TWI291874B - - Google Patents

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1291874 九、發明說明： 【考务明戶斤才支4特冷員】 本發明是有關於經黏膜用組成物。更具體來說，是有 關於可改善藥理活性肽或蛋白質之經黏膜吸收性之經黏膜 5用組成物。本發明更是有關於提高藥理活性肽或蛋白質之 經黏膜吸收之方法。 【先前技術；3 以往，藥理活性肽或蛋白質等藥物之投藥，主要是對 靜脈内或皮下以注射進行投藥。然而，藉注射之藥物投藥， 1〇對患者而言造成很大的精神上負擔或肉體痛苦，或有由患 者自行投藥困難等不便的問題。因此，近年來，以經由肺 黏膜、鼻黏膜、口腔黏膜、陰道黏膜、胃黏膜、消化管黏 膜等黏膜進行投藥之方法作為注射以外之藥物投藥方法已 開始受到注目。 15 錢’―般來說，由於肽或蛋白質在_之吸收性很 低，故很難以經黏膜吸收到可展現預期藥效之充分量。於 是，目前為止開發了各種可有效經黏膜吸收狀或蛋白質之 吸收促進劑。例如，有報告接屮 °徒出了使用胞啶核^:酸衍生物 (專利文獻υ或分子量5千以上之幾 0生物 20為吸收促進劑之方法。 2)^ 目前f崎，叫，_ 且有效之方法實現黏膜吸收之技術開發 更只用 蛋白質之難黏膜吸收性之方法。 〜可改善肽或 【專利文獻1】特開平6_9424號公報 .129.1874 L寻刊文獻2】 【考务日月内】 ㈣之目的是提供設相可㈣理活性肽及蛋白杯 、'黏膜、鼻黏膜、口腔黏膜、陰道黏膜、胃黏膜、、貝, 化管黏膜等黏膜有效吸收之經黏膜用級成物 、消 之目的是提供可彳效提㈣料性 發明 收之方法。 蛋白貝之經黏•及 • 本發明人等為了解決上述課題而進行專精研討，级果 發現，剌於«之組錄巾，藉岐藥妓性肽或= 10質同時與聚合度2〜20之幾丁聚寡糖、其衍生物、 糖共存，可提高藥理活性肽或蛋白質之經黏膜吸收性，二 得到藉適用黏膜來展現優異藥效之組成物。本發明即 據該發現進一步重複改良而完成者。 疋又 亦即’本發明是提供以下揭示之經黏顧組成物： 15 i·—種經黏膜聽成物，含有下記⑴及(ii)成分： _ ⑴選自於由具有藥理活性之肽及蛋白質所構成 至少1種；及 ^ (11)選自於由聚合度2〜20之幾丁聚寡糖、其衍生物、 葡萄胺糖及其鹽所構成之群之至少丨種。 20 2.如第1項之經黏膜用組成物，其中前述⑴成分係、琴 自於由抗生物質、增血劑、感染症治療劑、抗痴呆劑:： 病毒劑、抗種瘤劑、解熱劑、鎮痛劑、消炎劑、抗潰几 抗過敏劑、抗鬱劑、向精神藥、強心劑、4不整治療^ 血管擴張劑、降屡劑、糖尿病治療劑、抗凝血劑、膽：醇 1291874 低下劑、骨質疏鬆症治療 列及疫苗所構成之群之 5 10 15 至少1種 3.如第1項之經黏膜用組成物，其中前述⑴成 自於由細胞介素、胜肽激素、生長因子、作用於心職血^ 系統之因子'細胞黏翻子、作料中樞及末梢神經4 之因子、作用於體液電解f及血液有機物f之因子、作用 於骨及骨路之因子、作用於消化器官系統之因子、作用於 腎及泌尿器官系統之因子、作用於結締組織及皮膚之因 子、作用於感覺器官之因子、作用於免疫系統之因子 用於呼吸器官系統之因子、仙於生_官錢之因子及 酶所構成之群之至少1種。 項之經黏臈用組成物，其中前述⑴成分係選 自於由干&素、促白血球素、胰島素、生長激素、抑妈素、 黃體激素釋素、崎上腺皮質素、黃體激素、副甲狀腺激 素、及副曱狀腺«之活性斷片所構成之群之至少i種。 5.如第1項之_膜用組成物，其中前述⑼成分係選 自於聚合度2~15之幾丁聚寡糖、其衍生物、㈣胺糖、及 其鹽之至少1種。 6. 如第1項之經黏膜用組成物，係相對於⑴成分1〇〇 重量份，以0.001〜lxl〇6重量份之比例含有前述⑼成分。 7. 如第1項之經黏膜用組成物，係以1x1〇—6~3〇w/v%^ 比例含有前述⑴成分之液狀組成物。 8·如第1項之經黏膜用組成物，係以〇 〇i~3〇Wv%之比 例含有如述(ii)成分之液狀組成物。 1291874 9·如第1項之經黏膜用組成物，係以1χΐ〇·5〜99重量％ 之比例含有前述⑴成分之固態組成物。 1〇·如第1項之經黏膜用組成物，係以0.1〜50重量％之 比例含有前述(11)成分之固態組成物。 11·如第1項之經黏膜用組成物，係適用於鼻腔黏膜、 消化器官侧、肺黏膜、口腔細、眼或陰道黏膜之組成 物。 ^ 个知月杈供下述所揭示之提升黏膜吸收之方法： 10 12. 一種提高經黏膜吸收之方法，係使選自於由具有藥 理活性之肽及蛋白質所構成之群之至少i種在哺乳動物中 之㈣膜吸收提南之方法，該方法係將⑴選自於由具有藥 理活I·生之肽及蛋白質所構成之群之至少丄種，與⑼選自於 由水。度2 20之幾丁聚募糖、其衍生物、葡萄胺糖及其鹽 所構成之群之至少1種同時投藥於哺乳動物之黏膜。 15 13. 如第12項之方法，其中前述⑴成分係選自於由抗 生物質、增血劑、感染症治療劑、抗痴呆劑、抗病毒劑、 抗腫瘤劑、解熱劑、鎮痛劑、消炎劑、抗潰瘍劑、抗過敏 劑、抗鬱劑、向精神藥、強心劑、心律不整治療劑、血管 擴張劑、降壓劑、糖尿病治療劑、抗凝 劍、骨質疏驗_、_及疫㈣叙=之= 種。 14·如第12項之方法，其中前述⑴成 胞介素、胜狀激素、生長因子，_二= 子、細胞黏著因子、作用於中樞及末梢神經系㈣子、 20 1291874 作用於體液電解質及血液有機物質之因子、作用於骨及骨 骼之因子、作用於消化器官系統之因子、作用於腎及泌尿 器官系統之因子、作用於結締組織及皮膚之因子、作用於 感覺器官之因子、作用於免疫系統之因子、作用於呼吸器 5 官系統之因子、作用於生殖器官系統之因子及酶所構成之 群之至少1種。 15. 如第12項之方法，其中前述(i)成分係選自於由干 擾素、促白血球素、胰島素、生長激素、抑約素、黃體激 B 素釋素、激腎上腺皮質素、黃體激素、副甲狀腺激素、及 10 副甲狀腺激素之活性斷片所構成之群之至少1種。 16. 如第12項之方法，其中前述(ii)成分係選自於聚合 度2〜15之幾丁聚募糖、其衍生物、葡萄胺糖、及其鹽之至 少1種。 17. 如第12項之方法，係將比例相對於⑴成分100重 15 量份而為0.001〜lxio6重量份之前述(ii)成分與⑴成分同時 投予。 ® 18.如第12項之方法，係對哺乳動物之黏膜投予含有⑴ 成分及(ii)成分且以lxl〇_6〜30w/v%之比例含有前述⑴成分 之液狀組成物。 20 19.如第12項之方法，係對哺乳動物之黏膜投予含有⑴ 成分及（ii)成分且以〇·〇 1〜30w/v%之比例含有前述(ii)成分 之液狀組成物。 20.如第12項之方法，係對哺乳動物之黏膜投予含有⑴ 成分及(ii)成分且以lxlCT5〜99重量％之比例含有前述⑴成 1291874 分之固態組成物。 21·如第12項之方法，係對哺乳動物之黏膜投予含有⑴ 成分及(ii)成分且以〇1〜5〇重量％之比例含有前述(ii)成分 之固態組成物。 22·如第12項之方法，其中投藥之黏膜係鼻腔黏膜、 消化為官黏膜、肺點骐、口腔黏膜、眼或陰道黏膜。 23·如第12項之方法，係將第1〜11項中任一項之經黏 膜用組成物投藥於哺乳動物之黏膜。 又’本發明提供下述所揭示之用途。 24· —種用途，係將⑴選自於由具有藥理活性之肽及蛋 白質所構成之群之至少1種、及(ii)選自於由聚合度2〜20 之幾丁聚寡糖、其衍生物、葡萄胺糖及其鹽所構成之群之 至少1種使用於製造經黏膜用組成物。 圖式簡單說明 第1圖是顯示在試驗例1中，將各組成物(實施例 及比較例1_2)投藥於大鼠氣管内時之血清中IFNa之平均 濃度之歷時變化圖。 【方包 以下’更詳細說明本發明。 I ·經黏膜用組成物 ⑴成分 本發明之羥黏膜用 呈右㈣、錢 、組成物含有作為W成分之選自於由 ”有生理活性W及蛋白質所構成切之至少i種。 本發明中，作為具有生理活性之耿及蛋白質’係使用 10 1291874 由2個以上的胺基酸所構成之肽及其衍生物。具體來說， 該肽及蛋白質’除了僅由胺基酸所構成者之外，還可使用 例如半乳糖、甘露糖等糖、或以糖鏈修飾者；聚乙-醇等 合成聚合物、或硫酸軟骨素、玻尿酸等天然聚合物修都者\ 5其他以非肽性化合物修飾者等。又，亦可使用為了展現生 理活性而在所需之胺基酸序列上附加了具有其他機能之肤 之混合肽。又，以保持藥理活性為限定，也可使用已經得 知藥理活性之肽及蛋白質之斷片。 關於該肽及蛋白質之分子量並無特別限制，可舉例如 10 200〜200⑻〇,又以200〜100000為佳，更以2〇〇〜5〇〇〇〇為佳。 本發明所使用之肽及蛋白質，其黏膜吸收特性並無特 別限制，可以是黏膜易吸收性者，也可以是黏膜難吸收性 者。在此，所謂「黏膜易吸收性」，係指不需其他黏膜吸收 促進劑，以一般的投藥量即可使發揮藥效作用之量之肽及 15蛋白質經由黏膜吸收，而所謂「黏膜難吸收性」，係指若不 與其他黏膜吸收促進劑共存，以一般的投藥量無法使可發 揮藥效作用之量之肽及蛋白質經由黏膜吸收。鑒於提高肽 及蛋白質之黏膜吸收性之本發明效果，適合之肽及蛋白質 可舉黏膜難吸收性者。 20 該肽及蛋白質可使用來自天然者、藉基因重組技術製 造者、藉化學合成製造者之任一種。 具有生理活性之肽及蛋白質，可舉作為抗生物質、增 血劑、感染症治療劑、抗痴呆劑、抗病毒劑、抗腫瘤劑、 解熱劑、鎮痛劑、消炎劑、抗潰瘍劑、抗過敏劑、抗鬱劑、 11 •1291874

2精神藥、強心劑、心律不整治療劑、血管擴張劑、降壓 浏、糖尿病治療劑、抗凝血劑、膽固醇低下劑、骨質疏穸 症治療劑、激素劑及疫苗等所使用之成分。 A 该肽及蛋白質之具體例子，可舉細胞介素、胜肽激素、 5生長因子、作用於心臟血管系統之因子、細胞黏著因子、 作用於中樞及末梢神經系統之因子、作用於體液電解質及 血液有機物質之因子、作用於骨及骨骼之因子、作用於消 » 化器官系統之因子、作用於腎及泌尿器官系統之因子、作 用於結締組織及皮膚之因子、作用於感覺器官之因子、作 10用於免疫系統之因子、作用於呼吸器官系統之因子、作用 於生殖裔官系統之因子及晦。其中又可舉細胞介素、胜肽 激素、生長因子、作用於心臟血管系統之因子、作用於中 樞及末梢神經系統之因子、作用於體液電解質及血液有機 物質之因子、作用於骨及骨骼之因子、作用於消化器官系 15統之因子、作用於免疫系統之因子、作用於呼吸器官系統 • 之因子、作用於生殖器官系統之因子及酶為佳。 以下，例舉該肽及蛋白質之具體例。本發明並不限定 於這些肽及蛋白質。 細胞介素：例如干擾素（干擾素-α、点、γ )、促白血 20球素(促白血球素-1〜11)、腫瘤壞死因子(TNF-α、石）、血 癌抑制因子(LIF)、生血素、顆粒球株刺激因子(G_CSF)、顆 粒球巨噬細胞株刺激因子（GM_CSF)、巨噬細胞株刺激因子 (M-CSF)、血小板生成素、血小板增殖刺激因子、巨核細跑 增殖刺激因子等。 12 1291874 胜肽激素：例如胰島素、生長激素、黃體激素釋素 (LH-RH)、激腎上腺皮質素(ACTH)、澱粉素、催產素、黃 體激素等。 生長因子：例如神經成長因子(NGF、NGF-2/NT-3)、 5 表皮生長因子(EGF)、纖維芽細胞生長因子(FGF)、類似胰 島素生長因子(IGF)、變形生長因子(TGF)、血小板衍生生 長因子(PDGF)、肝細胞生長因子(HGF)等。 作用於心臟血管糸統之因子：例如内皮素、内皮素抑 制劑、内皮素對抗劑、内皮素生長酶阻礙劑、升壓素、腎 10素、血管緊縮素I、血管緊縮素Π、血管緊縮素瓜、血管 緊縮素I抑制劑、血管緊縮素Π受體對抗劑、心房利尿納 肽(ANP)、抗心律不整肽等。 細胞黏著因子：例如層黏連蛋白、細胞間附著因子 (IC AM 1)等。 15 作用於中樞及末梢神經系統之因子：例如腦素、腦内 啡、京都啡(kyotorphin)、趨神經因子(NTF)、抑約素基因系 肽(CGRP)、腺苔酸環化酶活化肽(PACAP)、甲狀腺促素釋 素(TRH)、神經調壓素等。 作用於體液電解質及血液有機物質之因子：例如抑舞 20 素、缺輔基蛋白E、水蛭素等。 作用於骨及骨骼之因子：例如甲狀腺激素、甲狀腺數 素之活性斷片、組蛋白H4-骨相關形成增殖肽等。 作用於消化器官糸統之因子：可舉例如騰類催素田 泌素等。 13 1291874 作用於腎及泌尿器官系統之因子：例如腦衍生利尿納 月大、硬骨魚緊張狀等。 作用於感覺态官之因子··例如P物質等。 作用於免疫系統之因子··例如趨化性肽、缓激肽等。 作用於呼吸器官系統之因子：例如抑制喘息反應之因 子等。 上述⑴成分中，適於使用的可舉干擾素、促白血球素、 胰島素、生長激素、黃體激素釋素、激腎上腺皮質素、黃 體激素、抑鈣素、曱狀腺激素及曱狀腺激素之活性斷片。 10 尤其適當之⑴成分可舉干擾素。 上述(1)成分之每日投藥量，依據該⑴成分之種類、患 者年齡或性別等而異，通常可設定為成人每曰 0.001〜100mg、又以0.01〜l〇mg為佳，以此作為標準。 (ii)成分 15 本發明之經黏膜用組成物，含有選自於由聚合度2〜20 之幾丁聚募糖、其何生物、葡萄胺糖及其鹽所構成之群之 至少1種作為(ii)成分。 個匍萄胺糖殘基猎点1 -4鍵結合之寡糖。 20 本發明中’ ％合度2〜20之幾丁聚寡糖之衍生物，只要 是藥學上可容許者即可’並無特龍制。這翻生物具體 可舉上述幾丁聚寡糖之羧甲基化物1乙基化物、^基 化物、二經丙基化物、甲基化物、乙基化物、乙二醇化物、 酿基化物、對甲基磺醯基化物、硫酸化物等。 14 1291874 又，作為(ii)成分使用之聚合度2〜20之幾丁聚寡糖、 其何生物及葡萄胺糖鹽，並無特別限制，只要是藥學上可 容許者即可。這種鹽具體可舉藉無機酸(例如鹽酸、硫酸、 磷酸等）形成之鹽；及藉有機酸(例如醋酸、酒石酸、乳酸、 5谷胺酸、馬來酸、褐藻酸、檸檬酸等）形成之鹽。 作為該(ii)成分者又以聚合度2〜15之幾丁聚寡糖、其 衍生物、葡萄胺糖及其鹽為佳，更以聚合度2〜1〇之幾丁聚 募糖、其衍生物、葡萄胺糖及其鹽為佳。 作為(ii)成分使用之上述幾丁聚募糖，可藉由利用酶（幾 1〇 丁聚糖酶(chitonase)等）或酸等將幾丁聚寡糖水解來製造。 又’上述幾丁聚募糖可藉由將幾丁質利用酶（幾丁質酶 (chitinase)專）或酸等水解後，將之在強驗溶液中脫乙醯之方 法來製造。 經黏膜用組成物 本杳月之經黏膜用組成物中，上述⑴及(ii)成分之滿合 比例並無特別限制，通常相對於上述⑴成分1〇〇重量份， 上述（η)成分〇·〇〇1〜1χ1〇6重量份之比例為佳，又以 0·01〜lxl〇S重量份之比例為佳，更以0.1〜lxlO4重量份之比 例為佳。藉由滿足上述比例，可格外提高⑴成分之經黏膳 20 吸收。 本發明之經黏膜用組成物中之上述⑴成分之混合量， 只要是適用於黏膜且可產生藥理效果之有效量即可，町因 應患者之性別、年齡、投藥形態、製劑之形狀或劑塑、所 使用之⑴成分之種類或一日投藥量、（ii)成分之種類、期待 15 •1291874 之藥效效果等，來適當設定。經黏膜用組成物中之上述⑴ 成分之混合比例之一例’可舉⑴成分相對於該組成物之總 重量而為ΙχΚΓ7〜99重量％之比例。具體來說，若是調製為 液狀組成物，⑴成分通常可舉ΐχ10·6〜30w/v%之比例，又以 5 lxicr5〜i〇w/v%之比例為佳，更以lxl0·4〜iw/v%之比例為 佳。在此，單位「w/v%」與「g/100m1」同義。又，例如， 若是調製為固態組成物’（丨)成分相對於該組成物之總重 量，通常可舉IX10-5〜99重量％之比例，又以1χ1〇·4〜50重 量％之比例為佳，更以lxl0·3〜1〇重量％之比例為佳。 10 本發明之經黏膜用組成物中之上述（ii)成分之混合 量，只要是可提高上述⑴成分之黏膜吸收之有效量即可， 可依據上述⑴及(ϋ)成分之混合比例、與上述⑴成分之混合 量來適當設定。經黏膜用組成物中之上述(ϋ)成分之混合比 例之一例，可舉（⑴成分相對於該組成物之總重量而為 15 0.001〜50重量％之比例。具體來說，若是調製為液狀組成 物，（ii)成分通常可舉0·01〜30w/v%之比例，又以 0.1~10w/v%之比例為佳’更以〇·5〜5w/v%之比例為佳。又， 例如，若是調製為固態組成物，（ϋ)成分相對於該組成物之 總重量，通常可舉0·1〜50重量％之比例，又以0.5〜30重量 20 %之比例為佳，更以1〜10重量％之比例為佳。 本發明之經黏膜用組成物可於上述⑴及(ii)成分，再加 上含有經常使用於經黏膜用組成物之各種藥效成分。 又，本發明之經黏膜用組成物中，除上述成分之外， 亦可依據該組成物之用途或形狀等，適當混合通常使用於 16 1291874 經黏膜用組成物之載體或添加劑。關於該載體或添加劑之 混合比例，以業界通常採用之範圍為基礎來適當設定即 可。可混合之載體或添加劑並無特別限制，例如可舉水、 生理食鹽水、其他水性溶劑、水性或油性基劑等各種載體； 5 賦形劑、結合劑、pH調整劑、崩解劑、吸收促進劑、滑澤 劑、著色劑、矯味劑、香料等各種添加劑。 這種添加劑，具體可例舉：乳糖、白糖、甘露糖醇、 氯化鈉、葡萄糖、碳酸鈣、高嶺土、結晶纖維素、矽酸鹽 等賦形劑；水、乙醇、單糖漿、葡萄糖液、澱粉液、寒天 10 液、羧曱基纖維素、羧甲基纖維素Na、蟲膠、甲基纖維素、 羥丙基甲基纖維素、羥丙基纖維素、聚乙烯吼咯啶酮、聚 乙烯醇、寒天、糊精、普路蘭等結合劑；檸檬酸、檸檬酸 酐、檸檬酸鈉、檸檬酸鈉二水和物、脫水磷酸氫一鈉、脫 水磷酸氫二鈉、填酸氫鈉、磷酸氫二鈉等pH調整劑；羧甲 15 基纖維素鈣、低取代度羥丙基纖維素、羧甲基纖維素、交 聯羧曱基纖維素鈉、羧甲基澱粉鈉、交聯聚乙烯聚咄咯啶 酮、聚山梨酸酯80等崩解劑；第4級銨鹽基、月桂硫酸鈉 等其他吸收促進劑；精製滑石粉、硬脂酸鹽、聚乙二醇、 膠狀矽酸、蔗糖脂肪酸類等之滑澤劑；黃氧化鐵、黃色三 20 氧化二鐵、三氧化二鐵、石胡蘿蔔素、氧化鈦、食用色素(例 如食用藍色1號等）、銅葉綠素、核黃素等著色劑；以及抗 壞血酸、阿斯巴甜、土常山藥、氯化鈉、果糖、糖精、粉 糖等矯味劑等。 又，除了上述成分之外，本發明之經黏膜用組成物更 17 1291874 可使用生分解性合成高分子作為基劑。這種生分解性合成 高分子可舉例如聚乳酸、聚（乳酸-乙二醇酸）共聚物、聚羥 酪酸、聚（羥酪酸-乙二醇酸）共聚物、及該等之混合物等作 為代表性者，不過並不限定於此。 5 本發明之經黏膜用組成物以可適用於黏膜為限度，關 於其形狀並無特別限制，可為固體狀、液體狀、半固體狀、 懸濁狀、粉末狀、微粒子狀之任一種形狀。又，本發明之 經黏膜用製劑，可依據習知之方法，成型為微膠囊（微球) 等粒子。 10 又，本發明之經黏膜用組成物，關於作為適用對象之 黏膜，並無特別限制。本發明之經黏膜用製劑之適用對象 黏膜，具體可舉鼻黏膜、消化器官黏膜（胃腸黏膜）、肺黏膜、 陰道黏膜、口腔黏膜、眼黏膜、氣管黏膜等。其中，基於 患者之順從性等理由，以鼻黏膜、消化器官黏膜、肺黏膜 15 及陰道黏膜為佳。 本發明之經黏膜用組成物，可因應其形狀或適用對象 黏膜，來調製成各種劑型。又，本發明之經黏膜用組成物， 可作為醫藥組成物來使用，依據其適用對象黏膜或劑型之 投藥型態來投藥於患者之黏膜。 20 Π .經黏膜吸收之提升方法 如前所述，上述成分(ii)可使具有藥理活性之肽及蛋白 質之經黏膜吸收提升。因此，本發明更提供使選自於由具 有藥理活性之肽及蛋白質所構成之群之至少1種在哺乳動 物中之經黏膜吸收提高之方法，該方法係藉由將⑴選自於 18 • 1291874 由具有藥理活性之肽及蛋白質所構成之群之至少1種，與 (ii)選自於由聚合度2〜20之幾丁聚寨糖、其衍生物、葡萄 胺糖及其鹽所構成之群之至少1種同時投藥於人類等哺乳 動物之黏膜來實施。 5 該方法中，關於⑴成分之種類或投藥量、（U)成分之種 類或投藥量、⑴成分與(ii)成分之比例、投藥對象黏膜等， 與前述「I·經黏膜用組成物」之情況相同。 該方法宜藉由將前述經黏膜用組成物投藥於哺乳動物 _ 之黏膜來實施。 10 【實施例1】 以下’以實施例及試驗例詳細说明本發明’不過本發 明並不因此受到限制。又，實施例4及比較例1中所使用 之幾丁聚寡糖或幾丁質之平均分子量，係藉由「幾丁質、 幾丁聚糖手冊」（幾丁質、幾丁聚糖研究會編、技報堂出版） 15第8章幾丁質、幾丁聚糖之分析法中所記載之利用高速液 ，體層析法(HPLC)之 GPC(Gel Permeation Chromatography) 模式之方法來求取。 實施例1 將幾丁聚糖六聚物(6個葡萄胺糖殘基藉万14鍵結合 20之募糖；製品名··幾丁聚糖六聚物，分子量·· 1204、Code Νο·4〇〇436、購入源··生化學工業株式會社）以注射用水（製 造編號· 2D71N、發售源：大塚製藥株式會社)溶解，調製 5mg/mL之幾丁聚糖六聚物溶液。將該溶液〇 5mL添加到 含有ΗΚ)0萬IU之干擾素a(IFNa)之管瓶（天然型干擾素^ 19 1291874 、·商叩名·歐踅耶弗、製造編號·· 3G86F10、製造發售 二大ft藥株式會社）巾，輕微搖晃混合使管瓶内之珠結 摩乙燦物溶解，胡制 ° 衣 Ν α >農度 2000 萬 IU/mL(約 0.01w/v%) 之組成物。 5 實施例2 使用相同伤夏之幾丁聚糖二聚物(6個葡萄胺糖殘基藉 沒1 4鍵結合之寡糖；製品名：幾丁聚糖二聚物，分子量： 413“ CodeN0.4〇〇432、購入源：生化學工業株式會社)來取 代成丁來糖六聚物，除此之外與實施例工相同，以此方法 周衣IFNa /辰度2〇〇〇萬IU/mL(約〇 〇lw/v%)之組成物。 實施例3 使用相同份;^之葡萄胺糖（分子量：216、c〇de 101782購入源·和光純藥工業株式會社)來取代幾丁 聚糖六聚物，除此之外與上述實施例i相同，以此方法調 15製1FNa濃度2000萬IU/mL(約0.01w/v%)之組成物。 實施例4 使用相同份量之幾丁聚糖（製品名：水溶性幾丁聚糖， 平均分子量：1800、製品Νο 037·143〇3、購入源：和光純 藥工業株式會社)來取代幾丁聚糖六聚物，除此之外與實施 20例1相同，以此方法調製IFNa濃度2000萬lu/mL(約 O.Olw/v%)之組成物。 實施例5 以等張磷酸緩衝溶液溶解幾丁聚糖六聚物（6個葡萄胺 糖殘基藉/3 1-4鍵結合之募糖；製品名：幾丁聚糖六聚物， 20 1291874 分子量：1204、Code No.400436、購入源：生化學工業株 式會社）’調製lOmg/mL之幾丁聚糖六聚物溶液。又，以等 張碗酸緩衝溶液溶解抑鈣激素((：〇(16 ν〇·Τ3660、購入源： 西格馬阿魯得利奇日本株式會社），調製2//g/mL之抑鈣激 5素溶液。將該抑鈣激素溶液0.5mL與幾丁聚糖六聚物溶液 0.5mL混合，調製抑鈣激素濃度1//g/mL之組成物。 比較例1 使用相同份量之幾丁聚糖（製品名：CHITOSANEF、平 均分子量48000、LOT 0302190、購入源：日本油脂株式會 10社）來取代幾丁聚糖六聚物，除此之外與上述實施例1相 同’以此方法調製IFNa濃度2000萬IU/mL(約O.Olw/v%) 之組成物。 比較例2 除了不使用幾丁聚糖六聚物之外，與實施例1相同之 15方法’調製1FNa濃度2〇〇〇萬IU/mL(約O.Olw/v%)之組成 物0 比較例3 除了不使用幾丁聚糖六聚物之外，與上述實施例5相 同之方去’調製抑飼激素濃度Ι/zg/mL之組成物。 20 試驗例1 為了檢討上述實施例1-4及比較例1-2之組成物之黏膜 吸收特性’尤其是肺黏膜之吸收特性，故而進行以下試驗。 使用已絕食約18小時之Wistar系雄性大鼠（體重約 200g)作為實驗動物。在異氟烷麻醉下，固定大鼠，並將特 21 1291874 氟隆吕（内# 0*8mm、外徑1.6mm)從口腔插入氣管内約 5Cm。透過该特氟隆管將上述實施爿1_4及比較例之組 5 10 、、5mL/kg之谷量投藥於氣管内。氣管内投藥後，在 3〇分鐘、1、2、3、4、5、6、8、1〇小時從鎖骨下靜脈採 血〇.2mL，以18〇〇g進行離心分離1〇分鐘，藉此得到血清。 使用依據酵素抗體法(ELISA)之人類IFNa測定組件（製月造 發售源·株式會社日本抗體研究所）來測定所得到之血产中 之IFNa濃度。 胃 所得到之結果顯示於第1圖及表1。第1圖中，顯示血 清中1FNa之平均濃度之歷時變化㈣）。表1巾，顯示藥 物動態學參數之平均值(n=4)。又，表i中之各參數表示二 下意義。 AUC10hr:投藥後10小時為止之血清中濃度-時間曲線 下面積(IU · hr/mL) 15 AUC‘投藥後無限大時間為止之血清中濃度·時間曲 線下面積(IU · hr/mL)

Cmax :最高血中濃度(IU/mL)

Tmax ·隶n血中;ί辰度到達時間（hr) 結果確認’將幾丁聚糖六聚物、幾丁聚糖二聚物、分 20子量1800之幾丁聚募糖、或葡萄胺糖與(IFNa)—起混合 之組成物（實施例1-4)，相較於混合有幾丁聚糖（分子量 48⑻0)之組成物（比較例1)、或單獨含有IFNa之組成物（比 較例2)，其最高血中濃度(Cmax)及投藥後1〇小時為止之血 清中濃度-時間曲線下面積(AUC! 0hr)同時增大。 22 ,1291874 【表1】 —AU?1〇hrJIlJ * Cmax(IU/mL) Tmax(hr) AUC〇〇 (IU · hr/mL) 5385 1006 2.0 ~~6105^ _4050 817 1.5 ~~4871^ 4131 768 --670~ --356~~ ~~ ~~375~~ 1.8 —2.8 o L9 ~~4967^ ~5899^ ~~2812^ ~~2373^ 攸以上結果可清楚得知，藉由使生理活性肽及蛋白質 與聚合度2〜2〇之幾丁聚寡糖或葡萄胺糖一起混合，可使組 成物中之生理活性肽及蛋白質之經黏膜吸收性提升，顯著 文二生物學可利用性(bio-availability)。 減驗例2

為了檢討上述實施例5及比較例3之組成物之黏臈吸 收特性，尤其是肺黏膜之吸收特性，故而進行以下試驗。 1 使用已絕食約18小時之Wistar系雄性大鼠（體重約 20〇g)作為實驗動物。在異氟域醉下，固定大鼠並將上 述實施例5及比較例3之組成物〇·1ιηί 内。在投藥後1〇分鐘、30分鐘、 "a 斗、3、6小時 從鎖骨下靜脈採血〇.2mL，以l800g進行離心分離ι〇分鐘， 藉此得到血清。使用依據曱基二甲笨盼藍(ΜχΒ)法之 15定組件（製造發售源：和光純藥株式會社)來測定所得到之血 清中之鈣濃度。 結果，確6忍以幾丁水糖六聚物與抑舞激素一（、、 組合物（實施例5)，相較於單獨含有抑鈣激素之組成&物^匕 較例3)，如清中齊降低作用而出3 · 8件，曰γ丄 °且错由投予實施 23 1291874 例5之組成物所形成之該作用可在投藥後持續至少6小時。 產業上可利用性 本發明之經黏膜用組成物中，使具有生理活性之肽及 蛋白質，同時與分子量3⑻0以下之聚合度2〜20之幾丁聚 5 寡糖、其衍生物、葡萄胺糖或其鹽共存，藉此，可改善具 有生理活性之肽及蛋白質之經黏膜吸收特性。因此，藉本 發明之經黏膜用組成物，可有效發揮以具有生理活性之肽 及蛋白質為基礎之藥效作用。 又，本發明之經黏膜用組成物，不同於對患者進行伴 10 隨痛苦之注射，可自行對鼻黏膜、肺黏膜、陰道黏膜、消 化管黏膜等黏膜投藥，故作為需要長期間連續投藥之生理 活性肽及蛋白質之經黏膜用製劑極為有用。 I：圖式簡單說明3 第1圖是顯示在試驗例1中，將各組成物（實施例1_4 15 及比較例1-2)投藥於大鼠氣管内時之血清中IFNa之平均 濃度之歷時變化圖。 L主要元件符號說明3 無 24

Claims (1)

1. Ι29·1 8^)4131630號專利申請案申請專利範圍替換本 修正日期：96年10月

   10 15

   20 十、申請專利範圍： 丨更)正本公告本 1. 一種經黏膜用組成物，含有下記⑴及出)成分： ⑴選自於由具有藥理活性之肽及蛋白質所構成之 群之至少1種；及 (ii)選自於由聚合度2〜20之幾丁聚寡糖、其衍生 物、葡萄胺糖及其鹽所構成之群之至少1種。 2. 如申請專利範圍第1項之經黏膜用組成物，其中前述⑴ 成分係選自於由抗生物質、增血劑、感染症治療劑、抗 痴呆劑、抗病毒劑、抗腫瘤劑、解熱劑、鎮痛劑、消炎 劑、抗潰瘍劑、抗過敏劑、抗鬱劑、向精神藥、強心劑、 心律不整治療劑、血管擴張劑、降壓劑、糖尿病治療劑、 抗凝血劑、膽固醇低下劑、骨質疏鬆症治療劑、激素劑 及疫苗所構成之群之至少1種。 3. 如申請專利範圍第1項之經黏膜用組成物，其中前述⑴ 成分係選自於由細胞介素、胜肽激素、生長因子、作用 於心臟血管系統之因子、細胞黏著因子、作用於中樞及 末梢神經系統之因子、作用於體液電解質及血液有機物 質之因子、作用於骨及骨骼之因子、作用於消化器官系 統之因子、作用於腎及泌尿器官系統之因子、作用於結 締組織及皮膚之因子、作用於感覺器官之因子、作用於 免疫系統之因子、作用於呼吸器官系統之因子、作用於 生殖器官系統之因子及酶所構成之群之至少1種。 4. 如申請專利範圍第1項之經黏膜用組成物，其中前述⑴ 成分係選自於由干擾素、促白血球素、騰島素、生長激 25 1291874 素、抑鈣素、黃體激素釋素、激腎上腺皮質素、黃體激 素、副甲狀腺激素、及副甲狀腺激素之活性斷片所構成 之群之至少1種。 5·如申請專利範圍第1項之經黏膜用組成物，其中前述(ii) 5 成分係選自於聚合度2〜15之幾丁聚募糖、其衍生物、葡 萄胺糖、及其鹽之至少1種。

   6.如申請專利範圍第1項之經黏膜用組成物，係相對於⑴ 成分100重量份，以0.001〜lxio6重量份之比例含有前述 (ii)成分。 10 7·如申請專利範圍第1項之經黏膜用組成物，係以 1X1 (Γ6〜30w/v%之比例含有前述⑴成分之液狀組成物。 8·如申請專利範圍第1項之經黏膜用組成物，係以 0·01〜30w/v%之比例含有前述(ii)成分之液狀組成物。 9·如申請專利範圍第丨項之經黏膜用組成物，係以 15 lxl〇_5〜99重量％之比例含有前述⑴成分之固態組成物。 !〇·如申請專利範圍第1項之經黏膜用組成物，係以0.1〜50 重量％之比例含有前述(ii)成分之固態組成物。 20 11·如申請專利範圍第1項之經黏膜用組成物，係經鼻、經 消化器官、經肺、口腔黏膜、眼黏膜或經陰道黏膜用之 組成物。 12· —種用途，係將⑴選自於由具有藥理活性之肽及蛋白質 所構成之群之至少1種、及(ii)選自於由聚合度2〜20之幾 丁聚寡糖、其衍生物、葡萄胺糖及其鹽所構成之群之至 少1種使用於製造經黏膜用組成物。 26