TWI356705B - Extracts from chlorella sorokiniana - Google Patents

Description

1356705 六、發明說明： 【發明所屬的技術領域】 本發明係關.於一種引藻（C/z/ore/M soroHm'awa)萃取 物，尤指一種適用於治療糖尿病、肥胖及血脂異常的引藻 萃取物。 【先前技術】 過氧化體增生劑活化受體（peroxisome proliferator-activated receptors, PPARs)屬於核受體家族，其 10 可控制許多細胞功能及代謝過程，其中如PPARa、PP AR3、 及ΡΡΑΓΙγ等三種哺乳動物的PPARs已被鑑定確認，（參考 Lee C.H. et al., 2003， 144: 2201-7)。關於活 化方面，PPARs會觸發一連串轉錄事件，導致脂質及葡萄 糖的代謝改變（例如參考Willson T.M. et al., J Med C/zew 15 2000，43, 527-50 ;及 Moraes L.A. et al•，尸/mrmaco/ TTzer. 2006, 110, 371-85)。 以PPARs在脂質及葡萄糖代謝上所扮演的角色來看， 如PPARs之於第二型糖尿病、肥胖、C型肝炎、血脂異常、 冠狀動脈心臟病、發炎性疾病及癌症等疾病的重要性，則 20 PPARs可為以上相關疾病具發展性的治療標的。舉例而 言，作為ΡΡΑΙΙγ促效劑的格列酮（glitazones)，則已經用於治 療第二型糖尿病。另外例如作為PPARa促效劑的纖維酸酯 (fibrates)，其可作為有效降低血液中三酸甘油含量的藥 3 物。不過，大部分PPAR類的治療劑，其功效有限且具有明 顯的副作用。 因此，仍需發展出可調控PPAR活性的藥物，以更為有 效地控制脂質及葡萄糖的代謝。 【發明内容】 本發明找出一種引藻（單細胞嗜溫性綠藻）萃取物，其 能夠有效的活化PPARct及PPARy。因此本發明一方面關於 一種萃取物，其包含肉豆蔻酸（myristic acid)、棕櫚酸 (palmitic acid)、標網烯酸（palmitoleic acid)、油酸（oleic acid)、亞麻油酸（linoleic acid)、次亞麻油酸（linolenic acid)、 及硬脂酸（stearic acid)，其中含量分別為萃取物乾重的0.1 % 至 5%、10%至 60%、2%至 15%、2%至 15%、2%至 15%、0.8% 至6%、及0.5%至5%。其中較佳而言，肉豆蔻酸、棕櫚酸、 棕禍烯酸、油酸、亞麻油酸、次亞麻油酸、及硬脂酸的含 量分別為萃取物乾重的0.5°/。至4%、15%至50%、3.5%至 12%、3.5%至 12%、3%至 12%、1.2%至 5%、及 0.8%至 4%。 然而，在萃取物中依上述次序的七種成分，其含量更佳分 別為萃取物乾重的〇.7°/。至1.7%、19.2%至43.6°/。、4.4%至 10.1%、4.4%至 10.0%、3.9%至 8.8%、1.8%至4.0%、及 1.1% 至 2.6%。 該萃取物可更包含十六碳二烯酸（hexadecadienoic acid)、十六碳稀酸（hexadecenoic acid)、及十八碳稀酸 (octadecenoic acid)，其含量分別為萃取物乾重的0.8%至 6%、1.2%至8%、及1.2%至8%。在一實施例中，十六碳二 烯酸、十六碳烯酸、及十八碳烯酸的含量分別為萃取物乾 重的1.2%至5%、2°/。至7°/。、及2%至7%。舉例而言，在萃取 物中的十六碳二烯酸、十六碳烯酸、及十八碳烯酸，其含 里也可分別為萃取物乾重的1.9%至4.3%、2.6%至6.0%、及 2.6%至 5.9%。 本發明另一方面關於一種治療糖尿病、肥胖或血脂異 常的方法，此方法包含投遞有效劑量的上述萃取物給所需 主體。 含上述萃取物及醫藥上可接受的載體的醫藥組成物、 使用這種組成物治療糖尿病、肥胖或血脂異常的用途及使 用此種組成物製出治療這些疾病的藥劑的用途，也涵蓋在 本發明範圍内。 以下列舉幾個本發明實施例的詳細内容，由申請專利 I巳圍及下述說明，本發明其他特徵、目標及優點將更臻明 確。 【實施方式】 本發明萃取物是利用醋酸乙酯萃取引藻 训α)的方式來進行製備，以此所得的萃取物可再以 溥層層析法（thin layer chromatography)、快速管柱層析法 (flash column chromatography) ' 高效液相層析法（high performance liquid chromatography)或任何其他合適的方法 進行純化。以下將提出一個實際實施例。 该萃取物能夠有效活化ΡΡΚΑα/γ，造成脂質及葡萄糖 代謝改變，所以可以用於治療糖展病、肥胖或血脂異常。 因此，本發明關於一種治療上述其中一疾病的方法，藉由 投遞有效劑量的萃取物給所需主體。「有效劑量」一詞是 才日犯夠對於該主體產生上述治療效果的萃取物劑量。如同 本領域通常技藝者所知，有效劑量可能會依投藥的途徑、 賦形劑的使用'以及與其它藥劑共同使用而改變。「治療」 一词是指以治癒（cure)、療傷（hea丨）' 減輕（aUeviate)、緩和 (relieve)、改變（alter)、補救（remedy)、改良她）、 改善（improve)、或影響（affect)目標疾病、目標疾病的症狀、 或朝目標疾病發展等為目的，投遞該萃取物給具有糖尿 病、肥胖或血脂異常、或具有傾向其中一疾病發展的主體。 為實現上述其中一方法，可藉由口服 '直腸、腸外、 噴霧吸入、或經由植入式貯藏器，將上述萃取物的單獨組 成物或该萃取物與醫藥上可接受載體的混合組成物投遞給 所需主體。於此所使用的「腸外」一詞，包含皮下 (subcutaneous)注射、皮内（intracutane〇us)注射、靜脈 (intravenous)注射、肌肉（intramuscuiar)注射、關節内 (intraarticular)注射、動脈（intraarteriai)注射、滑膜内 (intrasynovial)注射、胸骨内（intrasternai)注射、勒内 (intrathecal)注射、病灶内（jntraiesi〇nai)注射和顧内 (intracranial)注射或輸液技術（infusi〇n techniques)。 口服組成物為任何口服上可接受的藥劑形式，可包含 但不限於樂片、勝囊、乳劑及水懸浮液、分散液及溶液。 1356705 通常用於藥片的載體包含乳糖及玉米澱粉，一般藥片也會 添加如硬脂酸鎂的潤滑劑。若要以膠囊形式口服投藥，‘ 使用的稀釋劑包括乳糖及乾玉米殿粉。當水懸浮液或乳化 液以口服方式投藥，則有效成分會懸浮或溶解於結合乳化 .5劑或懸浮劑的油相中。如果需要的話，可添加—些甜味劑、 香料或著色劑。 可根據本領域已知技術，使用適合的分散劑或濕潤劑 # (例如Τ^η 8〇)及懸浮劑，配製無菌可注射式的組成物（如 水或油質懸浮液）。無菌可注射式的配製液，也可為腸外上 可接受的無毒稀釋劑或溶劑中的無菌可注射式溶液或懸浮 液，舉例如丨，3·丁二醇溶液。在可接受載體及溶劑間，能使 用者為甘露醇、水、林格氏液及等滲透的氣化鋼溶液。此 ^卜，習知上使用無菌固定油作為溶劑或懸浮基質（如合成的 單-或雙-甘油酯）。 15 可根據醫藥配製領域的已知技術，製備出吸入組成 勿，且可添加|甲醇或其他合適的防腐劑、加％生物可利 用二的吸收促進劑、氟碳化合物、及/或其他本領域已知的 私定劑或分散劑’以製備成鹽水溶液。 Θ部組成物可配置成油狀、霜狀、乳液狀、油膏狀及 請形式’而適用於此組成物的載體包括植物性或礦物性 一、白礦月曰（白色軟石蠟）、支鏈脂肪或油脂、動物性脂肪及 高分子量醇類(大於C12)，較佳的載體為有效成分可溶於其 1者。如果需要的話’也可包含乳化劑、安定劑、渴潤劑 〃、抗氧化劑，以及引入顏色或香味的藥劑。此外，這些局 1356705 p性的配方甲也可添加透皮加強劑，這類透皮加強劑的例 子則兄載於美國專利第3,989,816及4,444,762號。霜劑較佳 配製方式’係將礦物油、自乳化性料及水的混合物，與 溶於少量的油質（如杏仁油）中的有效成分進行摻合1類霜 劑舉例包含约40份水、約2〇份蜂蝶、約4〇份礦物油及約！份 杏仁油油月劑可將植物油（如杏仁油）中的有效成分與溫軟 石壞混合，而後冷卻混合物的方式配製。這類油膏劑舉例 可包含約3G重量百分比杏仁油及約7()重量百分比的白色軟 10 醫藥組成物的載體必須為「可接受的」，亦即可與配 方中的有效成分（較佳者為可穩定有效成分）相容，且對受户 療的主體無害。舉例而言，如環糊精(其可與萃取物中一： 多個活性化合物形成特定且更為穩定的錯合物)的穩定 15 劑，則可作為用來投遞活性化合物的醫藥賦形劑。1它載 體:例子包㈣狀二氧切、硬脂酸鎂、纖維素、月、 酸鈉、及D&G黃色#1〇。 20 口適的體外刀析可用於預先估量此發明萃取物對於 ::效率’參見以下所述之實施例，更可檢查萃取物 nr尿病、肥胖或血脂異常的效果。例如投遞萃取 H有疾病的動物（如小以驗模型h後取得其治療效 果，基於此結果，則可決定適當㈣量範圍及投藥途徑。 不需額外詳加解釋，相信上述的 > 本發明，因此以下具體實施仞椹& 已了適虽的貫把 貫靶例僅為說明用，並非用於限制 8 1356705 諸如此類的其餘揭露範圍。此所引載包含專利的所有公開 物，則完整併入以供參酌。 實施例1 :製備引藻萃取物 引澡（CA/oreZ/a 粗萃水溶液（W87-10)由中 5 華民國台灣彰化縣國際綠藻有限公司所提供。其製備方式 如下： 將引藻（Cryptomonadales)接種於含營養基質之培養瓶 中’持續在營養基質中通氣，同時以震盪器震盪培養瓶， 培養引藻約1.5個月。 10 以 ALFA-LAVEL 離心機收集引藻（Cryptomonadales algae) ’並以噴霧乾燥機乾燥形成粉末。將70 kg的水加入 30 kg的引藻粉末，i〇〇°c下煮沸30分鐘後，以離心移去未溶 解的殘渣並收集上清液，使用真空乾燥機自上清液移除約 95%的水分’過濾剩下的上清液，脫色後得到引藻粗萃溶液。 15 將1〇〇 mL的粗萃溶液加水稀釋，直至成為原始體積的 兩倍，並以EtOAc進行萃取（200 mLx4)，然後減壓濃縮有機 層，殘餘物裝填於矽膠管柱，以丙同-正己烷梯度（30%-100〇/〇) 流洗’收集CE1-CE8等8個分液，每一分液之乾重經測定後 分另1J 為：CE1 : 7.0 mg、CE2 : 17.9 mg、CE3 : 59.0 mg、CE4 : 20 60.9 mg > CE5 ： 68.4 mg > CE6 ： 115.7 mg ' CE7 ： 33.4 mg 及 CE8 : 17〇_2 mg。 再使用製備式的TLC純化分液CE3，利用33% EtOAc的 正己烷溶液展開，可獲得6個CE3-1-CE3-8等6個 9 次分液，每一分液之乾重經測定後分別為：CE3-1 : 5.3 mg、CE3-2 : 1.3 mg、CE3-3 : 25.6 mg、CE3-4 : 3.5 mg、 CE3-5 : 15.5 mg及CE3-6 : 5.6 mg。 於氮氣下將8·2 mg的CE3-3溶解在二氣甲烷（〇.6 mL)， 並與20%三氟化棚乙醚的曱醇溶液（4 mL)混合後，密封溶液 且於100 C下授伴5分鐘。待冷卻後’添加飽和氯化納水溶 液（10 mL)以中和溶液，然後以正己烷（2 mL)萃取。使用 MgS04乾燥有機層，並減壓濃縮有機層以得到黃色油狀曱 酯產物（CE3-3M)。使用氣相層析系統（Hewlett-Packard 6890 gas chromatography system)搭配質諸選擇偵測儀（HP5973 mass selective detector) ' 自動液態樣品取樣器（HP7673 automatic liquid sampler)及質譜管柱（Agilent DB-5MS column，30 cmx250 μηι，0.25 μηι膜厚）分析CE3-3M組成物， 載氣使用流速為1 mL/min的氦氣。把進口溫度維持在250 °C，將樣本（1 μ!〇以1:50的分流比注入。溫箱的起始溫度維 持在120t：持續3分鐘，接著設定以10°C/min的速度（持續1 分鐘）增加至180°C，然後以2°C/min的速度（持續5分鐘）增加 至210°C，全部運作時間為30分鐘。在70 eV游離能及230°C MS離子源溫度下，記錄50-500 amu範圍的質譜，並以化學 工作站軟體（HP C hem Station soft ware)收集及整合數據，透 過整合全部離子流光譜圖的訊號峰面積，並轉成百分比來 決定每一成份的含量，同時將該些成分的延遲時間與商業 標準品及國家技術標準局的MS搜尋引擎（National Institute 1356705 of Standards And Technology MS Search program)進行比 較，以鑑疋出各成分的身分。 由GC層析結果可觀察到10種脂肪酸，且由GC_MS搜尋 庫中可確疋其中7種。下表顯示全部脂肪酸的相對比例及延 5 遲時間. - 號碼 化合物名 延遲時間 (min.) 相對比例％ • 1 肉豆蔻酸 C14:0 11.9 1.7 10 [十四碳烷酸] 2 十六碳二烯酸C16:2 15.6 4.3 3 十六碳烯酸 C16:1 15.9 6.0 4 棕櫚烯酸 C16:l 15.9 10.1 [(Z)-9-十六碳烯酸] 15 5 棕櫚酸 C16:0 16.6 43.6 [十六破烷酸] 6 亞麻油酸 C18:2 21.5 8.8 • [(Z)，(Z)-9-12-十八碳 二烯酸] 7 次亞麻油酸 C18:3 21.7 4.0 20 [(Ζ),(Ζ),(Ζ)·9·，12-，15-[十八碳烯酸] 8 油酸 C18:1 21.8 10.0 [(Ζ)-9-十八碳烯酸] 9 十八碳烯酸 C18:1 22.0 5.9 10 硬脂酸 C18:〇 22.7 2.6 [十八碳烷酸] 25 1356705 實施例2:生物性分析 透過以下分析’研究CE3及CE3-3對於ppARoc/γ的活化 效果。 5 PPARy配體結合分析 在£· co/z·中以麵脱甘狀硫轉移酶（glutathione S-transferase，GST)融合蛋白的方式表現出hPPARy的配體 結合區域後，使用麵肤甘狀-壤脂糖膠體（Amersham Biosciences，NJ)透過親合純化法根據操作指南分離出重組

10 蛋白。製備出的GST-hPPARYLBD重組蛋白，最終使用濃度 約為5 nM ’而山羊抗-GST抗體（商品編號27-4577-01, Amersham Biosciences，NJ)則以 1:2000稀釋使用。將蛋白 A_ 石夕酸紀閃燥迫近分析微球（Protein A-yttrium silicate scintillation proximity assay beads)懸浮於含有 i〇 mM 15 Tris-Cl，pH 7.2、1 mM EDTA、10°/。（w/v)甘油、i〇 m]y[鉬酸 鈉、1 mM二硫蘇糖醇、0.5 mM笨曱基石黃醯氟 (phenylmethylsulfonyl fluoride) 、 2 pg/mL 苯甲脒 (benzamidine)、及 0.01%疊氮化納（sodium azide)的 50 mL分 析緩衝液中。 20 樣本萃取物溶於DMSO使其最終濃度為5 pg/mL，並使 用乙醇將放射標定的PPAR配體[3H]羅格列酮（rosiglitazone， 60 Ci/mmol, American Radiolabeled Chemicals，MO)稀釋 425倍，最終使用濃度為7.8 nM。 12 1356705 依序於96-孔微滴定盤（商品編號6005290，Packard Instrument，CT)加入 GST-PPARyLBD、山羊抗-GST 抗體、均 勻懸淖的蛋白A-矽酸釔閃爍迫近分析微球、樣本萃取物、 及經稀釋的[3H]羅格列酮溶液（每個20 pL)後，於4°C下輕微 5 震盪培養。待24小時後，使用微盤閃爍磷光計數器 (Topcount® Microplate Scintillation & Luminescence Counter，Packard Instrument Co.，Inc，USA)定出放射量。 結果顯示，CE3及CE3-3兩者皆具結合效力，其中顯示 對於結合於PPARYLBD的[3H]羅格列酮，CE3具有大於95%的 10 置換效果（見圖la)，而CE3-3具有大於99.8°/❹的置換效果（見 圖lb)。對於PPAR7LBD的IC5〇值，則使用8個3重複數據的劑 量反應曲線計算，而CE3及CE3-3的IC5〇值分別為2.7 pg/mL(圖 lc)及 1.6 pg/mL(圖 Id)。 PPARα碳末結合分析（PPARa Charcoal Binding Assay) 15 碳末結合分析的方法相似於Mahindroo, et al., J Med

Chem 2005, 48: 8194-208; Mahindroo N. et al., J Med Chem 2006, 49: 1212-6; Mahindroo N. et al., J Med Chem 2006, 49: 6421-6424; Lu, I. L. et al., J Med Chem 2006, 49: 2703-12 等 所描述的方法。 20 配製具有或不具有樣本萃取液的含TEGM缓衝液（10 mM Tris，pH 7.2、1 mM EDTA、10%甘油、7 pL/lOO mL的 β-毓乙醇、10 mM鉬酸鈉、1 mM二硫蘇糖醇、2 pg/mL笨甲脒、 及 0.5mM 苯甲基磺醯氟）及 2.5 nM [3H] L-783,483 (79 pCi/mmol，由台灣國家衛生研究院生物技術與藥物研究組 25 合成）的分析溶液，以最終體積為300 pL在24。(：下培養24小

13 1356705 時後，與200 eL的糊精/明膠層覆的碳末在冰上培養ι〇分 鐘，以移除未結合的配體。以3000 rpm於4。(：下離心10分鐘 後，在液體閃爍計數器（TRI-CARB 2100TR® liquid scintillation analyzer)中計算上清液的放射性。 5 取代[3H] L-783,483結合於ppARctLBD的 IC5〇值，則 6個 3 重複數據的劑量反應曲線計算，其中CE3及CE3-3的IC50值 分別為5.0 pg/mL(圖2a)及2.3 pg/mL(圖2b)。這些結果與在 細胞PPARoc TA分析中使用GAL4-PPARa嵌合報導系統所 得之EC5〇值’有相當好的關聯性，而CE3及CE3-3對於PPARa 10 的 EC5〇值分別為 6.0 pg/mL (圖 2c)及 2.0 pg/mL (圖 2d)。 PPAR轉錄活性分析 在37°C且5% C〇2的潮濕環境下，24孔細胞培養盤中具 有含有10%胎牛血清、1〇〇單位/mL青黴素G、100 mg/mL硫 酸鏈黴素、及0‘25 pg/mL雙性黴素B (amphotericin B)的高葡 15 萄糖含量 DMEM (Dulbecco’s modified Eagle's medium)，於 其中培養人類肝癌Huh7細胞株（5 χ 104個細胞/孔）。待24小時 後’根據操作指南使用轉染劑（Fugene 6® transfection reagent，Roche, Germany)進行轉染。具體而言，將0.5 mL 的轉染劑、0.05 pg 的 pGAL4-PPARyLBD質體、0.14 pg 的 20 pG5-TK-Luc報導子、及0.25 ng的pRL-SV40水母螢光素酶質 體（Renilla luciferase plasmid)的 轉染混合液，作為轉染的内 控制組，添加至培養盤的每個孔中，並於37°C且5°/。C02的 環境下，將Huh7細胞在轉染混合液中培養過夜。而後，在 14 1356705 含有不同濃度樣本萃取物DMSO溶液的新鮮高葡萄糖含量 DMEM中，培養細胞24小時，而對照組細胞則培養在DMSO。 待24小時後.收集細胞，遵照操作指南使用細胞溶解缓 衝液（Passive® Lysis Buffer，Promega，WI)製出細胞溶解 5 液，再使用雙螢光素酶分析組（Dual-Luciferase⑧Reporter Assay kit, P.romega，Madison，WI)評估，並以冷光儀 (SIRIUS-0 luminometer, Berthold detection systems, Pforzheim, Germany)計算勞光素酶的活性。簡單地說，將 50 pL 的螢光素酶分析劑（Luciferase Assay Reagent II， 10 LARII)加入含5 μί的細胞溶解產物的試瓶中，測量混合液 的螢火蟲螢光素酶活性，而後加入50 μΐ^的反應中止劑 (Stop & Glo® Reagent )，並測量混合液的水母螢光素 酶活性。分析中使用的DMSO,最高濃度為0.1%，其對於激 活作用的活性沒有影響。在全部的這些結果中，由PPAR配 15 體羅格列酮（2 μΜ)所活化者視為正反應對照組，激活作用 的結果以螢火蟲螢光素酶訊號/水母螢光素酶訊號的比例 表示。 CE3達到正反應對照組ΡΡΑΙΙγ最大活化的55.6% (圖 3a)，而CE3-3達到正反應對照組PPARy最大活化的63.4% 20 (圖 3b)。 .前月旨肪細胞分化分析（Preadipocyte Differentiation Assay) 在含有10%胎小牛血清、100單位/mL青黴素G、100 mg/mL硫酸鏈黴素、及150 nM胰島素的DMEM中，添加或 未添加測試分劃，於37°C且5%C02的潮濕環境下培養簇集 25 脂肪細胞3T3-L1細胞3天。培養基每兩天更換，持續保持細 IS] 15

胞在此狀態下，直到脂肪細胞出現為止（約9天）e*TroubaK J, et al.,. Toxicol Appl Pharmacol 2000, 168, 25-35所述，以 油紅-◦ (Oil Red-O, Sigma)染色分化成脂肪細胞的細胞。簡 單地講，在10%福馬林中至少固定丨小時，然後浸入油紅_〇 染色2小時’再以水徹底沖洗，於32ec下乾燥樣本。 CE3及CE3-3對於3T3-L1前脂肪細胞展現出中度成脂 分化的活性（參考圖4A至4F)。 其他實施例 本發明已經描述出一些實施例，不過應可瞭解到在不 彦離本發明精神及範疇的前提下，能夠進行各種修改。據 此，其他實施例也落入以下申請專利範圍的範疇中。 本發明中一個以上的實施例，其詳細内容於隨後圖示 及描述中，本發明其他特徵、目的及優點，自說明、圖示、 及申請專利範圍中將更臻明確。 上述實施例僅係為了方便說明而舉例而已，本發明所 主張的權利範圍自應以申請專利範圍所述為準，而非僅限 於上述貫施例。 【圖式簡單說明】 圖1顯示5 pg/mL引藻分劃對於ppar配體的結合活性 (SPA)’其中⑷為CE1至CE8的柱狀圖，（b)為CE3-1至CE3-6 的柱狀圖，而（c)及⑷分別為CE3及CE3-3對於pparylbd的 劑量反應曲線圖。 圖2顯示引藻分劃對於ppaRoc的活性，其中⑷及⑼分 1356705 一 別為碳末結合分析中所獲之對於PPARoc受體的劑量反應曲 線圖（IC5〇值），而（c)及（d)分別顯示使用GAL-PPARa嵌合螢 光素酶報導系統，進行轉錄活化（TA)分析所獲的曲線圖 (EC50值）。 5 圖3顯示引藻分劃的ΡΡΑΓΙγ TA分析，其中（a)顯示CE1 至 CE8於 0.8、4、20及 100pg/mL 的測試，而（b)顯示 CE3-1 • 至 CE3-6於 1.6、6.3、25及 lOOpg/mL的測試。

圖4顯示3 T3 -L1前脂肪細胞分化分析染色圖，其中（A) _ 為負控制組，（B)以 2 μΜ rosiglitazone處理 ’（C)以 100 pg/mL 10 的引藻粗萃液處理，（D)以100 pg/mL的EtOAc引藻粗萃液 處理，（E)以100 pg/mL的CE3處理，而（F)以100 pg/mL的 CE3-3處理。 【主要元件符號說明】 15 無 τ r· λ i 5 ί 17

Claims (1)

1356705 第97丨3<78〇8號，丨〇〇年9月修正頁 t中請料範圍： 丨r年1月崎(更)正本丨 u一種引藻萃取物，包括：肉豆蔻酸、棕櫚酸、棕櫚 烯酸、油酸、亞麻油酸、次亞麻油酸、及硬脂酸，其中， 該肉且缝酸、該棕櫚酸、該棕櫚烯酸、該油酸、該亞麻油 5 酸該次亞麻油酸、及該硬脂酸的含量分別為萃取物乾重 的0.1重量百分比至5重量百分比、10重量百分比至60重量百 刀比、2重量百分比至15重量百分比、2重量百分比至15重 | ’:百分比、2重量百分比至15重量百分比、〇 8重量百分比至 6重量百分比、及0.5重量百分比至5重量百分比。 10 2,如申請專利範圍第1項所述的萃取物，其中，該肉豆 謹酸、該棕櫚酸、該棕櫚烯酸、該油酸、該亞麻油酸、該 次亞麻油酸、及該硬脂酸的含量分別為萃取物乾重的〇.5重 量百分比至4重量百分比、15重量百分比至5〇重量百分比、 3·5重量百分比至重量百分比、3.5重量百分比至12重量百 15 分比、3重量百分比至12重量百分比、1.2重量百分比至5重 I 量百分比、及0.8重量百分比至4重量百分比。 3.如申請專利範圍第2項所述的萃取物，其中，該肉豆 每酸、該棕摘酸、該棕櫊烯酸、該油酸、該亞麻油酸、該 次亞麻油酸、及該硬脂酸的含量分別為萃取物乾重的〇 7重 20 量百分比至1.7重量百分比、19.2重量百分比至43.6重量百 分比、4.4重量百分比至10.1重量百分比、4.4重量百分比至 10.0重量百分比、3.9重量百分比至8.8重量百分比、1.8重量 百分比至4.0重量百分比、及1.1重量百分比至2.6重量百分 比0 18 1356705 4. 如申請專利範圍第1項所述的萃取物，更包括十六碳 二梯酸、十六碳稀酸、及十八碳稀酸，其中，該十六碳二 烯酸、該十六碳烯酸、及該十八碳烯酸的含量分別為萃取 物乾重的0.8重量百分比至6重量百分比、1.2重量百分比至 5 8重量百分比、及1.2重量百分比至8重量百分比。 5. 如申請專利範圍第4項所述的萃取物，其中，該十六 碳二烯酸、該十六碳烯酸、及該十八碳烯酸的含量分別為 萃取物乾重的1.2重量百分比至5重量百分比、2重量百分比 > 至7重量百分比、及2重量百分比至7重量百分比。 1〇 6.如申請專利範圍第4項所述的萃取物，其_，該十六 碳二烯酸、該十六碳烯酸、及該十八碳烯酸的含量分別為 萃取物乾重的1.9重量百分比至4.3重量百分比、2.6重量百 分比至6.0重量百分比、及2.6重量百分比至5.9重量百分比。 7. 如申請專利範圍第2項所述的萃取物，更包括十六碳 15 二稀酸、十六碳稀酸、及十八碳稀酸，其中，該十六碳二 稀酸、該十六碳稀酸、及該十八碳稀酸的含量分別為萃取 _ 物乾重的0.8重量百分比至6重量百分比、1.2重量百分比至 8重量百分比、及1.2重量百分比至8重量百分比❶ 8. 如申請專利範圍第7項所述的萃取物，其中，該十六 20 碳二稀酸、該十六碳烯酸、及該十八碳稀酸的含量分別為 萃取物乾重的1.2重量百分比至5重量百分比、2重量百分比 至7重量百分比、及2重量百分比至7重量百分比。 9. 如申請專利範圍第8項所述的萃取物，其中，該十六 碳二婦酸、該十六碳烯酸、及該十八碳烯酸的含量分別為 19 1356705 萃取物乾重的1.9重量百分比至4.3重量百分比、2.6重量百 分比至6.0重量百分比、及2.6重量百分比至5.9重量百分比。 10. 如申請專利範圍第3項所述的萃取物，更包括十六 碳二烯酸、十六碳烯酸、及十八碳烯酸，其中，該十六碳 .5 二烯酸、該十六碳烯酸、及該十八碳烯酸的含量分別為萃 取物乾重的0·8重量百分比至6重量百分比、1.2重量百分比 至8重量百分比、及1.2重量百分比至8重量百分比。 11. 如申請專利範圍第10項所述的萃取物，其中，該 w 十六碳二烯酸、該十六碳烯酸、及該十八碳烯酸的含量分 10 別為萃取物乾重的1.2重量百分比至5重量百分比、2重量百 分比至7重量百分比、及2重量百分比至7重量百分比。 12. 如申請專利範圍第11項所述的萃取物，其中，該 十六碳二烯酸、該十六碳烯酸、及該十八碳烯酸的含量分 別為萃取物乾重的1.9重量百分比至4.3重量百分比、2.6重 15 量百分比至6.0重查百分比、及2,6重量百分比至5.9重量百 分比。 • 13. 一種醫藥組成物，其包括申請專利範圍第1項所述 的萃取物及一醫藥上可接受的載體。 14.如申請專利範圍第13項所述的醫藥組成物，其 20 中，該肉豆蔻酸、該棕櫊酸、該棕櫚烯酸、該油酸、該亞 麻油酸、該次亞麻油酸、及該硬脂酸的含量分別為萃取物 乾重的0.5重量百分比至4重量百分比、15重量百分比呈50 重量百分比、3.5重量百分比至12重量百分比、3.5重量百分 20 1356705 比至12重量百分比、3重量百分比至12重量百分比、1.2重量 百分比至5重量百分比 '及0.8重量百分比至4重量百分比。 15. 如申請專利範圍第14項所述的醫藥組成物，其 中，該肉豆蔻酸、該棕櫊酸 '該棕櫚烯酸、該油酸、該亞 5 麻油酸、該次亞麻油酸.、及該硬脂酸的含量分別為萃取物 乾重的0.7重量百分比至1.7重量百分比、19.2重量百分比至 43.6重量百分比、4.4重量百分比至10.1重量百分比、4.4重 量百分比至10.0重量百分比、3.9重量百分比至8.8重量百分 > 比、1.8重量百分比至4.0重量百分比、及1.1重量百分比至 10 2.6重量百分比。 16. 如申請專利範圍第13項所述的醫藥組成物，其 中，該萃取物更包括十六碳二烯酸、十六碳烯酸、及十八 碳烯酸’其中，該十六碳二烯酸、該十六碳烯酸、及該十 八碳烯酸的含量分別為萃取物乾重的〇.8重量百分比至6重 15 量百分比、1.2重量百分比至8重量百分比、及1.2重量百分 比至8重量百分比。 _ 17.如申請專利範圍第16項所述的醫藥組成物，其 中’該十六碳二烯酸、該十六碳烯酸、及該十八碳烯酸的 含量分別為萃取物乾重的12重量百分比至5重量百分比、2 20 重量百分比至7重量百分比、及2重量百分比至7重量百分 比。 18. 一種使用如申請專利範圍第丨項所述之萃 取物製備治療糖尿病、肥胖或血脂異常的藥物之 用途° 21