、吡啶、嗒、吡、嘧啶、哌、哌啶、嗎啉、四唑、三唑、三唑啶、四唑啶、氮呯或高哌。“雜環”亦指三亞甲五胺。
在較佳具體例中，本發明係關於一種具有通式(I)之化合物，其中A、X；Y；R1 及R2 ；及R3 、R4 、R5 及R6 各自獨立具有下列意義：A為O；及/或X為－CR5 R6 基，其中R5 及R6 各自獨立選自下列所組成之群組：H；選自CH3 、C2 H5 、i－C3 H7 、n－C3 H7 、i－C4 H9 、n－C4 H9 、sec－C4 H9 、tert－C4 H9 之烷基；其中於任何烷基之一或多個H原子可選擇被一或多個取代基取代，該取代基各選自OH、F、Cl、Br及I所組成之群組；及/或R1 、R2 、R3 及R4 各選自下列所組成之群組：H；OH；C1 －C4 烷基或C1 －C4 －烷氧基，其經F、Cl、Br、I部份或全部取代；及/或R5 及R6 為H；或R5 為H且R6 為CH3 、C2 H5 、C3 H7 或C4 H9 或其異構物；或R1 與R2 為CH3 或R1 、R2 共同與其相連結之碳原子一起形成環丙基環；及/或Y為羧基；及/或其鹽或酯。
在此具體例之基中，若所有之基A；X；Y；R1 、R2 、R3 、R4 、R5 及R6 具有如前述之定義，則更佳。
較佳為，若A；X；Y；R1 及R2 ；及R3 、R4 、R5 及R6 各自獨立具有下列意義：A為O；X為－CR5 R6 基，R5 及R6 為H；或R5 為H且R6 為CH3 、C2 H5 、C3 H7 或C4 H9 或其異構物；或R1 與R2 為CH3 或R5 、R6 共同與其相連結之碳原子一起形成環丙基環；及/或R1 、R2 、R3 及R4 各選自下列所組成之群組：H；OH；C1 －C4 烷基或C1 －C4 －烷氧基，其經F、Cl、Br、I部份或全部取代；及/或及/或Y為羧基；及/或其鹽或酯。
在此具體例之基中，若所有之基A；X；Y；R1 、R2 、R3 、R4 、R5 及R6 具有如前述之定義，則更佳。
較佳為，若A；X；Y；R1 及R2 ；及R3 、R4 、R5 及R6 各自獨立具有下列意義：A為O；X為－CR5 R6 基，R5 及R6 為H；或R5 為H且R6 為CH3 、C2 H5 、C3 H7 或C4 H9 或其異構物；Y為羧基；R1 、R2 、R3 及R4 各選自下列所組成之群組：H、OH、CH3 、OCH3 、CF3 、F及Cl；及/或及/或其鹽或酯。
在此具體例之基中，若所有之基A；X；Y；R1 、R2 、R3 、R4 、R5 及R6 具有如前述之定義，則更佳。
在另一具體例中，本發明係關於選自下列所組成之群組之化合物：2－(5－(4－氟苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－戊酸 (I)2－(5－(苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－戊酸 (II)及其溶劑合物、水合物、酯類及醫藥可接受性鹽類。
在另一具體例中，本發明係關於選自下列所組成之群組之化合物： 及其溶劑合物、水合物、酯類及醫藥可接受性鹽類。
本發明之一些化合物及/或其鹽類或酯類將存在不同之立體異構物形式，所有這些形式皆從屬於本發明。
下述為包含於本文之本發明化合物之例示性鹽類，下述不同鹽類之清單並無完全及限制之意義。
含一或多個酸基之本發明化合物可根據本發明而使用，例如其之鹼金屬鹽類、鹼土金屬鹽類或銨鹽。此鹽類更精確之實例包括鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽或氨或有機胺鹽類，例如乙基胺、乙醇胺、三乙醇胺或胺基酸。
含一或多個鹼基(即可被質子化之基)之本發明化合物可根據本發明而使用其與無機或有機酸之加成鹽類之形式。
適當酸之實例包括氯化氫、溴化氫、磷酸、硫酸、硝酸、甲烷磺酸、p－甲苯磺酸、萘二磺酸、草酸、乙酸、酒石酸、乳酸、水楊酸、苯甲酸、甲酸、丙酸、三甲基乙酸、二乙基乙酸、丙二酸、琥珀酸、更二酸、反丁烯二酸、順丁烯二酸、蘋果酸、胺磺酸、苯基丙酸、葡萄庚酸、抗壞血酸、異菸碱酸、檸檬酸、己二酸及其他熟悉技術者已知之酸。
“醫藥可接受性”一詞意指經由例如EMEA(歐洲)及/或FDA(US)及/或任何其他國家管理機構之管理機構承認用於動物，較佳為人類。
本發明含數鹼基之化合物可同時形成不同之鹽類。
若本發明化合物在分子中同時含有酸性及鹼性基，則本發明除了所提及之鹽類形式外，亦包括包括內鹽或甜菜碱。
本發明化合物之各種鹽類可經由熟悉技術者已知之通常方法獲得，例如經由將其與有機或無機酸或鹼於溶劑或分散劑中接觸，或經由與其他鹽類陰離子交換或陽離子交換。
此外，本發明包括本發明化合物之所有鹽類，由於低的生理相容性，其並不直接適用於醫藥，但其可被使用作為例如化學反應或製備醫藥可接受性鹽類之中間產物，或其可適於以任何適當方式研究本發明化合物之γ－分泌酶調控活性，例如任何適當的細胞外分析。
本發明更包括所有本發明化合物之溶劑合物。
本發明更包括本發明化合物之衍生物/前藥(包括其鹽類)，其含有生理耐受性及可分離之基，且其在動物中，較佳為哺乳動物，最佳為人類，被代謝成本發明化合物。
本發明更包括本發明化合物之代謝物。
“代謝物”一詞表示在細胞或有機體中，較佳為哺乳動物中由本發明任何化合物所衍生之所有分子。
較佳之“代謝物”一詞係關於在生理條件下，與存在於任何此類細胞或有機體中任何分子不同的分子。
本發明化合物之代謝物結構對於使用不同適當方法之任何熟悉技術者將是顯著的。
通式(I)化合物可根據公開於文獻之方法或類似方法製備。
根據個別情況之細節，為了避免合成通式(I)化合物期間之側反應，其可必須或有利地經由導入保護基暫時阻斷官能基，並在合成後階段將其去保護，或以前驅基之形式導入官能基，並在後階段將其轉換成所欲之官能基。適當的合成策略、保護基及前驅基為熟悉技術者所知。
若需要，可將式(I)化合物經由通常純化程序純化，例如經由再結晶化或層析。用於製備式(I)化合物之起始原料為商業上可獲得，或可根據或類似於文獻之程序。
可作為用於經數種方法製備其他本發明化合物之基礎者，為熟悉技術者所知。
本發明亦關於使用作為藥物之本發明化合物，該化合物如上述之定義，此外，關於藥物，具體例如下所述，關於發明用途，例如調配、應用及組合，亦運用本發明此態樣。
特定之本發明化合物適於治療阿茲海莫氏症。
關於該用途之詳細情形進一步揭示於下文。
該化合物可被用於調控γ－分泌酶活性。
如本文所述，“調控γ－分泌酶活性”一詞表示以γ－分泌酶－複合物處理APP之效果。較佳地，其表示當無應用該化合物實質上剩餘之處理APP效果的總比率，但其中經處理產物之相對數量改變，更佳為在此方式中所產生Aβ42－胜肽之量降低。例如可製造不同Aβ種類(例如Aβ－38或其他代替Aβ－42之較短胺基酸序列的Aβ胜肽種類)，或產物之相對數量不同(例如Aβ－40與Aβ－42之比例改變，較佳為增大)。
γ－分泌酶活性可例如經由測定APP處理而量測，例如經由測定所製造Aβ胜肽種類之含量，最重要的含量。
已於先前指出γ－分泌酶複合物亦被包含於Notch－蛋白質之處理。Notch為一種信號蛋白質，其在促進處理上扮演決定性之角色(例如檢閱Schweisguth F(2004)Curr.Biol.14,R129)。
關於該化合物於治療上調控γ－分泌酶活性之用途，其似乎最好不要干擾γ－分泌酶活性之Notch－處理活性，以避免假設的非所欲之副作用。
因此，以不顯示γ－分泌酶－複合物之Notch－處理活性之效果的化合物較佳。
在本發明之詞義中，“Notch處理活性上之效果”包括以某些因子抑制或活化Notch－處理活性。
在如Shimizu et al(2000)Mol.Cell.Biol,20：6913中所述之各個分析上，於30 μM之濃度，若該因子小於20，較佳小於10，更佳小於5，最佳小於2，則定義化合物為不具有Notch處理活性上之效果。
此γ－分泌酶調控可例如於動物中進行，例如於哺乳動物中。例示性之哺乳動物為小鼠、大鼠、天竺鼠、猴、犬、貓。調控亦可於人類中進行。在本發明特定具體例中，該調控於細胞外或細胞培養中實行。如熟悉技術者所知，數種於細胞外或細胞培養之分析是可利用的。
於細胞株或基因轉殖動物中，以西方墨點分析法(Western blot analysis)用於量測C－端APP片段製造之例示性分析包括，但不限於Yan et al.,1999,Nature 402,533－537.中所述者。
細胞外γ－分泌酶分析之實例敘述於WO－03/008635，在此分析中，適當的胜肽基質與γ－分泌酶製劑接觸，並量度分裂該基質之能力。
γ－分泌酶分裂之不同產物的濃度(Aβ－胜肽)可經由熟悉技術者已知之不同方法確定。此方法例之實例包括經由質譜法測定胜肽或以抗體確定。
在經培養之細胞培養基及生物製劑液體中，用於可溶性Aβ胜肽輪廓定性之例示性分析包括，但不限於Wang et al.,1996,J.Biol.Chem.271,31894－31902.中所述者。在此分析中，以特定抗體與Aβ－胜肽之免疫沉澱，並以介質輔助雷射脫附離子化飛行時間質譜法測定及定量胜肽種類合併使用。
用於以ELISA量測Aβ－40及Aβ－42胜肽之製造的例示性實例包括，但不限於Vassar et al,1999,Science 286,735－741.中所述者。進一步之訊息揭示於例如N.Ida et al.(1996)J.Biol.Chem.271,22908，及M.Jensen et al.(2000)Mol.Med.6,291。可會得之適當抗體例如來自Genetics Company,Inc.,Switzerland，抗體－基礎套組亦可獲自Innogenetics,Belgium。
可使用於此分析之細胞包括內源性表現γ－分泌酶複合物之細胞及短暫或安定地表現一些或所有γ－分泌酶複合物之反應子(interactor)的經轉染之細胞。適於此分析之數種可獲得之細胞株為熟悉技術者所知。神經元或膠質來源之細胞及細胞株為特別適當。此外，可使用大腦細胞及組織與其均質液及膜之製劑(Xia et al.,1998,Biochemistry 37,16465－16471)。
此分析可根據發明中不同實驗條件及配置進行例如研究化合物之效果。
此外，此分析可進行γ－分泌酶複合物上官能部份之機能研究。
例如動物γ－分泌酶複合物，較佳為哺乳動物，更佳為人類之一或多個反應子(在其自然型式或攜帶某些突變及/或改質)可被表現於某些細胞株，並可研究本發明化合物之效果。
使用反應子之突變形式可為已被敘述於某些動物，較佳為哺乳動物，更佳為人類之突變形式，或尚未被敘述於該動物之突變形式。
γ－分泌酶複合物之反應子改質包括該反應子之任何生理上改質與已敘述於生物系統中蛋白質改質的其他改質。
此改質之實例包括，但不限於糖基化作用、磷酸化作用、異戊二烯基化作用、肉豆蔻基化作用及法呢基化作用(farnesylation)。
再者，本發明化合物可用於製備調控γ－分泌酶活性之藥物。
本發明進一步關於該化合物於製備調控γ－分泌酶活性之藥物上之用途。
γ－分泌酶之活性可以不同方式調控，即產生各種Aβ－胜肽之不同輪廓。
於調控γ－分泌酶活性化合物之用途較佳為造成降低所產生之Aβ42－胜肽之相對量。
個別之劑量、投與路徑、配方等進一步揭示於下。
本發明進一步關於本發明化合物之用途，其用於治療與提高Aβ42製造程度有關的疾病，具有提高Aβ胜肽製造程度並積於大腦之疾病典型為阿茲海莫氏症(AD)、大腦澱粉樣血管病、多梗塞性癡呆、拳擊員痴呆或唐氏症，較佳為AD。
如於本文中所使用，“治療”一詞欲表示可降低、阻斷、遏止或停止疾病之進行的所有方法，但並不必然表示所有症狀之全部去除。
如於本文中所使用，“Aβ42製造升高含量”一詞表示由於APP加工處理之全面增加，而使Aβ42－胜肽製造之速度增加之狀況，較佳地，其表示由於APP－加工處理輪廓之變異，與自然型式APP及非疾病狀態相比較下，Aβ42胜肽之製造增加之狀況。
如上所略述，此提高Aβ42含量為病患加重或罹患阿茲海莫氏症之特徵。
本發明化合物或部份化合物之一優點可在於其增加CNS－滲透。
此外，本發明係關於包含本發明化合物之混合物與惰性載劑之醫藥組合物。
在較佳具體例中，本發明係關於一種包含本發明化合物之混合物與惰性載劑之醫藥組合物，其中該惰性載劑為醫藥載劑。
“載劑”一詞表示與化合物投與之稀釋劑、佐劑、賦形劑、或媒劑。此醫藥載劑可為無菌液體，例如水及油，包括石油、動物、植物或合成來源者，包括但不限於花生油、大豆油、礦物油、芝麻油等。當醫藥組合物經口投與時，水為較佳之載劑。當醫藥組合物以靜脈內投與時，食鹽水及右旋葡萄糖水溶液為較佳載劑。食鹽水溶液及右旋葡萄糖水溶液及甘油溶液較佳使用作為可注射溶液之液體載劑。適當的醫藥賦形劑包括澱粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明膠、麥芽、米、麵粉、白堊、二氧化矽凝膠、硬脂酸鈉、單硬脂酸甘油酯、滑石、氯化鈉、乾脫脂奶粉、甘油、丙烯、乙二醇、水、乙醇等。如果希望，該組合物亦可含少量濕潤劑或乳化劑，或pH緩衝劑。這些組合物可以溶液、懸浮液、乳液、錠劑、丸劑、膠囊、粉劑、持續釋放調配劑等形式取得。該組合物可與傳統結合劑及載劑調配成栓劑，例如甘油三酸酯。口服調配劑可包括標準載劑，例如醫藥等級之甘露糖醇、乳糖、澱粉、硬脂酸鎂、糖精鈉、纖維素、碳酸鎂等。適當醫藥載劑之實例敘述於E.W.Martin之“Remington’s Pharmaceutical Sciences”。此組合物將含有治療有效量之化合物(較佳為純之型式)與適當量之載劑，以便提供正常投與病患之型式。調配劑應適於投與之模式。
此外，本發明係關於製備本發明化合物之方法。
在一製備本發明化合物之具體例中，可在鹼金屬氫化物，一般為氫化鈉存在下，在適當非質子溶劑中，例如四氫呋喃，以苯甲基醇處理二溴氟苯。產物可在鹼金屬氫化物，一般為氫化鈉與金屬鹵化物，一般為鹵化銅，較佳為溴化銅存在下，以適當丙二酸衍生物處理，例如丙二酸第三丁酯乙酯。於酸性溶劑，例如乙酸中，高溫進一步處理，以提供苯甲氧基－溴苯基乙酸酯。其可在熟悉技術者已知之此Suzuki偶合的不同條件下與硼酸偶合，一般使用之溶劑例如1,2－二甲氧基乙烷及水、例如碳酸鉀之鹼金屬碳酸鹽、及例如肆(三苯基膦)鈀(0)之鈀化合物。
如果需要，化合物可於適當非質子溶劑，例如四氫呋喃中，以適當之鹼，例如金屬二烷基醯胺，一般為LDA，與適當鹵化物，於適當溫度，一般為－78℃處理而烷化。
苯甲基保護基之移除可在熟悉技術者已知之此去保護的不同條件下進行，一般使用例如含10%鈀之炭之鈀觸媒，於例如乙醇之適當溶劑中，並在氫氣壓下。
可經由熟悉技術者已知之不同方法，例如DA Evans et al Tetrahedron Len.(1998),39,2937,Hosseinzadeh R et al Synlett (2005),7,1101.，將酚轉換成聯苯基。一般而言，在例如4A分子篩之試劑存在下，以例如三乙胺之四級胺、例如乙酸銅之金屬乙酸鹽、芳基硼酸及例如二氯甲烷之適當溶劑處理酚。
在水及例如甲醇之其他適當溶劑存在下，使用例如鹼金屬氫氧化物之鹼，一般為氫氧化鉀，可將酯轉換成酸。
在另一具體例中，A為S之化合物可在例如碳酸鉀之適當的鹼存在下，於例如N,N,二甲基甲醯胺之適當的非質子溶劑中，經由以芳基硫醇處理二溴氟苯而製備。產物可在鹼金屬氫化物，一般為氫化鈉與金屬鹵化物，一般為鹵化銅，較佳為溴化銅存在下，以適當的丙二酸衍生物處理，例如丙二酸第三丁酯乙酯。於酸性溶劑，例如乙酸中，高溫進一步處理，以提供芳基硫基－溴苯基乙酸酯。其可在熟悉技術者已知之此Suzuki偶合的不同條件下與硼酸偶合，一般使用之溶劑例如1,2－二甲氧基乙烷及水、例如碳酸鉀之鹼金屬碳酸鹽、及例如肆(三苯基膦)鈀(0)之鈀化合物。
如果需要，化合物可於適當非質子溶劑，例如四氫呋喃中，以適當之鹼，例如金屬二烷基醯胺，一般為LDA，與適當鹵化物，於適當溫度，一般為－78℃處理而烷化。
在水及例如甲醇之其他適當溶劑存在下，使用例如鹼金屬氫氧化物之鹼，一般為氫氧化鉀，可將酯轉換成酸。
在製備A為NH之本發明化合物的另一具體例中，可在鹼金屬氫化物，一般為氫化鈉存在下，於例如四氫呋喃之適當的非質子溶劑中，將二溴氟苯以苯甲基醇處理。產物可在鹼金屬氫化物，一般為氫化鈉與金屬鹵化物，一般為鹵化銅，較佳為溴化銅存在下，以適當的丙二酸衍生物處理，例如丙二酸第三丁酯乙酯。於例如乙酸之酸性溶劑中，高溫進一步處理，以提供苯甲氧基－溴苯基乙酸酯。其可在熟悉技術者已知之此Hartwig－Buchwald偶合的不同條件下與苯胺偶合，一般例如Hartwig JF in Modern Arene Chemistry,(2002)pp107－168.中所述。
苯甲基醚保護基之移除可在熟悉技術者已知之此去保護的不同條件下進行，一般使用例如含10%鈀之炭之鈀觸媒，於例如乙醇之適當溶劑中，並在氫氣壓下。
所產生之羥基化合物可使用例如三氟甲烷磺酸酐、例如吡啶之有機鹼、並於例如二氯甲烷之適當溶劑中，而轉換成三氟甲烷磺酸酯(triflate)。然後此三氟甲烷磺酸酯可在熟悉技術者已知之此suzuki偶合的不同條件下與硼酸偶合，一般使用之溶劑例如1,2－二甲氧基乙烷及水、例如碳酸鉀之鹼金屬碳酸鹽、及例如肆(三苯基膦)鈀(0)之鈀化合物。
如果需要，化合物可於適當非質子溶劑，例如四氫呋喃中，以適當之鹼，例如金屬二烷基醯胺，一般為LDA，與適當鹵化物，於適當溫度，一般為－78℃處理而烷化。
在水及例如甲醇之其他適當溶劑存在下，使用例如鹼金屬氫氧化物之鹼，一般為氫氧化鉀，可將酯轉換成酸。
當本發明化合物被製備成外消旋鹽時，可經由熟悉技術者已知之方法分離成其之鏡像異構物，一般經由使用對掌性HPLC管柱。
此外，本發明係關於藥物製備之方法，其包含之步驟為：a)製備本發明化合物，b)調配含該化合物之藥物。
本發明化合物及其醫藥可接受性鹽類，可選擇與其他醫藥活性化合物組合，適於治療或預防阿茲海莫氏症或其症狀。此另外之化合物包括增強認識力藥劑，例如乙醯膽鹼酯酶抑制劑(例如多奈哌齊(Donepezil)、他可林(Tacrine)、加蘭他敏(Galantamine)、利伐司替明(Rivastigmin))、NMDA拮抗劑(例如美金胺(Memantine))PDE4抑制劑(例如阿瑞佛(Ariflo))或熟悉技術者已知之適於治療或預防阿茲海莫氏症的任何其他藥劑。此化合物亦包括降低膽固醇藥劑，例如抑制素(例如辛伐他汀(simvastatin))。這些化合物可親自作為藥劑、以其相互之混合物或以醫藥製劑型式投與動物，較佳投與哺乳動物，且特別是人類。
已知有不同輸送系統並可使用於投與本發明化合物，以治療阿茲海莫氏症或調控γ－分泌酶活性，例如包封於脂質體、微粒及微膠囊中。
若不能直接輸送至中樞神經系統，較佳為大腦，較有利的為選擇及/或修正投與方法，該方法能使醫藥化合物通過血腦障礙。
導入之方法包括，但不限於，經皮內、肌肉內、腹膜內、靜脈內、皮下、鼻腔內、硬脊膜外及經口之路徑。
化合物可經由任何便利之路徑投與，例如經由輸液、經由團式注射、經由上皮或黏膜皮膚內層吸收，並可與其他生物活性藥劑一起投與。
投與可為全身性或局部。此外，理想上可將本發明醫藥組合物經由任何適當路徑導入中樞神經系統，包括心室內及鞘內注射；心室內注射可經由心室內導管順利完成，例如連接至儲器，例如Ommaya儲器。亦可使用肺部投與，例如經由使用吸入器或噴霧器及具有霧化劑之調配劑。
在另一具體例中，化合物可於小泡中運輸，特別是脂質體(Langer(1990)Science 249,1527.)。
在另一具體例中，化合物可經由控制釋放系統輸送。在一具體例中，可使用泵浦(Sefton(1987)CRC Crit.Ref.Biomed.Eng.14,201；Buchwald et al.(1980)Surgery 88,507；Saudek et al.(1989)N.Engl.J.Med.321,574)。在另一具體例中，可使用聚合材料(Ranger and Peppas(1983)Macromol.Sci.Rev.Macromol.Chem.23,61；Levy et al.(1985)Science 228,190；During et al.(1989)Ann.Neurol.25,351；Howard et al.(1989)J.Neurosurg.71,858)。在另一具體例中，控制釋放系統可置於治療標的之附近，即大腦附近，因此僅需要全身劑量之一小部份(例如Goodson,1984,In：Medical Applications of Controlled Release,supra,Vol.2,115)。其他控制釋放系統經由Langer檢視討論(1990,Science 249,1527)。
為了選擇投與之適當方法，熟悉技術者亦可考慮已被選擇之其他已知抗阿茲海莫氏症藥劑的投與路徑。
例如愛憶欣/多奈哌齊(Aricept/Donepezil)及康耐視/他可林(Cognex/Tacrine)(所有乙醯膽鹼酯酶－抑制劑)可經口服用，阿庫拉/美金胺(Axura/Memantine)(NMDA－受體拮抗劑)已以錠劑/液體發售，並作為i.v.－溶液。
此外，熟悉技術者可考量關於NSAID－家族成員於臨床試驗之投與路徑的有用資料，及研究其於阿茲海莫氏症上效果之其他研究。
為了選擇適當之劑量，熟悉技術者可選擇於臨床前及/或臨床研究上已顯示無毒性之劑量，及可依據事先給予之值的劑量，或脫離彼等之劑量。
使用於調配劑之精確的劑量亦可依據投與之路徑，及疾病或失調之嚴重性，且應根據開業醫師之判斷及每一病患之病況而決定。然而，靜脈內投與之適當劑量範圍一般約為每公斤體重20－500微克之活性化合物。鼻腔內投與之適當劑量範圍一般約為0.01 mg/kg體重至1 mg/kg體重。有效劑量可由活體外或動物模式測試系統導出之劑量－反應曲線推斷。
例示性動物模式為含具有雙突變KM670/671NL之APP695－型的基因轉殖小鼠品系“Tg2576”。參考資料詳見例如專利案US5877399及Hsiao et al.(1996)Science 274,99，及Kawarabayahsi T(2001)J.Neurosci.21,372；Frautschy et al.(1998)Am.J.Pathol.152,307；Irizarry et al.(1997)J.Neuropathol.Exp.Neurol.56,965；Lehman et al.(2003)Neurobiol.Aging 24,645。
熟悉技術者可獲得來自許多研究的可靠資料，其有助於熟悉技術者選擇用於所選擇之療法的適當劑量。
本文中“治療有效量”一詞意指經由研究人員、獸醫、醫師或其他臨床工作者所尋求，在組織系統、動物或人類中誘導出生物或醫學反應之活性化合物或藥劑之數量，包括緩和所治療之疾病或失調的症狀。
其中本發明係關於共同療法或組合療法，包含一或多種化合物，“治療上有效量”之投與係指藥劑一起合併之量，因而合併效果誘發所欲生物或醫藥反應。又，熟習技術者將認識到，於共同療法之情形中，此合劑之每一成分量若其本身被使用則可為或不可為治療上有效量。
許多研究已被發表，其中描述分子於γ－分泌酶活性上之效應，例示性研究為Lim et al.(2001)Neurobiol.Aging 22,983；Lim et al.(2000)J Neurosci.20,5709；Weggen et al.(2001)Nature 414,212；Eriksen et al.(2003)J Clin Invest.112,440；Yan et al.(2003)J Neurosci.23,7504。
如本文中之使用，除非另有指明，“經分離型式”一詞係指化合物以與另一化合物、溶劑系統或生物環境之任何固體混合物分離的型式存在。
如本文中之使用，除非另有指明，“實質上純的主劑”一詞係指雜質於經分離主劑之百分比少於約5莫耳百分比，較佳少於約2莫耳百分比，更佳少於約0.5莫耳百分比，最佳少於約0.1莫耳百分比。
如本文之使用，除非另有指明，“實質上無對應鹽型式”一詞係指當用於描述式(I)化合物時係指於式(I)經分離主劑中對應鹽型式之百分比少於約5莫耳百分比，較佳少於約2莫耳百分比，更佳少於約0.5莫耳百分比，最佳少於約0.1莫耳百分比。
用之無毒性物質。此等製劑可慣例含有醫藥可接受性濃度之鹽類、緩衝劑、防腐劑、相容載劑及可選擇之其他治療劑。
 一般合成說明
下列一般敘述僅為說明目的且並無限制本發明之意思。
式I化合物，其中A、X、R1 、R2 、R3 、R4 、R9 及R10 如式I中之定義，且Y為CO2 H，其可在標準酸性或鹼性水解條件下經由酯II之水解獲得，包括於室溫，在例如水、四氫呋喃(THF)、及甲醇之適當溶劑混合物中，與NaOH反應數小時。關於說明性質之目的，酯II顯示具有X為CHR5 ，但熟悉技術者將認識，酯水解將作用於如式I定義之所有X。
其中：對於Ia及IIa，A為NH；對於Ib及IIb，A為O；對於Ic及IIc，A為S。
A為NH之化合物IIa，可在典型Buckwald或Hartwig條件下，例如於甲苯、二烷或THF中，於第三丁氧化鉀，及催化劑存在下，例如乙酸鈀(II)(Pd(OAc)2 )或鈀(0)反式,反式－二苯亞甲基丙酮，於高溫(80－180℃之範圍)，經由將化合物IIIa或IIIb與芳基胺偶合而獲得，或反應可以微波反應器預先形成。A為O之化合物IIb，可如D.Evans,et.al.Tetrahedron Lettters(1980,39(19),2937－2940.中所述之相似條件，於二氯甲烷(DCM)中，在鹼(例如二甲基胺基吡啶(DMAP)、或三乙胺)、分子篩及Cu(OAc)2 存在下，於室溫，經由將酚IIIc與芳基硼酸偶合而獲得。或者是，A各為O及S之化合物IIb及IIc可由IIIa或IIIb與芳基酚或苯硫酚偶合而製備。化合物IIb亦可由IIIc製備，其經由在DCM中，於三乙胺存在下，與甲烷磺酸酐反應，然後在非質子溶劑中，於例如二異丙基乙基胺之鹼存在下，將所產生之甲烷磺酸鹽與酚或苯硫酚縮合。對於二芳基醚合成之不同反應條件詳見Rok Frlan及Danijel Kikkelj之回顧文獻(Synthesis 2006,No 14,pp 2271－2285)。化合物IIb亦可由IIIc製備，其經由在DCM中，於三乙胺存在下與甲烷磺酸酐反應，然後在非質子溶劑中，於例如二異丙基乙基胺之鹼存在下，將所產生之甲烷磺酸鹽與酚或苯硫酚縮合。
化合物IIIa可在DCM中，於例如吡啶、或三乙胺之胺存在下，於0℃，由酚IIIc與三氟甲烷磺酸酐反應而獲得。中間產物IIIb可於提高之溫度(25至120℃之範圍)由酚IIIc與濃縮HCl或HBr或HI反應而獲得。或者是，化合物IIIb之獲得可在適度條件下，經由在二烷中，於經PdCl2 催化之三乙胺存在下，以頻哪醇硼烷(pinacoborane)處理對應之三氟甲烷磺酸鹽IIIc，以獲得芳基頻哪醇(pinacol)硼酸酯，然後將其於甲醇－水中，以銅(II)鹵化物處理，程序敘述於Nesmejanow et al.(Chem Ber.1960,2729)。前述頻哪醇硼酸酯亦可於THF水溶液中，於氯胺－T存在下與NaI反應，獲得芳基碘化物，其敘述於J.W.Huffman et.al.(Synthesis,2005,547)。
其中：對於IIIa，A為OTf；對於IIIb，A為Cl、Br或I；對於IIIc，A為OH。
化合物IIIc可經由在例如MeOH或EtOH之醇中，於Pd－C存在下，將化合物IV以氫化作用去苯甲基化而獲得。去苯甲基化亦可以其他方法達成，例如BBr3 於DCM，NaCN於DMSO/120－200℃或LiCN於DMF/120－200℃。
化合物IV可由化合物V以烷基或烯基鹵化物之烷化而製備。將化合物V於THF或其他非質子溶劑中，以例如雙(三甲基矽烷基)醯胺鋰、雙(三甲基矽烷基)醯胺鈉、或二異丙基醯胺鋰之鹼於－78℃處理，之後添加親電子試劑，例如烷基或烯基鹵化物，產生烷化化合物IV。
化合物V可在含碳酸鈉之DME水溶液中，於Pd(PPh3 )4 存在下之Suzuki條件，由化合物VI與芳基硼酸之偶合反應而製備。相似地，三氟甲烷磺酸酯可在上述條件下轉換成硼酸酯，然後可與芳基溴化物或芳基氯化物偶合而獲得化合物V。
中間產物化合物VI可於DCM中，在一當量吡啶存在下，於0℃，由化合物VII與三氟甲烷磺酸酐製備。
中間產物化合物VII可由化合物VIII之單－去苯甲基化製備。化合物VIII之選擇性單－去苯甲基化可於乙醇或甲醇溶液中，在Pd－C觸媒存在下，在氫氣壓下，於Parr震盪器中，經由以1.1當量之鹼，例如氫氧化鈉或氫氧化鉀處理而達成。
中間產物VIII可在DMF中，於室溫，輕易地由3,5－二羥基苯基乙酸甲酯(商業上可獲得)與溴化苯甲基及碳酸鉀反應而製備。
化合物I具有對於羧基之對掌中心α，並可存在二種鏡像異構物中之一種(或其混合物，其中可或不可存在一種鏡像異構性過量)。顯示有鏡像異構物Ia(R鏡像異構物)及Ib(S鏡像異構物)，純的鏡像異構物Ia及Ib可經由使用對掌性管柱之對掌性分離獲得。該鏡像異構物Ia及Ib亦可分離，藉由經濾份再結晶作用形成對掌胺鹽而解析。該鏡像異構物Ia及Ib亦可由對應酯類之外消旋鹽的動力學解析獲得，其使用脂肪酶酵素，例如AmanoAk、Amano脂肪酶PS、Amano脂肪酶A、Amano脂肪酶M、Amano脂肪酶F－15、Amano脂肪酶G(來自Biocatalytics Inc)，於有機水性溶劑中，例如水性DMF、DMSO、第三丁基－乙基醚或曲力通X－100(Triton X－100)水溶液。
化合物I二種鏡像異構物可由對掌分析分離。化合物Ia及Ib可在過氧化氫存在下，以含氫氧化鋰之THF水溶液，各由化合物IXa及IXb移除對掌輔助基而獲得。
其中A為NH、O或SA為NH之化合物IXa及IXb可在典型Buckwald或Hartwig條件下，經由將化合物Xa與Xb各與芳基胺偶合而獲得，例如於甲苯、二烷或THF中，於於第三丁氧化鉀及催化性Pd(OAc)2或Pd(dba)2 存在。A為O之化合物IXa及IXb在DCM及DMAP中，於Pd(OAc)2 及分子篩存在下，經由將化合物Xa與Xb各與芳基硼酸反應而獲得。A為O或S之化合物IXa及IXb亦可在DCM及DMAP中，於Pd(OAc)2 及分子篩存在下，經由將化合物Xa與Xb各與酚或苯硫酚反應而獲得。化合物Xa及Xb可在DCM中，於例如吡啶或三乙胺之胺存在下，於0℃將酚XIa及XIb與三氟甲烷磺酸酐反應而獲得。
化合物XIa及XIb可於例如MeOH或EtOH之醇溶劑中，在Pd－C存在下經由氫化作用，各由化合物XIIa及XIIb之去苯甲基化製備。
化合物XIIa及XIIb可各以鹵化烷或烯基鹵化物烷化化合物XIIIa及XIIIb製備，於THF或其他非質子溶劑中，於－78℃以例如雙(三甲基矽烷基)醯胺鋰、雙(三甲基矽烷基)醯胺鈉、或二異丙基醯胺鋰之鹼處理化合物XIIIa及XIIIb，之後添加親電子試劑，例如鹵化烷或烯基鹵化物，各獲得烷化化合物XIIa及XIIb。
化合物XIIIa及XIIIb可以Evans氏製程，經由與4－苯甲基－唑啶－酮XVa之R－異構物或4－苯甲基－唑啶－酮XVb之S－異構物偶合，由共同之中間產物XIV製備。中間產物XIV可在THF中，於例如三乙胺或N－甲基嗎啉之鹼存在下，與三甲基以醯氯、草醯氯或氯甲酸異丙酯反應，成為混合之酐或醯基氯，然後將其於THF中與XVa或XVb之鋰鹽反應。
中間產物化合物XIV可於醇之水溶液中，以鹼(例如LiOH或NaOH之甲醇水溶液)酯水解化合物V獲得。
合成程序
所有反應在惰性氣壓下進行，除另有表示外。於Bruker dpx400上獲得NMR光譜。於Agilent 1100上進行LCMS，其使用ZORBAXSB－C18,4.6 x 75 mm,3.5微米管柱之方法A。管柱流動為1 ml/mm，且所使用之溶劑為具有10 ul注射體積之水及乙腈(0.1%TFA)，波長為254及210 nm。方法敘述於下：
實施例： 實施例(i)：2－(5－(4－氟苯氧基)－4’－三氟甲基－二苯基－3－基)－戊酸之製備
1－苯甲氧基－3,5－二溴苯之製備 將苯甲基醇(9.7 ml,94 mmol)於室溫逐滴添加至含NaH(4.0 g 60%懸浮液於礦物油中,100 mmol)之THF(150 mL)懸浮液，並在添加1,3－二溴－5－氟苯(15.9 g,62.5 mmol)之前，將混合物於室溫攪拌1小時。反應於室溫攪拌12小時，小心添加水並將THF在減壓下蒸發。殘餘物以異己烷(x3)萃取，且合併之有機萃取物以NaoH溶液(1 M aq.)、水、鹽水清洗，乾燥(MgSO4 )、過濾並在減壓下濃縮。殘餘物以急驟管柱層析(EtOAc：石油醚)純化，獲得1－苯甲氧基－3,5－二溴苯(14.7 g,65 mmol)之無色液體，產率69%。1 H NMR(CDCl3 )δ 7.45－7.33(m,5H),7.30－7.28(m,1H),7.10－7.08(m,2H),5.02(s,2H).
(3－苯甲氧基－5－溴－苯基)－乙酸乙酯之製備 將丙二酸第三丁酯乙酯(10.2 mL,53.8 mmol)於室溫逐滴添加至含NaH(2.2 g 60%懸浮液於礦物油中,53.8 mmol)之二烷(200 mL)懸浮液，並在添加CuBr(7.7 g,53.8 mmol)及1－苯甲氧基－3,5－二溴苯(9.2 g,26.9 mmol)之前，將混合物於此溫度攪拌1小時。將反應混合物加熱至回流5h，小心添加HCl溶液(1M aq,100 mL)，將混合物以異己烷(x3)萃取，合併之有機萃取物以HCl溶液(1 M aq)、水、鹽水清洗，乾燥(MgSO4 )，過濾並在減壓下濃縮。殘餘物經急驟管柱層析(EtOAc：石油醚)純化，依洗提獲得回收之1－苯甲氧基－3,5－二溴苯(3.2 g,9.4 mmol)，35%產率，及2－(3－苯甲氧基－5－溴－苯基)－丙二酸第三丁酯乙酯(7.2 g,含1.4當量丙二酸第三丁酯乙酯,10 mmol)之無色液體，37%產率。將2－(3－苯甲氧基－5－溴苯基)丙二酸第三丁酯乙酯(7.2 g,含1.4當量之丙二酸第三丁酯乙酯,10 mmol)溶於冰AcOH(50 ml)，並加熱至回流12小時。在減壓下移除AcOH。將殘餘物倒入Na2 CO3 溶液(sat.aq.)中，並將混合物以EtOAc(x3)萃取，合併之有機萃取物以水、鹽水清洗，乾燥(MgSO4 )、過濾及在減壓下濃縮，獲得(3－苯甲氧基－5－溴－苯基－)乙酸乙酯(6.8 g,9.7 mmol)之黃色液體，97%產率。1 H NMR(CDCl3 )δ 7.44－7.30(m,5H),7.07－7.03(m,2H),6.87－6.84(m,1H),5.03(s,2H),4.15(q,2H),3.54(s,2H),1.26(t,3H).
(5－苯甲氧基－4’－三氟甲基－二苯基－3－基)－乙酸乙酯之製備 將(3－苯甲氧基－5－溴－苯基)－乙酸乙酯(2.50 g,7.2 mmol)添加至含4－(三氟甲基)苯基硼酸(1.5 g,8.0 mmol)及K2 CO3 (14.4 mmol,2 M aq.)之DME(25 mL)溶液中，於添加肆(三苯基膦)鈀(0)(10%wt)之前，將氮通入反應混合物中起泡10分鐘，並將所產生之混合物在惰性氣壓下加熱至80℃ 4小時，反應混合物以水稀釋，並以EtOAc(x3)萃取，合併之有機萃取物以sat.Na2 CO3 、鹽水清洗，乾燥(MgSO4 )，過濾並在減壓下濃縮。殘餘物以急驟管柱層析(EtOAc：石油醚)純化，獲得(5－苯甲氧基－4’三氟甲基－聯苯基－3－基)－乙酸乙酯(2.2 g)之無色膠質物，74%產率。1 H NMR(CDCl3 )δ 7.59－7.54(m,2H),7.48－7.30(m,8H),7.13－7.11(m,2H),6.94－6.91(m,1H),5.12(s,2H),4.16(q,2H),3.64(s,2H),1.27(t,3H).
2－(5－苯甲氧基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－戊酸乙酯之製備 將含LDA(4.5 mL 1.8 M於THF中,8 mmol)溶液於－78℃逐滴添加至經攪拌的含(5－苯甲氧基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－乙酸乙酯(3 g,7.3 mmol)之THF(50 mL)溶液。在逐滴添加碘丙烷(0.85 mL,8.7 mmol)之前，將反應混合物於－78℃攪拌30分鐘。使反應混合物溫熱至室溫隔夜。小心添加氯化銨(10 mL)飽和水溶液，並將殘餘物分層於EtOAc與水之間，水層以EtOAc(x3)萃取，合併之有機層以水、鹽水清洗，乾燥(MgSO4 )，過濾並在減壓下濃縮。殘餘物以急驟管柱層析(EtOAc：石油醚)純化，獲得2－(5－苯甲氧基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－戊酸乙酯(2.2 g)之油狀物，66%產率。
2－(5－(4－氟苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－戊酸之製備 將2－(5－苯甲氧基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－戊酸乙酯(1.1 g,2.4 mmol)溶於EtOH(10 mL)，並與10% Pd/C(116 mg)在氫氣壓下攪拌。19 h之後，將混合物經由Celite(矽藻土)過濾，並於真空中濃縮，產生2－(5－羥基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－戊酸乙酯(0.85 g)之無色油狀物。
於室溫，通風下，將三乙胺(100 μL,0.72 mmol)添加至經攪拌的含2－(5－羥基－4－三氟甲基－聯苯基－3－基)－戊酸乙酯(90 mg,0.25 mmol)、Cu(OAc)2 (68 mg,0.38 mmol)、4－氟苯基硼酸(70 mg,0.57 mmol)、4分子篩(25 mg,粉末)及DCM(2 mL)之混合物。24 h之後，將反應混合物裝於二氧化矽上並純化(含0－10%乙酸乙酯之汽油)，獲得2－(5－(4－氟苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－戊酸乙酯(67 mg)之無色油狀物。
將酯溶於THF(1.2 mL)，並於6：1 MeOH/水(0.3 mL,2 eq)中以KOH 1M溶液處理。65 h之後，混合物以水(5 mL)稀釋，然後以1M HCl(aq)酸化。混合物以乙酸乙酯(2 x 5 mL)萃取，然後將合併之有機層以鹽水清洗；乾燥(MgSO4 )並於真空中濃縮，產生2－(5－(4－氟苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－戊酸(57 mg,90%)之淡黃色膠質物。LCMS方法A－3.65 min。
實施例(ii)2－(5－(苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－戊酸
在實施例1之類似型式中，使用苯基硼酸置換4－氟苯基硼酸，製備2－(5－(苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－戊酸LCMS方法A－3.69 min。
實施例1
2－[5－(3,5二氟－苯基胺基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸
a)(3,5－雙－苯甲氧基－苯基)－乙酸甲酯
將(3,5－二羥基－苯基)－乙酸甲酯(獲白Aldrich,70g,0.385 mole)、溴化苯甲基(137 mL,1.16 mole)、碳酸鉀(160 g,1.16 mole)及DMF(1.5 L)之混合物在N2 下於室溫機械攪拌隔夜。將所產生之反應混合物倒入1.5 L冰－水混合物中並攪拌，過濾獲得沉澱物，並以庚烷連續清洗以移除溴化苯甲基，獲得標題化合物(123.7 g)之棕色固體，將其風乾用於下一反應。1 H－NMR(CDCl3 )：δ 3.60(s,2H),3.71(s,3H),5.05(s,4H),6.60(s,3H),7.35－7.50(m,10H)；估計C23H22O4(M＋H)363.15,實測363.
b)3－苯甲氧基－5－羥基－苯基)－乙酸乙酯
將含50公克(1.38 mole)3,5－雙－(苯甲氧基－苯基)－乙酸甲酯及NaOH(6.6 g,1.65 mole)之1 L EtOH溶液於10% Pd－C存在下，於Parr震盪器中氫化至消耗1當量之氫。混合物以con HCl酸化，然後將觸媒及溶劑移除，獲得油狀殘餘物。粗產物以ISCO二氧化矽凝膠管柱層析(ISCO)純化，使用EtOAC－庚烷作為洗提液(梯度為10%至75%之EtOAc)，獲得25公克(65%產率)標題化合物(1b)。1H－NMR(CDCl3 )：δ 1.15－1.20(t,3H),3.4－(s,2H),4.05－4.1(q,2H),4.9(s,2H),5.5(s,1H),6.4(s,2H),6.5(s,1H),7.207.35(m,5H)；估計C17H18O4(M＋I－I)287.3,實測287.
e)(3－苯甲氧基－5－三氟甲烷磺醯氧基－苯基)－乙酸乙酯
在含3－(苯甲氧基－5－羥基－苯基)－乙酸乙酯(74.4 g,0.26 mol)之二氯甲烷(700 mL)溶液中，添加吡啶(62.5 mL,0.78 mol)，將混合物冷卻至0℃。在此冷溶液中添加三氟甲烷磺酸酐(65.6 mL,0.39 mol)超過1.5 h，維持內部溫度低於5℃並於0℃進一步攪拌0.5 h，將此反應混合物倒入1N HCl(420 mL)與冰(105 g)之混合物中，並攪拌0.5 h。水層以二氯甲烷(2 x 100 mL)萃取，合併之濾份以水(2 x 100 mL)、飽和水溶液NaHCO3 溶液(2 x 100 mL)及鹽水(2 x 100 mL)清洗。將有機物乾燥(MgSO4 )並於真空中濃縮，獲得淡紅色液體(108 g)，其不再進一步純化而繼續下一步驟。估計C18H17F3O6S(M＋H)419.07,實測419.1.
d)(5－苯甲氧基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－乙酸乙酯
將含(3－苯甲氧基－5－三氟甲烷磺醯氧基－苯基)－乙酸乙酯(108 g,0.26 mol)、4－(三氟甲基)苯基硼酸(55.6 g,0.29 mol)、1,2－二甲氧基乙烷(1.1 L)及Na2 CO3 (2 M,129 mL,0.26 mol)水溶液之混合物機械攪拌，同時於室溫以N2 清洗10 min。在此系統中添加Pd(Ph3 )4 (480 mg,0.42 mmol)，並加熱至回流(95℃)2.5 h，該紅棕色混合物以EtOAc(0.5 L)稀釋，並以飽和水溶液NaHCO3 溶液(3 x 200 mL)及鹽水(2 x 200 mL)清洗。將有機餾份乾燥(Na2 SO4 )並於真空中濃縮。粗製混合物以ISCO管柱層析純化，獲得(5－苯甲氧基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－乙酸乙酯(107 g,100%)。
1 H－NMR(CDCl3)：δ 1.26(t,3H),3.66(s,2H),4.17(q,2H),5.12(s,2H),6.99(s,1H),7.12(s,2H),7.34－7.49(m,5H),7.67(s,4H)；估計C24H21F3O3(M＋H)415.14,實測415.2.
e)2－(5－苯甲氧基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊－4－酸乙酯
在含化合物1d(4.9 g,11.8 mmole)之THF(50 mL)溶液中，於－78℃逐滴添加Li[N(SiMe3 )2 ](1N於THF中,14.2 mL,14.2 mmol)，將反應混合物於－78℃攪拌1 h，然後逐滴添加3－溴－2－甲基－丙烯(1.25 mL,12.4 mmole)。將該溶液緩慢溫熱製－35℃並於－35℃攪拌0.5 h。反應以NH4 Cl飽和溶液淬熄，並以EtOAc萃取，將有機萃取物乾燥(Na2 SO4 )，濃縮並以管柱層析純化，獲得化合物1e(5.1 g,92%)之清澈油狀物；1H NMR(400 MHz,CHLOROFORM－D)δ ppm 1.19－1.29(m,3H),1.74(s,3H),2.47(m,1H),2.85(m,1H),3.83(m,1H),4.11(m,2H),4.72(s,1H),4.77(s,1H),5.12(s,2H),7.03(s,1H),7.10(s,1H),7.15(s,1H),7.35-7.48(m,5H),7.67(s,4H)；估計C28H27F3O3(M+H)469.19，實測469.
f)2-(5-羥基-4’-三氟甲基-聯苯基-3-基)-4-甲基-戊酸乙酯
將含化合物1e(5.1 g,10.9 mmole)、10% Pd/C(500mg)之EtOH(50 mL)混合物在H2 (40 psi)下於par-震盪器中氫化20 h。所產生之反應混合物經由celite(矽藻土)過濾，並將濾液濃縮，獲得化合物1f(4.2g,100%)之清澈油狀物；1H NMR(300 MHz,CHLOROFORM-D)δ ppm 0.92(d,J=6.6 Hz,6H),1.25(m,3H),1.49-1.61(m,1H),1.65-1.70(m,1H),1.95-2.05(m,1H),3.67(t,J=7.7 Hz,1H),4.10-4.29(m,2H),6.91(s,1H),6.97(t,J=2.0 Hz,1H),7.08(s,1H),7.65(s,4H)；估計C21H23F3O3(M+H)381.16，實測381.
g)4-甲基-2-(5-三氟甲烷磺醯氧基-4’-三氟甲基-聯苯基-3-基)-戊酸乙酯
在含化合物1f(2.8 g,7.36 mmol)及N-苯基-雙(三氟甲烷磺醯亞胺)(3.16 g,8.83 mmol)之THF(30 mL)溶液，在N2 下添加Et3 N(2.05 mL,14.7 mmol)。將反應混合物加熱回流隔夜，冷卻至室溫後，將溶液濃縮並以管柱層析純化，獲得化合物1g(3.7g,98%)之無色黏稠油狀物；1H NMR(400 MHz,CHLOROFORM-D)δ ppm 0.94(dd,J=6.60,1.47 Hz,6H),1.22-1.28(m,3H),1.46-1.52(m,1H),1.69(ddd,J=13.82,7.09,6.97 Hz,1H),1.98-2.06(m,1H),3.75(t,J=7.83 Hz,1H),4.10-4.21(m,2H),7.31(s,1H),7.38(s,1H),7.57(s,1H),7.65-7.75(m,4H)；估計C22H22F6O5S(M+H)513.11，實測513.
h)2-[5-(3,5-二氟-苯基胺基)-4’-三氟甲基-聯苯基-3-基]-4-甲基-戊酸
將含化合物1g(50 mg,0.098 mmol)、3,5-二氟-苯胺(20 mg,0.156 mmol),Pd(OAc)2 (6.6 mg,0.029 mmol)、外消旋-2-(二-第三丁基膦)-1,1’-雙萘基(35 mg,0.088 mmol)及第三丁氧化鈉(NaOt-Bu)(11.3 mg,0.12 mmol)之甲苯(1.5 mL)混合物於85℃加熱17 h。冷卻至室溫後，將溶液分層於EtOAc與H2 O之間。將有機層乾燥(Na2 SO4 )，濃縮並以管柱層析純化，獲得乙酯中間產物。將含上述中間產物及NaOH(2N於H2 O中，0.147 mL,0.294 mmol)之THF-MeOH(0.6 mL-0.6 mL)混合物 攪拌18 h並濃縮，添加CH2 Cl2 及水，並將該混合物以1N HCl酸化，分離有機相，並以CH2 Cl2 萃取水相。將合併之有機層乾燥，濃縮並以管柱層析純化，獲得38 mg(84%,2步驟)之標題化合物白色固體；1H NMR(400 MHz,CHLOROFORM-D)δ ppm 0.91-1.00(m,6H),1.51-1.62(m,1H),1.70-1.80(m,1H),1.99(dd,J=7.83,5.87 Hz,1H),3.71(t,J=7.70 Hz,1H),6.01(brs,1H),6.30-6.40(m,1H),6.50-6.60(m,2H),7.13(d,J=1.71 Hz,1H),7.18-7.29(m,2H),7.62-7.72(m,4H)；估計C25H22F5NO2(M+H)464.16，實測464.
實施例2 2-[5-(2,4-二氟-苯基胺基)-4’-三氟甲基-聯苯基-3-基]-4-甲基-戊酸
標題化合物在實施例1所述之條件下，由2,4-二氟-苯胺及化合物1g製備；1H NMR(400 MHz,CHLOROFORM-D)δ ppm 0.88-0.99(m,6H),1.56(dt,J=13.39,6.63 Hz,1H),1.72(ddd,J=13.69, 7.21,6.97 Hz,1H),1.94-2.06(m,1H),3.69(t,J=7.70 Hz,1H),5.70(brs,1H),6.78-6.85(m,1H),6.90(ddd,J=10.94,8.38,2.93 Hz,1H),7.00(s,1H),7.04-7.14(m,2H),7.24-7.33(m,1H),7.64(q,J=8.31 Hz,4H)；估計C25H22F5O2(M+H)464.16，實測464.
實施例3 2-[5-(3,5-雙-三氟甲基-苯基胺基)-4’-三氟甲基-聯苯基-3-基]-4-甲基-戊酸
標題化合物在實施例1所述之條件下，由3,4-雙-三氟甲基-苯胺及化合物1g製備；1H NMR(400 MHz,CHLOROFORM-D)δppm 0.88-1.00(m,6H),1.56(ddd,J=13.33,6.85,6.72 Hz,1H),1.71-1.81(m,1H),1.95-2.06(m,1H),3.70-3.79(m,1H),6.14(s,1H),7.21(s,2H),7.25(d,J=4.89 Hz,1H),7.36(s,1H),7.43(s,2H),7.62-7.72(m, 4H)；估計C27H22F9NO2(M+H)564.15，實測564.
實施例4 2-[5-(4-異丙基-苯基胺基)-4’-三氟甲基-聯苯基-3-基]-4-甲基-戊酸
標題化合物在實施例1所述之條件下，由4-異丙基-苯胺及化合物1g製備；1H NMR(400 MHz,CHLOROFORM-D)δ ppm 0.87-0.98(m,6H),1.20-1.31(m,6H),1.52-1.63(m,1H),1.72(ddd,J＝13.69,7.21,6.97 Hz,1H),1.94－2.05(m,1H),2.88(dt,J＝13.69,6.85 Hz,1H),3.67(t,J＝7.70 Hz,1H),6.99－7.10(m,4H),7.11－7.20(m,3H),7.59－7.69(m,4H)；估計C28H30F3NO2(M＋H)470.22,實測470.
實施例5
2－[5－(4－氯－苯基胺基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基－4－甲基－戊酸
標題化合物在實施例1所述之條件下，由4－氯－苯胺及1g製備；1H NMR(400 MHz,CHLOROFORM－D)δ ppm 0.89－0.98(m,6H),1.56(ddd,J＝13.33,6.85,6.72 Hz,1H),1.72(ddd,1＝13.69,7.21,6.97 Hz,1H),1.94－2.06(m,1H),3.68(t,J＝7.70Hz,1H),6.98－7.06(m,3H),7.09(s,IH),7.14(s,1H),7.20－7.31(m,2H),7.64(q,J＝8.56 Hz,4H)；估計C25H23ClF3NO2(M＋H)462.14,實測462.
實施例6
2－[5－(4－氟－苯基胺基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸
標題化合物在實施例1所述之條件下，由4－氟－苯胺及1g製備；1H NMR(400 MHz,CHLOROFORM－D)δ ppm 0.93(dd,J＝6.60,1.22 Hz,6H),1.51－1.62(m,1H),1.71(ddd,J＝13.82,7.09,6.97Hz,1H),1.97(ddd,J＝13.57,7.70,7.58 Hz,1H),3.67(t,J＝7.70 Hz,1H),6.95－6.97(m,1H),6.99－7.09(m,6H),7.63(q,J＝8.56Hz,4H)；估計C25H23F4NO2(M＋H)446.17,實測446.
實施例7
2－[5－(3,5－二氯－苯基胺基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸
標題化合物在實施例1所述之條件下，由3,5－二氯－苯胺及化合物1g製備；1H NMR(400 MHz,CHLOROFORM－D)δ ppm 0.90－1.00(m,6H),1.55(ddd,J＝13.33,6.85,6.72 Hz,1H),1.71－1.81(m,1H),1.93－2.05(m,1H),3.71(t,J＝7.70 Hz,1H),5.90(brs,1H),6.87－6.96(m,3H),7.13(d,J＝1.47 Hz,1H),7.19(d,J＝1.71 Hz,2H),7.62－7.73(m,4H)；估計C25H22C12F3NO2(M＋H)496.10,實測496.
實施例8
2－[5－(2,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸
標題化合物在實施例1所述之條件下，由2,5－雙－三氟甲基－苯胺及化合物1g製備；估計C27H22F9NO2(M＋H)564.15,實測564.
實施例9
2－[5－(4－氟－2－三氟甲基－苯基胺基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸
標題化合物在實施例1所述之條件下，由4－氟－2－三氟甲基－苯胺及化合物1g製備；1H NMR(400 MHz,CHLOROFORM－D)δ ppm 0.90－1.00(m,6H),1.57(dt,J＝13.27,6.69 Hz,1H),1.71(ddd,J＝13.69,7.21,6.97Hz,1H),1.95－2.06(m,1H),3.69(t,J＝7.83 Hz,1H),5.94(s,1H),7.02(d,J＝1.71 Hz,1H),7.10－7.19(m,3H),7.33(dd,J＝8.68,3.06 Hz,1H),7.36(dd,J＝9.05,4.89 Hz,1H),7.65(q,J＝8.40 Hz,4H)；估計C26H22F7NO2(M＋H)514.15,實測514.
實施例10
4甲基－2－[4’三氟甲基－5(3－三氟甲基－苯基胺基)－聯苯基－3－基]－戊酸
標題化合物在實施例1所述之條件下，由3－三氟甲基－苯胺及化合物1g製備；1H NMR(400 MHz,CHLOROFORM－D)δ ppm 0.90－1.00(m,6H),1.57(dt,J＝13.39,6.63 Hz,1H),1.70－1.79(m,1H),1.94－2.05(m,1H),3.71(t,J＝7.83 Hz,1H),7.12－7.23(m,5H),7.30－7.40(m,2H),7.66(q,J＝8.40 Hz,4H)；估計C26H23F6NO2(M＋H)496.16,實測496.
實施例11
4－甲基－2－[4’－三氟甲基－5－(4－三氟甲基－苯基胺基)－聯苯基－3－基]－戊酸
標題化合物在實施例1所述之條件下，由4－三氟甲基－苯胺及化合物1g製備；1H NMR(400 MHz,CHLOROFORM－D)δ ppm 0.95(d,J＝6.36 Hz,6H),1.57(dt,J＝13.27,6.69 Hz,1H),1.74(ddd,J＝13.69,7.21,6.97 Hz,1H),1.96－2.05(m,1H),3.66－3.76(m,1H),7.07－7.12(m,2H),7.14－7.20(m,2H),7.25－7.29(m,1H)7.50(d,J＝8.56 Hz,2H)7.62－7.72(m,4H)；估計C26H23F6NO2(M＋H)496.16,實測496
實施例12
2－[5－(4－氯－3－三氟甲基－苯基胺基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸
標題化合物在實施例1所述之條件下，由4－氯－3－三氟甲基－苯胺及化合物1g製備；1H NMR(400 MHz,MeOD)δ ppm 0.88－0.98(m,6H),1.55(ddd,J＝13.33,6.85,6.72 Hz,1H),1.67－1.75(m,1H),1.92－2.01(m,1H),3.71(t,J＝7.70 Hz,1H),7.19(d,J＝1.71Hz,1H),7.21(s,1H),7.26－7.34(m,2H),7.35－7.45(m,2H),7.71－7.80(m,4H)；估計C26H22C1F6N02(M＋H)530.12,實測530.
實施例13
2－[5－(4－氰基－苯基胺基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸
標題化合物在實施例1所述之條件下，由4－氰基－苯胺及化合物1g製備；估計C26H23F3N202(M＋H)453.17,實測453.
實施例14
2－[5－(4－氰基－苯基胺基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－2,4－二甲基－戊酸
將含化合物1g(50 mg,0.098 mmol)、4－氰基－苯胺(20 mg,0.169 mmol)、Pd(OAc)2 (6.6 mg,0.029 mmol)、外消旋－2－(二－第三丁基膦)－1,1’－雙萘基(35 mg,0.088 mmol)及NaOt－Bu(11.3 mg,0.12 mmol)之甲苯(1.5 mL)混合物於140℃微波(300w)10 min。冷卻至室溫後，將溶液分層於EtOAc與H2 O之間，將有機層乾燥(Na2 SO4 )，濃縮並以管柱層析純化，獲得乙酯中間產物。在含上述中間產物之THF(1 mL)混合物中添加KOt－Bu(1M於THF中，0.098 mL,0.098 mmol)。攪拌30 min後，添加MeI(42 mg,0.295 mmol)，將反應混合物於室溫攪拌15 h，濃縮並以預備性TLC純化，獲得甲基化酯中間產物。標題化合物在實施例1所述之相同皂化條件下，由上述中間產物製備；H NMR(400 MHz,MeOD)δ ppm 0.89(d,J＝6.85Hz,3H),1.00(d,J＝6.60 Hz,3H),1.73(m,1H),2.23(d,J＝5.87Hz,1H),2.28－2.33(m,1H),3.45(s,3H),6.89－6.92(m,2H),7.44(t,J＝1.71 Hz,1H),7.50－7.55(m,3H),7.71(t,J＝1.59 Hz,1H),7.77－7.85(m,4H)；估計C27H25F3N2O2(M＋H)467.19,實測467.
實施例15
2－[5－(3－異丙基－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸
a)(3,5－雙－苯甲氧基－苯基)－乙酸甲酯
將含(3,5－二羥基－苯基)－乙酸甲酯(5 g,27.4 mmol)之無水DMF(20 mL)以K2 CO3 (11.4 g,82.5 mmol)及溴化苯甲基(6.5 mL,55 mmol)處理，將所產生之混合物於室溫攪拌隔夜，添加水至反應混合物中，並將水層以EtOAc(3 x 50 mL)萃取，合併有機層，以鹽水清洗，於MgSO4 上乾燥，過濾並濃縮獲得標題化合物之棕色固體(9.82 g,99%)。
b)2－(3,5－雙－苯甲氧基－苯基)－4－甲基－戊－4－酸甲酯
將含2M LDA之THF－庚烷－乙基苯(21.5 mL,43.0 mmol)溶液於－78℃氮氣壓下逐滴添加至經攪拌的含(3,5－雙－苯甲氧基苯基)乙酸甲酯(13.0 g,35.9 mmol)之THF(80 mL)溶液超過12 min，將溫度進一步維持在低於－70℃ 50 min，然後添加一部份3－溴－2－甲基丙烯(4.0 mL,39.7 mmol)，並將反應混合物溫熱至0℃。2h後，將混合物於真空中濃縮，以sat.aq.NH4 Cl(100 mL)稀釋並以EtOAc(100 mL)萃取，有機層以鹽水(100 mL)清洗，乾燥(MgSO4 )，於真空中濃縮並以驟層析(二氧化矽，含0－10% EtOAc之石油醚)純化，產生標題產物之黃色油狀物(14.1 g,94%)。
1 H－NMR(400 MHz,CD3 Cl)：δ 7.42－7.25(m,10H),6.58(s,2H),6.52(s,1H),5.02(s,4H),4.74(s,1H),4.66(s,1H),3.74(t,1H),3.64(s,3H),2.79(dd,1H),2.38(dd,1H),1.70(s,3H).
c)2－(3－苯甲氧基－5－羥基－苯基)－4－甲基－戊－4－酸甲酯
將10% Pd/C(Aldrich cat no 205699,0.55 g)於室溫添加至經攪拌含2－(3,5－雙－苯甲氧基苯基)－4－甲基－戊－4－酸甲酯(14.1 g,33.8 mmol)及NaOH(1.50 g,37.5 mmol)之MeOH(180 mL)溶液中，在H2 下(1 atm.)持續攪拌1h，然後將混合物經Celite(矽藻土)過濾，於真空中濃縮，懸浮於水中(100 mL)，並以1M HCl調整至pH 2，混合物以EtOAc(2 x 180 mL)萃取；合併之有機層以鹽水(50 mL)清洗，乾燥(MgSO4 )，於真空中濃縮並以驟層析(二氧化矽，含0－30%EtOAc之石油醚)純化，獲得標題產物之黃色油狀物(7.40 g,67%)。1 H－NMR(400 MHz,CDCl3 )：δ 7.41－7.25(m,5H),6.54(s,1H),6.43(s,1H),6.38(s,1H),5.01(s,3H),4.74(s,1H),4.67(s,1H),3.70(t,1H),3.65(s,3H),2.78(dd,1H),2.38(dd,1H),1.71(s,3H)；RT＝3.14 min.質譜(ESI,m/z)325(M－1)
d)2－(3－苯甲氧基－5－三氟甲烷磺醯氧基－苯基)－4－甲基－戊－4－酸甲酯
將三氟甲烷磺酸酐(3.3 mL,10.1 mmol)於0℃逐滴添加至經攪拌含2－(3－苯甲氧基－5－羥基苯基)－4－甲基－戊－4－酸甲酯(4.5 g,13.8 mmol)及吡啶(3.0 mL,38.7 mmol)之DCM(80 mL)溶液中，然後溫熱至室溫。1h後，將混合物以1M HCl(50 mL)清洗，乾燥(MgSO4 )並於真空中濃縮，產生標題產物之橘色油狀物(6.10 g,96%)。1 H－NMR(400 MHz,CDCl3 )：δ 7.42－7.30(m,5H),6.97(s,1H),6.85(s,1H),6.78(s,1H),5.05(s,3H),4.75(s,1H),4.64(s,1H),3.77(t,1H),3.66(s,3H),2.77(dd,1H),2.40(dd,1H),1.69(s,3H).
e)2－(5－苯甲氧基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊－4－酸甲酯
將含2－(3－苯甲氧基－5－三氟甲烷磺醯氧基－苯基)－4－甲基－戊－4－酸甲酯(4.3 g,9.4 mmol)、4－三氟甲基苯基硼酸(2.6 g,13.7 mmol)、K2 CO3 溶液(2M,9.4 mL)及DME(50 mL)之混合物，在添加Pd(PPh3 )4 (400 mg,0.3 mmol)之前，以N2 清洗三次。混合物於95℃加熱5h(之後經HPLC)。反應以EtOAc(200 mL)稀釋，然後連續以NaHCO3 溶液及鹽水清洗，將有機層乾燥(Mg2 SO4 )，過濾並於真空中濃縮，獲得標題化合物之油狀物。使用粗製殘餘物於下一步驟。
f)2－(5－羥基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯
將10% Pd/C(Aldrich cat no 205699,0.30 g)於室溫添加至經攪拌含2－(5－苯甲氧基－4－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊－4－酸甲酯(2.71 g,5.96 mmol)之MeOH(75 mL)溶液中。在H2 (1 atm)下持續攪拌2日，然後將混合物經Celite(矽藻土)過濾，於真空中濃縮，獲得化合物(1.83 g,84%)之黃色油狀物。1 H－NMR(400 MHZ,CD3 Cl)：δ 7.70－7.60(m,4H),7.08(t,1H),7.00－6.95(m,1H),6.90－6.87(m,1H),5.56(br.s,1H),3.73－3.65 min(m,4H),2.04－1.92(m,1H),1.76－1.64(m,1H),1.56－1.42(m,1H),0.92(d,6H).質譜(ESI,m/z)：365(M－H)；
g)2－5－(3－異丙基－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯
將含2－(5－羥基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯(50 mg,0.14 mmol)、3－異丙基苯基硼酸(45 mg,0.27 mmol)、乙酸銅(26 mg,0.14 mmol)、三乙胺(57 μL,0.4 mmol)及粉末狀4分子篩之DCM(1 mL)混合物於室溫攪拌2日。反應混合物於真空中濃縮，以驟層析(EtOAc：石油醚)純化，獲得標題化合物(32 mg,48%)。
h)2－[5－(3－異丙基－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸將含2－[5－(3－異丙基－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯(33 mg,0.07 mmol)、THF(0.6 mL)、10% aq.LiOH(0.2 mL)及MeOH(0.6 mL)混合物於30℃攪拌3h，將溶液濃縮且殘餘物以H2 O(1 mL)稀釋，然後以conc HCl酸化，水溶液以DCM(3x1 mL)萃取，且有機層經PTFE濾器過濾。將溶液於真空中濃縮，獲得固體殘餘物，該固體使用逆相預備性HPLC(MeCN,H2 O)純化，產生標題化合物(21.6 mg,67%)。1 H－NMR(CD3 Cl；400M Hz)：67.64(dd,4H),7.29－7.23(m,2H),7.11(br.s,1H),7.05(br.s),7.00(dd,1H),6.96－6.93(m,1H),6.84(d,1H),3.80－3.65(m,1H),2.95－2.85(m,1H),2.02－1.90(m,1H),1.80－1.65(m,1H),1.60－1.45(m,1H),1.23(d,6H),0.92(d,6H).
實施例A
2－(4’－氯－5－羥基－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯
在實施例15步驟(e－f)所述之條件下，使用步驟(e)之4－氯－5－三氟甲基苯基硼酸，由2－(3－苯甲氧基－5－三氟甲烷磺醯氧基－苯基)－4－甲基－戊－4－酸甲酯(於實施例15步驟(d)製備)製備標題化合物，70%產率。1 H－NMR(400 MHz,CDCl3 )：δ 7.84(s,1H),7.65(d,1H),7.55(d,1H),7.04(s,1H),6.92(m,1H), 6.86(m,1H),4.98(br s,1H),3.68(m,4H), 1.97(m,1H),1.68(m,1H),1.49(m,1H),0.92(d,6H)；.質譜(m/z,ESI)399(M－H)
實施例B
2－(3’－氟－5－羥基－5’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯
在實施例15步驟(e－f)所述之條件下，使用步驟(e)之3－氟－5－三氟甲基苯基硼酸，由2－(3－苯甲氧基－5－三氟甲烷磺醯氧基－苯基)－4－甲基－戊－4－酸甲酯(於實施例15步驟(d)製備)製備標題化合物，73%產率。
1H－NMR(400 MHz,CDCl3 )：δ 7.59(s,1H),7.44(dm,1H,J＝9.3Hz),7.30(dm,1H,J＝8.3 Hz),7.06(m,1H),6.94(m,1H),6.89(m,1H),4.97(s,1H),3.68(m,1H),3.68(s,3H),1.99(m,1H),1.70(m,1H),1.49(m,1H),0.92(d,6H,J＝6.6Hz).
實施例C
2－(5－羥基－3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯
在實施例15步驟(e－f)所述之條件下，使用步驟(e)之3－氟－5－三氟甲基苯基硼酸，由2－(3－苯甲氧基－5－三氟甲烷磺醯氧基－苯基)－4－甲基－戊－4－酸甲酯(於實施例15步驟(d)製備)製備標題化合物，38%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CD3 Cl)：δ 7.96(s,2H),7.85(s,1H),7.07(t,1H),6.97(t,1H),6.93(t,1H),3.71(t,1H),3.70(s,3H),2.04－1.97(m,1H),1.74－1.67(m,1H),1.55－1.48(m,1H),0.93(d,6H)；.質譜(ESI,m/z)：433(M－H)；
實施例16
4－甲基－2－[4’－三氟甲基－5－(4－三氟甲基－苯氧基)－聯苯基－3－基]－戊酸
a)4－甲基－2－[4’－三氟甲基－5－(4－三氟甲基－苯氧基)－聯苯基－3－基]－戊酸甲酯
在實施例15步驟(g)所述之條件下，由2－(5－羥基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯及4－三氟甲基苯基硼酸製備標題化合物，43%產率。
b)4－甲基－2－[4’－三氟甲基－5－(4－三氟甲基－苯氧基)－聯苯基－3－基]－戊酸在實施例15步驟(h)所述之條件下，由4－甲基－2－[4’－三氟甲基－5－(4－三氟甲基－苯氧基)－聯苯基－3－基]－戊酸甲酯製備標題化合物，15%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CD3 Cl)；δ 7.75－7.55(m,6H),7.37(s,1H),7.16(s,1H),7.14－7.06(m,3H),3.85－3.65(m,1H),2.10－1.90(m,1H),1.80－1.65(m,1H),1.62－1.45(m,1H),0.93(d,6H).
實施例17
4－甲基－2－[4’－三氟甲基－5－(3,4,5－三氟－苯氧基)－聯苯基－3－基]－戊酸
a)4－甲基－2－[4’－三氟甲基－5－(3,4,5－三氟－苯氧基)－聯苯基－3－基]－戊酸甲酯
在實施例15步驟(g)所述之條件下，由2－(5－羥基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯及3,4,5－三氟苯基硼酸製備標題化合物，30%產率。
b)4－甲基－2－[4’－三氟甲基－5－(3－三氟－苯氧基)－聯苯基－3－基]－戊酸在實施例15步驟(h)所述之條件下，由4－甲基－2－[4’－三氟甲基－5－(3,4,5－三氟－苯氧基)－聯苯基－3－基]－戊酸甲酯製備標題化合物，60%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CD3 Cl)：δ 7.66(dd,4H),7.37(s,1H),7.13(s,1H),7.06(m,3H),6.61(m,2H),3.77(t,1H),2.0(m,1H),1.72(m,1H),1.54(m,1H),0.93(d,6H).
實施例18
2－[5－(4－氟－3－甲氧基－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸
a)2－[5－(4－氟－3－甲氧基－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯在實施例15步驟(g)所述之條件下，由2－(5－羥基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯及4－氟－3－甲氧基苯基硼酸製備標題化合物，30%產率。
b)4－甲基－2－[4’－三氟甲基－5－(3－三氟甲基－苯氧基)－聯苯基－3－基1－戊酸在實施例15步驟(h)所述之條件下，由2－[5－(4－氟－3－甲氧基－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯製備標題化合物，60%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CD3 Cl)：δ 7.64(dd,4H),7.27(s,1H),7.07(s,1H),7.04(m,3H),7.02(m,1H),6.72(dd,1H),6.55,(m,1H),3.84(s,3H),3.72(t,1H),2.0(m,1H),1.72(m,1H),1.54(m,1H),0.93(d,6H).
實施例19
2－[5－(4－甲氧基－3－三氟甲基－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸
a)2－[5－(4－甲氧基－3－三氟甲基－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯
在實施例15步驟(g)所述之條件下，由2－(5－羥基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯及4－甲氧基－3－三氟甲基苯基硼酸製備標題化合物，25%產率。
b)2－[5－(4－甲氧基－3－三氟甲基－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸在實施例15步驟(h)所述之條件下，由2－[5－(4－甲氧基－3－三氟甲基－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯製備標題化合物，60%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CD3 Cl)：δ 7.66(dd,4H),7.31(s,1H),7.27(s,1H),7.20(m,3H),7.04(m,1H),7.02(dd,1H),7.00(m,1H),3.92(s,3H),3.73(t,1H),2.0(m,1H),1.72(m,1H),1.54(m,1H),0.93(d,6H).
實施例20
24－甲基－2－[4’－三氟甲基－5－(3－三氟甲基－苯氧基)－聯苯基－3－基]－戊酸
a)4－甲基－2－[4’－三氟甲基－5－(3－三氟甲基－苯氧基)－聯苯基－3－基]－戊酸甲酯
在實施例15步驟(g)所述之條件下，由2－(5－羥基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯及3－三氟甲基苯基硼酸製備標題化合物，25%產率。
b)4－甲基－2－[4’－三氟甲基－5－(3－三氟甲基－苯氧基)－聯苯基－3－基]－戊酸在實施例15步驟(h)所述之條件下，由4－甲基－2－[4’－三氟甲基－5－(3－三氟甲基－苯氧基)－聯苯基－3－基]－戊酸甲酯製備標題化合物，60%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CD3 Cl)：δ 7.61(d,2H),7.56(d,2H),7.27(m,1H),7.23(m,1H),7.04(d,1H),6.77(m,2H),6.69(m,1H),3.62(t,1H),1.87(m,1H),1.65(m,1H),1,44(m,1H),0.83(dd,6H).
實施例21
4－甲基－2－[4’－氯－3’－三氟甲基－5－(3－氟－5－三氟甲基苯氧基)－聯苯基－3－基]－戊酸
a)4－甲基－2－[4’－氯－3’－三氟甲基－5－(3－氟－5－三氟甲基苯氧基)－聯苯基－3－基]－戊酸甲酯
在實施例15步驟(g)所述之條件下，由2－(5－羥基－4’－氯－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯(於實施例A製備)及3－氟－5－三氟甲基苯基硼酸製備標題化合物，50%產率。
b)4－甲基－2－[4’－氯－3’－三氟甲基－5－(3－氟－5－三氟甲基苯氧基)－聯苯基－3－基]－戊酸在實施例15步驟(h)所述之條件下，由4－甲基－2－[4’－氯－3’－三氟甲基－5－(3－氟－5－三氟甲基苯氧基)－聯苯基－3－基]－戊酸甲酯製備標題化合物，90%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CDCl3 )：δ 7.79(d,1H),7.55(d,1H),7.50(d,1H),7.28(d,1H),7.05(m,4H),6.82(d,1H),3.59(t,1H),1.84(m,1H),1.64(m,1H),1.41(m,1H),0.83(d,6H).
實施例22
4－甲基－2－[4’－氯－3’－三氟甲基－5－(3－三氟甲基苯氧基)－聯苯基－3－基]－戊酸
a)4－甲基－2－[4’－氯－3’－三氟甲基－5－(3－三氟甲基苯氧基)－聯苯基－3－基]－戊酸甲酯
在實施例15步驟(g)所述之條件下，由2－(5－羥基－4’－氯－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯(於實施例A製備)及3－三氟甲基苯基硼酸製備標題化合物，71%產率。
b)4－甲基－2－[4’－氯－3’－三氟甲基－5－(3－三氟甲基苯氧基)－聯苯基－3－基]－戊酸在實施例15步驟(h)所述之條件下，由4－甲基－2－[4’－氯－3’－三氟甲基－5－(3－三氟甲基苯氧基)－聯苯基－3－基]－戊酸甲酯製備標題化合物，100%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CDCl3 )：δ 7.77(d,1H),7.54(dd,1H),7.47(d,1H),7.40(t,1H),7.32(d,1H),7.23(m,1H),7.19(m,1H),7.13(m,1H),7.01(m,2H),3.56(t,1H),1.80(m,1H),1.63(m,1H),1.39(m,1H),0.81(d,6H).
實施例23
4－甲基－2－[4’－氯－3’－三氟甲基－5－(3,5－二氟苯氧基)－聯苯基－3－基]－戊酸
a)4－甲基－2－[4’－氯－3’－三氟甲基－5－(3,5－二氟苯氧基)－聯苯基－3－基]－戊酸甲酯
在實施例15步驟(g)所述之條件下，由2－(5－羥基－4’－氯－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯(於實施例A製備)及3,5－二氟苯基硼酸製備標題化合物，49%產率。
b)4－甲基－2－[4’－氯－3’－三氟甲基－5－(3,5－二氟苯氧基)－聯苯基－3－基]－戊酸在實施例15步驟(h)所述之條件下，由4－甲基－2－[4’－氯－3’－三氟甲基－5－(3,5－二氟苯氧基)－聯苯基－3－基]－戊酸甲酯製備標題化合物，100%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CDCl3 )：δ 7.78(d,1H),7.54(dd,1H),7.49(d,1H),7.25(t,1H),7.03(s,2H),7.46(m,3H),3.55(t,1H),1.81(m,1H),1.62(m,1H),1.39(m,1H),0.81(d,6 Hz)..
實施例24
4－甲基－2－(5－苯氧基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－戊酸
a)4－甲基－2－(5－苯氧基－4’－三氟乙基－聯苯基－3－基)－戊酸甲酯
在實施例15步驟(g)所述之條件下，由2－(5－羥基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯(於實施例A步驟(f)製備)及苯硼酸製備標題化合物，21%產率。
b)4－甲基－2－(5－苯氧基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－戊酸在實施例15步驟(h)所述之條件下，由4－甲基－2－(5－苯氧基－4’－三氟乙基－聯苯基－3－基)－戊酸甲酯製備標題化合物，83%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CDCl3 )：δ 7.64(d,2H,8.6 Hz),7.60(d,2H,J＝8.4 Hz),7.34(dd,2H,J＝7.6,0.76 Hz),7.27(s,1H),7.12(t,1H,J＝7.3 Hz),7.05(m,4H),3.68(t,1H,J＝7.7 Hz),1.95(m,1H),1.70(m,1H),1.50(m,1H),0.90(dd,6H,J＝6.6,2.5 Hz).
實施例25
2－[5－(4－氟－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸
a)2－[5－(4氟－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯
在實施例15步驟(g)所述之條件下，由2－(5－羥基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯(於實施例A步驟(f)製備)及4－氟苯硼酸製備標題化合物，43%產率。
b)2－[5－(4－氟－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸在實施例15步驟(h)所述之條件下，由2－[5－(4氟－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯製備標題化合物，100%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CDCl3 )：δ 7.61(d,2H,J＝8.3Hz),7.55(d,2H,J＝8.3Hz),7.24(s,1H),6.98(m,6H),3.62(m,1H),1.88(m,1H),1.65(m,1H),1.54(m,1H),0.85(dd,6H,J＝6.3,3.3Hz).
實施例26
2－[5－(3－氟－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸
a)2－[5－(3－氟－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯
在實施例15步驟(g)所述之條件下，由2－(5－羥基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯(於實施例A步驟(f)製備)及3－氟苯硼酸製備標題化合物，26%產率。
b)2－[5－(3－氟－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸在實施例15步驟(h)所述之條件下，由2－[5－(3－氟－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯製備標題化合物，100%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CDCl3 )：δ 7.61(d,2H,J＝8,3Hz),7.57(d,2H,J＝8.3Hz),7.27(m,1H),7.24(m,1H),7.06(s,1H),7.04(s,1H),6.78(m,1H),6.68(dt,1H,J＝10.1,2.3Hz),3.62(br.s,1H),1.87(m,1H),1.65(m,1H),1.44(m,1H),0.84(dd,6H,J＝6.4,3.4Hz)..
實施例27
2－[5－(3,5－二氟－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸
a)2－[5－(3,5－二氟－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯
在實施例15步驟(g)所述之條件下，由2－(5－羥基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯(於實施例A步驟(f)製備)及3,5－二氟苯硼酸製備標題化合物，15%產率。
b)2－[5－(3,5－二氟－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸在實施例15步驟(h)所述之條件下，由2－[5－(3,5－二氟－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯製備標題化合物，100%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CDCl3 )：δ 7.66(d,2H,J＝8.3Hz),7.61(d,2H,J＝8.3Hz),7.35(m,1H),7.13(dd,1H,J＝2.3,0.51Hz),7.07(m,1H),6.50(m,3H),3.69(t,1H,J＝7.8Hz),1.94(m,1H),1.69(m,1H),1.49(m,1H),0.89(dd,6H,J＝6.6,2.5Hz).
實施例28
2－[5－(4－甲氧基－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸
a)2－[5－(4－甲氧基－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯
在實施例15步驟(g)所述之條件下，由2－(5－羥基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯(於實施例A步驟(f)製備)及4－甲氧基苯硼酸製備標題化合物，17%產率。
b)2－[5－(4－甲氧基－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸在實施例15步驟(h)所述之條件下，由2－[5－(4－甲氧基－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯製備標題化合物，100%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CDCl3 )：δ 7.64(d,2H,J＝8.3Hz),7.59(d,2H,J＝8.1Hz),7.22(s,1H),7.01(m,4H),6.89(d,2H,J＝9.1Hz),3.80(s,3H),3.68(br.S,1H),1.96(m,1H),1.70(m,1H),1.52(m,1H),0.91(dd,6H,J＝6.6,2.0Hz).
實施例29
2－[5－(4－氯－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸
a)2－[5－(4－氯－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯
在實施例15步驟(g)所述之條件下，由2－(5－羥基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯(於實施例A步驟(f)製備)及4－氯苯硼酸製備標題化合物，35%產率。
b)2－[5－(4－氯－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸在實施例15步驟(h)所述之條件下，由2－[5－(4－氯－苯氧基)－4－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯製備標題化合物，100%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CDCl3 )：δ 7.62(d,2H,J＝8.3Hz),7.57(d,2H,J＝8.1Hz)7.27(m,3H),7.02(d,2H,J＝1.5Hz),6.93(d,2H,J＝8.8Hz),3.62(t,1H,J＝7.7Hz),1.88(m,1H),1.66(m,1H),1.45(m,1H),0.86(dd,6H,J＝6.6,4.0Hz).
實施例30
2－[5－(3－氟－5－三氟甲基－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸
a)2－[5－(3－氟－5－三氟甲基－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯
在實施例15步驟(g)所述之條件下，由2－(5－羥基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯(於實施例A步驟(f)製備)及3－氟,5－三氟甲基苯硼酸製備標題化合物，10%產率。
b)2－[5－(4－氯－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸在實施例15步驟(h)所述之條件下，由2－[5－(3－氟－5－三氟甲基－苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯製備標題化合物，44%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CDCl3 )：δ 7.68(d,2H,J＝8.3Hz),7.63(d,2H,J＝8.1Hz),7.37(m,1H),7.16(m,1H),7.08(m,1H),7.06(m,2H),6.87(dt,2H,J＝9.6,2.3Hz),3.71(t,1H,J＝7.8Hz),1.95(m,1H),1.71(m,1H),1.50(m,1H),0.90(dd,6H,J＝6.6,2.3Hz).
實施例31
2－[3’－氟－5’－三氟甲基－5－(3－三氟甲基－苯氧基)－聯苯基－3－基－4－甲基－戊酸
a)2－[3’－氟－5’－三氟甲基－5－(3－三氟甲基－苯氧基)－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯
在實施例15步驟(g)所述之條件下，由2－(3’－氟－5－羥基－5’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯(於實施例B製備)及3－三氟甲基苯硼酸製備標題化合物，34%產率。
b)4－甲基－2－[4’－三氟甲基－5－(3－三氟甲基－苯氧基)－聯苯基－3－基]－戊酸在實施例15步驟(h)所述之條件下，由2－[3’－氟－5’－三氟甲基－5－(3－三氟甲基－苯氧基)－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯製備標題化合物，99%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CDCl3 )：δ 7.57(m,1H),7.47(t,1H,J＝8.0Hz),7.37－7.43(m,2H),7.32(m,2H),7.27(m,1H),7.20(dd,1H,J＝8.1,2.0Hz),7.14(t,1H,J＝2.3,1.77Hz),7.10(t,1H,J＝2.0,1.77Hz),3.74(t,1H,J＝7.8Hz),2.00(m,1H),1.73(m,1H),1.54,(m,1H),0.93(dd,6H,J＝6.6,1.8Hz).
實施例32
2－[3’－氟－5－(3－氟－5－三氟甲基－苯氧基)－5’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸
a)2－[3’－氟－5－(3－氟－5－三氟甲基－苯氧基)－5’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯
在實施例15步驟(g)所述之條件下，由2－(3’－氟－5－羥基－5’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯(於實施例B製備)及3－氟－5－三氟甲基苯硼酸製備標題化合物，73%產率。
b)2－[3’－氟－5－(3－氟－5－三氟甲基－苯氧基)－5’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸在實施例15步驟(h)所述之條件下，由2－[3’－氟－5－(3－氟－5－三氟甲基－苯氧基)－5’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯製備標題化合物，26%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CDCl3 )：δ 7.58(br.s,1H),7.43(br.d,1H,J＝9.6Hz),7.35(m,2H),7.16(br.s,1H),7.12,(br.s,1H),7.06,(m,2H),6.88(d,1H,J＝9.4Hz),3.83(br.s,1H),2.00(br.s,1H),1.78(br.s,1H),1.52(br.s,1H),0.92(br.s,6H).
實施例33
2－[5－(3,5－二氟－苯氧基)－3’－氟－5’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸
a)2－[5－(3,5－二氟－苯氧基)－3’－氟－5’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯
在實施例15步驟(g)所述之條件下，由2－(3’－氟－5－羥基－5’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯(於實施例B製備)及3,5－二氟苯硼酸製備標題化合物，83%產率。
b)4－甲基－2－[4’－三氟甲基－5－(3－三氟甲基－苯氧基)－聯苯基－3－基]－戊酸在實施例15步驟(h)所述之條件下，由2－[5－(3,5－二氟－苯氧基)－3’－氟－5’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯製備標題化合物，40%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CDCl3 )：δ 7.57(br.s,1H),7.42(d,1H,J＝9.1Hz),7.33(m,2H),7.15(br.s,1H),7.12(br.s,1H),6.59－6.51(m,3H),3.77(br.s,1H),2.00(br.s,1H),1.75(br.s,1H),1.54(br.s,1H),0.94(d,6H,J＝5.3Hz).
實施例34
2－[5－(3－氟－5－三氟甲基－苯氧基)－3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸
a)2－[5－(3－氟－5－三氟甲基－苯氧基)－3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯
在實施例15步驟(g)所述之條件下，由2－(5－羥基3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯(於實施例C製備)及3－氟－5－三氟甲基苯基－硼酸製備標題化合物，35%產率。
b)2－[5－(3－氟－5三氟甲基－苯氧基)－3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸在實施例15步驟(h)所述之條件下，由2－[5－(3－氟－5－三氟甲基－苯氧基)－3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯製備標題化合物，61%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CD3 Cl)：δ 7.96(s,2H),7.89(s,1H),7.38(s,1H),7.18(d,2H),7.08(d,2H),6.89(d,1H),2.66(s,2H),2.03－2.00(m,1H),1.79－1.73(m,1H),1.57－1.53(m,1H),0.94(d,6H).
實施例35
2－[3’,5’－雙－三氟甲基－5－(3－三氟甲基－苯氧基)－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸
a)2－[3’,5’－雙－三氟甲基－5－(3－三氟甲基－苯氧基)－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯
在實施例15步驟(g)所述之條件下，由2－(5－羥基3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯(於實施例C製備)及3－三氟甲基苯基硼酸製備標題化合物，60%產率。
b)2－[3’,5’－雙－三氟甲基－5－(3－三氟甲基－苯氧基)－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸在實施例15步驟(h)所述之條件下，由2－[3’,5’－雙－三氟甲基－5－(3－三氟甲基－苯氧基)－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯製備標題化合物，62%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CD3 Cl)：δ 7.95(s,2H),7.87(s,1H),7.48(t,1H),7.39(d,2H),7.33(t,1H),7.27(s,1H),7.21(d,1H),7.17(t,1H),7.12(t,1H),3.76(t,1H),2.02－1.99(m,1H),1.76－1.69(m,1H),1.58－1.51(m,1H),0.94(d,6H)。
實施例36
2－[5－(3,5－二氟－苯氧基)－3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸
a)2－[5－(3,5－二氟－苯氧基)－3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯
在實施例15步驟(g)所述之條件下，由2－(5－羥基3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯(於實施例C製備)及3,5－二氟－苯基硼酸製備標題化合物，15%產率。
b)2－[5－(3,5－二氟－苯氧基)－3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸在實施例15步驟(h)所述之條件下，由2－[5－(3,5－二氟－苯氧基)－3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯製備標題化合物，45%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CD3 Cl)：δ 7.95(s,2H),7.88(s,1H),7.36(s,1H),7.17(d,2H),6.59－6.51(m,3H),2.64(s,2H)2.07－1.98(m,1H),1.78－1.71(m,1H),1.59－1.53(m,1H),0.95(d,6H).
實施例37
2－[5－(3,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－4’－氯－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸
a)2－(4’－氯－5－三氟甲烷磺醯氧基－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯
將三氟甲磺酸酐(93 μL,0.57 mmol)於0℃逐滴添加至經攪拌之含戊酸甲酯(於實施例A製備)(150 mg,0.38 mmol)及吡啶(88 μL,1.1 mmol)之DCM(3 mL)溶液中，將反應溫熱至室溫並攪拌1h，然後添加1M氫氯酸，有機層經聚四氟乙烯(PTFE)玻璃料過濾，並於真空中濃縮，獲得標題化合物(205 mg,100%)之橘色油狀物。
b)2－[5－(3,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－4’－氯－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯
將含2－(4’－氯－5－三氟甲烷磺醯氧基－3－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯(48 mg,0.10 mmol)、3,5－雙－(三氟甲基)－苯胺(18 μL,0.12 mmol)、第三丁氧化鈉(9.8 mg,0.10 mmol)、Pd(OAc)2(2.5 mg,0.01 mmol)、2－(二－第三丁基膦－1,1’－雙萘基(3.5 mg,0.01 mmol)及甲苯(1 mL)之混合物在於130℃在微波照射下攪拌3 x 10 min。混合物以甲苯(9 mL)稀釋，以1M HCl(2 x 10 mL)及鹽水(10 mL)清洗，乾燥(MgSO4 )，於真空中濃縮並以急驟管柱層析(二乙醚－石油醚)純化，產生標題產物之無色粉末(28 mg,44%)。質譜(ESI,m/z)：610,612(M－H)。
c)2－[5－(3,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－4’－氯－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸將含2－[5－(3,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－4－氯－3－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯(10 mg,0.02 mmol)、THF(0.6 mL)、10% aq.LiOH(0.2 mL)及MeOH(0.6 mL)之混合物於30℃攪拌3h。濃縮溶液並將殘餘物以稀釋H2 O(1 mL)，然後以濃縮(conc)HCl酸化。水溶液以DCM(3x1 mL)萃取，且有機層經由PTFE濾器過濾，將溶液於真空中濃縮，獲得固體殘餘物。使用逆相預備性HPLC(MeCN,H2 O)將該固體純化，產生標題化合物(3 mg,30%)。質譜(m/z,ESI)598,600(M＋H)。
實施例38
2－[4’－氯－5－(3－氟－5－三氟甲基－苯基胺基)－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基－4－甲基－戊酸
a)2－[4’－氯－5－(3－氟－5－三氟甲基－苯基胺基)－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基－4－甲基－戊酸甲酯
在實施例37步驟(b)所述之條件下，由2－(4－氯－5－三氟甲烷磺醯氧基－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯及3－氟－5－(三氟甲基)苯胺製備標題化合物，28%產率。質譜(ES－,m/z)：560,562(M－H)；
b)4－甲基－2－[4’－三氟甲基－5－(4－三氟甲基－苯氧基)－聯苯基－3－基]－戊酸在實施例37步驟(c)所述之條件下，由2－[4’－氯－5－(3－氟－5－三氟甲基－苯基胺基)－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯製備標題化合物，73%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CDCl3 )：δ 7.80(br.s,1H),7.60(m,1H),7.52(m,1H),7.33(m,2H),7.2－7.1(m,3H),5.93(br.s,1H),3.65(br.s,1H),1.97(m,1H),1.72(m,1H),1.53(m,1H),0.90(br.s,6H).質譜(ES＋,m/z)：548,550(M＋H)
實施例39
2－[4’－氯－5－(2,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸
a)2－[4’－氯－5－(2,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯
在實施例37步驟(b)所述之條件下，由2－(4’－氯－5－三氟甲烷磺醯氧基－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯及2,5－雙－(三氟甲基)苯胺製備標題化合物，35%產率。
b)2－[4’－氯－5－(2,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸在實施例37步驟(c)所述之條件下，由2－[4’－氯－5－(2,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯製備標題化合物，86%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CDCl3 )：δ 7.83(br,1H),7.69(d,1H),7.63(d,1H),7.57(m,2H),7.19(m,3H),6.31(br s,1H),3.75(br.s,1H),1.98(m,1H),1.76(m,1H),1.54(m,1H),0.93(br,s,6H).質譜(ESI＋,m/z)：598,600(M＋H)
實施例40
2－[5’－氟－5－(2,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸
a)2－(3’－氟－5－三氟甲烷磺醯氧基－5’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯
在實施例37步驟(a)所述之條件下，由2－(3’－氟－5－羥基－5’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯(於實施例B製備)製備標題化合物，91%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CDCl3 )：δ 7.58；(s,1H),7.53(m,1H),7.44(dm,1H,J＝9.1Hz),7.39(m,1H),7.36,(m,1H),7.33(m,1H),3.78(m,1H),3.70(s,3H),2.03(m,1H),1.71(m,1H),1.49(m,1H),0.94(d,6H,J＝6.8Hz).
b)2－[5’－氟－5－(2,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯
在實施例37步驟(b)所述之條件下，由2－(5’－氟－5－三氟甲烷磺醯氧基－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯及2,5－雙－(三氟甲基)苯胺製備標題化合物，100%產率。
c)2－[5’－氟－5－(2,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸在實施例37步驟(c)所述之條件下，由2－[5’－氟－5－(2,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯製備標題化合物，42%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CDCl3 )：δ 7.70(d,1H),7.58(m,2H),7.42(d,1H),7.32(d,1H),7.20(m,3H),6.31(br s,1H),3.75(m,1H),1.98(m,1H),1.75(m,1H),1.55(m,1H),0.93(m,6H)；質譜(ESI,m/z)：582(M＋H)
實施例41
2－[5’－氟－5－(4－氟－2－三氟甲基－苯基胺基)－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸
a)2－[5’－氟－5－(4－氟－2－三氟甲基－苯基胺基)－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯
在實施例37步驟(b)所述之條件下，由2－(5’－氟－5－三氟甲烷磺醯氧基－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯(於實施例40步驟(a)製備)及4－氟－2－(三氟甲基)苯胺製備標題化合物，100%產率。
b)2－[5’－氟－5－(4－氟－2－三氟甲基－苯基胺基)－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸在實施例37步驟(c)所述之條件下，由2－[5’－氟－5－(4－氟－2－三氟甲基－苯基胺基)－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯製備標題化合物，82%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CDCl3 )：δ 7.54(brs,1H),7.41－7.29(m,4H),7.18－7.02(m,4H),5.94(br s,1H),3.75(1H),1.99(1H),1.73(1H),1.56(1H),0.93(6H)；質譜(ESI,m/z)：532(M＋H)
實施例42
2－[5’－氟－5－(3,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸
a)2－[5’－氟－5－(3,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯
在實施例37步驟(b)所述之條件下，由2－(5’－氟－5－三氟甲烷磺醯氧基－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯(於實施例40步驟(a)製備)及3,5－雙－(三氟甲基)苯胺製備標題化合物，97%產率。
b)2－[5’－氟－5－(3,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸在實施例37步驟(c)所述之條件下，由2－[5’－氟－5－(3,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－3’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯製備標題化合物，46%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CDCl3 )：δ 7.56(1H),7.44－7.35(m,4H),7.32(d,1H),6.12(1H),3.78(1H),1.96(1H),1.78(1H),1.53(1H),0.92(1H)；質譜(EST,mlz)：582(M＋H)
實施例43
2－[5－(3,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸
a)4－甲基－2－(5－三氟甲烷磺醯氧基－3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基)－戊酸甲酯
在實施例37步驟(a)所述之條件下，由2－(5－羥基－3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊酸甲酯(於實施例C製備)製備標題化合物，95%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CDCl3 )：δ1 H－NMR(400 MHz,CD3 Cl)：δ 7.96(s,2H),7.94(s,1H),7.55(m,1H),7.38(m,2H),3.80(t,1H),3.71(s,3H),2.01(m,1H),1.71(m,1H),1.49(m,1H),0.94(d,6H).
b)2－[5－(3,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯在實施例37步驟(b)所述之條件下，由4－甲基－2－(5－三氟甲烷磺醯氧基－3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基)－戊酸甲酯及3,5－雙－三氟甲基－苯胺製備標題化合物，47%產率。
c)2－[5－(3,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸在實施例37步驟(c)所述之條件下，由2－[5－(3,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯製備標題化合物，66%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CD3 Cl)：δ 7.95(s,2H),7.88(s,1H),7.44(s,2H),7.39(s,1H),7.25(d,1H),7.23－7.22(m,2H),6.17(s,1H),3.76(t,1H),2.05－1.98(m,1H),1.79－1.72(m,1H),1.62－1.52(m,1H),0.95(d,6H).
實施例44
2－[5－(2,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸
a)2－[5－(2,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯
在實施例37步驟(b)所述之條件下，由4－甲基－2－(5－三氟甲烷磺醯氧基－3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基)－戊酸甲酯(於實施例43步驟(a))及2,5－雙－三氟甲基－苯胺製備標題化合物，39%產率。
b)2－[5－(2,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸在實施例37步驟(c)所述之條件下，由2－[5－(2,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯製備標題化合物，40%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CD3 Cl)：δ 7.96(s,2H),7.88(s,1H),7.71(d,1H),7.61(s,1H),7.25(s,3H),7.21(d,1H),6.35(s,1H),3.76(t,1H),2.04－2.00(m,1H),1.78－1.71(m,1H),1.61－1.54(m,1H),0.95(d,6H).
實施例45
2－[5－(4－氟－2－三氟甲基－苯基胺基)－3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基－4－甲基－戊酸
a)2－[5－(4－氟－2－三氟甲基－苯基胺基)－3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯
在實施例37步驟(b)所述之條件下，由4－甲基－2－(5－三氟甲烷磺醯氧基－3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基)－戊酸甲酯(於實施例43步驟(a))及4－氟－2－三氟甲基－苯胺製備標題化合物，46%產率。
b)2－[5－(4－氟－2－三氟甲基－苯基胺基)－3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸在實施例37步驟(c)所述之條件下，由2－[5－(4－氟－2－三氟甲基－苯基胺基)－3’,5’－雙－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸甲酯製備標題化合物，83%產率。
1 H－NMR(400 MHz,CD3 Cl)：δ 7.92(s,2H),7.86(s,1H),7.37－7.33(m,2H),7.16－7.06(m,4H),5.96(s,1H),3.71(t,1H),2.05－1.96(m,1H),1.74－1.67(m,1H),1.61－1.53(m,1H),0.94(d,6H).
實施例46
(R)2－5－(2,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸
a)5－苯甲氧基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－乙酸
在含(5－苯甲氧基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－乙酸乙酯(120 g,0.29 mol)之THF(1.2 L)溶液中，添加水(240 mL)、LiOH.H2 O(16 g,0.32 mol)，並將所產生之混合物於室溫攪拌16h。將溶液過濾並於真空中濃縮以移除THF，所產生之黏稠液體經由添加2N HCl水溶液酸化成pH 2，並將白色懸浮液於室溫機械攪拌1h，過濾後回收潮濕白色產物，並溶於EtOAc(500 mL)，有機層以水分離，乾燥(MgSO4 )並於真空中濃縮，獲得(5－苯甲氧基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－乙酸(105 g,94%)。
1 H－NMR(d6 －DMSO)：δ 3.64(s,2H),5.18(s,2H),7.02(s,1H),7.24(d,2H),7.34－7.50(m,5H),7.81(d,2H),7.89(d,2H),12.25(bs,0.6H)；估計C22H17F3O3(M＋H)387.11,實測387.1.
b)4－苯甲基－3－[2－(5－苯甲氧基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－乙醯基]－唑啶－2－酮
在經機械攪拌之含(5－苯甲氧基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－乙酸(20g,52 mmol)之THF(104 mL)溶液中，於－78℃添加N－甲基嗎啉(NMM)(6.3 mL,57 mmol)及三甲基乙醯基氯(7.0 mL,57 mmol)，維持內部溫度低於－70℃。將此混合物於－78℃攪拌15分鐘，及於0℃ 1h。濾除白色固體，將濾液冷卻回復至－78℃以得到酐。在分液燒瓶中，在含(R)－(＋)－4－苯甲基－2－唑啶酮(9.6 g,54.4 mmol)之THF(109 mL)溶液，於－78℃逐滴添加nBuLi(1.6 M於己烷中,34 mL,54.4 mol)，維持內部溫度溫度低於－70℃並於－78℃攪拌45 min。將此金屬化對掌輔助物於－78℃導入酐中，並溫熱至0℃超過1.5h。將所產生之混合物於0℃進一步攪拌30分鐘，並經由添加過量飽和NH4 Cl水溶液淬熄，溶液以EtOAc(200 mL)稀釋，並將有機相以飽和水溶液NaHCO3 溶液(3 x 100 mL)及鹽水(2 x 100 mL)清洗。於MgSO4 上乾燥溶液，並將溶劑於真空中移除，粗製物以ISCO二氧化矽凝膠管柱層析純化，產生20.3 g(72%)之4－苯甲基－3－[2－(5－苯甲氧基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－乙醯基]－唑啶－2－酮白色固體。
1 H－NMR(CDCl3 )：δ 2.76(dd,1H),3.26(dd,1H),4.19(m,2H),4.35(q,2H),4.69(m,1H),5.13(s,2H),7.04－7.46(m,13H),7.67(s,4H)；估計C32H26F3NO4(M＋H)546.18,實測546.3.
c)4－苯甲基－3－[2－(5－苯甲氧基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊－4－烯醯]－唑啶－2－酮
在含4－苯甲基－3－[2－(5－苯甲氧基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－乙醯基]－唑啶－2－酮(6.0 g,11.00 mmol)之乾THF(22 mL)無色溶液中，於－78℃逐滴添加六甲基二矽基氨基鈉(NaHMDS)(1 M於THF溶液中,12.11 mL,12.11 mmol)，維持內部溫度低於－75℃。所產生之紅色溶液於－78℃攪拌30分鐘。於此添加3－溴－2－甲基丙烯(4.44 mL,44 mmol)，維持內部溫度低於－75℃。當添加將要完成時，系統轉變成綠色。在此時，快速移除乾冰浴，並以冰浴替代並完成添加。反應混合物於0℃進一步攪拌30 min，並以NH4 Cl飽和水溶液淬熄。系統以EtOAC(100 mL)稀釋並將有機相以飽和水溶液NaHCO3 溶液(3 x 50 mL)清洗並乾燥(MgSO4 )。將溶劑於真空中移除，並將粗製混合物以ISCO二氧化矽凝膠管柱純化，產生4－苯甲基－3－[2－(5－苯甲氧基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊－4－烯醯]－唑啶－2－酮(6.3 g,95%)。
1 H－NMR(CDCl3 )：δ 1.80(s,3H),2.46(dd,1H),2.75(dd,1H),3.05(dd,1H),3.32(dd,1H),4.08(m,2H),4.59(m,1H),4.80(d,2H),5.13(s,2H),5.48(dd,1H),7.11(d,2H),7.21－7.49(m,11H),7.67(s,4H)；估計C36H32F3NO4(M＋H)600.23,實測600.3.
d)4－苯甲基－3－[2－(5－羥基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊醯基]－唑啶－2－酮
在含4－苯甲基－3－[2－(5－苯甲氧基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊－4－烯醯基]－唑啶－2－酮(6.7 g,11.2 mmol)之MeOH(150 mL)溶液中，添加10% Pd/C(670 mg,10 w%)。黑色懸浮液於45－45 psi氫化隔夜。混合物經celite(矽藻土)過濾，並將溶劑於真空中移除，獲得相對純的4－苯甲基－3－[2－(5－羥基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊醯基]－唑啶－2－酮(5.4 g,93%)。
1 H－NMR(CDCl3 )：δ 0.94(d,3H),0.98(d,3H),1.54(m,1H),1.74(m,1H),2.12(m,1H),2.79(dd,1H),3.36(dd,1H),4.11(m,2H),4.62(m,1H),5.25(t,1H),6.97(m,2H),7.21－7.37(m,6H),7.67(s,4H)；估計C29H28F3NO4(M＋H)512.20,實測512.3.
e)三氟－甲烷磺酸5－[1－(4－苯甲基－2－酮基－唑啶－3－羰基)－3－甲基－丁基]－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基酯
在含4－苯甲基－3－[2－(5－羥基－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－4－甲基－戊醯基]－唑啶－2－酮(32 g,62.6 mmol)之二氯甲烷(170 mL)溶液中，添加吡啶(15.0 mL)。將系統冷卻至0℃。在此冷溶液中添加三氟甲烷磺酸酐(16 mL,94 mmol)，維持內部溫度低於5℃並進一步於0℃攪拌0.5 h。將此反應混合物倒入含1N HCl(100 mL)及冰(25 g)之混合物，並攪拌0.5 h。水層以二氯甲烷(2 x 100 mL)萃取，合併之濾份以水(2 x 100 mL)、NaHCO3 飽和水溶液(2 x 100 mL)、及鹽水(2 x 100 mL)清洗。將有機物乾燥(MgSO4 )並於真空中濃縮，得到淡紅色液體，將其以ISCO管柱層析純化，得到三氟－甲烷磺酸5－[1－(4－苯甲基－2－酮基－唑啶－3－羰基)－3－甲基－丁基]－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基酯(34 g,84%)。
1 H－NMR(CDCl3 )：δ 0.96(d,3H),0.98(d,3H),1.52(m,1H),1.77(m,1H),2.13(m,1H),2.79(dd,1H),3.37(dd,1H),4.14(m,2H),4.67(m,1H),5.33(t,1H),7.20－7.38(m,7H),7.70(m,5H)；估計C30H27F6NO6S(M＋H)644.15,實測644.2.
f)4－苯甲基－3－{2－[5－(2,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊醯基}－唑啶－2－酮
在含三氟－甲烷磺酸5－[1－(4－苯甲基－2－酮基－唑啶－3－羰基)－3－甲基－丁基]－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基酯(4.84 g,7.53 mmol)之甲苯(38 mL)溶液的密封試管中，添加2,5－雙－三氟甲基－苯基胺(1.42 mL,9.04 mmol)、[1,1’]雙萘基－2－基－二－第三丁基－膦(300 mg,0.75 mmol)、Pd(OAc)2 (169 mg,0.75 mmol)及KOtBu(7.53 mL,1.0M之THF溶液,7.53 mmol)。將反應混合物加熱至120℃ 1h。於此各添加另一部份之[1,1’]雙萘基－2－基－二－第三丁基－膦(300 mg,0.75 mmol)、Pd(OAc)2 (169 mg,0.75 mmol)及KOtBu(3.77 mL,1.0M之THF溶液,3.77 mmol)，並進一步加熱1h。將系統冷卻至室溫，並經由緩慢添加水而淬熄。混合物以EtOAc(3 x 50 mL)萃取，有機相以NaNCO3 飽和溶液及鹽水清洗，乾燥(Na2 SO4 )有機餾份並於真空中濃縮。粗製混合物以ISCO管柱層析純化，獲得4－苯甲基－3－{2－[5－(2,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊醯基}－唑啶－2－酮(2.32 g,43%)。
1 H－NMR(CDCl3 )：δ 0.97(d,3H),0.99(d,3H),1.56(m,1H),1.76(m,1H),2.10(m,1H),2.78(dd,1H),3.37(dd,1H),4.14(m,2H),4.65(m,1H),5.28(t,1H),6.32(s,1H),7.17－7.40(m,9H),7.59(s,1H),7.69(m,5H)；估計C37H31F9N2O3(M＋H)723.22,實測723.3.
g)(R)－2－[5－(2,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基－4－甲基－戊酸在含4－苯甲基－3－{2－[5－(2,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊醯基}－唑啶－2－酮(2.55 g,3.53 mmol)之THF(15 mL)溶液中，添加水(5 mL)。將系統冷卻至0℃。於此冷溶液中添加LiOH.H2 O(148 mg,3.53 mmol)及30% H2 O2 (1.20 mL,10.59 mmol,)，並於0℃攪拌15 min。過量之H2 O2 經由添加1.5M Na2 SO3 水溶液(7.06 mL,10.59 mmol)淬熄，並於室溫攪拌10 min。於真空中移除有機溶劑，所產生之液體以添加1N HCl水溶液酸化至pH＝2。水層以EtOAc(3 x 50 mL)萃取並乾燥(MgSO4 )。混合物於真空中濃縮，得到粗製混合物，將其以ISCO二氧化矽凝膠管柱層析純化，產生(R)2－[5－(2,5－雙－三氟甲基－苯基胺基)－4－三氟甲基－聯苯基－3－基]－4－甲基－戊酸(1.15 g,58%)。
1 H－NMR(CDCl3 )：δ 0.94(d,6H),1.56(m,1H),1.76(m,1H),2.00(m,1H),3.74(t,1H),6.32(s,1H),7.17－7.29(m,4H),7.60(s,1H),7.67(m,5H)；估計C27H22F9NO2(M＋H)564.15,實測564.3.
測定本發明化合物對於環加氧酶－1及環加氧酶－2(Cox－1,Cox－2)之效果
使用Cayman Chemical Company,Ann Arbor,MI,USA.(Cat.No.760111)所提供之Colorimetric Cox抑制劑篩選分析，根據製造說明書測定Cox－1及Cox－2之抑制。
本發明化合物於100 μM將顯示<50%抑制。
本發明化合物對於γ－分泌酶－調控活性之篩選
進行篩選係使用攜帶APP 695－野生型之SKNBE2細胞，生長於由Gibco(cat no.31330－38)提供之DMEM/NUT－混合F12(HAM)，含5%血清/Fe補充1%非必需胺基酸。
細胞生長至接近匯合。
使用如Citron et at(1997)Nature 10 Medicine 3：67.所述之分析實行篩選。
徑篩選本發明化合物於γ－分泌醯活性之IC50－值
活性範圍：10－100 uM 2－(5－(4－氟苯氧基)－4－三氟甲基－聯苯基－3－基)－戊酸；(實施例I)2－(5－(苯氧基)－4’－三氟甲基－聯苯基－3－基)－戊酸；(實施例ii)
活體內效力之證實
本發明Aβ42降低劑可用於治療AD，例如於人類之哺乳動物，或者是在經證實的動物模式中，例如小鼠、大鼠或天竺鼠。哺乳動物可未被診斷出AD，或可不具有AD之遺傳傾向，但可基因轉移，導致製造過多而最終以在罹患AD之人類所見到之類似之方法淤積。
Aβ42降低劑可使用任何方法以任何標準方式投與，例如，但不限於，Aβ42降低劑可以液體、錠劑或膠囊型式，其可以口服或注射攝取。Aβ42降低劑可以任何劑量投與，該劑量足以明顯降低血、血漿、血清、腦脊髓液(CSF)或腦中之Aβ42濃度。
為了測定急性投與Aβ42降低劑可降低活體內Aβ42濃度，可使用例如小鼠或大鼠之非基因轉殖齧齒類動物。或者是，可使用表現含“Swedish”突變之APP695的二至三月齡Tg2576小鼠，或由Dr.Fred Van Leuven(K.U.Leuven,Belgium)及其合作夥伴研發之基因轉殖小鼠模式，其具有人類澱粉樣前驅物蛋白質[V717I]臨床突變之神經原特異性表現(Moechars et al.,1999 J.Biol.Chem.274,6483)。一隻基因轉殖小鼠顯示自發、漸進地淤積β－澱粉樣(Aβ)於腦中，最後於海馬支角、海馬狀突起及皮質造成澱粉樣斑。此年齡之動物在腦中具有高濃度之Aβ，但並不能測出Aβ淤積。以Aβ42降低劑處理之小鼠將被試驗並與未治療或以媒劑治療之小鼠比較，且大腦可溶性Aβ42及總Aβ濃度可以標準技術定量，例如使用ELISA。一旦被確定之作用開始一段時間，治療期間可於數小時至數日間變化，且將根據Aβ42降低之結果調整。
已顯示測量活體內Aβ42降低之典型程序，但其僅為可被用於充分運用可測量Aβ濃度之許多變化中的一種，例如，整數量之化合物可溶於DMSO(體積等於最終調配物體積之1/10)、渦漩，並在超音波震動20秒後，進一步以含10%(w/v)羥基丙基β環糊精(HBC,Aldrich,Ref N°33,260－7)溶液之PBS稀釋(1：10)。
Aβ42降低劑可以單一口服劑量投與，在犧牲及分析之前3或4小時給予，或者是可隨日子經過給予，並在最終劑量給予後3至4小時將動物犧牲。
於犧牲時收集血液，在以克太拉(Ketalar；Ketamin)、若夢(Rompun；Xylazin 2%)及阿托品(Atropin；2：1：1)之混合物麻醉期間，以心臟穿刺進行血液收集，並收集於經EDTA處理之試管中。血液於4℃以4000 g離心5分鐘，並回收血漿用於分析。
小鼠以克太拉(Ketalar；Ketamin)、若夢(Rompun；Xylazin 2%)及阿托品(Atropin；2：1：1)之混合物麻醉，並於4℃以生理血清快速灌洗。
將大腦由頭爐中移出，並於冠狀合縫/額骨面切開將後腦及前腦分離。移除小腦，使用中線矢狀切割將前腦平均分離成左右大腦半球。
一大腦半球立刻浸入液態氮中，並儲存於－70℃直至用於生化分析時之均質化。
使用Potter，玻璃試管(無清潔劑,2 cm3 )及機械均質器(650 rpm)將大腦均質化。使用體積6.5 x 1/2腦重量之具蛋白質酶抑制劑(每50 ml Tris/HCl緩衝液1錠,CompleteTM,Roche,Mannheim,Germany)的新鮮製備20 mM Tris/HCl緩衝液(pH 8.5)作為均質化緩衝液。
將樣本由－70℃轉移至具有液態氮之樣本儲器，並經由在均質化前於工作檯上培養數秒鐘，將每一個別樣本預熱，在離心前，將均質液收集於Beckman離心管TLX，並於冰上收集。在二次取樣之間，將Potter及玻璃試管以無清潔劑蒸餾水小心潤洗，並以吸水紙乾燥。
將樣本於預冷之超速離心機(Beckman,Mannheim,Germany)內於4℃以48000 rpm(135.000 x g)離心1小時20分鐘。上清液(含經分泌APP及澱粉樣胜肽之可溶性濾份)與小團塊分離(在老年小鼠之情況中，含膜結合APP－片段之膜濾份及與斑相關性澱粉樣胜肽)。
小的逆相管柱(C 18－Sep－Pack Vac 3cc卡座,Waters,Massachusetts,MA)設置於真空系統，並以含80%乙腈之0.1%三氟乙酸(A－TFA)清洗，之後以0.1% TFA清洗二次。然後施用樣本，並將管柱以5%及25% A－TFA連續清洗。澱粉樣胜肽以75% A－TFA洗提，並將洗提液收集於冰上之2 ml試管，將洗提液於SpeedVac濃縮器(Savant,Farmingdale,NY)冷凍乾燥隔夜，並於ELISA套組所提供之240 μl樣本稀釋劑中解析。
為了定量大腦均質液之可溶性濾份中之人類Aβ－42之數量，使用商業上可獲得之酵素連結免疫吸附分析(ELISA)套組(h Amyloid β42 ELISA high sensitive，The Genetics Company,Zurich,Switzerland)，根據製造說明書進行ELISA。簡而言之，標準(合成Aβ1－42之稀釋物)及樣本製備於不具蛋白質結合力之96孔聚丙烯盤(Greiner bio－one,Frickenhausen,Germany)。具有最終濃度1000、500、250、125、62.5、31.3及15.6 pg/ml之標準稀釋物及樣本於ELISA套組所提供之樣本稀釋劑製備成60 μl之最終體積。除了選擇性抗－Aβ－抗體共軛物(生物素化測定抗體)之外，將樣本、標準及空白組(50 μl)添加至經抗Aβ塗佈之聚苯乙烯盤(捕捉選擇性識別抗原C終端之抗體)，並於4℃培養隔夜，以便形成抗體－類澱粉－抗體－複合物。次日，添加鏈抗生物素－過氧化酶共軛物，30分鐘後添加TMB/過氧化物混合物，造成基質轉變成產色產物。此反應經由添加硫酸(1M)終止，且顏色強度經由光度學方法以具有450 nm濾鏡之ELISA－讀取器量測。經由與以合成Aβ1－42所製之標準曲線比較吸收度，獲得樣本Aβ含量之定量。
在此模式中，以與未治療動物比較降低至少20% Aβ42之模式較有利。
活體中之資料口服劑量30 mg/kg於4 hr時間點
當前述說明書以所提供之以說明為目的之實施例教示本發明原理時，必須了解，本發明之實行包含所有一般變化、改造及/或修正，包含於下列申請專利範圍及其相等物之範圍內。
上述說明書中所有揭示之公開案，其全文於此一併做為參考。

Claims (19)

  1. 一種具有通式(I)之化合物， 其中A為O、NH或S，X為一鍵或-CR5 R6 基，其中R5 及R6 各自獨立選自下列所組成之群組：H、選自CH3 、C2 H5 、i-C3 H7 、n-C3 H7 、i-C4 H9 、n-C4 H9 、sec-C4 H9 、tert-C4 H9 之烷基；選自C2 H3 、i-C3 H5 、n-C3 H5 、n-C4 H7 、i-C4 H7 、sec-C4 H7 之烯基；其中於任何烷基或烯基之一或多個H原子可選擇被一或多個取代基取代，該取代基各選自OH、F、Cl、Br、I及CF3 所組成之群組；或R5 、R6 可共同與其相連結之碳原子一起形成具有3至6個C-原子之飽和或未飽和、經取代或未經取代之環，且其環中可包含一或多個N、S或O之雜原子，且若多於一個雜原子存在，則該雜原子可為相同或相異；R1 、R2 、R3 及R4 各選自下列所組成之群組：H；F；Cl；Br；I；CN；OH；C(O)N(R7 R8 )；S(O)2 R7 ；SO2 N(R7 R8 )；S(O)N(R7 R8 )；N(R7 )S(O)2 R8 ；N(R8 )S(O)R8 ；S(O)2 R7 ；N(R7 )S(O)2 N(R8 R8a )；SR7 ；N(R7 R8 )；N(R7 )C(O)R8 ；N(R7 )C(O)N(R8 R8a )；N(R7 )C(O)OR8 ；OC(O)N(R7 R8 )；C(O)R7 ；經取代或未經 取代之C1 -C4 -烷基及經取代或未經取代之C1 -C4 -烷氧基，且其中C1 -C4 -烷基與C1 -C4 -烷氧基之取代基選自F、Cl、Br、I、CF3 ；R7 、R8 、R8a 各選自下列所組成之群組：H；C1 -C4 -烷基；雜環；及C3-7 環烷基，其中C1 -C4 -烷基；雜環；及C3-7 環烷基可選擇經一或多個選自F、Cl、Br、I及CF3 之取代基取代；Y為羧基-C(O)OH；R9 及R10 各為H、F或CF3 ；及其溶劑合物、水合物、酯類及醫藥可接受性鹽類。
  2. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中：A為O或NH；X為-CR5 R6 ，其中R5 及R6 各選自下列所組成之群組：H、CH3 、C2 H5 、i-C3 H7 、n-C3 H7 、i-C4 H9 、n-C4 H9 、sec-C4 H9 及tert-C4 H9 ；其中於任何烷基之一或多個H原子可選擇被一或多個取代基取代，該取代基各選自OH、F、Cl、Br及I所組成之群組；或R5 、R6 可共同與其相連結之碳原子一起形成環丙基環；R1 、R2 、R3 及R4 各選自下列所組成之群組：H、OH、C(1-4) 烷基、C(1-4) -烷氧基、N(CH3 )2 、-SO2 CH3 、CN、OCF3 、-C(O)CH3 、OCH3 、CF3 、F及Cl；其中該C(1-4) 烷基與C(1-4) 烷氧基各經選擇以一、二或三個選自I、Br、F及Cl所組成之群組的取代基取代；Y為CO2 H；及其溶劑合物、水合物、酯類及醫藥可接受性鹽類。
  3. 如申請專利範圍第2項之化合物，其中： X為-CR5 R6 ，其中R5 及R6 為H、CH3 、C2 H5 、i-C3 H7 、n-C3 H7 、i-C4 H9 、n-C4 H9 、sec-C4 H9 或tert-C4 H9 ；及其溶劑合物、水合物、酯類及醫藥可接受性鹽類。
  4. 如申請專利範圍第3項之化合物，其中：R1 及R2 各選自CF3 、H、F、Cl、OCH3 、C(1-4) 烷基及CN所組成之群組；R3 及R4 各選自H、CF3 、F及Cl所組成之群組；R9 為H或F；R10 為H；及其溶劑合物、水合物、酯類及醫藥可接受性鹽類。
  5. 一種化合物，其選自下列所組成之群組：2-(5-(4-氟苯氧基)-4’-三氟甲基-聯苯基-3-基)-戊酸；2-(5-(苯氧基)-4’-三氟甲基-聯苯基-3-基)-戊酸；及其溶劑合物、水合物、酯類及醫藥可接受性鹽類。
  6. 一種化合物，其選自下列所組成之群組： 及其溶劑合物、水合物、酯類及醫藥可接受性鹽類。
  7. 如申請專利範圍第1至6項中任一項之化合物，其使用作為藥物。
  8. 一種如申請專利範圍第1至6項中任一項之化合物之用途，其用於製備調控γ-分泌酶之藥物。
  9. 一種如申請專利範圍第1至6項中任一項之化合物之用途，其用於製備與治療澱粉樣β-42(Aβ42)胜肽-製造升高含量有關之疾病的藥物。
  10. 一種如申請專利範圍第1至6項中任一項之化合物之用途，其用於製備治療阿茲海莫氏症之藥物。
  11. 一種醫藥組合物，其包含如申請專利範圍第1至6項中任一項之化合物與惰性載劑之混合。
  12. 一種製備如申請專利範圍第1至6項中任一項之化合物之方法，該化合物之A為O，其包含下列步驟：a)在鹼金屬氫化物存在下，以苯甲基醇處理二鹵化氟苯化合物；b)在鹼金屬氫化物及金屬鹵化物存在下，以適當的丙二酸酯衍生物處理產物；c)於酸性溶劑中處理；d)偶合至硼酸衍生物；e)可選擇性烷化所產生之化合物；f)移除苯甲基保護基；g)轉換酚成為聯苯基醚；h)將酯轉換成酸；i)可選擇性解析外消旋混合物成為鏡像異構物。
  13. 一種製備如申請專利範圍第1至6項中任一項之化合物之方法，該化合物之A為S，其包含申請專利範圍第12項所列之步驟，除了鹼金屬氫化物以適當的鹼置換，且苯甲基醇以芳基硫醇置換。
  14. 一種製備如申請專利範圍第1至6項中任一項之化合物之方法，該化合物之A為NH，其包含下列步驟：a)在鹼金屬氫化物存在下，以苯甲基醇處理二鹵化氟苯化合物；b)在鹼金屬氫化物及金屬鹵化物存在下，以適當的丙二酸酯 衍生物處理產物；c)於酸性溶劑中處理；d)偶合至苯胺；e)移除苯甲基醚保護基；f)將所產生之羥基化合物轉換成三氟甲烷磺酸酯，並偶合至硼酸；g)可選擇性烷化所產生之化合物；h)將酯轉換成酸；i)可選擇性解析外消旋混合物成為鏡像異構物。
  15. 如申請專利範圍第12至14項中任一項之方法，其中該二鹵化氟苯化合物為二溴氟苯。
  16. 一種製備藥物之方法，其包含下列步驟：a)製備如申請專利範圍第1至6項中任一項之化合物；及b)調配含該化合物之藥物。
  17. 一種治療哺乳動物以調控γ-分泌酶之醫藥組成物，其包含治療有效量之申請專利範圍第1至6項中任一項之化合物。
  18. 一種於哺乳動物中治療與Aβ42-製造升高含量有關疾病之醫藥組成物，其包含治療有效量之申請專利範圍第1至6項中任一項之化合物。
  19. 一種於哺乳動物中治療阿茲海莫氏症之醫藥組成物，其包含治療有效量之申請專利範圍第1至6項中任一項之化合物。
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