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TW202423929A - 用於治療補體介導之病症的醫藥化合物 - Google Patents

用於治療補體介導之病症的醫藥化合物 Download PDF

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TW202423929A
TW202423929A TW112131668A TW112131668A TW202423929A TW 202423929 A TW202423929 A TW 202423929A TW 112131668 A TW112131668 A TW 112131668A TW 112131668 A TW112131668 A TW 112131668A TW 202423929 A TW202423929 A TW 202423929A
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alkyl
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TW112131668A
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維恩卡特 瑞歐 葛達哈
伊凡斯 Ｏ 昂洋葛
周琪
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美商艾力克森製藥公司
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Abstract

本揭示案提供治療醫學病症諸如補體介導之病症，包括補體C1s介導之病症的化合物、組合物及方法。

Description

用於治療補體介導之病症的醫藥化合物
本文提供治療醫學病症，諸如補體介導之病症，包括補體C1介導之病症的醫藥化合物。
補體系統為先天免疫系統之一部分，它不適應個體生命過程中的變化，但由適應性免疫系統招募且使用。例如，它協助或補充抗體及吞噬細胞清除病原體之能力。此複雜的調節途徑可以對病原生物體做出快速反應，同時保護宿主細胞免受破壞。超過三十種蛋白質及蛋白質片段構成補體系統。此等蛋白質經由調理(增強抗原之吞噬作用)、趨化性(吸引巨噬細胞及嗜中性球)、細胞裂解(使外來細胞之膜破裂)及凝集(病原體聚類且結合在一起)發揮作用。
補體系統具有三種途徑：經典途徑、替代途徑及凝集素途徑。經典途徑係由抗體同型IgG及IgM之抗體-抗原複合物觸發。抗體-抗原複合物與C1結合，此舉啟動C4及C2之裂解，產生C3轉化酶，然後將C3裂解成C3a及C3b。C3a與其C3a受體相互作用以招募白血球，而C3b與C3轉化酶結合形成C5轉化酶。C5轉化酶將C5裂解成C5a及C5b。與C3a類似，C5a與其C5a受體相互作用以招募白血球，但C5b與C6、C7、C8相互作用，且C8及此等蛋白質一起形成圓柱體膜攻擊複合物(MAC)，導致細胞膨脹及破裂。此等免疫反應可以藉由阻止C1結合抗體-抗原複合物來抑制。
考慮到由補體系統功能失常介導之一系列嚴重疾病，顯然存在提供醫藥學上可接受之化合物、方法、組合物及製造方法以抑制有需要之患者中的補體系統之醫學需求。
因此，本揭示案提供治療由補體系統功能失常引起或由補體系統功能失常放大的病症之化合物及其用途與組合物。本揭示案亦提供抑制C1s (補體C1酯酶)，因此可以治療由C1s介導之病症的化合物、用途、組合物、組合及製程。
本揭示案提供用於治療由補體級聯(包括功能失常之級聯)介導之病症、不利地影響細胞參與正常補體活性(包括例如經典補體途徑)或對其作出反應之能力的細胞病症或異常，或對醫學治療(諸如手術或其他醫療程序或藥物或生物製藥投與、輸血或其他同種異體組織或液體投與)不期望之補體介導之反應的化合物、組合物及方法。在一些實施例中，活性化合物可以藉由抑制補體C1s充當補體經典途徑之抑制劑。
不希望受理論束縛，本揭示案係部分基於意外的發現，即本揭示案之化合物表現出優於結構相關化合物(例如，WO 2020/198062及WO2022/066774中所描述之化合物)的有利性質，諸如改善之C1s抑制活性、改善之經典途徑溶血抑制活性、改善之Caco-2滲透性、改善之口服生物可用度、改善之C1s選擇性(例如，相對於其他蛋白酶，諸如MASP-2)及/或改善之代謝穩定性。
在一個態樣中，本揭示案提供一種式(I)之化合物： (I)， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中變數A、B、L 1、L 2、X 1、X 2、R 1、R 1’、R 2、R 2’、R 3、R 3’、L及Y如本文所定義。
在另一態樣中，本揭示案提供一種表1之化合物，或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一態樣中，本揭示案提供一種醫藥組合物，其包括本文所揭示之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)及(VIIA)以及表1之化合物中的任一者)或其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接受之賦形劑。
在另一態樣中，本揭示案提供一種補體C1酯酶(C1s)介導之病症。該方法包括向有需要之個體，例如人類個體投與治療有效量的本文所揭示之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)及(VIIA)以及表1之化合物中的任一者)或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一態樣中，本揭示案提供一種本文所揭示之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)及(VIIA)以及表1之化合物中的任一者)或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療C1s介導之病症。
在另一態樣中，本揭示案提供一種本文所揭示之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)及(VIIA)以及表1之化合物中的任一者)或其醫藥學上可接受之鹽在製備用於治療C1s介導之病症的藥劑中的用途。 定義
使用標準命名法描述化合物。除非另有定義，本文中使用之所有技術及科學術語具有與本揭示案所屬領域之技術人員通常理解的相同含義。
術語「一」及「一個」並不表示數量限制，而表示至少一個所提及項目的存在。術語「或」意謂「及/或」。除非本文另有說明，數值範圍之列舉僅旨在用作個別提及落入該範圍內之各單獨值的速記方法，且將各單獨值併入說明書中，如同其在本文中個別列舉一樣。所有範圍之端點都包括在該範圍內且可獨立組合。除非本文另外指示或與上下文明顯矛盾，否則本文描述之所有方法可以以合適的順序執行。實例或示範性語言(例如，「諸如」)之使用僅旨在作為說明，且不構成對本發明之範圍的限制。
如本文所用之術語「烷氧基」係指-OR基團，其中R為如本文所定義之烷基。
如本文所用之術語「烷基」係指當未經取代時僅含有C及H的支鏈或直鏈單價飽和脂族基團。烷基之單價不包括烷基上之視情況可選之取代基。例如，若烷基附接至化合物，則烷基之單價係指其附接至化合物且不包括烷基上可能存在之任何另外的取代基。在一些實施例中，烷基可含有例如1-8、1-6、1-4或1-2個碳原子(例如C 1-C 8、C 1-C 6、C 1-C 4或C 1-C 2)。實例包括但不限於甲基、乙基、異丁基、二級丁基、三級丁基、2-甲基丙基及2,2-二甲基丙基。
如本文所用之術語「伸烷基」係指藉由自烷基之碳原子移除氫原子而獲得的二價基團。伸烷基之二價不包括伸烷基上的視情況可選之取代基。伸烷基之實例包括但不限於亞甲基、伸乙基及正伸丙基。
如本文所用之術語「胺基」係指式-NH 2之單價基團。如本文所用之「視情況經取代之胺基」係指其中一個或兩個氫原子獨立地經如本文所定義之取代基置換的胺基。
如本文所用之術語「芳基」係指環中僅含有碳原子之任何單環或稠環雙環或多環系統，其在整個環系統中之電子分佈方面具有芳香性特徵，例如，苯基、萘基或菲基。芳基可具有例如6-16、6-14或6-10個碳環原子(例如C 6-C 16、C 6-C 14、C 6-C 10、C 6、C 10、C 14或C 16)。
如本文所用之術語「伸芳基」係指藉由自芳基之碳原子移除氫原子而獲得的二價基團。伸芳基之二價不包括伸芳基上的視情況可選之取代基。伸苯基為伸芳基之非限制性實例。
如本文所用之術語「芳氧基」係指-OR基團，其中R為如本文所定義之芳基。
如本文所用之術語「碳環基」係指當未經取代時僅含有C及H之單價、飽和(即，環烷基)或不飽和、非芳族基團(例如，環烯基，其含有至少一個碳-碳雙鍵且不含碳-碳三鍵)，其可以為單環、雙環或多環(例如，三環)。碳環基可具有例如3-14個碳(例如C 3-C 4、C 3-C 5、C 3-C 6、C 3-C 7、C 3-C 8或C 3-C 14碳環基)。碳環基之實例包括但不限於環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基、環己烯基、環庚烯基及茀基。術語「碳環基」亦包括具有橋聯多環結構之環狀基團，其中一或多個碳橋聯單環之兩個不相鄰成員，例如雙環[2.2.1]庚基。
如本文所用之術語「環烷基氧基」係指-OR基團，其中R為如本文所定義之環烷基。
如本文所用之術語「鹵基」係指氟(氟基；F)、氯(氯基；Cl)、溴(溴基；Br)或碘(碘基；I)基團。
如本文所用之術語「雜芳基」係指單環、雙環或多環芳族環單環、雙環或多環基團，其含有1、2、3或4個選自N、O、S、B及P之雜原子(例如，1-4、1-3、或1或2個選自N、O及S之雜原子)作為環原子，其餘環原子為碳。在一些實施例中，雜芳基為含有至少一個5、6或7員芳族環之雙環或三環系統，該芳族環含有1、2、3或4個選自N、O、S、B或P之雜原子(例如，1-4、1-3、或1或2個選自N、O及S之雜原子)作為環原子，其餘環原子為碳。在一些實施例中，雜芳基為具有5或6個環原子之單環芳族環(即，5或6員雜芳基)。在一些實施例中，為具有8至10個環原子之雙環芳族環系統(即，8至10員雙環雜芳基)。雜芳基之實例包括但不限於吡啶基、咪唑基、咪唑并吡啶基、嘧啶基、吡唑基、三唑基、吡嗪基、呋喃基、噻吩基、異噁唑基、噻唑基、噁二唑基、噁唑基、異噻唑基、吡咯基、喹啉基、異喹啉基、四氫異喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、㖕啉基、吲唑基、吲嗪基、呔嗪基、嗒嗪基、三嗪基、異吲哚基、喋啶基、嘌呤基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、噻二唑基、呋呫基、苯并呋呫基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喏啉基、萘啶基、四氫呋喃基及呋喃并吡啶基。
如本文所用之術語「雜芳氧基」係指式-OR之單價基團，其中R為如本文所定義之雜芳基。
如本文所用之術語「雜環基」係指飽和或不飽和，非芳族，單環、雙環或多環基團，其含有1、2、3或4個選自N、O、S、B或P之雜原子(例如，1-4、1-3、或1或2個選自N、O及S之雜原子)作為環原子，其餘環原子為碳。術語「雜環基」包括例如單環3至12員環、雙環5至16員環系統、多環(例如三環) 10至18員環系統，當為雙環或多環時，其可以包括橋聯環系統。在一些實施例中，雜環基含有3-16個環原子(即，3至16員雜環基)，例如3-12個環原子(即，3至12員雜環基)或4-10個環原子(即，4至10員雜環基)。飽和雜環基之實例包括含有1至4個氮原子的飽和4至7員單環基團(例如吡咯啶基、咪唑啶基、哌啶基、吡咯啉基、氮雜環丁基、哌嗪基及吡唑啶基)；含有1至2個氧原子及1至3個氮原子的飽和4至6員單環基團(例如嗎啉基)；含有1至2個硫原子及1至3個氮原子的飽和3至6員單環基團(例如噻唑啶基)。不飽和非芳族雜環基之實例包括但不限於二氫噻吩基、二氫哌喃基、二氫呋喃基及二氫噻唑基。雜環基之其他實例包括但不限於吡咯啶基、咪唑啶基、哌啶基、吡咯啉基、吡唑啶基、哌嗪基、嗎啉基、四氫哌喃基、噻唑啶基、二氫噻吩基、2,3-二氫-苯并[1,4]二噁烷基、吲哚啉基、異吲哚啉基、二氫苯并噻吩基、二氫苯并呋喃基、異色原烷基、色原烷基、1,2-二氫喹啉基、1,2,3,4-四氫-異喹啉基、1,2,3,4-四氫-喹啉基、2,3,4,4a,9,9a-六氫-1H-3-氮雜-茀基、5,6,7-三氫-1,2,4-三唑并[3,4-a]異喹啉基、3,4-二氫-2H-苯并[1,4]噁嗪基、苯并[1,4]二噁烷基、2,3-二氫-1H-1λ-苯并[d]異噻唑-6-基、二氫哌喃基、二氫呋喃基及二氫噻唑基。「雙環雜環基」包括其中含有1、2、3或4個雜原子作為環原子之飽和或不飽和非芳族環與芳基(例如苯基)或環烷基稠合的基團。「雙環雜環基」亦包括其中如本文所定義之雜芳基稠合至含有0、1、2、3或4個雜原子作為環原子之飽和或不飽和非芳族環的基團。
如本文所用之術語「雜環基氧基」係指式-OR之單價基團，其中R為如本文所定義之雜環基。
如本文所用之術語「側氧基」係指＝O基團。
如本文所用之術語「經取代」意謂指定原子或基團上之任何一或多個氫經如本文所定義或選自指定部分組之部分置換，條件為不超過指定原子的正常價且所得化合物為穩定的。例如，當取代基為側氧基(即=O)時，則置換原子上的兩個氫。例如，經側氧基取代之吡啶基為吡啶酮。僅當取代基及/或變量之組合產生穩定之化合物或有用之合成中間物時，才為允許的。如本文所用之片語「視情況經取代之X」旨在等同於「X，其中X視情況經取代」(例如，「烷基，其中該烷基視情況經取代」)。它並不意味著特徵「X」(例如烷基) 本身為視情況可選的。如本文所用之術語「視情況經取代」係指具有0、1或更多個取代基(例如0-10個取代基、0-5個取代基或0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個取代基)。
烷基、伸烷基、烷氧基、胺基、碳環基、芳基、伸芳基、芳氧基、雜芳基及雜環基可以經以下基團取代：碳環基(例如環烷基)；芳基；雜芳基；雜環基；鹵基；OR，其中R為H、烷基、碳環基(例如環烷基)、芳基、雜芳基或雜環基；SR，其中R為H、烷基、環烷基、芳基、雜芳基或雜環基；CN；NO 2；N 3；NRR ’；其中R及R'中之每一者獨立地為H、烷基、環烷基、芳基、雜芳基或雜環基；SO 2R，其中R為H、烷基或芳基；SO 2NRR'，其中R及R'中之每一者獨立地為H、烷基或芳基；SOR，其中R為H、烷基或芳基；或P(O)(OR) 2，其中各R獨立地為H或烷基。胺基、芳基、碳環基、雜芳基及雜環基亦可經烷基取代。烷基、伸烷基、碳環基及雜環基亦可經側氧基或＝NR取代，其中R為H或烷基。烷基及伸烷基亦可經螺環碳環(例如螺環環烷基)或螺環雜環基取代。在一些實施例中，取代基進一步經一或多個如本文所述之取代基取代。例如，C 1烷基，即甲基，可以經側氧基取代以形成甲醯基且進一步經-OH或-NR 2取代以形成羧基或醯胺基。
如本文所用之術語「補體介導之病症」係指其中補體的量或活性足以在個體中引起病症之病症。
如本文所用，具有「補體C1酯酶(C1s)抑制活性」之化合物係指表現出小於100 nM之IC 50的化合物，如用如本文實例3中所述之人類補體C1s酶分析測定的。
如本文所用之術語「醫藥組合物」係指與一或多種醫藥學上可接受之賦形劑一起調配的一或多種活性化合物。在一些實施例中，本揭示案之化合物(例如，以適於在治療方案中投與之單位劑量量存在，當投與相關群體時，該治療方案顯示出實現預定治療效果之統計學上顯著的概率。在某些實施例中，醫藥組合物可以專門調配用於以固體或液體形式投與，包括適合於以下的彼等：口服投與，例如灌服劑(水性或非水性溶液或懸浮液)、錠劑或膠囊；及腸胃外投與，例如藉由皮下、肌肉內或靜脈內註射。
如本文所用，術語「醫藥學上可接受之鹽」表示在合理之醫學判斷範圍內適用於與人類及動物之組織接觸使用而沒有過度毒性、刺激性、過敏反應及其類似特性且與合理之收益/風險比相稱的所述化合物之彼等鹽。醫藥學上可接受之鹽係此項技術中眾所周知的。例如，醫藥學上可接受之鹽描述於：Berge等人, J. Pharmaceutical Sciences66:1-19, 1977及 Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, (P.H. Stahl及C.G.Wermuth編), Wiley-VCH, 2008中。此等鹽可以為涉及無機酸或有機酸之酸加成鹽。該等鹽可以在本文所述之化合物的最終分離及純化過程中 原位製備，或者藉由使遊離鹼基團與合適之酸反應而單獨製備。
如本文所用之術語「醫藥學上可接受之賦形劑」係指生物相容性且適合投與於個體之任何非活性成分(例如，能夠懸浮或溶解活性化合物之媒劑)。典型的賦形劑包括例如：抗黏劑、抗氧化劑、黏合劑、包衣劑、壓縮助劑、崩解劑、染料、潤膚劑、乳化劑、稀釋劑、成膜劑或包衣劑、調味劑、芳香劑、助流劑、潤滑劑、防腐劑、印刷油墨、吸附劑、懸浮劑或分散劑、甜味劑或水合水。一般熟習此項技術者熟悉可用作賦形劑之多種劑及材料。
如本文所用之術語「個體」可以為人類、非人類靈長類動物或其他非人類哺乳動物，諸如但不限於狗、貓、馬、牛、豬、山羊、猴、大鼠、小鼠及綿羊。在較佳實施例中，個體為人類。
如本文所使用且如此項技術中所熟知的，「治療」病狀或「治療」各種疾病及病症為用於獲得有益或期望之結果(諸如臨床結果)的方法。有益或期望之結果可以包括但不限於一或多種症狀或病狀之減輕；疾病、病症或病狀之程度減輕；疾病、病症或病狀之狀態穩定(即不惡化)；延遲或減緩疾病、病症或病狀之進展；疾病、病症或病狀之改善或緩和；及緩解(無論為部分緩解抑或全部緩解)，無論為可偵測到的抑或為不可偵測到的。「緩和」疾病、病症或病狀意謂與沒有治療的情況下之程度或時程相比，疾病、病症或病狀之程度及/或不期望的臨床表現減輕及/或進展之時程減慢或延長。
本揭示案之化合物或醫藥組合物之「治療有效量」或「有效量」係指當投與個體時有效提供治療益處的量，諸如症狀之改善或疾病本身之減少或減輕。在一個實施例中，治療有效量為足以防止患者血液、血清或組織中溶血之可偵測水準顯著增加或將使該可偵測水準顯著降低的量。
活性化合物
本揭示案提供了可用於治療由補體級聯介導之病症(例如由C1s介導之病症)的化合物及鹽。在一個態樣中，本揭示案提供一種式(I)之化合物： (I)， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： X 1為C或N； X 2為C、S或Si； R 1、R 1'、R 2、R 2'、R 3及R 3'中之每一者獨立地選自H、鹵基、羥基、視情況經取代之C 1-C 6烷基、視情況經取代之C 3-C 8環烷基、視情況經取代之C 6-C 14芳基、視情況經取代之5至10員雜環或視情況經取代之5至10員雜芳基；視情況經取代之C 1-C 6烷氧基；視情況經取代之C 6-C 14芳氧基、(視情況經取代之5至10員雜芳基)氧基；SO 2R a，其中R a為H、C 1-C 6烷基或C 3-C 8環烷基；S(O)(NH)R b，其中R b為H或C 1-C 6烷基，其中，當X 1為N時，R 1或R 1'不存在且當X 2為S時，R 2及R 2'不存在；或 R 1及R 2與各自附接的原子一起形成視情況經取代之C 3-C 8環烷基；或 R 1及R 2組合形成雙鍵；R 1'及R 2'與各自附接的原子一起形成視情況經取代之C 3-C 8環烷基；或 R 2及R 2'與它們附接的原子一起形成視情況經取代之4或5員螺環雜環；或 R 2及R 2'與它們附接的原子一起形成視情況經取代之C 3-C 8螺環環烷基；或 R 2及R 2'組合形成=C(R c) 2，其中各R c獨立地為H或鹵基； Y為 、 或 ，其中： Y 1為O、S、NR d，其中各R d獨立地為不存在、H或C 1-C 6烷基； Y 1’為O、S、NR d或C(R d) 2； Y 2及Y 3中之每一者獨立地為NR e或C(R e) 2，其中各R e獨立地為不存在；H；視情況經取代之C 1-C 6烷基；鹵基；或N(R g) 2，其中各R g獨立地為H或C 1-C 6烷基；或兩個R e組合形成側氧基； Y 4、Y 4’、Y 10及Y 13中之每一者獨立地為CR e或N； Y 5、Y 6及Y 7中之每一者獨立地為O、S、NR f或C(R f) 2，其中各R f獨立地為不存在；H；視情況經取代之C 1-C 6烷基；鹵基；或N(R g) 2；或兩個R f組合形成側氧基； Y 8及Y 9中之每一者獨立地為C(R f) 2或NR f；Y 11及Y 12中之每一者獨立地為NR e、C(R e) 2、S或O；各 獨立地為單鍵或雙鍵； R、R’、R”及R’”中之每一者獨立地為不存在、H、視情況經取代之C 1-C 6烷基、鹵基或N(R g) 2；或 兩個R組合形成側氧基；或 兩個R’組合形成側氧基；且 q為0或1； L選自鍵、 、 及 ，其中R 4為H、CH 3、CF 3或CH 2OH； L 1為鍵或視情況經取代之C 1-C 6伸烷基； L 2為鍵或O； B為視情況經取代之C 6-C 14芳基；視情況經取代之C 3-C 14碳環基；視情況經取代之5至14員雜環基；或視情況經取代之5至10員雜芳基，且 A為H或C 1-C 6烷基；或 A為與B中的環原子結合的C 1-C 2伸烷基。
在一些實施例中，Y為 。
在一些實施例中，Y為 。在一些實施例中，Y 2為N。在一些實施例中，Y 2為CR e。在一些實施例中，Y 2為CH。在一些實施例中，Y 2為CNH 2。在一些實施例中，Y 3為N。在一些實施例中，Y 3為CR e。在一些實施例中，Y 3為CH。在一些實施例中，Y 3為CNH 2。
在一些實施例中，Y為 。在一些實施例中，Y 2為NR e。在一些實施例中，Y 2為NH。在一些實施例中，Y 2為NCH 3。在一些實施例中，Y 2為C(R e) 2。在一些實施例中，Y 2為CH 2。在一些實施例中，Y 2為CHCH 3。在一些實施例中，Y 2為C(O)。在一些實施例中，Y 3為NR e。在一些實施例中，Y 3為NH。在一些實施例中，Y 3為NCH 3。在一些實施例中，Y 3為C(R e) 2。在一些實施例中，Y 3為CH 2。在一些實施例中，Y 3為CHCH 3。在一些實施例中，Y 3為C(O)。
在一些實施例中，其中Y為 、 或 ，Y 1為NR d。在一些實施例中，Y 1為NH。在一些實施例中，Y 1為NCH 3。在一些實施例中，Y 1為O。在一些實施例中，Y 1為S。
在一些實施例中，Y為 。在一些實施例中，Y 4為N。在一些實施例中，Y 2為N。在一些實施例中，Y 2為CR e。在一些實施例中，Y 2為CH。在一些實施例中，Y 3為N。在一些實施例中，Y 3為CR e。在一些實施例中，Y 3為CH。
在一些實施例中，R為H。在一些實施例中，R為CH 3。在一些實施例中，R為F。在一些實施例中，R為Cl。
在一些實施例中，R’為H。在一些實施例中，R’為CH 3。在一些實施例中，R’為NH 2。
在一些實施例中，Y為 。在一些實施例中，Y為 。在一些實施例中，Y為 。在一些實施例中，Y為 。在一些實施例中，Y為 。在一些實施例中，Y為 。在一些實施例中，Y為 。在一些實施例中，Y為 。在一些實施例中，Y為 。在一些實施例中，Y為 。在一些實施例中，Y為 。在一些實施例中，Y為 。
在一些實施例中，Y為 。
在一些實施例中，Y為 。在一些實施例中，q為0。在一些實施例中，q為1。在一些實施例中，Y 9為C(R f) 2。在一些實施例中，Y 9為CH。在一些實施例中，Y 8為C(R f) 2。在一些實施例中，Y 8為CH。在一些實施例中，Y 8為NR f。在一些實施例中，Y 8為N。在一些實施例中，Y 5為NR f。在一些實施例中，Y 5為NH。在一些實施例中，Y 6為C(R f) 2。在一些實施例中，Y 6為CH。在一些實施例中，Y 6為C(NH 2)。在一些實施例中，Y 6為NR f。在一些實施例中，Y 6為NH。在一些實施例中，Y 7為NR f。在一些實施例中，Y 7為N。在一些實施例中，Y 7為NH。在一些實施例中，Y 7為C(R f) 2。在一些實施例中，Y 7為CH。在一些實施例中，Y 6為CH 2。
在一些實施例中，Y為 。在一些實施例中，Y為 。在一些實施例中，Y為 。在一些實施例中，Y為 。在一些實施例中，Y為 。在一些實施例中，Y為 。在一些實施例中，Y為 。
在一些實施例中，Y為 。在一些實施例中，Y為 。
在一些實施例中，化合物為式(II)之化合物： (II)， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中所有變數如式(I)所定義。
在一些實施例中，B為視情況經取代之C 6-C 14芳基或視情況經取代之5至10員雜芳基。
在一些實施例中，化合物為式(III)之化合物： (III)， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中 X 3為CR 9或N； R 5、R 6及R 9中之每一者獨立地選自H、鹵基、CN、SF 5、視情況經取代之C 1-C 6烷基、視情況經取代之C 1-C 6烷氧基、S(O)(NH)CH 3、S(O) 2CH 3及S(O)(NCN)CH 3； R 7及R 8中之每一者獨立地為H、鹵基、CN、SF 5、視情況經取代之C 1-C 6烷基、視情況經取代之C 1-C 6烷氧基、視情況經取代之胺基、S(O)(NH)CH 3、S(O) 2CH 3、S(O)(NCN)CH 3、視情況經取代之C 3-C 8環烷基、視情況經取代之C 3-C 8環烷基氧基、視情況經取代之C 6-C 14芳氧基、視情況經取代之C 6-C 14芳基、視情況經取代之5至10員雜環基、視情況經取代之5至10員雜芳基、視情況經取代之(5至10員雜芳基)氧基或視情況經取代之(4至10員雜環基)氧基，前提為R 7及R 8中不超過一者為視情況經取代之C 6-C 14芳氧基、視情況經取代之C 6-C 14芳基、視情況經取代之5至10員雜芳基、視情況經取代之(5至10員雜芳基)氧基或視情況經取代之(4至10員雜環基)氧基；或 R 7及R 8與各自附接的原子一起形成視情況經取代之5至6員雜環基、視情況經取代之5至10員雜芳基或視情況經取代之C 6-C 14芳基；或 R 5及A組合形成視情況經取代之C 1-C 2伸烷基；或 R 6及R 9組合形成(C 2-C 6伸烷基)(C 6-C 14伸芳基)(C 2-C 6伸烷基)，且R 5、R 7及R 8中之每一者為H且所有其他變數如式(I)所定義。
在一些實施例中，化合物為式(IIIA)之化合物： (IIIA)， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中所有變數如式(III)所定義。
在一些實施例中，X 3為CR 9。在一些實施例中，X 3為CH。在一些實施例中，X 3為CF。在一些實施例中，X 3為N。在一些實施例中，R 7為視情況經取代之C 6-C 14芳基。在一些實施例中，R 7為視情況經取代之苯基。在一些實施例中，R 7為 。在一些實施例中，R 7為 。在一些實施例中，R 7為 。在一些實施例中，R 7為 。在一些實施例中，R 7為 。
在一些實施例中，R 7為視情況經取代之5至10員雜芳基。在一些實施例中，R 7為 。
在一些實施例中，R 7為視情況經取代之C 3-C 8環烷基氧基。在一些實施例中，R 7為 。
在一些實施例中，R 7為鹵基。在一些實施例中，R 7為Br。在一些實施例中，R 7為Cl。在一些實施例中，R 7為F。在一些實施例中，R 7為H。在一些實施例中，R 7為視情況經取代之C 1-C 6烷基。在一些實施例中，R 7為視情況經取代之CH 3。
在一些實施例中，R 8為鹵基。在一些實施例中，R 8為Br。在一些實施例中，R 8為Cl。在一些實施例中，R 8為F。在一些實施例中，R 8為H。在一些實施例中，R 8為視情況經取代之C 1-C 6烷基。在一些實施例中，R 8為視情況經取代之CH 3。
在一些實施例中，R 8為視情況經取代之C 6-C 14芳基。在一些實施例中，R 8為視情況經取代之苯基。在一些實施例中，R 8為 。
在一些實施例中，R 8為視情況經取代之C 6-C 14芳氧基。在一些實施例中，R 8為視情況經取代之苯氧基。在一些實施例中，R 8為 。在一些實施例中，R 8為 。在一些實施例中，R 8為 。在一些實施例中，R 8為 。在一些實施例中，R 8為 。在一些實施例中，R 8為 。在一些實施例中，R 8為 。在一些實施例中，R 8為 。在一些實施例中，R 8為 。在一些實施例中，R 8為 。在一些實施例中，R 8為 。在一些實施例中，R 8為 。在一些實施例中，R 8為 。在一些實施例中，R 8為 。
在一些實施例中，R 8為(視情況經取代之5至10員雜芳基)氧基。在一些實施例中，R 8為 。在一些實施例中，R 8為 。在一些實施例中，R 8為 。在一些實施例中，R 8為 。在一些實施例中，R 8為 。
在一些實施例中，R 8為視情況經取代之5至10員雜芳基。在一些實施例中，R 8為 。
在一些實施例中，R 8為視情況經取代之C 1-C 6烷氧基。在一些實施例中，R 8為 。
在一些實施例中，R 8為視情況經取代之5至10員雜環基。在一些實施例中，R 8為 。
在一些實施例中，R 7及R 8與各自附接的原子一起形成視情況經取代之5至6員雜環基。在一些實施例中，R 7及R 8與各自附接的原子一起形成 。
在一些實施例中，R 6為H。在一些實施例中，R 6為鹵基。在一些實施例中，R 6為F。在一些實施例中，R 6為視情況經取代之C 1-C 6烷基。在一些實施例中，R 6為CH 3。
在一些實施例中，R 5為H。在一些實施例中，R 5為鹵基。在一些實施例中，R 5為F。在一些實施例中，R 5為視情況經取代之C 1-C 6烷氧基。在一些實施例中，R 5為OCH 3。在一些實施例中，R 5及A組合形成視情況經取代之C 1-C 2伸烷基。在一些實施例中，R 5及A組合形成–CH 2–。
在一些實施例中，化合物為式(IV)之化合物： (IV)， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： X 4為O；C(R h) 2，其中各R h獨立地為氫、鹵基或視情況經取代之C 1-C 6烷基，或兩個R h組合形成側氧基；S(O) 2，或NR h； m選自0、1、2、3、4及5； n選自0、1、2、3及4； 各R 10及R 11獨立地為鹵基、CN、視情況經取代之C 1-C 6烷基、視情況經取代之C 1-C 6烷氧基或視情況經取代之C 3-C 8環烷基，且所有其他變數如式(I)所定義。
在一些實施例中，化合物為式(IVA)之化合物： (IVA)， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中所有變數如式(IV)所定義。
在一些實施例中，其中該化合物為式(IV)或(IVA)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，X 4為O。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。
在一些實施例中，其中該化合物為式(IV)或(IVA)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，X 4為C(R h) 2。在一些實施例中，其中該化合物為式(IV)或(IVA)之化合物，X 4為C(O)。在一些實施例中，B為 。
在一些實施例中，化合物為式(V)之化合物： (V)， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： X 4為O；C(R h) 2，其中各R h獨立地為氫、鹵基或視情況經取代之C 1-C 6烷基，或兩個R h組合形成側氧基；S(O) 2或NR h； m選自0、1、2、3、4及5； n選自0、1、2、3及4；且 各R 10及R 11獨立地為鹵基、CN、視情況經取代之C 1-C 6烷基、視情況經取代之C 1-C 6烷氧基或視情況經取代之C 3-C 8環烷基，且所有其他變數如式(I)所定義。
在一些實施例中，化合物為式(VA)之化合物： (VA)， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中所有變數如式(V)所定義。
在一些實施例中，其中該化合物為式(V)或(VA)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，X 4為O。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。
在一些實施例中，其中該化合物為式(V)或(VA)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，X 4為C(R h) 2。在一些實施例中，其中該化合物為式(V)或(VA)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，X 4為CH 2。在一些實施例中，B為： 。
在一些實施例中，其中該化合物為式(V)或(VA)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，X 4為NR h。在一些實施例中，其中該化合物為式(V)或(VA)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，X 4為NH。在一些實施例中，B為 。
在一些實施例中，B為視情況經取代之C 3-C 14碳環基或視情況經取代之5至14員雜環基。
在一些實施例中，化合物為式(VI)之化合物： (VI)， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： X 5及X 6中之每一者獨立地為鍵；O；S；C(R i) 2，其中各R i獨立地為H、OH、鹵基、視情況經取代之C 1-C 6烷基或視情況經取代之C 1-C 6烷氧基，或兩個R i組合形成側氧基；NR j，其中R j為H或C 1-C 6烷基；或SO 2； X 7為CH、CR 13或N； X 8為CH、CR 12或N； o選自0、1、2及3； p選自0、1及2； 各R 12及R 13獨立地為鹵基、視情況經取代之C 1-C 6烷基、視情況經取代之C 1-C 6烷氧基或視情況經取代之C 3-C 8環烷基，且所有其他變數如式(I)所定義。
在一些實施例中，化合物為式(VIA)之化合物： (VIA)， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中所有變數如式(VI)所定義。
在一些實施例中，化合物為式(VII)之化合物： (VII)， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： X 5及X 6中之每一者獨立地為鍵；O；S；C(R i) 2，其中各R i獨立地為H、OH、鹵基、視情況經取代之C 1-C 6烷基或視情況經取代之C 1-C 6烷氧基，或兩個R i組合形成側氧基；NR j，其中R j為H或C 1-C 6烷基；或SO 2； X 7為CH、CR 13或N； X 8為CH、CR 12或N； o選自0、1、2及3； p選自0、1及2；且 各R 12及R 13獨立地為鹵基、視情況經取代之C 1-C 6烷基、視情況經取代之C 1-C 6烷氧基或視情況經取代之C 3-C 8環烷基，且所有其他變數如式(I)所定義。
在一些實施例中，化合物為式(VIIA)之化合物： (VIIA)， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中所有變數如式(VII)所定義。
在一些實施例中，X 5為C(R i) 2。在一些實施例中，X 5為CF 2。在一些實施例中，X 5為CHCH 3。在一些實施例中，X 5為C(CH 3) 2。在一些實施例中，X 5為C(CH 3)(OH)。在一些實施例中，X 5為鍵。在一些實施例中，X 5為O。在一些實施例中，X 5為S。在一些實施例中，X 5為NR j。在一些實施例中，X 5為NH。
在一些實施例中，X 6為鍵。在一些實施例中，X 6為O。在一些實施例中，X 6為S。在一些實施例中，X 6為C(R i) 2。在一些實施例中，X 6為CF 2。在一些實施例中，X 6為CHCH 3。在一些實施例中，X 6為C(CH 3) 2。在一些實施例中，X 6為C(CH 3)(OH)。在一些實施例中，X 6為NR j。在一些實施例中，X 6為NH。
在一些實施例中，X 7為CH。在一些實施例中，X 7為N。
在一些實施例中，X 8為CH。在一些實施例中，X 8為N。
在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。
在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。
在一些實施例中，B為視情況經取代之5至10員雜芳基。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。在一些實施例中，B為 。
在一些實施例中，X 1為C且X 2為C。
在一些實施例中，R 1及R 2與各自附接的原子一起組合形成視情況經取代之C 3-C 8環烷基。在一些實施例中，R 1及R 2與各自附接的原子一起組合形成環丙基。
在一些實施例中，R 1’及R 2’與各自附接的原子一起組合形成視情況經取代之C 3-C 8環烷基。在一些實施例中，R 1’及R 2’與各自附接的原子一起組合形成環丙基。
在一些實施例中，X 1為N且X 2為C。
在一些實施例中，R 1及R 2組合形成雙鍵。
在一些實施例中，R 2及R 2’與他們附接的原子一起形成視情況經取代之4或5員螺環雜環。在一些實施例中，R 2及R 2’與他們附接的原子一起形成 。在一些實施例中，R 2及R 2’與他們附接的原子一起形成 。
在一些實施例中，R 2及R 2’與他們附接的原子一起形成視情況經取代之C 3-C 8螺環環烷基。在一些實施例中，R 2及R 2’與他們附接的原子一起形成螺環環丙基。在一些實施例中，R 2及R 2’與他們附接的原子一起形成螺環環戊基。
在一些實施例中，R 2為H。在一些實施例中，R 2為視情況經取代之C 1-C 6烷基。在一些實施例中，R 2為CH 3。在一些實施例中，R 2為CH 2F。在一些實施例中，R 2為CH 2OCH 3。在一些實施例中，R 2為CH 2O(CH 2) 4NH 2。在一些實施例中，R 2為CH 2O(CH 2) 4NHC(O)CH 3。在一些實施例中，R 2為CH 2O(CH 2) 5COOH。在一些實施例中，R 2為 。在一些實施例中，R 2為 。在一些實施例中，R 2為 。在一些實施例中，R 2為視情況經取代之視情況經取代之5至10員雜芳基。在一些實施例中，R 2為 。在一些實施例中，R 2為視情況經取代之5至10員雜環。在一些實施例中，R 2為 。
在一些實施例中，R 2’為H。在一些實施例中，R 2’為鹵基。在一些實施例中，R 2’為F。在一些實施例中，R 2’為視情況經取代之C 1-C 6烷基。在一些實施例中，R 2’為CH 3。在一些實施例中，R 2’為CF 3。在一些實施例中，R 2’為CH 2OH。在一些實施例中，R 2’為CH 2OCH 3。在一些實施例中，R 2’為CH 2O(CH 2) 4NH 2。在一些實施例中，R 2’為CH 2O(CH 2) 5COOH。在一些實施例中，R 2’為 。在一些實施例中，R 2’為 。在一些實施例中，R 2’為 。在一些實施例中，R 2’為 。在一些實施例中，R 2’為 。在一些實施例中，R 2’為視情況經取代之視情況經取代之5至10員雜芳基。在一些實施例中，R 2’為 。在一些實施例中，R 2’為 。在一些實施例中，R 2’為視情況經取代之5至10員雜環。在一些實施例中，R 2’為 。在一些實施例中，R 2’為視情況經取代之C 1-C 6烷氧基。在一些實施例中，R 2’為OCH 3。在一些實施例中，R 2’為OCHF 2。在一些實施例中，R 2’為OCF 3。在一些實施例中，R 2’為SO 2R a。在一些實施例中，R 2’為SO 2CH 3。在一些實施例中，R 2’為SO 2CH(CH 3) 2。在一些實施例中，R 2’為 。
在一些實施例中，X 1為C且X 2為Si。在一些實施例中，其中X 1為C且X 2為Si，R 2為視情況經取代之C 1-C 6烷基。在一些實施例中，其中X 1為C且X 2為Si，R 2為CH 3。在一些實施例中，其中X 1為C且X 2為Si，R 2’為視情況經取代之C 1-C 6烷基。在一些實施例中，其中X 1為C且X 2為Si，R 2’為CH 3。
在一些實施例中，X 1為C且X 2為S。
在一些實施例中，R 1為H。在一些實施例中，R 1為視情況經取代之C 1-C 6烷基。在一些實施例中，R 1為CH 3。
在一些實施例中，R 1’為H。
在一些實施例中，R 3為H。在一些實施例中，R 3為羥基。
在一些實施例中，R 3’為H。
在一些實施例中，L為鍵。在一些實施例中，L為 。在一些實施例中，L為 。在一些實施例中，L為 。在一些實施例中，R 4為H。在一些實施例中，R 4為CH 3。在一些實施例中，R 4為CF 3。在一些實施例中，R 4為CH 2OH。
在一些實施例中，L 1為鍵。在一些實施例中，L 1為視情況經取代之C 1-C 6伸烷基。在一些實施例中，L 1為–CH 2–。在一些實施例中，L 1為–(CH 2) 3–。
在一些實施例中，L 2為鍵。在一些實施例中，L 2為O。
在一些實施例中，A為H。
在另一態樣中，本揭示案提供一種表1之化合物，或其醫藥學上可接受之鹽。
在本文所述之任何態樣(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)及(VIIA)以及表1)的一些實施例中，本揭示案之化合物具有補體C1酯酶(C1s)抑制活性。 醫藥組合物
本發明之醫藥組合物含有本文所揭示之化合物中的一或多者(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)及(VIIA)以及表1之化合物中的一或多者)作為治療化合物。除了治療有效量的化合物之外，醫藥組合物亦含有醫藥學上可接受之賦形劑，其可藉由熟習此項技術者已知的方法來調配。在一些實施例中，用於治療癌症之醫藥組合物含有一或多種本文所揭示之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)及(VIIA)以及表1之化合物中的一或多者)，可與或不與用於特定病狀之其他治療劑一起調配及/或投與。本文描述了此類治療劑(第二治療劑)之實例。
本文所揭示之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)及(VIIA)以及表1之化合物)可以以游離鹼之形式或以鹽之形式使用。所有形式都在本揭示案之範圍內。
醫藥組合物(或組合物之化合物)的示範性投與途徑包括口服、舌下、口頰、經皮、皮內、肌內、腸胃外、靜脈內、動脈內、顱內、皮下、眶內、心室內、脊椎內、腹膜內、鼻內、吸入及局部投與。 用於口服投與之調配物
本發明之醫藥組合物包括調配用於口服投與的彼等(「口服劑型」)。口服劑型可以為例如錠劑、膠囊劑、液體溶液劑或混懸劑、散劑，或液體或固體晶體劑之形式，其含有活性成分與無毒醫藥學上可接受之賦形劑的混合物。此等賦形劑可以為例如惰性稀釋劑或填充劑；造粒劑及崩解劑；黏合劑；以及潤滑劑、助流劑及抗黏劑。其他醫藥學上可接受之賦形劑可以為著色劑、調味劑、增塑劑、濕潤劑、緩沖劑及其類似物。
用於口服投與之醫藥組合物亦可作為咀嚼錠、其中活性成分與惰性固體稀釋劑混合之硬明膠膠囊，或其中活性成分與水或油介質混合之軟明膠膠囊呈現。散劑、顆粒劑及丸劑可以使用上述錠劑及膠囊劑中提到的成分以習知方式使用例如混合器、流化床裝置或噴霧乾燥設備來製備。
本發明之化合物及組合物可摻入其中用於口服投與的液體形式包括水溶液、適當調味之糖漿、水或油懸浮液，及用食用油調味之乳液，以及酏劑與類似的醫藥媒劑。 用於腸胃外投與之調配物
本發明之醫藥組合物可以以如本文所述之醫藥學上可接受之腸胃外(例如，靜脈內、肌內、皮下或其類似方式)調配物投與。醫藥組合物亦可以以含有習知、無毒的醫藥學上可接受之載劑及佐劑的劑型或調配物腸胃外投與。具體而言，適合腸胃外投與之調配物包括水性及非水性無菌注射溶液，其可含有抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑及使調配物與預期接受者之血液等滲的溶質；以及可包括懸浮劑及增稠劑的水性及非水性無菌懸浮液。例如，為了製備此種組合物，可以將本發明之化合物溶解或懸浮於腸胃外可接受之液體媒劑中。可以使用之可接受的媒劑及溶劑為水；藉由添加適量鹽酸、氫氧化鈉或合適的緩沖劑調節至合適之pH的水；1,3-丁二醇；林格氏溶液(Ringer’s solution)；及等滲氯化鈉溶液。水性調配物亦可含有一或多種防腐劑，例如對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯或對羥基苯甲酸正丙酯。關於腸胃外調配物之額外資訊可以在例如美國藥典-官定處方集(United States Pharmacopeia-National Formulary，USP-NF)中找到，其全部內容以引用之方式併入本文。
腸胃外調配物可以為由USP-NF鑑定為適合腸胃外投與之五種一般類型製劑中的任何一種： (1) 「藥物注射劑」：液體製劑，其為原料藥(例如本發明之化合物)或其溶液； (2) 「注射用藥物」：作為乾燥固體之原料藥(例如，本發明之化合物)，其將與適當的無菌媒劑組合用於作為藥物注射劑腸胃外投與； (3) 「藥物可注射乳液」：原料藥(例如，本發明之化合物)之液體製劑，其溶解或分散於合適的乳液介質中； (4) 「藥物可注射懸浮液」：懸浮於合適的液體介質中之原料藥(例如，本發明之化合物)之液體製劑；及 (5) 「可注射懸浮液用藥物」：作為乾燥固體之原料藥(例如，本發明之化合物)，其將與適當的無菌媒劑組合用於作為藥物可注射懸浮液腸胃外投與。
用於腸胃外投與之示範性調配物包括在與界面活性劑例如羥丙基纖維素適當混合之水中製備之化合物的溶液。分散液亦可在甘油、液體聚乙二醇、DMSO及其含有或不含有醇之混合物中以及在油中製備。在普通儲存及使用條件下，此等製劑可能含有防腐劑以防止微生物生長。用於選擇且製備適合的調配物之習知程序及成分描述於例如Remington: The Science and Practice of Pharmacy，第23版，Adejare編，Academic Press (2020)及2021年出版之The United States Pharmacopeia and National Formulary ( USP-NF2021年第1-3期)中。
用於腸胃外投與之調配物可以例如含有無菌水、鹽水、聚伸烷基二醇(例如聚乙二醇)、植物來源的油或氫化萘。生物相容性、可生物降解之乳酸交酯聚合物、乳酸交酯/乙交酯共聚物或聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物可用於控制化合物的釋放。化合物之其他潛在有用之腸胃外遞送系統包括乙烯-乙酸乙烯酯共聚物顆粒、滲透泵、可植入輸注系統及脂質體。用於吸入之調配物可以含有例如乳糖，或者可以為含有例如聚氧乙烯-9-月桂基醚、甘膽酸鹽及去氧膽酸鹽之水溶液，或者可以為用於以滴鼻劑形式或作為凝膠投與之油性溶液。
本文所述之化合物(例如式(I)以及表1之化合物)及/或包括本文所述化合物之組合物的劑量可能取決於許多因素，諸如化合物之藥效學特性；投與方式；接收者的年齡、健康狀況及體重；症狀之性質及程度；治療頻率以及同時治療之類型(如果有)；以及化合物在待治療個體中之清除率。熟習此項技術者可以根據上述因素確定合適的劑量。一般而言，當將本文所述之化合物以介於例如0.05 mg至3000 mg (以固體形式量測)之間的每日劑量投與人類時，可獲得滿意之結果。例如，劑量範圍可以為10-1000 mg (例如50-800 mg)。
或者，可以使用患者之體重來計算劑量量。例如，投與患者之化合物或其醫藥組合物的劑量可為0.1-100 mg/kg。含有本文所揭示之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)及(VIIA)以及表1之化合物)的劑型可以例如每天一次(QD)、每天兩次(BID)、每天三次(TID)、一天四次(QID)、每隔一天一次(Q2D)、每三天一次(Q3D)，或根據需要之任何給藥方案投與。 活性化合物用於治療選定病症之用途
在一個態樣中，有效量的本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)及(VIIA)以及表1之化合物中的任一者，或其醫藥學上可接受之鹽)用於治療為炎症或免疫病狀之醫學病症，補體級聯(包括功能失常級聯)介導之病症，包括補體相關病症或補體旁路途徑(alternative complement pathway)相關病症，不利地影響細胞參與正常補體活性或對正常補體活性作出反應之能力的細胞病症或異常，或對醫學治療(諸如手術或其他醫療程序或藥物或生物製藥投與、輸血或其他同種異體組織或液體投與)不期望之補體介導之反應。
在一些實施例中，病症為自體免疫疾病。在一些實施例中，病症為癌症。在一些實施例中，病症為傳染病。在一些實施例中，病症為發炎性疾病。在一些實施例中，病症為血液疾病。在一些實施例中，病症為缺血再灌注損傷。在一些實施例中，病症為眼部疾病。在一些實施例中，病症為腎病。在一些實施例中，病症為移植排斥。在一些實施例中，病症為抗體介導之移植排斥，例如急性抗體介導之排斥。在一些實施例中，病症為血管疾病。在一些實施例中，病症為血管炎病症。在一些實施例中，病症為神經退化性病症，例如tau蛋白病。
在一些實施例中，病症為涉及補體活化之中樞神經系統(CNS)醫學病症或周圍神經系統病症。在一些實施例中，病症為獲得性腦或脊髓損傷。在一些實施例中，病症為缺血性再灌注損傷。在一些實施例中，病症為中風。在一些實施例中，病症為創傷性腦損傷(TBI)。在一些實施例中，病症為脊髓損傷(SCI)。
在一些實施例中，病症為神經發炎性病症。
在一些實施例中，神經發炎性病症為顱動脈炎。在一些實施例中，神經發炎性病症為巨大細胞動脈炎。在一些實施例中，神經發炎性病症為Holmes-Adie症候群。在一些實施例中，神經發炎性病症為包涵體肌炎(IBM)。在一些實施例中，神經發炎性病症為腦膜炎。在一些實施例中，神經發炎性病症為神經副腫瘤症候群，例如Lambert-Eaton肌無力症候群、僵人症候群、腦脊髓炎(腦及脊髓的炎症)、重症肌無力、小腦退化、邊緣及/或腦幹腦炎、神經性肌強直、眼陣攣(涉及眼球運動)或感覺神經病變。在一些實施例中，神經發炎性病症為多發性肌炎。在一些實施例中，神經發炎性病症為橫貫性脊髓炎。在一些實施例中，神經發炎性病症為血管炎，例如顳動脈炎。在一些實施例中，神經發炎性病症為蛛網膜炎。在一些實施例中，神經發炎性病症為金斯伯恩症候群(Kinsbourne syndrome)。在一些實施例中，神經發炎性疾病為眼陣攣性肌陣攣症候群(OMS)。在一些實施例中，神經發炎性病症為聖維特舞蹈病(Saint Vitus Dance)或西德納姆氏舞蹈病(Sydenham’s chorea，SD)。
在一些實施例中，病症為阿爾茨海默氏病(AD)。AD有兩個標誌性病理特徵：β類澱粉蛋白(Aβ)斑塊及包含過度磷酸化tau蛋白之神經原纖維纏結。最近研究表明補體與AD發病原理有關，包括全基因體關聯研究，確認編碼補體蛋白簇蛋白(CLU)及CR1 (CR1)之基因中與遲發性AD風險相關的單核苷酸多型性(SNP)。 參見Carpanini等人，Therapeutic Inhibition of the Complement System in Diseases of the Central Nervous System, Front.Immunol. ,2019年3月4日。生物標記研究亦鑑定血漿及/或CSF中之補體蛋白及活化產物，可將AD與對照區分開來且預測進展為AD之風險。
在一些實施例中，病症為額顳葉失智症。在一些實施例中，病症為皮克氏病(Pick's disease)。在一些實施例中，病症為散發性額顳葉失智症，例如與染色體17相關之伴有帕金森病的額顳葉失智症。在一些實施例中，進行性核上性麻痺(PSP)。在一些實施例中，皮質基底退化(CBD)。在一些實施例中，病症為亞急性硬化性泛腦炎。
在一些實施例中，病症為肌萎縮性脊髓側索硬化症(ALS)。ALS係由上下(α)運動神經元進行性損失引起，導致周圍神經系統神經肌肉接合處之去神經、進行性肌肉無力、萎縮、痙攣、呼吸衰竭及最終癱瘓與死亡。最近研究已顯示ALS死後組織之運動皮層及脊髓中的C1q蛋白增加；病理區域中之C3活化片段及TCC；ALS運動皮層及脊髓中退化神經元及神經膠質細胞之C4d及TCC染色，以及病理區域中之C5aR1上調。甚至在疾病過程的早期，C3d及C4d就已在脊髓及運動皮層中被CR4陽性小神經膠質細胞包圍之寡樹突膠細胞及退化神經突上發現，且C1q、C3及TCC已顯示存在於ALS供體肋間肌中之運動神經終板上。 參見Carpanini等人，Therapeutic Inhibition of the Complement System in Diseases of the Central Nervous System, Front.Immunol., 2019年3月4日。
在一些實施例中，病症為帕金森氏病(PD)。PD之特徵為黑質中多巴胺神經元之損失及蛋白質α-突觸核蛋白之沉積，形成該疾病的病理標誌——路易體。患者表現為靜止性震顫、運動遲緩及強直。補體活化與帕金森氏病中之α-突觸核蛋白及路易體有關； 活體外研究表明，與疾病相關之剪接變異體α-突觸核蛋白112 (而非全長蛋白)會引起補體活化。 活體內，C3d、C4d、C7及C9在路易體中之定位已有報導。最近，據報導iC3b及C9在路易體及黑化神經元中沉積，且已顯示iC3b免疫反應性隨著正常衰老而增加，且與年齡匹配之對照相比，在PD中進一步升高。此外，已顯示CSF中C3/Aβ42或FH/Aβ42之比率與帕金森氏病運動及認知症狀的嚴重程度之間存在相關性。 參見Carpanini等人，Therapeutic Inhibition of the Complement System in Diseases of the Central Nervous System, Front.Immunol., 2019年3月4日。在一些實施例中，待治療之個體罹患帕金森氏病伴失智症(PDD)。
在一些實施例中，病症為杭丁頓氏病(Huntington’s Disease，HD)。HD為一種常染色體顯性遺傳性神經退化性疾病，其特徵為進行性運動症狀、精神紊亂及失智症。它係由HTT基因外顯子1中三鹼基對(CAG)重複序列的擴展(39-121個重複序列相對於正常範圍8-39個重複序列)引起，該重複序列的擴展在蛋白質N末端轉譯成多聚麩醯胺通道(polyglutamine tract)。這導致紋狀體及皮質(第3、5及6層)中多聚麩醯胺長度依賴性錯誤折疊以及杭丁頓蛋白之積累，隨後此等區域中之神經元損失，擴散至海馬體。已經顯示HD尾狀核(caudate)及紋狀體中之神經元、星狀神經膠細胞及髓鞘對C1q、C4、C3以及iC3b及TCC中之新表位具有免疫反應性。已經顯示編碼早期補體組分C1q (c鏈)、C1r、C3及C4、補體調節因子C1INH、簇蛋白、MCP、DAF及CD59以及補體受體C3a及C5a之mRNA的表現在HD紋狀體中上調， 參見Carpanini等人，Therapeutic Inhibition of the Complement System in Diseases of the Central Nervous System, Front.Immunol., 2019年3月4日。
在一些實施例中，病症為嗜銀性顆粒失智症。在一些實施例中，病症為英國型類澱粉血管病變。在一些實施例中，病症為大腦類澱粉血管病變。在一些實施例中，病症為庫賈氏病(Creutzfeldt-Jakob disease)。在一些實施例中，病症為拳擊手型失智症。在一些實施例中，病症為伴有鈣化之瀰漫性神經原纖維纏結。在一些實施例中，病症為唐氏症候群(Down's syndrome)。在一些實施例中，病症為額顳葉退化。在一些實施例中，病症為格斯特曼-施特勞斯勒-沙因克病(Gerstmann-Straussler-Scheinker disease)。在一些實施例中，病症為Hallervorden-Spatz病。在一些實施例中，病症為包涵體肌炎。在一些實施例中，病症為多系統萎縮(MSA)。在一些實施例中，病症為肌強直性肌營養不良。在一些實施例中，病症為C型尼曼-皮克病(Niemann-Pick disease)。在一些實施例中，病症為伴有神經原纖維纏結之非關島(Guamanian)運動神經元病。在一些實施例中，病症為腦炎後帕金森病。在一些實施例中，病症為普里昂蛋白大腦類澱粉血管病變。在一些實施例中，病症為進行性皮質下神經膠瘤病。在一些實施例中，病症為進行性核上性麻痺。在一些實施例中，病症為亞急性硬化性泛腦炎。在一些實施例中，病症為純纏結性失智症(Tangle only dementia)。在一些實施例中，病症為多發性腦梗塞失智症。在一些實施例中，病症為缺血性中風。在一些實施例中，病症為慢性創傷性腦病變(CTE)。
在一些實施例中，病症為遺傳性運動及感覺神經病變(HMSN)。在一些實施例中，HMSN為夏馬杜三氏(Charcot-Marie-Tooth，CMT)病。在一些實施例中，HSMN為夏馬杜三氏病1A型或1B型。在一些實施例中，HSMN為夏馬杜三氏病2型。在一些實施例中，HSMN為代哲因－索他二氏病(Dejerine–Sottas disease) (夏馬杜三氏病3型)。在一些實施例中，HSMN為Refsum病。在一些實施例中，HSMN為具有金字塔特徵之夏馬杜三氏病。在一些實施例中，HSMN為夏馬杜三氏病6型。在一些實施例中，HSMN為HMSN+色素性視網膜炎。 在一些實施例中，病症為Churg-Strauss症候群。在一些實施例中，病症為周圍動脈疾病(PAD)。在一些實施例中，病症為重症肌無力，例如累及CNS (中樞神經系統)之重症肌無力。在一些實施例中，病症為路易體失智症。在一些實施例中，病症為普里昂疾病。在一些實施例中，病症為Behcet氏病。在一些實施例中，病症為先天性肌無力。在一些實施例中，病症為亞急性硬化性泛腦炎(SSPE)。
在一些實施例中，病症為脫髓鞘疾病。在一些實施例中，病症為脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病。在一些實施例中，病症為脫髓鞘性腦白質營養不良性疾病。
在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為多發性硬化症(MS)。多發性硬化症(MS)為北歐高加索人年輕人中神經功能障礙之最常見原因，其終生患病風險約為四百分之一。已經顯示C3在MS患者的大腦中沉積。已經顯示T細胞純系(TCC)與毛細血管內皮細胞相關，主要位於斑塊內且鄰近白質。亦顯示C活化定位於活性髓磷脂破壞區域，TCC專門沉積在此類區域。已經顯示C3d之沉積與低級活性脫髓鞘斑塊中受損髓磷脂之短片段相關，且C3d為C對疾病進展以及急性炎症的貢獻提供證據。 參見Ingram等人，Complement in multiple sclerosis: its role in disease and potential as a biomarker. Clin Exp Immunol. 2009年2月；155(2):128-39。
在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為視神經脊髓炎(NMO)。視神經脊髓炎(NMO)為一種主要影響視神經及脊髓的發炎性脫髓鞘性疾病。傳統上它被視為MS之一種變異體，最近根據新標準使用表型亞型化以及新開發的疾病生物標記NMO-免疫球蛋白G (IgG) (據報告，對於NMO之敏感性為58-76%且特異性為85–99%)之組合對其重新進行定義。NMO患者之C3a及抗C1q抗體水準高於健康對照。C3a水準與疾病活動度、神經功能障礙及水孔蛋白-4 IgG相關。Nytrova等人 J Neuroimmunol. 2014年9月15日；274(1-2):185-91。
在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為視神經脊髓炎譜系病症(NMOSD)。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為特發性發炎性脫髓鞘疾病(IIDD)。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為抗NMDA受體腦炎。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為急性彌漫性腦脊髓炎。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為抗MOG自體免疫性腦脊髓炎。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為慢性複發性發炎性視神經炎(CRION)。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為急性彌漫性腦脊髓炎(ADEM)。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為免疫介導之腦脊髓炎。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為進行性多灶性腦白質病(PML)。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為McDonalds陽性多發性硬化症。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為急性出血性腦白質炎。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為拉斯穆森腦炎(Rasmussen's Encephalitis)。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為Marburg多發性硬化症。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為假性腫脹性或腫脹性多發性硬化症。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為Balo同心圓硬化症。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為瀰漫性髓鞘破壞性硬化症。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為孤立性硬化症。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為多發性硬化症伴空洞性病變。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為脊髓皮質多發性硬化症(MCMS)。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為非典型視脊髓多發性硬化症。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為單純性脊髓多發性硬化症。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為HLA DRB3*02:02多發性硬化症。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性細胞疾病為自體免疫性GFAP星形細胞病。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為慢性發炎性脫髓鞘性多發性神經病變(CIDP)。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為格巴二氏症候群(Guillain–Barré syndrome) (急性或慢性)。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為進行性發炎性神經病變。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為劉易斯-薩姆納症候群(Lewis-Sumner Syndrome)。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為組合的中樞性及外周性脫髓鞘(CCPD)。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為比克斯塔夫腦幹腦炎(Bickerstaff brainstem encephalitis)。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為Fisher症候群。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為三叉神經痛。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為NMDAR抗NMDA受體腦炎。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為原發性進行性MS (PPMS)。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為OPA1變異性多發性硬化症。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為KIR4.1多發性硬化症。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為水孔蛋白相關多發性硬化症。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為慢性腦脊髓靜脈功能不全(CCSVI或CCVI)。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為彌漫性硬化症。在一些實施例中，脫髓鞘性髓鞘破壞性疾病為希爾德病(Schilder's disease)。
在某些態樣中，待治療之病症為脫髓鞘性腦白質營養不良性疾病。在一些實施例中，脫髓鞘性腦白質營養不良疾病為脊髓炎。在一些實施例中，脫髓鞘性腦白質營養不良疾病為腦橋中央髓鞘溶解症(CPM)。在一些實施例中，脫髓鞘性腦白質營養不良疾病為橋腦外髓鞘溶解症。在一些實施例中，脫髓鞘性腦白質營養不良疾病為脊髓癆(tabes dorsalis)。在一些實施例中，脫髓鞘性腦白質營養不良性疾病為進行性多灶性腦白質病。在一些實施例中，脫髓鞘性腦白質營養不良疾病為伴有白質消失之腦白質病。在一些實施例中，脫髓鞘性腦白質營養不良疾病為伴有神經軸突球體之腦白質病。在一些實施例中，脫髓鞘性腦白質營養不良疾病為可逆性後部腦白質病症候群。在一些實施例中，脫髓鞘性腦白質營養不良疾病為伴有皮質下囊腫之巨腦性腦白質病。在一些實施例中，脫髓鞘性腦白質營養不良疾病為伴有皮質下囊腫1之巨腦性腦白質病。在一些實施例中，脫髓鞘性腦白質營養不良性疾病為高血壓性腦白質病。在一些實施例中，脫髓鞘性腦白質營養不良性疾病為異染性白質失養症。在一些實施例中，脫髓鞘性腦白質營養不良疾病為克拉布病(Krabbe disease)。在一些實施例中，脫髓鞘性腦白質營養不良疾病為Canavan病。在一些實施例中，脫髓鞘性腦白質營養不良疾病為X連鎖腎上腺腦白質失養症。在一些實施例中，脫髓鞘性腦白質營養不良疾病為Alexander病。在一些實施例中，脫髓鞘性腦白質營養不良性疾病為腦腱性黃色瘤病。在一些實施例中，脫髓鞘性腦白質營養不良性疾病為佩利扎烏斯-梅茨巴赫病(Pelizaeus–Merzbacher disease)。在一些實施例中，脫髓鞘性腦白質營養不良疾病為雷夫敘姆病(Refsum disease)。
在一些實施例中，有效量之本文所述的化合物或其醫藥學上可接受之鹽係用於治療布爾格氏病(Buerger's disease)，亦稱為血栓閉塞性脈管炎。
在一些實施例中，有效量之本文所述的化合物或其醫藥學上可接受之鹽係用於治療巨大細胞動脈炎。
在一些實施例中，有效量之本文所述的化合物或其醫藥學上可接受之鹽係用於治療雷諾氏病(Raynaud's disease)。
在某些態樣中，待治療之病症為周圍神經系統之脫髓鞘疾病。在一些實施例中，周圍神經系統之脫髓鞘疾病為抗MAG周圍神經病變。在一些實施例中，周圍神經系統之脫髓鞘疾病為具有壓迫性麻痺傾向之遺傳性神經病變。在一些實施例中，周圍神經系統之脫髓鞘疾病為銅缺乏相關病狀(例如，周圍神經病變、脊髓病或罕見的視神經病變)。
在一些實施例中，有效量之本文所述的化合物或其醫藥學上可接受之鹽係用於治療橫貫性脊髓炎。
在某些態樣中，待治療之病症為周圍神經病變。在一些實施例中，周圍神經病變為單神經病變。在一些實施例中，神經病變為多發性神經病變。在一些實施例中，多發性神經病變為遠端軸突病、糖尿病性神經病變、脫髓鞘性多發性神經病變、小纖維周圍神經病變、多發性單神經炎、多發性多發性神經炎、自主神經病變或神經炎。
在一些實施例中，有效量之本文所述的化合物或其醫藥學上可接受之鹽係用於治療多灶性運動神經病變。
在一些實施例中，有效量之本文所述的化合物或其醫藥學上可接受之鹽係用於治療自體免疫性血管疾病。在一些實施例中，自體免疫性血管疾病為血管炎。在一些實施例中，血管炎包括但不限於自體免疫性發炎性血管炎、皮膚小血管血管炎、肉芽腫性多血管炎、嗜酸性肉芽腫性多血管炎、白塞氏病(Behçet's disease)、川崎病(Kawasaki disease)、布爾格氏病及「有限」肉芽腫性多血管炎。
在一些實施例中，如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或組合物係用於治療動脈炎。在一些實施例中，動脈炎為巨大細胞動脈炎。在一些實施例中，動脈炎為高安動脈炎(Takayasu arteritis)。在一些實施例中，動脈炎為顳動脈炎。在一些實施例中，動脈炎為結節性多動脈炎。
在一些實施例中，提供一種用於治療腎小球性腎炎之方法。在一些實施例中，腎小球性腎炎為膜性增生性腎小球性腎炎(MPGN)。在一些實施例中，MPGN為I型MPGN。在一些實施例中，MPGN為II型MPGN。在一些實施例中，MPGN為III型MPGN。在一些實施例中，MPGN為C3腎小球性腎炎(C3G)。在一些實施例中，MPGN為緻密沉積物病(DDD)。在一些實施例中，MPGN為C4沉積物病症。
在一些實施例中，腎小球性腎炎為IC-MPGN。在一些實施例中，腎小球性腎炎為膜性腎小球性腎炎。在一些實施例中，腎小球性腎炎為IgA腎病變。在一些實施例中，腎小球性腎炎為感染後腎小球性腎炎。在一些實施例中，腎小球性腎炎為快速進展性腎小球性腎炎，例如I型(Goodpasture症候群)、II型或III型快速進展性腎小球性腎炎。
在一些實施例中，提供一種用於治療陣發性夜間血紅素尿(PNH)之方法，其包括視情況以醫藥學上可接受之組合物形式向個體投與有效量的本文揭示之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)及(VIIA)以及表1之化合物中的任一者)或其醫藥學上可接受之鹽。
在一些實施例中，提供一種用於治療遺傳性血管水腫(HAE)之方法，其包括視情況以醫藥學上可接受之組合物形式向個體投與有效量的本文揭示之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)及(VIIA)以及表1之化合物中的任一者)或其醫藥學上可接受之鹽。SERPING1基因之突變會導致I型及II型遺傳性血管水腫。遺傳性血管水腫為一種以反復發作的嚴重腫脹(血管水腫)為特徵之病症。身體最常見發生腫脹的部位為四肢、面部、腸道及氣道。SERPING1基因提供了製造C1抑制劑蛋白之指令，此對於控制炎症很重要。C1抑制劑可阻斷某些促進炎症之蛋白質的活性。引起I型遺傳性血管水腫之突變導致血液中C1抑制劑之水準降低，而引起II型之突變導致產生功能異常的C1抑制劑。在沒有適當水準之功能性C1抑制劑的情況下，就會產生過量稱為緩激肽之蛋白質片段(肽)。緩激肽係藉由增加液體經血管壁滲漏至身體組織中來促進炎症。身體組織中液體過量積聚會引起I型及II型遺傳性血管水腫個體中之腫脹發作。
在一些實施例中，提供一種用於治療冷凝集素疾病(CAD)之方法，其包括視情況以醫藥學上可接受之組合物形式向個體投與有效量的本文揭示之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)及(VIIA)以及表1之化合物中的任一者)或其醫藥學上可接受之鹽。CAD為一種罕見的自體免疫性溶血性病狀，具有潛在嚴重之急性及慢性後果，由經典補體途徑之C1活化驅動。
在一些實施例中，提供一種用於治療非典型溶血性尿毒症候群(aHUS)之方法，其包括視情況以醫藥學上可接受之組合物形式向個體投與有效量的本文揭示之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)及(VIIA)以及表1之化合物中的任一者)或其醫藥學上可接受之鹽。非典型溶血性尿毒症候群為一種主要影響腎功能之疾病。非典型溶血性尿毒症候群可發生於任何年齡，導致腎臟小血管中形成異常血凝塊(血栓)。若此等血凝塊限制或阻塞血流，可能會導致嚴重的醫療問題。非典型溶血尿毒症候群之特徵為與凝血異常相關的三個主要特徵：溶血性貧血、血小板減少及腎衰竭。
在另一個實施例中，提供一種用於治療個體之濕性或乾性年齡相關性黃斑退化(AMD)之方法，其包括視情況以醫藥學上可接受之組合物形式向個體投與有效量的本文揭示之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)及(VIIA)以及表1之化合物中的任一者)或其醫藥學上可接受之鹽。在另一個實施例中，提供一種用於治療個體之類風濕性關節炎之方法，其包括視情況以醫藥學上可接受之組合物形式向個體投與有效量的本文揭示之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)及(VIIA)以及表1之化合物中的任一者)或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一個實施例中，提供一種用於治療個體之多發性硬化症之方法，其包括視情況以醫藥學上可接受之組合物形式向個體投與有效量的本文揭示之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)及(VIIA)以及表1之化合物中的任一者)或其醫藥學上可接受之鹽。
本文所揭示之活性化合物或其醫藥學上可接受之鹽亦可用於與第二藥劑組合(以相同或不同劑型)或交替投與，用於改善或減少第二藥劑的副作用。
例如，在一些實施例中，活性化合物可以與接受性細胞轉移療法組合使用，以減少與此種療法相關之發炎反應，例如細胞介素介導之反應，諸如細胞介素反應症候群。
在一些實施例中，接受性細胞轉移療法為用於治療血液腫瘤或固態腫瘤例如B細胞相關血液癌症之嵌合抗原受體T細胞(CAR T)或樹突細胞。
在一些實施例中，血液腫瘤或固態腫瘤為急性淋巴母細胞白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)、非霍奇金氏淋巴瘤、慢性淋巴球白血病(CLL)、胰臟癌、神經膠質母細胞瘤或表現CD19之癌症。
在一些實施例中，接受性細胞轉移療法為非工程化T細胞療法，其中T細胞已經活化及/或擴增為一或多種病毒或腫瘤抗原。在一些實施例中，相關的發炎反應為細胞介素介導之反應。
在一些實施例中，第二藥劑為已經轉化以表現蛋白質之細胞，其中個體中的蛋白質發生突變或以其他方式具有受損的功能。在一些實施例中，轉化細胞包括CRISPR基因。
提供了另一個實施例，其包括視情況以醫藥學上可接受之組合物的形式向個體投與有效量之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其醫藥學上可接受之鹽，以治療眼部、肺部、胃腸道或其他病症。
在本揭示案之其他實施例中，本文所提供之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)可用於治療或預防個體由補體介導之病症。作為實例，本揭示案包括治療或預防由抗體-抗原相互作用、免疫或自體免疫病症之組成部分或由缺血性損傷誘導之補體相關病症的方法。本揭示案亦提供減少由經典補體途徑介導或影響之炎症或免疫反應(包括自體免疫反應)的方法。
在一些實施例中，病症選自脂肪肝及源自脂肪肝的病狀，諸如非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、肝臟炎症、肝硬化及肝衰竭。在本揭示案的一些實施例中，提供一種治療個體脂肪肝病之方法，其係藉由投與有效量的如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或組合物來達成。
在另一個實施例中，如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或組合物係用於調節手術或其他醫療程序之前或期間的免疫反應。一個非限制性實例為與急性或慢性移植物抗宿主疾病(graft versus subject disease)相關之用途，其為器官移植、同種異體組織移植導致的常見併發症，且亦可由於輸血而發生。
在一些實施例中，本揭示案提供一種治療皮肌炎之方法，其藉由向有需要之個體投與有效量的如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物來達成。
在一些實施例中，本揭示案提供一種治療肌萎縮性脊髓側索硬化症之方法，其藉由向有需要之個體投與有效量的如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物來達成。
在一些實施例中，本揭示案提供一種治療腹主動脈瘤、血液透析併發症、溶血性貧血或血液透析之方法，其藉由向有需要之個體投與有效量的如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物來達成。
在另一個實施例中，提供一種對在個體中投與藥物或生物治療劑(例如，CAR T細胞療法或單株抗體療法)作出反應而治療或預防細胞介素或發炎反應之方法，其藉由投與有效量的如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物來達成。各種類型之細胞介素或發炎反應可能對多種因素起反應而發生，諸如生物治療劑的投與。
在一些實施例中，細胞介素或發炎反應為細胞介素釋放症候群。在一些實施例中，細胞介素或發炎反應為腫瘤溶解症候群(其亦導致細胞介素釋放)。細胞介素釋放症候群之症狀包括發燒、頭痛及皮疹至支氣管痙攣、低血壓，甚至心跳停止。嚴重的細胞介素釋放症候群係描述為細胞介素風暴，且可能為致命的。
已觀察到對輸注幾種單株抗體治療劑作出反應的致命細胞介素風暴。參見Abramowicz D等人「Release of tumor necrosis factor, interleukin-2, and gamma-interferon in serum after injection of OKT3 monoclonal antibody in kidney transplant recipients」 Transplantation(1989) 47(4):606-8；Chatenoud L等人「In vivo cell activation following OKT3 administration.Systemic cytokine release and modulation by corticosteroids」 Transplantation(1990) 49(4):697-702；以及Lim LC、Koh LP及Tan P. 「Fatal cytokine release syndrome with chimeric anti-CD20 monoclonal antibody rituximab in a 71-year-old patient with chronic lymphocytic leukemia」 J. Clin Oncol.(1999) 17(6):1962-3。
本文亦考慮如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物介導接受雙特異性T細胞接合劑(BiTE)之患者之不良免疫反應的用途。雙特異性T細胞接合劑引導T細胞靶向癌細胞表面上之特定抗原且與之結合。例如，博納吐單抗(Blinatumomab) (Amgen)，一種BiTE，最近被批准作為費城染色體陰性複發或難治性急性淋巴母細胞白血病之二線療法。博納吐單抗以4週為週期藉由連續靜脈內輸注給藥。BiTE劑的使用與不良免疫反應有關，包括細胞介素釋放症候群。與ACT相關之CRS中最顯著升高的細胞介素包括IL-10、IL-6及IFN-γ (Klinger等人，Immunopharmacologic response of patients with B-lineage acute lymphoblastic leukemia to continuous infusion of T cell-engaging CD19/CD3-bispecific BiTE antibody blinatumomab. Blood(2012) 119:6226–6233)。
在另一個實施例中，病症為上鞏膜炎、特發性上鞏膜炎、前上鞏膜炎或後上鞏膜炎。在一些實施例中，病症為特發性前眼色素層炎、HLA-B27相關眼色素層炎、疱疹性角膜眼色素層炎、Posner Schlossman症候群、Fuch氏異色性虹膜睫狀體炎或巨細胞病毒前眼色素層炎。
在一些實施例中，本揭示案提供一種藉由向有需要之個體投與有效量的如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物來治療IC-MPGN之方法。
在一些實施例中，本揭示案提供一種藉由向有需要之個體投與有效量的如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物來治療陣發性夜間血紅素尿症(PNH)之方法。
在一些實施例中，本揭示案提供一種藉由向有需要之個體投與有效量的如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物來治療遺傳性血管水腫(HAE)之方法。
在一些實施例中，本揭示案提供一種藉由向有需要之個體投與有效量的如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物來治療冷凝集素疾病(CAD)之方法。
在一些實施例中，本揭示案提供一種藉由向有需要之個體投與有效量的如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物來治療非典型溶血症候群(aHUS)之方法。
在一些實施例中，本揭示案提供一種藉由向有需要之個體投與有效量的如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物來治療年齡相關性黃斑退化(AMD)之方法。
在一些實施例中，本揭示案提供一種藉由向有需要之個體投與有效量的如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物來治療類風濕性關節炎之方法。
在一些實施例中，本揭示案提供一種藉由向有需要之個體投與有效量的如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物來治療多發性硬化症之方法。
在一些實施例中，本揭示案提供一種藉由向有需要之個體投與有效量的如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物來治療重症肌無力之方法。
在一些實施例中，本揭示案提供一種藉由向有需要之個體投與有效量的如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物來治療非典型溶血性尿毒症候群(aHUS)之方法。
在另一個實施例中，本揭示案提供一種藉由向有需要之個體投與有效量的如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物來治療如下所述之病症的方法，包括：玻璃體炎、類肉瘤病、梅毒、結核病或萊姆病(Lyme disease)；視網膜血管炎、艾爾斯病(Eales disease)、結核病、梅毒或弓蟲病；視神經綱膜炎、病毒性視網膜炎或急性視網膜壞死；水痘帶狀皰狀病毒、單純疱疹病毒、巨細胞病毒、Epstein-Barr二氏病毒、扁平苔蘚或登革熱相關疾病(例如出血性登革熱)；偽裝症候群、接觸性皮炎、創傷誘導之炎症、UVB誘導之炎症、濕疹、環狀肉芽腫或痤瘡。
在另一個實施例中，病症選自：急性心肌梗塞、動脈瘤、心肺分流、擴張性心肌病變、心肺分流手術期間之補體活化、冠狀動脈疾病、支架置入後再狹窄或經皮管內冠狀動脈成形術(PTCA)；抗體介導之移植排斥、過敏性休克、過敏反應、同種異體移植、體液及血管移植排斥、移植物功能障礙、移植物抗宿主疾病、葛瑞夫氏病(Graves' disease)、藥物不良反應或慢性移植物血管病變；過敏性支氣管肺麴菌病、過敏性神經炎、藥物過敏、輻射誘導之肺損傷、嗜酸性球性肺炎、放射照相造影劑過敏、阻塞性細支氣管炎或間質性肺炎；複合帕金森失智症、散發性額顳葉失智症、與染色體17相關之伴有帕金森病的額顳葉失智症、額顳葉退化、純纏結性失智症、腦類澱粉血管病變、腦血管病症、某些形式的額顳葉失智症、慢性創傷性腦病變(CTE)、帕金森氏病伴失智症(PDD)、嗜銀性顆粒失智症、拳擊手型失智症、路易體失智症(DLB)或多發梗塞性失智症；庫賈氏病、杭丁頓氏病、多灶性運動神經病變(MMN)、朊病毒蛋白大腦類澱粉血管病變、多發性肌炎、腦炎後帕金森病、亞急性硬化性泛腦炎、伴有神經原纖維纏結之非關島運動神經元病、神經再生及伴有鈣化之瀰漫性神經原纖維纏結。
在一些實施例中，病症選自：異位性皮炎、皮炎、皮肌炎大皰性類天皰瘡、硬皮病、硬皮肌炎、牛皮癬性關節炎、尋常型天皰瘡、盤狀紅斑狼瘡、皮膚狼瘡、凍瘡狀紅斑狼瘡或紅斑狼瘡-扁平苔蘚重疊症候群；冷凝球蛋白血管炎、腸系膜/腸血管病症、末梢血管病症、抗嗜中性球細胞質抗體(ANCA)相關血管炎(AAV)、IL-2誘導之血管滲漏症候群或免疫複合物血管炎；血管性水腫、低血小板(HELLP)症候群、鐮狀細胞病、血小板輸注無效、紅血球管型(red cell casts)，或典型或傳染性溶血性尿毒症候群(tHUS)；血尿、失血性休克、藥物誘導之血小板減少症、自體免疫溶血性貧血(AIHA)、氮質血症、血管及/或淋巴管炎症、冠狀動脈旋磨術，或遲發性溶血性輸血反應；英國型類澱粉血管病變、布爾格氏病、大皰性類天皰瘡、C1q腎病、癌症及災難性抗磷脂症候群。在一些實施例中，病症為自體免疫溶血性貧血，例如溫性自體免疫溶血性貧血。
在另一個實施例中，病症選自：濕性(滲出性) AMD、乾性(非滲出性) AMD、脈絡膜視網膜退化、脈絡膜新生血管(CNV)、脈絡膜炎、RPE功能損失、視力損失(包括視覺敏銳度或視野損失)、AMD導致的視力損失、光照引起的視網膜損傷、視網膜退化、視網膜剝離、視網膜功能障礙、視網膜新生血管(RNV)、早產兒視網膜病變、病理性近視或RPE退化；人工晶狀體性大皰性角膜病變、症狀性黃斑退化相關病症、視神經退化、感光受體退化、視錐細胞退化(cone degeneration)、感光受體細胞損失、扁平部炎、鞏膜炎、增生性玻璃體視網膜病變或眼玻璃膜疣形成(formation of ocular drusen)；慢性蕁麻疹、Churg-Strauss症候群、冷凝集素疾病(CAD)、皮質基底退化(CBD)、冷凝球蛋白血症、睫狀體炎、布魯赫膜損傷(damage of the Bruch's membrane)、Degos氏病、糖尿病性血管病變、肝酶升高、內毒血症、大皰性表皮鬆解症或後天性大皰性表皮鬆解症；原發性混合型冷凝球蛋白血症、血尿素氮-BUN過高、局灶節段性腎小球硬化、格斯特曼-施特勞斯勒-沙因克病、巨大細胞動脈炎、痛風、Hallervorden-Spatz病、橋本氏甲狀腺炎(Hashimoto's thyroiditis)、Henoch-Schonlein紫癜腎炎或異常尿渣；肝炎、A型肝炎、B型肝炎、C型肝炎或人類免疫缺陷病毒(HIV)，更一般地病毒感染，例如選自黃病毒科(Flaviviridae)、逆轉錄病毒(Retroviruses)、冠狀病毒科(Coronaviridae)、痘病毒科(Poxviridae)、腺病毒科(Adenoviridae)、疱疹病毒科(Herpesviridae)、杯狀病毒科(Caliciviridae)、呼腸孤病毒科(Reoviridae)、小核糖核酸病毒科(Picornaviridae)、披膜病毒科(Togaviridae)、正黏病毒科(Orthomyxoviridae)、彈狀病毒科(Rhabdoviridae)，或嗜肝DNA病毒科(Hepadnaviridae)；腦膜炎雙球菌(Neisseria meningitidis)、志賀毒素大腸桿菌相關溶血性尿毒症候群(STEC-HUS)、溶血性尿毒症候群(HUS)；鏈球菌(Streptococcus)及鏈球菌感染後腎小球性腎炎。
在又一實施例中，病症選自：高脂血症、高血壓、低白蛋白血症、低血容量性休克、低補體性蕁麻疹性血管炎症候群、低磷酸鹽血症(hypophosphastasis)、血容積過少性休克、特發性肺炎症候群或特發性肺纖維化；包涵體肌炎、腸缺血、虹膜睫狀體炎、虹膜炎、幼年慢性關節炎、川崎氏病(動脈炎)或脂肪尿；膜增生性腎小球性腎炎(MPGN) I、顯微鏡下之多血管炎、混合型冷凝球蛋白血症、A型鉬輔因子缺乏(MoCD)、胰臟炎、脂層炎、皮克氏病、結節性多動脈炎(PAN)、進行性皮質下神經膠瘤病、蛋白尿、腎小球濾過率(GFR)降低，或腎血管病症；多器官衰竭、多系統萎縮(MSA)、肌強直性肌營養不良、C型尼曼-匹克病、慢性脫髓鞘疾病或進行性核上性麻痺；脊髓損傷、脊髓性肌萎縮、脊椎關節病變、Reiter氏症候群、自發性流產、反復流產、子癎前症、突觸核蛋白病、高安氏動脈炎、產後甲狀腺炎、甲狀腺炎、I型冷凝球蛋白血症、II型混合型冷凝球蛋白血症、III型混合型冷凝球蛋白血症、潰瘍性結腸炎、尿毒症、蕁麻疹、靜脈氣體栓塞(VGE)或韋格納氏肉芽腫病(Wegener's granulomatosis)；von Hippel-Lindau病、眼睛組織胞漿菌病、硬玻璃膜疣、軟玻璃膜疣、色素結塊以及感光受體及/或視網膜色素上皮(RPE)損失。
在一些實施例中，如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物可用於治療選自以下之病症：自體免疫性卵巢炎、子宮內膜異位症、自體免疫性睪丸炎、奧德氏甲狀腺炎(Ord’s thyroiditis)、自體免疫性腸病變、腹腔疾病、橋本氏腦病變、抗磷脂症候群(APLS) (休斯症候群(Hughes syndrome))、再生不良性貧血、自體免疫性淋巴組織增生症候群(Canale-Smith症候群)、自體免疫性嗜中性球減少症、埃文斯症候群(Evans syndrome)、惡性貧血、純紅血球再生不良、血小板減少症、痛性肥胖病(adipose dolorosa) (Dercum氏病)、成人史迪爾氏症(adult onset Still’s disease)、強直性脊椎炎、CREST症候群、藥物誘導之狼瘡、嗜伊紅球性筋膜炎(舒爾曼氏症候群(Shulman’s syndrome))、Felty症候群、IgG4相關疾病、混合型結締組織疾病(MCTD)、復發性風濕病(Hench-Rosenberg症候群)、Parry-Romberg症候群、Parsonage-Turner症候群、復發性多軟骨炎(Meyenburg-Altherr-Uehlinger症候群)、腹膜後纖維化、風濕熱、Schnitzler症候群、纖維肌痛、神經性肌強直(艾薩克氏病(Isaac’s disease))、副腫瘤性退化、自體免疫性內耳病、梅尼埃氏病(Meniere’s disease)、間質性膀胱炎、自體免疫性胰臟炎、茲卡病毒(zika virus)相關病症、屈公病毒(chikungunya virus)相關病症、亞急性細菌性心內膜炎(SBE)、IgA腎病變、IgA血管炎、風濕性多肌痛、類風濕性血管炎、斑禿、自體免疫性黃體酮皮炎、疱疹樣皮炎、結節性紅斑、妊娠性類天皰瘡、化膿性汗腺炎、硬化性苔蘚、線性IgA病(LAD)、侷限性硬皮病、肌炎、急性痘瘡樣苔蘚性類乾癬、白斑病心肌梗塞後症候群(Dressler氏症候群)、心包切開術後症候群、自體免疫性視網膜病變、Cogan症候群、葛瑞夫眼病變、木質性結膜炎、莫倫潰瘍(Mooren’s ulcer)、眼陣攣性肌陣攣症候群、視神經炎、視網膜耳蝸腦血管病變(Susac氏症候群)、交感性眼炎、Tolosa-Hunt症候群、間質性肺病、抗合成酶症候群、艾迪生氏病(Addison’s disease)、I型自體免疫性多內分泌症候群(APS)、II型自體免疫性多內分泌症候群(APS)、III型自體免疫性多內分泌症候群(APS)、彌漫性硬化症(多發性硬化症，II型)、快速進展性腎小球性腎炎(RPGN)、幼年類風濕性關節炎、附著點炎相關關節炎、反應性關節炎(Reiter氏症候群)、自體免疫性肝炎或類狼瘡性肝炎、原發性膽汁性肝硬化(PBS)、原發性硬化性膽管炎、顯微鏡下之結腸炎、潛伏性狼瘡(未分化結締組織病(UCTD))、急性彌漫性腦脊髓炎(ADEM)、急性運動軸突神經病變、抗(R)-n-甲基-D-天冬胺酸受體腦炎、Balo同心圓硬化症(Schilders病)、Bickerstaff腦炎、慢性發炎性脫髓鞘性多發性神經病變、特發性發炎性脫髓鞘病、Lambert-Eaton二氏肌無力症候群、Oshtoran症候群、與鏈球菌相關之小兒自體免疫性神經精神病症(PANDAS)、進行性發炎性神經病變、不寧腿症候群、僵人症候群、Sydenhem症候群、橫貫性脊髓炎、狼瘡性血管炎、白血球破碎性血管炎、顯微鏡下之多血管炎、多發性肌炎及眼睛缺血性再灌注損傷。
可以根據本文所揭示之組合物及方法治療的眼部病症之實例包括阿米巴性角膜炎(amoebic keratitis)、真菌性角膜炎、細菌性角膜炎、病毒性角膜炎、盤尾絲蟲性角膜炎(onchocercal keratitis)、細菌性角膜結膜炎、病毒性角膜結膜炎、角膜營養不良性疾病、福克斯氏內皮營養不良(Fuchs' endothelial dystrophy)、乾燥症候群(Sjogren's syndrome)、史蒂文斯-約翰遜症候群(Stevens-Johnson syndrome)、自體免疫性乾眼病、環境性乾眼病、角膜新生血管疾病、角膜移植後排斥反應之預防及治療、自體免疫性眼色素層炎、感染性眼色素層炎、後眼色素層炎(包括弓蟲病)、全眼色素層炎、玻璃體或視網膜之發炎性疾病、眼內炎預防及治療、黃斑水腫、黃斑退化、年齡相關性黃斑退化、增生性及非增生性糖尿病視網膜病變、高血壓性視網膜病變、視網膜之自體免疫疾病、原發性及轉移性眼內黑色素瘤、其他眼內轉移性腫瘤、開角型青光眼、閉角型青光眼、色素性青光眼及其組合。
在又一實施例中，病症選自青光眼、糖尿病性視網膜病、起泡性皮膚病(包括大皰性類天皰瘡、天皰瘡及大皰性表皮鬆解症)、眼部瘢痕性類天皰瘡、眼色素層炎、成人黃斑退化、糖尿病性視網膜病、色素性視網膜炎、黃斑水腫、糖尿病性黃斑水腫、Behcet氏眼色素層炎、多灶性脈絡膜炎、Vogt-Koyanagi-Harada症候群、中間眼色素層炎、鳥槍彈樣視網膜脈絡膜炎(birdshot retino-chorioditis)、交感性眼炎、眼部瘢痕性類天皰瘡、眼部天皰瘡、非動脈性缺血性視神經病變、術後炎症及視網膜靜脈阻塞，及視網膜中央靜脈阻塞(CVRO)。
在一些實施例中，提供一種治療個體之自體免疫性水皰病之方法，其包括投與有效量的如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物。
在一些實施例中，提供一種治療個體之大皰性類天皰瘡之方法，其包括投與有效量的如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物。
在一些實施例中，補體介導之病症為眼科疾病(例如，早期或新生血管性年齡相關性黃斑退化及地圖樣萎縮)、自體免疫疾病(例如，關節炎或類風濕性關節炎)、呼吸道疾病或心血管疾病。在其他實施例中，本揭示案之化合物適用於治療與脂肪酸代謝相關之疾病及病症，包括肥胖症及其他代謝病症。
在一些實施例中，提供一種治療個體之地圖樣萎縮之方法，其包括投與有效量的如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物。
可以藉由如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物治療或預防之病症亦包括但不限於：遺傳性血管水腫、毛細血管滲漏症候群、溶血性尿毒症候群(HUS)、神經系統病症、格巴二氏症候群、中樞神經系統疾病及其他神經退化性病狀、腎小球性腎炎(包括膜增生性腎小球性腎炎)、SLE腎炎、增生性腎炎、肝纖維化、組織再生及神經再生，或Barraquer-Simons症候群；膿毒症之發炎作用、全身發炎反應症候群(SIRS)、不適當或不良補體活化之病症、IL-2治療期間介白素-2誘導之毒性、發炎性病症、自體免疫疾病之炎症、全身性紅斑狼瘡(SLE)、狼瘡性腎炎、關節炎、免疫複合物病症及自體免疫疾病、全身性狼瘡或紅斑狼瘡；缺血/再灌注損傷(I/R損傷)、心肌梗塞、心肌炎、缺血後再灌注病狀、球囊血管成形術、動脈粥樣硬化、心肺分流或腎分流中之泵後症候群、腎缺血、主動脈重建後腸系膜動脈再灌注、抗磷脂質症候群、自體免疫性心髒病、缺血再灌注損傷、肥胖症或糖尿病；阿爾茨海默氏失智症、中風、精神分裂症、創傷性腦損傷、創傷、帕金森氏病、癲癇、移植排斥、預防流產、生物材料反應(例如在血液透析中，植入物)、超急性同種異體移植物排斥、異種移植物排斥、移植、牛皮癬、燒傷、熱損傷，包括燒傷或凍瘡，或擠壓傷；哮喘、過敏、急性呼吸窘迫症候群(ARDS)、囊性纖維化、成人呼吸窘迫症候群、呼吸困難、咯血、慢性阻塞性肺病(COPD)、肺氣腫、肺栓塞及梗塞、肺炎、纖維性粉塵病、惰性粉塵及礦物質(例如，矽、煤塵、鈹及石棉)、肺纖維化、有機粉塵病、化學損傷(由於刺激性氣體及化學物質所致，例如氯、光氣、二氧化硫、硫化氫、二氧化氮、氨及鹽酸)、煙霧損傷、熱損傷(例如燒傷、凍傷)、支氣管收縮、過敏性肺炎、寄生蟲病、Goodpasture氏症候群(抗腎小球基底膜腎炎)、肺血管炎、非免疫性血管炎(Pauci-immune vasculitis)及免疫複合物相關炎症。
在一些實施例中，提供一種治療個體之鐮狀細胞病之方法，其包括投與有效量的如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物。
在一些實施例中，提供一種治療個體之免疫性血小板減少性紫癜(ITP)、血栓性血小板減少性紫癜(TTP)或特發性血小板減少性紫癜(ITP)之方法，其包括投與有效量的如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物。在一些實施例中，待治療之病症為ITP。
在一些實施例中，提供一種治療個體之ANCA-血管炎之方法，其包括投與有效量的如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物。
在一些實施例中，提供一種治療個體之IgA腎病變之方法，其包括投與有效量的如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物。
在一些實施例中，提供一種治療個體之快速進展性腎小球性腎炎(RPGN)之方法，其包括投與有效量的如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物。
在一些實施例中，提供一種治療個體之狼瘡性腎炎之方法，其包括投與有效量的如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物。
在一些實施例中，提供一種治療個體之出血性登革熱之方法，其包括投與有效量的如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物。
在另一替代實施例中，如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物係用於治療自體免疫病症。補體途徑增強了抗體及吞噬細胞清除體內微生物及受損細胞的能力。它為先天免疫系統之一部分，且在健康個體中係必不可少的過程。抑制補體途徑會降低身體之免疫系統反應。因此，本揭示案之一個目的為藉由向有需要之個體投與有效劑量的如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物來治療自體免疫病症。
在一些實施例中，自體免疫病症係由補體系統之活性引起。在一些實施例中，自體免疫病症係由補體旁路途徑之活性引起。在一些實施例中，自體免疫病症係由經典補體途徑之活性引起。在另一個實施例中，自體免疫病症係由與補體系統不直接相關的作用機制引起，諸如T淋巴球之過度增殖或細胞介素之過度產生。
自體免疫病症之非限制性實例包括：狼瘡、同種異體移植物排斥、自體免疫性甲狀腺疾病(諸如葛瑞夫氏病及橋本氏甲狀腺炎)、自體免疫性葡萄膜視網膜炎、巨大細胞動脈炎、發炎性腸病(包括克羅恩氏病(Crohn's disease)、潰瘍性結腸炎、區域性腸炎、肉芽腫性腸炎、遠端迴腸炎、局部性迴腸炎及末端迴腸炎)、糖尿病、多發性硬化症、惡性貧血、牛皮癬、類風濕性關節炎、類肉瘤病及硬皮病。
在一些實施例中，如本文所述之化合物(例如，式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物係用於治療狼瘡。狼瘡之非限制性實例包括紅斑狼瘡、皮膚狼瘡、盤狀紅斑狼瘡、凍瘡狀紅斑狼瘡及紅斑狼瘡-扁平苔蘚重疊症候群。
紅斑狼瘡為一種一般類別之疾病，其包括全身性病症與皮膚病症兩者。該疾病之全身形式可以有皮膚表現以及全身表現。然而，亦有一些形式之疾病僅累及皮膚，而沒有全身性累及。例如，SLE為一種病因不明之發炎性病症，主要發生在女性中，其特徵為關節症狀、蝶形紅斑、復發性胸膜炎、心包膜炎、全身性腺病、脾腫大以及CNS (中樞神經系統)累及及進行性腎衰竭。大多數患者(超過98%)之血清含有抗核抗體，包括抗DNA抗體。高滴定量之抗DNA抗體基本上對SLE具有特異性。此疾病之習知治療為投與皮質類固醇或免疫抑制劑。
皮膚狼瘡有三種形式：慢性皮膚狼瘡(亦稱為盤狀紅斑狼瘡或DLE)、亞急性皮膚狼瘡及急性皮膚狼瘡。DLE為一種毀容性慢性病症，主要影響皮膚，出現邊界清晰之斑點及斑塊，表現為紅斑、毛囊堵塞、鱗屑、毛細血管擴張及萎縮。該病狀常因日曬而突發，早期病變為紅斑性之圓形鱗屑丘疹，直徑5至10 mm，且表現出毛囊堵塞。DLE病變最常出現於臉頰、鼻子、頭皮及耳朵上，但亦可廣泛分佈在軀幹上部、四肢伸面及口腔黏膜上。如果不治療，中央病變會萎縮且留下疤痕。與SLE不同，DLE中幾乎一貫地不存在針對雙股DNA之抗體(例如DNA結合測試)。
糖尿病可以指1型或2型糖尿病。在一些實施例中，提供有效劑量之如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物來治療1型糖尿病患者。在一些實施例中，提供有效劑量之如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物來治療2型糖尿病患者。
1型糖尿病為一種自體免疫疾病。當身體抵抗感染之系統(免疫系統)攻擊身體的一部分時，就會產生自體免疫疾病。在1型糖尿病的情況下，胰臟產生很少或根本不產生胰島素。
在一些實施例中，補體介導之疾病或病症包含移植排斥。在一些實施例中，補體介導之疾病或病症為抗體介導之移植排斥。
在某些態樣中，如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽或組合物用於治療增殖性病症，包括但不限於癌症。適合投與本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)，或表1之化合物)或其鹽的靶向癌症包括但不限於雌激素受體陽性癌症、HER2陰性晚期乳癌、晚期轉移性乳癌、脂肪肉瘤、非小細胞肺癌、肝癌、卵巢癌、神經膠質母細胞瘤、難治性固態腫瘤、視網膜母細胞瘤陽性乳癌以及視網膜母細胞瘤陽性子宮內膜癌、陰道癌及卵巢癌以及肺癌及支氣管癌、結腸腺癌、直腸腺癌、中樞神經系統生殖細胞腫瘤、畸胎瘤、雌激素受體陰性乳癌、雌激素受體陽性乳癌、家族性睪丸生殖細胞腫瘤、HER2陰性乳癌、HER2陽性乳癌、男性乳癌、卵巢未成熟畸胎瘤、卵巢成熟畸胎瘤、卵巢單胚層及高度特異性畸胎瘤、孕激素受體陰性乳癌、孕激素受體陽性乳癌、復發性乳癌、復發性結腸癌、復發性性腺外生殖細胞腫瘤、復發性性腺外非精原細胞生殖細胞腫瘤、復發性性腺外精原細胞瘤、復發性惡性睪丸生殖細胞腫瘤、復發性黑色素瘤、復發性卵巢生殖細胞腫瘤、復發性直腸癌、III期性腺外非精原細胞生殖細胞腫瘤、III期性腺外精原細胞瘤、III期惡性睪丸生殖細胞腫瘤、III期卵巢生殖細胞腫瘤、IV期乳癌、IV期結腸癌、IV期性腺外非精原細胞生殖細胞腫瘤、IV期性腺外精原細胞瘤、IV期黑色素瘤、IV期卵巢生殖細胞腫瘤、IV期直腸癌、睪丸未成熟畸胎瘤、睪丸成熟畸胎瘤。在特定實施例中，靶向癌症包括雌激素受體陽性、HER2陰性晚期乳癌、晚期轉移性乳癌、脂肪肉瘤、非小細胞肺癌、肝癌、卵巢癌、神經膠質母細胞瘤、難治性固態腫瘤、視網膜母細胞瘤陽性乳癌以及視網膜母細胞瘤陽性子宮內膜癌、陰道癌及卵巢癌以及肺癌及支氣管癌、轉移性結直腸癌、CDK4突變或擴增之轉移性黑色素瘤，或順鉑難治性、不可切除之生殖細胞腫瘤、肺癌、骨癌、胰臟癌、皮膚癌、頭部或頸部癌症、皮膚或眼內黑色素瘤、子宮癌、卵巢癌、直腸癌、肛門區域癌症、胃癌、結腸癌、乳癌、子宮癌、輸卵管癌、子宮內膜癌、宮頸癌、陰道癌、外陰癌、食道癌、小腸癌、內分泌系統癌、甲狀腺癌、副甲狀腺癌、腎上腺癌、軟組織肉瘤、尿道癌、陰莖癌、前列腺癌、膀胱癌、腎或輸尿管癌、腎細胞癌、腎盂癌、中樞神經系統(CNS)之贅瘤、原發性CNS (中樞神經系統)淋巴瘤、脊椎軸腫瘤、腦幹神經膠質瘤、垂體腺瘤、纖維肉瘤、黏液肉瘤、軟骨肉瘤、骨肉瘤、脊索瘤、惡性纖維組織細胞瘤、血管肉瘤(hemangiosarcoma)、血管肉瘤(angiosarcoma)、淋巴管肉瘤、間皮瘤、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、鱗狀細胞癌；表皮樣癌、惡性皮膚附件腫瘤、腺癌、肝癌、肝細胞癌、腎細胞癌、腎上腺瘤、膽管癌、移行細胞癌、絨毛膜癌、精原細胞瘤、胚胎細胞癌、退行性神經膠質瘤；多形性神經膠質母細胞瘤、神經母細胞瘤、髓母細胞瘤、惡性腦膜瘤、惡性神經鞘瘤、神經纖維肉瘤、副甲狀腺癌、甲狀腺髓質癌、支氣管類癌、嗜鉻細胞瘤、胰島細胞癌、惡性類癌、惡性副神經節瘤、黑色素瘤、默克爾細胞(Merkel cell)贅瘤、葉狀囊肉瘤、唾液腺癌、胸腺癌、膀胱癌及威爾姆斯瘤(Wilms tumor)、血液病症或血液惡性腫瘤，包括但不限於骨髓病症、淋巴病症、白血病、淋巴瘤、骨髓發育不良症候群(MDS)、骨髓增生性疾病(MPD)、肥大細胞病症及骨髓瘤(例如，多發性骨髓瘤)，其中，T細胞或NK細胞淋巴瘤，例如但不限於：周圍T細胞淋巴瘤；退行性大細胞淋巴瘤，例如退行性淋巴瘤激酶(ALK)陽性、ALK陰性退行性大細胞淋巴瘤或原發性皮膚退行性大細胞淋巴瘤；血管免疫母細胞淋巴瘤；皮膚T細胞淋巴瘤，例如蕈狀肉芽腫、Sézary症候群、原發性皮膚退行性大細胞淋巴瘤、原發性皮膚CD30+ T細胞淋巴球增生性病症；原發性皮膚侵襲性親表皮性CD8+細胞毒性T細胞淋巴瘤；原發性皮膚γ-δ T細胞淋巴瘤；原發性皮膚小/中型CD4+ T細胞淋巴瘤及淋巴瘤樣丘疹病；成人T細胞白血病/淋巴瘤(ATLL)；母細胞性NK細胞淋巴瘤；腸病變型T細胞淋巴瘤；肝脾γ-δ T細胞淋巴瘤；淋巴母細胞淋巴瘤；鼻NK/T細胞淋巴瘤；治療相關之T細胞淋巴瘤；例如固態器官或骨髓移植後出現的淋巴瘤；T細胞前淋巴球白血病；T細胞大顆粒淋巴球白血病；NK細胞慢性淋巴球增生性病症；侵襲性NK細胞白血病；兒童期全身性EBV+ T細胞淋巴球增生性疾病(與慢性活動性EBV感染相關)；種痘水皰病樣淋巴瘤；成人T細胞白血病/淋巴瘤；腸病變相關之T細胞淋巴瘤；肝脾T細胞淋巴瘤；或皮下脂層炎樣T細胞淋巴瘤。
在一些實施例中，本文描述之方法可用於治療患有淋巴瘤或淋巴球或骨髓細胞增殖病症或異常之個體，例如人類。例如，如本文所述之方法可以投與患有霍奇金淋巴瘤或非霍奇金淋巴瘤之個體。例如，個體可以患有非霍奇金淋巴瘤，諸如但不限於：AIDS相關淋巴瘤；退行性大細胞淋巴瘤；血管免疫母細胞淋巴瘤；母細胞性NK細胞淋巴瘤；伯奇氏淋巴瘤(Burkitt’s Lymphoma)；伯奇樣淋巴瘤(小非裂細胞淋巴瘤)；慢性淋巴球白血病/小淋巴球淋巴瘤；皮膚T細胞淋巴瘤；瀰漫性大B細胞淋巴瘤；腸病變型T細胞淋巴瘤；濾泡性淋巴瘤；肝脾γ-δ T細胞淋巴瘤；淋巴母細胞淋巴瘤；被套細胞淋巴瘤；邊緣區淋巴瘤；鼻T細胞淋巴瘤；小兒淋巴瘤；周圍T細胞淋巴瘤；原發性中樞神經系統淋巴瘤；T細胞白血病；轉化淋巴瘤；治療相關T細胞淋巴瘤；或瓦登斯特隆巨球蛋白血症(Waldenstrom's Macroglobulinemia)，霍奇金淋巴瘤，諸如但不限於：結節性硬化症經典霍奇金淋巴瘤(CHL)；混合細胞性CHL；淋巴球耗竭CHL；富含淋巴球之CHL；淋巴球為主型霍奇金淋巴瘤；或結節性淋巴球為主之HL，特定的B細胞淋巴瘤或增生性病症，諸如但不限於：多發性骨髓瘤；瀰漫性大B細胞淋巴瘤；濾泡性淋巴瘤；黏膜相關淋巴組織淋巴瘤(MALT)；小細胞淋巴球淋巴瘤；縱隔大B細胞淋巴瘤；結節邊緣區B細胞淋巴瘤(NMZL)；脾邊緣區淋巴瘤(SMZL)；血管內大B細胞淋巴瘤；原發性滲出液淋巴瘤；或淋巴瘤樣肉芽腫病；B細胞前淋巴球白血病；毛細胞白血病；脾淋巴瘤/白血病，無法分類；脾瀰漫性紅髓小B細胞淋巴瘤；毛細胞白血病變異型；淋巴漿細胞淋巴瘤；重鏈疾病，例如，α重鏈疾病、γ重鏈疾病、μ重鏈疾病；漿細胞骨髓瘤；骨孤立性漿細胞瘤；骨外漿細胞瘤；原發性皮膚毛囊中心淋巴瘤；富含T細胞/組織細胞之大B細胞淋巴瘤；與慢性炎症相關之DLBCL；Epstein-Barr二氏病毒(EBV)+老年人DLBCL；原發性縱隔(胸腺)大B細胞淋巴瘤；原發性皮膚DLBCL，腿型；ALK+大B細胞淋巴瘤；漿母細胞淋巴瘤；HHV8相關之多中心性大B細胞淋巴瘤；Castleman氏病；B細胞淋巴瘤，無法分類，其特徵介於瀰漫性大B細胞淋巴瘤之間；或B細胞淋巴瘤，無法分類，其特徵介於瀰漫性大B細胞淋巴瘤與經典霍奇金淋巴瘤之間，白血病，例如淋巴球或骨髓來源之急性或慢性白血病，諸如但不限於：急性淋巴母細胞白血病(ALL)；急性骨髓性白血病(AML)；慢性淋巴球白血病(CLL)；慢性骨髓性白血病(CML)；幼年型骨髓單核球白血病(JMML)；毛細胞白血病(HCL)；急性前骨髓細胞白血病(AML的一種亞型)；大顆粒淋巴球白血病；或成人T細胞慢性白血病。在一些實施例中，患者患有急性骨髓性白血病，例如未分化之AML (M0)；骨髓母細胞性白血病(M1；伴有/沒有最小細胞成熟)；骨髓母細胞性白血病(M2；伴有細胞成熟)；前骨髓細胞白血病(M3或M3變異型[M3V])；骨髓單核球白血病(M4或伴有嗜酸性球增多的M4變異型[M4E])；單核球白血病(M5)；紅白血病(M6)；或巨核母細胞白血病(M7)、小細胞肺癌、視網膜母細胞瘤、HPV陽性惡性腫瘤(如宮頸癌及某些頭頸癌)、MYC擴增腫瘤(諸如伯奇氏淋巴瘤)及三陰性乳癌；某些類別肉瘤、某些類別非小細胞肺癌、某些類別黑色素瘤、某些類別胰臟癌、某些類別白血病、某些類別淋巴瘤、某些類別腦癌、某些類別結腸癌、某些類別前列腺癌、某些類別卵巢癌、某些類別子宮癌、某些類別甲狀腺癌及其他內分泌組織癌、某些類別唾液腺癌、某些類別胸腺癌、某些類別腎癌、某些類別膀胱癌及某些類別睪丸癌。
在某些態樣中，如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽可用於保存器官或血液產品或防止器官或血液產品受損。例如，本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽可用於防止為移植而採集之器官、組織、細胞產品或血液產品受損。在一些實施例中，器官為心臟、腎臟、胰臟、肺、肝或腸。在一些實施例中，組織源自角膜、骨、肌腱、肌肉、心臟瓣膜、神經、動脈或靜脈，或皮膚。在一些實施例中，血液產品為全血、血漿、紅血球或網狀紅血球。
在一些實施例中，如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或組合物預防或延遲個體中補體介導之疾病或病症的至少一種症狀之發作。在一些實施例中，如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或組合物減少或消除個體中補體介導之疾病或病症的至少一種症狀。症狀之實例包括但不限於與自體免疫疾病、癌症、血液疾病、傳染病、發炎性疾病、缺血-再灌注損傷、神經退化性疾病、神經退化性病症、腎臟病、移植排斥、眼部疾病、血管疾病或血管炎病症相關的症狀。症狀可以為神經系統症狀，例如認知功能受損、記憶障礙、運動功能喪失等。症狀亦可為個體細胞、組織或體液中C1s蛋白之活性。症狀亦可為個體之細胞、組織或體液中補體活化的程度。
在一些實施例中，向個體投與如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或組合物調節個體之細胞、組織或體液中的補體活化。在一些實施例中，向個體投與如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或組合物抑制個體之細胞、組織或體液中的補體活化。例如，在一些實施例中，如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或組合物當作為單一療法或組合療法以一或多個劑量投與患有補體介導之疾病或病症的個體時，與用本文所述之化合物治療之前個體中的補體活化相比，將個體中之補體活化抑制至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%或超過90%。
在一些實施例中，如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或組合物減少C3沉積於紅血球上；例如，在一些實施例中，如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或組合物減少C3b、iC3b等沉積於紅血球(RBC)上。在一些實施例中，如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或組合物抑制補體介導之紅血球裂解。
在一些實施例中，如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或組合物減少C3沉積於血小板上；例如，在一些實施例中，如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或組合物減少C3b、iC3b等沉積於血小板上。
在一些實施例中，投與如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或組合物導致選自由以下組成之群的結果：(a)補體活化減少；(b)認知功能改善；(c)神經元損失減少；(d)神經元中磷酸化Tau蛋白水準降低；(e)神經膠細胞活化減少；(f)淋巴球浸潤減少；(g)巨噬細胞浸潤減少；(h)抗體沉積減少，(i)神經膠細胞損失減少；(j)寡樹突膠細胞損失減少；(k)樹突細胞浸潤減少；(l)嗜中性球浸潤減少；(m)紅血球裂解減少；(n)紅血球吞噬作用減少；(o)血小板吞噬作用減少；(p)血小板溶解減少；(q)移植物存活率改善；(r)巨噬細胞介導之吞噬作用減少；(s)視力改善；(t)運動控制之改善；(u)血栓形成之改善；(v)凝血之改善；(w)腎功能之改善；(x)抗體介導之補體活化的減少；(y)自體抗體介導之補體活化的減少；(z)貧血之改善；(aa)脫髓鞘之減少；(ab)嗜酸性球增多之減少；(ac)紅血球上C3沉積之減少(例如，C3b、iC3b等在RBC上沉積之減少)；及(ad)血小板上C3沉積之減少(例如，血小板上C3b、iC3b等沉積的減少)；及(ae)過敏毒素產生之減少；(af)自體抗體介導之水皰形成的減少；(ag)自體抗體誘導之瘙癢的減少；(ah)自體抗體誘導之紅斑的減少；(ai)自體抗體介導之皮膚侵蝕的減少；(aj)因輸血反應引起之紅血球破壞的減少；(ak)因異體抗體引起之紅血球裂解的減少；(al)因輸血反應引起之溶血的減少；(am)異體抗體介導之血小板溶解的減少；(an)因輸血反應引起之血小板溶解的減少；(ao)肥大細胞活化之減少；(ap)肥大細胞組胺釋放之減少；(aq)血管滲透性之降低；(ar)水腫之減少；(as)移植物內皮上補體沉積的減少；(at)移植物內皮中過敏毒素產生之減少；(au)真皮-表皮接合處分離之減少；(av)真皮-表皮接合處過敏毒素產生之減少；(aw)移植物內皮中異體抗體介導之補體活化的減少；(ax)抗體介導之神經肌肉接合處損失之減少；(ay)神經肌肉接合處補體活化之減少；(az)神經肌肉接合處過敏毒素產生之減少；(ba)神經肌肉接合處補體沉積之減少；(bb)癱瘓之減少；(bc)麻木之減輕；(bd)膀胱控制增加；(be)腸道控制增加；(bf)與自體抗體相關之死亡率降低；及(bg)與自體抗體相關之發病率降低。
在一些實施例中，如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或組合物當以一或多個劑量投與患有補體介導之疾病或病症的個體時，與用活性化合物或其鹽治療之前個體的結果水準或程度相比，有效實現一或多種以下結果之至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%或超過90%的降低：(a)補體活化；(b)認知功能下降；(c)神經元損失；(d)神經元中之磷酸化Tau蛋白水準；(e)神經膠細胞活化；(f)淋巴球浸潤；(g)巨噬細胞浸潤；(h)抗體沉積，(i)神經膠細胞損失；(j)寡樹突膠細胞損失；(k)樹突細胞浸潤；(l)嗜中性球浸潤；(m)紅血球裂解；(n)紅血球吞噬作用；(o)血小板吞噬作用；(p)血小板溶解；(q)移植物排斥反應；(r)巨噬細胞介導之吞噬作用；(s)視力損失；(t)抗體介導之補體活化；(u)自體抗體介導之補體活化；(v)脫髓鞘作用；(w)嗜酸性球增多。
在一些實施例中，如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或組合物當以一或多個劑量投與患有補體介導之疾病或病症的個體時，與用活性化合物或其鹽治療之前個體的結果水準或程度相比，有效實現一或多種以下結果之至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%或超過90%的改善：a)認知功能；b)移植物存活率；c)視力；d)運動控制；e)血栓形成；f)凝血；g)腎功能；及h)血容比(紅血球計數)。
在一些實施例中，向個體投與如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或組合物減少該個體中之補體活化。例如，在一些實施例中，如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或組合物，當以一或多個劑量投與患有補體介導之疾病或病症的個體時，與用活性化合物或其鹽治療之前個體中之補體活化相比，減少個體中之補體活化至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%或超過90%。
在一些實施例中，投與如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或組合物改善個體之認知功能。例如，在一些實施例中，本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)，當以一或多個劑量投與患有補體介導之疾病或病症的個體時，與用活性化合物或其鹽治療之前個體之認知功能相比，改善個體之認知功能至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%或超過90%。
在一些實施例中，投與如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或組合物降低個體認知功能下降之速率。例如，在一些實施例中，化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽，當以一或多個劑量投與患有補體介導之疾病或病症的個體時，與用活性化合物或其鹽治療之前個體認知功能下降之速率相比，降低個體認知功能下降之速率至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%或超過90%。
在一些實施例中，向個體投與如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或組合物減少該個體之神經元損失。例如，在一些實施例中，化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽，當以一或多個劑量投與患有補體介導之疾病或病症的個體時，與用活性化合物或其鹽治療之前個體之神經元損失相比，減少個體之神經元損失至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%或超過90%。
在一些實施例中，向個體投與如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或組合物降低該個體之磷酸化Tau蛋白水準。例如，在一些實施例中，化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽，當以一或多個劑量投與患有補體介導之疾病或病症的個體時，與用活性化合物或其鹽治療之前個體之磷酸化Tau蛋白水準相比，減少個體之磷酸化Tau蛋白至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%或超過90%。
在一些實施例中，向個體投與如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或組合物減少該個體中之神經膠細胞活化。例如，在一些實施例中，化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽，當以一或多個劑量投與患有補體介導之疾病或病症的個體時，與用活性化合物或其鹽治療之前個體中之神經膠細胞活化相比，減少個體中之神經膠細胞活化至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%或超過90%。在一些實施例中，神經膠細胞為星狀神經膠細胞或微神經膠細胞。
在一些實施例中，向個體投與如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或組合物減少該個體中之淋巴球浸潤。例如，在一些實施例中，化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽，當以一或多個劑量投與患有補體介導之疾病或病症的個體時，與用活性化合物或其鹽治療之前個體中之淋巴球浸潤相比，減少個體中之淋巴球浸潤至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%或超過90%。
在一些實施例中，向個體投與如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或組合物減少該個體中之巨噬細胞浸潤。例如，在一些實施例中，化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽，當以一或多個劑量投與患有補體介導之疾病或病症的個體時，與用活性化合物或其鹽治療之前個體中之巨噬細胞浸潤相比，減少個體中之巨噬細胞浸潤至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%或超過90%。
在一些實施例中，向個體投與如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或組合物減少該個體中之抗體沉積。例如，在一些實施例中，化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽，當以一或多個劑量投與患有補體介導之疾病或病症的個體時，與用活性化合物或其鹽治療之前個體中之抗體沉積相比，減少個體中之抗體沉積至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%或超過90%。
在一些實施例中，向個體投與如本文所述之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或組合物減少該個體中過敏毒素(例如C3a、C4a、C5a)產生。例如，在一些實施例中，化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽，當以一或多個劑量投與患有補體介導之疾病或病症的個體時，與用活性化合物或其鹽治療之前個體中之過敏毒素產生水準相比，減少個體中之過敏毒素產生至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%或超過90%。
本揭示案提供一種本揭示案之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽或包含本揭示案之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽以及醫藥學上可接受之賦形劑的醫藥組合物治療患有補體介導之疾病或病症的個體之用途。在一些實施例中，本揭示案提供一種本揭示案之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽治療患有補體介導之疾病或病症的個體之用途。在一些實施例中，本揭示案提供一種包含本揭示案之化合物(例如式(I)、(II)、(III)、(IIIA)、(IV)、(IVA)、(V)、(VA)、(VI)、(VIA)、(VII)或(VIIA)或表1之化合物)或其鹽以及醫藥學上可接受之賦形劑的醫藥組合物治療患有補體介導之疾病或病症的個體之用途。 實例
以下實例僅為說明性的，且不應被解釋為以任何方式限製本揭示案之範圍，因為許多變化及等同物對於彼等熟習此項技術者而言在閱讀本揭示案後將變得顯而易見。本申請案通篇引用之所有參考文獻、專利及專利申請案的內容都以引用之方式明確併入本文。 實例 1. 本揭示案化合物之非限制性合成實例
以下方案為製得本揭示案之化合物之方法的非限制性實例。熟練之技工將認識到可以進行各種修飾以製得類似物或以其他方式製備化合物。 縮寫
Ac 2O 乙酸酐
AcOH 乙酸
BH 3·Me 2S 硼烷二甲硫醚
BF 3·Et 2O 三氟化硼合乙醚
Boc 2O 二碳酸二- 三級丁酯
BnBr 溴化苄基
MeOH 甲醇
DBU 1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯
DCM 二氯甲烷
DIBAL-H 二異丁基氫化鋁
DIEA、DIPEA N,N-二異丙基乙胺
DMAP 4-二甲胺基吡啶
DMF N,N-二甲基甲醯胺
DMSO 二甲亞碸
DPPA 二苯基磷醯基疊氮化物
EtOAc 乙酸乙酯
EtOH 乙醇
Et 3N或TEA 三甲胺
FA 甲酸
HATU 1-[雙(二甲胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽
HBTU 2-(1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸鹽
LDA 二異丙胺鋰
MeCN 乙腈
MeI 碘甲烷
MsCl 甲磺醯氯
NBS N-溴琥珀醯亞胺
NMP N-甲基-2-吡咯啶酮
Pd(dppf)Cl 2 [1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(II)
Pd(PPh 3) 4 四(三苯基膦)鈀(0)
Pd(PPh 3) 2Cl 2 雙(三苯基膦)二氯化鈀(II)
Pd/C 碳載鈀
PE 石油醚
PhSO 2Cl 苯磺醯氯
PPh 3 三苯基膦
PyBOP 六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯啶基鏻
T3P或T 3P 丙烷膦酸酐
t-BuOK 三級丁醇鉀
Tf 2O 三氟甲磺酸酐
TFA 三氟乙酸
THF 四氫呋喃
Ti(OEt) 4 乙醇鈦(IV)
TMEDA N,N,N′,N′-四甲基乙二胺
TMSCHN 2 三甲基矽基重氮甲烷
一般方法
所有非水反應均在乾燥氬氣或氮氣氛圍下使用無水溶劑進行。使用本文揭示之兩種液相層析(LC)方法A或B之一測定反應進程及目標化合物的純度。起始材料、中間物及最終產物之結構係藉由標準分析技術(包括NMR光譜法及質譜法)來確認。 LC 方法 A儀器：Waters Acquity Ultra Performance LC 管柱：ACQUITY UPLC BEH C18 2.1´ 50 mm，1.7 mm 柱溫：40℃ 流動相：溶劑A：H 2O+0.05% FA；溶劑B：CH 3CN + 0.05% FA 流率：0.8 mL/min 梯度：0.24 min @ 15% B，3.5 min梯度(15-85% B)，然後0.5 min @ 85% B。 偵測：UV (210-410 nm)及MS (ES+ 模式下之SQ) 流程 1. (1S,3S,5S)-N-((7- 胺基 -4,5- 二氫噻吩并 [ 2,3-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基苄醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 1) 之合成 步驟 1 ： 7- 側氧基 -4,7- 二氫噻吩并 [2,3-c] 吡啶 -6(5H)- 甲酸三級丁酯
在-5℃下向PPh 3(1.91 g，6.86 mmol)於DCM (10 mL)之溶液中逐滴添加Tf 2O (970 mg, 3.43 mmol)且在N 2氛圍，-5℃下攪拌0.5小時。將(2-(噻吩-3-基)乙基)胺甲酸三級丁酯(650 mg，2.86 mmol)於DCM (10 mL)中之溶液添加至攪拌反應混合物中且在-5℃下攪拌15分鐘，然後添加BF 3-Et 2O (2.03 g，14.30 mmol)且在-5℃下攪拌1小時。混合物用飽和NaHCO 3水溶液淬滅，用DCM稀釋且用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮至乾。將殘餘物溶解於THF (10 mL)中，添加(Boc) 2O (1.87 g，8.58 mmol)及DMAP (105 mg，0.86 mmol)，將混合物在室溫下攪拌隔夜。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮至乾。藉由急速層析法(PE中之0-12% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之7-側氧基-4,7-二氫噻吩并[2,3-c]吡啶-6(5H)-甲酸三級丁酯(600 mg，產率82.8%)。LC/MS (ESI) (m/z): 254 (M+H) +。 步驟 2 ： 2- 溴 -5,6- 二氫噻吩并 [2,3-c] 吡啶 -7(4H)- 酮
向7-側氧基-4,7-二氫噻吩并[2,3-c]吡啶-6(5H)-甲酸三級丁酯(600 mg，2.37 mmol)於MeCN (6 mL)之溶液中逐滴添加Br 2(568 mg，3.55 mmol)於MeCN (2 mL)中之溶液且將混合物在0℃下攪拌8小時。混合物用Na 2S 2O 3水溶液淬滅且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮至乾。藉由急速層析法(PE中之0-50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之2-溴-5,6-二氫噻吩并[2,3-c]吡啶-7(4H)-酮(300 mg，產率54.6%)。LC/MS (ESI) (m/z): 232/234 (M+H) +。 步驟 3 ： 7- 側氧基 -4,5,6,7- 四氫噻吩并 [2,3-c] 吡啶 -2- 甲腈
在0℃下向2-溴-5,6-二氫噻吩并[2,3-c]吡啶-7(4H)-酮(100 mg，0.43 mmol)於NMP (3 mL)之溶液中添加Zn(CN) 2(127 mg，1.08 mmol)及Pd(PPh 3) 4，且將混合物在120℃下攪拌6小時。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮至乾。藉由急速層析法(PE中之0-60% EtOAc)純化殘餘物，得到呈淺色油狀物之7-側氧基-4,5,6,7-四氫噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲腈(65 mg，產率84.7%)。LC/MS (ESI) m/z: 179 (M+H) +。 步驟 4 ： ((7- 側氧基 -4,5,6,7- 四氫噻吩并 [2,3-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 胺甲酸三級丁酯
在0℃下向7-側氧基-4,5,6,7-四氫噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲腈(65 mg，0.37 mmol)於THF (3 mL)之溶液中添加(Boc) 2O (159 mg，0.73 mmol)，隨後添加雷氏Ni (30 mg)且反應混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在H 2氣球下於室溫攪拌4小時。將混合物過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 20: 1)純化殘餘物，得到呈淺色油狀物之((7-側氧基-4,5,6,7-四氫噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基)甲基)胺甲酸三級丁酯(49 mg，產率47.6%)。LC/MS (ESI) m/z: 283 (M+H) +。 步驟 5 ： ((7- 硫酮 -4,5,6,7- 四氫噻吩并 [2,3-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 胺甲酸三級丁酯
向((7-側氧基-4,5,6,7-四氫噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基)甲基)胺甲酸三級丁酯(49 mg，0.17 mmol)於THF (3 mL)之溶液中添加勞森試劑(Lawesson's Reagent)(140 mg，0.35 mmol)且將混合物在室溫下攪拌3小時。將混合物濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 20: 1)純化殘餘物，得到呈淺色油狀物之((7-硫酮-4,5,6,7-四氫噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基)甲基)胺甲酸三級丁酯(25 mg，產率48.3%)。LC/MS (ESI) m/z: 299 (M+H) +。 步驟 6 ： ((7-( 甲硫基 )-4,5- 二氫噻吩并 [2,3-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 胺甲酸三級丁酯
向((7-硫酮-4,5,6,7-四氫噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基)甲基)胺甲酸三級丁酯(25 mg，0.084 mmol)於DMF (2 mL)之溶液中添加MeI (0.4 mL)且將混合物在0℃下攪拌2小時。將混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色油狀物之((7-(甲硫基)-4,5-二氫噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基)甲基)胺甲酸三級丁酯(26 mg，產率99.3%)，其未經進一步純化直接用於下一反應。LC/MS (ESI) m/z: 313 (M+H) +。 步驟 7 ： ((7- 胺基 -4,5- 二氫噻吩并 [2,3-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 胺甲酸三級丁酯
向((7-(甲硫基)-4,5-二氫噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基)甲基)胺甲酸三級丁酯(26 mg，0.083 mmol)於DMF (2 mL)之溶液中添加NH 3.MeOH (1 mL，7 M)，將混合物在50℃下攪拌24小時。將混合物濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化殘餘物，得到呈淺色油狀物之((7-胺基-4,5-二氫噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基)甲基)胺甲酸三級丁酯(20 mg，產率85.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 282 (M+H) +。 步驟 8 ： 2-( 胺基甲基 )-4,7- 二氫噻吩并 [2,3-c] 吡啶 -7- 胺鹽酸鹽
將((7-胺基-4,5-二氫噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基)甲基)胺甲酸三級丁酯(20 mg，0.071 mmol)於HCl/1,4-二噁烷(2 mL，4 M)中之溶液在N 2氛圍，室溫下攪拌4小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，與DCM共蒸發且在真空下乾燥，得到呈黃色固體之2-(胺基甲基)-4,7-二氫噻吩并[2,3-c]吡啶-7-胺鹽酸鹽(15 mg，產率96.9%)，其未經進一步純化直接用於下一反應。LC/MS (ESI) m/z: 182 (M+H) +。 步驟 9 ： (1S,3S,5S)-N-((7- 胺基 -4,5- 二氫噻吩并 [2,3-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基苄醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 1)
在0℃下向2-(胺基甲基)-4,7-二氫噻吩并[2,3-c]吡啶-7-胺鹽酸鹽(15 mg，0.069 mmol)及(1S,3S,5S)-5-甲基-2-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸(27 mg，0.069 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (45 mg，0.68 mmol)及HATU (31 mg，0.083 mmol)且將混合物在N 2氛圍，室溫下攪拌1小時。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 1(3.0 mg，產率7.8%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.88 - 7.78 (m, 2H), 7.43 (t, J= 8.0 Hz, 2H), 7.21 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 7.11 - 7.02 (m, 3H), 7.02 - 6.95 (m, 2H), 4.84 - 4.81 (m, 1H), 4.68 - 4.57 (m, 2H), 4.44 - 4.27 (m, 2H), 3.61 - 3.53 (m, 2H), 3.46 - 3.36 (m, 1H), 3.00 - 2.86 (m, 2H), 2.59 - 2.39 (m, 1H), 2.24 - 2.05 (m, 1H), 1.31 (s, 3H), 1.19 - 0.99 (m, 1H), 0.92 - 0.79 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 558 (M+H) +。RT (方法A): 1.29 min。
基於流程1中之步驟9來製備以下化合物：
化合物編號 反應物A 反應物B 特性化資料
2 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.67 (d, J= 44.7 Hz, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.93 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 7.83 (dd, J= 7.8, 1.5 Hz, 1H), 7.67 (dd, J= 15.9, 7.7 Hz, 3H), 7.57 (t, J= 7.3 Hz, 1H), 7.45 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 7.24 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 6.60 (d, J= 26.9 Hz, 1H), 4.64 (d, J= 7.9 Hz, 2H), 4.59 (d, J= 4.1 Hz, 1H), 4.26 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.20 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 4.04 - 4.00 (m, 4H), 3.89 - 3.81 (m, 2H), 2.47 (dd, J= 13.4, 8.9 Hz, 1H), 2.29 (dd, J= 13.2, 6.1 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) (m/z): 588 (M+H) +。RT (方法A): 1.22 min
3 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.12 (s, 1H), 7.86 - 7.79 (m, 1H), 7.72 - 7.63 (m, 3H), 7.56 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 7.44 (t, J= 7.2 Hz, 1H), 7.34 (t, J= 11.8 Hz, 1H), 7.18 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 6.89 (ddd, J= 12.6, 9.0, 6.7 Hz, 2H), 6.34 (d, J= 25.8 Hz, 1H), 4.62 (t, J= 7.5 Hz, 2H), 4.54 (d, J= 15.6 Hz, 1H), 4.22 (s, 2H), 4.02 - 3.97 (m, 4H), 3.83 (s, 2H), 2.45 (dd, J= 13.3, 9.0 Hz, 1H), 2.28 (dd, J= 13.1, 6.2 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) (m/z): 587 (M+H) +。RT (方法A): 2.29 min。
7 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.93 - 8.77 (m, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 8.03 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 7.84 (dd, J= 7.8, 1.4 Hz, 1H), 7.73 - 7.62 (m, 4H), 7.59 - 7.53 (m, 2H), 7.46 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 6.80 (d, J= 21.7 Hz, 1H), 4.76 (d, J= 3.4 Hz, 1H), 4.38 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 4.22 (ddd, J= 25.6, 16.3, 10.5 Hz, 5H), 3.10 (s, 3H), 2.85 - 2.77 (m, 1H), 2.53 - 2.46 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 608 (M+H) +。RT (方法A): 1.09 min。
8 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.89 (d, J= 69.9 Hz, 1H), 8.08 (s, 1H), 8.01 (d, J= 6.6 Hz, 1H), 7.84 (dd, J= 7.8, 1.5 Hz, 1H), 7.67 (dd, J= 15.5, 5.7 Hz, 3H), 7.57 (dd, J= 9.1, 7.1 Hz, 2H), 7.45 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 6.89 (t, J= 19.3 Hz, 1H), 6.54 (t, J= 74.5 Hz, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.73 - 4.61 (m, 3H), 4.32 - 4.22 (m, 2H), 4.06 (dd, J= 11.6, 4.4 Hz, 1H), 3.94 (d, J= 11.7 Hz, 1H), 2.58 - 2.50 (m, 1H), 2.31 (ddd, J= 13.4, 8.2, 4.8 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 596 (M+H) +。RT (方法A): 1.29 min。
11 LC/MS (ESI) m/z: 555 (M+H) +。RT (方法A): 2.21 min。
12 LC/MS (ESI) m/z: 506 (M+H) +。RT (方法A): 1.52 min。
13 LC/MS (ESI) m/z: 552 (M+H) +。RT (方法A): 2.63 min。
14 LC/MS (ESI) m/z: 505 (M+H) +。RT (方法A): 1.86 min。
15 LC/MS (ESI) m/z: 506 (M+H) +。RT (方法A): 1.02 min。
17 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.95 (d, J= 56.9 Hz, 1H), 8.17 (dd, J= 67.4, 6.4 Hz, 1H), 7.87 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.70 – 7.64 (m, 5H), 7.48 (t, J= 7.5 Hz, 2H), 7.40 (t, J= 7.4 Hz, 1H), 6.96 (d, J= 39.8 Hz, 1H), 4.76 – 4.69 (m, 2H), 4.66 – 4.63 (m, 1H), 4.28 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.16 – 4.11 (m, 1H), 3.99 (d, J= 28.8 Hz, 4H), 3.86 (q, J= 10.8 Hz, 2H), 2.49 (dd, J= 12.9, 9.1 Hz, 1H), 2.28 (dd, J= 13.2, 6.1 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 540 (M+H) +。RT (方法A): 1.21 min。
18 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.94 (s, 1H), 8.17 (d, J= 6.7 Hz, 1H), 7.84 (dd, J= 6.9, 1.9 Hz, 2H), 7.72 (d, J= 6.6 Hz, 1H), 7.43 (t, J= 7.9 Hz, 2H), 7.22 (t, J= 7.4 Hz, 1H), 7.07 (d, J= 8.6 Hz, 2H), 7.01 - 6.96 (m, 2H), 6.93 (s, 1H), 6.54 (t, J= 74.4 Hz, 1H), 5.06 (s, 1H), 4.75 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 4.63 (dd, J= 17.6, 9.7 Hz, 2H), 4.24 (s, 2H), 4.02 (dd, J= 11.6, 4.4 Hz, 1H), 3.92 (d, J= 11.7 Hz, 1H), 2.57 - 2.48 (m, 1H), 2.35 - 2.25 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 564 (M+H) +。RT (方法A): 1.38 min。
19 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.48 – 7.43 (m, 2H), 7.32 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.17 – 7.14 (m, 2H), 7.09 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 7.05 – 7.02 (m, 1H), 6.87 (dd, J= 8.6, 2.0 Hz, 1H), 6.27 (s, 1H), 4.58 (dd, J= 14.4, 7.5 Hz, 3H), 4.15 (s, 2H), 4.01 (d, J= 1.6 Hz, 4H), 3.80 (d, J= 3.7 Hz, 2H), 2.43 (dd, J= 13.2, 8.9 Hz, 1H), 2.26 (dd, J= 13.1, 6.2 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 619 (M+H) +。RT (方法A): 2.64 min。
20 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 9.02 - 8.94 (m, 1H), 8.23 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 7.88 - 7.83 (m, 1H), 7.21 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 6.98 - 6.91 (m, 1H), 6.87 (t, J = 9.0 Hz, 3H), 4.71 - 4.64 (m, 2H), 4.62 - 4.57 (m, 1H), 4.09 - 3.92 (m, 9H), 3.75 (s, 1H), 2.49 - 2.42 (m, 3H), 2.25 (dd, J = 13.1, 5.7 Hz, 1H), 2.06 (dt, J = 13.6, 4.3 Hz, 2H)。LC/MS (ESI) m/z: 522(M+H) +。RT (方法A): 0.92 min。
24 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.81 (s, 1H), 8.06 (d, J= 6.5 Hz, 1H), 7.59 (d, J= 8.5 Hz, 2H), 7.49 (s, 1H), 7.21 (d, J= 7.1 Hz, 1H), 7.16 – 7.10 (m, 2H), 7.06 – 6.99 (m, 2H), 6.81 (s, 1H), 4.77 (s, 1H), 4.63 (dd, J= 9.2, 6.4 Hz, 2H), 4.22 (d, J= 16.2 Hz, 1H), 4.08 (s, 1H), 4.02 (s, 4H), 3.85 (d, J= 16.1 Hz, 2H), 2.51 – 2.45 (m, 1H), 2.28 (dd, J= 13.3, 5.9 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 586 (M+H) +。RT (方法A): 1.30 min。
28 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.88 (s, 1H), 8.15 (t, J= 5.3 Hz, 1H), 7.86 - 7.78 (m, 2H), 7.64 (t, J= 5.6 Hz, 1H), 7.43 (dd, J= 10.8, 5.2 Hz, 2H), 7.21 (t, J= 7.4 Hz, 1H), 7.08 - 6.93 (m, 4H), 6.84 (d, J= 17.6 Hz, 1H), 4.90 (d, J= 3.7 Hz, 1H), 4.70 - 4.60 (m, 2H), 4.44 - 4.31 (m, 2H), 3.43 (dt, J= 12.2, 6.1 Hz, 1H), 2.49 (ddd, 1H), 2.17 (ddd 1H), 1.33 (d, J= 3.3 Hz, 3H), 1.28 - 1.22 (m, 1H), 0.86 (t, J= 5.8 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 524 (M+H) +。RT (方法A): 1.39 min。
29 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.55 - 7.43 (m, 2H), 7.34 (t, J= 15.0 Hz, 1H), 7.23 - 7.09 (m, 4H), 7.09 - 6.99 (m, 2H), 6.97 - 6.84 (m, 2H), 6.33 (d, 1H), 4.64 - 4.48 (m, 3H), 4.23 - 4.06 (m, 2H), 3.95 (d, 4H), 3.74 (d, J= 14.7 Hz, 2H), 2.44 (dd, 1H), 2.36 - 2.17 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 585 (M+H) +。RT (方法A): 2.47 min。
36 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.64 (d, J= 32.9 Hz, 1H), 7.95 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.57 – 7.46 (m, 2H), 7.26 – 7.12 (m, 4H), 7.10 – 7.01 (m, 2H), 6.71 – 6.32 (m, 2H), 5.04 (s, 1H), 4.69 (d, J= 16.0 Hz, 1H), 4.57 (dd, J= 22.6, 12.2 Hz, 2H), 4.30 – 4.12 (m, 2H), 4.02 – 3.86 (m, 2H), 2.65 – 2.45 (m, 1H), 2.41 – 2.23 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 594 (M+H) +。RT (方法A): 1.34 min。
40 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.84 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 8.48 (s, 1H), 7.98 – 7.82 (m, 3H), 7.43 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 7.39 - 7.34 (m, 1H), 7.22 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.06 (dd, J = 18.6, 8.4 Hz, 4H), 6.77 (d, J = 3.9 Hz, 1H), 5.32 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 4.62 (dd, J = 9.3, 7.9 Hz, 1H), 4.35 (d, J = 16.8 Hz, 1H), 4.15 (d, J = 16.9 Hz, 1H), 4.09 - 3.88 (m, 2H), 3.73 (dd, J = 17.7, 5.1 Hz, 2H), 3.45 (s, 3H), 2.59 - 2.48 (m, 1H), 2.33 - 2.17 (m, 1H), 1.63 (d, J = 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 574 (M+H) +。RT (方法A): 1.31 min。
44 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.81 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.08 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 7.73 – 7.28 (m, 3H), 7.23 – 6.99 (m, 5H), 6.77 (s, 1H), 4.90 (d, J= 3.2 Hz, 1H), 4.65 (s, 2H), 4.34 (d, J= 5.9 Hz, 2H), 3.44 (d, J= 3.9 Hz, 1H), 2.47 (t, J= 12.6 Hz, 1H), 2.22 (dd, J= 13.3, 3.6 Hz, 1H), 1.32 (s, 3H), 1.25 (d, J= 3.3 Hz, 1H), 0.88 (t, J= 5.9 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 554 (M+H) +。RT (方法A): 1.43 min。
58 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.91 (t, J= 9.2 Hz, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.20 (dd, J= 6.3, 3.6 Hz, 1H), 7.74 (dd, J= 11.6, 6.6 Hz, 1H), 7.25 – 7.16 (m, 2H), 6.89 – 6.78 (m, 4H), 4.83 (d, J= 3.4 Hz, 1H), 4.69 – 4.51 (m, 2H), 4.20 (dd, J= 35.9, 16.6 Hz, 2H), 3.97 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 3.35 (dd, J= 6.0, 2.4 Hz, 1H), 2.50 – 2.38 (m, 3H), 2.23 – 2.01 (m, 3H), 1.27 (d, J= 17.6 Hz, 3H), 1.21 (dd, J= 5.6, 2.3 Hz, 1H), 0.87 (dd, J= 33.2, 28.0 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) (m/z): 490 (M+H) +。RT (方法A): 1.05 min。
76 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.61 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 7.98 (d, J= 6.1 Hz, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.71 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 7.64 (d, J= 7.1 Hz, 1H), 7.61 - 7.52 (m, 3H), 7.49 - 7.42 (m, 2H), 6.73 (d, J= 26.2 Hz, 1H), 5.33 (t, J= 6.6 Hz, 1H), 4.95 (d, J= 3.4 Hz, 1H), 4.49 (d, J= 16.0 Hz, 1H), 4.23 (d, J= 15.9 Hz, 1H), 3.52 (dd, J= 5.9, 2.3 Hz, 1H), 2.51 (t, J= 12.2 Hz, 1H), 2.28 (dd, J= 13.5, 3.4 Hz, 1H), 1.73 (d, J= 7.0 Hz, 3H), 1.34 (s, 3H), 1.20 (dd, J= 5.8, 2.2 Hz, 1H), 0.94 (t, J= 6.1 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 570 (M+H) +。RT (方法A): 1.35 min。
77 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.67 (s, 1H), 8.57 - 8.12 (m, 1H), 8.03 - 7.86 (m, 2H), 7.77 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.65 (d, J= 7.5 Hz, 2H), 7.58 (dd, J= 13.3, 6.8 Hz, 2H), 7.46 (dd, J= 14.1, 6.7 Hz, 2H), 6.78 - 6.35 (m, 2H), 5.33 (q, J= 7.0 Hz, 1H), 5.05 (s, 1H), 4.62 (t, J= 8.1 Hz, 1H), 4.30 (d, J= 16.3 Hz, 1H), 4.18 (t, J= 12.8 Hz, 1H), 4.10 (dd, J= 11.6, 4.4 Hz, 1H), 3.95 (d, J= 11.6 Hz, 1H), 2.64 - 2.46 (m, 1H), 2.37 - 2.24 (m, 1H), 1.71 (d, J= 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 610 (M+H) +。RT (方法A): 1.41 min。
91 b 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.61 (s, 1H), 8.84 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.45 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 8.04 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.74 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.63 – 7.50 (m, 1H), 7.35 (ddd, J= 13.3, 7.9, 3.3 Hz, 1H), 7.28 – 7.22 (m, 1H), 7.18 (td, J= 8.4, 2.5 Hz, 1H), 6.92 (d, J= 12.3 Hz, 1H), 6.72 (s, 1H), 6.56 (s, 1H), 5.16 (t, J= 7.2 Hz, 1H), 5.05 (p, J= 7.0 Hz, 1H), 4.89 (s, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.63 (t, J= 7.3 Hz, 1H), 4.46 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 4.44 – 4.29 (m, 2H), 3.80 (dd, J= 11.4, 4.6 Hz, 1H), 3.76 – 3.67 (m, 1H), 3.62 – 3.54 (m, 1H), 2.28 (ddd, J= 12.6, 8.2, 4.0 Hz, 1H), 2.06 (ddd, J= 13.1, 7.5, 5.0 Hz, 1H), 1.40 (d, J= 6.9 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 610 (M+H) +。RT (方法A): 1.52 min。
95 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.81 (d, J= 6.1 Hz, 1H), 8.49 (d, J= 6.6 Hz, 1H), 8.16 - 7.96 (m, 1H), 7.92 - 7.81 (m, 2H), 7.46 (dd, J= 89.2, 6.1 Hz, 1H), 7.17 (dt, J= 14.3, 4.3 Hz, 2H), 7.11 (dd, J= 9.2, 4.5 Hz, 2H), 7.02 (dd, J= 16.2, 9.3 Hz, 2H), 6.80 (t, J= 9.0 Hz, 1H), 5.29 (t, J= 5.7 Hz, 1H), 4.82 - 4.74 (m, 2H), 4.71 - 4.64 (m, 1H), 4.35 (d, J= 17.0 Hz, 1H), 4.13 (dd, J= 17.6, 14.5 Hz, 2H), 4.05 - 3.94 (m, 2H), 3.93 (dd, J= 7.2, 4.0 Hz, 1H), 2.73 - 2.41 (m, 1H), 2.39 - 2.19 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 596 (M+H) +。RT (方法A): 1.23 min。
110 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.33 (s, 1H), 7.68 (d, J= 4.6 Hz, 1H), 7.49 (dd, J= 6.5, 4.0 Hz, 1H), 7.37 (dd, J= 15.7, 7.7 Hz, 1H), 7.23 – 7.17 (m, 2H), 7.15 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.06 (dd, J= 18.5, 7.8 Hz, 2H), 6.61 (d, J= 8.9 Hz, 1H), 4.79 (dd, J= 11.4, 3.4 Hz, 1H), 4.31 (d, J= 8.9 Hz, 1H), 4.25 (dd, J= 9.5, 5.4 Hz, 2H), 3.61 (d, J= 7.0 Hz, 1H), 3.38 (dd, J= 5.9, 2.3 Hz, 1H), 2.47 – 2.37 (m, 4H), 2.14 (dd, J= 13.4, 3.4 Hz, 1H), 1.29 (s, 3H), 1.18 (t, J= 7.0 Hz, 1H), 0.81 (t, J= 5.7 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 544 (M+H) +。RT (方法A): 1.43 min。
114 b 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.02 (s, 1H), 8.97 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 8.93 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.86 (t, J= 5.4 Hz, 1H), 8.73 (t, J= 5.2 Hz, 1H), 8.66 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 8.52 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 8.35 – 8.19 (m, 3H), 8.13 – 7.99 (m, 2H), 7.87 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.77 (t, J= 8.6 Hz, 3H), 7.49 (q, J= 7.7 Hz, 3H), 7.43 (t, J= 7.0 Hz, 1H), 7.04 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 6.38 (s, 1H), 5.10 (p, J= 8.1 Hz, 1H), 4.37 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 4.27 – 4.04 (m, 3H), 4.02 – 3.81 (m, 6H), 3.75 (d, J= 10.8 Hz, 1H), 3.58 (d, J= 10.8 Hz, 1H), 2.26 (dd, J= 13.0, 8.4 Hz, 1H), 2.08 (dd, J= 12.9, 8.0 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 555 (M+H) +。RT (方法A): 1.25 min。
121 b 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.17 (s, 1H), 9.04 – 8.52 (m, 2H), 8.16 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.85 – 7.71 (m, 2H), 7.35 (t, J= 8.6 Hz, 1H), 7.19 – 7.03 (m, 2H), 6.49 (s, 1H), 6.40 (s, 1H), 4.54 (dd, J= 14.3, 9.9 Hz, 2H), 4.47 – 4.26 (m, 2H), 3.96 (qt, J= 9.5, 4.2 Hz, 2H), 3.83 (d, J= 10.7 Hz, 1H), 3.67 (dd, J= 11.5, 6.4 Hz, 1H), 2.35 (dd, J= 13.1, 8.4 Hz, 1H), 2.11 (dd, J= 13.1, 7.3 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 570 (M+H) +。RT (方法A): 1.32 min。
139 b 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.15 (s, 1H), 8.73 – 8.62 (m, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.36 (t, J= 5.8 Hz, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.96 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.88 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.71 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 7.22 – 6.94 (m, 2H), 6.29 (s, 1H), 4.65 (dd, J= 11.3, 3.3 Hz, 1H), 4.40 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 4.30 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 4.02 (dd, J= 16.5, 5.8 Hz, 1H), 3.46 – 3.33 (m, 3H), 2.24 (t, J= 12.1 Hz, 1H), 2.00 (dd, J= 13.2, 3.3 Hz, 1H), 1.08 (s, 3H), 0.99 – 0.72 (m, 1H), 0.64 (t, J= 5.6 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 592 (M+H) +。RT (方法A): 1.76 min。
141 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.86 (s, 1H), 8.22 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 7.79 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 7.49 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.41 (s, 2H), 7.22 - 7.13 (m, 3H), 7.05 (dd, J= 16.3, 8.0 Hz, 2H), 6.51 (t, J= 74.5 Hz, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.77 (s, 1H), 4.62 (dd, J= 19.6, 11.8 Hz, 2H), 4.19 (s, 2H), 4.00 (d, J= 7.3 Hz, 1H), 3.88 (d, J= 11.2 Hz, 1H), 2.49 (dd, J= 13.8, 7.7 Hz, 1H), 2.32 - 2.21 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 571 (M+H) +。RT (方法A): 4.20 min。
192 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.97 (d, J= 17.5 Hz, 1H), 7.71 (d, J= 16.3 Hz, 1H), 7.52 - 7.44 (m, 3H), 7.40 - 7.32 (m, 1H), 7.22 - 7.13 (m, 3H), 7.09 - 7.02 (m, 2H), 6.48 (td, J= 74.5, 17.2 Hz, 1H), 5.00 (d, J= 3.4 Hz, 1H), 4.59 (dd, J= 15.2, 7.4 Hz, 1H), 4.55 - 4.45 (m, 2H), 4.31 - 4.10 (m, 2H), 3.96 (dd, J= 11.5, 4.7 Hz, 1H), 3.85 (d, J= 12.7 Hz, 1H), 2.66 - 2.42 (m, 1H), 2.37 - 2.18 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 594 (M+H) +。RT (方法A): 2.00 min。
193 LC/MS (ESI) m/z: 594 (M+H) +。RT (方法A): 1.54 min。
195 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.49 (dd, J= 8.4, 4.6 Hz, 3H), 7.32 (dd, J= 13.9, 8.4 Hz, 1H), 7.21 - 7.13 (m, 4H), 7.06 (ddd, J= 14.4, 7.8, 2.9 Hz, 3H), 6.68 - 6.39 (m, 1H), 6.37 - 6.26 (m, 1H), 4.95 (d, J= 31.0 Hz, 1H), 4.58 (dd, J= 15.9, 8.1 Hz, 1H), 4.46 (d, J= 5.1 Hz, 2H), 4.25 (dd, J= 17.0, 4.6 Hz, 1H), 4.14 (dd, J= 18.5, 8.7 Hz, 1H), 3.94 (d, J= 11.3 Hz, 1H), 3.82 (d, J= 15.6 Hz, 1H), 2.44 (dd, J= 12.8, 8.9 Hz, 1H), 2.36 - 2.20 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 593 (M+H) +。RT (方法A): 2.23 min。
196 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.47 - 7.61 (m, 3H), 7.35 (s, 1H), 7.19 - 7.11 (m, 4H), 7.08 - 6.99 (m, 2H), 6.93 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 6.68 - 6.38 (m, 1H), 6.36 - 6.25 (m, 1H), 4.98 - 4.90 (m, 1H), 4.69 - 4.56 (m, 1H), 4.53 - 4.44 (m, 2H), 4.31 - 4.03 (m, 2H), 3.97 - 3.88 (m, 1H), 3.86 - 3.78 (m, 1H), 2.64 - 2.41 (m, 1H), 2.35 - 2.19 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 593 (M+H) +。RT (方法A): 1.60 min。
199 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.95 (d, J= 24.1 Hz, 1H), 7.69 (dd, J= 28.2, 8.4 Hz, 1H), 7.52 - 7.43 (m, 3H), 7.23 - 7.13 (m, 3H), 7.10 - 7.02 (m, 3H), 6.70 - 6.28 (m, 1H), 4.97 (d, J= 38.4 Hz, 1H), 4.64 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 4.53 (t, J= 9.6 Hz, 2H), 4.29 - 4.13 (m, 2H), 3.98 (dd, J= 11.5, 4.6 Hz, 1H), 3.87 (d, J= 11.3 Hz, 1H), 2.63 - 2.44 (m, 1H), 2.37 - 2.22 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 594 (M+H) +。RT (方法A): 2.05 min。
201 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.61 - 8.52 (m, 2H), 8.06 - 7.99 (m, 2H), 7.82 (dd, J= 6.2, 1.0 Hz, 1H), 7.65 (d, J= 8.5 Hz, 2H), 7.56 (t, J= 7.8 Hz, 1H), 7.42 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 7.22 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 6.59 (s, 1H), 4.74 - 4.64 (m, 2H), 4.59 (d, J= 15.5 Hz, 1H), 4.29 (q, J= 16.7 Hz, 2H), 4.11 - 3.93 (m, 2H), 3.76 - 3.70 (m, 2H), 3.45 (s, 3H), 2.65 - 2.52 (m, 1H), 2.34 - 2.19 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 558 (M+H) +。RT (方法A): 1.27 min。
202 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.58 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.99 (dd, J= 8.7, 1.8 Hz, 1H), 7.89 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 7.62 (t, J= 4.3 Hz, 2H), 7.55 (s, 1H), 7.43 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.22 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 6.57 (d, J= 31.4 Hz, 1H), 4.76 (dd, J= 8.6, 5.0 Hz, 1H), 4.63 (d, J= 10.2 Hz, 2H), 4.34 (d, J= 14.6 Hz, 2H), 4.25 - 4.19 (m, 3H), 3.10 (s, 3H), 2.79 (dd, J= 10.0, 3.8 Hz, 1H), 2.53 - 2.46 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 574 (M+H) +。RT (方法A): 1.14 min。
206 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 9.25 (d, J= 17.7 Hz, 1H), 8.49 - 8.35 (m, 2H), 7.79 (d, J= 9.3 Hz, 1H), 7.53 - 7.36 (m, 2H), 7.22 - 7.12 (m, 3H), 7.07 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 7.00 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 5.45 (dq, J= 13.6, 6.8 Hz, 1H), 4.72 - 4.56 (m, 1H), 4.15 - 4.04 (m, 2H), 4.04 - 3.99 (m, 3H), 3.96 (dd, J= 8.4, 5.6 Hz, 1H), 3.83 - 3.74 (m, 2H), 2.50 - 2.37 (m, 1H), 2.36 - 2.11 (m, 1H), 1.72 (dd, J= 32.7, 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 617 (M+H) +。RT (方法A): 1.60 min。
207 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.18 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.88 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 7.76 - 7.63 (m, 4H), 7.57 (d, J= 3.8 Hz, 2H), 7.44 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 6.54 (t, J= 74.4 Hz, 1H), 5.39 - 5.35 (m, 1H), 5.06 (s, 1H), 4.65 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 4.34 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.19 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.01 - 3.97 (m, 1H), 3.90 (d, J= 10.9 Hz, 1H), 2.20 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 2.05 (s, 1H), 1.66 (d, J= 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 627 (M+H) +。RT (方法A): 1.48 min。
208 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.95 (s, 1H), 8.26 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.90 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.51 (d, J= 13.1 Hz, 2H), 7.46 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.18 (d, J= 8.1 Hz, 2H), 7.13 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.09 - 7.05 (m, 1H), 7.01 (dd, J= 8.0, 1.1 Hz, 1H), 6.52 (t, J= 74.5 Hz, 1H), 5.36 (d, J= 6.1 Hz, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.62 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 4.25 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.10 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 3.95 (dd, J= 11.4, 4.8 Hz, 1H), 3.85 (d, J= 12.6 Hz, 1H), 2.66 - 2.44 (m, 1H), 2.40 - 2.22 (m, 1H), 1.67 (dd, J= 26.1, 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 625 (M+H) +。RT (方法A): 1.61 min。
209 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 9.01 (s, 1H), 8.30 (dd, J= 8.6, 5.7 Hz, 1H), 7.99 (t, J= 8.3 Hz, 1H), 7.82 (dd, J= 24.2, 8.8 Hz, 2H), 7.57 (s, 1H), 7.42 (t, J= 7.9 Hz, 2H), 7.20 (t, J= 7.4 Hz, 1H), 7.06 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 6.99 (d, J= 8.7 Hz, 2H), 6.50 (td, J= 74.5, 15.4 Hz, 1H), 5.48 - 5.34 (m, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.62 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 4.31 - 4.08 (m, 2H), 3.97 - 3.78 (m, 2H), 2.48 (dd, J= 12.9, 8.8 Hz, 1H), 2.40 - 2.22 (m, 1H), 1.68 (dd, J= 25.5, 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 595 (M+H) +。RT (方法A): 1.50 min。
212 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.59 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.15 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 7.97 (dd, J= 28.6, 5.8 Hz, 2H), 7.87 - 7.80 (m, 3H), 7.53 (t, J= 6.7 Hz, 2H), 7.46 (d, J= 6.7 Hz, 1H), 6.83 (s, 1H), 4.73 - 4.61 (m, 3H), 4.33 (d, J= 16.3 Hz, 1H), 4.15 (s, 1H), 4.05 (s, 4H), 3.97 (d, J= 10.7 Hz, 1H), 3.88 (d, J= 10.8 Hz, 1H), 2.52 (dd, J= 13.1, 9.1 Hz, 1H), 2.31 (dd, J= 13.3, 5.7 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 570 (M+H) +。RT (方法A): 1.28 min。
221 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.38 - 8.30 (m, 1H), 7.65 (t, J= 6.6 Hz, 2H), 7.51 - 7.47 (m, 1H), 7.45 - 7.42 (m, 1H), 7.36 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 7.21 - 7.13 (m, 3H), 7.09 - 7.03 (m, 2H), 6.61 (d, J= 74.5 Hz, 1H), 5.03 - 4.99 (m, 1H), 4.60 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 4.56 (s, 2H), 4.24 - 4.13 (m, 2H), 4.00 - 3.95 (m, 1H), 3.86 (d, J= 11.3 Hz, 1H), 2.52 - 2.45 (m, 1H), 2.28 - 2.21 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 595 (M+H) +。RT (方法A): 2.10 min。
231 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.95 (d, J= 0.8 Hz, 1H), 8.27 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.87 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 7.50 - 7.46 (m, 3H), 7.21 - 7.16 (m, 2H), 7.14 (s, 1H), 7.09 - 7.07 (m, 1H), 7.02 - 6.99 (m, 1H), 5.36 - 5.31 (m, 1H), 4.89 (d, J= 3.3 Hz, 1H), 4.40 - 4.35 (m, 1H), 4.27 - 4.21 (m, 1H), 3.38 (dd, J= 5.8, 2.1 Hz, 1H), 2.47 - 2.39 (m, 1H), 2.23 - 2.17 (m, 1H), 1.65 (d, J= 6.9 Hz, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.19 - 1.15 (m, 1H), 0.79 - 0.74 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 585 (M+H) +。RT (方法A): 1.65 min。
233 1H NMR (400 MHz,CD 3OD): δ 8.46 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.50 (dd, J= 11.5, 5.3 Hz, 3H), 7.44 (s, 1H), 7.37 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.21 - 7.13 (m, 3H), 7.10 - 7.06 (m, 1H), 7.03 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 6.52 (t, J= 74.5 Hz, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.59 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 4.46 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 4.20 (s, 2H), 4.00 (dd, J= 11.5, 4.5 Hz, 1H), 3.88 (d, J= 11.8 Hz, 1H), 2.55 - 2.45 (m, 1H), 2.30 - 2.20 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 594 (M+H) +。RT (方法A): 1.45 min。
247 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.15 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.96 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.53 - 7.47 (m, 2H), 7.32 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 7.22 - 7.14 (m, 3H), 7.10 - 7.02 (m, 2H), 6.69 - 6.32 (m, 2H), 5.02 - 4.97 (m, 1H), 4.58 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 4.51 (d, J = 2.4 Hz, 2H), 4.27 - 4.11 (m, 2H), 3.95 (dd, J = 11.4, 4.6 Hz, 1H), 3.85 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 2.50 – 2.43 (m, 1H), 2.25 – 2.18 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 594 (M+H) +。RT (方法A): 1.93 min。
250 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.54 – 7.45 (m, 4H), 7.35 – 7.27 (m, 2H), 7.23 – 7.18 (m, 2H), 7.15 (dd, J= 7.7, 1.5 Hz, 1H), 7.06 (dd, J= 15.6, 7.8 Hz, 2H), 4.83 (d, J= 3.2 Hz, 1H), 4.48 – 4.33 (m, 3H), 4.29 – 4.25 (m, 1H), 3.39 – 3.36 (m, 1H), 2.41 (t, J= 12.7 Hz, 1H), 2.20 – 2.14 (m, 1H), 1.29 (s, 3H), 1.22 – 1.09 (m, 1H), 0.83 – 0.75 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 558 (M+H) +。RT (方法A): 2.06 min。
263 LC/MS (ESI) m/z: 558 (M+H) +。RT (方法A): 1.94 min。
269 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.82 (s, 1H), 8.23 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 7.88 (d, J= 0.5 Hz, 1H), 7.54 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.42 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.40 - 7.37 (m, 2H), 7.17 (s, 1H), 7.14 - 7.09 (m, 3H), 7.05 - 7.01 (m, 2H), 4.83 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 4.53 (s, 2H), 4.33 (s, 2H), 3.42 - 3.39 (m, 1H), 2.49 - 2.38 (m, 1H), 2.23 - 2.16 (m, 1H), 1.30 (s, 3H), 1.21 - 1.17 (m, 1H), 0.85 - 0.78 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 542 (M+H) +。RT (方法A): 1.41 min。
270 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.63 (d, J= 15.9 Hz, 1H), 8.02 (dd, J= 16.0 Hz, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.58 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.44 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 7.35 (d, J= 7.9 Hz, 2H), 7.28 (d, J= 4.6 Hz, 1H), 7.17 - 7.12 (m, 2H), 7.00 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 6.87 (d, J= 18.5 Hz, 1H), 6.69 - 6.27 (m, 1H), 5.02 - 4.98 (m, 1H), 4.60 - 4.56 (m, 1H), 4.52 (s, 2H), 4.22 - 4.14 (m, 2H), 3.99 - 3.94 (m, 1H), 3.85 (d, J= 10.4 Hz, 1H), 2.50 - 2.42 (m, 1H), 2.28 - 2.20 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 564 (M+H) +。RT (方法A): 1.35 min。
271 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.82 (d, J= 10.4 Hz, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.42 (d, J= 15.7 Hz, 2H), 7.30 (d, J= 18.3 Hz, 3H), 7.23 - 7.14 (m, 3H), 7.06 (d, J= 21.4 Hz, 2H), 4.66 (s, 1H), 4.62 (d, 1H), 4.55 (d, 1H), 4.35 (d, 1H), 4.29 (d, 1H), 3.43 (s, 1H), 2.53 - 2.43 (m, 1H), 2.26 - 2.16 (m, 1H), 1.32 (s, 3H), 1.25 - 1.18 (m, 1H), 0.89 - 0.84 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 554 (M+H) +。RT (方法A): 1.46 min。
277 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.76 (s, 1H), 8.16 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.54 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.42 - 7.31 (m, 5H), 7.16 - 7.07 (m, 3H), 6.99 (d, J= 7.8 Hz, 2H), 4.83 (s, 1H), 4.51 (s, 2H), 4.32 (s, 2H), 3.43 - 3.36 (m, 1H), 2.42 (t, J= 13.0 Hz, 1H), 2.24 - 2.10 (m, 1H), 1.29 (s, 3H), 1.20 - 1.15 (m, 1H), 0.83 - 0.76 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 524 (M+H) +。RT (方法A): 1.37 min。
278 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.59 (s, 1H), 7.98 (d, J= 4.7 Hz, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.59 – 7.55 (m, 1H), 7.46 – 7.41 (m, 2H), 7.28 (d, J= 5.0 Hz, 1H), 7.17 – 7.10 (m, 3H), 7.09 – 7.05 (m, 1H), 7.05 – 7.00 (m, 2H), 6.69 – 6.31 (m, 1H), 5.02 – 4.99 (m, 1H), 4.60 – 4.57 (m, 2H), 4.55 – 4.50 (m, 2H), 4.24 – 4.14 (m, 2H), 4.00 – 3.94 (m, 1H), 3.87 – 3.82 (m, 1H), 2.52 – 2.43 (m, 1H), 2.28 – 2.19 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 582 (M+H) +。RT (方法A): 1.39 min。
280 LC/MS (ESI) m/z: 546 (M+H) +。RT (方法A): 1.43 min
281 LC/MS (ESI) m/z: 534 (M+H) +。RT (方法A): 1.56 min
286 LC/MS (ESI) m/z: 622 (M+H) +。RT (方法A): 1.68 min
373 b 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.66 (t, J= 5.6 Hz, 1H), 8.30 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 7.87 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 7.44 (t, J= 7.8 Hz, 1H), 7.38 – 7.27 (m, 1H), 7.22 (dd, J= 15.8, 7.9 Hz, 1H), 7.09 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.06 – 6.99 (m, 1H), 4.86 – 4.55 (m, 1H), 4.42 – 4.24 (m, 1H), 4.22 (t, J= 5.1 Hz, 1H), 4.04 (dd, J= 16.4, 5.4 Hz, 1H), 3.51 (d, J= 6.5 Hz, 1H), 3.43 (dd, J= 6.1, 2.4 Hz, 1H), 2.28 (t, J= 12.4 Hz, 1H), 2.00 (dd, J= 13.3, 3.2 Hz, 1H), 1.23-1.98 (m, 3H), 1.18 (d, J= 6.7 Hz, 1H), 0.93 (s, 3H), 0.64– 0.47 (m, 2H)。LC/MS (ESI) m/z: 518 (M+H) +。RT (方法A): 2.52 min。
a使用PyBOP代替HATU。 b使用T 3P代替HATU。
可以基於流程1中之步驟9用以下反應物製備化合物359、360及363-365：
化合物編號 反應物A 反應物B
359
360
363
364
365
流程 2. (S)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 4) 之合成 步驟 1 ：啡㗁噻 -3- 甲酸 (2)
在0℃下向啡㗁噻-2-甲酸甲酯(400 mg，1.55 mmol)於MeOH (5 mL)/THF (1 mL)/ H 2O (2 mL)之溶液中添加LiOH·H 2O (195.3 mg，4.65 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色固體之啡㗁噻-3-甲酸(370 mg，產率97.8%)，其未經純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) (m/z): 245 (M+H) +。 步驟 2 ： ( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺酸甲酯 (3)
在N 2氛圍，0℃下向啡㗁噻-3-甲酸(370 mg，1.52 mmol)及甘胺酸甲酯(380.6 mg，3.04 mmol)於DMF (5 mL)之混合物中添加DIPEA (1.17 g，9.12 mmol)及HATU (691.5 mg，1.82 mmol)且將混合物在25℃下攪拌2小時。混合物用EtOAc稀釋且用水洗滌兩次。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 33% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之(啡㗁噻-3-羰基)甘胺酸甲酯(428 mg，產率89.6%)。LC/MS (ESI) m/z: 316 (M+H) +。 步驟 3 ： ( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺酸 (4)
在0℃下向(啡㗁噻-3-羰基)甘胺酸甲酯(428 mg，1.36 mmol)於MeOH (5 mL)/THF (1 mL)/H 2O (2 mL)之溶液中添加LiOH·H 2O (171.2 mg，2.72 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3，然後用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之(啡㗁噻-3-羰基)甘胺酸(350 mg，產率85.6%)，其直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) (m/z): 302 (M+H) +。 步驟 4 ： (S)-7-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲酸甲酯 (5)
在N 2氛圍，0℃下向(啡㗁噻-3-羰基)甘胺酸(100 mg，0.33 mmol)及(S)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸甲酯(93.1 mg，0.49 mmol)於DMF (3.0 mL)之混合物中添加DIPEA (257 mg，1.98 mmol)及T 3P (633.9 mg，0.99 mmol，EtOAc中之50% wt)且將混合物在25℃下攪拌2小時。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 69% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之(S)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸甲酯(135 mg，產率86.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 471 (M+H) +。 步驟 5 ： (S)-7-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲酸 (6)
在0℃下向(S)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸甲酯(135 mg，0.29 mmol)於MeOH (3 mL)及H 2O (1 mL)之溶液中添加LiOH·H 2O (36.2 mg，0.87 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之(S)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸(110 mg，產率83.9%)，其直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) (m/z): 457 (M+H) +。 步驟 6 ： (S)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 4)
在0℃下向(S)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸(60 mg，0.13 mmol)及(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲胺(23.2 mg，0.16 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (101.8 mg，0.78 mmol)及HATU (60 mg，0.16 mmol)且將混合物在N 2氛圍，室溫下攪拌1小時。將混合物在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 14: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 4(15 mg，產率19.5%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.75 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.05 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 7.50 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 7.47 – 7.44 (m, 1H), 7.34 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.20 (dd, J= 4.0, 3.2 Hz, 1H), 7.16 – 7.13 (m, 2H), 7.11 – 7.08 (m, 1H), 7.03 – 7.00 (m, 1H), 6.76 (s, 1H), 4.71 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.63 (dd, J= 10.2, 7.2 Hz, 2H), 4.22 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.09 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.02 (d, J= 3.5 Hz, 4H), 3.88 (d, J= 10.8 Hz, 1H), 3.82 (d, J= 10.7 Hz, 1H), 2.51 – 2.45 (m, 1H), 2.31 – 2.25 (m, 1H)。LC/MS (ESI) (m/z): 586 (M+H) +。RT (方法A): 1.15 min。
基於流程2來製備以下化合物：
化合物編號 反應物A 反應物B 反應物C 反應物D 特性化資料
297 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.82 (s, 1H), 8.05 (d, J= 6.5 Hz, 1H), 7.76 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.58 (d, J= 8.5 Hz, 3H), 7.30 (d, J= 3.5 Hz, 1H), 6.84 - 6.80 (m, 2H), 4.71 - 4.66 (m, 2H), 4.65 - 4.61 (m, 1H), 4.25 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 4.11 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.04 - 4.01 (m, 4H), 3.90 - 3.81 (m, 2H), 2.52 (s, 3H), 2.50 - 2.42 (m, 1H), 2.31 - 2.25 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 560 (M+H) +。RT (方法A): 1.30 min。
319 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.79 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.05 (d, J= 6.3 Hz, 1H), 7.55 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 7.45 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 7.41 (d, J= 4.0 Hz, 2H), 7.12 - 7.07 (m, 2H), 7.05 (s, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.74 (s, 1H), 4.77 (d, J= 6.3 Hz, 1H), 4.69 (m, 2H), 4.64 (s, 1H), 4.57 (d, J= 16.3 Hz, 1H), 4.26 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.20 (s, 1H), 4.14 - 4.08 (m, 1H), 3.99 (d, J= 20.3 Hz, 1H), 2.67 - 2.57 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.30 - 2.17 (m, 1H)。LCMS (ESI) (m/z): 580 (M+H) +。RT (方法A): 1.49 min。
a僅步驟2-6。 流程 3. (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-1-((9,9- 二氟 -9H- 茀 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-4- 氟 -4-( 甲氧基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 5) 之合成 步驟 1 ： 2-(((2S,4R)-1-((9,9- 二氟 -9H- 茀 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-4- 氟 -4-( 甲氧基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺基 ) 甲基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -1- 甲酸三級丁酯
在N 2氛圍，0℃下向(2S,4R)-1-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-4-氟-4-(甲氧基甲基)吡咯啶-2-甲酸(50 mg，0.11 mmol)及2-(胺基甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-甲酸三級丁酯(55 mg，0.22 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (75 mg，0.58 mmol)及HATU (62 mg，0.16 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。反應混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 5% MeOH)純化殘餘物，得到呈淺色油狀物之2-(((2S,4R)-1-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-4-氟-4-(甲氧基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-甲酸三級丁酯(60 mg，產率93.8%)。LC/MS (ESI) (m/z): 692 (M+H) +。 步驟 2 ： (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-1-((9,9- 二氟 -9H- 茀 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-4- 氟 -4-( 甲氧基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 5)
向2-(((2S,4R)-1-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-4-氟-4-(甲氧基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-甲酸三級丁酯(60 mg，0.087 mmol)於DCM (3 mL)之溶液中添加TFA (3 mL)且將反應混合物在室溫下攪拌4小時。將混合物在減壓下濃縮至乾且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 5(10 mg，19.5%產率)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.81 (d, J= 53.6 Hz, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.13 (d, J= 20.8 Hz, 1H), 7.95 (d, J= 6.3 Hz, 1H), 7.85 (dd, J= 7.8, 1.4 Hz, 1H), 7.68 (dd, J= 15.0, 7.7 Hz, 3H), 7.57 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 7.45 (dd, J= 10.3, 6.9 Hz, 2H), 6.79 (d, J= 23.9 Hz, 1H), 4.74 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.69 – 4.61 (m, 2H), 4.35 – 4.22 (m, 2H), 4.14 – 3.94 (m, 2H), 3.80 – 3.68 (m, 2H), 3.43 (d, J= 16.9 Hz, 3H), 2.65 – 2.52 (m, 1H), 2.26 (ddd, J= 37.4, 14.2, 9.8 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) (m/z): 592 (M+H) +。RT (方法A): 1.20 min。
基於流程3來製備以下化合物：
化合物編號 反應物A 反應物B 特性化資料
6 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.83 (s, 1H), 8.08 (d, J= 3.6 Hz, 1H), 8.02 (dd, J= 6.7, 0.7 Hz, 1H), 7.84 (dd, J= 7.8, 1.5 Hz, 1H), 7.68 (t, J= 8.0 Hz, 3H), 7.62 (d, J= 6.7 Hz, 1H), 7.57 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 7.46 (t, J= 7.1 Hz, 1H), 6.91 (d, J= 0.7 Hz, 1H), 4.79 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 4.74 (s, 1H), 4.69 (t, J= 13.5 Hz, 3H), 4.28 (s, 2H), 4.20 – 4.01 (m, 2H), 2.73 – 2.61 (m, 1H), 2.30 (ddd, J= 35.8, 14.2, 9.5 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) (m/z): 580 (M+H) +。RT (方法A): 1.26 min。
313 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.51 (s, 1H), 7.58 - 7.52 (m, 1H), 7.50 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 7.26 - 7.14 (m, 3H), 7.10 - 7.03 (m, 2H), 6.83 - 6.27 (m, 2H), 5.10 - 4.91 (m, 1H), 4.60 - 4.42 (m, 3H), 4.21 - 4.03 (m, 4H), 3.99 - 3.83 (m, 2H), 3.43 - 3.36 (m, 2H), 3.04 - 2.95 (m, 2H), 2.66 - 2.41 (m, 1H), 2.36 - 2.17 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 615 (M+H) +。RT (方法A): 1.08 min。
339 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.53 (s, 1H), 7.57 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 7.44 - 7.40 (m, 2H), 7.11 - 7.07 (m, 2H), 7.03 (m, 2H), 6.76 (d, J= 14.3 Hz, 1H), 6.68 - 6.29 (m, 1H), 4.98 (d, J= 3.4 Hz, 1H), 4.52 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 4.47 (d, J= 5.8 Hz, 2H), 4.19 - 4.13 (m, 4H), 3.96 - 3.91 (m, 1H), 3.83 (d, J= 10.6 Hz, 1H), 3.27 (m, 2H), 2.76 (m, 2H), 2.46 - 2.39 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.24 - 2.16 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 617 (M+H) +。
a使用HCl/1,4-二噁烷代替步驟2中之TFA。
化合物340-345、348-351、361及362可以基於流程3用以下反應物製備：
化合物編號 反應物A 反應物B
340
341
342
343
344
345
348
349
350
351
361
362
流程 4 ： (S)-N-((1H- 吡咯并 [2,3-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-((9,9- 二氟 -9H- 茀 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 9) 步驟 1 ： 2-((( 三級丁氧基羰基 ) 胺基 ) 甲基 )-1H- 吡咯并 [2,3-c] 吡啶 -1- 甲酸三級丁酯 (2)
在N 2氛圍下向(4-碘吡啶-3-基)胺甲酸三級丁酯(2.0 g，6.25 mmol)及丙-2-炔-1-基胺甲酸三級丁酯(1.16 g，7.5 mmol)於TEA (10 mL)及DMSO (5 mL)之混合物中添加CuI (59.97 mg，0.31 mmol)及Pd(PPh 3) 2Cl 2(218.9 mg，0.31 mmol)且將反應混合物在N 2氛圍、50℃下攪拌16小時。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色固體之2-(((三級丁氧基羰基)胺基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-1-甲酸三級丁酯(550 mg，產率25.4 %)。LC/MS (ESI) m/z: 348 (M+H) +。 步驟 2 ： 2-( 胺基甲基 )-1H- 吡咯并 [2,3-c] 吡啶 -1- 甲酸三級丁酯鹽酸鹽 (3)
向2-(((三級丁氧基羰基)胺基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-1-甲酸三級丁酯(100 mg，0.29 mmol)於DCM (1 ml)及HCl/1,4-二噁烷(2 mL，4M)之溶液中且將混合物在室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈棕色固體之2-(胺基甲基)-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-1-甲酸三級丁酯鹽酸鹽(71 mg，產率99.7%)，其未經進一步純化直接用於下一反應。LC/MS (ESI) m/z: 248 (M+H) +。 步驟 3 ： (S)-2-((7-((9,9- 二氟 -9H- 茀 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺基 ) 甲基 )-1H- 吡咯并 [2,3-c] 吡啶 -1- 甲酸三級丁酯 (4)
在N 2氛圍，0℃下向(S)-7-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸(70 mg，0.15 mmol)及2-(胺基甲基)-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-1-甲酸三級丁酯鹽酸鹽(56.6 mg，0.23 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (118.3 mg，0.9 mmol)及PyBOP (79.5 mg，0.15 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化殘餘物，得到呈棕色固體之(S)-2-((7-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-1-甲酸三級丁酯(70 mg，產率54.9%)。LC/MS (ESI) m/z: 688 (M+H) +。 步驟 4 ： (S)-N-((1H- 吡咯并 [2,3-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-((9,9- 二氟 -9H- 茀 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 9)
向(S)-2-((7-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-1-甲酸三級丁酯(50 mg，0.07 mmol)於TFA (3 mL)及DCM (1 ml)之溶液中且將混合物在室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 9(20 mg，產率34.2%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.62 (s, 1H), 7.99 (d, J= 10.4 Hz, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.67 – 7.56 (m, 5H), 7.46 (dd, J= 7.1, 4.0 Hz, 1H), 6.70 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 4.77 (d, J= 15.7 Hz, 1H), 4.69 (d, J= 16.6 Hz, 2H), 4.30 (dd, J= 16.4, 2.1 Hz, 1H), 4.13 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 4.04 (s, 4H), 3.92 (d, J= 10.9 Hz, 1H), 3.86 (d, J= 10.8 Hz, 1H), 2.51 (dd, J= 13.1, 9.2 Hz, 1H), 2.29 (dd, J= 13.2, 5.7 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 588 (M+H) +。 流程 5. (S)-N-((1H- 吡咯并 [2,3-b] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-((9,9- 二氟 -9H- 茀 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 10) 之合成 步驟 1 ： (3- 碘吡啶 -2- 基 )( 三級丁氧基羰基 ) 胺甲酸三級丁酯
向3-碘吡啶-2-胺(4.17 g，0.019 mol)及Boc 2O (8.26 g，0.038 mol)於THF (40 mL)之混合物中添加4-DMAP (232 mg，0.0019 mol)且將混合物在室溫下攪拌隔夜。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 30% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之(3-碘吡啶-2-基)(三級丁氧基羰基)胺甲酸三級丁酯(7.4 g，產率92.6%)。LC/MS (ESI) m/z: 421 (M+H) +。 步驟 2 ： ( 三級丁氧基羰基 )(3-(3-(( 三級丁氧基羰基 ) 胺基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 胺甲酸三級丁酯
在N 2氛圍下向(3-碘吡啶-2-基)(三級丁氧基羰基)胺甲酸三級丁酯(2.0 g，4.76 mmol)及丙-2-炔-1-基胺甲酸三級丁酯(886 mg，5.71 mmol)於TEA (10 mL)及DMSO (5 mL)之混合物中添加CuI (46 mg，0.24 mmol)及Pd(PPh 3) 2Cl 2(167 mg，0.24 mmol)，混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在50℃下攪拌隔夜。將反應混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 30% EtOAc)純化殘餘物，得到呈棕色油狀物之(三級丁氧基羰基)(3-(3-((三級丁氧基羰基)胺基)丙-1-炔-1-基)吡啶-2-基)胺甲酸三級丁酯(1.5 g，產率70.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 448 (M+H) +。 步驟 3 ： ((1H- 吡咯并 [2,3-b] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 胺甲酸三級丁酯
向(三級丁氧基羰基)(3-(3-((三級丁氧基羰基)胺基)丙-1-炔-1-基)吡啶-2-基)胺甲酸三級丁酯(1.32 g，2.95 mmol)於MeOH (6 mL)/H 2O (6 mL)之溶液中添加DBU (899 mg，5.91 mmol)且將反應混合物在60℃下攪拌隔夜。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 15% MeOH)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈黃色油狀物之((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-基)甲基)胺甲酸三級丁酯(150 mg，產率20.1%)。LC/MS (ESI) m/z: 248 (M+H) +。 步驟 4 ： (1H- 吡咯并 [2,3-b] 吡啶 -2- 基 ) 甲胺鹽酸鹽
向((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-基)甲基)胺甲酸三級丁酯(150 mg，0.61 mmol)於DCM (2.0 mL)之溶液中添加1,4-二噁烷(1.0 mL，4M)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色固體之(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-基)甲胺鹽酸鹽(150 mg，粗品)，其未經純化直接用於下一反應。LC/MS (ESI) m/z: 148 (M+H) +。 步驟 5 ： (S)-N-((1H- 吡咯并 [2,3-b] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-((9,9- 二氟 -9H- 茀 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 10)
在N 2氛圍，0℃下向(S)-7-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸(80 mg，0.18 mmol)及(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-基)甲胺鹽酸鹽(51 mg，0.35 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (136 mg，1.05 mmol)及PyBOP (119 mg，0.23 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。反應混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型HPLC (DCM: MeOH= 8:1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 10(5.5 mg，產率5.2%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.13 (d, J = 28.8 Hz, 1H), 7.98 (t, J = 22.5 Hz, 1H), 7.82 (td, J = 15.5, 7.9 Hz, 2H), 7.66 (dd, J = 16.7, 7.4 Hz, 3H), 7.55 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.44 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.06 - 6.93 (m, 1H), 6.41 (d, J = 23.2 Hz, 1H), 4.69 - 4.57 (m, 3H), 4.29 - 4.17 (m, 2H), 3.99 (d, J = 27.1 Hz, 4H), 3.88 - 3.74 (m, 2H), 2.47 (dd, J = 13.1, 9.1 Hz, 1H), 2.29 (dd, J = 13.1, 5.8 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) (m/z): 588 (M+H) +。RT (方法A): 1.97 min。
基於流程5來製備以下化合物：
化合物編號 反應物A 反應物B 反應物C 特性化資料
42 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.68 (d, J= 68.9 Hz, 1H), 8.78 (d, J= 4.5 Hz, 1H), 8.56 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 7.85 (t, J= 17.3 Hz, 1H), 7.61 - 7.56 (m, 2H), 7.37 (d, J= 3.7 Hz, 1H), 7.29 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.24 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 7.12 (d, J= 9.0 Hz, 2H), 6.44 (s, 1H), 4.56 - 4.50 (m, 1H), 4.45 - 4.34 (m, 2H), 4.17 (dd, J= 16.7, 5.8 Hz, 1H), 4.03 - 3.94 (m, 5H), 3.80 (d, J= 11.1 Hz, 1H), 3.67 (d, J= 11.0 Hz, 1H), 2.33 (s, 1H), 2.13 - 2.07 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 620 (M+H) +。RT (方法A): 2.06 min。
43 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.39 (t, 1H), 7.52 - 7.45 (m, 1H), 7.39 (t, J= 12.0 Hz, 1H), 7.24 - 7.13 (m, 4H), 7.07 (dd, J= 11.2, 3.8 Hz, 1H), 7.02 (dd, J= 8.1, 1.1 Hz, 1H), 6.51 (t, J= 18.1 Hz, 1H), 4.64 - 4.56 (m, 3H), 4.15 (q, J= 16.5 Hz, 2H), 4.00 (dd, J= 11.3, 9.8 Hz, 4H), 3.83 (q, J= 10.7 Hz, 2H), 2.45 (dd, J= 13.1, 9.1 Hz, 1H), 2.27 (dd, J= 13.1, 6.2 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 620 (M+H) +。RT (方法A): 2.04 min。
48 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.46 (s, 1H), 7.49 (dd, J= 19.7, 6.8 Hz, 3H), 7.44 - 7.27 (m, 1H), 7.22 - 7.10 (m, 3H), 7.08 - 6.99 (m, 2H), 6.92 - 6.72 (m, 1H), 6.31 - 6.08 (m, 1H), 4.81 (s, 1H), 4.22 (dd, J= 24.0, 9.8 Hz, 2H), 4.17 - 3.90 (m, 5H), 3.82 (q, J= 10.6 Hz, 2H), 2.71 - 2.49 (m, 1H), 2.39 - 2.17 (m, 1H)。LC/MS (ESI) (m/z): 587 (M+H) +。RT (方法A): 1.43 min。
52 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.54 - 7.44 (m, 2H), 7.23 - 7.14 (m, 3H), 7.10 - 7.01 (m, 3H), 6.92 (dd, J= 28.2, 2.4 Hz, 1H), 6.64 (ddd, J= 37.2, 8.7, 2.2 Hz, 1H), 6.26 (d, J= 27.3 Hz, 1H), 4.62 - 4.49 (m, 3H), 4.13 (d, J= 12.6 Hz, 2H), 4.02 - 3.93 (m, 4H), 3.79 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 3.76 - 3.72 (m, 3H), 2.59 - 2.40 (m, 1H), 2.38 - 2.22 (m, 1H), 1.37 (d, J= 5.9 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) (m/z): 615 (M+H) +。RT (方法A): 2.33 min。
53 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.67 (d, J= 55.9 Hz, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.51 - 7.41 (m, 1H), 7.31 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 7.20 (dd, J= 10.8, 4.5 Hz, 1H), 7.15 - 7.06 (m, 3H), 7.00 (dd, J= 8.0, 0.9 Hz, 1H), 6.77 (d, J= 28.7 Hz, 1H), 4.72 (dd, J= 16.0, 5.3 Hz, 1H), 4.66 - 4.59 (m, 2H), 4.21 (d, J= 16.3 Hz, 1H), 4.15 - 4.04 (m, 1H), 4.03 (d, J= 7.4 Hz, 4H), 3.95 - 3.88 (m, 1H), 3.84 - 3.73 (m, 1H), 2.62 - 2.46 (m, 1H), 2.43 - 2.25 (m, 1H) LC/MS (ESI) (m/z): 620 (M+H) +。RT (方法A): 1.33 min。
流程 6. (S)-N-((7H- 吡咯并 [2,3-d] 嘧啶 -6- 基 ) 甲基 )-7-((9,9- 二氟 -9H- 茀 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 16) 之合成 步驟 1 ： (5- 碘嘧啶 -4- 基 ) 胺甲酸三級丁酯
在0℃下向5-碘嘧啶-4-胺(1.0 g，4.52 mmol)於THF (10 mL)之溶液中依次添加(Boc) 2O (1.97 g，9.05 mmol)及DMAP (55 mg，0.45 mmol)且將混合物在室溫下攪拌16小時。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之(5-碘嘧啶-4-基)胺甲酸三級丁酯(870 mg，產率59.8%)。LC/MS (ESI) m/z: 322 (M+H) +。 步驟 2 ： ((7H- 吡咯并 [2,3-d] 嘧啶 -6- 基 ) 甲基 ) 胺甲酸三級丁酯
在N 2氛圍下向(5-碘嘧啶-4-基)胺甲酸三級丁酯(400 mg，1.25 mmol)及丙-2-炔-1-基胺甲酸三級丁酯(290 mg，1.87 mmol)於TEA (3 mL)及DMSO (1.5 mL)之混合物中添加CuI (12 mg，0.063 mmol)及Pd(PPh 3) 2Cl 2(44 mg，0.063 mmol)，混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在50℃下攪拌隔夜。將反應混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 10% MeOH)純化殘餘物，得到呈棕色油狀物之((7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲基)胺甲酸三級丁酯(200 mg，產率64.3%)。LC/MS (ESI) m/z: 249 (M+H) +。 步驟 3 ： (7H- 吡咯并 [2,3-d] 嘧啶 -6- 基 ) 甲胺鹽酸鹽
將((7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲基)胺甲酸三級丁酯(200 mg，0.81 mmol)於HCl/1,4-二噁烷(2 mL，4M)中之溶液在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色固體之(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲胺鹽酸鹽(110 mg，產率91.7%)，其未經進一步純化直接用於下一反應。LC/MS (ESI) m/z: 149 (M+H) +。 步驟 4 ： (S)-N-((7H- 吡咯并 [2,3-d] 嘧啶 -6- 基 ) 甲基 )-7-((9,9- 二氟 -9H- 茀 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 16)
在N 2氛圍下向(S)-7-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸(50 mg，0.11 mmol)及(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲胺鹽酸鹽(26 mg，0.14 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (85 mg，0.66 mmol)及PyBOP (63 mg，0.12 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 8: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 16(10 mg，產率15.4%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.95 (d, J= 60.6 Hz, 1H), 8.78 (d, J= 49.1 Hz, 1H), 8.13 (d, J= 32.8 Hz, 1H), 7.80 (dd, J= 20.4, 7.5 Hz, 1H), 7.70 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 7.65 (d, J= 7.8 Hz, 2H), 7.57 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 7.45 (t, J= 7.3 Hz, 1H), 6.77 (d, J= 29.2 Hz, 1H), 4.73 – 4.63 (m, 3H), 4.28 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 4.15 (dd, J= 16.7, 8.5 Hz, 1H), 4.05 – 3.96 (m, 4H), 3.91 – 3.74 (m, 2H), 2.49 (dd, J= 13.2, 9.1 Hz, 1H), 2.29 (dd, J= 13.2, 5.6 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 589 (M+H) +。RT (方法A): 1.52 min。
基於流程6來製備以下化合物：
化合物編號 反應物A 反應物B 反應物C 特性化資料
37 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 9.26 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.45 (dd, J= 8.1, 1.8 Hz, 1H), 7.35 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.23 - 7.18 (m, 1H), 7.15 (dd, J= 7.9, 1.6 Hz, 2H), 7.10 - 7.06 (m, 1H), 7.02 (dd, J= 8.1, 1.1 Hz, 1H), 6.83 (d, J= 24.4 Hz, 1H), 4.75 (t, J= 15.1 Hz, 2H), 4.64 (dd, J= 9.0, 5.9 Hz, 1H), 4.23 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 4.10 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 3.99 (d, J= 28.1 Hz, 4H), 3.85 (q, J= 10.8 Hz, 2H), 2.49 (dd, J= 13.1, 9.3 Hz, 1H), 2.28 (dd, J= 13.1, 5.8 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 587 (M+H) +。RT (方法A): 1.31 min。
50 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.85 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.73 (d, J= 6.1 Hz, 1H), 7.51 (dd, J= 8.1, 1.8 Hz, 1H), 7.42 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.18 (ddd, J= 11.1, 9.4, 4.6 Hz, 3H), 7.11 - 6.98 (m, 3H), 4.65 (ddd, J= 27.2, 19.6, 12.4 Hz, 3H), 4.16 (dd, J= 48.1, 16.5 Hz, 2H), 4.01 (d, J= 4.8 Hz, 4H), 3.83 (q, J= 10.7 Hz, 2H), 2.48 (dd, J= 13.2, 9.3 Hz, 1H), 2.26 (dd, J= 13.2, 5.4 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 587 (M+H) +。RT (方法A): 1.37 min。
a僅步驟2-4。 流程 7. (S)-N-((S)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-7-((9,9- 二氟 -9H- 茀 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 23) 之合成 步驟 1 ： 1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶
向NaH (2.3 g，97.5 mmol，礦物油中60%分散液)於THF (200 mL)之溶液中逐滴添加1H-吡咯并[3,2-c]吡啶 (5 g，42.4 mmol)於THF (50 mL)中之溶液且將混合物在0℃下攪拌1小時。在0℃下向混合物中添加PhSO 2Cl (8.2 g，46.6 mmol)於THF (40 mL)中之溶液且將所得混合物在28℃下攪拌2小時。混合物用飽和NH 4Cl水溶液淬滅且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 30% EtOAc)純化殘餘物，得到呈淺黃色固體之1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(9.0 g，產率82.3%)。LC/MS (ESI) m/z: 259 (M+H) +。 步驟 2 ： 1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙 -1- 酮
在-70℃下向1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(2.0 g，7.7 mmol)及TMEDA (895 mg，7.7 mmol)於THF (50 mL)之混合物中逐滴添加LDA (7.7 mL，THF中2 M)且將反應混合物在此溫度下攪拌2小時。在-70℃下向混合物中添加Ac 2O (1.2 g，11.6 mmol)且將混合物在-70℃至0℃攪拌2小時。混合物用水淬滅且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 – 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色固體之1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-酮(700 mg，產率30.3%)。LC/MS (ESI) m/z: 301 (M+H) +。 步驟 3 ： (R,E)-2- 甲基 -N-(1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 亞乙基 ) 丙烷 -2- 亞磺醯胺
向1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-酮(700 mg，2.3 mmol)及(R)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(566 mg，4.7 mmol)於1,4-二噁烷(10 mL)之混合物中添加Ti(OEt) 4(1.6 g，6.9 mmol)。將混合物在120℃下攪拌4小時。將反應混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色固體之(R,E)-2-甲基-N-(1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)亞乙基)丙烷-2-亞磺醯胺(320 mg，產率34.5%)。LC/MS (ESI) m/z: 404 (M+H) +。 步驟 4 ： (R)-2- 甲基 -N-((S)-1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 ) 丙烷 -2- 亞磺醯胺
在0℃下向(R,E)-2-甲基-N-(1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)亞乙基)丙烷-2-亞磺醯胺(320 mg，0.79 mmol)於MeOH (4 mL)之溶液中分批添加NaBH 4(45 mg，1.2 mmol)且將混合物在20℃下攪拌10分鐘。混合物用飽和NH 4Cl水溶液淬滅且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈黃色固體之(R)-2-甲基-N-((S)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)丙烷-2-亞磺醯胺(110 mg，產率34.3%)。LC/MS (ESI) m/z: 406 (M+H) +。 步驟 5 ： (S)-1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙 -1- 胺鹽酸鹽
將(R)-2-甲基-N-((S)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)丙烷-2-亞磺醯胺(110 mg，0.27 mmol)於HCl/1,4-二噁烷(2 mL，4M)中之溶液在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈淺黃色固體之(S)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-胺鹽酸鹽(100 mg，產率82.3%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 302 (M+H) +。 步驟 6 ： (S)-7-((9,9- 二氟 -9H- 茀 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-N-((S)-1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺
在N 2氛圍下向(S)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-胺鹽酸鹽(25 mg，0.085 mmol)及(S)-7-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸(40 mg，0.085 mmol)於DMF (0.7 mL)之混合物中添加DIPEA (44 mg，0.34 mmol)及PyBOP (44 mg，0.085 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 – 10% MeOH)純化殘餘物，得到呈白色固體之(S)-7-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-N-((S)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺(10 mg，產率15.9%)。LC/MS (ESI) m/z: 742 (M+H) +。 步驟 7 ： (S)-N-((S)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-7-((9,9- 二氟 -9H- 茀 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 23)
向(S)-7-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-N-((S)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺(10 mg，0.014 mmol)於MeOH/H 2O (0.5 mL，v/v= 1/1)之溶液中添加LiOH·H 2O (12 mg，0.30 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。藉由製備型HPLC純化混合物，得到呈白色固體之 化合物 23(3 mg，產率18.5%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.50 (s, 1H), 7.91 - 7.84 (m, 2H), 7.69 (dd, J= 7.8, 1.3 Hz, 1H), 7.65 - 7.53 (m, 4H), 7.44 (t, J= 7.3 Hz, 1H), 7.23 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 6.58 (d, J= 43.6 Hz, 1H), 5.35 (d, J= 7.0 Hz, 1H), 4.65 (dd, J= 9.1, 5.3 Hz, 1H), 4.27 (d, J= 16.1 Hz, 1H), 4.08 - 4.01 (m, 5H), 3.97 (d, J= 10.7 Hz, 1H), 3.85 (d, J= 10.7 Hz, 1H), 2.51 (dd, J= 13.2, 9.4 Hz, 1H), 2.28 (dd, J= 13.2, 5.4 Hz, 1H), 2.03 (s, 1H), 1.70 (d, J= 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 602 (M+H) +。RT (方法A): 1.37 min。 流程 8. 成 (2S,4R)-N-((S)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-4- 氟 -4-( 甲氧基甲基 )-1-((4- 苯氧基苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 21) 之合 步驟 1 ： (2S,4R)-4- 氟 -4-( 甲氧基甲基 )-1-((4- 苯氧基苄醯基 ) 甘胺醯基 )-N-((S)-1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺
在N 2氛圍下向(R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-胺(25 mg，0.085 mmol)及(S)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-胺(36 mg，0.085 mmol)於DMF (0.7 mL)之混合物中添加DIPEA (44 mg，0.34 mmol)及PyBOP (44 mg，0.085 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由層析法(矽膠，DCM中之0 - 10% MeOH)純化殘餘物，得到呈白色固體之(2S,4R)-4-氟-4-(甲氧基甲基)-1-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-N-((S)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)吡咯啶-2-甲醯胺(10 mg，產率16.5%)。LC/MS (ESI) m/z: 714 (M+H) +。 步驟 2 ： (2S,4R)-N-((S)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-4- 氟 -4-( 甲氧基甲基 )-1-((4- 苯氧基苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 21)
向(2S,4R)-4-氟-4-(甲氧基甲基)-1-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-N-((S)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)吡咯啶-2-甲醯胺(10 mg，0.014 mmol)於MeOH/H 2O (0.5 mL，v/v= 1/1)之溶液中添加LiOH·H 2O (12 mg，0.30 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。藉由製備型HPLC純化混合物，得到呈白色固體之 化合物 21(5.7 mg，產率71.0%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.66 (s, 1H), 8.05 (t, J= 18.1 Hz, 1H), 7.77 - 7.73 (m, 2H), 7.44 - 7.40 (m, 2H), 7.31 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 7.21 (t, J= 7.4 Hz, 1H), 7.07 - 7.04 (m, 2H), 6.93 - 6.90 (m, 2H), 6.57 (d, J= 29.4 Hz, 1H), 5.32 - 5.26 (m, 1H), 4.63 (t, J= 7.9 Hz, 1H), 4.18 (s, 2H), 4.08 - 3.93 (m, 2H), 3.71 (dd, J= 17.8, 5.3 Hz, 2H), 3.43 (s, 3H), 2.64 - 2.54 (m, 1H), 2.21 (ddd, J= 20.2, 14.2, 7.0 Hz, 1H), 1.65 (d, J= 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 574 (M+H) +。RT (方法A): 1.35 min。
基於流程8來製備以下化合物：
化合物編號 反應物A 反應物B 特性化資料
22 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.71 (d, J= 33.2 Hz, 1H), 8.08 (dd, J= 32.8, 5.9 Hz, 1H), 7.88 - 7.74 (m, 2H), 7.44 - 7.40 (m, 2H), 7.32 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 7.21 (t, J= 7.4 Hz, 1H), 7.05 (dd, J= 8.6, 1.0 Hz, 2H), 6.94 - 6.89 (m, 2H), 6.71 - 6.34 (m, 2H), 5.29 (q, J= 6.9 Hz, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.21 (dd, J= 16.4, 7.8 Hz, 2H), 4.02 (dt, J= 9.2, 4.6 Hz, 1H), 3.92 (t, J= 14.6 Hz, 1H), 2.56 - 2.47 (m, 1H), 2.32 - 2.23 (m, 1H), 1.66 (dd, J= 16.3, 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 578 (M+H) +。RT (方法A): 1.44 min。
38 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.90 (d, J = 34.1 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.97 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.75 - 7.69 (m, 2H), 7.66 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.58 - 7.50 (m, 2H), 7.45 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 23.9 Hz, 1H), 5.33 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 4.57 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.25 (dd, J = 41.0, 16.8 Hz, 2H), 4.03 (dd, J = 9.9, 5.2 Hz, 4H), 3.82 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 2.44 (dd, J = 13.0, 8.3 Hz, 1H), 2.27 (dd, J = 13.0, 7.8 Hz, 1H), 1.65 (t, J = 15.1 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 602 (M+H) +。RT (方法A): 1.35 min。
47 a,d 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.66 (s, 1H), 7.93 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 7.60 – 7.47 (m, 2H), 7.26 – 7.13 (m, 4H), 7.08 (t, J= 7.4 Hz, 1H), 7.03 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 5.31 (dd, J= 13.4, 6.8 Hz, 1H), 4.54 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 4.19 (dd, J= 58.7, 16.8 Hz, 2H), 4.02 (d, J= 6.8 Hz, 4H), 3.79 (s, 2H), 2.40 (dd, J= 13.0, 8.4 Hz, 1H), 2.27 (dd, J= 13.2, 7.7 Hz, 1H), 1.59 (d, J= 6.9 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 600 (M+H) +。RT (方法A): 1.23 min。
56 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.87 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.19 (d, J= 8.3 Hz, 2H), 6.88 - 6.85 (m, 3H), 6.77 (s, 1H), 5.28 - 5.23 (m, 1H), 4.79 (d, J= 3.8 Hz, 1H), 4.32 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 4.10 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.00 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 3.33 (s, 1H), 2.51 (t, J= 7.5 Hz, 2H), 2.40 (d, J= 11.5 Hz, 1H), 2.15 (dd, J= 13.4, 3.9 Hz, 1H), 2.09 (d, J= 6.5 Hz, 2H), 1.60 (d, J= 7.0 Hz, 3H), 1.30 (s, 4H), 0.82 (t, J= 5.4 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 504 (M+H) +。RT (方法A): 1.14 min。
57 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.91 (d, J= 12.6 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.21 (d, J= 6.5 Hz, 1H), 7.73 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 7.22 (t, J= 7.9 Hz, 2H), 6.91 - 6.83 (m, 3H), 6.79 (s, 1H), 5.25 (q, J= 6.8 Hz, 1H), 4.84 (s, 1H), 4.15 (d, J= 2.3 Hz, 2H), 3.93 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 3.36 (dd, J= 5.9, 2.2 Hz, 1H), 2.42 (dd, J= 12.6, 7.7 Hz, 3H), 2.22 (dd, J= 13.4, 3.3 Hz, 1H), 2.02 - 1.94 (m, 2H), 1.64 (d, J= 7.0 Hz, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.15 - 1.11 (m, 1H), 0.84 (t, J= 5.9 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 504 (M+H) +。RT (方法A): 1.16 min。
71 a,d 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.72 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.94 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 7.82 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 7.77 – 7.71 (m, 2H), 7.67 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 7.56 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 7.45 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 7.23 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 6.66 (s, 1H), 5.32 (q, J= 7.0 Hz, 1H), 4.50 (t, J= 8.3 Hz, 1H), 4.41 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 4.22 (d, J= 16.5 Hz, 2H), 3.84 (dt, J= 11.4, 7.4 Hz, 2H), 3.40 (s, 3H), 2.44 (dd, J= 13.6, 7.3 Hz, 1H), 2.17 – 2.06 (m, 1H), 1.61 (d, J= 6.9 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 574 (M+H) +。RT (方法A): 1.25 min。
72 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.84 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.90 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 7.72 (d, J= 7.4 Hz, 2H), 7.65 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.52 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 6.83 (s, 1H), 5.32 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.35 (s, 1H), 4.22 (d, J= 6.0 Hz, 3H), 3.11 (s, 3H), 2.81 (s, 1H), 2.50 (s, 1H), 1.63 (d, J= 6.2 Hz, 2H)。LC/MS (ESI) m/z: 622 (M+H) +。RT (方法A): 1.22 min。
73 a,d 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.85 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.91 (dd, J= 17.6, 7.1 Hz, 2H), 7.74 (dd, J= 14.2, 7.5 Hz, 2H), 7.67 (d, J= 7.3 Hz, 1H), 7.57 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 7.45 (dd, J= 11.2, 7.2 Hz, 2H), 6.85 (s, 1H), 5.37 – 5.30 (m, 1H), 4.67 – 4.61 (m, 1H), 4.40 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.21 (d, J= 16.9 Hz, 1H), 4.12 – 4.03 (m, 1H), 4.03 – 3.89 (m, 1H), 3.74 (dd, J= 17.5, 5.2 Hz, 2H), 3.45 (s, 3H), 2.55 (td, J= 15.1, 7.2 Hz, 1H), 2.36 – 2.19 (m, 1H), 1.64 (d, J= 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 606 (M+H) +。RT (方法A): 1.46 min。
74 a,d 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.70 (d, J= 10.1 Hz, 1H), 7.94 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 7.87 (t, J= 11.2 Hz, 2H), 7.17 (t, J= 7.5 Hz, 3H), 7.11 (dd, J= 8.4, 4.8 Hz, 2H), 7.00 (d, J= 8.5 Hz, 2H), 6.58 (s, 1H), 5.31 (q, J= 7.1 Hz, 1H), 4.54 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 4.25 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.13 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 4.01 (dd, J= 15.5, 8.9 Hz, 4H), 3.84 – 3.72 (m, 2H), 2.40 (dd, J= 12.8, 8.3 Hz, 1H), 2.26 (dd, J= 13.1, 7.6 Hz, 1H), 1.59 (d, J= 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 588 (M+H) +。RT (方法A): 1.24 min。
75 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.74 (s, 1H), 7.92 (d, J= 8.2 Hz, 3H), 7.24 - 7.09 (m, 5H), 7.03 (d, J= 8.3 Hz, 2H), 6.64 (s, 1H), 5.34 - 5.30 (m, 1H), 4.65 (s, 1H), 4.36 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 4.15 (d, J= 16.8 Hz, 2H), 2.65 - 2.54 (m, 1H), 2.34 - 2.24 (m, 1H), 1.62 (d, J= 6.9 Hz, 3H), 1.30 - 1.29 (m, 4H), 0.90 (t, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 556 (M+H) +。RT (方法A): 1.39 min。
79 a,d 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.65 (s, 1H), 7.98 (d, J= 7.9 Hz, 2H), 7.87 (s, 1H), 7.75 (d, J= 7.4 Hz, 2H), 7.69 (d, J= 7.6 Hz, 2H), 7.47 (d, J= 7.3 Hz, 2H), 7.40 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.54 (s, 1H), 5.32 (d, J= 7.3 Hz, 1H), 4.55 (t, J= 8.1 Hz, 1H), 4.30 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.16 (d, J= 17.7 Hz, 1H), 4.02 (d, J= 7.2 Hz, 4H), 3.82 (d, J= 11.3 Hz, 2H), 2.44 - 2.37 (m, 1H), 2.28 (dd, J= 11.1, 8.2 Hz, 1H), 1.60 (d, J= 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 554 (M+H) +。RT (方法A): 1.15 min。
80 a,d 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.94 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.05 (d, J= 6.1 Hz, 1H), 7.89 (d, J= 7.9 Hz, 2H), 7.55 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 7.24 (d, J= 7.2 Hz, 2H), 7.02 - 6.97 (m, 4H), 6.90 (s, 1H), 6.53 (t, J= 74.2 Hz, 1H), 5.33 (qd, J= 6.3, 1.2 Hz, 1H), 5.09 - 5.05 (m, 1H), 4.59 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 4.34 - 4.29 (m, 1H), 4.21 - 4.16 (m, 1H), 3.98 - 3.90 (m, 2H), 2.52 - 2.46 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.31 - 2.25 (m, 1H), 1.64 (d, J= 6.7 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 592 (M+H) +。RT (方法A): 1.46 min。
81 a,d 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.89 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.01 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.72 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 7.50 - 7.44 (m, 1H), 7.41 - 7.36 (m, 2H), 7.16 (ddd, J= 7.5, 6.6, 1.2 Hz, 1H), 6.99 (d, J= 7.9 Hz, 2H), 6.88 - 6.85 (m, 1H), 6.84 - 6.81 (m, 1H), 6.44 (d, J= 73.2 Hz, 1H), 5.35 - 5.30 (m, 1H), 5.07 (pd, J= 3.8, 0.8 Hz, 1H), 4.61 - 4.57 (m, 1H), 4.35 - 4.30 (m, 1H), 4.22 - 4.16 (m, 1H), 3.95 (ddd, J= 14.7, 1.6, 0.8 Hz, 2H), 2.52 - 2.46 (m, 1H), 2.33 (s, 3H), 2.27 (ddd, J= 7.6, 4.3, 1.8 Hz, 1H), 1.64 (d, J= 6.1 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 592 (M+H) +。RT (方法A): 1.44 min。
82 a,d 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.65 (s, 1H), 7.99 (d, J= 7.8 Hz, 2H), 7.89 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.76 (d, J= 7.2 Hz, 2H), 7.70 (d, J= 7.3 Hz, 2H), 7.48 (d, J= 7.1 Hz, 2H), 7.40 (s, 1H), 7.13 (d, J= 5.4 Hz, 1H), 6.53 (s, 1H), 5.29 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 4.70 (s, 1H), 4.35 (t, J= 13.2 Hz, 2H), 4.17 (d, J= 24.3 Hz, 4H), 3.09 (s, 3H), 2.77 (dd, J= 14.2, 7.5 Hz, 1H), 2.50 - 2.43 (m, 1H), 1.60 (d, J= 6.3 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 574 (M+H) +。RT (方法A): 1.07 min。
83 a,d 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.64 (s, 1H), 8.01 (d, J= 7.6 Hz, 2H), 7.79 (dd, J= 13.4, 6.7 Hz, 3H), 7.71 (d, J= 7.3 Hz, 2H), 7.49 (t, J= 7.4 Hz, 2H), 7.41 (d, J= 7.3 Hz, 1H), 7.03 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 6.52 (s, 1H), 5.31 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 4.62 (t, J= 8.2 Hz, 1H), 4.40 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 4.17 (d, J= 17.0 Hz, 1H), 4.09 - 3.88 (m, 2H), 3.78 - 3.69 (m, 2H), 3.45 (s, 3H), 2.60 - 2.47 (m, 1H), 2.34 - 2.15 (m, 1H), 1.61 (d, J= 6.5 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 558 (M+H) +。RT (方法A): 1.21 min。
84 a,d 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.65 (s, 1H), 8.01 (d, J= 8.3 Hz, 2H), 7.85 - 7.76 (m, 3H), 7.71 (d, J= 7.2 Hz, 2H), 7.48 (d, J= 7.8 Hz, 2H), 7.41 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.05 (s, 1H), 6.55 (s, 1H), 5.31 (d, J= 7.3 Hz, 1H), 4.78 (s, 1H), 4.67 (d, J= 9.2 Hz, 2H), 4.41 (d, J= 17.6 Hz, 1H), 4.18 (d, J= 15.1 Hz, 2H), 4.00 (dd, J= 32.8, 11.5 Hz, 1H), 2.59 (ddd, J= 15.4, 12.2, 7.8 Hz, 1H), 2.34 - 2.20 (m, 1H), 1.61 (d, J= 6.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 546 (M+H) +。RT (方法A): 1.23 min。
86 a,d 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.83 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.91 (dd, J= 13.8, 6.9 Hz, 2H), 7.74 (dd, J= 13.1, 7.6 Hz, 2H), 7.66 (s, 1H), 7.55 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.47 – 7.41 (m, 2H), 6.83 (s, 1H), 5.34 (q, J= 6.9 Hz, 1H), 4.79 (s, 2H), 4.71 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 4.41 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 4.22 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 4.18 – 4.10 (m, 1H), 4.02 (dd, J= 32.7, 12.1 Hz, 1H), 2.60 (dd, J= 16.3, 7.4 Hz, 1H), 2.37 – 2.21 (m, 1H), 1.63 (d, J= 6.9 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 594 (M+H) +。RT (方法A): 1.35 min。
87 a,da 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.67 (d, J= 12.4 Hz, 1H), 8.06 – 7.85 (m, 3H), 7.20 – 7.08 (m, 5H), 7.01 (d, J= 8.6 Hz, 2H), 6.56 (d, J= 29.6 Hz, 1H), 5.34 – 5.22 (m, 1H), 4.83 – 4.76 (m, 1H), 4.72 – 4.65 (m, 1H), 4.29 (q, J= 17.2 Hz, 2H), 4.18 (s, 2H), 3.05 (d, J= 22.0 Hz, 3H), 2.76 (s, 1H), 2.56 – 2.37 (m, 1H), 1.60 (d, J= 6.9 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 608 (M+H) +。RT (方法A): 1.15 min。
88 a,d 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.69 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 7.94 – 7.86 (m, 3H), 7.17 (t, J= 8.6 Hz, 2H), 7.12 (d, J= 4.9 Hz, 2H), 7.02 (d, J= 8.6 Hz, 2H), 6.71 – 6.34 (m, 2H), 5.30 (q, J= 6.6 Hz, 1H), 5.05 (s, 1H), 4.57 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 4.34 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 4.15 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 3.97 (dd, J= 11.6, 4.1 Hz, 1H), 3.89 (d, J= 11.5 Hz, 1H), 2.51 – 2.43 (m, 1H), 2.26 (ddd, J= 13.3, 8.5, 4.8 Hz, 1H), 1.60 (d, J= 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 596 (M+H) +。RT (方法A): 1.33 min。
92 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.66 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.89 (d, J= 7.8 Hz, 2H), 7.19 - 7.05 (m, 5H), 7.00 (d, J= 7.8 Hz, 2H), 6.56 (s, 1H), 5.27 - 5.15 (m, 1H), 4.93 - 4.89 (m, 1H), 4.52 - 4.44 (m, 1H), 4.27 (d, J= 16.0 Hz, 1H), 4.03 - 3.95 (m, 1H), 3.91 - 3.83 (m, 1H), 3.42 - 3.36 (m, 1H), 2.49 - 2.38 (m, 1H), 2.29 - 2.19 (m, 1H), 1.32 - 1.28 (m, 4H), 0.85 - 0.78 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 572 (M+H) +。RT (方法A): 1.29 min。
93 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.66 (d, J= 14.6 Hz, 1H), 7.97 (dd, J= 60.6, 5.7 Hz, 1H), 7.58 (dd, J= 11.0, 4.8 Hz, 2H), 7.26 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.21 - 7.15 (m, 2H), 7.10 (dd, J= 15.8, 6.6 Hz, 2H), 7.03 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 6.54 (dd, J= 81.5, 67.6 Hz, 2H), 5.32 - 5.26 (m, 1H), 5.06 (s, 1H), 4.65 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 4.34 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 4.14 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 4.05 - 3.95 (m, 2H), 3.88 (dd, J= 11.3, 6.8 Hz, 2H), 2.55 - 2.45 (m, 1H), 2.32 (ddd, J= 13.6, 8.5, 4.8 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 624 (M+H) +。RT (方法A): 1.35 min。
94 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.68 (d, J= 10.5 Hz, 1H), 7.95 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.88 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 7.17 (ddt, J= 9.0, 5.8, 2.8 Hz, 3H), 7.13 - 7.09 (m, 2H), 7.01 (d, J= 8.7 Hz, 2H), 6.63 (d, J= 22.0 Hz, 1H), 5.31 (dt, J= 24.8, 5.6 Hz, 1H), 4.62 (t, J= 7.9 Hz, 1H), 4.25 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.14 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.05 - 3.94 (m, 6H), 3.88 (dd, J= 11.4, 6.6 Hz, 1H), 3.80 (s, 1H), 2.43 (dd, J= 13.1, 8.4 Hz, 1H), 2.29 (dd, J= 13.1, 7.4 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 604 (M+H) +。RT (方法A): 1.16 min。
96 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.68 (d, J= 11.2 Hz, 1H), 7.95 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.88 (t, J= 9.7 Hz, 2H), 7.20 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 7.16 (d, J= 8.2 Hz, 2H), 7.13 - 7.09 (m, 2H), 7.01 (d, J= 8.9 Hz, 2H), 6.61 (d, J= 22.0 Hz, 1H), 5.30 - 5.23 (m, 1H), 4.79 - 4.76 (m, 2H), 4.29 (d, J= 9.0 Hz, 2H), 4.18 (s, 2H), 4.03 - 3.99 (m, 1H), 3.88 (dd, J= 11.3, 6.9 Hz, 1H), 3.08 (s, 3H), 2.83 - 2.70 (m, 1H), 2.59 - 2.45 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 624 (M+H) +。RT (方法A): 1.10 min。
97 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.66 (d, J= 0.9 Hz, 1H), 7.93 - 7.88 (m, 3H), 7.14 (ddt, J= 6.8, 4.6, 2.4 Hz, 4H), 7.09 (d, J= 6.1 Hz, 1H), 7.03 (d, J= 8.9 Hz, 2H), 6.57 (s, 1H), 5.30 - 5.26 (m, 1H), 4.72 - 4.67 (m, 1H), 4.35 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.12 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 4.05 - 3.99 (m, 2H), 3.88 (dd, J= 5.6, 4.0 Hz, 1H), 3.74 (d, J= 3.7 Hz, 1H), 3.70 (d, J= 6.6 Hz, 1H), 3.48 (dt, J= 3.3, 1.7 Hz, 1H), 3.44 (s, 3H), 3.13 (dt, J= 3.2, 1.6 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 608 (M+H) +。RT (方法A): 1.20 min。
98 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.66 (s, 1H), 7.93 - 7.83 (m, 3H), 7.20 - 7.09 (m, 5H), 7.04 - 6.97 (m, 2H), 6.72 - 6.34 (m, 2H), 5.27 (t, J= 5.9 Hz, 1H), 5.06 (s, 1H), 4.65 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 4.33 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 4.15 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 4.00 (ddd, J= 18.9, 11.4, 4.7 Hz, 2H), 3.88 (dd, J= 11.3, 6.8 Hz, 2H), 2.54 - 2.45 (m, 1H), 2.32 (ddd, J= 13.5, 8.4, 4.9 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 612 (M+H) +。RT (方法A): 1.10 min。
99 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.66 (d, J= 0.8 Hz, 1H), 7.95 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.58 (dd, J= 7.7, 1.5 Hz, 1H), 7.54 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.08 (dd, J= 11.2, 3.8 Hz, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.58 (s, 1H), 5.27 (t, J= 5.7 Hz, 1H), 4.83 - 4.66 (m, 2H), 4.34 (s, 1H), 4.27 (s, 1H), 4.23 - 4.14 (m, 3H), 4.01 (dd, J= 11.3, 5.0 Hz, 1H), 3.88 (dd, J= 11.3, 6.8 Hz, 1H), 3.18 - 2.95 (m, 3H), 2.87 - 2.68 (m, 1H), 2.59 - 2.41 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 636 (M+H) +。RT (方法A): 1.16 min。
102 b 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.63 (s, 1H), 8.00 (d, J= 6.5 Hz, 1H), 7.46 (d, J= 6.5 Hz, 1H), 7.33 (dd, J= 8.1, 1.8 Hz, 1H), 7.24 - 7.21 (m, 1H), 7.17 - 7.14 (m, 2H), 7.12 - 7.09 (m, 1H), 7.04 - 7.00 (m, 2H), 6.70 (s, 1H), 5.41 - 5.35 (m, 1H), 4.66 (dd, J= 9.3, 4.8 Hz, 1H), 4.25 (d, J= 15.9 Hz, 1H), 4.06 - 4.02 (m, 4H), 4.01 - 3.99 (m, 1H), 3.91 (d, J= 15.8 Hz, 1H), 3.84 (d, J= 10.6 Hz, 1H), 2.52 (dd, J= 13.2, 9.4 Hz, 1H), 2.29 (dd, J= 13.3, 4.8 Hz, 1H), 1.72 (d, J= 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 600 (M+H) +。RT (方法A): 1.35 min。
104 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.65 (d, J= 0.9 Hz, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.92 (dd, J= 7.8, 1.4 Hz, 1H), 7.88 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.78 - 7.70 (m, 3H), 7.66 (d, J= 7.1 Hz, 2H), 7.56 (t, J= 7.1 Hz, 1H), 7.44 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 7.18 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 6.58 (s, 1H), 5.28 (s, 1H), 4.85 (s, 61H), 4.35 (d, J= 13.1 Hz, 2H), 4.21 (s, 4H), 4.02 (dd, J= 11.3, 5.0 Hz, 2H), 3.88 (dd, J= 11.3, 6.8 Hz, 1H), 3.09 (q, J= 13.9 Hz, 4H), 2.79 (m, 1H), 2.55 (d, J= 5.3 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 638 (M+H) +。RT (方法A): 1.20 min。
115 c,d 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.01 (s, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.74 (t, J= 5.5 Hz, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.50 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.14 (t, J= 11.2 Hz, 1H), 7.89 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.73 (t, J= 8.6 Hz, 1H), 7.53 (d, J= 6.5 Hz, 1H), 7.30 (t, J= 7.3 Hz, 1H), 7.09 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 6.38 (s, 1H), 5.11 (h, J= 7.6 Hz, 1H), 4.63 – 4.17 (m, 2H), 4.04 (dd, J= 17.1, 5.5 Hz, 1H), 3.75 (d, J= 11.0 Hz, 1H), 3.59 (d, J= 10.7 Hz, 1H), 2.43 (s, 3H), 2.25 (dd, J= 13.1, 8.3 Hz, 1H), 2.07 (dd, J= 12.9, 8.0 Hz, 1H), 1.41 (d, J= 6.9 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 587(M+H) +。RT (方法A): 1.41 min。
122 c 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.99 (s, 1H), 8.71 (t, J= 13.5 Hz, 1H), 8.62 (d, J= 15.2 Hz, 2H), 8.43 (s, 1H), 8.07 (d, J= 5.4 Hz, 1H), 7.84 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.76 – 7.61 (m, 1H), 7.43 (d, J= 11.0 Hz, 2H), 7.26 (q, J= 9.8 Hz, 2H), 6.73 (s, 1H), 6.40 (s, 1H), 5.14 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.57 (d, J= 2.8 Hz, 2H), 4.54 – 4.44 (m, 1H), 4.39 (d, J= 15.3 Hz, 2H), 4.10 – 3.87 (m, 2H), 3.85 (d, J= 11.0 Hz, 1H), 3.67 (d, J= 10.8 Hz, 2H), 2.32 (t, J= 10.6 Hz, 1H), 2.22 – 2.02 (m, 1H), 1.55 (d, J= 6.9 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 602 (M+H) +。RT (方法A): 1.42 min。
123 c 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.94 (s, 1H), 8.71 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 8.63 (d, J= 6.7 Hz, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.00 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.73 (ddd, J= 16.0, 9.8, 5.3 Hz, 2H), 7.28 (t, J= 8.6 Hz, 3H), 6.63 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 6.28 (s, 1H), 5.07 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 4.55 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 4.42 (d, J= 17.6 Hz, 1H), 4.32 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 4.03 – 3.83 (m, 6H), 3.82 (s, 1H), 3.60 (d, J= 10.8 Hz, 2H), 2.24 (dt, J= 14.5, 7.3 Hz, 1H), 2.12 – 1.96 (m, 1H), 1.48 (d, J= 6.9 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 584 (M+H) +。RT (方法A): 1.38 min。
126 c,d 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.09 (s, 1H), 8.58 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.91 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.82 – 7.70 (m, 1H), 7.67 (d, J= 12.5 Hz, 1H), 7.37 (tt, J= 9.2, 2.6 Hz, 1H), 7.19 (td, J= 8.4, 2.7 Hz, 1H), 6.99 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 6.32 (s, 1H), 4.66 – 4.12 (m, 5H), 4.00 – 3.81 (m, 3H), 3.77 (d, J= 10.8 Hz, 1H), 3.59 (d, J= 10.8 Hz, 1H), 2.28 (dd, J= 13.0, 8.4 Hz, 1H), 2.04 (dd, J= 13.0, 7.4 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 602 (M+H) +。RT (方法A): 1.41 min。
130 a,d 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.64 (s, 1H), 7.92 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.56 (d, J= 7.4 Hz, 2H), 7.25 – 7.12 (m, 4H), 7.10 – 7.01 (m, 2H), 6.50 (s, 1H), 5.24 (q, J= 6.8 Hz, 1H), 4.80 (d, J= 3.4 Hz, 1H), 4.50 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.24 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 3.37 (d, J= 5.0 Hz, 1H), 2.43 (t, J= 12.4 Hz, 1H), 2.16 (dd, J= 13.1, 3.7 Hz, 1H), 1.58 (d, J= 6.9 Hz, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.28 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 0.83 (t, J= 5.4 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 568 (M+H) +。RT (方法A): 1.54 min。
140 c,d 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.09 (s, 1H), 8.90 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 8.72 (t, J= 5.4 Hz, 1H), 8.68 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 8.63 (d, J= 7.9 Hz, 2H), 8.45 – 8.32 (m, 1H), 8.11 – 7.95 (m, 2H), 7.88 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.56 – 7.36 (m, 4H), 7.22 (t, J= 7.1 Hz, 2H), 7.13 (d, J= 7.8 Hz, 3H), 7.06 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 6.94 (s, 1H), 6.73 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 6.45 (s, 1H), 6.18 (s, 1H), 5.10 (dt, J= 14.7, 7.0 Hz, 1H), 4.93 (s, 1H), 4.59 (t, J= 7.2 Hz, 0H), 4.40 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 4.19 (dd, J= 17.3, 5.3 Hz, 1H), 4.09 (dd, J= 17.1, 5.6 Hz, 1H), 3.82 (dd, J= 11.6, 4.4 Hz, 1H), 3.73 (q, J= 14.4 Hz, 1H), 2.26 (t, J= 10.3 Hz, 2H), 2.11 (ddd, J= 13.2, 8.1, 4.8 Hz, 1H), 1.42 (d, J= 6.9 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 579 (M+H) +。RT (方法A): 1.49 min。
143 a,d 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.65 (s, 1H), 7.87 (s, 2H), 7.72 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.18 - 7.00 (m, 5H), 6.82 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 6.72 - 6.34 (m, 2H), 5.30 (q, J= 6.7 Hz, 1H), 5.06 (s, 1H), 4.57 (t, J= 7.8 Hz, 1H), 4.35 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 4.16 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 3.93 (dd, J= 29.7, 10.5 Hz, 2H), 2.53 - 2.41 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.28 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 1.61 (d, J= 6.8 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 610 (M+H) +。RT (方法A): 1.95 min。
147 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.65 (s, 1H), 7.96 (d, J= 7.6 Hz, 2H), 7.90 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.62 (d, J= 8.1 Hz, 2H), 7.59 - 7.55 (m, 1H), 7.11 (dd, J= 14.0, 6.4 Hz, 3H), 6.51 (s, 1H), 5.25 (q, J= 6.6 Hz, 1H), 4.53 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.29 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 3.39 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 2.43 (t, J= 12.2 Hz, 1H), 2.17 (d, J= 13.7 Hz, 1H), 1.59 (d, J= 6.8 Hz, 3H), 1.32 (s, 4H), 0.82 (t, J= 5.3 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 558 (M+H) +。RT (方法A): 3.26 min。
149 a 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.13 (s, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.69 - 8.41 (m, 2H), 7.96 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 9.5 Hz, 2H), 7.39 (t, J= 8.1 Hz, 1H), 7.27 (dd, J= 20.3, 6.9 Hz, 2H), 7.11 (dd, J= 13.5, 6.4 Hz, 3H), 6.39 (s, 1H), 5.19 - 5.10 (m, 1H), 4.40 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 4.10 (ddd, J= 47.0, 17.5, 6.1 Hz, 2H), 3.80 (t, J= 8.6 Hz, 1H), 3.39 - 3.34 (m, 2H), 3.26 (d, J= 12.1 Hz, 4H), 2.69 (dd, J= 14.8, 7.1 Hz, 1H), 1.93 (dd, J= 20.6, 9.8 Hz, 2H), 1.46 (d, J= 6.8 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 586 (M+H) +。RT (方法A): 1.84 min。
162 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.67 (s, 1H), 8.01 (d, J= 7.8 Hz, 2H), 7.85 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.67 (d, J= 7.9 Hz, 2H), 7.60 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 7.10 (d, J= 8.9 Hz, 3H), 6.57 (s, 1H), 5.31 (q, J= 7.1 Hz, 1H), 4.67 (dd, J= 18.1, 10.2 Hz, 2H), 4.41 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.19 (d, J= 15.9 Hz, 1H), 4.10 - 3.98 (m, 1H), 2.65 - 2.53 (m, 1H), 2.35 - 2.20 (m, 1H), 1.61 (d, J= 6.7 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 582 (M+H) +。RT (方法A): 1.84 min。
165 a,d 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.63 (s, 1H), 7.87 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.64 - 7.51 (m, 2H), 7.25 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.21 - 7.14 (m, 2H), 7.08 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 7.02 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 6.49 (s, 1H), 5.31 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 4.38 (d, J= 15.7 Hz, 2H), 4.08 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 3.92 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 3.20 (t, J= 9.7 Hz, 1H), 2.39 (d, J= 6.6 Hz, 2H), 1.61 (t, J= 8.0 Hz, 4H), 1.15 (d, J= 5.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 556 (M+H) +。RT (方法A): 1.56 min。
166 a,d 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.86 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.96 - 7.82 (m, 2H), 7.69 (d, J= 21.1 Hz, 3H), 7.57 (s, 1H), 7.46 (s, 2H), 6.85 (s, 1H), 5.34 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 4.43 (d, J= 9.8 Hz, 2H), 4.18 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 3.99 (s, 1H), 3.24 (d, J= 9.5 Hz, 1H), 2.46 (s, 2H), 1.64 (d, J= 6.9 Hz, 4H), 1.19 (d, J= 4.3 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 558 (M+H) +。RT (方法A): 1.28 min。
167 a,d 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.90 (d, J= 22.1 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.10 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 7.97 (d, J= 5.4 Hz, 1H), 7.88 - 7.78 (m, 2H), 7.68 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 7.60 (t, J= 7.0 Hz, 1H), 7.50 (dd, J= 17.6, 7.1 Hz, 2H), 6.89 (d, J= 27.3 Hz, 1H), 6.55 (t, J= 74.4 Hz, 1H), 5.33 (d, J= 6.1 Hz, 1H), 5.08 (s, 1H), 4.60 (t, J= 7.8 Hz, 1H), 4.36 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 4.22 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 3.97 (dd, J= 30.0, 11.3 Hz, 2H), 2.69 - 2.45 (m, 1H), 2.29 (s, 1H), 1.67 (dd, J= 23.3, 6.6 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 610 (M+H) +。RT (方法A): 1.45 min。
171 c,d 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.01 (s, 1H), 8.78 (t, J= 5.7 Hz, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.40 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.86 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.52 – 7.38 (m, 2H), 7.35 – 7.27 (m, 2H), 7.17 (dd, J= 8.1, 2.4 Hz, 1H), 7.08 (t, J= 7.4 Hz, 1H), 7.01 – 6.79 (m, 3H), 6.29 (s, 1H), 5.02 (q, J= 7.3 Hz, 1H), 4.64 (dd, J= 11.2, 3.6 Hz, 1H), 4.32 (dd, J= 16.6, 5.8 Hz, 1H), 3.98 (dd, J= 16.6, 5.8 Hz, 1H), 2.33 – 2.12 (m, 1H), 1.96 (dd, J= 13.2, 3.6 Hz, 1H), 1.37 (d, J= 7.0 Hz, 3H), 1.25 (dd, J= 5.1, 2.4 Hz, 1H), 1.16 (s, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 538 (M+H) +。RT (方法A): 1.55 min。
172 c,d 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.00 (s, 1H), 8.78 (t, J= 5.8 Hz, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.38 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.85 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.62 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.50 – 7.37 (m, 2H), 7.22 – 7.09 (m, 4H), 7.08 – 6.98 (m, 2H), 6.96 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 6.29 (s, 1H), 5.03 (dp, J= 14.6, 7.2 Hz, 1H), 4.64 (dd, J= 11.2, 3.6 Hz, 1H), 4.31 (dd, J= 16.6, 5.9 Hz, 1H), 3.99 (dd, J= 16.6, 5.8 Hz, 1H), 2.35 – 2.17 (m, 1H), 1.96 (dd, J= 13.2, 3.6 Hz, 1H), 1.37 (d, J= 6.9 Hz, 3H), 1.25 (dd, J= 5.0, 2.4 Hz, 1H), 1.18 (s, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 556 (M+H) +。RT (方法A): 1.55 min。
173 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.85 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.98 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 7.55 (d, J= 18.0 Hz, 2H), 7.44 (s, 1H), 7.26 - 7.15 (m, 3H), 7.10 (d, J= 7.3 Hz, 1H), 7.02 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 6.83 (s, 1H), 5.33 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 4.62 (t, J= 8.2 Hz, 1H), 4.33 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 4.14 (d, J= 17.2 Hz, 1H), 3.96 (d, J= 35.7 Hz, 2H), 3.77 - 3.70 (m, 2H), 3.45 (s, 3H), 2.55 (s, 1H), 2.25 (dd, J= 26.5, 11.5 Hz, 1H), 1.63 (d, J= 6.1 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 604 (M+H) +。RT (方法A): 1.40 min。
175 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.67 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 7.98 (t, J= 21.4 Hz, 1H), 7.54 (dd, J= 23.9, 15.7 Hz, 2H), 7.26 - 7.14 (m, 4H), 7.06 (dd, J= 21.6, 7.4 Hz, 2H), 6.56 (d, J= 26.2 Hz, 1H), 5.28 (d, J= 7.1 Hz, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.16 (ddd, J= 31.9, 26.5, 13.1 Hz, 3H), 3.88 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 3.46 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 2.40 (dd, J= 25.8, 18.9 Hz, 2H), 1.63 (dd, J= 22.9, 6.3 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 592 (M+H) +。RT (方法A): 1.34 min。
200 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.63 (d, J= 9.7 Hz, 2H), 8.04 (t, J= 7.5 Hz, 2H), 7.76 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 7.69 - 7.63 (m, 2H), 7.55 (t, J= 7.8 Hz, 1H), 7.41 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 7.12 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 6.51 (s, 1H), 5.25 (q, J= 6.8 Hz, 1H), 4.58 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.33 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 3.41 (s, 1H), 2.44 (t, J= 12.5 Hz, 1H), 2.18 (dd, J= 13.5, 4.1 Hz, 1H), 1.59 (d, J= 6.9 Hz, 3H), 1.37 (dd, J= 5.5, 2.4 Hz, 1H), 1.33 (s, 3H), 1.28 (s, 1H), 0.85 (t, J= 5.5 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 536 (M+H) +。RT (方法A): 1.46 min。
219 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.66 (s, 1H), 7.90 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 7.62 - 7.53 (m, 2H), 7.26 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.21 - 7.07 (m, 4H), 7.03 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 6.72 - 6.35 (m, 2H), 5.31 (q, J= 6.4 Hz, 1H), 5.12 - 5.02 (m, 1H), 4.57 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 4.34 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 4.15 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 3.99 - 3.93 (m, 1H), 3.89 (d, J= 11.5 Hz, 1H), 2.52 - 2.44 (m, 1H), 2.31 - 2.23 (m, 1H), 1.61 (d, J= 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 608 (M+H) +。RT (方法A): 1.50 min。
220 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.81 (d, J= 11.0 Hz, 1H), 8.64 - 8.58 (m, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.05 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.82 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 7.71 - 7.63 (m, 2H), 7.56 (s, 1H), 7.43 (d, J= 7.2 Hz, 2H), 6.83 (d, J= 3.4 Hz, 1H), 6.65 (d, J= 74.5 Hz, 1H), 5.33 (d, J= 7.0 Hz, 1H), 5.09 (s, 1H), 4.62 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 4.37 (d, J= 5.0 Hz, 1H), 4.28 - 4.22 (m, 1H), 4.01 (d, J= 4.3 Hz, 1H), 3.96 (s, 1H), 2.55 - 2.48 (m, 1H), 2.34 - 2.27 (m, 1H), 1.63 (d, J= 7.0, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 576 (M+H) +。RT (方法A): 1.35 min。
238 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.65 (s, 1H), 7.93 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.59 - 7.53 (m, 2H), 7.26 - 7.15 (m, 4H), 7.10 - 7.02 (m, 2H), 6.52 (s, 1H), 5.28 (dd, J= 13.8, 6.8 Hz, 1H), 4.69 (dd, J= 8.4, 5.6 Hz, 1H), 4.31 - 4.13 (m, 5H), 3.09 (s, 3H), 2.81 - 2.73 (m, 1H), 2.50 - 2.42 (m, 1H), 1.60 (d, J= 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 620 (M+H) +。RT (方法A): 1.30 min。
300 a 1H-NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.74 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 8.59 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 8.06 - 7.99 (m, 2H), 7.83 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.68 - 7.62 (m, 2H), 7.57 - 7.52 (m, 1H), 7.43 - 7.39 (m, 1H), 7.35 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 6.73 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 5.35 - 5.28 (m, 1H), 4.58 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 4.33 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 4.21 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.08 - 4.00 (m, 4H), 3.84 (s, 2H), 2.46 - 2.40 (m, 1H), 2.31 - 2.25 (m, 1H), 1.63 - 1.57 (m, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 568(M+H) +。RT (方法A): 1.19 min。
a使用HATU代替PyBOP。 b使用HBTU代替PyBOP。 c使用T 3P代替PyBOP。 d來自偶合反應之產物未經進一步純化即使用。 流程 9. (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氟 -4-( 甲氧基甲基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 25) 之合成 步驟 1 ： (2S,4R)-4- 氟 -4-( 甲氧基甲基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸苄酯
在N 2氛圍，0℃下向(啡㗁噻-3-羰基)甘胺酸(45 mg，0.15 mmol)及(2S,4R)-4-氟-4-(甲氧基甲基)吡咯啶-2-甲酸苄酯鹽酸鹽(58.9 mg，0.19 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (115.8 mg，0.9 mmol)及T 3P (285 mg，0.45 mmol，EtOAc中50% wt.)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用飽和NaHCO 3水溶液淬滅且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 58% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之(2S,4R)-4-氟-4-(甲氧基甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸苄酯(75 mg，產率91.2%)。LC/MS (ESI) (m/z): 551 (M+H) +。 步驟 2 ： (2S,4R)-4- 氟 -4-( 甲氧基甲基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸
向(2S,4R)-4-氟-4-(甲氧基甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸苄酯(75 mg，0.16 mmol)於MeOH/H 2O (4 mL，v/v= 3/1)之溶液中添加LiOH·H 2O (17.2 mg，0.48 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色固體之(2S,4R)-4-氟-4-(甲氧基甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸(58 mg，產率92.4%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 461 (M+H) +。 步驟 3 ： (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氟 -4-( 甲氧基甲基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 25)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-4-氟-4-(甲氧基甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸(58 mg，0.13 mmol)及(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲胺(20.2 mg，0.14 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (97.6 mg，0.78 mmol)及PyBOP (65.5 mg，0.13 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 12: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 25(18 mg，產率24.2%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.83 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.58 (d, J= 6.5 Hz, 1H), 7.52 – 7.48 (m, 1H), 7.39 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.22 – 7.16 (m, 3H), 7.11 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 7.02 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 6.86 (s, 1H), 4.70 (d, J= 8.6 Hz, 2H), 4.64 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 4.21 (s, 2H), 4.06 (d, J= 16.8 Hz, 2H), 3.75 (d, J= 4.3 Hz, 1H), 3.71 (d, J= 7.1 Hz, 1H), 3.45 (s, 3H), 2.59 (dd, J= 14.7, 7.0 Hz, 1H), 2.31 – 2.20 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 590 (M+H) +。RT (方法A): 1.40 min。
根據流程9來製備以下化合物：
化合物編號 反應物A 反應物B 反應物C 特性化資料
26 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.80 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.05 (d, J= 6.5 Hz, 1H), 7.54 (d, J= 6.5 Hz, 1H), 7.49 (dd, J= 8.1, 1.7 Hz, 1H), 7.38 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.20 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 7.15 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 7.11 – 7.07 (m, 1H), 7.01 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 6.82 (s, 1H), 4.82 – 4.76 (m, 1H), 4.72 – 4.69 (m, 2H), 4.65 (t, J= 10.3 Hz, 2H), 4.22 (s, 2H), 4.11 (s, 1H), 4.01 (t, J= 16.3 Hz, 1H), 2.65 (dd, J= 14.9, 7.0 Hz, 1H), 2.33 – 2.20 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 578 (M+H) +。RT (方法A): 1.42 min。
27 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.96 – 8.72 (m, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.14 (dd, J= 52.1, 6.1 Hz, 1H), 7.65 (dd, J= 62.2, 5.9 Hz, 1H), 7.51 – 7.30 (m, 2H), 7.24 – 7.04 (m, 4H), 7.00 (t, J= 9.1 Hz, 1H), 6.84 (d, J= 41.7 Hz, 1H), 4.78 – 4.68 (m, 2H), 4.67 (s, 1H), 4.21 (ddd, J= 51.3, 44.4, 25.7 Hz, 5H), 3.07 (d, J= 25.8 Hz, 3H), 2.94 – 2.76 (m, 1H), 2.64 – 2.43 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 606 (M+H) +。RT (方法A): 1.29 min。
30 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.86 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.10 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.57 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 7.43 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 7.21 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 7.01 - 6.96 (m, 2H), 6.83 (s, 1H), 4.74 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 4.63 (dd, J = 17.2, 10.1 Hz, 2H), 4.22 (q, J = 16.7 Hz, 2H), 4.13 - 4.02 (m, 1H), 4.01 - 3.89 (m, 1H), 3.75 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 3.68 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 3.42 (d, J = 15.1 Hz, 3H), 2.57 (td, J = 14.6, 7.7 Hz, 1H), 2.25 (ddd, J = 37.2, 14.1, 9.9 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 560 (M+H) +。RT (方法A): 1.29 min。
32 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.91 (d, J= 35.3 Hz, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.18 (dd, J= 32.7, 6.5 Hz, 1H), 7.86 - 7.77 (m, 2H), 7.62 (d, J= 6.5 Hz, 1H), 7.45 - 7.40 (m, 2H), 7.22 (t, J= 7.4 Hz, 1H), 7.09 - 7.05 (m, 2H), 7.00 - 6.91 (m, 2H), 6.83 (s, 1H), 4.71 - 4.67 (m, 2H), 4.63 (dd, J= 9.0, 6.0 Hz, 1H), 4.24 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.11 (dd, J= 15.9, 12.3 Hz, 1H), 3.99 (d, J= 27.5 Hz, 4H), 3.87 - 3.76 (m, 2H), 2.48 (dd, J= 13.1, 9.1 Hz, 1H), 2.28 (dd, J= 13.1, 5.9 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) (m/z): 556 (M+H) +。RT (方法A): 1.19 min。
35 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.69 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.01 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.96 – 7.91 (m, 2H), 7.65 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 7.61 – 7.55 (m, 2H), 7.49 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 7.42 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 6.80 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.66 (dd, J= 9.8, 6.9 Hz, 2H), 4.32 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.18 – 4.13 (m, 1H), 4.04 (s, 4H), 3.95 – 3.86 (m, 2H), 2.50 (dd, J= 12.9, 9.1 Hz, 1H), 2.30 (dd, J= 13.2, 5.7 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 554 (M+H) +。RT (方法A): 1.16 min。
137 a 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.17 (s, 1H), 8.80 – 8.49 (m, 2H), 8.39 (d, J= 3.0 Hz, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.12 – 7.83 (m, 3H), 7.55 – 7.34 (m, 2H), 7.22 (q, J= 7.8 Hz, 2H), 7.16 (s, 1H), 6.93 (s, 1H), 6.74 (s, 1H), 6.32 (s, 1H), 5.01 – 4.79 (m, 1H), 4.60 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 4.40 (tt, J= 15.6, 8.3 Hz, 2H), 4.12 (qt, J= 9.2, 5.1 Hz, 2H), 3.92 – 3.75 (m, 1H), 2.37 – 2.14 (m, 2H)。LC/MS (ESI) m/z: 565 (M+H) +。RT (方法A): 1.45 min。
179 b,c 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.57 (d, J= 10.0 Hz, 1H), 8.36 (t, J= 8.6 Hz, 1H), 8.32 – 8.29 (m, 1H), 8.26 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 7.92 (ddd, J= 9.9, 7.1, 1.8 Hz, 2H), 7.85 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 7.56 - 7.51 (m, 2H), 7.17 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 6.56 (d, J= 31.4 Hz, 1H), 4.66 - 4.58 (m, 3H), 4.25 (t, J= 11.1 Hz, 2H), 4.03 (t, J= 5.0 Hz, 4H), 3.83 (t, J= 7.4 Hz, 2H), 2.46 (dd, J= 13.1, 8.9 Hz, 1H), 2.29 (dd, J= 13.1, 6.2 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 570 (M+H) +。RT (方法A): 1.23 min。
187 c 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.56 (d, J= 1.4 Hz, 2H), 8.05 - 8.00 (m, 2H), 7.80 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.64 (d, J= 8.5 Hz, 2H), 7.56 - 7.52 (m, 1H), 7.44 - 7.39 (m, 1H), 7.13 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 6.51 (d, J= 0.8 Hz, 1H), 4.78 - 4.65 (m, 4H), 4.55 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 4.36 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.24 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.17 (dd, J= 18.9, 12.3 Hz, 1H), 4.09 - 3.97 (m, 1H), 2.63 (td, J= 14.9, 7.8 Hz, 1H), 2.28 (ddd, J= 35.7, 14.2, 9.5 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 546 (M+H) +。RT (方法A): 1.22 min。
203 c 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.58 - 8.48 (m, 2H), 7.97 (dd, J= 13.3, 6.7 Hz, 2H), 7.86 (dd, J= 5.8, 2.4 Hz, 1H), 7.65 - 7.52 (m, 3H), 7.40 (dd, J= 9.4, 5.6 Hz, 1H), 7.18 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 6.50 (s, 1H), 4.89 (s, 1H), 4.66 - 4.36 (m, 4H), 3.44 (s, 1H), 2.45 (t, J= 12.1 Hz, 1H), 2.22 (d, J= 13.3 Hz, 1H), 1.32 (d, J= 3.4 Hz, 3H), 1.28 (d, J= 3.4 Hz, 1H), 0.85 (s, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 522 (M+H) +。RT (方法A): 1.37 min。
205 c 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.95 (d, J= 9.7 Hz, 1H), 8.27 (t, J= 6.9 Hz, 1H), 7.89 (t, J= 5.2 Hz, 1H), 7.86 - 7.77 (m, 2H), 7.52 (s, 1H), 7.18 - 7.06 (m, 4H), 6.99 - 6.95 (m, 2H), 6.49 (td, J= 74.5, 15.0 Hz, 1H), 5.38 (dt, J= 20.6, 6.5 Hz, 1H), 4.98 (d, J= 33.4 Hz, 1H), 4.71 - 4.59 (m, 1H), 4.31 - 4.07 (m, 2H), 3.96 - 3.75 (m, 2H), 2.50 (ddd, J= 34.7, 30.8, 12.1 Hz, 1H), 2.41 - 2.22 (m, 1H), 1.66 (t, J= 13.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 613 (M+H) +。RT (方法A): 1.55 min。
211 c 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.62 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.06 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.88 (dd, J= 8.5, 1.7 Hz, 1H), 7.80 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.49 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.45 (d, J= 4.2 Hz, 1H), 7.43 (d, J= 2.6 Hz, 1H), 7.22 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 7.12 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 6.51 (s, 1H), 4.70 (d, J= 16.1 Hz, 1H), 4.64 - 4.57 (m, 2H), 4.24 (d, J= 6.5 Hz, 2H), 4.02 (d, J= 3.7 Hz, 4H), 3.86 (d, J= 3.5 Hz, 2H), 2.49 - 2.43 (m, 1H), 2.29 (dd, J= 13.1, 6.1 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 553 (M+H) +。RT (方法A): 1.00 min。
218 c 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.56 (s, 2H), 8.03 (dd, J= 13.1, 8.0 Hz, 2H), 7.83 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.65 (d, J= 8.3 Hz, 2H), 7.55 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 7.41 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 7.16 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 6.60 (t, J= 41.7 Hz, 2H), 5.06 (s, 1H), 4.70 (d, J= 15.9 Hz, 1H), 4.65 - 4.54 (m, 2H), 4.30 (d, J= 9.5 Hz, 2H), 4.02 (d, J= 4.5 Hz, 1H), 3.95 (s, 1H), 2.50 (d, J= 11.0 Hz, 1H), 2.35 - 2.22 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 562 (M+H) +。RT (方法A): 1.29 min。
235 c 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.92 (d, J= 26.4 Hz, 1H), 8.28 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.87 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 7.57 (t, J= 9.1 Hz, 1H), 7.48 - 7.40 (m, 3H), 7.36 (t, J= 7.8 Hz, 2H), 7.16 - 7.11 (m, 2H), 7.00 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 6.69 - 6.27 (m, 1H), 5.03 - 4.97 (m, 1H), 4.76 - 4.67 (m, 2H), 4.61 - 4.56 (m, 1H), 4.25 - 4.14 (m, 2H), 3.97 (dd, J= 11.5, 4.7 Hz, 1H), 3.85 (d, J= 11.8 Hz, 1H), 2.52 - 2.43 (m, 1H), 2.30 - 2.20 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 581 (M+H) +。RT (方法A): 1.50 min。
246 c 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.88 (s, 1H), 8.33 – 8.18 (m, 1H), 7.87 (t, J= 6.9 Hz, 1H), 7.55 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 7.49 – 7.44 (m, 1H), 7.43 – 7.31 (m, 4H), 7.17 – 7.08 (m, 2H), 7.06 – 6.90 (m, 2H), 4.86 (d, J= 3.4 Hz, 1H), 4.64 (s, 2H), 4.32 (q, J= 16.4 Hz, 2H), 3.38 (dd, J= 6.0, 2.4 Hz, 1H), 2.49 – 2.28 (m, 1H), 2.19 (dd, J= 13.3, 3.3 Hz, 1H), 1.28 (s, 3H), 1.19 – 1.06 (m, 1H), 0.85 – 0.67 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 541 (M+H) +。RT (方法A): 1.45 min。
251 b,c 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.63 (d, J= 0.9 Hz, 1H), 7.88 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.62 – 7.55 (m, 2H), 7.26 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.21 – 7.15 (m, 2H), 7.10 – 7.06 (m, 2H), 7.03 (dd, J= 8.0, 1.2 Hz, 1H), 6.51 (s, 1H), 5.33 – 5.29 (m, 1H), 5.24 (s, 1H), 4.58 (t, J= 8.1 Hz, 1H), 4.35 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 4.15 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 4.06 – 3.98 (m, 2H), 2.60 – 2.53 (m, 1H), 2.38 – 2.30 (m, 1H), 1.60 (d, J= 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 626 (M+H) +。RT (方法A): 1.59 min。
252 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.90 (d, J= 3.9 Hz, 1H), 8.28 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 7.89 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 7.55 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.44 – 7.37 (m, 3H), 7.10 (dd, J= 11.8, 5.7 Hz, 3H), 7.04 – 6.99 (m, 2H), 4.65 (s, 2H), 4.58 (s, 1H), 4.33 (q, J= 22.9, 10.6 Hz, 2H), 3.39 (dd, J= 6.0, 2.4 Hz, 1H), 2.42 (t, J= 12.5 Hz, 1H), 2.19 (dd, J= 13.4, 3.3 Hz, 1H), 1.29 (s, 3H), 1.19 – 1.14 (m, 1H), 0.82 – 0.73 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 559 (M+H) +。RT (方法A): 1.50 min。
254 b,c 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.88 (s, 1H), 8.28 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.87 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.57 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.42 (t, J= 7.8 Hz, 3H), 7.14 – 7.08 (m, 3H), 7.05 – 6.99 (m, 2H), 6.50 (t, J= 74.5 Hz, 1H), 5.04 – 4.96 (m, 1H), 4.74 – 4.67 (m, 2H), 4.59 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 4.25 – 4.14 (m, 2H), 4.00 – 3.92 (m, 1H), 3.85 (d, J= 12.7 Hz, 1H), 2.54 – 2.42 (m, 1H), 2.29 – 2.19 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 599 (M+H) +。RT (方法A): 1.47 min。
256 b,c 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.98 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.57 – 7.54 (m, 1H), 7.53 – 7.48 (m, 1H), 7.46 – 7.39 (m, 2H), 7.39 – 7.34 (m, 2H), 7.16 – 7.10 (m, 2H), 7.03 – 6.97 (m, 2H), 4.71 (d, J= 7.0 Hz, 2H), 4.62 (dd, J= 9.3, 5.3 Hz, 1H), 4.14 (dd, J= 42.0, 16.5 Hz, 2H), 4.00 – 3.92 (m, 4H), 3.79 (s, 2H), 2.50 – 2.33 (m, 1H), 2.32 – 2.15 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 573 (M+H) +。RT (方法A): 1.27 min。
301 b,c 1H-NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.63 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.85 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 7.83 (dd, J = 8.0, 1.5 Hz, 1H), 7.79 - 7.76 (m, 1H), 7.57 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.53 - 7.50 (m, 1H), 7.36 (dd, J = 5.5, 3.2 Hz, 2H), 7.22 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 6.72 - 6.36 (m, 2H), 5.08 - 5.04 (m, 1H), 4.75 - 4.71 (m, 1H), 4.62 - 4.54 (m, 2H), 4.29 (d, J = 10.6 Hz, 2H), 4.05 - 4.01 (m, 1H), 3.95 - 3.91 (m, 1H), 2.55 - 2.48 (m, 1H), 2.33 - 2.26 (m, 1H), 1.51 (s, 6H)。LC/MS (ESI) m/z: 588 (M+H) +。RT (方法A): 1.53 min。
370 b,c 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.67 - 8.62 (m, 1H), 8.00 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.25 - 7.21 (m, 3H), 7.00 - 6.95 (m, 2H), 6.88 - 6.84 (m, 1H), 6.70 - 6.33 (m, 2H), 5.06 - 5.00 (m, 1H), 4.71 - 4.66 (m, 1H), 4.59 - 4.50 (m, 2H), 4.27 - 4.13 (m, 2H), 4.00 - 3.94 (m, 1H), 3.90 - 3.85 (m, 1H), 2.67 - 2.62 (m, 2H), 2.52 - 2.43 (m, 1H), 2.31 - 2.22 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 610 (M+H) +。RT (方法A): 1.75 min。
372 b,c 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.66 (s, 1H), 8.00 (m, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.32 - 7.27 (m, 2H), 7.26 - 7.19 (m, 4H), 7.02 (s, 1H), 6.98 - 6.94 (m, 2H), 6.88 - 6.83 (m, 1H), 6.53 (s, 1H), 4.71 (d, J= 15.9 Hz, 1H), 4.62 - 4.58 (m, 4H), 4.24 - 4.07 (m, 2H), 4.05 - 3.91 (m, 2H), 2.67 - 2.61 (m, 2H), 2.48 - 2.36 (m, 1H), 2.34 - 2.18 (m, 1H), 1.23 (t, J= 7.6, 1.2 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 642 (M+H) +。RT (方法A): 1.19 min。
a使用T 3P代替步驟3中之PyBOP。 b使用HATU代替步驟1中之T 3P。 c使用HATU代替步驟3中之PyBOP。 流程 10. (S)-N-( 噁唑并 [4,5-c] 吡啶 -2- 基甲基 )-7-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 31) 之合成 步驟 1 ： (2-((4- 羥基吡啶 -3- 基 ) 胺基 )-2- 側氧基乙基 ) 胺甲酸三級丁酯
在N 2氛圍，0℃下向3-胺基吡啶-4-醇(2.0 g，18.18 mmol)及(三級丁氧基羰基)甘胺酸(3.8 g，21.82 mmol)於DMF (20 mL)之混合物中添加DIPEA (11.7 g，90.90 mmol)及HBTU (8.6 g，21.82 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用EtOAc稀釋，用飽和NH 4Cl水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 20% MeOH)純化殘餘物，得到呈白色固體之(2-((4-羥基吡啶-3-基)胺基)-2-側氧基乙基)胺甲酸三級丁酯(3.75 g，產率77.3%)。LC/MS (ESI) (m/z): 268 (M+H) +。 步驟 2 ： ( 噁唑并 [4,5-c] 吡啶 -2- 基甲基 ) 胺甲酸三級丁酯
向C 2Cl 6(1.1 g，4.68 mmol)於DCM (10 mL)之溶液中添加PPh 3(1.5 g，5.61 mmol)及TEA (2.1 g，14.96 mmol)且將混合物在25℃下攪拌10分鐘。向混合物中添加(2-((4-羥基吡啶-3-基)胺基)-2-側氧基乙基)胺甲酸三級丁酯(0.5 g，1.87 mmol)且將所得混合物在25℃下攪拌2小時。混合物用飽和NH 4Cl水溶液淬滅且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 5% MeOH)純化殘餘物，得到呈棕色固體之(噁唑并[4,5-c]吡啶-2-基甲基)胺甲酸三級丁酯(0.3 g，產率64.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 250 (M+H) +。 步驟 3 ：噁唑并 [4,5-c] 吡啶 -2- 基甲胺鹽酸鹽
向(噁唑并[4,5-c]吡啶-2-基甲基)胺甲酸三級丁酯(0.3 g，1.20 mmol)於DCM (1 mL)之溶液中添加HCl/1,4-二噁烷(3 mL，4M)且將混合物在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈棕色固體之噁唑并[4,5-c]吡啶-2-基甲胺鹽酸鹽(150 mg，產率83.3%)，其未經進一步純化直接用於下一反應。LC/MS (ESI) m/z: 150 (M+H) +。 步驟 4 ： (S)-N-( 噁唑并 [4,5-c] 吡啶 -2- 基甲基 )-7-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 31)
在N 2氛圍，0℃下向(S)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸(40 mg，0.09 mmol)及噁唑并[4,5-c]吡啶-2-基甲胺鹽酸鹽(39 mg，0.27 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (70 mg，0.54 mmol)及PyBOP (55 mg，0.11 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用飽和NaHCO 3水溶液淬滅且用CHCl 3/i-PrOH (3/1, v/v)萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 31(3 mg，產率5.9%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.90 (s, 1H), 8.46 (t, J= 4.6 Hz, 1H), 7.68 (dd, J= 13.8, 5.7 Hz, 1H), 7.49 (dd, J= 8.1, 1.9 Hz, 1H), 7.43 (dd, J= 6.4, 1.7 Hz, 1H), 7.19 (dt, J= 14.2, 4.9 Hz, 2H), 7.13 (dd, J= 7.7, 1.6 Hz, 1H), 7.07 (dd, J= 11.2, 3.8 Hz, 1H), 7.04 – 7.00 (m, 1H), 4.76 (dd, J= 15.6, 9.5 Hz, 2H), 4.62 (dd, J= 13.5, 7.5 Hz, 1H), 4.23 – 4.13 (m, 2H), 3.97 (ddd, J= 12.3, 6.8, 3.7 Hz, 4H), 3.82 – 3.72 (m, 2H), 2.46 (dd, J= 13.2, 9.0 Hz, 1H), 2.28 (dd, J= 13.2, 6.0 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) (m/z): 588 (M+H) +。RT (方法A: 1.73 min。 流程 11. (S)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-((4- 苄醯基苄醯基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 33) 之合成 步驟 1 ： (4- 苄醯基苄醯基 ) 甘胺酸甲酯
在N 2氛圍下向4-苄醯基苯甲酸(200 mg，0.88 mmol)及甘胺酸甲酯鹽酸鹽(133 mg，1.06 mmol)於EtOAc (2 mL)之混合物中添加DIPEA (341 mg，2.64 mmol)及HBTU (402 mg，1.06 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 60% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之(4-苄醯基苄醯基)甘胺酸甲酯(210 mg，產率79.9%)。LC/MS (ESI) m/z: 298 (M+H) +。 步驟 2 ： (4- 苄醯基苄醯基 ) 甘胺酸
在0℃下向(4-苄醯基苄醯基)甘胺酸甲酯(200 mg，0.67 mmol)於MeOH (1.5 mL)及水(0.5 mL)之溶液中添加LiOH·H 2O (63 mg，1.5 mmol)且將混合物在室溫下攪拌3小時。反應混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之(4-苄醯基苄醯基)甘胺酸(170 mg，產率89.6%)，其未經純化用於下一反應。LC/MS (ESI) m/z: 284 (M+H) +。 步驟 3 ： (S)-7-((4- 苄醯基苄醯基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲酸甲酯
在N 2氛圍下向(S)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸甲酯(150 mg，0.8 mmol)及(4-苄醯基苄醯基)甘胺酸(150 mg，0.53 mmol)於DMF (1.5 mL)之混合物中添加DIPEA (260 mg，2.0 mmol)及T 3P (509 mg，0.8 mmol，EtOAc中50% wt.)且將混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 80% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之(S)-7-((4-苄醯基苄醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸甲酯(140 mg，產率58.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 453 (M+H) +。 步驟 4 ： (S)-7-((4- 苄醯基苄醯基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲酸
在0℃下向(S)-7-((4-苄醯基苄醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸甲酯(100 mg，0.22 mmol)於MeOH (1 mL)及水(0.5 mL)之溶液中添加LiOH·H 2O (21 mg，0.5 mmol)且將混合物在室溫下攪拌3小時。反應混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之(S)-7-((4-苄醯基苄醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸(90 mg，產率93.3%)，其未經純化用於下一反應。LC/MS (ESI) m/z: 439 (M+H) +。 步驟 5 ： (S)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-((4- 苄醯基苄醯基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 33)
在N 2氛圍下向(S)-7-((4-苄醯基苄醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸(45 mg，0.10 mmol)及(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲胺(17 mg，0.114 mmol)於DMF (0.5 mL)之混合物中添加DIPEA (65 mg，0.5 mmol)及T 3P (95 mg，0.15 mmol，EtOAc中50% wt)且將混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 8: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 33(28 mg，產率49.3%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.88 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.15 (d, J= 6.6 Hz, 1H), 7.94 (d, J= 8.3 Hz, 2H), 7.82 - 7.78 (m, 4H), 7.68 (dd, J= 15.7, 7.0 Hz, 2H), 7.56 (t, J= 7.7 Hz, 2H), 6.88 (s, 1H), 4.69 (s, 2H), 4.65 (dd, J= 8.9, 6.0 Hz, 1H), 4.29 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.19 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.04 (s, 4H), 3.89 - 3.82 (m, 2H), 2.49 (dd, J= 13.1, 9.1 Hz, 1H), 2.29 (dd, J= 13.2, 6.0 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) (m/z): 568 (M+H) +。RT (方法A): 1.07 min。 流程 12. (S)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-b] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-((9,9- 二氟 -9H- 茀 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 34) 之合成 步驟 1 ： (3-(3- 胺基吡啶 -2- 基 ) 丙 -2- 炔 -1- 基 ) 胺甲酸三級丁酯
在N 2氛圍下向2-碘吡啶-3-胺(500 mg，2.3 mmol)及(3-(3-胺基吡啶-2-基)丙-2-炔-1-基)胺甲酸三級丁酯(423 mg，2.7 mmol)於DMSO (5 mL)及TEA (3 mL)之混合物中添加CuI (53 mg，0.28 mmol)、Pd(dppf) 2Cl 2(197 mg，0.28 mmol)。混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在室溫下攪拌1小時。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 30% EtOAc)純化殘餘物，得到呈棕色油狀物之(3-(3-胺基吡啶-2-基)丙-2-炔-1-基)胺甲酸三級丁酯(400 mg，產率71.3%)。LC/MS (ESI) m/z: 248 (M+H) +。 步驟 2 ： (3-(3-( 雙 ( 三級丁氧基羰基 ) 胺基 ) 吡啶 -2- 基 ) 丙 -2- 炔 -1- 基 )( 三級丁氧基羰基 ) 胺甲酸三級丁酯
在0℃下向(3-(3-胺基吡啶-2-基)丙-2-炔-1-基)胺甲酸三級丁酯(400 mg，1.6 mmol)於THF (4 mL)之溶液中添加Boc 2O (1.1 g，4.8 mmol)且將混合物在28℃下攪拌16小時。將混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 10% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之(3-(3-(雙(三級丁氧基羰基)胺基)吡啶-2-基)丙-2-炔-1-基)(三級丁氧基羰基)胺甲酸三級丁酯(400 mg，產率71.0%)。LC/MS (ESI) m/z: 548 (M+H) +。 步驟 3 ： ((1H- 吡咯并 [3,2-b] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 胺甲酸三級丁酯
向(3-(3-(雙(三級丁氧基羰基)胺基)吡啶-2-基)丙-2-炔-1-基)(三級丁氧基羰基)胺甲酸三級丁酯(400 mg，1.6 mmol)於MeOH (4 mL)之溶液中添加DBU (139 mg，0.91 mmol)且將反應混合物在60℃下攪拌隔夜。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 5% MeOH)純化殘餘物，得到呈棕色油狀物之((1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)甲基)胺甲酸三級丁酯(50 mg，產率55.5%)。LC/MS (ESI) m/z: 248 (M+H) +。 步驟 4 ： (1H- 吡咯并 [3,2-b] 吡啶 -2- 基 ) 甲胺鹽酸鹽
將((1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)甲基)胺甲酸三級丁酯(50 mg，0.20 mmol)於HCl/1,4-二噁烷(2 mL，4M)中之溶液在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色固體之((1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)甲基)-l3-氯胺(35 mg，產率93.7%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 148 (M+H) +。 步驟 5 ： (S)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-b] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-((9,9- 二氟 -9H- 茀 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 34)
在N 2氛圍下向(1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)甲胺鹽酸鹽(29 mg，0.16 mmol)及(S)-7-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸(73 mg，0.16 mmol)於DMF (1.0 mL)之混合物中添加DIPEA (82 mg，0.64 mmol)及PyBOP (83 mg，0.16 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 34(30 mg，產率31.9%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.27 (s, 1H), 8.14 (dd, J= 5.2, 1.1 Hz, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.82 - 7.77 (m, 2H), 7.68 - 7.62 (m, 3H), 7.56 (t, J= 7.2 Hz, 1H), 7.44 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 7.05 (dd, J= 8.1, 5.3 Hz, 1H), 6.61 (d, J= 23.4 Hz, 1H), 4.70 (s, 2H), 4.64 (dd, J= 8.9, 6.0 Hz, 1H), 4.29 - 4.16 (m, 2H), 4.04 (s, 4H), 3.86 (q, J= 10.7 Hz, 2H), 2.49 (dd, J= 13.1, 9.0 Hz, 1H), 2.29 (dd, J= 13.2, 6.0 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 588 (M+H) +。RT (方法A): 1.32 min。 流程 13. (2S,4R)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((4- 苯氧基苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 39) 之合成 步驟 1 ： (R)-1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙 -1- 胺鹽酸鹽
將(S)-2-甲基-N-((R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)丙烷-2-亞磺醯胺(30 mg，0.07 mmol)於HCl/1,4-二噁烷(2 mL，4M)中之溶液在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之(R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-胺鹽酸鹽(24 mg，產率96.0%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 302 (M+H) +。 步驟 2 ： (2S,4R)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((4- 苯氧基苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 39)
在N 2氛圍下向(R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-胺鹽酸鹽(24 mg，0.07 mmol)及(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-吡咯啶-2-甲酸(30 mg，0.07 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (45 mg，0.35 mmol)及PyBOP (54 mg，0.10 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 39(5.2 mg，產率13.0%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.84 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.91 (d, J= 8.3 Hz, 2H), 7.42 (d, J= 8.1 Hz, 3H), 7.22 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 7.09 (d, J= 8.3 Hz, 2H), 7.04 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 6.76 (s, 1H), 6.53 (t, J= 74.5 Hz, 1H), 5.35 - 5.30 (m, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.58 (t, J= 7.8 Hz, 1H), 4.33 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 4.18 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 3.98 (dd, J= 11.5, 3.9 Hz, 1H), 3.91 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 2.48 (s, 1H), 2.29 (d, J= 12.9 Hz, 1H), 1.64 (t, J= 9.8 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 578 (M+H) +。RT (方法A): 1.39 min。 流程 14. (S)-7-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-N-( 噻唑并 [4,5-c] 吡啶 -2- 基甲基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 41) 之合成 步驟 1 ： 2-((4- 氯吡啶 -3- 基 ) 胺基 )-2- 側氧基乙酸乙酯
在N 2氛圍，0℃下向4-氯吡啶-3-胺(1.0 g，7.81 mmol)及2-氯-2-側氧基乙酸乙酯(1.17 g，8.6 mmol)於THF (20 mL)之混合物中添加TEA (0.94 g，9.31 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈棕色油狀物之2-((4-氯吡啶-3-基)胺基)-2-側氧基乙酸乙酯(1.6 g，產率89.8)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 229 (M+H) +。 步驟 2 ：噻唑并 [4,5-c] 吡啶 -2- 甲酸乙酯
在N 2氛圍下向2-((4-氯吡啶-3-基)胺基)-2-側氧基乙酸乙酯(1.6 g，7.02 mmol)於甲苯(23 mL)之溶液中添加勞森試劑(Lawessons) (1.7 g，4.21 mmol)且將反應混合物在115℃下攪拌2小時。混合物用DCM稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 31% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之噻唑并[4,5-c]吡啶-2-甲酸乙酯(900 mg，產率61.6%)。LC/MS (ESI) m/z: 209 (M+H) +。 步驟 3 ：噻唑并 [4,5-c] 吡啶 -2- 基甲醇
在0℃下向噻唑并[4,5-c]吡啶-2-甲酸乙酯(900 mg，4.33 mmol)於EtOH (18 mL)之溶液中添加NaBH 4(163.7 mg，4.33 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用冰水淬滅且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 83% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之噻唑并[4,5-c]吡啶-2-基甲醇(300 mg，產率41.8%)。LC/MS (ESI) m/z: 167 (M+H) +。 步驟 4 ： 2-( 疊氮基甲基 ) 噻唑并 [4,5-c] 吡啶
在N 2氛圍，0℃下向噻唑并[4,5-c]吡啶-2-基甲醇(300 mg，1.81 mmol)於THF (15 mL)之溶液中添加DPPA (994.7 mg，1.62 mmol)及DBU (220.1 mg，1.45 mmol)且將混合物在室溫下攪拌6小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 33% EtOAc)純化殘餘物，得到呈棕色固體之2-(疊氮基甲基)噻唑并[4,5-c]吡啶(220 mg，產率63.8%)。LC/MS (ESI) m/z: 192 (M+H) +。 步驟 5 ：噻唑并 [4,5-c] 吡啶 -2- 基甲胺
向2-(疊氮基甲基)噻唑并[4,5-c]吡啶(220 mg，1.15 mmol)於MeOH (3 mL)之溶液中添加Pd/C (22 mg，10% wt.)，混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在H 2氣球下於25℃攪拌隔夜。過濾混合物且將濾液濃縮至乾，得到呈棕色固體之噻唑并[4,5-c]吡啶-2-基甲胺(135 mg，產率71.1%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 166 (M+H) +。 步驟 6 ： (S)-7-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-N-( 噻唑并 [4,5-c] 吡啶 -2- 基甲基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 41)
在N 2氛圍下向(S)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸(40 mg，0.09 mmol)及噻唑并[4,5-c]吡啶-2-基甲胺(29.0 mg，0.18 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (67.9 mg，0.54 mmol)及PyBOP (54.7 mg，0.11 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 12: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 41(20 mg，產率37.8%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 9.10 (s, 1H), 8.36 (d, J= 5.5 Hz, 1H), 8.08 – 7.95 (m, 1H), 7.48 (dd, J= 8.1, 1.8 Hz, 1H), 7.42 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.20 (dd, J= 10.5, 4.8 Hz, 1H), 7.15 (dd, J= 7.8, 1.7 Hz, 2H), 7.10 – 7.06 (m, 1H), 7.02 (dd, J= 8.0, 1.1 Hz, 1H), 4.93 – 4.88 (m, 1H), 4.78 (s, 1H), 4.67 (dd, J= 9.2, 5.3 Hz, 1H), 4.19 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.11 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.81 (d, J= 12.3 Hz, 2H), 3.16 (td, J= 6.7, 3.7 Hz, 1H), 2.49 (dd, J= 13.2, 9.3 Hz, 1H), 2.28 (dd, J= 13.2, 5.3 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 604 (M+H) +。RT (方法A): 1.76 min。 流程 15. (S)-N-((7- 氟 -1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 45) 之合成 步驟 1 ： 3- 氟 -5- 碘吡啶 -4- 胺 (2)
在N 2氛圍下向3-氟吡啶-4-胺(1.0 g，8.93 mmol)於MeCN (10 mL)之溶液中添加NIS (2.4 g，10.7 mmol)及TsOH (85 mg，0.45 mmol)且將反應混合物在70℃下攪拌隔夜。混合物用飽和Na 2S 2O 3水溶液淬滅且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色油狀物之3-氟-5-碘吡啶-4-胺(1.5 g，產率71.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 239 (M+H) +。 步驟 2 ： ( 三級丁氧基羰基 )(3- 氟 -5- 碘吡啶 -4- 基 ) 胺甲酸三級丁酯 (2)
在0℃下向3-氟-5-碘吡啶-4-胺(1.5 g，6.30 mmol)於THF (20 mL)之溶液中添加(Boc) 2O (6.9 g，31.5 mmol)及DMAP (76.9 mg，0.63 mmol)且將混合物在室溫下攪拌16小時。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 10% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之(三級丁氧基羰基)(3-氟-5-碘吡啶-4-基)胺甲酸三級丁酯(180 mg，產率6.5%)。LC/MS (ESI) m/z: 439 (M+H) +。 步驟 3 ： ( 三級丁氧基羰基 )(3-(3-(( 三級丁氧基羰基 ) 胺基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 )-5- 氟吡啶 -4- 基 ) 胺甲酸三級丁酯 (4)
在N 2氛圍下向(三級丁氧基羰基)(3-氟-5-碘吡啶-4-基)胺甲酸三級丁酯(180 mg，0.41 mmol)及丙-2-炔-1-基胺甲酸三級丁酯(76.4 mg，0.49 mmol)於TEA (2 mL)及DMSO (2 mL)之混合物中添加CuI (4 mg，0.02 mmol)及Pd(PPh 3) 2Cl 2(14.4 mg，0.24 mmol)，混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在50℃下攪拌隔夜。將反應混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 30% EtOAc)純化殘餘物，得到呈棕色油狀物之(三級丁氧基羰基)(3-(3-((三級丁氧基羰基)胺基)丙-1-炔-1-基)-5-氟吡啶-4-基)胺甲酸三級丁酯(80 mg，產率41.8%)。LC/MS (ESI) m/z: 466 (M+H) +。 步驟 4 ： ((7- 氟 -1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 胺甲酸三級丁酯 (5)
向(三級丁氧基羰基)(3-(3-((三級丁氧基羰基)胺基) 丙-1-炔-1-基)-5-氟吡啶-4-基)胺甲酸三級丁酯(80 mg，0.17 mmol)於MeOH (1 mL)/H 2O (1 mL)之溶液中添加DBU (53 mg，0.35 mmol)且將反應混合物在90℃下攪拌隔夜。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 15% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之((7-氟-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)胺甲酸三級丁酯(15 mg，產率32.9%)。LC/MS (ESI) m/z: 266 (M+H) +。 步驟 5 ： (7- 氟 -1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲胺鹽酸鹽 (6)
將((7-氟-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)胺甲酸三級丁酯(15 mg，0.06 mmol)於HCl/1,4-二噁烷(2 mL，4M)中之溶液在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色固體之(7-氟-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲胺鹽酸鹽(10 mg，產率87.7%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 166 (M+H) +。 步驟 6 ： (S)-N-((7- 氟 -1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 45)
在N 2氛圍下向(S)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸(30 mg，0.07 mmol)及(7-氟-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲胺鹽酸鹽(10 mg，0.05 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (42 mg，0.33 mmol)及PyBOP (51 mg，0.10 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物首先係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 45(1.2 mg，產率4.0%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.74 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.55 (dd, J= 8.1, 1.9 Hz, 1H), 7.50 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.22 - 7.13 (m, 4H), 7.08 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.69 (dd, J= 7.2, 5.6 Hz, 1H), 4.58 - 4.53 (m, 1H), 4.33 - 4.27 (m, 2H), 4.17 (d, J= 14.0 Hz, 2H), 3.99 (d, J= 1.8 Hz, 4H), 3.76 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 2.42 (dd, J= 13.2, 8.7 Hz, 1H), 2.22 (dd, J= 13.0, 6.2 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 604 (M+H) +。RT (方法A): 1.42 min。 流程 16. (S)-N-((1- 甲基 -1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 46) 之合成 步驟 1 ： 2-((( 三級丁氧基羰基 ) 胺基 ) 甲基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -1- 甲酸三級丁酯 (2)
在N 2氛圍下向(3-碘吡啶-4-基)胺甲酸三級丁酯(2.0 g，6.25 mmol)及丙-2-炔-1-基胺甲酸三級丁酯(1.2 g，7.50 mmol)於TEA (10 mL)及DMSO (5 mL)之混合物中添加CuI (59 mg，0.31 mmol)及Pd(PPh 3) 2Cl 2(219 mg，0.31 mmol)，混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在50℃下攪拌隔夜。將反應混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 30% EtOAc)純化殘餘物，得到呈棕色油狀物之2-(((三級丁氧基羰基)胺基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-甲酸三級丁酯(2.0 g，產率92.2%)。LC/MS (ESI) m/z: 348 (M+H) +。 步驟 2 ： 2-( 胺基甲基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -1- 甲酸三級丁酯鹽酸鹽 (3)
在N 2氛圍下向2-(((三級丁氧基羰基)胺基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-甲酸三級丁酯(2.0 g，5.76 mmol)於DCM (10 mL)之溶液中添加HCl/1,4-二噁烷(10 mL，4M)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色固體之2-(胺基甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-甲酸三級丁酯鹽酸鹽(1.03 g，產率63.1%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 248 (M+H) +。 步驟 3 ： (1- 甲基 -1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲胺 (4)
在N 2氛圍下向2-(胺基甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-甲酸三級丁酯鹽酸鹽(200 mg，0.70 mmol)於THF (20 mL)之溶液中添加LiAlH 4(53 mg，1.41 mmol)且將反應混合物在90℃下攪拌隔夜。反應混合物在0℃下用Na 2SO 4.10H 2O淬滅且劇烈攪拌10 min。過濾混合物且將濾液濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 20% MeOH)純化殘餘物，得到呈白色固體之(1-甲基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲胺(40 mg，產率35.2%)。LC/MS (ESI) m/z: 162 (M+H) +。 步驟 4 ： (S)-N-((1- 甲基 -1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 46)
在N 2氛圍下向(S)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸(50 mg，0.11 mmol)及(1-甲基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲胺(26 mg，0.16 mmol)於DMF (5 mL) 之混合物中添加DIPEA (85 mg，0.66 mmol)及PyBOP (86 mg，0.16 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 5: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 46(10 mg，產率15.2%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.86 (dd, J= 15.6, 8.7 Hz, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.20 - 8.02 (m, 1H), 7.67 - 7.44 (m, 3H), 7.30 - 7.14 (m, 3H), 7.11 - 6.98 (m, 2H), 6.84 - 6.74 (m, 1H), 5.29 – 4.97 (m, 2H), 4.76 – 4.30 (m, 2H), 4.16 – 3.95 (m, 5H), 3.83 (dt, J= 17.0, 11.5 Hz, 2H), 3.20 – 2.91 (m, 3H), 2.78 – 2.44 (m, 1H), 2.21 (ddd, J= 21.4, 13.4, 6.4 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 600 (M+H) +。RT (方法A): 1.35 min。 流程 17. (S)-N-((1H- 咪唑并 [4,5-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 49) 之合成 步驟 1 ： (2-((4- 胺基吡啶 -3- 基 ) 胺基 )-2- 側氧基乙基 ) 胺甲酸三級丁酯
在N 2氛圍下向(三級丁氧基羰基)甘胺酸(701 mg，4.0 mmol)及吡啶-3,4-二胺(524 mg，4.8 mmol)於EtOAc (10 mL)之混合物中添加DIPEA (1.55 g，12.0 mmol)及HBTU (1.82 g，4.8 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 80% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之(2-((4-胺基吡啶-3-基)胺基)-2-側氧基乙基)胺甲酸三級丁酯(980 mg，產率92%)。LC/MS (ESI) m/z: 267 (M+H) +。 步驟 2 ： ((1H- 咪唑并 [4,5-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 胺甲酸三級丁酯
在N 2氛圍下向(2-((4-胺基吡啶-3-基)胺基)-2-側氧基乙基)胺甲酸三級丁酯(200 mg，0.75 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加AcOH (2 mL)，混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在120℃下攪拌隔夜。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈棕色固體之((1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲基)胺甲酸三級丁酯(187 mg，產率100%)。LC/MS (ESI) m/z: 249 (M+H) +。 步驟 3 ： (1H- 咪唑并 [4,5-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲胺鹽酸鹽
將((1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲基)胺甲酸三級丁酯(187 mg，0.75 mmol)於EtOAc (1 mL)及HCl/1,4-二噁烷(1 mL，4M)中之溶液在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。過濾反應混合物且用EtOAc洗滌固體。將固體在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色固體之(1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲胺鹽酸鹽(95 mg，產率68.6%)，其未經進一步純化直接用於下一反應。LC/MS (ESI) m/z: 149 (M+H) +。 步驟 4 ： (S)-N-((1H- 咪唑并 [4,5-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 49)
在N 2氛圍下向(S)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸(20 mg，0.044 mmol)及(1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲胺鹽酸鹽(20 mg，0.11 mmol)於DMF (0.5 mL)之混合物中添加DIPEA (29 mg，0.22 mmol)及PyBOP (23 mg，0.044 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 8: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 49(12 mg，產率46.5%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.71 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.47 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.23 - 7.15 (m, 4H), 7.12 - 6.99 (m, 3H), 4.75 (d, J= 3.8 Hz, 2H), 4.62 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 4.18 (d, J= 9.0 Hz, 2H), 4.03 (d, J= 4.8 Hz, 4H), 3.84 (d, J= 10.0 Hz, 2H), 2.51 - 2.44 (m, 1H), 2.30 (dd, J= 13.2, 6.7 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 587 (M+H) +。RT (方法A): 1.33 min。 流程 18. (S)-N-((1- 胺基異喹啉 -7- 基 ) 甲基 )-7-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 51) 之合成 步驟 1 ： 7- 溴 -N-(2,4- 二甲氧基苄基 ) 異喹啉 -1- 胺
向7-溴-1-氯異喹啉(310 mg，1.29 mmol)及(2,4-二甲氧基苯基)甲胺(385 mg，2.31 mmol)於NMP (6 mL)之混合物中添加K 2CO 3(850 mg，6.16 mmol)，混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在100℃下攪拌2天。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 17% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之7-溴-N-(2,4-二甲氧基苄基)異喹啉-1-胺(300 mg，產率62.8%)。LC/MS (ESI) m/z: 373 (M+H) +。 步驟 2 ： 1-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 ) 異喹啉 -7- 甲腈
在N 2氛圍下向7-溴-N-(2,4-二甲氧基苄基)異喹啉-1-胺(300 mg，0.81 mmol)及Zn(CN) 2(189 mg，1.61 mmol)於NMP (6 mL)之混合物中添加Pd(PPh 3) 4(468 mg，0.40 mmol)。混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在N 2氛圍，100℃下攪拌隔夜。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 25% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色固體之1-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)異喹啉-7-甲腈(253 mg，產率98.5%)。LC/MS (ESI) m/z: 320 (M+H) +。 步驟 3 ： ((1-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 ) 異喹啉 -7- 基 ) 甲基 ) 胺甲酸三級丁酯
在0℃下向1-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)異喹啉-7-甲腈(250 mg，0.78 mmol)於MeOH (5 mL)之溶液中添加NiCl 2(19 mg，0.08 mmol)、(Boc) 2O (510 mg，2.34 mmol)及NaBH 4(207 mg，5.47 mmol)且將混合物在25℃下攪拌16小時。混合物用NaHCO 3水溶液淬滅且用DCM萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 10% MeOH)純化殘餘物，得到呈淺色油狀物之((1-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)異喹啉-7-基)甲基)胺甲酸 三級丁酯(30 mg，產率9.1%)。LC/MS (ESI) m/z: 424(M+H) +。 步驟 4 ： 7-( 胺基甲基 ) 異喹啉 -1- 胺
向((1-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)異喹啉-7-基)甲基)胺甲酸 三級丁酯(30 mg，0.071 mmol)於DCM (2 mL)之溶液中添加TFA (1 mL)及且將混合物在N 2氛圍，室溫下攪拌4小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之7-(胺基甲基)異喹啉-1-胺(12 mg，產率97.8%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 174 (M+H) +。 步驟 5 ： (S)-N-((1- 胺基異喹啉 -7- 基 ) 甲基 )-7-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 51)
在N 2氛圍下向7-(胺基甲基)異喹啉-1-胺(12 mg，0.069 mmol)及(S)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸(30 mg，0.066 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (45 mg，0.35 mmol)及PyBOP (54 mg，0.10 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 51(2.9 mg，產率2.1%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.09 (s, 1H), 7.78 - 7.70 (m, 1H), 7.63 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.30 - 7.22 (m, 3H), 7.17 - 7.10 (m, 2H), 7.01 - 6.95 (m, 3H), 6.84 (d, J= 6.5 Hz, 1H), 4.93 (d, J= 16.3 Hz, 1H), 4.82 - 4.79 (m, 1H), 4.71 (dd, J= 9.3, 5.5 Hz, 1H), 4.45 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.30 (d, J= 15.8 Hz, 1H), 4.04 (dd, J= 7.2, 4.4 Hz, 4H), 3.96 (d, J= 15.9 Hz, 1H), 3.87 (d, J= 10.7 Hz, 1H), 2.56 (dd, J= 13.0, 9.4 Hz, 1H), 2.29 (dd, J= 13.1, 5.3 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 612 (M+H) +。RT (方法A): 1.44 min。 流程 19. (S)-7-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-N-( 噻吩并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基甲基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 54) 之合成 步驟 1 ：噻吩并 [3,2-c] 吡啶 -2- 甲酸甲酯
在N 2氛圍，室溫下向2-巰基乙酸甲酯(1.80 g，16.96 mmol)於DMF (16.5 mL)及水(5.5 mL)之溶液中添加K 2CO 3(2.34 g，16.96 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。將4-氯菸醛(1.80 g，14.13 mmol)添加至混合物中且將反應混合物在60℃下攪拌隔夜。混合物用飽和NH 4Cl水溶液淬滅且用EtOAc萃取兩次。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 100% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之噻吩并[3,2-c]吡啶-2-甲酸甲酯(1.50 g，產率54.9%)。LC/MS (ESI) m/z: 194 (M+H) +。 步驟 2 ：噻吩并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基甲醇
在N 2氛圍，室溫下向噻吩并[3,2-c]吡啶-2-甲酸甲酯(600 mg，3.11 mmol)於THF (10 mL)之混合物中逐滴添加LiAlH 4(6.20 mL，6.20 mmol，THF中1.0 M)。將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物在0℃下用Na 2SO 4.10H 2O淬滅且在此溫度下攪拌20分鐘。過濾混合物，濾液經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 80% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基甲醇(300 mg，產率58.5%)。LC/MS (ESI) (m/z): 166 (M+H) +。 步驟 3 ： 2-( 疊氮基甲基 ) 噻吩并 [3,2-c] 吡啶
在N 2氛圍下向噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基甲醇(280 mg，1.69 mmol)於甲苯(3 mL)之溶液中添加DBU (516 mg，3.39 mmol)及DPPA (465 mg，1.69 mmol)。將反應混合物在N 2氛圍，110℃下攪拌3小時。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (PE: EtOAc= 1: 1)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之2-(疊氮基甲基)噻吩并[3,2-c]吡啶(120 mg，產率37.3%)。LC/MS (ESI) m/z: 191 (M+H) +。 步驟 4 ：噻吩并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基甲胺
在N 2氛圍下向2-(疊氮基甲基)噻吩并[3,2-c]吡啶(40 mg，0.21 mmol)於THF/H 2O (1 mL，1/1)之溶液中添加PPh 3(58 mg，0.22 mmol)且將混合物在室溫下攪拌隔夜。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 8: 1)純化殘餘物，得到呈白色固體之噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基甲胺(30 mg，產率87.0%)。LC/MS (ESI) m/z: 165 (M+H) +。 步驟 5 ： (S)-N-((5- 溴 -1H- 吲哚 -2- 基 ) 甲基 )-7-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 54)
在N 2氛圍下向(S)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸(15 mg，0.033 mmol)及噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基甲胺(11 mg，0.066 mmol)於DMF (0.5 mL)之混合物中添加DIPEA (26 mg，0.2 mmol)及PyBOP (17 mg，0.033 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用EtOAc稀釋且用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 7: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 54(19.6 mg，產率73.2%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.92 (d, J= 45.9 Hz, 1H), 8.17 (d, J= 33.6 Hz, 1H), 7.82 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 7.48 - 7.41 (m, 2H), 7.35 (s, 1H), 7.20 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 7.10 (td, J= 14.4, 7.7 Hz, 3H), 7.01 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 4.76 (s, 1H), 4.65 (dd, J= 10.2, 4.8 Hz, 2H), 4.13 (dd, J= 52.0, 16.4 Hz, 2H), 3.97 (d, J= 25.8 Hz, 4H), 3.83 (q, J= 10.8 Hz, 2H), 2.47 (dd, J= 13.1, 9.3 Hz, 1H), 2.26 (dd, J= 13.3, 5.3 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 603 (M+H) +。RT (方法A): 1.42 min。
基於流程19來製備化合物55：
化合物編號 反應物A 反應物B 特性化資料
55 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.51 - 7.36 (m, 3H), 7.20 - 7.16 (m, 1H), 7.15 - 7.10 (m, 2H), 7.07 (dd, J= 10.4, 4.5 Hz, 2H), 7.03 - 6.96 (m, 2H), 6.30 (d, J= 31.6 Hz, 1H), 4.76 - 4.58 (m, 1H), 4.56 (d, J= 12.0 Hz, 2H), 4.11 (d, J= 11.1 Hz, 2H), 3.98 (d, J= 14.0 Hz, 4H), 3.78 (q, J= 10.6 Hz, 2H), 2.42 (dd, J= 13.2, 9.0 Hz, 1H), 2.25 (dd, J= 13.2, 6.2 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 663 (M+H) +。RT (方法A): 2.65 min。
a僅步驟2-5。 流程 20. (1S,3S,5S)-N-(3-(1H- 咪唑 -1- 基 ) 丙基 )-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 59) 之合成 步驟 1 ： 3-(1H- 咪唑 -1- 基 ) 丙腈
在0℃下向1H-咪唑(1.0 g，14.71 mmol)於MeOH (5 mL)之溶液中添加丙烯腈(1.2 g，22.07 mmol)且將反應混合物在55℃下攪拌3小時。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 10% MeOH)純化殘餘物，得到呈棕色固體之3-(1H-咪唑-1-基)丙腈(1.70 g，產率95.5%)。LC/MS (ESI) m/z: 122 (M+H) +。 步驟 2 ： 3-(1H- 咪唑 -1- 基 ) 丙 -1- 胺
在N 2氛圍下向3-(1H-咪唑-1-基)丙腈(500 mg，4.13 mmol)於MeOH (5 mL)之溶液中添加雷氏Ni (50 mg)。混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在H 2氣球下於室溫攪拌隔夜。過濾混合物，且將濾液在減壓下濃縮至乾，得到呈無色油狀物之3-(1H-咪唑-1-基)丙-1-胺(480 mg，產率93.0%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) (m/z): 126 (M+H) +。 步驟 3 ： (1S,3S,5S)-N-(3-(1H- 咪唑 -1- 基 ) 丙基 )-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 59)
在N 2氛圍下向(1S,3S,5S)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸(30 mg，0.08 mmol)及3-(1H-咪唑-1-基)丙-1-胺(21 mg，0.16 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (65 mg，0.48 mmol)及PyBOP (48 mg，0.09 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈無色油狀物之 化合物 59(10 mg，產率25.6%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.26 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.23 (dd, J= 8.6, 7.4 Hz, 3H), 6.91 - 6.85 (m, 3H), 4.73 (dd, J= 11.4, 3.7 Hz, 1H), 4.16 (t, J= 4.9 Hz, 2H), 4.14 - 4.05 (m, 2H), 3.99 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 3.22 - 3.16 (m, 1H), 3.13 - 3.04 (m, 1H), 2.47 (t, J= 7.1 Hz, 2H), 2.38 (t, J= 13.0 Hz, 1H), 2.12 - 1.96 (m, 5H), 1.27 (d, J= 12.6 Hz, 4H), 1.19 (dd, J= 5.5, 2.5 Hz, 1H), 0.83 (t, J= 5.3 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 468 (M+H) +。RT (方法A): 1.00 min。
基於流程20來製備以下化合物：
化合物編號 反應物A 反應物B 特性化資料
194 a 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.22 (s, 1H), 8.88 - 8.52 (m, 2H), 8.26 (dd, J= 15.9, 1.8 Hz, 1H), 7.66 (d, J= 26.3 Hz, 1H), 7.61 - 7.55 (m, 3H), 7.37 (dd, J= 8.0, 4.1 Hz, 1H), 7.30 - 7.24 (m, 2H), 7.15 - 7.11 (m, 2H), 6.98 - 6.59 (m, 1H), 6.54 - 6.44 (m, 1H), 4.96 - 4.84 (m, 1H), 4.46 - 4.41 (m, 1H), 4.38 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 4.20 (dd, J= 16.9, 5.9 Hz, 1H), 4.13 - 3.95 (m, 1H), 3.86 (dd, J= 11.3, 4.8 Hz, 1H), 3.76 (d, J= 12.9 Hz, 1H), 3.70 - 3.57 (m, 1H), 2.30 - 2.20 (m, 1H), 2.12 - 2.02 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 594 (M+H) +。RT (方法A): 1.53 min。
222 a,b 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 9.20 (d, J = 17.8 Hz, 1H), 8.04 - 7.94 (m, 2H), 7.51 - 7.43 (m, 3H), 7.22 - 7.13 (m, 3H), 7.05 (dd, J = 12.7, 7.8 Hz, 2H), 6.50 (dd, J= 83.2, 65.8 Hz, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.63 - 4.57 (m, 3H), 4.19 (dd, J= 40.7, 16.6 Hz, 2H), 4.00 - 3.84 (m, 2H), 2.55 - 2.44 (m, 1H), 2.30 - 2.21 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 611 (M+H) +。RT (方法A): 2.20 min。
227 a,b 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.14 (s, 1H), 7.93 (d, J= 8.9 Hz, 1H), 7.51 - 7.45 (m, 3H), 7.22 - 7.14 (m, 3H), 7.06 (dd, J= 14.1, 6.4 Hz, 2H), 6.52 (t, J= 74.5 Hz, 1H), 5.04 (s, 1H), 4.64 (q, J= 5.7 Hz, 3H), 4.26 - 4.14 (m, 2H), 4.00 (dd, J= 11.4, 4.7 Hz, 1H), 3.90 - 3.85 (m, 1H), 2.54 - 2.47 (m, 1H), 2.35 - 2.27 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 595 (M+H) +。RT (方法A): 1.80 min。
229 a,b 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.88 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.52 - 7.49 (m, 1H), 7.47 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.30 (d, J= 3.5 Hz, 1H), 7.20 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.18 - 7.16 (m, 1H), 7.14 - 7.13 (m, 1H), 7.11 - 7.09 (m, 1H), 7.08 - 7.05 (m, 1H), 7.03 (dd, J= 8.1, 1.0 Hz, 1H), 6.53 - 6.42 (m, 1H), 6.40 (d, J= 3.5 Hz, 1H), 5.06 – 5.00 (m, 1H), 4.65 (t, J= 7.3 Hz, 1H), 4.58 (s, 2H), 4.26 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.16 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.00 - 3.96 (m, 1H), 3.86 (d, J= 12.8 Hz, 1H), 2.53 - 2.46 (m, 1H), 2.34 - 2.27 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 594 (M+H) +。RT (方法A): 2.10 min。
230 a,b 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.73 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.54 - 7.45 (m, 3H), 7.22 - 7.13 (m, 4H), 7.09 - 7.01 (m, 2H), 6.70 - 6.29 (m, 2H), 5.03 (s, 1H), 4.67 - 4.57 (m, 3H), 4.25 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.15 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.02 - 3.92 (m, 1H), 3.91 - 3.84 (m, 1H), 2.54 - 2.41 (m, 1H), 2.33 - 2.16 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 594 (M+H) +。RT (方法A): 1.50 min。
236 a,b 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 9.07 (s, 1H), 8.25 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.97 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.69 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 7.61 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 7.47 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.22 (d, J= 7.1 Hz, 1H), 7.15 (d, J= 4.7 Hz, 2H), 7.10 (d, J= 7.3 Hz, 1H), 7.02 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 6.53 (t, J= 74.5 Hz, 1H), 5.06 - 5.02 (m, 1H), 4.67 - 4.61 (m, 3H), 4.20 (s, 2H), 4.03 (dd, J= 11.4, 4.5 Hz, 1H), 3.89 (d, J= 11.2 Hz, 1H), 2.56 - 2.50 (m, 1H), 2.33 - 2.26 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 605 (M+H) +。RT (方法A): 1.61 min。
237 a,b 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.35 - 8.33 (m, 1H), 7.77 - 7.75 (m, 1H), 7.53 - 7.49 (m, 3H), 7.45 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 7.21 - 7.15 (m, 3H), 7.11 - 7.08 (m, 1H), 7.05 - 7.02 (m, 1H), 6.94 (dd, J= 6.8, 1.0 Hz, 1H), 6.53 (t, J= 74.6 Hz, 1H), 5.05 - 5.01 (m, 1H), 4.62 (t, J= 7.8 Hz, 1H), 4.49 (s, 2H), 4.20 (d, J= 20.0 Hz, 2H), 4.01 - 3.97 (m, 1H), 3.91 - 3.86 (m, 1H), 2.55 - 2.48 (m, 1H), 2.31 - 2.23 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 594 (M+H) +。RT (方法A): 1.45 min。
249 a,b 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 9.12 (s, 1H), 8.28 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.81 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.72 (dd, J = 8.6, 1.6 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 7.43 (dd, J = 8.1, 1.8 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.23 - 7.19 (m, 1H), 7.16 - 7.08 (m, 3H), 7.01 (dd, J = 8.1, 1.1 Hz, 1H), 6.53 (t, J = 74.5 Hz, 1H), 5.06 - 5.01 (m, 1H), 4.71 - 4.58 (m, 3H), 4.19 (d, J = 3.7 Hz, 2H), 4.04 (dd, J = 11.5, 4.8 Hz, 1H), 3.92 - 3.88 (m, 1H), 2.57 - 2.50 (m, 1H), 2.33 - 2.26 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 605 (M+H) +。RT (方法A): 1.63 min。
a僅步驟2及3。 b使用HATU代替步驟3中之PyBOP。 流程 21. (1S,3S,5S)-N-((R)-1-((1H- 咪唑 -4- 基 ) 甲基 )-2- 側氧基吡咯啶 -3- 基 )-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 61) 之合成 步驟 1 ： (R)-(2- 側氧基 -1-((1- 三苯甲基 -1H- 咪唑 -4- 基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -3- 基 ) 胺甲酸三級丁酯 (1)
向(R)-4-胺基-2-(( 三級丁氧基羰基)胺基)丁酸(100 mg，0.46 mmol)及1-三苯甲基-1H-咪唑-4-甲醛(78 mg，0.23 mmol)於DCM (2 mL)之混合物中添加AcOH (0.2 mL)且將混合物在室溫下攪拌2小時。然後，在0℃下將NaBH(OAc) 3(292mg，1.38 mmol)分批添加至以上混合物中且將所得混合物在室溫下攪拌隔夜。混合物用飽和NH 4Cl水溶液淬滅且用DCM萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (PE: EtOAc= 3: 1)純化殘餘物，得到呈白色固體之(R)-(2-側氧基-1-((1-三苯甲基-1H-咪唑-4-基)甲基)吡咯啶-3-基)胺甲酸 三級丁酯(110 mg，產率45.8%)。LC/MS (ESI) m/z: 523 (M+H) +。 步驟 2 ： (R)-3- 胺基 -1-((1- 三苯甲基 -1H- 咪唑 -4- 基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -2- 酮鹽酸鹽 (2)
將(R)-(2-側氧基-1-((1-三苯甲基-1H-咪唑-4-基)甲基)吡咯啶-3-基)胺甲酸 三級丁酯(110 mg，0.21 mmol)於HCl/1,4-二噁烷(1 mL，4M)中之溶液在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之(R)-3-胺基-1-((1-三苯甲基-1H-咪唑-4-基)甲基)吡咯啶-2-酮鹽酸鹽(80 mg，產率90.1%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 423 (M+H) +。 步驟 3 ： (1S,3S,5S)-5- 甲基 -N-((R)-2- 側氧基 -1-((1- 三苯甲基 -1H- 咪唑 -4- 基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺
在N 2氛圍下向(1S,3S,5S)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸(50 mg，0.14 mmol)及(R)-3-胺基-1-((1-三苯甲基-1H-咪唑-4-基)甲基)吡咯啶-2-酮鹽酸鹽(65 mg，0.15 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (90 mg，0.70 mmol)及PyBOP (94 mg，0.18 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化殘餘物，得到呈白色固體之(1S,3S,5S)-5-甲基-N-((R)-2-側氧基-1-((1-三苯甲基-1H-咪唑-4-基)甲基)吡咯啶-3-基)-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺(50 mg，產率46.7%)。LC/MS (ESI) m/z: 765 (M+H) +。 步驟 4 ： (1S,3S,5S)-N-((R)-1-((1H- 咪唑 -4- 基 ) 甲基 )-2- 側氧基吡咯啶 -3- 基 )-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 61)
向(1S,3S,5S)-5-甲基-N-((R)-2-側氧基-1-((1-三苯甲基-1H-咪唑-4-基)甲基)吡咯啶-3-基)-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺(50 mg，0.065 mmol)於DCM (2 mL)之溶液中添加TFA (1 mL)且將混合物在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 61(5.3 mg，產率15.6%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.16 (s, 1H), 8.05 (d, J= 11.5 Hz, 1H), 7.22 (d, J= 3.3 Hz, 2H), 6.89 (dd, J= 7.5, 4.4 Hz, 3H), 4.79 (dd, J= 11.2, 3.3 Hz, 1H), 4.51 - 4.45 (m, 2H), 4.39 (t, J= 9.4 Hz, 1H), 4.17 (d, J= 17.1 Hz, 2H), 3.99 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 3.36 - 3.33 (m, 1H), 3.28 (d, J= 9.5 Hz, 1H), 2.52 - 2.23 (m, 6H), 2.09 - 2.03 (m, 2H), 2.01 - 1.94 (m, 1H), 1.29 (d, J= 9.9 Hz, 3H), 1.27 - 1.25 (m, 1H), 0.78 (t, J= 5.7 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) (m/z): 523 (M+H) +。RT (方法A): 0.92 min。 流程 22. (1S,3S,5S)-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-N-(1-(1,2,3,4- 四氫異喹啉 -7- 基 ) 環丙基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 62) 之合成 步驟 1 ： 7- 溴 -3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 甲酸三級丁酯 (2)
向7-溴-1,2,3,4-四氫異喹啉(2 g，9.43 mmol)及(Boc) 2O (4.1 g，18.86 mmol)於THF (20 mL)之混合物中添加4-DMAP (58 mg，0.47 mmol)且將混合物在室溫下攪拌6小時。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 20% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之7-溴-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸 三級丁酯(2.1 g，產率71.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 312 (M+H) +。 步驟 2 ： 7- 氰基 -3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 甲酸三級丁酯 (3)
在N 2氛圍下向7-溴-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸 三級丁酯(1.8 g，5.79 mmol)及Zn(CN) 2(1.36 g，11.58 mmol)於NMP (18 mL)之混合物中添加Pd(PPh 3) 4(1.34 g，1.16 mmol)，反應混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在80℃下攪拌隔夜。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 30% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之7-氰基-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸 三級丁酯(1.12 g，產率74.7%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.43 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.23 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 4.58 (s, 2H), 3.65 (t, J= 5.8 Hz, 2H), 2.88 (t, J= 5.7 Hz, 2H), 1.48 (s, 9H)。 步驟 3 ： 7-(1- 胺基環丙基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 甲酸三級丁酯 (4)
在N 2氛圍，-70℃下向7-氰基-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸 三級丁酯(300 mg，1.16 mmol)及Ti(O i-Pr) 4(727 mg，2.56 mmol)於無水THF (3 mL)之混合物中逐滴添加乙基溴化鎂(5.1 mL，5.1 mmol，THF中1M)歷時1小時且將反應混合物緩慢溫熱至10℃。然後，向反應混合物中添加BF 3.Et 2O (330 mg，2.33 mmol)且將所得混合物在10℃下攪拌1小時。混合物用1N HCl水溶液淬滅，用2N NaOH水溶液鹼化至pH~10且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 10% MeOH)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之7-(1-胺基環丙基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸 三級丁酯(21 mg，產率6.3%)。LC/MS (ESI) m/z: 289 (M+H) +。 步驟 4 ： 7-(1-((1S,3S,5S)-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺基 ) 環丙基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 甲酸三級丁酯 (5)
在N 2氛圍下向7-(1-胺基環丙基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸 三級丁酯(21 mg，0.073 mmol)及(1S,3S,5S)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸(29 mg，0.08 mmol)於DMF (1 mL)之混合物中添加DIPEA (47 mg，0.37 mmol)及PyBOP (49 mg，0.095 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 20: 1)純化殘餘物，得到呈白色固體之7-(1-((1S,3S,5S)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺基)環丙基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸 三級丁酯(20 mg，產率43.5%)。LC/MS (ESI) m/z: 631 (M+H) +。 步驟 5 ： (1S,3S,5S)-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-N-(1-(1,2,3,4- 四氫異喹啉 -7- 基 ) 環丙基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 62)
向7-(1-((1S,3S,5S)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺基)環丙基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸 三級丁酯(20 mg，0.032 mmol)於DCM (1 mL)之溶液中添加TFA (0.5 mL)且將混合物在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 62(2.9 mg，產率17.1%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.48 (s, 1H), 7.24 (t, J= 7.8 Hz, 2H), 7.10 (dd, J= 19.4, 9.3 Hz, 3H), 6.90 (dd, J= 7.5, 4.7 Hz, 3H), 4.77 (dd, J= 11.4, 3.4 Hz, 1H), 4.29 (s, 2H), 4.24 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 4.09 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.01 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 3.43 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.03 (t, J= 6.1 Hz, 2H), 2.49 (t, J= 7.5 Hz, 2H), 2.38 (t, J= 12.3 Hz, 1H), 2.11 - 2.04 (m, 3H), 1.28 (s, 3H), 1.25 - 1.13 (m, 6H), 0.78 (t, J= 5.5 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) (m/z): 531 (M+H) +。RT (方法A): 1.25 min。 流程 23. (1S,3S,5S)-N-((8-( 胺基甲基 ) 咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -3- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 63) 之合成 步驟 1 ： 8- 溴咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -3- 甲醛 (2)
在N 2氛圍下向3-溴吡啶-2-胺(2.0 g，11.56 mmol)於MeCN (30 mL)之溶液中添加2-溴丙二醛(2.1 g，13.87 mmol)，混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在85℃下攪拌隔夜。將反應混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之20 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈棕色固體之8-溴咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲醛(1.53 g，產率58.8%)。LC/MS (ESI) m/z: 225 (M+H) +。 步驟 2 ： (Z)-N-((8- 溴咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -3- 基 ) 亞甲基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 (3)
向8-溴咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲醛(1.53 g，6.80 mmol)於THF (30 mL)之溶液中添加(R)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(2.5 g，20.40 mmol)及Ti( i-PrO) 4(9.7 g，33.99 mmol)，混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在90℃下攪拌隔夜。將反應混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 40% EtOAc)純化殘餘物，得到呈棕色固體之(Z)-N-((8-溴咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1.95 g，產率87.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 328 (M+H) +。 步驟 3 ： N-((8- 溴咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -3- 基 ) 甲基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 (4)
在N 2氛圍下向(Z)-N-((8-溴咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1.95 g，5.94 mmol)於MeOH (30 mL)之溶液中分批添加NaBH 4(449 mg，11.88 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用飽和NH 4Cl水溶液淬滅且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 40% EtOAc)純化殘餘物，得到呈棕色固體之N-((8-溴咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1.96 g，產率99.9%)。LC/MS (ESI) m/z: 330 (M+H) +。 步驟 4 ： N-((8- 氰基咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -3- 基 ) 甲基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 (5)
在N 2氛圍下向N-((8-溴咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1.56 g，4.72 mmol)於NMP (20 mL)之溶液中添加Zn(CN) 2(1.1 g，9.45 mmol)及Pd(PPh 3) 4(819 mg，0.71 mmol)且將反應混合物在100℃下攪拌隔夜。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之N-((8-氰基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(200 mg，產率15.3%)。LC/MS (ESI) m/z: 277 (M+H) +。 步驟 5 ： 3-( 胺基甲基 ) 咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -8- 甲腈鹽酸鹽 (6)
將N-((8-氰基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(200 mg，0.72 mmol)於HCl/1,4-二噁烷(2 mL，4M)中之溶液在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色固體之3-(胺基甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-8-甲腈鹽酸鹽(150 mg，產率99.4%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 173 (M+H) +。 步驟 6 ： (1S,3S,5S)-N-((8- 氰基咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -3- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 (7)
在N 2氛圍下向(1S,3S,5S)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸(30 mg，0.083 mmol)及3-(胺基甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-8-甲腈鹽酸鹽(26 mg，0.12 mmol)於DMF (5 mL)之混合物中添加DIPEA (65 mg，0.50 mmol)及PyBOP (65 mg，0.12 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 5% MeOH)純化殘餘物，得到呈白色固體之(1S,3S,5S)-N-((8-氰基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)甲基)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺(40 mg，產率93.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 515 (M+H) +。 步驟 7 ： (1S,3S,5S)-N-((8-( 胺基甲基 ) 咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -3- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 63)
向(1S,3S,5S)-N-((8-氰基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)甲基)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺(40 mg，0.078 mmol)於MeOH (3 mL)之溶液中添加雷氏Ni (10 mg，濕)，混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在H 2氣球下於25℃攪拌隔夜。過濾混合物且將濾液濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 5: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 63(3.2 mg，產率7.9%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.43 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.63 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 7.39 (d, J= 6.9 Hz, 1H), 7.23 (dd, J= 10.3, 5.7 Hz, 2H), 7.02 (t, J= 6.9 Hz, 1H), 6.89 (dd, J= 7.4, 4.8 Hz, 3H), 4.76 (t, J= 10.0 Hz, 2H), 4.69 (d, J= 14.6 Hz, 1H), 4.43 (s, 2H), 4.15 (dd, J= 38.0, 16.6 Hz, 2H), 4.01 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 3.29 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 2.47 (t, J= 7.4 Hz, 2H), 2.35 (t, J= 12.4 Hz, 1H), 2.12 - 2.03 (m, 3H), 1.27 - 1.20 (m, 3H), 1.13 - 0.91 (m, 1H), 0.76 (t, J= 5.5 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 519 (M+H) +。RT (方法A): 0.88 min。
基於流程23來製備化合物78：
化合物編號 反應物A 反應物B 特性化資料
78 a,b 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.29 - 7.22 (m, 2H), 6.91 (d, J= 8.3 Hz, 3H), 6.29 (d, J= 3.6 Hz, 1H), 5.96 - 5.90 (m, 1H), 5.28 - 5.19 (m, 1H), 4.81 - 4.70 (m, 1H), 4.26 - 4.05 (m, 5H), 4.03 - 3.94 (m, 3H), 3.30 - 3.18 (m, 1H), 2.93 - 2.81 (m, 1H), 2.49 - 2.43 (m, 2H), 2.37 - 2.32 (m, 1H), 2.18 - 2.01 (m, 3H), 1.30 - 1.24 (m, 3H), 1.20 - 0.98 (m, 1H), 0.80 - 0.67 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 494 (M+H) +。RT (方法A): 1.03 min。
a僅步驟5-7。 b使用PyBOP代替T 3P。 流程 24. (1S,3S,5S)-N-(1-(3-( 胺基甲基 )-5- 甲基苯基 ) 環丙基 )-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 64) 之合成 步驟 1 ： 5- 甲基異酞腈 (2)
在N 2氛圍下向1,3-二溴-5-甲基苯(1.0 g，4.00 mmol)於NMP (20 mL)之溶液中添加Zn(CN) 2(940 mg，8.00 mmol)及Pd(PPh 3) 4(694 mg，0.60 mmol)且將反應混合物在110℃下攪拌隔夜。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之5-甲基異酞腈(460 mg，產率80.9%)。 步驟 2 ： 3-(1- 胺基環丙基 )-5- 甲基苯甲腈 (3)
在N 2氛圍，-70℃下向5-甲基異酞腈(200 mg，1.41 mmol)及Ti( i-PrO) 4(440 mg，1.55 mmol)於THF (5 mL)之混合物中逐滴添加乙基溴化鎂(3.1 mL，3.1 mmol，THF中1M)歷時1小時且將反應混合物緩慢溫熱至10℃。然後將BF 3 .Et 2O (399 mg，2.81 mmol)添加至以上混合物中且將所得混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用1N HCl水溶液淬滅，用2N NaOH水溶液鹼化至pH~10且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 10% MeOH)純化殘餘物，得到呈白色固體之3-(1-胺基環丙基)-5-甲基苯甲腈(30 mg，產率12.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 173 (M+H) +。 步驟 3 ： (1S,3S,5S)-N-(1-(3- 氰基 -5- 甲基苯基 ) 環丙基 )-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 (4)
在N 2氛圍下向(1S,3S,5S)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸(30 mg，0.083 mmol)及3-(1-胺基環丙基)-5-甲基苯甲腈(22 mg，0.12 mmol)於DMF (5 mL)之混合物中添加DIPEA (65 mg，0.50 mmol)及PyBOP (65 mg，0.12 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 5% MeOH)純化殘餘物，得到呈白色固體之(1S,3S,5S)-N-(1-(3-氰基-5-甲基苯基)環丙基)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺(40 mg，產率93.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 515 (M+H) +。 步驟 4 ： (1S,3S,5S)-N-(1-(3-( 胺基甲基 )-5- 甲基苯基 ) 環丙基 )-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 64)
向(1S,3S,5S)-N-(1-(3-氰基-5-甲基苯基)環丙基)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺(40 mg，0.078 mmol)於MeOH (3 mL)之溶液中添加雷氏Ni (10 mg，濕)，混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在H 2氣球下於25℃攪拌隔夜。過濾混合物且將濾液濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 5: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 64(10 mg，產率24.8%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.54 (s, 1H), 7.27 - 7.18 (m, 3H), 7.11 - 7.01 (m, 1H), 6.94 (s, 1H), 6.89 (d, J= 8.5 Hz, 3H), 4.80 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 4.24 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 4.11 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 4.01 (dd, J= 10.8, 5.2 Hz, 4H), 3.34 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 2.44 (dt, J= 24.9, 9.5 Hz, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.07 (dt, J= 7.5, 4.9 Hz, 3H), 1.28 (s, 3H), 1.22 (dt, J= 5.5, 4.5 Hz, 5H), 0.80 (t, J= 5.2 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 519 (M+H) +。RT (方法A): 1.30 min。 流程 25. (1S,3S,5S)-5- 甲基 -N-(1-(3- 甲基 -3H- 咪唑并 [4,5-c] 吡啶 -2- 基 ) 環丙基 )-2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 65) 之合成 步驟 1 ： 3-( 甲胺基 )-4- 硝基吡啶 1- 氧化物
在0℃下向3-溴-4-硝基吡啶1-氧化物 (2.0 g，9.13 mmol)及甲胺鹽酸鹽(925 mg，13.70 mmol)於DMF (20 mL)之溶液中添加DIPEA (3.78 g，27.39 mmol)且將混合物在28℃下攪拌16小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NH 4Cl水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 5% MeOH)純化殘餘物，得到呈黃色固體之3-(甲胺基)-4-硝基吡啶1-氧化物(885 mg，產率55.3%)。LC/MS (ESI) m/z: 170 (M+H) +。 步驟 2 ： N 3- 甲基吡啶 -3,4- 二胺
向3-(甲胺基)-4-硝基吡啶1-氧化物(885 mg，5.24 mmol)於MeOH (10 mL)之溶液中添加雷氏Ni (80 mg，濕)，混合物在N 2氛圍下脫氣三次且將混合物在H 2氣球下於25℃攪拌16小時。過濾混合物且將濾液在減壓下濃縮至乾，得到呈棕色油狀物之N 3-甲基吡啶-3,4-二胺(631 mg，產率98.0%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) (m/z): 124 (M+H) +。 步驟 3 ： (1-((3-( 甲胺基 ) 吡啶 -4- 基 ) 胺甲醯基 ) 環丙基 ) 胺甲酸苄酯
在N 2氛圍下向N 3-甲基吡啶-3,4-二胺(631 mg，5.13 mmol)及1-(((苄氧基)羰基)胺基)環丙烷-1-甲酸(1.2 g，5.13 mmol)於DMF (10 mL)之混合物中添加DIPEA (3.97 g，30.78 mmol)及HBTU (2.43 g，6.41 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NH 4Cl水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 5% MeOH)純化殘餘物，得到呈灰色固體之(1-((3-(甲胺基)吡啶-4-基)胺甲醯基)環丙基)胺甲酸苄酯(1.2 g，產率68.8%)。LC/MS (ESI) m/z: 341 (M+H) +。 步驟 4 ： (1-(3- 甲基 -3H- 咪唑并 [4,5-c] 吡啶 -2- 基 ) 環丙基 ) 胺甲酸苄酯
將(1-((3-(甲胺基)吡啶-4-基)胺甲醯基)環丙基)胺甲酸苄酯(600 mg，1.76 mmol)於AcOH (5 mL)中之溶液在CEM微波反應器中於120℃攪拌1.5小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈淺黃色固體之(1-(3-甲基-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)環丙基)胺甲酸苄酯(495 mg，產率87.1%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 323 (M+H) +。 步驟 5 ： 1-(3- 甲基 -3H- 咪唑并 [4,5-c] 吡啶 -2- 基 ) 環丙 -1- 胺
向(1-(3-甲基-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)環丙基)胺甲酸苄酯(250 mg，0.78 mmol)於MeOH (5 mL)之溶液中添加Pd/C (20 mg，10% wt.)，混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在H 2氣球下於25℃攪拌1小時。過濾混合物且將濾液在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色固體之1-(3-甲基-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)環丙-1-胺(118 mg，產率80.8%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 189 (M+H) +。 步驟 6 ： (1S,3S,5S)-5- 甲基 -N-(1-(3- 甲基 -3H- 咪唑并 [4,5-c] 吡啶 -2- 基 ) 環丙基 )-2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 65)
在N 2氛圍下向(1S,3S,5S)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸(30 mg，0.08 mmol)及1-(3-甲基-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)環丙-1-胺(15 mg，0.08 mmol)於DMF (1 mL)之混合物中添加DIPEA (65 mg，0.48 mmol)及PyBOP (48 mg，0.09 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 65(12 mg，產率27.3%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.81 (s, 1H), 8.31 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.64 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.26 - 7.20 (m, 2H), 6.88 (t, J= 8.5 Hz, 3H), 4.73 (dd, J= 11.4, 3.5 Hz, 1H), 4.22 (t, J= 14.4 Hz, 1H), 4.05 (s, 3H), 4.03 - 3.95 (m, 3H), 3.26 (dd, J= 5.9, 2.4 Hz, 1H), 2.40 (dt, J= 23.7, 9.6 Hz, 3H), 2.05 (ddd, J= 13.4, 12.1, 5.0 Hz, 3H), 1.80 - 1.70 (m, 1H), 1.56 - 1.46 (m, 1H), 1.41 - 1.31 (m, 2H), 1.25 (s, 3H), 1.11 (dd, J= 5.6, 2.4 Hz, 1H), 0.75 (t, J= 5.8 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 531 (M+H) +。RT (方法A): 1.07 min。
基於流程25來製備化合物109：
化合物編號 反應物A 反應物B 反應物C 特性化資料
109 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.73 (s, 1H), 8.21 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.53 (dd, J= 5.7, 0.8 Hz, 1H), 7.18 (dd, J= 8.8, 7.2 Hz, 2H), 6.87 – 6.82 (m, 3H), 4.82 (d, J= 4.5 Hz, 1H), 4.36 (d, J= 16.9 Hz, 1H), 4.11 (d, J= 16.9 Hz, 1H), 4.01 (td, J= 6.3, 1.3 Hz, 2H), 3.35 (dd, J= 5.9, 2.3 Hz, 1H), 2.49 (ddd, J= 31.3, 15.8, 8.6 Hz, 3H), 2.17 – 2.08 (m, 3H), 1.71 (tt, J= 11.3, 5.5 Hz, 2H), 1.43 (d, J= 2.8 Hz, 2H), 1.31 (s, 4H), 0.88 (t, J= 5.2 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 517 (M+H) +。RT (方法A): 1.29 min。
流程 26. (1S,3S,5S)-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲酸 (2,3- 二氫 -1H- 吡咯并 [3,4-c] 吡啶 -6- 基 ) 甲酯 ( 化合物 66) 之合成 步驟 1 ：二 ( 丙 -2- 炔 -1- 基 ) 胺甲酸三級丁酯 (2)
在N 2氛圍，0℃下向丙-2-炔-1-基胺甲酸 三級丁酯(1.0 g，6.45 mmol)於THF (15 mL)之溶液中添加NaH (310 mg，7.74 mmol，60%礦物油分散液)及3-溴丙-1-炔(921 mg，7.74 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌隔夜。反應混合物在0℃下用飽和NH4Cl水溶液淬滅且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 30% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之二(丙-2-炔-1-基)胺甲酸 三級丁酯(700 mg，產率56.2%)。 步驟 2 ： 6-( 氯甲基 )-1,3- 二氫 -2H- 吡咯并 [3,4-c] 吡啶 -2- 甲酸三級丁酯 (3)
在N 2氛圍下向二(丙-2-炔-1-基)胺甲酸 三級丁酯(600 mg，3.11 mmol)及2-氯乙腈(282 mg，3.73 mmol)於DCE (8 mL)之混合物中添加1,5-環辛二烯，釕錯合物(50 mg，0.16 mmol)，反應混合物在N 2氛圍下脫氣且在60℃下攪拌隔夜。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之6-(氯甲基)-1,3-二氫-2H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-甲酸 三級丁酯(250 mg，產率30.0%)。LC/MS (ESI) m/z: 269 (M+H) +。 步驟 3 ： 6-((((1S,3S,5S)-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 羰基 ) 氧基 ) 甲基 )-1,3- 二氫 -2H- 吡咯并 [3,4-c] 吡啶 -2- 甲酸三級丁酯 (4)
向6-(氯甲基)-1,3-二氫-2H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-甲酸 三級丁酯(45 mg，0.17 mmol)及(1S,3S,5S)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸(50 mg，0.14 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加K 2CO 3(38 mg，0.28 mmol)且反應混合物在60℃下攪拌3小時。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (PE: EtOAc= 1: 1)純化殘餘物，得到呈白色固體之6-((((1S,3S,5S)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羰基)氧基)甲基)-1,3-二氫-2H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-甲酸三級丁酯(40 mg，產率82.2%)。LC/MS (ESI) m/z: 593 (M+H) +。 步驟 4 ： (1S,3S,5S)-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲酸 (2,3- 二氫 -1H- 吡咯并 [3,4-c] 吡啶 -6- 基 ) 甲酯 ( 化合物 66)
將6-((((1S,3S,5S)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羰基)氧基)甲基)-1,3-二氫-2H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-甲酸 三級丁酯(40 mg，0.07 mmol)於DCM (1 mL)及TFA (1 mL)中之溶液在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾且藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈黃色固體之 化合物 66(7.8 mg，產率23.5%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.58 (d, J= 12.2 Hz, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.26 - 7.19 (m, 2H), 6.91 - 6.85 (m, 3H), 5.32 - 5.18 (m, 2H), 4.91 (d, J= 3.6 Hz, 1H), 4.68 (s, 4H), 4.30 (d, J= 16.9 Hz, 1H), 4.12 (d, J= 16.9 Hz, 1H), 4.01 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 3.37 - 3.33 (m, 1H), 2.49 (dd, J= 16.8, 9.7 Hz, 3H), 2.16 (m, J= 20.9, 14.0, 5.3 Hz, 3H), 1.28 (d, J= 15.4 Hz, 3H), 1.16 (dd, J= 5.7, 2.4 Hz, 1H), 0.82 (t, J= 5.7 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 493 (M+H) +。RT (方法A): 1.07 min。 流程 27. (S)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-7-((2',4'- 二氟 -[1,1'- 聯苯 ]-4- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 68) 之合成 步驟 1 ： (S)-7-((2',4'- 二氟 -[1,1'- 聯苯 ]-4- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲酸甲酯 (2)
在N 2氛圍，0℃下向(2',4'-二氟-[1,1'-聯苯]-4-羰基)甘胺酸(40 mg，0.15 mmol)及(S)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸甲酯(38.5 mg，0.21 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (106.4 mg，0.9 mmol)及T 3P (131.1 mg，0.21 mmol，EtOAc中50% wt.)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用飽和NaHCO 3水溶液淬滅且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 80% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之(S)-7-((2',4'-二氟-[1,1'-聯苯]-4-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸甲酯(50 mg，產率80.3%)。LC/MS (ESI) (m/z): 461 (M+H) +。 步驟 2 ： (S)-7-((2',4'- 二氟 -[1,1'- 聯苯 ]-4- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲酸 (3)
向(S)-7-((2',4'-二氟-[1,1'-聯苯]-4-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸甲酯(50 mg，0.11 mmol)於MeOH (3 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH·H 2O (13.6 mg，0.33 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之(S)-7-((2',4'-二氟-[1,1'-聯苯]-4-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸(40 mg，產率82.3%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 447 (M+H) +。 步驟 3 ： (S)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-7-((2',4'- 二氟 -[1,1'- 聯苯 ]-4- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 68)
在N 2氛圍下向(S)-7-((2',4'-二氟-[1,1'-聯苯]-4-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸(40 mg，0.09 mmol)及(R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-胺鹽酸鹽(28.8 mg，0.18 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (69.4 mg，0.54 mmol)及HATU (51 mg，0.14 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。向混合物中添加LiOH (4.8 mg，0.20 mmol)、MeOH (0.5 mL)及水(0.1 mL)且將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NH 4Cl水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 68(20 mg，產率37.8%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.97 (d, J= 21.0 Hz, 1H), 8.01 (dd, J= 19.1, 7.3 Hz, 3H), 7.66 (d, J= 8.1 Hz, 2H), 7.61 – 7.50 (m, 2H), 7.11 (dd, J= 13.4, 6.0 Hz, 2H), 6.92 (s, 1H), 5.33 (q, J= 7.0 Hz, 1H), 4.57 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 4.24 (dd, J= 39.6, 16.7 Hz, 2H), 4.07 – 3.98 (m, 4H), 3.82 (q, J= 10.7 Hz, 2H), 2.43 (dd, J= 12.9, 8.3 Hz, 1H), 2.27 (dd, J= 12.9, 7.9 Hz, 1H), 1.63 (d, J= 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 590 (M+H) +。RT (方法A): 1.25 min。
基於流程27來製備以下化合物：
化合物編號 反應物A 反應物B 反應物C 特性化資料
70 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.90 (s, 1H), 8.02 – 7.89 (m, 3H), 7.67 (d, J= 8.1 Hz, 2H), 7.62 – 7.56 (m, 1H), 7.46 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 7.11 (t, J= 9.7 Hz, 2H), 6.88 (s, 1H), 5.34 (q, J= 6.9 Hz, 1H), 4.67 – 4.59 (m, 1H), 4.38 (d, J= 17.0 Hz, 1H), 4.19 (d, J= 16.9 Hz, 1H), 4.12 – 3.89 (m, 2H), 3.79 – 3.66 (m, 2H), 3.45 (s, 3H), 2.54 (td, J= 15.3, 7.7 Hz, 1H), 2.36 – 2.16 (m, 1H), 1.64 (d, J= 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 594 (M+H) +。RT (方法A): 1.29 min。
85 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.96 (d, J= 18.9 Hz, 1H), 8.05 (d, J= 6.5 Hz, 1H), 7.99 (d, J= 8.1 Hz, 2H), 7.66 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 7.58 (dd, J= 11.4, 7.9 Hz, 2H), 7.10 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 6.95 (d, J= 34.3 Hz, 1H), 5.32 (q, J= 7.2 Hz, 1H), 4.75 – 4.70 (m, 1H), 4.37 – 4.12 (m, 5H), 3.11 (s, 3H), 2.89 – 2.73 (m, 1H), 2.58 – 2.41 (m, 1H), 1.65 (d, J= 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 610 (M+H) +。RT (方法A): 1.17 min。
132 c 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.64 (s, 1H), 7.89 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 7.60 (d, J= 13.6 Hz, 2H), 7.28 (t, J= 8.9 Hz, 1H), 7.21 – 7.15 (m, 2H), 7.09 (d, J= 6.4 Hz, 2H), 7.03 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 6.51 (s, 1H), 5.31 (d, J= 6.5 Hz, 1H), 4.40 (dd, J= 17.9, 12.1 Hz, 2H), 4.10 (d, J= 16.9 Hz, 1H), 3.97 – 3.90 (m, 1H), 3.50 – 3.42 (m, 3H), 3.34 (s, 3H), 2.66 (s, 1H), 2.39 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 1.85 – 1.75 (m, 1H), 1.60 (d, J= 6.9 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 586 (M+H) +。RT (方法A): 1.66 min。
133 c 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.66 (s, 1H), 7.94 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.60 – 7.48 (m, 2H), 7.27 – 7.15 (m, 4H), 7.10 – 7.02 (m, 2H), 6.54 (s, 1H), 5.33 – 5.26 (m, 1H), 4.73 – 4.64 (m, 1H), 4.29 (s, 2H), 4.15 (d, J= 6.5 Hz, 2H), 3.48 – 3.38 (m, 1H), 3.13 (s, 1H), 2.86 – 2.70 (m, 1H), 2.52 – 2.39 (m, 1H), 1.61 (d, J= 6.9 Hz, 3H), 1.39 (d, J= 6.8 Hz, 6H)。LC/MS (ESI) m/z: 648 (M+H) +。RT (方法A): 1.66 min。
145 c 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.68 (s, 1H), 7.96 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 7.62 - 7.51 (m, 2H), 7.29 - 7.14 (m, 4H), 7.10 - 7.01 (m, 2H), 6.54 (s, 1H), 5.28 (q, J= 7.1 Hz, 1H), 4.61 (d, J= 4.6 Hz, 1H), 4.55 - 4.48 (m, 1H), 4.28 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 4.16 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.09 (d, J= 11.7 Hz, 2H), 3.82 (t, J= 10.1 Hz, 3H), 3.70 - 3.64 (m, 1H), 2.75 - 2.54 (m, 1H), 2.25 (dd, J= 15.6, 5.4 Hz, 1H), 2.11 - 2.00 (m, 2H), 1.59 (d, J= 6.7 Hz, 3H), 1.37 (d, J= 12.5 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 628 (M+H) +。RT (方法A): 1.85 min。
148 c 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.64 (s, 1H), 7.87 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.60 (d, J= 13.2 Hz, 2H), 7.28 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.19 (dd, J= 15.6, 7.6 Hz, 2H), 7.11 - 7.01 (m, 3H), 6.52 (s, 1H), 5.31 (q, J= 6.6 Hz, 1H), 4.60 (dd, J= 19.1, 10.0 Hz, 2H), 4.37 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.13 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 4.00 (dd, J= 13.6, 6.7 Hz, 1H), 3.86 (d, J= 3.8 Hz, 1H), 3.82 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 2.50 (td, J= 14.7, 7.2 Hz, 1H), 2.32 - 2.16 (m, 1H), 1.61 (d, J= 6.8 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 590 (M+H) +。RT (方法A): 3.84 min。
150 c 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.66 (d, J= 4.0 Hz, 1H), 7.93 (dd, J= 19.8, 5.8 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.61 - 7.50 (m, 3H), 7.27 - 7.17 (m, 3H), 7.16 - 7.12 (m, 1H), 7.09 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 7.03 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 6.54 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 5.31 (dd, J= 14.0, 7.0 Hz, 1H), 4.57 (s, 2H), 4.40 (dd, J= 30.3, 12.5 Hz, 1H), 4.29 - 4.17 (m, 2H), 3.99 (dd, J= 17.5, 9.7 Hz, 1H), 2.79 - 2.33 (m, 2H), 1.61 (d, J= 6.8 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 625 (M+H) +。RT (方法A): 1.84 min。
164 c 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.79 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 7.99 – 7.94 (m, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.28 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.21 – 7.16 (m, 2H), 7.09 (s, 1H), 7.03 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 6.74 (s, 1H), 5.35 – 5.31 (m, 1H), 4.71 (s, 2H), 4.66 (s, 1H), 4.33 (s, 1H), 4.16 (d, J= 17.1 Hz, 3H), 2.63 – 2.56 (m, 1H), 2.30 (ddd, J= 11.4, 6.6, 2.1 Hz, 1H), 1.63 (d, J= 6.5 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) (m/z): 592 (M+H) +。RT (方法A): 1.84 min。
191 c 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.65 (d, J= 0.8 Hz, 1H), 7.92 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.57 (dd, J= 7.0, 1.7 Hz, 2H), 7.25 - 7.22 (m, 1H), 7.21 - 7.15 (m, 2H), 7.13 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.08 (dd, J= 11.3, 3.7 Hz, 1H), 7.03 (dd, J= 8.0, 1.1 Hz, 1H), 6.51 (s, 1H), 5.28 - 5.22 (m, 1H), 4.82 (d, J= 4.4 Hz, 1H), 4.51 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.26 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 3.57 - 3.51 (m, 2H), 3.38 (d, J= 4.7 Hz, 4H), 2.67 (t, J= 11.9 Hz, 1H), 2.11 (dd, J= 13.3, 4.3 Hz, 1H), 1.59 (d, J= 7.0 Hz, 3H), 1.43 (dd, J= 5.6, 2.7 Hz, 1H), 1.03 (t, J= 5.4 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 598 (M+H) +。RT (方法A): 1.59 min。
289 c 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.99 (s, 1H), 8.70 (s, 1H), 8.17 - 8.04 (m, 2H), 7.72 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 7.60 - 7.55 (m, 2H), 7.50 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.35 (dd, J = 8.1, 1.8 Hz, 1H), 7.25 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.24 - 7.20 (m, 2H), 7.19 - 7.17 (m, 1H), 7.14 (dd, J = 10.6, 1.6 Hz, 3H), 7.10 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 7.06 - 7.03 (m, 1H), 7.00 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 6.96 (s, 1H), 6.78 (s, 1H), 5.40 (dd, J = 9.5, 2.9 Hz, 1H), 5.35 - 5.30 (m, 1H), 5.05 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.98 (dd, J = 6.9, 3.2 Hz, 1H), 4.89 (s, 1H), 4.81 (s, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.42 (d, J = 15.8 Hz, 1H), 4.30 (s, 2H), 3.98 - 3.93 (m, 1H), 3.48 - 3.40 (m, 3H), 3.26 - 3.22 (m, 2H), 1.74 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.65 (d, J = 7.1 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 560 (M+H) +。RT (方法A): 1.45 min。
302 1H-NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.57 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.82 (dd, J= 11.7, 5.4 Hz, 3H), 7.62 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.57 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.37 (t, J= 3.5 Hz, 2H), 7.17 - 7.12 (m, 1H), 6.73 - 6.51 (m, 1H), 6.49 (s, 1H), 5.34 (t, J= 4.6 Hz, 1H), 5.06 (s, 1H), 4.69 (s, 1H), 4.61 (s, 1H), 4.57 (s, 1H), 4.30 (s, 1H), 4.27 (s, 1H), 4.02 (s, 1H), 3.92 (d, J= 11.1 Hz, 1H), 2.53 - 2.47 (m, 1H), 2.32 - 2.26 (m, 1H), 1.54 (d, J= 7.4 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 574 (M+H) +。RT (方法A): 1.46 min。
320 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.65 (s, 1H), 7.95 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.60 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.47 - 7.42 (m, 2H), 7.15 (dd, J= 8.6, 3.9 Hz, 2H), 7.04 - 6.93 (m, 3H), 6.49 (s, 1H), 5.23 (q, J= 6.6 Hz, 1H), 4.81 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 4.46 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.25 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 3.36 (dd, J= 5.8, 2.3 Hz, 1H), 2.41 (t, J= 12.3 Hz, 1H), 2.31 (s, 3H), 2.16 (dd, J= 13.4, 3.9 Hz, 1H), 1.55 (d, J= 6.9 Hz, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.28 - 1.26 (m, 1H), 0.80 (t, J= 5.5 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 570 (M+H) +。RT (方法A): 1.60 min。
338 b 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.58 – 7.53 (m, 1H), 7.42 (t, J= 7.9 Hz, 2H), 7.11 – 7.06 (m, 2H), 7.02 (t, J= 8.3 Hz, 2H), 6.69 – 6.30 (m, 2H), 4.99 – 4.96 (m, 1H), 4.69 – 4.62 (m, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.55 – 4.51 (m, 1H), 4.50 – 4.39 (m, 2H), 4.25 – 4.10 (m, 2H), 3.97 – 3.90 (m, 1H), 3.81 – 3.76 (m, 2H), 3.09 – 3.06 (m, 1H), 2.80 – 2.73 (m, 2H), 2.46 – 2.38 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.21 – 2.17 (m, 1H), 2.06 – 2.01 (m, 1H)。LCMS (ESI) m/z: 617 (M+H) +。RT (方法A): 1.61 min。
a使用HATU代替步驟1中之T 3P。 b在步驟4中使用HCl/1,4-二噁烷脫除保護基。 c在最終脫除保護基步驟之前分離最終偶合產物。 流程 28. (1S,3S,5S)-N-((S)-5-( 胺基甲基 )-2,3- 二氫 -1H- 吡咯嗪 -1- 基 )-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 69) 之合成 步驟 1 ： 2,3- 二氫 -1H- 吡咯嗪 -1- 酮 (2)
加熱AlCl 3(34.67 g，260.70 mmol)、KCl (7.02 g，94.14 mmol)及NaCl (6.77 g，115.90 mmol)之混合物以形成透明稻草褐色液體(約160℃)，當溫度降至120℃時，添加3-(1H-吡咯-1-基)丙腈(8.70 g，72.41 mmol)且將混合物在120℃下攪拌3分鐘。將反應混合物倒入冰水(100 mL)中且添加2MKOH水溶液(20 mL)。將混合物在80℃下攪拌30分鐘。混合物用水稀釋且用DCM萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之2,3-二氫-1H-吡咯嗪-1-酮(6.76 g，產率77.1%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.21 (d, J= 1.4 Hz, 1H), 6.68 (dd, J= 4.0, 0.9 Hz, 1H), 6.52 (dd, J= 4.0, 2.2 Hz, 1H), 4.35 - 4.31 (m, 2H), 3.10 - 3.05 (m, 2H)。LC/MS (ESI) (m/z): 122 (M+H) +。 步驟 2 ： 5- 溴 -2,3- 二氫 -1H- 吡咯嗪 -1- 酮 (3)
在-50℃下向2,3-二氫-1H-吡咯嗪-1-酮(6.50 g，53.66 mmol)於THF (70 mL)之溶液中添加NBS (12.43 g，69.84 mmol)且將反應混合物在-50℃下攪拌4小時。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 37% EtOAc)純化殘餘物，得到呈紅色固體之5-溴-2,3-二氫-1H-吡咯嗪-1-酮(8.50 g，產率79.2%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 6.70 (d, J= 4.1 Hz, 1H), 6.52 (d, J= 4.1 Hz, 1H), 4.24 - 4.20 (m, 2H), 3.14 - 3.09 (m, 2H)。LC/MS (ESI) m/z: 200 (M+H) +。 步驟 3 ： 1- 側氧基 -2,3- 二氫 -1H- 吡咯嗪 -5- 甲腈 (4)
在N 2氛圍下向5-溴-2,3-二氫-1H-吡咯嗪-1-酮(4.50 g，22.50 mmol)於NMP (70 mL)之溶液中添加CuCN (6.04 g，67.49 mmol)。將混合物在N 2氛圍，180℃下攪拌2小時。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 38% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色固體之1-側氧基-2,3-二氫-1H-吡咯嗪-5-甲腈(330 mg，產率10.0%)。LC/MS (ESI) m/z: 147 (M+H) +。 步驟 4 ： (S)-N-((R)-5- 氰基 -2,3- 二氫 -1H- 吡咯嗪 -1- 基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺及 (S)-N-((S)-5- 氰基 -2,3- 二氫 -1H- 吡咯嗪 -1- 基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 (5)
在N 2氛圍，0℃下向1-側氧基-2,3-二氫-1H-吡咯嗪-5-甲腈(200 mg，1.37 mmol)及(S)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(415 mg，3.42 mmol)於1,4-二噁烷(5 mL)之混合物中添加Ti(OEt) 4(1.25 g，5.48 mmol)。混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在90℃下攪拌2小時。將反應混合物冷卻至室溫。向反應混合物中分批添加NaBH 4(207 mg，5.47 mmol)且將所得混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用冰水淬滅且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 30% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色固體之(S)-N-((S)-5-氰基-2,3-二氫-1H-吡咯嗪-1-基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(167 mg，產率48.5%)及(S)-N-((R)-5-氰基-2,3-二氫-1H-吡咯嗪-1-基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(150 mg，產率43.6%)。LC/MS (ESI) m/z: 252 (M+H) +。 步驟 5 ： (S)-1- 胺基 -2,3- 二氫 -1H- 吡咯嗪 -5- 甲腈鹽酸鹽 (6)
向(S)-N-((S)-5-氰基-2,3-二氫-1H-吡咯嗪-1-基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(60 mg，0.24 mmol)於DCM (1.2 mL)之溶液中添加HCl/1,4-二噁烷(1.4 mL，4M)且將混合物在N 2氛圍，室溫下攪拌30分鐘。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色固體之(S)-1-胺基-2,3-二氫-1H-吡咯嗪-5-甲腈鹽酸鹽(43 mg，產率98.4%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 148 (M+H) +。 步驟 6 ： (1S,3S,5S)-N-((S)-5- 氰基 -2,3- 二氫 -1H- 吡咯嗪 -1- 基 )-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 (7)
在N 2氛圍下向(S)-1-胺基-2,3-二氫-1H-吡咯嗪-5-甲腈鹽酸鹽(43 mg，0.23 mmol)及(1S,3S,5S)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸(90 mg，0.25 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (161 mg，0.37 mmol)及T 3P (238 mg，0.15 mmol，EtOAc中50% wt.)且將混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 3% MeOH)純化殘餘物，得到呈淺黃色油狀物之(1S,3S,5S)-N-((S)-5-氰基-2,3-二氫-1H-吡咯嗪-1-基)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺(74 mg，產率63.6%)。LC/MS (ESI) m/z: 490 (M+H) +。 步驟 7 ： (1S,3S,5S)-N-((S)-5-( 胺基甲基 )-2,3- 二氫 -1H- 吡咯嗪 -1- 基 )-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 69)
向(1S,3S,5S)-N-((S)-5-氰基-2,3-二氫-1H-吡咯嗪-1-基)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺(74 mg，0.15 mmol)於MeOH (5 mL)之溶液中添加雷氏Ni (20 mg，濕)，混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在室溫，H 2氣球下攪拌2小時。過濾混合物且將濾液濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 69(10.0 mg，產率13.4%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.28 - 7.22 (m, 2H), 6.92 - 6.88 (m, 3H), 6.29 (d, J= 3.6 Hz, 1H), 5.91 (t, J= 4.8 Hz, 1H), 5.22 - 5.12 (m, 1H), 4.74 - 4.66 (m, 1H), 4.25 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.11 - 4.06 (m, 3H), 4.03 - 3.88 (m, 4H), 3.29 - 3.25 (m, 1H), 2.91 - 2.80 (m, 1H), 2.47 - 2.30 (m, 4H), 2.13 - 2.03 (m, 3H), 1.29 - 1.24 (m, 4H), 0.80 (t, J= 5.6 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 494 (M+H) +。RT (方法A): 1.04 min。 流程 29. (2S,4R)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-4- 氟 -4-( 氟甲基 )-1-((4-(4- 氟苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 89) 步驟 1 ： (2S,4R)-4- 氟 -4-( 氟甲基 )-1-((4-(4- 氟苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸苄酯 (2)
在N 2氛圍，0℃下向(4-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺酸(100 mg，0.34 mol)及(2S,4R)-4-氟-4-(氟甲基)吡咯啶-2-甲酸苄酯鹽酸鹽(88 mg，0.34 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (223 mg，1.73 mmol)及T 3P (197 mg，0.52 mmol，EtOAc中50% wt.)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用飽和NaHCO 3水溶液淬滅且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(118 mg，產率64.8%)。LC/MS (ESI) (m/z): 527 (M+H) +。 步驟 2 ： (2S,4R)-4- 氟 -4-( 氟甲基 )-1-((4-(4- 氟苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸 (3)
向(2S,4R)-4-氟-4-(氟甲基)-1-((4-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸苄酯(118 mg，0.22 mmol)於MeOH (2 mL)及水(0.5 mL)之溶液中添加LiOH·H 2O (18 mg，0.01 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色油狀物之標題化合物(95 mg，產率96.9%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 437 (M+H) +。 步驟 3 ： (2S,4R)-4- 氟 -4-( 氟甲基 )-1-((4-(4- 氟苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 )-N-((R)-1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 (4)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-4-氟-4-(氟甲基)-1-((4-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸(30 mg，0.069 mol)及(R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-胺鹽酸鹽(31 mg，0.10 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (45 mg，0.35 mmol)及HATU (32 mg，0.084 mol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NH 4Cl水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 20: 1)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(10 mg，產率20.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 720 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S,4R)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-4- 氟 -4-( 氟甲基 )-1-((4-(4- 氟苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 89)
向(2S,4R)-4-氟-4-(氟甲基)-1-((4-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-N-((R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)吡咯啶-2-甲醯胺(10 mg，0.014 mol)於MeOH (2 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH·H 2O (2 mg，0.048 mol)，且將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 89(1.1 mg，產率13.7%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.69 - 8.55 (m, 1H), 8.06 - 7.82 (m, 3H), 7.37 - 6.97 (m, 7H), 6.57 (d, J= 33.1 Hz, 1H), 5.31 (q, J= 6.5 Hz, 1H), 4.69 (dd, J= 39.3, 18.8 Hz, 3H), 4.37 (d, J= 17.0 Hz, 1H), 4.19 - 4.07 (m, 2H), 3.98 (dd, J= 32.5, 12.4 Hz, 1H), 2.71 - 2.52 (m, 1H), 2.35 - 2.18 (m, 1H), 1.63 (dd, J= 19.0, 6.5 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 580 (M+H) +。RT (方法A): 1.28 min。
基於流程29來製備以下化合物：
化合物編號 反應物A 反應物B 反應物C 特性化資料
146 a 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.13 (s, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.54 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.88 (d, J= 5.4 Hz, 1H), 7.64 (s, 2H), 7.43 - 7.37 (m, 1H), 7.31 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.28 - 7.24 (m, 1H), 7.13 (t, J= 8.0 Hz, 2H), 6.98 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 6.41 (s, 1H), 5.19 - 5.09 (m, 1H), 4.57 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 4.26 (dd, J= 18.5, 10.6 Hz, 2H), 3.98 (d, J= 11.0 Hz, 3H), 3.81 (t, J= 8.6 Hz, 1H), 3.72 - 3.63 (m, 2H), 3.42 (t, J= 10.0 Hz, 1H), 2.23 - 2.14 (m, 1H), 2.00 (d, J= 9.7 Hz, 1H), 1.81 (dd, J= 20.2, 10.2 Hz, 2H), 1.47 (d, J= 6.6 Hz, 3H), 1.32 (d, J= 13.7 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 628 (M+H) +。RT (方法A): 2.09 min。
160 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.64 (s, 1H), 7.88 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.62 - 7.55 (m, 2H), 7.26 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.21 - 7.15 (m, 2H), 7.09 (d, J= 5.9 Hz, 2H), 7.02 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 6.51 (s, 1H), 5.33 - 5.28 (m, 1H), 4.47 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 4.36 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 4.21 - 4.13 (m, 2H), 3.82 (q, J= 11.6 Hz, 2H), 3.39 (s, 3H), 2.45 - 2.37 (m, 1H), 2.13 - 2.05 (m, 1H), 1.60 (d, J= 6.8 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 572 (M+H) +。RT (方法A): 1.80 min。
161 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.65 (s, 1H), 7.92 (d, J= 5.0 Hz, 1H), 7.56 (s, 2H), 7.22 (dd, J= 19.3, 8.7 Hz, 3H), 7.15 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 7.09 (d, J= 6.9 Hz, 1H), 7.03 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 6.51 (s, 1H), 5.25 (d, J= 6.7 Hz, 1H), 4.51 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.27 (d, J= 16.2 Hz, 1H), 3.69 (d, J= 11.8 Hz, 1H), 3.52 (d, J= 9.8 Hz, 2H), 2.71 (t, J= 12.0 Hz, 1H), 2.11 (dd, J= 37.3, 24.1 Hz, 2H), 1.59 (d, J= 6.8 Hz, 3H), 1.03 (t, J= 5.1 Hz, 1H), 0.91 - 0.87 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 584 (M+H) +。RT (方法A): 1.38 min。
177 b 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.66 (s, 1H), 7.92 (d, J= 20.7 Hz, 2H), 7.56 (s, 2H), 7.21 (d, J= 44.7 Hz, 5H), 7.07 (d, J= 14.2 Hz, 2H), 6.53 (s, 1H), 5.31 (s, 1H), 4.61 (s, 1H), 4.31 - 4.14 (m, 3H), 4.04 (s, 2H), 2.62 (s, 1H), 2.48 (s, 1H), 1.61 (d, J= 6.3 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 609 (M+H) +。RT (方法A): 1.39 min。
321 b 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.66 (s, 1H), 7.95 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 7.60 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 7.47 - 7.43 (m, 2H), 7.16 - 7.13 (m, 2H), 7.06 - 7.01 (m, 2H), 6.97 (t, J = 9.5 Hz, 2H), 6.52 (s, 1H), 5.33 - 5.28 (m, 1H), 4.53 (t, J= 7.9 Hz, 1H), 4.22 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.11 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.05 - 4.02 (m, 1H), 4.02 - 3.99 (m, 2H), 3.99 - 3.97 (m, 1H), 3.78 (s, 2H), 2.43 - 2.36 (m, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.29 - 2.24 (m, 1H), 1.56 (d, J= 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 602 (M+H) +。RT (方法A): 1.45 min。
a僅步驟2-4。 b使用HATU代替步驟1中之T 3P。 流程 30. (2S,4R)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-1-(2-(5- 溴 -1- 側氧基異吲哚啉 -2- 基 ) 乙醯基 )-4-( 二氟甲氧基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 100) 之合成 步驟 1 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-2-(((R)-1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 ) 胺甲醯基 ) 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯 (3)
向(2S,4R)-1-三級丁氧基羰基-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸(37.33 mg，0.1327 mmol，1.0當量)於DMF (2 mL)之溶液中添加(1R)-1-[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]乙胺(40.00 mg，0.1327 mmol，1.0當量)、含T3P (50質量%)之乙酸乙酯(119 μL，0.199 mmol，1.5當量)及DIPEA (69.40 μL，0.398 mmol，3.0當量)。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘，然後藉由製備型HPLC純化，得到(2S,4R)-2-[[(1R)-1-[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]乙基]胺甲醯基]-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(64.72 mg，0.1146 mmol，86.37%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 565 (M+H) +。 步驟 2 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-N-((R)-1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 (4)
在冰浴溫度下將TFA (0.5 mL)添加至(2S,4R)-2-[[(1R)-1-[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]乙基]胺甲醯基]-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(115.0 mg，0.2037 mmol，1.0當量)於CH 2Cl 2(1 mL)之溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌2小時，然後濃縮至乾，得到呈白色固體之(2S,4R)-N-[(1R)-1-[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]乙基]-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲醯胺(94.00 mg，0.2024 mmol，99.35%產率)，其未經進一步純化用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 465 (M+H) +。 步驟 3 ： (2S,4R)-N-[(1R)-1-[1-( 苯磺醯基 ) 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ] 乙基 ]-1-[2-(5- 溴 -1- 側氧基 - 異吲哚啉 -2- 基 ) 乙醯基 ]-4-( 二氟甲氧基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 (5)
向(2S,4R)-1-[2-(5-溴-1-側氧基-異吲哚啉-2-基)乙醯基]-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸(250.0 mg，0.5771 mmol，1.0當量)於DMF (2 mL)之溶液中添加(1R)-1-[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]乙胺；二鹽酸鹽(0.2592 g，0.6925 mmol，1.2當量)、含T3P (50質量%)之乙酸乙酯(0.518 mL，0.865 mmol，1.5當量)及DIPEA (0.3020 mL，1.73 mmol，3.0當量)。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘，然後用水(5 mL)稀釋且攪拌30分鐘。傾析濾液，用水洗滌殘餘物且濃縮，然後藉由combi急速層析法純化；4 g管柱，溶劑A=CH 2Cl 2，溶劑B=MeOH純化，獲得呈淡黃色油狀物之(2S,4R)-N-[(1R)-1-[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]乙基]-1-[2-(5-溴-1-側氧基-異吲哚啉-2-基)乙醯基]-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲醯胺(245.0 mg，0.3419 mmol，100質量%，59.24%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 717 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S,4R)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-1-(2-(5- 溴 -1- 側氧基異吲哚啉 -2- 基 ) 乙醯基 )-4-( 二氟甲氧基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 100)
向(2S,4R)-N-[(1R)-1-[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]乙基]-1-[2-(5-溴-1-側氧基-異吲哚啉-2-基)乙醯基]-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲醯胺(5.000 mg，0.006977 mmol，1.00當量)於MeOH (1.5 mL)及水(0.5 mL)之溶液中添加LiOH (0.5000 mg，0.02088 mmol，3當量)。將反應混合物在室溫下攪拌隔夜，然後濃縮以移除MeOH。使用1 N HCl將pH調節至1。將酸化之混合物濃縮，然後藉由製備型HPLC純化，得到呈黃色黏性油狀物之 化合物 100(1.215 mg，0.002108 mmol，30.21%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 578 (M+H) +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.22 (s, 1H), 9.17 – 8.48 (m, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.20 – 7.87 (m, 1H), 7.64 (t, J= 9.1 Hz, 1H), 7.54 – 7.41 (m, 2H), 7.32 – 7.21 (m, 1H), 7.22 – 7.11 (m, 2H), 7.08 – 6.91 (m, 1H), 6.79 (d, J= 14.4 Hz, 1H), 6.62 (s, 1H), 6.38 (s, 1H), 4.97 (s, 1H), 4.43 (t, J= 6.3 Hz, 1H), 4.22 – 4.09 (m, 1H), 3.97 – 3.69 (m, 2H), 2.69 – 2.54 (m, 2H), 2.39 – 2.27 (m, 1H), 1.18 (s, 1H), 1.40 (d, J= 6.9 Hz, 3H)。RT (方法A): 1.17 min。 流程 31. (2S,4R)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-(2-(5-(4- 氟苯基 )-1- 側氧基異吲哚啉 -2- 基 ) 乙醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 101) 之合成
將(4-氟苯基)硼酸(4.686 mg，0.03349 mmol，1.2當量)、(2S,4R)-N-[(1R)-1-[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]乙基]-1-[2-(5-溴-1-側氧基-異吲哚啉-2-基)乙醯基]-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲醯胺(20.00 mg，0.02791 mmol，1.0當量)、Pd(PPh 3) 2dppf·CH 2Cl 2(2.300 mg，0.00279 mmol.)、Na 2CO 3(5.916 mg，0.05582 mmol，2當量)於1,4-二噁烷(3 mL)及水(0.3 mL)中之混合物在微波反應器中於110℃攪拌30 min。將反應混合物冷卻至室溫，然後經由矽藻土墊過濾。用水及EtOAc洗滌濾餅。分離兩層，用EtOAc萃取水層，用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥且濃縮，得到棕色油狀物。向棕色油狀物於MeOH (1.5 mL)及水(0.5 mL)之溶液中添加LiOH (1.350 mg，0.05581 mmol，2當量)。將反應混合物在室溫下攪拌隔夜，然後濃縮以移除MeOH。將pH調節至1，然後使用製備型HPLC純化混合物，得到 化合物 101(2.235 mg，0.003778 mmol，13.54%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 592 (M+H) +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.95 (s, 1H), 8.88 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 8.67 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.81 – 7.60 (m, 2H), 7.28 (td, J= 8.8, 3.7 Hz, 1H), 7.06 (t, J= 8.9 Hz, 1H), 6.96 (s, 1H), 6.68 – 6.52 (m, 1H), 6.32 (s, 1H), 5.05 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 4.96 (s, 1H), 4.52 (dd, J= 17.2, 7.7 Hz, 2H), 4.45 – 4.20 (m, 3H), 3.97 – 3.74 (m, 2H), 2.27 (t, J= 10.3 Hz, 1H), 2.11 (ddd, J= 13.4, 8.2, 4.8 Hz, 1H), 1.40 (d, J= 6.9 Hz, 3H)。RT (方法A): 1.51 min。
基於流程31來製備以下化合物：
化合物編號 反應物A 反應物B 特性化資料
105 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.95 (s, 1H), 8.92 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 8.68 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.78 – 7.72 (m, 2H), 7.72 – 7.65 (m, 2H), 7.59 (t, J= 9.2 Hz, 1H), 7.26 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 6.96 (s, 1H), 6.77 (s, 1H), 6.61 – 6.52 (m, 1H), 6.32 (s, 1H), 5.06 (t, J= 7.4 Hz, 1H), 4.96 (s, 1H), 4.69 – 4.12 (m, 5H), 3.92 – 3.70 (m, 2H), 2.11 (ddd, J= 13.3, 8.2, 4.8 Hz, 1H), 1.40 (d, J= 6.9 Hz, 3H)。RT (方法A): 1.59 min。
106 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.99 (s, 1H), 8.94 (s, 1H), 8.67 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.31 (s, 2H), 7.88 – 7.62 (m, 1H), 7.52 – 7.37 (m, 1H), 7.23 – 6.99 (m, 2H), 6.77 (s, 1H), 6.70 (t, J= 6.7 Hz, 1H), 6.33 (s, 1H), 5.26 – 4.97 (m, 2H), 4.96 (s, 1H), 4.61 – 4.21 (m, 2H), 3.94 – 3.66 (m, 2H), 2.43–2.30 (m, 5H), 2.31 (s, 3H), 1.41 (d, J= 7.0 Hz, 3H)。RT (方法A): 1.75 min。
116 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.89 (s, 1H), 8.56 (s, 2H), 8.49 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 8.32 (s, 2H), 7.88 (p, J= 8.5 Hz, 1H), 7.82 – 7.58 (m, 2H), 7.57 – 7.36 (m, 2H), 7.34 – 7.24 (m, 2H), 7.08 (h, J= 8.5 Hz, 2H), 6.90 (t, J= 8.8 Hz, 1H), 6.74 – 6.63 (m, 2H), 6.59 (s, 1H), 6.18 (s, 1H), 5.01 (t, J= 7.3 Hz, 1H), 4.77 – 4.59 (m, 2H), 4.55 (s, 1H), 4.41 (d, J= 16.9 Hz, 2H), 3.39 (d, J= 5.5 Hz, 1H), 2.25 (t, J= 12.3 Hz, 1H), 2.03 – 1.87 (m, 1H), 1.45 – 1.30 (m, 4H), 1.18 (d, J= 13.1 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 552 (M+H) +。RT (方法A): 1.57 min。
124 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.13 (s, 1H), 9.12 – 8.40 (m, 2H), 8.07 (s, 1H), 7.84 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 7.76 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 7.71 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.53 (tt, J= 7.7, 3.8 Hz, 2H), 7.47 – 7.39 (m, 1H), 7.30 (td, J= 8.6, 2.6 Hz, 2H), 7.24 (d, J= 6.5 Hz, 1H), 6.95 (s, 0H), 6.82 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 6.77 (s, 1H), 6.39 (s, 1H), 5.16 – 4.99 (m, 1H), 4.95 (s, 1H), 4.49 (dd, J= 17.9, 10.0 Hz, 2H), 3.92 – 3.73 (m, 2H), 2.27 (ddt, J= 16.1, 12.5, 5.7 Hz, 1H), 2.11 (ddd, J= 13.3, 8.0, 4.8 Hz, 1H), 1.41 (d, J= 6.9 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 626 (M+H) +。RT (方法A): 1.57 min。
流程 32. (2S,4R)-1-((9,9- 二氟 -9H- 茀 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-4-( 二氟甲氧基 )-N-((S)-2- 羥基 -1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 103) 之合成 步驟 1 ： 2- 側氧基 -2-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙酸乙酯 (2)
在-70℃下向1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(2.95 g，11.4 mmol)及TMEDA (7.9 g，68.6 mmol)於THF (30 mL)之混合物中逐滴添加n-BuLi (7 mL，THF中2.5 M)且將反應混合物在此溫度下攪拌2小時。在-70℃下向混合物中逐滴添加草酸二乙酯(2.5 g，17.2 mmol)且將混合物在-70℃至0℃攪拌2小時。混合物用飽和NH 4Cl水溶液淬滅且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 – 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色固體之2-側氧基-2-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙酸乙酯(1.7 g，產率41.5%)。LC/MS (ESI) m/z: 359 (M+H) +。 步驟 2 ： (R)-2-(( 三級丁基亞磺醯基 ) 亞胺基 )-2-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙酸乙酯 (3)
向2-側氧基-2-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙酸乙酯(1.7 g，4.7 mmol)及(R)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1.0 g，8.2 mmol)於THF (10 mL)之混合物中添加Ti(OEt) 4(2.7 g，11.8 mmol)。將混合物在80℃下攪拌16小時。將反應混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 70% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色固體之(R)-2-((三級丁基亞磺醯基)亞胺基)-2-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙酸乙酯(900 mg，產率41.1%)。LC/MS (ESI) m/z: 462 (M+H) +。 步驟 3 ： (R)-N-((S)-2- 羥基 -1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 (4-1) 及 (R)-N-((R)-2- 羥基 -1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 (4-2)
在0℃下向(R)-2-((三級丁基亞磺醯基)亞胺基)-2-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙酸乙酯(800 mg，1.7 mmol)於MeOH (8 mL)之溶液中分批添加NaBH 4(1.2 g，30.6 mmol)且將混合物在20℃下攪拌10分鐘。混合物用飽和NH 4Cl水溶液淬滅且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 70% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之(R)-N-((S)-2-羥基-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(110 mg，產率15.4%)。LC/MS (EsI) m/z: 422 (M+H) +。及呈白色固體之(R)-N-((R)-2-羥基-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(210 mg，產率29.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 422 (M+H) +。 步驟 4 ： (S)-2- 胺基 -2-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙 -1- 醇鹽酸鹽 (5)
將(R)-N-((S)-2-羥基-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(110 mg，0.26 mmol)於HCl/1,4-二噁烷(2 mL，4M)中之溶液在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色固體之(S)-2-胺基-2-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-醇鹽酸鹽(80 mg，產率87.0%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 318 (M+H) +。 步驟 5 ： (2S,4R)-1-((9,9- 二氟 -9H- 茀 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-4-( 二氟甲氧基 )-N-((S)-2- 羥基 -1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 103)
在N 2氛圍下向(S)-2-胺基-2-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-醇鹽酸鹽(23 mg，0.067 mmol)及(2S,4R)-1-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸(30 mg，0.067 mmol)於DMF (1 mL)之混合物中添加DIPEA (26 mg，0.20 mmol)及HATU (38 mg，0.10 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。向混合物中添加LiOH (4.8 mg，0.20 mmol)、MeOH (0.5 mL)及水(0.1 mL)且將混合物在室溫下攪拌6小時。將混合物用EtOAc稀釋且用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 7: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 103(2.0 mg，產率4.8%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.82 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.92 (d, J= 6.9 Hz, 2H), 7.76 – 7.70 (m, 2H), 7.67 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 7.56 (t, J= 7.2 Hz, 1H), 7.44 (dd, J= 12.1, 6.2 Hz, 2H), 6.84 (s, 1H), 6.55 (t, J= 74.8 Hz, 1H), 5.30 (t, J= 5.9 Hz, 1H), 5.08 (s, 1H), 4.69 (t, J= 8.1 Hz, 1H), 4.37 (d, J= 16.9 Hz, 1H), 4.22 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.01 (dd, J= 10.1, 4.9 Hz, 2H), 3.93 (dd, J= 11.3, 4.9 Hz, 2H), 2.52 (dd, J= 14.7, 8.5 Hz, 1H), 2.34 (dd, J= 12.5, 6.2 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 626 (M+H) +。RT (方法A): 1.38 min。 流程 33. (S)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-((5- 苯基甲基吡啶醯基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 107) 之合成 步驟 1 ： (8S)-8-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基甲基胺甲醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -7- 甲酸苄酯 (3)
向(7S)-6-苄氧基羰基-1,4-二氧雜-6-氮雜螺[4.4]壬烷-7-甲酸(50.00 mg，0.1627 mmol，1.0當量)於DMF (2 mL)之溶液中添加1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基甲胺二鹽酸鹽(39.39 mg，0.1790 mmol，1.0當量)、含T3P (50質量%)之乙酸乙酯(0.146 mL，0.244 mmol，1.5當量)及DIPEA (85.1 μL，0.488 mmol，3.0當量)。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘，然後直接藉由製備型HPLC純化，得到(8S)-8-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基甲基胺甲醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-7-甲酸苄酯(56.92 mg，0.1304 mmol，80.14%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 437 (M+H) +。 步驟 2 ： (8S)-N-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基甲基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 (4)
向(8S)-8-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基甲基胺甲醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-7-甲酸苄酯(30.00 mg，0.06873 mmol，1.0當量)於MeOH (2 mL)之溶液中添加10% Pd/C (14.63 mg，0.006874 mmol，0.1當量)。將燒瓶排空，然後用氣球中之氫氣回填。將反應混合物在室溫下攪拌隔夜，然後經由矽藻土墊過濾。濃縮濾液且在真空中乾燥，得到(8S)-N-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基甲基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺(18.56 mg，0.06140 mmol，100質量%，89.33%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 303 (M+H)+。 步驟 3 ： (S)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-((5- 苯基甲基吡啶醯基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 107)
向2-[(5-苯基吡啶-2-羰基)胺基]乙酸(7.565 mg，0.02952 mmol，1.0當量)於DMF (2 mL)之溶液中添加(8S)-N-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基甲基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺；鹽酸鹽(10.00 mg，0.02952 mmol，1.0當量)、含T3P (50質量%)之乙酸乙酯(26.5 μL，0.0443 mmol，1.5當量)及DIPEA (15.4 μL，0.0883 mmol，3.0當量)。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘，然後直接藉由製備型HPLC純化，得到 化合物 107(2.917 mg，0.005396 mmol，18.28%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 541 (M+H) +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.08 (s, 1H), 8.94 (d, J= 4.6 Hz, 1H), 8.83 – 8.70 (m, 1H), 8.63 (d, J= 14.3 Hz, 1H), 8.47 (t, J= 5.8 Hz, 1H), 8.23 (dd, J= 7.9, 2.6 Hz, 1H), 8.12 (d, J= 3.6 Hz, 1H), 8.05 (dd, J= 8.8, 5.6 Hz, 1H), 7.96 (d, J= 5.5 Hz, 1H), 7.76 (d, J= 7.5 Hz, 3H), 7.49 (t, J= 6.8 Hz, 3H), 7.43 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 7.24 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.15 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 6.71 – 6.21 (m, 3H), 4.91 – 4.28 (m, 2H), 4.14 (dd, J= 12.5, 5.3 Hz, 2H), 4.00 – 3.77 (m, 6H), 3.73 (d, J= 10.8 Hz, 1H), 3.59 (d, J= 10.7 Hz, 1H), 2.28 (dd, J= 13.1, 8.6 Hz, 1H), 2.08 (dd, J= 13.0, 6.8 Hz, 1H)。RT (方法A): 1.20 min。 流程 34. (S)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-((3- 氟 -5-( 對甲苯基 ) 甲基吡啶醯基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 108) 之合成
向2-[[3-氟-5-(對甲苯基)吡啶-2-羰基]胺基]乙酸(8.509 mg，0.02951 mmol，1.0當量)於DMF (2 mL)之溶液中添加(8S)-N-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基甲基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺；鹽酸鹽(10.00 mg，0.02952 mmol，1.0當量)、含T3P (50質量%)之乙酸乙酯(26.5 μL，0.0443 mmol，1.5當量)及DIPEA (15.4 μL，0.0883 mmol，3.0當量)。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘，然後直接藉由製備型HPLC純化，得到 化合物 108(3.857 mg，0.006736 mmol，22.82%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 573 (M+H) +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.11 (s, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.65 (dd, J= 12.7, 8.0 Hz, 2H), 8.47 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 8.13 (d, J= 13.8 Hz, 1H), 7.97 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.72 (d, J= 7.8 Hz, 3H), 7.30 (d, J= 7.7 Hz, 3H), 7.18 (d, J= 5.5 Hz, 1H), 6.40 (s, 1H), 4.38 (qd, J= 15.8, 7.7 Hz, 2H), 4.09 (qd, J= 17.4, 5.3 Hz, 2H), 3.95 – 3.77 (m, 3H), 3.73 (d, J= 10.7 Hz, 1H), 3.59 (d, J= 10.7 Hz, 1H), 3.34 (d, J= 12.1 Hz, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.07 (dd, J= 13.1, 6.8 Hz, 2H)。RT (方法A): 1.31 min。
基於流程34來製備以下化合物：
化合物編號 反應物A 反應物B 特性化資料
117 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.10 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.93 (dd, J= 12.9, 6.7 Hz, 4H), 7.58 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 7.33 (td, J= 10.3, 2.6 Hz, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.17 (td, J= 8.4, 2.5 Hz, 2H), 7.11 (d, J= 5.4 Hz, 1H), 6.39 (s, 1H), 6.33 (s, 1H), 4.67 – 4.24 (m, 3H), 4.15 (dd, J= 16.8, 5.5 Hz, 1H), 3.88 (dp, J= 16.4, 5.2 Hz, 2H), 3.76 (d, J= 10.9 Hz, 1H), 3.60 (d, J= 10.9 Hz, 1H), 2.26 (dd, J= 13.2, 8.7 Hz, 1H), 2.06 (dd, J= 13.0, 7.2 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 576 (M+H) +。RT (方法A): 1.35 min。
125 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.07 (s, 1H), 8.66 – 8.36 (m, 2H), 8.20 (s, 0H), 7.91 (d, J= 5.5 Hz, 1H), 7.75 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.59 (dd, J= 9.6, 7.2 Hz, 2H), 7.35 (ddd, J= 11.4, 9.3, 2.6 Hz, 1H), 7.18 (td, J= 8.4, 2.5 Hz, 1H), 7.00 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 6.31 (s, 1H), 4.59 – 4.39 (m, 3H), 4.40 – 4.22 (m, 4H), 3.89 (dtt, J= 15.0, 9.8, 4.1 Hz, 5H), 3.76 (d, J= 10.8 Hz, 1H), 3.60 (dd, J= 11.5, 5.1 Hz, 1H), 2.26 (td, J= 11.4, 6.6 Hz, 1H), 2.04 (dd, J= 13.1, 7.4 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 588 (M+H) +。RT (方法A): 1.35 min。
129 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.13 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.45 (t, J= 5.6 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.92 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.75 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.59 (q, J= 8.3 Hz, 2H), 7.45 – 7.29 (m, 1H), 7.18 (td, J= 8.6, 2.5 Hz, 1H), 7.01 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 6.28 (s, 1H), 4.81 – 4.52 (m, 3H), 4.43 (dd, J= 17.1, 11.6 Hz, 2H), 4.34 (t, J= 6.1 Hz, 2H), 2.25 (t, J= 12.3 Hz, 1H), 1.31 – 0.97 (m, 5H), 0.61 (t, J= 5.5 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 556 (M+H) +。RT (方法A): 1.54 min。
136 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.15 (s, 1H), 8.63 (d, J= 10.4 Hz, 2H), 8.49 – 8.33 (m, 2H), 8.28 (s, 1H), 7.96 (dd, J= 9.1, 5.2 Hz, 2H), 7.50 – 7.29 (m, 4H), 7.28 – 7.13 (m, 3H), 6.29 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 4.66 (dd, J= 11.2, 3.8 Hz, 1H), 4.33 (t, J= 7.8 Hz, 3H), 4.13 (dd, J= 16.9, 5.9 Hz, 1H), 2.25 (t, J= 12.1 Hz, 1H), 2.00 (d, J= 11.6 Hz, 1H), 1.17 (q, J= 9.7 Hz, 5H), 0.66 (t, J= 5.8 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 525 (M+H) +。RT (方法A): 1.46 min。
144 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.20 (s, 1H), 8.67 (dd, J= 13.5, 7.5 Hz, 3H), 8.45 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 8.07 (s, 0H), 7.99 (s, 1H), 7.60 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.47 – 7.37 (m, 3H), 7.33 (t, J= 7.7 Hz, 2H), 7.23 – 7.04 (m, 4H), 6.96 (d, J= 7.9 Hz, 3H), 6.35 (s, 1H), 4.64 (s, 0H), 4.57 – 4.36 (m, 2H), 4.10 (dd, J= 16.7, 5.7 Hz, 1H), 4.04 – 3.79 (m, 6H), 3.57 (d, J= 10.9 Hz, 1H), 2.36 – 2.13 (m, 1H), 2.04 (dd, J= 13.1, 7.3 Hz, 1H), 0.86 (ddd, J= 16.1, 7.7, 4.6 Hz, 2H)。LC/MS (ESI) m/z: 556 (M+H) +。RT (方法A): 1.28 min。
152 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.50 (s, 1H), 8.71 (t, J= 5.7 Hz, 2H), 8.40 (t, J= 5.6 Hz, 1H), 8.05 (d, J= 13.1 Hz, 1H), 7.59 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.52 – 7.37 (m, 3H), 7.33 (t, J= 7.9 Hz, 2H), 7.28 (s, 1H), 7.18 – 7.04 (m, 2H), 6.96 (d, J= 8.1 Hz, 2H), 6.39 (s, 1H), 4.64 (dd, J= 11.2, 3.3 Hz, 1H), 4.52 – 4.17 (m, 3H), 3.98 (dd, J= 16.5, 5.6 Hz, 1H), 3.36 (dd, J= 5.9, 2.4 Hz, 1H), 2.36 – 2.11 (m, 1H), 1.98 (dd, J= 13.2, 3.3 Hz, 1H), 1.41 (qt, J= 6.5, 4.1 Hz, 3H), 1.28 – 1.01 (m, 5H), 0.97 – 0.74 (m, 1H), 0.63 (t, J= 5.5 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 524 (M+H) +。RT (方法A): 1.49 min。
155 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.88 (s, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.51 (t, J= 5.6 Hz, 1H), 8.18 – 8.09 (m, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.54 (t, J= 7.2 Hz, 1H), 7.47 – 7.30 (m, 3H), 7.25 (dd, J= 8.2, 2.5 Hz, 1H), 7.19 – 7.05 (m, 3H), 6.51 (s, 1H), 6.42 (s, 2H), 4.79 – 4.45 (m, 3H), 3.42 – 3.29 (m, 16H), 2.25 (dd, J= 13.8, 10.9 Hz, 1H), 1.96 (dd, J= 13.3, 3.3 Hz, 1H), 1.02 (s, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 542 (M+H) +。RT (方法A): 1.50 min。
156 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.88 (s, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.16 – 8.09 (m, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.54 (t, J= 7.2 Hz, 1H), 7.43 – 7.30 (m, 3H), 7.25 (dd, J= 8.2, 2.5 Hz, 1H), 7.14 – 7.04 (m, 2H), 7.00 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 6.51 (s, 1H), 6.42 (s, 2H), 4.77 – 4.45 (m, 3H), 4.43 – 4.23 (m, 4H), 2.43 (t, J= 1.9 Hz, 4H), 2.25 (t, J= 12.3 Hz, 1H), 1.96 (dd, J= 13.3, 3.3 Hz, 1H), 1.29 – 1.03 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 536 (M+H) +。RT (方法A): 1.52 min。
157 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.09 (s, 1H), 8.67 (dd, J= 13.7, 7.8 Hz, 1H), 8.45 (t, J= 5.8 Hz, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.96 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.59 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.49 – 7.33 (m, 1H), 7.19 (dt, J= 17.4, 7.2 Hz, 1H), 7.12 (dd, J= 8.0, 2.6 Hz, 2H), 7.04 (td, J= 8.8, 4.5 Hz, 3H), 6.54 – 5.82 (m, 1H), 4.56 – 4.19 (m, 2H), 4.10 (dd, J= 16.7, 5.7 Hz, 1H), 3.89 (tdd, J= 15.8, 10.4, 6.0 Hz, 1H), 3.73 (d, J= 10.9 Hz, 1H), 3.57 (d, J= 10.8 Hz, 1H), 2.30 – 2.16 (m, 1H), 2.04 (dd, J= 13.0, 7.3 Hz, 1H), 1.30 – 1.07 (m, 2H), 0.98 – 0.67 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 574 (M+H) +。RT (方法A): 1.31 min。
159 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.22 (s, 1H), 9.20 – 8.95 (m, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.55 (t, J= 5.7 Hz, 1H), 8.38 – 8.20 (m, 2H), 8.15 – 8.05 (m, 1H), 7.99 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 7.88 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 7.61 – 7.45 (m, 2H), 7.31 (s, 1H), 7.13 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 6.35 (s, 1H), 4.74 (dd, J= 11.3, 3.4 Hz, 1H), 4.60 – 4.29 (m, 4H), 4.24 (dd, J= 17.0, 5.6 Hz, 1H), 2.34 (t, J= 12.2 Hz, 1H), 2.07 (dd, J= 13.3, 3.5 Hz, 1H), 1.26 (s, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 509 (M+H) +。RT (方法A): 1.41 min。
239 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.22 (s, 1H), 8.74 – 8.55 (m, 1H), 8.50 (t, J= 4.5 Hz, 1H), 8.19 (s, 1H), 8.01 (dd, J= 10.8, 5.6 Hz, 1H), 7.84 (dd, J= 12.6, 7.6 Hz, 1H), 7.42 (t, J= 7.9 Hz, 1H), 7.35 (dt, J= 13.1, 8.0 Hz, 1H), 7.25 – 7.08 (m, 2H), 7.03 (t, J= 8.2 Hz, 2H), 6.87 – 6.72 (m, 2H), 6.33 (s, 1H), 4.87 (s, 1H), 4.54 – 4.18 (m, 3H), 4.10 (qd, J= 17.4, 5.2 Hz, 2H), 3.78 (d, J= 13.3 Hz, 2H), 3.66 (d, J= 10.5 Hz, 1H), 3.52 (d, J= 13.2 Hz, 1H), 2.23 (d, J= 11.2 Hz, 1H), 2.19 – 1.88 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 564 (M+H) +。RT (方法A): 1.36 min。
241 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.15 (s, 1H), 8.86 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 8.79 – 8.58 (m, 2H), 8.44 (s, 1H), 7.92 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.71 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.58 – 7.46 (m, 2H), 7.33 – 7.20 (m, 2H), 7.11 (td, J= 10.3, 4.4 Hz, 3H), 6.93 (s, 2H), 6.83 (s, 1H), 6.41 (s, 1H), 6.30 (s, 1H), 5.15 (dt, J= 15.3, 7.7 Hz, 1H), 4.66 (t, J= 7.3 Hz, 1H), 4.43 (t, J= 7.8 Hz, 1H), 4.22 (dd, J= 16.8, 5.9 Hz, 1H), 4.02 (dd, J= 16.8, 5.7 Hz, 1H), 3.97 – 3.67 (m, 2H), 2.31 (d, J= 14.2 Hz, 1H), 2.25 – 1.99 (m, 1H), 1.47 (d, J= 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 596 (M+H) +。RT (方法A): 1.38 min。
284 a,b 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.90 (s, 1H), 8.71 – 8.49 (m, 2H), 8.38 (s, 1H), 7.96 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.27 – 7.04 (m, 3H), 6.71 (m, 1H), 6.35 (m, 1H), 4.90 (s, 1H), 1.68 (q, J = 5.9 Hz, 2H), 1.49 (m, 1H), 1.24 (d, J = 8.2 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 595 (M+H) +。RT (方法A): 1.26 min。
a使用HATU代替T 3P。 b偶合反應之後藉由添加KOH及TBAI脫除保護基。 流程 35. 7-{2-[( 啡㗁噻 -3- 羰基 )- 胺基 ]- 乙醯基 }-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜 - 螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲酸 ( 吡咯并 [1,2-a] 吡嗪 -7- 基甲基 )- 醯胺 ( 化合物 111) 之合成 步驟 1 ：吡咯并 [1,2-a] 吡嗪 -7- 甲酸乙酯 (2)
向2-甲基-吡嗪(9.0 g，95.63 mmol)及3-溴-2-側氧基-丙酸乙酯(18.65 g，95.63 mmol)於DMF (130 mL)之混合物中且將混合物在密封管中於90℃攪拌1天。將反應混合物冷卻至室溫歷時0℃，將TEA (28.98 g，286.93 mmol)添加至反應混合物中且在60℃下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋且過濾。濾液用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 60% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之吡咯并[1,2-a]吡嗪-7-甲酸乙酯(650 mg，產率18.2%)。LC/MS (ESI) m/z: 191 (M+H) +。 步驟 2 ：吡咯并 [1,2-a] 吡嗪 -7- 基 - 甲醇 (3)
在N 2氛圍，0℃下向吡咯并[1,2-a]吡嗪-7-甲酸乙酯(600 mg，0.3.16 mmol)於DCM (10 mL)之溶液中逐滴添加DIBAL-H (9.1 mL，9.1 mmol，THF中1 N)且將混合物在27℃下攪拌4小時。混合物用飽和酒石酸鉀鈉水溶液淬滅且用DCM萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 20% MeOH)純化殘餘物，得到呈黃色固體之吡咯并[1,2-a]吡嗪-7-基-甲醇(45 mg，產率9.6%)。LC/MS (ESI) m/z: 149 (M+H) +。 步驟 3 ： 7- 疊氮基甲基 - 吡咯并 [1,2-a] 吡嗪 (4)
在N 2氛圍下向吡咯并[1,2-a]吡嗪-7-基-甲醇(45 mg，0.30 mmol)於甲苯(3 mL)之溶液中添加DPPA (84 mg，0.31 mmol)及DBU (93 mg，0.61 mmol)。將混合物在110℃下攪拌2小時。將反應混合物用EtOAc稀釋且過濾。濾液用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 20: 1)純化殘餘物，得到呈淺色油狀物之7-疊氮基甲基-吡咯并[1,2-a]吡嗪(40 mg，產率76.1%)。LC/MS (ESI) m/z: 174 (M+H) +。 步驟 4 ： C- 吡咯并 [1,2-a] 吡嗪 -7- 基 - 甲胺 (5)
在N 2氛圍下向7-疊氮基甲基-吡咯并[1,2-a]吡嗪(40 mg，0.23 mmol)於THF (2 mL)及水(2 mL)之溶液中添加PPh 3(90 mg，0.34 mmol)。將混合物在40℃下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化殘餘物，得到呈淺色油狀物之C-吡咯并[1,2-a]吡嗪-7-基-甲胺(20 mg，產率58.8%)。LC/MS (ESI) m/z: 148 (M+H) +。 步驟 5 ： 7-{2-[( 啡㗁噻 -3- 羰基 )- 胺基 ]- 乙醯基 }-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜 - 螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲酸 ( 吡咯并 [1,2-a] 吡嗪 -7- 基甲基 )- 醯胺 ( 化合物 111)
向C-吡咯并[1,2-a]吡嗪-7-基-甲胺(20 mg，0.14 mmol)及7-{2-[(啡㗁噻-3-羰基)-胺基]-乙醯基}-1,4-二氧雜-7-氮雜-螺[4.4]壬烷-8-甲酸(62 mg，0.14 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (88 mg，0.68 mmol)且將HBTU (77 mg，0.20 mmol)添加至攪拌混合物中且將所得混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 111(2.3 mg，產率2.9%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.52 (s, 1H), 7.89 (d, J= 4.7 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.45 – 7.41 (m, 1H), 7.36 – 7.32 (m, 1H), 7.22 – 7.17 (m, 2H), 7.16 – 7.10 (m, 2H), 7.09 – 7.06 (m, 1H), 7.02 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 6.81 (s, 1H), 4.65 – 4.62 (m, 1H), 4.61 – 4.58 (m, 1H), 4.53 – 4.47 (m, 1H), 4.17 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.10 – 4.04 (m, 1H), 4.01 (s, 4H), 3.87 – 3.78 (m, 2H), 2.45 (dd, J= 13.2, 9.2 Hz, 1H), 2.25 (dd, J= 13.2, 5.5 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 586 (M+H) +。RT (方法A): 1.27 min。 流程 36. (1S,3S,5S)-5- 甲基 -2-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-N-((4,5,6,7- 四氫噻吩并 [2,3-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 112) 之合成 步驟 1 ： 2- 溴 -4,7- 二氫噻吩并 [2,3-c] 吡啶 -6(5H)- 甲酸三級丁酯 (2)
在N 2氛圍下向4,7-二氫噻吩并[2,3-c]吡啶-6(5H)-甲酸三級丁酯(500 mg，2.10 mmol)於ACN (5 mL)之溶液中添加NBS (260 mg，2.21 mmol)且在25℃下攪拌1小時。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 5% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之2-溴-4,7-二氫噻吩并[2,3-c]吡啶-6(5H)-甲酸三級丁酯(600 mg，產率90.5%)。LC/MS (ESI) m/z: 318/320 (M+H) +。 步驟 2 ： 2- 氰基 -4,7- 二氫噻吩并 [2,3-c] 吡啶 -6(5H)- 甲酸三級丁酯 (3)
在N 2氛圍下向2-溴-4,7-二氫噻吩并[2,3-c]吡啶-6(5H)-甲酸 三級丁酯(500 mg，1.58 mmol)及Zn(CN) 2(369 mg，3.16 mmol)於DMF (5 mL)之混合物中添加Pd(PPh 3) 4(183 mg，0.16 mmol)，反應混合物在N 2氛圍下脫氣十次且在110℃下攪拌隔夜。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 30% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之2-氰基-4,7-二氫噻吩并[2,3-c]吡啶-6(5H)-甲酸 三級丁酯(400 mg，產率96.2%)。LC/MS (ESI) m/z: 265 (M+H) +。 步驟 3 ： 2-( 胺基甲基 )-4,7- 二氫噻吩并 [2,3-c] 吡啶 -6(5H)- 甲酸三級丁酯 (4)
向2-氰基-4,7-二氫噻吩并[2,3-c]吡啶-6(5H)-甲酸 三級丁酯(200 mg，0.76 mmol)於MeOH (5 mL)之溶液中添加雷氏Ni (20 mg，濕)，混合物在N 2氛圍下脫氣十次且在H 2氣球下於25℃攪拌隔夜。過濾混合物，且將濾液在減壓下濃縮至乾，得到呈無色油狀物之2-(胺基甲基)-4,7-二氫噻吩并[2,3-c]吡啶-6(5H)-甲酸 三級丁酯(150 mg，產率73.9%)。LC/MS (ESI) m/z: 269 (M+H) +。 步驟 4 ： 2-(((1S,3S,5S)-5- 甲基 -2-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺基 ) 甲基 )-4,7- 二氫噻吩并 [2,3-c] 吡啶 -6(5H)- 甲酸三級丁酯 (5)
在N 2氛圍下向(1S,3S,5S)-5-甲基-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸(20 mg，0.05 mmol)及2-(胺基甲基)-4,7-二氫噻吩并[2,3-c]吡啶-6(5H)-甲酸 三級丁酯(25 mg，0.10 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (35 mg，0.30 mmol)及PyBOP (24 mg，0.05 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NH 4Cl水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 20: 1)純化殘餘物，得到呈白色固體之2-(((1S,3S,5S)-5-甲基-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺基)甲基)-4,7-二氫噻吩并[2,3-c]吡啶-6(5H)-甲酸 三級丁酯(30 mg，產率93.8%)。LC/MS (ESI) m/z: 675 (M+H) +。 步驟 5 ： (1S,3S,5S)-5- 甲基 -2-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-N-((4,5,6,7- 四氫噻吩并 [2,3-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 112)
將2-(((1S,3S,5S)-5-甲基-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺基)甲基)-4,7-二氫噻吩并[2,3-c]吡啶-6(5H)-甲酸 三級丁酯(30 mg，0.04 mmol)於HCl/1,4-二噁烷(2 mL，4M)中之溶液在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 112(6 mg，產率24.0%)。 1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 8.55 (s, 1H), 7.54 (dd, J= 8.1, 1.7 Hz, 1H), 7.49 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.24 – 7.13 (m, 3H), 7.06 (dd, J= 16.1, 7.8 Hz, 2H), 6.65 (d, J= 15.5 Hz, 1H), 4.80 (dd, J= 11.4, 3.2 Hz, 1H), 4.43 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 4.33 (dd, J= 34.5, 16.4 Hz, 2H), 3.79 (d, J= 13.9 Hz, 2H), 3.69 – 3.61 (m, 1H), 3.38 (dd, J= 6.0, 2.3 Hz, 1H), 3.07 (t, J= 5.2 Hz, 2H), 2.75 (t, J= 5.1 Hz, 2H), 2.39 (t, J= 12.4 Hz, 1H), 2.15 (dd, J= 13.3, 3.3 Hz, 1H), 1.29 (s, 3H), 1.19 – 1.10 (m, 1H), 0.78 (t, J= 5.5 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 575 (M+H) +。RT (方法A): 1.49 min。
基於流程36來製備以下化合物：
化合物編號 反應物A 反應物B 特性化資料
67 a,f 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.52 (s, 1H), 7.35 - 7.28 (m, 3H), 7.24 (t, J= 7.8 Hz, 2H), 6.92 - 6.88 (m, 3H), 4.80 (dd, J= 11.4, 3.1 Hz, 1H), 4.54 (d, J= 5.9 Hz, 4H), 4.36 (d, J= 20.0 Hz, 2H), 4.23 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.12 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.00 (t, J= 6.2 Hz, 2H), 3.35 (s, 1H), 2.47 (t, J= 7.4 Hz, 2H), 2.38 (t, J= 12.4 Hz, 1H), 2.13 (dd, J= 13.4, 3.2 Hz, 1H), 2.06 (dd, J= 13.6, 6.8 Hz, 2H), 1.28 (s, 3H), 1.18 - 1.09 (m, 1H), 0.79 (t, J= 5.7 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) (m/z): 491 (M+H) +。RT (方法A): 1.09 min。
170 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.50 (s, 1H), 7.56 (dd, J= 8.1, 1.9 Hz, 1H), 7.51 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.25 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 7.18 (ddd, J= 9.3, 7.0, 1.1 Hz, 2H), 7.10 - 7.04 (m, 2H), 6.73 (s, 1H), 4.80 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 4.46 (s, 2H), 4.33 (d, J= 3.1 Hz, 2H), 4.10 (d, J= 4.8 Hz, 2H), 3.44 - 3.39 (m, 3H), 3.02 - 2.99 (m, 2H), 2.43 - 2.36 (m, 1H), 2.15 (dd, J= 13.3, 3.4 Hz, 1H), 1.29 (s, 3H), 1.14 (dd, J= 5.8, 2.4 Hz, 1H), 0.79 (td, J= 5.9, 1.3 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 575 (M+H) +。RT (方法A): 1.51 min。
210 b,c 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.56 - 7.53 (m, 1H), 7.49 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.22 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 7.21 - 7.17 (m, 1H), 7.15 (dd, J= 7.7, 1.5 Hz, 1H), 7.10 - 7.06 (m, 1H), 7.04 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 6.54 (dd, J= 101.7, 47.1 Hz, 2H), 4.99 (s, 1H), 4.57 - 4.39 (m, 3H), 4.24 - 4.10 (m, 2H), 3.98 - 3.89 (m, 1H), 3.85 (s, 1H), 3.75 (s, 2H), 3.06 (t, J= 5.9 Hz, 2H), 2.74 (d, J= 5.8 Hz, 2H), 2.47 - 2.30 (m, 1H), 2.24 - 2.17 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 615 (M+H) +。RT (方法A): 1.00 min。
224 d,e 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.18 (d, J= 17.3 Hz, 1H), 9.00 - 8.78 (m, 1H), 8.75 - 8.61 (m, 1H), 8.51 - 8.43 (m, 1H), 7.61 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 7.56 (s, 2H), 7.37 (t, J= 6.8 Hz, 1H), 7.30 - 7.23 (m, 2H), 7.16 - 7.11 (m, 2H), 7.02 - 6.77 (m, 2H), 4.91 (d, J= 34.6 Hz, 1H), 4.50 - 4.38 (m, 2H), 4.35 - 4.32 (m, 1H), 4.22 - 4.17 (m, 1H), 4.02 - 3.98 (m, 1H), 3.90 - 3.86 (m, 1H), 3.81 - 3.79 (m, 1H), 2.16 - 2.10 (m, 1H), 2.05 - 1.95 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 595 (M+H) +。RT (方法A): 1.70 min。
225 d,e 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.18 (d, J= 55.1 Hz, 1H), 8.98 - 8.79 (m, 1H), 8.74 - 8.61 (m, 1H), 8.45 (d, J= 29.4 Hz, 1H), 7.73 (dd, J= 13.0, 9.4 Hz, 1H), 7.63 - 7.56 (m, 2H), 7.40 - 7.37 (m, 1H), 7.31 - 7.24 (m, 3H), 7.15 (dd, J= 8.9, 1.7 Hz, 2H), 7.00 - 6.62 (m, 1H), 4.98 - 4.85 (m, 1H), 4.44 - 4.37 (m, 1H), 4.36 - 4.24 (m, 2H), 4.22 - 4.11 (m, 1H), 4.08 - 4.00 (m, 1H), 3.92 - 3.83 (m, 1H), 3.82 - 3.77 (m, 1H), 2.37 - 2.29 (m, 1H), 2.17 - 2.09 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 595 (M+H) +。RT (方法A): 1.71 min。
228 a,e 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.11 (d, J= 15.7 Hz, 1H), 7.60 - 7.52 (m, 2H), 7.51 - 7.46 (m, 2H), 7.20 (dt, J= 8.0, 2.2 Hz, 3H), 7.15 (dd, J= 7.8, 1.6 Hz, 1H), 7.08 (dd, J= 7.5, 1.3 Hz, 1H), 7.03 (dd, J= 8.1, 1.1 Hz, 1H), 6.48 (dd, J= 74.6, 57.0 Hz, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.61 (t, J= 7.8 Hz, 1H), 4.53 (s, 2H), 4.26 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.14 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 3.96 (dd, J= 11.5, 4.6 Hz, 1H), 3.86 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 2.47 (ddd, J= 12.2, 8.3, 3.8 Hz, 1H), 2.28 - 2.20 (m, 1H)。LC/MS (ESI) (m/z): 594 (M+H) +。RT (方法A): 1.54 min。
245 d,e 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 9.19 - 9.05 (m, 1H), 8.07 - 7.93 (m, 2H), 7.56 - 7.41 (m, 3H), 7.21 - 7.11 (m, 3H), 7.08 - 6.99 (m, 2H), 6.72 - 6.32 (m, 1H), 5.04 - 4.91 (m, 1H), 4.64 - 4.53 (m, 3H), 4.25 - 4.11 (m, 2H), 4.03 - 3.94 (m, 1H), 3.91 - 3.83 (m, 1H), 2.54 - 2.42 (m, 1H), 2.30 - 2.18 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 611 (M+H) +。RT (方法A): 2.15 min。
a僅步驟2-5。 b僅步驟3-5。 C腈的氫化係在NH 3.H 2O存在下進行。 d僅步驟2-4。 e使用HATU代替步驟4中之PyBOP。 f使用TFA代替步驟5中之HCl/1,4-二噁烷。 流程 37. (1S,3S,5S)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-2-(2-(5-(2,4- 二氟苯基 )-1- 側氧基異吲哚啉 -2- 基 ) 乙醯基 )-5- 甲基 -2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 113) 之合成 步驟 1 ： (1S,3S,5S)-5- 甲基 -3-(((R)-1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 ) 胺甲醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯 (3)
向(1S,3S,5S)-2-三級丁氧基羰基-5-甲基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸(45.00 mg，0.1865 mmol，1.0當量)於DMF (3 mL)之溶液中添加(1R)-1-[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]乙胺；二鹽酸鹽(76.79 mg，0.2052 mmol，1.2當量)、含T3P (50質量%)之乙酸乙酯(0.168 mL，0.281 mmol，1.5當量)及DIPEA (97.6 μL，0.560 mmol，3.0當量)。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘，然後藉由combi Flash 4 g管柱，溶劑A=CH 2Cl 2，溶劑B=MeOH，100% A至5% B純化，得到(1S,3S,5S)-3-[[(1R)-1-[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]乙基]胺甲醯基]-5-甲基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(80.00 mg，0.1525 mmol，81.77%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 525 (M+H) +。 步驟 2 ： (1S,3S,5S)-5- 甲基 -N-((R)-1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 (4) 之合成
在冰浴溫度下將TFA (0.43 mL)添加至(1S,3S,5S)-3-[[(1R)-1-[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]乙基]胺甲醯基]-5-甲基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(0.1000 g，0.1906 mmol，1.0當量)於CH 2Cl 2(1 mL)之溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌4小時，然後濃縮至乾，得到呈白色固體之(1S,3S,5S)-N-[(1R)-1-[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]乙基]-5-甲基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺(0.07567 g，0.1783 mmol，93.51%產率)，其未經進一步純化用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 425 (M+H) +。 步驟 3 ： (1S,3S,5S)-2-(2-(5- 溴 -1- 側氧基異吲哚啉 -2- 基 ) 乙醯基 )-5- 甲基 -N-((R)-1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 (6)
向2-(5-溴-1-側氧基-異吲哚啉-2-基)乙酸(45.81 mg，0.1696 mmol，1.2當量)於DMF (5 mL)之溶液中添加(1S,3S,5S)-N-[(1R)-1-[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]乙基]-5-甲基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺(B, 60.00 mg，0.1413 mmol 1.0當量)、含T3P (50質量%)之乙酸乙酯(0.1270 mL，0.212 mmol，1.5當量)及DIPEA (0.0740 mL，0.424 mmol，3.0當量)。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘，然後用水(5 mL)稀釋且攪拌30分鐘。傾析濾液，且用水洗滌殘餘物，經Na 2SO 4乾燥，然後濃縮，獲得棕色油狀物，其藉由combi Flash層析法，12 g管柱，溶劑A=CH 2Cl 2，溶劑B=MeOH.100% A至5 % B純化，得到(1S,3S,5S)-N-[(1R)-1-[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]乙基]-2-[2-(5-溴-1-側氧基-異吲哚啉-2-基)乙醯基]-5-甲基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺(73.55 mg，0.1087 mmol，100質量%，76.91%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 677 (M+H) +。 步驟 4 ： (1S,3S,5S)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-2-(2-(5-(2,4- 二氟苯基 )-1- 側氧基異吲哚啉 -2- 基 ) 乙醯基 )-5- 甲基 -2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 113)
將(2,4-二氟苯基)硼酸(4.201 mg，0.02660 mmol，1.2當量)、(1S,3S,5S)-N-[(1R)-1-[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]乙基]-2-[2-(5-溴-1-側氧基-異吲哚啉-2-基)乙醯基]-5-甲基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺(15.00 mg，0.02217 mmol，1.0當量)、Pd(PPh 3) 2dppf·CH 2Cl 2(1.829 mg，0.002217 mmol，0.1當量)、Na 2CO 3(4.699 mg，0.04434 mmol，2當量)於1,4-二噁烷(3 mL)及水(0.3 mL)中之混合物在微波反應器中於110℃攪拌30 min。反應混合物經由矽藻土墊過濾。用水及EtOAc洗滌濾餅。分離兩層。將水層用EtOAc萃取，用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥且濃縮，得到棕色油狀物。向棕色油狀物於MeOH (1.5 mL)及水(0.5 mL)之溶液中添加LiOH (1.000 mg，0.04176 mmol，2當量)。將反應混合物在室溫下攪拌隔夜，然後濃縮以移除MeOH。將pH調節至1，然後直接使用製備型HPLC純化混合物，得到 化合物 113(1.890 mg，0.003318 mmol，14.97%產率)。LC/MS (ESI) m/z:570 (M+H) +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.96 (s, 1H), 8.59 – 8.45 (m, 1H), 8.44 (s, 1H), 7.77 (d, J= 8.6 Hz, 2H), 7.68 (s, 1H), 7.65 – 7.51 (m, 1H), 7.36 (t, J= 10.4 Hz, 1H), 7.26 – 7.11 (m, 1H), 6.97 (s, 2H), 6.69 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 6.30 (s, 1H), 6.18 (s, 1H), 5.01 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 4.66 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 4.58 (d, J= 17.6 Hz, 1H), 4.42 (d, J= 17.0 Hz, 2H), 3.39 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 2.26 (t, J= 12.3 Hz, 1H), 2.05 – 1.87 (m, 1H), 1.38 (d, J= 7.0 Hz, 3H), 1.32 (d, J= 4.5 Hz, 1H), 1.19 (d, J= 12.5 Hz, 2H), 0.78 (d, J= 7.9 Hz, 1H)。RT (方法A): 1.60 min。 流程 38. (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((3- 苯氧基苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 127) 之合成 步驟 1 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((3- 苯氧基苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸苄酯 (2)
向2-[(3-苯氧基苄醯基)胺基]乙酸(50.00 mg，0.1843 mmol，1.0當量)於DMF (2 mL)之溶液中添加(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸苄酯鹽酸鹽(68.05 mg，0.2212 mmol，1.2當量)、T3P (0.166 mL，0.277 mmol，1.5當量，乙酸乙酯中50質量%)及DIPEA (96.40 mL，553 mmol，3.0當量)。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘。將水(5 mL)添加至反應混合物中，藉由過濾收集固體，用水沖洗且乾燥，得到呈棕色固體之(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-[2-[(3-苯氧基苄醯基)胺基]乙醯基]吡咯啶-2-甲酸苄酯(85.00 mg，0.1621 mmol，87.93%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 525 (M+H) +。 步驟 2 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((3- 苯氧基苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸 (3)
向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-[2-[(3-苯氧基苄醯基)胺基]乙醯基]吡咯啶-2-甲酸苄酯(40.00 mg，0.07626 mmol，1.0當量)於MeOH (2 mL)之溶液中添加5% Pd/C (16.23 mg，0.007625 mmol，0.1當量)。將燒瓶排空，然後用氣球中之H 2氣體回填。將反應混合物在室溫下攪拌隔夜，然後經由矽藻土墊過濾。濃縮濾液且在真空下乾燥，得到呈透明油狀物之(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-[2-[(3-苯氧基苄醯基)胺基]乙醯基]吡咯啶-2-甲酸(30.00 mg，0.06906 mmol，90.56%產率)，其未經進一步純化即使用。LC/MS (ESI) m/z: 435 (M+H) +。 步驟 3 ： (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((3- 苯氧基苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 127)
向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-[2-[(3-苯氧基苄醯基)胺基]乙醯基]吡咯啶-2-甲酸(14.00 mg，0.03223 mmol，1.0當量)於DMF (2 mL)之溶液中添加1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基甲胺二鹽酸鹽(8.512 mg，0.03867 mmol，1.2當量)、含T3P (50質量%)之乙酸乙酯(28.9 μL，0.0483 mmol，1.5當量)及DIPEA (16.90 μL，0.0969 mmol，3.0當量)。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘，然後藉由製備型HPLC直接純化，獲得 化合物 127(3.129 mg，0.005552 mmol，12.85%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 564 (M+H) +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.15 (s, 1H), 8.86 (s, 1H), 8.70 (s, 1H), 8.59 (d, J= 9.9 Hz, 2H), 8.19 (s, 1H), 7.96 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.60 (t, J= 8.7 Hz, 2H), 7.49 – 7.39 (m, 1H), 7.39 – 7.30 (m, 3H), 7.20 – 7.06 (m, 2H), 6.98 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 6.74 (s, 1H), 6.31 (s, 1H), 4.90 (d, J= 4.9 Hz, 1H), 4.62 – 4.22 (m, 2H), 4.12 (dd, J= 16.6, 5.8 Hz, 1H), 3.95 (dd, J= 16.7, 5.6 Hz, 1H), 3.81 (dd, J= 11.6, 4.5 Hz, 1H), 2.26 (td, J= 9.9, 4.9 Hz, 1H), 2.17 – 1.96 (m, 1H)。RT (方法A): 1.43 min。
以下化合物基於流程38中之步驟1及2製備：
化合物編號 反應物A 反應物B 特性化資料
118 LC/MS (ESI) m/z: 435 (M+H) +。RT (方法A): 1.85 min。
119 LC/MS (ESI) m/z: 427 (M+H) +。RT (方法A): 1.64 min。
流程 39. (2S,4R)-1-((9,9- 二氟 -9H- 茀 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-4-( 二氟甲氧基 )-N-((R)-2- 羥基 -1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 128) 之合成 步驟 1 ： (R)-2- 胺基 -2-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙 -1- 醇鹽酸鹽 (2)
將(R)-N-((R)-2-羥基-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(200 mg，0.47 mmol)於HCl/1,4-二噁烷(2 mL，4M)中之溶液在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之(R)-2-胺基-2-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-醇鹽酸鹽(160 mg，產率95.8%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 318 (M+H) +。 步驟 2 ： (2R,4R)-1-((9,9- 二氟 -9H- 茀 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-4-( 二氟甲氧基 )-N-((S)-2- 羥基 -1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 128)
在N 2氛圍下向(R)-2-胺基-2-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-醇鹽酸鹽(23 mg，0.067 mmol)及(2S,4R)-1-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸(30 mg，0.067 mmol)於DMF (1 mL)之混合物中添加DIPEA (26 mg，0.20 mmol)及HATU (38 mg，0.10 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。向混合物中添加LiOH (4.8 mg，0.20 mmol)、MeOH (0.5 mL)及水(0.1 mL)且將混合物在室溫下攪拌6小時。將混合物用EtOAc稀釋且用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 7: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 128(1.04 mg，產率2.5%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.82 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.92 (d, J= 6.9 Hz, 2H), 7.76 – 7.70 (m, 2H), 7.67 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 7.56 (t, J= 7.2 Hz, 1H), 7.44 (dd, J= 12.1, 6.2 Hz, 2H), 6.84 (s, 1H), 6.55 (t, J= 74.8 Hz, 1H), 5.30 (t, J= 5.9 Hz, 1H), 5.08 (s, 1H), 4.69 (t, J= 8.1 Hz, 1H), 4.37 (d, J= 16.9 Hz, 1H), 4.22 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.01 (dd, J= 10.1, 4.9 Hz, 2H), 3.93 (dd, J= 11.3, 4.9 Hz, 2H), 2.52 (dd, J= 14.7, 8.5 Hz, 1H), 2.34 (dd, J= 12.5, 6.2 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 626 (M+H) +。RT (方法A): 1.37 min。 流程 40. (S)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-2-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 131) 之合成 步驟 1 ： (S)-2- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -2,3- 二甲酸 2-( 三級丁基 ) 酯 3- 甲酯 (2)
在0℃下向(S)-2-(三級丁氧基羰基)-2-氮雜螺[4.4]壬烷-3-甲酸(100 mg，0.37 mmol)及K 2CO 3(154 mg，1.11 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加CH 3I (39 mg，0.56 mmol)且將混合物在25℃下攪拌16小時。將混合物用EtOAc稀釋且用飽和NH 4Cl水溶液洗滌兩次，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈棕色油狀物之(S)-2-氮雜螺[4.4]壬烷-2,3-二甲酸2-(三級丁基)酯3-甲酯(88 mg，產率83.8%)。LC/MS (ESI) m/z: 284 (M+H) +。 步驟 2 ： (S)-2- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -3- 甲酸甲酯鹽酸鹽 (3)
將(S)-2-氮雜螺[4.4]壬烷-2,3-二甲酸2-(三級丁基)酯3-甲酯(88 mg，0.31 mmol)於HCl/1,4-二噁烷(3 mL，4M)中之溶液在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈棕色固體之(S)-2-氮雜螺[4.4]壬烷-3-甲酸甲酯鹽酸鹽(50 mg，產率89.3%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 184 (M+H) +。 步驟 3 ： (S)-2-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -3- 甲酸甲酯 (4)
在N 2氛圍下向(啡㗁噻-3-羰基)甘胺酸(50 mg，0.17 mmol)及(S)-2-氮雜螺[4.4]壬烷-3-甲酸甲酯鹽酸鹽(46 mg，0.26 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (132 mg，1.02 mmol)及T 3P (324 mg，0.51 mmol，EtOAc中50% wt.)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NH 4Cl水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之(S)-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜螺[4.4]壬烷-3-甲酸甲酯(71 mg，產率92.2%)。LC/MS (ESI) m/z: 467 (M+H) +。 步驟 4 ： (S)-2-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -3- 甲酸 (5)
向(S)-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜螺[4.4]壬烷-3-甲酸甲酯(71 mg，0.15 mmol)於MeOH (3 mL)及H 2O (1 mL)之溶液中添加LiOH·H 2O (6 mg，0.30 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈棕色固體之(S)-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜螺[4.4]壬烷-3-甲酸(60 mg，產率87.0%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 453 (M+H) +。 步驟 5 ： (S)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-2-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 131)
在N 2氛圍下向(S)-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜螺[4.4]壬烷-3-甲酸(30 mg，0.07 mmol)及(R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-胺鹽酸鹽(30.0 mg，0.11 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (54 mg，0.42 mmol)及HATU (40.0 mg，0.11mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。向混合物中添加LiOH·H 2O (4.4 mg，0.11 mmol)於MeOH (2 mL)及水(1 mL)中之溶液。將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NH 4Cl水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 131(2 mg，產率5.0%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.65 (s, 1H), 7.90 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.65 – 7.49 (m, 2H), 7.28 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 7.22 – 7.14 (m, 2H), 7.13 – 7.02 (m, 3H), 6.52 (s, 1H), 5.34 – 5.29 (m, 1H), 4.58 (s, 2H), 4.41 (d, J= 8.9 Hz, 1H), 3.64 (d, J= 9.7 Hz, 1H), 3.53 (d, J= 9.9 Hz, 1H), 2.18 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 1.99 (d, J= 10.0 Hz, 1H), 1.76 – 1.68 (m, 5H), 1.60 (d, J= 6.9 Hz, 3H), 1.30 (s, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 596 (M+H) +。RT (方法A): 1.71 min。 流程 41. (2S,4R)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-1-((9,9- 二氟 -9H- 茀 -4- 羰基 ) 甘胺醯基 )-4-( 二氟甲氧基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 134) 之合成 步驟 1 ： 4- 溴螺 [ 茀 -9,2'-[1,3] 二硫戊環 ](2)
在0℃下向4-溴-9H-茀-9-酮(2.0 g，7.72 mmol)於二氯甲烷 (20 mL)之溶液中添加乙烷-1,2-二硫醇(3.64 g，38.6 mmol)及BF 3.Et 2O (4.8mL)。將混合物在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。混合物用水稀釋且用二氯甲烷(2 x 50 mL)萃取。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 5% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色固體之4-溴螺[茀-9,2'-[1,3]二硫戊環](2.5 g，產率96.5%)。 步驟 2 ： 4- 溴 -9,9- 二氟 -9H- 茀 (3)
在-78℃下向N-碘琥珀醯亞胺(9.1 g，40.4 mmol)於二氯甲烷(40 mL)之溶液中逐滴添加HF-吡啶 (5.1 mL)且將混合物攪拌10 min。將反應混合物逐滴添加至4-溴螺[茀-9,2'-[1,3]二硫戊環] (2.5 g，7.48 mmol)於二氯甲烷(30 mL)之溶液中且將混合物在-78℃下攪拌3小時。反應混合物用水淬滅且用二氯甲烷萃取。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 5% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色固體之4-溴-9,9-二氟-9H-茀(1.1 g，產率52.4%)。 步驟 3 ： 9,9- 二氟 -9H- 茀 -4- 甲酸甲酯 (4)
向4-溴-9,9-二氟-9H-茀(500 mg，1.78 mmol)於MeOH (3 mL)/DMSO (3 mL)之溶液中添加Pd(dppf)Cl 2(260 mg，0.35 mmol)及三乙胺(540 mg，5.34 mmol)。將混合物在CO氛圍，80℃下攪拌隔夜。反應用飽和NH 4Cl水溶液淬滅。所得混合物用EtOAc萃取。將合併之有機層用水及鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 15% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之9,9-二氟-9H-茀-4-甲酸甲酯(145 mg，產率31.3%)。 步驟 4 ： 9,9- 二氟 -9H- 茀 -4- 甲酸 (5)
在0℃下向9,9-二氟-9H-茀-4-甲酸甲酯(145 mg，0.56 mmol)於MeOH (2 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH·H 2O (97 mg，2.24 mmol)且將混合物在室溫下攪拌16小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH＜3且用EtOAc萃取。將合併之有機層在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之9,9-二氟-9H-茀-4-甲酸(128 mg，產率93.4%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) (m/z): 247(M+H) +。 步驟 5 ： (9,9- 二氟 -9H- 茀 -4- 羰基 ) 甘胺酸甲酯 (6)
向9,9-二氟-9H-茀-3-甲酸(120 mg，0.49 mmol)於EtOAc (2 mL)之溶液中添加甘胺酸甲酯鹽酸鹽(73 mg，0.584 mmol)、HATU (277 mg，0.74 mmol)及DIPEA (314 mg，2.45 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用EtOAc稀釋且用飽和NaHCO 3水溶液洗滌。將水層用EtOAc萃取且將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 15% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之(9,9-二氟-9H-茀-4-羰基)甘胺酸甲酯(60 mg，產率34.3%)。LC/MS (ESI) m/z: 318 (M+H) +。 步驟 6 ： (9,9- 二氟 -9H- 茀 -4- 羰基 ) 甘胺酸 (7)
向(9,9-二氟-9H-茀-4-羰基)甘胺酸甲酯(60 mg，0.18 mmol)於MeOH/THF/水(2 mL，2/1/1)之混合物中添加LiOH·H 2O (32 mg，0.72 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌4小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~4且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之(9,9-二氟-9H-茀-4-羰基)甘胺酸(45 mg，產率82.5%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 304 (M+H) +。 步驟 7 ： (2S,4R)-1-((9,9- 二氟 -9H- 茀 -4- 羰基 ) 甘胺醯基 )-4-( 二氟甲氧基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸甲酯 (9)
向(9,9-二氟-9H-茀-4-羰基)甘胺酸(45 mg，0.15 mmol)、(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸甲酯(43 mg，0.15 mmol)及DIPEA (96 mg，0.75 mmol)於DMF (2 mL)之溶液中添加T 3P (142 mg，0.23 mmol，DMF中50% wt.)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用EtOAc稀釋且用飽和NaHCO 3水溶液洗滌。將水層用EtOAc萃取且將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 – 4 % MeOH)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之(2S,4R)-1-((9,9-二氟-9H-茀-4-羰基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸甲酯(56 mg，產率77.8%)。LC/MS (ESI) m/z: 481 (M+H) +。 步驟 8 ： (2S,4R)-1-((9,9- 二氟 -9H- 茀 -4- 羰基 ) 甘胺醯基 )-4-( 二氟甲氧基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸 (10)
向(2S,4R)-1-((9,9-二氟-9H-茀-4-羰基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸甲酯(56 mg，0.12 mmol)於MeOH/THF/H 2O (2 mL，2/2/1)之溶液中添加LiOH·H 2O (20 mg，0.48 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌4小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~4且用乙酸乙酯萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之(2S,4R)-1-((9,9-二氟-9H-茀-4-羰基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸(46 mg，產率84.6%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 467 (M+H) +。 步驟 9 ： (2S,4R)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-1-((9,9- 二氟 -9H- 茀 -4- 羰基 ) 甘胺醯基 )-4-( 二氟甲氧基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 134)
在N 2氛圍下向(R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-胺(15 mg，0.049 mmol)及(2S,4R)-1-((9,9-二氟-9H-茀-4-羰基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸(23 mg，0.049 mmol)於DMF (0.6 mL)之混合物中添加DIPEA (38 mg，0.29 mmol)及HATU (20 mg，0.054 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。向混合物中添加LiOH (4.8 mg，0.20 mmol)、MeOH (0.5 mL)及水(0.1 mL)且將混合物在室溫下攪拌6小時。將混合物用EtOAc稀釋且用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 7: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 134(0.71 mg，產率2.4%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.55 (s, 1H), 7.95 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 7.76 (d, J= 4.4 Hz, 2H), 7.67 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 7.48 (d, J= 7.4 Hz, 2H), 7.24 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 7.17 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 6.95 (d, J= 6.3 Hz, 1H), 6.74 – 6.37 (m, 2H), 5.34 (d, J= 6.2 Hz, 1H), 5.10 (s, 1H), 4.61 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 4.44 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.28 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.04 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 3.96 (d, J= 11.2 Hz, 1H), 2.49 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 2.32 (d, J= 12.8 Hz, 1H), 1.62 (d, J= 6.8 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 610 (M+H) +。RT (方法A): 1.84 min。 流程 42. (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-(2-(3-(2,4- 二氟苯基 )-5- 側氧基 -5,7- 二氫 -6H- 吡咯并 [3,4-b] 吡啶 -6- 基 ) 乙醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 135) 之合成 步驟 1 ： 2-(3- 溴 -5- 側氧基 -5,7- 二氫 -6H- 吡咯并 [3,4-b] 吡啶 -6- 基 ) 乙酸三級丁酯 (2)
向含己烷洗滌之氫化鈉(60質量%)之油(93.88 mg，2.347 mmol，2.0當量)於THF (5 mL)之溶液中添加3-溴-6,7-二氫吡咯并[3,4-b]吡啶-5-酮(250.0 mg，1.174 mmol，1.0當量)。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘，然後冷卻至冰浴溫度。添加2-溴乙酸三級丁酯(0.4578 g，2.347 mmol，2.0當量)，使反應混合物溫熱至室溫，然後攪拌2小時，然後用水(10 mL)及EtOAc (10 mL)稀釋。分離兩層，且將水層用EtOAc (10 mL x 2)萃取。將合併之有機萃取物用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，且濃縮。藉由Combi Flash；12 g管柱，溶劑A= CH 2Cl 2，溶劑B= MeOH純化，100% A至5% B得到2-(3-溴-5-側氧基-7H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)乙酸三級丁酯(0.3456 g，1.056 mmol，90.00%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 328 (M+H) +。 步驟 2 ： 2-(3- 溴 -5- 側氧基 -5,7- 二氫 -6H- 吡咯并 [3,4-b] 吡啶 -6- 基 ) 乙酸 (3)
在冰浴溫度下將TFA (1.7 mL)添加至2-(3-溴-5-側氧基-7H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)乙酸三級丁酯(200.0 mg，0.6112 mmol，1.0當量)於CH 2Cl 2(3 mL)之溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌4小時，然後濃縮至乾，得到呈白色固體之2-(3-溴-5-側氧基-7H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)乙酸(0.1567 g，0.5781 mmol，94.57%產率)，其未經進一步純化用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 272 (M+H) +。 步驟 3 ： (2S,4R)-1-(2-(3- 溴 -5- 側氧基 -5,7- 二氫 -6H- 吡咯并 [3,4-b] 吡啶 -6- 基 ) 乙醯基 )-4-( 二氟甲氧基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸甲酯 (5)
向2-(3-溴-5-側氧基-7H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)乙酸(120.0 mg，0.4427 mmol，1.0當量)於DMF (5 mL)之溶液中添加(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸甲酯鹽酸鹽(123.0 mg，0.5310 mmol，1.2當量)、T3P (398.0 μL，0.665 mmol，1.5當量，乙酸乙酯中50質量%)及DIPEA (232.0 μL，1.33 mmol，3.0當量)。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘。將水(5 mL)添加至反應混合物中，藉由過濾收集固體，用水沖洗且乾燥，得到呈棕色固體之(2S,4R)-1-[2-(3-溴-5-側氧基-7H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)乙醯基]-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸甲酯(167.0 mg，0.3726 mmol，84.17%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 449 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-(2-(3-(2,4- 二氟苯基 )-5- 側氧基 -5,7- 二氫 -6H- 吡咯并 [3,4-b] 吡啶 -6- 基 ) 乙醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸 (6)
將2,4-二氟苯基)硼酸(14.80 mg，0.09372 mmol，1.2當量)、(2S,4R)-1-[2-(3-溴-5-側氧基-7H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)乙醯基]-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸甲酯(35.00 mg，0.07809 mmol，1.0當量)、Pd(PPh 3) 2dppf.CH 2Cl 2(6.440 mg，0.00781 mmol，0.1當量)、Na 2CO 3(16.55 mg，0.1561 mmol，2當量)於1,4-二噁烷(3 mL)及水(0.3 mL)中之混合物在微波反應器中於110℃攪拌30 min。反應經由矽藻土墊過濾。用水及EtOAc洗滌濾餅。分離兩層，且將水層用EtOAc萃取，用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥且濃縮，得到棕色油狀物。向棕色油狀物於MeOH (1.5 mL)及水(0.5 mL)之溶液中添加LiOH (2.244 mg，0.09370 mmol，2當量)。將反應混合物在室溫下攪拌隔夜，然後濃縮以移除MeOH。用EtOAc及H 2O稀釋殘餘物。分離兩層，且使用4M HCl將水層pH調節至1，然後用EtOAc萃取。將合併之有機萃取物用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥且濃縮，得到呈棕色油狀物之(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-[2-[3-(2,4-二氟苯基)-5-側氧基-7H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基]乙醯基]吡咯啶-2-甲酸(20.36 mg，0.04356 mmol，55.78%產率)，其未經進一步純化用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 468 (M+H) +。 步驟 5 ： (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-(2-(3-(2,4- 二氟苯基 )-5- 側氧基 -5,7- 二氫 -6H- 吡咯并 [3,4-b] 吡啶 -6- 基 ) 乙醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 135)
向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-[2-[3-(2,4-二氟苯基)-5-側氧基-7H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基]乙醯基]吡咯啶-2-甲酸(21.24 mg，0.04544 mmol 1.0當量)於DMF (2 mL)之溶液中添加1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基甲胺；二鹽酸鹽(10.00 mg，0.04543 mmol，1.0當量)、含T3P (50質量%)之乙酸乙酯(40.80 μL，0.0681 mmol，1.5當量)及DIPEA (23.8 μL，0.136 mmol，3.0當量)。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘，然後直接用製備型HPLC純化，得到 化合物 135(4.218 mg，0.007071 mmol，15.56%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 597 (M+H) +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.12 (s, 1H), 8.87 (d, J= 11.9 Hz, 1H), 8.84 – 8.42 (m, 2H), 8.18 (d, J= 12.5 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.93 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.78 – 7.65 (m, 1H), 7.42 (d, J= 10.5 Hz, 1H), 7.23 (d, J= 10.0 Hz, 2H), 7.01 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 6.74 (d, J= 15.0 Hz, 1H), 6.55 (d, J= 16.0 Hz, 3H), 6.30 (s, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.68 – 4.16 (m, 3H), 3.93 – 3.64 (m, 2H), 2.27 (d, J= 10.5 Hz, 1H), 2.11 (d, J= 8.1 Hz, 1H)。RT (方法A): 1.28 min。
基於流程42來製備以下化合物：
化合物編號 反應物A 反應物B 反應物C 反應物D 特性化資料
90 a,b 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.22 (s, 1H), 8.86 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 8.77 – 8.54 (m, 1H), 8.41 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.91 (dd, J= 8.3, 4.3 Hz, 1H), 7.70 – 7.47 (m, 1H), 7.32 (ddd, J= 11.5, 9.3, 2.5 Hz, 1H), 6.92 (d, J= 11.8 Hz, 1H), 6.73 (d, J= 11.8 Hz, 1H), 6.54 (d, J= 11.7 Hz, 1H), 6.31 (s, 1H), 5.13 (q, J= 7.3 Hz, 1H), 4.89 (d, J= 4.6 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.61 (t, J= 7.3 Hz, 1H), 4.39 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 4.20 – 4.09 (m, 2H), 3.99 (dd, J= 16.7, 5.6 Hz, 2H), 3.81 (td, J= 10.7, 5.3 Hz, 1H), 3.77 – 3.65 (m, 1H), 3.54 (dd, J= 12.7, 4.8 Hz, 1H), 2.55 – 2.34 (m, 2H), 2.32 – 2.16 (m, 1H), 2.09 (dt, J= 13.0, 5.7 Hz, 1H), 1.42 (d, J= 6.9 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 598 (M+H) +。RT (方法A): 1.40 min。
120 a 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.11 (s, 1H), 9.17 – 8.37 (m, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.75 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 7.67 (d, J= 11.1 Hz, 1H), 7.60 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.36 (t, J= 10.3 Hz, 1H), 7.19 (t, J= 8.7 Hz, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.33 (s, 1H), 4.85 – 4.07 (m, 5H), 4.03 – 3.64 (m, 3H), 3.60 (d, J= 10.2 Hz, 1H), 2.38 – 2.14 (m, 1H), 2.05 (dd, J= 13.3, 7.3 Hz, 1H), 1.58 – 1.16 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 588 (M+H) +。RT (方法A): 1.34 min。
138 c 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.16 (s, 1H), 9.04 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 8.80 – 8.46 (m, 2H), 8.44 – 8.19 (m, 2H), 8.25 – 7.65 (m, 2H), 7.46 – 7.17 (m, 1H), 7.21 – 6.91 (m, 1H), 6.74 (d, J= 15.4 Hz, 1H), 6.47 – 5.95 (m, 1H), 5.01 – 4.87 (m, 1H), 4.68 – 4.43 (m, 2H), 4.39 (dd, J= 14.5, 5.7 Hz, 2H), 3.85 (dd, J= 11.5, 4.6 Hz, 1H), 3.76 (d, J= 10.8 Hz, 1H), 2.37 – 2.24 (m, 1H), 2.16 – 2.06 (m, 1H), 1.38 (s, 1H), 1.16 (d, J= 4.9 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 579 (M+H) +。RT (方法A): 1.27 min。
a僅步驟3-5。 b使用HATU代替步驟3中之T 3P。 c僅步驟4及5。 流程 43. (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-N-( 噻吩并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 142) 之合成 步驟 1 ： N- 甲氧基 -N- 甲基噻吩并 [3,2-c] 吡啶 -2- 甲醯胺 (2)
向噻吩并[3,2-c]吡啶-2-甲酸(900 mg，5.03 mmol)於DMF (10 mL)之溶液中添加N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(735 mg，7.54 mmol)、HATU (2.86 g，7.54 mmol)及DIPEA (0.89 mL，15.1 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用EtOAc稀釋且用飽和NaHCO 3水溶液洗滌。分離各層，且用EtOAc萃取水層。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 30% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之N-甲氧基-N-甲基噻吩并[3,2-c]吡啶-2-甲醯胺(1.1 g，產率98.6%)。LC/MS (ESI) m/z: 223 (M+H) +。 步驟 2 ：噻吩并 [3,2-c] 吡啶 -2- 甲醛 (3)
在0℃下向N-甲氧基-N-甲基噻吩并[3,2-c]吡啶-2-甲醯胺(300 mg，1.68 mmol)於THF (3 mL)之溶液中逐滴添加DIBAL-H (5 mL，5.06 mmol，1 mol/L)且將混合物在此溫度下攪拌1小時。混合物用飽和酒石酸鉀鈉溶液淬滅且攪拌2小時。混合物用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 5 % MeOH)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之噻吩并[3,2-c]吡啶-2-甲醛(120 mg，產率43.8%)。LC/MS (ESI) m/z: 164 (M+H) +。 步驟 3 ： (E)-2- 甲基 -N-( 噻吩并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基亞甲基 ) 丙烷 -2- 亞磺醯胺 (4)
在0℃下向噻吩并[3,2-c]吡啶-2-甲醛(120 mg，0.74 mmol)及(R)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(223 mg，1.84 mmol)於THF (3 mL)之混合物中添加四異丙醇鈦(0.2 mL)且將混合物在70℃下攪拌6小時。將混合物用冰水淬滅且過濾漿液。將濾液用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 – 5 % MeOH)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之(E)-2-甲基-N-(噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基亞甲基)丙烷-2-亞磺醯胺(80 mg，產率40.6%)。LC/MS (ESI) m/z: 267 (M+H) +。 步驟 4 ： 2- 甲基 -N-( 噻吩并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基甲基 ) 丙烷 -2- 亞磺醯胺 (4)
向(E)-2-甲基-N-(噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基亞甲基)丙烷-2-亞磺醯胺(80 mg，0.30 mmol)於MeOH (3 mL)之溶液中添加NaBH 4(45 mg，1.2 mmol)且將反應混合物在0℃下攪拌1小時。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 5 % MeOH)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之2-甲基-N-(噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基甲基)丙烷-2-亞磺醯胺(50 mg，產率63.2%)。LC/MS (ESI) m/z: 269 (M+H) +。 步驟 5 ：噻吩并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基甲胺鹽酸鹽 (5)
將2-甲基-N-(噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基甲基)丙烷-2-亞磺醯胺(50 mg，0.18 mmol)於HCl/1,4-二噁烷(1 mL，4M)中之溶液在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基甲胺鹽酸鹽(35 mg，產率97.3%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 165 (M+H) +。 步驟 6 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-N-( 噻吩并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 142)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸(20 mg，0.045 mmol)及噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基甲胺鹽酸鹽(9.2 mg，0.045 mmol)於DMF (1 mL)之混合物中添加DIPEA (17.4 mg，0.14 mmol)及HATU (25.6 mg，0.07 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 142(2.1 mg，產率7.6%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.86 (s, 1H), 8.22 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 7.79 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 7.49 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.41 (s, 2H), 7.22 - 7.13 (m, 3H), 7.05 (dd, J= 16.3, 8.0 Hz, 2H), 6.51 (t, J= 74.5 Hz, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.77 (s, 1H), 4.62 (dd, J= 19.6, 11.8 Hz, 2H), 4.19 (s, 2H), 4.00 (d, J= 7.3 Hz, 1H), 3.88 (d, J= 11.2 Hz, 1H), 2.49 (dd, J= 13.8, 7.7 Hz, 1H), 2.32 - 2.21 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 611 (M+H) +。RT (方法A): 1.57 min。 流程 44. (2S,3R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-3- 羥基 -1-((4- 苯氧基苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 151) 之合成 步驟 1 ： (2S,3R)-3- 羥基吡咯啶 -2- 甲酸甲酯 (2)
向(2S,3R)-3-羥基吡咯啶-2-甲酸(100 mg，0.76260 mmol)於甲醇(10 mL)之溶液中添加亞硫醯氯(0.064 mL，1.15當量)。將反應混合物加熱至70℃隔夜，得到葡萄酒色溶液。藉由在減壓下濃縮移除溶劑，將所得殘餘物與甲醇共沸兩次，得到呈粉色蠟狀物之(2S,3R)-3-羥基吡咯啶-2-甲酸甲酯(160 mg，86.7 %產率)。LC/MS (ESI) m/z: 146 (M+H) +。 步驟 2 ： (2S,3R)-3- 羥基 -1-((4- 苯氧基苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸甲酯 (3)
在室溫下向2-[(4-苯氧基苄醯基)胺基]乙酸(0.085 g，0.31 mmol)、(2S,3R)-3-羥基吡咯啶-2-甲酸甲酯(30 mg，0.20667 mmol)及HATU (100 mg，0.31 mmol)之溶液中添加DIPEA (0.11 mL，0.63 mmol)。將反應混合物攪拌18小時。用水稀釋反應混合物，將粗物質濃縮且在C-18管柱(含10至100%乙腈之水)上純化，得到呈黃色蠟狀物之(2S,3R)-3-羥基-1-[2-[(4-苯氧基苄醯基)胺基]乙醯基]吡咯啶-2-甲酸甲酯(160 mg，0.2 mmol，97.2 %產率)。LC/MS (ESI) m/z: 399 (M+H) +。 步驟 3 ： (2S,3R)-3- 羥基 -1-((4- 苯氧基苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸 (4)
向(2S,3R)-3-羥基-1-[2-[(4-苯氧基苄醯基)胺基]乙醯基]吡咯啶-2-甲酸甲酯(84 mg，0.2108 mmol)於MeOH (1 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH∙H 2O (88 mg，2.1 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌18小時。將反應混合物冷凍乾燥72小時，得到呈白色固體之(2S,3R)-3-羥基-1-[2-[(4-苯氧基苄醯基)胺基]乙醯基]吡咯啶-2-甲酸(82 mg，＞理論)。此物質未經進一步純化用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z = 385 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S,3R)-3- 羥基 -1-[2-[(4- 苯氧基苄醯基 ) 胺基 ] 乙醯基 ]-N-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 151)
在室溫下向(2S,3R)-3-羥基-1-[2-[(4-苯氧基苄醯基)胺基]乙醯基]吡咯啶-2-甲酸(82 mg，0.2133 mmol)、TBTU (200 mg，0.32 mmol)及[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]甲胺鹽酸鹽(83 mg，0.26 mmol)於DMF (1 mL)之溶液中。將反應混合物攪拌30分鐘且用水稀釋。混合物用乙酸乙酯萃取兩次。將兩層混合物在室溫下攪拌18小時。LC/MS分析表明，大多數產物主要由於前一步驟中使用額外量的鹼而失去保護。混合物首先在C-18管柱(水中之0至100%乙腈)上純化且將富集之部分濃縮在一起。再次在製備型HPLC上純化殘留之殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 151(2 mg，1.8%產率)。 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.61 (m, 1H), 8.50 (t, J= 9.8 Hz, 1H), 8.26 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 8.00 (dd, J= 18.5, 5.6 Hz, 1H), 7.88 – 7.76 (m, 2H), 7.38 (t, J= 7.7 Hz, 2H), 7.26 – 7.11 (m, 2H), 6.99 (m, 3H), 6.40 (m, 1H), 4.59 – 4.21 (m, 2H), 4.15 – 3.89 (m, 2H), 3.66 (s, 2H), 2.14 – 1.68 (m, 2H)。LC/MS (ESI) m/z = 514 (M+H) +。RT (方法A): 1.23 min。
基於流程44來製備以下化合物：
化合物編號 反應物A 反應物B 反應物C 特性化資料
214 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.06 (s, 1H), 8.72 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 8.58 (s, 1H), 8.52 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 7.91 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.62 – 7.48 (m, 3H), 7.33 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.30 – 7.15 (m, 4H), 7.07 (dd, J = 7.8, 4.3 Hz, 2H), 6.15 (s, 1H), 4.61 – 4.26 (m, 4H), 4.22 (dd, J = 16.9, 5.8 Hz, 1H), 4.02 (dd, J = 16.6, 5.6 Hz, 1H), 3.82 – 3.57 (m, 2H), 3.41 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 2.37 – 2.26 (m, 1H), 2.02 (dd, J = 12.4, 7.3 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 604 (M+H) +。RT (方法A): 1.61 min。
242 1H-NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.51 (m, 3H), 7.89 (s, 1H), 7.53 – 7.23 (m, 2H), 7.20 – 7.03 (m, 2H), 7.03 – 6.89 (m, 2H), 6.56 (s, 1H), 4.57 (d, J = 4.7 Hz, 2H), 4.50 (s, 2H), 4.11 (s, 2H), 3.88 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 3.81 – 3.65 (m, 2H), 2.37 – 2.23 (m, 1H), 2.22 – 2.10 (m, 1H), 1.66 (dd, J = 12.4, 8.3 Hz, 1H), 1.13 (d, J = 6.7 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 542.3 (M+H) +。RT (方法A): 1.30 min。
243 1H-NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.64 (m, 4H), 7.67 – 7.36 (m, 2H), 7.32 – 7.00 (m, 3H), 4.59 – 4.37 (m, 4H), 4.27 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 2.12 (m, 4H), 1.47 (d, J = 6.5 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 542.3 (M+H) +。RT (方法A): 1.29 min。
261 1H-NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.49 (m, 1H), 7.90 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.30 (s, 3H), 7.21 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.16 – 6.87 (m, 3H), 6.50 (m, 1H), 6.05 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 5.84 (s, 1H), 5.11 (s, 2H), 4.21 – 4.01 (m, 2H), 1.4 (m, 2H)。LC/MS (ESI) m/z = 526 (M+H) +。RT (方法A): 1.28 min。
流程 45. (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((3-(4- 氟苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 154) 之合成 步驟 1 及 2 ： (2S,4R)-2-(((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 胺甲醯基 )-4-( 二氟甲氧基 ) 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯 (3)
向(2S,4R)-1-三級丁氧基羰基-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸(0.1129 g，0.4014 mmol，1.0當量)於DMF (2 mL)之溶液中添加[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]甲胺鹽酸鹽(0.1300 g，0.4015 mmol，1.0當量)、含T3P (50質量%)之乙酸乙酯(361 μL，0.603 mmol，1.5當量)及DIPEA (0.210 mL，1.20 mmol，3.0當量)。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘，然後用水稀釋。傾析濾液，且用水洗滌殘餘物，經Na 2SO 4乾燥且濃縮，得到棕色油狀物，其未經進一步純化用於下一反應。向含以上所獲得之棕色油狀物之THF (1.5 mL)及水(0.5 mL)中添加LiOH (19.23 mg，0.8030 mmol，2當量)，將反應混合物在室溫下攪拌隔夜，然後濃縮以移除THF。使用4M HCl將pH調節至1，濃縮且藉由製備型HPLC純化，得到(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-2-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基甲基胺甲醯基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(0.1150 g，0.2802 mmol，69.79%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 411 (M+H) +。 步驟 3 ： (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 (4)
在冰浴溫度下將TFA (0.5 mL)添加至(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-2-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基甲基胺甲醯基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(0.1000 g，0.2437 mmol，1.0當量)於CH 2Cl 2(1 mL)之溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌3小時，然後濃縮至乾，得到呈透明油狀物之(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺(75 mg，0.2417 mmol，100質量%，99.19%產率)，其未經進一步純化用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 311(M+H) +。 步驟 4 ： (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((3-(4- 氟苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 154)
向2-[[3-(4-氟苯氧基)苄醯基]胺基]乙酸(10.00 mg，0.03457 mmol，1.0當量)於DMF (2 mL)之溶液中添加含(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺鹽酸鹽(B，11.99 mg，0.03457 mmol，1.0當量)、T3P (50質量%)之乙酸乙酯(31.00 μL，0.0518 mmol，1.5當量)及DIPEA (18.10 μL，0.104 mmol，3.0當量)。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘，然後直接藉由製備型HPLC純化，得到 化合物 154(4.125 mg，0.007094 mmol，100質量%，20.52%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 582 (M+H) +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.66 (s, 1H), 8.89 – 8.45 (m, 4H), 8.15 (s, 1H), 7.68 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 7.50 (q, J= 9.5 Hz, 3H), 7.31 – 7.17 (m, 4H), 7.11 (dd, J= 8.7, 4.7 Hz, 3H), 7.01 (s, 1H), 6.82 (s, 1H), 6.67 – 6.45 (m, 2H), 4.98 (s, 1H), 4.46 (d, J= 8.6 Hz, 3H), 4.29 – 3.42 (m, 3H), 2.39 – 2.28 (m, 3H), 2.21 – 2.06 (m, 2H)。RT (方法A): 1.50 min。
基於流程45來製備化合物240：
化合物編號 反應物A 反應物B 反應物C 特性化資料
240 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.99 (s, 1H), 8.77 (t, J= 5.8 Hz, 1H), 8.62 (d, J= 10.7 Hz, 2H), 8.46 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.86 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.52 – 7.37 (m, 2H), 7.25 – 7.10 (m, 4H), 7.09 – 6.98 (m, 3H), 6.96 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 6.37 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 5.08 (h, J= 7.4 Hz, 1H), 4.32 (t, J= 8.1 Hz, 1H), 4.13 (dd, J= 16.7, 6.0 Hz, 1H), 3.98 – 3.77 (m, 6H), 3.75 (d, J= 10.9 Hz, 1H), 3.57 (d, J= 10.8 Hz, 1H), 2.36 – 2.13 (m, 1H), 2.05 (dd, J= 12.9, 8.3 Hz, 1H), 1.38 (d, J= 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 588 (M+H) +。RT (方法A): 1.29 min。
a使用Pd/C代替含TFA之DCM在MeOH中進行步驟2中之脫除保護基反應。 流程 46. (2S,3R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-3- 羥基 -1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 158) 之合成 步驟 1 ： 3- 溴啡㗁噻 (2)
在密封管中，將叔丁醇鉀(5.47 g，48.7 mmol)在室溫下添加至2-羥基苯硫酚(3 g，23.8 mmol)於DMF (120 mL)之溶液中。攪拌30分鐘後，添加1,4-二溴-2-硝基苯(7 g，24.9mmol)且將混合物又攪拌20分鐘。將深色懸浮液加熱至150℃歷時65小時。冷卻至室溫後，將反應混合物用水(800 mL)稀釋，攪拌20分鐘。過濾黃色沉澱物且再溶解於DCM中，用飽和鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾，且濃縮，得到呈黃色固體之3-溴啡㗁噻(5 g，75.3%產率)。LC/MS上未觀察到質量。 步驟 2 ：啡㗁噻 -3- 甲腈 (3)
將氰化亞銅(150 mg，1.6 mmol)及3-溴啡㗁噻(0.23 g，0.82 mmol)於DMF (2 mL)中之混合物加熱至回流歷時15小時。冷卻至室溫後，用水稀釋混合物且藉由過濾移除不溶性固體。將濾液用乙酸乙酯萃取兩次。將合併之有機層用飽和鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾，且濃縮，得到呈黃色固體之啡㗁噻-3-甲腈(90 mg，48%產率)。LC/MS上未觀察到質量。 步驟 3 ：啡㗁噻 -3- 甲酸 (4)
向啡㗁噻-3-甲腈(90 mg，0.4 mmol)於EtOD (0.8 g，20 mmol)及水(5 mL)之溶液中添加KOH (0.11 g，2.0 mmol)。將反應混合物加熱至回流歷時5小時。將混合物在減壓下濃縮，用水稀釋且用乙酸乙酯萃取兩次。將合併之有機層用鹽水，飽和鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾，且濃縮，得到呈橘色固體之啡㗁噻-3-甲酸(100 mg，＞理論)。 步驟 4 ： ( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺酸三級丁酯 (5)
在室溫下向啡㗁噻-3-甲酸(100 mg，0.41 mmol) 、2-胺基乙酸 三級丁酯(100 mg，0.82 mmol)及HATU (200 mg，0.61 mmol)於DMF (1.1 mL)之溶液中添加DIPEA (0.27 mL，1.23 mmol)。30分鐘後，用水稀釋反應混合物且用乙酸乙酯萃取三次。將合併之有機層用飽和鹽水洗滌，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物在矽膠(庚烷中之0至80%乙酸乙酯)上純化，得到呈黃色固體之2-(啡㗁噻-3-羰基胺基)乙酸 三級丁酯(31 mg，21.2%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 358 (M+H) +。 步驟 5 ： 2-( 啡㗁噻 -3- 羰基胺基 ) 乙酸 (6)
在室溫下向2-(啡㗁噻-3-羰基胺基)乙酸三級丁酯(31 mg，0.087 mmol)於DCM (0.3 mL)之溶液中添加TFA (0.12 mL，1.6 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌18小時。藉由在減壓下濃縮來移除揮發物。將殘餘物與二氯甲烷共沸兩次，得到呈黃色固體之2-(啡㗁噻-3-羰基胺基)乙酸(26 mg，99%產率)。此物質未經進一步純化用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 302 (M+H) +。 步驟 6 ： (2S,3R)-3- 羥基 -1-[2-( 啡㗁噻 -3- 羰基胺基 ) 乙醯基 ] 吡咯啶 -2- 甲酸甲酯 (7)
在室溫下向2-(啡㗁噻-3-羰基胺基)乙酸(26 mg，0.086 mmol)、(2S,3R)-3-羥基吡咯啶-2-甲酸甲酯(30 mg，0.20667 mmol)、HATU (1.5當量, 0.13 mmol)於DMF (1 mL)之溶液中添加DIPEA (0.05 mL，0.26 mmol)。將反應混合物攪拌30分鐘，且粗反應混合物在C-18管柱(水中之0至100%乙腈)上直接純化，得到呈黃色蠟狀物之(2S,3R)-3-羥基-1-[2-(啡㗁噻-3-羰基胺基)乙醯基]吡咯啶-2-甲酸甲酯(60 mg，＞理論)。LC/MS (ESI) m/z = 429 (M+H) +。 步驟 7 ： (2S,3R)-3- 羥基 -1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸 (8)
在室溫下向(2S,3R)-3-羥基-1-[2-(啡㗁噻-3-羰基胺基)乙醯基]吡咯啶-2-甲酸甲酯(60 mg，0.09 mmol)於MeOH (0.25 mL)、水(0.25 mL)及THF (0.25 mL)之溶液中添加LiOH∙H 2O (43 mg，0.1 mmol)。將反應混合物攪拌18小時。在減壓下移除溶劑，且與甲醇共沸三次，得到呈黃色固體之(2S,3R)-3-羥基-1-[2-(啡㗁噻-3-羰基胺基)乙醯基]吡咯啶-2-甲酸(40 mg，理論產率)。LC/MS (ESI) m/z: 415 (M+H) +。 步驟 8 ： (2S,3R)-N-[[1-( 苯磺醯基 ) 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ] 甲基 ]-3- 羥基 -1-[2-( 啡㗁噻 -3- 羰基胺基 ) 乙醯基 ] 吡咯啶 -2- 甲醯胺 (9)
在0℃下向(2S,3R)-3-羥基-1-[2-(啡㗁噻-3-羰基胺基)乙醯基]吡咯啶-2-甲酸(40 mg，0.097 mmol)、HATU (73 mg，0.19 mmol)及[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]甲胺鹽酸鹽(45 mg，0.1324 mmol)於DMF (2 mL)之溶液中添加DIPEA (0.06 mL，0.34 mmol)。將反應混合物在0℃下攪拌30分鐘。反應混合物在C-18管柱(水中之0至35%乙腈)上直接純化，得到呈黃色固體之(2S,3R)-N-[[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]甲基]-3-羥基-1-[2-(啡㗁噻-3-羰基胺基)乙醯基]吡咯啶-2-甲醯胺(50 mg，75.8%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 684 (M+H) +。 步驟 9 ： (2S,3R)-3- 羥基 -1-[2-( 啡㗁噻 -3- 羰基胺基 ) 乙醯基 ]-N-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 158)
在室溫下向(2S,3R)-N-[[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]甲基]-3-羥基-1-[2-(啡㗁噻-3-羰基胺基)乙醯基]吡咯啶-2-甲醯胺(50 mg，0.073 mmol)於水(0.25 mL)、MeOH (0.25 mL)及THF (0.25 mL)之溶液中添加LiOH∙H 2O (40 mg，0.095 mmol)。將混合物攪拌18小時。將混合物在減壓下濃縮，用DMSO及水稀釋，過濾且在製備型HPLC上純化，得到呈白色固體之 化合物 158(3.5 mg，8.5%產率)。 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.13 (s, 1H), 8.82 – 8.54 (m, 2H), 8.40 – 8.26 (m, 1H), 8.13 – 7.91 (m, 1H), 7.71 – 7.49 (m, 2H), 7.46 – 7.08 (m, 6H), 6.45 (m, 1H), 4.59 – 4.29 (m, 2H), 4.26 – 3.96 (m, 2H), 3.81 – 3.52 (m, 2H), 2.10 – 1.86 (m, 2H)。LC/MS (ESI) m/z = 544 (M+H) +。RT (方法A): 1.27 imn。 流程 47. (5-((R)-1-((1S,3S,5S)-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基苄醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺基 ) 乙基 ) 噻吩 -3- 基 ) 硼酸 ( 化合物 163) 之合成 步驟 1 ： (R)-1-(4- 溴噻吩 -2- 基 ) 乙 -1- 胺鹽酸鹽 (2)
向N-((R)-1-(4-溴噻吩-2-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(50 mg，0.16 mmol)於DCM (1 mL)之溶液中添加HCl/1,4-二噁烷(1 mL，4M)且將反應混合物在室溫下攪拌3小時。將混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(65 mg，粗品)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 241 (M+H) +。 步驟 2 ： (1S,3S,5S)-N-((R)-1-(4- 溴噻吩 -2- 基 ) 乙基 )-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基苄醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 (3)
在0℃下向(1S,3S,5S)-5-甲基-2-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸(65 mg，0.16 mmol)及(R)-1-(4-溴噻吩-2-基)乙-1-胺鹽酸鹽(40 mg，0.20 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (128 mg，0.99 mmol)及HATU (76 mg，0.20 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(60 mg，產率62.7%)。LC/MS (ESI) m/z: 582 (M+H) +。 步驟 3 ： (1S,3S,5S)-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基苄醯基 ) 甘胺醯基 )-N-((R)-1-(4-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧雜硼雜環戊烷 -2- 基 ) 噻吩 -2- 基 ) 乙基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 (4)
向(1S,3S,5S)-N-((R)-1-(4-溴噻吩-2-基)乙基)-5-甲基-2-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺(60 mg，0.10 mmol)及4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-雙(1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷) (79 mg，0.31 mmol)於1,4-二噁烷(2 mL)之混合物中添加X-phos (10 mg，0.02 mmol)、Pd 2(dba) 3(10 mg，0.01 mmol)及KOAc (31 mg，0.31 mmol)，混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在80℃下攪拌隔夜。將混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (PE: EtOAc= 11: 1)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(50 mg，產率76.9%)。LC/MS (ESI) m/z:630 (M+H) +。 步驟 4 ： (5-((R)-1-((1S,3S,5S)-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基苄醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺基 ) 乙基 ) 噻吩 -3- 基 ) 硼酸 ( 化合物 163)
向(1S,3S,5S)-5-甲基-2-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-N-((R)-1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)噻吩-2-基)乙基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺(40 mg，0.06 mmol)於THF/H 2O (2 mL，1/1)之溶液中添加NaIO 4(28 mg，0.13 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用Na 2S 2O 3淬滅且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(1.1 mg，產率3.2%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.83 (d, J= 7.6 Hz, 2H), 7.64 (s, 1H), 7.41 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 7.22 – 7.16 (m, 2H), 7.06 (d, J= 7.2 Hz, 2H), 6.99 (d, J= 7.6 Hz, 2H), 5.24 (s, 1H), 4.78 (s, 1H), 4.39 (s, 1H), 4.27 (s, 1H), 3.37 (s, 1H), 2.37 (d, J= 12.6 Hz, 1H), 2.13 (d, J= 12.9 Hz, 1H), 1.57 (d, J= 6.3 Hz, 3H), 1.29 (s, 3H), 1.26 – 1.24 (m, 1H), 0.82 – 0.76 (m, 1H)。RT (方法A): 0.34 min。 流程 48. (R)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-3,3- 二甲基 -1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,3- 氮雜矽雜環戊烷 -5- 甲醯胺 ( 化合物 168) 之合成 步驟 1 ： (R)-3,3- 二甲基 -1,3- 氮雜矽雜環戊烷 -1,5- 二甲酸 1-( 三級丁基 ) 酯 5- 甲酯 (2)
在0℃下向(R)-1-( 三級丁氧基羰基)-3,3-二甲基-1,3-氮雜矽雜環戊烷-5-甲酸(50 mg，0.19 mmol)於THF (2 mL)及MeOH (2 mL)之溶液中添加TMSCHN 2(0.2 mL，0.40 mmol，己烷中2M)且將混合物在0℃下攪拌1小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 25% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之標題化合物(45 mg，產率86.5%)。LC/MS (ESI) m/z: 274 (M+H) +。 步驟 2 ： (R)-3,3- 二甲基 -1,3- 氮雜矽雜環戊烷 -5- 甲酸甲酯鹽酸鹽 (3)
將(R)-3,3-二甲基-1,3-氮雜矽雜環戊烷-1,5-二甲酸1-(三級丁基)酯5-甲酯(45 mg，0.16 mmol)於HCl/1,4-二噁烷(3 mL，4M)中之溶液在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(34 mg，產率98.7%)，其未經進一步純化直接用於下一反應。LC/MS (ESI) m/z: 174 (M+H) +。 步驟 3 ： (R)-3,3- 二甲基 -1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,3- 氮雜矽雜環戊烷 -5- 甲酸甲酯 (4)
在N 2氛圍，0℃下向(R)-3,3-二甲基-1,3-氮雜矽雜環戊烷-5-甲酸甲酯鹽酸鹽(34 mg，0.16 mmol)及(啡㗁噻-3-羰基)甘胺酸(53 mg，0.18 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (116 mg，0.90 mmol)及T 3P (153 mg，0.24 mmol，EtOAc中50% wt.)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用飽和NaHCO 3水溶液淬滅且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之(R)-3,3-二甲基-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,3-氮雜矽雜環戊烷-5-甲酸甲酯(30 mg，產率40.5%)。LC/MS (ESI) (m/z): 457 (M+H) +。 步驟 4 ： (R)-3,3- 二甲基 -1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,3- 氮雜矽雜環戊烷 -5- 甲酸 (5)
在N 2氛圍下向(R)-3,3-二甲基-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,3-氮雜矽雜環戊烷-5-甲酸甲酯(30 mg，0.066 mmol)於THF/MeOH/H 2O (4 mL，2/1/1)之溶液中添加LiOH·H 2O (11 mg，0.26 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，且在減壓下濃縮，得到呈淺黃色油狀物之標題化合物(29 mg，產率99.76%)，其未經進一步純化直接用於下一反應。LC/MS (ESI) m/z: 443 (M+H) +。 步驟 5 ： (R)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-3,3- 二甲基 -1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,3- 氮雜矽雜環戊烷 -5- 甲醯胺 ( 化合物 168)
在N 2氛圍下向(R)-3,3-二甲基-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,3-氮雜矽雜環戊烷-5-甲酸(22 mg，0.050 mmol)於DMF (0.7 mL)之溶液中添加(R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-胺(15 mg，0.049 mmol)、DIPEA (38 mg，0.29 mmol)及HATU (20 mg，0.054 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌10分鐘。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM中之10% MeOH)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 168(3 mg，產率10.5%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.69 (d, J= 19.2 Hz, 1H), 7.91 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.64 - 7.53 (m, 2H), 7.27 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.17 (dd, J= 17.5, 7.9 Hz, 3H), 7.08 (t, J= 7.1 Hz, 1H), 7.03 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 6.51 (d, J= 27.7 Hz, 1H), 5.25 (d, J= 6.3 Hz, 1H), 4.81 - 4.78 (m, 1H), 4.43 (d, J= 17.2 Hz, 1H), 4.23 (d, J= 17.0 Hz, 1H), 3.00 (d, J= 15.1 Hz, 2H), 1.60 (d, J= 6.7 Hz, 2H), 1.36 (d, J= 5.8 Hz, 3H), 0.32 (s, 6H)。LC/MS (ESI) m/z: 586 (M+H) +。RT (方法A): 1.60 min。 流程 49. (2S,4S)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-4- 苯基吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 169) 之合成 步驟 1 ： (2S,4S)-4- 苯基吡咯啶 -1,2- 二甲酸 2- 苄酯 1-( 三級丁基 ) 酯 (2)
在N 2氛圍下向(2S,4S)-1-(三級丁氧基羰基)-4-苯基吡咯啶-2-甲酸(150 mg，0.51 mmol)於DMF (2 mL)之溶液中添加BnBr (260 mg，1.5 mmol)及DIPEA (193 mg，1.5 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 15% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(150 mg，產率77.2%)。LC/MS (ESI) m/z: 382 (M+H) +。 步驟 2 ： (2S,4S)-4- 苯基吡咯啶 -2- 甲酸苄酯鹽酸鹽 (3)
將(2S,4S)-4-苯基吡咯啶-1,2-二甲酸2-苄酯1-(三級丁基)酯(150 mg，0.39 mmol)於HCl/1,4-二噁烷(2 mL，4M)中之溶液在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色油狀物之標題化合物(124 mg，產率99.0%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 182 (M+H) +。 步驟 3 ： (2S,4S)-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-4- 苯基吡咯啶 -2- 甲酸苄酯 (4)
在N 2氛圍下向(2S,4S)-4-苯基吡咯啶-2-甲酸苄酯鹽酸鹽(47 mg，0.14 mmol)及(啡㗁噻-3-羰基)甘胺酸(50 mg，0.16 mmol)於DMF (1.5 mL)之混合物中添加DIPEA (93 mg，0.72 mmol)及HATU (61 mg，0.16 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM中之5% MeOH)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(60 mg，產率73.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 565 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S,4S)-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-4- 苯基吡咯啶 -2- 甲酸 (5)
在N 2氛圍下向(2S,4S)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-4-苯基吡咯啶-2-甲酸苄酯(60 mg，0.11 mmol)於MeOH/H 2O (3 mL，1/1)之溶液中添加LiOH·H 2O (12 mg，0.30 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(40 mg，產率79.6%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 475 (M+H) +。 步驟 5 ： (2S,4S)-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-4- 苯基 -N-((R)-1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 (6)
在N 2氛圍下向(2S,4S)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-4-苯基吡咯啶-2-甲酸(40 mg，0.084 mmol)及(R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-胺於DMF (0.8 mL)之混合物中添加DIPEA (54 mg，0.42 mmol)及HATU (38 mg，0.10 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM中之8% MeOH)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(20 mg，產率31.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 758 (M+H) +。 步驟 5 ： (2S,4S)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-4- 苯基吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 169)
向(2S,4S)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-4-苯基-N-((R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)吡咯啶-2-甲醯胺(20 mg，0.15 mmol)於MeOH/H 2O (6 mL，1/1)之溶液中添加LiOH·H 2O (12 mg，0.30 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 169(4.0 mg，產率24.5%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.67 (d, J= 15.3 Hz, 1H), 8.00 (t, J= 17.9 Hz, 1H), 7.60 - 7.48 (m, 2H), 7.33 (s, 4H), 7.19 (dd, J= 32.7, 12.9 Hz, 5H), 7.05 (dd, J= 22.2, 7.3 Hz, 2H), 6.56 (d, J= 22.7 Hz, 1H), 5.31 (d, J= 6.6 Hz, 1H), 4.66 (s, 1H), 4.32 - 4.07 (m, 3H), 3.94 - 3.66 (m, 2H), 2.61 - 2.37 (m, 2H), 1.63 (dd, J= 24.4, 6.5 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 618 (M+H) +。RT (方法A): 1.73 min。 流程 50. (2S,4R)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-4-( 環丙基磺醯基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 174) 之合成 步驟 1 ： (2S,4R)-4-( 環丙基磺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸甲酯鹽酸鹽 (2)
將(2S,4R)-4-(環丙基磺醯基)吡咯啶-1,2-二甲酸1-( 三級丁基)酯2-甲酯(100 mg，0.30 mmol)於HCl/1,4-二噁烷(2 mL，4M)中之溶液在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色固體之標題化合物(68 mg，產率97.2%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 234 (M+H) +。 步驟 2 ： (2S,4R)-4-( 環丙基磺醯基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸甲酯 (3)
在N 2氛圍，0℃下向(啡㗁噻-3-羰基)甘胺酸(40 mg，0.13 mmol)及(2S,4R)-4-(環丙基磺醯基)吡咯啶-2-甲酸甲酯鹽酸鹽(46 mg，0.20 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (103 mg，0.78 mmol)及T 3P (127 mg，0.20 mmol，EtOAc中50% wt.)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用飽和NaHCO 3水溶液淬滅且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 60% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(50 mg，產率72.9%)。LC/MS (ESI) (m/z): 517 (M+H) +。 步驟 3 ： (2S,4R)-4-( 環丙基磺醯基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸 (4)
向(2S,4R)-4-(環丙基磺醯基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸甲酯(50 mg，0.10 mmol)於MeOH (4 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH·H 2O (12 mg，0.30 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(40 mg，產率82.3%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 503 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S,4R)-4-( 環丙基磺醯基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-N-((R)-1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 (5)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-4-(環丙基磺醯基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸(40 mg，0.08 mmol)及(R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-胺鹽酸鹽(36 mg，0.12 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (62 mg，0.48 mmol)及HATU (36 mg，0.10 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NH 4Cl水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化殘餘物，得到呈黃色固體之標題化合物(45 mg，產率71.9%)。LC/MS (ESI) m/z: 786 (M+H) +。 步驟 5 ： (2S,4R)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-4-( 環丙基磺醯基 ) -1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 174)
向(2S,4R)-4-(環丙基磺醯基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-((R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)吡咯啶-2-甲醯胺(45 mg，0.06 mmol)於MeOH (2 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH·H 2O (7 mg，0.18 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 174(8 mg，產率21.6%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.89 (d, J= 18.0 Hz, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.06 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 7.53 (d, J= 7.5 Hz, 3H), 7.18 (d, J= 19.8 Hz, 3H), 7.05 (d, J= 29.8 Hz, 2H), 6.83 (s, 1H), 5.32 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.25 (d, J= 29.4 Hz, 5H), 4.14 - 3.98 (m, 1H), 2.78 (s, 1H), 2.48 (s, 1H), 1.71 - 1.61 (m, 3H), 1.18 (d, J= 18.4 Hz, 4H)。LC/MS (ESI) m/z: 646 (M+H) +。RT (方法A): 1.39 min。
基於流程50來製備以下化合物：
化合物編號 反應物A 反應物B 反應物C 特性化資料
176 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.67 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 7.98 (t, J= 21.4 Hz, 1H), 7.54 (dd, J= 23.9, 15.7 Hz, 2H), 7.26 - 7.14 (m, 4H), 7.06 (dd, J= 21.6, 7.4 Hz, 2H), 6.56 (d, J= 26.2 Hz, 1H), 5.28 (d, J= 7.1 Hz, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.16 (ddd, J= 31.9, 26.5, 13.1 Hz, 3H), 3.88 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 3.46 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 2.40 (dd, J= 25.8, 18.9 Hz, 2H), 1.63 (dd, J= 22.9, 6.3 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 610 (M+H) +。RT (方法A): 1.55 min。
178 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.67 (d, J= 15.5 Hz, 1H), 7.93 - 7.85 (m, 2H), 7.59 (d, J= 10.9 Hz, 2H), 7.26 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 7.21 - 7.15 (m, 2H), 7.10 (s, 3H), 7.03 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 6.51 (s, 1H), 5.28 (d, J= 7.1 Hz, 1H), 4.55 (t, J= 8.2 Hz, 1H), 4.42 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.28 (t, J= 8.7 Hz, 1H), 4.15 (d, J= 16.0 Hz, 1H), 3.96 (t, J= 9.9 Hz, 1H), 3.82 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 2.76 (s, 1H), 2.36 (d, J= 11.1 Hz, 1H), 1.60 (d, J= 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 609 (M+H) +。RT (方法A): 1.35 min。
180 b 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.10 (s, 1H), 8.86 (s, 1H), 8.73 - 8.64 (m, 3H), 8.54 (s, 1H), 7.87 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.64 (s, 2H), 7.47 - 7.38 (m, 1H), 7.36 - 7.24 (m, 6H), 7.13 (d, J= 8.1 Hz, 3H), 7.00 (d, J= 7.7 Hz, 3H), 6.95 (d, J= 5.6 Hz, 2H), 6.40 (s, 1H), 5.16 (dd, J= 20.0, 12.0 Hz, 2H), 4.48 (t, J= 8.4 Hz, 1H), 4.25 (dd, J= 17.1, 6.1 Hz, 1H), 4.06 (d, J= 6.7 Hz, 1H), 4.01 (d, J= 5.4 Hz, 1H), 3.90 (d, J= 11.4 Hz, 2H), 2.03 - 1.95 (m, 2H), 1.47 (d, J= 7.0 Hz, 4H)。LC/MS (ESI) m/z: 634 (M+H) +。RT (方法A): 1.74 min。
183 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.78 (dd, J= 78.1, 10.4 Hz, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.05 (dd, J= 14.3, 8.4 Hz, 2H), 7.76 (d, J= 9.5 Hz, 1H), 7.53 - 7.48 (m, 1H), 7.38 - 7.33 (m, 1H), 7.24 - 7.15 (m, 2H), 7.09 (t, J= 6.2 Hz, 2H), 7.02 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 6.75 (dd, J= 42.7, 16.3 Hz, 1H), 5.34 (s, 1H), 4.62 (dd, J= 17.3, 6.3 Hz, 2H), 4.52 (d, J= 10.0 Hz, 1H), 4.29 - 4.19 (m, 1H), 4.06 (dd, J= 36.3, 18.2 Hz, 2H), 3.66 (dd, J= 22.6, 10.8 Hz, 1H), 3.10 - 2.98 (m, 1H), 2.21 (d, J= 6.9 Hz, 1H), 1.69 (dd, J= 18.1, 10.7 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 623 (M+H) +。RT (方法A): 1.84 min。
a僅步驟5。 b使用HATU代替步驟2中之T 3P。 流程 51. (1S,3S,5S)-N-((2- 胺基 -1H- 苯并 [d] 咪唑 -6- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -2-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 181) 之合成 步驟 1 ： 2- 胺基 -1H- 苯并 [d] 咪唑 -6- 甲腈 (2)
在N 2氛圍下向3,4-二胺基苯甲腈(550 mg，4.14 mmol)及BrCN (525 mg，4.96 mmol)於MeOH (8 ml)之混合物中，混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在50℃下攪拌隔夜。將反應混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 10% MeOH)純化殘餘物，得到呈棕色油狀物之標題化合物(320 mg，產率49.1%)。LC/MS (ESI) m/z: 159 (M+H) +。 步驟 2 ： 6-( 胺基甲基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 胺 (3)
在N 2氛圍下向2-胺基-1H-苯并[d]咪唑-6-甲腈(170 mg，1.08 mmol)於THF (3 mL)之溶液中添加BH 3.Me 2S (0.65 mL，6.48 mmol)且將混合物在70℃下攪拌2小時。混合物用MeOH淬滅且用EtOAc稀釋。混合物用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(100 mg，產率57.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 163 (M+H) +。 步驟 3 ： (1S,3S,5S)-N-((2- 胺基 -1H- 苯并 [d] 咪唑 -6- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -2-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 181)
在N 2氛圍，0℃下向(1S,3S,5S)-5-甲基-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸(30 mg，0.07 mmol)及6-(胺基甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-胺(23 mg，0.14 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (46 mg，0.35 mmol)及HATU (35 mg，0.09 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用EtOAc稀釋，用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化殘餘物且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 181(1.1 mg，產率2.7%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.43 (d, J= 7.0 Hz, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.21 - 7.13 (m, 4H), 7.09 (d, J= 6.1 Hz, 1H), 7.01 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 4.90 (s, 4H), 4.57 (s, 2H), 4.48 (s, 2H), 4.33 (s, 2H), 3.43 (s, 2H), 2.52 - 2.43 (m, 1H), 2.20 (d, J= 12.8 Hz, 1H), 1.31 (s, 3H), 1.22 - 1.18 (m, 1H), 0.87 (dd, J= 14.8, 3.8 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 569 (M+H) +。RT (方法A): 1.50 min。 流程 52. (2S,4R)-4-((1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 甲基 )-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 182) 之合成 步驟 1 ： (2S)-4-( 疊氮基甲基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸苄酯 (2)
向(2S)-4-(羥基甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸苄酯(300 mg，0.58 mmol)及DBU (264 mg，1.73 mmol)於甲苯(3 mL)之混合物中添加DPPA (319 mg，1.16 mmol)且將混合物在100℃下攪拌隔夜。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之標題化合物(110 mg，產率34.9%)。LC/MS (ESI) (m/z): 544 (M+H) +。 步驟 2 ： (2S)-4-((1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 甲基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸苄酯 (3)
向(2S)-4-(疊氮基甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸苄酯(110 mg，0.203 mmol)及乙炔基三甲基矽烷(264 mg，1.73 mmol)於t-BuOH (0.6 mL)及水(1.2 mL)之混合物中添加CuSO 4.5H 2O (109 mg，0.406 mmol)及抗壞血酸鈉(225 mg，1.13 mmol)且將混合物在60℃下攪拌3小時。將混合物用EtOAc稀釋，用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之標題化合物(40 mg，產率34.8%)。LC/MS (ESI) (m/z): 570 (M+H) +。 步驟 3 ： (2S)-4-((1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 甲基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸 (4)
向(2S,4R)-4-((1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺(40 mg，0.07 mmol)於MeOH (1 mL)及水(0.25 mL)之溶液中添加LiOH·H 2O (6 mg，0.14 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色油狀物之標題化合物(28 mg，產率84.8%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 480(M+H) +。 步驟 4 ： (2S,4R*)-4-((1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 甲基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-N-((R)-1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 (5-1) 及 (2S,4S*)-4-((1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 甲基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-N-((R)-1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 (5-2)
在N 2氛圍下向(2S)-4-((1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基) 甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸(28 mg，0.058 mol)及(R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-胺鹽酸鹽(26 mg，0.087 mmol)於DMF (1 mL)之混合物中添加DIPEA (37 mg，0.29 mmol)及HATU (33 mg，0.087 mol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 20: 1)純化殘餘物，得到呈棕色油狀物之(2S,4R*)-4-((1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-((R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)吡咯啶-2-甲醯胺(23 mg，產率52.3%)及呈棕色油狀物之(2S,4S*)-4-((1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-((R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)吡咯啶-2-甲醯胺(15 mg，產率34.1%)。LC/MS (ESI) m/z: 763 (M+H) +。 步驟 5 ： (2S,4R*)-4-((1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 甲基 )-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 182)
向(2S,4R*)-4-((1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-((R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)吡咯啶-2-甲醯胺(23 mg，0.03 mol)於MeOH (1 mL)及水(0.5 mL)之溶液中添加LiOH·H 2O (3 mg，0.06 mol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 182(1.4 mg，產率7.5%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.92 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.13 - 8.01 (m, 2H), 7.78 (s, 1H), 7.53 (s, 2H), 7.21 (dd, J= 26.9, 18.0 Hz, 3H), 7.06 (d, J= 19.6 Hz, 2H), 6.86 (s, 1H), 5.30 (s, 1H), 4.65 (s, 1H), 4.52 (d, J= 47.5 Hz, 3H), 4.22 (dd, J= 34.7, 15.1 Hz, 2H), 3.90 (s, 1H), 3.57 (s, 1H), 3.08 (d, J= 45.2 Hz, 1H), 2.15 (s, 1H), 1.63 (s, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 623 (M+H) +。RT (方法A): 1.28 min。 流程 53. (2S)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-4-( 哌啶 -1- 基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 185) 之合成 步驟 1 ： (2S)-4-( 羥基甲基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸苄酯 (2)
在N 2氛圍，0℃下向(啡㗁噻-3-羰基)甘胺酸(600 mg，1.99 mmol)及(2S)-4-(羥基甲基)吡咯啶-2-甲酸苄酯鹽酸鹽(562 mg，2.39 mmol)於DMF (6 mL)之混合物中添加DIPEA (1.29 g，9.95 mmol)及T 3P (1.9 g，2.99 mmol，EtOAc中50% wt.)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用飽和NaHCO 3水溶液淬滅且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 60% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(828 mg，產率80.2%)。LC/MS (ESI) (m/z): 519 (M+H) +。 步驟 2 ： (2S)-4-((( 甲基磺醯基 ) 氧基 ) 甲基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸苄酯 (3)
在N 2氛圍，0℃下向(2S)-4-(羥基甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基) 吡咯啶-2-甲酸苄酯(570 mg，1.1 mmol)及TEA (333 mg，3.3 mmol)於DCM (6 mL)之混合物中添加MsCl (255 mg，2.2 mmol)且將混合物在室溫下攪拌3小時。混合物用飽和NH 4Cl水溶液淬滅且用DCM萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 30% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(523 mg，產率79.7%)。LC/MS (ESI) (m/z): 597 (M+H) +。 步驟 3 ： (2S)-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-4-( 哌啶 -1- 基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸苄酯 (4)
將(2S)-4-(((甲基磺醯基)氧基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸苄酯(223 mg，0.37 mmol)及哌啶(159 mg，1.87 mmol)於DMSO (3 mL)中之混合物在100℃下攪拌3小時。將混合物用EtOAc稀釋，用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 80% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之標題化合物(100 mg，產率45.7%)。LC/MS (ESI) (m/z): 586 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S)-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-4-( 哌啶 -1- 基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸 (5)
向(2S)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-4-(哌啶-1-基甲基)吡咯啶-2-甲酸苄酯(100 mg，0.17 mmol)於MeOH (2 mL)及水(0.5 mL)之溶液中添加LiOH·H 2O (14 mg，0.34 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用CHCl 3/i-PrOH (v/v= 3/1)萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色油狀物之標題化合物(74 mg，產率88.1%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 496 (M+H) +。 步驟 5 ： (2S)-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-N-((R)-1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-4-( 哌啶 -1- 基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 (6)
在N 2氛圍下向(2S)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-4-(哌啶-1-基甲基)吡咯啶-2-甲酸(74 mg，0.15 mol)及(R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-胺鹽酸鹽(67 mg，0.22 mmol)於DMF (1 mL)之混合物中添加DIPEA (85 mg，0.75 mmol)及HATU (97 mg，0.22 mol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 10% MeOH)純化殘餘物，得到呈棕色油狀物之標題化合物(30 mg，產率25.7%)。LC/MS (ESI) m/z: 779 (M+H) +。 步驟 6 ： (2S)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-4-( 哌啶 -1- 基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 185)
向(2S)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-((R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(哌啶-1-基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺(30 mg，0.039 mol)於MeOH (1 mL)及水(0.5 mL)之溶液中添加LiOH·H 2O (3 mg，0.077 mol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 185(6.1 mg，產率24.5%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.62 (d, J= 60.5 Hz, 1H), 8.14 - 7.81 (m, 1H), 7.50 (ddd, J= 33.4, 14.6, 6.8 Hz, 2H), 7.31 - 6.99 (m, 6H), 6.67 - 6.49 (m, 1H), 5.36 - 5.23 (m, 1H), 4.54 - 3.89 (m, 4H), 3.49 - 3.33 (m, 1H), 2.70 - 2.43 (m, 7H), 2.29 - 1.85 (m, 1H), 1.81 - 1.38 (m, 10H)。LC/MS (ESI) m/z: 639 (M+H) +。RT (方法A): 0.97 min。
基於流程53中之步驟3-6來製備化合物184：
化合物編號 反應物A 反應物B 反應物C 特性化資料
184 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.68 (d, J= 19.6 Hz, 1H), 8.11 - 7.86 (m, 1H), 7.70 (t, J= 20.9 Hz, 1H), 7.53 (dd, J= 23.4, 16.2 Hz, 2H), 7.28 - 7.05 (m, 6H), 7.01 (s, 2H), 6.64 - 6.50 (m, 1H), 5.29 (dd, J= 20.2, 7.2 Hz, 1H), 4.59 - 4.38 (m, 1H), 4.27 (dd, J= 33.3, 12.4 Hz, 2H), 4.17 - 4.04 (m, 2H), 3.86 (dd, J= 15.9, 8.0 Hz, 1H), 3.48 (t, J= 8.6 Hz, 1H), 3.06 - 2.80 (m, 1H), 2.38 - 1.75 (m, 2H), 1.67 - 1.56 (m, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 622 (M+H) +。RT (方法A): 0.97 min。
流程 54. (1S,3S,5S)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-2-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-5-( 噻唑 -2- 基甲基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 186) 之合成 步驟 1 ： (1S,3S,5S)-5-(2- 胺基 -2- 硫酮乙基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -2,3- 二甲酸 3- 苄酯 2-( 三級丁基 ) 酯 (2)
在0℃下向(1S,3S,5S)-5-(2-胺基-2-側氧基乙基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2,3-二甲酸3-苄酯2-(三級丁基)酯(300 mg，0.80 mmol)於THF (5 mL)之溶液中添加勞森試劑(648 mg，1.60 mmol)且將混合物在0℃下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液洗滌十次，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，且濃縮，得到呈白色固體之標題化合物(60 mg，產率19.2%)。LC/MS (ESI) m/z: 391 (M+H) +。 步驟 2 ： (1S,3S,5S)-5-( 噻唑 -2- 基甲基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲酸苄酯 (3)
向(1S,3S,5S)-5-(2-胺基-2-硫酮乙基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2,3-二甲酸3-苄酯2-(三級丁基)酯(55 mg，0.14 mmol)及2-溴-1,1-二乙氧基乙烷(56 mg，0.28 mmol)於EtOH (5 mL)之溶液中添加2 N HCl水溶液(0.5 mL)且將反應混合物在90℃下攪拌16小時。將混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈棕色固體之標題化合物(40 mg，產率90.9%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 315 (M+H) +。 步驟 3 ： (1S,3S,5S)-2-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-5-( 噻唑 -2- 基甲基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲酸苄酯 (4)
在N 2氛圍，0℃下向(啡㗁噻-3-羰基)甘胺酸(21 mg，0.07 mmol)及(1S,3S,5S)-5-(噻唑-2-基甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸苄酯鹽酸鹽(22 mg，0.07 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (54 mg，0.42 mmol)及T 3P (89 mg，0.14 mmol，EtOAc中50% wt.)且將混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用飽和NaHCO 3水溶液淬滅且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 30: 1)純化殘餘物，得到呈黃色固體之標題化合物(15 mg，產率36.6%)。LC/MS (ESI) m/z: 598 (M+H) +。 步驟 4 ： (1S,3S,5S)-2-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-5-( 噻唑 -2- 基甲基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲酸 (5)
向(1S,3S,5S)-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-5-(噻唑-2-基甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸苄酯(15 mg，0.03 mmol)於MeOH (2.1 mL)及水(0.7 mL)之溶液中添加LiOH·H 2O (1.9 mg，0.05 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色固體之標題化合物(10 mg，產率76.9%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 508 (M+H) +。 步驟 5 ： (1S,3S,5S)-2-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-N-((R)-1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-5-( 噻唑 -2- 基甲基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 (6)
在N 2氛圍下向(1S,3S,5S)-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-5-(噻唑-2-基甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸(10 mg，0.02 mmol)及(R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-胺鹽酸鹽(11.9 mg，0.04 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (15.5 mg，0.12 mmol)及HATU (11.4 mg，0.03 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NH 4Cl水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(12 mg，產率75.0%)。LC/MS (ESI) m/z: 791 (M+H) +。 步驟 6 ： (1S,3S,5S)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-2-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-5-( 噻唑 -2- 基甲基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 186)
向(1S,3S,5S)-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-((R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-5-(噻唑-2-基甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺(12 mg，0.02 mmol)於MeOH (2 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH·H 2O (1.5 mg，0.03 mmol)，且將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 186(3 mg，產率30.0%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.65 (s, 1H), 7.92 (d, J= 3.5 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.57 (d, J= 7.0 Hz, 2H), 7.53 (s, 1H), 7.26 - 7.19 (m, 2H), 7.15 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 7.09 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 7.03 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 6.51 (s, 1H), 5.25 - 5.20 (m, 1H), 4.57 (s, 2H), 4.28 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 3.72 (s, 1H), 3.02 (s, 2H), 2.55 (t, J= 12.4 Hz, 1H), 2.14 (d, J= 13.3 Hz, 1H), 1.57 (d, J= 6.7 Hz, 3H), 1.52 (M, 1H), 1.14 (M, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 651 (M+H) +。RT (方法A): 1.50 min。 流程 55. (S)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 188) 之合成 步驟 1 ： (2S)-2-[[1-( 苯磺醯基 ) 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ] 甲基胺甲醯基 ] 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
在室溫下向(2S)-1-三級丁氧基羰基吡咯啶-2-甲酸(45 mg，0.21 mmol)、[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]甲胺鹽酸鹽(50 mg，0.17 mmol)及HATU (100 mg，0.26 mmol)於DMF (1 mL)之溶液中添加DIPEA (0.15 mL，0.86 mmol)。將反應混合物攪拌2小時且用水(5 mL)稀釋。混合物用乙酸乙酯萃取三次。將合併之有機層濃縮，且將殘餘物在矽膠(庚烷中之20% 乙酸乙酯)上純化，得到呈透明膠狀物之(2S)-2-[[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]甲基胺甲醯基]吡咯啶-1-甲酸 三級丁酯(70 mg，83%產率)。LC/MS (ESI) m/z = 485 (M+H) +。 步驟 2 ： (2S)-N-[[1-( 苯磺醯基 ) 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ] 甲基 ] 吡咯啶 -2- 甲醯胺
在室溫下向(2S)-2-[[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]甲基胺甲醯基]吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(70 mg，0.14 mmol)於DCM (0.5 ml)之溶液中添加TFA (0.11 mL，1.5 mmol)。將反應混合物攪拌30分鐘且在減壓下濃縮，得到(2S)-N-[[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]甲基]吡咯啶-2-甲醯胺(55 mg，理論)。此物質未經進一步純化用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 385 (M+H) +。 步驟 3 ： (2S)-N-[[1-( 苯磺醯基 ) 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ] 甲基 ]-1-[2-( 啡㗁噻 -3- 羰基胺基 ) 乙醯基 ] 吡咯啶 -2- 甲醯胺
在室溫下向2-(啡㗁噻-3-羰基胺基)乙酸(40 mg，0.13 mmol)、(2S)-N-[[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]甲基]吡咯啶-2-甲醯胺(56 mg，0.15 mmol)及HATU (76 mg，0.2 mmol)於DMF (1 mL)之溶液中添加DIPEA (0.14 mL，0.80 mmol)歷時2小時。反應混合物用水稀釋且在室溫下攪拌20分鐘。藉由過濾收集紅色固體，得到(2S)-N-[[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]甲基]-1-[2-(啡㗁噻-3-羰基胺基)乙醯基]吡咯啶-2-甲醯胺(80 mg，74%產率)。LC/MS (ESI) m/z =668 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S)-1-[2-( 啡㗁噻 -3- 羰基胺基 ) 乙醯基 ]-N-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 188)
在室溫下向(2S)-N-[[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]甲基]-1-[2-(啡㗁噻-3-羰基胺基)乙醯基]吡咯啶-2-甲醯胺(40 mg，0.049 mmol)於THF (0.4 mL)及水(0.2 mL)之混合物中添加LiOH∙H 2O (4.2 mg，0.10 mmol)。將混合物在室溫下攪拌18小時，LC/MS顯示不完全轉換。滴管添加三滴甲醇且將反應混合物攪拌1小時。用水稀釋反應混合物且藉由過濾收集黃色沉澱物。在矽膠(DCM中之0至100% (在甲醇中含有10% 7 N氨))上純化固體，得到呈白色固體之 化合物 188(10 mg，0.01895 mmol，38.59 %產率)。 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.23 (s, 1H), 8.80 – 8.54 (m, 2H), 8.39 (t, J= 5.8 Hz, 1H), 7.98 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 7.62 – 7.40 (m, 2H), 7.36 – 6.95 (m, 6H), 6.33 (s, 1H), 4.57 – 4.21 (m, 3H), 4.20 – 3.86 (m, 2H), 3.76 – 3.34 (m, 2H), 2.12 – 1.64 (m, 2H), 1.27 – 1.05 (m, 2H)。LC/MS (ESI) m/z: 528.2 (M+H) +。RT (方法A): 1.28 min。 流程 56. (5-((R)-1-((2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((4- 苯氧基苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺基 ) 乙基 ) 噻吩 -3- 基 ) 硼酸 ( 化合物 189) 之合成 步驟 1 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((4- 苯氧基苄醯基 ) 甘胺醯基 )-N-((R)-1-(4-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧雜硼雜環戊烷 -2- 基 ) 噻吩 -2- 基 ) 乙基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 (2)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-N-((R)-1-(4-溴噻吩-2-基)乙基)-4-(二氟甲氧基)-1-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺(80 mg，0.13 mmol)及雙(頻哪醇)二硼(132 mg，0.52 mmol)於1,4-二噁烷(2 mL)之混合物中添加KOAc (51 mg，0.52 mmol)、X-phos (10mg, 0.02 mmol)及Pd 2(dba) 3(36 mg，0.04 mmol)，混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在N 2氛圍，80℃下攪拌隔夜。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(80 mg，產率92.0%)。LC/MS (ESI) m/z: 670 (M+H) +。 步驟 2 ： (5-((R)-1-((2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((4- 苯氧基苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺基 ) 乙基 ) 噻吩 -3- 基 ) 硼酸 ( 化合物 189)
向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-N-((R)-1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)噻吩-2-基)乙基)吡咯啶-2-甲醯胺(45 mg，0.067 mol)於THF (1 mL)及水(1 mL)之溶液中添加NaIO 4(2 mg，0.048 mol)，且將混合物在室溫下攪拌6小時。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 189(1.1 mg，產率2.8%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.88 - 7.83 (m, 2H), 7.69 (d, J= 17.6 Hz, 1H), 7.41 (dd, J= 8.5, 7.6 Hz, 2H), 7.24 - 7.17 (m, 2H), 7.08 - 7.04 (m, 2H), 7.02 - 6.98 (m, 2H), 6.48 (td, J= 74.6, 15.4 Hz, 1H), 5.31 (dt, J= 20.7, 6.9 Hz, 1H), 5.00 - 4.89 (m, 1H), 4.55 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 4.32 - 4.08 (m, 2H), 3.95 (dd, J= 11.5, 4.7 Hz, 1H), 3.84 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 2.61 - 2.38 (m, 1H), 2.32 - 2.15 (m, 1H), 1.60 (dd, J= 19.8, 6.9 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 588 (M+H) +。RT (方法A): 1.91 min。 流程 57. (S)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-5-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-5- 氮雜螺 [2.4] 庚烷 -6- 甲醯胺 ( 化合物 190) 之合成 步驟 1 ： (S)-6-(((R)-1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 ) 胺甲醯基 )-5- 氮雜螺 [2.4] 庚烷 -5- 甲酸三級丁酯 (2)
在N 2氛圍下向(S)-5-( 三級丁氧基羰基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-甲酸(24 mg，0.1 mmol)及(R)-1-(1-((4-溴苯基)磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-胺(57 mg，0.15 mmol)於DMF (0.5 mL)之混合物中添加DIPEA (43 mg，0.33 mmol)及HATU (45 mg，0.12 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 12: 1)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(35 mg，產率66.7%)。LC/MS (ESI) m/z: 525 (M+H) +。 步驟 2 ： (S)-N-((R)-1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-5- 氮雜螺 [2.4] 庚烷 -6- 甲醯胺鹽酸鹽 (3)
向(S)-6-(((R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)胺甲醯基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-甲酸 三級丁酯(35 mg，0.057 mmol)於DCM (2 mL，4M)之溶液中添加HCl/1,4-二噁烷(0.5 mL，2.0 mmol)且將混合物在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(20 mg，產率76.1%)。LC/MS (ESI) (m/z): 425 (M+H) +。 步驟 3 ： (S)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-5-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-5- 氮雜螺 [2.4] 庚烷 -6- 甲醯胺 ( 化合物 190)
在N 2氛圍下向(啡㗁噻-3-羰基)甘胺酸(12 mg，0.040 mmol)及(S)-N-((R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-甲醯胺鹽酸鹽(20 mg，0.043 mmol)於DMF (0.5 mL)之混合物中添加DIPEA (26 mg，0.2 mmol)及HATU (23 mg，0.06 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。向以上混合物中添加MeOH (3 mL)及水(1 mL)，隨後添加LiOH·H 2O (2 mg，0.05 mmol)且將所得混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 7: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 190(3.5 mg，產率15.4%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.97 (s, 1H), 8.11 (d, J= 6.6 Hz, 1H), 7.67 (d, J= 6.6 Hz, 1H), 7.58 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.25 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 7.18 (dd, J= 12.6, 7.6 Hz, 2H), 7.11 - 7.07 (m, 1H), 7.03 - 6.95 (m, 2H), 5.35 (q, J= 6.7 Hz, 1H), 4.62 (t, J= 7.0 Hz, 1H), 4.25 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.15 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 3.72 (d, J= 9.8 Hz, 1H), 3.62 (d, J= 9.9 Hz, 1H), 2.21 (dd, J= 12.4, 8.4 Hz, 1H), 2.05 (dd, J= 12.3, 5.9 Hz, 1H), 1.65 (d, J= 7.0 Hz, 3H), 0.74 (s, 2H), 0.67 (s, 2H)。LC/MS (ESI) m/z: 568 (M+H) +。 流程 58. (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-N-( 吲哚啉 -5- 基甲基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 197) 之合成
在0℃下向(2S,4R)-N-((1H-吲哚-5-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺( 化合物 195 ；6 mg，0.01 mol)於AcOH (0.5 mL)之溶液中添加NaBH 3CN (2 mg，0.032 mol)且將混合物在30℃下攪拌1小時。過濾混合物，且將濾液濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 197(1.5 mg，產率24.9%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.52 (dd, J= 8.1, 1.7 Hz, 1H), 7.48 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 7.22 - 7.13 (m, 3H), 7.05 (dd, J= 16.4, 7.8 Hz, 3H), 6.96 - 6.90 (m, 1H), 6.69 - 6.58 (m, 1H), 6.57 - 6.27 (m, 1H), 4.98 (d, J= 3.5 Hz, 1H), 4.54 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 4.26 (d, J= 2.9 Hz, 2H), 4.15 (dd, J= 28.0, 23.4 Hz, 2H), 3.94 (dd, J= 11.4, 4.6 Hz, 1H), 3.85 - 3.78 (m, 1H), 3.40 (t, J= 8.3 Hz, 2H), 2.91 (dd, J= 15.3, 7.0 Hz, 2H), 2.49 - 2.36 (m, 1H), 2.24 - 2.16 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 595 (M+H) +。RT (方法A): 1.60 min。
基於流程58來製備化合物198：
化合物編號 反應物A 特性化資料
198 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.50 (dd, J= 18.5, 3.6 Hz, 2H), 7.26 - 7.11 (m, 3H), 7.09 - 6.96 (m, 3H), 6.69 - 6.27 (m, 3H), 4.95 (d, J= 32.8 Hz, 1H), 4.69 - 4.55 (m, 1H), 4.39 - 4.26 (m, 2H), 4.17 (dd, J= 28.8, 12.2 Hz, 2H), 3.94 (dt, J = 15.0, 7.7 Hz, 1H), 3.87 - 3.79 (m, 1H), 3.41 (dd, J= 18.5, 8.6 Hz, 2H), 2.91 (q, J= 8.5 Hz, 2H), 2.65 - 2.41 (m, 1H), 2.37 - 2.19 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 595 (M+H) +。RT (方法A): 1.66 min。
流程 59. 6-(((3S)-5-(((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 ) 胺甲醯基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -3- 基 ) 甲氧基 ) 己酸 ( 化合物 204) 之合成 步驟 1 ： (2S)-4-(( 烯丙氧基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -1,2- 二甲酸 2- 苄酯 1-( 三級丁基 ) 酯 (2)
向(2S)-4-(羥基甲基)吡咯啶-1,2-二甲酸2-苄酯1-( 三級丁基)酯(2 g，5.97 mmol)於DCE (20 mL)之溶液中添加AgOTf (2.3 g，8.96 mmol)，隨後添加2,6-二-三級丁基吡啶(3.4 g，17.9 mmol)及3-碘丙-1-烯(3 g，17.9 mmol)且混合物在N 2氛圍，30℃下攪拌16小時。過濾混合物且將濾液濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 15% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之標題化合物(1.46 g，產率65.2%)。LC/MS (ESI) (m/z): 376 (M+H) +。 步驟 2 ： (2S)-4-(( 烯丙氧基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸苄酯鹽酸鹽 (3)
將(2S)-4-((烯丙氧基)甲基)吡咯啶-1,2-二甲酸2-苄酯1-( 三級丁基)酯(1 g，2.67 mmol)於HCl/1,4-二噁烷(15 mL，4M)中之溶液在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色固體之標題化合物(830 mg，產率100%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 276 (M+H) +。 步驟 3 ： (2S)-4-(( 烯丙氧基 ) 甲基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸苄酯 (4)
在0℃下向(啡㗁噻-3-羰基)甘胺酸(803 mg，2.67 mmol)及(2S)-4-((烯丙氧基)甲基)吡咯啶-2-甲酸苄酯鹽酸鹽(733 mg，2.67 mmol)於DMF (10 mL)之混合物中添加DIPEA (2.07 g，16 mmol)及HATU (1.32 g，3.47 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用EtOAc稀釋，用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之標題化合物(890 mg，產率59.9%)。LC/MS (ESI) m/z: 559 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S)-4-((((E)-6- 甲氧基 -6- 側氧基己 -2- 烯 -1- 基 ) 氧基 ) 甲基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸苄酯 (5)
在N 2氛圍，室溫下向(2S)-4-((烯丙氧基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸苄酯(325 mg，0.58 mmol)及戊-4-烯酸甲酯(100 mg，0.88 mmol)於DCM (100 mL)之混合物中添加Grubbs二代催化劑(192 mg，0.23 mmol)且將混合物在室溫下攪拌16小時。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(120 mg，產率31.9%)。LC/MS (ESI) m/z: 645 (M+H) +。 步驟 5 ： (2S)-4-(((6- 甲氧基 -6- 側氧基己基 ) 氧基 ) 甲基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸 (6)
向(2S)-4-((((E)-6-甲氧基-6-側氧基己-2-烯-1-基)氧基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸苄酯(100 mg，0.16 mmol)於MeOH (2 mL)之溶液中添加Pd/C (10 mg，10% wt.)，混合物在N 2氛圍下攪拌三次且在H 2氣球下於25℃攪拌1小時。過濾混合物且在減壓下將濾液濃縮至乾，得到呈無色油狀物之標題化合物(55 mg，產率63.9%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 557 (M+H) +。 步驟 6 ： 6-(((3S)-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-5-(((R)-1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 ) 胺甲醯基 ) 吡咯啶 -3- 基 ) 甲氧基 ) 己酸甲酯 (7)
在N 2氛圍，0℃下向(2S,4S)-4-(((6-甲氧基-6-側氧基己基)氧基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸(52 mg，0.08 mmol)及(R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-胺(37 mg，0.12 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (40 mg，0.11 mmol)及HATU (62 mg，0.48 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用EtOAc稀釋，用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 15: 1)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之標題化合物(35 mg，產率44.9%)。LC/MS (ESI) m/z: 840 (M+H) +。 步驟 8 ： 6-(((3S)-5-(((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 ) 胺甲醯基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -3- 基 ) 甲氧基 ) 己酸 ( 化合物 204)
向6-(((3S)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-5-(((R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)胺甲醯基)吡咯啶-3-基)甲氧基)己酸甲酯(32 mg，0.04 mmol)於MeOH (2 mL)及水(0.7 mL)之溶液中添加LiOH·H 2O (3 mg，0.06 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 204(1.2 mg，產率4.6%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.66 (s, 3H), 7.90 (d, J= 5.9 Hz, 2H), 7.61 (s, 1H), 7.58 (d, J= 2.4 Hz, 3H), 7.26 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 7.20 (s, 3H), 7.17 (d, J= 7.8 Hz, 3H), 7.14 (s, 3H), 7.11 (d, J= 7.9 Hz, 2H), 7.07 (d, J= 6.1 Hz, 2H), 7.03 (d, J= 8.3 Hz, 3H), 6.53 (s, 3H), 5.31 (d, J= 6.9 Hz, 3H), 4.40 (dd, J= 20.4, 12.5 Hz, 5H), 4.13 (d, J= 16.7 Hz, 3H), 4.00 - 3.88 (m, 3H), 3.52 - 3.49 (m, 3H), 3.47 (d, J= 4.3 Hz, 5H), 3.43 (d, J= 7.5 Hz, 6H), 2.64 (s, 3H), 2.46 - 2.32 (m, 3H), 1.81 (dd, J= 22.2, 10.0 Hz, 3H), 1.70 (d, J= 6.8 Hz, 2H), 1.68 - 1.64 (m, 5H), 1.61 (d, J= 7.1 Hz, 14H), 1.57 (d, J= 8.1 Hz, 5H)。LC/MS (ESI) m/z: 686 (M+H) +。RT (方法A): 1.56 min。 流程 60. (S)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-(( 二苯并 [b,d] 呋喃 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 213) 之合成 步驟 1 ： ( 二苯并 [b,d] 呋喃 -3- 羰基 ) 甘胺酸甲酯 (2)
在N 2氛圍下向二苯并[b,d]呋喃-3-甲酸(110 mg，0.52 mmol)及甘胺酸甲酯(11 mg，0.075 mmol)於DMF ( 0.7 mL)之混合物中添加DIPEA (44 mg，0.34 mmol)及HATU (31 mg，0.082 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (PE中之10% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(100 mg，產率68.0%)。LC/MS (ESI) m/z: 284 (M+H) +。 步驟 2 ： ( 二苯并 [b,d] 呋喃 -3- 羰基 ) 甘胺酸 (3)
向(二苯并[b,d]呋喃-3-羰基)甘胺酸甲酯(100 mg，0.35 mmol)於MeOH/H 2O (2 mL，v/v= 1/1)之溶液中添加LiOH·H 2O (48 mg，1.2 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(92 mg，產率97.1%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 270 (M+H) +。 步驟 3 ： (S)-7-(( 二苯并 [b,d] 呋喃 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲酸甲酯 (4)
在N 2氛圍下向(二苯并[b,d]呋喃-3-羰基)甘胺酸(50 mg，0.19 mmol)及(S)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸甲酯(38 mg，0.20 mmol)於DMF (0.7 mL)之混合物中添加DIPEA (120 mg，0.93 mmol)及HATU (85 mg，0.22 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM中之4% MeOH)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(50 mg，產率61.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 439 (M+H) +。 步驟 4 ： (S)-7-(( 二苯并 [b,d] 呋喃 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲酸 (5)
向(S)-7-((二苯并[b,d]呋喃-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸甲酯(50 mg，0.11 mmol)於MeOH/H 2O (2 mL，v/v= 1/1)之溶液中添加LiOH·H 2O (24 mg，0.60 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(47 mg，產率96.5%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 425 (M+H) +。 步驟 5 ： (S)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-(( 二苯并 [b,d] 呋喃 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 213)
在N 2氛圍下向(S)-7-((二苯并[b,d]呋喃-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸(40 mg，0.094 mmol)及(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲胺(14 mg，0.094 mmol)於DMF (0.7 mL)之混合物中添加DIPEA (61 mg，0.47 mmol)及HATU (42 mg，0.11 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM中之8% MeOH)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 213(7 mg，產率13.4%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.63 (d, J= 43.6 Hz, 1H), 8.09 - 8.03 (m, 3H), 7.87 - 7.82 (m, 2H), 7.63 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 7.56 (t, J= 7.8 Hz, 1H), 7.40 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 7.17 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 6.55 (d, J= 30.9 Hz, 1H), 4.62 (dt, J= 24.1, 16.0 Hz, 4H), 4.23 (d, J= 4.0 Hz, 2H), 4.01 (d, J= 3.4 Hz, 3H), 3.83 (t, J= 7.0 Hz, 2H), 2.46 (dd, J= 13.1, 8.9 Hz, 1H), 2.28 (dd, J= 13.2, 6.2 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 554 (M+H) +。RT (方法A): 1.21 min。 流程 61. (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((3-(4- 異丙基苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 215) 之合成 步驟 1 ： (3-(4- 異丙基苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺酸三級丁酯 (3)
將2-[(3-溴苄醯基)胺基]乙酸三級丁酯(50.00 mg，0.1591 mmol，1.0當量)、異丙基phenol (43.35 mg，0.3183 mmol，2當量)、碘化銅(I) (3.031 mg，0.01592 mmol，0.1當量)、N,N-二甲基甘胺酸鹽酸鹽(4.442 mg，0.03182 mmol，0.2當量)、碳酸銫(0.2074 g，0.6365 mmol，4當量)於1,4-二噁烷(3 mL)中之混合物在微波反應器中於110℃攪拌12 h。將反應混合物冷卻至室溫，用水稀釋，用EtOAc萃取，用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，且濃縮。藉由combi-Flash；12 g管柱，溶劑A=己烷，溶劑B=EtOAc.100% A至15% B純化，得到2-[[3-(4-異丙基苯氧基)苄醯基]胺基]乙酸三級丁酯(46.90 mg，0.1270 mmol，100質量%，79.78%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 370 (M+H) +。 步驟 2 ： (3-(4- 異丙基苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺酸 (4)
在冰浴溫度下將TFA (0.5 mL)添加至2-[[3-(4-異丙基苯氧基)苄醯基]-胺基]乙酸三級丁酯(30.00 mg，0.08121 mmol，1.0當量)於CH 2Cl 2(1 mL)之溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌4小時，然後濃縮至乾，得到呈透明油狀物之2-[[3-(4-異丙基苯氧基)苄醯基]胺基]乙酸(25.45 mg，0.08121 mmol，99.99%產率)，其未經進一步純化用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 314 (M+H) +。 步驟 3.(2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((3-(4- 異丙基苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 215)
向2-[[3-(4-異丙基苯氧基)苄醯基]胺基]乙酸(9.037 mg，0.02884 mmol，1.0當量)於DMF (2 mL)之溶液中添加(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺；鹽酸鹽(10.00 mg，0.02884 mmol，1.0當量)、含T3P (50質量%)之乙酸乙酯(25.90 μL，0.0433 mmol，1.5當量)及DIPEA (15.10 μL，0.0866 mmol，3.0當量)。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘，然後藉由製備型HPLC直接純化，得到 化合物 215(2.837 mg，0.004685 mmol，16.25%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 606 (M+H) +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.23 (s, 1H), 9.10 – 8.43 (m, 2H), 8.20 (s, 1H), 8.03 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.64 (t, J= 8.9 Hz, 1H), 7.53 – 7.40 (m, 1H), 7.27 (t, J= 7.9 Hz, 2H), 7.18 (dd, J= 8.1, 2.8 Hz, 2H), 6.97 (dd, J= 8.8, 7.0 Hz, 1H), 6.81 (s, 1H), 6.38 (s, 1H), 4.97 (s, 1H), 4.56 – 4.30 (m, 3H), 4.18 (dd, J= 16.7, 5.7 Hz, 1H), 4.01 (dd, J= 17.0, 5.5 Hz, 1H), 3.88 (d, J= 11.2 Hz, 1H), 3.85 – 3.65 (m, 1H), 2.89 (p, J= 7.0 Hz, 1H), 2.32 (td, J= 9.5, 6.3 Hz, 1H), 2.14 (dd, J= 13.6, 6.7 Hz, 1H), 1.56 – 1.34 (m, 2H), 1.20 (d, J= 7.0 Hz, 6H)。RT (方法A): 1.85 min。
基於流程61來製備以下化合物：
化合物編號 反應物A 反應物B 反應物C 特性化資料
244 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.21 (s, 1H), 8.65 (d, J= 14.2 Hz, 2H), 8.24 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 8.02 (d, J= 5.4 Hz, 1H), 7.62 (t, J= 9.7 Hz, 1H), 7.42 (d, J= 7.7 Hz, 2H), 7.35 (d, J= 9.5 Hz, 1H), 6.83 (q, J= 9.7 Hz, 3H), 6.37 (s, 1H), 4.96 (s, 1H), 4.65 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 4.52 – 4.25 (m, 3H), 4.15 (dd, J= 16.8, 5.6 Hz, 1H), 3.97 (d, J= 16.9 Hz, 1H), 3.82 – 3.66 (m, 1H), 2.26 (s, 3H), 2.15 (s, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 592 (M+H) +。RT (方法A): 1.65 min。
260 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.40 (s, 1H), 9.16 – 8.47 (m, 2H), 8.30 – 7.89 (m, 1H), 7.62 (t, J= 8.7 Hz, 1H), 7.48 (t, J= 7.9 Hz, 1H), 7.38 (d, J= 13.8 Hz, 1H), 7.30 – 7.20 (m, 1H), 7.20 – 7.10 (m, 2H), 7.05 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 6.81 (s, 1H), 6.44 (s, 1H), 4.97 (s, 1H), 4.44 (q, J= 6.7 Hz, 4H), 4.18 (dd, J= 16.8, 5.8 Hz, 1H), 4.00 (dd, J= 16.7, 5.6 Hz, 1H), 3.86 (t, J= 5.8 Hz, 1H), 3.84 – 3.49 (m, 1H), 2.15 (dt, J= 13.3, 6.3 Hz, 2H), 1.47 (s, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 596 (M+H) +。RT (方法A): 1.47 min。
272 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.34 (s, 1H), 8.98 – 8.42 (m, 2H), 8.30 – 7.88 (m, 1H), 7.63 (t, J= 9.0 Hz, 1H), 7.52 – 7.39 (m, 2H), 7.27 – 7.12 (m, 2H), 6.97 – 6.91 (m, 2H), 6.81 (s, 1H), 6.42 (s, 1H), 4.97 (s, 1H), 4.57 – 4.30 (m, 2H), 4.18 (dd, J= 16.8, 5.8 Hz, 2H), 4.01 (dd, J= 16.7, 5.7 Hz, 1H), 3.87 (dd, J= 11.7, 4.5 Hz, 1H), 3.83 – 3.68 (m, 1H), 2.30 (d, J= 3.8 Hz, 1H), 2.25 – 2.07 (m, 1H), 1.48 (s, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 578 (M+H) +。RT (方法A): 1.50 min。
273 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.24 (s, 1H), 8.89 – 8.74 (m, 1H), 8.69 (d, J= 13.5 Hz, 2H), 8.35 (s, 2H), 8.02 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.65 (t, J= 9.2 Hz, 1H), 7.49 (q, J= 7.8 Hz, 2H), 7.18 (dd, J= 9.8, 6.6 Hz, 2H), 6.98 (t, J= 7.9 Hz, 3H), 6.81 (s, 1H), 4.97 (s, 1H), 4.57 – 4.33 (m, 3H), 4.19 (dd, J= 16.8, 5.8 Hz, 1H), 4.01 (dd, J= 16.8, 5.6 Hz, 1H), 3.87 (dd, J= 11.6, 4.5 Hz, 1H), 3.83 – 3.66 (m, 1H), 2.34 (s, 1H), 2.21 – 2.05 (m, 1H), 1.28 (d, J= 2.1 Hz, 9H)。LC/MS (ESI) m/z: 620 (M+H) +。RT (方法A): 1.88 min。
274 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.39 (s, 1H), 9.02 – 8.45 (m, 2H), 8.40 – 7.93 (m, 1H), 7.60 (t, J= 9.0 Hz, 1H), 7.47 (t, J= 7.9 Hz, 1H), 7.39 – 7.29 (m, 1H), 7.23 (dt, J= 9.1, 4.0 Hz, 2H), 7.08 (dd, J= 8.5, 2.8 Hz, 2H), 7.03 – 6.94 (m, 1H), 6.80 (d, J= 14.6 Hz, 1H), 6.43 (s, 1H), 4.61 – 4.27 (m, 4H), 4.18 (dd, J= 16.7, 5.8 Hz, 1H), 4.01 (dd, J= 16.7, 5.6 Hz, 1H), 3.95 – 3.82 (m, 1H), 3.84 – 3.66 (m, 1H), 2.65 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 2.33 (s, 3H), 2.16 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 1.70 – 1.39 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 596 (M+H) +。RT (方法A): 1.82 min。
292 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.45 (s, 1H), 9.04 – 8.44 (m, 4H), 8.13 (s, 0H), 7.63 (t, J= 8.7 Hz, 1H), 7.52 – 7.40 (m, 3H), 7.38 (t, J= 2.0 Hz, 1H), 7.34 (s, 0H), 7.19 (dd, J= 8.4, 2.0 Hz, 1H), 7.14 – 7.09 (m, 2H), 7.09 (s, 1H), 7.07 – 6.98 (m, 1H), 6.81 (s, 1H), 6.62 (s, 0H), 6.46 (s, 1H), 4.97 (s, 1H), 4.54 – 4.37 (m, 3H), 4.17 (dd, J= 16.8, 5.7 Hz, 1H), 4.07 – 3.95 (m, 1H), 3.88 (d, J= 11.7 Hz, 1H), 3.83 – 3.71 (m, 2H), 2.32 (d, J= 3.3 Hz, 5H), 2.18 – 2.10 (m, 1H), 1.47 (d, J= 9.0 Hz, 5H), 1.00 – 0.89 (m, 4H)。LC/MS (ESI) m/z: 612 (M) +。RT (方法A): 1.70 min。
293 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.22 (s, 1H), 8.81 – 8.71 (m, 1H), 8.67 (s, 2H), 8.36 (s, 1H), 8.02 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.64 (t, J= 9.0 Hz, 1H), 7.53 – 7.42 (m, 2H), 7.32 – 7.15 (m, 4H), 7.02 – 6.93 (m, 2H), 6.79 (d, J= 14.4 Hz, 1H), 6.38 (s, 1H), 4.97 (s, 1H), 4.54 – 4.36 (m, 3H), 4.18 (dd, J= 16.7, 5.8 Hz, 1H), 4.01 (dd, J= 16.8, 5.8 Hz, 1H), 3.87 (dd, J= 11.6, 4.6 Hz, 1H), 3.83 – 3.72 (m, 2H), 2.61 (q, J= 4.1 Hz, 1H), 2.61 – 2.52 (m, 1H), 2.20 – 2.09 (m, 1H), 1.33 (s, 1H), 1.26 – 1.13 (m, 4H)。LC/MS (ESI) m/z: 592 (M+H) +。RT (方法A): 1.59 min。
294 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.25 (s, 1H), 9.12 – 8.39 (m, 2H), 8.16 (s, 2H), 7.64 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.52 – 7.40 (m, 1H), 7.17 (tt, J= 9.2, 4.4 Hz, 1H), 7.10 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 6.94 (dd, J= 8.6, 6.7 Hz, 3H), 6.79 (d, J= 14.5 Hz, 1H), 6.39 (s, 1H), 4.97 (s, 1H), 4.44 (t, J= 7.5 Hz, 3H), 4.18 (dd, J= 16.7, 5.6 Hz, 1H), 4.07 – 3.96 (m, 1H), 3.87 (s, 1H), 3.84 – 3.69 (m, 2H), 2.32 (t, J= 5.9 Hz, 2H), 2.16 (dd, J= 13.4, 6.8 Hz, 1H), 1.91 (ddt, J= 13.4, 8.7, 4.8 Hz, 1H), 1.51 – 1.39 (m, 1H), 1.01 – 0.83 (m, 2H), 0.72 – 0.53 (m, 2H)。LC/MS (ESI) m/z: 604 (M+H) +。RT (方法A): 1.74 min。
295 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.17 (s, 1H), 8.81 (q, J= 4.8 Hz, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.96 (t, J= 4.7 Hz, 1H), 7.69 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 7.55 – 7.42 (m, 2H), 7.35 – 7.28 (m, 1H), 7.24 (dd, J= 8.2, 2.7 Hz, 1H), 7.14 (dddt, J= 11.9, 8.6, 5.4, 3.2 Hz, 1H), 7.06 – 6.91 (m, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.61 (s, 1H), 6.54 (s, 1H), 4.95 (q, J= 4.1 Hz, 1H), 4.53 (t, J= 6.8 Hz, 1H), 4.51 – 4.35 (m, 1H), 4.20 (dd, J= 16.8, 5.8 Hz, 1H), 4.11 – 3.96 (m, 1H), 3.88 (dd, J= 11.6, 4.7 Hz, 1H), 3.84 – 3.63 (m, 1H), 2.32 (dtd, J= 15.5, 10.2, 5.3 Hz, 2H), 2.14 (ddd, J= 13.1, 7.4, 5.0 Hz, 1H), 1.67 – 1.35 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 600 (M+H) +。RT (方法A): 1.45 min。
298 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.21 (s, 1H), 8.68 (t, J= 12.8 Hz, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.12 – 7.77 (m, 2H), 7.58 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.44 (t, J= 7.9 Hz, 1H), 7.34 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 7.32 – 7.25 (m, 1H), 7.16 (dd, J= 13.7, 3.8 Hz, 2H), 7.04 (td, J= 8.2, 2.4 Hz, 2H), 6.86 (t, J= 8.2 Hz, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.38 (s, 1H), 4.97 (s, 1H), 4.43 (t, J= 7.5 Hz, 2H), 4.17 (dd, J= 16.7, 5.7 Hz, 1H), 4.00 (dd, J= 16.6, 5.5 Hz, 1H), 3.87 (dd, J= 11.7, 4.5 Hz, 1H), 3.81 – 3.70 (m, 2H), 2.28 (s, 3H), 2.13 (d, J= 14.6 Hz, 1H), 2.07 (s, 3H), 2.09 (d, J= 13.9 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 592 (M+H) +。RT (方法A): 1.65 min。
299 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.15 (s, 1H), 8.75 – 8.61 (m, 1H), 8.63 – 8.54 (m, 1H), 8.16 (s, 1H), 8.03 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.96 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 7.82 (td, J= 16.0, 7.5 Hz, 1H), 7.59 (t, J= 8.5 Hz, 1H), 7.51 – 7.28 (m, 1H), 7.25 – 7.08 (m, 1H), 6.72 (d, J= 14.6 Hz, 1H), 6.53 (d, J= 14.6 Hz, 1H), 4.90 (p, J= 4.0 Hz, 1H), 4.81 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 4.61 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 4.43 (d, J= 10.3 Hz, 1H), 4.37 (t, J= 7.1 Hz, 2H), 4.12 (dd, J= 16.7, 5.9 Hz, 2H), 4.02 (d, J= 14.0 Hz, 1H), 3.94 (dd, J= 16.6, 5.6 Hz, 1H), 3.85 – 3.62 (m, 1H), 3.52 (dd, J= 12.7, 4.9 Hz, 1H), 2.24 (qd, J= 12.3, 4.4 Hz, 1H), 2.08 (ddd, J= 13.0, 7.5, 4.8 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 582 (M+H) +。
流程 62. (2S,4R)-4-((1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 甲基 )-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-4- 氟 -1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 216) 之合成 步驟 1 ： (2S,4R)-4-( 疊氮基甲基 )-4- 氟 -1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸苄酯 (2)
在N 2氛圍下向(啡㗁噻-3-羰基)甘胺酸(113 mg，0.38 mol)及(2S,4R)-4-(疊氮基甲基)-4-氟吡咯啶-2-甲酸苄酯鹽酸鹽(100 mg，0.31 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (219 mg，1.70 mmol)及HATU (194 mg，0.51 mol)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NH 4Cl水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 30% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之標題化合物(160 mg，產率93.0%)。LC/MS (ESI) m/z: 562 (M+H) +。 步驟 2 ： (2S,4R)-4-((1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 甲基 )-4- 氟 -1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸苄酯 (3)
在0℃下向(2S,4R)-4-(疊氮基甲基)-4-氟-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸苄酯(160 mg，0.28 mmol)於t-BuOH (2.8 mL)及水(5.6 mL)之溶液中添加三甲基矽基乙炔(56 mg，0.57 mmol)、CuSO 4.5 H 2O (154 mg，0.57 mmol)及抗壞血酸鈉(320 mg，1.62 mmol)。將混合物在密封管中在60℃下攪拌4小時。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 15: 1)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(48 mg，產率33.5%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.77 (d, J= 8.9 Hz, 1H), 7.67 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.44 (dd, J= 4.2, 2.4 Hz, 1H), 7.38 (d, J= 10.7 Hz, 6H), 7.24 - 7.21 (m, 1H), 7.15 - 7.11 (m, 1H), 7.10 - 6.96 (m, 3H), 5.45 - 5.12 (m, 3H), 4.86 - 4.62 (m, 3H), 4.26 - 3.88 (m, 2H), 3.79 - 3.58 (m, 1H), 2.58 - 2.42 (m, 1H), 2.29 - 2.17 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 588 (M+H) +。 步驟 3 ： (2S,4R)-4-((1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 甲基 )-4- 氟 -1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸 (4)
向(2S,4R)-4-((1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-4-氟-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸苄酯(45 mg，0.077 mmol)於MeOH (2 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH·H 2O (12 mg，0.31 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈淺黃色油狀物之標題化合物(34 mg，產率89.5%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 498 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S,4R)-4-((1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 甲基 )-4- 氟 -1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-N-((R)-1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 (5)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-4-((1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-4-氟-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸(34 mg，0.068 mol)及(R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-胺鹽酸鹽(34 mg，0.10 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (44 mg，0.34 mmol)及HATU (39 mg，0.10 mol)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NH 4Cl水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 15: 1)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(30 mg，產率56.6%)。LC/MS (ESI) m/z: 781 (M+H) +。 步驟 5 ： (2S,4R)-4-((1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 甲基 )-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-4- 氟 -1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 216)
向(2S,4R)-4-((1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-4-氟-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-((R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)吡咯啶-2-甲醯胺(30 mg，0.038 mol)於MeOH (2 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH·H 2O (6 mg，0.14 mol)，且將混合物在30℃下攪拌4小時。將混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 216(2.9 mg，產率12.2%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.64 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.88 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.60 - 7.55 (m, 2H), 7.26 (dd, J= 8.1, 4.3 Hz, 1H), 7.21 - 7.15 (m, 2H), 7.08 (t, J= 7.3 Hz, 2H), 7.03 (dd, J= 8.1, 1.2 Hz, 1H), 6.52 (d, J= 0.7 Hz, 1H), 5.35 - 5.29 (m, 1H), 5.07 (s, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.62 - 4.57 (m, 1H), 4.16 (ddd, J= 41.7, 21.8, 14.6 Hz, 3H), 3.98 (dd, J= 19.2, 12.3 Hz, 1H), 2.47 - 2.43 (m, 1H), 2.42 - 2.30 (m, 1H), 1.60 (d, J= 6.9 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 641 (M+H) +。RT (方法A): 1.32 min。 流程 63. (2S,4S)-4-((1H- 咪唑 -1- 基 ) 甲基 )-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-4- 氟 -1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 217) 之合成 步驟 1 ： (2S,4R)-4- 氟 -1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-4-(( 甲苯磺醯基氧基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸苄酯 (2)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-4-氟-4-((甲苯磺醯基氧基)甲基)吡咯啶-2-甲酸苄酯鹽酸鹽(480 mg，1.08 mmol)及(啡㗁噻-3-羰基)甘胺酸(326 mg，1.08 mmol)於DMF (5 mL)之混合物中添加DIPEA (697 mg，5.40 mmol)及HATU (615 mg，1.62 mol)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NH 4Cl水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 40% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之標題化合物(740 mg，產率99.0%)。LC/MS (ESI) m/z: 691 (M+H) +。 步驟 2 ： (2S,4S)-4-((1H- 咪唑 -1- 基 ) 甲基 )-4- 氟 -1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸苄酯 (3)
向(2S,4R)-4-氟-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-4-((甲苯磺醯基氧基)甲基)吡咯啶-2-甲酸苄酯(740 mg，1.07 mmol)於DMSO (10 mL)之溶液中添加1H-咪唑(365 mg，5.36 mmol)及DIPEA (1.38 g，10.72 mmol)且將混合物在120℃下攪拌20小時。將反應混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 70% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色固體之標題化合物(90 mg，產率14.3%)。LC/MS (ESI) m/z: 587 (M+H) +。 步驟 3 ： (2S,4S)-4-((1H- 咪唑 -1- 基 ) 甲基 )-4- 氟 -1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸 (4)
向(2S,4S)-4-((1H-咪唑-1-基)甲基)-4-氟-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸苄酯(90 mg，0.15 mmol)於MeOH (4 mL)及水(2 mL)之溶液中添加LiOH·H 2O (26 mg，0.61 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色油狀物之標題化合物(40 mg，產率52.6%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 497 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S,4S)-4-((1H- 咪唑 -1- 基 ) 甲基 )-4- 氟 -1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-N-((R)-1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 (5)
在N 2氛圍下向(2S,4S)-4-((1H-咪唑-1-基)甲基)-4-氟-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸(40 mg，0.081 mol)及(R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-胺鹽酸鹽(41 mg，0.12 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (52 mg，0.41 mmol)及HATU (46 mg，0.12 mol)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NH 4Cl水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 15: 1)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(40 mg，產率63.7%)。LC/MS (ESI) m/z: 780 (M+H) +。 步驟 5 ： (2S,4S)-4-((1H- 咪唑 -1- 基 ) 甲基 )-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-4- 氟 -1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 217)
向(2S,4S)-4-((1H-咪唑-1-基)甲基)-4-氟-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-((R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)吡咯啶-2-甲醯胺(40 mg，0.051 mol)於MeOH (2 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH·H 2O (8.6 mg，0.21 mol)，且將混合物在30℃下攪拌4小時。將混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 217(6.7 mg，產率20.4%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.64 (s, 1H), 7.88 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.61 - 7.56 (m, 2H), 7.28 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.21 (d, J= 7.6 Hz, 2H), 7.18 (s, 1H), 7.10 - 7.05 (m, 2H), 7.03 (d, J= 7.0 Hz, 2H), 6.52 (s, 1H), 5.32 (t, J= 6.9 Hz, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.60 - 4.55 (m, 2H), 4.34 - 4.11 (m, 2H), 4.05 - 3.93 (m, 2H), 2.41 - 2.35 (m, 1H), 2.34 - 2.19 (m, 1H), 1.60 (d, J= 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 580 (M+H) +。RT (方法A): 0.95 min。 流程 64. (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-N-((1,2,3,4- 四氫異喹啉 -6- 基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 223) 之合成 步驟 1 ： 6- 氰基 -3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 甲酸三級丁酯 (2)
在0℃下向1,2,3,4-四氫異喹啉-6-甲腈(120 mg，0.76 mmol)於DCM (3 mL)之溶液中添加(Boc) 2O (248 mg，1.15 mmol)，隨後添加TEA (0.21 mL，1.52 mmol)且將混合物在室溫下攪拌6小時。混合物用水稀釋且用DCM萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 30% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(160 mg，產率81.7%)。LC/MS (ESI) m/z: 259 (M+H) +。 步驟 2 ： 6-( 胺基甲基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 甲酸三級丁酯 (3)
向6-氰基-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸 三級丁酯(80 mg，0.31 mmol)於MeOH (3 mL)之溶液中添加雷氏Ni (10 mg，濕)，混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在H 2氣球下於室溫攪拌3小時。過濾混合物，且將濾液濃縮至乾，得到呈黃色油狀物之標題化合物(65 mg，產率80.0%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 263 (M+H) +。 步驟 3 ： 6-(((2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺基 ) 甲基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 甲酸三級丁酯 (4)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸(35 mg，0.08 mol)及6-(胺基甲基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸 三級丁酯(20 mg，0.08 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (30 mg，0.23 mmol)及HATU (43 mg，0.11 mol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NH 4Cl水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 100% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之標題化合物(35 mg，產率64.8%)。LC/MS (ESI) m/z: 709 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-N-((1,2,3,4- 四氫異喹啉 -6- 基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 223)
向6-(((2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺基)甲基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸三級丁酯(35 mg，0.05 mmol)於1,4-二噁烷(1 mL)之溶液中添加HCl/1,4-二噁烷(0.5 mL，4M)且將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物濃縮至乾且藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 223(4.5 mg，產率15.0%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.84 - 8.39 (m, 2H), 7.64 - 7.52 (m, 2H), 7.38 (dd, J= 8.1, 2.3 Hz, 1H), 7.32 - 7.22 (m, 2H), 7.17 - 7.11 (m, 2H), 7.05 - 6.59 (m, 4H), 4.98 – 4.83 (m, 1H), 4.66 - 4.40 (m, 1H), 4.32 - 4.10 (m, 3H), 4.08 - 3.98 (m, 1H), 3.91 - 3.81 (m, 1H), 3.78 (s, 2H), 3.70 - 3.56 (m, 1H), 2.93 - 2.77 (m, 2H), 2.69 - 2.58 (m, 2H), 2.35 - 2.20 (m, 1H), 2.17 - 1.85 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 609 (M+H) +。RT (方法A): 1.50 min。 流程 65. (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-N-((1,2,3,4- 四氫異喹啉 -7- 基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 226) 之合成 步驟 1 ： 7- 溴 -3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 甲酸三級丁酯 (2)
在N 2氛圍下向7-溴-1,2,3,4-四氫異喹啉(1.5 g，7.07 mmol)於MeOH (15 mL)之溶液中添加2N Na 2CO 3水溶液(21 mL，42 mmol)及(Boc) 2O (1.7 g，7.77 mmol)，將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 20% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色固體之標題化合物(1.66 g，產率75.1%)。LC/MS (ESI) m/z: 312 (M+H) +。 步驟 2 ： 7- 氰基 -3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 甲酸三級丁酯 (3)
在N 2氛圍下向7-溴-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸 三級丁酯(1 g，3.21 mmol)及Zn(CN) 2(1.1 g，0.32 mmol)於DMF (10 mL)之混合物中添加Pd(PPh 3) 4(370 mg，0.32 mmol)，反應混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在100℃下攪拌3小時。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 20% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色固體之標題化合物(680 mg，產率82.5%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO): δ 7.70 (s, 1H), 7.61 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 7.37 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 4.54 (s, 2H), 3.56 (t, J= 5.8 Hz, 2H), 2.85 (t, J= 5.7 Hz, 2H), 1.43 (s, 9H)。LC/MS (ESI) m/z: 259 (M+H) +。 步驟 3 ： 7-( 胺基甲基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 甲酸三級丁酯 (4)
向7-氰基-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸 三級丁酯(100 mg，0.38 mmol)於MeOH (2 mL)之溶液中添加雷氏Ni (10 mg，濕)，混合物在N 2氛圍下脫氣十次且在H 2氣球下於室溫攪拌隔夜。過濾混合物，且在減壓下將濾液濃縮至乾，得到呈黃色固體之標題化合物(80 mg，產率79.2%)。LC/MS (ESI) m/z: 263 (M+H) +。 步驟 4 ： 7-(((2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺基 ) 甲基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 甲酸三級丁酯 (5)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基) 吡咯啶-2-甲酸(30 mg，0.064 mol)及7-(胺基甲基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸 三級丁酯(34 mg，0.12 mmol)於DMF (1 mL)之混合物中添加DIPEA (36 mg，0.32 mmol)及HATU (41 mg，0.10 mol)且將反應混合物在室溫下攪拌30 min。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NH 4Cl水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 80% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(30 mg，產率66.6%)。LC/MS (ESI) m/z: 709 (M+H) +。 步驟 5 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-N-((1,2,3,4- 四氫異喹啉 -7- 基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 226)
在0℃下向7-(((2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺基)甲基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸 三級丁酯(30 mg，0.04 mmol)於DCM (1 mL)之溶液中添加TFA (0.5 mL)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 226(15.2 mg，產率60.8%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.55 - 7.42 (m, 2H), 7.24 - 7.15 (m, 4H), 7.11 - 7.00 (m, 4H), 6.51 (t, J= 74.4 Hz, 1H), 5.04 - 4.98 (m, 1H), 4.60 - 4.58 (m, 1H), 4.39 - 4.37 (m, 2H), 4.21 - 4.15 (m, 3H), 4.01 - 3.94 (m, 1H), 3.86 (d, J= 11.3 Hz, 1H), 3.43 - 3.38 (m, 3H), 3.04 - 2.94 (m, 2H), 2.54 - 2.42 (m, 1H), 2.29 - 2.17 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 609 (M+H) +。RT (方法A): 1.50 min。
基於流程65來製備以下化合物：
化合物編號 反應物A 反應物B 特性化資料
253 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.21 (s, 1H), 8.65 (d, J= 14.2 Hz, 2H), 8.24 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 8.02 (d, J= 5.4 Hz, 1H), 7.62 (t, J= 9.7 Hz, 1H), 7.42 (d, J= 7.7 Hz, 2H), 7.35 (d, J= 9.5 Hz, 1H), 6.83 (q, J= 9.7 Hz, 3H), 6.37 (s, 1H), 4.96 (s, 1H), 4.65 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 4.52 – 4.25 (m, 3H), 4.15 (dd, J= 16.8, 5.6 Hz, 1H), 3.97 (d, J= 16.9 Hz, 1H), 3.82 – 3.66 (m, 1H), 2.26 (s, 3H), 2.15 (s, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 592 (M+H) +。RT (方法A): 1.65 min。
257 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.61 (d, J= 12.6 Hz, 1H), 7.52 (dd, J= 8.1, 1.8 Hz, 1H), 7.49 (dd, J= 7.3, 1.8 Hz, 1H), 7.24 - 7.17 (m, 2H), 7.15 (dd, J= 7.8, 1.6 Hz, 1H), 7.06 (dd, J= 15.0, 7.7 Hz, 2H), 6.87 (d, J= 15.8 Hz, 1H), 6.70 - 6.28 (m, 1H), 5.02 - 4.97 (m, 1H), 4.56 (t, J= 7.8 Hz, 1H), 4.34 - 4.25 (m, 2H), 4.23 - 4.11 (m, 2H), 3.96 (dd, J= 11.4, 4.7 Hz, 1H), 3.85 (d, J= 12.1 Hz, 1H), 3.57 - 3.50 (m, 2H), 2.99 (t, J= 8.7 Hz, 2H), 2.51 - 2.42 (m, 1H), 2.26 - 2.17 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 596 (M+H) +。RT (方法A): 1.48 min。
258 b,c 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.33 (d, J= 13.5 Hz, 1H), 7.95 (dd, J= 26.9, 8.3 Hz, 1H), 7.56 - 7.41 (m, 2H), 7.37 - 7.31 (m, 1H), 7.21 - 7.12 (m, 3H), 7.09 - 7.00 (m, 2H), 6.71 - 6.29 (m, 1H), 5.05 - 4.94 (m, 1H), 4.70 - 4.61 (m, 3H), 4.27 - 4.13 (m, 2H), 4.03 - 3.84 (m, 2H), 2.69 - 2.47 (m, 1H), 2.45 - 2.26 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 595 (M+H) +。RT (方法A): 1.70 min。
a在DCM中在DIPEA存在下進行步驟1。 b僅步驟2-4。 c使用NMP作為步驟2中之溶劑。 流程 66. (2S,4R)-N-((3- 胺基苯并 [d] 異噁唑 -6- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 232) 之合成 步驟 1 ： ( 三級丁氧基羰基 )(4- 氰基 -3- 氟苄基 ) 胺甲酸三級丁酯 (2)
在N 2氛圍下向4-(溴甲基)-2-氟苯甲腈(500 mg，2.33 mol)於DMF (5 mL)之溶液中添加K 2CO 3(970 mg，7.02 mmol)及亞胺基二碳酸 二 - 三級丁酯(760 mg，3.49 mmol)且將混合物在80℃下攪拌隔夜。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 5% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(320 mg，產率39.1%)。LC/MS (ESI) (m/z): 351 (M+H) +。 步驟 2 ： ((3- 胺基苯并 [d] 異噁唑 -6- 基 ) 甲基 )( 三級丁氧基羰基 ) 胺甲酸三級丁酯 (3)
向(三級丁氧基羰基)(4-氰基-3-氟苄基)胺甲酸 三級丁酯(270 mg，0.77 mmol)及N-羥基乙醯胺(87 mg，1.16 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加 t-BuOK (1.15 mL，1.15 mmol，THF中1 M)且將混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 70% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(120 mg，產率99.5%)。LC/MS (ESI) m/z: 393 (M+H) +。 步驟 3 ： 6-( 胺基甲基 ) 苯并 [d] 異噁唑 -3- 胺 (4)
在0℃下向((3-胺基苯并[d]異噁唑-6-基)甲基)(三級丁氧基羰基)胺甲酸 三級丁酯(40 mg，0.11 mmol)於DCM (1 mL)之溶液中添加HCl/1,4-二噁烷(1 mL，4 M)且將混合物在N 2氛圍在室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(17 mg，產率94.6%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 164 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S,4R)-N-((3- 胺基苯并 [d] 異噁唑 -6- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 232)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸(50 mg，0.11 mol)及6-(胺基甲基)苯并[d]異噁唑-3-胺(17 mg，0.11 mmol)於DMF (2 mL)之溶液中添加DIPEA (72 mg，0.55 mmol)及HATU (54 mg，0.14 mol)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 232(5.8 mg，產率8.6%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.68 (dd, J= 22.2, 8.3 Hz, 1H), 7.54 - 7.45 (m, 2H), 7.36 (s, 1H), 7.23 - 7.17 (m, 3H), 7.14 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.06 (dd, J= 14.3, 7.8 Hz, 2H), 6.51 (t, J= 74.5 Hz, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.64 - 4.52 (m, 3H), 4.28 - 4.12 (m, 2H), 3.96 (dd, J= 11.4, 4.5 Hz, 1H), 3.89 - 3.81 (m, 1H), 2.61 - 2.41 (m, 1H), 2.30 - 2.15 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 610 (M+H) +。RT (方法A): 2.00 min。 流程 67. (S)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-2-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 234) 之合成 步驟 1 ： (R)-1-(3-( 苄氧基 )-2- 羥丙基 ) 環己烷 -1- 甲腈 (2)
在N 2氛圍，-78℃下向二異丙胺(1.35 g，13.4 mmol)於無水THF (20 mL)之溶液中逐滴添加n-BuLi (4.8 mL，12.2 mmol，己烷中2.5M)且將混合物在此溫度下攪拌30 min。在N 2氛圍，-78℃下將環己烷甲腈(666 mg，6.1 mmol)於無水THF (10 mL)中之溶液逐滴添加至以上混合物中且將混合物在-78℃下攪拌1小時。在N 2氛圍，-78℃下向以上混合物中逐滴添加(R)-2-((苄氧基)甲基)環氧乙烷(500 mg，3.05 mmol)於THF (5 mL)中之溶液且將所得混合物在-78℃至20℃攪拌20 min。反應混合物在0℃下用飽和NH 4Cl水溶液淬滅且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 30% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(681 mg，產率81.9%)。LC/MS (ESI) m/z: 274 (M+H) +。 步驟 2 ： (R)-((1-(3-( 苄氧基 )-2- 羥丙基 ) 環己基 ) 甲基 ) 胺甲酸三級丁酯 (3)
在0℃下向(R)-1-(3-(苄氧基)-2-羥丙基)環己烷-1-甲腈(580 mg，2.13 mmol)及CoCl 2.6H 2O (1.01 g，4.25 mmol)於MeOH (30 mL)之混合物中分批添加NaBH 4(404 mg，10.63 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。反應混合物用1 N HCl水溶液淬滅，且在減壓下濃縮混合物以移除MeOH。水性混合物用1N NaOH水溶液鹼化且添加Boc 2O (926 mg，4.25 mmol)於DCM (10 mL)中之溶液。將所得混合物在室溫下攪拌隔夜。混合物用DCM稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 30% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(550 mg，產率68.5%)。LC/MS (ESI) m/z: 378 (M+H) +。 步驟 3 ： (S)-3-(( 苄氧基 ) 甲基 )-2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -2- 甲酸三級丁酯 (4)
在0℃下向(R)-((1-(3-(苄氧基)-2-羥丙基)環己基)甲基)胺甲酸 三級丁酯(550 mg，1.46 mmol)及1,1,1-三乙氧基乙烷 (355 mg，2.19 mmol)於DCM (6 mL)之混合物中添加BF 3.Et 2O (104 mg，0.73 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。反應混合物用飽和NaHCO 3水溶液淬滅，用DCM萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 10% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(180 mg，產率34.3%)。LC/MS (ESI) m/z: 360 (M+H) +。 步驟 4 ： (S)-3-( 羥基甲基 )-2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -2- 甲酸三級丁酯 (5)
向(S)-3-((苄氧基)甲基)-2-氮雜螺[4.5]癸烷-2-甲酸 三級丁酯(180 mg，0.50 mmol)於MeOH (2 mL)之溶液中添加Pd/C (20 mg，10% wt.)且將混合物在H 2氣球下於室溫攪拌2小時。過濾混合物且將濾液濃縮至乾，得到呈無色油狀物之標題化合物(130 mg，產率96.3%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 270 (M+H) +。 步驟 5 ： (S)-2-( 三級丁氧基羰基 )-2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -3- 甲酸 (6)
在N 2氛圍，室溫下向(S)-3-(羥基甲基)-2-氮雜螺[4.5]癸烷-2-甲酸三級丁酯(130 mg，0.48 mmol)於丙酮(3 mL)之溶液中添加Jones氧化劑(15滴，2.7 M，新製備)且將混合物在室溫下攪拌10分鐘。過濾混合物。將濾液用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈無色油狀物之標題化合物(64 mg，產率47.1%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 284 (M+H) +。 步驟 6 ： (S)-3-(((R)-1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 ) 胺甲醯基 )-2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -2- 甲酸三級丁酯 (7)
在N 2氛圍，0℃下向(S)-2-( 三級丁氧基羰基)-2-氮雜螺[4.5]癸烷-3-甲酸(30 mg，0.11 mmol)及(R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-胺鹽酸鹽(48 mg，0.16 mmol)於DMF (1 mL)之混合物中添加DIPEA (68 mg，0.53 mmol)及HATU (60 mg，0.16 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 8: 1)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(25 mg，產率41.7%)。LC/MS (ESI) (m/z): 567 (M+H) +。 步驟 7 ： (S)-N-((R)-1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -3- 甲醯胺鹽酸鹽 (8)
將(S)-3-(((R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)胺甲醯基)-2-氮雜螺[4.5]癸烷-2-甲酸 三級丁酯(25 mg，0.044 mmol)於HCl/1,4-二噁烷(1 mL，4M)中之溶液在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(21 mg，產率94.6%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 467 (M+H) +。 步驟 8 ： (S)-2-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-N-((R)-1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -3- 甲醯胺 (9)
在N 2氛圍，0℃下向(啡㗁噻-3-羰基)甘胺酸(15 mg，0.049 mmol)及(S)-N-((R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-2-氮雜螺[4.5]癸烷-3-甲醯胺鹽酸鹽(21 mg，0.044 mmol)於DMF (1 mL)之混合物中添加DIPEA (29 mg，0.22 mmol)及T 3P (42 mg，0.066 mmol，EtOAc中50% wt.)且將混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(23 mg，產率63.8%)。LC/MS (ESI) (m/z): 750 (M+H) +。 步驟 9 ： ((S)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-2-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 234)
向(S)-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-((R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-2-氮雜螺[4.5]癸烷-3-甲醯胺(23 mg，0.03 mol)於MeOH (1 mL)及水(0.25 mL)之溶液中添加LiOH·H 2O (3 mg，0.06 mol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 234(2.8 mg，產率15.4%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.64 (s, 1H), 7.89 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.64 - 7.55 (m, 2H), 7.28 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.22 - 7.15 (m, 2H), 7.10 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 7.04 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 6.51 (s, 1H), 5.31 (d, J= 6.7 Hz, 1H), 4.46 - 4.36 (m, 2H), 4.11 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 3.72 (d, J= 9.9 Hz, 1H), 3.40 (d, J= 10.0 Hz, 1H), 2.27 - 2.20 (m, 1H), 1.80 - 1.74 (m, 1H), 1.60 (d, J= 6.8 Hz, 3H), 1.55 - 1.42 (m, 8H), 1.36 - 1.28 (m, 2H)。LC/MS (ESI) m/z: 610 (M+H) +。RT (方法A): 1.80 min。 流程 68. (2S,4R)-N-((4- 胺基 -2- 側氧基 -2H- 苯并 [e][1,3] 噁嗪 -7- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 248) 之合成 步驟 1 ： ( 三級丁氧基羰基 )(4- 胺甲醯亞胺基 -3- 羥基苄基 ) 胺甲酸三級丁酯 (2)
向((3-胺基苯并[d]異噁唑-6-基)甲基)(三級丁氧基羰基)胺甲酸 三級丁酯(50 mg，0.14 mmol)於MeOH (2 mL)之溶液中添加Pd/C (5 mg，10% wt.)，混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在H 2氣球下於室溫攪拌3小時。過濾混合物且將濾液濃縮至乾，得到呈黃色固體之標題化合物(50 mg，產率99.4%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 366 (M+H) +。 步驟 2 ： ((4- 胺基 -2- 側氧基 -2H- 苯并 [e][1,3] 噁嗪 -7- 基 ) 甲基 )( 三級丁氧基羰基 ) 胺甲酸三級丁酯 (3)
向( 三級丁氧基羰基)(4-胺甲醯亞胺基-3-羥基苄基)胺甲酸 三級丁酯(50 mg，0.14 mmol)於DMF (1 mL)之溶液中添加DIPEA (53 mg，0.41 mmol)及CDI (44 mg，0.27 mmol)且將混合物在室溫下攪拌隔夜。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(37 mg，產率69.0%)。LC/MS (ESI) m/z: 392(M+H) +。 步驟 3 ： 4- 胺基 -7-( 胺基甲基 )-2H- 苯并 [e][1,3] 噁嗪 -2- 酮 (4)
在0℃下向((4-胺基-2-側氧基-2H-苯并[e][1,3]噁嗪-7-基)甲基)(三級丁氧基羰基)胺甲酸 三級丁酯(35 mg，0.089 mmol)於DCM (0.9 mL)之溶液中添加TFA (0.3 mL)且將混合物在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色固體之標題化合物(16 mg，產率93.5%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 192 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S,4R)-N-((4- 胺基 -2- 側氧基 -2H- 苯并 [e][1,3] 噁嗪 -7- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 248)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基) 吡咯啶-2-甲酸(40 mg，0.086 mol)及4-胺基-7-(胺基甲基)-2H-苯并[e][1,3]噁嗪-2-酮(16 mg，0.083 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (55 mg，0.42 mmol)及HATU (42 mg，0.11 mol)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 248(9 mg，產率16.9%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.89 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.54 – 7.51 (m, 1H), 7.41 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.22 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.21 – 7.15 (m, 2H), 7.09 (dd, J = 7.5, 1.3 Hz, 1H), 7.04 (dd, J = 8.1, 1.1 Hz, 1H), 6.75 – 6.37 (m, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.61 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 4.52 (d, J = 4.0 Hz, 2H), 4.18 (d, J = 9.7 Hz, 2H), 3.99 (dd, J = 11.4, 4.5 Hz, 1H), 3.88 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 2.53 – 2.46 (m, 1H), 2.28 – 2.21 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 638 (M+H) +。RT (方法A): 1.74 min。 流程 69. (S)-7-((3-(4- 氟苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 )-N-( 噻吩并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基甲基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 255) 之合成 步驟 1 ： 3-(4- 氟苯氧基 ) 苯甲酸甲酯 (2)
在N 2氛圍下向1-氟-4-碘苯(2.0 g，13.3 mmol)及3-羥基苯甲酸甲酯(5.8 g，26.3 mmol)於1,4-二噁烷(20 mL)之混合物中添加CsCO 3(6.42 g，19.7 mmol)，隨後添加CuI (1.4 g，7.25 mmol)，且將混合物在100℃下攪拌12小時。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 30% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(450 mg，產率14.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 247 (M+H) +。 步驟 2 ： 3-(4- 氟苯氧基 ) 苯甲酸 (3)
向3-(4-氟苯氧基)苯甲酸甲酯(450 mg，1.83 mmol)於THF (5 mL)之溶液中添加NaOH (219 mg，5.48 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，且在減壓下濃縮，得到呈白色固體之標題化合物(300 mg，產率70.8%)。LC/MS (ESI) m/z: 233 (M+H) +。 步驟 3 ： (3-(4- 氟苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺酸乙酯 (4)
在N 2氛圍下向3-(4-氟苯氧基)苯甲酸(300 mg，1.29 mmol)及甘胺酸乙酯(270 mg，1.93 mmol)於DCM (10 mL)之混合物中添加DIPEA (334 mg，0.23 mmol)，隨後添加HOBT (262 mg，1.93 mmol)，且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用DCM稀釋，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 100% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(280 mg，產率58.0%)。LC/MS (ESI) m/z: 318 (M+H) +。 步驟 4 ： (3-(4- 氟苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺酸 (5)
向(3-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺酸乙酯(280 mg，0.88 mmol)於THF (3 mL)及H 2O (1.5 mL)之溶液中添加KOH (100 mg，1.76 mmol)且將混合物在70℃下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，且在減壓下濃縮，得到呈白色固體之標題化合物(210 mg，產率76.9%)。LC/MS (ESI) m/z: 290 (M+H) +。 步驟 5 ： (S)-7-((3-(4- 氟苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲酸甲酯 (6)
在N 2氛圍下向(3-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺酸(100 mg，0.35 mmol)及(S)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸甲酯(96.7 mg，0.52 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (133 mg，1.03 mmol)，隨後添加HATU (196 mg，0.52 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 100% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(40 mg，產率25.3%)。LC/MS (ESI) m/z: 459 (M+H) +。 步驟 6 ： (S)-7-((3-(4- 氟苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲酸 (7)
向(S)-7-((3-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸甲酯(40 mg，0.09 mmol)於THF/MeOH/H 2O (2 mL，4/1/1)之溶液中添加LiOH (7 mg，0.18 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，且在減壓下濃縮，得到呈白色固體之標題化合物(27 mg，產率69.9%)。LC/MS (ESI) m/z: 445 (M+H) +。 步驟 7 ： (S)-7-((3-(4- 氟苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 )-N-( 噻吩并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基甲基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 255)
在N 2氛圍下向(S)-7-((3-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸(27 mg，0.06 mmol)及噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基甲胺(15 mg，0.09 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (24 mg，0.18 mmol)，隨後添加HATU (35 mg，0.09 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 255(4 mg，產率11.4%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.87 (s, 1H), 8.27 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.88 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 7.55 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 7.43 – 7.38 (m, 3H), 7.10 (t, J= 8.6 Hz, 3H), 7.04 – 7.00 (m, 2H), 4.81 – 4.78 (m, 1H), 4.74 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 4.61 (dd, J= 9.1, 5.3 Hz, 1H), 4.18 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.10 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 3.98 (d, J= 1.5 Hz, 4H), 3.79 (s, 2H), 2.48 – 2.40 (m, 1H), 2.29 – 2.19 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 591 (M+H) +。RT (方法A): 1.31 min。 流程 70. (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((3-(2,4- 二氟苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 259) 之合成 步驟 1 ： (3-(2,4- 二氟苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺酸三級丁酯 (3)
向3-(2,4-二氟苯氧基)苯甲酸(90.00 mg，0.3597 mmol，1當量)於DMF (2 mL)之溶液中添加2-胺基乙酸三級丁酯鹽酸鹽(72.40 mg，0.4319 mmol，1.2當量)、HATU (205.0 mg，0.5391 mmol，1.3當量)及DIPEA (0.188 mL，1.08 mmol，3當量)。將反應混合物在室溫下攪拌1 h。添加水(5 mL)，攪拌10分鐘。藉由過濾收集破碎之產物且乾燥，得到2-[[3-(2,4-二氟苯氧基)苄醯基]胺基]乙酸三級丁酯(104.0 mg，0.2862 mmol，79.56%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 364 (M+H)+。 步驟 2 ： (3-(2,4- 二氟苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺酸 (4).
在冰浴溫度下將TFA (0.5 mL)添加至2-[[3-(2,4-二氟苯氧基)苄醯基]胺基]乙酸三級丁酯(100.0 mg，0.2752 mmol，1.0當量)於CH 2Cl 2(1 mL)之溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌4小時，然後濃縮至乾，得到呈透明油狀物之2-[[3-(2,4-二氟苯氧基)苄醯基]胺基]乙酸(84.00 mg，0.2734 mmol，99.37%產率)，其未經進一步純化用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z:308 (M+H) +。 步驟 3 及 4 ： (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((3-(2,4- 二氟苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 259)
向2-[[3-(2,4-二氟苯氧基)苄醯基]胺基]乙酸(17.35 mg，0.05648 mmol，1.0當量)於DMF (2 mL)之溶液中添加(2S,4R)-N-[[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]甲基]-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲醯胺；鹽酸鹽(25.00 mg，0.05135 mmol，1.0當量)、含T3P (50質量%)之乙酸乙酯(46.10 μL，0.0770 mmol，1.5當量)及DIPEA (26.90 μL，0.154 mmol，3.0當量)。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘，然後用水稀釋。傾析濾液且將殘餘物用水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，且濃縮，得到棕色油狀物，其未經進一步純化用於下一反應。向以上所獲得之於THF (1.5 mL)、MeOH (0.5mL)及水(0.5 mL)之棕色油狀物中添加LiOH (2.459 mg，0.1027 mmol，2當量)，將反應混合物在室溫下攪拌6小時，然後濃縮以移除THF/MeOH。使用4M HCl將The pH調節至1，濃縮且藉由製備型HPLC純化，得到 化合物 259(3.450 mg，0.005755 mmol，100質量%，11.21%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 600 (M+H) +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.25 (s, 1H), 8.94 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 8.89 – 8.75 (m, 1H), 8.69 (d, J= 14.2 Hz, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.03 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.65 (t, J= 8.3 Hz, 1H), 7.57 – 7.46 (m, 3H), 7.42 – 7.26 (m, 2H), 7.23 – 7.03 (m, 4H), 6.82 (s, 1H), 6.38 (s, 1H), 4.97 (s, 1H), 4.50 (dd, J= 9.9, 5.3 Hz, 1H), 4.19 (dd, J= 16.8, 5.8 Hz, 1H), 4.01 (dd, J= 16.7, 5.7 Hz, 1H), 3.87 (dd, J= 11.6, 4.6 Hz, 1H), 3.82 – 3.64 (m, 1H), 2.33 (td, J= 10.5, 4.8 Hz, 2H), 2.20 – 2.07 (m, 1H)。RT (方法A): 1.38 min。
基於流程70來製備化合物153：
化合物編號 反應物A 反應物B 反應物C 特性化資料
153 a 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.33 (s, 1H), 8.70 (dd, J= 13.5, 7.8 Hz, 1H), 8.38 (t, J= 5.8 Hz, 1H), 8.20 – 7.76 (m, 1H), 7.58 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.47 – 7.35 (m, 2H), 7.24 – 7.09 (m, 4H), 7.03 (dt, J= 9.1, 4.6 Hz, 2H), 6.34 (s, 1H), 4.63 (dd, J= 11.3, 3.3 Hz, 1H), 4.47 – 4.13 (m, 1H), 3.98 (dd, J= 16.5, 5.7 Hz, 1H), 3.36 (dd, J= 5.9, 2.4 Hz, 1H), 2.34 – 2.12 (m, 1H), 1.98 (dd, J= 13.2, 3.3 Hz, 1H), 1.54 – 1.32 (m, 4H), 1.32 – 1.03 (m, 5H), 0.86 (q, J= 7.6 Hz, 2H), 0.63 (t, J= 5.5 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 542 (M+H) +。RT (方法A): 1.54 min。
a步驟3中不需要脫除保護基。 流程 71. (2S,4R)-N-((1H- 吡唑并 [4,3-b] 吡啶 -6- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 262) 之合成 步驟 1 ： 6- 溴 -1-( 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-1H- 吡唑并 [4,3-b] 吡啶 (2)
向6-溴-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶(400 mg，2.02 mmol)及3,4-二氫-2H-哌喃(255 mg，3.03 mmol)於THF (5 mL)之混合物中添加PPTS (507 mg，2.02 mmol)且將反應混合物在50℃下攪拌隔夜。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 25% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(362 mg，產率63.8%)。LC/MS (ESI) m/z: 282 (M+H) +。 步驟 2 ： 1-( 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-1H- 吡唑并 [4,3-b] 吡啶 -6- 甲腈 (3)
向6-溴-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶(362 mg，1.29 mmol)及Zn(CN) 2(303 mg，2.58 mmol)於NMP (5 mL)之混合物中添加Pd(PPh 3) 4(149 mg，0.129 mmol)且將反應混合物在100℃下攪拌隔夜。將混合物用EtOAc稀釋，用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 28% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之標題化合物(123 mg，產率53.9%)。LC/MS (ESI) m/z: 229 (M+H) +。 步驟 3 ： (1-( 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-1H- 吡唑并 [4,3-b] 吡啶 -6- 基 ) 甲胺 (4)
向1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-甲腈(120 mg，0.53 mmol)於MeOH (2 mL)之溶液中添加雷氏Ni (25 mg，濕t)。混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在H 2氣球下於25℃攪拌隔夜。過濾混合物，且將濾液濃縮至乾，得到呈黃色油狀物之標題化合物(100 mg，產率81.9%)，其未經純化用於下一反應。LC/MS (ESI) m/z: 233 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-N-((1-( 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-1H- 吡唑并 [4,3-b] 吡啶 -6- 基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 (5)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸(50 mg，0.11 mmol)及(1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基)甲胺(50 mg，0.22 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (84 mg，0.65 mmol)及HATU (49 mg，0.13 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NH 4Cl水溶液洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 5% MeOH)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(50 mg，產率68.5%)。LC/MS (ESI) m/z: 679 (M+H) +。 步驟 5 ： (2S,4R)-N-((1H- 吡唑并 [4,3-b] 吡啶 -6- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 262)
向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-((1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基)甲基)吡咯啶-2-甲醯胺(30 mg，0.04 mmol)於DCM (1 mL)之溶液中添加HCl/1,4-二噁烷(3 mL，4 M)且將混合物在室溫下攪拌2小時。將反應混合物濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 262(4.5 mg，產率17.1%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.42 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.42 - 7.39 (m, 1H), 7.34 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.12 - 7.06 (m, 2H), 6.99 (m, 2H), 4.97 (s, 1H), 4.57 (m, 4H), 4.23 - 4.09 (m, 2H), 3.96 - 3.90 (m, 1H), 3.82 (d, J= 12.2 Hz, 1H), 2.50 - 2.41 (m, 1H), 2.26 - 2.15 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 595 (M+H) +。RT (方法A): 1.79 min。 流程 72. (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-N-((2,3- 二氫 -1H- 吡咯并 [3,2-b] 吡啶 -5- 基 ) 甲基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 264) 之合成 步驟 1 ： 5- 氰基 -1H- 吡咯并 [3,2-b] 吡啶 -1- 甲酸三級丁酯 (2)
在0℃下向1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-5-甲腈(42 mg，0.29 mmol)於THF (2.0 mL)之溶液中添加(Boc) 2O (126 mg，0.58 mmol)及DMAP (4 mg，0.03 mmol)且將混合物在室溫下攪拌16小時。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(70 mg，產率99.2%)。LC/MS (ESI) m/z: 244 (M+H) +。 步驟 2 ： (5-( 胺基甲基 )-2,3- 二氫 -1H- 吡咯并 [3,2-b] 吡啶 -1- 甲酸三級丁酯 (3)
向5-氰基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-1-甲酸 三級丁酯(68 mg，0.28 mmol)於EtOH (2 mL)之混合物中添加Pd(OH) 2/C (10 mg，10% wt.)，混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在H 2氣球下於室溫攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(60 mg，產率86.0%)。LC/MS (ESI) (m/z): 250 (M+H) +。 步驟 3 ： 5-(((2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺基 ) 甲基 )-2,3- 二氫 -1H- 吡咯并 [3,2-b] 吡啶 -1- 甲酸三級丁酯 (4)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸(46 mg，0.10 mmol)及(5-(胺基甲基)-2,3-二氫-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-1-甲酸 三級丁酯(60 mg，0.24 mmol)於DMF (0.5 mL)之混合物中添加DIPEA (40 mg，0.30 mmol)及HATU (46 mg，0.12 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用EtOAc稀釋，用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 12: 1)純化殘餘物，得到呈黃色固體之標題化合物(40 mg，產率58.0%)。LC/MS (ESI) m/z: 696 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-N-((2,3- 二氫 -1H- 吡咯并 [3,2-b] 吡啶 -5- 基 ) 甲基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 264)
將5-(((2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺基)甲基)-2,3-二氫-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-1-甲酸 三級丁酯(20 mg，0.029 mmol)於HCl/1,4-二噁烷(0.5 mL，4M)中之溶液在N 2氛圍，室溫下攪拌1小時。將反應混合物濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 264(3.6 mg，產率21.1%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.54 (d, J= 8.1, 1.8 Hz, 1H), 7.49 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.24 - 7.15 (m, 3H), 7.07 (d, J= 14.7, 7.7 Hz, 2H), 6.98 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 6.83 (d, J= 13.3, 8.1 Hz, 1H), 6.51 (t, J= 74.5 Hz, 1H), 4.37 (s, 2H), 4.20 (d, J= 25.9 Hz, 2H), 4.00 - 3.95 (m, 1H), 3.85 (d, J= 11.0 Hz, 1H), 3.55 (t, J= 8.6 Hz, 2H), 3.03 (t, J= 8.6 Hz, 2H), 2.47 (s, 1H), 2.31 - 2.23 (m, 1H), 2.22 - 2.16 (m, 1H), 2.04 (s, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 596 (M+H) +。RT (方法A): 1.59 min。
基於流程72來製備化合物265及374：
化合物編號 反應物A 反應物B 特性化資料
265 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.54 -7.51 (m, 1H), 7.46 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.15 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.14 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 7.09 - 7.07 (m, 1H), 7.05 (s, 1H), 6.51 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 6.48 - 6.33 (m, 1H), 5.03 - 5.00 (m, 1H), 4.58 (s, 2H), 4.27 (d, J= 2.3 Hz, 2H), 4.19 (d, J= 18.8 Hz, 2H), 4.00 - 3.96 (m, 1H), 3.53 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 2.97 - 2.93 (m, 2H), 2.50 - 2.45 (m, 1H), 2.31 - 2.25 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 596 (M+H) +。RT (方法A): 1.54 min。
374 a,b 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.55 (s, 1H), 7.22 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.20 - 7.16 (m, 3H), 6.91 - 6.88 (m, 2H), 6.70 -6.24 (m, 2H), 5.00 (s, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.52 (t, J= 7.8 Hz, 1H), 4.33 (d, J= 2.8 Hz, 2H), 4.20 - 4.13 (m, 1H), 3.93 - 3.90 (m, 1H), 3.83 (s, 1H), 3.49 (s, 1H), 3.14 (s, 1H), 2.40 (s, 1H), 2.37 (d, J= 7.1 Hz, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.25 (s, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 600 (M+H) +。RT (方法A): 1.55 min。
a步驟1以相對於6-胺基-2,4-二甲基菸鹼甲腈及1,4-二噁烷過量5倍的TEA作為溶劑進行。 b步驟2使用雷氏Ni作為氫化催化劑進行。 流程 73. (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-N-( 吡咯并 [1,2-a] 吡嗪 -7- 基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 266) 之合成 步驟 1 ： 5-(2,2,2- 三氯乙醯基 )-1H- 吡咯 -3- 甲腈 (2)
在0℃下向2,2,2-三氯-1-(1H-吡咯-2-基)乙-1-酮(4.5 g，21.0 mmol)於MeCN (50 mL)之溶液中添加氯磺醯異氰酸酯(4.0 mL，45 mmol)且將混合物在室溫下攪拌3小時。將DMF (15 mL)添加至反應混合物中且將所得混合物在室溫下攪拌隔夜。反應混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EA)純化殘餘物，得到呈黃色固體之標題化合物(4.2 g，產率83.5%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 11.08 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.51 (s, 1H)。 步驟 2 ： 4- 氰基 -1H- 吡咯 -2- 甲醯胺 (3)
在0℃下向5-(2,2,2-三氯乙醯基)-1H-吡咯-3-甲腈(2.50 g，10.5 mmol)於MeCN (20 mL)之溶液中添加NH 3.H 2O (7.0 mL，H 2O中25 wt.%)且將混合物在室溫下攪拌2小時。過濾沉澱物，用EtOAc洗滌，在真空下乾燥，得到呈白色固體之標題化合物(1.20 g，產率84.4%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.51 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.21 (s, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 136 (M+H) +。 步驟 3 ： 4- 氰基 -1-(2,2- 二甲氧基乙基 )-1H- 吡咯 -2- 甲醯胺 (4)
在N 2氛圍下向4-氰基-1H-吡咯-2-甲醯胺(1.20 g，8.88 mmol)於DMF (15 mL)之混合物中添加Cs 2CO 3(5.79 g，17.8 mmol)，隨後添加2-溴-1,1-二甲氧基乙烷(2.25 g，13.3 mmol)且將混合物在90℃下攪拌16小時。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 100% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之標題化合物(1.10 g，產率55.5%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 7.78 (s, 1H), 7.72 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.19 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 4.55 (t, J= 5.3 Hz, 1H), 4.44 (d, J= 5.3 Hz, 2H), 3.25 (s, 6H)。LC/MS (ESI) m/z: 224 (M+H) +。 步驟 4 ： 1- 側氧基 -1,2- 二氫吡咯并 [1,2-a] 吡嗪 -7- 甲腈 (5)
向4-氰基-1-(2,2-二甲氧基乙基)-1H-吡咯-2-甲醯胺(1.10 g，4.93 mmol)於AcOH (10 mL)之溶液中且將混合物在100℃下攪拌16小時。過濾漿液，且將濾餅用EtOAc洗滌，在真空下乾燥，得到呈黃色固體之標題化合物(600 mg，產率76.5%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 10.81 (s, 1H), 8.15 (d, J= 1.3 Hz, 1H), 7.35 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.77 (t, J= 5.7 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 160 (M+H) +。 步驟 5 ： 1- 溴吡咯并 [1,2-a] 吡嗪 -7- 甲腈 (6)
在0℃下向1-側氧基-1,2-二氫吡咯并[1,2-a]吡嗪-7-甲腈(600 mg，3.77 mmol)於MeCN (20 mL)之溶液中添加POBr 3(2.16 g，7.54 mmol)且將混合物在90℃下攪拌16小時。過濾混合物，且用MeOH洗滌濾餅，在真空下乾燥，得到呈黃色固體之標題化合物(400 mg，產率47.8%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.57 (s, 1H), 8.41 (dd, J= 4.8, 0.9 Hz, 1H), 7.51 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 223 (M+H) +。 步驟 6 ：吡咯并 [1,2-a] 吡嗪 -7- 甲腈 (7)
向1-溴吡咯并[1,2-a]吡嗪-7-甲腈(200 mg，0.90 mmol)於THF (20 mL)及MeOH (3 mL)之溶液中添加Pd/C (30 mg，10% wt.)，混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在H 2氣球下於室溫攪拌16小時。過濾混合物，且將濾液在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色固體之標題化合物(120 mg，產率93.1%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 144 (M+H) +。 步驟 7 ：吡咯并 [1,2-a] 吡嗪 -7- 基甲胺 (8)
向吡咯并[1,2-a]吡嗪-7-甲腈(120 mg，0.84 mmol)於7N NH 3/MeOH溶液(3 mL)之溶液中添加雷氏Ni (12 mg，wt.)，混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在H 2氣球下於室溫攪拌3分鐘。過濾混合物，且將濾液在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色固體之標題化合物(120 mg，產率97.3%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 148 (M+H) +。 步驟 8 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-N-( 吡咯并 [1,2-a] 吡嗪 -7- 基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 266)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基) 吡咯啶-2-甲酸(20 mg，0.043 mmol)及吡咯并[1,2-a]吡嗪-7-基甲胺(8 mg，0.052 mmol)於DMF (0.5 mL)之混合物中添加DIPEA (28 mg，0.22 mmol)及HATU (21 mg，0.056 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 266(1.0 mg，產率3.9%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.57 (s, 1H), 7.95 (d, J= 4.9 Hz, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.51 - 7.47 (m, 1H), 7.42 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 7.26 - 7.20 (m, 2H), 7.19 - 7.14 (m, 2H), 7.08 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 6.51 (t, J= 74.4 Hz, 1H), 5.05 - 4.96 (m, 1H), 4.58 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 4.55 (d, J= 6.4 Hz, 2H), 4.19 (s, 2H), 4.03 - 3.97 (m, 1H), 3.87 (d, J= 10.4 Hz, 1H), 2.52 - 2.45 (m, 1H), 2.29 - 2.22 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 594 (M+H) +。RT (方法A): 1.44 min。 流程 74. (1S,3S,5S)-5- 甲基 -N-((6- 甲基 -1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-2-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 268) 之合成 步驟 1 ： 5- 碘 -2- 甲基吡啶 -4- 胺 (2)
在N 2氛圍下向2-甲基吡啶-4-胺(7.5 g，69.4 mmol)於水(90 mL)之溶液中添加Na 2CO 3(5.2 g，48.6 mmol)、KI (15.0 g，90.2 mmol)、I 2(14.1 g，55.1 mmol)及TBAI (300 mg，0.69 mmol)且將反應混合物在100℃下攪拌隔夜。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和Na 2S 2O 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 4% MeOH)純化殘餘物，得到呈橘色固體之標題化合物(2.0 g，產率12.3%)。LC/MS (ESI) m/z: 235 (M+H) +。 步驟 2 ： ( 三級丁氧基羰基 )(5- 碘 -2- 甲基吡啶 -4- 基 ) 胺甲酸三級丁酯 (3)
在N 2氛圍下向5-碘-2-甲基吡啶-4-胺(400 mg，1.71 mmol)於THF (5 mL)之溶液中添加TEA (863 mg，8.55 mmol)、DMAP (21 mg，0.17 mmol)及(Boc) 2O (1.12 g，5.13 mmol)且將反應混合物在50℃下攪拌隔夜。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 12% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(620 mg，產率83.6%)。LC/MS (ESI) m/z: 435 (M+H) +。 步驟 3 ： ( 三級丁氧基羰基 )(5-(3-(( 三級丁氧基羰基 ) 胺基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 )-2- 甲基吡啶 -4- 基 ) 胺甲酸三級丁酯 (4)
在N 2氛圍下向( 三級丁氧基羰基)(5-碘-2-甲基吡啶-4-基)胺甲酸 三級丁酯(2.0 g，4.76 mmol)及丙-2-炔-1-基胺甲酸 三級丁酯(310 mg，0.71 mmol)於TEA (4 mL)及DMSO (2 mL)之混合物中添加CuI (7 mg，0.04 mmol)及Pd(PPh 3) 2Cl 2(25 mg，0.04 mmol)，混合物在N 2氛圍下脫氣十次且在50℃下攪拌隔夜。將反應混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 25% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之標題化合物(300 mg，產率90.9%)。LC/MS (ESI) m/z: 463 (M+H) +。 步驟 4 ： ((6- 甲基 -1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 胺甲酸三級丁酯 (5)
向( 三級丁氧基羰基)(5-(3-(( 三級丁氧基羰基)胺基)丙-1-炔-1-基)-2-甲基吡啶-4-基)胺甲酸 三級丁酯(300 mg，0.65 mmol)於MeOH (4 mL)之溶液中添加DBU (297 mg，1.95 mmol)且將反應混合物在90℃下攪拌隔夜。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 5% MeOH)純化殘餘物，得到呈棕色固體之標題化合物(100 mg，產率59.1%)。LC/MS (ESI) m/z: 262 (M+H) +。 步驟 5 ： (6- 甲基 -1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲胺鹽酸鹽 (6)
向((6-甲基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)胺甲酸 三級丁酯(100 mg，0.38 mmol)於DCM (1 mL)之溶液中添加HCl/1,4-二噁烷(2 mL，4M)且將反應混合物在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(70 mg，產率93.3%)，其未經進一步純化直接用於下一反應。LC/MS (ESI) m/z: 162 (M+H) +。 步驟 6 ： (1S,3S,5S)-5- 甲基 -N-((6- 甲基 -1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-2-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 268)
在N 2氛圍下向(1S,3S,5S)-5-甲基-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸(30 mg，0.07 mmol)及(6-甲基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲胺鹽酸鹽(23 mg，0.14 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (55 mg，0.42 mmol)及HATU (32 mg，0.08 mmol)且將反應混合物在25℃下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NH 4Cl水溶液洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 268(5 mg，產率12.5%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.60 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 7.46 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 7.31 (s, 2H), 7.21 (s, 1H), 7.15 (d, J= 8.2 Hz, 2H), 7.10 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 6.70 (s, 1H), 4.91 (d, J= 3.7 Hz, 1H), 4.63 (s, 2H), 4.39 (d, J= 16.3 Hz, 1H), 4.30 (d, J= 16.3 Hz, 1H), 3.45 (m, 1H), 2.52 (s, 3H), 2.47 (d, J= 11.9 Hz, 1H), 2.22 (m, 1H), 1.33 (s, 3H), 1.28 - 1.27 (m, 1H), 0.91 (s, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 568 (M+H) +。RT (方法A): 1.46 min。
基於流程74中之步驟2-6來製備化合物267：
化合物編號 反應物A 反應物B 反應物C 特性化資料
267 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.43 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 7.30 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 7.22 - 7.19 (m, 1H), 7.15 - 7.14 (m, 1H), 7.13 - 7.08 (m, 1H), 7.00 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 6.83 (s, 1H), 4.90 (m, 1H), 4.65 (m, 1H), 4.40 (d, J= 16.2 Hz, 1H), 4.27 (d, J= 16.2 Hz, 1H), 3.46 (m, 1H), 2.76 (s, 1H), 2.49 (m, 1H), 2.23 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 568 (M+H) +。RT (方法A): 1.46 min。
流程 75. (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((3-( 噻吩 -2- 基氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 275) 之合成 步驟 1 ： 2-[(3- 羥基苄醯基 ) 胺基 ] 乙酸三級丁酯 (2)
向3-羥基苯甲酸(1.000 g，7.240 mmol，1.0當量)於DMF (5 mL)之溶液中添加甘胺酸三級丁酯鹽酸鹽(1.578 g，9.413 mmol，1.2當量)、HATU (4.129 g，10.86 mmol，1.3當量)及DIPEA (0.406 mL，2.33 mmol，3.0當量)。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘。添加水(5 mL)及EtOAc (5 mL)，且分離兩層。將水層用EtOAc萃取兩次，用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，且濃縮。藉由Combi Flash，12 g管柱，溶劑A=CH 2Cl 2，溶劑B=MeOH，100% A至5% B純化，得到呈透明油狀物之2-[(3-羥基苄醯基)胺基]乙酸三級丁酯(1.535 g，6.108 mmol，84.37%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 252 (M+H) +。 步驟 2 ： (S)-7-(2-(4- 溴苯基 ) 乙醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲酸甲酯 (3)
將2-[(3-羥基苄醯基)胺基]乙酸三級丁酯(150.0 mg，0.5969 mmol，1.0當量)、2-溴噻吩(0.1946 g，1.194 mmol，2當量)、碘化銅(I) (11.37 mg，0.05970 mmol，0.1當量)、N,N-二甲基甘胺酸鹽酸鹽(16.66 mg，0.1194 mmol，0.2當量)、碳酸銫(0.7780 g，2.388 mmol，4當量)於1,4-二噁烷(3 mL)中之混合物在微波反應器中於110℃攪拌12 h。將反應混合物冷卻至室溫，用水稀釋，用EtOAc萃取，用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥且濃縮。藉由combi-Flash；12 g管柱，溶劑A=己烷，溶劑B=EtOAc.100% A至15% B純化，得到2-[[3-(2-噻吩基氧基)苄醯基]胺基]乙酸三級丁酯(30.00 mg，0.08998 mmol，15.07%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 334 (M+H) +。 步驟 3 ： (3-( 噻吩 -2- 基氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺酸 (4)
在冰浴溫度下將TFA (0.5 mL)添加至2-[[3-(2-噻吩基氧基)苄醯基]胺基]乙酸三級丁酯(25.00 mg，0.07499 mmol，1.0當量)於CH 2Cl 2(1 mL)之溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌2小時，然後濃縮至乾，得到呈白色固體之2-[[3-(2-噻吩基氧基)苄醯基]胺基]乙酸(20.50 mg，0.07393 mmol，98.59%產率)，其未經進一步純化用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 278 (M+H) +。 步驟 4 ： (S)-N-((R)-1-(4- 胺甲醯亞胺基噻吩 -2- 基 ) 乙基 )-7-(2-(2',4'- 二氟 -[1,1'- 聯苯 ]-4- 基 ) 乙醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 275)
向2-[[3-(2-噻吩基氧基)苄醯基]胺基]乙酸(6.397 mg，0.02307 mmol，1.0當量)於DMF (2 mL)之溶液中添加(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺；鹽酸鹽(8.000 mg，0.02307 mmol，1.0當量)、含T3P (50質量%)之乙酸乙酯(20.7 μL，0.0346 mmol，1.5當量)及DIPEA (12.1 μL，0.0694 mmol，3.0當量)。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘，然後藉由製備型HPLC純化，得到 化合物 275(2.400 mg，0.004213 mmol，18.27%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 570 (M+H) +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.15 (s, 1H), 8.73 (d, J= 15.7 Hz, 1H), 8.63 (d, J= 15.6 Hz, 1H), 8.11 (s, 1H), 8.03 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 7.96 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 7.71 – 7.52 (m, 2H), 7.51 – 7.34 (m, 1H), 7.24 (dd, J= 8.3, 2.9 Hz, 2H), 7.10 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 7.09 – 6.99 (m, 1H), 6.84 (dd, J= 5.8, 3.8 Hz, 1H), 6.73 (d, J= 14.6 Hz, 1H), 6.68 – 6.60 (m, 1H), 6.60 – 6.42 (m, 1H), 6.32 (s, 1H), 4.49 – 4.21 (m, 2H), 4.13 (dd, J= 16.8, 5.8 Hz, 1H), 3.95 (dd, J= 16.8, 5.7 Hz, 1H), 3.90 – 3.67 (m, 3H), 2.30 – 2.14 (m, 2H), 2.09 (dt, J= 13.2, 6.5 Hz, 1H), 1.51 – 1.19 (m, 1H)。RT (方法A): 1.28 min。 流程 76. (S)-7-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-N-( 吡咯并 [1,2-c] 嘧啶 -6- 基甲基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 276) 之合成 步驟 1 ： 6- 溴 -3- 甲苯磺醯基吡咯并 [1,2-c] 嘧啶 (2)
在N 2氛圍下向4-溴-1H-吡咯-2-甲醛(3.0 g，17.3 mmol)及DBU (2.9 g，26.0 mmol)於THF (40 mL)之混合物中添加異氰化甲苯磺醯基甲基(3.8 mg，26.0 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用AcOH酸化至pH~6且用EtOAc萃取兩次，用水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法純化殘餘物(矽膠，PE中之0 - 60% DCM)，得到呈棕色固體之標題化合物(3.4 g，產率56.7%)。LC/MS (ESI) m/z: 351/353 (M+H) +。 步驟 2 ： ((3- 甲苯磺醯基吡咯并 [1,2-c] 嘧啶 -6- 基 ) 甲基 ) 胺甲酸三級丁酯 (3)
在N 2氛圍下向6-溴-3-甲苯磺醯基吡咯并[1,2-c]嘧啶(400 mg，1.14 mmol)及{[( 三級丁氧基羰基)胺基]甲基}三氟硼酸鉀(325 mg，1.37 mmol)於1,4-二噁烷(6 mL)及水(1 mL)之混合物中添加Na 2CO 3(363 mg，3.42 mmol)及Pd(PPh 3) 4(132 mg，0.11 mmol)，反應混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在100℃下攪拌16小時。將混合物用EtOAc稀釋，用水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 30% EtOAc)純化殘餘物，得到呈棕色固體之標題化合物(300 mg，產率65.5%)。LC/MS (ESI) m/z: 402 (M+H) +。 步驟 3 ： ( 吡咯并 [1,2-c] 嘧啶 -6- 基甲基 ) 胺甲酸三級丁酯 (4)
在N 2氛圍，0℃下向Na 2HPO 4(300 mg，3.00 mmol)及Na/Hg-汞齊(172 mg，1.50 mmol，20% wt.)於MeOH (6 mL)之混合物中添加((3-甲苯磺醯基吡咯并[1,2-c]嘧啶-6-基)甲基)胺甲酸 三級丁酯(50 mg，0.75 mmol)於THF (6 mL)中之溶液且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋且用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 5% MeOH)純化殘餘物，得到呈棕色固體之標題化合物(174 mg，產率96.7%)。LC/MS (ESI) m/z: 248 (M+H) +。 步驟 4 ：吡咯并 [1,2-c] 嘧啶 -6- 基甲胺 (5)
向(吡咯并[1,2-c]嘧啶-6-基甲基)胺甲酸 三級丁酯(80 mg，0.32 mmol)於DCM (1 mL)之溶液中添加HCl/1,4-二噁烷(3 mL，4M)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈棕色油狀物之標題化合物(45 mg，產率6.5%)。其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 148 (M+H) +。 步驟 5 ： (S)-7-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-N-( 吡咯并 [1,2-c] 嘧啶 -6- 基甲基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 276)
在N 2氛圍下向(S)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸(30 mg，0.066 mol)及吡咯并[1,2-c]嘧啶-6-基甲胺鹽酸鹽(19 mg，0.13 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (51 mg，3.96 mmol)及HATU (38 mg，0.10 mol)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NH 4Cl水溶液洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 15: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 276(15 mg，產率39.5%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.76 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.44 – 7.41 (m, 1H), 7.33 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 7.21 – 7.17 (m, 1H), 7.15 – 7.10 (m, 3H), 7.09 – 7.06 (m, 2H), 7.02 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 6.39 (s, 1H), 4.65 – 4.62 (m, 1H), 4.60 (d, J= 9.3 Hz, 1H), 4.45 (d, J= 15.7 Hz, 1H), 4.18 (d, J= 16.3 Hz, 1H), 4.07 (d, J= 16.3 Hz, 1H), 4.01 (s, 4H), 3.86 (d, J= 10.8 Hz, 1H), 3.80 (d, J= 10.7 Hz, 1H), 2.49 – 2.42 (m, 1H), 2.29 – 2.22 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 586 (M+H) +。RT (方法A): 1.82 min。 流程 77. (2S,4R)-N-( 苯并 [d] 噁唑 -5- 基甲基 )-4-( 二氟甲氧基 ) -1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 282) 之合成 步驟 1 ： 5-( 疊氮基甲基 ) 苯并 [d] 噁唑 (2)
向5-(溴甲基)苯并[d]噁唑(50 mg，0.24 mmol)於DMF (3 mL)之溶液中添加NaN 3(77 mg，1.18 mmol)且將反應混合物在60℃下攪拌隔夜。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NH 4Cl水溶液洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 25% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(30 mg，產率41.0%)。LC/MS (ESI) m/z: 175 (M+H) +。 步驟 2 ：苯并 [d] 噁唑 -5- 基甲胺 (3)
向5-(疊氮基甲基)苯并[d]噁唑(30 mg，0.17 mmol)於THF (3 mL)及水(1 mL)之溶液中添加PPh 3(60 mg，0.23 mmol)且將反應混合物在在室溫下攪拌隔夜。將混合物用EtOAc稀釋，用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色油狀物之標題化合物(50 mg，粗品)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 149 (M+H) +。 步驟 3 ： (2S,4R)-N-( 苯并 [d] 噁唑 -5- 基甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 282)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基) 吡咯啶-2-甲酸(40 mg，0.08 mmol)及苯并[d]噁唑-5-基甲胺(50 mg，0.33 mmol，粗品)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (43 mg，0.48 mmol)及HATU (67 mg，0.12 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NH 4Cl水溶液洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 11: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 282(1.4 mg，產率2.7%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.39 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.55 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.49 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.43 – 7.39 (m, 2H), 7.22 – 7.17 (m, 2H), 7.13 (s, 1H), 7.08 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.03 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 6.51 (s, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.60 (t, J= 7.7 Hz, 2H), 4.24 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.12 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.00 – 3.95 (m, 1H), 3.87 (s, 1H), 3.85 – 3.74 (m, 1H), 2.48 (s, 1H), 2.27 – 2.21 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 595 (M+H) +。RT (方法A): 1.99 min。 流程 78. N-[2-[(2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-2-[[(1R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 ] 胺甲醯基 ] 吡咯啶 -1- 基 ]-2- 側氧基 - 乙基 ]-[1,4] 苯并噁噻并 [3,2-b] 吡啶 -3- 甲醯胺 ( 化合物 283) 之合成 步驟 1 ： [1,4] 苯并噁噻并 [3,2-b] 吡啶 -3- 甲腈
在室溫下向2-羥基苯硫酚(0.12 mL，1.2 mmol)及5,6-二氯吡啶-3-甲腈(200 mg，1.12 mmol) in DMSO (2 mL)之混合物中添加K 2CO 3(0.48 g，3.5 mmol)。將反應混合物攪拌48小時。將反應混合物用水洗滌且攪拌10分鐘。過濾固體且在矽膠(己烷中0至30%乙酸乙酯)上純化，得到呈灰白色固體之[1,4]苯并噁噻并[3,2-b]吡啶-3-甲腈(160 mg，61.2%產率)。 步驟 2 ： [1,4] 苯并噁噻并 [3,2-b] 吡啶 -3- 甲酸
將[1,4]苯并噁噻并[3,2-b]吡啶-3-甲腈(160 mg，0.71 mmol)及NaOH (0.11 g，2.8 mmol)於70%乙醇水溶液中之溶液加熱至回流歷時2小時。LC/MS顯示完全轉化，但大部分為醯胺形式。用1N HCl將反應混合物調節至pH 2。將固體過濾且懸浮於9: 1之二噁烷及水中，添加1 N HCl (0.7 mL)，隨後添加TiCl 4(0.008 mL，0.07 mmol)。將反應混合物加熱至回流歷時3小時。LC/MS顯示90%轉化為期望之羧酸。用水稀釋反應混合物，且過濾固體，得到呈黃色固體之[1,4]苯并噁噻并[3,2-b]吡啶-3-甲酸(220 mg，＞理論)。此物質未經進一步純化用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 426 (M+H) +。 步驟 3 ： 2-( 啡㗁噻 -3- 羰基胺基 ) 乙酸三級丁酯
在室溫下向[1,4]苯并噁噻并[3,2-b]吡啶-3-甲酸(220 mg，0.9 mmol)、2-胺基乙酸三級丁酯(0.14 g，1.1 mmol)及HATU (0.5 g，1 mmol)於DMF (5 mL)之懸浮液中添加DIPEA (0.8 mL，5 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘。添加水，且將反應混合物用乙酸乙酯萃取三次。將合併之有機層用飽和鹽水洗滌，Na 2SO 4，過濾且濃縮，得到2-(啡㗁噻-3-羰基胺基)乙酸三級丁酯(320 mg，理論)。此物質未經進一步純化用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 359 (M+H) +。 步驟 4 ： 2-( 啡㗁噻 -3- 羰基胺基 ) 乙酸
在室溫下向2-(啡㗁噻-3-羰基胺基)乙酸三級丁酯(320 mg，0.9 mmol)於DCM (2 mL)之溶液中添加TFA (2 mL)。18小時後，蒸發溶劑，將粗混合物與1N HCl共沸，得到2-(啡㗁噻-3-羰基胺基)乙酸(270 mg，理論)。此物質未經進一步純化用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 303 (M+H) +。 步驟 5 ： N-[2-[(2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-2-[[(1R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 ] 胺甲醯基 ] 吡咯啶 -1- 基 ]-2- 側氧基 - 乙基 ]-[1,4] 苯并噁噻并 [3,2-b] 吡啶 -3- 甲醯胺 ( 化合物 283)
在室溫下向2-(啡㗁噻-3-羰基胺基)乙酸(15 mg，0.05 mmol)、HATU (29 mg，0.076 mmol)及(2S,4R)-N-[(1R)-1-[1-(苯磺醯基)吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]乙基]-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲醯胺(23 mg，0.05 mmol)於DMF (1 mL)之溶液中添加DIPEA (0.04 mL，0.2 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌1小時且用水稀釋。粗混合物用乙酸乙酯萃取三次。將合併之有機層用飽和鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物。用THF (0.6 mL)及水(0.2 mL)之混合物稀釋該物質。在室溫下向此溶液中添加KOH (5.6 mg，0.10 mmol)及四丁基碘化銨(0.4 mg)。將雙層混合物加熱至65℃歷時24小時。藉由在減壓下濃縮來移除揮發物。將混合物用乙酸乙酯萃取兩次且丟棄有機層。水層用1N HCl酸化至pH 2，且藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 283(1 mg，8.2 %產率)。 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.08 (s, 1H), 8.91 (m, 2H), 8.63 (m, 2H), 8.39 (s, 1H), 8.12 – 7.59 (m, 3H), 7.22 (dt, J = 14.9, 7.7 Hz, 2H), 7.09 (t, J = 9.1 Hz, 1H), 6.99 – 6.74 (m, 2H), 6.38 (m, 1H), 5.21 – 5.00 (m, 1H), 4.87 (m, 1H), 4.38 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 1.43 (m, 2H), 1.23 (m, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 609 (M+H) +。RT (方法A): 1.33 min。 流程 79. N-(2-((2S,4R)-2-(((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 胺甲醯基 )-4-( 二氟甲氧基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-2- 側氧基乙基 ) 苯并 [5,6][1,4] 噁噻并 [3,2-b] 吡啶 -3- 甲醯胺 ( 化合物 285) 之合成 步驟 1 ： (2S,3R)-3- 甲氧基吡咯啶 -1,2- 二甲酸 O1- 三級丁酯 O2- 甲酯
在室溫下向(2S,3R)-3-羥基吡咯啶-2-甲酸甲酯(70 mg，0.48 mmol)及Boc 2O (0.1 mL，0.5 mmol)於DCM (2 mL)之混合物中添加DIPEA (0.25 mL，1.4 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌24小時。添加水且將反應混合物用乙酸乙酯萃取三次。將有機層用飽和鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮，得到紅色油狀物。在黑暗中用丙酮(5 mL)中之Ag 2O (167 mg，0.27 mmol)及MeI (0.05 mL，0.8 mmol)處理此物質48小時。過濾固體，濃縮濾液且在矽膠上(己烷中之0至50%乙酸乙酯)純化，得到呈黃色油狀物之(2S,3R)-3-甲氧基吡咯啶-1,2-二甲酸O1-三級丁酯O2-甲酯(70 mg，56%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 260 (M+H) +。 步驟 2 ： (2S,3R)-3- 甲氧基吡咯啶 -2- 甲酸甲酯鹽酸鹽
在室溫下向(2S,3R)-3-甲氧基吡咯啶-1,2-二甲酸O1-三級丁酯O2-甲酯(70 mg，0.28 mmol)於DCM (1 mL)之溶液中添加TFA (1 mL)。將反應混合物在室溫下攪拌3小時。藉由濃縮移除揮發物，且與1N HCl共沸，得到呈黃色油狀物之(2S,3R)-3-甲氧基吡咯啶-2-甲酸甲酯鹽酸鹽(100 mg，＞理論)。此物質未經進一步純化用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 160 (M+H) +。 步驟 3 ： (2S,3R)-3- 甲氧基 -1-[2-( 啡㗁噻 -3- 羰基胺基 ) 乙醯基 ] 吡咯啶 -2- 甲酸
在室溫下向2-(啡㗁噻-3-羰基胺基)乙酸(78 mg，0.26 mmol)、(2S,3R)-3-甲氧基吡咯啶-2-甲酸甲酯鹽酸鹽(95 mg，0.26 mmol)及HATU (147 mg，0.39 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (0.18 mL，1.04 mmol)。將混合物在室溫下攪拌30分鐘且用水(10 mL)稀釋。將固體過濾且溶解於甲醇(1 mL)、THF (1 mL)及水(1 mL)中。向此溶液中添加LiOH∙H 2O (31 mg，1.29 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌18小時。粗混合物用1 N HCl酸化至pH 3。藉由過濾移除固體。藉由製備型HPLC直接純化濾液，得到呈黃色蠟狀物之(2S,3R)-3-甲氧基-1-[2-(啡㗁噻-3-羰基胺基)乙醯基]吡咯啶-2-甲酸(7 mg，6.3 %產率)。LC/MS (ESI) m/z: 429 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S,3R)-3- 甲氧基 -1-[2-( 啡㗁噻 -3- 羰基胺基 ) 乙醯基 ]-N-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 285)
在室溫下向(2S,3R)-3-甲氧基-1-[2-(啡㗁噻-3-羰基胺基)乙醯基]吡咯啶-2-甲酸(7 mg，0.016 mmol)、1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基甲胺(2.4 mg，0.016 mmol)及DIPEA (0.12 mL，0.69 mmol)於DMF (1 mL)之溶液中添加含T 3P之50% 乙酸乙酯(0.02 mL，0.035 mmol)。將混合物在室溫下攪拌1小時且用水淬滅。過濾反應混合物，用DMSO稀釋水層且在製備型HPLC上純化，得到 化合物 285(1 mg，11 %產率)。 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.76 – 8.65 (m, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.39 (s, 2H), 7.98 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.20 (dd, J = 16.7, 7.6 Hz, 2H), 7.07 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.77 (s, 3H), 6.30 (s, 1H), 4.35 (s, 3H), 4.07 (m, 2H), 1.5 (m, 2H)。LC/MS (ESI) m/z: 558.2 (M+H) +。RT (方法A): 1.29 min。 流程 80. (S)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-((5-(3,4- 二氯苯氧基 ) 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 287) 之合成 步驟 1 ： 5-(3,4- 二氯苯氧基 ) 呋喃 -2- 甲酸甲酯 (2) 之合成
向5-硝基呋喃-2-甲酸甲酯(0.49 g，3 mmol)於DMSO (5 mL)之溶液中添加3,4-二氯酚(0.5 g，3 mmol)及K 2CO 3(496 mg，3.6 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(420 mg，產率48.9%)。LC/MS (ESI) m/z: 287(M+H) +。 步驟 2 ： 5-(3,4- 二氯苯氧基 ) 呋喃 -2- 甲酸 (3)
在N 2氛圍下向5-(3,4-二氯苯氧基)呋喃-2-甲酸甲酯(0.42 g，1.47 mmol)於THF/MeOH/H 2O (6 mL，4/1/1)之溶液中添加LiOH·H 2O (123 mg，2.93 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到呈白色固體之標題化合物(0.39 g，產率97%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 273 (M+H) +。 步驟 3 ： (5-(3,4- 二氯苯氧基 ) 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺酸甲酯 (4)
在N 2氛圍下向5-(3,4-二氯苯氧基)呋喃-2-甲酸(390 mg，1.43 mmol)及甘胺酸甲酯(127 mg，1.43 mmol)於DMF (5 mL)之混合物中添加DIPEA (922 mg，7.15 mmol)及HATU (596 mg，1.57 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 15: 1)純化殘餘物，得到呈黃色固體之標題化合物(260 mg，產率53%)。LC/MS (ESI) m/z: 344 (M+H) +。 步驟 4 ： (5-(3,4- 二氯苯氧基 ) 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺酸 (5)
在N 2氛圍下向(5-(3,4-二氯苯氧基)呋喃-2-羰基)甘胺酸甲酯(260 mg，0.75 mmol)於THF/MeOH/H 2O (6 mL，4/1/1)之溶液中添加LiOH·H 2O (63 mg，1.5 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到呈白色固體之標題化合物(240 mg，產率97%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 330 (M+H) +。 步驟 5 ： (S)-7-((5-(3,4- 二氯苯氧基 ) 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲酸甲酯 (6)
在N 2氛圍下向(5-(3,4-二氯苯氧基)呋喃-2-羰基)甘胺酸(240 mg，0.73 mmol)及(S)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸甲酯(136 mg，0.73mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (470 mg，3.65 mmol)及HATU (330 mg，0.87 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 15: 1)純化殘餘物，得到呈黃色固體之標題化合物(180 mg，產率49.5%)。LC/MS (ESI) m/z: 499 (M+H) +。 步驟 6 ： (S)-7-((5-(3,4- 二氯苯氧基 ) 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲酸 (7)
在N 2氛圍下向(S)-7-((5-(3,4-二氯苯氧基)呋喃-2-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸甲酯(180 mg，0.36 mmol)於THF/MeOH/H 2O (6 mL，4/1/1)之溶液中添加LiOH·H 2O (30 mg，0.72 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到呈白色固體之標題化合物(72 mg，產率42.0%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 485 (M+H) +。 步驟 7 ： (S)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-((5-(3,4- 二氯苯氧基 ) 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 287)
在N 2氛圍下向(S)-7-((5-(3,4-二氯苯氧基)呋喃-2-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸(26 mg，0.05 mmol)及(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲胺(8 mg，0.05 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (32 mg，0.25 mmol)及HATU (23 mg，0.06 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 15: 1)純化殘餘物，得到呈黃色固體之 化合物 287(1.2 mg，產率3.9%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.68 (d, J= 11.1 Hz, 1H), 8.04 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 7.54 (d, J= 8.9 Hz, 1H), 7.38 – 7.30 (m, 2H), 7.15 – 7.05 (m, 2H), 6.54 (s, 1H), 5.86 (d, J= 3.6 Hz, 1H), 4.59 – 4.55 (m, 3H), 4.59 – 4.55 (m, 3H), 4.14 (s, 1H), 3.99 (d, J= 2.9 Hz, 4H), 3.76 (s, 1H), 2.46 – 2.39 (m, 1H), 2.45 – 2.39 (m, 1H), 2.29 – 2.21 (m, 1H), 2.28 – 2.18 (m, 1H), 1.36 (d, J= 6.6 Hz, 1H), 1.29 (d, J= 5.7 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 614 (M+H) +。RT (方法A): 1.48 min。 流程 81. (2S)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-4-((4- 胺基丁氧基 ) 甲基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 288) 之合成 步驟 1 ： (2S)-4-(( 烯丙氧基 ) 甲基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸苄酯 (2)
在N 2氛圍下向(啡㗁噻-3-羰基)甘胺酸(728 mg，2.42 mmol)及(2S)-4-((烯丙氧基)甲基)吡咯啶-2-甲酸苄酯(800 mg，2.91 mmol)於DMF (8 mL)之混合物中添加DIPEA (1.56 g，12.1 mmol)及HATU (1.38 g，3.63 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法在矽膠(PE中之0 - 50% EtOAc)上純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(600 mg，產率44.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 559 (M+H) +。 步驟 2 ： (2S)-4-((((E)-4-(( 三級丁氧基羰基 ) 胺基 ) 丁 -2- 烯 -1- 基 ) 氧基 ) 甲基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸苄酯 (3)
在N 2氛圍下向(2S)-4-((烯丙氧基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸苄酯(200 mg，0.36 mmol)及烯丙基胺甲酸三級丁酯(113 mg，0.72 mmol)於無水DCM (200 mL)之混合物中添加Grubbs二代(152 mg，0.18 mmol)，反應混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在30℃下攪拌隔夜。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈棕色油狀物之標題化合物(70 mg，產率28.3%)。LC/MS (ESI) m/z: 688 (M+H) +。 步驟 3 ： (2S)-4-((4-(( 三級丁氧基羰基 ) 胺基 ) 丁氧基 ) 甲基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸苄酯 (4)
向(2S)-4-((((E)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)丁-2-烯-1-基)氧基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸苄酯(70 mg，0.10 mmol)於EtOAc (2 mL)之溶液中添加PtO 2(22 mg，0.10 mmol)。混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在H 2氣球下於室溫攪拌3小時。過濾混合物，且將濾液濃縮至乾，得到呈棕色油狀物之標題化合物(35 mg，產率99%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 690 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S)-4-((4-(( 三級丁氧基羰基 ) 胺基 ) 丁氧基 ) 甲基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸 (5)
向(2S)-4-((4-((三級丁氧基羰基)胺基)丁氧基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸苄酯(35 mg，0.06 mmol)於MeOH/H 2O (1 mL，4/1)之溶液中添加LiOH·H 2O (5 mg，0.12 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(27 mg，產率75.0%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 600 (M+H) +。 步驟 5 ： (4-(((5S)-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-5-(((R)-1-(1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 ) 胺甲醯基 ) 吡咯啶 -3- 基 ) 甲氧基 ) 丁基 ) 胺甲酸三級丁酯 (6)
在N 2氛圍下向(2S)-4-((4-((三級丁氧基羰基)胺基)丁氧基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸(27 mg，0.045 mmol)及(R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙-1-胺鹽酸鹽(25 mg，0.068 mmol)於DMF (1 mL)之混合物中添加DIPEA (29 mg，0.23 mmol)及HATU (22 mg，0.059 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化殘餘物，得到標題化合物(20 mg，產率50.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 883 (M+H) +。 步驟 6 ： (4-(((5S)-5-(((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 ) 胺甲醯基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -3- 基 ) 甲氧基 ) 丁基 ) 胺甲酸三級丁酯 (7)
向(4-(((5S)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-5-(((R)-1-(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)胺甲醯基)吡咯啶-3-基)甲氧基)丁基)胺甲酸三級丁酯(20 mg，0.022 mmol)於MeOH/H 2O (1 mL，4/1)之溶液中添加LiOH·H 2O (4 mg，0.088 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 7: 1)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(10 mg，產率62.5%)。LC/MS (ESI) m/z: 743 (M+H) +。 步驟 7 ： (2S)-N-((R)-1-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-4-((4- 胺基丁氧基 ) 甲基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 288)
將(4-(((5S)-5-(((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)胺甲醯基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-3-基)甲氧基)丁基)胺甲酸三級丁酯(10 mg，0.013 mmol)於HCl/1,4-二噁烷(1 mL，4M)中之溶液在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈黃色固體之 化合物 288(1.3 mg，產率15.7%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.57 (s, 1H), 7.51 – 7.47 (m, 1H), 7.40 (d, J= 8.9 Hz, 2H), 7.28 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 7.23 – 7.17 (m, 2H), 7.15 (d, J= 6.1 Hz, 1H), 7.08 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 7.04 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.83 (s, 1H), 4.42 (s, 2H), 4.32 (d, J= 13.1 Hz, 2H), 3.40 – 3.36 (m, 1H), 2.45 – 2.35 (m, 1H), 2.20 – 2.13 (m, 1H), 1.30 (s, 3H), 1.18 – 1.14 (m, 1H), 0.81 – 0.75 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 643 (M+H) +。RT (方法A): 1.05 min。 流程 81. (1S,3S,5S)-N-((1- 羥基 -1,3- 二氫苯并 [c][1,2] 氧雜硼雜環戊二烯 -6- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -2-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 290) 之合成 步驟 1 ： 1- 羥基 -1,3- 二氫苯并 [c][1,2] 氧雜硼雜環戊二烯 -6- 甲腈 (2)
在-78℃下向3-溴-4-(羥基甲基)苯甲腈(1.0 g，4.72 mmol)於THF (20 mL)之溶液中添加硼酸三異丙酯(1.8 g，9.4 mmol)。將反應混合物在N 2氛圍，-78℃下攪拌0.5小時。然後在-78℃下向反應混合物中添加n-BuLi (5.5 mL，4.8 mmol，4 M)且將混合物在25℃下攪拌隔夜。混合物用1 N HCl淬滅且用EtOAc稀釋，用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 20% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色固體之標題化合物(400 mg，產率53.3%)。 步驟 2 ： 6-( 胺基甲基 ) 苯并 [c][1,2] 氧雜硼雜環戊二烯 -1(3H)- 醇 (3)
在0℃下向1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼雜環戊二烯-6-甲腈(150 mg，0.94 mmol)於THF (3 mL)之溶液中添加LiAlH 4(1.88 mL，1.88 mmol，1.0 M)。將混合物在N 2氛圍，25℃下攪拌2小時。混合物用冰水及MeOH淬滅。過濾懸浮液，且在減壓下將濾液濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(90 mg，產率58.8%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 164 (M+H) +。 步驟 3 ： (1S,3S,5S)-N-((1- 羥基 -1,3- 二氫苯并 [c][1,2] 氧雜硼雜環戊二烯 -6- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -2-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 290)
在N 2氛圍下向(1S,3S,5S)-5-甲基-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸(30 mg，0.07 mmol)及6-(胺基甲基)苯并[c][1,2]氧雜硼雜環戊二烯-1(3H)-醇(35 mg，0.21 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (55 mg，0.42 mmol)及HATU (32 mg，0.08 mmol)且將反應混合物在25℃下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 290(3 mg，產率7.5%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.57 (s, 1H), 7.51 – 7.47 (m, 1H), 7.40 (d, J= 8.9 Hz, 2H), 7.28 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 7.23 – 7.17 (m, 2H), 7.15 (d, J= 6.1 Hz, 1H), 7.08 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 7.04 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.83 (s, 1H), 4.42 (s, 2H), 4.32 (d, J= 13.1 Hz, 2H), 3.38 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 2.41 (m, 1H), 2.20 – 2.13 (m, 1H), 1.30 (s, 3H), 1.16 (d, J= 3.2 Hz, 1H), 0.79 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 570 (M+H) +。RT (方法A): 2.13 min。
基於流程82來製備化合物279：
化合物編號 反應物A 反應物B 特性化資料
279 LC/MS (ESI) m/z: 570 (M+H) +。RT (方法A): 2.50 min。
流程 83. (2-(((1S,3S,5S)-5- 甲基 -2-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺基 ) 甲基 )-1H- 吲哚 -5- 基 ) 硼酸 ( 化合物 291) 之合成 步驟 1 ： (E)-5- 溴 -1H- 吲哚 -2- 甲醛肟 (2)
在N 2氛圍，0℃下向5-溴-1H-吲哚-2-甲醛(250 mg，1.12 mmol)及NH 2OH.HCl (155 mg，2.23 mmol)於EtOH (4 mL)及水(1.6 ml)之混合物中添加Na 2CO 3(178 mg，1.67 mmol)且將混合物在60℃下攪拌1小時。混合物用飽和NH 4Cl水溶液淬滅且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 – 40% EtOAc)純化，得到呈無色油狀物之標題化合物(250 mg，產率94.3%)。LC/MS (ESI) (m/z): 239 (M+H) +。 步驟 2 ： (5- 溴 -1H- 吲哚 -2- 基 ) 甲胺 (3)
在0℃下向(E)-5-溴-1H-吲哚-2-甲醛肟(250 mg，1.05 mmol)於MeOH (3 mL)之溶液中添加NiCl 2(144 mg，1.12 mmol)及NaBH 4(254 mg，6.69 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用冰水淬滅且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 10% MeOH)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(205 mg，產率87.6%)。LC/MS (ESI) m/z: 225 (M+H) +。 步驟 3 ： (1S,3S,5S)-N-((5- 溴 -1H- 吲哚 -2- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -2-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 (4)
在N 2氛圍，0℃下向(1S,3S,5S)-5-甲基-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸(57 mg，0.13 mmol)及(5-溴-1H-吲哚-2-基)甲胺(60 mg，0.27 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (104 mg，0.81 mmol)及HATU (66 mg，0.17 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用EtOAc稀釋，用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 40% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(80 mg，產率95.2%)。LC/MS (ESI) m/z: 631 (M+H) +。 步驟 4 ： (1S,3S,5S)-5- 甲基 -2-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-N-((5-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧雜硼雜環戊烷 -2- 基 )-1H- 吲哚 -2- 基 ) 甲基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 (5)
在N 2氛圍，25℃下向(1S,3S,5S)-N-((5-溴-1H-吲哚-2-基)甲基)-5-甲基-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺(80 mg，0.13 mmol)及Pin 2B 2(129 mg，0.51 mmol)於1,4-二噁烷(3 mL)之混合物中添加X-phos (19 mg，0.04 mmol)及Pd 2(dba) 3(18 mg，0.02 mmol)及KOAc (50 mg，0.51 mmol)且將混合物在80℃下攪拌10小時。混合物中添加水且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 5% MeOH)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(80 mg，產率93.0%)。LC/MS (ESI) m/z: 679 (M+H) +。 步驟 5 ： (2-(((1S,3S,5S)-5- 甲基 -2-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺基 ) 甲基 )-1H- 吲哚 -5- 基 ) 硼酸 ( 化合物 291)
在N 2氛圍，25℃下向(1S,3S,5S)-5-甲基-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-((5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)-1H-吲哚-2-基)甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺(30 mg，0.044 mmol)於THF (2 mL)之溶液中添加2 N HCl水溶液(1 mL)且將反應混合物在室溫下攪拌3小時。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 291(0.75 mg，產率2.85%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.48 (s, 1H), 7.45 – 7.43 (m, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.15 (d, J= 7.3 Hz, 1H), 7.08 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 7.02 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 6.31 (s, 1H), 4.49 – 4.37 (m, 2H), 4.29 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 3.37 (s, 1H), 2.46 – 2.38 (m, 1H), 2.20 (d, J= 12.5 Hz, 1H), 0.89 (d, J= 7.1 Hz, 2H)。LC/MS (ESI) m/z: 597 (M+H) +。RT (方法A): 1.93 min。 流程 84. (1S,3S,5S)-N-((R)-1-(3- 胺基丙醯基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 60) 之合成 步驟 1 ： (R)-(1-(3-((( 苄氧基 ) 羰基 ) 胺基 ) 丙醯基 ) 吡咯啶 -3- 基 ) 胺甲酸三級丁酯
在N 2氛圍，0℃下向(R)-吡咯啶-3-基胺甲酸 三級丁酯(500 mg，2.69 mmol)及3-(((苄氧基)羰基)胺基)丙酸(599 mg，2.69 mmol)於DMF (6 mL)之混合物中添加DIPEA (2.09 g，16.1 mmol)及T 3P (2.56 g，4.04 mmol，EtOAc中50% wt.)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用飽和NaHCO 3水溶液淬滅且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 89% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之(R)-(1-(3-(((苄氧基)羰基)胺基)丙醯基)吡咯啶-3-基)胺甲酸 三級丁酯(850 mg，產率80.9%)。LC/MS (ESI) (m/z): 392 (M+H) +。 步驟 2 ： (R)-(3-(3- 胺基吡咯啶 -1- 基 )-3- 側氧基丙基 ) 胺甲酸苄酯鹽酸鹽
將(R)-(1-(3-(((苄氧基)羰基)胺基)丙醯基)吡咯啶-3-基)胺甲酸 三級丁酯(850 mg，2.17 mmol)於DCM (2 mL)及HCl/1,4-二噁烷(8 mL，4M)中之溶液N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之(R)-(3-(3-胺基吡咯啶-1-基)-3-側氧基丙基)胺甲酸苄酯鹽酸鹽(620 mg，產率98.0%)，其未經進一步純化直接用於下一反應。LC/MS (ESI) m/z: 292 (M+H) +。 步驟 3 ： (3-((R)-3-((1S,3S,5S)-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-3- 側氧基丙基 ) 胺甲酸苄酯
在N 2氛圍下向(1S,3S,5S)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸(40 mg，0.11 mmol)及(R)-(3-(3-胺基吡咯啶-1-基)-3-側氧基丙基)胺甲酸苄酯鹽酸鹽(65 mg，0.22 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (86 mg，0.66 mmol)及PyBOP (69 mg，0.13 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化殘餘物，得到呈白色固體之(3-((R)-3-((1S,3S,5S)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺基)吡咯啶-1-基)-3-側氧基丙基)胺甲酸苄酯(60 mg，產率85.3%)。LC/MS (ESI) m/z: 634 (M+H) +。 步驟 4 ： (1S,3S,5S)-N-((R)-1-(3- 胺基丙醯基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 60)
向(3-((R)-3-((1S,3S,5S)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺基)吡咯啶-1-基)-3-側氧基丙基)胺甲酸苄酯(60 mg，0.09 mmol)於MeOH (2 mL)之溶液中添加Pd/C (10 mg，10% wt.)，混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在H 2氣球下於25℃攪拌1小時。過濾混合物，且在減壓下將濾液濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 60(8.0 mg，產率16.9%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.41 (s, 1H), 7.25 (t, J= 7.9 Hz, 2H), 6.93 - 6.88 (m, 3H), 4.74 - 4.68 (m, 1H), 4.28 (d, J= 18.2 Hz, 1H), 4.19 (d, J= 18.2 Hz, 1H), 4.07 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.02 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 3.66 (dd, J= 10.8, 5.8 Hz, 1H), 3.61 - 3.55 (m, 1H), 3.51 (dd, J= 11.2, 6.4 Hz, 1H), 3.39 (dd, J= 14.7, 8.5 Hz, 1H), 3.29 (s, 1H), 3.18 (t, J= 5.9 Hz, 2H), 2.68 (t, J= 12.5 Hz, 2H), 2.48 (t, J= 7.3 Hz, 2H), 2.41 - 2.33 (m, 1H), 2.19 - 2.05 (m, 4H), 1.99 - 1.88 (m, 1H), 1.26 (dd, J= 14.4, 3.9 Hz, 4H), 0.80 (dd, J= 10.6, 5.2 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 500 (M+H) +。RT (方法A): 0.99 min。 流程 85. (1S,3S,5S)-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-N-(1-((R)- 哌嗪 -2- 羰基 ) 氮雜環丁烷 -3- 基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 296) 之合成 步驟 1 ： 3-((1S,3S,5S)-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺基 ) 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯 (1)
在N 2氛圍下向(1S,3S,5S)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸(50 mg，0.14 mmol)及3-胺基氮雜環丁烷-1-甲酸 三級丁酯(26 mg，0.15 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (72 mg，0.55 mmol)及T 3P (133 mg，0.20 mmol，EtOAc中50% wt.)且將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 80% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之3-((1S,3S,5S)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺基)氮雜環丁烷-1-甲酸 三級丁酯(28 mg，產率39.2%)。LC/MS (ESI) m/z: 515 (M+H) +。 步驟 2 ： (1S,3S,5S)-N-( 氮雜環丁烷 -3- 基 )-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 (2)
將3-((1S,3S,5S)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺基)氮雜環丁烷-1-甲酸 三級丁酯(28 mg，0.05 mmol)於HCl/1,4-二噁烷(1 mL，4M)之溶液在N 2氛圍，室溫下攪拌3小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之(1S,3S,5S)-N-(氮雜環丁烷-3-基)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺(22 mg，產率97.6%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 415 (M+H) +。 步驟 3 ： (R)-2-(3-((1S,3S,5S)-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺基 ) 氮雜環丁烷 -1- 羰基 ) 哌嗪 -1,4- 二甲酸二 - 三級丁酯 (3)
在N 2氛圍下向(1S,3S,5S)-N-(氮雜環丁烷-3-基)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺(22 mg，0.05 mmol)及(R)-1,4-雙( 三級丁氧基羰基)哌嗪-2-甲酸(22.7 mg，0.07 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (27.4 mg，0.21 mmol)及PyBOP (36 mg，0.07 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化殘餘物，得到呈白色固體之(R)-2-(3-((1S,3S,5S)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺基)氮雜環丁烷-1-羰基)哌嗪-1,4-二甲酸二- 三級丁酯(38 mg，產率98.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 727 (M+H) +。 步驟 4 ： (1S,3S,5S)-5- 甲基 -2-((4- 苯氧基丁醯基 ) 甘胺醯基 )-N-(1-((R)- 哌嗪 -2- 羰基 ) 氮雜環丁烷 -3- 基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺 ( 化合物 296)
將(R)-2-(3-((1S,3S,5S)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺基)氮雜環丁烷-1-羰基)哌嗪-1,4-二甲酸二- 三級丁酯(38 mg，0.05 mmol)於HCl/1,4-二噁烷(1.5 mL，4M)中之溶液在N 2氛圍，室溫下攪拌1小時。將混合物在減壓下濃縮至乾且藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈黃色固體之 化合物 296(3.6 mg，產率13.1%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.40 (s, 2H), 7.27 - 7.22 (m, 2H), 6.92 - 6.88 (m, 3H), 4.77 - 4.73 (m, 1H), 4.54 (ddd, J= 19.0, 15.3, 8.0 Hz, 2H), 4.28 - 4.19 (m, 2H), 4.18 - 4.09 (m, 2H), 4.01 (t, J= 6.2 Hz, 2H), 3.98 - 3.91 (m, 1H), 3.75 - 3.71 (m, 1H), 3.26 - 3.21 (m, 1H), 3.17 - 2.95 (m, 6H), 2.48 (td, J= 7.5, 2.6 Hz, 2H), 2.41 - 2.34 (m, 1H), 2.11 (ddd, J= 13.5, 8.2, 4.4 Hz, 3H), 1.28 (s, 3H), 1.18 - 1.10 (m, 1H), 0.84 – 0.78 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 527 (M+H) +。RT (方法A): 0.82 min。 流程 86. (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-N-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基甲基 )-1-[2-[[3-(3- 噻吩基氧基 ) 苄醯基 ] 胺基 ] 乙醯基 ] 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 303) 之合成 步驟 1 ： 2-[(3- 羥基苄醯基 ) 胺基 ] 乙酸三級丁酯 (2)
向3-羥基苯甲酸(1.000 g，7.240 mmol，1.0當量)於DMF (5 mL)之溶液中添加甘胺酸三級丁酯鹽酸鹽(1.578 g，9.413 mmol，1.2當量)、HATU (4.129 g，10.86 mmol，1.3當量)及DIPEA (0.406 mL，2.33 mmol，3.0當量)。將反應在室溫下攪拌30分鐘。添加水(5 mL)及EtOAc (5 mL)，且分離兩層。將水層用EtOAc萃取兩次，用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，且濃縮。藉由Combi Flash，12 g管柱，溶劑A=CH 2Cl 2，溶劑B=MeOH，100% A至5% B純化，得到呈透明油狀物之2-[(3-羥基苄醯基)胺基]乙酸三級丁酯(1.535 g，6.108 mmol，84.37%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 252 (M+H) +。 步驟 2 ： 2-[[3-(3- 噻吩基氧基 ) 苄醯基 ] 胺基 ] 乙酸三級丁酯 (3)
將2-[(3-羥基苄醯基)胺基]乙酸三級丁酯(55.00 mg，0.2189 mmol，1.0當量)、3-溴噻吩(71.37 mg，0.04377 mmol，2當量)、N,N-二甲基甘胺酸鹽酸鹽(6.110 mg，0.04377 mmol，0.2當量)、CuI (4.168 mg，0.02189mmol，0.1當量)及Cs 2CO 3(0.2860 g，0.877 mmol，4當量)於1,4-二噁烷(3 mL)中之混合物在微波反應器中於110℃攪拌12 h。將反應物冷卻至室溫，用水稀釋，用EtOAc萃取，用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥且濃縮。藉由combi-Flash；12 g管柱，溶劑A=己烷，溶劑B=EtOAc.100% A至15% B純化，得到2-[[3-(3-噻吩基氧基)苄醯基]胺基]乙酸三級丁酯(8.920 mg，0.02675 mmol，12.22%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 334 (M+H) +。 步驟 2 ： 2-[[3-(3- 噻吩基氧基 ) 苄醯基 ] 胺基 ] 乙酸 (4)
在冰浴溫度下將TFA (0.5 mL)添加至2-[[3-(3-噻吩基氧基)苄醯基]胺基]乙酸三級丁酯(8.920 mg，0.02675 mmol，1.0當量)於CH 2Cl 2(1 mL)之溶液中。將反應在室溫下攪拌2小時，然後濃縮至乾，得到呈棕色固體之2-[[3-(3-噻吩基氧基)苄醯基]胺基]乙酸(7.000 mg，0.02524 mmol，94.35%產率)，其未經進一步純化用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 278 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-N-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基甲基 )-1-[2-[[3-(3- 噻吩基氧基 ) 苄醯基 ] 胺基 ] 乙醯基 ] 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 303)
向2-[[3-(3-噻吩基氧基)苄醯基]胺基]乙酸(7.000 mg，0.02524 mmol，1.1當量)於DMF (2 mL)之溶液中添加(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺鹽酸鹽(8.800 mg，0.02537 mmol，1.0當量)、含T3P (50質量%)之EtOAc (23.00 μL，0.0384 mmol，1.5當量)及DIPEA (13.00 μL，0.0745 mmol，3.0當量)。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘，然後藉由製備型HPLC純化，得到 化合物 303(1.900 mg，0.003336 mmol，13.15%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 570 (M+H) +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.15 (s, 1H), 8.73 (d, J= 15.7 Hz, 1H), 8.63 (d, J= 15.6 Hz, 1H), 8.11 (s, 1H), 8.03 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 7.96 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 7.71 – 7.52 (m, 2H), 7.51 – 7.34 (m, 1H), 7.24 (dd, J= 8.3, 2.9 Hz, 2H), 7.10 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 7.09 – 6.99 (m, 1H), 6.84 (dd, J= 5.8, 3.8 Hz, 1H), 6.73 (d, J= 14.6 Hz, 1H), 6.68 – 6.60 (m, 1H), 6.60 – 6.42 (m, 1H), 6.32 (s, 1H), 4.49 – 4.21 (m, 2H), 4.13 (dd, J= 16.8, 5.8 Hz, 1H), 3.95 (dd, J= 16.8, 5.7 Hz, 1H), 3.90 – 3.67 (m, 2H), 2.30 – 2.14 (m, 2H), 2.09 (dt, J= 13.2, 6.5 Hz, 1H)。RT (方法A): 1.28 min。
基於流程86中之步驟2-4來製備化合物366及385：
化合物編號 反應物A 反應物B 反應物C 特性化資料
366 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.22 (s, 1H), 8.79 – 8.51 (m, 2H), 8.25 (s, 1H), 8.02 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.72 – 7.50 (m, 1H), 7.37 – 7.24 (m, 2H), 7.17 (d, J= 5.5 Hz, 1H), 6.79 (d, J= 14.5 Hz, 1H), 6.70 – 6.55 (m, 1H), 6.56 – 6.44 (m, 2H), 6.38 (s, 1H), 5.01 – 4.93 (m, 1H), 4.44 (t, J= 7.1 Hz, 3H), 4.19 (dd, J= 16.8, 5.9 Hz, 1H), 4.02 (dd, J= 16.7, 5.7 Hz, 1H), 3.94 – 3.86 (m, 1H), 3.85 – 3.73 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.16 (ddd, J= 13.0, 7.5, 5.0 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 584 (M+H) +。RT (方法A): 1.49 min。
385 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.09 (s, 1H), 8.58 (d, J= 5.6 Hz, 2H), 8.23 (s, 1H), 7.91 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.76 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.64 – 7.46 (m, 2H), 7.37 (ddt, J= 11.8, 9.3, 2.6 Hz, 1H), 7.19 (td, J= 8.4, 2.7 Hz, 1H), 6.99 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 6.32 (s, 1H), 4.63 – 4.23 (m, 3H), 4.00 – 3.82 (m, 1H), 3.77 (d, J= 10.8 Hz, 1H), 3.59 (d, J= 10.8 Hz, 1H), 2.43 (s, 3H), 2.28 (d, J= 13.0, 8.5 Hz, 1H), 2.04 (dd, J= 13.0, 7.4 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 584 (M+H) +。RT (方法A): 1.47 min。
基於流程86中之步驟2-5來製備化合物326：
化合物編號 反應物A 反應物B 反應物C
326
流程 87. (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((4- 氟 -3- 苯氧基苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 304) 之合成 步驟 1 ： 4- 氟 -3- 苯氧基苯甲酸 (2)
向含4-氟-3-苯氧基苯甲醛(200.0 mg，0.9251 mmol，1當量)之THF (2 mL)及H 2O (1 mL)中添加過氧化氫(0.1608 mL，1.850 mmol，2.0當量)及亞氯酸鈉(0.1673 g，1.850 mmol，2.0當量)及磷酸二氫鉀(0.3777 g，2.775 mmol，3.0當量)。將反應混合物在室溫下攪拌隔夜，然後用飽和硫代硫酸鈉淬滅。分離兩層，且用EtOAc淬滅水層。將合併之有機萃取物用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，且濃縮，得到4-氟-3-苯氧基-苯甲酸(201.0 mg，0.8656 mmol，93.57%產率)。 步驟 2 ： (4- 氟 -3- 苯氧基苄醯基 ) 甘胺酸三級丁酯 (3)
向4-氟-3-苯氧基-苯甲酸(0.45 g，1.9 mmol，1.0當量)於DMF (5 mL)之溶液中添加甘胺酸三級丁酯鹽酸鹽(0.4223 g，2.519 mmol，1.2當量)、HATU (1.105 g，2.906 mmol，1.3當量)及DIPEA (1.010 mL，5.79 mmol，3.0當量)。將反應在室溫下攪拌30分鐘。添加水(5 mL)及EtOAc (5 mL)，且分離兩層。將水層用EtOAc萃取兩次，用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，且濃縮。藉由Combi Flash，12 g管柱，溶劑A=CH 2Cl 2，溶劑B=MeOH，100% A至5% B純化，得到呈白色固體之2-[(4-氟-3-苯氧基-苄醯基)胺基]乙酸三級丁酯(0.4138 g，1.198 mmol，62%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 346 (M+H) +。 步驟 3 ： (4- 氟 -3- 苯氧基苄醯基 ) 甘胺酸 (4)
在冰浴溫度下將TFA (0.5 mL)添加至2-[(4-氟-3-苯氧基-苄醯基)胺基]乙酸三級丁酯(50.00 mg，0.1448 mmol，1.0當量)於CH 2Cl 2(1 mL)之溶液中。將反應在室溫下攪拌2小時，然後濃縮至乾，得到呈棕色固體之2-[(4-氟-3-苯氧基-苄醯基)胺基]乙酸(41.00 mg，0.1417 mmol，97.90%產率)，其未經進一步純化用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 290 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((4- 氟 -3- 苯氧基苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 304)
向2-[(4-氟-3-苯氧基-苄醯基)胺基]乙酸(9.176 mg，0.03172 mmol，1.1當量)於DMF (2 mL)之溶液中添加(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺鹽酸鹽(10.00 mg，0.02884 mmol，1.0當量)、含T3P (50質量%)之EtOAc (25.90 μL，0.0433 mmol，1.5當量)及DIPEA (15.10 μL，0.0866 mmol，3.0當量)。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘，然後藉由製備型HPLC純化，得到 化合物 304(2.500 mg，0.004299 mmol，14.91%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 582 (M+H) +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.39 (s, 1H), 8.89 (t, J= 5.6 Hz, 1H), 8.80 (t, J= 5.8 Hz, 1H), 8.75 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 8.63 (t, J= 5.8 Hz, 1H), 8.13 (s, 1H), 8.08 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.86 – 7.73 (m, 1H), 7.72 – 7.62 (m, 1H), 7.53 (dd, J= 10.6, 8.6 Hz, 1H), 7.47 – 7.35 (m, 1H), 7.28 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.16 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 7.02 (q, J= 9.3 Hz, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.50 (s, 1H), 4.96 (s, 1H), 4.51 (t, J= 6.3 Hz, 1H), 4.47 – 4.34 (m, 1H), 4.17 (dd, J= 16.8, 5.8 Hz, 1H), 4.07 – 3.96 (m, 1H), 3.94 – 3.84 (m, 1H), 3.82 – 3.69 (m, 1H), 3.58 (dd, J= 12.6, 4.9 Hz, 1H), 2.42 – 2.29 (m, 2H), 2.22 – 2.07 (m, 1H)。RT (方法A): 1.42 min。 流程 88. (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-[2-[[4- 氟 -3-(3- 噻吩基氧基 ) 苄醯基 ] 胺基 ] 乙醯基 ]-N-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 317) 之合成 步驟 1 ： 4- 氟 -3-(3- 噻吩基氧基 ) 苯甲酸 (2)
將4-氟-3-羥基-苯甲酸(50.00 mg，0.3203 mmol，1.0當量)、3-溴噻吩(0.1044 g，0.6403 mmol，2當量)、N,N-二甲基甘胺酸鹽酸鹽(8.941 mg，0.06406 mmol，0.2當量)、CuI (6.100 mg，0.03203 mmol，0.1當量)、Cs 2CO 3(0.418 g，1.28 mmol，4當量)於1,4-二噁烷(3 mL)中之混合物在微波反應器中於110℃攪拌12小時。將反應冷卻至室溫，用水及EtOAc稀釋。分離兩層，將水層用EtOAc萃取，用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，且濃縮。藉由combi-Flash；4 g管柱，溶劑A=己烷，溶劑B=EtOAc.100% A至15% B純化，得到4-氟-3-(3-噻吩基氧基)苯甲酸(11.34 mg，0.04761 mmol，14.86%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 239 (M+H) +。 步驟 2 ： 2-[[4- 氟 -3-(3- 噻吩基氧基 ) 苄醯基 ] 胺基 ] 乙酸酯 (3)
向4-氟-3-(3-噻吩基氧基)苯甲酸(11.34 mg，0.04761 mmol，1當量)於DMF (2 mL)之溶液中添加2-胺基乙酸三級丁酯鹽酸鹽(11.97 mg，0.07141 mmol，1.5當量)、含T3P (50質量%)之EtOAc (42.80 μL，0.0715 mmol，1.3當量)及DIPEA (24.90 μL，0.143 mmol，3當量)。將反應在室溫下攪拌1 h且藉由HPLC純化，得到2-[[4-氟-3-(3-噻吩基氧基)苄醯基]胺基]乙酸三級丁酯(15.00 mg，0.04269 mmol，89.66%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 352 (M+H) +。 步驟 3 ： 2-[[4- 氟 -3-(3- 噻吩基氧基 ) 苄醯基 ] 胺基 ] 乙酸 (4)
在冰浴溫度下將TFA (0.5 mL)添加至2-[[4-氟-3-(3-噻吩基氧基)苄醯基]胺基]乙酸三級丁酯(11.34 mg，0.03227 mmol，1.0當量)於CH 2Cl 2(1 mL)之溶液中。將反應在室溫下攪拌2小時，然後濃縮，得到2-[[4-氟-3-(3-噻吩基氧基)苄醯基]胺基]乙酸(9.500 mg，0.03217 mmol，99.69%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 296 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-[2-[[4- 氟 -3-(3- 噻吩基氧基 ) 苄醯基 ] 胺基 ] 乙醯基 ]-N-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 317)
向2-[[4-氟-3-(3-噻吩基氧基)苄醯基]胺基]乙酸(9.366 mg，0.03172 mmol，1.1當量)於DMF (2 mL)之溶液中添加(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺鹽酸鹽(10.00 mg，0.02884 mmol ,1.0當量)、含T3P (50質量%)之EtOAc (25.90 μL，0.0433 mmol，1.5當量)及DIPEA (15.10 μL，0.0866 mmol，3.0當量)。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘，然後藉由製備型HPLC純化，得到 化合物 317(2.8 mg，0.0048 mmol，17%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 588 (M+H) +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.23 (s, 1H), 8.92 (s, 1H), 8.78 (d, J= 17.9 Hz, 1H), 8.75 – 8.59 (m, 2H), 8.38 (s, 1H), 8.03 (d, J= 5.5 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.72 – 7.64 (m, 1H), 7.58 (dd, J= 5.3, 3.4 Hz, 1H), 7.57 – 7.45 (m, 1H), 7.18 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 6.98 (dt, J= 10.2, 5.0 Hz, 1H), 6.91 (dd, J= 3.3, 1.6 Hz, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.37 (s, 1H), 5.31 – 4.75 (m, 2H), 4.58 – 4.19 (m, 1H), 3.95 – 3.63 (m, 2H), 2.43 – 2.06 (m, 2H)。RT (方法A): 1.35 min。 流程 89. (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-[2-[[5-(2- 吡啶基 ) 噻吩 -2- 羰基 ] 胺基 ] 乙醯基 ]-N-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 381) 之合成
向5-(2-吡啶基)噻吩-2-甲酸(4.102 mg，0.01999 mmol，1.0當量)於DMF (2 mL)之溶液中添加(2S,4R)-1-(2-胺基乙醯基)-4-(二氟甲氧基)-N-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺；二鹽酸鹽(8.000 mg，0.01817 mmol，1.0當量)、含T3P (50質量%)之EtOAc (16.30 μL，0.0272 mmol，1.5當量)及DIPEA (9.510 μL，0.0545 mmol，3.0當量)。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘，然後藉由製備型HPLC純化，得到 化合物 381(2.461 mg，0.004437 mmol，24.42%產率)。LC/MS (ESI) m/z:555 (M+H) +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.22 (s, 1H), 8.93 (s, 1H), 8.79 (t, J= 6.2 Hz, 1H), 8.73 – 8.64 (m, 1H), 8.64 – 8.50 (m, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.10 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 8.09 – 7.94 (m, 1H), 7.94 – 7.72 (m, 2H), 7.42 – 7.26 (m, 1H), 7.19 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.82 (s, 1H), 6.63 (s, 1H), 6.39 (s, 1H), 4.98 (s, 1H), 4.68 (d, J= 7.1 Hz, 1H), 4.59 – 4.36 (m, 1H), 4.21 (dd, J= 16.9, 5.9 Hz, 1H), 4.04 (dd, J= 16.7, 5.7 Hz, 1H), 3.96 – 3.85 (m, 1H), 3.80 (d, J= 10.8 Hz, 1H), 2.33 (d, J= 3.8 Hz, 1H), 2.17 (dd, J= 13.2, 6.8 Hz, 1H)。RT (方法A): 0.93 min。
基於流程381來製備以下化合物：
化合物編號 反應物A 反應物B 特性化資料
377 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.21 (s, 1H), 8.94 (s, 1H), 8.78 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 8.73 – 8.61 (m, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.30 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 8.23 – 8.13 (m, 1H), 7.96 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.82 – 7.67 (m, 1H), 7.59 – 7.48 (m, 1H), 7.18 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.81 (s, 1H), 6.63 (s, 1H), 6.38 (s, 1H), 4.98 (s, 1H), 4.70 (t, J= 7.4 Hz, 1H), 4.51 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 4.49 – 4.33 (m, 1H), 4.24 (dd, J= 17.0, 5.9 Hz, 1H), 4.07 (dd, J= 16.9, 5.6 Hz, 1H), 3.90 (dd, J= 11.6, 4.6 Hz, 1H), 3.85 – 3.73 (m, 1H), 2.77 – 2.59 (m, 1H), 2.42 – 2.27 (m, 1H), 2.16 (dt, J= 13.2, 6.7 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 589 (M+H) +。
378 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.22 (s, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.73 – 8.55 (m, 2H), 8.35 (s, 1H), 8.10 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 8.00 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.48 – 7.38 (m, 2H), 7.39 – 7.28 (m, 2H), 7.27 – 7.13 (m, 2H), 6.91 – 6.80 (m, 1H), 6.39 (s, 1H), 4.99 (s, 1H), 4.66 (d, J= 3.6 Hz, 2H), 4.53 (t, J= 6.1 Hz, 1H), 4.51 – 4.36 (m, 3H), 4.21 (dd, J= 16.7, 5.7 Hz, 1H), 4.06 (dd, J= 16.8, 5.8 Hz, 1H), 3.91 (dd, J= 11.4, 4.6 Hz, 1H), 3.87 – 3.74 (m, 1H), 3.63 (s, 1H), 2.67 (t, J= 1.9 Hz, 1H), 2.43 – 2.31 (m, 1H), 2.17 (dt, J= 13.2, 6.3 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 589(M+H) +。RT (方法A): 1.52 min。
379 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.19 (s, 1H), 8.92 (s, 1H), 8.79 (t, J= 5.8 Hz, 1H), 8.68 (d, J= 3.1 Hz, 1H), 8.41 – 8.31 (m, 1H), 8.15 – 8.06 (m, 1H), 7.96 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.78 – 7.65 (m, 2H), 7.46 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 7.34 (t, J= 7.1 Hz, 1H), 7.18 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 6.82 (s, 1H), 6.38 (s, 1H), 4.99 (s, 1H), 4.55 – 4.36 (m, 1H), 4.25 (dd, J= 16.9, 5.9 Hz, 1H), 4.07 (dd, J= 16.9, 5.7 Hz, 1H), 3.90 (dd, J= 11.5, 4.7 Hz, 1H), 3.87 – 3.72 (m, 1H), 2.75 – 2.64 (m, 1H), 2.33 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 2.17 (dt, J= 13.2, 6.2 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 554 (M+H) +。RT (方法A): 1.30 min。
380 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.25 (s, 1H), 9.00 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.73 – 8.60 (m, 1H), 8.61 – 8.49 (m, 1H), 8.41 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 8.08 – 7.97 (m, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.20 – 7.14 (m, 2H), 7.00 (s, 1H), 6.88 – 6.77 (m, 1H), 6.46 (s, 1H), 6.38 (s, 1H), 6.25 (s, 1H), 5.06 – 4.89 (m, 2H), 4.60 – 4.38 (m, 3H), 4.24 – 4.07 (m, 2H), 3.88 (d, J= 12.5 Hz, 1H), 3.81 – 3.71 (m, 2H), 3.68 (d, J= 4.7 Hz, 2H), 2.76 – 2.59 (m, 2H)。2.33 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 2.18 (d, J= 7.4 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 559 (M+H) +。RT (方法A): 0.60 min。
382 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.33 (s, 1H), 9.17 – 8.48 (m, 3H), 8.35 – 7.94 (m, 1H), 7.77 – 6.33 (m, 4H), 5.37 – 4.36 (m, 2H), 4.15 (m, 2H), 3.98 – 3.76 (m, 4H), 2.28 (s, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 502 (M+H) +。RT (方法A): 0.78 min。
384 1H-NMR (400 MHz, MeOD): δ 6.73 (m, 3H), 6.52 (d, J= 8.9 Hz, 2H), 6.10 (d, J= 7.0 Hz, 2H), 5.68 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 5.40 (d, J= 14.9 Hz, 2H), 5.23 (s, 2H), 2.93 (s, 2H), 2.56 (m, 4H), 2.32 (s, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 502.3 (M+H) +。RT (方法A): 0.75 min。
流程 90. (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-[2-[[3-[(5- 乙基 -2- 噻吩基 ) 氧基 ] 苄醯基 ] 胺基 ] 乙醯基 ]-N-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 368) 之合成 步驟 1 ： 3-[(5- 乙基 -2- 噻吩基 ) 氧基 ] 苯甲酸甲酯 (2)
將3-羥基苯甲酸甲酯(50.00 mg，0.3286 mmol，1.0當量)、2-溴-5-乙基-噻吩 (0.1256 g，0.6573 mmol，2當量)、N,N-二甲基甘胺酸鹽酸鹽(9.174 mg，0.06573 mmol，0.2當量)、CuI (6.259 mg，0.03286 mmol，0.1當量)、Cs 2CO 3(0.429 g，1.32 mmol，4當量)於1,4-二噁烷(3 mL)中之混合物在微波反應器中於110℃攪拌12小時。將反應冷卻至室溫，用水稀釋，用EtOAc萃取，用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，且濃縮。藉由combi-Flash；12 g管柱，溶劑A=己烷，溶劑B=EtOAc.100% A至15% B純化，得到3-[(5-乙基-2-噻吩基)氧基]苯甲酸甲酯(17.00 mg，0.06481 mmol，100質量%，19.72%產率)。LC/MS (ESI) m/z:263 (M+H) +。 步驟 2 ： 3-[(5- 乙基 -2- 噻吩基 ) 氧基 ] 苯甲酸 (3)
向3-[(5-乙基-2-噻吩基)氧基]苯甲酸甲酯(17.00 mg，0.06481 mmol，1.00當量)於MeOH (1.5 mL)、水(0.5 mL)之溶液中添加LiOH (3.104 mg，0.1296 mmol，2當量)。將反應在室溫下攪拌隔夜。然後濃縮反應以移除MeOH。使用1 N HCl將pH調節至1。酸化之混合物用EtOAc萃取。將合併之有機萃取物用鹽水洗滌，經MgSO 4乾燥，且濃縮，得到呈黃色黏稠油狀物之3-[(5-乙基-2-噻吩基)氧基]苯甲酸(12.00 mg，0.04833 mmol，74.57%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 249 (M+H) +。 步驟 3 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-[2-[[3-[(5- 乙基 -2- 噻吩基 ) 氧基 ] 苄醯基 ] 胺基 ] 乙醯基 ]-N-(1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 368)
向3-[(5-乙基-2-噻吩基)氧基]苯甲酸(6.203 mg，0.02498 mmol，1.1當量)於DMF (2 mL)之溶液中添加(2S,4R)-1-(2-胺基乙醯基)-4-(二氟甲氧基)-N-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺二鹽酸鹽(10.00 mg，0.02271 mmol，1.0當量)、含T3P (50質量%)之EtOAc (20.40 μL，0.0341 mmol，1.5當量)及DIPEA (11.90 μL，0.0682 mmol，3.0當量)。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘，然後藉由製備型HPLC純化，得到 化合物 368(2.129 mg，0.003563 mmol，15.69%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 598 (M+H) +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.21 (s, 1H), 8.94 (s, 1H), 8.78 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 8.73 – 8.61 (m, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.30 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 8.23 – 8.13 (m, 1H), 7.96 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.82 – 7.67 (m, 1H), 7.59 – 7.48 (m, 1H), 7.18 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.81 (s, 1H), 6.63 (s, 1H), 4.98 (s, 1H), 4.51 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 4.49 – 4.33 (m, 1H), 4.24 (dd, J= 17.0, 5.9 Hz, 1H), 4.07 (dd, J= 16.9, 5.6 Hz, 1H), 3.90 (dd, J= 11.6, 4.6 Hz, 1H), 3.85 – 3.73 (m, 1H), 2.77 – 2.59 (m, 1H), 2.42 – 2.27 (m, 1H), 2.16 (dt, J= 13.2, 6.7 Hz, 1H), 1.3 – 1.89 (m, 3H)。 流程 91. (2 S,4 R)- N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-1-((4-( 環己氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 )-4-( 二氟甲氧基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 383) 之合成 步驟 1 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸甲酯鹽酸鹽
在室溫下向(2 S,4 R)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-1,2-二甲酸1-( 三級丁基)酯2-甲酯(4.8 g，16 mmol)於DCM (5.3 mL)之溶液中添加TFA (5.3 mL，81 mmol)。1小時後，藉由在減壓下濃縮移除揮發物，得到(2 S,4 R)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸甲酯鹽酸鹽(4.5 g，120 %產率)。此物質未經進一步純化用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 196 (M+H) +(游離鹼)。 步驟 2 ： (2S,4R)-1-(( 三級丁氧基羰基 ) 甘胺醯基 )-4-( 二氟甲氧基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸甲酯
在0℃下向(2 S,4 R)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸甲酯鹽酸鹽(3.8 g，16 mmol)、2-(三級丁氧基羰基胺基)乙酸(3 g，17.1 mmol)及DIPEA (11 mL，63.2 mmol)於DMF (50 mL)之溶液中添加含50% T 3P之DMF (13 mL，21.8 mmol)。將反應在0℃下攪拌1小時，然後溫熱至室溫。添加H 2O (50 mL)，反應混合物用EtOAc萃取。將合併之有機層用飽和鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮，得到呈黃色油狀物之(2 S,4 R)-1-((三級丁氧基羰基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸甲酯(5.7 g，99 %產率)。此物質未經進一步純化用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 353 (M+H) +。 步驟 3 ： (2S,4R)-1-(( 三級丁氧基羰基 ) 甘胺醯基 )-4-( 二氟甲氧基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸
在室溫下向(2 S,4 R)-1-((三級丁氧基羰基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸甲酯(5.7 g，16 mmol)於1: 1: 1比例之MeOH/THF/H 2O (35 mL)之溶液中添加LiOH 單水合物(2.3 g，55 mmol)。將混合物攪拌隔夜。用MTBE (50 mL)洗滌混合物且丟棄有機層。水層用1N HCl酸化至pH=3且用EtOAc (3 x 50 mL)萃取。將合併之有機層用飽和鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾，且濃縮，得到呈透明油狀物之(2 S,4 R)-1-(( 三級丁氧基羰基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸(2.6 g，48 %產率)。LC/MS (ESI) m/z: 339 (M+H) +。 步驟 4 ： (2-((2S,4R)-2-(((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 胺甲醯基 )-4-( 二氟甲氧基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-2- 側氧基乙基 ) 胺甲酸三級丁酯
在0℃下向(2 S,4 R)-1-((三級丁氧基羰基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸(150 mg，0.44 mmol)、(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲胺二鹽酸鹽(100 mg，0.45 mmol)及含50% T 3P之DMF (0.4 mL，0.7 mmol)於DMF (20 mL)之溶液中添加DIPEA (0.39 mL，2.2 mmol)。將混合物溫熱至室溫歷時2小時且用H 2O (20 mL)淬滅。將混合物用EtOAc (3 x 50 mL)萃取。將有機層濃縮且藉由矽膠管柱層析法(DCM中之0至10% MeOH)純化，得到(2-((2 S,4 R)-2-(((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)胺甲醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-1-基)-2-側氧基乙基)胺甲酸 三級丁酯(130 mg，63%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 468 (M+H) +。 步驟 5 ： (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1- 甘胺醯基吡咯啶 -2- 甲醯胺鹽酸鹽
在室溫下向(2-((2 S,4 R)-2-(((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)胺甲醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-1-基)-2-側氧基乙基)胺甲酸 三級丁酯(130 mg，0.28 mmol)於EtOAc (5.5 mL)之溶液中添加含4N HCl之1,4-二噁烷(0.21 mL)。黃色固體立即粉碎。添加MeOH (1 mL)，得到黃色溶液。將反應在室溫下攪拌72小時。藉由濃縮移除揮發物且將混合物懸浮於MTBE (20 mL)中。將固體過濾且乾燥，得到(2 S,4 R)- N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-甘胺醯基吡咯啶-2-甲醯胺鹽酸鹽(100 mg，89%產率)。LC/MS (ESI) m/z: 404 (M+H) +。 步驟 6 ： (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-1-((4-( 環己氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 )-4-( 二氟甲氧基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 383)
在室溫下向(2 S,4 R)- N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-甘胺醯基吡咯啶-2-甲醯胺鹽酸鹽(10 mg，0.025 mmol)、DIPEA (0.022 mL，0.13 mmol)及4-(環己氧基)苯甲酸(6 mg，0.027 mmol)於DMF (0.5 mL)之溶液中添加含50% T 3P之DMF (0.022 mL，0.037 mmol)。將反應在室溫下攪拌隔夜。藉由矽膠管柱層析法(矽膠，含甲醇之DCM中之0至100%的10% 7N NH 3)直接純化混合物，得到呈白色固體之 化合物 383(2.3 mg，16%產率)。 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.29 (d, J= 77.5 Hz, 1H), 9.00 – 8.35 (m, 2H), 8.27 – 7.72 (m, 2H), 7.44 – 6.30 (m, 3H), 4.92 (d, J= 35.6 Hz, 1H), 4.61 – 4.37 (m, 1H), 4.26 – 3.94 (m, 1H), 3.94 – 3.69 (m, 2H), 2.24 (d, J= 63.8 Hz, 2H), 1.83 (d, J= 88.2 Hz, 2H), 1.62 – 0.98 (m, 6H)。LC/MS (ESI) m/z: 570 (M+H) +。RT (方法A): 1.55 min。 流程 92. (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((3-(2- 氟 -4- 甲基苄基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 305) 之合成 步驟 1 ： (2S,4R)-1-(( 三級丁氧基羰基 ) 甘胺醯基 )-4-( 二氟甲氧基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸甲酯 (2)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸甲酯(500 mg，2.56 mmol)及( 三級丁氧基羰基)甘胺酸(538 mg，3.07 mmol)於DMF (5 mL)之混合物中添加DIPEA (1653 mg，12.79 mmol)及HATU (1169 mg，3.07 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中0 - 5% MeOH之)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之標題化合物(500 mg，產率55.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 353 (M+H) +。 步驟 2 ： (2S,4R)-1-(( 三級丁氧基羰基 ) 甘胺醯基 )-4-( 二氟甲氧基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸 (3)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-1-(( 三級丁氧基羰基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸甲酯(500 mg，1.42 mol)於MeOH/水(5 mL，v/v= 4/1)之溶液中添加LiOH.H 2O (120 mg，2.86 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，且在減壓下濃縮，得到呈黃色固體之標題化合物(420 mg，產率87.4%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 339 (M+H) +。 步驟 3 ： (2-((2S,4R)-2-(((1-((4- 溴苯基 ) 磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 胺甲醯基 )-4-( 二氟甲氧基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-2- 側氧基乙基 ) 胺甲酸三級丁酯 (4)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-1-((三級丁氧基羰基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸(420 mg，1.24 mmol)及(1-((4-溴苯基)磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲胺(544 mg，1.67 mmol)於DMF (5 mL)之混合物中添加DIPEA (801 mg，6.20 mmol)及HATU (566 mg，1.49 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 10% MeOH)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之標題化合物(635 mg，產率74.5%)。LC/MS (ESI) m/z: 608 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S,4R)-N-((1-((4- 溴苯基 ) 磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1- 甘胺醯基吡咯啶 -2- 甲醯胺鹽酸鹽 (5)
向(2-((2S,4R)-2-(((1-((4-溴苯基)磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)胺甲醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-1-基)-2-側氧基乙基)胺甲酸 三級丁酯(635 mg，1.04 mmol)於DCM (3 mL)之溶液中添加HCl/1,4-二噁烷(3 mL，4M)且將反應混合物在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色固體之標題化合物(540 mg，產率99.5%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 508 (M+H) +。 步驟 5 ： (E)-N'-(2- 氟 -4- 甲基亞苄基 )-4- 甲基苯磺醯肼 (7)
在N 2氛圍下向2-氟-4-甲基苯甲醛(500 mg，3.6 mmol)於MeOH (8 mL)之溶液中添加4-甲基苯磺醯肼(674 mg，3.6 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。過濾混合物，且在真空下乾燥濾餅，得到呈白色固體之標題化合物(930 mg，產率83.9%)。LC/MS (ESI) m/z: 307 (M+H) +。 步驟 6 ： 3-(2- 氟 -4- 甲基苄基 ) 苯甲酸甲酯 (8)
在N 2氛圍，25℃下向(E)-N'-(2-氟-4-甲基亞苄基)-4-甲基苯磺醯肼(800 mg，2.6 mmol)及(3-(甲氧基羰基)苯基)硼酸(565 mg，3.1 mmol)於1,4-二噁烷(10 mL)之混合物中添加K 2CO 3(1.1 g，7.8 mmol)且將反應混合物在100℃下攪拌隔夜。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 10% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(470 mg，產率69.7%)。LC/MS (ESI) m/z: 259 (M+H) +。 步驟 7 ： 3-(2- 氟 -4- 甲基苄基 ) 苯甲酸 (9)
在N 2氛圍下向3-(2-氟-4-甲基苄基)苯甲酸甲酯(550 mg，2.1 mmol)於THF/MeOH/H 2O (6 mL，v/v/v= 2/1/1)之溶液中添加LiOH .H 2O (269 mg，6.4 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，且在減壓下濃縮，得到呈白色固體之標題化合物(60 mg，產率88.3%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 243 (M-H) -。 步驟 8 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((3-(2- 氟 -4- 甲基苄基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 )-N-((1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 (10)
在N 2氛圍下向3-(2-氟-4-甲基苄基)苯甲酸(15 mg，0.06 mmol)及(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-甘胺醯基-N-((1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)吡咯啶-2-甲醯胺(31 mg，0.06 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (39 mg，0.31 mmol)及HATU (30 mg，0.08 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 15: 1)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(20 mg，產率44.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 734 (M+H) +。 步驟 9 ： (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((3-(2- 氟 -4- 甲基苄基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 305)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-(2-氟-4-甲基苄基)苄醯基)甘胺醯基)-N-((1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)吡咯啶-2-甲醯胺(20 mg，0.03 mmol)於THF/MeOH/H 2O (2 mL，v/v/v= 2/1/1)之溶液中添加LiOH .H 2O (269 mg，6.4 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物在減壓下濃縮，得到呈白色固體之 化合物 305(1.6 mg，產率9.9%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.73 (s, 1H), 7.95 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.68 (d, J= 7.1 Hz, 1H), 7.40 - 7.36 (m, 2H), 7.32 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 7.08 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 6.90 - 6.84 (m, 2H), 6.71 - 6.34 (m, 2H), 5.04 (s, 1H), 4.72 (d, J= 15.6 Hz, 1H), 4.59 (t, J= 8.0 Hz, 2H), 4.22 (d, J= 2.6 Hz, 2H), 4.00 (d, J= 8.4 Hz, 3H), 3.89 (d, J= 11.2 Hz, 1H), 2.54 - 2.46 (m, 1H), 2.30 (s, 1H), 2.28 (s, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 594 (M+H) +。RT (方法A): 1.61 min。 流程 93. (S)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-((3,6- 二甲基 -2-( 間甲苯基 ) 異菸鹼醯基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 306) 之合成 步驟 1 ： 2,4- 二溴 -3,6- 二甲基吡啶 (2)
將4-羥基-3,6-二甲基吡啶-2(1H)-酮(800 mg，5.75 mmol)及POBr 3(5.0 g，17.5 mmol之混合物在150℃下攪拌6小時。將混合物用冰水淬滅且用1 M NaOH水溶液鹼化至pH~8。混合物用EtOAc萃取兩次且將合併之有機層用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 9% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(570 mg，產率37.7%)。LC/MS (ESI) (m/z): 264 (M+H) +。 步驟 2 ： 4- 溴 -3,6- 二甲基 -2-( 間甲苯基 ) 吡啶 (3)
在N 2氛圍下向2,4-二溴-3,6-二甲基吡啶(530 mg，2.02 mmol)及間甲苯基硼酸(274 mg，2.02 mmol)於1,4-二噁烷(6 mL)及水(1 mL)之混合物中添加Na 2CO 3(641 mg，6.06 mmol)及Pd(PPh 3) 4(233 mg，0.20 mmol)，反應混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在80℃下攪拌隔夜。將混合物用EtOAc稀釋，用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 10% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(320 mg，產率57.8%)。LC/MS (ESI) m/z: 276 (M+H) +。 步驟 3 ： 3,6- 二甲基 -2-( 間甲苯基 ) 異菸鹼酸甲酯 (4)
向4-溴-3,6-二甲基-2-(間甲苯基)吡啶(320 mg，1.16 mmol)於MeOH (2 mL)及DMSO (2 mL)之溶液中添加TEA (353 mg，3.49 mmol)及Pd(dppf)Cl 2(85 mg，0.12 mmol)。反應混合物在CO氛圍下脫氣三次且將反應混合物在85℃下攪拌隔夜。將混合物用EtOAc稀釋，用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 5% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(220 mg，產率74.1%)。LC/MS (ESI) m/z: 256 (M+H) +。 步驟 4 ： 3,6- 二甲基 -2-( 間甲苯基 ) 異菸鹼酸 (5)
向3,6-二甲基-2-(間甲苯基)異菸鹼酸甲酯(220 mg，0.86 mmol)於MeOH (3 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH .H 2O (109 mg，2.58 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(160 mg，產率76.9%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 242 (M+H) +。 步驟 5 ： (3,6- 二甲基 -2-( 間甲苯基 ) 異菸鹼醯基 ) 甘胺酸甲酯 (6)
在N 2氛圍下向3,6-二甲基-2-(間甲苯基)異菸鹼酸(100 mg，0.41 mmol)及甘胺酸甲酯鹽酸鹽(104 mg，0.82 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (321 mg，2.49 mmol)及HATU (189 mg，0.49 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 70% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(90 mg，產率69.5%)。LC/MS (ESI) m/z: 313 (M+H) +。 步驟 6 ： (3,6- 二甲基 -2-( 間甲苯基 ) 異菸鹼醯基 ) 甘胺酸 (7)
向(3,6-二甲基-2-(間甲苯基)異菸鹼醯基)甘胺酸甲酯(90 mg，0.29 mmol)於MeOH (3 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH .H 2O (36 mg，0.87 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用CHCl 3/i-PrOH (v/v= 3/1)萃取兩次。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(75 mg，產率87.3%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 299 (M+H) +。 步驟 7 ： (S)-7-((3,6- 二甲基 -2-( 間甲苯基 ) 異菸鹼醯基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲酸甲酯 (8)
在N 2氛圍下向(3,6-二甲基-2-(間甲苯基)異菸鹼醯基)甘胺酸(50 mg，0.17 mmol)及(S)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸甲酯(47 mg，0.25 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (130 mg，1.02 mmol)及HATU (76 mg，0.20 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 90% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(50 mg，產率63.8%)。LC/MS (ESI) m/z: 468 (M+H) +。 步驟 8 ： (S)-7-((3,6- 二甲基 -2-( 間甲苯基 ) 異菸鹼醯基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲酸 (9)
向(S)-7-((3,6-二甲基-2-(間甲苯基)異菸鹼醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸甲酯(50 mg，0.11 mmol)於MeOH (3 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH .H 2O (13 mg，0.32 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用CHCl 3/i-PrOH (v/v/= 3/1)萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈棕色固體之標題化合物(40 mg，產率82.5%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 454 (M+H) +。 步驟 9 ： (S)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-((3,6- 二甲基 -2-( 間甲苯基 ) 異菸鹼醯基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 306)
在N 2氛圍，0℃下向(S)-7-((3,6-二甲基-2-(間甲苯基)異菸鹼醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸(40 mg，0.09 mmol)及(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲胺(26 mg，0.18 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (68 mg，0.54 mmol)及HATU (40 mg，0.11 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用CHCl 3/i-PrOH (v/v= 3/1)萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 9: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 306(10 mg，產率19.4%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.84 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.14 (d, J= 6.3 Hz, 1H), 7.60 (d, J= 6.2 Hz, 1H), 7.37 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 7.27 (d, J= 4.2 Hz, 2H), 7.23 (s, 1H), 7.19 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 6.79 (s, 1H), 4.66 (s, 1H), 4.62 (d, J= 8.7 Hz, 2H), 4.22 (s, 2H), 4.01 (d, J= 2.0 Hz, 4H), 3.81 (s, 2H), 2.52 (s, 3H), 2.49 - 2.43 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 2.30 - 2.25 (m, 1H), 2.21 (s, 3H)。LC/MS (ESI) (m/z): 583 (M+H) +。RT (方法A): 0.79 min。 流程 94. (S)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-((3-(2- 氟 -4- 甲基苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 307) 之合成 步驟 1 ： (S)-7-(( 三級丁氧基羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲酸甲酯 (2)
向(三級丁氧基羰基)甘胺酸(370 mg，2.11 mmol)及(S)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸甲酯(400 mg，2.14 mmol)於DMF (10 mL)之混合物中添加HATU (975 mg，2.56 mmol)及DIPEA (827 mg，6.41 mmol)。將反應混合物在25℃下攪拌隔夜。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(300 mg，產率41.2%)。LC/MS (ESI) m/z: 345 (M+H) +。 步驟 2 ： (S)-7-(( 三級丁氧基羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲酸 (3)
向(S)-7-(( 三級丁氧基羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸甲酯(300 mg，0.87 mmol)於THF/MeOH/H 2O (15 mL，v/v/v= 1/1/1)之溶液中添加LiOH.H 2O (109 mg，2.60 mmol)且將混合物在25℃下攪拌隔夜。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，且濃縮至乾，得到呈黃色固體之標題化合物(200 mg，產率69.5%)，其未經純化用於下一反應。LC/MS (ESI) m/z: 331 (M+H) +。 步驟 3 ： (S)-(2- 側氧基 -2-(8-(((1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 胺甲醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬 -7- 基 ) 乙基 ) 胺甲酸三級丁酯 (4)
在N 2氛圍下向(S)-7-(( 三級丁氧基羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸(100 mg，0.30 mmol)及(1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲胺(110 mg，0.30 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (78 mg，0.61 mmol)及HATU (115 mg，0.30 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用EtOAc稀釋，用飽和NH 4Cl水溶液洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 5% MeOH)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(100 mg，產率71.9%)。LC/MS (ESI) m/z: 600 (M+H) +。 步驟 4 ： (S)-7- 甘胺醯基 -N-((1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 (5)
向(S)-(2-側氧基-2-(8-(((1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)胺甲醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬-7-基)乙基)胺甲酸 三級丁酯(100 mg，0.17 mmol)於DCM (2 mL)之溶液中添加TFA (1 mL)且將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色油狀物之標題化合物(110 mg，產率100%)，其未經純化直接用於下一反應。LC/MS (ESI) m/z: 500 (M+H) +。 步驟 5 ： (S)-7-((3-(2- 氟 -4- 甲基苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 )-N-((1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 (6)
向3-(2-氟-4-甲基苯氧基)苯甲酸(40 mg，0.16 mmol)於DMF (2.0 mL)之溶液中添加粗(S)-7-甘胺醯基-N-((1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺(100 mg，0.17 mmol)、HATU (74 mg，0.19 mmol)及DIEA (142 mg，1.1 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 5% MeOH)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(60 mg，產率50.8%)。LC/MS (ESI) m/z: 728 (M+H) +。 步驟 6 ： (S)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-((3-(2- 氟 -4- 甲基苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 307)
向(S)-7-((3-(2-氟-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-N-((1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺(60 mg，0.08 mmol)於MeOH/H 2O (2 mL，v/v= 2/1)之溶液中添加LiOH.H 2O (10.4 mg，0.25 mmol)且將混合物在50℃下攪拌1小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 307(2.0 mg，產率4.1%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.63 (s, 1H), 8.63 (s, 1H), 7.99 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.53 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 7.43 - 7.38 (m, 2H), 7.21 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.11 - 7.04 (m, 2H), 6.99 (t, J= 8.5 Hz, 2H), 6.50 (s, 1H), 4.81 - 4.60 (m, 2H), 4.60 - 4.43 (m, 2H), 4.18 - 4.01 (m, 1H), 4.01 - 3.96 (m, 4H), 3.80 (d, J= 11.3 Hz, 2H), 2.46 - 2.40 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.29 - 2.23 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 588 (M+H) +。RT (方法A): 1.40 min。
基於流程94來製備以下化合物：
化合物編號 反應物A 反應物B 反應物C 反應物D 特性化資料
309 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.84 (s, 1H), 8.47 - 8.39 (m, 1H), 8.12 (d, J= 6.3 Hz, 1H), 7.59 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 7.53 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.42 - 7.37 (m, 2H), 7.09 - 7.07 (m, 1H), 7.05 - 7.02 (m, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.79 (s, 1H), 4.72 (d, J= 3.9 Hz, 1H), 4.65 (d, J= 13.3 Hz, 1H), 4.31 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.18 (t, J= 8.2 Hz, 4H), 3.08 (s, 3H), 2.81 - 2.73 (m, 1H), 2.51 - 2.44 (m, 1H), 2.34 (s, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 608 (M+H) +。RT (方法A): 1.34 min。
312 a 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.69 (s, 1H), 7.92 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 7.62 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.47 (d, J= 8.1 Hz, 2H), 7.14 (d, J= 5.8 Hz, 2H), 7.07 - 7.01 (m, 2H), 6.99 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 6.63 (t, J= 58.9 Hz, 1H), 6.43 (d, J= 74.5 Hz, 1H), 5.32 - 5.27 (m, 1H), 5.05 (s, 1H), 4.58 - 4.53 (m, 1H), 4.31 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.17 - 4.12 (m, 1H), 3.98 - 3.93 (m, 1H), 3.88 (d, J= 11.4 Hz, 1H), 2.50 - 2.44 (m, 1H), 2.33 (s, 3H), 2.30 - 2.25 (m, 1H), 1.59 (d, J= 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 610 (M+H) +。RT (方法A): 1.58 min。
315 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.65 (d, J= 0.6 Hz, 1H), 8.00 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 7.54 (dd, J= 7.9, 1.2 Hz, 1H), 7.42 - 7.37 (m, 2H), 7.23 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 7.11 - 7.03 (m, 2H), 7.02 - 6.96 (m, 2H), 6.49 (d, J= 0.6 Hz, 1H), 4.82 (d, J= 3.8 Hz, 1H), 4.64 (dd, J= 15.9, 0.4 Hz, 1H), 4.43 (dd, J= 25.0, 16.2 Hz, 2H), 4.29 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 3.38 (dd, J= 6.0, 2.5 Hz, 1H), 2.45 - 2.38 (m, 1H), 2.33 (s, 3H), 2.20 (dd, J= 13.4, 3.7 Hz, 1H), 1.30 (s, 3H), 1.26 - 1.21 (m, 1H), 0.81 (td, J= 5.8, 1.1 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 556 (M+H) +。
a使用HCl/1,4-二噁烷代替步驟4中之TFA。 流程 95. (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((4-(4- 氟 -2- 甲基苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 308) 之合成 步驟 1 ： 4-(4- 氟 -2- 甲基苯氧基 ) 苯甲酸甲酯 (2)
在N 2氛圍下向4-氟-2-甲基酚(1.0 g，7.93 mmol)及4-氟苯甲酸甲酯(1.2 g，7.93 mmol)於DMSO (10 mL)之混合物中添加Cs 2CO 3(7.7 g，23.8 mmol)且將混合物在N 2氛圍，100℃下攪拌隔夜。將反應混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 20% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之標題化合物(682 mg，產率70.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 261 (M+H) +。 步驟 2 ： 4-(4- 氟 -2- 甲基苯氧基 ) 苯甲酸 (3)
向4-(4-氟-2-甲基苯氧基)苯甲酸甲酯(682 mg，2.62 mmol)於MeOH/THF/H 2O (6 mL，v/v/v= 4/1/1)之溶液中添加LiOH .H 2O (330 mg，7.87 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，且在減壓下濃縮，得到呈白色固體之標題化合物(625 mg，產率96.8%)，其未經進一步純化直接用於下一反應。LC/MS (ESI) m/z: 247 (M+H) +。 步驟 3 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((4-(4- 氟 -2- 甲基苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 )-N-((1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 (4)
在N 2氛圍下向4-(4-氟-2-甲基苯氧基)苯甲酸(14 mg，0.06 mmol)及(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-甘胺醯基-N-((1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)吡咯啶-2-甲醯胺鹽酸鹽(30 mg，0.06 mmol)於DMF (5 mL)之混合物中添加DIPEA (38 mg，0.29 mmol)及HATU (27 mg，0.07 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 15: 1)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(20 mg，產率11.8%)。LC/MS (ESI) m/z: 736 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((4-(4- 氟 -2- 甲基苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 308)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((4-(4-氟-2-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-N-((1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)吡咯啶-2-甲醯胺(20 mg，0.03 mmol)於MeOH/THF/H 2O (2 mL，v/v/v= 4/1/1)之溶液中添加LiOH .H 2O (10 mg，0.16 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(1.1 mg，產率6.79%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.63 (d, J= 0.6 Hz, 1H), 7.97 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.85 - 7.82 (m, 2H), 7.18 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.11 - 7.08 (m, 1H), 7.02 - 6.99 (m, 2H), 6.89 - 6.86 (m, 2H), 6.71 - 6.33 (m, 2H), 5.06 - 5.02 (m, 1H), 4.71 - 4.66 (m, 1H), 4.60 - 4.51 (m, 2H), 4.21 (dt, J= 16.7, 8.4 Hz, 2H), 4.00 - 3.95 (m, 1H), 3.91 - 3.87 (m, 1H), 2.52 - 2.45 (m, 1H), 2.31 - 2.24 (m, 1H), 2.17 (s, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 596 (M+H) +。RT (方法A): 1.56 min。
基於流程95來製備以下化合物：
化合物編號 反應物A 反應物B 反應物C 特性化資料
316 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.76 (s, 1H), 8.03 (d, J= 6.1 Hz, 1H), 7.82 (d, J= 8.9 Hz, 2H), 7.37 (d, J= 6.5 Hz, 1H), 7.11 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.07 (d, J= 3.6 Hz, 1H), 6.93 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 6.71 - 6.33 (m, 2H), 5.34 (s, 1H), 4.22 (s, 1H), 4.21 (s, 1H), 4.01 (d, J= 3.9 Hz, 1H), 3.98 (d, J= 4.5 Hz, 1H), 3.96 (s, 1H), 2.48 (d, J= 9.9 Hz, 1H), 2.38 (s, 3H), 2.29 (dd, J= 8.4, 4.8 Hz, 1H), 2.21 - 2.16 (m, 2H)。LC/MS (ESI) m/z: 596 (M+H) +。RT (方法A): 1.56 min。
323 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.85 (s, 1H), 8.55 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 8.12 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 7.59 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 7.50 (d, J= 2.6 Hz, 1H), 7.15 (d, J= 8.2 Hz, 2H), 7.11 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.10 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 6.77 (s, 1H), 6.52 (t, J= 74.4 Hz, 1H), 5.06 - 5.03 (m, 1H), 4.79 - 4.75 (m, 1H), 4.58 (t, J= 3.9 Hz, 2H), 4.29 (d, J= 10.3 Hz, 2H), 3.99 - 3.95 (m, 1H), 3.89 - 3.85 (m, 1H), 2.52 - 2.47 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.31 - 2.25 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 597 (M+H) +。RT (方法A): 1.53 min。
流程 96. (S)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-1-((3-(2- 氟 -4- 甲基苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 310) 之合成 步驟 1 ： (3-(2- 氟 -4- 甲基苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺酸 (2)
向(3-(2-氟-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺酸 三級丁酯(105 mg，0.42 mmol)於DCM (2 mL)之溶液中添加TFA (2 mL)且將混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈無色油狀物之標題化合物(126 mg，產率100%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 304 (M+H) +。 步驟 2 ： (3-(2- 氟 -4- 甲基苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 -L- 脯胺酸甲酯 (3)
在N 2氛圍下向(3-(2-氟-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺酸(126 mg，0.42 mmol)及L-脯胺酸甲酯鹽酸鹽(104 mg，0.63 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (269 mg，2.08 mmol)及HATU (238 mg，0.63 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌20分鐘。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NH 4Cl水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 15% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(167 mg，產率96.7%)。LC/MS (ESI) m/z: 415 (M+H) +。 步驟 3 ： (3-(2- 氟 -4- 甲基苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 -L- 脯胺酸 (4)
向(3-(2-氟-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基-L-脯胺酸甲酯(167 mg，0.40 mmol)於MeOH/H 2O (5 mL，v/v= 2/1)之溶液中添加LiOH .H 2O (68 mg，1.62 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~5且用EtOAc萃取兩次。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈無色油狀物之標題化合物(119 mg，產率73.7%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 401 (M+H) +。 步驟 4 ： (S)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-1-((3-(2- 氟 -4- 甲基苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 310)
在N 2氛圍下向(3-(2-氟-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基-L-脯胺酸(30 mg，0.08 mmol)及(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲胺(17 mg，0.11 mmol)於DMF (1 mL)之混合物中添加DIPEA (48 mg，0.37 mmol)及HATU (43 mg，0.11 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NH 4Cl水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH=8: 1)純化殘餘物且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈無色油狀物之 化合物 310(2.3 mg，產率5.8%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.65 (s, 1H), 8.01 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.54 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 7.43 - 7.39 (m, 2H), 7.26 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 7.11 - 7.05 (m, 2H), 7.03 - 6.98 (m, 2H), 6.52 (s, 1H), 4.66 - 4.45 (m, 4H), 4.21 (s, 2H), 3.80 - 3.67 (m, 2H), 2.34 (s, 3H), 2.22 - 2.16 (m, 1H), 2.08 - 2.04 (m, 2H)。LC/MS (ESI) m/z: 530 (M+H) +。RT (方法A): 1.36 min。 流程 97. (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((5-(2- 氟 -4- 甲基苯氧基 )-2- 甲氧基苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 311) 之合成 步驟 1 ： 5-(2- 氟 -4- 甲基苯氧基 )-2- 甲氧基苯甲酸甲酯 (2)
在N 2氛圍下向2-氟-4-甲基酚(100 mg，0.79 mmol)及5-碘-2-甲氧基苯甲酸甲酯(200 mg，0.68 mmol)於DMSO (1 mL)之混合物中添加2-吡啶甲酸(8 mg，0.065 mmol)、K 3PO 4(290 mg，1.36 mmol)及CuI (6 mg，0.032 mmol)，混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在80℃下攪拌隔夜。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 10% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(90 mg，產率45.2%)。LC/MS (ESI) m/z: 291 (M+H) +。 步驟 2 ： 5-(2- 氟 -4- 甲基苯氧基 )-2- 甲氧基苯甲酸 (3)
在N 2氛圍下向5-(2-氟-4-甲基苯氧基)-2-甲氧基苯甲酸甲酯(90 mg，0.31 mmol)於MeOH/水(1.5 mL，v/v= 4/1)之溶液中添加LiOH.H 2O (26 mg，0.62 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，且在減壓下濃縮，得到呈黃色固體之標題化合物(70 mg，產率81.7%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 277 (M+H) +。 步驟 3 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((5-(2- 氟 -4- 甲基苯氧基 )-2- 甲氧基苄醯基 ) 甘胺醯基 )-N-((1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺
在N 2氛圍下向5-(2-氟-4-甲基苯氧基)-2-甲氧基苯甲酸(70 mg，0.25 mmol)及(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-甘胺醯基-N-((1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)吡咯啶-2-甲醯胺鹽酸鹽(100 mg，0.20 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (164 mg，1.27 mmol)及HATU (116 mg，0.31 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NH 4Cl水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化殘餘物，得到呈黃色固體之標題化合物(30 mg，產率14.0%)。LC/MS (ESI) m/z: 766 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((5-(2- 氟 -4- 甲基苯氧基 )-2- 甲氧基苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 311)
向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((5-(2-氟-4-甲基苯氧基)-2-甲氧基苄醯基)甘胺醯基)-N-((1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)吡咯啶-2-甲醯胺(30 mg，0.036 mmol)於MeOH/水(1.5 mL，v/v= 4/1) 之溶液中添加LiOH.H 2O (3 mg，0.072 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 311(1.0 mg，產率4.5%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.65 (s, 1H), 8.01 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 7.56 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 7.26 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 7.15 (d, J= 2.7 Hz, 2H), 7.03 (d, J= 12.2 Hz, 1H), 6.94 (s, 1H), 6.54 (s, 1H), 6.43 (t, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.66 - 4.64 (m, 1H), 4.60 - 4.58 (m, 1H), 4.56 - 4.54 (m, 1H), 4.30 - 4.27 (m, 1H), 4.27 - 4.24 (m, 1H), 4.01 - 3.97 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.85 - 3.81 (m, 1H), 2.52 - 2.46 (m, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.29 - 2.24 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 626 (M+H) +。RT (方法A): 1.64 min。 流程 98. (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((9- 羥基 -9- 甲基 -9H- 茀 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 314) 之合成 步驟 1 ： 3- 溴 -9- 甲基 -9H- 茀 -9- 醇 (2)
在N 2氛圍下向3-溴-9H-茀-9-酮(500 mg，1.93 mmol)於THF (10 mL)之溶液中添加CH 3MgBr (6.4 mL，3.0M)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應混合物用飽和NH 4Cl水溶液淬滅且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 20% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(520 mg，產率97.9%)。LC/MS (ESI) m/z: 257 (M+H) +。 步驟 2 ： 9- 羥基 -9- 甲基 -9H- 茀 -3- 甲酸甲酯 (3)
向3-溴-9-甲基-9H-茀-9-醇(520 mg，1.89 mmol)於MeOH (3 mL)及DMSO (3 mL)之溶液中添加TEA (574 mg，5.67 mmol)、Pd(dppf)Cl 2(277 mg，0.38 mmol)，混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在CO氣球下於80℃攪拌隔夜。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 30% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(380 mg，產率79.1%)。LC/MS (ESI) m/z: 237 (M+H) +。 步驟 3 ： 9- 羥基 -9- 甲基 -9H- 茀 -3- 甲酸 (4)
在N 2氛圍下向9-羥基-9-甲基-9H-茀-3-甲酸甲酯(380 mg，1.49 mmol)於THF/MeOH/H 2O (6 mL，v/v/v= 4/1/1)之溶液中添加LiOH .H 2O (125 mg，2.99 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(355 mg，產率98.9%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 223 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((9- 羥基 -9- 甲基 -9H- 茀 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 )-N-((1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 (5)
在N 2氛圍下向9-羥基-9-甲基-9H-茀-3-甲酸(30 mg，0.12 mmol)及(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-甘胺醯基-N-((1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)吡咯啶-2-甲醯胺鹽酸鹽(82 mg，0.15 mmol)於DMF (5 mL)之混合物中添加HATU (52 mg，0.14 mmol)及DIPEA (97 mg，0.75 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 5% MeOH)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(30 mg，產率33.0%)。LC/MS (ESI) m/z: 730 (M+H) +。 步驟 5 ： (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((9- 羥基 -9- 甲基 -9H- 茀 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 314)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((9-羥基-9-甲基-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-N-((1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)吡咯啶-2-甲醯胺(30 mg，0.041 mmol)於THF/MeOH/H 2O (3 mL，v/v/v= 4/1/1)之溶液中添加LiOH .H 2O (10 mg，0.25 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 314(8 mg，產率33.0%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.70 - 8.54 (m, 1H), 8.18 - 8.06 (m, 1H), 7.84 (m, J= 38.7, 18.2, 5.1 Hz, 2H), 7.72 - 7.55 (m, SLXNHB3H), 4.38 - 4.13 (m, 2H), 4.06 - 3.88 (m, 2H), 2.59 - 2.43 (m, 1H), 2.33 - 2.26 (m, J= 34.3, 19.5, 15.4 Hz, 1H), 1.70 (s, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 590 (M+H) +。RT (方法A): 1.08 min。 流程 99. (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((3-((2- 氟 -4- 甲基苄基 ) 氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 325) 之合成 步驟 1 ： (2- 氟 -4- 甲基苯基 ) 甲醇 (2)
在N 2氛圍，0℃下向2-氟-4-甲基苯甲醛(1.0 g，7.2 mmol)於MeOH (10 mL)之溶液中分批添加NaBH 4(826 mg，21.7 mmol)，反應混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在室溫下攪拌2小時。混合物用飽和NH 4Cl水溶液淬滅且用EtOAc萃取兩次。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈無色油狀物之標題化合物(1.0 g，產率99.0%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.42 (t, J= 7.8 Hz, 1H), 7.10 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.02 (d, J= 11.1 Hz, 1H), 4.84 (s, 2H), 2.50 (s, 3H)。 步驟 2 ： 1-( 溴甲基 )-2- 氟 -4- 甲基苯 (3)
在N 2氛圍，0℃下向(2-氟-4-甲基苯基)甲醇(500 mg，3.6 mmol)於DCM (8 mL)之溶液中添加CBr 4(2.4 g，7.1 mmol)及PPh 3(1.9 g，7.1 mmol)且將反應混合物在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將混合物濃縮至乾，得到呈黃色固體之粗標題化合物(2.5 g，粗品)，其未經純化直接用於下一反應。 步驟 3 ： 3-((2- 氟 -4- 甲基苄基 ) 氧基 ) 苯甲酸甲酯 (4)
在25℃下向1-(溴甲基)-2-氟-4-甲基苯(2.5 g，3.6 mmol)及3-羥基苯甲酸甲酯(376 mg，2.5 mmol)於DMF (8 mL)之混合物中添加Cs 2CO 3(2.9 g，7.5 mmol)且將反應混合物在N 2氛圍，80℃下攪拌隔夜。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 10% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(460 mg，產率67.8%)。LC/MS (ESI) m/z: 275 (M+H) +。 步驟 4 ： 3-((2- 氟 -4- 甲基苄基 ) 氧基 ) 苯甲酸 (5)
向3-((2-氟-4-甲基苄基)氧基)苯甲酸甲酯(450 mg，1.6 mmol)於THF/MeOH/水(8 mL，v/v/v= 2/1/1)之溶液中添加LiOH .H 2O (207 mg，4.9 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，且在減壓下濃縮，得到呈白色固體之標題化合物(410 mg，產率96.0%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 259 (M-H) -。 步驟 5 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((3-((2- 氟 -4- 甲基苄基 ) 氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 )-N-((1-( 苯基磺醯基 )-1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 (6)
在N 2氛圍下向3-((2-氟-4-甲基苄基)氧基)苯甲酸(20 mg，0.08 mmol)及(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-甘胺醯基-N-((1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)吡咯啶-2-甲醯胺(47 mg，0.09 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (50 mg，0.38 mmol)及HATU (44 mg，0.12 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。過濾混合物，且在減壓下將濾液濃縮至乾。藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 15: 1)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(20 mg，產率34.7%)。LC/MS (ESI) m/z: 750 (M+H) +。 步驟 6 ： (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((3-((2- 氟 -4- 甲基苄基 ) 氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 325)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-((2-氟-4-甲基苄基)氧基)苄醯基)甘胺醯基)-N-((1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)吡咯啶-2-甲醯胺(20 mg，0.03 mmol)於THF/MeOH/水(2 mL，v/v/v= 2/1/1)之溶液中添加LiOH .H 2O (6 mg，0.13 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 325(1.5 mg，產率9.2%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.79 (s, 1H), 8.03 (d, J= 6.2 Hz, 1H), 7.50 - 7.44 (m, 3H), 7.37 (d, J= 7.5 Hz, 2H), 7.19 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.01 - 6.94 (m, 2H), 6.79 (s, 1H), 6.53 (t, J= 74.5 Hz, 1H), 5.10 (s, 2H), 5.05 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.63 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 4.59 (d, J= 7.3 Hz, 2H), 4.23 (s, 2H), 4.04 - 3.99 (m, 1H), 3.91 (d, J= 11.6 Hz, 1H), 2.54 - 2.48 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.32 - 2.25 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 610 (M+H) +。RT (方法A): 1.60 min。 流程 100. (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((3- 氟 -5-(2- 氟 -4- 甲基苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 329) 之合成 步驟 1 ： 3- 氟 -5-(2- 氟 -4- 甲基苯氧基 ) 苯甲酸甲酯 (2)
向2-氟-4-甲基酚(250 mg，1.98 mmol)及(3-氟-5-(甲氧基羰基)苯基)硼酸(787 mg，3.97 mmol)於無水DCM (5 mL)之混合物中添加吡啶(314 mg，3.97 mmol)、Cu(OAc) 2(538 mg，2.96 mmol)且將反應混合物在O 2氣球下於室溫攪拌隔夜。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 7% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(420 mg，產率76.7%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.43 - 7.37 (m, 2H), 7.02 (dd, J= 9.8, 6.0 Hz, 2H), 6.95 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 6.84 (d, J= 9.5 Hz, 1H), 3.89 (d, J= 0.6 Hz, 3H), 2.37 (s, 3H)。 步驟 2 ： 3- 氟 -5-(2- 氟 -4- 甲基苯氧基 ) 苯甲酸 (3)
在N 2氛圍下向3-氟-5-(2-氟-4-甲基苯氧基)苯甲酸甲酯(420 mg，1.58 mmol)於MeOH/水(5 mL，v/v= 4/1)之溶液中添加 LiOH .H 2O (133 mg，3.17 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，且在減壓下濃縮，得到呈黃色固體之標題化合物(395 mg，產率99.3%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 265 (M+H) +。 步驟 3 ： (3- 氟 -5-(2- 氟 -4- 甲基苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺酸甲酯 (4)
在N 2氛圍下向3-氟-5-(2-氟-4-甲基苯氧基)苯甲酸(395 mg，1.51 mmol)及甘胺酸甲酯鹽酸鹽(227 mg，1.81 mmol)於DMF (4 mL)之混合物中添加DIPEA (977 mg，7.56 mmol)及HATU (691 mg，1.81 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(430 mg，產率84.7%)。LC/MS (ESI) m/z: 336 (M+H) +。 步驟 4 ： (3- 氟 -5-(2- 氟 -4- 甲基苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺酸 (5)
向(3-氟-5-(2-氟-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺酸甲酯(430 mg，1.28 mol)於MeOH/水(5 mL，v/v= 4/1)之溶液中添加LiOH .H 2O (108 mg，2.57 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，且在減壓下濃縮，得到呈白色固體之標題化合物(400 mg，產率97.0%)，其未經進一步純化直接用於下一反應。LC/MS (ESI) m/z: 322 (M+H) +。 步驟 5 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((3- 氟 -5-(2- 氟 -4- 甲基苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸甲酯 (6)
在N 2氛圍下向(3-氟-5-(2-氟-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺酸(100 mg，0.31 mmol)及(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸甲酯鹽酸鹽(90 mg，0.41 mmol)於DMF (1 mL)之混合物中添加DIPEA (200 mg，1.54 mmol)及HATU (142 mg，0.37 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之標題化合物(135 mg，產率87.0%)。LC/MS (ESI) m/z: 499 (M+H) +。 步驟 6 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((3- 氟 -5-(2- 氟 -4- 甲基苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸 (7)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-氟-5-(2-氟-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸甲酯(135 mg，0.27 mol)於MeOH/水(1.5 mL，v/v= 4/1)之溶液中添加 LiOH .H 2O (26 mg，0.62 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，且在減壓下濃縮，得到呈白色固體之標題化合物(120 mg，產率91.4%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 485 (M+H) +。 步驟 7 ： (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((3- 氟 -5-(2- 氟 -4- 甲基苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 329)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-氟-5-(2-氟-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸(40 mg，0.082 mmol)及(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲胺鹽酸鹽(18 mg，0.098 mmol)於DMF (1 mL)之混合物中添加DIPEA (53 mg，0.41 mmol)及HATU (38 mg，0.10 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 329(5.9 mg，產率11.6%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.64 (s, 1H), 7.99 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.31 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.21 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.08 (dd, J= 14.2, 6.1 Hz, 2H), 7.02 (d, J= 8.9 Hz, 1H), 6.84 (d, J= 9.7 Hz, 1H), 6.60 (d, J= 74.4 Hz, 1H), 6.41 (d, J= 69.8 Hz, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.68 (d, J= 16.2 Hz, 1H), 4.61 - 4.56 (m, 1H), 4.51 (d, J= 15.9 Hz, 1H), 4.24 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.15 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 3.99 - 3.94 (m, 1H), 3.86 (d, J= 11.9 Hz, 1H), 2.51 - 2.44 (m, 1H), 2.35 (s, 3H), 2.29 - 2.23 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 614 (M+H) +。RT (方法A): 1.64 min。
基於流程100來製備以下化合物：
化合物編號 反應物A 反應物B 反應物C 反應物D 反應物E 特性化資料
322 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.65 (s, 1H), 8.02 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 7.36 (dd, J= 5.9, 3.2 Hz, 1H), 7.27 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 7.22 (d, J= 10.2 Hz, 1H), 7.15 - 7.11 (m, 1H), 7.06 (d, J= 11.5 Hz, 1H), 6.99 (t, J= 8.3 Hz, 2H), 6.69 - 6.52 (m, 1H), 6.51 - 6.31 (m, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.69 (d, J= 16.0 Hz, 1H), 4.57 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 4.51 (d, J= 15.8 Hz, 1H), 4.29 (d, J= 16.9 Hz, 1H), 4.21 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 3.97 - 3.93 (m, 1H), 3.84 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 2.51 - 2.44 (m, 1H), 2.33 (s, 3H), 2.29 - 2.22 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 614 (M+H) +。RT (方法A): 1.60 min。
327 H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.71 - 8.62 (m, 1H), 8.09 - 7.93 (m, 1H), 7.59 - 7.51 (m, 1H), 7.37 - 7.26 (m, 1H), 7.23 - 7.15 (m, 4H), 6.90 (d, J= 8.5 Hz, 2H), 6.71 - 6.33 (m, 2H), 5.07 - 4.92 (m, 1H), 4.75 - 4.69 (m, 1H), 4.62 - 4.47 (m, 2H), 4.36 - 4.17 (m, 2H), 4.02 - 3.85 (m, 2H), 2.52 - 2.36 (m, 1H), 2.31 (s, 3H), 2.30 - 2.23 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 596 (M+H) +。
328 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.63 (s, 1H), 7.97 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.18 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.05 (d, J= 11.0 Hz, 1H), 6.99 (d, J= 7.1 Hz, 2H), 6.93 (s, 1H), 6.70 - 6.50 (m, 1H), 6.50 - 6.32 (m, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.69 (d, J= 15.9 Hz, 1H), 4.63 - 4.56 (m, 1H), 4.51 (d, J= 16.0 Hz, 1H), 4.23 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.15 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 3.99 - 3.94 (m, 1H), 3.86 (d, J= 11.8 Hz, 1H), 2.51 - 2.44 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.30 - 2.23 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 610 (M+H) +。RT (方法A): 1.56 min。
371 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.68 - 8.65 (m, 1H), 8.04 - 8.01 (m, 1H), 7.30 - 7.25 (m, 3H), 7.24 - 7.21 (m, 2H), 6.98 - 6.94 (m, 2H), 6.87 - 6.82 (m, 1H), 6.53 - 6.50 (m, 1H), 4.85 - 4.82 (m, 1H), 4.65 - 4.60 (m, 1H), 4.51 - 4.46 (m, 1H), 4.41 - 4.35 (m, 1H), 4.31 - 4.25 (m, 1H), 3.39 - 3.36 (m, 1H), 2.67 - 2.65 (m, 1H), 2.63 - 2.61 (m, 1H), 2.46 - 2.39 (m, 1H), 2.22 - 2.17 (m, 1H), 1.30 (s, 3H), 1.25 -1.21 (m, 4H), 0.84 - 0.80 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 570 (M+H) +。RT (方法A): 1.74 min。
流程 101. (2S,4R*)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-1-((3-(2- 氟 -4- 甲基苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 )-4-( 甲氧基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 318) 之合成 步驟 1 ： (2S,4R*)-4-( 甲氧基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸苄酯鹽酸鹽 (2)
將(2S,4R)-4-(甲氧基甲基)吡咯啶-1,2-二甲酸2-苄酯1-( 三級丁基)酯(380 mg，1.1 mmol)於HCl/1,4-二噁烷(3 mL，4M)中之溶液在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色固體之標題化合物(310 mg，產率98.6%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 250 (M+H) +。 步驟 2 ： (2S,4R*)-1-(( 三級丁氧基羰基 ) 甘胺醯基 )-4-( 甲氧基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸苄酯 (3)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-4-(甲氧基甲基)吡咯啶-2-甲酸苄酯鹽酸鹽(310 mg，1.1 mmol)於DMF (150 mL)之溶液中添加( 三級丁氧基羰基)甘胺酸(200 mg，1.1 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌10分鐘。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 40% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(200 mg，產率44.8%)。LC/MS (ESI) m/z: 407 (M+H) +。 步驟 3 ： (2S,4R)-1- 甘胺醯基 -4-( 甲氧基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸苄酯鹽酸鹽 (4)
將(2S,4R*)-1-((三級丁氧基羰基)甘胺醯基)-4-(甲氧基甲基)吡咯啶-2-甲酸苄酯(100 mg，0.25 mmol)於HCl/1,4-二噁烷(2 mL，4M)中之溶液在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色糖漿狀之標題化合物(82 mg，產率95.7%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 307 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S,4R*)-1-((3-(2- 氟 -4- 甲基苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 )-4-( 甲氧基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸苄酯 (5)
向(2S,4R*)-1-甘胺醯基-4-(甲氧基甲基)吡咯啶-2-甲酸苄酯鹽酸鹽(82 mg，0.24 mmol)於DMF (1 mL)之溶液中添加3-(2-氟-4-甲基苯氧基)苯甲酸(59 mg，0.24 mmol)、HATU (106 mg，0.28 mmol)及DIPEA (155 mg，1.2 mmol)且將混合物在室溫下攪拌10分鐘。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(50 mg，產率39.0%)。 步驟 5 ： (2S,4R*)-1-((3-(2- 氟 -4- 甲基苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 )-4-( 甲氧基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸 (6)
向(2S,4R*)-1-((3-(2-氟-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-4-(甲氧基甲基)吡咯啶-2-甲酸苄酯(50 mg，0.094 mmol)於MeOH/水(1 mL，v/v= 1/1)之溶液中添加LiOH .H 2O (24 mg，0.60 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，且在減壓下濃縮，得到呈白色固體之標題化合物(40 mg，產率96.2%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 445 (M+H) +。 步驟 6 ： (2S,4R*)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-1-((3-(2- 氟 -4- 甲基苯氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 )-4-( 甲氧基甲基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 318)
在N 2氛圍下向(2S,4R*)-1-((3-(2-氟-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-4-(甲氧基甲基)吡咯啶-2-甲酸(40 mg，0.090 mmol)及(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲胺(13 mg，0.090 mmol)於DMF (1.5 mL)之混合物中添加HATU (41 mg，0.11 mmol)及DIPEA (58 mg，0.45 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌10分鐘。殘餘物係藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 10% MeOH)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 318(15 mg，產率29.1%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.77 (d, J= 19.3 Hz, 1H), 8.08 (t, J= 9.5 Hz, 1H), 7.53 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.44 - 7.37 (m, 3H), 7.10 - 6.99 (m, 4H), 6.66 (d, J= 13.4 Hz, 1H), 4.65 - 4.60 (m, 2H), 4.56 (dd, J= 8.4, 3.6 Hz, 1H), 4.26 - 4.10 (m, 2H), 3.96 - 3.90 (m, 1H), 3.52 - 3.39 (m, 3H), 3.37 (d, J= 7.2 Hz, 3H), 2.82 - 2.69 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.16 - 2.11 (m, 1H), 2.10 - 2.03 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 574 (M+H) +。RT (方法A): 1.43 min。
基於流程101來製備化合物367：
化合物編號 反應物A 反應物B 反應物C 反應物D 特性化資料
367 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.66 (s, 1H), 7.97(d, J= 5.8.3 Hz, 1H), 7.55 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.41 (dd, J= 9.9, 5.5 Hz, 2H), 7.18 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.12 - 7.04 (m, 2H), 7.03 - 6.96 (m, 2H), 6.52 (d, J= 24.6 Hz, 1H), 4.64 (m, 2H), 4.50 (d, J= 15.9 Hz, 1H), 4.43 (t, J= 8.3 Hz, 1H), 4.26 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.13 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 3.94 - 3.88 (m, 1H), 3.43 (dt, J= 16.3, 9.4 Hz, 3H), 3.32 (s, 1H), 3.30 - 3.30 (m, 1H), 2.68 - 2.59 (m, 1H), 2.45 - 2.37 (m, 1H), 2.34 (d, J= 6.1 Hz, 3H), 1.79 (dt, J= 12.5, 9.3 Hz, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 574 (M+H) +。RT (方法A): 1.41 min。
流程 102. (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((3-((2- 氟 -4- 甲基苯基 ) 胺基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 324) 之合成 步驟 1 ： 3-((2- 氟 -4- 甲基苯基 ) 胺基 ) 苯甲酸 (2)
在N 2氛圍下向3-胺基苯甲酸(1.37 g，10.0 mmol)及2-氟-1-碘-4-甲基苯(2.36 g，10.0 mmol)於甲苯(15 mL)之混合物中添加Cs 2CO 3(1.7 g，15.0 mmol)、BINAP (1.25 g，2.0 mmol)及Pd(OAc) 2(225 mg，1.0 mmol)，反應混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在100℃下攪拌隔夜。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 100% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色固體之標題化合物(100 mg，產率4.1%)。LC/MS (ESI) m/z: 246 (M+H) +。 步驟 2 ： (3-((2- 氟 -4- 甲基苯基 ) 胺基 ) 苄醯基 ) 甘胺酸甲酯 (3)
在N 2氛圍下向3-((2-氟-4-甲基苯基)胺基)苯甲酸(95 mg，0.39 mmol)及甘胺酸甲酯鹽酸鹽(58 mg，0.46 mmol)於DMF (1 mL)之混合物中添加DIPEA (155 mg，1.2 mmol)及HATU (175 mg，0.46 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 60% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色固體之標題化合物(90 mg，產率72.9%)。LC/MS (ESI) m/z: 317 (M+H) +。 步驟 3 ： (3-((2- 氟 -4- 甲基苯基 ) 胺基 ) 苄醯基 ) 甘胺酸 (4)
在0℃下向(3-((2-氟-4-甲基苯基)胺基)苄醯基)甘胺酸甲酯(86 mg，0.27 mmol)於MeOH (1 mL)及水(0.5 mL)之溶液中添加LiOH.H 2O (33 mg，0.80 mmol)且將混合物在室溫下攪拌4小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~4且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，且濃縮，得到呈白色固體之標題化合物(80 mg，產率97.6%)。LC/MS (ESI) (m/z): 303 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((3-((2- 氟 -4- 甲基苯基 ) 胺基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸甲酯 (5)
在N 2氛圍下向(3-((2-氟-4-甲基苯基)胺基)苄醯基)甘胺酸(80 mg，0.26 mmol)及(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸甲酯鹽酸鹽(90 mg，0.39 mmol)於DMF (1 mL)之混合物中添加DIPEA (104 mg，0.80 mmol)及HATU (133 mg，0.35 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 90% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色固體之標題化合物(95 mg，產率76.2%)。LC/MS (ESI) m/z: 480 (M+H) +。 步驟 5 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((3-((2- 氟 -4- 甲基苯基 ) 胺基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸 (6)
在0℃下向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-((2-氟-4-甲基苯基)胺基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸甲酯(90 mg，0.19 mmol)於MeOH (1 mL)及水(0.5 mL)之溶液中添加LiOH.H 2O (33 mg，0.80 mmol)且將混合物在室溫下攪拌4小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~4且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，且濃縮，得到呈白色固體之標題化合物(55 mg，產率62.2%)。LC/MS (ESI) (m/z): 466 (M+H) +。 步驟 6 ： (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((3-((2- 氟 -4- 甲基苯基 ) 胺基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 324)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-((2-氟-4-甲基苯基)胺基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸(42 mg，0.09 mmol)及(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲胺鹽酸鹽(33 mg，0.18 mmol)於DMF (0.5 mL)之混合物中添加DIPEA (39 mg，0.30 mmol)及HATU (38 mg，0.1 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 8: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 324(10 mg，產率18.7%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.67 (d, J= 24.9 Hz, 1H), 8.01 (m, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.29 (d, J= 5.1 Hz, 2H), 7.19 (m, 2H), 7.12 (m, 1H), 6.95 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 6.88 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 6.52 (m, 2H), 5.04 (s, 1H), 4.71 (d, J= 16.0 Hz, 1H), 4.62 - 4.49 (m, 2H), 4.29 - 4.10 (m, 2H), 3.99 (m, 1H), 3.88 (d, J= 11.3 Hz, 1H), 2.54 - 2.41 (m, 1H), 2.32 - 2.24 (m, 1H), 2.29 (s, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 595 (M+H) +。RT (方法A): 1.40 min。 流程 103. (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-N-((5- 甲基 -4,5,6,7- 四氫噻吩并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 347) 之合成
向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-((4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)吡咯啶-2-甲醯胺( 化合物 313 ；11 mg，0.018 mmol)於MeOH (2 mL)之溶液中添加多聚甲醛((CH 2O) n;43 mg)、MgSO 4(87 mg，0.72 mmol)、AcOH (15 mg)及NaBH 3CN (43 mg，0.68 mmol)且將反應混合物在N 2氛圍，室溫下攪拌隔夜。反應混合物用飽和NH 4Cl水溶液淬滅且用DCM萃取兩次。將合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 347(4.0 mg，產率39.0%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.55 - 7.50 (m, 1H), 7.49 - 7.44 (m, 1H), 7.21 - 7.11 (m, 3H), 7.08 - 7.00 (m, 2H), 6.69 - 6.27 (m, 2H), 5.03 - 4.96 (m, 1H), 4.55 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 4.50 - 4.38 (m, 2H), 4.25 - 4.09 (m, 2H), 3.99 - 3.89 (m, 1H), 3.85 - 3.75 (m, 1H), 3.37 (dd, J= 25.1, 10.4 Hz, 2H), 2.84 - 2.75 (m, 2H), 2.72 - 2.64 (m, 2H), 2.47 - 2.35 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.27 - 2.16 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 629 (M+H) +。RT (方法A): 1.53 min。 流程 104. (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((8- 甲基二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 334) 之合成 步驟 1 ： 4-(2- 溴 -4- 甲基苯氧基 ) 苯甲酸甲酯 (2)
在N 2氛圍，25℃下向2-溴-4-甲基酚(1.0 g，5.37 mmol)及4-氟苯甲酸甲酯(824 mg，5.34 mmol)於DMSO (20 mL)之混合物中添加Cs 2CO 3(5.22 g，16.02 mmol)，反應混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在N 2氛圍，80℃下攪拌隔夜。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 30% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(410 mg，產率24.0%)。LC/MS (ESI) m/z: 321 (M+H) +。 步驟 2 ： 8- 甲基二苯 -2- 甲酸甲酯 (3)
在N 2氛圍，25℃下向4-(2-溴-4-甲基苯氧基)苯甲酸甲酯(400 mg，1.25 mmol)於DMA (15 mL)之溶液中添加Pd(OAc) 2(11 mg，0.05 mmol)、PPh 3(27 mg，0.10 mmol)及K 2CO 3(224 mg，1.62 mmol)，反應混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在N 2氛圍，130℃下攪拌隔夜。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 7% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(120 mg，產率40.1%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.61 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 8.12 (dd, J= 8.6, 1.7 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.52 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 7.43 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.28 - 7.25 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 2.49 (s, 3H)。 步驟 3 ： 8- 甲基二苯 -2- 甲酸甲酯 (4)
向8-甲基二苯-2-甲酸甲酯(120 mg，0.50 mmol)於MeOH (2 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH (48 mg，2.00 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(110 mg，產率97.3%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 226 (M+H) +。 步驟 4 ： (8- 甲基二苯 -2- 甲羰基 ) 甘胺酸甲酯 (5)
向8-甲基二苯-2-甲酸甲酯(110 mg，0.48 mol)及甘胺酸甲酯(71 mg，0.79 mmol)於DMF (5 mL)之混合物中添加DIPEA (228 mg，1.76 mmol)及HATU (218 mg，8.46 mol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 23% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(100 mg，產率69.1%)。LC/MS (ESI) m/z: 298 (M+H) +。 步驟 5 ： (8- 甲基二苯 -2- 甲羰基 ) 甘胺酸 (6)
向(8-甲基二苯-2-甲羰基)甘胺酸甲酯(100 mg，0.33 mol)於MeOH (2 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH (32 mg，1.33 mol)，且將混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(72 mg，產率75.5%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 284 (M+H) +。 步驟 6 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((8- 甲基二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸甲酯 (7)
向(8-甲基二苯-2-甲羰基)甘胺酸(35 mg，0.12 mol)及(3S,4R)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-3-甲酸甲酯(25 mg，0.10 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (52 mg，0.41 mmol)及HATU (52 mg，0.13 mol)。將混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中0 - 49% EtOAc之)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之標題化合物(55 mg，產率96.7%)。LC/MS (ESI) m/z: 461 (M+H) +。 步驟 7 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((8- 甲基二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸 (8)
向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((8-甲基二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸甲酯(55 mg，0.12 mol)於MeOH (2 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH (10 mg，0.41 mol)，且將混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色油狀物之標題化合物(50 mg，產率93.7%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 447 (M+H) +。 步驟 8 ： (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((8- 甲基二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 334)
向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((8-甲基二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸(50 mg，0.10 mol)及(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲胺(27 mg，0.14 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (55.3 mg，0.14 mmol)及HATU (58 mg，0.44 mol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 8: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 334(5 mg，產率7.7%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.56 - 8.49 (m, 2H), 7.99 - 7.94 (m, 1H), 7.81 (d, J= 5.8 Hz, 2H), 7.59 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 7.49 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.35 (dd, J= 8.4, 1.2 Hz, 1H), 7.14 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 6.62 - 6.35 (m, 2H), 5.11 - 5.01 (m, 1H), 4.71 - 4.53 (m, 3H), 4.34 - 4.19 (m, 2H), 4.05 - 4.00 (m, 1H), 3.95 - 3.89 (m, 1H), 2.52 - 2.48 (m, 1H), 2.50 (s, 3H), 2.33 - 2.25 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 576 (M+H) +。RT (方法A): 1.43 min。 流程 105. (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((9- 氟二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 369) 之合成 步驟 1 ： 5- 溴 -2'- 氟 -6'- 甲氧基 -[1,1'- 聯苯 ]-2- 胺 (2)
在N 2氛圍，0℃下向(2-氟-6-甲氧基苯基)硼酸(740 mg，4.35 mmol)及4-溴-2-碘苯胺(1 g，3.35 mmol)於EtOH/甲苯/水(11 mL，v/v/v= 5/5/1)之混合物中添加K 2CO 3(1.4 g，10.1 mmol)及Pd(PPh 3) 4(387 mg，0.43 mmol)，反應混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在80℃下攪拌隔夜。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色固體之標題化合物(786 mg，產率79.3%)。LC/MS (ESI) m/z: 296 (M+H) +。 步驟 2 ： 8- 溴 -1- 氟二苯并 [b,d] 呋喃 (3)
在0℃下向5-溴-2'-氟-6'-甲氧基-[1,1'-聯苯]-2-胺(350 mg，1.17 mmol)於TFA (4 mL)之溶液中逐滴添加NaNO 2水溶液(0.4 mL，1.4 mmol，3.5 M)且將反應溶液在70℃下攪拌2小時。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(147 mg，產率47.6%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.19 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.58 (d, J= 6.7 Hz, 1H), 7.44 (d, J= 2.6 Hz, 1H), 7.43 - 7.40 (m, 1H), 7.37 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.06 (s, 1H)。 步驟 3 ： 9- 氟二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 甲酸甲酯 (4)
向8-溴-1-氟二苯并[b,d]呋喃(127 mg，0.48 mmol)於MeOH (2 mL)及DMSO (2 mL)之混合物中添加TEA (146 mg，1.44 mmol)及Pd(dppf)Cl 2(35 mg，0.05 mmol)。反應混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在CO氛圍，85℃下攪拌隔夜。過濾混合物，且在減壓下將濾液濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 40% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色固體之標題化合物(117 mg，產率99.3%)。LC/MS (ESI) m/z: 245 (M+H) +。 步驟 4 ： 9- 氟二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 甲酸 (5)
在N 2氛圍下向9-氟二苯并[b,d]呋喃-2-甲酸甲酯(117 mg，0.48 mmol)於MeOH/THF/水(4 mL，v/v/v= 2/1/1)之溶液中添加LiOH .H 2O (60 mg，1.44 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色固體之標題化合物(110 mg，產率99.8%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 231 (M+H) +。 步驟 5 ： (9- 氟二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺酸甲酯 (6)
在N 2氛圍下向9-氟二苯并[b,d]呋喃-2-甲酸(132 mg，0.57 mmol)及甘胺酸甲酯鹽酸鹽(86 mg，0.68 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (404 mg，3.1 mmol)及HATU (285 mg，0.75 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 70% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(132 mg，產率76.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 302 (M+H) +。 步驟 6 ： (9- 氟二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺酸 (7)
在N 2氛圍下向(9-氟二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺酸甲酯(132 mg，0.43 mmol)於MeOH/THF/水(3 mL，v/v/v= 2/1/1)之溶液中添加LiOH .H 2O (55 mg，1.3 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，且在減壓下濃縮，得到呈黃色固體之標題化合物(125 mg，產率99.4%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 288 (M+H) +。 步驟 7 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((9- 氟二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸甲酯 (8)
在N 2氛圍下向(9-氟二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺酸(125 mg，0.43 mmol)及(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸甲酯鹽酸鹽(151 mg，0.65 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (282 mg，2.19 mmol)及HATU (199 mg，0.52 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 60% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(202 mg，產率99.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 465 (M+H) +。 步驟 8 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((9- 氟二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸 (9)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((9-氟二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸甲酯(202 mg，0.43 mmol)於 MeOH/THF/水(3 mL，v/v/v= 2/1/1)之溶液中添加LiOH .H 2O (55 mg，1.28 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，且在減壓下濃縮，得到呈白色固體之標題化合物(195 mg，產率99.9%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 451 (M+H) +。 步驟 9 ： (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((9- 氟二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 374)
在N 2氛圍下向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((9-氟二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸(60 mg，0.13 mmol)及(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲胺鹽酸鹽(42 mg，0.23 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (84 mg，0.65 mmol)及HATU (59 mg，0.15 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 7: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 369(6.4 mg，產率8.29%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.59 - 8.53 (m, 2H), 8.05 (dd, J= 8.7, 1.8 Hz, 1H), 7.83 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.67 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 7.55 (dd, J= 8.1, 5.5 Hz, 1H), 7.49 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 7.17 (dd, J= 10.7, 7.4 Hz, 2H), 6.52 (d, J= 16.6 Hz, 2H), 5.07 (dd, J= 7.7, 5.2 Hz, 1H), 4.71 - 4.55 (m, 3H), 4.29 (q, J= 16.6 Hz, 2H), 4.04 (dd, J= 11.4, 4.6 Hz, 1H), 3.93 (d, J= 11.4 Hz, 1H), 2.56 - 2.47 (m, 1H), 2.35 - 2.25 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 580 (M+H) +。RT (方法A): 1.28 min。 流程 106. (8S)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-((5-(1-(3- 氟苯基 ) 乙基 ) 噻吩 -2- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 357) 之合成 步驟 1 ： (Z)-N'-(1-(3- 氟苯基 ) 亞乙基 )-4- 甲基苯磺醯肼 (2)
在N 2氛圍下向1-(3-氟苯基)乙-1-酮(1.3 g，9.41 mmol)於MeOH (15 mL)之溶液中添加4-甲基苯磺醯肼(1.75 g，9.39 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。過濾混合物，且用PE洗滌濾餅，得到呈白色固體之標題化合物(2.5 g，產率86.7%)，其未經純化用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 307 (M+H) +。 步驟 2 ： 5-(1-(3- 氟苯基 ) 乙基 ) 噻吩 -2- 甲酸甲酯 (3)
向(Z)-N'-(1-(3-氟苯基)亞乙基)-4-甲基苯磺醯肼(345 mg，1.12 mmol)及(5-(甲氧基羰基) 噻吩-2-基)硼酸(250 mg，1.34 mmol)於1,4-二噁烷(5 mL)之混合物中添加K 2CO 3(467 mg，3.38 mmol)且將反應混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在110℃下攪拌隔夜。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 5% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(100 mg，產率33.6%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.65 - 7.63 (m, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.04 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 6.93 (t, J= 9.0 Hz, 2H), 6.81 (d, J= 2.6 Hz, 1H), 4.34 (q, J= 7.0 Hz, 1H), 3.84 (d, J= 2.0 Hz, 3H), 1.70 (dd, J= 7.1, 1.9 Hz, 3H)。 步驟 3 ： 5-(1-(3- 氟苯基 ) 乙基 ) 噻吩 -2- 甲酸 (4)
在N 2氛圍下向5-(1-(3-氟苯基)乙基)噻吩-2-甲酸甲酯(100 mg，0.38 mmol)於MeOH/水(1.5 mL，v/v= 4/1)之溶液中添加LiOH .H 2O (32 mg，0.76 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，且在減壓下濃縮，得到呈白色固體之標題化合物(90 mg，產率95.0%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 251 (M+H) +。 步驟 4 ： (5-(1-(3- 氟苯基 ) 乙基 ) 噻吩 -2- 羰基 ) 甘胺酸甲酯 (5)
在N 2氛圍下向5-(1-(3-氟苯基)乙基)噻吩-2-甲酸(90 mg，0.36 mmol)及甘胺酸甲酯鹽酸鹽(54 mg，0.43 mmol)於DMF (1 mL)之混合物中添加DIPEA (232 mg，1.79 mmol)及HATU (164 mg，0.43 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(115 mg，產率99.5%)。LC/MS (ESI) m/z: 332 (M+H) +。 步驟 5 ： (5-(1-(3- 氟苯基 ) 乙基 ) 噻吩 -2- 羰基 ) 甘胺酸 (6)
在N 2氛圍下向(5-(1-(3-氟苯基)乙基)噻吩-2-羰基)甘胺酸甲酯(115 mg，0.35 mol)於MeOH/水(1.5 mL，v/v =4/1)之溶液中添加 LiOH.H 2O (30 mg，0.71 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌10分鐘。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，且在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之標題化合物(100 mg，產率90.9%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 308 (M+H) +。 步驟 6 ： (8S)-7-((5-(1-(3- 氟苯基 ) 乙基 ) 噻吩 -2- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲酸甲酯 (7)
在N 2氛圍下向(5-(1-(3-氟苯基)乙基)噻吩-2-羰基)甘胺酸(90 mg，0.29 mmol)及(S)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸甲酯(65 mg，0.34 mmol)於DMF (1 mL)之混合物中添加DIPEA (189 mg，1.46 mmol)及HATU (133 mg，0.35 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 90% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色固體之標題化合物(55 mg，產率39.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 477 (M+H) +。 步驟 7 ： (8S)-7-((5-(1-(3- 氟苯基 ) 乙基 ) 噻吩 -2- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲酸 (8)
在N 2氛圍下向(8S)-7-((5-(1-(3-氟苯基)乙基)噻吩-2-羰基) 甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸甲酯(55 mg，0.11 mol)於MeOH/水(1.5 mL，v/v= 4/1)之溶液中添加LiOH .H 2O (10 mg，0.24 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，且在減壓下濃縮，得到呈白色固體之標題化合物(45 mg，產率84.2%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 463 (M+H) +。 步驟 8 ： (8S)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-7-((5-(1-(3- 氟苯基 ) 乙基 ) 噻吩 -2- 羰基 ) 甘胺醯基 )-1,4- 二氧雜 -7- 氮雜螺 [4.4] 壬烷 -8- 甲醯胺 ( 化合物 357)
在N 2氛圍下向(8S)-7-((5-(1-(3-氟苯基)乙基)噻吩-2-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸(45 mg，0.097 mmol)及(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲胺鹽酸鹽(18 mg，0.098 mmol)於DMF (1 mL)之混合物中添加DIPEA (62 mg，0.48 mmol)及HATU (44 mg，0.11 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物在減壓下濃縮至乾。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 357(4.1 mg，產率7.1%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.62 (s, 1H), 7.97 (t, J= 5.7 Hz, 1H), 7.54 (dd, J= 3.8, 1.2 Hz, 1H), 7.34 - 7.29 (m, 1H), 7.23 - 7.19 (m, 1H), 7.10 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.00 (d, J= 10.2 Hz, 1H), 6.97 - 6.92 (m, 1H), 6.89 (d, J= 3.8 Hz, 1H), 6.49 (s, 1H), 4.64 (d, J= 16.1 Hz, 1H), 4.55 (dd, J= 12.6, 9.0 Hz, 2H), 4.42 - 4.36 (m, 1H), 4.12 (d, J= 3.0 Hz, 2H), 3.99 (d, J= 2.6 Hz, 4H), 3.77 (s, 2H), 2.42 (dd, 1H), 2.25 (dd, 1H), 1.68 (dd, J= 7.2, 2.4 Hz, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 592 (M+H) +。RT (方法A): 1.36 min。 流程 107. (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-N-((6- 甲基 -4,5,6,7- 四氫噻吩并 [2,3-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 346) 之合成 步驟 1 ： 4,5,6,7- 四氫噻吩并 [2,3-c] 吡啶 -2- 甲腈鹽酸鹽 (2)
向2-氰基-4,7-二氫噻吩并[2,3-c]吡啶-6(5H)-甲酸 三級丁酯(80 mg，0.30 mmol)於DCM (1 mL)之溶液中添加HCl/1,4-二噁烷(2 mL，4M)且將反應混合物在N 2氛圍，室溫下攪拌2小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(60 mg，產率100%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 165 (M+H) +。 步驟 2 ： 6- 甲基 -4,5,6,7- 四氫噻吩并 [2,3-c] 吡啶 -2- 甲腈 (3)
在N 2氛圍下向4,5,6,7-四氫噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲腈鹽酸鹽(60 mg，0.3 mmol)及多聚甲醛(88 mg，2.93 mmol)於MeOH (3 mL)之混合物中添加NaBH 3CN (110 mg，1.76 mmol)、MgSO 4(100 mg)且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。過濾混合物，且在減壓下將濾液濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(50 mg，產率93.5%)。LC/MS (ESI) m/z: 179 (M+H) +。 步驟 3 ： (6- 甲基 -4,5,6,7- 四氫噻吩并 [2,3-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲胺 (4)
向6-甲基-4,5,6,7-四氫噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲腈(30 mg，0.17 mmol)於EtOAc (3 mL)之溶液中添加雷氏Ni (5 mg)，混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在H 2氣球下於室溫攪拌隔夜。過濾混合物，且將濾液濃縮至乾，得到呈黃色固體之標題化合物(145 mg，產率99%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 183 (M+H) +。 步驟 4 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-N-((6- 甲基 -4,5,6,7- 四氫噻吩并 [2,3-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-1-(( 啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 346)
向(6-甲基-4,5,6,7-四氫噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基)甲胺(28 mg，0.15 mmol)及(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸(71 mg，0.15 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (99 mg，0.77 mmol)、HATU (88 mg，0.23 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 20: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 346(2.0 mg，產率2.1%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 7.54 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.23 - 7.18 (m, 2H), 7.15 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 7.09 - 7.03 (m, 2H), 6.70 (m, 1H), 6.65 - 6.31 (m, 1H), 4.99 (s, 1H), 4.54 (s, 2H), 4.46 (m, 2H), 4.19 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 3.98 - 3.93 (m, 1H), 3.83 (m, 1H), 3.56 (d, J= 7.3 Hz, 2H), 2.72 - 2.65 (m, 4H), 2.43 (s, 3H), 2.23 - 2.17 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 629 (M+H) +。RT (方法A): 1.52 min。 流程 108. (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((2- 氟啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 355) 之合成 步驟 1 ： 2- 氟啡㗁噻 -3- 甲腈 (2)
向2-巰基酚(300 mg，2.38 mmol)及2,4,5-三氟苯甲腈(373 mg，2.38 mmol)於DMSO (5 mL)之混合物中添加K 2CO 3(656 mg，4.76 mmol)，將反應混合物在80℃下攪拌隔夜。將混合物用EtOAc稀釋，用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 9% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(150 mg，產率25.9%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.43 - 7.41 (m, 1H), 7.40 - 7.35 (m, 2H), 7.23 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 7.17 - 7.14 (m, 3H), 6.43 (d, J= 4.2 Hz, 1H)。 步驟 2 ： 2- 氟啡㗁噻 -3- 甲酸 (3)
向2-氟啡㗁噻-3-甲腈(150 mg，0.62 mmol)於水(3 mL)之溶液中添加NaOH (123 mg，3.07 mmol)且將混合物在100℃下攪拌隔夜。混合物用1N.HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色固體之標題化合物(120 mg，產率74.2%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 263 (M+H) +。 步驟 3 ： (2- 氟啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺酸甲酯 (4)
向2-氟啡㗁噻-3-甲酸(100 mg，0.38 mmol)及甘胺酸甲酯鹽酸鹽(96 mg，0.76 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (295 mg，2.29 mmol)及HATU (174 mg，0.46 mmol)，將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 25% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(95 mg，產率74.8%)。LC/MS (ESI) m/z: 334 (M+H) +。 步驟 4 ： (2- 氟啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺酸 (5)
向(2-氟啡㗁噻-3-羰基)甘胺酸甲酯(95 mg，0.28 mmol)於MeOH (3 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH (36 mg，0.85 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N.HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(70 mg，產率76.9%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 320 (M+H) +。 步驟 5 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((2- 氟啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸甲酯 (6)
向(2-氟啡㗁噻-3-羰基)甘胺酸(70 mg，0.22 mmol)及(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸甲酯鹽酸鹽(64 mg，0.33 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (170 mg，1.32 mmol)及HATU (100 mg，0.26 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(85 mg，產率78.1%)。LC/MS (ESI) m/z: 497 (M+H) +。 步驟 6 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((2- 氟啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸 (7)
向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((2-氟啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸甲酯(85 mg，0.17 mmol)於MeOH (3 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH (22 mg，0.51 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N.HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(60 mg，產率72.6%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 483 (M+H) +。 步驟 7 ： (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((2- 氟啡㗁噻 -3- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 355)
在0℃下向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((2-氟啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸(60 mg，0.12 mmol)及(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲胺鹽酸鹽(40 mg，0.27 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (96 mg，0.72 mmol)及HATU (71 mg，0.18 mmol)，將混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 355(15 mg，產率19.7%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.82 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.12 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 7.60 (d, J= 6.5 Hz, 1H), 7.35 (d, J= 6.3 Hz, 1H), 7.24 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 7.17 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 7.10 (d, J= 3.1 Hz, 1H), 7.03 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 6.81 (s, 1H), 6.62 (d, J= 74.4 Hz, 1H), 5.05 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.64 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 4.61 (s, 1H), 4.25 (s, 2H), 4.03 - 3.99 (m, 1H), 3.89 (d, J= 11.7 Hz, 1H), 2.55 - 2.49 (m, 1H), 2.33 - 2.26 (m, 1H)。LCMS (ESI) (m/z): 612 (M+H) +。RT (方法A): 1.50 min。
可以基於方案107中所示之程序用以下反應物來製備化合物352-354：
化合物編號 反應物A 反應物B 反應物C 反應物D 反應物E
352
353
354
流程 109. (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((2,3- 二氫苯并 [b][1,4] 噁噻 -7- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 356) 之合成 步驟 1 ： 3-(2- 溴乙氧基 )-4- 碘苯甲酸甲酯 (2)
在N 2氛圍下向3-羥基-4-碘苯甲酸甲酯(4.22 g，15.18 mmol)於丙酮(5 mL)之溶液中添加K 2CO 3(4.2 g，30.36 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌0.5小時。然後將1,2-二溴乙烷(15.26 g，75.90 mmol)添加至混合物中且將反應混合物在40℃下攪拌隔夜。將混合物用EtOAc稀釋，用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(3.4 g，產率58.6%)。LC/MS (ESI) m/z: 385 (M+H) +。 步驟 2 ： 3-(2-( 乙醯基 thio) 乙氧基 )-4- 碘苯甲酸甲酯 (3)
在N 2氛圍下向AcSH (773 mg，9.38 mmol)於DMF (20 mL)之溶液中添加Cs 2CO 3(3.31 g，9.38 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌0.5小時。然後在N 2氛圍下將3-(2-溴乙氧基)-4-碘苯甲酸甲酯(2.6 g，6.25 mmol)添加至混合物中且將反應混合物在室溫下攪拌隔夜。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(1.18 g，產率46.1%)。LC/MS (ESI) m/z: 381 (M+H) +。 步驟 3 ： 4- 碘 -3-(2- 巰基乙氧基 ) 苯甲酸甲酯 (4)
在N 2氛圍，0℃下向3-(2-(乙醯硫基)乙氧基)-4-碘苯甲酸甲酯(500 mg，1.32 mmol)於MeOH (5 mL)之溶液中添加NaHCO 3(166 mg，1.97 mmol)且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用EtOAc稀釋，用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 30% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(300 mg，產率67.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 339 (M+H) +。 步驟 4 ： 2,3- 二氫苯并 [b][1,4] 噁噻 -7- 甲酸甲酯 (5)
在N 2氛圍下向Zn (81 mg，1.24 mmol)及NiCl 2(41 mg，0.31 mmol)於吡啶 (3 mL)之混合物中添加2,2'-聯吡啶(59 mg，0.37 mmol)且將反應混合物在55℃下攪拌0.5小時。然後，將混合物冷卻至室溫且在N 2氛圍下將4-碘-3-(2-巰基乙氧基)苯甲酸甲酯(210 mg，0.62 mmol)添加至混合物。將反應混合物在室溫下攪拌3小時。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(60 mg，產率46.2%)。LC/MS (ESI) m/z: 211 (M+H) +。 步驟 5 ： 2,3- 二氫苯并 [b][1,4] 噁噻 -7- 甲酸 (6)
向2,3-二氫苯并[b][1,4]噁噻-7-甲酸甲酯(60 mg，0.29 mmol)於MeOH (2 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH (18 mg，0.43 mmol)且將混合物在室溫下攪拌5小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(50 mg，產率89.2%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 197 (M+H) +。 步驟 6 ： (2,3- 二氫苯并 [b][1,4] 噁噻 -7- 羰基 ) 甘胺酸甲酯 (7)
向2,3-二氫苯并[b][1,4]噁噻-7-甲酸(50 mg，0.31 mmol)於DMF (2 mL)之溶液中添加甘胺酸甲酯(75 mg，0.46 mmol)、HATU (175 mg，0.46 mmol)及DIPEA (119 mg，0.92 mmol)且將混合物在室溫下攪拌隔夜。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 10% MeOH)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(33 mg，產率40.2%)。LC/MS (ESI) m/z: 268 (M+H) +。 步驟 7 ： (2,3- 二氫苯并 [b][1,4] 噁噻 -7- 羰基 ) 甘胺酸 (8)
向(2,3-二氫苯并[b][1,4]噁噻-7-羰基)甘胺酸甲酯(33 mg，0.12 mmol)於MeOH (2 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH (8 mg，0.18 mmol)且將混合物在室溫下攪拌5小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。合併之有機層在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(30 mg，產率96.8%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 254 (M+H) +。 步驟 8 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((2,3- 二氫苯并 [b][1,4] 噁噻 -7- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸甲酯 (9)
向(2,3-二氫苯并[b][1,4]噁噻-7-羰基)甘胺酸(30 mg，0.12 mmol)於DMF (2 mL)之溶液中添加(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸甲酯鹽酸鹽(28 mg，0.14 mmol)、HATU (68 mg，0.18 mmol)及DIPEA (46 mg，0.36 mmol)。將混合物在室溫下攪拌隔夜。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 10% MeOH)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(15 mg，產率51.0%)。LC/MS (ESI) m/z: 431 (M+H) +。 步驟 9 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((2,3- 二氫苯并 [b][1,4] 噁噻 -7- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸 (10)
向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((2,3-二氫苯并[b] [1,4]噁噻-7-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸甲酯(15 mg，0.03 mmol)於MeOH (2 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH (3 mg，0.05 mmol)且將混合物在室溫下攪拌5小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(12 mg，產率82.8%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 417 (M+H) +。 步驟 10 ： (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((2,3- 二氫苯并 [b][1,4] 噁噻 -7- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 356)
向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((2,3-二氫苯并[b][1,4]噁噻-7-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸(12 mg，0.03 mmol)於DMF (2 mL)之溶液中添加(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲胺鹽酸鹽(6 mg，0.03 mmol)、HATU (17 mg，0.05 mmol)及DIPEA (12 mg，0.09 mmol)且將混合物在室溫下攪拌隔夜。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，DCM中之0 - 10% MeOH)純化且進一步藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之 化合物 356(0.8 mg，產率5.10%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.63 (d, J= 0.8 Hz, 1H), 7.98 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.39 - 7.27 (m, 3H), 7.16 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.10 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 6.51 (d, J= 9.5 Hz, 2H), 5.04 (s, 1H), 4.68 (s, 1H), 4.59 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 4.55 (d, J= 4.0 Hz, 1H), 4.45 - 4.38 (m, 3H), 4.24 (m, 1H), 4.16 (m, 1H), 4.01 - 3.95 (m, 1H), 3.88 (m, 1H), 3.25 - 3.16 (m, 3H), 3.01 (s, 2H), 2.54 - 2.44 (m, 1H), 2.32 - 2.23 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 546 (M+H) +。RT (方法A): 0.91 min。 流程 110. (S)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-1-((6- 甲基二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 336) 之合成 步驟 1 ： 4-(2- 溴 -6- 甲基苯氧基 ) 苯甲酸甲酯 (2)
向2-溴-6-甲基酚(500 mg，2.67 mmol)及(4-(甲氧基羰基)苯基)硼酸(962 mg，5.35 mmol)於無水DCM (10 mL)之混合物中添加吡啶(423 mg，5.35 mmol)、Cu(OAc) 2(728 mg，4.01 mmol)，反應混合物在O 2氛圍下脫氣三次且在室溫下攪拌隔夜。過濾混合物，且在減壓下將濾液濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 5% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(670 mg，產率78.0%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.98 (d, J= 8.2 Hz, 2H), 7.49 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.23 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 7.06 (t, J= 7.8 Hz, 1H), 6.81 (d, J= 8.2 Hz, 2H), 3.88 (s, 3H), 2.17 (s, 3H)。 步驟 2 ： 6- 甲基二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 甲酸甲酯 (3)
在N 2氛圍，25℃下向4-(2-溴-6-甲基苯氧基)苯甲酸甲酯(570 mg，1.77 mmol)於NMP (15 mL)之溶液中添加Pd(OAc) 2(40 mg，0.18 mmol)、6-甲氧基喹啉(57 mg，0.35 mmol)及K 2CO 3(491 mg，3.55 mmol)，反應混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在N 2氛圍，135℃下攪拌隔夜。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 7% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(230 mg，產率54.0%)。LC/MS (ESI) m/z: 241 (M+H) +。 步驟 3 ： 6- 甲基二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 甲酸 (4)
向6-甲基二苯并[b,d]呋喃-2-甲酸甲酯(230 mg，0.96 mmol)於MeOH (2 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH (46 mg，1.91 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(215 mg，產率99.3%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 227 (M+H) +。 步驟 4 ： (6- 甲基二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺酸甲酯 (5)
向6-甲基二苯并[b,d]呋喃-2-甲酸(100 mg，0.44 mol)及甘胺酸甲酯鹽酸鹽(83 mg，0.66 mmol)於DMF (5 mL)之混合物中添加DIPEA (343 mg，2.65 mmol)及HATU (185 mg，0.49 mol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 25% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(130 mg，產率98.9%)。LC/MS (ESI) m/z: 298 (M+H) +。 步驟 5 ： (6- 甲基二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺酸 (6)
向(6-甲基二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺酸甲酯(130 mg，0.44 mol)於MeOH (2 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH (21 mg，0.87 mol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(120 mg，產率96.9%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 284 (M+H) +。 步驟 6 ： (6- 甲基二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺醯基 -L- 脯胺酸甲酯 (7)
向(6-甲基二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺酸(60 mg，0.21 mol)及L-脯胺酸甲酯鹽酸鹽(35 mg，0.21 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (164 mg，1.27 mmol)及HATU (89 mg，0.23 mol)。將混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中0 - 50% EtOAc之)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之標題化合物(60 mg，產率71.8%)。LC/MS (ESI) m/z: 395 (M+H) +。 步驟 7 ： (6- 甲基二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺醯基 -L- 脯胺酸 (8)
向(6-甲基二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺醯基-L-脯胺酸甲酯(60 mg，0.15 mol)於MeOH (2 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH (7 mg，0.30 mol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色油狀物之標題化合物(50 mg，產率86.4%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 381 (M+H) +。 步驟 8 ： (S)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-1-((6- 甲基二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 336)
向(6-甲基二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺醯基-L-脯胺酸(50 mg，0.13 mol)及(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲胺鹽酸鹽(36 mg，0.20 mmol)於DMF (5 mL)之混合物中添加DIPEA (102 mg，0.79 mmol)及HATU (55 mg，0.14 mol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 8: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 336(8 mg，產率11.9%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.70 - 8.44 (m, 2H), 8.07 - 7.94 (m, 1H), 7.83 (m, 2H), 7.61 (t, J= 7.9 Hz, 1H), 7.31 (m, 2H), 7.17 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 6.53 (m, 1H), 4.62 (s, 2H), 4.52 (dd, J= 8.5, 3.8 Hz, 1H), 4.28 (d, J= 2.3 Hz, 2H), 3.79 (m, 2H), 2.59 (s, 3H), 2.29 (s, 1H), 2.14 (m, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 510 (M+H) +。RT (方法A): 1.25 min。 流程 111. (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((7- 甲基二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 337) 之合成 步驟 1 ： 4-(2- 溴 -5- 甲基苯氧基 ) 苯甲酸甲酯 (2)
在N 2氛圍，0℃下向2-溴-5-甲基酚(500 mg，2.67 mmol)及(4-(甲氧基羰基)苯基)硼酸(721 mg，4.01 mmol)於DCM (5 mL)之混合物中添加吡啶(422 mg，5.35 mmol)、Cu(OAc) 2(729 mg，4.01 mmol)及4 Å MS (2 g)且將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用DCM稀釋且過濾。將濾液用飽和NaHCO 3水溶液洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 7% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之標題化合物(450 mg，產率52.6%)。LC/MS (ESI) m/z: 321 (M+H) +。 步驟 2 ： 7- 甲基二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 甲酸甲酯 (3)
在N 2氛圍，25℃下向4-(2-溴-5-甲基苯氧基)苯甲酸甲酯(380 mg，1.19 mmol)於NMP (4 mL)之溶液中添加Pd(OAc) 2(27 mg，0.12 mmol)、6-甲氧基喹啉(38 mg，0.24 mmol)及K 2CO 3(330 mg，2.38 mmol)，反應混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在N 2氛圍，135℃下攪拌隔夜。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 10% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(190 mg，產率66.7%)。LC/MS (ESI) m/z: 241 (M+H) +。 步驟 3 ： 7- 甲基二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 甲酸 (4)
向7-甲基二苯并[b,d]呋喃-2-甲酸甲酯(190 mg，0.79 mmol)於MeOH (2 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH (50 mg，1.19 mmol)，將混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(110 mg，產率90.1%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 227 (M+H) +。 步驟 4 ： (7- 甲基二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺酸甲酯 (5)
向7-甲基二苯并[b,d]呋喃-2-甲酸(110 mg，0.58 mmol)及甘胺酸甲酯鹽酸鹽(109 mg，0.86 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (223 mg，1.73 mmol)、HATU (328 mg，0.86 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 33% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(120 mg，產率82.8%)。LC/MS (ESI) m/z: 298 (M+H) +。 步驟 5 ： (7- 甲基二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺酸 (6)
向(7-甲基二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺酸甲酯(120 mg，0.40 mmol)於MeOH (2 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH (25 mg，0.60 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(110 mg，產率96.5%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 284 (M+H) +。 步驟 6 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((7- 甲基二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸甲酯 (7)
向(7-甲基二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺酸(110 mg，0.39 mmol)及(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸甲酯鹽酸鹽(125 mg，0.64 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加DIPEA (205 mg，1.59 mmol)及HATU (303 mg，0.80 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中0 - 50% EtOAc之)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之標題化合物(160 mg，產率89.4%)。LC/MS (ESI) m/z: 461 (M+H) +。 步驟 7 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((7- 甲基二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸 (8)
向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((7-甲基二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸甲酯(160 mg，0.35 mmol)於MeOH (2 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH (22 mg，0.52 mmol)，且將混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色油狀物之標題化合物(100 mg，產率64.5%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 447 (M+H) +。 步驟 8 ： (2S,4R)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 二氟甲氧基 )-1-((7- 甲基二苯并 [b,d] 呋喃 -2- 羰基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 332)
向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((7-甲基二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸(100 mg，0.22 mmol)及(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲胺鹽酸鹽(62 mg，0.34 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (87 mg，0.67 mmol)、HATU (128 mg，0.34 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 20: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 332(1 mg，產率0.8%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.66 (s, 1H), 8.50 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 8.43 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.94 (m, 1H), 7.86 (m, 2H), 7.57 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.38 (d, J= 6.3 Hz, 1H), 7.25 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 6.71 (s, 1H), 6.52 (m, 1H), 5.08 - 5.06 (m, 1H), 4.71 - 4.69 (m, 1H), 4.62 (m, 2H), 4.28 (s, 2H), 4.07 - 4.04 (m, 1H), 3.96 - 3.93 (m, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.51 - 2.49 (m, 1H), 2.34 - 2.27 (m, 1H)。LC/MS (ESI) m/z: 576 (M+H) +。RT (方法A): 1.46 min。
可以基於方案110用以下反應物來製備化合物330、331、333、335及337：
化合物編號 反應物A 反應物B 反應物C 反應物D 反應物E
330
331
333
335
337
流程 112. (S)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-1-((2- 氟 -3-( 對甲苯基氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 )-4,5- 二氫 -1H- 吡唑 -5- 甲醯胺 ( 化合物 375) 之合成 步驟 1 ： (S)-4,5- 二氫 -1H- 吡唑 -5- 甲酸三級丁酯 (2)
向丙烯酸三級丁酯(500 mg，3.91 mmol)於THF (3 mL)及甲苯(3 ml)之混合物中添加TMS-重氮甲烷(2.35 mL，4.7 mmol，己烷中2M)。反應混合物在N 2氛圍下脫氣三次且在室溫下攪拌4小時。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用飽和Na 2CO 3水溶液及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 20% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之標題化合物(130 mg，產率19.6%)。LC/MS (ESI) m/z: 171 (M+H) +。 步驟 2 ： (S)-1-((2- 氟 -3-( 對甲苯基氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 )-4,5- 二氫 -1H- 吡唑 -5- 甲酸三級丁酯 (3)
向(2-氟-3-(對甲苯基氧基)苄醯基)甘胺酸(45 mg，0.15 mmol)及(S)-4,5-二氫-1H-吡唑-5-甲酸 三級丁酯(30 mg，0.18 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加HATU (65 mg，0.17 mmol)、DIPEA (69 mg，0.53 mmol)且將混合物在室溫下攪拌0.5小時。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中0 - 20% EtOAc之)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之標題化合物(45 mg，產率60.7%)。LC/MS LC/MS (ESI) m/z: 456 (M+H) +。 步驟 3 ： (S)-1-((2- 氟 -3-( 對甲苯基氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 )-4,5- 二氫 -1H- 吡唑 -5- 甲酸 (4)
向(S)-1-((2-氟-3-(對甲苯基氧基)苄醯基)甘胺醯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-5-甲酸 三級丁酯(45 mg，0.10 mmol)於1,4-二噁烷(1 mL)、MeOH (1 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH (13 mg，0.54 mmol)且將混合物在60℃下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~4且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色油狀物之標題化合物(32 mg，產率80.0%)。LC/MS (ESI) m/z: 400 (M+H) +。 步驟 4 ： (S)-N-((1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-1-((2- 氟 -3-( 對甲苯基氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 )-4,5- 二氫 -1H- 吡唑 -5- 甲醯胺 ( 化合物 375)
向(S)-1-((2-氟-3-(對甲苯基氧基)苄醯基)甘胺醯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-5-甲酸(32 mg，0.08 mmol)及(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲胺鹽酸鹽(20 mg，0.11 mmol)於DMF (2 mL)之混合物中添加HATU (37 mg，0.10 mmol)、DIPEA (42 mg，0.32 mmol)且將混合物在室溫下攪拌0.5小時。將混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由急速層析法(矽膠，DCM中0 - 13% MeOH之)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 375(2.3 mg，產率5.3%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.80 - 8.74 (m, 2H), 8.57 (s, 1H), 8.13 - 8.09 (m, 1H), 7.47 - 7.42 (m, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.29 - 7.24 (m, 3H), 7.24 - 7.16 (m, 3H), 6.94 - 6.91 (m, 2H), 6.46 (s, 1H), 4.76 - 4.71 (m, 1H), 4.49 - 4.41 (m, 3H), 4.32 - 4.26 (m, 1H), 3.26 (s, 1H), 2.97 - 2.90 (m, 1H), 2.28 (s, 3H)。LC/MS (ESI) m/z: 529 (M+H) +。RT (方法A): 1.31 min。 流程 113. (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((2- 氟 -3-( 對甲苯基氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 )-N-( 噻吩并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 376) 之合成 步驟 1 ：噻吩并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基胺甲酸三級丁酯 (2)
向噻吩并[3,2-c]吡啶-2-甲酸(500 mg，2.79 mmol)於t-BuOH (5 mL)之溶液中添加TEA (846 mg，8.38 mmol)及DPPA (1.15 g，4.18 mmol)。將反應混合物在90℃下攪拌隔夜。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 66% EtOAc)純化殘餘物，得到呈白色固體之標題化合物(70 mg，產率10.0%)。LCMS (ESI) (m/z): 251 (M+H) +。 步驟 2 ：噻吩并 [3,2-c] 吡啶 -2- 胺鹽酸鹽 (3)
向噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基胺甲酸 三級丁酯(70 mg，0.06 mmol)於DCM (2 mL)之溶液中添加HCl/1,4-二噁烷(1 mL)且將混合物在N 2氛圍，室溫下攪拌3小時。將反應混合物在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色固體之標題化合物(50 mg，產率96.0%)。LCMS (ESI) (m/z): 151 (M+H) +。 步驟 3 ： 2- 氟 -3-( 對甲苯基氧基 ) 苯甲腈 (4)
向1-溴-2-氟-3-(對甲苯基氧基)苯(1.30 g，4.64 mmol)於NMP (13 mL)之溶液中添加CuCN (1.03 g，11.60 mmol)。將反應混合物在微波中於180℃下攪拌20分鐘。將混合物用EtOAc稀釋，用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 9% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(600 mg，產率57.1%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3): δ 7.32 (t, J= 6.3 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.16 (s, 2H), 7.13 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 6.91 (d, J= 8.1 Hz, 2H), 2.35 (s, 3H)。 步驟 4 ： 2- 氟 -3-( 對甲苯基氧基 ) 苯甲酸 (5)
向2-氟-3-(對甲苯基氧基)苯甲腈(600 mg，2.64 mmol)於水(6 mL)之溶液中添加NaOH (317 mg，7.92 mmol)且將混合物在100℃下攪拌隔夜。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈白色固體之標題化合物(580 mg，產率89.2%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 247 (M+H) +。 步驟 5 ： (2- 氟 -3-( 對甲苯基氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺酸甲酯 (6)
向2-氟-3-(對甲苯基氧基)苯甲酸(400 mg，1.63 mmol)及甘胺酸甲酯鹽酸鹽(408 mg，3.25 mmol)於DMF (4 mL)之混合物中添加DIPEA (1.26 g，9.76 mmol)及HATU (741 mg，1.96 mmol)。將反應混合物在25℃下攪拌2小時。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 23% EtOAc)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之標題化合物(400 mg，產率77.7%)。LCMS (ESI) (m/z): 318 (M+H) +。 步驟 6 ： (2- 氟 -3-( 對甲苯基氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺酸 (7)
向(2-氟-3-(對甲苯基氧基)苄醯基)甘胺酸甲酯(400 mg，1.26 mmol)於MeOH (3 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH (91 mg，3.78 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色固體之標題化合物(360 mg，產率94.2%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 304 (M+H) +。 步驟 7 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((2- 氟 -3-( 對甲苯基氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸甲酯 (8)
向(2-氟-3-(對甲苯基氧基)苄醯基)甘胺酸(120 mg，0.39mmol)及(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲酸甲酯鹽酸鹽(138 mg，0.58 mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (306 mg，2.34 mmol)及HATU (180 mg，0.47 mmol)。將反應混合物在25℃下攪拌2小時。混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。藉由急速層析法(矽膠，PE中之0 - 50% EtOAc)純化殘餘物，得到呈黃色固體之標題化合物(170 mg，產率89.5%)。LCMS (ESI) (m/z): 481 (M+H) +。 步驟 8 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((2- 氟 -3-( 對甲苯基氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 ) 吡咯啶 -2- 甲酸 (9)
向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((2-氟-3-(對甲苯基氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸甲酯(70 mg，0.15 mmol)於MeOH (3 mL)及水(1 mL)之溶液中添加LiOH (11 mg，0.45 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用1N HCl水溶液酸化至pH~3且用EtOAc萃取兩次。將合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾，得到呈黃色固體之標題化合物(60 mg，產率88.4%)，其未經進一步純化直接用於下一步驟。LC/MS (ESI) m/z: 467 (M+H) +。 步驟 9 ： (2S,4R)-4-( 二氟甲氧基 )-1-((2- 氟 -3-( 對甲苯基氧基 ) 苄醯基 ) 甘胺醯基 )-N-( 噻吩并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 吡咯啶 -2- 甲醯胺 ( 化合物 376)
在0℃下向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((2-氟-3-(對甲苯基氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸(50 mg，0.11 mmol)及噻吩并[3,2-c]吡啶-2-胺鹽酸鹽(30 mg，0.16mmol)於DMF (3 mL)之混合物中添加DIPEA (53 mg，0.66 mmol)及HATU (90 mg，0.16 mmol)且將混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用EtOAc萃取兩次，用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾。殘餘物係藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 13: 1)純化且進一步藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體之 化合物 376(10 mg，產率15.6%)。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.85 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.87 (d, J= 5.4 Hz, 1H), 7.54 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 7.19 - 7.10 (m, 5H), 6.85 (d, J= 7.7 Hz, 2H), 6.54 (t, J= 74.3 Hz, 1H), 5.08 (s, 1H), 4.74 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 4.37 (d, J= 17.1 Hz, 1H), 4.23 (d, J= 17.0 Hz, 1H), 4.04 - 3.99 (m, 1H), 3.91 (d, J= 11.9 Hz, 1H), 2.58 - 2.50 (m, 1H), 2.35 - 2.30 (m, 1H), 2.29 (s, 3H)。LCMS (ESI) (m/z): 599 (M+H) +。RT (方法A): 1.68 min。 實例 2. 本揭示案之化合物的非限制性實例
表1顯示說明性補體途徑抑制劑。 表 1. 本揭示案之化合物的非限制性實例
# 結構 名稱 # 結構 名稱
1 (1S,3S,5S)-N-((7-胺基-4,5-二氫噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基)甲基)-5-甲基-2-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 2 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
3 (S)-N-((1H-吲哚-2-基)甲基)-7-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 4 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
5 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-4-氟-4-(甲氧基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺 6 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-4-氟-4-(氟甲基)吡咯啶-2-甲醯胺
7 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-4-(甲基磺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 8 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲醯胺
9 (S)-N-((1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 10 (S)-N-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-基)甲基)-7-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
11 (S)-N-((1H-吲哚-2-基)甲基)-7-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 12 (S)-N-((1H-吡唑-5-基)甲基)-7-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
13 (1S,3S,5S)-N-(2,3-二氯苄基)-5-甲基-2-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 14 (S)-N-((1H-吡咯-2-基)甲基)-7-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
15 (S)-N-((1H-咪唑-2-基)甲基)-7-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 16 (S)-N-((7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲基)-7-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
17 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-(([1,1'-聯苯]-4-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 18 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
19 (S)-N-((5-氯-1H-吲哚-2-基)甲基)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 20 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
21 (2S,4R)-N-((S)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-氟-4-(甲氧基甲基)-1-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 22 (2S,4R)-N-((S)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(二氟甲氧基)-1-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
23 (S)-N-((S)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-7-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 24 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((啡㗁噻-2-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
25 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-氟-4-(甲氧基甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 26 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-氟-4-(氟甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
27 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(甲基磺醯基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 28 (1S,3S,5S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-5-甲基-2-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
29 (S)-N-((1H-吲哚-2-基)甲基)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 30 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-氟-4-(甲氧基甲基)-1-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
31 (S)-N-(噁唑并[4,5-c]吡啶-2-基甲基)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 32 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
33 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((4-苄醯基苄醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 34 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)甲基)-7-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
35 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 36 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
37 (S)-N-((1H-吡咯并[2,3-d]嗒嗪-2-基)甲基)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 38 (S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-7-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
39 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(二氟甲氧基)-1-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 40 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-氟-4-(甲氧基甲基)-1-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
41 (S)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-(噻唑并[4,5-c]吡啶-2-基甲基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 42 (S)-N-((4-氯-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
43 (S)-N-((6-氯-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 44 (1S,3S,5S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-5-甲基-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
45 (S)-N-((7-氟-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 46 (S)-N-((1-甲基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
47 (S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 48 (S)-N-((5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-6-基)甲基)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
49 (S)-N-((1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 50 (S)-N-(呋喃并[3,2-c]吡啶-2-基甲基)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
51 (S)-N-((1-胺基異喹啉-7-基)甲基)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 52 (S)-N-((5-甲氧基-1H-吲哚-2-基)甲基)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
53 (S)-N-((7-氯-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 54 (S)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-(噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基甲基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
55 (S)-N-((5-溴-1H-吲哚-2-基)甲基)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 56 (1S,3S,5S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
57 (1S,3S,5S)-N-((S)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 58 (1S,3S,5S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
59 (1S,3S,5S)-N-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 60 (1S,3S,5S)-N-((R)-1-(3-胺基丙醯基)吡咯啶-3-基)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
61 (1S,3S,5S)-N-((R)-1-((1H-咪唑-4-基)甲基)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 62 (1S,3S,5S)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-N-(1-(1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)環丙基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
63 (1S,3S,5S)-N-((8-(胺基甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)甲基)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 64 (1S,3S,5S)-N-(1-(3-(胺基甲基)-5-甲基苯基)環丙基)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
65 (1S,3S,5S)-5-甲基-N-(1-(3-甲基-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)環丙基)-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 66 (1S,3S,5S)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸(2,3-二氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-6-基)甲酯
67 (1S,3S,5S)-N-(異吲哚啉-5-基甲基)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 68 (S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-7-((2',4'-二氟-[1,1'-聯苯]-4-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
69 (1S,3S,5S)-N-((S)-5-(胺基甲基)-2,3-二氫-1H-吡咯嗪-1-基)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 70 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-((2',4'-二氟-[1,1'-聯苯]-4-羰基)甘胺醯基)-4-氟-4-(甲氧基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺
71 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-4-甲氧基吡咯啶-2-甲醯胺 72 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-4-(甲基磺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
73 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-4-氟-4-(甲氧基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺 74 (S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-7-((4-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
75 (1S,3S,5S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-2-((4-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-5-甲基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 76 (1S,3S,5S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-2-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-5-甲基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
77 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲醯胺 78 (1S,3S,5S)-N-((R)-5-(胺基甲基)-2,3-二氫-1H-吡咯嗪-1-基)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
79 (S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-7-(([1,1'-聯苯]-4-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 80 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(二氟甲氧基)-1-((4-(對甲苯基氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
81 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-甲基-4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 82 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-(([1,1'-聯苯]-4-羰基)甘胺醯基)-4-(甲基磺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
83 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-(([1,1'-聯苯]-4-羰基)甘胺醯基)-4-氟-4-(甲氧基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺 84 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-(([1,1'-聯苯]-4-羰基)甘胺醯基)-4-氟-4-(氟甲基)吡咯啶-2-甲醯胺
85 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-((2',4'-二氟-[1,1'-聯苯]-4-羰基)甘胺醯基)-4-(甲基磺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 86 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-4-氟-4-(氟甲基)吡咯啶-2-甲醯胺
87 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-((4-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-4-(甲基磺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 88 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(二氟甲氧基)-1-((4-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
89 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-氟-4-(氟甲基)-1-((4-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 90 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-((2',4'-二氟-[1,1'-聯苯]-4-羰基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲醯胺
91 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(二氟甲氧基)-1-(2-(5-(2,4-二氟苯基)-1-側氧基異吲哚啉-2-基)乙醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 92 (1S,3S,5S)-2-((4-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-N-((S)-2-羥基-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-5-甲基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
93 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-((S)-2-羥基-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 94 (S)-7-((4-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-N-((S)-2-羥基-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
95 (2S,4R)-4-氟-4-(氟甲基)-1-((4-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-N-((S)-2-羥基-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)吡咯啶-2-甲醯胺 96 (2S,4R)-1-((4-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-N-((S)-2-羥基-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(甲基磺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
97 (2S,4R)-4-氟-1-((4-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-N-((S)-2-羥基-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(甲氧基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺 98 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((4-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-N-((S)-2-羥基-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)吡咯啶-2-甲醯胺
99 (2S,4R)-N-((S)-2-羥基-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(甲基磺醯基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 100 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-(2-(5-溴-1-側氧基異吲哚啉-2-基)乙醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲醯胺
101 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(二氟甲氧基)-1-(2-(5-(4-氟苯基)-1-側氧基異吲哚啉-2-基)乙醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 102 (S)-N-((S)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
103 (2S,4R)-1-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)-N-((S)-2-羥基-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)吡咯啶-2-甲醯胺 104 (2S,4R)-1-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-N-((S)-2-羥基-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(甲基磺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
105 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(二氟甲氧基)-1-(2-(1-側氧基-5-(對甲苯基)異吲哚啉-2-基)乙醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 106 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(二氟甲氧基)-1-(2-(5-(2,4-二甲基苯基)-1-側氧基異吲哚啉-2-基)乙醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
107 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((5-苯基甲基吡啶醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 108 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((3-氟-5-(對甲苯基)甲基吡啶醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
109 (1S,3S,5S)-N-(1-(1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)環丙基)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 110 (1S,3S,5S)-N-((6-胺基-2-甲基吡啶-3-基)甲基)-5-甲基-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
111 (S)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-(吡咯并[1,2-a]吡嗪-7-基甲基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 112 (1S,3S,5S)-5-甲基-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-((4,5,6,7-四氫噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基)甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
113 (1S,3S,5S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-2-(2-(5-(2,4-二氟苯基)-1-側氧基異吲哚啉-2-基)乙醯基)-5-甲基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 114 (S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-7-((5-苯基甲基吡啶醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
115 (S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-7-((3-氟-5-(對甲苯基)甲基吡啶醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 116 (1S,3S,5S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-2-(2-(5-(4-氟苯基)-1-側氧基異吲哚啉-2-基)乙醯基)-5-甲基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
117 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((2',4'-二氟-[1,1'-聯苯]-4-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 118 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲酸
119 (S)-7-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲酸 120 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-(2-(5-(2,4-二氟苯基)-1-側氧基異吲哚啉-2-基)乙醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
121 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-(2-(5-(4-氟苯基)-1-側氧基異吲哚啉-2-基)乙醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 122 (S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-7-(2-(5-(2,4-二氟苯基)-1-側氧基異吲哚啉-2-基)乙醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
123 (S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-7-(2-(5-(4-氟苯基)-1-側氧基異吲哚啉-2-基)乙醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 124 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-(2-(5-(2-氯-4-氟苯基)-1-側氧基異吲哚啉-2-基)乙醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲醯胺
125 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-(2-(6-(2,4-二氟苯基)-1-側氧基異吲哚啉-2-基)乙醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 126 (S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-7-(2-(6-(2,4-二氟苯基)-1-側氧基異吲哚啉-2-基)乙醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
127 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 128 (2S,4R)-1-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)-N-((R)-2-羥基-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)吡咯啶-2-甲醯胺
129 (1S,3S,5S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-2-(2-(5-(2,4-二氟苯基)-1-側氧基異吲哚啉-2-基)乙醯基)-5-甲基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 130 (1S,3S,5S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-5-甲基-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
131 (S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜螺[4.4]壬烷-3-甲醯胺 132 (2S,4S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(甲氧基甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
133 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(異丙基磺醯基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 134 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-((9,9-二氟-9H-茀-4-羰基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲醯胺
135 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-(2-(3-(2,4-二氟苯基)-5-側氧基-5,7-二氫-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)乙醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 136 (1S,3S,5S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-5-甲基-2-((5-苯氧基甲基吡啶醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
137 N-(2-((2S,4R)-2-(((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)胺甲醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-1-基)-2-側氧基乙基)-5-苯氧基吡啶甲醯胺 138 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-(2-(3-(4-氟苯基)-5-側氧基-5,7-二氫-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)乙醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
139 (1S,3S,5S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-5-甲基-2-((4-(4-(三氟甲基)苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 140 N-(2-((2S,4R)-2-(((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)胺甲醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-1-基)-2-側氧基乙基)-5-苯氧基吡啶甲醯胺
141 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-(噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺 142 (1S,3S,5S)-5-甲基-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-(噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
143 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(二氟甲氧基)-1-((4-(4-氟苯氧基)-3-甲基苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 144 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((3-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
145 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(1,3-二噁烷-2-基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 146 (2S,4S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(1,3-二噁烷-2-基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
147 (1S,3S,5S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-2-((2',4'-二氟-[1,1'-聯苯]-4-羰基)甘胺醯基)-5-甲基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 148 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-氟-4-(羥基甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
149 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(甲氧基甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 150 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-4-(噻唑-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺
151 (2S,3R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-3-羥基-1-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 152 (1S,3S,5S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-5-甲基-2-((3-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
153 (1S,3S,5S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-2-((3-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-5-甲基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 154 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
155 (1R,3S,5R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-2-((3-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-5-甲基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 156 (1S,3S,5S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-5-甲基-2-(2-(1-側氧基-6-苯氧基異吲哚啉-2-基)乙醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
157 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((3-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 158 (2S,3R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-3-羥基-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
159 (1S,3S,5S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-5-甲基-2-((6-苯基甲基吡啶醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 160 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-甲氧基-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
161 (1S,3S,5R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-5-(羥基甲基)-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 162 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-((2',4'-二氟-[1,1'-聯苯]-4-羰基)甘胺醯基)-4-氟-4-(氟甲基)吡咯啶-2-甲醯胺
163 (5-((R)-1-((1S,3S,5S)-5-甲基-2-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺基)乙基)噻吩-3-基)硼酸 164 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-氟-4-(氟甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
165 (2S,4S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-甲基-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 166 (2S,4S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-4-甲基吡咯啶-2-甲醯胺
167 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-((9,9-二氟-9H-茀-2-羰基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲醯胺 168 (R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-3,3-二甲基-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,3-氮雜矽雜環戊烷-5-甲醯胺
169 (2S,4S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-4-苯基吡咯啶-2-甲醯胺 170 (1S,3S,5S)-5-甲基-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-((4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
171 (1S,3S,5S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-5-甲基-2-((3-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 172 (1S,3S,5S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-2-((3-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-5-甲基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
173 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-氟-4-(甲氧基甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 174 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(環丙基磺醯基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
175 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-氟-1-((4-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-4-(甲氧基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺 176 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-4-(三氟甲基)吡咯啶-2-甲醯胺
177 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(噁唑-2-基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 178 (2S,4S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(噁唑-2-基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
179 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((二苯并[b,d]噻吩-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 180 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-4-苯氧基吡咯啶-2-甲醯胺
181 (1S,3S,5S)-N-((2-胺基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)甲基)-5-甲基-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 182 (2S,4R)-4-((1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
183 (2S,4S)-4-((1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 184 (2S)-4-((1H-咪唑-1-基)甲基)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
185 (2S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-4-(哌啶-1-基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺 186 (1S,3S,5S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-5-(噻唑-2-基甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
187 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺醯基)-4-氟-4-(氟甲基)吡咯啶-2-甲醯胺 188 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
189 (5-((R)-1-((2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺基)乙基)噻吩-3-基)硼酸 190 (S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-5-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-甲醯胺
191 (1S,3S,5R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-5-(甲氧基甲基)-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 192 (2S,4R)-N-((1H-吲唑-5-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
193 (2S,4R)-N-((1H-苯并[d]咪唑-6-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 194 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-6-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
195 (2S,4R)-N-((1H-吲哚-5-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 196 (2S,4R)-N-((1H-吲哚-6-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
197 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-(吲哚啉-5-基甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 198 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-(吲哚啉-6-基甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
199 (2S,4R)-N-((1H-吲唑-6-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 200 (1S,3S,5S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-2-((二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺醯基)-5-甲基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
201 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺醯基)-4-氟-4-(甲氧基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺 202 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺醯基)-4-(甲基磺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
203 (1S,3S,5S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-2-((二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺醯基)-5-甲基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 204 6-(((5S)-5-(((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)胺甲醯基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-3-基)甲氧基)己酸
205 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((4-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-N-((R)-1-(噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)吡咯啶-2-甲醯胺 206 (S)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-((R)-1-(噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
207 (2S,4R)-1-((9,9-二氟-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)-N-((R)-1-(噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)吡咯啶-2-甲醯胺 208 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-((R)-1-(噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)吡咯啶-2-甲醯胺
209 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-N-((R)-1-(噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)吡咯啶-2-甲醯胺 210 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-((4,5,6,7-四氫噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基)甲基)吡咯啶-2-甲醯胺
211 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((9H-咔唑-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 212 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((二苯并[b,d]噻吩-2-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
213 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((二苯并[b,d]呋喃-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 214 (2S,3R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-3-苯基吡咯啶-2-甲醯胺
215 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-(4-異丙基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 216 (2S,4R)-4-((1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-氟-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
217 (2S,4S)-4-((1H-咪唑-1-基)甲基)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-氟-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 218 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲醯胺
219 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 220 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-((二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲醯胺
221 (2S,4R)-N-(苯并[d]噁唑-6-基甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 222 (2S,4R)-N-(苯并[d]噻唑-5-基甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
223 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-((1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)甲基)吡咯啶-2-甲醯胺 224 (2S,4R)-N-([1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-7-基甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
225 (2S,4R)-N-([1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-6-基甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 226 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-((1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)甲基)吡咯啶-2-甲醯胺
227 (2S,4R)-N-((1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 228 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-(異吲哚啉-5-基甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
229 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-6-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 230 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-5-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
231 (1S,3S,5S)-5-甲基-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-((R)-1-(噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 232 (2S,4R)-N-((3-胺基苯并[d]異噁唑-6-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
233 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-(咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 234 (S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜螺[4.5]癸烷-3-甲醯胺
235 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-N-(噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺 236 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-(異喹啉-6-基甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
237 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-(咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 238 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(甲基磺醯基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
239 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((2-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 240 (S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-7-((3-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
241 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 242 (2S,5S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-5-甲基-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
243 (2S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-3-甲基-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 244 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((4-甲基-3-(對甲苯基氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
245 (2S,4R)-N-(苯并[d]噻唑-6-基甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 246 (1S,3S,5S)-5-甲基-2-((3-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-N-(噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
247 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 248 (2S,4R)-N-((4-胺基-2-側氧基-2H-苯并[e][1,3]噁嗪-7-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
249 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-(異喹啉-7-基甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 250 (3-(((1S,3S,5S)-5-甲基-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺基)甲基)苯基)硼酸
251 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-4-(三氟甲氧基)吡咯啶-2-甲醯胺 252 (1S,3S,5S)-2-((3-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-5-甲基-N-(噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
253 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-((6,7-二氫-5H-吡咯并[3,4-b]吡啶-3-基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 254 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-N-(噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺
255 (S)-7-((3-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-N-(噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基甲基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 256 (S)-7-((3-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-N-(噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基甲基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
257 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-((2,3-二氫-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-6-基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 258 (2S,4R)-N-((1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
259 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-(2,4-二氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 260 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-(2-氟-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
261 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2,5-二氫-1H-吡咯-2-甲醯胺 262 (2S,4R)-N-((1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
263 (4-(((1S,3S,5S)-5-甲基-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺基)甲基)苯基)硼酸 264 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-((2,3-二氫-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-5-基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
265 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-((2,3-二氫-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-6-基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 266 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-(吡咯并[1,2-a]吡嗪-7-基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺
267 (1S,3S,5S)-5-甲基-N-((4-甲基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 268 (1S,3S,5S)-5-甲基-N-((6-甲基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
269 (1S,3S,5S)-2-((3-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-5-甲基-N-(吡咯并[1,2-a]吡嗪-7-基甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 270 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-N-(吡咯并[1,2-a]吡嗪-7-基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺
271 (1S,3S,5S)-5-甲基-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-(吡咯并[1,2-a]吡嗪-7-基甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 272 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-(對甲苯基氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
273 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((3-(4-(三級丁基)苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲醯胺 274 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-(4-氟-2-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
275 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-(噻吩-2-基氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 276 (S)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-(吡咯并[1,2-c]嘧啶-6-基甲基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
277 (1S,3S,5S)-5-甲基-2-((3-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-N-(吡咯并[1,2-a]吡嗪-7-基甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 278 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-(4-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-N-(吡咯并[1,2-a]吡嗪-7-基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺
279 (1S,3S,5S)-N-((1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼雜環戊二烯-5-基)甲基)-5-甲基-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 280 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((2-(3,4-二氯苯基)乙醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
281 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((6-甲基苯并[b]噻吩-2-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 282 (2S,4R)-N-(苯并[d]噁唑-5-基甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
283 N-(2-((2S,4R)-2-(((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)胺甲醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-1-基)-2-側氧基乙基)苯并[5,6][1,4]噁噻并[3,2-b]吡啶-3-甲醯胺 284 N-(2-((2S,4R)-2-(((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)胺甲醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-1-基)-2-側氧基乙基)苯并[5,6][1,4]噁噻并[3,2-b]吡啶-3-甲醯胺
285 (2S,3R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-3-甲氧基-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 286 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(二氟甲氧基)-1-((8-甲基啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
287 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((5-(3,4-二氯苯氧基)呋喃-2-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 288 (2S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-((4-胺基丁氧基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
289 N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-3-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)噻唑啶-4-甲醯胺 290 (1S,3S,5S)-N-((1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼雜環戊二烯-6-基)甲基)-5-甲基-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
291 (2-(((1S,3S,5S)-5-甲基-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺基)甲基)-1H-吲哚-5-基)硼酸 292 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((3-(2-氯-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲醯胺
293 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-(4-乙基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 294 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((3-(4-環丙基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲醯胺
295 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-(2,5-二氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 296 (1S,3S,5S)-5-甲基-2-((4-苯氧基丁醯基)甘胺醯基)-N-(1-((R)-哌嗪-2-羰基)氮雜環丁烷-3-基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
297 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((4-(5-甲基噻吩-2-基)苄醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 298 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-(2,4-二甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
299 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-(2-氟苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 300 (S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-7-((二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
301 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((9,9-二甲基-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 302 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((9-甲基-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
303 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-(噻吩-3-基氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 304 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((4-氟-3-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
305 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-(2-氟-4-甲基苄基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 306 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((3,6-二甲基-2-(間甲苯基)異菸鹼醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
307 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((3-(2-氟-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 308 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((4-(4-氟-2-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
309 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((3-(2-氟-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-4-(甲基磺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 310 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((3-(2-氟-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
311 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((5-(2-氟-4-甲基苯氧基)-2-甲氧基苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 312 (2S,4R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-(2-氟-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
313 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-((4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)吡咯啶-2-甲醯胺 314 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((9-羥基-9-甲基-9H-茀-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
315 (1S,3S,5S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-2-((3-(2-氟-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-5-甲基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 316 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((4-(2-氟-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
317 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((4-氟-3-(噻吩-3-基氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 318 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((3-(2-氟-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-4-(甲氧基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺
319 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-氟-1-((3-(2-氟-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-4-(氟甲基)吡咯啶-2-甲醯胺 320 (1S,3S,5S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-2-((3-(2-氟-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-5-甲基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
321 (S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-7-((3-(2-氟-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 322 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((2-氟-5-(2-氟-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
323 N-(2-((2S,4R)-2-(((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)胺甲醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-1-基)-2-側氧基乙基)-4-(2-氟-4-甲基苯氧基)吡啶甲醯胺 324 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-((2-氟-4-甲基苯基)胺基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
325 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-((2-氟-4-甲基苄基)氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 326 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-(呋喃-2-基氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
327 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((2-氟-3-(對甲苯基氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 328 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-(2-氟-4-甲基苯氧基)-5-甲基苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
329 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-氟-5-(2-氟-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 330 N-(2-((2S,4R)-2-(((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)胺甲醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-1-基)-2-側氧基乙基)苯并呋喃并[2,3-c]吡啶-6-甲醯胺
331 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((8-氯二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲醯胺 332 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((7-甲基二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
333 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((7-氟二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 334 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((8-甲基二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
335 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((8-氟二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 336 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((6-甲基二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
337 (8S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((9-氟二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺醯基)-1-氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 338 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-(2-氟-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-N-((4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)吡咯啶-2-甲醯胺
339 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-(2-氟-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-N-((4,5,6,7-四氫噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基)甲基)吡咯啶-2-甲醯胺 340 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-((R)-1-(4,5,6,7-四氫噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基)乙基)吡咯啶-2-甲醯胺
341 (1S,3S,5S)-5-甲基-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-((R)-1-(4,5,6,7-四氫噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基)乙基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 342 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-((7-側氧基-4,5,6,7-四氫噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
343 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-((5-側氧基-4,5,6,7-四氫噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 344 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-((6-側氧基-4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
345 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-((4-側氧基-4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 346 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-((6-甲基-4,5,6,7-四氫噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
347 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-((5-甲基-4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 348 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-((4-側氧基-4,5-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
349 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-((7-側氧基-6,7-二氫噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 350 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-((5-甲基-4,5,6,7-四氫噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
351 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-N-((7-甲基-4,5,6,7-四氫噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 352 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((7-氟啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
353 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((8-氟啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 354 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((6-氟啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
355 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((2-氟啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 356 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((2,3-二氫苯并[b][1,4]噁噻-7-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
357 (8S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((5-(1-(3-氟苯基)乙基)噻吩-2-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 358 (1S,3S,5R)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-5-((2-乙醯胺基乙氧基)甲基)-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
359 (1S,3S,5S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-5-(噁唑-2-基甲基)-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 360 (2S,4S)-N-((R)-1-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)-4-(噁唑-2-基甲基)-1-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
361 (1S,3S,5S)-5-甲基-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-((4,5,6,7-四氫-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 362 (1S,3S,5S)-5-甲基-2-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-N-((4,5,6,7-四氫-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-2-基)甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺
363 (S)-N-(咪唑并[1,2-c]嘧啶-2-基甲基)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 364 (S)-N-((4-胺基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺
365 (S)-N-((6-胺基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-7-((啡㗁噻-3-羰基)甘胺醯基)-1,4-二氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-8-甲醯胺 366 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-((5-甲基噻吩-2-基)氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
367 (2S,4S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((3-(2-氟-4-甲基苯氧基)苄醯基)甘胺醯基)-4-(甲氧基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺 368 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-((5-乙基噻吩-2-基)氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
369 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((9-氟二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 370 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-(4-乙基苯氧基)-5-氟苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
371 (1S,3S,5S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-2-((3-(4-乙基苯氧基)-5-氟苄醯基)甘胺醯基)-5-甲基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 372 (2S,4S)-4-((1H-咪唑-1-基)甲基)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((3-(4-乙基苯氧基)-5-氟苄醯基)甘胺醯基)-4-氟吡咯啶-2-甲醯胺
373 (1S,3S,5S)-N-(4-氯苄基)-5-甲基-2-((4-苯氧基苄醯基)甘胺醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺 374 (2S,4R)-N-((6-胺基-2,4-二甲基吡啶-3-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((2-氟-3-(對甲苯基氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
375 (S)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((2-氟-3-(對甲苯基氧基)苄醯基)甘胺醯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-5-甲醯胺 376 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-((2-氟-3-(對甲苯基氧基)苄醯基)甘胺醯基)-N-(噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺
377 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((4-(4-氯苯基)噻吩-2-羰基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲醯胺 378 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-(異吲哚啉-2-基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
379 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((4-苯基噻吩-2-羰基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺 380 N-(2-((2S,4R)-2-(((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)胺甲醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-1-基)-2-側氧基乙基)-6-N-嗎啉基吡嗪-2-甲醯胺
381 (2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-[2-[[5-(2-吡啶基)噻吩-2-羰基]胺基]乙醯基]-N-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基甲基)吡咯啶-2-甲醯胺 382 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-甲氧基苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
383 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-1-((4-(環己氧基)苄醯基)甘胺醯基)-4-(二氟甲氧基)吡咯啶-2-甲醯胺 384 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((4-甲氧基苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺
385 (2S,4R)-N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)-4-(二氟甲氧基)-1-((3-((3-甲基噻吩-2-基)氧基)苄醯基)甘胺醯基)吡咯啶-2-甲醯胺         
實例 3. 人類 C1s 酶分析
表1之化合物之IC 50值係用下述的人類C1s酶分析測定。亦可使用其他標準補體分析。
將終濃度為1.16 nM之人類補體C1s酶(自人類血清中純化，Complement Technology, Inc.)與不同濃度之測試化合物在50 mM Tris、1 M NaCl、pH 7.5中在室溫下孵育5 min。添加合成受質ZL-Lys-SBzl及DTNB (愛耳門試劑)至最終濃度各為100 µM。使用微孔板分光光度計以30秒的間隔記錄405 nm處之吸光度(A405)，持續30 min。IC 50值藉由作為測試化合物濃度之函數之補體C1s反應速率的非線性迴歸來計算。
表2顯示自上述人類C1s酶分析獲得之化合物的IC 50值。使用三個***表示IC 50＜100奈米莫耳之化合物；兩個**表示IC 50＞100奈米莫耳且小於1微莫耳之化合物，一個*表示IC 50＞大於1微莫耳之化合物。ND表示未測定IC 50值之化合物。 表 2. 本揭示案化合物之 C1s 抑制活性
化合物編號 IC 50( 星號) 化合物編號 IC 50( 星號) 化合物編號 IC 50( 星號) 化合物編號 IC 50( 星號) 化合物編號 IC 50( 星號)
1 * 2 *** 3 * 4 *** 5 ***
6 *** 7 *** 8 *** 9 ** 10 *
11 * 12 * 13 * 14 * 15 *
16 * 17 *** 18 *** 19 * 20 ***
21 * 22 ** 23 * 24 *** 25 ***
26 *** 27 *** 28 *** 29 * 30 ***
31 * 32 *** 33 *** 34 * 35 ***
36 *** 37 *** 38 *** 39 *** 40 **
41 * 42 * 43 * 44 *** 45 *
46 * 47 *** 48 * 49 * 50 **
51 * 52 * 53 * 54 *** 55 *
56 ** 57 * 58 *** 59 * 60 *
61 * 62 * 63 * 64 * 65 *
66 * 67 ** 68 ** 69 * 70 *
71 *** 72 *** 73 *** 74 ** 75 ***
76 * 77 *** 78 ** 79 ** 80 ***
81 *** 82 ** 83 ** 84 * 85 *
86 ** 87 ** 88 *** 89 * 90 ***
91 *** 92 ** 93 *** 94 * 95 *
96 * 97 * 98 ** 99 *** 100 **
101 *** 102 *** 103 ** 104 ** 105 ***
106 *** 107 *** 108 ** 109 * 110 *
111 *** 112 *** 113 *** 114 ** 115 *
116 * 117 ** 118 * 119 * 120 ***
121 ** 122 ** 123 ** 124 *** 125 ***
126 *** 127 *** 128 * 129 *** 130 ***
131 *** 132 *** 133 *** 134 * 135 *
136 ** 137 *** 138 * 139 ** 140 **
141 *** 142 *** 143 *** 144 *** 145 ***
146 *** 147 ** 148 *** 149 *** 150 ***
151 ** 152 *** 153 *** 154 *** 155 **
156 ** 157 *** 158 *** 159 * 160 ***
161 *** 162 ** 163 * 164 *** 165 ***
166 *** 167 *** 168 *** 169 *** 170 ***
171 *** 172 *** 173 *** 174 *** 175 ***
176 *** 177 *** 178 *** 179 *** 180 ***
181 *** 182 *** 183 *** 184 *** 185 ***
186 *** 187 *** 188 *** 189 * 190 ***
191 *** 192 * 193 * 194 * 195 *
196 * 197 * 198 * 199 * 200 ***
201 *** 202 *** 203 *** 204 *** 205 **
206 *** 207 * 208 *** 209 ** 210 ***
211 *** 212 *** 213 *** 214 * 215 ***
216 *** 217 *** 218 *** 219 *** 220 ***
221 * 222 * 223 ** 224 * 225 *
226 * 227 * 228 *** 229 * 230 *
231 *** 232 * 233 * 234 *** 235 ***
236 * 237 * 238 *** 239 * 240 ***
241 *** 242 * 243 * 244 *** 245 *
246 *** 247 ** 248 * 249 * 250 *
251 *** 252 *** 253 ** 254 *** 255 **
256 *** 257 * 258 * 259 *** 260 ***
261 *** 262 * 263 * 264 * 265 *
266 *** 267 * 268 * 269 *** 270 ***
271 *** 272 *** 273 *** 274 *** 275 ***
276 * 277 *** 278 *** 279 * 280 **
281 ** 282 * 283 *** 284 *** 285 *
286 *** 287 *** 288 *** 289 *** 290 *
291 * 292 *** 293 *** 294 *** 295 ***
296 * 297 *** 298 *** 299 *** 300 ***
301 *** 302 *** 303 *** 304 *** 305 ***
306 *** 307 *** 308 *** 309 *** 310 ***
311 *** 312 *** 313 *** 314 *** 315 ***
316 *** 317 *** 318 *** 319 *** 320 ***
321 *** 322 *** 323 *** 324 *** 325 ***
326 ND 327 *** 328 *** 329 *** 330 ND
331 ND 332 *** 333 ND 334 *** 335 ND
336 *** 337 ND 338 *** 339 *** 340 ND
341 ND 342 ND 343 ND 344 ND 345 ND
346 * 347 * 348 ND 349 ND 350 ND
351 ND 352 ND 353 ND 354 ND 355 ***
356 *** 357 ** 358 ND 359 ND 360 ND
361 ND 362 ND 363 ND 364 ND 365 ND
366 *** 367 *** 368 *** 369 *** 370 ***
371 *** 372 *** 373 * 374 * 375 ***
376 * 377 *** 378 *** 379 *** 380 *
381 *** 382 ** 383 *** 384 * 385 ***
實例 4. 溶血分析
表1之化合物的IC 50值亦使用溶血分析來測定。溶血分析先前係由Dodds, A.W.及Sim, R.B.(1997)；Morgan, B.P. (2000)描述。在分析之前，藉由滴定來確定實現100%裂解抗體致敏綿羊紅血球(EA)所需之正常人類血清(NHS)之最佳濃度。EA為表面結合有兔IgM抗綿羊紅血球抗體之綿羊紅血球。在分析中，NHS (Complement Technology)係稀釋於GVB++緩衝液(0.1 %明膠、5 mM Veronal、145 mM NaCl、0.025 % NaN 3、pH 7.3、0.15 mM氯化鈣及0.5 mM氯化鎂，Complement Technology)中且與不同濃度之測試化合物在室溫下孵育2 min。添加新懸浮於GVB++中之EA (Complement Technology)，最終濃度為1 x 10 8個細胞/mL，且將反應在37℃下孵育60 min。陽性對照反應(100%裂解)由GVB++與NHS及EA組成，但不含測試化合物；陰性對照反應(0%裂解)僅由GVB++與EA組成。將樣品在2000g下離心3 min且收集上清液。使用微孔板分光光度計記錄405 nm處之吸光度(A405)。IC 50值藉由作為測試化合物濃度之函數之溶血百分比的非線性迴歸來計算。
本說明書已經參考各種具體實施例進行了描述。然而，一般熟悉此項技術者應當理解，在不脫離申請專利範圍中闡述之本發明之範圍的情況下，可以進行各種修改及改變。因此，本說明書應當係視為說明性而不為限制性的，且所有此類修改旨在包括於申請專利範圍之範圍內。 實例 5. 微粒體穩定性分析
如下所述分析本揭示案化合物之微粒體穩定性。 材料
化學品及試劑： 產品編號
去離子水[H 2O]   
乙腈[ACN] (HPLC級) Sigma Aldrich編號34998
二甲基亞碸[DMSO] Sigma Aldrich編號D8418
Wistar-Han大鼠肝臟微粒體[RLM] XenoTech編號R6000
比格犬(Beagle Dog)肝臟微粒體[DLM] XenoTech編號D1000
食蟹猴肝臟微粒體[MLM] XenoTech編號P2000
人類肝臟微粒體[HLM] XenoTech編號H2610
β-菸鹼醯胺腺嘌呤二核苷酸磷酸鈉鹽[NADP+] Sigma Aldrich編號N3886
葡萄糖-6-磷酸 Sigma Aldrich編號G7879
葡萄糖-6-磷酸去氫酶 Sigma Aldrich編號G6378
氯化鎂[MgCl 2] Sigma Aldrich編號M8266
磷酸鹽緩衝液[0.5mM] Corning Life Sciences編號451201
方法
藉由將15.2 mL去離子水與1.9 mL之0.5 M磷酸鹽緩衝液及1.9 mL之33 mM MgCl 2混合來製備磷酸鹽緩衝溶液。藉由將14.655 mL去離子水與1.9 mL之0.5 mM磷酸鹽緩衝液、1.9 mL之33 mM MgCl 2及545 µL之20 mg/mL肝臟微粒體(物種特異性)混合來製備微粒體工作溶液。藉由將8.12 mL去離子水與1.45 mL之0.5 mM磷酸鹽緩衝液、1.45 mL之33 mM MgCl 2、1.16 mL之100 mM NADP+溶液、1.16 mL之100 mM葡萄糖-6-磷酸溶液及1.16 mL之100 U/mL葡萄糖-6-磷酸去氫酶溶液混合來製備輔因子溶液。最終分析試劑濃度為0.1 µM測試品、0.5 mg/mL肝臟微粒體、1 mM NADP+、5 mM葡萄糖-6-磷酸、1 U/mL葡萄糖-6-磷酸去氫酶、50 mM磷酸鉀緩衝液(pH 7.4)、3.3 mM MgCl 2及0.2% DMSO。
藉由取436 µL微粒體工作溶液，在1.5 mL 96孔板中將其與63 µL輔因子溶液混合，且在37℃下預孵育5分鐘來製備分析反應混合物。藉由添加1 µL 5 0 µM測試化合物之DMSO溶液來啟動分析。
在0分鐘、30分鐘及120分鐘時，取出100 µL孵育混合物之等份試樣，且在單獨的96孔板中與200 µL含有0.2 µM甲苯磺丁脲(內標)之冷乙腈混合。分析結束時，將樣品收集板渦旋三十秒，且在3000 xg及4℃下離心10分鐘。將上清液轉移至乾淨的96孔生物分析板中進行分析且儲存於4℃下。 樣品生物分析
藉由LC-MS/MS方法在Sciex API 5500 Q-Trap質譜儀上使用turbo ion噴霧且在正模式下進行MRM監測來分析肝臟微粒體樣品中之測試化合物濃度。Analyst ®軟體(1.6.2版)係用於捕獲LC-MS/MS資料且對峰面積進行積分。 實例 6. 肝臟清除率分析
如下所述分析本揭示案之化合物的肝臟清除率。 解凍培養基及測試物品準備
將解凍培養基在37℃的水浴中溫熱。將測試化合物在DMSO中自20 mM稀釋200倍至100 µM，然後藉由將3 µL測試化合物溶液添加至1.5 mL威廉姆斯E培養基(Williams E medium)中稀釋至0.2 µM。將咪達唑侖(Midazolam) (1 mM)及7-乙氧基香豆素(100 mM)對照解凍，且將3 µL各對照添加至1.5 mL威廉姆斯E培養基中。然後將含有內標之冷乙腈(150 µL)添加至96孔板中。 細胞活力測定
將冷凍保存之肝細胞(人類、大鼠、狗或猴)在水浴中解凍約90 s，轉移至溫解凍培養基中，且在100 g下離心5 min。然後吸出上清液，且將沉澱物再懸浮於5 mL威廉姆斯E培養基中。將細胞懸浮液(50 µL)與台盼藍(Trypan blue)混合，然後將等分試樣置於血球計上進行細胞活力測定。若確定細胞活力超過70%，則藉由添加適量的威廉姆斯E培養基將肝細胞培養基中之細胞濃度調整至10 6個/mL。 孵育
將肝細胞懸浮液(500 µL)添加至24孔板的各孔中。然後添加測試化合物溶液(500 µL)。0 min時，取出75 µL樣品，且在96孔板中用150 µL冷乙腈淬滅。在30 min、50 min及120 min (7-乙氧基香豆素為15 min及120 min)時取樣且淬滅。孵育及淬滅後，將樣品儲存於-20℃下隔夜。 LC-MS/MS 分析
使用2 mL 0.05 MS調整溶液針對各化合物調整質譜儀(各化合物為0.05 µM在1:1水/乙腈中之測試化合物)後，將含有孵育樣品及淬滅溶液之96孔板在25℃，3000 rpm下離心15 min。將樣品(160 µL)轉移至深孔板且在LC-MS/MS中排隊進行分析。為了測定測試化合物的內在清除率及肝臟清除率(%Qh)，將峰面積比(化合物峰面積/內標峰面積)相對於時間作圖且確定線的梯度。 實例 7. Caco-2 滲透性分析
按照下述程序測定在有及沒有流出抑制劑的情況下本揭示案化合物在Caco-2細胞單層中之雙向滲透性及流出概率。 材料與試劑
Caco-2細胞係獲自美國典型培養物保藏中心(ATCC)，且ATCC®編號為HTB-37。Hepes、青黴素、鏈黴素、胰蛋白酶/EDTA及DMSO係購自Solarbio。牛血清白蛋白(BSA)係購自Solarbio Biotechnology Co., Ltd。胎牛血清、Hank氏平衡鹽溶液(HBSS)及非必需胺基酸(NEAA)均購自Thermo Fisher Scientific之Gibco。Dulbecco改良Eagle培養基(DMEM)係購自Corning Corporation或Hyclone。HTS Transwell-96 Well (目錄號3391)可滲透支架及其他無菌塑膠製品係購自Corning Corporation。Millicell Epithelial伏特-歐姆量測系統係購自Millipore。Cellometer® Vision係購自Nexcelom Bioscience LLC。Infinite 200 PRO微板讀取器係購自Tecan。MTS2/4軌道振盪器係購自IKA Labortechnik。
運輸緩衝液：含有25 mM HEPES，pH 7.4及3% BSA之HBSS：為了製備含有25 mM HEPES，pH 7.4之HBSS，準確稱取5.958 g HEPES及0.35 g碳酸氫鈉且添加至900 mL純水中，然後超音波處理以溶解內容物。將100 mL之10× HBSS轉移至溶液中，且將溶液置於攪拌器上，用氫氧化鈉緩慢調節pH至7.4，然後過濾且添加3% BSA。
含流出抑制劑之運輸緩衝液：含有25 mM HEPES，pH 7.4及3% BSA之HBSS：為了製備含有25 mM HEPES，pH 7.4之HBSS，準確稱取5.958 g HEPES及0.35 g碳酸氫鈉且添加至900 mL純水中，然後超音波處理以溶解內容物。將100 mL之10× HBSS轉移至溶液中，且將溶液置於攪拌器上，用氫氧化鈉緩慢調節pH至7.4，然後過濾。實驗前，將10 mM zosuquidar、30 mM苯溴馬隆及2 mM KO-143添加至稀釋1000倍之HBSS (25 mM HEPES，pH 7.4)及3% BSA中，最終濃度為1 μM zosuquidar，30 μM苯溴馬隆及2 μM KO-143。 細胞接種之準備
1. 製備運輸緩衝液(含有25 mM HEPES，pH 7.4之HBSS)：準確稱取5.958 g HEPES及0.35 g碳酸氫鈉且添加至900 mL純水中，然後超音波處理以溶解內容物。將100 mL之10× HBSS轉移至溶液中，且將溶液置於攪拌器上，用氫氧化鈉緩慢調節pH至7.4，然後過濾。
2. 製備由含高葡萄糖及L-麩醯胺之Dulbecco改良Eagle培養基(DMEM)組成之Caco-2細胞培養基，補充有10% FBS、0.1 mg/mL鏈黴素、100單位青黴素、0.6 μg/mL硫酸康黴素及1x非必需胺基酸(NEAA)。
3. 將50 μL培養基添加至Transwell插件(Transwell insert)之各孔中。自貯藏器中取出Transwell插件且添加25 mL培養基。
4. 在37℃、5% CO 2下孵育1小時。板已準備好進行細胞接種。
5. 在設置為37℃、5% CO2、95%相對濕度之細胞培養孵育箱中培育T-75燒瓶中之細胞。在剝離及分開之前讓細胞達到80-90%匯合。
6. 用5 mL PBS沖洗T-75燒瓶中培育之細胞。吸出，添加1.5 mL胰蛋白酶/EDTA，且在37℃下孵育約5至10分鐘或直至細胞剝離且漂浮。藉由添加過量的含血清培養基來使胰蛋白酶/EDTA不活化。
7. 將細胞懸浮液轉移至錐形管中，且以120x g離心10分鐘沉澱細胞。
8. 以6.86 х 10 5個細胞/mL之密度將細胞再懸浮於接種培養基中。此細胞濃度可用於接種2.4х 10 5個細胞/cm 2。 將 Caco-2 細胞在 Transwell 板中接種且餵養
1. 將50 μL上述細胞懸液添加至先前準備之Transwell板的各孔中。
2. 將板孵育14-18天。每隔一天置換一次培養基，在初次塗敷後不少於48小時開始。進行實驗前一天必須置換培養基。
3. 培養基更換的程序如下。自孵育箱中取出板且放入通風櫃中。自貯藏器及各Transwell插件中吸出培養基。將100 μL培養基添加至Transwell插件之各孔中，且將25 mL培養基添加至貯藏器托盤中。將板放回孵育箱。 細胞單層完整性評估
1. 當培養14天的Caco-2細胞達到匯合且分化時，它們就可以用於運輸研究。
2. 使用Millicell Epithelial伏特-歐姆量測系統(Millipore)量測跨單層之電阻。
3. 記錄各孔之電阻。
4. 量測完所有孔後，將板放回孵育箱。
5. TEER值之計算：TEER量測值(歐姆)×膜面積(cm 2)= TEER值(歐姆·cm 2)。TEER值＜ 230 ohms·cm 2之任何單層(表明單層形成不良)將被丟棄。 進行藥物運輸分析
1. 自孵育箱中取出Caco-2板。接下來，清洗單層，使用預熱之運輸緩衝液將體積交換兩次。然後，將板在37℃下孵育30分鐘。
2. 對於測試化合物及對照化合物地高辛，在DMSO中製備2 mM之儲備溶液，且用含或不含流出抑制劑之運輸緩衝液稀釋，以獲得10 μM工作溶液。對於對照化合物美托洛爾，在DMSO中製備2 mM儲備溶液，且用不含3% BSA之HBSS稀釋，得到10 μM工作溶液。最終DMSO濃度為0.8%。
3. 使用597 μL運輸緩衝液(含或不含流出抑制劑)及3 μL 2 mM測試化合物或對照化合物製備大量供方溶液。
4. 使用597 μL運輸緩衝液(含或不含流出抑制劑)及3 μL DMSO製備大量受方溶液。
5. 為確定藥物自頂端至基底外側方向的運輸速率。將108 μL供方溶液添加至Transwell插件(頂端室)中，且立即將8 μL樣品自頂端室轉移至新96孔板中之72 μL運輸緩衝液及240 μL淬滅溶劑中，作為初始供方樣品(A-B)。以1000 rpm將板振盪5分鐘。用300 μL受方溶液填充受方板(基底外側室)中的孔。
6. 為確定藥物在基底外側至頂端方向上之傳輸速率。將308 μL供方溶液添加至受方板孔(基底外側室)中，且立即將8 μL樣品自基底外側室轉移至新96孔板中之72 μL運輸緩衝液及240 μL淬滅溶劑中，作為初始供方樣品(B-A)。用100 μL受方溶液填充Transwell插件(頂端室)。以1000 rpm將板振盪5分鐘。
7. 在37℃下孵育2小時。在運輸期結束時，將8 μL樣品自供方側(Ap→Bl通量之頂端室及Bl→Ap通量之基底外側室)轉移至新的96孔板中之72 μL運輸緩衝液及240 μL淬滅溶劑中。直接自受方側取出80 μL (Ap→Bl通量之基底外側室及Bl→Ap通量之頂端室)，且轉移至含有240 μL淬滅溶劑之新的96孔板中。以1000 rpm渦旋10分鐘。將各時間點之淬滅板在4,000 rpm及4℃下離心30分鐘。將各化合物之100 μL上清液轉移到含有100 μL純水之96孔分析板的相應孔中。以1,000 rpm將分析板振盪2分鐘且藉由LC-MS/MS分析樣品。所有孵育均一式兩份進行。
8. 為了確定2小時運輸期後螢光黃(Lucifer yellow)的洩漏情況，在水中製備螢光黃之儲備溶液且用運輸緩衝液稀釋以達到100 μM之最終濃度。將100 μL螢光黃溶液添加至Transwell插件(頂端室)中。用300 μL之運輸緩衝液填充受方板(基底外側室)中的孔。在37℃下孵育30分鐘。直接自頂端及基底外側孔中取出80 μL (使用基底外側進入孔)且轉移至新的96孔板。在螢光板讀取器中以485 nm激發及530 nm發射量測螢光黃螢光(以監測單層完整性)。 實例 8. 大鼠 IV 及 PO 投與後之藥物動力學概況
基於下述一般程序評估在雄性Wistar Han大鼠中以不同劑量靜脈內(IV)或口服(PO)投與本揭示案化合物後之藥物動力學概況。 示範性給藥資訊
IV給藥： 對於先前裝有頸靜脈導管(JVC)用於採血的雄性Wistar Han大鼠，動物將接受單次IV劑量之測試化合物(例如，以0.5 mg/kg或更高之劑量水準)。將自插管頸動脈中取樣。
PO給藥： 對於先前裝有頸靜脈導管用於採血的雄性Wistar Han大鼠，動物將接受單次口服劑量之化合物，例如，以5 mg/kg或更高之劑量水準。
動物飼養控制： 所有用於IV及PO投與的動物將禁食隔夜且在給藥後4小時收集後餵食。
給藥過程中之劑量調配處理： 劑量調配物將在室溫下保存且在製備後2小時內投與。
示範性藥物動力學 (PK) 時間表：IV給藥： 血漿：給藥前、給藥後0.33、0.083、0.25、0.5、1、2、4、8及24小時。 PO給藥： 血漿：給藥前、給藥後0.25、0.5、1、2、4、8及24小時。 PK 樣品分析
將使用LC-MS/MS方法分析血漿樣品中測試化合物之濃度。WinNonlin (Phoenix TM，8.3版)或其他類似軟體將用於藥物動力學計算。只要可能，將根據血漿濃度相對於時間的資料計算以下藥物動力學參數： IV投與：T 1/2、C 0、AUC 最後、AUC inf、MRT、Cl、Vss PO投與：T 1/2、C 最大、T 最大、AUC inf、AUC 最後、F% 實例 9. MASP-2 蛋白酶分析
本揭示案之化合物係用MASP-2蛋白酶分析進行評估。 材料
緩衝液 20 mM Hepes，140 mM NaCl，pH 7.4
酶 MASP-2 (CCP2-SP) (Charles River)
受質 Z-Lys-SBzl (Sigma Aldrich)
偵測 DTNB愛耳門試劑(Sigma Aldrich)
方法
將測試化合物及/或DMSO在有酶之情況下在緩衝液中在室溫(RT)下預孵育5分鐘，並且在沒有酶之情況下進行作為對照。藉由添加受質及DTNB混合物來啟動反應。在此分析中，酶、受質及DTNB濃度分別為16 nM、200 µM及200 µM。在微板讀取器上用405 nm以動態模式在RT下每30秒量測一次吸光度(A 405)至少30分鐘。測試化合物以0.1 μM濃度或起始濃度為10 μM之8點半對數稀釋系列進行篩選。化合物，(2R,4S)-N-((S)-1-(((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)甲基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)-4-苯基哌啶-2-甲醯胺以起始濃度為1 μM之8點半對數稀釋系列包括於各分析中。 其他實施例
本說明書已經參考各種具體實施例進行了描述。然而，一般熟悉此項技術者應當理解，在不脫離申請專利範圍中闡述之本發明之範圍的情況下，可以進行各種修改及改變。因此，本說明書應當係視為說明性而不為限制性的，且所有此類修改旨在包括於申請專利範圍之範圍內。

Claims (133)

  1. 一種式(I)之化合物： (I)， 或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 X 1為C或N； X 2為C、S或Si； R 1、R 1'、R 2、R 2'、R 3及R 3'中之每一者獨立地選自H、鹵基、羥基、視情況經取代之C 1-C 6烷基、視情況經取代之C 3-C 8環烷基、視情況經取代之C 6-C 14芳基、視情況經取代之5至10員雜環或視情況經取代之5至10員雜芳基；視情況經取代之C 1-C 6烷氧基；視情況經取代之C 6-C 14芳氧基、(視情況經取代之5至10員雜芳基)氧基；SO 2R a，其中R a為H、C 1-C 6烷基或C 3-C 8環烷基；S(O)(NH)R b，其中R b為H或C 1-C 6烷基，其中，當X 1為N時，R 1或R 1'不存在且當X 2為S時，R 2及R 2'不存在；或 R 1及R 2與各自附接的原子一起形成視情況經取代之C 3-C 8環烷基；或 R 1及R 2組合形成雙鍵； R 1'及R 2'與各自附接的原子一起形成視情況經取代之C 3-C 8環烷基；或 R 2及R 2'與它們附接的原子一起形成視情況經取代之4或5員螺環雜環；或 R 2及R 2'與它們附接的原子一起形成視情況經取代之C 3-C 8螺環環烷基；或 R 2及R 2'組合形成=C(R c) 2，其中各R c獨立地為H或鹵基； Y為： 、 ，或 其中 Y 1為O、S、NR d，其中各R d獨立地為不存在、H或C 1-C 6烷基； Y 1’為O、S、NR d或C(R d) 2； Y 2及Y 3中之每一者獨立地為NR e或C(R e) 2，其中各R e獨立地為不存在；H；視情況經取代之C 1-C 6烷基；鹵基；或N(R g) 2，其中各R g獨立地為H或C 1-C 6烷基；或兩個R e組合形成側氧基； Y 4、Y 4’、Y 10及Y 13中之每一者獨立地為CR e或N； Y 5、Y 6及Y 7中之每一者獨立地為O、S、NR f或C(R f) 2，其中各R f獨立地為不存在；H；視情況經取代之C 1-C 6烷基；鹵基；或N(R g) 2；或兩個R f組合形成側氧基； Y 8及Y 9中之每一者獨立地為C(R f) 2或NR f； Y 11及Y 12中之每一者獨立地為NR e、C(R e) 2、S或O； 各 獨立地為單鍵或雙鍵； R、R’、R”及R’”中之每一者獨立地為不存在、H、視情況經取代之C 1-C 6烷基、鹵基或N(R g) 2；或 兩個R組合形成側氧基；或 兩個R’組合形成側氧基；且 q為0或1； L選自鍵、 、 及 ，其中R 4為H、CH 3、CF 3或CH 2OH； L 1為鍵或視情況經取代之C 1-C 6伸烷基； L 2為鍵或O； B為視情況經取代之C 6-C 14芳基；視情況經取代之C 3-C 14碳環基；視情況經取代之5至14員雜環基；或視情況經取代之5至10員雜芳基；且 A為H或C 1-C 6烷基；或 A為與B中環原子結合的視情況經取代之C 1-C 2伸烷基。
  2. 如請求項1之化合物，其中Y為 。
  3. 如請求項2之化合物，其中Y為 。
  4. 如請求項3之化合物，其中Y 2為N。
  5. 如請求項3之化合物，其中Y 2為CH或CNH 2。
  6. 如請求項3至5中任一項之化合物，其中Y 3為N。
  7. 如請求項3至5中任一項之化合物，其中Y 3為CR e。
  8. 如請求項7之化合物，其中Y 3為CH或CNH 2。
  9. 如請求項2之化合物，其中Y為 。
  10. 如請求項9之化合物，其中Y 2為NH或NCH 3。
  11. 如請求項10之化合物，其中Y 2為CH 2、CHCH 3或C(O)。
  12. 如請求項9至11中任一項之化合物，其中Y 3為NH或NCH 3。
  13. 如請求項9至11中任一項之化合物，其中Y 3為CH 2、CHCH 3或C(O)。
  14. 如請求項2至13中任一項之化合物，其中Y 1為NH或NCH 3。
  15. 如請求項2至13中任一項之化合物，其中Y 1為O或S。
  16. 如請求項2之化合物，其中Y為 。
  17. 如請求項16之化合物，其中Y 4為N。
  18. 如請求項16或17之化合物，其中Y 2為N。
  19. 如請求項16或17之化合物，其中Y 2為CH。
  20. 如請求項16至19中任一項之化合物，其中Y 3為N。
  21. 如請求項16至19中任一項之化合物，其中Y 3為CH。
  22. 如請求項2至21中任一項之化合物，其中R為H、CH 3、F或Cl。
  23. 如請求項2至22中任一項之化合物，其中R’為H、CH 3或NH 2。
  24. 如請求項2之化合物，其中Y為 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
  25. 如請求項1之化合物，其中Y為 。
  26. 如請求項25之化合物，其中Y為 。
  27. 如請求項26之化合物，其中Y為 、 、 、 、 、 或 。
  28. 如請求項1之化合物，其中Y為 。
  29. 如請求項28之化合物，其中Y為 。
  30. 如請求項1至29中任一項之化合物，其中B為視情況經取代之C 6-C 14芳基或視情況經取代之5至10員雜芳基。
  31. 如請求項30之化合物，其中該化合物為式(III)之化合物： (III)， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中 X 3為CR 9或N； R 5、R 6及R 9中之每一者獨立地選自H、鹵基、CN、SF 5、視情況經取代之C 1-C 6烷基、視情況經取代之C 1-C 6烷氧基、S(O)(NH)CH 3、S(O) 2CH 3及S(O)(NCN)CH 3；且 R 7及R 8中之每一者獨立地為H、鹵基、CN、SF 5、視情況經取代之C 1-C 6烷基、視情況經取代之C 1-C 6烷氧基、視情況經取代之胺基、S(O)(NH)CH 3、S(O) 2CH 3、S(O)(NCN)CH 3、視情況經取代之C 3-C 8環烷基、視情況經取代之C 3-C 8環烷基氧基、視情況經取代之C 6-C 14芳氧基、視情況經取代之C 6-C 14芳基、視情況經取代之5至10員雜環基、視情況經取代之5至10員雜芳基、視情況經取代之(5至10員雜芳基)氧基或視情況經取代之(4至10員雜環基)氧基，前提為R 7及R 8中不超過一者為視情況經取代之C 6-C 14芳氧基、視情況經取代之C 6-C 14芳基、視情況經取代之5至10員雜芳基、視情況經取代之(5至10員雜芳基)氧基或視情況經取代之(4至10員雜環基)氧基；或 R 7及R 8與各自附接的原子一起形成視情況經取代之5至6員雜環基、視情況經取代之5至10員雜芳基或視情況經取代之C 6-C 14芳基；或 R 5及A組合形成視情況經取代之C 1-C 2伸烷基；或 R 6及R 9組合形成(C 2-C 6伸烷基)(C 6-C 14伸芳基)(C 2-C 6伸烷基)，且R 5、R 7及R 8中之每一者為H。
  32. 如請求項31之化合物，其中X 3為CH或CF。
  33. 如請求項31之化合物，其中X 3為N。
  34. 如請求項31至33中任一項之化合物，其中R 7為視情況經取代之C 6-C 14芳基。
  35. 如請求項34之化合物，其中R 7為視情況經取代之苯基。
  36. 如請求項35之化合物，其中R 7為 、 、 、 或 。
  37. 如請求項31至33中任一項之化合物，其中R 7為視情況經取代之5至10員雜芳基。
  38. 如請求項37之化合物，其中R 7為 。
  39. 如請求項31至33中任一項之化合物，其中R 7為視情況經取代之C 3-C 8環烷基氧基。
  40. 如請求項39之化合物，其中R 7為 。
  41. 如請求項40之化合物，其中R 7為Br或Cl。
  42. 如請求項31至33中任一項之化合物，其中R 7為H。
  43. 如請求項31至42中任一項之化合物，其中R 8為H或鹵基。
  44. 如請求項43之化合物，其中R 8為視情況經取代之苯基。
  45. 如請求項44之化合物，其中R 8為 。
  46. 如請求項31至33中任一項之化合物，其中R 8為視情況經取代之苯氧基。
  47. 如請求項46之化合物，其中R 8為 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
  48. 如請求項31至33中任一項之化合物，其中R 8為(視情況經取代之5至10員雜芳基)氧基。
  49. 如請求項48之化合物，其中R 8為 、 、 、 或 。
  50. 如請求項31至33中任一項之化合物，其中R 8為視情況經取代之5至10員雜芳基。
  51. 如請求項50之化合物，其中R 8為 。
  52. 如請求項31至33中任一項之化合物，其中R 8為視情況經取代之C 1-C 6烷氧基。
  53. 如請求項52之化合物，其中R 8為 。
  54. 如請求項31至33中任一項之化合物，其中R 8為視情況經取代之5至10員雜環基。
  55. 如請求項54之化合物，其中R 8為 。
  56. 如請求項44至55中任一項之化合物，其中R 7為H或C 1-C 6烷基。
  57. 如請求項31至33中任一項之化合物，其中R 7及R 8與各自附接的原子一起形成視情況經取代之5至6員雜環基。
  58. 如請求項57之化合物，其中R 7及R 8與各自附接的原子一起形成 。
  59. 如請求項31至58中任一項之化合物，其中R 6為H、鹵基或視情況經取代之C 1-C 6烷基。
  60. 如請求項31至59中任一項之化合物，其中R 5為H、鹵基或視情況經取代之C 1-C 6烷氧基。
  61. 如請求項31至59中任一項之化合物，其中R 5及A組合形成–CH 2–。
  62. 如請求項30之化合物，其中該化合物為式(IV)之化合物： (IV)， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中 X 4為O；C(R h) 2，其中各R h獨立地為氫、鹵基或視情況經取代之C 1-C 6烷基，或兩個R h組合形成側氧基；S(O) 2或NR h； m選自0、1、2、3、4及5； n選自0、1、2、3及4；且 各R 10及R 11獨立地為鹵基、CN、視情況經取代之C 1-C 6烷基、視情況經取代之C 1-C 6烷氧基或視情況經取代之C 3-C 8環烷基。
  63. 如請求項62之化合物，其中X 4為O。
  64. 如請求項63之化合物，其中B為 、 、 、 、 、 、 或 。
  65. 如請求項62之化合物，其中X 4為C(O)。
  66. 如請求項65之化合物，其中B為 。
  67. 如請求項30之化合物，其中該化合物為式(V)之化合物： (V)， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中 X 4為O；C(R h) 2，其中各R h獨立地為氫、鹵基或視情況經取代之C 1-C 6烷基，或兩個R h組合形成側氧基；S(O) 2或NR h； m選自0、1、2、3、4及5； n選自0、1、2、3及4；且 各R 10及R 11獨立地為鹵基、CN、視情況經取代之C 1-C 6烷基、視情況經取代之C 1-C 6烷氧基或視情況經取代之C 3-C 8環烷基。
  68. 如請求項67之化合物，其中X 4為O。
  69. 如請求項68之化合物，其中B為 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
  70. 如請求項67之化合物，其中X 4為CH 2。
  71. 如請求項70之化合物，其中B為 。
  72. 如請求項67之化合物，其中X 4為NH。
  73. 如請求項72之化合物，其中B為 。
  74. 如請求項1至29中任一項之化合物，其中B為視情況經取代之C 3-C 14碳環基或視情況經取代之5至14員雜環基。
  75. 如請求項74之化合物，其中該化合物為式(VI)之化合物： (VI)， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中 X 5及X 6中之每一者獨立地為鍵；O；S；C(R i) 2，其中各R i獨立地為H、OH、鹵基、視情況經取代之C 1-C 6烷基或視情況經取代之C 1-C 6烷氧基，或兩個R i組合形成側氧基；NR j，其中R j為H或C 1-C 6烷基；或SO 2； X 7為CH、CR 13或N； X 8為CH、CR 12或N； o選自0、1、2及3； p選自0、1及2；且 各R 12及R 13獨立地為鹵基、視情況經取代之C 1-C 6烷基、視情況經取代之C 1-C 6烷氧基或視情況經取代之C 3-C 8環烷基。
  76. 如請求項74之化合物，其中該化合物為式(VII)之化合物： (VII)， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中 X 5及X 6中之每一者獨立地為鍵；O；S；C(R i) 2，其中各R i獨立地為H、OH、鹵基、視情況經取代之C 1-C 6烷基或視情況經取代之C 1-C 6烷氧基，或兩個R i組合形成側氧基；NR j，其中R j為H或C 1-C 6烷基；或SO 2； X 7為CH、CR 13或N； X 8為CH、CR 12或N； o選自0、1、2及3； p選自0、1及2；且 各R 12及R 13獨立地為鹵基、視情況經取代之C 1-C 6烷基、視情況經取代之C 1-C 6烷氧基或視情況經取代之C 3-C 8環烷基。
  77. 如請求項75或76之化合物，其中X 5為CF 2、CHCH 3、C(CH 3) 2或C(CH 3)(OH)。
  78. 如請求項75或76之化合物，其中X 5為鍵。
  79. 如請求項75或76之化合物，其中X 5為O。
  80. 如請求項75或76之化合物，其中X 5為S。
  81. 如請求項75或76之化合物，其中X 5為NH。
  82. 如請求項75至81中任一項之化合物，其中X 6為鍵。
  83. 如請求項75至81中任一項之化合物，其中X 6為O。
  84. 如請求項75至81中任一項之化合物，其中X 6為S。
  85. 如請求項75至81中任一項之化合物，其中X 6為CF 2、CHCH 3、C(CH 3) 2或C(CH 3)(OH)。
  86. 如請求項75至81中任一項之化合物，其中X 6為NH。
  87. 如請求項75至86中任一項之化合物，其中X 7為CH或N。
  88. 如請求項75至86中任一項之化合物，其中X 8為CH或N。
  89. 如請求項75之化合物，其中B為 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
  90. 如請求項76之化合物，其中B為 、 或 。
  91. 如請求項1至29中任一項之化合物，其中B為視情況經取代之5至10員雜芳基。
  92. 如請求項91之化合物，其中B為 、 、 、 、 、 、 、 或 。
  93. 如請求項1至92中任一項之化合物，其中X 1為C且X 2為C。
  94. 如請求項1至93中任一項之化合物，其中R 1及R 2與各自附接的原子一起組合形成環丙基。
  95. 如請求項1至93中任一項之化合物，其中R 1'及R 2'與各自附接的原子一起組合形成環丙基。
  96. 如請求項1至92中任一項之化合物，其中X 1為N且X 2為C。
  97. 如請求項93或96之化合物，其中R 1及R 2組合形成雙鍵。
  98. 如請求項93或96之化合物，其中R 2及R 2'與它們附接的原子一起形成 、 、螺環環丙基或螺環環戊基。
  99. 如請求項1至93、95及96中任一項之化合物，其中R 2為H。
  100. 如請求項1至93、95及96中任一項之化合物，其中R 2為視情況經取代之C 1-C 6烷基。
  101. 如請求項100之化合物，其中R 2為CH 3、CH 2F、CH 2OCH 3、CH 2O(CH 2) 4NH 2、CH 2O(CH 2) 4NHC(O)CH 3、CH 2O(CH 2) 5COOH、 、 或 。
  102. 如請求項1至93、95及96中任一項之化合物，其中R 2為視情況經取代之視情況經取代之5至10員雜芳基或視情況經取代之5至10員雜環。
  103. 如請求項102之化合物，其中R 2為 或 。
  104. 如請求項1至94、96、97及99至103中任一項之化合物，其中R 2’為H。
  105. 如請求項1至94、96、97及99至103中任一項之化合物，其中R 2’為F。
  106. 如請求項1至94、96、97及99至103中任一項之化合物，其中R 2’為視情況經取代之C 1-C 6烷基。
  107. 如請求項106之化合物，其中R 2’為CH 3、CF 3、CH 2OH、CH 2OCH 3、CH 2O(CH 2) 4NH 2、CH 2O(CH 2) 5COOH、 、 .、 、 或 。
  108. 如請求項1至94、96、97及99至103中任一項之化合物，其中R 2’為視情況經取代之視情況經取代之5至10員雜芳基或視情況經取代之5至10員雜環。
  109. 如請求項108之化合物，其中R 2’為 、 或 。
  110. 如請求項1至94、96、97及99至103中任一項之化合物，其中R 2’為視情況經取代之C 1-C 6烷氧基。
  111. 如請求項110之化合物，其中R 2’為OCH 3、OCHF 2或OCF 3。
  112. 如請求項1至94、96、97及99至103中任一項之化合物，其中R 2’為SO 2CH 3、SO 2CH(CH 3) 2或 。
  113. 如請求項1至92中任一項之化合物，其中X 1為C且X 2為Si。
  114. 如請求項146之化合物，其中R 2及R 2’各自為視情況經取代之C 1-C 6烷基。
  115. 如請求項1至92中任一項之化合物，其中X 1為C且X 2為S。
  116. 如請求項1至93、95、96及98至115中任一項之化合物，其中R 1為H。
  117. 如請求項1至93、95、96及98至115中任一項之化合物，其中R 1為CH 3。
  118. 如請求項1至95及96至117中任一項之化合物，其中R 1’為H。
  119. 如請求項1至118中任一項之化合物，其中R 3為H或羥基。
  120. 如請求項1至118中任一項之化合物，其中R 3’為H。
  121. 如請求項1至120中任一項之化合物，其中L為 。
  122. 如請求項121之化合物，其中R 4為H或CH 3。
  123. 如請求項1至122中任一項之化合物，其中L 1為鍵。
  124. 如請求項1至122中任一項之化合物，其中L 1為–CH 2–或–(CH 2) 3–。
  125. 如請求項1至124中任一項之化合物，其中L 2為鍵。
  126. 如請求項1至124中任一項之化合物，其中L 2為O。
  127. 如請求項1至60及62至126中任一項之化合物，其中A為H。
  128. 一種表1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
  129. 如請求項1至128中任一項之化合物，其具有補體C1酯酶(C1s)抑制活性。
  130. 一種醫藥組合物，其包含如請求項1至129中任一項之化合物或醫藥學上可接受之鹽以及醫藥學上可接受之賦形劑。
  131. 一種治療C1s介導之病症的方法，其包含向有需要之個體投與治療有效量的如請求項1至129中任一項之化合物或醫藥學上可接受之鹽。
  132. 如請求項131之方法，其中該個體為人類。
  133. 如請求項131或132之方法，其中該病症為急性抗體介導之排斥、肌萎縮性脊髓側索硬化症、自體免疫性水皰病、大皰性類天皰瘡、慢性發炎性脫髓鞘性多發性神經病變、地圖樣萎縮、格巴二氏症候群(Guillain-Barré Syndrome)、杭丁頓氏病(Huntington’s Disease)、免疫性血小板減少性紫癜、狼瘡性腎炎、多灶性運動神經病變、類風濕性關節炎、創傷性腦損傷及溫性自體免疫溶血性貧血。
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