TW203008B

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Publication number: TW203008B
Application number: TW79102986A
Authority: TW
Original assignee: Beecham Group Plc
Priority date: 1989-04-13
Filing date: 1990-04-13
Publication date: 1993-04-01
Also published as: ZA902775B; GB8908353D0

Description

203008 A6 _ B6 _ 五、發明説明（1 ) 本發明是關於一種新穎磷衍生物、其製備方法及其醫藥上之用途。明確而言，；$：發明是關於其作爲中性金屬蛋 Γ 白質酵素之膠原酵素族群的酵素抑制劑，以治療關節炎和其他疾病。哺乳類膠原酵素的琴素系族包括多種蛋白質酵素，其範例有間質（.1型）膠原酵素本身，基質溶解素（又稱爲蛋白質溶解酵素或轉化酵素），結締組織細胞與多形核白血球解膠酵素（又稱爲膠原一I V —酵素），及'pump— 〃（假想型金靨蛋白質酵素1 ，子宮型金屬蛋白質酵素） C Goldberg et al. , J. Biol. Chem. 2610, 6600, 1986 ；

r r » < I f I < I

Whitham et al. , Biochem. J. 240, 913, 1986 ； Breathnach et al. , Nucleic Acids Rea., 15, 1139, 1987 ； Muller et al., Biochem. J., 253, 187, 1988 ； Collier et al., J. Biol. Chem., 263, 6579, 1988 ； Murphy et al ., Biochem. J., 258, 463, 1989 ； Quantin et al. , Biochem. ( N.Y.), 28, 5327, 1989 ； B i rkedal - Hans en, J. Oral Pathol., 17, 445, 1988〕。蛋白質酵素的哺乳類膠原酵素的系族資格甚易確認，因其具備多種高度特徵與實驗可辨測之性質，這些性質可以採用作爲鑒定此種酵素系族的基準，選自下列所述性質：經濟部中央揉準局印焚 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本百} ⑻在中性pH之最適蛋白分解活性。 ⑹酵素活性因應鋅之存在而定，這可明顯從以二價金靨離子螯合劑處理過所造成之鈍化而看出，例如1 ，1〇菲繞啉（1，10 phenanthroline )(尤其是鋅之螯合作用）甲 4(210X 297 公沒） 4 203008 A6 B6 五、發明説明（2) 、或EDTA (較低之螯合性質）；EDTA和EGTA皆造成酶的鈍化，這是經由將酵素安定化所需之鈣離子螯合起來所致。） (c)受TIMP (金屬蛋白質酵素的組織抑制劑/Tissue

Inhibitor of Metalloproteases )所抑制，TIMP 乃是— 種蛋白質酵素抑制劑，其在有關膠原酶素系族的生理控制中扮演重要的角色。金屬蛋白質酵素的其它系族並不受TIMP所抑制，至少到目前爲止，相關硏究所得之結果俱是如此。 ⑹對於其它中性之含鋅金屬蛋白質酵素，例如熱溶解素、血管緊縮素轉化酿和安克法酵素（enkephalinase ) ( EC 3· 4· 24· η )等之抑制劑，没有明顯的受抑制現象。最常用的一種抑制劑爲含磷醯胺，其能抑制熱溶解素和 '安克法酵素*。 ⑼進行生物合成與分泌而呈潛前驅形式.（酵素原）時，需要細胞外活化作用。多種內蛋白質酵素、有機汞化合物及蕭氏轉化劑（Chao tropic agent )可達成活化作用〇經濟部中央標準局印^ (請先聞讀背面之注意事項再填寫本11) 中性金屬蛋白質酵素的膠原酵素系族的成員具有不同的基質特性。因此，I型膠原酵素本身具有將間質膠原 (例如，Ϊ 、II或III型）中之天然原纖維的特定胜鍵裂開的特殊能力。解膠酵素在這些膠原上只有甚低的活性，但已足以變質的間質膠原退化，同時也能使非原纖維膠原如IV型等可在基膜中發現的膠原退化。據報導， pump -1尤其適於作用於變質的膠原（gelatins )上，雖然其甲4(210X 297公藶）〜5〜 203008 A6 B6 經濟部中央標準局印- 五、發明説明（3 ) 外形和基質溶解素或IV型膠原酵素有所不同。基質溶解素和解膠酵素二者皆能分解掉非膠原性結構化蛋白質，例如蛋白質素（)與彈力素（elastin ) 的蛋白質核。細胞-酵解物和細胞-細胞間作用所渉及的巨分子，例如昆布素（laminin )和雜維質素（fibr〇nectin ) 亦可被數種所述之金屬蛋白質酵素所退化。以下所述的有關膠原酵素系族的抑制劑的醫療應用範圍，反映出這些.酵素中的各種蛋白質基質在整個身體的結締組織的基本角色。其用途不僅在於治療許多由於膠原和其他結締組織的淨破壞的疾病和現象，同時亦渉及正常或異常組織的病變。膠原酵素系族酵素是由滑膜（synovial )和皮膚結締組織細胞、軟骨細胞（chondrocytes )、末梢單核細胞（ peripheral mononuclear cells )、角質細胞（keratinocytes )和齒齦組織（gingival tissue )所產出者，以及存在於多形核白血球（PMNLs / polymorphonuclear leucocytes ) 之顆粒狀貯存囊中。包含各種酵素之膠原酵素系族的抑制劑，被認爲對於下列各種疾病之治療有效： (i )關節炎疾病，諸如風濕性及骨關節炎，軟組織風濕症，多軟骨炎，以及腱炎等等； (ii)骨耗損疾病，諸如骨稀鬆症，柏哲德氏症，甲狀旁腺機能過旺症及膽硬脂瘤等等； (Πί)促進性膠原破壞，發生於與糖尿病相關之疾病； {請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) •裝· •訂· •線· 甲 4(210X297公沒） 6 203008

A B 經濟部中央標準局印装五、發明説明（4 ) (iv)營養不良性表皮起泡症之隱性疾病； (V )齒周圍疾病以及:膠原酵素在齒齦製造時之相關影響，或是在因細胞浸潤至發炎菌齦後之PMNL膠原酵素釋出所帶來的相關影響，此症狀係爲使易感病之糖尿病患抵抗齒周圍疾病時所產生； (vi) 角膜潰瘍，例如，因鹸金屬或其他灼傷，輻射，維他命E或視網膜缺陷所引起的角膜潰瘍； (vii) 皮膚及胃腸道之潰瘍，以及異常創傷愈合時之潰瘍； (vi ii)手術後之症狀，包括結腸之吻合，其中膠原酵素之程度將會增高； (ix)癌症，包含各種酵素之膠原酵素系族中的酵素群，係暗藏在必須支持腫瘤生長及生存之新脈管的形成過程中，暗藏在必須調節生長首發及次發腫瘤之組織重整過程中，以及暗藏在腫瘤細胞在轉移時經由脈管壁之基膜的穿透過程中； (X )中樞及末梢神經系統之脫髓鞘疾病，包括下列之症候群：基礎病理學上的髓鞘質損失，以及軸索萎縮症。髓鞘質在此等疾病中之由多發性硬化爲例的退化，係由包各種酵素之膨原酵素系族中的酵素群所調和。包含各種酵素之膠原酵素系族的抑制劑，諸如在本發明中所揭示之抑制劑的治療性之—個特殊實例是，會導致關節處軟骨、骨及腱的膨原、蛋白質素及彈力素成份廣泛性喪失之關節炎疾病，應該以膠原酵素抑制劑治療；蛋白 (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝· •打· .線· 甲 4(210X297 公沒） 7 203008 A6 B6 五、發明説明（5 ) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 質溶解酵素（基質溶解素）及解膠酵素在時下被認爲係其中最主要的酵素。此等酵素係以在滑膜及軟骨組織之浸出液中的狀態，由發明人等檢測，而且也以在許多相關性組織之組織培養液中之狀態，由發明人等廣泛地硏究。與生化合成控制法不同，酵素之分泌及活化，在正常及染病的狀態下，此等酵素之最重要的自然性調節，係被認爲是例如金®蛋白質酵素組織抑制劑及α — 2大球蛋白組織抑制劑之抑制劑的內生性製造。蛋白分解性酵素及天然抑制劑之局部程度的不平衡，將會使結締組織成份開始破壞。述於本發明中之化合物，係合成性，且係上述酵素系族之低分子量抑制劑，可據以提供一種能夠使抑制性及酵素活性間之更正常性或非病理性平衡爲之恢復的有效療法 ;此等化合物係可被用作爲內生性酵素抑制劑之補充源》詳實而言，由於此等酵素在被循環於血液中的抑制劑減低功能之前以及出現在發炎最烈的滲出物內之前，通常係僅在被限制之細胞周圍環境中作用，因此，揭示於本發明中之低分子量抑制劑係可較內生性蛋白酵素抑制劑更爲有效 ;此等蛋白酵累抑制劑係因其大小之故，被排除於結締組織破壞的局部區域。歐洲專利第〇〇五四八六二號中，曾揭示一種具備有效之安克法酵素抑制活性的被取代二胜類。本發明保揭7F —種具有新穎結構之關'連性化合物系，此化合物係可作爲膨原酵素抑制劑，在治療涉及膠原溶解甲4C210X 297公兮） 203008 A6 B6 五、發明説明（6 ) 活性及組織病變之疾病的疾病時，具有潛力。根據本發明，係_供一種具有下列通式（I )之化合物，或其塩、溶劑化物或水合物：

0 Η R. (I) 式中， B係氫、h-6烷基或選擇性經取代之苯甲基； Εχ係氫或CVe烷基；心係C 3-6焼基； &係氫、烷基、一CH2_Z( Z係選擇性經取代之苯基或雜芳基）；R3或可爲具有下式之基 -CH-0-R7 I r8 (請先閑讀背面之注意事項再填窝本頁) 經濟部中央操準局印¾ 其中，係氫、烷基或-CH2 — Ph ( Ph係選擇性經取代之本基），Re係氣或烧基；係一CH2 —（ CHt ) η 〇β 5 或一C —（ CH2 ) η 〇C〇R6 或

Rr

R 10 甲 4(210X 297 公沒） 9 ^ 203008 A6 B6 經濟部中央標準局印¾ 五、發明説明（7 ) 其中，η係1〜6之整數，心、R6及β9係氫或Q-e焼基，K。係羥基、一〇 -仏-6烷基或一NR5 R6 ( R5及R6 可結合或雜環）；又，Rs及R4係可結合形成m爲4〜12 之整數的.一（CH2 ) —。除非特別提及，以上所述之每個烷基宜爲G-β烷基，最好爲仏-6烷基，可爲直鏈狀，也可爲支鏈狀。苯基及雜芳基之選擇性取代基，係可選自OH、1-6 烷基、Ch烷氧基、鹵素、一NHOOCh烷基、—NHOOPh 及一CONEsE6 ;其中，Ph、R5、R6係如上所定義。此處所稱之選擇性經取代之苯甲基，係指苯基部份選擇性經取代Z苯甲基。選擇性之取代基係包括上述有關變數r3之苯基及雜芳基的敍述中所擧之取代基。當Z爲雜芳基時，係包括具有五或六個環元素之單環式雜芳基，以及具有九或十個環元素之二環式雜芳基。此外，上述具有五或六個環元累之箪瓌式雜芳基，以及具有九或十個環元累之二環式雜芳基，最好含有一或兩個選目氮、氧及硫之雜原子。當Z爲由九或十個環元素所構成之二環式雜芳基時’兩個結合環中的一個具有五或六個環元素之環，最好含有—個單一雜原子；例如’ z之實例爲吲哚基。 β宜爲薆i、甲基或乙基’最好係氫° 匕係可爲氫、甲基、乙基、異丙基及正丁基。作爲烷基，I最好係甲基或乙基。 r2宜爲諸如正丁基、異丁基或第二丁基之〇4烷基，最 (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝. •打· -緣. 甲4(21〇X 297公沒） 10 A6 B6 203008 五、發明説明（8) 好的是異丁基。 {請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) R3最好係苯甲基，4——羥基苯甲基，或是諸如C1H!烧氧基苯甲基，或是諸如3 —吲哚基甲基之具有九或十個環元素的稠合（縮合）性雙環雜芳基甲基。 R3及R*最好結合形成一（CH, ) „ —，特別有利的是m =丨0之狀況，如此，將會形成—種由具有十三個元素的環所構成之內醯胺結構。式（I )化合物係可與例如氣氧化鈉之鹸性物質形成塩類。又，該式（I)化合物係具有一個鹸性氮原子，可與諸如塩酸等形成酸加成塩類。此等塩類亦爲本發明之一部份。當式（I)化合物或其塩類形成爲溶劑化物或水合物時，此等溶劑化物及水合物亦屬本發明特點之一。式（I)化合物係具有至少一個，可具有二個、三個或更多之不對稱中心，因此，可以一種以上之立體異構物的形態存在。本發明之範圍係及於所有此等形態及其混合物，包括外消旋物，以及非對映異構性混合物。較隹的異構物是，當e3不爲氫原子時，在式（I )化合物中被標記以星形記號之不對稱中心具有S構形的異構物。經濟部中央標準局印¾ 式（I)化合物或其塩類、溶劑化物或水合物，最好形成爲藥學上可被接受之形態。所謂之槃學上可被接受之形態，係指槃學上在可被接受之不渉及諸如稀釋劑及載體等常用藥學添加劑，但不含在正常用量程度下被認爲有毒甲 4 (210X 297 公发） 11 A6 B6 203008 五、發明説明（9) 性之物質的純度程度。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 式（I )化合物或其塩_、溶劑化物或水合物，最好以在大致上純粹的形態呈現。大致上純粹之形態，一般係含有約50重量％，宜含有75重量％，更好能含有90重量％，最好能含有95重量％或99重量％以上之式（I )化合物或其塩類或溶劑化物。式（I)化合物或其塩類、溶劑化物或水合物，係可以結晶固體狀、泡沫狀或膠狀被分離。較佳之藥學上可被接受的形態，係結晶固體狀。本發明係提供一種可被用作爲活性治療劑之式（I) 化合物，或其在藥學上可被接受之塩類；此活性治療劑特別是用以治療人體中所發生之結締組織退化或其他之蛋白酵素相關成份退化的症狀；此症狀係例如由膠原分解活性所導致之肌結構障礙，特別是風濕症及/或關節炎性疾病以及組織病變。式（I)化合物，尙在治療癌症時，防止中樞及末梢神經系統中之髓鞘質退化時，以及包含中性金靨蛋白酵素之膠原酵素系族中的酵素具有病理學上之意義或是扮演其他角色之意義時，具有因應之潛力。經濟部中央操準局印製本發明復提供一種用以製備式（I)化合物之方法，此方法係包括：由式（I)化合物：甲 4(210X297 公发） 12 203008 A6 B6 五、發明説明（l〇 )

R. (II) 經濟部中央標準局印¾ 匕式中，R2e係烷基或選擇性經取代之苯甲基，係氫、烷基或選擇性經取代之苯甲基，I、e2 、恥及e4係如式（ϊ )中所定義）藉著使其基團Rw開裂而將該R*〇轉變成氫之步驟，以及在必要時將其中之R«予以轉變成氫之步驟者。 R2〇之開裂，以及必要時所實施之R21之開裂，係可於酸.或鹸水溶液中達成，或是利用最好是溴三甲基矽烷之三甲基甲矽烷基鹵化物，在是在例如二氯甲烷之惰性溶劑中達成。苯甲基酯，係可變通地由氫解或其他標準之脫苯甲基過程除去。當Rio及R»均爲烷基，而僅欲使r2(>開裂以使式（ I )中之爲氫而r21爲烷基時，亦卽，使該化合物（ I)爲R係烷基之式（I)化合物時，係可藉著在溫和之條件下以過量之鹸，例如以氫氧化鈉水溶液在醇性溶劑中，於室溫下處理該化合物（I)而達成。同樣地，當Rm係選擇性經取代之苯甲基而係烷基時，該苯甲基係可藉著氫化而開裂，而形成R2〇爲氫而 Eu爲烷基之式（I )化合物。而後’ Ra烷基之開裂，係可藉著上述方法而開裂，而形成R爲氫之式（I )化合物。 (請先聞讀背面之注意事項再填寫本页) 甲 4(210X297 公沒） 13 203008 A6 B6 經濟部中央標準局印說五、發明説明（11) 當式（I )化合物中之E爲氫，而式（I )化合物中之不爲氫之場合，則R«及之開裂可簡單地藉著單一反應而達成。較隹的队❶及R2i均爲烷基，諸如甲基或乙基，或是苯甲基。最好式（Ϊ )化合物中之爲氫，使其本身卽爲本發明之式（Ο化合物。式（I )化合物，係可藉著將式（I )化合物·· °>?20 〇/r21 (式中，Ri 、E*、R2()及Ra係如式（H )中所定義，惟R21不爲Η ) 以式（IV)化合物處理而製得： nhr4 (IV) C式中，R3及B4係如式（I )中所定義）該反應最好在偶合劑之存在下，諸如在二環己基碳化二亞胺或1 一乙基一3 —〔 3 —(二甲胺基）丙基〕碳化二亞胺氫氯化物之存在下，佐以同時使用之1 一羥基苯並三唑，或是利用1 ，厂一羧基二咪唑，在諸如二氯甲烷或

(請先閲讀背面之注意事項再填^本页) •裝· (1111 .訂· •線. 甲 4(210X 297 公沒） 14 203008 A6 B6 五、發明説明（12 ) 乙腈之惰性溶劑中進行。然後，之選擇性開裂，係可利用上述供製備式（ I )化合物之過程，而獲得R21爲氫之式（][)化合物。式（]1 )之中間化合物，係可藉著將式（V)化合物或其塩類：

NH

OR 2 21 (V) (式中，R: 、R2〇及R21係如式（证）中所定義）以下列式（VIA )或（VIB )化合物或其塩類予以處理之步驟： R2 R2 (請先聞讀背面之注意事項再填寫本页) .裝. .訂. R11 C02r12 Ο C02r12 (VIB) (VIA) (式中，R2係如式（I )中所定義，係諸如鹵素、甲烷磺醯氧基或三氟磺醯氧基等之離去基，ei2係氫或羧基保護基）以及隨後所進行的除去R12之步驟而製得c 當使用式（VI8 )化合物時，還原性胺化反應，係可著以附於碳上之諸如钯的貴金靨爲催化劑之氫化反應，或是與氫硼氰化鈉在pH = 6〜7之條件下反應而達成。諸中 4(210X297 公沒） .線. 經濟部中央標準局印裝 15 203008 A6 _ B6 五、發明説明（13 ) 如甲醇及乙醇之低級烷醇溶劑，係適於供上述二反應使用。此等反應係可於分子滴之存在下進行。雖然氫化反應較佳，但是此一反應中却排除使用任何 R2« 、或R12爲苯甲基之式（V )及（VIB )化合物。羧基保護基最好是甲基或乙基酯基。酯保護基，係可由利用稀釋鹸，諸如利用甲醇中之1 N氫氧化鈉水溶液等等的標準鹸性水解條件而除去。當式（V )化合物係自由鹸形態是，式（VIB )化合物宜爲α—酮式酯（R12 =烷基）。當式（v )化合物爲塩時，諸如爲氫氯化物塩時，式 (VIB )化合物宜爲α —酮式酸（Rl2 = H.)之塩，例如鈉塩。利用式（VIA )化合物而製備式（ϊ II )化合物之反應，係可於標準之烷化條件下達成。鹵素離去基最好爲漠，以氧爲基礎之離去基最好爲三氟甲烷擴醯氧基° 另外，式（JI )化合物也可藉著將式（νι)或其塩類，與Ri如同式（！）中所定義的醛類札_£：110縮合之步驟： R2 {請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) •裝· .打. .綠. 經濟部中央標準局印¾ h2n CO2R12 (VII) (式中，R2係如式（I)中所定義’ R12係羧基保護基）甲4 (210X 297公⑷ !6 A6 B6 203008 五、發明説明（14 ) 以及隨後之將縮合產物以適當之亞磷酸二烷酯或三烷酯，例如以亞磷酸二甲酯處理之步驟，和最後之除去羧基保護基之步驟而製得。羧基係可以烷酯或苯甲酯之形態方便地被保護，此等酯基係可經由利用標準之水解或氫化條件而除去。如上述式_( VIB )化合物之還原性胺化反應中所述，當苯甲基保護基R12經由氫化被除去後，Rw及R2l係可被限定成烷基。及R21係烷基或選擇性經取代之苯甲基的式（互 )化合物，係可藉著使式（VIII )化合物·· Ο Ο ...................................... ...........!st (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 (VIII) (式中，r2 、1^及1^4係如如式（I )中所定義）與式（IX )化合物：線

OR 20 P

OR 經濟部中央標準局印装 '11 21 (IX) (式中，Ri係如式（I )中所定義，E2。及R21係烷基或甲4(210X297 公沒）〜17

經濟部中央標準局印U 203008 A6 ____ B6 _ 五、發明説明（15 ) 選擇性經取代之苯甲基.，R11.係式（VIA )中所定義之離去基）在諸如三乙胺或Proton Sponge ( 1，8 —二（二甲胺基）一萘）之存在下反應，或是在醇性溶劑中之無水碳酸鉀的存在下使其反應而製得。當Rn爲以氧爲基礎的離去基時，例如爲較隹之三氟甲烷磺醯氧基時，該離去基之置換，係可方便地在諸如甲醇之惰性溶劑中的Pro ton Sponge之存在下，在無光之狀態下經過數日達成《式（I)化合物的另一種製備方法，係藉著使如上所定義之式.（IX)化合物，與爲羧基保護基之式（vi I )化合物，利用上述式（VIII )與（IX)化合物反應之條件使其反應，然後再予脫保護基而達成。適當之羧基保護基係包括烷基、苯甲基及三烷基甲矽烷基。三烷基甲矽烷基保護基，例如三甲基甲矽烷基，特別適用於作爲羧基保護基；此係因爲該三烷基甲矽烷基係可藉著例如將六甲基矽胺烷添加於出現有三乙胺之乙膪中的反應劑內，而輕易地在原處納人化合物中作爲保護基之故，以及因其可在甲醇水溶液中選擇性地經除去而無須對 r2〇及e21作任何限制之故。其他之甲矽烷化劑復包栝三甲基甲矽烷基氯，以及N，N —二乙基三甲基甲矽烷基胺。作爲羧基保護基之Rl 2烷基，係可由鹼水解，例如利用甲醇水溶液中之氫氧化納而經脫除。當羧基保護基爲烷基時，β2β及r21最好爲烷基 {請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) •裝. •訂· •線· 甲 4(210X 297公沒） 18 A6 B6 203008 五、發明説明（16 ) 或苯甲基衍生物，但當R12爲苯甲基時，Ra〇及Κί1係被限制成烷基。當式（H )化合物由此種途徑製成時，式（ΙΧ)化合物中之R2。及Rn最好爲苯甲基，Ru最好爲三氟甲烧碌醸氧基；另外，式（VII )化合物中之R12最好爲三甲基甲矽烷基或甲基。式（VIII )化合物，係可藉著以上述式（Iv)化合物，在諸如上述供由式（I )、（IV)化合物製備式（I ) 化合物時所用之偶合劑的存在下，處理式（VII ) ί匕合物而製得： (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) Η2Ν C02r12 (VII) 經濟部中央標準局印¾ (式中，R2係如式（I)中所定義，r12係氫，其中之胺基係選擇性地被保護）式（IX)化合物係可藉由習用方法之將羥基轉變成離去基Ru ，而由羥烷基膦酸酯衍生物製成。例如，當Ru 爲三氟甲烷磺醯氧基時，係可根據E. Vedejs等人掲示在 Journal of Organ ic Chemistry 50，2165 ，（ 1985 )中的 —般法，將三氟甲烷磺酸酑添加於諸如在二氯甲烷之惰性溶劑中的羥烷基膦酸酯內，在惰性氣氛中於低溫下促使反應進行，而製成該式（IX)化合物。甲 4 (210X297 公发） 19 203008

A B 五、發明説明（Γ7 ) 羥烷基膦酸酯，係可藉著使相關之亞磷酸酯，諸如使亞磷酸二苯甲酯與— C00 ( Ri係如式（I )化合物中所定義）反應而製成；此反應係根據F. Texi 61：-8〇111161及 A· Foucaud 等人揭示於 Synthesis，916 ( 1982 )中之一般法而達成。亞磷酸苯甲酯及亞磷酸烷酯係在商業上可取得之化合物，.可由標準法以商業上可利用之起始材料製成。式（V )中間化合物，係可爲習知化合物，也可利用標準方法，在必要時導人R2«)及r21 ，由習知之胺烷基膦酸衍生物製成。在此等反應中，可能須要保護胺之功能。當R2n或e21爲甲基其導X係可藉由與重氮甲烷在適當之惰性溶劑中反應而達成。具有固定構形之式（V)化合物，係可由R. Jacquier 等人掲示於 Phosphorns and Sulfur 36，73，（ 1 988 )中之方法製得。

式（IV)及（VII )化合物均爲習知之胺基酸衍生物也可依習知方法由相關衍生物製得。式（VIA )及（VIB )化合物，亦均爲習知之化合物，可依習知方法由習知化合物製得。經濟部中央標準局印製本文中所掲；3ρς之式（][)、（]|[)中間物，式（v) 之某些中間物，均爲新穎之化合物，構成本發明之特點；此外，此等中間物之製備方法亦屬本發明之特點之一。在欲製備式（I)化合物之藥學上可被接受的塩類時，係可依習用方法使該化合物與適當之酸或鹼反應，而予 20 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本页) 甲 4(210X297公髮） 203008 A6 B6 五、發明説明（18 ) 製得。又，該化合物（I )之溶劑化物，係可藉著由適當之溶劑予以結晶化而形成。如前所述，式（I)化合物係可以一種以上之非對映異構物的形態存在。當本發明所製得的是該化合物之混合物時，個別之異構物，係可藉著色層分離法，例如藉著 HPLC與其他之異構物分離。另外，式（I)化合物之經分離的非對映異構物，也可藉著利用在立體異構性上純粹之起始原料，或是藉著在反應過程之任何階段將所欲之異構物的中間體分離，然後再將此等中間物轉變成式（I)化合物而獲得。最好能使式（I)化合物之單一種非對映異構物由上述一種以上的方法製成，每一種方法係可界定出—個不同之不對稱中心；當利用特殊方法時，可推演在不對稱中心發生不可測之在不對稱中心形成的構形。雖然在某一特定之不對稱中心的決定性構形無法瞭解，但是令人欣慰的是，可參考極化光偏轉之方向，而相對差向異構物使某一旣定之非對映異構物被特徵化。本發明復提供一種學組成物，此組成物係由：式（ I )化合物或其藥學上可被接受之塩或溶劑化物，以及藥學上可被接受之載體所構成。本發明組成物係可有效地用於治療肌結構障礙，特別是風濕症及/或關節炎性疾病，也可有效地用以調節組織病變。經濟部中央標準局印父 {請先閱讀背面之注意事項再蜞寫本頁) 本發明組成物，尙在治療癌症時，防止中樞及末梢神經系統中之髓鞘質退化時，以及包含中性金驕蛋白酵素之膠原酵素系族中的酵素具有病理學上之意義或是扮演其他角色之意義時，具有因應之潛力。本發明組成物係可藉混合而製得，可依習用方式而納有稀釋劑、黏結劑、塡充劑、碎解劑、香劑、著色劑、潤甲 4^210Χ 297公发） 21 203008 A6 B6 經濟部中央標準局印製五、發明説明（19 ) 滑劑、或是防腐劑。此等習用之賦形劑係可依習用方式使用，例如，依據在製備士有相關之胜酵素抑制劑時，諸如製備ACE抑制劑enalapr il 時所採行之方式使用。本發明組成物係可被製作成適以供經口投與、局部投與、直腸投與、或非經腸投與，但以經口投與較隹。非經常投與組成物/係可經由靜脈投與、肌肉投與、或關節內投與，而供給至體內。本發明之藥學組成物最好形成爲單位劑量形式，其形態最好形成爲適以供醫學或獸醫學上使用。例如，本發明製劑係可被包裝成記載或印刷有使用指示之狀態，以供作爲治療或預防任何上述病症之藥齊j。本發明化合物之適當使用範圍，係依化合物之不同而變化，也可能根據待治療之症狀而不同。此外，使用量還與吸收力與選取之投與方式間之關係有關。本發明化合物或組成物係可被調製成能夠藉任何途徑供投與之形態，較佳之途徑係依待治療之疾病而定；又，其最好被形成爲單位劑量之形態，或是可供病患自行以單 —劑量投與之狀態。又，本發明組成物係可形成爲諸如片狀、膠囊狀、藥囊狀、收容於小瓶狀、粉狀、粒狀、錠狀、重製粉末狀、或液體製劑狀；液體製劑之實例是溶液或懸浮液，或栓劑。本發明組成物，例如適以供經口投與之組成物，係可含有習用之賦形劑；賦形劑之實例係包括：諸如糖漿、金合歡膠、明膠、山梨糖醇、黃蓍膠、或聚乙燦基吡咯烷酮一請先聞讀背面之注意事項再填寫本贡) .¾. •打. •綵· 甲 4 (210X297 公发） 22〜 A6 B6 203008 五、發明説明（20 ) 等之黏結劑，諸如乳糖、糖、玉米澱粉、磷酸鈣、山梨糖醇或甘胺酸之塡充劑；諸如硬脂酸鎂之製錠潤滑劑；諸如澱粉、聚乙烯基吡咯烷酮、鈉澱粉乙二醇塩.、或微結晶性嫌維素之碎解劑；諸如月桂基硫酸鈉之藥學上可被接受之潤濕劑。固體組成物係可藉著包含混合、塡充、製錠等等之習

V 用方法獲得。可採用重複之混合操作以將活性成份分散於使用大量塡充劑之組成物中。當組合物係形成爲片狀、粉狀或錠狀時，任何適以供調製固體藥學組成物之載體均可使用；載體之實例係包括硬脂酸鎂、澱粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、米細粉、以及白堊’。片劑係可根據一般藥學實務上習知之方法接受施覆，特別是被施覆以腸衣覆層。又，如果須要載體或其他陚形劑時，本發明組成物亦可形成爲可被攝取之膠囊狀，例如，可爲內含本發明化合物之明膠。例如，在一硬質明膠製膠囊中.，除含有必要量之形成爲粉狀、粒狀之本發明化合物外，復含有與該化合物密切混合之諸如硬脂酸鎂之潤滑劑，諸如微結晶性纖維素之塡充劑，以及諸如乙二醇鈉澱粉塩。以液狀供經口投與之組成物，係可爲諸如乳化液、糖漿、或香酒劑之形態，或是以供與水或其他適當載體在使用前重製之乾燥產品狀呈現。此等液體組成物係可含有習用之添加劑；添加劑之實例係包括：諸如山梨糖醇、糖漿、甲基纖維素、明膠、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁凝膠、氫化可食用油，諸如卵磷脂、山梨糖醇酑一 {請先閱讀背面之注意事項再填窩本页) •裝. •線· 經濟部中央操準局印紫甲 4 (210X297 公沒） 23〜 203008 A6 B6 經濟部中央標準局印裝五、發明説明（21 ) 油酸酯、金合歡膠之乳化劑，諸如包括杏仁油、分餾椰子油之可食用油類、包括甘油酯之油性酯、丙二醇、乙醇、甘油、水或生理食塩水等之水性或非水性載體，諸如銳一羥基苯甲酸甲酯或丙酯、或山梨酸之防腐劑。若有必要，添加劑中復可採用習用香劑或著色劑。本發明化合物亦可經由非經口之途徑投與。根據例行之藥學實務，本發明組成物係可被調製成例如供直腸投與之栓劑狀，或是供非經腸投與之可注射狀。就注射而言，例如藉著關節內注射，或是腦脊髓液內注射，或是其他可使本發明化合物接近髓鞘脫失部位之途徑時，由於自由可溶性溶液或是分散不良之物質i積在，因此本發明化合物係可以水性或非水性溶液、懸浮液或乳化液之狀態混入在藥學上可被接受之液體，例如混於無菌非發熱質水、或非經腸性可被接受之油類等之液體或液體混合物中，液體混合物中係可含有制菌劑、抗氧化劑或其他之防腐劑、能使溶液與血液等滲之緩衝液或溶質、增稠劑、懸浮劑或其他藥學上可被接受之添加劑。此等供注射用物係可被形成爲收容於小瓶內或收容於用過卽棄之裝匱內之無菌單位劑量形式，或是形成爲收容於大瓶內之適當劑量可被抽出的多劑量形式；此外，該供注射用物尙可形成爲固體狀或濃縮物狀，以製備可供注射之製劑。就局部及經皮投與而言，製劑也可以油膏狀、乳膏狀、乳液狀、膠狀、噴劑狀、氣溶膠狀、洗劑狀、皮膚塗劑狀或貼藥狀等之狀態呈現。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -¾. 甲4(210X 297W发） 24 203008 A6 B6 經濟部中央標準局印装五、發明説明（22 ) 供發炎病症使用之單位劑量，通常含有10〜1 000 mg 本發明鉬成物，宜含有10〜5 〇〇 mg 本發明化合物，含量之特例係 10，50，100，150 ，200 ，250 ，300，350 ，4 00，4 50或5 00 mg 。該鉬成物一天係可投與一次以上，例如可一日投與二，三或四次，以使體重爲70 Kg之成人每日總劑量/落於丨〇〜3000 mg之範圍內。此一劑量約符於約0. 15〜50 mg / Kg ·日之水準。另外，特別是有關注射，單位劑量係含有約2〜200 mg 本發明化合物，且係在必要時經多次投與，以獲得必要之每曰劑量。本發明復另外提供一種用以治療體內發生結締鉬織退化或其他蛋白酵素關連成份發生退化之.症狀的方法，此等症狀 (病症）之實例係發生於哺乳_，例如發生於人類之風濕症及/或關節炎；此方法係包括將有效量之式（I)化合物或其藥學上可被接受之塩類，投與至必須接受治療之哺乳類的步驟者。本發明復提供一種式（I)化合物或其藥學上可被接受之塩類，在製備藥劑上之用途；此藥劑係用以治療結締鉬織發生退化，以及體內之其他蛋白酵素關連性成份發生退化，例如用以治療風濕症及/或關節炎等之症狀。以下之敍述及實施例係例示本發明之製備過程，而隨後之生物資料係例示其藥學活性。所有之溫度均係以°(:表示。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) •裝· .訂· .線· 甲 4(210X297公沒) 25 203008 A6 B6 五、發明說明（23 ) 敍述例1 N —（ 1 一亞磷羧基乙基）一1—白胺酸三乙酯（D 1 ) ch3

I Η5<：2〇\ 丄 a 〇^\ H C〇2C2H5 OC2H5 首先，將〔1 —〔（苯基甲基）胺基〕乙基〕膦酸二乙酯（ 2.76 g )〔由 h.E. Atherton 等人掲示於 1986， 29期之J_. Med. Chem· P: 29中之方法所製得〕溶解於乙醇 (100 ml)中，並在大氣壓下利用附於木炭上之1〇 %鉋爲催化劑予以氫化。而後，將（4_甲基一2—氧代）戊酸乙酯（1 · 58 g )及分子篩添加於其中，並持續氫化48小時。繼之，藉著過濾法將其中之.催化劑予以濾除，並將濾液眞空蒸發之，而獲得無色油狀產物；將該產物以矽膠柱予以色層分離之（洗提液：乙酸乙酯），獲得異構物之混合物形態的標題化合物（0.83g )。敍述例2 N —（ 1 一二乙氧基磷醯基乙基）一白胺酸（D2 ) (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) •裝· •打· *線. 經濟部中央標準局印^ 甲 4 (210X297 公沒) 26 203008 A6 B6 五、發明説明（24)

〇C2H5 經濟部中央標準局印說方法A 首先，將N— ( 1 —亞磷羧基乙基）一白胺酸三乙酯 (D 1 ) ( t.Sl g )溶解於甲醇（30 ml)中，並以溶於水 (15 ml )之氫氧化鈉（b. 2 g )處理之。24小時之後，以 4 N HC1將所得之溶液酸也，並以二氯甲烷將其萃取之。繼之，將有機萃取液以無水硫酸鈉乾燥，並於眞空中將其中所含之溶劑脫除，獲得標題化合物（0.66 g )。方法8 首先，將〔1—(苯基甲基）胺基〕乙基〕膦酸二乙酯（15 g )之塩酸塩溶於乙醇（400 ml)中所得之溶液，在大氣壓下利用附於木炭上之10 %絶爲催化劑予以氫化，直到其完全轉變成伯胺爲止。而後，將4 一甲基一 2 —氧代戊酸納塩以溶於最少量體積水中之狀態添加於其中，並持續加氫3日。繼之，以過濾法除去其中之催化劑，並將濾液眞空蒸發之，而獲得無色油狀產物，之後，將該產物混於三氯甲烷中，並依序以水（30 ml)、稀檸檬酸水溶液 (2X3〇ml)及水予以洗之。在乾燥（Na2S〇4 )後，將其中之三氯甲烷層予以蒸發至乾，而獲得黏稠白色固體狀之 (請先閑讀背面之注意事項再填寫本页} 甲‘4 (210X297 公沒） 27 A6 B6 203008 五、發明説明（25 ) (請先閑讀背面之注意事項再填"本頁) 標題化合物，其光譜性質係與方法A中所獲得化合物之光譜性質相同。敍述例3 N —〔 N——〔N— ( i —二乙氧基磷醯基乙基）_白胺醯基〕一（S ) —色胺醯基〕一（s ) —丙胺酸甲酯（D3)

經濟部中央標準局印裂首先，將溶於二氯甲烷（50 ml)中之N — ( 1 —二乙氧基磷醯基乙基）一白胺酸（D.2 ) ( 1.0 g )予以冷却至〇°C。然後，將1 一羥基苯並三唑（0.6 g )及1—乙基一3— ( 3 —二甲基胺基丙基）碳化二亞胺氫氯化物（〇·88 g )添加於其中，並將所得之溶液在〇 °c下攪掸i/2 小時。繼之，再將Η — Trp — Ala 一 OMe三氣乙酸塩（1.5 g )及二異丙基乙基胺（2 ml)添加於其中，並將所得之溶液在〇 t下攪掸1小時。其後，在室溫下予以攪掸24小時，並將所得之溶液過濾，然後再以水、飽和碳酸氫納及 %檸檬酸水溶液予以洗之，並接著以無水硫酸鈉將其乾燥之。繼之，將所得之溶液過濾，並將其中之溶液眞空蒸甲 4(210X 297 公发） 28 A6 B6 2〇3〇〇8 五、發明説明（26 ) 除之，而獲得黃色油狀之產物。將該產物以矽膠柱色層分離（洗提液：3%甲醇/乙酸乙酯）法純化，獲得無色油狀之標題化合物（0.45 g )。

Observed El M+ 566. 敍述例4 N —〔N —〔N— ( 1—二乙氧基磷醯基乙基）—白胺醯基〕一氧一甲基一·（ S )—酪胺酿基〕一（S )—丙胺酸甲醒（D 4 ) {請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) .裝· Ο CH 3 H5C2〇

•訂· 經濟部中央標準局印故標題化合物（0.45 g )係藉N — ( 1 —二乙氧基鱗‘醯基乙基）白胺酸（D2) (0_5g)及H — Tyr(Me) — Ala — OMe三氟乙酸塩（0.84g )，依敍述例3中之過程製得。 Observed El M+ 557. 敍述例5 甲 4(210X 297 公沒） 29 •線· 203008 A6 B6 五、發明説明（27 ) .N— ( ( S ) — 1 一二乙氧基磁醯基丙基）一（R) —白胺酸甲酯及N—( ( S ) — 1—二乙氧基磷醯基丙基一（ S)—白胺酸甲酯（D5) CH. h5c2〇 0

、CH 3 八八广C〇2CH3 OC2H5 {請先閲讀背面之注意事項再填寫本页) 旨先，將（S) — 1，一〔（iS，2S，5S)2 — 羥基一2 ，6，6 —三甲基雙環〔3，1 ，1〕庚一 3 — 二叉胺基〕丙基膦酸二乙酯（12g )〔由E. JwquUr等人掲示於 1988 年 73 期 Phosphorus and Sulfur P· 36 中之方法製得〕，置於由15 %檸檬酸水溶液（210 ml )及四氫呋喃（2M ml )所組成之溶液中，在室溫下攪捽72小時。而後後，將所得之溶液濃縮，並以苯（150 ml)將其洗之，然後再以碳酸鈉將其鹼化，Μ以三氯甲烷（4X 200 ml)將其萃取。其次，以無水硫酸鈉將合併之有萃取液乾燥，並眞空蒸除其中之溶劑，而獲得不穩定油狀之（S ) 一 1 —胺基丙基膦酸二乙酯（5.63g )。經濟部中央標準局印紧其後，將（S ) — 1 _胺基丙基膦酸二乙酯（5.63 g )及（4 —甲基一 2 —氧代）戊酸甲酯（12.47 g)溶於乙醇（200 ml )中，並於大氣壓下，以附於木炭上之丨〇 % 钯爲催化劑予以氫化72小時。而後，藉過濾除去其中之催 f 4(210X 297公筹） 30 08% %

A B 經濟部中央標準局印說五、發明説明（28 ) 化劑，並將濾液眞空蒸發之，獲得無色油狀之產物。繼之，將該產物溶於二氯甲烷（50 ml)中，並以飽和碳酸氫鈉水溶液（50 ml)及5 %檸檬酸水溶液（50 ml )予以洗之，然後再以無水硫酸鈉將其乾燥◊除去其中之溶劑後，獲得以兩種非對映異構物之混合物形態呈現之標題化合物；以矽膠柱予以色-層分離（洗提液：乙醚），獲得單_種之非對映異構物。 Isomer D5A (1.72 g) = +27.32° (c=l% in methanol) 5 (CDCI3): 0.94 (6H, t), 1.06 (3H, t), 1.34 (6H, dt), 1.40-2.00 (5H, m), 2.68 (1H, m), 3.70 (3H, s), 3.78 (1H, t), 4.13 (4H, m). 進一步之洗提，獲得流出較慢之單一種非對映異構物。 isomer D5B (1.26 g) [a]D2〇 » +1.04〇 (Cel% in methanol) 5 (CDCI3): 0.90 (6H, dd), 1.05 (3H, t), 1.45 (6H, dt), 1.42-1.95 (5H, m), 2.76 (1H, m), 3.48 (1H, t), 3.72 (3H, S), 4.12 (4H, m). 敍述例6 N —（（ S) — i —二乙氧基磷醯基丙基）一（r) 一白胺酸及N —（（ S ) — i —二乙氧基磷醯基丙基）_( S )一白胺酸（D 6 ) (請先聞讀背面之注意事項再填寫本页) •裝· •打· -綠· 甲 4(210Χ 297公沒) 31 經濟部中央操準局印装 2〇3〇〇8 A6 B6 五、發明説明（29 ) CH3 | C2H5 H5C2〇 I [ H3

〇^\ H C02H °C2H5 (D6) 首先，將N—（（S)—1一二乙氧基磷醯基丙基） —(E或S ) —白胺酸甲酯（異構物D5 A ) ( 1.71g ) 溶解於乙醇（30 ml)中，並以溶於水（20 ml)中之氫氧化鈉（<23 g )予以處理之。24小時後.，以5 N HC1將所得之溶液酸化，並以二氯甲烷將其萃取之。繼之，以無水硫酸鈉將所得之有機萃取液乾燥之，並將其中之溶劑眞空蒸除之，獲得單一種之非對映異構物（D6 A) ( 1.49 g)。 [a]D20 = + 23.7° (c=l% in methanol) δ (CDC13): 〇.97(6H,d), 1.08(3H,t), 1.36(6H,dt), 1.44-1.99(5H,m), 2.80(lH,m), 3.78(lH,t), 4.17(4H,m). Observed M+ 309. C13H28N05P requires M 309. 同樣地，以N—((S)—1—二乙氧基磷醯基丙基 )—(R或S) —白胺酸甲酯（異構物D5B) ( iMg )，可獲得以單一種非對映異構物（D 6 B )形態呈現之標題化合物（；1.05 g )。甲 4 (210X297 公沒） 32 (請先閏讀背面之注意事項再填寫本頁) •裝· •線· A6 B6 2〇3〇〇8 五、發明説明（30) [α]〇20 = + 4.07° (c=0.984% in methanol) 5 (CDC13): 0.96(6H,dd), 1.05(3H,t), 1.34(6H,dt), 1.43-1.98(5H,n〇, 2.78(lH,dt), 3.42(lH,dd), 4.16(4H,m). Observed M+ 309. C13H28NO5P requires M 309. 敍述例7 3_〔 N —〔 N_( S ) — 1 一亞磷羧基丙基）一（R) —白胺醯基〕〕一（_) 一胺基氮雜環十三烷一 2 —酮二乙酯及3 —〔N —〔 N — ( S )_1 —亞磷羧基丙基）一 (S)—白胺醯基〕〕一（一）一胺基氮雜環十三烷一2 一酮二乙酯（D 7 ) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本页}

經濟部中央標準局印¾ (D7) 首先，將溶有N— ( ( S ) — 1 —二·乙氧基截_基丙基）一（R或S ) —白胺酸（D6 A ) ( 〇.68g )之二氯甲烷（25 1111)冷却至0°(：。然後，將1一羥基苯並三唑（〇.41g )及1 —乙基一3 ( 3_二甲胺基丙基）碳化二亞胺氫氯化物（0.58 g )添加於其中，並將所得之溶液在〇 •C下攪拌i/2小時。而後’將溶有（—）—3 —胺基氮雜環十三焼一2 -酮（〇·52^ )(〔 α〕# = — 63.6° ( C = 1% 甲 4(210X 2971'发） 33 a〇3〇〇8 五、發明説明（31) ，甲醇中））之二氯甲烷（25 ml) ，以滴狀加人。繼之，將所得之溶液在室溫下攪拌24小時，並接著以水、飽和碳酸氫納及5 %檸檬酸水溶液予以洗之。而後，以無水硫酸鈉將所得之溶液乾燥，並予眞空蒸發之，而獲得無色油狀之產物。利用砂膠柱將其色層分離（洗提液：2 — 1〇 %甲醇/乙醚梯度液）以予純化，獲得單一種之非對映異構物。

Isomer D7A (0.83 g) [α]〇20 = -6.23° (c=l% in methanol) m.p. 146-147°C. δ (CDCI3): 0.94(6H,t), 1.12(3H,t), 1.26-1.97(30H,m), 2.68(lH,m), 2.87(lH,m), 3.68(2H,m), 4.13(4H,m), 4.40 6.47(lH,broad s), 7.62(lH,d).

Analysis: C25H50N3O5P requires C,59.6.2; H, 10.01 ; N,8.34%. Found C,59.78; H,10.24; N,8.38%. 進一步之洗提，獲得流出較慢之作爲少量不純物的單一種非對映異構物。 isomer D7B (0.20 g) [a]D20 = -82.11° (c=l% in methanol) m.p. 142-144°c. 經濟部中央搮準局印¾ (請先閱讀背面之注意事項再填窝本页) δ (CDC13): 0.88(6H,dd), 1.04(3H,t), 1.14-1.91(30H,m), 2.68(2H,m), 3.55(lH,m), 3.70(lH,m>, 4·06(4Η,Π〇, 4.43 (lH,m), 6.97(lH,broad s), 7.69(lH,dd).

Analysis: C25H50N3O5P requires, C,59.62; H,10.01； N,8.34%. .Found: C,59.61; H,10.06; N,8.10%. 甲4(210父297公沒） 34〜 A6 B6 203008 五、發明説明（32) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本贳} 同樣地，以N—（（S)—1一二乙氧基磷醯基丙基 )—(R或S )—白胺酸（D 6 β ) ( 0.64g )，可獲得以單一種非對映異構物呈現之標題化合物（D 7 C )( 0.39 g ) 〇 [α]〇20 = -33.99° (c=l% in methanol) δ (CDCI3): 〇.96(6H,d), 1.03(3H,t), 1.20-1.92(30H,m), 2.75(lH,dt), 2.93(lH,m), 3.32(lH,m), 3.54(lH,m), 4.17 (4H,m), 4.47(lH,dt), 7.74(lH,br〇ad s), 8.11(lH,d). Observed M+ 503. C25H50N3O5P requires M 503. 敍述例8 (1—羥基丙基）膦酸二#甲酯 0 (PhCH2〇)2P C2H5 〇H (D8) 於本實施例中，係使用F. Texier-Boullet及A.

Foucaud 所掲示〔Synthes is，198 2，916〕之一般方法經濟部中央標準局印製。首先，將亞磷酸二苯甲醯（3 1 .1 3 ml ，0 · 14 mo le )及丙醛（10.21 ml，1 equiv·)在室溫下撹拌之，並一次將鹸式氧化鋁（70 g )添加於其中。而後，在室溫下將其靜匱過夜後，再將三氯甲烷添加於其中，然後再將其中之氧化鋁濾除，並以三氯甲烷將該氧化鋁洗之。繼之，將所得之濾液蒸發至乾，並將所得之清澄油狀產物以矽膠（ 6〇〇 g )柱色層分離之，其間係採用梯度洗提（乙醚一 5% 甲 4(210X297 公潑) 35 A6 B6 2〇3〇〇8 五、發明説明（33 ) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 甲醇一乙醚）。最後獲得清澄油狀之標題化合物，其會在靜置下固化（2^ · 82 g，64%)。以乙醚/戊烷系予以再結晶，獲得白色結晶狀固體（熔點81 — 82 t)樣品。

Found: C,64.09; H,6.71. Ci7H2i〇4pl requires C,63.74； H,6.61%. 5 (CDC13) 1.04(3H,t,J»7H2), 1.6-1.95(2H,m), 2.27(1H, brs), 3.8(1H, 2 overlapping triplets,J=>5 and 10Hz), 4.97-5.18(4H,m), 7.34(10H,S). 敍述例9 ((1—三氟甲烷磺醯氧）丙基）膦酸二苹甲醢（D 9 ) 0

(PhCH2〇)2P τ ? Ο - S - CF,

II O (D9) 經濟部中央標準局印狀標題化合物係藉E. Vedejs等人所掲示〔J. Org. Chem. 1985，50 (丨2 )，2165〕之一般方法匝製得。首先，將溶有（1 一羥基丙基）膦酸二卷甲酷（D8 ) (24.97 g，0.078 mole )之二氯甲烷（180 ml )溶液，在 N2 之籠罩下冷却至一 50 t。而後，在保持一 5〇°C之狀況下，依序將2 ，6 —二甲基吡啶（11.12 ml ，0.095 mole )及三氟甲烷磺酸酑（15.1 ml，0· 0898 mole )添加於其中。其次，任所得之混合物緩慢地溫熱至〇t，並接著將其中 4(210X297 公潑） 36 A6 B6 五、發明説明（34 ) 置入冷乙醚中。繼之，將所得之溶液中的有機層，快速地以冰水、稀塩酸（二次）及最終之塩水予以洗之（渉及水之操作）。之後，將經洗滌之有機層乾燥（無水MgS04 ) ，並予蒸發至乾，獲得以帶粉紅橙色油狀呈現之標題化合物（33.77 g，96%)，此標題化合物係在未經進一步純化下供使用。 6 (CDC13) 1.08(3H,t,J=7H2), 1.88(2H,m)/ 4.94(1H, 2 overlapping triplets,J=5.5 and 7Hz), 4.88-5.22(4H,m) and 7.35(l〇H,m). (請先閱讀背面之注意事項再填宵本頁) •裝· 敍述例10 (S )—白胺醒基—（一）一 3 —胺基氮雜環十三烧一 2 —酮（D 10 )

•打. (D10) 首先，將溶有N-举甲氧基绞基一（S )白胺酸（I·87 g)之二氯甲烷（13 0 ml)之溶液冷却至〇»c，然後將1 —羥基苯並三唑（1.25g)及1—乙基—3 —（ 3 —二甲胺基丙基）碳化二亞胺氫氯化物（fl .88 g )添加於其中，並將該溶液在〇 °C下攪拌I/2小時。而後，以涵狀將溶有 (―)_3 一胺基氮雜環十三烷一 2 一酮（15 g)(〔 a〕g°= — 63.6。（C=l%，甲醇中）之二氯甲烷（50 •線· 經濟部中央標準局印焚甲 4 (210X297 父沒） 37 A6 B6 2〇3〇^8 五、發明説明（35) ml)加入。加人後，在室溫下將所得之溶液撹掸24小時，並接著以水、飽和碳酸氫鈉水溶液予以洗之，然後再以無水硫酸鈉予以乾燥。繼之，將所得之溶液過濾，並眞空蒸除其中之溶劑，獲得白色固體狀之產物。繼之，將此產物溶於乙醇（棚ml)中，並以附於木炭上之10 %钯爲催化劑在大氣壓下予以氫化。最後，將生成之溶液過濾並將其中之溶劑眞空蒸除，獲得標題化合物（D丨〇 ) ( 1.1 g )。 δ (CDC13)： 0.95(6H,t), 1.20-2.10(23H,m), 2.83(lH,m), 3.40(lH,m), 3.73(lH,m), 4.45(lH,m), 6.68(1H,broad s) and 7.96(1H,broad d).

Observed M+ 325· C18H35N3O2 requires M 325. 敍述例11 3_〔N —〔N — ( 1 —亞磷羧基丙基）一（S) —白胺醯基〕〕一（一）一胺基氮雜環十三烷一 2 — gi司二苯甲酯 (D 11 ) {請先聞讀背面之注意事項再填穹本頁) (PhCH,0),P 2 ΊΙ 0

(Dll) 經濟部中央標準局印製首先，將1 一（三氟甲烷磺醯氫基）丙基膦_二苯甲酯 (D9) (1.4g)及.（S) — 白胺醯基一（―）_3 — 胺基氮雜環十三烷一2 —酮（Dio ) ( 1.0 g )溶解於甲醇（6 ml)中。而後，將1 ，8 —二（二甲胺基）—萘（甲 4(210X29 了公潑） 38 A6 B6 2〇3〇〇8 五、發明説明（36 ) 0.66 g )添加於該甲醇溶液中，並將所得之反應混合物在室溫無光之狀態下攪掸丨0日❶繼之，將其中之溶劑眞空蒸除，並將所得之殘餘物溶解於三氯甲烷（50 ml)中，然後再以水、稀檸檬酸水溶液將其洗之，而後再以無水硫酸鈉將其乾燥。脫除其中之溶劑，獲得橙色油狀之產物，將此產物以矽膠柱色層分離（洗提液：乙酸乙酯），獲得以兩種非對映異構物之混合物的狀態呈現之標題化合物（D 11 )(〇.73 g )。

Observed FAB (M+H)+ 628. 〇3,5H54N3°5p requires M 627. 敍述例12 N — ( 1 - ( R )-二苯曱氧基磷醯基丙基S ) 一白胺酸（D12A )及N—( 1— ( S )-二萃甲氧基磷醯基丙基）一（S ) —白胺酸（D丨2B) (請先聞讀背面之注意事項再填tr本頁)

經濟部中央標準局印紫

方法A 根據製備白胺酸三甲基甲矽烷酯之US 48 08 — 741 A 中所揭示之一般方法，首先將溶有（s ) —白胺酸（1>15 g ，0.00 8 8 mole )、六甲基二矽胺烷（1.75 ml)及三乙胺（1.38 ml)混合物之丙烯腈（13.5 ml)溶液，加熱於回流下達總計4小時。甲 4(210X 297 公发） 39

〇〇3〇〇8 五、發明説明（37 ) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本页) 而後，將（（1 一三氟甲烷磺醯氧）丙基）膦酸二袭甲酯（D9 ) ( 4.5 g，0. 01 mole )添加於其中，並將所得之混合物保持於40〜42 °C下48小時。此反應亦可於室溫下進行。在將此混合物冷却後，將其過濾，並以甲醇將其洗之，然後再將濾液蒸發至乾。繼之，將殘餘物置於三氯甲烷中，並先以稀HC1 (二次）後以水將其洗之。然後，再將三氯甲烷層乾燥（無水Na2S〇4 )、過濾及蒸發至乾，而獲得橙色之膠狀固體（3.67 g )。而後，以最少體積量之醚/戊烷將該粗製產物碾製之，而獲得白色固體產物，在予收集、以少量冷乙醚/戊烷洗之及乾燥後，獲得標題化合物之K，S·異搆物（D丨2 A ) ( 0.47 g，11 % )，溶點爲112〜115 °C。

Observed Desorption Cl (NH3) MH+ 434. C23H32NO5P requires M 433.

[a]D20 = -23.09° (C=0.97 MeOH).

Found : C,63.73; H,7.42; N,3.23. C23H32NO5P requires C,63.73; H,7.44; N,3.23%. 5 (CDCI3) 0.89 (6H,t), 1.03 (3H,t)/ 1.25-2.0 (5H,m), 2.74 (lH,m), 3.28 (2H, brs), 3.73 (1H, brt), 4.9-5.15 (4H, m) , 7.35 (10H, S).. 經濟部中央標準局印¾ 另—異構物N —（ 1 — ( S )-二苯甲氧基磷醯基丙基 )一（S)—白胺酸（D12 8)，係可藉著利用Harailt〇n PRP — 1 柱（300 X 7.0 ’ 264 R )之製備性 HPLC ’ 以40 : 60乙腈：水作爲洗提液，4.0m1· /min之流率 40 甲4C10X 297公沒) 2〇3〇οδ 經濟部中央標準局印装五、發明說明（38 ) 獲得。於此等條件下，R，S異構物（D12A )在34.6 分鐘之保持時間時首先洗提出，而s，S異構物（D〖2 8 )則在4;2.7分鐘時良好地分離出。就異構物（D |2 β ): Observed FAB (M+H)+ 434. C23H32NO5P requires Μ 433. δ <CDC13) 〇·85 (6H,t), 0.92 (3H,t), 2.62 (lH,m), 3.26 (lH,m), 4.8-5.1 (4H,m), 7.28 (10H,S). 在1.5 5處復有額外之訊號，此訊號係由一重疊之水訊號所遮蔽。 S，S異構物（.D12B )偶合於（S )—胺基酸衍生物時，生成S，S ，S系列。方法β 首先，將溶於甲醇（2 ml)中之（S )—白胺酸甲酯氫氯化物（0.543 g ; 〇_〇〇3 mole ) 及（1 —三氟甲烷磷_氧內基）膦酸二笨甲酯（D 9 )( 1:35 g ; 0 . 00 3 mole )及無水碳酸鉀（1.0 g )混合物，一面攪掸一面加熱於 5〇 °C下達4小時，然後任其在室溫下過夜。 - 繼之，將反應物眞空蒸發至乾，並將所得之殘餘物溶解於三氯甲烷（5 ml)中並予過濾。之後，合併濾液及洗液，並以矽膠60( 50 g )柱將其色層分離（洗提液：乙酸乙酯一戊烷（1:1)之混合物），獲得N—(1_(R )一二萃甲氧基磷醯基丙基）一（S )—白胺酸甲酯及N_ (1 一 ( s ) 一二蕃甲氧基碳_基丙基）一（s ) —白胺酸 (請先閑讀背面之注意事項再填寫本页) •裝· •訂· •線. 甲 4 (210X297 公发） 41 A6 B6 203008 五、發明説明（39 ) 甲酯之油狀混合物（{〇·55 g )。其次，將所得之酯混合物（1 .1 g，‘〇. 0025 mole ) 溶於甲醇（4 .〇 ml)中，並以氫氧化納（ϋ. 1 1 g ; (〇.〇〇275 mole )之水（Ι·5 ml)溶液將其處理之，然後再於室溫下將所得之溶液攪掸過夜。繼之，將其眞空蒸發至1/3體積，並將其匱於水中，再以乙醚將其萃取之。而後，以檸檬酸將其中之水層部份酸化至pH 3〜4的程度，並再以三氯甲烷將其萃取（5次）之。之後，將三氯甲烷部份乾煉 (Na*S04 )並眞空蒸發至乾，獲得油狀之標題化合物（ D12A)及（D12B)之混合物，其會緩慢地固化。以乙醚碾製上述產物，獲得白色固體狀之N_( 1 — (R ) ~二赛甲氧基磷醯基丙基）—（S)—白胺酸（D12 A ) ( 0.34g )，與由方法A所獲锝之產物相同。敍述例13 (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) •裝· .訂. (PhCH-0),Ρ 2 2\\ 0 經濟部中央標準局印装 N —〔N— ( i_( R) 一亞磁羧基丙基）—（3) 一白胺醯基〕一0 —甲基一（S )—酪胺酸_N_( 2 —羥甲基）酲胺二庠守酯（D 13 ) 〒2H5

OH 首先，將溶有N— ( i— (E) _二舉甲氧基磷醯基丙基—（s ) — 白胺酸（D12A ) ( 0.89 g，0.00 21 mole .線· 甲 4(210X297 公簷）〜42 203008 五、發明説明（40 ) )之經攪拌乙腈（9 ml)溶液，置於冰浴中在氮氣之籠罩下冷却至〇 t，然後再將1，广一紱基二咪唑（0·37痊，：L . 1 equ iv. ) —次添加於其中。在15分鐘後，在3〇分鐘內任混合物溫熱至室溫，並接著再予冷却至〇 °C。在經過另另一15分鐘後，將〇 —甲基一（S) —酪胺酸（2 —羥甲基）醯胺1〔依據標準偶合方法及以TFA / CHaCl2去保護，而由8〇C — 0 -甲基一（S )—酪胺酸製得〕（b .49 g ，1 equiv )加入，並在室溫下將所得之混合物攪拌過夜。而後，將所得之反應混合物蒸發至乾，並將所得之殘餘物分散於EtOAc及水中。繼之，將其中之有機層連續地以飽和NaHC03 ，檸檬酸，水及塩水連續地洗之。之後，將有機層乾燥（無水Na2S04 )並予蒸發至乾，而獲得蒼黃狀之膠狀產物（l.l6g)。以矽膠柱將該產物色層分離（梯度式洗提，由EtOAc升高至1〇 % MeOH / Et OAc )，獲得無色膠狀產物（0 .43 g，32 % )。

Observed FAB (M+H)+ 654. 〇35Η48Ν3°7ρ requires 653. 5 (CDC13) 0.8 (6Η, 2 overlapping d), 〇.96 (3H,t), 1.05-1.35 (2H,m), 1.35-1.65 (2H,m), 1.65-1.9 (lH,m), 2.4 (1H, brs), 2.68 (lH,m), 2.9 (1H, 2 overlapping d), 3.07 (1H, 2 overlapping d), 3.2-3.45 [2Hrm), 3.5-3.8 (total 6H, m; including singlet at 3.2 (3H)), 4.72 (lH,dd), 4.83-5.1 6.75 (2H,d), 7.08 (2H,d), 7.2 經濟部中央標準局印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) (1H, brt), 7.3 (10H,S), 7.5 (lH,d). 甲 4(210X297公髮） 43 1 . US 2,833,764 203°08 as B6 五、發明説明（41) 敍述例14 (1 —羥戊基）膦酸二弟甲酯（D 14 ) 〇 (PhCH2〇,2^ ^〇4η9 (D14)

OH 於本例中，係利用 F. Tex i er - Boullet 及 A·· Fou caud 所揭示之一般方法〔Synthesis，1982 ，916〕。首先，將亞磷酸酯（7.73 ml，Ό. 035 mole )及戊醛（ιι·5ΐ ml，b . 1 05 ml )之混合物攪拌於室溫下，並一次將鹸式氧化鋁（35 g )添加於其中。而後，將其在室溫下靜置過夜，並將三氯甲烷添加於其中，然後再將氧化鋁收集並以三氯甲烷將其洗之。繼之，將所得之濾液蒸發至乾，並將所得之油狀產物以矽膠柱予以色層分離之（梯度式洗提， 50%戊烷/乙酸乙酯一乙酸乙酯），獲得無色油狀之標題化合物（9 . 17 g，76 % )。 δ (CDCI3) 0.86 (3H,t), 1.20-1.80 (6H,m), 2.60 (lH,brs), 3.87 (1H, 2 overlapping triplets), 5.06 (4H,m), 7.34 (10H,S). 敍述例15 51..............................打…：.…：.................# {請先聞讀背面之注意事項再蜞寫本頁) 經濟部中央標準局印装

15 o ( 酯曱苳二酸膦基戊基氧酵磺烷甲氟三 - X 甲 4(210X 297公簷） 44〜 203008 A6 B6 五、發明説明（42 ) (PhCH2〇

II

(D15) 標題化合物，係藉敍述例9中所述之方法，由（1 一羥戊基）膦酸二.甲酯（DW)製得。 δ (CDCI3) 〇·88 (3H,t)/ 1.18-2.00 (6H,m), 5.03 (5H,m), 7.32 (10H,m). 敍述例16 3 一〔 N _〔 N _ ( 1 —亞磷駿基）一（S ) —白胺醯基〕〕一（一）一胺基氮雜環十三烷一2 —酮二苯甲酯（D 16 ) (PhCH Ο) P2ιι 0

(D16) 首先，將1 一（三氟甲烷磺醯氧基）戊基膦酸二荠甲酯 (D15 ) ( 0.96g)及（S ) — 白胺醯基—3_( —）一胺基氮雜環十三烷一2 —酮（DIO) ( 0.65g )溶解於甲醇（2.5 ml)中。而後，將1，8—二（二甲胺基）萘（ 0.426 g )添加於其中，並將反應混合物在室溫下無光之狀態中攪拌10曰。繼之，將其中之溶劑眞空蒸除，並將所得之殘餘物溶解於三氯甲烷（50 ml)中，並以水、稀檸檬酸水溶液將其洗之，然後再以無水硫酸納將其乾燥。繼之甲 4(210X297 公沒） 45 {請先閲讀背面之注意事項再填寫本百) 203008 A6 B6 五、發明説明（43 ) ，除去其中之溶劑，獲得橙色油狀之產物，以矽膠柱將其色層分離之（洗提液：乙酸乙酯），獲得以兩種非對映異構物之混合物呈現之標題化合物（D 16) ( 6.4 g ,30% )° Observed FAB (M+H)+ 656. ¢37^58^3^515 requires Μ 655.

實施例1 Ν —〔Ν—〔Ν —（ 1—亞磷羧基乙基）一白胺醯基〕 (S ) —色胺醯基〕一（S) —丙胺酸甲酯（El ) CBU

HO 0 P

Η (El) (請先閲讀背面之注竟事項再填寫本页) 經濟部中央標準局印焚首先，將二乙_( D3 ) ( 0.2 g )溶解於二氯甲烷 (10 ml)中，並以溴三甲基矽烷（b .5 ml)處理之。而後，在室溫下將所得之溶液撗拌於室溫下4日，然後再將甲醇（20 ml)添加於其中，並將其中之溶劑眞空蒸除，獲得粗製產物。而後，在反相二氧化矽柱中行色層分離，（洗提液：水中之5%〜30%甲醇的梯度式液），獲得非對映異構物之混合物的標題化合物（〇.1 g)。 Observed FAB (M+H)+ 511· 〇23Η35Ν4°7ρ requires Μ 510. 甲4(210X 297公沒) 46 2〇3〇〇8 A6 B6 五、發明説明（44 ) 實施例2 N_〔 N_〔 Ν_(1—亞磷羧基乙基）一白胺醯基〕一〇 —甲基_ ( S )—酪胺醯基〕_ ( S )—丙胺酸甲酯（ Ε 2 ) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) •裝· 經濟部中央標準局印裝於本實施例中，係藉述於實施例1中之方法，由D4 (沁.25 g )製得標題化合物（ϋ . 1 g )。 δ (CD3〇D): 0.83(6H,m), 1.05-1.60(9H,m), 2.38-3.30(4H,m), 3.65-3.78(6H,m), 4.40(lH,m), 4.60(lH,m), 6.83(2H,m), 7.18(2H,m). Observed FAB (M+H)+ 502. C22H36N3〇8P requires M 501. 實施例3 3 —〔 N —〔N— ( ( S) — 1—亞磷羧基丙基）—（E )—白胺醯基〕〕一（一）一胺基一氮雜環十三烧一2 — 酮及 3_〔N —〔N— ( ( S ) — 1—盟碟续基內基）一（S )一白胺醯基〕〕一（一）_胺基—~氮雜環十三烧一2 — 酮（E 3 ) •線·

〜47〜甲 4(210X 297 公沒） Α6 Β6 2〇3〇^8 五、發明説明（45 )

CH

{請先閲讀背面之注意事項再填寫本页) (E3) j

方法A 首先，將二乙酯（D7 A) ( 0.78 g )溶解於二氯甲烷（30 ml)中，並以溴三甲基矽烷（；2.04 1111)予以處理之。而後，將溶液在室溫下攪拌72小時，並接著將甲醇（ 20 ml)及水（丨0 ml)添加於其中，並將所得之溶液眞空蒸發之，獲得白色固體（E 3 A )。

Observed FAB (M+H)+ 448. C21H42N3O5P requires Μ 447. 同樣地，利用二乙酯（D 7 C ) ( ;0.23 g )，可獲得以單一種非對映異構物呈現之標題化合物（E 3 C )。 [a]D20 = -58.75° (c=l% in methanol). m.p. 180-183°C. δ (CD3OD): 0.97(6K,dd), 1.12 (3H,t), 1.25-1.93(23H,m), 2.79(lH,m), 2.97(lH,m), 3.66(lH,m), 4.22(lH,m), 4.40(lH,dd).

Observed FAB (M+H)+ 448. C21H42N3O5P requires M 447. 經濟部中央標準局印製方法β 首先，將二苯甲酯（D 11 ) ( 4.19 g )溶解於乙醇（伽甲 4 (210X297 公沒） A6 B6 ^q3〇〇° 五、發明説明（46) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ml)中，並於大氣壓下，以附於木炭上之10 %鈀爲催化劑予以氫化24小時。而後，將所得之溶液過濾，並將溶液眞空蒸除之，而獲得由兩種非對映異構物所構成之混合物，繼之，以 hplc〔 Hamilton PEP — 1 柱（300 X 7 咖）；移動相，2·腈 / 水（17.5 / 8.25 ) + 0.1 % TFA ;流率 ,6 ml / min〕將其分離，在保持時間爲32分鐘時，獲得單一種之非對映異構物（E 3 C)，由上述兩種製備方法A及β，似乎異構物E3 C係3 一〔Ν —〔 N—( ( S) — 1—亞碳竣基丙基）一（S ) 一白胺醯基〕〕一（一）一胺基氮雜環十三烷一2 —酮。因此，異構物Ε3 Α必定是3 —〔N-〔N—( ( S)— 1—亞磷羧基丙基）一（Ε) —白胺醯基〕〕一（一）一胺基氮雜環十三烷一2 —酮。將（D丨2 Β)與（一）一 3 —胺基氮雜環十三烷一 2 —酮偶合，然後再於大氣壓下，附於木炭上之10 %鈀爲催化劑予以氫化的過程，可提供另一條獲得3 —〔 Ν —〔 N—( ( S )— 1—亞碟羧基丙基）一（S )—白胺_基〕〕一（一）一胺基氮雜環十三烧一2 —酮（Ε3 C )之途徑。實施例4 經濟部中央標準局印裂 3 —〔Ν —〔N— ( — —亞磷羧基丙基（s )一白胺酿基〕〕一（一）一胺基一氮雜環十三烷一 2 — 酮（E 4 ) 甲 4(210X297 公发）〜49 2〇3〇08 A6 B6

(E4) 首先，將二荦甲酯（D 11 ) ( 〇· 19 g )溶於乙醇（JOO ml )中，並於大氣壓下，以對於木炭上之10%钯爲催化劑予以氫化。然後，將所得之溶液過濾，並將濾液中之溶劑眞空蒸除，獲得由兩種非對映異構物E 3 C及E4 C所組成之混合物；之後，以 bp lc〔 Hamilton PRP — 1 柱（300 X 7®j);移動相，乙腈 / 水（17.5 / 8.25 ) + 0.1% TFA ;流率，6rol / min〕，在保持時間37分鐘時，獲得單一種非對映異構物。 δ (CD3〇D): 1.00(6H,t)/ l.H(3H,t)/ 1.24-2.13(23H,m), 2.74(2H,m),.3.64(lH,m),4.32(lH,m),4.53(lH,t)·

Observed FAB (M+H)+ 448. C21H42N3O5P requires M 447. 經濟部中央標準局印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本百) 異構物E4與異構物E3 C之不同點在於，鄰於磷之不對稱中心具有相反之構形。因此，似乎異構物E 4係3 —CN—〔N— ( (R) — 1—亞磷羧基丙基）一（S) 一白胺酿基〕〕一（一）一胺基氮雜環十三烧一 2.—酮。實施例5 N —〔N — ( i — ( R)—亞磷羧基丙基）一（S)—白胺醯基〕一〇 —甲基一（S)—酪胺酸一N— ( 2 —羥乙基）醯胺（E 5 ) 甲 4 (210X297 公潑） 50 Α6 Β6 2〇3〇〇8 五、發明説明（48 ) (HO),Ρ ΊΙ 0

{請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 首先，將溶有Ν —〔Ν —（ R) —亞磷羧基丙基）_ (S )_白胺醯基〕—〇一甲基一（S)—酪胺酸一N — (2 —羥乙基）醯胺二苯曱酯（〇 13 )( 206 rag，0.00032 mole )之甲醇溶液，於大氣壓下，以附於木炭（50 mg)上之丨〇 %钯爲催化劑予以氫化。而後，將其中之催化劑濾除並以甲醇洗之，然後再將所得之濾液蒸發至乾。繼之，將殘餘物溶解於水中，並予過濾及冷凍乾燥，獲得白色固體 (120 mg ) 〇

Observed dynamic FAB (M+H)+ 474. C21H36N3O7P requires M 473. 在HPLC上，保持時間在18 .57分鐘時，具有單一之尖峯〔RP Select β，125 Χ4_，394 R.具移動相，5 :95乙腈：0.05 Μ磷酸酯水溶液（ρ Η 2.5 )，流率2 ml 經濟部中央標準局印装 /min 〕〇實施例6 3 —〔Ν —〔 Ν —（（ S) —亞磷羧基丙基）一（S)- 白胺醯基〕〕一（一）一胺基一氮雜環十三烷一2一酮一乙酯納塩（E 6 ) 甲4(210X 297公沒） 51 2〇3〇〇8 A6 B6 五、發明説明（49 ) CH. C2H5〇 χ Na—O /「丨 Ο

首先，二乙酯（D7 C) ( 015 g )溶解於甲醇（ 3 ml)中，並以過量之溶於水中的氫氧化鈉在室溫下予以處理5日。而後，將其中之溶劑眞空蒸除，獲得白色固體產物。繼之，以反相二氧化矽柱所進行之色層分離（洗提液：水中之5 %〜丨0 %甲醇梯度液）將該產物純化，獲得標題化合物（〇 . 〇 1 g )。

Observed FAB (M+H)+ 476, (M+Na+) 498. C23H46N3O5P requires M 475. δ (CD3OD) 0.88 (6H,t), 0.96 (3H,t), 1.20-1.90 (28H,m) 2.52 (ΙΗ,ΓΠ), 2.98 (lH,m), 3.43 (2H,m), 3.90 (2H,m), 4.22 · 實施例7 3 —〔N. —〔N — ( 1 —距礎羧基丙基）一（S)—白胺酸基〕〕~~ ( 一）一胺基氣雜環十二烧一 2 一酮二鈉塩（ E 7 ) CH, (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局印製

Na 0

Na+~0 II 0

(E7) 甲 4(210X297 公沒) 52〜 ^〇3〇^8 A6 ____B6___ 五、發明説明（50 ) 於本實施例中，係由實施例4中所製之兩種非對映異構物的混合物（以HPLC分離前）’製備標題化合物。首先，係將水（I50 ml)中之異構物混合物（709 mg ’ 0.0 016 mole )，冷却於冰浴上，冷却時，一面予以攪拌，一面以氫氧化納溶液（1〇 % ’ 1.2 6 ml，2叫11〗vs )處理之。而後，將所形成之溶液過濾並予冷凍乾燥，獲得白色固體狀之標題化合物（746呵，96 % )。

首先，將二萍甲酯（D 16 ) ( 0.4 )溶解於乙醇（伽ml )中，並於大氣壓下，以附於木炭上之丨0 %鈀爲催化劑予以氫化24小時。而後，將所得之溶液過濾並將所得之溶液眞空蒸發，獲得以兩種非對映異構物之混合物狀態呈現的標題化合物（b. 2 8 g )。經濟部中央標準局印製 (請先W讀背面之注意事項再填寫本頁)

Observed FAB (M+H)+ 476. C23H46N3O5P requires M 475. 膠原酵素抑制劑分析此試驗主要係依Cawston及Barr ett 等人發表於Anal. 甲4(210X297公发）〜33〜〇q3〇〇8 as Z.___ B6 五、發明説明（51 )

Biochem· 99，340 — 345 ( 1979 )中之方法達成。供測試之化合物係溶於甲醇+，並被添加於經純化之兔骨膠原酵素中，或被添加於將從人肺結締組織細胞線WI — 38所得之組織淸液純化所製得的人類膠原酵素中。在37¾下予以預培養5分鐘後，將分析試管冷却至4 °C，並將14 C —乙醯化鼠皮膚型I膠原添加於其中。繼之，在37 *c下將該分析試管培養過夜。其中，14 C —膠原形成不溶性微纖維，其爲酵素之酵化物。之後，爲中止分析，將分析試管以12000 rpm之速度旋轉25分鐘。未切斷之w C —膠原仍然爲不溶性微纖維狀，並粒狀化，而經切斷之14 C 一膠原則仍爲在淸液中之可溶性胜類。取一淸液樣品供液體閃爍計數。膠原酵素抑制劑之活性（IC5〇: 50%抑制濃度），係被定義成可抑制旣知（標準）酵素濃度之50%的化合物濃度，或是在化合物之一定濃度下，因旣知（標準）酵素濃度所造成之膠原變質的抑制％。本發明代表性化合物之在試驗過程中的活性，係示於下表中〇兔骨膠原酵素之抑制實施例異構物 IC50 ( )

El 非對映異構物之混合物 2.4 經濟部中央標準局印製 {請先閲讀背面之注意事項再蜞寫本頁) E 2 " 3.1 人肺結締組織細胞膠原酵素之抑制實施例異構物 ICg〇 ( ) 甲 4(210X 297公潑）〜 ^〇3〇〇β A6 B6 五、發明説明（52 ) Ε 3 C S，S ，（一) 0.04 5 Ε 4 R > S ?(—) 0.166 Ε 8 E，S，（一）及S，S，（一）丨9. 4 9 (請先閲讀背面之注意事項再填窝本頁) .裝· .訂· •線· 經濟部中央標準局印製甲 4(210X 297 公沒）

Claims

公 A7 B7 C7 D7 六、申請專利範圍一種具有下列通式（I )之化合物，或其塩經濟部中央標準局員工消费合作社印®

-----------------1------裝------訂------『 (請先閱讀背面之注意事項再塡寫本頁) 本纸張尺度適用中园a家標準（CNS)甲4現烙（210 X 297公釐） 2030°8 A7 B7 C7 D7 六、申請專利範圍

偽 η 4 為m 中ίο成其R形之 6 整 C 或基羥偽之 2 ,基 -R,,s的 ι'ίιΑπ數 6 整 c R 或a®— 氯 ίΛ ) ^ R Ζ 3 tH R 或 c 及 ;( 基垸合結可偽者 R 該中 .Γ1、其锪合化之項 1 第圍範利 C 專者 0 基申乙或依基 . 甲 2 、氫偽係 R 該中其物。合者化基之丁項正 1 或第基圍丙範異利、專請基申乙依、 . 基 3 甲 ' 氫 4 基丁正 5 1 者 1 第基第圍丁圍範二範利第利專或專請基.請申丁申依異依偽 2 R 該中其物合化之項 R 該中其物合化之項偽 Η 4 C R I , 或基 3 甲 Η 基 C 晬 ο 吲 2 - ) 3 2 或 Η 基 C 甲 ί 苯 I 基 -氣 Η 甲 ο 一 Ζ 4 > 或 2 、Η 基 C 甲 ί 苯 - Η c Η c 2 ο c 為成形合结可 & 4 Ra 3 R (請先閲讀背面之注意事項再塡寫本頁) -裝. 訂. 之 ο Η C 者 - £ 6 基 4 乙偽或 3 化基甲之丁啐項正吲 1 或 -第基 3 圍乙或範、基利基甲專甲苯 If偽基申 1 氯依 R 甲合基氫 R Η 偽；c R 基 ί 該丁一中異偽其偽 4 » ζ ΏΡ 物 R , Η c Η c I 或 κ ο Η C Ζ ο C R 經濟部中央標準局w工消费合作社印製 2 其 Η » C 物 ( 合 I 化之之 ο 項 t—I r-H -- 第 m 圍為範成利形專合If 結申可依也 . 4 7 R 及者為不： 3 圃 R 集在之 , 物心合中化稱列對下不含之包號自記。0 形者偽星形，以構物記 I 合標 S 化被有種中具一抱係 . 合， 8 化時 } 氫本紙張尺度適用中a國家懔準（CNS)甲4規格（210 X 297公蹵） B7 C7 D7 ^0¾0°8 六、申請專利範圍 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) N — 〔 N — C N - ( 1 一亞瞵羧基乙基）一白胺基 J ~ (S) —色胺證基〕一（S)—丙胺酸甲§旨； lN — l N - 一亞碟錢基乙基）一白胺IS基〕一 0 —甲基一（S ) —酪胺蕗基]一（S )—丙胺酸甲酯； 3 — 〔 Ν - [ Ν - ( ( S ) — 1 一亞瞵羧基丙基）— (R) —白胺酸基〕〕一（一）_胺基氮雜環十三院一 2 —_ ; 3 - C Ν - L Ν - ( ( S ) — 1 一亞膦羧基丙基）- i裝· (S )—白胺黯基〕} 一（一）—胺基氛雜環十三院一 2 —Μ ； 3 — [ Ν - 〔 Ν — ( ( R ) — 1 -亞瞵羧基丙基）一 (S ) 一白胺舔基〕：一（一）一胺基氮雜環十三烷一 2 —职， N — 〔 N — 〔 1 - ( R )-亞膦羧基丙基）一（S ) 一白胺證基〕〕一0 — 甲基一 (S ) —酷S安酸一N — ( 2 一羥乙基）韹胺； 3 - ： N - C N - i S )-亞膦菝基丙基）—（S) 經濟部中央標準局R工消費合作社印製一白胺醯基〕〕一(―)一胺基氮雜環十三烷一 2 —調一乙酯鈉塩； 3 — [ Ν - 〔Ν — 1—亞膦羧基丙基）一（S)- 白胺韹基〕〕—(一）一胺基氮雜環十三烷一 2 -銅二銷塩；及本纸張尺度適用中a國家標準（CNS)甲4現烙（210 X 297公釐） % 〇3〇〇B A7 B7 C7 D7 六、申請專利範園 3 N N 基戊基羧 m 亞 S 基 0 按白 9 式之 - 義 2 定 - 所垸中三項十 1 環第雜圍 «範基利胺專 -if > 申 - 如 ί 備 - 製 I r-J 種惰 % 在 R , 裂物開合，化下 ) 在 I 存丨饬式fb 列鹵下浣由矽活甲包或偽鹼法酸方性的水物及合以化劑、，溶 I 按 R 當適 ϋ : 解驟水步 fi之者氫或成 , 愛 Σ 轉 R20 裂 R 開該況將情而現，且值 R 或之 (請先閲讀背面之注意事項再塡寫本頁)

NE R II » Z 基 R 甲、苯 1 之 R 代，取基經甲性苯擇之選代或取基經垸性係擇 Z00 R 或 , 基中烷式、 { 氫 R R 如偽要必 + 在 R 及請將申時第圍範利專缦濟部t央櫺準居員工消#合作社印製 ο 中其物合化項變第 1 1 轉圍 C 1 範為 U.J 利 1 R 專 2 lilfR 上申之砍

式之 0 義者定，基甲義定之 m及以園集之物合化列下含包自選偽物合化 sys 種本纸張尺度適用t國國家櫺準（CNS) f 4現格（210 X 297公货） A7 B7 C7 D7 、申請專利範圍 N — L N - N - ( 1 一二乙氧基磷韹基乙基）一白胺 11基〕一（S) •—色胺證基j — (S)—丙胺酸甲醋； N — L N — 〔 N — ( 1 —二乙氧基碟醒基乙基）一白胺鏗基〕一 ◦一甲基一（S)—酪胺靉基〕一（S) —丙胺馥甲酯； 3 — 〔 N — (R ) _白胺韹麵二乙酯； 3 — C N - 〔N — ( ( S ) 一 1 —亞磷羧基丙基）_ 基〕]一（一）胺基m雜環十三烷一2_ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) S ) C N — ( ( S ) 一 1 一亞碟錢基丙基—（白胺證基]〕一（_)—胺基氮雜環十三烷一 2 — 溺二乙酯； 3 N •裝. 白胺鏗基 [N - (1一亞磷羧基丙基）一（S)- (一）一胺基氮雜環十三垸一2 —顏1二苯甲酯； N ：N ί 1 — ( R ) 一亞磷羧基丙基 (S ) 經濟部中央標準局負工消#合作社印製 —白胺ϋ基〕一 0 -甲基一（S ) —酪胺酸一 Ν — （ 2 — 羥乙基）S胺二苯甲酯；及 3 — ； Ν - ： Ν - (1 一亞锘羧基戊基）—（S)- 白胺謚基〕〕_(—)胺基氮雜環十三烷一 2——調二苯甲酯。 1 2 . —種用於治療人體結缔組織和其他蛋白醇素退化所造成疾病的藥學組作物，其偽'包括如申請專利範圍第 1項之化合物以及其藥學上可接受載體。本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公货）六、申請專利範圍 A7 B7 C7 D7 台於用。偽病其疾 , 的物成合造化所之化項退 1 素第酵圍白範蛋利他專其請和申織依 Μ . 缔 3 結 1 體人療 ------------------------裝------訂 (請先閱讀背面之注意事項再塡寫本頁) 經濟部中央標準局w工消费合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4规格（210 X 297公釐）