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TW202435867A - 作為葡萄糖激酶激活劑的吡咯烷酮衍生物的固體形式 - Google Patents

作為葡萄糖激酶激活劑的吡咯烷酮衍生物的固體形式 Download PDF

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TW202435867A
TW202435867A TW113109151A TW113109151A TW202435867A TW 202435867 A TW202435867 A TW 202435867A TW 113109151 A TW113109151 A TW 113109151A TW 113109151 A TW113109151 A TW 113109151A TW 202435867 A TW202435867 A TW 202435867A
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formula
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TW113109151A
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佘勁
靳向樂
趙強
胡彬
陳力
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大陸商華領醫藥技術（上海）有限公司
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Abstract

本發明涉及(R)-3-(3-((S)-2-(4-(2-氯苯氧基)-2-氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-4-甲基戊醯氨基)-1H-吡唑-1-基)-2-羥基丙基煙酸酯(化合物A)的游離態或其藥學上可接受鹽的晶型，及其藥物組合物和製備方法，以及所述晶型在製備用於治療糖尿病及相關症狀中的用途。

Description

作為葡萄糖激酶激活劑的吡咯烷酮衍生物的固體形式
本發明屬於醫藥技術領域，具體涉及作為葡萄糖激酶激活劑(Glucokinase Activator, GKA)的吡咯烷酮衍生物的固體形式，尤其涉及(R)-3-(3-((S)-2-(4-(2-氯苯氧基)-2-氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-4-甲基戊醯氨基)-1H-吡唑-1-基)-2-羥基丙基煙酸酯(化合物A)的游離態或其藥學上可接受鹽的晶型，其藥物組合物和製備方法，以及所述晶型和藥物組合物在製備用於治療糖尿病及相關症狀中的用途。
糖尿病已成為世界範圍的普遍性疾病。根據中華醫學會糖尿病學分會（CDS）第二十四次全國學術會議數據，中國糖尿病患者全球最多，成人糖尿病患病人數約1.298億。糖尿病中，2型糖尿病即非胰島素依賴型糖尿病(non-insulin dependent diabetes mellitus，NIDDM)占糖尿病患者的90%以上。2型糖尿病，是一種由於胰島素分泌障礙和胰島素抵抗引起的人體血糖穩態平衡失調而導致的高血糖慢性代謝功能紊亂性疾病。
葡糖激酶（Glucokinase，GK）在穩定人體血糖平衡中起著核心作用。GK作為血糖穩態中的葡萄糖傳感器感應血糖變化，調控信使控糖激素、胰島素、胰高糖素以及GLP-1的分泌，構成人體血糖穩態調控的傳感系統。GK主要分佈在肝臟中，在肝臟中，它根據血糖升高迅速將葡萄糖轉化為肝糖原，以進行儲存，同時降低血液中的葡萄糖水平。控糖激素控制的葡萄糖攝取時葡萄糖儲備和空腹時葡萄糖供給，構成人體血糖穩態調控。
當葡萄糖激酶（GK）功能和表達受損，傳感器功能失調，造成控糖激素早相分泌失調，影響葡萄糖的攝取和輸出，造成餐後高血糖、餐前低血糖。控糖激素信號指令異常，造成葡萄糖攝取和輸出操作執行系統中關鍵蛋白的功能和表達異常，形成異常狀態運行，形成2型糖尿病。
葡萄糖激酶激活劑是針對GK這一靶點的特徵進行開發的，其能夠通過提高α細胞、β細胞和L細胞對葡萄糖濃度變化的敏感性；改善葡萄糖調控的胰島素、胰高血糖素和GLP-1的分泌功能。
化合物A是本申請人開發的一種新的葡萄糖激酶激活劑，其化學名稱為(R)-3-(3-((S)-2-(4-(2-氯苯氧基)-2-氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-4-甲基戊醯氨基)-1H-吡唑-1-基)-2-羥基丙基煙酸酯（化合物A），化學式為C 28H 30C lN 5O 6，化學結構如下： (A)
化合物A為HMS5552的衍生物，可以在體內（尤其在小腸內）有效地轉化（例如經歷酶和/或化學轉化）為HMS5552，從而被吸收後進入循環系統，從而實現治療或預防某些代謝綜合征疾病的目的。優選地，本發明化合物具有在胃液中穩定，並且可以在腸道、小腸細胞內有效地轉化為HMS5552的特點。
因此，本領域需要開發化合物A的游離態和鹽型的固體形式（尤其是晶型），以便滿足藥物製備、儲藏和使用過程中對活性、藥物穩定性、生物利用度等藥物特性上的要求。
在一方面，本發明提供了化合物A的游離態晶型。
在一個實施方案中，本發明提供了化合物A的游離態晶型A。
在另一方面，本發明提供了化合物A的鹽的晶型。在一個實施方案中，本發明提供了化合物A的無機酸鹽的晶型；在另一個實施方案中，本發明提供了化合物A的有機酸鹽的晶型。
在一個具體實施方案中，本發明提供了化合物A的鹽酸鹽晶型A；在另一個具體實施方案中，本發明提供了化合物A的鹽酸鹽晶型B；在另一個具體實施方案中，本發明提供了化合物A的鹽酸鹽晶型C。
在另一個具體實施方案中，本發明提供了化合物A的馬來酸鹽晶型A；在另一個具體實施方案中，本發明提供了化合物A的馬來酸鹽晶型B；在另一個具體實施方案中，本發明提供了化合物A的萘二磺酸鹽晶型A；在另一個具體實施方案中，本發明提供了化合物A的草酸鹽晶型A；在另一個具體實施方案中，本發明提供了化合物A的氫溴酸鹽晶型A；在另一個具體實施方案中，本發明提供了化合物A的氫溴酸鹽晶型B。
在另一方面，本發明提供了一種藥物組合物，其包含本發明所述的晶型和一種或多種藥學上可接受的賦形劑。
在另一方面，本發明提供了本發明所述的晶型在製備用於治療和/或預防一種或多種選自以下疾病的藥物中的用途：I型糖尿病、II型糖尿病、葡萄糖耐量降低、空腹血糖異常、高血糖症、餐後高血糖症、超重、肥胖症、高血壓症、胰島素抵抗和代謝綜合征。
在另一方面，本發明提供了本發明所述的晶型，其用於治療和/或預防一種或多種選自以下疾病：I型糖尿病、II型糖尿病、葡萄糖耐量降低、空腹血糖異常、高血糖症、餐後高血糖症、超重、肥胖症、高血壓症、胰島素抵抗和代謝綜合征。
在另一方面，本發明提供了一種在受試者中治療和/或預防疾病的方法，包括向所述受試者給藥本發明所述的晶型，其中所述疾病選自以下一種或多種：I型糖尿病、II型糖尿病、葡萄糖耐量降低、空腹血糖異常、高血糖症、餐後高血糖症、超重、肥胖症、高血壓症、胰島素抵抗和代謝綜合征。
在另一方面，本發明提供了本發明所述的晶型或所述的藥物組合物在製備用於治癒糖尿病、引起糖尿病緩解和/或消退糖尿病的藥物中的用途。
在另一方面，本發明提供了本發明所述的晶型或所述的藥物組合物，其用於治癒糖尿病、引起糖尿病緩解和/或消退糖尿病。
在另一方面，本發明提供了一種在受試者中治癒糖尿病、引起糖尿病緩解和/或消退糖尿病的方法，包括向所述受試者給藥本發明所述的晶型，或所述的藥物組合物。
定義
除非另有說明，本文使用的所有技術和科學術語具有與本發明所屬領域的技術人員通常理解相同的含義，但如有衝突，則以本說明書中的定義為准。
如說明書和權利要求書中所用，單數形式“一”、“一個”和“該（所述）”包括複數形式，除非上下文另有明確說明。
在說明書和權利要求書中使用的所有數值或表述在所有情形中均應理解被“約”修飾。術語“約”當指數量或數值範圍時，意思是所指數量或者數值範圍是試驗變異性內（或統計學實驗誤差內）的近似值，因此該數量或者數值範圍可以在所述數量或數值範圍的例如±10%、優選±5%之間變化。
如本文所使用的，術語“基本上”是指考慮特定方法典型的可變性以及測量數值的標準誤差。例如，關於X射線粉末衍射峰的位置，術語“基本上”是指考慮峰位置和強度的典型的可變性。本領域技術人員將認識到，峰位置（2θ）將顯示出一些可變性，通常高達±0.2º。此外，本領域技術人員將認識到，相對峰強度將顯示設備間的可變性以及由於結晶度、優選取向、測試的樣品表面以及本領域技術人員已知的其它因素而導致的可變性。類似地，差示掃描量熱分析（Differential Scaning Calarmeutry, DSC）和熱解重量分析（Thermogravimetric Analysis, TGA）等測試也會因為設備間的可變性以及由於結晶度、優選取向、測試的樣品表面以及本領域技術人員已知的其它因素而導致的可變性。通常DSC的誤差範圍為±5℃，優選±4℃，優選±3℃，優選±2℃，優選±1℃，更優選±0.5℃；TGA的誤差範圍為±2.5%，優選±2%，優選±1.5%，優選±1%，更優選±0.5%。
本文使用的術語“結晶”和“晶型”是指具有規則重複排列的分子所構成的固體。結晶形式可以在熱力學穩定性、物理參數、X射線結構和製備過程方面不同。
術語“無定型”是指分子無序排列所構成的固體。
本文使用的術語“溶劑合物”是指在晶格中具有通過非共價分子間結合的化學劑量或非化學劑量量的溶劑（如水、甲醇、乙酸乙酯等或者它們的混合物）的晶體形式。術語“水合物”是指其中溶劑為水的溶劑合物。
本文使用的術語“無水”是指含有如通過標準方法如卡爾-費歇爾（Karl Fisher analysis）所測定的小於約1% （w/w）吸附水分的結晶形式。
本說明書和權利要求中使用的“和/或”，應當理解為相關聯的組分“二者擇一或二者”，即組分在一些情況中聯合存在而在另一些情況中分開存在。多個用“和/或”列出的組分應當以同樣的方式理解，即“一種或多種”相關聯的組分。除了“和/或”從句具體確定的組分，其它組分可任選地存在，無論與那些具體確定的組分相關還是不相關。因此，作為非限制性實例，提及“A和/或B”，當用於連接開放式結尾的文字如“包括”，在一個實施方案中，可僅指A（任選地包括除B外的組分）；在另一實施方案，可僅指B（任選地包括除A外的組分）；在再一實施方案中，指A和B（任選的包括其它組分）等。
“可藥用”或“藥學上可接受”是指並非在生物學上或其它方面實質上不希望的物質，即，可將所述物質給藥於個體，而不會導致任何不希望的生物作用或不會以有害的方式與包含這種物質的組合物的任何其它組分相互作用。
術語“可藥用鹽”是指不會對生物體造成顯著刺激且保留化合物的生物學活性和性質的鹽。
術語“可藥用載體”是指不會對生物體造成顯著刺激且不會消除所給予的化合物的生物學活性和性質的非活性成分。在本文中，“載體”和“賦形劑”具有相同含義。
術語“治療有效量”是指足以提供希望的生物結果的試劑的量。該結果可為疾病的徵兆、症狀或原因的減少和/或減輕，或任何其它希望的生物系統的變化。例如，治療用途的“治療有效量”是指包含作為本發明活性成分的化合物的臨床上顯著減少疾病所需要的組合物的量。在任何個案中，適當的“治療有效量”可由本領域普通技術人員使用常規實驗來測定。因此，表達方式“治療有效量”通常是指活性物質具有治療效果時的量。
本申請使用的術語“治療（treat）”與術語“預防（prevent）”、“減緩”同義，意在表示推遲疾病發展、防止疾病發展和/或降低將會發展或預期會發展的所述症狀的嚴重性。因此，這些術語包括改善已有的疾病症狀、預防另外的症狀、改善或預防症狀的潛在的代謝原因、抑制障礙或疾病，例如，阻止障礙或疾病的發展、減輕障礙或疾病、使障礙或疾病退行、減輕由疾病或障礙導致的病症，或使疾病或障礙的症狀停止。
本申請使用的術語“受試者”包括哺乳動物和非哺乳動物。哺乳動物的實例包括但不限於哺乳動物綱的任何成員：人、非人靈長類如黑猩猩及其它猿類和猴類；農場動物如牛、馬、綿羊、山羊、豬；家養動物如兔、狗和貓；實驗室動物，包括齧齒類動物如大鼠、小鼠和豚鼠等。非哺乳動物的實例包括但不限於鳥、魚等。在本發明一個實施方案中，哺乳動物為人。術語“受試者”包括確診患者，但所述“受試者”並不需要對醫院、診所或研究設備具有任何特殊的身份（如作為確診的病人、研究參與者等）。
應當理解本文採用的術語用於描述具體實施方案的目的，而不意在進行限制。通過參考本發明的實施方案的以下詳細描述和本文包括的實施例，可以更容易地理解本發明。此外，儘管在本發明的實踐或試驗中可以使用與本文描述的那些類似或等價的任何方法、裝置和材料，但是下文描述了優選的方法、裝置和材料。
化合物 A 及其晶型
化合物，(R)-3-(3-((S)-2-(4-(2-氯苯氧基)-2-氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-4-甲基戊醯氨基)-1H-吡唑-1-基)-2-羥基丙基煙酸酯，在本文中稱為化合物A，或化合物A游離態，具有下式： (A)
本發明涉及化合物A的結晶形式“化合物A晶型A”。在一些實施方案中，這些化合物的晶型為無水合物。
化合物 A 晶型 A
在一個實施方案中，本發明提供了化合物A晶型A，其為無水合物。
在另一個實施方案中，在使用CuK α輻射得到的晶型A的X射線粉末衍射圖中，至少包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：8.5±0.2、17.7±0.2、18.0±0.2和18.6±0.2。在另一個實施方案中，在所述X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：10.1±0.2、14.5±0.2、20.2±0.2、20.6±0.2、25.1±0.2和25.7±0.2。在另一個實施方案中，在所述X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：12.9±0.2、15.2±0.2、22.0±0.2、23.2±0.2和23.9±0.2。在另一個實施方案中，在所述X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：11.2±0.2、12.1±0.2、14.2±0.2、15.7±0.2、19.6±0.2、21.2±0.2、28.6±0.2和30.0±0.2。
在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖具有以下的特徵峰：
角度º2θ±0.2 º2θ 相對強度%
8.54 97.6
10.05 36.1
11.23 13.8
12.10 20.5
12.91 25.9
14.19 28.0
14.48 36.3
15.25 21.7
15.67 7.4
17.72 97.9
18.02 100.0
18.55 78.1
19.55 12.9
20.17 37.3
20.60 45.3
21.24 5.8
22.01 25.1
23.16 19.0
23.94 21.6
25.09 30.8
25.74 33.7
28.62 9.2
29.98 6.6
在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖包含在表18中的2θ值處的一個或多個峰。在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖基本上如圖7所示。
在另一個實施方案中，所述晶型A在差示掃描量熱分析中在135.5±2℃具有吸熱峰。
在另一個實施方案中，所述晶型A在熱解重量分析中，在150℃時失重為1.36±0.5%。
化合物 A 的鹽及其晶型
本發明涉及化合物A的多種鹽，例如鹽酸鹽、馬來酸鹽、萘二磺酸鹽、草酸鹽和氫溴酸鹽。
本發明還涉及化合物A的多種鹽的晶型，如“化合物A鹽酸鹽晶型A”、“化合物A鹽酸鹽晶型B”、“化合物A鹽酸鹽晶型C”、“化合物A馬來酸鹽晶型A”、“化合物A馬來酸鹽晶型B”、“化合物A萘二磺酸鹽晶型A”、“化合物A草酸鹽晶型A”、“化合物A氫溴酸鹽晶型A”和“化合物A氫溴酸鹽晶型B”。
化合物 A 鹽酸鹽晶型 A
在一個實施方案中，本發明提供了化合物A鹽酸鹽晶型A。在另一個實施方案中，鹽酸鹽晶型A是無水合物。
在另一個實施方案中，在使用CuK α輻射得到的鹽酸鹽晶型A的X射線粉末衍射圖中，至少包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：4.1±0.2、15.3±0.2和18.5±0.2。在另一個實施方案中，在所述X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：8.1±0.2、10.6±0.2、11.9±0.2、22.1±0.2和22.9±0.2。在另一個實施方案中，在所述X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：12.2±0.2、17.9±0.2、21.5±0.2和24.9±0.2。
在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖具有以下的特徵峰：
角度º2θ±0.2 º2θ 相對強度%
4.06 86.1
8.11 30.3
10.61 36.7
11.89 39.2
12.18 23.0
15.27 66.8
15.66 19.5
16.28 12.1
16.68 20.0
17.89 29.9
18.45 100.0
19.45 12.6
20.41 15.7
21.51 23.7
22.14 32.6
22.94 32.0
23.75 5.8
24.94 26.0
26.89 21.1
27.53 11.9
28.23 9.8
30.64 6.5
在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖包含在表21中的2θ值處的一個或多個峰。在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖基本上如圖9所示。
在另一個實施方案中，所述鹽酸鹽晶型A在差示掃描量熱分析中在125.9±2℃和177.8±2℃具有吸熱峰。
在另一個實施方案中，所述鹽酸鹽晶型A在熱解重量分析中，在150℃時失重為4.91±0.5%。
化合物 A 鹽酸鹽晶型 B
在一個實施方案中，本發明提供了化合物A鹽酸鹽晶型B。在另一個實施方案中，鹽酸鹽晶型B是無水合物。
在另一個實施方案中，在使用CuK α輻射得到的鹽酸鹽晶型B的X射線粉末衍射圖中，至少包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：4.5±0.2、18.1±0.2和21.4±0.2。在另一個實施方案中，在所述X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：11.1±0.2和21.7±0.2。在另一個實施方案中，在所述X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：8.7±0.2、13.7±0.2、14.4±0.2、15.1±0.2和23.2±0.2。
在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖具有以下的特徵峰：
角度º2θ±0.2 º2θ 相對強度%
4.46 66.9
8.73 26.1
11.09 38.6
13.66 21.8
14.35 27.7
15.07 28.4
16.46 19.0
17.44 18.9
18.13 70.4
18.83 17.6
21.35 100.0
21.67 44.8
22.19 14.1
23.17 21.4
24.36 13.4
25.43 7.4
25.96 14.7
26.78 13.9
27.47 11.4
28.37 10.4
29.50 6.5
30.36 5.8
31.35 8.7
32.34 7.2
34.95 6.7
在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖包含在表44中的2θ值處的一個或多個峰。在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖基本上如圖22所示。
在另一個實施方案中，所述鹽酸鹽晶型B在差示掃描量熱分析中在123.1±2℃、135.2±2℃和187.5±2℃具有吸熱峰。
在另一個實施方案中，所述鹽酸鹽晶型B在熱解重量分析中，在70℃時失重為1.32±0.5%，在70-150℃時失重為5.32±0.5%。
化合物 A 鹽酸鹽晶型 C
在一個實施方案中，本發明提供了化合物A鹽酸鹽晶型C。在另一個實施方案中，鹽酸鹽晶型C是無水合物。
在另一個實施方案中，在使用CuK α輻射得到的鹽酸鹽晶型C的X射線粉末衍射圖中，至少包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：8.2±0.2、10.6±0.2、13.4±0.2和20.2±0.2。在另一個實施方案中，在所述X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：16.8±0.2和17.7±0.2。在另一個實施方案中，在所述X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：4.1±0.2、8.8±0.2和12.2±0.2。
在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖具有以下的特徵峰：
角度º2θ±0.2 º2θ 相對強度%
4.11 24.8
8.16 78.6
8.78 28.8
10.61 100.0
12.24 32.4
12.52 17.6
13.41 71.0
15.05 16.2
16.78 48.8
17.72 57.7
19.06 8.8
20.22 60.2
21.52 18.1
24.64 19.7
26.66 20.6
27.73 21.7
在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖包含在表45中的2θ值處的一個或多個峰。在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖基本上如圖24所示。
在另一個實施方案中，所述鹽酸鹽晶型C在差示掃描量熱分析中在60.7±2℃、114.4±2℃和182.4±2℃具有吸熱峰。
在另一個實施方案中，所述鹽酸鹽晶型C在熱解重量分析中，在80℃時失重為5.53±0.5%，在80-150℃時失重為6.72±0.5%。
化合物 A 馬來酸鹽晶型 A
在一個實施方案中，本發明提供了化合物A馬來酸鹽晶型A。在另一個實施方案中，馬來酸鹽晶型A是無水合物。
在另一個實施方案中，在使用CuK α輻射得到的馬來酸鹽晶型A的X射線粉末衍射圖中，至少包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：6.0±0.2和18.4±0.2。在另一個實施方案中，在所述X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：10.4±0.2、15.9±0.2和17.4±0.2。在另一個實施方案中，在所述X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：6.9±0.2、12.0±0.2、21.2±0.2和21.8±0.2。
在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖具有以下的特徵峰：
角度º2θ±0.2 º2θ 相對強度%
6.01 100.0
6.92 12.6
10.41 18.6
12.01 12.2
15.93 17.4
17.38 30.8
18.42 57.6
19.46 8.1
21.21 12.1
21.76 14.4
22.93 5.1
在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖包含在表22中的2θ值處的一個或多個峰。在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖基本上如圖11所示。
化合物 A 馬來酸鹽晶型 B
在一個實施方案中，本發明提供了化合物A馬來酸鹽晶型B。在另一個實施方案中，馬來酸鹽晶型B是無水合物。
在另一個實施方案中，在使用CuK α輻射得到的馬來酸鹽晶型B的X射線粉末衍射圖中，至少包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：4.1±0.2、8.1±0.2、16.7±0.2和20.2±0.2。在另一個實施方案中，在所述X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：17.5±0.2和21.3±0.2。在另一個實施方案中，在所述X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：16.2±0.2、20.4±0.2、22.4±0.2、24.1±0.2、24.6±0.2和26.5±0.2。
在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖具有以下的特徵峰：
角度º2θ±0.2 º2θ 相對強度%
4.08 79.3
8.13 94.1
10.50 21.5
12.20 27.7
13.31 13.4
15.01 21.4
16.24 31.0
16.68 72.3
17.54 60.1
18.37 12.5
20.17 100.0
20.41 34.0
21.34 67.4
22.40 34.6
22.69 26.7
23.16 13.7
24.14 49.6
24.56 30.9
25.97 21.7
26.55 34.4
27.59 20.4
29.90 15.4
在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖包含在表23中的2θ值處的一個或多個峰。在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖基本上如圖12所示。
在另一個實施方案中，所述馬來酸鹽晶型B在差示掃描量熱分析中在85.6±2℃具有吸熱峰。
在另一個實施方案中，所述馬來酸鹽晶型B在熱解重量分析中，在120℃時失重為12.02±0.5%。
化合物 A 萘二磺酸鹽晶型 A
在一個實施方案中，本發明提供了化合物A萘二磺酸鹽晶型A。在另一個實施方案中，萘二磺酸鹽晶型A是無水合物。
在另一個實施方案中，在使用CuK α輻射得到的萘二磺酸鹽晶型A的X射線粉末衍射圖中，至少包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：4.0±0.2和13.7±0.2。在另一個實施方案中，在所述X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：10.3±0.2、15.5±0.2、21.0±0.2和22.3±0.2。
在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖具有以下的特徵峰：
角度º2θ±0.2 º2θ 相對強度%
4.03 100.0
10.28 31.9
11.96 12.6
13.68 67.6
15.49 28.7
20.96 22.4
22.27 28.0
26.22 15.1
在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖包含在表24中的2θ值處的一個或多個峰。在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖基本上如圖14所示。
在另一個實施方案中，所述萘二磺酸鹽晶型A在差示掃描量熱分析中在119.2±2℃和207.9±2℃具有吸熱峰。
在另一個實施方案中，所述萘二磺酸鹽晶型A在熱解重量分析中，在150℃時失重為5.97±0.5%。
化合物 A 草酸鹽晶型 A
在一個實施方案中，本發明提供了化合物A草酸鹽晶型A。在另一個實施方案中，草酸鹽晶型A是無水合物。
在另一個實施方案中，在使用CuK α輻射得到的草酸鹽晶型A的X射線粉末衍射圖中，至少包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：5.0±0.2和15.0±0.2。在另一個實施方案中，在所述X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：7.4±0.2、16.5±0.2、19.3±0.2、20.1±0.2、25.2±0.2和26.0±0.2。
在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖具有以下的特徵峰：
角度º2θ±0.2 º2θ 相對強度%
5.00 100.0
7.37 35.6
15.05 60.5
16.52 41.7
17.39 12.7
18.63 8.7
19.31 27.4
20.10 28.4
20.68 13.3
22.72 14.7
25.21 25.8
26.02 21.2
在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖包含在表25中的2θ值處的一個或多個峰。在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖基本上如圖16所示。
在另一個實施方案中，所述草酸鹽晶型A在差示掃描量熱分析中在131.4±2℃和192.8±2℃具有吸熱峰。
在另一個實施方案中，所述草酸鹽晶型A在熱解重量分析中，在150℃時失重為3.91±0.5%。
化合物 A 氫溴酸鹽晶型 A
在一個實施方案中，本發明提供了化合物A氫溴酸鹽晶型A。在另一個實施方案中，氫溴酸鹽晶型A是無水合物。
在另一個實施方案中，在使用CuK α輻射得到的氫溴酸鹽晶型A的X射線粉末衍射圖中，至少包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：4.3±0.2和8.3±0.2。在另一個實施方案中，在所述X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：12.4±0.2、17.5±0.2、17.9±0.2、20.5±0.2和21.3±0.2。
在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖具有以下的特徵峰：
角度º2θ±0.2 º2θ 相對強度%
4.26 42.7
8.29 100.0
10.63 5.4
12.42 29.3
14.81 19.3
16.53 11.4
16.86 19.9
17.53 26.9
17.90 22.6
20.50 32.3
21.31 35.0
22.52 9.6
22.96 9.1
24.60 9.8
24.96 12.8
在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖包含在表26中的2θ值處的一個或多個峰。在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖基本上如圖18所示。
化合物 A 氫溴酸鹽晶型 B
在一個實施方案中，本發明提供了化合物A氫溴酸鹽晶型B。在另一個實施方案中，氫溴酸鹽晶型B是無水合物。
在另一個實施方案中，在使用CuK α輻射得到的氫溴酸鹽晶型B的X射線粉末衍射圖中，至少包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：4.1±0.2、8.1±0.2、15.0±0.2、18.4±0.2和24.4±0.2。在另一個實施方案中，在所述X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：17.8±0.2、20.3±0.2、21.3±0.2、22.0±0.2和22.8±0.2。
在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖具有以下的特徵峰：
角度º2θ±0.2 º2θ 相對強度%
4.05 100.0
8.10 69.4
10.57 17.3
12.14 19.9
12.74 16.7
13.54 14.6
15.05 74.2
15.43 18.4
16.23 19.8
17.84 27.2
18.45 82.8
19.27 12.0
20.35 37.7
21.33 24.5
22.02 33.6
22.77 32.0
23.65 12.8
24.44 55.0
26.84 14.5
30.65 12.9
在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖包含在表27中的2θ值處的一個或多個峰。在另一個實施方案中，所述X射線粉末衍射圖基本上如圖19所示。
在另一個實施方案中，所述氫溴酸鹽晶型B在差示掃描量熱分析中在101.6±2℃和113.3±2℃具有吸熱峰。
在另一個實施方案中，所述氫溴酸鹽晶型B在熱解重量分析中，在90℃時失重為4.59±0.5%。
藥物組合和 / 或藥物組合物
本發明的晶型可單獨使用或與其他治療劑組合使用，以治療各種病況或疾病。本發明的晶型及其他治療劑可同時給藥（在同一劑型中或在分開劑型中）或依序給藥。
在一個實施方案中，與本發明的晶型組合的其他治療劑為降血糖藥物。
在另一實施方案中，提供了一種藥物組合物，包括本發明的晶型；和任選地一種或多種藥學上可接受的賦形劑。
治療和 / 或預防疾病的用途
本發明又一個實施方案涉及本發明的晶型或其藥物組合物在製備藥物中的用途。具體而言：
本發明的具體實施方案涉及使用本發明的晶型或其藥物組合物在製備治療和/或預防下列疾病及醫學病症，尤其是一種或多種選自選自I型糖尿病、II型糖尿病、葡萄糖耐量降低、空腹血糖異常、高血糖症、餐後高血糖症、超重、肥胖症、高血壓症、胰島素抵抗和代謝綜合征的藥物中的用途。
本發明的又一具體實施方案涉及使用本發明的晶型或其藥物組合物在製備用於治癒糖尿病、引起糖尿病緩解或消退糖尿病的藥物中的用途。
治療和 / 或預防疾病的方法
本發明又一個實施方案，涉及治療和/或預防一種或多種選自I型糖尿病、II型糖尿病、葡萄糖耐量降低、空腹血糖異常、高血糖症、餐後高血糖症、超重、肥胖症、高血壓症、胰島素抵抗和代謝綜合征的疾病的方法，包括向受試者施用治療有效量的本發明的晶型；或，向所述受試者施用治療有效量的含有該晶型的藥物組合、藥物組合物。
本發明的治療和/或預防糖尿病及其相關疾病的方法中： 預防選自以下的代謝障礙、減緩該代謝障礙的進展、延遲或治療該代謝障礙：I型糖尿病、2型糖尿病、葡萄糖耐量降低、空腹血糖異常、高血糖症、餐後高血糖症、高血壓症、超重、肥胖症、胰島素抵抗和代謝綜合征；或 治癒糖尿病、引起糖尿病緩解或消退糖尿病；或 改善血糖控制和/或降低空腹血漿葡萄糖、餐後血漿葡萄糖和/或糖基化血紅蛋白HbA1c；或 預防、減緩、延遲或逆轉葡萄糖耐量降低、胰島素抵抗和/或代謝綜合征進展成2型糖尿病；或 預防選自以下的病症或障礙、減緩該病症或障礙進展、延遲或治療該病症或障礙：糖尿病併發症，例如白內障及微血管及大血管疾病，例如腎病、視網膜病變、神經病變、學習和記憶受損、神經變性或認知障礙、心血管或腦血管疾病、組織缺血、糖尿病足或潰瘍、動脈硬化、高血壓、內皮功能障礙、心肌梗塞、急性冠狀動脈綜合征、不穩定型心絞痛、穩定型心絞痛、中風、外周動脈阻塞性疾病、心肌病、心力衰竭、心律失常及血管再狹窄；或 降低體重和/或身體脂肪、或預防體重和/或身體脂肪增加、或促進體重和/或身體脂肪的降低；或 預防、減緩、延遲或治療胰腺β細胞退化和/或胰腺β細胞功能降低，和/或改善和/或恢復或保護胰腺β細胞功能和/或恢復胰腺胰島素分泌功能；或 預防、減緩、延遲或治療由肝臟或異位脂肪異常蓄積引起的疾病或病症；或 保持和/或改善胰島素敏感性和/或治療或預防高胰島素血症和/或胰島素抵抗；或 預防移植後新發作的糖尿病（NODAT）和/或移植後的代謝綜合征（PTMS）、減緩其進展、延遲或治療這些病症；或 預防、延遲或減少NODAT和/或PTMS相關併發症，包括微血管及大血管疾病及事件、移植排斥、感染及死亡；或 治療高尿酸血症及高尿酸血症相關病症。
在本發明的一個優選方案中，所述疾病包括I型糖尿病、II型糖尿病、葡萄糖耐量降低、空腹血糖異常、高血糖症、餐後高血糖症、超重、肥胖症、高血壓症、胰島素抵抗和代謝綜合征。
根據另一個實施方案，本發明還提供了通過口服給藥需要所述治療的受試者治療有效量的本發明的晶型或其藥物組合物治療II型糖尿病的方法。在一種實施方案中，需要所述治療的受試者是人類。在另一實施方案中，藥物組合物為片劑的形式。
根據另一個實施方案，本發明還提供了在向所述受試者施用治療有效量的本發明的晶型；或，向所述受試者施用治療有效量的含有所述晶型的藥物組合物治療的同時或相繼，施用一種或多種其他組合藥物治療的方法。
本發明的式(A)化合物、藥物組合物可以每日一次（QD）、每日兩次（BID）或者每日三次（TID）給藥。
實施例
本文所用的材料或試劑為可購買到的或由本領域通常已知的合成方法製備。
以下實施例進一步描述和說明了在本發明範圍內的實施方案。但本發明並不局限於實施例，在本發明的技術基礎上做出的若干修改和替換均屬本發明的保護範圍。
以下實施例中，可採用表1所示縮寫含義。
表1、縮寫含義表
縮寫 含義
DMF N,N-二甲基甲醯胺
HATU 2-(7-氮雜苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽
HMS5552 (S)-2-(4-(2-氯苯氧基)-2-氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-N-(1-((R)-2,3-二羥基丙基)-1H-吡唑-3-基)-4-甲基戊醯胺
MeOH 甲醇
EtOH 乙醇
IPA 異丙醇
Acetone 丙酮
MIBK 甲基異丁基酮
EtOAc 乙酸乙酯
IPAc 乙酸異丙酯
MTBE 甲基叔丁基醚
THF 四氫呋喃
2-MeTHF 2-甲基四氫呋喃
Cyclohexane 環己烷
1,4-Dioxane 1,4-二氧六環
ACN 乙腈
DCM 二氯甲烷
CHCl 3 三氯甲烷
Toluene 甲苯
n-Heptane 正庚烷
DMSO 二甲基亞碸
DMAc N,N-二甲基乙醯胺
NMP N-甲基-2-吡咯烷酮
H 2O 水
晶型的 一般鑒定方法
1、X射線粉末衍射（XRPD）
使用PANalytacal生產的X射線粉末衍射分析儀，具體採集參數如下表所示。
型號 設定值
X射線 Cu, Kα, Kα1 (Å):1.540598, Kα2 (Å):1.544426 Kα2/Kα1強度比：0.50
X射線光管設定 45 kV, 40 mA
發散狹縫 1/8º
掃描模式 連續
掃描範圍(º2Theta) 3-40
每步掃描時間(s) 46.7
掃描步長(º2Theta) 0.0263
測試時間 約5 min
2、熱重分析（TGA）、差熱掃描量熱（DCS）
使用TA 5500熱重分析儀採集TGA，使用TA 2500差示掃描量熱儀採集DCS，具體採集參數如下表所示。
參數 TGA DSC
方法 線性升溫 線性升溫
樣品盤 鋁盤，敞開 鋁盤，壓蓋/不壓蓋
溫度範圍 室溫-設置終點溫度參考具體的圖譜 25 ºC-設置終點溫度
掃描速率(ºC/min) 10 10
保護氣體 氮氣 氮氣
3、調製差示掃描量熱（mDSC）
使用TA 2500差示掃描量熱儀採集mDSC，具體採集參數如下表所示。
參數 設定值
測試模式 常規mDSC
振幅 1.0 ºC
調製週期 60 s
掃描速率 3.0 ºC/min
保護氣體 氮氣，50.00 mL/min
4、液態氫譜核磁（Solution 1H NMR）
液態氫譜核磁譜圖在Bruker 400M核磁共振儀上採集，DMSO-d6作為溶劑。
5、超高效液相色譜/離子色譜（UPLC/IC）
試驗中濃度測試是由Waters H-Class超高效液相色譜儀測試，離子的成鹽莫爾比測試是由離子色譜測試，分析條件如下表。
超高效液相色譜測試條件
液相色譜儀 Waters H-Class，具備PDA檢測器
色譜柱 Waters BEH C18, 50×2.1 mm, 1.7 µm
A: 0.1% TFA的H 2O溶液
流動相 B: 0.1% TFA的ACN溶液
時間(分鐘)      %B
0.0             10
3.0             90
4.0             90
4.1             10
6.0             10
運行時間 6.0 min
流動相流速 1.0 mL/min
進樣體積 2 µL
檢測波長 UV at 254 nm
柱溫 40 ºC
進樣器溫度 RT
稀釋劑 ACN/H 2O (1:1, v/v)
離子色譜儀測試條件
離子色譜儀 ThermoFisher ICS-1100
色譜柱 IonPac AS18 Analytical Column, 250*4 mm
流動相 25 mM NaOH
進樣體積 25 µL
流速 1.0 mL/min
溫度 35 ºC
柱溫 35 ºC
電流 80 mA
運行時間 16 min
實施例 1 ：化合物 A 的製備
合成步驟：
將1.73 g（14.1 mmol, 1.3 eq.）煙酸溶於DMF中，0°C下加入4.19 g（32.4 mmol, 3.0 eq.）二異丙基乙胺和5.34 g HATU（14.0 mmol, 1.3 eq.），0 °C下攪拌反應30分鐘，然後分批加入5.0 g （10.8 mmol, 1.0 eq.）化合物HMS5552。室溫下攪拌反應20 h。加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取三次，合併有機相，飽和鹽水洗滌，無水硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮，製備色譜純化得3.3 g化合物A（產率53.7%, 粉棕色固體）。
對化合物A進行X射線粉末衍射和TGA/mDSC分析（熱解重量分析/調製差示掃描量熱分析），發現其為無定形（圖1），TGA/mDSC結果（圖2）顯示樣品加熱至150 ºC時有6.06%的失重，其玻璃化轉變溫度為32.8 ºC （中間溫度）。
MS[M+H] +: 568.11； 1H-NMR (d 6-DMSO, 400 MHz): δ 10.81(s, 1H), 9.16(s, 1H), 8.82-8.84(d, J=4.52, 1H), 8.32-8.34(d, J=8.00, 1H), 7.62-7.66(t, J=8.78, 2H), 7.57-7.60(dd, J1=7.88, J2=4.68, 1H), 7.52-7.54(d, J=8.04, 1H), 7.45-7.49(t, J=7.72, 1H), 7.35-7.39(t, J=7.62, 1H), 6.45(s, 1H), 5.40-5.60(br, 1H), 4.89-4.92(dd, J1=10.60, J2=4.72, 1H), 4.80(s, 1H), 4.60-4.64(d, J=18.44, 1H), 4.012-4.29(m, 6H), 1.68-1.80(m, 1H), 1.48-1.62(m, 1H), 1.32-1.50(m, 1H), 0.94-0.95(d, J=6.52, 3H), 0.90-0.92(d, J=6.52, 3H)。
實施例 2 ：化合物 A 在人工模擬胃液 (SGF) 中的穩定性實驗
人工模擬胃液（SGF）的製備：取0.04 g NaCl和0.064 g胃蛋白酶，溶於0.14 mL鹽酸中，加水至20 mL。供試溶液的pH約為1.20±0.05。
化合物A工作溶液的製備：將5 μL濃度30 mM的化合物A儲備溶液加入745 μL DMSO中，得到200 μM化合物A工作溶液。
1)    取2 μL濃度200 μM化合物A工作溶液，加入到96孔深孔板中對應的T0、T60、T120、T360和T1440孔中（n=2）。
2)    除T0外，分別取198 μL SGF溶液到前述各時間點（60、120、360和1440分鐘）的樣品孔中，使待測物終濃度為2 μM。該培養體系中DMSO的終濃度為1%。
3)    將樣品在37°C、600 rpm下培養指定的時間。
4)    將培養相應時間點（60、120、360和1440分鐘）的樣品取出，立即與400 μL含200 ng/mL內標甲苯磺丁脲的冰乙腈充分混合。
5)    取出200 μL上清，並再次與400 μL含200 ng/mL內標甲苯磺丁脲的冰乙腈充分混合。
6)    T0樣品的配製：取198 μL SGF溶液到相應的孔中，與400 μL含200 ng/mL內標甲苯磺丁脲的冰乙腈充分混合。然後取出200 μL上清，並再次與400 μL含200 ng/mL內標甲苯磺丁脲的冰乙腈充分混合。
7)    將所有樣品在4°C、4000 rpm下離心20分鐘。
8)    取出60 μL上清與180 μL超純水充分混合，進行LC-MS/MS分析，測試供試化合物和轉化得到的化合物HMS5552濃度，並繪製保留率/生成率對培養時間圖，以評價供試化合物在人工模擬胃液（SGF）中的穩定性。
LC-MS/MS分析條件： LC: Shimadzu LC-30AD； MS: QTRAP 6500+； 自動進樣器: CTC PAL； 流動相: A: 0.1%甲酸水溶液，B: 0.1%甲酸的乙腈溶液； 色譜柱: ACQUITY UPLC Protein BEH C4 300Å 2.1*50mm Part No. 186004495； 流速：600 µL/min； 掃描模式：質譜多反應監測（MRM，multiple reaction monitoring, MRM）。
結果如表2、圖3所示。
表2 化合物A在人工模擬胃液中的穩定性數據
時間 (hr) 化合物A（%） 母藥HMS5552（%）
化合物A 0 100.00 0.92
1 90.35 0.86
2 95.99 0.87
6 90.10 1.02
24 89.48 1.63
由表2和圖3的結果可知，化合物A在人工模擬胃液中24小時保持良好的穩定性，只有很少量的化合物A降解為母藥HMS5552。
實施例 3 ：化合物 A 在人工模擬腸液 (SIF) 中的穩定性實驗
人工模擬腸液（, SIF）的製備：取0.136 g KH 2PO 4和0.2 g胰酶，溶于水中，終體積為20 mL。供試溶液的pH約為6.80±0.05。
化合物A工作溶液的製備：取10 μL濃度10 mM的化合物A儲備溶液，加入490 μL DMSO，得到200 μM化合物A工作溶液。
1)    取2 μL濃度200 μM工作溶液，加入到96孔深孔板中對應的T0、T60、T120、T360和T1440孔中（n=2）。
2)    除T0外，分別取198 μL SIF溶液到前述各時間點（60、120、360和1440分鐘）的樣品孔中，使待測物終濃度為2 μM。該培養體系中DMSO的終濃度為1%。
3)    將樣品在37°C、600 rpm下培養指定的時間。
4)    將培養相應時間點（60、120、360和1440分鐘）的樣品取出，立即與400 μL含200 ng/mL內標甲苯磺丁脲的冰乙腈充分混合。
5)    取出200 μL上清，並再次與400 μL含200 ng/mL內標甲苯磺丁脲的冰乙腈充分混合。
6)    T0樣品的配製：取198 μL SIF溶液到相應的孔中，與400 μL含200 ng/mL內標甲苯磺丁脲的冰乙腈充分混合。然後取出200 μL上清，並再次與400 μL含200 ng/mL內標甲苯磺丁脲的冰乙腈充分混合。
7)    將所有樣品在4°C、4000 rpm下離心20分鐘。
8)    取出60 μL上清與180 μL超純水充分混合，進行LC-MS/MS分析，測試化合物A和轉化得到的化合物HMS5552濃度，並繪製保留率/生成率對培養時間圖，以評價化合物A在人工模擬腸液（SIF）中的穩定性。
LC-MS/MS分析條件： LC: Shimadzu LC 30-AD; MS: API4000; 自動進樣器: CTC PAL； 流動相: A: 0.1%甲酸水溶液；B: 0.1%甲酸的乙腈溶液； 色譜柱: ACQUITY UPLC BEH C18 1.7μm 2.1 × 50mm Part No. 186002350； 掃描模式：質譜多反應監測（MRM，multiple reaction monitoring, MRM）。
結果如表3和圖4所示。
表3 化合物A在人工模擬腸液中的穩定性數據
時間 (hr) 化合物A（%） 母藥HMS5552（%）
化合物A 0 100.00 0.86
1 53.14 35.61
2 37.56 46.64
6 2.35 72.79
24 0.00 73.43
由表3和圖4的結果可知，化合物A在人工模擬腸液中出現明顯降解，並且絕大部份轉化為母藥HMS5552。
實施例 4 ：化合物 A 在人腸 S9 模擬代謝實驗
磷酸鹽緩衝溶液（PB）的製備：取73.21 g的K 2HPO 4·3H 2O（AR級）和10.78 g的KH 2PO 4（AR級），溶於超純水中，終體積為4000 mL，終濃度為100 mM。使用H 3PO 4/KOH調節pH，使最終溶液pH為7.40±0.10。
化合物A工作溶液製備：取5 μL化合物A儲備溶液（配製於DMSO中，濃度為10 mM），用995 μL乙腈稀釋，得到溶於99%乙腈的濃度為50 μM的化合物A工作溶液。
實驗主要材料如表4所示，人腸S9（HIS9）溶液的製備組分參數如表5所示。
表4 實驗主要材料
材料 型號 來源
人腸S9（HIS9） Cat. No.H0610.IS9(NP) Lot No.1710039 Xenotech
D-葡萄糖二酸-1,4-內酯 （100 mM） S0375 Sigma
表5 人腸S9溶液的製備組分參數
人腸S9混合物組分 體積（μL） 化合物A工作液濃度 終濃度
HIS9 （4 mg-蛋白/mL） 675 1.0 mg/mL 0.5mg/mL
D-葡萄糖二酸-1,4-內酯 （100 mM） 270 10 mM 5 mM
100 mM PB 1755 - -
總體積 2700 - -
使用Apricot自動化移液工作站向所有反應板（空白、T0、T5、T15、T30、T45、T60）對應的孔中加入50 μL的人腸S9溶液。
除了空白板，使用Apricot自動化工作站向所有96孔反應板（T0、T5、T15、T30、T45、T60）對應的孔中加入2 μL化合物A工作溶液。
使用Apricot自動化移液工作站，向各反應板（空白、T0、T5、T15、T30、T45、T60）對應的孔中加入48 μL的磷酸鹽緩衝溶液溶液，以啟動反應。
各反應板在37°C下培養，並開始計時。在對應的培養結束時間到達後，使用Apricot自動化工作站，向各反應板對應的孔中加入300 μL終止溶液（含200 ng/mL內標甲苯磺丁脲的冰乙腈），以終止反應。
封板，震搖10分鐘，然後在4°C、4000 rpm下離心20分鐘。離心後，從每個反應板中取出100 μL上清至對應的分析板中，並與300 μL超純水充分混合。
將各分析板密封，進行LC-MS/MS分析，測試化合物A和轉化得到的化合物HMS5552的濃度，以評價化合物A在人腸S9中的代謝轉化。
LC-MS/MS分析條件： LC: Shimadzu LC 30-AD； MS: API4000； 自動進樣器: CTC PAL； 流動相: A: 0.1%甲酸水溶液；B: 0.1%甲酸的乙腈溶液。 色譜柱: ACQUITY UPLC BEH C18 1.7μm 2.1×50mm Part No. 186002350。
結果如表6所示。
表6 化合物A的人腸S9模擬結果
時間 (min) 人腸S9
化合物A（%） 母藥HMS5552（%）
化合物A 0 100 1.1
5 0 80.0
15 0 77.2
30 0 79.8
45 0 81.2
60 0 90.5
由表6的人腸S9模擬結果可知，化合物A在人腸S9中代謝良好，在5分鐘即可完全代謝，轉化為母藥HMS5552。
實施例 5 ：採用 Caco-2 細胞雙向評估化合物 A 的滲透性的實驗
Caco-2細胞培養：將Caco-2細胞（購自美國典型培養物保藏中心，ATCC）接種於96孔培養板的聚乙烯膜（PET）上，接種濃度為1 x 10 5個細胞/cm 2。每4天更換培養基，直到第21或28天匯合形成細胞單層。
轉運體實驗方法：實驗中使用的轉運體緩衝液為含10 mM (4-(2-羥乙基)-1-呱嗪乙磺酸) （HEPES）的漢克氏（Hank’s）平衡鹽溶液（HBSS），pH為7.40±0.05。用納多洛爾，美托洛爾和地高辛作為模型滲透物進行體外滲透性研究。待測化合物A為雙向評估，測試濃度分別為2.00、10.0和30.0 μM（n=2）。地高辛為雙向評估，測試濃度為10.0 μM（n=2）。納多洛爾和美托洛爾為單向評估，測試濃度均為2.00 μM（n=2）。該培養體系中DMSO的終濃度調整至＜1%。
具體步驟：
1) 將培養板置於37±1℃、5%二氧化碳的濕度飽和的培養箱中培養2小時，不需震搖。
2) 培養完成後，將所有樣品與含有內標的乙腈混合後，於3200g下離心10分鐘。
對於10.0 μM組和30.0 μM組的化合物A的T0和供給側樣品，用空白樣本上清稀釋10倍。
3) 對於納多洛爾和美托洛爾，取200 μL上清用600 μL超純水稀釋後，用於LC-MS/MS分析。
4) 對於地高辛和測試化合物，取200 μL上清用200 μL超純水稀釋後，用於LC-MS/MS分析。
5) 使用LC-MS/MS方法，用待測物與內標的峰面積比，定量測定起始溶液、供給側溶液、接收側溶液中的化合物A、母藥HMS5552和對照化合物的濃度。
6) 化合物滲透性實驗結果如表7所示。
表7 化合物A的滲透性實驗結果
化合物A濃度(µM) 平均表觀滲透係數 P app(10 -6cm/s) 外排比 平均 回收率（%） 平均母藥HMS5552 轉化率（%）
A→B B→A A→B B→A A→B B→A
2.00 0.02977 11.9 401 52.9 87.1 26.5 5.8
10.0 0.03187 12.0 376 37.5 81.6 37.4 5.6
30.0 0.04322 11.9 276 37.6 82.2 26.8 3.4
表7的結果表明，化合物A從A側到B側的滲透性較低，而從B側到A側的滲透性高，提示化合物A很可能是外排轉運蛋白的底物。
實施例 6 ：藥代動力學研究
2組SD雄性大鼠（HMS5552組和化合物A組各6只），每組分成2小組（靜脈推注組（IV）和灌胃組（PO））。分別單次靜脈推注給予10mg/kg HMS5552或10mg/kg化合物A；或者單次灌胃給予30mg/kg HMS5552或30mg/kg化合物A。
給藥前和給藥後0.083、0.25、0.5、1、2、4、8、12、24 h，通過頸靜脈穿刺方式採集全血樣品（約0.2 mL）。所有血樣立即轉移至貼有標簽的含4 μL 0.5M K2-EDTA和10 μL複合穩定劑的預冷商品化離心管中。樣品離心前置於濕冰中，並在採集後半小時內，4°C，3200g離心10分鐘，吸取上清血漿，迅速置於乾冰中，然後保存在-60°C或更低溫度，用於LC-MS/MS分析。複合穩定劑的配方如表8所示：
表8 複合穩定劑配方
複合穩定劑組分 各組分 儲備液濃度 儲備液溶媒 體積 各組分 濃度 複合穩定劑與全血樣品比例 各組分 終濃度
檸檬酸 600 mM 水 0.5 mL 150 mM 1:20 (體積：體積)，例如：0.1mL複合穩定劑+2 mL全血 7.5 mM
苯甲基磺醯氟PMSF 400 mM DMSO 0.5 mL 100 mM 5 mM
氟化鈉NaF 400 mM 水 0.5 mL 100 mM 5 mM
二氯松Dichlorvos 400 mM 水 0.5 mL 100 mM 5 mM
採用WinNonlin™ Version 6.3藥動學軟體的非房室模型處理血漿濃度，使用線性對數梯形法方法計算藥動學參數，結果如表9所示。
表9 藥代動力學研究結果
組別 第一組 第二組
測試化合物 HMS5552 化合物A
給藥途徑 IV (母藥) PO (母藥) IV (前藥) PO (前藥) IV (母藥) PO (母藥)
C max(ng/mL) / 2459 / 0.973 / 1346
C max比(%, 前藥/母藥) / / / 0.07 / /
C max比(%, 前藥轉化的母藥/第1組的母藥) / / / / / 67.2**
T max(h)* / 1 [1-1] / 0.25 [0.25-0.25] / 1 [0.5-1]
AUC 0-last(h ng/mL) 5049 7737 576 1.4 3422 5063
AUC inf(h ng/mL) 5051 7758 577 2.05 3423 5069
AUC比(%, 前藥/母藥) / / / 0.04 / /
AUC比(%, 前藥轉化的母藥/第1組的母藥) / / / / / 80.22**
CL(mL/min/kg) 33.1 / 290 / / /
V d(L/kg) 1.66 / 2.49 / / /
T 1/2(h)* 3.51 3.34 0.33 / 3.59 2.63
生物利用度(%) / 51.2 / 0.08 / /
*:T max是中值[最小值，最大值]；**基於莫爾量換算（HMS5552和化合物A的分子量分別為462.93和568.03）。
表9結果表明，化合物A通過靜脈注射在大鼠體內代謝非常快。口服給藥時，化合物A的暴露（C max，C max比，AUC，AUC比）與化合物HMS5552相當。上述研究結果表明，在大鼠中，化合物A在胃腸道和腸細胞內轉化為化合物HMS5552，從而被吸收後進入循環系統。
實施例 7 ：藥效學研究
在C57BL/6J小鼠中評價了化合物HMS5552和化合物A的降血糖作用。
實驗方法
7組小鼠，每組8只。第1組小鼠經口給予溶媒作為對照，其他各組小鼠經口給予相應濃度的化合物A，給藥體積為5 mL/kg。化合物A給藥組的低、中、高劑量水平相當於（等莫爾）HMS5552的給藥劑量為5、15、40 mg/kg。給藥後1 h進行口服葡萄糖耐受試驗（OGTT），分別於給藥前（-60 min）、給糖前（0 min）及給糖後15 min、30 min、60 min、120 min檢測小鼠血糖；另外於給糖前（0 min）及給糖後15 min尾尖采血40 µl收集血漿用於胰島素（Insulin）檢測。
數據處理與統計分析
所有的數據被錄入到Excel文檔中，血糖結果表示為mg/dL，並以MEAN ± SEM的方式表示，多組間差異採用Graphpad Prism 8軟體以單因素方差分析（One-way analysis of variance(ANOVA)）或雙因素方差分析（Two-way analysis of variance(ANOVA)）Dunnett’s方法進行比較，P值小於0.05時被認為在統計學上有顯著性差異。
實驗結果
體重：實驗期間，各組小鼠體重相近，組間無明顯差異。
OGTT結果詳見圖5。各組小鼠-60 min（給藥前）血糖相近，組間無明顯差異。小鼠給予化合物HMS5552和化合物A後，各給藥組小鼠0 min（給糖前）血糖總體低於溶媒對照組，並有量效關係。給糖後，各組小鼠血糖明顯上升，其中：HMS5552-40mg/kg組小鼠血糖在30 min、60 min、120 min時明顯低於溶媒對照組；化合物A-49.1mg/kg組小鼠血糖在15 min、30 min、60 min、120 min時明顯低於溶媒對照組，且在30 min、60 min、120 min時明顯低於HMS5552-40mg/kg組。各給藥組小鼠AUC 0-120min均明顯低於溶媒對照組，並有量效關係；另外化合物A的中、高劑量組小鼠AUC 0-120min均明顯低於化合物HMS5552對應劑量組。數據表明化合物A在小鼠上具有良好的降糖效果。
小鼠胰島素水平詳見圖6。溶媒對照組在0 min和15 min的胰島素分別為0.13±0.02 （μg/L）和0.50±0.05 （μg/L）；HMS5552各劑量組小鼠胰島素在0 min和15 min的胰島素稍高於溶媒對照組，無明顯差異；在0 min時，化合物A高劑量組小鼠胰島素明顯高於溶媒對照組和HMS5552高劑量組；在15 min時，化合物A-18.4mg/kg組、化合物A-49.1mg/kg組小鼠胰島素明顯高於溶媒對照組，化合物A-18.4mg/kg組明顯高於HMS5552對應劑量組。
本實驗證明，本發明化合物A在C57BL/6J小鼠上有良好的降血糖作用。相比於化合物HMS5552，化合物A促進了更多的胰島素分泌，產生了更大的降糖效果。
實施例 8 ：化合物 A 起始原料的溶解度測定
選用21種單一溶劑及5種混合溶劑在室溫下（RT, 25±3 ºC）對無定形的化合物A起始原料進行了初步溶解度測定，步驟包括：稱取約2 mg的化合物A起始原料樣品至3-mL小瓶中，再逐步加入相應溶劑，直至固體溶清；若加入2 mL溶劑後樣品仍未溶清，則不再增加溶劑。根據樣品的質量、添加溶劑的體積計算出化合物A在相應溶劑中的溶解度範圍，如下表10所示。
表10 起始原料樣品在室溫下的溶解度範圍
溶劑 溶解度 (mg/mL) 溶劑 (v/v) 溶解度 (mg/mL)
MeOH S＞50.0 DCM S＞44.0
EtOH S＞46.0 n-Heptane S＜1.1
IPA S＞38.0 Toluene 20.0＜S＜40.0
Acetone S＞46.0 DMAc S＞42.0
MIBK S＞40.0 DMSO S＞44.0
EtOAc S＞48.0 NMP S＞44.0
IPAc S＞44.0 H 2O S＜1.1
MTBE 5.3＜S＜10.5 Cyclohexane S＜1.1
THF S＞40.0 EtOH/H 2O (1:2) 2.1＜S＜5.3
2-MeTHF S＞42.0 Acetone/H 2O (1:2) 5.3＜S＜10.5
1,4-Dioxane S＞42.0 EtOAc/n-Heptane (1:4) S＜1.1
ACN S＞50.0 2-MeTHF/n-Heptane (1:4) S＜1.0
CHCl 3 S＞48.0 Toluene/n-Heptane (1:1) 1.0＜S＜2.0
實施例 9 ：化合物 A 游離態的晶型篩選
基於初步溶解度結果，以無定形的化合物A作為起始原料，運用包括室溫懸浮攪拌、循環升降溫、緩慢降溫、緩慢揮發、氣液滲透和反溶劑添加的篩選方法，共設置了50個多晶型篩選試驗，具體試驗方法及結果匯總於表11中。根據所得固體的XRPD結果，發現1種游離態晶型(晶型A)，基於物理表徵結果，確定其為無水晶型。
表11 多晶型篩選試驗結果匯總
實驗方法 實驗數量 結果
室溫懸浮攪拌 12 無定形/成膠
循環升降溫 8 無定形/成膠/成油
緩慢降溫 6 游離態晶型A/成膠
緩慢揮發 6 成膠/成油
氣液滲透 7 成膠/成油
反溶劑添加 11 無定形/成膠
總計 50 游離態晶型A/無定形/成膠/成油
實施例 9.1 ：室溫懸浮攪拌
稱量每份約15 mg的無定形起始原料至HPLC小瓶中，分別加入0.5 mL表12中所列的溶劑，得到的渾濁液置於室溫下磁力攪拌（1000 rpm）約3天後，離心收集固體並進行XRPD測試。試驗結果見表12，得到無定形及成膠樣品。
表12 室溫懸浮攪拌試驗小結
試驗編號 溶劑 (v/v) 結果
A1 EtOH/H 2O (1:9) 成膠*
A2 Acetone/n-Heptane (1:9) 成膠*
A3 EtOAc/Cyclohexane (1:9) 成膠*
A4 MTBE 成膠*
A5 n-Heptane 無定形
A6 Toluene/Cyclohexane (1:4) 成膠*
A7 H 2O 成膠*
A8 ACN/H 2O (1:9) 成膠*
A9 DCM/n-Heptane (1:9) 成膠*
A10 2-MeTHF/n-Heptane (1:9) 成膠*
A11 DMSO/H 2O (1:19) 成膠*
A12 THF/n-Heptane (1:9) 成膠*
*：樣品室溫懸浮攪拌下成膠，經循環升降溫處理後仍成膠。
實施例 9.2 ：循環升降溫
採用不同的溶劑體系共設置了8個循環升降溫試驗。稱量每份約15 mg的無定形起始原料至HPLC小瓶中，分別加入0.5 mL表13中所列的溶劑，得到的懸浮液在溫度循環下(將樣品加熱至50 ºC後以0.1 ºC/分鐘的速率降溫至5 ºC，然後重複這一循環，最後樣品保持在5 ºC)，磁力攪拌(1000 rpm)，離心收集固體並進行XRPD測試。試驗結果見表13，得到無定形、成膠和成油樣品。
表13 循環升降溫試驗小結
試驗編號 溶劑 (v/v) 結果
A1 EtOH/n-Heptane (1:9) 成膠*
A2 IPAc/n-Heptane (1:9) 無定形*
A3 Acetone/H 2O (1:9) 成膠
A4 MTBE/Cyclohexane (1:1) 成膠
A5 THF/H 2O (1:9) 成膠
A6 CHCl 3/n-Hexane (1:9) 成膠
A7 DMAc/H 2O (1:9) 成膠
A8 IPAc/H 2O (1:4) 成油
*：樣品在5 ºC下澄清，最終樣品轉至-20 ºC下攪拌得到。
實施例 9.3 ：緩慢降溫
採用不同的溶劑體系共設置了6個緩慢降溫試驗。稱取每份約15 mg的無定形起始原料於3-mL小瓶中，加入1.5~3.0 mL表14中的溶劑，在50 ºC下攪拌平衡約2小時後過濾取上清液。將所得上清液放置在生化培養箱中，以0.1 ºC/分鐘從50 ºC降溫至5 ºC後並在5 ºC保持恒溫。收集析出的固體並進行XRPD測試。試驗結果見表14，緩慢降溫試驗得到游離態晶型A和成膠樣品。
表14 緩慢降溫試驗小結
試驗編號 溶劑 (v/v) 結果
A1 EtOH/H 2O (1:2) 成膠*
A2 Acetone/H 2O (1:2) 成膠 #
A3 EtOAc/n-Heptane (1:1) 成膠*
A4 MTBE 成膠*
A5 2-MeTHF/n-Heptane (1:1) 游離態晶型A**
A6 Toluene/n-Heptane (1:1) 成膠*
*：樣品在5 ºC下有少量油滴，轉至-20 ºC下放置後液體渾濁且成膠，轉至室溫敞口緩慢揮發。 #：樣品在5 ºC下澄清，轉至室溫敞口緩慢揮發。 **：樣品在5 ºC下澄清，轉至-20 ºC下放置後澄清，轉至室溫封口膜紮孔緩慢揮發。
實施例 9.4 ：緩慢揮發
採用不同的溶劑體系共設置了6個緩慢揮發試驗。稱取約15 mg的無定形起始原料至3-mL小瓶中，加入0.2~3.0 mL表15中的溶劑溶解，用封口膜封住小瓶，並在上面紮4個針孔，放置在室溫下緩慢揮發。收集所得固體並進行XRPD測試。試驗結果如表15所示，得到成膠和成油樣品。
表15 緩慢揮發試驗小結
試驗編號 溶劑 (v/v) 結果
A1 MeOH/H 2O (4:1) 成膠
A2 Acetone/n-Heptane (1:1) 成膠
A3 MTBE 成膠
A4 Toluene 成油
A5 1,4-Dioxane/n-Heptane (1:1) 成油
A6 IPAc/Cyclohexane (1:1) 成膠
實施例 9.5 ：氣液滲透
採用不同的溶劑共設置了7個氣液滲透試驗。稱取約15 mg每份的無定形起始原料至3-mL小瓶中，加入0.4~0.5mL溶劑溶解，另取20-mL的小瓶向其中加入約3 mL的反溶劑，將裝有清液的3-mL小瓶敞口置於20-mL小瓶後，密封20-mL的小瓶並於室溫下靜置。收集得到的固體並進行XRPD測試。試驗結果如表16所示，得到成膠和成油樣品。
表16 氣液滲透試驗小結
試驗編號 溶劑 反溶劑 結果
A1 MIBK n-Heptane 成膠*
A2 Toluene n-Heptane 成膠*
A3 1,4-Dioxane Cyclohexane 成膠*
A4 Toluene Cyclohexane 成膠*
A5 1,4-Dioxane H 2O 成膠*
A6 NMP H 2O 成油 #
A7 DMSO H 2O 成膠*
*：樣品經循環升降溫處理後仍成膠。 #：樣品澄清，轉至室溫敞口緩慢揮發下得到。
實施例 9.6 ：反溶劑添加
採用不同的溶劑共設置了11個反溶劑添加試驗。分別稱取約15 mg的無定形起始原料加至20-mL的小瓶內，用0.2 mL的溶劑（見表17）將固體完全溶解。向該澄清溶液中邊攪拌（1000 rpm）邊滴加表17中的反溶劑，直至有固體析出，或當反溶劑總體積加至10 mL後，無固體析出的樣品在5 ºC下懸浮攪拌，澄清樣品轉移至-20 ºC下懸浮攪拌，仍澄清的樣品轉至室溫揮發。分離析出的固體並進行XRPD測試，結果如表17所示，反溶劑添加試驗得到無定形及成膠樣品。
表17 反溶劑添加試驗小結
試驗編號 溶劑 反溶劑 結果
A1 IPA n-Heptane 成膠*
A2 IPA H 2O 無定形
A3 Acetone n-Heptane 成膠*
A4 Acetone H 2O 無定形
A5 IPAc n-Heptane 成膠*
A6 IPAc Cyclohexane 成膠*
A7 2-MeTHF n-Heptane 成膠*
A8 1,4-Dioxane n-Heptane 成膠*
A9 ACN H 2O 無定形
A10 NMP H 2O 無定形
A11 DMAc H 2O 無定形
*：樣品經循環升降溫處理後仍成膠。
綜上，實施例9.1至9.6表明，在50個多晶型篩選實驗中，游離態晶型A只在2-MeTHF/n-Heptane（1:1, v/v）體系中經緩慢降溫後在室溫緩慢揮發後得到。
實施例 9.7 ：游離態晶型 A 的表徵
XRPD分析
圖7顯示了化合物A游離態晶型A的XRPD圖譜，其中主要峰的衍射角2θº、d間距和相對強度如表18所列。
表18 游離態晶型A的XRPD尋峰數據
衍射角 [°2θ] D 間距 [Å] 相對強度 [%]
8.5364 10.36 97.61
10.0516 8.80 36.10
11.2306 7.88 13.83
12.0951 7.32 20.51
12.9134 6.86 25.90
14.1911 6.24 28.05
14.4798 6.12 36.26
15.2469 5.81 21.69
15.6676 5.66 7.36
17.7236 5.00 97.89
18.0204 4.92 100.00
18.5540 4.78 78.14
19.5544 4.54 12.92
20.1656 4.40 37.27
20.5977 4.31 45.32
21.2390 4.18 5.76
22.0149 4.04 25.10
23.1577 3.84 19.04
23.9360 3.72 21.60
25.0882 3.55 30.76
25.7424 3.46 33.74
28.6172 3.12 9.16
29.9813 2.98 6.56
DSC和TGA熱分析
TGA/DSC結果（圖8）顯示樣品加熱至150 ºC時有1.36%的失重，並在135.5 ºC （峰值溫度）有1個吸熱峰。由於游離態晶型A的TGA失重較小，且DSC圖上僅觀察到單一吸熱信號，確定其為無水晶型。
實施例 10 ：化合物 A 的鹽型/共晶篩選
以無定形的化合物A作為起始原料，選用25種酸在4種溶劑體系中共設置了100個鹽型/共晶篩選試驗。篩選試驗中共得到7種鹽型晶型和1種游離態晶型（即游離態晶型A）。所有鹽型通過X射線粉末衍射（XRPD）、熱重分析（TGA）和差示掃描量熱(DSC)進行表徵，並通過液態氫譜核磁（ 1H NMR）或超高效液相色譜與離子色譜聯用（UPLC/IC）確定成鹽莫爾比。
將約15 mg無定形原料與等莫爾比的相應酸在0.5 mL的溶劑中室溫攪拌3天，若得到固體則離心分離樣品並對固體進行XRPD表徵。結果匯總於表19中。
表19 鹽型篩選試驗結果總結
序號 酸 A: MTBE B: Toluene C: EtOAc/n-Heptane (1:4, v/v) D: EtOH/n-Heptane (1:4, v/v)
1 鹽酸 鹽酸鹽晶型A 鹽酸鹽晶型A 鹽酸鹽晶型A # 鹽酸鹽晶型A*
2 硫酸 成膠** 成膠** 成膠** 成油**
3 天門冬氨酸 成膠** 成膠** 成膠** 游離態晶型A**
4 馬來酸 成膠** 馬來酸鹽晶型B 成膠** 成油**
5 磷酸 成膠** 成膠** 成膠** 成油**
6 谷氨酸 游離態晶型A 谷氨酸 游離態晶型A # 谷氨酸**
7 黏酸 成膠** 黏酸 成膠** 成膠**
8 酒石酸 成膠** 成膠** 成膠** 成油**
9 富馬酸 成膠** 成膠** 成膠** 富馬酸 #
10 檸檬酸 成膠** 成膠** 成膠** 成油**
11 蘋果酸 成膠** 成膠** 成膠** 成油**
12 馬尿酸 成膠** 馬尿酸 成膠** 游離態晶型A #
13 乳酸 成膠** 成膠** 成膠** 成油**
14 抗壞血酸 成膠** 成膠** 成膠** 成膠**
15 琥珀酸 游離態晶型A 成膠** 成膠** 成膠**
16 己二酸 成膠** 成膠** 游離態晶型A** 成油**
17 癸二酸 成膠** 成膠** 成膠** 成膠**
18 乙酸 成膠** 成膠** 成膠** 成油**
19 1.5-萘二磺酸 無定形** 萘二磺酸鹽晶型A** 成膠** 萘二磺酸鹽晶型A**
20 對甲苯磺酸 成膠** 成膠** 成膠** 成油**
21 甲磺酸 成膠** 成膠** 成膠** 成膠**
22 苯磺酸 成膠** 成膠** 成膠** 成膠**
23 草酸 低結晶度* 草酸鹽晶型A* 草酸鹽晶型A # 成油**
24 苯甲酸 成膠** 成油** 成膠** 成油**
25 氫溴酸 氫溴酸鹽晶型A 氫溴酸鹽晶型B 氫溴酸鹽晶型B 氫溴酸鹽晶型B
26 空白 成膠** 成膠** 成膠** 成油**
*：樣品攪拌3天後略成膠，經過循環升降溫攪拌處理10天後得到。 #：樣品攪拌3天後略成膠，經過循環升降溫攪拌處理15天後得到。 **：樣品攪拌3天後略成膠，經過循環升降溫攪拌處理19天後得到。
如表19所示，在鹽型篩選試驗中共得到7種鹽型晶型和1種游離態晶型。對篩選得到的各鹽型晶型和游離態晶型A進行XRPD、TGA、DSC、1H NMR或UPLC/IC表徵。
實施例 10.1 ：鹽酸鹽晶型 A
鹽酸鹽晶型A由約15 mg起始原料與等莫爾比的鹽酸在MTBE中室溫攪拌3天，離心分離後在室溫真空乾燥18小時得到。
XRPD分析
圖9顯示了化合物A鹽酸鹽晶型A的XRPD圖譜，其中主要峰的衍射角2θº、d間距和相對強度如表20所列。
表20 鹽酸鹽晶型A的XRPD尋峰數據
衍射角 [°2θ] D 間距 [Å] 相對強度 [%]
4.0636 21.74 86.11
8.1110 10.90 30.28
10.6058 8.34 36.71
11.8939 7.44 39.18
12.1781 7.27 22.96
15.2666 5.80 66.84
15.6573 5.66 19.52
16.2844 5.44 12.14
16.6797 5.32 19.99
17.8918 4.96 29.86
18.4527 4.81 100.00
19.4462 4.56 12.55
20.4121 4.35 15.66
21.5121 4.13 23.71
22.1424 4.01 32.60
22.9392 3.88 32.02
23.7499 3.75 5.78
24.9443 3.57 25.98
26.8884 3.32 21.10
27.5304 3.24 11.86
28.2329 3.16 9.77
30.6404 2.92 6.47
1H NMR分析
鹽酸鹽晶型A的 1H NMR數據如下： 1H NMR (400 MHz, d 6-DMSO) δ 10.78(s, 1H), 9.20(d, J=2.08 Hz, 1H), 8.87-8.89(dd, J 1 =5.00 Hz, J 2 =1.68 Hz, 1H), 8.44-8.47(dt, J 1 =8.00 Hz, J 2 =2.00 Hz, 1H), 7.68-7.71(dd, J 1 =7.96 Hz, J 2 =5.04 Hz, 1H), 7.64-7.67(dd, J 1 =8.00 Hz, J 2 =1.40 Hz, 1H), 7.62-7.63(d, J=2.28 Hz, 1H), 7.51-7.54(dd, J 1 =8.12 Hz, J 2 =1.56 Hz, 1H), 7.45-7.49(td, J 1 =7.68 Hz, J 2 =1.39 Hz, 1H), 7.35-7.39(td, J 1 =7.64 Hz, J 2 =1.93 Hz, 1H), 6.44(d, J=2.28 Hz, 1H), 4.88-4.92(dd, J 1 =10.76 Hz, J 2 =4.96 Hz, 1H), 4.80(s, 1H), 4.59-4.63(d, J=18.44 Hz, 1H), 4.12-4.30(m, ov, 7H), 1.73-1.82(m, 1H), 1.56-1.60(m, 1H), 1.41-1.48(m, 1H), 0.93-0.95(d, J=6.56 Hz, 3H), 0.90-0.91(d, J=6.56 Hz, 3H)。
DSC和TGA熱分析
TGA/DSC結果（圖10）顯示樣品加熱至150 ºC時有4.91%的失重，並在125.9 ºC和177.8 ºC（峰值溫度）有2個吸熱峰。鹽酸鹽晶型A加熱至100 ºC後晶型不變，且室溫至80 ºC的TGA失重較小，確定其為無水晶型。
UPLC/IC
UPLC/IC結果顯示鹽酸鹽晶型A的莫爾比為1.0 （酸/游離態）。IC結果顯示加熱至150 ºC後樣品中氯離子含量為1.88wt%，對應酸堿莫爾比計算為0.3，因此推測80 ºC至150 ºC的TGA失重對應脫酸信號。
實施例 10.2 ：馬來酸鹽晶型 A
馬來酸鹽晶型A由約15 mg起始原料與等莫爾比的馬來酸在甲苯中室溫攪拌3天得到。
XRPD分析
圖11顯示了化合物A馬來酸鹽晶型A的XRPD圖譜，其中主要峰的衍射角2θº、d間距和相對強度如表21所列。
表21 馬來酸鹽晶型A的XRPD尋峰數據
衍射角 [°2θ] D 間距 [Å] 相對強度 [%]
6.0101 14.71 100.00
6.9189 12.78 12.62
10.4123 8.50 18.64
12.0135 7.37 12.17
15.9271 5.56 17.37
17.3842 5.10 30.76
18.4174 4.82 57.57
19.4609 4.56 8.06
21.2127 4.19 12.07
21.7575 4.08 14.37
22.9314 3.88 5.12
實施例 10.3 ：馬來酸鹽晶型 B
將上述馬來酸鹽晶型A室溫真空乾燥18小時後轉為新晶型，命名為馬來酸鹽晶型B。
XRPD分析
圖12顯示了化合物A馬來酸鹽晶型B的XRPD圖譜，其中主要峰的衍射角2θº、d間距和相對強度如表22所列。
表22 馬來酸鹽晶型B的XRPD尋峰數據
衍射角 [°2θ] D 間距 [Å] 相對強度 [%]
4.0753 21.68 79.26
8.1265 10.88 94.14
10.5018 8.42 21.46
12.1989 7.26 27.72
13.3130 6.65 13.41
15.0103 5.90 21.08
16.2444 5.46 30.99
16.6849 5.31 72.32
17.5445 5.06 60.06
18.3734 4.83 12.47
20.1676 4.40 100.00
20.4062 4.35 34.05
21.3429 4.16 67.40
22.4006 3.97 34.55
22.6907 3.92 26.72
23.1628 3.84 13.72
24.1386 3.69 49.59
24.5568 3.63 30.91
25.9706 3.43 21.67
26.5459 3.36 34.49
27.5939 3.23 20.49
29.8963 2.99 15.45
1H NMR譜圖顯示馬來酸鹽晶型B中酸與游離態的莫爾比為1.2，甲苯與API莫爾比為0.2 （約2.2 wt%）
DSC和TGA熱分析
TGA/DSC結果（圖13）顯示樣品加熱至120 ºC時有12.0%的失重，並在85.6 ºC（峰值溫度）有1個吸熱峰。
實施例 10.4 ：萘二磺酸鹽晶型 A
萘二磺酸鹽晶型A由約15 mg起始原料與等莫爾比的萘二磺酸鹽在甲苯中室溫攪拌3天，並經過循環升降溫處理後，離心分離後室溫真空乾燥2小時得到。
XRPD分析
圖14顯示了化合物A萘二磺酸鹽晶型A的XRPD圖譜，其中主要峰的衍射角2θº、d間距和相對強度如表23所列。
表23 萘二磺酸鹽晶型A的XRPD尋峰數據
衍射角 [°2θ] D 間距 [Å] 相對強度 [%]
4.0252 21.95 100.00
10.2761 8.61 31.90
11.9617 7.40 12.57
13.6808 6.47 67.56
15.4877 5.72 28.71
20.9613 4.24 22.40
22.2682 3.99 28.03
26.2169 3.40 15.07
1H NMR譜圖顯示萘二磺酸鹽晶型A中酸堿莫爾比為1.0，殘留甲苯與API的莫爾比為0.02 （0.3 wt%）。
DSC和TGA熱分析
TGA/DSC結果（圖15）顯示樣品加熱至150 ºC時有6.0%的失重，在119.2 ºC和207.9 ºC （峰值溫度）有2個吸熱峰。
實施例 10.5 ：草酸鹽晶型 A
草酸鹽晶型A由約15 mg起始原料與等莫爾比的草酸在甲苯中室溫攪拌3天，經過循環升降溫攪拌處理10天後，離心分離後在室溫真空乾燥3小時得到。
XRPD分析
圖16顯示了化合物A草酸鹽晶型A的XRPD圖譜，其中主要峰的衍射角2θº、d間距和相對強度如表24所列。
表24 草酸鹽晶型A的XRPD尋峰數據
衍射角 [°2θ] D 間距 [Å] 相對強度 [%]
5.0018 17.67 100.00
7.3700 12.00 35.55
15.0480 5.89 60.46
16.5219 5.37 41.72
17.3923 5.10 12.72
18.6326 4.76 8.67
19.3099 4.60 27.42
20.0972 4.42 28.35
20.6792 4.30 13.32
22.7159 3.91 14.72
25.2083 3.53 25.85
26.0154 3.43 21.20
DSC和TGA熱分析
TGA/DSC結果（圖17）顯示樣品加熱至150 ºC時有3.9%的失重，在125.4 ºC （起始溫度）和192.8 ºC （峰值溫度）有2個吸熱峰。
UPLC/IC
UPLC/IC結果顯示草酸鹽晶型A的莫爾比為1.1 （配體/游離態）。
實施例 10.6 ：氫溴酸鹽晶型 A
氫溴酸鹽晶型A由約15 mg起始原料與等莫爾比的氫溴酸在MTBE中室溫攪拌3天得到。室溫真空乾燥18小時後轉為游離態晶型A。
XRPD分析
圖18顯示了化合物A氫溴酸鹽晶型A的XRPD圖譜，其中主要峰的衍射角2θº、d間距和相對強度如表25所列。
表25 氫溴酸鹽晶型A的XRPD尋峰數據
衍射角 [°2θ] D 間距 [Å] 相對強度 [%]
4.2552 20.77 42.66
8.2858 10.67 100.00
10.6343 8.32 5.38
12.4183 7.13 29.34
14.8106 5.98 19.32
16.5297 5.36 11.41
16.8559 5.26 19.87
17.5323 5.06 26.90
17.9040 4.95 22.59
20.4993 4.33 32.34
21.3131 4.17 35.04
22.5235 3.95 9.58
22.9553 3.87 9.11
24.6041 3.62 9.81
24.9613 3.57 12.75
實施例 10.7 ：氫溴酸鹽晶型 B
氫溴酸鹽晶型B由約15 mg起始原料與等莫爾比的氫溴酸在甲苯中室溫攪拌3天，離心分離後在室溫真空乾燥18小時得到。
XRPD分析
圖19顯示了化合物A氫溴酸鹽晶型B的XRPD圖譜，其中主要峰的衍射角2θº、d間距和相對強度如表26所列。
表26 氫溴酸鹽晶型B的XRPD尋峰數據
衍射角 [°2θ] D 間距 [Å] 相對強度 [%]
4.0548 21.79 100.00
8.0954 10.92 69.38
10.5733 8.37 17.29
12.1371 7.29 19.94
12.7400 6.95 16.67
13.5450 6.54 14.61
15.0489 5.89 74.19
15.4264 5.74 18.36
16.2325 5.46 19.77
17.8422 4.97 27.20
18.4470 4.81 82.75
19.2677 4.61 12.01
20.3453 4.37 37.70
21.3334 4.17 24.51
22.0226 4.04 33.60
22.7663 3.91 32.00
23.6534 3.76 12.83
24.4377 3.64 54.97
26.8442 3.32 14.52
30.6471 2.92 12.88
DSC和TGA熱分析
TGA/DSC結果（圖20）顯示樣品加熱至90 ºC後失重4.6%，並在101.6和113.3 ºC （峰值溫度）有2個吸熱峰。
UPLC/IC
UPLC/IC結果顯示氫溴酸鹽晶型B的莫爾比為1.0 （酸/游離態）。
實施例 11 ：游離態晶型 A 的重複製備
如實施例10所述，在鹽型（共晶）篩選實驗中，游離態晶型A也由化合物A起始原料與等莫爾比的琥珀酸在MTBE中室溫攪拌3天，離心分離後室溫真空乾燥18小時得到。因此，使用該方法重複製備游離態晶型A。
具體地，將約105 mg起始原料與等莫爾比的琥珀酸在MTBE中室溫攪拌3天，離心分離後室溫真空乾燥3小時得到。
1H NMR譜圖顯示游離態晶型A中未檢測到琥珀酸信號，殘留MTBE與API的莫爾比為0.08 （1.2 wt%）。
此外，為研究游離態晶型A的工藝可開發性，嘗試通過溶液結晶的方法製備游離態晶型A。
具體地，稱取約50 mg無定形的化合物A起始原料於20 mL小瓶中，加入表27中相應溶劑超聲溶解固體，向瓶中加入共約5.0 mg游離態晶型A晶種，並滴加反溶劑至析出固體，並繼續在室溫下懸浮攪拌3小時，測試濕樣XRPD。樣品攪拌過夜後，離心分離，室溫敞口乾燥，並測試乾樣XRPD。結果匯總於表27，XRPD疊圖列於圖21。結果顯示Acetone/H 2O和IPAc/n-Heptane體系中均得到游離態晶型A。
表27 溶液結晶製備游離態晶型A結果匯總
試驗編號 批量 溶劑 ( 體積 /mL) 反溶劑 ( 體積 /mL) 現象 結果
A1 50 mg Acetone (0.4) H 2O (1.2) 成膠* 游離態晶型A
A2 50 mg IPAc (0.6) n-Heptane (2.0) 成膠* 游離態晶型A
*：室溫攪拌3小時後轉為混懸液。
實施例 12 ：游離態其他晶型的篩選
以游離態晶型A為起始原料，對化合物A展開進一步的多晶型篩選，以考察是否能得到其他潛在晶型，並確定相互轉化關係。
具體地，共設置了52個多晶型篩選試驗，篩選方法包括氣固滲透、室溫和50 ºC懸浮攪拌、溫度循環攪拌和研磨。根據分離出固體的X射線粉末衍射（XRPD）結果，未發現新晶型。
實施例 12.1 ：游離態晶型 A 的溶解度測定
選用20種單一溶劑在室溫下（RT, 25±3 ºC）對游離態晶型A起始原料樣品進行初步溶解度測定，步驟包括：稱取約2 mg的起始原料樣品至3-mL小瓶中，再逐步加入相應溶劑，直至固體溶清；若加入2 mL溶劑後樣品仍未溶清，則不再增加溶劑。根據樣品的質量、添加溶劑的體積計算出相應溶劑中的溶解度範圍，如表28所示，並以此數據為基礎，指導篩選試驗中的溶劑選擇。
表28 游離態晶型A在室溫下的初步溶解度
溶劑 溶解度 (mg/mL) 溶劑 溶解度 (mg/mL)
MeOH S＞42.0 1,4-Dioxane S＞40.0
EtOH 20.0＜S＜40.0 ACN 10.0＜S＜20.0
IPA 5.0＜S＜10.0 CHCl 3 S＞40.0
Acetone S＞40.0 DCM S＞40.0
MIBK 5.0＜S＜10.0 n-Heptane S＜1.1
EtOAc 20.0＜S＜40.0 Toluene S＜1.0
IPAc 5.0＜S＜10.0 DMAc S＞40.0
MTBE S＜1.0 DMSO S＞42.0
THF S＞40.0 NMP S＞40.0
2-MeTHF 20.0＜S＜40.0 H 2O S＜1.0
實施例 12.2 ：多晶型篩選
以游離態晶型A作為起始原料，共設置了52個多晶型篩選試驗，篩選方法包括氣固滲透、室溫和50 ºC懸浮攪拌、溫度循環攪拌和研磨。具體試驗方法及結果匯總於表29中。
表29 多晶型篩選試驗結果匯總
實驗方法 實驗數量 結果
氣固滲透 8 游離態晶型A/成膠
室溫懸浮攪拌 17 游離態晶型A/成膠
50 ºC 懸浮攪拌 13 游離態晶型A
溫度循環攪拌 12 游離態晶型A
研磨 2 游離態晶型A
總計 52 游離態晶型A/成膠
實施例 12.2.1 ：氣固滲透
採用不同的溶劑共設置了8個氣固滲透試驗。稱取約20 mg的游離態晶型A於3-mL小瓶中，另在20-mL小瓶中加入約3.0 mL表30中所列的溶劑，將3-mL小瓶敞口置於20-mL小瓶中後，將20-mL小瓶密封。室溫下靜置6天後收集固體並進行XRPD測試。試驗結果如表30所示，得到成膠及游離態晶型A。
表30 氣固滲透試驗小結
試驗編號 溶劑 結果
A1 EtOH 游離態晶型A
A2 Acetone 游離態晶型A
A3 EtOAc 游離態晶型A
A4 THF 成膠*
A5 H 2O 游離態晶型A
A6 Toluene 游離態晶型A
A7 1,4-Dioxane 成膠*
A8 DMSO 游離態晶型A
*：樣品在室溫下放置3天後溶清，轉至室溫下緩慢揮發得到成膠樣品。
實施例 12.2.2 ：室溫懸浮攪拌
採用不同的溶劑體系共設置了17個室溫懸浮攪拌試驗。稱量約20 mg的游離態晶型A至HPLC玻璃小瓶中，分別加入0.5 mL表31中所列的溶劑，得到的渾濁液置於室溫下磁力攪拌（1000 rpm）約3天後，離心收集固體並進行XRPD測試。試驗結果見表31，得到成膠及游離態晶型A。
表31 室溫懸浮攪拌試驗小結
試驗編號 溶劑 (v/v) 結果
A1 IPA 游離態晶型A
A2 IPAc 游離態晶型A
A3 MTBE 游離態晶型A
A4 MIBK 游離態晶型A
A5 n-Heptane 游離態晶型A
A6 Toluene 游離態晶型A
A7 H 2O 游離態晶型A
A8 MeOH/H 2O (1:9) 游離態晶型A
A9 Acetone/n-Heptane (1:9) 游離態晶型A
A10 ACN/H 2O (1:1) 成膠*
A11 DCM/n-Heptane (1:9) 游離態晶型A
A12 2-MeTHF/MTBE (1:9) 游離態晶型A
A13 DMSO/H 2O (1:9) 游離態晶型A
A14 IPA/H 2O (982:18, 水活度a w~0.2) 成膠 #
A15 IPA/H 2O (957:43, 水活度a w~0.4) 成膠 #
A16 IPA/H 2O (918:82, 水活度a w~0.6) 成膠 #
A17 IPA/H 2O (849:151, 水活度a w~0.8) 成膠 #
*：樣品在室溫下攪拌2天成油，轉至5 ºC下攪拌1天成油，轉至室溫下緩慢揮發得到成膠樣品。 #：樣品在室溫下攪拌2天澄清，轉至5 ºC下攪拌1天澄清，轉至室溫下緩慢揮發得到成膠樣品。
實施例 12.2.3 ： 50 ºC 懸浮攪拌
採用不同的溶劑體系共設置了13個50 ºC懸浮攪拌試驗。稱量約20 mg的游離態晶型A至HPLC玻璃小瓶中，分別加入0.5 mL表32中所列的溶劑，得到的懸浮液在50 ºC下磁力攪拌（1000 rpm）約3天後，離心收集固體並進行XRPD測試。試驗結果見表32，得到游離態晶型A。
表32 50 ºC 懸浮攪拌試驗小結
試驗編號 溶劑 (v/v) 結果
A1 EtOH/H 2O (1:4) 游離態晶型A
A2 IPA 游離態晶型A*
A3 MIBK 游離態晶型A
A4 MTBE 游離態晶型A
A5 n-Heptane 游離態晶型A
A6 H 2O 游離態晶型A
A7 2-MeTHF/n-Heptane (1:4) 游離態晶型A
A8 EtOAc/Toluene (1:4) 游離態晶型A
A9 ACN/MTBE (1:1) 游離態晶型A*
A10 1,4-Dioxane/MTBE (1:9) 游離態晶型A
A11 THF/Toluene (1:9) 游離態晶型A
A12 CHCl 3/n-Heptane (1:9) 游離態晶型A
A13 DMAc/H 2O (1:9) 游離態晶型A
*：樣品在 50 ºC 條件下攪拌3天澄清，轉至5 ºC攪拌1天析出固體
實施例 12.2.4 ：溫度循環攪拌
採用不同的溶劑體系共設置了12個溫度循環攪拌試驗。稱量約20 mg的游離態晶型A至HPLC玻璃小瓶中，分別加入0.5 mL表33中所列的溶劑，得到的懸浮液在溫度循環下（將樣品加熱至50 ºC後以0.1 ºC/分鐘的速率降溫至5 ºC，然後重複這一循環，最後樣品保持在5 ºC）磁力攪拌（1000 rpm），離心收集固體並進行XRPD測試。試驗結果見表33，得到游離態晶型A。
表33 溫度循環攪拌試驗小結
試驗編號 溶劑 (v/v) 結果
A1 MeOH/MTBE (1:4) 游離態晶型A
A2 IPA 游離態晶型A
A3 MTBE 游離態晶型A
A4 IPAc 游離態晶型A
A5 ACN 游離態晶型A
A6 Toluene 游離態晶型A
A7 MIBK 游離態晶型A
A8 THF/H 2O (1:9) 游離態晶型A
A9 NMP/H 2O (1:9) 游離態晶型A
A10 EtOAc/n-Heptane (1:4) 游離態晶型A
A11 THF/MTBE (1:9) 游離態晶型A
A12 Acetone/n-Heptane (1:4) 游離態晶型A
實施例 12.2.5 ：研磨
採用不同的條件共設置了2個研磨試驗。分別稱取約20 mg的游離態晶型A至研缽中，分別加入20 μL表34中的溶劑，手動研磨樣品3~5分鐘。收集所得固體並進行XRPD測試。試驗結果如表34所示，得到游離態晶型A。
表34 研磨試驗小結
試驗編號 溶劑 結果
A1 N/A 游離態晶型A
A2 H 2O 游離態晶型A
綜上，以游離態晶型A作為起始原料，共設置了52個多晶型篩選試驗，根據分離出固體的XRPD結果，未發現新晶型。
實施例 13 ：鹽酸鹽晶型 B 的製備
將5 g化合物A溶解於100 mL四氫呋喃中，室溫下慢慢滴加2 mL 6N鹽酸。室溫下繼續攪拌過夜，過濾，用四氫呋喃洗滌，乾燥，得化合物A的鹽酸鹽晶型B，產率98%。
實施例 14 ：鹽酸鹽晶型的進一步篩選
以化合物A鹽酸鹽晶型B作為起始原料，共設置了50個多晶型篩選試驗，篩選方法包括緩慢揮發、溫度循環攪拌、研磨、室溫和50 ºC懸浮攪拌和反溶劑添加。根據分離出固體的X射線粉末衍射（XRPD）結果，發現3種鹽酸鹽多晶型（鹽酸鹽晶型A/B/C）及游離態晶型A，並對其進行熱重分析（TGA）、差示掃描量熱（DSC）表徵，通過離子色譜（IC）確定莫爾比。
實施例 14.1 ：鹽酸鹽晶型 B 的溶解度測定
選用20種單一溶劑及6種混合溶劑在室溫下（RT, 25±3 ºC）對鹽酸鹽晶型B起始原料樣品進行初步溶解度測定，步驟包括：稱取約2 mg的起始原料樣品至3-mL小瓶中，再逐步加入相應溶劑，直至固體溶清；若加入2 mL溶劑後樣品仍未溶清，則不再增加溶劑。根據樣品的質量、添加溶劑的體積計算出相應溶劑中的溶解度範圍，如表35所示，並以此數據為基礎，指導篩選試驗中的溶劑選擇。
表35 鹽酸鹽晶型B在室溫下的初步溶解度
溶劑(v/v) 溶解度(mg/mL) 溶劑(v/v) 溶解度(mg/mL)
MeOH S＞36.0 1,4-Dioxane S＜1.0
EtOH 10.0＜S＜20.0 ACN S＜1.1
IPA S＜1.1 CHCl 3 S＜1.1
Acetone S＜1.0 DCM S＜1.0
MIBK S＜1.0 n-Heptane S＜1.0
EtOAc S＜1.0 Toluene S＜1.0
IPAc S＜1.0 DMAc S＞40.0
MTBE S＜1.0 DMSO S＞42.0
THF S＜1.1 NMP S＞42.0
2-MeTHF S＜1.0 H 2O S＜1.0
ACN/H 2O (1:1) S＞40.0 THF/H 2O (1:1) 20.0＜S＜40.0
MeOH/H 2O (1:1) 11.0＜S＜22.0 IPA/H 2O (1:1) S＞40.0
EtOH/H 2O (1:1) 22.0＜S＜44.0 DMF/H 2O (1:1) 22.0＜S＜44.0
實施例 14.2 ：多晶型篩選
以化合物A鹽酸鹽晶型B為起始原料，共設置了50個多晶型篩選試驗，篩選方法包括緩慢揮發、溫度循環攪拌、研磨、室溫和50ºC懸浮攪拌和反溶劑添加。共發現3種鹽酸鹽多晶型（鹽酸鹽晶型A/B/C）及游離態晶型A。具體試驗方法及結果匯總於表36中。
表36 多晶型篩選試驗結果匯總
實驗方法 實驗數量 結果
緩慢揮發 3 鹽酸鹽晶型A/無定形
溫度循環攪拌 9 鹽酸鹽晶型A/B/游離態晶型A
研磨 2 鹽酸鹽晶型B/A+B
室溫懸浮攪拌 14 鹽酸鹽晶型A/B/游離態晶型A
50 ºC 懸浮攪拌 8 鹽酸鹽晶型A/B/游離態晶型A
反溶劑添加 14 鹽酸鹽晶型A/C/游離態晶型A/無定形
總計 50 鹽酸鹽晶型A/B/C/游離態晶型A/無定形
實施例 14.2.1 ：緩慢揮發
採用不同的溶劑體系共設置了3個緩慢揮發試驗。稱取約20 mg的起始原料至3-mL小瓶中，加入1.0~2.0 mL的表37中的溶劑溶解（未溶清的使用0.45 μm的PTFE濾頭過濾），用封口膜封住小瓶，並在上面紮4個針孔，放置在室溫下緩慢揮發。收集所得固體並進行XRPD測試。試驗結果如表37所示，得到鹽酸鹽晶型A及無定形。
表37 緩慢揮發試驗小結
試驗編號 溶劑 (v/v) 結果
A1 EtOH 鹽酸鹽晶型A
A2 THF/H 2O (1:1) 無定形
A3 ACN/H 2O (1:1) 無定形
實施例 14.2.2 ：溫度循環攪拌
採用不同的溶劑體系共設置了9個溫度循環攪拌試驗。稱量約20 mg的鹽酸鹽晶型B至HPLC玻璃小瓶中，分別加入0.5 mL表38中所列的溶劑，得到的懸浮液在溫度循環下（將樣品加熱至50 ºC後以0.1 ºC/分鐘的速率降溫至5 ºC，然後重複這一循環，最後樣品保持在5 ºC）磁力攪拌（1000 rpm），離心收集固體並進行XRPD測試。試驗結果見表38，得到鹽酸鹽晶型A/B及游離態晶型A。
表38 溫度循環攪拌試驗小結
試驗編號 溶劑 (v/v) 結果
A1 MeOH/MTBE (1:9) 鹽酸鹽晶型A
A2 IPA 鹽酸鹽晶型A
A3 IPAc 鹽酸鹽晶型A
A4 ACN 鹽酸鹽晶型A
A5 Toluene 鹽酸鹽晶型A
A6 Acetone/H 2O (1:9) 游離態晶型A
A7 THF 鹽酸鹽晶型B
A8 NMP/H 2O (1:9) 游離態晶型A
A9 EtOH/n-heptane (1:1) 鹽酸鹽晶型A
實施例 14.2.3 ：研磨
採用不同的條件共設置了2個研磨試驗。分別稱取約20 mg的鹽酸鹽晶型B至研缽中，分別加入20 μL的表39中的溶劑，手動研磨樣品3~5分鐘。收集所得固體並進行XRPD測試。試驗結果如表39所示，得到鹽酸鹽晶型B和鹽酸鹽晶型A+B。
表39 研磨試驗小結
試驗編號 溶劑 結果
A1 N/A 鹽酸鹽晶型B
A2 H 2O 鹽酸鹽晶型A+B
實施例 14.2.4 ：室溫懸浮攪拌
採用不同的溶劑體系共設置了14個室溫懸浮攪拌試驗。稱量約20 mg的鹽酸鹽晶型B至HPLC玻璃小瓶中，分別加入0.5 mL表40中所列的溶劑，得到的渾濁液置於室溫下磁力攪拌（1000 rpm）約3天後，離心收集固體並進行XRPD測試。試驗結果見表40，得到鹽酸鹽晶型A/B和游離態晶型A樣品。
表40 室溫懸浮攪拌試驗小結
試驗編號 溶劑 (v/v) 結果
A1 MeOH/H 2O (1:9) 游離態晶型A
A2 IPAc 鹽酸鹽晶型B
A3 MTBE 鹽酸鹽晶型A
A4 MIBK 鹽酸鹽晶型A
A5 DCM 鹽酸鹽晶型A
A6 Toluene 鹽酸鹽晶型A
A7 H 2O 游離態晶型A
A8 ACN 鹽酸鹽晶型A
A9 2-MeTHF 鹽酸鹽晶型B
A10 DMSO/H 2O (1:9) 游離態晶型A
A11 IPA/H 2O (982:18, 水活度a w~0.2) 鹽酸鹽晶型A
A12 IPA/H 2O (957:43, 水活度a w~0.4) 鹽酸鹽晶型A
A13 IPA/H 2O (918:82, 水活度a w~0.6) 鹽酸鹽晶型A
A14 IPA/H 2O (849:151, 水活度a w~0.8) 鹽酸鹽晶型A*
*：樣品在室溫下澄清，轉至5 ºC下攪拌3天澄清，轉至室溫敞口緩慢揮發析出固體。
實施例 14.2.5 ： 50 ºC 懸浮攪拌
採用不同的溶劑體系共設置了8個50 ºC懸浮攪拌試驗。稱量約20 mg的鹽酸鹽晶型B至HPLC玻璃小瓶中，分別加入0.5 mL表41中所列的溶劑，得到的懸浮液在50 ºC下磁力攪拌（1000 rpm）約3天後，離心收集固體並進行XRPD測試。試驗結果見表41，得到鹽酸鹽晶型A/B及游離態晶型A。
表41 50 ºC懸浮攪拌試驗小結
試驗編號 溶劑 (v/v) 結果
A1 EtOH/H 2O (1:9) 游離態晶型A
A2 Acetone 鹽酸鹽晶型A
A3 EtOAc 鹽酸鹽晶型A
A4 n-Heptane 鹽酸鹽晶型B
A5 H 2O 游離態晶型A
A6 THF 鹽酸鹽晶型B
A7 1,4-Dioxane 鹽酸鹽晶型B
A8 CHCl 3 鹽酸鹽晶型A
實施例 14.2.6 ：反溶劑添加
採用不同的溶劑共設置了14個反溶劑添加試驗。分別稱取約20 mg的起始原料加至20-mL的小瓶內，用0.8~1.4 mL的溶劑（見表42）將固體完全溶解（未溶清樣品使用0.45 μm的PTFE濾頭過濾得到澄清溶液）。向該澄清溶液中邊攪拌（1000 rpm）邊滴加表42中的反溶劑，直至有固體析出，或當反溶劑總體積加至10 mL後，無固體析出的樣品在5 ºC下懸浮攪拌，澄清樣品轉移至-20 ºC下懸浮攪拌，若仍澄清則轉移至室溫揮發。分離析出的固體並進行XRPD測試，結果如表42所示，反溶劑添加試驗得到鹽酸鹽晶型A/C、游離態晶型A和無定形。
表42 反溶劑添加試驗小結
試驗編號 溶劑 (v/v) 反溶劑 結果
A1 MeOH H 2O 游離態晶型A*
A2 MeOH MTBE 鹽酸鹽晶型A
A3 MeOH IPA 鹽酸鹽晶型A**
A4 MeOH Toluene 鹽酸鹽晶型A**
A5 MeOH EtOAc 鹽酸鹽晶型A
A6 ACN/H 2O (1:1) H 2O 游離態晶型A
A7 ACN/H 2O (1:1) THF 鹽酸鹽晶型C #
A8 ACN/H 2O (1:1) IPA 鹽酸鹽晶型A #
A9 NMP H 2O 游離態晶型A*
A10 NMP MTBE 鹽酸鹽晶型A
A11 DMSO H 2O 無定形*
A12 DMSO IPAc 游離態晶型A**
A13 DMAc H 2O 游離態晶型A*
A14 DMAc Toluene 鹽酸鹽晶型A**
*：樣品在室溫下成膠，轉至循環升降溫（50 ºC~ 5 ºC，0.1 ºC/min）處理後成膠，轉至室溫敞口緩慢揮發析出固體。 #：樣品在室溫下澄清，轉至5 ºC攪拌3天後澄清，轉至室溫敞口緩慢揮發析出固體。 **：樣品在室溫下澄清，轉至5 ºC攪拌3天後澄清，轉至-20 ºC攪拌1天後澄清，轉至室溫敞口緩慢揮發析出固體。
實施例 14.3 ：鹽酸鹽晶型 B
XRPD分析
圖22顯示了化合物A鹽酸鹽晶型B的XRPD圖譜，其中主要峰的衍射角2θº、d間距和相對強度如表43所列。
表43 鹽酸鹽晶型B的XRPD尋峰數據
衍射角 [°2θ] D 間距 [Å] 相對強度 [%]
4.4605 19.81 66.94
8.7286 10.13 26.07
11.0927 7.98 38.57
13.6554 6.48 21.81
14.3530 6.17 27.70
15.0742 5.88 28.45
16.4625 5.38 18.96
17.4392 5.09 18.87
18.1261 4.89 70.38
18.8298 4.71 17.61
21.3539 4.16 100.00
21.6675 4.10 44.82
22.1895 4.01 14.09
23.1699 3.84 21.40
24.3628 3.65 13.40
25.4251 3.50 7.40
25.9553 3.43 14.71
26.7822 3.33 13.92
27.4670 3.25 11.35
28.3711 3.15 10.41
29.4979 3.03 6.54
30.3649 2.94 5.76
31.3462 2.85 8.72
32.3419 2.77 7.22
34.9485 2.57 6.70
DSC和TGA熱分析
TGA/DSC結果(圖23)顯示樣品加熱至70 ºC時有1.32%的失重，在70-150 ºC時有5.32%的失重，並在123.1 ºC、135.2 ºC和187.5 ºC (峰值溫度)有3個吸熱峰。結合鹽酸鹽晶型B加熱至90 ºC後晶型不變，室溫至70ºC的TGA失重較小，確定其為無水晶型。
IC
IC結果顯示加熱至150 ºC後樣品中氯離子含量為3.52 wt%，對應酸堿莫爾比計算為0.6，因此推測TGA失重對應脫酸信號。
實施例 14.4 ：鹽酸鹽晶型 C
XRPD分析
圖24顯示了化合物A鹽酸鹽晶型C的XRPD圖譜，其中主要峰的衍射角2θº、d間距和相對強度如表44所列。
表44 鹽酸鹽晶型C的XRPD尋峰數據
衍射角 [°2θ] D 間距 [Å] 相對強度 [%]
4.1087 21.51 24.81
8.1552 10.84 78.55
8.7817 10.07 28.79
10.6086 8.34 100.00
12.2389 7.23 32.40
12.5236 7.07 17.55
13.4135 6.60 71.00
15.0471 5.89 16.21
16.7792 5.28 48.77
17.7190 5.01 57.72
19.0603 4.66 8.76
20.2194 4.39 60.20
21.5208 4.13 18.11
24.6386 3.61 19.74
26.6633 3.34 20.56
27.7318 3.22 21.71
DSC和TGA熱分析
TGA/DSC結果（圖25）顯示樣品加熱至80 ºC時有5.53%的失重，繼續加熱至150 ºC時有6.72%的失重，並在60.7 ºC、114.4 ºC和182.4 ºC （峰值溫度）處有3個吸熱峰。
IC
IC結果顯示樣品酸堿莫爾比為1.1。
為對鹽酸鹽晶型C的TGA失重進行研究，對其進行加熱試驗。XRPD結果顯示鹽酸鹽晶型C加熱至80 ºC並降至室溫晶型發生改變，出現鹽酸鹽晶型A衍射峰，加熱至150 ºC後樣品融化。IC結果顯示加熱至150 ºC後樣品中氯離子含量為2.69 wt%，對應酸堿莫爾比計算為0.4，因此推測TGA失重對應脫酸信號。
實施例 15 ：動態水吸附測試
對游離態晶型A和鹽酸鹽晶型B進行了動態水吸附測試（DVS試驗（Dynamic Vapour Sorption test））。
取一定量粉末放入樣品盤，用DVS按以下儀器方法評價樣品的吸濕性:
溫度（℃） 25
N 2流率(ml/min) 200
dm/dt (%/min) 0.002
最小平衡時間(min) 10
最大平衡時間(min) 180
相對濕度範圍(%) 濕度範圍：50%-95%-0%-95%-50%
增加或減少幅度：10% (90%-0%-90%)，5% (90%-95%-90%)
DVS試驗結果如表45所示。 表45
晶型種類 80%RH 時的水分吸附量， % 90%RH 時的水分吸附量， % 95%RH 時的水分吸附量， %
游離態晶型A 0.3556 0.4782 0.6525
鹽酸鹽晶型B 0.455 0.625 1.046
由表45和圖26和圖27可知，游離態晶型A在小於等於90%相對濕度條件下，引濕增重小於0.5%，95%的相對濕度條件下，引濕增重小於0.7%；鹽酸鹽晶型B在小於等於90%相對濕度條件下，引濕增重小於0.7%。
因此，游離態晶型A和鹽酸鹽晶型B在吸濕性方面具有優勢，適合於藥物開發，能夠滿足生產運輸儲存的藥用要求。
實施例 16 ：游離態晶型 A 在不同 pH 及生物相關介質中的溶解穩定性
檢測游離態晶型A在pH 1.0、1.2、3.0、4.5、5.0、6.8、7.0、7.4、9.0條件下，以及FaSSGF (pH 1.6)、FaSSIF (pH 6.5)、FeSSIF (pH 5.0)條件下的溶解度，並檢測試驗前後的XRPD，如圖28和圖29所示。結果顯示，在上述所有試驗條件下，游離態晶型A均沒有發生晶型轉變，因此晶型穩定。
實施例 17 ：游離態晶型 A 的強制降解穩定性測試（熱，濕熱和光照條件）
將游離態晶型A置於以下不同條件下進行強制降解穩定性測試：
稱取約10 mg樣品粉末裝入小瓶，分別置於50℃、80℃、40℃/75%RH (開放)條件下1天、2周和4周，然後進行熱穩定性評估。
稱取約10mg樣品粉分別取透明瓶、琥珀瓶、透明瓶蓋鋁箔置於燈箱中放置10天，總照度1.2×10 6Lux•hr，近紫外能量不低於200w·hr/m 2，用於光穩定性評價。
在每個時間點取樣進行HPLC和XRPD測試，以評估化學和物理穩定性。
穩定性測試前後的XRPD對比圖如圖30-33所示。
試驗條件 時間點 純度 , %
初始 0h 99.10
50℃ 24小時 99.08
2周 99.10
4周 99.11
80℃ 24小時 99.12
2周 99.12
4周 99.14
40℃/75%RH 24小時 99.09
2周 99.15
4周 99.15
光照-透明瓶 10天 99.10
光照-琥珀瓶 10天 99.17
光照-透明瓶蓋鋁箔 10天 99.17
由上表可知，在上述測試試驗條件下，游離態晶型A的晶型均沒有改變，而且純度高。游離態晶型A具有優異的高溫、濕熱穩定性；同時，光照對游離態晶型A的穩定性沒有影響。因此，游離態晶型A具有優異的強制降解穩定性。
實施例 18 ：游離態晶型 A 的高溫、高濕穩定性、光穩定性測試
HPLC條件
色譜柱 Agilent Poroshell 120 PheHex;4.6*150mm*2.7um
流動相A 5mm NH 4H 2PO 4in H 2O (pH 4.58)
流動相B ACN
波長 220nm
柱溫（℃） 40
進樣器溫度 5℃
稀釋劑 0.1% H 3PO 4in (THF: H 2O=1:1)
流率 (ml/min) 1.0
進樣體積(µl) 5
樣品濃度（mg/ml） 0.5
流動梯度表
時間（min） 流動相(%) 流動相(%)
0.00 65 35
14.00 55 45
18.00 15 85
22.00 15 85
23.00 65 35
28.00 停止
（一）游離態晶型A的高溫穩定性
稱取約300 mg游離態晶型A原料于皮式培養皿中，置於60℃烤箱內，不蓋蓋子，進行高溫穩定性試驗。所得樣品分別在6天、14天和34天取樣進行HPLC測試，結果如下表所示。
物質 0h 60℃ 6天 60℃ 14天 60℃ 34天
純度（Area%）
游離態晶型A 98.17 99.03 99.11 /
結論：樣本在60℃條件下14天仍穩定。
（二）游離態晶型A的高濕穩定性
稱取約300 mg游離態晶型A原料于皮式培養皿中，置於90%RH條件（飽和KNO 3溶液乾燥器），不蓋蓋子，進行高濕穩定性試驗。所得樣品分別在6天、14天和34天取樣進行HPLC測試，結果如下表所示。
物質 0 小時 90%RH 6天 90%RH 14天 90%RH 34天
純度（Area%）
游離態晶型A 98.17 98.99 99.09 /
結論：樣本在90%相對濕度條件下14天仍穩定。
（三）游離態晶型A的光穩定性
稱取約300 mg游離態晶型A原料於皮式培養皿中，置於陽光直射條件下，進行光穩定性試驗。所得樣品分別在4天和15天取樣進行HPLC測試，結果如下表所示。
峰名稱 0小時 光穩定性 4天 光穩定性 15天
純度（Area%）
游離態晶型A 98.17 99.07 99.10
結論：樣本在太陽光條件下15天仍穩定。
實施例 19 ：鹽酸鹽晶型 B 的高溫、高濕穩定性測試
分別稱取約10 mg鹽酸鹽晶型B原料於皮式培養皿中，置於如下表所示的條件下進行高溫、高濕穩定性試驗
物質 RT (min) 起始 60℃ 80℃
2天 5天 9天 2天 5天 9天
純度（Area%）
鹽酸鹽晶型B 13.045 99.72 99.55 99.43 99.55 95.20 94.65 96.80
物質 RT (min) 起始 25℃/75%RH 40℃/75%RH
2天 5天 9天 2天 5天 9天
純度（Area%）
鹽酸鹽晶型B 13.045 99.72 99.72 99.56 99.64 99.67 99.38 99.33
結論：鹽酸鹽晶型B在高溫和高濕條件下不如游離態晶型A穩定。
以上內容是結合具體的優選實施方式對本發明所作的進一步詳細說明，不能認定本發明的具體實施只局限於這些說明。對於本發明所屬技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明構思的前提下，還可以做出若干簡單推演或替換，都應當視為屬本發明的保護範圍。
無
圖1是起始原料樣品的XRPD圖。 圖2是起始原料樣品的TGA/mDSC圖。 圖3是化合物A與HMS5552在人工模擬胃液中的保留率/生成率-培養時間對比圖。 圖4是化合物A與HMS5552在人工模擬腸液中的保留率/生成率-培養時間對比圖。 圖5是HMS5552和化合物A在C57BL/6J小鼠中OGTT血糖-時間曲線和AUC 0-120min對比圖。圖中，相比於溶媒對照組，*表示P＜0.05，**表示P＜0.01；相比於HMS5552對應的劑量組，#表示P＜0.05，##表示P＜0.01。 圖6是HMS5552和化合物A在C57BL/6J小鼠中胰島素水平（0min和15min）的對比圖。圖中，相比於溶媒對照組，*表示P＜0.05，**表示P＜0.01；相比於HMS5552對應的劑量組，#表示P＜0.05，##表示P＜0.01。 圖7是游離態晶型A的XRPD圖。 圖8是游離態晶型A的TGA/DSC圖。 圖9是鹽酸鹽晶型A的XRPD圖。 圖10是鹽酸鹽晶型A的TGA/DSC圖。 圖11是馬來酸鹽晶型A的XRPD圖。 圖12是馬來酸鹽晶型B的XRPD圖。 圖13是馬來酸鹽晶型B的TGA/DSC圖。 圖14是萘二磺酸鹽晶型A的XRPD圖。 圖15是萘二磺酸鹽晶型A的TGA/DSC圖。 圖16是草酸鹽晶型A的XRPD圖。 圖17是草酸鹽晶型A的TGA/DSC圖。 圖18是氫溴酸鹽晶型A的XRPD圖。 圖19是氫溴酸鹽晶型B的XRPD圖。 圖20是氫溴酸鹽晶型B的TGA/DSC圖。 圖21是溶液結晶製備游離態晶型A的XRPD疊圖。 圖22是鹽酸鹽晶型B的XRPD圖。 圖23是鹽酸鹽晶型B的TGA/DSC圖。 圖24是鹽酸鹽晶型C的XRPD圖。 圖25是鹽酸鹽晶型C的TGA/DSC圖。 圖26和27是游離態晶型A和鹽酸鹽晶型B的DVS試驗。 圖28和29是游離態晶型A在不同pH及生物相關介質中的溶解穩定性試驗前後的XRPD對比圖。 圖30-33是游離態晶型A在強制降解穩定性測試前後的XRPD對比圖。

Claims (39)

  1. 一種式(A)化合物的晶型A， 式(A)； 其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，至少包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：8.5±0.2、17.7±0.2、18.0±0.2和18.6±0.2。
  2. 如請求項1所述的式(A)化合物的晶型A，其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：10.1±0.2、14.5±0.2、20.2±0.2、20.6±0.2、25.1±0.2和25.7±0.2， 和/或，其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：12.9±0.2、15.2±0.2、22.0±0.2、23.2±0.2和23.9±0.2， 和/或，其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：11.2±0.2、12.1±0.2、14.2±0.2、15.7±0.2、19.6±0.2、21.2±0.2、28.6±0.2和30.0±0.2， 或者，其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，具有以下的特徵峰： 角度º2θ±0.2 º2θ 相對強度% 8.54 97.6 10.05 36.1 11.23 13.8 12.10 20.5 12.91 25.9 14.19 28.0 14.48 36.3 15.25 21.7 15.67 7.4 17.72 97.9 18.02 100.0 18.55 78.1 19.55 12.9 20.17 37.3 20.60 45.3 21.24 5.8 22.01 25.1 23.16 19.0 23.94 21.6 25.09 30.8 25.74 33.7 28.62 9.2 29.98 6.6
    或者，其特徵在於：其具有基本上如圖7所示的X射線粉末衍射圖。
  3. 如請求項1-2中任一項的式(A)化合物的晶型A，其特徵還在於：在差示掃描量熱分析中在135.5±2℃具有吸熱峰。
  4. 如請求項1-3中任一項的式(A)化合物的晶型A，其特徵還在於：在熱解重量分析中，在150℃時失重為1.36±0.5%。
  5. 一種式(A)化合物的鹽酸鹽晶型A： 式(A)； 其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，至少包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：4.1±0.2、15.3±0.2和18.5±0.2。
  6. 如請求項5所述的式(A)化合物的鹽酸鹽晶型A，其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：8.1±0.2、10.6±0.2、11.9±0.2、22.1±0.2和22.9±0.2， 和/或，其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：12.2±0.2、17.9±0.2、21.5±0.2和24.9±0.2， 和/或，其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，具有以下的特徵峰： 角度º2θ±0.2 º2θ 相對強度% 4.06 86.1 8.11 30.3 10.61 36.7 11.89 39.2 12.18 23.0 15.27 66.8 15.66 19.5 16.28 12.1 16.68 20.0 17.89 29.9 18.45 100.0 19.45 12.6 20.41 15.7 21.51 23.7 22.14 32.6 22.94 32.0 23.75 5.8 24.94 26.0 26.89 21.1 27.53 11.9 28.23 9.8 30.64 6.5
    或者，其特徵在於：其具有基本上如圖9所示的X射線粉末衍射圖。
  7. 如請求項5-6中任一項的式(A)化合物的鹽酸鹽晶型A，其特徵還在於：在差示掃描量熱分析中在125.9±2℃和177.8±2℃具有吸熱峰。
  8. 如請求項5-7中任一項的式(A)化合物的鹽酸鹽晶型A，其特徵還在於：在熱解重量分析中，在150℃時失重為4.91±0.5%。
  9. 一種式(A)化合物的鹽酸鹽晶型B： 式(A)； 其中在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，至少包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：4.5±0.2、18.1±0.2和21.4±0.2。
  10. 如請求項9所述的式(A)化合物的鹽酸鹽晶型B，其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：11.1±0.2和21.7±0.2， 和/或，其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：8.7±0.2、13.7±0.2、14.4±0.2、15.1±0.2和23.2±0.2， 和/或，其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，具有以下的特徵峰： 角度º2θ±0.2 º2θ 相對強度% 4.46 66.9 8.73 26.1 11.09 38.6 13.66 21.8 14.35 27.7 15.07 28.4 16.46 19.0 17.44 18.9 18.13 70.4 18.83 17.6 21.35 100.0 21.67 44.8 22.19 14.1 23.17 21.4 24.36 13.4 25.43 7.4 25.96 14.7 26.78 13.9 27.47 11.4 28.37 10.4 29.50 6.5 30.36 5.8 31.35 8.7 32.34 7.2 34.95 6.7
    或者，其特徵在於：其具有基本上如圖22所示的X射線粉末衍射圖。
  11. 如請求項9-10中任一項的式(A)化合物的鹽酸鹽晶型B，其特徵還在於：在差示掃描量熱分析中在123.1±2℃、135.2±2℃和187.5±2℃具有吸熱峰。
  12. 如請求項9-11中任一項的式(A)化合物的鹽酸鹽晶型B，其特徵還在於：在熱解重量分析中，在70℃時失重為1.32±0.5%，在70-150℃時失重為5.32±0.5%。
  13. 一種式(A)化合物的鹽酸鹽晶型C： 式(A)； 其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，至少包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：8.2±0.2、10.6±0.2、13.4±0.2和20.2±0.2。
  14. 如請求項13所述的式(A)化合物的鹽酸鹽晶型C，其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：16.8±0.2和17.7±0.2， 和/或，其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：4.1±0.2、8.8±0.2和12.2±0.2， 和/或，其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，具有以下的特徵峰： 角度º2θ±0.2 º2θ 相對強度% 4.11 24.8 8.16 78.6 8.78 28.8 10.61 100.0 12.24 32.4 12.52 17.6 13.41 71.0 15.05 16.2 16.78 48.8 17.72 57.7 19.06 8.8 20.22 60.2 21.52 18.1 24.64 19.7 26.66 20.6 27.73 21.7
    或者，其特徵在於：其具有基本上如圖24所示的X射線粉末衍射圖。
  15. 如請求項13-14中任一項的式(A)化合物的鹽酸鹽晶型C，其特徵還在於：在差示掃描量熱分析中在60.7±2℃、114.4±2℃和182.4±2℃具有吸熱峰。
  16. 如請求項13-15中任一項的式(A)化合物的鹽酸鹽晶型C，其特徵還在於：在熱解重量分析中，在80℃時失重為5.53±0.5%，在80-150℃時失重為6.72±0.5%。
  17. 一種式(A)化合物的馬來酸鹽晶型A： 式(A)； 其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，至少包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：6.0±0.2和18.4±0.2。
  18. 如請求項17所述的所述的式(A)化合物的馬來酸鹽晶型A，其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：10.4±0.2、15.9±0.2和17.4±0.2， 和/或，其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：6.9±0.2、12.0±0.2、21.2±0.2和21.8±0.2， 和/或，其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，具有以下的特徵峰： 角度º2θ±0.2 º2θ 相對強度% 6.01 100.0 6.92 12.6 10.41 18.6 12.01 12.2 15.93 17.4 17.38 30.8 18.42 57.6 19.46 8.1 21.21 12.1 21.76 14.4 22.93 5.1
    或者，其特徵在於：其具有基本上如圖11所示的X射線粉末衍射圖。
  19. 一種式(A)化合物的馬來酸鹽晶型B： 式(A)； 其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，至少包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：4.1±0.2、8.1±0.2、16.7±0.2和20.2±0.2。
  20. 如請求項19所述的式(A)化合物的馬來酸鹽晶型B，其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：17.5±0.2和21.3±0.2， 和/或，其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：16.2±0.2、20.4±0.2、22.4±0.2、24.1±0.2、24.6±0.2和26.5±0.2， 和/或，其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，具有以下的特徵峰： 角度º2θ±0.2 º2θ 相對強度% 4.08 79.3 8.13 94.1 10.50 21.5 12.20 27.7 13.31 13.4 15.01 21.4 16.24 31.0 16.68 72.3 17.54 60.1 18.37 12.5 20.17 100.0 20.41 34.0 21.34 67.4 22.40 34.6 22.69 26.7 23.16 13.7 24.14 49.6 24.56 30.9 25.97 21.7 26.55 34.4 27.59 20.4 29.90 15.4
    或者，其特徵在於：其具有基本上如圖12所示的X射線粉末衍射圖。
  21. 如請求項19-20中任一項的式(A)化合物的馬來酸鹽晶型B，其特徵還在於：在差示掃描量熱分析中在85.6±2℃具有吸熱峰。
  22. 如請求項19-21中任一項的式(A)化合物的馬來酸鹽晶型B，其特徵還在於：在熱解重量分析中，在120℃時失重為12.02±0.5%。
  23. 一種式(A)化合物的萘二磺酸鹽晶型A： 式(A)； 其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，至少包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：4.0±0.2和13.7±0.2。
  24. 如請求項23所述的式(A)化合物的萘二磺酸鹽晶型A，其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：10.3±0.2、15.5±0.2、21.0±0.2和22.3±0.2， 和/或，其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，具有以下的特徵峰： 角度º2θ±0.2 º2θ 相對強度% 4.03 100.0 10.28 31.9 11.96 12.6 13.68 67.6 15.49 28.7 20.96 22.4 22.27 28.0 26.22 15.1
    或者，其特徵在於：其具有基本上如圖14所示的X射線粉末衍射圖。
  25. 如請求項23-24中任一項的式(A)化合物的萘二磺酸鹽晶型A，其特徵還在於：在差示掃描量熱分析中在119.2±2℃和207.9±2℃具有吸熱峰。
  26. 如請求項23-25中任一項的式(A)化合物的萘二磺酸鹽晶型A，其特徵還在於：在熱解重量分析中，在150℃時失重為5.97±0.5%。
  27. 一種式(A)化合物的草酸鹽晶型A： 式(A)； 其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，至少包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：5.0±0.2和15.0±0.2。
  28. 如請求項27所述的式(A)化合物的草酸鹽晶型A，其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：7.4±0.2、16.5±0.2、19.3±0.2、20.1±0.2、25.2±0.2和26.0±0.2， 和/或，其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，具有以下的特徵峰： 角度º2θ±0.2 º2θ 相對強度% 5.00 100.0 7.37 35.6 15.05 60.5 16.52 41.7 17.39 12.7 18.63 8.7 19.31 27.4 20.10 28.4 20.68 13.3 22.72 14.7 25.21 25.8 26.02 21.2
    或者，其特徵在於：其具有基本上如圖16所示的X射線粉末衍射圖。
  29. 如請求項27-28中任一項的式(A)化合物的草酸鹽晶型A，其特徵還在於：在差示掃描量熱分析中在131.4±2℃和192.8±2℃具有吸熱峰。
  30. 如請求項27-29中任一項的式(A)化合物的草酸鹽晶型A，其特徵還在於：在熱解重量分析中，在150℃時失重為3.91±0.5%。
  31. 一種式(A)化合物的氫溴酸鹽晶型A： 式(A)； 其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，至少包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：4.3±0.2和8.3±0.2。
  32. 如請求項31所述的式(A)化合物的氫溴酸鹽晶型A，其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：12.4±0.2、17.5±0.2、17.9±0.2、20.5±0.2和21.3±0.2， 和/或，其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，具有以下的特徵峰： 角度º2θ±0.2 º2θ 相對強度% 4.26 42.7 8.29 100.0 10.63 5.4 12.42 29.3 14.81 19.3 16.53 11.4 16.86 19.9 17.53 26.9 17.90 22.6 20.50 32.3 21.31 35.0 22.52 9.6 22.96 9.1 24.60 9.8 24.96 12.8
    或者，其特徵在於：其具有基本上如圖18所示的X射線粉末衍射圖。
  33. 一種式(A)化合物的氫溴酸鹽晶型B： 式(A)； 其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，至少包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：4.1±0.2、8.1±0.2、15.0±0.2、18.4±0.2和24.4±0.2。
  34. 如請求項33所述的式(A)化合物的氫溴酸鹽晶型B，其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，還包括位於以下 o2θ表示的特徵峰：17.8±0.2、20.3±0.2、21.3±0.2、22.0±0.2和22.8±0.2， 和/或，其特徵在於：在使用CuK α輻射得到的X射線粉末衍射圖中，具有以下的特徵峰： 角度º2θ±0.2 º2θ 相對強度% 4.05 100.0 8.10 69.4 10.57 17.3 12.14 19.9 12.74 16.7 13.54 14.6 15.05 74.2 15.43 18.4 16.23 19.8 17.84 27.2 18.45 82.8 19.27 12.0 20.35 37.7 21.33 24.5 22.02 33.6 22.77 32.0 23.65 12.8 24.44 55.0 26.84 14.5 30.65 12.9
    或者，其特徵在於：其具有基本上如圖19所示的X射線粉末衍射圖。
  35. 如請求項33-34中任一項的式(A)化合物的氫溴酸鹽晶型B，其特徵還在於：在差示掃描量熱分析中在101.6±2℃和113.3±2℃具有吸熱峰。
  36. 如請求項33-35中任一項的式(A)化合物的氫溴酸鹽晶型B，其特徵還在於：在熱解重量分析中，在90℃時失重為4.59±0.5%。
  37. 一種藥物組合物，其包含請求項1-36中任一項所述的晶型和一種或多種藥學上可接受的賦形劑。
  38. 一種包含請求項1-36中任一項所述的晶型或請求項37所述的藥物組合物在製備用於治療和/或預防一種或多種選自以下疾病的藥物中的用途：I型糖尿病、II型糖尿病、葡萄糖耐量降低、空腹血糖異常、高血糖症、餐後高血糖症、超重、肥胖症、高血壓症、胰島素抵抗和代謝綜合征症候群。
  39. 一種包含請求項1-36中任一項所述的晶型或請求項37所述的藥物組合物在製備用於治癒糖尿病、引起糖尿病緩解和/或消退糖尿病的藥物中的用途。
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