TW202600551A

TW202600551A - ＣｙｃｌｉｎＫ降解劑藥物及其抗體偶聯物

Info

Publication number: TW202600551A
Application number: TW114116431A
Authority: TW
Inventors: 韓曉軍; 徐貝帝; 邱慶崇; 俞智勇; 常鑫; 王小寒; 章玲; 王垚; 何南海
Original assignee: 新加坡商阿諾醫藥(新加坡)有限公司; 大陸商杭州阿諾生物醫藥科技有限公司
Priority date: 2024-04-30
Filing date: 2025-04-30
Publication date: 2026-01-01

Abstract

一種Cyclin K降解劑藥物及其抗體偶聯物，包括它們的製備方法和用途。式I所示的抗體-藥物偶聯化合物，或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物。其中，Ab為抗體或其抗原結合片段，或抗原配體；P為Cyclin K蛋白降解劑片段；L為共價連接Ab和P的片段；q為Ab上偶聯L-P的數目，q選自1.0-16.0之間的任意數值。

Description

Cyclin　K降解劑藥物及其抗體偶聯物

本公開涉及Cyclin K降解劑藥物及其抗體偶聯物，該抗體藥物偶聯物包含Cyclin K降解劑和結合抗原靶標（例如癌細胞上表達的抗原）的抗體或其抗原結合片段。本公開進一步涉及包含Cyclin K降解劑的抗體藥物偶聯物的製備方法和用途。

抗體藥物偶聯物（ADC）類藥物因其獨特的結構和靶向遞送殺傷特性，近年來在臨床上表現出良好的治療效果。目前已有十多款ADC藥物獲批上市，覆蓋了多種類型癌症，為患者帶來了更多治療選擇。

ADC藥物由抗體、生物活性分子（藥物載荷，payload）和連接子（linker）三部分組成。抗體主要起到靶向遞送的作用，生物活性分子通過連接子共價偶聯在抗體上，主要在靶組織或靶細胞發揮生物學活性（藥效）。目前已上市的ADC藥物所用的payload主要為微管蛋白抑制劑和DNA損傷藥物等細胞毒類藥物，這些payload的ADC臨床使用中難免會出現耐藥或者payload相關毒性。這就需要不斷開發一些具有創新作用機制payload的ADC，以解決現有ADC藥物的一些問題。

Cyclin K是一種細胞週期蛋白，其作用主要是在細胞週期中調節CDK（細胞週期依賴性激酶）的活性。Cyclin K作為CDK12和CDK13的調節亞基，通過調節基因轉錄、信使RNA的剪接和關鍵細胞訊號路徑來控制多種生物學過程。一些研究發現，Cyclin K在細胞生長和增殖中發揮著重要作用，其過度表達會促進細胞增殖和腫瘤生長，因此可能成為潛在的抗癌藥物靶點。另外，有研究發現，Cyclin K可能參與DNA損傷修復和細胞凋亡的調節過程。

研究中發現，Cyclin K降解劑具有廣譜的腫瘤細胞殺傷效果，適合作為藥物載荷payload進行創新ADC藥物開發。同時，新作用機制Payload的ADC的開發，有望解決現有傳統細胞毒類Payload的ADC藥物的耐藥或患者不響應問題。

本發明提供了一種新穎的抗體藥物偶聯物，其特點在於創新地應用了Cyclin K降解劑作為抗體藥物偶聯物的生物活性分子（藥物載荷，payload）。本發明的抗體藥物偶聯物具有高抗腫瘤活性，能夠有效地殺死腫瘤細胞，並具有旁觀者殺傷效應。PCT/CN2022/114693與PCT/CN2023/138417公開的內容通過引用併入本發明中。

一方面，本公開提供式I所示的抗體-Cyclin K降解劑偶聯物，或所述偶聯物的立體異構物、互變異構物、其前藥、其藥學上可接受的鹽或其藥學上可接受的溶劑合物，其中， Ab為抗體或抗原結合片段，或抗原配體； q為Ab上偶聯L-P的數目，q可以表示一個Ab上偶聯L-P的數目，q也可以表示一批次藥物中Ab上偶聯L-P的平均數，q選自1.0-16.0之間的任意數值； L為共價連接Ab和P的片段，L為-L₁-L₂-L₃-L₄-L₅-，其中L₁端連接Ab，L₄或L₅可以為直連鍵，L₄或L₅端連接P； P為Cyclin K蛋白降解劑片段。

在一些實施方案中，P為式II所示的結構單元，P通過其含有的氧原子、硫原子或氮原子與L₅或L₄相連：其中， R^cy選自：、、或；各自獨立地表示單鍵或者雙鍵； W¹各自獨立地表示CR、N或鍵； W²各自獨立地表示CR⁰、N、NR^a、S或O； W³各自獨立地表示C或N，最多只能有2個W³同時為N； W⁴各自獨立地表示CR¹、N、NR^a、S或O； W⁵各自獨立地表示CR或N，最多只能有2個W⁵同時為N； R⁴表示苯環或5-6元雜芳環，所述苯環或5-6元雜芳環可各自任選地地被0個、1個或者2個R取代； R、R⁰和R¹各自獨立地表示氫、鹵素、硝基、氰基、-R^a、-OR^a、-SR^a、-NR^aR^b、-C(O)R^a、-C(O)OR^a、-C(O)NR^aR^b、-NR^a C(O)R^b、-S(O)₂R^a、-S(O)R^a、-S(O)₂NR^aR^b、-P(O)R^aR^b、-C₁-C₆烷基、-(C₂-C₆)烯基、-(C₂-C₆)炔基，所述烷基、烯基或炔基可獨自任選地被0至3個選自-OR^a、-SR^a、-NR^aR^b、-NR^a C(O)R^b、-C(O)R^a、-C(O)OR^a、-C(O)NR^aR^b、-S(O)₂R^a、-S(O)R^a、-S(O)₂NR^aR^b、-P(O)R^aR^b的取代基取代；其中，所述-NR^aC(O)R^b中的R^b任選地可被0個、1個或者2個選自-(C₀-C₃亞烷基)OR^a、-(C₀-C₃亞烷基)SR^a、-(C₀-C₃亞烷基)NR^aR^b的取代基取代； R^L和R^L’各自獨立地表示氫、氟、C₁-C₆烷基或者C₃-C₆環烷基，R^L和R^L’可以和與之相連的碳原子一起形成3-6元環； R²表示鹵素、-R^a、-OR^a、-SR^a、硝基、氰基、-NR^aR^b、-NR^a C(O)R^b、-C(O)R^a、-C(O)OR^a、-C(O)NR^aR^b、-S(O)₂R^a、-S(O)R^a、-S(O)₂NR^aR^b、-P(O)R^aR^b、(C₂-C₆)烯基、(C₂-C₆)炔基； R³表示C₁-C₆烷基、C₁-C₆烯基、C₁-C₆炔基、C₃-C₁₀環烷基、3-10元雜環烷基、C₆-C₁₀芳基、5-10元雜芳基、-NR^MR^N、-NHR^M、-OR^M、-SR^M；當R³表示C₁-C₆烷基、C₁-C₆烯基、C₁-C₆炔基、C₃-C₁₀環烷基、3-10元雜環烷基時，其任選的可被0、1、2、3個選自以下的取代基取代：氧代、硝基、鹵素、氰基、-R^a、-(C₀-C₆亞烷基)OR^a、-(C₀-C₆亞烷基)SR^a、-(C₀-C₆亞烷基)NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)NR^a C(O)R^b、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)R^a、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)OR^a、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)₂R^a、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)R^a、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)₂NR^aR^b 、-(C₀-C₆亞烷基)P(O)R^aR^b；當R³表示C₆-C₁₀芳基或者5-10元雜芳基時，其任選的可被0、1、2、3個選自以下的取代基取代：硝基、鹵素、氰基、-R^a、-(C₀-C₆亞烷基)OR^a、-(C₀-C₆亞烷基)SR^a、-(C₀-C₆亞烷基)NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)NR^a C(O)R^b、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)R^a、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)OR^a、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)₂R^a、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)R^a、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)₂NR^aR^b 、-(C₀-C₆亞烷基)P(O)R^aR^b；當R³表示-NR^MR^N、-NHR^M、-OR^M、-SR^M，R^M和R^N各自獨立地表示C₁-C₆烷基、-(C₀-C₆亞烷基)(C₃-C₁₀環烷基)、-(C₀-C₆亞烷基)(3-10元雜環烷基)、-(C₀-C₆亞烷基)(C₆-C₁₀芳基)、-(C₀-C₆亞烷基)(5-10元雜芳基)；R^M和R^N各自任選的可被0、1、2、3個選自以下的取代基取代：氧代、硝基、鹵素、氰基、-R^a、-(C₀-C₆亞烷基)OR^a、-(C₀-C₆亞烷基)SR^a、-(C₀-C₆亞烷基)NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)NR^a C(O)R^b、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)R^a、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)OR^a、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)₂R^a、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)R^a、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)₂NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)P(O)R^aR^b；其中，當R^M或者R^N表示含有N原子的-(C₀-C₆亞烷基)(3-10元雜環烷基)且取代基位於所述N原子上時，所述取代基上位於所述N原子鄰位的C原子可以進一步被氧代取代；其中，R^a、R^b各自獨立地表示氫、C₁-C₆烷基或者C₃-C₈環烷基，所述烷基或環烷基可各自任選地可被0、1、2、3個鹵素原子取代。

在一些實施方案中，P為式III-a、式III-b、式III-c、式III-d所示的結構單元，P通過其含有的氧原子、硫原子或氮原子與L₅或L₄相連：其中，R^cy、R²和R³如上文式II所定義。

在一些實施方案中，P為式IV所示的結構單元，P通過其含有的氧原子、硫原子或氮原子與L₅或L₄相連：其中，R^cy和R²如上文式II所定義； R⁴¹選自：C₁-C₆烷基、C₁-C₆雜烷基、C₃-C₈環烷基、4-8元雜環烷基，所述烷基、雜烷基、環烷基、雜環烷基可任選地被1、2或3個下列基團取代：H、CN、鹵素、羥基、氨基、C₁-C₄烷基、C₁-C₄鹵代烷基、C₁-C₄羥烷基、C₃-C₈環烷基、4-8元雜環烷基、-NR^MR^N、-NHR^M、-OR^M、-SR^M，其中R^M和R^N如上文式II所定義。

在一些實施方案中，P為式V所示的結構單元，P通過其含有的氧原子、硫原子或氮原子與L₅或L₄相連：其中，R^cy和R³如上文式II所定義； R⁵¹選自：C₁-C₄烷基、C₁-C₄鹵代烷基、C₃-C₆環烷基。

在一些實施方案中，P為式VI-a、式VI-b、式VI-c、式VI-d、式VI-e、式VI-f、式VI-g、式VI-h所示的結構單元，P通過其含有的氧原子、硫原子或氮原子與L₅或L₄相連：其中，R⁶¹各自獨立地選自5-12元雜芳環或6-12元芳環，所述芳環和雜芳環可任選地被1、2或3個下列基團取代：H、鹵素、C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、C₁-C₄鹵代烷基、C₃-C₆環烷基、C₄-C₆雜環烷基； R⁶²各自獨立地選自：H或C₁-C₄烷基； R⁶³各自獨立地選自：H、鹵素、C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、C₁-C₄鹵代烷基、C₃-C₆環烷基。

在一些實施方案中，P為式II所示的結構單元，P通過其含有的氧原子、硫原子或氮原子與L₅或L₄相連：其中， R^cy選自：或；各自獨立地表示單鍵或者雙鍵； W¹各自獨立地表示CR、N或鍵； W²各自獨立地表示CR⁰、N、NR^a、S或O； W³各自獨立地表示C或N，最多只能有2個W³同時為N； W⁴各自獨立地表示CR¹、N、NR^a、S或O； W⁵各自獨立地表示CR或N，最多只能有2個W⁵同時為N； R⁴表示苯環或5-6元雜芳環，所述苯環或5-6元雜芳環可各自任選地地被0個、1個或者2個R取代； R、R⁰和R¹各自獨立地表示氫、鹵素、硝基、氰基、-R^a、-OR^a、-SR^a、-NR^aR^b、-C(O)R^a、-C(O)OR^a、-C(O)NR^aR^b、- NR^a C(O)R^b、-S(O)₂R^a、-S(O)R^a、-S(O)₂NR^aR^b、-P(O)R^aR^b、C₁-C₆烷基、(C₂-C₆)烯基、(C₂-C₆)炔基，所述烷基、烯基或炔基可獨自任選地被0至3個選自-OR^a、-SR^a、-NR^aR^b、-NR^a C(O)R^b、-C(O)R^a、-C(O)OR^a、-C(O)NR^aR^b、-S(O)₂R^a、-S(O)R^a、-S(O)₂NR^aR^b、-P(O)R^aR^b的取代基取代；其中，所述-NR^aC(O)R^b中的R^b任選地可被0個、1個或者2個選自-(C₀-C₃亞烷基)OR^a、-(C₀-C₃亞烷基)SR^a、-(C₀-C₃亞烷基)NR^aR^b的取代基取代； R^L和R^L’各自獨立地表示氫、氟、C₁-C₆烷基或者C₃-C₆環烷基，R^L和R^L’可以和與之相連的碳原子一起形成3-6元環； R²表示鹵素、-R^a、-OR^a、-SR^a、硝基、氰基、-NR^aR^b、-NR^a C(O)R^b、-C(O)R^a、 -C(O)OR^a、-C(O)NR^aR^b、-S(O)₂R^a、-S(O)R^a、-S(O)₂NR^aR^b、-P(O)R^aR^b、(C₂-C₆)烯基、(C₂-C₆)炔基； R³表示-NR^MR^N、-NHR^M、-OR^M、-SR^M，R^M和R^N各自獨立地表示C₁-C₆烷基、-(C₀-C₆亞烷基)(C₃-C₁₀環烷基)、-(C₀-C₆亞烷基)(3-10元雜環烷基)、-(C₀-C₆亞烷基)(C₆-C₁₀芳基)、-(C₀-C₆亞烷基)(5-10元雜芳基)；R^M和R^N各自任選的可被0、1、2、3個選自以下的取代基取代：氧代、硝基、鹵素、氰基、-R^a、-(C₀-C₆亞烷基)OR^a、-(C₀-C₆亞烷基)SR^a、-(C₀-C₆亞烷基)NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)NR^a C(O)R^b、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)R^a、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)OR^a、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)₂R^a、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)R^a、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)₂NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)P(O)R^aR^b；其中，當R^M或者R^N表示含有N原子的-(C₀-C₆亞烷基)(3-10元雜環烷基)且取代基位於所述N原子上時，所述取代基上位於所述N原子鄰位的C原子可以進一步被氧代取代；其中，R^a、R^b各自獨立地表示氫、C₁-C₆烷基或者C₃-C₈環烷基，所述烷基或環烷基可各自任選地可被0、1、2、3個鹵素原子取代。

在一些實施方案中，P為式II所示的結構單元，P通過其含有的氧原子、硫原子或氮原子與L₅或L₄相連；其中， R^cy選自：、、、、、、、、、、或；其中，X各自獨立地表示NR^a、O或S；W¹各自獨立地表示CR或N；W²各自獨立地表示CR⁰或N；W⁴各自獨立地表示CR¹或N；W⁵各自獨立地表示CR或N，最多只能有2個W⁵同時為N； R、R⁰和R¹各自獨立地表示氫、鹵素、硝基、氰基、-R^a、-OR^a、-SR^a、-NR^aR^b、-C(O)R^a、-C(O)OR^a、-C(O)NR^aR^b、- NR^a C(O)R^b、-S(O)₂R^a、-S(O)R^a、-S(O)₂NR^aR^b、-P(O)R^aR^b、C₁-C₆烷基、(C₂-C₆)烯基、(C₂-C₆)炔基，所述烷基、烯基或炔基可獨自任選地被0至3個選自-OR^a、-SR^a、-NR^aR^b、-NR^a C(O)R^b、-C(O)R^a、-C(O)OR^a、-C(O)NR^aR^b、-S(O)₂R^a、-S(O)R^a、-S(O)₂NR^aR^b、-P(O)R^aR^b的取代基取代；其中，所述-NR^aC(O)R^b中的R^b任選地可被0個、1個或者2個選自-(C₀-C₃亞烷基)OR^a、-(C₀-C₃亞烷基)SR^a、-(C₀-C₃亞烷基)NR^aR^b的取代基取代； R^L和R^L’各自獨立地表示氫、氟、C₁-C₆烷基或者C₃-C₆環烷基，R^L和R^L’可以和與之相連的碳原子一起形成3-6元環； R²表示鹵素、-R^a、硝基、氰基、-S(O)₂R^a、(C₂-C₆)烯基、(C₂-C₆)炔基； R³表示-NR^MR^N、-NHR^M、-OR^M、-SR^M，R^M和R^N各自獨立地表示C₁-C₆烷基、-(C₀-C₆亞烷基)(C₃-C₁₀環烷基)、-(C₀-C₆亞烷基)(3-10元雜環烷基)、-(C₀-C₆亞烷基)(C₆-C₁₀芳基)、-(C₀-C₆亞烷基)(5-10元雜芳基)；R^M和R^N各自任選的可被0、1、2、3個選自以下的取代基取代：氧代、硝基、鹵素、氰基、-R^a、-(C₀-C₆亞烷基)OR^a、-(C₀-C₆亞烷基)SR^a、-(C₀-C₆亞烷基)NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)NR^a C(O)R^b、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)R^a、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)OR^a、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)₂R^a、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)R^a、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)₂NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)P(O)R^aR^b；其中，當R^M或者R^N表示含有N原子的-(C₀-C₆亞烷基)(3-10元雜環烷基)且取代基位於所述N原子上時，所述取代基上位於所述N原子鄰位的C原子可以進一步被氧代取代；其中，R^a、R^b各自獨立地表示氫、C₁-C₆烷基或者C₃-C₈環烷基，所述烷基或環烷基可各自任選地可被0、1、2、3個鹵素原子取代。

在一些實施方案中，P為式II所示的結構單元，P通過其含有的氧原子、硫原子或氮原子與L₅或L₄相連；其中， R^cy選自：、、、或； R和R¹各自獨立地表示氫、鹵素、硝基、氰基、-R^a、-OR^a、-SR^a、-NR^aR^b、-C(O)R^a、-C(O)OR^a、-C(O)NR^aR^b、- NR^a C(O)R^b、-S(O)₂R^a、-S(O)R^a、-S(O)₂NR^aR^b、-P(O)R^aR^b、C₁-C₆烷基、(C₂-C₆)烯基、(C₂-C₆)炔基，所述烷基、烯基或炔基可獨自任選地被0至3個選自-OR^a、-SR^a、-NR^aR^b、-NR^a C(O)R^b、-C(O)R^a、-C(O)OR^a、-C(O)NR^aR^b、-S(O)₂R^a、-S(O)R^a、-S(O)₂NR^aR^b、-P(O)R^aR^b的取代基取代；其中，所述-NR^aC(O)R^b中的R^b任選地可被0個、1個或者2個選自-(C₀-C₃亞烷基)OR^a、-(C₀-C₃亞烷基)SR^a、-(C₀-C₃亞烷基)NR^aR^b的取代基取代； R^L和R^L’各自獨立地表示氫、氟、C₁-C₆烷基或者C₃-C₆環烷基，R^L和R^L’可以和與之相連的碳原子一起形成3-6元環； R²表示鹵素、-R^a、硝基、氰基、-S(O)₂R^a、(C₂-C₆)烯基、(C₂-C₆)炔基； R³表示-NR^MR^N、-NHR^M、-OR^M、-SR^M，R^M和R^N各自獨立地表示C₁-C₆烷基、-(C₀-C₆亞烷基)(C₃-C₁₀環烷基)、-(C₀-C₆亞烷基)(3-10元雜環烷基)、-(C₀-C₆亞烷基)(C₆-C₁₀芳基)、-(C₀-C₆亞烷基)(5-10元雜芳基)；R^M和R^N各自任選的可被0、1、2、3個選自以下的取代基取代：氧代、硝基、鹵素、氰基、-R^a、-(C₀-C₆亞烷基)OR^a、-(C₀-C₆亞烷基)SR^a、-(C₀-C₆亞烷基)NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)NR^a C(O)R^b、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)R^a、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)OR^a、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)₂R^a、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)R^a、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)₂NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)P(O)R^aR^b；其中，當R^M或者R^N表示含有N原子的-(C₀-C₆亞烷基)(3-10元雜環烷基)且取代基位於所述N原子上時，所述取代基上位於所述N原子鄰位的C原子可以進一步被氧代取代；其中，R^a、R^b各自獨立地表示氫、C₁-C₆烷基或者C₃-C₈環烷基，所述烷基或環烷基可各自任選地可被0、1、2、3個鹵素原子取代。

在一些實施方案中，P為式II-a、式II-b、式II-c、式II-d所示的結構單元，P通過其含有的氧原子、硫原子或氮原子與L₅或L₄相連；其中， R和R¹各自獨立地表示氫、鹵素、硝基、氰基、-R^a、-OR^a、-SR^a、-NR^aR^b、-C(O)R^a、-C(O)OR^a、-C(O)NR^aR^b、- NR^a C(O)R^b、-S(O)₂R^a、-S(O)R^a、-S(O)₂NR^aR^b、-P(O)R^aR^b、C₁-C₆烷基、(C₂-C₆)烯基、(C₂-C₆)炔基，所述烷基、烯基或炔基可獨自任選地被0至3個選自-OR^a、-SR^a、-NR^aR^b、-NR^a C(O)R^b、-C(O)R^a、-C(O)OR^a、-C(O)NR^aR^b、-S(O)₂R^a、-S(O)R^a、-S(O)₂NR^aR^b、-P(O)R^aR^b的取代基取代；其中，所述-NR^aC(O)R^b中的R^b任選地可被0個、1個或者2個選自-(C₀-C₃亞烷基)OR^a、-(C₀-C₃亞烷基)SR^a、-(C₀-C₃亞烷基)NR^aR^b的取代基取代； R²表示鹵素、-R^a、硝基、氰基、-S(O)₂R^a、(C₂-C₆)烯基、(C₂-C₆)炔基； R³表示-NR^MR^N、-NHR^M、-OR^M、-SR^M，R^M和R^N各自獨立地表示C₁-C₆烷基、-(C₀-C₆亞烷基)(C₃-C₁₀環烷基)、-(C₀-C₆亞烷基)(3-10元雜環烷基)、-(C₀-C₆亞烷基)(C₆-C₁₀芳基)、-(C₀-C₆亞烷基)(5-10元雜芳基)；R^M和R^N各自任選的可被0、1、2、3個選自以下的取代基取代：氧代、硝基、鹵素、氰基、-R^a、-(C₀-C₆亞烷基)OR^a、-(C₀-C₆亞烷基)SR^a、-(C₀-C₆亞烷基)NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)NR^a C(O)R^b、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)R^a、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)OR^a、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)₂R^a、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)R^a、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)₂NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)P(O)R^aR^b；其中，當R^M或者R^N表示含有N原子的-(C₀-C₆亞烷基)(3-10元雜環烷基)且取代基位於所述N原子上時，所述取代基上位於所述N原子鄰位的C原子可以進一步被氧代取代；其中，R^a、R^b各自獨立地表示氫、C₁-C₆烷基或者C₃-C₈環烷基，所述烷基或環烷基可各自任選地可被0、1、2、3個鹵素原子取代。

在一些實施方案中，P為式II-a、式II-b、式II-c、式II-d所示的結構單元，P通過其含有的氧原子、硫原子或氮原子與L₅或L₄相連；其中， R和R¹各自獨立地表示氫、鹵素、氰基、-R^a、-(C₀-C₂亞烷基)OH、-(C₀-C₂亞烷基)NH₂； R²表示鹵素、三氟甲基、氰基、乙烯基、乙炔基； R³表示-NR^MR^N、-NHR^M、-OR^M、-SR^M，R^M和R^N各自獨立地表示C₁-C₆烷基、-(C₀-C₆亞烷基)(C₃-C₁₀環烷基)、-(C₀-C₆亞烷基)(3-10元雜環烷基)、-(C₀-C₆亞烷基)(C₆-C₁₀芳基)、-(C₀-C₆亞烷基)(5-10元雜芳基)；R^M和R^N各自任選的可被0、1、2、3個選自以下的取代基取代：氧代、硝基、鹵素、氰基、-R^a、-(C₀-C₆亞烷基)OR^a、-(C₀-C₆亞烷基)SR^a、-(C₀-C₆亞烷基)NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)NR^a C(O)R^b、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)R^a、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)OR^a、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)₂R^a、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)R^a、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)₂NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)P(O)R^aR^b；其中，當R^M或者R^N表示含有N原子的-(C₀-C₆亞烷基)(3-10元雜環烷基)且取代基位於所述N原子上時，所述取代基上位於所述N原子鄰位的C原子可以進一步被氧代取代；其中，R^a、R^b各自獨立地表示氫、C₁-C₆烷基或者C₃-C₈環烷基，所述烷基或環烷基可各自任選地可被0、1、2、3個鹵素原子取代。

在一些實施方案中，P選自以下結構的片段，P通過其含有的氧原子或氮原子與L₅或L₄相連：。

在一些實施方案中，-P選自以下結構：。

在一些實施方案中，P選自以下結構的片段，P通過其含有的氧原子或氮原子與L₅或L₄相連：、、、、、、、、。

在一些實施方案中，P選自以下結構：、、、。

在一些實施方案中，P選自以下結構的片段，P通過其含有的氧原子或氮原子與L₅或L₄相連：、、、、、、、。

在一些實施方案中，P選自以下結構：、、、、、、。

在一些實施方案中，q選自0.1-16.0之間的任意數值。

在一些實施方案中，q選自1.0-8.0之間的任意數值。

在一些實施方案中，q選自1、2、3、4、5、6、7或8。

在一些實施方案中，q選自2、4、6或8。

在一些實施方案中，L₁選自：、、、、或。

在一些實施方案中，L₂選自：其中，E各自獨立地選自直連鍵、炔鍵、苯基、5-6元雜芳基、醯胺基，所述苯基和5-6元雜芳基可任選地被0、1或2個下列取代基取代：F、Cl、甲基、甲氧基； a1各自獨立地選自1、2、3、4、5和6； a2各自獨立地選自0、1、2、3、4、5和6； a3各自獨立地選自1、2、3、4、5和6； R^x1各自獨立地選自H、甲基或-CH₂CH₂N(Me)₂； R^x2各自獨立地選自H或甲基； R^x3各自獨立地選自-NH₂、-OH、-OMe、-NHMe、-N(Me)₂或-NHCH₂COOH。

在一些實施方案中，L₃不存在或存在，L₃不存在時，其為直連鍵；L₃存在時，L₃選自：-M-L_3a-或-L_3a-M-，其中， M各自獨立地選自：直連鍵、、、； L_3a各自獨立地選自：直連鍵、、， b1各自獨立地選自1、2、3、4和5； b2各自獨立地選自0、1、2、3、4和5； b3各自獨立地選自1、2、3、4和5； b4各自獨立地選自0、1、2和3； R^y1各自獨立地選自H、甲基、-CH₂CH₂N(Me)₂或HL； R^y2各自獨立地選自H、甲基、-CH₂CH₂N(Me)₂或HL； R^y3各自獨立地選自H、甲基或-CH₂CH₂N(Me)₂； R^y4各自獨立地選自H、甲基或-CH₂CH₂N(Me)₂； R^y5各自獨立地選自H、C₁-C₄烷基或HL； HL選自：或，其中c1選自0、1或2；c2選自2-20；c3選自1-20；R^y6選自H、甲基或乙醯基。

在一些實施方案中，L₄選自直連鍵、由2-5個氨基酸殘基組成的短肽、或氨基酸殘基和羧酸/胺組成的醯胺。

在一些實施方案中，L₄選自直連鍵。

在一些實施方案中，L₄選自氨基酸殘基和羧酸殘基組成的醯胺，或氨基酸殘基和胺殘基組成的醯胺。

在一些實施方案中，L₄為，其中p選自2、3、4或5；R^p各自獨立地任選自：H、甲基、異丙基、異丁基、仲丁基、苄基、對羥基苄基、-CH₂OH、-CH(OH)Me、-CH₂CH₂SCH₃、-CH₂CONH₂、-CH₂COOH、-CH₂CH₂CONH₂、-CH₂CH₂COOH、-(CH₂)₃NHC(=NH)NH₂、-(CH₂)_p1N(R^z)₂、-(CH₂)₃NHCOMe、-(CH₂)₃NHCONH₂、-(CH₂)₄NHCONH₂，其中p1選自1、2、3、4；R^z各自獨立地任選自H、C₁-C₄烷基或HL，HL如上文所定義。

在一些實施方案中，L₄為，其中r選自1或2；R^p如上文所定義。

在一些實施方案中，L₄選自：，其中，R^z各自獨立地選自H、C₁-C₄烷基或HL，HL如上文所定義。

在一些實施方案中，L₄選自：。

在一些實施方案中，L₅選自：直連鍵、，其中，R^w1各自獨立地選自：-CH₂NH-HL、-CH₂N(Me)-HL、-CH₂CH₂NH-HL、-CH₂CH₂N(Me)-HL、、或，其中d1選自0、1或2，d2選自1-20； R^w2各自獨立地選自：H、Me、-CH₂CH₂N(Me)₂或-CH₂CH₂SO₂Me； R^w3各自獨立地選自：H、Me、-CH₂CH₂N(Me)₂、-CH₂CH₂SO₂Me或-CH₂CH₂OCH₂CH₂OH； R^w4各自獨立地選自：H、Me、-CH₂CH₂N(Me)₂、-CH₂CH₂SO₂Me或-CH₂CH₂OCH₂CH₂OH； R^w5各自獨立地選自：H、Me或-CH₂CH₂N(Me)₂； R^w6各自獨立地選自：H、Me或-CH₂CH₂N(Me)₂； W¹各自獨立地選自或； W²為-L^w1-L^w2或-L^w3-L^w4，其中L^w1為2-5個氨基酸殘基組成的短肽；L^w2為H、C₁-C₄烷基、(C₁-C₄烷基)-醯基、HL，HL如上文所定義；L^w3為羧酸/胺和1-3個氨基酸殘基組成的醯胺；L^w4為-NH(C₁-C₄烷基)、-N(C₁-C₄烷基)₂、或，其中R^e為H或C₁-C₄烷基，e1或e3各自任選自1-20的整數； d各自獨立地選自0、1或2。

在一些實施方案中，L₅選自：直連鍵。

在一些實施方案中，L₅選自，其中R^w6各自獨立地選自H或甲基； d各自獨立地選自1或2； W²為-L^w1-L^w2或-L^w3-L^w4，其中，L^w1為，L^w1的N端和L^w2連接，p選自2、3、4或5；R^p各自獨立地任選自：H、甲基、異丙基、異丁基、仲丁基、苄基、對羥基苄基、-CH₂OH、-CH(OH)Me、-CH₂CH₂SCH₃、-CH₂CONH₂、-CH₂COOH、-CH₂CH₂CONH₂、-CH₂CH₂COOH、-(CH₂)₃NHC(=NH)NH₂、-(CH₂)₃NH₂、-(CH₂)₃N(Me)₂、-(CH₂)₃NHCOMe、-(CH₂)₃NHCONH₂、-(CH₂)₄NH₂、-(CH₂)₄N(Me)₂、-(CH₂)₄N(Et)₂、-(CH₂)₄N(nPr)₂、-(CH₂)₄NHCONH₂； L^w2為H、甲基、乙醯基、HL，HL如上文所定義； L^w3為，L^w3的左側和L^w4連接，其中r選自1或2；R^p各自獨立地任選自：H、甲基、異丙基、異丁基、仲丁基、苄基、對羥基苄基、-CH₂OH、-CH(OH)Me、-CH₂CH₂SCH₃、-CH₂CONH₂、-CH₂COOH、-CH₂CH₂CONH₂、-CH₂CH₂COOH、-(CH₂)₃NHC(=NH)NH₂、-(CH₂)₃NH₂、-(CH₂)₃N(Me)₂、-(CH₂)₃NHCOMe、-(CH₂)₃NHCONH₂、-(CH₂)₄NH₂、-(CH₂)₄N(Me)₂、-(CH₂)₄N(Et)₂、-(CH₂)₄N(nPr)₂、-(CH₂)₄NHCONH₂； L^w4為-NHMe、-N(Me)₂、、或，其中e1、e2或e3各自任選自1-20的整數。

在一些實施方案中，L₅選自：。

在一些實施方案中，-L₄-L₅-選自：。

在一些實施方案中，-L₁-L₂-選自：。

在一些實施方案中，-L₃-選自：直連鍵、。

在一些實施方案中，-L-選自下列結構或下列結構的丁二醯亞胺水解開環結構：。

在一些優選的實施方案中，-L-選自下列結構或下列結構的丁二醯亞胺水解開環結構：。

在一些實施方案中，所述抗體藥物偶聯物可由Ab和下列L-P通過偶聯反應得到：。

在一些優選的實施方案中，所述抗體藥物偶聯物可由Ab和下列L-P通過偶聯反應得到：。

在一些實施方案中，Ab為抗體或抗原配體。

在一些實施方案中，Ab為和靶點抗原結合的配體，所述靶點為在腫瘤細胞高表達，而在正常細胞低表達或不表達的靶點。

在一些實施方案中，Ab為抗體或抗原配體，所述抗體或抗原的靶點例如為5T4，ACTA2，ADGRE1，AG-7，AIF1，AKR1C1，AKR1C2，ANGPTL4，ASLG659，Axl，B7H3，B7H4，BAFF-R，BCMA，BMPR1B，BNIP3，C1QA，C1QB，CA6，CADM1，CCL5，CCR5，CCR7，CD123，CD138，CD142，CD147，CD166，CD19，CD22，CD21，CD20，CD205，CD22，CD223，CD228，CD25，CD30，CD33，CD37，CD38，CD40，CD45，CD46，CD47，CD49D(ITGA4)，CD56，CD70，CD71，CD72，CD74，CD79a，CD79b，CD80，CDCP1，CDH3，CDH6，CDH11，CD11b，CEA，CEACAM5，CEACAM6，CLDN18.2，c-Met，COL6A3，COL7A1，CRIPTO，CSF1R，CTGF，CTSD，CTSS，CXCL11，CXCL10，CXCR5，DDIT4，DLL3，DLL4，DR5，E16，EFNA4，EGFR，EGFRvIII，EGLN，EGLN3，EMR2，ENPP3，EpCAM，EphA2，EphB2R，ETBR，FcRH2，FcRH1，FGF2，FGFR2，FGFR3，FLT3，FOLR-α，GD2，GEDA，GPC-1，GPNMB，GPR20，GZMB，HER2，HER3，HLA-DOB，HMOX1，IFI6，IFNG，IGF-1R，IGFBP3，IL10RA1，IL-13R，IL-2，IL20Ra，IL-3，IL-4，IL-6，IRTA2，KISS1R，KRT33A，LIV-1，LOX，LRP-1，LRRC15，LUM，LY64，LY6E，Ly86，LYPD3，MDP，MMP10，MMP14，MMP16，MPF，MSLN，MUC-1，NaPi2b，Napi3b，Nectin-4，NOG，P2X5，PDGFRA，PDK1，PD-L1，PFKFB3，PGF，PGK1，PIK3AP1，PIK3CD，PLOD2，PSCA，PSMA，PTK7，RNF43，ROR1，ROR2，SERPINE1，SLC39A6，SLTRK6，STC2，STEAP1，STEAP2，TCF4，TENB2，TGF，TGFB1，TGFB2，TGFBR1，TNFRSF21，TNFSF9，Trop-2，TrpM4，Tyro7，UPK1B，VEGFA，WNT5A等。

在一些實施方案中，Ab為抗抗原抗體，所述抗原靶點例如為HER2、TROP2、EGFR、HER3、B7H3、FGFR2b、B7H4、Nectin4、FOLR1、CD30、CD79b、CD19、CD33、5T4、CLDN18.2等。

在一些實施方案中，Ab為抗體，例如adalimumab、aducanumab、alemtuzumab、altumomab、amivantamab、atezolizumab、anetumab、avelumab、bapineuzumab、basiliximab、bectumomab、bermekimab、besilesomab、bevacizumab、bezlotoxumab、brentuximab、brodalumab、catumaxomab、cemiplimab、cetuximab、cinpanemab、clivatuzumab、crenezumab、daclizumab、daratumumab、denosumab、dinutuximab、dostarlimab、durvalumab、edrecolomab、elotuzumab、emapalumab、enfortumab、epcoritamab、epratuzumab、etaracizumab、gemtuzumab、glofitamab、girentuximab、gosuranemab、ibritumomab、inebilizumab、infliximab、inotuzumab、ipilimumab、isatuximab、ixekizumab、J591、labetuzumab、lecanemab、loncastuximab、mirzotamab、mogamulizumab、mosunetuzumab、necitumumab、nimotuzumab、natalizumab、naratuximab、naxitamab、nivolumab、ocrelizumab、ofatumumab、olaratumab、oregovomab、panitumumab、pembrolizumab、pertuzumab、polatuzumab、prasinezumab、racotumomab、ramucirumab、rituximab、sacituzumab、semorinemab、siltuximab、solanezumab、tacatuzumab、tafasitamab、teprotumumab、tilavonemab、tocilizumab、tositumomab、trastuzumab、ustekinumab、vedolizumab、votumumab、zagotenemab、zanidatamab、zalutumumab、zanolimumab，或其片段或類似物。

在一些實施方案中，Ab為抗HER2抗體，例如Trastuzumab、Pertuzumab、Zanidatamab等。

在一些實施方案中，Ab為抗TROP2抗體，例如Sacituzumab。

在一些實施方案中，Ab為抗HER3抗體，例如Patritumab。

在一些實施方案中，Ab為抗Nectin4抗體，例如Enfortumab。

在一些實施方案中，Ab為抗B7H3抗體，例如Mirzotamab。

在一些實施方案中，Ab為抗EGFR抗體，例如Cetuximab。

在一些實施方案中，Ab為雙抗，例如為上述抗原靶點任意組合的雙抗。

在一些實施方案中，Ab為雙抗，例如為EGFR/c-Met雙抗、EGFR/HER3雙抗、FOLR1/TRPV6雙抗、HER2/TROP2雙抗、HER2/HER2雙抗、EGFR/MUC1雙抗、HER3/TROP2雙抗等。

在一些實施方案中，所述抗體藥物偶聯物結構如式I-1所示：

其中，Ab、L₁、L₂、L₃、L₄、L₅、P、q如上文式I所定義。

在一些實施方案中，所述抗體藥物偶聯物結構如式I-2a或式I-2b所示：，

其中各基團如上文所定義，L₅可以從R^cy或R³的取代基上連接。

在一些實施方案中，所述抗體藥物偶聯物結構如式I-3a、式I-3b、式I-3c、式I-3d、式I-3e、式I-3f、式I-3g或式I-3h所示：，

在一些實施方案中，所述抗體藥物偶聯物結構如式I-4a或式I-4b所示：，

其中各基團如上文所定義，L₅可以從R^cy或R⁴¹的取代基上連接。

在一些實施方案中，所述抗體藥物偶聯物結構如式I-5a或式I-5b所示：，

在一些實施方案中，所述抗體藥物偶聯物結構如式I-6a、式I-6b、式I-6c、式I-6d、式I-6e或式I-6f所示：，

其中各基團如上文所定義。

在一些實施方案中，所述抗體藥物偶聯物結構如式I-2a-1或式I-2b-1所示：，

在一些實施方案中，所述抗體藥物偶聯物結構如式I-2a-2或式I-2b-2所示：，

在一些實施方案中，所述抗體藥物偶聯物選自下列結構或下列結構的丁二醯亞胺水解開環結構：，其中， Ab為抗體，例如Ab為抗HER2抗體，例如為Trastuzumab；例如Ab為抗TROP2抗體，例如為Sacituzumab；例如Ab為抗HER3抗體，例如為Patritumab；例如Ab為抗Nectin4抗體，例如為Enfortumab； q為2到16的任意數值，例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16,；q優選為4到8的任意數值，例如q為4、5、6、7、8；q更優選地為4、6、8。

在一些優選的實施方案中，所述抗體藥物偶聯物選自下列結構或下列結構的丁二醯亞胺水解開環結構：，其中， Ab為抗體，例如Ab為抗HER2抗體，例如為Trastuzumab；例如Ab為抗TROP2抗體，例如為Sacituzumab；例如Ab為抗HER3抗體，例如為Patritumab；例如Ab為抗Nectin4抗體，例如為Enfortumab； q為2到16的任意數值，例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16,；q優選為4到8的任意數值，例如q為4、5、6、7、8；q更優選地為4、6、8。

在一些實施方案中，所述抗體藥物偶聯物選自下列結構：、、、、、、，其中， Ab為抗體，例如Ab為抗HER2抗體，例如為Trastuzumab；例如Ab為抗TROP2抗體，例如為Sacituzumab；例如Ab為抗HER3抗體，例如為Patritumab；例如Ab為抗Nectin4抗體，例如為Enfortumab； q為2到16的任意數值，例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16,；q優選為4到8的任意數值，例如q為4、5、6、7、8；q更優選地為4、6、8。

在一些實施方案中，所述抗體藥物偶聯物選自下列結構：、、、、、、，其中， Ab如上文所定義，例如Ab為抗體；例如Ab為抗HER2抗體，例如為Trastuzumab；例如Ab為抗TROP2抗體，例如為Sacituzumab；例如Ab為抗HER3抗體，例如為Patritumab；例如Ab為抗Nectin4抗體，例如為Enfortumab； q為1到16的任意數值，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16,；q優選為1到8的任意數值，例如q為1、2、3、4、5、6、7、8；q更優選地為4、6、8。

本發明的另一方面涉及一種藥物組合物，該組合物包含如本發明所述的化合物或抗體藥物偶聯物（ADC），或其立體異構物、互變異構物、溶劑合物、藥學上可接受的鹽、代謝產物、同位素衍生物、N-氧化物或前藥，及任選地藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。

本發明的另一方面涉及一種前述本發明所述的化合物或抗體藥物偶聯物（ADC），或其立體異構物、互變異構物、溶劑合物、藥學上可接受的鹽、代謝產物、同位素衍生物、N-氧化物或前藥，或者本發明所述的藥物組合物在製備用於預防或治療癌症相關的疾病或病症的藥物中的應用。所述癌症為實體腫瘤或血液腫瘤，具體地可選自食管癌、肺癌、乳腺癌、胃癌、結直腸癌、胰腺癌、卵巢癌、子宮癌、肝癌、腎癌、頭頸癌、腦瘤、尿路上皮癌、皮膚癌、前列腺癌、甲狀腺癌、神經母細胞瘤、膠質瘤、白血病或淋巴瘤等。

特別注意的是，在本文中，當提及具有特定結構式的“化合物”或“抗體藥物偶聯物”時，一般地還涵蓋其立體異構物、非對映異構物、對映異構物、外消旋混合物和同位素衍生物。

本領域技術人員公知，一種化合物或抗體藥物偶聯物的鹽、溶劑合物、水合物是化合物的替代性存在形式，它們都可以在一定條件下轉化為所述化合物，因此，特別注意的是在本文中當提到一種化合物時，一般地還包括它的可藥用鹽，進而還包括其溶劑合物和水合物。

相似地，在本文中當提到一種化合物或抗體藥物偶聯物時，一般地還包括其前藥、代謝產物和氮氧化物。

本發明化合物或抗體藥物偶聯物的“立體異構物”是指當式(I)化合物存在不對稱碳原子時，會產生對映異構物；當化合物存在碳碳雙鍵或環狀結構時，會產生順反異構物；當化合物存在酮或肟等時，會產生互變異構物，所有式(I)化合物的對映異構物、非對映異構物、消旋異構物、順反異構物、互變異構物、幾何異構物、差向異構物、旋轉異構物及其混合物，均包括在本發明範圍中。

本發明所述的“藥學上可接受的鹽”是指可藥用的酸和鹼的加成鹽或其溶劑化物。這樣的可藥用鹽包括以下酸的鹽：鹽酸、磷酸、氫溴酸、硫酸、亞硫酸、甲酸、甲苯磺酸、甲磺酸、硝酸、苯甲酸、檸檬酸、酒石酸、馬來酸、氫碘酸、鏈烷酸(諸如乙酸、HOOC‑(CH₂)n‑COOH(其中n是0～4))等。鹼的鹽：鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、銨鹽等。本領域技術人員知曉的多種無毒的可藥用加成鹽。

本發明所述的前體或代謝物可以本領域公知的前體或代謝物，只要所述的前體或代謝物通過體內代謝轉化形成化合物即可。例如“前藥”是指本發明化合物的那些前藥，在合理的醫學判斷範圍內，其適用於接觸人和更低等動物的組織，而沒有不適當的毒性、刺激性、過敏反應等，稱得上合理的受益/風險比並且對其預期用途有效。術語“前藥”是指在體內迅速經轉化產生上述式的母體化合物的化合物，例如通過在體內代謝。

定義

如果無另外說明，用於本發明申請(包括說明書和申請專利範圍)中的術語定義如下。必須注意，在說明書和所附的申請專利範圍中，如果文中無另外清楚指示，單數形式“一個”包括複數意義。如果無另外說明，使用質譜、核磁、HPLC、蛋白化學、生物化學、重組DNA技術和藥理的常規方法。在本申請中，如果無另外說明，使用“或”或“和”指“和/或”。

在說明書和申請專利範圍中，給定化學式或名稱應涵蓋所有立體和光學異構物及其中存在上述異構物的外消旋物。除非另外指明，否則所有手性(對映異構物和非對映異構物)和外消旋形式均在本發明範圍內。所述化合物中還可存在C＝C雙鍵、C＝N雙鍵、環系統等的許多幾何異構物，且所有上述穩定異構物均涵蓋於本發明內。本發明描述了本發明化合物的順式-和反式-(或E-和Z-)幾何異構物，且其可分離成異構物的混合物或分開的異構物形式。本發明化合物可以光學活性或外消旋形式加以分離。用於製備本發明化合物和其中製備的中間體的所有方法均視為本發明的部分。在製備對映異構物或非對映異構物產物時，其可通過常規方法(例如通過色譜或分段結晶)進行分離。取決於方法條件，以游離(中性)或鹽形式獲得本發明的終產物。這些終產物的游離形式和鹽均在本發明的範圍內。如果需要的話，則可將化合物的一種形式轉化成另一種形式。可將游離鹼或酸轉化成鹽；可將鹽轉化成游離化合物或另一種鹽；可將本發明異構物化合物的混合物分離成單獨的異構物。本發明化合物、其游離形式和鹽可以多種互變異構物形式存在，其中氫原子轉置到分子的其它部分上且由此分子的原子之間的化學鍵發生重排。應當理解的是，可存在的所有互變異構物形式均包括在本發明內。

本發明中，術語“配體”通常指能識別和結合目標細胞相關抗原或受體的大分子化合物，這些配體包括但不限於抗體、多肽、融合蛋白、奈米抗體或其他能與細胞、受體或抗原結合的分子。

術語“抗體”通常是指由兩對多肽鏈(每對具有一條輕鏈(LC)和一條重鏈(HC))組成的免疫球蛋白分子。抗體輕鏈可分類為κ(kappa)和λ(lambda)輕鏈。重鏈可分類為μ、δ、γ、α或ε，並且分別將抗體的同種型定義為IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。在輕鏈和重鏈內，可變區和恆定區通過大約12或更多個氨基酸的“J”區連接，重鏈還包含大約3個或更多個氨基酸的“D”區。各重鏈由重鏈可變區(VH)和重鏈恆定區(CH)組成。重鏈恆定區由3個結構域(CH1、CH2和CH3)組成。各輕鏈由輕鏈可變區(VL)和輕鏈恆定區(CL)組成。輕鏈恆定區由一個結構域CL組成。恆定結構域不直接參與抗體與抗原的結合，但展現出多種效應子功能，如可介導免疫球蛋白與宿主組織或因子，包括免疫系統的各種細胞(例如，效應細胞)和經典補體系統的第一組分(C1q)的結合。VH和VL區還可被細分為具有高變性的區域(稱為互補決定區(CDR))，其間散佈有較保守的稱為構架區(FR)的區域。各VH和VL由按下列順序：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4從氨基末端至羧基末端排列的3個CDR和4個FR組成。各重鏈/輕鏈對的可變區(VH和VL)分別形成抗原結合部位。氨基酸在各區域或結構域的分配可遵循本領域已知的各種編號系統。

術語“互補決定區”或“CDR”是指抗體可變區中負責抗原結合的氨基酸殘基。在重鏈和輕鏈的可變區中各含有三個CDRs，命名為CDR1、CDR2和CDR3。這些CDR的精確邊界可根據本領域已知的各種編號系統進行定義，例如可按照Kabat編號系統(Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md., 1991)、Chothia編號系統(Chothia&Lesk(1987) J.Mol.Biol. 196: 901-917；Chothia et al., (1989) Nature 342: 878-883)、IMGT編號系統(Lefranc et al., Dev.Comparat.Immunol. 27:55-77, 2003)或AbM編號系統(Martin ACR, Cheetham JC, Rees AR(1989) Modelling antibody hypervariable loops: A combined algorithm. Proc Natl Acad Sci USA 86:9268–9272)中的定義。對於給定的抗體，本領域技術人員將容易地鑒別各編號系統所定義的CDR。並且，不同編號系統之間的對應關係是本領域技術人員熟知的(例如，可參見Lefranc et al., Dev.Comparat.Immunol. 27:55-77, 2003)。

在本發明中，抗體或其抗原結合片段含有的CDR可根據本領域已知的各種編號系統確定，例如通過Kabat、Chothia、IMGT或AbM編號系統確定。在某些實施方案中，抗體或其抗原結合片段含有的CDR通過Chothia編號系統定義。

術語“構架區”或“FR”殘基是指，抗體可變區中除了如上定義的CDR殘基以外的那些氨基酸殘基。

術語抗體的“抗原結合片段”是指抗體的片段的多肽，例如全長抗體的片段的多肽，其保持特異性結合全長抗體所結合的相同抗原的能力，和/或與全長抗體競爭對抗原的特異性結合，其也被稱為“抗原結合部分”。通常參見，Fundamental Immunology, Ch.7 (Paul,W.,ed., 第2版，Raven Press, N.Y. (1989))，其以其全文通過引用合併入本文，用於所有目的。可通過重組DNA技術或通過完整抗體的酶促或化學斷裂產生抗體的抗原結合片段。抗原結合片段的非限制性實例包括Fab片段、Fab'片段、F(ab)'₂片段、F(ab)'₃片段、Fd、Fv、scFv、di-scFv、(scFv)₂、二硫鍵穩定的Fv蛋白(“dsFv”)、單結構域抗體(sdAb，奈米抗體)和這樣的多肽，其包含足以賦予多肽特異性抗原結合能力的抗體的至少一部分。工程改造的抗體變體綜述於文獻（Holliger等, 2005, Nat Biotechnol, 23:1126-1136）中。

術語“Fd”意指由VH和CH1結構域組成的抗體片段；術語“dAb片段”意指由VH結構域組成的抗體片段(Ward等人, Nature 341:544 546 (1989))；術語“Fab片段”意指由VL、VH、CL和CH1結構域組成的抗體片段；術語“F(ab’)₂片段”意指包含通過鉸鏈區上的二硫橋連接的兩個Fab片段的抗體片段；術語“Fab’片段”意指還原連接F(ab’)₂片段中兩個重鏈片段的二硫鍵後所獲片段，由一條完整的輕鏈和重鏈的Fd片段(由VH和CH1結構域組成)組成。

術語“Fv”意指由抗體的單臂的VL和VH結構域組成的抗體片段。Fv片段通常被認為是，能形成完整的抗原結合位點的最小抗體片段。一般認為，六個CDRs賦予抗體的抗原結合特異性。然而，即便是一個可變區(例如Fd片段，其僅僅含有三個對抗原特異的CDRs)也能夠識別並結合抗原，儘管其親和力可能低於完整的結合位點。

術語“Fc”意指，由抗體的第一重鏈的第二、第三恆定區與第二重鏈的第二、第三恆定區經二硫鍵結合而形成的抗體片段。抗體的Fc片段具有多種不同的功能，但不參與抗原的結合。

術語“scFv”是指，包含VL和VH結構域的單個多肽鏈，其中所述VL和VH通過接頭(linker)相連(參見，例如Bird等人, Science 242: 423-426 (1988)；Huston等人, Proc.Natl.Acad.Sci. USA 85:5879-5883(1988)；和Pluckthun，The Pharmacology of Monoclonal Antibodies，第113卷；Roseburg和Moore編，Springer-Verlag，紐約，第269-315頁(1994))。此類scFv分子可具有一般結構：NH₂-VL-接頭-VH-COOH或NH₂-VH-接頭-VL-COOH。合適的現有技術接頭由重複的GGGGS氨基酸序列或其變體組成。例如，可使用具有氨基酸序列(GGGGS)₄的接頭，但也可使用其變體(Holliger等人(1993)，Proc.Natl.Acad.Sci. USA 90:6444-6448)。可用於本發明的其他接頭由Alfthan等人(1995)，Protein Eng. 8:725-731，Choi等人(2001)，Eur.J.Immunol. 31:94-106，Hu等人(1996)，Cancer Res.56:3055-3061，Kipriyanov等人(1999)，J.Mol.Biol.293:41-56和Roovers等人(2001)，Cancer Immunol.描述。在一些情況下，scFv的VH與VL之間還可以存在二硫鍵。在某些實施方案中，VH和VL結構域可以以任何合適的排列彼此相對定位。例如，包含NH₂-VH-VH-COOH、NH₂-VL-VL-COOH的scFv。

術語“單域抗體(single-domain antibody, sdAb)”具有本領域技術人員通常理解的含義，其是指由單個單體可變抗體結構域(例如單個重鏈可變區)所組成的抗體片段，其保持特異性結合全長抗體所結合的相同抗原的能力(Holt,L.等人，生物技術趨勢(Trends in Biotechnology), 21(11):484-490, 2003)。單域抗體也稱為奈米抗體(nanobody)。

上述各個抗體片段均保持了特異性結合全長抗體所結合的相同抗原的能力，和/或與全長抗體競爭對抗原的特異性結合。

在本文中，除非上下文明確指出，否則當提及術語“抗體”時，其不僅包括完整抗體，而且包括抗體的抗原結合片段。

可使用本領域技術人員已知的常規技術(例如，重組DNA技術或酶促或化學斷裂法)從給定的抗體(例如本發明提供的抗體)獲得抗體的抗原結合片段(例如，上述抗體片段)，並且以與用於完整抗體的方式相同的方式就特異性篩選抗體的抗原結合片段。

術語“鼠源抗體”是指通過下述方法獲得的抗體：融合免疫接種過的小鼠的B細胞與骨髓瘤細胞，篩選出既能無限增殖又能分泌抗體的鼠雜交融合細胞，繼而進行篩選、抗體製備和抗體純化；或者是指，由抗原侵入小鼠體內後B細胞分化增殖而形成漿細胞所分泌產生的抗體。

術語“人源化抗體”是指經基因工程改造的非人源抗體，其氨基酸序列經修飾以提高與人源抗體的序列的同源性。通常而言，人源化抗體的全部或部分CDR區來自於非人源抗體(供體抗體)，全部或部分的非CDR區(例如，可變區FR和/或恆定區)來自於人源免疫球蛋白(受體抗體)。人源化抗體通常保留了供體抗體的預期性質，包括但不限於，抗原特異性、親和性、反應性、提高免疫細胞活性的能力、增強免疫應答的能力等。供體抗體可以是有預期性質(例如，抗原特異性、親和性、反應性、提高免疫細胞活性的能力和/或增強免疫應答的能力)的小鼠、大鼠、兔或非人靈長類動物(例如，食蟹猴)抗體。

術語“半人源化抗體”是指相對於人源化抗體或完全人源化抗體，其一抗體鏈包含鼠源可變區（如在嵌合抗體中那樣）並且另一抗體鏈包含人源化可變區的抗體。

術語“嵌合抗體”系指以下抗體，其中的可變區序列來自一物種而恆定區序列來自另一物種，例如可變區序列來自小鼠抗體而恆定區序列來自人抗體的抗體。通過使用基因重組技術可以製備根據本申請的嵌合抗體或其片段。例如，所述嵌合抗體可以通過克隆重組DNA來生產，所述重組DNA包含啟動子和編碼根據本申請的非人尤其是鼠單克隆抗體可變區的序列、以及編碼人抗體恆定區的序列。由這種重組基因編碼的本申請嵌合抗體將是，例如，鼠-人嵌合體，該抗體的特異性由來源於鼠DNA的可變區確定，並且其同種型由來源於人DNA的恆定區來確定。

術語“單克隆抗體”或“單抗”系指具有單一分子組成的抗體分子的製備物。單克隆抗體組合物顯示出對於特定表位的單一結合特異性和親和性。

術語“雙特異性抗體”或“雙抗”是指同時具有兩種抗原表位結合能力的抗體。兩種抗原表位可以在不同抗原上，也可是在同一抗原上。雙特異性抗體可以具有多種結構構型。例如，雙特異性抗體可以由兩個Fc片段以及分別與其融合的兩個結合部分組成（與天然抗體相似，區別在於兩個臂結合不同的抗原草巴標或表位），抗原結合部可以為單鏈抗體（scfv）或者Fab片段。

本發明中，術語“抗體或抗原結合片段”通常是指免疫學上的結合試劑延伸至來自所有物種的所有抗體。抗體包含單克隆抗體、多克隆抗體、二聚體、多聚體、前抗、嵌合抗體全人源抗體、人源化抗體、重組抗體及其片段。抗原結合片段可以指抗體的保持特異性結合抗原能力的一個或多個片段。

本發明中，術語“抗體藥物偶聯物”或“ADC”是指生物活性化合物片段（藥物分子）與抗體或抗原結合片段連接得到的物質。在本發明的部分實施方案中，生物活性分子與靶向部分通過連接體L相連。所述連接體在特定環境（例如腫瘤內的水解酶和/或低pH值環境）中或特定作用（例如溶酶體蛋白酶的作用）下能夠斷裂，從而使生物活性分子與抗體或抗原結合片段分離。在本發明的部分實施方案中，生物活性分子與抗體或抗原結合片段直接通過共價鍵相連，所述共價鍵在特定環境或作用下能夠斷裂，從而使生物活性分子與抗體或抗原結合片段分離。

本發明中，術語“藥物抗體比率”或“DAR”是指抗體藥物偶聯物中藥物與抗體的比例，例如可表示每個抗體上連接的藥物分子數量，也可表示一組ADC平均連接的藥物分子數量（即平均或均值DAR）。ADC的DAR可以是1到20的範圍內的任意數值。例如DAR可以為2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.2、7.4、7.6、7.8、8.0、10.0、12.0、20.0。

本發明中，L₁通過S原子與Ab相連，本領域技術人員可以理解的是，本發明可以通過試劑（例如還原劑TCEP等）打開Ab的二硫鍵，所得巰基和連接體藥物綴合物（即L-P）反應（如取代反應或加成反應等）得到所述抗體藥物偶聯物。

本發明中，術語“Cyclin K蛋白降解劑”是指可誘導Cyclin K蛋白泛素化降解的降解劑，它可以不只降解Cyclin K蛋白，也可同時誘導其他蛋白降解（例如CDK12）。本發明的Cyclin K蛋白降解劑為分子膠類降解劑。本發明所述抗體藥物偶聯物的連接體可在特定環境（例如特定蛋白酶/水解酶作用、低pH值環境）下斷裂，釋放出所述Cyclin K蛋白降解劑生物活性分子，從而起到降解蛋白/殺傷細胞的作用。

本發明中當所列連接基團沒有指明其連接方向時，其連接方向是任意的，例如中的L為-C(O)NH-，此時-C(O)NH-既可以按照以從左到右的讀取順序連接苯基和環己基構成，也可以按照以從左到右相反的讀取順序連接苯基和環己基構成。所述連接基團和被連接集團的組合只有在這樣的會產生穩定化合物的情況下才是被允許的。

除非另有定義，本發明的取代基的定義是各自獨立而非互相關聯的，例如對於取代基中R^a(或者R^b)而言，其在不同的取代基的定義中是各自獨立的。具體而言，對於R^a(或者R^b)在一種取代基中選擇一種定義時，並不意味著該R^a(或者R^b)在其他取代基中都具有該相同的定義。更具體而言，例如(僅列舉非窮舉)對於NR^aR^b中，當R^a(或者R^b)的定義選自氫時，其並不意味著在-C(O)-NR^aR^b中，R^a(或者R^b)必然為氫。在另一個方面，當某一個取代基中存在多於一個R^a(或者R^b)時，這些R^a(或者R^b)也是各自獨立的。例如，在取代基-(CR^aR^b)_m-O-(CR^aR^b)_n-中，在m+n大於等於2的情況下，其中的m+n個R^a(或者R^b)是各自獨立的，它們可以具有相同或者不同的含義。

除非另有定義，否則當取代基被標注為“任選取代的”時，所述取代基選自例如以下取代基，諸如烷基、環烷基、芳基、雜環基、鹵素、羥基、烷氧基、氧代、烷醯基、芳基氧基、烷醯基氧基、氨基、烷基氨基、芳基氨基、芳基烷基氨基、二取代的胺基團(其中兩個氨基取代基選自烷基、芳基或芳基烷基)、烷醯基氨基、芳醯基氨基、芳烷醯基氨基、取代的烷醯基氨基、取代的芳基氨基、取代的芳烷醯基氨基、硫基、烷基硫基、芳基硫基、芳基烷基硫基、芳基硫羰基、芳基烷基硫羰基、烷基磺醯基、芳基磺醯基、芳基烷基磺醯基、磺醯氨基例如-SO₂NH₂、取代的磺醯氨基、硝基、氰基、羧基、氨基甲醯基例如-CONH₂、取代的氨基甲醯基例如-CONH烷基、-CONH芳基、-CONH芳基烷基或在氮上具有兩個選自烷基、芳基或芳基烷基的取代基的情況、烷氧基羰基、芳基、取代的芳基、胍基、雜環基，例如吲哚基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡咯烷基、吡啶基、嘧啶基、吡咯烷基、哌啶基、嗎啉基、哌嗪基、高哌嗪基等和取代的雜環基。

本發明中，術語“烷基”意欲包括具有指定碳原子數的支鏈和直鏈飽和脂肪族烴基。例如，“C₁-C₆烷基”表示具有1個至6個碳原子的烷基。烷基的實例包括但不限於甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、異戊基、新戊基等。本發明優選的烷基包括C₁-C₆烷基或C₁-C₄烷基。烷基可以是非取代的或取代的，當被取代時，其可以在任何可使用的連接點被取代，所述取代基優選自氘、鹵素、羥基、氨基、氰基、烷基、烷氧基、鹵代烷基、環烷基、雜環烷基、芳基和雜芳基中的一個或多個。

本發明中，術語 “亞烷基”意欲包括具有指定碳原子數的支鏈和直鏈飽和脂肪族烴基，其為從母體烷的相同碳原子或兩個不同的碳原子上除去兩個氫原子所衍生的殘基。例如，“C₀-C₆亞烷基”表示具有0個至6個碳原子的亞烷基，C₀亞烷基表示亞烷基不存在(為一個鍵)。亞烷基的實例包括但不限於亞甲基(-CH₂-)、1,1-亞乙基(-CH(CH₃)-)、1,2-亞乙基(-CH₂CH₂-)、1,1-亞丙基(-CH(CH₂CH₃)-)、1,2-亞丙基(-CH₂CH(CH₃)-)、1,3-亞丙基(-CH₂CH₂CH₂-)、1,4-亞丁基(-CH₂CH₂CH₂CH₂-)等。本發明優選的亞烷基包括C₀-C₆亞烷基。

本發明中，術語“烯基”表示含一個或更多個雙鍵且通常長度為2至20個碳原子的直鏈或支鏈的烴基。例如，“C₂-C₆烯基”含有兩個至六個碳原子。烯基包括但不限於例如乙烯基、丙烯基、丁烯基、1-甲基-2-丁烯-1-基等。本發明優選的烯基包括C₂-C₆烯基。

本發明中，術語“炔基”表示含一個或更多個三鍵且通常長度為2至20個碳原子的直鏈或支鏈的烴基。例如，“C₂-C₆炔基”含有兩個至六個碳原子。代表性炔基包括但不限於例如乙炔基、1-丙炔基、1-丁炔基等。本發明優選的炔基包括C₂-C₆炔基。

本發明中，術語“烷氧基”或“烷基氧基”是指-O-烷基。“C₁-C₆烷氧基”(或烷基氧基)意欲包括C₁、C₂、C₃、C₄、C₅、C₆烷氧基。烷氧基的實例包括但不限於甲氧基、乙氧基、丙氧基(例如正丙氧基和異丙氧基)和叔丁氧基。類似地，“烷基硫基”或“硫代烷氧基”表示具有指定數量碳原子的經硫橋連接的如上文所定義的烷基；例如甲基-S-和乙基-S-。本發明優選的烷氧基包括C₁-C₆烷氧基或C₁-C₄烷氧基。

本發明中，術語“羰基”是指由碳和氧兩種原子通過雙鍵連接而成的有機官能團(C=O)。

本發明中，術語“芳基”單獨或作為較大部分諸如“芳烷基”、“芳烷氧基”或“芳基氧基烷基”的部分，是指具有總計5至12個環成員的單環、二環或三環的環系統，其中所述系統中的至少一個環為芳族的且其中所述系統中的每個環含有3至7個環成員。在本發明的某些實施方案中，“芳基”是指芳族環系統，其包括但不限於苯基、聯苯基、茚滿基、1-萘基、2-萘基和四氫萘基。術語“芳烷基”或“芳基烷基”是指連接至芳基環的烷基殘基。非限制性實例包括苄基、苯乙基等。稠合的芳基可在環烷基環或芳族環的合適位置上連接至另一基團。例從環系統中畫出的虛線表明鍵可連接至任意合適的環原子。芳基可以是非取代的或取代的，當被取代時，其可以在任何可使用的連接點被取代，所述取代基優選自氘、鹵素、羥基、氨基、氰基、烷基、烷氧基、鹵代烷基、環烷基、雜環烷基、芳基和雜芳基中的一個或多個。

本發明中，術語“鹵代”或“鹵素”包括氟、氯、溴和碘。“鹵代烷基”意欲包括具有指定碳原子數且取代有1個或多個鹵素的支鏈和直鏈飽和脂族烴基團。鹵代烷基的實例包括但不限於氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、三氯甲基、五氟乙基、五氯乙基、2,2,2-三氟乙基、七氟丙基和七氯丙基。鹵代烷基的實例還包括意欲包括具有指定碳原子數且取代有1個或多個氟原子的支鏈和直鏈飽和脂族烴基團的“氟烷基”。

本發明中，術語“鹵代烷氧基”或“鹵代烷基氧基”表示具有指定數量碳原子的經氧橋連接的如上文所定義的鹵代烷基。例如，“C₁-C₆鹵代烷氧基”意欲包括C₁、C₂、C₃、C₄、C₅、C₆鹵代烷氧基。鹵代烷氧基的實例包括但不限於三氟甲氧基、2,2,2-三氟乙氧基和五氟乙氧基。類似地，“鹵代烷基硫基”或“硫代鹵代烷氧基”表示具有指定數量碳原子的經硫橋連接的如上文所定義的鹵代烷基；例如三氟甲基-S-和五氟乙基-S-。

本發明中，當提到一些取代基團時使用C_x1-C_x2的表述，這表示所述取代基團中的碳原子數可以是_x1至_x2個。例如，C_0-C₈表示所述基團含有0、1、2、3、4、5、6、7或8個碳原子，C₁-C₈表示所述基團含有1、2、3、4、5、6、7或8個碳原子，C₂-C₈表示所述基團含有2、3、4、5、6、7或8個碳原子，C₃-C₈表示所述基團含有3、4、5、6、7或8個碳原子，C₄-C₈表示所述基團含有4、5、6、7或8個碳原子，C₀-C₆表示所述基團含有0、1、2、3、4、5或6個碳原子，C₁-C₆表示所述基團含有1、2、3、4、5或6個碳原子，C₂-C₆表示所述基團含有2、3、4、5或6個碳原子，C₃-C₆表示所述基團含有3、4、5或6個碳原子。

本發明中，當提到環狀基團(例如芳基、雜芳基、環烷基和雜環烷基)時使用“x1-x2元環”的表述，這表示該基團的環原子數可以是x1至x2個。例如，所述3-12元環狀基團可以是3、4、5、6、7、8、9、10、11或12元環，其環原子數可以是3、4、5、6、7、8、9、10、11或12個；3-6元環表示該環狀基團可以是3、4、5或6元環，其環原子數可以是3、4、5或6個；3-8元環表示該環狀基團可以是3、4、5、6、7或8元環，其環原子數可以是3、4、5、6、7或8個；3-9元環表示該環狀基團可以是3、4、5、6、7、8或9元環，其環原子數可以是3、4、5、6、7、8或9個；4-7元環表示該環狀基團可以是4、5、6或7元環，其環原子數可以是4、5、6或7個；5-8元環表示該環狀基團可以是5、6、7或8元環，其環原子數可以是5、6、7或8個；5-12元環表示該環狀基團可以是5、6、7、8、9、10、11或12元環，其環原子數可以是5、6、7、8、9、10、11或12個；6-12元環表示該環狀基團可以是6、7、8、9、10、11或12元環，其環原子數可以是6、7、8、9、10、11或12個。所述環原子可以是碳原子或雜原子，例如選自N、O和S的雜原子。當所述環是雜環時，所述雜環可以含有1、2、3或4個環雜原子，例如任選自N、O和S的雜原子。

本發明中，一個或更多個鹵素可以各自獨立地選自氟、氯、溴和碘。

本發明中，術語“雜芳基”指含有一個或多個相同或不同雜原子的單環或多環芳族基團，包括單環的雜芳基和含有至少一個雜芳環(至少含有一個雜原子的芳族環系)的雙環或多環環系，其可以具有5、6、7、8、9、10、11、12、13或14個環原子，例如5、6、7、8、9或10個環原子。所述雜原子可以是氧、氮或硫。所述雜芳基上的碳原子和雜原子任選地被氧代基團取代(例如形成C=O、S(=O)或S(=O)₂)。雜芳基可以是非取代的或取代的，當被取代時，其可以在任何可使用的連接點被取代，所述取代基優選自氘、鹵素、羥基、氨基、氰基、烷基、烷氧基、鹵代烷基、環烷基、雜環烷基、芳基和雜芳基中的一個或多個。

本發明中，術語“雜環烷基”或“雜環基”指的是飽和或部分不飽和的單環或多環雜環烷基體系，其1、2、3或4個環原子為獨立選自N、O和S的雜原子，其餘為碳原子，其中N原子可任選地被季銨化，N和S原子可任選地被氧化(即NO、SO和SO₂)。其包括單環雜環、雙環雜環和三環雜環體系，其中雙環雜環和三環雜環體系包括螺環雜環、並環雜環和橋環雜環。雜環烷基可以是非取代的或取代的，當被取代時，其可以在任何可使用的連接點被取代，所述取代基優選自氘、鹵素、羥基、氨基、氰基、烷基、烷氧基、鹵代烷基、環烷基、雜環烷基、芳基和雜芳基中的一個或多個。

本發明中，術語“3-10元雜環烷基”或“3-10元雜環基”指的是由3至10個環原子組成的飽和或部分不飽和的單環或多環雜環烷基體系，其1、2、3或4個環原子為獨立選自N、O和S的雜原子，其餘為碳原子，其中N原子可任選地被季銨化，N和S原子可任選地被氧化(即NO、SO和SO₂)。當雜環中S和O原子的總數超過1時，則這些雜原子彼此不相鄰。其包括單環雜環、雙環雜環和三環雜環體系，其中雙環雜環和三環雜環體系包括螺環雜環、並環雜環和橋環雜環。所述“3-10元雜環基”可以是3、4、5、6、7、8、9或10元雜環基。3-10元雜環基的具體實例包括但不限於氮雜環丁基、氧雜環丁烷基、吡咯烷基(包括2-吡咯烷基和3-吡咯烷基)、哌啶基(包括2-哌啶基、3-哌啶基和4-哌啶基等)、哌嗪基、六氫噠嗪基、嗎啉基、二噁烷基、六氫噠嗪基、氮雜環庚烷、1,4-二氮雜環庚烷、環戊基並吡咯烷基、吡咯烷基並吡咯烷基、環丙基螺哌嗪基、環丁基螺氮雜環丁基、氮雜環丁基螺氮雜環丁基、環丁基螺氮雜環戊基、氮雜環丁基螺環戊基、氮雜環丁基螺氮雜環戊基、環丁基螺氮雜環己基、氮雜環丁基螺環己基、氮雜環丁基螺氮雜環己基、環戊基螺氮雜環戊基、氮雜環戊基螺氮雜環戊基、3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷基、3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷基或8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷基等。

本發明中，術語“環烷基”指的是飽和或部分不飽和的單環或多環烷基體系，其環原子均為碳原子。其包括單環烷基、並環烷基、螺環烷基和橋環烷基。環烷基可以是非取代的或取代的，當被取代時，其可以在任何可使用的連接點被取代，所述取代基優選自氘、鹵素、羥基、氨基、氰基、烷基、烷氧基、鹵代烷基、環烷基、雜環烷基、芳基和雜芳基中的一個或多個。

本發明中，術語“C₃-C₁₀環烷基”指的是由3至10個環原子組成的飽和或部分不飽和的單環或多環烷基體系，其環原子均為碳原子。其包括單環烷基、並環烷基、螺環烷基和橋環烷基。所述“3-12元環烷基”可以是3、4、5、6、7、8、9、10、11或12元環烷基。3-12元雜環基的具體實例包括但不限於環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基、環戊基並環戊基、環丁基螺環丁基或雙環[1.1.1]戊烷基等。

本發明中，術語“並環”或“稠環”指的是由兩個或兩個以上環狀結構彼此共用兩個相鄰的原子所形成的多環基團。

本發明中，術語“芳香稠環”指的是具有芳香性的稠環，其中，稠環的芳香性可以根據本領域內常用的方法判斷，例如Huckel規則，當稠環的共軛π電子數為4n+2時，判定其具有芳香性。

本發明中，術語“橋環”指的是系統中兩個環共用兩個以上環原子的多環基團。

本發明中，術語“螺環”指的是單環之間共用一個碳原子(稱螺原子)的多環基團。

本發明中，術語“取代”意指至少一個氫原子被非氫基團替代，條件是維持正常化合價且所述取代得到穩定的化合物。本文所用的環雙鍵為在兩個相鄰環原子之間形成的雙鍵(例如C＝C、C＝N或N＝N)。

在本發明化合物上存在氮原子(例如胺)的情形下，可通過使用氧化劑(例如mCPBA和/或過氧化氫)進行處理來將這些氮原子轉化成N-氧化物以獲得本發明的其它化合物。因此，所顯示和要求保護的氮原子視為均涵蓋所顯示氮及其N-氧化物以獲得本發明衍生物。

當任何變量在化合物的任何組成或式中出現一次以上時，其每次出現時的定義均獨立於其在其它每種情況下出現時的定義。因此，例如如果顯示基團取代有0-3個R，則所述基團可任選地取代有至多三個R基團，且在每次出現時R獨立地選自R的定義。此外，取代基和/或變量的組合僅在上述組合可產生穩定的化合物時才容許存在。

本發明中，術語“患者”是指通過本發明的方法進行治療的有機體。這類有機體優選包括但不限於哺乳動物(例如鼠類、猿/猴、馬、牛、豬、犬、貓等)且最優選是指人類。

本發明中，術語“有效量”意指將會引起例如研究人員或臨床醫師所尋求的組織、系統、動物或人的生物學或醫學響應的藥物或藥劑(即本發明化合物)的量。此外，術語“治療有效量”意指這樣的量：與未接受上述量的相應受試者相比，所述量導致改善的治療、治癒、預防或減輕疾病、病症或副作用，或降低在疾病或病症的進展速度。有效量可以一個或更多個給藥、施用或劑量給予且不意欲被特定的製劑或給藥途徑限制。該術語還包括在其範圍內的增強正常生理機能的有效量。

本發明中，術語“治療”包括其廣義上的含義，涵蓋對對象的治療性處理和/或預防性處理。具體而言，所述“治療”包括導致病症、疾病、障礙等的緩和、抑制、消除和改善和/或預防的任何處理，例如減輕、減少、調節、改善、消除、預防、防止或改善其症狀。所述治療性處理包括緩和、抑制或改善疾病的症狀或狀況；抑制併發症的產生；改善潛在代謝綜合症；抑制疾病或症狀的產生，如控制疾病或情況的發展；減輕疾病或症狀；使疾病或症狀減退；減輕由疾病或症狀引起的併發症，或治療由疾病或症狀引起的徵兆。所述預防性處理包括事先處理以防止、阻斷或延遲、減緩疾病或病症的發生或發展或者減弱疾病或病症的嚴重程度。

同樣，“治療劑”也包括對對象具有治療性處理和/或預防性處理的藥劑或試劑。

本發明中，術語“藥用”或“藥學上可接受的”在本文中用於指如下那些化合物、物質、組合物和/或劑型：在合理醫學判斷的範圍內，其適於與人類和動物的組織接觸使用而無過高毒性、刺激性、過敏反應和/或其它問題或併發症，並與合理的益處/風險比相稱。

本發明中，術語“藥用載體”意指藥用物質、組合物或媒介物，諸如液體或固體填充劑、稀釋劑、賦形劑、製造助劑(例如潤滑劑、滑石、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或硬脂酸鋅或硬脂酸)或溶劑包囊物質，其涉及將主題化合物從一個器官或身體的部分攜帶或運送至另一個器官或身體的部分。每種載體在與製劑的其它成分相容和對患者無害的意義上必須是“可接受的”。

本發明中，術語“藥物組合物”意指包含本發明化合物與至少一種其它藥用載體的組合物。“藥用載體”是指本領域中通常接受用於將生物活性劑遞送至動物(具體為哺乳動物)的介質，包括(即)佐劑、賦形劑或媒介物，諸如稀釋劑、防腐劑、填充劑、流動調控劑、崩解劑、潤濕劑、乳化劑、懸浮劑、增甜劑、矯味劑、芳香劑、抗細菌劑、抗真菌劑、潤滑劑和分散劑，這取決於給藥模式和劑型的性質。

特定藥學及醫學術語

本發明中，術語“可接受的”，如本文所用，指一個處方組分或活性成分對一般治療目標的健康沒有過分的有害影響。

本發明中，術語“癌症”，如本文所用，指一種不能控制的細胞的異常生長，並且在某種條件下能夠轉移(傳播)。這種類型的癌症包括但不限於，實體腫瘤(如膀胱、腸、腦、胸、子宮、心臟、腎、肺、淋巴組織(淋巴瘤)、卵巢、胰腺或其它內分泌器官(如甲狀腺)、前列腺、皮膚(黑色素瘤)或血液瘤(如非白血性白血病)。

本發明中，術語“聯合給藥”或其類似術語，如本文所用，指將幾種所選的治療藥物給一個病人用藥，以相同或不同的給藥方式在相同或不同的時間給藥。

本發明中，術語“增強”或“能增強”，如本文所用，指預期的結果能夠在效價或是持續時間方面都有增加或延長。因此，在增強藥物的治療效果方面，術語“能增強”指藥物在系統中有提高或延長效價或持續時間的能力。本文所用的“增效值”，指在理想的系統中，能夠最大限度地的增強另外一個治療藥物的能力。

本發明中，術語“免疫性疾病”指對內源性或外源性抗原產生的不良或有害反應的疾病或症狀。結果通常會造成細胞的功能障礙、或因此而破壞並造成機能障礙、或破壞可能產生免疫症狀的器官或組織。

本發明中，術語“試劑盒”與“產品包裝”是同義詞。

本發明中，術語“對象”、“受試者”或“病人”包括哺乳動物和非哺乳動物。哺乳動物包括但不限於，哺乳類：人、非人靈長類如猩猩、猿及猴類；農業動物如牛、馬、山羊、綿羊、豬；家畜如兔、狗；實驗動物包括齧齒類，如大鼠、小鼠及豚鼠等。非哺乳類動物包括但不限於，鳥、魚等。在一優選例中，所選哺乳動物是人。

如本文所用，某一化合物或藥物組合物，給藥後，可以使某一疾病、症狀或情況得到改善，尤指其嚴重度得到改善，延遲發病，減緩病情進展，或減少病情持續時間。無論固定給藥或臨時給藥、持續給藥或斷續給藥，可以歸因於或與給藥有關的情況。

具體實施方式

以下通過具體實施方式的描述對本發明作進一步說明，但這並非是對本發明的限制。本領域技術人員根據本發明的教導，可以做出各種修改或改迸，而不脫離本發明的基本思想和範圍。本發明中當未提及製備途徑時，相關原料和中間體都採購於商業化試劑(例如購自畢得、藥石等)。

本發明中的縮寫具有以下含義：

縮寫	含義	縮寫	含義
ACN	乙腈	MS	質譜
Ac	乙醯基	NMP	N-甲基吡咯烷酮
Boc	叔丁氧羰基	Oxone	過硫酸氫鉀
DBU	1,8-二氮雜二環[5.4.0]十一碳-7-烯	Pd(dppf)Cl₂	[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀(II)
DCC	N,N'-二環己基碳二亞胺	Pd(dtbpf)Cl₂	1,1'-二(二叔丁基基)二茂鐵二氯化鈀(II)
DCE	1,2-二氯乙烷	Pd(PPh₃)Cl₂	雙(三苯基膦)二氯化鈀
DCM	二氯甲烷	PE	石油醚
DIEA/DIPEA	N,N-二異丙基乙胺	PPh₃	三苯基膦
DMF	N,N-二甲基甲醯胺	Prep-HPLC	製備型高效液相色譜
DMSO-d ₆	氘代二甲基亞碸	Py	吡啶
DPPA	疊氮磷酸二苯酯	Ruphos	2-二環己基磷-2',6'-二異丙氧基-1,1'-聯苯
DPPE	1,2-雙(二苯基膦)乙烷	S-phos	2-二環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯
EA	乙酸乙酯	STAB	三乙醯氧基硼氫化鈉
EEDQ	2-乙氧基-1-乙氧碳醯基-1,2-二氫喹啉	TBAF	四丁基氟化銨
Fmoc	((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基	TBDPSCl	叔丁基二苯基氯矽烷
h	小時	TCEP	三(2-羧乙基)膦
HATU	2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯	TEA	三乙胺
HBTU	苯並三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸鹽	Tf	三氟甲磺醯基
HOAc	乙酸	TFA	三氟乙酸
HOSu	N-羥基丁二醯亞胺	TFAA	三氟乙酸酐
HPLC	高效液相色譜	THF	四氫呋喃
LiHMDS	六甲基矽基氨基鋰	TLC	薄層色譜
m-CPBA	間氯過氧苯甲酸	TMSCl	三甲基氯矽烷
min	分鐘	TSTU	N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽
MeOH	甲醇

在以下實施例中，如無特殊說明，反應溫度為室溫(10-30℃)。

本發明的化合物通過製備TLC、矽膠柱層析、Prep-HPLC和/或矽膠快速柱層析(Flash柱層析)來分離純化，其結構通過¹H NMR和/或MS來確證。反應監測採用TLC或LC-MS進行。

¹H-NMR譜在Bruker儀器上於500 MHz記錄。化學位移值以百萬分率表示，即δ值。以下簡寫用於NMR訊號的多重性：s=單峰，brs=寬峰，d=二重峰，t=三重峰，m=多重峰。耦合常數以J值列出，以Hz測量。LC-MS實驗條件為：儀器：Thermo U3000，ALLtech ELSD，MSQ，UV檢測器結合ELSD和MSD(流出比為4 : 1)。柱：Waters X-Bridge C-18，3.5 µm，4.6x50 mm；柱溫：30^oC。梯度[時間(min)/溶劑B在A中(%)]：0.00/5.0，1.40/95，2.80/95，2.82/5，3.00/5。(溶劑A=0.01%三氟乙酸在水中；溶劑B=0.01%三氟乙酸在乙腈中)。UV檢測：214/254/280/300 nm；DAD檢測：210-350 nm；流速：2 mL/min；MS：ESI，100-1500 m/z。

製備型HPLC通常使用鹼性方法或酸性方法(鹼性方法流動相：乙腈/0.05%碳酸氫銨水溶液，酸性方法流動相：乙腈/0.05%甲酸水溶液)；儀器為Thermo U3000 AFC-3000; 柱：Globalsil C-18 12 nm，250 x 20 mm，10 µm，或相當；流速：20 mL/min，進行梯度洗脫分離。

實施例 1 ：生物活性分子（藥物載荷， payload ）的合成

實施例 1.1：化合物P-1的合成

步驟一：化合物P-1-a的合成

將(2-氯-3-硝基吡啶-4-基)甲醇(500 mg, 2.65 mmol)和(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(901 mg, 2.7 mmol)加入到1,4-二氧六環(5 mL)與水(0.5 mL)中，加入1,1'-二(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II) (97 mg, 132 µmol)和碳酸鉀(1.1 g, 7.95 mmol)。混合物在100℃下攪拌16小時。將反應液冷卻至室溫，加入30 mL乙酸乙酯，經過矽藻土過濾，濾液用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過矽膠柱層析色譜純化(PE/EA=25/75)得到化合物P-1 -a (729 mg, 收率76.5%)。ESI-MS (m/z): 360.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物P-1-b的合成

將化合物P-1 -a (4.7 g, 13.1 mmol)和1,2,2,3,4,4-六甲基膦-1-氧化物(684 mg, 3.9 mmol)溶於乙酸正丁酯(50 mL)，加入苯矽烷(4.25 g, 39.2 mmol)。混合物在110℃下反應16小時。將混合物冷卻至室溫，減壓濃縮，通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物P-1 -b (2.75 g, 收率64.2%)。ESI-MS (m/z): 328.3 [M+H]⁺.

步驟三：化合物P-1-c的合成

將化合物P-1 -b (1.08 g, 3.29 mmol)溶於四氫呋喃(20 mL)，加入1,8-二氮雜二環[5.4.0]十一碳-7-烯(601 mg, 3.95 mmol)和疊氮磷酸二苯酯(1.09 g, 3.95 mmol)。混合物在室溫下攪拌5小時。反應液加入50 mL乙酸乙酯，用水洗一次，5%稀鹽酸洗一次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物P-1 -c (1.1 g, 收率94.9%)。ESI-MS (m/z): 353.3 [M+H]⁺.

步驟四：化合物P-1-d的合成

將化合物P-1 -c(280 mg, 795 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入4 N鹽酸二氧六環溶液(2 mL)。混合物在室溫下攪拌5小時，濃縮得到化合物P-1 -d (229 mg, 收率99.9%)。ESI-MS (m/z): 253.3 [M+H]⁺.

步驟五：化合物P-1-e的合成

將4-氯-2-(甲硫基)-5-(三氟甲基)嘧啶(900 mg, 3.94 mmol)和(R)-2-氨基丁醯胺鹽酸鹽(813 mg, 7.97 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(1.53 g, 11.8 mmol)。混合物在70℃下攪拌2小時。將反應液冷卻至室溫，加入50 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=70/30)得到化合物P-1 -e (1.0 g, 收率86.3%)。ESI-MS (m/z): 295.5 [M+H]⁺.

步驟六：化合物P-1-f的合成

將化合物P-1 -e (277 mg, 941 µmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入間氯過氧苯甲酸(325 mg, 1.88 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液中加入30 mL二氯甲烷，用飽和碳酸氫鈉洗兩次，水洗兩次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化得到化合物P-1 -f (150 mg, 收率48.9%)。ESI-MS (m/z): 327.3 [M+H]⁺.

步驟七：化合物P-1-g的合成

將化合物P-1 -d (92 mg, 366 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(142 mg, 1.10 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物P-1 -f (120 mg, 366 µmol)。混合物在70℃下攪拌2小時。反應液冷卻至室溫，加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=93/7)得到化合物P-1 -g (94 mg, 收率51.4%)。ESI-MS (m/z): 499.4 [M+H]⁺.

步驟八：化合物P-1的合成

將化合物P-1 -g (94 mg, 188 µmol)溶於四氫呋喃(5 mL)，加入三苯基膦(148 mg, 565 µmol)和水(40 µL)。混合物在室溫下攪拌16小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-1 (46 mg, 收率52.4%)。ESI-MS (m/z): 473.4 [M+H]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.39 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.18 – 8.11 (m, 1H), 8.11 – 8.06 (m, 1H), 7.68 – 7.62 (m, 2H), 7.52 – 7.43 (m, 1H), 7.40 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.36 – 7.28 (m, 1H), 7.26 – 7.15 (m, 1H), 6.26 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 4.78 – 4.55 (m, 3H), 4.16 (s, 2H), 2.06 – 1.61 (m, 2H), 0.84 – 0.62 (m, 3H).

實施例 1.2：化合物P-2的合成

步驟一：化合物P-2-a的合成

將(R)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-2-環丙基乙酸(200 mg, 929 µmol)，N,N-二異丙基乙胺(480 mg, 3.72 mmol)和氯化銨(149 mg, 2.79 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3.0 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(530 mg, 1.39 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。向反應液中加入水(10 mL)，用乙酸乙酯(20 mL)萃取三次，合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過快速柱層析色譜純化(DCM/MeOH=98/2)得到化合物P-2-a(160 mg, 收率80.4%)。

步驟二：化合物P-2-b的合成

將化合物P-2-a(160 mg, 746 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入4 N鹽酸二氧六環溶液(1 mL)。反應液在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物P-2-b(112 mg, 收率99.6%)。

步驟三：化合物P-2-c的合成

將化合物P-2-b(100 mg, 664 µmol)和4-氯-2-(甲硫基)-5-(三氟甲基)嘧啶(152 mg, 664 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(257 mg, 1.99 mmol)。混合物在70℃下攪拌2小時。將反應液冷卻至室溫，加入水(10 mL)，用乙酸乙酯(20 mL)萃取三次，合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過快速柱層析色譜純化(PE/EA=70/30)得到化合物P-2-c(154 mg, 收率75.7%)。ESI-MS (m/z): 307.3 [M+H]⁺.

步驟四：化合物P-2-d的合成

將化合物P-2-c (154 mg, 503 µmol)溶於二氯甲烷(3 mL)，加入間氯過氧苯甲酸(174 mg, 1.01 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液中加入20 mL二氯甲烷，用飽和碳酸氫鈉洗兩次，水洗兩次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到粗產品化合物P-2-d (140 mg)。ESI-MS (m/z): 339.3 [M+H]⁺.

步驟五：化合物P-2-e的合成

將化合物P-2-d (96 mg, 284 µmol)和化合物P-1-d (72 mg, 284 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(110 mg, 852 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入水(10 mL)，用乙酸乙酯(20 mL)萃取三次，合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過快速柱層析色譜純化(PE/EA=50/50)得到化合物P-2-e(45 mg, 收率31.0%)。ESI-MS (m/z): 511.5 [M+H]⁺.\

步驟六：化合物P-2的合成

將化合物P-2-e (45 mg, 88 µmol)溶於四氫呋喃(3 mL)，加入三苯基膦(69.4 mg, 264 µmol)和水(0.1 mL)。混合物在室溫下攪拌16小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-2 (15 mg, 收率35.1%)。ESI-MS (m/z): 485.7 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.39 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 8.16 – 7.81 (m, 3H), 7.63 – 7.42 (m, 2H), 7.40 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.33 – 7.13 (m, 2H), 6.27 – 6.13 (m, 1H), 4.82 – 4.51 (m, 2H), 4.32 – 4.10 (m, 3H), 1.31 – 0.91 (m, 1H), 0.64 – 0.09 (m, 4H).

實施例 1.3- 實施例 1.9：

使用實施例1.2相同的方法和反應條件，分別用(叔丁氧羰基)-D-纈氨酸，(R)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-2-環戊基乙酸，(R)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-環丙基丙酸，(R)-2-((叔丁氧羰基)氨基)戊酸，(R)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3,3-二甲基丁酸，(R)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-2-環丁基乙酸，N-(叔丁氧羰基)-O-甲基-D-蘇氨酸代替(R)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-2-環丙基乙酸作為起始原料，得到下表中的目標產物。

化合物	結構	ESI-MS (m/z): [M+H]⁺.	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆)
P-3		487.6	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.77 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 8.24 – 7.82 (m, 3H), 7.77 – 7.50 (m, 3H), 7.37 – 7.21 (m, 2H), 6.12 – 5.85 (m, 2H), 5.13 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 4.84 – 4.50 (m, 3H), 2.06 – 1.94 (m, 1H), 0.98 – 0.63 (m, 6H).
P-4		513.7	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.44 – 8.32 (m, 1H), 8.18 – 7.99 (m, 3H), 7.59 – 7.42 (m, 2H), 7.38 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.25 – 7.12 (m, 2H), 6.27 – 5.84 (m, 1H), 4.99 – 4.39 (m, 4H), 4.07 (s, 2H), 1.72 – 0.87 (m, 9H).
P-5		499.7	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.46 – 8.28 (m, 1H), 8.21 – 7.86 (m, 3H), 7.58 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.38 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.32 – 7.13 (m, 2H), 6.38 – 6.20 (m, 1H), 4.83 – 4.46 (m, 3H), 4.09 (s, 2H), 1.86 – 1.45 (m, 2H), 0.71 – 0.05 (m, 4H), -0.18 – -0.29 (m, 1H).
P-6		487.6	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.45 – 8.28 (m, 1H), 8.24 – 7.80 (m, 3H), 7.64 – 7.43 (m, 2H), 7.38 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 7.32 – 7.07 (m, 2H), 6.33 – 6.16 (m, 1H), 4.88 – 4.40 (m, 3H), 4.09 (s, 2H), 1.99 – 0.77 (m, 7H).
P-7		501.5	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.37 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.20 – 7.55 (m, 4H), 7.51 – 7.41 (m, 1H), 7.38 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 7.32 – 7.08 (m, 2H), 5.98 – 5.64 (m, 1H), 5.00 – 4.42 (m, 3H), 4.07 (s, 2H), 1.06 – 0.70 (m, 9H).
P-8		499.3	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.42 – 8.26 (m, 1H), 8.19 – 7.79 (m, 3H), 7.65 – 7.34 (m, 3H), 7.30 – 7.08 (m, 2H), 6.21 – 5.95 (m, 1H), 4.90 – 3.86 (m, 5H), 2.80 – 2.54 (m, 1H), 2.03 – 1.39 (m, 6H).
P-9		503.3	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.41 – 8.37 (m, 1H), 8.21 – 7.91 (m, 3H), 7.48 – 7.30 (m, 4H), 7.24 – 7.11 (m, 1H), 6.04 – 5.93 (m, 1H), 4.77 – 4.60 (m, 3H), 4.18 – 4.11 (m, 2H), 3.82 – 3.77 (m, 1H), 3.17 – 3.13 (m, 3H), 1.10 – 0.91 (m, 3H).

實施例 1.10：化合物P-10的合成

步驟一：化合物P-10-a的合成

將4-氯-2-(甲硫基)-5-(三氟甲基)嘧啶(1 g, 4.37 mmol)和(2R,3R)-3-氨基丁-2-醇鹽酸鹽(549 mg, 4.37 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(1.70 g, 13.1 mmol)。混合物在60℃下攪拌16小時。將反應液冷卻至室溫，加入50 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=80/20)得到化合物P-10 -a (700 mg, 收率56.9%)。ESI-MS (m/z): 282.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物P-10-b的合成

將化合物P-10 -a (630 mg, 2.24 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入間氯過氧苯甲酸(773 mg, 4.48 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液中加入二氯甲烷(20 mL)，用飽和碳酸氫鈉溶液洗一次，水洗一次，乾燥，濃縮得到粗產品化合物P-10 -b (701 mg, 收率99.9%)。ESI-MS (m/z): 314.3 [M+H]⁺.

步驟三：化合物P-10-c的合成

將化合物P-1-d (200 mg, 792 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(307 mg, 2.38 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物P-10-b (248 mg, 793 µmol)。混合物在80℃下攪拌2小時。反應液冷卻至室溫，加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物P-10-c (280 mg, 收率72.8%)。ESI-MS (m/z): 486.6 [M+H]⁺.

步驟四：化合物P-10的合成

將化合物P-10-c(39 mg, 80 µmol)溶於四氫呋喃(2 mL)，加入三苯基膦(63 mg, 241 µmol)和水(40 µL)。混合物在室溫下攪拌16小時。濃縮反應液，濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-10(32 mg, 收率87%)。ESI-MS (m/z): 460.3 [M+H]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.36 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 8.10 (br.s, 1H), 8.08 – 8.02 (m, 2H), 7.45 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.23 – 7.11 (m, 1H), 5.75 – 5.65 (m, 1H), 5.04 (br.s, 1H), 4.73 – 4.52 (m, 2H), 4.15 – 3.96 (m, 3H), 3.78 – 3.57 (m, 1H), 1.48 – 0.78 (m, 6H).

實施例 1.11：化合物P-11的合成

步驟一：化合物P-11-a的合成

將6-溴-1H-吲唑-3-胺(2 g, 9.43 mmol)和4-((叔丁基二甲基矽氧基)丁-2-炔醛(6.2 g, 31.3 mmol)溶於乙腈(60 mL)，加入冰醋酸(566 mg, 9.43 mmol)和三氟乙酸銀(625 mg, 2.83 mmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。加入80 mL乙酸乙酯和50 mL水，經矽藻土過濾，分液，有機相用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜(PE/EA=50/50)純化得到化合物P-11-a (700 mg, 收率18.9%)。ESI-MS (m/z): 392.4 [M+H]⁺.

步驟二：化合物P-11-b的合成

將化合物P-11-a (700 mg, 1.78 mmol)和((叔丁氧羰基氨基)甲基)三氟硼酸鉀(383 mg, 1.62 mmol)溶於1,4-二氧六環(6 mL)和水(1 mL)的混合物，加入二環己基(2',6'-二甲氧基-(1,1'-聯苯)-2-基)膦(73 mg, 178 µmol)，碳酸鉀(740 mg, 5.35 mmol)和醋酸鈀(40 mg, 178 µmol)。混合物在氮氣保護下90℃攪拌16小時。將反應液冷卻至室溫，加入50 mL乙酸乙酯和30 mL水，經矽藻土過濾，分液，有機相用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=50/50)得到化合物P-11-b (400 mg, 收率18.9%)。ESI-MS (m/z): 443.4 [M+H]⁺.

步驟三：化合物P-11-c的合成

將化合物P-11-b (90 mg, 203 µmol)溶於甲醇(1 mL)和二氯甲烷(5 mL)的混合物，加入4 N鹽酸二氧六環溶液(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物P-11-c (53 mg, 收率98.5%)。ESI-MS (m/z): 229.4 [M+H]⁺.

步驟四：化合物P-11的合成

將化合物P-11-c (10 mg, 38 µmol)和化合物P-1-f (12 mg, 38 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(24.4 mg, 189 µmol)。混合物在80℃下攪拌6小時。將反應液冷卻至室溫後，通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-11 (3 mg, 收率16.7%)。ESI-MS (m/z): 475.4 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.82 – 8.52 (m, 1H), 8.26 – 7.88 (m, 3H), 7.77 – 7.52 (m, 3H), 7.40 – 7.23 (m, 2H), 6.33 – 6.20 (m, 1H), 5.17 – 5.07 (m, 2H), 4.81 – 4.53 (m, 3H), 1.79 – 1.63 (m, 2H), 0.79 – 0.64 (m, 3H).

實施例 1.12：化合物P-12的合成

步驟一：化合物P-12-a的合成

將化合物P-1-b (1.1 g, 3.36 mmol)溶於甲醇(3 mL)和二氯甲烷(15 mL)的混合物，加入4 N鹽酸二氧六環溶液(5 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物P-12-a (884 mg, 收率100%)。ESI-MS (m/z): 228.4 [M+H]⁺.

步驟二：化合物P-12的合成

將化合物P-12-a (200 mg, 758 µmol)和化合物P-1 -f (247 mg, 758 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(294 mg, 2.28 mmol)。混合物在80℃下攪拌6小時。將反應液冷卻至室溫後，反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-12 (152 mg, 收率42.3%)。ESI-MS (m/z): 474.4 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.33 (s, 1H), 8.52 – 8.41 (m, 1H), 8.31 – 8.12 (m, 3H), 7.75 – 7.24 (m, 5H), 6.44 – 6.27 (m, 1H), 5.73 – 5.53 (m, 1H), 5.01 – 4.92 (m, 2H), 4.84 – 4.63 (m, 3H), 2.01 – 1.67 (m, 2H), 0.91 – 0.71 (m, 3H).

實施例 1.13：化合物P-13的合成

步驟一：化合物P-13的合成

將化合物P-12-a (150 mg, 568 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(220 mg, 1.71 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入化合物P-10-b (169 mg, 568 µmol)。混合物在50℃下攪拌6小時。反應液冷卻至室溫，加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物P-13 (102 mg, 收率39%)。ESI-MS (m/z): 461.4 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.25 (s, 1H), 8.39 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 8.17 – 7.89 (m, 3H), 7.51 – 7.44 (m, 1H), 7.40 – 7.32 (m, 1H), 7.24 – 7.13 (m, 1H), 5.80 – 5.63 (m, 1H), 5.62 – 5.46 (m, 1H), 5.11 – 4.94 (m, 1H), 4.94 – 4.84 (m, 2H), 4.74 – 4.55 (m, 2H), 4.17 – 3.99 (m, 1H), 3.83 – 3.57 (m, 1H), 1.21 – 0.86 (m, 6H).

實施例 1.14：化合物P-14的合成

步驟一：化合物P-14的合成

將化合物P-11-c (73 mg, 242 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(94 mg, 726 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入化合物P-10-b (80 mg, 242 µmol)。混合物在50℃下攪拌6小時。反應液冷卻至室溫，加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物P-14 (40 mg, 收率36%)。ESI-MS (m/z): 462.4 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.79 – 8.75 (m, 1H), 8.22 – 8.18 (m, 1H), 8.16 – 7.93 (m, 2H), 7.71 – 7.62 (m, 1H), 7.56 – 7.53 (m, 1H), 7.33 – 7.25 (m, 1H), 6.14 – 6.05 (m, 1H), 5.78 – 5.65 (m, 1H), 5.16 – 5.10 (m, 2H), 5.07 – 4.94 (m, 1H), 4.73 – 4.57 (m, 2H), 4.16 – 3.99 (m, 1H), 3.77 – 3.60 (m, 1H), 1.08 – 0.88 (m, 6H).

實施例 1.15：化合物P-15的合成

步驟一：化合物P-15-a的合成

將N-(叔丁氧羰基)-O-甲基-D-蘇氨酸(620 mg, 2.66 mmol)，氯化銨(284 mg, 5.32 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(1.37 g, 10.6 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(1.52 g, 3.99 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入30 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=10/90)得到化合物P-15-a (600 mg, 收率97%)。

步驟二：化合物P-15-b的合成

將化合物P-15-a (600 mg, 2.58 mmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入三氟乙酸(2 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物P-15-b (630 mg, 收率99%)。

步驟三：化合物P-15-c的合成

將4-氯-2-(甲硫基)-5-(三氟甲基)嘧啶(470 mg, 2.06 mmol)和化合物P-15-b (630 mg, 2.57 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(1.33 g, 10.3 mmol)。混合物在70℃下攪拌2小時。將反應液冷卻至室溫，加入50 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=60/40)得到化合物P-15 -c (414 mg, 收率50%)。ESI-MS (m/z): 325.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物P-15-d的合成

將化合物P-15 -c (320 mg, 986 µmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入間氯過氧苯甲酸(340 mg, 1.97 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液中加入30 mL二氯甲烷，用飽和碳酸氫鈉洗兩次，水洗兩次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到粗產品化合物P-15 -d (340 mg)。ESI-MS (m/z): 357.3 [M+H]⁺.

步驟五：化合物P-15的合成

將化合物P-11 -c (50 mg, 219 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(142 mg, 1.10 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物P-15 -d (82 mg, 230 µmol)。混合物在80℃下攪拌6小時。反應液冷卻至室溫，加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物P-15 (84 mg, 收率76%)。ESI-MS (m/z): 505.4 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.81 – 8.75 (m, 1H), 8.25 – 7.96 (m, 3H), 7.75 – 7.62 (m, 1H), 7.58 – 7.53 (m, 1H), 7.45 – 7.26 (m, 3H), 6.19 – 5.91 (m, 2H), 5.19 – 5.07 (m, 2H), 4.82 – 4.60 (m, 3H), 3.96 – 3.75 (m, 1H), 3.20 – 3.10 (m, 3H), 1.11 – 0.91 (m, 3H).

實施例 1.16：化合物P-16的合成

步驟一：化合物P-16的合成

將化合物P-12 -a (30 mg, 100 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(65 mg, 500 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物P-15 -d (34 mg, 100 µmol)。混合物在80℃下攪拌6小時。反應液冷卻至室溫，加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物P-16 (15 mg, 收率30%)。ESI-MS (m/z): 504.2 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.23 (s, 1H), 8.39 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.25 – 7.89 (m, 3H), 7.51 – 7.30 (m, 4H), 7.25 – 7.12 (m, 1H), 6.05 – 5.88 (m, 1H), 5.54 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.88 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 4.76 – 4.48 (m, 3H), 3.95 – 3.66 (m, 1H), 3.33 – 3.14 (m, 3H), 1.10 – 0.84 (m, 3H).

實施例 1.17：化合物P-17的合成

步驟一：化合物P-17-a的合成

將(6-溴吡啶-2-基)甲醇(200 mg, 1.06 mmol)和(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(425 mg, 1.28 mmol)溶於1,4-二氧六環(5 mL)與水(0.5 mL)的混合物，加入1,1'-二(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II) (78 mg, 106 µmol)和碳酸鉀(367 mg, 2.66 mmol)。混合物在100℃下攪拌16小時。將反應液冷卻至室溫，加入30 mL乙酸乙酯，經過矽藻土過濾，濾液用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過矽膠柱層析色譜純化(PE/EA=25/75)得到化合物P-17 -a (300 mg, 收率89.7%)。ESI-MS (m/z): 315.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物P-17-b的合成

將化合物P-17 -a (300 mg, 954 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入4 N鹽酸二氧六環溶液(2 mL)。混合物在室溫下攪拌3小時，濃縮得到化合物P-17 -b (200 mg, 收率97.8%)。ESI-MS (m/z): 215.3 [M+H]⁺.

步驟三：化合物P-17的合成

將化合物P-17 -b (30 mg, 119 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(75 mg, 598 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物P-15 -d (41 mg, 119 µmol)。混合物在80℃下攪拌6小時。反應液冷卻至室溫，加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物P-17 (18 mg, 收率31%)。ESI-MS (m/z): 491.4 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.18 – 7.97 (m, 4H), 7.86 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.46 – 7.33 (m, 5H), 6.00 – 5.90 (m, 1H), 5.49 – 5.42 (m, 1H), 4.68 – 4.46 (m, 5H), 3.94 – 3.79 (m, 1H), 3.33 – 3.20 (m, 3H), 1.10 – 0.96 (m, 3H).

實施例 1.18：化合物P-18的合成

步驟一：化合物P-18-a的合成

將(2-溴吡啶-4-基)甲醇(1 g, 5.32 mmol)和(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(2.13 g, 6.38 mmol)溶於1,4-二氧六環(10 mL)與水(1 mL)的混合物，加入1,1'-二(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II) (389 mg, 532 µmol)和碳酸鉀(1.84 g, 13.3 mmol)。混合物在100℃下攪拌16小時。將反應液冷卻至室溫，加入30 mL乙酸乙酯，經過矽藻土過濾，濾液用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過矽膠柱層析色譜純化(PE/EA=25/75)得到化合物P-18 -a (1.5 g, 收率90%)。ESI-MS (m/z): 315.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物P-18-b的合成

將化合物P-18 -a (300 mg, 954 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入4 N鹽酸二氧六環溶液(2 mL)。混合物在室溫下攪拌5小時，濃縮得到化合物P- 18-b (200 mg, 收率97.8%)。ESI-MS (m/z): 215.3 [M+H]⁺.

步驟三：化合物P-18的合成

將化合物P-18 -b (175 mg, 490 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(181 mg, 1.4 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物P-15 -d (100 mg, 466 µmol)。混合物在50℃下攪拌6小時。反應液冷卻至室溫，加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物P-18 (206 mg, 收率90%)。ESI-MS (m/z): 491.4 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.57 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.19 – 7.96 (m, 4H), 7.84 (s, 1H), 7.48 – 7.32 (m, 4H), 7.28 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 5.96 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 5.50 (s, 1H), 4.72 – 4.43 (m, 5H), 3.93 – 3.72 (m, 1H), 3.33 – 3.18 (m, 3H), 1.10 – 0.91 (m, 3H).

實施例 1.19：化合物P-19的合成

步驟一：化合物P-19-a的合成

將2-氯-6-(羥甲基)吡啶-4-甲腈(182 mg, 1.08 mmol)和(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(432 mg, 1.30 mmol)溶於1,4-二氧六環(5 mL)與水(0.5 mL)的混合物，加入1,1'-二(二叔丁基基)二茂鐵二氯化鈀(II) (78 mg, 106 µmol)和碳酸銫(1.06 g, 3.24 mmol)。混合物在100℃下攪拌16小時。將反應液冷卻至室溫，加入30 mL乙酸乙酯，經過矽藻土過濾，濾液用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過矽膠柱層析色譜純化(PE/EA=60/40)得到化合物P-19 -a (238 mg, 收率65%)。ESI-MS (m/z): 340.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物P-19-b的合成

將化合物P-19 -a (30 mg, 88 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入4 N鹽酸二氧六環溶液(1 mL)。混合物在室溫下攪拌5小時，濃縮得到化合物P-19 -b (25 mg, 收率100%)。ESI-MS (m/z): 240.3 [M+H]⁺.

步驟三：化合物P-19的合成

將化合物P-19 -b (25 mg, 104 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(32 mg, 250 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物P-15 -d (43 mg, 125 µmol)。混合物在80℃下攪拌6小時。反應液冷卻至室溫，加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-19 (12 mg, 收率19%)。ESI-MS (m/z): 516.6 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.31 (s, 1H), 8.19 – 7.83 (m, 4H), 7.72 (s, 1H), 7.49 – 7.28 (m, 4H), 5.96 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 5.69 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 4.68 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 4.67 – 4.46 (m, 3H), 3.94 – 3.75 (m, 1H), 3.27 (s, 3H), 1.08 – 0.94 (m, 3H).

實施例 1.20：化合物P-20的合成

步驟一：化合物P-20-a的合成

將4-氯-2-(甲硫基)-5-(三氟甲基)嘧啶(105 mg, 459 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)，加入(3R,4S)-3-氨基-4-羥基哌啶-1-甲酸叔丁酯(99 mg, 459 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(178 mg, 1.38 mmol)。混合物在50℃下攪拌過夜。反應液中加入水(10 mL)，用乙酸乙酯(10 mL)萃取三次。合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=60/40)得到化合物P-20-a (180 mg, 收率95.9%)。ESI-MS (m/z): 409.3 [M+H]⁺.

步驟二：化合物P-20-b的合成

將化合物P-20 -a (154 mg, 503 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入間氯過氧苯甲酸(152 mg, 881 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液中加入飽和碳酸氫鈉(10 mL)，用乙酸乙酯(10 mL)萃取三次。合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮得到粗產品化合物P-20 -b (190 mg)。ESI-MS (m/z): 441.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物P-20-c的合成

將化合物P-12 -a (50 mg, 220 µmol)和粗產品化合物P-20 -b (97 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(85.3 mg, 660 µmol)。混合物在室溫下攪拌過夜。將反應液通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=98/2)得到化合物P-20 -c (95 mg, 收率73.5%)。ESI-MS (m/z): 588.4 [M+H]⁺.

步驟四：化合物P-20的合成

將化合物P-20 -c (95 mg, 161 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-20(35 mg, 收率44.4%)。ESI-MS (m/z): 488.7 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.25 (s, 1H), 8.42 – 8.35 (m, 1H), 8.19 – 7.95 (m, 3H), 7.53 – 7.42 (m, 1H), 7.39 – 7.32 (m, 1H), 7.25 – 7.15 (m, 1H), 5.81 – 5.67 (m, 1H), 5.59 – 5.48 (m, 1H), 5.13 – 4.81 (m, 3H), 4.71 – 4.56 (m, 2H), 4.19 – 4.00 (m, 1H), 3.89 – 3.73 (m, 1H), 2.86 – 2.66 (m, 2H), 2.58 – 2.51 (m, 2H), 1.64 – 1.51 (m, 2H).

實施例 1.21：化合物P-21的合成

步驟一：化合物P-21-a的合成

將化合物P-18 -b (47 mg, 219 µmol)和化合物P-20 -b (97 mg, 219 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(85 mg, 658 µmol)。混合物在室溫下攪拌過夜。將反應液通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=98/2)得到化合物P-21 -a (118 mg, 收率93.6%)。ESI-MS (m/z): 575.8 [M+H]⁺.

步驟二：化合物P-21的合成

將化合物P-21 -a (118 mg, 205 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌1小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-21(40 mg, 收率41.0%)。ESI-MS (m/z): 475.7 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.59 – 8.53 (m, 1H), 8.15 – 8.06 (m, 1H), 8.05 – 7.88 (m, 3H), 7.86 – 7.81 (m, 1H), 7.48 – 7.36 (m, 2H), 7.29 – 7.25 (m, 1H), 5.79 – 5.64 (m, 1H), 5.54 – 5.44 (m, 1H), 5.17 – 4.98 (m, 1H), 4.62 – 4.58 (m, 2H), 4.57 – 4.40 (m, 2H), 4.16 – 4.02 (m, 1H), 3.87 – 3.76 (m, 1H), 2.83 – 2.67 (m, 2H), 2.58 – 2.51 (m, 2H), 1.67 – 1.53 (m, 2H).

實施例 1.22：化合物P-22的合成

步驟一：化合物P-22-a的合成

將化合物P-1-b (1 g, 3.05 mmol)溶於二氯甲烷(30 mL)，冰浴下加入戴斯-馬丁試劑(1.43 g, 3.36 mmol)。混合物緩慢升至室溫，在室溫下攪拌過夜。在反應液中加入飽和碳酸氫鈉(20 mL)，減壓除去二氯甲烷，殘留物用乙酸乙酯(30 mL)萃取三次。合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮得到粗產品化合物P-22-a (1 g)。ESI-MS (m/z): 326.8 [M+H]⁺.

步驟二：化合物P-22-b的合成

將粗產品化合物P-22 -a (1 g)溶於95%乙醇(20 mL)，加入乙酸鈉(756 mg, 9.22 mmol)和鹽酸羥胺(320 mg, 4.61 mmol)。混合物在室溫下攪拌4小時。濃縮反應液，殘留物加入水(30 mL)，用乙酸乙酯(30 mL)萃取三次。合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮得到粗產品化合物P-22-b (1.05 g)。ESI-MS (m/z): 341.7 [M+H]⁺.

步驟三：化合物P-22-c的合成

將粗產品化合物P-22-b (1.05 g)溶於吡啶(10 mL)，冰浴下緩慢加入三氟乙酸酐(2.57 g, 12.2 mmol)。混合物緩慢升至室溫，在室溫下攪拌4小時。在反應液中加入甲醇(5 mL)，室溫下攪拌1小時。濃縮反應液，殘留物加入水(30 mL)，用乙酸乙酯(30 mL)萃取三次。合併有機相，用飽和檸檬酸溶液洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過快速柱層析色譜純化(PE/EA=50/50)得到化合物P-22 -c (400 mg, 收率40.6%)。ESI-MS (m/z): 323.7 [M+H]⁺.

步驟四：化合物P-22-d的合成

將粗產品化合物P-22 -c (250 mg, 775 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入4 M鹽酸二氧六環溶液(2 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物P-22 -d (229 mg, 收率100%)。ESI-MS (m/z): 223.5 [M+H]⁺.

步驟五：化合物P-22的合成

將化合物P-22 -d (17 mg, 67 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(43 mg, 336 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物P-10 -b (20 mg, 67 µmol)。混合物在50℃下攪拌6小時。反應液冷卻至室溫，加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-22 (10 mg, 收率33%)。ESI-MS (m/z): 456.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.62 – 12.17 (m, 1H), 8.60 – 8.53 (m, 1H), 8.20 – 7.95 (m, 3H), 7.82 – 7.47 (m, 2H), 7.35 – 7.27 (m, 1H), 5.79 – 5.65 (m, 1H), 5.12 – 4.93 (m, 1H), 4.80 – 4.55 (m, 2H), 4.19 – 3.92 (m, 1H), 3.83 – 3.57 (m, 1H), 1.16 – 0.85 (m, 6H).

實施例 1.23：化合物P-23的合成

步驟一：化合物P-23-a的合成

將化合物P-22 -d (28 mg, 112 µmol)和化合物P-20 -b (50 mg, 112 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(44 mg, 337 µmol)。混合物在室溫下攪拌過夜。將反應液通過柱層析色譜純化(PE/EA=30/70)得到化合物P-23 -a (42 mg, 收率64%)。ESI-MS (m/z): 583.4 [M+H]⁺.

步驟二：化合物P-23的合成

將化合物P-23 -a (42 mg, 72 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-23(11 mg, 收率32%)。ESI-MS (m/z): 483.7 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.37 (s, 1H), 8.56 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.25 – 7.95 (m, 3H), 7.79 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.63 – 7.46 (m, 1H), 7.40 – 7.26 (m, 1H), 5.82 – 5.68 (m, 1H), 5.15 – 4.90 (m, 1H), 4.75 – 4.56 (m, 2H), 4.23 – 3.93 (m, 1H), 3.86 – 3.72 (m, 1H), 2.88 – 2.52 (m, 4H), 1.65 – 1.49 (m, 2H).

實施例 1.24：化合物P-24的合成

步驟一：化合物P-24-a的合成

將4-氯-2-(甲硫基)-5-(三氟甲基)嘧啶(1 g, 4.37 mmol)和(2R,3R)-2,3-丁二醇(473 mg, 5.25 mmol)溶於四氫呋喃(10 mL)，加入叔丁醇鉀(589 mg, 5.25 mmol)。混合物在70℃下攪拌2小時。將反應液冷卻至室溫，加入50 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=90/10)得到化合物P-24-a (400 mg, 收率32.4%)。ESI-MS (m/z): 283.1 [M+H]⁺.

步驟二：化合物P-24-b的合成

將化合物P-24-a (400 mg, 1.42 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入間氯過氧苯甲酸(318 mg, 1.84 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=70/30)得到化合物P-24 -b (250 mg, 收率56.1%)。ESI-MS (m/z): 315.3 [M+H]⁺.

步驟三：化合物P-24-c的合成

將化合物P-1 -d (115 mg, 455 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(177 mg, 1.37 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物P-24 -b (136 mg, 455 µmol)。混合物在80℃下攪拌2小時。反應液冷卻至室溫，加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物P-24 -c (68 mg, 收率31%)。ESI-MS (m/z): 487.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物P-24的合成

將化合物P-24 -c (68 mg, 139 µmol)溶於四氫呋喃(5 mL)，加入三苯基膦(110 mg, 419 µmol)和水(30 µL)。混合物在室溫下攪拌16小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-24 (20 mg, 收率31%)。ESI-MS (m/z): 461.4 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.66 – 8.41 (m, 1H), 8.39 – 8.30 (m, 2H), 8.10 – 8.05 (m, 1H), 7.49 – 7.44 (m, 1H), 7.42 – 7.37 (m, 1H), 7.23 – 7.17 (m, 1H), 5.30 – 5.13 (m, 1H), 4.86 – 4.60 (m, 3H), 4.06 (s, 2H), 3.86 – 3.68 (m, 1H), 1.09 – 1.06 (m, 3H), 1.00 – 0.93 (m, 3H).

實施例 1.25：化合物P-25的合成

步驟一：化合物P-25的合成

將N-(叔丁氧羰基)甘氨酸(3.6 mg, 21 µmol)和N-羥基丁二醯亞胺(2.9 mg, 25 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(6 mg, 31 µmol)。混合物在室溫下攪拌0.5小時，加入化合物P-23 (10 mg, 21 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(6 mg, 50 µmol), 混合物在室溫下繼續攪拌2小時。反應液中加入水(5 mL)，二氯甲烷(10 mL)萃取三次，合併有機相，濃縮。將殘留物溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)，混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-25 (3 mg, 收率23%)。ESI-MS (m/z): 540.4 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.53 – 8.45 (m, 1H), 8.25 – 7.98 (m, 3H), 7.75 – 7.68 (m, 1H), 7.53 – 7.43 (m, 1H), 7.29 – 7.20 (m, 1H), 5.72 – 5.57 (m, 1H), 5.45 – 5.27 (m, 1H), 4.82 – 4.04 (m, 3H), 3.96 – 3.37 (m, 5H), 3.12 – 2.69 (m, 2H), 1.63 – 1.44 (m, 2H).

實施例 1.26：化合物P-26的合成

步驟一：化合物P-26的合成

將化合物P-23 (450 mg, 867 µmol)溶於二氯甲烷(10 mL)和甲醇(3 mL)，加入甲醛水溶液(34%水溶液, 213 µL)和冰乙酸(52 mg, 867 µmol)。混合物在室溫下攪拌10分鐘，加入三乙醯氧基硼氫化鈉(919 mg, 4.34 mmol)，之後在室溫下攪拌過夜。反應液中加入飽和碳酸氫鈉(10 mL)，乙酸乙酯(30 mL)萃取三次，合併有機相，濃縮。殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-26 (200 mg, 收率46.5%)。ESI-MS (m/z): 497.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.40 (s, 1H), 8.63 – 8.54 (m, 1H), 8.27 – 8.07 (m, 3H), 7.85 – 7.77 (m, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.39 – 7.27 (m, 1H), 5.81 – 5.67 (m, 1H), 5.16 – 4.55 (m, 3H), 4.32 – 4.07 (m, 1H), 3.84 – 3.63 (m, 1H), 3.29 – 3.18 (m, 2H), 2.36 – 1.87 (m, 5H), 1.74 – 1.41 (m, 2H).

實施例 1.27：化合物P-27的合成

步驟一：化合物P-27的合成

將化合物P-20 (20 mg, 41 µmol)和2-羥基乙酸(3 mg, 41 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(17 mg, 45 µmol)和三乙胺(8.4 mg, 82 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入水(0.1 mL)，直接通過製備液相色譜純化得到化合物P-27 (6.5 mg, 收率29%)。ESI-MS (m/z): 546.3 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.26 – 11.16 (m, 1H), 8.39 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.25 – 7.98 (m, 3H), 7.53 – 7.42 (m, 1H), 7.35 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 7.23 – 7.14 (m, 1H), 5.76 – 5.64 (m, 1H), 5.59 – 5.41 (m, 2H), 4.88 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 4.80 – 4.59 (m, 2H), 4.53 – 4.37 (m, 1H), 4.32 – 4.02 (m, 2H), 4.02 – 3.54 (m, 3H), 3.48 – 3.38 (m, 1H), 3.26 – 3.07 (m, 2H), 1.72 – 1.51 (m, 2H).

實施例 1.28：化合物P-28的合成

步驟一：化合物P-28-a的合成

將化合物P-1 -d (500 mg, 2.2 mmol)和粗產品化合物P-20 -b (1 g)溶於N,N-二甲基甲醯胺(20 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(850 mg, 6.6 mmol)。混合物在室溫下攪拌過夜。將反應液通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=98/2)得到化合物P-28 -a (750 mg, 收率56%)。ESI-MS (m/z): 613.6 [M+H]⁺.

步驟二：化合物P-28-b的合成

將化合物P-28 -a (200 mg, 326 µmol)溶於四氫呋喃(5 mL)，加入三苯基膦(170 mg, 652 µmol)和水(100 µL)。混合物在室溫下攪拌16小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=80/20)得到化合物P-28-b (74 mg, 收率39%)。ESI-MS (m/z): 587.4 [M+H]⁺.

步驟三：化合物P-28的合成

將化合物P-28 -b (18 mg, 30 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-28(10 mg, 收率67%)。ESI-MS (m/z): 487.7 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.41 – 8.37 (m, 1H), 8.27 – 8.25 (m, 1H), 8.21 – 8.05 (m, 3H), 7.53 – 7.43 (m, 1H), 7.40 – 7.38 (m, 1H), 7.26 – 7.15 (m, 1H), 5.80 – 5.72 (m, 1H), 5.32 – 5.04 (m, 1H), 4.74 – 4.57 (m, 2H), 4.18 – 4.08 (m, 3H), 3.80 – 3.77 (m, 1H), 2.89 – 2.57 (m, 4H), 1.70 – 1.55 (m, 2H).

實施例 1.29：化合物P-29的合成

步驟一：化合物P-29-a的合成

將化合物P-28 -a(300 mg, 489 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入4 N鹽酸二氧六環溶液(2 mL)。混合物在室溫下攪拌5小時，濃縮得到化合物P-29 -a (280 mg, 收率100%)。ESI-MS (m/z): 513.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物P-29-b的合成

將化合物P-29 -a(280 mg, 489 µmol)溶於二氯甲烷(3 mL)和甲醇(3 mL)的混合物，加入37%的甲醛水溶液(0.5 mL)，加入三乙醯氧基硼氫化鈉(208 mg, 979 µmol)，混合物在室溫下攪拌2小時。反應液中加入飽和碳酸氫鈉(10 mL)，用乙酸乙酯(10 mL)萃取三次。合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=70/30)得到化合物P-29 -b (217 mg, 收率84%)。ESI-MS (m/z): 527.4 [M+H]⁺.

步驟三：化合物P-29的合成

將化合物P-29 -b (100 mg, 163 µmol)溶於四氫呋喃(5 mL)，加入三苯基膦(90 mg, 326 µmol)和水(50 µL)。混合物在室溫下攪拌16小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-29 (40 mg, 收率34%)。ESI-MS (m/z): 501.4 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.41 (s, 1H), 8.40 – 8.33 (m, 1H), 8.22 – 8.00 (m, 3H), 7.50 – 7.42 (m, 1H), 7.42 – 7.34 (m, 1H), 7.22 – 7.15 (m, 1H), 5.75 – 5.68 (m, 1H), 5.21 – 5.02 (m, 1H), 4.79 – 4.63 (m, 2H), 4.58 – 4.48 (m, 1H), 4.09 – 4.03 (m, 2H), 3.70 – 3.67 (m, 1H), 2.66 – 2.56 (m, 2H), 2.39 – 1.88 (m, 7H), 1.72 – 1.53 (m, 2H).

實施例 1.30：化合物P-30的合成

步驟一：化合物P-30-a的合成

將化合物P-23 (25 mg, 52 µmol)溶於二氯乙烷(3 mL)，加入3-(叔丁基二甲基矽氧基)丙醛(10 mg, 52 µmol)。混合物在室溫下攪拌10分鐘，加入三乙醯氧基硼氫化鈉(92 mg, 434 µmol)，之後在室溫下攪拌過夜。反應液中加入飽和碳酸氫鈉(10 mL)，乙酸乙酯(30 mL)萃取三次，合併有機相，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=98/2)得到化合物P-30-a (30 mg, 收率95%)。ESI-MS (m/z): 655.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物P-30的合成

將化合物P-30 -a (30 mg, 45 µmol)溶於四氫呋喃(2 mL)，加入1 M四丁基氟化銨四氫呋喃溶液(150 µL)。混合物在室溫下攪拌30分鐘。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-30 (15 mg, 收率60%)。ESI-MS (m/z): 541.4 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.41 (s, 1H), 8.56 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 8.28 – 8.07 (m, 3H), 7.80 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.59 – 7.48 (m, 1H), 7.36 – 7.26 (m, 1H), 5.81 – 5.70 (m, 1H), 5.22 – 4.96 (m, 1H), 4.80 – 4.52 (m, 2H), 4.51 – 4.05 (m, 2H), 3.84 – 3.65 (m, 1H), 3.24 – 3.12 (m, 2H), 2.42 – 1.95 (m, 5H), 1.75 – 1.51 (m, 3H), 1.37 – 1.26 (m, 2H).

實施例 1.31：化合物P-31的合成

步驟一：化合物P-31-a的合成

將化合物P-11 -c (25 mg, 109 µmol)和化合物P-20 -b (48 mg, 109 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(44 mg, 337 µmol)。混合物在室溫下攪拌過夜。將反應液通過柱層析色譜純化(PE/EA=30/70)得到化合物P-31 -a (55 mg, 收率85%)。ESI-MS (m/z): 589.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物P-31的合成

將化合物P-31 -a (55 mg, 93 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-31(22 mg, 收率48%)。ESI-MS (m/z): 489.4 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.79 – 8.72 (m, 1H), 8.22 – 7.96 (m, 3H), 7.76 – 7.61 (m, 1H), 7.56 – 7.53 (m, 1H), 7.34 – 7.24 (m, 1H), 6.19 – 5.96 (m, 1H), 5.80 – 5.67 (m, 1H), 5.15 – 4.98 (m, 3H), 4.73 – 4.55 (m, 2H), 4.20 – 3.98 (m, 1H), 3.89 – 3.71 (m, 1H), 2.86 – 2.52 (m, 4H), 2.49 – 2.45 (m, 1H), 1.63 – 1.50 (m, 2H).

實施例 1.32：化合物P-32的合成

步驟一：化合物P-32的合成

將化合物P-20 (15 mg, 31 µmol)溶於二氯甲烷(3 mL)和甲醇(1 mL)，加入甲醛水溶液(34%水溶液, 50 µL)。混合物在室溫下攪拌10分鐘，加入三乙醯氧基硼氫化鈉(33 mg, 153 µmol)，之後在室溫下攪拌過夜。反應液中加入飽和碳酸氫鈉(10 mL)，乙酸乙酯(30 mL)萃取三次，合併有機相，濃縮。殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-32 (9 mg, 收率58%)。ESI-MS (m/z): 502.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.27 (s, 1H), 8.43 – 8.35 (m, 1H), 8.28 – 8.01 (m, 3H), 7.49 – 7.41 (m, 1H), 7.40 – 7.33 (m, 1H), 7.23 – 7.12 (m, 1H), 5.75 – 5.68 (m, 1H), 5.61 – 5.53 (m, 1H), 5.31 – 4.99 (m, 2H), 4.94 – 4.84 (m, 2H), 4.78 – 4.64 (m, 1H), 4.32 – 4.10 (m, 1H), 3.84 – 3.66 (m, 1H), 2.49 – 1.78 (m, 7H), 1.75 – 1.50 (m, 2H).

實施例 1.33：化合物P-33的合成

步驟一：化合物P-33-a的合成

將4-氯-2-(甲硫基)-5-(三氟甲基)嘧啶(100 mg, 437 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)，加入((3R,4R)-4-氨基四氫-2H-吡喃-3-基)氨基甲酸叔丁酯(95 mg, 437 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(170 mg, 1.31 mmol)。混合物在室溫下攪拌過夜。反應液中加入水(10 mL)，用乙酸乙酯(10 mL)萃取三次。合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=60/40)得到化合物P-33-a (170 mg, 收率95%)。ESI-MS (m/z): 409.4 [M+H]⁺.

步驟二：化合物P-33-b的合成

將化合物P-33-a (55 mg, 135 µmol)溶於二氯甲烷(3 mL)，加入間氯過氧苯甲酸(46 mg, 269 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液中加入飽和碳酸氫鈉(10 mL)，用乙酸乙酯(10 mL)萃取三次。合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮得到粗產品化合物P-33- b (58 mg)。ESI-MS (m/z): 441.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物P-33-c的合成

將化合物P-12 -a (30 mg, 132 µmol)和粗產品化合物P-33- b (58 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(51 mg, 396 µmol)。混合物在室溫下攪拌過夜。將反應液通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物P-33-c (59 mg, 收率76%)。ESI-MS (m/z): 588.4 [M+H]⁺.

步驟四：化合物P-33的合成

將化合物P-33 -c (59 mg, 100 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-33(25 mg, 收率51%)。ESI-MS (m/z): 488.4 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.29 – 11.20 (m, 1H), 8.41 – 8.35 (m, 1H), 8.22 – 7.93 (m, 3H), 7.47 – 7.40 (m, 1H), 7.38 – 7.31 (m, 1H), 7.20 – 7.14 (m, 1H), 6.42 – 6.25 (m, 1H), 5.60 – 5.49 (m, 1H), 4.91 – 4.81 (m, 2H), 4.71 – 4.51 (m, 2H), 4.22 – 3.89 (m, 1H), 3.86 – 3.62 (m, 1H), 3.58 – 3.48 (m, 1H), 3.48 – 3.42 (m, 1H), 3.21 – 3.14 (m, 1H), 2.65 – 2.57 (m, 1H), 2.18 – 1.99 (m, 1H), 1.88 – 1.55 (m, 1H), 1.37 – 0.94 (m, 2H).

實施例 1.34：化合物P-34的合成

步驟一：化合物P-34-a的合成

將4-氯-2-(甲硫基)-5-(三氟甲基)嘧啶(127 mg, 554 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)，加入(3S,4R)-4-氨基-3-羥基哌啶-1-甲酸叔丁酯(100 mg, 462 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(178 mg, 1.38 mmol)。混合物在50℃下攪拌過夜。反應液中加入水(10 mL)，用乙酸乙酯(10 mL)萃取三次。合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=70/30)得到化合物P-34-a (180 mg, 收率95%)。ESI-MS (m/z): 409.3 [M+H]⁺.

步驟二：化合物P-34-b的合成

將化合物P-34-a (90 mg, 220 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入間氯過氧苯甲酸(76 mg, 440 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液中加入飽和碳酸氫鈉(10 mL)，用乙酸乙酯(10 mL)萃取三次。合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮得到粗產品化合物P-34 -b (90 mg)。ESI-MS (m/z): 441.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物P-34-c的合成

將化合物P-22 -d (36 mg, 110 µmol)和粗產品化合物P-34- b (40 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(43 mg, 330 µmol)。混合物在室溫下攪拌過夜。將反應液通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=96/4)得到化合物P-34-c (59 mg, 收率92%)。ESI-MS (m/z): 583.4 [M+H]⁺.

步驟四：化合物P-34的合成

將化合物P-34 -c (20 mg, 34 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-34 (12 mg, 收率72%)。ESI-MS (m/z): 483.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.32 (s, 1H), 8.52 – 8.41 (m, 1H), 8.25 – 7.90 (m, 3H), 7.74 – 7.69 (m, 1H), 7.51 – 7.40 (m, 1H), 7.27 – 7.16 (m, 1H), 5.71 – 5.54 (m, 1H), 5.24 – 5.04 (m, 1H), 4.70 – 4.49 (m, 2H), 4.14 – 3.81 (m, 1H), 3.68 – 3.39 (m, 1H), 2.94 – 2.51 (m, 3H), 2.37 – 2.27 (m, 1H), 1.76 – 1.46 (m, 1H), 1.39 – 1.09 (m, 2H).

實施例 1.35：化合物P-35的合成

步驟一：化合物P-35-a的合成

將2-氯-4-甲基-3-硝基吡啶(1.92 g, 11.1 mmol)和(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(4.08 g, 12.2 mmol)加入到1,4-二氧六環(30 mL)與水(5 mL)中，加入1,1'-二(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II) (39 mg, 61 µmol)和碳酸銫(7.98 g, 24.5 mmol)。混合物在100℃下攪拌16小時。將反應液冷卻至室溫，加入乙酸乙酯，經過矽藻土過濾，濾液用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過矽膠柱層析色譜純化(PE/EA=50/50)得到化合物P-35 -a (3.68 g, 收率88%)。ESI-MS (m/z): 344.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物P-35-b的合成

將化合物P-35- a (1 g, 2.9 mmol)和1,2,2,3,4,4-六甲基膦-1-氧化物(174 mg, 1 mmol)溶於乙酸正丁酯(20 mL)，加入苯矽烷(940 mg, 8.7 mmol)。混合物在110℃下反應16小時。將混合物冷卻至室溫，減壓濃縮，通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物P-35-b(453 mg, 收率50%)。ESI-MS (m/z): 312.3 [M+H]⁺.

步驟三：化合物P-35-c的合成

將化合物P-35-b (38 mg, 122 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入4 N鹽酸二氧六環溶液(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物P-35-c (25 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 212.4 [M+H]⁺.

步驟四：化合物P-35-d的合成

將化合物P-35-c (24 mg, 112 µmol)和化合物P-20 -b (50 mg, 112 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(44 mg, 337 µmol)。混合物在室溫下攪拌過夜。將反應液通過柱層析色譜純化(PE/EA=20/80)得到化合物P-35-d (50 mg, 收率78%)。ESI-MS (m/z): 572.4 [M+H]⁺.

步驟五：化合物P-35的合成

將化合物P-35 -d (50 mg, 87 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-35(12 mg, 收率29%)。ESI-MS (m/z): 472.7 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.48 – 11.28 (m, 1H), 8.35 – 8.26 (m, 1H), 8.25 – 7.92 (m, 3H), 7.53 – 7.42 (m, 1H), 7.28 – 7.15 (m, 2H), 5.86 – 5.75 (m, 1H), 5.32 – 5.14 (m, 1H), 4.75 – 4.60 (m, 2H), 4.24 – 4.15 (m, 1H), 3.91 – 3.80 (m, 1H), 2.93 – 2.66 (m, 4H), 2.57 (s, 3H), 2.54 – 2.53 (m, 1H), 1.75 – 1.58 (m, 2H).

實施例 1.36：化合物P-36的合成

步驟一：化合物P-36-a的合成

將4-氯-2-(甲硫基)-5-(三氟甲基)嘧啶(115 mg, 503 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)，加入(3R,4S)-3-氨基-4-羥基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(102 mg, 503 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(195 mg, 1.51 mmol)。混合物在50℃下攪拌過夜。反應液中加入水(10 mL)，用乙酸乙酯(10 mL)萃取三次。合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=70/30)得到化合物P-36-a (190 mg, 收率96%)。ESI-MS (m/z): 394.3 [M+H]⁺.

步驟二：化合物P-36-b的合成

將化合物P-36-a (190 mg, 482 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入間氯過氧苯甲酸(166 mg, 963 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液中加入飽和碳酸氫鈉(10 mL)，用乙酸乙酯(10 mL)萃取三次。合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮得到粗產品化合物P-36 -b (205 mg)。ESI-MS (m/z): 427.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物P-36-c的合成

將化合物P-22 -d (13 mg, 58 µmol)和粗產品化合物P-36- b (25 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(23 mg, 157 µmol)。混合物在室溫下攪拌過夜。反應液中加入水，用乙酸乙酯萃取三次。合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=96/4)得到化合物P-36-c (24 mg, 收率72%)。ESI-MS (m/z): 569.4 [M+H]⁺.

步驟四：化合物P-36的合成

將化合物P-36 -c (24 mg, 42 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-36 (9 mg, 收率46%)。ESI-MS (m/z): 469.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.45 (s, 1H), 8.61 – 8.53 (m, 1H), 8.23 – 7.97 (m, 3H), 7.83 – 7.76 (m, 1H), 7.59 – 7.52 (m, 1H), 7.36 – 7.28 (m, 1H), 7.26 – 7.20 (m, 1H), 6.22 – 5.96 (m, 1H), 5.79 – 5.43 (m, 1H), 4.76 – 4.64 (m, 2H), 4.47 – 4.00 (m, 2H), 3.11 – 3.00 (m, 2H), 2.70 – 2.57 (m, 1H), 2.42 – 2.27 (m, 1H).

實施例 1.37：化合物P-37的合成

步驟一：化合物P-37-a的合成

將化合物P-23 (80 mg, 165 µmol)溶於二氯乙烷(3 mL)，加入甲基（2-氧代乙基）氨基甲酸叔丁酯(29 mg, 165 µmol)。混合物在室溫下攪拌10分鐘，加入三乙醯氧基硼氫化鈉(176 mg, 829 µmol)，之後在室溫下攪拌過夜。反應液中加入飽和碳酸氫鈉(10 mL)，乙酸乙酯(30 mL)萃取三次，合併有機相，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=90/10)得到化合物P-37-a (100 mg, 收率94%)。ESI-MS (m/z): 640.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物P-37的合成

將化合物P-37 -a (100 mg, 156 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-37 (20 mg, 收率24%)。ESI-MS (m/z): 540.4 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.03 (s, 1H), 8.59 – 8.50 (m, 1H), 8.36 – 8.01 (m, 3H), 7.81 – 7.74 (m, 1H), 7.67 – 7.51 (m, 1H), 7.41 – 7.26 (m, 1H), 5.80 – 5.71 (m, 1H), 5.28 – 5.03 (m, 1H), 4.84 – 4.42 (m, 2H), 4.33 – 4.11 (m, 1H), 3.78 – 3.68 (m, 1H), 2.78 – 2.53 (m, 4H), 2.47 – 2.05 (m, 8H), 1.72 – 1.56 (m, 2H).

實施例 1.38：化合物P-38的合成

步驟一：化合物P-38-a的合成

將4-環丙基-1H-吡唑-5-胺(3.58 g, 29 mmol)溶於二氯甲烷(15 mL)，冰浴下緩慢加入異硫氰醯甲酸乙酯(3.85 g, 29.4 mmol)。混合物在室溫下攪拌1小時，過濾反應液。所得固體溶於乙腈(30 mL)，加入碳酸鉀(6.03 g, 43.6 mmol)。混合物在60℃下攪拌3小時。將反應液冷卻至室溫，加入水(60 mL)，用稀鹽酸將pH調至5，攪拌15分鐘，過濾，固體用水洗三次，真空乾燥得到化合物P-38-a (2.4 g, 收率40%)。ESI-MS (m/z): 209.3 [M+H]⁺.

步驟二：化合物P-38-b的合成

將化合物P-38-a (2.4 g, 11.5 mmol)溶於乙醇(25 mL)，冰浴下加入2 M氫氧化鈉溶液(11.5 mL)，混合物在冰浴下攪拌10分鐘，加入碘甲烷(1.72 g, 12.1 mmol)。混合物在室溫下繼續攪拌4小時。濃縮反應液除去乙醇，將剩餘溶液緩慢加入至2 N稀鹽酸和碎冰的混合物中，攪拌10分鐘，過濾，固體用水洗三次，真空乾燥得到化合物P-38-b (2.45 g, 收率96%)。ESI-MS (m/z): 223.3 [M+H]⁺.

步驟三：化合物P-38-c的合成

將化合物P-38-b (1.45 g, 6.52 mmol)溶於三氯氧磷(30 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(2.53 g, 19.5 mmol)。混合物在90℃下攪拌4小時。將反應液冷卻至室溫，濃縮除去大部分三氯氧磷，殘留物緩慢加入至冰水中，用乙酸乙酯萃取三次，合併有機相，水洗一次，食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=85/15)得到化合物P-38-c (1 g, 收率64%)。ESI-MS (m/z): 241.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物P-38-d的合成

將2-(叔丁氧羰基氨基)乙酸(2 g, 11.4 mmol)和1-羥基苯並三唑(2.45 g, 16 mmol)溶於二氯甲烷(40 mL)，加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳醯二亞胺鹽酸鹽(2.63 g, 13.7 mmol)，混合物在室溫下攪拌10分鐘，加入3,4-二氟苯-1,2-二胺(1.65 g, 11.4 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(3.54 g, 27 mmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。向反應液加入二氯甲烷，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到化合物P-38-d (3 g, 收率87%)。ESI-MS (m/z): 302.5 [M+H]⁺.

步驟五：化合物P-38-e的合成

將化合物P-38-d (3 g, 9.96 mmol)溶於冰乙酸(30 mL)。混合物在70℃下攪拌2小時。將反應液冷卻至室溫，濃縮，殘留物用乙酸乙酯溶解，飽和碳酸氫鈉洗一次，水洗一次，食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=35/65)得到化合物P-38-e (2.2 g, 收率78%)。ESI-MS (m/z): 284.5 [M+H]⁺.

步驟六：化合物P-38-f的合成

將化合物P-38-e (2.2 g, 7.77 mmol)溶於二氯甲烷(15 mL)，加入4 N鹽酸二氧六環溶液(5 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物P-38-f(1.42 g, 收率100%)。ESI-MS (m/z): 184.3 [M+H]⁺.

步驟七：化合物P-38-g的合成

將化合物P-38-f (213 mg, 830 µmol)和化合物P-38-c (200 mg, 830 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(537 mg, 4.15 mmol)。混合物在70℃下攪拌3小時。將反應液冷卻至室溫，加入乙酸乙酯，水洗三次，食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=10/90)得到化合物P-38-g (320 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 388.5 [M+H]⁺.

步驟八：化合物P-38-h的合成

將化合物P-38-g(320 mg, 825 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入間氯過氧苯甲酸(286 mg, 1.66 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液中加入20 mL二氯甲烷，用飽和碳酸氫鈉洗兩次，水洗兩次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到粗產品化合物P-38-h (300 mg)。ESI-MS (m/z): 420.5 [M+H]⁺.

步驟九：化合物P-38-i的合成

將化合物P-38-h (300 mg)和哌嗪-1-甲酸叔丁酯(200 mg, 1.07 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(537 mg, 4.15 mmol)。混合物在70℃下攪拌16小時。將反應液冷卻至室溫，加入乙酸乙酯，水洗三次，食鹽水洗一次，乾燥，濃縮得到粗產品化合物P-38-i (375 mg)。ESI-MS (m/z): 526.5 [M+H]⁺.

步驟十：化合物P-38的合成

將粗產品化合物P-38-i (375 mg)溶於二氯甲烷(8 mL)，加入4 N鹽酸二氧六環溶液(3 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-38(200 mg, 收率66%)。ESI-MS (m/z): 426.3 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.48 – 8.08 (m, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.26 – 7.20 (m, 1H), 7.20 – 7.13 (m, 1H), 4.82 (s, 2H), 3.62 – 3.46 (m, 4H), 3.25 – 3.21 (m, 1H), 2.59 – 2.51 (m, 4H), 1.80 – 1.69 (m, 1H), 0.83 – 0.67 (m, 4H).

實施例 1.39：化合物P-39的合成

步驟一：化合物P-39-a的合成

將4-環丙基-1H-吡唑-5-胺(10.8 g, 87.9 mmol)溶於乙醇(75 mL)，加入20%乙醇鈉乙醇溶液(41.3 mL)和丙二酸二乙酯(15.5 g, 96.6 mmol)。混合物在80℃下攪拌16小時。將反應液冷卻至室溫，濃縮除去部分乙醇，加入水(60 mL)，用稀鹽酸將pH調至3，攪拌15分鐘，過濾，固體用水洗三次，真空乾燥得到化合物P-39-a (9.6 g, 收率57%)。ESI-MS (m/z): 192.3 [M+H]⁺.

步驟二：化合物P-39-b的合成

將化合物P-39-a (2 g, 10.4 mmol)溶於三氯氧磷(20 mL)。混合物在100℃下攪拌16小時。將反應液冷卻至室溫，濃縮除去大部分三氯氧磷，殘留物緩慢加入至冰水中，用乙酸乙酯萃取三次，合併有機相，水洗一次，食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=85/15)得到化合物P-39-b(674 mg, 收率28%)。ESI-MS (m/z): 229.6 [M+H]⁺.

步驟三：化合物P-39-c的合成

將化合物P-39-b (150 mg, 658 µmol)和(4-(吡啶-2-基)苯基)甲胺(133 mg, 723 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(255 mg, 1.97 mmol)。混合物在90℃下攪拌2小時。將反應液冷卻至室溫，加入乙酸乙酯，水洗三次，食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=30/70)得到化合物P-39-c (200 mg, 收率80%)。ESI-MS (m/z): 376.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物P-39-d的合成

將化合物P-39-c (347 mg, 923 µmol)溶於四氫呋喃(5 mL)，加入二碳酸二叔丁酯(202 mg, 923 mmol)和4-二甲氨基吡啶(11.29 mg, 92 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。反應液加入乙酸乙酯，水洗三次，食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=50/50)得到化合物P-39-d (191 mg, 收率43%)。ESI-MS (m/z): 476.5 [M+H]⁺.

步驟五：化合物P-39-e的合成

將化合物P-39-d (151 mg, 317 µmol)和(S)-1-叔丁氧羰基-3-氨基吡咯烷(295 mg, 1.59 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(123 mg, 951 µmol)。混合物在120℃微波下攪拌4小時。將反應液冷卻至室溫，加入乙酸乙酯，水洗三次，食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=30/70)得到化合物P-39-e (65 mg, 收率33%)。ESI-MS (m/z): 626.5 [M+H]⁺.

步驟六：化合物P-39的合成

將化合物P-39-e (60 mg, 95 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-39(33 mg, 收率81%)。ESI-MS (m/z): 526.3 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.65 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 8.00 – 7.91 (m, 2H), 7.90 – 7.84 (m, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.44 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.37 – 7.30 (m, 1H), 6.81 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 5.08 (s, 1H), 4.51 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 4.29 – 4.22 (m, 1H), 3.19 – 3.16 (m, 1H), 3.04 – 2.99 (m, 1H), 2.97 – 2.91 (m, 1H), 2.79 – 2.74 (m, 1H), 2.08 – 2.00 (m, 1H), 1.80 – 1.74 (m, 1H), 1.71 – 1.61 (m, 1H), 0.82 – 0.72 (m, 4H).

實施例 1.40：化合物P-40的合成

步驟一：化合物P-40-a的合成

將一甲胺鹽酸鹽(154 mg, 2.28 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(884 mg, 6.84 mmol)，(2S,3R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-3-羥基丁酸(500 mg, 2.28 mmol)和2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(1.3 g, 3.42 mmol)。混合物在室溫下攪拌3小時。反應液加入乙酸乙酯，水洗三次，食鹽水洗一次，乾燥，濃縮得到粗產品化合物LP-40-a (529 mg)。ESI-MS (m/z): 233.3 [M+H]⁺.

步驟二：化合物P-40-b的合成

將粗產品化合物LP-40-a (529 mg)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入4 N鹽酸二氧六環溶液(2 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到粗產品化合物P-40-b(300 mg)。

步驟三：化合物P-40-c的合成

將4-氯-2-(甲硫基)-5-(三氟甲基)嘧啶(470 mg, 2.06 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入粗產品化合物P-40-b(300 mg)和N,N-二異丙基乙胺(797 mg, 6.17 mmol)。混合物在50℃下攪拌過夜。反應液中加入水，用乙酸乙酯萃取三次。合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=70/30)得到化合物P-40-c (510 mg, 收率76%)。ESI-MS (m/z): 325.3 [M+H]⁺.

步驟四：化合物P-40-d的合成

將化合物P-40-c (466 mg, 1.44 mmol)溶於1 M硼烷四氫呋喃溶液(15 mL)，混合物在室溫下攪拌16小時。反應液用甲醇和稀鹽酸淬滅，濃縮得到粗產品化合物P-40-d(457 mg)。ESI-MS (m/z): 311.3 [M+H]⁺.

步驟五：化合物P-40-e的合成

將粗產品化合物P-40-d(457 mg)溶於四氫呋喃(10 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(571 mg, 4.42 mmol)和二碳酸二叔丁酯(482 mg, 2.21 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液中加入水，用乙酸乙酯萃取三次。合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=80/20)得到化合物P-40-e (341 mg, 收率56%)。ESI-MS (m/z): 411.5 [M+H]⁺.

步驟六：化合物P-40-f的合成

將化合物P-40-e (55 mg, 134 µmol)溶於二氯甲烷(3 mL)，加入間氯過氧苯甲酸(46 mg, 268 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液中加入飽和碳酸氫鈉(10 mL)，用乙酸乙酯(10 mL)萃取三次。合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮得到粗產品化合物P-40-f (59 mg)。ESI-MS (m/z): 443.5 [M+H]⁺.

步驟七：化合物P-40-g的合成

將化合物P-22 -d (30 mg, 135 µmol)和粗產品化合物P-40-f (59 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(52 mg, 404 µmol)。混合物在室溫下攪拌過夜。反應液中加入水，用乙酸乙酯萃取三次。合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=96/4)得到化合物P-40-g (78 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 585.4 [M+H]⁺.

步驟八：化合物P-40的合成

將化合物P-40-g (78 mg, 133 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-40 (20 mg, 收率31%)。ESI-MS (m/z): 485.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.40 (s, 1H), 8.58 – 8.53 (m, 1H), 8.28 – 8.05 (m, 3H), 7.82 – 7.77 (m, 1H), 7.56 – 7.49 (m, 1H), 7.35 – 7.29 (m, 1H), 5.87 – 5.77 (m, 2H), 4.79 – 4.52 (m, 2H), 4.29 – 4.17 (m, 1H), 4.03 – 3.78 (m, 1H), 2.94 – 2.82 (m, 1H), 2.76 – 2.64 (m, 1H), 2.47 – 2.07 (m, 3H), 1.08 – 0.74 (m, 3H).

實施例 1.41：

使用實施例1.1相同的方法和反應條件，用(3R,4S)-3-氨基四氫-2H-吡喃-4-醇代替(R)-2-氨基丁醯胺鹽酸鹽作為起始原料，得到下表中的目標產物。

化合物	結構	ESI-MS (m/z): [M+H]⁺.	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆)
P-41		488.3	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.79 – 10.42 (m, 1H), 8.43 – 8.36 (m, 1H), 8.33 – 8.04 (m, 5H), 7.49 – 7.36 (m, 2H), 7.24 – 7.15 (m, 1H), 5.64 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 4.73 – 4.56 (m, 2H), 4.22 – 4.16 (m, 2H), 4.08 – 4.01 (m, 1H), 3.88 – 3.85 (m, 1H), 3.73 – 3.70 (m, 1H), 3.57 – 3.55 (m, 2H), 3.45 – 3.42 (m, 1H), 3.33 – 3.30 (m, 1H), 1.82 – 1.55 (m, 2H).

實施例 1.42：化合物P-42的合成

步驟一：化合物P-42的合成

將化合物P-20 (25 mg, 51 µmol)溶於二氯甲烷(3 mL)和甲醇(1 mL)，加入丙酮(15 mg, 256 µmol)。混合物在室溫下攪拌10分鐘，加入三乙醯氧基硼氫化鈉(87 mg, 410 µmol)，之後在室溫下攪拌過夜。反應液中加入飽和碳酸氫鈉(10 mL)，乙酸乙酯(30 mL)萃取三次，合併有機相，濃縮。殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-42 (4 mg, 收率15%)。ESI-MS (m/z): 530.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.25 – 11.21 (m, 1H), 8.40 – 8.37 (m, 1H), 8.14 – 8.05 (m, 3H), 7.45 (s, 1H), 7.37 – 7.34 (m, 1H), 7.22 – 7.16 (m, 1H), 5.85 – 5.78 (m, 1H), 5.56 – 5.51 (m, 1H), 5.05 – 4.92 (m, 1H), 4.90 – 4.85 (m, 2H), 4.80 – 4.53 (m, 1H), 4.13 – 4.04 (m, 1H), 3.80 – 3.65 (m, 1H), 2.61 – 2.58 (m, 1H), 2.44 – 2.39 (m, 2H), 2.33 – 2.10 (m, 2H), 2.05 – 1.93 (m, 1H), 1.67 – 1.53 (m, 2H), 1.00 – 0.67 (m, 6H).

實施例 1.43：化合物P-43的合成

步驟一：化合物P-43-a的合成

將化合物P-11 -b (500 mg, 1.13 mmol)溶於四氫呋喃(5 mL)，冰浴下加入1 M四丁基氟化銨四氫呋喃溶液(2.3 mL)。混合物在冰浴下攪拌10分鐘，反應液加水淬滅，加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=60/40)得到化合物P-43-a (325 mg, 收率88%)。ESI-MS (m/z): 329.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物P-43-b的合成

將化合物P-43-a(100 mg, 304 µmol)、鄰苯二甲醯亞胺(49 mg, 335 µmol)和三苯基膦(160 mg, 609 µmol)溶於四氫呋喃(5 mL)，加入偶氮二甲酸二異丙酯(123 mg, 609 µmol)。混合物在60℃下攪拌6小時，反應液加水淬滅，加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=60/40)得到化合物P-43-b (113 mg, 收率81%)。ESI-MS (m/z): 458.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物P-43-c的合成

將化合物P-43-b(50 mg, 109 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入4 N鹽酸二氧六環溶液(2 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時，濃縮得到化合物P-43-c (39 mg, 收率100%)。ESI-MS (m/z): 358.3 [M+H]⁺.

步驟四：化合物P-43-d的合成

將化合物P-43-c (39 mg, 109 µmol)和化合物P-20 -b (48 mg, 109 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(44 mg, 337 µmol)。混合物在室溫下攪拌過夜。反應液加水淬滅，加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=60/40)得到化合物P-43-d (60 mg, 收率77%)。ESI-MS (m/z): 718.0 [M+H]⁺.

步驟五：化合物P-43-e的合成

將化合物P-43-d(60 mg, 83.6 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入4 N鹽酸二氧六環溶液(2 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時，濃縮得到化合物P-43-e (51 mg, 收率100%)。ESI-MS (m/z): 618.1 [M+H]⁺.

步驟六：化合物P-43-f的合成

將化合物P-43-e (50 mg, 81 µmol)溶於二氯甲烷(3 mL)和甲醇(3 mL)的混合物，加入37%的甲醛水溶液(0.2 mL)，加入三乙醯氧基硼氫化鈉(172 mg, 809 µmol)，混合物在室溫下攪拌2小時。反應液中加入飽和碳酸氫鈉(10 mL)，用乙酸乙酯(10 mL)萃取三次。合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=90/10)得到化合物P-43-f(29 mg, 收率57%)。ESI-MS (m/z): 632.0 [M+H]⁺.

步驟七：化合物P-43的合成

將化合物P-43-f(15 mg, 24 µmol)溶於無水乙醇(5 mL)，加入80%水合肼(1 mL)。混合物在80℃下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-43 (3 mg, 收率25%)。ESI-MS (m/z): 501.6 [M+H]⁺.

實施例 1.44：化合物P-44的合成

步驟一：化合物P-44的合成

將化合物P-20 (22 mg, 45 µmol)溶於二氯甲烷(3 mL)和甲醇(1 mL)，加入5 M乙醛四氫呋喃溶液(50 µL)。混合物在室溫下攪拌10分鐘，加入三乙醯氧基硼氫化鈉(76 mg, 361 µmol)，之後在室溫下攪拌過夜。反應液中加入飽和碳酸氫鈉溶液(10 mL)，乙酸乙酯(20 mL)萃取三次，合併有機相，濃縮。殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-44 (8 mg, 收率34%)。ESI-MS (m/z): 516.9 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.21 (s, 1H), 8.38 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 8.18 – 8.00 (m, 3H), 7.46 (s, 1H), 7.35 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.21 – 7.14 (m, 1H), 5.75 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 5.52 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 5.13 – 4.99 (m, 1H), 4.87 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 4.79 – 4.53 (m, 2H), 4.33 – 4.06 (m, 1H), 3.83 – 3.67 (m, 1H), 2.46 – 2.39 (m, 2H), 2.34 – 2.20 (m, 2H), 2.13 – 1.94 (m, 2H), 1.70 – 1.52 (m, 2H), 1.02 – 0.69 (m, 3H).

實施例 1.45：化合物P-45的合成

步驟一：化合物P-45的合成

將化合物P-31 (5 mg, 10 µmol)溶於二氯甲烷(3 mL)和甲醇(1 mL)，加入甲醛水溶液(34%水溶液, 50 µL)。混合物在室溫下攪拌10分鐘，加入三乙醯氧基硼氫化鈉(22 mg, 102 µmol)，之後在室溫下攪拌過夜。反應液中加入飽和碳酸氫鈉溶液(10 mL)，乙酸乙酯(30 mL)萃取三次，合併有機相，濃縮。殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物P-45 (3 mg, 收率58%)。ESI-MS (m/z): 502.9 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.77 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 8.24 – 8.17 (m, 2H), 8.12 – 8.04 (m, 1H), 7.70 – 7.61 (m, 1H), 7.54 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 7.33 – 7.25 (m, 1H), 6.09 (s, 1H), 5.78 – 5.64 (m, 1H), 5.20 – 5.01 (m, 3H), 4.80 – 4.50 (m, 2H), 4.33 – 4.11 (m, 1H), 3.87 – 3.61 (m, 1H), 2.34 – 2.21 (m, 2H), 2.19 – 1.96 (m, 4H), 1.75 – 1.53 (m, 2H), 1.49 – 1.26 (m, 1H).

實施例 2 ：連接子 - 藥物綴合物 LP 的合成

實施例 2.1：化合物LP-1的合成

步驟一：化合物LP-1-a的合成

將6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-N-((S)-1-((S)-1-((4-(羥甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)己醯胺(200 mg, 349 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(90 mg, 698 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(212 mg, 698 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物在乙酸乙酯中打漿，過濾得到固體化合物LP-1-a (220 mg, 收率85.4%)。

步驟二：化合物LP-1的合成

將化合物LP-1-a (58 mg, 78 µmol)和化合物P-1 (37 mg, 78 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(20 mg, 156 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-1 (10 mg, 收率11.9%)。ESI-MS (m/z): 1071.2 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.38 (s, 1H), 10.01 (s, 1H), 8.37 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.18 – 8.12 (m, 1H), 8.13 – 8.06 (m, 3H), 8.00 – 7.92 (m, 1H), 7.81 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.67 – 7.56 (m, 3H), 7.51 – 7.43 (m, 1H), 7.36 – 7.17 (m, 5H), 7.00 (s, 2H), 6.30 – 6.24 (m, 1H), 6.03 – 5.96 (m, 1H), 5.42 (s, 2H), 5.00 (s, 2H), 4.77 – 4.54 (m, 5H), 4.43 – 4.35 (m, 1H), 4.23 – 4.16 (m, 1H), 3.39 – 3.35 (m, 2H), 3.04 – 3.00 (m, 1H), 2.96 – 2.92 (m, 1H), 2.22 – 2.08 (m, 2H), 2.04 – 1.90 (m, 2H), 1.87 – 1.76 (m, 1H), 1.75 – 1.56 (m, 3H), 1.53 – 1.42 (m, 5H), 1.40 – 1.33 (m, 1H), 1.21 – 1.14 (m, 2H), 0.87 – 0.81 (m, 6H), 0.71 – 0.64 (m, 2H).

實施例 2.2- 實施例 2.8：

使用實施例2.1相同的方法和反應條件，利用化合物P-2至P-8作為原料代替P-1，得到下表中的目標產物。

化合物	結構	ESI-MS (m/z): [M+H]⁺.	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆)
LP-2		1083.5	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.40 (s, 1H), 10.02 (s, 1H), 8.37 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 8.15 – 7.84 (m, 5H), 7.82 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.63 – 7.42 (m, 4H), 7.33 – 7.15 (m, 5H), 7.00 (s, 2H), 6.27 – 6.17 (m, 1H), 6.06 – 5.97 (m, 1H), 5.42 (s, 2H), 5.00 (s, 2H), 4.79 – 4.34 (m, 6H), 4.26 – 4.15 (m, 2H), 3.40 – 3.35 (m, 2H), 3.06 – 2.88 (m, 3H), 2.24 – 1.93 (m, 4H), 1.65 – 1.34 (m, 8H), 0.87 – 0.84 (m, 3H), 0.83 – 0.80 (m, 3H), 0.59 – 0.14 (m, 4H).
LP-3		1085.4	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.42 (s, 1H), 10.03 (s, 1H), 8.37 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.17 – 7.86 (m, 5H), 7.82 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.66 – 7.52 (m, 3H), 7.50 – 7.42 (m, 1H), 7.33 – 7.17 (m, 5H), 6.99 (s, 2H), 6.09 – 5.97 (m, 2H), 5.42 (s, 2H), 5.00 (s, 2H), 4.83 – 4.50 (m, 6H), 4.47 – 4.33 (m, 2H), 4.25 – 4.13 (m, 2H), 3.04 – 2.93 (m, 3H), 2.21 – 2.13 (m, 2H), 1.74 – 1.55 (m, 3H), 1.52 – 1.44 (m, 5H), 0.93 – 0.87 (m, 2H), 0.87 – 0.71 (m, 12H).
LP-4		1111.5	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.38 (s, 1H), 10.02 (s, 1H), 8.37 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.17 – 7.90 (m, 5H), 7.82 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.62 – 7.43 (m, 4H), 7.33 – 7.16 (m, 5H), 7.00 (s, 2H), 6.16 – 5.98 (m, 2H), 5.42 (s, 2H), 5.00 (s, 2H), 4.85 – 4.16 (m, 9H), 3.38 – 3.35 (m, 2H), 3.04 – 2.92 (m, 3H), 2.67 – 2.56 (m, 1H), 2.22 – 2.09 (m, 3H), 2.01 – 1.93 (m, 1H), 1.69 – 1.25 (m, 14H), 0.87 – 0.81 (m, 6H).
LP-5		1097.6	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.35 (s, 1H), 10.01 (s, 1H), 8.37 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.16 – 7.78 (m, 6H), 7.63 – 7.43 (m, 4H), 7.34 – 7.17 (m, 5H), 7.00 (s, 2H), 6.30 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 5.99 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 5.42 (s, 2H), 5.01 (s, 2H), 4.80 – 4.15 (m, 8H), 3.39 – 3.35 (m, 2H), 3.08 – 2.88 (m, 3H), 2.24 – 2.08 (m, 2H), 2.02 – 1.93 (m, 1H), 1.79 – 1.48 (m, 7H), 1.26 – 1.14 (m, 3H), 0.88 – 0.80 (m, 6H), 0.50 – 0.00 (m, 4H), -0.20 – -0.25 (m, 1H).
LP-6		1085.4	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.38 (s, 1H), 10.02 (s, 1H), 8.37 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.19 – 7.84 (m, 5H), 7.81 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.65 – 7.43 (m, 4H), 7.35 – 7.17 (m, 5H), 7.00 (s, 2H), 6.25 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 6.00 (s, 1H), 5.42 (s, 2H), 5.00 (s, 2H), 4.97 – 4.08 (m, 8H), 3.39 – 3.35 (m, 2H), 3.10 – 2.88 (m, 3H), 2.24 – 2.07 (m, 2H), 2.01 – 1.93 (m, 1H), 1.75 – 1.23 (m, 12H), 1.15 – 0.87 (m, 3H), 0.87 – 0.80 (m, 6H).
LP-7		1099.5	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.35 (s, 1H), 10.01 (s, 1H), 8.37 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.21 – 7.92 (m, 5H), 7.81 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.68 – 7.45 (m, 4H), 7.37 – 7.14 (m, 5H), 7.00 (s, 2H), 6.04 – 5.76 (m, 2H), 5.42 (s, 2H), 5.01 (s, 2H), 4.93 – 4.15 (m, 8H), 3.39 – 3.34 (m, 2H), 3.09 – 2.89 (m, 3H), 2.23 – 2.08 (m, 2H), 2.02 – 1.92 (m, 1H), 1.70 – 1.35 (m, 8H), 0.99 – 0.78 (m, 15H).
LP-8		1097.5	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.42 (d, J = 17.3 Hz, 1H), 10.04 (s, 1H), 8.37 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.19 – 7.85 (m, 5H), 7.83 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.64 – 7.43 (m, 4H), 7.34 – 7.17 (m, 5H), 7.00 (s, 2H), 6.17 – 5.99 (m, 2H), 5.43 (s, 2H), 5.00 (s, 2H), 4.82 – 4.15 (m, 8H), 3.40 – 3.33 (m, 2H), 3.08 – 2.90 (m, 3H), 2.69 – 2.58 (m, 1H), 2.24 – 2.08 (m, 2H), 2.03 – 1.94 (m, 1H), 1.91 – 1.40 (m, 14H), 0.88 – 0.78 (m, 6H).

實施例 2.9：化合物LP-9的合成

步驟一：化合物LP-9-a的合成

將6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-N-((S)-1-((S)-1-((4-(羥甲基)苯基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁烷-2-基)己醯胺(325 mg, 667 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(129 mg, 1 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(406 mg, 1.34 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過反相柱層析色譜純化(水/乙腈=40/60)得到化合物LP-9-a (200 mg, 收率45.9%)。ESI-MS (m/z): 652.3 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-9的合成

將化合物P-1 (10 mg, 21 µmol)和化合物LP-9-a (14 mg, 21 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(8 mg, 61 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-9 (5 mg, 收率24%)。ESI-MS (m/z): 985.5 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.46 – 11.34 (m, 1H), 9.96 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.21 – 8.06 (m, 4H), 8.00 – 7.88 (m, 1H), 7.82 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.59 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.52 – 7.42 (m, 1H), 7.35 – 7.17 (m, 5H), 7.00 (s, 2H), 6.26 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.76 – 4.55 (m, 5H), 4.43 – 4.35 (m, 1H), 4.21 – 4.13 (m, 1H), 3.36 (s, 2H), 2.20 – 2.08 (m, 2H), 2.00 – 1.92 (m, 1H), 1.87 – 1.76 (m, 1H), 1.72 – 1.61 (m, 1H), 1.52 – 1.42 (m, 4H), 1.33 – 1.28 (m, 3H), 1.26 – 1.11 (m, 2H), 0.90 – 0.77 (m, 7H), 0.69 – 0.64 (m, 2H).

實施例 2.10：化合物LP-10的合成

步驟一：化合物LP-10的合成

將(6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基)甘氨醯甘氨醯-L-苯丙氨醯甘氨酸(13 mg, 25 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N-羥基丁二醯亞胺(2.9 mg, 25 µmol)，3-(3-二甲基氨基丙基)-1-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(4.9 mg, 25 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。向反應液中加入將化合物P-1 (10 mg, 21 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(2.6 mg, 25 µmol)，混合物在室溫下繼續攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-10 (5 mg, 收率24%)。ESI-MS (m/z): 984.5 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.38 (s, 1H), 8.46 – 8.39 (m, 1H), 8.36 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.16 – 8.03 (m, 5H), 7.64 (s, 1H), 7.54 – 7.44 (m, 1H), 7.35 – 7.27 (m, 1H), 7.26 – 7.13 (m, 9H), 6.98 (s, 2H), 6.26 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 4.73 – 4.68 (m, 1H), 4.65 – 4.57 (m, 4H), 4.53 – 4.47 (m, 1H), 3.82 – 3.63 (m, 8H), 3.38 – 3.31 (m, 2H), 3.09 – 3.05 (m, 1H), 2.86 – 2.80 (m, 1H), 2.12 – 2.07 (m, 2H), 1.50 – 1.42 (m, 4H), 1.22 – 1.11 (m, 2H), 0.83 – 0.77 (m, 1H), 0.69 – 0.64 (m, 2H).

實施例 2.11：化合物LP-11的合成

步驟一：化合物LP-11-a的合成

將3-(2-氨基乙氧基)丙酸叔丁酯(1 g, 5.28 mmol)和馬來酸酐(622 mg, 6.34 mmol)溶於冰乙酸(20 mL)。混合物在100℃下攪拌16小時。將反應液冷卻至室溫，濃縮，殘留物通過反相柱層析色譜純化(水(0.05%甲酸)/乙腈=90/10)得到化合物LP-11-a (560 mg, 收率49.7%)。ESI-MS (m/z): 236.3 [M+Na]⁺.

步驟二：化合物LP-11-b的合成

將化合物LP-11-a (250 mg, 1.17 mmol)和N-羥基丁二醯亞胺(270 mg, 2.35 mmol)溶於四氫呋喃(5 mL)，加入N,N'-二環己基碳二亞胺(484 mg, 2.35 mmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。過濾反應液，濾渣用四氫呋喃洗滌兩次，合併並濃縮濾液。殘留物通過反相柱層析色譜純化(水/乙腈=70/30)得到化合物LP-11-b (560 mg, 收率49.7%)。ESI-MS (m/z): 333.3 [M+Na]⁺.

步驟三：化合物LP-11-c的合成

將(S)-2-((S)-2-氨基-3-甲基丁氨基)-N-(4-(羥甲基)苯基)-5-脲基戊醯胺(93 mg, 245 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-11-b (127 mg, 409 µmol)。混合物在室溫下攪拌4小時。向反應液中加入甲基叔丁基醚，過濾，濾餅用甲基叔丁基醚洗滌兩次。濾餅通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-11- c (36 mg, 收率15.3%)。ESI-MS (m/z): 575.4 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-11-d的合成

將化合物LP-11- c (36 mg, 62 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(8 mg, 62 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(22 mg, 73 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物在乙酸乙酯中打漿，過濾得到固體化合物LP-11-d (40 mg, 收率88.8%)。ESI-MS (m/z): 740.4 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-11的合成

將化合物LP-11-d (10 mg, 13 µmol)和化合物P-1 (6.4 mg, 13 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(5.2 mg, 40 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP- 11 (5 mg, 收率34.5%)。ESI-MS (m/z): 1073.2 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.37 (s, 1H), 10.00 (s, 1H), 8.37 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.18 – 8.07 (m, 4H), 7.96 – 7.82 (m, 2H), 7.66 – 7.43 (m, 5H), 7.36 – 7.27 (m, 3H), 7.25 – 7.18 (m, 3H), 7.01 (s, 2H), 6.32 – 6.22 (m, 1H), 5.99 (s, 1H), 5.41 (s, 2H), 5.01 (s, 2H), 4.76 – 4.53 (m, 5H), 4.44 – 4.35 (m, 2H), 4.25 – 4.19 (m, 1H), 3.56 – 3.49 (m, 4H), 3.06 – 2.92 (m, 3H), 2.45 – 2.30 (m, 3H), 2.01 – 1.91 (m, 2H), 0.88 – 0.64 (m, 11H).

實施例 2.12：化合物LP-12的合成

步驟一：化合物LP-12的合成

將化合物LP-1-a (48 mg, 65 µmol)和化合物P-10 (30 mg, 65 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(25 mg, 196 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP- 12 (10 mg, 收率14.5%)。ESI-MS (m/z): 1058.5 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.36 (s, 1H), 10.02 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.16 – 8.01 (m, 4H), 7.98 – 7.90 (m, 1H), 7.81 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.49 – 7.43 (m, 1H), 7.34 – 7.28 (m, 2H), 7.24 – 7.16 (m, 2H), 7.00 (s, 2H), 6.00 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 5.75 – 5.65 (m, 1H), 5.42 (s, 2H), 5.08 – 4.92 (m, 3H), 4.73 – 4.64 (m, 1H), 4.64 – 4.49 (m, 3H), 4.45 – 4.34 (m, 1H), 4.22 – 4.15 (m, 1H), 4.15 – 3.99 (m, 1H), 3.76 – 3.63 (m, 1H), 3.39 – 3.35 (m, 2H), 3.09 – 2.91 (m, 3H), 2.22 – 2.08 (m, 2H), 2.01 – 1.93 (m, 1H), 1.74 – 1.65 (m, 1H), 1.65 – 1.56 (m, 1H), 1.51 – 1.44 (m, 4H), 1.38 – 1.32 (m, 1H), 1.22 – 1.18 (m, 1H), 1.07 – 0.81 (m, 13H).

實施例 2.13：化合物LP-13的合成

步驟一：化合物LP-13-a的合成

將((2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)乙醯)氨基)乙酸甲酯(109 mg, 295 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入三甲基氯矽烷(233 mg, 2.14 mmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。濃縮反應液，殘留物溶於二氯甲烷(5 mL)，加入化合物P-11 (70 mg, 147 µmol)。混合物在60℃下攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，濃縮，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-13-a (22 mg, 收率19%)。ESI-MS (m/z): 783.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-13-b的合成

將化合物LP-13-a (29 mg, 37 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入二乙胺(0.4 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-13-b (11 mg, 收率53%)。ESI-MS (m/z): 561.4 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-13的合成

將化合物LP-13-b (2.4 mg, 4.2 µmol)，(6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基)甘氨醯甘氨醯-L-苯丙氨酸(2.4 mg, 5. µmol)和N,N-二異丙基乙胺(1.4 mg, 11 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(1.5 mg, 5 µmol)。混合物在室溫下攪拌0.5小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-13 (1 mg, 收率24%)。ESI-MS (m/z): 1015.6 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.87 – 8.79 (m, 1H), 8.75 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.40 – 8.34 (m, 1H), 8.24 – 8.02 (m, 6H), 7.74 – 7.60 (m, 2H), 7.51 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.35 – 7.19 (m, 6H), 7.17 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 6.98 (s, 2H), 6.31 – 6.21 (m, 1H), 5.18 (s, 2H), 4.88 (d, J = 6.7 Hz, 2H), 4.80 – 4.56 (m, 2H), 4.51 – 4.46 (m, 1H), 3.79 – 3.60 (m, 6H), 3.37 – 3.34 (m, 2H), 3.08 – 3.00 (m, 1H), 2.84 – 2.75 (m, 1H), 2.12 – 2.05 (m, 2H), 1.84 – 1.62 (m, 2H), 1.51 – 1.41 (m, 4H), 1.20 – 1.15 (m, 2H), 0.83 – 0.76 (m, 2H), 0.70 – 0.63 (m, 2H).

實施例 2.14：化合物LP-14的合成

步驟一：化合物LP-14-a的合成

將((2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)乙醯)氨基)乙酸甲酯(39 mg, 105 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入三甲基氯矽烷(83 mg, 766 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。濃縮反應液，殘留物溶於二氯甲烷(5 mL)，加入化合物P-12 (25 mg, 53 µmol)。混合物在60℃下攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，濃縮，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-14-a (10 mg, 收率24%)。ESI-MS (m/z): 782.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-14-b的合成

將化合物LP-14-a (8 mg, 10.2 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)，加入二乙胺(0.1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-14-b (3 mg, 收率52%)。ESI-MS (m/z): 560.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-14的合成

將化合物LP-14-b (5 mg, 8.9 µmol)，(6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基)甘氨醯甘氨醯-L-苯丙氨酸(5.1 mg, 10.7 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(2.9 mg, 22 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(3.2 mg, 11 µmol)。混合物在室溫下攪拌0.5小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-14 (2 mg, 收率22%)。ESI-MS (m/z): 1014.6 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.27 (s, 1H), 8.69 (s, 1H), 8.40 – 8.34 (m, 2H), 8.17 – 8.04 (m, 5H), 7.63 (s, 1H), 7.53 – 7.45 (m, 1H), 7.33 – 7.15 (m, 9H), 6.98 (s, 2H), 6.26 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 4.83 (s, 2H), 4.76 – 4.43 (m, 6H), 3.83 – 3.57 (m, 7H), 3.09 – 3.05 (m, 2H), 2.87 – 2.77 (m, 2H), 1.49 – 1.40 (m, 5H), 1.21 – 1.13 (m, 3H), 0.83 – 0.76 (m, 1H), 0.70 – 0.64 (m, 3H).

實施例 2.15：化合物LP-15的合成

步驟一：化合物LP-15-a的合成

將化合物P-12 (10 mg, 21 µmol)溶於乙腈(2 mL)，加入N,N'-二琥珀醯亞胺基碳酸酯(6.5 mg, 25 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(8.2 mg, 63 µmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到粗產品化合物LP-15-a (10 mg)。ESI-MS (m/z): 500.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-15-b的合成

將粗產品化合物LP-15-a (10 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N'-二甲基-1,2-乙二胺(8.8 mg, 100 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(5.2 mg, 40 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-15-b (5 mg, 收率43%)。ESI-MS (m/z): 588.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-15的合成

將化合物LP-1-a (6 mg, 8 µmol)和化合物LP-15-b (5 mg, 8 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(3 mg, 25 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP- 15 (3 mg, 收率29.7%)。ESI-MS (m/z): 1186.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.51 (s, 1H), 10.00 (s, 1H), 8.17 – 7.85 (m, 4H), 7.80 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.67 – 7.44 (m, 4H), 7.35 – 7.16 (m, 5H), 6.99 (s, 2H), 6.26 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 6.02 (s, 1H), 5.50 – 5.29 (m, 4H), 4.99 – 4.56 (m, 5H), 4.37 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.18 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 3.41 – 3.33 (m, 7H), 3.02 – 2.66 (m, 8H), 2.20 – 1.94 (m, 4H), 1.86 – 1.23 (m, 11H), 0.87 – 0.78 (m, 7H), 0.70 – 0.64 (m, 2H).

實施例 2.16：化合物LP-16的合成

步驟一：化合物LP-16-a的合成

將化合物P-11 (30 mg, 63 µmol)溶於乙腈(2 mL)，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(29 mg, 94 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(12 mg, 94 µmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到粗產品化合物LP-16-a (41 mg)。ESI-MS (m/z): 640.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-16-b的合成

將粗產品化合物LP-16-a (15 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入甲基(2-(甲基氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(13 mg, 70 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(3 mg, 23 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-16-b (5 mg, 收率31%)。ESI-MS (m/z): 689.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-16-c的合成

將化合物LP-16-b (4 mg, 5 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-16-c (3 mg, 收率87%)。ESI-MS (m/z): 589.6 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-16的合成

將化合物LP-16-c (3 mg, 4.8 µmol)和化合物LP-1-a (4 mg, 4.8 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(2 mg, 18 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP- 16 (3 mg, 收率50.8%)。ESI-MS (m/z): 1187.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.96 (s, 1H), 8.80 – 8.66 (m, 1H), 8.27 – 7.88 (m, 4H), 7.82 – 7.67 (m, 2H), 7.64 – 7.52 (m, 3H), 7.45 – 7.22 (m, 5H), 6.99 (s, 2H), 6.32 – 6.20 (m, 1H), 6.03 – 5.94 (m, 1H), 5.77 – 5.63 (m, 2H), 5.40 (s, 2H), 5.05 – 4.90 (m, 2H), 4.80 – 4.57 (m, 3H), 4.44 – 4.31 (m, 1H), 4.22 – 4.13 (m, 1H), 3.51 – 3.43 (m, 4H), 3.38 – 3.33 (m, 2H), 3.05 – 2.82 (m, 8H), 2.24 – 1.93 (m, 4H), 1.82 – 1.23 (m, 11H), 0.86 – 0.79 (m, 7H), 0.70 – 0.61 (m, 2H).

實施例 2.17：化合物LP-17的合成

步驟一：化合物LP-17-a的合成

將化合物P-15 (10 mg, 20 µmol)溶於乙腈(2 mL)，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(6 mg, 20 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(5 mg, 40 µmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到粗產品化合物LP-17-a (13 mg)。ESI-MS (m/z): 670.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-17-b的合成

將粗產品化合物LP-17-a (13 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入甲基(2-(甲基氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(3.6 mg, 20 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(3.6 mg, 20 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-17-b (4 mg, 收率28.7%)。ESI-MS (m/z): 719.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-17-c的合成

將化合物LP-17-b (4 mg, 5 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-17-c (3 mg)。ESI-MS (m/z): 619.7 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-17的合成

將化合物LP-17-c (3 mg)和化合物LP-1-a (4 mg, 4.8 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(2 mg, 18 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP- 17 (3 mg, 收率50 %)。ESI-MS (m/z): 1217.9 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.02 – 9.94 (m, 1H), 8.77 – 8.67 (m, 1H), 8.19 – 8.08 (m, 2H), 7.86 – 7.72 (m, 2H), 7.70 – 7.51 (m, 3H), 7.44 – 7.21 (m, 7H), 7.00 (s, 2H), 6.73 – 6.60 (m, 1H), 6.01 – 5.95 (m, 2H), 5.73 – 5.66 (m, 2H), 5.42 (s, 2H), 5.01 – 4.62 (m, 6H), 4.39 – 4.33 (m, 1H), 4.20 – 4.16 (m, 1H), 3.85 – 3.73 (m, 1H), 3.59 – 3.40 (m, 6H), 3.39 – 3.37 (m, 2H), 3.05 – 2.82 (m, 10H), 2.23 – 2.07 (m, 3H), 2.03 – 1.91 (m, 4H), 1.10 – 1.06 (m, 1H), 0.96 – 0.79 (m, 11H).

實施例 2.18：化合物LP-18的合成

步驟一：化合物LP-18-a的合成

將化合物P-17 (10 mg, 20 µmol)溶於乙腈(2 mL)，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(6 mg, 20 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(5 mg, 40 µmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到粗產品化合物LP-18-a (13 mg)。ESI-MS (m/z): 656.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-18-b的合成

將粗產品化合物LP-18-a (13 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入甲基(2-(甲基氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(3.6 mg, 20 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(3.6 mg, 20 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到粗產品化合物LP-18-b (13 mg)。ESI-MS (m/z): 705.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-18-c的合成

將粗產品化合物LP-18-b (13 mg)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-18-c (5 mg, 收率45%)。ESI-MS (m/z): 605.7 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-18的合成

將化合物LP-18-c (5 mg, 8.2 µmol)和化合物LP-1-a (4 mg, 4.8 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(6 mg, 53 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP- 18 (4.5 mg, 收率45.2%)。ESI-MS (m/z): 1203.9 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.93 (s, 1H), 8.09 – 8.02 (m, 3H), 7.97 – 7.93 (m, 2H), 7.88 (s, 1H), 7.84 – 7.72 (m, 4H), 7.54 – 7.31 (m, 6H), 7.29 – 7.14 (m, 5H), 6.93 (s, 2H), 5.95 – 5.88 (m, 2H), 5.36 (s, 2H), 5.14 – 4.83 (m, 5H), 4.61 – 4.27 (m, 5H), 4.16 – 3.70 (m, 3H), 3.30 – 3.28 (m, 5H), 3.14 (s, 3H), 2.96 – 2.92 (m, 1H), 2.90 – 2.85 (m, 2H), 2.81 – 2.71 (m, 6H), 2.15 – 1.98 (m, 2H), 1.98 – 1.85 (m, 2H), 1.13 – 1.09 (m, 2H), 0.93 – 0.88 (m, 3H), 0.79 – 0.76 (m, 3H), 0.76 – 0.73 (m, 3H).

實施例 2.19：化合物LP-19的合成

步驟一：化合物LP-19-a的合成

將化合物P-14 (20 mg, 43 µmol)溶於乙腈(2 mL)，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(16 mg, 52 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(11 mg, 87 µmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到粗產品化合物LP-19-a (27 mg)。ESI-MS (m/z): 627.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-19-b的合成

將粗產品化合物LP-19-a (20 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入甲基(2-(甲基氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(12 mg, 63 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(12 mg, 94 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-19-b (10 mg, 收率46%)。ESI-MS (m/z): 676.6 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-19-c的合成

將化合物LP-19-b (13 mg, 18 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-19-c (10 mg, 收率100%)。ESI-MS (m/z): 576.6 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-19的合成

將化合物LP-19-c (10 mg, 17 µmol)和化合物LP-1-a (13 mg, 17 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(4.5 mg, 34 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-19 (11 mg, 收率53.2%)。ESI-MS (m/z): 1174.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.02 – 9.93 (m, 1H), 8.78 – 8.66 (m, 1H), 8.24 – 7.93 (m, 4H), 7.81 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.75 – 7.66 (m, 1H), 7.61 – 7.51 (m, 2H), 7.44 – 7.20 (m, 4H), 7.00 (s, 2H), 5.99 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 5.75 – 5.64 (m, 3H), 5.42 (s, 2H), 5.02 – 4.59 (m, 5H), 4.43 – 4.30 (m, 1H), 4.20 – 4.00 (m, 2H), 3.72 – 3.36 (m, 8H), 3.02 – 2.81 (m, 7H), 2.20 – 2.07 (m, 2H), 2.04 – 1.90 (m, 1H), 1.73 – 1.53 (m, 2H), 1.51 – 1.39 (m, 5H), 1.22 – 1.14 (m, 3H), 1.08 – 0.78 (m, 12H).

實施例 2.20：化合物LP-20的合成

步驟一：化合物LP-20-a的合成

將化合物P-13 (14 mg, 31 µmol)溶於乙腈(2 mL)，加入N,N'-二琥珀醯亞胺基碳酸酯(16 mg, 64 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(12 mg, 91 µmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到粗產品化合物LP-20-a (13 mg)。ESI-MS (m/z): 487.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-20-b的合成

將粗產品化合物LP-20-a (13 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入甲基(2-(甲基氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(10 mg, 53 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(7 mg, 53 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-20-b (5 mg, 收率28%)。ESI-MS (m/z): 675.6 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-20-c的合成

將化合物LP-20-b (5 mg, 7.4 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-20-c (5 mg, 收率100%)。ESI-MS (m/z): 575.6 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-20的合成

將化合物LP-20-c (4 mg, 7 µmol)和化合物LP-1-a (5 mg, 7 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(2 mg, 16 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-20 (3 mg, 收率37%)。ESI-MS (m/z): 1173.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.52 – 11.44 (m, 1H), 9.99 (s, 1H), 8.44 – 8.34 (m, 1H), 8.14 – 7.89 (m, 4H), 7.80 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.60 – 7.44 (m, 3H), 7.32 – 7.16 (m, 4H), 7.00 (s, 2H), 6.04 – 5.94 (m, 1H), 5.77 – 5.66 (m, 1H), 5.46 – 5.34 (m, 4H), 5.09 – 4.55 (m, 5H), 4.44 – 4.32 (m, 1H), 4.22 – 4.00 (m, 2H), 3.79 – 3.59 (m, 1H), 3.39 – 3.34 (m, 5H), 3.05 – 2.69 (m, 9H), 2.22 – 2.07 (m, 2H), 1.99 – 1.91 (m, 1H), 1.72 – 1.63 (m, 1H), 1.63 – 1.54 (m, 1H), 1.52 – 1.42 (m, 5H), 1.22 – 1.14 (m, 3H), 1.08 – 0.79 (m, 12H).

實施例 2.21：化合物LP-21的合成

步驟一：化合物LP-21-a的合成

將化合物P-18 (20 mg, 41 µmol)溶於乙腈(2 mL)，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(24 mg, 82 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(10 mg, 80 µmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到粗產品化合物LP-21-a (26 mg)。ESI-MS (m/z): 656.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-21-b的合成

將粗產品化合物LP-21-a (26 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入甲基(2-(甲基氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(7.5 mg, 40 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(10 mg, 80 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-21-b (20 mg, 收率72%)。ESI-MS (m/z): 705.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-21-c的合成

將化合物LP-21-b (20 mg, 28 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-21-c (17 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 605.7 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-21的合成

將化合物LP-21-c (17 mg, 28 µmol)和化合物LP-1-a (21 mg, 28 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(6 mg, 53 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-21(13 mg, 收率38%)。ESI-MS (m/z): 1203.6 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.02 (s, 1H), 8.64 – 8.58 (m, 1H), 8.18 – 8.08 (m, 3H), 8.04 – 7.99 (m, 2H), 7.87 – 7.82 (m, 2H), 7.60 – 7.21 (m, 10H), 7.00 (s, 2H), 6.04 – 5.94 (m, 2H), 5.44 (s, 2H), 5.17 – 5.06 (m, 2H), 4.95 – 4.88 (m, 2H), 4.68 – 4.61 (m, 1H), 4.58 – 4.46 (m, 2H), 4.39 – 4.35 (m, 1H), 4.20 – 4.16 (m, 1H), 3.85 – 3.77 (m, 1H), 3.39 – 3.31 (m, 5H), 3.20 (s, 3H), 3.03 – 2.99 (m, 1H), 2.97 – 2.91 (m, 2H), 2.87 – 2.84 (m, 2H), 2.83 – 2.78 (m, 3H), 2.20 – 2.08 (m, 2H), 1.98 – 1.93 (m, 1H), 1.70 – 1.56 (m, 2H), 1.52 – 1.33 (m, 6H), 1.21 – 1.14 (m, 2H), 1.09 – 0.77 (m, 9H).

實施例 2.22：化合物LP-22的合成

步驟一：化合物LP-22-a的合成

將化合物P-10-a (130 mg, 462 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(211 mg, 693 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(60 mg, 470 µmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到粗產品化合物LP-22-a (206 mg)。ESI-MS (m/z): 447.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-22-b的合成

將粗產品化合物LP-22-a (206 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入甲基(2-(甲基氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(260 mg, 1.38 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(119 mg, 922 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=85/15)得到化合物LP-22-b (220 mg, 收率96%)。ESI-MS (m/z): 496.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-22-c的合成

將化合物LP-22-b(40 mg, 80 µmol)溶於二氯甲烷(3 mL)，加入間氯過氧苯甲酸(21 mg, 121 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液中加入10 mL二氯甲烷，用飽和碳酸氫鈉洗兩次，水洗兩次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=50/50)得到化合物LP- 22-c (10 mg, 收率24%)。ESI-MS (m/z): 528.6 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-22-d的合成

將化合物P- 12-a (4.4 mg, 19 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(5 mg, 39 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP- 22-c (10 mg, 19 µmol)。混合物在50℃下攪拌6小時。反應液冷卻至室溫，加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP- 22-d (8 mg, 收率61%)。ESI-MS (m/z): 675.6 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-22-e的合成

將化合物LP-22-d (8 mg, 12 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-22-e (6 mg)。ESI-MS (m/z): 575.6 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-22的合成

將化合物LP-22-e (6 mg, 10 µmol)和化合物LP-1-a (8 mg, 10 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(2.7 mg, 21 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP- 22 (5 mg, 收率41%)。ESI-MS (m/z): 1173.6 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.25 (s, 1H), 10.01 (s, 1H), 8.38 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 8.17 – 8.00 (m, 4H), 7.82 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.61 – 7.54 (m, 2H), 7.49 – 7.45 (m, 1H), 7.35 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.29 – 7.14 (m, 3H), 7.00 (s, 2H), 6.05 – 5.82 (m, 2H), 5.43 (s, 2H), 4.97 – 4.35 (m, 10H), 4.25 – 4.16 (m, 1H), 3.40 – 3.27 (m, 5H), 3.10 – 2.61 (m, 10H), 2.23 – 2.07 (m, 2H), 2.00 – 1.90 (m, 1H), 1.70 – 1.36 (m, 8H), 1.20 – 1.14 (m, 4H), 1.04 – 1.00 (m, 3H), 0.87 – 0.79 (m, 6H).

實施例 2.23：化合物LP-23的合成

步驟一：化合物LP-23-a的合成

將化合物LP-16-a (15 mg, 23 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入(S)-2-((甲基氨基)甲基)吡咯烷-1-甲酸苄酯(17 mg, 70 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(15 mg, 115 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-23-a (12 mg, 收率68%)。ESI-MS (m/z): 749.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-23-b的合成

將化合物LP-23-a (8 mg, 10 µmol)溶於濃鹽酸(3 mL)。混合物在100℃下攪拌2小時。濃縮反應液得到粗產品化合物LP-23-b (6 mg)。ESI-MS (m/z): 615.6 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-23的合成

將粗產品化合物LP-23-b (6 mg)和化合物LP-1-a (7 mg, 10 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(2.5 mg, 20 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP- 23 (2 mg, 收率17%)。ESI-MS (m/z): 1213.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.12 (s, 1H), 8.78 – 8.68 (m, 1H), 8.23 – 8.18 (m, 1H), 8.08 – 7.79 (m, 3H), 7.72 – 7.15 (m, 8H), 6.99 (s, 2H), 6.92 – 6.65 (m, 1H), 6.33 – 6.00 (m, 1H), 5.80 – 5.63 (m, 2H), 5.52 – 5.39 (m, 2H), 5.09 – 4.57 (m, 5H), 4.42 – 4.00 (m, 5H), 3.26 – 2.74 (m, 11H), 2.18 – 2.06 (m, 3H), 2.00 – 1.94 (m, 1H), 1.88 – 1.57 (m, 10H), 1.19 – 1.11 (m, 3H), 0.88 – 0.57 (m, 11H).

實施例 2.24：化合物LP-24的合成

步驟一：化合物LP-24-a的合成

將化合物LP-16-a (15 mg, 23 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入(S)-甲基(吡咯烷-2-基甲基)氨基甲酸叔丁酯(17 mg, 70 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(15 mg, 115 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-24-a (10 mg, 收率60%)。ESI-MS (m/z): 715.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-24-b的合成

將化合物LP-24-a (10 mg, 14 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到粗產品化合物LP-24-b (8 mg)。ESI-MS (m/z): 615.6 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-24的合成

將粗產品化合物LP-24-b (8 mg)和化合物LP-1-a (9.6 mg, 13 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(3 mg, 24 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP- 24 (7 mg, 收率44%)。ESI-MS (m/z): 1213.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.00 (s, 1H), 8.79 – 8.69 (m, 1H), 8.25 – 8.07 (m, 4H), 7.83 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.78 – 7.64 (m, 2H), 7.61 – 7.54 (m, 2H), 7.50 – 7.23 (m, 5H), 7.00 (s, 2H), 6.33 – 6.22 (m, 1H), 6.03 – 5.98 (m, 1H), 5.78 – 5.59 (m, 2H), 5.44 (s, 2H), 5.04 – 4.90 (m, 2H), 4.80 – 4.56 (m, 3H), 4.41 – 4.32 (m, 1H), 4.29 – 4.04 (m, 2H), 3.41 – 3.27 (m, 5H), 3.04 – 2.81 (m, 5H), 2.22 – 2.07 (m, 2H), 2.01 – 1.73 (m, 6H), 1.72 – 1.64 (m, 2H), 1.61 – 1.54 (m, 1H), 1.52 – 1.34 (m, 6H), 1.22 – 1.14 (m, 2H), 0.87 – 0.77 (m, 8H), 0.69 – 0.62 (m, 2H ).

實施例 2.25：化合物LP-25的合成

步驟一：化合物LP-25-a的合成

將N-(2-氯乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(800 mg, 4.13 mmol)溶於乙腈(20 mL)，加入N,N-二甲基乙二胺(5.46 g, 62 mmol)。混合物在80℃下攪拌16小時。將反應液冷卻至室溫，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-25-a (600 mg, 收率59%)。ESI-MS (m/z): 246.3 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-25-b的合成

將化合物LP-16-a (15 mg, 23 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-25-a (5.7 mg, 23 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(15 mg, 115 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-25-b (10 mg, 收率57%)。ESI-MS (m/z): 746.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-25-c的合成

將化合物LP-25-b (10 mg, 14 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到粗產品化合物LP-25-c (8 mg)。ESI-MS (m/z): 646.6 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-25的合成

將粗產品化合物LP-25-c (8 mg)和化合物LP-1-a (9.2 mg, 12 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(3 mg, 24 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP- 25 (5 mg, 收率32%)。ESI-MS (m/z): 1244.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.98 (s, 1H), 8.81 – 8.65 (m, 1H), 8.26 – 8.18 (m, 2H), 8.13 – 8.07 (m, 2H), 7.97 – 7.73 (m, 2H), 7.69 – 7.22 (m, 9H), 7.00 (s, 2H), 6.33 – 6.22 (m, 1H), 6.02 – 5.95 (m, 1H), 5.73 – 5.63 (m, 2H), 5.42 (s, 2H), 5.04 – 4.51 (m, 6H), 4.43 – 4.29 (m, 1H), 4.18 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 3.53 – 3.45 (m, 4H), 3.37 (s, 2H), 3.27 (s, 2H), 3.03 – 2.80 (m, 5H), 2.37 – 2.27 (m, 2H), 2.17 – 2.05 (m, 7H), 1.99 – 1.91 (m, 1H), 1.83 – 1.74 (m, 1H), 1.70 – 1.33 (m, 10H), 0.86 – 0.80 (m, 6H), 0.79 – 0.63 (m, 3H).

實施例 2.26：化合物LP-26的合成

步驟一：化合物LP-26-a的合成

將N-(2-溴乙基)-氨基甲酸叔丁酯(2.5 g, 11.2 mmol)溶於乙腈(25 mL)，加入N,N-二甲基乙二胺(11.8 g, 134 mmol)。混合物在80℃下攪拌16小時。將反應液冷卻至室溫，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-26-a (1.8 g, 收率70%)。ESI-MS (m/z): 232.3 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-26-b的合成

將化合物LP-16-a (15 mg, 23 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-26-a (5.4 mg, 23 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(15 mg, 115 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-26-b (8 mg, 收率47%)。ESI-MS (m/z): 732.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-26-c的合成

將化合物LP-26-b (8 mg, 11 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到粗產品化合物LP-26-c (6 mg)。ESI-MS (m/z): 646.6 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-26的合成

將粗產品化合物LP-26-c (6 mg)和化合物LP-1-a (7 mg, 9.5 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(3 mg, 24 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP- 26 (5 mg, 收率43%)。ESI-MS (m/z): 1230.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.00 (s, 1H), 8.80 – 8.70 (m, 1H), 8.21 – 8.17 (m, 1H), 8.15 – 8.07 (m, 2H), 7.85 – 7.79 (m, 1H), 7.78 – 7.44 (m, 7H), 7.36 – 7.22 (m, 5H), 7.00 (s, 2H), 6.31 – 6.22 (m, 1H), 6.02 – 5.94 (m, 1H), 5.70 (s, 2H), 5.42 (s, 2H), 5.01 – 4.57 (m, 6H), 4.40 – 4.34 (m, 1H), 4.22 – 4.15 (m, 1H), 3.51 – 3.42 (m, 2H), 3.38 – 3.33 (m, 2H), 3.31 – 3.25 (m, 3H), 3.21 – 3.14 (m, 1H), 3.04 – 2.98 (m, 1H), 2.96 – 2.89 (m, 1H), 2.43 – 2.39 (m, 2H), 2.20 – 2.08 (m, 9H), 2.00 – 1.93 (m, 1H), 1.82 – 1.74 (m, 1H), 1.73 – 1.63 (m, 2H), 1.61 – 1.53 (m, 1H), 1.50 – 1.45 (m, 3H), 1.21 – 1.14 (m, 2H), 0.87 – 0.79 (m, 6H), 0.68 – 0.62 (m, 3H).

實施例 2.27：化合物LP-27的合成

步驟一：化合物LP-27-a的合成

將化合物LP-16-a (15 mg, 23 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入(2-((2-(2-羥基乙氧基)乙基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(6.2 mg, 23 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(15 mg, 115 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-27-a (10 mg, 收率56%)。ESI-MS (m/z): 763.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-27-b的合成

將化合物LP-27-a (10 mg, 13 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到粗產品化合物LP-27-b (8 mg)。ESI-MS (m/z): 663.6 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-27的合成

將粗產品化合物LP-27-b (8 mg)和化合物LP-1-a (9 mg, 12 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(3 mg, 24 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP- 27 (6 mg, 收率39%)。ESI-MS (m/z): 1261.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.98 (s, 1H), 8.80 – 8.64 (m, 1H), 8.26 – 8.07 (m, 4H), 7.98 – 7.50 (m, 6H), 7.49 – 7.19 (m, 5H), 7.00 (s, 2H), 6.36 – 6.17 (m, 1H), 5.99 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 5.77 – 5.61 (m, 2H), 5.43 (s, 2H), 5.05 – 4.31 (m, 8H), 4.18 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 3.65 – 3.41 (m, 10H), 3.37 – 3.33 (m, 2H), 3.05 – 2.91 (m, 2H), 2.89 – 2.78 (m, 3H), 2.22 – 2.07 (m, 2H), 2.00 – 1.91 (m, 1H), 1.83 – 1.53 (m, 4H), 1.52 – 1.36 (m, 6H), 1.21 – 1.13 (m, 2H), 0.87 – 0.79 (m, 6H), 0.78 – 0.62 (m, 3H).

實施例 2.28：化合物LP-28的合成

步驟一：化合物LP-28-a的合成

將化合物LP-16-a (20 mg, 31 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入(2-(甲基氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(5.5 mg, 31 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(8 mg, 62 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-28-a (11 mg, 收率52%)。ESI-MS (m/z): 675.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-28-b的合成

將化合物LP-28-a (11 mg, 16 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到粗產品化合物LP-28-b (9 mg)。ESI-MS (m/z): 575.6 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-28的合成

將粗產品化合物LP-28-b (9 mg)和化合物LP-1-a (12 mg, 16 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(4 mg, 32 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP- 28 (10 mg, 收率54%)。ESI-MS (m/z): 1174.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.06 – 9.97 (m, 1H), 8.79 – 8.69 (m, 1H), 8.26 – 8.07 (m, 4H), 7.98 – 7.46 (m, 7H), 7.41 – 7.20 (m, 5H), 7.01 (s, 2H), 6.32 – 6.23 (m, 1H), 6.04 – 5.97 (m, 1H), 5.77 – 5.67 (m, 2H), 5.44 (s, 2H), 4.97 – 4.88 (m, 2H), 4.82 – 4.65 (m, 2H), 4.62 – 4.57 (m, 1H), 4.39 – 4.34 (m, 1H), 4.21 – 4.16 (m, 1H), 3.38 – 3.34 (m, 2H), 3.29 – 3.16 (m, 2H), 3.09 – 2.99 (m, 3H), 2.98 – 2.88 (m, 3H), 2.20 – 2.08 (m, 2H), 2.03 – 1.91 (m, 2H), 1.84 – 1.63 (m, 3H), 1.54 – 1.39 (m, 6H), 1.21 – 1.15 (m, 2H), 0.88 – 0.63 (m, 9H).

實施例 2.29：化合物LP-29的合成

步驟一：化合物LP-29-a的合成

將化合物P-1-b (500 mg, 1.53 mmol)溶於二氯甲烷(20 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(394 mg, 3.05 mmol)和乙酸酐(234 mg, 2.29 mmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=70/30)得到化合物LP-29-a (434 mg, 收率77%)。ESI-MS (m/z): 370.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-29-b的合成

將化合物LP-29-a(275 mg, 1.02 mmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入4 N鹽酸二氧六環溶液(2 mL)。混合物在室溫下攪拌5小時，濃縮得到化合物LP-29-b (230 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 270.3 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-29-c的合成

將化合物LP-29-b (230 mg, 1.02 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(396 mg, 3.07 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入化合物P-10-b (304 mg, 1.02 µmol)。混合物在50℃下攪拌6小時。反應液冷卻至室溫，加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-29-c (389 mg, 收率77%)。ESI-MS (m/z): 503.4 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-29-d的合成

將((2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)乙醯)氨基)乙酸甲酯(997 mg, 2.71 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入三甲基氯矽烷(1.71 g, 15.8 mmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。濃縮反應液，殘留物溶於二氯甲烷(10 mL)，加入化合物LP-29-c (340 mg, 676 µmol)。混合物在60℃下攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，濃縮得到粗產品化合物LP-29-d (800 mg)。ESI-MS (m/z): 811.5 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-29-e的合成

將粗產品化合物LP-29-d (800 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入二乙胺(0.5 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-29-e (135 mg, 收率34%)。ESI-MS (m/z): 589.5 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-29-f的合成

將化合物LP-29-e (135 mg, 222 µmol)溶於四氫呋喃(5 mL)和水(1 mL)的混合物，加入1 N氫氧化鋰(0.5 mL)。混合物在室溫下攪拌3小時。反應液加入醋酸至pH=7，濃縮。殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-29-f (90 mg, 收率72%)。ESI-MS (m/z): 547.4 [M+H]⁺.

步驟七：化合物LP-29的合成

將化合物LP-29-f (10 mg, 18 µmol)，(6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基)甘氨醯甘氨醯-L-苯丙氨酸(10 mg, 22 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(8 mg, 60 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(6.6 mg, 22 µmol)。混合物在室溫下攪拌0.5小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-29 (2 mg, 收率22%)。ESI-MS (m/z): 1001.6 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.33 – 11.23 (m, 1H), 8.56 – 8.47 (m, 1H), 8.40 – 8.37 (m, 1H), 8.17 – 7.96 (m, 7H), 7.47 (s, 1H), 7.36 – 7.34 (m, 1H), 7.26 – 7.15 (m, 7H), 6.99 (s, 2H), 5.65 – 5.43 (m, 2H), 4.91 – 4.86 (m, 2H), 4.71 – 4.46 (m, 6H), 4.31 – 4.18 (m, 1H), 3.73 – 3.63 (m, 7H), 3.09 – 3.04 (m, 1H), 2.84 – 2.77 (m, 1H), 2.13 – 2.08 (m, 2H), 1.51 – 1.43 (m, 4H), 1.21 – 1.15 (m, 2H), 1.12 – 0.90 (m, 6H).

實施例 2.30：化合物LP-30的合成

步驟一：化合物LP-30-a的合成

將化合物P-10-a (200 mg, 710 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入吡啶(112 mg, 1.42 mmol)和乙酸酐(145 mg, 1.42 mmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用檸檬酸水溶液洗一次，水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=70/30)得到化合物LP-30-a (226 mg, 收率98%)。ESI-MS (m/z): 324.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-30-b的合成

將化合物LP-30 -a (116 mg, 358 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入間氯過氧苯甲酸(93 mg, 537 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液中加入飽和碳酸氫鈉(10 mL)，用二氯甲烷(10 mL)萃取三次。合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮得到粗產品化合物LP-30 -b (121 mg)。ESI-MS (m/z): 340.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-30-c的合成

將粗產品化合物LP-30 -b (121 mg)和N,N-二異丙基乙胺(137 mg, 1.07 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入化合物P-12-a (81 mg, 356 µmol)。混合物在50℃下攪拌6小時。反應液冷卻至室溫，加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-30-c (389 mg, 收率77%)。ESI-MS (m/z): 503.4 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-30-d的合成

將((2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)乙醯)氨基)乙酸甲酯(145 mg, 394 µmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入三甲基氯矽烷(171 mg, 1.58 mmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。濃縮反應液，殘留物溶於二氯甲烷(5 mL)，加入化合物LP-30-c (99 mg, 197 µmol)。混合物在60℃下攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，濃縮得到粗產品化合物LP-30-d (150 mg)。ESI-MS (m/z): 811.5 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-30-e的合成

將粗產品化合物LP-30-d (150 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入二乙胺(0.2 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-30-e (40 mg, 收率35%)。ESI-MS (m/z): 589.5 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-30-f的合成

將化合物LP-30-e (40 mg, 67 µmol)溶於四氫呋喃(5 mL)和水(1 mL)的混合物，加入1 N氫氧化鋰(0.5 mL)。混合物在室溫下攪拌3小時。反應液加入醋酸至pH=7，濃縮。殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-30-f (20 mg, 收率54%)。ESI-MS (m/z): 547.4 [M+H]⁺.

步驟七：化合物LP-30的合成

將化合物LP-30-f (10 mg, 18 µmol)，(6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基)甘氨醯甘氨醯-L-苯丙氨酸(9 mg, 20 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(8 mg, 60 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(6.6 mg, 22 µmol)。混合物在室溫下攪拌0.5小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-30 (5 mg, 收率27%)。ESI-MS (m/z): 1001.6 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.29 (s, 1H), 8.76 – 8.68 (m, 1H), 8.44 – 8.41 (m, 2H), 8.41 – 8.36 (m, 2H), 8.21 – 8.16 (m, 1H), 8.13 – 8.03 (m, 5H), 7.51 – 7.45 (m, 1H), 7.33 – 7.30 (m, 1H), 7.27 – 7.15 (m, 7H), 6.99 (s, 2H), 5.74 – 5.66 (m, 1H), 5.12 – 4.86 (m, 1H), 4.85 – 4.81 (m, 2H), 4.76 – 4.49 (m, 5H), 3.83 – 3.56 (m, 7H), 3.09 – 3.05 (m, 1H), 2.84 – 2.78 (m, 2H), 2.12 – 2.08 (m, 2H), 1.52 – 1.41 (m, 5H), 1.07 – 0.88 (m, 6H).

實施例 2.31：化合物LP-31的合成

步驟一：化合物LP-31-a和LP-31-b的合成

將((2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)乙醯)氨基)乙酸甲酯(39 mg, 106 µmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入三甲基氯矽烷(43 mg, 394 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。濃縮反應液，殘留物溶於二氯甲烷(5 mL)，加入化合物P-14 (49 mg, 106 µmol)。混合物在60℃下攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，濃縮。將殘留物溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入二乙胺(0.2 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到

化合物LP-31-a (2 mg, 收率4%)。ESI-MS (m/z): 548.5 [M+H]⁺.

化合物LP-31-b (2 mg, 收率4%)。ESI-MS (m/z): 548.4 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-31的合成

將化合物LP-31-a (2 mg, 3.7 µmol)，(6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基)甘氨醯甘氨醯-L-苯丙氨酸(2 mg, 4.4 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(2 mg, 15 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(2.6 mg, 9 µmol)。混合物在室溫下攪拌0.5小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-31 (1 mg, 收率27%)。ESI-MS (m/z): 1002.6 [M+H]⁺.

實施例 2.32：化合物LP-32的合成

步驟二：化合物LP-32的合成

將化合物LP-31-b (2 mg, 3.7 µmol)，(6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基)甘氨醯甘氨醯-L-苯丙氨酸(2 mg, 4.4 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(2 mg, 15 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(2.6 mg, 9 µmol)。混合物在室溫下攪拌0.5小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-32 (2 mg, 收率54%)。ESI-MS (m/z): 1002.6 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.90 – 8.81 (m, 1H), 8.75 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 8.40 – 8.35 (m, 1H), 8.24 – 8.15 (m, 2H), 8.14 – 7.96 (m, 4H), 7.71 – 7.61 (m, 1H), 7.50 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.39 – 7.12 (m, 8H), 6.99 (s, 2H), 5.78 – 5.66 (m, 1H), 5.22 – 5.13 (m, 2H), 4.92 – 4.81 (m, 2H), 4.75 – 4.45 (m, 3H), 4.16 – 3.96 (m, 2H), 3.74 – 3.61 (m, 7H), 3.07 – 3.03 (m, 1H), 2.84 – 2.77 (m, 1H), 2.15 – 2.05 (m, 2H), 1.50 – 1.40 (m, 5H), 1.10 – 0.89 (m, 7H).

實施例 2.33- 實施例 2.36：

使用實施例2.14相同的方法和反應條件，分別利用化合物P-15，P-17，P-18，P-19作為原料代替P-12，得到下表中的目標產物。

化合物	結構	ESI-MS (m/z): [M+H]⁺.	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆)
LP-33		1045.5	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.86 – 8.72 (m, 2H), 8.42 – 8.34 (m, 2H), 8.24 – 8.18 (m, 2H), 8.17 – 8.11 (m, 2H), 8.10 – 8.02 (m, 2H), 7.71 – 7.63 (m, 1H), 7.56 – 7.50 (m, 1H), 7.45 – 7.38 (m, 1H), 7.34 – 7.28 (m, 2H), 7.25 – 7.21 (m, 4H), 7.19 – 7.15 (m, 1H), 6.98 (s, 2H), 5.19 – 5.12 (m, 2H), 4.89 – 4.86 (m, 1H), 4.77 – 4.45 (m, 4H), 3.78 – 3.71 (m, 2H), 3.71 – 3.56 (m, 3H), 3.18 – 3.16 (m, 2H), 3.06 – 3.04 (m, 1H), 3.04 – 3.02 (m, 1H), 2.83 – 2.75 (m, 2H), 2.10 – 2.06 (m, 2H), 2.02 – 1.97 (m, 2H), 1.48 – 1.41 (m, 5H), 1.09 – 1.06 (m, 1H), 0.97 – 0.91 (m, 3H), 0.88 – 0.80 (m, 2H).
LP-34		1031.4	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.69 (t, J = 6.7 Hz, 1H), 8.38 – 8.07 (m, 5H), 8.05 – 7.96 (m, 3H), 7.89 – 7.85 (m, 1H), 7.83 – 7.78 (m, 1H), 7.47 – 7.27 (m, 5H), 7.27 – 7.15 (m, 5H), 6.99 (s, 2H), 6.00 – 5.89 (m, 1H), 4.78 – 4.41 (m, 8H), 3.96 – 3.68 (m, 4H), 3.68 – 3.63 (m, 2H), 3.62 – 3.57 (m, 1H), 3.21 – 3.19 (m, 2H), 3.08 – 3.04 (m, 1H), 2.84 – 2.77 (m, 1H), 2.13 – 2.06 (m, 2H), 1.52 – 1.13 (m, 9H), 1.10 – 1.03 (m, 1H), 1.00 – 0.94 (m, 2H).
LP-35		1031.5	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.60 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.54 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 8.47 (t, J = 6.7 Hz, 1H), 8.17 – 8.09 (m, 2H), 8.04 – 8.00 (m, 2H), 7.82 – 7.79 (m, 1H), 7.50 – 7.29 (m, 5H), 7.28 – 7.21 (m, 5H), 7.20 – 7.17 (m, 2H), 7.15 – 7.11 (m, 1H), 7.11 – 7.07 (m, 1H), 6.69 (s, 1H), 5.98 – 5.93 (m, 1H), 4.73 – 4.43 (m, 8H), 4.35 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.29 – 4.22 (m, 1H), 4.13 – 3.80 (m, 2H), 3.69 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 3.61 – 3.56 (m, 3H), 3.20 (s, 3H), 2.65 – 2.63 (m, 2H), 2.20 – 2.10 (m, 4H), 2.03 – 1.97 (m, 3H), 0.99 – 0.95 (m, 3H), 0.87 – 0.83 (m, 2H).
LP-36		1056.5	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.72 – 8.60 (m, 1H), 8.34 – 8.30 (m, 1H), 8.15 – 8.02 (m, 6H), 7.67 (s, 1H), 7.50 – 7.39 (m, 3H), 7.28 – 7.15 (m, 7H), 6.89 (s, 2H), 5.96 – 5.91 (m, 1H), 4.75 – 4.72 (m, 2H), 4.66 (s, 2H), 4.63 – 4.59 (m, 2H), 4.54 – 4.41 (m, 6H), 4.28 – 4.23 (m, 4H), 3.21 – 3.17 (m, 3H), 3.10 – 3.04 (m, 2H), 2.87 – 2.73 (m, 2H), 1.51 – 1.33 (m, 5H), 1.19 – 1.10 (m, 3H), 1.05 – 0.92 (m, 3H).

實施例 2.37：化合物LP-37的合成

步驟一：化合物LP-37的合成

將化合物P-10 (10 mg, 22 µmol)和化合物LP-9-a (28 mg, 43 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(8 mg, 61 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-37 (6 mg, 收率28%)。ESI-MS (m/z): 972.5 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.37 (s, 1H), 9.98 (s, 1H), 8.40 – 8.33 (m, 1H), 8.24 – 8.17 (m, 1H), 8.16 – 7.90 (m, 4H), 7.87 – 7.80 (m, 1H), 7.63 – 7.54 (m, 2H), 7.49 – 7.44 (m, 1H), 7.37 – 7.28 (m, 2H), 7.26 – 7.16 (m, 2H), 7.00 (s, 2H), 5.77 – 5.66 (m, 1H), 5.01 (s, 2H), 4.72 – 4.53 (m, 4H), 4.44 – 4.34 (m, 1H), 4.20 – 4.02 (m, 2H), 3.75 – 3.62 (m, 2H), 2.22 – 2.08 (m, 2H), 2.01 – 1.93 (m, 1H), 1.54 – 1.43 (m, 4H), 1.33 – 1.15 (m, 8H), 1.09 – 0.99 (m, 3H), 0.92 – 0.80 (m, 8H).

實施例 2.38：化合物LP-38的合成

步驟一：化合物LP-38的合成

將(6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基)甘氨醯甘氨醯-L-苯丙氨醯甘氨酸(11 mg, 22 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N-羥基丁二醯亞胺(5 mg, 44 µmol)，3-(3-二甲基氨基丙基)-1-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(8 mg, 44 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。向反應液中加入將化合物P-10 (10 mg, 22 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(12 mg, 90 µmol)，混合物在室溫下繼續攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-38 (7 mg, 收率33%)。ESI-MS (m/z): 971.5 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.35 (s, 1H), 8.47 – 8.40 (m, 2H), 8.39 – 8.34 (m, 1H), 8.20 – 8.15 (m, 1H), 8.15 – 8.00 (m, 5H), 7.51 – 7.44 (m, 1H), 7.27 – 7.14 (m, 8H), 6.99 (s, 2H), 5.75 – 5.66 (m, 1H), 4.70 – 4.49 (m, 5H), 3.84 – 3.71 (m, 3H), 3.68 – 3.56 (m, 4H), 3.11 – 3.06 (m, 1H), 2.87 – 2.79 (m, 1H), 2.08 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.04 – 1.95 (m, 1H), 1.49 – 1.41 (m, 5H), 1.18 – 1.12 (m, 3H), 1.05 – 0.82 (m, 6H).

實施例 2.39：化合物LP-39的合成

步驟一：化合物LP-39-a的合成

將Nε-(叔丁氧基羰基)-L-賴氨酸(8 g, 32.5 mmol)溶於二氯甲烷(100 mL)，加入N-苄氧羰基-L-纈氨酸琥珀醯亞胺酯(12.5 g, 35.7 mmol)和三乙胺(4.93 g, 48.7 mmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。濃縮反應液。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-39-a (6.5 g, 收率42%)。ESI-MS (m/z): 480.6 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-39-b的合成

將化合物LP-39-a (4 g, 8.4 mmol)溶於乙醇(40 mL)，加入10%鈀炭(0.5 g)。混合物在氫氣氣氛中室溫下攪拌16小時。反應液經矽藻土過濾，濃縮得到化合物LP-39-b (2.5 g, 收率87%)。ESI-MS (m/z): 346.3 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-39-c的合成

將化合物LP-39-b (200 mg, 578 µmol)和2,5-二氧代吡咯烷-1-基1-（2,5-二氫-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基）-3-氧代-7,10,13,16-四氧代-4-氮雜十九烷-19-酸酯(594 mg, 1.16 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入N-甲基嗎啉(117 mg, 1.16 mmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。濃縮反應液。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=85/15)得到化合物LP-39-c (230 mg, 收率53%)。ESI-MS (m/z): 744.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-39-d的合成

將化合物LP-39-c (31 mg, 42 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N-羥基丁二醯亞胺(10 mg, 84 µmol)，3-(3-二甲基氨基丙基)-1-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(16 mg, 84 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。向反應液中加入將化合物P-1 (20 mg, 42 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(12 mg, 90 µmol)，混合物在室溫下繼續攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-39-d (10 mg, 收率20%)。ESI-MS (m/z): 1198.5 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-39的合成

將化合物LP-39-d (10 mg, 8 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(0.5 mL)，混合物在室溫下繼續攪拌0.5小時。濃縮反應液，殘留物通過凍乾(冷凍乾燥)得到化合物LP-39 (9 mg, 收率98%)。ESI-MS (m/z): 1098.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.94 (s, 1H), 8.76 – 8.67 (m, 1H), 8.57 – 8.47 (m, 1H), 8.26 – 8.12 (m, 3H), 8.11 – 8.01 (m, 1H), 7.92 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.71 – 7.50 (m, 5H), 7.45 – 7.29 (m, 3H), 7.00 (s, 2H), 6.57 – 6.27 (m, 1H), 4.81 – 4.65 (m, 4H), 4.58 – 4.52 (m, 1H), 4.33 – 4.28 (m, 1H), 4.19 – 4.16 (m, 1H), 3.60 – 3.54 (m, 7H), 3.47 – 3.45 (m, 5H), 3.37 – 3.34 (m, 2H), 3.16 – 3.13 (m, 2H), 2.78 – 2.75 (m, 2H), 2.38 – 2.30 (m, 4H), 2.03 – 1.93 (m, 2H), 1.80 – 1.71 (m, 2H), 1.68 – 1.60 (m, 2H), 1.56 – 1.51 (m, 2H), 1.39 – 1.29 (m, 3H), 0.87 – 0.63 (m, 11H).

實施例 2.40：化合物LP-40的合成

步驟一：化合物LP-40-a的合成

將 ((S)-5-((S)-2-氨基-3-甲基丁醯胺基)-6-((4-(羥甲基)苯基)氨基)-6-氧代己基)氨基甲酸叔丁酯(200 mg, 443 µmol)和2,5-二氧代吡咯烷-1-基1-（2,5-二氫-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基）-3-氧代-7,10,13,16-四氧代-4-氮雜十九烷-19-酸酯(251 mg, 488 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(172 mg, 1.33 mmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。濃縮反應液。殘留物通過反相柱層析色譜純化(水/乙腈=50/50)得到化合物LP-40-a (100 mg, 收率26%)。ESI-MS (m/z): 849.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-40-b的合成

將化合物LP-40-a (45 mg, 53 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(32 mg, 106 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(16 mg, 122 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-40-b (32 mg, 收率60%)。ESI-MS (m/z): 1014.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-40-c的合成

將化合物P-1 (5 mg, 10 µmol)和化合物LP-40-b (10 mg, 10 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(8 mg, 61 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-40-c (8 mg, 收率60%)。ESI-MS (m/z): 1347.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-40的合成

將化合物LP-40-c (8 mg, 6 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(0.5 mL)，混合物在室溫下繼續攪拌0.5小時。濃縮反應液，殘留物通過凍乾得到化合物LP-40 (8 mg, 收率98%)。ESI-MS (m/z): 1247.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.11 (s, 1H), 10.02 (s, 1H), 8.66 – 8.52 (m, 1H), 8.28 – 8.01 (m, 6H), 7.98 – 7.88 (m, 1H), 7.73 – 7.56 (m, 8H), 7.40 – 7.29 (m, 4H), 7.01 (s, 2H), 5.08 – 4.97 (m, 2H), 4.81 – 4.65 (m, 5H), 4.61 – 4.55 (m, 1H), 4.48 – 4.34 (m, 2H), 4.22 – 4.18 (m, 2H), 3.60 – 3.58 (m, 4H), 3.50 – 3.48 (m, 13H), 3.37 – 3.34 (m, 2H), 3.17 – 3.13 (m, 2H), 2.85 – 2.75 (m, 2H), 2.36 – 2.31 (m, 3H), 2.05 – 1.91 (m, 2H), 1.83 – 1.59 (m, 4H), 0.88 – 0.83 (m, 6H), 0.80 – 0.63 (m, 3H).

實施例 2.41：化合物LP-41的合成

步驟一：化合物LP-41-a的合成

將((2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)乙醯)氨基)乙酸甲酯(81 mg, 219 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入三甲基氯矽烷(428 mg, 3.94 mmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。濃縮反應液，殘留物溶於二氯甲烷(5 mL)，加入化合物P-22 (50 mg, 109 µmol)。混合物在60℃下攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，濃縮得到粗產品化合物LP-41-a (83 mg)。ESI-MS (m/z): 764.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-41-b的合成

將化合物LP-41-a (83 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入二乙胺(0.2 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-14-b (26 mg, 收率44%)。ESI-MS (m/z): 542.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-41的合成

將化合物LP-41-b (20 mg, 36 µmol)，(6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基)甘氨醯甘氨醯-L-苯丙氨酸(26 mg, 55 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(29 mg, 222 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(17 mg, 55 µmol)。混合物在室溫下攪拌0.5小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-41 (5 mg, 收率14%)。ESI-MS (m/z): 996.5 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.57 – 12.32 (m, 1H), 8.60 – 8.50 (m, 2H), 8.39 – 8.31 (m, 1H), 8.22 – 7.98 (m, 6H), 7.78 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.35 – 7.12 (m, 7H), 6.99 (s, 2H), 5.66 – 5.49 (m, 1H), 4.76 – 4.46 (m, 5H), 4.33 – 4.12 (m, 1H), 3.76 – 3.55 (m, 6H), 3.37 – 3.33 (m, 2H), 3.10 – 3.00 (m, 1H), 2.85 – 2.73 (m, 1H), 2.16 – 2.05 (m, 2H), 1.52 – 1.41 (m, 4H), 1.21 – 0.90 (m, 8H).

實施例 2.42：化合物LP-42的合成

步驟一：化合物LP-42-a的合成

將化合物P-10 (10 mg, 22 µmol)和化合物LP-40-b (22 mg, 22 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(8 mg, 61 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-42-a (8 mg, 收率28%)。ESI-MS (m/z): 1334.6 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-42的合成

將化合物LP-42-a (8 mg, 6 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(0.5 mL)，混合物在室溫下繼續攪拌0.5小時。濃縮反應液，殘留物通過凍乾得到化合物LP-42 (8 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 1234.7 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.21 (s, 1H), 10.02 (s, 1H), 8.65 – 8.47 (m, 2H), 8.29 – 8.24 (m, 1H), 8.16 – 8.08 (m, 2H), 8.06 – 8.01 (m, 1H), 7.95 – 7.89 (m, 1H), 7.71 – 7.51 (m, 7H), 7.38 – 7.31 (m, 2H), 7.01 (s, 2H), 6.30 – 5.79 (m, 1H), 5.02 (s, 2H), 4.77 – 4.65 (m, 4H), 4.38 – 4.30 (m, 2H), 4.21 – 4.16 (m, 2H), 3.60 – 3.58 (m, 2H), 3.51 – 3.45 (m, 13H), 3.37 – 3.34 (m, 2H), 3.16 – 3.13 (m, 2H), 2.96 – 2.89 (m, 2H), 2.80 – 2.75 (m, 2H), 2.38 – 2.35 (m, 1H), 2.35 – 2.31 (m, 2H), 2.05 – 1.90 (m, 2H), 1.76 – 1.50 (m, 5H), 1.17 – 1.13 (m, 3H), 1.01 – 0.89 (m, 4H), 0.89 – 0.82 (m, 7H).

實施例 2.43：化合物LP-43的合成

步驟一：化合物LP-43-a的合成

將化合物LP-39-c (57 mg, 76 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N-羥基丁二醯亞胺(18 mg, 152 µmol)，3-(3-二甲基氨基丙基)-1-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(29 mg, 152 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。向反應液中加入將化合物P-10 (35 mg, 76 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(30 mg, 228 µmol)，混合物在室溫下繼續攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-43-a (38 mg, 收率42%)。ESI-MS (m/z): 1185.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-43的合成

將化合物LP-43-a (38 mg, 32 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(0.5 mL)，混合物在室溫下繼續攪拌0.5小時。濃縮反應液，殘留物通過凍乾得到化合物LP-43 (36 mg, 收率93%)。ESI-MS (m/z): 1085.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.23 (s, 1H), 8.82 – 8.72 (m, 1H), 8.69 – 8.54 (m, 2H), 8.31 – 8.24 (m, 1H), 8.23 – 8.12 (m, 2H), 8.07 – 8.01 (m, 1H), 7.97 – 7.91 (m, 1H), 7.74 – 7.47 (m, 5H), 7.42 – 7.31 (m, 1H), 7.00 (s, 2H), 4.88 – 4.64 (m, 5H), 4.37 – 4.26 (m, 2H), 4.21 – 4.14 (m, 2H), 3.61 – 3.53 (m, 12H), 3.47 – 3.42 (m, 6H), 3.39 – 3.30 (m, 4H), 3.16 – 3.12 (m, 2H), 2.80 – 2.74 (m, 2H), 2.38 – 2.31 (m, 3H), 2.02 – 1.95 (m, 1H), 1.77 – 1.51 (m, 4H), 1.08 – 0.90 (m, 5H), 0.85 – 0.80 (m, 6H).

實施例 2.44：化合物LP-44的合成

步驟一：化合物LP-44-a的合成

將5-溴-2-甲硫基嘧啶(11 g, 54 mmol)和5-己炔酸甲酯(8.1 g, 64 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(50 mL)，加入碘化亞銅(1.02 g, 5.36 mmol)，雙(三苯基膦)二氯化鈀(1.88 g, 2.68 mmol)和三乙胺(21.7 g, 214 mmol)。混合物在95℃下攪拌6小時。將反應液冷卻至室溫，加入200 mL乙酸乙酯，經矽藻土過濾，濾液用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=75/25)得到化合物LP-44-a (12 g, 收率89%)。ESI-MS (m/z): 251.2 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-44-b的合成

將化合物LP-44-a (12 g, 48 mmol)溶於四氫呋喃(100 mL)和水(100 mL)的混合物，加入一水合氫氧化鋰(6.03 g, 144 mmol)。混合物在室溫下攪拌4小時。反應液加入稀鹽酸至pH=3，濃縮除去四氫呋喃。殘留物加入200 mL乙酸乙酯萃取，分液，有機相用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到化合物LP-44-b (10.89 g, 收率96%)。ESI-MS (m/z): 237.4 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-44-c的合成

將化合物LP-44-b(5.8 g, 24.5 mmol)溶於二氯甲烷(300 mL)，加入間氯過氧苯甲酸(12.5 g, 61.4 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液。殘留物通過反相柱層析色譜純化(水(0.05%甲酸)/甲醇=50/50)得到化合物LP-44-c (6 g, 收率91%)。ESI-MS (m/z): 269.3 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-44-d的合成

將Nε-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-L-賴氨酸叔丁酯鹽酸鹽(1.4 g, 3.04 mmol)溶於二氯甲烷(40 mL)，加入N-苄氧羰基-L-纈氨酸琥珀醯亞胺酯(1.06 g, 3.04 mmol)和三乙胺(307 mg, 3.04 mmol)。混合物在室溫下攪拌6小時。反應液加入100 mL二氯甲烷萃取，分液，有機相用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=40/60)得到化合物LP-44-d (1.43 g, 收率72%)。ESI-MS (m/z): 658.6 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-44-e的合成

將化合物LP-44-d (1.4 g, 2.13 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)，加入二乙胺(2 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過反相柱層析色譜純化(水/乙腈=20/80)得到化合物LP-44-e (510 mg, 收率55%)。ESI-MS (m/z): 436.4 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-44-f的合成

將化合物LP-44-e (510 mg, 1.17 mmol)溶於二氯甲烷(20 mL)，加入丙醛(408 mg, 7.03 mmol)。混合物在室溫下攪拌10分鐘，加入三乙醯氧基硼氫化鈉(1.24 g, 5.85 mmol)，繼續攪拌6小時。反應液加入10 mL飽和氯化銨溶液淬滅，用50 mL二氯甲烷萃取，分液，有機相用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過反相柱層析色譜純化(水/乙腈=50/50)得到化合物LP-44-f (310 mg, 收率51%)。ESI-MS (m/z): 520.5 [M+H]⁺.

步驟七：化合物LP-44-g的合成

將化合物LP-44-f (310 mg, 596 µmol)溶於乙酸乙酯(10 mL)，加入10%鈀炭(0.1 g)。混合物在氫氣氣氛中室溫下攪拌16小時。反應液經矽藻土過濾，濃縮得到化合物LP-44-g (200 mg, 收率87%)。ESI-MS (m/z): 386.5 [M+H]⁺.

步驟八：化合物LP-44-h的合成

將化合物LP-44-g (770 mg, 2.00 mmol)，化合物LP-44-c (589 mg, 2.20 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(516 mg, 3.99 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(987 mg, 2.60 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入30 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過反相柱層析色譜純化(水/乙腈=50/50)得到化合物LP-44-h (1 g, 收率79%)。ESI-MS (m/z): 636.5 [M+H]⁺.

步驟九：化合物LP-44-i的合成

將化合物LP-44-h (1 g, 1.57 mmol)溶於二氯甲烷(6 mL)，加入三氟乙酸(2 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過反相柱層析色譜純化(水/乙腈=70/30)得到化合物LP-44-i (870 mg, 收率95%)。ESI-MS (m/z): 580.6 [M+H]⁺.

步驟十：化合物LP-44的合成

將化合物LP-44-i (37 mg, 63 µmol)，化合物P-1 (20 mg, 42 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(29 mg, 222 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(19 mg, 63 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-44 (10 mg, 收率23%)。ESI-MS (m/z): 1034.5 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.34 (s, 1H), 9.11 (s, 2H), 8.70 – 8.61 (m, 1H), 8.35 – 8.31 (m, 1H), 8.25 – 8.24 (m, 1H), 8.19 – 8.05 (m, 4H), 7.99 – 7.94 (m, 1H), 7.66 – 7.63 (m, 1H), 7.52 – 7.42 (m, 1H), 7.40 – 7.30 (m, 1H), 7.25 – 7.18 (m, 2H), 6.30 – 6.25 (m, 1H), 4.76 – 4.52 (m, 6H), 4.33 – 4.26 (m, 1H), 3.41 (s, 3H), 2.48 – 2.11 (m, 12H), 2.00 – 1.79 (m, 4H), 1.36 – 1.15 (m, 8H), 0.82 – 0.65 (m, 15H).

實施例 2.45：化合物LP-45的合成

步驟一：化合物LP-45-a的合成

將((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-L-丙氨醯)氨基甲酸(1.5 g, 4.07 mmol)和吡啶(386 mg, 4.89 mmol)溶於四氫呋喃(60 mL)和甲苯的混合物(20 mL)，加入四乙酸鉛(2.17 g, 4.89 mmol)。混合物在80℃下攪拌16小時。將反應液冷卻至室溫，經矽藻土過濾，濃縮，殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=40/60)得到化合物LP-45-a (1.4 g, 收率90%)。ESI-MS (m/z): 383.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-45-b的合成

將化合物LP-45-a (121 mg, 317 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入三甲基氯矽烷(1.07 g, 9.85 mmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。濃縮反應液，殘留物溶於二氯甲烷(5 mL)，加入化合物P-12 (50 mg, 105 µmol)。混合物在60℃下攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，濃縮得到粗產品化合物LP-45-b (84 mg)。ESI-MS (m/z): 796.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-45-c的合成

將粗產品化合物LP-45-b (84 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)，加入二乙胺(0.1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-45-c (20 mg, 收率33%)。ESI-MS (m/z): 574.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-45的合成

將化合物LP-45-c (20 mg, 34 µmol)，(6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基)-L-纈氨酸(16 mg, 52 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(9 mg, 69 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(16 mg, 52 µmol)。混合物在室溫下攪拌0.5小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-45 (10 mg, 收率33%)。ESI-MS (m/z): 866.5 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.24 (s, 1H), 8.84 – 8.72 (m, 1H), 8.38 – 8.36 (m, 1H), 8.20 – 8.07 (m, 4H), 7.85 – 7.77 (m, 1H), 7.70 – 7.59 (m, 1H), 7.55 – 7.44 (m, 1H), 7.37 – 7.18 (m, 3H), 6.99 (s, 2H), 6.35 – 6.20 (m, 1H), 4.86 – 4.50 (m, 8H), 4.29 – 4.21 (m, 1H), 4.20 – 4.12 (m, 1H), 3.37 – 3.33 (m, 2H), 2.21 – 2.01 (m, 3H), 2.03 – 1.90 (m, 2H), 1.87 – 1.75 (m, 1H), 1.72 – 1.59 (m, 1H), 1.49 – 1.42 (m, 4H), 1.24 – 1.21 (m, 2H), 0.84 – 0.79 (m, 6H), 0.77 – 0.63 (m, 3H).

實施例 2.46：化合物LP-46的合成

步驟一：化合物LP-46-a的合成

將(S)-3-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丙酸(2.44 g, 8.58 mmol)和N-羥基丁二醯亞胺(1.09 g, 9.44 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(30 mL)，加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳醯二亞胺鹽酸鹽(1.81 g, 9.44 mmol)。混合物在室溫下攪拌3小時。反應液加入100 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=30/70)得到化合物LP-46-a (426 mg, 收率13%)。ESI-MS (m/z): 382.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-46-b的合成

將(2R,3R,4S,5S,6S)-2-溴-6-(甲氧羰基)四氫-2H-吡喃-3,4,5-三乙酸酯(500 mg, 1.26 mmol)和4-羥甲基-2-硝基苯酚(319 mg, 1.89 mmol)溶於乙腈(20 mL)，加入氧化銀(1.46 g, 6.29 mmol)。混合物在室溫下攪拌4小時。反應液經矽藻土過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=50/50)得到化合物LP-46-b (282 mg, 收率38%)。ESI-MS (m/z): 484.5 [M-H]^-.

步驟三：化合物LP-46-c的合成

將化合物LP-46-b (2.60 g, 5.36 mmol)溶於冰乙酸(2 mL)和甲醇(20 mL)的混合物，加入鋅粉(3.50 g, 53.6 mmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。反應液經矽藻土過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=10/90)得到化合物LP-46-c (1.67 g, 收率68%)。ESI-MS (m/z): 456.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-46-d的合成

將化合物LP-46-c (1.67 g, 3.67 mmol)和3-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)丙酸(1.71 g, 5.5 mmol)溶於二氯甲烷(20 mL)，加入2-乙氧基-1-乙氧碳醯基-1,2-二氫喹啉(1.81 g, 7.33 mmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=50/50)得到化合物LP-46-d (2.09 g, 收率76%)。ESI-MS (m/z): 749.5 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-46-e的合成

將化合物LP-46-d (100 mg, 133 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(52 mg, 400 µmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(54 mg, 267 µmol)。混合物在40℃下攪拌過夜。反應液加入20 mL二氯甲烷，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到粗產品化合物LP-46-e (80 mg)。ESI-MS (m/z): 914.5 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-46-f的合成

將粗產品化合物LP-46-e (40 mg)和化合物P-1 (20 mg, 42 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(22 mg, 168 µmol)。混合物在室溫下攪拌過夜。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=90/10)得到化合物LP-46-f (33 mg, 收率70%)。ESI-MS (m/z): 1247.7 [M+H]⁺.

步驟七：化合物LP-46-g的合成

將化合物LP-46-f (33 mg, 26 µmol)溶於四氫呋喃(1 mL)和水(1 mL)的混合物，加入1 N氫氧化鋰水溶液(0.2 mL)。混合物在冰浴下攪拌2小時。反應液加入醋酸至pH=7，濃縮，殘留物溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入二乙胺(0.2 mL)，混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-46-g (9 mg, 收率38%)。ESI-MS (m/z): 885.5 [M+H]⁺.

步驟八：化合物LP-46的合成

將化合物LP-46-g (9 mg, 10 µmol)和化合物LP-46-a (6 mg, 15 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(5.5 mg, 42 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)，混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-46 (9 mg, 收率38%)。ESI-MS (m/z): 1051.5 [M+H]⁺

實施例 2.47：化合物LP-47的合成

步驟一：化合物LP-47-a的合成

將化合物LP-44-b (100 mg, 423 µmol)和N-羥基丁二醯亞胺(58 mg, 507 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(30 mL)，加入N,N'-二環己基碳二亞胺(105 mg, 507 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。濃縮反應液得到化合物LP-47-a (426 mg, 收率13%)。ESI-MS (m/z): 334.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-47-b的合成

將化合物LP-39-b (200 mg, 578 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入化合物LP-47-a (140 mg, 419 µmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。向反應液中加入20 mL水，用飽和碳酸氫鈉將pH調至10，用乙酸乙酯洗滌兩次，用檸檬酸溶液將水相pH值調至4-5，用乙酸乙酯萃取三次。合併有機相，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到化合物LP-47-b (200 mg, 收率84%)。ESI-MS (m/z): 564.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-47-c的合成

將化合物LP-47-b (200 mg, 354 µmol)溶於四氫呋喃(5 mL)和水(5 mL)的混合物，加入過硫酸氫鉀(654 mg, 1.06 mmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。濃縮反應液，殘留物通過反相柱層析色譜純化(0.1%甲酸水溶液/乙腈=50/50)得到化合物LP-47-c (130 mg, 收率62%)。ESI-MS (m/z): 596.6 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-47-d的合成

將化合物LP-47-c (15 mg, 25 µmol)，化合物P-1 (10 mg, 21 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(15 mg, 108 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(10 mg, 31 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-47-d (8 mg, 收率36%)。ESI-MS (m/z): 1050.7 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-47的合成

將化合物LP-47-d (8 mg, 7.6 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(0.5 mL)，混合物在室溫下繼續攪拌0.5小時。濃縮反應液，殘留物通過凍乾得到化合物LP-47 (6 mg, 收率82%)。ESI-MS (m/z): 950.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.61 (s, 1H), 9.11 (s, 2H), 8.74 – 8.65 (m, 1H), 8.48 – 8.38 (m, 1H), 8.26 – 8.11 (m, 4H), 8.00 – 7.92 (m, 1H), 7.72 – 7.59 (m, 4H), 7.55 – 7.47 (m, 1H), 7.37 – 7.23 (m, 3H), 6.41 – 6.28 (m, 1H), 4.79 – 4.56 (m, 5H), 4.34 – 4.27 (m, 1H), 4.21 – 4.15 (m, 1H), 3.41 (s, 3H), 2.80 – 2.72 (m, 2H), 2.43 – 2.29 (m, 3H), 2.03 – 1.96 (m, 3H), 1.83 – 1.71 (m, 4H), 1.65 – 1.51 (m, 4H), 0.86 – 0.81 (m, 6H), 0.80 – 0.63 (m, 3H).

實施例 2.48- 實施例 2.50：

使用實施例2.1相同的方法和反應條件，利用化合物P-9，P-20和P-21作為原料代替化合物P-1，得到下表中的目標產物。

化合物	結構	ESI-MS (m/z): [M+H]⁺.	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆)
LP-48		1101.5	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.45 – 11.41 (m, 1H), 10.04 (s, 1H), 8.56 – 8.41 (m, 2H), 8.39 – 8.35 (m, 1H), 8.23 – 8.07 (m, 4H), 8.00 – 7.96 (m, 1H), 7.87 – 7.80 (m, 1H), 7.62 – 7.58 (m, 2H), 7.48 – 7.42 (m, 2H), 7.37 – 7.18 (m, 6H), 7.00 (s, 2H), 6.04 – 5.96 (m, 2H), 5.45 – 5.42 (m, 2H), 5.02 – 4.99 (m, 2H), 4.77 – 4.60 (m, 4H), 4.57 – 4.36 (m, 4H), 4.27 – 4.11 (m, 2H), 3.95 – 3.75 (m, 2H), 3.08 – 2.87 (m, 4H), 2.22 – 1.91 (m, 6H), 1.09 – 0.90 (m, 3H), 0.90 – 0.78 (m, 9H).
LP-49		1085.4	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.32 – 11.19 (m, 1H), 10.07 – 9.96 (m, 1H), 8.46 – 8.29 (m, 2H), 8.25 – 7.77 (m, 6H), 7.61 – 7.08 (m, 8H), 7.00 (s, 2H), 6.05 – 5.99 (m, 1H), 5.73 – 5.65 (m, 1H), 5.49 – 5.39 (m, 3H), 5.08 – 4.92 (m, 2H), 4.87 (s, 2H), 4.49 – 4.31 (m, 2H), 4.25 – 4.10 (m, 2H), 3.98 – 3.86 (m, 2H), 3.10 – 2.86 (m, 4H), 2.21 – 1.92 (m, 4H), 1.75 – 1.54 (m, 5H), 1.50 – 1.42 (m, 5H), 1.21 – 1.15 (m, 2H), 0.87 – 0.78 (m, 7H).
LP-50		1085.4	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.00 (s, 1H), 8.60 – 8.53 (m, 1H), 8.40 – 8.25 (m, 1H), 8.18 – 7.93 (m, 5H), 7.84 – 7.79 (m, 2H), 7.63 – 7.51 (m, 2H), 7.45 – 7.24 (m, 4H), 7.22 – 7.12 (m, 1H), 7.00 (s, 2H), 6.05 – 5.96 (m, 1H), 5.75 – 5.62 (m, 1H), 5.51 – 5.35 (m, 3H), 5.14 – 4.86 (m, 2H), 4.72 – 4.52 (m, 3H), 4.47 – 4.34 (m, 2H), 4.21 – 4.17 (m, 1H), 3.96 – 3.79 (m, 3H), 3.38 – 3.36 (m, 5H), 3.05 – 2.91 (m, 3H), 2.20 – 2.08 (m, 2H), 1.98 – 1.92 (m, 1H), 1.72 – 1.57 (m, 4H), 1.51 – 1.41 (m, 5H), 1.21 – 1.15 (m, 2H), 0.86 – 0.83 (m, 3H), 0.83 – 0.79 (m, 3H).

實施例 2.51：化合物LP-51的合成

步驟一：化合物LP-51-a的合成

將4-氯-2-(甲硫基)-5-(三氟甲基)嘧啶(400 mg, 1.75 mmol)和(R)-2-氨基丁酸甲酯鹽酸鹽(275 mg, 1.75 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(678 mg, 5.25 mmol)。混合物在70℃下攪拌2小時。將反應液冷卻至室溫，加入50 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=80/20)得到化合物LP-51 -a (408 mg, 收率75%)。ESI-MS (m/z): 310.8 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-51-b的合成

將化合物LP-51-a(100 mg, 323 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入間氯過氧苯甲酸(112 mg, 646 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液中加入30 mL二氯甲烷，用飽和碳酸氫鈉洗兩次，水洗兩次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到化合物LP-51- b (110 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 342.3 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-51-c的合成

將化合物P-12- a (69 mg, 303 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(118 mg, 910 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-51- b (110 mg, 320 µmol)。混合物在室溫下攪拌過夜。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-51-c (87 mg, 收率59%)。ESI-MS (m/z): 489.4 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-51-d的合成

將化合物LP-51-c (47 mg, 96 µmol)溶於四氫呋喃(1 mL)和水(1 mL)的混合物，加入1 N氫氧化鋰水溶液(0.2 mL)。混合物在室溫下攪拌3小時。反應液加入醋酸至pH=7，濃縮，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-51-d (20 mg, 收率38%)。ESI-MS (m/z): 475.5 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-51-e的合成

將(6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基)-L-纈氨醯-L-丙氨酸(200 mg, 524 µmol)和4-((N-叔丁氧羰基)氨甲基)苯胺(122 mg, 550 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入2-乙氧基-1-乙氧碳醯基-1,2-二氫喹啉(136 mg, 550 µmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-51-e (262 mg, 收率85%)。ESI-MS (m/z): 586.4 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-51-f的合成

將化合物LP-51-e (50 mg, 85 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(0.5 mL)，混合物在室溫下繼續攪拌0.5小時。濃縮反應液得到化合物LP-51-f (41 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 485.5 [M+H]⁺.

步驟七：化合物LP-51的合成

將化合物LP-51-f (15 mg, 31 µmol)，化合物LP-51-d (10 mg, 21 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(8.17 mg, 63 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入O-苯並三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸鹽(10 mg, 31 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-51 (3 mg, 收率15%)。ESI-MS (m/z): 942.7 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.31 (s, 1H), 9.89 (s, 1H), 8.68 – 8.59 (m, 1H), 8.45 – 8.35 (m, 4H), 8.19 – 8.13 (m, 2H), 8.12 – 8.04 (m, 2H), 7.85 – 7.81 (m, 1H), 7.56 – 7.48 (m, 3H), 7.36 – 7.34 (m, 1H), 7.22 – 7.16 (m, 2H), 7.13 – 7.11 (m, 1H), 7.00 (s, 2H), 4.86 (s, 2H), 4.72 – 4.58 (m, 3H), 4.38 – 4.35 (m, 1H), 4.28 – 4.24 (m, 1H), 4.18 – 4.15 (m, 1H), 4.11 – 4.06 (m, 1H), 2.22 – 2.06 (m, 5H), 2.03 – 1.92 (m, 4H), 1.83 – 1.75 (m, 2H), 1.72 – 1.62 (m, 2H), 0.87 – 0.83 (m, 5H), 0.83 – 0.79 (m, 4H), 0.68 – 0.64 (m, 2H).

實施例 2.52：化合物LP-52的合成

步驟一：化合物LP-52-a的合成

將(S)-2-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-5-(叔丁氧基)-5-氧代戊酸(5 g, 11.8 mmol)和(4-氨基苯基)甲醇苯胺(2.89 g, 23.5 mmol)溶於二氯甲烷(50 mL)，加入2-乙氧基-1-乙氧碳醯基-1,2-二氫喹啉(2.91 g, 11.8 mmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。濃縮反應液，殘留物甲基叔丁基醚打漿三次得到化合物LP-52-a (4.6 g, 收率74%)。ESI-MS (m/z): 531.4 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-52-b的合成

將化合物LP-52-a (4.6 g, 8.67 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(20 mL)，加入二乙胺(5 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-52-b (2.5 g, 收率94%)。ESI-MS (m/z): 309.4 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-52-c的合成

將(2S)-2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)丙酸(2 g, 6.42 mmol)，N,N-二異丙基乙胺(2.49 g, 19 mmol)和化合物LP-52-b (2.97 g, 9.64 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(30 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(3.66 g, 9.64 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。向反應液中加入水(100 mL)，用乙酸乙酯(100 mL)萃取三次，合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過快速柱層析色譜純化(PE/EA=20/80)得到化合物LP-52-c(2 g, 收率52%)。ESI-MS (m/z): 602.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-52-d的合成

將化合物LP-52-c (2 g, 3.32 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(20 mL)，加入二乙胺(4 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-52-d (600 mg, 收率48%)。ESI-MS (m/z): 380.4 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-52-e的合成

將((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-D-亮氨酸(605 mg, 1.71 mmol)，N,N-二異丙基乙胺(511 mg, 3.95 mmol)和化合物LP-52-d (500 mg, 1.32 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(752 mg, 1.98 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。向反應液中加入水(30 mL)，用乙酸乙酯(30 mL)萃取三次，合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過快速柱層析色譜純化(PE/EA=20/80)得到化合物LP-52-e(900 mg, 收率96%)。ESI-MS (m/z): 715.5 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-52-f的合成

將化合物LP-52-e (900 mg, 1.26 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(20 mL)，加入二乙胺(3 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-52-f (450 mg, 收率72%)。ESI-MS (m/z): 493.4 [M+H]⁺.

步驟七：化合物LP-52-g的合成

將化合物LP-52-f (380 mg, 771 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入3-馬來醯亞胺丙酸N-羥基琥珀醯亞胺酯(246 mg, 926 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。向反應液中加入水(30 mL)，用乙酸乙酯(30 mL)萃取三次，合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-52-g (450 mg, 收率91%)。ESI-MS (m/z): 644.5 [M+H]⁺.

步驟八：化合物LP-52-h的合成

將化合物LP-52-g (100 mg, 155 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(94 mg, 310 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液。殘留物通過柱層析色譜純化(EA=100)得到化合物LP-52-h (70 mg, 收率56%)。ESI-MS (m/z): 809.5 [M+H]⁺.

步驟九：化合物LP-52-i的合成

將化合物P-1(20 mg, 42 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(11 mg, 85 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-52- h (34 mg, 42 µmol)。混合物在室溫下攪拌過夜。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-52-i (25 mg, 收率52%)。ESI-MS (m/z): 1142.4 [M+H]⁺.

步驟十：化合物LP-52的合成

將化合物LP-52-i (25 mg, 22 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(0.5 mL)，混合物在室溫下繼續攪拌0.5小時。濃縮反應液，殘留物通過凍乾得到化合物LP-52 (20 mg, 收率84%)。ESI-MS (m/z): 1086.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.38 (s, 1H), 9.53 (s, 1H), 8.56 – 8.49 (m, 1H), 8.44 – 8.35 (m, 2H), 8.27 – 8.11 (m, 2H), 8.08 – 7.91 (m, 3H), 7.67 – 7.18 (m, 10H), 6.97 (s, 2H), 6.31 – 6.25 (m, 1H), 5.01 (s, 2H), 4.78 – 4.53 (m, 6H), 4.37 – 4.28 (m, 1H), 4.27 – 4.17 (m, 2H), 3.64 – 3.54 (m, 1H), 3.53 – 3.47 (m, 1H), 2.37 – 2.20 (m, 5H), 1.93 – 1.74 (m, 2H), 1.72 – 1.52 (m, 2H), 1.28 – 1.23 (m, 3H), 0.91 – 0.83 (m, 6H), 0.79 – 0.64 (m, 3H).

實施例 2.53：化合物LP-53的合成

步驟一：化合物LP-53-a的合成

將化合物LP-44-f (1.24 g, 2.4 mmol)溶於二氯甲烷(6 mL)，加入三氟乙酸(4 mL)，混合物在室溫下繼續攪拌0.5小時。濃縮反應液得到化合物LP-53-a (1 g, 收率90%)。ESI-MS (m/z): 464.6 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-53-b的合成

將化合物LP-53-a (1 g, 2.16 mmol)，N,N-二異丙基乙胺(1.12 g, 8.6 mmol)和甘氨酸叔丁酯(566 mg, 4.31 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(20 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(1.23 g, 3.24 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。向反應液中加入水(30 mL)，用乙酸乙酯(30 mL)萃取三次，合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過快速柱層析色譜純化(DCM/MeOH=90/10)得到化合物LP-53-b(1 g, 收率80%)。ESI-MS (m/z): 577.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-53-c的合成

將化合物LP-53-b (1 g, 2.16 mmol)溶於乙酸乙酯(20 mL)，加入10%鈀炭(0.1 g)。混合物在氫氣氣氛中室溫下攪拌16小時。反應液經矽藻土過濾，濃縮得到化合物LP-53-c (750 mg, 收率98%)。ESI-MS (m/z): 443.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-53-d的合成

將化合物LP-53-c (600 mg, 1.36 mmol)，N,N-二異丙基乙胺(700 mg, 5.42 mmol)和化合物LP-44-c (566 mg, 4.31 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(20 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(773 mg, 2.03 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。向反應液中加入水(30 mL)，用乙酸乙酯(30 mL)萃取三次，合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過快速柱層析色譜純化(DCM/MeOH=90/10)得到化合物LP-53-d(330 mg, 收率35%)。ESI-MS (m/z): 693.5 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-53-e的合成

將化合物LP-53-d (160 mg, 231 µmol)溶於二氯甲烷(3 mL)，加入三氟乙酸(2 mL)，混合物在室溫下繼續攪拌0.5小時。濃縮反應液得到化合物LP-53-e (145 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 637.6 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-53的合成

將化合物LP-53-e (22 mg, 34 µmol)，化合物P-1 (15 mg, 31 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(8 mg, 63 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(14 mg, 47 µmol)。混合物在室溫下攪拌0.5小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-53 (10 mg, 收率29%)。ESI-MS (m/z): 1091.6 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.43 – 11.35 (m, 1H), 9.10 (s, 2H), 8.59 – 8.48 (m, 1H), 8.37 – 8.30 (m, 2H), 8.18 – 8.05 (m, 4H), 7.94 – 7.89 (m, 1H), 7.68 – 7.63 (m, 1H), 7.52 – 7.44 (m, 1H), 7.37 – 7.28 (m, 1H), 7.25 – 7.17 (m, 2H), 6.27 (s, 1H), 4.76 – 4.56 (m, 5H), 4.26 – 4.13 (m, 2H), 3.88 – 3.82 (m, 1H), 3.78 – 3.73 (m, 1H), 3.40 (s, 3H), 2.39 – 2.29 (m, 10H), 1.95 – 1.88 (m, 1H), 1.85 – 1.75 (m, 3H), 1.72 – 1.64 (m, 2H), 1.60 – 1.54 (m, 1H), 1.40 – 1.32 (m, 6H), 1.29 – 1.21 (m, 2H), 0.85 – 0.79 (m, 12H), 0.76 – 0.65 (m, 3H).

實施例 2.54：化合物LP-54的合成

步驟一：化合物LP-54-a的合成

將(2R,3S,4S,5R,6R)-2-(乙醯氧甲基)-6-溴四氫-2H-吡喃-3,4,5-三乙酸酯(5 g, 12 mmol)和4-羥基-3-硝基苯甲醛(2.03 g, 12.2 mmol)溶於乙腈(100 mL)，加入氧化銀(1.46 g, 6.29 mmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。反應液經矽藻土過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=40/60)得到化合物LP-54-a (3.5 g, 收率58%)。ESI-MS (m/z): 498.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-54-b的合成

將化合物LP-54-a (3 g, 6.03 mmol)溶於四氫呋喃(25 mL)和甲醇(5 mL)的混合物，冰浴下緩慢加入硼氫化鈉(228 mg, 6.03 mmol)。混合物在升至室溫，持續攪拌2小時。向反應液中加入氯化銨水溶液(50 mL)淬滅，用乙酸乙酯(50 mL)萃取三次，合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=40/60)得到化合物LP-54-b (750 mg, 收率25%)。ESI-MS (m/z): 500.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-54-c的合成

將化合物LP-54-b (750 mg, 1.51 mmol)溶於四氫呋喃(20 mL)，加入氫氧化鈀/炭(200 mg)。混合物在氫氣氣氛下室溫攪拌過夜。反應液經矽藻土過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=20/80)得到化合物LP-54-c (500 mg, 收率70%)。ESI-MS (m/z): 470.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-54-d的合成

將化合物LP-54-c (7.30 g, 15.5 mmol)和3-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)丙酸(4.84 g, 15.5 mmol)溶於二氯甲烷(100 mL)，加入2-乙氧基-1-乙氧碳醯基-1,2-二氫喹啉(5.77 g, 23.3 mmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=50/50)得到化合物LP-54-d (4.89 g, 收率41%)。ESI-MS (m/z): 763.5 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-54-e的合成

將化合物LP-54-d (200 mg, 262 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(104 mg, 800 µmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(105 mg, 523 µmol)。混合物在40℃下攪拌過夜。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=50/50)得到化合物LP-54-e (186 mg, 收率76%)。ESI-MS (m/z): 928.5 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-54-f的合成

將化合物LP-54-e (108 mg, 116 µmol)和化合物P-1 (50 mg, 105 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(4 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(27 mg, 211 µmol)。混合物在室溫下攪拌過夜。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-54-f (123 mg, 收率92%)。ESI-MS (m/z): 1261.7 [M+H]⁺.

步驟七：化合物LP-54-g的合成

將化合物LP-54-f (51 mg, 40 µmol)溶於四氫呋喃(1 mL)和水(1 mL)的混合物，加入1 N氫氧化鋰水溶液(0.2 mL)。混合物在冰浴下攪拌2小時。反應液加入醋酸至pH=7，濃縮，殘留物溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入二乙胺(0.2 mL)，混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-54-g (20 mg, 收率50%)。ESI-MS (m/z): 871.5 [M+H]⁺.

步驟八：化合物LP-54-h的合成

將化合物LP-54-g (10 mg, 11 µmol)和化合物LP-46-a (7 mg, 17 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(5.5 mg, 42 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-54-h (12 mg, 收率92%)。ESI-MS (m/z): 1137.5 [M+H]⁺.

步驟九：化合物LP-54的合成

將化合物LP-54-h (12 mg, 11 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(0.5 mL)，混合物在室溫下繼續攪拌0.5小時。濃縮反應液，殘留物通過凍乾得到化合物LP-54 (20 mg, 收率84%)。ESI-MS (m/z): 1037.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, Methanol-d ₄) δ 8.62 – 8.54 (m, 1H), 8.33 – 8.27 (m, 1H), 8.23 – 8.18 (m, 1H), 8.17 – 8.11 (m, 1H), 7.78 – 7.71 (m, 1H), 7.68 – 7.62 (m, 1H), 7.48 – 7.42 (m, 1H), 7.28 – 7.22 (m, 1H), 7.14 – 7.08 (m, 1H), 6.90 (s, 2H), 5.10 (s, 2H), 4.98 – 4.90 (m, 3H), 4.85 – 4.79 (m, 3H), 4.78 – 4.70 (m, 2H), 4.64 – 4.58 (m, 1H), 3.93 – 3.90 (m, 1H), 3.90 – 3.83 (m, 1H), 3.80 – 3.76 (m, 2H), 3.67 – 3.59 (m, 3H), 3.55 – 3.48 (m, 2H), 3.46 – 3.36 (m, 2H), 2.66 – 2.55 (m, 2H), 2.22 – 2.14 (m, 1H), 1.90 – 1.72 (m, 2H), 1.62 – 1.57 (m, 1H), 1.40 – 1.31 (m, 5H), 0.91 – 0.88 (m, 1H), 0.84 – 0.75 (m, 3H).

實施例 2.55：化合物LP-55的合成

步驟一：化合物LP-55-a的合成

將化合物LP-39-a (8 g, 16.7 mmol)和N-羥基丁二醯亞胺(3.84 g, 33.4 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(30 mL)，加入N,N'-二環己基碳二亞胺(6.88 g, 33.4 mmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=50/50)得到化合物LP-55-a (9 g, 收率94%)。ESI-MS (m/z): 577.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-55-b的合成

將甘氨酸(1.29 g, 17.2 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(100 mL)，加入化合物LP-55-a (9 g, 15.6 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(3.03 g, 23.4 mmol)。混合物在50℃下攪拌16小時。濃縮反應液。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-55-b (4 g, 收率48%)。ESI-MS (m/z): 537.6 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-55-c的合成

將化合物LP-55-b (800 mg, 1.49 mmol)溶於乙醇(10 mL)，加入10%鈀炭(0.2 g)。混合物在氫氣氣氛中室溫下攪拌16小時。反應液經矽藻土過濾，濃縮得到化合物LP-55-c (600 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 403.3 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-55-d的合成

將化合物LP-55-c (300 mg, 745 µmol)和2,5-二氧代吡咯烷-1-基1-（2,5-二氫-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基）-3-氧代-7,10,13,16-四氧代-4-氮雜十九烷-19-酸酯(402 mg, 782 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入N-甲基嗎啉(151 mg, 1.49 mmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。濃縮反應液。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=85/15)得到化合物LP-55-d (75 mg, 收率13%)。ESI-MS (m/z): 801.5 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-55-e的合成

將化合物LP-55-d (38 mg, 47 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N-羥基丁二醯亞胺(7.3 mg, 63 µmol)，3-(3-二甲基氨基丙基)-1-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(38 mg, 47 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。向反應液中加入將化合物P-1 (15 mg, 31 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(12 mg, 90 µmol)，混合物在室溫下繼續攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-55-e (8 mg, 收率20%)。ESI-MS (m/z): 1255.5 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-55的合成

將化合物LP-55-e (8 mg, 6 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(0.5 mL)，混合物在室溫下繼續攪拌0.5小時。濃縮反應液，殘留物通過凍乾得到化合物LP-55 (5 mg, 收率62%)。ESI-MS (m/z): 1155.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.88 (s, 1H), 8.68 – 8.59 (m, 1H), 8.56 – 8.48 (m, 1H), 8.34 – 8.30 (m, 1H), 8.24 – 8.18 (m, 1H), 8.16 – 8.11 (m, 2H), 7.90 – 7.84 (m, 1H), 7.68 – 7.53 (m, 5H), 7.43 – 7.27 (m, 3H), 7.24 – 7.18 (m, 1H), 7.13 – 7.08 (m, 1H), 7.00 (s, 2H), 6.51 – 6.31 (m, 1H), 4.81 – 4.52 (m, 6H), 4.27 – 4.10 (m, 4H), 3.48 – 3.43 (m, 12H), 3.39 – 3.32 (m, 4H), 3.16 – 3.12 (m, 2H), 2.77 – 2.72 (m, 3H), 2.35 – 2.30 (m, 3H), 2.05 – 1.95 (m, 2H), 1.82 – 1.63 (m, 4H), 1.38 – 1.30 (m, 3H), 0.84 – 0.79 (m, 6H), 0.77 – 0.62 (m, 3H).

實施例 2.56：化合物LP-56的合成

步驟一：化合物LP-56-a的合成

將(S)-2-((S)-2-氨基-3-甲基丁氨基)-N-(4-(羥甲基)苯基)-5-脲基戊醯胺(141 mg, 372 µmol)，化合物LP-44-c (100 mg, 372 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(96 mg, 746 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(141 mg, 372 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到得到化合物LP-56-a (178 mg, 收率76%)。ESI-MS (m/z): 630.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-56-b的合成

將化合物LP-56-a (100 mg, 158 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(62 mg, 476 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(105 mg, 523 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物用乙酸乙酯打漿得到化合物LP-56-b (120 mg, 收率95%)。ESI-MS (m/z): 795.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-56的合成

將化合物LP-56-b (17 mg, 21 µmol)和化合物P-1 (10 mg, 21 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(10 mg, 88 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-56 (15 mg, 收率63%)。ESI-MS (m/z): 1128.2 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.37 (s, 1H), 10.03 (s, 1H), 9.12 (s, 2H), 8.39 – 8.36 (m, 1H), 8.20 – 8.07 (m, 4H), 7.99 – 7.92 (m, 2H), 7.66 – 7.58 (m, 3H), 7.50 – 7.44 (m, 1H), 7.36 – 7.18 (m, 5H), 6.31 – 6.24 (m, 1H), 6.03 – 5.96 (m, 1H), 5.43 (s, 2H), 5.00 (s, 2H), 4.77 – 4.55 (m, 5H), 4.43 – 4.36 (m, 1H), 4.27 – 4.22 (m, 1H), 3.41 (s, 3H), 3.04 – 2.93 (m, 2H), 2.58 – 2.53 (m, 2H), 2.40 – 2.32 (m, 2H), 2.03 – 1.92 (m, 2H), 1.88 – 1.77 (m, 3H), 1.70 – 1.60 (m, 2H), 1.47 – 1.35 (m, 2H), 0.90 – 0.82 (m, 6H), 0.79 – 0.64 (m, 3H).

實施例 2.57：化合物LP-57的合成

步驟一：化合物LP-57的合成

將化合物LP-41-b (15 mg, 28 µmol)，化合物LP-44-i (18 mg, 30 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(7 mg, 55 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(9 mg, 30 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-57 (9 mg, 收率29%)。ESI-MS (m/z): 1103.6 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.40 (s, 1H), 9.17 – 9.06 (m, 2H), 8.63 – 8.49 (m, 2H), 8.36 – 8.27 (m, 2H), 8.18 – 7.92 (m, 5H), 7.78 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.35 – 7.27 (m, 1H), 5.65 – 5.46 (m, 1H), 4.73 – 4.44 (m, 4H), 4.29 – 4.13 (m, 3H), 3.74 – 3.67 (m, 3H), 3.41 (s, 3H), 2.33 – 2.18 (m, 8H), 2.02 – 1.91 (m, 2H), 1.82 – 1.75 (m, 2H), 1.74 – 1.57 (m, 2H), 1.56 – 1.43 (m, 2H), 1.36 – 1.30 (m, 6H), 1.15 – 1.05 (m, 2H), 0.98 – 0.89 (m, 4H), 0.85 – 0.76 (m, 12H).

實施例 2.58：化合物LP-58的合成

步驟一：化合物LP-58的合成

將化合物LP-56-b (7 mg, 8 µmol)和化合物P-23 (4 mg, 8 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(3 mg, 25 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-58 (8 mg, 收率85%)。ESI-MS (m/z): 1138.5 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.44 – 12.34 (m, 1H), 10.10 – 9.95 (m, 1H), 9.12 (s, 2H), 8.41 – 8.32 (m, 1H), 8.29 – 8.07 (m, 4H), 7.96 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.82 – 7.75 (m, 1H), 7.63 – 7.46 (m, 3H), 7.35 – 7.04 (m, 3H), 6.10 – 5.99 (m, 1H), 5.78 – 5.63 (m, 1H), 5.61 – 5.32 (m, 3H), 5.07 – 4.55 (m, 4H), 4.42 – 4.36 (m, 1H), 4.27 – 4.22 (m, 1H), 4.20 – 4.00 (m, 1H), 3.97 – 3.84 (m, 2H), 3.81 – 3.76 (m, 1H), 3.42 (s, 3H), 3.22 – 3.12 (m, 1H), 3.06 – 2.92 (m, 2H), 2.57 – 2.54 (m, 2H), 2.42 – 2.33 (m, 2H), 2.02 – 1.97 (m, 1H), 1.87 – 1.79 (m, 2H), 1.73 – 1.33 (m, 7H), 0.89 – 0.86 (m, 3H), 0.86 – 0.82 (m, 3H).

實施例 2.59：化合物LP-59的合成

步驟一：化合物LP-59-a的合成

將((2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)乙醯)氨基)乙酸甲酯(71 mg, 193 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入三甲基氯矽烷(428 mg, 3.94 mmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。濃縮反應液，殘留物溶於二氯甲烷(5 mL)，加入化合物P-19 (50 mg, 97 µmol)。混合物在60℃下攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，濃縮得到粗產品化合物LP-59-a (60 mg)。ESI-MS (m/z): 824.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-59-b的合成

將粗產品化合物LP-59-a (60 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)，加入二乙胺(0.2 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-59-b (15 mg, 收率26%)。ESI-MS (m/z): 602.4 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-59-c的合成

將N-芴甲氧羰基-甘氨醯-甘氨酸(2.00 g, 5.64 mmol)，L-苯丙氨酸叔丁酯鹽酸鹽(1.6 g, 6.21 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(1.46 g, 11 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(20 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(3.22 g, 8.47 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入100 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-59-c (5.6 g, 收率98%)。ESI-MS (m/z): 558.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-59-d的合成

將化合物LP-59-c (5.6 g, 5.52 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(50 mL)，加入二乙胺(5 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=90/10)得到化合物LP-59-d (1 g, 收率54%)。ESI-MS (m/z): 336.4 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-59-e的合成

將化合物LP-44-c (105 mg, 391 µmol)，化合物LP-59-d (131 mg, 391 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(152 mg, 1.17 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(223 mg, 587 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-59-e (290 mg, 收率75%)。ESI-MS (m/z): 586.5 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-59-f的合成

將化合物LP-59-e (292 mg, 374 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-59-f (230 mg, 收率95%)。ESI-MS (m/z): 530.5 [M+H]⁺.

步驟七：化合物LP-59的合成

將化合物LP-59-f (11 mg, 20 µmol)，化合物LP-59-b (8 mg, 13 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(7 mg, 55 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(6 mg, 20 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-59 (6 mg, 收率41%)。ESI-MS (m/z): 1113.6 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.10 (s, 2H), 8.75 – 8.68 (m, 1H), 8.39 – 8.32 (m, 2H), 8.21 – 8.07 (m, 7H), 7.72 – 7.68 (m, 1H), 7.46 – 7.40 (m, 3H), 7.36 – 7.30 (m, 1H), 7.25 – 7.22 (m, 4H), 7.19 – 7.14 (m, 1H), 6.02 – 5.92 (m, 1H), 4.79 – 4.72 (m, 2H), 4.68 (s, 2H), 4.66 – 4.47 (m, 5H), 3.78 – 3.69 (m, 5H), 3.63 – 3.57 (m, 1H), 3.40 (s, 3H), 3.21 (s, 3H), 3.09 – 3.02 (m, 1H), 2.85 – 2.78 (m, 1H), 2.60 – 2.54 (m, 2H), 2.35 – 2.31 (m, 2H), 1.85 – 1.78 (m, 2H), 1.08 – 0.96 (m, 3H).

實施例 2.60：化合物LP-60的合成

步驟一：化合物LP-60的合成

將化合物LP-53-e (7.6 mg, 12 µmol)，化合物P-24 (5 mg, 11 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(3 mg, 22 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(5 mg, 16 µmol)。混合物在室溫下攪拌0.5小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-60 (3 mg, 收率26%)。ESI-MS (m/z): 1079.6 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.39 (s, 1H), 9.11 (s, 2H), 8.69 – 8.42 (m, 2H), 8.39 – 8.31 (m, 3H), 8.14 – 8.05 (m, 2H), 7.97 – 7.86 (m, 1H), 7.55 – 7.43 (m, 1H), 7.28 – 7.15 (m, 2H), 5.30 – 5.12 (m, 1H), 4.88 – 4.51 (m, 4H), 4.25 – 4.13 (m, 2H), 3.93 – 3.72 (m, 4H), 3.41 (s, 3H), 2.57 – 2.52 (m, 2H), 2.38 – 2.26 (m, 7H), 2.08 – 1.43 (m, 6H), 1.40 – 1.31 (m, 6H), 1.28 – 1.24 (m, 3H), 1.12 – 1.05 (m, 3H), 1.04 – 0.94 (m, 2H), 0.87 – 0.77 (m, 12H).

實施例 2.61：化合物LP-61的合成

步驟一：化合物LP-61的合成

將化合物LP-59-f (12 mg, 22 µmol)，化合物LP-41-b (10 mg, 18 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(25 mg, 46 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(8 mg, 27 µmol)。混合物在室溫下攪拌0.5小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-60 (2 mg, 收率9.3%)。ESI-MS (m/z): 1053.6 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.41 (s, 1H), 9.09 (s, 2H), 8.58 – 8.55 (m, 1H), 8.34 – 8.27 (m, 1H), 8.22 – 8.03 (m, 6H), 7.81 – 7.78 (m, 1H), 7.56 – 7.51 (m, 1H), 7.35 – 7.28 (m, 1H), 7.26 – 7.15 (m, 5H), 6.11 – 5.68 (m, 1H), 4.78 – 4.16 (m, 6H), 3.78 – 3.52 (m, 12H), 2.58 – 2.55 (m, 2H), 2.34 – 2.31 (m, 3H), 1.86 – 1.78 (m, 2H), 1.03 – 0.88 (m, 6H).

實施例 2.62：化合物LP-62的合成

步驟一：化合物LP-62的合成

將化合物LP-1-a (8 mg, 10 µmol)和化合物P-23 (5 mg, 10 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(3 mg, 25 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-62 (4 mg, 收率32%)。ESI-MS (m/z): 1081.5 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.36 (s, 1H), 10.06 – 9.90 (m, 1H), 8.65 – 8.33 (m, 1H), 8.21 – 8.03 (m, 3H), 7.84 – 7.72 (m, 2H), 7.61 – 7.42 (m, 3H), 7.37 – 7.04 (m, 4H), 6.99 (s, 2H), 6.12 – 5.77 (m, 2H), 5.54 – 5.28 (m, 2H), 5.07 – 4.89 (m, 2H), 4.68 – 4.32 (m, 4H), 4.23 – 4.15 (m, 2H), 3.41 – 3.33 (m, 3H), 3.13 – 2.90 (m, 4H), 2.22 – 2.06 (m, 3H), 2.00 – 1.88 (m, 1H), 1.69 – 1.28 (m, 13H), 0.85 – 0.79 (m, 6H).

實施例 2.63：化合物LP-63的合成

步驟一：化合物LP-63-a的合成

將化合物L-丙氨酸(7 g, 79 mmol)溶於甲醇(400 mL)，加入碳酸鉀(29.3 g, 212 mmol)，五水合硫酸銅(196 mg, 786 µmol)和1H-咪唑-1-磺醯疊氮鹽酸鹽(19.8 g, 94 mmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。濃縮反應液，加入100 mL水，用稀鹽酸調至pH=1，用二氯甲烷萃取三次，合併有機相，乾燥，濃縮得到化合物LP-63-a (7.5 g, 收率83%)。

步驟二：化合物LP-63-b的合成

將化合物LP-63-a (7.5 g, 65 mmol)和(4-氨基苯基)甲醇(16 g, 130 mmol)溶於二氯甲烷(150 mL)和甲醇(75 mL)的混合物，加入2-乙氧基-1-乙氧碳醯基-1,2-二氫喹啉(16.1 g, 65.2 mmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=50/50)得到化合物LP-63-b (9.9 g, 收率69%)。ESI-MS (m/z): 221.4 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-63-c的合成

將化合物LP-63-b (3 g, 13.6 mmol)和三乙胺(4.14 g, 40.9 mmol)溶於四氫呋喃(75 mL)，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(4.56 g, 15 mmol)。混合物在室溫下攪拌1小時，加入2-(甲磺醯基)乙胺(2.52 g, 20.4 mmol)，繼續攪拌1小時。濃縮反應液，加入100 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=5/95)得到化合物LP-63-c (4.2 g, 收率83%)。ESI-MS (m/z): 370.4 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-63-d的合成

將化合物LP-63-c (1.9 g, 5.14 mmol)和多聚甲醛(232 mg, 7.7 mmol)溶於二氯甲烷(70 mL)，加入三甲基氯矽烷(5.59 g, 51 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到粗產品化合物LP-63-d (2.15 g)。

步驟五：化合物LP-63-e的合成

將化合物LP-29-c (820 mg, 1.63 mmol)溶於二氯甲烷(25 mL)，加入粗產品化合物LP-63-d (1.70 g)。混合物在60℃下攪拌過夜。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-63-e (500 mg, 收率35%)。ESI-MS (m/z): 884.5 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-63-f的合成

將化合物LP-63-e (500 mg, 565 µmol)溶於四氫呋喃(5 mL)和水(5 mL)的混合物，加入1 N氫氧化鋰水溶液(2 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入醋酸至pH=7，濃縮，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-63-f (476 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 842.5 [M+H]⁺.

步驟七：化合物LP-63-g的合成

將化合物LP-63-f (476 mg, 565 µmol)溶於四氫呋喃(5 mL)和水(5 mL)的混合物，加入三(2-羰基乙基)磷鹽酸鹽(324 mg, 1.13 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。向反應液加入飽和碳酸氫鈉，用乙酸乙酯萃取三次，合併有機相，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到化合物LP-63-g (416 mg, 收率90%)。ESI-MS (m/z): 816.7 [M+H]⁺.

步驟八：化合物LP-63-h的合成

將化合物LP-63-g (461 mg, 565 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(219 mg, 1.70 mmol)和2,5-二氧代吡咯烷-1-基(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-L-纈氨酸酯(343 mg, 565 µmol)。混合物在室溫下攪拌3小時。向反應液加入乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到粗產品化合物LP-63-h (642 mg)。ESI-MS (m/z): 1137.5 [M+H]⁺.

步驟九：化合物LP-63-i的合成

將粗產品化合物LP-63-h (642 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)，加入二乙胺(2 mL)。混合物在室溫下攪拌3小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-63-i (105 mg, 收率20%)。ESI-MS (m/z): 915.6 [M+H]⁺.

步驟十：化合物LP-63的合成

將化合物LP-44-c (4 mg, 11 µmol)，化合物LP-63-i (8 mg, 10 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(4 mg, 30 µmol) 溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(8 mg, 27 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-63 (2 mg, 收率18%)。ESI-MS (m/z): 1165.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.29 (s, 1H), 10.12 – 9.84 (m, 1H), 9.11 (s, 2H), 8.40 – 8.36 (m, 1H), 8.31 – 8.20 (m, 1H), 8.12 – 8.04 (m, 3H), 8.00 – 7.90 (m, 1H), 7.89 – 7.42 (m, 4H), 7.38 – 7.16 (m, 5H), 5.80 – 5.69 (m, 1H), 5.09 – 4.98 (m, 2H), 4.94 – 4.73 (m, 4H), 4.73 – 4.55 (m, 3H), 4.45 – 4.36 (m, 1H), 4.34 – 4.12 (m, 2H), 3.74 – 3.53 (m, 3H), 3.01 – 2.87 (m, 4H), 2.44 – 2.29 (m, 4H), 2.05 – 1.91 (m, 2H), 1.86 – 1.79 (m, 2H), 1.35 – 1.28 (m, 4H), 1.02 – 0.94 (m, 4H), 0.90 – 0.83 (m, 8H).

實施例 2.64：化合物LP-64的合成

步驟一：化合物LP-64-a的合成

將((2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)乙醯)氨基)乙酸甲酯(118 mg, 322 µmol)和化合物P-22 (80 mg, 161 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)，加入碳酸銫(105 mg, 322 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。向反應液加入乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到粗產品化合物LP-64-a (110 mg)。ESI-MS (m/z): 764.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-64-b的合成

將化合物LP-64-a (110 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入二乙胺(0.4 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-64-b (27 mg, 收率28%)。ESI-MS (m/z): 542.4 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-64的合成

將化合物LP-64-b (10 mg, 17 µmol)，化合物LP-59-f (13 mg, 25 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(7 mg, 55 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(9 mg, 30 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-64 (8 mg, 收率43%)。ESI-MS (m/z): 1053.6 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.10 (s, 2H), 8.61 – 8.59 (m, 1H), 8.11 – 8.02 (m, 3H), 7.89 – 7.87 (m, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.24 – 7.19 (m, 5H), 6.71 – 6.64 (m, 1H), 6.07 – 5.97 (m, 2H), 5.75 – 5.71 (m, 1H), 5.36 – 5.33 (m, 1H), 5.10 – 4.97 (m, 1H), 4.77 – 4.63 (m, 2H), 4.55 – 4.41 (m, 1H), 4.13 – 4.03 (m, 1H), 3.78 – 3.71 (m, 2H), 3.41 (s, 3H), 2.57 – 2.56 (m, 2H), 2.33 – 2.31 (m, 2H), 1.83 – 1.79 (m, 2H), 1.13 (s, 4H), 1.07 – 1.00 (m, 6H), 0.98 – 0.91 (m, 3H), 0.89 – 0.83 (m, 5H).

實施例 2.65：化合物LP-65的合成

步驟一：化合物LP-65的合成

將化合物LP-53-e (17 mg, 27 µmol)，化合物P-23 (15 mg, 25 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(6 mg, 50 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(11 mg, 37 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-65 (2 mg, 收率5%)。ESI-MS (m/z): 1101.6 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.39 – 12.34 (m, 1H), 9.16 – 9.08 (m, 2H), 9.00 (s, 1H), 8.60 – 8.54 (m, 1H), 8.23 – 8.00 (m, 4H), 7.99 – 7.85 (m, 2H), 7.82 – 7.79 (m, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.35 – 7.27 (m, 1H), 6.06 – 5.45 (m, 1H), 4.90 – 4.51 (m, 2H), 4.45 – 4.30 (m, 2H), 4.22 – 4.15 (m, 1H), 4.08 – 3.91 (m, 4H), 3.42 (s, 3H), 3.31 – 3.19 (m, 2H), 3.02 – 2.88 (m, 8H), 2.56 – 2.53 (m, 2H), 2.39 – 2.29 (m, 2H), 2.03 – 1.90 (m, 1H), 1.65 – 1.51 (m, 10H), 0.94 – 0.76 (m, 15H).

實施例 2.66：化合物LP-66的合成

步驟一：化合物LP-66-a的合成

將化合物LP-44-c (360 mg, 1.34 mmol)和N-羥基丁二醯亞胺(183 mg, 1.6 mmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入N,N'-二環己基碳二亞胺(332 mg, 1.61 mmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=50/50)得到化合物LP-66-a (450 mg, 收率94%)。ESI-MS (m/z): 366.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-66-b的合成

將化合物LP-39-a (4.5 g, 9.38 mmol)溶於二氯甲烷(50 mL)，加入4 N鹽酸二氧六環(10 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-66-b (3.5 g, 收率98%)。ESI-MS (m/z): 380.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-66-c的合成

將化合物LP-66-b (3.15 g, 8.3 mmol)溶於二氯甲烷(50 mL)，加入(叔丁基二甲基矽氧基)乙醛(5.79 g, 33.2 mmol)。混合物在室溫下攪拌10分鐘，加入三乙醯氧基硼氫化鈉(8.8 g, 41.5 mmol)，繼續攪拌6小時。反應液加入50 mL飽和氯化銨溶液淬滅，用100 mL二氯甲烷萃取，分液，有機相用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過反相柱層析色譜純化(水/乙腈=65/35)得到化合物LP-66-c (3 g, 收率52%)。ESI-MS (m/z): 696.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-66-d的合成

將化合物LP-66-c (1 g, 1.44 mmol)溶於乙酸乙酯(10 mL)，加入10%鈀炭(0.1 g)。混合物在氫氣氣氛中室溫下攪拌16小時。反應液經矽藻土過濾，濃縮得到化合物LP-66-d (500 mg, 收率62%)。ESI-MS (m/z): 562.5 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-66-e的合成

將化合物LP-66-d (500 mg, 889 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)，加入化合物LP-66-a (479 mg, 889 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過反相柱層析色譜純化(水/乙腈=60/40)得到化合物LP-66-e (600 mg, 收率83%)。ESI-MS (m/z): 812.5 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-66-f的合成

將化合物LP-66-e (600 mg, 738 µmol)溶於二氯甲烷(6 mL)和甲醇(1 mL)的混合物，加入4 N鹽酸二氧六環(2 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過反相柱層析色譜純化(水/甲醇=90/10)得到化合物LP-66-f (390 mg, 收率90%)。ESI-MS (m/z): 584.6 [M+H]⁺.

步驟七：化合物LP-66的合成

將化合物LP-66-f (13 mg, 23 µmol)，化合物P-1 (10 mg, 21 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(15 mg, 111 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(7 mg, 23 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-66 (2 mg, 收率9%)。ESI-MS (m/z): 1038.5 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.44 – 11.36 (m, 1H), 9.08 (s, 2H), 8.67 – 8.62 (m, 1H), 8.48 – 8.42 (m, 1H), 8.34 – 8.29 (m, 2H), 8.17 – 8.05 (m, 5H), 7.71 – 7.64 (m, 1H), 7.54 – 7.42 (m, 1H), 7.39 – 7.30 (m, 1H), 7.26 – 7.21 (m, 1H), 7.19 – 7.15 (m, 2H), 6.30 – 6.24 (m, 1H), 4.74 – 4.56 (m, 7H), 4.37 – 4.23 (m, 2H), 4.20 – 4.05 (m, 2H), 3.53 (s, 3H), 2.45 – 2.32 (m, 10H), 2.02 – 1.94 (m, 2H), 1.88 – 1.76 (m, 4H), 1.71 – 1.59 (m, 5H), 0.86 – 0.66 (m, 8H).

實施例 2.67：化合物LP-67的合成

步驟一：化合物LP-67-a的合成

將化合物LP-46-c (200 mg, 439 µmol)和8((9H-芴-9-基甲氧基)羰基氨基)-3,6-二氧雜-正辛酸(254 mg, 658 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入2-乙氧基-1-乙氧碳醯基-1,2-二氫喹啉(217 mg, 878 µmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=97/3)得到化合物LP-67-a (279 mg, 收率77%)。ESI-MS (m/z): 823.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-67-b的合成

將化合物LP-67-a (279 mg, 339 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(88 mg, 678 µmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(206 mg, 678 µmol)。混合物在40℃下攪拌過夜。反應液加入20 mL二氯甲烷，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=50/50)得到化合物LP-67-b (200 mg, 收率62%)。ESI-MS (m/z): 988.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-67-c的合成

將化合物LP-67-b (61 mg, 62 µmol)和化合物P-23 (30 mg, 62 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(16 mg, 124 µmol)。混合物在室溫下攪拌過夜。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=97/3)得到化合物LP-67-c (39 mg, 收率47%)。ESI-MS (m/z): 1331.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-67-d的合成

將化合物LP-67-c (39 mg, 29 µmol)溶於四氫呋喃(1 mL)和水(1 mL)的混合物，加入1 N氫氧化鋰水溶液(0.2 mL)。混合物在室溫下攪拌16小時。反應液加入醋酸至pH=7，反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-67-d (10 mg, 收率36%)。ESI-MS (m/z): 969.5 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-67的合成

將化合物LP-67-d (5 mg, 5 µmol)和化合物LP-66-a (2 mg, 7 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(5.5 mg, 42 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-67 (2 mg, 收率32%)。ESI-MS (m/z): 1219.5 [M+H]⁺.

實施例 2.68：化合物LP-68的合成

步驟一：化合物LP-68-a的合成

將5-溴-2-甲硫基嘧啶(10 g, 48.8 mmol)和乙炔基三甲基矽烷(5.75 g, 58.5 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(70 mL)，加入碘化亞銅(928 mg, 4.88 mmol)，雙(三苯基膦)二氯化鈀(1.71 g, 2.44 mmol)和三乙胺(14.8 g, 146 mmol)。混合物在95℃下攪拌16小時。將反應液冷卻至室溫，加入200 mL乙酸乙酯，經矽藻土過濾，濾液用稀鹽酸洗一次，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/DCM=80/20)得到化合物LP-68-a (6 g, 收率55%)。ESI-MS (m/z): 223.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-68-b的合成

將化合物LP-68-a (3 g, 13.5 mmol)溶於甲醇(30 mL)，加入碳酸鉀(2.80 g, 20.2 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液過濾，濃縮濾液得到粗產品化合物LP-68-b (2.11 g)。ESI-MS (m/z): 151.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-68-c的合成

將化合物LP-68-b (2.11 g)和6-疊氮己酸(1.44 g, 9.13 mmol)溶於叔丁醇(12 mL)和水(15 mL)的混合物，加入抗壞血酸鈉(5.43 g, 27.4 mmol)和溴化亞銅(2.62 g, 18.3 mmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。用稀鹽酸將反應液pH調至7，用乙酸乙酯萃取三次，合併有機相，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過反相柱層析色譜純化(水/ACN=50/50)得到化合物LP-68-c (620 mg, 收率22%)。ESI-MS (m/z): 308.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-68-d的合成

將化合物LP-68-c (620 mg, 2.02 mmol)溶於四氫呋喃(5 mL)和水(5 mL)的混合物，加入過硫酸氫鉀(3.72 g, 6.05 mmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。反應液用乙酸乙酯萃取三次，合併有機相，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到化合物LP-68-d (500 mg, 收率73%)。ESI-MS (m/z): 340.6 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-68-e的合成

將化合物LP-53-c (391 mg, 884 µmol)，N,N-二異丙基乙胺(457 mg, 3.54 mmol)和化合物LP-68-d (300 mg, 883 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(20 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(504 mg, 1.33 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。向反應液中加入水(50 mL)，用乙酸乙酯(50 mL)萃取三次，合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過快速柱層析色譜純化(DCM/MeOH=90/10)得到化合物LP-68-e(400 mg, 收率59%)。ESI-MS (m/z): 764.5 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-68-f的合成

將化合物LP-68-e (400 mg, 523 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入三氟乙酸(2 mL)，混合物在室溫下繼續攪拌4小時。濃縮反應液得到化合物LP-68-f (370 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 708.6 [M+H]⁺.

步驟七：化合物LP-68的合成

將化合物LP-68-f (23 mg, 31 µmol)和N-羥基丁二醯亞胺(4 mg, 35 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳醯二亞胺鹽酸鹽(7 mg, 35 µmol)。混合物在室溫下攪拌10分鐘，加入N,N-二異丙基乙胺(8 mg, 63 µmol)和化合物P-1 (15 mg, 32 µmol)。混合物在室溫下反應3小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-68 (5 mg, 收率14%)。ESI-MS (m/z): 1162.6 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.45 – 11.30 (m, 1H), 9.48 (s, 2H), 8.93 (s, 1H), 8.56 – 8.48 (m, 1H), 8.37 – 8.26 (m, 3H), 8.17 – 8.01 (m, 3H), 7.94 – 7.77 (m, 1H), 7.70 – 7.62 (m, 1H), 7.52 – 7.44 (m, 1H), 7.37 – 7.29 (m, 1H), 7.26 – 7.16 (m, 2H), 6.32 – 6.24 (m, 1H), 4.79 – 4.54 (m, 5H), 4.50 – 4.42 (m, 2H), 4.25 – 4.07 (m, 2H), 3.89 – 3.73 (m, 3H), 3.45 (s, 3H), 2.34 – 2.23 (m, 6H), 2.20 – 2.08 (m, 2H), 2.04 – 1.81 (m, 3H), 1.75 – 1.62 (m, 2H), 1.59 – 1.47 (m, 3H), 1.38 – 1.18 (m, 10H), 0.85 – 0.63 (m, 15H).

實施例 2.69：化合物LP-69的合成

步驟一：化合物LP-69-a的合成

將化合物P-23(17 mg, 20 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(8 mg, 62 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-52- h (10 mg, 21 µmol)。混合物在室溫下攪拌過夜。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-69-a (7 mg, 收率31%)。ESI-MS (m/z): 1152.4 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-69的合成

將化合物LP-69-a (7 mg, 6 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(0.5 mL)，混合物在室溫下繼續攪拌0.5小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-69 (0.3 mg, 收率4%)。ESI-MS (m/z): 1096.5 [M+H]⁺.

實施例 2.70和實施例 2.71：化合物LP- 70和化合物LP-71的合成

步驟一：化合物LP-70-a的合成

將化合物LP-44-i (60 mg, 103 µmol)，(4-氨基苯基)甲醇(38 mg, 310 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(20 mg, 155 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入O-苯並三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸鹽(78 mg, 206 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。向反應液中加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(20 mL)萃取三次，合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過快速柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-70-a(47 mg, 收率66%)。ESI-MS (m/z): 685.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-70-b的合成

將化合物LP-70-a (47 mg, 68 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(26 mg, 205 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(42 mg, 137 µmol)。混合物在40℃下攪拌過夜。反應液加入20 mL二氯甲烷，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=5/95)得到化合物LP-70-b (24 mg, 收率28%)。ESI-MS (m/z): 850.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-70和化合物LP-71的合成

將化合物P-23(10 mg, 16 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(7 mg, 50 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-70-b (21 mg, 25 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到

化合物LP-70 (3 mg, 收率15%)。ESI-MS (m/z): 1193.7 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.39 – 12.33 (m, 1H), 9.08 (s, 2H), 8.58 – 8.53 (m, 1H), 8.47 – 8.42 (m, 1H), 8.18 – 7.96 (m, 6H), 7.81 – 7.75 (m, 1H), 7.69 – 7.49 (m, 3H), 7.36 – 7.04 (m, 4H), 5.81 – 5.62 (m, 1H), 5.54 – 5.31 (m, 1H), 5.01 – 4.89 (m, 1H), 4.42 – 4.30 (m, 1H), 4.22 – 4.16 (m, 1H), 3.99 – 3.84 (m, 2H), 3.78 (s, 1H), 3.41 (s, 3H), 3.23 – 3.11 (m, 2H), 2.47 – 2.31 (m, 4H), 1.98 – 1.89 (m, 2H), 1.84 – 1.73 (m, 4H), 1.69 – 1.54 (m, 5H), 1.46 – 1.33 (m, 8H), 0.92 – 0.76 (m, 16H).

化合物LP-71 (5 mg, 收率25%)。ESI-MS (m/z): 1193.7 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.28 (s, 1H), 9.04 (s, 2H), 8.53 – 8.44 (m, 1H), 8.28 – 8.14 (m, 3H), 8.08 – 7.97 (m, 3H), 7.90 – 7.84 (m, 1H), 7.75 – 7.65 (m, 1H), 7.55 – 7.36 (m, 3H), 7.30 – 6.97 (m, 4H), 5.69 – 5.56 (m, 1H), 5.07 – 4.75 (m, 2H), 4.59 – 4.45 (m, 1H), 4.33 – 4.23 (m, 1H), 4.17 – 4.11 (m, 1H), 3.89 – 3.70 (m, 3H), 3.34 (s, 3H), 3.10 – 3.07 (m, 2H), 2.32 – 2.17 (m, 5H), 1.93 – 1.85 (m, 2H), 1.76 – 1.70 (m, 2H), 1.66 – 1.46 (m, 6H), 1.35 – 1.19 (m, 7H), 0.82 – 0.64 (m, 16H).

實施例 2.72：化合物LP-72的合成

步驟一：化合物LP-72-a的合成

將化合物LP-67-d (5 mg, 5 µmol)和化合物LP-46-a (4 mg, 10 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(5.5 mg, 42 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-72-a (6 mg, 收率94%)。ESI-MS (m/z): 1235.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-72的合成

將化合物LP-72-a (6 mg, 5 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(0.5 mL)，混合物在室溫下繼續攪拌0.5小時。濃縮反應液，殘留物通過凍乾得到化合物LP-72 (4 mg, 收率73%)。ESI-MS (m/z): 1135.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 13.18 – 12.59 (m, 1H), 12.34 (s, 1H), 9.16 – 9.02 (m, 1H), 8.60 – 8.50 (m, 1H), 8.42 – 8.36 (m, 1H), 8.31 – 8.02 (m, 4H), 7.95 – 7.83 (m, 3H), 7.81 – 7.75 (m, 1H), 7.58 – 7.46 (m, 1H), 7.34 – 7.19 (m, 1H), 7.12 (s, 2H), 7.11 – 6.74 (m, 2H), 5.88 – 5.18 (m, 4H), 5.12 – 4.43 (m, 7H), 4.21 – 3.74 (m, 11H), 3.36 – 3.09 (m, 10H), 1.72 – 1.55 (m, 2H).

實施例 2.73：化合物LP-73的合成

步驟一：化合物LP-73-a的合成

將化合物LP-46-e (51 mg, 55 µmol)和化合物P-23 (30 mg, 50 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(13 mg, 100 µmol)。混合物在室溫下攪拌過夜。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=5/95)得到化合物LP-73-a (28 mg, 收率44%)。ESI-MS (m/z): 1257.7 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-73-b的合成

將化合物LP-73-a (28 mg, 22 µmol)溶於四氫呋喃(1 mL)和水(1 mL)的混合物，加入1 N氫氧化鋰水溶液(0.2 mL)。混合物在冰浴下攪拌2小時。反應液加入醋酸至pH=7，濃縮，殘留物溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入二乙胺(0.2 mL)，混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-73-b (10 mg, 收率50%)。ESI-MS (m/z): 895.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-73-c的合成

將化合物LP-73-b (5 mg, 6 µmol)和化合物LP-46-a (4 mg, 11 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(5.5 mg, 42 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-73-c (6 mg, 收率92%)。ESI-MS (m/z): 1161.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-73的合成

將化合物LP-73-c (4 mg, 4 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(0.5 mL)，混合物在室溫下繼續攪拌0.5小時。濃縮反應液，殘留物通過凍乾得到化合物LP-73 (3 mg, 收率80%)。ESI-MS (m/z): 1061.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 13.05 – 12.69 (m, 1H), 12.33 (s, 1H), 9.10 – 8.95 (m, 1H), 8.59 – 8.53 (m, 1H), 8.44 – 8.38 (m, 1H), 8.21 – 8.05 (m, 4H), 7.92 – 7.85 (m, 3H), 7.81 – 7.76 (m, 1H), 7.60 – 7.46 (m, 1H), 7.32 – 7.19 (m, 1H), 7.11 (s, 2H), 7.07 – 6.89 (m, 2H), 5.83 – 5.27 (m, 4H), 5.09 – 4.45 (m, 6H), 4.21 – 3.73 (m, 5H), 3.28 – 2.93 (m, 9H), 2.57 – 2.53 (m, 2H), 2.11 – 1.90 (m, 2H).

實施例 2.74：化合物LP-74的合成

步驟一：化合物LP-74-a的合成

將化合物LP-44-c (59 mg, 221 µmol)，((S)-5-((S)-2-氨基-3-甲基丁醯胺基)-6-((4-(羥甲基)苯基)氨基)-6-氧代己基)氨基甲酸叔丁酯(100 mg, 221 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(86 mg, 665 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入苯並三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸鹽(126 mg, 332 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-74-a (134 mg, 收率86%)。ESI-MS (m/z): 701.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-74-b的合成

將化合物LP-74-a (134 mg, 191 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(116 mg, 382 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(74 mg, 573 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=5/95)得到化合物LP-74-b (110 mg, 收率66%)。ESI-MS (m/z): 866.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-74-c的合成

將化合物P-23 (40 mg, 67 µmol)和化合物LP-74-b (58 mg, 67 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(17 mg, 134 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-74-c (43 mg, 收率53%)。ESI-MS (m/z): 1209.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-74-d的合成

將化合物LP-74-c (18 mg, 15 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(0.5 mL)，混合物在室溫下繼續攪拌0.5小時。濃縮反應液，殘留物通過凍乾得到化合物LP-74-d (16 mg, 收率96%)。ESI-MS (m/z): 1109.5 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-74的合成

將化合物LP-74-d (16 mg, 14 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(4 mg, 30 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入2,5-二氧代吡咯烷-1-基 2,5,8,11,14,17,20,23-八氧雜二十六烷-26-酸酯(7 mg, 14 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-74 (5 mg, 收率23%)。ESI-MS (m/z): 1503.7 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.35 (s, 1H), 10.03 – 9.83 (m, 1H), 9.11 (s, 2H), 8.59 – 8.53 (m, 1H), 8.31 – 8.05 (m, 4H), 7.98 – 7.91 (m, 1H), 7.83 – 7.73 (m, 2H), 7.64 – 7.43 (m, 3H), 7.36 – 7.02 (m, 3H), 5.77 – 5.59 (m, 1H), 5.51 – 5.34 (m, 1H), 5.09 – 4.43 (m, 4H), 4.41 – 4.30 (m, 1H), 4.28 – 4.19 (m, 1H), 4.19 – 3.61 (m, 3H), 3.61 – 3.56 (m, 2H), 3.53 – 3.45 (m, 28H), 3.44 – 3.42 (m, 2H), 3.41 (s, 3H), 3.24 (s, 3H), 3.05 – 2.98 (m, 2H), 2.59 – 2.54 (m, 2H), 2.45 – 2.33 (m, 2H), 2.32 – 2.26 (m, 2H), 2.04 – 1.95 (m, 1H), 1.88 – 1.79 (m, 2H), 1.74 – 1.55 (m, 4H), 1.44 – 1.24 (m, 5H), 0.97 – 0.84 (m, 6H).

實施例 2.75：化合物LP-75的合成

步驟一：化合物LP-75-a的合成

將((2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)乙醯)氨基)乙酸甲酯(28 mg, 77 µmol)和化合物P-23-a (30 mg, 51 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)，加入碳酸銫(36 mg, 102 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。向反應液加入乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到粗產品化合物LP-75-a (50 mg)。ESI-MS (m/z): 891.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-75-b的合成

將粗產品化合物LP-75-a (50 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入二乙胺(0.4 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-75-b (18 mg, 收率51%)。ESI-MS (m/z): 669.4 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-75-c的合成

將化合物LP-75-b (10 mg, 15 µmol)，化合物LP-59-f (11 mg, 17 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(7 mg, 55 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(9 mg, 30 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-75-c (5 mg, 收率28%)。ESI-MS (m/z): 1180.6 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-75的合成

將化合物LP-75-c (5 mg, 4 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(0.5 mL)，混合物在室溫下繼續攪拌0.5小時。濃縮反應液，殘留物通過凍乾得到化合物LP-75 (4 mg, 收率87%)。ESI-MS (m/z): 1080.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.03 (s, 2H), 8.93 – 8.85 (m, 1H), 8.64 – 8.51 (m, 2H), 8.28 – 8.21 (m, 1H), 8.17 – 8.11 (m, 3H), 8.08 – 8.05 (m, 1H), 8.04 – 7.96 (m, 2H), 7.85 – 7.80 (m, 1H), 7.80 – 7.76 (m, 1H), 7.39 – 7.33 (m, 1H), 7.18 – 7.11 (m, 5H), 6.05 – 5.90 (m, 2H), 5.88 – 5.74 (m, 1H), 5.65 – 5.56 (m, 1H), 4.74 – 4.64 (m, 2H), 4.45 – 4.32 (m, 2H), 4.00 – 3.77 (m, 1H), 3.68 – 3.58 (m, 6H), 3.34 (s, 3H), 3.12 – 3.04 (m, 2H), 2.94 – 2.88 (m, 3H), 2.74 – 2.65 (m, 1H), 2.50 – 2.47 (m, 2H), 2.25 – 2.22 (m, 2H), 1.79 – 1.69 (m, 4H).

實施例 2.76：化合物LP- 76的合成

步驟一：化合物LP-76-a的合成

將化合物LP-53-e (145 mg, 227 µmol)，(4-氨基苯基)甲醇(33 mg, 273 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(44 mg, 341 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入O-苯並三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸鹽(172 mg, 455 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。向反應液中加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(20 mL)萃取三次，合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過快速柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-76-a(150 mg, 收率89%)。ESI-MS (m/z): 742.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-76-b的合成

將化合物LP-76-a (150 mg, 202 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(78 mg, 606 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(123 mg, 404 µmol)。混合物在40℃下攪拌過夜。反應液加入20 mL二氯甲烷，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=5/95)得到化合物LP-76-b (168 mg, 收率92%)。ESI-MS (m/z): 907.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-76的合成

將化合物P-23(10 mg, 21 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(7 mg, 50 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-76-b (19 mg, 21 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-76 (10 mg, 收率39%)。ESI-MS (m/z): 1250.7 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.37 (s, 1H), 9.87 (s, 1H), 9.11 (s, 2H), 8.58 – 8.53 (m, 1H), 8.23 – 8.09 (m, 3H), 8.09 – 8.06 (m, 1H), 7.98 – 7.94 (m, 1H), 7.80 – 7.76 (m, 1H), 7.61 – 7.49 (m, 3H), 7.35 – 7.19 (m, 3H), 7.16 – 6.97 (m, 1H), 5.75 – 5.64 (m, 1H), 5.06 – 4.42 (m, 4H), 4.27 – 4.15 (m, 2H), 4.10 – 3.94 (m, 1H), 3.90 – 3.83 (m, 3H), 3.80 – 3.77 (m, 1H), 3.41 (s, 3H), 3.23 – 3.17 (m, 2H), 3.01 – 2.91 (m, 1H), 2.56 – 2.52 (m, 3H), 2.39 – 2.25 (m, 8H), 2.04 – 1.95 (m, 2H), 1.90 – 1.74 (m, 2H), 1.73 – 1.65 (m, 2H), 1.62 – 1.54 (m, 3H), 1.39 – 1.32 (m, 6H), 0.87 – 0.79 (m, 12H).

實施例 2.77：化合物LP- 77的合成

步驟一：化合物LP-77的合成

將化合物LP-63-i(10 mg, 12 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(7 mg, 50 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入 6-(馬來醯亞胺基)己酸琥珀醯亞胺酯(5 mg, 15 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-77 (4.5 mg, 收率33%)。ESI-MS (m/z): 1108.7 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.24 (s, 1H), 10.03 – 9.78 (m, 1H), 8.40 – 8.38 (m, 1H), 8.19 – 8.05 (m, 4H), 7.84 – 7.80 (m, 1H), 7.63 – 7.52 (m, 2H), 7.49 – 7.46 (m, 1H), 7.37 – 7.31 (m, 2H), 7.26 – 7.16 (m, 2H), 7.00 (s, 2H), 5.83 – 5.46 (m, 2H), 5.07 – 4.97 (m, 2H), 4.88 (s, 2H), 4.82 – 4.56 (m, 3H), 4.42 – 4.36 (m, 1H), 4.28 – 4.13 (m, 2H), 3.68 – 3.55 (m, 3H), 3.37 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 3.01 – 2.89 (m, 3H), 2.22 – 1.92 (m, 5H), 1.53 – 1.28 (m, 8H), 1.22 – 1.14 (m, 3H), 1.01 – 0.95 (m, 3H), 0.89 – 0.84 (m, 5H), 0.84 – 0.81 (m, 3H).

實施例 2.78：化合物LP- 78的合成

步驟一：化合物LP-78的合成

將化合物LP-53-e (16 mg, 27 µmol)，化合物LP-30-f (15 mg, 27 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(90 mg, 70 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入O-苯並三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸鹽(17 mg, 45 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-78(5 mg, 收率16%)。ESI-MS (m/z): 1108.7 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.26 (s, 1H), 9.11 (s, 2H), 8.38 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.31 – 8.23 (m, 2H), 8.15 – 7.90 (m, 5H), 7.49 (s, 1H), 7.30 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.24 – 7.15 (m, 1H), 5.85 – 5.60 (m, 1H), 4.83 (s, 2H), 4.80 – 4.54 (m, 4H), 4.28 – 4.21 (m, 1H), 4.19 – 4.14 (m, 1H), 4.07 – 3.98 (m, 1H), 3.85 – 3.71 (m, 3H), 3.41 (s, 3H), 2.56 – 2.53 (m, 2H), 2.39 – 2.25 (m, 8H), 2.01 – 1.91 (m, 1H), 1.85 – 1.75 (m, 2H), 1.40 – 1.29 (m, 6H), 1.23 – 1.00 (m, 6H), 0.96 – 0.72 (m, 16H).

實施例 2.79：化合物LP- 79的合成

步驟一：化合物LP-79-a的合成

將((S)-1-(((S)-1-((4-(羥甲基)苯基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基甲酸叔丁酯(500 mg, 1.27 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(493 mg, 3.81 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(773 mg, 2.54 mmol)。混合物在40℃下攪拌過夜。反應液加入20 mL二氯甲烷，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=40/60)得到化合物LP-79-a (535 mg, 收率75%)。ESI-MS (m/z): 559.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-79-b的合成

將化合物P-23(100 mg, 168 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(65 mg, 503 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入化合物LP-79-a (112 mg, 201 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=20/80)得到化合物LP-79-b (120 mg, 收率79%)。ESI-MS (m/z): 902.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-79-c的合成

將化合物LP-79-b (120 mg, 106 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-79-c (30 mg, 收率35%)。ESI-MS (m/z): 802.6 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-79-d的合成

將(S)-2-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-6-氨基己酸叔丁酯鹽酸鹽(1.53 g, 3.32 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(429 mg, 3.32 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入2,5-二氧代吡咯烷-1-基 2,5,8,11,14,17,20,23-八氧雜二十六烷-26-酸酯(1.69 g, 3.32 mmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。反應液通過反相柱層析色譜純化(乙腈/水=50/50)得到化合物LP-79-d (2.7 g, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 819.5 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-79-e的合成

將化合物LP-79-d (2.7 g, 3.30 mmol)溶於四氫呋喃(30 mL)，加入二乙胺(6 mL)。混合物在室溫下攪拌16小時。濃縮反應液得到粗產品化合物LP-79-e (1.96 g, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 597.5 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-79-f的合成

將化合物LP-44-e (607 mg, 2.26 mmol)，N,N-二異丙基乙胺(779 mg, 6.03 mmol)和化合物LP-79-e (900 mg, 1.51 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(20 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(688 mg, 1.81 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。向反應液中加入水(50 mL)，用乙酸乙酯(50 mL)萃取三次，合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過反相柱層析色譜純化(乙腈/水=50/50)得到化合物LP-79-f(800 mg, 收率63%)。ESI-MS (m/z): 847.5 [M+H]⁺.

步驟七：化合物LP-79-g的合成

將化合物LP-79-f (800 mg, 944 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入三氟乙酸(2 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過反相柱層析色譜純化(乙腈/水=50/50)得到化合物LP-79-g (440 mg, 收率59%)。ESI-MS (m/z): 805.6 [M+H]⁺.

步驟八：化合物LP-79的合成

將化合物LP-79-g (9 mg, 12 µmol)和N-羥基丁二醯亞胺(1.4 mg, 12 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳醯二亞胺鹽酸鹽(2.4 mg, 12 µmol)。混合物在室溫下攪拌10分鐘，加入N,N-二異丙基乙胺(8 mg, 63 µmol)和化合物LP-79-c (10 mg, 11 µmol)。混合物在室溫下反應3小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-79 (4 mg, 收率23%)。ESI-MS (m/z): 1574.8 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.38 (s, 1H), 9.09 (s, 2H), 8.54 (s, 1H), 8.24 – 8.06 (m, 5H), 7.84 – 7.66 (m, 3H), 7.62 – 7.42 (m, 3H), 7.35 – 7.04 (m, 3H), 5.78 – 5.49 (m, 1H), 5.06 – 4.90 (m, 1H), 4.40 – 4.11 (m, 4H), 3.96 – 3.76 (m, 4H), 3.58 – 3.55 (m, 3H), 3.51 – 3.47 (m, 30H), 3.40 (s, 3H), 3.22 (s, 3H), 3.06 – 2.94 (m, 4H), 2.56 – 2.54 (m, 3H), 2.29 – 2.25 (m, 2H), 1.84 – 1.75 (m, 2H), 1.68 – 1.56 (m, 4H), 1.36 – 1.22 (m, 10H), 0.89 – 0.80 (m, 6H).

實施例 2.80：化合物LP- 80的合成

步驟一：化合物LP-80-a的合成

將一甲胺鹽酸鹽(45.2 g, 669 mmol)溶於甲醇(200 mL)，緩慢加入三乙胺(79.1 g, 781 mmol)，室溫下攪拌15分鐘，加入6-硝基異苯並呋喃-1(3H)-酮(20 g, 112 mmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。反應液加入600 mL水，攪拌15分鐘，過濾，固體用水洗滌三次，真空乾燥得到化合物LP-80-a (20 g, 收率85%)。ESI-MS (m/z): 211.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-80-b的合成

將化合物LP-80-a (20 g, 95 mmol)溶於四氫呋喃(200 mL)，冰浴下緩慢滴加2 M硼烷二甲硫醚絡合物四氫呋喃溶液(142 mL)，滴加完成後混合物在70℃下攪拌5小時。將反應液冷卻至室溫，冰浴下向反應液中緩慢加入4 N鹽酸二氧六環溶液(80 mL)，混合物繼續在70℃下攪拌8小時。將反應液冷卻至0℃，過濾得到固體化合物LP-80-b (20 g, 收率90%)。ESI-MS (m/z): 197.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-80-c的合成

將化合物LP-80-b (15 g, 64.5 mmol)和咪唑(22 g, 322 mmol)溶於二氯甲烷(200 mL)，冰浴下緩慢加入叔丁基二苯基氯矽烷(18 g, 64.5 mmol)，滴加完成後混合物在室溫下攪拌8小時。將反應液加入至400 mL冰水中，用乙酸乙酯萃取三次，合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=20/80)得到化合物LP-80-c (20 g, 收率71%)。ESI-MS (m/z): 435.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-80-d的合成

將化合物LP-80-c (15 g, 34.5 mmol)和三乙胺(5.24 g, 52 mmol)溶於四氫呋喃(200 mL)，加入9-芴甲基-N-琥珀醯亞胺基碳酸酯(12.2 g, 36 mmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。反應液加400 mL水，用乙酸乙酯萃取三次，合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=60/40)得到化合物LP-80-d (15 g, 收率66%)。ESI-MS (m/z): 657.5 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-80-e的合成

將化合物LP-80-d (20 g, 30.5 mmol)溶於乙酸乙酯(200 mL)和甲醇(100 mL)的混合物，加入10%鈀炭(2 g)。混合物在室溫氫氣氣氛下攪拌16小時。反應液經矽藻土過濾，濃縮，殘留物通過石油醚打漿得到化合物LP-80-e (19 g, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 627.5 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-80-f的合成

將化合物LP-80-e (2.51 g, 4 mmol)溶於二氯甲烷(20 mL)和甲醇(10 mL)的混合物，加入(叔丁氧羰基)-L-纈氨醯-L-丙氨酸(1.27 g, 4.4 mmol)和2-乙氧基-1-乙氧碳醯基-1,2-二氫喹啉(1.98 g, 8 mmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=40/60)得到化合物LP-80-f (2.6 g, 收率72%)。ESI-MS (m/z): 897.5 [M+H]⁺.

步驟七：化合物LP-80-g的合成

將化合物LP-80-f (1.78 g, 1.98 mmol)溶於四氫呋喃(20 mL)，加入1 M的四丁基氟化銨四氫呋喃溶液(6 mL)。混合物在室溫下攪拌16小時。反應液加50 mL水，用乙酸乙酯萃取三次，合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=80/20)得到化合物LP-80-g (825 mg, 收率95%)。ESI-MS (m/z): 437.5 [M+H]⁺.

步驟八：化合物LP-80-h的合成

將化合物LP-80-g (506 mg, 1.16 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入2,5-二氧代吡咯烷-1-基 2,5,8,11,14,17,20,23-八氧雜二十六烷-26-酸酯(591 mg, 1.16 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(300 mg, 2.32 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=92/8)得到化合物LP-80-h (608 mg, 收率63%)。ESI-MS (m/z): 831.5 [M+H]⁺.

步驟九：化合物LP-80-i的合成

將化合物LP-80-h (608 mg, 731 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入三氟乙酸(2 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到粗產品化合物LP-80-i (600 mg)。ESI-MS (m/z): 731.5 [M+H]⁺.

步驟十：化合物LP-80-j的合成

將粗產品化合物LP-80-i (600 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入化合物LP-66-a (321 mg, 878 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(284 mg, 2.19 mmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=92/8)得到化合物LP-80-j (560 mg, 收率78%)。ESI-MS (m/z): 981.5 [M+H]⁺.

步驟十一：化合物LP-80-k的合成

將化合物LP-80-j (560 mg, 570 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(150 mg, 1.14 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(347 mg, 1.14 mmol)。混合物在40℃下攪拌過夜。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=92/8)得到化合物LP-80-k (360 mg, 收率55%)。ESI-MS (m/z): 1146.5 [M+H]⁺.

步驟十二：化合物LP-80的合成

將化合物P-23 (10 mg, 21 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-80-k (35 mg, 30 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(5 mg, 42 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-80 (5 mg, 收率16%)。ESI-MS (m/z): 1489.7 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.29 (s, 1H), 10.03 – 9.76 (m, 1H), 9.03 (s, 2H), 8.41 – 8.26 (m, 2H), 8.22 – 7.83 (m, 5H), 7.74 – 7.67 (m, 1H), 7.59 – 7.39 (m, 2H), 7.31 – 7.10 (m, 3H), 5.73 – 5.57 (m, 1H), 5.46 – 5.24 (m, 1H), 5.01 – 4.94 (m, 1H), 4.60 – 4.31 (m, 4H), 4.19 – 3.95 (m, 2H), 3.87 – 3.69 (m, 2H), 3.44 – 3.38 (m, 30H), 3.34 (s, 3H), 3.33 (s, 3H), 3.15 (s, 3H), 2.86 – 2.71 (m, 4H), 2.51 – 2.47 (m, 2H), 2.36 – 2.22 (m, 4H), 1.98 – 1.84 (m, 2H), 1.79 – 1.69 (m, 2H), 1.54 – 1.48 (m, 1H), 1.19 – 1.15 (m, 3H), 0.81 – 0.76 (m, 6H).

實施例 2.81：

使用實施例2.79相同的方法和反應條件，利用((S)-1-(((S)-1-((4-(羥甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基甲酸叔丁酯作為原料代替((S)-1-(((S)-1-((4-(羥甲基)苯基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基甲酸叔丁酯，利用(S)-2-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-4-氨基丁酸叔丁酯鹽酸鹽作為原料代替(S)-2-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-6-氨基己酸叔丁酯鹽酸鹽，得到下表中的目標產物。

化合物	結構	ESI-MS (m/z): [M+H]⁺.	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆)
LP-81		1632.5	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.38 (s, 1H), 10.08 – 9.97 (m, 1H), 9.12 (s, 2H), 8.57 – 8.54 (m, 1H), 8.28 – 8.20 (m, 2H), 8.19 – 8.10 (m, 3H), 7.89 – 7.83 (m, 1H), 7.83 – 7.75 (m, 2H), 7.62 – 7.47 (m, 3H), 7.36 – 7.05 (m, 3H), 6.10 – 5.97 (m, 1H), 5.78 – 5.66 (m, 1H), 5.51 – 5.38 (m, 3H), 5.03 – 4.93 (m, 1H), 4.69 – 4.57 (m, 1H), 4.42 – 4.32 (m, 2H), 4.26 – 4.18 (m, 1H), 3.97 – 3.78 (m, 2H), 3.60 – 3.57 (m, 2H), 3.51 – 3.47 (m, 30H), 3.44 – 3.42 (m, 2H), 3.41 (s, 3H), 3.24 (s, 3H), 3.21 – 2.93 (m, 6H), 2.58 – 2.55 (m, 2H), 2.34 – 2.28 (m, 4H), 2.04 – 1.96 (m, 1H), 1.85 – 1.78 (m, 3H), 1.71 – 1.65 (m, 2H), 1.64 – 1.57 (m, 3H), 1.46 – 1.34 (m, 2H), 0.87 – 0.81 (m, 6H).

實施例 2.82：化合物LP-82的合成

步驟一：化合物LP-82-a的合成

將化合物5-溴-2-甲硫基嘧啶(3 g, 14.6 mmol)和戊-4-炔-1-基氨基甲酸叔丁酯(2.9 g, 16 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(30 mL)，加入碘化亞銅(278 mg, 1.46 mmol)，雙(三苯基膦)二氯化鈀(513 mg, 731 µmol)和三乙胺(5.92 g, 58.5 mmol)。混合物在95℃下攪拌6小時。將反應液冷卻至室溫，加入乙酸乙酯，經矽藻土過濾，濾液用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=75/25)得到化合物LP-82-a (3.35 g, 收率74%)。ESI-MS (m/z): 308.2 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-82-b的合成

將化合物LP-82-a (3.93 g, 12.8 mmol)溶於二氯甲烷(30 mL)，加入4 N的鹽酸二氧六環溶液(20 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-82-b (3 g, 收率96%)。ESI-MS (m/z): 208.4 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-82-c的合成

將化合物LP-82-b (2.8 g, 11.5 mmol)和三乙胺(1.51 g, 15 mmol)溶於二氯甲烷(30 mL)，加入1,4-二氧雜六環-2,6-二酮(1.33 g, 11.5 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液用稀鹽酸將pH值調至4-5，用二氯甲烷萃取三次，合併有機相，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到化合物LP-82-c (3 g, 收率81%)。ESI-MS (m/z): 324.4 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-82-d的合成

將化合物LP-82-c (3 g, 9.28 mmol)溶於四氫呋喃(30 mL)和水(20 mL)的混合物，加入過硫酸氫鉀(17.1 g, 27.8 mmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。反應液加100 mL水，用乙酸乙酯萃取三次，合併有機相，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到化合物LP-82-d (2.5 g, 收率76%)。ESI-MS (m/z): 356.4 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-82-e的合成

將化合物LP-82-d (230 mg, 647 µmol)，N,N-二異丙基乙胺(180 mg, 1.4 mmol)和化合物LP-44-g (262 mg, 679 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(295 mg, 776 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。向反應液中加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(20 mL)萃取三次，合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=90/10)得到化合物LP-82-e(220 mg, 收率47%)。ESI-MS (m/z): 723.5 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-82-f的合成

將化合物LP-82-e (220 mg, 304 µmol)溶於二氯甲烷(3 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過反相柱層析色譜純化(乙腈/水=50/50)得到化合物LP-82-f (110 mg, 收率54%)。ESI-MS (m/z): 667.6 [M+H]⁺.

步驟七：化合物LP-82的合成

將化合物LP-82-f (12 mg, 18 µmol)，化合物LP-30-f (10 mg, 18 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(15 mg, 111 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(8 mg, 27 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-82 (3 mg, 收率14%)。ESI-MS (m/z): 1195.6 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.25 (s, 1H), 9.09 (s, 2H), 8.80 – 8.70 (m, 1H), 8.40 – 8.37 (m, 1H), 8.29 – 8.04 (m, 7H), 7.95 – 7.91 (m, 1H), 7.51 – 7.47 (m, 1H), 7.32 – 7.29 (m, 1H), 7.24 – 7.18 (m, 1H), 5.78 – 5.62 (m, 1H), 4.83 (s, 2H), 4.80 – 4.57 (m, 5H), 4.28 – 4.19 (m, 2H), 4.03 (s, 2H), 3.98 (s, 2H), 3.79 – 3.73 (m, 3H), 3.41 (s, 3H), 2.58 – 2.54 (m, 4H), 2.31 – 2.25 (m, 6H), 2.06 – 1.98 (m, 2H), 1.79 – 1.74 (m, 2H), 1.70 – 1.66 (m, 1H), 1.59 – 1.54 (m, 1H), 1.38 – 1.29 (m, 7H), 1.06 – 0.90 (m, 6H), 0.86 – 0.78 (m, 12H).

實施例 2.83：化合物LP-83的合成

步驟一：化合物LP-83-a的合成

將化合物P-26 (80 mg, 161 µmol)溶於丙酮(10 mL)，加入碳酸銫(105.00 mg, 322 µmol)攪拌5分鐘，加入((2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)乙醯)氨基)乙酸甲酯(118 mg, 322 µmol)和N,N-二甲基甲醯胺(0.1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。向反應液加入乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到粗產品化合物LP-83-a (120 mg)。ESI-MS (m/z): 805.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-83-b的合成

將化合物LP-83-a (120 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入二乙胺(0.4 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-83-b (27 mg, 收率29%)。ESI-MS (m/z): 583.4 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-83的合成

將化合物LP-83-b (10 mg, 17 µmol)，化合物LP-59-f (14 mg, 26 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(7 mg, 55 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(8 mg, 26 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-83 (8 mg, 收率43%)。ESI-MS (m/z): 1094.6 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.02 (s, 2H), 8.95 – 8.88 (m, 1H), 8.51 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.26 – 8.24 (m, 1H), 8.15 – 8.10 (m, 2H), 8.07 – 8.01 (m, 2H), 8.01 – 7.93 (m, 2H), 7.79 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.78 – 7.73 (m, 1H), 7.34 – 7.28 (m, 1H), 7.16 – 7.05 (m, 5H), 6.07 – 5.90 (m, 2H), 5.72 – 5.60 (m, 1H), 4.74 – 4.48 (m, 2H), 4.45 – 4.32 (m, 1H), 4.25 – 4.02 (m, 1H), 3.66 – 3.47 (m, 9H), 3.33 (s, 3H), 2.96 – 2.88 (m, 2H), 2.74 – 2.62 (m, 2H), 2.51 – 2.45 (m, 4H), 2.27 – 2.22 (m, 3H), 1.76 – 1.70 (m, 2H), 1.63 – 1.50 (m, 3H).

實施例 2.84：化合物LP-84的合成

步驟一：化合物LP-84-a的合成

將化合物LP-44-c (200 mg, 745 µmol)，N,N-二異丙基乙胺(180 mg, 1.4 mmol)和甘氨酸叔丁酯(107 mg, 820 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(340 mg, 894 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。向反應液中加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(20 mL)萃取三次，合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=10/90)得到化合物LP-84-a(250 mg, 收率88%)。ESI-MS (m/z): 382.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-84-b的合成

將化合物LP-84-a (250 mg, 655 µmol)溶於二氯甲烷(3 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過反相柱層析色譜純化(乙腈/水=40/60)得到化合物LP-84-b (110 mg, 收率54%)。ESI-MS (m/z): 326.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-84-c的合成

將化合物LP-84-b (200 mg, 614 µmol)，N,N-二異丙基乙胺(180 mg, 1.4 mmol)和化合物LP-44-g (284 mg, 737 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(351 mg, 922 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。向反應液中加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(20 mL)萃取三次，合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=90/10)得到化合物LP-84-c(80 mg, 收率19%)。ESI-MS (m/z): 693.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-84-d的合成

將化合物LP-84-c (80 mg, 115 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過反相柱層析色譜純化(乙腈/水=50/50)得到化合物LP-84-d (40 mg, 收率54%)。ESI-MS (m/z): 637.6 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-84的合成

將化合物LP-82-f (7 mg, 11 µmol)，化合物LP-30-f (5 mg, 9 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(3 mg, 22 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(4 mg, 13 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-84 (3 mg, 收率28%)。ESI-MS (m/z): 1165.5 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.28 (s, 1H), 9.11 (s, 2H), 8.75 (s, 1H), 8.38 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 8.26 – 8.01 (m, 6H), 7.97 – 7.80 (m, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.30 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.25 – 7.16 (m, 1H), 5.70 (s, 1H), 4.83 (s, 2H), 4.80 – 4.51 (m, 5H), 4.23 – 4.00 (m, 4H), 3.81 – 3.70 (m, 6H), 2.60 – 2.53 (m, 2H), 2.38 – 2.23 (m, 8H), 2.03 – 1.94 (m, 1H), 1.86 – 1.78 (m, 2H), 1.39 – 1.23 (m, 10H), 1.10 – 0.88 (m, 6H), 0.86 – 0.74 (m, 12H).

實施例 2.85：化合物LP-85的合成

步驟一：化合物LP-85-a的合成

將化合物LP-79-g (30 mg, 38 µmol)，N,N-二異丙基乙胺(10 mg, 75 µmol)和化合物LP-59-d (19 mg, 57 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(17 mg, 57 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-85-a(15 mg, 收率36%)。ESI-MS (m/z): 1108.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-85-b的合成

將化合物LP-85-a (15 mg, 14 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-85-b (14 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 1052.6 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-85的合成

將化合物LP-85-b (11 mg, 9 µmol)，化合物LP-30-f (5 mg, 9 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(3 mg, 22 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(4 mg, 13 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-85 (4 mg, 收率28%)。ESI-MS (m/z): 1580.8 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.26 (s, 1H), 9.11 (s, 2H), 8.71 (s, 1H), 8.39 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 8.24 – 8.01 (m, 6H), 7.79 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.32 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.26 – 7.16 (m, 7H), 6.67 (s, 1H), 5.70 (s, 1H), 5.39 – 5.28 (m, 1H), 5.10 – 4.95 (m, 1H), 4.84 (s, 2H), 4.75 (d, J = 6.7 Hz, 2H), 4.71 – 4.65 (m, 1H), 4.62 – 4.50 (m, 1H), 4.26 – 4.16 (m, 1H), 3.81 – 3.55 (m, 9H), 3.53 – 3.45 (m, 30H), 3.41 (s, 3H), 3.24 (s, 3H), 3.04 – 2.94 (m, 2H), 2.35 – 2.26 (m, 4H), 2.05 – 1.94 (m, 4H), 1.86 – 1.78 (m, 2H), 1.10 – 0.99 (m, 4H), 0.97 – 0.83 (m, 6H).

實施例 2.86：化合物LP-86的合成

步驟一：化合物LP-86的合成

將化合物LP-79-g (9 mg, 11 µmol)，化合物LP-63-i (10 mg, 11 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(3 mg, 22 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(4 mg, 13 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-86 (4.5 mg, 收率24%)。ESI-MS (m/z): 1687.8 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.17 (s, 1H), 10.05 – 9.57 (m, 1H), 9.12 – 8.91 (m, 2H), 8.31 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.12 – 7.97 (m, 5H), 7.79 – 7.45 (m, 4H), 7.41 – 7.09 (m, 7H), 6.82 – 6.58 (m, 1H), 5.73 – 5.60 (m, 1H), 5.52 – 5.33 (m, 1H), 5.06 – 4.78 (m, 4H), 4.76 – 4.48 (m, 4H), 4.35 – 4.07 (m, 4H), 3.51 – 3.48 (m, 2H), 3.45 – 3.39 (m, 30H), 3.34 (s, 3H), 3.16 (s, 3H), 2.93 – 2.81 (m, 6H), 2.51 – 2.48 (m, 2H), 2.24 – 2.18 (m, 2H), 1.96 – 1.89 (m, 2H), 1.78 – 1.71 (m, 1H), 1.60 – 1.52 (m, 1H), 1.42 – 1.36 (m, 2H), 1.30 – 1.23 (m, 4H), 0.96 – 0.69 (m, 15H).

實施例 2.87：化合物LP-87的合成

步驟一：化合物LP-87的合成

將化合物LP-59-f (18 mg, 27 µmol)，化合物LP-30-f (10 mg, 18 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(6 mg, 45 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(7 mg, 22 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-87 (8 mg, 收率41%)。ESI-MS (m/z): 1058.7 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.27 (s, 1H), 9.09 (s, 2H), 8.71 (s, 1H), 8.42 – 8.35 (m, 2H), 8.22 – 8.14 (m, 2H), 8.12 – 8.02 (m, 4H), 7.50 – 7.45 (m, 1H), 7.31 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.27 – 7.13 (m, 7H), 5.73 – 5.66 (m, 1H), 4.83 (s, 2H), 4.77 – 4.71 (m, 2H), 4.69 – 4.65 (m, 1H), 4.64 – 4.47 (m, 2H), 4.14 – 3.99 (m, 1H), 3.81 – 3.61 (m, 7H), 3.40 (s, 3H), 3.09 – 3.05 (m, 1H), 2.84 – 2.79 (m, 1H), 2.59 – 2.53 (m, 2H), 2.35 – 2.31 (m, 2H), 1.85 – 1.78 (m, 2H), 1.13 – 0.88 (m, 6H).

實施例 2.88：化合物LP-88的合成

步驟一：化合物LP-88-a的合成

將2-(2-(2-氨基乙氧基)乙氧基)乙酸(30 mg, 180 µmol)溶於二氯甲烷(3 mL)，加入化合物LP-46-a (50 mg, 90 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=80/20)得到化合物LP-88-a(20 mg, 收率51%)。ESI-MS (m/z): 430.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-88-b的合成

將化合物LP-80-f (1.43 g, 1.59 mmol)溶於四氫呋喃(20 mL)，加入1 M的四丁基氟化銨四氫呋喃溶液(2.4 mL)和冰乙酸(0.4 mL)。混合物在室溫下攪拌48小時。反應液加50 mL水，用乙酸乙酯萃取三次，合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=97/3)得到化合物LP-88-b (1 g, 收率96%)。ESI-MS (m/z): 659.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-88-c的合成

將化合物LP-88-b (733 mg, 1.11 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(1.15 g, 8.9 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(1.02 g, 3.34 mmol)。混合物在40℃下攪拌過夜。反應液加入20 mL二氯甲烷，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=20/80)得到化合物LP-88-c (805 mg, 收率88%)。ESI-MS (m/z): 824.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-88-d的合成

將化合物P-23(471 mg, 977 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(1.26 g, 9.77 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入化合物LP-88-c (805 mg, 977 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-88-d (1.1 g, 收率96%)。ESI-MS (m/z): 1167.7 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-88-e的合成

將化合物LP-88-d (1.1 g, 942 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)，加入二乙胺(2 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=90/10)得到化合物LP-88-e (656 mg, 收率74%)。ESI-MS (m/z): 945.7 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-88-f的合成

將化合物LP-88-e (100 mg, 105 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入2,5-二氧代吡咯烷-1-基 2,5,8,11,14,17,20,23-八氧雜二十六烷-26-酸酯(108 mg, 211 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(29 mg, 211 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=90/10)得到化合物LP-88-f (140 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 1339.8 [M+H]⁺.

步驟七：化合物LP-88-g的合成

將化合物LP-88-f (100 mg, 75 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物加入二氯甲烷溶解，用飽和碳酸氫鈉洗兩次，水洗一次，食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=85/15)得到化合物LP-88-g (65 mg, 收率70%)。ESI-MS (m/z): 1239.7 [M+H]⁺.

步驟八：化合物LP-88-h的合成

將化合物LP-88-a (14 mg, 32 µmol)和N-羥基丁二醯亞胺(4 mg, 32 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳醯二亞胺鹽酸鹽(6 mg, 32 µmol)。混合物在室溫下攪拌10分鐘，加入N,N-二異丙基乙胺(8 mg, 63 µmol)和化合物LP-88-g (20 mg, 16 µmol)。混合物在室溫下反應3小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-88-h (8 mg, 收率30%)。ESI-MS (m/z): 1650.8 [M+H]⁺.

步驟九：化合物LP-88的合成

將化合物LP-88-h (8 mg, 5 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(0.5 mL)，混合物在室溫下繼續攪拌0.5小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-88 (2 mg, 收率27%)。ESI-MS (m/z): 1550.5 [M+H]⁺.

實施例 2.89：化合物LP-89的合成

步驟一：化合物LP-89-a的合成

將8-氨基-3,6-二氧雜辛酸叔丁酯(87 mg, 396 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入馬來醯亞胺基乙酸琥珀醯亞胺酯(100 mg, 396 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-89-a (121 mg, 收率86%)。ESI-MS (m/z): 357.4 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-89-b的合成

將化合物LP-89-a (121 mg, 204 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-89-b (80 mg, 收率95%)。ESI-MS (m/z): 301.4 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-89-c的合成

將(((9H-氟-9-基)甲氧基)羰基)甘氨醯甘氨醯-L-苯丙氨酸(11 mg, 22 µmol)，化合物LP-30-f (8 mg, 15 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(6 mg, 45 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(7 mg, 22 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到粗產品化合物LP-89-c (10 mg)。ESI-MS (m/z): 1030.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-89-d的合成

將粗產品化合物LP-89-c (10 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入二乙胺(0.4 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-89-d (10 mg, 收率85%)。ESI-MS (m/z): 808.6 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-89的合成

將化合物LP-89-d (10 mg, 12 µmol)，化合物LP-89-b (4 mg, 12 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(6 mg, 45 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(6 mg, 18 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-89 (3 mg, 收率22%)。ESI-MS (m/z): 1090.7 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.25 (s, 1H), 8.73 – 8.66 (m, 1H), 8.40 – 8.36 (m, 2H), 8.18 – 8.15 (m, 1H), 8.12 – 8.03 (m, 4H), 7.91 – 7.88 (m, 1H), 7.49 – 7.46 (m, 1H), 7.31 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.26 – 7.15 (m, 8H), 7.07 (s, 2H), 5.73 – 5.66 (m, 1H), 4.83 (s, 2H), 4.76 – 4.72 (m, 2H), 4.70 – 4.66 (m, 1H), 4.61 – 4.49 (m, 2H), 4.01 (s, 2H), 3.92 (s, 2H), 3.78 – 3.73 (m, 6H), 3.60 – 3.54 (m, 8H), 3.21 – 3.20 (m, 2H), 3.08 – 3.05 (m, 1H), 2.82 – 2.78 (m, 1H), 1.07 – 0.90 (m, 6H).

實施例 2.90：化合物LP-90的合成

步驟一：化合物LP-90-a的合成

將((S)-1-(((S)-1-((4-(羥甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊烷-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸 (9H-芴-9-基)甲酯(1 g, 1.66 mmol)溶於四氫呋喃(5 ml)，冰浴下滴加三溴化磷(449.88 mg, 1.66 mmol)，混合物在室溫下攪拌1小時。將反應液緩慢加入冰水中，攪拌5分鐘，過濾，固體通過真空乾燥得到化合物LP-90-a (800 mg, 收率72%)。ESI-MS (m/z): 664.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-90-b的合成

將化合物P-26 (300 mg, 604 µmol)溶於二氯甲烷(5 ml)，加入4-二甲氨基吡啶(15 mg, 120 µmol)和二碳酸二叔丁酯(198 mg, 906 µmol)。混合物在室溫下攪拌3小時。反應液加入20 mL二氯甲烷，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=70/30)得到化合物LP-90-b (300 mg, 收率83%)。ESI-MS (m/z): 597.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-90-c和化合物LP-90-d的合成

將化合物LP-90-b (20 mg, 33 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(15 mg, 120 µmol)和化合物LP-90-a (45 mg, 67 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。向反應液中加入二乙胺(0.4 mL)，繼續攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到

化合物LP-90-c (10 mg, 收率31%)。ESI-MS (m/z): 958.6 [[M-Br]⁺.

化合物LP-90-d (15 mg, 收率46%)。ESI-MS (m/z): 958.6 [M-Br]⁺.

步驟四：化合物LP-90-e的合成

將化合物LP-90-c (10 mg, 11 µmol)溶於二氯甲烷(2 ml)，加入三氟乙酸(1 ml)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-90-e (9 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 858.5 [M-Br]⁺.

步驟五：化合物LP-90的合成

將化合物LP-90-e (9 mg, 11 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-66-a (10 mg, 27 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(5 mg, 42 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-90 (3 mg, 收率29%)。ESI-MS (m/z): 1108.5 [M-Br]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.48 (s, 1H), 10.45 – 10.27 (m, 1H), 9.12 (s, 2H), 8.58 – 8.52 (m, 1H), 8.53 – 8.28 (m, 5H), 8.27 – 8.21 (m, 1H), 8.22 – 8.11 (m, 1H), 8.09 – 7.95 (m, 1H), 7.83 – 7.73 (m, 2H), 7.59 – 7.48 (m, 4H), 7.37 – 7.22 (m, 1H), 6.96 – 6.85 (m, 2H), 6.18 – 5.74 (m, 2H), 5.47 (s, 2H), 4.95 – 3.90 (m, 5H), 3.41 (s, 3H), 3.03 – 2.91 (m, 4H), 2.66 – 2.59 (m, 3H), 2.59 – 2.52 (m, 2H), 2.41 – 2.34 (m, 2H), 2.05 – 1.91 (m, 1H), 1.90 – 1.77 (m, 3H), 1.77 – 1.59 (m, 3H), 1.49 – 1.35 (m, 3H), 0.91 – 0.82 (m, 6H).

實施例 2.91：

使用實施例2.90相同的方法和反應條件，利用化合物LP-90-d作為原料代替化合物LP-90-c，得到下表中的目標產物。

化合物	結構	ESI-MS (m/z): [M-Br]⁺.	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆)
LP-91		1108.5	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.48 (s, 1H), 10.32 – 10.25 (m, 1H), 9.12 (s, 2H), 8.63 – 8.55 (m, 1H), 8.55 – 8.46 (m, 2H), 8.37 – 8.23 (m, 2H), 7.98 – 7.92 (m, 1H), 7.84 – 7.76 (m, 1H), 7.77 – 7.59 (m, 2H), 7.55 – 7.50 (m, 1H), 7.34 – 7.24 (m, 1H), 7.21 – 7.14 (m, 1H), 6.75 – 6.69 (m, 1H), 6.09 – 6.01 (m, 1H), 6.00 – 5.81 (m, 2H), 5.45 (s, 2H), 4.81 – 4.52 (m, 4H), 4.43 – 4.35 (m, 1H), 4.33 – 4.21 (m, 2H), 4.10 – 3.94 (m, 1H), 3.83 – 3.77 (m, 1H), 3.41 (s, 3H), 3.16 – 3.08 (m, 1H), 3.05 – 2.91 (m, 2H), 2.57 – 2.52 (m, 8H), 2.41 – 2.37 (m, 1H), 2.07 – 1.77 (m, 4H), 1.75 – 1.53 (m, 3H), 1.51 – 1.30 (m, 2H), 0.91 – 0.83 (m, 6H).

實施例 2.92：化合物LP-92的合成

步驟一：化合物LP-92-a的合成

將化合物LP-30-c (215 mg, 427 µmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入化合物LP-63-d (447 mg, 1.07 mmol)。混合物在60℃下攪拌過夜。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-92-a (180 mg, 收率48%)。ESI-MS (m/z): 884.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-92-b的合成

將化合物LP-92-a (160 mg, 181 µmol)溶於四氫呋喃(3 mL)和水(3 mL)的混合物，加入1 N氫氧化鋰水溶液(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入醋酸至pH=7，濃縮，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-92-b (25 mg, 收率17%)。ESI-MS (m/z): 842.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-92-c的合成

將化合物LP-92-b (20 mg, 23 µmol)溶於四氫呋喃(1 mL)和水(1 mL)的混合物，加入三(2-羰基乙基)磷鹽酸鹽(14 mg, 47 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。向反應液加入飽和碳酸氫鈉，用乙酸乙酯萃取三次，合併有機相，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到化合物LP-92-c (19 mg, 收率98%)。ESI-MS (m/z): 816.4 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-92-d的合成

將化合物LP-92-c (5 mg, 6 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(2 mg, 16 µmol)和2,5-二氧代吡咯烷-1-基(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-L-纈氨酸酯(4 mg, 6 µmol)。混合物在室溫下攪拌3小時。向反應液加入乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到粗產品化合物LP-92-d (6 mg)。ESI-MS (m/z): 1137.5 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-92-e的合成

將粗產品化合物LP-92-d (6 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)，加入二乙胺(0.2 mL)。混合物在室溫下攪拌3小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-92-e (4 mg, 收率83%)。ESI-MS (m/z): 915.6 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-92的合成

將化合物LP-92-e (4 mg, 5 µmol)，化合物LP-89-b (3 mg, 8 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(4 mg, 30 µmol) 溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(2 mg, 8 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-92 (2.5 mg, 收率48%)。ESI-MS (m/z): 1197.7 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.32 (s, 1H), 10.07 – 9.97 (m, 1H), 8.53 – 8.48 (m, 1H), 8.39 – 8.31 (m, 1H), 8.25 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.11 – 8.03 (m, 2H), 7.58 – 7.46 (m, 3H), 7.38 – 7.28 (m, 1H), 7.27 – 7.15 (m, 3H), 7.02 (s, 2H), 6.74 – 6.65 (m, 1H), 5.74 – 5.65 (m, 1H), 5.12 – 4.81 (m, 6H), 4.72 – 4.64 (m, 1H), 4.62 – 4.28 (m, 2H), 4.13 – 3.97 (m, 3H), 3.95 (s, 2H), 3.75 – 3.69 (m, 2H), 3.63 – 3.59 (m, 2H), 3.57 – 3.54 (m, 2H), 3.43 – 3.42 (m, 2H), 3.26 – 3.25 (m, 2H), 3.01 – 2.93 (m, 2H), 2.04 – 1.94 (m, 4H), 1.51 – 1.40 (m, 2H), 1.32 – 1.29 (m, 4H), 1.19 – 1.13 (m, 1H), 1.07 – 0.81 (m, 12H).

實施例 2.93：化合物LP-93的合成

步驟一：化合物LP-93的合成

將化合物LP-88-g (10 mg, 8 µmol)，化合物LP-89-b (4 mg, 12 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(4 mg, 30 µmol) 溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(3 mg, 12 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-93 (3 mg, 收率24%)。ESI-MS (m/z): 1521.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.35 (s, 1H), 10.18 – 9.93 (m, 1H), 8.58 – 8.52 (m, 1H), 8.51 – 8.43 (m, 1H), 8.42 – 8.36 (m, 2H), 8.27 – 8.03 (m, 4H), 7.81 – 7.73 (m, 1H), 7.72 – 7.42 (m, 3H), 7.37 – 7.11 (m, 3H), 7.02 (s, 2H), 5.79 – 5.57 (m, 1H), 5.51 – 5.28 (m, 1H), 5.15 – 4.91 (m, 2H), 4.70 – 4.23 (m, 9H), 4.02 – 3.91 (m, 7H), 3.80 – 3.74 (m, 1H), 3.57 – 3.52 (m, 2H), 3.51 – 3.46 (m, 30H), 3.45 (s, 3H), 3.22 (s, 3H), 2.91 – 2.82 (m, 2H), 2.56 – 2.54 (m, 2H), 2.02 – 1.94 (m, 2H), 1.70 – 1.43 (m, 2H), 1.30 – 1.27 (m, 3H), 0.90 – 0.82 (m, 6H).

實施例 2.94：化合物LP-94的合成

步驟一：化合物LP-94-a的合成

將化合物LP-88-e (40 mg, 42 µmol)，N-乙醯基十聚肌酸(39 mg, 51 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(29 mg, 211 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(19 mg, 51 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-94-a (24 mg, 收率33%)。ESI-MS (m/z): 1697.8 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-94-b的合成

將化合物LP-94-a (24 mg, 14 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-94-b (22 mg, 收率98%)。ESI-MS (m/z): 1597.9 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-94的合成

將化合物LP-94-b (22 mg, 14 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(4 mg, 30 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-66-a (9 mg, 16 µmol)。混合物在室溫下反應3小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-94 (8 mg, 收率31%)。ESI-MS (m/z): 1847.9 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.35 (s, 1H), 10.17 – 9.87 (m, 1H), 9.10 (s, 2H), 8.57 – 8.51 (m, 1H), 8.40 – 8.28 (m, 2H), 8.17 – 8.07 (m, 2H), 7.99 – 7.90 (m, 1H), 7.81 – 7.72 (m, 1H), 7.64 – 7.13 (m, 5H), 5.75 – 5.65 (m, 1H), 5.17 – 4.92 (m, 2H), 4.70 – 4.46 (m, 3H), 4.37 – 3.91 (m, 23H), 3.88 – 3.72 (m, 2H), 3.40 (s, 3H), 3.00 – 2.66 (m, 36H), 2.56 – 2.53 (m, 3H), 2.43 – 2.30 (m, 3H), 2.01 – 1.97 (m, 2H), 1.84 – 1.78 (m, 3H), 1.68 – 1.41 (m, 3H), 1.31 – 1.26 (m, 3H), 0.89 – 0.80 (m, 6H).

實施例 2.95：化合物LP-95的合成

步驟一：化合物LP-95的合成

將化合物LP-89-b (4 mg, 13 µmol)，化合物LP-63-i (8 mg, 9 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(3 mg, 22 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(4 mg, 13 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-95 (4 mg, 收率38%)。ESI-MS (m/z): 1197.6 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.23 (s, 1H), 10.08 – 9.96 (m, 1H), 8.50 – 8.37 (m, 3H), 8.27 – 8.17 (m, 2H), 8.12 – 8.03 (m, 3H), 7.64 – 7.51 (m, 3H), 7.50 – 7.44 (m, 2H), 7.37 – 7.12 (m, 5H), 7.04 (s, 2H), 5.82 – 5.48 (m, 2H), 4.88 (s, 3H), 4.84 – 4.54 (m, 5H), 4.47 – 4.17 (m, 5H), 4.02 – 3.98 (m, 2H), 3.97 – 3.94 (m, 3H), 3.63 – 3.60 (m, 3H), 3.58 – 3.55 (m, 3H), 3.44 – 3.42 (m, 2H), 2.99 – 2.89 (m, 3H), 2.04 – 1.93 (m, 2H), 0.98 – 0.83 (m, 12H).

實施例 2.96：化合物LP-96的合成

步驟一：化合物LP-96-a的合成

將(S)-3-((2-(叔丁氧基)-2-氧代乙基)(叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丙酸(300 mg, 753 µmol)和五氟苯酚(152 mg, 828 µmol)溶於四氫呋喃(5 mL)，加入N,N'-二環己基碳二亞胺(171 mg, 828 µmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=10/90)得到化合物LP-96-a (280 mg, 收率66%)。ESI-MS (m/z): 565.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-96-b的合成

將8-氨基-3,6-二氧雜辛酸叔丁酯(29 mg, 177 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-96-a (50 mg, 89 µmol)。混合物在室溫下反應3小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-96-b (24 mg, 收率50%)。ESI-MS (m/z): 544.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-96-c的合成

將化合物LP-88-g (12 mg, 10 µmol)，化合物LP-96-b (8 mg, 15 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(4 mg, 30 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(4 mg, 16 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-96-c (8 mg, 收率47%)。ESI-MS (m/z): 1764.9 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-96的合成

將化合物LP-96-c (8 mg, 5 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(0.5 mL)，混合物在室溫下繼續攪拌0.5小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-96 (1 mg, 收率14%)。ESI-MS (m/z): 1608.7 [M+H]⁺.

實施例 2.97：化合物LP-97的合成

步驟一：化合物LP-97-a的合成

將8-((9H-芴-9-基甲氧基)羰氨基)-3,6-二氧雜正辛酸(73 mg, 190 µmol)，化合物LP-88-e (180 mg, 190 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(74 mg, 571 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(109 mg, 285 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。向反應液加入乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-97-a (220 mg, 收率88%)。ESI-MS (m/z): 1312.7 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-97-b的合成

將化合物LP-97-a (213 mg, 162 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)，混合物在室溫下繼續攪拌0.5小時。濃縮反應液得到化合物LP-97-b (196 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 1212.7 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-97-c的合成

將化合物LP-97-b (90 mg, 74 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(19 mg, 148 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入2,5-二氧代吡咯烷-1-基 2,5,8,11,14,17,20,23-八氧雜二十六烷-26-酸酯(38 mg, 74 µmol)。混合物在室溫下反應3小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=90/10)得到化合物LP-97-c (110 mg, 收率92%)。ESI-MS (m/z): 1606.7 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-97-d的合成

將化合物LP-97-c (100 mg, 62 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入二乙胺(0.2 mL)。混合物在室溫下反應3小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-97-d (56 mg, 收率65%)。ESI-MS (m/z): 1384.7 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-97的合成

將化合物LP-97-d (15 mg, 11 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(4 mg, 30 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-66-a (9 mg, 16 µmol)。混合物在室溫下反應3小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-97 (11 mg, 收率62%)。ESI-MS (m/z): 1634.9 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.35 (s, 1H), 10.08 – 9.82 (m, 1H), 9.15 – 9.04 (m, 2H), 8.60 – 8.46 (m, 1H), 8.35 – 8.30 (m, 1H), 8.25 – 8.05 (m, 4H), 7.99 – 7.85 (m, 4H), 7.81 – 7.72 (m, 1H), 7.63 – 7.46 (m, 2H), 7.35 – 7.18 (m, 3H), 5.81 – 5.68 (m, 2H), 5.54 – 5.29 (m, 1H), 5.15 – 4.91 (m, 2H), 4.90 – 4.67 (m, 1H), 4.62 – 4.33 (m, 3H), 4.28 – 4.08 (m, 2H), 3.95 – 3.74 (m, 4H), 3.60 – 3.56 (m, 30H), 3.23 (s, 3H), 3.21 – 3.19 (m, 2H), 3.13 – 3.09 (m, 2H), 2.88 – 2.81 (m, 2H), 2.66 – 2.63 (m, 1H), 2.42 – 2.19 (m, 6H), 2.02 – 1.92 (m, 2H), 1.83 – 1.67 (m, 3H), 1.30 – 1.27 (m, 2H), 1.21 – 1.13 (m, 8H), 0.87 – 0.81 (m, 6H).

實施例 2.98：

使用實施例2.80相同的方法和反應條件，利用(叔丁氧羰基)- L-纈氨醯基-L-瓜氨酸作為原料代替(叔丁氧羰基)-L-纈氨醯-L-丙氨酸，得到下表中的目標產物。

化合物	結構	ESI-MS (m/z): [M+H]⁺.	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆)
LP-98		1575.8	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.34 (s, 1H), 10.16 – 9.90 (m, 1H), 9.11 (s, 2H), 8.59 – 8.52 (m, 1H), 8.40 – 8.31 (m, 1H), 8.19 – 8.03 (m, 3H), 7.97 – 7.89 (m, 2H), 7.79 – 7.71 (m, 1H), 7.63 – 7.47 (m, 1H), 7.37 – 7.14 (m, 2H), 6.05 – 5.91 (m, 1H), 5.76 – 5.66 (m, 1H), 5.50 – 5.29 (m, 2H), 5.10 – 4.91 (m, 1H), 4.85 – 4.31 (m, 3H), 4.26 – 3.72 (m, 4H), 3.61 – 3.57 (m, 3H), 3.52 – 3.46 (m, 32H), 3.45 (s, 3H), 3.28 – 3.26 (m, 3H), 3.23 – 3.21 (m, 4H), 2.38 – 2.28 (m, 5H), 2.03 – 1.33 (m, 14H), 0.89 – 0.79 (m, 6H).

實施例 2.99：化合物LP-99的合成

步驟一：化合物LP-99-a的合成

將N-叔丁氧羰基-甘氨酸(219 mg, 1.25 mmol)，化合物LP-99-a (522 mg, 833 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(323 mg, 2.5 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(475 mg, 1.25 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。向反應液加入乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=75/25)得到化合物LP-99-a (735 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 784.4 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-99-b的合成

將化合物LP-99-a (650 mg, 829 µmol)溶於四氫呋喃(10 mL)，加入1 M的四丁基氟化銨四氫呋喃溶液(1.2 mL)和冰乙酸(0.2 mL)。混合物在室溫下攪拌48小時。反應液加50 mL水，用乙酸乙酯萃取三次，合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=97/3)得到化合物LP-99-b (321 mg, 收率71%)。ESI-MS (m/z): 546.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-99-c的合成

將化合物LP-99-b (195 mg, 357 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(370 mg, 2.86 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(435 mg, 1.43 mmol)。混合物在40℃下攪拌過夜。反應液加入20 mL二氯甲烷，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=20/80)得到化合物LP-99-c (225 mg, 收率89%)。ESI-MS (m/z): 711.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-99-d的合成

將化合物P-23(90 mg, 186 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(193 mg, 1.49 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入化合物LP-99-c(132 mg, 186 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=90/10)得到化合物LP-99-d (161 mg, 收率82%)。ESI-MS (m/z): 1054.5 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-99-e的合成

將化合物LP-99-d (161 mg, 152 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入二乙胺(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=80/20)得到化合物LP-99-e (90 mg, 收率71%)。ESI-MS (m/z): 832.7 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-99-f的合成

將化合物LP-99-e (40 mg, 48 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入2,5-二氧代吡咯烷-1-基 2,5,8,11,14,17,20,23-八氧雜二十六烷-26-酸酯(29 mg, 57 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(6 mg, 48 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=80/20)得到化合物LP-99-f (44 mg, 收率75%)。ESI-MS (m/z): 1226.8 [M+H]⁺.

步驟七：化合物LP-99-g的合成

將化合物LP-99-f (44 mg, 36 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-99-g (40 mg, 收率98%)。ESI-MS (m/z): 1126.7 [M+H]⁺.

步驟八：化合物LP-99的合成

將化合物LP-59-f (29 mg, 44 µmol)，化合物LP-99-g (40 mg, 35 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(14 mg, 108 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(16 mg, 54 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-99 (20 mg, 收率34%)。ESI-MS (m/z): 1637.9 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.33 (s, 1H), 10.05 – 9.83 (m, 1H), 9.09 (s, 2H), 8.60 – 8.49 (m, 1H), 8.42 – 8.37 (m, 1H), 8.19 – 8.04 (m, 6H), 7.79 – 7.76 (m, 1H), 7.68 – 7.46 (m, 2H), 7.33 – 7.11 (m, 9H), 5.76 – 5.65 (m, 1H), 5.49 – 5.35 (m, 1H), 5.11 – 5.01 (m, 1H), 4.68 – 4.49 (m, 4H), 3.95 – 3.82 (m, 3H), 3.80 – 3.72 (m, 2H), 3.72 – 3.68 (m, 2H), 3.66 – 3.56 (m, 4H), 3.52 – 3.43 (m, 30H), 3.41 – 3.39 (m, 4H), 3.22 (s, 3H), 3.13 – 3.01 (m, 1H), 2.92 – 2.77 (m, 5H), 2.58 – 2.53 (m, 4H), 2.35 – 2.30 (m, 2H), 1.86 – 1.77 (m, 2H), 1.70 – 1.55 (m, 2H).

實施例 2.100：化合物LP-100的合成

步驟一：化合物LP-100-a的合成

將冰乙酸(8 mg, 144 µmol)，化合物LP-97-b (87 mg, 72 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(28 mg, 215 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(41 mg, 108 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。向反應液加入乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=90/10)得到化合物LP-100-a (74 mg, 收率71%)。ESI-MS (m/z): 1254.7 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-100-b的合成

將化合物LP-100-a (60 mg, 48 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入二乙胺(0.2 mL)。混合物在室溫下反應3小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-100-b (29 mg, 收率59%)。ESI-MS (m/z): 1032.7 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-100的合成

將化合物LP-100-b (10 mg, 10 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(4 mg, 30 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-66-a (9 mg, 15 µmol)。混合物在室溫下反應3小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-100 (9 mg, 收率72%)。ESI-MS (m/z): 1282.7 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.40 – 12.28 (m, 1H), 10.00 – 9.83 (m, 1H), 9.09 (s, 2H), 8.59 – 8.44 (m, 1H), 8.31 – 8.03 (m, 4H), 7.98 – 7.83 (m, 2H), 7.81 – 7.71 (m, 1H), 7.71 – 7.44 (m, 2H), 7.35 – 7.03 (m, 3H), 5.74 – 5.55 (m, 1H), 5.50 – 5.32 (m, 1H), 5.14 – 4.78 (m, 2H), 4.62 – 3.74 (m, 10H), 3.62 – 3.46 (m, 4H), 3.44 – 3.36 (m, 5H), 3.31 – 3.27 (m, 2H), 3.24 – 3.11 (m, 3H), 2.90 – 2.68 (m, 3H), 2.54 – 2.52 (m, 1H), 2.28 – 2.22 (m, 2H), 2.00 – 1.90 (m, 1H), 1.87 (s, 3H), 1.83 – 1.74 (m, 2H), 1.71 – 1.52 (m, 2H), 1.41 – 1.21 (m, 5H), 0.89 – 0.76 (m, 6H).

實施例 2.101：化合物LP-101的合成

步驟一：化合物LP-101-a的合成

將(2-((2-氨基乙基)(甲基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.3 g, 5.98 mmol)溶於冰乙酸(15 mL)，加入馬來酸酐(645 mg, 6.58 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物溶於乙腈(20 mL)，加入無水乙酸鈉 (250 mg, 3.04 mmol)。混合物在75℃下攪拌5小時。將反應液冷卻至室溫，過濾，濃縮濾液。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=90/10)得到化合物LP-101-a (1.7 g, 收率96%)。ESI-MS (m/z): 298.4 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-101-b的合成

將化合物LP-101-a (200 mg, 672 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-101-b (132 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 198.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-101-c的合成

將N2-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-N6-(叔丁氧基羰基)-L-賴氨酸(1.5 g, 3.2 mmol)溶於二氯甲烷(20 mL)和甲醇(10 mL)的混合物，加入(4-氨基苯基)甲醇(473 mg, 3.84 mmol)和2-乙氧基-1-乙氧碳醯基-1,2-二氫喹啉(1.58 g, 6.4 mmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=40/60)得到化合物LP-101-c (1.8 g, 收率98%)。ESI-MS (m/z): 574.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-101-d的合成

將化合物LP-101-c (1.3 g, 2.27 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)，加入二乙胺(2 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=90/10)得到化合物LP-101-d (700 mg, 收率88%)。ESI-MS (m/z): 352.5 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-101-e的合成

將環丁基-1,1-二羧酸單乙酯(393 mg, 2.28 mmol)，化合物LP-101-d (803 mg, 2.28 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(886 mg, 6.85 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(1.30 g, 3.43 mmol)。混合物在室溫下攪拌3小時。向反應液加入二氯甲烷，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=90/10)得到化合物LP-101-e (490 mg, 收率42%)。ESI-MS (m/z): 506.6 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-101-f的合成

將化合物LP-101-e (490 mg, 969 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入三氟乙酸(2 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-101-f (392 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 406.5 [M+H]⁺.

步驟七：化合物LP-101-g的合成

將化合物LP-101-f (392 mg, 969 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入34%甲醛水溶液(0.5 mL)和三乙醯氧基硼氫化鈉(1.07 g, 5.06 mmol)。混合物在室溫下攪拌3小時。向反應液加入飽和碳酸氫鈉至pH=8，用二氯甲烷萃取三次，合併有機相，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=90/10)得到化合物LP-101-g (306 mg, 收率70%)。ESI-MS (m/z): 434.5 [M+H]⁺.

步驟八：化合物LP-101-h的合成

將化合物LP-101-g (282 mg, 65 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(841 mg, 6.5 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(594 mg, 1.95 mmol)。混合物在40℃下攪拌過夜。反應液加入二氯甲烷，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=90/10)得到化合物LP-101-h (200 mg, 收率51%)。ESI-MS (m/z): 599.5 [M+H]⁺.

步驟九：化合物LP-101-i的合成

將化合物LP-101-h (200 mg, 334 µmol)和化合物P-23 (161 mg, 334 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(432 mg, 3.34 mmol)。混合物在室溫下攪拌過夜。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=92/8)得到化合物LP-101-i (235 mg, 收率75%)。ESI-MS (m/z): 942.5 [M+H]⁺.

步驟十：化合物LP-101-j的合成

將化合物LP-101-i (235 mg, 250 µmol)溶於四氫呋喃(5 mL)和水(1 mL)的混合物，加入1 N氫氧化鋰(1 mL)。混合物在室溫下攪拌3小時。反應液加入醋酸至pH=7，濃縮。殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-101-j (75 mg, 收率33%)。ESI-MS (m/z): 914.4 [M+H]⁺.

步驟十一：化合物LP-101的合成

將化合物LP-101-j (10 mg, 11 µmol)，化合物LP-101-b (3 mg, 16 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(5 mg, 33 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(6 mg, 16 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(酸法)得到化合物LP-101 (4 mg, 收率33%)。ESI-MS (m/z): 1093.7 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.36 (s, 1H), 10.17 – 10.00 (m, 1H), 8.61 – 8.45 (m, 1H), 8.22 – 8.04 (m, 3H), 7.85 – 7.65 (m, 3H), 7.64 – 7.46 (m, 3H), 7.33 – 7.04 (m, 3H), 6.98 (s, 2H), 5.76 – 5.58 (m, 1H), 5.57 – 5.25 (m, 1H), 5.08 – 4.29 (m, 5H), 4.17 – 4.02 (m, 1H), 3.89 – 3.76 (m, 3H), 3.46 – 3.43 (m, 2H), 3.14 – 3.09 (m, 3H), 2.44 – 2.36 (m, 7H), 2.20 – 2.13 (m, 5H), 2.12 – 2.04 (m, 6H), 1.79 – 1.52 (m, 8H), 1.43 – 1.26 (m, 4H).

實施例 2.102：化合物LP-102的合成

步驟一：化合物LP-102-a的合成

將甲基(2-(甲基氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(500 mg, 2.66 mmol)溶於乙腈(10 mL)，加入溴乙腈(319 mg, 2.66 mmol)和碳酸鉀(367 mg, 2.66 mmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。將反應液冷卻至室溫，過濾，濃縮濾液得到化合物LP-102-a (600 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 228.4 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-102-b的合成

將化合物LP-102-a (600 mg, 2.64 mmol)溶於1 M的氨甲醇溶液(10 mL)，加入雷尼鎳(0.05 g)。混合物在氫氣氣氛中室溫下攪拌16小時。反應液經矽藻土過濾，濃縮得到化合物LP-102-b (610 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 232.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-102-c的合成

將化合物LP-101-j (15 mg, 16 µmol)，化合物LP-102-b (4 mg, 16 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(5 mg, 33 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(9 mg, 24 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-102-c (5 mg, 收率27%)。ESI-MS (m/z): 1127.7 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-102-d的合成

將化合物LP-102-c (5 mg, 4 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-102-d (4.5 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 1027.8 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-102的合成

將化合物LP-102-d (4.5 mg, 4 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(4 mg, 30 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-66-a (5 mg, 8 µmol)。混合物在室溫下反應3小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-102 (4 mg, 收率71%)。ESI-MS (m/z): 1277.7 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.35 (s, 1H), 10.20 – 10.00 (m, 1H), 9.09 (s, 2H), 8.67 – 8.49 (m, 1H), 8.23 – 8.05 (m, 3H), 7.82 – 7.71 (m, 3H), 7.64 – 7.45 (m, 3H), 7.35 – 7.04 (m, 3H), 5.76 – 5.61 (m, 1H), 5.47 – 4.32 (m, 6H), 3.94 – 3.75 (m, 3H), 3.18 – 3.14 (m, 5H), 2.61 – 2.54 (m, 4H), 2.42 – 2.37 (m, 9H), 2.18 – 2.07 (m, 12H), 1.85 – 1.49 (m, 12H), 1.43 – 1.17 (m, 6H).

實施例 2.103：化合物LP-103的合成

步驟一：化合物LP-103-a的合成

將N-乙醯基十聚肌酸(15 mg, 20 µmol)，化合物LP-97-b (20 mg, 16 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(5 mg, 40 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(8 mg, 22 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。向反應液中加入二乙胺(0.2 mL)。混合物在室溫下反應2小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-103-a (20 mg, 收率59%)。ESI-MS (m/z): 1742.9 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-103的合成

將化合物LP-103-a (10 mg, 6 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(4 mg, 30 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-66-a (7 mg, 12 µmol)。混合物在室溫下反應3小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-103 (3 mg, 收率26%)。ESI-MS (m/z): 1992.9 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.35 (s, 1H), 10.14 – 9.86 (m, 1H), 9.09 (s, 2H), 8.58 – 8.50 (m, 1H), 8.33 – 8.08 (m, 4H), 7.97 – 7.85 (m, 2H), 7.83 – 7.73 (m, 1H), 7.62 – 7.42 (m, 2H), 7.35 – 7.16 (m, 3H), 6.74 – 6.60 (m, 1H), 5.73 – 5.62 (m, 1H), 5.51 – 5.33 (m, 1H), 5.11 – 4.90 (m, 2H), 4.68 – 4.43 (m, 2H), 4.42 – 3.83 (m, 28H), 3.41 (s, 3H), 3.40 (s, 3H), 2.97 – 2.70 (m, 27H), 2.57 – 2.52 (m, 2H), 2.27 – 2.21 (m, 3H), 2.06 – 1.93 (m, 4H), 1.87 – 1.73 (m, 6H), 1.70 – 1.53 (m, 3H), 1.33 – 1.20 (m, 7H), 1.16 – 1.09 (m, 2H), 0.92 – 0.77 (m, 8H).

實施例 2.104：化合物LP-104的合成

步驟一：化合物LP-104-a的合成

將(S)-2-氨基-N-((S)-1-((4-(羥甲基)苯基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)-3-甲基丁醯胺(333 mg, 1.14 mmol)，N-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-N-(2-((叔丁氧羰基)氨基)乙基)甘氨酸(250 mg, 567 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(220 mg, 1.7 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(324 mg, 851 µmol)。混合物在室溫下攪拌3小時。向反應液加入乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-104-a (305 mg, 收率75%)。ESI-MS (m/z): 716.6 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-104-b的合成

將化合物LP-104-a (140 mg, 195 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(253 mg, 1.96 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(297 mg, 977 µmol)。混合物在40℃下攪拌過夜。反應液加入二氯甲烷，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-104-b (80 mg, 收率46%)。ESI-MS (m/z): 881.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-104-c的合成

將化合物LP-104-b (80 mg, 90 µmol)和化合物P-23 (40 mg, 82 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(54 mg, 414 µmol)。混合物在室溫下攪拌過夜。向反應液中加入二乙胺(0.3 mL)。混合物在室溫下反應2小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-104-c (25 mg, 收率30%)。ESI-MS (m/z): 1002.6 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-104-d的合成

將化合物LP-104-c (25 mg, 25 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)，加入2,5-二氧代吡咯烷-1-基 2,5,8,11,14,17,20,23-八氧雜二十六烷-26-酸酯(25 mg, 50 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(6 mg, 48 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-104-d (17 mg, 收率49%)。ESI-MS (m/z): 1396.7 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-104-e的合成

將化合物LP-104-d (17 mg, 12 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-104-e (16 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 1296.7 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-104的合成

將化合物LP-104-e (16 mg, 12 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(4 mg, 30 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-66-a (14 mg, 24 µmol)。混合物在室溫下反應3小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-104 (3 mg, 收率16%)。ESI-MS (m/z): 1546.7 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.38 (s, 1H), 10.10 – 9.70 (m, 1H), 9.11 (s, 2H), 8.60 – 8.52 (m, 1H), 8.38 – 8.31 (m, 1H), 8.28 – 8.07 (m, 4H), 8.05 – 7.98 (m, 1H), 7.87 – 7.76 (m, 2H), 7.64 – 7.44 (m, 3H), 7.39 – 7.04 (m, 3H), 5.81 – 5.61 (m, 1H), 5.09 – 4.87 (m, 2H), 4.61 – 3.87 (m, 9H), 3.59 – 3.44 (m, 35H), 3.42 (s, 3H), 3.24 (s, 3H), 3.22 – 3.13 (m, 2H), 2.61 – 2.55 (m, 2H), 2.47 – 2.44 (m, 2H), 2.29 – 2.20 (m, 3H), 2.05 – 1.98 (m, 1H), 1.85 – 1.77 (m, 2H), 1.35 – 1.28 (m, 4H), 0.92 – 0.83 (m, 6H).

實施例 2.105：化合物LP-105的合成

步驟一：化合物LP-105-a的合成

將N,N’,N’’-三甲基二乙烯三胺(500 mg, 3.44 mmol)溶於乙腈(10 mL)，加入溴乙酸苄酯(394 mg, 1.72 mmol)和碳酸鉀(475 mg, 3.44 mmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。將反應液冷卻至室溫，過濾，濃縮得到粗產品化合物LP-105-a (1 g)。ESI-MS (m/z): 294.4 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-105-b的合成

將粗產品化合物LP-105-a (1 g)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入9-芴甲基-N-琥珀醯亞胺基碳酸酯(394 mg, 1.72 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(1.19 g, 9.2 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入二氯甲烷，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=90/10)得到化合物LP-105-b (500 mg, 收率57%)。ESI-MS (m/z): 516.3 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-105-c的合成

將化合物LP-105-b (100 mg, 194 µmol)溶於甲醇(10 mL)，加入10%鈀炭(0.05 g)。混合物在氫氣氣氛中室溫下攪拌16小時。反應液過濾，濃縮得到粗產品化合物LP-105-c (80 mg)。ESI-MS (m/z): 426.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-105-d的合成

將粗產品化合物LP-105-c (20 mg)，化合物LP-89-d (20 mg, 25 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(10 mg, 75 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(14 mg, 37 µmol)。混合物在室溫下攪拌3小時。向反應液中加入二乙胺(0.2 mL)。混合物在室溫下反應2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-105-d (6 mg, 收率25%)。ESI-MS (m/z): 993.6 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-105的合成

將化合物LP-105-d (5 mg, 5 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(4 mg, 30 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-66-a (5 mg, 11 µmol)。混合物在室溫下反應3小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-105 (4 mg, 收率64%)。ESI-MS (m/z): 1243.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.25 (s, 1H), 9.10 (s, 2H), 8.73 – 8.67 (m, 1H), 8.41 – 8.35 (m, 2H), 8.21 – 8.14 (m, 2H), 8.12 – 7.86 (m, 5H), 7.51 – 7.45 (m, 1H), 7.34 – 7.30 (m, 1H), 7.28 – 7.12 (m, 6H), 5.75 – 5.65 (m, 1H), 5.09 – 4.94 (m, 1H), 4.83 (s, 2H), 4.78 – 4.70 (m, 2H), 4.70 – 4.51 (m, 3H), 4.13 – 3.99 (m, 1H), 3.82 – 3.71 (m, 5H), 3.67 – 3.57 (m, 2H), 3.40 (s, 3H), 3.09 – 3.03 (m, 1H), 3.02 – 2.95 (m, 2H), 2.86 – 2.80 (m, 1H), 2.59 – 2.55 (m, 2H), 2.53 – 2.52 (m, 1H), 2.48 – 2.46 (m, 2H), 2.44 – 2.41 (m, 2H), 2.26 – 2.15 (m, 6H), 1.85 – 1.75 (m, 2H), 1.53 – 1.37 (m, 1H), 1.28 – 1.20 (m, 3H), 1.19 – 0.83 (m, 9H).

實施例 2.106：化合物LP- 106的合成

步驟一：化合物LP-106的合成

將化合物LP-53-e (12 mg, 20 µmol)，化合物LP-83-b (10 mg, 17 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(9 mg, 70 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入2-琥珀醯亞胺基-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸酯(6 mg, 20 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-106(2 mg, 收率10%)。ESI-MS (m/z): 1144.7 [M+H]⁺.

實施例 2.107：化合物LP- 107的合成

步驟一：化合物LP-107-a的合成

將(2-(甲基氨基)乙基)氨基甲酸苄酯鹽酸鹽(956 mg, 3.92 mmol)溶於乙腈(10 mL)，加入碳酸銫(3.83 g, 11.8 mmol)，攪拌10分鐘，加入3-溴丙酸叔丁酯(1.64 g, 7.84 mmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。將反應液冷卻至室溫，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-107-a (480 mg, 收率36%)。ESI-MS (m/z): 337.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-107-b的合成

將化合物LP-107-a (480 mg, 1.43 mmol)溶於乙醇(10 mL)，加入10%鈀炭(0.1 g)。混合物在氫氣氣氛中室溫下攪拌16小時。反應液過濾，濃縮得到粗產品化合物LP-107-b (300 mg)。ESI-MS (m/z): 203.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-107-c的合成

將化合物LP-107-b (100 mg, 209 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(54 mg, 418 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-66-a (76 mg, 209 µmol)。混合物在室溫下反應3小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-107-c (89 mg, 收率94%)。ESI-MS (m/z): 453.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-107-d的合成

將化合物LP-107-c (89 mg, 196 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-107-d (83 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 397.5 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-107-e的合成

將化合物LP-107-d (10 mg, 25 µmol)和N-羥基丁二醯亞胺(3 mg, 27 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N'-二環己基碳二亞胺(5 mg, 27 µmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。濃縮反應液得到粗產品化合物LP-107-e (10 mg)。ESI-MS (m/z): 494.5 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-107的合成

將化合物LP-64-d (5 mg, 5 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(4 mg, 30 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-107-e (5 mg, 10 µmol)。混合物在室溫下反應3小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-107 (2 mg, 收率29%)。ESI-MS (m/z): 1347.5 [M+H]⁺.

實施例 2.108：化合物LP- 108的合成

步驟一：化合物LP-108-a的合成

將2-(哌嗪-1-基)乙酸叔丁酯(744 mg, 3.72 mmol)溶於1,2-二氯乙烷(10 mL)，加入甲基(2-氧代乙基)氨基甲酸苄酯(770 mg, 3.72 mmol)。混合物在室溫下攪拌10分鐘，加入三乙醯氧基硼氫化鈉(3.94 g, 18.6 mmol)，繼續攪拌6小時。反應液加入30 mL飽和氯化銨溶液淬滅，用50 mL二氯甲烷萃取，分液，有機相用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=90/10)得到化合物LP-108-a (1.2 g, 收率82%)。ESI-MS (m/z): 392.4 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-108-b的合成

將化合物LP-108-a (1.2 g, 3.07 mmol)溶於乙醇(15 mL)，加入10%鈀炭(0.2 g)。混合物在氫氣氣氛中室溫下攪拌16小時。反應液過濾，濃縮得到化合物LP-108-b (760 mg, 收率96%)。ESI-MS (m/z): 258.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-108-c的合成

將化合物LP-108-b (25 mg, 97 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(37 mg, 291 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入化合物LP-66-a (52 mg, 97 µmol)。混合物在室溫下反應3小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=85/15)得到化合物LP-108-c (15 mg, 收率30%)。ESI-MS (m/z): 508.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-108-d的合成

將化合物LP-108-c (15 mg, 29 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-108-d (13 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 452.5 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-108的合成

將化合物LP-108-d (11 mg, 25 µmol)，化合物LP-89-d (20 mg, 25 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(9 mg, 70 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(14 mg, 37 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-108(10 mg, 收率33%)。ESI-MS (m/z): 1241.7 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.22 (s, 1H), 9.08 (s, 2H), 8.70 – 8.63 (m, 1H), 8.40 – 8.31 (m, 2H), 8.18 – 7.81 (m, 7H), 7.49 – 7.42 (m, 1H), 7.30 – 7.26 (m, 1H), 7.23 – 7.11 (m, 6H), 5.71 – 5.63 (m, 1H), 5.09 – 4.84 (m, 1H), 4.80 (s, 2H), 4.75 – 4.68 (m, 2H), 4.68 – 4.46 (m, 3H), 4.15 – 3.97 (m, 1H), 3.81 – 3.69 (m, 6H), 3.61 – 3.56 (m, 2H), 3.37 (s, 3H), 3.05 – 3.02 (m, 1H), 2.95 – 2.92 (m, 2H), 2.88 – 2.78 (m, 3H), 2.57 – 2.53 (m, 2H), 2.43 – 2.30 (m, 10H), 1.82 – 1.72 (m, 2H), 1.37 – 1.34 (m, 1H), 1.22 – 1.11 (m, 2H), 1.05 – 0.96 (m, 3H), 0.90 – 0.81 (m, 3H).

實施例 2.109：化合物LP- 109的合成

步驟一：化合物LP-109-a的合成

將(2R,3R,4S,5S,6S)-2-溴-6-(甲氧羰基)四氫-2H-吡喃-3,4,5-三乙酸三酯(717 mg, 1.81 mmol)，和2-羥基乙酸苄酯(100 mg, 601 µmol)溶於二氯甲烷(20 mL)，加入三氟甲磺酸銀(464 mg, 1.81 mmol)。混合物在室溫下攪拌48小時。將反應液過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=40/60)得到化合物LP-109-a (280 mg, 收率95%)。ESI-MS (m/z): 483.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-109-b的合成

將化合物LP-109-a (70 mg, 145 µmol)溶於甲醇(5 mL)，加入10%鈀炭(0.05 g)。混合物在氫氣氣氛中室溫下攪拌16小時。反應液過濾，濃縮得到化合物LP-109-b (30 mg, 收率87%)。ESI-MS (m/z): 393.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-109-c的合成

將化合物LP-109-b (8 mg, 19 µmol)，化合物LP-88-e (18 mg, 19 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(7 mg, 57 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(9 mg, 23 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。向反應液加入乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-109-c (8 mg, 收率32%)。ESI-MS (m/z): 1319.8 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-109-d的合成

將化合物LP-109-c (8 mg, 6 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-109-d (8 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 1219.7 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-109-e的合成

將化合物LP-109-d (8 mg, 6 µmol)溶於四氫呋喃(1 mL)和水(0.3 mL)的混合物，加入1 N氫氧化鋰(0.1 mL)。混合物在室溫下攪拌3小時。反應液加入醋酸至pH=7，濃縮。殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-109-e (5 mg, 收率76%)。ESI-MS (m/z): 1079.6 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-109的合成

將化合物LP-109-e (5 mg, 5 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(4 mg, 30 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-66-a (5 mg, 11 µmol)。混合物在室溫下反應3小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-109 (4 mg, 收率65%)。ESI-MS (m/z): 1329.7 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.54 – 12.26 (m, 1H), 10.86 – 9.88 (m, 1H), 9.10 (s, 2H), 8.58 – 8.52 (m, 1H), 8.29 – 7.49 (m, 8H), 7.39 – 6.99 (m, 3H), 5.79 – 5.56 (m, 1H), 5.52 – 5.29 (m, 1H), 5.28 – 4.89 (m, 3H), 4.88 – 4.51 (m, 3H), 4.51 – 4.11 (m, 7H), 4.11 – 3.46 (m, 4H), 3.40 (s, 3H), 3.29 – 3.08 (m, 5H), 3.09 – 2.70 (m, 4H), 2.56 – 2.52 (m, 2H), 2.41 – 2.30 (m, 2H), 2.07 – 1.91 (m, 1H), 1.86 – 1.74 (m, 2H), 1.72 – 1.52 (m, 2H), 1.34 – 1.17 (m, 5H), 0.87 – 0.77 (m, 6H)

實施例 2.110：化合物LP- 110的合成

步驟一：化合物LP-110-a的合成

將2-(2-(2-氨基乙氧基)乙氧基)乙基氨基甲酸叔丁酯(1 g, 3.51 mmol)和5-甲醯水楊酸(642 mg, 3.86 mmol)溶於二氯甲烷(20 mL)，加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳醯二亞胺鹽酸鹽(464 mg, 1.81 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(1.18 g, 9.13 mmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。向反應液加入二氯甲烷，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-110-a (190 mg, 收率14%)。ESI-MS (m/z): 397.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-110-b的合成

將(2R,3S,4S,5R,6R)-2-(乙醯氧甲基)-6-溴四氫-2H-吡喃-3,4,5-三乙酸酯(190 mg, 479 µmol)和化合物LP-110-a (190 mg, 479 µmol)溶於乙腈(10 mL)，加入氧化銀(555 mg, 2.4 mmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。反應液經矽藻土過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-110-b (325 mg, 收率95%)。ESI-MS (m/z): 713.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-110-c的合成

將化合物LP-110-b (325 mg, 455 mmol)溶於三氯甲烷(10 mL)和異丙醇(2 mL)的混合物，冰浴下緩慢加入硼氫化鈉(45 mg, 1.2 mmol)。混合物在升至室溫，持續攪拌2小時。向反應液中加入氯化銨水溶液(20 mL)淬滅，用乙酸乙酯(20 mL)萃取三次，合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-110-c (180 mg, 收率52%)。ESI-MS (m/z): 715.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-110-d的合成

將化合物LP-110-c (180 mg, 252 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(98 mg, 755 µmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(153 mg, 503 µmol)。混合物在40℃下攪拌過夜。反應液加入二氯甲烷，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-110-d (200 mg, 收率72%)。ESI-MS (m/z): 880.5 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-110-e的合成

將化合物LP-110-d (146 mg, 165 µmol)和化合物P-23 (80 mg, 165 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(107 mg, 829 µmol)。混合物在室溫下攪拌過夜。反應液加入乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-110-e (200 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 1223.7 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-110-f的合成

將化合物LP-110-e (85 mg, 69 µmol)溶於四氫呋喃(2 mL)和水(0.5 mL)的混合物，加入1 N氫氧化鋰(0.3 mL)。混合物在室溫下攪拌3小時。反應液加入醋酸至pH=7，濃縮。殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-110-f (23 mg, 收率31%)。ESI-MS (m/z): 1083.6 [M+H]⁺.

步驟七：化合物LP-110-g的合成

將化合物LP-110-f (12 mg, 11 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-110-g (12 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 983.7 [M+H]⁺.

步驟八：化合物LP-110-h的合成

將化合物LP-110-g (12 mg, 11 µmol)和化合物LP-46-a (9 mg, 22 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(11 mg, 85 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-110-h (8 mg, 收率58%)。ESI-MS (m/z): 1249.8 [M+H]⁺.

步驟九：化合物LP-110的合成

將化合物LP-110-h (8 mg, 6 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，凍乾得到化合物LP-110 (5 mg, 收率68%)。ESI-MS (m/z): 1149.7 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 13.41 – 12.54 (m, 1H), 12.35 (s, 1H), 8.58 – 8.52 (m, 1H), 8.41 – 8.36 (m, 1H), 8.32 – 8.25 (m, 1H), 8.18 – 8.09 (m, 2H), 7.93 – 7.84 (m, 3H), 7.83 – 7.71 (m, 2H), 7.66 – 7.42 (m, 2H), 7.33 – 7.16 (m, 2H), 7.12 (s, 2H), 5.91 – 5.67 (m, 2H), 5.52 – 5.31 (m, 2H), 5.16 – 4.94 (m, 3H), 4.77 – 4.73 (m, 1H), 4.68 – 4.51 (m, 2H), 4.02 – 3.95 (m, 3H), 3.82 – 3.75 (m, 3H), 3.52 – 3.34 (m, 12H), 3.23 – 3.16 (m, 4H), 3.05 – 2.96 (m, 1H), 1.69 – 1.55 (m, 2H), 1.28 – 1.24 (m, 2H).

實施例 2.111：化合物LP- 111的合成

步驟一：化合物LP-111的合成

將化合物P-1 (10 mg, 21 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-80-k (35 mg, 30 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(5 mg, 42 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-111 (10 mg, 收率32%)。ESI-MS (m/z): 1479.7 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.39 (s, 1H), 10.12 – 9.93 (m, 1H), 9.12 (s, 2H), 8.37 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.26 – 8.24 (m, 1H), 8.19 – 8.06 (m, 3H), 8.03 – 7.90 (m, 2H), 7.74 – 7.60 (m, 2H), 7.51 – 7.42 (m, 1H), 7.38 – 7.16 (m, 5H), 6.30 – 6.25 (m, 1H), 5.12 – 4.99 (m, 2H), 4.77 – 4.60 (m, 3H), 4.60 – 4.53 (m, 4H), 4.42 – 4.34 (m, 1H), 4.26 – 4.20 (m, 1H), 3.71 – 3.65 (m, 1H), 3.65 – 3.59 (m, 1H), 3.52 – 3.42 (m, 30H), 3.41 (s, 3H), 3.23 – 3.21 (m, 3H), 2.93 – 2.85 (m, 3H), 2.58 – 2.52 (m, 2H), 2.41 – 2.34 (m, 2H), 2.01 – 1.94 (m, 1H), 1.87 – 1.75 (m, 3H), 1.73 – 1.58 (m, 1H), 1.32 – 1.27 (m, 3H), 0.90 – 0.82 (m, 6H), 0.80 – 0.64 (m, 3H).

實施例 2.112：化合物LP- 112的合成

步驟一：化合物LP-112的合成

將化合物P-20 (10 mg, 21 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-80-k (35 mg, 30 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(5 mg, 42 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-112 (5 mg, 收率16%)。ESI-MS (m/z): 1494.7 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.31 – 11.19 (m, 1H), 10.12 – 9.93 (m, 1H), 9.12 (s, 2H), 8.39 – 8.37 (m, 1H), 8.24 – 7.90 (m, 5H), 7.74 – 7.56 (m, 1H), 7.53 – 7.41 (m, 1H), 7.40 – 7.03 (m, 5H), 5.75 – 5.28 (m, 2H), 5.16 – 4.95 (m, 2H), 4.87 (s, 2H), 4.81 – 4.03 (m, 8H), 3.95 – 3.74 (m, 3H), 3.69 – 3.59 (m, 3H), 3.49 – 3.41 (m, 28H), 3.22 (s, 3H), 3.19 – 2.96 (m, 4H), 2.92 – 2.77 (m, 3H), 2.57 – 2.53 (m, 2H), 2.41 – 2.34 (m, 2H), 2.01 – 1.95 (m, 1H), 1.86 – 1.75 (m, 2H), 1.67 – 1.57 (m, 2H), 1.32 – 1.26 (m, 4H), 0.89 – 0.81 (m, 6H).

實施例 2.113：化合物LP- 113的合成

步驟一：化合物LP-113-a的合成

將2-(哌嗪-1-基)乙酸叔丁酯(100 mg, 500 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(129 mg, 1 mmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入化合物LP-66-a (183 mg, 500 µmol)。混合物在室溫下反應3小時。反應液加入二氯甲烷，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-113-a (200 mg, 收率89%)。ESI-MS (m/z): 451.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-113-b的合成

將化合物LP-113-a (200 mg, 444 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-113-b (173 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 395.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-113的合成

將化合物LP-113-b (6 mg, 16 µmol)，化合物LP-63-i (15 mg, 16 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(6 mg, 49 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(9 mg, 25 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-113(11 mg, 收率52%)。ESI-MS (m/z): 1291.8 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.22 (s, 1H), 10.08 – 9.93 (m, 1H), 9.11 (s, 2H), 8.43 – 8.30 (m, 2H), 8.18 – 8.12 (m, 1H), 8.08 – 8.01 (m, 2H), 7.74 – 7.66 (m, 1H), 7.61 – 7.52 (m, 2H), 7.48 – 7.44 (m, 1H), 7.36 – 7.22 (m, 3H), 7.20 – 7.16 (m, 1H), 5.80 – 5.48 (m, 2H), 5.09 – 4.95 (m, 2H), 4.91 – 4.79 (m, 3H), 4.75 – 4.54 (m, 3H), 4.41 – 4.18 (m, 3H), 3.72 – 3.44 (m, 7H), 3.40 (s, 3H), 3.07 – 2.86 (m, 6H), 2.74 – 2.56 (m, 3H), 2.48 – 2.39 (m, 5H), 2.05 – 1.98 (m, 1H), 1.84 – 1.77 (m, 2H), 1.33 – 1.28 (m, 3H), 1.21 – 0.91 (m, 6H), 0.89 – 0.84 (m, 4H), 0.83 – 0.77 (m, 3H).

實施例 2.114：化合物LP-114的合成

步驟一：化合物LP-114的合成

將(6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基)甘氨醯甘氨醯-L-苯丙氨酸(34 mg, 71 µmol)，化合物P-25 (32 mg, 59 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(45 mg, 350 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入2-琥珀醯亞胺基-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸酯(21 mg, 71 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-114(12 mg, 收率20%)。ESI-MS (m/z): 994.7 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.37 – 12.29 (m, 1H), 8.56 – 8.51 (m, 1H), 8.28 – 8.21 (m, 1H), 8.20 – 7.71 (m, 9H), 7.57 – 7.51 (m, 1H), 7.36 – 7.06 (m, 8H), 6.99 (s, 2H), 5.70 – 5.30 (m, 1H), 4.93 – 4.44 (m, 3H), 4.02 – 3.91 (m, 2H), 3.85 – 3.73 (m, 2H), 3.73 – 3.69 (m, 1H), 3.68 – 3.63 (m, 2H), 3.09 – 2.87 (m, 2H), 2.87 – 2.68 (m, 2H), 2.11 – 2.07 (m, 2H), 1.70 – 1.53 (m, 1H), 1.52 – 1.40 (m, 6H), 1.26 – 1.12 (m, 3H).

實施例 2.115：化合物LP-115的合成

步驟一：化合物LP-115-a的合成

將1-(9H-芴-9-基)-3,6-二氧代-2,9-二氧雜-4,7-二氮雜癸烷-11-酸(24 mg, 61 µmol)，化合物P-23 (30 mg, 61 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(24 mg, 185 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(35 mg, 92 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。向反應液加入乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到粗產品化合物LP-115-a (50 mg)。ESI-MS (m/z): 854.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-115-b的合成

將化合物LP-115-a (50 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)，加入二乙胺(0.3 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-115-b (35 mg, 收率94%)。ESI-MS (m/z): 632.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-115的合成

將(6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基)甘氨醯甘氨醯-L-苯丙氨酸(13 mg, 29 µmol)，化合物LP-115-b (15 mg, 23 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(15 mg, 117 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入2-琥珀醯亞胺基-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸酯(9 mg, 29 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-115(5 mg, 收率19%)。ESI-MS (m/z): 1086.7 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.29 – 11.18 (m, 1H), 8.46 – 8.34 (m, 3H), 8.26 – 7.97 (m, 6H), 7.51 – 7.43 (m, 1H), 7.37 – 7.33 (m, 1H), 7.27 – 7.13 (m, 7H), 6.99 (s, 2H), 5.80 – 5.38 (m, 3H), 4.90 – 4.75 (m, 3H), 4.70 – 4.44 (m, 4H), 4.31 – 4.15 (m, 2H), 4.05 – 3.87 (m, 2H), 3.81 – 3.65 (m, 6H), 3.61 – 3.56 (m, 1H), 3.08 – 3.02 (m, 1H), 2.82 – 2.75 (m, 1H), 2.12 – 1.97 (m, 3H), 1.73 – 1.60 (m, 2H), 1.50 – 1.43 (m, 4H), 1.20 – 1.14 (m, 2H), 1.06 – 0.84 (m, 3H).

實施例 2.116：化合物LP-116的合成

步驟一：化合物LP-116-a的合成

將化合物LP-105-c (12 mg, 27 µmol)，化合物LP-63-i (25 mg, 27 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(10 mg, 75 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(16 mg, 41 µmol)。混合物在室溫下攪拌3小時。向反應液中加入二乙胺(0.2 mL)。混合物在室溫下反應2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-116-a (1.5 mg, 收率5%)。ESI-MS (m/z): 1100.6 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-116的合成

將化合物LP-116-a (1.5 mg, 1.4 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(2 mg, 15 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-66-a (1 mg, 2 µmol)。混合物在室溫下反應3小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-116 (0.4 mg, 收率22%)。ESI-MS (m/z): 1350.7 [M+H]⁺.

實施例 2.117：化合物LP-117的合成

步驟一：化合物LP-117的合成

將化合物LP-108-d (8 mg, 16 µmol)，化合物LP-63-i (15 mg, 16 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(9 mg, 70 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入2-琥珀醯亞胺基-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸酯(6 mg, 20 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-117(13 mg, 收率59%)。ESI-MS (m/z): 1348.7 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.25 (s, 1H), 10.10 – 10.01 (m, 1H), 9.12 (s, 2H), 8.43 – 8.34 (m, 2H), 8.22 – 8.15 (m, 2H), 8.15 – 7.81 (m, 3H), 7.73 – 7.50 (m, 3H), 7.48 – 7.43 (m, 1H), 7.36 – 7.11 (m, 4H), 5.84 – 5.68 (m, 1H), 5.65 – 5.34 (m, 1H), 5.10 – 4.91 (m, 2H), 4.87 (s, 2H), 4.84 – 4.53 (m, 4H), 4.39 – 4.19 (m, 3H), 3.62 – 3.46 (m, 6H), 3.41 (s, 3H), 3.02 – 2.89 (m, 7H), 2.82 – 2.79 (m, 1H), 2.70 – 2.69 (m, 1H), 2.59 – 2.56 (m, 2H), 2.48 – 2.34 (m, 9H), 2.06 – 1.94 (m, 1H), 1.86 – 1.76 (m, 2H), 1.35 – 1.27 (m, 3H), 1.19 – 0.91 (m, 6H), 0.89 – 0.77 (m, 7H).

實施例 2.118：化合物LP-118的合成

步驟一：化合物LP-118-a的合成

將化合物P-20(80 mg, 164 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(66 mg, 492 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-88-c (135 mg, 164 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=90/10)得到化合物LP-118-a (101 mg, 收率53%)。ESI-MS (m/z): 1172.7 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-118-b的合成

將化合物LP-118-a (101 mg, 86 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入二乙胺(0.4 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=80/20)得到化合物LP-118-b (30 mg, 收率37%)。ESI-MS (m/z): 950.7 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-118-c的合成

將化合物LP-118-b (10 mg, 11 µmol)，N-乙醯基十聚肌酸(8 mg, 10 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(4 mg, 32 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(6 mg, 16 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-118-c (8 mg, 收率33%)。ESI-MS (m/z): 1702.8 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-118-d的合成

將化合物LP-118-c (8 mg, 4 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-118-d (8 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 1602.9 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-118的合成

將化合物LP-118-d (8 mg, 4 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(2 mg, 15 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-66-a (2 mg, 6 µmol)。混合物在室溫下反應3小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-118 (1 mg, 收率12%)。ESI-MS (m/z): 1852.9 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.29 – 11.22 (m, 1H), 10.16 – 9.96 (m, 1H), 9.11 (s, 2H), 8.41 – 8.35 (m, 2H), 8.30 – 8.21 (m, 2H), 8.17 – 7.91 (m, 4H), 7.59 – 7.42 (m, 2H), 7.38 – 7.28 (m, 2H), 7.23 – 7.13 (m, 1H), 5.76 – 5.60 (m, 1H), 5.19 – 4.95 (m, 2H), 4.87 (s, 2H), 4.67 – 4.52 (m, 2H), 4.38 – 3.90 (m, 26H), 3.40 (s, 3H), 2.94 – 2.70 (m, 37H), 2.57 – 2.52 (m, 5H), 2.39 – 2.35 (m, 2H), 2.01 – 1.95 (m, 3H), 1.85 – 1.80 (m, 3H), 1.31 – 1.26 (m, 3H), 0.88 – 0.80 (m, 6H).

實施例 2.119：化合物LP-119的合成

步驟一：化合物LP-119-a的合成

將(2S)-6-氨基-2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)己酸鹽酸鹽(500 mg, 1.23 mmol)溶於甲醇(5 mL)，加入34%甲醛水溶液(1 mL)和氰基硼氫化鈉(182 mg, 2.9 mmol)。混合物在室溫下攪拌3小時。反應液加入稀鹽酸淬滅，濃縮，殘留物通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-119-a (306 mg, 收率70%)。ESI-MS (m/z): 397.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-119-b的合成

將化合物LP-119-a (45 mg, 113 µmol)和N-羥基丁二醯亞胺(19.59 mg, 170 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳醯二亞胺鹽酸鹽(65 mg, 340 µmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。向反應液加入二氯甲烷，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到粗產品化合物LP-119-b (50 mg)。ESI-MS (m/z): 494.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-119-c的合成

將化合物LP-67-d (20 mg, 20 µmol)和化合物LP-119-b (20 mg, 41 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(11 mg, 84 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-119-c (10 mg, 收率36%)。ESI-MS (m/z): 1347.7 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-119-d的合成

將化合物LP-119-c (10 mg, 8 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)，加入二乙胺(0.2 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-119-d (8 mg, 收率92%)。ESI-MS (m/z): 1125.8 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-119的合成

將化合物LP-119-d (5 mg, 4 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(2 mg, 15 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-66-a (2 mg, 6 µmol)。混合物在室溫下反應3小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-119 (4 mg, 收率65%)。ESI-MS (m/z): 1375.8 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.82 – 12.26 (m, 1H), 9.11 (s, 2H), 8.59 – 8.46 (m, 1H), 8.41 – 7.90 (m, 7H), 7.82 – 7.68 (m, 1H), 7.56 – 6.93 (m, 4H), 6.68 (s, 1H), 5.81 – 5.60 (m, 1H), 5.50 – 5.39 (m, 1H), 5.36 – 5.28 (m, 2H), 5.04 – 4.75 (m, 5H), 4.48 – 4.39 (m, 2H), 4.28 – 4.16 (m, 4H), 3.93 – 3.81 (m, 8H), 3.71 – 3.57 (m, 2H), 3.40 (s, 3H), 2.57 – 2.52 (m, 6H), 2.38 – 2.31 (m, 4H), 2.04 – 1.96 (m, 6H), 1.82 – 1.76 (m, 2H), 1.63 – 1.59 (m, 2H), 1.53 – 1.38 (m, 4H), 0.93 – 0.78 (m, 4H).

實施例 2.120：化合物LP-120的合成

步驟一：化合物LP-120-a的合成

將化合物LP-67-c (270 mg, 203 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)，加入二乙胺(0.1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=70/30)得到化合物LP-120-a (134 mg, 收率60%)。ESI-MS (m/z): 1109.7 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-120-b的合成

將化合物LP-120-a (74 mg, 66 µmol)，化合物LP-105-c (34 mg, 80 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(26 mg, 200 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(38 mg, 100 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。向反應液加入乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=70/30)得到化合物LP-120-b (55 mg, 收率54%)。ESI-MS (m/z): 1516.8 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-120-c的合成

將化合物LP-120-b (55 mg, 36 µmol)溶於四氫呋喃(5 mL)和水(1 mL)的混合物，加入1 N氫氧化鋰水溶液(0.4 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入醋酸至pH=7，濃縮，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-120-c (26 mg, 收率62%)。ESI-MS (m/z): 1154.7 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-120的合成

將化合物LP-120-c (10 mg, 8 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(4 mg, 26 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-66-a (5 mg, 13 µmol)。混合物在室溫下反應2小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-120 (3 mg, 收率22%)。ESI-MS (m/z): 1404.8 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 13.05 – 12.24 (m, 1H), 9.11 (s, 2H), 8.59 – 8.46 (m, 1H), 8.24 – 7.65 (m, 7H), 7.60 – 7.38 (m, 1H), 7.32 – 7.05 (m, 2H), 6.98 – 6.69 (m, 1H), 5.75 – 5.67 (m, 1H), 5.55 – 5.35 (m, 2H), 5.10 – 4.93 (m, 2H), 4.91 – 4.68 (m, 3H), 4.62 – 4.48 (m, 1H), 4.09 – 3.81 (m, 9H), 3.69 – 3.57 (m, 14H), 3.41 (s, 3H), 2.97 – 2.77 (m, 11H), 2.59 – 2.53 (m, 4H), 2.43 – 2.38 (m, 4H), 2.20 – 2.16 (m, 3H), 1.84 – 1.63 (m, 4H).

實施例 2.121：化合物LP-121的合成

步驟一：化合物LP-121-a的合成

將化合物P-29(7 mg, 14 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(5 mg, 42 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-79-a (12 mg, 21 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=90/10)得到化合物LP-121-a (10 mg, 收率78%)。ESI-MS (m/z): 920.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-121-b的合成

將化合物LP-121-a (10 mg, 11 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-121-b (9 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 820.6 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-121的合成

將化合物LP-121-b (9 mg, 11 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(4 mg, 26 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-66-a (5 mg, 13 µmol)。混合物在室溫下反應2小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-121 (4 mg, 收率31%)。ESI-MS (m/z): 1070.8 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.52 (s, 1H), 10.03 – 9.96 (m, 1H), 9.83 – 9.67 (m, 1H), 9.12 (s, 2H), 8.36 – 8.31 (m, 1H), 8.28 – 8.24 (m, 1H), 8.16 – 8.12 (m, 1H), 8.04 – 7.99 (m, 1H), 7.96 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.53 – 7.47 (m, 1H), 7.34 – 7.30 (m, 2H), 7.29 – 7.22 (m, 2H), 5.92 – 5.87 (m, 1H), 5.80 – 5.74 (m, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.85 – 4.69 (m, 2H), 4.63 – 4.56 (m, 2H), 4.50 – 4.35 (m, 2H), 4.27 – 4.16 (m, 1H), 3.64 – 3.59 (m, 1H), 3.41 (s, 3H), 3.26 – 3.19 (m, 4H), 2.67 – 2.62 (m, 3H), 2.58 – 2.54 (m, 2H), 2.43 – 2.30 (m, 3H), 2.03 – 1.94 (m, 2H), 1.87 – 1.79 (m, 3H), 1.33 – 1.30 (m, 3H), 0.90 – 0.84 (m, 6H).

實施例 2.122：化合物LP-122的合成

步驟一：化合物LP-122-a的合成

將化合物P-30-a (135 mg, 206 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入吡啶(49 mg, 618 µmol)和乙酸酐(63 mg, 61 µmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用檸檬酸水溶液洗一次，水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=30/70)得到化合物LP-122-a (143 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 697.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-122-b的合成

將化合物LP-122-a (143 mg, 205 µmol)溶於四氫呋喃(5 mL)，加入1 M的四丁基氟化銨四氫呋喃溶液(0.6 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加50 mL水，用乙酸乙酯萃取三次，合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=93/7)得到化合物LP-122-b (80 mg, 收率67%)。ESI-MS (m/z): 583.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-122-c的合成

將((2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)乙醯)氨基)乙酸甲酯(225 mg, 617 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入三甲基氯矽烷(428 mg, 3.94 mmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。濃縮反應液，殘留物溶於二氯甲烷(5 mL)，加入化合物LP-122-b (80 mg, 137 µmol)。混合物在60℃下攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，濃縮得到粗產品化合物LP-122-c (122 mg)。ESI-MS (m/z): 891.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-122-d的合成

將粗產品化合物LP-122-c (122 mg)溶於四氫呋喃(5 mL)和水(1 mL)的混合物，加入1 N氫氧化鋰水溶液(0.8 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入醋酸至pH=7，濃縮，殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-122-d (20 mg, 收率23%)。ESI-MS (m/z): 627.5 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-122的合成

將化合物LP-122-d (10 mg, 16 µmol)，(6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基)甘氨醯甘氨醯-L-苯丙氨酸(9 mg, 19 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(4 mg, 32 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(9 mg, 32 µmol)。混合物在室溫下攪拌0.5小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-122 (3 mg, 收率17%)。ESI-MS (m/z): 1081.8 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.40 (s, 1H), 8.56 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 8.49 – 8.40 (m, 1H), 8.31 – 8.26 (m, 1H), 8.22 – 8.00 (m, 6H), 7.79 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.55 – 7.50 (m, 1H), 7.35 – 7.12 (m, 7H), 6.99 (s, 2H), 5.78 – 5.72 (m, 1H), 5.17 – 4.97 (m, 1H), 4.80 – 4.72 (m, 1H), 4.69 – 4.26 (m, 5H), 4.16 – 4.05 (m, 1H), 3.80 – 3.58 (m, 6H), 3.15 – 3.12 (m, 1H), 3.05 – 3.02 (m, 1H), 2.81 – 2.77 (m, 1H), 2.59 – 2.58 (m, 2H), 2.45 – 2.38 (m, 1H), 2.35 – 1.93 (m, 6H), 1.78 – 1.72 (m, 2H), 1.70 – 1.34 (m, 7H), 1.20 – 0.83 (m, 2H).

實施例 2.123：化合物LP- 123的合成

步驟一：化合物LP-123-a的合成

將化合物P-28-b (10 mg, 17 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-80-k (20 mg, 17 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(5 mg, 42 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到粗產品化合物LP-123-a (25 mg)。ESI-MS (m/z): 1593.8 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-123的合成

將粗產品化合物LP-123-a (25 mg)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-123 (8 mg, 收率31%)。ESI-MS (m/z): 1493.7 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.58 – 11.36 (m, 1H), 10.14 – 9.94 (m, 1H), 9.12 (s, 2H), 8.36 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.28 – 8.20 (m, 1H), 8.14 – 8.06 (m, 2H), 8.02 – 7.93 (m, 2H), 7.76 – 7.61 (m, 1H), 7.55 – 7.44 (m, 1H), 7.37 – 7.29 (m, 1H), 7.29 – 7.24 (m, 1H), 7.22 – 7.14 (m, 2H), 5.83 – 5.75 (m, 1H), 5.09 – 5.02 (m, 2H), 4.74 – 4.52 (m, 5H), 4.40 – 4.35 (m, 1H), 4.25 – 4.19 (m, 2H), 3.91 – 3.78 (m, 1H), 3.69 – 3.60 (m, 2H), 3.50 – 3.46 (m, 30H), 3.22 – 3.21 (m, 3H), 2.94 – 2.72 (m, 7H), 2.75 – 2.65 (m, 3H), 2.57 – 2.52 (m, 5H), 2.43 – 2.29 (m, 3H), 2.00 – 1.95 (m, 1H), 1.87 – 1.66 (m, 4H), 1.34 – 1.27 (m, 3H), 0.91 – 0.80 (m, 6H).

實施例 2.124：化合物LP-124的合成

步驟一：化合物LP-124-a的合成

將化合物LP-101-g (300 mg, 692 µmol)溶於四氫呋喃(5 mL)和水(1 mL)的混合物，加入1 N氫氧化鋰(1 mL)。混合物在室溫下攪拌3小時。反應液加入稀鹽酸至pH=6，用乙酸乙酯萃取三次，合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮得到化合物LP-124-a (280 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 406.4 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-124-b的合成

將化合物LP-124-a (280 mg, 690 µmol)，化合物LP-102-b (171 mg, 739 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(287 mg, 2.22 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(422 mg, 1.11 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-124-b (147 mg, 收率32%)。ESI-MS (m/z): 619.7 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-124-c的合成

將化合物LP-124-b (147 mg, 237 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(98 mg, 755 µmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(216 mg, 712 µmol)。混合物在40℃下攪拌過夜。反應液加入二氯甲烷，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=85/15)得到化合物LP-124-c (90 mg, 收率48%)。ESI-MS (m/z): 784.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-124-d的合成

將化合物LP-124-c (45 mg, 57 µmol)和化合物P-20 (28 mg, 57 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(22 mg, 172 µmol)。混合物在室溫下攪拌過夜。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-124-d (147 mg, 收率32%)。ESI-MS (m/z): 1132.7 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-124-e的合成

將化合物LP-124-d (18 mg, 16 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-124-e (16 mg, 收率97%)。ESI-MS (m/z): 1032.8 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-124的合成

將化合物LP-124-e (16 mg, 16 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(6 mg, 45 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-66-a (8 mg, 16 µmol)。混合物在室溫下反應3小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-124 (2.5 mg, 收率13%)。ESI-MS (m/z): 1282.7 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.32 – 11.21 (m, 1H), 10.22 – 10.02 (m, 1H), 9.10 (s, 2H), 8.43 – 8.37 (m, 1H), 8.24 – 7.98 (m, 3H), 7.87 – 7.05 (m, 11H), 5.76 – 5.61 (m, 1H), 5.09 – 4.90 (m, 2H), 4.87 (s, 2H), 4.83 – 4.49 (m, 2H), 4.47 – 4.34 (m, 2H), 3.98 – 3.87 (m, 2H), 3.80 – 3.77 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.19 – 3.13 (m, 7H), 2.94 – 2.91 (m, 2H), 2.80 – 2.75 (m, 2H), 2.44 – 2.35 (m, 12H), 2.19 – 2.09 (m, 12H), 1.68 – 1.56 (m, 4H), 1.43 – 1.22 (m, 5H).

實施例 2.125：

使用實施例2.118相同的方法和反應條件，利用化合物P-29作為原料代替化合物P-20，得到下表中的目標產物。

化合物	結構	ESI-MS (m/z): [M+H]⁺.	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆)
LP-125		1865.9	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.41 (s, 1H), 9.12 (s, 2H), 8.37 – 8.35 (m, 1H), 8.10 – 7.95 (m, 4H), 7.46 – 7.44 (m, 1H), 7.25 – 7.17 (m, 6H), 6.91 – 6.78 (m, 2H), 6.70 – 6.66 (m, 2H), 5.78 – 5.69 (m, 1H), 5.34 – 5.32 (m, 3H), 5.10 – 5.02 (m, 3H), 4.60 – 4.52 (m, 3H), 4.36 – 3.95 (m, 24H), 3.41 (s, 3H), 2.94 – 2.76 (m, 36H), 2.65 – 2.63 (m, 2H), 2.55 – 2.55 (m, 2H), 2.38 – 2.35 (m, 4H), 1.97 – 1.94 (m, 3H), 1.85 – 1.81 (m, 3H), 1.29 – 1.29 (m, 3H), 0.89 – 0.86 (m, 6H).

實施例 2.126：化合物LP-126的合成

步驟一：化合物LP-126-a的合成

將化合物LP-67-b (226 mg, 229 µmol)和化合物P-20 (100 mg, 190 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(123 mg, 954 µmol)。混合物在室溫下攪拌過夜。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-126-a (176 mg, 收率69%)。ESI-MS (m/z): 1336.8 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-126-b的合成

將化合物LP-126-a (176 mg, 132 µmol)溶於四氫呋喃(3 mL)和水(1 mL)的混合物，加入1 N氫氧化鋰水溶液(1 mL)。混合物在室溫下攪拌16小時。反應液加入醋酸至pH=7，反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-126-b (34 mg, 收率26%)。ESI-MS (m/z): 974.7 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-126-c的合成

將化合物LP-126-b (15 mg, 15 µmol)和化合物LP-46-a (9 mg, 23 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(5.5 mg, 42 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-126-c (5 mg, 收率26%)。ESI-MS (m/z): 1240.7 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-126的合成

將化合物LP-126-c (5 mg, 5 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(0.5 mL)，混合物在室溫下繼續攪拌0.5小時。濃縮反應液，殘留物通過凍乾得到化合物LP-126 (5 mg, 收率98%)。ESI-MS (m/z): 1140.8 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.98 (s, 1H), 9.15 – 9.00 (m, 1H), 8.69 – 8.57 (m, 1H), 8.44 – 8.37 (m, 1H), 8.26 – 8.16 (m, 2H), 8.15 – 8.10 (m, 1H), 7.95 – 7.84 (m, 3H), 7.76 – 7.65 (m, 1H), 7.62 – 7.50 (m, 1H), 7.36 – 7.20 (m, 1H), 7.13 (s, 2H), 7.09 – 6.99 (m, 1H), 5.95 – 5.31 (m, 6H), 5.08 – 4.90 (m, 5H), 4.79 – 4.73 (m, 1H), 4.68 – 4.44 (m, 1H), 4.21 – 4.02 (m, 3H), 3.96 – 3.85 (m, 3H), 3.80 – 3.75 (m, 1H), 3.71 – 3.61 (m, 6H), 3.59 – 3.55 (m, 4H), 3.23 – 3.18 (m, 4H), 2.60 – 2.53 (m, 2H), 2.04 – 1.95 (m, 2H), 1.74 – 1.54 (m, 2H).

實施例 2.127：化合物LP- 127的合成

步驟一：化合物LP-127-a的合成

將化合物LP-127-a (14 mg, 24 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-80-k (33 mg, 29 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(10 mg, 87 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到粗產品化合物LP-127-a (35 mg)。ESI-MS (m/z): 1519.8 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-127的合成

將粗產品化合物LP-127-a (35 mg)溶於四氫呋喃(5 mL)和水(1 mL)，加入三(2-羧乙基)膦鹽酸鹽(14 mg, 50 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-127 (5 mg, 收率13%)。ESI-MS (m/z): 1493.7 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.10 – 9.92 (m, 1H), 9.11 (s, 2H), 8.40 – 8.36 (m, 1H), 8.26 – 8.21 (m, 1H), 8.16 – 8.01 (m, 3H), 8.00 – 7.90 (m, 1H), 7.75 – 7.57 (m, 1H), 7.51 – 7.37 (m, 2H), 7.34 – 7.07 (m, 5H), 5.75 – 5.63 (m, 1H), 5.51 – 5.33 (m, 1H), 5.12 – 4.95 (m, 2H), 4.88 – 4.74 (m, 1H), 4.67 – 4.49 (m, 4H), 4.42 – 4.33 (m, 2H), 4.26 – 4.20 (m, 1H), 4.13 (s, 2H), 3.96 – 3.76 (m, 4H), 3.49 – 3.45 (m, 30H), 3.22 (s, 3H), 2.86 – 2.75 (m, 4H), 2.56 – 2.54 (m, 2H), 2.41 – 2.31 (m, 4H), 2.00 – 1.94 (m, 2H), 1.86 – 1.78 (m, 3H), 1.67 – 1.57 (m, 3H), 1.31 – 1.27 (m, 3H), 0.88 – 0.82 (m, 6H).

實施例 2.128-2.133：

使用實施例2.80相同的方法和反應條件，利用化合物P-31，P-33，P-34，P-35，P-36，P-37作為原料代替化合物P-23，得到下表中的目標產物。

化合物	結構	ESI-MS (m/z): [M+H]⁺.	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆)
LP-128		1495.9	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.13 – 9.87 (m, 1H), 9.11 (s, 2H), 8.78 – 8.75 (m, 1H), 8.43 – 8.31 (m, 1H), 8.22 – 8.12 (m, 2H), 8.10 – 8.06 (m, 1H), 7.97 – 7.90 (m, 1H), 7.73 – 7.58 (m, 2H), 7.56 – 7.52 (m, 1H), 7.39 – 7.13 (m, 3H), 6.16 – 6.06 (m, 1H), 5.74 – 5.63 (m, 1H), 5.52 – 5.35 (m, 1H), 5.16 – 4.99 (m, 4H), 4.88 – 4.75 (m, 1H), 4.70 – 4.45 (m, 3H), 4.41 – 4.31 (m, 1H), 4.26 – 4.19 (m, 1H), 4.18 – 3.81 (m, 2H), 3.72 – 3.62 (m, 3H), 3.50 – 3.44 (m, 30H), 3.41 (s, 3H), 3.22 (s, 3H), 2.93 – 2.77 (m, 4H), 2.56 – 2.54 (m, 2H), 2.43 – 2.29 (m, 4H), 2.01 – 1.93 (m, 1H), 1.85 – 1.79 (m, 2H), 1.68 – 1.56 (m, 2H), 1.31 – 1.25 (m, 3H), 0.88 – 0.81 (m, 6H).
LP-129		1494.9	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.23 (s, 1H), 10.09 – 9.92 (m, 1H), 9.12 (s, 2H), 8.40 – 8.37 (m, 1H), 8.24 – 8.21 (m, 1H), 8.12 – 8.05 (m, 2H), 7.96 – 7.91 (m, 1H), 7.49 – 7.43 (m, 1H), 7.37 – 7.33 (m, 1H), 7.27 – 7.18 (m, 4H), 6.72 – 6.57 (m, 3H), 6.01 – 5.89 (m, 1H), 5.58 – 5.50 (m, 1H), 5.36 – 5.28 (m, 3H), 5.02 – 4.93 (m, 2H), 4.88 (s, 2H), 4.68 – 4.21 (m, 8H), 3.51 – 3.43 (m, 32H), 3.41 (s, 3H), 3.22 (s, 3H), 2.57 – 2.54 (m, 4H), 2.37 – 2.32 (m, 2H), 1.98 – 1.95 (m, 3H), 1.83 – 1.78 (m, 2H), 1.29 – 1.28 (m, 4H), 0.88 – 0.85 (m, 6H).
LP-130		1489.8	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.39 (s, 1H), 10.14 – 9.97 (m, 1H), 9.11 (s, 2H), 8.60 – 8.47 (m, 1H), 8.33 – 8.22 (m, 2H), 8.20 – 8.06 (m, 2H), 7.98 – 7.91 (m, 1H), 7.81 – 7.56 (m, 2H), 7.53 – 7.48 (m, 1H), 7.36 – 7.10 (m, 3H), 5.75 – 5.59 (m, 1H), 5.52 – 5.22 (m, 1H), 5.08 – 4.92 (m, 2H), 4.75 – 4.33 (m, 5H), 4.29 – 4.15 (m, 1H), 4.11 – 3.82 (m, 2H), 3.52 – 3.44 (m, 32H), 3.41 (s, 3H), 3.22 (s, 3H), 2.94 – 2.90 (m, 1H), 2.86 – 2.82 (m, 1H), 2.68 – 2.63 (m, 2H), 2.56 – 2.53 (m, 3H), 2.45 – 2.29 (m, 4H), 2.02 – 1.95 (m, 2H), 1.86 – 1.77 (m, 2H), 1.34 – 1.23 (m, 4H), 0.89 – 0.81 (m, 6H).
LP-131		1478.8	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.36 – 11.29 (m, 1H), 10.11 – 9.94 (m, 1H), 9.11 (s, 2H), 8.36 – 8.20 (m, 3H), 8.16 – 8.08 (m, 1H), 8.07 – 8.00 (m, 1H), 7.97 – 7.92 (m, 1H), 7.73 – 7.37 (m, 2H), 7.34 – 7.06 (m, 4H), 5.75 – 5.61 (m, 1H), 5.52 – 5.33 (m, 1H), 5.10 – 4.99 (m, 1H), 4.86 – 4.33 (m, 5H), 4.25 – 4.20 (m, 1H), 4.18 – 3.69 (m, 3H), 3.67 – 3.56 (m, 3H), 3.53 – 3.43 (m, 30H), 3.41 (s, 3H), 3.22 (s, 3H), 2.97 – 2.66 (m, 4H), 2.55 (s, 3H), 2.54 – 2.52 (m, 2H), 2.46 – 2.29 (m, 4H), 2.00 – 1.93 (m, 1H), 1.86 – 1.76 (m, 2H), 1.69 – 1.56 (m, 2H), 1.31 – 1.25 (m, 3H), 0.90 – 0.80 (m, 6H).
LP-132		1475.8	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.41 (s, 1H), 10.10 – 9.95 (m, 1H), 9.11 (s, 2H), 8.59 – 8.51 (m, 1H), 8.32 – 8.25 (m, 2H), 8.21 – 8.07 (m, 2H), 8.00 – 7.92 (m, 1H), 7.83 – 7.67 (m, 1H), 7.63 – 7.47 (m, 2H), 7.38 – 7.05 (m, 4H), 6.00 – 5.93 (m, 1H), 5.89 – 5.61 (m, 1H), 5.14 – 4.89 (m, 2H), 4.77 – 4.51 (m, 4H), 4.47 – 4.34 (m, 2H), 4.25 – 4.19 (m, 1H), 4.12 – 3.82 (m, 1H), 3.54 – 3.44 (m, 32H), 3.41 (s, 3H), 3.22 (s, 3H), 2.98 – 2.79 (m, 4H), 2.70 – 2.61 (m, 2H), 2.56 – 2.54 (m, 2H), 2.42 – 2.33 (m, 2H), 1.99 – 1.95 (m, 2H), 1.86 – 1.77 (m, 2H), 1.31 – 1.28 (m, 2H), 0.88 – 0.82 (m, 6H).
LP-133		1546.8	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.36 (s, 1H), 10.07 – 9.93 (m, 1H), 9.11 (s, 2H), 8.58 – 8.50 (m, 1H), 8.25 – 8.22 (m, 1H), 8.21 – 8.01 (m, 3H), 7.96 – 7.91 (m, 1H), 7.80 – 7.72 (m, 1H), 7.70 – 7.54 (m, 1H), 7.54 – 7.49 (m, 1H), 7.32 – 7.12 (m, 3H), 5.78 – 5.67 (m, 1H), 5.21 – 4.61 (m, 4H), 4.59 – 4.42 (m, 2H), 4.41 – 4.33 (m, 1H), 4.29 – 3.76 (m, 2H), 3.68 – 3.63 (m, 2H), 3.61 – 3.41 (m, 33H), 3.41 (s, 3H), 3.22 (s, 3H), 3.00 – 2.72 (m, 6H), 2.66 – 2.62 (m, 1H), 2.58 – 2.52 (m, 4H), 2.41 – 2.28 (m, 4H), 2.24 – 2.12 (m, 2H), 2.01 – 1.93 (m, 1H), 1.87 – 1.75 (m, 2H), 1.68 – 1.49 (m, 2H), 1.31 – 1.27 (m, 3H), 0.88 – 0.80 (m, 6H).

實施例 2.134：化合物LP-134的合成

步驟一：化合物LP-134-a的合成

將化合物P-20-a (500 mg, 1.22 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入吡啶(291 mg, 3.67 mmol)和乙酸酐(375 mg, 3.67 mmol)。混合物在室溫下攪拌16小時。反應液加入30 mL二氯甲烷，用檸檬酸水溶液洗一次，水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(PE/EA=50/50)得到化合物LP-134-a (540 mg, 收率98%)。ESI-MS (m/z): 451.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-134-b的合成

將化合物LP-134 -a (436 mg, 822 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入間氯過氧苯甲酸(284 mg, 1.65 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液中加入飽和碳酸氫鈉(10 mL)，用二氯甲烷(10 mL)萃取三次。合併有機相，用水洗一次，飽和食鹽水洗一次，乾燥，濃縮得到粗產品化合物LP-134 -b (390 mg)。ESI-MS (m/z): 483.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-134-c的合成

將粗產品化合物LP-134 -b (390 mg)和N,N-二異丙基乙胺(318 mg, 2.47 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入化合物P-12-a (81 mg, 356 µmol)。混合物在50℃下攪拌6小時。反應液冷卻至室溫，加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-134-c (413 mg, 收率80%)。ESI-MS (m/z): 630.4 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-134-d的合成

將化合物LP-134-c (142 mg, 225 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入4 N鹽酸二氧六環溶液(0.4 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-134-d (128 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 530.6 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-134-e的合成

將化合物LP-134-d (128 mg, 225 µmol)溶於二氯甲烷(3 mL)和甲醇(1 mL)，加入甲醛水溶液(34%水溶液, 0.5 mL)。混合物在室溫下攪拌10分鐘，加入三乙醯氧基硼氫化鈉(478 mg, 2.26 mmol)，之後在室溫下攪拌過夜。反應液中加入飽和碳酸氫鈉(10 mL)，乙酸乙酯(30 mL)萃取三次，合併有機相，濃縮。殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-134-e(35 mg, 收率29%)。ESI-MS (m/z): 544.5 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-134-f的合成

將((2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)乙醯)氨基)乙酸甲酯(127 mg, 345 µmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入三甲基氯矽烷(856 mg, 7.88 mmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。濃縮反應液，殘留物溶於二氯甲烷(5 mL)，加入化合物LP-134-e (47 mg, 86 µmol)。混合物在60℃下攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，濃縮得到粗產品化合物LP-134-f (70 mg)。ESI-MS (m/z): 852.5 [M+H]⁺.

步驟七：化合物LP-134-g的合成

將化合物LP-134-f (70 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入二乙胺(0.2 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-134-g (30 mg, 收率55%)。ESI-MS (m/z): 630.5 [M+H]⁺.

步驟八：化合物LP-134-h的合成

將化合物LP-134-g (30 mg, 47 µmol)溶於四氫呋喃(3 mL)和水(0.5 mL)的混合物，加入1 N氫氧化鋰(0.3 mL)。混合物在室溫下攪拌3小時。反應液加入醋酸至pH=7，濃縮。殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-134-h (10 mg, 收率36%)。ESI-MS (m/z): 588.4 [M+H]⁺.

步驟九：化合物LP-134的合成

將化合物LP-134-h (5 mg, 8 µmol)，化合物LP-44-i (7 mg, 12 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(8 mg, 60 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(5 mg, 17 µmol)。混合物在室溫下攪拌0.5小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-134 (2 mg, 收率20%)。ESI-MS (m/z): 1149.6 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.25 (s, 1H), 9.10 (s, 2H), 8.78 – 8.71 (m, 1H), 8.40 – 8.35 (m, 1H), 8.27 – 8.22 (m, 1H), 8.20 – 8.14 (m, 1H), 8.13 – 8.02 (m, 4H), 7.98 – 7.92 (m, 1H), 7.48 – 7.45 (m, 1H), 7.31 – 7.28 (m, 1H), 7.22 – 7.16 (m, 1H), 5.77 – 5.65 (m, 1H), 4.82 (s, 2H), 4.78 – 4.65 (m, 4H), 4.30 – 4.10 (m, 3H), 3.81 – 3.72 (m, 3H), 3.40 (s, 3H), 2.35 – 2.21 (m, 12H), 2.02 – 1.91 (m, 5H), 1.78 – 1.75 (m, 3H), 1.60 – 1.52 (m, 2H), 1.35 – 1.30 (m, 6H), 0.89 – 0.72 (m, 16H).

實施例 2.135：化合物LP- 135的合成

步驟一：化合物LP-135的合成

將化合物LP-134-h (5 mg, 8 µmol)，化合物LP-59-f (7 mg, 13 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(8 mg, 60 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(5 mg, 17 µmol)。混合物在室溫下攪拌0.5小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-135 (3 mg, 收率32%)。ESI-MS (m/z): 1099.7 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.28 (s, 1H), 9.09 (s, 2H), 8.71 (t, J = 6.7 Hz, 1H), 8.42 – 8.36 (m, 2H), 8.24 – 8.14 (m, 3H), 8.13 – 8.00 (m, 4H), 7.49 – 7.45 (m, 1H), 7.32 – 7.30 (m, 1H), 7.26 – 7.22 (m, 4H), 7.21 – 7.16 (m, 2H), 5.77 – 5.69 (m, 1H), 4.83 (s, 2H), 4.76 – 4.72 (m, 2H), 4.72 – 4.66 (m, 1H), 4.58 – 4.50 (m, 2H), 4.30 – 4.11 (m, 1H), 3.80 – 3.74 (m, 3H), 3.72 – 3.68 (m, 3H), 3.62 – 3.58 (m, 1H), 3.40 (s, 3H), 3.09 – 3.03 (m, 1H), 2.86 – 2.77 (m, 1H), 2.57 – 2.54 (m, 3H), 2.34 – 2.30 (m, 2H), 2.25 – 2.12 (m, 3H), 2.05 – 1.89 (m, 3H), 1.84 – 1.79 (m, 2H), 1.71 – 1.56 (m, 2H).

實施例 2.136- 實施例 2.137：

使用實施例2.1相同的方法和反應條件，利用化合物P-38和P-39作為原料代替P-1，得到下表中的目標產物。

化合物	結構	ESI-MS (m/z): [M+H]⁺.	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆)
LP-136		1024.7	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 13.17 – 12.14 (m, 1H), 10.02 (s, 1H), 8.99 – 8.81 (m, 1H), 8.10 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.29 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.26 – 7.13 (m, 2H), 6.99 (s, 2H), 6.07 – 5.94 (m, 1H), 5.41 (s, 2H), 5.01 (s, 2H), 4.84 (s, 2H), 4.44 – 4.35 (m, 1H), 4.23 – 4.15 (m, 1H), 3.63 – 3.58 (m, 4H), 3.30 – 3.29 (m, 2H), 3.06 – 2.91 (m, 3H), 2.24 – 2.06 (m, 3H), 2.01 – 1.93 (m, 1H), 1.80 – 1.30 (m, 11H), 1.23 – 1.13 (m, 2H), 0.89 – 0.81 (m, 6H), 0.80 – 0.69 (m, 4H).
LP-137		1024.4	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.01 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 8.64 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.95 – 7.90 (m, 2H), 7.89 – 7.84 (m, 1H), 7.82 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.60 – 7.55 (m, 3H), 7.44 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.35 – 7.32 (m, 1H), 7.31 – 7.24 (m, 2H), 7.00 (s, 2H), 6.89 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 6.04 – 5.96 (m, 1H), 5.43 (s, 2H), 5.11 (s, 1H), 5.02 – 4.90 (m, 2H), 4.54 – 4.46 (m, 2H), 4.40 – 4.34 (m, 1H), 4.34 – 4.28 (m, 1H), 4.21 – 4.17 (m, 1H), 3.68 – 3.56 (m, 2H), 3.18 – 3.12 (m, 1H), 3.04 – 2.91 (m, 2H), 2.23 – 2.04 (m, 4H), 2.02 – 1.93 (m, 2H), 1.84 – 1.74 (m, 2H), 1.70 – 1.65 (m, 1H), 1.61 – 1.56 (m, 1H), 1.51 – 1.40 (m, 6H), 1.38 – 1.34 (m, 1H), 1.20 – 1.15 (m, 2H), 0.86 – 0.84 (m, 3H), 0.83 – 0.80 (m, 3H), 0.78 – 0.74 (m, 4H).

實施例 2.138-2.139：

使用實施例2.80相同的方法和反應條件，利用化合物P-40，P-31作為原料代替化合物P-23，得到下表中的目標產物。

化合物	結構	ESI-MS (m/z): [M+H]⁺.	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆)
LP-138		1491.9	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.42 (s, 1H), 10.12 – 9.87 (m, 1H), 9.19 – 9.02 (m, 2H), 8.57 – 8.53 (m, 1H), 8.32 – 8.23 (m, 1H), 8.20 – 8.12 (m, 1H), 7.99 – 7.91 (m, 1H), 7.80 – 7.74 (m, 1H), 7.58 – 7.48 (m, 1H), 7.25 – 7.18 (m, 3H), 7.05 (s, 1H), 6.70 – 6.60 (m, 2H), 5.64 – 5.48 (m, 1H), 5.36 – 5.27 (m, 3H), 5.03 – 4.89 (m, 2H), 4.65 – 4.32 (m, 4H), 3.70 – 3.56 (m, 2H), 3.53 – 3.42 (m, 34H), 3.41 (s, 3H), 3.23 – 3.21 (m, 6H), 2.93 – 2.80 (m, 2H), 1.99 – 1.95 (m, 6H), 1.49 – 1.43 (m, 3H), 1.29 – 1.27 (m, 6H), 0.89 – 0.82 (m, 6H).
LP-139		1494.9	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.41 – 11.33 (m, 1H), 10.10 – 9.95 (m, 1H), 9.12 (s, 2H), 8.38 – 8.35 (m, 1H), 8.29 – 8.12 (m, 2H), 8.11 – 8.05 (m, 2H), 8.03 – 7.90 (m, 2H), 7.75 – 7.60 (m, 1H), 7.49 – 7.42 (m, 1H), 7.35 – 7.16 (m, 4H), 5.68 – 5.62 (m, 1H), 5.45 – 5.31 (m, 1H), 5.12 – 4.99 (m, 2H), 4.74 – 4.65 (m, 2H), 4.61 – 4.53 (m, 3H), 4.44 – 4.31 (m, 1H), 4.26 – 4.18 (m, 1H), 4.11 – 3.96 (m, 1H), 3.73 – 3.67 (m, 1H), 3.64 – 3.59 (m, 1H), 3.58 – 3.51 (m, 4H), 3.50 – 3.40 (m, 33H), 3.23 – 3.21 (m, 3H), 2.95 – 2.84 (m, 3H), 2.59 – 2.52 (m, 2H), 2.42 – 2.34 (m, 2H), 2.02 – 1.95 (m, 2H), 1.86 – 1.72 (m, 3H), 1.69 – 1.42 (m, 2H), 1.32 – 1.28 (m, 3H), 0.89 – 0.82 (m, 6H).

實施例 2.140：化合物LP-140的合成

步驟一：化合物LP-140-a的合成

將化合物LP-134-d (100 mg, 158 µmol)溶於二氯甲烷(3 mL)和甲醇(1 mL)，丙酮(395 mg, 6.81 mmol)。混合物在室溫下攪拌10分鐘，加入三乙醯氧基硼氫化鈉(337 mg, 1.59 mmol)，之後在室溫下攪拌過夜。反應液中加入飽和碳酸氫鈉(10 mL)，乙酸乙酯(30 mL)萃取三次，合併有機相，濃縮。殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-140-a(53 mg, 收率58%)。ESI-MS (m/z): 572.5 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-140-b的合成

將((2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)乙醯)氨基)乙酸甲酯(137 mg, 370 µmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入三甲基氯矽烷(856 mg, 7.88 mmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。濃縮反應液，殘留物溶於二氯甲烷(5 mL)，加入化合物LP-140-a (53 mg, 92 µmol)。混合物在60℃下攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，濃縮得到粗產品化合物LP-140-b (80 mg)。ESI-MS (m/z): 880.5 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-140-c的合成

將粗產品化合物LP-140-b (80 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入二乙胺(0.2 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-140-c (29 mg, 收率47%)。ESI-MS (m/z): 658.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-140-d的合成

將化合物LP-140-c (29 mg, 44 µmol)溶於四氫呋喃(3 mL)和水(0.5 mL)的混合物，加入1 N氫氧化鋰(0.3 mL)。混合物在室溫下攪拌3小時。反應液加入醋酸至pH=7，濃縮。殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-140-d (18 mg, 收率36%)。ESI-MS (m/z): 616.4 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-140的合成

將化合物LP-140-d (10 mg, 16 µmol)，化合物LP-59-f (10 mg, 19 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(8 mg, 60 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(7 mg, 24 µmol)。混合物在室溫下攪拌0.5小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-140 (6 mg, 收率33%)。ESI-MS (m/z): 1127.7 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.27 (s, 1H), 9.09 (s, 2H), 8.75 – 8.66 (m, 1H), 8.43 – 8.37 (m, 2H), 8.24 – 8.15 (m, 2H), 8.14 – 8.05 (m, 4H), 7.46 (s, 1H), 7.32 – 7.30 (m, 1H), 7.26 – 7.22 (m, 5H), 7.21 – 7.14 (m, 2H), 5.84 – 5.78 (m, 1H), 5.05 – 4.92 (m, 1H), 4.83 (s, 2H), 4.77 – 4.69 (m, 3H), 4.68 – 4.56 (m, 1H), 4.55 – 4.49 (m, 1H), 4.34 – 4.06 (m, 1H), 3.83 – 3.73 (m, 4H), 3.71 – 3.66 (m, 3H), 3.63 – 3.58 (m, 1H), 3.40 (s, 3H), 3.10 – 3.04 (m, 1H), 2.84 – 2.79 (m, 1H), 2.58 – 2.53 (m, 4H), 2.42 – 2.39 (m, 1H), 2.35 – 2.30 (m, 2H), 1.85 – 1.79 (m, 2H), 1.66 – 1.54 (m, 2H), 0.97 – 0.68 (m, 6H).

實施例 2.141-2.143：

使用實施例2.80相同的方法和反應條件，利用化合物P-38，P-39，P-43作為原料代替化合物P-23，得到下表中的目標產物。

化合物	結構	ESI-MS (m/z): [M/2+H]⁺.	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆)
LP-141		718.1	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.68 (s, 1H), 10.10 – 9.96 (m, 1H), 9.11 (s, 2H), 8.99 – 8.89 (m, 1H), 8.23 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 7.95 – 7.90 (m, 1H), 7.72 – 7.58 (m, 2H), 7.33 – 7.14 (m, 4H), 5.09 – 5.02 (m, 2H), 4.88 – 4.82 (m, 2H), 4.69 – 4.63 (m, 1H), 4.58 – 4.53 (m, 1H), 4.40 – 4.33 (m, 1H), 4.26 – 4.18 (m, 1H), 3.63 – 3.44 (m, 34H), 3.41 – 3.40 (m, 3H), 3.22 (s, 3H), 2.92 – 2.86 (m, 3H), 2.68 – 2.63 (m, 2H), 2.57 – 2.53 (m, 6H), 2.38 – 2.34 (m, 2H), 1.99 – 1.95 (m, 1H), 1.84 – 1.79 (m, 2H), 1.76 – 1.71 (m, 1H), 1.31 – 1.27 (m, 3H), 0.89 – 0.83 (m, 6H), 0.80 – 0.70 (m, 4H).
LP-142		717.7	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.08 – 9.91 (m, 1H), 9.11 (s, 2H), 8.64 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.25 – 8.19 (m, 1H), 8.04 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.95 – 7.83 (m, 4H), 7.71 – 7.54 (m, 2H), 7.44 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.36 – 7.13 (m, 3H), 6.89 – 6.84 (m, 1H), 5.14 – 5.08 (m, 1H), 5.05 – 4.92 (m, 2H), 4.69 – 4.48 (m, 4H), 4.41 – 4.35 (m, 1H), 4.33 – 4.27 (m, 1H), 4.25 – 4.19 (m, 1H), 3.68 – 3.57 (m, 4H), 3.49 – 3.41 (m, 32H), 3.23 – 3.21 (m, 3H), 2.93 – 2.79 (m, 4H), 2.57 – 2.53 (m, 4H), 2.39 – 2.32 (m, 2H), 2.10 – 2.03 (m, 1H), 2.00 – 1.94 (m, 1H), 1.85 – 1.75 (m, 4H), 1.31 – 1.27 (m, 3H), 0.88 – 0.81 (m, 6H), 0.78 – 0.71 (m, 4H).
LP-143		755.8	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.11 – 9.95 (m, 1H), 9.12 (s, 2H), 8.72 (s, 1H), 8.27 – 8.17 (m, 4H), 8.13 – 8.03 (m, 1H), 7.97 – 7.90 (m, 1H), 7.78 – 7.58 (m, 2H), 7.38 – 7.26 (m, 4H), 6.71 – 6.62 (m, 1H), 5.78 – 5.66 (m, 1H), 5.13 – 5.05 (m, 2H), 4.89 – 4.82 (m, 2H), 4.77 – 4.68 (m, 2H), 4.64 – 4.60 (m, 1H), 4.42 – 4.35 (m, 1H), 4.24 – 4.12 (m, 4H), 3.51 – 3.46 (m, 33H), 3.23 – 3.21 (m, 3H), 2.95 – 2.88 (m, 6H), 2.74 – 2.68 (m, 2H), 2.56 – 2.55 (m, 2H), 2.38 – 2.36 (m, 2H), 2.17 – 2.14 (m, 2H), 2.02 – 1.96 (m, 2H), 1.86 – 1.80 (m, 2H), 1.73 – 1.67 (m, 2H), 1.60 – 1.54 (m, 1H), 1.40 – 1.36 (m, 3H), 0.91 – 0.81 (m, 6H).

實施例2.144：

使用實施例2.135相同的方法和反應條件，利用乙醛作為原料代替丙酮，得到下表中的目標產物。

化合物	結構	ESI-MS (m/z): [M/2+H]⁺.	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆)
LP-144		558.2	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.26 (s, 1H), 9.09 (s, 2H), 8.70 (s, 1H), 8.38 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 8.21 – 7.99 (m, 6H), 7.47 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.27 – 7.15 (m, 6H), 5.80 – 5.74 (m, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.83 (s, 2H), 4.78 – 4.70 (m, 2H), 4.61 – 4.48 (m, 2H), 4.32 – 4.09 (m, 1H), 3.79 – 3.62 (m, 8H), 3.40 (s, 3H), 3.10 – 3.05 (m, 2H), 2.88 – 2.77 (m, 2H), 2.58 – 2.54 (m, 4H), 2.37 – 2.29 (m, 4H), 1.85 – 1.76 (m, 2H), 1.70 – 1.54 (m, 2H), 1.00 – 0.67 (m, 3H).

實施例 2.145：化合物LP-145的合成

步驟一：化合物LP-145-a的合成

將粗產品化合物LP-134 -b (164 mg)和N,N-二異丙基乙胺(131 mg, 1.02 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入化合物P-11-c (77 mg, 339 µmol)。混合物在室溫下攪拌過夜。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=95/5)得到化合物LP-145-a (130 mg, 收率61%)。ESI-MS (m/z): 631.4 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-145-b的合成

將化合物LP-145-a (130 mg, 206 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到粗產品化合物LP-145-b (130 mg, 收率100%)。ESI-MS (m/z): 531.6 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-145-c的合成

將粗產品化合物LP-145-b (130 mg)溶於二氯甲烷(3 mL)和甲醇(1 mL)，加入甲醛水溶液(34%水溶液, 0.5 mL)。混合物在室溫下攪拌10分鐘，加入三乙醯氧基硼氫化鈉(350 mg, 1.65 mmol)，之後在室溫下攪拌2小時。反應液中加入飽和碳酸氫鈉(10 mL)，乙酸乙酯(30 mL)萃取三次，合併有機相，濃縮。殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-145-c(53 mg, 收率47%)。ESI-MS (m/z): 545.5 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-145-d的合成

將((2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)乙醯)氨基)乙酸甲酯(143 mg, 389 µmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入三甲基氯矽烷(1.06 g, 9.73 mmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。濃縮反應液，殘留物溶於二氯甲烷(5 mL)，加入化合物LP-145-c (53 mg, 97 µmol)。混合物在60℃下攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，濃縮得到粗產品化合物LP-145-d (75 mg)。ESI-MS (m/z): 852.2 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-145-e的合成

將粗產品化合物LP-145-d (75 mg)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入二乙胺(0.2 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-145-e (25 mg, 收率41%)。ESI-MS (m/z): 631.1 [M+H]⁺.

步驟六：化合物LP-145-f的合成

將化合物LP-145-e (25 mg, 40 µmol)溶於四氫呋喃(3 mL)和水(0.5 mL)的混合物，加入1 N氫氧化鋰水溶液(0.3 mL)。混合物在室溫下攪拌3小時。反應液加入醋酸至pH=7，濃縮。殘留物通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-145-f (5 mg, 收率21%)。ESI-MS (m/z): 589.8 [M+H]⁺.

步驟七：化合物LP-145的合成

將化合物LP-145-f (5 mg, 8 µmol)，化合物LP-59-f (7 mg, 13 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(8 mg, 60 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(5 mg, 17 µmol)。混合物在室溫下攪拌0.5小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-145 (3 mg, 收率32%)。ESI-MS (m/z): 1101.0 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.09 (s, 2H), 8.90 – 8.83 (m, 1H), 8.74 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 8.25 – 8.17 (m, 4H), 8.15 – 8.05 (m, 2H), 7.69 – 7.63 (m, 1H), 7.50 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.32 – 7.13 (m, 7H), 5.78 – 5.65 (m, 1H), 5.17 (s, 2H), 4.87 (d, J = 6.7 Hz, 2H), 4.77 – 4.67 (m, 1H), 4.60 – 4.44 (m, 1H), 4.31 – 4.10 (m, 1H), 3.81 – 3.62 (m, 8H), 3.40 (s, 3H), 3.08 – 3.00 (m, 2H), 2.58 – 2.54 (m, 3H), 2.35 – 2.29 (m, 4H), 1.99 – 1.94 (m, 3H), 1.85 – 1.77 (m, 2H), 1.72 – 1.63 (m, 2H), 1.59 – 1.43 (m, 2H).

實施例 2.146：化合物LP-146的合成

步驟一：化合物LP-146-a的合成

將化合物LP-67-b (116 mg, 117 µmol)和化合物P-38 (50 mg, 117 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(16 mg, 124 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=97/3)得到化合物LP-146-a (105 mg, 收率70%)。ESI-MS (m/z): 1274.3 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-146-b的合成

將化合物LP-146-a (97 mg, 76 µmol)溶於四氫呋喃(3 mL)和水(3 mL)的混合物，加入1 N氫氧化鋰水溶液(2 mL)。混合物在室溫下攪拌16小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-146-b (20 mg, 收率29%)。ESI-MS (m/z): 912.1 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-146-c的合成

將化合物LP-146-b (20 mg, 20 µmol)和化合物LP-119-b (20 mg, 41 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(11 mg, 84 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-146-c (10 mg, 收率36%)。ESI-MS (m/z): 1290.7 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-146-d的合成

將化合物LP-146-c (10 mg, 8 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)，加入二乙胺(0.2 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液通過製備液相色譜純化(鹼法)得到化合物LP-146-d (7 mg, 收率80%)。ESI-MS (m/z): 1069.8 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-146的合成

將化合物LP-146-d (5 mg, 4 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(2 mg, 15 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-66-a (2 mg, 6 µmol)。混合物在室溫下反應3小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-146 (2 mg, 收率32%)。ESI-MS (m/z): 1318.5 [M+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.27 (s, 2H), 9.13 – 9.09 (m, 1H), 8.92 (s, 1H), 8.83 – 8.78 (m, 1H), 8.65 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.70 (s, 2H), 7.25 – 7.17 (m, 5H), 5.36 – 5.29 (m, 1H), 5.03 – 5.00 (m, 4H), 4.87 – 4.82 (m, 4H), 4.23 – 4.18 (m, 2H), 4.08 – 4.04 (m, 2H), 3.92 – 3.90 (m, 2H), 3.61 – 3.58 (m, 11H), 3.05 – 3.01 (m, 8H), 2.19 – 2.18 (m, 1H), 2.14 – 2.11 (m, 12H), 1.48 – 1.44 (m, 4H), 0.81 – 0.78 (m, 4H), 0.73 – 0.70 (m, 4H).

實施例 2.147：

使用實施例2.146相同的方法和反應條件，利用化合物P-20作為原料代替化合物P-38，得到下表中的目標產物。

化合物	結構	ESI-MS (m/z): [M+H]⁺.	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆)
LP-147		1113.9	¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.70 (s, 1H), 9.10 (s, 2H), 8.37 – 8.25 (m, 6H), 8.16 – 7.97 (m, 5H), 7.51 – 7.30 (m, 1H), 7.19 – 7.06 (m, 1H), 5.78 – 5.35 (m, 2H), 5.02 – 4.71 (m, 5H), 4.24 – 3.84 (m, 15H), 3.65 – 3.60 (m, 11H), 2.57 – 2.54 (m, 2H), 2.33 – 2.28 (m, 4H), 2.21 – 2.17 (m, 4H), 2.12 (s, 6H), 1.81 – 1.75 (m, 2H), 1.62 – 1.57 (m, 2H), 1.51 – 1.46 (m, 2H), 1.38 – 1.32 (m, 2H), 1.26 – 1.19 (m, 2H).

實施例 2.148：化合物LP-148的合成

步驟一：化合物LP-148-a的合成

將N2-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-N6,N6-二甲基-L-賴氨酸(292 mg, 387 µmol)、化合物LP-59-d (195 mg, 465 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(150 mg, 1.16 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(20 mL)，加入2-琥珀醯亞胺基-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸酯(175 mg, 581 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入20 mL乙酸乙酯，用水洗三次，飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過柱層析色譜純化(DCM/MeOH=85/15)得到化合物LP-148-a (119 mg, 收率43%)。ESI-MS (m/z): 714.2 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-148-b的合成

將化合物LP-148-a (119 mg, 166 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入二乙胺(0.5 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到粗產品化合物LP-148-b (90 mg)。ESI-MS (m/z): 492.4 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-148-c的合成

將粗產品化合物LP-148-b (90 mg)和化合物LP-66-a (89 mg, 244 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(21 mg, 162 µmol)。混合物在室溫下攪拌3小時。反應液通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-148-c (50 mg, 收率41%)。ESI-MS (m/z): 742.2 [M+H]⁺.

步驟四：化合物LP-148-d的合成

將化合物LP-148-c (50 mg, 67 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-148-d (46 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 686.5 [M+H]⁺.

步驟五：化合物LP-148的合成

將化合物LP-140-d (13 mg, 21 µmol)、化合物LP-148-d (35 mg, 25 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(8 mg, 63 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(9 mg, 32 µmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-148 (6 mg, 收率41%)。ESI-MS (m/z): 1283.8 [M+H]⁺; ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.26 (s, 1H), 9.10 (s, 2H), 8.76 – 8.65 (m, 1H), 8.42 – 8.36 (m, 2H), 8.25 – 8.21 (m, 1H), 8.16 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 8.13 – 8.01 (m, 5H), 7.46 (s, 1H), 7.31 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 7.25 – 7.22 (m, 4H), 7.21 – 7.14 (m, 2H), 5.87 – 5.76 (m, 1H), 5.07 – 4.91 (m, 1H), 4.83 (s, 2H), 4.77 – 4.70 (m, 3H), 4.55 – 4.47 (m, 1H), 4.35 – 4.19 (m, 2H), 4.12 – 4.02 (m, 1H), 3.80 – 3.66 (m, 9H), 3.40 (s, 3H), 3.09 – 3.02 (m, 1H), 2.85 – 2.77 (m, 2H), 2.57 – 2.51 (m, 4H), 2.35 – 2.27 (m, 2H), 2.18 – 2.11 (m, 2H), 2.08 (s, 6H), 1.82 – 1.78 (m, 2H), 1.69 – 1.59 (m, 2H), 1.54 – 1.44 (m, 2H), 1.37 – 1.30 (m, 2H), 1.28 – 1.18 (m, 2H), 0.98 – 0.91 (m, 2H), 0.75 – 0.66 (m, 4H).

實施例 2.149：化合物LP-149的合成

步驟一：化合物LP-149-a的合成

將叔丁基((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-L-賴氨酸鹽酸鹽(577 mg, 1.25 mmol)、N-乙醯基十聚肌酸(804 mg, 1.04 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(404 mg, 3.13 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(20 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(714 mg, 1.88 mmol)。混合物在室溫下攪拌3小時。反應液通過反相柱層析色譜純化(乙腈/水=50/50)得到化合物LP-149-a (327 mg, 收率27%)。ESI-MS (m/z): 1194.7 [M+NH₄]⁺.

步驟二：化合物LP-149-b的合成

將化合物LP-149-a (327 mg, 277 µmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入4 N鹽酸二氧六環溶液(2 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時，濃縮得到粗產品化合物LP-149-b (310 mg)。ESI-MS (m/z): 561.2 [M/2+H]⁺.

步驟三：化合物LP-149-c的合成

將粗產品化合物LP-149-b (310 mg)和化合物LP-59-d (112 mg, 333 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(108 mg, 833 µmol)和N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀醯亞胺基)脲四氟硼酸鹽(125 mg, 416 µmol)。混合物在室溫下攪拌3小時。反應液通過反相柱層析色譜純化(乙腈/水=60/40)得到化合物LP-149-c (250 mg, 收率63%)。ESI-MS (m/z): 785.3 [M/2+H]⁺.

步驟四：化合物LP-149-d的合成

將化合物LP-149-c (40 mg, 27 µmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入4 N鹽酸二氧六環溶液(1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到化合物LP-149-d (38 mg, 收率99%)。ESI-MS (m/z): 708.9 [M/2+NH₄]⁺.

步驟五：化合物LP-149-e的合成

將化合物LP-149-d (27 mg, 19 µmol)、化合物LP-140-d (11 mg, 17 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(7 mg, 53 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(10 mg, 26 µmol)。混合物在室溫下攪拌3小時。反應液通過製備液相色譜(鹼法)純化得到化合物LP-149-e (18 mg, 收率51%)。ESI-MS (m/z): 990.4 [M/2+H]⁺.

步驟六：化合物LP-149-f的合成

將化合物LP-149-e (18 mg, 9 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)，加入二乙胺(0.1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到粗產品化合物LP-149-f (18 mg)。ESI-MS (m/z): 878.5 [M/2+H]⁺.

步驟七：化合物LP-149的合成

將粗產品化合物LP-149-f (18 mg)和N,N-二異丙基乙胺(2 mg, 15 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-66-a (3 mg, 9 µmol)。混合物在室溫下反應2小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-149 (6 mg, 收率33%)。ESI-MS (m/z): 1004.0 [M/2+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.26 (s, 1H), 9.10 (s, 2H), 8.70 (s, 1H), 8.38 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 8.23 – 8.01 (m, 8H), 7.47 (s, 1H), 7.31 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 7.25 – 7.22 (m, 4H), 7.21 – 7.15 (m, 2H), 5.86 – 5.74 (m, 1H), 5.05 – 4.92 (m, 1H), 4.83 (s, 2H), 4.76 – 4.70 (m, 3H), 4.63 – 4.50 (m, 2H), 4.36 – 4.30 (m, 4H), 4.27 – 4.15 (m, 7H), 4.12 – 3.98 (m, 7H), 3.95 – 3.86 (m, 5H), 3.79 – 3.65 (m, 8H), 3.40 (s, 3H), 2.94 – 2.74 (m, 37H), 2.43 – 2.39 (m, 2H), 2.33 – 2.30 (m, 3H), 2.01 – 1.97 (m, 2H), 1.86 – 1.76 (m, 4H), 1.66 – 1.60 (m, 2H), 1.42 – 1.32 (m, 4H), 0.98 – 0.90 (m, 2H), 0.74 – 0.66 (m, 4H).

實施例 2.150：化合物LP-150的合成

步驟一：化合物LP-150-a的合成

將化合物LP-140-d (28 mg, 45 µmol)、(((9H-氟-9-基)甲氧基)羰基)甘氨醯甘氨醯-L-苯丙氨酸(27 mg, 54 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(7 mg, 53 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(26 mg, 68 µmol)。混合物在室溫下攪拌3小時。反應液通過製備液相色譜(鹼法)純化得到化合物LP-150-a (35 mg, 收率70%)。ESI-MS (m/z): 1100.1 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-150-b的合成

將化合物LP-150-a (3 mg, 2.7 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)，加入二乙胺(0.1 mL)。混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮反應液得到粗產品化合物LP-150-b (3 mg)。ESI-MS (m/z): 877.7 [M+H]⁺.

步驟三：化合物LP-150的合成

將粗產品化合物LP-150-b (3 mg)和N,N-二異丙基乙胺(2 mg, 15 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入6-(馬來醯亞胺基)己酸琥珀醯亞胺酯(2 mg, 5 µmol)。混合物在室溫下反應2小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-150 (1.5 mg, 收率51%)。ESI-MS (m/z): 535.8 [M/2+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.26 (s, 1H), 8.69 (s, 1H), 8.40 – 8.36 (m, 2H), 8.20 – 8.02 (m, 7H), 7.47 (s, 1H), 7.31 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.26 – 7.22 (m, 5H), 7.20 – 7.15 (m, 2H), 6.98 (s, 1H), 5.85 – 5.79 (m, 1H), 4.83 (s, 2H), 4.76 – 4.71 (m, 3H), 4.62 – 4.57 (m, 1H), 4.54 – 4.48 (m, 1H), 4.35 – 4.05 (m, 1H), 3.79 – 3.63 (m, 11H), 3.09 – 3.04 (m, 3H), 2.84 – 2.78 (m, 2H), 2.23 – 2.17 (m, 2H), 1.50 – 1.42 (m, 6H), 1.21 – 1.15 (m, 2H), 0.98 – 0.92 (m, 2H), 0.76 – 0.67 (m, 4H).

實施例 2.151：化合物LP-151的合成

步驟一：化合物LP-151-a的合成

將化合物LP-150-b (10 mg, 10 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(2 mg, 15 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-96-a (4 mg, 12 µmol)。混合物在室溫下反應2小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-151-a (8 mg, 收率64%)。ESI-MS (m/z): 1257.8 [M+H]⁺.

步驟二：化合物LP-151的合成

將化合物LP-151-a (8 mg, 6 µmol)溶於硝基甲烷(1 mL)，加入溴化鋅(3 mg, 13 µmol)。混合物在室溫下反應2小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-151 (1.5 mg, 收率51%)。ESI-MS (m/z): 1101.8 [M+H]⁺.

實施例 2.152：化合物LP-152的合成

步驟一：化合物LP-152-a的合成

將化合物LP-150-b (6 mg, 6 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(1 mg, 8 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入化合物LP-46-a (4 mg, 11 µmol)。混合物在室溫下反應2小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-152-a (4 mg, 收率64%)。ESI-MS (m/z): 572.3 [M/2+H]⁺.

步驟二：化合物LP-152的合成

將化合物LP-152-a (4 mg, 3 µmol)溶於硝基甲烷(1 mL)，加入溴化鋅(1.6 mg, 7 µmol)。混合物在室溫下反應2小時。濃縮反應液，殘留物通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-152 (2 mg, 收率55%)。ESI-MS (m/z): 521.4 [M/2+H]⁺.

實施例 2.153：化合物LP-153的合成

步驟一：化合物LP-153的合成

將化合物LP-150-b (6 mg, 6 µmol)和N,N-二異丙基乙胺(1 mg, 8 µmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入2,5-二氧代吡咯烷-1-基 1-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-3-氧代-7,10,13,16,19,22,25,28,31,34-十氧雜-4-氮雜三十七烷-37-酸酯(6 mg, 8 µmol)。混合物在室溫下反應2小時。反應液加入醋酸淬滅，通過製備液相色譜(酸法)純化得到化合物LP-153 (4 mg, 收率46%)。ESI-MS (m/z):770.3 [M/2+H]⁺;¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.26 (s, 1H), 8.70 (s, 1H), 8.41 – 8.34 (m, 2H), 8.18 – 7.97 (m, 6H), 7.50 – 7.44 (m, 1H), 7.31 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.27 – 7.14 (m, 7H), 5.86 – 5.78 (m, 1H), 5.04 – 4.92 (m, 1H), 4.83 (s, 2H), 4.79 – 4.69 (m, 3H), 4.66 – 4.47 (m, 2H), 4.35 – 4.06 (m, 1H), 3.80 – 3.72 (m, 3H), 3.70 – 3.68 (m, 2H), 3.60 – 3.57 (m, 2H), 3.51 – 3.45 (m, 40H), 3.18 – 3.15 (m, 2H), 3.09 – 3.05 (m, 1H), 3.03 – 2.99 (m, 1H), 2.83 – 2.79 (m, 1H), 2.74 – 2.70 (m, 1H), 2.60 – 2.59 (m, 1H), 2.40 – 2.36 (m, 3H), 2.32 – 2.28 (m, 1H), 2.19 – 2.14 (m, 1H), 2.03 – 1.96 (m, 2H), 1.65 – 1.53 (m, 2H), 1.48 – 1.41 (m, 1H), 0.98 – 0.91 (m, 2H), 0.89 – 0.66 (m, 6H).

實施例 3 ：抗體藥物偶聯物的製備

以下為所用抗體序列

SEQ ID No :1

Trastuzumab（HER2）

（重鏈）

EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIKDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGDGFYAMDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK

SEQ ID No :2

Trastuzumab（HER2）

（輕鏈）

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVNTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

SEQ ID No :3

Sacituzumab (TROP2)

（重鏈）

QVQLQQSGSELKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGMNWVKQAPGQGLKWMGWINTYTGEPTYTDDFKGRFAFSLDTSVSTAYLQISSLKADDTAVYFCARGGFGSSYWYFDVWGQGSLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK

SEQ ID No :4

Sacituzumab (TROP2)

（輕鏈）

DIQLTQSPSSLSASVGDRVSITCKASQDVSIAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASYRYTGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFAVYYCQQHYITPLTFGAGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

SEQ ID No :5

Enfortumab（Nectin 4）

（重鏈）

EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYNMNWVRQAPGKGLEWVSYISSSSSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLSLQMNSLRDEDTAVYYCARAYYYGMDVWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK

SEQ ID No :6

Enfortumab（Nectin 4）

（輕鏈）

DIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISGWLAWYQQKPGKAPKFLIYAASTLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQANSFPPTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

SEQ ID No :7

Bis-09（HER2 x TROP2雙抗）

（重鏈）

EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIKDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGDGFYAMDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDIQLTQSPSSLSASVGDRVSITCKASQDVSIAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASYRYTGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFAVYYCQQHYITPLTFGAGTKVEIKRGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQQSGSELKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGMNWVKQAPGQGLKWMGWINTYTGEPTYTDDFKGRFAFSLDTSVSTAYLQISSLKADDTAVYFCARGGFGSSYWYFDVWGQGSLVTVSS

SEQ ID No :8

Bis-09（HER2 x TROP2雙抗）

（輕鏈）

實施例 3.1 ：HER2抗體藥物偶聯物的製備通用方法

取Trastuzumab抗體（95 uL，21 mg/mL），用259 μL的DPBS（VivaCell，2214082）溶液稀釋，後加入EDTA溶液（40 μL，1 mM）混勻。然後加入TCEP（三(2-羧乙基)膦）溶液（5.4 μL，50 mM）混勻，37℃反應90 min。向上述溶液體系中先加入17.76 μL 二甲基亞碸混勻，再加入連接子藥物綴合物LP（20倍抗體當量）的二甲基亞碸溶液（26.68 μL，10 mM），使體系中二甲基亞碸終濃度為10%。室溫旋轉混勻3h，完畢後加入100 mM的半胱氨酸8 μL，室溫旋轉混勻30 min終止反應。反應體系室溫12000g離心10 min，取上清，最後採用Zeba™脫鹽離心柱（Thermo Fisher，A57761）將緩衝液置換為pH 5.5的20 mM組氨酸和240 mM蔗糖緩衝液。得到trastuzumab抗體和連接子藥物綴合物LP的偶聯產物，用疏水作用色譜HIC和體積排阻色譜SEC對得到的ADC進行表徵。

本發明抗體和連接子藥物綴合物的偶聯一般步驟還可描述為：第一步用還原劑如TCEP打開抗體鏈間二硫鍵；第二步得到的巰基和本發明的連接子藥物綴合物LP反應（如果LP的偶聯接頭為馬來醯亞胺就發生邁克爾加成反應（部分馬來醯亞胺接頭LP在偶聯後，丁二醯亞胺可水解開環）；如果LP的偶聯接頭為甲磺醯基嘧啶就發生取代反應）得到所述抗體藥物偶聯物。

實施例 3.2 ：TROP2抗體藥物偶聯物的製備通用方法

參考實施例3.1的製備方法，將Trastuzumab替換為Sacituzumab，得到所述TROP2抗體藥物偶聯物。

實施例 3.3 ：Nectin4抗體藥物偶聯物的製備通用方法

參考實施例3.1的製備方法，將Trastuzumab替換為Enfortumab，得到所述Nectin4抗體藥物偶聯物。

實施例 3.4 ：HER2 x TROP2雙抗抗體藥物偶聯物的製備通用方法

參考實施例3.1 的製備方法，將Trastuzumab 替換為Bis-09，得到所述HER2 x TROP2雙抗抗體藥物偶聯物。

HIC-HPLC方法條件儀器型號：DIONEX UltiMate 3000 色譜柱：Proteomix®HIC Ethyl，4.6×35 mm，5μm 流動相：流動相A：0.1 mol/L NaH₂PO₄，2 mol/L (NH₄)₂SO₄，pH=7 流動相B：0.1 mol/L NaH₂PO₄，pH=7 流動相C：異丙醇柱溫：30℃，樣品室溫度：室溫流速為0.8 mL/min，梯度洗脫40分鐘流動相參數為：

時間（min）	流動相A%	流動相B%	流動相C%
0.0	79	20	1
5.0	79	20	1
20.0	0	70	30
30.0	0	70	30
31.0	0	100	0
33.0	0	100	0
34.0	79	20	1
40.0	79	20	1

進樣體積：10 μL，檢測波長：280 nm 樣品處理：用DPBS將樣品稀釋至1 mg/mL。

SEC-HPLC方法條件儀器型號：DIONEX UltiMate 3000 色譜柱：TSKgel G3000SWXL，7.8mm I.D. *30cm，5μm 流動相：90%（40 mmol/L NaH₂PO₄，400 mmol/L NaClO₄），10% (v/v) 乙腈，pH=6.8 柱溫：室溫樣品室溫度：室溫流速：0.8 mL/min 進樣體積：10 μL 檢測波長：280 nm 樣品處理：用DPBS將樣品稀釋至1 mg/mL。

通過通用的偶聯方法製備得到下列示例ADC：

ADC編號	抗體（Ab）	連接子-藥物綴合物（LP）	HIC DAR8峰保留時間（min）	SEC單體比例（280 nM, %）
ADC1-1	Trastuzumab	LP-1	16.6	97.9
ADC1-9	Trastuzumab	LP-9	17.0	98.3
ADC1-10	Trastuzumab	LP-10	15.6	97.6
ADC1-13	Trastuzumab	LP-13	14.7	95.2
ADC1-30	Trastuzumab	LP-30	16.4	98.4
ADC1-32	Trastuzumab	LP-32	15.3	93.3
ADC1-36	Trastuzumab	LP-36	15.3	98.0
ADC1-37	Trastuzumab	LP-37	17.5	95.6
ADC1-39	Trastuzumab	LP-39	13.3	100
ADC1-44	Trastuzumab	LP-44	12.8	97.3
ADC1-45	Trastuzumab	LP-45	15.2	100
ADC1-46	Trastuzumab	LP-46	14.8	99.5
ADC1-47	Trastuzumab	LP-47	12.3	97.8
ADC1-50	Trastuzumab	LP-50	15.4	97.9
ADC1-53	Trastuzumab	LP-53	12.3	100
ADC1-54	Trastuzumab	LP-54	14.7	95.5
ADC1-57	Trastuzumab	LP-57	12.5	100
ADC1-60	Trastuzumab	LP-60	13.0	100
ADC1-62	Trastuzumab	LP-62	14.8	60.1
ADC1-65	Trastuzumab	LP-65	12.2	100
ADC1-66	Trastuzumab	LP-66	11.2	100
ADC1-68	Trastuzumab	LP-68	12.3	100
ADC1-70	Trastuzumab	LP-70	12.8	99.4
ADC1-71	Trastuzumab	LP-71	13.6	100
ADC1-72	Trastuzumab	LP-72	14.1	98.3
ADC1-73	Trastuzumab	LP-73	13.3	85.5
ADC1-75	Trastuzumab	LP-75	11.2	95.2
ADC1-76	Trastuzumab	LP-76	13.6	95.9
ADC1-77	Trastuzumab	LP-77	12.5	95.2
ADC1-78	Trastuzumab	LP-78	13.1	97.8
ADC1-80	Trastuzumab	LP-80	14.1	100
ADC1-82	Trastuzumab	LP-82	13.3	96.5
ADC1-83	Trastuzumab	LP-83	11.9	97.2
ADC1-84	Trastuzumab	LP-84	13.3	96.1
ADC1-85	Trastuzumab	LP-85	15.1	100
ADC1-86	Trastuzumab	LP-86	15.2	98.4
ADC1-87	Trastuzumab	LP-87	15.4	93.1
ADC1-90	Trastuzumab	LP-90	10.6	98.0
ADC1-91	Trastuzumab	LP-91	11.3	97.8
ADC1-92	Trastuzumab	LP-92	16.3	94.8
ADC1-93	Trastuzumab	LP-93	14.5	100
ADC1-94	Trastuzumab	LP-94	12.0	100
ADC1-96	Trastuzumab	LP-96	14.9	100
ADC1-97	Trastuzumab	LP-97	13.8	100
ADC1-98	Trastuzumab	LP-98	13.4	100
ADC1-99	Trastuzumab	LP-99	14.4	100
ADC1-100	Trastuzumab	LP-100	14.0	98.5
ADC1-101	Trastuzumab	LP-101	13.6	95.3
ADC1-102	Trastuzumab	LP-102	12.0	98.8
ADC1-103	Trastuzumab	LP-103	12.1	100
ADC1-105	Trastuzumab	LP-105	14.4	100
ADC1-107	Trastuzumab	LP-107	12.0	100
ADC1-108	Trastuzumab	LP-108	15.0	98.2
ADC1-109	Trastuzumab	LP-109	12.4	100
ADC1-110	Trastuzumab	LP-110	13.9	97.6
ADC1-111	Trastuzumab	LP-111	14.3	100
ADC1-112	Trastuzumab	LP-112	13.8	100
ADC1-115	Trastuzumab	LP-115	14.9	97.5
ADC1-118	Trastuzumab	LP-118	12.2	100
ADC1-119	Trastuzumab	LP-119	11.6	100
ADC1-120	Trastuzumab	LP-120	11.5	100
ADC1-122	Trastuzumab	LP-122	13.6	100
ADC1-123	Trastuzumab	LP-123	10.2	100
ADC1-124	Trastuzumab	LP-124	11.7	100
ADC1-126	Trastuzumab	LP-126	13.9	99.2
ADC1-127	Trastuzumab	LP-127	11.8	100
ADC1-128	Trastuzumab	LP-128	13.2	98.9
ADC1-129	Trastuzumab	LP-129	13.3	100
ADC1-131	Trastuzumab	LP-131	14.1	100
ADC1-133	Trastuzumab	LP-133	13.9	100
ADC1-134	Trastuzumab	LP-134	11.9	100
ADC1-135	Trastuzumab	LP-135	12.5	100
ADC1-140	Trastuzumab	LP-140	12.3	100
ADC1-141	Trastuzumab	LP-141	13.4	99.0
ADC1-142	Trastuzumab	LP-142	13.9	99.3
ADC1-143	Trastuzumab	LP-143	12.3	100
ADC1-144	Trastuzumab	LP-144	12.4	98.4
ADC1-145	Trastuzumab	LP-145	11.6	98.9
ADC1-146	Trastuzumab	LP-146	11.1	98
ADC1-148	Trastuzumab	LP-148	11.7	100
ADC1-149	Trastuzumab	LP-149	11.5	100
ADC1-150	Trastuzumab	LP-150	13.0	96.6
ADC2-80	Sacituzumab	LP-80	14.1	100
ADC2-94	Sacituzumab	LP-94	12.6	100
ADC2-112	Sacituzumab	LP-112	14.1	100
ADC2-118	Sacituzumab	LP-118	12.6	100
ADC2-128	Sacituzumab	LP-128	13.6	100
ADC2-135	Sacituzumab	LP-135	11.0	100
ADC3-72	Enfortumab	LP-72	14.2	98.7
ADC3-80	Enfortumab	LP-80	14.1	100
ADC3-94	Enfortumab	LP-94	12.4	100
ADC4-149	Bis-09	LP-149	12.0	100

抗體藥物偶聯物ADC的DAR值（LC-MS/MS法）

取約30 μg 本發明ADC樣品，加入超純水、2.5 μL 0.1 M DTT溶液和2.5 μL 1 M Tris 8.0溶液，使最終體系ADC濃度約為1 mg/mL。37℃放置15分鐘後，通過LC-MS/MS (Agilent 6224)檢測DAR值，進樣量2-4 μg。

化合物	ADC1-30	ADC1-80	ADC1-83	ADC1-86
DAR	8.0	8.0	8.0	8.0

實驗例 1 ：化合物對腫瘤細胞體外增殖抑制活性測試

化合物腫瘤細胞抑制活性實驗方法：將本公開的化合物與腫瘤細胞進行共培養，然後添加CTG試劑（Promega，G7573），用酶標儀（廠商：Molecular Devices，型號：SpectraMax i3x）讀取化學發光值，以評價化合物對細胞增殖的抑制作用。

所用到的腫瘤細胞信息如下表：

細胞名稱	細胞類型
NCI-N87	人胃癌細胞
MDA-MB-468	人乳腺癌細胞
MDA-MB-453	人乳腺癌細胞
HCC1569	人乳腺癌細胞
ASPC-1	人轉移胰腺腺癌細胞
H520	人肺鱗癌細胞
HepG2	人肝癌細胞
HT29	人結腸癌細胞
Miapaca-2	人胰腺癌細胞
A431	人表皮癌細胞
NCI-H727	人肺癌細胞
NCI-H2087	人非小細胞肺腺癌細胞
LS513	人結直腸癌細胞
SW480	人結腸癌細胞
Lncap	人前列腺癌細胞
22RV1	人前列腺癌細胞
ZR-75-30	人乳腺癌細胞
TE4	人食管癌細胞
OE33	人食管腺癌細胞
AU-565	人乳腺癌細胞
MKN7	人胃癌細胞
SK-OV-3	人卵巢癌細胞
SK-BR-3	人乳腺癌細胞
MDA-MB-361	人乳腺癌細胞
JIMT-1	人乳腺癌細胞
HCC2218	人乳腺導管癌細胞
HCC1569	人乳腺癌細胞

體外細胞活性通用檢測方法：用對應檢測培養基（含10% FBS）稀釋化合物（3倍稀釋，9個濃度梯度）。使用胰酶對腫瘤細胞進行消化，收集細胞並計數，用對應的檢測培養基（含10% FBS）重懸至細胞密度為3x10⁴個/mL，取96孔板，每孔加入細胞懸液100 μL。37℃，5% CO₂貼壁過夜培養。取出過夜貼壁培養的細胞，取稀釋的生物活性分子100 μL加入96孔板中，以檢測培養基作為對照組，繼續培養3天或6天。然後每孔中加入CTG試劑50 μL，室溫避光孵育10 min後每孔各吸取100 μL轉移至不透明白板，讀取化學發光值，並計算抑制率。

抑制率（100%）=（1-（樣品訊號值-無細胞孔樣品平均值）/（無殺傷孔訊號平均值-無細胞孔樣品平均值））*100

實驗例 1.1 ：本申請中生物活性分子（藥物載荷，payload）對NCI-N87細胞體外增殖抑制活性測試結果如下表：

化合物編號	NCI-N87 CTG 3天 IC₅₀ (nM)
P-1	15
P-2	14
P-3	20
P-4	32
P-5	48
P-6	32
P-7	19
P-8	30
P-9	12
P-10	8
P-11	20
P-12	20
P-13	2
P-14	2
P-15	9
P-16	5
P-17	4
P-18	3
P-19	3
P-20	20
P-21	25
P-22	1.5
P-23	1
P-24	13
P-25	12
P-26	1
P-28	6
P-29	2
P-30	1
P-31	5
P-32	1.5
P-33	10
P-34	3
P-35	8
P-36	4
P-37	3
P-38	2
P-39	1.5
P-40	7
P-41	14
P-42	1.3
P-43	12
P-44	1.4
P-45	3

由上表數據可以看出，本申請ADC所用的生物活性分子（藥物載荷，payload）對NCI-N87腫瘤細胞有著較強的增殖抑制活性。

實驗例 1.2 ：本申請中生物活性分子（藥物載荷，payload）對多個腫瘤細胞體外增殖抑制活性測試結果如下表：

化合物	P-1	P-13	P-23
細胞	3天 CTG IC₅₀ (nM)	3天 CTG IC₅₀ (nM)	3天 CTG IC₅₀ (nM)
ASPC-1	58.0	26.5
H520	9.3	3.4
HepG2	10.3	0.9
HT29	29.3	4.9
Miapaca-2	59.5	2.7
A431	29.1	11.6
H358	13.9	5.1
H727	12.4	4.5
H2087	19.6	11.5
LS513	32.3	11.7
MDA-MB-468	6.9	3.8
SW480	13.3	5.2
Lncap	27.0	19.0
22RV1	5.1	3.4
ZR-75-30	12.3	11.5	4.5
TE4	4.6	2.9	1.2
OE33	3.6	1.8	1.0
AU-565	2.7	1.8	1.1
MKN7	7.1	7.7	3.0
SK-OV-3	12.6	9.7	4.5
SK-BR-3	2.2	2.5	1.0
MDA-MB-361	4.3	3.0	1.4
MDA-MB-453	5.9	5.4	4.0
JIMT-1	17.1	17.1	2.5
HCC2218	13.3	9.8	2.4
HCC1569	3.9	2.4	0.9

由上表數據可以看出，本申請ADC所用的生物活性分子（P-1、P13、P-23）對多種腫瘤細胞有著較強的增殖抑制活性。

實驗例 1.3 ：本申請中抗HER2 ADC對NCT-N87細胞體外增殖抑制活性測試結果如下表：

化合物編號	NCI-N87 CTG 6天 IC₅₀ (nM)
ADC1-1	0.13
ADC1-9	0.74
ADC1-10	1.07
ADC1-13	0.57
ADC1-30	0.63
ADC1-36	4.3
ADC1-37	4.3
ADC1-39	0.78
ADC1-44	0.97
ADC1-46	0.29
ADC1-47	0.43
ADC1-53	0.44
ADC1-54	0.2
ADC1-57	3.48
ADC1-62	0.62
ADC1-65	0.75
ADC1-68	0.5
ADC1-71	0.31
ADC1-72	0.27
ADC1-73	0.38
ADC1-75	0.24
ADC1-76	0.49
ADC1-77	0.52
ADC1-78	0.36
ADC1-80	0.49
ADC1-82	2.1
ADC1-83	0.46
ADC1-84	1.7
ADC1-85	0.6
ADC1-86	0.6
ADC1-87	2.87
ADC1-90	0.83
ADC1-91	3.82
ADC1-92	3.36
ADC1-93	0.45
ADC1-94	0.35
ADC1-96	0.38
ADC1-97	0.46
ADC1-98	0.44
ADC1-99	0.49
ADC1-100	0.75
ADC1-101	0.79
ADC1-102	0.77
ADC1-103	1.34
ADC1-105	5.4
ADC1-107	0.6
ADC1-108	2.67
ADC1-109	0.15
ADC1-110	0.21
ADC1-111	0.31
ADC1-112	0.12
ADC1-118	0.12
ADC1-119	0.23
ADC1-120	0.23
ADC1-122	0.95
ADC1-124	0.28
ADC1-126	0.29
ADC1-128	0.4
ADC1-131	1.44
ADC1-134	2.38
ADC1-135	0.4
ADC1-141	0.83
ADC1-142	0.91
ADC1-144	0.43
ADC1-145	0.96
ADC1-148	1.0
ADC1-149	0.29
ADC1-150	0.09

由上表數據可以看出，本申請HER2 ADC化合物對NCI-N87腫瘤細胞有著較強的增殖抑制活性。

實驗例 1.4 ：本申請中抗HER2 ADC對多個腫瘤細胞體外增殖抑制活性測試結果如下表：

化合物	ADC1-72	ADC1-80	ADC1-112
細胞	6天 CTG IC₅₀ (nM)	6天 CTG IC₅₀ (nM)	6天 CTG IC₅₀ (nM)
ZR-75-30	1.6	9.8
AU565	0.18	0.13
HCC2218	0.7	0.44
SK-BR-3	0.187	0.15
HCC1569	5.5	0.7	0.22
TE-4		11.3	0.53
BT-474	0.22	0.12
MDA-MB-453			0.15

由上表數據可以看出，本申請HER2 ADC化合物對多種腫瘤細胞有著較強的增殖抑制活性。

實驗例 1.5 ：本申請中抗TROP2 ADC對多個腫瘤細胞體外增殖抑制活性測試結果如下表：

化合物	ADC2-94	ADC2-112	ADC2-135	ADC2-118
細胞	6天 CTG IC₅₀ (nM)	6天 CTG IC₅₀ (nM)	6天 CTG IC₅₀ (nM)	6天 CTG IC₅₀ (nM)
NCI-N87	0.77	0.55	0.52	0.25
MDA-MB-468	0.59	0.38

由上表數據可以看出，本申請TROP2 ADC化合物對NCI-N87和MDA-MB-468腫瘤細胞有著較強的增殖抑制活性。

實驗例 1.6 ：本申請中抗Nectin4 ADC對MDA-MB-468腫瘤細胞體外增殖抑制活性測試結果如下表：

化合物	ADC3-72	ADC3-80
細胞	6天 CTG IC₅₀ (nM)	6天 CTG IC₅₀ (nM)
MDA-MB-468	＜100	＜100

由上表數據可以看出，本申請Nectin4 ADC化合物對MDA-MB-468腫瘤細胞有著良好的增殖抑制活性。

實驗例 1.7 ：本申請中抗HER2 x TROP2雙抗ADC對多個腫瘤細胞體外增殖抑制活性測試結果如下表：

化合物	ADC4-149
細胞	6天 CTG IC₅₀ (nM)
NCI-N87	0.07
BT-474	0.36
MDA-MB-468	4.03
A431	2.29

由上表數據可以看出，本申請HER2 x TROP2雙抗ADC化合物對多個腫瘤細胞都有著較強的增殖抑制活性。

實驗例 2 ：抗體藥物偶聯物 ADC1-80 的旁觀者殺傷效應

為檢測抗體藥物偶聯物的旁觀者效應，使用NCI-N87作為HER2表達陽性細胞、MDA-MB-468_Luciferase（使用pLV[Exp]-Puro-EF1A＞Luciferase 慢病毒感染MDA-MB-468細胞後，篩選單克隆，構建穩定表達Luciferase的MDA-MB-468細胞）作為HER2表達陰性細胞，基於化學發光的方法進行檢測。取對數生長期的NCI-N87和MDA-MB-468_Luciferase細胞，調整兩種細胞的細胞密度分別為4x10⁵個/mL、4x10⁴個/mL。每孔加入兩種細胞各50 μL至96孔板，置於37℃、5% CO₂細胞培養箱中過夜培養。用對應檢測培養基（含10% FBS）稀釋抗體藥物偶聯物（ADC1-80，3倍稀釋，9個濃度梯度）。過夜培養後每孔加入100 μL抗體偶聯藥物，置於37℃、5% CO₂細胞培養箱中培養6天。培養結束後，每孔中加入One-Glo 試劑（Promega，E6130）50 μL，室溫避光孵育3 min後每孔各吸取100 μL轉移至不透明白板，用酶標儀（廠商：Molecular Devices，型號：SpectraMax i3x）讀取化學發光值。

由圖1數據可以看出，本發明化合物ADC1-80有著優秀的旁觀者殺傷效應。

實驗例 3 ：抗體藥物偶聯物血漿穩定性實驗

樣品準備：取抗體偶聯藥物，使用含0.05%疊氮鈉的人血漿稀釋至1 mg/mL，37℃水浴0小時或者7天。水浴結束後，使用HER2蛋白偶聯磁珠（ACRO，MBS-K006-2 mg）捕獲收集血漿中的抗體偶聯藥物。

HER2蛋白偶聯磁珠前處理：取HER2蛋白偶聯磁珠試劑置於磁力分離器上靜置2 min，棄上清。向磁珠中加入1 mL洗液（PBS、pH 7.3，0.05% Tween-20），斡旋混勻10 s。將磁珠置於磁力架上靜置2 min，棄上清。重複以上洗滌步驟兩遍。

抗體偶聯藥物捕獲：分別取孵育後的抗體偶聯藥物50 μL、400 μL 洗液加入到洗滌完成的磁珠中（100 μg/樣品），室溫混勻2 h。使用磁力分離器分離出磁珠，棄上清，使用洗液洗滌磁珠兩遍。向磁珠中加入500 μL 10%乙腈水溶液，斡旋混勻10 s以去除非特異性結合的血漿蛋白。將磁珠置於磁力分離器上靜置2 min，棄上清，加入50 μL洗脫液（30%乙腈，1%甲酸水溶液）室溫混勻洗脫15 min。洗脫完成後，收集上清，質譜法測定抗體偶聯藥物DAR值。

血漿孵育時間（天）	DAR
ADC1-80	ADC1-83	ADC1-86
0	8.0	8.0	8.0
7	8.0	8.0	8.0

由上表數據可以看出，本申請ADC化合物（ADC1-80、ADC1-83、ADC1-86）有著較好的血漿穩定性。

實驗例 4 ：抗體藥物偶聯物體內藥效測試

實驗例 4.1：本申請抗HER2 ADC對NCI-N87移植瘤模型藥效測試

1. 實驗材料受試化合物：ADC1-72、ADC1-80、ADC1-94，DPBS作為陰性對照。實驗細胞：NCI-N87細胞，購自南京科佰生物。實驗動物：CB-17 SCID小鼠，雌性，約8周齡，購自上海斯萊克實驗動物有限責任公司。

2. 實驗方案

2.1. 細胞處理 NCI-N87細胞用含10%FBS的1640培養基培養於細胞培養瓶中，達80-90%左右匯合度時用胰蛋白酶消化，然後離心重懸於預冷PBS中，細胞計數儀計數，PBS稀釋使細胞密度為5x10⁷個/mL。

2.2. 腫瘤細胞移植 CB-17 SCID小鼠在實驗室環境適應2-5天，於右側前肢背部皮下接種NCI-N87細胞，接種細胞量為5x10⁶個/只，接種體積為0.1 mL，待腫瘤生長至150 mm³左右時，按照每組8只小鼠進行分組給藥。

2.3. 動物給藥與檢測入組的荷瘤裸鼠，按以下方案給藥： ADC1-72: 3或10mpk, iv., 單次給藥 ADC1-80: 3或10mpk, iv., 單次給藥 ADC1-94: 3mpk, iv., 單次給藥

2.4. 腫瘤體積及體重測定：每週測量2次瘤體積及體重，計算T/C%和TGI (%)的計算公式為：相對腫瘤增殖率T/C(%)= TRTV / CRTV x 100% (TRTV：治療組平均RTV；CRTV：對照組平均RTV；RTV=Vt/VO, VO為分組時該動物的瘤體積，Vt為治療後該動物的瘤體積)；相對腫瘤抑制率TGI% = (1-T/C) x 100% (T和C分別為治療組和對照組在某一特定時間點的相對腫瘤體積RTV)。腫瘤體積(V)計算公式為：V=1/2 x (L_長) x (L_短)²，其中L_長、L_短分別表示腫瘤長徑、短徑。

3. 實驗結果如下圖表所示：

治療組分別與vehicle組比較（分組後第27天腫瘤體積）
實驗組	腫瘤體積	RTV	腫瘤完全消退小鼠數量	T/C	p值
(mm³)	(%)
Group 1	Vehicle (i.v.,單次給藥 )	1101±102	6.34±0.48	0
Group 2	ADC1-72 (10mg/kg, i.v.,單次給藥 )	0±0	0.00±0.00	8	0	＜0.001
Group 3	ADC1-72 (3mg/kg, i.v.,單次給藥 )	90±15	0.52±0.08	0	8	＜0.001
Group 4	ADC1-80 (10mg/kg, i.v.,單次給藥 )	0±0	0.00±0.00	8	0	＜0.001
Group 5	ADC1-80 (3mg/kg, i.v.,單次給藥 )	394±87	2.28±0.49	0	36	0.002
Group 6	ADC1-94 (3mg/kg, i.v.,單次給藥 )	65±23	0.40±0.15	1	6	＜0.001

由圖2數據可以看出，本申請化合物ADC1-72、ADC1-80、ADC1-94對NCI-N87移植瘤模型有著較強的體內藥效。ADC1-72和ADC1-80在10 mpk單次給藥可以使小鼠腫瘤完全消退，並且藥效可以持續至96天，腫瘤無復發。

實驗例 4.2：本申請抗TROP2 ADC對NCI-N87移植瘤模型藥效測試

1. 實驗材料受試化合物：ADC2-94、ADC2-118、Sacituzumab，DPBS作為陰性對照。實驗細胞：NCI-N87細胞，購自南京科佰生物。實驗動物：CB-17 SCID小鼠，雌性，約8周齡，購自上海斯萊克實驗動物有限責任公司。

2. 實驗方案

2.2. 腫瘤細胞移植

CB-17 SCID小鼠在實驗室環境適應2-5天，於右側前肢背部皮下接種NCI-N87細胞，接種細胞量為5x10⁶個/只，接種體積為0.1 mL，待腫瘤生長至170 mm³左右時，按照每組8只小鼠進行分組給藥。

2.3. 動物給藥與檢測入組的荷瘤裸鼠，按以下方案給藥： ADC1-94: 5或10mpk, iv., 單次給藥 ADC1-118: 5或10mpk, iv., 單次給藥 Sacituzumab: 10mpk, iv., 單次給藥

2.4. 腫瘤體積及體重測定：每週測量2次瘤體積及體重，腫瘤體積(V)計算公式為：V=1/2 x (L_長) x (L_短)²，其中L_長、L_短分別表示腫瘤長徑、短徑。

3. 實驗結果如下圖表所示：

實驗組	平均腫瘤體積	平均腫瘤體積	腫瘤完全消退小鼠數量
Day0, mm³	Day29, mm³
Group 1	Vehicle (i.v.,單次給藥 )	172±6	1108±91 (day18)	0
Group 2	ADC2-94 (10mg/kg, i.v.,單次給藥 )	172±6	0±0	8
Group 3	ADC2-94 (5mg/kg, i.v.,單次給藥 )	171±8	71±15	0
Group 4	ADC2-118 (10mg/kg, i.v.,單次給藥 )	173±7	29±9	2
Group 5	ADC2-118 (5mg/kg, i.v.,單次給藥 )	171±8	196±45	1
Group 6	Sacituzumab (10mg/kg, i.v.,單次給藥 )	174±7	1022±66 (day18)	0

由上表和圖5、圖6數據可以看出，本申請化合物ADC2-94和ADC2-118對NCI-N87移植瘤模型有著較強的體內藥效，ADC2-94在10 mpk單次給藥可以使小鼠腫瘤完全消退。同時給藥期間，小鼠體重無明顯下降，且無其他明顯毒性，說明本發明TROP2 ADC耐受性良好。

實驗例 4.3：本申請ADC藥物對BT-474移植瘤模型藥效測試

1. 實驗材料受試化合物：ADC1-149、ADC2-149、ADC4-149，PBS作為陰性對照。實驗細胞：BT-474細胞，購自ATCC。實驗動物：B-NDG小鼠，雌性，約8周齡，購自百奧賽圖江蘇基因生物技術有限公司。

2. 實驗方案

2.1. 細胞處理 BT-474細胞培養在37 ℃、5% CO₂的培養箱中，培養基成分為含有10 %滅活胎牛血清的RPMI1640培養基。然後離心重懸於PBS與Matrigel 1:1中，細胞計數儀計數，使細胞密度為5x10⁷個/mL。

2.2. 腫瘤細胞移植在B-NDG小鼠右側背部皮下接種BT-474細胞，接種細胞量為1x10⁷個/只，接種體積為0.2 mL，待腫瘤生長至156 mm³左右時，按照每組8只小鼠進行分組給藥。

2.3. 動物給藥與檢測入組的荷瘤裸鼠，按以下方案給藥： ADC1-149: 5mpk, iv., 單次給藥 ADC2-149: 10mpk, iv., 每週一次給藥2次 ADC4-149: 6.7mpk, iv., 單次給藥

2.4. 腫瘤體積及體重測定：每週測量2次瘤體積及體重，腫瘤體積(V)計算公式為：V=1/2 x (L_長) x (L_短)²，其中L_長、L_短分別表示腫瘤長徑、短徑。TGI_TV (%) = [1-(Ti-T0)/(Ci-C0)] × 100%，Ti：治療組在給藥第i天的腫瘤體積均值，T0：治療組在給藥第0天的腫瘤體積均值；Ci：對照組在給藥第i天的腫瘤體積均值，C0：對照組在給藥第0天的腫瘤體積均值)

3. 實驗結果如下圖表所示：

實驗組	平均腫瘤體積（mm³）	p值
給藥前Day0	給藥後Day30	TGI_TV (%)
Group 1	Vehicle	156±8	499±61	-	-
Group 2	ADC1-149	156±10	115±22	112.0	＜0.0001
Group 3	ADC2-149	156±10	203±24	86.3	0.0001
Group 4	ADC4-149	156±10	127±26	108.5	＜0.0001

由上表和圖7、圖8數據可以看出，本申請LP-149偶聯的不同抗體的ADC對BT-474移植瘤模型有著較強的體內藥效。同時給藥期間，小鼠體重無明顯下降，且無其他明顯毒性，說明本發明ADC耐受性良好。

實驗例 5 ：化合物 Cyclin K 蛋白降解實驗

實驗例 5.1 ：本申請生物活性分子（藥物載荷，payload）對Cyclin K蛋白的降解活性測試取對數生長期的NCI-N87或者HEK293細胞，按照2x10⁵個/孔接種於24孔細胞培養板（Corning，3524），並將該培養板置於37℃、5% CO₂細胞培養箱中過夜培養。第二天使用完全培養基（1640+10%FBS）將小分子毒素配製成100 nM，10 nM，1 nM和0.1 nM。取24孔板，棄細胞上清後加入小分子毒素稀釋液，置於37℃、5% CO₂細胞培養箱中孵育6 h。處理結束後，取出細胞培養板，用預冷的DPBS 清洗兩次細胞，再按100 μL/孔加入含PMSF（碧雲天，ST507）的RIPA裂解液，放置於冰上裂解30 min。裂解結束後，在4℃，12000g條件下離心10 min，將上清轉移到新的1.5 mL 離心管，置於冰上，使用BCA蛋白檢測試劑盒（Thermo Fisher，A53225）測蛋白濃度。取20 μg蛋白和上樣緩衝液混勻後，95℃金屬浴10 min使蛋白變性。將變性後的蛋白樣品按20 μL/孔加入 12% Bis-Tris gel (金斯瑞，M00667)對應的孔中，將電壓調至120V電泳60 min。電泳結束，350 mA恆流轉膜60 min。轉膜結束，用5%的脫脂奶粉室溫封閉2 h，再用TBST緩衝液漂洗三次，每次10 min。5%的脫脂奶粉按合適的比例稀釋一抗，配置一抗工作液，4℃過夜孵育。一抗孵育結束，用TBST緩衝液在室溫洗膜三次，每次10 min，同時用5%的脫脂奶粉配置二抗工作液，室溫孵育二抗2 h。再用TBST洗膜三次後，加ECL顯色液(Thermo fisher，34095)，用Biorad Chemi Doc凝膠成像儀成像。實驗結果如圖3所示。由圖3可以看出，本申請ADC所用藥物載荷P-13和P-23對Cyclin K蛋白有很強的降解活性。

實驗例 5.2 ：本申請抗HER2 ADC對NCI-N87荷瘤鼠腫瘤組織的Cyclin K蛋白的降解活性測試

1. 實驗材料受試化合物：ADC1-1, DPBS作為陰性對照。實驗細胞：NCI-N87細胞，購自南京科佰生物。實驗動物：CB-17 SCID小鼠，雌性，約8周齡，購自上海斯萊克實驗動物有限責任公司。

2. 實驗方案

2.2. 腫瘤細胞移植 CB-17 SCID小鼠在實驗室環境適應2-5天，於右側前肢背部皮下接種NCI-N87細胞，接種細胞量為5x10⁶個/只，接種體積為0.1 mL，待腫瘤生長至1200 mm³左右時，按照每組3只小鼠進行分組給藥。

2.3. 動物給藥與檢測入組的荷瘤裸鼠，按以下方案給藥： ADC1-1: 5 mpk, iv., 單次給藥

3. 樣本收集及處理

3.1 給藥7天後，小鼠安樂死後，收集腫瘤組織。

3.2 腫瘤組織蛋白樣品製備及Cyclin K含量檢測：取腫瘤組織稱重，以質量體積比1:1加入組織裂解液（20 mL DPBS +蛋白酶抑制劑混合物）。使用組織勻漿機在60Hz勻漿2 min。收集勻漿液，4℃ 12000g離心15 min，收集組織裂解上清待測。使用Pierce™ BCA 蛋白檢測試劑盒檢測蛋白濃度。使用5X蛋白loading配製蛋白樣品（20 μg/樣品），並99℃金屬浴10 min。隨後進行western blot實驗，實驗條件與上述檢測NCI-N87細胞Cyclin k降解條件一致。曝光後使用image J 軟件進行數據分析，計算出相對灰度值。本申請化合物ADC1-1對NCI-N87荷瘤鼠腫瘤組織的Cyclin K蛋白的降解活性如圖4示。由圖4結果可以看出，本申請化合物ADC1-1對NCI-N87荷瘤鼠腫瘤組織的Cyclin K蛋白也有較強的降解活性。

無

圖1、本發明化合物ADC1-80具有優秀的旁觀者殺傷效應。

圖2、本申請化合物ADC1-72、ADC1-80、ADC1-94對NCI-N87移植瘤模型有著較強的體內藥效，ADC1-72和ADC1-80在10 mpk單次給藥可以使小鼠腫瘤完全消退，並且藥效可以持續至96天，腫瘤無復發。

圖3、本申請ADC所用藥物載荷P-13和P-23對Cyclin K蛋白有很強的降解活性。

圖4、本申請化合物ADC1-1對NCI-N87荷瘤鼠腫瘤組織的Cyclin K蛋白也有較強的降解活性。

圖5、本申請抗TROP2 ADC對NCI-N87小鼠移植瘤模型抑瘤效果。

圖6、本申請抗TROP2 ADC對NCI-N87小鼠移植瘤模型小鼠體重影響結果。

圖7、本申請ADC對BT-474小鼠移植瘤模型抑瘤效果。

圖8、本申請ADC對BT-474小鼠移植瘤模型小鼠體重影響結果。

TW202600551A_114116431_SEQL.xml

Claims

一種式I所示的抗體-藥物偶聯化合物，或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物：其中， Ab為抗體或其抗原結合片段，或抗原配體； P為Cyclin K蛋白降解劑片段； L為共價連接Ab和P的片段； q為Ab上偶聯L-P的數目，q選自1.0-16.0之間的任意數值。
如請求項1所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，P為式II所示的結構單元，P通過其含有的氧原子、硫原子或氮原子與L相連：其中， Rcy選自：、、或，其中，各自獨立地表示單鍵或者雙鍵； W1各自獨立地表示CR、N或鍵； W2各自獨立地表示CR0、N、NRa、S或O； W3各自獨立地表示C或N，最多只能有2個W3同時為N； W4各自獨立地表示CR1、N、NRa、S或O； W⁵各自獨立地表示CR或N，最多只能有2個W⁵同時為N； R⁴表示苯環或5-6元雜芳環，所述苯環或5-6元雜芳環可各自任選地地被0個、1個或者2個R取代； R、R⁰和R¹各自獨立地表示氫、鹵素、硝基、氰基、-R^a、-OR^a、-SR^a、-NR^aR^b、-C(O)R^a、-C(O)OR^a、-C(O)NR^aR^b、-NR^a C(O)R^b、-S(O)₂R^a、-S(O)R^a、-S(O)₂NR^aR^b、-P(O)R^aR^b、-C₁-C₆烷基、-(C₂-C₆)烯基、-(C₂-C₆)炔基，所述烷基、烯基或炔基可獨自任選地被0至3個選自-OR^a、-SR^a、-NR^aR^b、-NR^a C(O)R^b、-C(O)R^a、-C(O)OR^a、-C(O)NR^aR^b、-S(O)₂R^a、-S(O)R^a、-S(O)₂NR^aR^b、-P(O)R^aR^b的取代基取代；其中，所述-NR^aC(O)R^b中的R^b任選地可被0個、1個或者2個選自-(C₀-C₃亞烷基)OR^a、-(C₀-C₃亞烷基)SR^a、-(C₀-C₃亞烷基)NR^aR^b的取代基取代； R^L和R^L’各自獨立地表示氫、氟、C₁-C₆烷基或者C₃-C₆環烷基，R^L和R^L’可以和與之相連的碳原子一起形成3-6元環； R²表示鹵素、-R^a、-OR^a、-SR^a、硝基、氰基、-NR^aR^b、-NR^a C(O)R^b、-C(O)R^a、-C(O)OR^a、-C(O)NR^aR^b、-S(O)₂R^a、-S(O)R^a、-S(O)₂NR^aR^b、-P(O)R^aR^b、-(C₂-C₆)烯基、-(C₂-C₆)炔基； R³表示C₁-C₆烷基、C₁-C₆烯基、C₁-C₆炔基、C₃-C₁₀環烷基、3-10元雜環烷基、C₆-C₁₀芳基、5-10元雜芳基、-NR^MR^N、-NHR^M、-OR^M、-SR^M；當R³表示C₁-C₆烷基、C₁-C₆烯基、C₁-C₆炔基、C₃-C₁₀環烷基、3-10元雜環烷基時，其任選的可被0、1、2、3個選自以下的取代基取代：氧代、硝基、鹵素、氰基、-R^a、-(C₀-C₆亞烷基)OR^a、-(C₀-C₆亞烷基)SR^a、-(C₀-C₆亞烷基)NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)NR^a C(O)R^b、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)R^a、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)OR^a、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)₂R^a、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)R^a、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)₂NR^aR^b 、-(C₀-C₆亞烷基)P(O)R^aR^b；當R³表示C₆-C₁₀芳基或者5-10元雜芳基時，其任選的可被0、1、2、3個選自以下的取代基取代：硝基、鹵素、氰基、-R^a、-(C₀-C₆亞烷基)OR^a、-(C₀-C₆亞烷基)SR^a、-(C₀-C₆亞烷基)NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)NR^a C(O)R^b、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)R^a、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)OR^a、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)₂R^a、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)R^a、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)₂NR^aR^b 、-(C₀-C₆亞烷基)P(O)R^aR^b；當R³表示-NR^MR^N、-NHR^M、-OR^M、-SR^M時，R^M和R^N各自獨立地表示C₁-C₆烷基、-(C₀-C₆亞烷基)(C₃-C₁₀環烷基)、-(C₀-C₆亞烷基)(3-10元雜環烷基)、-(C₀-C₆亞烷基)(C₆-C₁₀芳基)、-(C₀-C₆亞烷基)(5-10元雜芳基)；R^M和R^N各自任選的可被0、1、2、3個選自以下的取代基取代：氧代、硝基、鹵素、氰基、-R^a、-(C₀-C₆亞烷基)OR^a、-(C₀-C₆亞烷基)SR^a、-(C₀-C₆亞烷基)NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)NR^a C(O)R^b、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)R^a、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)OR^a、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)₂R^a、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)R^a、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)₂NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)P(O)R^aR^b；其中，當R^M或者R^N表示含有N原子的-(C₀-C₆亞烷基)(3-10元雜環烷基)且取代基位於所述N原子上時，所述取代基上位於所述N原子鄰位的C原子可以進一步被氧代取代；其中，R^a、R^b各自獨立地表示氫、C₁-C₆烷基或者C₃-C₈環烷基，所述烷基或環烷基可各自任選地可被0、1、2、3個鹵素原子取代；上述烷基、環烷基、雜環烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基可各自任選地可被0、1、2、3個鹵素原子取代。
如請求項2所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，R^cy選自：或者，其中W¹、W²、W³、W⁴、W⁵、R⁴如請求項2所定義。
如請求項3所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，R^cy選自：、、、、、、、、、、或，其中，X各自獨立地表示NR^a、O或S；W¹各自獨立地表示CR或N；W²各自獨立地表示CR⁰或N；W⁴各自獨立地表示CR¹或N；W⁵各自獨立地表示CR或N，最多只能有2個W⁵同時為N；其餘基團如請求項2所定義。
如請求項4所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，R^cy選自：、、、或， R、R¹如請求項2所定義。
如請求項1所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，P為式III-a、式III-b、式III-c、式III-d所示的結構單元，P通過其含有的氧原子、硫原子或氮原子與L相連：其中，R^cy、R²和R³如請求項2所定義。
如請求項1所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，P為式IV所示的結構單元，P通過其含有的氧原子、硫原子或氮原子與L相連：其中，R⁴¹選自：C₁-C₆烷基、C₁-C₆雜烷基、C₃-C₈環烷基、4-8元雜環烷基，所述烷基、雜烷基、環烷基、雜環烷基可任選地被1、2或3個下列基團取代：H、CN、鹵素、羥基、氨基、C₁-C₄烷基、C₁-C₄鹵代烷基、C₁-C₄羥烷基、C₃-C₈環烷基、4-8元雜環烷基、-NR^MR^N、-NHR^M、-OR^M、-SR^M； R^cy、R²、R^M和R^N如請求項2所定義。
如請求項1所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，P為式V所示的結構單元，P通過其含有的氧原子、硫原子或氮原子與L相連：其中， R⁵¹選自：C₁-C₄烷基、C₁-C₄鹵代烷基、C₃-C₆環烷基； R^cy和R³如請求項2所定義。
如請求項1所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，P為式VI-a、式VI-b、式VI-c、式VI-d、式VI-e、式VI-f、式VI-g、式VI-h所示的結構單元，P通過其含有的氧原子、硫原子或氮原子與L相連：其中，R⁶¹各自獨立地選自5-12元雜芳環或6-12元芳環，所述芳環和雜芳環可任選地被1、2或3個下列基團取代：H、鹵素、C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、C₁-C₄鹵代烷基、C₃-C₆環烷基、C₄-C₆雜環烷基； R⁶²各自獨立地選自：H或C₁-C₄烷基； R⁶³各自獨立地選自：H、鹵素、C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、C₁-C₄鹵代烷基、C₃-C₆環烷基。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，R³表示-NR^MR^N、-NHR^M、-OR^M、-SR^M，R^M和R^N各自獨立地表示C₁-C₆烷基、-(C₀-C₆亞烷基)(C₃-C₁₀環烷基)、-(C₀-C₆亞烷基)(3-10元雜環烷基)、-(C₀-C₆亞烷基)(C₆-C₁₀芳基)、-(C₀-C₆亞烷基)(5-10元雜芳基)；R^M和R^N各自任選的可被0、1、2、3個選自以下的取代基取代：氧代、硝基、鹵素、氰基、-R^a、-(C₀-C₆亞烷基)OR^a、-(C₀-C₆亞烷基)SR^a、-(C₀-C₆亞烷基)NR^aR^b、- (C₀-C₆亞烷基)NR^a C(O)R^b、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)R^a、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)OR^a、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)₂R^a、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)R^a、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)₂NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)P(O)R^aR^b；其中，當R^M或者R^N表示含有N原子的-(C₀-C₆亞烷基)(3-10元雜環烷基)且取代基位於所述N原子上時，所述取代基上位於所述N原子鄰位的C原子可以進一步被氧代取代。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，R和R¹各自獨立地表示氫、鹵素、氰基、-R^a、-(C₀-C₂亞烷基)OH、-(C₀-C₂亞烷基)NH₂，R^a如請求項2所定義。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，R²表示鹵素、-R^a、硝基、氰基、-S(O)₂R^a、(C₂-C₆)烯基、(C₂-C₆)炔基。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，R²表示鹵素、三氟甲基、氰基、-S(O)₂Me、乙烯基、乙炔基。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，R^cy選自：或者， R³表示-NR^MR^N、-NHR^M、-OR^M、-SR^M，R^M和R^N各自獨立地表示C₁-C₆烷基、-(C₀-C₆亞烷基)(C₃-C₁₀環烷基)、-(C₀-C₆亞烷基)(3-10元雜環烷基)、-(C₀-C₆亞烷基)(C₆-C₁₀芳基)、-(C₀-C₆亞烷基)(5-10元雜芳基)；R^M和R^N各自任選的可被0、1、2、3個選自以下的取代基取代：氧代、硝基、鹵素、氰基、-R^a、-(C₀-C₆亞烷基)OR^a、-(C₀-C₆亞烷基)SR^a、-(C₀-C₆亞烷基)NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)NR^a C(O)R^b、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)R^a、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)OR^a、-(C₀-C₆亞烷基)C(O)NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)₂R^a、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)R^a、-(C₀-C₆亞烷基)S(O)₂NR^aR^b、-(C₀-C₆亞烷基)P(O)R^aR^b；其中，當R^M或者R^N表示含有N原子的-(C₀-C₆亞烷基)(3-10元雜環烷基)且取代基位於所述N原子上時，所述取代基上位於所述N原子鄰位的C原子可以進一步被氧代取代；其餘基團如引用的請求項所定義。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，R^cy選自：、、、、、、、、、、或；其中，X各自獨立地表示NR^a、O或S；W¹各自獨立地表示CR或N；W²各自獨立地表示CR⁰或N；W⁴各自獨立地表示CR¹或N；W⁵各自獨立地表示CR或N，最多只能有2個W⁵同時為N； R²表示鹵素、-R^a、硝基、氰基、-S(O)₂R^a、 (C₂-C₆)烯基、(C₂-C₆)炔基；其餘基團如引用的請求項所定義。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，P為式II-a、式II-b、式II-c、式II-d所示的結構單元，P通過其含有的氧原子、硫原子或氮原子與L相連；， R和R¹各自獨立地表示氫、鹵素、氰基、-R^a、-(C₀-C₂亞烷基)OH、-(C₀-C₂亞烷基)NH₂； R²表示鹵素、三氟甲基、氰基、-S(O)₂Me、乙烯基、乙炔基；其餘基團如引用的請求項所定義。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，P選自以下結構的片段，P通過其含有的氧原子或氮原子與L相連：。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，-P選自以下結構：。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，P選自以下結構的片段，P通過其含有的氧原子或氮原子與L相連：、、、、、、、、、、、、、、、、。
如前述任一請求項所述的的抗體-藥物偶聯化合物，其中，-P選自以下結構：、、、、、、、、、、。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，L為-L₁-L₂-L₃-L₄-L₅-，其中，L₁連接Ab， L₅連接P，但當L₅為直連鍵時，L₄連接P，其中： L₁選自：、、、、或，優選地，L₁選自：、、或者； L₂選自：其中，E各自獨立地選自直連鍵、炔鍵、苯基、5-6元雜芳基、醯胺基，所述苯基和5-6元雜芳基可任選地被0、1或2個下列取代基取代：F、Cl、甲基、甲氧基， a1各自獨立地選自1、2、3、4、5和6， a2各自獨立地選自0、1、2、3、4、5和6， a3各自獨立地選自1、2、3、4、5和6， R^x1各自獨立地選自H、甲基或-CH₂CH₂N(Me)₂， R^x2各自獨立地選自H或甲基， R^x3各自獨立地選自-NH₂、-OH、-OMe、-NHMe、-N(Me)₂或-NHCH₂COOH； L₃不存在或存在，當L₃不存在時，其為直連鍵；當L₃存在時，L₃選自：-M-L_3a-或-L_3a-M-，其中，M各自獨立地選自：直連鍵、、、，其中，L_3a各自獨立地選自：直連鍵、、， b1各自獨立地選自1、2、3、4和5， b2各自獨立地選自0、1、2、3、4和5， b3各自獨立地選自1、2、3、4和5， b4各自獨立地選自0、1、2和3， R^y1各自獨立地選自H、甲基、-CH₂CH₂N(Me)₂或HL， R^y2各自獨立地選自H、甲基、-CH₂CH₂N(Me)₂或HL， R^y3各自獨立地選自H、甲基或-CH₂CH₂N(Me)₂， R^y4各自獨立地選自H、甲基或-CH₂CH₂N(Me)₂， R^y5各自獨立地選自H、C₁-C₄烷基或HL， HL選自：或，其中c1選自0、1或2；c2選自2-20；c3選自1-20；R^y6選自H、甲基或乙醯基； L₄選自直連鍵、由2-5個氨基酸殘基組成的短肽、或氨基酸殘基和羧酸/胺組成的醯胺； L₅選自：直連鍵、， R^w1各自獨立地選自：-CH₂NH-HL、-CH₂N(Me)-HL、-CH₂CH₂NH-HL、-CH₂CH₂N(Me)-HL、、或，其中d1選自0、1或2，d2選自1-20； R^w2各自獨立地選自：H、Me、-CH₂CH₂N(Me)₂或-CH₂CH₂SO₂Me； R^w3各自獨立地選自：H、Me、-CH₂CH₂N(Me)₂、-CH₂CH₂SO₂Me或-CH₂CH₂OCH₂CH₂OH； R^w4各自獨立地選自：H、Me、-CH₂CH₂N(Me)₂、-CH₂CH₂SO₂Me或-CH₂CH₂OCH₂CH₂OH； R^w5各自獨立地選自：H、Me或-CH₂CH₂N(Me)₂； R^w6各自獨立地選自：H、Me或-CH₂CH₂N(Me)₂； W¹各自獨立地選自或； W²為-L^w1-L^w2或-L^w3-L^w4，其中L^w1為2-5個氨基酸殘基組成的短肽；L^w2為H、C₁-C₄烷基、(C₁-C₄烷基)-醯基、HL，HL如上文所定義；L^w3為羧酸/胺和1-3個氨基酸殘基組成的醯胺；L^w4為-NH(C₁-C₄烷基)、-N(C₁-C₄烷基)₂、或，其中R^e為H或C₁-C₄烷基，e1或e3各自任選自1-20的整數； d各自獨立地選自0、1或2。
如請求項21所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，L₄選自直連鍵。
如請求項21所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，L₄選自氨基酸殘基和羧酸殘基組成的醯胺，或氨基酸殘基和胺殘基組成的醯胺。
如請求項21所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，L₄為，其中p選自2、3、4或5；R^p各自獨立地任選自：H、甲基、異丙基、異丁基、仲丁基、苄基、對羥基苄基、-CH₂OH、-CH(OH)Me、-CH₂CH₂SCH₃、-CH₂CONH₂、-CH₂COOH、-CH₂CH₂CONH₂、-CH₂CH₂COOH、-(CH₂)₃NHC(=NH)NH₂、-(CH₂)_p1N(R^z)₂、-(CH₂)₃NHCOMe、-(CH₂)₃NHCONH₂、-(CH₂)₄NHCONH₂，其中p1選自1、2、3、4；R^z各自獨立地任選自H、C₁-C₄烷基或HL。
如請求項21所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，L₄為，其中r選自1或2；R^p如請求項24所定義。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，L₄選自：， R^z各自獨立地選自H、C₁-C₄烷基或HL。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，L₄選自：。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，L₄選自：。
如請求項21所述的抗體-藥物偶聯化合物，L₅選自：直連鍵。
如請求項21所述的抗體-藥物偶聯化合物，L₅選自：，其中R^w6各自獨立地選自H或甲基； d各自獨立地選自1或2； W²為-L^w1-L^w2或-L^w3-L^w4，其中L^w1為，L^w1的N端和L^w2連接，p選自2、3、4或5；R^p各自獨立地任選自：H、甲基、異丙基、異丁基、仲丁基、苄基、對羥基苄基、-CH₂OH、-CH(OH)Me、-CH₂CH₂SCH₃、-CH₂CONH₂、-CH₂COOH、-CH₂CH₂CONH₂、-CH₂CH₂COOH、-(CH₂)₃NHC(=NH)NH₂、-(CH₂)₃NH₂、-(CH₂)₃N(Me)₂、-(CH₂)₃NHCOMe、-(CH₂)₃NHCONH₂、-(CH₂)₄NH₂、-(CH₂)₄N(Me)₂、-(CH₂)₄N(Et)₂、-(CH₂)₄N(nPr)₂、-(CH₂)₄NHCONH₂； L^w2為H、甲基、乙醯基、HL； L^w3為，L^w3的左側和L^w4連接，其中r選自1或2；R^p各自獨立地任選自：H、甲基、異丙基、異丁基、仲丁基、苄基、對羥基苄基、-CH₂OH、-CH(OH)Me、-CH₂CH₂SCH₃、-CH₂CONH₂、-CH₂COOH、-CH₂CH₂CONH₂、-CH₂CH₂COOH、-(CH₂)₃NHC(=NH)NH₂、-(CH₂)₃NH₂、-(CH₂)₃N(Me)₂、-(CH₂)₃NHCOMe、-(CH₂)₃NHCONH₂、-(CH₂)₄NH₂、-(CH₂)₄N(Me)₂、-(CH₂)₄N(Et)₂、-(CH₂)₄N(nPr)₂、-(CH₂)₄NHCONH₂； L^w4為-NHMe、-N(Me)₂、、或，其中e1、e2或e3各自任選自1-20的整數。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，L₅選自：。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，L₅選自：。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，-L₄-L₅-選自：。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，-L₄-L₅-選自：。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，-L₁-L₂-選自：。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，-L₃-選自：直連鍵、。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，-L-選自下列結構或下列結構的丁二醯亞胺水解開環結構：。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，L₅可以從R^cy或R³的取代基或R⁴¹的取代基上連接。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其結構如式I-2a或式I-2b所示：。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其結構如式I-2a-1或式I-2b-1所示：。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其結構如式I-2a-2或式I-2b-2所示：。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其結構如式I-3a、式I-3b、式I-3c、式I-3d、式I-3e、式I-3f、式I-3g或式I-3h所示：。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其結構如式I-4a或式I-4b所示：。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其結構如式I-5a或式I-5b所示：。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其結構如式I-6a、式I-6b、式I-6c、式I-6d、式I-6e或式I-6f所示：。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，選自下列結構或下列結構的丁二醯亞胺水解開環結構：。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，選自下列結構或下列結構的丁二醯亞胺水解開環結構：。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，選自下列結構：、、、、、、。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，選自下列結構：、、、、、、。
如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，q選自1.0-16.0之間的任意數值；優選地，q選自2.0-16.0之間的任意數值；優選地，q選自1.0-8.0之間的任意數值；優選地，q選自4.0-8.0之間的任意數值；優選地，q選自2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16；優選地，q選自1、2、3、4、5、6、7或8；優選地，q選自2、4、6或8；優選地，q選自4、5、6、7、8；優選地，q選自4、6、8。
如前述請求項任意所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，Ab為與靶點抗原結合的配體，所述靶點為在腫瘤細胞高表達，而在正常細胞低表達或不表達的靶點。
如前述請求項任意所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，Ab為抗體或抗原配體，所述抗體或抗原配體的靶點例如為5T4、ACTA2、ADGRE1、AG-7、AIF1、AKR1C1、AKR1C2、ANGPTL4、ASLG659、Axl、B7H3、B7H4、BAFF-R、BCMA、BMPR1B、BNIP3、C1QA、C1QB、CA6、CADM1、CCL5、CCR5、CCR7、CD123、CD138、CD142、CD147、CD166、CD19、CD22、CD21、CD20、CD205、CD22、CD223、CD228、CD25、CD30、CD33、CD37、CD38、CD40、CD45、CD46、CD47、CD49D(ITGA4)、CD56、CD70、CD71、CD72、CD74、CD79a、CD79b、CD80、CDCP1、CDH3、CDH6、CDH11、CD11b、CEA、CEACAM5、CEACAM6、CLDN18.2、c-Met、COL6A3、COL7A1、CRIPTO、CSF1R、CTGF、CTSD、CTSS、CXCL11、CXCL10、CXCR5、DDIT4、DLL3、DLL4、DR5、E16、EFNA4、EGFR、EGFRvIII、EGLN、EGLN3、EMR2、ENPP3、EpCAM、EphA2、EphB2R、ETBR、FcRH2、FcRH1、FGF2、FGFR2、FGFR3、FLT3、FOLR-α、GD2、GEDA、GPC-1、GPNMB、GPR20、GZMB、HER2、HER3、HLA-DOB、HMOX1、IFI6、IFNG、IGF-1R、IGFBP3、IL10RA1、IL-13R、IL-2、IL20Ra、IL-3、IL-4、IL-6、IRTA2、KISS1R、KRT33A、LIV-1、LOX、LRP-1、LRRC15、LUM、LY64、LY6E、Ly86、LYPD3、MDP、MMP10、MMP14、MMP16、MPF、MSLN、MUC-1、NaPi2b、Napi3b、Nectin-4、NOG、P2X5、PDGFRA、PDK1、PD-L1、PFKFB3、PGF、PGK1、PIK3AP1、PIK3CD、PLOD2、PSCA、PSMA、PTK7、RNF43、ROR1、ROR2、SERPINE1、SLC39A6、SLTRK6、STC2、STEAP1、STEAP2、TCF4、TENB2、TGF、TGFB1、TGFB2、TGFBR1、TNFRSF21、TNFSF9、Trop-2、TrpM4、Tyro7、UPK1B、VEGFA、WNT5A。
如前述請求項任意所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，Ab為抗抗原抗體或其抗原結合片段，所述抗原靶點選自HER2、TROP2、EGFR、HER3、B7H3、FGFR2b、B7H4、Nectin4、FOLR1、CD30、CD79b、CD19、CD33、5T4、CLDN18.2。
如前述請求項任意所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，Ab為抗體或其抗原結合片段，所述抗體選自adalimumab、aducanumab、alemtuzumab、altumomab、amivantamab、atezolizumab、anetumab、avelumab、bapineuzumab、basiliximab、bectumomab、bermekimab、besilesomab、bevacizumab、bezlotoxumab、brentuximab、brodalumab、catumaxomab、cemiplimab、cetuximab、cinpanemab、clivatuzumab、crenezumab、daclizumab、daratumumab、denosumab、dinutuximab、dostarlimab、durvalumab、edrecolomab、elotuzumab、emapalumab、enfortumab、epcoritamab、epratuzumab、etaracizumab、gemtuzumab、glofitamab、girentuximab、gosuranemab、ibritumomab、inebilizumab、infliximab、inotuzumab、ipilimumab、isatuximab、ixekizumab、J591、labetuzumab、lecanemab、loncastuximab、mirzotamab、mogamulizumab、mosunetuzumab、necitumumab、nimotuzumab、natalizumab、naratuximab、naxitamab、nivolumab、ocrelizumab、ofatumumab、olaratumab、oregovomab、panitumumab、pembrolizumab、pertuzumab、polatuzumab、prasinezumab、racotumomab、ramucirumab、rituximab、sacituzumab、semorinemab、siltuximab、solanezumab、tacatuzumab、tafasitamab、teprotumumab、tilavonemab、tocilizumab、tositumomab、trastuzumab、ustekinumab、vedolizumab、votumumab、zagotenemab、zanidatamab、zalutumumab、zanolimumab。
如前述請求項任意所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，Ab為抗HER2抗體或其抗原結合片段，所述抗體優選Trastuzumab、Pertuzumab、Zanidatamab。
如前述請求項任意所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，Ab為抗TROP2抗體或其抗原結合片段，所述抗體優選Sacituzumab。
如前述請求項任意所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，Ab為抗HER3抗體或其抗原結合片段，所述抗體優選Patritumab。
如前述請求項任意所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，Ab為抗Nectin4抗體或其抗原結合片段，所述抗體優選Enfortumab。
如前述請求項任意所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，Ab為抗B7H3抗體或其抗原結合片段，所述抗體優選Mirzotamab。
如前述請求項任意所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，Ab為抗EGFR抗體或其抗原結合片段，所述抗體優選Cetuximab。
如前述請求項任意所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，Ab為多功能抗體或其抗原結合片段，所述雙功能抗體的抗原靶點包括任意2個或以上上述靶點的組合。
如前述請求項任意所述的抗體-藥物偶聯化合物，其中，Ab為雙功能抗體或其抗原結合片段，所述雙功能抗體的抗原靶點的組合選自：EGFR/c-Met、EGFR/HER3、FOLR1/TRPV6、HER2/TROP2、HER2/HER2、EGFR/MUC1、HER3/TROP2。
一種藥物組合物，包含如前述任一請求項所述的抗體-藥物偶聯化合物，及任選地藥學上可接受的鹽、載體、稀釋劑或賦形劑。
一種如請求項1至62所述的抗體-藥物偶聯化合物或者請求項63所述的藥物組合物在製備用於預防或治療癌症相關的疾病或病症的藥物中的應用。
一種如請求項1至62所述的抗體-藥物偶聯化合物或者請求項63所述的藥物組合物用於預防或治療癌症相關的疾病或病症中的應用。
一種用於預防或治療癌症相關的疾病或病症的方法，包括向需要治療的病人施用治療有效量的如請求項1-62所述的抗體-藥物偶聯化合物或者請求項63所述的藥物組合物。
一種如請求項64或65所述的應用，或者如請求項66所述的方法，所述癌症為實體腫瘤或血液腫瘤，具體地可選自食管癌、肺癌、乳腺癌、胃癌、結直腸癌、胰腺癌、卵巢癌、子宮癌、肝癌、腎癌、頭頸癌、腦瘤、尿路上皮癌、皮膚癌、前列腺癌、甲狀腺癌、神經母細胞瘤、膠質瘤、白血病或淋巴瘤等。
一種L-P中間物，可以與Ab通過偶聯反應製備抗體-藥物偶聯化合物，所述L-P中間物具有如下結構，或其立體異構物：，其中，Ab為抗體或其抗原結合片段，或抗原配體。
一種L-P中間物，可以與Ab通過偶聯反應製備抗體-藥物偶聯化合物，所述L-P中間物具有如下結構：，其中，Ab為抗體或其抗原結合片段，或抗原配體。
一種L-P中間物，可以與Ab通過偶聯反應製備抗體-藥物偶聯化合物，所述L-P中間物具有如下結構：，其中，Ab為抗體或其抗原結合片段，或抗原配體。
一種製備抗體-藥物偶聯化合物的方法，包括使用如請求項68至70任一所述的L-P中間物與Ab偶聯的步驟，其中，Ab為抗體或其抗原結合片段，或抗原配體。