TWI293301B - A1 adenosine receptor antagonists - Google Patents

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1293301 A7 B7 五、發明説明（1 ) 本案主張2000年1 2月1曰申請之美國臨時專利申請案編 號60/250,658之利益，其併入本文供參考。 . 發明之技術領域 本發明係關於醫藥化學及藥理學。本發明更特別關於腺 甞受體之拮抗劑，包括這些化合物之醫藥組合物，以及製 造彼等及使用彼等以治療疾病之方法。 發明之背景 腺荅為到處存在之生物化學傳訊者。腺甞結合及活化七 種穿膜跨越之G蛋白質偶合之受體，激發各種生理反應。 腺甞受體分成四種已知之亞型（即Ai，A2a，A2b及A3)。 這些受體亞型調節不同，有時相反，之作用。例如，腺甞 Αι受體之活化激發腎血管抗性之增加，而腺甞A2a受體之 活化激發腎血管抗體之減少。 在大部份哺乳類器官系統中，代謝壓力（stress)期間造成 組織中腺芬之濃度顯著增加。例如，心臟產生及釋放腺甞 以調節對於壓力之適應反應，如心跳速率降低及冠狀血管 擴張。同樣地，對於低氧，代謝壓力，及許多毒腎物質之 反應，腎中腺荅濃度增加。腎在結構上亦產生腺甞。腎可 調節結構上所產生腺甞之量以調節絲球體之過濾及電解質 之再吸收^關於絲球體過濾之控制，Αι受體之活化導致傳 入小動脈收縮，而A2a受體之活化導致傳出小動脈擴張。 A2a受體之活化對於傳入小動脈產生血管擴張作用。總之， 這些絲球體腺甞受體活化之作用為降低絲球體過濾之速 率。此外，At腺甞受體位於小管近端及小管遠端位置。這 -4- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1293301 A7 B7 五、發明説明（2 ) 些受體之活化刺激鈉由小管腔再吸收。因此，阻斷腺甞對 於這些受體之作用可造成絲球體過濾速率升高及鈉排出增 加0 發明之摘要 本發明係基於發現式I及11之化合物為特定亞型腺芬受體 之有效及選擇性抑制劑。基於此發現，本發明之特徵在於 腺芬拮抗劑可用於預防及/或治療許多疾病，包括心臟及循 環疾病，中樞神經系統之變性疾病，呼吸疾病，及許多適 合利尿治療之疾病。一般而言，本發明之特徵在於腺甞Ai 受體之高度有效及選擇性拮抗劑。 本發明之特·徵在於下式I或11之化合物：

R?

R? ☆

式II -5- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1293301 A7 B7 五、發明説明（3 ) 其中Ri&R2獨立選自下列： a )鼠， b) 烷基，烯基，或炔基，其中該烷基，埽基，或炔基為 未經取代，或具有一或多個選自下列之取代基：羥基，烷 氧基，胺基，烷胺基，二烷胺基，雜環基，醯基胺基，烷 基磺醯基胺基，及雜環基羰基胺基Γ及 c) 芳基或經取代之芳基； R3係選自下列： (a) —個雙環，三環，或五環基，選自下列：

-6 - 本紙張尺度適用中國國家榉準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1293301 A7 ______B7 五、發明説明（4 )

其中雙環，三環，或五環基為未經取代，戒鼻有一或多個 選自下列之取代基： ， (i )燒基，婦基，及块基；其中各嫁基’烯基或块基 為未經取代，或具有一或多個遂自下列之取代基·· (貌氧基談基）芳燒基胺基甲醯慕’（胺基）（D酿基 肼基羰基，（胺基）（r5)醯氧基羧基，（羥基）（烷氧 羰基）.烷基胺基甲醯基，醯基膀基烷基胺基，醯氧 基，酸基，婦氧基，埽基胺基，婦基續酿基胺基’ 烷氧基，烷氧基羰基，烷氧基羰基烷基胺基，烷氧 基羰基胺基，烷氧基羰基胺基籬氧基，燒氧基羰基 胺基烷基胺基，烷基胺基，烷基胺基烷基胺基，烷 基胺基甲醯基，烷基膦酸基，嫁基磺醯基胺基，烷 基磺醯基氧基，胺基，胺基醯氧基，胺基烷基芳烷 基胺基甲醯基，胺基烷基胺基f醯基，胺基烷基雜 環基烷基胺基f*醯基，胺基環嫁基烷基環烷基胺基 甲醯基，胺基環烷基胺基甲醯基，芳烷氧基羰基， 芳烷氧基羰基胺基，芳基雜環基，芳基氧基，芳基 績酿基胺基’芳基續酿基氧基’胺基甲酿基’談 基，氰基，氰基烷基胺基甲醯基’環烷基胺基，二 烷基胺基，二烷基胺基烷基胺基，二烷基胺基烷基 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1293301

五、發明説明（5 ) 胺基甲酿基，二垸*基膦酸基，函燒基橫驗基胺基’ 鹵素，雜環基，雜環基烷基胺基，雜環基胺基甲酿 基，羥基，羥基烷基磺醯基胺基，肟基，磷酸基， 膦酸基，-r5，R5-烷氧基，R5-燒基（燒基）胺基’ r5-烷基烷基胺基甲醯基，R5-烷基胺基，R5·烷基 胺基甲龜基，R5 -燒基磺酿基’ Rr烷基續酿基胺 基，r5-烷基硫基，Rr雜環基羰基，經取代之芳燒 基胺基，經取代之芳基羧基烷氧基羰基’經取代之 芳基橫醯基胺基垸基醯基’經取代之雜芳基續酿基 胺基，經取代之雜環基，經取代之雜環基胺基燒基 胺基，經取代之雜環基績酿基胺基’硫氧基 (sulfoxy)酸基胺基’硫胺基甲酿基’三氟甲基，及 (ii) (烷氧基羰基）芳烷基胺基甲醯基，（胺基）（Rs)醯基 肼基羰基，（胺基）（尺5)醯氧基羧基，（羥基）（烷氧 羰基）烷基胺基甲醯基，醯基胺基烷基胺基，醯氧 基，醛基，婦氧基，晞基胺基，烯基磺醯基胺基， 烷氧基，烷氧基羰基，烷氧基羰基烷基胺基，烷氧 基羰基胺基，烷氧基羰基胺基醯氧基，烷氧基羰基 胺基烷基胺基，烷基胺基，烷基胺基烷基胺基，烷 基胺基甲醯基，烷基膦酸基，烷基磺醯基胺基，烷 基磺醯基氧基，胺基，胺基醯氧基，胺基烷基芳烷 基胺基甲醯基，胺基烷基胺基甲醯基，胺基烷基雜 環基烷基胺基甲醯基，胺基環烷基燒基環烷基胺基 甲醯基，胺基環烷基胺基甲醯基，芳烷氧基羰基， -8 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公嫠) 1293301 A7 B7 五、發明説明（e ) 芳烷氧基羰基胺基，芳基雜環基，芳基氧基，芳基 磺醯基胺基，芳基磺醯基氧基，胺基甲醯基，羰 基，氰基，氰基烷基胺基甲醯基，環烷基胺基，二 烷基胺基，二烷基胺基烷基胺基，二烷基胺基烷基 胺基甲醯基，二烷基膦酸基，函烷基磺醯基胺基， 鹵素，雜環基，雜環基烷基胺基，雜環基胺基甲醯 基，經基，基燒基續醯基胺基，Μ基，鱗酸基， 膦酸基，-R5，烷氧基，烷基（燒基）胺基， R5-烷基烷基胺基甲醯基，R5-烷基胺基，R5-烷基 胺基甲醯基，R5-烷基磺醯基，R5-烷基磺醯基胺 基，R5-烷基硫基，R5-雜環基羰基，經取代之芳烷 基胺基，經取代之芳基羧基烷氧基羰基，經取代之 芳基續酿基胺基燒基酿基，經取代之雜芳基續酿基 胺基，經取代之雜環基，經取代之雜環基胺基烷基 胺基，經取代之雜環基磺醯基胺基，硫氧基 (sulfoxy)醯基胺基，硫胺基甲醯基，三氟甲基； R4係選自氫，Cle4烷基，Ci.4烷基-C02H，及苯基，其中 Ci-4烷基，Ci.4烷基-C02H，及苯基為未經取代，或具有 一至三個選自下列之取代基：鹵素，-OH，-OMe，NH2， N02，苯甲基，及苯甲基具有一至三個選自鹵素，-OH， -OMe，-NH2，-N02之取代基； R5 係選自-(CHhCOOH，-c(cf3)2oh，-conhnhso2cf3 ，-conhor4，-conhso2r4，-conhso2nhr4， -C(0H)R4P03H2，-NHCOCF3，-NHC0NHS02R4， • 9 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1293301 A7 B7 五、發明説明（7 ) -ΝΗΡ03Η2，-NHS02R4，-NHS02NHC0R4，-0Ρ03Η2， -0S03H，-PO(OH)R4，-Ρ03Η2，-S03H，-S02NHR4， -so3nhcor4，-so3nhconhco2r4，及下列：

A係選自- CH = CH，-(CH)m-(CH)m，CH = CH-CH2，及 -ch2-ch = ch ; m = 1 或 2 ; X為0或s ; Z 係選自一單鍵…Ο - ’ - ( CH2)n- ’ - Ο - ( CH2)i-2- ’ -CH2OCH2- J ~(CH2)i-2*〇· j -CH = CHCH2- * -CH = CH- j 及-ch2ch = ch-;及 R 6係選自氫，烷基，醯基，烷基磺醯基，芳烷基，經取代 之芳烷基，經取代之烷基，及雜環基；及 R7係選自下列： * a) 氫； b) 烷基，不少於3個碳之婦基，或不少於3個碳之決基； 其中該烷基，缔基，或炔基為未經取代’或具有一或多個 -10- 本紙張尺度適用中國國W準(CNS) A4規格(21〇X 297公嫠） 1293301 A7 B7 五、發明説明（8 ) 選自下列之取代基：羥基，烷氧基，胺基，烷基胺基，二 烷基胺基，雜環基，醯基胺基，烷基磺醯基胺基，及雜環 基羰基胺基；及 c) 芳基或經取代之芳基； d) 烷基芳基或烷基經取代之芳基。 式I或11之化合物可選擇性呈例如非對掌性化合物，消旋 物，光學活性化合物，純非對映體，非對映體之混合物， 或藥理學上可接受之加成鹽之形式。在某些較佳具體實施 例中，本發明化合物為式I或11中R i及R 2均不為氫之化合 物，及{^及！^各獨立選自下列 a )坑基’缔基’或块基’其中該坑基’婦基，或決基為 未經取代，或具有一或多個選自下列之取代基：羥基，烷 氧基，胺基，燒胺基，二烷胺基，雜環基，醯基胺基，烷 基磺醯基胺基，及雜環基羰基胺基；及 b)芳基或經取代之芳基。 更佳至少R!及R 2之一為烷基。在其他較佳具體實施例 中， A為-(CH)m-(CH)m 〇 在其他較佳具體實施例中，汉7為烷基，Z較佳為一單鍵。 本發明之較佳化合物為： 2-(4 -羥基-雙環[2· 2.2]辛-1-基）-7 -異丙基-4-丙基-1，4,6,7-四氫- l，3,4,5a，8 -五氮雜-艾斯（as)·印達辛 (indacen)-5-酮（化合物 1); 7-乙基- 2-(4 -羥基-雙環μ·2·2]辛-1-基）-4-丙基乂 -11- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210X297公I) 1293301 A7 ___ B7 五、發明説明（9 ) 1，4,6,7-四氫-1，3,4,5&，8-五氮雜_艾斯（“）_印達辛 (indacen) — 5-酮（化合物 2); 3-[4-(7-乙基-5-氧基-4-丙基 _4,5,6,7-四氫-lH-l，3,4,5a，8 -五氣雜-艾斯（as) -印達辛（indacen)-2 -基）-雙 環[2·2·2]辛-1-基卜丙酸（化合物3); 2- (4-羥基ν雙環[2.2.2]辛-1-基广7_甲基-4·丙基· 1，4,6,7-四氫- l，3,4,5a，8-五氮雜-艾斯（as)_印達辛 (indacen)-5-酮（化合物 4);及 3- [4-(7 -異丙基-5 -氧基-4_丙基-4,5,6,7 -四 氫-ΙΗ-l，3,4,5a，8-五氣雜艾斯（as) -印達辛（indacen)-2 -基）-雙 環[2·2·2]辛-1-基卜丙酸（化合物5)。 本發明化合物可以修飾以增進所欲性質。該修飾為此技 藝中已知’包括在生物學上增加’參透入一個特定生物學系 統（例如血液，淋巴系統，中樞神經系統），增加口服可利 用性’增加溶解度以便經由注射施用，改變代謝，及/或改 變排泄速率。這些修飾之實例包括，但不限於，以聚乙二 醇酿化，以新戊酸酯或脂肪酸取代基衍化，轉化為胺基甲 酸酯，芳環之羥化，及芳環經雜原子取代。 本發明之特徵亦在於一種醫藥組合物，包括任一種上述 化合物單獨或與一種適合賦形劑組合在一起。 本發明之特徵亦在於一種治療顯示Ai腺:y：受體活化為疾 病或達常原因之疾病或達常跡象或徵候之病人之方法。該 方法包括對於該病人施用有效量之任一種上述化合物。該 疾並或達常可為例如系統性高血壓，腎衰竭，糖尿病，氣 -12- 張尺度適用_家標準(⑽）A4giGχ撕公董) 1293301 A7 B7 五、發明説明（1〇 ) 喘，水腫症狀，充血性心臟衰竭，或腎功能不良（例如，腎 功能不良為一種用於治療充血性心臟衰竭之利尿劑所發生 之副作用，或腎毒性為以化學治療劑治療所發生之副作 用）。 本發明化合物提供下列優點。例如，（1 )彼等可以低劑量 使用以使可能發生之副作用減至最少，（2)彼等可併入許多 劑形，包括，但不限於，藥丸，錠，膠囊，氣溶膠，栓 劑，食入或注射之液體調配物，食物補充物，或局部製 劑。除人類醫藥應用外，本發明化合物可用於獸醫之動物 治療。在一些具體實施例中，醫藥組合物係調配以經口， 經靜脈内，經肌肉内，或經皮下施用。 本發明之特徵亦在於一種製備上述化合物之方法，包含 下列步驟：（a) —種硫酮烷基化以產生一種硫醚；b)該硫醚 與一種經取代之胺基醇反應以產生一種醇中間物；及〇該 醇中間物環化以產生一種環化產物、 在一些具體實施例中，上述方法另包含下列步驟：a)該 環化產物轉化為一種羧酸衍生物。在一些具體實施例中， 該方法包含下列步驟：a)一種二胺基尿嘧啶與雙環[2.22] 辛-1，4 -二羧酸一甲酯偶合以產生一種酸；b)該酸還原成一 種對應醇；c)該醇氧化成一種醛；d)該醛與（三苯基亞正膦 基（phosphoroanylidene))醋酸甲酯偶合以產生一種偽合產 物；e)該偶合產物轉化為一種硫酮；f)該硫酮烷基化以產 生一種硫g)該硫醚與一種經取代之胺基醇反應以產生 一種醇中間物；h)該醇中間物環化以產生一種環化產物； -13- 本紙張尺度適用中國國豕標準(CNS) A4規格(210X297公爱) 1293301 A7 B7 五、發明説明（11 ) 及i)該環化產物轉化為一種羧酸衍生物。 在一些具體實施例中，該方法包含下列步驟·· a) —種二 胺基尿嘧啶與雙環[2·2·2]辛-1，4-二羧酸一甲酯偶合以產 生一種酸；b)該酸酯化成一種對應酯；c)該酯轉化以產生 一種硫酮；d )該硫酮烷基化以產生一種硫醚；e )該硫醚與 一種經取代之胺基醇反應以產生一種醇中間物；f)該醇中 間物環化以產生一種環化產物；及g)該環化產物轉化為一 種羧酸衍生物。 在一些具體實施例中，該方法包含下列步驟：a)6-胺基_ 1-丙基-1H -喊咬-2,4-二酮亞確基化以產生一種亞硝基中 間物；b)該亞硝基中間物還原以產生對應之二胺基尿嘧 咬；c)該二胺基尿喊淀轉化為一種胺鹽；d)該胺鹽與4 -幾 基·雙％[2·2·2]辛-1-幾酸偶合以產生一種偶合產物；6)該 偶合產物轉化為一種硫酮；f)該硫酮烷基化以產生一種硫 趟，g)該硫醚與一種經取代之胺基醇反應以產生一種醇中 間物；及h )該醇中間物環化以產生一種環化產物。 本發明之其他特徵及優點可由下列詳細說明及申請專利 範圍而明瞭。 發明之詳細說明 除非另外定義，本文中所有技術及科學術語具有熟習本 發明技蟄人士一般所明瞭之相同意義。雖然相似或相等於 本文中所述之方法及材料可用於本發明之實施或試驗中， 但是適合之方法及材料說明如下。本文中所述之所有公 開專利中請案，專利，及其他參考資料全部併入供參

1293301 A7 B7 五、發明説明（12 ) 考β此外，材料，方法，及實例僅用於例示，並非用於限 制。 在本說明書中，”包含”或其變異如”包括”或”含有”表示 包括所述之整體或整組，但是不排除任何其他整體或整 組。 本文中所用之”缔基”為具有至少一個雙鍵之脂族碳基。 烯基可為直鏈或分支鏈，可具有例如3至6個碳原子於一鏈 中及1或2個雙鍵。埽基之實例包括，但不限於，婦丙基及 異戊二烯基。 本文中所用之”炔基”為具有至少一個三鍵之脂族碳基。 炔基可為直鏈或分支鏈，可具有例如3至6個碳原子於一個 鏈中及1至2個三鍵。炔基之實例包括，但不限於，炔丙基 及丁炔基。 本文中所用之”芳基”為苯基或莕基，或其衍生物經取 代之芳基”為一個芳基經一或多個取代基如燒基，燒氧基， 胺基，硝基’幾基，燒基談基，氰基，燒胺基，二燒胺 基，齒，羥基，羥基烷基，巯基，烷基巯基，三齒烷基， 叛燒基，硫氧基（sulfoxy)，或胺基甲酿基取代。 本文中所用之”芳烷基”為烷基經一個芳基取代。芳烷基 之一個實例為苯甲基。 本文中所用之”環烷基”為例如3至8個碳原子之脂族環。 環烷基之實例包括環丙基及環己基。 本文中所用之”醯基”為直鏈或分支之烷基_〇(=〇)_基或 甲酿基。酿基之實例包括燒Si基（例如具有1至6個碳原子於 -15- 本紙張尺度適财® ®家標準(CNS) A4規格(21GX 297公釐)

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1293301 A7 B7 __ 五、發明説明（13 ) 燒基中）。乙酿基及二甲基乙酿基為酿基之實例。酿基可經 取代或未經取代。 本文中所用之”胺基甲醯基”為具有H2N-C〇2·結構之基。 ，，烷基胺基甲醯基”及”二烷基胺基甲醯基”表胺基甲醯基之 氮分別接有一或二個烷基替代氫。相似地，’’芳基胺基甲醯 基"及’，芳基烷基胺基甲醯基’’包括一個芳基替代一個氫，而 在後者，一個虎基替代第二個氫。 本文中所用之”羧基”為-COOH之基。 本文中所用之”烷氧基”為烷基_0·之基，其中Γ烷基」如 上述定義。 本文中所用之”烷氧基烷基”為如上述定義之烷基具有一 個氫經一個如上述定義之烷氧基替代。 本文中所用之”鹵素”或”鹵”為氟，氯，溴，或碘。 本文中所用之”雜環基”為一個5至約10員環結構，其中 環中一或多個原子為一個非碳之元素，例如Ν，〇，S。雜 環基可為芳族或非芳族，即可為飽和，或可部份或完全未 飽和。雜環基之實例包括吹淀基，咪峻基，吱喃基，，塞吩 基，〃塞嗤基，四氫吱喃基，四氫旅喃基，嗎淋基，硫嗎淋 基，W嗓基，4丨嗓淋基，異4丨嗓淋基，六氫π比咬基，喊淀 基，六氫ρ比0井基，異崎嗤基，異今嗅淀基，四吐基，及苯 并咪唑基。 本文中所用之”經取代之雜環基”為一個雜環基中一或多 個氫經取代基如烷氧基，烷氧胺基，二烷基胺基，烷氧羰 基，胺基甲醯基，氰基，鹵，三鹵甲基，羥基，羰基，硫 -16- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) Α4規格(210X 297公釐)

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1293301 A7 B7 五、發明説明（14 ) 羰基，羥基烷基，或硝基替代。 本文中所用之”羥基烷基”為烷基經一個羥基取代。 本文中所用之”胺磺醯基”具有結構-S(0)2NH2。”烷基胺 磺醯基”及”二烷基胺磺醯基”表胺磺醯基中氮分別接有一或 二個烷基以替代氫。相似地，”芳基胺磺醯基”及”芳基烷基 胺磺醯基”包括一個芳基替代一個氫，而在後者，一個烷基 替代第二個氫3 本文中所用之”拮抗劑”為一種結合於一個受體而未活化 該受體之分子。其與内生性配位體競爭結合位置，因此減 少内生性配位體刺激該受體之能力。 在本發明中，一種”選擇性拮抗劑”為一種結合於一特定 亞型腺甞受體之親和力較結合於其他腺甞受體亞型高之拮 抗劑。例如，本發明之拮抗劑對於Αι受體具有高親和力及 選擇性，（a)對於八1受體具有奈莫耳（nanomolar)結合親和 力，及（b)對於Αι受體亞型之親和力較任何其他受體亞型 之親和力大至少10倍，更佳5 0倍，及最佳至少100倍。 本文中所用之’’醫藥有效量”為可有效治療或預防一種以 腺甞濃度增加及/或對於腺甞敏感性增加為特徵之症狀之 量。本文所用之術語”病人”為一種哺乳類，包括人類。 本文中所用之”醫藥可接受之載劑或佐劑”為一種無毒性 之載劑或佐劑，可與本發明之一種化合物一起施用於動物 而不破壞該化合物之藥理學活性。 一般而言，本發明係關於腺芬Αι受體之有效及選擇性拮 抗劑。本發明化合物之實例述於下表1中。本發明所教導之 -17- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐) 1293301 A7 B7 五、發明説明（15 ) 化合物對於鼠A1受體之IC50在約7至約1095之範圍内。 腺答拮抗劑化合物之合成 本發明化合物可以許多已知方法製備。例如，這些化合 物可以 Suzuki，F· et al. J· Med. Chem. 1992, 35, 3581-3583 及 /或 Shimada，J; Suzuki, F. Tetrahedron Lett. 1992, 33, 3151-3154中所教導之方法製備。 三種製造本發明化合物之一般合成概圖如下述。 -18- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1293301 A7 B7

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1293301 A7 B7 五、發明説明（18 ) 方法3之一般概圖

熟習技藝人士可明瞭，上述合成概圖並未包含可合成本 案所述及申請專利化合物之所有方式。其他方法為熟習技 藝人士顯而易知。 腺苷拮抗劑化合物之用途 A1亞型腺荅受體之活化激發許多生理反應，包括腎血流 減少，絲球體過濾速率降低，及腎中鈉再吸收增加。A1腺 甞受體之活化亦降低心跳速率，降低傳導速率，及降低收 縮力。這些，及其他器官中A1腺荅受體活化之其他作用， 為正常調節過程。然而，這些作用在許多疾病中變為病 -21 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1293301 A7 B7 五、發明説明（19 ) 理。因此，A 1腺甞受體拮抗劑廣泛應用於疾病之預防及治 療。可以A1腺甞受體拮抗劑預防及/或治療之疾病包括A1 腺甞受體之活化在病理生理學中居要角之疾病及達常。該 等疾病及達常包括，但不限於，充血性心臟衰竭；呼吸疾 病（例如支氣管氣喘，過敏性肺病）；及許多需要利尿治療 之疾病（例如急性及慢性腎衰竭，腎功能不足，高血壓）。 另外，本發明提供施用高選擇及有效之腺甞A1受體拮抗 劑以激發例如利尿反應（在單獨施用時）及加強對於傳統利 尿劑之利尿反應。此外，A1腺甞受體拮抗劑與傳統利尿劑 之施用可減少傳統利尿劑所引發之絲球體過濾速率之降 低。其在治療例如水腫症狀如充血性心臟衰竭及水腹中有 用。 腺#拮抗劑化合物之施用 化合物可施用於動物（例如哺乳類，如人類，非人類之靈 長類，馬，狗，牛，豬，綿羊，山羊，小鼠，大鼠，天竺 氣，兔，倉鼠，沙鼠，白鼬，蜥蜴，爬蟲類，或烏類）。化 合物可以任何適合醫藥化合物施用之方式施用，包括，但 不限於，藥丸，錠，膠囊，氣溶膠，栓劑，食用或注射用 之液體調配物，或眼或耳滴液，食物補充物，及局部製 劑。化合物可經口，經鼻内，經皮，經皮内，經陰道，經 耳内’經眼内，經頰，經直腸，經黏膜，或經吸入，植入 (例如以外科手術），或經靜脈内施用。 化合物可選擇性與一種非腺甞修飾之醫藥組合物連合（例 如與一種非腺菩修飾之利尿劑組合，例如1999年4月23日

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-22- 1293301 A7 B7 五、發明説明（20 ) 申請之共同審理之申請案PCT/US99/08879中所述）施用。 醫藥紐公物 A1腺嘗受體拮抗劑可調配成施用於動物（包括人類）之醫 藥組合物。這些醫藥組合物較佳包括A i腺答受體拮抗劑之 量可有效減少血管收縮或增進肺血液動力學及一種醫藥可 接受之載劑。 可用於這些醫藥組合物中之醫藥可接受載劑包括例如離 子交換劑，氧化鋁，硬脂酸鋁，卵磷脂，血清蛋白，如人 類血清白蛋白，緩衝物質，如嶙酸鹽，甘胺酸，山梨酸， 山梨酸鉀，飽和植物脂肪酸之部份甘油酯混合物，水，鹽 或電解質，如硫酸魚精蛋白，磷酸氫二鈉，磷酸氫卸，氯 化鈉，鋅鹽，膠體矽石，三矽酸鎂，聚乙晞基吡咯啶酮， 纖維素物質，聚乙二醇，羧甲基纖維素鈉，聚丙烯酸酯， 蠕’聚乙婦-聚乳丙婦-嵌段聚合物，聚乙二醇，及羊毛 脂。 本發明之組合物可以非經腸，經口，由喷灑吸入，經局 部，經直腸，經鼻，經頰，經陰道，或經一個植入貯存器 施用。本文中所用之術語，，非經腸”包括經皮下，經靜脈 内，經肌肉内，經關節内，經滑膜内，經胸骨内，經鞘 内，經肝内，經損傷内及經顱内注射或注入技術。組合物 較佳經口，經腹膜内，或經靜脈内施用。 本發明組合物之滅菌注射形式可為水或油懸浮液。這些 懸浮液可根據此技勢中已知之技術使用適合分散或潤濕劑 及懸浮劑調配。诚菌之注射製劑亦可為一種滅菌之注射溶 -23 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公董j ----- 裝 訂

1293301 A7 B7 五、發明説明（21 ) 液或懸浮液於一種無毒非經腸可接受之稀釋劑或溶劑中， 例如於1，3 - 丁二醇中之溶液。可使用之可接受媒液及溶劑 為水，Ringer氏溶液，及等張氣化鈉溶液。此外，習知使 用滅菌之固定油（fixed oils)作為溶劑或懸浮介質。為此目 的，可使用任何品牌之固定油，包括合成之一或二酸甘油 酉曰。脂肪阪，如油酸，及其甘油醋衍生物可用於注射製劑 中’如天然之醫藥可接受油，如橄禮油或蔑麻油，特別是 其聚氧乙基化形式。這些油溶液或懸浮液亦可含有一種長 鏈醇稀釋劑或分散劑，如羧甲基纖維素，或普遍用於醫藥 可接受劑形（包括乳液及懸浮液）之調配物中之相似分散 劑。其他普遍使用之表面活性劑，如Tweens，Spans，及其 他普遍用於醫藥可接受之固體，液體，或其他劑形之製造 中之乳化劑或生物利用增進劑亦可用於調配。 非經腸調配物可為單一巨（bolus)劑，輸液，或一負載 (loading)巨劑接著一種維持劑。這些組合物可以每天一次 或以”需要”基準施用。 本發明之醫藥組合物可以任何經口可接受之劑形，包括 膠囊，錠，水懸浮液或溶液，經口施用。在經口施用之錠 中，普遍使用之載劑包括乳糖及玉米澱粉。典型亦加入潤 滑劑，如硬脂酸鎂。對於經口施用之膠囊形式，可用之稀 釋劑包括乳糖及乾燥之玉米澱粉。當需要以水懸浮液經口 施用時，活性成份與乳化及懸浮劑組合。若需要，亦可加 入某些甜化劑’調味劑，或著色劑。 或者，本發明之醫藥組合物可以經直腸施用之栓劑形式 -24- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1293301 A7 B7 五、發明説明（22) 施用。這些可由該劑與一種在室溫為固體但在直腸溫度為 液體（因此在直腸中溶解而釋放藥物）之適當無刺激性賦形 劑混合而製備。該等物質可包括可可脂，蜂壤，及聚乙二 醇。 本發明之醫藥組合物亦可局部施用。局部施用可以一種 直腸栓劑調配物（參見上述）或以一種適合之灌腸劑調配物 進行。亦可使用局部經皮貼片。 對於局部施用，醫藥組合物可調配成一種含有活性成份 懸浮於或溶於一或多種載劑中之適當軟膏。供局部施用本 發明化合物之載劑包括礦油，液體石壤脂，白色石蟻脂， 丙二醇，聚氧乙烯，聚乙丙埽化合物，乳化蠟，及水^或 者’醫藥組合物可調配成適當洗劑或乳劑，含有活性成份 懸浮於或溶於一或多種醫藥可接受之載劑中。適合之載劑 包括，但不限於，礦油，一硬脂酸山梨糖醇酐酯，聚山梨 酸酉旨60 ’鯨蟻醋蟻’踪蟻芳基（cetearyi)醇，2-辛基十二 醇，苯甲醇，及水。 對於眼睛使用，醫藥組合物可調配成微粒子化懸浮液於 等張之p Η經調節之滅菌鹽水中，或較佳調配成溶液於等張 之ρ Η經調節之減菌鹽水中，有或無防腐劑，如氯化苯甲烴 銨（benzylalkonium)。或者，對於眼睛使用，醫藥組合物可 調配呈軟膏，如蟻膏。 本發明之醫藥組合物可以鼻氣溶膠或吸入施用。該組合 物係根據醫藥調配物技藝中眾所周知之技術製備，可製備 成落液於鹽水中，使用苯甲醇或其他適合防腐劑，吸收促 '25 - ^紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規4(210X297公董) 1293301 A7 ______B7 ___ 五、發明説明（23 ) 進劑以增進生物可利用性，氟碳，及/或其他習知助溶或分 散劑。 A χ腺芬受體拮抗劑與載劑物質組合以產生單一劑形之量 將依所治療之宿主及特定施用方式變化。該組合物可調配 成0.01 -100毫克A i腺荅受體拮抗劑/公斤體重之劑量施用於 接受該組合物之病人。在本發明之一些具體實施例中，該 劑量為〇·1-10毫克/公斤體重。該組合物可以單劑，多劑施 用，或以注入施用一定時間。 任何特定病人之特定劑量及治療方法將依各種因素而 定，包括特定之八1腺甞受體拮抗劑，病人之年齡，體重， 一般健康，性別，及食物，以及施用時間，排池速率，藥 物合併，及所治療之特定疾病之嚴重性。醫藥人員判斷該 等因素係在熟習技藝人士之範圍内。拮抗劑之量亦依所治 療之各病人，施用途徑，調配物之種類，所用化合物之特 性，疾病之嚴重性，及所欲效果而定。拮抗劑之量可由此 技藝中眾所周知之藥理學及藥物動力學原則決定。 為使本文中所述之本發明可被更完全明瞭，提供下列實 例。應明瞭，這些實例僅用於例示，並非以任何方式限制 本發明。 實例 實例1 化合物 l,2，4，8，9，ll,12-2l，24，27，28，3l 及32係根據下列方法使用適當胺基醇於步驟5中而製備。 製備化合物所用之胺基醇為：（R)_2-胺基-3 -甲基-1 _ 丁醇 -26 - 本紙張尺度適用中S @家料(CNS) A4规格(21GX 297公1) 1293301 A7 _______B7 五、發明説明（24 ) (化合物1) ; (R)-2-胺基-1-丁醇（化合物2) ; (R)-2-胺基· 1- 丙醇（化合物4) ; (R)-異白胺基醇（化合物8) ; 胺 基-1-丁醇（化合物9) ; (R)-2-胺基-1-戊醇（化合物u); (S ) -1 -胺基-2 -丙醇（化合物1 2 );( R ) - 2 -胺基-2 -苯乙醇 (化合物13) ; (R)-l-胺基-2-丙醇（化合物14) ; (s)_異白 胺基醇（化合物15) ; (R)-2-胺基-3，1-二甲基-丁醇（化 合物16)，（R)-2 -胺基-4-甲基-戊-1-醇（化合物17) ; (r)_ 2- 胺基-3-苯基-丙-1-醇（化合物18) ; (R)-2 -胺基-己-1-醇（化合物19) ; 3-胺基丙醇（化合物20) ; 2-胺基乙醇（化 合物21) ; (S)_2-胺基-己-1-醇（化合物24) ; 4-胺基丁醇 (化合物27) ; (R)-4-(2-胺基-3-羥基-丙基）-酚（化合物 28)，（R)-3 -胺基-丁-1-醇（化合物31);及（R)-3-胺基· 戊-1 -醇（化合物3 2)。 表1顯示所合成化合物之結構，合成化合物所用之方法， 及化合物之質譜數據。 步驟1 ·· 5,6-二胺墓-1-丙基-1^1-。密淀-2,4-二嗣1|酸鹽： 起始物質6 -胺基-1-丙基-1H -嘧啶-2,4 -二酮係根據已知 之文獻程序（J. Med. Chem. 1989，ρ· 1231)製備。此物質 (8.5克，50毫莫耳）溶於250毫升醋酸水溶液中，然後於冰 浴中冷卻。亞硝酸鈉（4.14克，1.2當量）於10毫升水中之溶 液加入歷約1 5分鐘β在約1 0分鐘後，淡黃色溶液開始由反 應混合物沉澱出。固體以過濾收集，在真空下乾燥過夜， 獲得8.0克亞硝基中間物。 亞硝基中間物（6.0克，30毫莫耳）懸浮於100亳升水中， -27- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) Α4規格(210 X 297公釐） 1293301 A7 _____ B7 _____ 五、發明説明（25 ) 加熱至80-85。(：。二亞硫磺酸鈉（15·8克，3·0當量）迅速加 入歷約5分鐘。在約5分鐘後，加熱源移除，淡綠色反應混 合物冷卻至室溫，然後於冰浴中冷卻。固體以過濾收集， 在真空下乾燥，獲得二胺基尿嘧啶。然後由溶於1〇毫升 Η2〇含有1.5當量HC1中轉化為鹽酸鹽，然後冰凍乾燥。 免览g ·· 8 -丄4 ·羥基-繫瑷[2 · 2 · 21辛-1 -某）-3 -丙基-3 · 7 -二 氣-嗜今- 2·6 -二g同 5,6 -二胺基-1-丙基qH -嘧啶-2,4-二酮鹽酸鹽（3.4克）與 4-羥基-雙環[2.2.2]辛-1-羧酸（2·5克，15毫莫耳）溶於80 毫升DMF中。HATU(5.9克，1.05當量）加入，然後 Ε“Ν(8·30毫升，4.05當量）加入《生成之反應混合物在室 溫攪拌過夜。反應混合物過濾以移除一些沉澱物。滤液在 減壓下濃縮。生成之殘餘物溶於60毫升Η20含有1〇當量 NaOH(5.9克）中。反應混合物在回流下攪拌1小時，冷卻至 室溫’以濃HC1酸化至ρ Η 2。生成之沉殿物以過遽收集， 乾燥，獲得1.85克黃嗓吟（xanthine)衍生物。 步驟3 : 8-(4-羥基-雙環丨2.2.21辛-1-某）-3-丙基砝其-1,3,6,7 -四氮-嗓吟- 2- S同 8-(4·羥基-雙環[2.2.2]辛-1-基）-3 -丙基-3,7-二氫-嘌 呤-2,6-二酮（500毫克，1.57毫莫耳）溶於10毫升吡淀中。 P4S1G(1.05克，1.5當量）加入，反應混合物在回流下授拌6 小時。然後反應混合物冷卻至室溫，以5毫升Η 2 〇緩慢淬 火。然後混合物在〇 °C以6Ν HC1酸化至ρ Η 5。水層以 EtOAc萃取。合併之有機層乾燥（Na2S04)，在減壓下濃 -28 - 本紙張尺度適用中國國家擦準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1293301 A7 B7 五、發明説明（26 ) 縮。以製備性HPLC純化，獲得100毫克標題化合物。 步騾4 : 8-M-羥基·雙環丨2·2·21辛-1-基甲某硫基 (sulfanvl)-3 -丙矣-3，7 -二氪-嘌呤-2 -酉同 8-(4 -羥基-雙環[2.2· 2]辛-1-基）-3 -丙基-6-硫基-1，3,6,7-四氫-嘌吟-2-酮（120毫克，0.36毫莫耳）懸浮於3 毫升H20及1.5毫升EtOH中。NaOH於0.4毫升H20中之溶 液加入，然後M e I加入。反應混合物在室溫擾拌1小時。然 後以0·1Ν HC1中和，以CHC13萃取。合併之有機層乾燥 (NadCU)，在減壓下濃縮，獲得實質上定量之標題化合 物。 步驟5 : 8-(4-韃基-雙環Γ2·2·2〗辛-1-篡•鞀某甲某· 丙基胺基）-3 -丙基-3，7 -二氣-嗓吟-2 -嗣 8-(4-羥基-雙環[2·2·2]辛-1-基）-6-甲基硫基-3 -丙基-3,7-二氫-嗜呤-2-酮（125毫克，0.36毫莫耳）與過量之適當 胺基醇（例如（R)-(-)-2-胺基-1_丁醇（〇.24毫升，7當量）， 對於化合物2)溶於3毫升DMSO中。生成之反應混合物在 150 °C攪拌3小時。然後冷卻至室溫，以製備性HPLC純 化，獲得110毫克標題化合物。 步驟6 : 7 -乙基- 2- (4 -經基-雙環丨2·2·2]辛-1-某、-4-丙基· 1，4,6,7-四氮- l，3,4,5a，8-五氮.雜-艾斯（as、-印達辛 (indacenK5- _(化合物 2) 8-(4-羥基-雙環[2·2·2]辛-1·基）-6-(1_羥基甲基-丙基 胺基）-3 -丙基-3,7 -二氫-嘌吟-2-酮（11〇亳克）溶於3毫升 S0C12中，在回流下授拌20分鐘。然後冷卻至室溫，濃 -29- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1293301 A7 -— —____ B7 _____ 五、發明説明（27 ) 縮 殘餘物以飽和NaHC03水溶液淬火，以CHCI3萃取。合 併之有機層乾燥（Na2S04)，在減壓下濃縮。以製備性HPLC 純化’獲得5 0毫克標題化合物，呈TF A鹽。 化合物3，5及7係根據下列方法使用適當胺基醇於步驟8 中而製備。製備化合物所用之胺基醇為：（r)-2-胺基-1-丁 醇（化合物3) ; (R)-2-胺基-3-甲基-1-丁醇（化合物5);及 (R)-2-胺基-1-丙醇（化合物7)。 表1顯示所合成化合物之結構，合成化合物所用之方法， 及化合物之質譜數據。 受^1^_4-(2.6-二氣基-3-丙某-2,3,6,7-四氪-111-嘌呤- ^41^環『2.2.21夺-1-#酸 5,6-二胺基-1-丙基-1H-嘧啶-2,4-二酮鹽酸鹽（570毫克） 與雙環[2·2·2]辛-1，4-二羧酸一甲酯（520毫克，2.45毫莫 耳）溶於20毫升DMF中。HATU(980毫克，1·05當量）加 入，然後Et3N(1.40毫升，4.05當量）加入。生成之反應混 合物在室溫攪拌過夜。次日早上，反應混合物過濾以移除 一些沉澱物。濾液在減壓下濃縮。生成之殘餘物溶於1 0毫 升H2〇含有1〇當量NaOH (980毫克）中。反應混合物在回流 下攪摔2小時。然後冷卻至室溫，以濃HC1酸化至p Η 2。生 成之沉澱物以過濾收集，乾燥，獲得680毫克上述酸衍生 物0 步驟2 : 8-(牡淼某甲基-雙瑷[2·2·21辛-1·某V3-丙基-3,7-二氮,-嗓呤-2,6-二酮 -30 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CMS) Α4规格(210 X 297公釐) 1293301 A7 B7 五、發明説明（28) 4-(2,6·二氧基-3 -丙基-2,3,6,7-四氫-lH-嘌呤-8-基）-雙環[2·2·2]辛-l-羧酸（3·2克，9·25毫莫耳）溶於l00毫升 無水THF中，冷卻至0°C。硼烷_THF(1.0M於THF中，1.85 毫升，2當量）加入，反應混合物在〇°C攪拌10分鐘，然後 加熱至室溫，攪拌4 8小時。然後反應混合物以1 0毫升 MeOH小心地淬火，然後在減壓下濃縮。生成之殘餘物溶 於20亳升MeOH中，在減壓下濃縮。重複此處理四次，獲. 得所欲醇。 步驟3:4^2.6-二氫基-3-丙基-2,3,6,7-四氣-1{1-嘌呤-8 -基）-繫環f 2.2.21辛-1 -浚醛 8-(4-羥基甲基-雙環[2·2·2]辛-1-基）-3 -丙基- 3,7 -二 氫-嘌呤-2,6-二酮（2.70克，8.13毫莫耳）溶於40毫升DMSO 中。吡啶-S03(3.88克，3當量）加入，然後Et3N(7.4毫升， 7當量）在室溫加入。生成之反應混合物在室溫攪拌1 8小 時。然後以EtOAc稀釋，以5%檸檬酸水溶液，H20，鹽水 洗，乾燥（Na2S04)，在減壓下濃縮，獲得900毫克所欲醛。 步驟4 : 3-Γ4“2·6-二氣基-3 -丙某 吟-8 -基）-雙環Γ 2.2.2 1辛-1 -某-1 -丙烯酸甲酯 4-(2,6-二氧基-3-丙基-2,3,6,7-四氫-111-嘌呤-8-基）-雙環[2.2.2]辛-1-羧饉（900毫克，2.73亳莫耳）溶於25毫升 THF中，（三苯基亞正膦基（phosphoranylidene))醋酸甲酯 (1.83克，2當量）加入。生成之反應混合物在回流下攪摔18 小時。然後冷卻至室溫，以製備性HPLC使用乙腈水溶液之 混合物純化，獲得300毫克所欲產物。 -31 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐)

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k 1293301 A7 B7 五、發明説明（29) 步驟5 ·· 3-『4-Γ2·6-二氣某-3-而篡-2,3,6,7-四氤-11嘌 吟二8-基）-雙環『2.2.21辛-1-盔卜兩酸甲酯 3-[4-(2,6-二氧基-3-丙基-2,3,6,7-四氫-1^1-嘌呤-8-基）-雙環[2,2.2]辛-1-基卜丙烯酸甲酯（300毫克）溶於20毫 升THF中。10% Pd/C(25毫克）加入，生成之反應混合物在 50 psi之Η]下於室溫氫化6小時。反應混合物經Celite過 濾，濾液在減壓下濃縮，獲得280毫克所欲產物。 步—_驟6:3-『4-(2-氧基-3-雨甚-6-硫基-2,3,6,7-四&-111-嗟吟-8-基）-雙環〖2.2.21辛-1-某1-丙酸甲酯 3-[4-(2,6-二氧基-3-丙基-2,3,6,7-四氫-111-嘌呤-8-基）-雙環[2·2·2]辛-1-基卜丙酸甲酯（250毫克，0.64毫莫 耳）溶於8毫升吡啶中。p4s1〇(430毫克，1.5當量）加入，反 應混合物在回流下攪拌3小時。然後冷卻至室溫，以3毫升 KUO淬火，然後以充份6N只^使#至3。生成之反應混合 物以CHCI3萃取。有機層乾燥（Na2S〇4)，在減壓下濃縮。祖 殘餘物以製備性HPLC純化，獲得1〇〇毫克所欲產物。 ϋ 7. : 3 -『4 - ( 6 -甲幕硫基（suifanvi)-3 -丙某-3，7 -二氣-2K-嗜呤-8·基雙環『2·2·21辛-1-基丙酸甲酯 3-[4-(2·乳基-3-丙基-6-硫基- 2,3,6,7-四氯-lH-嗓呤- 8-基）-雙環[2·2·2]辛-l-基]-丙酸甲酯（loo毫克）溶於2毫 升EtOH及1毫升Η2〇中。NaOH(20毫克）於1毫升η2〇中之 溶液加入，然後Mel(23微升，1.5當量）加入。生成之反應 混合物在室溫攪拌3 0分鐘。然後以EtOAc萃取。有機層乾 燥（NajO4) ’在減壓下濃縮，獲得1〇5毫克標題化合物。 -32- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐)

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1293301 A7 B7 五、發明説明（30 )

步驟8 : 3-{4>丨6-(1-羥基甲基-丙某胺基）-2-氫某-3-丙墓-3,7-二氪-211-嘌呤-8-基卜雙環『2.2.21辛-1-基卜丙酸甲 IL 3-[4-(6 -甲基硫基-2 -氧基-3 -丙基- 3,7 -二氫- 2H -嗓吟· 8-基）-雙環[2·2·2]辛-1-基]-丙酸甲酯（1〇5毫克）與一種適 當胺基醇（例如160微升（R)-(-)-2-胺基-1-丁醇，對於化合 物3)溶於2毫升DMSO中。反應混合物在150°C攪摔3小時。 然後冷卻至室溫，以製備性HPLC純化，獲得5 0亳克標題 化合物。 步騾9:3-『4-(7-乙基-5-氣某-4_丙基-4,5.6,7-四1-111-l,3,4,5a,8-五氤,雜-艾斯（as) -印逵辛（indaceip-2 -基繫 環f 2.2.21辛-1-基卜丙酸（化合物3、 3-{4-[6-(1-羥基甲基-丙基胺基）-2-氧基-3 -丙基-3,7-二氫-2Η -嘌呤-8 -基]-雙環[2.2.2】辛-1-基卜丙酸甲酯（30 毫克）溶於1毫升S0C12中，在回流下攪捽1 5分鐘。然後反 應混合物冷卻至室溫，在減壓下濃縮。生成之殘餘物溶於 含有1毫升水，0·5毫升MeOH，及0.1毫升10% NaOH水溶 液之溶液中。反應混合物在室溫攪拌30分鐘。然後以稀1N HC1酸化至p Η 2，濃縮。生成之粗產物以製備性HPLC純 化，獲得標題化合物。 f例3 化合物6，10，22，23，25，26，29及30係根據下列 方法使用適當胺基醇於步驟3中而製備。製備化合物所用之 胺基醇為：2-胺基乙醇（化合物6) ; (R)-2-胺基-1· 丁醇（化 -33- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1293301 A7 __ B7 五、發明説明（31 ) 合物10) , (R)-2-胺基-1-丙醇（化合物22) ; (R)-2-胺基-1-戊醇（化合物23) ; (R)·異白胺基醇（化合物25) ; (s)_2-胺基-1-丁醇（化合物26) ; 3-胺基丙醇（化合物29);及4-胺基丁醇（化合物30)。表1顯示所合成化合物之結構，合 成化合物所用之方法，及化合物之質譜數據。 步-靂 1 : 4-(2,6-二氧基二3-丙某-2,3·6-7-四f-lH-嘌呤-8-基）-螯瑷『2.2.2〗辛-l-#醴甲醛 4-(2,6-二氧基-3-丙基-2,3,6,7-四氫-11^-嘌呤-8-基）- 雙環[2·2·2]辛-1-羧酸根據上述程序製備。此物質（1<4克） 懸浮於50毫升MeOH中，5滴濃硫酸加入。反應混合物在回 流下擾拌1 8小時。然後冷卻至室溫，在減壓下濃縮。生成 之殘餘物以CH2C12稀釋，以NaHC03水溶液，鹽水洗，乾燥 (Na2S04)，濃縮，獲得1.2克標題化合物。 步—驟2 : 4-(6-甲基硫基（sulfanvlV2-氧葚-3-丙基-3,7-二 氫-2H-嘌呤-8-基雙環丨2.2.2Ί辜·1-勒酩τ酯 4-(2,6-二氧基-3-丙基-2,3,6,7-四氫-111-嘌呤-8-基）-雙環[2.2.2]辛-1-羧酸甲酯（1.2克，3.33亳莫耳）溶於20毫 升吡啶中。P4S1()(2.22克，1.5當量）加入，反應混合物在回 流下攪摔3小時。然後冷卻至0 °C，小心地以水淬火。充份 6N HC1加入以使p Η至5，反應混合物以CH2C12萃取。有機 層乾燥（Na2S04)，濃縮，獲得860毫克硫酯衍生物。此物質 (860毫克，2·29毫莫耳）溶於5毫升EtOH及5毫升H20中。 NaOH(183毫克，2當量）於2毫升H2〇中之溶液加入，然後 Mel(213微升，1.5當量）加入。生成之反應混合物在室溫攪 -34- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(2说X 297公釐) 1293301 A7 _____B7 __ 五、發明説明（32 ) 拌30分鐘。然後以Et〇Ac萃取。有機層乾燥（Ν&5〇4)，在 減壓下濃縮，獲得8〇〇毫克標題化合物。 竟·· 4 - f 6 - ( 2 -勒某-乙胺某、-2 -氲基-3 -而I - 3 · 7 -二氣-2ϋΐ·^-8-基卜雙璟[2·2·21辛-1-淼酩 4-(6 -甲基硫基-2 -氧基-3-丙基-3,7 -二氫- 2Η -嘌呤- 8-基）-雙環[2·2·2]辛-羧酸甲酯（5〇毫克）與一種適當胺基醇 (例如7當量2-胺基乙醇，對於化合物6)溶於2毫升DMSO 中。反應混合物在150 °C攪摔3小時。然後冷卻至室溫，以 製備性HPLC純化，獲得30毫克標題化合物。 童一^ 4 ·· 4-(5·氣某-4-丙某-4.5.6.7- 四翁 -ΙΗ- U，4，5 a，8 五孔雜-艾斯（as、-印遠辛（indacen) - 2 -華^ -雙 遂丄^.21辛-1-#酸 4-[6-(2-羥基-乙基胺基）_2_氧基-3 -丙基-3,7-二氫-2H-嗓呤-8-基]-雙環[2·2·2]辛-1-羧酸甲酯（30毫克）溶於1毫 升S0C12中，在回流下攪拌i 5分鐘ι然後反應混合物冷卻 至室溫，在減壓下濃縮◎生成之殘餘物溶於含有i毫升水， 0.5毫升MeOH，及〇·1亳升1〇% NaOH水溶液之溶液中。反 應混合物在室溫攪拌30分鐘。然後以稀IN HC1酸化至pH 2，濃縮。生成之粗產物以製備性HPLC純化，獲得標題化 合物。 實例4 分析方法 製備許多具有表1所示結構之黃嘌呤衍生物。一些化合物 對於鼠及人類腺甞A!受體之Ki值係根據下列結合分析方案 -35- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1293301 A7 B7 五、發明説明（33 ) 測定。 材料 腺荅去胺酶及HEPES係購自Sigma(St· Louis, MO)。漢氏 (Ham’s)F-12細胞培養基及胎牛血清係購自GIBCO Life Technologies (Gaithersburg, MD) 0 抗生素 G- 418，Falcon 150 mM培養板及Costar 12井培養板係購自Fisher (Pittsburgh, PA)。[3H]CPX 係購自 DuPont-New fengland Nuclear Research Products (Boston，MA)。青黴素/鍵徽素 抗生素混合物係購自Mediatech (Washington，DC)。 HEPES-緩衝之漢克氏（Hank、）溶液之組合物為：130 mM NaCl，5.0 mM Cl，1.5 mM CaCl2，〇·41 mM MgS〇4，〇·49 mM Na2HP04，0.44 mM KH2P〇4，5.6 mM 右旋糖（dextrose) ，及5 mM HEPES (pH 7.4)。 膜製備 鼠Ai受體：膜係由新鮮安逸死之鼠所分離之大腦皮質製 備。組織於緩衝液 A(10 mM EDTA，10 mM Na-HEPES， pH 7.4)補充蛋白酶抑制劑（l〇微克/毫升苯甲脒，100 PMSF，及各2微克/毫升之抑肽酶（aprotinin)，胃酶抑素 (pepstatin)，及亮肽素（leupeptin))中均質化，在20,000 xg 離心20分鐘。沉澱粒以緩衝液HE(10 mM Na_HEPES，1 mM EDTA，pH 7.4，加蛋白酶抑制劑）再懸浮及洗二次。 最終沉澱粒再懸浮於緩衝液HE補充1 0 % (重量/體積）蔗糖 及蛋白酶抑制劑中，等份冷凍於-8 0 °C。蛋白質濃度使用 BCA蛋白質分析套組（pierce )測量。 -36- 本紙張尺度適用中國國家操準(CNs) A4規格(210X 297公釐） 1293301 A7 B7 五、發明説明（34 ) 人類Ai受體：人類八1腺省：受體cDNA係由RT-PCR獲 得，次選殖於pcDNA3·l(InvitΓogen)。CHO-Kl細胞之穩定 轉感染係使用 LIPOFECTAMINE-PLUS(GIBCO-BRL)進 行，純系於1毫克/毫升G418中選擇，使用放射配位體結合 分析篩檢。對於膜製備，CHO-K1細胞於完全培養基（F 12 + 10% FCS+1毫克/毫升G418)中生長持單層，於PBS中洗， 於缓衝液A補充蛋白酶抑制劑中收穫。細胞均質化，離心 ，以上述之緩衝液HE洗二次。最終沉澱粒等份貯存於-80 °C 〇 放射配位體結合分析 膜（50微克膜蛋白質用於鼠AlARs，及25微克CHO-K1膜 蛋白質用於人類AlARs)，放射配位體，及各種濃度之競爭 配位體以三組於0·1毫升緩衝液HE加2單位/毫升腺甞去胺 酶中在2 1 °C培育2.5小時。放射配位體[3H]DPCPX(112 Ci/毫莫耳得自NEN，最終濃度·· InM)用於AiARs之競爭 結合分析。非特異性結合係在10 // M BG9719存在下測量。 結合分析係以Whatman GF/C玻璃纖維濾器過濾，使用 BRANDEL細胞收穫器終止。濾器以3-4毫升冰冷之10 mM Tris-HCl，pH 7·4，及5 mM MgCl2在4°C沖洗三次。濾紙移 入一個小瓶中，加入3毫升閃爍混合物ScintiVersell(Fisher) 。放射活性係於一個Wallac /3 -計數器中計數。 結合數據之分析 對於Ki測定：競爭結合數據係配合一個單一位置結合模 型’並使用Prizm GraphPad作圖。使用Cheng-Prusoff方程 -37- 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1293301 A7 B7 五、發明説明（35) 式Ki = IC50/(l + [I]/KD)以由IC50值計算Ki值，其中Ki為 競爭配位體之親和力常數，[I]為自由放射配位體之濃度， Kd為放射配位體之親和力常數。 對於結合％ :對於一點結合分析，數據係以1 # Μ競爭化 合物之總特異性結合％表示··總％ = 1〇〇 * ( 1 # Μ競爭化合物 之特異性結合/總特異性結合）。結合％表在1 # Μ競爭拮抗 劑存在下結合之放射配位體之量。 結果 所有試驗化合物顯示鼠Αι之Ki值在約4至約800 ηΜ之 間。在表2中，顯示化合物之鼠Α1腺甞受體Ki值及結合 % 0 實例5 替代分析方法 材料 參見實例4。 細胞培養 穩定表現重組人類A! AdoR之CHO細胞（CHO : Ai AdoR 細胞）係如（Kollias-Barker et al·，J. Pharma. Exp. Ther· 281(2)，761，1997)所述製備，及如CHO : Wild細胞培養。 CHO細胞在塑膠盤上於漢氏（Ham’s) F -12培養基補充10% 胎牛血清’ 100U青黴素G及100微克鏈黴素中在5% C02/ 95%空氣之濕氣壓下於37 °C培養呈單層。CHO細胞中 [3H]CPX結合位置之密度為26土 2(n = 4)fmol/毫克蛋白 質。在使用1 mM EDTA於不含Ca2 + -Mg2 +之HEPES緩衝之 -38 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1293301 A7 _B7_ __ 五、發明説明（36 ) 漢克氏（Hank’s)溶液中脫離後，細胞每星期次培養二次。 三個不同群落之CHO : Ai AdoR細胞用於實驗，所有結果 以二或三個群落之細胞確認。在這些細胞中Αχ AdoRs之密 度為4000-8000如〇1/毫克蛋白質，以[311]€?\特真性結合 之分析測定。 放射配位體結合 生長於150毫米培養皿上之CHO細胞以HEPES緩衝之漢克 氏（Hank、）溶液沖洗，然後以一個細胞刮取器移除，於冰 冷之50 mM Tris-HCl，pH 7.4中均質化。細胞膜係由細胞 均質液在48,000 xg離心1 5分鐘而形成沉澱粒。膜沉澱粒由 再懸浮於新鮮緩衝液中及離心而洗二次。最終沉澱物再懸 浮於小體積之50 mM Tris-HCl，pH 7.4中，1毫升之等份貯 存於-80°C直到分析使用時。 為測定CH0細胞膜中Ai AdoRs之密度，100微升等份之 膜（5微克蛋白質）與25°C與0.15-20 nM [3H]CPX及腺苷去 胺酶（2U/毫升）於100微升50 mM Tris-HCl，pH 7.4中培育 2小時。培育係以4毫升冰冷50 mM Tris-HCl緩衝液稀釋而 終止，膜立即以真空過滤（Brandel, Gaithersburg，MD)收集 於玻璃纖維遽器（Schleicher and Schuell，Keene，NH)上。滤 器以冰冷緩衝液迅速洗三次以移除未結合之放射配位體。 含有捕捉膜結合放射配位體之滤盤放入4毫升Scintiverse BD (Fisher)中，放射活性係使用一個液體閃爍計數器定 量。為測定非特異性結合之[3 Η ] CPX，膜如上述培育，10 # M CPT加入培育緩衝液中。非特異性結合係定義為在1〇 -39- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) Α4規格(210X 297公釐） 1293301 A7 B7 五、發明説明（37 ) /z M CPT存在下結合之[3H] CPX。放射配位體特異性結合 於A1 AdoR係由總結合扣除非特異性結合而測定。發現非 特異性結合隨[3 Η ] CPX濃度之增加而呈線性增加。三組分 析以[3H]CPX之各試驗濃度進行。 為測定A i AdoR之拮抗劑對於CHO細胞中所表現之人類 重組Ai AdoR之親和力，在增加濃度之拮抗劑存在下測量2 nM [3H]CPX之結合。等份之CHO細胞膜（100微升：5微克 蛋白質），[3H]CPX，拮抗劑（0.1 nM -100 i M)，及腺甞去 胺酶（2U/毫升）在25°C於200微升50 mM Tris-HCl緩衝液中 (pH 7.4)培育3小時。分析係如上述終止。 其他具體實施例 應明瞭，雖然本發明已結合上述詳細說明作說明，但是 上述說明係用以例示，並非用以限制本發明之範圍，其範 圍係以下列申請專利範圍定義。其他方面，優點，及修飾 係在下列申請專利範圍内。 -40- 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1293301 A7 B7 五、發明説明（38 ) 表1 化合物 結構 ;合成方法j MS(M+1) 1 1 386 1 1 1 2 V 1 372 3 2 428 4 &令 1 358 5 2 442 6 3 372 -41 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1293301 A7 B7 五、發明説明（39 ) 化合物 5 結構 •合成方法 MS (M+-1) 7 2 414 8 。心^-Λ 1 400 9 1 356 10 3 400 11 1 386 12 Λϊί^- 1 358 -42 * 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1293301 A7 B7 五、發明説明（4〇 ) 化合物 結構 合成方法1 t MS(M^1) 13 〇 1 420 14 ..·，&鲁 H 1 358 15 1 400 16 %， 1 400 17 1 400 18 〇-νΝ - 1 434

裝 訂

線 -43-本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1293301 A7 B7 五、發明説明（41 ) 化合物 結構 ^ 合成方法1 MS(Mf1) 19 1 400 20 1 358 21 'V 1 .344 22 3 386 23 3 414 24 < 1 372 -44- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1293301 A7 B7 五、發明説明（42 ) 化合物 結構 {合成方法1 MS (M+1) 25 。丄 3 414 26 产 3 400 27 V 1 372 28 1 450 29 3 386 30 &鲁： 3 400 -45- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1293301 A7 B7 五、發明説明（43 )

裝 化合物 結構 {合成方法1 31 Λ 1 372 32 X 1 372 訂

k -46- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1293301 A7 B7 五、發明説明（44 ) 表2 化合物號碼 Ki(nM) 結合％ 化合物號碼 Ki(nM) 結合％ 1 4.4 ND 17 166.7 ND 2 5.75 ND 18 708 ND 3 8.38 ND 19 ND 18.1 4 9.92 ND 20 ND 52.7 5 10.5 1.9 21 ND 12.2 6 ND 2.6 22 ND 24 7 13.7 2.5 23 ND 22.8 8 14.1 1 24 ND 11 9 26.7 0.1 25 ND 46.7 10 40.2 6.2 26 ND 41.1 11 43.2 3.7 27 ND 16.3 12 51.3 8.6 28 ND 36.3 13 68.3 ND 29 ND 81.8 14 68.5 7.8 30 ND 71 15 93 7.7 31 ND 40 16 155 ND 32 ND 61 -47- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐）

Claims (1)

1293多6Ui^29678號專利申請案 _^文申請專利範圍替換木(96车5月) 、申請專利範圍 一種下式I，之化合物： A8 B8 C8 D8 98· 5. 03!

式Γ 其中R!及R2獨立選自下列所組成之群： a)氫； 烷基，其為未經取代，或被一個苄基取代基官 能基化，其中該芊基係為未經取代或被一個羥基取代基 官能基化；及 c)苯基； R3係為 其為未經取代，或被一或多個選自下列所組成之取代基 官能基化：羥基、羰基-C ! . 6燒基友藥基； A 係為 _(CH2)m_(CH2)m ; m = 1或2 ;及 75281-960503.doc 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐) A8 BB C8 D8 1293301 、申請專利範園 R 7係為c、- 6燒基。 2·根據申請專利範圍第1項之化合物，其中化合物係呈選自 非對掌性化合物，消旋物，光學活性化合物，純非對映 體’非對映之混合物，及藥理學上可接受之加成鹽所組 成之群之形式。 3·根據申請專利範圍第1項之化合物，其中Ri&r2係獨立 選自下列所組成之群： (a) Cr·6烷基，其為未經取代，或被一個苄基取代基官 能基化，其中該苄基係為未經取代或被一個羥基取代基 官能基化；及 (b) 苯基。 4.根據申請專利範圍第3項之化合物，其中Ri&r2中至少 一嗰為未經取代之Cle6烷基。 5·根據申請專利範圍第i項之化合物，其中m為1。 6.根據申請專利範圍第丨項之化舍物，其中化合物係選自表 1之化合物1 - 3 2 〇 7·根據申請專利範圍第6項之化合物，其中化合物係選自下 列所組成之群： 2-(4-羥基-雙環[2.2.2]辛-1 -基異丙基4 -丙基_ 1，4,6,7_四氫-1，3,4,5&，8-五氮雜_艾斯（&8)-印達辛 (indacen)-5-酮（化合物 1); 7_乙基-羥基_雙環[2·2·2]辛-1-基丙基_ 1，4,6,7_四氫-1，3,4,5&，8-五氮雜_艾斯（&3)-印達辛 (indacen)--5-酮（化合物 2); -2 - 75281-960503.doc 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) ——~ ——---- A8 B8 C8 D8 1293301 穴、申請專利範圍 3 - [ 4 - ( 7 _ 乙基-5 -氧基丙基 4，5，6，7 四氫-1 jj · 1，3,4,5&，8_五氮雜_艾斯（^)_印達辛（111如(^11)-2-基）· 雙％[2.2.2]辛-1-基]_丙酸（化合物3); 2- (4-羥基-雙環[2.2.2]辛-1-基）-7 -甲基-4 -丙基-1，4,6,7 -四氫_ l，3,4,5a，8 -五氮雜-艾斯（as)_印達辛 (indacen)-5-酮（化合物 4);及 3- [4-(7 -異丙基-5 -氧基-丙基_4,5,6,7 -四氫Vltj二 1，3，4,5 a，8 -五氮雜-艾斯（as)_ 印達辛（indacen)_2_ 基）· 雙％[2.2.2]辛-1-基]-丙酸（化合物5)。 8· —種用於治療病人顯示Al|苷受體活化作用為疾病或失 調原因之跡象或徵候之醫藥組合物，其包括醫藥有效量 之根據申請專利範圍第1項之化合物及醫藥可接受之載 劑、佐劑或媒液。 9·根據申請專利範圍第8項之醫藥組合物，另包含非腺芬修 飾劑。 10.根據申請專利範圍第8項之醫藥組合物，其中該組合物係 調配成經口、經靜脈内、經肌肉内或經皮下施用。 11_根據申請專利範圍第1 - 7項中任一項之化合物，其係用於 製造阻斷病人Ai腺苷受體之藥物。 12_根據申請專利範圍第1 - 7項中任一項之化合物，其係用於 製造用於治療或預防A1腺甞受體活化作用為疾病或失調 原因之病人疾病或失調之藥物。 13·根據申請專利範圍第8項之醫藥組合物，其中該疾^病 < 失 調係選自系統性高血壓、腎哀竭、糖尿病、氣喘、水腫 75281-960503.doc -3- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) " --- 1293301 六、申請專利範圍 A8 B8 C8 D8

症狀、充血性心臟衰竭及腎功能不良所組成之群。 14· 一種製備根據申請專利範圍第1項之化合物之方法，其包 含下列步驟： 八匕 a )將位於經雙環[2 · 2 · 2 ]辛_丨-基取代之嘌呤上之硫酉同 燒基化以產生硫醚； b)將該硫醚與經取代之胺基醇反應以產生醇中間物， 其中該經取代之胺基醇係以如申請專利範圍第1 ,中所定 義之Ri及r2取代；及 Ο將該醇中間物環化以產生環化產物。 15·根據申請專利範圍第1 4項之方法，其另包含下列步驟： a)將該環化產物轉化為幾酸衍生物。 16·根據申請專利範圍第15項之方法，其另包含下列步驟： a) 將二胺基尿嘧啶與雙環[2·2·2]辛—上仁二羧酸單甲 酉旨偶合以產生酸； b) 將該酸還原成對應醇； c) 將該醇氧化成酸； d) 將該駿:與（二苯基亞正膦基（phosphoroanyiidene))醋 酸甲酯偶合以產生偶合產物；及 e) 將該偶合產物轉化成為硫酮。 17.根據申請專利範圍第1 5項之方法，其另包含下列步驟： a) 將二胺基尿嘧啶與雙環[2 · 2 · 2 ]辛· 1，4 -二羧酸單甲 酯偶合以產生酸； b) 將該酸酯化成對應酯； 〇將該酯轉化以產生硫酮。 75281-960503.doc 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公嫠y A8 B8 C8 D8 1293301 六、申請專利範園 18.根據申請專利範圍第1 4項之方法·，其另包含下列步驟： a )將6 -胺基-1-丙基- ΙΗ-ρ密淀-2,4-二酬亞硝基化以產 生亞硝基中間物； b) 將該亞硝基中間物還原以產生對應之二胺基尿嘧 啶； c) 將該二胺基尿嘧啶轉化為胺鹽； d )將該胺鹽與4 -羥基-雙環[2.2.2 ]辛-1 -羧酸偶合以產 生偶合產物；及 e)將該偶合產物轉化為硫酮。 75281-960503.doc -5- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐)