[go: up one dir, main page]

TW202402269A - ＲＯＣＫ（Ｒｈｏ相關激酶）抑制劑及其用途 - Google Patents

ＲＯＣＫ（Ｒｈｏ相關激酶）抑制劑及其用途 Download PDF

Info

Publication number
TW202402269A
TW202402269A TW112112551A TW112112551A TW202402269A TW 202402269 A TW202402269 A TW 202402269A TW 112112551 A TW112112551 A TW 112112551A TW 112112551 A TW112112551 A TW 112112551A TW 202402269 A TW202402269 A TW 202402269A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
mmol
alkyl
compound
pharmaceutically acceptable
acceptable salt
Prior art date
Application number
TW112112551A
Other languages
English (en)
Inventor
王汝民
齊長河
漢忠 徐
慶北 曾
楊振帆
小林 張
Original Assignee
大陸商迪哲（江蘇）醫藥股份有限公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 大陸商迪哲（江蘇）醫藥股份有限公司 filed Critical 大陸商迪哲（江蘇）醫藥股份有限公司
Publication of TW202402269A publication Critical patent/TW202402269A/zh

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6558—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system
    • C07F9/65583—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system each of the hetero rings containing nitrogen as ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A61K31/4155—1,2-Diazoles non condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A61K31/416—1,2-Diazoles condensed with carbocyclic ring systems, e.g. indazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4178—1,3-Diazoles not condensed 1,3-diazoles and containing further heterocyclic rings, e.g. pilocarpine, nitrofurantoin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/454—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pimozide, domperidone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/472—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine
    • A61K31/4725—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/675—Phosphorus compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pyridoxal phosphate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/06—Antiglaucoma agents or miotics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

本文公開了用作ROCK抑制劑的式(I)的化合物及其藥學上可接受的鹽。還公開了包含式(I)的化合物的藥物組合物，以及使用這類化合物或組合物治療ROCK相關病症(例如，青光眼)的方法。

Description

ＲＯＣＫ（Ｒｈｏ相關激酶）抑制劑及其用途
本公開總體上涉及抑制Rho相關蛋白激酶(“ROCK”)的新型化合物及其藥學上可接受的鹽。本公開還涉及包含所述化合物作為活性成分的藥物組合物，以及所述化合物在治療包括青光眼在內的ROCK相關病症中的用途。
Rho相關蛋白激酶(ROCK)是絲胺酸-蘇胺酸蛋白激酶家族的一員。ROCK存在兩種亞型，即ROCK1和ROCK2。這兩種亞型都被Rho GTP酶的GTP結合形式啟動。ROCK在許多細胞過程中起重要作用，包括平滑肌細胞收縮、細胞增殖、黏附和遷移。ROCK活性的抑制已經證明了在廣泛的病理條件下的潛在治療適用性。 目前可獲得的ROCK抑制劑藥物包括來自旭化成(Asahi Kasei)的Eril(用於治療腦血管痙攣)、來自興和(Kowa)的Glanatec(用於治療高眼壓症和青光眼)和來自艾黎(Aerie)的Rhopressa(用於降低患有開角青光眼或高眼壓症的患者的升高的眼內壓(IOP))。 因此，需要抑制ROCK的新型化合物作為藥理學工具，並且所述新型化合物作為用於治療如青光眼等ROCK相關病症的藥物具有相當大的價值。
本文公開了能夠抑制ROCK的新型化合物。因此，本公開的化合物可用於治療ROCK相關疾病，例如青光眼。 在一方面，本公開提供了一種式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽： (I)， 其中 R 1和R 2各自獨立地選自由以下組成的群組：氫、羥基、鹵素、氰基、胺基、烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基和雜炔基，其中所述烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基和雜炔基各自任選地被獨立地選自以下的一個或多個基團取代：羥基、鹵素、氰基或胺基； X、W、Z和U各自獨立地是N或C(R 3)； R 3選自由以下組成的群組：氫、羥基、鹵素、氰基、胺基、烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基和雜炔基，其中所述烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基和雜炔基各自任選地被獨立地選自以下的一個或多個基團取代：羥基、鹵素、氰基或胺基； E是-N(R 4)C(=O)-、-C(=O)N(R 4)-、-N(R 4)SO 2-或-SO 2N(R 4)-； R 4選自由以下組成的群組：氫、烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基和雜炔基； Y是-Y 1-Y 2-(Y 3) n，其中 Y 1不存在或是-C(R 5) 2-， 每個R 5獨立地選自由以下組成的群組：氫、-N(R a) 2、烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基、雜炔基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基和-烷基-雜環基，其中所述烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基、雜炔基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基和-烷基-雜環基任選地被一個或多個R 6取代， 每個R 6獨立地選自由以下組成的群組：羥基、鹵素、氰基、胺基、烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基、雜炔基和-烷基-N(R a) 2； 每個R a獨立地選自氫或烷基； Y 2選自-(CH 2) p-環烷基-*、-(CH 2) p-雜環基-*、-(CH 2) p-芳基-*或-(CH 2) p-雜芳基-*，它們各自任選地被獨立地選自以下的一個或多個基團取代：羥基、鹵素、氰基、胺基、烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基或雜炔基，並且其中p是0、1或2，並且Y 2的*端與Y 3相連； Y 3不存在或是-Y 31-Y 32-Y 33；其中 Y 31選自不存在、烷基、烯基或炔基； Y 32選自不存在、-O-#、-OC(=O)-#、-C(=O)O-#、-P(=O)(R b)-#、-OC(=O)N(R b)-#、-N(R b)C(=O)-#或 -C(=O)N(R b)-#，其中每個R b獨立地選自氫或烷基，並且Y 32的#端與Y 33連接； Y 33選自由以下組成的群組：氫、羥基、氰基、鹵素、-N(R c) 2、烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基、雜炔基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，其中所述烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基、雜炔基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基任選地被一個或多個R 7取代，其中每個R 7獨立地選自鹵素、羥基、胺基、氰基、硝基氧基、烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基、雜炔基或鹵代烷基，並且每個R c獨立地選自氫或烷基；並且 n是1至5的整數。 在另一方面，本公開提供了一種藥物組合物，其包含本公開的化合物或其藥學上可接受的鹽和藥學上可接受的載體。 在又一方面，本公開提供了一種用於在有需要的受試者中抑制ROCK活性的方法，其包括向所述受試者施用有效量的本公開的化合物或其藥學上可接受的鹽或本公開的藥物組合物。 在又一方面，本公開提供了一種用於治療ROCK相關病症的方法，其包括向有需要的受試者施用有效量的本公開的化合物或其藥學上可接受的鹽或本公開的藥物組合物。 在另一方面，本公開提供了一種本公開的化合物或其藥學上可接受的鹽或本公開的藥物組合物在製造用於治療ROCK相關病症的藥劑中的用途。 在另一方面，本公開提供了一種本公開的化合物或其藥學上可接受的鹽或本公開的藥物組合物，用於治療ROCK相關病症。
現將詳細參考本公開的某些實施方式，其實例在附隨結構和式中得以說明。雖然將結合所列舉的實施方式描述本公開，但應理解其並不旨在將本公開限於那些實施方式。相反，本公開旨在涵蓋所有替代方案、修改和等效物，所述替代方案、修改和等效物可以包括在如請求項所限定的本公開的範圍內。本領域技術人員將認識到與本文所描述的那些方法和材料類似或等效的許多方法和材料，所述方法和材料可以用於實踐本公開。本公開決不限於所描述的方法和材料。在所併入的參考文獻和類似材料中的一個或多個(包括但不限於所定義的術語、術語用法、所描述的技術等)與本申請不同或相矛盾的情況下，以本公開為准。本公開中所引用的所有參考文獻、專利、專利申請均由此通過引用整體併入。 應瞭解，為清楚起見而在單個實施方式的上下文中所描述的本公開的某些特徵也可以組合提供於單個實施方式中。相反，為簡潔起見而在單個實施方式的上下文中所描述的本公開的各種特徵也可以單獨提供或以任何合適的子組合提供。必須指出，除非上下文另外明確規定，否則如說明書和所附權利要求書中所用，單數形式“一(a/an)”和“所述(the)”包括其複數形式。因此，舉例來說，提及“一種化合物”包括多種化合物。 定義下文更詳細描述特定官能團和化學術語的定義。出於本公開的目的，化學元素根據《化學和物理手冊(Handbook of Chemistry and Physics)》第75版內封的CAS版本元素週期表來標識，並且特定官能團通常如其中所述定義。此外，有機化學的一般原理以及特定功能部分和反應性描述於《有機化學(Organic Chemistry)》, Thomas Sorrell, 大學科學書籍(University Science Books), 索薩利托, 1999；Smith和March 《馬奇高級有機化學(March's Advanced Organic Chemistry)》, 第5版, 約翰威利父子公司(John Wiley & Sons, Inc.), 紐約, 2001；Larock, 《有機官能團轉換(Comprehensive Organic Transformations)》, VCH出版公司(VCH Publishers, Inc.), 紐約, 1989；Carruthers, 《當代有機合成方法(Some Modern Methods of Organic Synthesis)》, 第3版, 劍橋大學出版社(Cambridge University Press), 劍橋, 1987中；其中每一個的全部內容通過引用併入本文。 在本公開的多處，描述了連接取代基。在結構明確需要連接基團的情況下，關於所述基團所列的馬庫什變數(markush variable)應理解為連接基團。舉例來說，如果結構需要連接基團且所述變數的馬庫什組定義列舉“烷基”，那麼應理解，所述“烷基”表示連接亞烷基。 當任何變數(例如，R i)在化合物的任何成分或式中出現超過一次時，其在每次出現時的定義獨立於其在其它每次出現時的定義。因此，舉例來說，如果基團顯示為被0-2個R i部分取代，那麼所述基團可以任選地被至多兩個R i部分取代，並且R i在每次出現時獨立地選自R i的定義。而且，取代基和/或變數的組合是允許的，但僅在此類組合產生穩定化合物時才允許。 如本文所用，為方便起見，在化學基團的前端或末端使用破折號“-”來指示取代基的連接點。舉例來說，-OH是通過氧原子連接的；化學基團可以用或不用一個或多個破折號來描述，而不會失去它們的普通含義。通過結構中的線繪製的波浪線指示基團的連接點。除非化學或結構需要，否則方向性不由化學基團所書寫或命名的順序所指示或暗示。如本文所用，從環中心出來的實線指示環上的取代基的連接點可以在任何環原子處。當列出取代基而未指示此取代基鍵合至給定式的化合物的其餘部分所經由的原子時，那麼此取代基可以經由此式中的任何原子鍵合。取代基和/或變數的組合是允許的，但僅在此類組合產生穩定化合物時才允許。 除非本文另外指示，否則對值的範圍的敘述僅旨在用作單獨地提及落入所述範圍內的每個單獨值的速記方法，並且每個單獨值併入說明書中，如同所述單獨值在本文中單獨地敘述一樣。除非另有說明，否則本文所用的範圍包括所述範圍的兩個極限。舉例來說，表達“n是1和6之間的整數”和“n是1至6的整數”都意指“n是1、2、3、4、5或6”。 如本文所用，術語“本文提供的化合物”或“本文公開的化合物”或“本公開的化合物”是指式(I)的化合物以及本文公開的具體化合物。 如本文所用，術語“C i-j”指示碳原子數的範圍，其中i和j是整數，並且碳原子數的範圍包括端點(即，i和j)和其間的每個整數點，並且其中j大於i。舉例來說，C 1-6指示一至六個碳原子的範圍，包括一個碳原子、兩個碳原子、三個碳原子、四個碳原子、五個碳原子和六個碳原子。在一些實施方式中，術語“C 1-12”指示1至12，尤其為1至10，尤其為1至8，尤其為1至6，尤其為1至5，尤其為1至4，尤其為1至3或尤其為1至2個碳原子。 不論作為另一術語的一部分還是獨立地使用，如本文所用，術語“烷基”均是指飽和的直鏈或支鏈烴自由基，其可以任選地獨立地被下文所述的一個或多個取代基取代。術語“C i-j烷基”是指具有i至j個碳原子的烷基。在一些實施方式中，烷基含有1至10個碳原子。在一些實施方式中，烷基含有1至9個碳原子。在一些實施方式中，烷基含有1至8個碳原子、1至7個碳原子、1至6個碳原子、1至5個碳原子、1至4個碳原子、1至3個碳原子或1至2個碳原子。“C 1-10烷基”的實例包括但不限於甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基和癸基。“C 1-6烷基”的實例是甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、二級丁基、三級丁基、正戊基、2-戊基、3-戊基、2-甲基-2-丁基、3-甲基-2-丁基、3-甲基-1-丁基、2-甲基-1-丁基、1-己基、2-己基、3-己基、2-甲基-2-戊基、3-甲基-2-戊基、4甲基-2-戊基、3-甲基-3-戊基、2-甲基-3-戊基、2,3-二甲基-2-丁基、3,3-二甲基-2-丁基等。 不論作為另一術語的一部分還是獨立地使用，如本文所用，術語“烯基”均是指具有至少一個碳-碳雙鍵的直鏈或支鏈烴自由基，其可以任選地獨立地被本文所述的一個或多個取代基取代，並且包括具有“順”和“反”取向，或可替代地具有“E”和“Z”取向的自由基。在一些實施方式中，烯基含有2至12個碳原子。在一些實施方式中，烯基含有2至11個碳原子。在一些實施方式中，烯基含有2至11個碳原子、2至10個碳原子、2至9個碳原子、2至8個碳原子、2至7個碳原子、2至6個碳原子、2至5個碳原子、2至4個碳原子、2至3個碳原子，並且在一些實施方式中，烯基含有2個碳原子。烯基的實例包括但不限於乙烯基(ethylenyl/vinyl)、丙烯基(烯丙基)、丁烯基、戊烯基、1-甲基-2丁-1-基、5-己烯基等。 不論作為另一術語的一部分還是獨立地使用，如本文所用，術語“炔基”均是指具有至少一個碳-碳三鍵的直鏈或支鏈烴自由基，其以可任選地獨立地被本文所述的一個或多個取代基取代。在一些實施方式中，烯基含有2至12個碳原子。在一些實施方式中，炔基含有2至11個碳原子。在一些實施方式中，炔基含有2至11個碳原子、2至10個碳原子、2至9個碳原子、2至8個碳原子、2至7個碳原子、2至6個碳原子、2至5個碳原子、2至4個碳原子、2至3個碳原子，並且在一些實施方式中，炔基含有2個碳原子。炔基的實例包括但不限於乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基等。 如本文所用，術語“胺基”是指-NH 2基團。胺基還可以被一個或多個基團取代，所述基團如烷基、芳基、羰基或其它胺基。 不論作為另一術語的一部分還是獨立地使用，如本文所用，術語“芳基”均是指具有總共5至20個環成員的單環和多環環系統，其中所述系統中的至少一個環是芳香族的，並且其中所述系統中的每個環含有3至12個環成員。“芳基”的實例包括但不限於苯基、聯苯、萘基、蒽基等，其可以帶有一個或多個取代基。如本文所用，其中芳環與一個或多個另外的環稠合的基團也包括在術語“芳基”的範圍內。在多環環系統的情況下，僅需要一個環是芳香族的(例如，2,3-二氫吲哚)，不過所有環均可以是芳香族的(例如，喹啉)。第二環也可以是稠合的或橋接的。多環芳基的實例包括但不限於苯並呋喃基、茚滿基、鄰苯二甲醯亞胺基、萘醯亞胺基、啡啶基或四氫萘基等。芳基可以在一個或多個環位置處被如上文所述的取代基取代。 如本文所用，術語“氰基”是指-CN。 不論作為另一術語的一部分還是獨立地使用，如本文所用，術語“環烷基”均是指單價非芳香族、飽和或部分不飽和的單環和多環環系統，其中所有環原子均是碳，並且所述環系統含有至少三個成環碳原子。在一些實施方式中，環烷基可含有3至12個成環碳原子、3至10個成環碳原子、3至9個成環碳原子、3至8個成環碳原子、3至7個成環碳原子、3至6個成環碳原子、3至5個成環碳原子、4至12個成環碳原子、4至10個成環碳原子、4至9個成環碳原子、4至8個成環碳原子、4至7個成環碳原子、4至6個成環碳原子、4至5個成環碳原子。環烷基可以是飽和或部分不飽和的。環烷基可以被取代。在一些實施方式中，環烷基可以是飽和的環狀烷基。在一些實施方式中，環烷基可以是在其環系統中含有至少一個雙鍵或三鍵的部分不飽和的環狀烷基。在一些實施方式中，環烷基可以是單環或多環的。稠合、螺和橋接環系統也包括在本定義的範圍內。單環環烷基的實例包括但不限於環丙基、環丁基、環戊基、1-環戊-1-烯基、1-環戊-2-烯基、1-環戊-3-烯基、環己基、1-環己-1-烯基、1-環己-2-烯基、1-環己-3-烯基、環己二烯基、環庚基、環辛基、環壬基、環癸基、環十一烷基和環十二烷基。多環環烷基的實例包括但不限於金剛烷基、降冰片烷基、芴基、螺-戊二烯基、螺[3.6]-癸基、雙環[1,1,1]戊烯基、雙環[2,2,1]庚烯基等。 如本文所用，術語“鹵素”是指選自氟(fluorine/fluoro)、氯(chlorine/chloro)、溴(bromine/bromo)和碘(iodine/iodo)的原子。 如本文所用，術語“雜原子”是指氮、氧或硫，並且包括氮或硫的任何氧化形式，以及鹼性氮(包括N-氧化物)的任何季銨化形式。 如本文所用，術語“雜烷基”是指其中至少一個碳原子被選自N、O或S的雜原子替換的烷基。雜烷基可以是碳自由基或雜原子自由基(即，雜原子可以出現在自由基的中間或末端處)，並且可以任選地獨立地被本文中所述的一個或多個取代基取代。術語“雜烷基”涵蓋烷氧基和雜烷氧基自由基。 如本文所用，術語“雜烯基”是指其中至少一個碳原子被選自N、O或S的雜原子替換的烯基。雜烯基可以是碳自由基或雜原子自由基(即，雜原子可以出現在自由基的中間或末端處)，並且可以任選地獨立地被本文所述的一個或多個取代基取代。 如本文所用，術語“雜炔基”是指其中至少一個碳原子被選自N、O或S的雜原子替換的炔基。雜炔基可以是碳自由基或雜原子自由基(即，雜原子可以出現在自由基的中間或末端處)，並且可以任選地獨立地被本文所述的一個或多個取代基取代。 不論作為另一術語的一部分還是獨立地使用，如本文所用，術語“雜芳基”均是指除碳原子之外還具有一個或多個雜原子的芳基。雜芳基可以是單環的。單環雜芳基的實例包括但不限於噻吩基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、噁唑基、異噁唑基、噁二唑基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吲哚嗪基、嘌呤基、萘啶基、苯並呋喃基和蝶啶基。雜芳基還包括其中雜芳環與一個或多個芳基、環脂肪族環或雜環基環稠合的多環基團，其中連接自由基或連接點位於雜芳環上。多環雜芳基的實例包括但不限於吲哚基、異吲哚基、苯並噻吩基、苯並呋喃基、苯並[1,3]二氧雜環戊烯基、二苯並呋喃基、吲唑基、苯並咪唑基、苯並噻唑基、喹啉基、異喹啉基、二氫喹啉基、二氫異喹啉基、四氫喹啉基、四氫異喹啉基、噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、4H-喹嗪基、哢唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基、四氫喹啉基、四氫異喹啉基等。 如本文所用，術語“雜環基”是指其中一個或多個環原子是獨立地選自氧、硫、氮、磷等的雜原子而其餘環原子是碳的飽和或部分不飽和的碳環基，其中一個或多個環原子可以任選地獨立地被一個或多個取代基取代。在一些實施方式中，雜環基是飽和雜環基。在一些實施方式中，雜環基是在其環系統中具有一個或多個雙鍵的部分不飽和的雜環基。在一些實施方式中，雜環基可以含有碳、氮或硫的任何氧化形式和鹼性氮的任何季銨化形式。“雜環基”還包括其中雜環基自由基與飽和、部分不飽和或完全不飽和(即，芳香族)的碳環或雜環稠合的自由基。在可能的情況下，雜環基自由基可以是碳連接的或氮連接的。在一些實施方式中，雜環是碳連接的。在一些實施方式中，雜環是氮連接的。舉例來說，衍生自吡咯的基團可以是吡咯-1-基(氮連接)或吡咯-3-基(碳連接)。此外，衍生自咪唑的基團可以是咪唑-1-基(氮連接)或咪唑-3-基(碳連接)。 在一些實施方式中，術語“3至12元雜環基”是指具有獨立地選自氮、氧或硫的1至3個雜原子的3至12元飽和或部分不飽和的單環或多環雜環環系統。稠合、螺和橋接環系統也包括在本定義的範圍內。單環雜環基的實例包括但不限於氧雜環丁烷基、1,1-二氧代硫雜環丁基吡咯烷基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、三唑基、噁唑基、噻唑基、呱啶基(piperidyl)、呱嗪基、呱啶基(piperidinyl)、嗎啉基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、三嗪基、吡啶酮基、嘧啶酮基、吡嗪酮基、嘧啶酮基、噠嗪酮基、吡咯烷基、三嗪酮基等。稠合雜環基的實例包括但不限於苯基稠環或吡啶基稠環，如喹啉基、異喹啉基、四氫喹啉基、四氫異喹啉基、喹喔啉基、喹嗪基、喹唑啉基、氮雜吲哚嗪基、蝶啶基、色烯基、異色烯基、吲哚基、異吲哚基、吲哚嗪基、吲唑基、嘌呤基、苯並呋喃基、異苯並呋喃基、苯並咪唑基、苯並噻吩基、苯並噻唑基、哢唑基、吩嗪基、吩噻嗪基、菲啶基、六氫-1H-吡咯嗪基、咪唑並[1,2-a]吡啶基、[1,2,4]三唑並[4,3-a]吡啶基、[1,2,3]三唑並[4,3-a]吡啶基等。螺雜環基的實例包括但不限於螺吡喃基、螺噁嗪基等。橋接雜環基的實例包括但不限於嗎啡烷基(morphanyl)、六亞甲基四胺基、3-氮雜-雙環[3.1.0]己烷、8-氮雜-雙環[3.2.1]辛烷、1-氮雜-雙環[2.2.2]辛烷、1,4-二氮雜雙環[2.2.2]辛烷(DABCO)等。 如本文所用，術語“羥基(hydroxyl/hydroxy)”是指-OH。 如本文所用，術語“部分不飽和的”是指包括至少一個雙鍵或三鍵的自由基。術語“部分不飽和的”旨在涵蓋具有多個不飽和位點的環，但並不旨在包括芳香族(即，完全不飽和的)部分。 如本文所用，術語“任選的”或“任選地”意指隨後描述的事件或情況可能發生或不發生，並且所述描述包括所述事件或情況發生的例子和所述事件或情況不發生的例子。如本文所用，不論前面是否有術語“任選地”，術語“經取代的”意指指定部分的一個或多個氫被合適的取代基替換。應理解，“取代”或“被…取代”包括以下隱含的限制條件：此取代與被取代的原子的容許價態一致，並且取代產生穩定或化學上可行的化合物，例如不會通過重排、環化、消除等而自發地進行轉化的化合物。除非另外指示，否則“任選地經取代的”基團可以在基團的每個可取代位置處具有合適的取代基，並且當任何給定結構中的一個以上位置可以被選自規定基團的一個以上取代基取代時，取代基在每一位置處可以是相同或不同的。取代基可以包括但不限於烷基、烯基、炔基、烷氧基、醯基、胺基、醯胺基、脒基、芳基、疊氮基、胺基甲醯基、羧基、羧基酯、氰基、胍基、鹵基、鹵代烷基、雜烷基、雜芳基、雜環基、羥基、肼基、亞胺基、氧基、硝基、烷基亞磺醯基、磺酸、烷基磺醯基、硫氰酸根、硫醇、硫酮或其組合。本領域技術人員應理解，如果合適的話，取代基本身可以是經取代的。除非具體陳述為“未經取代的”，否則提及本文中的化學部分應理解為包括經取代的變體。舉例來說，提及“芳基”基團或部分隱含地包括經取代和未經取代的變體兩者。 如本文所用，不論前面是否有術語“任選地”，術語“經取代的”意指指定部分的一個或多個氫被合適的取代基置換。應理解，“取代”或“被…取代”包括以下隱含的限制條件：此取代與被取代的原子的容許價態一致，並且取代產生穩定或化學上可行的化合物，例如不會通過重排、環化、消除等而自發地進行轉化的化合物。除非另外指示，否則“任選地經取代的”基團可以在基團的每個可取代位置處具有合適的取代基，並且當任何給定結構中的一個以上位置可以被選自規定基團的一個以上取代基取代時，取代基在每一位置處可以是相同或不同的。本領域技術人員應理解，如果合適的話，取代基本身可以是經取代的。除非具體陳述為“未經取代的”，否則提及本文中的化學部分應理解為包括經取代的變體。舉例來說，提及“芳基”基團或部分隱含地包括經取代和未經取代的變體兩者。 符號“R”和“S”表示手性碳原子周圍的取代基的構型。如本文所述的異構描述符“R”和“S”用於指示相對於核心分子的原子構型，並且旨在如文獻(《IUPAC建議1996(IUPAC Recommendations 1996)》, 《純粹與應用化學(Pure and Applied Chemistry)》, 68:2193-2222 (1996))中所定義的那樣使用。 化合物在一方面，本公開提供了式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽： (I)， 其中 R 1和R 2各自獨立地選自由以下組成的群組：氫、羥基、鹵素、氰基、胺基、烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基和雜炔基，其中所述烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基和雜炔基各自任選地被獨立地選自以下的一個或多個基團取代：羥基、鹵素、氰基或胺基； X、W、Z和U各自獨立地是N或C(R 3)； R 3選自由以下組成的群組：氫、羥基、鹵素、氰基、胺基、烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基和雜炔基，其中所述烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基和雜炔基各自任選地被獨立地選自以下的一個或多個基團取代：羥基、鹵素、氰基或胺基； E是-N(R 4)C(=O)-、-C(=O)N(R 4)-、-N(R 4)SO 2-或 -SO 2N(R 4)-； R 4選自由以下組成的群組：氫、烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基和雜炔基； Y是-Y 1-Y 2-(Y 3) n，其中 Y 1不存在或是-C(R 5) 2-， 每個R 5獨立地選自由以下組成的群組：氫、-N(R a) 2、烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基、雜炔基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基和-烷基-雜環基，其中所述烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基、雜炔基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基和-烷基-雜環基任選地被一個或多個R 6取代， 每個R 6獨立地選自由以下組成的群組：羥基、鹵素、氰基、胺基、烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基、雜炔基和-烷基-N(R a) 2； 每個R a獨立地選自氫或烷基； Y 2選自-(CH 2) p-環烷基-*、-(CH 2) p-雜環基-*、-(CH 2) p-芳基-*或-(CH 2) p-雜芳基-*，它們各自任選地被獨立地選自以下的一個或多個基團取代：羥基、鹵素、氰基、胺基、烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基或雜炔基，並且其中p是0、1或2，並且Y 2的*端與Y 3相連； Y 3不存在或是-Y 31-Y 32-Y 33；其中 Y 31選自不存在、烷基、烯基或炔基； Y 32選自不存在、-O-#、-OC(=O)-#、-C(=O)O-#、-P(=O)(R b)-#、-OC(=O)N(R b)-#、-N(R b)C(=O)-#或 -C(=O)N(R b)-#，其中每個R b獨立地選自氫或烷基，並且Y 32的#端與Y 33連接； Y 33選自由以下組成的群組：氫、羥基、氰基、鹵素、-N(R c) 2、烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基、雜炔基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，其中所述烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基、雜炔基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基任選地被一個或多個R 7取代，其中每個R 7獨立地選自鹵素、羥基、胺基、氰基、硝基氧基、烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基、雜炔基或鹵代烷基，並且每個R c獨立地選自氫或烷基；並且 n是1至5的整數。 在一些實施方式中，R 1和R 2各自獨立地是氫、鹵素、氫、氰基、胺基或任選地被一個或多個鹵素取代的烷基。 在一些實施方式中，R 1是氫或烷基，並且R 2是氫、鹵素或烷基。在某些實施方式中，R 1是氫或C 1-6烷基，並且R 2是氫、鹵素或C 1-6烷基。 在一些實施方式中，R 1和R 2都是氫。 在一些實施方式中，R 1和R 2都是烷基。在某些實施方式中，R 1是C 1-6烷基、C 1-5烷基、C 1-4烷基、C 1-3烷基或C 1-2烷基，並且R 2是C 1-6烷基、C 1-5烷基、C 1-4烷基、C 1-3烷基或C 1-2烷基。在某些實施例中，R 1是甲基，並且R 2是甲基。 在一些實施方式中，R 1是氫，並且R 2是鹵素。在某些實施方式中，R 1是氫，並且R 2是氟。 在一些實施方式中，R 1是氫，並且R 2是烷基。在某些實施方式中，R 1是氫，並且R 2是C 1-6烷基、C 1-5烷基、C 1-4烷基、C 1-3烷基或C 1-2烷基。在某些實施方式中，R 1是氫，並且R 2是甲基。 在一些實施方式中，X、W、U和Z是C(R 3)。在某些實施方式中，W、U和Z是C(R 3)，並且R 3是氫。 在一些實施方式中，X和U是C(R 3)，並且W和Z是N。在某些實施方式中，X和U是C(R 3)，其中R 3是氫，並且W和Z是N。 在一些實施方式中，E是-N(R 4)C(=O)-或-C(=O)N(R 4)-。在某些實施方式中，E是-N(R 4)C(=O)-或-C(=O)N(R 4)-，並且R 4是氫。 在一些實施方式中，Y 1不存在。 在一些實施方式中，Y 1是-C(R 5) 2-。 在某些實施方式中，Y 1是-C(R 5) 2-，一個R 5是氫，另一個R 5選自-N(R a) 2、烷基、環烷基、雜環基和-烷基-雜環基，其中所述烷基、環烷基、雜環基和-烷基-雜環基任選地被一個或多個R 6取代。 在某些實施方式中，Y 1是-C(R 5) 2-，一個R 5是氫，另一個R 5選自-N(R a) 2、C 1-6烷基、C 3-12環烷基、5至12元雜環基或-(C 1-6烷基)-(5至12元雜環基)，其中所述C 1-6烷基、C 3-12環烷基、5至12元雜環基和-(C 1-6烷基)-(5至12元雜環基)任選地被一個或多個R 6取代。 在某些實施方式中，Y 1是-C(R 5) 2-，一個R 5是烷基，另一個R 5選自-N(R a) 2、烷基、環烷基或雜環基，其中所述烷基、環烷基和雜環基任選地被一個或多個R 6取代。 在某些實施方式中，Y 1是-C(R 5) 2-，一個R 5是C 1-6烷基，另一個R 5選自-N(R a) 2、C 1-6烷基、C 3-12環烷基或5至12元雜環基，其中所述C 1-6烷基、C 3-12環烷基或5至12元雜環基任選地被一個或多個R 6取代。 在一些實施方式中，R 6選自胺基、烷基或-烷基-N(R a) 2。在某些實施方式中，R 6選自胺基、C 1-6烷基或-(C 1-6烷基)-N(R a) 2。 在一些實施方式中，Y 1選自由以下組成的群組： 、 、 、 、 、 、 、 和 。 在一些實施方式中，Y 2是-(CH 2) p-環烷基-*。 在某些實施方式中，Y 2是-(CH 2) p-(C 3-10環烷基)-*，並且p是0或1。 在某些實施方式中，Y 2是環戊基或環己基。 在某些實施方式中，Y 2是-(CH 2) p-雜環基-*。 在某些實施方式中，Y 2是-(CH 2) p-(5至12元雜環基)-*，並且p是0或1。 在某些實施方式中，Y 2是四氫呋喃基、吡咯烷基或四氫吡喃基。 在一些實施方式中，Y 2是-(CH 2) p-芳基-*。 在某些實施方式中，Y 2是-(CH 2) p-(C 5-12芳基)-*，並且p是0或1。 在某些實施方式中，Y 2是苯基或-CH 2-苯基-*。 在一些實施方式中，Y 2是-(CH 2) p-雜芳基-*。 在某些實施方式中，Y 2是-(CH 2) p-(5至12元雜芳基)-*，並且p是0或1。 在某些實施方式中，Y 2是吡啶基、四氫異喹啉基、-CH 2-咪唑基-*或-CH 2-吲哚基-*。 在一些實施方式中，Y 31不存在或是烷基。在某些實施方式中，Y 31不存在或是C 1-6烷基、C 1-5烷基、C 1-4烷基、C 1-3烷基或C 1-2烷基。 在一些實施方式中，Y 31不存在，並且Y 32選自不存在、-O-#、-C(=O)O-#、-P(=O)(R b)-#、-N(R b)C(=O)-#或-C(=O)N(R b)-#。 在一些實施方式中，Y 31不存在，Y 32選自不存在、-O-#、-C(=O)O-#、-P(=O)(R b)-#、-N(R b)C(=O)-#或-C(=O)N(R b)-#，並且Y 33選自-N(R c) 2、烷基或芳基，其中所述烷基和芳基任選地被一個或多個R 7取代。 在一些實施方式中，Y 31不存在，Y 32選自不存在、-O-#、-C(=O)O-#、-P(=O)(R b)-#、-N(R b)C(=O)-#或-C(=O)N(R b)-#，並且Y 33選自-N(R c) 2、C 1-6烷基或C 5-12芳基，其中所述C 1-6烷基和C 5-12芳基任選地被一個或多個R 7取代。 在某些實施方式中，Y 31不存在，Y 32選自不存在、-O-#、-C(=O)O-#、-P(=O)(R b)-#、-N(R b)C(=O)-#或-C(=O)N(R b)-#，並且Y 33選自-N(R c) 2、C 1-6烷基或C 5-12芳基，其中所述C 1-6烷基和C 5-12芳基任選地被獨立地選自以下的一個或多個R 7取代：鹵素、羥基、胺基、氰基、硝基氧基或烷基。 在某些實施方式中，Y 31不存在，Y 32選自不存在、-O-#、-C(=O)O-#、-P(=O)(R b)-#、-N(R b)C(=O)-#或-C(=O)N(R b)-#，並且Y 33選自氫、羥基、氰基、鹵素、-NH 2、甲基、-CH 2CH 2OCH 3。 在一些實施方式中，Y 31是烷基，並且Y 32選自不存在、-O-#、-OC(=O)-#、-OC(=O)N(R b)-#或-N(R b)C(=O)-#。 在一些實施方式中，Y 31是C 1-6烷基、C 1-5烷基、C 1-4烷基、C 1-3烷基或C 1-2烷基，並且Y 32選自不存在、-O-#、-OC(=O)-#、-OC(=O)N(R b)-#或-N(R b)C(=O)-#。 在一些實施方式中，Y 31是C 1-6烷基、C 1-5烷基、C 1-4烷基、C 1-3烷基或C 1-2烷基，Y 32選自不存在、-O-#、-OC(=O)-#、-OC(=O)N(R b)-#或-N(R b)C(=O)-#，並且Y 33選自-N(R c) 2、烷基或芳基，其中所述烷基和芳基任選地被一個或多個R 7取代。 在一些實施方式中，Y 31是C 1-6烷基、C 1-5烷基、C 1-4烷基、C 1-3烷基或C 1-2烷基，Y 32選自不存在、-O-#、-OC(=O)-#、-OC(=O)N(R b)-#或-N(R b)C(=O)-#，並且Y 33選自-NH 2、-N(CH 3) 2、甲基、二甲基苯基或硝基氧基戊基，其中所述烷基和芳基任選地被一個或多個R 7取代。 在某些實施方式中，Y 31是C 1-6烷基、C 1-5烷基、C 1-4烷基、C 1-3烷基或C 1-2烷基，Y 32選自不存在、-O-#、-OC(=O)-#、-OC(=O)N(R b)-#或-N(R b)C(=O)-#，並且Y 33選自-NH 2、-N(CH 3) 2、甲基、二甲基苯基或硝基氧基戊基。 在一些實施方式中，n是1或2。 示例性的式(I)的化合物陳述於以下表1中。 表1. 示例性的式(I)的化合物
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 、 、
、 和 。
本文提供的化合物參考通式和具體化合物來進行描述。此外，本公開的化合物可以以許多不同的形式或衍生物存在，包括但不限於前藥、活性代謝衍生物(活性代謝物)、溶劑化物、藥學上可接受的鹽或同位素衍生物，所有這些都在本公開的範圍內。 如本文所用，術語“前藥”是指當在生理條件下代謝時或當通過溶劑分解轉化時產生所需活性化合物的化合物或其藥學上可接受的鹽。前藥包括但不限於活性化合物的酯、醯胺、胺基甲酸酯、碳酸酯、醯脲、溶劑合物或水合物。典型地，前藥無活性或活性小於活性化合物，但可以提供有利的處理、施用和/或代謝特性中的一者或多者。舉例來說，一些前藥是活性化合物的酯；在代謝分解(metabolysis)的過程中，酯基裂解以產生活性藥物。此外，一些前藥被酶活化以產生活性化合物，或產生在進一步化學反應後產生活性化合物的化合物。前藥可以在單個步驟中由前藥形式發展為活性形式，或可以具有本身可以具有活性或可以無活性的一種或多種中間形式。前藥的製備和使用在T. Higuchi和V. Stella, “作為新型遞送系統的前藥(Pro-drugs as Novel Delivery Systems)”, 《A.C.S.研討會文集(A.C.S. Symposium Series)》第14卷, 《藥物設計中的生物可逆載體(Bioreversible Carriers in Drug Design)》, Edward B. Roche編, 美國藥學協會和培格曼出版社(American Pharmaceutical Association and Pergamon Press), 1987; 《Prodrugs: Challenges and Rewards (Prodrugs: Challenges and Rewards)》, V. Stella、R. Borchardt、M. Hageman、R. Oliyai、H. Maag、J. Tilley編, 施普林格出版社紐約公司(Springer-Verlag New York), 2007有所討論，所有這些文獻均由此通過引用整體併入。 如本文所用，術語“代謝物”，例如活性代謝物，與如上文所述的前藥重疊。因此，此類代謝物是藥理學活性化合物或進一步代謝為藥理學活性化合物的化合物，所述藥理學活性化合物是由受試者身體內的代謝過程產生的衍生物。舉例來說，此類代謝物可以由使所施用的化合物或鹽或前藥的氧化、還原、水解、醯胺化、脫醯胺化、酯化、脫酯化、酶裂解等產生。其中活性代謝物是此類藥理學活性衍生化合物。對於前藥，前藥化合物一般無活性或活性比代謝產物低。對於活性代謝物，母體化合物可以是活性化合物或可以是無活性前藥。 前藥和活性代謝物可以使用本領域中已知的常規技術確認。參見例如Bertolini等人, 1997, 《藥物化學雜誌(J Med Chem)》 40:2011-2016；Shan等人, 《藥學雜誌(J Pharm Sci)》 86:756-757；Bagshawe, 1995, 《藥物開發研究(DrugDev Res)》 34:220-230；Wermuth, 同上。 如本文所用，術語“藥學上可接受的”指示所述物質或組合物在化學和/或毒理學上與構成調配物的其它成分和/或用其治療的受試者相容。 如本文所用，除非另外指示，否則術語“藥學上可接受的鹽”包括保留指定化合物的游離酸和鹼的生物有效性並且在生物學上或其它方面並非不合需要的鹽。所考慮的藥學上可接受的鹽形式包括但不限於單鹽、雙鹽、三鹽、四鹽等。藥學上可接受的鹽在其所施用的量和濃度下是無毒的。此類鹽的製備可以通過改變化合物的物理特性而不妨礙其發揮其生理作用來促進藥理學使用。物理性質的有用改變包括降低熔點以促進透黏膜施用和增加溶解度以促進施用更高濃度的藥物。 藥學上可接受的鹽包括酸加成鹽，如含有硫酸鹽、氯化物、鹽酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、磷酸鹽、胺基磺酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、環己基胺基磺酸鹽和奎尼酸鹽的那些。藥學上可接受的鹽可以由如以下的酸獲得：鹽酸、馬來酸、硫酸、磷酸、胺基磺酸、乙酸、檸檬酸、乳酸、酒石酸、丙二酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、對甲苯磺酸、環己基胺基磺酸、富馬酸和奎尼酸。 當存在如羧酸或苯酚等酸性官能團時，藥學上可接受的鹽還包括鹼加成鹽，如含有苄星(benzathine)、氯普魯卡因、膽鹼、二乙醇胺、乙醇胺、三級丁胺、乙二胺、葡甲胺、普魯卡因、鋁、鈣、鋰、鎂、鉀、鈉、銨、烷基胺和鋅的那些。例如，參見《雷明頓製藥科學(Remington's Pharmaceutical Sciences)》, 第19版, 馬克出版公司(Mack Publishing Co.), 伊斯頓, 賓夕法尼亞州, 第2卷, 第1457頁, 1995; “藥用鹽手冊：性質、選擇和用途(Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use)” Stahl和Wermuth, 威利-VCH出版社(Wiley-VCH), 魏因海姆, 德國, 2002。此類鹽可以使用適當的相對應鹼來製備。 藥學上可接受的鹽可以通過標準技術製備。舉例來說，化合物的游離鹼形式可以溶解於合適的溶劑，如含有適當酸的水溶液或水-醇溶液中，並且然後通過蒸發溶液來加以分離。因此，如果特定化合物是鹼，那麼期望的藥學上可接受的鹽可以通過本領域中可用的任何合適方法製備，舉例來說，用無機酸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等處理游離鹼，或用有機酸如乙酸、馬來酸、琥珀酸、杏仁酸、富馬酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、乙醇酸、水楊酸、吡喃糖基酸如葡糖醛酸或半乳糖醛酸、α-羥基酸如檸檬酸或酒石酸、胺基酸如天冬胺酸或麩胺酸、芳香族酸如苯甲酸或肉桂酸、磺酸如對甲苯磺酸或乙磺酸等處理游離鹼。 類似地，如果特定化合物是酸，那麼期望的藥學上可接受的鹽可以通過任何合適方法製備，舉例來說，用無機或有機鹼如胺(一級胺、二級胺或三級胺)、鹼金屬氫氧化物或鹼土金屬氫氧化物等處理游離酸。合適的鹽的說明性實例包括衍生自胺基酸如L-甘胺酸、L-離胺酸和L-精胺酸、氨、一級胺、二級胺和三級胺以及環胺，如羥乙基吡咯烷、呱啶、嗎啉或呱嗪的有機鹽；和衍生自鈉、鈣、鉀、鎂、錳、鐵、銅、鋅、鋁和鋰的無機鹽。 還應理解，本公開的化合物可以以非溶劑化形式、溶劑化形式(例如，水合形式)和固體形式(例如，晶體或多晶形式)存在，並且本公開旨在涵蓋所有此類形式。 如本文所用，術語“溶劑化物”或“溶劑化形式”是指含有化學計量或非化學計量量的溶劑的溶劑加成形式。一些化合物具有在結晶固態中捕獲固定摩爾比的溶劑分子，從而形成溶劑化物的趨勢。如果溶劑是水，那麼所形成的溶劑化物是水合物；並且如果溶劑是醇，那麼所形成的溶劑化物是醇化物。水合物通過將一個或多個水分子與物質的一個分子組合而形成，其中水的分子狀態保持為H 2O。形成溶劑化物的溶劑的實例包括但不限於水、異丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸和乙醇胺。 本公開還旨在包括化合物中的原子的所有同位素。原子的同位素包括具有相同原子數但質量數不同的原子。舉例來說，除非另有說明，否則本公開的化合物中的氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯、溴或碘旨在也包括它們的同位素，例如但不限於 1H、 2H、 3H、 11C、 12C、 13C、 14C、 14N、 15N、 16O、 17O、 18O、 31P、 32P、 32S、 33S、 34S、 36S、 17F、 18F、 19F、 35Cl、 37Cl、 79Br、 81Br、 124I、 127I和 131I。在一些實施方式中，氫包括氕、氘和氚。在一些實施方式中，碳包括 12C和 13C。 本文提供的化合物或其藥學上可接受的鹽可以含有一個或多個不對稱中心，因此產生對映異構體、非對映異構體和其它立體異構形式，所述立體異構形式可以根據絕對立體化學定義為(R)-或(S)-形式或胺基酸的(D)-或(L)-形式，或者根據相對構型定義為rel-(R)-或rel-(S)-形式。本公開包括所有這些可能的異構體以及它們的外消旋和光學純形式。光學活性(+)和(-)、(R)-和(S)-或(D)-和(L)-異構體可以使用手性合成子或手性試劑來製備，或者通過如色譜法和分級結晶等常規技術來拆分。製備、分離單個對映體的傳統技術包括從合適的光學純前體進行手性合成或使用例如手性高壓液相色譜法(HPLC)拆分外消旋體(或鹽或衍生物的外消旋體)。當化合物以其手性形式表示時，應理解，所述實施方式包括但不限於特定的非對映異構體或對映異構體富集形式。在存在手性但未對其進行指定的情況下，應理解，所述實施方式旨在包括特定的非對映異構體或對映異構體的富集形式；或此類化合物的外消旋或非外消旋(scalemic)混合物。 術語“立體異構體”是指含有由相同鍵鍵合的相同原子但具有不可互換的不同的三維結構的化合物。本公開考慮了各種立體異構體和其混合物並且包含“對映異構體”，所述對映異構體是指其分子互為不重疊鏡像的兩個立體異構體。 術語“對映異構體”表示互為不重疊鏡像的一對立體異構體。一對對映異構體的1:1混合物是“外消旋”混合物。比例不是1:1的對映異構體的混合物是“非外消旋”混合物。 術語“非對映異構體”表示具有至少兩個不對稱原子但不互為鏡像的立體異構體。 術語“互變異構體”或“互變異構形式”是指可經由低能壘相互轉化的不同能量的結構異構體。異構形式的存在和濃度將取決於化合物所處的環境並且可以取決於例如化合物是否為固體或是否在有機溶液或水性溶液中而有所不同。舉例來說，質子互變異構體(也稱為親質子互變異構體)包括經由質子遷移的相互轉化，如酮-烯醇、醯胺-亞胺酸、內醯胺-內醯亞胺、亞胺-烯胺異構化和環狀形式，其中質子可以佔據雜環系統的兩個或多個位置。價互變異構體包括通過一些成鍵電子的重組而進行的相互轉化。互變異構體可以處於平衡狀態或通過適當取代而空間鎖定成一種形式。除非另外說明，否則通過名稱或結構標識為一種特定互變異構形式的本公開的化合物旨在包含其它互變異構形式。 當本文提供的化合物含有烯屬雙鍵或其它幾何不對稱中心時，除非另有說明，否則這些化合物包括E和Z幾何異構體。 合成方法本文提供的化合物可以使用任何已知的有機合成技術製備，並且可以根據許多可能的合成路線中的任何一種合成。 用於製備本公開的化合物的反應可以在合適的溶劑中進行，有機合成領域的技術人員可以容易地選擇所述合適的溶劑。合適的溶劑在進行反應的溫度下可以基本上不與起始原料(反應物)、中間體或產物反應，所述溫度例如可以是從溶劑的凍結溫度到溶劑的沸騰溫度。給定的反應可以在一種溶劑或一種以上溶劑的混合物中進行。取決於特定反應步驟，用於特定反應步驟的合適溶劑可以由本領域技術人員進行選擇。 本公開的化合物的製備可能涉及各種化學基團的保護和脫保護。本領域技術人員可以容易地確定保護和脫保護的需要以及適當保護基團的選擇。保護基團的化學可以在例如T. W. Greene和P. G. M. Wuts, 《有機合成中的保護基團(Protective Groups in Organic Synthesis)》, 第3版, 威利父子公司(Wiley & Sons, Inc.), 紐約 (1999)；P. Kocienski, 《保護基團(Protecting Groups)》, 格奧爾格蒂梅出版社(Georg Thieme Verlag), 2003；和Peter G.M. Wuts, 《格林氏有機合成中的保護基團(Greene's Protective Groups in Organic Synthesis)》, 第5版, 威利(Wiley), 2014中找到，所有這些文獻通過引用整體併入本文。 可以根據本領域中已知的任何合適方法監測反應。舉例來說，產物的形成可以通過光譜方法監測，如核磁共振光譜法(例如， 1H或 13C)、紅外光譜法、分光光度法(例如，UV-可見光)、質譜法，或通過色譜方法監測，如高效液相色譜法(HPLC)、液相色譜-質譜聯用法(LCMS)或薄層色譜法(TLC)。本領域技術人員可以通過多種方法純化化合物，包括高效液相色譜法(HPLC)(“製備型LC-MS純化：改進的化合物特異性方法優化(Preparative LC-MS Purification: Improved Compound Specific Method Optimization)” Karl F. Blom、Brian Glass、Richard Sparks、Andrew P. Combs 《組合化學雜誌(J. Combi. Chem.)》 2004, 6(6), 874-883，其通過引用整體併入本文)和正相矽膠色譜法。 藥物組合物在又一方面，提供了包含一種或多種本公開的化合物或其藥學上可接受的鹽的藥物組合物。在一些實施方式中，本公開的藥物組合物包含式(I)的第一化合物或其藥學上可接受的鹽和相同式的一種或多種另外的化合物，但是所述第一化合物和另外的化合物不是相同的分子。 在另一方面，提供了包含一種或多種本公開的化合物或其藥學上可接受的鹽和至少一種藥學上可接受的賦形劑的藥物組合物。 在一些實施方式中，本公開的藥物組合物包含治療有效量的一種或多種本公開的化合物或其藥學上可接受的鹽。 在一些實施方式中，本公開的藥物組合物包含治療有效量的一種或多種本公開的化合物或其藥學上可接受的鹽和至少一種藥學上可接受的賦形劑。 如本文所用，術語“治療有效量”是指治療、改善或預防所確診的疾病或病狀或表現出可檢測的治療或抑制作用的分子、化合物或包含所述分子或化合物的組合物的量。所述作用可以通過本領域已知的任何測定方法來檢測。受試者的精確有效量將取決於受試者的體重、體型和健康狀況；病狀的性質和程度；施用速率；選擇用於施用的治療劑或治療劑組合；和處方醫生的判斷。針對給定情況的治療有效量可以通過在臨床醫生的技能和判斷內的常規實驗來確定。 如本文所用，術語“藥物組合物”是指含有呈適於向受試者施用形式的本公開的分子或化合物的調配物。藥物組合物包括適於口服施用、直腸施用、局部施用、胃腸外(包括皮下、肌內和靜脈內)施用、舌下施用、眼部施用、經皮施用或鼻內施用的組合物，但在任何給定情況下，最合適的途徑將取決於特定的宿主以及活性成分施用所針對病狀的性質和嚴重程度。藥物組合物可以方便地以單位劑型存在，並且通過藥學領域熟知的任何方法製備。 如本文所用，術語“藥學上可接受的賦形劑”意指可用於製備通常安全無毒並且在生物學上和其它方面皆非不合乎需要的藥物組合物的賦形劑，並且包括對於獸用以及對於人藥物使用可接受的賦形劑。如本文所用，“藥學上可接受的賦形劑”包括一種和多於一種此類賦形劑。術語“藥學上可接受的賦形劑”還涵蓋“藥學上可接受的載體”和“藥學上可接受的稀釋劑”。 所用的特定賦形劑將取決於應用本公開的化合物的方式和目的。溶劑一般基於待向包括人在內的哺乳動物施用的由本領域技術人員公認為安全的溶劑來選擇。一般來說，安全溶劑是無毒水性溶劑，如水和可溶於或可混溶於水中的其它無毒溶劑。合適的水性溶劑包括水、乙醇、丙二醇、聚乙二醇(例如，PEG 400、PEG 300)等，及其混合物。 在一些實施方式中，合適的賦形劑可以包括緩衝劑，如磷酸鹽、檸檬酸鹽和其它有機酸；抗氧化劑，包括抗壞血酸和蛋胺酸；防腐劑(例如，十八烷基二甲基苄基氯化銨；氯化六甲雙銨；苯紮氯銨、苄索氯銨；苯酚、丁醇或苯甲醇；對羥基苯甲酸烷基酯，如對羥基苯甲酸甲酯或對羥基苯甲酸丙酯；兒茶酚；間苯二酚；環己醇；3-戊醇；和間甲酚)；低分子量(少於約10個殘基的)多肽；蛋白質，如血清白蛋白、明膠或免疫球蛋白；親水聚合物，如聚乙烯吡咯烷酮；胺基酸，如甘胺酸、麩醯胺酸、天冬醯胺酸、組胺酸、精胺酸或離胺酸；單糖、二糖和其它碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合劑，如EDTA；糖，如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨糖醇；成鹽抗衡離子，如鈉；金屬絡合物(例如，鋅-蛋白質絡合物)；和/或非離子表面活性劑，如TWEEN™、PLURONICS™或聚乙二醇(PEG)。 在一些實施方式中，合適的賦形劑可以包括一種或多種穩定劑、表面活性劑、潤濕劑、潤滑劑、乳化劑、混懸劑、防腐劑、抗氧化劑、不透明劑、助滑劑、處理助劑、著色劑、甜味劑、芳香劑、調味劑和其它已知添加劑以提供藥物(即，本公開的化合物或其藥物組合物)的最佳呈現或説明製造藥用產品(即，藥劑)。活性藥學成分還可以包覆在例如通過凝聚技術或通過介面聚合製備的微膠囊中，例如分別在膠狀藥物遞送系統(例如，脂質體、白蛋白微球、微乳液、納米顆粒和納米膠囊)中或粗乳液中的羥甲基纖維素或明膠微膠囊和聚(甲基丙烯酸甲酯)微膠囊。這種技術公開於《雷明頓製藥科學(Remington's Pharmaceutical Sciences)》第16版, Osol, A.編 (1980)中。“脂質體”是由各種類型的脂質、磷脂和/或表面活性劑構成的小囊泡，其可用於將藥物(例如，本文公開的化合物和任選的化療劑)遞送到包括人在內的哺乳動物。脂質體的組分通常排列成雙層形式，類似於生物膜的脂質排列。 本文提供的藥物組合物可以呈允許將組合物施用於受試者，包括但不限於人，並且調配成與預期施用途徑相容的任何形式。 針對本文提供的藥物組合物考慮了多種途徑，並且因此，本文提供的藥物組合物可以取決於預期施藥途徑以散裝或單位劑型供應。例如，對於口服、經頰和舌下施用，粉劑、混懸液、顆粒、片劑、丸劑、膠囊、膠囊錠和囊片作為固體劑型可以是可接受的，並且乳液、糖漿、酏劑、混懸液和溶液作為液體劑型可以是可接受的。對於注射施用，乳液和混懸液作為液體劑型可以是可接受的，並且適於用適當溶液復原的粉劑作為固體劑型可以是可接受的。對於吸入施用，溶液、噴霧劑、乾粉和氣霧劑可以是可接受的劑型。對於局部(包括經頰和舌下)或經皮施用，粉劑、噴霧劑、軟膏、糊劑、乳膏、洗劑、凝膠、溶液和貼片可以是可接受的劑型。對於陰道施用，陰道栓劑、棉塞、乳膏、凝膠、糊劑、泡沫和噴霧劑可以是可接受的劑型。 在一些實施例中，本公開的藥物組合物可以呈口服施用調配物形式。 在某些實施例中，本公開的藥物組合物可以呈片劑調配物形式。舉例來說，用於片劑調配物的合適的藥學上可接受的賦形劑包括惰性稀釋劑，如乳糖、碳酸鈉、磷酸鈣或碳酸鈣；制粒劑和崩解劑，如玉米澱粉或海藻酸；黏合劑，如澱粉；潤滑劑，如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石；防腐劑，如對羥基苯甲酸乙酯或對羥基苯甲酸丙酯；和抗氧化劑，如抗壞血酸。片劑調配物可以未包覆包衣或包覆包衣，以調節其崩解和後續活性成分在胃腸道內的吸收，或改進其穩定性和/或外觀，在任一種情況下，均使用本領域熟知的常規包衣劑和程式。 在某些實施例中，本公開的藥物組合物可以呈硬明膠膠囊形式，其中活性成分與惰性固體稀釋劑，例如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土混合；或呈軟明膠膠囊形式，其中活性成分與水或油，如花生油、液體石蠟或橄欖油混合。 在某些實施例中，本公開的藥物組合物可以呈水性混懸液形式，其通常含有呈細粉形式的活性成分以及一種或多種混懸劑，如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、海藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃蓍膠和阿拉一級樹膠；分散劑或濕潤劑，如卵磷脂或氧化烯與脂肪酸的縮合產物(例如，聚氧乙烯硬脂酸酯)，或氧化乙烯與長鏈脂肪醇的縮合產物，例如十七碳乙烯氧基鯨蠟醇，或氧化乙烯與衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的縮合產物，如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯，或氧化乙烯與衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的縮合產物，例如聚乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯。水性混懸液還可以含有一種或多種防腐劑(例如，對羥基苯甲酸乙酯或對羥基苯甲酸丙酯)、抗氧化劑(例如，抗壞血酸)、著色劑、調味劑和/或甜味劑(例如，蔗糖、糖精或阿斯巴甜)。 在某些實施方式中，本公開的藥物組合物可以呈油性混懸液形式，其通常含有於植物油(例如，花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油)中或礦物油(例如，液體石蠟)中的混懸活性成分。油性混懸液還可以含有增稠劑，如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇。可以加入如上文所述的那些甜味劑和調味劑以提供適口的經口製劑。這些組合物可通過加入如抗壞血酸等抗氧化劑來保存。 在某些實施方式中，本公開的藥物組合物可以呈水包油乳液形式。油相可以是植物油，如橄欖油或花生油；或礦物油，如液體石蠟；或任何這些油的混合物。合適的乳化劑可以是例如天然存在的膠，如阿拉一級樹膠或黃蓍膠；天然存在的磷脂，如大豆、卵磷脂、衍生自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯(例如，脫水山梨糖醇單油酸酯)和所述偏酯與氧化乙烯的縮合產物，如聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯。乳液還可以含有甜味劑、調味劑和防腐劑。 在某些實施方式中，本文提供的藥物組合物可以呈糖漿和酏劑形式，其可以含有甜味劑，如甘油、丙二醇、山梨糖醇、阿斯巴甜或蔗糖；緩和劑；防腐劑；調味劑和/或著色劑。 在一些實施方式中，本公開的藥物組合物可以呈注射施用調配物形式。 在某些實施方式中，本公開的藥物組合物可以呈無菌可注射製劑形式，如無菌可注射水性或油性混懸液。此混懸液可以根據已知技術使用上文所提及的那些合適的分散劑或濕潤劑和混懸劑來調配。無菌可注射製劑也可以是於無毒的腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液或混懸液，如於1,3-丁二醇中的溶液或製備為凍乾粉劑。可以使用的可接受的媒劑和溶劑是水、林格氏溶液和等滲氯化鈉溶液。另外，無菌不揮發油可以常規地用作溶劑或混懸介質。出於此目的，可以使用任何溫和的不揮發油，包括合成的甘油單酯或甘油二酯。另外，如油酸等脂肪酸同樣可以用於製備可注射物。 在一些實施方式中，本公開的藥物組合物可以呈吸入施用調配物形式。 在某些實施方式中，本公開的藥物組合物可以呈水性和非水性(例如，於碳氟化合物拋射劑中的)氣溶膠形式，其含有任何適當的溶劑和任選的其它化合物，如但不限於穩定劑、抗微生物劑、抗氧化劑、pH調節劑、表面活性劑、生物可用性調節劑和這些的組合。載體和穩定劑隨特定化合物的要求而有所不同，但通常包括非離子表面活性劑(Tween、Pluronics或聚乙二醇)、例如血清白蛋白的無害蛋白質、脫水山梨糖醇酯、油酸、卵磷脂、如甘胺酸等胺基酸、緩衝液、鹽、糖或糖醇。 在一些實施方式中，本公開的藥物組合物可以呈局部或經皮施用調配物形式。在某些實施方式中，本文提供的藥物組合物可以呈乳膏、軟膏、凝膠和水性或油性溶液或混懸液形式，其可以通常通過調配活性成分以及常規的局部可接受的賦形劑，如動物脂肪和植物脂肪、油、蠟、石蠟、澱粉、黃蓍膠、纖維素衍生物、聚乙二醇、矽酮、膨潤土、矽酸、滑石和氧化鋅或其混合物獲得。 在某些實施方式中，本文提供的藥物組合物可以調配成用於眼部施用。在某些實施方式中，本文提供的藥物組合物可以呈眼用調配物形式，例如眼用軟膏、粉末、溶液等。在某些實施方式中，用適當的緩衝系統在適宜的pH下製備眼用調配物。 除上述那些代表性劑型以外，本領域技術人員通常已知藥學上可接受的賦形劑和載體並且因此包括於本公開中。這類賦形劑和載體描述於例如“雷明頓製藥科學(Remingtons Pharmaceutical Sciences)” 馬克出版公司(Mack Pub. Co.), 新澤西 (1991)；“雷明頓：藥學的科學與實踐(Remington: The Science and Practice of Pharmacy)”, 費城科學大學編, 第21版, LWW (2005), 其通過引用併入本文。 本文提供的化合物的劑量方案將取決於已知因素而有所不同，例如特定試劑的藥效學特性及其施用方式和途徑；受體的物種、年齡、性別、健康狀況、醫療狀況和體重；症狀的性質和程度；並行治療的種類；治療頻率；施用途徑、患者的腎功能和肝功能以及期望的效果。醫生或獸醫可以確定並開出預防、對抗或阻止病症進展所需的藥物的有效量。 在一些實施方式中，可以調配本公開的藥物組合物，使得可以施用劑量在0.001-1000 mg/kg體重/天之間，例如劑量為0.01-800 mg/kg體重/天、0.01-700 mg/kg體重/天、0.01-600 mg/kg體重/天、0.01-500 mg/kg體重/天、0.01-400 mg/kg體重/天、0.01-300 mg/kg體重/天、0.1-200 mg/kg體重/天、0.1-150 mg/kg體重/天、0.1-100 mg/kg體重/天、0.5-100 mg/kg體重/天、0.5-80 mg/kg體重/天、0.5-60 mg/kg體重/天、0.5-50 mg/kg體重/天、1-50 mg/kg體重/天、1-45 mg/kg體重/天、1-40 mg/kg體重/天、1-35 mg/kg體重/天、1-30 mg/kg體重/天、1-25 mg/kg體重/天的本文提供的化合物或其藥學上可接受的鹽。在一些實例中，低於前述範圍的下限的劑量水準可能綽綽有餘，而在其它情況下，可以採用較大劑量而不引起任何有害副作用，其條件是這種較大劑量首先分成若干小劑量以供全天施用。有關施用途徑和劑量方案的進一步資訊，參見《綜合藥物化學(Comprehensive Medicinal Chemistry)》(Corwin Hansch；編委會主席)第5卷第25.3章, 培格曼出版公司(Pergamon Press) 1990，其通過應用特此併入本文。 在一些實施方式中，本公開的藥物組合物可以調配成單一劑型。本文提供的化合物在單一劑型中的量將取決於所治療的受試者和特定的施用方式而有所不同。 在一些實施方式中，適合於施用的劑型可以每劑量單位含有約1 mg至約1000 mg活性成分。在這些藥物組合物中，活性成分通常將以基於組合物的總重量的約0.1-95重量%的量存在。 在一些實施方式，本公開的藥物組合物可以調配成短效、快速釋放、長效和持續釋放。因此，本公開的藥物調配物也可以被調配用於控制釋放或緩慢釋放。 在一些實施方式中，每天、每隔一天、每隔幾天、每隔三天、每週一次、每週兩次、每週三次或每兩週一次向受試者施用一定劑量的本文提供的化合物或本文提供的藥物組合物。如果需要的話，活性化合物的有效日劑量可以在一天中以適當的間隔以兩個、三個、四個、五個、六個或更多個亞劑量單獨施用，任選地以單位劑型施用。在一些實施方式中，本文提供的化合物或本文提供的藥物組合物的劑量施用2天、3天、5天、7天、14天、21天、1個月、2個月、2.5個月、3個月、4個月、5個月、6個月或更長時間。 在又一個方面，還提供了一種獸用組合物，其包含一種或多種本公開的分子或化合物或其藥學上可接受的鹽和獸用載體。獸用載體是可用於施用組合物目的的物質，並且可以是原本呈惰性或在獸醫學領域中可接受的固體、液體或氣態物質，並與活性成分相容。這些獸用組合物可以腸胃外、口服或通過任何其它所需途徑來施用。 藥物組合物或獸用組合物可以取決於用於施用藥物的方法以多種方式包裝。舉例來說，用於分配的製品可以包括其中放置有適當形式的組合物的容器。合適的容器是本領域技術人員所熟知的，並且包括如瓶子(塑膠和玻璃)、藥囊、安瓿、塑膠袋、金屬筒等材料。容器還可以包括防拆組合件，以防止輕易獲取包裝的內含物。另外，容器上附有描述容器內含物的標籤。標籤還可以包括適當的警告。可以使組合物包裝於單位劑量或多劑量容器，例如密封安瓿和小瓶中，並且可以在一種冷凍乾燥(凍乾)條件下儲存，僅需要在使用之前即刻加入例如水的無菌液體載體用於注射。即用型注射溶液和混懸液由先前所述的種類的無菌粉劑、顆粒和片劑來製備。 在一些實施方式中，包含一種或多種本文提供的化合物或其藥學上可接受的鹽的本公開的藥物組合物進一步包含一種或多種另外的治療活性劑。 另外的治療活性劑具有與本文提供的化合物互補的活性，使得它們不會相互產生不利影響。這些試劑以對預期目的有效的量適當地組合存在。 在某些實施方式中，另外的治療劑選自β阻斷劑、α-激動劑、碳酸酐酶抑制劑、前列腺素樣化合物、縮瞳劑或膽鹼能劑或腎上腺素化合物。 β受體阻滯劑減少房水的產生。實例包括左布諾洛爾(BETAGAN®)、噻嗎洛爾(BETIMOL®，TIMOPTIC®)、倍他洛爾(BETOPTIC®)和美替洛爾(OPTIPRANOLOL®)。 α-激動劑減少房水的產生並增加排水量。實例包括阿可樂定(IOPIDINE®)和溴莫尼定(ALPHAGAN®)。 碳酸酐酶抑制劑減少房水的產生。實例包括多佐胺(TRUSOPT®)和布林佐胺(AZOPT®)。 前列腺素和前列腺素樣化合物增加房水的流出。實例包括拉坦前列素(XALATAN®)、比馬前列素(LUMIGAN®)和曲伏前列素(TRAVATAN™)。 縮瞳劑或膽鹼能劑增加房水的流出。實例包括毛果芸香鹼(ISOPTO CARPINE®，PILOPINE®)和卡巴膽鹼(ISOPTO CARBACHOL®)。 腎上腺素化合物，如地匹福林(PROPINE®)，也增加房水的流出。 另外的一種或多種治療劑可以與本文提供的化合物同時或依次施用。依次施用包括在本文提供的化合物之前或之後施用。在一些實施方式中，另外的一種或多種治療劑可以在與本文提供的化合物相同的組合物中施用。在其它實施方式中，在施用另外的治療劑和本文提供的化合物之間可以有時間間隔。 在一些實施方式中，將另外的治療劑與本文提供的化合物一起施用，可以實現較低劑量的其它治療劑和/或以較低頻率間隔的施用。 治療方法本公開的化合物和包含其的藥物組合物能夠抑制ROCK，並且因此可用於在有需要的受試者中抑制ROCK活性並用於預防或治療ROCK相關病症。 在又一方面，本公開提供了一種治療ROCK相關病症的方法，其包括向有需要的受試者施用有效量的本文提供的化合物或其藥學上可接受的鹽或藥物組合物。 如本文所用，術語“治療(treating/treatment)”或“療法”旨在具有其處置疾病的正常含義，以便完全或部分緩解其一個、一些或所有症狀或糾正或補償潛在的病理，從而獲得有益或期望的臨床結果。出於本公開的目的，有益或期望的臨床結果包括但不限於症狀的緩解、疾病程度的減輕、疾病狀態的穩定(即，未惡化)、疾病進展的延緩或減慢、疾病病況的改善或緩和，以及緩解(無論是部分地還是完全地)，不論其是可檢測的還是不可檢測的。“治療”也可以意指相較於未接受治療時的預期存活時間，存活時間得以延長。需要療法的人包括已患有病狀或病症的人以及易於患上病狀或病症的人或應預防病狀或病症的人。 如本文所用，術語“預防(preventing/prevention/ prophylaxis)”旨在具有其正常含義，並且包括預防疾病發展的初級預防和二級預防，在二級預防的情況下，疾病已經有所發展，並且患者被暫時地或永久地保護以免受疾病的加重或惡化或與疾病相關聯的新症狀的發展。 在一些實施方式中，本文提供的化合物或其藥學上可接受的鹽和組合物可以用於治療多種ROCK相關病症，包括癌症、心血管疾病、自身免疫性疾病、眼部疾病、代謝綜合症、呼吸窘迫綜合症、腎病、膀胱過度活動症、癲癇、偏頭痛、糖尿病、高原肺水腫、精神障礙等。 在某些實施方式中，本文提供的化合物或其藥學上可接受的鹽和組合物可以用於治療眼部疾病，包括青光眼、高眼壓症、視網膜疾病，包括濕性AMD、乾性AMD和DME；骨病症，包括骨質疏鬆症和骨關節炎；血管疾病，包括腦血管痙攣、冠狀血管痙攣、高血壓、肺動脈高血壓、高原原發性高血壓、猝死綜合症、心絞痛、心肌梗死、再狹窄、中風、高血壓性血管疾病、心力衰竭、心臟移植物血管病變、動脈粥樣硬化、動脈阻塞、外周動脈疾病、外周迴圈障礙、靜脈移植物疾病；肺病，包括慢性阻塞性肺病(COPD)和哮喘；神經病症，包括脊髓損傷、癡呆、阿爾茨海默氏病、帕金森氏病、神經元變性、多發性硬化、抑鬱症、注意力不足過動症和神經性疼痛、多發性硬化、肌萎縮側索硬化；新生血管性病症；癌症，包括星形細胞癌、乳腺癌、宮頸癌、結腸直腸癌、子宮內膜癌、食道癌、胃癌、頭頸癌、肝細胞癌、喉癌、肺癌、口腔癌、卵巢癌、前列腺癌和甲狀腺癌和肉瘤；肥胖；泌尿器官疾病，包括膀胱過度活動症(OAB)和良性前列腺肥大(BPH)；勃起功能障礙；急性和慢性疼痛；哮喘；脊髓損傷；類風濕性關節炎；銀屑病；病毒感染；心肌保護。 在某些實施方式中，可以用本文提供的化合物或其藥學上可接受的鹽和組合物治療的眼部疾病是青光眼。 向受試者施用的濃度和途徑將取決於待治療的ROCK相關病症而有所不同。在某些實施例中，所述施用經由選自由以下組成的群組的途徑進行：腸胃外施用、腹膜內施用、皮內施用、心內施用、心室內施用、顱內施用、腦脊髓內施用、滑膜內施用、鞘內施用、肌內注射、玻璃體內注射、靜脈內注射、動脈內注射、口服施用、經頰施用、舌下施用、透皮施用、局部施用、氣管內施用、直腸內施用、皮下施用和眼部施用。 實例以下進一步闡明本公開的通用方法。本公開的化合物可以通過本領域已知的方法製備。以下說明本公開的優選化合物的詳細製備方法。然而，這些決不限制本公開的化合物的製備方法。 合成實例出於說明的目的，包括以下實例。本文提供的實例描述了本文公開的化合物的合成以及用於製備所述化合物的中間體。然而，應理解，這些實例並不限制本公開，並且僅旨在表明實踐本公開的方法。本領域技術人員將認識到，所描述的化學反應可以易於適用於製備本公開的多種其它化合物，並且用於製備本公開的化合物的替代性方法被認為在本公開的範圍內。例如，可以通過本領域技術人員顯而易見的修改，例如通過適當地保護干擾基團、通過利用除所述試劑和構建塊外的本領域已知的其它合適試劑和構建塊和/或通過對反應條件進行常規修改，成功地合成根據本公開的非示例性化合物。此外，本領域技術人員還將理解，本文所述的單獨步驟或化合物的不同批次可以組合。可替代地，本文公開或本領域已知的其它反應將被認為適用於製備本公開的其它化合物。因此，以下描述並不旨在限制本公開的範圍，而是由所附權利要求來限定。 在本文提供的化合物的合成中使用的化學試劑的縮寫列於下文：
1H NMR 質子核磁共振波譜法
(Boc) 2O 二碳酸二三級丁酯
aq 水溶液
CDCl 3 氘代氯仿
CDI 1,1'-羰基二咪唑
CH 2Cl 2 二氯甲烷
CH 3CN或MeCN或ACN 乙腈
CoCl 2.6H 2O 六水合氯化鈷
DIAD 偶氮二羧酸二異丙酯
DIEA或DIPEA N, N,-二異丙基乙胺
DMAP 4-二甲基胺基吡啶
DMF 二甲基甲醯胺
DMSO 二甲亞碸
DMSO-d 6 氘代二甲亞碸
EDCI 1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳二亞胺
ee 對映體過量
EA或EtOAc 乙酸乙酯
EtOH 乙醇
H 2 氫氣
H 2O 水
HATU (1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑並[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽
HCl 鹽酸
HPLC 高效液相色譜法
IPA 異丙醇
K 2CO 3 碳酸鉀
LCMS 液相色譜-質譜聯用法
LiOH 氫氧化鋰
m/z (ESI) 質荷比(電噴霧電離)
MeOH 甲醇
CD 3OD 氘代甲醇
MTBE 甲基三級丁基醚
Na 2SO 4 硫酸鈉
NaBH 4 硼氫化鈉
NaCl 氯化鈉
NH 3 氨
NH 4Cl 氯化銨
NH 4HCO 3 碳酸氫銨
NMI N-甲基咪唑
PE 石油醚
Pd(dppf)Cl 2 [1,1'‑雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(II)
Pd(OAc) 2 乙酸鈀(Ⅱ)
Pd(PPh 3) 4 四(三苯基膦)鈀(0)
Pd/C 鈀/碳
Pd 2(dba) 3 三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)
Prep-TLC 製備型薄層色譜法
s, d, t, q, m 單峰、雙峰、三重峰、四重峰、多重峰
SFC 超臨界流體色譜法
Silica 矽膠
TBSCl 三級丁基二甲基氯矽烷
TCFH 氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸鹽
TEA或Et 3N 三乙胺
TFA 三氟乙酸
THF 四氫呋喃
t R 保留時間
v/v 體積/體積
XPhos 二環己基[2',4',6'-三(丙-2-基)[1,1'-聯苯]-2-基]膦
Zn(CN) 2 氰化鋅
中間體的合成 中間體 I-1 的合成 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，將對氰甲基苯甲酸I-1a(20 g，124.10 mmol，1當量)和CDI(22.14 g，136.51 mmol，1.1當量)於THF(50 mL)中的溶液攪拌3小時。在0℃下，在氮氣氣氛下，向混合物中逐滴加入含NaBH 4(14.08 g，372.30 mmol，3當量)的H 2O(45 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。在室溫下，用水淬滅反應。用乙酸乙酯(3 x 500 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用CH 2Cl 2/EtOAc(8:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈淺黃色液體的2-[4-(羥甲基)苯基]乙腈I-1b(10.9 g，59.67%，粗製品)。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.87 - 3.91 (2H, m), 4.62 (2H, s), 7.37 (4H, q)。 步驟2：在0℃下，在氮氣氣氛下，向醇I-1b(10.9 g，74.06 mmol，1當量)和三乙胺(22.48 g，222.18 mmol，3當量)、DMAP(0.09 g，0.741 mmol，0.01當量)於DCM(100 mL)中的攪拌混合物中分批加入TBSCl(13.39 g，88.87 mmol，1.2當量)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌4小時。用水(260 mL)稀釋所得混合物。用CH 2Cl 2(3 x100 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC(PE/EA = 6:1，v/v)來對殘餘物進行純化，以得到呈淺黃色液體的2-(4-(((三級丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)苯基)乙腈I-1c(14.0 g，72.31%)。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 0.13 (6H, s), 0.96 (9H, s), 3.89 (2H, s), 4.77 (2H, s), 7.31 - 7.40 (4H, m)。 步驟3：向腈I-1c(14.0 g，53.55 mmol，1當量)於THF(20 mL)中的攪拌溶液中分批加入氫化鈉(1.93 g，80.33 mmol，1.5當量)。在0℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。在0℃下，在氮氣氣氛下，向上述混合物中分批加入碳酸二甲酯(19.29 g，214.20 mmol，4當量)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。在室溫下，用水(200 ml)淬滅反應。用乙酸乙酯(3 x 250 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法(PE/EA = 6:1，v/v)來對殘餘物進行純化，以得到呈淺黃色液體的2-(4-{[(三級丁基二甲基矽烷基)氧基]甲基}苯基)-2-氰基乙酸甲酯I-1d(12.6 g，73.65%)。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 0.13 (6H, s), 0.97 (9H, s), 3.78 (3H, s), 4.78 (2H, s), 7.37 - 7.47 (4H, m)。 步驟4：在室溫下，向250 mL圓底燒瓶中加入含酯I-1d(12.6 g，39.44 mmol，1當量)和Boc 2O(34.44 g，157.76 mmol，4當量)、CoCl 2.6H 2O(24.42 g，102.55 mmol，2.6當量)的甲醇(150 mL)。在0℃下，向上述混合物中加入NaBH 4(11.94 g，315.53 mmol，8當量)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌15小時。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(0-5.5%)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈淺黃色油狀物的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(4-{[(三級丁基二甲基矽烷基)氧基]甲基}苯基)丙酸甲酯I-1e(7.1 g，42.51%)。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 0.08 (6H, s), 0.91 (9H, s), 1.34 (9H, s), 3.25 (1H, dt), 3.48 (1H, ddd), 3.59 (3H, s), 3.84 (1H, t), 4.68 (2H, s), 6.93 (1H, t), 7.22 (2H, d), 7.27 (2H, d)。 步驟5：在60℃下，在氮氣氣氛下，將含酯I-1e(10.1 g，23.84 mmol，1當量)的甲醇(10 mL)和含LiOH.H 2O(2.00 g，47.68 mmol，2當量)的H 2O(6 mL)的溶液攪拌過夜。將所得混合物減壓濃縮。用HCl(水溶液)將混合物酸化至pH 6。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水，10%至50%梯度，40分鐘；檢測器，UV 220 nm。這得到呈灰白色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-[4-(羥甲基)苯基]丙酸I-1(3.58 g，50.84%)。LCMS: m/z (ESI), [M+Na] += 318.00。 中間體 I-2 的合成 步驟1：在0℃下，向2-(3-甲氧基苯基)乙腈I-2a(3 g，20.38 mmol，1當量)於THF(50 mL)中的溶液中加入氫化鈉(0.54 g，22.42 mmol，1.1當量)。將混合物攪拌50分鐘。加入碳酸二甲酯(14.69 g，163.07 mmol，8當量)，並且將混合物和所得混合物溫熱至RT並攪拌2小時。反應混合物用水(50 mL)淬滅並用DCM(3 x 50 mL)萃取。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(12:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的2-氰基-2-(3-甲氧基苯基)乙酸甲酯I-2b(2.84 g，67.89%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 3.76 (d, 6H), 5.63 (s, 1H), 6.81 - 7.11 (m, 3H), 7.39 (t, 1H)。 步驟2：在室溫下，在氮氣氣氛下，將酯I-2b(800 mg，3.90 mmol，1當量)、Boc 2O(1701.62 mg，7.80 mmol，2當量)、CoCl 2.6H 2O(1113.06 mg，4.68 mmol，1.2當量)和NaBH 4(368.72 mg，9.75 mmol，2.5當量)於甲醇(20 mL)中的混合物攪拌過夜。所得混合物用水(30 mL)稀釋，用CH 2Cl 2(3 x 40 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC(PE/EA = 2:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈淺黃色油狀物的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(3-甲氧基苯基)丙酸甲酯I-2c(504 mg，41.79%)。LCMS: m/z (ESI), [M+Na] += 332.00。 步驟3：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含酯I-2c(760 mg，2.46 mmol，1當量)和LiOH(117.67 mg，4.91 mmol，2.0當量)的THF(3 mL)和水(3 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌3小時。將所得混合物減壓濃縮。用HCl(1 M)將混合物酸化至pH 5。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，水/甲醇，0%至100%梯度，50分鐘；檢測器，UV 254 nm。將所得混合物真空濃縮，以得到呈棕黃色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(3-甲氧基苯基)丙酸I-2(200 mg，27.57%)。LCMS: m/z (ESI), [M- tBu] += 240.25。 中間體 I-3 的合成 步驟1：在0℃下，向2-(3-溴苯基)乙腈I-3a(10 g，51.01 mmol，1當量)於THF(200 mL)中的溶液中加入氫化鈉(4.08 g，102.02 mmol，2當量，60%)。將混合物攪拌40分鐘。加入碳酸二甲酯(18.38 g，204.03 mmol，4當量)，並且將混合物溫熱至RT，並攪拌2小時。用0℃的水(500 mL)淬滅所得混合物。用乙酸乙酯(3 x 200 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用鹽水(2 x 200 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過DCM/PE(1:10 v/v，500 mL)對粗產物進行重結晶，以得到呈白色固體的2-(3-溴苯基)-2-氰基乙酸甲酯I-3b(6.5 g，50.15%)。LCMS: m/z (ESI), [M-H] -= 253.70。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 3.43 (3H, s), 6.67 (1H, ddd), 6.94 (1H, t), 7.39 (1H, d), 7.86 (1H, s)。 步驟2：在0℃下，在空氣氣氛下，向酯I-3b(5.5 g，21.65 mmol，1當量)、CoCl 2.6H 2O(15.45 g，64.94 mmol，3當量)和Boc 2O(14.17 g，64.94 mmol，3當量)於甲醇(100 mL)中的攪拌混合物中逐滴加入NaBH 4(4.91 g，129.88 mmol，6當量)。將混合物溫熱至RT並攪拌2小時。用0℃的水(200 mL)淬滅所得混合物。過濾所得混合物。用DCM(4 x 100 mL)洗滌濾餅。用CH 2Cl 2(2 x 300 mL)萃取濾液。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(10:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的2-(3-溴苯基)-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙酸甲酯I-3c(4 g，30.95%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H- tBu] += 303.85。 步驟3：在80℃下，在氮氣氣氛下，將Pd(PPh 3) 4(0.16 g，0.14 mmol，0.05當量)、Zn(CN) 2(0.20 g，1.68 mmol，0.6當量)和酯I-3c(1 g，2.79 mmol，1當量)於DMF(15 mL)中的混合物攪拌4小時。用水(50 mL)稀釋所得混合物。用乙酸乙酯(3 x 50 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用鹽水(3 x 70 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC(PE/EA = 3:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈白色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(3-氰基苯基)丙酸甲酯I-3d(400 mg，47.08%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H- tBu] += 248.95。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 1.31 (9H, s), 3.33-3.42 (1H, m), 3.46-3.58 (1H, m), 3.63 (3H, s), 3.96 (1H, t), 6.96 (1H, t), 7.47-7.65 (2H, m), 7.73 (1H, d), 7.77 (1H, d)。 步驟4：在室溫下，在空氣氣氛下，將LiOH.H 2O (86.17 mg，2.05 mmol，2.5當量)和腈I-3d(250 mg，0.82 mmol，1當量)於THF(5 mL)和H 2O(1 mL)中的混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮，以得到呈白色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(3-氰基苯基)丙酸I-3(200 mg，83.87%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 291.00。 中間體 I-4 的合成 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，向2-(4-溴苯基)-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙酸(2.0 g，5.81 mmol，1當量)和DMAP(141.97 mg，1.16 mmol，0.2當量)於DCM(10 mL)和甲醇(1.0 mL，24.70 mmol，4.25當量)中的攪拌混合物中分批加入EDCI(2227.74 mg，11.620 mmol，2當量)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。反應後，用水(40 mL)稀釋所得混合物。用乙酸乙酯(3 x 30 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用水(3 x 20 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(4:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈白色固體的2-(4-溴苯基)-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙酸甲酯I-4a(1.58 g，75.91%)。LCMS: m/z (ESI), [M- t-Bu] += 301.80。 步驟2：在室溫下，在氮氣氣氛下，向酯I-4a(1.48 g，4.13 mmol，1當量)和Zn(CN) 2(494.81 mg，4.21 mmol，1.02當量)於DMF(4 mL)中的攪拌混合物中分批加入Pd(PPh 3) 4(477.42 mg，0.41 mmol，0.1當量)。在80℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌3小時。冷卻至室溫後，用水(25 mL)稀釋所得混合物。用乙酸乙酯(3 x 30 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。用DCM(3 mL)稀釋粗製品。通過製備型TLC以PE/EA(3:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(4-氰基苯基)丙酸甲酯I-4b(1.1 g，87.48%)。LCMS: m/z (ESI), [M- t-Bu] += 249.30。 步驟3：在0℃下，在氮氣氣氛下，向腈I-4b(300 mg，0.99 mmol，1當量)和(Boc) 2O(430.26 mg，1.97 mmol，2當量)、CoCl 2.6H 2O(469.05 mg，1.97 mmol，2當量)於甲醇(10 mL)中的攪拌混合物中分批加入NaBH 4(298.32 mg，7.89 mmol，8當量)。在25℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌3小時。在0℃下，用冰水(30 mL)淬滅反應。過濾所得混合物，並且用甲醇(3 x 20 mL)洗滌濾餅。將濾液減壓濃縮。用乙酸乙酯(3 x 30 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用水(3 x 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以PE/EA(5:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(4-{[(三級丁氧基羰基)胺基]甲基}苯基)丙酸甲酯I-4c(170 mg，42.22%)。LCMS: m/z (ESI), [M+Na] += 431.10。 步驟4：在25℃下，在氮氣氣氛下，向酯I-4c(160 mg，0.39 mmol，1當量)於甲醇(4.0 mL)中的攪拌混合物中逐滴加入含LiOH.H 2O(65.74 mg，1.57 mmol，4.0當量)的水(2.0 mL)。在60℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌3小時。冷卻至室溫後，用HCl(1 M)將混合物酸化至pH 4。將所得混合物減壓濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，10%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，30%保持20分鐘。蒸發溶劑後，得到呈白色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(4-{[(三級丁氧基羰基)胺基]甲基}苯基)丙酸I-4(90 mg，58.25%)。LCMS: m/z (ESI), [M-H] -= 393.15。 中間體 I-5 的合成 步驟1：在室溫下，向20 mL小瓶中加入含3-碘硝基苯I-5a(12.56 g，50.46 mmol，1當量)、K 2CO 3(20.92 g，151.38 mmol，3當量)、CuI(9.61 g，50.46 mmol，1當量)和氰基乙酸甲酯(5 g，50.46 mmol，1當量)的DMSO(100 mL)。在120℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌3小時。所得混合物用EA(200 mL)稀釋並用1 x 200 mL飽和NaHCO 3(水溶液)、水(2 x 200 mL)和飽和鹽水(1 x 200 mL)洗滌。將有機層減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(1:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(25:1)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈紅色油狀物的2-氰基-2-(3-硝基苯基)乙酸甲酯I-5b(3.0 g，27.00%)。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 3.77 (3H, s), 6.01 (1H, s), 7.79 (1H, t), 7.93 (1H, d), 8.30 (1H, dd), 8.34 (1H, t)。 步驟2：在0℃下，向酯I-5b(440 mg，2.00 mmol，1當量)、CoCl 2.6H 2O(1.24 g，5.20 mmol，2.6當量)和Boc 2O(1.74 g，7.99 mmol，4當量)於甲醇(10 mL)中的混合物中加入NaBH 4(604.77 mg，15.98 mmol，8當量)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。所得混合物用水(50 mL)淬滅，過濾，並且用DCM(3 x 10 mL)洗滌濾餅。將濾液減壓濃縮。用DCM(3 x 50 mL)萃取所得混合物。將有機層減壓濃縮。通過製備型TLC以PE/EA(2:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-{3-[(三級丁氧基羰基)胺基]苯基}丙酸甲酯I-5c(300 mg，38.06%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 395.20。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ1.43 (9H, s), 1.54 (9H, s), 3.35 -3.42 (1H, m), 3.61 (1H, dd), 3.70 (3H, s), 3.85 (1H, dd), 6.94 (1H, d), 7.23 (1H, t), 7.27 -7.43 (2H, m)。 步驟3：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含酯I-5c(300 mg，0.76 mmol，1當量)和LiOH(36.43 mg，1.52 mmol，2當量)的THF(2.5 mL)和水(2.5 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1.5小時。用HCl(1 M)將混合物酸化至pH 5。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水，0%至20%梯度，30分鐘；檢測器，UV 254 nm。將所得混合物真空濃縮，以得到呈黃色油狀物的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-{3-[(三級丁氧基羰基)胺基]苯基}丙酸I-5(200 mg，69.12%)。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.42 (9H, s), 1.53 (9H, s), 3.40 (1H, dd), 3.48 (1H, dd), 3.61 (1H, dd), 7.03 (1H, d), 7.17 (1H, d), 7.21 (1H, dd), 7.42 (1H, d)。 中間體 I-6 的合成 步驟1：在室溫下，向250 mL圓底燒瓶中加入氰基乙酸乙酯(2.26 g，19.98 mmol，1當量)和氧雜環己烷-3-酮I-6a(2 g，19.98 mmol，1當量)和丁啶(etidin)(5.06 g，19.98 mmol，1當量)和L-脯胺酸(0.46 g，4.00 mmol，0.2當量)和甲醇(100 mL)。在25℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌15小時。將所得混合物減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(2:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的2-氰基-2-(氧雜環己烷-3-基)乙酸乙酯I-6b(3.2 g，81.22%)。 1H NMR (CDCl 3, 400 MHz) δ 1.35 (3H, td), 1.47 - 1.79 (3H, m), 1.85 - 2.04 (1H, m), 2.29 - 2.40 (1H, m), 3.36 - 3.53 (3H, m), 3.88 (1H, ddt), 4.26 - 4.34 (2H, m)。 步驟2：在0℃下，向250 mL圓底燒瓶中加入含酯I-6b(3.1 g，15.72 mmol，1當量)和Boc 2O(6.86 g，31.43 mmol，2當量)和CoCl 2.6H 2O(7.48 g，31.43 mmol，2當量)的甲醇(80 mL)。在0℃下，向上述混合物中分批加入NaBH 4(2.97 g，78.59 mmol，5當量)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌12小時。通過在0℃下加入水(200 mL)淬滅反應。過濾所得混合物，並且用DCM(6 x 50 mL)洗滌濾餅。用CH 2Cl 2(3 x 200 mL)萃取水層。將所得混合物減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(2:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(氧雜環己烷-3-基)丙酸乙酯I-6c(3 g，63.33%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H- tBu] += 246.05。 1H NMR (CDCl 3, 400 MHz) δ 1.26 - 1.31 (3H, m), 1.44 (9H, s), 1.63 (2H, dq), 1.78 (1H, d), 1.93 (2H, dh), 2.51 (1H, dtd), 3.15 - 3.48 (4H, m), 3.77 - 3.96 (2H, m), 4.13 - 4.23 (2H, m)。 步驟3：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入酯I-6c(1 g，3.32 mmol，1當量)和LiOH.H 2O(158.93 mg，6.64 mmol，2當量)和H 2O(4 mL)和甲醇(8 mL)。在60℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌15小時。用HCl(1 M)將混合物酸化至pH 5。將所得混合物減壓濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水，0%至30%梯度，40分鐘；檢測器，UV 220 nm。將所得混合物減壓濃縮。通過凍乾法乾燥所得固體。這得到呈白色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(氧雜環己烷-3-基)丙酸I-6(650 mg，71.67%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H- tBu] += 218.15。 1H NMR (CDCl 3, 400 MHz) δ 1.48 (9H, d), 1.65 (2H), 1.74 - 2.06 (2H, m), 2.51 (1H, s), 3.14 (1H, s), 3.20 - 3.54 (4H, m), 3.89 (2H, dt), 6.77 (1H, s), 10.29 (1H, s)。 中間體 I-7 的合成 步驟1：在0℃下，向250 mL圓底燒瓶中加入2-(吡啶-3-基)乙腈I-7a(6 g，50.79 mmol，1當量)和THF(40 mL，493.71 mmol)、氫化鈉(2.23 g，55.87 mmol，1.1當量，60%)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時，向上述混合物中加入碳酸二甲酯(36.60 g，406.30 mmol，8當量)。在室溫下，將所得混合物攪拌4小時。用CH 2Cl 2/甲醇= 20:1(3 x 30 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(1:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈棕黃色固體的2-氰基-2-(吡啶-3-基)乙酸甲酯I-7b(7.4 g，54.83%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 177.25。 步驟2：向100 mL圓底燒瓶中加入含酯I-7b(2 g，11.35 mmol，1當量)、CoCl 2.6H 2O(8.10 g，34.06 mmol，3當量)和Boc 2O(4.96 g，22.70 mmol，2當量)的甲醇(40 mL)。在0℃下，加入NaBH 4(3.44 g，90.82 mmol，8當量)。在0℃下，將所得混合物攪拌2小時。在室溫下，用水淬滅反應。所得混合物用CH 2Cl 2(3 x 30 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以DCM/EA(1:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(吡啶-3-基)丙酸甲酯I-7c(310 mg，8.14%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 281.15。 步驟3：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入酯I-7c(300 mg，1.07 mmol，1當量)、LiOH(51.26 mg，2.14 mmol，2當量)、THF(5 mL)和水(5 mL)。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，10%至50%梯度，40分鐘；檢測器，UV 220 nm。這得到呈黃色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(吡啶-3-基)丙酸I-7(140 mg，41.16%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 267.05。 中間體 I-8 的合成 步驟1.在室溫下，向250 mL圓底燒瓶中加入阿托酸I-8a(8 g，54.00 mmol，1當量)和乙醇(220 mL)、H 2SO 4(0.5 mL，9.38 mmol，0.17當量)。在80℃下，將所得混合物攪拌過夜。冷卻至室溫後，用飽和NaHCO 3(水溶液)將混合物中和至pH 8。用水(70 mL)稀釋所得混合物。用乙酸乙酯(3 x 100 mL)萃取水層。將所得混合物減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(10:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈無色液體的2-苯基丙-2-烯酸乙酯I-8b(7.5 g，78.82%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 1.3 (t, 3H), 4.2 (q, 2H), 6.0 (d, 1H), 6.2 (d, 1H), 7.2 - 7.5 (m, 5H)。 步驟2：在室溫下，在氮氣氣氛下，將酯I-8b(250 mg，1.50 mmol，1當量)和1-甲基呱嗪(568.42 mg，5.68 mmol，4當量)於DMF(3 mL)中的溶液攪拌1小時。將殘餘物溶於PE(20 mL)中。合併的有機層用水(3 x 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮，得到呈灰白色固體的3-(4-甲基呱嗪-1-基)-2-苯基丙酸乙酯I-8c(330 mg，84.16%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 277.25。 步驟3：在室溫下，在空氣氣氛下，向呱嗪I-8c(500 mg，1.81 mmol，1當量)於甲醇(10 mL)和H 2O(5 mL)中的攪拌溶液中逐滴加入LiOH(173.31 mg，7.24 mmol，4當量)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌3小時。將所得混合物減壓濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，20%至30%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，以得到呈白色固體的3-(4-甲基呱嗪-1-基)-2-苯基丙酸I-8(220 mg，48.97%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 249.15。 中間體 I-9 的合成 步驟1：在0℃下，在空氣氣氛下，向苯基乙酸乙酯I-9a(1000 mg，6.09 mmol，1當量)和4-碘呱啶-1-甲酸三級丁酯I-9b(2.84 g，9.14 mmol，1.5當量)於DMF(10 mL)中的攪拌混合物中分批加入t-BuOK(1.37 g，12.18 mmol，2當量)。在25℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌16小時。在0℃下，用飽和NH 4Cl(水溶液)淬滅反應。所得混合物用乙酸乙酯(3 x 50 mL)萃取，經無水Na2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，矽膠；流動相，MeCN/水，50%至90%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，以得到呈黃色固體的4-(2-乙氧基-2-氧代-1-苯基乙基)呱啶-1-甲酸三級丁酯(550 mg，25.99%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ1.13 (4H, t), 1.37 (9H, s), 1.67 (1H, d), 2.01-2.16 (1H, m), 3.37 (4H, d), 3.83 (1H, d), 3.90-4.17 (3H, m), 7.25-7.37 (5H, m)。 步驟2：向4-(2-乙氧基-2-氧代-1-苯基乙基)呱啶-1-甲酸三級丁酯(500 mg，1.44 mmol，1當量)於DCM(6 mL)中的攪拌溶液中加入TFA(2 mL)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。將所得混合物真空濃縮，以得到呈黃色油狀物的2-苯基-2-(呱啶-4-基)乙酸乙酯I-9c(340 mg，95.52%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 248.15。 步驟3：向酯I-9c(350 mg，1.42 mmol，1當量)和甲醛(424.89 mg，14.15 mmol，10當量)於DCM(10 mL)中的攪拌混合物中加入DIEA(914.47 mg，7.08 mmol，5當量)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌0.5小時。向上述混合物中加入NaBH(OAc) 3(899.73 mg，4.25 mmol，3當量)。在室溫下，將所得混合物再攪拌2小時。通過在0℃下加入水(4 mL)淬滅反應。所得混合物用乙酸乙酯(3 x 30 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。這得到呈黃色油狀物的2-(1-甲基呱啶-4-基)-2-苯基乙酸乙酯(350 mg，94.63%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 262.10。 步驟4：向2-(1-甲基呱啶-4-基)-2-苯基乙酸乙酯(350 mg，1.34 mmol，1當量)於THF(4 mL)和H 2O(1 mL)中的攪拌溶液中加入LiOH.H 2O(67.43 mg，1.61 mmol，1.2當量)。在70℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌16小時。用HCl(1 M)將混合物酸化至pH 6。將所得混合物真空濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水，10%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，以得到呈白色固體的(1-甲基呱啶-4-基)(苯基)乙酸I-9(240 mg，76.82%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 234.15。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 7.41-7.19 (5H, m), 3.18 (1H, d), 2.85 (1H, d), 2.71 (1H, d), 2.19 (3H, t), 1.99 (1H, s), 1.86 (2H, d), 1.76 (1H, d), 1.31 (1H, q), 1.14-0.99 (2H, m)。 中間體 I-10 的合成 步驟1：在70℃下，在氮氣氣氛下，將2-溴-2-苯基乙酸甲酯I-10a(10 g，43.65 mmol，1當量)、1-甲基-呱嗪(13.12 g，130.96 mmol，3當量)和三乙胺(4.42 g，43.65 mmol，1當量)於THF(100 mL)中的混合物攪拌4小時。將所得混合物減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用CH 2Cl 2/甲醇(15:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈棕色油狀物的2-(4-甲基呱嗪-1-基)-2-苯基乙酸甲酯I-10b(6.3 g，58.12%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] +=249.15。 步驟2：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含酯I-10b(2.7 g，10.87 mmol，1當量)和LiOH.H 2O(0.91 g，21.75 mmol，2.0當量)的甲醇(16 mL)和水(8 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌5小時。用HCl(1 M)將混合物酸化至pH 6。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水，0%至5%梯度，30分鐘；檢測器，UV220 nm，以得到呈白色固體的(4-甲基呱嗪-1-基)(苯基)乙酸I-10(1.6 g，62.81%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 235.15。 中間體 I-11 的合成 步驟1：在0℃下，在空氣氣氛下，向3-(氰基甲基)苯甲酸甲酯I-11a(15 g，85.62 mmol，1當量)於甲醇(250 mL)中的攪拌溶液中分批加入NaBH 4(16.20 g，428.12 mmol，5當量)。在70℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。將混合物冷卻至室溫。將所得混合物減壓濃縮。通過在室溫下加入水(100 mL)淬滅反應。用乙酸乙酯(3 x 50 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(1:10，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的2-[3-(羥甲基)苯基]乙腈(11.14 g，88.40%)。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 4.10(2H, s), 4.52 (2H, d), 5.28 (1H, t), 7.21 (1H, d), 7.27 (1H, d), 7.32 - 7.39 (2H, m)。 步驟2：在室溫下，在空氣氣氛下，向2-[3-(羥甲基)苯基]乙腈(11.14 g，75.69 mmol，1當量)和TBSCl(17.11 g，113.54 mmol，1.5當量)於DCM(100 mL)中的攪拌溶液中逐滴加入DMAP(0.92 g，7.569 mmol，0.1當量)和三乙胺(22.98 g，227.073 mmol，3當量)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。通過在室溫下加入水(100 mL)淬滅反應。用CH 2Cl 2(3 x 100 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(1:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈無色油狀物的2-(3-{[(三級丁基二甲基矽基)氧基]甲基}苯基)乙腈I-11b(19.5 g，98.54%)。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 0.09 (6H, s), 0.92 (9H, s), 4.04 (2H, s), 4.73 (2H, s), 7.24 (2H, dd), 7.35 (2H, dd)。 步驟3：在0℃下，在空氣氣氛下，向腈I-11b(19.5 g，74.59 mmol，1當量)於THF(100 mL)中的攪拌溶液中逐滴加入氫化鈉(3.58 g，149.17 mmol，2當量)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。在室溫下，向上述混合物中逐滴加入碳酸二甲酯(53.75 g，596.70 mmol，8當量)。在室溫下，將所得混合物再攪拌3小時。通過在室溫下加入水/冰(100 mL)淬滅反應。用乙酸乙酯(3 x 100 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(1:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的2-(3-{[(三級丁基二甲基矽基)氧基]甲基}苯基)-2-氰基乙酸甲酯(10.1 g，42.39%)。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 0.13 (6H, d), 0.97 (9H, s), 3.78 (3H, s), 4.79 (2H, d), 7.22 - 7.46 (3H, m), 7.50 (1H, dq)。 步驟4：在室溫下，在空氣氣氛下，向2-(3-{[(三級丁基二甲基矽基)氧基]甲基}苯基)-2-氰基乙酸甲酯(5 g，15.65 mmol，1當量)和CoCl 2.6H 2O(11.17 g，46.95 mmol，3當量)於甲醇(100 mL)中的攪拌混合物中加入Boc 2O(10.25 g，46.95 mmol，3當量)。在0℃下，向上述混合物中分批加入NaBH 4(4.74 g，125.21 mmol，8當量)。在室溫下，將所得混合物再攪拌3小時。通過在室溫下加入水(100 mL)淬滅反應。用CH 2Cl 2(3 x 50 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(1:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(3-{[(三級丁基二甲基矽基)氧基]甲基}苯基)丙酸甲酯I-11c(2282 mg，34.42%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H-Boc] += 324.15。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 0.12 (6H, s), 0.97 (9H, d), 1.43 (9H, d), 3.39 (1H, dd), 3.61 (1H, dd), 3.69 (3H, s), 3.90 (1H, dd), 4.75 (2H, d), 7.19 (1H, d), 7.23 - 7.34 (3H, m)。 步驟5：在室溫下，在空氣氣氛下，向酯I-11c(200 mg，0.472 mmol，1當量)於THF(5 mL，61.71 mmol)中的攪拌溶液中加入TBAF(370.32 mg，1.42 mmol，3當量)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌3小時。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(40:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈白色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-[3-(羥甲基)苯基]丙酸甲酯(97 mg，66.41%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 310.20。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.37 (9H, d), 3.23 (1H, dt), 3.50 (1H, ddd), 3.60 (3H, s), 3.86 (1H, dt), 4.48 (2H, t), 5.21 (1H, t), 6.85 - 7.08 (1H, m), 7.09 - 7.15 (1H, m), 7.23 (2H, d), 7.30 (1H, t)。 步驟6：在室溫下，在空氣氣氛下，向3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-[3-(羥甲基)苯基]丙酸甲酯(300 mg，0.97 mmol，1當量)於DCM(6 mL，94.38 mmol，97.33當量)中的攪拌溶液中逐滴加入N-甲基胺基甲醯氯(108.82 mg，1.16 mmol，1.2當量)和Et 3N(294.39 mg，2.91 mmol，3當量)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。通過在室溫下加入水(10 mL)淬滅反應。用CH 2Cl 2(3 x 10 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，100%至100%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，以得到呈無色油狀物的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(3-{[(甲基胺基甲醯基)氧基]甲基}-苯基)丙酸甲酯I-11d(90 mg，25.33%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 367.15。 步驟7：在室溫下，在空氣氣氛下，向酯I-11d(270 mg，0.74 mmol，1當量)於甲醇(8 mL)和H 2O(2 mL)中的攪拌溶液中加入LiOH(70.59 mg，2.95 mmol，4當量)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，50%至60%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，以得到呈白色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(3-{[(甲基胺基甲醯基)氧基]甲基}苯基)丙酸I-11(90 mg，34.66%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 353.20。 中間體 I-12 的合成 步驟1：在25℃下，在氮氣氣氛下，向2-氰基-2-(4-硝基苯基)乙酸乙酯I-12a(2.0 g，8.539 mmol，1當量)和鋅(4.47 g，68.31 mmol，8當量)於THF(40 mL)中的攪拌混合物中逐滴加入含NH 4Cl(4.57 g，85.39 mmol，10當量)的水(10 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌48小時。反應後，過濾所得混合物，用甲醇(3 x 20 mL)洗滌濾餅。將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用CH 2Cl 2/甲醇(60:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的2-(4-胺基苯基)-2-氰基乙酸乙酯I-12b(1.2 g，68.81%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 205.15。 步驟2：在0℃下，在氮氣氣氛下，向腈I-12b(1.1 g，5.39 mmol，1當量)和三乙胺(1.64 g，16.16 mmol，3當量)於DCM(30 mL)中的攪拌混合物中逐滴加入三乙胺(1.64 g，16.16 mmol，3當量)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。反應後，用水(80 mL)稀釋所得混合物。用乙酸乙酯(3 x 60 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用飽和鹽水(3 x 100 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。將殘餘物溶於DCM(5 mL)中。通過製備型TLC以PE/EA(1:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的2-氰基-2-(4-乙醯胺基苯基)乙酸乙酯I-12c(1.2 g，90.47%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 247.15。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.18 (3H, t), 2.06 (3H, s), 4.18 (2H, qq), 5.56 (1H, s), 7.34 (2H, m), 7.65 (2H, m), 10.08 (1H, s)。 步驟3：在0℃下，在空氣氣氛下，向酯I-12c(1.1 g，4.47 mmol，1當量)和CoCl 2･6H 2O(2.13 g，8.93 mmol，2當量)於甲醇(40 mL)中的攪拌混合物中分批加入(Boc) 2O(1.95 g，8.93 mmol，2當量)和NaBH 4(0.68 g，17.87 mmol，4當量)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。反應後，過濾所得混合物，用水(3 x 30 mL)洗滌濾餅。用水(50 mL)稀釋所得混合物。用乙酸乙酯(3 x 40 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(5:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(4-乙醯胺基苯基)丙酸乙酯I-12d(900 mg，57.50%)。LCMS: m/z (ESI), [M-Boc] += 251.15。 步驟4：在室溫下，在氮氣氣氛下，向酯I-12d(500 mg，2.03 mmol，1當量)於甲醇(4.0 mL)中的攪拌混合物中逐滴加入含LiOH(194.51 mg，8.12 mmol，4當量)的水(1.0 mL)。在60℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。冷卻至室溫後，將所得混合物真空濃縮。用甲醇(3.0 mL)稀釋所得混合物。用HCl(1 M)將混合物酸化至pH 5。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，10%至50%梯度，30分鐘；檢測器，UV 254 nm，16%保持10分鐘。凍乾後，得到呈白色固體的2-(4-乙醯胺基苯基)-3-((三級丁氧基羰基)胺基)丙酸I-12(260 mg，36.54%)。LCMS: m/z (ESI), [M- t-Bu] += 267.05。 中間體 I-13 的合成 步驟1：在100 ℃下，在氮氣氣氛下，向N-[2-(3-溴苯基)-2-羥乙基]胺基甲酸三級丁酯I-13a(2.0 g，6.33 mmol，1當量)和(甲基磷醯基)甲烷(0.59 g，7.59 mmol，1.2當量)於二噁烷(25 mL)中的混合物中分批加入Pd(OAc) 2(0.28 g，1.27 mmol，0.2當量)、K 3PO 4(2.69 g，12.65 mmol，2.0當量)和XantPhos(1.10 g，1.90 mmol，0.3當量)。將混合物攪拌過夜。將混合物冷卻至室溫。在室溫下，用水淬滅反應。用乙酸乙酯(3 x 30 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水(0.1% FA)，0%至100%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm。這得到呈黃色油狀物的N-{2-[3-(二甲基磷醯基)苯基]-2-羥乙基}胺基甲酸三級丁酯I-13b(1.3 g，65.59%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 1.35 (9H, s), 1.64 (6H, d), 3.11 (2H, m), 4.65 (1H, q), 5.48 (1H, d), 6.78 (1H, t), 7.48 (2H, dd), 7.64 (1H, ddd), 7.72 (1H, d)。 步驟2：在0℃下，在氮氣氣氛下，將苯鄰二甲醯亞胺(169.05 mg，1.15 mmol，1.2當量)、PPh 3(753.39 mg，2.87 mmol，3當量)於THF(1 mL)中的混合物用DIAD(580.81 mg，2.87 mmol，3當量)處理0.5小時。隨後，在0℃下，逐滴加入含醇I-13b(300 mg，0.96 mmol，1當量)的THF(2 mL)1小時。在室溫下，用水淬滅反應。所得混合物用CH 2Cl 2(3 x 20 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(10:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈白色固體的N-{2-[3-(二甲基磷醯基)苯基]-2-(1,3-二氧代異吲哚-2-基)乙基}胺基甲酸三級丁酯I-13c(270 mg，63.74%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 1.27 (9H, s), 1.64 (6H, dd), 3.89 (2H, m), 5.43 (1H, dd), 7.27 (1H, t), 7.54 (2H, m), 7.72 (2H, m), 7.87 (4H, m)。 步驟3：在室溫下，在氮氣氣氛下，將苯鄰二甲醯亞胺I-13c(240 mg，0.54 mmol，1當量)和肼(216.97 mg，4.34 mmol，8當量)於甲醇(5 mL)中的溶液攪拌4小時。過濾所得混合物，用甲醇(3 x 5 mL)洗滌濾餅。將濾液減壓濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，10%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm。這得到呈無色油狀物的N-{2-胺基-2-[3-(二甲基磷醯基)苯基]乙基}-胺基甲酸三級丁酯I-13(82 mg，48.40%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 1.35 (9H, s), 1.63 (6H, d), 3.09 (3H, m), 6.84 (1H, t), 7.54 (4H, m)。 中間體 I-14 的合成 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，向酯I-26c(2.08 g，5.81 mmol，1當量)和Pd(PPh 3) 4(67.10 mg，0.058 mmol，0.01當量)於DMF(10 mL)中的攪拌溶液中分批加入Zn(CN) 2(688.59 mg，5.86 mmol，1.01當量)。在80℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2.0小時。冷卻至室溫後，用水(60 mL)稀釋所得混合物。用乙酸乙酯(3 x 40 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用水(3 x 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以PE/EA(2:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(4-氰基苯基)丙酸甲酯I-14c(1.3 g，73.57%)。 步驟2：在室溫下，在氮氣氣氛下，向腈I-14c(600 mg，1.97 mmol，1當量)於甲醇(8.0 mL)中的攪拌溶液中逐滴加入和含LiOH.H 2O(330.89 mg，7.88 mmol，4.0當量)的水(2.0 mL)。在70℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2.0小時。冷卻至室溫後，將所得混合物真空濃縮。蒸發後，將殘餘物溶於甲醇(2.0 mL)中並用NH 3水溶液鹼化至pH 9。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，10%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，18.2%保持20分鐘，以得到呈白色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(4-氰基苯基)丙酸I-14(400 mg，69.89%)。LCMS: m/z (ESI), [M- t Bu] += 235.05。 中間體 I-15 的合成 步驟1：在0℃下，向250 mL圓底燒瓶中加入(5-溴吡啶-2-基)甲醇I-15a(5 g，26.59 mmol，1當量)、TBSCl(4.81 g，31.91 mmol，1.2當量)、三乙胺(8.07 g，79.78 mmol，3當量)、DMAP(0.32 g，2.66 mmol，0.1當量)和DCM(80 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌過夜。所得混合物用CH 2Cl 2(3 x 30 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用EA/CH 2Cl 2(3:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的5-溴-2-{[(三級丁基二甲基矽基)氧基]甲基}吡啶(6.33 g，78.23%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 304.05。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 0.15 (6H, s), 0.93 (9H, d), 4.77 (2H, d), 7.50 (1H, m), 8.01 (1H, m), 8.55 (1H, m)。 步驟2：在室溫下，向六個500 mL圓底燒瓶中加入5-溴-2-{[(三級丁基二甲基矽基)氧基]甲基}吡啶(6.3 g，20.84 mmol，1當量)、氰基乙酸甲酯(2.48 g，25.01 mmol，1.2當量)、Pd(OAc) 2(0.47 g，2.08 mmol，0.1當量)、dppf(2.30 g，4.17 mmol，0.2當量)、t-BuOK(7.02 g，62.52 mmol，3當量)和1,4-二噁烷(240 mL)。在70℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌5小時。混合物用飽和鹽水(200 mL)淬滅，用EA(2 x 200 mL)萃取。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並蒸發，以得到粗固體。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(1:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的2-(6-{[(三級丁基二甲基矽基)氧基]甲基}吡啶-3-基)-2-氰基乙酸甲酯I-15b(2.4 g，33.38%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 321.15。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 0.17 (6H, s), 0.99 (9H, s), 3.68 (1H, d), 3.83 (3H, s), 4.86 (2H, s), 7.66 (1H, d), 7.98 (1H, dd), 8.56 (1H, d)。 步驟3：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入腈I-15b(2.24 g，6.99 mmol，1當量)、CoCl 2.6H 2O(2.49 g，10.49 mmol，1.5當量)、Boc 2O(3.05 g，13.98 mmol，2.0當量)和甲醇(20 mL)。在0℃下，分批加入NaBH 4(1.06 g，27.96 mmol，4.0當量)。在室溫下，將所得混合物攪拌過夜。在室溫下，用水(100 mL)淬滅反應。過濾所得混合物，並且用CH 2Cl 2(3x30 mL)洗滌濾餅。用DCM(2 x 100 mL)萃取濾液。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(17:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈棕黃色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(6-{[(三級丁基二甲基矽基)氧基]甲基}吡啶-3-基)丙酸甲酯(625 mg，14.74%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 425.30。 步驟4：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(6-{[(三級丁基二甲基矽基)氧基]甲基}吡啶-3-基)丙酸甲酯(600 mg，1.41 mmol，1當量)、LiOH(67.69 mg，2.83 mmol，2當量)、水(5 mL)和THF(5 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌過夜。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水，0至10%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，以得到呈淺棕色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-[6-(羥甲基)吡啶-3-基]丙酸I-15(300 mg，63.77%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 297.10。 中間體 I-16 的合成 步驟1：在70℃下，在氮氣氣氛下，將3-溴-5-甲基吡啶I-16a(5 g，29.07 mmol，1當量)和2-氰基乙酸甲酯(3.46 g，34.88 mmol，1.2當量)、Pd(OAc) 2(0.65 g，2.91 mmol，0.1當量)、dppf(3.21 g，5.81 mmol，0.2當量)、2-甲基丙-2-醇鉀(9.78 g，87.20 mmol，3當量)於1,4-二噁烷(100 mL)中的混合物攪拌2小時。通過LCMS監測反應。用飽和NH 4Cl(水溶液)將混合物酸化至pH 9。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。用乙酸乙酯(3 x 300 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用CH 2Cl 2/甲醇(30:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的2-氰基-2-(5-甲基吡啶-3-基)乙酸甲酯I-16b(710 mg，12.84%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 191.05。 步驟2：在0℃下，在氮氣氣氛下，向腈I-16b(800 mg，4.21 mmol，1當量)和Boc 2O(3671.87 mg，16.82 mmol，4當量)、CoCl 2.6H 2O(2601.83 mg，10.94 mmol，2.6當量)於甲醇(50 mL)中的攪拌混合物中分批加入NaBH 4(1272.92 mg，33.65 mmol，8當量)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。在室溫下，用水淬滅反應。用CH 2Cl 2(2 x 100 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(32:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(5-甲基吡啶-3-基)丙酸甲酯I-16c(310 mg，43.66%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 295.15。 步驟3：在室溫下，在氮氣氣氛下，將含酯I-16c(300 mg，1.02 mmol，1當量)的甲醇(3 mL)和含LiOH.H 2O(85.53 mg，2.04 mmol，2當量)的H 2O(1.5 mL)的溶液攪拌1小時。用HCl(1 M)將殘餘物酸化至pH 5。將所得混合物減壓濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水，10%至23%梯度，30分鐘；檢測器，UV 220 nm，以得到呈黃色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(5-甲基吡啶-3-基)丙酸I-16(140 mg，49.00%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 281.10。 中間體 I-17 的合成 步驟1：在室溫下，向250 mL圓底燒瓶中加入含溴化物I-17a(2.26 g，22.80 mmol，1.2當量)、dppf(1.05 g，1.90 mmol，0.1當量)、t-BuOK(6.40 g，57.01 mmol，3.0當量)、乙酸鈀(0.21 g，0.95 mmol，0.05當量)和2-氰基-2-甲基乙酸甲酯(2.58 g，22.80 mmol，1.2當量)的二噁烷(70 mL)。在70℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌3小時。用飽和NH 4Cl(100 mL)淬滅殘餘物。過濾所得混合物，並且用乙酸乙酯(2 x 150 mL)萃取濾液。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(10:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的2-[3-(苄氧基)苯基]-2-氰基乙酸甲酯I-17b(1.8 g，33.67%)。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 3.71 (2H, s), 3.73 (3H, s), 4.03 (1H, s), 5.13 (2H, s), 7.01 (1H, dt), 7.03 - 7.12 (2H, m), 7.31 - 7.44 (4H, m), 7.45 - 7.50 (2H, m)。 步驟2：在0℃下，向40 mL小瓶中加入含腈I-17b(2 g，7.11 mmol，1當量)、CoCl 2.6H 2O(4.40 g，18.49 mmol，2.6當量)和Boc 2O(6.21 g，28.44 mmol，4.0當量)的甲醇(5 mL)。在0℃下，向上述混合物中加入NaBH 4(2.15 g，56.88 mmol，8.0當量)。在室溫下，將所得混合物攪拌2小時。在0℃下，用水淬滅反應。濾出沉澱固體並用DCM(1 x 100 mL)洗滌。用DCM(3 x 100 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(10:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的2-[3-(苄氧基)苯基]-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙酸甲酯I-17c(1.1 g，40.14%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H- tBu] += 330.10。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 1.35 (9H, s), 3.25 (1H, dt), 3.48 (1H, ddd), 3.59 (3H, s), 3.83 (1H, t), 5.09 (2H, d), 6.83 (1H, d), 6.89 (1H, t), 6.94 (2H, dd), 7.26 (1H, t), 7.38 - 7.43 (2H, m), 7.46 (2H, d)。 步驟3：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含酯I-17c(1.1 g，2.85 mmol，1當量)的THF(2 mL)和含LiOH.H 2O(239.49 mg，5.71 mmol，2當量)的水(2 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1.5小時。用HCl(水溶液)將混合物酸化至pH 5。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，水/甲醇，0%至100%梯度，30分鐘；檢測器，UV 254 nm。將所得混合物真空濃縮，以得到呈黃色固體的2-[3-(苄氧基)苯基]-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙酸I-17(500 mg，47.17%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H- tBu] += 316.10。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 1.34 (9H, s), 3.23 (1H, dt), 3.44 (1H, ddd), 3.74 (1H, t), 5.08 (2H, d), 6.85 (1H, t), 6.89 - 6.96 (2H, m), 7.25 (1H, t), 7.31 - 7.37 (1H, m), 7.37 - 7.43 (2H, m), 7.46 (2H, d)。 中間體 I-18 的合成 步驟1：在80℃下，在氮氣氣氛下，將2-(吡啶-3-基)乙酸甲酯I-18a(4 g，26.46 mmol，1當量)和K 2CO 3(10.97 g，79.38 mmol，3當量)和甲醛(1.59 g，52.92 mmol，2當量)於DMF(40 mL)中的混合物攪拌2小時。將混合物冷卻至室溫。在室溫下，用水(60 mL)淬滅反應。用乙酸乙酯(3 x 50 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用飽和氯化鈉溶液(3 x 50 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(2:3，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色液體的2-(吡啶-3-基)丙-2-烯酸甲酯I-18b(757 mg，17.53%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 164.25。 1H NMR (CDCl 3, 400 MHz) δ 3.87 (3H, s), 6.02 (1H, d), 6.54 (1H, d), 7.34 (1H, ddd), 7.81 (1H, ddd), 8.60 (1H, dd), 8.68 (1H, dd)。 步驟2：在室溫下，在氮氣氣氛下，向烯醇鹽I-18b(757 mg，4.64 mmol，1當量)於DMF(10 mL)中的攪拌混合物中加入1-甲基呱嗪(2323.41 mg，23.20 mmol，5當量)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，10%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm。將所得混合物真空濃縮。這得到呈黃色固體的3-(4-甲基呱嗪-1-基)-2-(吡啶-3-基)丙酸甲酯I-18c(884 mg，72.36%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 264.30。 步驟3：在室溫下，在氮氣氣氛下，向呱嗪I-18c(150 mg，0.57 mmol，1當量)於THF(8 mL)和H 2O(2 mL)中的攪拌混合物中分批加入LiOH(68.2 mg，2.85 mmol，5當量)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。通過反向快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，含MeCN的水，10%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm。這得到呈白色固體的3-(4-甲基呱嗪-1-基)-2-(吡啶-3-基)丙酸I-18(120 mg，84.5%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 250.35。 中間體 I-19 的合成 步驟1：在室溫下，向500 mL圓底燒瓶中加入含3-溴苯甲酸三級丁酯I-19a(8 g，31.11 mmol，1當量)和氰基乙酸甲酯(4624.44 mg，46.67 mmol，1.5當量)、Pd(OAc) 2(698.52 mg，3.11 mmol，0.1當量)、dppf(3437.21 mg，6.22 mmol，0.2當量)、t-BuOK(10.47 g，93.34 mmol，3當量)的二噁烷(200 mL)。在70℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌6小時。用飽和NH 4Cl(水溶液)將混合物酸化至pH 6。用乙酸乙酯(3 x 50 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(7:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈淺黃色油狀物的3-(1-氰基-2-甲氧基-2-氧代乙基)苯甲酸三級丁酯I-19b(3.7 g，43.20%)。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.63 (9H, s), 3.81 (3H, s), 7.56 (1H, td), 7.70 (1H, ddd), 8.02 (1H, dt), 8.05 - 8.09 (1H, m)。 步驟2：在室溫下，向100 mL圓底燒瓶中加入含腈I-19b(3.7 g，13.44 mmol，1當量)和CoCl 2.6H 2O(2.62 g，20.16 mmol，1.5當量)、Boc 2O(5.87 g，26.88 mmol，2當量)的甲醇(20 mL)。在0℃下，在30分鐘內向上述混合物中分批加入NaBH 4(1.53 g，40.32 mmol，3當量)。在室溫下，將所得混合物再攪拌15小時。在室溫下，用水淬滅反應。用DCM(3 x 40 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(5:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈白色油狀物的3-{3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-1-甲氧基-1-氧代丙-2-基}苯甲酸三級丁酯I-19c(2.07 g，40.59%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H-Boc- tBu] += 223.95。 步驟3：在室溫下，向100 mL圓底燒瓶中加入含酯I-19c(2 g，5.27 mmol，1當量)和LiOH(252.47 mg，10.54 mmol，2當量)的水(15 mL)和甲醇(15 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。用HCl(1 M)將混合物酸化至pH 5。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水，12%至22%梯度，25分鐘；檢測器，UV 254 nm。這得到呈灰白色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-[3-(三級丁氧基羰基)苯基]丙酸I-19(650 mg，33.75%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 366.00。 中間體 I-20 的合成 步驟1.在室溫下，向40 mL小瓶中加入含2-溴-2-苯基乙酸甲酯I-20a(1 g，4.37 mmol，1當量)和N-[2-(呱嗪-1-基)乙基]胺基甲酸三級丁酯(1.20 g，5.24 mmol，1.2當量)、三乙胺(1.33 g，13.10 mmol，3當量)的THF(20 mL)。在70℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌15小時。通過在室溫下加入水(60 mL)淬滅反應。用EA(3 x 50 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用飽和鹽水(1 x 100 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。將殘餘物溶於DCM(4 mL)中。通過製備型TLC以PE/EA(1:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈淺黃色油狀物的2-(4-{2-[(三級丁氧基羰基)胺基]乙基}呱嗪-1-基)-2-苯基乙酸甲酯I-20b(1.54 g，93.45%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 378.10。 步驟2.在室溫下，向40 mL小瓶中加入含呱嗪I-20b(600 mg，1.59 mmol，1當量)和LiOH(76.14 mg，3.18 mmol，2當量)的THF(5 mL)和水(5 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌15小時。用HCl(水溶液)將混合物酸化至pH 5。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水，5%至10%梯度，30分鐘；檢測器，UV 220 nm。將所得混合物減壓濃縮。這得到呈灰白色固體的(4-{2-[(三級丁氧基羰基)胺基]乙基}呱嗪-1-基)(苯基)乙酸I-20(469 mg，81.18%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 364.10。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.44 (8H, s), 2.63 (2H, s), 2.91 (5H, d), 3.22 (2H, t), 4.40 (1H, s), 7.18 - 7.49 (3H, m), 7.57 (2H, dd)。 中間體 I-21 的合成 步驟1：在室溫下，將3-(氰基甲基)苯甲酸I-21a(5 g，31.03 mmol，1當量)和CDI(5.53 g，34.13 mmol，1.1當量)於THF(26 mL)中的混合物攪拌3小時。在0℃下，在氮氣氣氛下，向上述混合物中逐滴加入含NaBH 4(3.52 g，93.08 mmol，3當量)的H 2O(20 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。通過TLC以PE/EA(6:1，v/v)監測反應。在室溫下，用水淬滅反應。用DCM(3 x 200 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(8:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈淺黃色液體的2-[3-(羥甲基)苯基]乙腈(2.3 g，50.37%)。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.91 (2H, s), 4.64 (2H, s), 7.00 - 7.07 (1H, m), 7.17 (1H, t), 7.39 (1H, q), 7.99 (1H, s)。 步驟2：在0℃下，在氮氣氣氛下，向2-[3-(羥甲基)苯基]乙腈(2.3 g，15.63 mmol，1當量)和三乙胺(4.74 g，46.88 mmol，3當量)、DMAP(0.02 g，0.16 mmol，0.01當量)於DCM(10 mL)中的攪拌混合物中分批加入TBSCl(2.83 g，18.75 mmol，1.2當量)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。通過TLC以PE/EA(6:1，v/v)監測反應。在室溫下，用水淬滅反應。用CH 2Cl 2(3 x 100 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以PE/EA(6:1，v/v)來對殘餘物進行純化，以得到呈淺黃色液體的2-(3-{[(三級丁基二甲基矽基)氧基]甲基}苯基)乙腈I-21b(2.1 g，51.40%)。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 0.13 (6H, s), 0.97 (9H, s), 3.91 (2H, s), 4.78 (2H, s), 7.25 (1H, d), 7.30 (1H, d), 7.36 (1H, d), 7.38 (1H, d)。 步驟3.在0℃下，在氮氣氣氛下，向腈I-21b(2.1 g，8.03 mmol，1當量)於THF(25 mL)中的攪拌混合物中分批加入氫化鈉(289.14 mg，12.05 mmol，1.5當量)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。接下來，在0℃下，在氮氣氣氛下，分批加入碳酸二甲酯(2.89 g，32.13 mmol，4當量)。在室溫下，將最終反應混合物攪拌過夜。通過TLC以PE/EA(6:1，v/v)監測反應。在室溫下，用水淬滅反應。用乙酸乙酯(3 x 150 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以PE/EA(6:1，v/v)來對殘餘物進行純化，以得到呈淺黃色液體的2-(3-{[(三級丁基二甲基矽基)氧基]甲基}苯基)-2-氰基乙酸甲酯(1.9 g，74.04%)。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 0.13 (6H, s), 0.97 (9H, s), 3.78 (3H, s), 4.80 (2H, q), 7.32 - 7.51 (4H, m)。 步驟4.在0℃下，在氮氣氣氛下，向2-(3-{[(三級丁基二甲基矽基)氧基]甲基}苯基)-2-氰基乙酸甲酯(1.9 g，5.95 mmol，1當量)和(Boc) 2O(5.19 g，23.79 mmol，4當量)和CoCl 2.6H 2O(8.9 g，8.96 mmol，1.5當量)於甲醇(50 mL)中的攪拌混合物中分批加入NaBH 4(1.80 g，47.58 mmol，8當量)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。過濾所得混合物。將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以PE/EA(5:1，v/v)來對殘餘物進行純化，以得到呈淺黃色液體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(3-{[(三級丁基二甲基矽基)氧基]甲基}苯基)丙酸甲酯(1.2 g，47.63%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 324.20。 步驟5.在60℃下，在氮氣氣氛下，將含3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(3-{[(三級丁基二甲基矽基)氧基]甲基}苯基)丙酸甲酯(1.2 g，2.83 mmol，1當量)的甲醇(1 mL)和含LiOH.H 2O(237.72 mg，5.67 mmol，2當量)的H 2O(1 mL)的溶液攪拌過夜。用HCl(1 M)將混合物酸化至pH 5。將所得混合物真空濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水，0%至5%梯度，30分鐘；檢測器，UV 220 nm。這得到呈灰白色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-[3-(羥甲基)苯基]丙酸I-21(530 mg，63.35%)。LCMS: m/z (ESI), [M- tBu] += 240.06。 中間體 I-22 的合成 步驟1：向氰基乙酸乙酯(10 g，88.41 mmol，1.00當量)於DMF(50 ml)中的溶液中分批加入氫化鈉(2.55 g，106.09 mmol，1.2當量)，並且在0℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。隨後，在0℃下，逐滴加入含4-氟硝基苯I-22a(8.73 g，61.87 mmol，0.70當量)的二噁烷(50 ml)。在80℃下，將所得混合物攪拌12小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於DCM(300 mL)中。用2 x 250 mL HCl(1 M)和2 x 250 ml水和1 x 250 mL飽和鹽水洗滌所得混合物。將所得混合物減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(8:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈紅色油狀物的2-氰基-2-(4-硝基苯基)乙酸乙酯I-22b(11.8 g，55.37%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 235.10。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 1.20 (3H, t), 4.15 (2H, m), 5.97 (1H, s), 7.74 (2H, d), 8.29 (2H, d)。 步驟2：在0℃下，在氮氣氣氛下，將腈I-22b(1 g，4.54 mmol，1當量)於甲醇中的溶液用Boc 2O(3.96 g，18.17 mmol，4當量)和CoCl 2.6H 2O(2.81 g，11.81 mmol，2.6當量)處理5分鐘。隨後，在0℃下，分批加入NaBH 4(1.37 g，36.34 mmol，8當量)。在室溫下，將所得混合物攪拌2小時。在室溫下，用水淬滅反應。過濾所得混合物，並且用甲醇(3 x 20 mL)洗滌濾餅。用CH 2Cl 2(3 x 100 mL)萃取水層。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(2:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的3-((三級丁氧基羰基)胺基)-2-(4-((三級丁氧基羰基)胺基)苯基)丙酸乙酯I-22c(500 mg，27.91%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 409.25。 步驟3：在室溫下，向100 mL圓底燒瓶中加入含酯I-22c(500 mg，1.27 mmol，1當量)和LiOH.H 2O(106.37 mg，2.54 mmol，2當量)的THF(5 mL)和H 2O(5 mL)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌15小時。用HCl(1 M)將混合物酸化至pH 5。將所得混合物減壓濃縮。通過凍乾法乾燥所得油狀物。這得到呈黃色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-{4-[(三級丁氧基羰基)胺基]苯基}丙酸I-22(420 mg，68.74%)。LCMS: m/z (ESI), [M-H] -= 379.15。 中間體 I-23 的合成 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，將2-(2-甲氧基苯基)乙腈I-23a(3 g，20.38 mmol，1當量)和氫化鈉(391.04 mg，16.31 mmol，1.2當量)於THF(30 mL)中的混合物攪拌2小時。在室溫下，在氮氣氣氛下，向上述混合物中逐滴加入碳酸二甲酯(4.60 g，50.96 mmol，2.5當量)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。用水(40 mL)淬滅所得混合物。水層用CH 2Cl 2(3x20 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥。將所得混合物減壓濃縮。通過反相快速來對粗產物進行純化，以得到呈黃色固體的2-氰基-2-(2-甲氧基苯基)乙酸甲酯(900 mg，43.03%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 206.21。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 3.72 (3H, s), 3.83 (3H, d), 7.01 (1H, t), 7.12 (1H, d), 7.34 (1H, d), 7.42 (1H, d)。 步驟2：在室溫下，在氮氣氣氛下，向2-氰基-2-(2-甲氧基苯基)乙酸甲酯(1.9 g，9.26 mmol，1當量)和Boc 2O(4.04 g，18.52 mmol，2當量)於甲醇中的攪拌混合物中分批加入CoCl 2(3.01 g，23.15 mmol，2.5當量)和NaBH 4(2.80 g，74.07 mmol，8當量)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。用水(30 mL)淬滅所得混合物。水層用CH 2Cl 2(3 x 20 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥。將所得混合物減壓濃縮。通過反相快速來對粗產物進行純化，以得到呈黃色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(2-甲氧基苯基)丙酸甲酯I-23b(1.3 g，45.39%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 310.10。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 1.34 (9H, s), 3.20 (1H, d), 3.50 (1H, td), 3.56 (3H, s), 3.76 (3H, s), 4.11 (1H, t), 6.79 (1H, t), 6.91 (1H, t), 6.99 (1H, d), 7.15 (1H, d), 7.26 (1H, d)。 步驟3：在室溫下，在氮氣氣氛下，將3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(2-甲氧基苯基)丙酸甲酯(1.3 g，4.20 mmol，1當量)和LiOH(0.40 g，16.81 mmol，4當量)於甲醇(4 mL)和水(1 mL)中的混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。通過反相快速來對粗產物進行純化，以得到呈黃色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(2-甲氧基苯基)丙酸I-23(800 mg，64.46%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) 1.33 (9H, s), 3.08 - 3.24 (2H, m), 3.75 (4H, s), 6.61 (1H, s), 6.78 - 6.87 (1H, m), 6.84 - 6.97 (1H, m), 7.13 (1H, td), 7.22 (1H, dd)。 中間體 I-24 的合成 步驟1：在0℃下，在氮氣氣氛下，將4-氟苯乙腈I-24a(3 g，22.20 mmol，1當量)於THF中的溶液用氫化鈉(1.1 g，45.84 mmol，2.06當量)處理1小時。隨後，在室溫下，分批加入碳酸二甲酯(4.40 g，48.84 mmol，2.2當量)。在室溫下，將所得混合物攪拌12小時。在室溫下，用水淬滅反應。所得混合物用乙酸乙酯(3 x 30 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以PE/EA(3:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的2-氰基-2-(4-氟苯基)乙酸甲酯(1.1 g，15.01%)。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 3.74 (3H, s), 5.73 (1H, s), 7.25 - 7.35 (2H, m), 7.46 - 7.55 (2H, m)。 步驟2：在0℃下，在氮氣氣氛下，將2-氰基-2-(4-氟苯基)乙酸甲酯(1 g，5.18 mmol，1當量)、Boc 2O(2.26 g，10.36 mmol，2.00當量)和CoCl 2.6H 2O(2.46 g，10.34 mmol，2.00當量)於甲醇中的混合物攪拌5分鐘。在0℃~rt下，向混合物中加入NaBH4(1.57 g，41.42 mmol，8當量)。過濾所得混合物，並且用CH 2Cl 2(3 x 30 mL)洗滌濾餅。將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以PE/EA(5:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(4-氟苯基)丙酸甲酯I-24b(400 mg，25.68%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 298.25。 步驟3.在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(4-氟苯基)丙酸甲酯I-24b(380 mg，1.28 mmol，1當量)、LiOH(61.22 mg，2.56 mmol，2.00當量)和THF(2 mL)、水(1 mL)。在60℃下，將所得混合物攪拌8小時。用濃HCl將混合物酸化至pH 4-6。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水，10%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm。這得到呈黃色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(4-氟苯基)丙酸I-24(260 mg，63.98%)。LCMS: m/z (ESI), [M-56] += 228.05。 中間體 I-25 的合成 步驟1：向(1H-苯並[d][1,2,3]三唑-1-基)甲醇I-25a(25 g，167.62 mmol)於甲苯(400 mL)中的溶液中加入胺基甲酸三級丁酯(19.64 g，167.62 mmol)和4-甲基苯磺酸水合物(64 mg，336.46 μmol，51.61 μL)，並且在120℃下，使用Dean-Stark分水器將溶液回流24小時。減壓蒸發一半甲苯，將溶液冷卻至0℃，並且對產物進行重結晶，以得到呈白色固體的N-(苯並三唑-1-基甲基)胺基甲酸三級丁酯I-25b(24 g，58%產率)。LCMS: t R= 1.55分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(6 mmol/L NH 4HCO 3)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 249.1 [M+H] +。 1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6) δ 8.42 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.96 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.57 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.44 - 7.38 (m, 1H), 5.88 (d, J = 6.7 Hz, 2H), 1.37 (s, 9H)。 步驟2：沿燒瓶側面向-78℃的含(R)-4-苄基噁唑烷-2-酮(9.1 g，51.35 mmol)的THF(100 mL)中緩慢加入2.5 M正丁基鋰(3.32 g，51.87 mmol，20.75 mL)，並且在-78℃下，將反應物攪拌20分鐘。接下來，將含有鋰陰離子的(R)-4-苄基噁唑烷-2-酮於THF中的溶液經插管加入2-(3-甲氧基苯基)乙醯氯I-25c(10.05 g，54.44 mmol)溶於THF(100 mL)中的預冷卻(-78℃)溶液中。在-78℃下，將反應物攪拌1小時，然後倒入NH4Cl(飽和)/HCl(1 M)(3:1)中並用乙酸乙酯萃取。合併的萃取液經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓蒸發。通過矽膠快速色譜柱並用乙酸乙酯/石油醚0至40%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分凍乾，以得到呈白色固體的(4R)-4-苄基-3-[2-(3-甲氧基苯基)乙醯基]噁唑烷-2-酮I-25d(12.19 g，73%產率)。LCMS: t R= 1.82分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(6 mmol/L NH 4HCO 3)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 326.2 [M+H] +。 1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6) δ 7.32 - 7.20 (m, 4H), 7.19 - 7.08 (m, 2H), 6.86 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 4.68 (ddd, J = 10.8, 7.6, 2.9 Hz, 1H), 4.34 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 4.25 (d, J = 15.9 Hz, 1H), 4.20 (dd, J = 8.9, 2.8 Hz, 1H), 4.10 (d, J = 15.9 Hz, 1H), 3.75 (s, 3H), 2.95 (ddd, J = 20.9, 13.5, 5.3 Hz, 2H)。 步驟3：經由插管向冷卻至-70℃的1 M LiHMDS(10.68 g，44.59 mmol)於THF(44.59 mL)中的溶液中加入(4R)-4-苄基-3-[2-(3-甲氧基苯基)乙醯基]噁唑烷-2-酮I-25d(12.19 g，37.47 mmol)於THF(60 mL)中的冷卻(-70℃)溶液，並且在-70℃下，將此混合物攪拌40分鐘。然後，經由插管加入同樣冷卻至-70℃的N-(苯並三唑-1-基甲基)胺基甲酸三級丁酯I-25b(11.16 g，44.96 mmol)於THF(60 mL)中的溶液。將此溶液溫熱至-25至-30℃並攪拌2小時。將混合物倒入乙酸乙酯和NH 4Cl(飽和)/HCl(1 M)(3:1)中，並且水相進一步用乙酸乙酯萃取一次以上。合併的有機物經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓蒸發。通過矽膠快速色譜柱並用乙酸乙酯/DCM 0至4%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分凍乾，以得到呈軟白色固體的N-[(2S)-3-[(4R)-4-苄基-2-氧代-噁唑烷-3-基]-2-(3-甲氧基苯基)-3-氧代-丙基]胺基甲酸三級丁酯I-25e(15 g，88%產率)。LCMS: t R= 1.95分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 455.3 [M+H] +。 1H NMR: (500 MHz, DMSO-d 6) δ 7.37 - 7.17 (m, 6H), 7.08 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 6.83 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 6.78 (s, 1H), 5.16 (dd, J = 8.4, 6.1 Hz, 1H), 4.68 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 4.25 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 4.17 (dd, J = 12.4, 10.3 Hz, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.67 - 3.57 (m, 1H), 3.29 - 3.17 (m, 1H), 3.02 (ddd, J = 20.6, 13.5, 4.9 Hz, 2H), 1.35 (s, 9H)。 步驟4：向冷卻至0℃的含N-[(2S)-3-[(4R)-4-苄基-2-氧代-噁唑烷-3-基]-2-(3-甲氧基苯基)-3-氧代-丙基]胺基甲酸三級丁酯I-25e(15 g，33.00 mmol)的THF(270 mL)和水(90 mL)中加入30%過氧化氫(16.36 g，144.26 mmol，14.87 mL，30%純度)和氫氧化鋰(1.03 g，42.90 mmol)。在0℃下，將溶液攪拌0.75小時，並且加入400 ml飽和硫酸鈉溶液。將混合物再攪拌15分鐘，然後用1 M HCl酸化至pH = 5(pH試紙)並用乙酸乙酯(200 mL x 3)萃取。合併的有機物經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓蒸發。通過矽膠快速色譜柱並用乙酸乙酯/含1%乙酸的石油醚0至40%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分凍乾，以得到呈白色固體的(2S)-3-(三級丁氧基羰基胺基)-2-(3-甲氧基苯基)丙酸I-25(8.7 g，89%產率)。 1H NMR: (500 MHz, DMSO-d 6) δ 12.33 (s, 1H), 7.24 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 3.79 - 3.63 (m, 4H), 3.74-3.71 (m, 4H) 3.42 (ddd, J = 13.3, 7.8, 5.4 Hz, 1H), 3.21 (dt, J = 13.3, 6.7 Hz, 1H), 1.33 (s, 9H)。SFC t R= 4.638分鐘, ee值 = 98.7%。 中間體 I-26 的合成 步驟1：在0℃下，向4-溴-苯乙腈I-26a(10 g，51.01 mmol，1當量)於THF(200 mL)中的攪拌混合物中加入氫化鈉(2.45 g，102.02 mmol，2當量)。在0℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。然後，向上述混合物中加入碳酸二甲酯(18.38 g，204.03 mmol，4當量)。反應後，用冰水(200 mL)淬滅所得混合物。用乙酸乙酯(3 x 100 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(10:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的2-(4-溴苯基)-2-氰基乙酸甲酯I-26b(6.1 g，47.07%)。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 3.74 (3H, s), 5.74 (1H, s), 7.41 (2H, m), 7.68 (2H, m)。 步驟2：向腈I-26b(5.0 g，19.68 mmol，1當量)於甲醇(35 mL)中的攪拌混合物中加入CoCl 2.6H 2O(1102.40 mg，39.36 mmol，2當量)、(Boc) 2O(8589.67 mg，39.36 mmol，2當量)。在0℃下，加入NaBH 4(4466.65 mg，118.07 mmol，6當量)。在25℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌4小時。反應後，用加入的冰水(100 mL)淬滅所得混合物。用乙酸乙酯(3 x 70 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(5:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的2-(4-溴苯基)-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙酸甲酯I-26c(4.0 g，56.74%)。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.34 (9H, d), 3.26 (1H, m), 3.48 (1H, m), 3.60 (3H, d), 3.85 (1H, t), 6.94 (1H, t), 7.24 (2H, m), 7.34 (1H, m), 7.53 (1H, m)。 步驟3：向酯I-26c(4.0 g，11.17 mmol，1當量)於甲醇(16 mL)中的攪拌混合物中加入含LiOH.H 2O(1874.09 mg，44.66 mmol，4當量)的水(4 mL)。在60℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌8小時。冷卻至25℃後，將所得混合物減壓濃縮。用水(20 mL)稀釋反應混合物，並且用HCl(1 M，30 mL)調節pH至2。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，A相水。B相ACN，0%至50%梯度，40分鐘；檢測器，UV 254 nm，30%保持20分鐘。蒸發溶劑後，得到呈黃色固體的2-(4-溴苯基)-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙酸I-26(3.2 g，83.26%)。LCMS: m/z (ESI), [M- t Bu] += 289.95。 中間體 I-27 的合成 步驟1：在室溫下，在空氣氣氛下，向1-溴-4-(2-甲氧基乙氧基)苯I-27a(1 g，4.35 mmol，1當量)和氰基乙酸甲酯(198.18 mg，2.00 mmol，0.46當量)和Pd(OAc) 2(97.61 mg，0.44 mmol，0.1當量)、t-BuOK(975.77 mg，8.70 mmol，2當量)於二噁烷(15 mL)中的攪拌溶液中加入Dppf(480.33 mg，0.87 mmol，0.2當量)。在70℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。所得混合物用乙酸乙酯(3 x 20 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以PE/EA(1:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的2-氰基-2-[4-(2-甲氧基乙氧基)苯基]乙酸甲酯(200 mg，9.26%)。 1H NMR (CDCl 3, 400 MHz) δ 3.48 (3H, s), 3.76 - 3.80 (2H, m), 3.82 (3H, s), 4.12 - 4.17 (2H, m), 6.98 (2H, d), 7.39 (2H, d)。 步驟2：在0℃下，在空氣氣氛下，向2-氰基-2-[4-(2-甲氧基乙氧基)苯基]乙酸甲酯(300 mg，1.20 mmol，1當量)和CoCl 2.6H 2O(572.69 mg，2.41 mmol，2當量)和(Boc) 2O(525.34 mg，2.41 mmol，2.00當量)於甲醇(10 mL)中的攪拌混合物中分批加入NaBH 4(364.24 mg，9.63 mmol，8當量)。在0℃下，在空氣氣氛下，將含混合物的甲醇攪拌過夜。在室溫下，用水(10 mL)淬滅反應。所得混合物用乙酸乙酯(3 x 15 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(15:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈白色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-[4-(2-甲氧基乙氧基)苯基]丙酸甲酯I-27b(100 mg，23.51%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H-boc] += 254。 步驟3：在0℃下，在氮氣氣氛下，向酯I-27b(200 mg，0.57 mmol，1當量)於THF(40 mL)和H 2O(10 mL)中的攪拌混合物中分批加入LiOH(40.66 mg，1.70 mmol，3當量)。在60℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。將混合物冷卻至室溫。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水(0.1% FA)，10%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm。這得到呈白色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-[4-(2-甲氧基乙氧基)苯基]丙酸I-27(90 mg，46.86%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H-boc] += 240。 中間體 I-28 的合成 步驟1：在0℃下，向2-(4-甲氧基苯基)乙腈I-28a(6 g，40.77 mmol，1當量)於THF(100 mL)中的溶液中加入含氫化鈉(1.47 g，61.15 mmol，1.5當量)60%的油。將混合物攪拌80分鐘。在0℃下，加入碳酸二甲酯(29.38 g，326.14 mmol，8當量)，並且將混合物溫熱至RT並攪拌4小時。反應混合物用水(100 mL)淬滅並用DCM(3 x 100 mL)萃取。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(8:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的2-氰基-2-(4-甲氧基苯基)乙酸甲酯(5.96 g，70.03%)。 步驟2：向2-氰基-2-(4-甲氧基苯基)乙酸甲酯(5.50 g，26.80 mmol，1當量)、(Boc) 2O(11.7 g，53.60 mmol，2當量)和CoCl 2.6H 2O(8.29 mg，34.84 mmol，1.3當量)於甲醇(10 mL)中的混合物中分批加入NaBH 4(40.56 g，107.21 mmol，4當量)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將混合物攪拌過夜。在0℃下，用水(50 mL)淬滅反應。所得混合物用DCM(3 x 40 mL)萃取。合併的有機層用飽和鹽水(1 x 100 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(5:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈無色油狀物的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(4-甲氧基苯基)丙酸甲酯I-28b(3.50 mg，38.16%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 310.15。 步驟3：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入酯I-28b(2 g，6.47 mmol，1當量)和LiOH.H 2O(0.54 g，12.93 mmol，2當量)和H 2O(4 mL)和甲醇(8 mL)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。用HCl(1 M)將殘餘物酸化至pH = 5。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水，0%至15%梯度，30分鐘；檢測器，UV 220 nm。通過凍乾法乾燥所得液體。這得到呈白色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(4-甲氧基苯基)丙酸I-28(1.38 g，70.83%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H- tBu] += 240.25。 中間體 I-29 的合成 步驟1：在0℃下，在空氣氣氛下，向2-(6-甲基吡啶-2-基)乙腈I-29a(500 mg，3.78 mmol，1當量)於THF(20 mL)中的攪拌溶液中分批加入氫化鈉(181.57 mg，7.57 mmol，2當量)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。在室溫下，向上述混合物中加入碳酸二甲酯(436.34 mg，4.54 mmol，1.2當量)。在室溫下，將所得混合物再攪拌2小時。通過在室溫下加入水/冰(20 mL)淬滅反應。用CH 2Cl 2(3 x 20 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(20:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈橙色固體的2-氰基-2-(6-甲基吡啶-2-基)乙酸甲酯(330 mg，45.86%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 191.20。 1H NMR (CDCl 3, 400 MHz) δ 2.49 (3H, s), 3.82 (3H, s), 6.49 (1H, d), 7.18 (1H, d), 7.54 (1H, dd)。 步驟2：在室溫下，在空氣氣氛下，向2-氰基-2-(6-甲基吡啶-2-基)乙酸甲酯(1.8 g，9.46 mmol，1當量)於甲醇(20 mL)中的攪拌溶液中逐滴加入CoCl 2.6H 2O(6.75 g，28.39 mmol，3當量)和(Boc) 2O(6.20 g，28.39 mmol，3當量)。在0℃下，向上述混合物中逐滴加入NaBH 4(2.86 g，75.71 mmol，8當量)。在室溫下，將所得混合物再攪拌過夜。通過在室溫下加入水(20 mL)淬滅反應。用CH 2Cl 2(3 x 20 mL)萃取所得混合物。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(50:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(6-甲基吡啶-2-基)丙酸甲酯I-29b(1 g，35.90%)。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.34 (9H, s), 2.43 (3H, s), 3.31 - 3.44 (1H, m), 3.50 - 3.60 (4H, m), 3.99 (1H, t), 6.87 (1H, t), 7.13 (2H, dd), 7.65 (1H, t)。 步驟3：在室溫下，向酯I-29b(1 g，3.40 mmol，1當量)於甲醇(20 mL)和H 2O(10 mL)中的攪拌溶液中加入LiOH(0.16 g，6.69 mmol，1.97當量)。在60℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，10%至20%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，以得到呈黃色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(6-甲基吡啶-2-基)丙酸I-29(865 mg，90.83%)。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.34 (9H, s), 2.41 (3H, s), 3.34 - 3.38 (2H, m), 3.45 (1H, t), 6.51 (1H, t), 6.99 (1H, d), 7.09 (1H, d), 7.51 (1H, t)。 中間體 I-30 的合成 步驟1：在室溫下，在空氣氣氛下，向氰基乙酸乙酯(3 g，26.52 mmol，1當量)和溴代環戊烷I-30a(4.74 g，31.83 mmol，1.2當量)於DMSO(50 mL)中的攪拌混合物中加入K 2CO 3(11.00 g，79.56 mmol，3當量)。在60℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。冷卻至室溫後，通過在室溫下加入水(20 mL)淬滅反應。用乙酸乙酯(3 x 20 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用鹽水(3x20 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，40%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，以得到呈黃色油狀物的2-氰基-2-環戊基乙酸乙酯(1.1 g，22.89%)。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.23 (3H, t), 1.28-1.41 (2H, m), 1.46-1.60 (2H, m), 1.60 -1.71 (2H, m), 1.71- 1.90 (2H, m), 2.40 (1H, ttd), 4.19-4.26 (2H, m)。 步驟2：在室溫下，在空氣氣氛下，向2-氰基-2-環戊基乙酸乙酯(900 mg，4.97 mmol，1當量)和CoCl 2.6H 2O(3.54 g，14.90 mmol，3當量)於甲醇(20 mL)中的攪拌混合物中逐滴加入(Boc) 2O(3.25 g，14.90 mmol，3當量)。在0℃下，在3分鐘內向上述混合物中分批加入NaBH 4(1.50 g，39.73 mmol，8當量)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。通過在0℃下加入水/冰(20 mL)淬滅反應，並且將混合物減壓濃縮。用乙酸乙酯(3 x 20 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用鹽水(3 x 20 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(1:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-環戊基丙酸乙酯I-30b(900 mg，63.51%)。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.18 (3H, s), 1.36 (9H, s), 1.50 - 1.67 (6H, m), 1.77 - 1.88 (2H, m), 2.35 (1H, td), 3.02 - 3.13 (2H, m), 3.13 - 3.19 (1H, m), 4.05 (2H, d), 6.86 (1H, t)。 步驟3：在室溫下，在空氣氣氛下，向酯I-30b(1.1 g，3.85 mmol，1當量)於甲醇(10 mL)和H 2O(5 mL)中的攪拌溶液中加入LiOH(184.63 mg，7.71 mmol，2當量)。在60℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。冷卻至室溫後，將所得混合物減壓濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，20%至30%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，以得到呈白色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-環戊基丙酸I-30(878 mg，88.52%)。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.36 (9H, s), 1.57 (8H, d), 1.83 (1H, s), 3.00 (2H, s), 6.52 (1H, s)。 中間體 I-31 的合成 步驟1：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(3-氰基苯基)丙酸甲酯 I-3d(300 mg，0.99 mmol，1當量)、NH 3水溶液(2.5 mL，64.20 mmol，65.13當量)和雷尼Ni(10 mg，0.12 mmol，0.12當量)的甲醇(10 mL)。在室溫下，在H 2氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。過濾所得混合物，並且用甲醇(2 x 20 mL)洗滌濾餅。將濾液減壓濃縮，以得到呈綠色油狀物的2-[3-(胺基甲基)苯基]-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙酸甲酯 I-31b(260 mg，77.94%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 309.15。 步驟2：在25℃下，在N 2氣氛下，向胺I-31b(240 mg，0.78 mmol，1當量)和多聚甲醛(1402.09 mg，15.56 mmol，20當量)於DCM(100 mL)中的溶液中加入三乙胺(157.51 mg，1.56 mmol，2當量)和MgSO 4(93.67 mg，0.78 mmol，1當量)。在25℃下，將混合物攪拌30分鐘。並且在25℃下，向所得混合物中加入NaBH(OAc) 3(659.78 mg，3.11 mmol，4當量)。在25℃下，將所得混合物攪拌12小時。過濾所得混合物，並且用甲醇(3 x 100 mL)洗滌濾餅。將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以PE/EA(3:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-{3-[(二甲基胺基)甲基]苯基}丙酸甲酯I-31c(115 mg，37.24%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 337.20。 步驟3：在25℃下，在N 2氣氛下，向酯I-31c(105 mg，0.31 mmol，1當量))於THF(20 mL)和H 2O(4 mL)中的溶液中加入LiOH.H 2O(26.19 mg，0.62 mmol，2當量)。在25℃下，將混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。這得到呈白色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-{3-[(二甲基胺基)甲基]苯基}丙酸I-31(100 mg，69.15%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 323.20。 中間體 I-32 的合成 步驟1：向溴化物I-26b(1.0 g，3.94 mmol，1當量)於1,4-二噁烷(10 mL)中的攪拌混合物中加入二甲基氧化膦(614.37 mg，7.87 mmol，2當量)、Pd(OAc) 2(176.72 mg，0.79 mmol，0.2當量)、XantPhos(683.20 mg，1.18 mmol，0.3當量)和K 3PO 4(2088.54 mg，9.84 mmol，2.5當量)。在80℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。冷卻至25℃後，用水(40 mL)稀釋所得混合物。用乙酸乙酯(3 x 50 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用水(3 x 30 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。然後，用DMF(5 mL)稀釋。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，10%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 220 nm，15%保持15分鐘。蒸發溶劑後，得到呈黃色固體的2-氰基-2-[4-(二甲基磷醯基)苯基]乙酸甲酯(220 mg，22.25%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 252.05。 步驟2：在0℃下，在氮氣氣氛下，向2-氰基-2-[4-(二甲基磷醯基)苯基]乙酸甲酯(660 mg，2.63 mmol，1當量)、CoCl 2.6H 2O(1875.16 mg，7.881 mmol，3當量)、(Boc) 2O(1146.75 mg，5.25 mmol，2當量)於MeOH(40 mL)中的攪拌混合物中分批加入NaBH 4(795.08 mg，21.02 mmol，8當量)。將所得混合物攪拌過夜。反應後，通過加入冰水(40 mL)淬滅反應混合物。用DCM(3 x 40 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以PE/EA(5:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-[4-(二甲基磷醯基)苯基]丙酸甲酯I-32b(330 mg，35.35%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H- tBu] += 300.10。 步驟3：在25℃下，在氮氣氣氛下，向酯I-32b(310 mg，0.87 mmol，1當量)於甲醇(4 mL)中的攪拌混合物中逐滴加入含LiOH.H 2O(146.41 mg，3.49 mmol，4當量)的水(1 mL)。在60℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。冷卻至25℃後，將所得混合物減壓濃縮並用甲醇(5 mL)稀釋。用HCl(1 M，10 mL)酸化溶液。向上述溶液中加入DCM(10 mL)。萃取後，將反應混合物減壓蒸發。用DMF(2 mL)稀釋殘餘物，並通過反相快速色譜法來對其進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，B相MeCN，A相水，10%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，16.5%保持20分鐘。凍乾後，這得到呈白色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-[4-(二甲基磷醯基)苯基]丙酸I-32(200 mg，67.17%)。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.33 (9H, s), 1.60 (6H, d), 3.27 (2H, m), 7.37 (2H, dd), 7.60 (2H, m)。 中間體 I-33 的合成 步驟1：在0℃下，向2-(吡啶-2-基)乙腈I-33a(2.0 g，16.93 mmol，1.00當量)於THF(30 mL)中的攪拌溶液中加入氫化鈉(812.53 mg，33.86 mmol，2當量)。在0℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌30分鐘。在0℃下，向上述混合物中逐滴加入碳酸二甲酯(3049.90 mg，33.86 mmol，2當量)。在25℃下，將所得混合物再攪拌3小時。通過在0℃下加入水(80 mL)淬滅反應。用乙酸乙酯(3 x 60 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用水(3 x 40 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用DCM/甲醇(6%)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的2-氰基- 2-(吡啶-2-基)乙酸甲酯(2.3 g，77.12%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 176.95。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 3.69 (3H, s), 6.88 (1H, t), 7.21 (1H, d), 7.84 (1H, ddd), 8.09 (1H, t)。 步驟2：在0℃，向2-氰基-2-(吡啶-2-基)乙酸甲酯(2.25 g，12.77 mmol，1當量)、CoCl 2.6H 2O(6077.14 mg，25.54 mmol，2當量)和(Boc) 2O(5574.69 mg，25.54 mmol，2當量)於甲醇(50 mL)中的攪拌混合物中加入NaBH 4(2898.85 mg，76.63 mmol，6當量)。在25℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌3小時。通過在0℃下加入水(80 mL)淬滅反應。過濾後，用DCM(60 mL x 3)萃取所得混合物。合併的有機層用水(3 x 50 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以PE/EA(3/1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(吡啶-2-基)丙酸甲酯I-33b(600 mg，16.76%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 281.05。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ1.34 (9H, s), 3.33 (1H, s), 3.42 (1H, dt), 3.55 (3H, dd), 4.04 (1H, q), 6.87 (1H, t), 7.30 (2H, m), 7.77 (1H, td), 8.51 (1H, m)。 步驟3：在25℃下，向酯I-33b(575 mg，2.05 mmol，1當量)於甲醇(4.0 mL)中的攪拌混合物中加入含LiOH(196.50 mg，8.20 mmol，4當量)的水(1.0 mL)。在70℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌3小時。冷卻至室溫後，將所得混合物真空濃縮並用甲醇(5 mL)稀釋。用HCl(1 M，10 mL)酸化溶液。向上述溶液中加入DCM(10 mL)。萃取後，將反應混合物減壓蒸發。用DMF(2 mL)稀釋殘餘物。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，B相MeCN，A相水，10%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，10.8%保持20分鐘。凍乾後，得到呈白色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(吡啶-2-基)丙酸I-33(387 mg，70.85%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 267.00。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.33 (9H, s), 3.39 (1H, d), 3.43 (1H, m), 3.54 (1H, t), 6.50 (1H, t), 7.15 (1H, m), 7.32 (1H, dd), 7.63 (1H, td), 8.40 (1H, m)。 中間體 I-34 的合成 步驟1：在0℃下，在空氣氣氛下，將(4-溴-2-甲氧基苯基)甲醇I-34a(2 g，9.21 mmol，1當量)於CH 2Cl 2中的溶液用三乙胺(2.80 g，27.64 mmol，3當量)和DMAP(11.26 mg，0.092 mmol，0.01當量)處理5分鐘。隨後，在0℃下，逐滴加入TBSCl(1.67 g，11.06 mmol，1.2當量)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。用水(100 mL)稀釋所得混合物。用CH 2Cl 2(3x100 mL)萃取水層。將合併的有機層減壓濃縮。通過製備型TLC以PE/EA(40:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的[(4-溴-2-甲氧基苯基)甲氧基](三級丁基)二甲基矽烷(2.56 g，83.86%)。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 0.12 (6H, s), 0.97 (9H, s), 3.84 (3H, s), 4.70 (2H, d), 7.06 - 7.14 (2H, m), 7.31 (1H, dt)。 步驟2：在室溫下，向40 mL小瓶中加入含[(4-溴-2-甲氧基苯基)甲氧基](三級丁基)二甲基矽烷(1 g，3.02 mmol，1當量)和氰基乙酸甲酯(358.88 mg，3.62 mmol，1.20當量)和Pd(OAc) 2(67.76 mg，0.30 mmol，0.1當量)和dppf(333.43 mg，0.60 mmol，0.2當量)和t-BuOK(1.02 g，9.05 mmol，3當量)的1,4-二噁烷(8 mL)。在90℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。用飽和NH 4Cl(水溶液)將混合物酸化至pH 5。在室溫下，將所得混合物攪拌30分鐘。用乙酸乙酯(3 x 100 mL)萃取水層。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。通過製備型TLC以PE/EA(4:1，v/v)來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的2-(4-{[(三級丁基二甲基矽基)氧基]甲基}-3-甲氧基苯基)-2-氰基乙酸甲酯I-34b(350 mg，33.18%)。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 0.09 (6H, d), 0.92 (9H, d), 3.74 (3H, d), 3.81 (3H, d), 4.68 (2H, s), 5.62 (1H, s), 6.99 - 7.05 (2H, m), 7.42 (1H, dd)。 步驟3：在0℃下，向40 mL小瓶中加入含腈I-34b(550 mg，1.57 mmol，1當量)、CoCl 2.6H 2O(973.46 mg，4.09 mmol，2.6當量)和Boc 2O(1.37 g，6.30 mmol，4當量)的甲醇(5 mL)。在0℃下，向上述混合物中加入NaBH 4(476.25 mg，12.59 mmol，8當量)。在室溫下，將所得混合物攪拌2小時。在室溫下，用水淬滅反應。過濾所得混合物，並且用DCM(3 x 30 mL)洗滌濾餅。用DCM(3 x 30 mL)萃取濾液。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(40:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(4-{[(三級丁基二甲基矽基)氧基]甲基}-3-甲氧基苯基)丙酸甲酯(410 mg，57.43%)。LCMS: m/z (ESI), [M+Na] += 476.15。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 0.08 (6H, s), 0.91 (9H, s), 1.34 (9H, s), 3.3(1H, m), 3.41 - 3.54 (1H, m), 3.60 (3H, s), 3.78 (3H, s), 3.85 (1H, t), 4.59 - 4.67 (2H, m), 6.83 (2H, d), 6.94 (1H, t), 7.29 (1H, d)。 步驟4：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(4-{[(三級丁基二甲基矽基)氧基]甲基}-3-甲氧基苯基)丙酸甲酯(390 mg，0.86 mmol，1當量)、THF(2 mL，24.69 mmol，28.71當量)和LiOH.H 2O (72.15 mg，1.72 mmol，2.0當量)的水(1 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1.5小時。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水，0%至100%梯度，30分鐘；檢測器，UV 220 nm。將所得混合物真空濃縮，以得到呈灰色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(4-{[(三級丁基二甲基矽基)氧基]甲基}-3-甲氧基苯基)丙酸I-34(160 mg，42.33%)。LCMS: m/z (ESI), [M+Na] += 462.15。 中間體 I-35 的合成 步驟1：在室溫下，向100 mL圓底燒瓶中加入含3-溴-5-甲氧基吡啶I-35a(4 g，21.27 mmol，1當量)和氰基乙酸甲酯(2.53 g，25.53 mmol，1.2當量)、Pd(OAc) 2(477.62 mg，2.13 mmol，0.1當量)、dppf(2.35 g，4.26 mmol，0.2當量)、t-BuOK(7.16 g，63.82 mmol，3當量)的二噁烷(40 mL，590.14 mmol，27.74當量)。在70℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌5小時。用飽和NH 4Cl(水溶液)將混合物酸化至pH 6。用乙酸乙酯(3 x 60 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用DCM(3 x 3 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用CH 2Cl 2/甲醇(50:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈淺黃色固體的2-氰基-2-(5-甲氧基吡啶-3-基)乙酸甲酯(3.8 g，86.63%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] +=207.00。 步驟2：在0℃下，在氮氣氣氛下，向2-氰基-2-(5-甲氧基吡啶-3-基)乙酸甲酯(700 mg，3.40 mmol，1當量)和CoCl 2.6H 2O(1.21 g，5.09 mmol，1.5當量)於甲醇(15 mL)中的攪拌混合物中分批加入NaBH 4(385.27 mg，10.19 mmol，3當量)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。在室溫下，用水淬滅反應。過濾所得混合物，並且用甲醇(1 x 10 mL)洗滌濾餅。用DCM(3 x 100 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用DCM(2 x 3 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(35:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈淺黃色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(5-甲氧基吡啶-3-基)丙酸甲酯I-35b(250 mg，23.73%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 311.15。 步驟3：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含酯I-35b(80 mg，0.26 mmol，1當量)和LiOH(12.35 mg，0.52 mmol，2當量)的水(3 mL)和甲醇(3 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。用濃HCl將混合物酸化至pH 5。將所得混合物減壓濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水，28%至32%梯度，15分鐘；檢測器，UV 254 nm。將所得混合物真空濃縮。這得到呈灰白色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(5-甲氧基吡啶-3-基)丙酸I-35(40 mg，52.37%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 297.05。 中間體 I-36 的合成 步驟1：在室溫下，向250 mL圓底燒瓶中加入4-溴-1-甲基吡啶-2-酮I-36a(3 g，15.96 mmol，1當量)和氰基乙酸甲酯(1.90 g，19.15 mmol，1.2當量)和Pd(OAc) 2(358.21 mg，1.60 mmol，0.1當量)和Dppf(1.76 g，3.19 mmol，0.2當量)和t-BuOK(5.37 g，47.87 mmol，3當量)和1,4-二噁烷(100 mL)。在70℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。在室溫下，用水淬滅反應。用HCl(1 M)將混合物酸化至pH 5。用水(100 mL)稀釋殘餘物。用3 x 100 mL乙酸乙酯洗滌所得混合物。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於甲醇(5 mL)中。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水，0%至0%梯度，15分鐘；檢測器，UV 254 nm。將所得混合物減壓濃縮。這得到呈棕色固體的2-氰基-2-(1-甲基-2-氧代吡啶-4-基)乙酸甲酯(1.15 g，34.95%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 207.05。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.37 (1H, s), 3.45 (3H, s), 3.63 (3H, s), 6.75 (1H, s), 6.91 (1H, s), 7.23 (1H, d)。 步驟2：在0℃下，在空氣氣氛下，將2-氰基-2-(1-甲基-2-氧代吡啶-4-基)乙酸甲酯(1.1 g，5.34 mmol，1當量)於甲醇(15 mL)中的溶液用Boc 2O(4.66 g，21.34 mmol，4當量)和CoCl 2.6H 2O(3.30 g，13.87 mmol，2.6當量)處理5分鐘。隨後，在0℃下，分批加入NaBH 4(1.61 g，42.68 mmol，8當量)。在70℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌15小時。通過在室溫下加入水(80 mL)淬滅反應。過濾所得混合物，並且用DCM(3 x 10 mL)洗滌濾餅。用CH 2Cl 2(3 x 80 mL)萃取水層。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(18:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈白色油狀物的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(1-甲基-2-氧代吡啶-4-基)丙酸甲酯I-36b(445 mg，26.88%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 311.15。 步驟3：在室溫下，向100 mL圓底燒瓶中加入酯I-36b(445 mg，1.43 mmol，1當量)和LiOH.H 2O(120.33 mg，2.87 mmol，2當量)和THF(3 mL)和H 2O(3 mL)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。用HCl(1 M)將混合物酸化至pH 5。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於甲醇(5 mL)中。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水，0%至10%梯度，30分鐘；檢測器，UV 220 nm。將所得混合物減壓濃縮。通過凍乾法乾燥所得液體。這得到呈灰白色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(1-甲基-2-氧代吡啶-4-基)丙酸I-36(350 mg，82.37%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 297.15。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.43 (9H, d), 3.44 (2H, m), 3.56 (3H, d), 3.69 (1H, d), 6.43 (1H, d), 6.50 (1H, s), 7.63 (1H, d)。 中間體 I-37 的合成 步驟1：在0℃下，向4-溴-苯乙腈I-37a(10 g，51.01 mmol，1當量)於THF(120 mL)中的攪拌溶液中加入氫化鈉(4 g，166.68 mmol，3.27當量)。在0℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌1.5小時。然後，在0℃下，向上述混合物中加入碳酸二甲酯(18.38 g，204.03 mmol，4當量)。反應後，用水(20 mL)稀釋所得混合物。用乙酸乙酯(3 x 30 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以PE/EA(2:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的2-(4-溴苯基)-2-氰基乙酸甲酯(8.923 g，68.85%)。 1H NMR (CDCl 3, 400 MHz) δ 3.84 (3H, s), 4.72 (1H, s), 7.35 - 7.39 (2H, m), 7.56 - 7.62 (2H, m)。 步驟2：在室溫下，向250 mL圓底燒瓶中加入含2-(4-溴苯基)-2-氰基乙酸甲酯(2 g，7.87 mmol，1當量)、Boc 2O(3.44 g，15.74 mmol，2當量)和CoCl 2.6H 2O(3.75 g，15.74 mmol，2當量)的甲醇(70 mL)。在0℃下，向上述混合物中加入NaBH 4(1.79 g，47.23 mmol，6當量)。在0℃下，將所得混合物攪拌2小時。過濾所得混合物，並且用DCM(4 x 50 mL)洗滌濾餅。用CH 2Cl 2(3 x 100 mL)萃取濾液。將合併的有機層減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(1:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的2-(4-溴苯基)-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙酸甲酯I-37b(1.9 g，67.38%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H- tBu] += 301.9/303.90。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.33 (9H, s), 3.26 (1H, dt), 3.42 - 3.53 (1H, m), 3.60 (3H, s), 3.85 (1H, t), 7.19 - 7.25 (2H, m), 7.51 - 7.57 (2H, m)。 步驟3：在室溫下，向40 mL小瓶中加入含酯I-37b(1.9 g，5.30 mmol，1當量)、Zn(CN) 2(0.62 g，5.30 mmol，1.0當量)和Pd(PPh 3) 4(0.61 g，0.53 mmol，0.1當量)的DMF(10 mL)。在80℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌3小時。用飽和NaHCO 3(1x40 mL)洗滌殘餘物。用乙酸乙酯(3 x 200 mL)萃取所得混合物。將合併的有機層減壓濃縮。通過製備型TLC以PE/EA(1:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(4-氰基苯基)丙酸甲酯(1.0 g，61.95%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H-tBu] += 248.95。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.31 (9H, s), 3.51 (1H, ddd), 3.62 (3H, s), 4.01 (2H, dt), 7.44 - 7.50 (2H, m), 7.82 (2H, d)。 步驟4：在室溫下，向20 mL小瓶中加入含3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(4-氰基苯基)丙酸甲酯(900 mg，2.96 mmol，1當量)、甲醇(3.75 mL)和LiOH.H 2O(248.16 mg，5.91 mmol，2當量)的水(2.5 mL)。在70℃下，將所得混合物攪拌1.5小時。用HCl(水溶液)將混合物酸化至pH 5。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水，0%至100%梯度，30分鐘；檢測器，UV 254 nm。將所得混合物真空濃縮，以得到呈白色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(4-胺基甲醯基苯基)丙酸I-37(800 mg，87.74%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H- tBu] += 253.00。 中間體 I-38 的合成 步驟1：在80℃下，在空氣氣氛下，向2-(4-溴苯基)-2-[(三級丁氧基羰基)胺基]乙酸甲酯I-38a(500 mg，1.45 mmol，1當量)於二噁烷(30 mL)中的溶液中加入(Bu) 3SnCH 2OH(700 mg，2.18 mmol，1.5當量)和Pd(PPh 3) 4(84 mg，0.073 mmol，0.05當量)16小時。將混合物冷卻至室溫。所得混合物用水淬滅並用乙酸乙酯(3 x 30 mL)萃取。合併的有機層用飽和NaCl(3 x 30 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC，使用石油醚/乙酸乙酯(3:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到325 mg呈橙色油狀物的2-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-[4-(羥甲基)苯基]乙酸甲酯I-38b(76%)。LCMS: m/z (ESI), [M + H] += 296.14。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.39 (9H, s), 3.62 (3H, s), 5.22-5.26 (1H, d), 7.35-7.38 (2H, m), 7.52-7.59 (2H, m), 7.83-7.86 (1H, d)。 步驟2：在室溫下，在氮氣氣氛下，2-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-[4-(羥甲基)苯基]乙酸甲酯(390 mg，1.30 mmol，1當量)和LiOH.H 2O(109 mg，2.60 mmol，2當量)於THF(4 mL)和H 2O(1 mL)中的混合物5小時。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型HPLC來對殘餘物進行純化，條件如下(流動相由溶劑含0.1% NH 4HCO 3的水和含0.1% NH 4OH的乙腈組成。利用恆定梯度，流動相：95%水相/5%有機相至5%水相/95%有機相，25分鐘。流速恆定為40毫升/分鐘)，以得到312 mg呈黃色固體的[(三級丁氧基羰基)胺基][4-(羥甲基)苯基]乙酸I-38(84%)。LCMS: m/z (ESI), [M + H] += 282.13。 中間體 I-39 的合成 步驟1：向2-(3-溴苯基)乙酸甲酯I-39a(3.0 g，13.10 mmol，1當量)於DMF(4.0 mL)中的混合物中加入K 2CO 3(2171.96 mg，15.72 mmol，1.20當量)、聚甲醛(601.93 mg，13.36 mmol，1.02當量)。在70℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。冷卻至室溫後，用水(40 mL)稀釋所得混合物。用乙酸乙酯(3 x 40 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用水(3 x 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以PE/EA(3:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的2-(3-溴苯基)丙-2-烯酸甲酯(850 mg，26.92%)。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 3.76 (3H, s), 6.12 (1H, d), 6.33 (1H, d), 7.35 (1H, t), 7.44 (1H, ddd), 7.57 (1H, ddd), 7.64 (1H, t)。 步驟2：向2-(3-溴苯基)丙-2-烯酸甲酯(800 mg，3.32 mmol，1當量)於DMF(5 mL)中的混合物中加入1-甲基呱嗪(1661.86 mg，16.59 mmol，5當量)。在25℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。用EA(20 mL)稀釋反應混合物。用飽和NaHCO 3(2 x 10 mL)，然後用水(2 x 20 mL)，再用飽和NaCl(3 X 20 mL)洗滌殘餘物。所得有機層用Na 2SO 4乾燥。將所得混合物減壓濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，10%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，65%保持30分鐘。蒸發水後，得到呈黃色油狀物的2-(3-溴苯基)-3-(4-甲基呱嗪-1-基)丙酸甲酯I-39b(740 mg，65.35%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 341.00, 343.00。 步驟3：在室溫下，在氮氣氣氛下，向甲基呱嗪I-39b(740 mg，1.32 mmol，1當量)和Zn(CN) 2(154.84 mg，1.32 mmol，1.0當量)於DMF(3.0 mL)中的攪拌混合物中分批加入Pd(PPh 3) 4(152.39 mg，0.13 mmol，0.1當量)。在80℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2.0小時。將混合物冷卻至室溫。用水(20 mL)稀釋所得混合物。用乙酸乙酯(3 x 30 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用水(3 x 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，10%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，28%保持30分鐘。蒸發溶劑後，得到呈黃色油狀物的2-(3-氰基苯基)-3-(4-甲基呱嗪-1-基)丙酸甲酯(400 mg，52.50%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 288.05。 步驟4：在室溫下，在氮氣氣氛下，向2-(3-氰基苯基)-3-(4-甲基呱嗪-1-基)丙酸甲酯(400 mg，1.39 mmol，1當量)於THF(8.0 mL)中的攪拌混合物中逐滴加入和含LiOH･H 2O(175.22 mg，4.18 mmol，3.0當量)的水(2.0 mL)。在25℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌4.0小時。反應後，將所得混合物真空濃縮。用甲醇(4.0 mL)稀釋所得混合物。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，0%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，9.8%保持20分鐘，以得到呈白色固體的2-(3-氰基苯基)-3-(4-甲基呱嗪-1-基)丙酸I-39(240 mg，63.08%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 274.10。 中間體 I-40 的合成 步驟1：在室溫下，向100 mL 3頸圓底燒瓶中加入3-溴-5-甲氧基吡啶I-40a(8 g，42.55 mmol，1當量)和THF(40 mL)。在-10℃下，在氮氣氣氛下，向混合物中加入異丙基溴化鎂於THF中的1 M溶液(17.61 mL，51.06 mmol，1.2當量)。在-10℃下，在氮氣氣氛下，將混合物攪拌30分鐘。在-10℃下，向上述混合物中加入2-氧代丁酸乙酯(6.64 g，51.06 mmol，1.2當量)。在-8℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌3小時。通過在0℃下加入飽和NH 4Cl(水溶液)(50 mL)淬滅反應。用乙酸乙酯(3 x 30 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並蒸發，以得到粗油狀物。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(1:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的2-(5-甲氧基吡啶-3-基)-2-氧代乙酸乙酯I-40b(4.6 g，45.48%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 210.05。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.23 (3H, t), 3.91 (3H, s), 4.15 - 4.26 (2H, m), 7.61 (1H, dd), 8.23 (1H, d), 8.37 (1H, d)。 步驟2：在0℃下，向50 mL圓底燒瓶中加入酯I-40b(2 g，9.56 mmol，1當量)、鹽酸羥胺(0.86 g，12.43 mmol，1.3當量)、吡啶(0.83 g，10.52 mmol，1.1當量)和甲醇(10 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌6小時。用CH 2Cl 2(40 mL)稀釋所得混合物。用1 x 40 mL HCl(0.5 M)、1 x 40 mL水和1 x 40 mL飽和NaCl(水溶液)洗滌所得混合物。將有機層真空濃縮。通過過濾收集水相中的沉澱固體並用水(3 x 10 mL)洗滌。這得到呈白色固體的(2E)-2-(N-羥基亞胺基)-2-(5-甲氧基吡啶-3-基)乙酸乙酯(1.78 g，83.04%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 225.15。 步驟3：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入-2-(N-羥基亞胺基)-2-(5-甲氧基吡啶-3-基)乙酸乙酯(1.7 g，7.58 mmol，1當量)、Pd/C(1.86 g，17.44 mmol，2.3當量)和甲醇(100 mL)。在室溫下，在氫氣氣氛下，將所得混合物攪拌6小時。過濾所得混合物，並且用甲醇(6 x 30 mL)洗滌濾餅。將濾液減壓濃縮。這得到呈黃色油狀物的2-胺基-2-(5-甲氧基吡啶-3-基)乙酸乙酯I-40c(1.6 g，87.33%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 211.10。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.22 (3H, t), 4.19 (2H, m), 4.69 (1H, d), 4.88 (3H, s), 7.50 (1H, dq), 8.20 (2H, t)。 步驟4：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入胺I-40c(1.6 g，7.61 mmol，1當量)、三乙胺(3.85 g，38.06 mmol，5當量)、Boc 2O(3.32 g，15.22 mmol，2當量)和DCM(5 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌2小時。所得混合物用水(50 mL)淬滅，用DCM(2 x 50 mL)萃取。合併的有機層用飽和鹽水(1 x 50 mL)洗滌。有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(25:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的2-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(5-甲氧基吡啶-3-基)乙酸乙酯(1.38 g，49.19%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 311.20。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.19 - 1.29 (3H, m), 1.47 (9H, s), 3.91 (3H, s), 4.10 - 4.31 (2H, m), 7.46 (1H, q), 8.10 - 8.27 (2H, m)。 步驟5：在60℃下，將2-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(5-甲氧基吡啶-3-基)乙酸乙酯(1.38 g，4.45 mmol，1當量)和LiOH(0.21 g，8.89 mmol，2當量)於THF(13 mL)和水(13 mL)中的溶液攪拌6小時.用濃HCl將混合物/殘餘物酸化至pH 5。通過過濾收集沉澱固體並用甲醇(2 x 10 mL)洗滌。通過反相快速色譜法來對濾液進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水，0至50梯度，30分鐘；檢測器，UV 254 nm。這得到呈白色固體的[(三級丁氧基羰基)胺基](5-羥基吡啶-3-基)乙酸I-40(500 mg，41.41%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 283.15。 中間體 I-41 的合成 在70℃下，在空氣氣氛下，將3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(3-氰基苯基)丙酸甲酯I-3d(700 mg，2.30 mmol，1當量)和LiOH.H 2O(220.34 mg，9.20 mmol，4當量)於MeOH(8 mL)和H 2O(4 mL)中的混合物攪拌4.5小時。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，10%至100%梯度，50分鐘；檢測器，UV 220 nm。這得到呈黃色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(3-胺基甲醯基苯基)丙酸I-41(330 mg，46.53%)。LCMS: m/z (ESI), [M-H] += 307.05。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.40 (9H, s), 3.50 (2H, m), 3.73 (1H, t), 7.40 (1H, t), 7.56 (1H, d), 7.73 (1H, d), 7.86 (1H, t)。 中間體 I-42 的合成 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，向2-胺基-1-(吡啶-3-基)乙酮I-42a(1.0 g，7.35 mmol，1當量)和Et 3N(2.23 g，22.03 mmol，3當量)於DCM(20 mL)中的攪拌混合物中加入Boc 2O(1.92 g，8.81 mmol，1.2當量)。在室溫下，將所得混合物攪拌3小時。反應後，所得混合物用水(50 mL)稀釋，用乙酸乙酯(3 x 30 mL)萃取。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以PE/EA(1:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的N-[2-氧代-2-(吡啶-3-基)乙基]胺基甲酸三級丁酯(650 mg，37.46%)。LCMS: [M+H] += 237.05。 1H NMR (CDCl 3, 400 MHz) δ 1.52 (9H, s), 4.69 (2H, d), 5.50 (1H, s), 7.48 (1H, ddd), 8.25 (1H, dt), 8.85 (1H, dd), 9.19 (1H, m)。 步驟2：在0℃下，在氮氣氣氛下，向N-[2-氧代-2-(吡啶-3-基)乙基]胺基甲酸三級丁酯(640 mg，2.71 mmol，1當量)和鹽酸羥胺(564.70 mg，8.13 mmol，3當量)於甲醇(10 mL)中的攪拌混合物中逐滴加入吡啶(642.79 mg，8.13 mmol，3當量)。在室溫下，將所得混合物攪拌過夜。反應後，用水(20 mL)淬滅所得混合物。用乙酸乙酯(3 x 20 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮，以得到呈黃色油狀物的N-[2-(羥基亞胺基)-2-(吡啶-3-基)乙基]胺基甲酸三級丁酯I-42b(400 mg，58.77%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 252.00。 步驟3：在室溫下，在氮氣氣氛下，向羥基亞胺I-42b(465 mg，1.85 mmol，1當量)和甲酸(170.34 mg，3.70 mmol，2當量)於甲醇(4.0 mL)中的攪拌混合物中分批加入Zn(362.95 mg，5.55 mmol，3當量)。在室溫下，將所得混合物攪拌3小時。可以通過LCMS檢測到期望產物。反應後，將所得混合物真空濃縮。然後，用甲醇(4.0 mL)稀釋。用K 2CO 3將殘餘物鹼化至pH 9。濾出沉澱固體並用DCM/甲醇(10:1，v/v)洗滌。蒸發濾液，並通過反相快速色譜法進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，10%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 220 nm，45%保持20分鐘。蒸發溶劑後，得到呈黃色油狀物的N-[2-胺基-2-(吡啶-3-基)乙基]胺基甲酸三級丁酯I-42(287 mg，65.36%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 238.10。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.32 (9H, s), 2.05 (2H, s), 3.06 (2H, m), 3.90 (1H, t), 6.86 (1H, t), 7.32 (1H, dd), 7.73 (1H, dt), 8.41 (1H, dd), 8.49 (1H, d)。 中間體 I-43 的合成 步驟1：在室溫下，向250 mL圓底燒瓶中加入含[(三級丁氧基羰基)胺基](3-甲氧基苯基)乙酸I-43a(3 g，10.66 mmol，1當量)和1-甲基-呱嗪(1.28 g，12.80 mmol，1.2當量)、TCFH(4.49 g，16.00 mmol，1.5當量)、NMI(4.38 g，53.32 mmol，5當量)的MeCN(30 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌3小時。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水，0%至70%梯度，40分鐘；檢測器，UV 254 nm，以得到呈黃色油狀物的N-[1-(3-甲氧基苯基)-2-(4-甲基呱嗪-1-基)-2-氧代乙基]胺基甲酸三級丁酯I-43b(2.5 g，64.50%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 364.20。 步驟2：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含醯胺I-43b(2.2 g，6.05 mmol，1當量)和TFA(4 mL，53.85 mmol，8.90當量)的DCM(4 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌15小時。將所得混合物減壓濃縮。用NH 3·H 2O將殘餘物鹼化至pH 9。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水(5 mmol/L NH 4HCO 3)，10%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，以得到呈黃色油狀物的2-胺基-2-(3-甲氧基苯基)-1-(4-甲基呱嗪-1-基)乙酮I-43c(1.5 g，94.10%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H- tBu] +=264.05。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.62 (1H, d), 2.79 (3H, s), 3.16 (3H, d), 3.44 (1H, s), 3.85 (5H, s), 4.03 (1H, s), 5.55 (1H, s), 7.03 - 7.18 (3H, m), 7.45 (1H, t)。 步驟3：在室溫下，向40 mL小瓶中加入胺I-43c(1.5 g，5.70 mmol，1當量)和BH 3.C 4H 8O(20 mL，208.98 mmol，36.69當量)。在70℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌24小時。將混合物冷卻至室溫。通過在0℃加入甲醇(20 mL)淬滅反應。並且，將所得混合物攪拌2小時，減壓濃縮。並且，通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水，0%至50%梯度，40分鐘；檢測器，UV 220 nm，以得到呈無色油狀物的1-(3-甲氧基苯基)-2-(4-甲基呱嗪-1-基)乙胺I-43(500 mg，35.20%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H- tBu] += 250.05。 中間體 I-44 的合成 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，將三溴四丁基胺(6.42 g，13.32 mmol，1當量)和1-[4-(羥甲基)苯基]乙酮I-44a(2 g，13.32 mmol，1當量)於ACN(100 mL)和丙酮(10 mL)中的混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。用水(10 mL)稀釋所得混合物。用MTBE(2 x 20 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用水(7 x 20 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮，以得到呈黃色油狀物的2-溴-1-[4-(羥甲基)苯基]乙酮I-44b(2 g，65.56%)。所得混合物直接用於下一步。 步驟2：在室溫下，在氮氣氣氛下，將含NH 3(g)的甲醇(6.24 mL，43.66 mmol，5當量)和含溴化物I-44b(2 g，8.73 mmol，1當量)的THF(50 mL)的混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水(0.1% NH 3.H 2O)，0%至50%梯度，60分鐘；檢測器，UV 254 nm，以得到呈無色油狀物的2-胺基-1-[4-(羥甲基)苯基]乙酮I-44c(1 g，69.34%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 2.56 (2H, d), 4.62 (2H, s), 5.43 (1H, s), 7.53 (2H, d), 8.00 (2H, d), 8.21 (2H, s)。 步驟3：在室溫下，在氮氣氣氛下，將Boc 2O(1.32 g，6.05 mmol，1當量)、三乙胺(1.84 g，18.16 mmol，3當量)和胺I-44c(1 g，6.05 mmol，1當量)於DCM(20 mL)中的混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC水PE/EA(1:2，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的N-{2-[4-(羥甲基)苯基]-2-氧代乙基}胺基甲酸三級丁酯I-44d(500 mg，31.13%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 1.40 (9H, s), 4.43 (2H, d), 4.59 (2H, s), 5.38 (1H, s), 7.05 (1H, t), 7.47 (2H, d), 7.89-8.00 (2H, m)。 步驟4：在80℃下，在氮氣氣氛下，將NaBH 3CN(278.31 mg，4.43 mmol，2.5當量)、NH 4Oac (682.77 mg，8.86 mmol，5當量)和酮I-44d(470 mg，1.77 mmol，1當量)於甲醇(10 mL)中的混合物攪拌2小時。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，0%至100%梯度，60分鐘；檢測器，UV 254 nm，以得到呈黃色油狀物的N-{2-胺基-2-[4-(羥甲基)苯基]乙基}胺基甲酸三級丁酯I-44(110 mg，23.31%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 1.41 (9H, s), 4.43 (2H, d), 4.59 (3H, d), 5.37 (1H, t), 7.04 (1H, t), 7.47 (2H, d), 7.94 (2H, s)。 中間體 I-45 的合成 步驟1：在70℃下，在氮氣氣氛下，將丙酮酸甲酯I-45a(5 g，48.98 mmol，1當量)和4-甲基苯磺醯肼(10.03 g，53.88 mmol，1.1當量)於1,4-二噁烷(30 mL)中的溶液攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。通過用甲醇(20 mL)研磨來對殘餘物進行純化，以得到呈灰白色固體的[N'-(4-甲基苯磺醯基)肼羰基]甲酸甲酯I-45b(12.8 g，95.98%)。LCMS: m/z (ESI), [M+NH 4] += 288.05。 步驟2：在室溫下，向40 mL小瓶中加入含酯I-45b(5000 mg，18.36 mmol，1當量)、Pd 2(dba) 3(840.8 mg，0.92 mmol，0.05當量)、XPhos(1750.9 mg，3.67 mmol，0.2當量)、(三級丁氧基)鋰(3528.2 mg，44.06 mmol，2.4當量)和3-溴-5-甲氧基吡啶(3452.8 mg，18.36 mmol，1.0當量)的二噁烷(100 mL)。在110℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌20分鐘。在0℃下，用飽和NH 4Cl(水溶液)淬滅反應。所得混合物用水(100 mL)淬滅，用乙酸乙酯(3 x 100 mL)萃取。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並蒸發，以得到粗固體。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(45:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的2-(5-甲氧基吡啶-3-基)丙-2-烯酸甲酯I-45c(1500 mg，42.28%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 193.95。 步驟3：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含烯酸酯I-45c(1.5 g，7.76 mmol，1當量)、三乙胺(2.36 g，23.29 mmol，3當量)和1-甲基呱嗪(777.65 mg，7.76 mmol，1當量)的DMF(3 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1.5小時。將所得混合物真空濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水，0%至100%梯度，30分鐘；檢測器，UV 254 nm。將所得混合物真空濃縮，以得到呈白色油狀物的2-(5-甲氧基吡啶-3-基)-3-(4-甲基呱嗪-1-基)丙酸甲酯I-45d(900 mg，39.51%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 294.10。 步驟4：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含甲基呱嗪I-45d(900 mg，3.07 mmol，1當量)、THF(2 mL)和LiOH.H 2O(257.45 mg，6.14 mmol，2當量)的水(2 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌2小時。用HCl(水溶液)將混合物酸化至pH 5。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水，0%至100%梯度，30分鐘；檢測器，UV 254 nm。將所得混合物真空濃縮，以得到呈白色固體的2-(5-甲氧基吡啶-3-基)-3-(4-甲基呱嗪-1-基)丙酸I-45(330 mg，38.51%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 280.10。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 2.70 (3H, s), 3.05 (3H, dd), 3.36 (7H, s), 3.84 (3H, s), 3.94 (1H, t), 7.34 (1H, dd), 8.16 (1H, d), 8.22 (1H, d)。 中間體 I-46 的合成 在室溫下，向20 mL小瓶中加入含N-(3-氧代-3-苯基丙基)胺基甲酸三級丁酯I-46a(400 mg，1.60 mmol，1當量)、氰基硼氘化鈉(403.30 mg，6.42 mmol，4當量)和NH 4OAc(1.24 g，16.04 mmol，10當量)的甲醇(20.00 mL)。在60℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。用NaOH(2 mol/L)將混合物鹼化至pH 9。用乙酸乙酯(3 x 100 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(15:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的N-(3-胺基-3-苯基丙基)胺基甲酸三級丁酯I-46(250 mg，62.24%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 251.15。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.37 (9H, s), 1.66 - 1.80 (2H, m), 2.89 (2H, p), 3.89 (1H, t), 7.25 (1H, ddt), 7.29 - 7.41 (4H, m)。 中間體 I-47 的合成 步驟1：在0℃下，在空氣氣氛下，向N-甲氧基-N,1-二甲基呱啶-4-甲醯胺I-47a(1.0 g，5.37 mmol，1當量)於THF(10 mL)中的攪拌混合物中逐滴加入溴-(3-甲氧基苯基)鎂(1.16 g，5.48 mmol，1.02當量)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。反應後，在0℃下，用飽和NH 4Cl(水溶液)(40 mL)淬滅反應。用乙酸乙酯(3 x 40 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用水(3 x 40 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用CH 2Cl 2/甲醇(50:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈白色固體的4-(3-甲氧基苯甲醯基)-1-甲基呱啶I-47b(900 mg，71.85%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 234.10。 1H NMR (CDCl 3, 400 MHz) δ 1.90 (4H, m), 2.14 (2H, m), 2.34 (3H, s), 2.96 (2H, dd), 3.22 (1H, tt), 3.87 (3H, s), 7.12 (1H, ddd), 7.39 (1H, t), 7.50 (2H, m)。 步驟2：在0℃下，在空氣氣氛下，向甲基呱啶I-47b(880 mg，3.77 mmol，1當量)於甲醇(10 mL)中的攪拌混合物中分批加入NaBH 3CN(948.08 mg，15.09 mmol，4當量)和CH 3COONH 4(3488.89 mg，45.26 mmol，12當量)。在70℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。冷卻至室溫後，通過在0℃下加入飽和NH 4Cl(水溶液)(30 mL)淬滅反應。用CH 2Cl 2(3 x 40 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用水(3 x 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，10%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，40%保持25分鐘，以得到呈黃色固體的1-(3-甲氧基苯基)-1-(1-甲基呱啶-4-基)甲胺I-47(340 mg，38.47%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 235.15。 中間體 I-48 的合成 步驟1：在室溫下，向40 mL小瓶中加入含N-甲氧基-N,1-二甲基呱啶-4-甲醯胺I-47a(2 g，10.74 mmol，1當量)和溴(環己基)鎂(21.48 mL，21.48 mmol，2當量)的THF(10.00 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。在室溫下，用水淬滅反應。用乙酸乙酯(3 x 20 mL)萃取所得混合物。將合併的有機層減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用CH 2Cl 2/甲醇(20:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的4-環己烷羰基-1-甲基呱啶I-48b(270 mg，12.01%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 210.20。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.08 - 1.32 (5H, m), 1.35 - 1.48 (2H, m), 1.56 - 1.78 (7H, m), 1.86 (2H, td), 2.14 (3H, s), 2.46 (1H, ddt), 2.56 (1H, td), 2.75 (2H, dt)。 步驟2：在室溫下，向20 mL小瓶中加入含甲基呱啶I-48b(260 mg，1.24 mmol，1當量)、NH 4OAc(1.34 g，17.39 mmol，14當量)和氰基硼氘化鈉(312.21 mg，4.97 mmol，4當量)的甲醇(5 mL)。在60℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，水/MEOH，0%至100%梯度，30分鐘；檢測器，UV 254 nm。將所得混合物真空濃縮，以得到呈棕色油狀物的1-環己基-1-(1-甲基呱啶-4-基)甲胺I-48(180 mg，68.89%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 211.20。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 0.96 (1H, qd), 1.04 - 1.12 (1H, m), 1.17 (4H, ddt), 1.22 - 1.34 (3H, m), 1.44 (2H, ddd), 1.54 - 1.79 (7H, m), 2.08 (1H, d), 2.11 (3H, s), 2.70 - 2.81 (2H, m)。 中間體 I-49 的合成 步驟1：在室溫下，向250 mL圓底燒瓶中加入3-溴-7-硝基-1H-吲哚I-49a(20 g，82.97 mmol，1當量)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)吡唑-1-甲酸三級丁酯(26.85 g，91.27 mmol，1.1當量)、K 2CO 3(34.40 g，248.92 mmol，3當量)、Pd(dppf)Cl 2(3.04 g，4.15 mmol，0.05當量)、1,4-二噁烷(80 mL，0.023 mmol)和水(20 mL，27.76 mmol)。在80℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。通過用水(30 mL)研磨來對殘餘物進行純化。這得到粗固體(26 g)。用甲醇(50 mL)研磨粗固體，並且這得到呈棕黃色固體的4-(7-硝基-1H-吲哚-3-基)吡唑-1-甲酸三級丁酯I-49b(17 g，39.31%)。LCMS: m/z (ESI), [M-Boc] += 229.05。 步驟2：在0℃下，向100 mL圓底燒瓶中加入硝基-吲哚I-49b(2.5 g，7.61 mmol，1當量)和Zn(3.98 g，60.91 mmol，8當量)。在0℃下，向上述混合物中加入NH 4Cl(1.79 g，33.51 mmol，5當量)於水(10 mL)中的溶液。在0℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。過濾所得混合物，並且用乙酸乙酯(2 x 20 mL)洗滌濾餅。用水(50 mL)稀釋濾液，並且用EA(2 x 50 mL)萃取殘餘物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並蒸發，以得到粗固體。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(25:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈棕色固體的4-(7-胺基-1H-吲哚-3-基)吡唑-1-甲酸三級丁酯I-49(1 g，44.02%)。LCMS: m/z (ESI), [M- tBu] += 243.10。 中間體 I-50 的合成 步驟1：在90℃下，在氮氣下，將含3-溴-7-硝基-吲哚-1-甲酸三級丁酯I-50a(219 mg，641.93 μmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑(249.81 mg，770.32 μmol)、碳酸鉀(266.16 mg，1.93 mmol)和Pd(dppf)Cl 2(52.42 mg，64.19 μmol)的二噁烷(5.00 mL)和水(1.00 mL)攪拌16小時。減壓去除溶劑。通過矽膠柱色譜法並用甲醇/DCM 0至10%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分蒸乾，以得到呈棕色固體的三甲基-[2-[[4-(7-硝基-1H-吲哚-3-基)吡唑-1-基]甲氧基]乙基]矽烷I-50b(200 mg，87%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 359.3。 步驟2：向硝基-吲哚I-50b(200 mg，557.93 μmol)和鹽酸氨(298.45 mg，5.58 mmol)於乙醇(10 mL)和水(10 mL)中的混合物中加入鐵粉(155.79 mg，2.79 mmol)。然後，在80℃下，將反應混合物攪拌並加熱3小時。將反應混合物通過矽藻土過濾並用乙醇(3 x 10 mL)洗滌，並且將濾液減壓濃縮。將殘餘物溶於50 mL乙酸乙酯中，過濾，並且將濾液減壓濃縮，以得到呈棕色固體的3-[1-(2-三甲基矽基乙氧基甲基)吡唑-4-基]-1H-吲哚-7-胺I-50(160 mg，87%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 329.3。 中間體 I-51 的合成 步驟1：在-10℃下，向50 mL 3頸圓底燒瓶中加入1H-吲哚-7-甲酸甲酯I-51a(5 g，28.54 mmol，1當量)和DCE(50 mL)。在-10℃下，在氮氣氣氛下，向攪拌混合物中分批加入NBS(6.10 g，34.25 mmol，1.2當量)。所得混合物用水(80 mL)淬滅，用CH 2Cl 2(3 x 50 mL)萃取。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(5:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈白色固體的3-溴-1H-吲哚-7-甲酸甲酯I-51b(5.1 g，68.71%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] +=253.95。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 3.95 (3H, s), 7.27 (1H, t), 7.60 (1H, d), 7.74 (1H, dt), 7.88 (1H, dd), 11.51 (1H, s)。 步驟2：在80℃下，在氮氣氣氛下，將溴化物I-51b(2 g，7.87 mmol，1當量)、Pd(dppf)Cl 2.CH 2Cl 2(0.64 g，0.79 mmol，0.1當量)、K 2CO 3(3.26 g，23.61 mmol，3當量)和4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡唑(1.53 g，7.87 mmol，1當量)於1,4-二噁烷(4 mL)、水(1 mL)中的溶液攪拌12小時。所得混合物用水(30 mL)稀釋，用乙酸乙酯(3 x 30 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用CH 2Cl 2/甲醇(5:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的3-[1-(三級丁氧基羰基)吡唑-4-基]-1H-吲哚-7-甲酸甲酯I-51c(810 mg，19.41%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] +=242.00。 步驟3：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入酯I-51c(390 mg，1.14 mmol，1當量)、LiOH(136.81 mg，5.71 mmol，5當量)、THF(2.5 mL)和水(2.5 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌8小時。用HCl(1 M)將混合物酸化至pH 5。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水，0%至20%梯度，30分鐘；檢測器，UV 254 nm。這得到呈黃色固體的3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-甲酸I-51(60 mg，13.98%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 242.10。 中間體 I-52 的合成 步驟1：向2-胺基-2-(3-溴苯基)乙酸甲酯I-52a(2.0 g，8.19 mmol，1當量)於DCM(30 mL)中的混合物中加入(Boc) 2O(3576.56 mg，16.39 mmol，2當量)、TEA(2487.46 mg，24.58 mmol，3當量)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌4小時。反應後，將所得混合物真空濃縮並用DMF(4 mL)溶解。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeOH/水，10%至100%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，90%保持30分鐘，以得到呈白色固體的2-(3-溴苯基)-2-[(三級丁氧基羰基)胺基]乙酸甲酯I-52b(1.65 g，58.50%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M-Boc] += 243.95。 步驟2：向溴化物I-52b(1.2 g，3.49 mmol，1當量)於DMF(4.0 mL)中的混合物中加入Zn(CN) 2(417.55 mg，3.56 mmol，1.02當量)、Pd(PPh 3) 4(402.87 mg，0.35 mmol，0.1當量)。在70℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。冷卻至室溫後，用水(40 mL)稀釋所得混合物。用EtOAc(3 x 40 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用水(3 x 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以PE/EA(3:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈白色固體的2-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(3-氰基苯基)乙酸甲酯I-52c(990 mg，97.81%產率)。LCMS: m /z (ESI), [M-Boc+H] += 191.00。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.40 (9H, s),3.72 (3H, s) 5.38 (1H, d), 7.58 (1H, t), 7.75 (1H, m), 7.81 (1H, d), 7.88 (1H, d), 7.94 (1H, d)。 步驟3：向酯I-52c(990 mg，3.41 mmol，1當量)於THF(4.0 mL)中的混合物中加入含LiOH･H 2O(572.34 mg，13.64 mmol，4當量)的水(1.0 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌6小時。反應後，將所得混合物真空濃縮並用DMF(2 mL)稀釋。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，10%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，25%保持25分鐘。蒸發水後，得到呈白色固體的[(三級丁氧基羰基)胺基](3-氰基苯基)乙酸I-52(540 mg，57.31%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 277.00。 中間體 I-53 的合成 步驟1：在室溫下，在空氣氣氛下，向4-溴苯甲酸三級丁酯(20.11 g，78.21 mmol，1.55當量)和氰基乙酸甲酯(5 g，50.46 mmol，1.00當量)於二噁烷(40 mL)中的攪拌溶液中加入t-BuOK(14.16 g，126.19 mmol，2.50當量)和Pd(OAc) 2(1.13 g，5.03 mmol，0.10當量)dppf(5.57 g，10.08 mmol，0.20當量)。在70℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌3小時。通過在室溫下加入水(100 mL)淬滅反應。用EtOAc(3 x 50 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na2SO4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(1:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的4-(1-氰基-2-甲氧基-2-氧代乙基)苯甲酸三級丁酯I-53b(3.77 g，27.14%產率)。 1H NMR: (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.55 (9H, s), 3.72 (3H, d), 5.84 (1H, s), 7.54 - 7.61 (2H, m), 7.94 - 8.02 (2H, m)。 步驟2：在0℃下，向腈I-53b(3.77 g，13.69 mmol，1當量)和CoCl 2.6H 2O(9.77 g，41.08 mmol，3當量)和(Boc) 2O(8.97 g，41.08 mmol，3當量)於MeOH(50 mL)中的攪拌溶液中分批加入NaBH 4(4.14 g，109.55 mmol，8當量)。在室溫下，將所得混合物再攪拌過夜。通過在室溫下加入冰/水(50 mL)淬滅反應。濾出沉澱固體並用DCM(3 x 20 mL)洗滌。用CH 2Cl 2(3 x 50 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(1:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的4-{3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-1-甲氧基-1-氧代丙-2-基}苯甲酸三級丁酯I-53c(2947 mg，56.71%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 380.45。 1H NMR: (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.41 (9H, s), 1.61 (9H, s), 3.43 (1H, dd), 3.63 (1H, dd), 3.70 (3H, s), 3.98 (1H, t), 7.40 (2H, d), 7.89 - 7.97 (2H, m)。 步驟3：在室溫下，在空氣氣氛下，向酯I-53c(2937 mg，7.74 mmol，1當量)於MeOH(20 mL)和H 2O(10 mL)中的攪拌溶液中加入LiOH(741.50 mg，30.96 mmol，4當量)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌3小時。將所得混合物減壓濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，90%至100%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm。這得到呈白色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-[4-(三級丁氧基羰基)苯基]丙酸I-53(2.5 g，88.39%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 366.20。 1H NMR: (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.41 (9H, d), 1.60 (8H, s), 2.88 (1H, s), 3.01 (1H, s), 3.44 (1H, dd), 3.53 (1H, dd), 3.73 (1H, q), 7.46 (2H, d), 7.88 (2H, d)。 中間體 I-54 的合成 步驟1：在0℃下，在氮氣氣氛下，向3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(3-氰基苯基)丙酸甲酯I-3d(200 mg，0.66 mmol，1當量)和CoCl 2.6H 2O(469.05 mg，1.97 mmol，3當量)於MeOH(10 mL)中的溶液中加入Boc 2O(430.26 mg，1.97 mmol，3當量)。在0℃下，向混合物中加入NaBH 4(124.30 mg，3.29 mmol，5當量)。在0℃下，將反應物攪拌2小時。過濾所得混合物，並且用MeOH(3 x 20 mL)洗滌濾餅。將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以PE: EA(2:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈白色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(3-{[(三級丁氧基羰基)胺基]甲基}苯基)-丙酸甲酯I-54a(180 mg，47.94%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 409.10。 步驟2：在室溫下，在氮氣氣氛下，向酯I-54a(180 mg，0.44 mmol，1當量)於THF(10 mL)和H 2O(5 mL)中的溶液中加入LiOH.H 2O(36.98 mg，0.88 mmol，2當量)。在室溫下，將混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，ACN/水，10%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 220 nm。這得到呈白色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(3-{[(三級丁氧基羰基)胺基]甲基}苯基)-丙酸I-54(159 mg，91.27%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 395.10。 中間體 I-55 的合成 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，向1-(苄氧基)-4-溴苯(8232.15 mg，31.29 mmol，1.55當量)、t-BuOK(5662.23 mg，50.46 mmol，2.5當量)和Pd(OAc) 2(453.15 mg，2.02 mmol，0.1當量)於二噁烷(50.00 mL，590.18 mmol)中的攪拌混合物中逐滴加入dppf(2229.81 mg，4.04 mmol，0.2當量)和氰基乙酸甲酯(2 g，20.18 mmol，1當量)。在70℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌3小時。將所得混合物減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(4:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的2-[4-(苄氧基)苯基]-2-氰基乙酸甲酯I-55b(1.955 g，34.43%產率)。 1H-NMR: (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 3.72 (3H, s), 5.13 (2H, s), 5.59 (1H, s), 7.09 (2H, m), 7.40 (7H, m)。 步驟2：在0℃下，在空氣氣氛下，向腈I-55b(500 mg，1.78 mmol，1當量)和CoCl 2.6H 2O(1268.63 mg，5.33 mmol，3當量)於MeOH(2 mL)中的攪拌混合物中分批加入Boc 2O(1163.74 mg，5.33 mmol，3當量)和NaBH 4(168.10 mg，4.44 mmol，2.5當量)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。在室溫下，用水淬滅反應。過濾所得混合物，並且用MeOH(2 x 4 mL)洗滌濾餅。將濾液減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(3:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈白色固體的2-[4-(苄氧基)苯基]-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙酸甲酯I-55c(371 mg，54.15%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M- tBu] += 330.15。 步驟3：在室溫下，在空氣氣氛下，將酯I-55c(371 mg，0.96 mmol，1當量)和LiOH.H 2O(121.16 mg，2.89 mmol，3當量)於THF(4 mL)和H 2O(1 mL)中的混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，10%至50%梯度，50分鐘；檢測器，UV 254 nm。這得到呈黃色固體的2-[4-(苄氧基)苯基]-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙酸I-55(150 mg，41.96%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M-H] -= 370.10。 1H NMR: (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.34 (9H, s), 3.10 -3.24 (3H, m), 5.05 (2H, s), 6.50 (1H, d), 6.82 -6.92 (2H, m), 7.10 -7.17 (2H, m), 7.28 -7.35 (1H, m), 7.35 -7.41 (2H, m), 7.41 -7.46(2H, m)。 中間體 I-56 的合成 步驟1：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入環己烷乙酸I-56a(2500 mg，17.58 mmol，1.0當量)和SOCl 2(1.5 mL，20.68 mmol)。在80℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將反應混合物冷卻至室溫。在室溫下，向上述混合物中加入三溴化磷(4.26 mL，44.83 mmol，2.55當量)、溴(3512.00 mg，21.98 mmol，1.25當量)。在80℃下，將所得混合物再攪拌2小時。將混合物冷卻至室溫。然後，向上述溶液中加入MeOH(2.5 mL)。在70℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。將混合物冷卻至室溫。在室溫下，用飽和NaS 2O 3(水溶液)(50 mL)淬滅反應。用DCM(2 x 50 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並蒸發，以得到粗固體。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(5:1，v/v)洗脫來對粗固體進行純化，以得到呈灰白色油狀物的2-溴-2-環己基乙酸甲酯I-56b(2000 mg，40.25%產率)。 1H NMR: (CDCl 3, 400 MHz) δ 0.90 - 1.21 (4H, m), 1.27 (2H, qt), 1.60 - 1.81 (5H, m), 1.88 (1H, tdt), 2.06 (1H, dtd), 3.77 (3H, s), 4.02 (1H, d)。 步驟2：在室溫下，向40 mL小瓶中加入含溴化物I-56b(2000 mg，8.52 mmol，1當量)、1-甲基-呱嗪(1022.44 mg，10.21 mmol，1.2當量)、K 2CO 3(3526.84 mg，25.52 mmol，3.0當量)的ACN(20.0 mL)。在80℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌12小時。將混合物冷卻至室溫。將所得混合物減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用CH 2Cl 2/MeOH(20:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈灰白色固體的2-環己基-2-(4-甲基呱嗪-1-基)乙酸甲酯I-56c(950 mg，24.23%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 255.15。 1H NMR: (CDCl 3, 400 MHz) δ 0.83 - 0.99 (3H, m), 1.15 - 1.32 (4H, m), 1.53 (1H, d), 1.78 (4H, dtd), 1.95 (1H, d), 2.30 (3H, s), 2.53 (6H, dd), 2.64 (2H, dt), 2.89 (1H, d), 3.68 (3H, s)。 步驟3：在70℃下，在氮氣氣氛下，將甲基呱嗪I-56c(590 mg，2.32 mmol，1當量)和LiOH.H 2O(194.66 mg，4.64 mmol，2當量)於MeOH(3.0 mL)和H 2O(3.0 mL)中的溶液攪拌2小時。將混合物冷卻至室溫。用1 M HCl(水溶液)將混合物酸化至pH 5。將所得混合物真空濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeOH/水，10%至50%梯度，30分鐘；檢測器，UV 220 nm。這得到呈灰白色固體的環己基(4-甲基呱嗪-1-基)乙酸I-56(240 mg，35.8%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 241.15。 中間體 I-57 的合成 步驟1：在0℃下，在空氣氣氛下，向3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(4-氰基苯基)丙酸甲酯I-14c(740 mg，2.43 mmol，1當量)和CoCl 2.6H 2O(1156.98 mg，4.86 mmol，2當量)於MeOH(10 mL)中的攪拌混合物中分批加入NaBH 4(919.81 mg，24.31 mmol，10當量)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌5小時。反應後，在0℃下，用水(30 mL)淬滅反應。過濾所得混合物，並且用MeOH(3 x 10 mL)洗滌濾餅。用EtOAc(3 x 20 mL)萃取濾液。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮，以得到粗產物。通過反相快速色譜法來對粗製品進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，10%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，15%保持20分鐘。減壓蒸發溶劑後，得到呈白色固體的2-[4-(胺基甲基)苯基]-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙酸甲酯I-57b(300 mg，40.01%產率)。LCMS: m/z (ESI), [2M+H] += 617.40。 步驟2：在0℃下，在空氣氣氛下，向胺I-57b(200 mg，0.649 mmol，1當量)和乙醯氯(51.93 mg，0.66 mmol，1.02當量)於DCM(3.0 mL)中的攪拌混合物中分批加入Et 3N(196.89 mg，1.95 mmol，3當量)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌3小時。反應後，用水(10 mL)稀釋所得混合物。用CH 2Cl 2(3 x 20 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/MeOH(30:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈白色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-[4-(乙醯胺基甲基)苯基]丙酸甲酯I-57c(100 mg，44.00%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M-Boc] += 251.15。 步驟3：在室溫下，在空氣氣氛下，向酯I-57c(150 mg，0.43 mmol，1當量)於MeOH(4.0 mL)中的攪拌混合物中逐滴加入含LiOH.H 2O(71.85 mg，1.71 mmol，4當量)的水(1.0 mL)。在60℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。冷卻至室溫後，將所得混合物減壓濃縮。用MeOH(2.0 mL)稀釋所得混合物。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，10%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，26%保持30分鐘。減壓蒸發溶劑後，得到呈白色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-[4-(乙醯胺基甲基)苯基]丙酸I-57(92 mg，63.89%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M+Na] += 359.00。 中間體 I-58 的合成 步驟1：在室溫下，向40 mL小瓶中加入3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(4-{[(三級丁基二甲基矽基)氧基]甲基}苯基)丙酸甲酯I-1e(1.5 g，3.54 mmol，1當量)和TBAF(2.78 g，10.62 mmol，3當量)和THF(25 mL)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌3小時。通過在室溫下加入水(50 mL)淬滅反應。用EtOAc(3 x 50 mL)萃取水層。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/EA(1:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-[4-(羥甲基)苯基]丙酸甲酯I-58a(975 mg，89.01%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 310.20。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.42 (9H, s), 3.39 (1H, m), 3.64 (5H, m), 4.60 (2H, s), 5.51 (1H, s), 7.31 (4H, m)。 步驟2：在室溫下，向40 mL小瓶中加入3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-[4-(羥甲基)苯基]丙酸甲酯(650 mg，2.10 mmol，1當量)和N-甲基胺基甲醯氯(432.24 mg，4.62 mmol，2.2當量)和TEA(1.06 g，10.51 mmol，5當量)和DCM(15 mL)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌3小時。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/MeOH(40:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(4-{[(甲基胺基甲醯基)氧基]甲基}苯基)-丙酸甲酯I-58b(570 mg，74.04%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 367.05。 步驟3：在室溫下，向100 mL圓底燒瓶中加入酯I-58b(570 mg，1.56 mmol，1.00當量)和LiOH.H2O(163.18 mg，3.89 mmol，2.5當量)和MeOH(4 mL)和水(2 mL)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌16小時。將所得混合物減壓濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeOH/水(0.1% FA)，0%至25%梯度，20分鐘；檢測器，UV 254 nm。將所得混合物減壓濃縮，以得到呈灰白色固體的3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(4-{[(甲基胺基甲醯基)-氧基]甲基}苯基)丙酸I-58(520 mg，94.86%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M+H-Boc] += 253.15。 中間體 I-59 的合成 步驟1：在0℃下，向50 mL圓底燒瓶中加入含2-(3-甲氧基苯基)乙酸甲酯I-59a(3 g，16.65 mmol，1當量)、t-BuOK(3.74 g，33.30 mmol，2當量)和4-碘呱啶-1-甲酸三級丁酯(6.73 g，21.642 mmol，1.3當量)的DMF(10 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌2小時。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(25:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的呱啶I-59b(2.02 g，33.38%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H- tBu] += 308.20。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 0.83 -0.97 (1H, m), 1.04 -1.17 (2H, m), 1.37 (9H, s), 1.65 (1H, dt), 2.07 (1H, qt), 2.66 (2H, d), 3.38 (1H, d), 3.59 (3H, s), 3.83 (1H, d), 3.90 -3.98 (1H, m), 6.81 - 6.92 (3H, m), 7.19 - 7.30 (1H, m)。 步驟2：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含呱啶I-59b(2.0 g，5.50 mmol，1當量)和TFA(1.5 mL)的DCM(3 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1.5小時。用飽和NaHCO 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9。用DCM(3 x 50 mL)萃取所得混合物。將合併的有機層減壓濃縮，以得到呈黃色油狀物的呱啶I-59c(1.3 g，89.71%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 264.20。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.08 - 1.23 (1H, m), 1.23 - 1.33 (1H, m), 1.33 - 1.46 (1H, m), 1.81 (1H, dt), 2.22 (1H, qt), 2.77 (1H, td), 2.87 (1H, td), 3.15 (1H, dt), 3.26 (1H, dt), 3.43 (1H,d), 3.57 (3H, s), 3.75 (3H, s), 6.81 - 6.95 (3H, m), 7.28 (1H, t), 8.25 (2H, s)。 步驟3：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含呱啶I-59c(1.3 g，4.94 mmol，1當量)、DIEA(3.19 g，24.69 mmol，5.0當量)、氰基硼氘化鈉(620 mg，9.87 mmol，2當量)和CH 2O(296 mg，9.88 mmol，2當量)的MeOH(2.5 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌過夜。在室溫下，用水淬滅反應。用EtOAc(3 x 10 mL)萃取所得混合物。將合併的有機層減壓濃縮，以得到呈黃色油狀物的甲基呱啶I-59d(1.1 g，80.34%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 278.25。 步驟4：在室溫下，向20 mL小瓶中加入含甲基呱啶I-59d(600 mg，2.16 mmol，1當量)的THF(2 mL)和含LiOH(104 mg，4.33 mmol，2當量)的水(2 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌3小時。用HCl(1 M)將混合物酸化至pH 5。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，水/MeOH，0%至30%梯度，40分鐘；檢測器，UV 254 nm，以得到呈白色固體的酸I-59(270 mg，47.40%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 264.20。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 0.95 - 1.16 (2H, m), 1.27 (1H, qd), 1.63 - 1.97 (4H, m), 2.14 (3H, s), 2.67 (1H, d), 2.79 (1H, d), 3.14 (1H, d), 3.73 (3H, s), 6.71 - 6.94 (3H, m), 7.23 (1H, t)。 中間體 I-60 的合成 步驟1：在室溫下，向20 mL小瓶中加入酯I-60a(2 g，11.10 mmol，1當量)、甲醛(0.67 g，22.20 mmol，2當量)、K 2CO 3(4.60 g，33.30 mmol，3當量)和DMF(2 mL)。在85℃下，在下，將所得混合物攪拌1小時。將混合物冷卻至室溫。所得混合物用EtOAc(30 mL)稀釋並用水(3 x 30 mL)洗滌。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以PE/EA(8:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈淺黃色油狀物的烯酸酯I-60b(1.3 g，60.88%)。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.82 (6H, d), 5.95 (1H, d), 6.31 (1H, d), 6.88 - 6.95 (1H, m), 6.95 - 7.02 (2H, m), 7.23 - 7.31 (1H, m)。 步驟2：在室溫下，向100 mL圓底燒瓶中加入烯醇鹽I-60b(1.3 g，6.76 mmol，1當量)、1-甲基呱嗪(2.71 g，27.05 mmol，4當量)、TEA(2.05 g，20.29 mmol，3當量)和DMF(10 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。所得混合物用EtOAc(50 mL)稀釋，用2 x 30 mL水和1 x 30 mL飽和鹽水洗滌。將所得混合物減壓濃縮。這得到呈棕黃色油狀物的甲基呱啶I-60c(1.7 g，81.33%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H ]+= 293.15。 步驟3.在室溫下，向80 mL小瓶中加入甲基呱啶I-60c(1 g，3.42 mmol，1當量)、LiOH(163.83 mg，6.84 mmol，2當量)、THF(5 mL)和水(5 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。用HCl(1 M)將混合物酸化至pH 5。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeOH/水，10%至50%梯度，30分鐘；檢測器，UV 220 nm。這得到呈白色固體的酸I-60(497 mg，51.16%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 279.15。 化合物的合成 實例 1( 外消旋體 ) 、實例 2( 對映異構體 1) 和實例 3( 對映異構體 2)N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-胺基-2-(4-(羥甲基)苯基)丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，將酸I-1(498.91 mg，1.69 mmol，1.2當量)和胺I-49(420 mg，1.41 mmol，1當量)、HATU(802.92 mg，2.11 mmol，1.5當量)、三乙胺(427.37 mg，4.22 mmol，3當量)於DMF(5 mL)中的混合物攪拌過夜。用乙酸乙酯(100 mL)稀釋所得混合物。用飽和NaHCO 3(1 x 80 mL)、水(2 x 80 mL)和飽和NaCl(1 x 80 mL)洗滌殘餘物。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，35%至65%梯度，40分鐘；檢測器，UV 254 nm，以得到呈灰白色固體的醯胺C-1a(500 mg，61.70%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 576.5。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.37 (9H, s), 1.62 (9H, s), 3.60 (1H, s), 4.08 (1H, s), 4.47 (2H, s), 5.13 (1H, s), 7.04 (1H, t), 7.10 (1H, s), 7.29 (2H, d), 7.38 (2H, d), 7.45 (1H, d), 7.60 (1H, d), 7.84 (1H, d), 8.26 (1H, s), 8.49 (1H, s), 9.97 (1H, s), 10.83 (1H, s)。 步驟2：通過製備型HPLC來對醯胺C-1a(250 mg)進行純化，條件如下(柱：CHIRALPAK ID, 2*25 cm, 5 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA)，流動相B：EtOH；流速：20毫升/分鐘；梯度：50% B，13分鐘；波長：220/254 nm；樣品溶劑：EtOH)，以得到呈灰白色固體的對映異構體醯胺C-1b(80 mg，32.00%)。t R= 7.48分鐘。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 576.2。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.44 (9H, s), 1.70 (9H, s), 3.48 (1H, dd), 3.79 (1H, dd), 4.11 (1H, dd), 4.62 (2H, s), 7.05 - 7.14 (2H, m), 7.38 (2H, d), 7.49 (2H, d), 7.64 (2H, q), 8.16 (1H, d), 8.42 (1H, d)，SFC: t R= 1.41分鐘, ee = 100%，和呈灰白色固體的對映異構體 C-1c(85.3 mg，32.52%)。t R= 9.78分鐘。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 576.2。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.44 (9H, s), 1.70 (9H, s), 3.48 (1H, dd), 3.79 (1H, dd), 4.11 (1H, dd), 4.62 (2H, s), 7.05 - 7.14 (2H, m), 7.38 (2H, d), 7.49 (2H, d), 7.64 (2H, q), 8.16 (1H, d), 8.42 (1H, d)。SFC: t R= 1.89分鐘, ee = 99.76%。 步驟3：(實例3，對映異構體2)：在0℃下，將對映異構體C-1c(33 mg，57.33 μmol)於DCM(1.48 mL)中的溶液在冰/水浴中冷卻並攪拌。然後，向反應物中逐滴加入三氟乙酸(261.45 mg，2.29 mmol，176.66 μL)。將所得混合物攪拌0.5小時。將反應物減壓濃縮。通過C18快速色譜柱並用MeCN/水(6 mmol/L NH 4HCO 3)0%至60%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分凍乾，以得到呈白色固體的胺實例3的對映異構體2(20.76 mg，93%產率)。LCMS: t R= 1.09分鐘，3分鐘色譜(5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 376.2 [M+H] +。 1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.80 (s, 1H), 10.83 (s, 1H), 7.94 (s, 2H), 7.57 (d, J = 12.1 Hz, 2H), 7.49 - 7.31 (m, 3H), 7.29 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 6.98 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 5.14 (s, 1H), 4.46 (s, 2H), 3.92 - 3.84 (m, 1H), 2.89 (dd, J = 11.7, 5.0 Hz, 1H)。 按照上述程式，以醯胺C1-b開始，可以得到實例2(對映異構體1)。 步驟4：(實例1，外消旋體)：在0℃下，向100 mL圓底燒瓶中加入含醯胺C-1a(60 mg，0.10 mmol，1當量)的DCM(3 mL)和TFA(1 mL)。在0℃下在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於甲醇(3 mL)中。用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：Xselect CSH C18 OBD 30*150 mm；流動相A：水(0.1% FA)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至18% B，7分鐘；波長：254; 220 nm；t R= 6.05)，以得到呈白色固體的外消旋體實例1(21.5 mg，54.94%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 376.3。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.37 (1H, s), 3.68 (1H, dd), 4.26 (1H, dd), 4.65 (2H, s), 7.04 - 7.12 (2H, m), 7.43 - 7.55 (5H, m), 7.62 - 7.69 (1H, m), 7.92 (2H, s)。 實例 5( 對映異構體 1) 和實例 6( 對映異構體 2)3,5-二甲基苯甲酸4-(1-((3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)胺基)-3-胺基-1-氧代丙-2-基)苄酯的製備 步驟1：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含醇C-1a(146 mg，0.25 mmol，1當量)和2,4-二甲基苯甲酸(45.71 mg，0.31 mmol，1.2當量)、EDCI(72.93 mg，0.38 mmol，1.5當量)、DMAP(30.98 mg，0.25 mmol，1當量)的DMF(5 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌4小時。通過加入水使產物沉澱。通過製備型HPLC來對粗產物(146 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD C18 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：55% B至85% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 8.25分鐘)，以得到呈灰白色固體的外消旋體酯C-5a(130 mg，72.42%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 708.30。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.36 (9H, s), 1.62 (9H, s), 2.31 (3H, s), 2.50 (3H, s), 3.35 - 3.42 (1H, m), 3.61 (1H, dt), 4.12 (1H, t), 5.28 (2H, s), 6.97 - 7.16 (4H, m), 7.40 - 7.53 (5H, m), 7.61 (1H, d), 7.78 (1H, d), 7.84 (1H, d), 8.27 (1H, s), 8.49 (1H, s), 10.02 (1H, s), 10.83 (1H, s)。 步驟2：通過製備型手性HPLC來對外消旋體酯C-5a(260 mg)進行純化，條件如下(柱：(R, R) WHELK-O1, 4.6*50 mm, 3.5 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA): (EtOH/DCM = 1:1，v/v)= 65:35(v/v)；流速：1毫升/分鐘；進樣體積：5ul mL)，以得到對映異構體酯C-5c，SFC: t R= 2.79分鐘, ee = 100%，和對映異構體酯C-5b，SFC: t R= 3.567分鐘, ee = 100%。 步驟3：在室溫下，向100 mL小瓶中加入含對映異構體酯C-5c(110 mg，0.16 mmol，1當量)的DCM(3 mL)和TFA(1 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌30分鐘。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於甲醇(3 mL)中。用NH 3水溶液將殘餘物鹼化至pH 8。在0℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。通過製備型HPLC來對粗產物(80 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：30% B至60% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.58分鐘)，以得到呈白色固體的實例6的對映異構體2(28.8 mg，36.51%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 508.25。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.35 (3H, s), 2.54 (3H, s), 3.08 (1H, dd), 3.46 (1H, dd), 4.01 (1H, dd), 5.33 (2H, s), 6.98 - 7.08 (2H, m), 7.08 - 7.15 (2H, m), 7.45 (1H, s), 7.48 - 7.57 (4H, m), 7.64 (1H, dd), 7.83 (1H, d), 7.91 (2H, s)。SFC: t R= 2.338分鐘, ee = 99.28%。 在室溫下，向100 mL小瓶中加入含對映異構體酯C-5b(110 mg，0.16 mmol，1當量)的DCM(3 mL)和TFA(1 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌30分鐘。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於甲醇(3 mL)中。用NH 3水溶液將殘餘物鹼化至pH 8。在0℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD C18 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：34% B至54% B，8分鐘；波長：254 nm；t R= 7.83分鐘)，以得到呈白色固體的實例5的對映異構體1(24.5 mg，42.71%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 508.25。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.35 (3H, s), 2.55 (3H, s), 3.04 (1H, dd), 3.43 (1H, dd), 3.96 (1H, dd), 5.34 (2H, s), 7.03 - 7.15 (4H, m), 7.42 - 7.54 (5H, m), 7.61 - 7.85 (2H, m), 7.91 (2H, s)。SFC: t R= 2.123分鐘, ee = 100%。 實例 7( 外消旋體 )N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-胺基-2-苯基乙醯胺(外消旋體)的製備 步驟1：向硝基-吲哚I-7a(5 g，11.30 mmol)和鹽酸胺(6.05 g，113.05 mmol)於EtOH(30 mL)和水(30 mL)中的混合物中加入鐵粉(3.16 g，56.52 mmol，401.63 μL)。然後，在80℃下，將反應混合物攪拌並加熱3小時。將反應混合物通過矽藻土過濾並用乙醇(50 mL x 3)洗滌，並且將濾液濃縮。將殘餘物溶於200 ml乙酸乙酯中，過濾，並且將濾液減壓濃縮，以得到呈棕色固體的胺I-7b(3.10 g，67%產率)。LCMS: t R= 2.07分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 413.2 [M+H] +。 步驟2：在室溫下，將含胺I-7b(3.1 g，7.52 mmol)、2-(三級丁氧基羰基胺基)-2-苯基-乙酸(3.21 g，12.78 mmol)和HATU(4.86 g，12.78 mmol)的NMP(20 mL)攪拌15分鐘。然後，在室溫下，加入DIPEA(4.37 g，33.83 mmol，5.89 mL)。在室溫下，將所得混懸液攪拌16小時。反應混合物用200 ml水稀釋，然後在室溫下攪拌30分鐘，過濾並用水(10 mL x 2)洗滌。收集固體並乾燥，以得到呈棕色固體的醯胺外消旋體C-7a(1.60 g，33%產率)。LCMS: t R= 2.13分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 646.7 [M+H] +。 步驟3：在90℃下，在氮氣下，將含外消旋體C-7a(200 mg，309.80 μmol)、4-溴-1-甲苯磺醯基-1H-吡唑(139.95 mg，464.70 μmol)、K 2CO 3(128.45 mg，929.41 μmol)和PdCl 2dppf(25.30 mg，30.98 μmol)的二噁烷(3.00 mL)和水(0.60 mL)攪拌16小時。減壓去除溶劑。通過矽膠快速色譜柱並用乙酸乙酯/石油醚0至40%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分蒸乾，以得到呈棕色固體的外消旋體醯胺C-7b(136 mg，59%產率)。LCMS: t R= 2.01分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 740.7 [M+H] +。 步驟4和步驟5：將外消旋體醯胺C-7b(136 mg，183.82 μmol)插入THF(0.60 mL)/MeOH(0.60 mL)中，隨後向反應物中加入含2 N氫氧化鈉(73.53 mg，1.84 mmol，34.52 μL)的水。在室溫下，將反應混合物攪拌3小時。當反應完成時，攪拌混合物並用冰/水浴將其冷卻至0℃。然後，加入飽和NH 4Cl水溶液(20 mL)，並用二氯甲烷(10 mL x 3)萃取。合併的有機層用鹽水(50 mL x 1)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，以得到粗外消旋體醯胺C-7c。將粗外消旋體醯胺溶於DCM(2.00 mL)中。攪拌反應物並在0℃下用冰/水浴將其冷卻。然後，向反應物中逐滴加入三氟乙酸(1.05 g，9.19 mmol，708.08 μL)。在0℃下，將所得混合物攪拌2小時。然後，將所得混合物減壓濃縮。通過C18快速色譜法並用MeCN/水(0.02% TFA)0%至30%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分凍乾，以得到呈棕色固體的外消旋體實例7(3.5 mg，7.88 μmol，4.28%產率，TFA鹽)。LCMS: t R= 0.93分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 332.4 [M+H] +。 1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6) δ 8.42 (s, 2H), 8.36 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 8.29 - 8.25 (m, 1H), 8.16 (dd, J = 7.5, 1.9 Hz, 1H), 8.10 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.96 - 7.84 (m, 5H), 7.60 (dd, J = 7.4, 1.0 Hz, 1H), 7.46 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.35 (s, 1H)。 實例 8(2R)-2-胺基-2-苯基-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]乙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向80 mL小瓶中加入胺I-49(120 mg，0.40 mmol，1當量)、(R)-[(三級丁氧基羰基)胺基](苯基)乙酸(151.61 mg，0.60 mmol，1.5當量)、TCFH(225.71 mg，0.80 mmol，2當量)、NMI(165.12 mg，2.01 mmol，5當量)和MeCN(5 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌8小時。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(40:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的醯胺(R)-C-8(160 mg，83.39%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H- tBu] += 476.20。 步驟2：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入醯胺(R)-C-8(120 mg，0.23 mmol，1當量)、TFA(1 mL)和DCM(3 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。用CH 2Cl 2(20 mL)稀釋所得混合物。將混合物冷卻至0℃。用NH 3水溶液將混合物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物(100 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3+0.1% NH 3水溶液)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：17% B至40% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.67分鐘)。通過製備型手性HPLC來對粗產物(60 mg)進行純化，條件如下(柱：CHIRAL ART Cellulose-SB, 2*25 cm, 5 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA)，流動相B：EtOH/DCM(1:1，v/v)；流速：20毫升/分鐘；梯度：45% B至45% B，16分鐘；波長：220/254 nm；t R-1 = 8.97分鐘；t R-2 = 12.51分鐘；樣品溶劑：EtOH/DCM(1:1，v/v)；進樣體積：0.7 mL)。通過製備型HPLC來對粗產物(32 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3+0.1% NH 3水溶液)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：17% B至40% B，8分鐘，40% B；波長：220 nm；t R= 7.67分鐘)，以得到呈白色固體的(R)-實例8(17.5 mg，23.34%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 332.10。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 4.76 (1H, s), 7.07 (1H, t), 7.14 (1H, dd), 7.31 - 7.39 (1H, m), 7.39 - 7.48 (3H, m), 7.59 (2H, dd), 7.65 (1H, dd), 7.92 (2H, s)。SFC: t R= 0.938分鐘, ee = 100%。 實例 9(2S)-2-胺基-2-苯基-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]乙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，將胺I-49(150 mg，0.50 mmol，1當量)和(S)-[(三級丁氧基羰基)胺基](苯基)乙酸(189.51 mg，0.75 mmol，1.5當量)、TCFH(211.60 mg，0.75 mmol，1.5當量)、NMI(144.48 mg，1.76 mmol，3.5當量)於MeCN(3 mL)中的溶液攪拌1小時。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(22:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的醯胺(S)-C-9(200 mg，74.83%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H- tBu] += 476.25。 步驟2：在室溫下，在氮氣氣氛下，將醯胺(S)-C-9(160 mg，0.27 mmol，1當量)和TFA(1.00 mL)於DCM(3 mL)中的溶液攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。用甲醇(2 mL)稀釋所得混合物。在0℃，用氨水將混合物鹼化至pH 9並攪拌30分鐘。通過製備型HPLC來對粗產物(200 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3+0.1% NH 3水溶液)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：17% B至40% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.77分鐘)，以得到呈灰白色固體的(S)-實例9(46.6 mg，20.74%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 332.15。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 4.75 (1H, s), 7.07 (1H, t), 7.14 (1H, d), 7.31 - 7.39 (1H, m), 7.43 (3H, dd), 7.59 (2H, d), 7.65 (1H, d), 7.91 (2H, s)。SFC: t R= 1.364分鐘, ee = 100%。 實例 10( 對映異構體 1)6-硝基氧基己酸[4-[(1S)-1-(胺基甲基)-2-氧代-2-[[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]胺基]乙基]苯基]甲酯的製備 步驟1：在70℃下，將含6-溴己酸C-10a(500 mg，2.56 mmol)和硝酸銀(566.09 mg，3.33 mmol，130.08 μL)的MeCN(12.5 mL)18小時。然後，將反應溶液減壓蒸發。然後，加入10 mL DCM。在室溫下，將混懸液攪拌15分鐘，過濾並減壓蒸發，以得到呈棕色油狀物的6-硝基氧基己酸C-10b(440 mg，97%產率). 1H NMR: (400 MHz, CDCl 3) δ11.18 (s, 1H), 4.45 (t, J= 6.6 Hz, 2H), 2.38 (t, J= 7.3 Hz, 2H), 1.83 - 1.63 (m, 4H), 1.56 - 1.40 (m, 2H)。 步驟2：在0℃下，用冰/水浴將6-硝基氧基己酸C-10b(23.08 mg，130.29 μmol)溶於DCM(1.50 mL)中。加入EDCI(24.98 mg，130.29 μmol)、DMAP(1.06 mg，8.69 μmol)和對映異構體醇C-1c(50 mg，86.86 μmol)。攪拌反應混合物並將其緩慢溫熱至25℃，持續16小時。所得混合物用水(50 mL)稀釋，用乙酸乙酯(20 mL x 3)萃取。合併的有機層用鹽水(60 mL x 1)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓蒸發，以得到呈棕色固體的對映異構體酯C-10c(62 mg，97%產率)。LCMS: t R= 2.07分鐘，3分鐘色譜(5-95% MeCN/水(6 mmol/L NH 4HCO 3)，waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 735.2 [M+H] +。 步驟3：在0℃下，將對映異構體C-10c(62.00 mg，84.38 μmol)於DCM(3.01 mL)中的溶液在冰/水浴中冷卻並攪拌。然後，向反應物中逐滴加入TFA(481.05 mg，4.22 mmol，325.03 μL)。將所得混合物攪拌2小時。將反應混合物減壓濃縮。通過C18快速色譜法並用MeCN/水(6 mmol/L NH 4HCO 3)0%至50%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分凍乾，以得到呈白色固體的硝基氧基酯實例10的對映異構體1(40 mg，89%產率)。LCMS: t R= 1.63分鐘，3分鐘色譜(5-95% MeCN/水(6 mmol/L NH 4HCO 3)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 535.3 [M+H] +。 1H NMR: (500 MHz, DMSO-d 6) δ 12.85 (s, 1H), 10.81 (s, 1H), 7.95 (s, 2H), 7.57 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 7.51 - 7.20 (m, 5H), 6.98 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 5.06 (s, 2H), 4.48 (t, J= 6.2 Hz, 2H), 3.98 - 3.84 (m, 1H), 3.29 - 3.26 (m, 1H), 2.98 - 2.84 (m, 1H), 2.35 (t, J= 7.0 Hz, 2H), 1.75 - 1.47 (m, 4H), 1.42 - 1.27 (m, 2H)。 實例 11( 對映異構體 1)5-(硝基氧基)戊酸4-(1-((3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)胺基)-3-胺基-1-氧代丙-2-基)苄酯的製備 步驟1：在70℃下，在氮氣氣氛下，將5-溴戊酸I-11a(1 g，5.52 mmol，1當量)和AgNO 3(1.9 g，11.05 mmol，2當量)於MeCN(15 mL)中的混合物攪拌24小時。反應對光敏感，應避光。將混合物冷卻至室溫。通過過濾收集沉澱固體並用二氯甲烷(5 x 40 mL)洗滌。過濾後，將濾液減壓濃縮，以得到600 mg呈無色油狀物的5-(硝基氧基)戊酸I-11b(67%)。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.58-1.63 (2H, m), 1.79-1.81 (2H, m), 2.23-2.29 (2H, m), 3.49-3.54 (2H, m), 12.08 (1H, s)。 步驟2：在0℃下，在氮氣氣氛下，向5-(硝基氧基)戊酸I-11b(120 mg，0.74 mmol，5當量)於DCM(10 mL)中的混合物中加入EDCI(57 mg，0.30 mmol，2當量)和DMAP(2 mg，0.016 mmol，0.1當量)30分鐘，隨後在0℃下逐滴加入醇C-1c(85 mg，0.15 mmol，1當量)。將混合物溫熱至室溫後，將反應物攪拌16小時。在室溫下，反應物用水(20 mL)淬滅，並用CH 2Cl 2(3 x 20 mL)萃取。合併的有機層用飽和NaCl(3 x 20 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC，使用二氯甲烷/甲醇(30:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到60 mg呈橙色固體的對映異構體C-11(40%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 721.31。 步驟3：在0℃下，在氮氣氣氛下，將對映異構體C-11(60 mg，0.08 mmol，1當量)和TFA(0.8 mL，10.74 mmol)於DCM(3 mL)中的混合物攪拌30分鐘。將所得混合物減壓濃縮。殘餘物用飽和NaHCO 3中和至pH 7~8，並用CH 2Cl 2(3 x 10 mL)萃取。合併的有機層用飽和NaCl(3 x 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型HPLC來對殘餘物進行純化，條件如下(流動相由溶劑含0.1% NH 4HCO 3的水和含0.1% NH 4OH的乙腈組成。利用恆定梯度，流動相：70%水相/30%有機相至47%水相/53%有機相，8分鐘。流速恆定為60毫升/分鐘)，以得到10.6 mg呈橙色固體的實例11的對映異構體1(24%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 521.25。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.60-1.69 (4H, m), 2.39 (2H, t), 2.88-2.93 (1H, m), 3.85-3.92 (1H, m), 4.50 (2H, t), 5.07 (2H, s), 6.96 (1H, t), 7.32-7.38 (3H, m), 7.43 (2H, d), 7.56-7.60 (2H, m), 7.96 (2H, d), 7.82-8.12 (2H, m), 10.78 (1H, s), 12.81-12.88 (1H, m)。 實例 12( 對映異構體 1)4-(硝基氧基)丁酸4-(1-((3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)胺基)-3-胺基-1-氧代丙-2-基)苄酯的製備 步驟1：在0℃下，在氮氣氣氛下，向4-溴丁酸C-12a(290 mg，1.75 mmol，5當量)於DCM(30 mL)中的混合物中加入EDCI(133 mg，0.70 mmol，2當量)和DMAP(4.2 mg，0.04 mmol，0.1當量)30分鐘，隨後加入醇C-1c(200 mg，0.35 mmol，1當量)。在室溫下，將反應物攪拌2小時。混合物用水(30 mL)淬滅，用CH 2Cl 2(3 x 30 mL)萃取，用飽和NaCl(3 x 20 mL)洗滌，並經無水硫酸鈉乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC，使用二氯甲烷/甲醇(30:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的1H-吲哚-3-基)-1H-溴酯C-12b(220 mg，88%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M + H] += 724.23。 步驟2：在70℃下，在氮氣氣氛下，將溴酯C-12b(120 mg，0.17 mmol，1當量)和AgNO 3(56 mg，0.34 mmol，2當量)於MeCN(15 mL)中的混合物攪拌2小時。反應對光敏感，應避光。將混合物冷卻至室溫。過濾所得混合物，並且用CH 2Cl 2(3 x 50 mL)洗滌濾餅，並減壓濃縮，以得到呈橙色固體的硝基氧基酯C-12c(25 mg，26%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M + H] += 707.2。 步驟3：在0℃下，在氮氣氣氛下，將硝基氧基酯C-12c(25 mg，0.04 mmol，1當量)和TFA(0.6 mL，8 mmol)於DCM(3 mL)中的混合物攪拌30分鐘。混合用氨中和至pH 7~8並減壓濃縮。通過製備型HPLC來對殘餘物進行進一步純化，條件如下(流動相由溶劑含0.1%甲酸的水和乙腈組成。利用恆定梯度，流動相：83%水相/17%有機相至70%水相/30%有機相，7分鐘。流速恆定為70毫升/分鐘)，以得到呈白色固體的實施例12的對映異構體1(2 mg，9%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M + H] += 507.35。 1H NMR: (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.92-1.96 (2H, m), 2.47-2.50 (2H, m), 3.03-3.07 (2H, m), 4.07-4.11 (1H, m), 4.54 (2H, t), 5.09 (2H, s), 6.97-7.01 (1H, m), 7.37 (3H, m), 7.46 (2H, d), 7.59 (2H, d), 7.95 (2H, s), 8.28 (1H, s), 10.08 (1H, br s), 10.83 (1H, s)。 實例 14(R)-N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-胺基-2-苯基丙醯胺的製備 步驟1：在90℃下，在氮氣下，將含胺I-7b(3.560 g，8.63 mmol)、4-溴吡唑-1-甲酸三級丁酯(3.20 g，12.95 mmol)、碳酸鉀(3.58 g，25.90 mmol)和PdCl 2dppf(705.11 mg，863.43 μmol)的二噁烷(60.00 mL)和水(12.00 mL)攪拌16小時。減壓去除溶劑。通過矽膠色譜柱並用乙酸乙酯/石油醚10至50%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分蒸乾，以得到胺I-14b(0.471 g，748.56 μmol，9%產率，72%純度)。LCMS: t R= 1.77分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 453.6 [M+H] +；和呈棕色固體的胺I-14a(3.19 g，6.88 mmol，80%產率，76%純度)。LCMS: tR = 1.43分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 353.6 [M+H] +。 步驟2：在0℃下，將胺I-14b(85 mg，135.09 μmol)、(R)-3-((三級丁氧基羰基)胺基)-2-苯基丙酸(39.42 mg，148.60 μmol)和DIPEA(26.19 mg，202.64 μmol，35.29 μL)於NMP(2.00 mL)中的攪拌混合物冷卻並攪拌。然後，在此溫度下，一次性加入HATU(56.80 mg，149.39 μmol)。在室溫下，將所得混合物攪拌17小時。然後，通過LCMS檢測反應，反應未完成。向反應物中加入更多的(R)-3-((三級丁氧基羰基)胺基)-2-苯基丙酸(107.52 mg，405.27 μmol)。在0℃下，將反應混合物冷卻並攪拌。在此溫度下，一次性加入更多的DIPEA(69.84 mg，540.36 μmol，94.12 μL)。在室溫下，將所得混合物攪拌31小時。通過C18快速色譜柱並用MeCN/水(6 mmol/L NH 4HCO 3)0至80%梯度洗脫來對溶液進行純化。將純級分凍乾，以得到呈白色固體的醯胺(R)-對映異構體C-14c(15 mg，16%產率)。LCMS: t R= 2.18分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 700.5 [M+H] +。 步驟3：在0℃下，將(R)-對映異構體C-14c(15 mg，21.43 μmol)於DCM(1.00 mL)中的溶液在冰/水浴中冷卻並攪拌。然後，向反應物中逐滴加入4 M HCl(72.76 mg，2.00 mmol，0.50 mL)。在0℃下，將所得混合物攪拌1小時。將反應混合物減壓濃縮。通過C18快速色譜法並用MeCN/水(6 mmol/L NH 4HCO 3)0%至50%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分凍乾，以得到呈白色固體的(R)-對映異構體C-14d(10 mg，93%產率)。LCMS: t R= 1.59分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 500.2 [M+H] +。 步驟4：將(R)-對映異構體C-14d(10 mg，20.02 μmol)的溶液溶於含1 M TBAF的THF(104.67 mg，400.34 μmol，0.40 mL)中。在80℃下，將反應物密封並加熱16小時。將反應溶液減壓蒸發。通過C18快速色譜柱並用CH 3CN/水(0.02% TFA)0至30%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分蒸乾，以得到呈棕色固體的(R)-對映異構體實施例14(4 mg，8.73 μmol，44%產率，TFA鹽)。LCMS: t R= 1.23分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 346.3 [M+H] +。 1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.75 (s, 1H), 10.20 (s, 1H), 7.97 (d, J = 12.6 Hz, 5H), 7.66 - 7.56 (m, 2H), 7.48 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 7.42 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 7.35 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 6.99 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 4.21 (dd, J = 9.4, 4.6 Hz, 1H), 3.58 - 3.55 (m, 1H), 3.16 - 3.12 (m, 1H)。 實例 15(S)-N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-胺基-2-苯基丙醯胺的製備 步驟1：在90℃下，在氮氣下，將含硝基-吲哚I-15a(219 mg，641.93 μmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑(249.81 mg，770.32 μmol)、碳酸鉀(266.16 mg，1.93 mmol，116.23 μL)和PdCl 2dppf(52.42 mg，64.19 μmol)於二噁烷(5.00 mL)和水(1 mL)攪拌16小時。減壓去除溶劑。通過矽膠柱色譜法並用甲醇/DCM 0至10%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分蒸乾，以得到呈棕色固體的吡唑I-15b(200 mg，87%產率)。LCMS: t R= 2.01分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 359.3 [M+H] +。 步驟2：向吡唑I-15b(200 mg，557.93 μmol)和鹽酸氨(298.45 mg，5.58 mmol)於乙醇(10 mL)和水(10 mL)中的混合物中加入鐵粉(155.79 mg，2.79 mmol)。然後，在80℃下，將反應混合物攪拌並加熱3小時。將反應混合物通過矽藻土過濾並用乙醇(10 mL x 3)洗滌，並且將濾液濃縮。將殘餘物溶於50 mL乙酸乙酯中，過濾，並且將濾液減壓濃縮，以得到呈棕色固體的胺I-15c(160 mg，87%產率)。LCMS: t R= 1.56分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 329.3 [M+H] +。 步驟3：在0℃下，將(S)-3-((三級丁氧基羰基)胺基)-2-苯基丙酸(40.38 mg，152.21 μmol)、胺I-15c(50 mg，152.21 μmol)和DIPEA(59.02 mg，456.64 μmol，79.54 μL)於NMP(2 mL)中的攪拌混合物冷卻並攪拌。然後，在此溫度下，一次性加入HATU(69.82 mg，183.63 μmol)。在0℃下，將所得混合物攪拌2小時。通過C18快速色譜柱並用MeCN/水0至60%梯度洗脫來對溶液進行純化。將純級分凍乾，以得到呈白色固體的醯胺(S)-對映異構體C-15(38 mg，43%產率)。LCMS: t R= 2.08分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 576.6 [M+H] +。 步驟4：在0℃下，將醯胺(S)-對映異構體C-15(38 mg，66.00 μmol)於DCM(2.00 mL)中的溶液在冰/水浴中冷卻並攪拌。然後，向反應物中逐滴加入4 M HCl(145.83 mg，4.00 mmol，1.00 mL)。在0℃下，將所得混合物攪拌2小時。將反應混合物減壓濃縮。通過C18快速色譜法並用MeCN/水(6 mmol/L NH 4HCO 3)0%至50%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分凍乾，以得到呈白色固體的(S)-對映異構體實例15(3.2 mg，14%產率)。LCMS: t R= 1.17分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 346.2 [M+H] +。 1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.87 (s, 1H), 7.95 (s, 2H), 7.58 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.43 (t, J = 8.8 Hz, 3H), 7.40 - 7.32 (m, 3H), 7.29 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 6.98 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 4.07 - 3.97 (m, 1H), 3.61 - 3.56 (m, 1H), 3.00 - 2.93 (m, 1H)。 實例 16( 外消旋體 ) 、實例 17( 對映異構體 1) 和實例 18( 對映異構體 2)N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-胺基-2-(3-甲氧基苯基)丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向20 mL小瓶中加入含酸I-2(237.58 mg，0.80 mmol，1.2當量)、TCFH(282.14 mg，1.01 mmol，1.5當量)、NMI(220.16 mg，2.68 mmol，4當量)和胺I-49(200 mg，0.67 mmol，1.00當量)的CH 3CN(1.5 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以DCM/甲醇(30:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的醯胺C-16a(150 mg，38.87%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 576.30。 步驟2：通過製備型手性HPLC來對外消旋體醯胺C-16a進行純化，條件如下(柱：CHIRALPAK IG, 2*25 cm, 5 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA)，流動相B：EtOH: DCM = 1:1，v/v；流速：20毫升/分鐘；梯度：25% B，23分鐘；波長：220/254 nm；t R-1 = 14.66分鐘；t R-2 = 19.11分鐘；樣品溶劑：EtOH: DCM = 1:1，v/v；進樣體積：0.3 mL)，以得到呈白色固體的對映異構體C-16b和對映異構體C-16c。 步驟3：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含對映異構體C-16c(50 mg，0.087 mmol，1當量)和DCM(2 mL)的TFA(1 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1.5小時。用飽和NaHCO 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9。用CH 2Cl 2(3 x 10 mL)萃取所得混合物。將合併的有機層減壓濃縮。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD  30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：10% B至40% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 6.25分鐘)，以得到呈白色固體的實例18的對映異構體2(14.0 mg，42.93%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 376.15。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.05 (1H, dd), 3.43 (1H, dd), 3.83 (3H, s), 3.93 (1H, dd), 6.90 (1H, ddd), 7.00 - 7.13 (4H, m), 7.26 - 7.35 (1H, m), 7.47 (1H, s), 7.64 (1H, dd), 7.91 (2H, s)。SFC: t R= 3.248, ee = 97.14%。 在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含對映異構體C-16b(50 mg，0.087 mmol，1當量)和DCM(2 mL)的TFA(1 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1.5小時。用飽和NaHCO 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 7。用CH 2Cl 2(3 x 10 mL)萃取所得混合物。將合併的有機層減壓濃縮。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱, 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3+0.1% NH 3.H 2O)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：18% B至40% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.52分鐘)，以得到呈白色固體的實例17的對映異構體1(4.3 mg，13.19%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 376.15。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ3.05 (1H, dd), 3.43 (1H, dd), 3.83 (3H, s), 3.93 (1H, dd), 6.90 (1H, ddd), 7.00 - 7.13 (4H, m), 7.26 - 7.35 (1H, m), 7.47 (1H, s), 7.64 (1H, dd), 7.91 (2H, s)。SFC: t R= 3.744分鐘, ee = 95.56%。 步驟4：在室溫下，向25 mL圓底燒瓶中加入含外消旋體醯胺C-16a(20 mg，0.035 mmol，1當量)和TFA(1 mL)的DCM(2 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌2小時。用飽和NaHCO 3將混合物鹼化至pH 9。用CH 2Cl 2(3 x 50 mL)萃取所得混合物。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD C18 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：14% B至39% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 6.97分鐘)，以得到呈白色固體的醯胺實施例16的外消旋體(1.6 mg，12.27%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 376.20。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.04 - 3.08 (1H, m), 3.32-3.50(1H, m), 3.83 (3H, s), 3.93 (2H, dd), 6.90 (1H, ddd), 6.99 - 7.18 (4H, m), 7.32 (1H, t), 7.47 (1H, s), 7.64 (1H, dd), 7.92 (2H, s)。 實例 19( 外消旋體 ) 、實例 20( 對映異構體 1) 和實例 21( 對映異構體 2)N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-胺基-2-(3-氰基苯基)丙醯胺的製備 步驟1：在25℃下，在N 2氣氛下，向酸I-3(379.51 mg，1.31 mmol，1.2當量)和胺I-49(325 mg，1.09 mmol，1當量)於CH 3CN(20 mL)中的溶液中加入TCFH(366.78 mg，1.31 mmol，1.2當量)和NMI(357.77 mg，4.36 mmol，4當量)。在25℃下，將混合物攪拌2小時。過濾所得混合物，並且用甲醇(3 x 100 mL)洗滌濾餅。將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以PE/EA(1:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈棕色固體的外消旋體醯胺C-20a(350 mg，54.46%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 571.30。 步驟2：通過手性HPLC來對外消旋體醯胺C-20a(350 mg，0.61 mmol，1當量)進行純化，條件如下(柱：CHIRALPAK IG, 2*25 cm, 5 μm；流動相A：Hex(0.5% 2 M NH 3-甲醇)，流動相B：EtOH:DCM(1: 1，v/v)；流速：20毫升/分鐘；梯度：40% B至40% B，8.5分鐘；波長：220/254 nm；t R-1 = 5.60分鐘；t R-2 = 7.14分鐘。樣品溶劑：EtOH:DCM(1:1，v/v)；進樣體積：0.6 mL)，以得到呈白色固體的對映異構體醯胺C-20c(112 mg，31.68%)。LCMS m/z (ESI), [M+H] += 571.30。手性HPLC: t R= 1.336分鐘, ee = 100%，和呈白色固體的對映異構體醯胺C-20b(119 mg，33.66%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 571.30。手性HPLC: t R= 1.735分鐘, ee = 100%。 步驟3：在25℃下，在N 2氣氛下，向對映異構體醯胺C-20c(102 mg，0.18 mmol，1當量)於DCM(15 mL)中的溶液中加入TFA(5 mL)。在25℃下，將混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於甲醇(50 mL)中。用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 8。將所得混合物真空濃縮。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱, 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：13% B至39% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.58分鐘)，以得到呈白色固體的實例21的對映異構體2(51.4 mg，76.95%)。LCMS m/z (ESI), [M+H] += 371.10。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.03 (1H, m), 3.42 (1H, m), 3.98 (1H, dt), 7.06 (2H, m), 7.47 (1H, s), 7.58 (1H, m), 7.67 (2H, m), 7.80 (1H, m), 7.86 (1H, t), 7.91 (2H, s)。SFC: t R= 2.432分鐘, ee = 98.42%。 在25℃下，在N 2氣氛下，向對映異構體醯胺C-20b(109 mg，0.19 mmol，1當量)於DCM(15 mL)中的溶液中加入TFA(5 mL)。在25℃下，將混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於甲醇(50 mL)中。用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 8。將所得混合物真空濃縮。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱, 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：13% B至39% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.57分鐘)，以得到呈白色固體的實例20的對映異構體1(37.4 mg，52.10%)。LCMS m/z (ESI), [M+H] += 371.10。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.04 (1H, dd), 3.43 (1H, dd), 3.98 (1H, dd), 7.06 (2H, m), 7.47 (1H, s), 7.58 (1H, t), 7.68 (2H, m), 7.81 (1H, dt), 7.87 (1H, d), 7.92 (2H, s)。SFC: t R= 1.999分鐘, ee = 100%。 步驟4：在室溫下，在空氣氣氛下，將TFA(2 mL)和外消旋體醯胺C-20a(170 mg，0.30 mmol，1當量)於DCM(6 mL)中的混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。用水(20 mL)稀釋所得混合物。用飽和NaHCO 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 8。所得混合物用乙酸乙酯(3 x 20 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型HPLC按以下條件來對粗產物(100 mg)進行純化，以得到呈白色固體的外消旋體實例19(30 mg，26.68%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 371.10。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 3.06 (1H, d), 3.45 (1H, d), 4.01 (1H, d), 7.02-7.10 (2H, m), 7.47 (1H, s), 7.59 (1H, t), 7.62-7.68 (1H, m), 7.71 (1H, t), 7.82 (1H, t), 7.86-7.94 (3H, m)。 實例 22( 外消旋體 )3-胺基-2-環己基-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺(外消旋體)的製備 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，向胺I-50(110 mg，0.34 mmol，1當量)和3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-環己基丙酸(99.95 mg，0.37 mmol，1.1當量)於DMF(5 mL)中的攪拌溶液中分批加入HATU(190.99 mg，0.50 mmol，1.5當量)和DIEA(129.84 mg，1.01 mmol，3當量)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。通過反相快速色譜法來對粗產物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，0%至100%梯度，20分鐘；檢測器，UV 254 nm。將所得混合物真空濃縮。這得到呈白色固體的外消旋體醯胺C-22a(70 mg，35.93%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 582.50。 步驟2：在室溫下，在氮氣氣氛下，將含外消旋體醯胺C-22a(40 mg，0.069 mmol，1當量)的TBAF(7 M)於THF(2 mL)中的溶液攪拌過夜。用水(10 mL)稀釋所得混合物。用DCM(3 x 20 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以DCM/甲醇(15:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈白色固體的吡唑C-22b(15 mg，48.32%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 452.30。 步驟3：在室溫下，在氮氣氣氛下，將吡唑C-22b(15 mg，0.033 mmol，1當量)和TFA(0.5 mL)於DCM(1 mL)中的溶液攪拌2小時。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD  30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：17% B至42% B，8分鐘；波長：254 nm；t R= 7.47分鐘)，以得到呈白色固體的外消旋體實例22(2 mg，16.57%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 352.20。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ1.06 - 0.95 (1H, m), 1.31 - 1.10 (4H, m), 12.81 (1H, s), 1.91 - 1.50 (6H, m), 2.38 (1H, td), 2.96 - 2.81 (2H, m), 7.00 (1H, t), 7.43 (1H, d), 7.62 - 7.53 (2H, m), 7.95 (2H, s), 9.76 (1H, s), 10.92 (1H, s)。 實例 23( 對映異構體 1) 和實例 24( 對映異構體 2)N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-胺基-2-環己基丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向40 mL小瓶中加入胺I-49(300 mg，1.01 mmol，1當量)和3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-環己基丙酸(300.15 mg，1.11 mmol，1.1當量)和TCFH(338.56 mg，1.21 mmol，1.2當量)和NMI(330.24 mg，4.02 mmol，4當量)和MeCN(5 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1.5小時。通過LCMS監測反應。可以通過LCMS檢測到期望產物。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC(CH 2Cl 2/甲醇45:1)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的醯胺C-23a(420 mg，75.71%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 552.40。 步驟2：通過製備型手性HPLC來對醯胺C-23a(420 mg)進行純化，條件如下(柱：CHIRALPAK IE, 2*25 cm, 5 μm；流動相A：MTBE(0.1% DEA)，流動相B：ACN(0.1% IPA)；流速：20毫升/分鐘；梯度：10% B至10% B，16分鐘；波長：220/254 nm；t R-1 = 8.86分鐘；t R-2 = 12.61分鐘；樣品溶劑：IPA；進樣體積：0.6 mL)，以得到對映異構體C-23c和呈黃色固體的對映異構體C-23b(170 mg，40.5%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 552.40。 步驟3：在室溫下，向100 mL圓底燒瓶中加入醯胺C-23c(200 mg，0.36 mmol，1當量)和TFA(1 mL)和DCM(3 mL)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。用DMF(2 mL)稀釋所得混合物。用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9。在0℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌30分鐘。通過製備型HPLC來對粗產物(180 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3+0.1% NH 3水溶液)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：20% B至45% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.67分鐘)，以得到呈白色固體的實例24的對映異構體2(69.4 mg，53.98%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 352.15。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 0.98 (1H, q), 1.18 (4H, p), 1.64 (5H, d), 1.83 (1H, d), 2.37 (1H, s), 2.87 (1H, m), 3.22 (1H, s), 7.00 (1H, m), 7.44 (1H, d), 7.57 (2H, m), 7.95 (2H, s)。SFC: t R= 1.971分鐘, ee = 97.42%。 在室溫下，向100 mL圓底燒瓶中加入醯胺C-23b(170 mg，0.31 mmol，1當量)和TFA(1 mL)和DCM(3 mL)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。用DMF(2 mL)稀釋所得混合物。用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9。在0℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌30分鐘。通過製備型HPLC來對粗產物(150 mg)進行純化，條件如下(柱：YMC-Actus Triart C18 ExRS, 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：18% B至43% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 6.55分鐘)，以得到呈白色固體的實例23的對映異構體1(57 mg，52.26%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 352.20。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.21 (5H, m), 1.75 (6H, dd), 2.35 (1H, d), 2.86 (1H, m), 3.21 (1H, s), 7.00 (1H, m), 7.44 (1H, m), 7.57 (2H, m), 7.95 (2H, s)。SFC: t R= 1.860分鐘, ee = 100%。 實例 26( 對映異構體 1) 和實例 27( 對映異構體 2)N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-胺基-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向40 mL小瓶中加入3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(氧雜環己烷-4-基)丙酸(250 mg，0.92 mmol，1當量)、胺I-49(272.88 mg，0.92 mmol，1當量)、TCFH(513.26 mg，1.83 mmol，2當量)、NMI(375.49 mg，4.58 mmol，5當量)和CH 3CN(10 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌2小時。通過製備型TLC(CH 2Cl 2/甲醇(25:1)對殘餘物進行純化，以得到呈棕色固體的外消旋體醯胺C-26a(312 mg，59.76%)。LCMS: m/z (ESI), [M- tBu+H] += 498.25。 步驟2：通過製備型手性HPLC來對外消旋體醯胺C-26a(312 mg，59.76%)進行純化，條件如下(柱：CHIRALPAK IF, 2*25 cm, 5 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA)，流動相B：EtOH:DCM(1: 1，v/v)；流速：20毫升/分鐘；梯度：30% B至30% B，12分鐘；波長：220/254 nm；t R-1 = 7.46分鐘；t R-2 = 9.02分鐘；樣品溶劑：EtOH: DCM(1:1，v/v)；進樣體積：0.2 mL)，以得到對映異構體C-26c(130 mg，41.6%)，SFC: t R= 1.932分鐘, ee = 100%，和呈白色固體的對映異構體C-26b(120 mg，38.4%)，SFC: t R= 2.524分鐘, ee = 99.634%。 步驟3：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入對映異構體C-26c(120 mg，0.22 mmol，1當量)和DCM(3 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。在0℃下，用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9並攪拌1小時。通過製備型HPLC來對粗產物(100 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱, 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水10 mmol/L NH 4HCO 3+0.1% NH 3水溶液)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至30% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.95分鐘)，以得到呈白色固體的實例27的對映異構體2(41.3 mg，53.39%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] +=354.2。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.46 (1H, qd), 1.54 - 1.73 (2H, m), 1.81 (1H, d), 1.95 - 1.99 (1H, m), 2.50 (1H, td), 3.00 - 3.14 (2H, m), 3.44 (2H, dd), 4.00 (2H, s), 7.10 (1H, t), 7.18 (1H, dd), 7.48 (1H, s), 7.67 (1H, dd), 7.93 (2H, s)。SFC: t R= 2.418分鐘, ee = 99.56%。 在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入對映異構體C-26b(120 mg，0.22 mmol，1當量)、TFA(0.02 mL，0.22 mmol，1當量)和DCM(3 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至24% B，9分鐘；波長：254 nm；t R= 8.83分鐘)，以得到呈白色固體的實例26的對映異構體1(45.5 mg，59.24%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] +=354.2。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.46 (1H, qd), 1.61 (1H, qd), 1.70 (1H, d), 1.81 (1H, d), 1.90 - 2.08 (1H, m), 2.51 (1H, td), 3.01 - 3.15 (2H, m), 3.45 (2H, dt), 3.95 - 4.05 (2H, m), 7.10 (1H, t), 7.19 (1H, dd), 7.48 (1H, s), 7.67 (1H, dd), 7.92 (2H, s)。SFC: t R= 2.527分鐘, ee = 98.12%。 實例 29( 對映異構體 1) 和實例 30( 對映異構體 2)N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(3-甲氧基苯基)-2-(1-甲基呱啶-4-基)乙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向20 mL小瓶中加入含酸I-59(264.80 mg，1.01 mmol，1.5當量)、TCFH(282.14 mg，1.01 mmol，1.5當量)、NMI(220.16 mg，2.680 mmol，4.0當量)和胺I-49(200 mg，0.670 mmol，1當量)的CH 3CN(5 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1.5小時。將所得混合物真空濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(10:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈棕色固體的外消旋體醯胺C-29a(260 mg，71.34%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 544.30。 步驟2：通過製備型手性HPLC來對外消旋體醯胺C-29a(260 mg)進行純化，條件如下(柱：CHIRAL ART Amylose-SA, 2*25 cm, 5 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA)，流動相B：EtOH/DCM(1:1，v/v)；流速：20毫升/分鐘；梯度：20% B至20% B，13分鐘；波長：220/254 nm；t R-1 = 5.15分鐘；t R-2 = 7.57分鐘；樣品溶劑：EtOH/DCM(1:1，v/v)；進樣體積：0.9 mL)，以得到對映異構體C-29c，SFC: t R= 1.919分鐘, ee = 100%，和呈棕色固體的對映異構體C-29b，SFC: t R= 2.434分鐘, ee = 100%。 步驟3：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含對映異構體C-29c(140 mg，0.26 mmol，1當量)和TFA(0.5 mL)的DCM(1 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。用NH 3水溶液將混合物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD C18 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：15% B至45% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 7.98分鐘)，以得到呈白色固體的實例30的對映異構體2(32.4 mg，28.37%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 444.20。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.18 - 1.30 (1H, m), 1.37 (1H, dt), 1.54 (1H, qd), 2.02 (2H, ddd), 2.18 (2H, qt), 2.32 (3H, s), 2.87 (1H, d), 2.99 (1H, d), 3.43 (1H, d), 3.83 (3H, s), 6.88 (1H, ddd), 7.01 - 7.14 (3H, m), 7.20 (1H, dd), 7.29 (1H, t), 7.44 (1H, s), 7.61 (1H, dd), 7.80 - 7.98 (2H, m)。SFC: t R= 2.156, ee = 100%。 在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含對映異構體C-29b(140 mg，0.26 mmol，1當量)和TFA(0.5 mL，6.73 mmol，26.14當量)的DCM(1 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。用NH 3水溶液將混合物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD C18 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：10% B至45% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 8.58分鐘)，以得到呈白色固體的實例29的對映異構體1(35.2 mg，23.97%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 444.25。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.15 - 1.29 (1H, m), 1.36 (1H, dt), 1.53 (1H, qd), 1.91 - 2.06 (2H, m), 2.06 - 2.26 (2H, m), 2.30 (3H, s), 2.85 (1H, d), 2.97 (1H, d), 3.42 (1H, d), 3.83 (3H, s), 6.88 (1H, ddd), 7.01 - 7.13 (3H, m), 7.20 (1H, dd), 7.29 (1H, t), 7.45 (1H, s), 7.61 (1H, dd), 7.91 (2H, s)。SFC: t R= 2.036分鐘, ee = 91.58%。 實例 31( 外消旋體 ) 、實例 32( 對映異構體 1) 和實例 33( 對映異構體 2)N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-胺基-2-(吡啶-3-基)丙醯胺的製備 步驟1：在25℃下，在空氣氣氛下，向酸I-7(190 mg，0.71 mmol，1當量)於CH 3CN(3.0 mL)中的攪拌混合物中分批加入NMI(175.75 mg，2.14 mmol，3當量)、TCFH(400.38 mg，1.43 mmol，2當量)和胺I-49(217.12 mg，0.73 mmol，1.02當量)。在25℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。反應後，所得混合物用水(10 mL)稀釋，並用乙酸乙酯(3 x 20 mL)萃取。合併的有機層用水(3 x 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(20:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的外消旋體C-32a(220 mg，56.41%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 547.20。 步驟2：通過製備型HPLC來對外消旋體C-32a(220 mg)進行純化，條件如下(柱：CHIRALPAK IG, 2*25 cm, 5 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA)，流動相B：EtOH:DCM(1:1，v/v)；流速：20毫升/分鐘；梯度：35% B至35% B，17分鐘；波長：220/254 nm；t R-1 = 9.63分鐘；t R-2 = 13.49分鐘；樣品溶劑：EtOH:DCM(1:1，v/v)；進樣體積：0.5 mL)，以得到對映異構體C-32c(80 mg，36.36%)，SFC: t R= 2.452分鐘, ee = 100%，和呈白色固體的對映異構體C-32b(80 mg，36.36%)，SFC: t R= 3.466分鐘, ee = 97.6%。 步驟3：在室溫下，在空氣氣氛下，將對映異構體C-32c(80 mg，0.15 mmol，1當量)於TFA(0.5 mL)和DCM(2.0 mL)中的溶液攪拌0.5小時。反應後，將所得混合物真空濃縮。將殘餘物溶於甲醇(1 mL)中並用NH 3(水溶液)鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：DZ-CHIRALPAK IG-3, 4.6*50 mm, 3.0 μm；流動相：Hex(0.2% DEA):(甲醇:DCM(1:1，v/v)= 60:40(v/v)；流速：1毫升/分鐘；進樣體積：5ul mL)，以得到呈白色固體的實例33的對映異構體2(19 mg，58.46%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 347.10。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.05 (1H, d), 3.45 (1H, t), 3.99 (1H, dd), 7.07 (2H, q), 7.48 (2H, q), 7.65 (1H, dt), 7.92 (2H, s), 8.00 (1H, dt), 8.51 (1H, m), 8.67 (1H, d)。手性-HPLC: t R= 2.308分鐘, ee = 100%。 在室溫下，在空氣氣氛下，將對映異構體C-32b(80 mg，0.15 mmol，1當量)於TFA(0.5 mL)和DCM(2.0 mL)中的溶液攪拌0.5小時。反應後，將所得混合物真空濃縮。將殘餘物溶於甲醇(1 mL)中並用NH 3(水溶液)鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱, 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3+0.1% NH 3水溶液)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：8% B至30% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.87分鐘)，以得到呈白色固體的實例32的對映異構體1(20 mg，39.45%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 347.10。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.06 (1H, dd), 3.47 (1H, m), 4.00 (1H, dd), 7.07 (2H, m), 7.48 (2H, m), 7.66 (1H, dd), 7.92 (2H, m), 8.01 (1H, d), 8.52 (1H, dd), 8.68 (1H, d)。SFC: t R= 0.488分鐘, ee = 100%。 步驟4：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入外消旋體C-32a(60 mg，0.11 mmol，1當量)、TFA(1 mL)和DCM(3.00 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。用CH 2Cl 2(30 mL)稀釋所得混合物。將所得混合物減壓濃縮。用甲醇(2 mL)稀釋所得混合物。用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物(50 mg)進行純化，條件如下(柱：Xselect CSH F-Phenyl OBD柱, 19*250 mm, 5 μm；流動相A：水10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：25毫升/分鐘；梯度：31% B至54% B，8分鐘；波長：254 nm；t R= 7.85分鐘)，以得到呈白色固體的實例1的外消旋體(11.1 mg，28.78%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 347.15。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.07 (1H, dd), 3.47 (1H, dd), 4.01 (1H, dd), 7.07 (2H, q), 7.44 - 7.52 (2H, m), 7.65 (1H, dd), 7.92 (2H, s), 8.01 (1H, dt), 8.52 (1H, dd), 8.67 (1H, d)。 實例 35( 對映異構體 1) 和實例 36( 對映異構體 2)N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(3-甲氧基苯基)-3-(4-甲基呱嗪-1-基)丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入酸I-60(233.25 mg，0.84 mmol，1當量)、胺I-49(250 mg，0.84 mmol，1當量)、TCFH(470.23 mg，1.676 mmol，2當量)、NMI(344.00 mg，4.19 mmol，5當量)和CH 3CN(10 mL，190.242 mmol)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/MeOH(15:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈棕色固體的外消旋體C-34a(600 mg，115.60%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 559.35。 步驟2：通過製備型手性HPLC來對外消旋體C-34a(400 mg)進行純化，條件如下(柱：CHIRALPAK IC, 2*25 cm, 5 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA)，流動相B：EtOH:DCM(1:1，v/v)；流速：20毫升/分鐘；梯度：40% B至40% B，10.5分鐘；波長：220/254 nm；t R-1 = 6.34分鐘；t R-1 = 7.94分鐘；樣品溶劑：EtOH:DCM(1:1，v/v)；進樣體積：0.5 mL)，以得到對映異構體C-34c(130 mg，32.5%)，SFC: t R= 1.787分鐘, ee = 100%，和呈白色固體的對映異構體C-34b(150 mg，37.5%)，SFC: t R= 2.160分鐘, ee = 95.09%。 步驟3：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入對映異構體C-34c(130 mg，0.23 mmol，1當量)、TFA(1 mL)和DCM(3 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。用NH 3水溶液將混合物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物(100 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD C18柱, 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：15% B至45% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 7.83分鐘)，以得到呈白色固體的實例36的對映異構體2(66.1 mg，61.89%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 459.3。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.31 (3H, d), 2.58 (6H, dd), 2.85 (2H, s), 3.33 (1H, s), 3.44 (1H, t), 3.82 (3H, s), 4.11 (1H, dd), 6.88 (1H, dd), 7.08 (4H, dd), 7.29 (1H, t), 7.50 (1H, s), 7.66 - 7.69 (1H, m), 7.91 (2H, s)。SFC: t R= 1.511分鐘, ee = 100%。 在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入對映異構體C-34b(160 mg，0.29 mmol，1當量)、TFA(1 mL)和DCM(3 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。用NH 3·H 2O將混合物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物(120 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD C18柱, 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：15% B至45% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 7.78分鐘)，以得到呈白色固體的實例35的對映異構體1(29.2 mg，22.22%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 459.3。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.31 (3H, d), 2.58 (6H, dd), 2.85 (2H, s), 3.33 (1H, s), 3.44 (1H, t), 3.82 (3H, s), 4.11 (1H, dd), 6.88 (1H, dd), 7.08 (4H, dd), 7.29 (1H, t), 7.50 (1H, s), 7.66 - 7.69 (1H, m), 7.91 (2H, s)。SFC: t R= 1.312分鐘, ee = 95.6%。 實例 37( 外消旋體 ) 、實例 38( 對映異構體 1) 和實例 39( 對映異構體 2)N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-(4-甲基呱嗪-1-基)-2-苯基丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，在空氣氣氛下，向酸I-8(200 mg，0.81 mmol，1當量)和胺I-49(317.48 mg)於CH 3CN(20 mL)中的攪拌溶液中逐滴加入TCFH(271.17 mg，0.97 mmol，1.2當量)和NMI(66.13 mg，0.81 mmol，1當量)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌3小時。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(12:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈棕色油狀物的外消旋體醯胺C-38(316 mg，74.22%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 529.35。 步驟2：在室溫下，在空氣氣氛下，向外消旋體醯胺C-38(300 mg，0.568 mmol，1當量)於DCM(25 mL)中的攪拌溶液中逐滴加入TFA(5 mL)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。將反應物減壓濃縮。在0℃下，用NH 3(水溶液)將殘餘物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱, 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3+0.1% NH 3水溶液)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：22% B至43% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.80分鐘)，以得到呈白色固體的實例37的外消旋體(200 mg，82.24%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 429.25。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 2.14 (3H, s), 2.34 (4H, s), 2.48 (2H, d), 2.68 (2H, s), 3.22 - 3.31 (2H, m), 4.11 (1H, dd), 7.01 (1H, t), 7.27 (1H, d), 7.34 - 7.49 (5H, m), 7.57 - 7.64 (2H, m), 7.93 (2H, d), 10.03 (1H, s), 10.52 (1H, s), 12.82 (1H, s)。 步驟3：通過製備型HPLC來對實例37的外消旋體(200 mg)進行純化，條件如下(柱：DZ-CHIRALPAK IG-3, 4.6*50 mm, 3.0 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA): (EtOH:DCM(1:1，v/v))= 60:40(v/v)；流速：1毫升/分鐘；進樣體積：5ul mL)，以得到實例39的對映異構體2(58.0 mg，29.00%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 429.15。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 2.14 (3H, s), 2.34 (4H, s), 2.48 (2H, d), 2.68 (2H, s), 3.22-3.31 (2H, m), 4.11 (1H, dd), 7.01 (1H, t), 7.27 (1H, d), 7.34-7.39 (3H, m),7.41-7.49 (2H, t) 7.57 - 7.64 (2H, m), 7.93 (2H, d), 10.03 (1H, s), 10.52 (1H, s), 12.82 (1H, s)。手性-HPLC: t R= 1.760分鐘, ee = 100%，和呈白色固體的實例38的對映異構體1(71.4 mg，35.70%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 429.15。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 2.14 (3H, s), 2.34 (4H, s), 2.48 (2H, d), 2.68 (2H, s), 3.22-3.31 (2H, m), 4.11 (1H, dd), 7.01 (1H, t), 7.27 (1H, d), 7.34-7.39 (3H, m),7.41-7.49 (2H, t) 7.57 - 7.64 (2H, m), 7.93 (2H, d), 10.03 (1H, s), 10.52 (1H, s), 12.82 (1H, s)。手性-HPLC: t R= 2.520分鐘, ee = 97.39%。 實例 41(2S)-2-胺基-2-(3-甲氧基苯基)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]乙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向20 mL小瓶中加入胺I-49(150 mg，0.50 mmol，1當量)和(S)-[(三級丁氧基羰基)胺基](3-甲氧基苯基)乙酸(155.58 mg，0.55 mmol，1.1當量)和TCFH(169.28 mg，0.60 mmol，1.2當量)和NMI(165.12 mg，2.01 mmol，4當量)和CH 3CN(5 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌40分鐘。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(25:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到4-{7-[(2S)-2-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(3-甲氧基苯基)乙醯胺基]-1H-吲哚-3-基}吡唑-1-甲酸三級丁酯。通過製備型手性HPLC來對粗產物(250 mg)進行純化，條件如下(柱：CHIRALPAK IE, 2*25 cm, 5 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA)，流動相B：EtOH:DCM = 1:1(v/v)；流速：20毫升/分鐘；梯度：30% B至30% B，18分鐘；波長：220/254 nm；t R-1 = 10.60分鐘；t R-2 = 14.56分鐘；樣品溶劑：EtOH:DCM = 1:1(v/v)；進樣體積：0.9 mL)，以得到呈黃色固體的4-{7-[(2S)-2-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(3-甲氧基苯基)乙醯胺基]-1H-吲哚-3-基}吡唑-1-甲酸三級丁酯(180 mg，63.74%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H- tBu] += 506.25。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.52 (9H, s), 1.71 (9H, s), 3.84 (3H, s), 5.51 (1H, s), 6.95 (1H, d), 7.14 (4H, dd), 7.34 (1H, t), 7.63 (1H, s), 7.67 (1H, m), 8.16 (1H, d), 8.43 (1H, s)。 步驟2：在室溫下，向100 mL圓底燒瓶中加入4-{7-[(2S)-2-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(3-甲氧基苯基)乙醯胺基]-1H-吲哚-3-基}吡唑-1-甲酸三級丁酯(180 mg，0.320 mmol，1當量)和TFA(1 mL)和DCM(3 mL)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於DMF(2 mL)中。用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9。在0℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌30分鐘。通過製備型HPLC來對粗產物(100 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD C18 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：15% B至45% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 6.92分鐘)，以得到呈白色固體的(2S)-2-胺基-2-(3-甲氧基苯基)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]乙醯胺(61.6 mg，52.95%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 362.15。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 3.71 (3H, s), 4.61 (1H, s), 6.84 (1H, m), 7.02 (1H, td), 7.10 (2H, m), 7.27 (1H, t), 7.37 (1H, d), 7.58 (2H, t), 7.96 (2H, s)。SFC: t R= 1.460分鐘, ee = 94.14%。 實例 42(2R)-2-胺基-2-(3-甲氧基苯基)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]乙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向20 mL小瓶中加入胺I-49(150 mg，0.50 mmol，1當量)和(R)-[(三級丁氧基羰基)胺基](3-甲氧基苯基)乙酸(155.58 mg，0.55 mmol，1.1當量)和TCFH(169.28 mg，0.60 mmol，1.2當量)和NMI(165.12 mg，2.01 mmol，4當量)和CH 3CN(5 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌40分鐘。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(25:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到粗固體。通過製備型手性HPLC來對粗產物(280 mg)進行純化，條件如下(柱：CHIRALPAK IE, 2*25 cm, 5 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA)，流動相B：EtOH/DCM(1:1，v/v)；流速：20毫升/分鐘；梯度：30% B至30% B，18分鐘；波長：220/254 nm；t R-1 = 10.60分鐘；t R-2 = 14.56分鐘；樣品溶劑：EtOH/DCM(1:1，v/v)；進樣體積：0.9 mL)，以得到呈黃色固體的4-{7-[(2R)-2-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(3-甲氧基苯基)乙醯胺基]-1H-吲哚-3-基}吡唑-1-甲酸三級丁酯(240 mg，84.99%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H- tBu] += 506.25。 1H NMR (MeOH-d 4, 400 MHz) δ 1.52 (9H, s), 1.71 (9H, s), 3.84 (3H, s), 5.39 (1H, s), 7.14 (4H, m), 7.34 (2H, t), 7.63 (1H, s), 7.67 (1H, d), 8.16 (1H, s), 8.43 (1H, s)。 步驟2：在室溫下，向100 mL圓底燒瓶中加入4-{7-[(2R)-2-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(3-甲氧基苯基)乙醯胺基]-1H-吲哚-3-基}吡唑-1-甲酸三級丁酯(240 mg，0.43 mmol，1當量)和TFA(1 mL)和DCM(3 mL)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於DMF(2 mL)中。用NH 3水溶液將混合物鹼化至pH 9。在0℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌30分鐘。通過製備型HPLC來對粗產物(120 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD C18 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：15% B至45% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 7.02分鐘)，以得到呈白色固體的(2R)-2-胺基-2-(3-甲氧基苯基)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]乙醯胺(63.5 mg，41.12%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 362.15。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 3.75 (3H, d), 4.61 (1H, d), 6.84 (1H, dq), 7.02 (1H, td), 7.11 (2H, m), 7.27 (1H, td), 7.38 (1H, dd), 7.58 (2H, q), 7.95 (2H, s)。SFC: t R= 1.110分鐘, ee = 100%。 實例 43( 外消旋體 ) 、實例 44( 對映異構體 1) 和實例 45( 對映異構體 2)N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(1-甲基呱啶-4-基)-2-苯基乙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向10 mL小瓶中加入含胺I-50(350 mg，1.07 mmol，1當量)和酸I-9(248.59 mg，1.07 mmol，1當量)和TCFH(358.74 mg，1.28 mmol，1.2當量)和NMI(349.93 mg，4.26 mmol，4當量)的MeCN(8 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(10:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到粗固體(220 mg)。通過製備型HPLC來對粗產物(220 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：15% B至45% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 7.65分鐘)，以得到呈灰白色油狀物的外消旋體C-43(140 mg，28.22%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 544.50。 步驟2：在室溫下，向8 mL小瓶中加入外消旋體C-43(70 mg，0.13 mmol，1當量)和CsF(58.66 mg，0.39 mmol，3當量)和DMSO(2.3 mL)。在100℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌12小時。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱, 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3+0.1% NH 3水溶液)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：23% B至48% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.37分鐘)，以得到呈白色固體的實例43的外消旋體(22 mg)。通過製備型手性HPLC來對固體進行純化，條件如下(柱：(R, R)-WHELK-O1-Kromasi, 5*25 cm, 5 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA)，流動相B：EtOH: DCM(1:1，v/v)；流速：20毫升/分鐘；梯度：50% B至50% B，10分鐘；波長：220/254 nm；t R-1 = 5.70分鐘；t R-2 = 7.69分鐘；樣品溶劑：EtOH:DCM(1:1，v/v)；進樣體積：0.7 mL)，以得到呈白色固體的實例45的對映異構體2(9.5 mg，17.78%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 414.25。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 0.85 (1H, d), 1.19 (2H, m), 1.44 (1H, d), 1.85 (1H, d), 2.08 (2H, s), 2.28 (3H, d), 2.70 (1H, m), 2.90 (1H, s), 3.50 (1H, d), 6.98 (1H, t), 7.27 (1H, t), 7.36 (2H, t), 7.49 (2H, s), 7.57 (3H, m), 7.95 (2H, s), 9.92 (1H, s), 10.72 (1H, s), 12.77 (1H, s)。手性HPLC: t R= 1.743分鐘, ee = 100%，和呈白色固體的實例44的對映異構體1(5.4 mg，9.82%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 414.20。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.13 (3H, m), 1.47 (1H, d), 1.87 (1H, d), 2.00 (2H, m), 2.31 (3H, s), 2.92 (2H, d), 3.52 (1H, s), 6.98 (1H, t), 7.18 (1H, m), 7.28 (2H, m), 7.36 (2H, d), 7.52 (3H, m), 7.95 (2H, s), 9.95 (1H, s), 10.76 (1H, s), 12.77 (1H, s)。手性HPLC: t R= 2.636分鐘, ee = 99.06%。 實例 46( 外消旋體 )2-(4-甲基呱嗪-1-基)-2-苯基-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]乙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向40 mL小瓶中加入胺I-50(300 mg，0.91 mmol，1當量)、NMI(374.92 mg，4.57 mmol，5當量)、TCFH(512.49 mg，1.83 mmol，2當量)、CH 3CN(10 mL)和酸I-10(320.97 mg，1.37 mmol，1.5當量)。將混合物攪拌12小時。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(20:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈淺棕色固體的外消旋體醯胺C-46(500 mg，99.01%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 545.25。 步驟2：在rt下，向50 mL圓底燒瓶中加入含外消旋體醯胺C-46(200 mg，0.37 mmol，1當量)和HCl(氣體)的1,4-二噁烷(20 mL)。在60℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將混合物冷卻至0℃，並且用飽和NaHCO 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9。用CH 2Cl 2(3 x 30 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型HPLC來對粗產物(120 mg)進行純化，條件如下(柱：Xselect CSH C18 OBD 30*150 mm 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：25毫升/分鐘；梯度：51% B至64% B，11分鐘；波長：220 nm；t R= 10.3分鐘)，以得到呈白色固體的外消旋體實例46(2 mg，1.27%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 415.20。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 2.33 (3H, s), 2.61 (8H, s), 4.15 (1H, s), 7.08 (1H, t), 7.17 (1H, dd), 7.42 (4H, m), 7.63 (3H, m), 7.91 (2H, s)。 實例 47( 對映異構體 1) 和實例 48( 對映異構體 2)N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基呱嗪-1-基)-2-苯基乙醯胺的製備 步驟1：通過製備型手性HPLC來對外消旋體醯胺C-46(330 mg)進行純化，條件如下(柱：CHIRALPAK IF, 2*25 cm, 5 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA)，流動相B：EtOH:DCM(1:1，v/v)；流速：20毫升/分鐘；梯度：30% B至30% B，12分鐘；波長：220/254 nm；t R-1 = 8.67分鐘；t R-2 = 10.09分鐘；樣品溶劑：EtOH: DCM(1:1，v/v)；進樣體積：0.25 mL)，以得到對映異構體C-47b(124 mg，37.6%)，SFC: t R= 2.052分鐘, ee = 100%，和呈白色固體的對映異構體C-47a(110 mg，33.3%)，SFC: t R= 2.366分鐘, ee = 99.02%。 步驟2：在室溫下，向8 mL小瓶中加入對映異構體C-47b(100 mg，0.18 mmol，1當量)和TBAF(2 mL，0.008 mmol，0.04當量)。在40℃下，將所得混合物攪拌8小時。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，10%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm。通過製備型HPLC來對粗產物(50 mg)進行純化，條件如下(柱：YMC-Actus Triart C18 ExRS, 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：20% B至45% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 6.53分鐘)，以得到呈白色固體的實例48的對映異構體2(4.1 mg，5.34%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] +=415.25。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 2.33 (s, 3H), 2.61 (s, 8H), 4.15 (s, 1H), 7.08 (t, 1H), 7.17 (dd, 1H), 7.42 (m, 4H), 7.63 (m, 3H), 7.91 (s, 2H)。SFC: t R= 2.264分鐘, ee = 97%。 步驟3：在室溫下，向20 mL小瓶中加入含對映異構體C-47a(100 mg，0.18 mmol，1當量)、DCM(4 mL)和HCl(氣體)的1,4-二噁烷(4 mL)。在40℃下，將混合物攪拌8小時。將所得混合物減壓濃縮。用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物(60 mg)進行純化，條件如下(柱：Xselect CSH C18 OBD 30*150 mm 5 μm；流動相A：水(0.1% FA)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：10% B至22% B，7分鐘；波長：254; 220 nm；t R= 6.5分鐘)，以得到呈白色固體的實例47的對映異構體1(17.9 mg，22.84%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 415.25。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 2.33 (3H, s), 2.61 (4H, s), 3.16(4H, s), 4.15 (1H, s), 7.08 (1H, t), 7.17 (1H, dd), 7.42 (4H, m), 7.63 (3H, m), 7.91 (2H, s), 8.49 (1H, s)。SFC: t R= 2.074分鐘, ee = 99.5%。 實例 49( 外消旋體 ) 、實例 50( 對映異構體 1) 和實例 51( 對映異構體 2)甲基胺基甲酸3-(1-((3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)胺基)-3-胺基-1-氧代丙-2-基)苄酯的製備 步驟1：在室溫下，在空氣氣氛下，向酸I-11(60 mg，0.17 mmol，1當量)和胺I-49(60.96 mg，0.20 mmol，1.2當量)於CH 3CN(12 mL)中的攪拌溶液中加入NMI(13.98 mg，0.17 mmol，1當量)和TCFH(57.33 mg，0.204 mmol，1.2當量)。將所得混合物減壓濃縮。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。通過製備型TLC以PE/EA(1: 1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的外消旋體醯胺C-49(80 mg，74.26%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 633.35。 步驟2：在室溫下，在空氣氣氛下，向外消旋體醯胺C-49(80 mg，0.13 mmol，1當量)於DCM(5 mL)中的攪拌溶液中加入TFA(1 mL)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。將反應物減壓濃縮，溶於甲醇中。用NH 3(水溶液)將殘餘物鹼化至pH 8。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：Xselect CSH C18 OBD 30*150 mm 5 μm；流動相A：水(0.1% FA)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：10% B至22% B，7分鐘；波長：254; 220 nm；t R= 6.03分鐘)，以得到呈白色固體的實例49的外消旋體(29.1 mg，48.10%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 433.25。 1H NMR: (MeOH-d 4, 400 MHz) δ 2.70 (3H, s), 3.36 (1H, s), 3.67 (1H, dd), 4.26 (1H, dd), 5.14 (2H, s), 7.02 - 7.12 (2H, m), 7.42 (1H, d), 7.48 (3H, d), 7.52 (1H, s), 7.66 (1H, dd), 7.92 (2H, s), 8.5(0.311H, s)。 步驟3：通過製備型HPLC來對實例49的外消旋體(188 mg)進行純化，條件如下(柱：CHIRALPAK IG, 2*25 cm, 5 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA)--HPLC，流動相B：EtOH:DCM =(1:1，v/v)；流速：20毫升/分鐘；梯度：50% B至50% B，10分鐘；波長：220/254 nm；t R-1 = 6.10分鐘；t R-2 = 8.19分鐘；樣品溶劑：EtOH:DCM =(1:1，v/v)；進樣體積：0.3 mL)，以在製備型HPLC(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱, 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3+ 0.1% NH 3.H 2O)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：12% B至40% B，8分鐘，40% B；波長：220 nm；t R= 7.67分鐘)後得到呈白色固體的實例51的對映異構體2(35.7 mg，39.67%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 433.15。 1H NMR: (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.69 (3H, s), 3.00 (1H, dd), 3.40 (1H, dd), 3.93 (1H, dd), 5.09 (2H, s), 6.97 - 7.09 (2H, m), 7.27 - 7.52 (5H, m), 7.62 (1H, dd), 7.89 (2H, s)，SFC: t R= 1.580分鐘, ee = 100%，並在製備型HPLC(柱：XBridge Prep OBD C18柱, 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至35% B，7分鐘，35% B；波長：220 nm；t R= 8.08分鐘)後得到呈白色固體的實例50的對映異構體1(28.3 mg，31.44%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 433.15。 1H NMR: (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.69 (3H, s), 3.00 (1H, dd), 3.40 (1H, dd), 3.93 (1H, dd), 5.09 (2H, s), 6.97 - 7.09 (2H, m), 7.27 - 7.52 (5H, m), 7.62 (1H, dd), 7.89 (2H, s)。SFC: t R= 2.127分鐘, ee = 97.47%。 實例 52( 外消旋體 )3-胺基-2-苄基-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙烯醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向20 mL小瓶中加入含胺I-49(100 mg，0.34 mmol，1當量)和2-苄基-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙酸(140.44 mg，0.50 mmol，1.5當量)、TCFH(141.07 mg，0.50 mmol，1.5當量)的NMI(137.60 mg，1.68 mmol，5.00當量)和MeCN(3 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(20:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈灰白色固體的4-(7-{2-苄基-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙醯胺基}-1H-吲哚-3-基)吡唑-1-甲酸三級丁酯(160 mg，85.29%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 560.2。 步驟2：在室溫下，向20 mL圓底燒瓶中加入含4-(7-{2-苄基-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙醯胺基}-1H-吲哚-3-基)吡唑-1-甲酸三級丁酯(150 mg，0.27 mmol，1當量)的DCM(3 mL)和TFA(1 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於甲醇(4 mL)中。用NH 3(水溶液)將殘餘物鹼化至pH 9，並且在0℃下，將所得混合物攪拌30分鐘。通過製備型HPLC來對粗產物(100 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：15% B至40% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 6.28分鐘)，以得到呈白色固體的3-胺基-2-苄基-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺(47 mg，48.79%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 360.2。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.80 - 3.05 (4H, m), 3.05 - 3.19 (1H, m), 6.90 (1H, dd), 7.03 (1H, t), 7.25 (1H, dt), 7.28 - 7.37 (4H, m), 7.43 (1H, d), 7.63 (1H, dd), 7.91 (2H, s)。 實例 53(2R)-3-胺基-2-苄基-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，將胺I-49(120 mg，0.402 mmol，1當量)和(2R)-2-苄基-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙酸(112.35 mg，0.402 mmol，1當量)、TCFH(169.28 mg，0.60 mmol，1.5當量)、NMI(115.59 mg，1.41 mmol，3.5當量)於MeCN(2 mL)中的溶液攪拌1小時。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(30:1，v/v)對殘餘物進行純化。將所得混合物真空濃縮。通過製備型HPLC來對粗產物(320 mg)進行純化，條件如下(柱：(R, R)-WHELK-O, 2.11*25 cm, 5 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA)，流動相B：EtOH: DCM=1:1(v/v)；流速：20毫升/分鐘；梯度：30% B至30% B，29分鐘；波長：220/254 nm；t R-1 = 18.45分鐘；t R-2 = 22.38分鐘；樣品溶劑：EtOH:DCM = 1:1(v/v)；進樣體積：1 mL)，以得到呈棕黃色固體的4-{7-[(2R)-2-苄基-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙醯胺基]-1H-吲哚-3-基}吡唑-1-甲酸三級丁酯(140 mg，62.19%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 560.15。SFC: t R= 3.024分鐘, ee = 100%。 步驟2：在室溫下，在氮氣氣氛下，將4-{7-[(2R)-2-苄基-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙醯胺基]-1H-吲哚-3-基}吡唑-1-甲酸三級丁酯(140 mg，0.25 mmol，1當量)和TFA(1 mL)於DCM(3 mL)中的溶液攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於甲醇(2 mL)中。在0℃下，用NH 3水溶液將混合物鹼化至pH 9。在0℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌30分鐘。通過製備型HPLC來對粗產物(100 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱, 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：12% B至42% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.50分鐘)，以得到呈灰白色固體的(2R)-3-胺基-2-苄基-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺(37.0 mg，40.95%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 360.30。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.86 - 3.05 (4H, m), 3.10 - 3.18 (1H, m), 6.90 (1H, d), 7.03 (1H, t), 7.23 - 7.29 (1H, m), 7.33 (4H, d), 7.43 (1H, s), 7.64 (1H, dd), 7.91 (2H, s)。SFC: t R= 2.712分鐘, ee = 100%。 實例 54(2S)-3-胺基-2-苄基-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺的製備。 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，將胺I-49(110 mg，0.37 mmol，1當量)和(2S)-2-苄基-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙酸(102.99 mg，0.37 mmol，1當量)、TCFH(155.17 mg，0.55 mmol，1.5當量)、NMI(105.95 mg，1.29 mmol，3.5當量)於MeCN(3 mL)中的溶液攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(30:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈淺粉色固體的4-{7-[(2S)-2-苄基-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙醯胺基]-1H-吲哚-3-基}吡唑-1-甲酸三級丁酯(200 mg，96.92%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H- tBu] += 504.25。 步驟2：在室溫下，在氮氣氣氛下，將4-{7-[(2S)-2-苄基-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙醯胺基]-1H-吲哚-3-基}吡唑-1-甲酸三級丁酯(200 mg，0.36 mmol，1當量)和TFA(1 mL)於DCM(3 mL)中的溶液攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於甲醇(3 mL)中。在0℃下，用NH 3·H 2O將混合物鹼化至pH 9。在0℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌30分鐘。通過製備型HPLC來對粗產物(160 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3+0.1% NH 3水溶液)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：15% B至42% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.72分鐘)，以得到呈灰白色固體的(2S)-3-胺基-2-苄基-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺(43.6 mg，33.69%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 360.10。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.88 - 3.03 (4H, m), 3.12 (1H, dd), 6.90 (1H, dd), 7.03 (1H, t), 7.23 - 7.29 (1H, m), 7.33 (4H, d), 7.43 (1H, s), 7.64 (1H, dd), 7.91 (2H, s)。SFC: t R= 2.462分鐘, ee = 93.97%。 實例 55(S)-3-胺基-N-(3-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-苯基丙醯胺的製備 步驟1：將4-溴-3-甲基-1H-吡唑I-55a(100 mg，621.12 μmol)、碳酸三級丁氧基羰基三級丁酯(216.89 mg，993.79 μmol，228.07 μL)和氫氧化鈉(27.33 mg，683.23 μmol)置於水(1.50 mL)/二噁烷(1.50 mL)中，並且在室溫下，將反應混合物攪拌16小時。去除溶劑，殘餘物用乙酸乙酯處理並過濾。將濾液減壓濃縮，以得到呈棕色固體的4-溴-3-甲基-吡唑-1-甲酸三級丁酯I-55b(160 mg，99%產率)。LCMS: t R= 1.80分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 206.8 [M-55] +。 步驟2：在90℃下，在氮氣下，將4-溴-3-甲基-吡唑-1-甲酸三級丁酯I-55b(160 mg，612.76 μmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1,3,2-二噁硼烷(186.72 mg，735.31 μmol)、乙酸鉀(78.18 mg，796.58 μmol)和PdCl 2dppf(50.04 mg，61.28 μmol)於二噁烷(2.00 mL)中的混合物攪拌並加熱2小時。混合物無需進一步純化用於步驟6。LCMS: t R= 2.00分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(6 mmol/L NH 4HCO 3)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 309.2 [M+H] +。 步驟3：向3-溴-7-硝基-吲哚-1-甲酸三級丁酯I-55d(820 mg，2.40 mmol)和鹽酸氨(1.29 g，24.04 mmol)於乙醇(15 mL)和水(15 mL)中的混合物中加入鐵粉(671.20 mg，12.02 mmol，85.39 μL)。然後，在80℃下，將反應混合物攪拌並加熱3小時。將反應混合物通過矽藻土過濾並用乙醇(50 mL x 3)洗滌，並且將濾液濃縮。將殘餘物溶於200 ml乙酸乙酯中，過濾，並且將濾液減壓濃縮，以得到呈棕色固體的3-溴-1H-吲哚-7-胺I-55e(393 mg，77%產率)。LCMS: t R= 1.25分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(6 mmol/L NH 4HCO 3)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 210.9 [M+H] +。 步驟4：在室溫下，將含3-溴-1H-吲哚-7-胺I-55e(393 mg，1.02 mmol)、(2S)-3-(三級丁氧基羰基胺基)-2-苯基-丙酸(200 mg，753.85 μmol)和DIPEA(292.28 mg，2.26 mmol，393.91 μL)的NMP(3.00 mL)攪拌15分鐘。然後，在0℃下，用冰/水浴冷卻反應混合物。然後，在此溫度下，加入HATU(374.60 mg，980.01 μmol)。在0℃下，將所得混懸液攪拌2小時。然後，將反應混合物倒入水(60 mL)中，並用乙酸乙酯(30 mL × 3)萃取。合併的有機層用鹽水(80 mL × 1)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾，並且將濾液濃縮。通過矽膠快速色譜柱並用乙酸乙酯/石油醚15%至50%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分蒸乾，以得到呈淺棕色固體的N-[(2S)-3-[(3-溴-1H-吲哚-7-基)胺基]-3-氧代-2-苯基-丙基]胺基甲酸三級丁酯C-55a(280 mg，81%產率)。LCMS: t R= 1.97分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Watersarters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 458.1 [M+H] +。 步驟5：將N-[(2S)-3-[(3-溴-1H-吲哚-7-基)胺基]-3-氧代-2-苯基-丙基]胺基甲酸三級丁酯C-55a(242 mg，527.98 μmol)溶於DCM(5 mL)中。加入碳酸三級丁氧基羰基三級丁酯(126.75 mg，580.78 μmol，133.28 μL)和N,N-二甲基吡啶-4-胺(6.45 mg，52.80 μmol)，並且在25℃下，將溶液攪拌16小時。反應混合物用DCM(50 mL)稀釋並用水(30 mL x 3)洗滌。將有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，以得到呈棕色固體的3-溴-7-[[(2S)-3-(三級丁氧基羰基胺基)-2-苯基-丙醯基]胺基]吲哚-1-甲酸三級丁酯C-55b(270 mg，92%產率)。LCMS: t R= 2.35分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 558.1 [M+H] +。 步驟6：在90℃下，在氮氣下，將含3-溴-7-[[(2S)-3-(三級丁氧基羰基胺基)-2-苯基-丙醯基]胺基]吲哚-1-甲酸三級丁酯C-55b(90 mg，161.16 μmol)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)吡唑-1-甲酸三級丁酯I-55c(124.16 mg，402.89 μmol)、PdCl 2dppf(13.16 mg，16.12 μmol)和碳酸鈉(51.24 mg，483.47 μmol)的二噁烷(2.00 mL)和水(0.40 mL)攪拌並加熱16小時。減壓去除溶劑。通過矽膠柱色譜法並用乙酸乙酯/石油醚0至30%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分蒸乾，以得到呈棕色固體的N-[(2S)-3-[[3-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]胺基]-3-氧代-2-苯基-丙基]胺基甲酸三級丁酯C-55d(12 mg，16%產率)。LCMS: t R= 2.24分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 460.2 [M+H] +。 步驟7：將N-[(2S)-3-[[3-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]胺基]-3-氧代-2-苯基-丙基]胺基甲酸三級丁酯C-55d(12 mg，26.11 μmol)於DCM(0.30 mL)中的溶液攪拌並在0℃下用冰/水浴冷卻。然後，向反應物中逐滴加入三氟乙酸(148.87 mg，1.31 mmol，100.59 μL)。在此溫度下，將所得混合物攪拌2小時。將反應混合物減壓濃縮。通過C18快速色譜法並用MeCN/水(0.02% TFA)0%至30%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分凍乾，以得到呈棕色固體的(2S)-3-胺基-N-[3-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]-2-苯基-丙醯胺實例55(1.95 mg，16%產率，TFA鹽)。LCMS: t R= 1.36分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(6 mmol/L NH 4HCO 3)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 360.2 [M+H] +。 1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.96 (s, 1H), 10.32 (s, 1H), 8.06 (s, 3H), 7.75 (s, 1H), 7.50 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 7.40 (d, J = 8.0 Hz, 3H), 7.34 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 6.97 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 4.29 (dd, J = 9.1, 4.6 Hz, 1H), 3.82 - 3.70 (m, 1H), 3.14 (dd, J = 13.2, 6.8 Hz, 1H), 2.29 (s, 3H)。 實例 56(2S)-3-胺基-N-[3-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]-2-苯基-丙醯胺的製備 步驟1：在90℃下，在氮氣下，將含3-溴-7-[[(2S)-3-(三級丁氧基羰基胺基)-2-苯基-丙醯基]胺基]吲哚-1-甲酸三級丁酯C-55b(50 mg，89.53 μmol)、(1-三級丁氧基羰基-3,5-二甲基-吡唑-4-基)硼酸(32.24 mg，134.30 μmol)、K 2CO 3(30.93 mg，223.83 μmol，13.51 μL)和PdCl 2dppf (6.55 mg，8.95 μmol)的二噁烷(2.00 mL)和水(0.40 mL)攪拌16小時。減壓去除溶劑。通過矽膠柱色譜法並用甲醇/DCM 0至10%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分蒸乾，以得到呈棕色固體的N-[(2S)-3-[[3-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]胺基]-3-氧代-2-苯基-丙基]胺基甲酸三級丁酯C-56(22 mg，52%產率)。LCMS: t R= 1.69分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Warters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 474.4 [M+H] +。 步驟2：在0℃下，將N-[(2S)-3-[[3-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]胺基]-3-氧代-2-苯基-丙基]胺基甲酸三級丁酯C-56(22 mg，46.46 μmol)於DCM(0.60 mL)中的溶液在冰/水浴中冷卻並攪拌。然後，向反應物中逐滴加入三氟乙酸(264.85 mg，2.32 mmol，178.95 μL)。將所得混合物攪拌2小時。將反應混合物減壓濃縮。通過C18快速色譜法並用MeCN/水(0.02% TFA)0%至30%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分凍乾，以得到呈白色固體的(2S)-3-胺基-N-[3-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]-2-苯基-丙醯胺實例56(4 mg，18%產率，TFA鹽)。LCMS: t R= 1.47分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(6 mmol/L NH4HCO3)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 374.3 [M+H] +。 1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.95 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 10.29 (s, 1H), 8.07 (s, 3H), 7.49 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.42 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.35 (dd, J = 12.5, 4.9 Hz, 3H), 7.11 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.95 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 4.25 (dd, J = 9.3, 5.0 Hz, 1H), 3.57 (ddd, J = 14.6, 11.9, 5.6 Hz, 1H), 3.14 (dt, J = 17.4, 5.6 Hz, 1H), 2.15 (s, 6H)。 實例 57(S)-3-胺基-N-(3-(3-氟-1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-苯基丙醯胺的製備 步驟1：將4-溴-3-氟-1H-吡唑I-57a(100 mg，606.19 μmol)、碳酸三級丁氧基羰基三級丁酯(211.68 mg，969.91 μmol，222.59 μL)和氫氧化鈉(26.67 mg，666.81 μmol)置於水(1.50 mL)/二噁烷(1.50 mL)中，並且在室溫下，將反應混合物攪拌16小時。去除溶劑，殘餘物用乙酸乙酯處理並過濾。將濾液減壓濃縮，以得到呈棕色固體的4-溴-3-氟-吡唑-1-甲酸三級丁酯I-57b(160 mg，99%產率)。LCMS: t R= 1.84分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 164.8 [M-100] +。 步驟2：在90℃下，在氮氣下，將4-溴-3-氟-吡唑-1-甲酸三級丁酯I-57b(160 mg，603.59 μmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1,3,2-二噁硼烷(183.93 mg，724.31 μmol)、乙酸鉀(77.01 mg，784.67 μmol)和PdCl 2dppf(49.29 mg，60.36 μmol)於二噁烷(3.00 mL)中的混合物攪拌並加熱2小時。混合物無需進一步純化用於步驟3。LCMS: t R= 1.88分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(6 mmol/L NH 4HCO 3)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 257.1 [M-55] +。 步驟3：在90℃下，在氮氣下，將含3-溴-7-[[(2S)-3-(三級丁氧基羰基胺基)-2-苯基-丙醯基]胺基]吲哚-1-甲酸三級丁酯C-55b(90 mg，161.16 μmol)、3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)吡唑-1-甲酸三級丁酯I-57c(125.76 mg，402.89 μmol)、PdCl 2dppf(13.16 mg，16.12 μmol)和碳酸鈉(51.24 mg，483.47 μmol，20.24 μL)的二噁烷(2.00 mL)和水(0.40 mL)攪拌16小時。減壓去除溶劑。通過矽膠快速色譜柱並用乙酸乙酯/石油醚0至30%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分蒸乾，以得到呈棕色固體的N-[(2S)-3-[[3-(3-氟-1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]胺基]-3-氧代-2-苯基-丙基]胺基甲酸三級丁酯C-57(15 mg，20%產率)。LCMS: t R= 2.21分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 464.2 [M+H] +。 步驟4：將N-[(2S)-3-[[3-(3-氟-1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]胺基]-3-氧代-2-苯基-丙基]胺基甲酸三級丁酯C-57(15 mg，26.02 μmol，TFA)於DCM(0.30 mL)中的溶液攪拌並在0℃下用冰/水浴冷卻。然後，向反應物中逐滴加入三氟乙酸(148.33 mg，1.30 mmol，100.23 μL)。在此溫度下，將所得混合物攪拌2小時。將反應混合物減壓濃縮。通過C18快速色譜柱並用MeCN/水(0.02% TFA)0%至30%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分凍乾，以得到呈灰白色固體的(2S)-3-胺基-N-[3-(3-氟-1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]-2-苯基-丙醯胺實例57(1.85 mg，20%產率，TFA鹽)。LCMS: t R= 1.47分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(6 mmol/L NH 4HCO 3)，Warters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 364.2 [M+H] +。 1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.44 (s, 1H), 11.17 (s, 1H), 10.39 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.53 - 7.47 (m, 5H), 7.41 (t, J = 7.3 Hz, 3H), 7.37 - 7.29 (m, 2H), 7.01 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 4.31 (qdd, J = 6.1, 4.4, 2.8 Hz, 1H), 3.61 - 3.53 (m, 1H), 3.14 - 3.09 (m, 1H)。 實例 58( 對映異構體 1) 和實例 59( 對映異構體 2)N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-胺基-2-(4-氰基苯基)丙醯胺的製備 步驟1：在25℃下，在空氣氣氛下，向酸I-14(400 mg，1.38 mmol，1當量)於CH 3CN(8.0 mL)中的攪拌混合物中分批加入NMI(339.38 mg，4.13 mmol，3.0當量)、胺I-49(419.28 mg，1.41 mmol，1.02當量)和TCFH(773.16 mg，2.76 mmol，2.0當量)。在25℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。用水(10 mL)稀釋所得混合物。用乙酸乙酯(3 x 30 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用水(3 x 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(20:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的外消旋體醯胺C-58a(450 mg，57.23%)。LCMS: m/z (ESI), [M-Boc- tBu] += 471.25。 步驟2：對外消旋體醯胺C-58a(450 mg，0.79 mmol，1.0當量)進行分離，條件如下(柱：CHIRALPAK IG, 2*25 cm, 5 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA)，流動相B：EtOH:DCM(1:1，v/v)；流速：20毫升/分鐘；梯度：40% B至40% B，12分鐘；波長：220/254 nm；t R-1 = 3.71分鐘；t R-2 = 6.23分鐘；樣品溶劑：EtOH: DCM(1:1，v/v)；進樣體積：0.55 mL)，以得到對映異構體C-58b(200 mg，44.4%)，SFC: t R= 1.488分鐘, ee = 100%，和呈白色固體的對映異構體C-58c(135 mg，30.0%)，SFC: t R= 2.431分鐘, ee = 100%。 步驟3：在室溫下，在空氣氣氛下，向對映異構體C-58b(200 mg，0.35 mmol，1當量)於DCM(5 mL)中的攪拌溶液中加入TFA(1 mL，13.46 mmol)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合攪拌2小時。通過在室溫下加入水(5 mL)淬滅反應。用CH 2Cl 2(3 x 10 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。用NH 3·H 2O將混合物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD C18 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：18% B至31% B，8分鐘；波長：254 nm；t R= 7.65分鐘)，以得到呈白色固體的實例58的對映異構體1(26.6 mg，20.49%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] +=371.15。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.03 (1H, dd), 3.43 (1H, dd), 4.02 (1H, dd), 7.06 (2H, m), 7.47 (1H, s), 7.67 (3H, m), 7.77 (2H, dd), 7.92 (2H, s)。手性HPLC: t R= 2.574分鐘, ee = 97.7%。 在室溫下，在空氣氣氛下，向對映異構體C-58c(135 mg，0.24 mmol，1當量)於DCM(5 mL)中的攪拌溶液中加入TFA(1 mL，13.46 mmol)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。通過在室溫下加入水(10 mL)淬滅反應。用CH 2Cl 2(3 x 10 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD C18 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至40% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 8.05分鐘)，以得到呈白色固體的實例59的對映異構體2(31.5 mg，35.95%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 371.15。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.05 (1H, dd), 3.45 (1H, dd), 4.04 (1H, dd), 7.06 (2H, m), 7.47 (1H, s), 7.66 (3H, m), 7.78 (2H, m), 7.92 (2H, s)。手性HPLC: t R= 3.535分鐘, ee = 95.8%。 實例 60( 對映異構體 1) 和實例 61( 對映異構體 2)N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-胺基-2-(6-(羥甲基)吡啶-3-基)丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入酸I-15(297.97 mg，1.01 mmol，1當量)、胺I-49(300 mg，1.01 mmol，1當量)、TCFH(423.20 mg，1.51 mmol，1.5當量)、NMI(412.81 mg，5.03 mmol，5當量)和MeCN(10 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌過夜。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水(0.5% NH 3水溶液)，10%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，以得到呈棕黃色固體的外消旋體醯胺C-60a(80 mg，12.51%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 577.35。 步驟2：通過製備型手性HPLC來對外消旋體醯胺C60a(80 mg，12.51%)進行純化，條件如下(柱：CHIRALPAK IG, 2*25 cm, 5 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA)，流動相B：EtOH:DCM(1:1，v/v)；流速：20毫升/分鐘；梯度：30% B至30% B，26分鐘；波長：220/254 nm；t R-1 = 14.51分鐘；t R-2 = 20.12分鐘；樣品溶劑：EtOH:DCM(1:1，v/v)；進樣體積：0.7 mL)，以得到對映異構體C-60c(28 mg 35%)，SFC: t R= 3.614分鐘, ee = 100%，和呈棕黃色固體的對映異構體C-60b(29 mg，36.25%)，SFC: t R= 4.986分鐘, ee = 100%。 步驟3：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入對映異構體C60c(30 mg，0.052 mmol，1當量)、TFA(1 mL)和DCM(3 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。用NH 3水溶液將混合物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物(28 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD C18 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：2% B至25% B，8分鐘；波長：254 nm；t R= 7.23分鐘)，以得到呈白色固體的實例61的對映異構體2(10 mg，50.40%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 377.2。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.06 (1H, m), 3.47 (1H, m), 4.00 (1H, m), 4.73 (2H, s), 7.01 - 7.10 (2H, m), 7.48 (1H, s), 7.56 - 7.73 (2H, m), 7.92 (2H, s), 8.00 (1H, m), 8.60 (1H, d)。SFC: t R= 4.285分鐘, ee = 98.7%。 在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入對映異構體C-60b(30 mg，0.052 mmol，1當量)、TFA(1 mL)和DCM(3 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。用NH 3水溶液將殘餘物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物(29 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：3% B至29% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.80分鐘)，以得到呈白色固體的實例60的對映異構體1(7.8 mg，39.72%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 377.2。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.06 (1H, m), 3.47 (1H, m), 4.00 (1H, m), 4.73 (2H, s), 7.01 - 7.10 (2H, m), 7.48 (1H, s), 7.56 - 7.73 (2H, m), 7.92 (2H, s), 8.00 (1H, m), 8.60 (1H, d)。SFC: t R= 3.815分鐘, ee = 95.34%。 實例 62( 對映異構體 1) 和實例 63( 對映異構體 2)N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-胺基-2-(5-甲基吡啶-3-基)丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，將酸I-16(124.03 mg，0.44 mmol，1.2當量)和胺I-49(110 mg，0.37 mmol，1.00當量)、TCFH(155.17 mg，0.55 mmol，1.5當量)、NMI(105.95 mg，1.29 mmol，3.5當量)於CH 3CN(3 mL)中的溶液攪拌1小時。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(10:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈淺黃色固體的外消旋體醯胺C-62a(287 mg，90.46%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 561.35。 步驟2：通過製備型手性HPLC來對外消旋體醯胺C-62a(287 mg)進行純化，條件如下(柱：CHIRALPAK IC, 2*25 cm, 5 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA)，流動相B：EtOH:DCM(1:1，v/v)；流速：20毫升/分鐘；梯度：40% B至40% B，13分鐘；波長：220/254 nm；t R-1 = 7.14分鐘；t R-2 = 10.33分鐘；樣品溶劑：EtOH:DCM(1:1，v/v)；進樣體積：0.6 mL)，以得到對映異構體C-62b(100 mg，34.84%)，SFC: t R=1.875分鐘, ee = 100%，和呈淺黃色固體的對映異構體C-62c(80 mg，27.87%)，SFC: t R= 2.41分鐘, ee = 100%。 步驟3：在室溫下，在氮氣氣氛下，將對映異構體C-62c(80 mg，0.14 mmol，1當量)和TFA(0.8 mL)於DCM(2 mL)中的溶液攪拌30分鐘。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於甲醇(2 mL)中。在0℃下，用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9。在0℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌30分鐘。通過製備型HPLC來對粗產物(40 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：10% B至30% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.78分鐘)，以得到呈白色固體的實例63的對映異構體2(14.0 mg，35.00%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 361.20。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.41 (3H, s), 3.11 (1H, dd), 3.50 (1H, dd), 4.05 (1H, dd), 7.02 - 7.12 (2H, m), 7.47 (1H, s), 7.65 (1H, dd), 7.83 (1H, d), 7.91 (2H, s), 8.37 (1H, d), 8.48 (1H, d)。SFC: t R= 1.928分鐘, ee = 99.62%。 在室溫下，在氮氣氣氛下，將對映異構體C-62b(100 mg，0.18 mmol，1當量)和TFA(0.8 mL)於DCM(2 mL)中的溶液攪拌30分鐘。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於甲醇(2 mL)中。在0℃下，用NH 3水溶液將混合物鹼化至pH 9。在0℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌30分鐘。通過製備型HPLC來對粗產物(40 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：7% B至33% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.73分鐘)，以得到呈白色固體的實例62的對映異構體1(22 mg，55.00%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 361.20。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.41 (3H, s), 3.11 (1H, dd), 3.50 (1H, dd), 4.05 (1H, dd), 7.02 - 7.12 (2H, m), 7.47 (1H, s), 7.65 (1H, dd), 7.83 (1H, d), 7.91 (2H, s), 8.37 (1H, d), 8.48 (1H, d)。SFC: t R= 0.503分鐘, ee = 100%。 實例 64( 對映異構體 1) 和實例 65( 對映異構體 2)N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-胺基-2-(3-羥苯基)丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向20 mL小瓶中加入含酸I-17(448.19 mg，1.21 mmol，1.2當量)、TCFH(423.20 mg，1.51 mmol，1.5當量)、NMI(330.24 mg，4.024 mmol，4.0當量)和胺I-49(300 mg，1.01 mmol，1.00當量)的CH 3CN(3 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(40:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的4-(7-{2-[3-(苄氧基)苯基]-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙醯胺基}-1H-吲哚-3-基)吡唑-1-甲酸三級丁酯(350 mg，53.40%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 652.20。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ1.37 (9H, s), 1.62 (9H, s), 3.39 (1H, d), 3.55 - 3.65 (1H, m), 4.07 (1H, t), 5.09 (2H, s), 6.93 (1H, dd), 7.00 - 7.06 (2H, m), 7.06 - 7.10 (1H, m), 7.27 (1H, d),7.32 - 7.35 (1H, m), 7.35 - 7.41 (2H, m), 7.42 - 7.50 (3H, m), 7.61 (1H, d), 7.85 (1H, d), 8.27 (1H, s), 8.49 (1H, s)。 步驟2：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含4-(7-{2-[3-(苄氧基)苯基]-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙醯胺基}-1H-吲哚-3-基)吡唑-1-甲酸三級丁酯(330 mg，0.51 mmol，1當量)和Pd/C(20 mg，0.19 mmol，0.37當量)的甲醇(5 mL)。在室溫下，在氫氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。過濾所得混合物，並且用甲醇(4 x 20 mL)洗滌濾餅。將濾液減壓濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水，0%至100%梯度，30分鐘；檢測器，UV 254 nm。將所得混合物真空濃縮，以得到呈白色固體的外消旋體醯胺C-64a(80 mg，28.13%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 562.20。 步驟3：通過製備型手性HPLC來對外消旋體醯胺C-64a(80 mg)進行純化，條件如下(柱：CHIRALPAK IC, 2*25 cm, 5 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA)，流動相B：EtOH:DCM(1:1，v/v)；流速：20毫升/分鐘；梯度：20% B至20% B，21分鐘；波長：220/254 nm；t R-1 = 12.04分鐘；t R-2 = 16.90分鐘；樣品溶劑：EtOH:DCM(1:1，v/v)；進樣體積：0.8 mL)，以得到對映異構體C-64b(25 mg，31.25%)，SFC: t R= 2.323分鐘, ee = 100%，和呈黃色固體的對映異構體C-64c(23 mg，28.75%)，SFC: t R= 3.04分鐘, ee = 98.84%。 步驟4：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含對映異構體C-64b(20 mg，0.036 mmol，1當量)和TFA(0.5 mL)的DCM(1 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD C18 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至35% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 7.08分鐘)，以得到呈白色固體的實例64的對映異構體1(11.9 mg，92.47%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 362.05。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.03 (1H, dd), 3.41 (1H, dd), 3.89 (1H, dd), 6.74 - 6.78 (1H, m), 6.93 - 6.97 (2H, m), 7.03 - 7.12 (2H, m), 7.22 (1H, dd), 7.47 (1H, s), 7.64 (1H, dd), 7.92 (2H, s)。SFC: t R= 3.572分鐘, ee = 100.00%。 在室溫下，向25 mL小瓶中加入含對映異構體C-64c(30 mg，0.053 mmol，1當量)和TFA(1.50 mL)的DCM(1 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3+0.1% NH 3水溶液)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至35% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 8.30分鐘)，以得到呈白色固體的實例65的對映異構體2(12.6 mg，65.27%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 362.05。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.04 (1H, dd), 3.41 (1H, dd), 3.90 (1H, dd), 6.74 - 6.78 (1H, m), 6.93 - 6.97 (2H, m), 7.03 - 7.12 (2H, m), 7.22 (1H, t), 7.47 (1H, s), 7.64 (1H, dd), 7.92 (2H, s)。SFC: t R= 4.347分鐘, ee = 92.08%。 實例 66( 對映異構體 1) 和實例 67( 對映異構體 2)N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-(4-甲基呱嗪-1-基)-2-(吡啶-3-基)丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，向酸I-18(300 mg，1.20 mmol，1當量)和胺I-49(359.00 mg，1.20 mmol，1.00當量)於CH 3CN(30 mL)中的攪拌混合物中加入TCFH(675.24 mg，2.41 mmol，2當量)和NMI(493.99 mg，6.02 mmol，5當量)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將混合物攪拌2小時。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，10%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm。這得到呈棕色固體的外消旋體醯胺C-66a(151 mg，23.69%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 530.35。 步驟2：通過製備型手性HPLC來對外消旋體醯胺C-66a(205 mg)進行純化，條件如下(柱：CHIRALPAK IC, 2*25 cm, 5 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA)，流動相B：EtOH:DCM(1:1，v/v)；流速：20毫升/分鐘；梯度：40% B至40% B，14.5分鐘；波長：220/254 nm；t R-1 = 8.02分鐘；t R-2 = 11.66分鐘；樣品溶劑：EtOH:DCM(1:1，v/v)；進樣體積：0.8 mL)，以得到呈黃色固體的對映異構體C-66c，SFC: t R= 2.186, ee = 100%，和呈黃色固體的對映異構體C-66b，SFC: t R= 3.308, ee = 100%。 在室溫下，在氮氣氣氛下，向對映異構體C-66b(80 mg，0.15 mmol，1當量)於DCM(6 mL)中的攪拌混合物中加入TFA(1.5 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將混合物攪拌1.5小時。用NH 3(水溶液)將反應混合物鹼化至pH 8。通過製備型HPLC來對混合物進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3+0.1% NH 3水溶液)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：13% B至35% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.68分鐘)，以得到呈白色固體的實例66的對映異構體1(37.8 mg，58.26%)。LCMS m/z (ESI), [M+H] += 430.20。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.31 (3H, s), 2.51 - 2.91 (9H, m), 3.35-3.4(1H, m), 4.21 (1H, dd), 7.06 - 7.12 (2H, m), 7.45 - 7.53 (2H, m), 7.68 (1H, dd), 8.05 (3H, d), 8.50 (1H, dd), 8.66 (1H, d)。SFC: t R= 1.958, ee = 100%。 在室溫下，在氮氣氣氛下，向對映異構體C-66c(80 mg，0.15 mmol，1當量)於DCM(6 mL)中的攪拌混合物中加入TFA(1.5 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將混合物攪拌1.5小時。用NH 3水溶液將反應混合物鹼化至pH 8。通過製備型HPLC來對混合物進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3+0.1% NH 3水溶液)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：13% B至35% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.68分鐘)，以得到呈白色固體的實例67的對映異構體2(37.8 mg，58.26%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 430.25。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.31 (3H, s), 2.46 - 2.90 (9H, m), 3.37 - 3.44 (1H, m), 4.21 (1H, dd), 7.05 - 7.14 (2H, m), 7.44 - 7.54 (2H, m), 7.68 (1H, dd), 7.93 (2H, d), 8.02 - 8.07 (1H, m), 8.50 (1H, dd), 8.66 (1H, d)。SFC: t R= 2.053分鐘, ee = 100%。 實例 68( 對映異構體 1) 、實例 69( 對映異構體 2) 和實例 100( 外消旋體 )N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-胺基-2-(3-氰基苯基)乙醯胺的製備 步驟1：向酸I-52(300 mg，1.09 mmol，1當量)於CH 3CN(6.0 mL)中的混合物中加入NMI(267.45 mg，3.26 mmol，3當量)、TCFH(609.31 mg，2.17 mmol，2當量)和胺I-49(327.19 mg，1.10 mmol，1.01當量)。在25℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。用水(15 mL)稀釋所得混合物。用乙酸乙酯(3 x 20 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(20:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的外消旋體醯胺C-68(510 mg，84.38%)。LCMS: m/z (ESI), [M-Boc+H] += 457.15。 步驟2：在室溫下，在氮氣氣氛下，將外消旋體醯胺C-68(320 mg，0.58 mmol，1當量)於TFA(1.0 mL)和DCM(4.0 mL)中的混合物攪拌1.0小時。反應後，將所得混合物真空濃縮並用甲醇(2.0 mL)稀釋，用NH 3水溶液將殘餘物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD C18 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：15% B至40% B，8分鐘；波長：254 nm；t R= 7.05分鐘)，以得到呈白色固體的實例100的外消旋體(200 mg，97.62%)。 步驟3：通過手性HPLC來對實例100的外消旋體(200 mg)進行純化，條件如下(柱：CHIRALPAK IG, 2*25 cm, 5 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA)，流動相B：EtOH/DCM (1:1，v/v)；流速：20毫升/分鐘；梯度：50% B至50% B，8分鐘；波長：220/254 nm；t R-1 = 4.12分鐘；t R-2 = 5.81分鐘；樣品溶劑：EtOH/DCM(1:1，v/v)；進樣體積：0.3 mL)，以在製備型HPLC(柱：XBridge Prep OBD C18 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：15% B至40% B，8分鐘，40% B；波長：254 nm；t R= 7.05分鐘)後得到呈白色固體的實例68的對映異構體1(11.7 mg，22.08%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 357.15。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 4.82 (1H, s), 7.12 (2H, m), 7.47 (1H, s), 7.64 (2H, m), 7.73 (1H, d), 7.91 (1H, d), 7.98 (1H, s)，SFC: t R= 5.974分鐘, ee = 93.35%，並在製備型HPLC(柱：Xselect CSH F-Phenyl OBD柱, 19*250 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：甲醇；流速：25毫升/分鐘；梯度：38% B至57% B，11分鐘；波長：254 nm；t R= 10.61分鐘)後得到呈白色固體的實例69的對映異構體2(3.7 mg，4.63%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] =357.15。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 4.82 (1H, s), 7.11 (2H, m), 7.64 (4H, m), 7.94 (4H, m)。SFC: t R= 6.817, ee = 81.22%。 實例 70( 外消旋體 )3-(2-胺基-1-{[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]胺基甲醯基}乙基)苯甲酸的製備 步驟1：向8 mL小瓶中加入含酸I-19(122.48 mg，0.34 mmol，1當量)和胺I-49(100 mg，0.34 mmol，1當量)、HATU(191.17 mg，0.50 mmol，1.5當量)的DMF(2 mL)。在0℃下，向上述混合物中加入DIEA(129.96 mg，1.01 mmol，3當量)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。用乙酸乙酯(40 mL)稀釋所得混合物。用NaHCO 3(1 x 40 mL)、水(1 x 40 mL)和飽和鹽水(2 x 40 mL)洗滌所得混合物。有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(30:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈灰白色固體的外消旋體醯胺C-70(150 mg，84.88%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 646.45。 步驟2.在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含外消旋體醯胺C-70(60 mg，0.093 mmol，1當量)的DCM(3 mL)和TFA(1 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將混合物減壓濃縮並溶於DMF(1 mL)中，用NH 3(水溶液)鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物(50 mg)進行純化，條件如下(柱：Xselect CSH C18 OBD 30*150 mm 5 μm, n；流動相A：ACN，流動相B：ACN；流速：25毫升/分鐘；梯度：61% B至83% B，8分鐘；波長：254 nm；t R= 9.2分鐘)，以得到呈白色固體的實例70的外消旋體(25.9 mg，71.58%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 390.15。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 2.97 (1H, dd), 3.39 (1H, dd), 4.32 (1H, dd), 6.99 (1H, t), 7.38 (1H, t), 7.44 - 7.61 (3H, m), 7.69 (1H, d), 7.77 - 8.10 (3H, m), 8.22 (1H, d)。 實例 71( 外消旋體 )4-(2-胺基-1-{[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]胺基甲醯基}乙基)苯甲酸的製備 步驟1：在室溫下，在空氣氣氛下，向酸I-53(50 mg，0.14 mmol，1當量)和胺I-49(48.99 mg，0.16 mmol，1.2當量)於DMF(4 mL)中的攪拌溶液中加入HATU(104.05 mg，0.27 mmol，2當量)和DIEA(53.05 mg，0.411 mmol，3當量)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌3小時。通過在室溫下加入水(5 mL)淬滅反應。用乙酸乙酯(3 x 10 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用鹽水(3 x 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(10:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的外消旋體醯胺C-71(50 mg，56.59%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 646.40。 步驟2：在室溫下，在空氣氣氛下，向外消旋體醯胺C-71(150 mg，0.23 mmol，1當量)於DCM(5 mL)中的攪拌溶液中加入TFA(1 mL)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。將反應物減壓濃縮。將混合物用DMF(1 mL)溶解並用NH 3水溶液鹼化至pH 8。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3+0.1% NH 3水溶液)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：22% B至43% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.80分鐘)，以得到呈白色固體的實例71的外消旋體(15.7 mg，17.36%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 390.10。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 2.99 (1H, dd), 3.20 - 3.25(3H, m), 4.07 - 4.15 (1H, m), 6.99 (1H, t), 7.51 (3H, dd), 7.55 - 7.61 (2H, m), 7.95 (4H, d), 11.22 (1H, s)。 實例 72( 外消旋體 )4-(2-胺基-1-{[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]胺基甲醯基}乙基)-N,N-二甲基苯甲醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向外消旋體醯胺C-71(350 mg，0.54 mmol，1當量)於甲醇(20 mL)、H 2O(5 mL)中的攪拌溶液中加入LiOH(51.92 mg，2.17 mmol，4當量)。在室溫下，在空氣氣氛下，將混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，50%至60%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，以得到呈粉色固體的外消旋體酸C-72a(300 mg，113.07%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 490.53。 步驟2：在室溫下，在空氣氣氛下，向外消旋體酸C-72a(120 mg，0.25 mmol，1當量)和二甲胺(13.26 mg，0.29 mmol，1.2當量)於DMF(8 mL，103.37 mmol)中的攪拌溶液中加入HATU(186.42 mg，0.49 mmol，2當量)和DIEA(95.05 mg，0.74 mmol，3當量)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌3小時。通過在室溫下加入水(10 mL)淬滅反應。用乙酸乙酯(3 x 10 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用鹽水(3 x 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以PE/EA(1:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈白色固體的外消旋體醯胺C-72b(90 mg，71.07%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 517.60。 步驟3：在室溫下，在空氣氣氛下，向外消旋體醯胺C-72b(70 mg，0.11 mmol，1當量)於DCM(5 mL，78.65 mmol)中的攪拌溶液中加入TFA(1 mL，13.46 mmol)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。通過在室溫下加入水(5 mL)淬滅反應。用CH 2Cl 2(3 x 5 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。用NH 3(水溶液)將殘餘物鹼化至pH 8。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：Xselect CSH C18 OBD 30*150 mm 5 μm；流動相A：水(0.1% FA)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至20% B，7分鐘；波長：254; 220 nm；t R= 6.5分鐘)，以得到呈白色固體的實例72的外消旋體(2 mg，4.44%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 417.25。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.03 (3H, s), 3.13 (3H, s), 3.41 (1H, s), 3.66 - 3.73 (1H, m), 4.31 (1H, dd), 7.04 - 7.10 (2H, m), 7.48 (1H, s), 7.54 (2H, d), 7.60 - 7.70 (3H, m), 7.92 (2H, s)。 實例 73( 外消旋體 )4-(2-胺基-1-{[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]胺基甲醯基}乙基)-N-甲基苯甲醯胺的製備 步驟1：在室溫下，在空氣氣氛下，向外消旋體酸C-72a(120 mg，0.25 mmol，1當量)和甲胺(9.14 mg，0.29 mmol，1.2當量)於DMF(8 mL，103.37 mmol)中的攪拌溶液中加入HATU(186.42 mg，0.49 mmol，2當量)和DIEA(95.05 mg，0.74 mmol，3當量)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。通過在室溫下加入水(10 mL)淬滅反應。用乙酸乙酯(3 x 10 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用鹽水(3 x 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(10:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈白色固體的外消旋體醯胺C-73(50 mg，40.59%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 503.45。 步驟2：在室溫下，在空氣氣氛下，將含外消旋體醯胺C-73(50 mg，0.099 mmol，1當量)的HCl(氣體)於1,4-二噁烷(4 mL)中的溶液攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。用NH 3(水溶液)將殘餘物鹼化至pH 8。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：Xselect CSH C18 OBD 30*150 mm 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：甲醇；流速：25毫升/分鐘；梯度：41% B至56% B，8分鐘；波長：254 nm；t R= 6.6分鐘)，以得到呈白色固體的實例73的外消旋體(1.3 mg，3.25%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 403.45。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 2.78 (3H, d), 3.17 (1H, d), 4.10 (1H, d), 4.12 (1H, d), 7.00 (1H, t), 7.34 (1H, d), 7.53 (2H, d), 7.57 - 7.64 (2H, m), 7.85 (2H, d), 7.96 (1H, s), 8.42 (1H, d), 10.69 (1H, s)。 實例 74( 外消旋體 )4-(1-((3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)胺基)-3-胺基-1-氧代丙-2-基)苯甲醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向40 mL小瓶中加入酸I-37(148.82 mg，0.48 mmol，1.2當量)和胺I-49(120 mg，0.40 mmol，1當量)和TCFH(135.43 mg，0.48 mmol，1.2當量)和NMI(132.10 mg，1.61 mmol，4當量)和MeCN(8 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(18:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈棕色固體的外消旋體醯胺C-74(220 mg，92.92%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 589.30。 步驟2：在室溫下，向8 mL小瓶中加入外消旋體醯胺C-74(220 mg，0.37 mmol，1當量)和TFA(1 mL)和DCM(3 mL)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於DMF(2 mL)中。用NH 3·H 2O將混合物鹼化至pH 9。在0℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌30分鐘。通過製備型HPLC來對粗產物(150 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD C18 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至22% B，9分鐘；波長：254 nm；t R= 8.32分鐘)，以得到呈白色固體的實例74的外消旋體(43.1 mg，29.65%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 389.15。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 2.94 (1H, m), 3.64 (1H, s), 3.95 (1H, s), 6.99 (1H, m), 7.33 (1H, s), 7.40 (1H, m), 7.50 (2H, d), 7.58 (2H, m), 7.85 (2H, d), 7.93 (3H, s)。 實例 75( 外消旋體 )3-胺基-2-[3-(羥甲基)苯基]-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含酸I-21(100 mg，0.34 mmol，1當量)、胺I-49(151.53 mg，0.51 mmol，1.5當量)、HATU(193.12 mg，0.51 mmol，1.5當量)、三乙胺(171.32 mg，1.70 mmol，5當量)的DMF(5 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌8小時。用乙酸乙酯(30 mL)稀釋所得混合物。用水(3 x 30 mL)洗滌殘餘物。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(20:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的外消旋體醯胺C-75(120 mg，54.08%)。LCMS: m/z (ESI), [M +H] += 576.25。 步驟2：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入外消旋體醯胺C-75(100 mg，0.17 mmol，1當量)、TFA(1 mL，13.46 mmol，77.50當量)和DCM(3 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。用甲醇(10 mL)稀釋所得混合物。用NH 3(水溶液)將混合物中和至pH 9，並且在0℃下，將所得混合物攪拌30分鐘。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：Xselect CSH C18 OBD 30*150 mm 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：20% B至35% B，8分鐘；波長：254 nm；t R= 7.3分鐘)，以得到呈白色固體的實例75的外消旋體(26 mg，39.69%)。LCMS: m/z (ESI), [M +H] += 376.15。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 3.06 (dd, 1H), 3.45 (dd, 1H), 3.98 (dd, 1H), 4.65 (s, 2H), 7.07 (m, 2H), 7.33 (d, 1H), 7.40 (m, 2H), 7.49 (d, 2H), 7.64 (dd, 1H), 7.91 (s, 2H)。 實例 76( 外消旋體 )3-胺基-2-[3-(胺基甲基)苯基]-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺的製備 步驟1：在25℃下，在N 2氣氛下，向酸I-54(126.93 mg，0.32 mmol，1.2當量)和胺I-49(80 mg，0.27 mmol，1當量)於ACN(8 mL)中的溶液中加入TCFH(90.28 mg，0.32 mmol，1.2當量)和NMI(88.06 mg，1.07 mmol，4當量)。在25℃下，將混合物攪拌2小時。過濾所得混合物，並且用甲醇(3 x 100 mL)洗滌濾餅。將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以DCM/甲醇(10:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈棕色固體的外消旋體醯胺C-76(145 mg，65.15%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 675.50。 步驟2：在25℃下，在N 2氣氛下，向外消旋體醯胺C-76(180 mg，0.27 mmol，1當量)於DCM(15 mL)中的溶液中加入TFA(5 mL)。在25℃下，將混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於水(50 mL)中。用NaHCO 3將混合物鹼化至pH=8。用EA(3 x 50 mL)萃取所得混合物。將水層真空濃縮。通過製備型HPLC來對粗產物(100 mg)進行純化，條件如下(柱：YMC-Actus Triart C18 ExRS, 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(50 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至30% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 6.05分鐘)，以得到呈白色固體的實例76的外消旋體(19 mg，18.87%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 375.25。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.06 (1H, dd), 3.46 (1H, dd), 3.93 (2H, s), 3.99 (1H, m), 7.07 (2H, m), 7.35 (1H, dt), 7.43 (2H, m), 7.46 (1H, d), 7.50 (1H, d), 7.64 (1H, dd), 7.91 (2H, s)。 實例 77( 外消旋體 )3-胺基-2-[4-(胺基甲基)苯基]-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，向酸I-4(80 mg，0.20 mmol，1當量)和DIEA(78.64 mg，0.61 mmol，3當量)於DMF(1.0 mL)中的攪拌混合物中分批加入胺I-49(61.72 mg，0.21 mmol，1.02當量)和HATU(154.23 mg，0.41 mmol，2當量)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2.0小時。用水(10 mL)稀釋所得混合物。用CH 2Cl 2(3 x 10 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用水(3 x 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(20:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的外消旋體醯胺C-77(130 mg，94.99%)。LCMS: m/z (ESI), [M- +H] += 675.40。 步驟2：在室溫下，在空氣氣氛下，將外消旋體醯胺C-77(105 mg，0.16 mmol，1當量)和TFA(0.5 mL)於DCM(2.0 mL)中的溶液攪拌2小時。反應後，將所得混合物減壓濃縮，以得到80 mg粗製品。用甲醇(2 mL)稀釋粗製品。用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物(80 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3+0.1% NH 3水溶液)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至28% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.83分鐘)，以得到呈白色固體的實例77的外消旋體(22.6 mg，38.79%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] +=375.15。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.02 (1H, dd), 3.43 (1H, dd), 3.88 (2H, s), 3.95 (1H, dd), 7.05 (2H, m), 7.41 (2H, d), 7.49 (3H, m), 7.64 (1H, dd), 7.91 (2H, s)。 實例 78( 外消旋體 )3-胺基-2-{3-[(二甲基胺基)甲基]苯基}-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺的製備 步驟1：在25℃下，在N 2氣氛下，向酸I-31(90.55 mg，0.29 mmol，1.2當量)和胺I-49(73 mg，0.25 mmol，1當量)於ACN(10 mL)中的溶液中加入TCFH(82.38 mg，0.29 mmol，1.2當量)和NMI(80.36 mg，0.98 mmol，4當量)。在25℃下，將混合物攪拌2小時。過濾所得混合物，並且用甲醇(3 x 100 mL)洗滌濾餅。將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以DCM/甲醇(10:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈棕色固體的外消旋體醯胺C-78(160 mg，85.11%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 603.40。 步驟2：在25℃下，在N 2氣氛下，向外消旋體醯胺C-78(160 mg，0.27 mmol，1當量)於DCM(15 mL)中的溶液中加入TFA(5 mL)。在25℃下，將混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於水(50 mL)中。用NaHCO 3將混合物鹼化至pH = 8。將所得混合物真空濃縮。通過製備型HPLC按以下條件(NH 4HCO 3)來對粗產物進行純化，以得到呈白色固體的實例78的外消旋體(51.3 mg，46.98%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 403.20。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.35 (6H, s), 3.24 (1H, dd), 3.59 (2H, m), 3.66 (1H, d), 4.16 (1H, dd), 7.08 (2H, m), 7.35 (1H, dt), 7.48 (4H, m), 7.65 (1H, dd), 7.92 (2H, s)。 實例 79( 外消旋體 )N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-胺基-2-(4-羥苯基)-丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，在空氣氣氛下，向酸I-55(140 mg，0.38 mmol，1.00當量)和NMI(108.32 mg，1.32 mmol，3.5當量)於MeCN(3 mL)中的攪拌溶液中分批加入TCFH(158.63 mg，0.57 mmol，1.5當量)和胺I-49(112.45 mg，0.38 mmol，1當量)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法，使用PE/EA(1:1，v/v)洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈棕色固體的4-(7-{2-[4-(苄氧基)苯基]-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙醯胺基}-1H-吲哚-3-基)吡唑-1-甲酸三級丁酯(226 mg，92.00%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 652.40。 步驟2：在室溫下，在氫氣氣氛下，將4-(7-{2-[4-(苄氧基)苯基]-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙醯胺基}-1H-吲哚-3-基)吡唑-1-甲酸三級丁酯(216 mg，0.33 mmol，1當量)和Pd/C(10.58 mg，0.10 mmol，0.3當量)於MeOH(5 mL)中的混合物攪拌2小時。通過過濾濾出沉澱固體並用MeOH(3 x 30 mL)洗滌。將濾液減壓濃縮，以得到呈白色固體的外消旋體醯胺C-79(72.4 mg，38.90%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 562.30。 1H NMR: (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.35 (9H, d), 1.62 (9H, s), 3.28 (1H, d), 3.54 (1H, s), 3.96 (1H, d), 6.73 (2H, d), 7.04 (2H, t), 7.22 (2H, d), 7.47 (1H, d), 7.60 (1H, d), 7.84 (1H, d), 8.26 (1H, s), 8.49 (1H, s), 9.32 (1H, d), 9.91 (1H, s), 10.85 (1H, s)。 步驟3：在室溫下，在空氣氣氛下，將外消旋體醯胺C-79(72 mg，0.13 mmol，1當量)和TFA(1 mL)於DCM(3 mL)中的溶液攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於DMF(1 mL)中。用NH 3·H 2O將混合物鹼化至pH 9並攪拌30分鐘。通過製備型HPLC來對粗產物(72 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD C18柱, 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至25% B，7分鐘，25% B；波長：220 nm；t R: 7.55分鐘)，以得到呈白色固體的實例79的外消旋體(23 mg，49.64%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 362.15。 1H NMR: (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 2.82 (1H, m), 3.19 (1H, m), 3.76 (1H, m), 6.73 (2H, m), 6.99 (1H, t), 7.22 (2H, m), 7.45 (1H, m), 7.57 (2H, q), 7.95 (2H, s), 9.65 (1H, d), 10.79 (1H, m), 12.81 (1H, s)。 實例 80( 外消旋體 )3-胺基-2-(4-胺基苯基)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向8 mL小瓶中加入含I-22酸(100 mg，0.26 mmol，1當量)和胺I-49(78.42 mg，0.26 mmol，1當量)和TCFH(88.50 mg，0.32 mmol，1.2當量)和NMI(86.33 mg，1.05 mmol，4當量)的MeCN(5 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(38:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的外消旋體醯胺C-80(230 mg，132.42%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 661.40。 步驟2：在室溫下，向8 mL小瓶中加入外消旋體醯胺C-80(220 mg，0.33 mmol，1當量)和DCM(3 mL)和TFA(1 mL)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。在0℃下，用DMF(2 mL)稀釋所得混合物並用NH 3(水溶液)鹼化至pH 9。在0℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌20分鐘。通過製備型HPLC來對粗產物(200 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至25% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 7.03分鐘)，以得到呈白色固體的實例80的外消旋體(31.9 mg，25.93%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 361.10。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 2.80 (1H, dd), 3.18 (1H, m), 3.66 (1H, dd), 4.98 (2H, s), 6.53 (2H, d), 6.98 (1H, td), 7.07 (2H, d), 7.46 (1H, t), 7.56 (2H, dt), 7.95 (2H, s), 9.93 (1H, s), 10.82 (1H, d)。 實例 81( 外消旋體 )3-胺基-2-(3-胺基苯基)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向20 mL小瓶中加入含酸I-5(110 mg，0.29 mmol，1當量)、TCFH(105.46 mg，0.38 mmol，1.3當量)、NMI(94.96 mg，1.16 mmol，4當量)和胺I-49(86.26 mg，0.29 mmol，1當量)的CH 3CN(1.5 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(18:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的外消旋體醯胺C-81(70 mg，36.64%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 661.40。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ1.37 (9H, s), 1.48 (9H, s), 1.62 (9H, s), 3.56 (2H, s), 4.02 (1H, d), 7.05 (1H, s), 7.11 (1H, s), 7.22 (1H, d), 7.27 (1H, d), 7.48 (1H, d), 7.61 (1H, d), 7.68 (1H, s), 7.84 (1H, d), 8.26 (1H, s), 8.49 (1H, s), 9.37 (1H, s), 9.98 (1H, s), 10.82 (1H, s)。 步驟2：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含外消旋體醯胺C-81(70 mg，0.11 mmol，1當量)和TFA(0.75 mL，10.10 mmol)的DCM(1.5 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9並繼續攪拌30分鐘。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD C18 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至28% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.45)，以得到呈白色固體的實例81的外消旋體(37.8 mg，99.00%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 361.20。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.03 (1H, dd), 3.40 (1H, dd), 3.85 (1H, dd), 6.69 (1H, ddd), 6.77 - 6.90 (2H, m), 7.01 - 7.19 (3H, m), 7.46 (1H, s), 7.64 (1H, dd), 7.91 (2H, s)。 實例 82( 外消旋體 )2-胺基-2-(3,4-二甲氧基苯基)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]乙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向20 mL小瓶中加入含胺I-49(110 mg，0.37 mmol，1當量)和[(三級丁氧基羰基)胺基](3,4-二甲氧基苯基)乙酸(137.75 mg，0.44 mmol，1.2當量)、TCFH(124.14 mg，0.44 mmol，1.2當量)、NMI(121.09 mg，1.48 mmol，4當量)的MeCN(5 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於DCM(3 mL)中。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(30:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈淺黃色固體的外消旋體醯胺C-82(201 mg，82.93%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 592.15。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.52 (9H, s), 1.71 (9H, s), 3.86 (3H, s), 3.89 (3H, s), 5.33 (1H, s), 7.00 (1H, d), 7.13 (3H, t), 7.19 (1H, s), 7.64 (1H, s), 7.67 (1H, d), 8.16 (1H, s), 8.43 (1H, s)。 步驟2：在室溫下，加入含外消旋體醯胺C-82(200 mg，0.34 mmol，1當量)的TFA(1 mL，13.46 mmol，39.83當量)和DCM(3 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於甲醇(3 mL)中。用NH 3水溶液將混合物鹼化至pH 9。在0℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。通過製備型HPLC來對粗產物(120 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD C18 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至40% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 7.67分鐘)，以得到呈白色固體的實例82的外消旋體(68.3 mg，51.62%)。LCMS: m/z (ESI), [M-NH 2] +=375.10。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.85 (3H, s), 3.89 (3H, s), 4.69 (1H, s), 6.98 (1H, s), 7.00 (1H, s), 7.20 (2H, d), 7.47 (1H, s), 7.64 (1H, d), 7.66 (1H, d), 7.92 (2H, s)。 實例 83( 外消旋體 )2-胺基-2-(3,5-二甲氧基苯基)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]乙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向40 mL小瓶中加入含胺I-49(100 mg，0.34 mmol，1當量)和[(三級丁氧基羰基)胺基](3,5-二甲氧基苯基)乙酸(114.79 mg，0.37 mmol，1.1當量)、TCFH(112.85 mg，0.40 mmol，1.2當量)、NMI(110.08 mg，1.34 mmol，4當量)的MeCN(5 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(35:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈淺黃色固體的外消旋體醯胺C-83(80 mg，40.34%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 592.15。 步驟2：在室溫下，向100 mL圓底燒瓶中加入含外消旋體醯胺C-83(80 mg，0.14 mmol，1當量)的DCM(3 mL)和TFA(1 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於甲醇(3 mL)中。用NH 3水溶液將混合物鹼化至pH 9。在0℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。通過製備型HPLC來對粗產物(80 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD C18 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：15% B至45% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 7.33分鐘)，以得到呈白色固體的實例83的外消旋體(44.8 mg，84.65%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 392.15。1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.82 (6H, s), 4.68 (1H, s), 6.47 (1H, t), 6.76 (2H, d), 6.95 - 7.21 (2H, m), 7.47 (1H, s), 7.66 (1H, dd), 7.92 (2H, s)。 實例 84( 外消旋體 )3-胺基-2-(2-甲氧基苯基)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，向酸I-23(210 mg，0.71 mmol，1當量)和NMI(175.15 mg，2.13 mmol，3當量)於DMF中的攪拌混合物中加入胺I-50(256.93 mg，0.782 mmol，1.1當量)和TCFH(997.54 mg，3.56 mmol，5當量)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。用水(30 mL)稀釋所得混合物。用CH 2Cl 2(3 x 20 mL)萃取水層。將所得混合物減壓濃縮。通過反相快速來對粗產物進行純化，以得到呈白色固體的外消旋體醯胺C-84(230 mg，53.39%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 606.81。 步驟2：在室溫下，在氮氣氣氛下，將外消旋體醯胺C-84(70 mg，0.12 mmol，1當量)和HCl(氣體)於1,4-二噁烷(6 mL，0.002 mmol)中的混合物攪拌4小時。將所得混合物真空濃縮。用NH 3(水溶液)將混合物/殘餘物鹼化至pH 7。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，10%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，以得到粗產物。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：15% B至34% B，8分鐘；波長：254 nm；t R= 7.45分鐘)，以得到呈白色固體的實例84的外消旋體(2.8 mg，6.45%)LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 376.15。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) 2.88 (1H, dd), 3.13 (1H, dd), 3.87 (3H, s), 4.23 (1H, dd), 6.93 (1H, t), 6.96-7.07 (2H, m), 7.26 (1H, t), 7.37 (1H, dd), 7.47 (1H, d), 7.52-7.62 (2H, m), 7.95(2H, s), 10.81 (1H, s), 12.81 (1H, s)。 實例 85( 外消旋體 )3-胺基-2-(4-氟苯基)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入酸I-24(400 mg，1.41 mmol，1當量)、MeCN(10 mL)、TCFH(792.32 mg，2.82 mmol，2當量)、NMI(579.64 mg，7.06 mmol，5當量)和胺I-50(417.70 mg，2.12 mmol，1.5當量)。在室溫下，將所得混合物攪拌8小時。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(30:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈灰白色固體的外消旋體醯胺C-85(260 mg，39.09%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 594.15。 步驟2：在室溫下，向25 mL小瓶中加入外消旋體醯胺C-85(200 mg，0.34 mmol，1當量)和TBAF(2 mL，0.019 mmol，0.23當量)。在40℃下，將所得混合物攪拌8小時。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(20:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈淺黃色固體的N-[2-(4-氟苯基)-2-{[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]胺基甲醯基}乙基]胺基甲酸三級丁酯(40 mg，25.62%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 464.05。 步驟3.在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入N-[2-(4-氟苯基)-2-{[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]胺基甲醯基}乙基]胺基甲酸三級丁酯(100 mg，0.22 mmol，1當量)、TFA(1 mL)和DCM(3 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。用甲醇(10 mL)稀釋所得混合物。用飽和NaHCO 3(水溶液)將混合物酸化至pH 7-8。所得混合物用CH 2Cl 2(3 x 20 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型HPLC來對粗產物(mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水10 mmol/L NH 4HCO 3+0.1% NH 3水溶液)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：17% B至40% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.83分鐘)，以得到呈白色固體的實例85的外消旋體(2.9 mg，3.37%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 364.10。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 1.31 (1H, s), 3.03 (1H, dd), 3.39 (1H, s), 3.97 (1H, d), 7.07 (2H, d), 7.15 (2H, d), 7.47 (1H, s), 7.52 (2H, m), 7.64 (1H, m), 7.92 (2H, s)。 實例 86( 外消旋體 )3-胺基-2-(4-氰基苯基)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺的製備 步驟1：在25℃下，在氮氣氣氛下，向酸I-26(320 mg，0.93 mmol，1當量)和胺I-49(282.91 mg，0.95 mmol，1.02當量)於DMF(1.0 mL)中的攪拌混合物中逐滴加入HATU(706.99 mg，1.86 mmol，2當量)和DIEA(360.47 mg，2.79 mmol，3.0當量)。在25℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。用水(20 mL)稀釋所得混合物。用乙酸乙酯(3 x 30 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用水(3 x 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以(CH 2Cl 2/甲醇(25:1，v/v))對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的4-{7-[2-(4-溴苯基)-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙醯胺基]-1H-吲哚-3-基}吡唑-1-甲酸三級丁酯(360 mg，62.00%)。LCMS m/z (ESI), [M- t-Bu] += 568.15。 步驟2：在25℃下，在氮氣氣氛下，向4-{7-[2-(4-溴苯基)-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙醯胺基]-1H-吲哚-3-基}吡唑-1-甲酸三級丁酯(290 mg，0.46 mmol，1當量)和Zn(CN) 2(30.36 mg，0.46 mmol，1當量)於DMF(3.0 mL)中的攪拌溶液中加入Pd(PPh 3) 4(53.66 mg，0.046 mmol，0.1當量)。在80℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌16小時。用水(50 mL)稀釋所得混合物。用乙酸乙酯(3 x 40 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用水(3 x 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(20:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的外消旋體醯胺C-86(200 mg，75.4 8%)。LCMS m/z (ESI), [M+H] += 471.20。 步驟3：在室溫下，在氮氣氣氛下，將外消旋體醯胺C-86(110 mg，0.19 mmol，1當量)於TFA(0.5 mL)和DCM(2.0 mL)中的溶液攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。用甲醇(2.0 mL)稀釋所得混合物。用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物(60 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水 柱：XBridge Prep OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水10(mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：12% B至37% B，8分鐘；波長：254 nm；t R= 7.33分鐘)，以得到呈白色固體的實例86的外消旋體(13.2 mg，33.00%)。LCMS m/z (ESI), [M+H] += 371.10。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.04 (1H, dd), 3.42 (1H, m), 4.03 (1H, dd), 7.06 (2H, m), 7.47 (1H, s), 7.66 (3H, m), 7.77 (2H, d), 7.92 (2H, s)。 實例 87( 外消旋體 )N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-胺基-2-(間甲苯基)丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向8 mL小瓶中加入含胺I-49(100 mg，0.34 mmol，1當量)和4-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-苯基丁酸(93.63 mg，0.34 mmol，1.0當量)、TCFH(141.07 mg，0.50 mmol，1.5當量)的MeCN(1 mL)，加入NMI(9.63 mg，0.12 mmol，3.5當量)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(30:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的外消旋體醯胺C-87(80 mg，42.65%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 560.45。 步驟2：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入外消旋體醯胺C-87(80 mg，0.14 mmol，1當量)、TFA(1 mL)和DCM(3 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。用NH 3水溶液將混合物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物(60 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD C18 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：15% B至45% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 7.10分鐘)，以得到呈白色固體的實例87的外消旋體(40.6 mg，78.43%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 360.2。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.39 (3H, s), 3.09 (1H, dd), 3.47 (1H, dd), 3.98 (1H, dd), 7.03 - 7.10 (2H, m), 7.17 (1H, d), 7.26 - 7.35 (3H, m), 7.47 (1H, s), 7.64 (1H, dd), 7.91 (2H, s)。 實例 88( 外消旋體 )3-胺基-2-[4-(2-甲氧基乙氧基)苯基]-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，將酸I-27(90 mg，0.27 mmol，1當量)和胺I-49(79.12 mg，0.27 mmol，1當量)和NMI(123.67 mg，1.51 mmol，5.68當量)和TCFH(148.81 mg，0.53 mmol，2當量)於CH 3CN(10 mL)中的混合物攪拌過夜。將所得混合物減壓濃縮。在室溫下，用水淬滅反應。用乙酸乙酯(3 x 10 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(20:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的外消旋體醯胺C-88(122 mg，74.24%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 620。 步驟2：在室溫下，在氮氣氣氛下，將外消旋體醯胺C-88(140 mg，0.23 mmol，1當量)和TFA(1.5 mL)於DCM(4.5 mL)中的混合物攪拌0.5小時。用NH 3(水溶液)將反應混合物鹼化至pH 8。通過製備型HPLC來對混合物進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至40% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 7.550分鐘)，以得到呈白色固體的實例88的外消旋體(42.9 mg，42.90%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 420.20。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.05 (1H, dd), 3.43 (4H, s), 3.70 - 3.80 (2H, m), 3.94 (1H, dd), 4.07 - 4.20 (2H, m), 6.93 - 7.03 (2H, m), 7.02 - 7.13 (2H, m), 7.34 - 7.45 (2H, m), 7.47 (1H, s), 7.64 (1H, dd), 7.92 (2H, s)。 實例 89( 外消旋體 )3-胺基-2-(3-氯苯基)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向20 mL小瓶中加入含胺I-49(100 mg，0.34 mmol，1當量)和3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(3-氯苯基)丙酸(120.56 mg，0.40 mmol，1.2當量)、TCFH(112.85 mg，0.40 mmol，1.2當量)、NMI(110.08 mg，1.34 mmol，4當量)的MeCN(5 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於DCM(3 mL)中。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(25:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈淺黃色固體的外消旋體醯胺C-89(170 mg，87.43%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 580.15。 步驟2：在室溫下，向25 mL圓底燒瓶中加入含外消旋體醯胺C-89(170 mg，0.29 mmol，1當量)的DCM(3 mL)和TFA(1 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9。在0℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。通過製備型HPLC來對粗產物(mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 19*250 mm, 10 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：20% B至43% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.77分鐘)，以得到呈白色固體的實例89的外消旋體(45.5 mg，40.87%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 380.15。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.99 - 3.08 (1H, m), 3.43 (1H, dd), 3.94 (1H, ddd), 7.02 - 7.20 (2H, m), 7.28 - 7.37 (1H, m), 7.37 - 7.45 (2H, m), 7.47 (1H, s), 7.53 (1H, t), 7.65 (1H, dd), 7.92 (2H, s)。 實例 90( 外消旋體 )3-胺基-2-(4-甲氧基苯基)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向40 mL小瓶中加入含酸I-28(100 mg，0.34 mmol，1當量)和胺I-50(111.23 mg，0.34 mmol，1當量)和TCFH(114.00 mg，0.41 mmol，1.2當量)和NMI(111.20 mg，1.36 mmol，4當量)的MeCN(8 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1.5小時。 將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(35:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到外消旋體醯胺C-90(200 mg，97.50%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 606.45。 步驟2：在室溫下，向100 mL圓底燒瓶中加入含外消旋體醯胺C-90(200 mg，0.33 mmol，1當量)和HCl(氣體)的1,4-二噁烷(18 mL)。在40℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌15小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於甲醇(5 mL)中。用飽和NaHCO 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 8。用CH 2Cl 2/甲醇(10:1，v/v)(3 x 50 mL)萃取水層。通過製備型HPLC按以下條件來對粗產物(280 mg)進行純化，以得到呈白色固體的實例90的外消旋體(32.9 mg，25.33%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 376.15。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 2.86 (1H, dd), 3.23 (1H, dd), 3.73 (3H, s), 3.77 (1H, dt), 6.91 (2H, m), 6.99 (1H, t), 7.35 (2H, d), 7.42 (1H, d), 7.57 (2H, m), 7.95 (2H, s), 10.04 (1H, s), 10.78 (1H, s), 12.78 (1H, s)。 實例 91( 混合物 )3-胺基-2-(氧雜環己烷-3-基)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向40 mL小瓶中加入含酸I-6(200 mg，0.73 mmol，1當量)和胺I-50(240.36 mg，0.73 mmol，1當量)和TCFH(246.37 mg，0.88 mmol，1.2當量)和NMI(240.31 mg，2.93 mmol，4當量)的MeCN(5 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(25:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈白色固體的外消旋體醯胺C-91(410 mg，95.98%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 584.45。 步驟2：在0℃下，在空氣氣氛下，將外消旋體醯胺C-91(120 mg，0.21 mmol，1當量)於DCM中的溶液攪拌10分鐘，隨後，在0℃下，逐滴加入含HCl(氣體)的1,4-二噁烷(2 mL)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌2.3小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於甲醇(2 mL)中。用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 8。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型HPLC來對粗產物(120 mg)進行純化，條件如下(柱：Ultimate Diol, 2*25 cm, 5 μm；流動相A：CO 2，流動相B：甲醇(0.5% 2 M NH 3-甲醇)；流速：50毫升/分鐘；梯度：等度35% B；柱溫(35℃)；反壓(100巴)；波長：254 nm；t R= 4.5分鐘；樣品溶劑：甲醇；進樣體積：1.3 mL)，以得到呈白色固體的實例91的外消旋體(31.2 mg，41.10%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 354.35。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.49 (1H, m), 1.70 (2H, m), 1.98 (2H, m), 2.56 (1H, dd), 3.05 (2H, t), 3.44 (3H, m), 3.90 (2H, m), 4.03 (1H, dt), 7.10 (1H, t), 7.18 (1H, m), 7.47 (1H, d), 7.67 (1H, d), 7.93 (2H, s)。 實例 92( 外消旋體 )4-{7-[3-胺基-2-(4-乙醯胺基苯基)丙醯胺基]-1H-吲哚-3-基}吡唑-1-甲酸三級丁酯的製備 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，向酸I-12(130 mg，0.40 mmol，1當量)和NMI(99.33 mg，1.21 mmol，3當量)於CH 3CN(3.0 mL)中的攪拌混合物中分批加入TCFH(226.30 mg，0.81 mmol，2當量)和胺I-49(122.72 mg，0.41 mmol，1.02當量)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2.0小時。用水(10 mL)稀釋所得混合物。用乙酸乙酯(3 x 10 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用水(3 x 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(20:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的外消旋體醯胺C-92(190 mg，93.75%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 603.40。 步驟2：在室溫下，在空氣氣氛下，將外消旋體醯胺C-92(100 mg，0.20 mmol，1當量)和TFA(0.5 mL)於DCM(2.0 mL)中的溶液攪拌1.0小時。反應後，將所得混合物真空濃縮。用甲醇(1.0 mL)稀釋所得混合物。用NH 3水溶液(0.2 mL)將混合物鹼化至pH 9。將所得溶液進行製備型HPLC，條件如下(柱：Xselect CSH C18 OBD 30*150 mm 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：25毫升/分鐘；梯度：18% B至37% B，8分鐘；波長：254 nm；t R= 7.28分鐘)，以得到呈白色固體的實例92的外消旋體(28 mg，34.97%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 403.15。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.13 (3H, s), 3.01 (1H, dd), 3.40 (1H, dd), 3.91 (1H, dd), 7.06 (2H, m), 7.44 (3H, m), 7.61 (3H, m), 7.91 (2H, s)。 實例 93( 外消旋體 )3-胺基-2-(6-甲基吡啶-2-基)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，在空氣氣氛下，向酸I-29(200 mg，0.71 mmol，1當量)和胺I-50(281.24 mg，0.856 mmol，1.2當量)於DMF(5 mL)中的攪拌溶液中加入HATU(542.57 mg，1.43 mmol，2當量)和DIEA(276.64 mg，2.14 mmol，3當量)。在室溫下，在空氣氣氛下，將反應混合物攪拌過夜。將所得混合物減壓濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，80%至90%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，以得到呈黃色固體的外消旋體醯胺C-93(420 mg，99.64%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 591.80。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 0.06 (9H,s), 0.82 - 0.90 (2H, m), 1.36 (9H, s), 2.50 (3H, s), 3.51 (1H, dt), 3.55 - 3.62 (2H, m), 3.66 (1H, dd), 4.25 (1H, t), 5.44 (2H, s), 6.97 - 7.08 (2H, m), 7.17 (1H, d),7.30 (1H, d), 7.45 (1H, d), 7.58 (1H, d), 7.62 - 7.72 (2H, m), 7.90 (1H, s), 8.27 (1H, s), 10.05 (1H, s), 10.70 (1H, s)。 步驟2：在室溫下，在空氣氣氛下，將含外消旋體醯胺C-93(100 mg，0.17 mmol，1當量)的HCl(氣體)於1,4-二噁烷(10 mL)中的溶液攪拌過夜。將反應混合物減壓濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，0%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，以得到粗固體。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：YMC-Actus Triart C18 ExRS, 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(50 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：10% B至30% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.89分鐘)，以得到呈白色固體的實例93的外消旋體(5.7 mg，9.34%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 361.42。 1H NMR: (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 2.47 (3H, s), 3.04 - 3.15 (1H, m), 3.29 (1H, s), 4.06 (1H, dt), 7.01 (1H, t), 7.17 (1H, d), 7.31 (1H, d), 7.42 (1H, d), 7.54 - 7.63 (2H, m), 7.68 (1H, t), 7.96 (2H, s), 10.69 - 10.91 (1H, m), 12.84 (1H, s)。 實例 95( 外消旋體 )3-胺基-2-環戊基-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，在空氣氣氛下，向酸I-30(200 mg，0.78 mmol，1當量)和胺I-50(306.37 mg，0.93 mmol，1.2當量)於CH 3CN(10 mL)中的攪拌混合物中逐滴加入NMI(63.81 mg，0.78 mmol，1當量)和TCFH(261.68 mg，0.93 mmol，1.2當量)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。通過在室溫下加入水(10 mL)淬滅反應。用CH 2Cl 2(3 x 20 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以DCM/甲醇(20:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的外消旋體醯胺C-95(385 mg，87.24%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 568.80。 步驟2：在室溫下，在空氣氣氛下，將含外消旋體醯胺C-95(85 mg，0.15 mmol，1當量)的HCl(氣體)於1,4-二噁烷(5 mL)中的溶液攪拌4小時。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：Xselect CSH C18 OBD 30*150 mm 5 μm；流動相A：水(0.1% FA)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：10% B至21% B，8分鐘，21% B；波長：254; 220 nm；t R= 7.18分鐘)，以得到呈白色固體的實例95的外消旋體(12.4 mg，24.55%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 338.42。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.22 (1H, s), 1.47 (3H, dd), 1.63 (3H, d), 1.81 - 1.86 (1H, m), 1.98 - 2.07 (1H, m), 2.69 (1H, d), 2.98 (2H, dd), 7.01 (1H, t), 7.51 (1H, d), 7.54 - 7.63 (2H, m), 7.96 (2H, s), 8.42 (1H, s), 10.27 (1H, s), 11.25 (1H, s)。 實例 94( 混合物 1) 和實例 96( 混合物 2)N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-胺基-2-(四氫呋喃-3-基)丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，將胺I-50(250 mg，0.76 mmol，1當量)和3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(四氫呋喃-3-基)丙酸(256.55 mg，0.99 mmol，1.3當量)、TCFH(427.07 mg，1.52 mmol，2當量)、NMI(312.44 mg，3.81 mmol，5當量)於MeCN(4 mL)中的混合物攪拌過夜。所得混合物用水(20 mL)稀釋，用CH 2Cl 2(3 x 100 mL)萃取。合併的有機層經無水Na2SO4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(20:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈灰白色固體的外消旋體醯胺C-94a(200 mg，46.12%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 570.45。 步驟2：在0℃下，在氮氣氣氛下，向外消旋體醯胺C-94a(100 mg，0.18 mmol，1當量)於DCM(2 mL)中的攪拌溶液中逐滴加入含HCl(氣體)的1,4-二噁烷(2 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。將所得混合物真空濃縮。在0℃下，用飽和NH 3(水溶液)將殘餘物鹼化至pH 8。 步驟3：通過製備型HPLC來對粗產物C-94b(150 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水10 mmol/L NH 4HCO 3+0.1% NH 3水溶液)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：8% B至20% B，10分鐘；波長：220 nm；t R-1 = 8.88, t R-2 = 9.53)，以得到呈灰白色固體的實例94的混合物1(6 mg，9.70%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 340.10。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.73 - 1.91 (1H, m), 2.22 (1H, td), 2.54 - 2.67 (2H, m), 2.98 - 3.21 (2H, m), 3.70 - 3.84 (2H, m), 3.86 - 4.02 (2H, m), 7.05 - 7.19 (2H, m), 7.47 (1H, s), 7.68 (1H, dd), 7.92 (2H, s)，和呈灰白色固體的實例96的混合物2(7.6 mg，12.06%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 340.10。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.91 - 2.02 (1H, m), 2.07 - 2.20 (1H, m), 2.46 - 2.69 (2H, m), 2.89 (1H, dd), 3.07 (1H, dd), 3.63 (1H, dd), 3.78 (1H, q), 3.89 - 4.05 (2H, m), 7.05 - 7.21 (2H, m), 7.48 (1H, s), 7.68 (1H, dd), 7.93 (2H, s)。 實例 97( 外消旋體 )3-胺基-2-[4-(二甲基磷醯基)苯基]-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺的製備 步驟1：在25℃下，在氮氣氣氛下，向酸I-32(80 mg，0.029 mmol，1當量)和胺I-49(96.14 mg，0.32 mmol，1.1當量)於DMF(4 mL)中的攪拌混合物中分批加入HATU(222.79 mg，0.586 mmol，2當量)和DIEA(113.59 mg，0.88 mmol，3當量)。在25℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。所得混合物用水(10 mL)稀釋，並用乙酸乙酯(3 x 20 mL)萃取。合併的有機層用水(3 x 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(25:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的外消旋體醯胺C-97(80 mg，54.91%)。LCMS: m/z (ESI), [M-156] += 466.20。 步驟2：在25℃下，在氮氣氣氛下，向外消旋體醯胺C-97(70 mg，0.097 mmol，1當量)於DCM(2.0 mL)中的攪拌混合物中加入TFA(0.5 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。將所得混合物真空濃縮。用甲醇(2.0 mL)稀釋所得混合物。用NH 3水溶液(0.5 mL)將混合物中和至pH 7。通過製備型HPLC來對混合物進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：41% B至61% B，8分鐘；波長：254 nm；t R= 7.65分鐘)。凍乾後，得到呈白色固體的實例97的外消旋體(13.2 mg，32.45%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 422.15。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.63 (6H, d), 2.93 (1H, dd), 3.30 (2H, dd), 3.5-3.97 (2H, m), 7.00 (1H, t), 7.41 (1H, d), 7.57 (4H, m), 7.75 (2H, dd), 7.96 (2H, s), 10.80 (1H, m)。 實例 98( 外消旋體 )3-胺基-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]-2-(吡啶-2-基)丙醯胺的製備 步驟1：在25℃下，向酸I-33(80 mg，0.30 mmol，1當量)於DMF(1.2 mL)中的攪拌混合物中加入HATU(228.46 mg，0.60 mmol，2當量)、DIEA(155.31 mg，1.20 mmol，4當量)和胺I-49(90.52 mg，0.30 mmol，1.01當量)。在25℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。用水(20 mL)稀釋所得混合物。用乙酸乙酯(3 x 30 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用水(3 x 20 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮並用DCM(2 mL)稀釋。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(20:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的外消旋體醯胺C-98(80 mg，48.72%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 577.30。 步驟2：在25℃下，在氮氣氣氛下，將外消旋體醯胺C-98(80 mg，0.15 mmol，1當量)於DCM(2.0 mL)和TFA(0.5 mL)中的混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。用甲醇(2.0 mL)稀釋所得混合物。用NH 3水溶液(0.2 mL)將混合物鹼化至pH 7。通過製備型HPLC來對粗製品進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至30% B，8分鐘；波長：254 nm；t R= 7.4分鐘)。凍乾後，得到呈白色固體的實例98的外消旋體(5.2 mg，10.26%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 347.10。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.26 (1H, dd), 3.51 (1H, dd), 4.19 (1H, dd), 7.10 (2H, m), 7.38 (1H, m), 7.49 (1H, s), 7.59 (1H, dt), 7.66 (1H, dd), 7.88 (3H, m), 8.63 (1H, m)。 實例 99( 外消旋體 )N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-(乙醯胺基甲基)苯基)-3-胺基丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，在空氣氣氛下，向酸I-57(82 mg，0.24 mmol，1當量)和NMI(60.04 mg，0.73 mmol，3當量)於MeCN(3.0 mL)中的攪拌混合物中分批加入胺I-49(87.27 mg，0.29 mmol，1.2當量)和TCFH(136.79 mg，0.49 mmol，2當量)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。反應後，用水(20 mL)稀釋所得混合物。用EtOAc(3 x 10 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用水(3 x 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/MeOH(20:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的外消旋體醯胺C-99(42 mg，27.94%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M+Na] += 639.35。 步驟2：在室溫下，在空氣氣氛下，將外消旋體醯胺C-99(42 mg，0.068 mmol，1當量)於TFA(0.5 mL)和DCM(2 mL)中的混合物攪拌2小時。反應後，將所得混合物真空濃縮。用MeOH(1.2 mL)稀釋所得混合物。用NH 3·H 2O(0.4 mL)將混合物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物(40 mg)進行純化，條件如下(柱：YMC-Actus Triart C18 ExRS, 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至27% B，8分鐘，27% B；波長：254 nm；t R= 8.07分鐘)，以得到呈白色固體的實例99的外消旋體(8.7 mg，30.67%產率)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 417.15。 1H NMR: (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.00 (3H, s), 3.01 (1H, dd), 3.42 (1H, dd), 3.93 (1H, dd), 4.37 (2H, s), 7.05 (2H, m), 7.33 (2H, d), 7.46 (3H, t), 7.64 (1H, dd), 7.91 (2H, s)。 實例 101( 外消旋體 )3-胺基-2-[4-(羥甲基)-3-甲氧基苯基]-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向20 mL小瓶中加入含酸I-34(140 mg，0.32 mmol，1當量)、TCFH(134.03 mg，0.48 mmol，1.5當量)、NMI(104.59 mg，1.27 mmol，4當量)和胺I-49(95.01 mg，0.32 mmol，1當量)的CH 3CN(2 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌4小時。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(42:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的外消旋體醯胺C-101(50 mg，21.81%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 720.30。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 0.07 (6H, d), 0.90 (9H, d), 1.36 (9H, s), 1.62 (9H, s), 3.70 (1H, s), 3.75 (1H, s), 3.81 (3H, s), 4.08 (1H, t), 4.65 (2H, s), 6.79 (1H, s), 7.31 (2H, d), 7.44 (2H,d), 7.61 (1H, d), 7.84 (1H, d), 8.26 (1H, s), 8.49 (1H, s)。 步驟2：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含外消旋體醯胺C-101(50 mg，0.069 mmol，1當量)和TFA(0.75 mL)的DCM(1.5 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：Xselect CSH C18 OBD 30*150 mm 5 μm；流動相A：水(0.1% FA)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：7% B至18% B，7分鐘；波長：254; 220 nm；t R= 6.5分鐘)，以得到粗固體。通過製備型HPLC來對粗固體進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水10 mmol/L NH 4HCO 3+0.1% NH 3水溶液)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至35% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 8.55分鐘)，以得到呈黃色固體的實例101的外消旋體(3.5 mg，12.43%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 406.20。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.07 (1H, dd), 3.46 (1H, d), 3.89 (3H, s), 3.96 (1H, dd), 4.64 (2H, s), 7.04 - 7.11 (4H, m), 7.39 (1H, d), 7.47 (1H, s), 7.65 (1H, dd), 7.92 (2H, s)。 實例 102( 外消旋體 )3-胺基-2-(5-甲氧基吡啶-3-基)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向40 mL小瓶中加入含酸I-35(35.00 mg，0.12 mmol，1當量)和胺I-49(35.24 mg，0.12 mmol，1當量)、TCFH(39.77 mg，0.14 mmol，1.2當量)、NMI(38.79 mg，0.47 mmol，4當量)的MeCN(5 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於DCM(2 mL)中。通過製備型TLC以(CH 2Cl 2/甲醇(8:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈淺黃色固體的外消旋體醯胺C-102(60 mg，88.09%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 477.20。 步驟2：在室溫下，向100 mL圓底燒瓶中加入含外消旋體醯胺C-102(80 mg，0.14 mmol，1當量)的DCM(1 mL)和TFA(0.3 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌數小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於甲醇(1 mL)中。用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：10% B至32% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.17分鐘)，以得到呈白色固體的實例102的外消旋體(15 mg，28.72%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 377.20。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.08 (1H, dd), 3.47 (1H, dd), 3.91 (3H, dd), 4.00 (1H, dd), 6.95 - 7.15 (2H, m), 7.48 (1H, s), 7.55 (1H, t), 7.61 - 7.71 (1H, m), 7.92 (2H, s), 8.22 (1H, d), 8.26 (1H, d)。 實例 103( 外消旋體 )3-胺基-2-(1-甲基-2-氧代吡啶-4-基)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向20 mL小瓶中加入酸I-36(158.92 mg，0.54 mmol，1當量)和胺I-49(160 mg，0.54 mmol，1.00當量)和HATU(305.87 mg，0.80 mmol，1.5當量)和三乙胺(162.81 mg，1.61 mmol，3當量)和DMF(5 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1.5小時。用乙酸乙酯(100 mL)稀釋所得混合物。所得混合物用1 x 60 mL飽和NaHCO 3(水溶液)和2 x 60 mL水和1 x 40 mL飽和NaCl(水溶液)洗滌。有機層經無水Na 2SO 4乾燥，減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(17:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的外消旋體醯胺C-103(100 mg，32.34%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 577.40。 步驟2：在室溫下，向100 mL小瓶中加入含外消旋體醯胺C-103(80 mg，0.14 mmol，1當量)的HCl(氣體)的1,4-二噁烷(1 mL)和DCM(3 mL)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌30分鐘。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於DMF(2 mL)中。用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9。在0℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌30分鐘。通過製備型HPLC來對粗產物(60 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：25毫升/分鐘；梯度：2% B至25% B，8分鐘；波長：254 nm；t R= 9.73分鐘)，以得到呈白色固體的實例103的外消旋體(14.3 mg，25.30%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 377.20。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 2.88 (1H, dd), 3.19 (1H, dd), 3.38 (3H, s), 3.64 (1H, dd), 6.30 (1H, dd), 6.38 (1H, d), 7.00 (1H, td), 7.38 (1H, d), 7.60 (3H, m), 7.96 (2H, s), 10.75 (1H, s), 12.83 (1H, s)。 實例 104( 外消旋體 )2-胺基-2-(4-甲氧基苯基)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]乙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，將胺I-49(110 mg，0.37 mmol，1當量)和[(三級丁氧基羰基)胺基](4-甲氧基苯基)乙酸(124.46 mg，0.44 mmol，1.2當量)、TCFH(155.17 mg，0.55 mmol，1.5當量)、NMI(105.95 mg，1.29 mmol，3.5當量)於MeCN(3 mL)中的溶液攪拌1小時。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(30:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈棕黃色固體的外消旋體醯胺C-104(140 mg，67.61%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H-tBu] += 506.25。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.51 (9H, s), 1.71 (9H, s), 2.83 (1H, s), 3.82 (3H, s), 6.98 (2H, d), 7.12 (2H, d), 7.50 (2H, d), 7.65 (2H, d), 8.16 (1H, s), 8.43 (1H, s)。 步驟2.在室溫下，在氮氣氣氛下，將外消旋體醯胺C-104(260 mg，0.46 mmol，1當量)和TFA(1 mL)於DCM(3 mL)中的溶液攪拌40分鐘。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於甲醇(3 mL)中。在0℃下，用NH 3水溶液將混合物鹼化至pH 9。在0℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌30分鐘。通過製備型HPLC來對粗產物(230 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD C18 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：10% B至40% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.77分鐘)，以得到呈灰白色固體的實例104的外消旋體(75.0 mg，44.49%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H-NH 2] += 345.10。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.81 (3H, s), 4.70 (1H, s), 6.95 - 6.99 (2H, m), 7.07 (1H, t), 7.13 (1H, dd), 7.46 (1H, s), 7.49 (1H, d), 7.50 (1H, d), 7.65 (1H, dd), 7.92 (2H, s)。 實例 105( 外消旋體 )2-[4-(2-胺基乙基)呱嗪-1-基]-2-苯基-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]乙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向20 mL小瓶中加入含酸I-20(160.81 mg，0.44 mmol，1.2當量)和胺I-49(110 mg，0.37 mmol，1當量)、TCFH(124.14 mg，0.44 mmol，1.2當量)、NMI(121.09 mg，1.48 mmol，4當量)的MeCN(3 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1.5小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於DCM(4 mL)中。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(25:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈淺棕色油狀物的外消旋體醯胺C-105(256 mg，88.44%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 644.30。 步驟2：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含外消旋體醯胺C-105(250 mg，0.39 mmol，1當量)的TFA(1 mL，13.46 mmol)和DCM(3 mL，47.19 mmol)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌40分鐘。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於甲醇(5 mL)中。用NH 3水溶液將混合物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物(200 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：12% B至37% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.45分鐘)，以得到呈灰白色固體的實例105的外消旋體(77.7 mg，44.94%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 444.20。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.33 - 2.69 (10H, m), 2.83 (2H, t), 4.15 (1H, s), 6.96 - 7.19 (2H, m), 7.24 - 7.51 (4H, m), 7.58 - 7.68 (3H, m), 7.91 (2H, s)。 實例 106( 外消旋體 )4-胺基-2-苯基-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丁醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向40 mL小瓶中加入胺I-49(110 mg，0.369 mmol，1當量)、4-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-苯基丁酸(102.99 mg，0.37 mmol，1當量)、TCFH(206.90 mg，0.74 mmol，2當量)、NMI(151.36 mg，1.85 mmol，5當量)和MeCN(0.02 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(45:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的外消旋體醯胺C-106(200 mg，87.33%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 560.3。 步驟2：在室溫下，向40 mL小瓶中加入外消旋體醯胺C-106(180 mg，0.32 mmol，1當量)、TFA(1 mL，13.46 mmol)和DCM(3 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。用NH 3水溶液將混合物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物(150 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD C18 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：10% B至35% B，8分鐘；波長：254 nm；t R= 7.42分鐘)，以得到呈白色固體的實例106的外消旋體(65.8 mg，56.89%)。LCMS: m/z (ESI), [M] += 360.20。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.81 - 1.91 (1H, m), 2.23 (1H, d), 2.60 (1H, d), 3.04 (1H, d), 4.00 (1H, s), 6.98 (1H, t), 7.26 (1H, d), 7.35 (2H, t), 7.46 (2H, t), 7.51 - 7.59 (3H, m), 7.94 (2H, s)。 實例 107( 外消旋體 )2-胺基-2-苯基-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向8 mL小瓶中加入含胺I-50(150 mg，0.46 mmol，1當量)、HATU(260.44 mg，0.69 mmol，1.50當量)、三乙胺(138.62 mg，1.37 mmol，3當量)和2-胺基-2-苯基丙酸(105.61 mg，0.64 mmol，1.4當量)的DMF(2 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌4小時。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(30:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的外消旋體醯胺C-107(110 mg，50.64%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 476.35。 步驟2：在室溫下，向50 mL小瓶中加入含外消旋體醯胺C-107(100 mg，0.21 mmol，1當量)和HCl(氣體)的1,4-二噁烷(2.5 mL，0.53 mmol，2.5當量)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，ACN/水，0%至100%梯度，40分鐘；檢測器，UV 254 nm。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：Xselect CSH C18 OBD 30*150 mm 5 μm；流動相A：水(0.1% FA)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：6% B至18% B，7分鐘；波長：254; 220 nm；t R= 6.66分鐘)，以得到呈白色固體的實例107的外消旋體(4.0 mg，5.51%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 346.10。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.04 (3H, s), 7.00 - 7.15 (2H, m), 7.42 (1H, t), 7.46 - 7.53 (3H, m), 7.68 (3H, td), 7.92 (2H, s), 8.53 (1H, s)。 實例 108(2S)-2-胺基-3-(1H-咪唑-4-基)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向20 mL小瓶中加入胺I-49(150 mg，0.50 mmol，1當量)和(2S)-2-[(三級丁氧基羰基)胺基]-3-[1-(三級丁氧基羰基)咪唑-4-基]丙酸(214.42 mg，0.60 mmol，1.2當量)和TCFH(169.28 mg，0.60 mmol，1.2當量)和NMI(165.12 mg，2.01 mmol，4當量)和MeCN(5 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(35:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到粗固體(250 mg)。通過製備型手性HPLC來對粗產物(250 mg)進行純化，條件如下(柱：CHIRAL ART Cellulose-SB, 2*25 cm, 5 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA)，流動相B：EtOH/ DCM(1:1，v/v)；流速：20毫升/分鐘；梯度：25% B至25% B，10分鐘；波長：220/254 nm；t R-1 = 4.20分鐘；t R-2 = 6.60分鐘；樣品溶劑：EtOH/DCM(1:1，v/v)；進樣體積：0.6 mL)，以得到呈黃色油狀物的(S)-對映異構體醯胺C-108(180 mg，56.32%)。SFC: t R=1.879分鐘, ee = 97.33%。 步驟2：在室溫下，向100 mL圓底燒瓶中加入(S)-對映異構體醯胺C-108(180 mg，0.28 mmol，1當量)和TFA(1 mL)和DCM(3 mL)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於DMF(2 mL)中。用NH 3水溶液將混合物鹼化至pH 9。在0℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌30分鐘。通過製備型HPLC來對粗產物(100 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至25% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.53分鐘)，以得到呈白色固體的(2S)-2-胺基-3-(1H-咪唑-4-基)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺實例108(40.1 mg，41.84%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 336.15。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.05 (1H, dd), 3.15 (1H, dd), 3.86 (1H, t), 6.99 (1H, d), 7.09 (2H, m), 7.49 (1H, s), 7.66 (1H, dd), 7.70 (1H, d), 7.92 (2H, s)。SFC: t R= 0.414分鐘, ee = 100%。 實例 109(2S)-2-胺基-3-(1H-吲哚-3-基)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，將胺I-49(120 mg，0.40 mmol，1當量)和boc-色胺酸(183.62 mg，0.60 mmol，1.5當量)、NMI(115.59 mg，1.41 mmol，3.5當量)、TCFH(169.28 mg，0.60 mmol，1.5當量)於MeCN(3 mL)中的溶液攪拌2小時。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(20:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈棕黃色固體的4-{7-[(2S)-2-[(三級丁氧基羰基)胺基]-3-(1H-吲哚-3-基)丙醯胺基]-1H-吲哚-3-基}吡唑-1-甲酸三級丁酯C-109(160 mg，68.04%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H-tBu] += 529.10。 步驟2：在室溫下，在氮氣氣氛下，將4-{7-[(2S)-2-[(三級丁氧基羰基)胺基]-3-(1H-吲哚-3-基)丙醯胺基]-1H-吲哚-3-基}吡唑-1-甲酸三級丁酯C-109(160 mg，0.27 mmol，1當量)和TFA(1.00 mL)於DCM(3 mL)中的溶液攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。用甲醇(2 mL)稀釋所得混合物。在0℃，用氨水將混合物鹼化至pH 9並繼續攪拌30分鐘。通過製備型HPLC來對粗產物(120 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3+0.1% NH 3水溶液)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：20% B至41% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.77分鐘)，以得到呈灰白色固體的(2S)-2-胺基-3-(1H-吲哚-3-基)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺實例109(43.7 mg，41.31%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 385.15。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.22 (1H, dd), 3.37 (1H, d), 3.93 (1H, t), 6.97 (1H, dd), 7.00 - 7.09 (2H, m), 7.15 (1H, ddd), 7.20 (1H, s), 7.34 - 7.41 (2H, m), 7.63 (1H, dd), 7.69 - 7.74 (1H, m), 7.91 (2H, s)。SFC: t R= 4.207, ee = 100%。 實例 110( 對映異構體 1) 和實例 111( 對映異構體 2)N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(5-甲氧基吡啶-3-基)-3-(4-甲基呱嗪-1-基)丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向20 mL小瓶中加入含酸I-45(230 mg，0.82 mmol，1當量)、TCFH(300.33 mg，1.07 mmol，1.3當量)、NMI(270.41 mg，3.29 mmol，4當量)和胺I-49(245.65 mg，0.82 mmol，1當量)的ACN(3 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。將所得混合物真空濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(10:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的外消旋體醯胺C-110a(190 mg，41.23%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 560.20。 步驟2：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含外消旋體醯胺C-110a(190 mg，0.16 mmol，1當量)和TFA(1 mL)的DCM(1 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。將混合物減壓濃縮，溶於甲醇(5 mL)中，用NH 3水溶液鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：14% B至37% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.42分鐘)，以得到呈白色固體的外消旋體吡唑C-110(150 mg，96.15%)。 步驟3：通過製備型HPLC來對外消旋體吡唑C-110(150 mg)進行純化，條件如下(柱：DZ-CHIRALPAK IC-3, 4.6*50 mm, 3.0 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA): (EtOH:DCM = 1:1，v/v)= 65:35(v/v)；流速：1毫升/分鐘；梯度：0% B至0% B；進樣體積：5ul mL)，以得到呈白色固體的實例111的對映異構體2(52.8 mg，71.45%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 460.30。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ2.34 (3H, s), 2.53 - 2.90 (9H, m), 3.36 - 3.42 (1H, m), 3.89 (3H, s), 4.17 (1H, dd), 7.04 - 7.10 (2H, m), 7.48 (1H, s), 7.58 (1H, dd), 7.65 (1H, p), 7.91 (2H, s), 8.18 (1H, d), 8.23 (1H, d)，SFC: t R= 3.360分鐘, ee = 100%，和呈白色固體的實例110的對映異構體1(38.1 mg，46.40%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] +=460.30。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.34 (3H, s), 2.66 (7H, dd), 2.82 (2H, s), 3.36 - 3.42 (1H, m), 3.89 (3H, s), 4.17 (1H, dd), 7.04 - 7.10 (2H, m), 7.48 (1H, s), 7.58 (1H, dd), 7.65 (1H, p), 7.91 (2H, s), 8.18 (1H, d), 8.23 (1H, d)。SFC: t R= 4.521, ee = 99.13%。 實例 112( 對映異構體 1) 和 113( 對映異構體 2)4-(1-((3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)胺基)-3-胺基-1-氧代丙-2-基)苯甲醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向40 mL小瓶中加入含酸I-37(434.06 mg，1.41 mmol，1.2當量)和I-49(350 mg，1.17 mmol，1.00當量)和TCFH(394.99 mg，1.41 mmol，1.2當量)和NMI(385.29 mg，4.69 mmol，4當量)的MeCN(8 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(15:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈棕色固體的外消旋體醯胺C-112a(220 mg，31.86%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 589.35。 步驟2：通過製備型手性HPLC來對外消旋體醯胺C-112a(220 mg)進行純化，條件如下(柱：DZ-CHIRALPAK IC-3, 4.6*50 mm, 3.0 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA):(EtOH: DCM = 1:1，v/v)= 50:50(v/v)；流速：1毫升/分鐘；進樣體積：5ul mL)，以得到呈黃色固體的對映異構體C-112c，SFC: t R= 2.550分鐘, ee = 100%，和呈黃色固體的對映異構體C-112b，SFC: t R= 3.573分鐘, ee = 99.47。 步驟3：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含對映異構體C-112c(35 mg，0.059 mmol，1當量)和TFA(0.58 mL)的DCM(1 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：YMC-Actus Triart C18 ExRS, 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至25% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 8.07分鐘)，以得到呈白色固體的實例113的對映異構體2(19.6 mg，99.01%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 389.15。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 2.89 (1H, dd), 3.26 (1H, dd), 3.92 (1H, dd), 6.99 (1H, td), 7.36 (1H, d), 7.50 (2H, d), 7.58 (2H, d), 7.84 (2H, d), 7.94 (2H, s)。 在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含對映異構體C-112b(40 mg，0.068 mmol，1當量)和TFA(0.5 mL)的DCM(1 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：2% B至25% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 7.35分鐘)，以得到呈白色固體的實例112的對映異構體1(20.8 mg，70.05%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 389.10。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 2.90 (1H, dd), 3.27 (1H, dd), 3.92 (1H, dd), 6.99 (1H, td), 7.40 (1H, dd), 7.50 (2H, dd), 7.58 (2H, d), 7.85 (2H, d), 7.95 (2H, s)。 實例 114( 對映異構體 1) 和實例 115( 對映異構體 2)甲基胺基甲酸4-(1-((3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)胺基)-3-胺基-1-氧代丙-2-基)苄酯的製備 步驟1：在室溫下，向20 mL小瓶中加入酸I-58(454.74 mg，1.29 mmol，1.1當量)和胺I-49(350 mg，1.17 mmol，1當量)和TCFH(394.99 mg，1.41 mmol，1.2當量)和NMI(192.64 mg，2.35 mmol，2當量)和MeCN(5 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(25:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的外消旋體醯胺C-114a(310 mg，41.76%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 633.40。 步驟2：通過製備型手性HPLC來對外消旋體醯胺C-114a(310 mg)進行純化，條件如下(柱：CHIRALPAK IE, 2*25 cm, 5 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA)，流動相B：EtOH:DCM，(1:1，v/v)；流速：20毫升/分鐘；梯度：30% B至30% B，31分鐘；波長：220/254 nm；t R-1 = 18.21分鐘；t R-2 = 24.77分鐘；樣品溶劑：EtOH:DCM，(1:1，v/v)；進樣體積：1.25 mL)，以得到對映異構體C-114c(120 mg，38.71%)，SFC: t R= 4.743分鐘, ee = 100%，和呈黃色固體的對映異構體C-114b(90 mg，29.03%)，SFC: t R= 6.999分鐘, ee = 100%。 步驟3：在室溫下，向100 mL圓底燒瓶中加入對映異構體C-114c(120 mg，0.19 mmol，1當量)和TFA(1 mL)和DCM(3 mL)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於DMF(2 mL)中。用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9。在0℃下，將所得混合物攪拌30分鐘。通過製備型HPLC來對粗產物(120 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：10% B至35% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.80分鐘)，以得到呈白色固體的實例115的對映異構體2(39.5 mg，48.10%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 433.20。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.71 (3H, s), 3.05 (1H, dd), 3.44 (1H, dd), 3.99 (1H, td), 5.09 (2H, s), 7.05 (2H, m), 7.45 (5H, m), 7.63 (1H, dt), 7.91 (2H, s)。SFC: t R= 1.753分鐘, ee = 92.58%。 在室溫下，向100 mL圓底燒瓶中加入對映異構體C-114b(90 mg，0.14 mmol，1當量)和TFA(1 mL)和DCM(3 mL)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於DMF(2 mL)中。用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9。在0℃下，將所得混合物攪拌30分鐘。通過製備型HPLC來對粗產物(90 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至35% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 8.00分鐘)，以得到呈白色固體的實例114的對映異構體1(37.2 mg，60.22%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 433.10。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.71 (3H, s), 3.04 (1H, dd), 3.44 (1H, dd), 3.98 (1H, dd), 5.09 (2H, s), 7.05 (2H, m), 7.40 (2H, d), 7.47 (3H, m), 7.64 (1H, m), 7.91 (2H, s)。SFC: t R= 1.914分鐘, ee = 98.90%。 實例 116( 對映異構體 1) 和實例 117( 對映異構體 2)N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(3-氰基苯基)-3-(4-甲基呱嗪-1-基)丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，向酸I-39(200 mg，0.37 mmol，1當量)於CH 3CN(6.0 mL)中的攪拌混合物中分批加入NMI(141.86 mg，1.10 mmol，3當量)、TCFH(278.22 mg，0.73 mmol，2當量)和胺I-49(110.24 mg，0.37 mmol，1.01當量)。反應後，用水(20 mL)稀釋所得混合物。用乙酸乙酯(3 x 20 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用水(3 x 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水，10%至100%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，90%保持30分鐘。蒸發後，得到呈黃色油狀物的外消旋體醯胺C-116a(180 mg，44.44%)。LCMS m/z (ESI), [M+H] += 554.25。 步驟2：通過製備型手性HPLC來對外消旋體醯胺C-116a(180 mg)進行分離，條件如下(柱：DZ-CHIRALPAK IE-3, 4.6*50 mm, 3.0 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA): (EtOH:DCM = 1:1，v/v)= 70:30(v/v)；流速：1毫升/分鐘；梯度：0% B至0% B；進樣體積：5ul mL)，以得到對映異構體C-116c(60 mg，33.33%)，SFC: t R= 4.527分鐘, ee = 97.5%，和呈白色固體的對映異構體C-116b(60 mg，33.33%)，SFC: t R= 5.122分鐘, ee = 95.32%。 步驟3：在室溫下，在氮氣氣氛下，將對映異構體C-116c(55 mg，0.099 mmol，1當量)和TFA(0.5 mL)於DCM(2.0 mL)中的溶液攪拌0.5小時。反應後，將所得混合物真空濃縮。將殘餘物溶於甲醇(1.2 mL)中，用NH 3水溶液(0.5 mL)將殘餘物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對所得混合物進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：20% B至45% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.27分鐘)，以得到呈白色固體的實例117的對映異構體2(13.6 mg，30.22%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 454.25。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.31 (3H, s), 2.67 (9H, m), 3.40 (1H, m), 4.21 (1H, dd), 7.08 (2H, m), 7.51 (1H, s), 7.58 (1H, t), 7.68 (2H, m), 7.86 (4H, m)。SFC: t R= 2.013分鐘, ee = 96.46%。 在室溫下，在氮氣氣氛下，將對映異構體C-116b(55 mg，0.099 mmol，1當量)和三氟乙酸(0.5 mL)於CH 2Cl 2(2.0 mL)中的溶液攪拌0.5小時。冷卻至室溫後，將所得混合物真空濃縮。將殘餘物溶於甲醇(1.2 mL)中。用NH 3水溶液(0.5 mL)將殘餘物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對所得混合物進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：20% B至45% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.27分鐘)，以得到呈白色固體的實例116的對映異構體1(11.9 mg，26.44%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 454.25。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.31 (3H, s), 2.67 (9H, m), 3.40 (1H, dd), 4.21 (1H, dd), 7.09 (2H, m), 7.51 (1H, s), 7.58 (1H, t), 7.68 (2H, m), 7.86 (4H, m)。SFC: t R= 2.232分鐘, ee = 95.84%。 實例 118( 外消旋體 )N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-胺基-2-(4-(羥甲基)苯基)乙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向酸I-38(300 mg，1.07 mmol，1當量)於DCM(20 mL)中的溶液中加入胺I-49(340 mg，1.14 mmol，1當量)、TCFH(360 mg，1.28 mmol，1.2當量)和NMI(140 mg，1.70 mmol，1.5當量)5小時。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型HPLC來對殘餘物進行純化，條件如下(流動相由溶劑含0.1% NH 4HCO 3的水和含0.1% NH 4OH的乙腈組成。利用恆定梯度，流動相：70%水相/30%有機相至47%水相/53%有機相，8分鐘。流速恆定為60毫升/分鐘)，以得到38 mg呈棕色油狀物的外消旋體醯胺C-118(6%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 562.26。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.42 (9H, s), 1.63 (9H, s), 4.46 (2H, d), 5.18 (1H, t), 5.44 (1H, d), 7.06 (1H, t), 7.31 (3H, d), 7.42-7.68 (6H, m), 7.84 (1H, d), 8.27 (1H, s), 8.50 (1H, s), 10.05 (1H, d), 10.92 (1H, s)。 步驟2：在0℃下，在氮氣氣氛下，將外消旋體醯胺C-118(35 mg，0.06 mmol，1當量)和TFA(1 mL，13.46 mmol)於DCM(5 mL)中的溶液攪拌30分鐘。將所得混合物減壓濃縮。殘餘物用飽和NaHCO 3中和至pH 7~8，並用CH 2Cl 2(3 x 10 mL)萃取。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型HPLC來對殘餘物進行純化，條件如下(流動相由溶劑含0.1% NH 4HCO 3的水和含0.1% NH 4OH的乙腈組成。利用恆定梯度，流動相：70%水相/30%有機相至47%水相/53%有機相，8分鐘。流速恆定為60毫升/分鐘)，以得到9 mg呈黃色固體的實例118的外消旋體(36%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 362.15。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 4.46 (2H, d), 4.63 (1H, s), 5.14 (1H, t), 6.83 (1H, t), 7.29 (2H, d), 7.42-7.52 (3H, m), 7.52-7.62 (2H, m), 7.84 (1H, s), 8.06 (1H, s), 10.83 (1H, s), 12.81 (1H, s)。 實例 119( 對映異構體 1) 和實例 120( 對映異構體 2)(2-((3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)胺基)-1-(5-甲氧基吡啶-3-基)-2-氧代乙基)胺基甲酸三級丁酯的製備 步驟1：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入酸I-40(250 mg，0.89 mmol，1當量)、胺I-49(264.21 mg，0.89 mmol，1當量)、TCFH(496.96 mg，1.77 mmol，2當量)、NMI(145.43 mg，1.77 mmol，2當量)和MeCN(5 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌6小時。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水，61.5%梯度，35分鐘；檢測器，UV 254 nm。這得到呈黃色固體的外消旋體醯胺C-119a(259 mg，44.18%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 563.35。 步驟2：通過製備型手性HPLC來對外消旋體醯胺C-119a(259 mg，44.18%)進行純化，條件如下(柱：CHIRALPAK IG, 2*25 cm, 5 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA)，流動相B：EtOH:DCM(1:1，v/v)；流速：20毫升/分鐘；梯度：50% B至50% B，9.5分鐘；波長：220/254 nm；t R-1 = 5.32分鐘；t R-2 = 7.56分鐘；樣品溶劑：EtOH: DCM(1:1，v/v)；進樣體積：0.5 mL)，以得到對映異構體C-119c(120.5 mg，46.52%)，SFC: t R= 1.195分鐘, ee = 95.32%，和呈白色固體的對映異構體C-119b(120.1 mg，46.3%)，SFC: t R= 1.711分鐘, ee = 95.02%。 步驟3：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入對映異構體C-119c(120 mg，0.21 mmol，1當量)、TFA(1 mL)和DCM(3 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。在0℃下，將混合物減壓濃縮，溶於甲醇中，用NH 3(水溶液)鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物(90 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：7% B至37% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 6.73分鐘)，以得到呈白色固體的實例120的對映異構體2(26.3 mg，33.92%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 363.20。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.93 (3H, s), 4.83 (1H, s), 7.04 - 7.16 (2H, m), 7.48 (1H, s), 7.63 - 7.70 (2H, m), 7.92 (2H, s), 8.23 (1H, d), 8.36 (1H, d)。SFC: t R= 2.687分鐘, ee = 97.22%。 在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入對映異構體C-119b(120 mg，0.21 mmol，1當量)、TFA(1 mL)和DCM(3 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。在0℃下，將混合物減壓濃縮，溶於甲醇(2 mL)中，用NH 3(水溶液)鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物(90 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：9% B至34% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.45分鐘)，以得到呈白色固體的實例119的對映異構體1(23.4 mg，30.18%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 363.15。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.93 (3H, s), 4.83 (1H, s), 7.04 - 7.16 (2H, m), 7.48 (1H, s), 7.63 - 7.70 (2H, m), 7.92 (2H, s), 8.23 (1H, d), 8.36 (1H, d)。SFC: t R= 2.515, ee = 92.72%。 實例 121(2R)-3-甲氧基-2-(4-甲基呱嗪-1-基)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向8 mL小瓶中加入含3-(1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-胺I-50(200 mg，0.61 mmol，1當量)、TCFH(256.24 mg，0.91 mmol，1.5當量)、NMI(199.96 mg，2.44 mmol，4當量)和(2R)-3-甲氧基-2-(4-甲基呱嗪-1-基)丙酸(147.77 mg，0.73 mmol，1.2當量)的ACN(2 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌過夜。用EA(2 x 10 mL)萃取所得混合物。將合併的有機層減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(15:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈紫色固體的(2R)-3-甲氧基-2-(4-甲基呱嗪-1-基)-N-[3-(1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺C-121(140 mg，44.85%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 513.15。 步驟2：在室溫下，向8 mL小瓶中加入含(2R)-3-甲氧基-2-(4-甲基呱嗪-1-基)-N-[3-(1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺C-121(90 mg，0.18 mmol，1當量)和HCl(氣體)的1,4-二噁烷(1.5 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水，0%至100%梯度，40分鐘；檢測器，UV 254 nm。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：Xselect CSH C18 OBD 30*150 mm 5 μm；流動相A：水(0.1% FA)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至15% B，7分鐘；波長：254; 220 nm；t R= 5.98分鐘)以得到呈白色固體的(2R)-3-甲氧基-2-(4-甲基呱嗪-1-基)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺實例121(1.2 mg，1.79%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 383.15。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.73 (3H, d), 3.08 (8H, d), 3.45 (3H, s), 3.67 (1H, t), 3.86 - 3.92 (1H, m), 3.95 (1H, dd), 7.11 (1H, t), 7.15 - 7.21 (1H, m), 7.48 (1H, s),7.7(1H, d), 7.93 (2H, s), 8.46 (1H, s)。 實例 122( 外消旋體 )N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-胺基-2-環己基乙醯胺的製備 步驟1和步驟2：將胺I-14a(2.73 g，7.75 mmol)的溶液溶於1 M TBAF(10.47 g，40.05 mmol，11.60 mL)中。在80℃下，將反應物密封並加熱16小時。將反應溶液減壓蒸發。LCMS: t R= 0.67分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 199.5 [M+1] +。將殘餘物溶於二噁烷(25 mL)/水(25 mL)中。然後，加入碳酸三級丁氧基羰基三級丁酯(10.14 g，46.48 mmol，10.67 mL)和碳酸氫鈉(6.51 g，77.47 mmol，3.01 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌16小時。然後，將有機溶液減壓蒸發。用乙酸乙酯(30 mL x 3)萃取。合併的有機物用水(50 mL x 3)和鹽水(50 mL x 1)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓蒸發。通過矽膠快速色譜柱並用乙酸乙酯/石油醚0至30%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分蒸乾，以得到呈棕色固體的7-(三級丁氧基羰基胺基)-3-(1-三級丁氧基羰基吡唑-4-基)吲哚-1-甲酸三級丁酯I-122b(800 mg，21%產率)。LCMS: t R= 2.14分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 443.7 [M-55] +。 步驟3：將7-(三級丁氧基羰基胺基)-3-(1-三級丁氧基羰基吡唑-4-基)吲哚-1-甲酸三級丁酯I-122b(800 mg，1.60 mmol)於DCM(20 mL)中的溶液攪拌並在0℃下用冰/水浴冷卻。然後，向反應物中逐滴加入含4 M HCl(1.76 g，48.14 mmol)的二噁烷(12 mL)。在此溫度下，將反應混合物攪拌2小時。將溶液減壓蒸發，以得到呈棕色固體的3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-胺I-122a(519 mg，94%產率，HCl鹽)。LCMS: tR = 2.31分鐘，7分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 199.6 [M+1] +。 步驟4：將3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-胺I-122a(75 mg，217.98 μmol，HCl鹽)、2-(三級丁氧基羰基胺基)-2-環己基-乙酸(20 mg，77.72 μmol)和N-乙基-N-異丙基-丙-2-胺(100.45 mg，777.23 μmol，135.38 μL)於NMP(1.50 mL)中的攪拌混合物攪拌並在0℃下用冰/水浴冷卻。然後，在此溫度下，一次性加入HATU(35.65 mg，93.76 μmol)。攪拌所得混合物並將其緩慢溫熱至室溫，持續2小時。通過C18快速色譜柱並用MeCN/水(6 mmol/L NH 4HCO 3)0至80%梯度洗脫來對反應物進行純化。將純級分凍乾，以得到呈棕色固體的外消旋體醯胺C-122(20 mg，59%產率)。LCMS: t R= 2.08分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 438.4 [M+H] +。 步驟5：將外消旋體醯胺C-122(20 mg，45.71 μmol)於DCM(1.00 mL)中的溶液攪拌並在0℃下用冰/水浴冷卻。然後，向反應物中逐滴加入TFA(521.21 mg，4.57 mmol，352.17 μL)。在0℃下，將所得混合物攪拌2小時。將反應混合物減壓濃縮。通過C18快速色譜法並用MeCN/水(0.02% TFA)0%至30%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分凍乾，以得到呈棕色固體實例122的外消旋體(4.56 mg，22%產率，TFA)。LCMS: t R= 1.27分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 338.4 [M+H] +。 1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.72 (s, 1H), 10.35 (s, 1H), 8.26 (s, 3H), 7.97 (s, 2H), 7.66 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.06 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 3.85 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 1.67 - 1.55 (m, 5H), 1.13 - 1.00 (m, 6H)。 實例 123( 外消旋體 ) 、實例 124( 對映異構體 1) 和實例 125( 對映異構體 2)3-(1-((3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)胺基)-3-胺基-1-氧代丙-2-基)苯甲醯胺的製備 步驟1：在室溫下在下，在空氣氣氛下，向酸I-41(330 mg，1.07 mmol，1當量)和胺I-49(319.31 mg，1.07 mmol，1當量)和TCFH(450.44 mg，1.61 mmol，1.5當量)於MeCN(3 mL)中的攪拌溶液中逐滴加入NMI(307.56 mg，3.75 mmol，3.5當量)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，10%至50%梯度，50分鐘；檢測器，UV 254 nm。這得到呈白色固體的外消旋體醯胺C-124a(489 mg，77.62%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 589.35。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.43 (9H, s), 1.71 (9H, s), 3.54 (1H, m), 3.83 (1H, m), 4.18 (1H, m), 7.12 (2H, m), 7.50 (1H, t), 7.65 (2H, d), 7.71 (1H, d), 7.82 (1H, d), 8.02 (1H, t), 8.16 (1H, s), 8.43 (1H, s)。 步驟2.通過製備型手性HPLC來對外消旋體醯胺C-124a(360 mg)進行純化，條件如下(柱：CHIRALPAK IC, 2*25 cm, 5 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA)，流動相B：EtOH:DCM(1: 1，v/v)；流速：20毫升/分鐘；梯度：30% B至30% B，18分鐘；波長：220/254 nm；t R-1 = 10.22分鐘；t R-2 = 14.67分鐘；樣品溶劑：EtOH:DCM(1:1，v/v)；進樣體積：0.5 mL)，以得到呈白色固體的對映異構體C-124c(100 mg，27.78%)，SFC: t R= 1.404分鐘, ee = 100%，和呈白色固體的對映異構體C-124b(210 mg，58.33%)，SFC: t R= 1.819分鐘, ee = 100%。 步驟3：在室溫下，在空氣氣氛下，將對映異構體C-124c(100 mg，0.17 mmol，1當量)和TFA(1 mL)於DCM(3 mL)中的溶液攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。用DMF(0.5 mL)稀釋所得混合物。在0℃下，用NH 3(水溶液)將殘餘物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物(80 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：2% B至30% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 7.18分鐘)，以得到呈白色固體的實例125的對映異構體2(29.7 mg，45.01%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 389.15。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.04 (1H, m), 3.44 (1H, m), 3.99 (1H, m), 7.06 (2H, m), 7.47 (2H, m), 7.63 (2H, m), 7.80 (1H, d), 7.89 (2H, s), 7.98 (1H, d)。SFC: t R= 0.650, ee = 100%。 在室溫下，在空氣氣氛下，將對映異構體C-124b(210 mg，0.36 mmol，1當量)和TFA(1 mL)於DCM(3 mL)中的溶液攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。用DMF(0.5 mL)稀釋所得混合物。用NH 3(水溶液)將殘餘物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物(100 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：3% B至30% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.83分鐘)，以得到呈白色固體的實例124的對映異構體1(70.1 mg，50.59%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 389.15。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.04 (1H, m), 3.44 (1H, m), 3.99 (1H, m), 7.06 (2H, m), 7.47 (2H, m), 7.63 (2H, m), 7.80 (1H, d), 7.89 (2H, s), 7.98 (1H, d)。SFC: t R= 1.140分鐘, ee = 100%。 步驟4：在室溫下，在空氣氣氛下，將4-(7-{3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-2-(3-胺基甲醯基苯基)丙醯胺基}-1H-吲哚-3-基)吡唑-1-甲酸三級丁酯(100 mg，0.17 mmol，1當量)和TFA(1 mL)於DCM(2 mL)中的溶液攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。用NH 3(水溶液)將殘餘物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物(50 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至25% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 6.72分鐘)，以得到呈白色固體的3-(1-((3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)胺基)-3-胺基-1-氧代丙-2-基)苯甲醯胺(35.5 mg，53.80%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 389.25。 實例 126(R)-N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-胺基-3-苯基丙醯胺的製備 步驟1：將4-[7-胺基-1-(對甲苯磺醯基)吲哚-3-基]吡唑-1-甲酸三級丁酯I-14b(142 mg，313.79 μmol，TFA)、(2R)-2-(三級丁氧基羰基胺基)-3-苯基-丙酸(249.75 mg，941.38 μmol)和DIPEA(243.33 mg，1.88 mmol，327.94 μL)於NMP(2.00 mL)中的溶液攪拌並在0 ℃下用冰/水浴冷卻15分鐘。然後，在此溫度下，向反應物中加入HATU(395.82 mg，1.04 mmol)。攪拌所得混懸液並將其緩慢溫熱至室溫，持續16小時。然後，將反應混合物倒入水(50 mL)中，並用乙酸乙酯(30 mL × 3)萃取。合併的有機層用鹽水(60 mL × 1)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾，並且將濾液減壓濃縮。通過矽膠快速色譜柱並用乙酸乙酯/石油醚15%至40%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分蒸乾，以得到呈白色固體的外消旋體醯胺C-126a(25 mg，11%產率)。LCMS: t R= 2.23分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 700.5 [M+H] +。 步驟2：將外消旋體醯胺C-126a(25 mg，35.21 μmol)於DCM(2 mL)中的溶液攪拌並在0℃下冷卻。然後，向反應物中逐滴加入4 M HCl(128.38 mg，3.52 mmol)。攪拌所得混合物並將其緩慢溫熱至室溫，持續1小時。然後，將有機溶液減壓蒸發，以得到呈棕色油狀物的(2R)-2-胺基-3-苯基-N-[1-(對甲苯磺醯基)-3-(1H-吡唑-4-基)吲哚-7-基]丙醯胺C-126b(20 mg，97%產率，HCl鹽)。LCMS: t R= 1.45分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 500.4 [M+H] +。 步驟3：將(2R)-2-胺基-3-苯基-N-[1-(對甲苯磺醯基)-3-(1H-吡唑-4-基)吲哚-7-基]丙醯胺C-126b(20 mg，19.17 μmol，HCl鹽)的溶液溶於含1 M TBAF的THF(125.32 mg，479.30 μmol，0.48 mL)中。在80℃下，將反應物密封並加熱16小時。將反應溶液減壓蒸發。通過C18快速色譜柱並用CH3CN/水(0.02% TFA)0至30%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分蒸乾，以得到呈棕色固體的(2R)-2-胺基-3-苯基-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]丙醯胺實例126(3.0 mg，45%產率)。LCMS: t R= 1.19分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 346.3 [M+H] +。 1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.68 (s, 1H), 10.34 (s, 1H), 8.34 (s, 2H), 7.97 (s, 1H), 7.66 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 4.4 Hz, 4H), 7.32 - 7.27 (m, 2H), 7.20 (s, 1H), 7.05 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 6.66 (s, 1H), 5.32 (t, J = 4.5 Hz, 1H), 3.25 - 3.10 (m, 2H)。 實例 127( 外消旋體 )2-(4-溴苯基)-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]丙酸甲酯的製備 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，將胺I-50(100 mg，0.30 mmol，1當量)、2-(二甲基胺基)-2-苯基乙酸(60.01 mg，0.33 mmol，1.1當量)、HATU(231.50 mg，0.61 mmol，2當量)和DIEA(118.04 mg，0.91 mmol，3當量)於DMF(3 mL)中的混合物攪拌2小時。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水(0.1% NH 3.H 2O)，10%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，以得到呈白色固體的外消旋體醯胺C-127(100 mg，67.08%)。LCMS: m/z (ESI), [M- t Bu+H] +=490.30。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 0.05(9H, d), δ 0.86 (2H, m), 2.26 (6H, s), 3.59 (2H, dd), 4.02 (1H, s), 5.44 (2H, s), 7.01 (1H, t), 7.33 (1H, m), 7.39 (2H, m), 7.58 (5H, m), 7.89 (1H, d), 8.27 (1H, d), 9.92 (1H, s), 10.84 (1H, s)。 步驟2：在25℃下，向外消旋體醯胺C-127(77 mg，0.16 mmol，1當量)的溶液中加入含HCl(氣體)的1,4-二噁烷(10 mL)。在40℃下，將混合物攪拌12小時。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型HPLC來對粗產物(50 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD C18 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：12% B至37% B，8分鐘；波長：254 nm；t R= 7.33分鐘)，以得到呈白色固體的實例127的外消旋體(1.5 mg，2.56%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] +=360.05。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 2.26 (6H, s), 4.03 (1H, d), 6.99 (1H, t), 7.33 (1H, m), 7.39 (2H, dd), 7.52(1H, d), 7.58 (4H, dt), 8.05 (2H, d), 9.93 (1H, s), 10.81 (1H, s), 12.82 (1H, s)。 實例 128(2S)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]吡咯烷-2-甲醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向20 mL小瓶中加入胺I-49(150 mg，0.50 mmol，1當量)和(2S)-1-(三級丁氧基羰基)吡咯烷-2-甲酸(129.87 mg，0.60 mmol，1.2當量)和TCFH(169.28 mg，0.60 mmol，1.2當量)和NMI(165.12 mg，2.01 mmol，4當量)和MeCN(5 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。用水(40 mL)稀釋所得混合物。用CH 2Cl 2(3 x 40 mL)萃取水層。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並蒸發，以得到粗固體。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(37:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的4-{7-[(2S)-1-(三級丁氧基羰基)吡咯烷-2-醯胺基]-1H-吲哚-3-基}吡唑-1-甲酸三級丁酯C-128(240 mg，96.32%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H- tBu] += 440.20。 步驟2：在室溫下，向50 mL小瓶中加入4-{7-[(2S)-1-(三級丁氧基羰基)吡咯烷-2-醯胺基]-1H-吲哚-3-基}吡唑-1-甲酸三級丁酯C-128(240 mg，0.48 mmol，1當量)和TFA(1 mL)和DCM(3 mL)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於DMF(2 mL)中。用NH 3水溶液將混合物鹼化至pH 9。在0℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌30分鐘。通過製備型HPLC來對粗產物(150 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(50 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至30% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 6.35分鐘)以得到呈白色固體的(2S)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]吡咯烷-2-甲醯胺實例128(92.8 mg，64.11%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 296.25。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.73 (2H, m), 2.08 (2H, d), 2.93 (1H, m), 3.30 (1H, d), 4.35 (1H, s), 7.01 (1H, q), 7.51 (3H, m), 7.94 (2H, s)。SFC: t R= 2.070分鐘, ee = 99.56%。 實例 129( 外消旋體 )2-環己基-2-(4-甲基呱嗪-1-基)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基]乙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向20 mL小瓶中加入胺I-49(150 mg，0.50 mmol，1當量)和酸I-56(181.26 mg，0.75 mmol，1.5當量)和TCFH(705.34 mg，2.52 mmol，5當量)和NMI(330.24 mg，4.02 mmol，8當量)和MeCN(5 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(27:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈棕色油狀物的外消旋體醯胺C-129(440 mg，168.08%)(粗製品)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 521.45。 步驟2：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入外消旋體醯胺C-129(430 mg，0.83 mmol，1當量)和TFA(1 mL)和DCM(3 mL)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於DMF(2 mL)中。用NH 3水溶液將混合物鹼化至pH 9。在0℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌30分鐘。通過製備型HPLC來對粗產物(150 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3+0.1% NH 3水溶液)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：28% B至50% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.75分鐘)，以得到呈白色固體的實例129的外消旋體(26.9 mg，7.70%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 307.04。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.12 (2H, dt), 1.33 (3H, m), 1.77 (4H, d), 2.02 (2H, m), 2.31 (3H, s), 2.56 (4H, s), 2.83 (4H, m), 3.09 (1H, d), 7.09 (1H, t), 7.20 (1H, dd), 7.48 (1H, s), 7.65 (1H, dd), 7.93 (2H, s)。 實例 131( 對映異構體 1) 和實例 132( 對映異構體 2)N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-胺基-2-(吡啶-3-基)乙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向40 mL小瓶中加入[(三級丁氧基羰基)胺基](吡啶-3-基)乙酸(250 mg，0.99 mmol，1當量)和胺I-49(295.66 mg，0.99 mmol，1當量)和TCFH(333.67 mg，1.19 mmol，1.2當量)和NMI(325.47 mg，3.96 mmol，4當量)和MeCN(5 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(18:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈棕黃色固體的外消旋體醯胺C131a(200 mg，37.89%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 533.35。 步驟2：在室溫下，向100 mL圓底燒瓶中加入外消旋體醯胺C131a(300 mg，0.56 mmol，1當量)和DCM(3 mL)和TFA(0.86 mL)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於DMF(2 mL)中。用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9。在0℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌30分鐘。通過製備型HPLC來對粗產物(250 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至30% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.93分鐘)，以得到呈白色固體的外消旋體胺C-131b(150 mg，80.21%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 333.3。 步驟3：通過製備型手性HPLC來外消旋體胺C-131b(120 mg)進行純化，條件如下(柱：CHIRALPAK IG, 2*25 cm, 5 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA)，流動相B：EtOH:DCM(1:1，v/v)；流速：20毫升/分鐘；梯度：50% B至50% B，22分鐘；波長：220/254 nm；t R= 12.23分鐘；t R= 14.06分鐘；樣品溶劑：EtOH:DCM(1:1，v/v)；進樣體積：0.6 mL)，以得到呈白色固體的實例132的對映異構體2(38 mg，31.66%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 333.20。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 5.11 (1H, q), 7.09 (1H, t), 7.17 (1H, td), 7.48 (1H, s), 7.56 (1H, ddd), 7.67 (1H, dd), 7.92 (2H, s), 8.13 (1H, dt), 8.62 (1H, dq), 8.83 (1H, d)，SFC: t R= 2.398, ee = 97.40%，和呈白色固體的實例131的對映異構體1(18.5 mg，15.41%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 333.15。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 5.11 (1H, q), 7.09 (1H, t), 7.17 (1H, td), 7.48 (1H, s), 7.56 (1H, ddd), 7.67 (1H, dd), 7.92 (2H, s), 8.13 (1H, dt), 8.62 (1H, dq), 8.83 (1H, d)。SFC: t R= 2.682, ee = 95.58%。 實例 133( 外消旋體 )N-(3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-4-甲醯胺的製備 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，將胺I-50(100 mg，0.30 mmol，1當量)、2-(三級丁氧基羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-4-甲酸(1當量)、HATU(231.50 mg，0.61 mmol，2當量)和DIEA(118.04 mg，0.91 mmol，3當量)於DMF(3 mL)中的混合物攪拌2小時。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水(0.1% NH 3.H 2O)，10%至50%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm，以得到呈黃色固體的外消旋體醯胺C-133(120 mg，67.06%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 588.25。 步驟2：在25℃下，向外消旋體醯胺C-133(102 mg，0.17 mmol，1當量)的溶液中加入含HCl(氣體)的1,4-二噁烷(10 mL)。在40℃下，將混合物攪拌3小時。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型HPLC來對粗產物(80 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD C18 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：12% B至37% B，8分鐘；波長：254 nm；t R= 7.33分鐘)，以得到呈白色固體的實例133的外消旋體(6.7 mg，10.59%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 358.10。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 3.22 (1H, dd), 3.38 (2H, dd), 3.83 (1H, t), 3.90 (1H, d), 3.99 (1H, d), 7.00 (1H, t), 7.11 (1H, dd), 7.18 (2H, dt), 7.34 (1H, m), 7.42 (1H, d), 7.59 (2H, m), 7.94 (2H, s), 10.39 (1H, s), 10.69 (1H, m), 12.81(1H, s)。 實例 134( 外消旋體 )N-(2-胺基-1-苯基乙基)-3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-甲醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向40 mL小瓶中加入酸I-52(100 mg，0.44 mmol，1當量)、N-(2-胺基-2-苯基乙基)胺基甲酸三級丁酯(155.97 mg，0.66 mmol，1.5當量)、HATU(250.01 mg，0.62 mmol，1.5當量)、TEA(150.26 mg，1.32 mmol，3當量)和DMF(20 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌8小時。用EtOAc(30 mL)稀釋所得混合物。用3 x 30 mL水洗滌所得混合物。有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/MeOH(15: 1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈淺黃色固體的外消旋體醯胺C-134(120 mg，61.22%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 446.40。 步驟5：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入外消旋體醯胺C-134(100 mg，0.23 mmol，1當量)、TFA(1 mL)和DCM(3 mL)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。將混合物減壓濃縮並用飽和NaHCO 3(水溶液)鹼化至pH 9。所得混合物用CH 2Cl 2/MeOH(10: 1，v/v)(3 x 30 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型HPLC來對粗產物(80 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱, 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3+0.1% NH 3.H 2O)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：17% B至37% B，8分鐘，37% B；波長：220 nm；t R= 7.85分鐘)，以得到呈白色固體的實例134的外消旋體(21.6 mg，27.87%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 346.15。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 3.12 (2H, m), 5.28 (1H, dd), 7.23 (1H, t), 7.30 (1H, m), 7.39 (2H, m), 7.48 (3H, m), 7.82 (1H, dd), 7.97 (2H, m), 8.00 (1H, d)。 實例 135(S)-N-(2-胺基-1-苯基乙基)-3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-甲醯胺的製備 步驟1：將酸I-135a(48.20 mg，199.95 μmol)、(S)-(2-胺基-2-苯基乙基)胺基甲酸三級丁酯(45 mg，190.43 μmol)和N,N-二乙基乙胺(57.81 mg，571.29 μmol，79.63 μL)於NMP(2.00 mL)中的混合物攪拌並在0℃下用冰/水浴冷卻。然後，在此溫度下，一次性加入HATU(86.89 mg，228.51 μmol)。攪拌所得混合物並將其緩慢溫熱至室溫，持續2小時。通過C18快速色譜柱並用乙腈/水0至50%梯度洗脫來對反應溶液進行純化。將純級分蒸乾，以得到呈黃色固體的N-[(2S)-2-[(3-溴-1H-吲唑-7-羰基)胺基]-2-苯基-乙基]胺基甲酸三級丁酯C-135a(82 mg，94%產率)。LCMS: t R= 1.91分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z =459.1 [M+H] +。 步驟2：在80℃下在下，在氮氣下，將含N-[(2S)-2-[(3-溴-1H-吲唑-7-羰基)胺基]-2-苯基-乙基]胺基甲酸三級丁酯C-135a(82 mg，178.52 μmol)、(1-(三級丁氧基羰基)-1H-吡唑-4-基)硼酸(45.42 mg，214.22 μmol)、碳酸鉀(74.02 mg，535.56 μmol，32.32 μL)和PdCl 2dppf(13.06 mg，17.85 μmol)的二噁烷(1.50 mL)和水(0.30 mL)攪拌並加熱16小時。將反應溶液減壓蒸發。在氮氣下，通過矽膠快速色譜柱並用10至50%梯度洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈棕色固體的N-[(2S)-2-苯基-2-[[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲唑-7-羰基]胺基]乙基]胺基甲酸三級丁酯C-135b(75 mg，94%產率)。LCMS: t R= 1.61分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z =447.4 [M+H] +。 步驟3：將N-[(2S)-2-苯基-2-[[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲唑-7-羰基]胺基]乙基]胺基甲酸三級丁酯C-135b(75 mg，167.97 μmol)於DCM(3.00 mL)中的溶液攪拌並在0℃下用冰/水浴冷卻。然後，向反應物中逐滴加入含4 M HCl(145.76 mg，4.00 mmol)的二噁烷(1.00 mL)。在此溫度下，將所得混合物攪拌2小時。將反應混合物減壓濃縮。通過C18快速色譜柱並用MeCN/水(6 mmol/L NH 4HCO 3)0%至60%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分凍乾，以得到呈白色固體的N-[(1S)-2-胺基-1-苯基-乙基]-3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲唑-7-甲醯胺實例135(37 mg，64%產率)。LCMS: t R= 1.16分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(6 mmol/L NH 4HCO 3)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 347.2 [M+H] +。 1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6) δ13.12 (s, 1H), 8.99 (s, 1H), 8.25 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 8.11 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 7.41 (d, J= 7.3 Hz, 2H), 7.33 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 7.25 (dt, J= 11.8, 7.4 Hz, 2H), 5.05 (qd, J= 6.9, 3.1 Hz, 1H), 2.95 (ddd, J= 18.2, 13.0, 7.0 Hz, 2H)。 實例 136( 對映異構體 1) 和實例 139( 對映異構體 2)N-(2-胺基-1-(3-甲氧基苯基)乙基)-3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-甲醯胺的製備 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，向酸I-51(100 mg，0.44 mmol，1當量)和N-[2-胺基-2-(3-甲氧基苯基)乙基]胺基甲酸三級丁酯(117.22 mg，0.44 mmol，1當量)於DMF(5 mL)中的攪拌溶液中分批加入HATU(251.01 mg，0.66 mmol，1.5當量)和DIEA(170.64 mg，1.32 mmol，3當量)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。將所得混合物真空濃縮。通過反相快速色譜法來對粗產物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，0%至100%梯度，25分鐘；檢測器，UV 254 nm。將所得混合物真空濃縮。這得到呈白色固體的外消旋體醯胺C-136a(70 mg，33.45%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 476.10。 步驟2：通過手性HPLC來對外消旋體醯胺C-136a進行純化，條件如下(柱：CHIRALPAK IG, 2*25 cm, 5 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA)，流動相B：EtOH:DCM(1:1，v/v)；流速：20毫升/分鐘；梯度：80% B至80% B，12分鐘；波長：220/254 nm；t R-1 = 6.18分鐘；t R-2 = 9.16分鐘；樣品溶劑：EtOH:DCM(1:1，v/v)；進樣體積：0.55 mL)，以得到呈白色固體的對映異構體C-136c(25 mg)。SCF: t R= 1.464分鐘, ee = 100%，和呈白色固體的對映異構體C-136b(25 mg)。SCF: t R= 2.09分鐘, ee = 100%。 步驟3：在室溫下，在氮氣氣氛下，將對映異構體C-136b(25 mg，0.053 mmol，1當量)和TFA(1 mL)於DCM(2 mL)中的溶液攪拌2小時。將所得混合物真空濃縮。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3+0.1% NH 3水溶液)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：15% B至40% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.82分鐘)，以得到呈白色固體的實例136的對映異構體1(4.9 mg，24.83%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 376.10。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 2.94 (2H, qd), 3.74 (3H, s), 5.11 - 4.97 (1H, m), 6.85 - 6.76 (1H, m), 6.99 (2H, dd), 7.16 (1H, d), 7.25 (1H, t), 7.51 (1H, s), 8.14 - 7.79 (4H, m), 8.77 (1H, d), 11.21 (1H, d), 12.81 (1H, s)。 在室溫下，在氮氣氣氛下，將對映異構體C-136c(25 mg，0.053 mmol，1當量)和TFA(1 mL)於DCM(2 mL)中的溶液攪拌2小時。將所得混合物真空濃縮。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：14% B至39% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 6.82分鐘)，以得到呈白色固體的實例139的對映異構體2(4.9 mg，19.08%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 376.10。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 3.15 (2H, dd), 3.75 (3H, s), 5.24 (1H, s), 6.84-6.34(2H, m), 6.86 (1H, dd), 7.09 - 6.98 (2H, m), 7.19 (1H, t), 7.29 (1H, t), 7.52 (1H, s), 7.89 (2H, d), 8.03 (2H, d), 8.90 (1H, d), 11.14 (1H, s), 12.84 (1H, s)。 實例 137( 對映異構體 1) 和實例 138( 對映異構體 2)N-(1-(3-甲氧基苯基)-2-(4-甲基呱嗪-1-基)乙基)-3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-甲醯胺的製備 步驟1：向8 mL小瓶中加入含胺I-43(109.74 mg，0.44 mmol，1當量)、酸I-51(100 mg，0.44 mmol，1當量)、三乙胺(133.60 mg，1.32 mmol，3當量)的DMF(2 mL)，並且在室溫下，向上述混合物中加入HATU(251.01 mg，0.66 mmol，1.5當量)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。所得混合物用EtOAc(20 mL)稀釋，並用飽和NaHCO 3(水溶液)(20 mL)、水(20 mL)和飽和鹽水(2 x 20 mL)洗滌。有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並蒸發，以得到粗固體。通過反相快速色譜法來對粗產物(150 mg)進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水(10 mmol/L, NH 4HCO 3)，0%至100%梯度，60分鐘；檢測器，UV 254 nm，以得到呈黃色固體的外消旋體醯胺C-137(80 mg，39.64%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 459.10。 步驟2：通過製備型手性HPLC來對外消旋體醯胺C-137(80 mg)進行純化，條件如下(柱：DZ-CHIRALPAK IC-3, 4.6*50 mm, 3.0 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA):(EtOH:DCM = 1:1，v/v)= 60:40(v/v)；流速：1毫升/分鐘；進樣體積：5ul mL)，以得到呈白色固體的實例137的對映異構體1(19.5 mg，23.52%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 459.20。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.32 (3H, s), 2.45 - 2.86 (9H, m), 2.98 (1H, d), 3.81 (3H, s), 5.40 (1H, dd), 6.84 (1H, d), 7.04 (2H, d), 7.26 (2H, dt), 7.54 (1H, s), 7.74 (1H, d), 7.89 (1H, s), 7.99 (2H, d)。手性HPLC: t R= 1.655分鐘, ee = 100%，和呈白色固體的實例138的對映異構體2(16.5 mg，20.37%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 459.20。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.32 (3H, s), 2.45 - 2.86 (9H, m), 2.98 (1H, d), 3.81 (3H, s), 5.40 (1H, dd), 6.84 (1H, d), 7.04 (2H, d), 7.26 (2H, dt), 7.54 (1H, s), 7.74 (1H, d), 7.89 (1H, s), 7.99 (2H, d)。手性HPLC: t R= 2.002分鐘, ee = 97.88%。 實例 140( 外消旋體 )N-(3-胺基-1-苯基丙基)-3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-甲醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向20 mL小瓶中加入含胺I-46(250 mg，1.00 mmol，1當量)、HATU(379.72 mg，1.00 mmol，1當量)、三乙胺(303.16 mg，3.00 mmol，3當量)和酸I-51(226.91 mg，1.00 mmol，1當量)的DMF(2.50)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。殘餘物用EtOAc(20 mL)稀釋，用飽和NaHCO 3(水溶液)(1 x 20 mL)和飽和鹽水(3 x 20 mL)洗滌。將有機層減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(10:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的外消旋體醯胺C-140(250 mg，54.48%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 460.35。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1.38 (9H, s), 2.01 (2H, dddd), 3.01 (2H, dq), 5.03 - 5.18 (1H, m), 6.92 (1H, t), 7.16 (1H, t), 7.20 - 7.27 (1H, m), 7.34 (2H, t), 7.42 - 7.47 (2H, m), 7.51 (1H, d), 7.84 (1H, d), 8.00 (1H, d)。 步驟2：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含外消旋體醯胺C-140(250 mg，0.54 mmol，1當量)和TFA(1 mL)的DCM(3 ml)。在室溫下，將所得混合物攪拌1.5小時。將所得混合物減壓濃縮。用NH 3水溶液將混合物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：9% B至39% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.82分鐘)，以得到呈白色固體的實例140的外消旋體(90.7 mg，46.39%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 360.20。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.12 - 2.27 (2H, m), 2.77 - 3.03 (2H, m), 5.37 (1H, dd), 7.21 (1H, t), 7.25 - 7.33 (1H, m), 7.36 - 7.43 (2H, m), 7.45 - 7.54 (3H, m), 7.75 (1H, dd), 7.94 (2H, s), 7.99 (1H, dd)。 實例 141( 對映異構體 1) 和實例 142( 對映異構體 2)N-((3-甲氧基苯基)(1-甲基呱啶-4-基)甲基)-3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-甲醯胺的製備 步驟1：在25℃下，在空氣氣氛下，向酸I-51(148.35 mg，0.65 mmol，1.02當量)於CH 3CN(4.0 mL)中的攪拌混合物中分批加入胺I-47(150 mg，0.64 mmol，1當量)、NMI(157.67 mg，1.92 mmol，3當量)和TCFH(359.19 mg，1.28 mmol，2當量)。在25℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌2.0小時。反應後，用水(20 mL)稀釋所得混合物。用乙酸乙酯(3 x 30 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用水(3 x 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(20:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈白色固體的外消旋體醯胺C-141(200 mg，70.44%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 444.20。 步驟2：通過製備型手性HPLC來對外消旋體醯胺C-141(200 mg)進行純化，條件如下(柱：DZ-CHIRALPAK IG-3, 4.6*50 mm, 3.0 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA)/ (EtOH:DCM，1:1，v/v)= 50:50(v/v)；流速：1毫升/分鐘；進樣體積：5ul mL)，以得到實例141的對映異構體1(42 mg，21.66%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 444.25。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.35 (2H, d), 1.51 (1H, dt), 1.97 (2H, m), 2.09 (2H, d), 2.31 (3H, d), 2.88 (1H, d), 3.00 (1H, d), 3.82 (3H, s), 4.98 (1H, m), 6.84 (1H, m), 7.04 (2H, m), 7.20 (1H, t), 7.28 (1H, t), 7.50 (1H, s), 7.73 (1H, dd), 7.96 (3H, m)。SCF: t R= 2.644分鐘, ee = 100%，和呈白色固體的實例142的對映異構體2(42.8 mg，22.08%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 444.20。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.35 (2H, d), 1.51 (1H, dt), 1.97 (2H, m), 2.09 (2H, d), 2.31 (3H, d), 2.88 (1H, d), 3.00 (1H, d), 3.82 (3H, s), 4.97 (1H, m)6.84 (1H, m), 7.04 (2H, m), 7.20 (1H, t), 7.28 (1H, t), 7.50 (1H, s), 7.73 (1H, dd), 7.96 (3H, m)。SFC: t R= 3.725分鐘, ee = 100%。 實例 143( 外消旋體 )N-[環己基(1-甲基呱啶-4-基)甲基]-3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-甲醯胺的製備 在室溫下，向20 mL小瓶中加入含胺I-48(111.10 mg，0.53 mmol，1.50當量)、HATU(133.87 mg，0.35 mmol，1當量)、三乙胺(106.88 mg，1.06 mmol，3當量)和酸I-51(80 mg，0.35 mmol，1當量)的DMF(1.5 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1.5小時。殘餘物用EA(50 mL)稀釋，並用飽和NaHCO 3(水溶液)(1 x 50 mL)和飽和鹽水(2 x 50 mL)洗滌。將有機層減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(5:1，v/v)對殘餘物進行純化。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3+0.1% NH 3水溶液)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：25% B至48% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 8.10分鐘)，以得到呈白色固體的實例143的外消旋體(28.3 mg，19.16%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] +=420.30。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 1.02 - 1.41 (5H, m), 1.51 (2H, p), 1.63 - 1.94 (9H, m), 2.01 - 2.19 (2H, m), 2.30 (3H, s), 2.98 (2H, d), 3.98 (1H, t), 7.20 (1H, t), 7.53 (1H, s), 7.84 - 8.03 (3H, m)。 實例 144( 對映異構體 1) 和實例 145( 對映異構體 2)N-(2-胺基-1-(4-甲氧基苯基)乙基)-3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-甲醯胺的製備 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，將酸I-51(300 mg，1.32 mmol，1當量)和N-[2-胺基-2-(4-甲氧基苯基)乙基]胺基甲酸三級丁酯(351.65 mg，1.32 mmol，1當量)、TCFH(555.67 mg，1.98 mmol，1.5當量)、NMI(379.41 mg，4.62 mmol，3.5當量)於MeCN(5 mL)中的混合物攪拌過夜。用水(80 mL)稀釋所得混合物。用CH 2Cl 2(3 x 100 mL)萃取所得混合物。合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(18:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈棕色固體的外消旋體C-144a(370 mg，58.93%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 476.25。 步驟2：通過製備型手性HPLC來對外消旋體C-144a(370 mg)(粗製品，純度= 82%)進行純化，條件如下(柱：CHIRALPAK IG, 2*25 cm, 5 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA)，流動相B：EtOH:DCM(1:1，v/v)；流速：20毫升/分鐘；梯度：80% B，15分鐘；波長：220/254 nm；t R-1 = 5.17分鐘；t R-2 = 11.31分鐘；樣品溶劑：EtOH: DCM(1:1，v/v)；進樣體積：1.4 mL)，以得到對映異構體C-144b(100 mg，31.02%)和呈白色固體的對映異構體C-144c(110 mg，35.46%)。 步驟3：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含對映異構體C-144b(60 mg，0.13 mmol，1當量)的DCM(3 mL)和TFA(1 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於DCM(3 mL)中。將所得混合物減壓濃縮。用NH 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物(50 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3+0.1% NH 3.H 2O)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：18% B至38% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.60分鐘)，以得到呈白色固體的實例144的對映異構體1(24.8 mg，52.36%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 376.05。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 2.88 (1H, dd), 2.92 - 3.03 (1H, m), 3.73 (3H, s), 4.86 - 5.26 (1H, m), 6.82 - 6.95 (2H, m), 7.16 (1H, td), 7.26 - 7.41 (2H, m), 7.51 (1H, d), 7.84 (1H, dd), 8.00 (2H, d), 8.53 - 9.03 (1H, m)。SFC: t R= 2.027分鐘, ee = 98.92%。 在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入對映異構體C-144c(60 mg，0.13 mmol，1當量)和TFA(1 mL，13.46 mmol)、DCM(3 mL，47.19 mmol)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。用DMF(5 mL)稀釋所得混合物。用飽和NH 3(水溶液)將殘餘物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD  30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：13% B至38% B，8分鐘；波長：220 nm)，以得到呈白色固體的實例145的對映異構體2(46.9 mg，98.55%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 376.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 2.87 (dd, 1H), 2.96 (dd, 1H), 3.73 (s, 3H), 4.99 (d, 1H), 6.90 (m, 2H), 7.15 (td, 1H), 7.34 (dd, 2H), 7.51 (s, 1H), 7.85 (d, 1H), 8.00 (d, 3H), 8.74 (d, 1H), 11.13 (s, 1H)。SCF: t R= 1.697分鐘, ee = 100%。 實例 146( 外消旋體 )N-(2-胺基-1-(4-(羥甲基)苯基)乙基)-3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-甲醯胺的製備 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，向胺I-44(120 mg，0.45 mmol，1當量)和酸I-51(102.38 mg，0.45 mmol，1當量)於MeCN(3 mL)中的攪拌混合物中分批加入TCFH(189.62 mg，0.68 mmol，1.5當量)和NMI(147.97 mg，1.80 mmol，4當量)1小時。將所得混合物真空濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水，0%至100%梯度，60分鐘；檢測器，UV 254 nm。將所得混合物真空濃縮。通過製備型HPLC按以下條件來對粗產物進行純化，以得到呈白色固體的外消旋體醯胺C-146(30 mg，14.00%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 1.36 (9H, s), 3.30 - 3.48 (1H, m), 4.47 (2H, d), 5.13 - 5.21 (1H, m), 7.05 - 7.23 (2H, m), 7.27 (2H, d), 7.30 - 7.45 (3H, m), 7.52 (1H, dd), 7.82 (1H, d), 8.00 (3H, s), 8.01 (1H, s), 8.76 (1H, d), 11.12 (1H, d)。 步驟2：在室溫下，在氮氣氣氛下，向外消旋體醯胺C-146(20 mg，0.042 mmol，1當量)和TFA(4.80 mg，0.042 mmol，1當量)於DCM(1 mL)中的攪拌混合物中1.5小時。用飽和Na 2CO 3(水溶液)將混合物鹼化至pH 8。通過過濾收集沉澱固體並用DCM(20 mL)洗滌。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD C18 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至25% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 7.63分鐘)，以得到呈白色固體的實例146的外消旋體(8.3 mg，52.57%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 376.15。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 2.89 - 3.06 (1H, m), 4.46 (2H, d), 5.06 (1H, s), 5.12 (1H, t), 7.17 (1H, t), 7.27 (2H, d), 7.36 (2H, d), 7.51 (1H, s), 7.88 (1H, d), 8.01 (1H, d), 8.80 (1H, d)。 實例 147( 外消旋體 )N-(1-胺基-3-苯基丙-2-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-甲醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向20 mL小瓶中加入含酸I-51(150 mg，0.66 mmol，1當量)和N-(2-胺基-3-苯基丙基)胺基甲酸三級丁酯(247.89 mg，0.99 mmol，1.5當量)、TCFH(222.27 mg，0.79 mmol，1.2當量)、NMI(216.81 mg，2.64 mmol，4當量)的MeCN(5.00 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於DCM(5 mL)中。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(15:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈淺黃色油狀物的外消旋體醯胺C147(302 mg，89.59%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 460.10。 步驟2：在室溫下，向50 mL圓底燒瓶中加入含外消旋體醯胺C-147(300 mg，0.65 mmol，1當量)的TFA(1 mL)和DCM(3 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於甲醇(3 mL)中。用NH 3水溶液將混合物鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對粗產物(150 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3+0.1% NH 3水溶液)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：18% B至38% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.77分鐘)，以得到呈白色固體的實例147的外消旋體(105.3 mg，44.88%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 360.15。 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 2.74 (1H, s), 2.81 - 3.02 (2H, m), 3.19 (1H, d), 4.05 - 4.32 (1H, m), 7.01 - 7.21 (2H, m), 7.21 - 7.39 (4H, m), 7.52 (1H, s), 7.68 (1H, dd), 8.12 (3H, dd)。 實例 148N-[(1S)-2-胺基-1-苯基-乙基]-3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯並[3,2-c]吡啶-7-甲醯胺的製備 步驟1：向酸C148a(250 mg，1.54 mmol)於AcOH(10 mL)中的溶液中加入N-溴琥珀醯亞胺(329.31 mg，1.85 mmol，156.96 μL)。在室溫下將反應混合物攪拌16小時。將反應溶液減壓蒸發。通過C18快速色譜柱並用MeCN/水0至20%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分凍乾，以得到呈白色固體的3-溴-1H-吡咯並[3,2-c]吡啶-7-甲酸C148b(200 mg，54%產率)。LCMS: t R= 0.77分鐘，3分鐘色譜(5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z =240.8 [M+H] +。 步驟2：在0℃下，將3-溴-1H-吡咯並[3,2-c]吡啶-7-甲酸C-148b(50 mg，207.43 μmol)、N-[(2S)-2-胺基-2-苯基-乙基]胺基甲酸三級丁酯(49.02 mg，207.43 μmol)和N,N-二乙基乙胺(104.95 mg，1.04 mmol，144.56 μL)於DMF(1.44 mL)中的攪拌混合物冷卻並攪拌。然後，在此溫度下，一次性加入HATU(118.31 mg，311.15 μmol)。在0℃下，將所得混合物攪拌2小時。通過C18快速色譜柱並用MeCN/水0至60%梯度洗脫來對溶液進行純化。將純級分凍乾，以得到呈黃色固體的N-[(2S)-2-[(3-溴-1H-吡咯並[3,2-c]吡啶-7-羰基)胺基]-2-苯基-乙基]胺基甲酸三級丁酯C-148c(60 mg，63%產率)。LCMS: t R= 1.45分鐘，3分鐘色譜(5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z =459.1 [M+H] +。 步驟3：在90℃下，在氮氣下，將含N-[(2S)-2-[(3-溴-1H-吡咯並[3,2-c]吡啶-7-羰基)胺基]-2-苯基-乙基]胺基甲酸三級丁酯C-148c(60 mg，130.62 μmol)、(1-(三級丁氧基羰基)-1H-吡唑-4-基)硼酸(41.54 mg，195.94 μmol)、K 2CO 3(54.16 mg，391.87 μmol)和Pd(dppf)Cl2(10.67 mg，13.06 μmol)的二噁烷(0.5 mL)和水(3 mL)攪拌16小時。減壓去除溶劑。通過矽膠快速色譜柱並用甲醇/DCM 0至10%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分蒸乾，以得到呈棕色固體的N-[(2S)-2-苯基-2-[[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯並[3,2-c]吡啶-7-羰基]胺基]乙基]胺基甲酸三級丁酯C-148d(40 mg，69%產率)。LCMS: t R= 1.39分鐘，3分鐘色譜(5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z =447.3 [M+H] +。 步驟4：在0℃下，將N-[(2S)-2-苯基-2-[[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯並[3,2-c]吡啶-7-羰基]胺基]乙基]胺基甲酸三級丁酯C-148d(40 mg，89.59 μmol)於DCM(1.00 mL)中的溶液在冰/水浴中冷卻並攪拌。然後，向反應物中逐滴加入三氟乙酸(510.74 mg，4.48 mmol，345.10 μL)。將所得混合物攪拌2小時。將反應混合物減壓濃縮。通過C18快速色譜法並用MeCN/水(6 mmol/L NH 4HCO 3)0%至50%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分凍乾，以得到呈白色固體的N-[(1S)-2-胺基-1-苯基-乙基]-3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯並[3,2-c]吡啶-7-甲醯胺實例148(25 mg，81%產率)。LCMS: t R= 0.87分鐘，3分鐘色譜(5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z =347.5 [M+H] +。 1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.90 (s, 1H), 9.22 (s, 1H), 8.99 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.09 (s, 2H), 7.59 (s, 1H), 7.41 (d, J= 7.5 Hz, 2H), 7.33 (t, J= 7.5 Hz, 2H), 7.23 (t, J= 7.2 Hz, 1H), 5.03 (dd, J= 11.8, 6.1 Hz, 1H), 3.05 - 2.84 (m, 2H)。 實例 149( 外消旋體 )N-[2-胺基-1-(吡啶-3-基)乙基]-3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-甲醯胺的製備 步驟1：在室溫下在下，在氮氣氣氛下，向酸I-51(130 mg，0.572 mmol，1.00當量)和DIEA(221.84 mg，1.716 mmol，3.00當量)、胺I-42(149.34 mg，0.629 mmol，1.1當量)於DMF(2.0 mL)中的攪拌混合物中分批加入和HATU(337.19 mg，0.887 mmol，1.55當量)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。反應後，向混合物中加入10 mL水。用乙酸乙酯(3 x 30 mL)萃取所得混合物。合併的有機層用水(3 X 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(12:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色油狀物的外消旋體醯胺C-149(130 mg，50.89%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 447.15。 步驟2.在室溫下，在氮氣氣氛下，向外消旋體醯胺C-149(125 mg，0.280 mmol，1當量)於DCM(4.0 mL)中的攪拌溶液中逐滴加入TFA(1.0 mL)。反應後，將所得混合物真空濃縮並溶於甲醇(2.0 mL)中。在0℃下，用NH 3水溶液(1.0 mL)將混合物鹼化至pH 9。將所得混合物進行製備型HPLC，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至28% B，8分鐘；波長：220/254 nm；t R= 7.97分鐘)，以得到呈白色固體的實例149的外消旋體(26.7 mg，26.70%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 347.20。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.16 (2H, m), 5.32 (1H, dd), 7.23 (1H, t), 7.49 (2H, m), 7.83 (1H, m), 7.98 (4H, m), 8.48 (1H, dd), 8.68 (1H, d)。 實例 151( 外消旋體 )(rac)-N-{2-胺基-1-[3-(二甲基磷醯基)苯基]乙基}-3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-甲醯胺的製備 步驟1：在室溫下，在氮氣氣氛下，向胺I-13(50 mg，0.16 mmol，1當量)和酸I-51(36.37 mg，0.16 mmol，1當量)於MeCN(3 mL)中的攪拌混合物中分批加入TCFH(53.90 mg，0.19 mmol，1.2當量)和NMI(52.57 mg，0.64 mmol，4當量)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物真空濃縮。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，MeCN/水(0.1% FA)，0%至100%梯度，10分鐘；檢測器，UV 254 nm。這得到呈白色固體的外消旋體醯胺C-151(30 mg，35.93%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 1.31 (9H, s), 1.64 (6H, d), 3.30 (1H, s), 3.44 (1H, dd), 5.26 (1H, q), 7.16 (2H, dt), 7.44 - 7.53 (2H, m), 7.62 (2H, dt), 7.81 - 7.90 (2H, m), 8.01 (1H, d), 8.09 (1H, s), 8.89 (1H, d), 11.14 (1H, d), 12.81 (1H, s)。 步驟2：在室溫下，在氮氣氣氛下，向外消旋體醯胺C-151(20 mg，0.038 mmol，1當量)於CH 2Cl 2(2 mL)中的攪拌混合物中加入TFA(4.37 mg，0.038 mmol，1.0當量)。在室溫下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物真空濃縮。通過製備型HPLC來對粗產物進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：5% B至25% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 7.63分鐘)，以得到呈白色固體的實例151的外消旋體(5.2 mg，32.18%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 422.25。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 1.62 (3H, s), 1.65 (3H, s), 2.89 - 3.06 (2H, m), 5.08 (1H, d), 7.18 (1H, t), 7.37 - 7.54 (2H, m), 7.54 - 7.68 (2H, m), 7.74 - 7.94 (3H, m), 8.01 (2H, d), 8.88 (1H, d), 11.17 (1H, s), 12.82 (1H, s)。 實例 152( 外消旋體 )3-胺基-2-(3-氰基苯基)-N-[7-(1H-吡唑-4-基)-5H-吡咯並[3,2-d]嘧啶-4-基]丙醯胺的製備 步驟1：在室溫下，向40 mL小瓶中加入7-溴-4-氯-5H-吡咯並[3,2-d]嘧啶C-152a(1 g，4.30 mmol，1當量)和NH 3水溶液(20 mL)。在100℃下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌72小時。通過加入水使產物沉澱。通過過濾收集沉澱固體並用水(3 x 10 mL)洗滌。通過凍乾法乾燥所得固體。這得到呈棕色固體的7-溴-5H-吡咯並[3,2-d]嘧啶-4-胺C-152b(0.84 g，91.66%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 212.95。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 7.60 (1H, s), 8.19 (1H, s)。 步驟2：在室溫下，向40 mL小瓶中加入胺C-152b(232.37 mg，1.09 mmol，1當量)和酸I-3(380.00 mg，1.31 mmol，1.2當量)和TCFH(1.84 g，6.545 mmol，6當量)和NMI(716.46 mg，8.73 mmol，8當量)和MeCN(8 mL)。在室溫下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。過濾所得混合物，並且用CH 2Cl 2(3 x 10 mL)洗滌濾餅。將濾液減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(30:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到粗固體。通過反相快速色譜法來對殘餘物進行純化，條件如下：柱，C18矽膠；流動相，甲醇/水(0.1% FA)，50%至70%梯度，20分鐘；檢測器，UV 254 nm。將所得混合物減壓濃縮。這得到呈棕黃色固體的外消旋體醯胺C-152c(290 mg，54.78%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 487.10。 步驟3：在室溫下，向20 mL小瓶中加入外消旋體醯胺C-152c(250 mg，0.52 mmol，1當量)和4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)吡唑-1-甲酸三級丁酯(393.96 mg，1.34 mmol，2.6當量)和Pd(dppf)Cl 2.CH 2Cl 2(125.88 mg，0.15 mmol，0.3當量)和K 2CO 3(213.57 mg，1.55 mmol，3當量)和1,4-二噁烷(8 mL)和H 2O(2 mL)。在80℃下，在氮氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。用水(100 mL)稀釋所得混合物。用乙酸乙酯(3 x 100 mL)萃取水層。將所得混合物減壓濃縮。通過製備型TLC以CH 2Cl 2/甲醇(20:1，v/v)對殘餘物進行純化，以得到呈黃色固體的外消旋體吡唑C-152d(100 mg，33.90%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 573.15。 步驟4：在室溫下，向8 mL小瓶中加入外消旋體吡唑C-152d(100 mg，0.17 mmol，1當量)和TFA(1 mL，13.46 mmol，77.93當量)和DCM(3 mL)。在室溫下，在空氣氣氛下，將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物減壓濃縮。將殘餘物溶於DMF(1 mL)中。用NH 3水溶液將混合物鹼化至pH 9。在0℃下，將所得混合物攪拌30分鐘。通過製備型HPLC來對粗產物(65 mg)進行純化，條件如下(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：9% B至34% B，8分鐘；波長：220 nm；t R= 7.47分鐘)，以得到呈白色固體的實例152的外消旋體(4 mg，55.89%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 373.15。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.04 (1H, dd), 3.43 (1H, dd), 4.10 (1H, dd), 7.56 (1H, t), 7.68 (1H, dt), 7.79 (1H, dt), 7.87 (1H, d), 7.93 (1H, s), 8.18 (2H, m), 8.54 (1H, s)。 實例 153( 對映異構體 1) 和實例 154( 對映異構體 2)N-(7-(1H-吡唑-4-基)-5H-吡咯並[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-胺基-2-(3-甲氧基苯基)丙醯胺的製備 步驟1：通過製備型手性HPLC來對外消旋體醯胺C-153a(220 mg，0.46 mmol，1當量)進行純化，條件如下(柱：CHIRAL ART Cellulose-SB, 4.6*100 mm, 3 μm；流動相A：Hex(0.2% DEA):(EtOH:DCM = 1:1，v/v)= 70:30(v/v)；流速：1毫升/分鐘；梯度：0% B至0% B；進樣體積：5ul mL)，以得到呈黃色固體的對映異構體C-153c(64.5 mg，29.32%)，SFC: t R= 2.862分鐘, ee = 100%，和呈黃色固體的對映異構體C-153b(74.3 mg，33.77%)，SFC: t R= 3.979分鐘, ee = 97.83%。 步驟2：在室溫下，在氮氣氣氛下，將對映異構體C-153c(55.0 mg，0.12 mmol，1當量)和TFA(1.0 mL)於DCM(4.0 mL)中的溶液攪拌30分鐘。反應後，在0℃下，將所得混合物真空濃縮，並用NH 3水溶液(0.5 mL)鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對所得混合物進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：10% B至33% B，7分鐘；波長：220 nm)，以得到呈黃色固體的實例154的對映異構體2(15.8 mg，36.35%)。LCMS m/z (ESI), [M+H] += 378.15。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 3.05 (1H, dd), 3.45 (1H, dd), 3.82 (3H, s), 4.05 (1H, dd), 6.89 (1H, m), 7.06 (2H, dt), 7.31 (1H, t), 7.95 (1H, s), 8.15 (2H, s), 8.54 (1H, s)。SFC: t R= 2.027分鐘, ee = 51.30%。 在室溫下，在氮氣氣氛下，將對映異構體C-153b(55.0 mg，0.12 mmol，1當量)和TFA(1.0 mL)於DCM(4.0 mL)中的溶液攪拌30分鐘。將所得混合物真空濃縮，並用NH 3水溶液(0.5 mL)鹼化至pH 9。通過製備型HPLC來對所得混合物進行純化，條件如下(柱：XBridge Prep OBD 30*150 mm, 5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，流動相B：ACN；流速：60毫升/分鐘；梯度：10% B至33% B，7分鐘；波長：220 nm；t R= 6.55分鐘)，以得到呈黃色固體的實例153的對映異構體1(19.2 mg，44.17%)。LCMS: m/z (ESI), [M+H] += 378.15。 1H NMR (CD 3OD, 400 MHz) δ 2.95 (1H, dd), 3.05 (1H, dd), 3.26 (1H, dd), 3.45 (1H, dd), 3.70 (2H, s), 3.81 (5H, d), 4.05 (1H, dd), 6.89 (3H, m), 7.05 (2H, m), 7.28 (2H, m), 7.95 (1H, s), 8.18 (2H, d), 8.55 (1H, s)。SFC: t R= 2.143分鐘, ee = 54.82%。 實例 155(2S)-3-胺基-2-苯基-N-[7-(1H-吡唑-4-基)-5H-吡咯並[3,2-d]嘧啶-4-基]丙醯胺的製備 步驟1：在110℃下，將7-溴-4-氯-5H-吡咯並[3,2-d]嘧啶C-155a(204 mg，877.55 μmol)和25%-28% NH 3水溶液(900.00 mg，25.68 mmol，1.00 mL)於二噁烷(3 mL)中的溶液密封並加熱44小時。將反應物減壓蒸發。通過C18快速色譜柱並用乙腈/水0至10%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分凍乾，以得到呈棕色固體的7-溴-5H-吡咯並[3,2-d]嘧啶-4-胺C-155b(120 mg，64%產率)。LCMS: t R= 0.75分鐘，3分鐘色譜(5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z =212.9 [M+H] +。 步驟2：含(2S)-3-(三級丁氧基羰基胺基)-2-苯基-丙酸(224.16 mg，844.93 μmol)、7-溴-5H-吡咯並[3,2-d]嘧啶-4-胺C-155b(120 mg，563.29 μmol)、N-乙基-N-異丙基-丙-2-胺(218.40 mg，1.69 mmol，294.34 μL)的NMP(2.95 mL)。將反應混合物攪拌並在0℃下用冰/水浴冷卻。然後，向反應物中加入HATU(278.43 mg，732.28 μmol)。在此溫度下，將所得混合物攪拌2小時。通過C18快速色譜柱並用MeCN/水0%至80%梯度洗脫來對反應溶液進行純化。將純級分凍乾，以得到呈棕色固體的N-[(2S)-3-[(7-溴-5H-吡咯並[3,2-d]嘧啶-4-基)胺基]-3-氧代-2-苯基-丙基]胺基甲酸三級丁酯C-155c(45 mg，17%產率)。LCMS: t R= 1.65分鐘，3分鐘色譜(5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z =460.1 [M+H] +。 步驟3：在90℃下，在氮氣下，將含N-[(2S)-3-[(7-溴-5H-吡咯並[3,2-d]嘧啶-4-基)胺基]-3-氧代-2-苯基-丙基]胺基甲酸三級丁酯C-155c(45 mg，97.76 μmol)、(1-(三級丁氧基羰基)-1H-吡唑-4-基)硼酸(31.09 mg，146.64 μmol)、K 2CO 3(40.53 mg，293.27 μmol)和Pd(dppf)Cl 2(7.98 mg，9.78 μmol)的二噁烷(3.00 mL)和水(0.50 mL)攪拌並加熱16小時。減壓去除溶劑。通過矽膠快速色譜柱並用甲醇/DCM 0至10%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分蒸乾，以得到呈棕色固體的N-[(2S)-3-氧代-2-苯基-3-[[7-(1H-吡唑-4-基)-5H-吡咯並[3,2-d]嘧啶-4-基]胺基]丙基]胺基甲酸三級丁酯C-155d(10 mg，23%產率)。LCMS: t R= 1.58分鐘，3分鐘色譜(5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z =448.3 [M+H] +。 步驟4：在0℃下，將N-[(2S)-3-氧代-2-苯基-3-[[7-(1H-吡唑-4-基)-5H-吡咯並[3,2-d]嘧啶-4-基]胺基]丙基]胺基甲酸三級丁酯C-155d(10 mg，22.35 μmol)於DCM(0.50 mL)中的溶液在冰/水浴中冷卻，然後向反應物中逐滴加入三氟乙酸(127.40 mg，1.12 mmol，86.08 μL)。將所得混合物攪拌2小時。將反應混合物減壓濃縮。通過C18快速色譜法並用MeCN/水(6 mmol/L NH 4HCO 3)0%至50%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分凍乾，以得到呈白色固體的(2S)-3-胺基-2-苯基-N-[7-(1H-吡唑-4-基)-5H-吡咯並[3,2-d]嘧啶-4-基]丙醯胺實例155(2.00 mg，26%產率)。LCMS: t R= 0.83分鐘，3分鐘色譜(5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z =348.6 [M+H] +。 1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.85 (s, 1H), 11.06 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.18 (s, 2H), 7.97 (s, 1H), 7.42 (d, J= 7.3 Hz, 2H), 7.35 (t, J= 7.5 Hz, 2H), 7.27 (t, J= 7.3 Hz, 1H), 4.07 (dd, J= 9.3, 5.1 Hz, 1H), 3.30-3.27 (m, 1H), 2.88 (dd, J= 12.5, 5.0 Hz, 1H)。 實例 156(R)-N-(2-胺基-1-苯基乙基)-3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-7-甲醯胺的製備 步驟1：將酸I-135a(48.20 mg，199.95 μmol)、N-[(2R)-2-胺基-2-苯基-乙基]胺基甲酸三級丁酯(45.00 mg，190.43 μmol)和DIPEA(57.81 mg，571.29 μmol，79.63 μL)於NMP(2.00 mL)中的混合物攪拌並在0℃下用冰/水浴冷卻。然後，在此溫度下，一次性加入HATU(86.89 mg，228.51 μmol)。攪拌所得混合物並將其緩慢溫熱至室溫，持續2小時。通過C18快速色譜柱並用乙腈/水0至50%梯度洗脫來對反應溶液進行純化。將純級分蒸乾，以得到呈黃色固體的N-[(2R)-2-[(3-溴-1H-吲唑-7-羰基)胺基]-2-苯基-乙基]胺基甲酸三級丁酯C-156a(60 mg，69%產率)。LCMS: tR = 1.91分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 459.0 [M+H] +。 步驟2：在80℃下，在氮氣下，將含N-[(2R)-2-[(3-溴-1H-吲唑-7-羰基)胺基]-2-苯基-乙基]胺基甲酸三級丁酯C-156a(60 mg，130.62 μmol)、(1-(三級丁氧基羰基)-1H-吡唑-4-基)硼酸(33.23 mg，156.75 μmol)、碳酸鉀(54.16 mg，391.87 μmol，23.65 μL)和PdCl2dppf(10.67 mg，13.06 μmol)的二噁烷(1.50 mL)和水(0.30 mL)攪拌並加熱16小時。將反應溶液減壓蒸發。在氮氣下，通過矽膠快速色譜柱並用10%至50%梯度洗脫來對殘餘物進行純化，以得到呈棕色固體的N-[(2R)-2-苯基-2-[[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲唑-7-羰基]胺基]乙基]胺基甲酸三級丁酯C-156b(50 mg，86%產率)。LCMS: tR = 1.61分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(0.02% TFA)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 447.3 [M+H] +。 步驟3：將N-[(2R)-2-苯基-2-[[3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲唑-7-羰基]胺基]乙基]胺基甲酸三級丁酯C-156b(50 mg，111.98 μmol)於DCM(2.10 mL)中的溶液攪拌並在0℃下用冰/水浴冷卻。然後，向反應物中逐滴加入含4 M HCl(102.07 mg，2.80 mmol)的二噁烷(0.70 mL)。在此溫度下，將所得混合物攪拌2小時。將反應混合物減壓濃縮。通過C18快速色譜柱並用乙腈/水(6 mmol/L NH 4HCO 3)0%至60%梯度洗脫來對殘餘物進行純化。將純級分凍乾，以得到呈白色固體的N-[(1R)-2-胺基-1-苯基-乙基]-3-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲唑-7-甲醯胺實例156(31 mg，90%產率)。LCMS: t R= 1.16分鐘，3分鐘色譜(3分鐘-5-95% MeCN/水(6 mmol/L NH 4HCO 3)，Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)，MS (ESI) m/z = 347.2 [M+H] +。 1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6) δ 13.16 (s, 1H), 8.99 (s, 1H), 8.25 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 8.10 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.33 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.25 (dt, J = 11.9, 7.5 Hz, 2H), 5.05 (s, 1H), 2.94 (ddd, J = 18.5, 13.1, 7.1 Hz, 2H)。 生物學實例本文所公開的示例性化合物已經在以下一個或多個生物測定中表徵。 生物學實例 1 ： IC 50 測定重組ROCK1和ROCK2購自賽默飛世爾(Thermo Fisher)，目錄號為PV3691和PR71168。使用Lance Ultra激酶測定評估化合物對這些酶的抑制效力。簡而言之，在室溫下，在存在或不存在化合物的情況下，將重組激酶預孵育30分鐘。通過加入ATP(Km)和底物肽來引發反應，所述底物肽可以在反應中被激酶磷酸化。孵育1小時後，通過加入含有EDTA的檢測試劑混合物來終止反應。以320 nm的激發波長，分別在615 nm和665 nm處測量螢光。665 nm /615 nm的計算信號比與激酶活性成正比。使用四參數邏輯計算對相應激酶產生50%抑制的化合物濃度(IC 50)。 生物學實例 2 ：細胞 PD 測定將PASMC(人肺動脈平滑肌細胞)在平滑肌細胞生長培養基(Promocell#C-22162)中生長。將細胞以每孔3×105個細胞重懸於平滑肌細胞生長培養基(Promocell#C-22162)的6孔板中，並且孵育化合物濃度範圍：(10000/1111/333/ 111/37/12.3/4.1/0.41/0 nM)30分鐘。 然後，將細胞置於冰上，用冰冷的PBS洗滌。用2 X SDS製備細胞裂解物。通過SDS-PAGE分離蛋白質2小時，將蛋白質從凝膠轉移到膜上90分鐘，用5%牛奶封閉膜1小時，並在第一抗體中於4℃下孵育過夜，在室溫下，將膜在用封閉緩衝液(1:2000)稀釋的HRP綴合第二抗體中孵育1小時。使用Amersham ECL加蛋白質印跡檢測系統(LAS4000)進行檢測。通過SDS PAGE分析經純化的產物，並通過Multi-Gauge V3.0軟體的灰度掃描計算靶蛋白質的量。 生物學實例 3 ：基於細胞的磷脂沉積測定將HepG2細胞以5000個細胞/90 μL/孔分配到膠原I包被的96孔黑壁/透明底測定板中。 將測定板在37℃下孵育4小時，以使細胞附著在孔上，然後加入30 μL 1:250 LipidTOX Red染料(1:1000最終濃度，然後加入120 nL測試化合物達到最終濃度(50 uM起始濃度，3倍稀釋，8劑量，一式兩份)。20 μM胺碘酮和DMSO(0.1%最終濃度)用於最大和最小對照。 然後，將測定板在37℃下孵育24小時，將120 μL含有含8 μg/ml Hoechst 33342(最終濃度為4 μg/mL)的DPBS的8%多聚甲醛(最終濃度為4%)固定溶液加入每個孔中。在室溫下孵育25分鐘後，用DPBS洗滌測定板。成像前，將測定板密封並在4℃下儲存。 螢光強度(針對LipidTOX Red，595 nm激發，615 nm發射；針對Hoechst 33342，352 nm激發，461 nm發射)使用具有10× Fluor物鏡的高內涵篩選系統(Operetta，珀金埃爾默(PerkinElmer))測量。在每個孔中獲取4個視野的圖像，並用軟體進行分析。將平均強度進行Prism，並計算EC 50。本公開提供了作為強效的ROCK1和ROCK2抑制劑而不易於誘導磷脂沉積的化合物。 以下表2-4示出了本公開的一些示例性化合物的結果。 表 2 ： ROCK1 和 ROCK2 抑制的 IC 50
實例 ROCK1 IC 50(nM) ROCK2 IC 50(nM)
1 0.59 0.27
3 0.33 0.17
5 8.0 4.3
6 442 247
7 34 16
8 20 11
9 0.24 0.14
10 1.6 0.63
14 2.2 1.1
15 1.4 0.74
16 0.84 0.37
17 31 15
18 0.30 0.14
19 2.2 0.92
20 2.8 1.3
21 125 70
22 1.1 0.88
23 0.19 0.13
24 4.0 3.0
26 1.4 0.96
27 87 66
29 59 23
30 3.2 1.1
31 1.2 0.48
32 0.55 0.24
33 97 50
35 1.8 0.76
36 321 174
37 0.71 0.43
38 0.44 0.26
39 175 116
40 0.33 0.18
41 5.4 3.5
42 0.18 0.10
43 1.3 0.66
44 111 70
45 0.53 0.27
46 4.0 2.3
47 201 121
48 1.6 0.84
49 0.86 0.65
50 0.32 0.22
51 33 22
52 0.93 0.59
53 5.8 4.1
54 0.18 0.09
55 2.9 1.9
56 1194 1098
57 2.7 1.6
58 136 48
59 2.7 0.83
60 2.3 0.70
61 26 8.9
62 68 31
63 0.43 0.24
64 0.37 0.19
65 4.4 2.5
66 604 310
67 2.6 1.6
68 4.0 1.5
69 21 9.2
70 2.2 0.6
71 227 64
72 173 67
73 82 20
74 2.0 0.62
75 204 71
76 14 7.9
77 84 32
78 34 16
79 2.9 1.7
80 0.39 0.18
81 1.8 0.91
82 12 3.3
83 7.3 3.1
84 1.3 0.96
85 0.81 0.52
86 2.7 0.98
87 0.29 0.18
88 17 9.3
89 1.2 0.66
90 5.3 0.91
91 1.2 0.75
92 16 6.0
93 20 13
94 6.5 3.0
95 3.7 2.3
96 7.3 4.0
97 122 28
98 9.2 4.3
99 3.2 1.1
101 1.6 0.81
102 1.3 0.56
103 1.4 0.53
104 2.0 0.90
105 0.42 0.22
107 6.0 3.7
108 98 51
109 15 11
110 6.6 3.3
111 297 167
112 1.3 0.47
113 110 43
121 75 42
122 11 8.9
126 6.3 3.0
127 2.7 0.99
128 111 61
129 1.7 1.7
131 22 12
132 0.76 0.39
133 44 31
134 2.6 0.88
135 4.5 1.2
136 0.62 0.24
137 149 65
138 73 23
139 5.5 3.1
140 2.8 0.86
141 331 163
142 113 37
143 397 315
144 60 32
145 46 20
146 18 4.9
147 0.88 0.40
148 21 5.7
151 204 71
155 0.96 0.63
表 3 ：細胞藥效學測定資料
實例 PASMC中的pMLC2 IC 50(nM) PASMC中的pMYPT1 IC 50(nM)
奈舒地爾-M1 14 22
3 46 99
7 13 -
9 15 2.2
10 8.1 10
18 4.2 5.6
20 38 41
22 13 1.5
23 3.5 4.3
26 85 153
31 31 -
32 42 62
37 8 6.2
38 8.2 13
42 3 2.8
43 102 18
45 29 11
52 12 -
59 61 155
105 95 -
135 1.3 26
136 5.1 1.9
154 8.3 -
表 4 ：基於細胞的磷脂沉積測定資料
實例 EC 50(uM) 實例 EC 50(uM)
胺碘酮 1.37 32 ＞200
奈舒地爾 0.89 38 6.23
3 ＞200 42 ＞200
10 ＞66.6 49 ＞200
18 10.9 59 ＞66.6
19 ＞50 60 ＞50
20 ＞200 74 ＞200
26 ＞200 91 24.4
31 ＞50 105 23.6
上述描述僅被視為本公開的原理的說明。此外，由於許多修改和變化對於本領域的技術人員來說將顯而易見，所以並不期望將本發明限於如上文所述的所示確切構造和過程。因此，所有合適的修改和等效方案可以被視為落入由所附申請專利範圍限定的本發明的範圍內。

Claims (53)

  1. 一種式I的化合物或其藥學上可接受的鹽： (I)， 其中： R 1和R 2各自獨立地選自由以下組成的群組：氫、羥基、鹵素、氰基、胺基、烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基和雜炔基，其中所述烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基和雜炔基各自任選地被獨立地選自以下的一個或多個基團取代：羥基、鹵素、氰基或胺基； X、W、Z和U各自獨立地是N或C(R 3)； R 3選自由以下組成的群組：氫、羥基、鹵素、氰基、胺基、烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基和雜炔基，其中所述烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基和雜炔基各自任選地被獨立地選自以下的一個或多個基團取代：羥基、鹵素、氰基或胺基； E是-N(R 4)C(=O)-、-C(=O)N(R 4)-、-N(R 4)SO 2-或 -SO 2N(R 4)-； R 4選自由以下組成的群組：氫、烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基和雜炔基； Y是-Y 1-Y 2-(Y 3) n，其中 Y 1不存在或是-C(R 5) 2-， 每個R 5獨立地選自由以下組成的群組：氫、-N(R a) 2、烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基、雜炔基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基和-烷基-雜環基，其中所述烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基、雜炔基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基和-烷基-雜環基任選地被一個或多個R 6取代， 每個R 6獨立地選自由以下組成的群組：羥基、鹵素、氰基、胺基、烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基、雜炔基和-烷基-N(R a) 2； 每個R a獨立地選自氫或烷基； Y 2選自-(CH 2) p-環烷基-*、-(CH 2) p-雜環基-*、-(CH 2) p-芳基-*或-(CH 2) p-雜芳基-*，它們各自任選地被獨立地選自以下的一個或多個基團取代：羥基、鹵素、氰基、胺基、烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基或雜炔基，並且其中p是0、1或2，並且Y 2的*端與Y 3相連； Y 3不存在或是-Y 31-Y 32-Y 33；其中 Y 31選自不存在、烷基、烯基或炔基； Y 32選自不存在、-O-#、-OC(=O)-#、-C(=O)O-#、 -P(=O)(R b)-#、-OC(=O)N(R b)-#、-N(R b)C(=O)-#或 -C(=O)N(R b)-#，其中每個R b獨立地選自氫或烷基，並且Y 32的#端與Y 33連接； Y 33選自由以下組成的群組：氫、羥基、氰基、鹵素、-N(R c) 2、烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基、雜炔基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，其中所述烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基、雜炔基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基任選地被一個或多個R 7取代，其中每個R 7獨立地選自鹵素、羥基、胺基、氰基、硝基氧基、烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基、雜炔基或鹵代烷基，並且每個R c獨立地選自氫或烷基； 並且 n是1至5的整數。
  2. 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R 1和R 2各自獨立地是氫、鹵素、氫、氰基、胺基或任選地被一個或多個鹵素取代的烷基。
  3. 如請求項2所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R 1是氫或烷基，並且R 2是氫、鹵素或烷基。
  4. 如請求項3所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R 1和R 2都是氫。
  5. 如請求項3所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R 1和R 2都是烷基。
  6. 如請求項5所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R 1是甲基，並且R 2是甲基。
  7. 如請求項3所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R 1是氫，並且R 2是鹵素。
  8. 如請求項7所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R 1是氫，並且R 2是氟。
  9. 如請求項3所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R 1是氫，並且R 2是烷基。
  10. 如請求項9所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R 1是氫，並且R 2是甲基。
  11. 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中X、W、U和Z是C(R 3)。
  12. 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中X和U是C(R 3)，W和Z是N。
  13. 如請求項10至12中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R 3是氫。
  14. 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中E是-N(R 4)C(=O)-或-C(=O)N(R 4)-。
  15. 如請求項14所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R 4是氫。
  16. 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中Y 1不存在。
  17. 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中Y 1是-C(R 5) 2-。
  18. 如請求項17所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中一個R 5是氫，另一個R 5選自-N(R a) 2、烷基、環烷基、雜環基或-烷基-雜環基，其中所述烷基、環烷基、雜環基和-烷基-雜環基任選地被一個或多個R 6取代。
  19. 如請求項17所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中一個R 5是烷基，另一個R 5選自-N(R a) 2、烷基、環烷基或雜環基，其中所述烷基、環烷基和雜環基任選地被一個或多個R 6取代。
  20. 如請求項18或19所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R 6選自胺基、烷基或-烷基-N(R a) 2。
  21. 如請求項17至20中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中Y 1選自由以下組成的群組： 、 、 、 、 、 、 、 和 。
  22. 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中Y 2是-(CH 2) p-環烷基-*。
  23. 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中Y 2是-(CH 2) p-(C 3-10環烷基)-*，並且p是0或1。
  24. 如請求項23所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中Y 2是環戊基或環己基。
  25. 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中Y 2是-(CH 2) p-雜環基-*。
  26. 如請求項25所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中Y 2是-(CH 2) p-(5至12元雜環基)-*，並且p是0或1。
  27. 如請求項26所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中Y 2是四氫呋喃基、吡咯烷基或四氫吡喃基。
  28. 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中Y 2是-(CH 2) p-芳基-*。
  29. 如請求項28所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中Y 2是-(CH 2) p-(C 5-12芳基)-*，並且p是0或1。
  30. 如請求項29所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中Y 2是苯基或-CH 2-苯基-*。
  31. 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中Y 2是-(CH 2) p-雜芳基-*。
  32. 如請求項31所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中Y 2是-(CH 2) p-(5至12元雜芳基)-*，並且p是0或1。
  33. 如請求項32所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中Y 2是吡啶基、四氫異喹啉基、-CH 2-咪唑基-*或-CH 2-吲哚基-*。
  34. 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中Y 31不存在或是烷基。
  35. 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中Y 31不存在。
  36. 如請求項35所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中Y 32選自不存在、-O-#、-C(=O)O-#、-P(=O)(R b)-#、-N(R b)C(=O)-#或-C(=O)N(R b)-#。
  37. 如請求項35或36所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中Y 33選自氫、羥基、氰基、鹵素、-N(R c) 2、烷基或雜烷基，其中所述烷基和雜烷基任選地被一個或多個R 7取代。
  38. 如請求項37所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中Y 33選自氫、羥基、氰基、鹵素、-NH 2、甲基、-CH 2CH 2OCH 3。
  39. 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中Y 31是烷基。
  40. 如請求項38所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中Y 32選自不存在、-O-#、-OC(=O)-#、-OC(=O)N(R b)-#或-N(R b)C(=O)-#。
  41. 如請求項38或39所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中Y 33選自-N(R c) 2、烷基或芳基，其中所述烷基和芳基任選地被一個或多個R 7取代。
  42. 如請求項41所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中每個R 7獨立地選自鹵素、羥基、胺基、氰基、硝基氧基或烷基。
  43. 如請求項42所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中Y 33選自-NH 2、-N(CH 3) 2、甲基、二甲基苯基或硝基氧基戊基。
  44. 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中n是1或2。
  45. 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中所述化合物選自由以下組成的群組： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 和 。
  46. 一種藥物組合物，其包含如請求項1至45中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽和藥學上可接受的載體。
  47. 如請求項46所述的藥物組合物，其被調配成滴眼劑。
  48. 一種在有需要的受試者中抑制ROCK活性的方法，其包括向所述受試者施用有效量的如請求項1至45中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽或如請求項46或47所述的藥物組合物。
  49. 一種在有需要的受試者中治療ROCK相關病症的方法，其包括向所述受試者施用有效量的如請求項1至45中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽或如請求項46或47所述的藥物組合物。
  50. 如請求項49所述的方法，其中所述ROCK相關病症是眼部疾病，包括青光眼和視網膜疾病，如濕性AMD、乾性AMD和DME；骨病症，包括骨質疏鬆症；血管疾病，包括腦血管痙攣、冠狀血管痙攣、高血壓、肺動脈高血壓、猝死綜合症、心絞痛、心肌梗死、再狹窄、中風、高血壓性血管疾病、心力衰竭、心臟移植物血管病變、靜脈移植物疾病；肺病，包括慢性阻塞性肺病(COPD)和哮喘；神經病症，包括脊髓損傷、阿爾茨海默氏病、多發性硬化、抑鬱症、注意力不足過動症和神經性疼痛；新生血管性病症和癌症；肥胖；和勃起功能障礙。
  51. 如請求項50所述的方法，其中所述ROCK相關病症是青光眼。
  52. 如請求項49至51中任一項所述的方法，其中所述化合物與一種或多種另外的治療劑同時、分別或依次施用。
  53. 如請求項52所述的方法，其中所述一種或多種另外的治療劑選自β阻斷劑、α-激動劑、碳酸酐酶抑制劑、前列腺素樣化合物、縮瞳劑或膽鹼能劑或腎上腺素化合物。
TW112112551A 2022-05-26 2023-03-31 ＲＯＣＫ（Ｒｈｏ相關激酶）抑制劑及其用途 TW202402269A (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2022095127 2022-05-26
WOPCT/CN2022/095127 2022-05-26

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TW202402269A true TW202402269A (zh) 2024-01-16

Family

ID=88918506

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW112112551A TW202402269A (zh) 2022-05-26 2023-03-31 ＲＯＣＫ（Ｒｈｏ相關激酶）抑制劑及其用途

Country Status (11)

Country Link
US (1) US20250346616A1 (zh)
EP (1) EP4532484A1 (zh)
JP (1) JP2025518098A (zh)
KR (1) KR20250019074A (zh)
CN (1) CN119173509A (zh)
AR (1) AR129469A1 (zh)
AU (1) AU2023277513A1 (zh)
CA (1) CA3257493A1 (zh)
MX (1) MX2024014486A (zh)
TW (1) TW202402269A (zh)
WO (1) WO2023226965A1 (zh)

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI627173B (zh) * 2013-09-26 2018-06-21 比利時商健生藥品公司 作為ＮＩＫ抑制劑的新穎３－（１Ｈ－吡唑－４－基）－１Ｈ－吡咯并［２，３－ｃ］吡啶衍生物
US9902702B2 (en) * 2014-07-15 2018-02-27 Bristol-Myers Squibb Company Spirocycloheptanes as inhibitors of rock
WO2016062791A1 (en) * 2014-10-23 2016-04-28 Janssen Pharmaceutica Nv New pyrazole derivatives as nik inhibitors
KR20220102622A (ko) * 2019-11-15 2022-07-20 우한 엘엘 사이언스 앤드 테크놀로지 디벨롭먼트 컴퍼니, 리미티드 Rock 억제제 및 이의 제조 방법과 용도

Also Published As

Publication number Publication date
KR20250019074A (ko) 2025-02-07
WO2023226965A1 (en) 2023-11-30
MX2024014486A (es) 2025-01-09
JP2025518098A (ja) 2025-06-12
CN119173509A (zh) 2024-12-20
CA3257493A1 (en) 2023-11-30
EP4532484A1 (en) 2025-04-09
AR129469A1 (es) 2024-08-28
AU2023277513A1 (en) 2024-11-07
US20250346616A1 (en) 2025-11-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN107295798B (zh) 苯并氮杂*二甲酰胺化合物
CN105814055B (zh) 作为tnf活性调节剂的稠合咪唑和吡唑衍生物
CN101687827B (zh) 环状基团取代的氨基二氢噻嗪衍生物
WO2023284537A1 (en) Kras g12d inhibitors and uses thereof
US20100216798A1 (en) Fused heterocycles as lck inhibitors
JP3397320B2 (ja) 縮合イミダゾリウム誘導体
TW202227397A (zh) 雙環的－雜環衍生物及相關用途
JP2018525379A (ja) Ｔｎｆアルファの修飾因子として有用なヘテロ環化合物
CN108137542B (zh) 用作溴结构域抑制剂的吡啶酮二甲酰胺
WO2025096957A1 (en) Ras-pi3k inhibitors and uses thereof
JP2025532626A (ja) 複素環式ｓｉｋ阻害薬
UA128087C2 (uk) Заміщені алкініленові сполуки як протипухлинні засоби
TW202402269A (zh) ＲＯＣＫ（Ｒｈｏ相關激酶）抑制劑及其用途
CN116529252B (zh) 用于持续释放治疗剂的前药及其用途
JP2025530793A (ja) Ｅｇｆｒ阻害剤及びその使用
HK40117136A (zh) Rock抑制剂及其用途
WO2025007743A1 (en) Sting agonists and uses thereof
HK40116585A (zh) Sarm1调节剂、其制备和用途
HK40119559A (zh) 用於治疗与lpa受体活性相关的病症的化合物和组合物
TW202334097A (zh) 用於治療癌症之苯并【ｈ】喹唑啉－４－胺衍生物
JP2026505122A (ja) 新規化合物およびこれを含む薬学組成物
CN119212997A (zh) 作为造血祖细胞激酶1（hpk1）抑制剂的吲唑及其使用方法
HK40122844A (zh) 用於治疗疾病的双环化合物及其用途
HK40119202A (zh) 杂环类sik抑制剂
HK1245766B (zh) 苯并氮杂䓬二甲酰胺化合物