TWI355491B - Method for ingredient analysis - Google Patents

Description

1355491 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明關於一種檢測方法及檢測裝置’特別關於一種 成分檢測方法及成分檢測裝置。 【先前技術】 藥品、化妝品或食品的品質控管與成分鑑定能力已是 長期以來相當重要的研究之一。舉例來說，一般鑑別方法 • 包括外觀描述、顯微鑑別與化學類別試驗，其中化學類別 • 試驗的方法則包括薄膜層析（thin layer chromatography, -TLC )、分光先度計、氣相層析（gas chromatography, GC )、 氣相層析質譜·（ mass spectrum，MS ).、液相層析（liquid chromatography, LC )及液相層析質譜（liquid chromatography-mass spectrum, LC-MS )等方法。 以習知經常使用的薄膜層析方法為例，其分析的流程 _ 如圖1所示。首先，在步驟soi中，準備一展開槽。接續， 在步驟S02中，取一矽膠薄膜層析板以展開溶媒，其中溶 媒可由丙酮、石油本清（petr〇leu贝叩池）、二曱苯 • (xylene)、甲基乙基闕（etllyimethyiket〇ne)的混合溶液 _ :構成。在步驟S03中，.配製適當濃度的樣品溶液及對照 樂品溶液，而配製樣品溶液與對照藥品溶液的方法則包括 =步驟：第一’取適量的固狀（或粉狀）樣品（或對照 樂），第—，利用一溶劑（例如丙酮）溶解固狀（或粉 狀）樣品（或對照藥品）以製成具有適當濃度的樣品溶液 1355491 (或對照藥品溶液）。 在步驟S04中，將步驟S03所配製完成的樣品溶液與 對照藥品溶液分別在薄膜層析板下端以間隔一定距離的 •位置點上定量的樣品溶液與對照藥品溶液，並風乾展開。 接續，在步驟S05中，將具有樣品溶液與對照藥品溶液且 已風乾展開後的薄膜層析板局部浸入溶媒，直到溶媒展開 於薄膜層析板至一定距離為止。最後，在步驟S06中，藉 由紫外燈源（波長254奈米）以檢視樣品溶液與對照藥品 ♦ 溶液在薄膜層析板上顯現斑點的移動比值（ratio of flow， 'Rf)，‘並比對樣品溶液與對照藥品溶液中的成分。 • 然而，由於薄膜層析法在解讀移動比值（Rf)時，人 為的判斷因素可能嚴重影響最後的檢測結果，同時整個流 程的步驟相當繁瑣且耗時、耗力，且也僅能侷限在特定樣 品的分析。另外’在樣品的定性分析上’則必須要有兩種 以上不同的條件才能夠完成，故分析結果的解析度與感度 均表現不佳。不過，相較於薄膜層析、分光光度計而言， 為了得到更清晰且明確的分析結果，則氣相層析、氣相層 析質譜、液相層析及液相層析質·譜等方法卻必須耗費相# . 長的分析時間以獲得具有良好分離效果的層析圖譜，惟， 當樣品中各種成分對應的極性範圍分佈相當地廣時，此些 成分滯留在分離管柱中的時間變得相當長，因而影響分離 管柱的效能，甚至會干擾分析的結果、降低分析結果的再 現性。 因此，如何提供一種成分檢測方法及成分檢測裝置， 1355491 能夠同時快速而精準地確認樣品中含有的所有成分，已成 為的課題之一。 【發明内容】 有鑑於上述課題，本發明之目的為提供一種成分檢測 方法及成分檢測裝置，藉由儲存複數筆標準成分資料的資 料庫配合南.效能液相層析方法的設置^將樣品經過檢測分 析後的檢測資料與資料庫的標準成分資料進行比對，而快 • 速精準地確認樣品中含有的所有成分的種類及/或其含量。 • 為達上述目的，依據本發明之一種成分檢測方法包括 • 以下步驟：首先，提供一資料庫，該資料庫儲存複數筆標 準成分資料；接著，藉由高效能液相層析方法分析一樣 品，以獲得複數筆檢測資料；最後，分別比對該等檢測資 料與其對應的該等標準成分資料，以同時確認樣品中含有 的所有成分。其中，確認成分能夠得知成分的種類及/或含 量。成分檢測方法更可在樣品中添加對應的標準成分並進 ® 行再次的檢測，藉以降低檢測時因雜質而產生的雜訊。 為達上述目的，依據本發明之一種成分檢測裝置用以 . 分析一樣品，成分檢測裝置包括一資料庫、一取樣模組以 及一比對模組，比對模組與取樣模組及資料庫連結。資料 庫儲存複數筆標準成分資料；取樣模組藉由高效能液相層 析方法分析樣品，以獲得複數筆檢測資料。比對模組分別 比對該等檢測資料與其對應的該等標準成分資料，以同時 確認樣品中含有的所有成分。其中’確認成分能夠得知成 8 1355491 分的種類及/或含量。成分檢測裝置更可進一步搭配紫外線 檢測裝置及/或質譜儀，提升檢測結果的準確性。 承上所述，因依據本發明之一種成分檢測方法及成分 檢測裝置，藉由資料庫配合高效能液相層析方法的設置， ' 使樣品在經過至少一次檢測後，將該等檢測資料與其對應 的該等標準成分資料進行比對，即能夠同時確認樣品中含 有的所有成分的種類及/或含量。此外，本發明更可藉由進 一步的檢測裝置例如高效能液相層析儀搭配紫外線檢測 • 裝置、或高效能液相層析儀搭配質譜儀，提升檢測結果的 * \ 準破性。再者，更可在樣品中添加對應的標準成分並進行 • 再次的檢測，藉以降低檢測時因雜質而產生的雜訊。 【實施方式】 以下將參照相關圖式，說明依據本發明較佳實施例之 一種成分檢測方法及成分檢測裝置，其中相同的元件將以 相同的元件符號加以說明。 本發明的成分檢測方法及成分檢測裝置可適用於分 析單一物品構成的樣品，或多種物品混合構成的樣品，並 . 可適用於中藥、西藥、化妝品或食品等的成分分析。本發 明例如可作為分析藥品、化妝品或食品是否含有毒物，中 藥是否含有西藥成分等的應用。 請參照圖2所示，本發明較佳實施例之一種成分檢測 方法包括步驟S11至步驟S14。首先，依據步驟S11以提 供一資料庫，此資料庫儲存複數筆標準成分資料。接著， 9 在步驟S12中，則藉由古· =的該等檢測資料與資料庫中的該二分別比對 同時確認樣.品中含有的所有成分。W成分資料’以 步驟S11中的標準成分 得。舉例來說，當藉由高效能液相析方法而獲 =獲得標準成分資料時，其分析二:準成 :括步物至步驟S113。第一，依據步驟：所 先取-定量的標準成分；接著，在步驟S11 可知， 的標準成分溶解於—溶劑以,# 隹 中，將定量 在步驟士 ―合J以形成—標準成分溶液；最後， 中，藉由咼效能液相層析方法分 溶液’以獲得該等標準成分資料。此外，在 ㈣Μ __ ’例如但不限於 醇，以稀釋標準成分至特定濃度。 、 另外，為了使經過高效能液相層析方法分 ⑽應出的所有成分皆能夠具有較高的㈣度，在:= m進行刀析％•，注入南效能液相層析儀的移動相… 咖se)可隨著時間而有不同的濃度變化，使得樣品中的每 :成分與移動相之間的極性差異更可#由移動相濃度的 變化而更彰顯。是以，與移動相之間具有相近極性的成分 對應的滯留時間，可利用移動相隨著時間的濃度變化而改 變，因此使具有相似滯留時間的成分可以藉此而在不同的 B守間。其中，移動相可為單一溶劑，亦可為多種溶劑的混 合’例如但不限於乙腈（acet〇nitrile)與麟酸；且更可在 10 1355491 大況下’猎由其他溶劑’例如但不限於氨水，以調 整移動相的酸鹼值（pH)。 前，效能液相層析方法以分析樣品之 1括牛^ 作成樣品溶液，而此—步驟如圖4所示， =1驟S121至步驟S123。第—，在步驟則中，先取 液，如+妒°σ，第:’將樣品溶解於溶劑以形成樣品溶 ^驟S122所示。最後，依據步 則 析方法分析樣品溶液，以獲得該等檢=: === 與之_的樣品溶液的品質，在進 取、稀釋而二 ，更可先對樣品溶液進.行萃 提升檢測結果的树性。當然，在^’進而 ffl AA ,, 在4成樣ασ >谷液時，所採 4例如但不限於樣品溶液中的溶劑。 相層a行圖2綱Μ3時，除了可直接以高效能液 效能液相以作為檢測資料.，更可將透過高 ==或質譜儀以進行所有成分的分析，並以紫外線 、p、丨㈣/ f ^儀所獲得的數據以作為檢測資料，提升檢 测結果的準確性。 银，例巾，無論撿測資料是以何種分析數據呈 护，資料與標準成分資料的圖譜相似度大於92% 二準Ui樣品中含有對應的標準成分。而當檢測資料與 不a刀貪料的圖譜相似度不大於92%時，則判定樣品中 〜的“準成分。需注意者’本實施例雖以92%為 11 1355491 判定標準，其僅為舉例說明，非用以限制本發明。 而在圖2的步驟S13之後，為了提高整體分析的準確 度，更可包.括步驟S14。依據檢測資料與資料庫中標準成 分資料的比對結果，選取出對應於檢測資料的標準成分， 並將一定量的標準成分加入至樣品中，再藉由適當的分析 方法以檢測摻雜標準成分的樣品，並得到對應的圖譜。同 於上述，此處採用的分析方法可為高效能液相層析方法， 且更可在高效能液相層析方法完成後搭配紫外線偵測裝 Φ 置或質譜儀以進一步確認樣品中所有的成分。 ' 當加入標準成分的樣品所獲得的檢測資料與對應的 - 標準成分資料的圖譜相似度大於95%，且未有任何新的波 形出現時，則可判定樣品中確實含有對應的此些標準成 分。而當加入標準成分的樣品所獲得的檢測資料與標準成 分資料的圖譜相似度不大於95%，或是有新的波形出現 時，無論為上述哪一種情形發生，均表示樣品中不完全含 有對應的標準成分。 而上述用以溶解、稀釋標準成分或樣品用的溶劑例如 但不限於曱醇；移動相則例如但不限於乙腈與磷酸的混合 . 溶液，且更可利用氨水以將乙腈與磷酸的混合溶液的pH 值調整至pH3左右。且在進行萃取的步驟時，可藉由振盪 或離心專方法以獲得純度較向的樣品溶液。 上述成分檢測方法可應用於成分檢測裝置，本發明較 佳實施例之一種成分檢測裝置包括一資料庫12、一取樣模 組16以及一比對模組14。資料庫12儲存複數筆標準成分 12 1355491 資料，取樣模組16可藉由高效能液相層析方法分析樣品， 以獲得複數筆檢測資料。比對模組14與取樣模組16及資 料庫12連結，當取樣模組16藉由高效能液相層析方法分 析樣品而獲得複數筆檢測資料後，取樣模組16將該等檢 ’則資料分別與資料庫12内對應的該等標準成分資料進行 比對，藉由上述的成分檢測方法，以同時確認樣品中含有 的所有成分的種類及/或其含量。

成分檢測裝置更可包括一紫外線檢測裝置17及一質 譜儀18，紫外線檢測裝置17及質譜儀18與取樣模組16 連結。.藉由高效能液相層析儀搭配紫外線檢測裝置、或高 效能液相層析儀搭配質譜儀，進—步分析樣品，而能夠提 升檢測結果的準確性。 铄上所返 囚依據本發明之 m / j〜裡成分檢測方法及成分 檢測裝置’一藉由資料庫配合高效能液相層析方法的設置， 使樣品在經過至少—錢測後，將該等檢測資料與其對應 行比對，即能夠同時破認樣品中含 有的所有成㈣種類及/或含量。此外，本發明更可藉由進 ΐ Γ ^ ^^^ ^^ =性儀搭配質譜儀，提升檢測結果的 一 在樣品中添加對應的標準成分並進行 再次檢測時因雜質而產生的雜訊。 以上所达僅為舉你丨祕 本發明之精神與範嘴，而對:„者。任何未脱離 應包含於後叫物_=狀纽修改或變更’均 13

1355491 【圖式簡單說明】 圖1為習知薄膜層析方法的流程圖； 圖2為本發明較佳實施例之一種成分檢測方法的流程 圖； 圖3為本發明藉由高效能液相層析方法分析標準成分 的流程圖； .圖4為本發明錯由南效能液相層析方法分析樣品的流 程圖；以及 圖5為本發明較佳實施例之一種成分檢測裝置的方塊 圖。 【主要元件符號說明】 12 :資料庫 14 :比對模組 16 :取樣模組 17:紫外線檢測裝置 18 :質譜儀 S11〜S14 :成分檢測方法的流程步驟

Sill〜S113 :以高效能液相層析方法分析標準成分的流程 步驟 . S121〜S123 :以高效能液相層析方法分析樣品的流程步魏 14

Claims (1)

1. 、申請專利範圍： ⑽ :種成分檢測方法，包括以下步驟： ^一#料庫’㈣料庫儲存複數筆標準成分資料； 猎相層析方法分析—樣品，以獲得複數筆 檢測資料；以及 分別比對該等檢測資料與其對應的料標準成分資 料，以同時確認該樣品中含有的所有成分；

   其^確認該樣品中含有的所有成分之後，該成分檢測 方法更包括以下步驟： 加入該樣品中含有的成分所對應的至少一該等標準 成分至該樣品；以及 再藉由高效能液相層析方法分析加入該標準成分的 該樣品。

   2、 如申請專利範圍第i項所述之成分檢測方法，其中確 涊成分的步驟得知成分的種類及/或其含量。 3、 如申請專利範圍第！項所述之成分檢測方法，其中該 等標準成分資料藉㈣效能液相層析方法所分析师。 4、 如申請專利範圍帛！項所述之成分檢測方法，其又中該 樣品預先形成-樣品溶液，再藉由高效能液相層析方 法進行分析。 、如申請專利範圍第4項所述之成分檢測方法，其中形 成該樣品溶液包括以下步驟： 取定量的該樣品； 溶解該樣品於一溶劑以形成該樣品溶液；以及 15 1355491 藉由高效能液相層析方法分析該樣 等檢測資料。 、：申請專利侧5項所述之成分檢測方法，其中形 成該樣品溶液之後更包括一步驟： 卒取該樣品溶液。 '如申請專利範圍第6項所述之成分檢測方法，其中萃 取該樣品溶液之後更包括一步驟：

   100年6月丨6日主動修正_替@頁 品溶液，以獲得該 稀釋已萃取的該樣品溶液。 、如申請專利範圍第1項所述之成分檢測方法，其中應 用於高效能液相層析方法中的一流動相為乙猜與碟酸 的混合溶液。 '如申請專㈣圍第8項所述之成分檢财法，其中應 用於高效能液相層析方法中該流動相的濃度隨時間變 化° 10、如申請專·圍第丨項所述之成分檢測方法，其中藉 由高效能液相層析方法分析該樣品以獲得該等檢測資 料之後更包括一步驟： 胃 藉由一紫外線偵測裝置分析該樣品。 U、如申請專利範圍第1項所述之成分檢測方法，其中藉 由高效能液相層才斤方法分析該樣品以獲得該等檢^ 資料之後更包括一步驟： 藉由質譜方法分析該樣品。 12、如申請專利範圍第1項所述之成分檢測方法，其中比 對該檢測資料與其對應的該標準成分資料，以確認該 16 1355491 100年6月16日主動修jE-替換頁 =品是否含有該標準成分的判定依據為： 當該檢測資料與該標準成分資料的圖譜相似度大於 ，92 /〇,則判定該樣品中含有該標準成分；以及 田名核測貝料與該標準成分資料的圖譜相似度不大 於92%，貝,!判定該樣品中不含有該標準成分。 3、如申請專利範圍第丨項所述之成分檢财法，其中比 對加入該標準成分的該樣品所獲得的檢測資料與其 φ 肖應的該標準成分資料’以確認該樣品是否含有該標 準成分的判定依據為： 當力:入該標準成分的該樣品所獲得的檢測資料與該 . 標準成分資料的圖譜相似度大於95¾，且未有新的 * /皮形出現’關定該樣品中含有該標準成分；以及 當：入該標準成分的該樣品所獲得的檢測資料與該 標準成分資料的圖譜相似度不大於95%，或有新^ 波形出現，則判定該樣品中不含有該標準成分。 17