TWI230161B - N-pyrazole A2A receptor agonists - Google Patents

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經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1230161 A7 ___ Β7__ 五、發明說明（1 ) 發明之背景 發明之領域 本發明包括N-吡唑取代之2-腺苷化合物，其可用作a2a 爻體激動劑。本發明化合物爲血管擴張劑，可用作心臟顯 像助劑，協助用於鑑定哺乳類，特別是人類，罹患冠狀動 脈疾病，如冠狀動脈灌流不良，其爲冠狀動脈疾病（CAD) 之指標。本發明化合物亦可用作冠狀動脈疾病及任何其他 涉及A2A受體之疾病之治療劑。 ， 技藝之説明 藥理學應力（stress)通常係由腺甞或潘生丁（dipyridani〇le) 引發於懷疑具有CAD之病人，在以τ丨閃爍圖或回聲心電圓 顯像之前。二種藥物係由活化細胞表面a2受體而擴張冠狀 抗性血管。雖然藥理學應力最初加入不能運動之病人以引 發冠狀動脈擴張，但是幾個研究已顯示接受腺甞或潘生丁 引發藥理學應力之病人之2〇ΐΤ1或回聲心電圖顯像之預後値 等於接受傳統運動應力之試驗之病人。然而，在藥理學應 力以這這些藥物顯像期間，藥物有關之不利副作用如頭痛 及噁心發生率高，其可以新治療劑改良。 腺苷八⑶及A 3受體涉及肥胖細胞去顆粒，因此氣喘患者 不給予非異性腺甞激動劑以引發藥理學應力試驗。此外， 腺苷刺激心房A - V結中Ai受體可縮小s - Η間隔，其可引發 AV 阻斷（Ν· C· Gupto et al·; J· Am· Coll. Cardiol; (1992) 19: 248-257)。以腺甞刺激腺荅A i受體亦可引發噁心，因爲Ai 受體發現於腸道（J· Nicholls et al·; Eur· J· Pharm· (1997) 338 -4 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ---------------------訂---------線·▲ (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) 1230161 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 五、發明說明（2 ) (2)143-150)。 ， ”動物數據建議冠抗性血管上特異腺Μα亞型受體涉及 =狀動脈？於腺甞之擴張反應，而A2b亞型受體之刺激使 得未稍血管鬆弛（註：後者降低系統血壓）。因此，需要 :2A受體激動劑之醫藥組合物，在活體内刺激〜受體並無 藥理學作用。此外，需要具有短半衰期，並可爲進行藥理 學冠狀動脈應力評估之病人所耐受之a2A受體激動劑。 發明之摘要 在方面本發明包括2 -腺嘗N - p比峻化合物，其爲有 用之A2a受體激動劑。 在另一方面，本發明包括醫藥化合物，包含2_腺钻N· 吡唑化合物，具有極少副作用，可被充分耐受。 本發明之另一方面爲Ν_吡唑化合物，其可輕易與放射活 性顯像劑連合使用以促進冠狀動脈顯像。 在-具體實施例中，本發明包括具有下式之2_腺芬^ ρ比峻化合物 -

在另一具體實施例中，本發明包括使用本發明化合物以 刺激哺乳類’特別是人類，冠狀血管擴張之方法，用於應 -5- 本紙張尺度適时關家標準（UNS)A4規格（210 X 297公釐 I n ϋ ϋ ϋ ϋ n ϋ ^1 ϋ ^1 1 I I ϋ I I I I ϋ I ^1 ϋ ϋ ^1 ϋ I ϋ ϋ I ^1 ^1 ϋ ϋ ϋ . (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1230161 A7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 B7 五、發明說明（3 ) 激（stressing)引發偷竊（steal)情況，以使心臟顯像。 在另一具體實施例中，本發明爲一種醫藥組合物，包含 一或多種本發明化合物及一或多種醫藥賦形劑。 圖式之説明 圖1A爲本發明化合物1 6所引發之冠狀血管傳導率增加 之類比記錄，在注入CPX及ZM241385之前及之後。 圖1B爲圖1A所示數據之摘要，顯示Cpx不滅弱，但是 ZM241385會減弱，本發明化合物ι6所引發之冠狀血管傳 導率之增加。在圖1 B中，方條表6個鼠分離之灌流心臟單 一測量之平均土 SEM。 圖2爲化合物1 6在鼠分離之灌流心臟中所引發之a ι腺替 受體（AdoR)涉及之負變（dromotropic)(AV傳導時間）及a2a AdoR所涉及之血管擴張（增加冠狀血管傳導率）作用之濃 度反應曲線。符號及誤差方塊顯示四個心臟單一测定之平 均土 SEM。ECw値（效力）爲化合物1 6引發50%最大反應之 濃度。 圖3爲化合物1 6在天竺鼠分離之灌流心臟中所引發之Αι 腺嘗受體（AdoR)涉及之負變導（dromotropic)(AV傳導時間） 及八2 AdoB所涉及之血管擁張（增加冠狀血管傳導率作用之 濃度反應曲線。符號及誤差方塊顯示四個心臟單一測定之 平均土SEM。ECm値（效力）爲化合物16引發50%最大反應 之濃度。 圖4爲CVT510 ( —種A 1腺苷受體激動劑）及本發明化合物 16 ( —種Asa腺苷受體激動劑）在鼠分離之灌流心臟中對於 -6- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ------------% _ n ϋ n I n n MM w MM n ϋ ϋ I ϋ ϋ I I ϋ ϋ n · (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1230161 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（4 ) 房室（AV)傳導時間影響之圖杀。 具體實施例之説明 本發明包括一種具有下式之2 -腺苷N -吡唑：

其中 RLCHWH，-CONR5R6 ; R3獨立選自 CN15虎基，鹵，N02，CF3，CN，OR20，SR20， N(R2Q)2，S(0)R22，so2r22，so2n(r2G)2，so2nr2°cor22， SO2NR20CO2R22，SO2NR20CON(R20)2，N(R20)2NR20COR22， NR20CO2R22，NR20CON(R20)2，NR20C(NR20)NHR23，COR20， co2r20，CON(R20)2，CONR20SO2R22，NR20SO2R22，SO2NR20CO2R22， OCONR20SO2R22，oc(o)r20，c(o)och2oc(o)r20，OCON(R20)2， -CONR7R8，C2_15晞基，C2_15炔基，雜環基，芳基，及雜芳 基，其中烷基，烯基，块基，芳基，雜環基，及雜芳基取 代基選擇性經1至3個獨立選自下列之取代基取代：鹵， 烷基，N02，雜環基，芳基，雜芳基，CF3，CN，OR20， SR20，N(R2())2，S(0)R22，S02R22，S02N(R2°)2， SO2NR20COR22，SO2NR20CO2R22，SO2NR20CON(R20)2 , N(R20)2NR20COR22 ， NR20CO2R22 ， NR20CON(R20)2 , NR20C(NR20)NHR23 ^ COR20 ^ co2r20 ^ CON(R20)2 » CONR20SO2R22 ^ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） --------------------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1230161 A7 B7 五、發明說明（5 ) NR20SO2R22，SO2NR20CO2R22，OCONR20SO2R22，oc(o)r20， c(o)och2oc(o)r20，及OCON(R20)2，其中選擇性取代之雜 芳基，芳基，及雜環基取代基選擇性經下列基取代：鹵， N02，烷基，CF3,胺基，一或二烷基胺基，烷基或芳基或 雜芳基醯基，NCOR22，NR2GS02R22，COR2。，C02R2〇， CON(R20)2，NR20CON(R20)2，oc(o)r20，〇c(o)n(r20)2， SR20，S(0)R22，S02R22，SO2N(R20)2，CN，或OR20 ; R5及R6各獨立選自H，及(^_15烷基，選擇性經1至2個獨 立選自下列之取代基取代：鹵，N02，雜環基，芳基，雜 芳基，CF3，CN，OR2。，SR20，N(R20)2，S(0)R22， S02R22，SO2N(R20)2，SO2NR20COR22，SO2NR20CO2R22， SO2NR20CON(R20)2，N(R20)2NR20COR22，NR20CO2R22， nr20con(r20)2，nr20c(nr20)nhr23，COR20，co2r20， CON(R20)2，CONR20SO2R22，NR20SO2R22，SO2NR20CO2R22， OCONR20SO2R22，oc(o)r20，c(o)och2oc(o)r20，及 OCON(R2G)2，其中選擇性取代之雜芳基，芳基，及雜環基 取代基選擇性經下列基取代：鹵，N02，烷基，CF3，胺 基，一烷基胺基，二烷基胺基，烷基醯胺，芳基醯胺，雜 芳基醯基，NCOR22，NR2°S02R22，COR20，C02R2〇， CON(R20)2，nr20con(r20)2，oc(o)r20，OC(O)N(R20)2 , SR20 , S(0)R22，S02R22 , SO2N(R20)2，CN，或OR20 ; R7係選自氫，CV15烷基，C2_15烯基，C2_15炔基，雜環 基，芳基，及雜芳基，其中烷基，晞基，炔基，芳基，雜 環基，及雜芳基取代基選擇性經1至3個獨立選自下列之 -8- ^^張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -ϋ «^1 ·Β1 ϋ -ϋ ϋ n ϋ ϋ ·ϋ ^1 ϋ II ^1 ϋ I ϋ I ϋ ϋ ^1 ^1 ϋ n ϋ n ϋ I ^1 ·ϋ ϋ ϋ I (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) A7 1230161 __B7___ 五、發明說明（6 ) 取代基取代：鹵，N02，雜環基，芳基，雜芳基，CF3， CN，OR20，SR20，N(R20)2，S(0)R22，S02R22，SO2N(R20)2， SO2NR20COR22，SO2NR20CO2R22，SO2NR20CON(R20)2， N(R20)2NR20COR22 ，NR20CO2R22 ，NR20CON(R20)2 ， NR20C(NR20)NHR23，COR20，co2r20，CON(R20)2，CONR20SO2R22， NR20SO2R22，SO2NR20CO2R22，OCONR20SO2R22，oc(o)r20， C(0)0CH20C(0)R2()，及OCON(R20)2，其中各選擇性取代之 雜芳基，芳基，及雜環基取代基選擇性經下列基取代： 鹵，N02，烷基，CF3，胺基，一或二烷基胺基，烷基或芳 基或雜芳基醯胺，NCOR22，NR20SO2R22，COR20，C02R20， CON(R20)2，NR20CON(R20)2，oc(o)r20，OC(O)N(R20)2， SR20，S(0)R22，S02R22，SO2N(R20)2，CN，及OR20 ;

R8係選自氫，CN15烷基，C2_15晞基，C 2-15 炔基，雜環基， 芳基，及雜芳基，其中烷基，晞基，炔基，芳基，雜環基，及 雜芳基取代基選擇性經1至3個獨立選自下列之取代基取 代：鹵，N02，雜環基，芳基，雜芳基，CF3，CN，OR20，SR20， N(R2°)2，S(0)R22，so2r22，so2n(r20)2，S02NR2°C0R22， SO2NR20CO2R22，SO2NR20CON(R20)2，N(R20)2NR20COR22 , NR20CO2R22，NR20CON(R20)2，NR20C(NR20)NHR23，COR20， C02R2〇，CON(R20)2，CONR20SO2R22 , NR20SO2R22， so2nr2()co2r22，oconr2°so2r22，oc(o)r2。，c(o)och2oc(o)r20， 及OCON(R20)2，其中選擇性取代之雜芳基，芳基，及雜環 基取代基選擇性經下列基取代：鹵，no2，烷基，cf3，胺 基，一或二烷基胺基，烷基或芳基或雜芳基醯胺， -9- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -------------%------- 丨訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1230161 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 ---------B7___ 五、發明說明（7 ) NCOR22，NR2 0S〇R22，c〇r2。，c〇2R2。，c〇N(R20)2， NR20c〇N(R2())2，0C(0)R2。，〇c(〇)n(R20)2，SR20，S(0)R22， S〇2R22，s〇2N(R20)2，CN，及〇R2〇 ; R20係選自H，CN15烷基，c2 15晞基，C215炔基，雜環 基，芳基，及雜芳基，其中烷基，烯基，炔基，雜環基， 芳基’及雜芳基取代基選擇性經1至3個獨立選自下列之 取代基取代··卣，烷基，一或二烷基胺基，烷基或芳基或 雜芳醯胺，CN，O-Cu烷基，CF3，芳基，及雜芳基； R22係選自Cm5烷基，c2_15烯基，c2_15炔基，雜環基，芳 基’及雜芳基，其中烷基，晞基，炔基，雜環基，芳基， 及雜芳基取代基選擇性經1至3個獨立選自下列之取代基 取代··卣，烷基，一或二烷基胺基，烷基或芳基或雜芳醯 胺，CN，O-C^y充基，CF3，芳基，及雜芳基；及 其中R2及R4係選自Η，烷基，及芳基，其中烷基及芳 基取代基選擇性經鹵，CN，CF3，OR20，及N(R20)2取代， 但是當R2不爲氫時，則R4爲氫，及當R4不爲氫時，則R2爲 氫。 在本發明之較佳化合物中，R3係選自Ci i5烷基，鹵， CF3，CN，OR20，SR20，S(0)R22，S02R22，S02N(R22)2， COR20，C02R20，-CONR7R8，芳基，及雜芳基，其中烷 基’芳基，及雜芳基取代基選擇性經1至3個獨立選自下 列之取代基取代：鹵，芳基，雜芳基，CF3，CN，OR20， SR20，S(0)R22，S02R22，SO2N(R20)2，COR20，C02R20，或 CON(R2())2，各選擇性雜芳基及芳基取代基選擇性經鹵，烷 -10- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -I--------I----丨！！訂---------線 (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) 1230161 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（8 ) 基，CF3，CN，及OR20取代；R5及R6獨立選自η，；5r ^ •^^1-15 大元 基，包括一個選擇性芳基取代基，各選擇性芳基取代基選 擇性經卣或CF3取代；R7係選自C^5烷基，（：2_15块基，芳 基，及雜芳基，其中烷基，块基，芳基，及雜芳基取代基 選擇性經1至3個獨立選自下列之取代基取代：_，芳 基，雜芳基，CF3，CN，0R2G，各選擇性雜芳基及芳基取 代基選擇性經鹵，燒基，CF3，CN，或OR20取代；r8係選 自氫及CV15烷基；R20係選自Η，CV4烷基，及芳基，其中 烷基及芳基取代基選擇性經一個烷基取代基取代；R22係 選自<^_4烷基及芳基，各選擇性經1至3個烷基取代。 在更佳化合物中，R1爲CH2OH;R3係選自C02R20, _CONR7R8，及芳基，其中芳基取代基選擇性經1至2個獨 立選自下列之取代基取代；鹵，CV6烷基，CF3，及OR2〇 ; R7係選自氫，cN8烷基，及芳基，其中烷基及芳基取代基 選擇性經一個選自下列之取代基取代：i，芳基，cf3， CN，〇R2G，各選擇性芳基取代基選擇性經鹵，烷基， CF3，CN，及OR2G取代；R8係選自氳及CV8烷基；R2。係選自 Η及CV4烷基。 在另一更佳化合物中，R1 = CH2OH ; R3係選自C02R20， -CONR7R8，及芳基，選擇性經一個選自下列之取代基取 代：鹵，CV3烷基，及OR20 ; R7係選自氫及Cw烷基；R8爲 氫；R2G係選自Η及Cm烷基。在此較佳具體實施例中，R3 最佳選自-C02Et及-CONHEt。 -11 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） --------------------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) A7 B7 1230161 五、發明說明（9 ) -------------% (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 在另一更佳化合物中，Ri = _C〇NHEt ; R3係選自C〇2R2〇， -CONR7R8，及芳基，其中芳基選擇性經i至2個獨立選自 下列之取代基取代：齒，Cl_3烷基，Cf3，或〇r2G;r7係選 自氫，及Cw烷基，其選擇性經一個選自下列之取代基取 代：ΐ，CF3，CN，或〇R2〇 ; r8係選自氫及Gy烷基；及r2〇 係選自Η及Cm烷基。在此更佳具體實施例中，r8較佳爲 氫；R7較佳選自氫及Cw烷基；及汉2〇較佳選自Η及Ch烷 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 在一最佳具體實施例中，本發明化合物係選自ΐβ{9_ [(48,213尺，5幻-3,4-二羥基_5-(羥基甲基）氧環戊烷（(^〇1紐)-2-基]-6-胺基嗓吟-2-基} ρ比峡-4-幾酸乙酉旨，（4s，2R，3R，5R)· 2-{6-胺基-2-[4-(4-氣苯基）吡唑基]嘌呤-9_基}_5_(羥基甲基） 氧環戊烷-3,4-二醇，（43,2匕3尺，5&)-2-{6-胺基-2_[4-(4_甲氧 基苯基）吡唑基]嘌呤-9-基卜5_(羥基甲基）氧環戊烷_3，心二 醇，（48,2尺，3尺，5&)-2-{6-胺基-2-[4-(4-甲基苯基）峨吐基]嘌 呤-9-基}-5-(羥基甲基）氧環戊烷_3,4_二醇，（1_{9_ [(4S，2R，3R，5R)-3,4-二羥基-5-(羥基甲基）氧環戊烷·2_基卜6_ 胺基嗓吟-2-基}吡唑_4_基）善甲基羧醯胺，丨-{9_ [(43,2尺，311，511)-3,4-二羥基-5-(羥基甲基）氧環戊烷_2_基]_6_ 胺基嘌呤-2-基}吡唑_4_羧酸，l-{9-[(4S，2R，3R，5R)-3,4^ 羥基-5-(羥基甲基）氧環戊烷基胺基嘌呤-2_基}吡唑_ 4- 基）-N，N-二甲基羧醯胺， 5- (經基甲基）氧環戊境-2-基]-6-胺基嘌呤-2-基}吹峡_4_ 基）-N_乙基羧醯胺，1-{9-[(43,2尺，3化，51〇_3,4-二羥基-5-(羥 -12- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1230161 A7 ----------—_ 五、發明說明（1〇 ) :甲基）氧％戊烷_2_基]_6_胺基嘌呤冬基}吡唑_4_羧醯 胺1 {9 [(4S，2R，3R，5R)-3,4-二羥基_5-(羥基甲基）氧環戊 烷2-基]-6-胺基嘌呤_2_基}吡唑基）_ν·(環戊基甲基）叛 醯胺，（1-{9-[(48,2化，311，5汉)-3,4_二獲基_5-(藉基甲基）氧環 戊烷2-基]-6-胺基嘌呤_2_基卜比唑_4_基）_ν_[(4_氣苯基）甲 土]，，胺 2-[(1-{9-[(43,211，311，511)-3,4-二經基-5-(經基甲 基）氧環戊燒-2-基]_6_胺基嗓呤_2_基}吡嗓-心基）羰基胺基] 醋酸乙酯，及其混合物。 下列定義用於本文中所用之術語。 ”函”或”商素”，單獨或組合，意爲所有齒素，即氣 (C1)，氟（F)，溴（Br)，碘⑴。 ”羥基”表-OH基。 ’’硫醇基”或，，巯基”表-SH基。 ，，烷基，，，單獨或組合，意爲烷衍生之基，含有1至2〇 個，較佳1至1 5個，碳原子（除非特別定義）ό其爲直鏈烷 基，刀支鏈烷基或環烷基。直鏈或分支鏈烷基較佳含有b 15個，更佳丨至8個，甚至更佳1-6個，而更佳μ個，最 ，1-2個碳原子，如甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基， 第一丁基等。術*吾低垸基’’在本文中用於表上述直鏈燒 基。環烷基較佳爲單環，雙環，或三環系統，每環3_8 個，更佳3 - 6個，環成員，如環丙基，環戊基，環己基， 金剛烷基，等。烷基亦包括直鏈或分支鏈烷基，含有一個 J衣烷基邵份或爲該部份中斷。直鏈或分支鏈烷基接於任何 可能點，產生一種安定化合物。其實例包括，但不限於， -13- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） -------------% (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 *· 一：口Y ^1 ϋ ϋ I I I 1 ϋ ϋ i^i i^i ϋ am— ·ϋ ϋ 1 I 11 I 1» 1^1 A7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1230161 _____B7_ 五、發明說明（11 ) 4-(異丙基）-環己基乙基或2 -甲基-環丙基戊基。經取代之 紀基爲上述定義之直鏈燒基，分支鏈燒基，或環燒基，獨 立經1至3個下列基或取代基取代：自，羥基，烷氧基， 烷硫基，烷基亞續醯基，烷基磺醯基，醯基氧基，芳基氧 基，雜芳基氧基，胺基選擇性經烷基，芳基，或雜芳基一 或二取代，脒基，脲選擇性經烷基，芳基，雜芳基，或雜 環基取代，胺基橫醯基選擇性經燒基，芳基，或雜芳基 N- —或N，N-二取代，烷基磺醯基胺基，芳基磺醯基胺 基，雜芳基磺醯基胺基，烷基羰基胺基，芳基羰基胺基， 雜芳基羰基胺基，等。 π埽基"’單獨或組合，意爲直鏈，分支鏈，或環狀烴， 含有2 - 2 0個，較佳2-17個，更佳2-10個，甚至更佳2 - 8 個，取佳2 - 4個，碳原子，及至少一個，較佳1 · 3個，更 佳1 - 2個，最佳一個，碳-碳雙鍵。在環烷基之情況，多 於一個碳-碳雙鍵之共軛不提供該環芳族性。碳-碳雙鍵可 含於一個環烷基内，但環丙基除外，或在一個直鏈或分支 部份内。晞基之實例包括乙晞基，丙晞基，異丙烯基，丁 晞基，環己晞基，環己烯基烷基，等。經取代之晞基爲上 述足義之直鏈烯基，分支鏈晞基，或環烯基，獨立經i至 3個下列基或取代基取代：_，羥基，烷氧基，烷硫基， 燒基亞橫醯基，烷基磺醯基，醯基氧基，芳基氧基，雜芳 基氧基，胺基選擇性經烷基，芳基，或雜芳基一或二取 代’脒基，脲選擇性經烷基，芳基，雜芳基，或雜環基取 代，胺基橫醯基選擇性經烷基，芳基，或雜芳基N_ 一或 -14 表紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（21〇 χ 297公釐 «^1 n 1 ima ϋ I ϋ mmm— I I n ϋ ^1 ϋ ϋ ^1 ϋ ϋ H ϋ I ϋ 1^— ^1 ϋ ^1 ϋ ^1 _ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1230161 A7 B7 五、發明說明（12) N，N-二取代’燒基績醯基胺基，芳基續醯基胺基，雜芳基 ㈣酿基胺基’纟元基談基胺基’方基談基胺基，雜芳基談基 胺基’瘦基’说乳基談基’方基氧基談基，雜芳基氧基談 基等接於任何可能點，產生一種安定化合物。 ”块基"’單獨或組合，意爲直鏈或分支鏈烴，含有2_2〇 個，較佳2-17個，更佳2-10個，甚至更佳2-8個，最佳2-4 個，碳原子，及含有至少一個，較佳一個，碳-碳三鍵。 炔基之實例包括乙炔基，丙炔基，丁炔基，等。經取代之 块基表上述定義之直鏈炔基或分支鏈炔基，獨立經1至3 個下列基或取代基取代：卣，羥基，烷氧基，烷硫基，烷 基亞續聽基’燒基續酿基，酿基氧基，芳基氧基，雜芳基 氧基，胺基選擇性經烷基，芳基，或雜芳基一或二取代， 月米基’脲選擇性經燒基，芳基，雜芳基，或雜環基取代， 胺基續驢基選擇性經坑基，芳基，或雜芳基N -一或ν，Ν· 二取代，烷基磺醯基胺基，芳基磺醯基胺基，雜芳基磺醯 基胺基，烷基羰基胺基，芳基羰基胺基，雜芳基羰基胺基 等接於任何可能點，產生一種安定化合物。 ，，烷基烯基”表^11，=€^，”，基，其中以爲低烷基，或經 取代之低烷基，R，，R”，，R””可獨立爲氫，_素，低烷基， 經取代之低悦基，醯基，芳基，經取代之芳基，雜芳基， 或經取代之雜芳基，如下定義。 ”烷基炔基”表-R-C Ξ CR，基，其中R爲低烷基，經取代之 低燒基，R’爲氫，低燒基，經取代之低垸基，醯基，芳 基，經取代之芳基，雜芳基，或經取代之雜芳基，如下定 -15- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -ϋ H ϋ ϋ ϋ ϋ ϋ ϋ ϋ I ϋ ϋ ϋ ϋ ϋ ϋ 一0, ϋ ϋ ϋ ϋ ϋ ^1 I I — ϋ ϋ ϋ ϋ ϋ ^1 ϋ ϋ ϋ ϋ H ϋ .1 ϋ ^1 ϋ ϋ H ϋ ϋ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 230161 A7 _ B7 五、發明說明（13) 義。 •’烷氧基"表-OR基，其中R爲低烷基，經取代之低嫁 基，醯基，芳基，經取代之芳基，芳烷基，經取代之芳坑 基，雜芳基，雜芳基烷基，環烷基，經取代之環烷基，環 雜烷基，或經取代之環雜烷基，如下定義。 *’抗硫基’•表-SR，-S(〇)n-i_2_R，其中R爲低燒基，經取代 之低烷基，芳基，經取代之芳基，芳烷基，或經取代之芳 燒基，如本文中定義。 π醯基’’表-C(0)R基，其中R爲氫，低坑基，經取代之低 燒基，芳基，經取代之芳基等，如本文中定義。 ’’芳基氧基11表-Ο Ar基，其中Ar爲芳基，經取代之芳 基，雜芳基，或經取代之雜芳基，如本文中定義。 "胺基Π表NRRΪ基，其中R及R’可獨立爲氫，低烷基，經 取代之低烷基，芳基，經取代之芳基，雜芳基，或經取代 之雜芳基，如本文或驢基定義。 π醯胺基”表-(：(0州10^基，其中R及R，可獨立爲氫，低 烷基，經取代之低烷基，芳基，經取代之芳基，雜芳基， 經取代之雜芳基，如本文中定義。 "羧基”表-C(0)0R基，其中R爲氫，低烷基，經取代之 低烷基，芳基，經取代之芳基，雜芳基，經取代之雜芳 基，如本文中定義。 π芳基”，單獨或組合，意爲苯基或莕基，碳環選擇性稠 合於一個環烷基，較佳5 - 7個，更佳5 - 6個，環成員，及/ 或選擇性經1至3個下列基或取代基取代··卣，羥基，烷 -16- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） ------------% (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 ^ « — — — — — — I— — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — 1230161 A7 B7 五、發明說明（14) 氧基，烷硫基，烷基亞磺醯基，烷基磺醯基，醯基氧基， 芳基氧基，雜芳基氧基，胺基選擇性經烷基，芳基，或雜 芳基一或二取代，脒基，脲選擇性經烷基，芳基，雜芳 基’或雜環基取代，胺基磺醯基選擇性經烷基，芳基，或 雜芳基N-—或N，N-二取代，烷基磺醯基胺基，芳基磺醯 基胺基，雜芳基磺醯基胺基，烷基羰基胺基，芳基羰基胺 基，雜芳基羰基胺基等。 ’’經取代之芳基”表芳基選擇性經一或多個官能基，如南 素，低烷基，低烷氧基，烷硫基，乙炔基，胺基，醯胺 基，羧基，羥基，芳基，芳基氧基，雜環基，雜芳基，經取 代之雜芳基，硝基，氰基，硫醇基，磺醯胺基等，取代。 π雜環”表飽和，未飽和，或芳族碳環基，具有一個環 (例如嗎啉基，吡啶基，或呋喃基）或多個縮合環（例如莕 吡啶基，峻喏琳基，峻琳基，Κ丨畊基，或苯幷[b ] ρ塞吩基） 及具有至少一個雜原子，如Ν，0或S，於環中，其可選 擇性未經取代，或經例如_素，低燒基，低燒氧基，燒硫 基’乙块基，胺基，醯胺基，叛基，禮基，芳基，芳基氧 基，雜環基，雜芳基，經取代之雜芳基，硝基，氰基，硫 醯基，磺醯胺基等取代。 π雜芳基”，單獨或組合，意爲一個單環芳環結構含有5 或6個環原子，或一個雙環芳基具有8至1 〇個原子，含有 一或多個，較佳1-4個，更佳1-3個，甚至更佳丨_2個，雜 原子獨立選自0，S，及N，及選擇性經丨至3個下列基或 取代基取代·· ，羥基，烷氧基，烷硫基，烷基亞橫醯 -17- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -------------% C請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 一-ov I ϋ ϋ ϋ ϋ —i 1 in I ϋ I ϋ I I I ϋ n ϋ ϋ ϋ _ 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1230161 A7 --- -- B7_____ 五、發明說明（15 ) 基，烷基磺醯基，醯基氧基，芳基氧基，雜芳基氧基，胺 基選擇性經烷基，芳基，或雜芳基一或二取代，脒基，脲 選擇性經烷基，芳基，雜芳基，或雜環基取代，胺基磺醯 基選擇性經烷基，芳基，或雜芳基N_ 一或队义二取代， 认基磺醯基胺基，芳基磺醯基胺基，雜芳基磺醯基胺基， 烷基羰基胺基，芳基羰基胺基，雜芳基羰基胺基等。雜芳 基亦包括氧化之S或N，如亞磺醯基，磺醯基，及三級環 氮之N -氧化物。一個碳或氮原子爲雜芳基環結構之接 點，以維持一種安定芳環。雜芳基之實例爲吡啶基，嗒畊 基，吡畊基，喳唑啉基，嘌呤基，吲哚基，喹啉基，嘧啶 基，吡咯基，嘮唑基，噻唑基，噻吩基，異嘮唑基，嘮嘧 二吐基’異嘍唑基，四唑基，咪唑基，三畊基，呋喃基， 苯並呋喃基，吲哚基，等。經取代之雜芳基含有一個取代 基接於任何可能之碳或氮以產生一種安定化合物。 ”雜環基”，單獨或組合，意爲一個非芳族環烷基，具有 5至1 0個原子，其中環中i至3個碳原子以雜原子〇，8或 N替代，爲選擇性苯幷稠合之5 - 6個環成員之雜芳基及/或 擇性經取代，如環烷基之情況。雜環基亦包括氧化之s或 N，如亞磺醯基，磺醯基，及三級環氮之n -氧化物。接點 係在一個破或氮原子。雜環基之實例爲四氫吱喃基，二氯 吡啶基，六氫吡啶基，吡咯啶基，六氫吡呼基，二氯苯幷 呋喃基，二氫峭哚基，等。經取代之雜環基含有一個取代 基接於任何可能之碳或氮以產生一種安定化合物。 "經取代之雜芳基”表雜環選擇性經一或多個官能基，如 -18- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公愛） --------訂---------線> (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1230161 A7 五、發明說明（16) 鹵素，低烷基，低烷氧基，烷硫基，乙炔基，胺基，醯胺 基，羧基，羥基，芳基，芳基氧基，雜環基，經取代之雜 環基，雜芳基，經取代之雜芳基，硝基，氰基，硫醇基， 續醯胺基等，一或多取代。 ’·芳烷基’’表-R-Ar，其中Ar爲芳基，R爲低烷基或經取代 之低烷基。芳基可選擇性未經取代，或經例如_素，低烷 基，烷氧基，烷硫基，乙炔基，胺基，醯胺基，羧基，羥 基，芳基，芳基氧基，雜環基，經取代之雜環基，雜芳 基，經取代之雜芳基，硝基，氰基，硫醇基，磺醯胺基等 取代。 ’’雜烷基”表-R-Het，其中Het爲雜環基，R爲低烷基。雜 燒基可選擇性未經取代，或經例如1¾素，低燒基，低虎氧 基，烷硫基，乙块基，胺基，醯胺基，羧基，芳基，芳基 氧基，雜環基，經取代之雜環基，雜芳基，經取代之雜芳 基，硝基，氰基，硫醇基，磺醯胺基等取代。 π雜芳基烷基”表-R-HetAr，其中HetAr爲雜芳基，R爲低 烷基或經取代之低烷基。雜芳基烷基可選擇性未經取代， 或經例如ή素，低嫁基，經取代之低燒基，燒氧基，虎硫 基，乙炔基，芳基，芳基氧基，雜環基，經取代之雜環 基，雜芳基，經取代之雜芳基，硝基，氰基，硫醇基，磺 醯胺基等取代。 "環烷基”表一個或二價環或多環烷基含有3至1 5個碳原 子。 ”經取代之環烷基”表一個環烷基包含一或多個取代基， -19- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） I — — — — — — · II---------I---I — I--I — I----I--------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1230161 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明說明（17) 例如自素，低燒基，經取代之低燒基，燒氧基，燒硫基， 乙炔基，芳基，芳基氧基，雜環基，經取代之雜環基，雜 芳基，經取代之雜芳基’硝基’氰基，硫醇基，橫醯胺基 等0 ”環雜烷基”表一個環烷基，其中一或多個環碳原子經一 個雜原子（例如N，0，S或P )替代。 ”經取代之環雜烷基π表一個如本文中所定義之環雜燒 基，含有一或多個取代基，如_素，低燒基，低燒氧基， 硫基’乙块基，胺基’酿胺基’幾基，經基，芳基，芳 基氧基，雜環基，經取代之雜環基，雜芳基，經取代之雜 芳基，硝基，氰基，硫醇基，磺醯胺基等。 ”烷基環烷基”表-R-環烷基，其中環烷基爲一個環燒 基，R爲低燒基或經取代之低烷基。環烷基可選擇性未經 取代，或經例如_素，低烷基，低烷氧基，烷硫基，乙块 基’胺基，酿胺基，叛基，經基，芳基，芳基氧基，雜環 基，經取代之雜環基，雜芳基，經取代之雜芳基，硝基， 夜基’硫鮮基’續酸胺基等取代。 Π烷基環雜烷基"表-R-環雜烷基，其中R爲低烷基或經取 代之低烷基。環雜烷基可選擇性未經取代，或經例如_ 素，低烷基，低烷氧基，烷硫基，胺基，醯胺基，羧基， 乙炔基，羥基，芳基，芳基氧基，雜環基，經取代之雜環 基，雜芳基，經取代之雜芳基，硝基，氰基，硫醇基，磺 酿胺基等取。 本發明化合物可如概圖1 _ 4中所示製備。 -20- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ---------------------訂---------線—赢 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -ϋ ϋ n I _1 1 ϋ ϋ ϋ ϋ ^1 ^1 I , 1230161

五、發明說明（18) 具有通式IV之化合物可如概圖1中所示製備 概圖1

乂 HaC〇-^sOCH, t>-TaOH B <1 氧化 -------------樣 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

ύ 酸

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 化合物I可由化合物1與經適當取代之丨，3_二羰基在AcOH 及MeOH之混合物中於80°C反應而製備（Holzer et al·，J. Heterocycl· Chem· (1993) 30，865)。化合物 II，可由化合物 I與2,2-二甲氧基丙烷在一種酸存在下反應而獲得，可氧化 成複酸III，基於結構相似化合物，使用過錳酸鉀或氣絡酸 口比錢（M· Hudlicky，（1990) Oxidations in Organic Chemistry， -21 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 χ 297公釐） 一aJ«II ^ — — — — — I I ^ ^ ^ H 1_| ^ 1 ϋ I ϋ I I I ϋ — — — — — — 1230161 A7 ___B7____五、發明說明（19) ACS Monographs, American Chemical Society, Washington D. C.)。具有式HNR6R7之一級或二級胺與化合物III使用DCC (M. Fujino et al·，Chem. Pharm. Bull· (1974)，22，1857)， PyBOP (J. Martinez et al·，J. Med. Chem. (1988) 28，1874)或 PyBrop (J. Caste et al· Tetrahedron，（1991)，32，1967)之偶合 條件反應，可獲得化合物I V。 概圖2

2

m¥s 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 化合物V可如概圖2中所示製備。三TBDMS衍生物4可由 化合物2以TBDMSC1及咪唑在DMF中處理，然後乙酯使用 NaOH水解而獲得。具有式HNR6R7之一級或二級胺與化合 物 4 使用 DCC (M. Fujino et al·，Chem· Pharm· Bull. (1974)， 22, 1857), PyBOP (J. Martinez et al., J. Med. Chem. (1988) 28, 1874)或 PyBrop (J· Caste et al. Tetrahedron，（1991)，32, 1967)之偶合條件反應，可獲得化合物V。 -22 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -ϋ tm§ 11 11 ϋ ί 1 ϋ —el I B^i —Bi ϋ ·ϋ ϋ n I I ϋ I ϋ I (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) A7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1230161 丨_B7 五、發明說明（20) 概圖3

化合物1 1之特定合成例示於概圖3。商業上可得之鳥苷 5如上述轉化爲三氟醋酸酯6 (M· J. Robins and B. Uznanski， Can· J. Chem. (1981)，59，2601-2607)。化合物 7，依據 Cerster et al. (J. F. Cerster, A. F. Lewis, and R. K. Robins, -23- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） -^1 ϋ ϋ ϋ ϋ ί I ϋ ϋ ϋ 一-or I «^1 ϋ I ϋ i I I ϋ ϋ ϋ ϋ ϋ I I (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1230161 A7 B7

3,3-二乙氧基丙酸酯或 五、發明說明（21 )

Org· Synthesis，242-243)之文獻程序製備，如上述以二步驟 轉化爲化合物 9 (V· Nair et al·，J· 〇rg· chem·，（1988)，53, 3051-3057)。化合物1係由胼水合物與化合物9在乙醇中於 80°C反應而獲得。化合物1與乙氧基羰基丙二醛於ac〇h及 MeOH之混合物在80°C縮合，產生化合物丨〇。化合物1 〇於 過量曱胺中加熱，獲得化合物1 1。 概圖4 X"

VI 1，3-二醛VII之合成述於概圖4 3,3-二乙氧基丙腈或丨，^二乙氧基冬硝基乙烷VI (R3-CC^R ’ CN或N〇2)與甲酸乙酯或甲酯在NaH存在下反 應’可獲知·二醛 VII (Y. Yamamoto et al·，J· Org. Chem. (1989) 54, 4734)。 本發明化合物可與放射活性顯像劑一起以使冠狀動脈之 活性顯像。本發明化合物爲A2a激動劑，相信可特異活化 端狀血管中腺甞a〗a受體，相對於心房及A V結中腺甞A丨受 體及/或末稍血管中Asb受體，因此可避免不欲之副作用。在 施用冶療量時，本發明化合物可引起冠狀血管擴張以引發 冠狀血管偷竊，其中健康之冠狀血管由不健康之血管偷竊 血液’造成血液不流入心臟組織。較低劑量之a2a激動劑可 才疋么、有利之甩狀血管擴張（較不嚴重）用於治療慢性caD。 24 本、、，氏張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ------------4-------- tr---------線 ί請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1230161 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明說明（22 ) 作爲Asa激動劑，本發明化合物亦可與血管造形術一起 用於治療，以引發擴張，抑制血小板凝集，及用作一般抗 發炎劑。激動劑，如本發明化合物，可由防止中性球 活化（Purinergic Approaches in Experimental Therapeutics K· A· Jacobson and Μ· F· Jarvis 1997 Wiley，New York)而提供 上述治療利益。本發明化合物亦可有效對抗一種稱爲無回 j (no-reflow)之症狀，其中血小板及中性球凝集並阻斷血 管。作爲Asa激動劑，本發明化合物可由防止中性球及血 小板活化（例如相信可防止過氧化物由中性球釋放）而有效 對抗操回流症狀。作爲Asa激動劑，本發明化合物亦可經 由對於中性球之抗發炎作用而用作心臟保護劑。因此，在 心臟進行絕血狀態之情況，如移植，彼等有用。 本發明亦包括上述Asa激動劑之前藥。前藥爲一種已經 化學修飾且在作用位置無生物活性，但可以一或多種酶或 活體内過程降解或修飾成生物活性形式之藥物。本發明之 前藥應具有不同於母藥之藥物動力情況，具有改良之黏膜 上皮吸收，較佳鹽形成及/或溶解度，及改良之系統安定 性。上述化合物較佳在一或多個羥基經修飾。修飾可爲（1) 酯或胺基甲酸酯衍生物，其可以例如酯酶或脂肪酶裂解； (2)肽，可由特異或非特異蛋白酶辦認；或（3)衍生物，經 由膜選擇積聚於作用位置，或前藥形式或修飾之前藥形 式，或上述（1)至（3)之任何組合。 組合物可經口，經靜脈内，經表皮，或經由此技藝中已 知之施用治療劑之任何其他方式施用。治療方法包含施用 -25- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） --------訂---------線 (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) 1230161 A7 B7 五、發明說明（23) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 有效量所選擇之化合物，較佳分散於一種醫藥載劑中。活 性成份之劑量單位一般係選自〇 〇1至1〇〇亳克/公斤之範 圍，可輕易由熟習技藝人士依施用途徑，病人之年鹼及症 狀決定。此劑量典型在冠狀動脈顯像前約5分鐘至約i小 時或以上以溶液施用。當本發明化合物依據本發明施用 時’無不可接受之毒性作用。 若本發明之最終化合物含有一個鹼基，可製備一種酸加 成鹽。化合物之酸加成鹽係以標準方式於適合溶劑中由母 化6物及過量酸（如鹽酸，氫溴酸，硫酸，蹲酸，醋酸， 順丁晞二酸，琥拍酸，或甲磺酸）製備。鹽酸鹽特別有 用。若最終化合物含有一個酸基，可製備陽離子鹽。母化 合物典型以過量鹼性試劑（如含有適合陽雕子之氫氧化 物’碳酸鹽’或坑醇）處理。陽離子如Na+，，Ca+2，及 NH/爲存在於醫藥可接受鹽中陽離子之實例。某些化合物 形成兩性離子之内鹽，亦可接受。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 包括本發明化合物及/或其衍生物之醫藥組合物可調配 成溶液或冰凍乾燥粉末供非經腸施用。粉末可在使用前由 加入一種適合稀釋劑或其他醫藥可接受載劑重製。若以液 體形式使用，本發明組合物較佳併入一種緩衝之等張水溶 液中。適合稀釋劑之實例爲生理等張鹽水溶液，標準5 〇/。 葡聚糖於水中，及緩衝之醋酸鈉或銨溶液。該液體調配物 適合非經腸施用，但是亦可口服施用。較佳將賦形劑，如 聚^晞基吡咯啶酮，明膠，羥基纖維素，金合歡膠，聚乙 二醇，甘露糖醇，氯化鈉，檸檬酸納，或熟習技藝人士已 -26- 本紙張尺度適时國國家標準（CNS)A4規格（21〇 X 297公爱） 123〇161

五、發明說明（24 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 知之任何其他賦形劑，加入包含本發明化合物之醫藥組合 物中。或者’I藥化合物可包膠，製錠，或製備成乳液或 糖漿，供口服施用。醫藥可接受之固體或液體載劑可加入 以增強或安足組合物，或促進組合物之製備。液體載劑包 括糖漿，花生油，橄棍油，甘油，鹽水，醇，及水。固骨# ，劑包括澱粉，乳糖，.硫酸鈣，二水合物，teffaalba 脂酸鎂或硬脂酸，滑石，果膠，金合歡膠，瓊脂，或明 膠。載劑亦可包括一種持續釋放物質，如一硬脂酸甘油酯 ，一硬脂酸甘油酯，單獨，或與蠟混合。固體載劑之量可 又化’但較佳爲每劑量單位約2 〇毫克至約1克。藥劑係使 用習知技術，如研磨，混合，顆粒化，及壓縮，若需要， 製成錠形式；或研磨，混合，及裝填，製成硬明膠膠囊形 式。當使用液體載劑時，製劑可呈糖漿，酏劑，乳液，或 水或非水懸浮液。該液體調配物可直接施用，或裝填入軟 明膠膠囊中。本發明組合物較佳以溶液口服施用，或經靜 脈内以連續注入或大丸劑（b〇luS)施用。 下列實例係用以例示本發明。該等實例並非用以限制本 發明範圍，而係提供以顯示如何製造及使用本發明化合 物。在實例中，所有溫度爲攝氏度數。 實例1

OH 27- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ----------------------^--------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -^ ϋ -I H - 1230161 A7 B7 五、發明說明（25) 1-{9-[(48,2尺，311，511)-3,4-二磋基-5-(羥基甲基）氧環戊烷 (oxolan)-2-基]-6-胺基嘌呤-2-基}被峻-4-竣酸乙酯（12) 在2-肼基腺苷（0.025克，0.08毫莫耳）於MeOH/AcOH之1 : 1 混合物中之懸浮液内加入（乙氧基羰基）丙二醛（0.019克， 0.12毫莫耳），混合物在80°C加熱3小時。所形成之沉澱物 以過濾收集，以EtOH及醚洗，獲得12。ΑΝΜΙΙφΜΒΟ-ίΙό) d 1.25 (t，3 Η)，3.5 (m，1 Η)，3·6 (m，1 Η)，3·8 (d，1 Η)，4·15 (d 1 Η), 4.55 (m9 1 H), 5.Q (t, Ι,Η), 5,2 (d, 1 Η), 5.5 (4, 1 Η), ^ 1 Η), 7.15-7.3 (m;1 5 Η), 7,8 (b!r s, 2 Η), 8.1 (s, 1 Η), 8.4 (s，1 Η)，8·9 (s，1 Η)。 實例2 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

OH (48,2尺，31^，51^)-2-{6-胺基-2-[4-(4-氣苯基）？比峻基]嗓吟-9-基}-5-(羥基甲基）氧環戊烷-3,4-二醇（13) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 在2-肼基腺甞（0.025克，0.08毫莫耳）於MeOH/AcOH之1 : 1 ；；：!；;：： 混合物中之懸浮液内加入2_(4_氣）苯基丙二醛（〇〇瑪i克， 0.12毫莫耳），混合物在80°C加熱3小時。所形成之沉澱物 以過濾收集，以EtOH及醚洗，獲得13。iHNMR^DMSO-c^) β 3.5(m，1 Η)，3·6 (m，1 Η)，3·8 (d，1 H)，4.15 (d，1 H)，4.2 (q， -28 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） 1230161 A7 B7

五、發明說明（26) 2 H)，4.55 (m，1 Η)，5·9 (d，1 H)，7.45 (d，2 H)，7.75 (d，2 H)， 8·25 (s，1 H)，8.35 (s，1 H)，8·9 (s，1 H)。 實例3 h3co (48,2尺，311，5以)-2-{6-胺基-2-[4-(4-甲氣基苯基）吡唑基]嘌呤 -9-基}_5-(羥基甲基）氧環戊烷-3,4-二醇（14) 在2-肼基腺茹（〇.〇25克，0.08毫莫耳）於MeOH/AcOH之1 : 1 混合物中之懸浮液内加入2-(4-甲氧基）苯基丙二醛（0.022 克，0.12毫莫耳），混合物在80°C加熱3小時。所形成之沉 澱物以過濾收集，以EtOH及醚洗，獲得1 4。〖HNMR (DMSO-d6) Θ3.55 (m，1 H)，3.65 (m，1 H)，3.75 (s，3H)，3.9 (d，1 H)，4.15 (d，1 H)，4.6 (m，1 H)，5.9 (d，1 H)，6.75 (d，2 H)，7.6 (d，2 H)，8.15 (s，1 H)，8.35 (s，1 H)，8·8 (s，1 H)。 實例4 -------------% (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂---------線! 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

•29- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） A7

五、發明說明（27) l23〇l61 (48,211，31^，5尺)-2_{6_胺基-2-[心(4-甲基苯基）吡唑基]螺呤_9_ 基}-5-(羥基甲基）氧環戊烷_3,4_二醇（15) 在2 -耕基腺甞（〇·〇25克，0.08毫莫耳）於MeOH/AcOH之1 : 1 混合物中之懸浮液内加入2-(4-甲基）苯基丙二醛（〇〇19克， 〇· 12毫莫耳），混合物在8〇°C加熱3小時。所形成之沉澱物 以過濾收集，以EtOH及醚洗，獲得15。iHNMR^DMSO-de) β 3.55 (m，1 Η)，3·65 (m，1 H)，3.75 (s，3 Η)，3·9 (d，1 H)， 4·15 (d，1 Η)，4·6 (m，1 Η)，5.9 (d，1 Η)，6·75 (d，2 Η)，7·6 (d， 2 Η)，8.15 (s，1 Η)，8·35 (s，1 Η)，8·8 (s，1 Η)。 實例5 -------------% (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 (1-{9-[(48,211，311，511)-3,4-二羥基-5，（羥基甲基）氧環戊烷-2-基]-6-胺基嘌呤_2-基}吡唑-4_基）->1-甲基羧醯胺（16) 化合物12 (〇·〇5毫克，0.12毫莫耳）加入4毫升甲胺（40% 溶液於水中）中。混合物在65°C加熱24小時。在眞空中濃 縮後’殘餘物使用製備性TLC (10% MeOH : DCM)純化。 WNMR (CD3〇DH 2.90 (s，3 H)，3.78 (m，1 H)，3.91 (m，1 H)， 4.13 (d，1 H)，4.34 (d，1 H)，4.64 (m，1 H)，6.06 (d，1 H)，8·11 (s，1 H)，8·38 (s，1 H)，9·05 (s，1 H) 〇 -30- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） 訂---------線 -I ^1 ϋ ϋ ϋ 1 ϋ ϋ n ϋ -1 _ 1230161

、發明說明（28) 五 實例6

M9_[(4S，2R，3R，5R)-3,4_二羥基-5-(羥基甲基）氧環戊烷-2 基]-6-胺基嗓吟-2-基} p比峻-4-羧酸（17) 化合物12 (0.05毫克，〇·ΐ2毫莫耳）溶於一當量IN NaOt 中。溶液在室溫攪拌2小時，然後酸化至pH 4。生成之沉 搬物過濾，以水及醚洗。iHNMR (CD3OD)A3.75 (m，1 H) 3·90 (m，1 h)，4.13 (d，1 H)，4.43 (d，1 H)，4.64 (m，1 Η): 6.05 (d，1 H)，8.10 (s，1 H)，8.35 (s，1 H)，8.35 (s，1 H)，9·05 (s，1 H) 〇 %-------丨訂----------線赢 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 實例7

卜{9_[(48,211，311，511)-3,4-二羥基-5-(羥基甲基）氧環戊烷-2-基]-6-胺基嘌呤_2-基}吡唑-4-基）-N，N-二甲基羧醯胺（18) -31 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -I I I I I I I ^ I I I I _ 1230161 A7 B7 五、 發明說明（29 ) 化合物1 8係以相似於化合物1 6之方法使用二甲胺替代 甲胺製備。MS 405.12 (M+1)。 實例8 ih2

Κ{9-[(48,2ΙΙ，3ΓΙ，5ι^3,4_二羥基·5_(羥基甲基）氧環戊烷 _2_ 基]·6-胺基嘌呤-2-基}吡唑-4」基）-Ν-乙基羧醯胺（19) 化合物1 9係以相似於化合物1 6之方法使用乙胺替代甲 胺製備。MS 405.35 (Μ+1)。 實例9 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

烷-2- 基]胺基嘌吟-2-基} p比峻-4-羧醯胺（20) 化合物2 0係以相似於化合物1 6之方法使用氨替代甲胺 製備。MS 377.25 (Μ+1)。 -32- 度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐 ------------I --I-----訂--------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -ϋ ·1 I ϋ ϋ i_i I ϋ ϋ I ϋ ι 1230161 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（30) 實>]1 0

1-{9-[(48,211，311，511)_3,4-二羥基-5-(羥基甲基）氧環戊烷-2- 基]-6·胺基嗓吟基}吡唑_心基）善(環戊基甲基）瘦醯胺（21) 化合物12 (0.5克，1.2毫莫耳）溶於無水DMF中，TBDMSC1 (1.5克，10彦莫耳）及咪唑（〇68克，1〇毫莫耳）加入，混合物 在80 C加熱2 4小時。溶劑蒸發，殘餘物以急驟管柱純化， 獲得化合物1 2之三矽烷基保護形式。然後三矽烷基衍生 物（〇·8克）懸浮於1毫升水中，以2毫升in KOH/MeOH處 理。混合物在室溫攪拌7 2小時。溶劑在減壓下移除，殘 餘物懸浮於5毫升水中，以1N HC1酸化至pH 5.5。生成之 沉澱物過濾，以水及乙醚洗，獲得酸2 〇之三矽烷基形式。 然後酸2 0之三碎燒基衍生物（〇丨4克，〇 2毫莫耳）溶於5 晕升二氣甲烷中。在溶液中加入HBTU (0.19克，0.4毫莫 耳）’ HOBt (0.76克’ 4毫莫耳），N -甲基嗎琳（〇.〇4克，0.4 毫莫耳），及催化劑DMAP。混合物在室溫攪拌2 4小時。 然後混合物以10%檸檬酸，飽和NaHC03，鹽水洗，以 MgS04乾燥。溶劑移除，殘餘物以5毫升〇.5 n NH4F/MeOH 處ϊ里。溶液在回流加熱2 4小時。溶劑，蒸發，殘餘物以製 -33- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） • ϋ I .1 I ϋ ϋ I ^1 ^1 I I ϋ ϋ ϋ I I 1 ϋ ϋ ^1 I ϋ ϋ ^1 ^1 ^1 ^1 ϋ ϋ ί ϋ ^1 I ϋ ^1 1 «^1 I ϋ I · (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1230161 A7 __B7 五、發明說明（31 ) 備性TLC純化，獲得化合物21，MS 445·26 (M+1)。 實例1 1

(149_[(48,2匕311，511)-3,4-二羥基-5-(羥基甲基）氧環戊烷-2_ 基]-6-胺基嘌呤-2_基丨吡唑基）-Ν_[(4-氯苯基）甲基]羧醯 胺（22) r 化合物2 2係以相似於化合物2 1之方式使用4 -氣苯甲基 胺替代環戊胺製備。MS 501.19 (M+1)。 實例1 3

/U_{9-[(4S，2R，3R，5R)-3,4_二羥基-5-(羥基甲基）氧環戊烷 4 胺基嗓呤-2•基}吡唑_4_基）羰基胺基]醋酸乙酯 化合Afrr 0。π 3係以相似於化合物2 1之方式使用甘胺酸甲西皆 替代環戊胺製備。MS 445_26(M+1)。 尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱） --------------------訂---------線—赢 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1230161 A7 B7 五 發明說明（32) 實例1 4 分析本發明化合物以測定其對於豬紋狀體膜製品中 受體之親和力。簡言之，〇·2毫克豬紋狀體膜以腺菩去^ 酶（2U/毫升）及50 mM Tris緩衝液（ΡΗ=7·4)處理，然後混 泛。在該豬紋狀體膜中加入2微^--系列稀釋之本發明化 合物之DMSO原料溶液，濃度範圍由10 至1〇〇 "Μ，或對 照組僅接受2微升〇]^0，然後拮抗劑2]^ 241385於丁1^緩

衝液（50 mM，pH 7.4)中加入以達成最終濃度2 ηΜ。在23°C 培育2小時後，溶液使用一種膜獲取器遇濾，洗膜多次 (3x)。濾盤於閃爍混合物中計數，以測定氚化zm由本發明 化合物置換之量。使用多於5點之曲線以產生Ki，實驗數 目數示於下表1之標欄中。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

表1 化合物號碼 A2a Ki (nM) η 12 +++ 2 13 ++ 3 — 14 ++ 1 15 ++ 3 16 ++ 2 17 - 1 18 +++ 3 19 +++ Γ 3 20 +++ 3 21 +++ 3 22 +++ 3 +++=10-1,000 nM ++=1，000-10,000 nM

+=大於 10,000 nM -=大於 100,000 nM -35- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公t ) 1230161 A7 B7 五、發明說明（33) 實例1 5 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 此實驗之目的爲測定本發明化合物對於Ai，A2A，A2B， 及A3腺甞受體之親和力及受體結合選擇性。分子選殖已鑑 定及確認四種亞型之腺甞受體（AdoRs) A!，A2a，A2B，及 A3 AdoRs存在（Linden，1994)。這些AdoR亞型具有不同解 剖學分布，藥理學性質，及生理學功能（Shryock and Belardinelli，1997)。Ai&A3 AdoRs偶合於抑制性G蛋白質 (Gi/o)，降低腺嘌呤基環化酶之活性，而A2a及A2B AdoRs經 由偶合於刺激性G蛋白質（Gs)增加細胞内cAMP含量。 對於不同腺甞受體亞型具有高效力及組織/器官選擇性 之配位體對於各種疾病（如心律不整，絕血性心臟疾病， 氣喘，及巴金森生氏症）具有治療及診斷潛力，爲大量學 術及工業研究努力之焦點。在本文中，吾等報告一系列本 發明之新穎腺棼類似物之藥理學及功能特徵，使用表現内 生性AdoRs或重組之人類AdoRs之哺乳類細胞株。 材料 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 腺嘗去胺酶係賭自 Boehringer Mannheim Biochemicals Indianapolis，IN，U· S· A)。[3H] ZM241385 (批號 1 )係購自 Tocris Cookson Ltd (Langford, Bristol，UK)。[3H] CPX(批號 3329207)係購自 New England Nuclear (Boston，MA，USA)。 CGS21680 (批號 SW-3R-84及 89H4607)，NECA (批號 OXV-295E)，R-PIA (批號 WY—V-23)，Rolipram及HEK-hA2AAR膜 係得自 Sigma—RBI (Natick，MA)。WRC-0470 係如文獻（K. Niiya et al·，J· Med· Chem· 35:4557-4561 (1992))中所述製 -36- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） A7 1230161 _____B7 __ 五、發明說明（34 ) 備。本發明化合物16係如上述合成，製備成DMSO之原科 溶液（1 0毫莫耳/升）。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 細胞培養及膜製品 PC12 細胞係得自 American Type Culture Collection，生長 於DMEM具有5%胎牛血清，10%馬血清，0.5毫莫耳/升L-麩醯胺，100 U/毫升青黴素，0.1毫克/毫升鏈黴素，及2.5 微克/毫升兩性黴素（amphotericin)中。穩定表現重組人類 A2B AdoRs之 HEK-293 細胞（HEK-hA2B AdoR)生長於 DMEM 補充10%胎牛血清及0.5毫克/毫升G-418中。穩定表現重組 人類 Ai AdoR之 CHOK1 細胞（CHO-hA^doR)及 A3 AdoR之 CHOK1細胞（CHO-hA3 AdoR)於150毫米塑膠培孤上生長成 單層，其中含有Ham氏F-12培養基補充10%胎牛血清於0.5 毫克/毫升G-418存在下。細胞培養於5% C02/95%空氣之氣 壓下，維持在37°C。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 爲製造膜，細胞由培養皿移人冰泠之5 0毫莫耳/升Tris-HC1緩衝液（pH 7.4)中。細胞懸浮液以Polytron設定在4均質 化3 0秒，在48,000g旋轉1 5分鐘。顆粒由再懸浮於冰冷之 Tris-HCl緩衝液中及離心而洗三次。最終顆粒再懸浮於小 體積Tris-HCl中，等分，及泠凍於-80°C直到使用於受體結 合分析。膜懸浮液之蛋白質濃度係使用Bradford方法（Bio-Rad) 以牛 血清作 爲標準 測定。 競爭性結合分析 進行競爭性分析以測定下列未標示化合物（競爭劑）之親 和力（KJ :化合物WRC-0470 ;本發明化合物16 ; NECA ; -37- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） A7 1230161 _ B7 _ 五、發明說明（35 ) CGS 21680 ;及R-PIA，對於 AAdoRs CHO-hAiAdoR細胞膜 上（[3H]DPCPX結合位置），A2AdoRsPC12 及 HEK-hA2AAR 細胞膜上（[3H]ZM241385結合位置）。 A2BAdoR HEK-hA2BAdoR細胞膜上（[3H] DPCPX結合位 置），及 A3AdoRCHO-hA3AdoR細胞膜上（[125I] ABMECA結 合位置）。 膜懸浮液在室溫於5 0毫莫耳/升Tris-HCl緩衝液（pH 7.4) 含有ADA (1U/毫升），Gpp(NH)p (100 //Μ)，放射配位體 {[3Η]ΖΜ241385 (約 1.5至 5 毫微莫耳 / 升），[3H]DPCPX(約2.5 至3.0毫微莫耳/升對於A1&30nM對於A2B)，或[125I]ABMECA (1 nM)}，及漸增濃度之競爭劑中培育2小時。在培育結束 時，結合及自由之放射配位體經由Whatman GF/C玻璃纖維 滤器過滤及使用Brandel組織獲取器（Gaithersburg，MD)分 離。各濃度之競爭劑進行三組測定。 研究設計（方案） 各種CVT化合物對於a1&a2A腺苷受體之親和力（Ki)係由 彼等競爭 CH〇-hAiAd〇R，PC12，或HEK-HA2AAdoR細胞所 衍生之膜上[3H]CPX (A〇或[3H]ZM241385 (A2A)結合位置之 效力測定。使用R-PIA及CGS21680 (分別選擇Ai&A2A之激 動劑）及NECA (非選擇性AdoR激動劑）作爲對照。爲促進 比較及避免受體偶合於G蛋白質之多親和狀態之複雜性， 競爭性結合研究係在Gpp (NH)p (100 //M)存在下進行，以 使受體不偶合於0蛋白質。所選擇化合物對於A2B及A3受體 之親和力係由彼等競爭HEK-hA2BAdoR及CHO-hA3AdoR細 -38- 本紐尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公楚） ------------I--------^-1111111 秦 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1230161 A7 B7 五 、發明說明（36 ) 胞所衍生之膜上[3H] CPX (A2B)及[125I] ABMECA (A3)結合 位置之效力評估。 結果 WRC-0470及本發明化合物1 6對人類Αι，鼠及人類 A2AAdoRs之親和力（Ki)，以競爭性結合研究測定，摘示於 下表2中。所有化合物顯示對於人類人^及入！受體之適度選 擇性。此外，化合物16，在10//Μ之濃度，降低[3H] CPX (HEK-hA2BAdoR)或[125I] IBMECA (CHO-hA3AdoR)之特異結 合分別爲20%及22%。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 表2 ·腺棼受體激動劑對於A^AdoRsKAiAdoRs之結合親和 力Ki/毫微莫耳/升（pKi 土 SEM) HEK-hA2AAdoR 細胞 HCO-hAiAR 結合親和力 η 結合親和力 η WRC-0470 272 (6.55 ±0.04) [0.83 ±0.07] 6 7278(5·16±0·09) [U3 土 0·21] 3 化合物16 1269 (5.90土0.03) [0.73 ±0.04] 7 >16460 (4·59±0·35) [0.92 ±0.04] 3 CGS21680 609 (6.22 土 0.06) [0.65 ±0.07] 3 >3540 (5.47土 0.20) 3 NECA 360 (6.45 ±0.06) [0.83 ±0.08] 3 328 (6·49± 0.06) [0·88土0·03] 3 R-PIA 1656(5·78±0·02) [1.05 ±0.02) 3 477(6·35±0·11) [1.03 土 0.08] 3 此實驗之結果顯示化合物1 6爲低親和力A 2 A激動劑。 實例16 此實例之目的爲顯示本發明化合物1 6在藥理學上對於冠 --------------------訂---------線 i^w. (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -39 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1230161 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（37) 狀動脈傳導率之作用。特定言之，此實驗係設計用以測定 1)化合物16之效力，及比較其效力與腺甞及其他選擇之 A2AAdoR激動劑之效力，及2)何種腺甞受體，A i或 A2AAdoR亞型，涉及本發明化合物16所引起之冠狀血管擴 張。 在心臟内，腺替受體涉及腺甞所引起之冠狀血 管擴張，而Ai受體涉及腺甞之心臟抑制作用，如負變速 (chronotropic)及變導（dromotropic)(AV阻斷）作用。 已合成幾種AiKAuAdoRs之有效及選擇性配位體，均爲 激動劑及拮抗劑。在心臟中，Ai AdoRs之激動劑已被提議 可用作抗心律不整劑，而A2AAdoRs之激動劑係發展用於選 擇性冠狀血管擴張。 已合成一系列用於選擇性活化A2A腺嘗受體（A2AAdoR)之 腺甞衍生物用於發展冠狀血管擴張劑。更特定言之，在此 研究中，吾等報告一系列新穎A2AAdoR激動劑在鼠及天竺 鼠分離之灌流心臟中對於冠狀動脈傳導（血管擴張）之作 用。 材料 鼠（Sprague Dawley)及天竺鼠（Hartley)係分別購自 Simonsen及 Charles Rivers。WRC-0470 係如文獻（K· Niiya et al·，J· Med. Chem. 35:4557-4561 (1992))中所述製備。本發 明化合物1 6係如上述製備。CGS 21680及腺苷係購自 Sigma°Krebs-Henseleit溶液係根據標準方法製備，0.9%鹽 水係購自McGraw，Inc.。 -40- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） --------------------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1230161 A7 B7 五、發明說明（38) 方法

Sprague Dawley成鼠及Hartley天竺鼠各6隻分別重230至 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 260克及300至350克用於此研究中。該等動物由腹膜内注 射含有克他命（ketamine)及甲苯嘧喚（xylazine)(克他命1〇〇 毫克，甲苯噻嗪2 0毫克/毫升）之混合物麻醉。打開胸部， 心臟迅速取出。心臟以冰冷之Krebs-Henseleit溶液（參見下 文）簡略沖洗，大動脈加套管。然後心臟以修飾之Krebs_

Henseleit (K-H)溶液，含有 NaCl 117.9，KC1 4.5，CaCl2 2.5，MgS04 1·18，KH2P04 1.18，丙酮酸 2.0 毫莫耳 / 升，流 率1 0毫升/分鐘灌注。K-H溶液（pH 7.4)連續以95% 〇2及 5% C02充氣，加熱至35 ±0.50°C。心臟以電節律於固定週 期長度340 ms (250跳/分鐘），使用一個雙極電極放於左心 房上。電刺激係由一個Grass刺激器（Model S48，W. Warwick，RI)產生，並經由一個刺激分離單元（Model SIU5, Astro-Med，Inc·，NY)輸送，以期間3毫秒之方波脈，幅度 至少爲閾強度之二倍。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 冠狀血管灌流壓（CPP)係使用一個壓力轉換器測量，該 轉換器經由一個位於心臟上方約3公分之T連接器連接於 大動脈套管。冠狀血管灌流壓在實驗期間偵測並記錄於一 種圖表記錄器（Gould Recorder 2200S)或一種電腦記綠系統 (PowerLab/4S，ADinstruments Pty Ltd，Australia)。僅使用 CPP範圍在60至85 mmHg (在藥物不存在下）之心臟於研究 中。冠狀血管傳導率（毫升/分鐘/mmHg)係以冠狀血管灌 流率（10毫升/分鐘）及冠狀血管灌流壓間之比例計算。 -41 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1230161 A7 _____B7__ 五、發明說明（39 ) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 在測量A!腺4受體所涉及之負變導（drorn〇tropic)作用之 實驗中’在怪定心房節律期間記綠心房及心室表面電位記 綠圖（electrograms)。各種腺苷受體激動劑對於房室傳導時 間之影響係如 Jenkins and Belardinelli Circ. Res. 63:97-116 (1988)所述測定。 本發明化合物16 (5 mM)及CGS 21680 (5 mM)之原料溶液 係於二甲亞颯（DMSO)中製備；購自Aldrich，PS 04253MS。 腺甞（1毫克/毫升）之原料溶液係於鹽水中製備。一種濃度 係由原料溶液於鹽水中稀釋而製備，產生2xl〇·4或2Χ10-5 μ 之溶液。這些溶液注射入裝置之灌流管線中，以2 〇微升 之大丸劑（boluses)。在一些實驗中，溶液放入30毫升玻璃 注射筒中，藥物以達成所欲灌流濃度（例如1〇，1〇〇 nM， 等）所需之速率注入。 八2八腺甞受體激動劑之冠狀血管擴張作用 獲得本發明化合物16 (0.1至400 nM)及CGS21680 (0.1至10 nM)增加冠狀血管傳導作用之濃度-反應關係。在記綠冠狀 血管灌流壓之對照測量後，施用漸高濃度之腺甞受體激動 劑直到測得最大冠狀血管擴張爲止。記錄各濃度之腺苷受 體激動劑之穩定狀態反應。在此系列之各心臟（各激動劑4 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 至6個心臟）中，僅獲得一種激動劑及一種濃度-反應關 係。 化合物16在腺苷受體拮抗劑不存在及存在下之冠狀血管 擴張作用 爲測定何種腺甞受體亞型（Ai*A2a)涉及化合物i 2所引起 _ -42- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（21〇 x 297公釐） 1230161 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

A7 ------B7_____ 五、發明說明（40) 〈疝狀血管擴張’分別使用A!或Am腺甞受體拮抗劑cpx及 ΖΜ241385。心臟（η = 6)暴露於試驗化合物（丨〇 ηΜ)，在此激 動刎之作用達到穩定狀態後，先CPX (60 ηΜ)，然後 ΖΜ2413 85，加入灌流液中，記綠cpp之改變。 在分離之灌流心臟（鼠n==36&天竺鼠n=18)節律於恆定心 房週期長度340毫秒中，腺苷，CGS2168〇，WRC〇47〇，及 化合物16造造成冠狀血管傳導率隨濃度增加。CGS21680 及WRC0470爲最有效之激動劑。化合物16在增加冠狀血管 傳導中較腺甞有效約丨〇倍。値得注意者，所有激動劑爲對 於鼠心臟較對於天竺鼠心臟有效幾倍之冠狀血管擴張劑。 表3 -在鼠及天竺鼠分離之灌流心臟中腺甞及A2a腺苷受體 爲測定涉及化合物1 6存在下所測得之冠狀血管擴張之 AdoR亞型（A^A^)，此激動劑（1〇 nM)對冠狀血管傳導之 作用係在CPX，一種選擇性入丨AdoR激動劑（Belardinelli et al，1998)及 ZM241385，一種選擇性 A2A AdoR拮抗劑（Poucher et al. 1995)於60 nM濃度不存在及存在下研究。如圖1所 示，化合物16顯著增加冠狀血管傳導率，由基線値〇.丨6 + -43- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公ϋ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 激動劑增加冠狀血管傳導率之效力 效力（ec50) 激動劑 η 鼠 天社鼠 化合物16 4 6.4 土 1.2 18.6 + 6.0 腺苷 4 59.2 土 6.4 86.0 + 0.5 CGS21680 4 0.5 土 0.1 1.7 + 0.4 WRC0470 3 0.6 土 0.2 2.4 +1.1 訂---------線- 1230161 A7 B7 五、發明說明（41 ) 0.02毫升/ mmHg/分鐘增加至0.22 + 0.01毫升/ mmHg/分鐘。 化合物1 6所引發之冠狀血管傳導率增加不被CPX影響，但 是被ZM241385完全逆轉（0·17±0·02毫升/ mmHg/分鐘）。 實例1 7 此實例之目的係用以測定化合物1 6引起冠狀血管擴張之 功能選擇性。特定言之，化合物1 6引發冠狀血管擴張（A2A AdoR反應）及延長A - V結傳導時間（Ai AdoR反應）之效力係 於鼠及天竺鼠心臟中測定。 材料

Sprague Dawley鼠係購自Simonsen。Hartley天竺鼠係購自 Charles River。化合物 1 6 係如上述製備。CVT-5 10，2-{6-[((3R)氧環戊烷-3-基）胺基]嘌呤-9-基}(48,3尺，511)-5-(羥基 甲基）氧環戊烷-3,4-二醇，係根據美國專利5,789,416中所 揭示之合成方法製備，該説明書併入本文供參考。克他命 (Ketamine)係購自 Fort Dodge Animal Health (批號 440444)， 甲苯 p塞唤（xylazine)係購自 Bayer (批號 26051A)。Krebs-Henseleit溶液係根據標準方法製備，0.9%氣化鈉係購自 McGraw，Inc·(批號 J8B246)。 分離之灌流心臟製品 鼠及天竺鼠各6隻分別重230至260克及300至350克用於 此研究中。動物由腹膜内注射含有克他命（ketamine)及甲 苯p塞嗪（xylazine)(克他命100毫克，甲苯p塞唤20毫克/毫升） 之混合物麻醉。打開胸部，心臟迅速取出。心臟以冰冷之 Krebs-Henseleit溶液（參見下文）簡略沖洗，大動脈加套 -44- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -------------—— (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

一-口、I I I ^1 ϋ — ϋ I .1 1 ϋ ϋ ϋ ϋ ^1 ^1 ^1 ^1 ^1 .1 I ϋ I A7 1230161 ——__ _B7_ 五、發明說明（42) 管。然後心臟以修飾之Krebs-Henseleit (K_H)溶液，含有

NaCl 117.9，KC1 4.5，CaCl2 2.5，MgS04 1·18，KH2P〇4 1 · 1 8，丙酮酸2·0毫莫耳/升，流率1 〇毫升/分鐘灌注。κ _ Η 溶液（pH 7·4)連續以μ% 〇2，及5% c〇2充氣，加熱至35 士 〇.50°C °心臟以電節律於固定週期長度34〇抓（250跳/分 鐘），使用一個雙極電極放於左心房上。電刺激係由一個 Grass刺激器（Model S48, W. Warwick，RI)產生，並經由一 個刺激分離單元（Model SIU5, Astro-Med，Inc·，NY)輸送， 以期間3毫秒之方波脈，幅度至少爲閾強度之二倍。 冠狀血管灌流壓（CPP)係使用一個壓力轉換器測量，該 轉換器經由一個位於心臟上方約3公分之T連接器連接於 大動脈套管。冠狀血管灌流壓在實驗期間偵測並記錄於一 種圖表記錄器（Gould Recorder 2200S)或一種電腦記錄系統 (PowerLab/4S ’ ADinstruments Pty Ltd，Australia)。僅使用 CPP範圍在6 0至85 mmHg (在藥物不存在下）之心臟於研究 中。冠狀血管傳導率（毫升/分鐘/mmHg)係以冠狀血管灌 流率（10毫升/分鐘）及冠狀血管灌流壓間之比例計算。。 測量Ai腺苷受體所涉及之A-V結傳導時間之壓抑（負變 導（dromotropic)作用）。在恆定心房節律期間，記錄鼠心 房及心室表面電位圖及天鼠His束電位圖。化合物1 6對於 房室傳導時間及對於His束之刺激（S_H間隔）係如上述 Jenkins and Belardinelli (1988)所述測定。 然後測定化合物1 6對於冠狀血管傳導率之作用（a2A作用） 及對於房室傳導時間對於His束之刺激（S - Η間隔）之作用 -45- 尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱了 -------------% (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 一^I ϋ I ϋ I 11 1- §1 I I ϋ ϋ ϋ n ϋ - 1230161 A7 B7 五、發明說明（43 ) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) (Al作用）。心臟使用儀器連續記錄冠狀血管灌流壓（a2a反 應）及房1：(A-V)傳導時間或S_H間隔（Αι反應）。在各實驗 中’測疋化合物16(藏n = 6，天竺氣n = 4)增加冠狀血管傳 導及延長A-V傳導時間或S_H間隔之濃度_反應關係。在 對照測量CPP及A-V傳導時間或S-H間隔後，施用漸高濃度 之化$物1 6，直到達到最大冠狀血管擴張及a _ v結傳導 時間或S-H間隔延長爲止。在分離之鼠心臟（n = 4)中，測 足各種濃度（100-400 nM)之CVT51〇 (一種、腺苷激動劑） (Snowdy et al，1999)對於A_v結傳導時間之影響，並與化 合物 1 6 (0.1-30 "m)比較。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 化合物1 6增加冠狀動脈傳導及延長a _ v結傳導時間或 S-Η間隔之濃度·反應曲線示於圖2及3中。在鼠及天鼠 中，化合物1 6以濃度依賴方式增加冠狀血管傳導率。化 合物16增加冠狀血管傳導率之效力（Ec5G値），在鼠心臟爲 6.4 土 0·6 nM，在天竺鼠心臟爲18·6 土 6·〇 nM。反之，此激 動劑對於S - Η間隔之影響在鼠及天竺鼠心臟之間有些變 化。在鼠心臟中，化合物1 6不會延長A - V結傳導時間（圖 2及3)，而A〗 AdoR激動劑CVT510顯著延長A-V結傳導時 間（圖4)。不像在鼠心臟，在天竺鼠心臟中，化合物1 6引 發S - Η間隔之濃度依賴性延長（A 1反應），EC5G値（效力）爲 4.0 土 2·3 aM (圖4)。此値大於（即效力小於）引發冠狀血管 擴張之EC5〇値18.6 士6·0ηΜ(Α2Α反應，圖3)約215倍。 此結果顯示化合物1 6在鼠心臟中爲冠狀血管擴張劑（a， ^ Α.

AdoR涉及之作用），無負變導（dromotropic)作用（A! AdoR -46- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公髮） 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1230161 ΚΙ Β7___ 五、發明說明（Μ) 涉及之作用）。在天竺鼠心臟中，化合物1 6引發一些負變 導作用。盡管如此，化合物1 6引發冠狀血管擴張較引發 負變導作用之選擇性大至少215倍。在化合物1 6所引發之 Ai AdoR涉及之反應中，種差異之原因不明。無論如何， 在二種（鼠及天竺鼠）中，化合物16在不引起A-V結傳導 時間延長（即無負變導作用）之濃度可引發最大冠狀血管擴 張。亦測得化合物1 6對A2A AdoR之親和力大於對A! AdoR (即〉2-/>-13倍），且對於A2A AdoR涉及之冠狀血管擴張， 較對於Ai AdoR涉及之負變導作用，具有顯著較大之受體 保留。 實例1 8 此研究係設計用以測試A2A腺苷受體（AdoR)之親和力（Ki 或pKi)及作用期間之間具有相反關係之假説。特定言之， 此研究之目的係用以測定一選擇系列之高及低親和力a2A AdoR激動劑於鼠分離之心臟及麻醉之豬體内引發冠狀血 管擴張之期間及這些激動劑對於豬紋狀體中A2a AdoRs之 親和力間之關係。 材料 鼠（Sprague Dawley)係購自Simonen。飼養豬係獲自 Division of Laboratory Animal Resources, University of Kentucky。本發明化合物i 2，1 3及1 6係如上述方法製 備。YT-0146係如美國專利4,956,345中所述製備，該説明 書併入本文供參考。WRC-0470係如文獻（K· Niiya et al·，J. Med· Chem· 35; 4557-4561 (1992))中所述製備。CGS 21680 •47- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 χ 297公釐） -I— n I I ϋ ϋ ϋ I 0 n ϋ ϋ ϋ 一一 n ϋ ϋ I ^1 ϋ I I I ^^^^1 1 I I 1 1 H ϋ I ϋ ϋ n ϋ ^1 1 n 1« I (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1230161 A7 B7 五、發明說明（45) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 係購自 Research Biochemicals，Inc·及 Sigma，R-PIA (批號 WY-V-23)係購自 Research Biochemicals，Inc. HENECA 爲 University of Camerino，Italy敎授 Gloria Cristalli之禮物。 麻醉劑：克他命（Ketamine)係購自Fort Dodge Animal Health。甲苯p塞嗪（Xylazine)係購自Bayer。戊巴比妥 (pentobarbital)鋼係購自The Butler Co.苯腎上腺素係講自 Sigma。DMSO 係購自 Sigma 及 American Tissue Type Collections。Krebs-Henseleit溶液係根據標準方法製備， 0.9%鹽水係購自 McGraw，Inc.。 在此研究中，使用下列實驗室製品：1)鼠分離之灌流心 臟；2 )麻醉打開胸部之豬。 鼠分離之灌流心臟製品 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

Sprague Dawley成鼠各6隻重230至2 60克用於此研究中。 該等動物由腹膜内注射含有克他命（ketamine)及甲苯p塞唤 (xylazine)(克他命100毫克，甲苯嘧嗪20毫克/毫升）之混合 物麻醉。打開胸部，心臟迅速取出。心臟以冰泠之Krebs-Henseleit溶液（參見下文）簡略沖洗，大動脈加套管。然後 心臟以修飾之Krebs-Henseleit (K-H)溶液，含有NaCl 117.9，KC1 4·5，CaCl 2·5，MgS04 1.18，KH2P04 1.18，丙 酮酸2.0毫莫耳/升，流率10毫升/分鐘灌注。K-H溶液（pH 7.4)連續以95% 02，及5% C02充氣，加熱至35 土 0.50°C。心 臟以電節律於固定週期長度340 ms ( 250跳/分鐘），使用一 個雙極電極放於左心房上。電刺激係由一個Grass刺激器 (Model S48, W. Warwick，RI)產生，並經由一個刺激分離單 -48- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1230161 A7 B7 五、發明說明（46) 元（Model SIU5, Astro-Med，Inc·，NY)輸送，以期間 3 毫秒之 方波脈，幅度至少爲閾強度之二倍。 冠狀血管灌流壓（CPP)係使用一個壓力轉換器測量，該 轉換器經由一個位於心臟上方約3公分之T連接器連接於 大動脈套管。冠狀血管灌流壓在實驗期間偵測並記錄於一 種圖表記綠器（Gould Recorder 2200S)或一種電腦記錄系統 (PowerLab/4S，ADinstruments Pty Ltd，Australia)。僅使用 CPP範圍在60至85 mmHg (在藥物不存在下）之心臟於研究 中。冠狀血管傳導率（毫升/分鐘/mmHg)係以冠狀血管灌 流率（10毫升/分鐘）及冠狀血管灌流壓間之比例計算。 麻醉打開胸部之豬製品 飼養豬重22_27公斤用於此研究中。所有動物接受人道 照顧，根據National Society for Medical Research所訂立之 ’’The Principles Laboratory Animal Care’，及 Institute of Laboratory Animal Resources所製作及 National Institutes of Health所公布之 ’’Guide for the Care and Use of Laboratory Animals”（NIH公布號碼86-23，修正於1996)中所述之指 導。此外，動物係根據 University of Kentucky Institutional Animal Care and Use Protocol之指導使用。 以克他命（Ketamine) (20毫克/公斤，經肌肉内）及戊巴比 妥（pentobarbital)鈉（15_18毫克/公斤，經靜脈内）麻醉。再 以戊巴比妥鈉（1·5_2毫克/公斤，經靜脈内）維持麻醉，每 15-20分鐘。維持換氣，經由氣管切開術使用室内空氣及 100% 02之混合物。調節潮流（tidal)體積，呼吸速率，及吸 -49- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ------------%------- — 訂---------^ J^wi (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1230161 A7 __ B7 五、發明說明（47 ) 入空氣中02分壓以維持正常動脈血氣體（ABG)及pH値。核 心體溫以一支食道溫度探針偵測，並以一加熱墊維持在 37.0-37.5°C之間。在最初施用大丸劑（bolus) 300-400毫升 後，乳酸鹽Ringers溶液經由一耳或股靜脈以5 - 7毫升/公 斤/分鐘施用。一套管插入股動脈以偵測動脈血壓及獲得 ABG樣品。 心臟經由一種正中軀幹切開術暴露，並懸浮於一個心包 支架中。左心室壓（LVP)以一個5F高傳眞壓力敏感尖端轉 換器（Millar Instruments，Houston，TX)經由心尖放入左心室 腔中並以一袋口縫線固定而測量。一段左前下行冠狀動脈 (LAD)，接近第一個對角分支之起源，去除周圍組織。一 支通過時間血管周圍血流探針（Transonic Systems Inc.， Ithaca，NY)於在此段周圍以測量冠狀動脈血流（CBF)。接近 該血流探針插入一支2 4克改良之血管套管用於冠狀動脈 内灌流。所有血液動力數據連續顯示於一個電腦偵測器 上，並經由一個3 2位元之類-數位轉化器傳送至一個具有 定製軟體（Augury，Coyote Bay Instruments，Manchester，NH) 之連線作業數據取得電腦。A2A AdoR激動劑溶於DMSO中 以產生原料濃度1-5 mM，其於0.9%鹽水中稀釋，以1-1.5 毫升/分鐘之速率注入。A2A AdoR激動劑經冠狀動脈内施 用。爲維持血壓恆定，苯基腎上腺素經靜脈内施用。苯基 腎上腺素原料溶液（30 mM)於蒸餾水中製備。 分離之灌流心臟 爲測定腺苷及腺苷受體激動劑所引發之A2A腺苷受體所 50- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公蓳） --------------------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1230161 A7 B7 五、發明說明（48 ) 涉及冠狀血管擴張之期間，激動劑經靜脈内施用，由大丸 劑注射（方案A )或由連續注入（方案b )。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 方案A :大丸劑注射 在此系列之各心臟（各激動劑3至丨丨個心臟）中，大丸劑 之腺茹（2 0微升，2Χ10·4 μ)，本發明化合物（2()至4〇微 升，2 X 10·5 M)，及其他腺苷受體激動劑注射入灌流管 中。測量CPP減少逆轉50% (t 0.5)及90% (t 0.9)之時間。各 心臟暴露於最多三種血管擴張劑中。 方案B : 連續注入 在另一系列之實例（n = 4)中，化合物16及腺甞注入灌流 管中，以恆定速率歷6分鐘期間。化合物16及腺甞之灌流 濃度分別爲20 nM及200 nM ’其爲約4 X各別先前確立以引 發鼠分離之灌流心臟中冠狀血管傳導率最大增加5〇%之濃 度（EC5〇)。由激動劑注入停止之時間測量cPP減少逆轉5〇% (t 0.5)及90% (t 0.9)之時間。 化合物1 6大丸劑注射所引發之最大血管擴張之劑量依賴 期間 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 爲測定化合物1 6引發最大冠狀血管擴張期間之劑量依賴 性，大丸劑（100-300微升）之化合物16之2>< 1〇-5 M原料溶 液注射入灌流管中。此外，注射期間根據大丸劑之體積變 化’ 100 ’ 200及300微升大丸劑分別爲1 〇，2 0及3 〇秒。最 大作用期間係由CPP減少達到最低點至CPP逆轉開始點測 量。 各種激動劑對於A2 a腺嘗受體之親和力及用於增加冠狀血 -51 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） A7 1230161 五、發明說明（49 ) 管傳導率之逆轉時間之間之關係 這些實驗係用以建立各種激動劑對於a2a腺 和力及各別影響冠狀血管傳導期間之間之關係。^激動 劑大丸劑注入鼠分離之灌流心臟（對於各激動劑，至6) 之灌流管中，測量CPP減少逆轉90%之時間（t 〇 9)。各種激 動劑對於Asa腺苷受體之親和力係於豬紋狀體膜中使用放 射配位體結合分析測定，如上述。cpp減少之逆轉時間（t 〇·9)對於八以腺铝受體之親和力（pKi)作圖。 打開胸部之豬 在實驗開始前，所有裝置完成後經過一個3 〇分鐘安定 期。在獲得基準血液動力數據後，開始第一次冠狀動脈内 注入A2a AdoR激動劑。注入維持4_5分鐘以使1^;〇 cbf達 到穩定狀態，然後終止注入。記綠恢復5〇% (t 〇.5)及9〇% (t 0.9)之基線CBF之時間。在CBF回到藥前値後1 〇至丨5分 鐘，開始第二次注入不同激動劑。在初步研究中，發現腺 苷激動劑經冠狀血管内注入會產生不同程度之系統性低血 壓’因此在所有以後實驗中，經靜脈内施用苯基腎上腺 素。在苯基腎上腺素以1微克/公斤/分鐘之劑量注入開始 之前及之後測量血液動力。在腺甞激動劑注入期間及之後 調節苯基調節苯基腎上腺素注入速率，以維持動脈血壓於 注入前値之5 mmHg内。最多三種不同激動劑之作用測定 於各實驗中。 結果 腺苷，本發明化合物，及其他腺甞衍生物係以大丸劑注 52- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -------------% (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

一so、_ _1 t ·ϋ —Ml I n ϋ ϋ ϋ ϋ ϋ I ϋ I ϋ I i^i n ϋ ϋ .^1 ^1 I 1230161 A7 B7 五、發明說明（5〇 ) 入灌流管中，以可引發冠狀血管傳導率相等或接近相等增 加之濃度。雖然腺誓及激動劑可引發冠狀血管傳導率相等 最大增加，但是彼等作用之期間顯著不同。腺甞之作用期 間最短，然後爲化合物16，而CGS21680及WRC0470最 長。腺茹，本發明化合物，及其他激動劑所引發之冠狀血 管擴張之期間以冠狀血管傳導率增加逆轉5〇%及9〇%之時 間（分別爲t 05.及t 0.9)測量，摘示於下表4中。 表4 -在鼠分離之灌流心臟中腺苷及腺茹受體激動劑所引發 激動劑 t 0·5 (分鐘） t 〇·9 (分鐘）、 η 腺甞 1·06 土 0·1 5.6 + 0.8 11 HENECA 28.6± 1.1 32.8 + 3.1 3 R-PIA 7.9 土 0.1 12.6 + 0.8 3 CGS21680 14.5±0.9 19.5 + 0.9 3 YJ-146 17·7±1·0 28.5+4.0 3 化合物12 14.83+2.1 15.0 + 0.8 3 化合物13 14·4土1·9 21.3 + 3.9 4 化合物16 5.2 + 0.2 11.3 + 1.1 5 ▼ '，，，I V ·认〜从巨 ^ ^ 7JXJ ^ 50%及90%之時間（分別爲1〇.9)(分鐘）。各値爲各製 劑（n )之單一測定之平均土 SEM。 冠狀血管擴張之逆轉時間依腺甞衍生物對於腦紋狀體 Am受體之親和力而定。（圖2A)各激動劑對於AuAd〇R之 親和力（PKi)及相同激動劑所引發之冠狀血管擴張之逆轉 -------------% (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

)aJ n ϋ ϋ ϋ I I I ϋ ϋ I ϋ n 1 ϋ ϋ 1 ϋ H ϋ I -53- 1230161 A7 B7 五、發明說明（51) 時間（t 0.9)之間具有顯著（p<〇 〇5)相反應關係（r=〇 87)。 不論化合物1 6係以大丸劑或連續注入給予，冠狀血管擴 張之逆轉相當迅速。事實上，比較6分鐘注入腺苷及化合 物1 6 ’以引起冠狀灌流壓（cpp)同樣減少之劑量，顯示腺 芬及化合物1 6具有相似血管擴張期間及逆轉時間。t 〇.5及 t 0·9幾乎相同。化合物丨6所引起之冠狀血管擴張期間爲劑 量依賴性。增加化合物丨6 (原料溶液2 χ丨〇_5 Μ)大丸劑體積 可造成CPP減少持續較長期。冠狀血管擴張之最大期間 (CPP維持最低之時間）隨大丸劑之體積由1 〇〇微升增加至 200及300微升而增加，不影響cpP之最大降低。 打開胸部之豬製品中冠狀血管擴張 在打開胸部之麻醉豬製品之心臟中，本發明化合物1 6及 CGS21680 及其他 A2A AdoR 激動劑（即 WRC-0470 及 YT-146) 可引起冠狀血管血流（CBF)顯著增加。這些化合物之選擇 劑量以連續（4至5分鐘）冠狀血管内注入可引起CBF增加 3.1至3.8倍，如下表5中所示。在確立所有激動劑可引起 CBF^I乎相同幅度之增加（即”倍增（f〇id increase)")及引起 心跳速率及平均動脈血壓之相似變化，測定各別之冠狀血 管擴張作用之逆轉時間。 表5 ·各種腺苷受體激動劑於打開胸部之麻醉豬中引起冠狀 血管血流增加之幅度 激動劑 CBF("倍增"） η 化合物16 (10微克/公斤/分鐘） 3.40±0.04 3 化合物16 (310微克/公斤/分鐘） 3.83 土0.39 6 -54- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -------------% (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 I- .1 ϋ ϋ H ϋ I I ϋ ϋ ϋ ϋ ϋ — ϋ ϋ ϋ I I ι ϋ ϋ ϋ ϋ ^1 ϋ ^1 ϋ ϋ - 1230161 A7

t C JD/ 五、發明說明（52 ) WRC-470 (1 微克 3.14 + 0.24 6 GSC21680 (2微克/公斤/分锖） 3.54 + 0.093 3 YT-146 (1 微克/公^7^7 3.44 + 0.47 3 線之最大’’倍增’，。數據表各豬（η)之一或二個測量値之平 均土 SEM。 如表6中，各種AdoR激動劑及” CVT-化合物，，所引起 之甩狀I；擴張之t〇 $及％ 9不同。本發明化合物1 6所引起 之CBF增加之逆轉時間較CGS21680，WRC-0470或YT-146 ：更重要者如在鼠分離之灌流心臟，A2a AdoR激動劑 對於豬腦紋狀體Am受體之親和力（PKi)及冠狀血管擴張之 逆轉時間（t 0.9)之間具有顯著（p<〇 〇5)相反關係（㈣·93)。 選擇數目之激動劑於鼠分離之灌流心臟中及於麻醉之開胸 豬製品中所引起之冠狀血管擴張之逆轉時間之間有極佳之 一致性。 表6·各種料受體激動劑於開胸之麻 血管擴張之逆^間 ”㈣ 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

-55- 本紙張尺度適用中國國家標準

份 79c s / ) i I Μ (< / y z X u n : n ϋ n ϋ n n n ϋ ϋ ϋ ϋ I 一 «Μ MB MB MM MB ΙΜ I MB B·· M· MB ΙΜ I I Η· Η· MM MM (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) A7 1230161 B7 五、發明說明（53 ) 90%之時間（分別爲t() 5及t() 9)(分鐘）。各値爲在各動物（11)之 一或二個測定之平均土 SEM。 化合物1 6爲低親和力之A2A AdoR激動劑，效力較原典型 激動劑CGS21680低（10倍）。盡管如此，化合物1 6爲一種 引起冠狀血管擴張之完全激動劑。但是，如此研究中所 示，其作用期間較高親和力激動劑CGS21680及WRC-0470 短幾倍。因此，化合物1 6爲一種短作用之a2A AdoR激動劑 之冠狀血管擴張劑。因爲其較短作用期間，與高親和力之 A2A AdoR激動劑（例如WRC-0470，CGS21680)比較，此親 和力低但完全之激動劑作爲冠狀血管擴張劑可證明爲心肌 之放射性核素顯像期間理想之藥理學”應激劑（stress〇r agents)’’ 0 ------------% (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 111111. 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐）

Claims (1)

1. B8 10 月)S WJc ——„1 公中舍笨利 123 0 號專利申請案 Γ範圍替換本(93年 申請專利範園 1 · 一種具有下式之化合物：

   R3係選自由下列組成之群：C 〇 2 R2 0，c〇N(R20)2，-CONR7R8 ’及苯基；其中苯基取代基係經下列丨至3個取 代基取代或未取代，其取代基係獨立選自由下列組成 之群··鹵，Ci_5烷基及〇R20 ; , R7係選自氫，Cp環烷基，及Cl 5烷基，其中烷基取 代基係經1至3個取代基取代或未取代，其取代基獨立 選自由下列組成之群：苯基及c〇2r2〇，及其中該選擇性 苯基取代係經鹵取代或未取代； R8係選自由下列組成之群：氫及Cl 5烷基； R20係選自由下列組成之群：Η及Cl_5烷基；及其中r2 及R4為Η。 2 ·根據申请專利範圍第1項之化合物，其中R3係選自由下 列組成之群C〇2R2G，-COMR7R8及苯基，其中苯基取代基 係經1至3個取代基取代或未取代，其取代基獨立選自 由下列組成之群：鹵及OR20 ; R7係選自由下列組成之群：Ci 5烷基，其中烷基取代 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公

   六、申請專利範園 A8 B8 C8

   基係經1至3個取代基取抑 ,, 代或未取代，其取代基獨立選 ,^ 本基，及其中各選擇性苯基取代基 係經|g取代或未取代； ^ 匕係選自由下列組成之群：氫及cl-5烧基； R係選自由下列組成之群：Η及C"烧基。 根據申請專利範圍第i項之化合物，其中R3係選自 列組成之群：C〇,R20，7 δ b ^ _ 2 -CONR R8，及苯基；其中苯基取 1、土係經下列i至3個取代基取代或未取代，其取代基 系獨立選自由下列組成之群：鹵，Cl_5烷基及〇尺2。； r7 係、自由c“5烷基所組成之群，其中烷基取代基係經工 至2個取代基取代或未取代，其取代基獨立選自由下列 、、且成之群·苯基’及其中各選擇性苯基表代基係經翁取 代或未取代； R8係選自由下列組成之群：氫5烷基； R20係選自由下列組成之群：烷基。 4 ·根據申請專利範圍第丨項之化合物，其中 R係選自由下列組成之群：C〇2R20，-ConW，及苯 基，其中苯基取代基係經i至3個取代基取代或未取 代，其取代基獨立選自由下列組成之群：鹵，C15烷基 及OR20 ; R7係選自由下列組成之群：氫及C15烷基，其中烷基取 代基係經1至2個取代基取代或未取代，其取代基獨立 選自由下列組成之群：笨基，·及其中各選擇性苯基取代 基係視需要經鹵取代； -2- 本紙張尺度適财S ®家標準(CNS) A4規格(21Gχ 297公爱) 1230161

   %年/D月D日 A8 B8 C8 D8

   R8係選自氫及（V5烷基；及 R2G係選自氫及Cw烷基。 5 ·根據申請專利範圍第1項之化合物，其中 R3係選自由下列組成之群：C〇2R2〇，_c〇Nr7r8，及苯 基，及其中苯基取代基經丨至2個取代基取代或未取 代，其取代基獨立選自下列由組成之群：_，Ci $烷基 及OR20 ; 1-5 土 R7係選自由下列組成之群：氫，及Cw烷基，其中烷基 取代基經一個選自下列之取代基取代或未取代：苯基， 及其中各選擇性苯基取代基經函取代或未取代； R8係選自氫及Cw烷基；及 R2G係選自氫及烷基。 6 ·根據申清專利範圍第1項之化合物，其中 R3係選自由下列組成之群：co2r20，-CONR7R8，及苯 基，其係經1至2個取代基取代或未取代，其取代基獨 立選自由下列組成之群：鹵，Cl_3烷基，及〇R20 ; R7係選自由下列組成之群：氫及(^_5烷基，其中烷基取 代基經苯基取代或未取代，其中各選擇性苯基取代基 經鹵取代或未取代； R8係選自氫及Cw烷基；及 R2G係選自氫及cN4烷基。 7 ·根據申請專利範圍第1項之化合物，其中 R3係選自由下列組成之群：co2r2()，-CONR7R8，及苯基 (其係經一個取代基取代或未取代，其取代基選自下 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)八4規格(210X 297公羡) 修正 Ι23〇16]γ- P年/d月之之9 六、申 歹成之群：鹵，CK3烷基，及〇R20); 、R係選自氫及Cl-5烷基，其中烷基取代基經苯基取代 或未取代’及其中各選擇性苯基取代基經_取代或未 取代； R8為氫；及 R20係選自氫及CK4烷基。 根據申睛專利範圍第7項之化合物，其中R7為甲基。 根據申明專利範圍第7項之化合物，其中r3為_匸〇2以。 1〇·根據申請專利範圍第1項之化合物，其中化合物係選 自： 二羥基-5-(羥基甲基）氧環戊烷 (〇xolan)-2-基]-6-胺基σ票呤，2-基卜比α坐-4-緩酸乙酯， (48,211，311，5幻-2-{6-胺基-2-[4-(4-氣苯基）吡唑基]嘌呤-9_基卜5-(經基甲基）氧環戊烷-3,4_二醇， (43,211，311，511)-2-{6-胺基-2_[4-(4-甲氧基苯基）吡唑基]嘌 〜-9-基}_5-(羥基甲基）氧環戊烷-3,4-二醇， (4S，2R，3R，5R)-2-{6-胺基·2-[4-(4·甲基苯基）吡唑基]嘌 呤-9-基}-5_(羥基甲基）氧環戊烷-3,4-二醇， 、 (l-{M(4S，2R，3R，5R)-3,4-二羥基(羥基甲基）氧環戊 烷-2-基]-6_胺基嘌呤_2_基}吡唑基）-Ν_甲基羧醯胺， 1_{9-[(43,211，311，5及)-3,4-二羥基-5_(羥基曱基）氧環戊烷-2-基]-6-胺基嘌呤-2-基}吡唑_4_羧酸， (l-{9-[(4S，2R，3R，5R)-3,4-二羥基-5-(羥基曱基）氧環戊 烷-2-基]-6_胺基嘌呤_2-基}吡唑_4•基）·ν，ν_二甲基羧醯 -4 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) Α4規格(210 X 297公爱）. --------

   六、申請專利範園 123016 胺， 1]9_[(48,211，311，51〇-3,4-二羥基-5-(羥基曱基）氧環戊烷-2-基;1-6-胺基嘌呤_2-基}吡唑-4-基）-N-乙基羧醯胺， 1- {9-[(48,2尺，311，51〇-3,4-二羥基-5-(羥基甲基）氧環戊烷- 2- 基;^6-胺基嘌呤_2-基}吡唑-4-羧醯胺， 1一（9-[(48,211，311，511)-3,4-二羥基-5-(羥基甲基）氧環戊烷- 2-基]-6-胺基嘌呤_2-基}吡唑-4-基）-N-(環戊基甲基）羧醯 胺， 二羥基-5-(羥基曱基）氧環戊 烧基]-6-胺基嘌呤-2-基}吡唑-4-基）-N-[(4-氯苯基）甲 基]竣醯胺，及 2_[(1-{9-[(48,211，311，511)-3,4-二羥基-5-(羥基甲基）氧環戊 烧-2-基]—6-胺基嘌呤_2-基}吡唑-4-基）羰基胺基]醋酸乙 酯。 11· 一種用於刺激哺乳類冠狀血管擴張之醫藥組合物，其包 括治療有效量之根據申請專利範圍第1項之化合物，其足 以應激（stress)心臟及引發冠狀血管偷竊（steal)情況，以 使心臟顯像。 12.根據申請專利範圍第丨丨項之醫藥組合物，其中治療有效 量之範圍為約0·01至約1〇〇亳克/哺乳類之公斤重量。 13·根據申請專利範圍第丨丨項之醫藥組合物，其中哺乳類為 人類。 〆 14· 一種醫藥組合物，包含根據申請專利範圍第i項化合物及 一或多種醫藥賦形劑，其中該組合物係可用作:種抗 -5-

   1230161 %年/D月曰

   A8 B8 C8 D8 々、申請專利範圍 發炎劑，用於與血管造形術連合治療，用作血小板凝集 抑制劑，及用作血小板及中性球活化之抑制劑。 15.根據申請專利範圍第1 4項之醫藥組合物，其中醫藥組合 鹵物係呈溶液形式。 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐)