TWI358295B - Epothilone derivatives and radiation - Google Patents

Description

1358295 玫、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於有機化合物，特定言之，係關於與游離輻 射組合使用，以延遲增生性疾病（尤其為實體腫瘤疾病）進 展，或治療該疾病之醫藥組合物。 【先前技術.】 吾人已經發現，某些依波西林酮衍生物當與游離輻射組 合使用時，可有效延遲增生性疾病（尤其是實體腫瘤疾病） 之進展或治療該疾病。 【發明内容】 據此，本發明係提供一種延遲需此治療受體增生性疾病 (尤其為實體腫瘤疾病）之進展或治療需此治療受體該等疾 病之方法，其包括與離子化輻射作用組合投與受體一有效 量之式I依波西林酮衍生物

Ο 0H 0 其中此化合物中的A表示0或NRN，其中RN為氫或低碳數烷 基，R為氫或低碳數烷基，而Z為0或一鍵結，此化合物係 為游離形態或醫藥可接受鹽類形態，及視需要至少一種醫 藥可接受之載體。 其中A表示0、R為氫，而Z為0之式I化合物為吾人所熟知 9l935.doc ίΓΓ林其中A表示0、R為甲基，而Z為0之式1化 °人所热知《依波西林酮B ;其中A表示0 ' R為氫， 本-鍵結之式他合物為吾人所熟知之依波西林酮c;其 中A表示〇，r為甲箕 土，而Z為一鍵結之式I化合物為吾人所 无、知之依波西林酮D。 本發明另外提供製備與游離韓射組合使用之式！化合物. (或醫樂可接受鹽或其酯類前驅藥物)之醫藥物之用途，其係· 用以治療增生性疾病。 -.- 又ϋ另S面係提供與游離輕射组合使用之式工依波 林酉同何生物（或醫藥可接受鹽類或其醋類前驅藥物）之用 途’其係用以治療增生性疾病（尤其為實體腫瘤卜 在另方面本發明係提供與游離輻射组合使用而作為活· 性j分之式I依波西林綱衍生物（或醫藥可接受鹽類或其酉旨· 類前驅藥物）’其係用於治療增生性疾病（尤其是實體腫瘤）。 另一万面本發明還提供一種包裝，其包括式j依波西林酉同-何生物（或醫藥可接受鹽或其酯類前驅藥物）及附有與游離·參 輻射組合使用I說明書，其係用於治療增生性疾病，尤其 是實體腫瘤。 ‘ 本說明前述或他處之下列術語具有以下意義： 如文或後文分別與有機基團或化合物有關之,,低碳數"一 同定義為南達至及包括7個碳原子（較佳者高達至及包括* 個碳原子）之具分支或不具分支之化合物或基團。 低碳數烷基係為具分支或不具分支，並且包含丨至7個碳 原子者（較佳為1 _4個碳原子）。低碳數烷基為，例如，f基、 9I935.doc 1358295 乙基、丙基、丁基、異丙基或異丁基。 本專利說明書使用，，延遲進展” 一詞佴 货、 、才曰將該治療組合投 與病人，而該病人係處在欲治療之增生 ,^ 土迮疾病义早期階段。 本專利說明書使用"實體腫瘤疾病"― -„^ ^ 3包含但不僅限於 神...工膠貝瘤、甲狀腺癌、乳腺癌、 9r果殛、結腸及一般冒 腸這癌、子宮頸癌、肺癌，特定言 ., <為小細胞肺癌及非小 細胞肺癌、頭頸癌、膀胱癌、前 J幻脲召或卡波西氏肉瘤。 在本發明一個較佳具體實施 .^ 呵/D潦疋腫瘤疾病係為 神哨瘤、前列腺或，狀腺癌。本組合不但可抑制實許 腫瘤生長，也抑制液體腫瘤。另一方面’根據腫瘤類型及 所使用《特足組合，可使腫瘤體積減小。本專利說明書揭 、。也適用於預防腫瘤轉移性擴散和殘留癌腫微小轉 移之生長與發展。 '' 才曰足里之式I依波西林嗣衍生物與一定量之游 _ 、 σ投用，以產生當式I依波西林酮衍生物未與游離 輻=刀別、同時或依序投用時所不能獲得之協同效應，其 Γ t用《游離輕射可以連續'依序、或不定時進行；或者 離輕射未與式1依波西林酮衍生物分別、同時或依序 投用時所不能辑復 又仔疋效應’其中依波西林酮衍生物之投用 可以連續、依成 依·序、或不定時進行。

較佳之組合伯4 A 知組合投用一定量之式I依波西林酮衍生 物與一定量之游 雕福射，以產生協同抗增生效應和/或殺死 集落細胞之效廄。 〜如果係下述情況，不會產生該效應： a)投用式I依油而 印林酮衍生物時，沒有先於、同時或隨後 9l935.doc 1358295 投用游離輕射’其中可以連續、依序或不定時方式投藥物； b)投用游離輻射劑時，沒有先於、同時或隨後投用式1依 波西林酮衍生物，其中可以連績、依序或不定時方式投藥。 珂文及後文中之”游離輻射”一詞意為或者以電磁射線（諸 如X-射線和珈瑪射線）型態，或者以粒子型態（諸如阿爾發 及^_他粒子）發生之游離輕射。輕射療法（但不僅限於此）可· 提供離子輻射，並且在所屬技術領域已為吾人所熟知. (Heilman, Principles of Radiation Therapy, Cancer, in φ Principles and Practice of 0nc〇1〇gy，248 275 (Deviu等，ed， 4th Ed., VI，1993)。 式I依波西林酮衍生物（其中A表示〇或NRN，其中rn為氫 或低碳數烷基，R為氫或低碳數烷基及2為〇或鍵結）及，特， 定言之’製備此等依波西林酮衍生物之一般及特殊方法揭· 示於專利和專利申請號W0 93/10121、US 6，194，181、W0 98/25929、W0 98/08849、W0 99/43653、W0 98/22461 及 W0 00/31247之每個案例中，特定言之，在化合物中請專利.籲 範圍和發明最終產品之實施例中。最終產品之主體要素、· 醫藥製劑及申請專利範圍因此以用方式併入本發明申請 出版物中《其同樣包括對應之立體異構物以及對應之結晶 變體，例如溶劑合物和多形物也揭示於其中。 國際專利WO 99/〇25丨4之流程21 (31，32頁）及實例3 (48-50頁）揭示將依波西林酮B轉化成其對應内醯胺之作用。 與依波西林酮B不同之幻化合物轉化成纟對應内酿胺之作 用可以類似方法完成。對應之式H皮西林酮衍生物（其中rn 91935.doc 1358295 為低碳數纟元基）可以所屬技術領域熟知方法（諸如起始於依 波西林g同衍生物之還原性烷基化反應，其中RN為氫）製備 之。 式I依波西林酮衍生物（尤其為依波西林酮B)可以揭示於 W0 99/3 9694中醫藥組合物之部分投藥之。 一種組合係為本專利說明書後文所指之本發明組合其 包括（a)式I依波西林酮衍生物（其中化合物中的A表示〇或 NRN，其中RN為氫或低竣數燒基，r為氫或低碳數垸基， 及Z為0或鍵結，該衍生物可以游離型態或醫藥可接受之鹽 類型態存在，且視需要含有至少一種醫藥可接受載體及（b) 游離輻射。 增生性疾病（如實體腫瘤）之本質係為多因素疾病。在某些. 情況下，具有不同作用機制之藥物可以組合使用。然而，- 僅考慮具有不同作用模式的藥物之任何组合不一定導致具 有高效組合。 · 本發明組合中，式I依波西林酮衍生物和醫藥可接受鹽類. 及前驅藥物衍生物較佳地係以藥物製劑型態應用，該藥物 製劑包括相關治療有效劑量之活性成分，視需要還包括或 混與適以投藥用之無機性或有機性、固體或液體之醫藥可 接受載體。 在-較佳具體實施财，每個病人係接受多劑量游離輕 射，而式I依波西林酮衍生物係以靜脈注射方式每週投用一 次達3週，然後停用一週。A u 母四週為一週期。每個週期的第 一天限定為投用式I依波西；j；太縮少_ < 收四砵酮何生物和游離輻射。治療效 9l935.doc 1358295 果以此研究測定之 射學評估腫瘤。 例如，在18或24週後，每6週以腫瘤輻 在另-具體實施例中，游離輻射係在治療前投用，亦即 在應用本發明組合進行治療開始前；在-特定相内單獨 投給病人游離輻射，例如， 、 母天早獨投用游離輕射持續2或 3天或幾週。 、在另一較佳具體實施例中，式！依波西林嗣衍生物以靜脈 注射万式每週投用一次達3週’然後停用—週。每四週為一 個週期。治療效果以此研究測定之，例如，在ΐ8_週後， 每6週以腫瘤輻射學評估腫瘤。 舉例而έ，孩依波西林酮衍生物醫藥組合物可為經腸组 合物（諸如經口 1直腸、喷霧法或鼻孔投用）、非經腸組合 物(諸如靜脈内或皮下投用），或經皮投用組合物（例如被動 或離子電滲）、或局部投用組合物。 較佳者該依波西林酮衍生物醫藥組合物係採口服投用。 根據本發明醫藥组合物可以本來熟知方式製備之，並適 於以經腸(諸如經口或直腸)、及非經腸投與哺乳動物(溫血 動物）（包括人）’其包括治療有效劑量之至少一種具藥理活 性之單獨組合部分，或與一或多種醫藥可接受載體組合， 尤其適於經腸或非經腸投藥。 該新穎醫藥組合物包括，例如約10%至約1〇〇%(較佳者約 20%至約60%)之活性成分。舉例而言，以經腸或非經腸投 用組合療法之醫藥製劑為單位劑型，諸如糖衣錠劑、錠劑、 膠囊或栓劑，以及安瓶。如果沒有特別說明，此等劑型係 91935.doc 以本來熟知備之， 用、糖塗覆、慣用“合作用、粒化作 量中所含组合部分之單位… 了解母-劑型個別劑 “机 成分本身不需為有效劑量，因為 多次投用單位劑量可達到所需之有效劑量。 04 在製備口服劑型組合物時， 諸如，例如水、乙二醇、也、1 何吊用之藥物介質 十丨.'醇、6周味劑、防腐劑、著色 -1，或在固體口服製劑（諸如， 恭触浐田扪如叔劑、膠囊和錠劑）中， 載把知用，諸如澱粉、糖、 潤滑劑、粘合劑、崩㈣及^素稀釋劑、成粒劑、 髀製叫更佳士 ” -類似物。固體口服製劑比液 之口服單位劑型，至中明,二用’因此其是最有利 ^ 7、中明顯係扭用固體醫藥載體。 可Τι :《’本發明組合之每—組合部分之治療有效劑量 用Ί 序及任何順序投用之，而其成分可分別投 用，或以-固定組合投用之。例如，根據本發明延遲增生 二疾病進展或治療該疾病之方法包括⑴投用第—組合部 刀及(U)投用罘二組合部分，其中所投用組合部分可同時 或依任何順序’共同組合投用治療有效劑量（較佳者具有協 同效果《有效劑I),例如，以相當於本發明描述量之日劑 量或週劑量投用之。本發明組合之個別組合部分可在治療 期間於不同時間分別或同時投用。此外，”投用”一詞也包 含式I依波西林酮衍生物之前驅藥物之應用，其在體内可轉 變成此等組合部分。咸欲了解本發明因此為包含所有此等 領域之同時或交替治療’而”投用"-詞也將被相對地解釋。 較佳《游離韓射與式1依波西林酮衍生物二者之劑量關 91935.doc 1358295 係為可產生協同效果之比率。

如果該溫血動物為人類，當点人B 田成人服用時，式I化合物之南丨 量範圍較佳為約°.25至75毫克/平方米，更佳為。.5至5。心 /平万米’例如2.5毫克/平方米，每週—次連續2至: 例如3週，然後停用6至8天。在本發明之一個且 ’ 中’係依照美國專利號US 6，取838(其揭示内以 式併入本發明說明參考）中描 万 酮B。 、^料劃投用依波西林 m 幻化合物之特定投用模式和劑量可由主 人之特點’特別是年齡、體重、生 W“ 擇定之。 .Μ万式L度等選 式I依▲西林酮衍生物之劑量可端視多種因素而定 活性成分作用之有效性和持久性、投用模式射口 用之有效性和持久性和/或性別 ^射作 之個體狀況。 平齡體重及心療主體 游離輻射之劑量可端视多種因素 用之有效性和持久性、投用模式、投:位；如=射作 鋼衍生物㈣之有錄和敎料波西林 欲产秦μ、 柙次u別年齡、體重及 射吸收^u大'兄而疋。游離輕射之劑量-般依照輻 W !、時間和吸收分量而定’並且 仔細確定。 叫王醫生 .·* 基式^合物之成鹽基團係為具有驗或酸特徵之基團或殘 ^咐味^少一個驗性基團或至少一個驗基，例如游離胺 、土或口比呢基《化合物可形成酸加成鹽，例如與有 91935.doc 12 1358295 機酸（諸如鹽酸、硫酸或$粦酸）或與適宜之有機羰氧基酸或續 酸，例如脂肪族單羧氧基酸或二羰氧基酸（諸如三氟乙酸、 乙酸、丙酸、羥基乙酸、琥珀酸、順丁烯二酸、富馬酸、 經基順丁烯二酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸或草酸，或胺 基酸（諸如精胺酸或離胺酸）、芳香羰氧基酸（諸如苯甲酸、 2-苯氧基-苯甲酸、2-乙醯氧基-苯曱酸、水楊酸、4_胺基水 . 楊酸）、芳香-脂肪羰氧基酸，諸如杏仁酸或桂皮酸，芳香雜 、 環羰氧基酸諸如於驗酸或異於驗酸，脂肪族績酸（諸如〒 烷-、乙烷-或2-羥基乙烷-磺酸）、或芳香磺酸（例如苯_、p_ - 甲苯-或莕-2-磺酸）。當存有數個鹼性基團時，可形成單或 多-酸加成鹽。 為了分離或純化及化合物進一步用作中間體時之目的，· 也可以應用醫藥可接受鹽類。 只有醫藥可接受、無毒鹽類可作為治療目的，然而，此 等鹽卻因此較佳。 · 式1化^物中較佳者八為〇、R為低碳數烷基（例如乙基或最_ 佳為甲基），Ζ較佳為〇。 在本發明—個較佳具體實施例中，該組合包括依波西林 酮Β及游離輻射。 ·- 此外本發明係關於一種治療溫血動物增生性疾病之方 法’其包括以聯併有效治療增生性疾病之方式投以該動物 本發明組合，並击^人. 再中孩組合邵分也可以其醫藥可接受鹽類之 形式存在。 ’本發明係關於本發明組合之用途，其係用於 9I935.doc 13 1358295 延遲增生性疾病進展或料該疾病，及祕製備延遲增生 性疾病進展或治療該疾病之醫藥物。 在本發明-個具體實施例巾，H寫藥劑與本發明組 合共同投藥’以預防、控制或消除有時與投用依波西林銅 (尤其為依波西林酮B)有關之腹瀉。因此，本發明還關於一 預防或控制與投用式I依波西林酮衍生物有關之腹瀉之方 法，其包括投與接受本發明組合治療之病人一有效劑量之 抗腹离藥劑。抗腹寫藥劑及其投用步驟已為所屬技術領域 之技術人員所熟知者適用於本發明之方法和組合物之抗 腹瀉藥劑包括但不僅限於天然阿片類（諸如鴉片酊劑止痛 劑和可待因）、合成阿片類（諸如苯乙呱啶、狄芬諾新和洛呱 丁胺）、次水楊酸鉍、奥曲肽（例如作為sand〇_statintm 獲得）、促胃動素拮抗劑和慣用之抗腹瀉藥物諸如高嶺土、 果膠、小蘗鹼和毒蕈素性藥物。 【實施方式】 下列之實施例旨在說明本發明，而非解釋限制。 實施例1 藉由以彳貞測代謝活性為基礎之似-MTT alamarBlue分析 法評估腫瘤細胞之增生作用。為測定集落存活力，以特定 處理方式將塗板的單細胞數目調整至每皿約1 〇〇個集落。暴 露於不同藥物24小時後，細胞接受照射，然後在其以甲醇/ 乙酸（75%/25%)進行固定作用及以結晶紫染色之前，讓其生 長8至1 0小時。只有超過5 〇細胞/集落之集落才計數。測定 未處理細胞之塗板效率（PE)，並計算pe(%)=(計數的集落/ 91935.doc 1358295 塗板細胞數目）Χ100。特定處理之存活分量（SF)則以SF=(計 · 數集落.)/(塗板細胞數目XPE/100)求之。集落存活能力分析 法至少進行兩次，並且由於標準偏差最小而沒有出現誤差。 於室溫下在組織培養皿（100x100毫米）或96槽孔培養盤中照 射培養細胞’其採用？31^让1^以？3\ 3,300千伏1-射線，〇7 Gy/分鐘。放射量測定係以Vigiiant_放射性劑量儀控制。 - 進行初始增生分析法，以測定用於與游離輻射組合治療 . 時之依波西林酮B之劑量範圍。咸已發現次奈莫耳和低奈莫 ^ 耳範圍之依波西林酮B對兩種細胞株（E1 A/ras轉化之 -—, P53-/-MEF ;人類結腸腺癌細胞株sw48〇)具有超過72小時 之明顯抗增生劑量反應。與已遺傳性限定之經致癌基因轉 化MEFs(附錄依波西林酮B-1)相比，人類SW480細胞對依波-西林酮B表現出較強的敏感性。依波西林酮B與游離輻射. (5Gy)組合治療顯示出對此.兩種細胞株（附錄依波西林酮 B-2’以典型之依波西林酮b濃度表示）具有至少相加之抗谐. 生 1應。以此組合治療而言’模型細胞在接受照射前，係·應 用依波西林酮B預處理24小時。 基於此等結果，組合使用依波西林酮B與游離輻射進行集 落存活能力分析法。集落存活能力分析法係以低密度接種 於培養盤中之單個細胞之緊密集落生長物為基礎。可量化 及比較不同處理條件下之集落生長物。 附錄依波西林酮B-3摘錄SW480及ElA/ras-轉化之MEFs 用游離輻射與依波西林酮B單獨處理及組合處理後之集落 存活·能力。與增生分析法相似，SW480細胞比MEFs對依波 91935.doc -15- 1358295 西，酮B更敏感，並且組合治療再次顯示兩個細胞株（如各. 自所示，S W480和MEFS對依波西林嗣B之劑量範圍不 同）中具有至_^=^：^：;|^生效應。根據此等結果，組合治 療功土應該以腫瘤同種異體移植/異種移植模型進行I體 内锋J則。 根據依波西林酮B在（一些）紫杉醇_耐藥性腫瘤細胞株中. 也表現出抗增生效應之有趣檢測圖，我們比較了依波西林. 酮B與游離輻射組合及紫杉醇與游離輻射組合對此兩種細 胞株之效果。證明人SW480結腸癌細胞株對紫杉醇有耐藥 ' 性（劑量至高達500 nM，附錄4a)。 但在鼠類纖維肉瘤細胞株中，紫杉醇和依波西林單獨 使用及與游離輻射組合可降低增生活性至相當的程度（在， 低奈莫耳範圍，附錄4b)。 我們也比較經依波西林酮B/汉和紫杉醇/IR組合處理在 細胞集落存活能力分析中之效果。兩種細胞株都分別表現. 出對依波西林酮B/汛和紫杉醇/IR組合處理具有至少相加·· 放應，但紫杉醇·•抗性細胞株SW480僅在高濃度紫杉醇時有 效（附錄依波西林酮B_5)。 糸杉醇-抗性經常係由於醋蛋白在腫瘤細胞中過 度表現所致’其可逆轉藥劑維拉帕米（Verapam⑴抑 制°因此可用經維拉帕米預處理之SW480細胞，以不同處 里模式進行增生實驗。低劑量之維拉帕米（5山g/ml，經紫杉 醇處理前30分鐘加入）可使SW480細胞對單獨使用之低劑 量紫杉醇及紫杉醇與游離輻射組合處理模式再具有敏感 9l93S.doc 16 1358295 性，其顯示MDR_P·醣蛋白過度表現為該細胞株巾紫杉醇— 耐藥性效應的原因（附錄依波西林酮B 6)，維拉帕米本身在 該濃度下並不具有抗增生效果，其只是輕微影響對依波西 林酮B(未列出)之反應。我們目前係以免疫染色直接偵測 SW480細胞中MDR-P-醣蛋白含量。 總觀此等結果顯示依波西林酮B和紫杉醇兩者與游離輻 射組合使用時，至少具有相加之抗增生和殺滅集落細胞$ 應。依波西林酮B單獨使用和與游離輻射組合時，對紫杉醇 -耐藥性人結腸腺癌細胞株SW480仍保持其全部活性。因此 在治療紫杉醇耐藥性腫瘤（例如結腸直腸腫瘤）中，依波西林 酮可作為一種利用汛和微管抑制劑組合療法之冀望替代方 法。下步試驗則係有關於以同種異體移植/異種移植鼠類腫 瘤模型進行依波西林酮B/IR之活體内檢測。 91935.doc

Claims (1)

1358295 拾、申請專利範圍： 1. 一種與游離輻射併用 第093106690號專利f請案 中文申請專換靜野ίο月） 〆年丨。月7日扁充 以於需此治療個體中延緩增生性疾 病之進展或治療該疾病之醫藥組合物，其包含式I之依波 西林酮（epothilone)衍生物 R

在δ亥化合物中，A表示〇，R為曱基，而Z為0(依波西林酮 B(epGthil〇ne B))，其為游離型態或為醫藥可接受鹽類之 型態。 2·如申請專利範圍第丨項之醫藥組合物，其中該個體為患有 增生性疾病之溫血動物，該醫藥組合物係與游離輻射併 用，且以可聯合治療有效對抗增生性疾病之方式使用。 3. 如申請專利範圍第1或2項之醫藥組合物，其包含可與游 離輻射併用而聯合治療有效對抗增生性疾病量之式I之依 波西林酮衍生物，及至少一種醫藥可接受之載體。 4. 如申請專利範圍第丨或2項之醫藥組合物，其係用以延遲 需此治療個體之增生性疾病之進展。 5. 如申請專利範圍第_項之醫藥組合物，其係用以治療 增生性疾病。 6_ 一種如申請專利範圍第1項所定義之式I之依波西林酮衍 生物之用途，其係用以製備與游離輻射併用藉以延遲增 91935-1001017.doc 1358295 生性疾病之進展或治療該疾病之醫藥品。 7·如申請專利範圍第4項之醫藥組合物，其中該增生性疾病 為實體腫瘤。 8· 一種包裝’其包含其中A表示〇、R為甲基及Z為〇之式I 之依波西林酮衍生物（或其醫藥 游離輻射併用以延緩增生性疾 使用說明書。 可接受鹽類），及附有一與 病之進展或治療該疾病之

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