[go: up one dir, main page]

TW202220987A - 經取代雜環化合物及其治療用途 - Google Patents

經取代雜環化合物及其治療用途 Download PDF

Info

Publication number
TW202220987A
TW202220987A TW110127548A TW110127548A TW202220987A TW 202220987 A TW202220987 A TW 202220987A TW 110127548 A TW110127548 A TW 110127548A TW 110127548 A TW110127548 A TW 110127548A TW 202220987 A TW202220987 A TW 202220987A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
pyridin
pyrrolo
butanamide
fluorophenyl
difluoro
Prior art date
Application number
TW110127548A
Other languages
English (en)
Inventor
沃克 舒爾
安妮 曼婕兒
阿爾瓦雷斯 德 萊莫斯 艾德拉迪 卡拉 法里亞
思凡 克莉絲汀
爾芙 巴馬爾
羅曼 西爾格
克莉絲提安 樂奇奈
傑瑞米 賽維亞 Ｇ 莫迪爾
史塔芬 卡福斯
史蒂芬 柯賽羅
卡塔日娜 漢丁
阿梅爾 麥德斯
蘿拉 佛斯特
米娜 席哈
馬克斯 柏格
拉傑莎 魯派莫爾
飛利普 立爾諾
道格拉斯 奧西
大衛 麥金尼
克里斯托弗 布雷澤津卡
Original Assignee
德商拜耳廠股份有限公司
美商博德研究所有限公司
美商達納 法伯癌症協會
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 德商拜耳廠股份有限公司, 美商博德研究所有限公司, 美商達納 法伯癌症協會 filed Critical 德商拜耳廠股份有限公司
Publication of TW202220987A publication Critical patent/TW202220987A/zh

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F7/00—Compounds containing elements of Groups 4 or 14 of the Periodic Table
    • C07F7/02—Silicon compounds
    • C07F7/08—Compounds having one or more C—Si linkages
    • C07F7/0803—Compounds with Si-C or Si-Si linkages
    • C07F7/081—Compounds with Si-C or Si-Si linkages comprising at least one atom selected from the elements N, O, halogen, S, Se or Te
    • C07F7/0812—Compounds with Si-C or Si-Si linkages comprising at least one atom selected from the elements N, O, halogen, S, Se or Te comprising a heterocyclic ring

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

本發明揭示一種式(I)化合物

Description

經取代雜環化合物及其治療用途
本發明係關於經取代之雜環化合物、其製造方法及用途。
癌細胞之一種最基本特徵為其維持慢性增殖之能力，而在正常組織中進入細胞分裂週期及進展至細胞分裂週期受嚴格控制以確保細胞數目恆定及維持正常組織功能。喪失增殖控制被強調為癌症之六個標誌之一[Hanahan D及Weinberg RA, Cell 100, 57, 2000；Hanahan D及Weinberg RA, Cell 144, 646, 2011]。
酪蛋白激酶1 (CSNK1)家族之成員高度保守且表現於在酵母菌至人類範圍內之許多真核生物中。哺乳動物CSNK1同功異型物(α、β、γ、δ、ε)及其剪接變異體參與不同細胞過程，包括膜遷移、晝夜性律動、細胞週期進程、染色體分離、細胞凋亡及細胞分化。CSNK1表現及活性之突變及失調與增生性疾病有關，諸如癌症(Knippschild, Onkologie 2005;28:508-514)。
CSNK1受質為酶、轉錄因子、剪接因子、細胞骨架蛋白、受體、膜相關蛋白及細胞信號傳導蛋白。因為在大部分細胞蛋白質上發現CSNK1之識別模體，迄今為止已報導超過140個活體外及活體內受質(Knippschild等人，Front Oncol. 2014年5月19日；4:96)。若干已知受質，尤其CSNK1α及δ同功異型物之受質，涉及如下致癌信號傳導路徑：Wnt/β-連環蛋白(β-連環蛋白；散落蛋白(DVL)；腺瘤性結腸息肉病(APC)；細胞質3經活化T細胞核因子(NFATC3))、p53 (p53；p53/E3泛蛋白接合酶Mdm2 (MDM2))、PI3K/AKT (叉頭樣蛋白O1 (Foxo1))、死亡受體傳導(Fas相關死亡域蛋白(FADD)；及BH3相互作用域死亡促效劑(BID)) (Schittek及Sinnberg Molecular Cancer 2014, 13:231)。CSNK1家族成員之顯著特徵係其使ATP受質磷酸化之排他性需要及其與其他輔因子之獨立性。
CSNK1α在細胞分裂期間及在DNA修復機制中起有絲分裂紡錘體形成作用，且參與RNA代謝。對CSNK1α具有特異性之抗體阻斷小鼠卵母細胞在M期期間之細胞週期進程，由此指示此等細胞中之適當細胞週期進程需要CSNK1α。CSNK1α可見於中心體、微管星體及著絲點。類似地，CSNK1α調節細胞凋亡信號傳導路徑，然而似乎為細胞特異性差異。已展示CSNK1α在外來細胞凋亡路徑中具有抗細胞凋亡功能。其抑制增加HeLa細胞中之Fas誘導之細胞凋亡，而CSNK1α之過度表現延遲由BID之磷酸化引起之細胞死亡，防止BID之凋亡蛋白酶8依賴性裂解。另外，CSNK1α藉由修飾死亡誘導性信號傳導複合物(DISC)處之TNF受體或FADD而抑制TRAIL誘導之細胞凋亡。因此，CSNK1α之下調引起TRAIL誘導之細胞死亡增強。同樣，CSNK1α亦藉由與類視黃素X受體(RXR)相互作用而促進細胞存活。CSNK1α之下調增強RXR促效劑之細胞凋亡作用(Schittek and Sinnberg, Molecular Cancer 2014, 13:231)。
減弱或下調小鼠腸上皮中、人類結腸癌中或白血病細胞中之CSNK1α觸發p53活化。類似地，一項研究顯示CSNK1α與MDM2穩定結合，刺激MDM2-p53結合，且與MDM2協作以使p53不活化。此等資料表明CSNK1α活性之抑制增加p53活性。由於MDM2磷酸化為與p53相互作用所需的，所以CSNK1α之減弱藉由降低MDM2對p53之抑制作用而誘導p53轉錄活性(Schittek及Sinnberg, Molecular Cancer 2014, 13:231)。
核糖體蛋白S6 (RPS6)為介導轉譯起始之40S核糖體次單位之關鍵組分。RPS6活性藉由CSNK1α之磷酸化調節，CSNK1α使絲胺酸殘基247磷酸化，增強上游位點之磷酸化(Hutchinson等人，JBC, 2011, 286, 10, 8688)。CSNK1α抑制引起p53之RPS6磷酸化及活化顯著降低，導致實體腫瘤及AML細胞之選擇性消除。p53wt%結腸及肺癌中以及AML中之CSNK1α之藥理學抑制誘導p53積聚以及細胞凋亡。CSNK1α之靶向提供對AML中p53之治療活化的潛在途徑，AML為一種主要與非突變p53相關的病症(Jaras等人，J. Exp. Med. 2014, 211, 4, 605)。
CSNK1α為ABC DLBCL亞型存活所需之異常NF-kB活動的基本參與者。CSNK1α減弱對ABC DLBCL細胞具有特異性殺傷性(Bidere, Nature, 458, 2009年3月5日)。CSNK1α之藥理學抑制將由於阻斷CARD11-Bcl-10-MALT1複合物(CBM複合物)而特異性殺滅ABC-DLBCL。
因此，CSNK1α之藥理學抑制代表一種用於治療增生性病症之新方法，該等增生性病症包括實體腫瘤，諸如癌瘤、肉瘤、白血病及淋巴惡性疾病或其他與不受控細胞增殖相關之病症。
尤其是由人類身體或動物體之不同器官組織中之不受控增殖性細胞過程表現之癌症疾病仍不被視為受控疾病，由於此事實，因此雖然不存在充足藥物療法，但強烈需要提供其他新穎治療上適用藥物，較佳係抑制新目標且提供新治療選項之藥物。
因此，酪蛋白激酶1α及/或1δ之抑制劑表示作為單一藥劑療法之有價值的化合物，在一些情況下，其可作為單一藥劑或與其他藥物組合補充其他治療選項。
WO 2016/120196揭示4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮衍生物，其可適用作Bub1激酶抑制劑。
WO 2008/132434係關於一種預防及/或控制植物及/或植物繁殖材料中之真菌感染的方法，其包含將殺真菌有效量之化合物施用於植物或植物繁殖材料，且係關於此類吡咯并吡啶化合物。
本發明提供抑制酪蛋白激酶1α及/或酪蛋白激酶1δ之化合物。
現已發現本發明化合物具有出人意料且有利的特性。詳言之，已出人意料地發現本發明化合物有效抑制CSNK1A1。此外，在某些實施例中，本發明化合物另外顯示出對野生型EGFR激酶之低抑制。
在某些實施例中，本發明化合物在CSNK1A1激酶分析中在1 µM ATP存在下顯示低於100 nM之IC 50，且在野生型EGFR激酶分析中在2 mM ATP存在下效力比在600 nM下低。
在某些實施例中，本發明化合物在CSNK1A1激酶分析中在1 mM ATP存在下顯示低於125 nM之IC 50，且在野生型EGFR激酶分析中在2 mM ATP存在下效力比在100 nM下低。
一般而言，對其他激酶之抑制減少或不存在且具體言之，對野生型EGFR激酶之抑制減少或不存在，尤其是在高ATP分析(例如，濃度為2 mM ATP)中，認為在臨床環境中相關，以避免/減少與該野生型EGFR激酶抑制相關之不合需要的副作用，諸如皮疹及GI毒性。
根據第一態樣，本發明係關於式(I)化合物，
Figure 02_image005
其中： A    表示選自以下之基團：
Figure 02_image007
； X    表示N、C-H、C-F、C-Cl或C-Me； Y    表示N或C-R 4a； Z    表示N或C-R 4b， 其中X、Y及Z中無一者或其中一者表示N； R 1a表示氫或氟； R 1b表示氫或鹵素； R 1c表示氫或氟； R 1d表示氫或鹵素； R 1e表示氫或鹵素； R 1f表示氫或氟； R 1g表示氫或氟； R 2表示C 1-C 3鹵烷基或C 1-C 3羥基烷基； R 3表示苯基，其中該苯基獨立地視情況經鹵素、甲基、甲氧基、C 1-C 2鹵烷基或C 1-C 2鹵烷氧基取代一或多次； R 4a表示氫、鹵素、C 1-C 3烷基、C 2-C 3烯基、甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、C 3-C 4環烷基、4員至5員雜環烷基、環丙氧基、4員至5員雜環烷基-O-或R 5aR 6aN-，其中該4員至5員雜環烷基及4員至5員雜環烷基-O-視情況經甲基取代一次或兩次； R 4b表示氫、鹵素、C 1-C 4烷基、C 2-C 4烯基、C 1-C 3鹵烷基-CH 2-、C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、C 3-C 6環烷基、C 3-C 6環烷基-C 1-C 4烷基、C 3-C 6環烷基-O-、C 3-C 6環烷基-CH 2-O-、哌𠯤-1-基、𠰌啉-4-基、經由其碳原子連接之3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-、3員至6員雜環烷基-CH 2-O-、C 1-C 3烷氧基-C 1-C 3烷基-、C 1-C 3烷氧基-C 2-C 3烷氧基-、C 1-C 4羥基烷基、C 1-C 4羥基烷基-O-或3員至6員雜環烷基-C 1-C 3烷基-，其中該C 3-C 6環烷基、C 3-C 6環烷基-C 1-C 4烷基、C 3-C 6環烷基-O-、C 3-C 6環烷基-CH 2-O-、3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-、3員至6員雜環烷基-CH 2-O-、哌𠯤-1-基、𠰌啉-4-基、C 1-C 3烷氧基-C 1-C 3烷基-、C 1-C 3烷氧基-C 2-C 3烷氧基-、C 1-C 4羥基烷基、C 1-C 4羥基烷基-O-及3員至6員雜環烷基-C 1-C 3烷基視情況經鹵素、甲基、甲氧基或三氟甲氧基取代一次、兩次或三次； R 5a表示氫、甲基、環丙基、甲氧基乙基或3員至5員雜環烷基； R 6a表示氫或甲基，或 R 5a及R 6a與其所連接之氮原子一起表示4員至5員雜環，其中該雜環視情況經甲基取代一次或兩次； 或該化合物之N-氧化物、鹽、互變異構體或立體異構體，或該N-氧化物、互變異構體或立體異構體之鹽。
根據第一態樣之一實施例，本發明係關於上述式(I)化合物，其中： A    表示選自以下之基團：
Figure 02_image009
； X    表示N、C-H、C-F、C-Cl或C-Me； Y    表示N或C-R 4a； Z    表示N或C-R 4b， 其中X、Y及Z中無一者或其中一者表示N； R 1b表示氫或鹵素； R 1c表示氫或氟； R 1e表示氫或氟； R 1f表示氫或氟； R 1g表示氫或氟； R 2表示C 1-C 3鹵烷基或C 1-C 3羥基烷基； R 3表示苯基，其中該苯基獨立地視情況經鹵素、甲基、甲氧基、C 1-C 2鹵烷基或C 1-C 2鹵烷氧基取代一或多次； R 4a表示氫、鹵素、C 1-C 3烷基、C 2烯基、甲氧基、二氟甲氧基、C 3環烷基、4員雜環烷基、環丙氧基、4員雜環烷基-O-或R 5aR 6aN-； R 4b表示氫、鹵素、C 1-C 4烷基、C 2-C 4烯基、C 1-C 3鹵烷基-CH 2-、C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、C 3-C 5環烷基、C 3-C 5環烷基-C 1-C 2烷基、C 3-C 5環烷基-O-、C 3-C 5環烷基-CH 2-O-、哌𠯤-1-基、𠰌啉-4-基、經由其碳原子連接之3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-、3員至6員雜環烷基-CH 2-O-、C 1-C 3烷氧基-C 1-C 3烷基-、C 1-C 3烷氧基-C 2-C 3烷氧基-或C 1-C 4羥基烷基、C 1-C 4羥基烷基-O-， 其中該C 3-C 5環烷基、C 3-C 5環烷基-C 1-C 2烷基、C 3-C 5環烷基-O-、C 3-C 5環烷基-CH 2-O-、3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-、3員至6員雜環烷基-CH 2-O-、哌𠯤-1-基、𠰌啉-4-基、C 1-C 3烷氧基-C 1-C 3烷基-、C 1-C 3烷氧基-C 2-C 3烷氧基-、C 1-C 4羥基烷基及C 1-C 4羥基烷基-O-基團視情況經鹵素、甲基或甲氧基取代一次、兩次或三次； R 5a表示氫或甲基； R 6a表示氫或甲基，或 R 5a及R 6a與其所連接之氮原子一起表示4員雜環，其中該雜環視情況經甲基取代； 或該化合物之N-氧化物、鹽、互變異構體或立體異構體，或該N-氧化物、互變異構體或立體異構體之鹽。
根據第一態樣之一實施例，本發明係關於上述式(I)化合物，其中： A    表示選自以下之基團：
Figure 02_image011
； X    表示N、C-H、C-F或C-Cl； Y    表示N或C-R 4a； Z    表示N或C-R 4b， 其中X、Y及Z中無一者或其中一者表示N； R 1b表示氫或氟； R 1c表示氫； R 1e表示氫； R 1f表示氫或氟； R 1g表示氫或氟； R 2表示C 1-C 3鹵烷基或C 1-C 3羥基烷基； R 3表示苯基，其中該苯基獨立地視情況經鹵素、甲基或C 1鹵烷基取代一或多次； R 4a表示氫、鹵素、C 1烷基、C 2烯基、C 3環烷基、4員雜環烷基或R 5aR 6aN-； R 4b表示氫、鹵素、C 1-C 4烷基、C 2-C 4烯基、C 1-C 3鹵烷基-CH 2-、C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、C 3-C 4環烷基、C 3-C 4環烷基-C 1-C 2烷基、C 3-C 4環烷基-O-、C 3-C 4環烷基-CH 2-O-、哌𠯤-1-基、𠰌啉-4-基、經由其碳原子連接之3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-、3員至6員雜環烷基-CH 2-O-、C 1-C 3烷氧基-C 2-C 3烷氧基-、C 1-C 4羥基烷基或C 1-C 4羥基烷基-O-， 其中該C 3-C 4環烷基、C 3-C 4環烷基-C 1-C 2烷基、C 3-C 4環烷基-O-、C 3-C 4環烷基-CH 2-O-、3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-、3員至6員雜環烷基-CH 2-O-、哌𠯤-1-基、𠰌啉-4-基、C 1-C 3烷氧基-C 2-C 3烷氧基-、C 1-C 4羥基烷基及C 1-C 4羥基烷基-O-基團視情況經鹵素或甲基取代一次或兩次； R 5a表示氫或甲基； R 6a表示氫或甲基，或 R 5a及R 6a與其所連接之氮原子一起表示4員雜環； 或該化合物之N-氧化物、鹽、互變異構體或立體異構體，或該N-氧化物、互變異構體或立體異構體之鹽。
根據第一態樣之一實施例，本發明係關於上述式(I)化合物，其中： A    表示：
Figure 02_image013
； X    表示C-H、C-F； Y    表示N或C-R 4a； Z    表示N或C-R4b； 其中Y及Z中無一者或其中一者表示N； R 1b表示氫或氟； R 1e表示氫； R 1f表示氫； R 1g表示氫或氟； R 2表示C 1-C 2鹵烷基； R 3表示苯基，其中該苯基獨立地視情況經鹵素或甲基取代一或多次； R 4a表示氫、鹵素或甲基； R 4b表示氫、鹵素、C 1-C 4烷基、C 1-C 3鹵烷基-CH 2-、C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、C 3環烷基、C 3環烷基-C 1-C 2烷基、C 3環烷基-O-、C 3環烷基-CH 2-O-、經由其碳原子連接之3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-或3員至6員雜環烷基-CH 2-O-、哌𠯤-1-基、𠰌啉-4-基、C 1-C 3烷氧基-C 2-C 3烷氧基-、C 1-C 4羥基烷基或C 1-C 4羥基烷基-O-, 或該化合物之N-氧化物、鹽、互變異構體或立體異構體，或該N-氧化物、互變異構體或立體異構體之鹽。
根據第一態樣之一實施例，本發明係關於上述式(I)化合物，其中：
Figure 02_image015
A    表示選自以下之基團：
Figure 02_image017
； X    表示N、C-H、C-F、C-Cl或C-Me； Y    表示N或C-R 4a； Z    表示N或C-R 4b， 其中X、Y及Z中無一者或其中一者表示N； R 1a表示氫或氟； R 1b表示氫或鹵素； R 1c表示氫或氟； R 1d表示氫或鹵素； R 1e表示氫、鹵素或甲基； R 2表示C 1-C 3鹵烷基或C 1-C 3羥基烷基； R 3表示苯基，其中該苯基獨立地視情況經鹵素、甲基、甲氧基、C 1-C 2鹵烷基或C 1-C 2鹵烷氧基取代一或多次； R 4a表示氫、鹵素、C 1-C 3烷基、C 2-C 3烯基、甲氧基、三氟甲氧基、C 3-C 4環烷基、4員至5員雜環烷基、環丙氧基、4員至5員雜環烷基-O-或R 5aR 6aN-，其中該4員至5員雜環烷基及4員至5員雜環烷基-O-視情況經甲基取代一次或兩次； R 4b表示氫、鹵素、C 1-C 4烷基、C 2-C 4烯基、C 1-C 4鹵烷基、C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、C 3-C 6環烷基、C 3-C 6環烷基-C 1-C 4烷基、C 3-C 6環烷基-O-、C 3-C 6環烷基-CH 2-O-、經由其碳原子連接之3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-或3員至6員雜環烷基-CH 2-O-， 其中該C 3-C 6環烷基、C 3-C 6環烷基-C 1-C 4烷基、C 3-C 6環烷基-O-、C 3-C 6環烷基-CH 2-O-、3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-及3員至6員雜環烷基-CH 2-O-基團視情況經鹵素、甲基、甲氧基或三氟甲氧基取代一次、兩次或三次； R 5a表示氫、甲基、環丙基、甲氧基乙基或3員至5員雜環烷基； R 6a表示氫或甲基，或 R 5a及R 6a與其所連接之氮原子一起表示4員至5員雜環，其中該雜環視情況經甲基取代一次或兩次； 或該化合物之N-氧化物、鹽、互變異構體或立體異構體，或該N-氧化物、互變異構體或立體異構體之鹽。
根據第一態樣之一實施例，本發明係關於上述式(I)化合物，其中： A    表示選自以下之基團：
Figure 02_image019
； X    表示N、C-H、C-F、C-Cl或C-Me； Y    表示N或C-R 4a； Z    表示N或C-R 4b， 其中X、Y及Z中無一者或其中一者表示N； R 1b表示氫或鹵素； R 1c表示氫或氟； R 1e表示氫或氟； R 2表示C 1-C 3鹵烷基或C 1-C 3羥基烷基； R 3表示苯基，其中該苯基獨立地視情況經鹵素、甲基、甲氧基、C 1-C 2鹵烷基或C 1-C 2鹵烷氧基取代一或多次； R 4a表示氫、鹵素、C 1-C 3烷基、C 2烯基、甲氧基、C 3環烷基、4員雜環烷基、環丙氧基、4員雜環烷基-O-或R 5aR 6aN-； R 4b表示氫、鹵素、C 1-C 4烷基、C 2-C 4烯基、C 1-C 4鹵烷基、C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、C 3-C 5環烷基、C 3-C 5環烷基-C 1-C 2烷基、C 3-C 5環烷基-O-、C 3-C 5環烷基-CH 2-O-、經由其碳原子連接之3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-或3員至6員雜環烷基-CH 2-O-， 其中該C 3-C 5環烷基、C 3-C 5環烷基-C 1-C 2烷基、C 3-C 5環烷基-O-、C 3-C 5環烷基-CH 2-O-、3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-及3員至6員雜環烷基-CH 2-O-基團視情況經鹵素、甲基或甲氧基取代一次、兩次或三次； R 5a表示氫或甲基； R 6a表示氫或甲基，或 R 5a及R 6a與其所連接之氮原子一起表示4員雜環，其中該雜環視情況經甲基取代； 或該化合物之N-氧化物、鹽、互變異構體或立體異構體，或該N-氧化物、互變異構體或立體異構體之鹽。
根據第一態樣之一實施例，本發明係關於上述式(I)化合物，其中： A    表示選自以下之基團：
Figure 02_image021
； X    表示N、C-H、C-F或C-Cl； Y    表示C-R 4a； Z    表示N或C-R 4b， 其中X及Z中無一者或其中一者表示N； R 1b表示氫或氟； R 1c表示氫； R 2表示C 1-C 3鹵烷基或C 1-C 3羥基烷基； R 3表示苯基，其中該苯基獨立地視情況經鹵素、甲基或C 1鹵烷基取代一或多次； R 4a表示氫、鹵素、C 1烷基、C 2烯基、C 3環烷基、4員雜環烷基或R 5aR 6aN-； R 4b表示氫、鹵素、C 1-C 4烷基、C 2-C 4烯基、C 1-C 4鹵烷基、C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、C 3-C 4環烷基、C 3-C 4環烷基-C 1-C 2烷基、C 3-C 4環烷基-O-、C 3-C 4環烷基-CH 2-O-、經由其碳原子連接之3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-或3員至6員雜環烷基-CH 2-O-， 其中該C 3-C 4環烷基、C 3-C 4環烷基-C 1-C 2烷基、C 3-C 4環烷基-O-、C 3-C 4環烷基-CH 2-O-、3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-及3員至6員雜環烷基-CH 2-O-基團視情況經鹵素或甲基取代一次或兩次； R 5a表示氫或甲基； R 6a表示氫或甲基，或 R 5a及R 6a與其所連接之氮原子一起表示4員雜環； 或該化合物之N-氧化物、鹽、互變異構體或立體異構體，或該N-氧化物、互變異構體或立體異構體之鹽。
根據第一態樣之一實施例，本發明係關於上述式(I)化合物，其中： A    表示：
Figure 02_image023
； X    表示C-H、C-F； Y    表示C-R 4a； Z    表示C-R 4b； R 1b表示氫； R 2表示C 1-C 2鹵烷基； R 3表示苯基，其中該苯基獨立地視情況經鹵素或甲基取代一或多次； R 4a表示氫、鹵素或甲基； R 4b表示氫、鹵素、C 1-C 4烷基、C 1-C 4鹵烷基、C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、C 3環烷基、C 3環烷基-C 1-C 2烷基、C 3環烷基-O-、C 3環烷基-CH 2-O-、經由其碳原子連接之3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-或3員至6員雜環烷基-CH 2-O-； 或該化合物之N-氧化物、鹽、互變異構體或立體異構體，或該N-氧化物、互變異構體或立體異構體之鹽。
根據第一態樣之一實施例，本發明係關於式(XXIII)化合物
Figure 02_image025
其中： X    表示C-H、C-F； Y    表示N或C-R 4a； Z    表示N或C-R 4b； 其中Y及Z中無一者或其中一者表示N； R 1b表示氫或氟； R 1e表示氫； R 1f表示氫； R 1g表示氫或氟； R 4a表示氫、鹵素或甲基； R 4b表示氫、鹵素、C 1-C 4烷基、C 1-C 3鹵烷基-CH 2-、C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、C 3環烷基、C 3環烷基-C 1-C 2烷基、C 3環烷基-O-、C 3環烷基-CH 2-O-、哌𠯤-1-基、𠰌啉-4-基、經由其碳原子連接之3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-或3員至6員雜環烷基-CH 2-O-、C 1-C 3烷氧基-C 2-C 3烷氧基-、C 1-C 4羥基烷基或C 1-C 4羥基烷基-O-， 或該化合物之N-氧化物、鹽、互變異構體或立體異構體，或該N-氧化物、互變異構體或立體異構體之鹽。
本發明之一個態樣為如實例中所述之式(I)化合物，其特徵在於，其如技術方案5中所主張之標題之名稱及/或其特定揭示於實例之化合物中之結構以及所有殘基之子組合。
本發明之另一態樣為用於其合成之中間物。
本發明之一個特殊態樣為中間物(VII-A)或其鹽：
Figure 02_image027
其中A、X、Y及Z如本文關於通式(I)化合物所定義。
本發明之另一態樣係關於中間物(VII-A)或其鹽之用途：
Figure 02_image029
， 其中A、X、Y及Z如本文關於通式(I)化合物所定義，其用於製備如本文所定義之式(I)化合物或該化合物之N-氧化物、鹽、互變異構體或立體異構體，或該N-氧化物、互變異構體或立體異構體之鹽。
本發明之一個特定態樣為中間物(IX-Q)或其鹽：
Figure 02_image031
其中R 2、R 3、X、Y及Z如本文關於通式(I)化合物所定義，且Q表示氯、溴或碘，且PG表示保護基。
本發明之另一態樣係關於中間物(IX-Q)或其鹽之用途：
Figure 02_image033
， 其中R 2、R 3、X、Y及Z如通式(I)化合物所定義，且Q表示氯、溴或碘，且PG表示保護基，其用於製備如本文所定義之式(I)化合物或該化合物之鹽，或該N-氧化物、互變異構體或立體異構體之鹽。
本發明之一個特殊態樣為中間物(IX-A)或其鹽：
Figure 02_image035
其中R 2、R3、A、X、Y及Z如本文關於通式(I)化合物所定義，且PG表示保護基。
本發明之另一態樣係關於中間物(IX-A)或其鹽之用途：
Figure 02_image037
， 其中R 2、R 3、A、X、Y及Z如通式(I)化合物所定義且PG表示保護基，其用於製備如本文所定義之式(I)化合物或該化合物之N-氧化物、鹽、互變異構體或立體異構體，或該N-氧化物、互變異構體或立體異構體之鹽。
本發明之一個特殊態樣為中間物(XIV-Q)或其鹽：
Figure 02_image039
其中R 2、R 3、X、Y及Z如通式(I)化合物所定義，且Q表示氯、溴或碘。
本發明之另一態樣係關於中間物(XIV-Q)或其鹽之用途：
Figure 02_image041
， 其中R 2、R 3、X、Y及Z如通式(I)化合物所定義，且Q表示氯、溴或碘，其用於製備如本文所定義之式(I)化合物或該化合物之N-氧化物、鹽、互變異構體或立體異構體，或該N-氧化物、互變異構體或立體異構體之鹽。
本發明之一個特殊態樣為中間物(XVII)或其鹽：
Figure 02_image043
其中R 2、R 3、X、Y及Z如通式(I)化合物所定義，且T表示CF 3-C(O)-、甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或Ph-SO 2-，其中Ph可經鹵素、甲基或硝基取代一次、兩次或三次。
本發明之另一態樣係關於中間物(XVII)或其鹽之用途：
Figure 02_image045
， 其中R 2、R 3、X、Y及Z如通式(I)化合物所定義，且T表示CF 3-C(O)-、甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或Ph-SO 2-，其中Ph可經鹵素、甲基或硝基取代一次、兩次或三次，其用於製備如本文所定義之式(I)化合物或該化合物之N-氧化物、鹽、互變異構體或立體異構體，或該N-氧化物、互變異構體或立體異構體之該鹽。
本發明之另一態樣係關於本文所描述之中間物中之任一者的用途，其用於製備如本文中所定義之式(I)化合物或該化合物之N-氧化物、鹽、互變異構體或立體異構體，或該N-氧化物、互變異構體或立體異構體之鹽。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： A    表示選自以下之基團：
Figure 02_image047
。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： A    表示選自以下之基團：
Figure 02_image049
。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： A    表示：
Figure 02_image051
。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： A    表示選自以下之基團：
Figure 02_image053
。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： A    表示選自以下之基團：
Figure 02_image055
。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： A    表示選自以下之基團：
Figure 02_image057
。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： A    表示：
Figure 02_image059
。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： X    表示N、C-H、C-F、C-Cl或C-Me。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： X    表示N、C-H、C-F或C-Cl。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： X    表示C-H、C-F。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： X    表示C-F。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： X    表示N。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： Y    表示N或C-R 4a。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： Y    表示C-R 4a。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： Y    表示N。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： Z    表示N或C-R 4b。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： Z    表示N。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： Z    表示C-R 4b。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 1a表示氫或氟。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 1b表示氫或鹵素。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 1b表示氫或氟。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 1b表示氫。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 1c表示氫或氟。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 1c表示氫。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 1d表示氫或鹵素。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 1e表示氫、鹵素或甲基。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 1e表示氫或鹵素。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 1e表示氫或氟。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 1e表示氫。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 1f表示氫或氟。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 1f表示氫。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 1g表示氫或氟。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 2表示C 1-C 3鹵烷基或C 1-C 3羥基烷基。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 2表示C 1-C 2鹵烷基。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 2表示2,2-二氟-乙基。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 3表示苯基，其中該苯基獨立地視情況經鹵素、甲基、甲氧基、C 1-C 2鹵烷基或C 1-C 2鹵烷氧基取代一或多次。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 3表示苯基，其中該苯基獨立地視情況經鹵素、甲基或C 1鹵烷基取代一或多次。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 3表示苯基，其中該苯基獨立地視情況經鹵素或甲基取代一或多次。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中：
Figure 02_image061
表示
Figure 02_image063
。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中：
Figure 02_image065
表示
Figure 02_image067
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 4a表示氫、鹵素、C 1-C 3烷基、C 2-C 3烯基、甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、C 3-C 4環烷基、4員至5員雜環烷基、環丙氧基、4員至5員雜環烷基-O-或R 5aR 6aN-， 其中該4員至5員雜環烷基及4員至5員雜環烷基-O-視情況經甲基取代一次或兩次。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 4a表示氫、鹵素、C 1-C 3烷基、C 2烯基、甲氧基、二氟甲氧基、C 3烷基、4員雜環烷基、環丙氧基、4員雜環烷基-O-或R 5aR 6aN-。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 4a表示氫、鹵素、C 1-C 3烷基、C 2-C 3烯基、甲氧基、三氟甲氧基、C 3-C 4環烷基、4員至5員雜環烷基、環丙氧基、4員至5員雜環烷基-O-或R 5aR 6aN-， 其中該4員至5員雜環烷基及4員至5員雜環烷基-O-視情況經甲基取代一次或兩次。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 4a表示氫、鹵素、C 1-C 3烷基、C 2烯基、甲氧基、C 3環烷基、4員雜環烷基、環丙氧基、4員雜環烷基-O-或R 5aR 6aN-。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 4a表示氫、鹵素、C 1烷基、C 2烯基、C 3環烷基、4員雜環烷基或R 5aR 6aN-。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 4a表示氫、鹵素或甲基-。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 4b表示氫、鹵素、C 1-C 4烷基、C 2-C 4烯基、C 1-C 3鹵烷基-CH 2-、C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、C 3-C 6環烷基、C 3-C 6環烷基-C 1-C 4烷基、C 3-C 6環烷基-O-、C 3-C 6環烷基-CH 2-O-、經由其碳原子連接之3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-、3員至6員雜環烷基-CH 2-O-、哌𠯤-1-基、𠰌啉-4-基、C 1-C 3烷氧基-C 1-C 3烷基-、C 1-C 3烷氧基-C 2-C 3烷氧基-、C 1-C 4羥基烷基、C 1-C 4羥基烷基-O-或3員至6員雜環烷基-C 1-C 3烷基- 其中該C 3-C 6環烷基、C 3-C 6環烷基-C 1-C 4烷基、C 3-C 6環烷基-O-、C 3-C 6環烷基-CH 2-O-、3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-、3員至6員雜環烷基-CH 2-O-、哌𠯤-1-基、𠰌啉-4-基、C 1-C 3烷氧基-C 1-C 3烷基-、C 1-C 3烷氧基-C 2-C 3烷氧基-、C 1-C 4羥基烷基、C 1-C 4羥基烷基-O-及3員至6員雜環烷基-C 1-C 3烷基視情況經鹵素、甲基、甲氧基或三氟甲氧基取代一次、兩次或三次。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 4b表示氫、鹵素、C 1-C 4烷基、C 2-C 4烯基、C 1-C 3鹵烷基-CH 2-、C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、C 3-C 5環烷基、C 3-C 5環烷基-C 1-C 2烷基、C 3-C 5環烷基-O-、C 3-C 5環烷基-CH 2-O-、經由其碳原子連接之3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-、3員至6員雜環烷基-CH 2-O-、哌𠯤-1-基、𠰌啉-4-基、C 1-C 3烷氧基-C 1-C 3烷基-、C 1-C 3烷氧基-C 2-C 3烷氧基-或C 1-C 4羥基烷基、C 1-C 4羥基烷基-O-， 其中該C 3-C 5環烷基、C 3-C 5環烷基-C 1-C 2烷基、C 3-C 5環烷基-O-、C 3-C 5環烷基-CH 2-O-、3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-、3員至6員雜環烷基-CH 2-O-、哌𠯤-1-基、𠰌啉-4-基、C 1-C 3烷氧基-C 1-C 3烷基-、C 1-C 3烷氧基-C 2-C 3烷氧基-、C 1-C 4羥基烷基及C 1-C 4羥基烷基-O-基團視情況經鹵素、甲基或甲氧基取代一次、兩次或三次。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 4b表示氫、鹵素、C 1-C 4烷基、C 2-C 4烯基、C 1-C 3鹵烷基-CH 2-、C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、C 3-C 4環烷基、C 3-C 4環烷基-C 1-C 2烷基、C 3-C 4環烷基-O-、C 3-C 4環烷基-CH 2-O-、經由其碳原子連接之3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-、3員至6員雜環烷基-CH 2-O-、哌𠯤-1-基、𠰌啉-4-基、C 1-C 3烷氧基-C 2-C 3烷氧基-、C 1-C 4羥基烷基或C 1-C 4羥基烷基-O-， 其中該C 3-C 4環烷基、C 3-C 4環烷基-C 1-C 2烷基、C 3-C 4環烷基-O-、C 3-C 4環烷基-CH 2-O-、3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-、3員至6員雜環烷基-CH 2-O-、哌𠯤-1-基、𠰌啉-4-基、C 1-C 3烷氧基-C 2-C 3烷氧基-、C 1-C 4羥基烷基及C 1-C 4羥基烷基-O-基團視情況經鹵素或甲基取代一次或兩次。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 4b表示氫、鹵素、C 1-C 4烷基、C 1-C 3鹵烷基-CH 2-、C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、C 3環烷基、C 3環烷基-C 1-C 2烷基、C 3環烷基-O-、C 3環烷基-CH 2-O-、經由其碳原子連接之3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-或3員至6員雜環烷基-CH 2-O-、哌𠯤-1-基、𠰌啉-4-基、C 1-C 3烷氧基-C 2-C 3烷氧基-、C 1-C 4羥基烷基或C 1-C 4羥基烷基-O-。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 4b表示氫、鹵素、C 1-C 4烷基、C 2-C 4烯基、C 1-C 4鹵烷基、C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、C 3-C 6環烷基、C 3-C 6環烷基-C 1-C 4烷基、C 3-C 6環烷基-O-、C 3-C 6環烷基-CH 2-O-、經由其碳原子連接之3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-或3員至6員雜環烷基-CH 2-O-， 其中該C 3-C 6環烷基、C 3-C 6環烷基-C 1-C 4烷基、C 3-C 6環烷基-O-、C 3-C 6環烷基-CH 2-O-、3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-及3員至6員雜環烷基-CH 2-O-視情況經鹵素、甲基、甲氧基或三氟甲氧基取代一次、兩次或三次。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 4b表示氫、鹵素、C 1-C 4烷基、C 2-C 4烯基、C 1-C 4鹵烷基、C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、C 3-C 5環烷基、C 3-C 5環烷基-C 1-C 2烷基、C 3-C 5環烷基-O-、C 3-C 5環烷基-CH 2-O-、經由其碳原子連接之3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-或3員至6員雜環烷基-CH 2-O-， 其中該C 3-C 5環烷基、C 3-C 5環烷基-C 1-C 2烷基、C 3-C 5環烷基-O-、C 3-C 5環烷基-CH 2-O-、3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-及3員至6員雜環烷基-CH 2-O-基團視情況經鹵素、甲基或甲氧基取代一次、兩次或三次。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 4b表示氫、鹵素、C 1-C 4烷基、C 2-C 4烯基、C 1-C 4鹵烷基、C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、C 3-C 4環烷基、C 3-C 4環烷基-C 1-C 2烷基、C 3-C 4環烷基-O-、C 3-C 4環烷基-CH 2-O-、經由其碳原子連接之3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-或3員至6員雜環烷基-CH 2-O-， 其中該C 3-C 4環烷基、C 3-C 4環烷基-C 1-C 2烷基、C 3-C 4環烷基-O-、C 3-C 4環烷基-CH 2-O-、3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-及3員至6員雜環烷基-CH 2-O-視情況經鹵素或甲基取代一次或兩次。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 4b表示氫、鹵素、C 1-C 4烷基、C 1-C 4鹵烷基、C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、C 3環烷基、C 3環烷基-C 1-C 2烷基、C 3環烷基-O-、C 3環烷基-CH 2-O-、經由其碳原子連接之3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-或3員至6員雜環烷基-CH 2-O-。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 5a表示氫、甲基、環丙基、甲氧基乙基或3員至5員雜環烷基。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 5a表示氫或甲基。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 6a表示氫或甲基。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 5a及R 6a與其所連接之氮原子一起表示4員至5員雜環，其中該雜環視情況經甲基取代一次或兩次。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 5a及R 6a與其所連接之氮原子一起表示4員雜環，其中該雜環視情況經甲基取代。
在上文所提及之態樣之其他實施例中，本發明係關於式(I)化合物，其中： R 5a及R 6a與其所連接之氮原子一起表示4員雜環。
本發明之另一態樣為式(I)化合物，其以其鹽形式存在。
應瞭解，本發明係關於前述通式(I)化合物之本發明任何實施例或態樣內的任何子組合。
再更特定言之，本發明涵蓋本文實例部分(見下文)中所揭示之通式(I)化合物。
根據另一態樣，本發明涵蓋製備本發明化合物之方法，該等方法包含如本文實驗部分中所描述之步驟。
在本發明之其他實施例中，化合物係根據如申請專利範圍部分中所揭示之申請專利範圍定義，其中根據如下文所揭示之較佳或更佳定義或特定揭示之例示性化合物之殘基及其子組合來限制定義。
在某些實施例中，本發明化合物具有出人意料且有利的特性。
特定言之，已出人意料地發現本發明化合物有效抑制酪蛋白激酶1α及/或1δ，且可因此用於治療或預防不受控細胞生長、增殖及/或存活、不當細胞免疫反應或不當細胞發炎性反應之疾病或伴隨有不受控細胞生長、增殖及/或存活、不當細胞免疫反應或不當細胞發炎性反應之疾病。特定言之，所揭示之化合物可用於治療或預防其中不受控細胞生長、增殖及/或存活、不當細胞免疫反應或不當細胞發炎性反應由酪蛋白激酶1α及/或1δ介導之疾病，諸如血液腫瘤、實體腫瘤及/或其轉移，例如白血病及骨髓發育不良症候群、惡性淋巴瘤、頭頸部腫瘤(包括腦腫瘤及腦轉移瘤)、胸部腫瘤(包括非小細胞肺腫瘤及小細胞肺腫瘤)、胃腸腫瘤(包括食道腫瘤、胃腫瘤及結腸直腸腫瘤)、內分泌腫瘤、乳腺及其他婦科腫瘤、泌尿腫瘤(包括腎腫瘤、膀胱腫瘤及前列腺腫瘤)、皮膚腫瘤及肉瘤，及/或其轉移。 定義
除非另外指出，否則如本文中所述視情況經取代之成分可彼此獨立地在任何可能位置處經取代一或多次。當任何變數在任何成分中出現超過一次時，各定義為獨立的。舉例而言，當R 2、R 3、R 4、R 7及/或R 8在任何式(I)化合物中出現超過一次時，R 2、R 3、R 4、R 7及R 8之各定義為獨立的。
除非另外指出，否則若成分由超過一種部分(例如C 3-C 6環烷基-C 1-C 4烷基-)構成，則可能取代基之位置可在此等部分中之任一者之任何適合位置處(例如，在經取代之C 3-C 6環烷基-C 1-C 4烷基-基團之情況下，取代基可存在於該基團之C 3-C 6環烷基部分處，存在於該基團之C 1-C 4烷基部分處或二者)。成分開端或末端處之連字符標示與分子其餘部分之連接點。若環經取代，則取代基可在環之任何適合位置處，適合時亦在環氮原子上。
術語「包含」當用於本說明書中時包括「由……組成」。
若在說明書內提及「如上文所提及」或「上文所提及」、「上述」，則係指在本說明書內任何前述頁中或在相同頁上方所作出之任何揭示內容。
若在說明書內提及「如本文所提及」、「本文所描述」、「本文所提供」或「本文所陳述」，則係指在本說明書內任何前述頁或後續頁中所作出之任何揭示內容。
本發明意義內之「適合」意謂化學上可能藉由熟習此項技術者之瞭解內之方法來製造。
如本發明正文中提及之術語較佳具有以下意義：
術語「鹵素原子」、「鹵基-」或「鹵-」應理解為意謂氟、氯、溴或碘原子，較佳為氟、氯或溴原子。
術語「C 1-C 6烷基」應理解為意謂具有1、2、3、4、5或6個碳原子之直鏈或分支鏈飽和單價烴基，例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、異丙基、異丁基、二級丁基、三級丁基、異戊基、2-甲基丁基、1-甲基丁基、1-乙基丙基、1,2-二甲基丙基、新戊基、1,1-二甲基丙基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、2-乙基丁基、1-乙基丁基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基或1,2-二甲基丁基或其異構體。較佳地，該基團具有1、2、3或4個碳原子(「C 1-C 4烷基」)，例如甲基、乙基、丙基、丁基、異丙基、異丁基、二級丁基、三級丁基，更佳具有1、2或3個碳原子(「C 1-C 3烷基」)，例如甲基、乙基、正丙基或異丙基。
術語「C 1-C 4鹵烷基」應理解為意謂直鏈或分支鏈飽和單價烴基，其中術語「C 1-C 4烷基」如上文所定義，且其中一或多個氫原子以相同或不同方式經鹵素原子置換，亦即一個鹵素原子獨立於另一鹵素原子。較佳地，該鹵素原子為F。該C 1-C 4鹵烷基為例如-CF 3、-CHF 2、-CH 2F、-CF 2CF 3、-CH 2CH 2F、-CH 2CHF 2、-CH 2CF 3、-CH 2CH 2CF 3或-CH(CH 2F) 2。較佳地，該基團具有1、2或3個碳原子(「C 1-C 3鹵烷基」)。更佳地，該基團具有1或2個碳原子(「C 1-C 2鹵烷基」)。
術語「C 1-C 5羥基烷基」意謂直鏈或分支鏈飽和單價烴基，其中術語「C 1-C 5烷基」如上文所定義且其中1或2個氫原子經羥基置換，例如羥基甲基、1-羥基乙基、2-羥基乙基、1,2-二羥基乙基、3-羥基丙基、2-羥基丙基、1-羥基丙基、1-羥基丙-2-基、2-羥基丙-2-基、2,3-二羥基丙基、1,3-二羥基丙-2-基、3-羥基-2-甲基-丙基、2-羥基-2-甲基-丙基或1-羥基-2-甲基-丙基。
術語「C 1-C 4烷氧基」應理解為意謂式-O-烷基之直鏈或分支鏈飽和單價烴基，其中術語「烷基」如上文所定義，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、三級丁氧基或二級丁氧基或其異構體。
術語「C 1-C 4鹵烷氧基」應理解為意謂如上文所定義之直鏈或分支鏈飽和單價C 1-C 4烷氧基，其中一或多個氫原子以相同或不同方式經鹵素原子置換。較佳地，該鹵素原子為F。該C 1-C 4鹵烷氧基為例如-OCF 3、-OCHF 2、-OCH 2F、-OCF 2CF 3或-OCH 2CF 3。特定言之，該基團具有1、2或3個碳原子(「C 1-C 3鹵烷氧基」)。更佳地，該基團具有1或2個碳原子(「C 1-C 2鹵烷氧基」)。
術語「C 3-C 6環烷基」應理解為意謂含有3、4、5或6個碳原子之飽和單價單環或雙環烴環(「C 3-C 6環烷基」)。該C 3-C 6環烷基為例如單環烴環，例如環丙基、環丁基、環戊基或環己基；或雙環烴環。
術語「鹵環丙基」應理解為意謂其中一或多個氫原子以相同或不同方式經鹵素原子置換(亦即一個鹵素原子獨立於另一鹵素原子)之環丙基。特定言之，該鹵素原子為F。
術語「3員至6員雜環烷基」及「4員至6員雜環烷基」意謂含有一或兩個相同或不同的來自N、O及S系列之環雜原子的分別具有總計3、4、5或6個、或4或5個環原子之單環飽和雜環，該雜環烷基有可能經由任一碳原子或(若存在)氮原子連接於分子之其餘部分上。
該雜環烷基可為但不限於：例如3員環，諸如環氧乙烷基或氮丙啶基；或例如4員環，諸如氮雜環丁烷基、氧雜環丁烷基或硫雜環丁烷基；或例如5員環，諸如四氫呋喃基、1,3-二氧雜環戊烷基、硫雜環戊烷基、吡咯啶基、咪唑啶基、吡唑啶基、1,1-二氧離子基硫雜環戊烷基、1,2-㗁唑啶基、1,3-㗁唑啶基或1,3-噻唑啶基；或例如6員環，諸如四氫哌喃基、四氫硫代哌喃基、哌啶基、𠰌啉基、二噻烷基、硫代𠰌啉基、哌𠯤基、1,3-二氧雜環己烷基、1,4-二氧雜環己烷基或1,2-氧氮雜環己烷基。
特定言之，「3員至6員雜環烷基」意謂如上文所定義之3員至6員雜環烷基，其含有一個環氮或氧原子及視情況選用之另一個選自N、O、S系列的環雜原子。更特定言之，「3員或4員雜環烷基」意謂含有一個環氮或氧原子之總共具有3或4個環原子的單環飽和雜環。
術語「雜芳基」意謂具有5、6、8、9、10、11、12、13或14個環原子(「5員至14員雜芳基」)，較佳具有5、6、9或10個環原子之單價單環、雙環或三環芳環，其含有至少一個環雜原子及視情況選用之一個、兩個或三個來自N、O及/或S系列之其他環雜原子且經由環碳原子或視情況經由環氮原子(若原子價允許)鍵結。
該雜芳基可為5員雜芳基，諸如噻吩基、呋喃基、吡咯基、㗁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、異㗁唑基、異噻唑基、㗁二唑基、三唑基、噻二唑基或四唑基；或6員雜芳基，諸如吡啶基、嗒𠯤基、嘧啶基、吡𠯤基或三𠯤基；或三環雜芳基，諸如咔唑基、吖啶基或啡𠯤基；或9員雜芳基，諸如苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并㗁唑基、苯并異㗁唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并三唑基、吲唑基、吲哚基、異吲哚基、吲哚𠯤基或嘌呤基；或10員雜芳基，諸如喹啉基、喹唑啉基、異喹啉基、㖕啉基、呔𠯤基、喹喏啉基或喋啶基。
一般而言，且除非另有提及，雜芳基或伸雜芳基包括其所有可能的異構體形式，例如就連至分子之其餘部分之連接點而言的互變異構體及位置異構體。因此，對於一些說明性的非限制實例，術語吡啶基包括吡啶-2-基、吡啶-3-基及吡啶-4-基；或術語噻吩基包括噻吩-2-基及噻吩-3-基。
如本文通篇所使用之術語「C 1-C 6」，例如在定義「C 1-C 6烷基」之情況下，應理解為意謂具有1至6之有限數目個碳原子(亦即1、2、3、4、5或6個碳原子)的烷基。此外應理解，該術語「C1-C6」應解釋為其中所包含之任何子範圍，例如C 1-C 6、C 2-C 6、C 3-C 6、C 1-C 2、C 1-C 3，尤其C 1-C 2、C 1-C 3、C 1-C 4。
如本文通篇所使用之術語「C 1-C 4」，例如在定義「C 1-C 4烷基」、「C 1-C 4鹵烷基」、「C 1-C 4烷氧基」或「C 1-C 4鹵烷氧基」之情況下，應理解為意謂具有1至4之有限數目個碳原子(亦即1、2、3或4個碳原子)的烷基。應進一步理解，在「C 1-C 4鹵烷基」或「C 1-C 4鹵烷氧基」之情況下，該術語「C1-C4」應解釋為包含於其中之任何子範圍，例如C 1-C 4、C 2-C 4、C 3-C 4、C 1-C 2、C 1-C 3，較佳C 1-C 2、C 1-C 3、C 1-C 4，甚至更佳C 1-C 2。
此外，如本文所使用，如本文通篇所使用之術語「C 3-C 6」，例如在定義「C 3-C 6環烷基」之情況下，應理解為意謂具有3至6個有限數目之碳原子(亦即3、4、5或6個碳原子)之環烷基。應進一步理解，該術語「C 3-C 6」應解釋為其中所包含之任何子範圍，例如C 3-C 6、C 4-C 5、C 3-C 5、C 3-C 4、C 4-C 6、C 5-C 6；較佳C 3-C 6。
術語「經取代」意謂指定原子上之一或多個氫經自所指定基團之選擇置換，其限制條件為在現有情形下未超出經取代原子之正常原子價且該取代產生穩定化合物。取代基及/或變數之組合僅在此類組合產生穩定化合物時為容許的。
術語「視情況經取代」意謂視情況經指定基團、自由基或部分取代。
環系統取代基意謂連接至芳族或非芳族環系統之取代基，其例如置換環系統上之可用氫。
如本文所使用，例如在本發明通式化合物之取代基的定義中，術語「一或多個」應理解為意謂「一個、兩個、三個、四個或五個，較佳一個、兩個、三個或四個，更尤其是一個、兩個或三個，甚至更佳一個或兩個」。
通式(I)化合物可以同位素變體形式存在。因此，本發明包括通式(I)化合物之一或多種同位素變體，尤其是含氘之通式(I)化合物。
術語化合物或試劑之「同位素變體」定義為如下化合物，其展現非天然比例的構成此類化合物之同位素中之一或多者。
術語「通式(I)化合物之同位素變體」定義為如下通式(I)化合物，其展現非天然比例的構成此類化合物之同位素中之一或多者。
表述「非天然比例」應理解為意謂此類同位素之高於其天然豐度的比例。在此情形下，待應用之同位素之天然豐度描述於「Isotopic Compositions of the Elements 1997」, Pure Appl. Chem., 70(1), 217-235, 1998中。
此類同位素之實例包括氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯、溴及碘之穩定及放射性同位素，分別諸如 2H (氘)、 3H (氚)、 11C、 13C、 14C、 15N、 17O、 18O、 32P、 33P、 33S、 34S、 35S、 36S、 18F、 36Cl、 82Br、 123I、 124I、 125I、 129I及 131I。因此，除非另外說明，否則「氫」或「H」之敍述應理解為涵蓋 1H (氕)、 2H (氘)及 3H (氚)。
關於本文中所指定病症之治療及/或預防，通式(I)化合物之同位素變體較佳含有升高量之氘(「含氘之通式(I)化合物」)。併入有一或多種放射性同位素(諸如 3H或 14C)的通式(I)化合物之同位素變體可用於例如藥物及/或受質組織分佈研究中。為方便同位素之併入及可偵測性，此等同位素為尤其較佳的。可將諸如 18F或 11C之正電子發射同位素併入至通式(I)化合物中。通式(I)化合物之此等同位素變體適用於活體內成像應用。在臨床前研究或臨床研究之情形下，含氘及含 13C之通式(I)化合物可用於質譜分析中(H. J. Leis等人, Curr. Org. Chem., 1998, 2, 131)。
通式(I)化合物之同位素變體通常可藉由熟習此項技術者已知之方法製備，諸如本文流程及/或實例中所述之彼等方法，例如藉由用某一試劑之同位素變體、較佳含氘試劑取代該試劑。視所需氘化位點而定，在一些情況下，可將來自D 2O之氘直接併入化合物中或併入適用於合成此等化合物之試劑中(Esaki等人, Tetrahedron, 2006, 62, 10954；Esaki等人, Chem. Eur. J., 2007, 13, 4052)。氘氣亦為適用於將氘併入分子中之試劑。烯鍵(H. J. Leis等人, Curr. Org. Chem., 1998, 2, 131；J. R. Morandi等人, J. Org. Chem., 1969, 34 (6), 1889)及炔鍵(N. H. Khan, J. Am. Chem. Soc., 1952, 74 (12), 3018；S. Chandrasekhar等人, Tetrahedron, 2011, 52, 3865)之催化氘化為併入氘之快速途徑。在氘氣存在下，金屬催化劑(亦即Pd、Pt及Rh)可用於將含有烴之官能基中的氫直接交換為氘(J. G. Atkinson等人，美國專利3966781)。各種氘化試劑及合成結構單元可購自各公司，諸如C/D/N Isotopes, Quebec, Canada；Cambridge Isotope Laboratories Inc., Andover, MA, USA；及CombiPhos Catalysts, Inc., Princeton, NJ, USA。關於氘-氫交換之目前先進技術的進一步資訊在以下中給出：例如Hanzlik等人, J. Org. Chem. 55, 3992-3997, 1990；R. P. Hanzlik等人, Biochem. Biophys. Res. Commun. 160, 844, 1989；P. J. Reider等人, J. Org. Chem. 52, 3326-3334, 1987；M. Jarman等人, Carcinogenesis 16(4), 683-688, 1993；J. Atzrodt等人, Angew. Chem., Int. Ed. 2007, 46, 7744；K. Matoishi等人, J. Chem. Soc, Chem. Commun. 2000, 1519-1520；K. Kassahun等人, WO2012/112363。
術語「含氘之通式(I)化合物」定義為一或多個氕( 1H)原子經一或多個氘原子置換且通式(I)化合物之各氘化位置之氘的豐度高於氘之天然豐度(其為約0.015%)的通式(I)化合物。特定言之，在含氘之通式(I)化合物中，通式(I)化合物之各氘化位置處之氘豐度在該(該等)位置處高於10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%或80%，較佳地高於90%、95%、96%或97%，甚至更佳地高於98%或99%。應理解，各氘化位置處之氘豐度獨立於其他氘化位置處之氘豐度。
將一或多個氘原子選擇性併入通式(I)化合物中可更改分子之物理化學特性(諸如(例如)酸性[A. Streitwieser等人, J. Am. Chem. Soc., 1963, 85, 2759；C. L. Perrin等人, J. Am. Chem. Soc., 2007, 129, 4490]、鹼性[C. L. Perrin等人, J. Am. Chem. Soc., 2003, 125, 15008；C. L. Perrin, Advances in Physical Organic Chemistry, 44, 144；C. L. Perrin等人, J. Am. Chem. Soc., 2005, 127, 9641]、親脂性[B. Testa等人, Int. J. Pharm., 1984, 19(3), 271])及/或代謝概況且可引起母體化合物與代謝物之比率或所形成之代謝物之量變化。該等變化可以產生某些治療優勢且因此在一些情況下可為較佳的。在代謝物比率改變之情況下，代謝速率及代謝轉換速率降低已有報導(D. J. Kushner等人, Can. J. Physiol. Pharmacol., 1999, 77, 79；A. E. Mutlib等人, Toxicol. Appl. Pharmacol., 2000, 169, 102)。在暴露於母體藥物及代謝物時此等改變可具有關於含氘之通式(I)化合物之藥效學、耐受性及功效的重要結果。在一些情況下，氘取代減少或消除不合需要或毒性代謝物之形成及/或增強所需代謝物之形成((例如，奈韋拉平(Nevirapine)：A. M. Sharma等人, Chem. Res.Toxicol., 2013, 26, 410；Uetrecht等人, Chemical Research in Toxicology, 2008, 21, 9, 1862；依法韋侖(Efavirenz)：A. E. Mutlib等人, Toxicol. Appl. Pharmacol., 2000, 169, 102)。在其他情況下，氘化之主要作用為降低全身清除速率。因此，化合物之生物半衰期增加。潛在臨床益處將包括能夠藉由降低之峰值水準及增加之谷值水準(亦即，降低之值-谷變化)來維持類似的全身性暴露。此舉可視特定化合物之藥物動力學/藥效學關係而定，減少副作用及/或增強功效。茚地普隆(Indiplon) (A. J. Morales等人, 摘要285, The 15 thNorth American Meeting of the International Society of Xenobiotics, San Diego, CA, 2008年10月12-16日)、ML-337 (C. J. Wenthur等人 J. Med. Chem., 2013, 56, 5208)及奧當卡替(Odanacatib) (K. Kassahun等人, WO2012/112363)為此氘化作用之實例。另外報導有其他情況，其中代謝速率降低導致在不改變全身性清除率之情況下藥物之暴露量增加(例如，羅非考昔(Rofecoxib)：F. Schneider等人, Arzneim. Forsch. Drug. Res., 2006, 56, 295；特拉匹偉(Telaprevir)：F. Maltais等人, J. Med. Chem., 2009, 52, 7993)。展示此作用之氘化藥物可具有降低之給藥要求(例如，用於達成所需作用之劑量數目減少或劑量降低)及/或可產生較低之代謝物負載。
通式(I)之化合物可以具有多個潛在的容易發生代謝之位點。為使對物理化學特性及代謝概況之上述影響最佳化，可選擇具有特定的一或多個氘-氫交換模式的含氘之通式(I)化合物。特定言之，含氘之通式(I)化合物之氘原子連接至碳原子及/或位於通式(I)化合物之彼等位置，其係諸如細胞色素P 450之代謝酶的攻擊位點。
當本文使用複數形式之措詞化合物、鹽、多晶型物、水合物、溶劑合物及其類似物時，此亦理解為意謂單個化合物、鹽、多晶型物、異構體、水合物、溶劑合物或其類似物。
「穩定化合物」或「穩定結構」意謂足夠穩固能經受自反應混合物分離至適用純度，且能夠經受進一步化學轉化或較佳調配成有效治療劑的化合物。
本發明化合物取決於所需之各種取代基之位置及性質，含有一或多個不對稱中心。不對稱碳原子可以(R)或(S)組態存在，在單個不對稱中心之情況下產生外消旋混合物，且在多個不對稱中心之情況下產生非對映異構體混合物。在某些情況下，不對稱性亦可由於圍繞既定鍵(例如，與指定化合物(亦即滯轉異構體)之兩個經取代芳環鄰接之中心鍵)限制性旋轉而存在。
非平面環上之取代基亦可以順式或反式組態存在。希望所有此類組態(包括對映異構體及非對映異構體)均包括在本發明之範疇內。
較佳化合物為產生更合乎需要之生物活性之化合物。本發明化合物之經分離、純或部分純化異構體及立體異構體或外消旋或非對映異構體混合物亦包括在本發明之範疇內。此類物質之純化及分離可藉由此項技術中已知之標準技術實現。
分離的光學異構體可藉由根據習知製程解析外消旋混合物，例如藉由使用光學活性酸或鹼形成非對映異構鹽，或形成共價非對映異構體來獲得。適當酸之實例為酒石酸、二乙醯基酒石酸、二甲苯醯基酒石酸及樟腦磺酸。非對映異構體之混合物可藉由此項技術中已知之方法(例如層析或分步結晶)、基於其物理及/或化學差異分離成其個別非對映異構體。隨後自經分離之非對映異構鹽釋放光活性鹼或酸。分離光學異構體之不同製程涉及使用對掌性層析法(例如對掌性HPLC管柱)，其含有或不含習知衍生，經最佳選擇以使對映異構體之分離最大化。適合對掌性HPLC管柱由Daicel (尤其例如Chiracel OD及Chiracel OJ)製造，其均可常規選擇。使用或不使用衍生法的酶分離亦為適用的。本發明之光活性化合物同樣可藉由利用光活性起始物質或光活性催化劑之對掌性合成來獲得。
為了將不同類型的異構體彼此區分開，參考IUPAC規則E部分(Pure Appl Chem 45, 11-30, 1976)。
本發明包括本發明化合物之所有可能的立體異構體，其呈單一立體異構體形式或呈該等立體異構體(例如R或S異構體，或E或Z異構體)之任何比率的任何混合物形式。本發明化合物之單一立體異構體(例如單一對映異構體或單一非對映異構體)之分離可藉由任何適合之目前先進技術方法(諸如層析，尤其例如對掌性層析)達成。
此外，本發明化合物可以互變異構體之形式存在。舉例而言，含有吡唑部分作為雜芳基之任何本發明化合物可例如以1H互變異構體或2H互變異構體或甚至任何量之兩種互變異構體之混合物的形式存在，或者含有三唑部分作為雜芳基之任何本發明化合物可例如以1H互變異構體、2H互變異構體或4H互變異構體或甚至任何量之該等1H、2H及4H互變異構體之混合物的形式存在，亦即：
Figure 02_image069
。
具體言之，式(I)化合物可至少以以下互變異構體之形式存在：
Figure 02_image071
。
本發明包括本發明化合物之所有可能互變異構體，其呈單一互變異構體形式或該等互變異構體的任何比率之任何混合物形式。
此外，本發明化合物可以N-氧化物形式存在，其定義為本發明化合物之至少一個氮經氧化。本發明包括所有此類可能的N-氧化物。
本發明亦係關於如本文所揭示之化合物的適用形式，諸如代謝物、水合物、溶劑合物、前藥、鹽(尤其是醫藥學上可接受之鹽)及共沈澱物。
本發明化合物可以水合物或溶劑合物之形式存在，其中本發明化合物含有極性溶劑(較佳水、甲醇或乙醇)例如作為化合物晶格的結構要素。極性溶劑(尤其是水)之量可以化學計量或非化學計量比率存在。在化學計量溶劑合物(例如水合物)之情況下，半(hemi/semi)、單、倍半、二、三、四、五等溶劑合物或水合物分別為可能的。本發明包括所有此類水合物或溶劑合物。
另外，本發明化合物可以游離形式，例如游離鹼或游離酸或兩性離子形式存在或可以鹽形式存在。該鹽可為藥學中慣用之任何鹽，有機或無機加成鹽，尤其是任何醫藥學上可接受之有機或無機加成鹽。
術語「醫藥學上可接受之鹽」係指相對無毒之本發明化合物之無機或有機酸加成鹽。舉例而言，參見S. M. Berge,等人「Pharmaceutical Salts,」J. Pharm. Sci. 1977, 66, 1-19。
本發明化合物之適合的醫藥學上可接受之鹽可為例如在例如鏈或環中具有氮原子之本發明化合物之酸加成鹽，其具有足夠鹼性，諸如與無機酸(諸如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、二硫酸、磷酸或硝酸)或與有機酸(諸如甲酸、乙酸、乙醯乙酸、丙酮酸、三氟乙酸、丙酸、丁酸、己酸、庚酸、十一烷酸、月桂酸、苯甲酸、水楊酸、2-(4-羥基苯甲醯基)-苯甲酸、樟腦酸、肉桂酸、環戊丙酸、二葡萄糖酸、3-羥基-2-萘甲酸、菸鹼酸、雙羥萘酸、果膠酯酸、過硫酸、3-苯基丙酸、苦味酸、特戊酸、2-羥基乙烷磺酸、伊康酸、胺磺酸、三氟甲烷磺酸、十二烷基硫酸、乙烷磺酸、苯磺酸、對甲苯磺酸、甲烷磺酸、2-萘磺酸、萘二磺酸、樟腦磺酸、檸檬酸、酒石酸、硬脂酸、乳酸、草酸、丙二酸、丁二酸、蘋果酸、己二酸、褐藻酸、順丁烯二酸、反丁烯二酸、D-葡萄糖酸、杏仁酸、抗壞血酸、葡糖庚酸、甘油磷酸、天冬胺酸、磺基水楊酸、半硫酸或硫氰酸)之酸加成鹽。
此外，本發明化合物之具有足夠酸性的另一適合的醫藥學上可接受之鹽為鹼金屬鹽，例如鈉或鉀鹽；鹼土金屬鹽，例如鈣或鎂鹽；銨鹽或與提供生理學上可接受之陽離子的有機鹼之鹽，例如與N-甲基-還原葡糖胺、二甲基-還原葡糖胺、乙基-還原葡糖胺、離胺酸、二環己胺、1,6-己二胺、乙醇胺、葡糖胺、肌胺酸、絲胺醇、參-羥基-甲基-胺基甲烷、胺基丙二醇、sovak鹼、1-胺基-2,3,4-丁三醇之鹽。此外，鹼性含氮基團可經諸如以下之藥劑四級銨化：低碳烷基鹵化物，諸如甲基、乙基、丙基及丁基氯化物、溴化物及碘化物；硫酸二烷酯，如硫酸二甲酯、二乙酯及二丁酯；及硫酸二戊酯；長鏈鹵化物，諸如癸基、月桂基、肉豆蔻基及硬脂基氯化物、溴化物及碘化物；芳烷基鹵化物，如苯甲基及苯乙基溴化物；及其他。
熟習此項技術者應進一步瞭解，所主張化合物之酸加成鹽可藉由使化合物與適當無機酸或有機酸經由多種已知方法中之任一者反應製備。或者，本發明之酸性化合物的鹼金屬鹽及鹼土金屬鹽可藉由使本發明化合物與適當鹼經由多種已知方法中之任一種反應製備。
本發明包括本發明化合物之所有可能鹽，其呈單一鹽形式或呈該等鹽之任何比率之任何混合物形式。
在本發明正文中，尤其在實驗部分中，對於本發明之中間物及實例之合成，當以與相應鹼或酸形成之鹽形式提及化合物時，如藉由各別製備及/或純化製程獲得之該鹽形式的精確化學計量組成在大多數情況下為未知的。
除非另外規定，否則化學名稱或結構式之後綴，諸如「鹽酸鹽」、「三氟乙酸鹽」、「鈉鹽」或「x HCl」、「x CF 3COOH」、「x Na +」，不應依化學計量規範理解，而僅理解為鹽形式。
此類似地應用於已藉由所描述之製備及/或純化製程以(若定義)未知化學計量組成的溶劑合物(諸如水合物)形式獲得合成中間物或實例化合物或其鹽的情況。
鹽包括水不溶性鹽及尤其水溶性鹽。
此外，本發明涵蓋可在生物系統(生物前驅體或前藥)中轉變成式(I)化合物或其鹽之式(I)化合物及其鹽之衍生物。該生物系統為例如哺乳動物生物，尤其為人類個體。生物前驅物係例如藉由代謝過程轉化為式(I)化合物或其鹽。
如本文所使用，術語「活體內可水解之酯」理解為意謂含有羧基或羥基之本發明化合物的活體內可水解酯，例如在人類或動物體內水解產生母體酸或醇的醫藥學上可接受之酯。適合於羧基之醫藥學上可接受之酯包括例如烷基、環烷基及視情況經取代之苯烷基之酯，尤其是苯甲酯；C 1-C 6烷氧基甲酯，例如甲氧基甲酯；C 1-C 6烷醯氧基甲酯，例如特戊醯氧甲酯；酞基酯；C 3-C 8環烷氧基-羰氧基-C 1-C 6烷基酯，例如1-環己基羰氧基乙酯；1,3-二氧雜環戊烯-2-酮基甲酯，例如5-甲基-1,3-二氧雜環戊烯-2-酮基甲酯；及C 1-C 6烷氧羰氧基乙酯，例如1-甲氧羰氧基乙酯，且可在本發明化合物中之任何羧基基團處形成。
含有羥基之本發明化合物之活體內可水解酯包括無機酯，諸如磷酸酯及[α]-醯氧基烷基醚及相關化合物，其由於酯的活體內水解而分解產生母體羥基。[α]-醯氧基烷基醚之實例包括乙醯氧基甲氧基及2,2-二甲基丙醯氧基甲氧基。針對羥基選擇的活體內可水解酯形成基團包括烷醯基、苯甲醯基、苯乙醯基及經取代之苯甲醯基及苯乙醯基、烷氧羰基(得到碳酸烷基酯)、二烷基胺甲醯基及N-(二烷基胺基乙基)-N-烷基胺甲醯基(得到胺基甲酸酯)、二烷基胺基乙醯基及羧基乙醯基。本發明涵蓋所有此類酯。
此外，本發明包括本發明化合物之所有可能結晶形式或多晶型物，其呈單一多晶型物或任何比率之超過一種多晶型物之混合物形式。
在本發明化合物之特性之情況下，術語「藥物動力學概況」意謂如在適合實驗中量測之一個單一參數或其組合，包括滲透性、生物可用性、暴露及藥力學參數(諸如持續時間)或藥理學效應量值。具有改良之藥物動力學概況之化合物可例如以更低劑量使用而實現相同作用，可實現更長作用持續時間，或可實現兩種作用之組合。
本發明中之術語「組合」如熟習此項技術者所知般使用，且可以固定組合、非固定組合或分裝部分之套組形式存在。
本發明中之「固定組合」係如熟習此項技術者所已知般使用，且定義為其中該第一活性成分與該第二活性成分一起存在於一個單位劑量或單一實體中的組合。「固定組合」之一個實例為其中該第一活性成分與該第二活性成分存在於同時投與之混雜物(諸如調配物)中的醫藥組合物。「固定組合」之另一實例為其中該第一活性成分與該第二活性成分存在於一個單位中而未經摻合之醫藥組合。
本發明中之非固定組合或「分裝部分之套組」係如熟習此項技術者所已知般使用，且定義為其中該第一活性成分與該第二活性成分存在於超過一個單位中的組合。非固定組合或分裝部分之套組之一個實例為其中該第一活性成分與該第二活性成分單獨存在之組合。非固定組合或分裝部分之套組之組分可單獨、依序、同時、並行或時間上錯開地投與。本發明之式(I)化合物與如下文所定義之抗癌劑之任何此類組合為本發明之一實施例。
術語「(化學治療)抗癌劑」包括(但不限於)： 131I-chTNT、阿巴瑞克(abarelix)、阿比特龍(abiraterone)、阿克拉黴素(aclarubicin)、阿達木單抗(adalimumab)、曲妥珠單抗-美坦新偶聯物(ado-trastuzumab emtansine)、阿法替尼(afatinib)、阿法利貝(aflibercept)、阿地白介素(aldesleukin)、阿來替尼(alectinib)、阿侖珠單抗(alemtuzumab)、阿侖膦酸(Alendronic acid)、亞利崔托寧(alitretinoin)、六甲蜜胺(altretamine)、阿米福汀(amifostine)、胺格魯米特(aminoglutethimide)、胺基乙醯丙酸己酯、胺柔比星(amrubicin)、安吖啶(amsacrine)、阿那曲唑(anastrozole)、安西司亭(ancestim)、大茴香腦、二硫雜環戊二烯硫酮、阿內圖單抗(anetumab)、拉夫坦辛(ravtansine)、血管緊張素II、抗凝血酶III、阿匹坦(aprepitant)、阿西莫單抗(arcitumomab)、阿格拉賓(arglabin)、三氧化二砷、天冬醯胺酶、阿特珠單抗(atezolizumab)、阿西替尼(axitinib)、阿紮胞苷(azacitidine)、巴利昔單抗(basiliximab)、貝洛替康(belotecan)、苯達莫司汀(bendamustine)、貝索單抗(besilesomab)、貝林諾他(belinostat)、貝伐單抗(bevacizumab)、貝瑟羅汀(bexarotene)、比卡魯胺(bicalutamide)、比生群(bisantrene)、博萊黴素(bleomycin)、布林莫單抗(blinatumomab)、硼替佐米(bortezomib)、布舍瑞林(buserelin)、伯舒替尼(bosutinib)、貝倫妥單抗維多汀(brentuximab vedotin)、白消安(busulfan)、卡巴他賽(cabazitaxel)、卡博替尼(cabozantinib)、降鈣素(calcitonine)、亞葉酸鈣、左旋亞葉酸鈣、卡培他濱(capecitabine)、卡羅單抗(capromab)、卡馬西平(carbamazepine)、卡鉑(carboplatin)、卡波醌(carboquone)、卡非佐米(carfilzomib)、卡莫氟(carmofur)、卡莫司汀(carmustine)、卡托莫西單抗(catumaxomab)、塞內昔布(celecoxib)、西莫白介素(celmoleukin)、塞瑞替尼(ceritinib)、西妥昔單抗(cetuximab)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、氯地孕酮(chlormadinone)、雙氯乙基甲胺(chlormethine)、西多福韋(cidofovir)、西那卡塞(cinacalcet)、順鉑(cisplatin)、克拉屈濱(cladribine)、氯膦酸(clodronic acid)、氯法拉濱(clofarabine)、考比替尼(cobimetinib)、考班昔布(copanlisib)、克裏沙納塔斯蛋白酶(crisantaspase)、克唑替尼(crizotinib)、環磷醯胺、環丙孕酮(cyproterone)、阿糖胞苷(cytarabine)、達卡巴嗪(dacarbazine)、放線菌素d (dactinomycin)、達雷木單抗(daratumumab)、阿法達貝泊汀(darbepoetin alfa)、達拉非尼(dabrafenib)、達沙替尼(dasatinib)、道諾黴素(daunorubicin)、地西他濱(decitabine)、地加瑞克(degarelix)、地尼白介素迪夫托斯(denileukin diftitox)、德諾單抗(denosumab)、地普奧肽(depreotide)、德舍瑞林(deslorelin)、衛康醇(dianhydrogalactitol)、右雷佐生(dexrazoxane)、二溴螺氯銨(dibrospidium chloride)、衛康醇(dianhydrogalactitol)、雙氯芬酸(diclofenac)、迪努妥昔單抗(dinutuximab)、多西他賽(docetaxel)、多拉司瓊(dolasetron)、脫氧氟尿苷(doxifluridine)、小紅莓(doxorubicin)、小紅莓+雌酮、屈大麻酚(dronabinol)、依庫珠單抗(eculizumab)、依決洛單抗(edrecolomab)、依利醋銨(elliptinium acetate)、埃羅妥珠單抗(elotuzumab)、艾曲波帕(eltrombopag)、內皮生長抑素(endostatin)、依諾他濱(enocitabine)、恩雜魯胺(enzalutamide)、表柔比星(epirubicin)、環硫雄醇(epitiostanol)、阿法依泊汀(epoetin alfa)、倍他依泊汀(epoetin beta)、澤塔依伯汀(epoetin zeta)、依鉑(eptaplatin)、艾瑞布林(eribulin)、厄洛替尼(erlotinib)、埃索美拉唑(esomeprazole)、雌二醇(estradiol)、雌氮芥(estramustine)、炔雌醇(ethinylestradiol)、依託泊苷(etoposide)、依維莫司(everolimus)、依西美坦(exemestane)、法屈唑(fadrozole)、芬太尼(fentanyl)、非格司亭(filgrastim)、氟甲睾酮(fluoxymesterone)、氟尿苷(floxuridine)、氟達拉濱(fludarabine)、氟尿嘧啶(fluorouracil)、氟他胺(flutamide)、亞葉酸(folinic acid)、福美司坦(formestane)、福沙匹坦(fosaprepitant)、福莫司汀(fotemustine)、氟維司群(fulvestrant)、釓布醇(gadobutrol)、釓特醇(gadoteridol)、釓特酸葡甲胺(gadoteric acid meglumine)、釓弗塞胺(gadoversetamide)、釓塞酸(gadoxetic acid)、硝酸鎵、加尼瑞克(ganirelix)、吉非替尼、吉西他濱、吉妥珠單抗(gemtuzumab)、谷卡匹酶(Glucarpidase)、氧化型麩胱甘肽(glutoxim)、GM-CSF、戈舍瑞林(goserelin)、格拉司瓊(granisetron)、粒細胞群落刺激因子、組胺二鹽酸鹽、組胺瑞林(histrelin)、羥基脲、I-125種子、蘭索拉唑(lansoprazole)、伊班膦酸(ibandronic acid)、替伊莫單抗(ibritumomab tiuxetan)、依魯替尼(ibrutinib)、艾達黴素(idarubicin)、異環磷醯胺(ifosfamide)、伊馬替尼(imatinib)、咪喹莫特(imiquimod)、英丙舒凡(improsulfan)、吲地司瓊(indisetron)、英卡膦酸(incadronic acid)、巨大戟醇甲基丁烯酸酯(ingenol mebutate)、干擾素α、干擾素β、干擾素γ、碘比醇(iobitridol)、碘苄胍(iobenguane) (123I)、碘美普爾(iomeprol)、伊匹木單抗(ipilimumab)、伊立替康(irinotecan)、伊曲康唑(Itraconazole)、伊沙匹隆(ixabepilone)、依薩佐米(ixazomib)、蘭瑞肽(lanreotide)、蘭索拉唑(lansoprazole)、拉帕替尼(lapatinib)、艾索膽鹼(Iasocholine)、來那度胺(lenalidomide)、樂伐替尼(lenvatinib)、來格司亭(lenograstim)、香菇多糖(lentinan)、來曲唑(letrozole)、亮丙瑞林(leuprorelin)、左旋咪唑(levamisole)、左炔諾孕酮(levonorgestrel)、左旋甲狀腺素鈉(levothyroxine sodium)、麥角乙脲(lisuride)、洛鉑(lobaplatin)、洛莫司汀(lomustine)、氯尼達明(lonidamine)、馬索羅酚(masoprocol)、甲羥孕酮(medroxyprogesterone)、甲地孕酮(megestrol)、美拉胂醇(melarsoprol)、美法侖(melphalan)、美雄烷(mepitiostane)、巰基嘌呤、美司鈉(mesna)、美沙酮(methadone)、甲胺喋呤(methotrexate)、甲氧沙林(methoxsalen)、胺基乙醯丙酸甲酯(methylaminolevulinate)、甲基潑尼龍(methylprednisolone)、甲睾酮(methyltestosterone)、甲酪胺酸(metirosine)、米伐木肽(mifamurtide)、米替福新(miltefosine)、米鉑(miriplatin)、二溴甘露醇(mitobronitol)、米托胍腙(mitoguazone)、二溴衛矛醇(mitolactol)、絲裂黴素(mitomycin)、米托坦(mitotane)、米托蒽醌(mitoxantrone)、莫格利珠單抗(mogamulizumab)、莫拉司亭(molgramostim)、莫哌達醇(mopidamol)、嗎啡鹼鹽酸鹽、嗎啡鹼硫酸鹽、納比隆(nabilone)、納比系莫耳(nabiximols)、那法瑞林(nafarelin)、納洛酮(naloxone)+戊唑辛(pentazocine)、納曲酮(naltrexone)、那托司亭(nartograstim)、萊西單抗(necitumumab)、奈達鉑(nedaplatin)、奈拉濱(nelarabine)、奈立膦酸(neridronic acid)、奈妥吡坦/帕洛諾司瓊(netupitant/palonosetron)、納武單抗(nivolumab)、噴曲肽(pentetreotide)、尼羅替尼(nilotinib)、尼魯米特(nilutamide)、尼莫唑(nimorazole)、尼妥珠單抗(nimotuzumab)、尼莫司汀(nimustine)、尼達尼布(nintedanib)、二胺硝吖啶(nitracrine)、納武單抗、歐比托珠單抗(obinutuzumab)、奧曲肽(octreotide)、奧伐木單抗(ofatumumab)、奧拉帕尼(olaparib)、奧拉單抗(olaratumab)、奧馬他辛(omacetaxine)、美匹辛雷(mepesuccinate)、奧美拉唑(omeprazole)、昂丹司瓊(ondansetron)、奧普瑞白介素(oprelvekin)、奧古蛋白(orgotein)、奧瑞洛替莫德(orilotimod)、奧希替尼(osimertinib)、奧沙利鉑(oxaliplatin)、羥考酮(oxycodone)、羥次甲氫龍(oxymetholone)、奧佐米星(ozogamicine)、p53基因療法、太平洋紫杉醇(paclitaxel)、帕泊昔布(palbociclib)、帕利夫明(palifermin)、鈀-103種子、帕洛諾司瓊(palonosetron)、帕米膦酸(pamidronic acid)、帕尼單抗(panitumumab)、帕比諾他(panobinostat)、泮托拉唑(pantoprazole)、帕佐泮尼(pazopanib)、培門冬酶(pegaspargase)、PEG-倍他依泊汀(甲氧基PEG-倍他依泊汀)、帕博利珠單抗(pembrolizumab)、派非格司亭(pegfilgrastim)、peg干擾素α-2b、帕博利珠單抗、培美曲塞(pemetrexed)、戊唑辛(pentazocine)、噴司他丁(pentostatin)、培洛黴素(peplomycin)、全氟正丁烷、培磷醯胺(perfosfamide)、帕妥珠單抗(Pertuzumab)、畢西巴尼(picibanil)、匹魯卡品(pilocarpine)、吡柔比星(pirarubicin)、匹蒽醌(pixantrone)、普樂沙福(plerixafor)、普卡黴素(plicamycin)、聚胺葡糖(poliglusam)、聚磷酸雌二醇、聚乙烯吡咯啶酮+玻尿酸鈉、多醣-K、泊利度胺(pomalidomide)、普納替尼(ponatinib)、卟吩姆鈉(porfimer sodium)、普拉曲沙(pralatrexate)、潑尼氮芥(prednimustine)、潑尼松(prednisone)、丙卡巴肼(procarbazine)、丙考達唑(procodazole)、普萘洛爾(propranolol)、喹高利特(quinagolide)、雷貝拉唑(rabeprazole)、拉克莫單抗(racotumomab)、氯化鐳-223、拉多替尼(radotinib)、雷洛昔芬(raloxifene)、雷替曲塞(raltitrexed)、拉莫司瓊(ramosetron)、雷莫蘆單抗(ramucirumab)、雷莫司汀(ranimustine)、拉布立酶(rasburicase)、雷佐生(razoxane)、瑞法美替尼(refametinib)、瑞戈非尼(regorafenib)、利塞膦酸(risedronic acid)、依替膦酸錸-186、利妥昔單抗(rituximab)、羅拉匹坦(rolapitant)、羅米地辛(romidepsin)、羅米司亭(romiplostim)、羅莫泰德(romurtide)、盧卡帕尼(roniciclib)、來昔決南釤(153Sm)、沙格司亭(sargramostim)、沙妥莫單抗(satumomab)、腸泌素(secretin)、司妥昔單抗(siltuximab)、西普亮塞-T (sipuleucel-T)、西索菲蘭(sizofiran)、索布佐生(sobuzoxane)、甘胺雙唑鈉(sodium glycididazole)、索尼得吉(sonidegib)、索拉非尼(sorafenib)、司坦唑醇(stanozolol)、鏈脲黴素(streptozocin)、舒尼替尼(sunitinib)、他拉泊芬(talaporfin)、塔裏穆尼拉赫帕雷普韋克(talimogene laherparepvec)、他米巴羅汀(tamibarotene)、他莫昔芬(tamoxifen)、他噴他多(tapentadol)、他索納明(tasonermin)、替西白介素(teceleukin)、美噴坦諾非單抗鎝( 99mTc) (nofetumomab merpentan)、99mTc-HYNIC-[Tyr3]-奧曲肽、替加氟(tegafur)、替加氟+吉美拉西(gimeracil)+奧特拉西(oteracil)、替莫泊芬(temoporfin)、替莫唑胺(temozolomide)、替西羅莫司(temsirolimus)、替尼泊苷(teniposide)、睾固酮、替曲膦(tetrofosmin)、沙立度胺(thalidomide)、噻替派(thiotepa)、胸腺法新(thymalfasin)、促甲狀腺激素α (thyrotropin alfa)、硫鳥嘌呤、托西利單抗(tocilizumab)、拓朴替康(topotecan)、托瑞米芬(toremifene)、托西莫單抗(tositumomab)、曲貝替定(trabectedin)、曲美替尼(trametinib)、曲馬多(tramadol)、曲妥珠單抗(trastuzumab)、曲妥珠單抗恩他新、曲奧舒凡(treosulfan)、維甲酸(tretinoin)、曲氟尿苷(trifluridine)+替吡嘧啶(tipiracil)、曲洛司坦(trilostane)、曲普瑞林(triptorelin)、曲美替尼(trametinib)、曲洛磷胺(trofosfamide)、血小板生成素(thrombopoietin)、色胺酸、烏苯美司(ubenimex)、伐拉替尼(valatinib)、伐柔比星(valrubicin)、凡德他尼(vandetanib)、伐普肽(vapreotide)、維羅非尼(vemurafenib)、長春鹼(vinblastine)、長春新鹼(vincristine)、長春地辛(vindesine)、長春氟寧(vinflunine)、長春瑞濱(vinorelbine)、維莫德吉(vismodegib)、伏立諾他(vorinostat)、伏羅唑(vorozole)、釔-90玻璃微球、淨司他丁(zinostatin)、淨司他丁司他美(zinostatin stimalamer)、唑來膦酸(zoledronic acid)、左柔比星(zorubicin)。 通用程序
本發明化合物可根據以下流程1至7製備。
下文所描述之流程及程序說明本發明之通式(I)化合物之合成途徑且並不意欲為限制性的。熟習此項技術者清楚，可以各種方式來修改如流程中所例示之轉化次序。因此，流程中所例示之轉化次序並不意欲為限制性的。另外，取代基R 1a、R 1b、R 1c、R 1d、R 1e、R 2、R 3、R 4a、R 4b、R 5a、R 6a、A、X、Y、Z、Q、PG及T中之任一者之互換可在例示性轉化之前及/或之後達成。此等修改可為諸如保護基引入、保護基裂解、官能基還原或氧化、去氫化、鹵化、金屬化、取代或熟習此項技術者所已知之其他反應。此等轉化包括引入官能基的彼等轉化，從而允許取代基進一步互換。適當保護基及其引入及裂解為熟習此項技術者所熟知。
特定實例描述於後續段落中。
流程 1
Figure 02_image073
流程 1：通式(I)化合物之製備途徑，其中R 2、R 3、A、X、Y及Z具有如上文關於通式(I)所給出之意義。Q表示氯、溴或碘，較佳為溴或碘，且M表示氯、溴或碘，較佳為溴。另外，取代基R 1a、R 1b、R 1c、R 1d、R 1e、R 2、R 3、R 4a、R 4b、R 5a、R 6a、A、X、Y、Z、Q及PG中之任一者之互換可在例示性轉化之前及/或之後達成。
試劑A為可商購的或可根據可自公共領域獲得的如熟習此項技術者可理解的程序來製備。特定實例描述於隨後段落中。
通式(II)之胺基-芳基化合物，諸如2-溴-吡啶-3-胺或2-溴-6-氟吡啶-3-胺，可利用催化劑系統，在適合的溶劑系統中(諸如三乙胺，或三乙胺與DMF或DMA或NMP，較佳DMF之混合物)，在50℃至120℃範圍內之溫度下，較佳在70℃至90℃範圍內之溫度下與式(III)之炔烴反應，得到通式(IV)之中間物，該催化劑系統通常用於文獻((K. Sonogashira, Y. Tohda, N. Hagihara: Tetrahedron Lett. 1975, S. 4467-4470)中所描述的薗頭偶合中，如同例如二氯雙(三苯基膦)鈀(II)及碘化銅(I)。之前進行類似反應且描述於文獻(ACS Med. Chem. Lett. 2018, 9, 1117-1122)中。
通式(IV)之中間物可藉由在適合的溶劑系統(諸如NMP或DMA，較佳NMP)中，在50℃至120℃範圍內之溫度下，較佳在80℃至100℃範圍內之溫度下與適合的鹼(諸如2-甲基丙-2-醇鉀)反應而轉化成通式(V-H)之中間物。或者，反應可在適合溶劑系統(諸如NMP)中，在100℃與150℃之間的溫度下，較佳120℃至140℃下，用碘化銅(I)進行，得到通式(V-H)化合物。
通式(V-H)之中間物可藉由與鹵化劑(如NBS)在適合溶劑系統(諸如DMF或DMA)中在0℃至50℃範圍內之溫度下，較佳在室溫下反應而轉化為通式(V-Q)之中間物。利用NBS作為試劑將得到式(V-Q)之中間物，其中Q表示溴。利用NCS作為試劑將得到通式(V-Q)之中間物，其中Q表示氯，且利用NIS作為試劑將得到通式(V-Q)之中間物，其中Q表示碘。
通式(V-H)之中間物可在適合的溶劑系統(諸如，DMF或DMA或NMP或二氯甲烷或THF或此等溶劑之混合物，較佳在DMF中)及適合試劑中與適合的鹼(如例如碳酸氫鈉、碳酸鈉、碳酸鉀或氫化鈉)在0℃至50℃之範圍內之溫度下，較佳在室溫下反應，以引入如例如SEM-Cl之保護基，得到通式(VI)之中間物。適當保護基及其引入及裂解為熟習此項技術者所熟知(參見例如T.W. Greene及P.G.M. Wutts in Protective Groups in Organic Synthesis, 第3版, Wiley 1999)。
同樣，通式(V-Q)之中間物可在適合的溶劑系統(諸如，DMF或DMA或NMP或二氯甲烷或THF或此等溶劑之混合物中，較佳在DMF中)及適合試劑中與適合的鹼(如例如碳酸氫鈉、碳酸鈉、碳酸鉀或氫化鈉)在0℃至50℃溫度範圍中，較佳在室溫下反應，以引入如例如SEM-Cl之保護基，得到通式(VI-Q)之中間物。適當保護基及其引入及裂解為熟習此項技術者所熟知(參見例如T.W. Greene及P.G.M. Wutts in Protective Groups in Organic Synthesis, 第3版，Wiley 1999)。
通式(VI-H)之中間物可藉由在0℃至50℃範圍內之溫度下，較佳在室溫下與如NBS之鹵化劑在適合的溶劑系統(諸如DMF或DMA)中反應而轉化為通式(VI-Q)之中間物。利用NBS作為試劑將得到式(VI-Q)之中間物，其中Q表示溴。利用NCS作為試劑將得到通式(VI-Q)之中間物，其中Q表示氯，且利用NIS作為試劑將得到通式(VI-Q)之中間物，其中Q表示碘。
通式(VI-Q)之中間物可藉由如下轉化為通式(VI-A)之中間物：在適合的溶劑系統(諸如甲苯、二㗁烷、DMF、DMA或NMP，或此等溶劑之混合物)中，較佳在二㗁烷中，在60℃至130℃之溫度範圍中，較佳在80℃至100℃之溫度範圍中，在適合的催化劑系統存在下與適合的錫烷(如例如2-(三丁基錫烷基)吡啶或2-氟-6-(三丁基錫烷基)吡啶)或適合的硼酸(如例如苯基硼酸或適合的硼酸衍生物)反應，該催化劑系統較佳為鈀催化劑，如例如肆(三苯基膦)鈀(0)或使用氯化鋰作為添加劑之肆(三苯基膦)鈀(0)，或例如由如同乙酸鈀或Pd 2dba 3的鈀源且作為配位體之XPhos製備的鈀催化劑，或鈀-XPhos預催化劑，如同Pd-Xphos G2或Pd-Xphos G3，較佳Pd-Xphos G3。
通式(V-Q)之中間物可藉由如下轉化為通式(V-A)之中間物：在適合的溶劑系統(諸如甲苯、二㗁烷、DMF、DMA或NMP，或此等溶劑之混合物)中，較佳在二㗁烷中，在60℃至130℃之溫度範圍中，較佳在90℃至110℃之溫度範圍中，在適合的催化劑系統存在下與適合的錫烷(如例如2-(三丁基錫烷基)吡啶或2-氟-6-(三丁基錫烷基)吡啶)或適合的硼酸(如例如苯基硼酸或適合的硼酸衍生物)反應，該催化劑系統較佳為鈀催化劑，如例如肆(三苯基膦)鈀(0)或使用氯化鋰作為添加劑之肆(三苯基膦)鈀(0)，或例如由如同乙酸鈀或Pd 2dba 3的鈀源且作為配位體之XPhos製備的鈀催化劑，或鈀-XPhos預催化劑，如同Pd-Xphos G2或Pd-Xphos G3，較佳為使用氯化鋰作為添加劑之肆(三苯基膦)鈀(0)。
通式(VI-A)之中間物可藉由利用適當試劑裂解熟習此項技術者熟知之所應用保護基而轉化為通式(V-A)之中間物(參見例如T.W. Greene及P.G.M. Wutts in Protective Groups in Organic Synthesis,第3版本, Wiley 1999)。具體言之，對於PG表示SEM之中間物，可例如在60℃至130℃之溫度範圍中，較佳在各別溶劑之沸點溫度下，在適合的溶劑系統(如例如醇，如乙醇或1-丙醇)中使用酸(如例如鹽酸)移除SEM基團。或者，對於PG表示SEM之中間物，SEM基團可例如藉由以下方式移除：使通式(VI-A)之中間物與醚合三氟化硼在例如乙腈之適合溶劑系統中在0℃至40℃之溫度範圍中，較佳在室溫下反應，接著在0℃至40℃之溫度範圍內中，較佳在室溫下添加過量氫氧化銨水溶液，得到通式(V-A)之中間物。
通式(V-A)之中間物可藉由在適合的溶劑系統(諸如甲醇或乙醇或THF或三級丁醇或此等溶劑之混合物)中，較佳在甲醇或THF中，在60℃至100℃之溫度範圍中，較佳在70℃至90℃之溫度範圍中與適合的鹼(諸如氫氧化鈉水溶液或氫氧化鉀水溶液或氫氧化鋰水溶液，較佳氫氧化鈉水溶液)反應而轉化為通式(VII-A)之中間物。
使通式(VII-A)之中間物與由通式之試劑(試劑A)製備之醯化劑或可自通式之試劑(試劑A)原位產生之醯化劑反應以得到通式(I)之化合物。此等反應類型為熟知的(所選文獻實例為：S. Miwatashi等人，J. Med. Chem., 2005, 48, 5966 - 5979; J. Zhao等人，Bioorg. Med. Chem. Lett., 2014, 24,. 2802 - 2806; M. P. Hay等人，J. Med. Chem., 2010, 53, 787 - 797; J. M. Keith等人，Med. Chem. Lett, 2012, 3, 823 - 827; J. Liang等人，Eur. J. Med. Chem., 2013, 67, 175 - 187)。
此等類型試劑之非限制實例為： i)       羧酸與通常在醯胺鍵形成中所用之脫水試劑，諸如(HBTU、HATU、PyBOP、BOP、T3P、EDC、DIC、DCC) ii)     酸氟化物、酸氯化物或酸溴化物，較佳在鹼存在下 iii)   以下通式之酸酐
Figure 02_image075
較佳在鹼存在下。
較佳地，醯化反應係在如DMF、DMA、NMP、二氯甲烷或THF或此等溶劑之混合物之溶劑中進行，更佳地係在如DMA或二氯甲烷或DMA與二氯甲烷之混合物之溶劑中進行，以使用偶合劑(如例如HATU、PyBOP或BOP，更佳PyBOP)及鹼(如例如碳酸鉀或三乙胺或休尼格鹼、較佳休尼格鹼)，使通式(VII-A)之中間物與通式之試劑(試劑A)在0℃至40℃之溫度範圍中，較佳在室溫下反應，得到通式(I)化合物。
該醯化劑可呈受保護形式，含有如Boc之保護基，例如產生受保護形式之通式(I)化合物，其在另一去保護步驟之後得到通式(I)化合物。其他保護基為熟習此項技術者所熟知。有關大多數經證實保護基之使用的詳細描述可見於例如T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, 1999, 第3版或P. Kocienski, Protecting Groups, Thieme Medical Publishers, 2000中。
流程 2
Figure 02_image077
流程 2：通式(I)化合物之製備途徑，其中R 2、R 3、A、X、Y及Z具有如上文關於通式(I)所給出之意義。Q表示氯、溴或碘，較佳為溴或碘。另外，取代基R 1a、R 1b、R 1c、R 1d、R 1e、R 2、R 3、R 4a、R 4b、R 5a、R 6a、A、X、Y、Z、Q及PG中之任一者之互換可在例示性轉化之前及/或之後達成。
通式(VI-H)之中間物可藉由在適合的溶劑系統(諸如甲醇或乙醇或THF或三級丁醇或此等溶劑之混合物)中，較佳在甲醇或THF中，在60℃至100℃之溫度範圍中，較佳在70℃至90℃之溫度範圍中與適合的鹼(諸如氫氧化鈉水溶液或氫氧化鉀水溶液或氫氧化鋰水溶液，較佳氫氧化鈉水溶液)反應而轉化為通式(VII-H)之中間物。
同樣，通式(VI-Q)之中間物可藉由在適合的溶劑系統(諸如甲醇或乙醇或THF或三級丁醇或此等溶劑之混合物)中，較佳在甲醇或THF中，在60℃至100℃之溫度範圍中，較佳在70℃至90℃之溫度範圍中與適合的鹼(諸如氫氧化鈉水溶液或氫氧化鉀水溶液或氫氧化鋰水溶液，較佳氫氧化鈉水溶液)反應而轉化為通式(VIII-Q)之中間物。
同樣，通式(VI-A)之中間物可藉由在適合的溶劑系統(諸如甲醇或乙醇或THF或三級丁醇或此等溶劑之混合物)中，較佳在甲醇或THF中，在60℃至100℃之溫度範圍中，較佳在70℃至90℃之溫度範圍中與適合的鹼(諸如氫氧化鈉水溶液或氫氧化鉀水溶液或氫氧化鋰水溶液，較佳氫氧化鈉水溶液)反應而轉化為通式(VIII-A)之中間物。
通式(VIII-H)之中間物可藉由如針對通式(VII-A)之中間物轉化成上述通式(I)化合物所描述的類似程序轉化成通式(IX-H)之中間物。
同樣地，通式(VIII-Q)之中間物可藉由如針對通式(VII-A)之中間物轉化成上述通式(I)化合物所描述之類似程序而轉化成通式(IX-Q)之中間物。
同樣地，通式(VIII-A)之中間物可藉由如針對通式(VII-A)之中間物轉化成上述通式(I)之化合物所描述之類似程序而轉化成通式(IX-A)之中間物。
通式(VIII-H)之中間物可藉由如針對通式(VI-H)之中間物轉化成上述通式(VI-Q)之化合物所描述之類似程序轉化成通式(VIII-Q)之中間物。
通式(VIII-Q)之中間物可藉由如針對通式(VI-Q)之中間物轉化成上述通式(VI-A)之化合物所描述之類似程序轉化成通式(VIII-A)之中間物。
通式(IX-H)之中間物可藉由如針對通式(V-H)之中間物轉化成上述通式(V-Q)之中間物所描述之類似程序轉化成通式(IX-Q)之中間物。
通式(IX-Q)之中間物可藉由如針對通式(VI-Q)之中間物轉化成上述通式(VI-A)之中間物所描述之類似程序轉化成通式(IX-A)之中間物。
通式(IX-A)之中間物可藉由如針對通式(VI-A)之中間物轉化成上述通式(V-A)之中間物所描述之類似程序轉化成通式(I)化合物。
流程 3
Figure 02_image079
流程 3：通式(I)化合物之製備途徑，其中R 2、R 3、A、X、Y及Z具有如上文關於通式(I)所給出之意義。Q表示氯、溴或碘，較佳為溴或碘，且M表示氯、溴或碘，較佳為溴。另外，取代基R 1a、R 1b、R 1c、R 1d、R 1e、R 2、R 3、R 4a、R 4b、R 5a、R 6a、A、X、Y、Z、Q及PG中之任一者之互換可在例示性轉化之前及/或之後達成。
試劑B可與由通式之試劑(試劑A)製備之醯化劑或可自通式之試劑(試劑A)原位產生之醯化劑反應以得到通式(X)之化合物。此等反應類型為熟知的(所選文獻實例為：S. Miwatashi等人，J. Med. Chem., 2005, 48, 5966 - 5979; J. Zhao等人，Bioorg. Med. Chem. Lett., 2014, 24,. 2802 - 2806; M. P. Hay等人，J. Med. Chem., 2010, 53, 787 - 797; J. M. Keith等人，Med. Chem. Lett, 2012, 3, 823 - 827; J. Liang等人，Eur. J. Med. Chem., 2013, 67, 175 - 187)。
此等類型試劑之非限制實例為： i)       羧酸與通常在醯胺鍵形成中所用之脫水試劑，諸如(HBTU、HATU、PyBOP、BOP、T3P、EDC、DIC、DCC) ii)     酸氟化物、酸氯化物或酸溴化物，較佳在鹼存在下 iii)   以下通式之酸酐
Figure 02_image081
較佳在鹼存在下。
較佳地，醯化反應係在如DMF、DMA、NMP、二氯甲烷或THF或此等溶劑之混合物之溶劑中進行，更佳地係在如同DMA或二氯甲烷或DMA與二氯甲烷之混合物之溶劑中進行，以使用偶合劑(如例如HATU、PyBOP或BOP，更佳HATU)及鹼(如例如碳酸鉀或三乙胺或休尼格鹼、較佳休尼格鹼)，使試劑B與通式之試劑(試劑A)在0℃至40℃之溫度範圍中，較佳在室溫下反應，得到通式(X)之化合物。
通式(X)之中間物可藉由以下方式轉化為通式(XI)之中間物：利用催化劑系統，在適合的溶劑系統中(諸如三乙胺，或三乙胺與DMF或DMA或NMP，較佳DMF之混合物)，在50℃至120℃範圍內之溫度下，較佳在70℃至90℃範圍內之溫度下與乙炔基(三甲基)矽烷反應，得到通式(XI)之中間物，該催化劑系統通常用於文獻((K. Sonogashira, Y. Tohda, N. Hagihara: Tetrahedron Lett. 1975, S. 4467-4470)中所描述的薗頭偶合中，如同例如二氯雙(三苯基膦)鈀(II)及碘化銅(I)。之前進行類似反應且描述於文獻(ACS Med. Chem. Lett. 2018, 9, 1117-1122; Org. Lett. 2014, 16, 708-711)中。
通式(XI)之中間物可藉由以下方式轉化為通式(XII)之中間物：在適合的溶劑系統(諸如甲醇或乙醇或DMF或DMA或NMP或此等溶劑之混合物)，較佳在甲醇或乙醇中，在0℃至50℃之溫度範圍中，較佳在室溫下，與適合的鹼(如例如碳酸鉀或氫氧化鈉，較佳碳酸鉀)反應，得到通式(XII)之中間物。適當保護基及其引入及裂解為熟習此項技術者所熟知(參見例如T.W. Greene及P.G.M. Wutts in Protective Groups in Organic Synthesis, 第3版，Wiley 1999)。
通式(XII)之中間物可藉由以下方式轉化為通式(XIII)之中間物：利用催化劑系統，在適合的溶劑系統(諸如三乙胺，或三乙胺與DMF或DMA或NMP，較佳DMF之混合物)中，在50℃至120℃範圍內之溫度下，較佳在70℃至110℃範圍內之溫度下，與通式(II)之胺基-芳基化合物(諸如2-溴-吡啶-3-胺或2-溴-6-氟吡啶-3-胺)反應，得到通式(IV)之中間物，該催化劑系統通常用於文獻((K. Sonogashira, Y. Tohda, N. Hagihara: Tetrahedron Lett. 1975, S. 4467-4470)中所描述的薗頭偶合中，如同例如二氯雙(三苯基膦)鈀(II)及碘化銅(I)。之前進行類似反應且描述於文獻(ACS Med. Chem. Lett. 2018, 9, 1117-1122)中。
通式(XIII)之中間物可藉由如針對通式(IV)之中間物轉化成上述通式(V-H)之中間物所描述的類似程序轉化成通式(XIV-H)之中間物。
通式(XIV-H)之中間物可藉由如針對通式(V-H)之中間物轉化成上述通式(V-Q)之中間物所描述之類似程序轉化成通式(XIV-Q)之中間物。
通式(XIV-H)之中間物可藉由如針對通式(V-H)之中間物轉化成上述通式(VI-H)之中間物所描述的類似程序轉化成通式(IX-H)之中間物。
通式(XIV-Q)之中間物可藉由如針對通式(V-Q)之中間物轉化成上述通式(VI-Q)之中間物所描述之類似程序轉化成通式(IX-Q)之中間物。
通式(XIV-Q)之中間物可藉由以下方式轉化為通式(I)之化合物：在適合的溶劑系統(諸如甲苯、二㗁烷、DMF、DMA或NMP，或此等溶劑之混合物)中，較佳在二㗁烷中，在60℃至130℃之溫度範圍中，較佳在90℃至110℃之溫度範圍中，在適合的催化劑系統存在下與適合的錫烷(如例如2-(三丁基錫烷基)吡啶或2-氟-6-(三丁基錫烷基)吡啶)或適合的硼酸(如例如苯基硼酸或適合的硼酸衍生物)反應，該催化劑系統較佳為鈀催化劑，如例如肆(三苯基膦)鈀(0)或使用氯化鋰作為添加劑之肆(三苯基膦)鈀(0)，或例如由如同乙酸鈀或Pd 2dba 3的鈀源且作為配位體之XPhos製備的鈀催化劑，或鈀-XPhos預催化劑，如同Pd-Xphos G2或Pd-Xphos G3，較佳為使用氯化鋰作為添加劑之肆(三苯基膦)鈀(0)。
流程 4
Figure 02_image083
流程 4：通式(I)化合物之製備途徑，其中R 2、R 3、A、X、Y及Z具有如上文關於通式(I)給出之意義；T表示CF 3-C(O)-、甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或Ph-SO 2-，其中Ph可經鹵素或甲基-基團或硝基-基團取代一次、兩次或三次。取代基R 1a、R 1b、R 1c、R 1d、R 1e、R 2、R 3、R 4a、R 4b、R 5a、R 6a、A、X、Y、Z及T中之任一者之互換可在例示性轉化之前及/或之後達成。
通式(IV)之中間物可藉由以下方式轉化為通式(XV)之中間物(其中T表示CF 3-C(O)-)：在適合的溶劑系統(諸如二氯甲烷、THF或乙腈或此等溶劑之混合物)中，較佳在二氯甲烷或乙腈中與如三氟乙酸酐之試劑反應，且在-10℃至40℃之溫度範圍中，較佳在0℃至室溫之溫度範圍中與鹼(如例如碳酸鉀或三乙胺或休尼格鹼，較佳三乙胺或休尼格鹼)反應，得到通式(XV)之中間物，其中T表示CF 3-C(O)-。
通式(IV)之中間物可藉由以下方式轉化為通式(XV)之中間物(其中T表示甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或Ph-SO 2-，其中Ph可經鹵素或甲基-基團或硝基基團取代一次、兩次或三次)：在適合的溶劑系統(諸如二氯甲烷、THF或乙腈或此等溶劑之混合物)中，較佳在二氯甲烷或乙腈中與適合的試劑(如例如甲烷磺醯氯或甲苯磺醯氯或硝苯磺醯氯)反應，且在-10℃至40℃之溫度範圍中，較佳在0℃至室溫之溫度範圍中與鹼(如例如碳酸鉀或三乙胺或休尼格鹼或吡啶，較佳三乙胺、吡啶或休尼格鹼)反應，得到通式(XV)之中間物，其中T表示甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或Ph-SO 2-，其中Ph可經鹵素或甲基-基團或硝基-基團取代一次、兩次或三次。
通式(XV)之中間物(其中T表示CF 3-C(O)-)可藉由以下方式轉化為通式(V-A)之中間物：在適合的溶劑系統(諸如乙腈、甲苯、二㗁烷、DMF、DMA或NMP，或此等溶劑之混合物)中，較佳在乙腈或二㗁烷中，在如碳酸銫或磷酸三鉀之鹼之存在下，在60℃至130℃之溫度範圍中，較佳在80℃至100℃之溫度範圍中，與適合的鹵素化合物(如例如2-溴吡啶或2-碘吡啶或碘苯)在適合的催化劑系統存在下反應，得到通式(V-A)之中間物，該催化劑系統較佳為鈀催化劑，如例如肆(三苯基膦)鈀(0)，或例如由如同乙酸鈀或Pd 2dba 3之鈀源且XPhos作為配位體製備的鈀催化劑，或鈀-XPhos預催化劑，如同Pd-Xphos G2或Pd-Xphos G3，較佳Pd-Xphos G3。
通式(XV)之中間物(其中T表示甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或Ph-SO 2-，其中Ph可經鹵素或甲基-基團或硝基-基團取代一次、兩次或三次)可藉由以下方式轉化為通式(XVI)之中間物(其中T表示甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或Ph-SO 2-，其中Ph可經鹵素或甲基-基團或硝基-基團取代一次、兩次或三次)：在適合的溶劑系統(諸如乙腈、甲苯、二㗁烷、DMF、DMA或NMP，或此等溶劑之混合物)中，較佳在乙腈或二㗁烷中，在如碳酸銫或磷酸三鉀之鹼之存在下，在60℃至130℃之溫度範圍中，較佳在80℃至100℃之溫度範圍中，與適合的鹵素化合物(如例如2-溴吡啶或2-碘吡啶或碘苯)在適合的催化劑系統存在下反應，得到通式(XVI)之中間物(其中T表示甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或Ph-SO 2-，其中Ph可經鹵素或甲基-基團或硝基-基團取代一次、兩次或三次)，該催化劑系統較佳為鈀催化劑，如例如肆(三苯基膦)鈀(0),或例如由如同乙酸鈀或Pd 2dba 3之鈀源且XPhos作為配位體製備的鈀催化劑，或鈀-XPhos預催化劑，如同Pd-Xphos G2或Pd-Xphos G3，較佳Pd-Xphos G3。
通式(XVI)之中間物(其中T表示甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或Ph-SO 2-，其中Ph可經鹵素或甲基-基團或硝基-基團取代一次、兩次或三次)可藉由以下方式轉化為通式(VII-A)之中間物：在適合的溶劑系統(諸如甲醇或乙醇或THF或三級丁醇或此等溶劑之混合物)中，較佳在甲醇或THF中，在60℃至100℃之溫度範圍中，較佳在70℃至90℃之溫度範圍中與適合的鹼(諸如氫氧化鈉水溶液或氫氧化鉀水溶液或氫氧化鋰水溶液，較佳氫氧化鈉水溶液)反應，得到通式(VII-A)之中間物。
通式(XIII)之中間物可藉由以下方式轉化為通式(XVII)之中間物(其中T表示CF 3-C(O)-)：在適合的溶劑系統(諸如二氯甲烷、THF或乙腈或此等溶劑之混合物)中，較佳在二氯甲烷或乙腈中與如三氟乙酸酐之試劑反應，且在-10℃至40℃之溫度範圍中，較佳在0℃至室溫之溫度範圍中與鹼(如例如碳酸鉀或三乙胺或休尼格鹼，較佳三乙胺或休尼格鹼)反應，得到通式(XVII)之中間物，其中T表示CF 3-C(O)-。通式(XIII)之中間物可藉由以下方式轉化為通式(XV)之中間物(其中T表示甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或Ph-SO 2-，其中Ph可經鹵素或甲基-基團或硝基-基團取代一次、兩次或三次)：在適合的溶劑系統(諸如二氯甲烷、THF或乙腈或此等溶劑之混合物)中，較佳在二氯甲烷或乙腈中與適合的試劑(如例如甲烷磺醯氯或甲苯磺醯氯或硝苯磺醯氯)反應，且在-10℃至40℃之溫度範圍中，較佳在0℃至室溫之溫度範圍中與鹼(如例如碳酸鉀或三乙胺或休尼格鹼或吡啶，較佳三乙胺、吡啶或休尼格鹼)反應，得到通式(XVII)之中間物，其中T表示甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或Ph-SO 2-，其中Ph可經鹵素或甲基-基團或硝基基團取代一次、兩次或三次。
通式(XVII)之中間物(其中T表示CF 3-C(O)-)可藉由以下方式轉化為通式(I)之化合物：在適合的溶劑系統(諸如乙腈、甲苯、二㗁烷、DMF、DMA或NMP，或此等溶劑之混合物)中，較佳在乙腈或二㗁烷中，在如碳酸銫或磷酸三鉀之鹼之存在下，在60℃至130℃之溫度範圍中，較佳在80℃至100℃之溫度範圍中，與適合的鹵素化合物(如例如2-溴吡啶或2-碘吡啶或碘苯)在適合的催化劑系統存在下反應，得到通式(I)之化合物，該催化劑系統較佳為鈀催化劑，如例如肆(三苯基膦)鈀(0)，或例如由如同乙酸鈀或Pd 2dba 3之鈀源且XPhos作為配位體製備的鈀催化劑，或鈀-XPhos預催化劑，如同Pd-Xphos G2或Pd-Xphos G3，較佳Pd-Xphos G3。
通式(XVII)之中間物(其中T表示甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或Ph-SO 2-，其中Ph可經鹵素或甲基-基團或硝基-基團取代一次、兩次或三次)可藉由以下方式轉化為通式(XVIII)之中間物(其中T表示甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或Ph-SO 2-，其中Ph可經鹵素或甲基-基團或硝基-基團取代一次、兩次或三次)：在適合的溶劑系統(諸如乙腈、甲苯、二㗁烷、DMF、DMA或NMP，或此等溶劑之混合物)中，較佳在乙腈或二㗁烷中，在如碳酸銫或磷酸三鉀之鹼之存在下，在60℃至130℃之溫度範圍中，較佳在80℃至100℃之溫度範圍中，與適合的鹵素化合物(如例如2-溴吡啶或2-碘吡啶或碘苯)在適合的催化劑系統存在下反應，得到通式(XVIII)之中間物(其中T表示甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或Ph-SO 2-，其中Ph可經鹵素或甲基-基團或硝基-基團取代一次、兩次或三次)，該催化劑系統較佳為鈀催化劑，如例如肆(三苯基膦)鈀(0)，或例如由如同乙酸鈀或Pd 2dba 3之鈀源且XPhos作為配位體製備的鈀催化劑，或鈀-XPhos預催化劑，如同Pd-Xphos G2或Pd-Xphos G3，較佳Pd-Xphos G3。
通式(XVIII)之中間物(其中T表示甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或Ph-SO 2-，其中Ph可經鹵素或甲基-基團或硝基-基團取代一次、兩次或三次)可藉由以下方式轉化為通式(VII-A)之中間物：在適合的溶劑系統(諸如甲醇或乙醇或THF或三級丁醇或此等溶劑之混合物)中，較佳在甲醇或THF中，在60℃至100℃之溫度範圍中，較佳在70℃至90℃之溫度範圍中與適合的鹼(諸如氫氧化鈉水溶液或氫氧化鉀水溶液或氫氧化鋰水溶液，較佳氫氧化鈉水溶液)反應，得到通式(VII-A)之中間物。
通式(XVIII)之中間物(其中T表示甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或Ph-SO 2-，其中Ph可經鹵素或甲基-基團或硝基-基團取代一次、兩次或三次)可藉由以下方式轉化為通式(I)化合物：在適合的溶劑系統(諸如甲醇或乙醇或THF或三級丁醇或此等溶劑之混合物)中，較佳在甲醇或THF中，在60℃至100℃之溫度範圍中，較佳在70℃至90℃之溫度範圍中與適合的鹼(諸如碳酸鉀水溶液或碳酸銫水溶液或氫氧化鋰水溶液，較佳碳酸鉀水溶液)反應，得到通式(I)化合物。
流程 5
Figure 02_image085
流程 5：通式(IV)之中間物的製備途徑，其中X表示C-F，Y表示C-H，Z表示C-R 4bx，其中R 4bx表示選自由以下之基團：C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、C 3-C 6環烷基-O-、C 3-C 6環烷基-CH 2-O-、3員至6員雜環烷基-O-或3員至6員雜環烷基-CH 2-O-，其中該C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、C 3-C 6環烷基-O-、C 3-C 6環烷基-CH 2-O-、3員至6員雜環烷基-O-及3員至6員雜環烷基-CH 2-O-基團視情況經鹵素、甲基、甲氧基或三氟甲氧基取代一次、兩次或三次。另外，取代基R 4bx之互換可在例示性轉化之前及/或之後達成。
試劑C係可商購的且可轉化為通式(IXX)之中間物，其中C-R 4bx表示選自由以下之基團：C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、C 3-C 6環烷基-O-、C 3-C 6環烷基-CH 2-O-、3員至6員雜環烷基-O-及3員至6員雜環烷基-CH 2-O-，其中該C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、C 3-C 6環烷基-O-、C 3-C 6環烷基-CH 2-O-、3員至6員雜環烷基-O-及3員至6員雜環烷基-CH 2-O-基團視情況鹵素、甲基、甲氧基或三氟甲氧基取代一次、兩次或三次，該轉化可藉由以下進行：在適合的溶劑系統(諸如乙腈、THF、二㗁烷、DMF、DMA或NMP或此等溶劑之混合物)中，較佳在THF或二㗁烷中，最佳在THF中，在適合的鹼(諸如三乙胺、休尼格鹼、碳酸鉀或碳酸銫，較佳休尼格鹼)的存在下，在-10℃至100℃之溫度範圍中，較佳在室溫至80℃之溫度範圍中，最佳在50℃至70℃之溫度範圍中與適合的試劑H-R 4bx反應。
通式(IXX)之中間物可藉由以下方式轉化為通式(XX)之中間物：在適合的催化劑(諸如鈀/碳或雷尼鎳，較佳鈀/碳)存在下，在適合溶劑系統(諸如甲醇或乙醇或二氯甲烷或此等溶劑之混合物)中，較佳在乙醇中，在0℃至50℃之溫度範圍中，較佳在室溫下進行氫化；或在如濃鹽酸之酸存在下，在0℃至50℃之溫度範圍中，較佳在室溫下，在如甲醇或乙醇之溶劑中用其他適合的還原劑(諸如鐵粉)進行還原。
通式(XX)之中間物可藉由在0℃至50℃之溫度範圍內中，較佳在室溫下與鹵化劑(如NBS)在適合溶劑系統(諸如DMF或DMA)中反應而轉化為通式(XXI)之中間物。或者且較佳地，通式(XX)之中間物可藉由以下方式轉化為通式(XXI)之中間物：在適合溶劑系統(諸如乙酸或二氯甲烷或此等溶劑之混合物)中，較佳在乙酸中，在10℃至50℃之溫度範圍中，較佳在-5℃至室溫之溫度範圍中，更佳在0℃至10℃之溫度範圍中，與鹵化劑(如溴)反應，得到通式(XXI)之中間物。
通式(XXI)之中間物可利用催化劑系統，在適合的溶劑系統中(諸如三乙胺，或三乙胺與DMF或DMA或NMP，較佳DMF之混合物)，在50℃至120℃範圍內之溫度下，較佳在70℃至90℃範圍內之溫度下與式(III)之炔烴反應，得到通式(IV)之中間物，該催化劑系統通常用於文獻((K. Sonogashira, Y. Tohda, N. Hagihara: Tetrahedron Lett. 1975, S. 4467-4470)中所描述的薗頭偶合中，如同例如二氯雙(三苯基膦)鈀(II)及碘化銅(I)，其中Z表示C-R 4bx，其中R 4bx表示選自以下之基團：C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、C 3-C 6環烷基-O-、C 3-C 6環烷基-CH 2-O-、3員至6員雜環烷基-O-或3員至6員雜環烷基-CH 2-O-，其中該C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、C 3-C 6環烷基-O-、C 3-C 6環烷基-CH 2-O-、3員至6員雜環烷基-O-及3員至6員雜環烷基-CH 2-O-基團視情況經鹵素、甲基、甲氧基或三氟甲氧基取代一次、兩次或三次。之前進行類似反應且描述於文獻(ACS Med. Chem. Lett. 2018, 9, 1117-1122)中。
流程 6
Figure 02_image087
流程 6：通式(VI-A)之中間物之製備途徑，其中X、Y及A具有如上文關於通式(I)所給出之意義。Z表示C-R 4bz，其中R 4bz表示選自以下之基團：C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、C 3-C 6環烷基-O-、C 3-C 6環烷基-CH 2-O-、3員至6員雜環烷基-O-或3員至6員雜環烷基-CH 2-O-，其中該C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、C 3-C 6環烷基-O-、C 3-C 6環烷基-CH 2-O-、3員至6員雜環烷基-O-及3員至6員雜環烷基-CH 2-O-基團視情況經鹵素、甲基、甲氧基或三氟甲氧基取代一次、兩次或三次。另外，任一取代基R 4bz之互換可在例示性轉化之前及/或之後達成。
通式(XXII)之中間物可轉化為通式(VI-A)之中間物，其中Z表示C-R 4bz，其中R 4bz表示選自以下之基團：C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、C 3-C 6環烷基-O-、C 3-C 6環烷基-CH 2-O-、3員至6員雜環烷基-O-或3員至6員雜環烷基-CH 2-O-，其中該C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、C 3-C 6環烷基-O-、C 3-C 6環烷基-CH 2-O-、3員至6員雜環烷基-O-及3員至6員雜環烷基-CH 2-O-基團視情況經鹵素、甲基、甲氧基或三氟甲氧基取代一次、兩次或三次，該轉化係藉由以下方式進行：在適合的催化劑系統存在下，在適合的溶劑系統(諸如乙腈、甲苯、二㗁烷、DMF、DMA或NMP或此等溶劑之混合物)中，較佳在甲苯中，在適合的鹼(諸如碳酸銫)存在下，在60℃至130℃之溫度範圍中，較佳在90℃至110℃之溫度範圍中與適合的試劑H-R 4bz反應，該催化劑系統較佳為鈀催化劑，如例如由鈀源(如乙酸鈀或Pd 2dba 3)及5-(二-三級丁基膦)-1'3',5'-聯三苯-1,4'-二-1H-吡唑製備之鈀催化劑。
此等修飾可為諸如保護基引入、保護基裂解、官能基還原或氧化、鹵化、金屬化、取代或熟習此項技術者已知之其他反應。此等轉化包括引入官能基的彼等轉化，從而允許取代基進一步互換。適當保護基及其引入及裂解為熟習此項技術者所熟知(參見例如T.W. Greene及P.G.M. Wutts in Protective Groups in Organic Synthesis, 第3版，Wiley 1999)。特定實例描述於後續段落中。
為熟習此項技術者所知的是，若在起始或中間化合物上存在多個反應中心，則可能需要藉由保護基暫時阻斷一或多個反應中心以允許反應特定在所需反應中心處進行。有關大多數經證實保護基之使用的詳細描述可見於例如T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, 1999, 第3版或P. Kocienski, Protecting Groups, Thieme Medical Publishers, 2000中。
以本身已知之方式，例如藉由在真空中蒸餾出溶劑及使所獲得之殘餘物自適合溶劑中再結晶或使其進行慣用純化方法(諸如在適合載體材料上進行層析)中之一者來分離及純化根據本發明之化合物。此外，可應用逆相製備型HPLC。具有足夠鹼性或酸性官能基之本發明化合物可產生為鹽，諸如在本發明化合物具有足夠鹼性之情況下，例如三氟乙酸鹽或甲酸鹽；或在本發明化合物具有足夠酸性之情況下，例如銨鹽。此類型之鹽可藉由多種熟習此項技術者已知之方法而分別轉化成其游離鹼或游離酸形式，或用作隨後生物分析中之鹽。另外，分離本發明化合物期間之乾燥過程可能不完全移除痕量共溶劑(尤其諸如甲酸或三氟乙酸)，從而得到溶劑合物或包合錯合物。熟習此項技術者將認識到，溶劑合物或包合錯合物就用於隨後生物分析中而言為可接受。應理解，如本文中分離及描述之本發明化合物之特定形式(例如鹽、游離鹼、游離酸、溶劑合物、包合錯合物)未必為該化合物可應用於生物分析以便定量特定生物活性的唯一形式。
根據本發明之式(I)化合物之鹽可藉由將游離化合物溶解於適合溶劑(例如酮，諸如丙酮、甲基乙基酮或甲基異丁基酮；醚，諸如二乙醚、四氫呋喃或二㗁烷；氯化烴，諸如二氯甲烷或氯仿；或低分子量脂族醇，諸如甲醇、乙醇或異丙醇)中來獲得，該溶劑含有所需酸或鹼或隨後添加所需酸或鹼至其中。視關於一元或多元酸或鹼而定且視所需何種鹽而定，酸或鹼可以等莫耳比或不同於此之比率用於鹽製備中。鹽藉由用非鹽溶劑過濾、再沈澱、沈澱或藉由蒸發溶劑而獲得。所獲得之鹽可轉化成游離化合物，該等游離化合物又可轉化成鹽。以此方式，例如可作為工業規模製造中之製程產物獲得的醫藥學上不可接受之鹽可藉由熟習此項技術者已知之製程轉變成醫藥學上可接受之鹽。尤其較佳為鹽酸鹽及用於實例部分中之製程。
本發明化合物及鹽之純非對映異構體及純對映異構體可例如藉由不對稱合成，藉由在合成中使用對掌性起始化合物或光活性催化劑且藉由分離合成中所獲得之對映異構及非對映異構混合物來獲得。
對映異構與非對映異構混合物可藉由熟習此項技術者已知之方法分離為純對映異構體及純非對映異構體。較佳地，非對映異構混合物係藉由結晶(尤其分步結晶)或層析來分離。對映異構混合物可例如藉由與對掌性助劑形成非對映異構體、解析所得非對映異構體且移除對掌性助劑來分離。關於對掌性助劑，舉例而言，藉由形成非對映異構鹽，可使用對掌性酸(諸如杏仁酸)來分離對映異構鹼且對掌性鹼可用於來分離對映異構酸。此外，諸如非對映異構酯之非對映異構衍生物可分別使用對掌性酸或對掌性醇作為對掌性助劑分別由醇之對映異構混合物或酸之對映異構混合物來形成。另外，非對映異構錯合物或非對映異構晶籠化合物可用於分離對映異構混合物。或者，對映異構混合物可在層析中使用對掌性分離管柱來分離。用於分離對映異構體之另一適合方法為酶促分離。
本發明之一個較佳態樣為根據實例製備如技術方案1至4之化合物的製程以及用於其製備之中間物。
用於合成如本文所描述之技術方案之式(I)之化合物之中間物以及其用於合成式(I)化合物之用途為本發明之另一態樣。較佳中間物為如本文中所揭示之中間物實例。
式(I)化合物可視情況轉化成其鹽，或式(I)化合物之鹽可視情況轉換成游離化合物。相應製程為熟習此項技術者所慣用。
商業效用如上文所提及，已出人意料地發現，本發明化合物有效抑制酪蛋白激酶1α及/或1δ從而最終導致細胞死亡(例如細胞凋亡)，且可因此用於治療或預防不受控細胞生長、增殖及/或存活、不當細胞免疫反應或不當細胞發炎反應之疾病或伴隨著不受控細胞生長、增殖及/或存活、不當細胞免疫反應或不當細胞發炎反應之疾病。特定言之，所揭示之化合物可用於治療或預防其中不受控細胞生長、增殖及/或存活、不當細胞免疫反應或不當細胞發炎反應由酪蛋白激酶1α及/或1δ介導之疾病，諸如良性及惡性贅瘤，更具體言之，血液學腫瘤、實體腫瘤及/或其轉移，例如白血病及骨髓發育不良症候群、惡性淋巴瘤、頭部及頸部腫瘤(包括腦瘤及腦轉移)、胸部腫瘤(包括非小細胞及小細胞肺腫瘤)、腸胃腫瘤、內分泌腫瘤、乳房及其他婦科腫瘤、泌尿腫瘤(包括腎腫瘤、膀胱腫瘤及前列腺腫瘤)、皮膚腫瘤及肉瘤及/或其轉移，尤其血液學腫瘤、實體腫瘤及/或乳房、膀胱、骨、腦、中樞及周邊神經系統、子宮頸、結腸、內分泌腺(例如甲狀腺及腎上腺皮質)轉移、內分泌腫瘤、子宮內膜、食道、腸胃腫瘤、生殖細胞、腎、肝、肺、喉及舌、間皮瘤、卵巢、胰臟、前列腺、直腸、腎、小腸、軟組織、胃、皮膚、睾丸、輸尿管、陰道及外陰以及惡性贅瘤形成，包括該等器官中之原發性腫瘤及遠端器官中之相應二級腫瘤(「腫瘤轉移」)。血液學腫瘤可例如例示為白血病及淋巴瘤之侵襲性及惰性形式，亦即非霍奇金氏淋巴瘤(non-Hodgkins disease)、慢性及急性骨髓白血病(CML/AML)、急性淋巴母細胞白血病(ALL)、霍奇金氏淋巴瘤、多發性骨髓瘤及T細胞淋巴瘤。亦包括骨髓發育不良症候群、漿細胞瘤形成、副腫瘤症候群、未知原發性位點之癌症以及AIDS相關之惡性病。
如本文所用，術語「不當」在本發明之上下文中，尤其在「不當細胞免疫反應或不當細胞發炎反應」之上下文中，應理解為較佳意謂反應與該疾病病變相關、造成該疾病病變或導致該疾病病變。
較佳地，用途為治療或預防疾病，尤其為治療，其中該疾病為血液學腫瘤、實體腫瘤及/或其轉移。
另一態樣為式(I)化合物之用途，其係用於預防及/或治療子宮頸腫瘤、肺腫瘤(諸如肺癌)、結腸腫瘤(諸如結腸直腸癌)或淋巴瘤(諸如彌漫性大B細胞淋巴瘤)及/或其轉移，尤其較佳用於其治療。
本發明之另一態樣為如本文所描述之式(I)化合物或其立體異構體、互變異構體、N-氧化物、水合物、溶劑合物或鹽，尤其是其醫藥學上可接受之鹽或其混合物之用途，其用於製造用於治療或預防疾病的藥劑，其中此類疾病為過度增生性病症或對誘導細胞死亡(例如細胞凋亡)具反應性之病症。在一實施例中，疾病為血液腫瘤、實體腫瘤及/或其轉移。在另一實施例中，疾病為子宮頸腫瘤、肺腫瘤(諸如肺癌)、結腸腫瘤(諸如結腸直腸癌)或淋巴瘤(諸如彌漫性大B細胞淋巴瘤及/或其轉移)。
治療 過度 增生性病症之方法本發明係關於一種使用本發明化合物及其組合物治療哺乳動物過度增生性病症之方法。化合物可用以使細胞增生及/或細胞分裂受到抑制、阻斷、減少、降低等及/或產生細胞死亡，例如細胞凋亡。此方法包含向有需要之哺乳動物(包括人類)投與有效治療病症之量之本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽、異構體、多晶型物、代謝物、水合物、溶劑合物或酯等。過度增生性病症包括(但不限於)例如牛皮癬、瘢痕瘤及影響皮膚之其他增生；良性前列腺增生(BPH)；實體腫瘤，諸如乳癌、呼吸道癌、腦癌、生殖器官癌、消化道癌、泌尿道癌、眼癌、肝癌、皮膚癌、頭頸癌、甲狀腺癌、副甲狀腺癌及其遠端轉移癌。彼等病症亦包括淋巴瘤、肉瘤及白血病。
乳癌之實例包括(但不限於)侵襲性乳腺管癌、侵襲性小葉癌、乳腺管原位癌及小葉原位癌。
呼吸道癌之實例包括(但不限於)小細胞肺癌及非小細胞肺癌，以及支氣管腺瘤及胸膜肺母細胞瘤。
腦癌實例包括(但不限於)腦幹及下丘腦神經膠質瘤、小腦及大腦星形細胞瘤、神經管胚細胞瘤、室管膜瘤，以及神經外胚層及松果體腫瘤。
男性生殖器官腫瘤包括(但不限於)前列腺癌及睾丸癌。女性生殖器官腫瘤包括(但不限於)子宮內膜癌、子宮頸癌、卵巢癌、陰道癌及外陰癌以及子宮肉瘤。
消化道腫瘤包括(但不限於)肛門癌、結腸癌、結腸直腸癌、食道癌、膽囊癌、胃癌、胰臟癌、直腸癌、小腸癌及唾液腺癌。
泌尿道腫瘤包括(但不限於)膀胱癌、陰莖癌、腎癌、腎盂癌、尿管癌、尿道癌及人類乳頭狀腎癌。
眼癌包括(但不限於)眼內黑色素瘤及視網膜母細胞瘤。
肝癌之實例包括(但不限於)肝細胞癌瘤(有或無纖維板層變異之肝細胞癌瘤)、膽管癌瘤(肝內膽管癌瘤)及混合型肝細胞膽管癌瘤。
皮膚癌包括(但不限於)鱗狀細胞癌、卡波西氏肉瘤(Kaposi's sarcoma)、惡性黑色素瘤、默克細胞皮膚癌(Merkel cell skin cancer)及非黑色素瘤皮膚癌。
頭頸癌包括(但不限於)喉癌、下咽癌、鼻咽癌、口咽癌、唇及口腔癌及鱗狀細胞癌。淋巴瘤包括(但不限於) AIDS相關淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、皮膚T細胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤(Burkitt lymphoma)、霍奇金氏病(Hodgkin’s disease)及中樞神經系統淋巴瘤。
肉瘤包括(但不限於)軟組織肉瘤、骨肉瘤、惡性纖維組織細胞瘤、淋巴肉瘤及橫紋肌肉瘤。
白血病包括(但不限於)急性骨髓白血病、急性淋巴母細胞白血病、慢性淋巴細胞性白血病、慢性骨髓性白血病及毛細胞白血病。
此等病症在人類中已得到良好表徵，且在其他哺乳動物中亦以類似病源學存在，且可藉由投與本發明之醫藥組合物來治療。
如本文通篇所述之術語「治療(treating/treatment)」係按照慣例使用，例如管理或護理個體以便對抗、減輕、減少、緩解、改善疾病或病症(諸如癌症)之病狀等。
治療激酶病症之方法本發明亦提供用於治療與異常有絲分裂原細胞外激酶活性相關的病症之方法，該等病症包括(但不限於)中風、心臟衰竭、肝腫大、心肥大、糖尿病、阿茲海默氏病(Alzheimer's disease)、囊腫性纖維化、異種移植排斥反應症狀、敗血性休克或哮喘。
有效量之本發明化合物可用於治療此類病症，包括上文先前技術部分中所提及之彼等疾病(例如癌症)。儘管如此，不論作用機制及/或激酶與病症之間的關係如何，此類癌症及其他疾病均可用本發明化合物治療。
片語「異常激酶活性」或「異常酪胺酸激酶活性」包括編碼激酶之基因或該基因所編碼之多肽的任何異常表現或活性。此類異常活性之實例包括(但不限於)基因或多肽之過表現；基因擴增；產生組成性活性或活性過高之激酶活性的突變；基因突變、缺失、取代、添加等。
本發明亦提供抑制激酶活性、尤其有絲分裂原細胞外激酶活性之方法，該等方法包含投與有效量之本發明化合物，包括其鹽、多晶型物、代謝物、水合物、溶劑合物、前藥(例如酯)及其非對映異構形式。可抑制細胞中(例如活體外)或哺乳動物個體、尤其需要治療之人類患者之細胞中的激酶活性。
治療血管生成病症之方法本發明亦提供治療與過度及/或異常血管生成相關之病症及疾病的方法。
血管生成之不當及異位表現可能對生物體有害。多種病理性病狀與額外血管生長相關。此等包括例如糖尿病性視網膜病變、局部缺血性視網膜靜脈閉塞及早產兒視網膜病變[Aiello等人 New Engl. J. Med. 1994, 331, 1480；Peer等人 Lab. Invest. 1995, 72, 638]、年齡相關之黃斑變性[AMD；參見Lopez等人 Invest. Opththalmol. Vis. Sci. 1996, 37, 855]、新生血管性青光眼、牛皮癬、晶狀體後纖維組織增生、血管纖維瘤、發炎、類風濕性關節炎(RA)、再狹窄、支架中再狹窄、血管移植再狹窄等。另外，與癌性及贅生性組織相關之血液供應增加促進生長，導致快速腫瘤擴大及轉移。此外，腫瘤中新血管及淋巴管之生長向反叛細胞提供逃脫途徑，從而促進轉移及隨後之癌擴散。因此，本發明化合物可用以治療及/或預防上述血管生成病症中之任一者，例如藉由抑制及/或減少血管形成；藉由使血管生成中所涉及之內皮細胞增生或其他類型受到抑制、阻擋、降低、減少等，以及導致此類細胞類型之細胞死亡，例如細胞凋亡。
較佳地，該方法之疾病為血液腫瘤、實體腫瘤及/或其轉移。
本發明化合物尤其可用於治療及預防(prevention/prophylaxis)，尤其用於治療腫瘤生長及轉移，尤其用於在有或無預治療腫瘤生長之情況下治療所有適應症及階段之實體腫瘤。
本發明化合物之醫藥組合物本發明亦係關於含有一或多種本發明化合物之醫藥組合物。可利用此等組合物藉由向有需要之患者投與來達成所需藥理學效應。對本發明而言，患者為需要治療特定病狀或疾病之哺乳動物，包括人類。
因此，本發明包括包含醫藥學上可接受之載劑或助劑及醫藥學上有效量之本發明化合物或其鹽的醫藥組合物。
本發明之另一態樣為包含醫藥學上有效量之式(I)化合物及醫藥學上可接受之助劑的醫藥組合物，其用於治療上文提及之疾病，尤其用於治療血液腫瘤、實體腫瘤及/或其轉移。
醫藥學上可接受之載劑或助劑較佳為在符合活性成分之有效活性之濃度下對患者無毒且無害之載劑，以使得任何可歸因於載劑之副作用不會使活性成分之有益效應失效。載劑及助劑為可幫助組合物變得適用於投與之所有種類之添加劑。
化合物之醫藥學上有效量較佳為對所治療之特定病狀產生結果或施加預期影響之量。
本發明化合物可與此項技術中所熟知之醫藥學上可接受之載劑或助劑一起，使用包括速釋、緩釋及延時釋放製劑之任何有效習知單位劑型經口、非經腸、局部、經鼻、經眼部(ophthalmically)、經眼、舌下、經直腸、經陰道及其類似途徑投與。
為了經口投與，可將化合物調配成固體或液體製劑，諸如膠囊、丸劑、錠劑、糖衣錠、口含錠、熔物、散劑、溶液、懸浮液或乳液，且可根據此項技術中已知用於製造醫藥組合物之方法來製備。固體單位劑型可為膠囊，其可為含有例如界面活性劑、潤滑劑及惰性填充劑(諸如乳糖、蔗糖、磷酸鈣及玉米澱粉)之助劑的普通硬殼或軟殼明膠型膠囊。
在另一實施例中，可將本發明化合物與習知錠劑基質(諸如乳糖、蔗糖及玉米澱粉)及以下之組合一起製成錠劑：黏合劑，諸如阿拉伯膠(acacia)、玉米澱粉或明膠；旨在輔助錠劑在投與後分解及溶解之崩解劑，諸如馬鈴薯澱粉、褐藻酸、玉米澱粉及瓜爾膠(guar gum)、黃蓍膠、阿拉伯膠；旨在改良錠劑顆粒之流動且防止錠劑材料黏附於錠劑壓模及衝頭之表面的潤滑劑，例如滑石、硬脂酸或硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或硬脂酸鋅；旨在增強錠劑之美觀品質且使其較能為患者接受之染料、著色劑及調味劑，諸如胡椒薄荷、冬青油或櫻桃調味劑。適用於口服液體劑型之適合賦形劑包括磷酸二鈣；及稀釋劑，諸如水及醇，例如乙醇、苯甲醇及聚乙烯醇，其中添加或不添加醫藥學上可接受之界面活性劑、懸浮劑或乳化劑。各種其他材料可以包衣形式存在或以其他方式改變劑量單元之物理形式。舉例而言，錠劑、丸劑或膠囊可用蟲膠、糖或二者包覆包衣。
分散性散劑及顆粒適用於製備水性懸浮液。其提供活性成分與分散劑或濕潤劑、懸浮劑及一或多種防腐劑之混合物。適合的分散劑或濕潤劑及懸浮劑由上文已提及的試劑例示。亦可存在上文所描述之另外賦形劑，例如彼等甜味劑、調味劑及著色劑。
本發明之醫藥組合物亦可呈水包油乳液形式。油相可為植物油(諸如液體石蠟)或植物油之混合物。適合的乳化劑可為(1)天然產生之樹膠，諸如阿拉伯膠及黃蓍膠；(2)天然產生之磷脂，諸如大豆及卵磷脂；(3)衍生自脂肪酸及己醣醇酐之酯或偏酯，例如脫水山梨糖醇單油酸酯；(4)該等偏酯與氧化乙烯之縮合產物，例如聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯。乳液亦可含有甜味劑及調味劑。
油性懸浮液可藉由使活性成分懸浮於植物油(諸如(例如)花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油)中或礦物油(諸如液體石蠟)中來調配。油性懸浮液可含有增稠劑，諸如(例如)蜂臘、硬石蠟或十六烷醇。懸浮液亦可含有一或多種防腐劑，例如對羥基苯甲酸乙酯或對羥基苯甲酸正丙酯；一或多種著色劑；一或多種調味劑；及一或多種甜味劑，諸如蔗糖或糖精。
糖漿及酏劑可用諸如(例如)甘油、丙二醇、山梨糖醇或蔗糖之甜味劑來調配。此類調配物亦可含有緩和劑及防腐劑(諸如對羥基苯甲酸甲酯及對羥基苯甲酸丙酯)以及調味劑及著色劑。
本發明化合物亦可非經腸(亦即皮下、靜脈內、眼內、滑膜內、肌肉內或腹膜內)投與，較佳以化合物於生理學上可接受之稀釋劑與醫藥載劑中的可注射劑型投與，該醫藥載劑可為添加或未添加醫藥學上可接受之界面活性劑(諸如皂或清潔劑)、懸浮劑(諸如果膠、卡波姆(carbomer)、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素或羧甲基纖維素)或乳化劑及其他醫藥佐劑的無菌液體或液體混合物，諸如水、生理食鹽水、右旋糖水溶液及相關糖溶液；醇，諸如乙醇、異丙醇或十六烷醇；二醇，諸如丙二醇或聚乙二醇；甘油縮酮，諸如2,2-二甲基-1,1-二氧雜環戊烷-4-甲醇；醚，諸如聚(乙二醇) 400；油、脂肪酸、脂肪酸酯或脂肪酸甘油酯或乙醯化脂肪酸甘油酯。
可用於本發明之非經腸調配物中之說明性油為石油、動物油、植物油或合成來源之油，例如花生油、大豆油、芝麻油、棉籽油、玉米油、橄欖油、石蠟脂及礦物油。適合的脂肪酸包括油酸、硬脂酸、異硬脂酸及肉豆蔻酸。適合的脂肪酸酯為例如油酸乙酯及肉豆蔻酸異丙酯。適合皂類包括脂肪酸鹼金屬鹽、銨鹽及三乙醇胺鹽且適當清潔劑包括陽離子型清潔劑，例如二甲基二烷基鹵化銨、烷基鹵化吡錠及烷基胺乙酸鹽；陰離子型清潔劑，例如烷基、芳基及烯烴磺酸酯，烷基、烯烴、醚及單甘油酸硫酸酯，及磺基丁二酸酯；非離子型清潔劑，例如脂肪胺氧化物、脂肪酸烷醇醯胺及聚(氧乙烯-氧丙烯)，或氧化乙烯或氧化丙烯共聚物；及兩性清潔劑，例如烷基-β-胺基丙酸酯及2-烷基咪唑啉四級銨鹽；以及混合物。
本發明之非經腸組合物通常在溶液中含有約0.5重量%至約25重量%之活性成分。亦宜使用防腐劑及緩衝劑。為使注射位點處之刺激降至最低或消除，此類組合物可含有親水親油平衡值(HLB)較佳為約12至約17之非離子型界面活性劑。此類調配物中界面活性劑之量較佳在約5重量%至約15重量%範圍內。界面活性劑可為具有上述HLB之單一組分或可為兩種或更多種具有所需HLB之組分的混合物。
用於非經腸調配物中之說明性界面活性劑為聚乙烯脫水山梨糖醇脂肪酸酯類(例如脫水山梨糖醇單油酸酯)及環氧乙烷與藉由環氧丙烷與丙二醇縮合所形成之疏水性基質的高分子量加成物。
醫藥組合物可呈無菌可注射水性懸浮液形式。此類懸浮液可根據已知方法使用以下來調配：適合的分散劑或濕潤劑及懸浮劑，諸如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、褐藻酸鈉、聚乙烯吡咯啶酮、黃蓍膠及阿拉伯膠；分散劑或濕潤劑，其可為天然產生之磷脂，諸如卵磷脂；環氧烷與脂肪酸之縮合產物，例如聚氧乙烯硬脂酸酯；環氧乙烷與長鏈脂族醇之縮合產物，例如十七伸乙氧基十六醇；環氧乙烷與衍生自脂肪酸與己醣醇之偏酯的縮合產物，諸如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯；或環氧乙烷與衍生自脂肪酸與己糖醇酐之偏酯的縮合產物，例如聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯。
無菌可注射製劑亦可為非經腸可接受之無毒稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液或懸浮液。可採用的稀釋劑及溶劑為例如水、林格氏溶液(Ringer's solution)、等張氯化鈉溶液及等張葡萄糖溶液。另外，無菌不揮發性油習知用作溶劑或懸浮介質。出於此目的，可採用包括合成單甘油酯或二甘油酯之任何溫和的不揮發性油。另外，諸如油酸之脂肪酸亦可用於製備可注射劑。
本發明組合物亦可以用於經直腸投與藥物之栓劑形式投與。可藉由將藥物與適合無刺激賦形劑混合來製備此等組合物，該賦形劑在常溫下為固體，但在直腸溫度下為液體且因此將在直腸中融化而釋放藥物。此類材料為例如可可脂及聚乙二醇。
用於非經腸投與之控制釋放調配物包括此項技術中已知之脂質體、聚合微球體及聚合凝膠調配物。
可能需要或必需經由機械遞送裝置將醫藥組合物引入患者中。用於遞送醫藥劑之機械遞送裝置的建構及使用在此項技術中已熟知。例如向大腦直接投與藥物之直接投與技術通常涉及將藥物遞送導管置入患者之腦室系統中以繞過血腦障壁。一種用於將藥劑輸送至身體之特定解剖學區域的此類可植入式遞送系統描述於1991年4月30日頒佈之美國專利第5,011,472號中。
本發明組合物視需要或必需時亦可含有其他習知醫藥學上可接受之混配成分(一般稱為載劑或稀釋劑)。可使用用於製備此類組合物之適當劑型的習知程序。
此類成分及程序包括以下文獻中所描述之成分及程序，該等文獻各自以引用之方式併入本文中：Powell, M.F.等人，「Compendium of Excipients for Parenteral Formulations」 PDA Journal of Pharmaceutical Science & Technology 1998, 52(5), 238-311；Strickley, R.G 「Parenteral Formulations of Small Molecule Therapeutics Marketed in the United States (1999)-Part-1」PDA Journal of Pharmaceutical Science & Technology 1999, 53(6), 324-349；及Nema, S.等人，「Excipients and Their Use in Injectable Products」 PDA Journal of Pharmaceutical Science & Technology 1997, 51(4), 166-171。
適當時可用於調配適於其預期投與途徑之組合物的常用醫藥成分包括： 酸化劑(實例包括(但不限於)乙酸、檸檬酸、反丁烯二酸、鹽酸、硝酸)； 鹼化劑(實例包括(但不限於)氨水溶液、碳酸銨、二乙醇胺、單乙醇胺、氫氧化鉀、硼酸鈉、碳酸鈉、氫氧化鈉、三乙醇胺(triethanolamine、trolamine))； 吸附劑(實例包括(但不限於)粉末纖維素及活性炭)； 氣溶膠推進劑(實例包括(但不限於)二氧化碳、CCl 2F 2、F 2ClC-CClF 2及CClF 3)； 排氣劑-實例包括(但不限於)氮氣及氬氣； 抗真菌防腐劑(實例包括(但不限於)苯甲酸、對羥基苯甲酸丁酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯、苯甲酸鈉)； 抗菌防腐劑(實例包括(但不限於)苯紮氯銨、苄索氯銨(benzethonium chloride)、苯甲醇、氯化十六烷基吡錠、氯丁醇、苯酚、苯乙醇、硝酸苯汞及硫柳汞(thimerosal))； 抗氧化劑(實例包括(但不限於)抗壞血酸、抗壞血酸棕櫚酸酯、丁基化羥基大茴香醚、丁基化羥基甲苯、次磷酸、單硫代甘油、沒食子酸丙酯、抗壞血酸鈉、亞硫酸氫鈉、甲醛合次硫酸氫鈉、偏亞硫酸氫鈉)； 黏合材料(實例包括(但不限於)嵌段聚合物、天然及合成橡膠、聚丙烯酸酯、聚胺甲酸酯、聚矽氧、聚矽氧烷及苯乙烯-丁二烯共聚物)； 緩衝劑(實例包括(但不限於)偏磷酸鉀、磷酸氫二鉀、乙酸鈉、無水檸檬酸鈉及二水合檸檬酸鈉)； 載劑(實例包括(但不限於)阿拉伯膠糖漿、芳香糖漿、芳香酏劑、櫻桃糖漿、可可糖漿、橙糖漿、玉米油、礦物油、花生油、芝麻油、抑菌氯化鈉注射劑及抑菌注射用水)； 螯合劑(實例包括(但不限於)依地酸二鈉及依地酸)； 著色劑(實例包括(但不限於) FD&C紅3號、FD&C紅20號、FD&C黃6號、FD&C藍2號、D&C綠5號、D&C橙5號、D&C紅8號、焦糖及氧化鐵紅)； 澄清劑(實例包括(但不限於)膨潤土)； 乳化劑(實例包括(但不限於)阿拉伯膠、聚西托醇(cetomacrogol)、十六烷醇、單硬脂酸甘油酯、卵磷脂、脫水山梨糖醇單油酸酯、聚氧乙烯50單硬脂酸酯)； 囊封劑(實例包括(但不限於)明膠及鄰苯二甲酸乙酸纖維素)； 調味劑(實例包括(但不限於)大茴香油、肉桂油、可可、薄荷醇、橙油、薄荷油及香草精(vanillin))； 保濕劑(實例包括(但不限於)甘油、丙二醇及山梨糖醇)； 研和劑(實例包括(但不限於)礦物油及丙三醇)； 油(實例包括(但不限於)花生油(arachis oil)、礦物油、橄欖油、花生油、芝麻油及植物油)； 軟膏基質(實例包括(但不限於)羊毛脂、親水性軟膏、聚乙二醇軟膏、石蠟脂、親水性石蠟脂、白色軟膏、黃色軟膏及玫瑰水軟膏)； 滲透增強劑(經皮傳遞)(實例包括(但不限於)一元醇或多元醇、一價醇或多價醇、飽和或不飽和脂肪醇、飽和或不飽和脂肪酯、飽和或不飽和二羧酸、精油、磷脂醯基衍生物、腦磷脂、萜、醯胺、醚、酮及脲)； 塑化劑(實例包括(但不限於)鄰苯二甲酸二乙酯及甘油)； 溶劑 (實例包括(但不限於)乙醇、玉米油、棉籽油、甘油、異丙醇、礦物油、油酸、花生油、純化水、注射用水、無菌注射用水及無菌灌注用水)； 硬化劑(實例包括(但不限於)十六烷醇、十六烷酯蠟、微晶蠟、石蠟、硬脂醇、白蠟及黃蠟)； 栓劑基質(實例包括(但不限於)可可脂及聚乙二醇(混合物))； 界面活性劑(實例包括(但不限於)苯紮氯銨、壬苯醇醚10 (nonoxynol 10)、辛苯聚醇9 (oxtoxynol 9)、聚山梨醇酯80、月桂基硫酸鈉及脫水山梨糖醇單棕櫚酸酯)； 懸浮劑(實例包括(但不限於)瓊脂、膨潤土、卡波姆、羧甲基纖維素鈉、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、高嶺土、甲基纖維素、黃蓍膠及維格姆(veegum))； 甜味劑(實例包括(但不限於)阿斯巴甜糖(aspartame)、右旋糖、甘油、甘露糖醇、丙二醇、糖精鈉、山梨糖醇及蔗糖)； 錠劑抗黏劑(實例包括(但不限於)硬脂酸鎂及滑石)； 錠劑黏合劑(實例包括(但不限於)阿拉伯膠、褐藻酸、羧甲基纖維素鈉、可壓縮糖、乙基纖維素、明膠、液體葡萄糖、甲基纖維素、非交聯聚乙烯吡咯啶酮及預膠凝化澱粉)； 錠劑及膠囊稀釋劑(實例包括(但不限於)磷酸氫鈣、高嶺土、乳糖、甘露糖醇、微晶纖維素、粉末纖維素、沈澱碳酸鈣、碳酸鈉、磷酸鈉、山梨糖醇及澱粉)； 錠劑包衣劑(實例包括(但不限於)液體葡萄糖、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、甲基纖維素、乙基纖維素、鄰苯二甲酸乙酸纖維素及蟲膠)； 錠劑直接壓縮賦形劑(實例包括(但不限於)磷酸氫鈣)； 錠劑崩解劑(實例包括(但不限於)褐藻酸、羧甲基纖維素鈣、微晶纖維素、泊拉可林鉀(polacrillin potassium)、交聯聚乙烯吡咯啶酮、褐藻酸鈉、乙醇酸澱粉鈉及澱粉)； 錠劑 滑動劑(實例包括(但不限於)膠態二氧化矽、玉米澱粉及滑石)； 錠劑潤滑劑(實例包括(但不限於)硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、礦物油、硬脂酸及硬脂酸鋅)； 錠劑 / 膠囊遮光劑(實例包括(但不限於)二氧化鈦)； 錠劑拋光劑(實例包括(但不限於)巴西棕櫚蠟(carnuba wax)及白蠟)； 增稠劑(實例包括(但不限於)蜂蠟、十六烷醇及石蠟)； 張力劑(實例包括(但不限於)右旋糖及氯化鈉)； 增 黏 劑(實例包括(但不限於)褐藻酸、膨潤土、卡波姆、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、聚乙烯吡咯啶酮、褐藻酸鈉及黃蓍膠)；及 濕潤劑(實例包括(但不限於)十七碳伸乙基氧基十六醇、卵磷脂、山梨糖醇單油酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯及聚氧乙烯硬脂酸酯)。
根據本發明之醫藥組合物可說明如下： 無菌靜脈內溶液：可使用無菌可注射水製得本發明所需化合物之5 mg/mL溶液，且視需要調節pH值。將溶液用無菌5%右旋糖稀釋至1-2 mg/mL以供投與且以靜脈內輸注形式經約60分鐘投與。 用於靜脈內投與之凍乾粉末：可用以下製備無菌製劑：(i) 100-1000 mg呈凍乾粉末形式的本發明所需化合物，(ii) 32-327 mg/mL檸檬酸鈉及(iii) 300-3000 mg聚葡萄糖40。調配物經無菌可注射生理食鹽水或5%右旋糖復原至10至20 mg/mL之濃度，其經生理食鹽水或5%右旋糖進一步稀釋至0.2-0.4 mg/mL且經15-60分鐘藉由靜脈內推注或靜脈內輸注來投與。 肌肉內懸浮液 ：可製備以下溶液或懸浮液用於肌肉內注射： 50 mg/mL所需水不溶性本發明化合物 5 mg/mL羧甲基纖維素鈉 4 mg/mL TWEEN 80 9 mg/mL氯化鈉 9 mg/mL苯甲醇 硬殼膠囊：藉由將標準兩件式硬明膠膠囊各用100 mg粉末狀活性成分、150 mg乳糖、50 mg纖維素及6 mg硬脂酸鎂填充來製備大量單位膠囊。 軟明膠膠囊：製備活性成分於可消化油(諸如大豆油、棉籽油或橄欖油)中之混合物且藉助於正排量泵注入熔融明膠中以形成含有100 mg活性成分之軟明膠膠囊。將膠囊洗滌且乾燥。可將活性成分溶解於聚乙二醇、丙三醇及山梨糖醇之混合物中以製備水混溶性醫藥混合物。 錠劑 ：藉由習知程序製備大量錠劑，以使得劑量單位為100 mg活性成分、0.2 mg膠態二氧化矽、5 mg硬脂酸鎂、275 mg微晶纖維素、11 mg澱粉及98.8 mg乳糖。可應用適當水性及非水性包衣來增加適口性，改良美觀性及穩定性或延遲吸收。 速釋型錠劑 / 膠囊：此等為藉由習知及新穎製程製得的口服固體劑型。此等單位劑型無水口服，以便藥物即刻溶解及遞送。將活性成分混入含有諸如糖、明膠、果膠及甜味劑之成分的液體中。此等液體藉由冷凍乾燥及固態提取技術固化成固體錠劑或囊片。藥物化合物可與黏彈性及熱彈性糖及聚合物或起泡組分壓縮產生無需水即可立即釋放的多孔性基質。
劑量及投與基於已知用於評估可用於治療過度增生性病症及血管生成病症之化合物的標準實驗室技術，藉由標準毒性測試及用於測定對哺乳動物之以上所鑑別之病狀之治療的標準藥理學分析，且藉由比較此等結果與用於治療此等病狀之已知藥劑之結果，可容易地測定用於治療各種所需適應症之本發明化合物的有效劑量。待投與以治療此等病狀中之一者之活性成分之量可根據諸如以下考慮因素而廣泛變化：所用特定化合物及劑量單位、投與模式、治療週期、所治療患者之年齡及性別，及所治療病狀之性質及程度。
待投與之活性成分之總量的範圍一般為每日每公斤體重約0.001 mg至約200 mg且較佳為每日每公斤體重約0.01 mg至約20 mg。臨床上適用之給藥時程之範圍將為一天給藥一至三次至每四週給藥一次。此外，「藥物假期」(不給與患者藥物的特定時間段)可有益於藥理學效應與耐受性之間的總體平衡。單位劑量可含有約0.5 mg至約1500 mg活性成分，且可每天投與一或多次或少於一天一次。藉由注射(包括靜脈內、肌肉內、皮下及非經腸注射)及使用輸注技術投與之平均日劑量較佳為每公斤總體重0.01至200 mg。直腸平均日劑量方案較佳為每公斤總體重0.01至200 mg。陰道平均日劑量方案較佳為每公斤總體重0.01至200 mg。局部平均日劑量方案較佳為0.1至200 mg，每日投與一次至四次。透皮濃度較佳為維持0.01至200 mg/kg之日劑量所需之濃度。吸入平均日劑量方案較佳為每公斤總體重0.01至100 mg。
當然，各患者之特定初始及連續給藥方案將根據如主治診斷醫師所確定之病狀性質及嚴重程度、所用特定化合物之活性、患者之年齡及一般狀況、投與時間、投與途徑、藥物之排泄速率、藥物組合及其類似者而變化。所需治療模式及本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽或酯或組合物之劑量數可由熟習此項技術者使用習知治療測試來確定。
組合療法本發明化合物可以單一醫藥劑形式或與一或多種其他醫藥劑組合投與，其中該組合不會引起不可接受之副作用。彼等組合醫藥劑可為具有抗增生作用諸如(例如)用於治療血液腫瘤、實體腫瘤及/或其轉移之其他試劑及/或用於治療非所需副作用之藥劑。本發明亦係關於此類組合。
適合於與本發明組合物一起使用之其他抗過度增生劑包括(但不限於)已在以下文獻中確認可用於治療贅生性疾病之彼等化合物：Goodman及Gilman之The Pharmacological Basis of Therapeutics (第九版), 編者Molinoff等人, 由McGraw-Hill出版, 第1225-1287頁, (1996)，該文獻以引用之方式併入本文中，尤其如上文所定義之(化學治療)抗癌劑。視具體情況而定，組合可為非固定組合或固定劑量組合。
針對特定藥理學或醫藥特性之測試方法為熟習此項技術者所熟知。
本文所描述之實例測試實驗用以說明本發明且本發明不限於所給出之實例。
如熟習此項技術者將瞭解，本發明不限於本文所描述之特定實施例，但涵蓋屬於如所附申請專利範圍所定義之本發明精神及範疇內之該等實施例之所有修改。
以下實例更詳細說明本發明而非限制其製備未明確描述之根據本發明之其他化合物可以類似方式製備。
實例中所提及之化合物及其鹽表示本發明之較佳實施例以及涵蓋如由特定實例所揭示之式(I)化合物之所有殘餘物子組合的技術方案。
實驗部分內之術語「根據」係以所提及之程序「類似於」使用的意義使用。
實驗部分表1列出本段及中間物與實例部分中所用之縮寫，只要其在本文正文內未加解釋。 表 1
縮寫 含義
AcOH 乙酸(乙醇酸)
aq. 水溶液
Boc 三級丁氧基羰基
BOP (苯并三唑-1-基氧基)參(二甲胺基)鏻六氟磷酸鹽
br 寬峰
CI 化學電離
Cs 2CO 3 碳酸銫
d 二重峰
DAD 二極體陣列偵測器
DBU 1,8-二氮雜雙環(5.4.0)十一-7-烯
DCC N,N'-二環己烷基碳化二亞胺
DCM 二氯甲烷
dd 雙二重峰
DIC N,N'-二異丙基碳化二亞胺
DIPEA 二異丙基乙胺
DMA 二甲基乙醯胺
DMF N,N-二甲基甲醯胺
DMSO 二甲亞碸
dt 雙三重峰
EDC 1-乙基-3-(3-二甲胺基丙基)碳化二亞胺
ELSD 蒸發光散射偵測器
EtOAc 乙酸乙酯
EtOH 乙醇
eq. 當量
ESI 電噴霧(ES)電離
h 小時
HATU 1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽
HBTU (鄰-苯并三唑-10基)-N,N,N',N,-四甲釒尿六氟磷酸鹽
HCl 鹽酸
HPLC 高效液相層析
K 2CO 3 碳酸鉀
LC-MS 液相層析質譜法
m 多重峰
mCPBA 間氯過氧苯甲酸
min 分鐘
MeCN 乙腈
MeOH 甲醇
MS 質譜
MTBE 甲基-三級丁基醚
NaCl 氯化鈉
NBS 1-溴吡咯啶酮2,5-二酮；N-溴代丁二醯亞胺
NaHCO 3 碳酸氫鈉(sodium hydrogen carbonate/sodium bicarbonate)
NMR 核磁共振光譜：以ppm為單位給出化學位移(δ)。除非另外規定，否則藉由將DMSO信號設定為2.50 ppm來校正化學位移。
Na 2SO 4 硫酸鈉
PDA 光二極體陣列
Pd/C 鈀/活性炭
PyBOP (苯并三唑-1-基氧基)三吡咯啶鏻六氟磷酸鹽
q 四重峰
r.t.或rt或RT 室溫
     
Rt 以分鐘為單位之滯留時間(如用HPLC或UPLC所量測)
s 單峰
sat. 飽和
SEM (2-甲氧基乙基)(三甲基)矽烷基
SEM-Cl [2-(氯甲氧基)乙基](三甲基)矽烷
SFC 超臨界流體層析
SIBX 穩定之2-二氧碘基苯甲酸
SM 起始物質
SQD 單四極偵測器
T3P 丙基膦酸酐
t 三重峰
tBuBrettPhos 二-三級丁基(2',4',6'-三異丙基-3,6-二甲氧基[聯苯]-2-基)膦(CAS 1160861-53-9)
tBuBrettPhos Pd G3 (2'-胺基[聯苯]-2-基)(甲磺酸根基-κO)鈀-二-三級丁基(2',4',6'-三異丙基-3,6-二甲氧基[聯苯]-2-基)膦(1:1) (CAS: 1536473-72-9)
td 三-二重峰
TEA 三乙胺
TFA 三氟乙酸
TFAA 三氟乙酸酐
THF 四氫呋喃
UPLC 超高效液相層析
XPhos或 X-Phos 二環己基[2',4',6'-參(丙-2-基)[1,1'-聯苯]-2-基]磷烷； 二環己基(2',4',6'-三異丙基[聯苯]-2-基)膦； CAS-RN:[564483-18-7]
XPhos Pd G3；或 XPhos-Pd-G3 (2-二環己基膦基-2′,4′,6′-三異丙基-1,1′-聯苯)[2-(2′-胺基-1,1′-聯苯)]鈀(II)甲烷磺酸鹽
其他縮寫具有熟習此項技術者本身慣用之含義。
本申請案中所描述之本發明之各種態樣藉由不以任何方式限制本發明之以下實例來說明。
特定實驗描述以下特定實驗描述中之NMR波峰形式係如其在光譜中呈現來陳述，尚未考慮可能之更高級效應。
所選化合物之 1H-NMR資料以 1H-NMR峰清單形式列出。其中，關於各信號峰，給出以ppm為單位之δ值，隨後為在圓括號中報導之信號強度。不同峰之δ值-信號強度對用逗號隔開。因此，峰清單用以下通用形式描述：δ 1(強度 1), δ 2(強度 2), ... , δ i(強度 i), ... , δ n(強度 n)。
尖銳信號之強度與所列印之NMR譜中信號之高度(以cm為單位)相關。與其他信號比較時，此資料可與信號強度之真實比率相關。在寬信號之情況下，展示多於一個峰或信號中心以及其相比於光譜中所顯示之最強信號之相對強度。 1H-NMR峰清單類似於經典的 1H-NMR讀數，且因此通常含有經典NMR解釋中所列之所有峰。另外，類似於經典 1H-NMR印出資料，峰清單可以展示溶劑信號、來源於特定目標化合物之立體異構體的信號、雜質峰、 13C衛星峰及/或旋轉邊帶。立體異構體之峰及/或雜質之峰所顯示之強度通常低於目標化合物之峰(例如純度＞ 90%)。此類立體異構體及/或雜質可為特定製造製程所特有的，且因此其峰可能有助於基於「副產物指紋」鑑別製造製程之再現。藉由已知方法(MestReC、ACD模擬或藉由使用憑經驗評估之期望值)計算目標化合物之峰的專家視需要，可視情況使用額外的強度過濾器分離出目標化合物之峰。此類操作類似於經典 1H-NMR解釋中之峰挑選。以峰清單形式報導NMR資料之詳細描述可見於公開案「專利申請案內之NMR峰清單資料之引用(Citation of NMR Peaklist Data within Patent Applications)」(參見http://www.researchdisclosure.com/searching-disclosures，研究揭示資料庫(Research Disclosure Database)第605005期, 2014, 2014年8月01日)。在峰挑選例行程序中，如研究揭示內容資料庫第605005號中所述，參數「最小高度」可在1%與4%之間調節。然而，視化學結構而定及/或視所量測化合物之濃度而定，將參數「最小高度」設定為＜1%可為合理的。
採用微波照射之反應可用視情況配備有機器人單元之Biotage Initator®微波烘箱來進行。所報導之採用微波加熱的反應時間意欲理解為達到指定反應溫度後之固定反應時間。
根據本發明方法產生之化合物及中間物可能需要純化。有機化合物之純化為熟習此項技術者所熟知且該化合物可存在若干種純化方法。在一些情況下，可不必純化。在一些情況下，可藉由結晶來純化化合物。在一些情況下，雜質可藉由使用適合之溶劑攪拌移除。在一些情況下，化合物可藉由層析，尤其急驟管柱層析，使用例如預裝填矽膠濾筒(例如來自Separtis，諸如Isolute®急驟矽膠或Isolute®急驟NH 2矽膠以及Isolera®自動純化劑(Biotage))及溶離劑(諸如例如己烷/乙酸乙酯或DCM/甲醇之梯度)來純化。在一些情況下，化合物可藉由製備型HPLC純化，該製備型HPLC使用例如配備有二極體陣列偵測器及/或聯機電噴霧電離質譜儀之Waters自動純化器，與適合之預填充逆相管柱及可含有添加劑(諸如三氟乙酸、甲酸或氨水)的諸如水及乙腈之梯度之溶離劑組合。
在一些情況下，如上文所描述之純化方法可提供具有足夠鹼性或酸性官能基、呈鹽形式的彼等本發明化合物，諸如在本發明化合物具有足夠鹼性之情況下，例如呈三氟乙酸鹽或甲酸鹽形式；或在本發明化合物具有足夠酸性之情況下，例如呈銨鹽形式。此類型之鹽可藉由熟習此項技術者已知之多種方法分別轉化為其游離鹼或游離酸形式，或在後續生物學分析中作為鹽來使用。應理解，呈如本文所描述之分離形式之本發明化合物之特定形式(例如鹽、游離鹼等)未必為該化合物可應用於生物分析以便定量特定生物活性的唯一形式。
以下實例中所報導的百分比產率係基於以最低莫耳量使用的起始組分。空氣及水分敏感性液體及溶液係經由注射器或套管轉移，且經由橡膠隔墊引入反應容器中。商業級試劑及溶劑不經進一步純化即使用。術語「真空濃縮」係指在約15 mm Hg之最小壓力下使用Buchi旋轉蒸發器。所有溫度係未經校正以攝氏度(℃)報導。
為了能更好地理解本發明，闡述以下實例。此等實例僅為達成說明之目的，且並不應視為以任何方式限制本發明之範疇。本文所提及所有公開案均以全文引用之方式併入。
分析條件UPLC-MS標準程序  除非另外說明，否則後續特定實驗描述中給出之LC-MS資料係指以下條件：
方法 1 ：
系統： Waters Acquity UPLC-MS：二元溶劑管理器、樣本管理器/處理器、管柱管理器、PDA、ELSD、SQD 3001
管柱： Acquity BEH C18 1.7 50x2.1mm
溶劑： A = 水 + 0.1體積%甲酸(99%)
B = 乙腈
梯度： 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B
流速： 0.8 mL/min
溫度： 60℃
注射： 2.0 µL
偵測： DAD掃描範圍210-400 nm
MS ESI+，ESI-，掃描範圍160-1000 m/z
ELSD
方法2：
系統： Waters Acquity UPLC-MS：二元溶劑管理器、樣本管理器/處理器、管柱管理器、PDA、ELSD、SQD 3001
管柱： Acquity BEH C18 1.7 50x2.1mm
溶劑： A = 水 + 0.2體積%氨(32%)
B = 乙腈
梯度： 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B
流速： 0.8 mL/min
溫度： 60℃
注射： 2.0 µL
偵測： DAD掃描範圍210-400 nm
MS ESI+，ESI-，掃描範圍160-1000 m/z
ELSD
方法3：
儀器 SHIMADZU LCMS-2020;
軟體 LabSolution Version 5.97SP1
HPLC 管柱  Kinetex® EVO C18 2.1x30mm 5um
移動相 A: 0.0375% TFA/水(v/v)
B: 0.01875% TFA/乙腈(v/v)
梯度 時間(min) B(%) 流速(mL/min)
0.0 5 0.8
3.0 95 0.8
3.60 95 0.8
3.61 5 0.8
4.00 5 0.8
管柱溫度 40℃
偵測器 PDA (220nm及254nm)
MS 電離源 ESI
乾燥氣體 N2
乾燥氣體流速 15(L/min)
DL電壓 120(v)
Qarray DC電壓 20(V)
MS極性 陽性
MS模式 掃描
質量範圍 100-1000
        
方法4：  HPLC儀器類型：SHIMADZU LCMS-2020；管柱：Kinetex EVO C18 2.1×30mm，5µm；移動相A：0.0375% TFA/水(V/V)；B：0.01875% TFA於乙腈中(V/V)；梯度：0.00 min 5% B至0.80 min 95.0% B至1.2 min 95.0% B至1.21 min 5.0% B至1.50 min 5.0% B；流動速率：15 mL/min；烘箱溫度：40℃；UV偵測：220 nm及254 nm。
方法5：  HPLC儀器類型：Agilent 1200\G6110A；軟體：Agilent ChemStation Rev. B. 04.03[54]。管柱：Kinetex@ 5µm EVO C18 30*2.1mm；移動相A：0.0375% TFA於水中(v/v)；B：0.01875% TFA於乙腈中(v/v)；梯度：0.01 min 0% B至0.80 min 60% B至1.2 min 60% B至1.21min 0% B至1.50 min 0% B；流動速率：1.5 mL/min；烘箱溫度：40℃；UV偵測：220 nm及254 nm。
方法6：  HPLC儀器類型：SHIMADZU LCMS-2020；管柱：Kinetex EVO C18 2.1 X 30 mm，5 µm；移動相A：0.05% NH 3•H 2O於水中(v/v)，B：乙腈。梯度：0.0 min 5% B至0.8 min 95% B至1.2 min 95% B至1.21 min 5%至1.5 min 5% B；流動速率：1.5 mL/min；管柱溫度：40℃；UV偵測：220 nm及254。
方法7:  HPLC儀器：Agilent 1200\G6110A。軟體：Agilent ChemStation Rev. B. 04.03[52]。管柱。HPLC管柱：XBridge C18 2.1*50mm，5um。移動相A：0.05% NH3•H2O於水中(v/v)，B：乙腈。梯度：0.0 min 10% B至1.2 min 80% B至1.6 min 80% B至1.61 min 10% B至2.0 min 10% B；流動速率：1.5 mL/min；管柱溫度：40℃；UV偵測：220 nm及254 nm。
方法8:  HPLC儀器類型：SHIMADZU LCMS-2020；管柱：Kinetex EVO C18 2.1 X 30 mm，5 um；移動相A：0.05% NH 3•H 2O於水中(v/v)，B：乙腈。梯度：0.00 min 0% B至0.80 min 60% B至1.2 min 60% B至1.21min 0% B至1.5 min 0% B；流動速率：1.5 mL/min；管柱溫度：40℃；UV偵測：220 nm及254 nm。
方法9:  HPLC儀器類型：SHIMADZU LCMS-2020；管柱：Kinetex EVO C18 2.1X30mm，5um；移動相A：0.0375% TFA於水中(V/V)；B:0.01875% TFA於乙腈中(V/V)；梯度：0.00 min 0% B至0.80 min 60% B至1.2 min 60% B至1.21 min 0% B至1.55 min 0% B；流動速率：15 L/min；烘箱溫度：40℃；UV偵測：220 nm及254 nm。
製備型 HPLC 條件除非另外說明，否則後續實驗描述中之「藉由製備型HPLC純化」係指以下條件：
方法A:  儀器：SHIMADZU LCMS-2020 SingleQuad；管柱：Chromolith@Flash RP-18E 25-2 MM；溶離劑A：水 + 0.0375 vol %三氟乙酸，溶離劑B：乙腈 + 0.01875 vol %三氟乙酸；梯度：0-0.8 min 0-60% B，0.8-1.2 min 60% B；流速1.5 ml/min；溫度：50℃；PDA：220 nm及254 nm。
方法B: 儀器：Labomatic HD-5000，泵頭HDK-280，梯度模組NDB-1000，餾分收集器Labomatic Labocol Vario 2000，Knauer UV偵測器Azura UVD 2.1S，Prepcon 5軟體。管柱：Chromatorex C18 10µM 120x30 mm；溶離劑A：0.1%氨水溶液；溶離劑B：乙腈；梯度：針對中間物及實例給出，速率150 mL/min，溫度25℃；UV 250 nm
方法C:  儀器：SHIMADZU LCMS-2020 SingleQuad；管柱：Chromolith@Flash RP-18E 25-2 MM；溶離劑A：水 + 0.0375 vol %三氟乙酸，溶離劑B：乙腈 + 0.01875 vol %三氟乙酸；梯度：0-0.8 min，5-95% B，0.8-1.2 min 95% B；流速1.5 ml/min；溫度：50℃；PDA：220 nm及254 nm。
方法D:  儀器：Labomatic HD-5000，泵頭HDK-280，梯度模組NDB-1000，餾分收集器Labomatic Labocol Vario 2000，Knauer UV偵測器Azura UVD 2.1S，Prepcon 5軟體。管柱：Chromatorex C18 10µM 120x30 mm；溶離劑A：水 + 0.1%甲酸；溶離劑B：乙腈；梯度：針對中間物及實例給出，速率150 mL/min，溫度25℃；UV 220 nm
方法E: 儀器：Agilent 1200\G6110A SingleQuad；管柱：XBridge C18 2.1*50 mm，5 μm；溶離劑A：水 + 0.025 vol %氫氧化銨，溶離劑B：乙腈；梯度：0-1.2 min 10-80% B，1.2-1.6 min 80% B；流速1.2 ml/min；溫度：40℃；DAD：220 nm及254 nm。
方法I：  儀器：SHIMADZU LCMS-2020 SingleQuad；管柱：Kinetex EVO C18 2.1*30 mm，5um；溶離劑A：水 + 0.025 vol %氫氧化銨，溶離劑B：乙腈；梯度：0-0.8 min，5-95% B，0.8-1.2 min，95% B；流速1.5 ml/min；溫度：40℃；PDA：220 nm及254 nm。
急驟管柱層析條件如後續特定實驗描述中所陳述之「藉由(急驟)管柱層析來純化」係指使用Biotage Isolera純化系統。關於技術規範，參見www.biotage.com上之「Biotage product catalogue」。
化學名稱係使用來自ACD/Labs之ACD/Name軟體生成。在一些情況下，使用市售試劑之公認名稱替代ACD/Name生成之名稱。
旋光度係使用JASCO P2000偏光計量測。通常，濃度為1 mg/mL至15 mg/mL之化合物溶液用於量測。比旋光度[α]D係根據下式計算：
Figure 02_image089
在此方程式中，α為以度為單位之所量測旋光度；d為以公寸為單位之路徑長度；且β為以g/mL為單位之濃度。
實驗部分 - 中間物中間物1  N-{4-[(3-胺基-6-氟吡啶-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image091
將N-(4-乙炔基吡啶-2-基)乙醯胺(799 mg，4.99 mmol，CAS-RN:[1445876-40-3])、2-溴-6-氟吡啶-3-胺(1.00 g，5.24 mmol，CAS-RN:[1068976-51-1])、雙(三苯膦)二氯化鈀(II)(350 mg，499 µmol；CAS-RN:[13965-03-2])、碘化銅(I)(19.0 mg，99.7 µmol；CAS-RN:[7681-65-4])及三乙胺(6.3 mL，45 mmol)溶解於2.1 mL DMF中，且在氬氣氛圍下於80℃攪拌1.5小時。減壓濃縮反應混合物且藉由急驟層析(55 g管柱，胺基相；二氯甲烷/乙醇0%至5%)純化，得到65%純度之目標化合物：168 mg。 LC-MS (方法1): R t= 0.84 min; MS (ESIpos): m/z = 271 [M+H] + 1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 2.11 (s, 3H), 5.87 (s, 2H), 6.99 (dd, 1H), 7.31 - 7.34 (m, 1H), 7.36 (dd, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.35 (dd, 1H), 10.63 (s, 1H)。
中間物2  N-{2-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-6-氟吡啶-3-基}-2,2,2-三氟乙醯胺
Figure 02_image093
使N-{4-[(3-胺基-6-氟吡啶-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺(參見中間物1，830 mg)及三乙胺(1.3 mL，9.2 mmol)懸浮於13 mL二氯甲烷中且用冰浴冷卻。隨後分批添加三氟乙酸酐(640 µL，4.6 mmol)。在氬氣氛圍下，於0℃攪拌反應混合物2小時。向反應混合物中添加碳酸氫鈉飽和水溶液及二氯甲烷。濾出未溶解的沈澱，用水及二氯甲烷/異丙醇(7:3)洗滌且在50℃下真空乾燥，得到85%純度之目標化合物：304 mg。 LC-MS (方法2): R t= 0.51 min; MS (ESIpos): m/z = 368 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 2.09 - 2.15 (m, 3H), 7.19 (dd, 1H), 7.44 (dd, 1H), 8.17 (dd, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.41 (dd, 1H), 10.71 (s, 1H), 11.66 (br s, 1H)。
中間物 3N-{4-[5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image095
將N-{2-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-6-氟吡啶-3-基}-2,2,2-三氟乙醯胺(參見中間物2，250 mg)、2-溴吡啶(75 µL，790 µmol)、肆(三苯基)鈀(39.4 mg，34.1 µmol；CAS-RN:[14221-01-3])及碳酸銫(645 mg，1.98 mmol)溶解於5.7 mL乙腈中，且在氬氣氛圍下於100℃在密封容器中攪拌1 h.反應混合物與以N-{2-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-6-氟吡啶-3-基}-2,2,2-三氟乙醯胺(參見中間物2，50 mg)為起始物質的另一批合併。濾出未溶解的沈澱且用二氯甲烷及甲醇洗滌。減壓濃縮濾液且藉由HPLC層析在鹼性條件下以2份進行純化。減壓濃縮含有產物之溶離份且用二氯甲烷及乙醇處理。濾出未溶解的沈澱，用二氯甲烷洗滌且在50℃下真空乾燥，得到88%純度之目標化合物：26 mg。 LC-MS (方法2): R t= 0.89 min; MS (ESIpos): m/z = 348 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 2.08 (s, 3H), 7.00 (dd, 1H), 7.12 (dd, 1H), 7.27 (ddd, 1H), 7.83 - 7.97 (m, 2H), 8.05 (dd, 1H), 8.24 - 8.33 (m, 2H), 8.45 (d, 1H), 10.56 (s, 1H), 12.15 - 12.50 (m, 1H)。
中間物4  4-[5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺
Figure 02_image097
將N-{4-[5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺(參見中間物3，180 mg)溶解於39 mL甲醇中且用氫氧化鈉水溶液(5.2 mL，1.0 M，5.2 mmol)處理。在氬氣氛圍下，於80℃攪拌反應混合物1.5小時。再添加氫氧化鈉水溶液(2.1 mL，2.0 M，4.1 mmol)且將其在氬氣氛圍下於80℃攪拌6.5小時。減壓濃縮反應混合物且用水稀釋。濾出未溶解的沈澱物且用水洗滌直至濾液不再為鹼性為止。在50℃下真空乾燥殘餘物，得到分析純目標化合物：139 mg。 LC-MS (方法2): R t= 0.85 min; MS (ESIpos): m/z = 306 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 6.02 (s, 2H), 6.50 (dd, 1H), 6.59 (s, 1H), 6.96 (dd, 1H), 7.23 - 7.32 (m, 1H), 7.81 - 7.92 (m, 3H), 7.99 (dd, 1H), 8.51 (dt, 1H), 11.81 - 12.54 (m, 1H)。
中間物5  N-{4-[(3-胺基-6-甲基吡啶-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image099
將N-(4-乙炔基吡啶-2-基)乙醯胺(1.17 g，70%純度，5.09 mmol)、2-溴-6-甲基吡啶-3-胺(1.00 g，5.35 mmol)、雙三苯膦氯化鈀(II)(357 mg，509 µmol；CAS-RN:[13965-03-2])、碘化銅(I)(19.4 mg，102 µmol；CAS-RN:[7681-65-4])及三乙胺(6.4 mL，46 mmol)溶解於2.2 mL DMF中且在氮氣氛圍下於80℃攪拌1小時。用二氯甲烷:異丙醇(7:3)及水之混合物稀釋反應混合物。分離各層，且將水層用二氯甲烷:異丙醇(7:3)萃取兩次。使用耐水濾紙乾燥合併之有機層。減壓濃縮澄清濾液。藉由急驟層析(100g矽膠超管柱，梯度二氯甲烷/乙醇1至10%)純化粗物質，得到99%純度之目標化合物：770 mg。 LC-MS (方法2): R t= 0.80 min; MS (ESIpos): m/z = 267 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 2.11 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 5.61 (s, 2H), 6.96 - 7.12 (m, 2H), 7.34 (dd, 1H), 8.22 (s, 1H), 8.34 (dd, 1H), 10.61 (s, 1H)。
中間物6  N-{2-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-6-甲基吡啶-3-基}-2,2,2-三氟乙醯胺
Figure 02_image101
使N-{4-[(3-胺基-6-甲基吡啶-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺(參見中間物5，764 mg)懸浮於12 mL二氯甲烷中且添加三乙胺(1.2 mL，8.6 mmol)。將混合物冷卻至0℃。在此溫度下，分批添加三氟乙酸酐(600 µL，4.3 mmol)。完全添加後，在惰性氛圍下於0℃攪拌反應混合物1小時。向反應混合物中添加飽和碳酸氫鈉水溶液及二氯甲烷。有機層變為固體。藉由對水層進行傾析來對水層進行成像。用更多二氯甲烷稀釋有機層且在真空下濾出固體。用二氯甲烷洗滌濾餅三次，得到米色固體及紅色澄清濾液。使用耐水濾紙乾燥濾液且減壓濃縮。用二氯甲烷稀釋濾液之殘餘物。再次沈澱米色固體且將其在真空下濾出。透明濾液2係藉由急驟層析(25g矽膠超管柱，梯度二氯甲烷/乙醇1%至10%)純化，得到分析純目標化合物：251 mg。 LC-MS (方法2): R t= 0.51 min; MS (ESIpos): m/z = 363 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 2.11 (s, 3H), 2.53 (s, 3H), 7.17 (dd, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.83 (d, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.39 (dd, 1H), 10.68 (s, 1H), 11.50 (s, 1H)。
中間物7  N-{4-[5-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image103
使N-{2-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-6-甲基吡啶-3-基}-2,2,2-三氟乙醯胺(參見中間物6，245 mg)、2-溴吡啶(97 µL，1.0 mmol)、肆三苯膦鈀(39.1 mg，33.8 µmol；CAS-RN:[14221-01-3])及碳酸銫(661 mg，2.03 mmol)懸浮於3.6 mL乙腈中且在100℃在密封容器中攪拌3小時。用二氯甲烷/異丙醇(7:3)及水之混合物稀釋反應混合物。分離各層且用DCM/異丙醇(7:3)之混合物萃取水層兩次。使用耐水濾紙乾燥經合併之有機層且減壓濃縮。用二氯甲烷稀釋粗產物。沈澱米色固體且在真空下濾出，得到96%純度之目標化合物：189 mg。 LC-MS (方法1): R t= 0.61 min; MS (ESIpos): m/z = 344 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 2.08 (s, 3H), 2.56 (s, 3H), 7.08 - 7.17 (m, 2H), 7.24 (ddd, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.84 - 7.92 (m, 1H), 8.10 (d, 1H), 8.23 - 8.29 (m, 2H), 8.41 - 8.47 (m, 1H), 10.52 (s, 1H), 11.94 (s, 1H)。
中間物8  4-[5-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺
Figure 02_image105
使N-{4-[5-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺(參見中間物7，185 mg)懸浮於22 mL甲醇中且添加氫氧化鈉水溶液(5.4 mL，1.0 M，5.4 mmol)。在80℃攪拌反應混合物隔夜。藉由旋轉蒸發移除甲醇。用一些水稀釋所得懸浮液。在真空下濾出米色固體且不洗滌直至濾液為中性。在50℃下乾燥濾餅，得到97%純度之目標化合物：117 mg。 LC-MS (方法2): R t= 0.82 min; MS (ESIpos): m/z = 302 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 2.54 (s, 3H), 5.96 (s, 2H), 6.48 (dd, 1H), 6.59 (d, 1H), 7.09 (d, 1H), 7.24 (ddd, 1H), 7.71 (d, 1H), 7.80 - 7.93 (m, 2H), 8.02 (dt, 1H), 8.40 - 8.58 (m, 1H), 11.78 (s, 1H)。
中間物9  N-{4-[(3-胺基-5-甲基吡啶-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image107
使N-(4-乙炔基吡啶-2-基)乙醯胺(1.17 g，70%純度，5.09 mmol)、2-溴-5-甲基吡啶-3-胺(1.00 g，5.35 mmol)、雙(三苯膦)二氯化鈀(II)(357 mg，509 µmol；CAS-RN:[13965-03-2])、碘化銅(I)(19.4 mg，102 µmol；CAS-RN:[7681-65-4])及三乙胺(6.4 mL，46 mmol)懸浮於2.2 mL DMF中。在氮氣氛圍下，於80℃下攪拌反應混合物1小時。用二氯甲烷/異丙醇(7:3)及水之混合物稀釋反應混合物。分離各層，且將水層用二氯甲烷/異丙醇(7:3)萃取兩次。使用耐水濾紙乾燥合併之有機層。減壓濃縮澄清濾液。藉由急驟層析(100g矽膠超管柱，梯度二氯甲烷/乙醇1%至10%)純化粗物質，得到97%純度之目標化合物：679 mg。 LC-MS (方法2): R t= 0.85 min; MS (ESIpos): m/z = 267 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 2.11 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 5.75 (s, 2H), 6.92 (dd, 1H), 7.33 (dd, 1H), 7.67 (d, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.28 - 8.38 (m, 1H), 10.61 (s, 1H)。
中間物10  N-{2-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-5-甲基吡啶-3-基}-2,2,2-三氟乙醯胺
Figure 02_image109
使N-{4-[(3-胺基-5-甲基吡啶-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺(參見中間物9，673 mg)懸浮於11 mL二氯甲烷中且添加三乙胺(1.1 mL，7.6 mmol)。將混合物冷卻至0℃。在此溫度下，分批添加三氟乙酸酐(530 µL，3.8 mmol)。完全添加後，將其在惰性氛圍下於0℃攪拌1小時。向反應混合物中添加飽和碳酸氫鈉水溶液及二氯甲烷。有機層變為固體。藉由對水層進行傾析來對水層進行成像。用二氯甲烷稀釋有機層且在真空下過濾出混合物中之固體。用二氯甲烷洗滌濾餅三次，得到白色固體及紅色澄清濾液。使用耐水濾紙乾燥濾液且減壓濃縮。藉由急驟層析(25g矽膠超管柱，梯度二氯甲烷/乙醇1%至10%)純化濾液，得到分析純目標化合物：142 mg。 1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 2.11 (s, 3H), 2.53 (s, 3H), 7.17 (dd, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.83 (d, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.39 (dd, 1H), 10.68 (s, 1H), 11.50 (s, 1H)。
中間物11  N-{4-[6-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image111
使N-{2-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-5-甲基吡啶-3-基}-2,2,2-三氟乙醯胺(參見中間物10，135 mg)、2-溴吡啶(53 µL，560 µmol)、肆(三苯基膦)鈀(21.5 mg，18.6 µmol；CAS-RN:[14221-01-3])及碳酸銫(364 mg，1.12 mmol)懸浮於2 mL乙腈中且在100℃在密封容器中攪拌3小時。用二氯甲烷/異丙醇(7:3)及水之混合物稀釋反應混合物。分離各層，且將水層用二氯甲烷/異丙醇(7:3)之混合物萃取兩次。使用耐水濾紙乾燥經合併之有機層且減壓濃縮。用二氯甲烷稀釋粗產物。沈澱米色固體且將其在真空下濾出。減壓濃縮濾液。藉由急驟層析(11g胺基管柱，梯度二氯記憶/乙醇2-5%)純化濾液，得到85%純度之目標化合物：79 mg。 LC-MS (方法1): R t= 0.64 min; MS (ESIpos): m/z = 344 [M+H] +
中間物12  4-[6-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺
Figure 02_image113
使N-{4-[6-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺(參見中間物11，185 mg，76%純度)懸浮於17 mL甲醇中且添加氫氧化鈉水溶液(4.1 mL，1.0 M，4.1 mmol)。在80℃攪拌反應混合物隔夜。減壓移除甲醇。用水稀釋所得混合物。液體中存在白色顆粒且在燒瓶底部存在黃色沈澱物。在真空(fc1)下使用吸管濾出液體中之白色固體的溶液且在50℃下將其乾燥。用水洗滌(用移液管)在燒瓶中洗滌黃圓塊(fc2)且將其移除至新燒瓶中。為了均質化，將其溶解於MeOH中且減壓濃縮。合併fc1及fc2且藉由急驟層析(11g胺基管柱，梯度二氯甲烷/乙醇1%-10%)純化，得到75%純度之目標化合物：100 mg。 LC-MS (方法2): R t= 0.79 min; MS (ESIpos): m/z = 302 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 2.42 - 2.47 (m, 3 H) 5.93 - 6.00 (m, 2 H) 6.46 - 6.53 (m, 1 H) 6.58 - 6.69 (m, 1 H) 7.16 - 7.30 (m, 1 H) 7.57 - 7.65 (m, 1 H) 7.77 - 7.91 (m, 2 H) 8.00 - 8.06 (m, 1 H) 8.24 - 8.34 (m, 1 H) 8.43 - 8.54 (m, 1 H) 11.74 - 11.87 (m, 1 H)。
中間物13  N-{4-[(3-胺基吡啶-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image115
向N-(4-乙炔基吡啶-2-基)乙醯胺(CAS 1445876-40-3，2.00 g，12.5 mmol)及2-溴吡啶-3-胺(CAS 39856-58-1，2.59 g，15.0 mmol)於DMF (34 mL)中之經攪拌溶液中添加三乙胺(7.0 mL，50 mmol；CAS-RN:[121-44-8])、Pd(PPh 2) 3Cl 2(438 mg，624 µmol；CAS-RN:[13965-03-2])及CuI (238 mg，1.25 mmol；CAS-RN:[7681-65-4])，且使燒瓶脫氣兩次並用氬氣回填。在80℃攪拌混合物1 h。添加乙酸乙酯，且將混合物用半飽和氯化鈉溶液洗滌(三次)，乾燥(硫酸鈉)，過濾且真空移除溶劑。矽膠層析(梯度：二氯甲烷/乙醇0-25%)產生1.72 g標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.59 min; MS (ESIpos): m/z = 253 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 10.62 (s, 1H), 8.35 (d, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.81 (br s, 1H), 7.35 (dd, 1H), 7.18-7.08 (m, 2H), 5.83 (s, 2H), 2.11 (s, 3H)。
中間物14  N-{2-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]吡啶-3-基}-2,2,2-三氟乙醯胺
Figure 02_image117
將N-{4-[(3-胺基吡啶-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺(參見中間物13，560 mg，2.22 mmol)及三乙胺(620 µl，4.4 mmol；CAS-RN:[121-44-8])於二氯甲烷(25 ml)中之經攪拌溶液冷卻至0℃，緩慢添加三氟乙酸酐(470 µl，3.3 mmol；CAS-RN:[407-25-0])並在0℃攪拌混合物2 h。添加二氯甲烷及碳酸氫鈉水溶液，且用二氯甲烷與甲醇之混合物萃取混合物。將有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌、乾燥(硫酸鈉)、過濾，且真空移除溶劑。用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨殘餘物。過濾混合物，丟棄固體且將溶液濃縮至乾燥，得到256 mg (純度68%)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.88 min; MS (ESIpos): m/z = 349 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.153 (3.27), 1.171 (6.97), 1.189 (3.55), 1.229 (1.19), 2.102 (4.88), 2.115 (16.00), 2.518 (1.36), 2.522 (0.82), 3.083 (0.79), 3.094 (0.80), 3.102 (0.81), 3.112 (0.76), 5.758 (0.87), 6.895 (2.00), 7.169 (1.60), 7.172 (1.59), 7.181 (1.59), 7.185 (1.60), 7.329 (0.40), 7.564 (1.04), 7.576 (0.91), 7.584 (2.62), 7.596 (2.78), 7.605 (2.04), 7.617 (2.09), 7.841 (0.89), 7.844 (0.93), 7.861 (0.83), 7.865 (0.84), 7.960 (1.84), 7.964 (1.96), 7.981 (1.79), 7.985 (1.72), 8.238 (1.83), 8.395 (1.04), 8.408 (1.01), 8.619 (1.52), 8.623 (1.59), 8.631 (2.06), 8.634 (2.07), 8.642 (1.01), 8.645 (0.90), 10.455 (0.52), 10.690 (1.67), 11.603 (1.81)。
中間物15  N-{4-[3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image119
在密封管中向N-{2-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]吡啶-3-基}-2,2,2-三氟乙醯胺(參見中間物14，250 mg，65%純度，467 µmol)及2-溴吡啶(67 µl，700 µmol；CAS-RN:[109-04-6])於乙腈(2.6 mL)中之經攪拌溶液中添加碳酸銫(456 mg，1.40 mmol；CAS-RN:[534-17-8])及肆(三苯基膦)鈀(27.0 mg，23.3 µmol；CAS-RN:[14221-01-3])，且使燒瓶脫氣兩次並用氬氣回填。將混合物加熱至80℃持續3 h且隨後加熱至100℃持續1 h。添加水，用二氯甲烷與甲醇之混合物萃取混合物。將有機相乾燥(硫酸鈉)、過濾，且真空移除溶劑。矽膠層析(梯度：二氯甲烷/乙醇0-25%)產生26.0 mg標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.59 min; MS (ESIpos): m/z = 330 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.09 (s, 1H), 10.55 (s, 1H), 8.48-8.41 (m, 2H), 8.31 (s, 1H), 8.30-8.27 (m, 1H), 8.15-8.10 (m, 1H), 7.91-7.83 (m, 2H), 7.29-7.22 (m, 2H), 7.15 (dd, 1H), 2.08 (s, 3H)。
中間物16  4-[3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺
Figure 02_image121
向N-{4-[3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺(參見中間物15，25.0 mg，75.9 µmol)於甲醇(5.8 ml)中之經攪拌溶液中添加氫氧化鈉水溶液(760 µl，1.0 M、760 µmol；CAS-RN:[1310-73-2])且在80℃下攪拌混合物3 h。真空濃縮混合物。添加水且藉由過濾收集沈澱物，得到21.0 mg標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 0.73 min; MS (ESIpos): m/z = 288 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.231 (1.34), 2.084 (0.74), 2.518 (12.32), 2.523 (8.29), 3.372 (1.51), 5.995 (16.00), 6.511 (8.09), 6.515 (8.49), 6.525 (8.10), 6.528 (8.77), 6.620 (10.35), 6.622 (12.25), 6.624 (11.64), 7.207 (7.71), 7.219 (7.66), 7.228 (7.84), 7.234 (5.17), 7.237 (6.52), 7.240 (8.83), 7.246 (4.71), 7.249 (5.30), 7.253 (5.58), 7.256 (4.84), 7.265 (5.32), 7.268 (4.88), 7.813 (7.93), 7.817 (9.14), 7.822 (4.63), 7.826 (4.81), 7.834 (8.65), 7.838 (8.53), 7.841 (7.64), 7.846 (7.30), 7.860 (4.63), 7.865 (5.18), 7.872 (9.90), 7.885 (9.50), 8.028 (5.70), 8.031 (9.22), 8.033 (5.81), 8.048 (4.82), 8.051 (7.59), 8.404 (7.91), 8.408 (8.64), 8.415 (8.16), 8.419 (7.99), 8.476 (4.99), 8.479 (5.68), 8.481 (5.85), 8.483 (5.16), 8.488 (5.27), 8.491 (6.08), 8.493 (5.68), 8.495 (4.84), 11.934 (4.71)。
中間物17  N-{4-[(5-胺基嘧啶-4-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image123
向N-(4-乙炔基吡啶-2-基)乙醯胺(767 mg，4.79 mmol)及4-溴嘧啶-5-胺(1.00 g，5.75 mmol)於DMF (13 mL)中之經攪拌溶液中添加三乙胺(2.7 mL，19 mmol；CAS-RN:[121-44-8])、Pd(PPh 2) 3Cl 2(168 mg，239 µmol；CAS-RN:[13965-03-2])及CuI (91.2 mg，479 µmol；CAS-RN:[7681-65-4])，且使燒瓶脫氣兩次並用氬氣回填。在80℃攪拌混合物1 h。過濾混合物，添加乙酸乙酯且將混合物用半飽和氯化鈉溶液洗滌(三次)，乾燥(硫酸鈉)，過濾且真空移除溶劑。矽膠層析(梯度：二氯甲烷/乙醇0-10%)產生544 mg標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.64 min; MS (ESIpos): m/z = 254 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2.116 (16.00), 2.518 (0.89), 2.523 (0.64), 6.163 (2.81), 7.390 (2.24), 7.394 (2.24), 7.403 (2.21), 7.407 (2.35), 8.278 (2.13), 8.321 (8.32), 8.382 (11.04), 8.395 (2.37), 8.397 (2.43), 10.671 (1.80)。
中間物18  N-{4-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]嘧啶-5-基}-2,2,2-三氟乙醯胺
Figure 02_image125
使N-{4-[(5-胺基嘧啶-4-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺(參見中間物17，495 mg，1.95 mmol)及三乙胺(1.4 ml，9.8 mmol；CAS-RN:[121-44-8])於二㗁烷(120 ml)中之經攪拌溶液脫氣兩次且用氬氣回填燒瓶。使混合物冷卻至0℃，緩慢添加三氟乙酸酐(410 µl，2.9 mmol；CAS-RN:[407-25-0])且在0℃攪拌混合物45 min。再緩慢添加三氟乙酸酐(410 µl, 2.9 mmol；CAS-RN:[407-25-0])且在室溫下再攪拌混合物60 min。再緩慢添加三氟乙酸酐(550 µl，3.9 mmol；CAS-RN:[407-25-0])且在室溫下再攪拌混合物1.5 h。添加二氯甲烷，沈澱固體且藉由過濾收集，得到487 mg標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.84 min; MS (ESIpos): m/z = 350 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 11.87 (s, 1H), 10.75 (s, 1H), 9.23 (s, 1H), 9.04 (s, 1H), 8.44 (dd, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.24 (dd, 1H), 2.12 (s, 3H)
中間物19  N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image127
在密封管中向N-{4-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]嘧啶-5-基}-2,2,2-三氟乙醯胺(參見中間物18，483 mg，1.38 mmol)及2-溴吡啶(200 µl，2.1 mmol；CAS-RN:[109-04-6])於乙腈(7.7 mL)中之經攪拌溶液中添加碳酸銫(1.35 g，4.15 mmol；CAS-RN:[534-17-8])及肆(三苯膦)鈀(79.9 mg，69.1 µmol；CAS-RN:[14221-01-3])，且使燒瓶脫氣兩次並用氬氣回填。將混合物加熱至100℃持續4 h。添加水，用二氯甲烷與甲醇之混合物萃取混合物。將有機相乾燥(硫酸鈉)、過濾，且真空移除溶劑。矽膠層析(梯度：二氯甲烷/乙醇0-35%)產生264 mg標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.55 min; MS (ESIpos): m/z = 331 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.67 (br d, 1H), 10.62 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.95 (s, 1H), 8.49-8.40 (m, 1H), 8.34 (d, 2H), 8.11 (d, 1H), 7.89 (td, 1H), 7.28 (ddd, 1H), 7.21-7.17 (m, 1H), 2.09 (s, 3H)。
中間物20  4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-胺
Figure 02_image129
向N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}乙醯胺(參見中間物19，255 mg，772 µmol)於甲醇(59 ml)中之經攪拌溶液中添加氫氧化鈉水溶液(7.7 ml，1.0 M，7.7 mmol；CAS-RN:[1310-73-2])且在80℃攪拌混合物3 h。真空濃縮混合物。添加水且接著用氯化鈉使混合物飽和，並且用二氯甲烷與甲醇之混合物(1:1)萃取。將有機相乾燥(硫酸鈉)、過濾，且真空移除溶劑。將殘餘物溶解於DMA與乙酸乙酯之混合物中且藉由胺基相-矽膠層析(梯度：二氯甲烷/乙醇0-35%)純化，得到68 mg標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.46 min; MS (ESIpos): m/z = 289 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.49 (br s, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.92 (s, 1H), 8.55-8.47 (m, 1H), 8.01 (dt, 1H), 7.93 (dd, 1H), 7.87 (td, 1H), 7.28 (ddd, 1H), 6.64 (dd, 1H), 6.55 (dd, 1H), 6.09 (s, 2H)。
中間物21 N-{4-[(3-胺基-5-氟吡啶-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image131
向N-(4-乙炔基吡啶-2-基)乙醯胺(699 mg，4.36 mmol)及2-溴-5-氟吡啶-3-胺(1.00 g，5.24 mmol)於DMF (12 mL)中之經攪拌溶液中添加三乙胺(2.4 mL，17 mmol；CAS-RN:[121-44-8])、Pd(PPh 2) 3Cl 2(153 mg，218 µmol CAS-RN:[13965-03-2])及CuI (83.1 mg，436 µmol；CAS-RN:[7681-65-4])，且使燒瓶脫氣兩次並用氬氣回填。在80℃攪拌混合物1 h。添加二氯甲烷與甲醇之混合物(7:3；1000 mL)且用半飽和氯化鈉溶液洗滌混合物。將有機相乾燥(硫酸鈉)、過濾，且真空移除溶劑。用二氯甲烷與甲醇之混合物(9:1)濕磨殘餘物，得到784 mg標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.79 min; MS (ESIpos): m/z = 271 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 10.62 (s, 1H), 8.35 (br d, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.35 (dd, 1H), 6.94 (dd, 1H), 6.19 (s, 2H), 2.11 (s, 3H)
中間物22  N-{2-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-5-氟吡啶-3-基}-2,2,2-三氟乙醯胺
Figure 02_image133
使N-{4-[(3-胺基-5-氟吡啶-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺(參見中間物21，300 mg，1.11 mmol)及三乙胺(390 µl，2.8 mmol；CAS-RN:[121-44-8])於乙腈(5 ml)中之經攪拌溶液脫氣兩次，且用氬氣回填燒瓶。使混合物冷卻至0℃，緩慢添加三氟乙酸酐(240 µl，1.7 mmol；CAS-RN:[407-25-0])且在0℃攪拌混合物30 min。真空移除溶劑。矽膠層析(梯度：二氯甲烷/乙醇0-30%)產生固體，將該固體用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到222 mg標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 1.04 min; MS (ESIpos): m/z = 367 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 11.77 (s, 1H), 10.69 (s, 1H), 8.70 (d, 1H), 8.40 (br d, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.09 (dd, 1H), 7.18 (dd, 1H), 2.11 (s, 3H)。
中間物 23N-{4-[6-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image135
在密封管中向N-{2-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-5-氟吡啶-3-基}-2,2,2-三氟乙醯胺(參見中間物22，760 mg，2.07 mmol)及2-溴吡啶(300 µl，3.1 mmol；CAS-RN:[109-04-6])於乙腈(12 mL)中之經攪拌溶液中添加碳酸銫(2.03 g，6.22 mmol；CAS-RN:[534-17-8])及肆(三苯膦)鈀(120 mg，104 µmol；CAS-RN:[14221-01-3])，且使燒瓶脫氣兩次並用氬氣回填。將混合物加熱至100℃持續1 h。添加水，用二氯甲烷與甲醇之混合物萃取混合物。將有機相乾燥(硫酸鈉)、過濾，且真空移除溶劑。矽膠層析(梯度：二氯甲烷/乙醇0-35%)產生固體，將該固體用二氯甲烷濕磨，得到425 mg (產率59%)標題化合物。另外，獲得153 mg中間物24。 LC-MS (方法1): R t= 0.62 min; MS (ESIpos): m/z = 348 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.23 (s, 1H), 10.55 (s, 1H), 8.48-8.43 (m, 2H), 8.30 (s, 1H), 8.28 (dd, 1H), 8.04 (dt, 1H), 7.86 (td, 1H), 7.75 (dd, 1H), 7.27 (ddd, 1H), 7.13 (dd, 1H), 2.08 (s, 3H)。
中間物24  4-[6-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺
Figure 02_image137
向N-{4-[6-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺(參見中間物24，420 mg，1.21 mmol)於甲醇(10 ml)中之經攪拌溶液中添加氫氧化鈉水溶液(12 ml，1.0 M，12 mmol；CAS-RN:[1310-73-2])，且在80℃攪拌混合物4 h。真空濃縮混合物。添加乙酸乙酯與甲醇之混合物，且用半飽和氯化鈉溶液洗滌混合物。將有機相乾燥(硫酸鈉)，過濾，且真空移除溶劑，得到334 mg標題化合物，其不經進一步純化即使用。 LC-MS (方法1): R t= 0.53 min; MS (ESIpos): m/z = 306 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.18 (s,br, 1H), 8.50 (ddd, 1H), 8.41 (dd, 1H), 7.96 (dt, 1H), 7.89-7.81 (m, 2H), 7.70 (dd, 1H), 7.27 (ddd, 1H), 6.68-6.57 (m, 1H), 6.51 (dd, 1H), 6.00 (s, 2H)
中間物25  N-[4-(6-氟-3-苯基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]乙醯胺
Figure 02_image139
在密封管中向N-{2-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-5-氟吡啶-3-基}-2,2,2-三氟乙醯胺(參見中間物22，1.29 g，3.51 mmol)及碘苯(590 µl，5.3 mmol；CAS-RN:[591-50-4])於乙腈(20 mL)中之經攪拌溶液中添加碳酸銫(3.43 g，10.5 mmol；CAS-RN:[534-17-8])及肆(三苯膦)鈀(203 mg，175 µmol；CAS-RN:[14221-01-3])，且使燒瓶脫氣兩次並用氬氣回填。將混合物加熱至100℃持續1 h。添加水，用二氯甲烷與甲醇之混合物萃取混合物。將有機相乾燥(硫酸鈉)、過濾，且真空移除溶劑。矽膠層析(梯度：二氯甲烷/乙醇0-35%)產生375 mg標題化合物。另外，獲得220 mg中間物21。 LC-MS (方法2): R t= 1.05 min; MS (ESIpos): m/z = 347 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.11 (s, 1H), 10.59 (s, 1H), 8.41 (dd, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.26 (d, 1H), 7.72 (dd, 1H), 7.50-7.45 (m, 2H), 7.41-7.35 (m, 2H), 7.33-7.28 (m, 1H), 7.02 (dd, 1H), 2.09 (s, 3H)
中間物26  4-(6-氟-3-苯基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-胺
Figure 02_image141
向N-[4-(6-氟-3-苯基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]乙醯胺(參見中間物25，370 mg，1.07 mmol)於甲醇(40 ml)中之經攪拌溶液中添加氫氧化鈉水溶液(11 mL，1.0 M，11 mmol；CAS-RN:[1310-73-2])且在80℃攪拌混合物6 h。真空濃縮混合物。添加飽和碳酸鉀溶液，且隨後用氯仿與甲醇之混合物(3:1)萃取混合物。將有機相乾燥(硫酸鈉)、過濾，且真空移除溶劑，得到273 mg (約75純度)標題化合物，其不經進一步純化即使用。 LC-MS (方法2): R t= 1.00 min; MS (ESIpos): m/z = 305 [M+H] +
中間物27  N-[4-(3-苯基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]乙醯胺
Figure 02_image143
用氮氣吹掃N-{2-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]吡啶-3-基}-2,2,2-三氟乙醯胺(8.00 g，23.0 mmol，參見中間物14)、碘苯(7.03 g，34.5 mmol)及碳酸銫(22.5 g，68.9 mmol)於1-甲基-2-吡咯啶酮(80 ml)中之混合物。接著，向該混合物中添加甲磺酸根基(2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯)(2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (1.94 g，2.30 mmol)，且在室溫下用氮氣吹掃混合物。隨後將混合物加熱至100℃持續16 h。將混合物倒入水中且用乙酸乙酯萃取該混合物。將經合併之有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。藉由矽膠層析(石油醚/乙酸乙酯=0-100%)純化殘餘物，得到1.70 g呈黃色油狀物之標題化合物。 LC-MS (方法C): R t= 0.596 min; MS (ESIpos): m/z = 329.1 [M+H] +。
中間物28  4-(3-苯基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-胺
Figure 02_image145
在80℃下攪拌N-[4-(3-苯基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]乙醯胺(2.70 g，8.22 mmol，參見中間物27)及氫氧化鈉於四氫呋喃及水中的混合物20小時。過濾混合物且獲得濾餅。用乙酸乙酯萃取濾液三次且合併之有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。用乙腈溶解殘餘物及濾餅，且自混合物中移除大部分溶劑。添加水且對混合物進行音波處理，並且對所得混合物進行油泵冷凍乾燥，得到982 mg呈黃色固體之標題化合物。 LC-MS (方法A): R t= 0.703 min; MS (ESIpos): m/z = 287.3 [M+H] + 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ): δ [ppm] = 11.80 (s, 1H), 8.38 (dd, J= 4.4, 1.2 Hz, 1H), 7.90 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.80 (dd, J= 8.0, 1.2 Hz, 1H), 7.55 (d, J= 7.2 Hz, 2H), 7.37 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 7.26 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 7.20 (dd, J= 8.0, 4.4 Hz, 1H), 6.59 (s, 1H), 6.50 (dd, J= 5.2, 1.2 Hz, 1H), 6.03 (s, 2H)。
中間物29  N-[4-(1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]乙醯胺
Figure 02_image147
向N-{4-[(3-胺基吡啶-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺(參見中間物13，2.48 g，9.83 mmol)於NMP (25 mL)中之經攪拌溶液中添加2-甲基丙-2-醇鉀(2.21 g，19.7 mmol；CAS-RN:[865-47-4])且在90℃下攪拌混合物2 h。添加乙酸乙酯且用半飽和氯化鈉溶液洗滌混合物(三次)。用氯仿與甲醇之混合物(3:1)萃取水相。將經合併之有機相乾燥(硫酸鈉)、過濾，且真空移除溶劑。矽膠層析(梯度：二氯甲烷/乙醇0-10%)產生固體，將該固體用二氯甲烷濕磨，得到1.61 g標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.49 min; MS (ESIpos): m/z = 253 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.04 (d, 1H), 10.59 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.39 (d, 1H), 8.37 (dd, 1H), 7.81 (dt, 1H), 7.60 (dd, 1H), 7.21-7.13 (m, 2H), 2.14 (s, 3H)。
中間物30  N-[4-(3-溴-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]乙醯胺
Figure 02_image149
向N-[4-(1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]乙醯胺(參見中間物29，2.32 g，9.20 mmol)於DMF (22 mL)中之經攪拌溶液中添加NBS (2.46 g，13.8 mmol；CAS-RN:[128-08-5])且在室溫下攪拌混合物1 h。添加碳酸氫鈉水溶液及硫代硫酸二鈉水溶液，且將混合物攪拌30分鐘。沈澱固體且藉由過濾收集，得到2.67 g標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 0.79 min; MS (ESIpos): m/z = 333 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.33 (s, 1H), 10.69 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.55-8.41 (m, 2H), 7.87 (dd, 1H), 7.59 (dd, 1H), 7.29 (dd, 1H), 2.14 (s, 3H)。
中間物31  N-{4-[3-(6-氟吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image151
在密封管中向N-[4-(3-溴-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]乙醯胺(參見中間物30，300 mg，906 µmol)及2-氟-6-(三丁基錫烷基)吡啶(525 mg，1.36 mmol)於1,4-二㗁烷(9.0 mL)中之經攪拌溶液中添加氯化鋰(115 mg，2.72 mmol；CAS-RN:[7447-41-8])及肆(三苯膦)鈀(0)(105 mg，90.6 µmol；CAS-RN:[14221-01-3])，且使試管脫氣兩次且用氬氣回填。將混合物加熱至100℃持續16 h。反應混合物直接藉由矽膠層析純化，得到42.0 mg標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 0.84 min; MS (ESIpos): m/z = 348 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.23 (s, 1H), 10.58 (s, 1H), 8.48 (dd, 1H), 8.35 (d, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.21 (dd, 1H), 8.04 (q, 1H), 7.90 (dd, 1H), 7.33-7.26 (m, 1H), 7.22 (dd, 1H), 6.99 (dd, 1H), 2.08 (s, 3H)。
中間物32  4-[3-(6-氟吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺
Figure 02_image153
向N-{4-[3-(6-氟吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺(參見中間物31，40.0 mg，115 µmol)於甲醇(2.5 ml)中之經攪拌溶液中添加氫氧化鈉水溶液(1.2 mL，1.0 M，1.2 mmol；CAS-RN:[1310-73-2])且在80℃攪拌混合物3 h。真空濃縮混合物。添加水且藉由過濾收集沈澱物，得到27.0 mg標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 0.80 min; MS (ESIpos): m/z = 306 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.36-11.74 (m, 1H), 8.44 (dd, 1H), 8.14 (dd, 1H), 8.02 (q, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.83 (dd, 1H), 7.23 (dd, 1H), 6.97 (dd, 1H), 6.59 (s, 1H), 6.57 (dd, 1H), 6.02 (s, 2H)。
中間物33  4-(2,2-二氟乙氧基)-2-氟-5-硝基吡啶
Figure 02_image155
向2,4-二氟-5-硝基吡啶(CAS-RN:[60186-15-4]，2000 mg，12.5 mmol)於THF (16.0 mL)中之溶液中添加2,2-二氟乙-1-醇(CAS-RN:[359-13-7]，1.58 mL，25.0 mmol)及N,N-二異丙基乙基胺(4.35 mL，25.0 mmol)。在60℃攪拌反應混合物6小時。真空移除溶劑。藉由層析(50g管柱，矽膠ULTRA，梯度：己烷/乙酸乙酯20%-100%乙酸乙酯)及(100 g管柱，矽膠ULTRA，梯度：己烷/乙酸乙酯20%-100%乙酸乙酯)純化粗產物，得到2.23 g標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.95 min; MS (ESIpos): m/z = 223 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ [ppm]: 1.172 (0.58), 1.987 (1.21), 2.518 (0.85), 2.523 (0.60), 4.652 (3.36), 4.661 (3.65), 4.688 (7.03), 4.697 (6.93), 4.724 (3.38), 4.733 (3.16), 6.331 (1.03), 6.340 (2.23), 6.348 (0.95), 6.466 (2.01), 6.474 (4.53), 6.483 (2.02), 6.600 (0.92), 6.609 (1.88), 6.617 (0.96), 7.409 (16.00), 8.869 (13.07)。
中間物34  4-(2,2-二氟乙氧基)-6-氟吡啶-3-胺
Figure 02_image157
向4-(2,2-二氟乙氧基)-2-氟-5-硝基吡啶(參見中間物33，2.20 g)於乙醇(63 mL)中之溶液中添加鈀/碳(1.05 g，10%純度，990 µmol)且在氫氣氛圍下於室溫攪拌反應混合物4小時。過濾混合物且減壓濃縮濾液，得到1.87 g標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.72 min; MS (ESIpos): m/z = 193 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ [ppm]: 2.518 (2.27), 2.523 (1.65), 4.403 (5.53), 4.413 (6.06), 4.439 (11.69), 4.449 (11.67), 4.475 (5.77), 4.484 (5.33), 4.578 (0.63), 4.587 (0.67), 4.799 (2.57), 5.758 (2.43), 6.272 (1.69), 6.281 (3.61), 6.290 (1.55), 6.408 (3.17), 6.417 (7.31), 6.426 (3.36), 6.445 (0.45), 6.544 (1.50), 6.553 (3.25), 6.562 (1.60), 6.764 (14.53), 6.767 (14.27), 7.273 (0.47), 7.288 (0.49), 7.425 (16.00), 7.429 (15.79), 7.940 (1.20), 7.942 (1.29), 7.988 (0.52), 8.003 (0.48)。
中間物35  2-溴-4-(2,2-二氟乙氧基)-6-氟吡啶-3-胺
Figure 02_image159
將4-(2,2-二氟乙氧基)-6-氟吡啶-3-胺(參見中間物34，1.66 g)於乙酸(4.2 mL)中之經攪拌溶液冷卻至5℃，緩慢添加含溴之乙酸(9.5 mL，1.0 M，9.5 mmol)且在5℃攪拌混合物1小時。真空移除溶劑且添加碳酸氫鈉溶液直至pH為弱鹼性為止。隨後用二氯甲烷萃取水層，乾燥經合併之有機層且減壓濃縮。藉由層析(50 g管柱，矽膠ULTRA，梯度：己烷/乙酸乙酯20%-50%乙酸乙酯)純化粗產物，得到2.01 g標題化合物。 ¹H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ [ppm]: 1.154 (0.48), 1.173 (0.94), 1.190 (0.49), 1.988 (1.93), 2.518 (4.52), 2.523 (3.22), 4.035 (0.40), 4.461 (6.34), 4.471 (6.68), 4.497 (12.89), 4.506 (13.42), 4.533 (6.33), 4.542 (5.99), 4.920 (13.80), 6.294 (1.80), 6.304 (4.09), 6.313 (1.82), 6.430 (3.75), 6.439 (7.95), 6.449 (3.84), 6.566 (1.65), 6.575 (3.77), 6.584 (1.72), 6.932 (15.93), 6.934 (16.00)。
中間物 36N-(4-{[3-胺基-4-(2,2-二氟乙氧基)-6-氟吡啶-2-基]乙炔基}吡啶-2-基)乙醯胺
Figure 02_image161
將2-溴-4-(2,2-二氟乙氧基)-6-氟吡啶-3-胺(中間物35，915 mg)、N-(4-乙炔基吡啶-2-基)乙醯胺(CAS-RN:[1445876-40-3]，584 mg，3.65 mmol)、雙(三苯膦)二氯化鈀(II) (CAS-RN:[13965-03-2]，107 mg，152 µmol)、碘化銅(I) (CAS-RN:[7681-65-4]，57.9 mg，304 µmol)及三乙胺(1.7 mL，12 mmol)溶解於8.3 mL DMF中，且在氬氣氛圍下於80℃攪拌30 min。真空移除溶劑且藉由層析(50 g管柱，矽膠ULTRA，梯度：己烷/乙酸乙酯20%-80%乙酸乙酯)純化粗產物，得到545 mg標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.99 min; MS (ESIpos): m/z = 351 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ [ppm]: 2.113 (16.00), 2.518 (0.69), 2.522 (0.45), 4.478 (0.97), 4.488 (1.05), 4.514 (2.01), 4.523 (2.08), 4.550 (0.98), 4.559 (0.90), 5.455 (3.07), 6.327 (0.68), 6.454 (0.63), 6.463 (1.44), 6.472 (0.63), 6.599 (0.59), 6.916 (3.57), 7.345 (1.85), 7.348 (1.82), 7.357 (1.88), 7.361 (1.83), 8.232 (1.94), 8.349 (1.17), 8.362 (1.12), 10.632 (1.93).
中間物37  N-{2-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-4-(2,2-二氟乙氧基)-6-氟吡啶-3-基}-2,2,2-三氟乙醯胺
Figure 02_image163
將N-(4-{[3-胺基-4-(2,2-二氟乙氧基)-6-氟吡啶-2-基]乙炔基}吡啶-2-基)乙醯胺(中間物36，1.07 g)及三乙胺(3.4 mL，24 mmol)於乙腈(80 mL)中之經攪拌溶液脫氣三次且用氬氣回填燒瓶。使混合物冷卻至0℃，緩慢添加三氟乙酸酐(CAS-RN:[407-25-0]，1.3 mL，9.2 mmol)且在0℃攪拌混合物30 min。真空移除溶劑且藉由層析(50 g管柱，矽膠ULTRA，梯度：二氯甲烷/乙醇0-15%乙醇)純化粗產物，得到863 mg標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 1.05 min; MS (ESIneg): m/z = 445 [M-H] -¹H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ [ppm]: 1.154 (1.48), 1.171 (3.17), 1.190 (1.55), 2.113 (16.00), 2.124 (0.74), 2.518 (1.65), 2.523 (1.10), 3.083 (0.78), 3.095 (0.79), 3.102 (0.77), 3.114 (0.76), 4.566 (0.94), 4.575 (1.03), 4.603 (1.88), 4.611 (1.94), 4.639 (0.94), 4.647 (0.86), 5.758 (1.12), 6.261 (0.63), 6.387 (0.62), 6.396 (1.30), 6.404 (0.65), 6.530 (0.55), 7.161 (1.93), 7.164 (1.90), 7.173 (1.91), 7.177 (1.96), 7.321 (4.98), 8.217 (2.41), 8.404 (1.65), 8.417 (1.57), 10.715 (2.23), 11.456 (3.16)。
中間物38  N-{4-[7-(2,2-二氟乙氧基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image165
使N-{2-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-4-(2,2-二氟乙氧基)-6-氟吡啶-3-基}-2,2,2-三氟乙醯胺(中間物37，200 mg)、2-溴吡啶(85 µL，900 µmol)、X-Phos-G2 (CAS-RN:[1310584-14-5]，35.3 mg，44.8 µmol)及碳酸銫(219 mg，672 µmol)懸浮於8.0 mL乙腈中，且使其脫氣三次並用氬氣回填。在120℃攪拌混合物1 h。用水稀釋反應混合物，且用乙酸乙酯/甲醇萃取水層。乾燥有機層且真空移除溶劑。藉由層析(50 g管柱，矽膠ULTRA，梯度：乙醇/甲醇0%-35%甲醇)純化粗產物，得到26 mg標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.77 min; MS (ESIneg): m/z = 426 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ [ppm]: 1.053 (0.58), 1.232 (0.48), 2.052 (0.65), 2.072 (16.00), 2.327 (0.80), 2.669 (0.82), 4.655 (1.19), 4.663 (1.31), 4.691 (2.43), 4.699 (2.50), 4.727 (1.24), 4.735 (1.15), 5.759 (3.90), 6.389 (0.75), 6.516 (0.77), 6.524 (1.49), 6.533 (0.77), 6.660 (0.71), 6.827 (5.78), 7.097 (2.14), 7.100 (2.20), 7.110 (2.20), 7.114 (2.25), 7.228 (1.19), 7.243 (1.56), 7.255 (1.29), 7.258 (1.24), 7.829 (0.80), 7.832 (0.83), 7.848 (1.78), 7.852 (1.87), 7.867 (1.33), 7.871 (1.34), 7.906 (3.00), 7.926 (1.67), 8.246 (4.08), 8.259 (3.00), 8.405 (1.92), 8.416 (1.87), 10.522 (3.15), 12.450 (3.37)。
中間物39  4-[7-(2,2-二氟乙氧基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺
Figure 02_image167
將N-{4-[7-(2,2-二氟乙氧基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺(中間物38，60.0 mg)溶解於1.5 mL甲醇中且用氫氧化鈉水溶液(700 µL，2.0 M，1.4 mmol)處理。在80℃攪拌反應混合物2小時。用水稀釋反應混合物，且用二氯甲烷/甲醇9:1萃取水層。乾燥有機層且真空移除溶劑，得到40 mg標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.68 min; MS (ESIpos): m/z = 386 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ [ppm]: 0.851 (0.64), 1.232 (2.68), 2.072 (0.57), 2.337 (1.21), 2.518 (16.00), 2.523 (11.35), 2.678 (1.21), 3.147 (0.45), 3.309 (0.89), 3.506 (1.02), 3.890 (0.70), 4.633 (2.93), 4.642 (3.19), 4.669 (5.93), 4.678 (6.18), 4.706 (3.00), 4.714 (2.74), 5.760 (8.29), 5.956 (10.84), 6.354 (1.21), 6.363 (2.61), 6.372 (1.15), 6.448 (7.20), 6.452 (7.52), 6.461 (7.08), 6.465 (7.78), 6.490 (2.49), 6.499 (5.42), 6.508 (2.49), 6.585 (9.75), 6.625 (1.08), 6.634 (2.29), 6.643 (1.15), 6.701 (0.51), 6.781 (8.41), 7.232 (2.74), 7.238 (3.19), 7.244 (3.25), 7.249 (4.59), 7.253 (3.25), 7.260 (2.68), 7.265 (3.12), 7.796 (0.57), 7.799 (0.83), 7.802 (2.04), 7.804 (2.17), 7.818 (13.26), 7.822 (14.34), 7.824 (8.73), 7.833 (12.05), 7.838 (6.37), 7.845 (8.16), 7.854 (1.78), 7.858 (1.66), 8.464 (4.08), 8.467 (6.88), 8.471 (4.40), 8.476 (4.46), 8.479 (5.67), 8.483 (4.14), 12.308 (6.12)。
中間物40  N-{4-[(3-胺基吡𠯤-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image169
用氮氣吹掃N-(4-乙炔基吡啶-2-基)乙醯胺(8.37 g，52.2 mmol)、3-溴吡𠯤-2-胺(10.0 g，57.5 mmol)、二氯雙(三苯膦)鈀(II)(1.83 g，2.61 mmol)及碘化銅(I)(995 mg，5.22 mmol)於三甲胺(20 ml，140 mmol)及N,N-二甲基甲醯胺(100 ml)中之混合物。在100℃攪拌混合物2小時。使混合物冷卻至室溫。反應混合物係以3-溴吡𠯤-2-胺(1.0 g，5.7 mmol)為起始物質之經合併反應混合物，將其用乙酸乙酯稀釋且隨後用水洗滌。有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物。粗產物藉由矽膠管柱層析(100至200目，用石油醚/乙酸乙酯=3:1，接著1:1，接著0:1溶離)純化，得到呈黃色固體之N-{4-[(3-胺基吡𠯤-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺(13.0 g，98%產率)。 LC-MS (方法 C): R t= 0.665 min; MS (ESIpos): m/z = 254.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ): δ [ppm] = 10.64 (s, 1H), 8.38 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.03 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.83 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 7.41 (dd, J= 5.2, 1.2 Hz, 2H), 6.89 (s, 2H), 6.77-6.69 (m, 1H), 2.12 (s, 3H)。
中間物41  N-[4-(5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基)吡啶-2-基]乙醯胺
Figure 02_image171
在130℃攪拌N-{4-[(3-胺基吡𠯤-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺(13.0 g，51.3 mmol，參見中間物40)及碘化銅(I)(1.96 g，10.3 mmol)於1-甲基-2-吡咯啶酮(100 ml)及N,N-二甲基甲醯胺(100 ml)之混合物72小時。將混合物倒入水中且用乙酸乙酯萃取該混合物。將合併之有機相用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由矽膠管柱層析(100至200目，石油醚:乙酸乙酯=2:1，接著1:1，接著1:2，接著0:1，接著乙酸乙酯:甲醇=10:1)純化，得到呈黃色固體之N-[4-(5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基)吡啶-2-基]乙醯胺(5.00 g，38%產率)。
中間物42  N-[4-(5-{[2-(三甲基矽烷基)乙氧基]甲基}-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基)吡啶-2-基]乙醯胺
Figure 02_image173
在室溫下分批向N-[4-(5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基)吡啶-2-基]乙醯胺(4.90 g，19.3 mmol，參見中間物41)於N,N-二甲基甲醯胺(98 ml)中之溶液中添加碳酸鉀(13.4 g，96.7 mmol)。攪拌30分鐘後，一次性添加[2-(氯甲氧基)乙基](三甲基)矽烷(9.68 g，58.0 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物1小時。將混合物倒入水中且用乙酸乙酯萃取該混合物。將合併之有機相用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由矽膠層析(100-200目矽膠，石油醚/乙酸乙酯=10/1、5/1、3/1、2/1、1/1)純化，得到呈黃色固體之N-[4-(5-{[2-(三甲基矽烷基)乙氧基]甲基}-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基)吡啶-2-基]乙醯胺(3.10 g，42%產率)。 LC-MS (方法 C): R t= 0.924 min; MS (ESIpos): m/z = 383.9 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ): δ [ppm] = 10.83 (s, 1 H), 8.71-8.69 (m, 1H), 8.62-8.60 (m, 1H), 8.56-8.53 (m, 1H), 7.68-7.66 (m, 1H), 7.25-7.22 (m, 1H), 5.84 (s, 2H), 3.67 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 2.27 (s, 3H), 0.96 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 0.00 (s, 9H)。
中間物43  N-[4-(7-溴-5-{[2-(三甲基矽烷基)乙氧基]甲基}-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基)吡啶-2-基]乙醯胺
Figure 02_image175
在室溫下向N-[4-(5-{[2-(三甲基矽烷基)乙氧基]甲基}-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基)吡啶-2-基]乙醯胺(3.20 g，8.34 mmol，參見中間物42)於N,N-二甲基甲醯胺(30 ml)中之溶液中分批添加N-溴代丁二醯亞胺(1.49 g，8.34 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物1小時。藉由碳酸氫鈉飽和溶液及硫代硫酸鈉飽和溶液淬滅反應混合物，用乙酸乙酯萃取混合物。將合併之有機相用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。藉由矽膠管柱層析(100至200目，石油醚:乙酸乙酯=5:1，接著2:1，接著1:1)純化殘餘物，得到呈白色固體之N-[4-(7-溴-5-{[2-(三甲基矽烷基)乙氧基]甲基}-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基)吡啶-2-基]乙醯胺(3.70 g，96%產率)。 LC-MS (方法 C): R t= 0.968 min; MS (ESIpos): m/z = 464.0 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ): δ [ppm] = 10.78 (s, 1 H), 8.66 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 8.54 (dd, J= 5.2, 0.8 Hz, 1H), 8.52 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 7.41 (dd, J= 4.8, 1.6 Hz, 1H), 5.61 (s, 2H), 3.43 (t, J= 8.0 Hz, 2H), 2.14 (s, 3H), 0.76 (t, J= 8.0 Hz, 2H), -0.15 (s, 9H)。
中間物44  N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5-{[2-(三甲基矽烷基)乙氧基]甲基}-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image177
在室溫下向N-[4-(7-溴-5-{[2-(三甲基矽烷基)乙氧基]甲基}-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基)吡啶-2-基]乙醯胺(3.70 g，8.00 mmol，參見中間物43)及2-(三丁基錫烷基)吡啶(5.89 g，16.0 mmol)於1,4-二㗁烷(50 ml)中之溶液中一次性添加雙(三苯膦)氯化鈀(II) (562 mg，0.8 mmol)。在氮氣氛圍下於100℃攪拌反應混合物16小時。減壓濃縮反應混合物，得到殘餘物。用水稀釋殘餘物且用乙酸乙酯萃取。將有機相用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥且過濾。濃縮濾液，得到殘餘物。藉由矽膠管柱層析(100至200目，石油醚:乙酸乙酯=5:1，接著2:1，接著1:1，接著0:1)純化殘餘物，得到呈白色固體之N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5-{[2-(三甲基矽烷基)乙氧基]甲基}-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}乙醯胺(2.80 g，76%產率)。 LC-MS (方法 C): R t= 0.836 min; MS (ESIpos): m/z = 461.2 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ): δ [ppm] = 10.64 (s, 1 H), 8.65 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.50 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.39 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 8.35 (d, J= 4.4 Hz, 1H), 8.22 (s, 1H), 8.14 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.84 (dt, J= 7.6, 1.6 Hz, 1H), 7.24-7.19 (m, 2H), 5.57 (s, 2H), 3.44 (t, J= 8.0 Hz, 2H), 2.08 (s, 3H), 0.78 (t, J= 8.0 Hz, 2H), -0.14 (s, 9H)。
中間物45  4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-胺-氯化氫
Figure 02_image179
在50℃攪拌N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5-{[2-(三甲基矽烷基)乙氧基]甲基}-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}乙醯胺(2.80 g，6.08 mmol，參見中間物44)及鹽酸/甲醇(4 M)於甲醇中之混合物16小時。藉由蒸發濃縮混合物以移除大部分有機溶劑。接著添加乙酸乙酯(30 ml)且在室溫下攪拌混合物10分鐘。隨後過濾混合物且收集濾餅，且在真空下乾燥，得到呈黃色固體之4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-胺鹽酸鹽(1.87 g，95%純度，90%產率)。 LC-MS (方法 A): Rt = 0.635 min; MS (ESIpos): m/z = 289.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ): δ [ppm] = 13.67 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.66-8.63 (m, 1H), 8.57-8.43 (m, 3H), 8.40-8.30 (m, 1H), 8.26-8.21 (m, 1H), 8.05-8.01 (m, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.29 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 6.95-6.92 (m, 1H)。
中間物46  (rac)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image181
將(rac)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(外消旋體) (2.00 g)溶解於二氯甲烷中且用冰浴冷卻。添加乙二醯氯(960 µL，11 mmol)，隨後添加50 µL DMF。將其在氬氣氛圍下於室溫攪拌1小時。再次冷卻混合物且逐滴用氨水(20 mL，33%純度，120 mmol)處理。向反應混合物中添加水且用二氯甲烷萃取三次。在兩層之間形成白色沈澱。將其濾出，用二氯甲烷及水洗滌，且在50℃下在真空下乾燥。分離濾液層，且將有機層用水及鹽水洗滌，經由塗有聚矽氧之濾紙過濾且減壓濃縮，得到分析純目標化合物：1.12 g。 LC-MS (方法2): R t= 0.87 min; MS (ESIpos): m/z = 218 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.97 - 2.21 (m, 1 H), 2.53 - 2.65 (m, 1 H), 3.69 (dd, 1 H), 5.65 - 6.14 (m, 1 H), 6.99 (br s, 1 H), 7.08 - 7.22 (m, 2 H), 7.29 - 7.43 (m, 2 H), 7.58 (br s, 1 H)。- 含有DMF。
中間物47  2-氟-5-肼基-3-甲基吡啶
Figure 02_image183
將6-氟-5-甲基吡啶-3-胺(1.00 g，7.93 mmol，CAS-RAN:[186593-48-6])溶解於鹽酸水溶液(20 mL，6.0 M，120 mmol)中且冷卻至0℃。在此溫度下逐滴添加含亞硝酸鈉(547 mg，7.93 mmol)之21 mL水。在30 min後，在冷卻下緩慢添加氯化錫(II)二水合物(4.47 g，19.8 mmol)於鹽酸水溶液(20 mL，6.0 M，120 mmol)中之溶液。在0℃攪拌反應混合物1.5 h。向混合物中添加氫氧化鉀水溶液(24 mL，40%純度，240 mmol)直至pH值變成鹼性。用乙酸乙酯萃取混合物水溶液三次。合併之有機層使用耐水濾紙乾燥且減壓濃縮，得到86%純度之目標化合物：766 mg。DSC量測展示180℃下之分解。 LC-MS (方法2): R t= 0.55 min; MS (ESIpos): m/z = 142 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 2.14 (s, 3 H), 4.06 (br s, 2 H), 6.78 (s, 1 H), 7.02 - 7.29 (m, 1 H), 7.46 (t, 1 H)。
中間物48  5-{-2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-2-氟-3-甲基吡啶
Figure 02_image185
將2-氟-5-肼基-3-甲基吡啶(參見中間物47，50.0 mg)溶解於2.6 mL乙酸乙酯中。添加丙烷磷酸酐(230 µL，50%於乙酸乙酯中，390 µmol；CAS-RN:[68957-94-8])及1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)乙-1-酮(98.2 mg，354 µmol，CAS-RN:[656257-84-0])。在室溫下攪拌混合物1 min，且隨後在微波中在120℃下加熱15分鐘。用乙酸乙酯及碳酸氫鈉飽和水溶液稀釋反應混合物。分離各層且使用耐水濾紙乾燥有機層。減壓濃縮澄清濾液，得到65%純度之目標化合物：145 mg。DSC顯示187℃下以400 J/g進行分解。 LC-MS (方法2): R t= 1.28 min; MS (ESIpos): m/z = 402 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 2.26 (s, 3 H), 4.39 (s, 2 H), 7.25 (ddd, 1 H), 7.39 (d, 1 H), 7.62 - 8.06 (m, 5 H), 8.29 (d, 1 H), 8.39 - 8.55 (m, 1 H), 10.58 (s, 1 H)。
中間物49  2-(2-溴吡啶-4-基)-5-氟-6-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶
Figure 02_image187
將5-{2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-2-氟-3-甲基吡啶(參見中間物48，124 mg)溶解於2.2 mL環丁碸中，且添加氯化鋅(46.5 mg，341 µmol)。在170℃加熱混合物4小時。用乙酸乙酯稀釋反應混合物。將其用半飽和氯化鈉水溶液洗滌三次。使用耐水濾紙乾燥有機層。減壓濃縮澄清濾液。用二氯甲烷稀釋粗產物。米色固體沈澱。將其在真空下濾出，得到87%純度之目標化合物：56 mg。 LC-MS (方法2): R t= 1.08 min; MS (ESIpos): m/z = 383 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 2.38 (s, 3 H), 7.31 (ddd, 1 H), 7.50 (dd, 1 H), 7.80 (d, 1 H), 7.87 - 7.98 (m, 2 H), 7.99 - 8.08 (m, 1 H), 8.37 (d, 1 H), 8.45 - 8.55 (m, 1 H), 12.30 (s, 1 H)。
中間物50  2-氟-5-肼基-4-甲基吡啶
Figure 02_image189
將6-氟-4-甲基吡啶-3-胺(1.00 g，7.93 mmol，CAS-RN:[954236-33-0])溶解於鹽酸水溶液(20 mL，6.0 M，120 mmol)中且冷卻至0℃。在此溫度下逐滴添加含亞硝酸鈉(547 mg，7.93 mmol)之21 mL水。在30 min後，在冷卻下緩慢添加氯化錫(II)二水合物(4.47 g，19.8 mmol)於鹽酸水溶液(20 Ll，6.0 M，120 mmol)中之溶液。在0℃攪拌反應混合物1.5 h。向反應混合物中添加氫氧化鉀水溶液(24 ml，40%純度，240 mmol)直至pH值變成鹼性。用乙酸乙酯萃取混合物水溶液三次。合併之有機層使用耐水濾紙乾燥且減壓濃縮，得到96%純度之目標化合物：774 mg。 LC-MS (方法2): R t= 0.53 min; MS (ESIpos): m/z = 142 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 2.10 (d, 3 H), 4.04 (s, 2 H), 6.39 (s, 1 H), 6.76 (d, 1 H), 7.78 (d, 1 H)。
中間物51  5-{2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-2-氟-4-甲基吡啶
Figure 02_image191
將2-氟-5-肼基-4-甲基吡啶(參見中間物50，204 mg)、1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)乙-1-酮(400 mg，1.44 mmol，CAS-RN:[656257-84-0])及丙烷磷酸酐(950 µL，50%於乙酸乙酯中，1.6 mmol；CAS-RN:[68957-94-8])溶解於11 mL乙酸乙酯中且在氮氣氛圍下，在微波反應器中於120℃攪拌15分鐘。反應混合物經音波處理，用乙酸乙酯及碳酸氫鈉飽和水溶液稀釋且將其攪拌5分鐘。在兩層之間形成少量沈澱，濾出且用乙酸乙酯及水洗滌，得到第1批之分析純目標化合物：325 mg。分離各層且有機層經由耐水濾紙過濾並減壓濃縮。將粗產物懸浮於二氯甲烷中且進行音波處理。濾出未溶解的沈澱物，用二氯甲烷洗滌且在50℃下真空乾燥，得到第二批分析純目標化合物：202 mg。合併兩批並用於以下反應。 第2批之分析； LC-MS (方法2): R t= 1.32 min; MS (ESIpos): m/z = 400/402 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 2.46 (s, 3 H), 4.41 (s, 2 H), 7.06 (d, 1 H), 7.33 (ddd, 1 H), 7.61 (d, 1 H), 7.86 (td, 1 H), 7.97 (dd, 1 H), 8.08 (d, 1 H), 8.28 (d, 1 H), 8.36 (d, 1 H), 8.50 - 8.62 (m, 1 H), 10.97 (s, 1 H)。
中間物52  2-(2-溴吡啶-4-基)-5-氟-7-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶
Figure 02_image193
將5-{2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-2-氟-4-甲基吡啶(參見中間物51，520 mg)及氯化鋅(195 mg，1.43 mmol)溶解於9.3 mL環丁碸中且在氮氣氛圍下於170℃攪拌4小時。用約50 mL乙酸乙酯稀釋反應混合物。形成精細沈澱。濾出沈澱並用乙酸乙酯洗滌。將殘餘物懸浮於二氯甲烷中且進行音波處理。濾出未溶解的沈澱。藉由HPLC純化此第二殘餘物，得到93%純度之第一批目標化合物。用半濃縮氯化鈉溶液萃取濾液三次，用耐水濾紙乾燥且在真空下濃縮。將粗產物溶解於0.5 mL二氯甲烷中且用MTBE處理。濾出所形成之沈澱，得到94%純度之第二批目標化合物：74 mg。 第2批之分析： LC-MS (方法2): R t= 1.13 min; MS (ESIpos): m/z = 383/385 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 2.64 (d, 3 H), 6.91 (s, 1 H), 7.30 (ddd, 1 H), 7.50 (dd, 1 H), 7.82 - 7.87 (m, 1 H), 7.91 (td, 1 H), 8.03 (dt, 1 H), 8.35 - 8.41 (m, 1 H), 8.43 - 8.52 (m, 1 H), 12.20 (s, 1 H)。-  含有環丁碸
中間物53  2-氟-5-肼基-4-甲氧基吡啶
Figure 02_image195
將6-氟-4-甲氧基吡啶-3-胺(1.00 g，7.04 mmol，CAS-RN:[1807013-79-1])溶解於鹽酸水溶液(18 mL，6.0 M，110 mmol)中且冷卻至0℃。在此溫度下逐滴添加含亞硝酸鈉(485 mg，7.04 mmol)之19 mL水。在30 min後，在冷卻下緩慢添加氯化錫(II)二水合物(3.97 g，17.6 mmol；CAS-RN:[10025-69-1])於鹽酸水溶液(18 mL，6.0 M，110 mmol)中之溶液。在0℃攪拌混合物1.5 h。向混合物中添加氫氧化鉀水溶液(21 mL，40%純度，210 mmol)直至pH值變成鹼性。用乙酸乙酯萃取混合物水溶液三次。合併之有機層使用耐水濾紙乾燥且減壓濃縮，得到84%純度之目標化合物：845 mg。 LC-MS (方法2): R t= 0.49 min; MS (ESIpos): m/z = 158 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.85 (s, 4 H) 3.95 - 4.08 (m, 2 H) 6.00 - 6.12 (m, 1 H) 6.58 - 6.69 (m, 1 H) 7.61 - 7.73 (m, 1 H)。
中間物54  5-{-2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-2-氟-4-甲氧基吡啶
Figure 02_image197
將2-氟-5-肼基-4-甲氧基吡啶(參見中間物53，227 mg)溶解於11 mL乙酸乙酯中。添加丙烷膦酸酐(950 µL，50%於乙酸乙酯中，1.6 mmol；CAS-RN:[68957-94-8])及1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)乙-1-酮(400 mg，1.44 mmol，CAS-RN:[656257-84-0])。在室溫下攪拌反應混合物1 min，且隨後在微波中於120℃加熱15分鐘。用乙酸乙酯及碳酸氫鈉飽和水溶液稀釋反應混合物。分離各層且使用耐水濾紙乾燥有機層。減壓濃縮澄清濾液，得到81%純度之第1批粗產物：298 mg。用乙酸乙酯再萃取水層兩次。使用耐水濾紙乾燥各層且減壓濃縮澄清濾液，得到78%純度之第2批粗產物：234 mg。用二氯甲烷稀釋粗產物。米色固體沈澱。在真空下將其濾出。減壓濃縮澄清濾液，得到92%純度之目標化合物：529 mg。 LC-MS (方法2): R t= 1.23 min; MS (ESIpos): m/z = 416/418 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 4.05 (s, 3 H), 4.34 (s, 2 H), 6.91 (s, 1 H), 7.27 - 7.40 (m, 1 H), 7.60 (d, 1 H), 7.82 - 7.90 (m, 1 H), 7.94 - 8.01 (m, 1 H), 8.07 (d, 1 H), 8.15 (d, 1 H), 8.36 (d, 1 H), 8.48 - 8.60 (m, 1 H), 11.21 (s, 1 H)。- 芳族及脂族範圍內之少量雜質。
中間物55  2-(2-溴吡啶-4-基)-5-氟-7-甲氧基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶
Figure 02_image199
將5-{2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-2-氟-4-甲氧基吡啶(參見中間物54，520 mg)溶解於8.9 mL環丁碸中且添加氯化鋅(187 mg，1.37 mmol)。在170℃加熱混合物4小時。用乙酸乙酯及半飽和氯化鈉水溶液稀釋反應混合物。儘管其為極混濁混合物，分離各層且再次用乙酸乙酯萃取水層。使用耐水濾紙乾燥合併之有機層。減壓濃縮澄清濾液。用乙酸乙酯稀釋殘餘物且用半飽和氯化鈉水溶液洗滌三次。使用耐水濾紙乾燥有機層。減壓濃縮澄清濾液。在真空下濾出水層中之米色固體。在真空乾燥烘箱中在40℃乾燥濾餅隔夜，得到91%純度之目標化合物：193 mg。 LC-MS (方法2): R t= 1.07 min; MS (ESIpos): m/z = 399/401 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 4.09 (s, 3 H), 6.71 (s, 1 H), 7.29 (ddd, 1 H), 7.47 (dd, 1 H), 7.80 (d, 1 H), 7.89 (td, 1 H), 7.96 - 8.03 (m, 1 H), 8.33 (d, 1 H), 8.41 - 8.52 (m, 1 H), 12.53 (br s, 1 H)。- 含有環丁碸。
中間物56  4-(環丙氧基)-2-氟-5-肼基吡啶
Figure 02_image201
將4-(環丙氧基)-6-氟吡啶-3-胺(250 mg，1.49 mmol)溶解於酸性酸水溶液(3.7 ml，6.0 M，22 mmol)中且冷卻至0天。在此溫度下逐滴添加含亞硝酸鈉(103 mg，1.49 mmol)之4 mL水。30 min後，在冷卻下緩慢添加氯化錫(II)二水合物於酸性水溶液(3.7 ml，6.0 M，22 mmol)中之溶液。在0℃攪拌混合物1.5 h。向反應混合物中添加氫氧化鉀水溶液(4.5 ml，40%純度，45 mmol)。用乙酸乙酯萃取混合物水溶液三次。合併之有機層使用耐水濾紙乾燥且減壓濃縮，得到85%純度之目標化合物：231 mg。 LC-MS (方法2): R t= 0.67 min; MS (ESIpos): m/z = 184 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 0.68 - 0.75 (m, 2 H), 0.79 - 0.90 (m, 2 H), 3.91 - 4.09 (m, 3 H), 5.98 (s, 1 H), 6.81 (d, 1 H), 7.66 (d, 1 H)。
中間物57  5-{2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-4-(環丙氧基)-2-氟吡啶
Figure 02_image203
將4-(環丙氧基)-2-氟-5-肼基吡啶(參見中間物56，220 mg，85%純度)溶解於7.5 mL乙酸乙酯中。添加丙烷磷酸酐(670 µl，50%純度，1.1 mmol；CAS-RN:[68957-94-8及1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)乙-1-酮(283 mg，CAS-RN:[656257-84-0])。在室溫下攪拌混合物1 min，且隨後在微波中於120℃加熱15分鐘。用乙酸乙酯及碳酸氫鈉飽和水溶液稀釋反應混合物。分離各層，且將水層用乙酸乙酯萃取兩次。使用耐水濾紙乾燥合併之有機層。減壓濃縮澄清濾液，得到64%純度之目標化合物，其不經進一步純化即使用：500 mg： LC-MS (方法2): R t= 1.35 min; MS (ESIpos): m/z = 442 [M+H] +
中間物58  2-(2-溴吡啶-4-基)-7-(環丙氧基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶
Figure 02_image205
將5-{2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-4-(環丙氧基)-2-氟吡啶(參見中間物57，500 mg)溶解於8.1 mL環丁碸中且添加氯化鋅(170 mg，1.24 mmol)。在130℃加熱混合物1小時。用乙酸乙酯及半飽和氯化鈉水溶液稀釋反應混合物。在有機層中形成米色沈澱，在真空下濾出該沈澱。用半飽和氯化鈉水溶液洗滌澄清有機層兩次。使用耐水濾紙乾燥有機層。減壓濃縮澄清濾液，得到90%純度之目標化合物：385 mg。 LC-MS (方法2): R t= 1.13 min; MS (ESIpos): m/z = 425 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.850 (0.45), 0.865 (1.25), 0.873 (0.94), 0.881 (0.47), 0.927 (0.43), 0.941 (1.14), 0.955 (0.91), 1.986 (0.56), 2.047 (5.91), 2.055 (3.91), 2.057 (4.30), 2.065 (16.00), 2.073 (4.21), 2.076 (3.85), 2.084 (6.56), 2.099 (0.41), 2.518 (0.87), 2.523 (0.56), 2.964 (0.56), 2.972 (6.35), 2.979 (2.96), 2.984 (3.62), 2.991 (13.74), 2.998 (3.26), 3.003 (2.63), 3.010 (5.77), 4.230 (0.48), 4.237 (0.63), 4.245 (0.47), 6.796 (0.54), 7.256 (0.49), 7.467 (0.80), 7.471 (0.85), 7.480 (0.84), 7.483 (0.85), 7.801 (1.91), 7.804 (1.90), 7.868 (0.69), 7.873 (0.68), 7.887 (0.44), 7.892 (0.42), 7.973 (0.90), 7.976 (1.58), 7.978 (0.97), 7.993 (0.70), 7.995 (1.11), 7.998 (0.64), 8.285 (0.96), 8.298 (0.93), 8.428 (0.68), 8.430 (0.76), 8.432 (0.81), 8.440 (0.71), 8.443 (0.77), 8.444 (0.75)。
中間物59  N-{4-[(3-胺基-4-氯吡啶-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image207
在25℃用氮氣吹掃N-(4-乙炔基吡啶-2-基)乙醯胺(CAS 1445876-40-3，5.00 g，31.2 mmol)、2,4-二氯吡啶-3-胺(CAS 173772-63-9，5.09 g，31.2 mmol)、二氯雙(三苯膦)鈀(II) (1.10 g，1.56 mmol)及碘化銅(I)(595 mg，3.12 mmol)於三甲胺(20 mL，140 mmol)及N,N-二甲基甲醯胺(50 ml)中之混合物。在100℃攪拌混合物2小時。在25℃將反應混合物(與先前實驗合併)倒入水中且用乙酸乙酯萃取。有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。藉由急驟管柱層析(120 g，石油：10%甲醇/乙酸乙酯=9:1至2:3)純化殘餘物，得到呈黃色固體之N-{4-[(3-胺基-4-氯吡啶-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺(3.5 g，60%純度，且3.5 g純)。 LC-MS (方法 C): R t= 0.698 min; MS (ESIpos): m/z = 286.9 [M+H] +。
中間物60  N-{2-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-4-氯吡啶-3-基}-2,2,2-三氟乙醯胺
Figure 02_image209
在25℃向N-{4-[(3-胺基-4-氯吡啶-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺(3.50 g，12.2 mmol，參見中間物59)於二氯甲烷(60 ml)中之懸浮液中添加三乙胺(3.4 ml，24 mmol)。將反應混合物冷卻至0℃。將三氟乙酸酐(2.6 ml，18 mmol)緩慢添加至以上反應混合物中。在0℃攪拌反應混合物0.5小時。向反應混合物中添加水(與來自先前實驗之混合物合併)且分離。有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。藉由急驟管柱層析(石油醚：10%甲醇/乙酸乙酯=10:1至2:3)純化殘餘物，得到呈黃色固體之N-{2-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-4-氯吡啶-3-基}-2,2,2-三氟乙醯胺(4.88 g)。 LC-MS (方法 C): R t= 0.698 min; MS (ESIpos): m/z = 383.2 [M+H] +。
中間物61  N-{4-[7-氯-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image211
在25℃用氮氣吹掃N-{2-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-4-氯吡啶-3-基}-2,2,2-三氟乙醯胺(1.20 g，3.14 mmol，參見中間物60)、2-碘吡啶(771 mg，3.76 mmol)、甲磺酸根基(2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯)(2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (265 mg，0.314 mmol)及碳酸銫(3.06 g，9.41 mmol)於1-甲基-2-吡咯啶酮(20 ml)中之混合物。在氮氣下於100℃攪拌16小時之後，將反應混合物(與來自先前實驗之混合物合併)倒入水中，用乙酸乙酯萃取。有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。藉由急驟管柱層析(石油醚：10%甲醇/乙酸乙酯=9:1至3:2)純化殘餘物，得到呈黃色固體之N-{4-[7-氯-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺(357.3 mg，96%純度)。 LC-MS (方法 C): R t= 0.703 min; MS (ESIpos): m/z = 364.0 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ): δ [ppm] = 12.46 (s, 1H), 10.55 (s, 1H), 8.43-8.39 (m, 2H), 8.31-8.29 (m, 2H), 8.08 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.86 (dt, J= 7.6, 2.0 Hz, 1H), 7.43 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 7.28-7.24 (m, 1H), 7.17 (dd, J= 5.2 Hz, 1.6 Hz, 1H), 2.09 (s, 3H)。
中間物62  4-[7-氯-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺
Figure 02_image213
使N-{4-[7-氯-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺(參見中間物61，160 mg，440 µmol)懸浮於丙醇(3.0 ml)與水(300 µl)之混合物中，且添加4,5-二氫呋喃-2-基硼酸(100 mg，880 µmol，CAS 1218790-93-2)、雙-(三苯膦)-二氯化鈀(II)(30.9 mg，44.0 µmol；CAS-RN:[13965-03-2])、三苯膦(11.5 mg，44.0 µmol；CAS-RN:[603-35-0])及碳酸鉀(304 mg，2.20 mmol；CAS-RN:[584-08-7])之混合物。將反應混合物抽空且用氬氣吹掃三次並在100℃攪拌2小時。用乙酸乙酯稀釋混合物且用鹽水洗滌一次。使用耐水濾紙乾燥經分離之有機層。藉由旋轉蒸發濃縮澄清濾液。藉由矽膠層析(梯度己烷/乙酸乙酯40-100%)純化粗物質，得到60 mg標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 0.82 min; MS (ESIpos): m/z = 322 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.33 (s, 1H), 8.58-8.45 (m, 1H), 8.36 (d, 1H), 7.97 (dt, 1H), 7.91-7.81 (m, 2H), 7.39 (d, 1H), 7.27 (ddd, 1H), 6.65 (dd, 1H), 6.50 (dd, 1H), 6.02 (s, 2H)
中間物63  4-{[(2R)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-2-氟-5-硝基吡啶(單一立體異構體)
Figure 02_image215
將2,4-二氟-5-硝基吡啶(2.00 g，12.5 mmol，CAS 60186-15-4)溶解於THF (16 ml)中，添加[(2S)-1,4-二㗁烷-2-基]甲醇(2.95 g，25.0 mmol，CAS 406913-93-7)及N,N-二異丙基乙胺(4.4 mL，25 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])中且在60℃攪拌混合物6小時。將其真空濃縮且藉由矽膠層析(梯度：己烷/乙酸乙酯20-100%)純化，得到2.69 g (83%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.88 min; MS (ESIpos): m/z = 259 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.154 (3.28), 1.172 (6.28), 1.190 (3.25), 1.988 (11.82), 2.518 (1.84), 2.523 (1.37), 3.405 (3.38), 3.430 (3.91), 3.433 (4.36), 3.446 (1.79), 3.458 (4.23), 3.466 (2.60), 3.473 (2.72), 3.489 (0.94), 3.499 (2.01), 3.501 (2.48), 3.596 (1.84), 3.603 (2.35), 3.625 (2.59), 3.630 (2.35), 3.632 (3.29), 3.654 (5.50), 3.656 (5.46), 3.681 (1.80), 3.687 (1.53), 3.750 (3.18), 3.759 (1.90), 3.780 (1.86), 3.783 (1.72), 3.790 (0.42), 3.809 (2.48), 3.815 (2.85), 3.838 (2.07), 3.844 (2.59), 3.879 (0.89), 3.886 (0.86), 3.891 (1.84), 3.897 (1.73), 3.903 (1.49), 3.909 (1.35), 3.915 (1.75), 3.922 (1.42), 3.927 (0.96), 3.933 (0.75), 4.000 (0.90), 4.017 (2.77), 4.035 (2.76), 4.053 (0.89), 4.324 (13.23), 4.336 (10.94), 7.319 (16.00), 8.825 (13.64)。
中間物64  4-{[(2R)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-6-氟吡啶-3-胺(單一立體異構體)
Figure 02_image217
將4-{[(2R)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-2-氟-5-硝基吡啶(參見中間物63，2.69 g，10.4 mmol)溶解於乙醇(66 ml)與二氯甲烷(17 ml)之混合物中。添加鈀(1.11 g，碳上純度10%，1.04 mmol；CAS-RN:[7440-05-3])且在氫氣氛圍下攪拌混合物四小時。濾出催化劑且減壓濃縮澄清濾液，得到2.23 g (95%純度，89%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.63 min; MS (ESIpos): m/z = 229 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.053 (0.66), 2.518 (2.62), 2.523 (1.85), 3.413 (5.33), 3.439 (6.87), 3.442 (7.06), 3.468 (6.34), 3.478 (1.38), 3.488 (2.66), 3.509 (4.60), 3.516 (5.23), 3.528 (1.09), 3.540 (4.30), 3.542 (4.61), 3.551 (0.40), 3.597 (3.39), 3.603 (4.21), 3.626 (4.59), 3.630 (4.12), 3.632 (5.80), 3.640 (0.71), 3.651 (8.38), 3.656 (7.89), 3.678 (3.02), 3.684 (2.74), 3.751 (5.94), 3.758 (3.02), 3.763 (1.64), 3.781 (3.34), 3.790 (1.05), 3.867 (1.13), 3.874 (1.73), 3.880 (5.16), 3.887 (8.73), 3.893 (3.12), 3.899 (2.79), 3.910 (6.17), 3.917 (4.87), 3.924 (1.51), 3.938 (0.46), 4.006 (3.53), 4.017 (2.98), 4.033 (8.60), 4.044 (7.20), 4.061 (8.64), 4.074 (7.57), 4.088 (3.53), 4.101 (2.87), 4.757 (2.40), 5.758 (2.00), 6.644 (14.56), 6.646 (14.35), 7.374 (16.00), 7.377 (15.44), 7.887 (1.00), 7.890 (1.04)。
中間物65  2-溴-4-{[(2R)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-6-氟吡啶-3-胺(單一立體異構體)
Figure 02_image219
將4-{[(2R)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-6-氟吡啶-3-胺(參見中間物64，2.23 g，9.75 mmol)於乙酸(9.0 ml)中之混合物冷卻至5℃。在此溫度下逐滴添加含溴之乙酸(10 mL，1.0 M，10 mmol；CAS-RN:[7726-95-6])。在完成添加之後，將其在5℃下攪拌1小時。濃縮混合物。使用NaHCO 3飽和水溶液鹼化殘餘物且將其用二氯甲烷/甲醇之混合物萃取。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。矽膠層析(梯度：己烷/乙酸乙酯，20-50%)得到2.75 g (95%純度，87%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.89 min; MS (ESIpos): m/z = 307 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.154 (2.20), 1.172 (4.16), 1.190 (2.01), 1.987 (7.90), 2.518 (2.46), 2.523 (1.73), 3.402 (4.29), 3.428 (8.00), 3.431 (7.85), 3.457 (5.39), 3.480 (1.48), 3.490 (2.59), 3.510 (5.07), 3.517 (5.79), 3.528 (0.95), 3.541 (4.89), 3.544 (4.94), 3.599 (3.96), 3.606 (4.84), 3.628 (5.20), 3.632 (4.87), 3.635 (6.40), 3.645 (1.48), 3.652 (9.52), 3.658 (9.26), 3.664 (1.24), 3.680 (3.50), 3.684 (3.00), 3.752 (6.79), 3.759 (3.31), 3.765 (1.44), 3.781 (3.73), 3.792 (1.22), 3.890 (4.58), 3.896 (6.46), 3.905 (2.27), 3.911 (1.66), 3.918 (9.04), 3.925 (7.40), 3.937 (2.95), 3.944 (2.10), 3.949 (2.07), 3.956 (1.48), 3.999 (0.56), 4.017 (1.70), 4.035 (1.73), 4.053 (0.63), 4.066 (2.64), 4.072 (0.87), 4.077 (2.44), 4.092 (9.84), 4.104 (9.10), 4.113 (8.24), 4.120 (1.96), 4.127 (7.00), 4.141 (3.13), 4.154 (2.93), 4.852 (14.09), 5.758 (12.01), 6.819 (16.00), 6.821 (15.97)。
中間物66  N-{4-[(3-胺基-4-{[(2R)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-6-氟吡啶-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺(單一立體異構體)
Figure 02_image221
使2-溴-4-{[(2R)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-6-氟吡啶-3-胺(參見中間物65，1.15 g，3.74 mmol)、N-(4-乙炔基吡啶-2-基)乙醯胺(720 mg，4.49 mmol，CAS 1445876-40-3)、二氯[雙(三苯膦)]鈀(131 mg，187 µmol；CAS-RN:[13965-03-2])、碘化銅(I)(71.3 mg，374 µmol；CAS-RN:[7681-65-4])及三乙胺(2.1 mL，15 mmol；CAS-RN:[121-44-8])懸浮於DMF中。將混合物抽空且用氬氣吹掃三次，且在80℃下攪拌60分鐘。反應混合物藉由旋轉蒸發濃縮且直接藉由矽膠層析(梯度：二氯甲烷/乙醇0-20%)純化，得到733 mg (95%純度，48%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.89 min; MS (ESIneg): m/z = 385 [M-H] -¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2.112 (14.69), 2.518 (2.08), 2.523 (1.44), 2.729 (14.51), 2.888 (16.00), 3.415 (0.79), 3.441 (1.41), 3.444 (1.40), 3.471 (0.90), 3.502 (0.42), 3.523 (0.92), 3.530 (1.01), 3.553 (0.89), 3.556 (0.84), 3.614 (0.67), 3.620 (0.77), 3.642 (0.96), 3.646 (0.95), 3.648 (1.09), 3.663 (1.68), 3.671 (1.30), 3.691 (0.71), 3.767 (1.30), 3.773 (0.63), 3.793 (0.65), 3.796 (0.67), 3.919 (0.89), 3.926 (1.19), 3.936 (0.41), 3.948 (1.98), 3.955 (1.28), 3.962 (0.43), 3.968 (0.57), 3.974 (0.41), 4.078 (0.53), 4.090 (0.46), 4.105 (1.42), 4.117 (1.31), 4.132 (1.29), 4.146 (1.07), 4.160 (0.58), 4.173 (0.54), 5.399 (2.60), 6.802 (3.23), 7.338 (1.56), 7.341 (1.59), 7.351 (1.60), 7.354 (1.62), 7.950 (1.97), 8.225 (1.60), 8.347 (0.83), 8.360 (0.81), 10.630 (1.69)。
中間物67  N-(2-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-4-{[(2R)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-6-氟吡啶-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(單一立體異構體)
Figure 02_image223
用三乙胺(1.8 mL，13 mmol；CAS-RN:[121-44-8])處理溶解於乙腈(46 ml)中之N-{4-[(3-胺基-4-{[(2R)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-6-氟吡啶-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺(參見中間物66，630 mg，1.63 mmol)，且抽空混合物並用氬氣吹掃三次。將其冷卻至0℃，且將三氟乙酸酐(690 µl，4.9 mmol；CAS-RN:[407-25-0])緩慢引入反應混合物中。在完成添加之後，將其在0℃攪拌30分鐘。使用NaHCO 3飽和水溶液鹼化混合物且將其用二氯甲烷/甲醇之混合物萃取。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且在真空下濃縮，得到725 mg (92%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.97 min; MS (ESIneg): m/z = 481 [M-H] -¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.162 (0.54), 1.172 (0.50), 1.987 (0.78), 2.112 (16.00), 2.518 (1.09), 2.523 (0.74), 2.866 (1.27), 3.204 (0.94), 3.366 (1.12), 3.391 (1.43), 3.395 (1.66), 3.403 (0.72), 3.420 (1.61), 3.423 (1.38), 3.430 (1.12), 3.450 (0.66), 3.458 (0.71), 3.579 (0.60), 3.585 (0.75), 3.608 (0.97), 3.615 (1.15), 3.641 (1.25), 3.647 (1.59), 3.653 (0.87), 3.675 (0.87), 3.737 (1.06), 3.744 (1.25), 3.754 (1.05), 3.761 (1.45), 3.771 (0.94), 3.783 (0.90), 3.789 (1.13), 3.820 (0.73), 3.826 (0.71), 3.831 (0.61), 3.838 (0.55), 3.845 (0.71), 3.851 (0.59), 3.855 (0.45), 4.223 (1.54), 4.233 (2.70), 4.244 (1.64), 5.758 (3.20), 7.156 (2.02), 7.160 (1.92), 7.169 (1.97), 7.173 (1.99), 7.211 (3.03), 7.228 (0.48), 7.773 (1.41), 8.071 (0.49), 8.214 (2.04), 8.399 (2.11), 8.400 (1.96), 8.411 (1.93), 8.413 (1.87), 10.708 (1.85)。
中間物68  N-{4-[7-{[(2R)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺(單一立體異構體)
Figure 02_image225
在密封容器中使N-(2-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-4-{[(2R)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-6-氟吡啶-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(參見中間物67，720 mg，75%純度，1.12 mmol)、2-溴吡啶(210 µl，2.2 mmol；CAS-RN:[109-04-6])、XPhos Pd G2 (88.1 mg，112 µmol，CAS 1310584-14-5)及磷酸鉀(356 mg，1.68 mmol；CAS-RN:[7778-53-2])懸浮於乙腈(20 ml)中。將其抽空且用氬氣吹掃三次並在120℃攪拌1小時。向反應混合物中添加水且用乙酸乙酯/甲醇之混合物萃取。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠層析(梯度：二氯甲烷/乙醇0-35%)純化，得到70.0 mg (13%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.75 min; MS (ESIneg): m/z = 462 [M-H] -¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.797 (0.98), 0.802 (0.42), 0.814 (1.05), 0.821 (1.08), 0.840 (0.50), 0.886 (0.62), 0.904 (1.28), 0.922 (0.69), 1.035 (0.50), 1.052 (0.93), 1.070 (0.60), 1.215 (0.43), 1.232 (0.80), 1.255 (0.60), 1.907 (0.55), 2.077 (16.00), 2.106 (0.99), 2.115 (3.66), 2.131 (2.06), 2.518 (3.14), 2.523 (2.08), 3.525 (1.33), 3.532 (0.68), 3.551 (2.50), 3.554 (2.34), 3.559 (1.55), 3.581 (1.70), 3.636 (0.88), 3.642 (1.09), 3.652 (0.55), 3.665 (1.27), 3.671 (1.48), 3.687 (2.13), 3.694 (1.76), 3.714 (0.97), 3.797 (1.76), 3.827 (1.14), 3.997 (1.48), 4.004 (2.07), 4.011 (0.82), 4.019 (1.05), 4.027 (1.67), 4.032 (1.18), 4.247 (0.75), 4.259 (0.74), 4.274 (1.66), 4.286 (1.42), 4.303 (1.60), 4.317 (1.49), 4.330 (0.68), 4.344 (0.67), 5.759 (14.38), 6.625 (0.65), 6.708 (5.45), 6.968 (0.48), 6.974 (0.45), 7.085 (0.57), 7.098 (2.36), 7.102 (2.36), 7.111 (2.32), 7.115 (2.44), 7.195 (0.48), 7.199 (0.52), 7.208 (0.50), 7.213 (1.27), 7.216 (1.15), 7.226 (1.16), 7.229 (1.24), 7.232 (1.38), 7.235 (1.22), 7.244 (1.36), 7.247 (1.31), 7.821 (1.01), 7.826 (0.96), 7.841 (1.58), 7.846 (1.68), 7.860 (1.34), 7.864 (1.35), 7.919 (1.54), 7.922 (2.55), 7.924 (1.57), 7.939 (1.05), 7.942 (1.61), 7.945 (0.95), 8.224 (0.49), 8.241 (1.80), 8.254 (3.15), 8.256 (2.62), 8.267 (2.59), 8.269 (2.42), 8.380 (0.97), 8.382 (0.77), 8.389 (1.26), 8.394 (1.84), 8.401 (1.39), 8.403 (1.52), 8.406 (1.40), 8.408 (1.19), 10.533 (2.50), 12.314 (2.73)。
中間物69  4-[7-{[(2R)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺(單一立體異構體)
Figure 02_image227
將N-{4-[7-{[(2R)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺(參見中間物68，95.0 mg，205 µmol)溶解於甲醇(4.4 ml)中，添加氫氧化鈉水溶液(2.0 ml，1.0 M，2.0 mmol；CAS-RN:[1310-73-2])且在80℃攪拌3小時。濃縮反應混合物且藉由矽膠層析(梯度：二氯甲烷/甲醇0-30%)純化，得到48.0 mg (95%純度，53%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.66 min; MS (ESIneg): m/z = 420 [M-H] -¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.052 (0.49), 1.231 (0.73), 1.903 (9.21), 2.336 (0.48), 2.518 (5.69), 2.522 (3.71), 2.673 (1.11), 3.525 (0.86), 3.535 (1.34), 3.556 (3.55), 3.561 (5.19), 3.585 (6.66), 3.588 (6.88), 3.612 (3.24), 3.638 (2.12), 3.644 (2.41), 3.667 (2.93), 3.673 (3.46), 3.688 (5.34), 3.696 (3.76), 3.715 (2.43), 3.795 (4.30), 3.802 (2.03), 3.811 (0.66), 3.824 (2.32), 3.834 (0.92), 3.957 (0.74), 3.963 (1.03), 3.969 (1.73), 3.976 (2.24), 3.981 (1.53), 3.988 (2.06), 4.000 (2.97), 4.007 (4.84), 4.033 (3.10), 4.039 (2.62), 4.221 (1.74), 4.233 (1.69), 4.247 (4.09), 4.259 (3.79), 4.288 (3.35), 4.302 (3.21), 4.315 (2.20), 4.328 (1.90), 5.758 (3.65), 5.973 (11.12), 6.443 (6.04), 6.447 (6.22), 6.457 (5.89), 6.461 (6.42), 6.579 (0.49), 6.590 (8.55), 6.592 (8.50), 6.594 (6.96), 6.660 (16.00), 7.221 (3.40), 7.229 (2.83), 7.233 (5.24), 7.242 (6.19), 7.245 (4.05), 7.254 (3.74), 7.265 (0.47), 7.799 (0.73), 7.803 (0.62), 7.819 (5.42), 7.823 (11.54), 7.826 (7.28), 7.832 (12.32), 7.836 (11.78), 7.838 (9.09), 7.840 (7.99), 7.846 (1.15), 7.851 (7.18), 7.853 (6.88), 8.452 (3.73), 8.457 (5.17), 8.459 (3.57), 8.464 (3.68), 8.468 (6.73), 8.471 (3.23), 12.179 (7.45)。
中間物70  N-{4-[(3-胺基-6-氯吡啶-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image229
用氮氣吹掃N-(4-乙炔基吡啶-2-基)乙醯胺(5.00 g，31.2 mmol)、2-溴-6-氯吡啶-3-胺(7.12 g，34.3 mmol)、二氯雙(三苯膦)鈀(II) (1.10 g，1.56 mmol)、碘化銅(I)(595 mg，3.12 mmol)及三甲胺(20 mL，140 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(50 mL)中之混合物。在氮氣保護下於100℃攪拌16小時之後，將反應混合物倒入水中，用乙酸乙酯萃取。將合併之有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾，且減壓濃縮。藉由矽膠層析(100至200目，石油醚:乙酸乙酯=1:1至0:1)純化殘餘物，得到呈黃色固體之N-{4-[(3-胺基-6-氯吡啶-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺(5.90 g，66%產率)。
中間物71  N-[4-(5-氯-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]乙醯胺
Figure 02_image231
在25℃向N-{4-[(3-胺基-6-氯吡啶-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺(5.90 g，參見中間物70)於1-甲基-2-吡咯啶酮(50 mL)中之溶液中添加碘化銅(I)(784 mg，4.12 mmol)。在130℃攪拌16小時之後，用水稀釋反應混合物且用乙酸乙酯萃取。將有機層用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，得到殘餘物。藉由矽膠管柱(100至200目，石油醚:乙酸乙酯=1:1至1:2)純化殘餘物，得到呈黃色固體之N-[4-(5-氯-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]乙醯胺(2.60 g，44%產率)。
中間物72  N-[4-(3-溴-5-氯-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]乙醯胺
Figure 02_image233
在0℃向N-[4-(5-氯-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]乙醯胺(2.40 g，參見中間物71)於N,N-二甲基甲醯胺(29 mL)中之溶液中添加N-溴代丁二醯亞胺(1.34 g，7.53 mmol)。在室溫下攪拌0.5小時之後，用飽和碳酸氫鈉及飽和硫代硫酸鈉淬滅反應混合物(與以200 mg中間物71為起始物質的另一批次合併)，用乙酸乙酯溶離。有機層用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，得到殘餘物。用乙酸乙酯濕磨殘餘物，得到呈黃色固體之N-[4-(3-溴-5-氯-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]乙醯胺(2.7 g，88%產率)。
中間物73  N-[4-(3-溴-5-氯-1-{[2-(三甲基矽烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]乙醯胺
Figure 02_image235
在25℃向N-[4-(3-溴-5-氯-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]乙醯胺(2.50 g，參見中間物72)於N,N-二甲基甲醯胺(25 mL)中之溶液中添加碳酸鉀(2.8 g，20.51 mmol)。在室溫下攪拌10分鐘後，將[2-(氯甲氧基)乙基](三甲基)矽烷(1.71 g，10.3 mmol)添加至反應混合物中。在室溫下攪拌2小時之後，將反應混合物(與以200 mg中間物72為起始物質之另一批次合併)用水稀釋，用乙酸乙酯萃取。將有機層用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥且過濾。濃縮濾液，得到殘餘物。藉由矽膠管柱(100至200目，石油醚:乙酸乙酯=10:1至3:1)純化殘餘物，得到呈黃色膠狀物之N-[4-(3-溴-5-氯-1-{[2-(三甲基矽烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]乙醯胺(3 g，88%產率)。
中間物74  N-{4-[5-氯-3-(吡啶-2-基)-1-{[2-(三甲基矽烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image237
在室溫下向N-[4-(3-溴-5-氯-1-{[2-(三甲基矽烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]乙醯胺(2.50 g，參見中間物73)、2-(三丁基錫烷基)吡啶(2.23 g，6.05 mmol)於1,4-二㗁烷(30 mL)中之混合物中一次性添加二氯雙(三苯膦)鈀(II) (354 mg，0.5 mmol)。在氮氣氛圍下於100℃攪拌16小時之後，濃縮反應混合物(與以50 mg中間物73及500 mg中間物73為起始物質之另外兩個批次合併)，得到殘餘物。藉由急驟層析(石油醚:乙酸乙酯=3:1)純化殘餘物，得到呈黃色膠狀物之N-{4-[5-氯-3-(吡啶-2-基)-1-{[2-(三甲基矽烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺(940 mg，38%產率)。
藉由製備型HPLC (儀器：ACSWH-GX-Q；管柱：Shim-pack C18 150*25*10 µm；溶離劑A：水(0.225%甲酸)，溶離劑B：乙腈；梯度：0-14 min 32-60% B；流速25 mL/min；溫度：室溫；偵測器：UV 220/254 nm)純化N-{4-[5-氯-3-(吡啶-2-基)-1-{[2-(三甲基矽烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺(400 mg，中間物74)之粗產物，得到呈白色固體之N-{4-[5-氯-3-(吡啶-2-基)-1-{[2-(三甲基矽烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺(138 mg，98%純度)。 LC-MS (方法 C): R t= 0.78 min; MS (ESIpos): m/z = 494 [M+H] + . 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ): δ [ppm] = 10.61 (s, 1H), 8.36 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 8.32-8.34 (m, 1H), 8.27 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.84 (td, J= 7.8, 2.0 Hz, 1H), 7.43 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.22-7.19 (m, 1H), 7.10 (dd, J= 5.2, 1.6 Hz, 1H), 5.51 (s, 2H), 2.06 (s, 3H), 0.75-0.69 (m, 2H), -0.14 (s, 10H)。
中間物75 N-{4-[5-氯-3-(吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image239
將 N-{4-[5-氯-3-(吡啶-2-基)-1-{[2-(三甲基矽烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺(參見中間物74，138 mg)溶解於3.8 mL乙腈中且用醚合三氟化硼(370 µl，46%純度，1.4 mmol)處理。在氮氣氛圍下於室溫攪拌反應混合物4小時。向反應混合物中添加氨水(2.6 mL，33%純度，45 mmol)及水，且將其在室溫下攪拌隔夜。濾出所形成之沈澱，用水及己烷洗滌且在50℃下真空乾燥，得到分析純目標化合物：72 mg。 LC-MS (方法2): R t= 0.93 min; MS (ESIpos): m/z = 364 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 2.08 (s, 3 H), 7.07 - 7.21 (m, 1 H), 7.23 - 7.35 (m, 2 H), 7.81 - 8.02 (m, 3 H), 8.29 (d, 2 H), 8.42 - 8.54 (m, 1 H), 10.56 (s, 1 H), 12.37 (br s, 1 H)。
中間物76  4-[5-氯-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺
Figure 02_image241
使 N-{4-[5-氯-3-(吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺(中間物75，70 mg)溶解於甲醇(7.8 ml)中且用氫氧化鈉水溶液(1.9 ml，1.0 M，1.9 mmol)處理。在氬氣氛圍下於80℃攪拌反應混合物10小時。減壓濃縮反應混合物且用水稀釋。濾出未溶解的沈澱且用水洗滌直至濾液不再為鹼性為止。在50℃真空乾燥殘餘物，得到98%純度之目標化合物：50 mg。 LC-MS (方法2): R t= 0.89 min; MS (ESIpos): m/z = 322 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] = 6.03 (s, 2 H), 6.49 (dd, 1 H), 6.59 (dd, 1 H), 7.17 - 7.36 (m, 2 H), 7.81 - 7.97 (m, 4 H), 8.44 - 8.65 (m, 1 H), 12.21 (s, 1 H)。
中間物77  2-(二氟甲氧基)-6-[2-(二苯基亞甲基)肼基]吡𠯤
Figure 02_image243
將2-氯-6-(二氟甲氧基)吡𠯤(700 mg，3.88 mmol)、(二苯基亞甲基)肼(837 mg，4.26 mmol)、4,5-雙(二苯基膦基)-9,9-二甲基二苯并哌喃(74.0 mg，128 µmol，CAS-RN:[161265-03-8])及乙酸鈀(29.6 mg，132 µmol；CAS-RN:[3375-31-3])溶解於甲苯(21 ml)中。用氮氣使混合物脫氣10 min，添加三級丁醇鈉(522 mg，5.43 mmol)且在80℃攪拌混合物16小時。用EtOAc及水稀釋反應混合物。分離各層且用EtOAc萃取水層兩次。合併之有機層經由不透水濾紙過濾且減壓濃縮濾液。藉由急驟層析(矽膠，梯度：己烷/己烷/EtOAc 0-50%)純化殘餘物，得到1.0 g (90%純度，68%產率)目標化合物。 LC-MS (方法2): R t= 1.46 min; MS (ESIpos): m/z = 341 [M+H] + 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] 7.36 - 7.45 (m, 6H) 7.51 - 7.55 (m, 2H), 7.57 (t, 1H), 7.60 - 7.68 (m, 2H) 7.89 (s, 1 H), 8.60 (s, 1 H), 9.20 (s, 1H)。
中間物78  2-{(2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-6-(二氟甲氧基)吡𠯤
Figure 02_image245
將2-(二氟甲氧基)-6-[2-(二苯基亞甲基)肼基]吡𠯤(中間物77，492 mg，1.45 mmol)、1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)乙-1-酮(401 mg，1.45 mmol，CAS-RN:[656257-84-0])及4-甲苯磺酸(1.37 g，7.23 mmol)溶解於EtOAc (13 ml)中且在80℃加熱16小時。用乙酸乙酯及NaHCO 3飽和水溶液稀釋反應混合物。分離各層且用EtOAc萃取水層兩次。合併之有機層經由不透水濾紙過濾且減壓濃縮濾液。藉由急驟層析(矽膠，梯度：己烷/EtOAc 50-100%)純化之後，分離189 mg (97%純度，29%產率)標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 1.28 min; MS (ESIneg): m/z = 433 [M-H] - 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] 4.52 (s, 2H), 7.27 (dd, 1H), 7.46 (d, 1H), 7.62 (t, 1H), 7.80 (dt, 1H), 7.90 (dd, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.99 - 8.02 (m, 1H), 8.35 (d, 1H), 8.44 - 8.48 (m, 1H), 8.66 (s, 1H), 11.47 (br s, 1H)。
中間物79  6-(2-溴吡啶-4-基)-3-(二氟甲氧基)-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤
Figure 02_image247
將2-{2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-6-(二氟甲氧基)吡𠯤(中間物78，168 mg，386 µmol)及氯化鋅(57.9 mg，425 µmol)溶解於2.8 mL環丁碸中且在氮氣氛圍中下於170℃攪拌2小時。用乙酸乙酯稀釋反應混合物且用半濃縮氯化鈉水溶液洗滌三次，有機層經由不透水濾紙過濾且減壓濃縮。用DCM稀釋殘餘物且在72小時之後藉由過濾收集緩慢形成之沈澱，得到94.3 mg (95%純度，55%產率)目標化合物。 LC-MS (方法2): R t= 0.99 min; MS (ESIneg): m/z = 416 [M-H] - 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 7.36 (ddd, 1H), 7.56 (dd, 1H), 7.73 (t, 1H), 7.84 -7.85 (m, 1H), 7.93 (td, 1H), 8.05 (dt, 1H), 8.40 (d, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.49 - 8.54 (m, 1H), 13.11 (br s, 1H)。
中間物80  2-氟-5-硝基-4-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}吡啶(單一立體異構體)
Figure 02_image249
將2,4-二氟-5-硝基吡啶(CAS 60186-15-4，2.00 g，12.5 mmol)溶解於THF中且添加(3S)-氧雜環戊-3-醇(CAS 286087-23-2，2.20 g，25.0 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(4.4 ml，25 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])。在60℃攪拌混合物4小時且在室溫下攪拌72小時。減壓濃縮反應混合物且直接藉由矽膠急驟層析，梯度己烷/乙酸乙酯20-100%純化，得到2.21 g (產率78%)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.87 min; MS (ESIpos): m/z = 229 [M+H] + 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ ppm 1.99 - 2.10 (m, 1 H) 2.25 - 2.38 (m, 1 H) 3.73 - 3.87 (m, 2 H) 3.87 - 3.94 (m, 2 H) 5.34 - 5.43 (m, 1 H) 7.31 (s, 1 H) 8.82 (s, 1 H)
中間物81  6-氟-4-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}吡啶-3-胺(單一立體異構體)
Figure 02_image251
將2-氟-5-硝基-4-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}吡啶(參見中間物80，2.20 g，9.64 mmol)溶解於乙醇(61 ml)與二氯甲烷(16 ml)之混合物中。添加鈀/碳(1.03 g，10%純度，964 µmol；CAS-RN:[7440-05-3])且在氫氣氛圍下攪拌混合物四小時。濾出催化劑且減壓濃縮澄清濾液，得到1.91 g (95%純度，95%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.61 min; MS (ESIpos): m/z = 199 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.035 (2.40), 1.053 (4.62), 1.070 (2.32), 1.979 (1.03), 1.981 (1.03), 1.995 (1.81), 2.001 (1.08), 2.011 (2.15), 2.013 (2.17), 2.029 (2.39), 2.043 (1.39), 2.045 (1.37), 2.209 (1.63), 2.224 (1.90), 2.229 (3.59), 2.245 (4.18), 2.249 (1.93), 2.258 (1.48), 2.263 (3.44), 2.279 (2.76), 2.283 (1.55), 2.299 (1.37), 2.518 (1.48), 2.523 (1.04), 3.411 (1.44), 3.429 (2.57), 3.446 (2.54), 3.464 (0.96), 3.727 (2.44), 3.738 (2.60), 3.748 (6.20), 3.759 (6.15), 3.769 (3.67), 3.780 (3.28), 3.828 (3.32), 3.836 (3.50), 3.853 (10.86), 3.856 (11.78), 3.874 (5.78), 3.897 (9.30), 3.908 (9.51), 3.923 (4.85), 3.934 (4.81), 4.826 (0.63), 5.093 (1.56), 5.098 (2.85), 5.104 (2.22), 5.109 (4.37), 5.113 (4.30), 5.120 (2.19), 5.125 (2.84), 5.129 (1.50), 5.758 (16.00), 6.615 (14.50), 6.616 (14.67), 7.383 (15.90), 7.386 (15.28)。
中間物82  2-氟-5-肼基-4-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}吡啶(單一立體異構體)
Figure 02_image253
將6-氟-4-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}吡啶-3-胺(參見中間物81，500 mg，2.52 mmol)溶解於半濃鹽酸水溶液(6.3 mL，6.0 M，38 mmol)中且冷卻至0℃。在此溫度下逐滴添加亞硝酸鈉(174 mg，2.52 mmol；CAS-RN:[7632-00-0])於水(6.8 ml)中之溶液且在冷卻下攪拌混合物30分鐘。現分批添加氯化錫(II)二水合物(1.42 g，6.31 mmol；CAS-RN:[10025-69-1])於半濃鹽酸水溶液(6.3 ml，6.0 M，38 mmol)中之懸浮液，且在0℃下繼續攪拌1.5小時。使用氫氧化鉀水溶液(7.6 ml，40%純度，76 mmol；CAS-RN:[1310-58-3])使混合物鹼化且用乙酸乙酯萃取。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮，得到445 mg (90%純度，74%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.46 min; MS (ESIpos): m/z = 214 [M+H] +1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.66 (d, 1H), 6.61 (d, 1H), 6.06 (s, 1H), 5.18-5.05 (m, 1H), 4.00 (s, 2H), 3.94-3.88 (m, 1H), 3.87-3.81 (m, 2H), 3.75 (td, 1H), 2.30-2.17 (m, 1H), 2.07-1.96 (m, 1H)
中間物83  5-{(2Z)-2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-2-氟-4-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}吡啶(單一立體異構體)
Figure 02_image255
將2-氟-5-肼基-4-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}吡啶(參見中間物82，308 mg，1.44 mmol)及1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)乙-1-酮(CAS 656257-84-0，400 mg，1.44 mmol)溶解於乙酸乙酯(11 mL，110 mmol)中且添加含丙基膦酸酐之乙酸乙酯(950 µl，50%純度，1.6 mmol；CAS-RN:[68957-94-8])。在微波反應器中加熱混合物15分鐘。將其用乙酸乙酯及NaHCO3飽和水溶液稀釋。萃取水層兩次且將合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且在真空下濃縮，得到690 mg (98%純度，99%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 1.27 min; MS (ESIpos): m/z = 473 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.153 (1.02), 1.171 (1.96), 1.189 (0.94), 1.986 (3.80), 2.362 (0.47), 2.382 (0.45), 2.518 (0.87), 2.523 (0.57), 3.782 (0.76), 3.794 (0.75), 3.803 (0.46), 3.893 (0.41), 3.912 (0.78), 3.931 (0.66), 3.974 (2.06), 3.984 (1.51), 3.998 (0.44), 4.016 (0.92), 4.034 (0.85), 4.328 (1.60), 4.333 (1.60), 5.309 (0.49), 5.315 (0.48), 5.320 (0.42), 5.758 (16.00), 6.685 (0.67), 6.918 (2.14), 7.314 (0.51), 7.317 (0.55), 7.326 (0.54), 7.329 (0.60), 7.333 (0.62), 7.336 (0.57), 7.345 (0.80), 7.348 (0.71), 7.603 (0.92), 7.622 (1.08), 7.808 (0.40), 7.820 (0.80), 7.825 (0.90), 7.839 (0.94), 7.844 (0.98), 7.859 (0.48), 7.863 (0.48), 7.972 (1.27), 7.976 (1.17), 7.985 (1.05), 7.989 (1.07), 8.098 (1.61), 8.100 (1.52), 8.167 (1.93), 8.169 (1.93), 8.360 (1.53), 8.373 (1.41), 8.455 (0.57), 8.466 (0.48), 8.511 (0.62), 8.513 (0.73), 8.516 (0.75), 8.518 (0.68), 8.523 (0.68), 8.525 (0.75), 8.528 (0.72), 8.530 (0.63), 10.980 (1.83)。
中間物84  2-(2-溴吡啶-4-基)-5-氟-7-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶(單一立體異構體)
Figure 02_image257
將5-{(2Z)-2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-2-氟-4-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}吡啶(參見中間物83，690 mg，1.46 mmol)溶解於環丁碸(CAS 126-33-0，10 ml)中且添加二氯化鋅(219 mg，1.61 mmol；CAS-RN:[7646-85-7])。在130℃加熱混合物3小時。用乙酸乙酯稀釋反應混合物且用半濃縮鹽水洗滌三次。在真空下濾出有機層中之沈澱且乾燥，得到409 mg (90%純度，55%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.91 min; MS (ESIpos): m/z = 457 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.153 (1.77), 1.171 (3.90), 1.189 (2.03), 1.227 (0.45), 1.986 (7.80), 2.066 (0.41), 2.083 (0.42), 2.106 (1.16), 2.119 (1.87), 2.137 (2.36), 2.154 (2.41), 2.167 (1.44), 2.323 (1.54), 2.327 (1.39), 2.331 (0.99), 2.344 (2.28), 2.359 (3.08), 2.378 (2.83), 2.394 (1.80), 2.414 (0.79), 2.518 (3.54), 2.523 (2.36), 2.665 (0.67), 2.669 (0.93), 2.673 (0.63), 3.788 (2.02), 3.800 (2.24), 3.809 (5.31), 3.821 (5.04), 3.830 (2.93), 3.842 (2.42), 3.924 (2.32), 3.943 (5.24), 3.962 (4.96), 3.982 (2.82), 3.990 (13.02), 3.999 (16.00), 4.016 (2.09), 4.034 (1.73), 4.051 (0.58), 5.428 (2.80), 6.626 (2.34), 7.241 (2.44), 7.255 (3.19), 7.271 (2.60), 7.472 (4.84), 7.482 (4.96), 7.806 (12.11), 7.809 (12.23), 7.851 (2.12), 7.856 (2.07), 7.870 (4.36), 7.875 (4.20), 7.890 (2.69), 7.894 (2.47), 7.990 (5.99), 7.992 (9.88), 7.995 (6.12), 8.010 (4.45), 8.013 (7.16), 8.015 (4.36), 8.303 (5.76), 8.316 (5.50), 8.424 (4.55), 8.425 (5.03), 8.428 (5.29), 8.436 (4.76), 8.437 (5.14), 8.440 (4.92), 12.435 (0.58)。
中間物85  1-(2-氟-5-硝基吡啶-4-基)-4-甲基哌𠯤
Figure 02_image259
將2,4-二氟-5-硝基吡啶(CAS 60186-15-4，2.00 g，12.5 mmol)溶解於40 ml THF中且冷卻至0℃。在此溫度下，添加N,N-二異丙基乙胺(3.3 mL，19 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])且將溶解於27 ml THF中之1-甲基哌𠯤(CAS 109-01-3，1.4 mL，12 mmol)滴入反應混合物中。在完成添加之後，將其在-40℃攪拌20分鐘。真空濃縮混合物且藉由矽膠層析(梯度二氯甲烷/乙醇0-10%)純化，得到2.97 g (99%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.47 min; MS (ESIpos): m/z = 241 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2.205 (16.00), 2.384 (3.16), 2.397 (3.71), 2.409 (3.38), 2.518 (0.80), 2.523 (0.58), 3.209 (3.39), 3.222 (3.80), 3.234 (3.23), 6.936 (3.40), 6.938 (3.40), 8.574 (6.97)。
中間物86  6-氟-4-(4-甲基哌𠯤-1-基)吡啶-3-胺
Figure 02_image261
將1-(2-氟-5-硝基吡啶-4-基)-4-甲基哌𠯤(參見中間物85，2.97 g，12.3 mmol)溶解於乙醇(78 ml)與二氯甲烷(20 ml)之混合物中。添加鈀/碳(1.31 g，10%純度，1.23 mmol；CAS-RN:[7440-05-3])且在氫氣氛圍下攪拌混合物四小時。濾出催化劑且減壓濃縮澄清濾液，得到2.51 g (95%純度，92%產率)標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 0.70 min; MS (ESIpos): m/z = 211 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.033 (2.98), 1.051 (6.67), 1.069 (2.88), 2.326 (0.41), 2.368 (16.00), 2.399 (0.58), 2.518 (1.29), 2.522 (0.86), 2.697 (4.72), 3.036 (4.51), 3.445 (0.80), 4.663 (7.81), 5.758 (7.64), 6.518 (9.12), 7.459 (9.80), 7.462 (9.48)。
中間物87  2-溴-6-氟-4-(4-甲基哌𠯤-1-基)吡啶-3-胺
Figure 02_image263
將6-氟-4-(4-甲基哌𠯤-1-基)吡啶-3-胺(參見中間物86，2.51 g，11.9 mmol)於乙酸(5.7 ml)中之混合物冷卻至5℃。在此溫度下逐滴添加含溴之乙酸(13 ml，1.0 M，13 mmol；CAS-RN:[7726-95-6])。在完成添加之後，將其在5℃下攪拌1小時。濃縮混合物。使用NaHCO 3飽和水溶液鹼化殘餘物且將其用二氯甲烷/甲醇之混合物萃取。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。矽膠層析(梯度：二氯甲烷/甲醇0-10%)得到[P1]標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 0.81 min; MS (ESIpos): m/z = 289 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 6.69 (d, 1H), 4.61 (s, 2H), 2.97 (br s, 4H), 2.23 (s, 3H), 4H未偵測到。
中間物88  N-(4-{[3-胺基-6-氟-4-(4-甲基哌𠯤-1-基)吡啶-2-基]乙炔基}吡啶-2-基)乙醯胺
Figure 02_image265
使2-溴-6-氟-4-(4-甲基哌𠯤-1-基)吡啶-3-胺(參見中間物87，1.55 g，5.36 mmol)、N-(4-乙炔基吡啶-2-基)乙醯胺(CAS 1445876-40-3，1.03 g，6.43 mmol)、雙(三苯膦)氯化鈀(II)(188 mg，268 µmol；CAS-RN:[13965-03-2])、碘化銅(I)(102 mg，536 µmol；CAS-RN:[7681-65-4])及三乙胺(3.0 mL，21 mmol；CAS-RN:[121-44-8])懸浮於DMF (15 ml)中。將混合物抽空且用氬氣吹掃三次，且在80℃攪拌60分鐘。反應混合物藉由旋轉蒸發濃縮且藉由胺基矽膠層析(梯度：己烷/乙酸乙酯20-100%)純化兩次，得到740 mg (90%純度，35%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.63 min; MS (ESIneg): m/z = 367 [M-H] -¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2.113 (16.00), 2.227 (0.57), 2.240 (10.96), 2.518 (3.52), 2.523 (2.99), 2.727 (1.81), 2.729 (1.88), 2.888 (2.21), 2.990 (1.87), 5.081 (2.62), 5.759 (1.16), 6.692 (3.06), 7.322 (2.40), 7.325 (2.38), 7.334 (2.21), 7.338 (2.50), 8.229 (1.86), 8.351 (2.31), 8.354 (2.57), 8.365 (2.30), 8.366 (2.43), 10.642 (1.79)。
中間物89  N-{2-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-6-氟-4-(4-甲基哌𠯤-1-基)吡啶-3-基}-2,2,2-三氟乙醯胺
Figure 02_image267
用三乙胺(1.3 ml，9.6 mmol；CAS-RN:[121-44-8])處理溶解於乙腈(34 ml)中之N-(4-{[3-胺基-6-氟-4-(4-甲基哌𠯤-1-基)吡啶-2-基]乙炔基}吡啶-2-基)乙醯胺(參見中間物88，440 mg，1.19 mmol)，且抽空混合物並用氬氣吹掃三次。將其冷卻至0℃，且將三氟乙酸酐(510 µl，3.6 mmol；CAS-RN:[407-25-0])緩慢滴入反應混合物中。在完成添加之後，將其在0℃下攪拌30分鐘。使用NaHCO 3飽和水溶液鹼化混合物且將其用二氯甲烷/甲醇之混合物萃取。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮，得到543 mg (88%純度，98%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.70 min; MS (ESIpos): m/z = 465 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 11.44 (br s, 1H), 10.70 (s, 1H), 8.40 (dd, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.14 (dd, 1H), 6.86 (s, 1H), 3.25 (br s, 4H), 2.28 (s, 3H), 2.11 (s, 3H),  4H未偵測到。
中間物90  N-{4-[5-氟-7-(4-甲基哌𠯤-1-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image269
在密封容器中使N-{2-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-6-氟-4-(4-甲基哌𠯤-1-基)吡啶-3-基}-2,2,2-三氟乙醯胺(參見中間物89，540 mg，1.16 mmol)、2-溴吡啶(220 µl，2.3 mmol；CAS-RN:[109-04-6])、XPhosPd G2 (CAS 1310584-14-5，91.5 mg，116 µmol)及磷酸鉀(370 mg，1.74 mmol；CAS-RN:[7778-53-2])懸浮於乙腈(21 ml)中。將其抽空且用氬氣吹掃三次且並在120℃攪拌3小時。向反應混合物中添加水且用乙酸乙酯/甲醇之混合物萃取。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。藉由胺基矽膠層析(梯度：乙酸乙酯/甲醇0-35%)純化，接著進行第二矽膠層析，得到34.0 mg (7%產率)標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 0.89 min; MS (ESIneg): m/z = 444 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 11.70 (s, 1H), 10.52 (s, 1H), 8.37 (ddd, 1H), 8.28 (d, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.95 (dt, 1H), 7.82 (td, 1H), 7.20 (ddd, 1H), 7.12 (dd, 1H), 6.39 (s, 1H), 3.39-3.34 (m, 4H), 2.60-2.53 (m, 4H), 2.26 (s, 3H), 2.07 (s, 3H)。
中間物91  4-[5-氟-7-(4-甲基哌𠯤-1-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺
Figure 02_image271
將N-{4-[5-氟-7-(4-甲基哌𠯤-1-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺(參見中間物90，32.0 mg，71.8 µmol)溶解於甲醇(1.6 ml)中，添加氫氧化鈉水溶液(720 µl，1.0 M，720 µmol；CAS-RN:[1310-73-2])且將其在80℃攪拌10小時。濃縮反應混合物且藉由胺基矽膠層析(梯度：二氯甲烷/甲醇0-20%)純化，得到13.0 mg (45%產率)標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 0.86 min; MS (ESIneg): m/z = 402 [M-H] -¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.232 (0.64), 2.260 (16.00), 2.331 (0.90), 2.337 (0.41), 2.518 (4.99), 2.523 (3.64), 2.536 (3.87), 2.548 (5.39), 2.558 (4.37), 2.673 (0.92), 2.678 (0.42), 5.760 (5.77), 5.979 (3.20), 6.014 (0.59), 6.277 (0.40), 6.347 (2.19), 6.420 (2.12), 6.423 (2.14), 6.433 (2.14), 6.437 (2.18), 6.578 (3.48), 6.875 (0.41), 7.203 (0.80), 7.217 (1.37), 7.229 (0.90), 7.784 (0.56), 7.788 (0.58), 7.804 (1.50), 7.808 (1.48), 7.822 (1.58), 7.826 (1.84), 7.830 (3.44), 7.835 (5.89), 7.837 (4.50), 7.850 (2.85), 7.852 (1.82), 7.857 (0.90), 8.437 (1.77), 8.448 (1.89), 11.629 (2.13)。
中間物92  2-溴-4-{1-[2-(4-甲基吡啶-3-基)亞肼基]-2-(吡啶-2-基)乙基}吡啶
Figure 02_image273
將3-肼基-4-甲基吡啶(264 mg，2.14 mmol，CAS-RN:[794569-03-2])及1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)乙-1-酮(594 mg，2.14 mmol，CAS-RN:[656257-84-0])溶解於乙酸乙酯(16 ml)中且添加含丙基膦酸酐之EtOAc (1.4 ml，50%，2.4 mmol；CAS-RN:[68957-94-8])。在微波反應器中將混合物加熱15分鐘達到120℃。將其用乙酸乙酯及NaHCO 3飽和水溶液稀釋。用EtOAc萃取水層，且合併之有機層經由不透水濾紙過濾且真空濃縮。藉由矽膠層析(梯度：DCM/EtOH 0-8%)純化殘餘物，得到334 mg (89%純度，36%產率)標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 1.21 min; MS (ESIpos): m/z = 382 [M+H] + 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] 2.42 (s, 3H), 4.42 (s, 2 H) 7.19 (d, 1H), 7.33 (ddd, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.86 (td, 1H), 7.98 (dd, 1H), 8.05 (d, 1H), 8.09 (s, 1 H), 8.37 (d, 1H), 8.53 - 8.58 (m, 1H), 8.73 (s, 1H), 11.00 (s, 1H)。
中間物93  2-(2-溴吡啶-4-基)-7-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶
Figure 02_image275
將2-溴-4-{1-[2-(4-甲基吡啶-3-基)亞肼基]-2-(吡啶-2-基)乙基}吡啶(中間物92，330 mg，863 µmol)溶解於環丁碸(6.2 ml)中且添加二氯化鋅(129 mg，950 µmol；CAS-RN:[7646-85-7])。在氮氣下於170℃加熱混合物7小時。用乙酸乙酯稀釋反應混合物且用半濃縮鹽水洗滌三次。有機層經由不透水濾紙過濾且在真空下濃縮。藉由矽膠層析(梯度：DCM/EtOH 0-70%)純化殘餘物，得到198 mg (84%純度，53%產率)標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 1. min; MS (ESIpos): m/z =  [M+H] + 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] 2.61 (s, 3H) 7.12 (dd, 1H), 7.28 (ddd, 1), 7.53 (dd, 1H) 7.85 - 7.87 (m, 1H), 7.89 (td, 1H), 8.23 (dt, 1H), 8.35 (d, 1H), 8.39 (d, 1H), 8.43 - 8.46 (m, 1H), 11.97 (s, 1H)。
中間物94  2-氟-5-硝基-4-{[(rac)-氧雜環戊-2-基]甲氧基}吡啶(外消旋體)
Figure 02_image277
將2,4-二氟-5-硝基吡啶(CAS 60186-15-4，150 mg，937 µmol)溶解於THF (1.3 ml)中，添加[(rac)-氧雜環戊-2-基]甲醇(CAS 97-99-4，180 µl，1.9 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(330 µl，1.9 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])。在60℃攪拌黃色溶液4小時。減壓濃縮反應混合物且藉由矽膠層析，梯度己烷/乙酸乙酯20-100%純化，得到147 mg (98%純度，64%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.98 min; MS (ESIpos): m/z = 243 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 8.81 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 4.38-4.17 (m, 3H), 3.81-3.64 (m, 2H), 2.05-1.67 (m, 4H)
中間物95  6-氟-4-{[(rac)-氧雜環戊-2-基]甲氧基}吡啶-3-胺(外消旋體)
Figure 02_image279
將2-氟-5-硝基-4-{[(rac)-氧雜環戊-2-基]甲氧基}吡啶(參見中間物94，147 mg，608 µmol)溶解於乙醇(3.9 ml)中。添加鈀/碳(64.7 mg，10%純度，60.8 µmol；CAS-RN:[7440-05-3])且在氫氣氛圍下攪拌混合物四小時。濾出催化劑且減壓濃縮澄清濾液，得到156 mg呈粗產物形式之標題化合物，其不經進一步純化即使用。 LC-MS (方法1): R t= 0.73 min; MS (ESIpos): m/z = 213 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.38 (d, 1H), 6.64 (d, 1H), 4.67 (br s, 2H), 4.24-4.14 (m, 1H), 4.11-3.98 (m, 2H), 3.84-3.62 (m, 2H), 2.10-1.62 (m, 4H)
中間物96  2-溴-6-氟-4-{[(rac)-氧雜環戊-2-基]甲氧基}吡啶-3-胺(外消旋體)
Figure 02_image281
將6-氟-4-{[(rac)-氧雜環戊-2-基]甲氧基}吡啶-3-胺(參見中間物94，2.08 g，90%純度，8.83 mmol)於乙酸(3.0 ml)中之混合物冷卻至0℃。在此溫度下逐滴添加含溴之乙酸(9.7 ml，1.0 M，9.7 mmol；CAS-RN:[7726-95-6])。完全添加後，將其在室溫下攪拌1小時。濃縮混合物。將殘餘物溶解於二氯甲烷/甲醇之混合物中且使用NaHCO 3飽和水溶液鹼化。水層用二氯甲烷萃取兩次。合併之有機層使用耐水濾紙乾燥且在真空下濃縮，得到2.75 g呈粗產物形式之標題化合物，其不經進一步純化即使用。 LC-MS (方法1): R t= 0.99 min; MS (ESIpos): m/z = 293 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.035 (1.51), 1.052 (2.79), 1.070 (1.45), 1.641 (1.12), 1.658 (2.44), 1.662 (1.73), 1.671 (1.52), 1.676 (1.77), 1.680 (3.16), 1.688 (3.08), 1.693 (2.01), 1.697 (1.98), 1.705 (2.01), 1.710 (3.55), 1.727 (2.16), 1.773 (0.61), 1.791 (1.10), 1.793 (0.85), 1.803 (1.47), 1.809 (1.41), 1.811 (1.39), 1.821 (2.74), 1.823 (2.35), 1.828 (1.58), 1.840 (4.54), 1.854 (3.45), 1.857 (4.78), 1.871 (2.80), 1.875 (3.07), 1.885 (2.23), 1.892 (2.09), 1.900 (1.05), 1.907 (1.72), 1.916 (0.60), 1.922 (0.66), 1.937 (0.46), 1.987 (1.94), 2.000 (1.78), 2.005 (2.36), 2.008 (1.94), 2.018 (3.31), 2.026 (1.94), 2.031 (1.85), 2.036 (2.09), 2.038 (2.71), 2.049 (1.77), 2.055 (1.41), 2.069 (1.13), 2.518 (2.87), 2.523 (1.92), 2.727 (1.25), 2.729 (1.11), 2.888 (1.43), 3.410 (1.02), 3.428 (1.64), 3.446 (1.37), 3.463 (0.60), 3.658 (2.60), 3.673 (3.20), 3.678 (4.78), 3.693 (5.35), 3.696 (4.53), 3.711 (3.92), 3.746 (4.03), 3.763 (7.38), 3.766 (3.51), 3.780 (4.57), 3.783 (4.90), 3.800 (2.56), 4.068 (2.51), 4.083 (3.08), 4.094 (8.27), 4.110 (11.68), 4.114 (9.22), 4.124 (10.56), 4.140 (2.46), 4.150 (2.87), 4.179 (1.84), 4.189 (1.71), 4.196 (3.96), 4.207 (3.72), 4.213 (3.40), 4.222 (2.65), 4.230 (1.39), 4.239 (1.08), 4.747 (1.78), 6.822 (16.00), 6.823 (15.83)。
中間物97  N-{4-[(3-胺基-6-氟-4-{[(rac)-氧雜環戊-2-基]甲氧基}吡啶-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺(外消旋體)
Figure 02_image283
將2-溴-6-氟-4-{[(rac)-氧雜環戊-2-基]甲氧基}吡啶-3-胺(參見中間物96，2.55 g，8.76 mmol)、N-(4-乙炔基吡啶-2-基)乙醯胺(1.68 g，10.5 mmol)、碘化銅(I)(167 mg，876 µmol；CAS-RN:[7681-65-4])、二氯[雙(三苯基膦)]鈀(307 mg，438 µmol；CAS-RN:[13965-03-2])及三乙胺(4.9 mL，35 mmol；CAS-RN:[121-44-8])溶解於DMF (24 ml)中。將燒瓶抽空且用氬氣回填三次。將其在80℃下攪拌1小時。減壓濃縮反應混合物。藉由矽膠層析(梯度己烷/乙酸乙酯20-100%)純化，得到1.40 g (95%純度，41%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.97 min; MS (ESIpos): m/z = 372 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.670 (0.52), 1.688 (0.40), 1.691 (0.67), 1.700 (0.65), 1.704 (0.45), 1.708 (0.43), 1.717 (0.45), 1.721 (0.78), 1.739 (0.47), 1.830 (0.61), 1.851 (0.86), 1.867 (1.11), 1.885 (0.75), 1.898 (0.52), 1.904 (0.50), 1.987 (0.65), 2.007 (0.40), 2.025 (0.53), 2.038 (0.76), 2.045 (0.45), 2.050 (0.44), 2.058 (0.66), 2.069 (0.42), 2.112 (16.00), 2.128 (0.48), 2.518 (0.88), 2.523 (0.58), 2.727 (10.79), 2.888 (12.53), 3.671 (0.58), 3.687 (0.75), 3.692 (1.14), 3.707 (1.27), 3.710 (1.05), 3.725 (0.87), 3.761 (0.88), 3.778 (1.71), 3.795 (1.01), 3.799 (1.14), 3.816 (0.57), 4.086 (0.47), 4.102 (0.54), 4.113 (1.54), 4.129 (3.71), 4.139 (2.00), 4.155 (0.45), 4.165 (0.46), 4.227 (0.85), 4.237 (0.90), 4.243 (0.77), 4.253 (0.64), 5.300 (2.83), 6.803 (3.64), 7.334 (2.02), 7.338 (2.10), 7.347 (1.99), 7.350 (2.13), 7.950 (1.48), 8.224 (1.87), 8.346 (1.35), 8.358 (1.31), 10.630 (1.83)。
中間物98  N-(2-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-6-氟-4-{[(rac)-氧雜環戊-2-基]甲氧基}吡啶-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(外消旋體)
Figure 02_image285
用N,N-二異丙基乙胺(2.1 mL，12 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])處理懸浮於乙腈(64 ml)中之N-{4-[(3-胺基-6-氟-4-{[(rac)-氧雜環戊-2-基]甲氧基}吡啶-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺(參見中間物97，902 mg，2.44 mmol)，且將混合物抽空並用氬氣吹掃三次。將其冷卻至0℃，且將三氟乙酸酐(1.0 ml，7.3 mmol；CAS-RN:[407-25-0])緩慢滴入反應混合物中。在完全添加之後，將其在0℃下攪拌1小時。使用NaHCO 3飽和水溶液鹼化混合物且用乙酸乙酯萃取兩次。減壓濃縮經合併之有機層。藉由矽膠層析(梯度二氯甲烷/乙醇0-30%)純化，得到1.02 g (95%純度，85%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 1.05 min; MS (ESIpos): m/z = 468 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 11.40 (s, 1H), 10.71 (s, 1H), 8.40 (dd, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.16 (dd, 1H), 4.29-4.12 (m, 3H), 3.79-3.62 (m, 2H), 2.11 (s, 3H), 2.02-1.90 (m, 1H), 1.89-1.66 (m, 3H)
中間物99  N-{4-[5-氟-7-{[(rac)-氧雜環戊-2-基]甲氧基}-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺(外消旋體)
Figure 02_image287
在密封容器中使N-(2-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-6-氟-4-{[(rac)-氧雜環戊-2-基]甲氧基}吡啶-3-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(參見中間物98，1.02 g，2.19 mmol)、2-溴吡啶(420 µl，4.4 mmol；CAS-RN:[109-04-6])、XPhosPd G2 (CAS 1310584-14-5，172 mg，219 µmol)及磷酸鉀(697 mg，3.28 mmol；CAS-RN:[7778-53-2])懸浮于乙腈(39 ml)中。將其抽空且用氬氣吹掃三次且在115℃下攪拌3小時。將水添加至反應混合物中且將其用二氯甲烷萃取兩次。合併之有機層經由耐水濾紙過濾且減壓濃縮。藉由矽膠層析(梯度：乙酸乙酯/乙醇0-15%及0-7%)純化兩次，得到105 mg (11%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.80 min; MS (ESIpos): m/z = 449 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.155 (0.52), 1.173 (1.13), 1.190 (0.60), 1.232 (0.64), 1.750 (0.44), 1.762 (0.43), 1.767 (0.46), 1.771 (0.50), 1.779 (0.52), 1.789 (0.47), 1.800 (0.41), 1.813 (0.40), 1.827 (0.48), 1.838 (0.41), 1.844 (0.52), 1.855 (0.74), 1.862 (0.51), 1.874 (1.05), 1.892 (0.85), 1.910 (0.70), 1.917 (0.52), 1.929 (0.70), 1.938 (0.46), 1.943 (0.64), 1.965 (0.47), 1.988 (2.13), 2.053 (1.04), 2.058 (0.77), 2.073 (16.00), 2.090 (0.75), 2.095 (0.53), 2.103 (0.44), 2.129 (3.98), 2.518 (3.48), 2.523 (2.24), 3.691 (0.77), 3.706 (1.03), 3.711 (1.45), 3.727 (1.45), 3.730 (1.32), 3.744 (0.90), 3.807 (0.84), 3.818 (0.50), 3.824 (1.59), 3.840 (1.12), 3.843 (1.11), 3.860 (0.50), 4.017 (0.43), 4.035 (0.42), 4.245 (0.42), 4.264 (1.44), 4.271 (0.58), 4.285 (1.53), 4.295 (2.58), 4.302 (1.75), 4.312 (2.05), 4.319 (1.74), 4.330 (0.51), 4.336 (1.00), 4.343 (0.44), 6.622 (1.17), 6.704 (3.19), 6.960 (0.67), 6.963 (0.64), 7.094 (2.29), 7.098 (2.21), 7.107 (2.16), 7.110 (2.20), 7.212 (0.98), 7.215 (0.96), 7.224 (0.96), 7.227 (1.06), 7.231 (1.08), 7.233 (0.97), 7.243 (1.02), 7.245 (0.94), 7.651 (0.47), 7.656 (0.48), 7.665 (0.48), 7.669 (0.46), 7.820 (0.88), 7.824 (0.84), 7.839 (1.50), 7.844 (1.52), 7.858 (1.16), 7.863 (1.20), 7.913 (1.57), 7.915 (2.64), 7.918 (1.58), 7.932 (1.05), 7.935 (1.62), 7.938 (0.88), 8.234 (1.84), 8.240 (3.26), 8.253 (2.38), 8.355 (0.61), 8.368 (0.59), 8.389 (1.29), 8.392 (1.39), 8.394 (1.43), 8.396 (1.25), 8.401 (1.26), 8.404 (1.42), 8.406 (1.30), 8.408 (1.13), 8.504 (0.46), 10.513 (2.18), 10.556 (0.54), 12.332 (1.71)。
中間物100  4-[5-氟-7-{[(rac)-氧雜環戊-2-基]甲氧基}-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺(外消旋體)
Figure 02_image289
將N-{4-[5-氟-7-{[(rac)-氧雜環戊-2-基]甲氧基}-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺(參見中間物99，127 mg，283 µmol)溶解於甲醇(3.0 ml)中，添加氫氧化鈉水溶液(2.8 mL，1.0 M，2.8 mmol；CAS-RN:[1310-73-2])且將其在75℃攪拌2小時，並且為了完成轉化，在80℃再攪拌2小時。用二氯甲烷及水稀釋混合物。分離各層且用二氯甲烷萃取水相兩次。合併之有機層經由耐水濾紙過濾且減壓濃縮。由於產率低，用乙酸乙酯/乙醇之混合物萃取水相三次以上。合併之粗產物得到102 mg (89%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.71 min; MS (ESIpos): m/z = 4067 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.034 (1.13), 1.052 (2.99), 1.070 (1.28), 1.232 (0.49), 1.568 (16.00), 2.518 (2.14), 2.523 (1.43), 2.674 (0.44), 3.410 (1.00), 3.428 (1.09), 3.445 (0.91), 3.462 (0.43), 3.700 (0.42), 3.706 (0.62), 3.721 (0.57), 3.724 (0.54), 3.822 (0.66), 3.839 (0.47), 3.842 (0.47), 4.258 (0.68), 4.274 (0.98), 4.288 (0.64), 4.302 (0.42), 5.758 (2.18), 7.825 (0.84), 7.844 (0.47)。
中間物101  2-氟-6-肼基吡𠯤
Figure 02_image291
將2,6-二氟吡𠯤(CAS 33873-09-5，500 mg，4.31 mmol)及單水合肼(CAS 7803-57-8，720 µl，64%純度，9.5 mmol)溶解於乙醇(5.0 ml)中且在室溫下攪拌2小時。添加半濃縮NaCL水溶液且用乙酸乙酯萃取混合物。將有機層用半濃縮NaCL水溶液洗滌三次。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮，得到260 mg (90%純度，42%產率)標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 0.44 min; MS (ESIpos): m/z = 129 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2.332 (0.46), 2.518 (2.59), 2.522 (1.64), 2.673 (0.48), 4.382 (14.31), 5.758 (0.65), 7.551 (15.88), 7.571 (16.00), 7.717 (0.74), 8.007 (9.22), 8.021 (9.21), 8.043 (0.49), 8.410 (4.90), 10.209 (0.52)。
中間物102  2-{2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-6-氟吡𠯤
Figure 02_image293
將2-氟-6-肼基吡𠯤(參見中間物101，95.0 mg，742 µmol)及1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)乙-1-酮(CAS 656257-84-0，206 mg，742 µmol)溶解於乙酸乙酯(5.4 ml)中且添加含丙基膦酸酐之乙酸乙酯(490 µl，50%純度，820 µmol；CAS-RN:[68957-94-8])。在微波反應器中加熱混合物15分鐘。將其用乙酸乙酯及NaHCO 3飽和水溶液稀釋。萃取水層兩次且合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且在真空下濃縮，得到265 mg呈粗產物形式之標題化合物，其不經進一步純化即使用。 LC-MS (方法1): R t= 1.20 min; MS (ESIpos): m/z = 387 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 11.47 (s, 1H), 8.75 (d, 1H), 8.47-8.42 (m, 1H), 8.36 (d, 1H), 8.08 (d, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.90 (dd, 1H), 7.78 (td, 1H), 7.47 (d, 1H), 7.25 (ddd, 1H), 4.50 (s, 2H)。
中間物103  6-(2-溴吡啶-4-基)-3-氟-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤
Figure 02_image295
將2-{2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-6-氟吡𠯤(中間物102，190 mg，491 µmol)溶解於環丁碸(3.5 ml)中且添加二氯化鋅(73.6 mg，540 µmol，CAS-RN:[7646-85-7])。在175℃加熱混合物3小時。用乙酸乙酯稀釋反應混合物且用半濃縮鹽水洗滌三次。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠層析(梯度己烷/乙酸乙酯20-100%及二氯甲烷/乙醇0-20%)純化，得到65.0 mg (產率36%)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.90 min; MS (ESIneg): m/z = 368 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ [ppm] 13.14 (br d, 1H), 8.57 (d, 1H), 8.53-8.49 (m, 1H), 8.42 (d, 1H), 8.08 (d, 1H), 7.94 (td, 1H), 7.86 (d, 1H), 7.60-7.54 (m, 1H), 7.36 (ddd, 1H)。
中間物104  3-[2-(二苯基亞甲基)肼基]-5-甲氧基吡啶
Figure 02_image297
將3-溴-5-甲氧基吡啶(700 mg，3.72 mmol)、(二苯基亞甲基)肼(804 mg，4.10 mmol)、4,5-雙(二苯基膦基)-9,9-二甲基二苯并哌喃(71.1 mg，123 µmol，CAS-RN:[161265-03-8])及乙酸鈀(28.4 mg，127 µmol)溶解於甲苯(20 ml)中。用氮氣使混合物脫氣10 min，添加三級丁醇鈉(501 mg，5.21 mmol)且在80℃攪拌混合物16小時。用EtOAc及水稀釋反應混合物。分離各層且用EtOAc萃取水層兩次。合併之有機層經由不透水濾紙過濾且減壓濃縮濾液。殘餘物藉由急驟層析(矽膠，梯度：己烷/EtOAc 25-100%，接著EtOH 0-5%)純化，得到810 mg (98%純度，70%產率)目標化合物。 LC-MS (方法2): R t= 1.31 min; MS (ESIpos): m/z = 304 [M+H] + 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] 3.78 (s, 3H), 7.20 (t, 1H), 7.29 - 7.36 (m, 5H), 7.43 - 7.47 (m, 2H), 7.56 - 7.65 (m, 3H), 7.72 (d, 1H), 8.17 (d, 1H), 9.11 (s, 1H)。
中間物105  2-溴-4-[1-[2-(5-甲氧基吡啶-3-基)亞肼基]-2-(吡啶-2-基)乙基]吡啶
Figure 02_image299
將3-[2-(二苯基亞甲基)肼基]-5-甲氧基吡啶(中間物104，500 mg，1.65 mmol)、1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)乙-1-酮(457 mg，1.65 mmol，CAS-RN:[656257-84-0])及對甲苯磺酸單水合物(1.57 g，8.24 mmol；CAS-RN:[6192-52-5])溶解於乙醇(8.7 ml)中且在80℃加熱16小時。用EtOAc及NaHCO 3飽和水溶液稀釋反應混合物。分離各層且用EtOAc萃取水層兩次。合併之有機層經由不透水濾紙過濾且減壓濃縮。藉由急驟層析(矽膠，梯度：己烷/EtOAc 25-75%，接著EtOAc/EtOH 0-25%)純化粗產物，得到316 mg (75%純度，36%產率)目標化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.90 min; MS (ESIpos): m/z = 398 [M+H] + 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] 3.84 (s, 3H), 4.41 (s, 2H), 7.23 - 7.27 (m, 2H), 7.40 (d, 1H), 7.77 (dt, 1H), 7.82 (dd, 1H), 7.83 (d, 1H), 7.86 - 7.90 (m, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.30 (d, 1H), 8.45 - 8.51 (m, 1H),10.62(s, 1H)。
中間物106  2-(2-溴吡啶-4-基)-6-甲氧基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶
Figure 02_image301
將2-溴-4-[(1-[2-(5-甲氧基吡啶-3-基)亞肼基]-2-(吡啶-2-基)乙基]吡啶(中間物105，410 mg，1.03 mmol)溶解於環丁碸(7.4 ml)中且添加二氯化鋅(154 mg，1.13 mmol)。在170℃加熱混合物2小時。冷卻後，用EtOAc稀釋反應混合物且用半濃縮鹽水洗滌。分離各層且藉由過濾有機相收集含有所需產物之沈澱。在真空下濃縮有機濾液且藉由急驟層析(胺基矽膠，梯度：EtOAc/EtOH 0-25%)純化，得到330 mg (90%純度，76%產率)標題化合物以及沈澱。 LC-MS (方法2): R t= 0.99 min; MS (ESIpos): m/z = 381 [M+H] + 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] 3.90 (s, 3H), 7.31 (ddd, 1H), 7.37 (d, 1H), 7.51 (dd, Hz, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.90 (dt, 1H) 8.13 (d, 1H) 8.24 (d, 1H) 8.36 (d, 1H) 8.47 - 8.53 (m, 1 H) 12.07 (br s, 1H)。
中間物107  2-{(2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-6-甲基吡𠯤
Figure 02_image303
將2-肼基-6-甲基吡𠯤(280 mg，2.26 mmol，CAS-RN:[19848-57-8])及1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)乙-1-酮(625 mg，2.26 mmol)溶解於乙酸乙酯(17 ml)中且添加含丙基膦酸酐之乙酸乙酯(1.5 ml，50%，2.5 mmol，CAS-RN:[68957-94-8])。在微波反應器中將混合物加熱至120℃持續15分鐘。將其用EtOAc及NaHCO 3飽和水溶液稀釋。用EtOAc萃取水層且合併之有機層經由不透水濾紙過濾。減壓濃縮濾液，得到733 mg (85%產率)呈粗產物形式之標題化合物，其不經進一步純化即用於下面的步驟。 LC-MS (方法2): R t= 1.14 min; MS (ESIpos): m/z = 383.3, 385.3 [M+H] + 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] 2.39 (s, 3H), 4.49 (s, 2H), 7.25 (ddd, 1H), 7.46 (d, 1H), 7.77 (dt, 1H), 7.89 (dd, 1H), 7.86 - 7.91 (m, 1H), 8.04 (s, 1H) 8.34 (d, 1H), 8.44 - 8.48 (m, 1H), 8.63 (s, 1H),11.14 (s, 1H)。
中間物108  6-(2-氯吡啶-4-基)-3-甲基-7-(吡啶-2-基)-5 H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤
Figure 02_image305
將2-{2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-6-甲基吡𠯤(中間物107，730 mg，1.90 mmol)溶解於環丁碸(14 ml)中，且添加二氯化鋅(286 mg，2.10 mmol)。在130℃加熱混合物1.5小時，接著在170℃加熱4小時。在冷卻後，用EtOAc及半濃縮鹽水稀釋反應混合物。用EtOAc萃取水相且合併之有機相用半濃縮鹽水再次洗滌。有機層經由不透水濾紙過濾且在真空下濃縮。將殘餘物溶解於水(150 ml)中且經15分鐘進行音波處理。藉由過濾收集形成的沈澱，在乾燥之後得到91 mg (75%純度，11%產率)標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 0.91 min; MS (ESIpos): m/z = 322 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ [ppm] = 2.63 (s, 3H), 7.32 (ddd, 1H) 7.54 (dd, 1H), 7.70 -7.73 (m, 1H), 7.92 (dt, 1H), 8.12 (dt, 1 H) 8.43 (dd, 1H), 8.46 -8.50 (m, 2H) 12.74 (s, 1H)。
中間物109  3-氯-5-肼基吡啶
Figure 02_image307
將5-氯吡啶-3-胺(340 mg，2.64 mmol)溶解於6N HCl (6.6 ml，40 mmol)中且用冰浴冷卻。逐滴添加硝酸鈉(182 mg，2.64 mmol)於水(7.1 ml)中之溶液。在此溫度下在N 2氛圍下攪拌反應物30分鐘，隨後緩慢添加溶解於6N HCl (6.6 ml，40 mmol)中之SnCl2二水合物溶液(1.49 g，6.61 mmol)且在0℃下攪拌反應物1.5小時。藉由逐滴添加40% KOH水溶液(8 ml)淬滅反應物直至將pH調節至12。用乙酸乙酯萃取反應物三次。將合併之有機層用水及鹽水洗滌一次，經由塗有聚矽氧之濾紙過濾且減壓濃縮。藉由過濾收集形成於水層中之沈澱，且用水及乙酸乙酯洗滌。收集之沈澱與有機萃取物組合，得到呈粗產物形式之標題化合物(327 mg，86%產率)，其不經進一步純化即用於後續反應。 LC-MS (方法2): R t= 0.59 min; MS (ESIpos): m/z = 144 [M+H] +
中間物110  2-溴-4-[1-[2-(5-氯吡啶-3-基)亞肼基]-2-(吡啶-2-基)乙基]吡啶
Figure 02_image309
在氮氣氛圍下，在微波反應器中，於120℃將(5-氯-3-吡啶基)肼(中間物109，320 mg，2.23 mmol)、1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)乙-1-酮(618 mg，2.23 mmol，CAS-RN:[656257-84-0])、乙酸乙酯(16.4 ml)及50%丙烷膦酸酐於EtOAc (1.46 mL，2.45 mmol)中之混合物攪拌15分鐘。將反應混合物冷卻至室溫，且用乙酸乙酯及NaHCO 3飽和溶液稀釋，且用乙酸乙酯萃取三次。合併之有機層經由塗有聚矽氧之濾紙過濾且減壓濃縮，得到標題化合物(923 mg，定量產量)，其不經進一步純化即使用。 LC-MS (方法2): R t= 1.28 min; MS (ESIpos): m/z = 402 [M+H] + 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] 4.42 (s, 2H), 7.22 - 7.28 (m, 1H), 7.42 (d, 1H), 7.76 - 7.78 (m, 1H), 7.85 (dd, 1H), 7.89 - 7.92 (m, 1H), 8.10 (d, 1H), 8.31 (d, 1H), 8.32 (d, 1H), 8.44 - 8.48 (m, 1H), 8.53 (d, 1H), 10.76 (s, 1H)。
中間物111  2-(2-溴吡啶-4-基)-6-氯-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶
Figure 02_image311
在Ar氛圍下於170℃攪拌2-溴-4-[1-[2-(5-氯吡啶-3-基)亞肼基]-2-(吡啶-2-基)乙基]吡啶(中間物110，720 mg，1.79 mmol)及氯化鋅(II)(268 mg，1.97 mmol)於環丁碸(13 ml)中之混合物2小時。將反應混合物冷卻至室溫且用乙酸乙酯稀釋。用50%飽和NaCl溶液洗滌混合物以移除環丁碸，且有機層經由塗有聚矽氧之濾紙過濾，接著減壓濃縮。殘餘物藉由矽膠急驟層析，使用乙酸乙酯及乙醇之混合物部分純化，得到標題化合物281 mg (41%產率)作為與副產物2-(2-氯吡啶-4-基)-6-氯-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶的混合物。此混合物不經進一步純化即用於以下反應中。 LC-MS (方法2): R t= 1.11 min; MS (ESIpos): m/z = 385 [M+H] + 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ [ppm] 7.33 (ddd, 1H), 7.52 (dd, 1H), 7.82- 7.83 (m, 1H), 7.91 (dt, 1H), 8.02 (d, 1H), 8.13 (d, 1H), 8.41 (d, 1H), 8.48- 8.51 (m, 2H), 12.46 (s, 1H)。
中間物112  2-[2-(二苯基亞甲基)肼基]-6-甲氧基吡𠯤
Figure 02_image313
將2-氯-6-甲氧基吡𠯤(1.00 g，6.91 mmol)、苯甲酮肼(1.49 g，7.61 mmol)、Xantphos (132 mg，228 µmol)及乙酸鈀(II)(52.8 mg，235 µmol)溶解於甲苯(37 ml)中。用N2使混合物脫氣10 min。添加三級丁醇鈉(931 mg，9.68 mmol)且在80℃攪拌混合物4 h。用乙酸乙酯及水稀釋反應混合物。分離各層，且用乙酸乙酯萃取水層兩次。合併之有機層使用塗有聚矽氧之濾紙乾燥。減壓濃縮澄清濾液且藉由急驟層析純化，得到標題化合物(2.11 g，93%產率)。 LC-MS (方法2): R t= 1.42 min; MS (ESIpos): m/z = 305 [M+H] + 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] 3.77 (s, 3H), 7.36 - 7.38 (m, 2H), 7.38 - 7.41 (m, 3H), 7.48 - 7.52 (m, 1H), 7.52 - 7.55 (m, 1H), 7.57 - 7.68 (m, 3H), 7.71 (d, 1H), 8.29 (s, 1 H), 8.68 (br s, 1H)。
中間物113  2-{2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-6-甲氧基吡𠯤
Figure 02_image315
將2-[2-(二苯基亞甲基)肼基]-6-甲氧基吡𠯤(中間物112，990 mg，3.25 mmol)、1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)乙-1-酮(901 mg，3.25 mmol，CAS-RN:[656257-84-0])及4-甲苯磺酸(3.09 g，16.3 mmol)溶解於乙醇(17 ml)中且在80℃下加熱隔夜。用乙酸乙酯及NaHCO 3飽和水溶液稀釋反應混合物。分離各層且用EtOAc萃取水層兩次。合併之有機層藉由穿過塗有聚矽氧之濾紙乾燥。減壓濃縮澄清濾液且藉由急驟層析純化，得到標題化合物(1.3 g，30%產率)。 LC-MS (方法2): R t= 1.20 min; MS (ESIpos): m/z = 399 [M+H] + 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] 3.90 (s, 3H), 4.51 (s, 2H), 7.23 - 7.29 (m, 1H), 7.46 (br d, 1H), 7.76 - 7.82 (m, 2H), 7.88 (dd, 1H), 7.95 - 8.03 (m, 1H), 8.35 (d, 2H), 8.42 - 8.52 (m, 1H), 11.18 (br s, 1H)。
中間物114  6-(2-溴吡啶-4-基)-3-甲氧基-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤
Figure 02_image317
將2-{2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-6-甲氧基吡𠯤(中間物113，345 mg，864 µmol)溶解於環丁碸中，且添加ZnCl 2(130 mg，951 µmol)。在170℃加熱混合物3小時。隨後用乙酸乙酯及半飽和NaCl水溶液稀釋反應混合物。藉由真空過濾收集綠色沈澱，得到182 mg目標化合物。將澄清濾液轉移至分液漏斗中且用半飽和NaCl水溶液洗滌有機層兩次。減壓濃縮有機層且藉由製備型HPLC (方法B，梯度：0.50-6.00 min 15-55% B)純化，且將此物質(35 mg)與來自濾餅之物質合併，得到標題化合物(218 mg，62%產率)。 LC-MS (方法2): R t= 1.02 min; MS (ESIneg): m/z = 380 [M-H] - 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] 3.98 (s, 3H), 7.25 - 7.39 (m, 1H), 7.55 (dd, 1H), 7.78 - 7.84 (m, 1H), 7.90 (dt, 1H), 8.03 (td, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.34 (d, 1H), 8.46 - 8.54 (m, 1H), 12.81 (br s, 1H)。
中間物115 N-{4-[5-氟-3-(5-氟吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image319
使 N-{2-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-6-氟吡啶-3-基}-2,2,2-三氟乙醯胺(中間物2，1.42 g，3.87 mmol)、5-氟-2-碘吡啶(1.0 g，4.48 mmol)、肆(三苯膦)鈀(223 mg，193 µmol；CAS-RN:[14221-01-3])及碳酸銫(3.65 g，11.2 mmol)懸浮於32 mL乙腈中且在密封容器中在氬氣氛圍下於100℃攪拌3小時。濾出未溶解的沈澱且用DCM及甲醇洗滌。減壓濃縮濾液且藉由急驟層析(矽膠，梯度：EtOAc/EtOH 0%-50%)純化，得到865 mg列產物，將其在DCM中音波處理，在過濾之後得到762 mg (91%純度，49%產率)標題化合物。 LC-MS (方法2): Rt = 0.93 min; MS (ESIpos): m/z = 366 [M+H]+ 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] 2.08 (s, 3H), 7.01 (dd, 1H), 7.14 (dd, 1H), 7.83 (td, 1H), 8.00 (dd, 1 H), 8.05 (dd, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.31 (d, 1H), 8.46 (d, 1H), 10.56 (s, 1H), 12.35 (s, 1H)。
中間物116  4-[5-氟-3-(5-氟吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺
Figure 02_image321
將 N-{4-[5-氟-3-(5-氟吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺(中間物115，760 mg，2.08 mmol)溶解於甲醇(84 ml)中且用氫氧化鈉水溶液(21 ml，1.0 M，21 mmol)處理。在氮氣氛圍下，於80℃攪拌反應混合物16小時。減壓濃縮反應混合物且用水稀釋。濾出沈澱且用水洗滌直至濾液不再為鹼性為止。在50℃真空乾燥殘餘物，得到667 mg (86%純度，85%產率)目標化合物： LC-MS (方法2): R t= 0.89 min; MS (ESIpos): m/z = 324 [M+H] + 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] 6.03 (br s, 2H), 6.51 (dd,1H), 6.55 (s, 1H), 6.97 (dd, 1H), 7.81 (dt, 1H), 7.90 - 7.95 (m, 2H), 8.00 (dd, 1 H), 8.51 (d, 1H),12.19 (br s, 1H)。
中間物117  2-(4-氟苯基)-3-羥基丙酸乙酯(外消旋體)
Figure 02_image323
將2-(4-氟苯基)乙酸乙酯(1.00 g，5.49 mmol，CAS-RN: [712-52-7])溶解於DMSO (10 mL)中且冷卻至0℃。在0℃一次性添加甲醇鈉(14.8 mg，274 μmol，0.05 eq CAS-RN: [124-41-4])。在0℃攪拌所得混合物10分鐘。添加1,3,5-三㗁烷(598 mg，6.64 mmol，CAS-RN：[110-88-3])。在20℃攪拌所得混合物2 h。用H 2O (20 mL)稀釋反應混合物且用EtOAc (2×30 mL)萃取。將合併之有機層用鹽水(2×10 mL)洗滌、經Na 2SO 4乾燥且濃縮，得到殘餘物。藉由急驟層析[矽膠，石油醚/乙酸乙酯5%-25%]純化殘餘物，得到＞95%純度之目標化合物：0.90 g，4.24 mmol，77%產率。
中間物118  2-(4-氟苯基)-3-羥丙酸(外消旋體)
Figure 02_image325
將2-(4-氟苯基)-3-羥基-丙酸乙酯(0.900 g，4.24 mmol)溶解於10 mL THF及2 mL H 2O中。單水合氫氧化鋰(355 mg，8.48 mmol，2 eq，CAS-RN：1310-66-3)。在25℃攪拌反應混合物12 h。用5 mL H2O稀釋反應混合物，其中藉由添加2.5 M HCl (水溶液)將混合物之pH調節至4。用EtOAc (12 mL×3)萃取所得水溶液。將合併之有機層用鹽水(8 mL×3)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且真空濃縮，得到＞95%產率之目標化合物，0.760 g，4.13 mmol，產率97.3%。
中間物119  3-(4-氟苯基)二氫呋喃-2(3 H)-酮(外消旋體)
Figure 02_image327
將2-(4-氟苯基)乙酸乙酯(5 g，27.4 mmol，CAS-RN: [712-52-7])溶解於50 mL THF中且冷卻至-15℃。添加1 M LiHMDS於THF (32.9 mL，32.9 mmol，CAS-RN= [4039-32-1])中之溶液，且在-15℃攪拌反應混合物0.5 h。隨後經由注射器添加1,3,2-二氧硫雜環戊烷-2,2-二氧化物(8.52 g，68.6 mmol，CAS-RN: [1072-53-3])於50 mL THF中之溶液，且在-15℃下攪拌反應混合物2 h。減壓濃縮反應混合物且添加氫氧化鈉(5.49 g，137 mmol，CAS-RN: [1310-73-2])於25 mL H 2O及50 mL EtOH中之溶液。在100℃攪拌反應混合物16 h。用1 M HCl水溶液將反應混合物調節至pH=4且用EtOAc (3 mL×3)萃取。將合併之有機層用鹽水(3 mL×3)洗滌，經Na 2SO4乾燥且減壓濃縮。藉由急驟層析(矽膠，石油醚/乙酸乙酯=18%)純化殘餘物，得到＞95%純度之標題化合物：1.00 g，5.55 mmol，20.2%產率。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ [ppm] 7.35 - 7.28 (m, 2H), 7.07 - 7.00 (m, 2H), 4.56 - 4.45 (m, 1H), 4.36 (dt, J= 6.4, 9.2 Hz, 1H), 4.13 (q, J= 7.2 Hz, 1H), 3.90 - 3.82 (m, 1H), 3.71 (td, J= 5.6, 10.8 Hz, 1H), 3.59 (ddd, J= 5.2, 7.6, 10.8 Hz, 1H), 2.41 - 2.29 (m, 1H), 2.04 - 1.94 (m, 1H)。
中間物120  (6-氟吡啶-3-基)胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image329
在40℃攪拌6-氟吡啶-3-胺(50.0 g，446 mmol)、三級丁醇(25 ml)、二甲酸二-三級丁酯(200 ml)之混合物4小時。用己烷稀釋混合物，冷卻至0℃且靜置兩小時以沈澱出晶體。過濾晶體，用己烷洗滌且真空乾燥，得到80.0 g (85%產率)的呈粗產物及粉色固體之標題化合物，其不經進一步純化即使用。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ): δ [ppm] = 9.62 (brs, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.00 (td, J= 8.0, 2.4 Hz, 1H), 7.10 (dd, J= 8.8, 3.2 Hz, 1H), 1.47 (s, 9H)。
中間物121  (4-溴-6-氟吡啶-3-基)胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image331
在-70℃添加(6-氟吡啶-3-基)胺基甲酸三級丁酯(參見中間物120，20.0 g，94.2 mmol)於四氫呋喃(150 ml)中之溶液中添加三級丁基鋰(217 ml，1.3 M於戊烷中之溶液，283 mmol)。在-40℃攪拌1小時後，在-70℃添加1,2-二溴乙烷(53.1 g，283 mmol)於四氫呋喃(100 ml)中之溶液。在-78℃下攪拌2小時後，使反應混合物升溫至室溫且攪拌12小時。用氯化銨飽和水溶液稀釋混合物，用乙酸乙酯萃取。將合併之有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。藉由急驟管柱層析(石油醚:乙酸乙酯=1:0至20:1)純化殘餘物，得到呈黃色固體之(4-溴-6-氟吡啶-3-基)胺基甲酸三級丁酯(8.0 g，29%產率)。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ): δ [ppm] = 8.97 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.69 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 1.45 (s, 9H)。
中間物122  [4-(環丙基甲基)-6-氟吡啶-3-基]胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image333
在氮氣氛圍下，於80℃將(4-溴-6-氟吡啶-3-基)胺基甲酸三級丁酯(參見中間物121，8.09 g，27.8 mmol)、(環丙基甲基)(三氟化)硼酸鉀(9.00 g，55.6 mmol)、碳酸銫(27.2 g，83.3 mmol)、甲磺酸根基(2-二環己基膦基-2',6'-二-異丙氧基-1,1'-聯苯)(2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (1.16 g，1.389 mmol)及水(8.0 ml)於甲苯(80 ml)中之混合物攪拌16小時。將混合物(與以500 mg中間物121為起始物質之兩個批次合併)倒入水中且用乙酸乙酯萃取。將合併之有機相用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。藉由急驟管柱層析(石油醚:乙酸乙酯=7:1)純化殘餘物，得到7.3 g (54%純度)呈粗產物及黃色油狀物之標題化合物，其不經進一步純化即使用。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ): δ [ppm] = 8.75 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.17 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 2.53 (d, J= 7.2 Hz, 2H), 1.44 (s, 9H), 1.02-0.95 (m, 1H), 0.53-0.48 (m, 2H), 0.20-0.17 (m, 2H)。
中間物123  4-(環丙基甲基)-6-氟吡啶-3-胺氯化氫
Figure 02_image335
向4-(環丙基甲基)-6-氟吡啶-3-基]胺基甲酸三級丁酯(參見中間物122，7.30 g，54%純度，14.8 mmol)於乙酸乙酯(50 ml)中之溶液中添加鹽酸(20 ml，80 mmol，4 M於乙酸乙酯中)。在室溫下攪拌4小時之後，濃縮混合物，得到5.0 g (54%純度)呈粗產物及黃色固體之標題化合物，其不經進一步純化即使用。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ): δ [ppm] = 7.94 (s, 1H), 7.17 (s, 1H), 2.55 (d, J= 6.8 Hz, 2H), 1.13-1.06 (m, 1H), 0.58-0.53 (m, 2H), 0.23-0.19 (m, 2H)。
中間物124  4-(環丙基甲基)-2-氟-5-肼基吡啶
Figure 02_image337
在-10℃向4-(環丙基甲基)-6-氟吡啶-3-胺氯化氫(參見中間物123、4.50 g，22.2 mmol)於鹽酸(50 ml，6 M於水中，300 mmol)中之溶液中添加亞硝酸鈉(2.30 g，33.3 mmol)於水(5.0 ml)中之溶液。在添加之後，使反應混合物升溫至0℃且攪拌0.5小時。隨後在-10℃將氯化錫(II)脫水物(12.5 g，55.5 mmol)添加至反應混合物中，且在0℃攪拌1小時。添加氫氧化鉀(40%)至反應物中以使pH值調節約11。用乙酸乙酯萃取反應混合物。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到3.1 g呈粗產物形式之標題化合物，其不經進一步純化即使用。
中間物125  2-溴-N-甲氧基-N-甲基吡啶-4-甲醯胺
Figure 02_image339
在25℃向2-溴吡啶-4-羧酸(10.0 g，49.5 mmol)於二氯甲烷(100 ml)中之溶液中添加1,1-羰基二咪唑(12.0 g，74.3 mmol)。在室溫下攪拌2小時之後，在25℃將N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(5.31 g，54.5 mmol)添加至上述混合物中。在室溫下攪拌16小時之後，將反應混合物用氫氧化鈉(0.1 M)淬滅，用二氯甲烷萃取。將合併之有機相用鹽水洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。藉由急驟管柱層析(石油醚:乙酸乙酯=10:1至4:1)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之2-溴-N-甲氧基-N-甲基異菸鹼醯胺(10.3 g，85%產率)。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ): δ [ppm] = 8.50 (dd, J= 5.2, 0.8 Hz, 1H), 7.78 (d, J= 0.8 Hz, 1H), 7.58 (dd, J= 5.2, 1.2 Hz, 1H), 3.56 (s, 3H), 3.27 (s, 3H)。
中間物126  1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)乙醇
Figure 02_image341
在-78℃向2-甲基吡啶(3.26 g，35.0 mmol)於四氫呋喃(100 ml)中之溶液中添加雙(三甲基矽烷基)胺基鈉(42 ml，1M於四氫呋喃中，42 mmol)。在-78℃攪拌1小時後，在-78℃添加2-溴-N-甲氧基-N-甲基吡啶-4-甲醯胺(參見中間物125，10.3 g，42.0 mmol)於四氫呋喃(50 ml)中之溶液。在25℃攪拌16小時之後，用飽和氯化銨水溶液淬滅混合物，用乙酸乙酯萃取。合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。藉由急驟管柱層析(石油醚:乙酸乙酯=1:0至2:1)純化殘餘物，得到呈黃色固體之1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)乙醇(5.91 g，51%產率)。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ): δ [ppm] = 15.52 (br.s, 1H), 8.46 (d, J= 4.2 Hz, 2H), 7.97 (d, J= 0.8 Hz, 1H), 7.89 (td, J= 8.0, 1.2 Hz, 1H), 7.81 (dd, J= 4.2, 1.2 Hz, 1H), 7.36 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.26-7.23 (m, 1H), 6.68 (s, 1H)。
中間物127  5-(2-(1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基)肼基)-4-(環丙基甲基)-2-氟吡啶
Figure 02_image343
在78℃將4-(環丙基甲基)-2-氟-5-肼基吡啶(3.10 g，17.1 mmol，中間物124)、1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)乙醇(2.37 g，8.55 mmol，中間物126)、乙酸(cat. 0.098 ml)於乙醇(62 ml)中之混合物攪拌24小時。濃縮反應混合物。藉由急驟管柱(石油醚:乙酸乙酯=3:1)純化殘餘物，得到呈黃色固體之5-(2-(1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基)肼基)-4-(環丙基甲基)-2-氟吡啶(2.00 g，27%產率)。 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ): δ [ppm] = 10.93 (s, 1H), 8.50 (d, J= 4.0 Hz, 1H), 8.36 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.07 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 7.95 (dd, J= 5.2, 1.6 Hz, 1H), 7.86 (td, J= 7.6, 2.0 Hz, 1H), 7.62 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.34 (dd, J= 6.8, 4.8 Hz, 1H), 7.15 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 4.40 (s, 2H), 2.73 (d, J= 6.8 Hz, 2H), 1.18-1.09 (m, 1H), 0.60-0.55 (m, 2H), 0.29-0.25 (m, 2H)。
中間物128  2-(2-溴吡啶-4-基)-7-(環丙基甲基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶
Figure 02_image345
在空氣(開放系統)下，於180℃攪拌5-(2-(1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基)肼基)-4-(環丙基甲基)-2-氟吡啶(參見中間物127，100 mg，0.227 mmol)、二氯化鋅(34.1 mg，0.250 mmol)於四亞甲基碸(2.0 ml)中之混合物4小時。將反應混合物(與以100 mg中間物127為起始物質之批次合併)倒入水中且用乙酸乙酯萃取。將合併之有機相用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。藉由急驟管柱層析(石油醚:乙酸乙酯=3:1)純化殘餘物，得到黃色油狀物。將黃色油狀物用乙酸乙酯濕磨，得到呈白色固體之2-(2-溴吡啶-4-基)-7-(環丙基甲基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶(710 mg)。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ): δ [ppm] = 12.16 (s, 1H), 8.46 (d, J= 4.0 Hz, 1H), 8.38 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 8.03 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.91 (td, J= 7.6, 2.0 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.48 (dd, J= 5.2, 1.6 Hz, 1H), 7.30 (dd, J= 6.4, 4.8 Hz, 1H), 7.01 (s, 1H), 2.94 (d, J= 7.2 Hz, 2H), 1.25-0.19 (m, 1H), 0.58-0.53 (m, 2H), 0.35-0.29 (m, 2H)。
中間物129  4-{[(2S)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-2-氟-5-硝基吡啶(單一立體異構體)
Figure 02_image347
向2,4-二氟-5-硝基吡啶(CAS-RN:[60186-15-4]，2.00 g，12.5 mmol)於THF中之溶液中添加[(2R)-1,4-二㗁烷-2-基]甲醇(CAS-RN:[406913-88-0]，2.95 g，25.0 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(4.4 mL，25 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])。將反應混合物加熱至60℃持續6小時。減壓濃縮反應混合物且直接藉由矽膠急驟層析，梯度己烷/乙酸乙酯20%-100%純化，得到2.64 g (82%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.88 min; MS (ESIpos): m/z = 259 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.154 (0.59), 1.172 (1.18), 1.190 (0.57), 1.987 (2.01), 2.518 (1.43), 2.523 (0.94), 3.405 (3.30), 3.430 (3.87), 3.433 (4.29), 3.446 (1.68), 3.458 (4.18), 3.466 (2.48), 3.473 (2.63), 3.489 (0.88), 3.501 (2.39), 3.596 (1.71), 3.603 (2.14), 3.625 (2.52), 3.629 (2.30), 3.632 (3.09), 3.653 (5.30), 3.656 (5.35), 3.681 (1.75), 3.687 (1.48), 3.750 (3.09), 3.758 (1.86), 3.780 (1.81), 3.790 (0.40), 3.808 (2.39), 3.815 (2.73), 3.837 (2.01), 3.844 (2.47), 3.879 (0.84), 3.885 (0.82), 3.890 (1.78), 3.897 (1.70), 3.903 (1.43), 3.909 (1.30), 3.915 (1.68), 3.922 (1.38), 3.926 (0.92), 3.933 (0.73), 4.017 (0.44), 4.035 (0.44), 4.324 (12.32), 4.336 (10.55), 5.758 (5.36), 7.319 (16.00), 8.825 (13.15)。
中間物130  4-{[(2S)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-6-氟吡啶-3-胺(單一立體異構體)
Figure 02_image349
將4-{[(2S)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-2-氟-5-硝基吡啶(參見中間物129，2.63 g，10.2 mmol)溶解於乙醇(65 ml)及二氯甲烷(17 ml)之混合物中。添加鈀/碳(1.08 g，10%純度，1.02 mmol；CAS-RN:[7440-05-3])且在氫氣氛圍下攪拌混合物四小時。過濾混合物且減壓濃縮濾液至乾燥，得到2.17 g (94%產率)呈粗產物形式之標題化合物，其不經進一步純化即使用。 LC-MS (方法1): R t= 0.63 min; MS (ESIpos): m/z = 229 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2.518 (1.21), 2.523 (0.78), 3.413 (5.55), 3.429 (0.52), 3.439 (6.99), 3.442 (7.22), 3.468 (6.45), 3.478 (1.33), 3.488 (2.66), 3.508 (4.64), 3.515 (5.37), 3.528 (1.08), 3.540 (4.34), 3.542 (4.73), 3.597 (3.59), 3.603 (4.16), 3.625 (4.62), 3.630 (4.24), 3.632 (5.46), 3.651 (8.37), 3.656 (7.87), 3.678 (3.10), 3.684 (2.74), 3.751 (5.98), 3.758 (2.91), 3.763 (1.52), 3.781 (3.35), 3.790 (1.00), 3.867 (1.14), 3.874 (1.76), 3.880 (5.21), 3.887 (8.92), 3.893 (3.10), 3.899 (2.82), 3.910 (6.05), 3.917 (4.61), 3.924 (1.41), 4.007 (3.54), 4.018 (3.02), 4.033 (8.71), 4.045 (7.20), 4.061 (8.46), 4.075 (7.56), 4.088 (3.41), 4.102 (2.81), 4.777 (1.76), 5.758 (2.47), 6.645 (14.88), 6.647 (14.64), 7.376 (15.41), 7.380 (16.00)。
中間物131  4-{[(2S)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-2-氟-5-肼基吡啶(單一立體異構體)
Figure 02_image351
將4-{[(2S)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-6-氟吡啶-3-胺(參見中間物130，500 mg，2.19 mmol)溶解於半濃縮鹽酸水溶液(5.5 ml，6.0 M，33 mmol)中且冷卻至0℃。在保持該溫度的情況下逐滴添加亞硝酸鈉(151 mg，2.19 mmol；CAS-RN:[7632-00-0])於水(5.9 ml)中之溶液且攪拌混合物30分鐘。添加二水合氯化錫(II) (1.24 g，5.48 mmol；CAS-RN:[10025-69-1])於半濃鹽酸水溶液(5.5 ml，6.0 M，33 mmol)中的溶液。在0℃再攪拌反應混合物1.5小時。在冷卻下，用碳酸氫鉀水溶液(6.6 ml，40%純度，66 mmol；CAS-RN：[1310-58-3])鹼化混合物且用乙酸乙酯萃取。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且在真空下濃縮，得到412 mg (77%產率)呈粗產物形式之標題化合物，其不經進一步純化即使用。 LC-MS (方法1): R t= 0.47 min; MS (ESIpos): m/z = 244 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.154 (3.66), 1.172 (7.55), 1.190 (4.08), 1.821 (0.40), 1.920 (3.42), 1.987 (14.03), 2.327 (0.47), 2.518 (1.61), 2.523 (1.06), 2.669 (0.50), 3.349 (0.66), 3.375 (0.55), 3.378 (0.57), 3.396 (0.71), 3.403 (6.52), 3.409 (1.33), 3.422 (1.47), 3.429 (7.74), 3.433 (7.46), 3.438 (1.10), 3.442 (1.10), 3.449 (0.80), 3.458 (6.99), 3.468 (0.87), 3.474 (1.82), 3.485 (3.26), 3.490 (1.04), 3.497 (1.11), 3.505 (5.83), 3.512 (6.42), 3.525 (2.96), 3.537 (5.06), 3.539 (5.69), 3.552 (1.07), 3.558 (0.59), 3.568 (0.41), 3.585 (2.69), 3.594 (4.18), 3.601 (4.88), 3.614 (0.82), 3.623 (5.58), 3.627 (5.11), 3.630 (6.75), 3.642 (1.70), 3.649 (10.40), 3.654 (8.92), 3.677 (3.89), 3.682 (3.42), 3.746 (6.69), 3.754 (3.50), 3.758 (2.48), 3.777 (4.10), 3.788 (1.44), 3.795 (0.71), 3.824 (0.45), 3.860 (1.44), 3.867 (2.30), 3.872 (5.96), 3.879 (9.89), 3.886 (3.89), 3.891 (3.47), 3.901 (7.01), 3.908 (5.13), 3.917 (2.11), 3.930 (0.63), 3.939 (1.33), 3.955 (0.64), 3.965 (1.98), 3.999 (2.46), 4.007 (5.53), 4.017 (11.00), 4.033 (14.08), 4.038 (4.83), 4.045 (9.71), 4.055 (11.13), 4.068 (8.60), 4.081 (3.68), 4.091 (1.43), 4.095 (3.81), 4.104 (1.34), 4.122 (0.46), 4.152 (0.58), 4.165 (0.74), 4.179 (0.45), 4.627 (0.59), 4.754 (0.81), 5.758 (3.22), 6.036 (8.37), 6.431 (1.58), 6.646 (16.00), 6.649 (15.39), 6.775 (0.92), 6.781 (1.09), 6.784 (1.45), 6.789 (1.49), 6.848 (0.75), 6.939 (0.77), 6.941 (0.78), 6.944 (0.61), 6.947 (0.68), 6.953 (0.79), 6.956 (0.79), 6.958 (0.58), 6.962 (0.47), 7.373 (0.97), 7.377 (0.99), 7.621 (0.64), 7.665 (12.60), 7.667 (12.23), 7.891 (0.62), 8.026 (1.58), 8.030 (1.03), 8.041 (1.50), 8.045 (0.90), 10.211 (1.00)。
中間物132  5-{(2Z)-2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-4-{[(2S)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-2-氟吡啶(單一立體異構體)
Figure 02_image353
將4-{[(2S)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-2-氟-5-肼基吡啶(參見中間物131，351 mg，1.44 mmol)及1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)乙-1-酮(CAS 656257-84-0，400 mg，1.44 mmol)溶解於乙酸乙酯(11 mL)中且添加含丙基膦酸酐之乙酸乙酯(950 µl，50%純度，1.6 mmol；CAS-RN:[68957-94-8])。在微波反應器中於120℃攪拌混合物15分鐘。用乙酸乙酯及飽和碳酸氫鈉水溶液稀釋反應混合物。再次用乙酸乙酯萃取水層。合併之有機層在真空下濃縮且乾燥，得到690 mg (95%產率)呈粗產物形式之標題化合物，其不經進一步純化即使用。 LC-MS (方法1): R t= 1.23 min; MS (ESIneg): m/z = 500, 502 [M-H] -¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.152 (4.78), 1.170 (10.21), 1.188 (5.03), 1.221 (0.50), 1.986 (16.00), 2.036 (0.43), 2.038 (0.53), 2.163 (1.11), 2.289 (1.01), 2.518 (2.19), 2.523 (1.35), 3.266 (2.71), 3.349 (1.51), 3.352 (1.81), 3.363 (1.10), 3.381 (2.98), 3.389 (3.23), 3.402 (0.67), 3.411 (2.59), 3.422 (0.96), 3.438 (0.74), 3.442 (0.68), 3.463 (0.63), 3.468 (0.93), 3.475 (3.44), 3.483 (0.65), 3.491 (0.87), 3.500 (4.47), 3.503 (4.35), 3.514 (0.90), 3.518 (0.86), 3.528 (4.49), 3.542 (1.24), 3.554 (1.66), 3.578 (1.74), 3.585 (2.59), 3.610 (7.64), 3.625 (0.96), 3.636 (4.89), 3.642 (3.46), 3.649 (1.64), 3.655 (1.27), 3.669 (0.99), 3.675 (1.29), 3.698 (0.69), 3.716 (0.49), 3.740 (0.44), 3.749 (0.79), 3.758 (0.50), 3.776 (3.86), 3.783 (2.78), 3.806 (2.52), 3.817 (0.95), 3.823 (0.53), 3.867 (0.45), 3.874 (0.41), 3.880 (0.59), 3.887 (0.89), 3.894 (3.00), 3.901 (3.50), 3.923 (2.75), 3.929 (3.22), 3.948 (1.26), 3.961 (1.91), 3.968 (1.97), 3.972 (1.93), 3.979 (1.90), 3.986 (1.89), 3.998 (2.32), 4.003 (1.06), 4.015 (4.03), 4.033 (4.18), 4.043 (0.60), 4.051 (1.40), 4.060 (0.71), 4.074 (0.58), 4.089 (0.92), 4.093 (1.03), 4.103 (0.94), 4.146 (0.50), 4.187 (0.62), 4.196 (0.72), 4.209 (1.93), 4.219 (2.00), 4.235 (4.49), 4.246 (4.23), 4.255 (4.59), 4.268 (4.08), 4.282 (1.63), 4.295 (1.56), 4.307 (0.50), 4.316 (0.44), 4.345 (11.19), 4.383 (0.44), 4.754 (0.68), 5.757 (11.31), 6.117 (0.64), 6.403 (0.49), 6.408 (0.49), 6.644 (0.84), 6.683 (5.43), 6.748 (0.77), 6.773 (0.69), 6.779 (0.75), 6.889 (0.49), 6.938 (10.39), 6.969 (0.49), 7.228 (1.22), 7.231 (1.28), 7.242 (1.17), 7.245 (1.43), 7.247 (1.46), 7.250 (1.35), 7.260 (1.14), 7.263 (1.26), 7.321 (2.59), 7.324 (2.57), 7.334 (2.64), 7.336 (3.05), 7.341 (3.62), 7.343 (4.18), 7.352 (2.96), 7.355 (2.95), 7.364 (2.28), 7.375 (0.93), 7.378 (0.93), 7.463 (0.46), 7.476 (0.42), 7.480 (0.41), 7.570 (0.85), 7.573 (0.81), 7.583 (0.80), 7.586 (0.87), 7.613 (4.53), 7.632 (5.23), 7.723 (0.45), 7.783 (1.00), 7.785 (1.22), 7.788 (1.11), 7.806 (2.61), 7.810 (2.47), 7.820 (2.43), 7.823 (2.68), 7.828 (3.16), 7.832 (3.16), 7.847 (4.68), 7.851 (4.48), 7.867 (2.46), 7.868 (2.13), 7.871 (2.66), 7.889 (1.68), 7.891 (1.55), 7.893 (1.66), 7.908 (1.17), 7.912 (1.52), 7.927 (0.52), 7.968 (3.51), 7.972 (7.93), 7.976 (5.53), 7.985 (4.97), 7.989 (5.27), 8.007 (0.63), 8.029 (0.89), 8.043 (0.72), 8.097 (7.78), 8.099 (7.49), 8.181 (9.54), 8.345 (0.52), 8.350 (0.65), 8.359 (7.84), 8.373 (6.78), 8.452 (4.24), 8.465 (3.92), 8.467 (3.87), 8.489 (1.06), 8.491 (1.02), 8.502 (0.99), 8.504 (0.93), 8.542 (2.98), 8.544 (3.48), 8.547 (3.48), 8.549 (3.13), 8.554 (3.13), 8.556 (3.48), 8.559 (3.28), 8.561 (2.83), 11.030 (8.79), 15.529 (0.64)。
中間物133  2-(2-溴吡啶-4-基)-7-{[(2S)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶(單一立體異構體)
Figure 02_image355
將5-{(2Z)-2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-4-{[(2S)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-2-氟吡啶(參見中間物132，685 mg，1.36 mmol)溶解於環丁碸(CAS 126-33-0，9.7 ml)中且添加二氯化鋅(204 mg，1.50 mmol；CAS-RN:[7646-85-7])。將混合物加熱至130℃且攪拌3小時。用乙酸乙酯稀釋反應混合物且用半飽和鹽水洗滌三次。有機層中之沈澱藉由過濾收集且乾燥，得到288 mg呈粗產物形式之標題化合物，其不經進一步純化即使用。 LC-MS (方法1): R t= 0.89 min; MS (ESIneg): m/z = 483, 485 [M-H] -¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.154 (3.29), 1.172 (7.32), 1.189 (3.80), 1.230 (0.90), 1.987 (13.62), 2.518 (7.25), 2.523 (4.40), 3.423 (0.71), 3.478 (2.62), 3.504 (5.30), 3.523 (3.37), 3.530 (3.60), 3.543 (5.52), 3.550 (5.49), 3.574 (4.69), 3.633 (3.54), 3.638 (4.01), 3.661 (5.67), 3.668 (6.37), 3.682 (9.35), 3.690 (6.81), 3.709 (4.23), 3.789 (7.36), 3.795 (3.81), 3.818 (4.04), 3.858 (0.45), 3.952 (4.18), 3.978 (6.78), 3.987 (5.22), 3.994 (3.26), 3.999 (4.64), 4.006 (3.09), 4.012 (3.81), 4.016 (5.33), 4.034 (3.51), 4.052 (1.03), 4.329 (11.78), 4.341 (10.74), 6.529 (0.92), 6.573 (1.01), 7.197 (2.97), 7.252 (0.51), 7.274 (0.51), 7.528 (4.61), 7.569 (0.58), 7.772 (0.98), 7.821 (16.00), 7.997 (10.01), 8.017 (8.12), 8.271 (3.44), 8.380 (0.92), 8.401 (5.40), 8.411 (5.09), 12.460 (0.69)。
中間物134  2-氟-5-肼基吡𠯤
Figure 02_image357
向2,5-二氟吡𠯤(CAS-RN:[1207861-11-7]，500 mg，4.31 mmol)於乙醇(1 ml)中之溶液中添加單水合肼(CAS-RN:[7803-57-8]，360 µl，64%純度，4.7 mmol)且在室溫下攪拌16 h。向反應混合物中添加半飽和鹽水，用乙酸乙酯稀釋，且分離有機層，乾燥且濃縮，得到241 mg (95%純度，42%產率)呈粗產物形式之標題化合物，其不經進一步純化即使用。 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 8.00 (dd, 1H), 7.87 (br s, 1H), 7.72 (dd, 1H), 4.27 (s, 2H)。
中間物135  2-{(2Z)-2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-5-氟吡𠯤
Figure 02_image359
將2-氟-5-肼基吡𠯤(參見中間物134，99.0 mg，773 µmol)及1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)乙-1-酮(CAS-RN:[656257-84-0]，214 mg，773 µmol)溶解於乙酸乙酯(5.7 ml)中且添加含丙基膦酸酐之乙酸乙酯(510 µl，50%純度，850 µmol；CAS-RN:[68957-94-8])。在微波反應器中於120℃攪拌混合物15分鐘。用乙酸乙酯及飽和碳酸氫鈉水溶液稀釋反應混合物。分離有機層，乾燥且濃縮，得到578 mg (193%產率)呈粗產物形式之標題化合物，其不經進一步純化即使用。 LC-MS (方法1): R t= 1.21 min; MS (ESIpos): m/z = 387 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 11.38 (s, 1H), 8.48-8.44 (m, 1H), 8.44-8.42 (m, 1H), 8.34 (d, 1H), 8.31 (dd, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.91 (dd, 1H), 7.79 (td, 1H), 7.48 (d, 1H), 7.25 (ddd, 1H), 4.48 (s, 2H)。
中間物136  6-(2-溴吡啶-4-基)-2-氟-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤
Figure 02_image361
將2-{(2Z)-2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-5-氟吡𠯤(參見中間物135，285 mg，736 µmol)溶解於環丁碸(5.3 mL，CAS-RN:[126-33-0])中且添加二氯化鋅(110 mg，810 µmol；CAS-RN:[7646-85-7])。將混合物加熱至175℃且攪拌2小時。將反應混合物用乙酸乙酯稀釋且用碳酸氫鈉水溶液洗滌一次並用半飽和鹽水洗滌三次。分離有機層且藉由矽膠急驟層析，梯度己烷/乙酸乙酯20-100%及二氯甲烷/乙醇0-20%純化，得到70 mg (26%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.95 min; MS (ESIneg): m/z = 368 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 13.22 (s, 1H), 8.53-8.47 (m, 1H), 8.46-8.40 (m, 2H), 8.02-7.91 (m, 2H), 7.86 (dd, 1H), 7.56 (dd, 1H), 7.35 (ddd, 1H)。
中間物137  4-(2-氟-5-硝基吡啶-4-基)𠰌啉
Figure 02_image363
將2,4-二氟-5-硝基吡啶(2.00 g，12.5 mmol)溶解於THF (60 ml)中且冷卻至-40℃。添加N,N-二異丙基乙胺(3.3 mL，19 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])及𠰌啉(1.1 mL，12 mmol；CAS-RN:[110-91-8])於THF (1 ml)中之溶液且攪拌，維持溫度在-20至-40℃之間持續50分鐘。減壓濃縮反應混合物且直接藉由矽膠急驟層析，梯度二氯甲烷/乙醇0-10%純化，得到2.61 g (90%純度，83%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.88 min; MS (ESIpos): m/z = 228 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 8.60 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 3.71-3.64 (m, 4H), 3.27-3.21 (m, 4H)。
中間物138  6-氟-4-(𠰌啉-4-基)吡啶-3-胺
Figure 02_image365
將4-(2-氟-5-硝基吡啶-4-基)𠰌啉(參見中間物137，2.61 g，11.5 mmol)溶解於乙醇(73 ml)及二氯甲烷(19 ml)之混合物中。添加鈀/碳(1.22 g，10%純度，1.15 mmol；CAS-RN:[7440-05-3])且在氫氣氛圍下攪拌混合物四小時。過濾混合物且將濾液減壓濃縮至乾燥。粗產物藉由胺基矽膠急驟層析，梯度乙酸乙酯/乙醇0-10%純化，得到1.84 g (90%純度，73%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.70 min; MS (ESIpos): m/z = 198 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.46 (d, 1H), 6.50 (d, 1H), 4.71 (s, 2H), 3.81-3.68 (m, 4H), 3.04-2.90 (m, 4H)。
中間物139  4-(2-氟-5-肼基吡啶-4-基)𠰌啉
Figure 02_image367
將6-氟-4-(𠰌啉-4-基)吡啶-3-胺(參見中間物138，1.84 g，9.33 mmol)溶解於半濃鹽酸水溶液(23 ml，6.0 M，140 mmol)中且冷卻至0℃。在保持該溫度的情況下逐滴添加亞硝酸鈉(644 mg，9.33 mmol；CAS-RN:[7632-00-0])於水(25 ml)中之溶液且攪拌混合物30分鐘。添加二水合氯化錫(II) (5.26 g，23.3 mmol；CAS RN:[10025-69-1])於半濃縮鹽酸水溶液(23 ml，6.0 M，140 mmol)中的溶液。在0℃再攪拌反應混合物1.5小時。用碳酸氫鉀水溶液(28 ml，40%純度，280 mmol；CAS-RN:[1310-58-3])將混合物鹼化至≥8且用乙酸乙酯萃取三次。合併之有機層在真空下濃縮且乾燥，得到1.67 g (84%產率)呈粗產物形式之標題化合物，其不經進一步純化即使用。 LC-MS (方法1): R t= 0.45 min; MS (ESIpos): m/z = 213 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2.918 (1.21), 2.931 (10.50), 2.943 (13.39), 2.954 (11.88), 2.967 (2.02), 2.979 (0.91), 2.994 (0.81), 3.005 (1.06), 3.017 (0.92), 3.705 (3.82), 3.717 (0.68), 3.738 (15.07), 3.750 (16.00), 3.760 (15.27), 3.781 (1.75), 3.792 (0.69), 3.805 (1.45), 4.052 (1.55), 4.076 (4.17), 4.153 (0.72), 4.171 (0.58), 5.924 (7.34), 6.466 (0.95), 6.474 (0.98), 6.479 (1.21), 6.484 (1.51), 6.488 (1.19), 6.498 (0.79), 6.535 (11.75), 6.538 (12.15), 6.562 (0.45), 6.686 (0.52), 6.689 (0.67), 6.786 (0.61), 6.791 (0.95), 6.796 (0.62), 6.801 (0.66), 6.806 (0.98), 6.812 (0.63), 6.912 (2.43), 7.821 (3.00), 7.827 (10.52), 7.836 (2.77)。
中間物140  4-(5-{(2Z)-2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-2-氟吡啶-4-基)𠰌啉
Figure 02_image369
將4-(2-氟-5-肼基吡啶-4-基)𠰌啉(參見中間物139，197 mg，50%純度，464 µmol)及1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)乙-1-酮(CAS-RN:[656257-84-0]，129 mg，464 µmol)溶解於乙酸乙酯(3.4 ml)中且添加含丙基膦酸酐之乙酸乙酯(300 µl，50%純度，510 µmol；CAS-RN:[68957-94-8])。在微波反應器中於120℃攪拌混合物15分鐘。用碳酸氫鈉飽和水溶液稀釋反應混合物且用乙酸乙酯萃取兩次。分離有機層，經疏水性濾紙乾燥，濃縮且藉由矽膠急驟層析，梯度己烷/乙酸乙酯10-70%純化。將富含產物之溶離份再溶解於二氯甲烷中且在劇烈攪拌下逐滴添加己烷。藉由過濾收集沈澱，得到77.0 mg (95%純度，33%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 1.24 min; MS (ESIpos): m/z = 471 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.857 (0.69), 2.337 (0.81), 2.518 (8.42), 2.523 (5.53), 2.678 (0.77), 3.076 (9.07), 3.087 (11.86), 3.098 (9.83), 3.391 (0.47), 3.695 (10.53), 3.707 (12.39), 3.718 (9.77), 3.787 (0.53), 3.801 (0.54), 4.404 (16.00), 5.758 (0.45), 6.807 (11.35), 7.319 (3.09), 7.322 (3.13), 7.332 (3.04), 7.334 (3.53), 7.338 (3.61), 7.341 (3.24), 7.350 (3.36), 7.353 (3.22), 7.606 (5.59), 7.626 (6.37), 7.835 (3.60), 7.840 (3.65), 7.854 (5.81), 7.859 (5.96), 7.873 (3.01), 7.878 (2.86), 7.964 (6.11), 7.968 (6.42), 7.977 (6.19), 7.981 (6.78), 8.085 (9.78), 8.088 (9.25), 8.307 (12.36), 8.363 (9.40), 8.377 (8.52), 8.517 (3.82), 8.519 (4.32), 8.521 (4.48), 8.524 (3.92), 8.529 (3.90), 8.531 (4.53), 8.534 (4.17), 8.536 (3.68), 10.718 (10.00)。
中間物141  2-(2-溴吡啶-4-基)-5-氟-7-(𠰌啉-4-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶
Figure 02_image371
將4-(5-{(2Z)-2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-2-氟吡啶-4-基)𠰌啉(參見中間物140，77.0 mg，163 µmol)溶解於環丁碸(1.2 mL，CAS-RN:[126-33-0])中且添加二氯化鋅(24.5 mg，180 µmol；CAS-RN:[7646-85-7])。將混合物加熱至130℃且攪拌3小時。用乙酸乙酯稀釋反應混合物且用半飽和鹽水洗滌三次。有機層中之沈澱藉由過濾收集且乾燥，得到60.2 mg (94%純度，76%產率)呈粗產物形式之標題化合物，其不經進一步純化即使用。 LC-MS (方法1): R t= 0.88 min; MS (ESIneg): m/z = 452 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 11.94-11.74 (m, 1H), 8.41 (br d, 1H), 8.38-8.32 (m, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.93-7.83 (m, 1H), 7.81 (d, 1H), 7.50-7.44 (m, 1H), 7.29-7.21 (m, 1H), 6.51-6.35 (m, 1H), 3.88-3.81 (m, 4H),4H未偵測到。
中間物142  4-氯-6-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}嘧啶-5-胺(單一立體異構體)
Figure 02_image373
將(3S)-氧雜環戊-3-醇(1.8 mL，22 mmol)溶解於THF (80 ml)中，冷卻至0℃且緩慢添加氫化鈉(878 mg，60%純度，22.0 mmol；CAS-RN:[7646-69-7])。攪拌混合物10 min，隨後添加4,6-二氯嘧啶-5-胺(3.00 g，18.3 mmol)，加熱至70℃且攪拌4小時。用水稀釋反應混合物且用乙酸乙酯萃取。分離有機層，乾燥，濃縮且藉由矽膠急驟層析，梯度二氯甲烷/乙醇0-20%純化，得到3.34 g (85%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.73 min; MS (ESIneg): m/z = 214 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2.085 (0.40), 2.087 (0.44), 2.091 (0.68), 2.096 (0.43), 2.098 (0.41), 2.105 (0.48), 2.107 (0.96), 2.109 (0.96), 2.112 (0.68), 2.119 (0.68), 2.121 (0.73), 2.125 (1.19), 2.126 (1.16), 2.130 (0.71), 2.137 (0.63), 2.138 (0.64), 2.142 (0.61), 2.183 (0.80), 2.200 (0.95), 2.204 (1.81), 2.220 (1.94), 2.224 (0.96), 2.233 (0.62), 2.238 (1.32), 2.240 (1.06), 2.254 (1.11), 2.258 (0.57), 2.274 (0.52), 3.732 (1.02), 3.744 (1.14), 3.753 (2.55), 3.764 (2.49), 3.773 (1.57), 3.785 (1.30), 3.832 (1.27), 3.836 (1.30), 3.858 (2.58), 3.862 (2.64), 3.886 (2.52), 3.906 (5.28), 3.918 (4.14), 3.924 (1.04), 3.932 (2.06), 3.944 (2.06), 5.417 (4.45), 5.499 (0.66), 5.504 (1.22), 5.510 (1.04), 5.515 (1.88), 5.520 (1.84), 5.526 (1.07), 5.531 (1.23), 5.536 (0.61), 5.756 (4.48), 7.799 (0.45), 7.883 (16.00)。
中間物143  N-{4-[(5-胺基-6-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}嘧啶-4-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺(單一立體異構體)
Figure 02_image375
將4-氯-6-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}嘧啶-5-胺(參見中間物142，2.90 g，13.4 mmol)、N-(4-乙炔基吡啶-2-基)乙醯胺(4.31 g，26.9 mmol，CAS-RN: [1445876-40-3])、碘化銅(I)(256 mg，1.34 mmol，CAS-RN:[7681-65-4])、X-Phos (641 mg，1.34 mmol，CAS-RN: [564483-18-7])、X-Phos-Pd-3G (569 mg，672 µmol、CAS-RN: [1445085-55-1])及三甲胺(14 mL，100 mmol；CAS-RN:[121-44-8])於THF (14 ml)中之混合物抽空且用氬氣回填三次。在80℃加熱反應混合物2.5小時。將反應混合物倒入氨水(33%純度)中，且用二氯甲烷與甲醇之混合物萃取。將有機層用半飽和鹽水洗滌，乾燥，濃縮且藉由矽膠急驟層析，梯度二氯甲烷/乙醇0-20%純化，得到1.43 g (31%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.82 min; MS (ESIneg): m/z = 338 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.035 (0.55), 1.052 (1.33), 1.069 (0.63), 1.153 (3.08), 1.171 (6.70), 1.189 (3.37), 1.986 (11.43), 2.114 (16.00), 2.132 (0.62), 2.148 (0.66), 2.226 (0.46), 2.230 (0.77), 2.246 (0.91), 2.249 (0.48), 2.264 (0.68), 2.280 (0.49), 2.518 (0.47), 3.743 (0.50), 3.755 (0.52), 3.763 (1.25), 3.775 (1.20), 3.784 (0.70), 3.796 (0.60), 3.861 (0.65), 3.865 (0.69), 3.888 (1.90), 3.908 (1.32), 3.922 (1.84), 3.926 (1.46), 3.934 (1.92), 3.948 (1.20), 3.960 (0.86), 3.998 (0.85), 4.015 (2.53), 4.033 (2.46), 4.051 (0.78), 5.536 (0.62), 5.542 (0.62), 5.548 (0.98), 5.552 (0.95), 5.558 (0.59), 5.563 (0.64), 5.757 (0.45), 5.839 (2.66), 7.374 (2.09), 7.378 (2.22), 7.388 (2.04), 7.391 (2.27), 7.996 (9.61), 8.257 (1.97), 8.362 (2.35), 8.364 (2.37), 8.375 (2.17), 8.377 (2.27), 10.647 (1.83)。
中間物144  N-(4-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-6-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}嘧啶-5-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(單一立體異構體)
Figure 02_image377
用三乙胺(3.9 mL，28 mmol; CAS-RN:[121-44-8])處理N-{4-[(5-胺基-6-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}嘧啶-4-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺(參見中間物143，1.60 g，4.71 mmol)於1,4-二㗁烷(290 ml)中之經攪拌溶液。將燒瓶抽空且用氬氣回填三次。將混合物冷卻至5℃，緩慢添加三氟乙酸酐(3.3 ml，24 mmol；CAS-RN:[407-25-0])且在室溫下攪拌混合物30分鐘。濃縮反應混合物且藉由矽膠急驟層析(梯度己烷/乙酸乙酯35-100%，二氯甲烷/乙醇0-20%)純化，得到675 mg (33%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.94 min; MS (ESIneg): m/z = 434 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.972 (0.41), 1.986 (0.71), 1.990 (0.46), 2.006 (0.51), 2.115 (16.00), 2.247 (0.59), 2.262 (0.78), 2.281 (0.75), 2.297 (0.51), 3.165 (2.02), 3.435 (0.47), 3.764 (1.28), 3.775 (1.90), 3.784 (1.17), 3.798 (2.37), 3.802 (2.00), 3.819 (1.04), 3.922 (1.24), 3.934 (1.50), 3.949 (1.15), 3.960 (0.97), 5.666 (0.59), 5.673 (0.50), 5.677 (0.91), 5.682 (0.91), 5.689 (0.47), 5.693 (0.59), 5.757 (0.59), 7.201 (2.17), 7.205 (1.99), 7.214 (2.10), 7.218 (2.06), 8.248 (2.04), 8.424 (2.29), 8.426 (2.37), 8.437 (2.17), 8.439 (2.22), 8.827 (7.36), 10.740 (1.75), 11.647 (2.33)。
中間物145  2,2,2-三氟-N-{4-[4-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}乙醯胺(單一立體異構體)
Figure 02_image379
在密封管中，將N-(4-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-6-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}嘧啶-5-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(參見中間物144，605 mg，1.24 mmol)、2-溴吡啶(177 µl，1.9 mmol；CAS-RN:[109-04-6])、肆(三苯膦)鈀(71.4 mg，61.8 µmol；CAS-RN:[14221-01-3])及碳酸銫(1.21 g，3.71 mmol；CAS-RN:[534-17-8])於乙腈(6.9 ml)中之混合物抽空且用氬氣回填三次。在100℃加熱反應混合物4.5小時。用水稀釋混合物且用二氯甲烷與甲醇之混合物萃取。濃縮有機層，乾燥且藉由矽膠急驟層析，梯度二氯甲烷/乙醇0-35%純化，得到193.0 mg (90%純度，30%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.82 min; MS (ESIneg): m/z = 469 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.74 (s, 1H), 12.11 (br s, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.45 (d, 1H), 8.43-8.40 (m, 1H), 8.19-8.16 (m, 1H), 8.14 (dt, 1H), 7.88 (td, 1H), 7.39 (dd, 1H), 7.27 (ddd, 1H), 5.87 (ddt, 1H), 4.07-3.91 (m, 3H), 3.83 (td, 1H), 2.44-2.30 (m, 1H), 2.26-2.14 (m, 1H)。
中間物146  4-[4-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-胺(單一立體異構體)
Figure 02_image381
向2,2,2-三氟-N-{4-[4-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}乙醯胺(參見中間物145，190 mg，404 µmol)於甲醇(29 ml)中之經攪拌溶液中添加氫氧化鈉水溶液(4.0 mL，1.0 M，4.0 mmol；CAS-RN:[1310-73-2])且在50℃攪拌混合物2 h。濃縮混合物且藉由胺基矽膠急驟層析，梯度二氯甲烷/乙醇0-20%純化，得到151 mg (100%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.58 min; MS (ESIneg): m/z = 373 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.52 (br s, 1H), 8.51-8.41 (m, 2H), 7.97 (dt, 1H), 7.87 (dd, 1H), 7.86-7.82 (m, 1H), 7.25 (ddd, 1H), 6.64-6.58 (m, 1H), 6.50 (dd, 1H), 6.00 (s, 2H), 5.83 (td, 1H), 4.05-3.92 (m, 3H), 3.83 (td, 1H), 2.41-2.29 (m, 1H), 2.22-2.11 (m, 1H)。
中間物147  4-(2,2-二氟乙氧基)-3-硝基吡啶
Figure 02_image383
將2,2-二氟乙-1-醇(1.4 ml，23 mmol)溶解於THF (60 ml)中且添加氫化鈉(908 mg，60%純度，22.7 mmol；CAS-RN:[7646-69-7])。在室溫下攪拌混合物30 min，隨後添加4-氯-3-硝基吡啶(3.00 g，18.9 mmol)且再攪拌16 h。將反應混合物用水稀釋且用乙酸乙酯萃取三次。合併有機層，分離，經疏水性濾紙乾燥，濃縮且藉由矽膠急驟層析，梯度己烷/乙酸乙酯30-100%純化，得到3.49 g (90%純度，81%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.83 min; MS (ESIpos): m/z = 205 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.03 (s, 1H), 8.73 (d, 1H), 7.53 (d, 1H), 6.45 (tt, 1H), 4.67 (td, 2H).
中間物148  4-(2,2-二氟乙氧基)吡啶-3-胺
Figure 02_image385
將4-(2,2-二氟乙氧基)-3-硝基吡啶(參見中間物147，6.19 g，30.3 mmol)溶解於乙醇(190 ml)中且添加鈀/碳(3.23 g，10%純度，03 mmol；CAS-RN:[7440-05-3])。在氫氣氛圍下攪拌混合物四小時。過濾混合物且減壓濃縮濾液至乾燥，得到5.09 g (85%純度，82%產率)呈粗產物形式之標題化合物，其不經進一步純化即使用。 LC-MS (方法2): R t= 0.60 min; MS (ESIpos): m/z = 175 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.91 (s, 1H), 7.75 (d, 1H), 6.93 (d, 1H), 6.40 (tt, 1H), 5.40-4.64 (m, 2H), 4.39 (td, 2H)。
中間物149  2-溴-4-(2,2-二氟乙氧基)吡啶-3-胺
Figure 02_image387
將4-(2,2-二氟乙氧基)吡啶-3-胺(參見中間物148，2.50 g，90%純度，12.9 mmol)溶解於乙酸(6.2 ml)中，冷卻至5℃且緩慢添加溴-1,4-二㗁烷複合物(3.36 g，13.6 mmol；CAS-RN:[15481-39-7])。在保持溫度的情況下，攪拌混合物1.5 h。濃縮反應混合物，用碳酸氫鈉飽和水溶液鹼化且用乙酸乙酯萃取三次。有機層經疏水性濾紙乾燥，濃縮且藉由矽膠急驟層析，梯度己烷/乙酸乙酯20-50%純化，得到950 mg標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.82 min; MS (ESIpos): m/z = 253 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.59 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 6.42 (tt, 1H), 4.98 (s, 2H), 4.44 (td, 2H)。
中間物150  N-(4-{[3-胺基-4-(2,2-二氟乙氧基)吡啶-2-基]乙炔基}吡啶-2-基)乙醯胺
Figure 02_image389
將2-溴-4-(2,2-二氟乙氧基)吡啶-3-胺(參見中間物149，1.66 g，6.58 mmol)、N-(4-乙炔基吡啶-2-基)乙醯胺(2.11 g，13.2 mmol，CAS-RN: [1445876-40-3])、碘化銅(I)(125 mg，658 µmol，CAS-RN:[7681-65-4]) X-Phos (313 mg，658 µmol，CAS-RN: [564483-18-7])，X-Phos-Pd-3G (278 mg，329 µmol，CAS-RN: [1445085-55-1])及三甲胺(7.1 mL，51 mmol；CAS-RN:[121-44-8])於THF (7.1 ml)中之混合物抽空且用氬氣回填三次。在80℃加熱反應混合物2.5小時。將反應混合物倒入氨水(33%純度)中，且用二氯甲烷與甲醇之混合物萃取。將有機層用半飽和鹽水洗滌，經疏水性濾紙乾燥，濃縮且藉由矽膠急驟層析，梯度二氯甲烷/乙醇0-15%純化，得到1.70 g (78%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.70 min; MS (ESIpos): m/z = 333 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.63 (s, 1H), 8.35 (dd, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.35 (dd, 1H), 7.00 (d, 1H), 6.45 (tt, 1H), 5.41 (s, 2H), 4.45 (td, 2H), 2.11 (s, 3H)。
中間物151  N-(4-{[4-(2,2-二氟乙氧基)-3-(2,2,2-三氟乙醯胺基)吡啶-2-基]乙炔基}吡啶-2-基)-2,2,2-三氟乙醯胺
Figure 02_image391
用三乙胺(4.3 ml，31 mmol；CAS-RN:[121-44-8])處理N-(4-{[3-胺基-4-(2,2-二氟乙氧基)吡啶-2-基]乙炔基}吡啶-2-基)乙醯胺(參見中間物150，1.70 g，5.12 mmol)於1,4-二㗁烷(310 ml)中之經攪拌溶液。將燒瓶抽空且用氬氣回填三次。使混合物冷卻至5天，緩慢添加三氟乙酸酐(3.6 ml，26 mmol；CAS=RN:[407-25-0])。將混合物在室溫下攪拌30 min且接著在旋轉式蒸發器上在50℃下(在無真空下)旋轉。濃縮反應混合物且藉由矽膠急驟層析，梯度己烷/乙酸乙酯30-100%純化，得到2.19 g (89%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 1.13 min; MS (ESIneg): m/z = 481 [M-H] -¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.154 (4.77), 1.171 (10.03), 1.189 (4.79), 1.907 (2.27), 1.986 (16.00), 2.112 (1.97), 2.518 (3.00), 2.523 (2.01), 3.565 (0.69), 3.999 (1.04), 4.017 (3.23), 4.034 (3.25), 4.052 (1.08), 4.524 (2.64), 4.532 (2.80), 4.561 (5.44), 4.569 (5.64), 4.597 (2.66), 4.605 (2.38), 6.233 (0.89), 6.241 (1.90), 6.249 (0.78), 6.368 (1.76), 6.376 (3.91), 6.384 (1.71), 6.502 (0.76), 6.511 (1.61), 6.519 (0.78), 7.366 (5.23), 7.369 (5.43), 7.378 (5.25), 7.381 (5.62), 7.421 (8.14), 7.436 (8.42), 8.071 (6.98), 8.073 (9.49), 8.076 (7.30), 8.544 (0.71), 8.553 (5.64), 8.558 (11.23), 8.566 (5.38), 8.572 (9.63), 11.438 (8.45), 12.238 (1.80)。
中間物152  N-{4-[7-(2,2-二氟乙氧基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2,2,2-三氟乙醯胺
Figure 02_image393
在密封管中，將N-(4-{[4-(2,2-二氟乙氧基)-3-(2,2,2-三氟乙醯胺基)吡啶-2-基]乙炔基}吡啶-2-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(參見中間物151，2.00 g，4.15 mmol)、2-溴吡啶(590 µl，6.2 mmol；CAS-RN:[109-04-6])、肆(三苯膦)鈀(240 mg，207 µmol；CAS-RN:[14221-01-3])及碳酸銫(4.05 g，12.4 mmol；CAS-RN:[534-17-8]於乙腈(23 ml)中之混合物抽空且用氬氣回填三次。在100℃加熱反應混合物8小時。用水(8.0 ml)稀釋混合物且在80℃攪拌30 min。藉由過濾收集沈澱，得到940 mg (61%產率)呈粗產物形式之標題化合物，其不經進一步純化即使用。 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.30 (s, 1H), 12.19-11.99 (m, 1H), 8.44-8.38 (m, 2H), 8.36 (d, 1H), 8.20-8.14 (m, 2H), 7.87 (td, 1H), 7.37 (dd, 1H), 7.25 (ddd, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.52 (tt, 1H), 4.66 (td, 2H)。
中間物153  4-[7-(2,2-二氟乙氧基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺
Figure 02_image395
向N-{4-[7-(2,2-二氟乙氧基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2,2,2-三氟乙醯胺(參見中間物152，182 mg，393 µmol)於甲醇(20 ml)中之經攪拌溶液中添加氫氧化鈉水溶液(3.9 ml，1.0 M，3.9 mmol；CAS-RN:[1310-73-2])且在50℃攪拌混合物2 h。濃縮混合物且用水稀釋。沈澱係藉由過濾收集且真空乾燥，得到136 mg (95%純度，90%產率)呈粗產物形式之標題化合物，其不經進一步純化即使用。 LC-MS (方法1): R t= 0.46 min; MS (ESIpos): m/z = 368 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.232 (0.64), 2.076 (0.47), 2.332 (1.02), 2.518 (5.09), 2.522 (3.29), 2.673 (1.08), 3.159 (0.49), 3.172 (0.49), 4.583 (3.26), 4.592 (3.49), 4.619 (6.63), 4.628 (6.69), 4.655 (3.40), 4.664 (3.11), 5.759 (1.57), 5.934 (16.00), 6.344 (1.63), 6.353 (3.43), 6.362 (1.48), 6.480 (11.87), 6.483 (10.36), 6.489 (8.55), 6.494 (9.86), 6.497 (11.69), 6.620 (14.43), 6.634 (1.77), 6.951 (6.02), 6.964 (6.11), 7.209 (3.93), 7.212 (4.01), 7.221 (4.25), 7.224 (4.74), 7.228 (4.80), 7.230 (4.33), 7.240 (4.31), 7.242 (4.16), 7.796 (3.99), 7.801 (3.99), 7.816 (7.21), 7.820 (7.48), 7.832 (12.92), 7.839 (5.67), 7.844 (11.93), 8.005 (8.84), 8.024 (7.13), 8.283 (8.87), 8.297 (8.55), 8.445 (6.08), 8.447 (6.55), 8.449 (7.19), 8.452 (6.14), 8.457 (6.20), 8.459 (6.75), 8.461 (6.49), 8.464 (5.56), 12.089 (6.81)。
中間物154  4-氯-6-(2,2-二氟乙氧基)嘧啶-5-胺
Figure 02_image397
將2,2-二氟乙-1-醇(2.3 mL，37 mmol；CAS-RN:[359-13-7])溶解於THF (50 ml)中且添加氫化鈉(1.59 g，60%純度，39.6 mmol；CAS-RN:[7646-69-7])。在室溫下攪拌混合物30 min，隨後添加4,6-二氯嘧啶-5-胺(5.0 g，30.5 mmol；CAS-RN:[5413-85-4])且再攪拌16 h。將反應混合物用水稀釋且用乙酸乙酯萃取三次。合併有機層，分離，經疏水性濾紙乾燥，濃縮且藉由矽膠急驟層析，梯度己烷/乙酸乙酯30-100%純化，得到5.20 g (81%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.85 min; MS (ESIpos): m/z = 210 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.93 (s, 1H), 6.40 (tt, 1H), 5.50 (s, 2H), 4.67 (td, 2H)。
中間物155  N-(4-{[5-胺基-6-(2,2-二氟乙氧基)嘧啶-4-基]乙炔基}吡啶-2-基)乙醯胺
Figure 02_image399
將4-氯-6-(2,2-二氟乙氧基)嘧啶-5-胺(中間物154，4.20 g，20.0 mmol)、N-(4-乙炔基吡啶-2-基)乙醯胺(6.42 g，40.1 mmol，CAS-RN: [1445876-40-3])、碘化銅(I)(382 mg，2.00 mmol，CAS-RN:[7681-65-4])、X-Phos (955 mg，2.00 mmol，CAS-RN: [564483-18-7])，X-Phos-Pd-3G (848 mg，1.00 mmol，CAS-RN: [1445085-55-1])及三甲基胺(11 mL，80 mmol；CAS-RN:[121-44-8])於THF (58 ml)中之混合物抽空且用氬氣回填三次。在80℃加熱反應混合物1.5 h。反應混合物直接藉由矽膠急驟層析，梯度己烷/乙酸乙酯30-100%純化，得到3.19 g (48%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.93 min; MS (ESIpos): m/z = 334 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.65 (s, 1H), 8.38 (dd, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.40 (dd, 1H), 6.43 (tt, 1H), 5.93 (s, 2H), 4.68 (td, 2H), 2.11 (s, 3H)。
中間物156  N-[4-(2,2-二氟乙氧基)-6-{[2-(2,2,2-三氟乙醯胺基)吡啶-4-基]乙炔基}嘧啶-5-基]-2,2,2-三氟乙醯胺
Figure 02_image401
在氬氣下，用N,N-二異丙基乙胺(12 mL，67 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])處理含N-(4-{[5-胺基-6-(2,2-二氟乙氧基)嘧啶-4-基]乙炔基}吡啶-2-基)乙醯胺(參見中間物155，3.19 g，9.57 mmol)之乙腈(250 ml)，隨後用三氟乙酸酐(6.8 mL，48 mmol；CAS-RN:[407-25-0])進行處理。在室溫下攪拌混合物45 min。濃縮反應混合物且藉由矽膠急驟層析(梯度己烷/乙酸乙酯0-100%)純化兩次，並用二氯甲烷濕磨，得到1.09 g (24%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 1.20 min; MS (ESIneg): m/z = 482 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.29 (br s, 1H), 11.78 (s, 1H), 8.89 (s, 1H), 8.60 (d, 1H), 8.25-8.02 (m, 1H), 7.44 (dd, 1H), 6.41 (tt, 1H), 4.79 (td, 2H)。
中間物157  4-[4-(2,2-二氟乙氧基)-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-胺
Figure 02_image403
將N-[4-(2,2-二氟乙氧基)-6-{[2-(2,2,2-三氟乙醯胺基)吡啶-4-基]乙炔基}嘧啶-5-基]-2,2,2-三氟乙醯胺(參見中間物156，430 mg，890 µmol)、2-溴吡啶(130 µl，1.3 mmol；CAS-RN:[109-04-6])、肆(三苯膦)鈀(51.4 mg，44.5 µmol；CAS-RN:[14221-01-3])及碳酸銫(870 mg，2.67 mmol；CAS-RN:[534-17-8])於乙腈(16 ml)中之混合物抽空且用氬氣回填三次。在115℃加熱反應混合物3小時。用水稀釋混合物且在80℃攪拌1h。藉由過濾收集沈澱，得到185 mg (57%產率)呈粗產物形式之標題化合物，其不經進一步純化即使用。 LC-MS (方法1): R t= 0.62 min; MS (ESIneg): m/z = 367 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.71 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.49-8.45 (m, 1H), 7.95 (dt, 1H), 7.89-7.81 (m, 2H), 7.26 (ddd, 1H), 6.68-6.35 (m, 3H), 6.00 (s, 2H), 4.89 (td, 2H)。
中間物158  2-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)-5-硝基吡啶
Figure 02_image405
將含2,4-二氟-5-硝基吡啶(1.00 g，6.25 mmol)之THF (10 ml)用N,N-二異丙基乙胺(2.2 mL，12 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])處理並加熱至60℃持續6 h。濃縮反應混合物且藉由矽膠急驟層析，梯度己烷/乙酸乙酯0-100%純化，得到730 mg (54%產率)標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 0.85 min; MS (ESIpos): m/z = 217 [M+H] + 1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 3.316 (16.00), 3.328 (6.85), 3.705 (1.79), 3.709 (1.01), 3.712 (1.78), 3.714 (1.05), 3.719 (1.85), 4.440 (1.67), 4.445 (1.02), 4.448 (1.77), 4.450 (1.04), 4.455 (1.60), 7.306 (4.04), 8.810 (3.40)。
中間物159  6-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)吡啶-3-胺
Figure 02_image407
將2-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)-5-硝基吡啶(參見中間物158，730 mg，3.38 mmol)溶解於乙醇(21 ml)及二氯甲烷(5.5 ml)之混合物中。添加鈀/碳(359 mg，10%純度，338 µmol；CAS-RN:[7440-05-3])且在氫氣氛圍下攪拌混合物5小時。過濾混合物且減壓濃縮濾液至乾燥，得到596 mg (95%產率)呈粗產物形式之標題化合物，其不經進一步純化即使用。 LC-MS (方法2): R t= 0.62 min; MS (ESIpos): m/z = 187 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.035 (0.05), 1.052 (0.13), 1.070 (0.06), 1.232 (0.05), 2.332 (0.08), 2.518 (0.40), 2.522 (0.25), 2.673 (0.09), 3.135 (0.07), 3.330 (16.00), 3.487 (0.07), 3.684 (1.29), 3.691 (0.96), 3.695 (1.38), 3.700 (0.96), 3.706 (1.47), 4.192 (1.37), 4.199 (0.87), 4.204 (1.32), 4.207 (0.87), 4.215 (1.27), 4.686 (1.18), 6.648 (1.56), 6.650 (1.56), 7.380 (1.81), 7.383 (1.70)。
中間物160  2-氟-5-肼基-4-(2-甲氧基乙氧基)吡啶
Figure 02_image409
將6-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)吡啶-3-胺(參見中間物159，596 mg，3.20 mmol)溶解於半濃度鹽酸水溶液(8.0 ml，6.0 M，48 mmol)中且冷卻至0℃。在保持該溫度的情況下逐滴添加亞硝酸鈉(221 mg，3.20 mmol；CAS-RN:[7632-00-0])於水(8.7 ml)中之溶液且攪拌混合物30分鐘。添加二水合氯化錫(II) (1.81 g，8.00 mmol；CAS-RN: [10025-69-1])於半濃鹽酸水溶液(8.0 ml，6.0 M，48 mmol)中的溶液。在0℃再攪拌反應混合物1.5小時。將混合物用氫氧化鉀水溶液(19 ml，5.0 M，96 mmol；CAS-RN: [1310-58-3])鹼化，保持溫度在0至-10℃之間。過濾懸浮液且用乙酸乙酯萃取濾液三次。有機層經乾燥且真空濃縮，得到230 mg (36%產率)呈粗產物形式之標題化合物，其不經進一步純化即使用。 LC-MS (方法2): R t= 0.66 min; MS (ESIpos): m/z = 202 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 3.308 (3.34), 3.313 (4.85), 3.334 (16.00), 3.684 (0.67), 3.692 (0.52), 3.695 (0.56), 3.699 (0.62), 3.707 (0.55), 4.193 (0.56), 4.200 (0.58), 4.204 (0.61), 4.215 (0.46), 4.688 (0.43), 6.651 (0.59), 7.380 (0.59), 7.383 (0.56)。
中間物161  5-{(2Z)-2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-2-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)吡啶
Figure 02_image411
將2-氟-5-肼基-4-(2-甲氧基乙氧基)吡啶(參見中間物160，472 mg，50%純度，1.17 mmol)及1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)乙-1-酮(CAS 656257-84-0，325 mg，1.17 mmol)溶解於乙酸乙酯(8.6 ml)中且添加含丙基膦酸酐之乙酸乙酯(770 µl，50%純度，1.3 mmol；CAS-RN:[68957-94-8])。在微波反應器中於120℃攪拌混合物15分鐘。用碳酸氫鈉飽和水溶液稀釋反應混合物且用乙酸乙酯萃取。分離有機層，乾燥，濃縮且藉由矽膠急驟層析，梯度己烷/乙酸乙酯0-100%純化，得到467 mg (86%產率)標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 1.24 min; MS (ESIpos): m/z = 460 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 3.299 (4.71), 3.313 (6.05), 3.330 (16.00), 3.684 (0.53), 3.691 (0.39), 3.695 (0.56), 3.700 (0.39), 3.706 (0.59), 3.765 (0.33), 3.772 (0.32), 3.776 (0.37), 3.781 (0.31), 3.787 (0.37), 4.192 (0.55), 4.199 (0.36), 4.204 (0.54), 4.207 (0.36), 4.215 (0.51), 4.324 (0.87), 4.383 (0.37), 4.389 (0.31), 4.394 (0.38), 4.398 (0.31), 4.405 (0.34), 4.686 (0.50), 6.648 (0.62), 6.935 (0.69), 7.319 (0.16), 7.322 (0.17), 7.331 (0.17), 7.334 (0.19), 7.338 (0.19), 7.341 (0.17), 7.350 (0.19), 7.353 (0.18), 7.380 (0.68), 7.383 (0.67), 7.615 (0.29), 7.634 (0.34), 7.829 (0.20), 7.833 (0.21), 7.848 (0.31), 7.853 (0.31), 7.867 (0.15), 7.872 (0.15), 7.967 (0.33), 7.970 (0.33), 7.980 (0.34), 7.984 (0.34), 8.089 (0.51), 8.092 (0.48), 8.162 (0.62), 8.359 (0.50), 8.372 (0.46), 8.548 (0.20), 8.550 (0.23), 8.552 (0.23), 8.554 (0.21), 8.560 (0.21), 8.562 (0.24), 8.565 (0.22), 11.200 (0.58)。
中間物162  2-(2-溴吡啶-4-基)-5-氟-7-(2-甲氧基乙氧基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶
Figure 02_image413
將5-{(2Z)-2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-2-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)吡啶(參見中間物161，467 mg，1.01 mmol)溶解於環丁碸(CAS 126-33-0，9.7 ml)中且添加二氯化鋅(152 mg，1.12 mmol；CAS-RN:[7646-85-7])。將混合物加熱至130℃且攪拌3小時。用水稀釋反應混合物且用乙酸乙酯萃取。有機層中之沈澱藉由過濾收集且真空乾燥，得到196 mg (44%產率)呈粗產物形式之標題化合物，其不經進一步純化即使用。 LC-MS (方法2): R t= 1.11 min; MS (ESIpos): m/z = 443 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.154 (2.90), 1.172 (5.87), 1.190 (2.97), 1.232 (1.69), 1.988 (11.48), 2.048 (3.11), 2.058 (2.50), 2.066 (8.10), 2.074 (2.57), 2.085 (3.31), 2.523 (10.53), 2.974 (3.38), 2.981 (1.76), 2.993 (7.36), 3.012 (3.11), 3.314 (3.11), 3.355 (16.00), 3.793 (1.49), 3.804 (1.76), 3.814 (1.62), 3.999 (0.81), 4.017 (2.43), 4.035 (2.36), 4.053 (0.81), 4.465 (1.55), 4.476 (1.76), 4.487 (1.49), 6.747 (2.30), 7.276 (0.68), 7.293 (0.81), 7.307 (0.68), 7.455 (1.28), 7.469 (1.22), 7.812 (2.36), 7.879 (0.54), 7.894 (1.08), 7.898 (1.08), 7.913 (0.68), 7.917 (0.68), 7.992 (1.76), 8.011 (1.15), 8.328 (1.76), 8.341 (1.62), 8.443 (1.08), 8.453 (1.08), 12.485 (1.42)。
中間物163  2-溴-6-氟吡啶-3-胺
Figure 02_image415
將6-氟吡啶-3-胺(4.00 g，35.7 mmol)溶解於乙酸(12 ml)中，冷卻至0℃，且逐滴添加含溴之乙酸(39 ml，1.0 M，39 mmol；CAS-RN:[7726-95-6])。在室溫下攪拌混合物1 h。將反應混合物(以1.0 g為起始物質與物料合併)溶解於二氯甲烷與甲醇之混合物中且用碳酸氫鈉飽和水溶液洗滌。用乙酸乙酯萃取水層兩次。合併之有機層經疏水性濾紙乾燥且濃縮，得到7.79 g呈粗產物形式之標題化合物，其不經進一步純化即使用。 LC-MS (方法1): R t= 0.78 min; MS (ESIpos): m/z = 191 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2.518 (3.41), 2.523 (2.55), 5.440 (13.89), 5.758 (1.71), 6.952 (10.15), 6.960 (10.05), 6.974 (11.76), 6.982 (11.80), 7.268 (14.90), 7.286 (16.00), 7.289 (12.94), 7.307 (13.10)。
中間物164  N-{4-[(3-胺基-6-氟吡啶-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image417
使2-溴-6-氟吡啶-3-胺(參見中間物163，2.00 g，10.5 mmol)、N-(4-乙炔基吡啶-2-基)乙醯胺(2.01 g，12.6 mmol，CAS 1445876-40-3)、碘化銅(I)(199 mg，1.05 mmol；CAS-RN:[7681-65-4])、二氯[雙(三苯膦)]鈀(367 mg，524 µmol；CAS-RN:[13965-03-2])及三乙胺(5.8 mL，42 mmol；CAS-RN:[121-44-8])懸浮於DMF (29 ml)中。將燒瓶抽空且用氬氣回填三次，並在80℃加熱混合物1小時。濃縮反應混合物且藉由矽膠急驟層析，梯度己烷/乙酸乙酯20-100%純化，得到1.90 g (67%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.84 min; MS (ESIpos): m/z = 271 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2.112 (16.00), 2.518 (0.87), 2.523 (0.60), 2.727 (7.18), 2.729 (7.54), 2.888 (9.08), 5.869 (2.99), 6.977 (1.29), 6.985 (1.34), 6.999 (1.49), 7.008 (1.44), 7.303 (1.51), 7.321 (1.63), 7.325 (1.52), 7.343 (1.44), 7.348 (1.70), 7.352 (1.63), 7.361 (1.68), 7.365 (1.64), 7.950 (1.12), 8.229 (1.65), 8.349 (0.75), 8.361 (0.73), 10.631 (1.64)。
中間物165  N-{2-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-6-氟吡啶-3-基}-2,2,2-三氟乙醯胺
Figure 02_image419
用N,N-二異丙基乙胺(6.9 mL，39 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])處理含N-{4-[(3-胺基-6-氟吡啶-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺(參見中間物164，2.13 g，7.88 mmol)之乙腈(20 ml)。將燒瓶抽空且用氬氣回填三次。將混合物冷卻至0℃，逐滴添加三氟乙酸酐(2.8 ml，20 mmol；CAS-RN:[407-25-0])。在保持溫度的情況下，攪拌混合物1 h。用水稀釋反應混合物且用乙酸乙酯萃取兩次。合併之有機層經疏水性濾紙乾燥且濃縮。用二氯甲烷濕磨粗產物，得到838 mg (29%產率)呈粗產物形式之標題化合物，其不經進一步純化即使用。 LC-MS (方法1): R t= 0.99 min; MS (ESIpos): m/z = 367 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.986 (0.45), 2.114 (16.00), 2.121 (4.37), 2.158 (2.20), 2.165 (0.56), 2.518 (0.53), 7.183 (2.38), 7.186 (2.32), 7.195 (2.30), 7.199 (2.40), 7.301 (0.70), 7.305 (0.56), 7.314 (0.60), 7.317 (0.70), 7.422 (1.40), 7.431 (1.37), 7.445 (1.47), 7.452 (1.41), 8.153 (1.32), 8.170 (1.52), 8.174 (1.52), 8.192 (1.35), 8.236 (2.32), 8.298 (0.46), 8.398 (0.70), 8.401 (0.80), 8.403 (2.51), 8.405 (2.58), 8.411 (0.71), 8.413 (0.80), 8.416 (2.36), 8.418 (2.41), 10.707 (2.06)。
中間物166  N-{4-[5-氟-3-(4-氟吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image421
用X-Phos-2G (180 mg，229 µmol，CAS1310584-14-5)處理N-{2-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-6-氟吡啶-3-基}-2,2,2-三氟乙醯胺(參見中間物165，838 mg，2.29 mmol)、2-溴-4-氟吡啶(470 µl，4.6 mmol；CAS-RN:[357927-50-5])於乙腈(20 ml)中之混合物，隨後用磷酸鉀(728 mg，3.43 mmol；CAS-RN:[7778-53-2])處理。將混合物抽空且用氬氣回填三次，並在105℃攪拌1.5 h。用水稀釋反應混合物且用二氯甲烷萃取兩次。合併之有機層經疏水性濾紙乾燥，濃縮且藉由矽膠急驟層析，梯度乙酸乙酯/乙醇0-5%純化，得到112 mg標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.84 min; MS (ESIpos): m/z = 366 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.44 (br s, 1H), 10.58 (s, 1H), 8.45 (dd, 1H), 8.32 (dd, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.07 (dd, 1H), 7.90 (dd, 1H), 7.25-7.14 (m, 2H), 7.03 (dd, 1H), 2.08 (s, 3H)。
中間物167  4-[5-氟-3-(4-氟吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺
Figure 02_image423
用氫氧化鋰水溶液(1.5 ml，2.0 M，3.06 mmol)處理含N-{4-[5-氟-3-(4-氟吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺(參見中間物166，112 mg，306 µmol)之THF (6.6 ml)且在75℃攪拌7h。用半濃縮碳酸氫鈉水溶液稀釋反應混合物且用乙酸乙酯萃取兩次。合併之有機層經疏水性濾紙乾燥，濃縮且藉由胺基矽膠急驟層析，梯度二氯甲烷/乙醇0-30%純化，得到80.5 mg (80%純度，65%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.74 min; MS (ESIpos): m/z = 324 [M+H] + 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6, 22ºC): δ = 12.29 (br s, 1H), 8.51 (dd, J = 9.4, 5.8 Hz, 1H), 7.98-8.05 (m, 1H), 7.92 (dd, J = 5.3, 0.8 Hz, 1H), 7.83 (dd, J = 10.9, 2.5 Hz, 1H), 7.21 (ddd, J = 8.8, 5.9, 2.5 Hz, 1H), 6.96-7.02 (m, 1H), 6.56-6.61 (m, 1H), 6.54 (dd, J = 5.1, 1.5 Hz, 1H), 6.04 ppm (s, 2H)。
中間物168  (2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯氯(外消旋體)
Figure 02_image425
在室溫下向(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(20.0 g，91.7 mmol)及草醯基二鹽酸鹽(24 ml，280 mmol)於二氯甲烷(100 ml)中之溶液中添加N,N-二甲基甲醯胺(1.0 ml)。在室溫下攪拌1小時之後，濃縮反應混合物，得到21.0 g呈粗產物及黃色油狀物形式之標題化合物，其不經進一步純化即使用。
中間物169  (2RS)-N-(4-溴吡啶-2-基)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image427
在室溫下向4-溴吡啶-2-胺(15.4 g，88.7 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(62 ml)於二氯甲烷(200 ml)中之溶液中添加(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯氯(參見中間物168，21.0 g，88.7 mmol)於二氯甲烷(100 ml)中之溶液。在室溫下攪拌16小時之後，濃縮反應混合物，得到殘餘物。藉由急驟管柱層析(石油醚:乙酸乙酯=1:0至9:1)純化殘餘物，得到16.5 g (50%產率)呈黃色油狀物之標題化合物。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3): δ [ppm] = 8.38 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.95 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.23-7.19 (m, 2H), 7.14-7.13 (m, 1H), 7.01-6.96 (m, 2H), 5.88-5.58 (m, 1H), 3.70 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 2.79-2.63 (m, 1H), 2.22-1.98 (m, 1H)。
中間物170  (2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[(三甲基矽烷基)乙炔基]吡啶-2-基}丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image429
在氮氣氛圍下，於室溫向(2RS)-N-(4-溴吡啶-2-基)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(參見中間物169，13.3 g，35.6 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(150 ml)中之溶液中添加乙炔基(三甲基)矽烷(10 ml，71 mmol)、三甲胺(30 ml)、二氯雙(三苯膦)鈀(II) (2.50 g，3.56 mmol)及碘化銅(I)(1.36 g，7.13 mmol)。在氮氣氛圍下於60℃攪拌1小時之後，將混合物倒入水中且用乙酸乙酯萃取。有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由急驟管柱層析(石油醚:乙酸乙酯=1:0至9:1)純化，得到13.4 g (96%產率)呈黃色油狀物之標題化合物。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ): δ [ppm] = 10.98 (s, 1H), 8.29 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.48-7.41 (m, 2H), 7.20-7.15 (m, 2H), 7.13-7.11 (m, 1H), 6.17-5.89 (m, 1H), 4.19-4.16 (m, 1H), 2.75-2.70 (m, 1H), 2.23-2.18 (m, 1H), 0.24 (s, 9H)。
中間物171  (2RS)-N-(4-乙炔基吡啶-2-基)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image431
在25℃向(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[(三甲基矽烷基)乙炔基]吡啶-2-基}丁醯胺(參見中間物170，4.40 g，11.3 mmol)於四氫呋喃(50 ml)中之溶液中添加氟化四正丁基銨(17 ml，1.0 M，17 mmol)。在室溫下攪拌1小時之後，濃縮反應混合物獲得殘餘物。殘餘物藉由急驟管柱層析(石油醚:乙酸乙酯=1:0至9:1)純化，得到3.4 g (95%產率)呈黃色固體之標題化合物。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ): δ [ppm] = 10.99 (s, 1H), 8.31 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.49-7.46 (m, 2H), 7.20-7.15 (m, 3H), 6.17-5.88 (m, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.21-4.17 (m, 1H), 2.81-2.66 (m, 1H), 2.29-2.14 (m, 1H)。
中間物172  (2RS)-N-{4-[(4-胺基-6-氯嗒𠯤-3-基)乙炔基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image433
用氮氣吹掃(2RS)-N-(4-乙炔基吡啶-2-基)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(參見中間物171，2.00 g，6.28 mmol)、3,6-二氯嗒𠯤-4-胺(937 mg，5.71 mmol)、二氯雙(三苯膦)鈀(II) (120 mg，0.171 mmol)、碘化銅(I)(54.4 mg，0.286 mmol)及三乙胺(4.0 mL，29 mmol)於乙腈(20 ml)中之混合物。在60℃攪拌16小時之後，將混合物冷卻至室溫，倒入水中且用乙酸乙酯萃取。有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由急驟管柱層析(石油醚:乙酸乙酯=9:1至3:2)純化，得到770 mg (92%純度，25%產率)呈黃色固體之標題化合物。 LC-MS (方法C): R t= 0.907 min; MS (ESIpos): m/z = 446.1 [M+H] +。
中間物173  (2RS)-N-(4-{[6-氯-4-(2,2,2-三氟乙醯胺基)嗒𠯤-3-基]乙炔基}吡啶-2-基)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image435
在0℃向(2RS)-N-{4-[(4-胺基-6-氯嗒𠯤-3-基)乙炔基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(參見中間物172，670 mg，92%純度，1.39 mmol)及三甲胺(0.770 mL，5.6 mmol)於二氯甲烷(20 ml)中之懸浮液中添加三氟乙酸酐(0.59 ml，4.2 mmol)。在0℃攪拌0.5小時後，將水添加至混合物中。分離反應混合物且藉由急驟管柱層析(石油醚:乙酸乙酯=9:1至4:1)純化有機相，得到550 mg (95%純度，69%產率)呈黃色油狀物之標題化合物。 LC-MS (方法 E): R t= 0.946 min; MS (ESIpos): m/z = 276.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ [ppm] = 8.53 (d, J= 4.0 Hz, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.29 (d, J= 4.4 Hz, 1H), 7.99-7.90 (m, 2H), 7.83 (s, 1H),7.46-7.42 (m, 3H), 7.16-7.14 (m, 1H), 7.12-7.07 (m, 2H), 5.98-5.69 (m, 1H), 4.06-4.03 (m, 1H), 2.72-2.70 (m, 1H), 2.24-2.19 (m, 1H)。
中間物174  4-[2-(2-胺基吡啶-4-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-7-基]哌𠯤-1-甲酸三級丁酯
Figure 02_image437
在130℃攪拌N-{4-[7-氯-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺(參見中間物61，300 mg，0.82 mmol)及哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(461 mg，2.47 mmol)於1-甲基-2-吡咯啶酮(5.0 ml)中之混合物72小時。混合物藉由逆相(儀器：Agela HP1000；管柱：Welch Ultimate XB_C18  150*400 mm 20/40 µm；溶離劑A：水，溶離劑：B：乙腈；梯度：0-35 min 0-50% B；流速：35 ml/min；溫度：室溫；偵測器：UV 220/254 nm)純化，得到250 mg (64%產率)呈黃色固體之標題化合物。 LC-MS (方法C): R t= 0.828 min; MS (ESIpos): m/z = 472.2 [M+H] +。
中間物175  4-[2-(2-{[(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯基]胺基}吡啶-4-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-7-基]哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(外消旋體)
Figure 02_image439
在室溫下向(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(231 mg，1.06 mmol)及草醯基二鹽酸鹽(0.140 ml，1.6 mmol)於二氯甲烷(10 ml)中之溶液中添加N,N-二甲基甲醯胺(0.01 ml)。在室溫下攪拌30分鐘之後，濃縮反應混合物，得到殘餘物。將殘餘物用二氯甲烷(5 ml)溶解且在0℃添加至4-[2-(2-胺基吡啶-4-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-7-基]哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(參見中間物174，250 mg，0.530 mmol及N,N-二異丙基乙胺(0.460 mL，2.7 mmol)於二氯甲烷(5 ml)中之溶液中。在室溫下攪拌1小時之後，用水稀釋反應混合物且用乙酸乙酯萃取。有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。藉由急驟管柱層析(10%甲醇/乙酸乙酯:石油醚=0:1至1:0)純化殘餘物，得到160 mg (99%純度，44%產率)呈黃色固體之標題化合物。 LC-MS (方法 I): R t= 1.137 min; MS (ESIpos): m/z = 672.5 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ [ppm] = 8.51 (d, J= 4.4 Hz, 1H), 8.21-8.16 (m, 3H), 7.86 (m, 1H), 7.62 (m, 1H), 7.46-7.42 (m, 2H), 7.34 (m, 1H), 7.12-7.08 (m, 3H), 7.39-7.35 (m, 2H), 6.82-6.81 (m, 1H), 5.98-5.69 (m, 1H), 3.71 (s, 2H), 4.06-4.02 (m, 1H), 3.73 (m, 4H), 3.49-3.41 (m, 3H), 2.73-2.72 (m, 1H), 2.25-2.20 (m, 1H), 1.51 (s, 9H)。
中間物176  4-[2-(2-{[(2R或S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯基]胺基}吡啶-4-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-7-基]哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(對映異構體1)
Figure 02_image441
外消旋化合物(參見中間物175，160 mg，238 µmol)藉由製備型SFC (儀器：ACSWH-PREP-SFC-D；管柱：DAICEL CHIRALPAK AD(250 mm*30 mm,10 µm)；移動相；用於超臨界二氧化碳之相A，用於甲醇(0.1%氨水)之相B；等度溶離：30%相B (30%相A)；流速：60 ml/min；循環時間：8分鐘；背壓：100巴以使二氧化碳保持超臨界流動；溫度：室溫；偵測器：UV 220 nm)分離成對映異構體，得到呈黃色固體之 對映異構體 1(參見中間物176，第一溶離，SFC滯留時間：1.257 min，70 mg，99%純度)及呈黃色固體之 對映異構體 2(參見中間物177，第二溶離，SFC滯留時間：2.028 min，70 mg，99%純度)。 LC-MS (方法C): R t= 0.898 min; MS (ESIpos): m/z = 672.3 [M+H] +。
中間物177  4-[2-(2-{[(2R或S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯基]胺基}吡啶-4-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-7-基]哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(對映異構體2)
Figure 02_image443
關於外消旋標題化合物之製備，參見中間物175。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見中間物176)分離對映異構體，得到呈黃色固體之標題化合物(70 mg，99%純度)。 LC-MS (方法C): R t= 0.898 min; MS (ESIpos): m/z = 672.3 [M+H] +。
中間物178  5-胺基-2-氟吡啶-4-甲酸甲酯
Figure 02_image445
在25℃向5-胺基-2-氟吡啶-4-羧酸(20.0 g，128 mmol)於乙酸乙酯(200 ml)及甲醇(200 ml)中之溶液中添加(重氮甲基)三甲基矽烷(130 mL，2.0 M於己烷中，260 mmol)。在室溫下攪拌1.5小時之後，濃縮反應混合物，得到殘餘物。藉由急驟管柱層析(石油醚:乙酸乙酯=1: 1)純化殘餘物，得到呈黃色固體之5-胺基-2-氟異煙鹼酸甲酯(17.8 g，82%產率)。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ): δ [ppm] = 7.86 (s, 1H), 7.21 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 6.51 (s, 2H), 3.85 (s, 3H)。
中間物179  3-胺基-2-溴-6-氟吡啶-4-甲酸甲酯
Figure 02_image447
在室溫下，向5-胺基-2-氟吡啶-4-甲酸甲酯(參見中間物178，17.8 g，105 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(200 ml)中之溶液中添加N-溴代丁二醯亞胺(55.9 g，314 mmol)。在室溫下攪拌16小時之後，用水稀釋反應混合物且用乙酸乙酯萃取。有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。藉由急驟層析(石油醚:乙酸乙酯=1:1)純化殘餘物，得到呈黃色固體之3-胺基-2-溴-6-氟異菸鹼酸甲酯(12.64 g，49%產率)。 LC-MS (方法A): R t= 0.996 min; MS (ESIpos): m/z = 249.0 [M+H] + .
中間物180  3-胺基-2-[(2-{[(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯基]胺基}吡啶-4-基)乙炔基]-6-氟吡啶-4-甲酸甲酯(外消旋體)
Figure 02_image449
在25℃用氮氣吹掃3-胺基-2-溴-6-氟吡啶-4-甲酸甲酯(參見中間物179，1.30 g，5.22 mmol)、(2RS)-N-(4-乙炔基吡啶-2-基)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(參見中間物171，1.66 g，5.22 mmol)、二氯雙(三苯膦)鈀(II) (183 mg，0.261 mmol)、碘化銅(I) (199 mg，1.04 mmol)及三甲胺(3.0 mL，22 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(15 ml)中之混合物。在氮氣下於80℃攪拌2小時之後，用水稀釋反應混合物且用乙酸乙酯萃取。有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。藉由急驟管柱層析(石油醚:乙酸乙酯=1:1)純化殘餘物，得到2.2 g (87%產率)呈黃色油狀物之標題化合物。 LC-MS (方法C): R t= 1.007 min; MS (ESIpos): m/z = 486.9 [M+H] + .
中間物181  2-[(2-{[(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯基]胺基}吡啶-4-基)乙炔基]-6-氟-3-(2,2,2-三氟乙醯胺基)吡啶-4-甲酸甲酯(外消旋體)
Figure 02_image451
在0℃向3-胺基-2-[(2-{[(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯基]胺基}吡啶-4-基)乙炔基]-6-氟吡啶-4-甲酸甲酯(參見中間物180，4.00 g，8.22 mmol)於二氯甲烷(40 ml)中之溶液中添加三氟乙酸酐(5.8 mL，41 mmol)。在室溫下攪拌5分鐘之後，用水淬滅反應混合物且分離。有機相直接藉由急驟管柱層析(石油醚:乙酸乙酯=1:0至0:1)純化，得到4 g (66%純度，55%產率)呈黃色固體之標題化合物。 LC-MS (方法C): R t= 0.986 min; MS (ESIpos): m/z = 583.0 [M+H] + .
中間物182  2-(2-{[(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯基]胺基}吡啶-4-基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-7-甲酸甲酯(外消旋體)
Figure 02_image453
用氮氣吹掃2-[(2-{[(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯基]胺基}吡啶-4-基)乙炔基]-6-氟-3-(2,2,2-三氟乙醯胺基)吡啶-4-甲酸甲酯(參見中間物181、4.00 g，6.87 mmol)、2-碘吡啶(1.69 g，8.24 mmol)、肆(三苯膦)鈀(0) (397 mg，0.343 mmol)及碳酸鉀(2.85 g，20.6 mmol)於乙腈(40 ml)中之混合物。在氮氣下於100℃攪拌16小時之後，用水稀釋反應混合物且用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。藉由急驟管柱層析(10%甲醇/乙酸乙酯:石油醚=0:1至1:0)純化殘餘物，得到粗產物。粗產物藉由製備型TLC (石油醚:乙酸乙酯=1:2)進一步純化兩次，得到263 mg呈黃色固體之標題化合物。 LC-MS (方法C): R t= 0.873 min; MS (ESIpos): m/z = 564.2 [M+H] + .
中間物183  (4-溴吡啶-2-基)胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image455
將4-溴吡啶-2-胺(5.00 g，28.9 mmol，1 eq、CAS-RN: [84249-14-9])溶解於150 mL DCM中。依序添加三乙胺(6.03 mL，43.3 mmol，1.5 eq，CAS-RN: [121-44-8])、二甲酸二-三級丁酯(6.31 g，28.9 mmol，1 eq，CAS-RN: [24424-99-5])及4-二甲基胺基吡啶(176.5 mg，1.44 mmol，0.05 eq，CAS-RN: [1122-58-3])。使反應混合物在25℃下攪拌12 h。反應混合物藉由添加50 mL NH 4Cl飽和水溶液淬滅，且接著用DCM (50 mL×3)萃取。將合併之有機層用鹽水(50 mL×3)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且真空濃縮。藉由急驟管柱層析(ISCO®；60g SepaFlash®矽膠急驟管柱，0至5%乙酸乙酯/石油醚之溶離劑，梯度@ 50 mL/min)純化殘餘物，得到＞95%純度之目標化合物：6.5 g，21.3 mmol，74%產率。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] δ = 10.08 (s, 1H), 8.14 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 8.04 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.27 (dd, J= 1.6, 5.4 Hz, 1H), 1.47 (s, 9H)。
中間物184  {4-[(三甲基矽烷基)乙炔基]吡啶-2-基}胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image457
將N-(4-溴-2-吡啶基)胺基甲酸三級丁酯(1.00 g，3.66 mmol，1 eq)、乙炔基(三甲基)矽烷(576.4 mg，5.49 mmol，1.5 eq，CAS-RN: [1066-54-2])、碘化銅(I)(27.9 mg，0.146 mmol，0.04 eq，CAS-RN: [7681-65-4])及雙(三苯膦)二氯化鈀(II)(51.4 mg，0.073 mmol，0.02 eq，CAS-RN: [13965-03-2])溶解於10 mL三乙胺中。將混合物置於氮氣氛圍下，且在75℃下攪拌2 h。隨後經由矽藻土過濾反應物，且真空濃縮濾液。粗物質不經進一步純化即使用。回收1.00 g呈紅色油狀物之粗物質。
中間物185  (4-乙炔基吡啶-2-基)胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image459
將N-[4-(2-三甲基矽烷基乙炔基)-2-吡啶基]胺基甲酸三級丁酯(1.00g、3.44 mmol，1 eq)溶解於10 mL THF中。經由注射器添加8.61 mL的1 M TBAF於THF (8.61 mmol，2.5 eq，CAS-RN: [429-41-4])中之溶液，且在25℃攪拌混合物2 h。反應混合物藉由添加10 mL NH4Cl飽和溶液淬滅，且接著用EtOAc (10 mL×3)萃取。合併之有機層用鹽水(10 mL×5)洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且真空濃縮。藉由正相矽膠急驟管柱層析(SiO2，石油醚/乙酸乙酯=10/1至5/1)純化粗殘餘物，得到94%純度之目標化合物：760 mg，3.27 mmol，95%產率。 LC-MS (方法3): R t= 0.533 min; MS (ESIpos): m/z = 163.1 [M+H] +
中間物186  {4-[(3-胺基吡啶-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image461
將N-(4-乙炔基-2-吡啶基)胺基甲酸三級丁酯(0.70 g，3.21 mmol，1 eq)及2-溴吡啶-3-胺(0.665 g，3.85 mmol，1.2 eq，CAS-RN: [39856-58-1])溶解於14 mL DMF中。依序添加碘化銅(I) (61.1 mg，0.320 mmol，0.1 eq，CAS-RN: [7681-65-4])、雙(三苯膦)二氯化鈀(II) (225 mg，0.320 mmol，0.1 eq，CAS-RN: [13965-03-2])及三乙胺(4.46 mL，32.07 mmol，10 eq，CAS-RN: [121-44-8])。在70℃攪拌混合物12 h。反應混合物藉由添加15 mL NH4Cl飽和溶液淬滅，且接著用EtOAc (15 mL×3)萃取。合併之有機層用鹽水(15 mL×3)洗滌，經Na2SO 4乾燥，過濾且真空濃縮。藉由正相矽膠急驟管柱層析(SiO2，石油醚/乙酸乙酯=1/1)純化粗殘餘物，得到目標化合物：800 mg，2.58 mmol，80.3%產率。 LC-MS (方法3): R t= 0.374 min; MS (ESIpos): m/z = 255.1 [M+H] +
中間物187  (4-{[3-(2,2,2-三氟乙醯胺基)吡啶-2-基]乙炔基}吡啶-2-基)胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image463
將N-[4-[2-(3-胺基-2-吡啶基)乙炔基]-2-吡啶基]胺基甲酸三級酯(0.80 g，2.58 mmol，1 eq)溶解於25 mL DCM中且冷卻至0℃。添加三乙胺(0.716 mL，5.16 mmol，2 eq，CAS-RN: [121-44-8])及三氟乙酸酐(0.537 mL，3.87 mmol，1.5 eq，CAS-RN: [407-25-0])。在0℃下攪拌混合物6 h。反應混合物藉由添加30 mL NaHCO3飽和溶液淬滅，且接著用EtOAc (30 mL×3)萃取。合併之有機層用鹽水(30 mL×3)洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且真空濃縮。藉由正相矽膠急驟管柱層析(ISCO®；10 g SepaFlash®矽膠急驟管柱，0至50%乙酸乙酯/石油醚之溶離劑，梯度在50 mL/min下)純化粗殘餘物，得到目標化合物：760 mg，1.29 mmol，產率50.1%。 1H NMR (400 MHz, 6d-DMSO) δ = 11.58 (s, 1H), 10.01 (s, 1H), 8.67 - 8.61 (m, 1H), 8.34 (d, J= 5.0 Hz, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.64 - 7.55 (m, 2H), 7.10 (dd, J= 1.2, 5.2 Hz, 1H), 1.49 (s, 9H). LC-MS (方法3): R t= 0.936 min; MS (ESIpos): m/z = 456.1 [M+H] +
中間物188  4-[3-(嘧啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺
Figure 02_image465
向30 mL密封管中添加N-[4-[2-[3-[(2,2,2-三氟乙醯基)胺基]-2-吡啶基]乙炔基]-2-吡啶基]胺基甲三級丁酯(0.850 g，2.09 mmol，1 eq)及2-碘吡啶(0.268 mL，2.09 mmol，1 eq，CAS-RN: [5029-67-4])。使混合物溶解於18 mL MeCN中。隨後一次性添加Xphos-Pd-G3 (177 mg，0.209 mmol，0.1 eq，CAS-RN: [1445085-55-1])及Cs2CO3 (2.04 g，6.28 mmol，3 eq，CAS-RN: [534-17-8])且將反應置於氮氣氛圍下。在100℃攪拌混合物12 h。將反應混合物真空濃縮。藉由逆相製備型HPLC (管柱：Phenomenex Gemini 150*25mm*10um；移動相：[水(0.05% NH3H2O)-ACN]；B%: 15%-45%，10min)純化粗殘餘物，得到目標化合物：170 mg，0.531 mmol，25.4%產率。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 8.82 (d, J= 4.8 Hz, 2H), 8.35 - 8.30 (m, 1H), 7.86 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.81 (dd, J= 1.2, 8.0 Hz, 1H), 7.39 - 7.33 (m, 1H), 7.16 (dd, J= 4.6, 8.0 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 6.48 (dd, J= 1.2, 5.2 Hz, 1H), 6.40 - 6.40 (m, 1H), 6.32 (s, 1H), 5.94 (s, 2H), 1.99 (s, 2H), 1.18 (t, J= 7.2 Hz, 2H)。
中間物189  [6-氟-4-(呋喃-2-基)吡啶-3-基]胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image467
用氮氣吹掃(4-溴-6-氟吡啶-3-基)胺基甲酸三級丁指(參見中間物121，4.00 g，13.7 mmol)、呋喃-2-基硼酸(1.54 g，13.7 mmol)、甲磺酸根基(2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯)(2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (580 mg，687 µmol)及碳酸銫(13.4 g，41.2 mmol)於1,4-二㗁烷(40 ml)及水(4.0 ml)中之混合物。在氮氣下於100℃攪拌混合物16小時。用水稀釋反應混合物且用乙酸乙酯萃取混合物。有機相經無水硫酸鈉乾燥並過濾。藉由真空蒸發濃縮濾液。藉由急驟層析(石油醚:乙酸乙酯=2: 1)純化殘餘物，得到呈黃色固體之標題化合物(2.9 g，76%產率)。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ): δ [ppm] = 8.94 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.94 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.41 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.13 (t, J= 3.2 Hz, 1H), 6.75-6.73 (m, 1H), 1.40 (s, 9H)。
中間物190  {6-氟-4-[(2RS)-四氫呋喃-2-基]吡啶-3-基}胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image469
在25℃向[6-氟-4-(呋喃-2-基)吡啶-3-基]胺基甲酸三級丁酯(參見中間物189，2.90 g，10.4 mmol)於四氫呋喃(30 ml)中之溶液中添加鈀/活性炭(1.11 g，濕，10%純度，1.04 mmol)及氫氧化鈀(II) (732 mg，濕，20%純度，1.04 mmol)。在氫氣(15 psi)下於50℃攪拌16小時之後，過濾反應混合物且濃縮濾液，得到殘餘物。藉由急驟管柱層析(石油醚:乙酸乙酯=1:0至2:1)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之{6-氟-4-[(2RS)-四氫呋喃-2-基]吡啶-3-基}胺基甲酸三級丁酯(2.6 g，88%產率)。 LC-MS (方法 C): R t= 0.870 min; MS (ESIpos): m/z = 283.2 [M+H] +。
中間物191  6-氟-4-[(2RS)-四氫呋喃-2-基]吡啶-3-胺
Figure 02_image471
在室溫下將{6-氟-4-[(2S)-氧雜環戊-2-基]吡啶-3-基}胺基甲酸三級丁酯(參見中間物190，2.60 g，9.21 mmol)於三氟乙酸(6.0 ml)及二氯甲烷(20 ml)中之混合物攪拌16小時。濃縮混合物，得到殘餘物。將殘餘物用乙酸乙酯溶解，用飽和碳酸氫鈉洗滌。合併之有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到6-氟-4-[(2RS)-四氫呋喃-2-基]吡啶-3-胺(1.60 g，95%產率)。殘餘物不經進一步純化即直接用於下一步驟中。 LC-MS (方法 C): R t= 0.347 min; MS (ESIpos): m/z = 183.2 [M+H] +。
中間物192  2-溴-6-氟-4-[(2RS)-四氫呋喃-2-基]吡啶-3-胺(外消旋體)
Figure 02_image473
在室溫下向6-氟-4-[(2S)-氧雜環戊-2-基]吡啶-3-胺(參見中間物191，1.60 g，8.78 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(20 ml)中之溶液中添加N-溴代丁二醯亞胺(1.56 g，8.78 mmol)。在室溫下攪拌16小時之後，用水稀釋反應混合物且用乙酸乙酯萃取。有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。藉由急驟層析(石油醚:乙酸乙酯=1:0至1:1)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之2-溴-6-氟-4-[(2RS)-四氫呋喃-2-基]吡啶-3-胺(1.77 g，77%產率)。 LC-MS (方法 C): R t= 0.708 min; MS (ESIpos): m/z = 261.3, 263.3 [M+H] +。
中間物193  (2RS)-N-[4-({3-胺基-6-氟-4-[(2RS)-四氫呋喃-2-基]吡啶-2-基}乙炔基)吡啶-2-基]-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺
Figure 02_image475
在25℃用氮氣吹掃(2RS)-N-(4-乙炔基吡啶-2-基)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(參見中間物171，2.16 g，6.78 mmol)、2-溴-6-氟-4-[(2RS)-四氫呋喃-2-基]吡啶-3-胺(參見中間物192，1.77 g，6.78 mmol)、二氯雙(三苯膦)鈀(II) (238 mg，0.339 mmol)、碘化銅(I)(258 mg，1.36 mmol)及三甲胺(7.0 ml)於N,N-二甲基甲醯胺(20 ml)中之混合物。在氮氣下於80℃攪拌2小時之後，用水稀釋反應混合物且用乙酸乙酯萃取。有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由急驟矽膠管柱(石油醚:乙酸乙酯=1:0至1:1)純化，得到呈黃色固體之(2RS)-N-[4-({3-胺基-6-氟-4-[(2RS)-四氫呋喃-2-基]吡啶-2-基}乙炔基)吡啶-2-基]-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(2.30 g，84%純度，57%產率)。 LC-MS (方法 C): R t= 0.978 min; MS (ESIpos): m/z = 499.3 [M+H] +。
中間物194  (2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-[4-({6-氟-4-[(2RS)-四氫呋喃-2-基]-3-(2,2,2-三氟乙醯胺基)吡啶-2-基}乙炔基)吡啶-2-基]丁醯胺
Figure 02_image477
在25℃向(2RS)-N-[4-({3-胺基-6-氟-4-[(2RS)-四氫呋喃-2-基]吡啶-2-基}乙炔基)吡啶-2-基]-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(參見中間物193，1.8 g，3.6 mmol)於二氯甲烷(20 ml)中之溶液中添加三氟乙酸酐(2.6 ml，18 mmol)。在室溫下攪拌5分鐘之後，用水稀釋反應混合物且分離。有機相直接藉由急驟層析(石油醚:乙酸乙酯=0:1)純化，得到呈黃色固體之(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-[4-({6-氟-4-[(2RS)-四氫呋喃-2-基]-3-(2,2,2-三氟乙醯胺基)吡啶-2-基}乙炔基)吡啶-2-基]丁醯胺(1.55 g，93%純度，67%產率)。 LC-MS (方法 C): R t= 0.997 min; MS (ESIpos): m/z = 595.4 [M+H] +。
中間物195  1-(4-甲氧基嘧啶-5-基)肼-1,2-二甲酸二-三級丁酯
Figure 02_image479
將5-溴-4-甲氧基嘧啶(CAS：4319-85-1，1.00 g，5.29 mmol)溶解於THF (22 mL)中且冷卻至-78℃。緩慢添加1.3 M異丙基氯化鎂氯化鋰複合物於THF (CAS: 745038-86-2，4.9 ml，6.37 mmol)中之溶液。使所得混合物升溫至室溫且在Ar氛圍下攪拌3小時，接著分批添加二氮烯-1,2-二甲酸二-三級丁酯(CAS: 870-50-8，1.22 g，5.29 mmol)，同時用水浴冷卻混合物。在室溫下繼續攪拌隔夜。用飽和NH 4Cl溶液淬滅反應混合物，且用乙酸乙酯稀釋。用乙酸乙酯萃取混合物三次且將合併之有機層用NaHCO 3飽和溶液、水及鹽水洗滌。有機相經由塗有聚矽氧之濾紙過濾且減壓濃縮。藉由矽膠層析(己烷/乙酸乙酯15至80%)純化粗產物，得到1.14 g (57%產率)所需產物。 LC-MS (方法2): R t= 1.11 min; MS (ESIpos): m/z = 341 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm]: 1.35 - 1.46 (m, 18 H) 3.97 (s, 3 H) 8.45 (s, 1 H) 8.69 (s, 1 H) 9.74 (br s, 1 H)。
中間物196  5-肼基-4-甲氧基嘧啶
Figure 02_image481
使1-(4-甲氧基嘧啶-5-基)肼-1,2-二甲酸二-三級丁酯(中間物195，893 mg，2.62 mmol)懸浮於二氯甲烷(6.2 mL)中且用含HCl之二㗁烷(7.5 ml，4.0 M，30 mmol)處理，得到澄清黃色溶液，將其在Ar氛圍下於室溫攪拌。逐漸形成沈澱。在1小時之後，濾出沈澱，用二氯甲烷洗滌且在50℃真空乾燥，得到540 mg標題化合物之HCl鹽。將HCl鹽溶解於水(5 ml)中且使其通過裝載有DOWEX 1×8 200-400目Cl之陰離子型離子交換管柱，用NaOH水溶液(1 M)活化該管柱，且隨後用水洗滌直至濾液在使用之前呈pH中性。收集鹼性溶離份且藉由凍乾乾燥，得到178 mg (48%產率)呈游離鹼形式之標題化合物。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ [ppm] 3.91 (s, 3 H), 4.04 - 4.12 (m, 2 H), 6.49 (br s, 1 H), 8.08 (s, 1H), 8.12 (s, 1 H)。
中間物197  5-{-2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-4-甲氧基嘧啶
Figure 02_image483
向含5-肼基-4-甲氧基嘧啶(中間物196，213 mg，1.52 mmol)及1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)乙-1-酮(421 mg，1.52 mmol)之乙酸乙酯(11 mL)中添加丙基膦酸酐於乙酸乙酯中之溶液(CAS: 68957-94-8，994 µl， 50wt.%，1.67 mmol)，且在Ar氛圍下，於微波反應器中將混合物加熱至120℃持續15分鐘。冷卻後，用乙酸乙酯稀釋混合物且用NaHCO 3飽和溶液淬滅。將混合物用二氯甲烷萃取且將合併之有機層用水及鹽水洗滌，經由塗有聚矽氧之濾紙過濾且減壓濃縮。藉由矽膠急驟層析(乙酸乙酯/乙醇，0%-10%)純化殘餘物，得到327 mg (54%產率)標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 1.18 min; MS (ESIpos): m/z = 401 [M+H] + 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm]: 4.10 (s, 3 H), 4.38 (s, 2 H), 7.34 (ddd 1 H), 7.62 (d, 1 H), 7.86 (dt, 1 H), 7.99 (dd, 1 H), 8.11 (m, 1 H), 8.38 (d, 1 H), 8.39 (s, 1 H), 8.52 - 8.56 (m, 1 H), 8.66 (s, 1 H), 11.47 (s, 1 H)。
中間物198  6-(2-溴吡啶-4-基)-4-甲氧基-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶
Figure 02_image485
在Ar氛圍下，於170℃將5-{2-[1-(2-溴吡啶-4-基)-2-(吡啶-2-基)亞乙基]肼基}-4-甲氧基嘧啶(中間物197，320 mg，801 µmol)及氯化鋅(120 mg，882 µmol)於環丁碸(5.7 ml)中攪拌3小時。冷卻後，用乙酸乙酯稀釋反應混合物。用乙酸乙酯萃取混合物且將合併之有機層用半飽和NaCl溶液洗滌。有機相經由不透水濾紙過濾且減壓濃縮。將粗產物懸浮於二氯甲烷中且進行音波處理。濾出未溶解之沈澱且用二氯甲烷洗滌。藉由矽膠層析(己烷/乙酸乙酯0-100%，接著乙酸乙酯/乙醇0-50%)純化濾液，得到22 mg (86%純度，6%產率)標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 0.78 min; MS (ESIpos): m/z = 382 [M+H] + 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm]: 3.92 (s, 3 H), 7.16 (ddd, 1 H) 7.46 (dd, 1 H), 7.72 - 7.75 (m, 1 H), 7.79 (dt, 1 H), 7.97 (s, 1 H), 8.14 (td, 1 H), 8.23 - 8.28 (m, 1 H), 8.45 (d, 1 H), 12.24 (br s, 1 H)。
中間物199  (2RS)-4,4,4-三氟-2-(4-氟苯基)丁酸乙酯
Figure 02_image487
在-78℃下，向(4-氟苯基)乙酸乙酯(3.00 g，16.5 mmol)於四氫呋喃(25 mL)中之經攪拌溶液中添加LDA溶液(11 mL，2.0 M於THF/庚烷/乙苯中，21 mmol)。在-65℃攪拌溶液30分鐘。將溶液冷卻至-78℃且添加三氟甲烷磺酸2,2,2-三氟乙酯(4.59 g，19.8 mmol)溶解於四氫呋喃(5 mL)中之溶液。在-65℃下攪拌溶液2 h，且隨後使其升溫至0℃。添加水且用乙酸乙酯萃取混合物。將有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌，乾燥(硫酸鈉)，過濾，且真空移除溶劑。矽膠層析(梯度：己烷/乙酸乙酯5-20%)得到1.38 g (32%產率)標題化合物。 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 7.46-7.40 (m, 2H), 7.23-7.16 (m, 2H), 4.16-3.94 (m, 3H), 3.12 (dqd, 1H), 2.78 (dqd, 1H), 1.11 (t, 3H)。
中間物200  (2RS)-4,4,4-三氟-2-(4-氟苯基)丁酸
Figure 02_image489
向(2RS)-4,4,4-三氟-2-(4-氟苯基)丁酸乙酯(1.37 g，5.19 mmol)於乙醇(46 ml)中之經攪拌溶液中添加氫氧化鈉水溶液(5.2 ml，2.0 M，10 mmol)且在室溫下攪拌混合物3 h。添加鹽酸水溶液直至達到pH 3且用乙酸乙酯萃取混合物。將有機相乾燥(硫酸鈉)，過濾，且真空移除溶劑。矽膠層析(梯度：己烷/乙酸乙酯20-60%)得到1.01 g (90%純度，74%產率)標題化合物。 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 7.44-7.38 (m, 2H), 7.22-7.14 (m, 2H), 3.87 (t, 1H), 3.16-3.01 (m, 1H), 2.79-2.64 (m, 1H),  1H未經偵測到。
中間物201  4-氯-6-(2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-5-胺
Figure 02_image491
將2,2,2-三氟乙-1-醇(1.8 mL，24 mmol；CAS-RN:[75-89-8])溶解於THF (77 ml)中且添加氫化鈉(1.17 g，60%純度，29.3 mmol；CAS-RN:[7646-69-7])。在室溫下攪拌混合物10 min，添加4,6-二氯嘧啶-5-胺(4.00 g，24.4 mmol)且在室溫下再攪拌混合物64 h。用水稀釋反應混合物且用乙酸乙酯萃取。將有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌，乾燥(硫酸鈉)，過濾，且真空移除溶劑。矽膠層析(梯度：己烷/乙酸乙酯，10-60%)得到4.27 g (77%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.95 min; MS (ESIpos): m/z = 228 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 7.95 (s, 1H), 5.58 (s, 2H), 5.10 (q, 2H)。
中間物202  N-(4-{[5-胺基-6-(2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基]乙炔基}吡啶-2-基)乙醯胺
Figure 02_image493
向4-氯-6-(2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-5-胺(2.24 g，9.84 mmol)及N-(4-乙炔基吡啶-2-基)乙醯胺(3.15 g，19.7 mmol)於THF (27 mL)中之經攪拌溶液中添加三乙胺(5.5 mL，39 mmol；CAS-RN:[121-44-8])、XPhos Pd G3 (417 mg，492 µmol；CAS-RN: [1445085-55-1])、XPhos (469 mg，984 µmol；CAS-RN:[564483-18-7])及CuI (187 mg，984 µmol；CAS-RN:[7681-65-4])，且使燒瓶脫氣兩次並用氬氣回填。在70℃攪拌混合物3 h。將混合物冷卻至室溫，添加氫氧化銨水溶液(c=10%)且用二氯甲烷與甲醇之混合物(10: 1)萃取混合物。將有機相用半飽和氯化鈉溶液洗滌，乾燥(硫酸鈉)，過濾，且真空移除溶劑。矽膠層析(梯度：二氯甲烷/甲醇0-20%)得到1.13 g (90%純度，29%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.99 min; MS (ESIpos): m/z = 353 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 10.66 (s, 1H), 8.38 (dd, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.40 (dd, 1H), 5.99 (s, 2H), 5.12 (q, 2H), 2.12 (s, 3H)。
中間物203  N-{4-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-6-(2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-5-基}-2,2,2-三氟乙醯胺
Figure 02_image495
使N-(4-{[5-胺基-6-(2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基]乙炔基}吡啶-2-基)乙醯胺(1.13 g，3.20 mmol)及三乙胺(2.7 mL，19 mmol；CAS-RN:[121-44-8])於1,4-二㗁烷(80 ml)中之經攪拌溶液脫氣兩次且用氬氣回填燒瓶。使混合物冷卻至5℃，緩慢添加三氟乙酸酐(1.8 ml，13 mmol；CAS-RN:[407-25-0])且在室溫攪拌混合物2 h。添加乙酸乙酯且用水洗滌混合物兩次，乾燥(硫酸鈉)，過濾，且真空移除溶劑，得到1.48 g (95%純度，98%產率)標題化合物，其不經進一步純化即使用。 LC-MS (方法1): R t= 1.07 min; MS (ESIneg): m/z = 446 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 11.81 (s, 1H), 10.75 (s, 1H), 8.92 (s, 1H), 8.44 (dd, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.23 (dd, 1H), 5.21 (q, 2H), 2.12 (s, 3H)。
中間物204  2,2,2-三氟-N-[4-{[2-(2,2,2-三氟乙醯胺基)吡啶-4-基]乙炔基}-6-(2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-5-基]乙醯胺
Figure 02_image497
將固體N-{4-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-6-(2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-5-基}-2,2,2-三氟乙醯胺(1.48 g，95%純度，3.14 mmol)溶解於三氟乙酸酐(8.5 mL，60 mmol；CAS-RN:[407-25-0])中且在50℃攪拌混合物1 h。形成黏稠沈澱。添加無水乙腈(5 mL)，將其攪拌3 min且真空濃縮混合物，移除約90%溶劑。直接藉由矽膠層析(梯度：己烷/乙酸乙酯35-100%)純化剩餘混合物，產生固體，將該固體用二氯甲烷濕磨，得到878 mg (95%純度，53%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 1.21 min; MS (ESIpos): m/z = 502 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.30 (s, 1H), 11.84 (s, 1H), 8.94 (s, 1H), 8.60 (d, 1H), 8.15-8.10 (m, 1H), 7.46 (dd, 1H), 5.22 (q, 2H)。
中間物205  4-[7-(吡啶-2-基)-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-胺
Figure 02_image499
在微波小瓶中向2,2,2-三氟-N-[4-{[2-(2,2,2-三氟乙醯胺基)吡啶-4-基]乙炔基}-6-(2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-5-基]乙醯胺(875 mg，1.75 mmol)於無水乙腈(15 mL)中之經攪拌溶液中添加2-碘吡啶(370 µl，3.5 mmol)、肆(三苯膦)鈀(0) (101 mg，87.3 µmol；CAS-RN:[14221-01-3])及碳酸銫(1.71 g，5.24 mmol；CAS-RN:[534-17-8])，且在真空中使封蓋小瓶脫氣兩次並用氬氣回填。將混合物加熱至100℃持續16 h。添加水(2 mL)且在80℃攪拌反應混合物1 h。過濾粗混合物，用乙酸乙酯洗滌固體且收集，得到380 mg (95%純度，54%產率)標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 0.87 min; MS (ESIpos): m/z = 387 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.78 (br s, 1H), 8.71-8.38 (m, 2H), 7.96 (dt, 1H), 7.84 (br d, 2H), 7.23 (br d, 1H), 6.66 (br s, 1H), 6.53 (br d, 1H), 6.17-5.75 (m, 2H), 5.40-5.17 (m, 2H)。
中間物206  N-{4-[(三甲基矽烷基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image501
向N-(4-溴吡啶-2-基)乙醯胺(18.0 g，83.7 mmol)及乙炔基(三甲基)矽烷(14 mL，100 mmol)於DMF (43 mL)中之經攪拌溶液中添加三乙胺(47 mL，330 mmol；CAS-RN:[121-44-8])、Pd(PPh 2) 3Cl 2(2.94 g，4.19 mmol；CAS-RN:[13965-03-2])及CuI (1.59 g，8.37 mmol；CAS-RN:[7681-65-4])，且使燒瓶脫氣兩次並用氬氣回填。在80℃攪拌混合物1 h。添加乙酸乙酯且將混合物用半飽和氯化鈉溶液洗滌(三次)，乾燥(硫酸鈉)，過濾且真空移除溶劑。矽膠層析(梯度：己烷/乙酸乙酯10-45%)得到12.1 g (產率62%)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 1.18 min; MS (ESIpos): m/z = 233 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 10.63 (s, 1H), 8.30 (dd, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.10 (dd, 1H), 2.09 (s, 3H), 0.25 (s, 9H)。
中間物207  4-氯-6-(環丙基甲氧基)嘧啶-5-胺
Figure 02_image503
將環丙基甲醇(2.11 g，29.3 mmol；CAS-RN:[2516-33-8])溶解於THF (40 ml)中且添加氫化鈉(1.27 g，60%純度，31.7 mmol；CAS-RN:[7646-69-7])。在室溫下攪拌混合物30 min，添加4,6-二氯嘧啶-5-胺(4.00 g，24.4 mmol；CAS-RN:[5413-85-4])且在室溫下再攪拌混合物16 h。用水稀釋反應混合物且用乙酸乙酯萃取三次。將合併之有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌，經由疏水性濾紙過濾且真空移除溶劑。矽膠層析(梯度：己烷/乙酸乙酯，70-100%)得到4.80 g (產率99%)標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 0.91 min; MS (ESIpos): m/z = 146 [M+H-C 4H 7] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 7.91-7.82 (m, 1H), 5.31 (s, 2H), 4.22 (d, 2H), 1.33-1.21 (m, 1H), 0.59-0.51 (m, 2H), 0.40-0.32 (m, 2H)。
中間物208  N-(4-{[5-胺基-6-(環丙基甲氧基)嘧啶-4-基]乙炔基}吡啶-2-基)乙醯胺
Figure 02_image505
向4-氯-6-(環丙基甲氧基)嘧啶-5-胺(參見中間物207；3.03 g，75%純度，11.4 mmol)及N-{4-[(三甲基矽烷基)乙炔基]吡啶-2-基}乙醯胺(參見中間物206；2.91 g，12.5 mmol；參見中間物206)於DMF (60 mL)中之經攪拌溶液中添加三乙胺(6.3 mL，46 mmol；CAS-RN:[121-44-8])、XPhos Pd G3 (482 mg，569 µmol；CAS-RN: [1445085-55-1])、XPhos (543 mg，1.14 mmol；CAS-RN:[564483-18-7])、CuI (217 mg，1.14 mmol；CAS-RN:[7681-65-4])及氟化銫(3.46 g，22.8 mmol；CAS-RN:[13400-13-0])，且使燒瓶脫氣兩次並用氬氣回填。在100℃攪拌混合物1 h。將混合物冷卻至室溫，添加半飽和氯化鈉溶液且用乙酸乙酯萃取混合物。將有機相乾燥(硫酸鈉)、過濾，且真空移除溶劑。矽膠層析(梯度：己烷/乙酸乙酯，45-100%)得到1.22 g (95%純度，31%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.94 min; MS (ESIpos): m/z = 325 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 10.65 (s, 1H), 8.37 (dd, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.39 (dd, 1H), 5.77 (br s, 2H), 4.24 (d, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.39-1.25 (m, 1H), 0.62-0.54 (m, 2H), 0.42-0.35 (m, 2H)。
中間物209  N-{4-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-6-(環丙基甲氧基)嘧啶-5-基}-2,2,2-三氟乙醯胺
Figure 02_image507
使N-(4-{[5-胺基-6-(環丙基甲氧基)嘧啶-4-基]乙炔基}吡啶-2-基)乙醯胺(500 mg，1.55 mmol)及三乙胺(1.1 mL，7.7 mmol; CAS-RN:[121-44-8])於1,4-二㗁烷(31 ml)中之經攪拌溶液脫氣兩次且用氬氣回填燒瓶。使混合物冷卻至5℃，緩慢添加三氟乙酸酐(870 µl，6.2 mmol；CAS-RN:[407-25-0])且在室溫攪拌混合物2 h。添加乙酸乙酯且用水洗滌混合物兩次，乾燥(硫酸鈉)，過濾且真空移除溶劑，得到615 mg (90%純度，85%產率)標題化合物，其不經進一步純化即使用。 LC-MS (方法1): R t= 1.05 min; MS (ESIneg): m/z = 418 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 11.63 (s, 1H), 10.74 (s, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.43 (dd, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.20 (dd, 1H), 4.32 (d, 2H), 2.12 (s, 3H), 1.31-1.21 (m, 1H), 0.60-0.52 (m, 2H), 0.40-0.33 (m, 2H)。
中間物210  N-[4-(環丙基甲氧基)-6-{[2-(2,2,2-三氟乙醯胺基)吡啶-4-基]乙炔基}嘧啶-5-基]-2,2,2-三氟乙醯胺
Figure 02_image509
將固體N-{4-[(2-乙醯胺基吡啶-4-基)乙炔基]-6-(環丙基甲氧基)嘧啶-5-基}-2,2,2-三氟乙醯胺(565 mg，1.35 mmol)溶解於三氟乙酸酐(2.7 ml，19 mmol；CAS-RN:[407-25-0])中且在50℃攪拌混合物1 h。形成黏稠沈澱。添加無水乙腈(3 mL)，將其攪拌3 min且真空濃縮混合物，移除約90%溶劑。直接藉由矽膠層析(梯度：己烷/乙酸乙酯35%-100%)純化剩餘混合物，得到295 mg (95%純度，44%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 1.21 min; MS (ESIneg): m/z = 472 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.28 (s, 1H), 11.66 (s, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.59 (d, 1H), 8.13-8.09 (m, 1H), 7.43 (dd, 1H), 4.32 (d, 2H), 1.33-1.21 (m, 1H), 0.60-0.51 (m, 2H), 0.41-0.32 (m, 2H)。
中間物211  4-[4-(環丙基甲氧基)-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-胺
Figure 02_image511
在微波小瓶中向N-[4-(環丙基甲氧基)-6-{[2-(2,2,2-三氟乙醯胺基)吡啶-4-基]乙炔基}嘧啶-5-基]-2,2,2-三氟乙醯胺(290 mg，613 µmol)於無水乙腈(4.5 mL)中之經攪拌溶液中添加2-碘吡啶(130 µl、1.2 mmol)、肆(三苯膦)鈀(0) (35.4 mg，30.6 µmol；CAS-RN:[14221-01-3])及碳酸銫(599 mg，1.84 mmol；CAS-RN:[534-17-8])，且在真空中使封蓋小瓶脫氣兩次並用氬氣回填。將混合物加熱至100℃持續16 h。添加水(2 mL)且在80℃攪拌反應混合物1 h。添加乙酸乙酯且將混合物用半飽和氯化鈉溶液洗滌，乾燥(硫酸鈉)，過濾且真空移除溶劑。殘餘物之矽膠層析(梯度：乙酸乙酯/乙醇0-30%)得到82.0 mg (90%純度，34%產率)標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 0.84 min; MS (ESIpos): m/z = 359 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.56 (s, 1H), 8.47 (ddd, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.95 (dt, 1H), 7.88-7.85 (m, 1H), 7.85-7.81 (m, 1H), 7.25 (ddd, 1H), 6.61 (dd, 1H), 6.51 (dd, 1H), 5.98 (s, 2H), 4.43 (d, 2H), 1.45-1.32 (m, 1H), 0.65-0.57 (m, 2H), 0.49-0.40 (m, 2H)。
中間物212  (2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸乙酯
Figure 02_image513
在氮氣下，於-70℃至-60℃向二異丙胺(133.30 g，1.32 mol)於THF (600 mL)中之溶液中逐滴添加n-BuLi (2.5 M於己烷中，571 mL)，接著在氮氣下於-70℃至-60℃逐滴添加2-(4-氟苯基)乙酸乙酯(200 g，1.10 mol)於THF (600 mL)中之溶液。在氮氣下於-70℃至-60℃攪拌混合物30 min。在氮氣下，於-70℃至-60℃向此混合物中逐滴添加三氟甲烷磺酸2,2-二氟乙酯(305.55 g，1.43 mol)。在-70℃至-60℃攪拌此混合物1.5 h。用氯化銨飽和水溶液(2000 mL)淬滅反應混合物且接著用MTBE (1000 mL×2)萃取。用水(1000 mL)及氯化鈉溶飽和液(1000 mL)洗滌合併之有機層，乾燥(硫酸鈉)，過濾且減壓濃縮。藉由管柱層析(SiO2，石油醚)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之標題化合物。 ¹H-NMR (400 MHz, CDCl 3) δ [ppm] = 7.31 - 7.27 (m, 2H), 7.08 - 7.03 (m, 2H), 5.90 - 5.59 (m, 1H), 4.20 - 4.09 (m, 1H), 3.71 (t, J = 7.2 Hz, 1 H), 2.71 - 2.63 (m, 1H), 2.28 - 2.26 (m, 1H), 1.12 (t, J = 7.1 Hz, 3 H)
中間物213  (2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸
Figure 02_image515
在20℃向rac-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸乙酯(175 g，710.73 mmol)於EtOH (1800 mL)中之溶液中添加LiOH•H2O (89.47 g，2.13 mol)，在20℃攪拌混合物2 h。TLC (石油醚:乙酸乙酯=10:1)指示起始物質完全耗盡。減壓濃縮反應混合物，得到白色固體。用水(200 mL)溶解固體且接著藉由鹽酸水溶液(c=2 M)將pH調節至2至3。用乙酸乙酯(400 mL)萃取混合物。將有機相用氯化鈉飽和溶液(200 mL)洗滌，乾燥(硫酸鈉)，過濾且在50℃下減壓濃縮，得到呈黃色油狀物之標題化合物(153 g，624.14 mmol，89%純度)，其不經進一步純化即使用。 ¹H-NMR (400 MHz, CDCl 3) δ [ppm] = 10.9 (br s, 1H), 7.31 - 7.27 (m, 2H), 7.08 - 7.03 (m, 2H), 5.89 - 5.59 (m, 1H), 3.84 (t, J = 7.6 Hz, 1 H), 2.67 - 2.63 (m, 1H), 2.29 - 2.22 (m, 1H),
中間物214  (2S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸
Figure 02_image517
第一步：利用(1R)-1-苯乙胺進行解析。
在90℃向rac-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(153 g，624.14 mmol，89%純度)於乙酸異丙酯(2142 mL)中之溶液中添加(1R)-1-苯乙胺(37.82 g，312.07 mmol)，且在90℃攪拌混合物15 min。隨後將混合物緩慢冷卻至20℃且形成大量白色固體。過濾混合物。用乙酸異丙酯(800 mL)洗滌濾餅(R-酸-R-胺，約88% ee)。將母液用HCl水溶液(1 M，1000 mL)洗滌，乾燥(硫酸鈉)，過濾且減壓濃縮，得到呈黃色油狀物之(S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(116 g，482.77 mmol，90.8%純度，峰1，24.9% ee；分析型對掌性SFC條件：管柱：Chiralcel OD-RH 150×4.6mm I.D.，5 µm；移動相A：水，含0.375% TFA；B：乙腈，含0.1875% TFA；20%至30%之B/A；流動速率：1.0mL/min；波長：220nm)。 第二步：用(1S)-1-苯乙胺進行解析。
在90℃向(S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(116 g，482.77 mmol，90.8%純度，峰1，24.9% ee)於乙酸異丙酯(1624 mL)中之溶液中添加(1S)-1-苯乙胺(40.95 g，337.94 mmol)。在90℃攪拌混合物15 min。隨後將混合物冷卻至20℃且形成大量白色固體。在20℃攪拌混合物10 min且接著過濾。將濾餅用乙酸異丙酯(500 mL)洗滌，接著溶解於HCl水溶液(1 M，483.28 mL)中，同時保持pH低於2。用MTBE (600 mL))萃取混合物兩次。將有機相用HCl水溶(1 M，400 mL)洗滌，乾燥(硫酸鈉)，過濾且在50℃減壓濃縮，得到呈無色油狀物之(S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(51 g，233.76 mmol，峰1，90.2 ee%；分析型對掌性SFC條件：管柱：Chiralcel OD-RH 150×4.6mm I.D.，5 µm；移動相A：水，含0.375% TFA；B：乙腈，含0.1875% TFA；20%至30%之B/A；流動速率：1.0mL/min；波長：220nm)。 第三步：用(1S)-1-苯乙胺解析以改良產物之ee。
以與第二步中所描述相同的方式，用含(1S)-1-苯乙胺(46.43 g，383.18 mmol)之乙酸異丙酯(1232 mL)處理三個批次之(S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(88 g，51 g，各90% ee，37 g，96% ee)，得到呈無色油狀物之(S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(79.7 g，峰1，97.5 ee%)。
以與第二步中所描述相同的方式，用含(1S)-1-苯乙胺(42.94 g，354.35 mmol)之乙酸異丙酯(1120 mL)處理(S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(79.7 g，峰1，97.5 ee%)，得到呈無色油狀物之(S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(67.5 g，峰1，＞99% ee，分析型對掌性SFC條件：管柱：Chiralcel OD-RH 150×4.6mm I.D.，5 µm；移動相A：水，含0.375% TFA；B：乙腈，含0.1875% TFA；20%至30%之B/A；流動速率：1.0mL/min；波長：220nm)。 [a] D= +78.2° (CAN, c = 0.955)
中間物215  N-(4-溴吡啶-2-基)-2,2-二甲基丙醯胺
Figure 02_image519
在0℃向4-溴吡啶-2-胺(480 g，2.77 mol)及TEA (308.82 g，3.05 mol)於二氯甲烷(2200 mL)中之溶液中緩慢添加2,2-二甲基丙醯氯(341 mL，2.77 mol)，將其在0℃攪拌1 h。TLC (石油醚:乙酸乙酯=1: 1)顯示反應完成。用水(2.5 L)洗滌混合物，且剩餘有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮，得到標題化合物。
將產物與另一批次(來自400 g 4-溴吡啶-2-胺)合併，得到呈棕色固體之標題化合物(1280，4.98 mol)，其不經進一步純化即使用。 ¹H-NMR (400 MHz, CDCl 3) δ [ppm] = 8.52 (s, 1H), 8.05 - 8.08 (m, 2H), 7.2 (d, 2H), 1.29 (s, 1H)。
中間物216  2,2-二甲基-N-{4-[(三甲基矽烷基)乙炔基]吡啶-2-基}丙醯胺
Figure 02_image521
在氮氣下，於80℃向N-(4-溴-2-吡啶基)-2,2-二甲基-丙醯胺(320 g，1.24 mol)、TEA (433 mL，3.11 mol)、Pd(PPh 3) 2Cl 2(17.47 g，24.89 mmol)及CuI (23.70 g，124.45 mmol)於THF (2 L)中之混合物中分批添加乙炔基(三甲基)矽烷(244.47 g，2.49 mol)且將其在80℃攪拌16 h。反應針對4個批次同時進行，且一起處理。將四個批次之反應混合物合併，用MTBE (8 L)稀釋，用水(8 L)洗滌。有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠管柱層析(石油醚:乙酸乙酯=1:1)純化殘餘物且用正庚烷(800 mL)濕磨殘餘物，得到呈淺色固體之標題化合物(640 g，2.23 mol)。 ¹H-NMR (400 MHz, CDCl 3) δ [ppm] = 8.36 (s, 1H), 8.18 (d, J= 3.7 Hz, 1 H), 8.11 (s, 1H), 7.05 (d, J= 4.9 Hz, 1 H), 1.33 (s, 9H), 0.25 (s, 9H)
中間物217  N-{4-[(3-胺基-6-氟吡啶-2-基)乙炔基]吡啶-2-基}-2,2-二甲基丙醯胺
Figure 02_image523
在真空下使2,2-二甲基-N-[4-(2-三甲基矽烷基乙炔基)-2-吡啶基]丙醯胺(300，1.09 mol)、2-溴-6-氟-吡啶-3-胺(230 g，1.20 mol)、Pd(PPh 3) 2Cl 2(15.00 g，21.37 mmol)、CuI (21.00 g，110.27 mmol)、CsF (180 g，1.18 mol)及TEA (300.00 mL，2.16 mol)於DMF (1500 mL)中之混合物脫氣且用氮氣吹掃數次(20-30 min)。隨後將混合物加熱至70℃且在氮氣下於70℃攪拌1 h (注意：發熱且釋放氣體)。將反應物冷卻且緩慢倒入碳酸氫鈉飽和水溶液(5000 mL)中。所形成固體藉由過濾收集，用水(800 mL×2)洗滌，隨後懸浮於乙酸乙酯(2 L)及EDTA水溶液(3.6 L)中。在15℃攪拌混合物2 h且接著過濾。用EDTA水溶液(500 mL×2)、水(500 mL×4)及二氯甲烷(500 mL×2)洗滌濾餅。為了乾燥，用乙腈(800 mL)濕磨固體，過濾，用乙腈(200 mL)、MTBE (500 mL)洗滌，接著在60℃下用油泵真空乾燥，得到呈淡棕色固體之標題化合物(220 g，704.36 mmol，64.4%產率)。 ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 9.92 (s, 1H), 8.26 (br s, 2H), 7.49 - 7.41 (m, 2H), 7.37 (s, 1H), 7.33 (dd, J= 8.6 Hz, 1 H) , 6.99 (dd, J= 8.8 Hz, 1 H), 5.86 (s, 2H), 1.25 (s, 9H)。
中間物218  N-(4-{[6-氟-3-(2,2,2-三氟乙醯胺基)吡啶-2-基]乙炔基}吡啶-2-基)-2,2-二甲基丙醯胺
Figure 02_image525
在氮氣下，於0℃至10℃向N-[4-[2-(3-胺基-6-氟-2-吡啶基)乙炔基]-2-吡啶基]-2,2-二甲基-丙醯胺(110 g，348.7 mmol)及吡啶(60 mL，743.36 mmol)於二氯甲烷(1000 mL)中之懸浮液中逐滴添加TFAA (50 mL，359 mmol)於二氯甲烷(200 mL)中之溶液。隨後在0℃至10℃攪拌反應物0.5 h且形成澄清溶液。反應針對2個批次同時進行，且一起處理。將反應混合物倒入冰水(4000 mL)中且攪拌1 h且接著過濾。用水(500 mL×2)洗滌濾餅，且隨後在40℃真空乾燥。為了進一步純化，將產物用二氯甲烷(500 mL)濕磨，過濾，用二氯甲烷(200 mL×2)、MTBE (200 mL×2)洗滌，接著在60℃下用油泵真空乾燥，得到呈灰白色固體之標題化合物(194 g，475 mmol，68.1%產率)。 LC-MS (方法4): R t= 0.902 min; MS (ESIpos): m/z = 409.2 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] = 11.65 (s, 1H), 10.00 (s, 1H), 9.45 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 8.16 (t, J= 7.9 Hz, 1 H), 7.44 (dd, J= 8.6 Hz, 1 H) , 6.99 (d, J= 3.9 Hz, 1 H), 1.24 (s, 9H)。
中間物219  N-{4-[5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2,2-二甲基丙醯胺
Figure 02_image527
向N-(4-{[6-氟-3-(2,2,2-三氟乙醯胺基)吡啶-2-基]乙炔基}吡啶-2-基)-2,2-二甲基丙醯胺(194 g，475.08 mmol)及2-溴吡啶(150 g，949.39 mmol)於乙腈(1 L)中之溶液中添加碳酸銫(300 g，920.75 mmol)及Pd(PPh 3) 2Cl 2(17 g，24.22 mmol)。在真空下使反應物脫氣且用氮氣吹掃數次(20至30 min)。接著在氮氣下於90℃攪拌混合物2 h。將反應混合物冷卻至室溫，倒入冰水(5 L)中。攪拌混合物1 h，過濾且用H 2O (500 mL×2)洗滌。收集濾餅且與EDTA水溶液(1 L)及乙酸乙酯(500 mL)一起攪拌10 min，隨後過濾，用EDTA水溶液(200 mL×2)、水(300 mL×2)、MTBE (100 mL×2)洗滌，且接著在60℃真空乾燥。用乙酸乙酯(400 mL×3)濕磨殘餘物三次，得到呈淡黃色固體之標題化合物(62 g，159 mmol，33.5%產率)。 LC-MS (方法4): R t= 0.748 min; MS (ESIpos): m/z = 390.3 [M+H] +LC-MS (方法5): R t= 0.806 min; MS (ESIpos): m/z = 390.2 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] = 9.84(s, 1H), 8.44 (d, J= 4.2 Hz, 1 H), 8.34 (s, 1H), 8.26 (d, J= 5.1 Hz, 1 H), 8.04 (t, J= 8.0 Hz, 1 H), 7.96 (d, J= 7.8 Hz, 1 H), 7.88 (td, J= 7.6 Hz, 1 H), 7.25 (td, J= 6.1 Hz, 1 H), 7.11 (dd, J= 5.2 Hz, 1 H) , 6.96 (d, J= 7.8 Hz, 1 H), 1.24 (s, 9H)。
中間物220  2,2,2-三氟-N-{4-[5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image529
在15℃向N-{4-[5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2,2-二甲基丙醯胺及吡啶(60.00 mL，743 mmol)於二氯甲烷(100 mL)中之溶液中逐滴添加TFAA (60.00 mL，431.36 mmol)之溶液，接著在15℃攪拌反應物18 h。在50℃真空濃縮混合物，得到粗產物形式之標題化合物，其不經進一步純化即直接使用。
中間物221  4-[5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺
Figure 02_image531
在50℃將2,2,2-三氟-N-{4-[5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}乙醯胺(來自實例9之粗產物，最大理論量63.89 g)及碳酸鉀(60 g，434.14 mmol)於甲醇(300 mL)中之溶液攪拌3 h。將混合物倒入冰水(2 L)中，攪拌1 h且接著過濾。用乙腈(500 mL)濕磨濾餅0.5 h，接著過濾。用乙腈(100 mL×2)洗滌濾餅，且接著在60℃真空乾燥，得到呈淡黃色固體之標題化合物(37 g，121.2 mmol)。 LC-MS (方法5): R t= 0.626 min; MS (ESIpos): m/z = 306.1 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] = 12.15(s, 1H), 8.51 (d, J= 4.5 Hz, 1 H), 7.99 (t, J= 8.0 Hz, 1 H), 7.89 (d, J= 5.3 Hz, 1 H), 7.86 (d, J= 3.5 Hz, 2 H), 7.30 - 7.25 (m, 1H), 6.96 (d, J= 8.41 Hz, 1 H), 6.60 (s, 1H), 6.50 (d, J= 5.2 Hz, 1 H), 6.00 (s, 2H)。
中間物222  2,2-二甲基-N-[4-(5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基)吡啶-2-基]丙醯胺
Figure 02_image533
在真空下使2,2-二甲基-N-{4-[(三甲基矽烷基)乙炔基]吡啶-2-基}丙醯胺(參見中間物216；200 g，728.8 mmol)、3-氯吡𠯤-2-胺(110 g，849.11 mmol)、Pd(PPh 3) 2Cl 2(10.0 g，14.3 mmol)、CuI (14.0 g，73.5 mmol)、氟化銫(120 g，790 mmol)及TEA (145.4 g，1.44 mol，200 mL)於DMF (1 L)中之混合物脫氣且用氮氣吹掃數次(20-30 min)。隨後在氮氣下於110℃攪拌混合物1 h (注意，會釋放氣體)。將混合物冷卻至室溫且在氮氣下分批添加碳酸銫(300 g，920.7 mmol)。接著在110℃攪拌混合物3 h。將反應混合物在攪拌下倒入水(5 L)中，過濾且用水(500 mL×2)洗滌。收集濾餅且將其懸浮於EDTA水溶液(3 L)及乙酸乙酯(1000 mL)中。攪拌混合物20 min且接著過濾。將濾餅用EDTA水溶液(500 mL×2)、水(500 mL×2)及乙酸乙酯(500 mL)洗滌，接著在70℃真空乾燥，得到呈棕色固體之標題化合物(95 g，321.7 mmol，44.2%產率)，其不經進一步純化即使用。 LC-MS (方法7): R t= 1.157 min; MS (ESIpos): m/z = 296.2 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] = 12.80 (s, 1H), 9.92 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.45 (s, 2H), 8.31 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 1.23 (s, 9H)。
中間物223  N-[4-(7-溴-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基)吡啶-2-基]-2,2-二甲基丙醯胺
Figure 02_image535
向2,2-二甲基-N-[4-(5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基)吡啶-2-基]丙烯醯胺(92 g，311.5 mmol)於THF (800 mL)中之混合物中分批添加NBS (49.90 g，280.4 mmol)且將其在20℃攪拌1 h。用MTBE (500 mL)稀釋混合物，且添加碳酸氫鈉水溶液(1 L)及硫代硫酸二鈉水溶液(1 L，c約10%)。將混合物在20℃攪拌30 min且經由矽藻土墊過濾。用乙酸乙酯(1 L×2)萃取水相。2,2-二甲基-N-[4-(5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基)吡啶-2-基]丙醯胺合併之有機相經乾燥(硫酸鈉)，過濾且真空濃縮，得到呈棕色固體之標題化合物(80 g，213.8 mmol，68.6%產率)，其不經進一步純化即使用。 ¹H-NMR (400 MHz, CDCl 3) δ [ppm] = 10.82 (s, 1H), 8.88 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.52 - 8.00 (m, 3H), 8.31 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 1.30 (s, 9H)。
中間物224  N-[4-(7-溴-5-{[2-(三甲基矽烷基)乙氧基]甲基}-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基)吡啶-2-基]-2,2-二甲基丙醯胺
Figure 02_image537
在20℃向N-[4-(7-溴-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基)吡啶-2-基]-2,2-二甲基丙醯胺(80 g，213.8 mmol)及碳酸銫(139.3 g，427.5 mmol)於DMF (800 mL)中之混合物中逐滴添加[2-(氯甲氧基)乙基](三甲基)矽烷(57.0 g，342.0 mmol)且將其在20℃攪拌2 h。用水(1500 mL)稀釋混合物且用MTBE (1 L×3)萃取。合併之有機相經乾燥(硫酸鈉)，過濾且真空濃縮。藉由急驟矽膠層析(ISCO®；240g SepaFlash®矽膠急驟管柱，0至20%乙酸乙酯/石油醚梯度之溶離劑；流速：85 mL/min)純化殘餘物，得到呈黃色固體之標題化合物(66 g，130.8 mmol)。 LC-MS (方法4): R t= 1.057 min; MS (ESIpos): m/z = 506.5 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, CDCl 3) δ [ppm] = 8.61 (s, 1H), 8.60 (d, J= 2.8, 1H), 8.48 (d, J= 5.1, 1H), 8.38 (d, J= 2.5, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.45 (dd, J= 5.1, 1.5, 1H), 5.68 (s, 2H), 3.58 - 3.53 (m, 2H), 1.36 (s, 9H), 0.88 - 0.85 (m, 2H), -0.07 (s, 9H)。
中間物225  (吡啶-2-基)氯化鋅(II)
Figure 02_image539
使氯化鋅(II) (196 g，1.44 mol)及無水甲苯(600 mL)共蒸發以移除水，進行兩次，且接著懸浮於甲苯(600 mL)及THF (1000 mL)中。在單獨的反應器中藉由在15℃將氯(異丙基)鎂(2.0 M於THF中，700 mL)添加至含2-溴吡啶(223 g，1.41 mol)之THF (500 mL)中來製備2-吡啶基氯化鎂之溶液。在添加期間使溫度上升至50℃，且接著保持在50℃持續1 h。將溶液冷卻至18至25℃，經45 min添加至氯化鋅(II)懸浮液中，同時將溫度保持在25℃與30℃之間。在添加結束時，使反應溫度升高至50至55℃且攪拌溶液1 h，得到呈棕色溶液之標題化合物[約0.4 M於THF (2300 mL)及甲苯(600 mL)之溶液中]，其直接用於下一步驟。
中間物226  2,2-二甲基-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5-{[2-(三甲基矽烷基)乙氧基]甲基}-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丙醯胺
Figure 02_image541
使氮氣鼓泡通過N-[4-(7-溴-5- {[2-(三甲基矽烷基)乙氧基]甲基}-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基)吡啶-2-基]-2,2-二甲基丙醯胺(參見中間物224，50 g，99.1 mmol)、Pd(OAc) 2(1.11 g，4.96 mmol)、XPhos (4.72 g，9.91 mmol；CAS-RN:[564483-18-7])及無水THF (150 mL)之混合物持續10 min。隨後逐滴添加(吡啶-2-基)氯化鋅(II) (1.11 L，0.40 M於THF/甲苯中，參見中間物225)。將深褐色溶液加熱至63℃持續1小時。冷卻混合物且用氯化銨飽和水溶液(250 mL)淬滅並用乙酸乙酯(250 mL×3)萃取。合併之有機相經乾燥(硫酸鈉)，過濾且真空濃縮。藉由急驟矽膠層析(ISCO®；240 g SepaFlash®矽膠急驟管柱，0至90%乙酸乙酯/石油醚梯度之溶離劑，流速：100 mL/min)純化與藉由以23 g中間物225為起始物質獲得的第二批合併之殘餘物，得到呈黃色固體之標題化合物(57 g)作為粗產物，其不經進一步純化即使用。 LC-MS (方法4): R t= 0.886 min; MS (ESIpos): m/z = 503.2 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, CDCl 3) δ [ppm] = 8.62 (d, J= 2.5, 1H), 8.53 (d, J= 4.9, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.38 (d, J= 2.6, 1H), 8.31 (d, J= 5.0, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.83 (d, J= 7.9, 1H), 7.69 (td, J= 7.7, 1.8, 1H), 7.21 (dd, J= 5.1, 1.4, 1H), 7.18 - 7.12 (m, 1H), 5.74 (s, 2H), 3.57 - 3.50 (m, 2H), 1.32 (s, 9H), 0.92 - 0.85 (m, 2H), -0.08 (s, 9H)。
中間物227  2,2,2-三氟-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5-{[2-(三甲基矽烷基)乙氧基]甲基}-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}乙醯胺
Figure 02_image543
在20℃向2,2-二甲基-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5-{[2-(三甲基矽烷基)乙氧基]甲基}-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基丙醯胺(57 g粗產物，參見中間物226)及吡啶(44.85 g，566.96 mmol)於二氯甲烷(500 mL)中之溶液中添加TFAA (71.5 g，340.2 mmol)。在20℃攪拌此混合物1 h。將混合物用乙酸乙酯(1000 mL)稀釋，用水(800 mL)洗滌，乾燥(硫酸鈉)，過濾且濃縮，得到呈棕色油狀物之標題化合物(60 g，粗產物)，其不經進一步純化即使用。
中間物228  4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-胺
Figure 02_image545
在20℃向2,2,2-三氟-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5-{[2-(三甲基矽烷基)乙氧基]甲基}-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}乙醯胺(60 g，粗產物，參見中間物227)於甲醇(100 mL)中之溶液中添加含鹽酸之甲醇(c = 4 M，500 mL)。在80℃攪拌混合物1 h，隨後真空濃縮。將殘餘物溶解於水(200 mL)中且用氫氧化鈉水溶液(c=2 M)鹼化至pH 10。過濾混合物且收集固體且真空乾燥，得到呈黃色固體之標題化合物(23 g，79.8 mmol)。 LC-MS (方法8): R t= 1.140 min; MS (ESIpos): m/z = 289.1 [M+H] +
實驗部分 - 實例實例1  4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image547
將4-[5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺(參見中間物4，130 mg)、4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(外消旋體)(139 mg，639 µmol)、N,N-二異丙基乙胺(440 µL，2.6 mmol)及PyBOP (665 mg，1.28 mmol)溶解於2.5 mL DMA中，且在氬氣氛圍下於室溫攪拌隔夜。將反應混合物用二氯甲烷、飽和碳酸氫鈉水溶液及水稀釋。將其攪拌10分鐘，且有機層經由塗有聚矽氧之濾紙過濾並減壓濃縮。粗產物用於相同反應。使用相同量之所有化合物。將其在氬氣氛圍下於室溫攪拌隔夜。將反應混合物用二氯甲烷、碳酸氫鈉飽和水溶液及水稀釋。將其攪拌10分鐘，且有機層經由塗有聚矽氧之濾紙過濾並減壓濃縮。藉由HPLC層析在鹼性條件下純化粗產物，得到79%純度之目標化合物：105 mg。 LC-MS (方法2): R t= 1.25 min; MS (ESIpos): m/z = 506 [M+H] + 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm = 2.12 - 2.29 (m, 1 H) 2.63 - 2.76 (m, 1 H) 4.20 (br dd, 1 H) 5.85 - 6.18 (m, 1 H) 7.00 (dd, 1 H) 7.10 (dd, 1 H) 7.17 - 7.24 (m, 2 H) 7.26 - 7.30 (m, 1 H) 7.43 - 7.51 (m, 2 H) 7.84 - 7.91 (m, 1 H) 7.93 - 7.98 (m, 1 H) 8.04 (dd, 1 H) 8.27 (d, 1 H) 8.31 (s, 1 H) 8.36 - 8.43 (m, 1 H) 10.93 (s, 1 H) 12.32 (s, 1 H) - 脂族及芳族範圍內之少量雜質。
實例2  (2S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image549
外消旋化合物(參見實例1，100 mg)藉由製備型對掌性HPLC分離成對映異構體，得到對映異構體1 (40 mg，100% ee，參見實例2)及對映異構體2 (39 mg，97.9% ee，參見實例3)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-3；管柱：YMC Cellulose SB 10µ，250×50；溶離劑A：己烷+0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇+0.1 vol%二乙胺；等度：80%A+20%B；流速：140 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm； 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Waters Alliance 2695；管柱：YMC Cellulose SB 3µ，100×4.6；溶離劑A：己烷+0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：80%A+20%B；流速：1.4 mL/min；溫度：25℃；UV：254 nm； 分析型對掌性HPLC (方法參見實例2)：R t= 3.3 min。 [a] D= +183.3° (來自DMSO中之溶液，c = 6.3 mg/mL) ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] = 2.10 - 2.28 (m, 1 H) 2.62 - 2.80 (m, 1 H) 4.20 (dd, 1 H) 5.83 - 6.20 (m, 1 H) 7.00 (dd, 1 H) 7.10 (dd, 1 H) 7.16 - 7.24 (m, 2 H) 7.26 - 7.31 (m, 1 H) 7.43 - 7.53 (m, 2 H) 7.82 - 7.92 (m, 1 H) 7.93 - 7.97 (m, 1 H) 8.04 (dd, 1 H) 8.27 (d, 1 H) 8.31 (s, 1 H) 8.37 - 8.47 (m, 1 H) 10.93 (s, 1 H) 12.32 (br s, 1 H)。- 含有脂族範圍內之少量雜質。
實例2 (替代合成)  (2S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image551
在0℃向(S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(參見中間物214；26.79 g，122.40 mmol，約96.6% ee)、4-(5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-胺(參見中間物221；37 g，121.2 mmol)及吡啶(70.0 mL，867.3 mmol)於二氯甲烷(1850 mL)中之溶液中逐滴添加氧氯化磷(12.50 mL，134.5 mmol，CAS-RN: 10025-87-3)於二氯甲烷(80 mL)中之溶液。使反應混合物升溫至15℃且在氮氣下於15℃攪拌3.5 h。用水(800 mL)緩慢淬滅混合物，接著攪拌5 min。分離混合物。用乙酸乙酯(400 mL×3)萃取水層。將合併之有機溶液用鹽酸鹽水溶液(0.5 M，500 mL×1，300 mL×1)、飽和碳酸氫鈉水溶液(500 mL×2)、飽和氯化鈉溶液(500 mL×1)洗滌，乾燥(硫酸鈉)，經由矽膠墊過濾且在40℃真空濃縮。將殘餘物用MTBE (200 mL)濕磨，過濾，用MTBE (80 mL×2)洗滌且在50℃真空乾燥，得到呈固體之粗產物(22 g，約90.7% ee，分析型對掌性SFC條件：管柱：Chiralcel OD-3 50 × 4.6mm I.D.，3µm；移動相：CO 2之相A及EtOH (0.05%DEA)之相B；梯度溶離：自5%至40%之EtOH (0.05% DEA)於CO 2中；流動速率：3mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃：背壓：100巴)。
將粗產物在回流下用乙醇(220 mL)濕磨1 h，接著冷卻且過濾，得到固體(19 g，約94.7% ee)。將此固體與以相同方式獲得之另一批次(1.7 g，95% ee)合併，且將經合併之固體在回流下用乙醇濕磨三次，得到呈灰白色固體之標題化合物(16.6 g，32.8 mmol，99.7% ee，分析型對掌性SFC條件：管柱：Chiralcel OD-3 50 × 4.6mm I.D.，3µm；移動相：CO 2之相A及EtOH (0.05%DEA)之相B；梯度溶離：自5%至40%之EtOH (0.05% DEA)於CO 2中；流動速率：3mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃：背壓：100巴)。 分析型對掌性HPLC (方法直接參見上文)：峰1；R t= 1.928 min； ((R)-異構體(參見實例3)：峰2；R t= 2.104 min)。 [a] D= +217.5° (DMSO) LC-MS (方法6): R t= 1.029 min; MS (ESIpos): m/z = 506.3 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] = 12.31 (s, 1H), 10.92 (s, 1H), 8.40 (d, J= 4.1 Hz, 1 H), 8.31 (s, 1H), 8.27 (d, J= 5.1 Hz, 1 H), 8.04 (t, J= 8.0 Hz, 1 H), 7.97 - 7.92 (m, 1H), 7.90 - 7.84 (m, 1H), 7.47 (dd, J= 8.7 Hz, 1 H), 7.27 (ddd, J= 7.3 Hz, 4.9 Hz, 1 H), 7.21 (t, J= 8.9 Hz, 2 H), 7.10 (dd, J= 5.2 Hz, 1 H), 7.00 (dd, J= 8.6 Hz, 1 H), 6.12 - 5.86 (m, 1H), 4.21 (dd, J= 9.0 Hz, 1 H), 2.80 - 2.64 (m, 1H), 2.28 - 2.13 (m, 1H)。
實例3  (2R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺
Figure 02_image553
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例1。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例2)分離對映異構體，得到標題化合物(39 mg)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例2)：R t= 4.17 min。 [a] D= -177.5° (來自DMSO中之溶液，c = 5.3 mg/mL) ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] = 2.10 - 2.29 (m, 1 H) 2.62 - 2.85 (m, 1 H) 4.20 (dd, 1 H) 5.82 - 6.18 (m, 1 H) 7.00 (dd, 1 H) 7.10 (dd, 1 H) 7.16 - 7.24 (m, 2 H) 7.27 (ddd, 1 H) 7.42 - 7.52 (m, 2 H) 7.80 - 7.91 (m, 1 H) 7.92 - 7.98 (m, 1 H) 8.04 (dd, 1 H) 8.27 (d, 1 H) 8.31 (s, 1 H) 8.36 - 8.45 (m, 1 H) 10.93 (s, 1 H) 12.32 (s, 1 H)。- 含有脂族範圍內之少量雜質。
實例4  4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[5-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image555
將4-[5-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺(參見中間物8，113 mg)、4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(外消旋體) (164 mg，750 µmol)、N,N-二異丙基乙胺(390 µL，2.2 mmol)及PYBOP (585 mg，1.12 mmol)溶解於3.5 mL DMA中且在氮氣氛圍下於室溫攪拌隔夜。向反應混合物中添加碳酸氫鈉飽和水溶液及二氯甲烷。分離各層，且用二氯甲烷萃取水層一次。使用耐水濾紙乾燥合併之有機層。減壓濃縮澄清濾液。藉由製備型HPLC在鹼性條件下純化粗產物，得到99%純度之目標化合物：51 mg。 LC-MS (方法2): R t= 1.21 min; MS (ESIpos): m/z = 502 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] =  2.11 - 2.30 (m, 1 H) 2.54 - 2.59 (m, 3 H) 2.66 - 2.82 (m, 1 H) 4.14 - 4.25 (m, 1 H) 5.82 - 6.20 (m, 1 H) 7.05 - 7.15 (m, 2 H) 7.18 - 7.31 (m, 3 H) 7.42 - 7.52 (m, 2 H) 7.73 - 7.78 (m, 1 H) 7.79 - 7.94 (m, 1 H) 8.06 - 8.14 (m, 1 H) 8.22 - 8.25 (m, 1 H) 8.28 - 8.31 (m, 1 H) 8.34 - 8.41 (m, 1 H) 10.77 - 10.98 (m, 1 H) 11.82 - 12.01 (m, 1 H)。
實例 54,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[5-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image557
外消旋化合物(參見實例4，49 mg)藉由製備型對掌性HPLC分離成對映異構體，得到對映異構體1 (18 mg，100% ee，參見實例5)及對映異構體2 (19 mg，98.2% ee，參見實例6)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-3；管柱：YMC Cellulose SB 10µ，250×50；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇+ 0.1 vol%二乙胺；等度：80%A+20%B；流速：100 mL/min；溫度：25℃；UV：254 nm； 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Waters Alliance 2695；管柱：YMC Cellulose SB 3µ，100×4.6；溶離劑A：己烷+ 0.1vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：80%A+20%B；流速：1.4 mL/min；溫度：25℃；UV：254 nm； 分析型對掌性HPLC (方法參見實例5)：R t= 2.63 min。 LC-MS (方法2): R t= 1.20 min; MS (ESIpos): m/z = 502 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] = 2.11 - 2.28 (m, 1 H), 2.56 (s, 3 H), 2.65 - 2.81 (m, 1 H), 4.20 (dd, 1 H), 5.82 - 6.17 (m, 1 H), 7.06 - 7.16 (m, 2 H), 7.16 - 7.29 (m, 3 H), 7.41 - 7.53 (m, 2 H), 7.75 (d, 1 H), 7.86 (td, 1 H), 8.05 - 8.16 (m, 1 H), 8.24 (dd, 1 H), 8.29 (s, 1 H), 8.35 - 8.41 (m, 1 H), 10.89 (s, 1 H), 11.94 (s, 1 H)。
實例 64,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[5-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image559
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例4。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例5)分離對映異構體，得到標題化合物(19 mg)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例5)：R t= 3.23 min。 LC-MS (方法2): R t= 1.20 min; MS (ESIpos): m/z = 502 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] = 2.09 - 2.29 (m, 1 H), 2.56 (s, 3 H), 2.64 - 2.83 (m, 1 H), 4.20 (dd, 1 H), 5.79 - 6.24 (m, 1 H), 7.09 (dd, 1 H), 7.13 (d, 1 H), 7.17 - 7.28 (m, 3 H), 7.44 - 7.53 (m, 2 H), 7.75 (d, 1 H), 7.86 (td, 1 H), 8.11 (d, 1 H), 8.24 (d, 1 H), 8.29 (s, 1 H), 8.37 (dd, 1 H), 10.89 (s, 1 H), 11.94 (s, 1 H)。
實例7  4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[6-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image561
合併4-[6-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺(參見中間物12，62.0 mg)、4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(外消旋體) (89.8 mg，411 µmol)、N,N-二異丙基乙胺(220 µL，1.2 mmol)及PyBOP (321 mg，617 µmol)，且在氮氣氛圍下於室溫攪拌隔夜。向反應混合物中添加碳酸氫鈉飽和水溶液及二氯甲烷。分離各層，且用二氯甲烷萃取水層一次。使用耐水濾紙乾燥合併之有機層。減壓濃縮澄清濾液。在與以4-[6-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺(參見實例7，61.0 mg)為起始物質之另一批次合併的情況下，藉由製備型HPLC在鹼性條件下純化粗產物，得到70%純度之目標化合物之批次1：40 mg及97%純度之批次2：10 mg。 第2批之分析： ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] = 2.09 - 2.28 (m, 1 H) 2.45 (s, 3 H) 2.68 - 2.82 (m, 1 H) 4.08 - 4.29 (m, 1 H) 5.84 - 6.21 (m, 1 H) 7.10 (dd, 1 H) 7.17 - 7.27 (m, 3 H) 7.41 - 7.54 (m, 2 H) 7.64 - 7.68 (m, 1 H) 7.84 (dt, 1 H) 8.11 (td, 1 H) 8.21 - 8.27 (m, 1 H) 8.31 (br d, 2 H) 8.34 - 8.40 (m, 1 H) 10.89 (br s, 1 H) 11.93 (br s, 1 H)。
實例8  4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[6-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image563
外消旋化合物(參見實例7，29 mg)藉由製備型對掌性HPLC分離成對映異構體，得到對映異構體1 (10 mg，99.5% ee，參見實例8)及對映異構體2 (11 mg，100% ee，參見實例9)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-3；管柱：YMC Cellulose SB 10 µ，250×50；溶離劑A：己烷 + 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：2-丙醇 + 0.1 vol%二乙胺； 等度：60%A+40%B；流速：100 mL/min；溫度：25℃；UV：254 nm； 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Thermo Fisher UltiMate 3000；管柱：YMC Cellulose SB 3 µ，100×4.6；溶離劑A：己烷+0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：2-丙醇；等度：60%A+40%B；流速：1.4 mL/min；溫度：25℃；UV：254 nm； 分析型對掌性HPLC (方法參見實例8)：R t= 2.25 min。 LC-MS (方法2): R t= 1.18 min; MS (ESIpos): m/z = 502 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] = 2.10 - 2.29 (m, 1 H), 2.45 (s, 3 H), 2.63 - 2.82 (m, 1 H), 4.20 (dd, 1 H), 5.83 - 6.22 (m, 1 H), 7.11 (dd, 1 H), 7.16 - 7.29 (m, 3 H), 7.43 - 7.53 (m, 2 H), 7.65 (dd, 1 H), 7.85 (td, 1 H), 8.08 - 8.16 (m, 1 H), 8.22 - 8.27 (m, 1 H), 8.31 (d, 2 H), 8.35 - 8.41 (m, 1 H), 10.90 (s, 1 H), 11.92 (s, 1 H)。
實例9  4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[6-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image565
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例7。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例8)分離對映異構體，得到標題化合物(11 mg)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例8)：R t= 3.05 min。 LC-MS (方法2): R t= 1.18 min; MS (ESIpos): m/z = 502 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] = 2.10 - 2.28 (m, 1 H), 2.45 (s, 3 H), 2.63 - 2.82 (m, 1 H), 4.20 (dd, 1 H), 5.84 - 6.21 (m, 1 H), 7.11 (dd, 1 H), 7.16 - 7.28 (m, 3 H), 7.41 - 7.52 (m, 2 H), 7.65 (d, 1 H), 7.85 (td, 1 H), 8.12 (d, 1 H), 8.22 - 8.27 (m, 1 H), 8.31 (d, 2 H), 8.34 - 8.40 (m, 1 H), 10.90 (s, 1 H), 11.92 (s, 1 H)。
實例10  4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image567
向4-[3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺(參見中間物16，200 mg，696 µmol)於DMA (1.2 mL)中之經攪拌溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(730 µl，4.2 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])、4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(380 mg，1.74 mmol)及PyBOP (1.45 g，2.78 mmol；CAS-RN:[128625-52-5])。在室溫下攪拌混合物48 h。添加碳酸氫鈉水溶液，將混合物攪拌5分鐘，且用乙酸乙酯萃取混合物。將有機相用半飽和氯化鈉溶液洗滌(三次)、乾燥(硫酸鈉)、過濾，且真空移除溶劑。矽膠層析(梯度：二氯甲烷/乙醇0-25%)，隨後進行胺基相-矽膠層析(梯度：二氯甲烷/乙醇0-25%)，得到固體，將該固體用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到291 mg標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 1.13 min; MS (ESIpos): m/z = 488 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.09 (s, 1H), 10.92 (s, 1H), 8.45 (dd, 1H), 8.40-8.36 (m, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.26 (dd, 1H), 8.14 (dt, 1H), 7.90-7.83 (m, 2H), 7.51-7.43 (m, 2H), 7.30-7.17 (m, 4H), 7.12 (dd, 1H), 6.01 (tt, 1H), 4.21 (dd, 1H), 2.81-2.63 (m, 1H), 2.29-2.10 (m, 1H)。
實例11  (+)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image569
外消旋化合物(參見實例10，280 mg)藉由製備型對掌性HPLC分離成對映異構體。粗對映異構體1用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體1 (70.6 mg，＞99% ee，參見實例11)。粗對映異構體2用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體2 (67.4 mg，94% ee，參見實例12)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC；管柱：YMC Cellulose SB 10µ，250×50；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇+ 0.1 vol%二乙胺；等度：70%A+30%B；流速：100 mL/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Waters Alliance 2695；管柱：YMC Cellulose SB 3µ，100×4.6；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：70%A+30%B；流速：1.4 mL/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性HPLC (方法參見實例11)：R t= 1.99 min。 [α] D= 191.5° (來自DMSO中之溶液，c = 1.0 mg/mL) LC-MS (方法2): R t= 1.13 min; MS (ESIpos): m/z = 488 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.09 (br s, 1H), 10.91 (s, 1H), 8.45 (dd, 1H), 8.40-8.35 (m, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.29-8.24 (m, 1H), 8.13 (dt, 1H), 7.90-7.82 (m, 2H), 7.51-7.44 (m, 2H), 7.30-7.16 (m, 4H), 7.12 (dd, 1H), 6.01 (tt, 1H), 4.20 (dd, 1H), 2.82-2.64 (m, 1H), 2.29-2.11 (m, 1H)。
實例12  (-)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image571
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例10。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例11)分離對映異構體，隨後用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到標題化合物(67.4 mg，94% ee)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例11)：R t= 2.34 min。 [α] D= -178.4° (來自DMSO中之溶液，c = 1.0 mg/mL) LC-MS (方法2): R t= 1.13 min; MS (ESIpos): m/z = 488 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.09 (s, 1H), 10.92 (s, 1H), 8.45 (dd, 1H), 8.40-8.35 (m, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.28-8.24 (m, 1H), 8.16-8.11 (m, 1H), 7.90-7.83 (m, 2H), 7.51-7.44 (m, 2H), 7.29-7.17 (m, 4H), 7.12 (dd, 1H), 6.01 (tt, 1H), 4.20 (dd, 1H), 2.82-2.62 (m, 1H), 2.30-2.11 (m, 1H)。
實例 134,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image573
向4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-胺(參見中間物20，64.0 mg，222 µmol)於DMA (2.4 mL)中之經攪拌溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(230 µl，1.3 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])、(rac)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(121 mg，555 µmol)及PyBOP (578 mg，1.11 mmol；CAS-RN:[128625-52-5])。在室溫下攪拌混合物48 h。添加水，攪拌混合物30分鐘且用乙酸乙酯萃取混合物。將有機相用半飽和氯化鈉溶液洗滌(三次)、乾燥(硫酸鈉)、過濾，且真空移除溶劑。矽膠層析(梯度：二氯甲烷/乙醇0-25%)得到固體，將該固體用二氯甲烷濕磨，得到55.0 mg標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 0.91 min; MS (ESIpos): m/z = 489 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.65 (br s, 1H), 10.99 (s, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.40-8.37 (m, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.32 (dd, 1H), 8.12 (dt, 1H), 7.89 (td, 1H), 7.50-7.43 (m, 2H), 7.28 (ddd, 1H), 7.24-7.18 (m, 2H), 7.17 (dd, 1H), 6.02 (tt, 1H), 4.21 (dd, 1H), 2.83-2.62 (m, 1H), 2.30-2.11 (m, 1H)。
實例14  (-)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image575
外消旋化合物(參見實例13，75 mg)藉由製備型對掌性HPLC分離成對映異構體。粗對映異構體1用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體1 (17 mg，＞99% ee，參見實例14)。粗對映異構體2用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體2 (16 mg，＞99% ee，參見實例15)。
製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-3；管柱：YMC Cellulose SB 10µ，250×50；溶離劑A：乙腈+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇+ 0.1 vol%二乙胺；等度：90%A+10%B；流速：120 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm。 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Waters Alliance 2695；管柱：YMC Cellulose SB 3µ，100×4.6；溶離劑A：乙腈+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇 + 0.1 vol%二乙胺；等度：90%A+10%B；流速：1.4 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性HPLC (方法參見實例14)：R t= 1.86 min。 [α] D= -194.2° (來自DMSO中之溶液，c = 1.40 mg/mL) LC-MS (方法2): R t= 0.92 min; MS (ESIpos): m/z = 489 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.84-12.34 (m, 1H), 10.99 (s, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.41-8.37 (m, 1H), 8.37-8.34 (m, 1H), 8.34-8.30 (m, 1H), 8.12 (dt, 1H), 7.89 (td, 1H), 7.51-7.44 (m, 2H), 7.28 (ddd, 1H), 7.24-7.18 (m, 2H), 7.17 (dd, 1H), 6.02 (tt, 1H), 4.21 (dd, 1H), 2.81-2.63 (m, 1H), 2.29-2.12 (m, 1H)。
實例15  (+)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image577
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例13。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例14)分離對映異構體，隨後用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到標題化合物(16 mg，＞99% ee)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例14)：R t= 2.13 min。 [α] D= +174,3° (來自DMSO中之溶液，c = 1.87 mg/mL) LC-MS (方法2): R t= 0.92 min; MS (ESIpos): m/z = 489 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.65 (s, 1H), 10.99 (s, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.41-8.37 (m, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.32 (d, 1H), 8.14-8.09 (m, 1H), 7.89 (td, 1H), 7.51-7.43 (m, 2H), 7.28 (ddd, 1H), 7.24-7.18 (m, 2H), 7.17 (dd, 1H), 6.01 (tt, 1H), 4.21 (dd, 1H), 2.82-2.62 (m, 1H), 2.29-2.11 (m, 1H)。
實例16  4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[6-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image579
向4-[6-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺(參見中間物24，202 mg，662 µmol)於DMA (4.7 mL)中之經攪拌溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(690 µl，4.0 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])、(rac)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(361 mg，1.65 mmol)及PyBOP (1.72 g，3.31 mmol；CAS-RN:[128625-52-5])。在室溫下攪拌混合物72 h。添加水，攪拌混合物30分鐘且用乙酸乙酯萃取混合物。將有機相用半飽和氯化鈉溶液洗滌(三次)、乾燥(硫酸鈉)、過濾，且真空移除溶劑。矽膠層析(梯度：己烷/乙酸乙酯40%-100%)產生固體，將固體用二氯甲烷濕磨，得到205 mg標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 1.18 min; MS (ESIpos): m/z = 506 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.23 (s, 1H), 10.92 (s, 1H), 8.46 (dd, 1H), 8.42-8.37 (m, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.26 (dd, 1H), 8.05 (dt, 1H), 7.86 (td, 1H), 7.75 (dd, 1H), 7.51-7.43 (m, 2H), 7.27 (ddd, 1H), 7.24-7.17 (m, 2H), 7.13-7.09 (m, 1H), 6.01 (tt 1H), 4.20 (dd, 1H), 2.83-2.60 (m, 1H), 2.29-2.11 (m, 1H)。
實例17  (+)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[6-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image581
外消旋化合物(參見實例16，125 mg)藉由製備型對掌性HPLC分離成對映異構體。粗對映異構體1用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體1 (57 mg，＞99% ee，參見實例17)。粗對映異構體2用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體2 (54 mg，97.6% ee，參見實例18)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-3；管柱：YMC Cellulose SB 10µ，250×50；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇+ 0.1 vol%二乙胺；等度：90%A+10%B；流速：100 mL/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Waters Alliance 2695；管柱：YMC Cellulose SB 3µ，100×4.6；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：90%A+10%B；流速：1.4 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性HPLC (方法參見實例17)：R t= 4.61 min。 [α] D= +191.0° (來自DMSO中之溶液，c = 2.74 mg/mL) LC-MS (方法2): R t= 1.18 min; MS (ESIpos): m/z = 506 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.23 (s, 1H), 10.92 (s, 1H), 8.46 (dd, 1H), 8.41-8.38 (m, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.26 (dd, 1H), 8.05 (dt, 1H), 7.87 (td, 1H), 7.75 (dd, 1H), 7.51-7.44 (m, 2H), 7.27 (ddd, 1H), 7.24-7.17 (m, 2H), 7.13-7.09 (m, 1H), 6.01 (tt, 1H), 4.20 (dd, 1H), 2.81-2.62 (m, 1H), 2.29-2.10 (m, 1H)。
實例18  (-)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[6-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image583
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例16。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例17)分離對映異構體，隨後用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到標題化合物(54 mg，97.6% ee)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例17)：R t= 7.10 min。 [α] D= -180.4° (來自DMSO中之溶液，c = 2.73 mg/mL) LC-MS (方法2): R t= 1.18 min; MS (ESIpos): m/z = 506 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.41-12.06 (m, 1H), 10.92 (s, 1H), 8.46 (dd, 1H), 8.42-8.37 (m, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.28-8.24 (m, 1H), 8.05 (dt, 1H), 7.86 (td, 1H), 7.75 (dd, 1H), 7.51-7.43 (m, 2H), 7.27 (ddd, 1H), 7.24-7.17 (m, 2H), 7.11 (dd, 1H), 6.01 (tt, 1H), 4.20 (dd, 1H), 2.86-2.62 (m, 1H), 2.20 (tdt, 1H)。
實例19  4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-[4-(6-氟-3-苯基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image585
向4-(6-氟-3-苯基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-胺(參見中間物26，180 mg，75%純度，444 µmol)於DMA (3.1 mL)中之經攪拌溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(460 µl，2.7 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])、(rac)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(242 mg，1.11 mmol)及PyBOP (1.15 g，2.22 mmol；CAS-RN:[128625-52-5])。在室溫下攪拌混合物120 h。添加水，攪拌混合物30分鐘且用乙酸乙酯萃取混合物。將有機相用半飽和氯化鈉溶液洗滌(三次)，乾燥(硫酸鈉)，過濾，且真空移除溶劑。矽膠層析(梯度：二氯甲烷/乙醇0-5%)，隨後進行胺基相-矽膠層析(梯度：二氯甲烷/乙醇0-15%)，得到72.0 mg標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 1.34 min; MS (ESIpos): m/z = 505 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.10 (s, 1H), 10.96 (s, 1H), 8.40 (dd, 1H), 8.34 (s, 1H), 8.23 (dd, 1H), 7.71 (dd, 1H), 7.51-7.43 (m, 4H), 7.40-7.34 (m, 2H), 7.33-7.27 (m, 1H), 7.24-7.16 (m, 2H), 6.99 (dd, 1H), 6.01 (tt, 1H), 4.20 (dd, 1H), 2.83-2.63 (m, 1H), 2.31-2.13 (m, 1H)
實例 20(-)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-[4-(6-氟-3-苯基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image587
外消旋化合物(參見實例19，65 mg)藉由製備型對掌性HPLC分離成對映異構體。粗對映異構體1用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體1 (19 mg，＞99% ee，參見實例20)。粗對映異構體2用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體2 (15 mg，＞99% ee，參見實例21)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-3；管柱：YMC Cellulose SB 10µ，250×50；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇+ 0.1 vol%二乙胺；等度：90%A+10%B；流速：140 mL/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Waters Alliance 2695；管柱：YMC Cellulose SB 3µ，100×4.6；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：90%A+10%B；流速：1.4 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性HPLC (方法參見實例20)：R t= 1.77 min。 [α] D= -180.8° (來自DMSO中之溶液，c = 2.74 mg/mL) LC-MS (方法2): R t= 1.34 min; MS (ESIpos): m/z = 505 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.10 (s, 1H), 10.96 (s, 1H), 8.40 (dd, 1H), 8.34 (s, 1H), 8.27-8.18 (m, 1H), 7.71 (dd, 1H), 7.52-7.42 (m, 4H), 7.40-7.33 (m, 2H), 7.33-7.28 (m, 1H), 7.25-7.17 (m, 2H), 6.99 (dd, 1H), 6.01 (tt, 1H), 4.20 (dd, 1H), 2.83-2.63 (m, 1H), 2.30-2.13 (m, 1H)。
實例21  (+)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-[4-(6-氟-3-苯基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image589
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例19。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例20)分離對映異構體，隨後用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到標題化合物(15 mg，＞99% ee)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例20)：R t= 2.20 min。 [α] D= +200.5° (來自DMSO中之溶液，c = 1.48 mg/mL) LC-MS (方法2): R t= 1.34 min; MS (ESIpos): m/z = 505 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.10 (s, 1H), 10.96 (s, 1H), 8.40 (dd, 1H), 8.34 (s, 1H), 8.23 (dd, 1H), 7.71 (dd, 1H), 7.51-7.43 (m, 4H), 7.40-7.33 (m, 2H), 7.33-7.28 (m, 1H), 7.24-7.17 (m, 2H), 6.99 (dd, 1H), 6.01 (tt, 1H), 4.21 (dd, 1H), 2.82-2.63 (m, 1H), 2.30-2.13 (m, 1H)。
實例22  4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-[4-(3-苯基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image591
向4-(3-苯基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-胺(參見中間物28，200 mg，698 µmol)於DMA (1.5 mL)中之經攪拌溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(730 µl，4.2 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])、(rac)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(381 mg，1.75 mmol)及PyBOP (1.45 g，2.79 mmol；CAS-RN:[128625-52-5])。在室溫下攪拌混合物16 h。添加碳酸氫鈉水溶液，將混合物攪拌5分鐘，且用乙酸乙酯萃取混合物。將有機相用半飽和氯化鈉溶液洗滌(三次)，乾燥(硫酸鈉)，過濾，且真空移除溶劑。矽膠層析(梯度：二氯甲烷/乙醇0-25%)，隨後進行胺基相-矽膠層析(梯度：二氯甲烷/乙醇0-25%)得到固體，將該固體用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到210 mg標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 1.28 min; MS (ESIneg): m/z = 485 [M+H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 11.96 (s, 1H), 10.95 (s, 1H), 8.39 (dd, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.24 (d, 1H), 7.84 (dd, 1H), 7.52-7.43 (m, 4H), 7.40-7.32 (m, 2H), 7.32-7.26 (m, 1H), 7.25-7.17 (m, 3H), 7.01 (dd, 1H), 6.01 (tt, 1H), 4.21 (dd, 1H), 2.83-2.64 (m, 1H), 2.31-2.13 (m, 1H)。
實例23  (-)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-[4-(3-苯基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image593
外消旋化合物(參見實例22，200 mg)藉由製備型對掌性HPLC分離成對映異構體。粗對映異構體1用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體1 (77 mg，＞99% ee，參見實例23)。粗對映異構體2用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體2 (75 mg，＞99% ee，參見實例24)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-3；管柱：YMC Cellulose SB 10µ，250×50；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：90%A+10%B；流速：100 mL/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Waters Alliance 2695；管柱：YMC Cellulose SB 3µ，100×4.6；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：90%A+10%B；流速：1.4 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性HPLC (方法參見實例23)：R t= 2.85 min。 [α] D= -159.4° (來自DMSO中之溶液，c = 3.91 mg/mL) LC-MS (方法2): R t= 1.26 min; MS (ESIpos): m/z = 487 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 11.96 (s, 1H), 10.95 (s, 1H), 8.39 (dd, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.26-8.20 (m, 1H), 7.84 (dd, 1H), 7.52-7.44 (m, 4H), 7.39-7.32 (m, 2H), 7.32-7.26 (m, 1H), 7.25-7.17 (m, 3H), 7.01 (dd, 1H), 6.01 (tt, 1H), 4.21 (dd, 1H), 2.82-2.64 (m, 1H), 2.31-2.13 (m, 1H)。
實例24  (+)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-[4-(3-苯基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image595
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例22。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例23)分離對映異構體，隨後用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到標題化合物(75 mg，＞99% ee)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例23)：R t= 3.74 min。 [α] D= +223.6° (來自DMSO中之溶液，c = 2.30 mg/mL) LC-MS (方法2): R t= 1.26 min; MS (ESIpos): m/z = 487 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 11.96 (s, 1H), 10.95 (s, 1H), 8.39 (dd, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.25-8.22 (m, 1H), 7.84 (dd, 1H), 7.51-7.44 (m, 4H), 7.39-7.33 (m, 2H), 7.32-7.26 (m, 1H), 7.25-7.18 (m, 3H), 7.01 (dd, 1H), 6.23-5.79 (m, 1H), 4.21 (dd, 1H), 2.81-2.63 (m, 1H), 2.30-2.13 (m, 1H)。
實例25  4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[3-(6-氟吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image597
向4-[3-(6-氟吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺(參見中間物32，25.0 mg，81.9 µmol)於DMA (2.4 mL)中之經攪拌溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(86 µl，490 µmol；CAS-RN:[7087-68-5])、(rac)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(44.7 mg，205 µmol)及PyBOP (170 mg，328 µmol；CAS-RN:[128625-52-5])。在室溫下攪拌混合物48 h。再添加PyBOP (170 mg，328 µmol；CAS-RN:[128625-52-5])且在室溫下再攪拌混合物24 h。添加碳酸氫鈉水溶液，將混合物攪拌5分鐘，且用乙酸乙酯萃取混合物。將有機相用半飽和氯化鈉溶液洗滌(三次)，乾燥(硫酸鈉)，過濾，且真空移除溶劑。矽膠層析(梯度：二氯甲烷/乙醇0-25%)，隨後進行胺基相-矽膠層析(梯度：二氯甲烷/乙醇0-25%)，得到5.0 mg標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 1.22 min; MS (ESIpos): m/z = 506 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.21 (br s, 1H), 10.95 (s, 1H), 8.48 (dd, 1H), 8.34-8.28 (m, 2H), 8.23 (dd, 1H), 8.10-7.99 (m, 1H), 7.92-7.84 (m, 1H), 7.52-7.42 (m, 2H), 7.28 (dd, 1H), 7.24-7.15 (m, 3H), 6.99 (dd, 1H), 6.00 (tt, 1H), 4.21 (dd, 1H), 2.81-2.60 (m, 1H), 2.29-2.11 (m, 1H)。
實例26  (-)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[3-(6-氟吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image599
外消旋化合物(參見實例25，48 mg)藉由製備型對掌性HPLC分離成對映異構體。粗對映異構體1用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體1 (14 mg，＞99% ee，參見實例256)。粗對映異構體2用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體2 (15 mg，＞99% ee，參見實例27)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-4；管柱：YMC Cellulose SB 10µ，250×50；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：90%A+10%B；流速：100 mL/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Thermo Fisher UltiMate 3000；管柱：YMC Cellulose SB 3 µ，100×4.6；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：90%A+10%B；流速：1.4 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性HPLC (方法參見實例26)：R t= 4.10 min。 [α] D= -211.1° (來自DMSO中之溶液，c = 1.80 mg/mL) LC-MS (方法2): R t= 1.00 min; MS (ESIneg): m/z = 504 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.21 (s, 1H), 10.95 (s, 1H), 8.49 (dd, 1H), 8.34-8.31 (m, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.23 (dd, 1H), 8.09-8.01 (m, 1H), 7.88 (dd, 1H), 7.51-7.44 (m, 2H), 7.29 (dd, 1H), 7.24-7.16 (m, 3H), 6.99 (dd, 1H), 6.00 (tt, 1H), 4.21 (dd, 1H), 2.81-2.61 (m, 1H), 2.30-2.11 (m, 1H)。
實例27  (+)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[3-(6-氟吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image601
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例25。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例26)分離對映異構體，隨後用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到標題化合物(15 mg，＞99% ee)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例26)：R t= 5.12 min。 [α] D= 217.1° (來自DMSO中之溶液，c = 1.30 mg/mL) LC-MS (方法2): R t= 1.23 min; MS (ESIpos): m/z = 506 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.21 (br s, 1H), 10.95 (s, 1H), 8.49 (dd, 1H), 8.33 (d, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.23 (dd, 1H), 8.10-8.00 (m, 1H), 7.88 (dd, 1H), 7.54-7.42 (m, 2H), 7.29 (dd, 1H), 7.24-7.16 (m, 3H), 6.99 (dd, 1H), 6.00 (tt, 1H), 4.21 (dd, 1H), 2.81-2.61 (m, 1H), 2.29-2.10 (m, 1H)。
實例28  (2RS)-N-{4-[7-(2,2-二氟乙氧基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image603
將4-[7-(2,2-二氟乙氧基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺(參見中間物39，38.0 mg)、4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(外消旋體) (CAS-RN:[1538957-14-0]，86.1 mg，394 µmol)、PyBOP (CAS-RN:[128625-52-5]，308 mg，592 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(140 µL，790 µmol)溶解於700 µL N,N-二甲基乙醯胺中且在室溫攪拌2天。將水添加至反應混合物中且將其攪拌30分鐘。接著用乙酸乙酯對其進行稀釋，且用乙酸乙酯萃取水層一次。將有機層用半飽和氯化鈉溶液洗滌(三次)，乾燥且真空移除溶劑。藉由層析(25 g管柱，矽膠ULTRA，梯度：己烷/乙酸乙酯20%-100%乙酸乙酯)純化粗產物。用二氯甲烷/己烷稀釋產物且攪拌。濾出形成的沈澱物，得到23 mg標題化合物。 LC-MS (方法2): Rt = 1.29 min; MS (ESIpos): m/z = 586.6 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.46 (s, 1H), 10.89 (s, 1H), 8.38-8.32 (m, 1H), 8.28-8.21 (m, 2H), 7.96-7.89 (m, 1H), 7.85 (td, 1H), 7.52-7.43 (m, 2H), 7.27-7.16 (m, 3H), 7.10-7.05 (m, 1H), 6.83 (s, 1H), 6.68-6.35 (m, 1H), 6.18-5.83 (m, 1H), 4.69 (td, 2H), 4.20 (dd, 1H), 2.80-2.61 (m, 1H), 2.29-2.11 (m, 1H)。
實例29  (2R或S)-N-{4-[7-(2,2-二氟乙氧基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image605
外消旋化合物(參見實例28，17 mg)藉由製備型對掌性HPLC分離成對映異構體。粗對映異構體1用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體1 (6.5 mg，100% ee，參見實例29)。粗對映異構體2用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體2 (6 mg，100% ee，參見實例30)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-2；管柱：YMC Cellulose SB 5µ，250×30； 溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇+0.1 vol%二乙胺；等度：70%A+30%B；流速：50 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Thermo Fisher UltiMate 3000；管柱：YMC Cellulose SB 3µ，100×4.6； 溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：70%A+30%B；流速：1.4 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性HPLC (方法參見實例29)：R t= 2.96min。 LC-MS (方法2): R t= 1.24 min; MS (ESIpos): m/z = 586 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.46 (s, 1H), 10.89 (s, 1H), 8.35 (d, 1H), 8.29-8.21 (m, 2H), 7.97-7.90 (m, 1H), 7.89-7.81 (m, 1H), 7.47 (dd, 2H), 7.28-7.16 (m, 3H), 7.08 (dd, 1H), 6.83 (s, 1H), 6.52 (tt, 1H), 6.00 (tt, 1H), 4.69 (td, 2H), 4.20 (br dd, 1H), 2.80-2.63 (m, 1H), 2.28-2.11 (m, 1H)
實例 30(2R或S)-N-{4-[7-(2,2-二氟乙氧基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image607
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例28。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例29)分離對映異構體，隨後用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到標題化合物(6 mg，100% ee)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例29)：R t= 4.30 min。 LC-MS (方法2): R t= 1.25 min; MS (ESIneg): m/z = 584 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.46 (br s, 1H), 10.89 (s, 1H), 8.35 (br d, 1H), 8.29-8.19 (m, 2H), 7.99-7.89 (m, 1H), 7.89-7.80 (m, 1H), 7.47 (br dd, 2H), 7.30-7.15 (m, 3H), 7.08 (br d, 1H), 6.83 (s, 1H), 6.52 (tt, 1H), 6.00 (tt, 1H), 4.69 (td, 2H), 4.20 (br dd, 1H), 2.81-2.62 (m, 1H), 2.29-2.11 (m, 1H)
實例31  (2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image609
將4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-胺鹽酸鹽(參見中間物45，205 mg)、(rac)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(外消旋體) (179 mg，821 µmol)、PyBOP (821 mg，1.58 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(660 µL，3.8 mmol)溶解於1.1 mL DMA中且在室溫下攪拌隔夜。用二氯甲烷稀釋反應混合物且添加經濃縮之碳酸氫鈉水溶液。分離各層，且用二氯甲烷萃取水層一次。將經合併之有機層用經濃縮之氯化鈉水溶液洗滌兩次，經由拒水濾紙過濾且在80℃減壓濃縮。將粗產物溶解於二氯甲烷中且用半濃縮氯化鈉水溶液萃取三次，經由耐水濾紙過濾且濃縮，並藉由HPLC純化，得到97%純度之目標化合物：126 mg。 LC-MS (方法2): R t= 1.04 min; MS (ESIpos): m/z = 489 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 2.19 (br dd, 1 H), 2.63 - 2.80 (m, 1 H), 4.19 (dd, 1 H), 5.80 - 6.24 (m, 1 H), 7.15 - 7.25 (m, 3 H), 7.28 (dd, 1 H), 7.44 - 7.52 (m, 2 H), 7.88 (td, 1 H), 8.05 (br d, 1 H), 8.24 - 8.33 (m, 2 H), 8.40 (br s, 2 H), 8.53 (br s, 1 H), 10.93 (s, 1 H), 12.85 (br s, 1 H)。
實例32  (2S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image611
外消旋化合物(參見實例31，103 mg)藉由製備型對掌性HPLC分離成對映異構體，得到對映異構體1 (17 mg，＞99.9% ee，參見實例32)及對映異構體2 (20 mg，95.7% ee，參見實例33)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-4；管柱：YMC Cellulose SB 10µ，250×50；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：2-丙醇；等度：70%A+30%B；流速：100 mL/min；溫度：25℃；UV：254 nm； 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Thermo Fisher UltiMate 3000；管柱：YMC Cellulose SB 3 µ，100×4.6；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：2-丙醇；等度：70%A+30%B；流速：1.4 mL/min；溫度：25℃；UV：254 nm； 分析型對掌性HPLC (方法參見實例32)：R t= 4.83 min。 [a] D= +179° (來自DMSO中之溶液，c = 5.8 mg/mL) ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 2.10 - 2.29 (m, 1H), 2.62 - 2.80 (m, 1 H), 4.19 (dd, 1 H), 5.78 - 6.21 (m, 1 H), 7.17 - 7.24 (m, 3 H), 7.28 (ddd, 1 H), 7.39 - 7.52 (m, 2 H), 7.88 (td, 1 H), 8.05 (dt, 1 H), 8.28 - 8.34 (m, 2 H), 8.37 - 8.44 (m, 2 H), 8.53 (d, 1 H), 10.92 (s, 1 H), 12.85 (br s, 1 H)。
實例32 (替代合成)  (2S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image613
在0℃向(2S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(15 g，68.6 mmol，99+% ee；參見中間物214)、4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-胺(參見中間物228；15 g，52.0 mmol)及吡啶(40 mL，495.6 mmol)於二氯甲烷(750 mL)中之溶液中逐滴添加氧氯化磷(7.20 mL，77.48 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液。使反應混合物升溫至20℃且在氮氣下於20℃攪拌3 h。用水(100 mL)緩慢淬滅混合物，攪拌5 min，接著分離各相。用乙酸乙酯(200 mL×3)萃取水層。將合併之有機相用鹽酸水溶液(c=0.5 M，100 mL×1，50 mL×1)、飽和碳酸氫鈉水溶液(100 mL×2)、飽和氯化鈉水溶液(100 mL×1)洗滌，乾燥(硫酸鈉)，經由矽膠墊過濾且在40℃真空濃縮，得到殘餘物。
將殘餘物溶解於碳酸氫鈉(6.67 g，79.3 mmol)於甲醇(100 mL)中之懸浮液中。將反應混合物在15℃攪拌1 h，用乙酸乙酯(80 mL)及水(300 mL)稀釋，攪拌5 min，接著過濾。將濾餅用水(500 mL)洗滌，在50℃真空乾燥，得到粗標題化合物(16 g)。將此批次與第二批粗標題化合物(6 g)合併，該第二批粗標題化合物係以10 g中間物228為起始物質自相同反應獲得。將合併之固體溶解於乙酸乙酯(2 L)中，經由矽膠墊過濾，且在50℃真空濃縮。在回流下用乙醇(270 mL)濕磨殘餘物，得到呈灰白色固體之標題化合物(16.8 g，34.19 mmol，98.7% ee，分析型對掌性SFC條件：管柱：Chiralcel OD-3 50 × 4.6 mm I.D.，3 μm；移動相：CO 2之相A及IPA (0.05% DEA)之相B；梯度溶離：自5%至40%之IPA (0.05% DEA)於CO 2中；流動速率：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100巴)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例32，替代合成)：峰1；R t= 2.325 min； ( (R)-異構體(參見實例33)：峰2； R t= 2.670 min)。 [a] D= +237.2° (DMSO)。 LC-MS (方法9): R t= 0.794 min; MS (ESIpos): m/z = 489.1 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] = 12.85 (s, 1H), 10.92 (s, 1H), 8.54 (d, J= 2.5 Hz, 1 H), 8.41 (d, J= 2.3 Hz, 1 H), 8.40 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 8.32 (d, J= 5.3 Hz, 1 H), 8.06 (d, J= 7.8 Hz, 1 H), 7.88 (td, J= 7.7 Hz, 1.6 Hz, 1 H), 7.47 (dd, J= 8.5 Hz, 5.5 Hz, 1 H), 7.29 (dd, J= 7.0 Hz, 5.5 Hz, 1 H), 7.25 - 7.18 (m, 3 H), 6.17 - 5.86 (m, 1H), 4.21 (dd, J= 9.0 Hz, 1 H), 2.80 - 2.64 (m, 1H), 2.28 - 2.13 (m, 1H)。
實例32  (2R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image615
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例31。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例32)分離對映異構體，得到標題化合物(20 mg)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例32)：R t= 7.16 min。 [a] D= -214° (來自DMSO中之溶液，c = 4.9 mg/mL) ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]= 2.09 - 2.29 (m, 1 H), 2.59 - 2.83 (m, 1 H), 4.19 (dd, 1 H), 5.76 - 6.21 (m, 1 H), 7.15 - 7.25 (m, 3 H), 7.28 (ddd, 1 H), 7.41 - 7.54 (m, 2 H), 7.88 (td, 1 H), 8.05 (dt, 1 H), 8.28 - 8.36 (m, 2 H), 8.37 - 8.46 (m, 2 H), 8.53 (d, 1 H), 10.93 (s, 1 H), 12.85 (br s, 1 H)。
實例33  (rac)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-6-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image617
將2-(2-溴吡啶-4-基)-5-氟-6-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶(參見中間物49，50.0 mg)、(rac)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(外消旋體) (參見中間物46，42.5 mg)、碳酸銫(128 mg，391 µmol)、二-三級丁基(2',4',6'-三異丙基-3,6-二甲氧基-[1,1'-聯苯]-2-基)膦(12.6 mg，26.1 µmol；CAS-RN:[1160861-53-9])及6'-三異丙基-1,1'-聯苯)-2-(2'-胺基-1,1'-聯苯)]甲磺酸鈀(II)(11.1 mg，13.0 µmol；CAS-RN:[1536473-72-9])溶解於1.1 mL 1,4-二㗁烷中，且在氮氣氛圍下於100℃攪拌1小時。用乙酸乙酯及水稀釋混合物。分離各層且用乙酸乙酯萃取水層一次。使用耐水濾紙乾燥經合併之有機層且減壓濃縮澄清濾液。藉由急驟層析(5g矽膠超管柱，梯度二氯甲烷/乙醇0-10%)及HPLC純化粗產物，得到分析純目標化合物：21 mg。 LC-MS (方法2): R t= 1.20 min; MS (ESIpos): m/z = 520 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 2.12 - 2.28 (m, 1 H), 2.37 (s, 3 H), 2.66 - 2.78 (m, 1 H), 4.20 (dd, 1 H), 5.80 - 6.19 (m, 1 H), 7.09 (dd, 1 H), 7.16 - 7.31 (m, 3 H), 7.43 - 7.52 (m, 2 H), 7.83 - 7.91 (m, 2 H), 7.92 - 8.00 (m, 1 H), 8.17 - 8.28 (m, 1 H), 8.29 - 8.33 (m, 1 H), 8.34 - 8.44 (m, 1 H), 10.91 (s, 1 H), 12.15 (s, 1 H)。
實例34  4,4-二氟-N-{4-[5-氟-6-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image619
外消旋化合物(參見實例34，14 mg)藉由製備型對掌性HPLC分離成對映異構體，得到對映異構體1 (5 mg，93.8% ee，參見實例35)及對映異構體2 (5 mg，91.8% ee，參見實例35)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-1；管柱：YMC Cellulose SB 5 µ，250×30；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇+ 0.1 vol%二乙胺；等度：80%A+20%B；流速：50 mL/min；溫度：25℃；UV：254 nm； 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Thermo Fisher UltiMate 3000；管柱：YMC Cellulose SB 3 µ，100×4.6；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：80%A+20%B；流速：1.4 mL/min；溫度：25℃；UV：254 nm； 分析型對掌性HPLC (方法參見實例35)：R t= 3.00 min。 ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 12.16 (s, 1H), 10.91 (s, 1H), 8.42-8.37 (m, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.25 (d, 1H), 7.96-7.92 (m, 1H), 7.91-7.83 (m, 2H), 7.52-7.41 (m, 2H), 7.30-7.16 (m, 3H), 7.09 (dd, 1H), 6.21-5.81 (m, 1H), 4.20 (dd, 1H), 2.81-2.62 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.28-2.11 (m, 1H)。
實例35  4,4-二氟-N-{4-[5-氟-6-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image621
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例34。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例35)分離對映異構體，得到標題化合物(5 mg)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例35)：R t= 3.98 min。 ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 12.15 (s, 1H), 10.91 (s, 1H), 8.42-8.35 (m, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.25 (dd, 1H), 7.98-7.92 (m, 1H), 7.91-7.83 (m, 2H), 7.52-7.42 (m, 2H), 7.30-7.15 (m, 3H), 7.09 (dd, 1H), 6.23-5.83 (m, 1H), 4.20 (dd, 1H), 2.82-2.63 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.29-2.11 (m, 1H)。
實例36  (rac)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image623
將2-(2-溴吡啶-4-基)-5-氟-7-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶(參見中間物52，70.0 mg)、(rac)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(外消旋體) (參見中間物46，59.5 mg)、碳酸銫(179 mg，548 µmol)、二-三級丁基(2',4',6'-三異丙基-3,6-二甲氧基-[1,1'-聯苯]-2-基)膦(17.7 mg，36.5 µmol；CAS-RN:[1160861-53-9])及[(2-二-三級丁基膦基-3,6-二甲氧基-2',4'、6'-三異丙基-1,1'-聯苯)-2-(2'-胺基-1,1'-聯苯)]甲磺酸鈀(II)(15.6 mg，18.3 µmol；CAS-RN:[1536473-72-9])溶解於1.6 mL 1,4-二㗁烷中，且在氮氣氛圍下於100℃攪拌。用二氯甲烷及水稀釋反應混合物。將其用二氯甲烷萃取三次，將合併之有機層用水及鹽水洗滌，經由塗有聚矽氧之濾紙過濾且減壓濃縮。藉由HPLC在鹼性條件下純化粗產物，得到99%純度之目標化合物：29 mg。 LC-MS (方法2): R t= 1.26 min; MS (ESIpos): m/z = 520 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 2.10 - 2.29 (m, 1 H), 2.63 (s, 3 H), 2.69 - 2.82 (m, 1 H), 4.21 (dd, 1 H), 5.82 - 6.23 (m, 1 H), 6.86 (s, 1 H), 7.10 (dd, 1 H), 7.16 - 7.30 (m, 3 H), 7.43 - 7.54 (m, 2 H), 7.86 (td, 1 H), 7.94 - 8.02 (m, 1 H), 8.24 - 8.32 (m, 2 H), 8.36 (ddd, 1 H), 10.92 (s, 1 H), 12.15 (s, 1 H)。
實例37  (+)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image625
外消旋化合物(參見實例37，92 mg)藉由製備型對掌性HPLC分離成對映異構體，得到對映異構體1 (31 mg，100% ee，參見實例38)及對映異構體2 (42 mg，98% ee，參見實例39)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-1；管柱：YMC Cellulose SB 5µ，250×30； 溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇+0.1 vol%二乙胺；等度：70%A+30%B；流速：50 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Thermo Fisher UltiMate 3000；管柱：YMC Cellulose SB 3µ，100×4.6； 溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：70%A+30%B；流速：1.4 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性HPLC (方法參見實例38)：R t= 2.18 min。 [a] D= 182.19° (來自DMSO中之溶液，c = 5.6 mg/mL) 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 2.08 - 2.29 (m, 1 H), 2.63 (s, 3H), 2.66 - 2.83 (m, 1 H), 4.21 (dd, 1 H), 5.81 - 6.23 (m, 1 H), 6.86 (s, 1 H), 7.03 - 7.15 (m, 1 H), 7.18 - 7.29 (m, 3 H), 7.43 - 7.51 (m, 2 H), 7.85 (td, 1 H), 7.96 (dt, 1 H), 8.22 - 8.33 (m, 2 H), 8.33 - 8.41 (m, 1 H), 10.92 (s, 1 H), 12.15 (s, 1 H)。
實例 38(-)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image627
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例37。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例38)分離對映異構體，得到標題化合物(42 mg)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例38)：R t= 3.13 min。 [a] D= -176.7 ° (來自DMSO中之溶液，c = 5.2 mg/mL) 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.11 - 2.29 (m, 1 H), 2.63 (d, 3 H), 2.72 (ddd, 1 H), 4.21 (dd, 1 H), 5.80 - 6.19 (m, 1 H), 6.86 (s, 1 H), 7.06 - 7.14 (m, 1 H), 7.16 - 7.29 (m, 3 H), 7.42 - 7.53 (m, 2 H), 7.86 (td, 1 H), 7.96 (dt, 1 H), 8.24 - 8.31 (m, 2 H), 8.33 - 8.40 (m, 1 H), 10.92 (s, 1 H), 12.15 (s, 1 H)。
實例39  (rac)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-甲氧基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image629
將2-(2-溴吡啶-4-基)-5-氟-7-甲氧基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶(參見中間物55，210 mg)、(rac)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(參見中間物46，171 mg)、碳酸銫(514 mg，1.58 mmol)、二-三級丁基(2',4',6'-三異丙基-3,6-二甲氧基-[1,1'-聯苯]-2-基)膦(51.0 mg，105 µmol；CAS-RN:[1160861-53-9])及[(2-二-三級丁基膦基-3,6-二甲氧基-2',4'、6'-三異丙基-1,1'-聯苯)-2-(2'-胺基-1,1'-聯苯)]甲磺酸鈀(II) (44.9 mg，52.6 µmol；CAS-RN:[1536473-72-9])溶解於4.5 mL 1,4-二㗁烷中且在氮氣氛圍下於100℃攪拌1小時。用乙酸乙酯及水稀釋反應混合物。分離各層且用乙酸乙酯萃取水層一次。使用耐水濾紙乾燥經合併之有機層且減壓濃縮澄清濾液。用二氯甲烷稀釋粗產物。沈澱米色固體且將其在真空下濾出，得到98%純度之目標化合物：83 mg。 LC-MS (方法2): R t= 1.21 min; MS (ESIpos): m/z = 534 [M+H] -¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 2.07 - 2.30 (m, 1 H), 2.58 - 2.82 (m, 1 H), 4.08 (s, 3 H), 4.19 (dd, 1 H), 5.83 - 6.20 (m, 1 H), 6.69 (s, 1 H), 7.04 - 7.12 (m, 1 H), 7.16 - 7.28 (m, 3 H), 7.39 - 7.53 (m, 2 H), 7.77 - 7.96 (m, 2 H), 8.17 - 8.30 (m, 2 H), 8.31 - 8.41 (m, 1 H), 10.86 (s, 1 H), 12.40 (s, 1 H)。- 含有二氯甲烷。
實例40  (+)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-甲氧基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image631
外消旋化合物(參見實例40，105 mg)藉由製備型對掌性HPLC分離成對映異構體，得到對映異構體1 (35 mg，97.9% ee，參見實例41)及對映異構體2 (41 mg，98.3% ee，參見實例42)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-1；管柱：YMC Cellulose SB 5µ，250×30； 溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇+0.1 vol%二乙胺；等度：70%A+30%B；流速：50 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm； 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Thermo Fisher UltiMate 3000；管柱：YMC Cellulose SB 3µ，100×4.6； 溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：70%A+30%B；流速：1.4 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性HPLC (方法參見實例41)：R t= 2.77 min。 [a] D= 146.03° (來自DMSO中之溶液，c = 5.50 mg/mL) 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 2.09 - 2.28 (m, 1 H), 2.70 (br d, 1 H), 4.03 - 4.12 (m, 3 H), 4.19 (dd, 1 H), 5.78 - 6.20 (m, 1 H), 6.69 (s, 1 H), 7.08 (dd, 1 H), 7.16 - 7.27 (m, 3 H), 7.42 - 7.52 (m, 2 H), 7.80 - 7.95 (m, 2 H), 8.19 - 8.27 (m, 2 H), 8.35 (ddd, 1 H), 10.86 (s, 1 H), 12.39 (s, 1 H)。
實例41  (-)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-甲氧基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image633
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例40。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例41)分離對映異構體，得到標題化合物(41 mg)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例41)：R t= 3.75 min。 [a] D= -151.55° (來自DMSO中之溶液，c = 5.5 mg/mL) 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 2.09 - 2.28 (m, 1 H), 2.66 - 2.81 (m, 1 H), 4.08 (s, 3 H), 4.19 (dd, 1 H), 5.80 - 6.20 (m, 1 H), 6.69 (s, 1 H), 7.03 - 7.13 (m, 1 H), 7.16 - 7.28 (m, 3 H), 7.41 - 7.51 (m, 2 H), 7.81 - 7.94 (m, 2 H), 8.16 - 8.29 (m, 2 H), 8.33 - 8.39 (m, 1 H), 10.86 (s, 1 H), 12.39 (s, 1 H)。
實例 42(rac)-N-{4-[7-(環丙氧基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image635
將2-(2-溴吡啶-4-基)-7-(環丙氧基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶(參見中間物58，380 mg)、(rac)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(外消旋體) (參見中間物46，291 mg)、碳酸銫(873 mg，2.68 mmol)、二-三級丁基(2',4',6'-三異丙基-3,6-二甲氧基-[1,1'-聯苯]-2-基)膦(86.6 mg，179 µmol；CAS-RN:[1160861-53-9])及[(2-二-三級丁基膦基-3,6-二甲氧基-2',4'、6'-三異丙基-1,1'-聯苯)-2-(2'-胺基-1,1'-聯苯)]甲磺酸鈀(II)(76.3 mg，89.4 µmol；CAS-RN:[1536473-72-9])溶解於7.6 mL 1,4-二㗁烷中且在氮氣氛圍下於100℃攪拌1小時。用乙酸乙酯及水稀釋反應混合物。分離各層且用二氯甲烷/異丙醇(7:3)之混合物萃取水層。再分離各層且再次用乙酸乙酯萃取水層。使用耐水濾紙乾燥各有機層且減壓濃縮澄清濾液。藉由急驟層析(25g超管柱，梯度二氯甲烷/乙醇0-10%)及HPLC純化粗產物，得到具有分析純度之目標化合物：6 mg。 LC-MS (方法2): R t= 1.30 min; MS (ESIpos): m/z = 562 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 0.83 - 0.90 (m, 2 H), 0.91 - 1.02 (m, 2 H), 2.06 - 2.30 (m, 1 H), 2.63 - 2.83 (m, 1 H), 4.14 - 4.29 (m, 2 H), 5.84 - 6.21 (m, 1 H), 6.85 (s, 1 H), 7.04 - 7.10 (m, 1 H), 7.18 - 7.30 (m, 3 H), 7.42 - 7.51 (m, 2 H), 7.80 - 7.96 (m, 2 H), 8.18 - 8.28 (m, 2 H), 8.31 - 8.43 (m, 1 H), 10.87 (s, 1 H), 12.33 (s, 1 H)。- 含有芳族範圍內之雜質。
實例43  N-{4-[7-(環丙氧基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image637
外消旋化合物(參見實例43，17 mg)藉由製備型對掌性HPLC分離成對映異構體，得到對映異構體1 (7 mg，86.4% ee，參見實例44)及對映異構體2 (6 mg，98.6% ee，參見實例45)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-1；管柱：YMC Cellulose SB 5 µ，250×30；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇+ 0.1 vol%二乙胺；等度：70%A+30%B；流速：50 mL/min；溫度：25℃；UV：254 nm； 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Thermo Fisher UltiMate 3000；管柱：YMC Cellulose SB 3 µ，100×4.6；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：70%A+30%B；流速：1.4 mL/min；溫度：25℃；UV：254 nm； 分析型對掌性HPLC (方法參見實例44)：R t= 2.46 min。 ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 12.35 (br s, 1H), 10.87 (s, 1H), 8.40-8.32 (m, 1H), 8.27-8.18 (m, 2H), 7.96-7.90 (m, 1H), 7.89-7.80 (m, 1H), 7.51-7.40 (m, 2H), 7.27-7.16 (m, 3H), 7.07 (d, 1H), 6.85 (s, 1H), 6.25-5.77 (m, 1H), 4.30-4.13 (m, 2H), 2.81-2.61 (m, 1H), 2.28-2.09 (m, 1H), 1.00-0.92 (m, 2H), 0.91-0.82 (m, 2H)。
實例44  N-{4-[7-(環丙氧基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image639
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例43。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例44)分離對映異構體，得到標題化合物(6 mg)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例44)：R t= 3.43 min。 ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] = 12.34 (br s, 1H), 10.87 (s, 1H), 8.38-8.32 (m, 1H), 8.27-8.19 (m, 2H), 7.96-7.89 (m, 1H), 7.88-7.81 (m, 1H), 7.50-7.42 (m, 2H), 7.27-7.17 (m, 3H), 7.06 (dd, 1H), 6.85 (s, 1H), 6.17-5.81 (m, 1H), 4.30-4.13 (m, 2H), 2.82-2.60 (m, 1H), 2.28-2.09 (m, 1H), 0.99-0.92 (m, 2H), 0.91-0.83 (m, 2H)。含有少量雜質。
實例46  (2RS)- N-{4-[7-(環丙基甲基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2- b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image641
在25℃向2-(2-溴吡啶-4-基)-7-(環丙基甲基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶(300 mg，0.709 mmol，參見中間物128)及(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(308 mg，1.42 mmol，參見中間物46)於三級戊醇(15 ml)中之混合物中添加甲磺酸根基(2-二環己基膦基-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯)(2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基) (64.2 mg，0.071 mmol及碳酸銫(693 mg，2.13 mmol)。在氮氣氛圍下於100℃攪拌16小時之後，將混合物倒入水中且用乙酸乙酯萃取。將有機相用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。藉由急驟矽膠層析(10%甲醇/乙酸乙酯:石油醚=2:1至1:1)純化殘餘物，得到粗產物。藉由製備型HPLC (儀器：ACSWH-GX-L；管柱：Unisil 3-100 C18 Ultra 150*50 mm*3 µm；溶離劑A：水(0.225%甲酸)，溶離劑B：乙腈；梯度：0-10 min 38-58% B；流速25 ml/min；溫度：室溫；偵測器：UV 220/254 nm)進一步純化粗產物，得到40.2 mg (96%純度，9%產率)呈白色固體之標題化合物。 LC-MS (方法C): R t= 0.902 min; MS (ESIpos): m/z = 560.1 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, CD 3OD): δ [ppm] = 8.47 (d, J= 4.0 Hz, 1H), 8.21-8.19 (m, 2H), 7.91 (td, J= 8.0, 2.0 Hz, 1H), 7.74 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.46-7.42 (m, 2H), 7.38-7.35 (m, 1H), 7.12-7.07 (m, 3H), 6.96 (s, 1H), 5.84 (tt, J= 56.4, 4.4 Hz, 1H), 4.06-4.03 (m, 1H), 2.98 (d, J= 6.8 Hz, 2H), 2.76-2.66 (m, 1H), 2.29-2.19 (m, 1H) 1.28-1.23 (m, 1H), 0.68-0.64 (m, 2H), 0.38-0.34 (m, 2H)。
實例47  (2R或S)-N-{4-[7-(環丙基甲基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image643
外消旋化合物(參見實例46，30.0 mg)藉由製備型SFC (儀器：ACSWH-PREP-SFC-C；管柱：DAICEL CHIRALPAK AD (250 mm*30 mm,10 µm)；移動相；用於超臨界二氧化碳之相A，用於甲醇(0.1%氨水)之相B；等度溶離：30%相B (70%相A)；流速：60 g/min；循環時間：3.0分鐘；背壓：100巴以使二氧化碳保持超臨界流動；溫度：室溫；偵測器：UV 220 nm)分離成對映異構體，得到呈白色固體之 對映異構體 1(參見實例47，12.8 mg，99%純度，第一溶離，SFC滯留時間：1.659 min)。 LC-MS (方法C): R t= 0.798 min; MS (ESIpos): m/z = 560.3 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ [ppm] = 8.47-8.46 (m, 1H), 8.21-8.19 (m, 2H), 7.91 (td, J= 7.6, 1.6 Hz, 1H), 7.74 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.46-7.42 (m, 2H), 7.38-7.35 (m, 1H), 7.12-7.06 (m, 3H), 6.96 (s, 1H), 5.84 (tt, J= 56.4, 4.8 Hz, 1H), 4.06-4.03 (m, 1H), 2.98 (d, J= 7.2 Hz, 2H), 2.76-2.66 (m, 1H), 2.28-2.15 (m, 1H), 1.29-1.25 (m, 1H), 0.68-0.64 (m, 2H), 0.38-0.34 (m, 2H)。
實例48  (2R或S)-N-{4-[7-(環丙基甲基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image645
外消旋化合物(參見實例46，30.0 mg)藉由製備型SFC (儀器：ACSWH-PREP-SFC-C；管柱：DAICEL CHIRALPAK AD (250 mm*30 mm，10 µm)；移動相；用於超臨界二氧化碳之相A，用於甲醇(0.1%氨水)之相B；等度溶離：30%相B (70%相A)；流速：60 g/min；循環時間：3.0分鐘；背壓：100巴以使二氧化碳保持超臨界流動；溫度：室溫；偵測器：UV 220 nm)分離成對映異構體，得到呈白色固體之 對映異構體2 (參見實例48，13.2 mg，99%純度，第二溶離，SFC滯留時間：1.801 min)。 LC-MS (方法C): R t= 0.787 min; MS (ESIpos): m/z = 560.3 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ [ppm] = 8.47-8.46 (m, 1H), 8.21-8.19 (m, 2H), 7.91 (td, J= 8.0, 1.6 Hz, 1H), 7.74 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.46-7.43 (m, 2H), 7.38-7.35 (m, 1H), 7.12-7.06 (m, 3H), 6.96 (s, 1H), 5.84 (tt, J= 56.8, 4.8 Hz, 1H), 4.06-4.03 (m, 1H), 2.98 (d, J= 7.2 Hz, 2H), 2.76-2.66 (m, 1H), 2.26-2.15 (m, 1H), 1.29-1.25 (m, 1H), 0.68-0.64 (m, 2H), 0.38-0.34 (m, 2H)。
實例49  (2RS)-N-{4-[7-氯-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image647
向4-[7-氯-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺(參見中間物62，58.0 mg，180 µmol)於N,N-二甲基乙醯胺(1.3 ml)中之經攪拌溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(190 µl，1.1 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])、(rac)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(98.3 mg，451 µmol，CAS 1538957-14-0)及PyBOP (469 mg，901 µmol；CAS-RN:[128625-52-5])。在室溫下攪拌混合物48 h。添加水，攪拌混合物30分鐘且用乙酸乙酯萃取混合物。將有機相用氯化鈉溶液洗滌(三次)、乾燥(硫酸鈉)、過濾，且真空移除溶劑。矽膠層析(梯度：二氯甲烷/乙醇0-15%)，隨後進行胺基相-矽膠層析(梯度：二氯甲烷/乙醇0-15%)，得到15.0 mg (95%純度，15%產率)標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 1.23 min; MS (ESIpos): m/z = 522 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.48 (s, 1H), 10.93 (s, 1H), 8.40 (d, 1H), 8.38-8.35 (m, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.27 (dd, 1H), 8.09 (dt, 1H), 7.86 (td, 1H), 7.52-7.45 (m, 2H), 7.43 (d, 1H), 7.25 (ddd, 1H), 7.23-7.17 (m, 2H), 7.15-7.11 (m, 1H), 6.01 (tt, 1H), 4.21 (dd, 1H), 2.88-2.61 (m, 1H), 2.20 (dtq, 1H)。
實例50  (2RS)-N-{4-[7-{[(2R)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(2種立體異構體之混合物)
Figure 02_image649
向4-[7-{[(2R)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺(參見中間物69，46.0 mg，109 µmol)於N,N-二甲基乙醯胺(350 µl)中之經攪拌溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(150 µl，870 µmol；CAS-RN:[7087-68-5])、(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(119 mg，546 µmol，CAS 1538957-14-0)及PyBOP (454 mg，873 µmol；CAS-RN:[128625-52-5])。在室溫下攪拌混合物48 h。添加NaHCO 3飽和水溶液且用乙酸乙酯萃取。將有機相用氯化鈉溶液洗滌(三次)，乾燥(硫酸鈉)，過濾，且真空移除溶劑。矽膠層析(梯度：二氯甲烷/乙醇0-25%)，隨後進行胺基相-矽膠層析(梯度：己烷/乙酸乙酯25-100%)得到27.0 mg (90%純度，36%產率)標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 1.22 min; MS (ESIneg): m/z = 620 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.32 (br s, 1H), 10.90 (br d, 1H), 8.34 (d, 1H), 8.28-8.21 (m, 2H), 7.94 (d, 1H), 7.88-7.81 (m, 1H), 7.47 (dd, 2H), 7.28-7.16 (m, 3H), 7.08 (dt, 1H), 6.71 (s, 1H), 6.24-5.77 (m, 1H), 4.36-4.23 (m, 2H), 4.20 (br dd, 1H), 4.00 (dq, 2H), 3.86-3.78 (m, 1H), 3.74-3.62 (m, 2H), 3.59-3.48 (m, 2H), 2.81-2.61 (m, 2H), 2.29-2.11 (m, 1H)
實例51  (2R或S)-N-{4-[7-{[(2R)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(立體異構體1)
Figure 02_image651
外消旋化合物(參見實例50，22 mg)藉由製備型對掌性HPLC分離成對映異構體。粗對映異構體1用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體1 (7 mg，＞99.9% ee，參見實例51)。粗對映異構體2用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體2 (8 mg，97.3% ee，參見實例52)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-4；管柱：YMC Cellulose SB 10µ，250×50；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：50%A+50%B；流速：100 mL/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Thermo Fisher UltiMate 3000；管柱：YMC Cellulose SB 3 µ，100×4.6；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：50%A+50%B；流速：1.4 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性HPLC (方法參見實例51)：R t= 2.35 min。 LC-MS (方法2): R t= 1.16 min; MS (ESIpos): m/z = 622 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.33 (s, 1H), 10.89 (s, 1H), 8.39-8.30 (m, 1H), 8.28-8.21 (m, 2H), 7.97-7.90 (m, 1H), 7.84 (td, 1H), 7.52-7.43 (m, 2H), 7.26-7.16 (m, 3H), 7.12-7.05 (m, 1H), 6.71 (s, 1H), 6.19-5.83 (m, 1H), 4.29 (qd, 2H), 4.20 (br dd, 1H), 4.06-3.94 (m, 2H), 3.86-3.77 (m, 1H), 3.74-3.62 (m, 2H), 3.60-3.50 (m, 2H), 2.81-2.62 (m, 1H), 2.30-2.10 (m, 1H)。
實例52  (2R或S)-N-{4-[7-{[(2R)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(立體異構體2)
Figure 02_image653
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例50。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例51)分離對映異構體，隨後用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到標題化合物(8 mg，97.3% ee)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例51)：R t= 3.07 min。 LC-MS (方法2): R t= 1.09 min; MS (ESIpos): m/z = 622 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.32 (s, 1H), 10.90 (s, 1H), 8.38-8.31 (m, 1H), 8.28-8.21 (m, 2H), 7.97-7.90 (m, 1H), 7.84 (td, 1H), 7.52-7.43 (m, 2H), 7.27-7.16 (m, 3H), 7.08 (dd, 1H), 6.71 (s, 1H), 6.17-5.83 (m, 1H), 4.36-4.23 (m, 2H), 4.20 (br dd, 1H), 4.07-3.95 (m, 2H), 3.85-3.78 (m, 1H), 3.74-3.62 (m, 2H), 3.59-3.48 (m, 2H), 2.82-2.63 (m, 1H), 2.29-2.11 (m, 1H)。
實例53  (2RS)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺(2種立體異構體之混合物)
Figure 02_image655
將2-(2-溴吡啶-4-基)-5-氟-7-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶(參見中間物84，203 mg，446 µmol)溶解於1,4-二㗁烷(3.8 ml)中。添加tBuBrettPhos Pd G3 (CAS 1536473-72-9，38.1 mg，44.6 µmol)、tBuBrettPhos (CAS 1160861-53-9，43.2 mg，89.2 µmol)、(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(參見中間物46，145 mg，669 µmol)及碳酸銫(436 mg，1.34 mmol；CAS-RN:[534-17-8])。用氬氣使混合物脫氣三次且在100℃加熱1小時。反應混合物藉由矽膠急驟層析，梯度己烷/乙酸乙酯30-100%直接純化。然後，藉由在己烷/二氯甲烷混合物中攪拌來萃取產物，得到91.0 mg (95%純度，33%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 1.09 min; MS (ESIneg): m/z = 590 [M-H] -1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.31 (d, 1H), 10.89 (s, 1H), 8.39-8.31 (m, 1H), 8.29-8.19 (m, 2H), 7.96-7.90 (m, 1H), 7.84 (td, 1H), 7.47 (dd, 2H), 7.27-7.17 (m, 3H), 7.07 (dd, 1H), 6.67 (s, 1H), 6.20-5.83 (m, 1H), 5.37 (br s, 1H), 4.19 (br dd, 1H), 4.06-3.90 (m, 3H), 3.87-3.76 (m, 1H), 2.80-2.61 (m, 1H), 2.43-2.30 (m, 1H), 2.28-2.09 (m, 2H)
實例54  (2R或S)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺(立體異構體1)
Figure 02_image657
外消旋化合物(參見實例53，80 mg)藉由製備型對掌性HPLC分離成對映異構體。粗對映異構體1用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體1 (32 mg，98.8% ee，參見實例54)。粗對映異構體2用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體2 (30 mg，98.4% ee，參見實例55)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-1；管柱：YMC Cellulose SB 5 µ，250×30；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇+ 0.1 vol%二乙胺；等度：60%A+40%B；流速：50 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Thermo Fisher UltiMate 3000；管柱：YMC Cellulose SB 3 µ，100×4.6；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：60%A+40%B；流速：1.4 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性HPLC (方法參見實例54)：R t= 2.46 min。 [a]D = 129,60 ° (來自DMSO中之溶液，c =1,8  mg/mL) LC-MS (方法1): R t= 1.06 min; MS (ESIneg): m/z = 590 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.31 (s, 1H), 10.89 (s, 1H), 8.39-8.31 (m, 1H), 8.27-8.21 (m, 2H), 7.97-7.90 (m, 1H), 7.84 (td, 1H), 7.52-7.42 (m, 2H), 7.27-7.15 (m, 3H), 7.12-7.05 (m, 1H), 6.67 (s, 1H), 6.19-5.82 (m, 1H), 5.38 (dt, 1H), 4.19 (br dd, 1H), 4.06-3.89 (m, 3H), 3.81 (td, 1H), 2.83-2.60 (m, 1H), 2.42-2.30 (m, 1H), 2.28-2.09 (m, 2H)。
實例55  (2R或S)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺(立體異構體2)
Figure 02_image659
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例53。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例54)分離對映異構體，隨後用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到標題化合物(30 mg，98.4% ee)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例53)：R t= 3.38 min。 [α] D= -182.1° (來自DMSO中之溶液，c = 1.60 mg/mL) LC-MS (方法1): R t= 1.05 min; MS (ESIneg): m/z = 590 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.30 (s, 1H), 10.89 (s, 1H), 8.37-8.32 (m, 1H), 8.26-8.21 (m, 2H), 7.96-7.90 (m, 1H), 7.84 (td, 1H), 7.51-7.43 (m, 2H), 7.26-7.17 (m, 3H), 7.10-7.05 (m, 1H), 6.67 (s, 1H), 6.18-5.82 (m, 1H), 5.37 (dt, 1H), 4.20 (dd, 1H), 4.06-3.91 (m, 3H), 3.82 (td, 1H), 2.81-2.60 (m, 1H), 2.43-2.30 (m, 1H), 2.28-2.11 (m, 2H)。
實例56  (2RS)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-(4-甲基哌𠯤-1-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image661
向4-[5-氟-7-(4-甲基哌𠯤-1-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺(參見中間物91，12.0 mg，29.7 µmol)於N,N-二甲基乙醯胺(96 µl)中之經攪拌溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(41 µl，240 µmol；CAS-RN:[7087-68-5])、(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(CAS 1538957-14-0，32.4 mg，149 µmol)及Pybop (124 mg，238 µmol；CAS-RN:[128625-52-5])。在室溫下攪拌混合物48 h。添加NaHCO 3水溶液且用乙酸乙酯萃取混合物。將有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌(三次)，乾燥(硫酸鈉)，過濾，且真空移除溶劑。胺基矽膠層析(梯度：二氯甲烷/乙醇0-25%)，隨後矽膠層析(梯度：二氯甲烷/乙醇0-25%)得到5.00 mg (90%純度，25%產率)標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 1.16 min; MS (ESIneg): m/z = 602 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] (偵測到的信號) = 11.71 (s, 1H), 10.88 (s, 1H), 8.31 (d, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.95 (dt, 1H), 7.82 (td, 1H), 7.51-7.41 (m, 2H), 7.24-7.16 (m, 3H), 7.10 (dd, 1H), 6.39 (s, 1H), 6.18-5.81 (m, 1H), 4.19 (br dd, 1H), 2.80-2.61 (m, 1H), 2.59-2.53 (m, 4H), 2.44-2.35 (m, 1H), 2.26 (s, 3H), (來自未偵測到之哌𠯤之4H-低於水或DMSO峰)
實例57  (2RS)-N-(4-{7-[(2S)-1,4-二㗁烷-2-基甲氧基]-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基}吡啶-2-基)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(2種立體異構體之混合物)
Figure 02_image663
將2-(2-溴吡啶-4-基)-7-[(2S)-1,4-二㗁烷-2-基甲氧基]-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶(參見中間物133，284 mg，585 µmol)溶解於1,4-二㗁烷(5.0 ml)中。添加tBuBrettPhos Pd 3G (CAS 1536473-72-9，50.0 mg，58.5 µmol)、tBuBrettPhos (CAS 1160861-53-9，56.7 mg，117 µmol)、(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(參見中間物46，191 mg，878 µmol)及碳酸銫(572 mg，1.76 mmol；CAS-RN:[534-17-8])。將燒瓶抽空且用氬氣回填三次，並在100℃加熱混合物1小時。反應混合物直接藉由矽膠急驟層析，梯度己烷/乙酸乙酯30-100%純化，得到166 mg (95%純度，43%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 1.04 min; MS (ESIpos): m/z = 622 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.32 (s, 1H), 10.90 (d, 1H), 8.34 (dt, 1H), 8.28-8.21 (m, 2H), 7.97-7.91 (m, 1H), 7.84 (td, 1H), 7.47 (dd, 2H), 7.26-7.16 (m, 3H), 7.08 (dt, 1H), 6.71 (s, 1H), 6.21-5.84 (m, 1H), 4.36-4.23 (m, 2H), 4.20 (br dd, 1H), 4.08-3.96 (m, 2H), 3.85-3.77 (m, 1H), 3.73-3.62 (m, 2H), 3.59-3.48 (m, 2H), 2.80-2.62 (m, 1H), 2.28-2.10 (m, 1H)。
實例58  (2R或S)-N-{4-[7-{[(2S)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(立體異構體1)
Figure 02_image665
兩種立體異構體(參見實例57，160 mg，257 µmol)藉由製備型對掌性HPLC分離。粗立體異構體1用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到立體異構體1 (65.0 mg，＞99% ee，參見實例58)。粗立體異構體2用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到立體異構體2 (70.0 mg，98.5% ee，參見實例59)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-1；管柱：YMC Cellulose SB 5µ，250×30； 溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇+0.1vol%二乙胺；等度：50%A+50%B；流速：50 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Thermo Fisher UltiMate 3000；管柱：YMC Cellulose SB 3µ，100×4.6； 溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：50%A+50%B；流速：1.4 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性HPLC (方法參見實例58)：R t= 2.27 min。 [α] D= +150,3° (來自DMSO中之溶液，c = 2.4 mg/mL) LC-MS (方法2): R t= 1.26 min; MS (ESIpos): m/z = 622 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.32 (br s, 1H), 10.89 (br s, 1H), 8.33 (br d, 1H), 8.28-8.20 (m, 2H), 7.94 (dt, 1H), 7.83 (br t, 1H), 7.51-7.42 (m, 2H), 7.26-7.16 (m, 3H), 7.08 (dd, 1H), 6.70 (br s, 1H), 6.21-5.83 (m, 1H), 4.36-4.23 (m, 2H), 4.20 (br dd, 1H), 4.07-3.95 (m, 2H), 3.85-3.78 (m, 1H), 3.73-3.62 (m, 2H), 3.59-3.48 (m, 2H), 2.82-2.62 (m, 1H), 2.30-2.10 (m, 1H)。
實例59  (2R或S)-N-{4-[7-{[(2S)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(立體異構體2)
Figure 02_image667
關於作為立體異構體混合物之標題化合物的製備，參見實例57。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例58)分離立體異構體，隨後用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到標題化合物(70.0 mg，98.5% ee)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例58)：R t= 3.05 min。 [α] D= -147,82° (來自DMSO中之溶液，c = 2.4 mg/mL) LC-MS (方法2): R t= 1.24 min; MS (ESIneg): m/z = 620 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.32 (br s, 1H), 10.88 (br s, 1H), 8.33 (br d, 1H), 8.29-8.17 (m, 2H), 7.93 (d, 1H), 7.83 (br s, 1H), 7.52-7.43 (m, 2H), 7.27-7.15 (m, 3H), 7.09 (dd, 1H), 6.80-6.59 (m, 1H), 6.19-5.82 (m, 1H), 4.37-4.24 (m, 2H), 4.19 (br dd, 1H), 4.05-3.96 (m, 2H), 3.85-3.77 (m, 1H), 3.73-3.62 (m, 2H), 3.59-3.49 (m, 2H), 2.81-2.62 (m, 1H), 2.29-2.11 (m, 1H)。
實例60  (2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[3-氟-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image669
將6-(2-溴吡啶-4-基)-3-氟-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤(參見中間物103，62.0 mg，167 µmol)溶解於1,4-二㗁烷(1.4 ml)中。添加碳酸銫(164 mg，502 µmol；CAS-RN:[534-17-8])、tBuBrettPhos Pd G3 (CAS 1536473-72-9，14.3 mg，16.7 µmol)、tBuBrettPhos (CAS 1160861-53-9，16.2 mg，33.5 µmol)及(rac)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(參見中間物46，54.6 mg，251 µmol)。用氬氣使混合物脫氣三次且在100℃加熱1小時。反應混合物藉由矽膠急驟層析，梯度己烷/乙酸乙酯30-100%直接純化。產物自二氯甲烷結晶且再次藉由胺基矽膠層析純化，得到12.0 mg (95%純度，13%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 1.09 min; MS (ESIpos): m/z = 507 [M+H] +1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 13.02 (br s, 1H), 10.93 (s, 1H), 8.53 (d, 1H), 8.44-8.39 (m, 1H), 8.33-8.28 (m, 2H), 7.98 (dt, 1H), 7.88 (td, 1H), 7.50-7.42 (m, 2H), 7.30 (ddd, 1H), 7.25-7.16 (m, 3H), 6.00 (tt, 1H), 4.19 (dd, 1H), 2.81-2.61 (m, 1H), 2.28-2.10 (m, 1H)。
實例61  (2RS)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-{[(2RS)-氧雜環戊-2-基]甲氧基}-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺(四種立體異構體之混合物)
Figure 02_image671
向4-[5-氟-7-{[rac)-氧雜環戊-2-基]甲氧基}-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺(參見中間物100，50.7 mg，125 µmol)於N,N-二甲基乙醯胺(890 µl)中之經攪拌溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(170 µl，1.0 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])、(rac)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(CAS 1538957-14-0，109 mg，500 µmol)及Pybop (390 mg，750 µmol；CAS-RN:[128625-52-5])。在室溫下攪拌混合物48 h。添加水，攪拌混合物30分鐘且用乙酸乙酯萃取混合物。用半濃縮NaCl水溶液洗滌有機層三次且用NaHCO 3飽和水溶液洗滌一次。經由耐水濾紙乾燥有機層且減壓濃縮。矽膠層析(梯度：己烷/乙酸乙酯20-100%)得到14.0 mg (95%純度，18%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 1.09 min; MS (ESIpos): m/z = 606 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.56-12.08 (m, 1H), 10.88 (d, 1H), 8.34 (ddt, 1H), 8.27-8.20 (m, 2H), 7.96-7.91 (m, 1H), 7.84 (td, 1H), 7.51-7.43 (m, 2H), 7.26-7.17 (m, 3H), 7.08 (dt, 1H), 6.70 (s, 1H), 6.18-5.83 (m, 1H), 4.38-4.23 (m, 3H), 4.19 (br dd, 1H), 3.87-3.79 (m, 1H), 3.72 (td, 1H), 2.80-2.61 (m, 1H), 2.29-1.69 (m, 5H)。
實例62  (2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[2-氟-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image673
將6-(2-溴吡啶-4-基)-2-氟-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤(參見中間物136，67.0 mg，181 µmol)溶解於1,4-二㗁烷(1.5 ml)中。添加tBuBrettPhos Pd 3G (CAS 1536473-72-9，15.5 mg，18.1 µmol)、tBuBrettPhos (CAS 1160861-53-9，17.5 mg，36.2 µmol)、(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(參見中間物46，59.0 mg，271 µmol)及碳酸銫(177 mg，543 µmol；CAS-RN:[534-17-8])。將燒瓶抽空且用氬氣回填三次，並在100℃加熱混合物1小時。反應混合物直接藉由矽膠急驟層析，梯度己烷/乙酸乙酯30-100%，接著第二胺基矽膠急驟層析，梯度己烷/乙酸乙酯30-100%純化，得到36.0 mg (95%純度，37%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 1.13 min; MS (ESIneg): m/z = 505 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 13.12 (br s, 1H), 10.94 (s, 1H), 8.41 (dt, 1H), 8.38 (d, 1H), 8.33-8.30 (m, 2H), 7.93-7.86 (m, 2H), 7.50-7.43 (m, 2H), 7.34-7.26 (m, 1H), 7.25-7.15 (m, 3H), 6.00 (tt, 1H), 4.19 (dd, 1H), 2.79-2.61 (m, 1H), 2.19 (tdt, 1H)。
實例63  (2R或S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[2-氟-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image675
外消旋化合物(參見實例62，30.0 mg)藉由製備型對掌性HPLC分離成對映異構體。粗對映異構體1用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體1 (10.7 mg，＞99% ee，參見實例63)。粗對映異構體2用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體2 (12.0 mg，89.6% ee，參見實例64)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-1；管柱：YMC Cellulose SB 5 µ，250×30；溶離劑A：甲基三級丁基醚+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：95%A+5%B；流速：50 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Thermo Fisher UltiMate 3000；管柱：YMC Cellulose SB 3 µ，100×4.6；溶離劑A：甲基三級丁基醚+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：95%A+5%B；流速：1.4 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性HPLC (方法參見實例63)：R t= 1.85 min。 [α] D= +226,9° (來自DMSO中之溶液，c = 1.6 mg/mL) LC-MS (方法2): R t= 1.13 min; MS (ESIpos): m/z = 507 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 13.12 (br s, 1H), 10.94 (s, 1H), 8.41 (dt, 1H), 8.38 (d, 1H), 8.34-8.30 (m, 2H), 8.01-7.80 (m, 2H), 7.49-7.42 (m, 2H), 7.34-7.27 (m, 1H), 7.24-7.16 (m, 3H), 6.24-5.78 (m, 1H), 4.19 (dd, 1H), 2.80-2.61 (m, 1H), 2.30-2.10 (m, 1H)。
實例 64(2R或S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[2-氟-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image677
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例62。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例63)分離對映異構體，隨後用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到標題化合物(12.0 mg，89.6% ee)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例63)：R t= 2.40 min。 [α] D= -184,9° (來自DMSO中之溶液，c = 1.7 mg/mL) LC-MS (方法2): R t= 1.15 min; MS (ESIpos): m/z = 507 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 13.12 (br s, 1H), 10.94 (s, 1H), 8.41 (dt, 1H), 8.38 (d, 1H), 8.33-8.30 (m, 2H), 7.93-7.86 (m, 2H), 7.50-7.42 (m, 2H), 7.30 (td, 1H), 7.25-7.16 (m, 3H), 6.17-5.84 (m, 1H), 4.19 (dd, 1H), 2.79-2.61 (m, 1H), 2.29-2.10 (m, 1H)。
實例65  (2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-c]嗒𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image679
在氫氣(15 psi)下，在室溫下攪拌(2RS)-N-{4-[3-氯-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-c]嗒𠯤-6-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(參見實例68，380 mg，0.727 mmol)及鈀/活性炭(77.3 mg，含有50%水，10%純度)於甲醇(50 mL)中之混合物16小時。經由矽藻土墊過濾混合物。濃縮濾液，得到殘餘物。藉由製備型HPLC (儀器：ACSWH-GX-k；管柱：Phenomenex Gemini-NX C18 75*30 mm*3 µm；溶離劑A：水(0.225%甲酸)，溶離劑B：乙腈；梯度：0-10 min 15-45% B；流速25 ml/min；溫度：室溫；偵測器：UV 220/254 nm)純化殘餘物，得到45 mg (95%純度)標題化合物。 LC-MS (方法C): R t= 0.774 min; MS (ESIpos): m/z = 489.3 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ [ppm] = 9.02 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 8.54 (d, J= 4.0 Hz, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.29 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 8.01-7.92 (m, 2H), 7.81 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 7.47-7.43 (m, 3H), 7.18-7.16 (m, 1H), 7.13-7.08 (m, 2H), 5.98-5.69 (m, 1H), 4.07-4.03 (m, 1H), 2.76-2.68 (m, 1H), 2.28-2.16 (m, 1H)。
實例66  (2R或2S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-c]嗒𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image681
外消旋化合物(參見實例65，35.0 mg)藉由製備型SFC (儀器：ACSWH-PREP-SFC-A；管柱：DAICEL CHIRALCEL OD (250 mm*30 mm，10 µm)；移動相；用於超臨界二氧化碳之相A，用於甲醇(0.1%氨水)之相B；等度溶離：25%相B (50%相A)；流速：70 ml/min；循環時間：3.5分鐘；背壓：100巴以使二氧化碳保持超臨界流動；溫度：室溫；偵測器：UV 220 nm)分離成對映異構體，得到呈黃色固體之 對映異構體 1(第一溶離，SFC滯留時間：1.707 min，13.3 mg，96%純度，參見實例66)。 LC-MS (方法C): R t= 0.801 min; MS (ESIpos): m/z = 489.2 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ [ppm] = 9.01 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 8.54-8.52 (m, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.29 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 8.00-7.91 (m, 2H), 7.80 (d, J= 5.6 Hz, 1H),7.46-7.42 (m, 3H), 7.17-7.16 (m, 1H), 7.12-7.08 (m, 2H), 5.98-5.69 (m, 1H), 4.08-4.01 (m, 1H), 2.76-2.61 (m, 1H), 2.29-2.11 (m, 1H)。
實例67  (2R或S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-c]嗒𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image683
外消旋化合物(參見實例65，35.0 mg)藉由製備型SFC (儀器：ACSWH-PREP-SFC-A；管柱：DAICEL CHIRALCEL OD (250 mm*30 mm，10 µm)；移動相；用於超臨界二氧化碳之相A，用於甲醇(0.1%氨水)之相B；等度溶離：25%相B (50%相A)；流速：70 ml/min；循環時間：3.5分鐘；背壓：100巴以使二氧化碳保持超臨界流動；溫度：室溫；偵測器：UV 220 nm)分離成對映異構體，得到呈黃色固體之 對映異構體 2(第二溶離，SFC滯留時間：1.235 min，13.1 mg，95%純度，參見實例67)。 LC-MS (方法C): R t= 0.801 min; MS (ESIpos): m/z = 489.2 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ [ppm] = 9.01 (d, J= 6 Hz, 1H), 8.53 (d, J= 4.4 Hz, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.28 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 8.01-7.91 (m, 2H), 7.79 (d, J= 6.0 Hz, 1H),7.45-7.42 (m, 3H), 7.18-7.16 (dd, J= 5.2 Hz, J= 1.6 Hz 1H), 7.12-7.08 (m, 2H), 5.98-5.68 (m, 1H), 4.06-4.03 (m, 1H), 2.76-2.62 (m, 1H), 2.26-2.18 (m, 1H)。
實例68  (2RS)-N-{4-[3-氯-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-c]嗒𠯤-6-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image685
用氮氣吹掃(2RS)-N-(4-{[6-氯-4-(2,2,2-三氟乙醯胺基)嗒𠯤-3-基]乙炔基}吡啶-2-基)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(參見中間物173，550 mg，0.964 mmol)、2-碘吡啶(237 mg，1.16 mmol)、甲磺酸根基(2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯)(2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (81.4 mg，0.096 mmol)及碳酸銫(943 mg，2.89 mmol)於1-甲基-2-吡咯啶酮(10 ml)中之混合物。在氮氣下於100℃攪拌16小時之後，將混合物冷卻至室溫，倒入水中且用乙酸乙酯萃取。有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。藉由急驟管柱層析(10%甲醇/乙酸乙酯:石油醚=0:1至5:1)純化殘餘物，得到400 mg (97%純度，79產率)呈黃色固體之 標題化合物。 LC-MS (方法C): R t= 0.798 min; MS (ESIpos): m/z = 523.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ [ppm] = 8.53 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.29 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 8.00-7.95 (m, 1H), 7.94-7.88 (m, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.47-7.40 (m, 3H), 7.15 (dd, J= 5.4, 1.6 Hz, 1H), 7.10 (t, J= 8.8 Hz, 2H), 6.00-5.67 (m, 1H), 4.08-4.01 (m, 1H), 2.81-2.62 (m, 1H), 2.31-2.13 (m, 1H)。
實例69  (2RS)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-(𠰌啉-4-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image687
將2-(2-溴吡啶-4-基)-5-氟-7-(𠰌啉-4-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶(參見中間物141，60.2 mg，133 µmol)溶解於1,4-二㗁烷(1.1 ml)中。添加tBuBrettPhos Pd 3G (CAS 1536473-72-9，11.3 mg，13.3 µmol)、tBuBrettPhos (CAS 1160861-53-9，12.8 mg，26.5 µmol)、(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(參見中間物46，43.2 mg，199 µmol)及碳酸銫(130 mg，398 µmol；CAS-RN:[534-17-8])。將燒瓶抽空且用氬氣回填三次，並在100℃加熱混合物1小時。濃縮反應混合物且藉由矽膠急驟層析，梯度己烷/乙酸乙酯60-100%純化，得到10.1 mg (90%純度，12%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 1.06 min; MS (ESIneg): m/z = 589 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 11.78 (s, 1H), 10.89 (s, 1H), 8.29 (dd, 2H), 8.20 (s, 1H), 7.96 (dt, 1H), 7.88-7.79 (m, 1H), 7.51-7.40 (m, 2H), 7.25-7.15 (m, 3H), 7.10 (dd, 1H), 6.45-6.36 (m, 1H), 6.16-5.82 (m, 1H), 4.19 (br dd, 1H), 3.89-3.79 (m, 4H), 3.33-3.25 (m, 4H), 2.79-2.61 (m, 1H), 2.28-2.09 (m, 1H)。
實例70  (2RS)-N-{4-[5-氯-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image689
將4-[5-氯-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺(參見中間物76，47.0 mg)、(rac)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(外消旋體) (47.8 mg，219 µmol)、N,N-二異丙基乙胺(150 µL，880 µmol)及Pybop (228 mg，438 µmol；CAS-RN:[128625-52-5])溶解於850 µL DMA中且在氮氣氛圍下於室溫攪拌2天。此外，添加(rac)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(外消旋體) (47.8 mg，219 µmol)、N,N-二異丙基乙胺(150 µL，880 µmol)及Pybop (228 mg，438 µmol；CAS-RN:[128625-52-5])，且在室溫下攪拌反應混合物隔夜。用二氯甲烷稀釋反應混合物且添加碳酸氫鈉飽和水溶液及水。將其攪拌10分鐘，有機層經由塗有聚矽氧之濾紙過濾且減壓濃縮。藉由HPLC在鹼性條件下純化粗產物，得到92%純度之目標化合物：32 mg。 LC-MS (方法2): R t= 1.27 min; MS (ESIpos): m/z = 522 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 2.10 - 2.29 (m, 1 H), 2.62 - 2.83 (m, 1 H), 4.20 (dd, 1 H), 5.81 - 6.21 (m, 1 H), 7.10 (dd, 1 H), 7.16 - 7.25 (m, 2 H), 7.27 - 7.32 (m, 2 H), 7.42 - 7.51 (m, 2 H), 7.85 - 7.99 (m, 3 H), 8.25 - 8.33 (m, 2 H), 8.37 - 8.46 (m, 1 H), 10.93 (s, 1 H), 12.38 (s, 1 H)。- 含有乙醇。
實例71  (2RS)-N-(4-(6-氟-3-(吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基)-2-(4-氟苯基)-3-羥基丙醯胺(外消旋體)
Figure 02_image691
將2-(4-氟苯基)-3-羥基-丙酸(中間物118，72.3 mg，393 µmol)溶解於1 mL吡啶中。添加4-[6-氟-3-(2-吡啶基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺(中間物24，60 mg，196 µmol)及1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳化二亞胺(113 mg，589 µmol，3當量，CAS-RN:[1892-57-5])。在25℃攪拌反應混合物12 h。藉由添加1 mL水稀釋反應混合物且用EtOAc (1 mL×3)萃取。將合併之有機層用鹽水(1 mL×3)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且真空濃縮。粗殘餘物藉由逆相製備型HPLC (管柱：Phenomenex luna C18 150*25mm* 10um；移動相：[水(0.225% FA)-ACN]；B%：9%-39%，經11.5min)純化，得到94%純度之標題化合物：16 mg，31.9 µmol，16%產率。 LC-MS (方法3): R t=1.180 min; MS (ESIpos): m/z = 472.3 [M+H] + 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] 12.46 - 12.28 (m, 1H), 10.91 - 10.77 (m, 1H), 8.50 (br s, 1H), 8.48 - 8.45 (m, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.31 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 8.11 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.91 (dt, J= 1.6, 7.6 Hz, 1H), 7.79 (dd, J= 2.4, 9.6 Hz, 1H), 7.52 - 7.42 (m, 2H), 7.36 - 7.28 (m, 1H), 7.28 - 7.19 (m, 2H), 7.17 (d, J= 4.4 Hz, 1H), 5.04 (t, J= 4.4 Hz, 1H), 4.16 - 4.03 (m, 2H), 3.60 (td, J= 4.4, 9.2 Hz, 1H)。
實例72  (2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[4-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(2種立體異構體之混合物)
Figure 02_image693
向4-[4-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-胺(參見中間物146，162 mg，433 µmol)於DMA (1.4 mL)中之經攪拌溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(600 µl，3.5 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])、(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(472 mg，2.16 mmol)及PyBOP (1.80 g，3.46 mmol；CAS-RN:[128625-52-5])。在室溫下攪拌混合物72 h。用碳酸氫鈉飽和水溶液稀釋反應混合物且用乙酸乙酯萃取。將有機層用半飽和氯化鈉溶液洗滌(三次)，乾燥且真空移除溶劑。粗產物藉由矽膠急驟層析，梯度二氯甲烷/乙醇0-25%，隨後的第二胺基矽膠急驟層析，梯度己烷/乙酸乙酯25-100%純化，得到92.0 mg (95%純度，35%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 1.02 min; MS (ESIneg): m/z = 573 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.68 (s, 1H), 10.93 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.34 (dt, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.28-8.25 (m, 1H), 8.09 (dt, 1H), 7.86 (td, 1H), 7.51-7.43 (m, 2H), 7.27-7.17 (m, 3H), 7.12 (dd, 1H), 6.01 (tt, 1H), 5.87-5.83 (m, 1H), 4.20 (dd, 1H), 4.06-3.91 (m, 3H), 3.88-3.79 (m, 1H), 2.83-2.62 (m, 1H), 2.43-2.11 (m, 3H)。
實例73  (2R或S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[4-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(立體異構體1)
Figure 02_image695
兩種立體異構體(參見實例72，98.0 mg，171 µmol)藉由製備型對掌性HPLC分離。粗立體異構體1用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到立體異構體1 (42.0 mg，＞99% ee，參見實例73)。粗立體異構體2用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到立體異構體2 (41.0 mg，＞99% ee，參見實例74)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-3；管柱：YMC Cellulose SB 5µ，250×30； 溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇+0.1 vol%二乙胺；等度：80%A+20%B；流速：50 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Thermo Fisher UltiMate 3000；管柱：YMC Cellulose SB 3µ，100×4.6； 溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：80%A+20%B；流速：1.4 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性HPLC (方法參見實例73)：R t= 4.04 min。 [α] D= +130,54° (來自DMSO中之溶液，c = 2.5 mg/mL) LC-MS (方法1): R t= 1.03 min; MS (ESIneg): m/z = 573 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.68 (s, 1H), 10.93 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.37-8.32 (m, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 8.09 (dt, 1H), 7.86 (td, 1H), 7.52-7.43 (m, 2H), 7.28-7.17 (m, 3H), 7.12 (dd, 1H), 6.01 (tt, 1H), 5.85 (ddd, 1H), 4.20 (dd, 1H), 4.05-3.92 (m, 3H), 3.83 (td, 1H), 2.81-2.62 (m, 1H), 2.42-2.30 (m, 1H), 2.28-2.11 (m, 2H)。
實例74  (2R或S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[4-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(立體異構體2)
Figure 02_image697
關於作為立體異構體混合物之標題化合物的製備，參見實例72。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例73)分離立體異構體，隨後用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到標題化合物(41.0 mg，＞99% ee)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例73)：R t= 6.31 min。 [α] D= -118,9° (來自DMSO中之溶液，c = 2.7 mg/mL) LC-MS (方法1): R t= 1.02 min; MS (ESIneg): m/z = 573 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.69 (s, 1H), 10.93 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.37-8.32 (m, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.28-8.25 (m, 1H), 8.09 (dt, 1H), 7.86 (td, 1H), 7.51-7.44 (m, 2H), 7.27-7.17 (m, 3H), 7.12 (dd, 1H), 6.01 (tt, 1H), 5.89-5.83 (m, 1H), 4.20 (dd, 1H), 4.05-3.92 (m, 3H), 3.83 (td, 1H), 2.81-2.62 (m, 1H), 2.41-2.30 (m, 1H), 2.28-2.11 (m, 2H)。
實例 75(2RS)-N-{4-[7-(2,2-二氟乙氧基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image699
向4-[7-(2,2-二氟乙氧基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺(參見中間物153，136 mg，370 µmol)於DMA (1.2 mL)中之經攪拌溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(390 µl，2.2 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])、(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(404 mg，1.85 mmol)及PyBOP (963 mg，1.85 mmol；CAS-RN:[128625-52-5])。在室溫下攪拌混合物48 h。用碳酸氫鈉飽和水溶液稀釋反應混合物且用乙酸乙酯萃取。將有機層用半飽和氯化鈉溶液洗滌(三次)，乾燥且真空移除溶劑。粗產物藉由矽膠急驟層析(梯度二氯甲烷/乙醇0-25%)純化且用二氯甲烷濕磨，得到114 mg (95%純度，52%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 1.05 min; MS (ESIneg): m/z = 566 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.24 (s, 1H), 10.88 (s, 1H), 8.36-8.31 (m, 2H), 8.28 (s, 1H), 8.23 (dd, 1H), 8.13 (dt, 1H), 7.84 (td, 1H), 7.54-7.43 (m, 2H), 7.25-7.17 (m, 3H), 7.13-7.07 (m, 1H), 7.00 (d, 1H), 6.51 (tt, 1H), 6.01 (tt, 1H), 4.64 (td, 2H), 4.20 (dd, 1H), 2.80-2.62 (m, 1H), 2.29-2.10 (m, 1H)。
實例76  (2R或S)-N-{4-[7-(2,2-二氟乙氧基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image701
外消旋化合物(參見實例75，106 mg)藉由製備型對掌性HPLC分離成對映異構體，得到對映異構體1 (4.90 mg，98.3% ee，參見實例76)及對映異構體2 (2.7 mg，＞99% ee，參見實例77)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-1；管柱：YMC Cellulose SB 5 µ，250×30；溶離劑A：甲基三級丁基醚+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：90%A+10%B；流速：90 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Waters Acquity UPLCMS SingleQuad；管柱：Acquity UPLC BEH C18 1.7µ，50×2.1mm；溶離劑A：水 + 0.2 vol%氨水(32%)；溶離劑B：乙腈；梯度：0-1.6 min 1-99% B，1.6-2.0 min 99% B；流速：0.8 ml/min；溫度：60℃；DAD掃描：210-400 nm及儀器：Thermo Fisher UltiMate 3000；管柱：YMC Cellulose SB 3µ，100×4.6；溶離劑A：甲基三級丁基醚 + 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：90%A+10%B；流速：1.4 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性HPLC (方法參見實例76)： R t= 3.28 min。 LC-MS (方法1): R t= 1.09 min; MS (ESIneg): m/z = 566 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.25 (s, 1H), 10.88 (s, 1H), 8.34 (d, 2H), 8.28 (s, 1H), 8.25-8.21 (m, 1H), 8.13 (d, 1H), 7.84 (td, 1H), 7.52-7.43 (m, 2H), 7.26-7.17 (m, 3H), 7.10 (dd, 1H), 7.00 (d, 1H), 6.51 (tt, 1H), 6.01 (tt, 1H), 4.64 (td, 2H), 4.20 (dd, 1H), 2.81-2.62 (m, 1H), 2.30-2.10 (m, 1H)。
實例77  (2R或S)-N-{4-[7-(2,2-二氟乙氧基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image703
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例75。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例76)分離對映異構體，得到標題化合物(2.7 mg，＞99% ee)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例76)：R t= 4.52 min。 LC-MS (方法1): R t= 1.08 min; MS (ESIneg): m/z = 566 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.24 (s, 1H), 10.88 (s, 1H), 8.37-8.30 (m, 2H), 8.28 (s, 1H), 8.23 (dd, 1H), 8.13 (dt, 1H), 7.84 (td, 1H), 7.53-7.44 (m, 2H), 7.26-7.17 (m, 3H), 7.14-7.08 (m, 1H), 7.00 (d, 1H), 6.51 (tt, 1H), 6.01 (tt, 1H), 4.64 (td, 2H), 4.20 (dd, 1H), 2.80-2.62 (m, 1H), 2.30-2.10 (m, 1H)。
實例78  (2RS)-N-{4-[4-(2,2-二氟乙氧基)-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image705
將(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(59.2 mg，271 µmol)及4-(二甲基胺基)吡啶(49.7 mg，407 µmol；CAS-RN:[1122-58-3])於THF (1.5 ml)中之混合物冷卻至0℃，隨後緩慢添加2,4,6-三氯苯甲醯氯(32 µl，200 µmol；CAS-RN:[4136-95-2])且在室溫下攪拌1 h。逐滴添加4-[4-(2,2-二氟乙氧基)-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-胺(參見中間物157，50.0 mg，136 µmol)及4-(二甲基胺基)吡啶(49.7 mg，407 µmol；CAS-RN:[1122-58-3])於N,N-二甲基乙醯胺(770 µl)中之溶液且在60℃加熱混合物1 h。製備第二溶液：將含(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(35.5 mg，163 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(31 µl，180 µmol；CAS-RN:[7087-68-5])之THF (1.0 ml)冷卻至0℃，隨後逐滴添加2,4,6-三氯苯甲醯氯(28 µl，180 µmol；CAS-RN:[4136-95-2])且在室溫下攪拌1 h。將第二溶液逐滴添加至反應混合物中。接著在60℃下攪拌混合物1 h且在室溫下再攪拌16 h。添加碳酸氫鈉飽和水溶液(10 ml)且在室溫下攪拌30 min。將混合物用水稀釋且用乙酸乙酯萃取三次。將有機層用半飽和鹽水洗滌三次，經疏水性濾紙乾燥，濃縮且藉由矽膠急驟層析，梯度己烷/乙酸乙酯30-100%純化，得到56.0 mg (99%純度，72%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 1.13 min; MS (ESIneg): m/z = 567 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.87 (s, 1H), 10.93 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.39-8.33 (m, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 8.07 (dt, 1H), 7.86 (td, 1H), 7.53-7.42 (m, 2H), 7.28-7.23 (m, 1H), 7.23-7.17 (m, 2H), 7.13 (dd, 1H), 6.52 (tt, 1H), 6.01 (tt, 1H), 4.90 (td, 2H), 4.20 (dd, 1H), 2.81-2.61 (m, 1H), 2.20 (tdt, 1H)
實例79  (2R或S)-N-{4-[4-(2,2-二氟乙氧基)-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image707
外消旋化合物(參見實例78，102 mg)藉由製備型對掌性HPLC分離成對映異構體。粗對映異構體1用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體1 (38.9 mg，＞99% ee，參見實例79)。粗對映異構體2用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體2 (38.7 mg，99.3% ee，參見實例80)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-2；管柱：YMC Cellulose SB 5µ，250×30；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：80%A+20%B；流速：70 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm； 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Thermo Fisher UltiMate 3000；管柱：YMC Cellulose SB 3 µ，100×4.6；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：80%A+20%B；流速：1.4 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm； 分析型對掌性HPLC (方法參見實例80)：R t= 3.52 min。 [α] D= +153,07 ° (來自DMSO中之溶液，c = 2.1 mg/mL) 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.87 (br s, 1H), 10.93 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.38-8.33 (m, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 8.07 (dt, 1H), 7.86 (td, 1H), 7.51-7.44 (m, 2H), 7.29-7.17 (m, 3H), 7.13 (dd, 1H), 6.52 (tt, 1H), 6.01 (tt, 1H), 4.90 (td, 2H), 4.20 (dd, 1H), 2.81-2.62 (m, 1H), 2.29-2.11 (m, 1H)。
實例80  (2R或S)-N-{4-[4-(2,2-二氟乙氧基)-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image709
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例78。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例79)分離對映異構體，隨後用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到標題化合物(38.7 mg，99.3% ee)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例79)：R t= 5.41 min。 [α] D= -160.53 ° (來自DMSO中之溶液，c = 1.7 mg/mL) 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 13.05-12.56 (m, 1H), 10.93 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.38-8.33 (m, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 8.07 (dt, 1H), 7.86 (td, 1H), 7.51-7.43 (m, 2H), 7.29-7.17 (m, 3H), 7.13 (dd, 1H), 6.52 (tt, 1H), 6.01 (tt, 1H), 5.42-5.42 (m, 1H), 4.90 (td, 2H), 4.20 (dd, 1H), 2.82-2.62 (m, 1H), 2.29-2.11 (m, 1H)。
實例81  4,4-二氟-2-(4-氟苯基)- N-{4-[6-甲氧基-3-(吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺
Figure 02_image711
將2-(2-溴吡啶-4-基)-6-甲氧基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶(中間物106，330 mg，866 µmol)、4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(中間物46，282 mg，1.30 mmol)、碳酸銫(846 mg，2.60 mmol)、二-三級丁基(2',4',6'-三異丙基-3,6-二甲氧基-[1,1'-聯苯]-2-基)膦(83.9 mg，173 µmol；CAS-RN:[1160861-53-9])及[(2-二-三級丁基膦基-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯)-2-(2'-胺基-1,1'-聯苯)]甲磺酸鈀(II) (74.0 mg，86.6 µmol；CAS-RN:[1536473-72-9])溶解於1,4-二㗁烷(7.5 ml)中且在氮氣氛圍下於100℃攪拌16 h。用EtOAc及水稀釋反應混合物。將其攪拌幾分鐘，隨後過濾。分離各相且用EtOAc萃取水層。減壓濃縮合併之有機相且殘餘物藉由急驟層析(25g矽膠管柱，梯度己烷/EtOAc/50%-100%，隨後乙醇0-10%)純化，得到29.3 mg目標化合物(97%純度，6%產率)。 LC-MS (方法2): R t= 1.15 min; MS (ESIpos): m/z = 518 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] = 2.12 - 2.28 (m, 1H), 2.60 - 2.80 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 4.20 (dd, 1H), 5.81-6.23 (m, 1H), 6.01 (tt, 1H), 7.10 (dd, 1H), 7.18-7.27 (m, 3H), 7.34 (d, 1H), 7.45 - 7.49 (m, 2H), 7.85 (dt, 1H), 8.06 (d, 1H), 8.22 (d, 1H), 8.24 (d, 1H), 8.30 (br, s, 1H), 8.37-8.40 (m, 1H), 10.88 (s, 1H), 11.91 (br s, 1H)。
實例82  4,4-二氟-2-(4-氟苯基)- N-{4-[6-甲氧基-3-(吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image713
藉由製備型對掌性HPLC將來自實例81之外消旋標題化合物(29.3 mg)分離成對映異構體，得到標題化合物(對映異構體1，14.1 mg，99% ee)及對映異構體2 (6.9 mg，99% ee，參見實例83)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：Thermo Fisher UltiMate 3000；管柱：YMC Cellulose SB 3 µ，100×4.6；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：2-丙醇；等度：85%A+15%B；流速：1.4 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm； 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：PrepCon Labomatic HPLC-1；管柱：YMC Amylose SA 5µ，250×30；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：2-丙醇；等度：85%A+15%B；流速：90 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm； 分析型對掌性 HPLC：R t= 3.24 min。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ [ppm] 2.12 - 2.24 (m, 1H), 2.67 - 2.82 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 4.14 - 4.26 (m, 1H), 5.80 - 6.25 (m, 1H), 7.10 (dd, 1H), 7.17 - 7.23 (m, 2H), 7.23 - 7.28 (m, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.44 - 7.51 (m, 2H), 7.84 (dt, 1H), 8.06 (td, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.25 (dd, 1H) 8.29 (br s, 1H), 8.34 - 8.41 (m, 1H), 10.86 - 10.90 (m, 1H), 11.86 - 11.94 (m, 1H)。
實例83  4,4-二氟-2-(4-氟苯基)- N-{4-[6-甲氧基-3-(吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image715
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例81。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例82)分離對映異構體，得到標題化合物(6.9 mg，99% ee)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例82)：R t= 4.43 min。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ [ppm] 2.12 - 2.24 (m, 1H), 2.67 - 2.82 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 4.14 - 4.26 (m, 1H), 5.80 - 6.25 (m, 1H), 7.10 (dd, 1H), 7.17 - 7.23 (m, 2H), 7.23 - 7.28 (m, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.44 - 7.51 (m, 2H), 7.84 (dt, 1H), 8.06 (td, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.25 (dd, 1H) 8.29 (br s, 1H), 8.34 - 8.41 (m, 1H), 10.86 - 10.90 (m, 1H), 11.86 - 11.94 (m, 1H)。
實例84  4,4-二氟-2-(4-氟苯基)- N-{4-[7-甲基-3-(吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺
Figure 02_image717
將2-(2-溴吡啶-4-基)-7-甲基-3-(吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶(中間物93，100 mg，274 µmol)、(rac)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(中間物46，89.2 mg，411 µmol)、碳酸銫(268 mg，821 µmol)、二-三級丁基(2',4',6'-三異丙基-3,6-二甲氧基-[1,1'-聯苯]-2-基)膦(26.5 mg，54.8 µmol；CAS-RN:[1160861-53-9])及[(2-二-三級丁基膦基-3,6-二甲氧基-2',4'、6'-三異丙基-1,1'-聯苯)-2-(2'-胺基-1,1'-聯苯)]甲磺酸鈀(II)(23.4 mg，27.4 µmol；CAS-RN:[1536473-72-9])溶解於1,4-二㗁烷(2.3 ml)中且在氮氣氛圍下於100℃攪拌10 h。用二氯甲烷及水稀釋反應混合物。將其用二氯甲烷萃取三次，合併之有機層用水及鹽水洗滌且經由拒水濾紙過濾。減壓濃縮濾液且藉由製備型HPLC (方法D，梯度：0.00-0.50 min 15% B，0.50-6.00 min 15-55% B)純化，得到6.0 mg目標化合物(99%純度，4%產率)。 LC-MS (方法1): R t= 0.98 min; MS (ESIpos): m/z = 502 [M+H] + 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ [ppm] 2.12 - 2.28 (m, 1H), 2.60 - 2.80 (m, 1H), 2.59 (s, 3H) 4.19 - 4.23 (m, 1H), 6.01 (tt, 1H), 7.07 (d, 1H), 7.13 (dd, 1H), 7.19 -7.23 (m, 3H 7.45 - 7.50 (m, 2 H) 7.84 (td, 1H), 8.16 (d, 1H), 8.27 (d, 1H), 8.30 - 8.34 (m, 3H) 10.91 (s, 1 H) 11.92 (br s, 1 H)。
實例85  4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[3-甲基-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺
Figure 02_image719
將6-(2-溴吡啶-4-基)-3-甲基-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤(中間物108，90.0 mg，246 µmol)、(rac)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(中間物46，80.1 mg，369 µmol)、碳酸銫(240 mg，737 µmol)、二-三級丁基(2',4',6'-三異丙基-3,6-二甲氧基-[1,1'-聯苯]-2-基)膦(23.8 mg，49.2 µmol；CAS-RN:[1160861-53-9])及[(2-二-三級丁基膦基-3,6-二甲氧基-2',4'、6'-三異丙基-1,1'-聯苯)-2-(2'-胺基-1,1'-聯苯)]甲磺酸鈀(II) (21.0 mg，24.6 µmol CAS-RN:[1536473-72-9])溶解於1,4-二㗁烷(2.1 ml)中，且在氮氣氛圍下於100℃攪拌3 h。用二氯甲烷及水稀釋反應混合物。將其用二氯甲烷萃取三次，合併之有機層用水及鹽水洗滌且經由不透水濾紙過濾。減壓濃縮濾液且藉由製備型HPLC (方法B，梯度：0.00-0.50 min 30% B，0.50-6.00 min 30-70% B)純化，得到18.1 mg (99%純度，14%產率)目標化合物。 LC-MS (方法2): R t= 1.12 min; MS (ESIpos): m/z = 503 [M+H] + 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] 2.10 - 2.24 (m, 1H), 2.62 (s, 3H), 2.67 - 2.79 (m, 1H), 4.13 - 4.25 (m, 1H), 6.01 (tt, 1H), 7.13 - 7.21 (m, 2 H), 7.24 - 7.31 (m, 1 H), 7.40 - 7.54 (m, 2H), 7.86 (dt, 1H), 8.03 (td, 1H), 8.30 (d, 2H), 8.35 - 8.41 (m, 1H), 8.46 (s, 1H), 10.88 (br s, 1H), 12.68 (br s, 1H)。
實例86  (+)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[3-甲基-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image721
藉由製備型對掌性HPLC將來自實例85之外消旋標題化合物(10 mg)分離成對映異構體，得到標題化合物(對映異構體1，5.0 mg，99% ee)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-3；管柱：YMC Cellulose SB 5µ，250×30；溶離劑A：甲基三級丁基醚+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇+ 0.1 vol%二乙胺；等度：0-15 min 0-10% B；流速：50 ml/min；溫度：25℃；UV：325 nm。 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Thermo Fisher UltiMate 3000；管柱：YMC Cellulose SB 3 µ，100×4.6；溶離劑A：甲基三級丁基醚+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：95%A+5%B；流速：1.4 ml/min；溫度：25℃；UV：325 nm。 分析型對掌性 HPLC：R t= 1.94 min。 [α] D= +75.2° (來自DMSO中之溶液，c = 5.0 mg/mL) 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 2.10 - 2.24 (m, 1 H), 2.62 (s, 3H), 2.67 - 2.79 (m, 1H), 4.19 (dd, 1 H), 6.00 (tt, 1 H) 7.15 - 7.23 (m, 3H), 7.27 (ddd, 1H), 7.25 - 7.29 (m, 1H), 7.39 - 7.53 (m, 2H), 7.87 (dt, 1 H), 8.03 (td, 1H), 8.27 - 8.32 (m, 2 H), 8.35 - 8.41 (m, 1 H), 8.44 (s, 1 H), 10.90 (s, 1 H), 12.63 (s, 1 H)。
實例87 N-{4-[6-氯-3-(吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺
Figure 02_image723
向2-(2-溴吡啶-4-基)-6-氯-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶(75.0 mg，194 µmol)與6-氯-2-(2-氯吡啶-4-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶之混合物中添加4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(63.4 mg，292 µmol)、碳酸銫(190 mg，583 µmol)、tBuBrettPhos (18.9 mg，38.9 µmol)及tBuBrettPhos Pd G3 (16.6 mg，19.4 µmol)。將混合物溶解於1,4-二㗁烷(1.7 ml)中且在Ar氛圍下於100℃攪拌3小時。用二氯甲烷及水稀釋反應混合物。將其用二氯甲烷萃取三次且將合併之有機層用水及鹽水洗滌一次，經由塗有聚矽氧之濾紙過濾且減壓濃縮。藉由HPLC層析(方法B，梯度：0.00-0.50 min 30% B，0.50-6.00 min 30-70% B)純化粗產物，得到標題化合物(26 mg，26%產率)。 LC-MS (方法2): R t= 1.27 min; MS (ESIpos): m/z = 522 [M+H] + 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] 2.20 (m, 1 H), 2.67 - 2.80 (m, 1 H), 4.20 (m, 1 H), 5.83 - 6.20 (tt, 1 H), 7.11 (dd, 1 H), 7.21 (m, 2 H), 7.27 (ddd, 1 H), 7.42 - 7.50 (m, 2H), 7.87 (td, 1H), 7.95 (d, 1H), 8.04 (dt, 1H), 8.27 (dd, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.37 - 8.42 (m, 1H), 8.45 (d, 1H), 10.94 (s, 1H), 12.30 (br s, 1H)。
實例88  (+)- N-{4-[6-氯-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image725
藉由製備型對掌性HPLC將來自實例87之外消旋標題化合物(mg)分離成對映異構體，得到標題化合物(對映異構體1，22.2 mg，99% ee)及對映異構體2 (23.7 mg，99% ee，參見實例89)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-2；管柱：YMC Cellulose SB 5µ，250×30；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：80%A+20%B；流速：70 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm； 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Thermo Fisher UltiMate 3000；管柱：YMC Cellulose SB 3 µ，100×4.6；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：80%A+20%B；流速：1.4 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm； 分析型對掌性 HPLC ：R t= 2.59 min。 [a] D= 201.1° (來自DMSO中之溶液，c = 5.8 mg/mL) 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] 2.12 - 2.30 (m, 1H) 2.62 - 2.81 (m, 1H) 4.20 (dd, 1H) 6.01 (tt, 1H) 7.11 (dd, 1H), 7.17 - 7.24 (m, 2H), 7.27 (dd, 1H) 7.44 - 7.51 (m, 2H) 7.87 (dt, 1H) 7.95 (d, 1 H) 8.04 (td, 1H), 8.27 (d, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.37 - 8.42 (m, 1H) 8.45 (d, 1H) 10.94 (s, 1H), 12.29 (br s, 1H)。
實例89  (-)-N-{4-[6-氯-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image727
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例87。藉由製備型對掌性HLPC (方法參見實例88)分離對映異構體，得到標題化合物(23.7 mg，99.9% ee)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例88)：R t= 3.68 min。 [a] D= -169.2° (來自DMSO中之溶液，c = 5.8 mg/mL) 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] 2.11 - 2.29 (m, 1H), 2.64 - 2.81 (m, 1H), 4.20 (m, 1H) 6.01 (tt, 1H), 7.11 (dd, 1H), 7.17 - 7.24 (m, 2H), 7.27 (m, 1H), 7.44 - 7.50 (m, 2H), 7.87 (dt, 1H), 7.95 (d, 1H), 8.04 (td, 1H), 8.27 (d, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.38 - 8.42 (m, 1H), 8.45 (d, 1H), 10.94 (s, 1H), 12.29 (br s, 1H)。
實例90  (2R或S)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-(2-甲氧基乙氧基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image729
外消旋化合物(參見實例111，93 mg)藉由製備型對掌性HPLC分離成對映異構體，得到對映異構體1 (41 mg，98.5% ee，參見實例90)及對映異構體2 (40 mg，98.7% ee，參見實例91)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-2；管柱：YMC Cellulose SB 5µ，250×30；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：70%A+30%B；流速：60 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm； 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Thermo Fisher UltiMate 3000；管柱：YMC Cellulose SB 3 µ，100×4.6；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：70%A+30%B；流速：1.4 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm； 分析型對掌性HPLC (方法參見實例90)：R t= 2.81 min。 LC-MS (方法2): R t= 1.24 min; MS (ESIpos): m/z = 580 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.37 (s, 1H), 10.88 (s, 1H), 8.37-8.32 (m, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.22 (dd, 1H), 7.94-7.90 (m, 1H), 7.84 (td, 1H), 7.51-7.44 (m, 2H), 7.26-7.16 (m, 3H), 7.07 (dd, 1H), 6.70 (s, 1H), 6.18-5.84 (m, 1H), 4.52-4.42 (m, 2H), 4.20 (dd, 1H), 3.83-3.76 (m, 2H), 3.35 (s, 3H), 2.80-2.62 (m, 1H), 2.29-2.11 (m, 1H)。
實例91  (2R或S)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-(2-甲氧基乙氧基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image731
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例111。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例90)分離對映異構體，得到標題化合物(40 mg，98.7% ee)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例90)：R t= 4.03 min。 LC-MS (方法2): R t= 1.24 min; MS (ESIpos): m/z = 580 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.38 (s, 1H), 10.88 (s, 1H), 8.37-8.32 (m, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.24-8.20 (m, 1H), 7.95-7.90 (m, 1H), 7.84 (td, 1H), 7.51-7.44 (m, 2H), 7.26-7.17 (m, 3H), 7.10-7.05 (m, 1H), 6.70 (s, 1H), 6.18-5.82 (m, 1H), 4.51-4.42 (m, 2H), 4.20 (dd, 1H), 3.84-3.74 (m, 2H), 3.35 (s, 3H), 2.81-2.61 (m, 1H), 2.30-2.10 (m, 1H)。
實例92  (2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(哌𠯤-1-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image733
在25℃向4-[2-(2-{[(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯基]胺基}吡啶-4-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-7-基]哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(參見中間物175，100 mg，0.15 mmol)於二氯甲烷(1.0 ml)中之混合物中添加三氟乙酸(1.0 ml，13 mmol)。在室溫下攪拌2小時之後，濃縮混合物，得到殘餘物。藉由製備型HPLC (儀器：ACSWH-GX-Q；管柱：Phenomenex Synergi C18 150*25 mm* 10 µm；溶離劑A：水(0.225%甲酸)，溶離劑B：乙腈；梯度：0-10 min 8-38% B；流速25 ml/min；溫度：室溫；偵測器：UV 220/254 nm)純化殘餘物，得到50.1 mg (97%純度)標題化合物。 LC-MS (方法C): R t= 0.767 min; MS (ESIpos): m/z = 572.2 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ [ppm] = 8.65 (d, J= 4.4 Hz, 1H), 8.35 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.28 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 7.78-7.74 (m, 1H), 7.47-7.39 (m, 3H), 7.36-7.32 (m, 1H), 7.22-7.21 (m, 1H), 7.12-7.08 (m, 2H), 7.03 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 5.99-5.71 (m, 1H), 4.11-4.07 (m, 1H), 3.85-3.82 (m, 4H), 3.46-3.44 (m, 4H), 2.78-2.66 (m, 1H), 2.35-2.12 (m, 1H)。
實例93  (2R或S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(哌𠯤-1-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image735
在25℃向4-[2-(2-{[(2R或S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯基]胺基}吡啶-4-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-7-基]哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(對映異構體1，參見中間物176，70 mg，104.2 µmol)於二氯甲烷(2 ml)中之混合物中添加三氟乙酸(2 ml)。在室溫下攪拌16小時之後，濃縮混合物，得到殘餘物。藉由製備型HPLC (儀器：ACSWH-GX-Q；管柱：Phenomenex Synergi C18 150*25 mm* 10 µm；溶離劑A：水(0.225%甲酸)，溶離劑B：乙腈；梯度：0-10 min 8-38% B；流速25 ml/min；溫度：室溫；偵測器：UV 220/254 nm)純化殘餘物，得到50.2 mg (99%純度，83%產率)呈黃色固體之標題化合物。 LC-MS (方法C): R t= 0.734 min; MS (ESIpos): m/z = 572.3 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD: δ [ppm] = 8.60 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.30-8.29 (m, , 2H), 8.24 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.81-7.77 (m, 1H), 7.48-7.43 (m, 3H), 7.36-7.33 (m, 1H), 7.18-7.17 (m, 1H), 7.12-7.08 (m, 2H), 6.96 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 5.99-5.71 (m, 1H), 4.09-4.06 (m, 1H), 3.78-3.73 (m, 4H), 3.43-3.38 (m, 4H), 2.77-2.68 (m, 1H), 2.28-2.18 (m, 1H)。
實例94  (2R或S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(哌𠯤-1-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image737
在25℃向4-[2-(2-{[(2R或S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯基]胺基}吡啶-4-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-7-基]哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(對映異構體2，參見中間物177，70.0 mg，0.104 mmol)於二氯甲烷(2.0 mL)中之混合物中添加三氟乙酸(2.0 ml)。在室溫下攪拌2小時之後，濃縮混合物，得到殘餘物。藉由製備型HPLC (儀器：ACSWH-GX-Q；管柱：Phenomenex Synergi C18 150*25 mm* 10 µm；溶離劑A：水(0.225%甲酸)，溶離劑B：乙腈；梯度：0-10 min 8-38% B；流速25 ml/min；溫度：室溫；偵測器：UV 220/254 nm)純化殘餘物，得到51.8 mg (99%純度，86%產率)呈黃色固體之標題化合物。 LC-MS (方法C): R t= 0.733 min; MS (ESIpos): m/z = 572.3 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD: δ [ppm] = 8.62 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.32-8.30 (m, , 2H), 8.25 (d, J= 6 Hz, 1H), 7.81-7.76 (m, 1H), 7.47-7.43 (m, 3H), 7.36-7.33 (m, 1H), 7.19-7.17 (m, 1H), 7.12-7.08 (m, 2H), 6.98 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 5.99-5.71 (m, 1H), 4.09-4.06 (m, 1H), 3.79-3.75 (m, 4H), 3.45-3.40 (m, 4H), 2.78-2.69 (m, 1H), 2.27-2.18 (m, 1H)。
實例95  (2RS)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-3-(4-氟吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image739
向4-[5-氟-3-(4-氟吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺(參見中間物167，80.5 mg，249 µmol)於DMA (110 µl)中之經攪拌溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(350 µl，2.0 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])、(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(163 mg，747 µmol)及PyBOP (713 mg，1.37 mmol；CAS-RN:[128625-52-5])。在室溫下攪拌混合物72 h。用水稀釋反應混合物，攪拌30 min且用乙酸乙酯萃取。將有機層用半飽和氯化鈉溶液洗滌三次，用碳酸氫鈉水溶液洗滌一次，經疏水性濾紙乾燥且濃縮。粗產物藉由矽膠急驟層析(梯度己烷/乙酸乙酯20-100%)純化且用二氯甲烷濕磨，得到80.6 mg (98%純度，61%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 1.29 min; MS (ESIneg): m/z = 522 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.44 (s, 1H), 10.95 (s, 1H), 8.39 (dd, 1H), 8.33-8.27 (m, 2H), 8.06 (dd, 1H), 7.91 (dd, 1H), 7.52-7.42 (m, 2H), 7.25-7.17 (m, 3H), 7.17-7.14 (m, 1H), 7.03 (dd, 1H), 6.01 (tt, 1H), 4.20 (dd, 1H), 2.82-2.62 (m, 1H), 2.29-2.11 (m, 1H)。
實例96  (2R或S)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-3-(4-氟吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image741
外消旋化合物(參見實例95，80.6 mg)藉由製備型對掌性HPLC分離成對映異構體。粗對映異構體1用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體1 (20.1 mg，93.4 ee，參見實例96)。粗對映異構體2用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體2 (10.2 mg，91.7% ee，參見實例97)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-1；管柱：YMC Cellulose SB 5µ，250×30； 溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇+0.1 vol%二乙胺；等度：70%A+30%B；流速：50 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Thermo Fisher UltiMate 3000；管柱：YMC Cellulose SB 3µ，100×4.6； 溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：70%A+30%B；流速：1.4 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性HPLC (方法參見實例96)：R t= 3.03 min。 [α] D= +39,5° (來自DMSO中之溶液，c = 1.7 mg/mL) LC-MS (方法1): R t= 1.28 min; MS (ESIneg): m/z = 522 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.68-12.06 (m, 1H), 10.95 (s, 1H), 8.39 (dd, 1H), 8.33-8.26 (m, 2H), 8.06 (dd, 1H), 7.95-7.87 (m, 1H), 7.52-7.41 (m, 2H), 7.24-7.18 (m, 3H), 7.17-7.14 (m, 1H), 7.03 (dd, 1H), 6.19-5.84 (m, 1H), 4.20 (dd, 1H), 2.82-2.63 (m, 1H), 2.29-2.11 (m, 1H)。
實例97  (2R或S)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-3-(4-氟吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image743
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例95。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例96)分離對映異構體，隨後用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到標題化合物(10.2 mg，91.7% ee)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例96)：R t= 3.17 min。 [α] D= -114,8° (來自DMSO中之溶液，c = 1.7 mg/mL) LC-MS (方法1): R t= 1.28 min; MS (ESIneg): m/z = 522 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.68-12.22 (m, 1H), 10.95 (s, 1H), 8.39 (dd, 1H), 8.32-8.28 (m, 2H), 8.06 (dd, 1H), 7.91 (dd, 1H), 7.51-7.43 (m, 2H), 7.25-7.18 (m, 3H), 7.17-7.14 (m, 1H), 7.03 (dd, 1H), 6.23-5.83 (m, 1H), 4.20 (dd, 1H), 2.83-2.62 (m, 1H), 2.30-2.10 (m, 1H)。
實例98  (2RS)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-(2-羥基丙-2-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image745
在25℃向2-(2-{[(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯基]胺基}吡啶-4-基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-7-甲酸甲酯(參見中間物182，263 mg，0.467 mmol)於四氫呋喃(10 ml)中之溶液中添加溴(甲基)鎂(0.780 mL，3 M於二乙醚中，2.3 mmol)。在室溫下攪拌16小時之後，用水稀釋反應混合物且用乙酸乙酯萃取。有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。藉由急驟管柱層析(石油醚:乙酸乙酯=0:1至1:0)純化殘餘物，得到粗產物。藉由製備型HPLC [儀器：ACSWH-GX-k；管柱：Phenomenex Gemini-NX C18 75*30 mm*3 µm；溶離劑A：水(0.2%甲酸水溶液)，溶離劑B：乙腈；梯度：0-7 min 22-52% B；流速25 ml/min；溫度：RT；偵測器：UV 220/254 nm.]進一步純化粗產物，得到10.2 mg (97%純度)呈黃色固體之標題化合物。 LC-MS (方法C): R t= 0.841 min; MS (ESIpos): m/z = 264.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ [ppm] = 11.31 (s, 1H), 10.90 (s, 1H), 8.37-8.36 (m, 1H), 8.26-8.24 (m, 2H), 7.94-7.92 (m, 1H), 7.87-7.83 (m, 1H), 7.51-7.46 (m, 2H), 7.25-7.18 (m, 3H), 7.07-7.05 (dd, J= 5.2, 1.6 Hz, 1H), 6.95 (s, 1H), 6.15-5.85 (m, 1H), 5.79-5.76 (m, 1H), 4.24-4.19 (m, 1H), 2.80-2.70 (m, 1H), 2.28-2.12 (m, 1H), 1.65 (s, 6H)。
實例99  (2R或S)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-(2-羥基丙-2-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image747
外消旋化合物(參見實例98，35.0 mg)藉由製備型SFC (儀器：ACSWH-PREP-SFC-A；管柱：DAICEL CHIRALCEL OD (250 mm*30 mm,10 µm)；移動相；用於超臨界二氧化碳之相A，用於甲醇(0.1%氨水)之相B；等度溶離：50%相B (50%相A)；流速：70 ml/min；循環時間：3分鐘；背壓：100巴以使二氧化碳保持超臨界流動；溫度：室溫；偵測器：UV 220 nm)分離成對映異構體，得到呈白色固體之 對映異構體 1(參見實例99，第一溶離，SFC滯留時間：2.042 min，13.2 mg，96%純度)及呈白色固體之 對映異構體 2(參見實例100，第二溶離，SFC滯留時間：2.403 min，11.6 mg，98%純度)。 LC-MS (方法C): R t= 0.837 min; MS (ESIpos): m/z = 564.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ [ppm] = 8.47 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 8.24-8.18 (m, 2H), 7.91 (td, J= 7.8, 2.0 Hz, 1H), 7.73 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.47-7.40 (m, 2H), 7.37-7.36 (m, 1H), 7.15-7.05 (m, 3H), 6.87 (s, 1H), 6.00-5.66 (m, 1H), 4.07-4.017 (m, 1H), 2.802-2.62 (m, 1H), 2.32-2.12 (m, 1H), 1.74 (s, 6H)。
實例100  (2R或S)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-(2-羥基丙-2-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image749
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例98。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例99)分離對映異構體，得到呈白色固體之標題化合物(11.6 mg，純度98%)。 LC-MS (方法C): R t= 0.856 min; MS (ESIpos): m/z = 564.4 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ [ppm] = 8.50-8.44 (m, 1H), 8.25-8.19 (m, 2H), 7.91 (td, J= 7.8, 2.0 Hz, 1H), 7.73 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.47-7.41 (m, 2H), 7.39-7.37 (m, 1H), 7.13-7.06 (m, 3H), 6.87 (s, 1H), 5.99-5.67 (m, 1H), 4.04 (dd, J= 8.4, 6.0 Hz, 1H), 2.79-2.62 (m, 1H), 2.30-2.13 (m, 1H), 1.74 (s, 6H)。
實例101  4,4-二氟-2-(4-氟苯基)- N-{4-[3-甲氧基-7-(吡啶-2-基)-5 H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺
Figure 02_image751
在氮氣氛圍中下，於100℃攪拌6-(2-溴吡啶-4-基)-3-甲氧基-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤(中間物114，205 mg，536 µmol)、4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(175 mg，805 µmol)、碳酸銫(524 mg，1.61 mmol)、tBuBrettPhos (52.0 mg，107 µmol)及tBuBrettPhos Pd G3 (45.8 mg，53.6 µmol)於1,4-二㗁烷(4.6 ml)中之混合物1小時。用乙酸乙酯及水稀釋混合物，且用乙酸乙酯萃取水層兩次。合併之有機層經由塗有聚矽氧之濾紙過濾且減壓濃縮澄清濾液。藉由製備型HPLC純化粗產物，得到標題化合物(83 mg，30%產率)。 LC-MS (方法2): R t= 1.23 min; MS (ESIpos): m/z = 519 [M+H] +¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2.09 - 2.28 (m, 1 H), 2.61 - 2.79 (m, 1H), 3.99 (s, 3H), 4.10 - 4.26 (m, 1H), 5.98 (br tt, 1H), 7.15 - 7.24 (m, 3H), 7.26 - 7.31 (m, 1H), 7.41 - 7.49 (m, 2H), 7.86 (dt, 1 H) 7.95 (td, 1H) 8.20 (s, 1H) 8.24 - 8.26 (m, 1H), 8.26 - 8.29 (m, 1H), 8.37 - 8.42 (m, 1H), 10.83 (s, 1H), 12.66 (s, 1H)。
實例102  4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[3-甲氧基-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image753
藉由製備型對掌性HPLC將來自實例101之外消旋標題化合物(75 mg)分離成對映異構體，得到標題化合物(對映異構體1，30.3 mg，99% ee)及對映異構體2 (29.9 mg，99% ee，參見實例103)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-2；管柱：YMC Cellulose SB 5µ，250×30；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：80%A+20%B；流速：70 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm； 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Thermo Fisher UltiMate 3000；管柱：YMC Cellulose SB 3µ，100×4.6；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：80%A+20%B；流速：1.4 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm； 分析型對掌性HPLC：R t= 3.17 min。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] 2.08 - 2.27 (m, 1 H) 2.61 - 2.76 (m, 1 H) 4.00 (s, 3 H) 4.11 - 4.23 (m, 1 H) 6.00 (tt, 1 H) 7.15 - 7.25 (m, 3 H) 7.26 - 7.31 (m, 1H) 7.41 - 7.50 (m, 2H) 7.86 (dt, 1H) 7.95 (td, 1H) 8.20 (s, 1H) 8.24 - 8.29 (m, 2H) 8.38 - 8.41 (m, 1H) 10.83 (s, 1H) 12.65 (s, 1H)
實例103  4,4-二氟-2-(4-氟苯基)- N-{4-[3-甲氧基-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image755
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例101。藉由製備型對掌性HLPC (方法參見實例102)分離對映異構體，得到標題化合物(29.9 mg，99% ee)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例102)：R t= 4.41 min。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] 2.08 - 2.27 (m, 1 H) 2.61 - 2.76 (m, 1 H) 4.00 (s, 3 H) 4.11 - 4.23 (m, 1 H) 6.00 (tt, 1 H) 7.15 - 7.25 (m, 3 H) 7.26 - 7.31 (m, 1 H) 7.41 - 7.50 (m, 2 H) 7.86 (dt, 1 H) 7.95 (td, 1 H) 8.20 (s, 1 H) 8.24 - 8.29 (m, 2 H) 8.38 - 8.41 (m, 1 H) 10.83 (s, 1 H) 12.65 (s, 1 H)
實例104  2-(4-氟苯基)-4-羥基 -N-(4-(3-(吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基)-丁醯胺
Figure 02_image757
將4-[3-(2-吡啶基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺(中間物16，50 mg，174 µmol)溶解於1 mL THF中。在0℃逐滴添加氯化異丙基鎂於THF (520 μL，260 µmol，CAS-RN:[1068-55-9])中之2 M溶液。經由注射器添加含3-(4-氟苯基)四氫呋喃-2-酮(中間物119，62.7 mg，348 umol)之THF (1 mL)。在20℃攪拌反應混合物14 h。藉由添加2 mL MeOH/TFA=10/1淬滅反應混合物且減壓濃縮。粗殘餘物藉由逆相製備型HPLC (管柱：Phenomenex luna C18 150x25mm，10 μm；溶離劑A：水+0.225% TFA，溶離劑B：ACN]；B%：8%-38%，11.5 min)純化，得到＞98%純度之標題化合物：5.0 mg，10.7 µmol，6.15%產率。 LC-MS (方法3): R t= 1.157 min; MS (ESIpos) m/z = 468.0 (M+H) + 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ [ppm] 8.54 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 8.40 - 8.36 (m, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.20 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.99 - 7.91 (m, 2H), 7.73 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.48 - 7.39 (m, 3H), 7.31 (dd, J= 4.4, 8.4 Hz, 1H), 7.13 - 7.04 (m, 3H), 3.95 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 3.58 - 3.48 (m, 2H), 2.38 - 2.25 (m, 1H), 1.99 - 1.89 (m, 1H)。
實例105 N-{4-[3-(二氟甲氧基)-7-(吡啶-2-基)-5 H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺
Figure 02_image759
將6-(2-溴吡啶-4-基)-3-(二氟甲氧基)-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤(85.0 mg，203 µmol)、4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(中間物46，66.2 mg，305 µmol)、碳酸銫(199 mg，610 µmol)、二-三級丁基(2',4',6'-三異丙基-3,6-二甲氧基-[1,1'-聯苯]-2-基)膦(19.7 mg，40.7 µmol，CAS-RN:[1160861-53-9])及[(2-二-三級丁基膦基-3,6-二甲氧基-2',4'、6'-三異丙基-1,1'-聯苯)-2-(2'-胺基-1,1'-聯苯)]甲磺酸鈀(II)(17.4 mg，20.3 µmol，CAS-RN:[1536473-72-9])溶解於1,4-二㗁烷(1.7 ml)中，且在氮氣氛圍下於100℃攪拌1小時。用EtOAc及水稀釋反應混合物。將其用EtOAc萃取且合併之有機層經由不透水濾紙過濾。減壓濃縮濾液且藉由製備型HPLC (方法D，梯度：0.00-0.50 min 30% B，0.50-6.00 min 30-70% B)純化，得到30.7 mg (95%純度，26%產率)目標化合物。 LC-MS (方法2): R t= 1.25 min; MS (ESIpos): m/z = 555 [M+H] + 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] 2.12 - 2.27 (m, 1H), 2.63 - 2.80 (m, 1H), 4.18 (dd, 1H) 5.99 (tt, 1H), 7.15 - 7.25 (m, 3H), 7.31 (m, 1H), 7.40 - 7.50 (m, 2H) 7.71 (t, 1H), 7.90 (td, 1H), 7.97 (dt, 1H), 8.26 - 8.32 (m, 2H), 8.39 -8.43 (m, 1H), 8.42 (s, 1H), 10.95 (s, 1H), 13.02 (s, 1H)。
實例106 N-{4-[3-(二氟甲氧基)-7-(吡啶-2-基)-5 H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image761
藉由製備型對掌性HPLC將來自實例105之外消旋標題化合物(27 mg)分離成對映異構體，得到標題化合物(對映異構體1，13.6 mg，99% ee)及對映異構體2 (12.4 mg，99% ee，參見實例101)。 製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-4；管柱：YMC Cellulose SB 5µ，250×30；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：80%A+20%B；流速：70 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm； 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Thermo Fisher UltiMate 3000；管柱：YMC Cellulose SB 3 µ，100×4.6；溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；梯度：流速：1.4 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm 分析型對掌性HPLC：R t= 3.38 min。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ [ppm] 2.12 - 2.25 (m, 1H), 2.62 - 2.68 (m, 1H), 4.13 - 4.22 (m, 1H) 5.99 (tt, 1H), 7.17 - 7.24 (m, 3H), 7.31 (ddd, 1H), 7.42 - 7.48 (m, 2H), 7.71 (t, 1H), 7.88 (td, 1H), 7.97 (dt, 1H), 8.28 - 8.31 (m, 2H), 8.39 - 8.42 (m, 1H), 8.42 (s, 1H), 10.90 (s, 1H), 13.02 (s, 1H)。
實例107 N-{4-[3-(二氟甲氧基)-7-(吡啶-2-基)-5 H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image763
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例105。藉由製備型對掌性HLPC (方法參見實例106)分離對映異構體，得到標題化合物(12.4 mg，99% ee)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例106)：R t= 4.69 min。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ [ppm] 2.12 - 2.25 (m, 1H), 2.62 - 2.68 (m, 1H), 4.11 - 4.26 (m, 1H) 6.00 (tt, 1H) 7.17 - 7.24 (m, 3H), 7.31 (ddd, 1H), 7.42 - 7.48 (m, 2H), 7.71 (t, 1H), 7.88 (td, 1H), 7.97 (dt, 1H), 8.28 - 8.31 (m, 2H), 8.39 - 8.42 (m, 1H), 8.42 (s, 1H), 10.90 (s, 1 H), 13.02 (s, 1 H)。
實例108  4,4-二氟- N-{4-[5-氟-3-(5-氟吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺
Figure 02_image765
將4-[5-氟-3-(5-氟吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-胺(中間物116，200 mg，619 µmol)、4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(中間物46，139 mg，639 µmol)、 N,N-二異丙基乙胺(650 µl，3.7 mmol)及PyBOP (966 mg，1.86 mmol，CAS-RN:[128625-52-5])溶解於DMA (3.6 ml)中且在氬氣氛圍下於室溫攪拌隔夜。用DCM及半飽和碳酸氫鈉溶液稀釋反應混合物。攪拌混合物10分鐘，分離各相且用DCM萃取水層。合併之有機層經由不透水濾紙過濾且減壓濃縮。藉由HPLC層析(方法B，梯度：0.00-0.50 min 30% B，0.50-6.00 min 30-70% B)純化粗產物，得到216 mg (97%純度，65%產率)標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 1.27 min; MS (ESIpos): m/z = 524 [M+H] + 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] 2.12 - 2.27 (m, 1H), 2.67 - 2.80 (m, 1H), 4.19 (dd, 1H) 6.01 (tt, 1H), 7.01 (dd, 1H), 7.12 (dd, 1H), 7.15 - 7.24 (m, 2H), 7.42 - 7.50 (m, 2H), 7.83 (td, 1H), 8.00 (dd, 1H), 8.04 (dd,1H), 8.26 (br. s, 1H), 8.29 (dd, 1H), 8.39 (d, 1H), 10.93 (s, 1H), 12.36 (s, 1H)。
實例109  (+)-4,4-二氟- N-{4-[5-氟-3-(5-氟吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺
Figure 02_image767
藉由製備型對掌性HPLC將來自實例108之外消旋標題化合物(131 mg)分離成對映異構體，得到標題化合物(對映異構體1，50 mg，99% ee)及對映異構體2 (45 mg，99% ee，參見實例110)。
製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：Sepiatec：Prep SFC100；管柱：Chiralpak IB 5µ 250×30mm；溶離劑A：CO 2；溶離劑B：甲醇+ 0.2 vol%氨水(32%)；等度：10%B；流速：100 ml/min；溫度：40℃；BPR：150巴；UV：254 nm。 分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Agilent：1260，Aurora SFC-Modul；管柱：Chiralpak IB 5µ 100×4.6mm；溶離劑A：CO2；溶離劑B：甲醇+ 0.2 vol%氨水(32%)；等度：10%B；流速：4 ml/min；溫度：37.5℃；BPR：100巴；UV：254 nm。 分析型對掌性HPLC：R t= 4.90 min。 [a] D= +143,2° (來自DMSO中之溶液，c = 6.2 mg/mL) 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] 2.12 - 2.27 (m, 1H), 2.67 - 2.80 (m, 1H), 4.19 (dd, 1H) 6.01 (tt, 1H), 7.01 (dd, 1H), 7.12 (dd, 1H), 7.15 - 7.24 (m, 2H), 7.42 - 7.50 (m, 2H), 7.83 (dt, 1H), 8.00 (dd, 1H), 8.04 (dd,1H), 8.26 (s, 1H), 8.29 (dd, 1H), 8.39 (d, 1H), 10.93 (s, 1H), 12.36 (s, 1H)。
實例110  (-)-4,4-二氟- N-{4-[5-氟-3-(5-氟吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺
Figure 02_image769
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例108。藉由製備型對掌性HLPC (方法參見實例109)分離對映異構體，得到標題化合物(45 mg，99% ee)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例109)：R t= 4.08 min。 [a] D= -127,5 (來自DMSO中之溶液，c = 6.8 mg/mL)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm] 2.12 - 2.27 (m, 1H), 2.67 - 2.80 (m, 1H), 4.19 (dd, 1H) 6.01 (tt, 1H), 7.01 (dd, 1H), 7.12 (dd, 1H), 7.15 - 7.24 (m, 2H), 7.42 - 7.50 (m, 2H), 7.83 (dt, 1H), 8.00 (dd, 1H), 8.04 (dd,1H), 8.26 (s, 1H), 8.29 (dd, 1H), 8.39 (d, 1H), 10.93 (s, 1H), 12.36 (s, 1H)。
實例111  (2RS)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-(2-甲氧基乙氧基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image771
將2-(2-溴吡啶-4-基)-5-氟-7-(2-甲氧基乙氧基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶(參見中間物162，146 mg，329 µmol)溶解於1,4-二㗁烷(2.8 ml)中。添加tBuBrettPhos Pd 3G (CAS 1536473-72-9，28.1 mg，32.9 µmol)、tBuBrettPhos (CAS 1160861-53-9，31.9 mg，65.9 µmol)、(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(參見中間物46，107 mg，494 µmol)及碳酸銫(322 mg，988 µmol；CAS-RN:[534-17-8])。將燒瓶抽空且用氬氣回填三次，並在100℃加熱混合物1小時。將反應混合物倒入水中且藉由過濾收集沈澱並真空乾燥。粗產物藉由矽膠急驟層析(梯度二氯甲烷/乙醇0-25%)純化，得到68.0 mg (36%產率)標題化合物。 LC-MS (方法1): R t= 1.04 min; MS (ESIneg): m/z = 578 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2.132 (0.02), 2.177 (0.06), 2.210 (0.06), 2.258 (0.02), 2.673 (0.12), 2.708 (0.06), 3.331 (16.00), 3.349 (4.79), 3.785 (0.31), 3.792 (0.31), 3.796 (0.34), 3.800 (0.32), 3.807 (0.33), 4.178 (0.09), 4.191 (0.10), 4.200 (0.10), 4.214 (0.09), 4.448 (0.32), 4.455 (0.30), 4.459 (0.33), 4.463 (0.30), 4.470 (0.30), 5.852 (0.04), 5.864 (0.09), 5.874 (0.04), 5.993 (0.08), 6.004 (0.18), 6.015 (0.09), 6.134 (0.04), 6.145 (0.08), 6.155 (0.04), 6.705 (0.85), 7.063 (0.39), 7.067 (0.35), 7.076 (0.34), 7.080 (0.37), 7.182 (0.35), 7.187 (0.11), 7.204 (0.74), 7.211 (0.30), 7.214 (0.24), 7.223 (0.29), 7.226 (0.60), 7.230 (0.27), 7.233 (0.21), 7.242 (0.20), 7.245 (0.19), 7.452 (0.34), 7.457 (0.15), 7.465 (0.38), 7.473 (0.34), 7.482 (0.12), 7.487 (0.31), 7.821 (0.15), 7.825 (0.17), 7.841 (0.25), 7.845 (0.28), 7.859 (0.22), 7.864 (0.20), 7.909 (0.25), 7.912 (0.43), 7.915 (0.27), 7.929 (0.17), 7.932 (0.26), 7.934 (0.15), 8.214 (0.40), 8.215 (0.42), 8.226 (0.38), 8.228 (0.44), 8.252 (0.37), 8.335 (0.22), 8.337 (0.24), 8.340 (0.25), 8.342 (0.21), 8.347 (0.21), 8.349 (0.24), 8.352 (0.23), 8.354 (0.19), 10.876 (0.43), 12.375 (0.47)。
實例112  (2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-[4-(3-嘧啶-2-基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)-2-吡啶基]丁醯胺
Figure 02_image773
將4-(3-嘧啶-2-基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-胺(參見中間物188，50.0 mg，173.4 µmol)及(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(75.67 mg，346.85 umol)溶解於1 mL吡啶中。添加T3P溶液(331.09 mg, 0.520 mmol，50%於DMF中，CAS-RN: [68957-94-8])。在25℃攪拌反應混合物2 h。減壓濃縮反應物，得到殘餘物。粗殘餘物藉由逆相製備型HPLC (管柱：Phenomenex Gemini 150*25mm*10μm；移動相：[水(0.05% NH3H2O)-ACN]；B%：25%-55%，10 min)純化，得到98%純度之標題化合物：31.8 mg，36.8%產率。 LC-MS (方法3): R t= 1.324 min; MS (ESIpos): m/z = 489.0 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 12.77 - 11.97 (m, 1H), 10.92 (s, 1H), 8.81 (d, J= 4.8 Hz, 2H), 8.45 (d, J= 4.4 Hz, 1H), 8.31 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.98 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.55 - 7.37 (m, 3H), 7.33 (dd, J= 4.4, 7.6 Hz, 1H), 7.26 - 7.10 (m, 3H), 6.34 - 5.71 (m, 1H), 4.23 - 4.14 (m, 1H), 2.29 - 2.06 (m, 2H)。
實例113  4,4-二氟-2-(4-氟苯基)- N-{4-[4-甲氧基-7-(吡啶-2-基)-5 H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺
Figure 02_image775
在Ar氛圍下，於100℃將含6-(2-溴吡啶-4-基)-4-甲氧基-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶(中間物198，40.0 mg，105 µmol)、4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(中間物46，34.1 mg，157 µmol)、碳酸銫(102 mg，314 µmol)、tBuBrettPhos (CAS: 1160861-53-9，10.1 mg，20.9 µmol)及tBuBrettPhos Pd G3 (CAS: 1536473-72-9，8.94 mg，10.5 µmol)之1,4-二㗁烷(900 µl)攪拌3小時。冷卻至室溫後，用乙酸乙酯及水稀釋反應混合物。接著用二氯甲烷萃取混合物且用水及鹽水洗滌合併之有機層。有機相經由不透水濾紙過濾且減壓濃縮。藉由矽膠急驟層析(己烷/乙酸乙酯0-100%，接著乙酸乙酯/乙醇0-50%)純化混合物，得到11.8 mg呈白色固體之標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 1.02 min; MS (ESIpos): m/z = 519 [M+H] 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ [ppm]: 2.10 - 2.26 (m, 1 H), 2.61 - 2.79 (m, 1 H), 3.55 (s, 3 H), 4.17 (m, 1 H), 5.99 (tt, 1 H), 7.07 (dd, 1 H), 7.20 (tt, 2 H), 7.25 (m, 1 H), 7.42 - 7.50 (m, 2 H), 7.80 - 7.90 (m, 2 H), 8.18 - 8.24 (m, 3 H), 8.36 (td, 1 H), 10.84 (s, 1 H), 12.88 (br s, 1 H)。
實例114  (2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-(4-{5-氟-3-(吡啶-2-基)-7-[(2RS)-四氫呋喃-2-基]-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基}吡啶-2-基)丁醯胺
Figure 02_image777
用氮氣吹掃(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-[4-({6-氟-4-[(2RS)-四氫呋喃-2-基]-3-(2,2,2-三氟乙醯胺基)吡啶-2-基}乙炔基)吡啶-2-基]丁醯胺(中間物194，1.25 g，2.10 mmol)、2-碘吡啶(517 mg，2.52 mmol)、肆(三苯膦)鈀(0) (121 mg，0.105 mmol)及碳酸鉀(872 mg，6.31 mmol)於乙腈(15 ml)中之混合物。在氮氣下於100℃攪拌16小時之後，用水稀釋反應混合物且用乙酸乙酯萃取。將有機層用飽和鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由急驟層析(石油醚:乙酸乙酯=0:1)純化，得到粗產物(100 mg)。粗產物(與以300 mg中間物194為起始物質之另一批次合併)藉由製備型HPLC [儀器：ACSWH-GX-G；管柱：Unisil 3-100 C18 Ultra 150*50 mm*3 µm；溶離劑A:水(0.225%甲酸於水中)，溶離劑B：乙腈；梯度：0-10 min 30-60% B；流速25 ml/min；溫度：RT；偵測器：UV 220/254 nm]進一步純化，得到呈黃色固體之(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-(4-{5-氟-3-(吡啶-2-基)-7-[(2RS)-四氫呋喃-2-基]-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基}吡啶-2-基)丁醯胺(79.9 mg，96%純度)。 LC-MS (方法 C): R t= 0.822 min; MS (ESIpos): m/z = 576.3 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ [ppm] = 12.08 (s, 1H), 10.92 (s, 1H), 8.37-8.36 (m, 1H), 8.28-8.27 (m, 2H), 7.98-7.93 (m, 1H), 7.88-7.84 (m, 1H), 7.49-7.46 (m, 2H), 7.26-7.18 (m, 3H), 7.11-7.09 (m, 1H), 6.91 (s, 1H), 6.16-5.87 (m, 1H), 5.45-5.42 (m, 1H), 4.23-4.19 (m, 1H), 4.16-4.10 (m, 1H), 3.96-3.90 (m, 1H), 2.79-2.67 (m, 2H), 2.28-2.14 (m, 1H), 2.01-1.97 (m, 2H), 1.79-1.72 (m, 1H)。
實例115  (2R或S)-4,4-二氟-N-(4-{5-氟-7-[(2R或S)-氧雜環戊-2-基]-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基}吡啶-2-基)-2-(4-氟苯基)丁醯胺(立體異構體1)
Figure 02_image779
藉由製備型SFC (儀器：ACSWH-PREP-SFC-A；管柱：DAICEL CHIRALCEL OD (250 mm*30 mm，10 µm)；移動相：用於超臨界二氧化碳之相A，用於異丙醇(0.1%氨水)之相B；等度溶離：60%相B (40%相A)；流速：80 ml/min；循環時間：3.7分鐘；背壓：100巴以使二氧化碳保持超臨界流動；溫度：室溫；偵測器：UV 220 nm)分離(Rac) (2RS)-4,4-二氟-N-(4-{5-氟-7-[(2RS)-氧雜環戊-2-基]-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基}吡啶-2-基)-2-(4-氟苯基)丁醯胺(實例114，70.0 mg，122 µmol)，得到兩種溶離份。
藉由製備型SFC (儀器：ACSWH-PREP-SFC-C；管柱：DAICEL CHIRALCEL OD (250 mm*30 mm，10 µm)；移動相：用於超臨界二氧化碳之相A，用於乙醇(0.1%氨水)之相B；等度溶離：45%相B (55%相A)；流速：70 ml/min；循環時間：3.5分鐘；背壓：100巴以使二氧化碳保持超臨界流動；溫度：室溫；偵測器：UV 220 nm)分離第一溶離份(滯留時間=1.063 min + 1.239 min)，得到(立體異構體1，第一溶離，SFC滯留時間：2.223 min (方法： IG-3)，10.2 mg，97%純度，SFC滯留時間：1.101 min (方法： OD-3))及(立體異構體2，第一溶離，SFC滯留時間：2.584 min (方法： IG-3)，11.4 mg，97%純度，SFC滯留時間：1.285 min (方法： OD-3))。
藉由製備型SFC (儀器：ACSWH-PREP-SFC-B；管柱：DAICEL CHIRALCEL OD (250 mm*30 mm，10 µm)；移動相：用於超臨界二氧化碳之相A，用於甲醇(0.1%氨水)之相B；等度溶離：45%相B (55%相A)；流速：70 ml/min；循環時間：2.2分鐘；背壓：100巴以使二氧化碳保持超臨界流動；溫度：室溫；偵測器：UV 220 nm)分離第二溶離份(滯留時間=2.301 min + 2.488 min)，得到(立體異構體3，第一溶離，SFC滯留時間：2.328 min (方法： IG-3)，9.7 mg，98%純度，SFC滯留時間：2.144 min (方法： OD-3))及(立體異構體4，第一溶離，SFC滯留時間：2.196 min (方法： IG-3)，13 mg，93%純度，SFC滯留時間：1.912 min (方法： OD-3))。 方法詳情：「管柱：Chiralcel OD-3，50×4.6 mm I.D.，3 µm；移動相：CO 2之相A及IPA (0.05% DEA)之相B；梯度溶離：40% IPA (0.05% DEA)於CO 2中；流動速率：3ml/min：偵測器：PDA：管柱溫度：35℃；背壓：100巴」。 方法詳情：「管柱：Chiralpak IG-3，50×4.6 mm I.D.，3 µm；移動相：CO 2之相A及EtOH (0.05% DEA)之相B；梯度溶離：自5%至40%之EtOH (0.05% DEA)於CO 2中；流動速率：3ml/min：偵測器：PDA：管柱溫度：35℃；背壓：100巴」。 實例 115，立體異構體1，第一溶離，SFC滯留時間：2.223 min (方法： IG-3)，SFC滯留時間：1.101 min (方法： OD-3)；10.2 mg，97%純度。 LC-MS (方法 C): R t= 0.864 min; MS (ESIpos): m/z = 576.1 [M+H] +. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ [ppm] = 8.47-8.46 (m, 1H), 8.22-8.21 (m, 2H), 7.93-7.89 (m, 1H), 7.76-7.74 (m, 1H), 7.48-7.42 (m, 2H), 7.38-7.35 (m, 1H), 7.12-7.07 (m, 3H), 6.94 (s, 1H), 5.99-5.67 (m, 1H), 5.48-5.43 (m, 1H), 4.27-4.21 (m, 1H), 4.06-4.01 (m, 2H), 2.76-2.63 (m, 2H), 2.26-2.19 (m, 1H), 2.14-2.07 (m, 2H), 1.94-1.89 (m, 1H)。
實例116  (2R或S)-4,4-二氟-N-(4-{5-氟-7-[(2R或S)-氧雜環戊-2-基]-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基}吡啶-2-基)-2-(4-氟苯基)丁醯胺(立體異構體2)
Figure 02_image781
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例114。藉由製備型對掌性HPLC (描述及方法，參見實例115)分離對映異構體，得到標題化合物， 實例 116，立體異構體2。 方法詳情：「管柱：Chiralcel OD-3，50×4.6 mm I.D.，3 µm；移動相：CO 2之相A及IPA (0.05% DEA)之相B；梯度溶離：40% IPA (0.05% DEA)於CO 2中；流動速率：3ml/min：偵測器：PDA：管柱溫度：35℃；背壓：100巴」。 方法詳情：「管柱：Chiralpak IG-3，50×4.6 mm I.D.，3 µm；移動相：CO 2之相A及EtOH (0.05% DEA)之相B；梯度溶離：自5%至40%之EtOH (0.05% DEA)於CO 2中；流動速率：3ml/min：偵測器：PDA：管柱溫度：35℃；背壓：100巴」。 實例 116，立體異構體2，第一次溶離，SFC滯留時間：2.584 min (方法： IG-3)，SFC滯留時間：1.285 min (方法： OD-3)，11.4 mg，97%純度。 LC-MS (方法 C): R t= 0.870 min; MS (ESIpos): m/z = 576.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ [ppm] = 8.48-8.47 (m, 1H), 8.23-8.22 (m, 2H), 7.94-7.89 (m, 1H), 7.76-7.74 (m, 1H), 7.46-7.42 (m, 2H), 7.40-7.36 (m, 1H), 7.12-7.07 (m, 3H), 6.94 (s, 1H), 5.95-5.72 (m, 1H), 5.48-5.43 (m, 1H), 4.26-4.21 (m, 1H), 4.07-4.01 (m, 2H), 2.71-2.63 (m, 2H), 2.25-2.20 (m, 1H), 2.15-2.09 (m, 2H), 1.95-1.87 (m, 1H)。
實例117  (2R或S)-4,4-二氟-N-(4-{5-氟-7-[(2R或S)-氧雜環戊-2-基]-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基}吡啶-2-基)-2-(4-氟苯基)丁醯胺(立體異構體3)
Figure 02_image783
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例114。藉由製備型對掌性HPLC (描述及方法，參見實例115)分離對映異構體，得到標題化合物， 實例 117，立體異構體3。 方法詳情：「管柱：Chiralcel OD-3，50×4.6 mm I.D.，3 µm；移動相：CO 2之相A及IPA (0.05% DEA)之相B；梯度溶離：40% IPA (0.05% DEA)於CO 2中；流動速率：3ml/min：偵測器：PDA：管柱溫度：35℃；背壓：100巴」。 方法詳情：「管柱：Chiralpak IG-3，50×4.6 mm I.D.，3 µm；移動相：CO 2之相A及EtOH (0.05% DEA)之相B；梯度溶離：自5%至40%之EtOH (0.05% DEA)於CO 2中；流動速率：3ml/min：偵測器：PDA：管柱溫度：35℃；背壓：100巴」。 實例 117，立體異構體3，第一次溶離，SFC滯留時間：2.328 min (方法： IG-3)，SFC滯留時間：2.144 min(方法： OD-3)，9.7 mg，98%純度。 LC-MS (方法 C): R t= 0.865 min; MS (ESIpos): m/z = 576.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ [ppm] = 8.47-8.46 (m, 1H), 8.22-8.21 (m, 2H), 7.94-7.89 (m, 1H), 7.76-7.73 (m, 1H), 7.46-7.42 (m, 2H), 7.37-7.36 (m, 1H), 7.12-7.07 (m, 3H), 6.94 (s, 1H), 5.93-5.73 (m, 1H), 5.46-5.43 (m, 1H), 4.28-4.21 (m, 1H), 4.07-4.01 (m, 2H), 2.77-2.62 (m, 2H), 2.28-2.18 (m, 1H), 2.16-2.07 (m, 2H), 1.96-1.89 (m, 1H)。
實例118  (2R或S)-4,4-二氟-N-(4-{5-氟-7-[(2R或S)-氧雜環戊-2-基]-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基}吡啶-2-基)-2-(4-氟苯基)丁醯胺(立體異構體4)
Figure 02_image785
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例114。藉由製備型對掌性HPLC (描述及方法，參見實例115)分離對映異構體，得到標題化合物， 實例 118，立體異構體4。 方法詳情：「管柱：Chiralcel OD-3, 50×4.6 mm I.D.，3 µm；移動相：CO 2之相A及IPA (0.05% DEA)之相B；梯度溶離：40% IPA (0.05% DEA)於CO 2中；流動速率：3ml/min：偵測器：PDA：管柱溫度：35℃；背壓：100巴」。 方法詳情：「管柱：Chiralpak IG-3，50×4.6 mm I.D.，3 µm；移動相：CO 2之相A及EtOH (0.05% DEA)之相B；梯度溶離：自5%至40%之EtOH (0.05% DEA)於CO 2中；流動速率：3ml/min：偵測器：PDA：管柱溫度：35℃；背壓：100巴」。 實例 118，立體異構體4，第一次溶離，SFC滯留時間：2.196 min (方法： IG-3)，SFC滯留時間：1.912 min (方法： OD-3)，13 mg，93%純度。 LC-MS (方法 C): R t= 0.860 min; MS (ESIpos): m/z = 576.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ [ppm] = 8.49-8.48 (m, 1H), 8.23-8.22 (m, 2H), 7.95-7.89 (m, 1H), 7.75-7.73 (m, 1H), 7.48-7.42 (m, 2H), 7.40-7.34 (m, 1H), 7.12-7.08 (m, 3H), 6.95 (s, 1H), 5.99-5.68 (m, 1H), 5.46-5.43 (m, 1H), 4.28-4.21 (m, 1H), 4.07-4.01 (m, 2H), 2.73-2.63 (m, 2H), 2.28-2.19 (m, 1H), 2.18-2.07 (m, 2H), 1.95-1.87 (m, 1H)。
實例 119(2RS)-4,4,4-三氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺
Figure 02_image787
在室溫下，向(2RS)-4,4,4-三氟-2-(4-氟苯基)丁酸(541 mg，2.29 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(785 µl，4.5 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])於THF (3.0 mL)中之經攪拌溶液中添加2,4,6-三氯苯甲醯氯(380 µl，2.4 mmol)。在室溫下攪拌混合物1 h。經由注射器向此混合物中添加單獨製備的4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-胺(參見中間物228；200 mg，694 µmol)、N,N-二異丙基乙胺(182 µl，1.0 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])及DMAP (42.4 mg，347 µmol；CAS-RN:[1122-58-3])於DMA (3.0 mL)中之溶液。在室溫下攪拌混合物48 h。添加碳酸氫鈉水溶液，將混合物攪拌1 h，添加水且用乙酸乙酯萃取混合物。將有機相用半飽和氯化鈉溶液洗滌，乾燥(硫酸鈉)，過濾，且真空移除溶劑。矽膠層析(梯度：己烷/乙酸乙酯50-100%)產生固體，將該固體用二氯甲烷濕磨，得到251 mg (71%產率)標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 1.09 min; MS (ESIneg): m/z = 505 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.86 (s, 1H), 11.00 (s, 1H), 8.53 (d, 1H), 8.40 (d, 1H), 8.39-8.35 (m, 1H), 8.32 (dd, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.05 (dt, 1H), 7.87 (td, 1H), 7.52-7.44 (m, 2H), 7.27 (ddd, 1H), 7.25-7.18 (m, 3H), 4.32 (dd, 1H), 3.28-3.10 (m, 1H), 2.75-2.58 (m, 1H)
實例120  (2R或S)-4,4,4-三氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image789
外消旋化合物(參見實例119，234 mg)藉由製備型對掌性HPLC分離成對映異構體。粗對映異構體1用二氯甲烷濕磨，得到對映異構體1 (68 mg，＞99% ee，參見實例120)。粗對映異構體2用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體2 (48 mg，＞99% ee，參見實例121)。
製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：Sepiatec: Prep SFC360；管柱：Chiralpak IG 5µ 250×50mm；溶離劑A：CO2；溶離劑B：2-丙醇 + 0.4 vol%二乙胺；等度：20%B；流速：300 ml/min；溫度：40℃；BPR：120巴；UV：254 nm
分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀錶：Waters Acquity UPC2 QDA；管柱：Chiralpak IG 3µ 100×4.6mm；溶離劑A：CO2；溶離劑B：2-丙醇 + 0.4 vol %二乙胺；等度：20%B；流速：4 ml/min；溫度：37.5℃；BPR：100巴；UV: 254 nm 分析型對掌性HPLC (方法參見實例120)： R t= 2.54 min。 [α] D= +218° (來自DMSO中之溶液，c = 2.0 mg/mL) LC-MS (方法2): R t= 1.09 min; MS (ESIpos): m/z = 507 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.86 (s, 1H), 11.00 (s, 1H), 8.53 (d, 1H), 8.40 (d, 1H), 8.39-8.36 (m, 1H), 8.32 (d, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.05 (dt, 1H), 7.87 (td, 1H), 7.52-7.45 (m, 2H), 7.27 (ddd, 1H), 7.25-7.18 (m, 3H), 4.32 (dd, 1H), 3.28-3.11 (m, 1H), 2.75-2.59 (m, 1H)。
實例121  (2R或S)-4,4,4-三氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image791
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例119。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例120)分離對映異構體，隨後用二氯甲烷濕磨，得到標題化合物(48 mg，＞99% ee)對映異構體2 (實例121)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例120)：R t= 3.10 min。 [α] D= -179.4° (來自DMSO中之溶液，c = 1.9 mg/mL) LC-MS (方法2): R t= 1.08 min; MS (ESIpos): m/z = 507 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.86 (s, 1H), 11.00 (s, 1H), 8.53 (d, 1H), 8.40 (d, 1H), 8.39-8.35 (m, 1H), 8.32 (d, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.08-8.03 (m, 1H), 7.87 (td, 1H), 7.52-7.45 (m, 2H), 7.27 (ddd, 1H), 7.25-7.18 (m, 3H), 4.32 (br dd, 1H), 3.28-3.11 (m, 1H), 2.76-2.58 (m, 1H)。
實例 122(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image793
在室溫下，向(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(339 mg，1.55 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(585 µl，3.36 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])於THF (3.0 mL)中之經攪拌溶液中添加2,4,6-三氯苯甲醯氯(260 µl，1.7 mmol)。在室溫下攪拌混合物1 h。經由注射器向此混合物中添加單獨製備的4-[7-(吡啶-2-基)-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-胺(200 mg，518 µmol)、N,N-二異丙基乙胺(135 µl，0.77 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])及DMAP (31.6 mg，259 µmol；CAS-RN:[1122-58-3])於DMA (2.3 mL)中之溶液。在室溫下攪拌混合物16 h。添加碳酸氫鈉水溶液，將混合物攪拌1 h，添加水且用乙酸乙酯萃取混合物。將有機相用半飽和氯化鈉溶液洗滌，乾燥(硫酸鈉)，過濾，且真空移除溶劑。矽膠層析(梯度：己烷/乙酸乙酯50-100%)產生固體，將該固體用二氯甲烷濕磨，得到164 mg (54%產率)標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 1.26 min; MS (ESIneg): m/z = 585 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.92 (s, 1H), 10.94 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.38-8.34 (m, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.29-8.27 (m, 1H), 8.08 (dt, 1H), 7.87 (td, 1H), 7.51-7.43 (m, 2H), 7.26 (ddd, 1H), 7.23-7.17 (m, 2H), 7.14 (dd, 1H), 6.01 (tt, 1H), 5.33 (q, 2H), 4.20 (dd, 1H), 2.81-2.62 (m, 1H), 2.29-2.11 (m, 1H)。
實例123  (2R或S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image795
外消旋化合物(參見實例122，154 mg)藉由製備型對掌性HPLC分離成對映異構體。將粗對映異構體1溶解於乙酸乙酯與甲醇之混合物中且用水洗滌。將有機相乾燥(硫酸鈉)，過濾，減壓濃縮，且用二氯甲烷濕磨，得到對映異構體1 (39 mg，98.1% ee，參見實例123)。將粗對映異構體2溶解於乙酸乙酯與甲醇之混合物中且用水洗滌。將有機相乾燥(硫酸鈉)，過濾，減壓濃縮，且用二氯甲烷濕磨，得到對映異構體2 (41 mg，＞99% ee，參見實例124)。
製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：Sepiatec: Prep SFC100；管柱：Chiral Art Cellulose-SB 5µ 250×30mm；溶離劑A：CO2；溶離劑B：2-丙醇+0.4 vol%二乙胺；等度：30%B；流速：100 ml/min；溫度：40℃；BPR：150巴；UV：243 nm
分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀錶：Waters Acquity UPC2 QDA；管柱：Chiral Art Cellulose-SB 3µ 100×4.6mm；溶離劑A：CO2；溶離劑B：2-丙醇 + 0.4 vol %二乙胺；等度：30%B；流速：4 ml/min；溫度：40.0℃；BPR：100巴；UV: 254 nm 分析型對掌性HPLC (方法參見實例123)：R t= 1.27 min。 [α] D= +109,9° (來自DMSO中之溶液，c = 2.8 mg/mL) LC-MS (方法2): R t= 1.21 min; MS (ESIneg): m/z = 585 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.92 (s, 1H), 10.95 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.36 (br d, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.29-8.27 (m, 1H), 8.08 (d, 1H), 7.87 (td, 1H), 7.52-7.43 (m, 2H), 7.26 (dd, 1H), 7.23-7.17 (m, 2H), 7.16-7.12 (m, 1H), 6.18-5.83 (m, 1H), 5.33 (q, 2H), 4.20 (dd, 1H), 2.82-2.60 (m, 1H), 2.29-2.09 (m, 1H)
實例124  (2R或S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image797
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例122。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例123)分離對映異構體，得到粗產物。將粗產物溶解於乙酸乙酯與甲醇之混合物中且用水洗滌。將有機相乾燥(硫酸鈉)，過濾，減壓濃縮，且用二氯甲烷濕磨，得到標題化合物(41 mg，＞99% ee)對映異構體2 ( 實例 124)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例123)：R t= 1.75 min。 [α] D= -96.9° (來自DMSO中之溶液，c = 2.7 mg/mL) LC-MS (方法2): R t= 1.20 min; MS (ESIneg): m/z = 585 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.92 (s, 1H), 10.95 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.36 (br d, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.30-8.26 (m, 1H), 8.08 (d, 1H), 7.87 (td, 1H), 7.51-7.43 (m, 2H), 7.26 (dd, 1H), 7.23-7.17 (m, 2H), 7.16-7.12 (m, 1H), 6.17-5.85 (m, 1H), 5.33 (q, 2H), 4.20 (dd, 1H), 2.83-2.62 (m, 1H), 2.20 (tdt, 1H)。
實例125  (2RS)-4,4,4-三氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image799
在室溫下，向(2RS)-4,4,4-三氟-2-(4-氟苯基)丁酸(335 mg，1.42 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(487 µl，2.76 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])於THF (3.0 mL)中之經攪拌溶液中添加2,4,6-三氯苯甲醯氯(230 µl, 1.5 mmol)。在室溫下攪拌混合物1 h。經由注射器向此混合物添加單獨製備的4-[7-(吡啶-2-基)-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-胺(166 mg，430 µmol)、N,N-二異丙基乙胺(113 µl，0.64 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])及DMAP (26.2 mg，215 µmol；CAS-RN:[1122-58-3])於DMA (2.0 mL)中之溶液。在室溫下攪拌混合物2 h。添加碳酸氫鈉水溶液，將混合物攪拌1 h，添加水且用乙酸乙酯萃取混合物。將有機相用半飽和氯化鈉溶液洗滌，乾燥(硫酸鈉)，過濾，且真空移除溶劑。矽膠層析(梯度：己烷/乙酸乙酯50-100%)產生固體，將該固體用二氯甲烷濕磨，得到158 mg (60%產率)標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 1.31 min; MS (ESIpos): m/z = 605 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.93 (s, 1H), 11.02 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.37-8.32 (m, 1H), 8.31-8.26 (m, 2H), 8.08 (dt, 1H), 7.86 (td, 1H), 7.53-7.46 (m, 2H), 7.28-7.18 (m, 3H), 7.16 (dd, 1H), 5.33 (q, 2H), 4.33 (dd, 1H), 3.28-3.11 (m, 1H), 2.76-2.59 (m, 1H)。
實例126  (2R或S)-4,4,4-三氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體1)
Figure 02_image801
外消旋化合物(參見實例125，150 mg)藉由製備型對掌性HPLC分離成對映異構體。粗對映異構體1用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體1 (38 mg，＞99% ee，參見實例126)。粗對映異構體2用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體2 (45 mg，95.3% ee，參見 實例 127)。
製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-3；管柱：YMC Cellulose SB 5µ，250×30； 溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：90%A+10%B；流速：90 ml/min；溫度：25℃；UV：254
分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Thermo Fisher UltiMate 3000；管柱：YMC Cellulose SB 3µ，100×4.6； 溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：90%A+10%B；流速：1.4 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm； 分析型對掌性HPLC (方法參見實例126)：R t= 4.98 min。 [α] D= +140.8 ° (來自DMSO中之溶液，c = 2.5 mg/mL) LC-MS (方法2): R t= 1.26 min; MS (ESIpos): m/z = 605 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 13.23-12.70 (m, 1H), 11.02 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.37-8.33 (m, 1H), 8.31-8.27 (m, 2H), 8.08 (dt, 1H), 7.86 (td, 1H), 7.49 (dd, 2H), 7.28-7.18 (m, 3H), 7.16 (dd, 1H), 5.33 (q, 2H), 4.33 (dd, 1H), 3.29-3.11 (m, 1H), 2.75-2.59 (m, 1H)。
實例127  (2R或S)-4,4,4-三氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺(對映異構體2)
Figure 02_image803
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例125。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例126)分離對映異構體，隨後用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到標題化合物(45 mg，95.3% ee)對映異構體2 ( 實例 127)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例126)：R t= 6.48 min。 [α] D= -157.23 ° (來自DMSO中之溶液，c = 1,8  mg/mL) LC-MS (方法2): R t= 1.27 min; MS (ESIneg): m/z = 603 [M-H] - 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.93 (br s, 1H), 11.02 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.37-8.33 (m, 1H), 8.31-8.26 (m, 2H), 8.08 (dt, 1H), 7.87 (td, 1H), 7.53-7.46 (m, 2H), 7.28-7.18 (m, 3H), 7.16 (dd, 1H), 5.33 (q, 2H), 4.33 (dd, 1H), 3.30-3.11 (m, 1H), 2.77-2.59 (m, 1H)
實例128  (2RS)-N-{4-[4-(環丙基甲氧基)-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(外消旋體)
Figure 02_image805
在室溫下，向(2RS)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁酸(142 mg，653 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(173 µl，0.98 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])於THF (3.0 mL)中之經攪拌溶液中添加2,4,6-三氯苯甲醯氯(110 µl，670 µmol)。在室溫下攪拌混合物1 h。經由注射器向此混合物添加單獨製備的4-[4-(環丙基甲氧基)-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-胺(78.0 mg，218 µmol)、N,N-二異丙基乙胺(58 µl，0.33 mmol；CAS-RN:[7087-68-5])及DMAP (2.66 mg，21.8 µmol；CAS-RN:[1122-58-3])於DMA (2.0 mL)中之溶液。在40℃攪拌混合物3 h。添加碳酸氫鈉水溶液，將混合物攪拌1 h，添加水且用乙酸乙酯萃取混合物。將有機相用半飽和氯化鈉溶液洗滌，乾燥(硫酸鈉)，過濾，且真空移除溶劑。矽膠層析(梯度：己烷/乙酸乙酯，60-100%)產生61.0 mg (產率50%)標題化合物。 LC-MS (方法2): R t= 1.23 min; MS (ESIpos): m/z = 559 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.73 (s, 1H), 10.92 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.37-8.32 (m, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.28-8.24 (m, 1H), 8.07 (dt, 1H), 7.85 (td, 1H), 7.51-7.43 (m, 2H), 7.27-7.17 (m, 3H), 7.13 (dd, 1H), 6.19-5.84 (m, 1H), 4.44 (d, 2H), 4.20 (dd, 1H), 2.81-2.61 (m, 1H), 2.30-2.11 (m, 1H), 1.39 (qdd, 1H), 0.68-0.58 (m, 2H), 0.49-0.40 (m, 2H)
實例129  (2R或S)-N-{4-[4-(環丙基甲氧基)-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映异構體1)
Figure 02_image807
外消旋化合物(參見實例128，54 mg)藉由製備型對掌性HPLC分離成對映異構體。粗對映異構體1用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體1(21 mg，99.7% ee，參見 實例 129)。粗對映異構體2用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到對映異構體2 (16 mg，97.2% ee，參見 實例 130)。
製備型對掌性 HPLC 方法： 儀器：PrepCon Labomatic HPLC-3；管柱：YMC Cellulose SB 5µ，250×30； 溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：70%A+30B；流速：70 mL/min；溫度：25℃；UV：254 nm
分析型對掌性 HPLC 方法 ：儀器：Thermo Fisher UltiMate 3000；管柱：YMC Cellulose SB 3µ，100×4.6； 溶離劑A：己烷+ 0.1 vol%二乙胺；溶離劑B：乙醇；等度：70%A+30%B；流速：1.4 ml/min；溫度：25℃；UV：254 nm； 分析型對掌性HPLC (方法參見實例129)：R t= 1.95 min。 [α] D= +122.8° (來自DMSO中之溶液，c = 2.8 mg/mL) LC-MS (方法2): R t= 1.22 min; MS (ESIpos): m/z = 559 [M+H] + 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ [ppm] = 12.73 (br s, 1H), 10.91 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.37-8.33 (m, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.07 (dt, 1H), 7.85 (td, 1H), 7.50-7.44 (m, 2H), 7.28-7.17 (m, 3H), 7.13 (dd, 1H), 6.18-5.84 (m, 1H), 4.44 (d, 2H), 4.20 (dd, 1H), 2.83-2.62 (m, 1H), 2.30-2.10 (m, 1H), 1.39 (quint, 1H), 0.67-0.58 (m, 2H), 0.49-0.42 (m, 2H)
實例 130(2R或S)-N-{4-[4-(環丙基甲氧基)-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺(對映异構體2)
Figure 02_image809
關於外消旋標題化合物之製備，參見實例128。藉由製備型對掌性HPLC (方法參見實例129)分離對映異構體，隨後用二氯甲烷與己烷之混合物濕磨，得到標題化合物(16 mg，97.2% ee)。 分析型對掌性HPLC (方法參見實例129)：R t= 2.69 min。 [α] D= -135.0° (來自DMSO中之溶液，c = 1.8 mg/mL) LC-MS (方法2): R t= 1.22 min; MS (ESIneg): m/z = 557 [M-H] -
酪蛋白激酶抑制劑與酪蛋白激酶 1D 之共結晶及結構測定結晶化  使用沈滴蒸氣擴散裝置獲得酪蛋白激酶1D (殘基1至294)與實例2複合之晶體。將濃度為7.9 mg/ml之酪蛋白激酶1D (20 mM Hepes、150 mM NaCl、0.5 mM TCEP、5 mM ß-OG，pH 7.0)與0.33 mM (1.4倍莫耳過量)之實例2 (50 mM於DMSO中)一起預培育30 min。隨後將0.2 µl蛋白質溶液與0.1 µl儲備溶液(0.1 M Bis-Tris丙烷：HCl，pH 7.0，1 M檸檬酸三銨，pH 7.0)混合且在20℃下經36 μl儲備溶液平衡。繞射良好的盤在48小時內生長且在未添加額外低溫保護劑之情況下自單晶收集資料。
資料收集、結構測定及改進在ALBA同步加速器(Barcelona, Spain)處收集酪蛋白激酶1D/實例2晶體之完整2.2 Å資料集(表2)。分子置換係使用先前確定之酪蛋白激酶1D模型作為起始模型進行。用軟體PHENIX替代人工重建及改進之若干回合產生最終模型(表2)。對於不對稱單元中之酪蛋白激酶1D之兩個複本中之每一者，B因子經由各原子及五個TLS組(分別覆蓋殘基2-41、42-59、60-167、168-245及246-293)之各向同性B因子之組合而模型化。
表2：資料收集及改進統計資料   
間隔基 P2 12 12 1
單位晶胞參數, 軸a, b, c [Å], 角α, β, γ (°)    73.6, 93.6, 106.3, 90°, 90°, 90°
解析度[Å] 48.81-2.19 (2.25-2.19)
獨特反射數目 38262 (6201)
平均I/σ 11.02 (3.09)
完整性 99.3 (96.5)
多重性 7.3 (7.2)
Rmeas 0.116 (0.721)
解析度[Å] 48.81-2.19 (2.25-2.19)
R work 0.231 (0.290)
R free 0.265 (0.361)
完整性 99.9 (100.0)
r.m.s.d. 鍵[Å] 0.008
r.m.s.d.角 0.996
括號中的值係指最高解析度殼層
結合於酪蛋白激酶1D之實例2之絕對組態  酪蛋白激酶1D與實例2之複合物用不對稱單元中之酪蛋白激酶1D之兩個分子結晶。實例2之單分子存在於酪蛋白激酶1D之兩個分子之活性位點中。為了共結晶，在確切立體組態未知的情況下，使用實例2之純對映異構體批次。電子密度圖允許推導出在晶體中所結合之立體異構體之C3處的組態。藉由蛋白質酪蛋白激酶1D之立體化學知識明確地定義實例2之中央碳原子C3處的立體化學方法(圖1)。在兩種酪蛋白激酶1D分子中，實例2明確地特徵在於碳原子C3上之( S)-組態(圖1)。
實驗部分 - 生物分析可使用以下分析來說明根據本發明之化合物之商業效用。
實例在所選生物學分析中測試一或多次。當測試超過一次時，資料係以平均值形式或以中值形式或以單一個別量測值形式報導，其中 •平均值(亦稱為算術平均值)表示所得值之總和除以所測試次數，且 •中位值表示該組值當以升序或降序排列時之中間數。若資料集中之值數目為奇數，則中位值為中間值。若資料集中之值數目為偶數，則中位值為兩個中間值之算術平均值。 •當無法計算中位值或平均值時，展示個別量測值。
合成實例一或多次。當合成超過一次時，生物分析資料表示利用獲自測試一或多個合成批次之資料集所計算之平均值。 本發明化合物之 活體外活性可在以下分析中證明：
CSNK1A1 分析 1採用如以下段落中所描述之CSNK1A1分析定量本發明化合物在1 µM三磷酸腺苷(ATP)存在下之CSNK1A1抑制活性。本質上，酶活性係藉由經由來自Promega公司之「ADP-Glo™激酶分析」套組定量產生為酶反應之副產物的二磷酸腺苷(ADP)來量測。此偵測系統如下工作：在第一步中，在激酶反應中未消耗之ATP係使用腺苷酸環化酶(「ADP-Glo-試劑」)定量轉化為cAMP，隨後停止腺苷酸環化酶且使激酶反應中產生之ADP轉化為ATP，其在基於螢光素酶之反應中產生輝光發光信號(「激酶偵測試劑」)。
由經桿狀病毒感染之昆蟲細胞表現且經由麩胱甘肽親和性層析純化之N端麩胱甘肽-S-轉移酶(GST)及全長人類CSNK1A1之重組融合蛋白購自Life Technologies (產品編號PV4174)且用作酶。作為激酶反應之受質，使用生物素標記肽Btn-Ahx-SGSEGDSESGEEEG (醯胺形式中之C端)，其可購自例如Biosyntan公司(Berlin-Buch, Germany)。
對於分析，將50 nl測試化合物於DMSO中之100倍濃縮溶液吸入至白色1536孔微量滴定盤(Greiner Bio-One, Frickenhausen, Germany)中，添加2 µL CSNK1A1於分析緩衝水溶液[50 mM HEPES pH 7.5、10% (v/v)甘油、10 mM MgCl 2、50 mM NaCl、1 mM二硫蘇糖醇、0.01 % (w/v)牛血清白蛋白、0.01% (v/v) Trition X-100]中之溶液，且在22℃培育混合物15 min以允許在激酶反應開始之前使測試化合物與酶預結合。隨後藉由添加3 µL ATP (1.67 µM=＞5 µL分析體積中之最終濃度為1 µM)及肽受質(50 µM=＞5 µL分析體積中之最終濃度為30 µM)於分析緩衝液中之溶液來使激酶反應開始，且在22℃下培育所得混合物，反應時間為30 min。CSNK1A1之濃度視酶批次之活性而調節，且經選擇適於使分析在線性範圍中，典型濃度為0.15 ng/µL。藉由添加2.5 µL「ADP-Glo-試劑」(用水稀釋1:1.5倍)來中止反應且將所得混合物在22℃培育1 h以將激酶反應中未消耗之ATP完全轉化為cAMP。隨後添加2.5 µL「激酶偵測試劑」(比生產商建議的濃度高1.2倍)，將所得混合物在22℃培育1 h，且接著用適合的量測儀器(例如Viewlux™，來自Perkin-Elmer)量測發光。將發射光之量視為所產生之ADP之量的量度，且由此視為CSNK1A1之活性的量度。
將資料標準化(無抑制劑之酶反應 = 0%抑制，不包括酶的所有其他分析組分= 100%抑制)。通常，在相同微量滴定盤上以20 µM至0.07 nM範圍內之11種不同濃度(20 µM、5.7 µM、1.6 µM、0.47 µM、0.13 µM、38 nM、11 nM、3.1 nM、0.9 nM、0.25 nM及0.07 nM，在分析前藉由連續稀釋以於DMSO中之100倍濃縮溶液的水準單獨地製備之稀釋系列，確切濃度可視所使用移液器而變化)，對各濃度以一式兩份值對測試化合物進行測試，且使用Genedata Screener™軟體計算IC 50值。
CSNK1A1 分析 2採用如以下段落中所描述之CSNK1A1分析定量本發明化合物在1 µM三磷酸腺苷(ATP)存在下之CSNK1A1抑制活性。本質上，酶活性係藉由經由來自Promega公司之「ADP-Glo™激酶分析」套組定量產生為酶反應之副產物的二磷酸腺苷(ADP)來量測。此偵測系統如下工作：在第一步中，在激酶反應中未消耗之ATP係使用腺苷酸環化酶(「ADP-Glo-試劑」)定量轉化為cAMP，隨後停止腺苷酸環化酶且使激酶反應中產生之ADP轉化為ATP，其在基於螢光素酶之反應中產生輝光發光信號(「激酶偵測試劑」)。
由經桿狀病毒感染之昆蟲細胞表現且經由麩胱甘肽親和性層析純化之N端麩胱甘肽-S-轉移酶(GST)及全長人類CSNK1A1之重組融合蛋白購自Life Technologies (產品編號PV4174)且用作酶。作為激酶反應之受質，使用生物素標記肽生物素-Ahx-KRRRAL-pS-VASLPGL (醯胺形式中之C端)，其可購自例如Biosyntan公司(Berlin-Buch, Germany)。
對於分析，將50 nl測試化合物於DMSO中之100倍濃縮溶液吸入至白色1536孔微量滴定盤(Greiner Bio-One, Frickenhausen, Germany)中，添加2 µL CSNK1A1於分析緩衝水溶液[50 mM HEPES pH 7.5、10% (v/v)甘油、10 mM MgCl 2、50 mM NaCl、1 mM二硫蘇糖醇、0.01 % (w/v)牛血清白蛋白、0.01% (v/v) Trition X-100]中之溶液，且在22℃培育混合物15 min以允許在激酶反應開始之前使測試化合物與酶預結合。隨後藉由添加3 µL ATP (1.67 µM=＞5 µL分析體積中之最終濃度為1 µM)及肽受質(50 µM=＞5 µL分析體積中之最終濃度為30 µM)於分析緩衝液中之溶液來使激酶反應開始，且在22℃培育所得混合物，反應時間為30 min。CSNK1A1之濃度視酶批次之活性而調節，且經選擇適於使分析在線性範圍中，典型濃度為約0.0375 ng/µL。藉由添加2.5 µL「ADP-Glo-試劑」(用水稀釋1:1.5倍)來中止反應且將所得混合物在22℃培育1 h以將激酶反應中未消耗之ATP完全轉化為cAMP。隨後添加2.5 µL「激酶偵測試劑」(比生產商建議的濃度高1.2倍)，將所得混合物在22℃培育1 h，且接著用適合的量測儀器(例如Viewlux™，來自Perkin-Elmer)量測發光。將發射光之量視為所產生之ADP之量的量度，且由此視為CSNK1A1之活性的量度。
將資料標準化(無抑制劑之酶反應 = 0%抑制，不包括酶的所有其他分析組分= 100%抑制)。通常，在相同微量滴定盤上以20 µM至0.07 nM範圍內之11種不同濃度(20 µM、5.7 µM、1.6 µM、0.47 µM、0.13 µM、38 nM、11 nM、3.1 nM、0.9 nM、0.25 nM及0.07 nM，在分析前藉由連續稀釋以於DMSO中之100倍濃縮溶液的水準單獨地製備之稀釋系列，確切濃度可視所使用移液器而變化)，對各濃度以一式兩份值對測試化合物進行測試，且使用Genedata Screener™軟體計算IC 50值。
CSNK1A1 高 ATP 分析採用如以下段落中所描述之CSNK1A1高ATP分析定量本發明化合物在1 mM三磷酸腺苷(ATP)存在下之CSNK1A1抑制活性。本質上，酶活性係藉由經由來自Promega公司之「ADP-Glo™激酶分析」套組定量產生為酶反應之副產物的二磷酸腺苷(ADP)來量測。此偵測系統如下工作：在第一步中，在激酶反應中未消耗之ATP係使用腺苷酸環化酶(「ADP-Glo-試劑」)定量轉化為cAMP，隨後停止腺苷酸環化酶且使激酶反應中產生之ADP轉化為ATP，其在基於螢光素酶之反應中產生輝光發光信號(「激酶偵測試劑」)。
由經桿狀病毒感染之昆蟲細胞表現且經由麩胱甘肽親和性層析純化之N端麩胱甘肽-S-轉移酶(GST)及全長人類CSNK1A1之重組融合蛋白購自Life Technologies (產品編號PV4174)且用作酶。作為激酶反應之受質，使用生物素標記肽生物素-Ahx-KRRRAL-pS-VASLPGL (醯胺形式中之C端)，其可購自例如Biosyntan公司(Berlin-Buch, Germany)。
對於分析，將50 nl測試化合物於DMSO中之100倍濃縮溶液吸入至白色低體積384孔微量滴定盤(Greiner Bio-One, Frickenhausen, Germany)中，添加2 µL CSNK1A1於分析緩衝水溶液[50 mM HEPES pH 7.5、10% (v/v)甘油、10 mM MgCl 2、50 mM NaCl、1 mM二硫蘇糖醇、0.01 % (w/v)牛血清白蛋白、0.01% (v/v) Trition X-100]中之溶液，且在22℃培育混合物15 min以允許在激酶反應開始之前使測試化合物與酶預結合。隨後藉由添加3 µL ATP (1.67 mM=＞5 µL分析體積中之最終濃度為1 mM)及肽受質(167 µM=＞5 µL分析體積中之最終濃度為100 µM)於分析緩衝液中之溶液來使激酶反應開始，且在22℃培育所得混合物，反應時間為30 min。CSNK1A1之濃度視酶批次之活性而調節，且經選擇適於使分析在線性範圍中，典型濃度為約0.4 ng/µL。藉由添加2.5 µL「ADP-Glo-試劑」(用水稀釋1:1.5倍)來中止反應且將所得混合物在22℃培育1 h以將激酶反應中未消耗之ATP完全轉化為cAMP。隨後添加2.5 µL「激酶偵測試劑」(比生產商建議的濃度高1.2倍)，將所得混合物在22℃培育1 h，且接著用適合的量測儀器(例如Viewlux™，來自Perkin-Elmer)量測發光。將發射光之量視為所產生之ADP之量的量度，且由此視為CSNK1A1之活性的量度。
將資料標準化(無抑制劑之酶反應 = 0%抑制，不包括酶的所有其他分析組分= 100%抑制)。通常，在相同微量滴定盤上以20 µM至0.07 nM範圍內之11種不同濃度(20 µM、5.7 µM、1.6 µM、0.47 µM、0.13 µM、38 nM、11 nM、3.1 nM、0.9 nM、0.25 nM及0.07 nM，在分析前藉由連續稀釋以於DMSO中之100倍濃縮溶液的水準單獨地製備之稀釋系列，確切濃度可視所使用移液器而變化)，對各濃度以一式兩份值對測試化合物進行測試，且使用Genedata Screener™軟體計算IC 50值。
CSNK1D 分析採用如以下段落中所描述之CSNK1D分析定量本發明化合物在1 µM三磷酸腺苷(ATP)存在下之CSNK1D抑制活性。本質上，酶活性係藉由經由來自Promega公司之「ADP-Glo™激酶分析」套組定量產生為酶反應之副產物的二磷酸腺苷(ADP)來量測。此偵測系統如下工作：在第一步中，在激酶反應中未消耗之ATP係使用腺苷酸環化酶(「ADP-Glo-試劑」)定量轉化為cAMP，隨後停止腺苷酸環化酶且使激酶反應中產生之ADP轉化為ATP，其在基於螢光素酶之反應中產生輝光發光信號(「激酶偵測試劑」)。
由經桿狀病毒感染之昆蟲細胞表現且經由麩胱甘肽親和性層析純化之N端麩胱甘肽-S-轉移酶(GST)及全長人類CSNK1D之重組融合蛋白購自Life Technologies (產品編號PV3665)且用作酶。作為激酶反應之受質，使用生物素標記肽Btn-Ahx-SGSEGDSESGEEEG (醯胺形式中之C端)，其可購自例如Biosyntan公司(Berlin-Buch, Germany)。
對於分析，將50 nl測試化合物於DMSO中之100倍濃縮溶液吸入至白色1536孔微量滴定盤(Greiner Bio-One, Frickenhausen, Germany)中，添加2 µL CSNK1D於分析緩衝水溶液[50 mM HEPES pH 7.5、10% (v/v)甘油、10 mM MgCl 2、50 mM NaCl、1 mM二硫蘇糖醇、0.01 % (w/v)牛血清白蛋白、0.01% (v/v) Trition X-100]中之溶液，且在22℃培育混合物15 min以允許在激酶反應開始之前使測試化合物與酶預結合。隨後藉由添加3 µL ATP (16.7 µM=＞5 µL分析體積中之最終濃度為1 µM)及肽受質(50 µM=＞5 µL分析體積中之最終濃度為30 µM)於分析緩衝液中之溶液來使激酶反應開始，且在22℃培育所得混合物，反應時間為30 min。CSNK1D之濃度視酶批次之活性而調節，且經選擇適於使分析在線性範圍中，典型濃度為約0.5 ng/µL。藉由添加2.5 µL「ADP-Glo-試劑」(用水稀釋1:1.5倍)來中止反應且將所得混合物在22℃培育1 h以將激酶反應中未消耗之ATP完全轉化為cAMP。隨後添加2.5 µL「激酶偵測試劑」(比生產商建議的濃度高1.2倍)，將所得混合物在22℃培育1 h，且接著用適合的量測儀器(例如Viewlux™，來自Perkin-Elmer)量測發光。將發射光之量視為所產生之ADP之量的量度，且由此視為CSNK1D之活性的量度。
將資料標準化(無抑制劑之酶反應 = 0%抑制，不包括酶的所有其他分析組分= 100%抑制)。通常，在相同微量滴定盤上以20 µM至0.07 nM範圍內之11種不同濃度(20 µM、5.7 µM、1.6 µM、0.47 µM、0.13 µM、38 nM、11 nM、3.1 nM、0.9 nM、0.25 nM及0.07 nM，在分析前藉由連續稀釋以於DMSO中之100倍濃縮溶液的水準單獨地製備之稀釋系列，確切濃度可視所使用移液器而變化)，對各濃度以一式兩份值對測試化合物進行測試，且使用Genedata Screener™軟體計算IC 50值。
CSNK1G3 分析採用如以下段落中所描述之CSNK1G3分析定量本發明化合物在1 µM三磷酸腺苷(ATP)存在下之CSNK1G3抑制活性。本質上，酶活性係藉由經由來自Promega公司之「ADP-Glo™激酶分析」套組定量產生為酶反應之副產物的二磷酸腺苷(ADP)來量測。此偵測系統如下工作：在第一步中，在激酶反應中未消耗之ATP係使用腺苷酸環化酶(「ADP-Glo-試劑」)定量轉化為cAMP，隨後停止腺苷酸環化酶且使激酶反應中產生之ADP轉化為ATP，其在基於螢光素酶之反應中產生輝光發光信號(「激酶偵測試劑」)。
由經桿狀病毒感染之昆蟲細胞表現且經由麩胱甘肽親和性層析純化之N端麩胱甘肽-S-轉移酶(GST)及全長人類CSNK1G3之重組融合蛋白購自Life Technologies (產品編號PV3838)且用作酶。作為激酶反應之受質，使用生物素標記肽生物素-Ahx-KRRRAL-pS-VASLPGL (醯胺形式中之C端)，其可購自例如Biosyntan公司(Berlin-Buch, Germany)。
對於分析，將50 nl測試化合物於DMSO中之100倍濃縮溶液吸入至白色1536孔微量滴定盤(Greiner Bio-One, Frickenhausen, Germany)中，添加2 µL CSNK1G3於分析緩衝水溶液[50 mM HEPES pH 7.5、10% (v/v)甘油、10 mM MgCl 2、50 mM NaCl、1 mM二硫蘇糖醇、0.01 % (w/v)牛血清白蛋白、0.01% (v/v) Trition X-100]中之溶液，且在22℃培育混合物15 min以允許在激酶反應開始之前使測試化合物與酶預結合。隨後藉由添加3 µL ATP (1.67 µM=＞5 µL分析體積中之最終濃度為1 µM)及肽受質(50 µM=＞5 µL分析體積中之最終濃度為30 µM)於分析緩衝液中之溶液來使激酶反應開始，且在22℃培育所得混合物，反應時間為30 min。CSNK1G3之濃度視酶批次之活性而調節，且經選擇適於使分析在線性範圍中，典型濃度為約0.06 ng/µL。藉由添加2.5 µL「ADP-Glo-試劑」(用水稀釋1:1.5倍)來中止反應且將所得混合物在22℃培育1 h以將激酶反應中未消耗之ATP完全轉化為cAMP。隨後添加2.5 µL「激酶偵測試劑」(比生產商建議的濃度高1.2倍)，將所得混合物在22℃培育1 h，且接著用適合的量測儀器(例如Viewlux™，來自Perkin-Elmer)量測發光。將發射光之量視為所產生之ADP之量的量度，且由此視為CSNK1G3之活性的量度。
將資料標準化(無抑制劑之酶反應 = 0%抑制，不包括酶的所有其他分析組分= 100%抑制)。通常，在相同微量滴定盤上以20 µM至0.07 nM範圍內之11種不同濃度(20 µM、5.7 µM、1.6 µM、0.47 µM、0.13 µM、38 nM、11 nM、3.1 nM、0.9 nM、0.25 nM及0.07 nM，在分析前藉由連續稀釋以於DMSO中之100倍濃縮溶液的水準單獨地製備之稀釋系列，確切濃度可視所使用移液器而變化)，對各濃度以一式兩份值對測試化合物進行測試，且使用Genedata Screener™軟體計算IC 50值。
WT-EGFR 激酶分析採用如以下段落所述之基於TR-FRET的EGFR分析來定量本發明化合物對野生型表皮生長因子受體(EGFR)之抑制活性。
將在Sf9昆蟲細胞中表現且經由親和性層析使用如上文所描述之麩胱甘肽瓊脂糖純化的N端麩胱甘肽-S-轉移酶(GST)與人類EGFR之片段(胺基酸R669至A1210)之重組融合蛋白用作激酶。作為激酶反應之受質，使用生物素標記肽生物素-Ahx-AEEEEYFELVAKKK (醯胺形式中之C端)，其可購自例如Biosynthan GmbH公司(Berlin-Buch，Germany)。
對於分析，將50 nl測試化合物於DMSO中之100倍濃縮溶液吸入黑色低體積384孔微量滴定板或黑色1536孔微量滴定板(均為Greiner Bio-One，Frickenhausen，Germany)，添加2 µL EGFR於分析緩衝水溶液[50 mM Hepes pH 7.0，10 mM MgCl 2，1 mM二硫蘇糖醇，0.5 mM EGTA，0.3 mM經活化鄰釩酸鈉，0.005% (w/v)牛血清蛋白，0.005% (v/v) Tween-20]中之溶液，且在22℃培育混合物15 min以允許在激酶反應開始之前使測試化合物與酶預結合。隨後藉由添加3 µL三磷酸腺苷(ATP，3.33 mM=＞5 µL分析體積中之最終濃度為2 mM)及受質(1.67 µM=＞5 µL分析體積中之最終濃度為1 µM)於分析緩衝液中之溶液來使激酶反應開始，且在22℃培育所得混合物，反應時間為30 min。EGFR之濃度視酶批次之活性而調節，且經選擇適於使分析在線性範圍中，典型濃度為7.6 pg/µL。藉由添加3 µL HTRF偵測試劑(83.3 nM抗生蛋白鏈菌素-XL665 [Cisbio Bioassays，Codolet，France]及1.67 nM PT66-Tb-穴狀合物，來自Cisbio Bioassays之經鋱穴狀合物標記的抗磷酸基酪胺酸抗體[代替亦可使用之來自Perkin Elmer之PT66 Tb穴狀合物PT66-Eu螯合物])於EDTA水溶液(133.3 mM EDTA，0.2% (w/v)牛血清蛋白於50 mM HEPES pH 7.5中)中之溶液使反應停止。
在22℃培育所得混合物1 h，以使得生物素標記磷酸化肽結合於抗生蛋白鏈菌素-XL665及PT66-Tb穴狀合物。隨後藉由量測PT66-Tb穴狀合物至抗生蛋白鏈菌素-XL665之共振能量轉移來評估磷酸化受質之量。因此，在HTRF讀取器，例如Pherastar (BMG Labtechnologies, Offenburg, Germany)或Viewlux (Perkin-Elmer)中量測337 nm下激發後620 nm及665 nm下之螢光發射。665 nm及622 nm下之發射比用作磷酸化受質之量的量度。將資料標準化(無抑制劑之酶反應 = 0%抑制，不包括酶的所有其他分析組分= 100%抑制)。通常，在相同微量滴定盤上以20 µM至0.07 nM範圍內之11種不同濃度(20 µM、5.7 µM、1.6 µM、0.47 µM、0.13 µM、38 nM、11 nM、3.1 nM、0.9 nM、0.25 nM及0.07 nM，在分析前藉由連續稀釋以於DMSO中之100倍濃縮溶液的水準單獨地製備之稀釋系列，確切濃度可視所使用移液器而變化)，對各濃度以一式兩份值對測試化合物進行測試，且使用Genedata Screener™軟體計算IC50值。
Bub1 激酶分析本發明化合物之Bub1-抑制活性採用如以下段落中所描述之Bub1 TR-FRET分析定量。
將在昆蟲細胞(Hi5)中表現且藉由Ni-NTA親和性層析及隨後尺寸排阻層析法純化之人類Bub1之N末端His 6標記之重組催化域(胺基酸704-1085)用作酶。作為激酶反應之受質，使用生物素標記肽生物素-Ahx-VLLPKKSFAEPG (醯胺形式中之C末端)，其可購自例如Biosyntan公司(Berlin, Germany)。
對於分析，將50 nl測試化合物於DMSO中之100倍濃縮溶液吸入至黑色低體積384孔微量滴定盤或黑色1536孔微量滴定盤(兩者均為Greiner Bio-One, Frickenhausen, Germany)中，添加2 µL Bub1於分析緩衝水溶液[50 mM Tris/HCl pH 7.5、10 mM氯化鎂(MgCl 2)、200 mM氯化鉀(KCl)、1.0 mM二硫蘇糖醇(DTT)、0.1 mM鄰釩酸鈉、1% (v/v)甘油、0.01 % (w/v)牛血清白蛋白(BSA)、0.005% (v/v) Trition X-100 (Sigma)、1× 完全不含 EDTA之蛋白酶抑制劑混合物(Roche)]中之溶液，且在22℃培育混合物15 min以允許在激酶反應開始之前使測試化合物與酶預結合。隨後藉由添加3 µL三磷酸腺苷(ATP，16.7 µM=＞5 µL分析體積中之最終濃度為10 µM)及受質(1.67 µM=＞5 µL分析體積中之最終濃度為1 µM)於分析緩衝液中之溶液來使激酶反應開始，且在22℃培育所得混合物，反應時間為60 min。Bub1之濃度視酶批次之活性而調節，且經選擇適於使分析在線性範圍中，典型濃度在200 ng/mL範圍內。藉由添加5 µL TR-FRET偵測試劑(0.2 µM抗生蛋白鏈菌素-XL665 [Cisbio Bioassays, Codolet, France]及1 nM抗磷酸基絲胺酸抗體[Merck Millipore, 目錄號35-002]及0.4 nM LANCE EU-W1024標記之抗小鼠IgG抗體[Perkin-Elmer, 產品編號AD0077，可使用來自Cisbio Bioassays之鋱-穴狀化合物-標記之抗小鼠IgG抗體作為替代])於EDTA水溶液(50 mM EDTA，0.2 % (w/v)牛血清白蛋白於100 mM HEPES中，pH 7.5)中之溶液使反應停止。
在22℃下培育所得混合物1 h，以使磷酸化生物素標記肽與偵測試劑之間形成複合物。隨後，藉由量測Eu螯合劑至抗生蛋白鏈菌素-XL之共振能量轉移來評估磷酸化受質之量。因此，在TR-FRET讀取器，例如Rubystar或Pherastar FS (均來自BMG Labtechnologies，Offenburg，Germany)或Viewlux (Perkin-Elmer)中量測350 nm下激發後620 nm及665 nm下之螢光發射。665 nm及622 nm下之發射比用作磷酸化受質之量的量度。將資料標準化(無抑制劑之酶反應 = 0%抑制，不包括酶的所有其他分析組分= 100%抑制)。在相同微量滴定盤上以20 µM至0.1 nM範圍內之11個不同濃度(20 µM、5.9 µM、1.7 µM、0.51 µM、0.15 µM、44 nM、13 nM、3.8 nM、1.1 nM、0.33 nM及0.1 nM，在分析前藉由連續1:3.4稀釋以於DMSO中之100倍濃縮溶液的水準單獨製備之稀釋系列，精確濃度及所測試濃度數目可視用於測試樣本製備之液體處理測試設備而變化)，對各濃度以一式兩份值對測試化合物進行測試，且藉由4參數擬合計算IC 50值。
Bub1 高 ATP 激酶分析採用如以下段落所描述之Bub1 TR-FRET高ATP激酶分析來定量本發明化合物在高ATP濃度下之Bub1抑制活性。
將在昆蟲細胞(Hi5)中表現且藉由Ni-NTA親和性層析及隨後尺寸排阻層析法純化之人類Bub1之N末端His 6標記重組催化域(胺基酸704-1085)用作酶。作為激酶反應之受質，使用生物素標記肽生物素-Ahx-VLLPKKSFAEPG (醯胺形式中之C末端)，其可購自例如Biosyntan公司(Berlin, Germany)。
對於分析，將50 nl測試化合物於DMSO中之100倍濃縮溶液吸入黑色低體積384孔微量滴定板或黑色1536孔微量滴定板(均為Greiner Bio-One，Frickenhausen，Germany)，添加3 µL三磷酸腺苷(ATP，3.33 mM =＞於5 µL分析體積中最終濃度為2 mM)及受質(1.67 µM =＞於5 µL分析體積中最終濃度為1 µM)於分析緩衝水溶液[50 mM Tris/HCl pH 7.5，10 mM氯化鎂(MgCl 2)，200 mM氯化鉀(KCl)，1.0 mM二硫蘇糖醇(DTT)，0.1 mM鄰釩酸鈉，1% (v/v)甘油，0.01% (w/v)牛血清蛋白(BSA)，0.005% (v/v) Trition X-100 (Sigma)，1x 完全不含 EDTA之蛋白酶抑制劑混合物(Roche)]中之溶液。隨後藉由添加2 µL Bub1於分析緩衝液中之溶液使激酶反應開始，且在22℃下培育所得混合物，反應時間為60 min。視酶批次活性而定調節Bub1之濃度且經選擇適於使分析在線性範圍中，典型濃度為約200 ng/mL。藉由添加3 µL TR-FRET偵測試劑(0.167 µM抗生蛋白鏈菌素-XL665 [Cisbio Bioassays, Codolet, France]及1.67 nM抗磷酸基絲胺酸抗體[Merck Millipore，目錄號35-002]及0.67 nM LANCE EU-W1024標記之抗小鼠IgG抗體[Perkin-Elmer，產品號AD0077，可使用來自Cisbio Bioassays之鋱-穴狀合物-標記之抗小鼠IgG抗體作為替代])於EDTA水溶液(83.3 mM EDTA，0.2% (w/v)牛血清蛋白於100 mM HEPES pH 7.5中)中之溶液使反應停止。
在22℃下培育所得混合物1 h，以使磷酸化生物素標記肽與偵測試劑之間形成複合物。隨後，藉由量測Eu螯合劑至抗生蛋白鏈菌素-XL之共振能量轉移來評估磷酸化受質之量。因此，在TR-FRET讀取器，例如Rubystar或Pherastar FS (均來自BMG Labtechnologies，Offenburg，Germany)或Viewlux (Perkin-Elmer)中量測350 nm下激發後620 nm及665 nm下之螢光發射。665 nm及622 nm下之發射比用作磷酸化受質之量的量度。將資料標準化(無抑制劑之酶反應 = 0%抑制，不包括酶的所有其他分析組分= 100%抑制)。通常，在相同微量滴定盤上以20 µM至0.7 nM範圍內之11個不同濃度(20 µM、5.7 µM、1.6 µM、0.47 µM、0.13 µM、38 nM、11 nM、3.1 nM、0.9 nM、0.25 nM及0.07 nM，在分析前藉由連續稀釋以於DMSO中之100倍濃縮溶液的水準單獨製備之稀釋系列，精確濃度可視所使用移液器而變化)，對各濃度以一式兩份值對測試化合物進行測試，且藉由4參數擬合計算IC50值。
細胞機制分析 P-RPS6 (Ser244/247) 核糖體蛋白 S6激酶CSNK1A使核糖體蛋白S6在Ser247處磷酸化。細胞內西方分析使用兩種在光譜上不同之近紅外染料同時偵測700及800 nm處之兩個目標。利用特異性抗體，可以量化Ser244/247-磷酸化RPS6 (Thermo Fisher 44-923)且可以同時用細胞染色劑Draq5 (Cell signaling, 4084L)及Sapphire700 (LiCor, 928-40022)標準化樣本。
在37℃下，將2000個HCT 116細胞接種於96孔盤(Falcon 353075)中之生長培養基(DMEM/Ham的F12，10% FCS)中隔夜。在37℃用不同濃度之測試化合物處理細胞4h。在2-8℃下與初級抗體(Ser244/247-磷酸化RPS6 (Thermo Fisher 44-923)一起培育隔夜之前，將細胞用4%多聚甲醛固定，洗滌(Sigma-Aldrich, AB351787, Tween 20, 1%)且用緩衝液(Odyssey阻斷緩衝液，LiCor, 927-40000)阻斷。洗滌後，添加次級IR染料標記之抗體與細胞染色劑之混合物持續1h且再次洗滌。用LiCor Odyssey紅外線成像儀CLX對於pRPS6在800 nm下掃描培養盤，且對於細胞染色劑Draq5/Sapphire在700 nm下掃描。標準經化合物處理之細胞的800 nm與700 nm之商設定為0%，且經DMSO處理之細胞的800 nm與700 nm之商設定為100%。結果以%之形式給出，反映相較於對照對酪蛋白激酶活性之抑制且根據細胞數標準化。
藉助於4參數擬合測定IC 50值。
P-ß- 連環蛋白 (Ser45)將50,000個DLD-1細胞接種於RPMI 1640 (Biochrom; # FG 1215、10%FCS、2mM L-麩醯胺酸)中之96孔盤(nunc #161093)中。24h後，在37℃用不同濃度之測試化合物處理細胞30 min。將細胞用冰冷PBS緩衝液洗滌兩次，用溶解緩衝液處理，並按照供應商手冊(ß-連環蛋白pS45 ELISA套組；ab205703)進行所有下一步驟。用ELISA在450 nm下量測pS45之含量，用校準曲線計算且按照白質含量標準化。經對照化合物處理之細胞之標準化商經設定為0%且未處理細胞之標準化商經設定為100%。結果以%形式給出，反映活性ß-連環蛋白pS45相比於對照之含量。藉助於4參數擬合測定IC50值。
增殖分析 HCT 116第1天，將400個HCT 116細胞/30 µL/孔接種於384孔盤(CORNING #3571)中之生長培養基(DMEM/Ham的 F12，10% FCS)中。接種參考盤以用於零時測定。在37℃下培育所有盤隔夜。第2天：以7步稀釋添加測試化合物且在37℃培育96h。第2天：零時培養盤：添加30 µL/孔CTG溶液(Promega Cell Titer Glo溶液；目錄號G755B及G756B)，培育30分鐘，在PheraSta上讀取發光。第6天：經化合物處理之盤：添加30 µL/孔CTG溶液(Promega Cell Titer Glo溶液；目錄號G755B及G756B)，培育30分鐘，在PheraSta上讀取發光。在減去來自第6天值之零時發光值之後計算增殖且與未經處理孔比較。
使用四參數擬合測定IC 50值。
A549第1天，將400個A549細胞/30 µL/孔接種於384孔盤(CORNING #3571)中之生長培養基(DMEM/Ham的F12，10% FCS)中。接種參考盤以用於零時測定。在37℃下培育所有盤隔夜。第2天：以7步稀釋添加測試化合物且在37℃培育96h。第2天：零時培養盤：添加30 µL/孔CTG溶液(Promega Cell Titer Glo溶液；目錄號G755B及G756B)，培育30分鐘，在PheraSta上讀取發光。第6天：經化合物處理之盤：添加30 µL/孔CTG溶液(Promega Cell Titer Glo溶液；目錄號G755B及G756B)，培育30分鐘，在PheraSta上讀取發光。在減去來自第6天值之零時發光值之後計算增殖且與未經處理孔比較。
使用四參數擬合測定IC 50值。
TMD8第1天，將400個TMD8細胞/30 µL/孔接種於384孔盤(CORNING #3571)中之生長培養基(RPMI1640，20% FCS)中。接種參考盤以用於零時測定。在37℃培育所有盤隔夜。第2天：以7步稀釋添加測試化合物且在37℃培育96h。第2天：零時培養盤：添加30 µL/孔CTG溶液(Promega Cell Titer Glo溶液；目錄號G755B及G756B)，培育30分鐘，在PheraSta上讀取發光。第6天：經化合物處理之盤：添加30 µL/孔CTG溶液(Promega Cell Titer Glo溶液；目錄號G755B及G756B)，培育30分鐘，在PheraSta上讀取發光。在減去來自第6天值之零時發光值之後計算增殖且與未經處理孔比較。
使用四參數擬合測定IC 50值。
結果：表3展示CSNK1A1及CSNK1D生物化學分析中之抑制結果。 表 3
實例編號 CSNK1A1 分析1 IC 50[mol/l] ( 中值) CSNK1A1 分析2 IC 50[mol/l] ( 中值) CSNK1D IC 50[mol/l] ( 中值) CSNK1A1 高 ATP 分析 IC 50[mol/l] ( 中值)
1    1.01 E-8 1.57 E-8 6.13 E-8
2    1.36 E-9 2.63 E-9 5.00 E-9
3    9.21 E-9 2.01 E-8 8.49 E-7
4    6.49 E-9 9.45 E-9 1.58 E-7
5    4.43 E-9 7.13 E-9 1.19 E-7
6    6.82 E-8 8.97 E-8 2.99 E-6
7    2.76 E-9 4.13 E-9 8.12 E-9
8    3.01 E-9 4.01 E-9 8.57 E-9
9    1.58 E-8 3.28 E-8 9.45 E-7
10    2.61 E-9 4.99 E-9 9.88 E-9
11    1.20 E-9 2.57 E-9 5.35 E-9
12    4.45 E-9 1.24 E-8 8.56 E-7
13    4.66 E-9 1.23 E-8 2.40 E-7
14    1.64 E-8 2.85 E-8 2.14 E-6
15    1.32 E-9 3.06 E-9 3.09 E-8
16    3.39 E-9 4.57 E-9 2.19 E-8
17    1.70 E-9 3.16 E-9 5.48 E-9
18    1.62 E-8 2.54 E-8 5.42 E-7
19    9.22 E-9 6.92 E-9 6.02 E-7
20    1.32 E-7 4.78 E-8 1.01 E-5
21    4.21 E-9 3.59 E-9 2.29 E-7
22    2.37 E-9 3.18 E-9 9.04 E-8
23    3.36 E-8 1.25 E-8 3.74 E-6
24    1.62 E-9 2.48 E-9 6.66 E-8
25    2.77 E-9 7.87 E-9 1.86 E-8
26    1.58 E-8 5.07 E-8 1.58 E-8
27    1.55 E-9 4.05 E-9 1.55 E-9
28    3.95 E-9 4.00 E-9 3.95 E-9
29    3.31 E-9 2.32 E-9 3.31 E-9
30    8.84 E-9 1.47 E-8 8.84 E-9
31    3.04 E-9 7.81 E-9 3.04 E-9
32    1.37 E-9 4.55 E-9 1.37 E-9
33    1.95 E-8 3.73 E-8 1.95 E-8
34    3.79 E-9 6.86 E-9 3.79 E-9
35    2.69 E-9 3.70 E-9 2.69 E-9
36    2.14 E-8 4.19 E-8 2.14 E-8
37    3.97 E-9 8.32 E-9 3.97 E-9
38    2.26 E-9 3.80 E-9 2.26 E-9
39    1.90 E-8 4.02 E-8 1.90 E-8
40    3.69 E-9 5.57 E-9 3.69 E-9
41    3.37 E-9 4.13 E-9 3.37 E-9
42    8.22 E-9 1.44 E-8 8.22 E-9
43    1.02 E-8 7.64 E-9 1.02 E-8
44    6.02 E-9 5.31 E-9 6.02 E-9
45    2.23 E-8 4.04 E-8 2.23 E-8
46    2.32 E-8 1.92 E-8 2.32 E-8
47    3.16 E-8 5.90 E-8 3.16 E-8
48    9.91 E-9 6.99 E-9 9.91 E-9
49    3.64 E-9 7.69 E-9 3.64 E-9
50    9.34 E-9 9.03 E-9 9.34 E-9
51    4.65 E-9 4.10 E-9 4.65 E-9
52    1.72 E-8 2.34 E-8 1.72 E-8
53    6.00 E-9 7.31 E-9 6.00 E-9
54    4.22 E-9 3.70 E-9 4.22 E-9
55    1.83 E-8 2.49 E-8 1.83 E-8
56    3.19 E-9 6.67 E-9 3.19 E-9
57    7.89 E-9 6.33 E-9 7.89 E-9
58    3.56 E-9 3.03 E-9 3.56 E-9
59    1.27 E-8 1.96 E-8 1.27 E-8
60    5.81 E-9 1.25 E-8 5.81 E-9
61    1.11 E-8 8.79 E-9 1.11 E-8
62    3.92 E-9 8.90 E-9 3.92 E-9
63    1.48 E-9 3.77 E-9 1.48 E-9
64    2.30 E-8 4.04 E-8 2.30 E-8
65    2.75 E-9 5.62 E-9 2.75 E-9
66    2.43 E-9 4.59 E-9 2.43 E-9
67    2.20 E-8 2.97 E-8 2.20 E-8
68    6.93 E-9 1.44 E-8 6.93 E-9
69    1.04 E-8 9.76 E-9 1.04 E-8
70    5.43 E-9 9.21 E-9 5.43 E-9
71    8.21 E-9 1.28 E-8 8.21 E-9
72    7.10 E-9 7.30 E-9 7.10 E-9
73    4.16 E-9 4.02 E-9 4.16 E-9
74    3.58 E-8 5.54 E-8 3.58 E-8
75    4.37 E-9 4.37 E-9 4.37 E-9
76    2.94 E-9 3.10 E-9 2.94 E-9
77    7.20 E-9 1.62 E-8 7.20 E-9
78    5.16 E-9 5.15 E-9 5.16 E-9
79    3.10 E-9 3.27 E-9 3.10 E-9
80    1.69 E-8 2.64 E-8 1.69 E-8
81    4.02 E-9 5.85 E-9 4.02 E-9
82    2.68 E-9 3.17 E-9 2.68 E-9
83    9.86 E-9 3.53 E-8 9.86 E-9
84    4.77 E-9 7.35 E-9 4.77 E-9
85    4.21 E-9 7.11 E-9 4.21 E-9
86    2.89 E-9 6.16 E-9 2.89 E-9
87    6.08 E-9 1.08 E-8 6.08 E-9
88    4.72 E-9 7.42 E-9 4.72 E-9
89    8.90 E-8 1.04 E-7 8.90 E-8
90    2.43 E-9 2.50 E-9 2.43 E-9
91    9.57 E-9 2.34 E-8 9.57 E-9
92    2.35 E-9 6.27 E-9 2.35 E-9
93    5.35 E-9 1.73 E-8 5.35 E-9
94    2.31 E-9 3.67 E-9 2.31 E-9
95    5.62 E-9 1.05 E-8 5.62 E-9
96    4.67 E-9 1.04 E-8 4.67 E-9
97    3.60 E-8 6.70 E-8 3.60 E-8
98    7.36 E-9 6.84 E-9 7.36 E-9
99    3.55 E-9 3.36 E-9 3.55 E-9
100    3.36 E-8 4.63 E-8 3.36 E-8
101    4.82 E-9 9.17 E-9 4.82 E-9
102    3.11 E-8 7.50 E-8 3.11 E-8
103    1.97 E-9 4.30 E-9 1.97 E-9
104    6.29 E-9 1.63 E-8 6.29 E-9
105    1.09 E-8 1.23 E-8 1.09 E-8
106    4.32 E-9 6.10 E-9 4.32 E-9
107    6.46 E-8 1.17 E-7 6.46 E-8
108    4.55 E-9 5.93 E-9 4.55 E-9
109    3.14 E-9 3.41 E-9 3.14 E-9
110    4.76 E-8 4.30 E-8 4.76 E-8
111            
112    1.01 E-8 1.69 E-8 2.17 E-7
113    3.74 E-9 9.20 E-9 1.57 E-7
114    6.74 E-9 8.03 E-9 3.70 E-8
115    5.84 E-9 7.02 E-9 2.31 E-8
116    5.10 E-9 4.25 E-9 1.32 E-8
117    9.89 E-9 2.80 E-8 3.57 E-6
118    6.69 E-8 1.25 E-7 6.66 E-6
119    2.71 E-9 7.07 E-9 4.86 E-8
120    1.36 E-9 4.35 E-9 3.58 E-8
121    2.94 E-8 6.29 E-8 9.46 E-7
122    7.69 E-9 7.04 E-9 2.99 E-8
123    4.50 E-9 4.49 E-9 1.40 E-8
124    3.00 E-8 4.66 E-8 2.18 E-6
125    1.48 E-8 1.42 E-8 4.61 E-8
126    5.94 E-9 7.84 E-9 2.00 E-8
127    8.50 E-8 8.81 E-8 ＞ 2.00 E-5
128    8.03 E-9 8.51 E-9 4.74 E-8
129    4.52 E-9 5.94 E-9 1.03 E-8
130    4.37 E-8 5.58 E-8 4.96 E-6; ＞5.71 E-6
表4展示WT-EGFR分析中之抑制結果。 表 4
實例編號 EGFR 野生型 2mM ATP IC 50[mol/l] ( 中值 )
1 ＞ 2.00 E-5
2 1.84 E-5 ＞ 2.00 E-5
3 ＞ 2.00 E-5
4 ＞ 2.00 E-5
5 ＞ 2.00 E-5
6 ＞ 2.00 E-5
7 ＞ 2.00 E-5
8 ＞ 2.00 E-5
9 ＞ 2.00 E-5
10 ＞ 2.00 E-5
11 ＞ 2.00 E-5
12 ＞ 2.00 E-5
13 ＞ 2.00 E-5
14 ＞ 2.00 E-5
15 ＞ 2.00 E-5
16 ＞ 2.00 E-5
17 ＞ 2.00 E-5
18 ＞ 2.00 E-5
19 ＞ 2.00 E-5
20 ＞ 2.00 E-5
21 ＞ 2.00 E-5
22 ＞ 2.00 E-5
23 ＞ 2.00 E-5
24 ＞ 2.00 E-5
25 ＞ 2.00 E-5
26 ＞ 2.00 E-5
27 ＞ 2.00 E-5
28 ＞ 2.00 E-5
29 ＞ 2.00 E-5
30 ＞ 2.00 E-5
31 ＞ 2.00 E-5
32 ＞ 2.00 E-5
33 ＞ 2.00 E-5
34 ＞ 2.00 E-5
35 ＞ 2.00 E-5
36 ＞ 2.00 E-5
37 7.97 E-7 9.32 E-7 5.31 E-7 5.66 E-7 ＞ 2.00 E-5 ＞ 2.00 E-5
38 ＞ 2.00 E-5
39 ＞ 2.00 E-5
40 ＞ 2.00 E-5
41 ＞ 2.00 E-5
42 ＞ 2.00 E-5
43 ＞ 2.00 E-5
44 ＞ 2.00 E-5
45 ＞ 2.00 E-5
46 ＞ 2.00 E-5
47 ＞ 2.00 E-5
48 ＞ 2.00 E-5
49 ＞ 2.00 E-5
50 ＞ 2.00 E-5
51 ＞ 2.00 E-5
52 ＞ 2.00 E-5
53 ＞ 2.00 E-5
54 ＞ 2.00 E-5
55 ＞ 2.00 E-5
56 ＞ 2.00 E-5
57 ＞ 2.00 E-5
58 ＞ 2.00 E-5
59 ＞ 2.00 E-5
60 ＞ 2.00 E-5
61 ＞ 2.00 E-5
62 ＞ 2.00 E-5
63 ＞ 2.00 E-5
64 ＞ 2.00 E-5
65 ＞ 2.00 E-5
66 ＞ 2.00 E-5
67 ＞ 2.00 E-5
68 ＞ 2.00 E-5
69 ＞ 2.00 E-5
70 ＞ 2.00 E-5
71 ＞ 2.00 E-5
72 ＞ 2.00 E-5
73 ＞ 2.00 E-5
74 ＞ 2.00 E-5
75 ＞ 2.00 E-5
76 ＞ 2.00 E-5
77 ＞ 2.00 E-5
78 ＞ 2.00 E-5
79 ＞ 2.00 E-5
80 ＞ 2.00 E-5
81 ＞ 2.00 E-5
82 ＞ 2.00 E-5
83 ＞ 2.00 E-5
84 ＞ 2.00 E-5
85 ＞ 2.00 E-5
86 ＞ 2.00 E-5
87   
88 ＞ 2.00 E-5
89 ＞ 2.00 E-5
90   
91   
92 ＞ 2.00 E-5
93 ＞ 2.00 E-5
94 ＞ 2.00 E-5
95 ＞ 2.00 E-5
96 ＞ 2.00 E-5
97 ＞ 2.00 E-5
98 ＞ 2.00 E-5
99 ＞ 2.00 E-5
100 ＞ 2.00 E-5
101 ＞ 2.00 E-5
102 ＞ 2.00 E-5
103 ＞ 2.00 E-5
104 ＞ 2.00 E-5
105 ＞ 2.00 E-5
106   
107   
108   
109 ＞ 2.00 E-5
110 ＞ 2.00 E-5
111   
112 ＞ 2.00 E-5
113 ＞ 2.00 E-5
114 ＞ 2.00 E-5
115 1.96 E-5
116 1.51 E-5
117 ＞ 2.00 E-5
118 ＞ 2.00 E-5
119 ＞ 2.00 E-5
120 ＞ 2.00 E-5
121 ＞ 2.00 E-5
122 ＞ 2.00 E-5
123 ＞ 2.00 E-5
124 ＞ 2.00 E-5
125 ＞ 2.00 E-5
126 ＞ 2.00 E-5
127 ＞ 2.00 E-5
128 1.12 E-5
129 9.50 E-6
130 6.67 E-6
現已發現，本發明化合物具有出人意料且有利的組合特性。詳言之，已出人意料地發現本發明化合物有效抑制CSNK1A1。此外，在某些實施例中，本發明化合物另外顯示出對野生型EGFR激酶之低抑制。
在某些實施例中，本發明化合物在CSNK1A1激酶分析中在1 µM ATP存在下顯示低於100 nM之IC 50且在野生型EGFR激酶分析中在2 mM ATP存在下效力比在600 nM下低。
在某些實施例中，本發明化合物在CSNK1A1激酶分析中在1 mM ATP存在下顯示低於125 nM之IC 50且在野生型EGFR激酶分析中在2 mM ATP存在下效力比在100 nM下低。
與本發明所主張之化合物相比，WO 2016/120196中所主張之化合物不展示上文所描述的有利組合特性。此在表5中可見。 表 5
WO 2016/120196 實例編號 CSNK1A1 分析1 IC 50[mol/l] ( 中值) CSNK1A1 分析2 IC 50[mol/l] ( 中值) EGFR 野生型-2mM ATP IC 50[mol/l] ( 中值)
14 2.03E-8    1.04E-7
23    1.14E-8 1.50E-7
24 ＜ 3.43E-9 9.32E-9 1.01E-8 5.57E-9 4.38E-9 4.51E-9 4.26E-8
25 6.25E-8    3.21E-7
40 2.41E-8    8.55E-8
圖1：實例2與酪蛋白激酶1D複合之結構。為了清楚起見，僅顯示配位體原子，且僅顯示結合於酪蛋白激酶1D分子A的ATP結合位點中的配位體。碳原子C3的特徵明確在於(S)組態。
Figure 110127548-A0101-11-0002-3

Claims (30)

  1. 一種式(I)化合物
    Figure 03_image811
    其中： A    表示選自以下之基團：
    Figure 03_image813
    ； X    表示N、C-H、C-F、C-Cl或C-Me； Y    表示N或C-R 4a； Z    表示N或C-R 4b， 其中X、Y及Z中無一者或其中一者表示N； R 1a表示氫或氟； R 1b表示氫或鹵素； R 1c表示氫或氟； R 1d表示氫或鹵素； R 1e表示氫或鹵素； R 1f表示氫或氟； R 1g表示氫或氟； R 2表示C 1-C 3鹵烷基或C 1-C 3羥基烷基； R 3表示苯基，其中該苯基獨立地視情況經鹵素、甲基、甲氧基、C 1-C 2鹵烷基或C 1-C 2鹵烷氧基取代一或多次； R 4a表示氫、鹵素、C 1-C 3烷基、C 2-C 3烯基、甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、C 3-C 4環烷基、4員至5員雜環烷基、環丙氧基、4員至5員雜環烷基-O-或R 5aR 6aN-，其中該4員至5員雜環烷基及4員至5員雜環烷基-O-視情況經甲基取代一次或兩次； R 4b表示氫、鹵素、C 1-C 4烷基、C 2-C 4烯基、C 1-C 3鹵烷基-CH 2-、C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、C 3-C 6環烷基、C 3-C 6環烷基-C 1-C 4烷基、C 3-C 6環烷基-O-、C 3-C 6環烷基-CH 2-O-、哌𠯤-1-基、𠰌啉-4-基、經由其碳原子連接之3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-、3員至6員雜環烷基-CH 2-O-、C 1-C 3烷氧基-C 1-C 3烷基-、C 1-C 3烷氧基-C 2-C 3烷氧基-、C 1-C 4羥基烷基、C 1-C 4羥基烷基-O-或3員至6員雜環烷基-C 1-C 3烷基-，其中該C 3-C 6環烷基、C 3-C 6環烷基-C 1-C 4烷基、C 3-C 6環烷基-O-、C 3-C 6環烷基-CH 2-O-、3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-、3員至6員雜環烷基-CH 2-O-、哌𠯤-1-基、𠰌啉-4-基、C 1-C 3烷氧基-C 1-C 3烷基-、C 1-C 3烷氧基-C 2-C 3烷氧基-、C 1-C 4羥基烷基、C 1-C 4羥基烷基-O-及3員至6員雜環烷基-C 1-C 3烷基視情況經鹵素、甲基、甲氧基或三氟甲氧基取代一次、兩次或三次； R 5a表示氫、甲基、環丙基、甲氧基乙基或3員至5員雜環烷基； R 6a表示氫或甲基，或 R 5a及R 6a與其所連接之氮原子一起表示4員至5員雜環，其中該雜環視情況經甲基取代一次或兩次； 或該化合物之N-氧化物、鹽、互變異構體或立體異構體，或該N-氧化物、互變異構體或立體異構體之鹽。
  2. 如請求項1之式(I)化合物，其中： A    表示選自以下之基團：
    Figure 03_image815
    ； X    表示N、C-H、C-F、C-Cl或C-Me； Y    表示N或C-R 4a； Z    表示N或C-R 4b， 其中X、Y及Z中無一者或其中一者表示N； R 1b表示氫或鹵素； R 1c表示氫或氟； R 1e表示氫或氟； R 1f表示氫或氟； R 1g表示氫或氟； R 2表示C 1-C 3鹵烷基或C 1-C 3羥基烷基； R 3表示苯基，其中該苯基獨立地視情況經鹵素、甲基、甲氧基、C 1-C 2鹵烷基或C 1-C 2鹵烷氧基取代一或多次； R 4a表示氫、鹵素、C 1-C 3烷基、C 2烯基、甲氧基、二氟甲氧基、C 3環烷基、4員雜環烷基、環丙氧基、4員雜環烷基-O-或R 5aR 6aN-； R 4b表示氫、鹵素、C 1-C 4烷基、C 2-C 4烯基、C 1-C 3鹵烷基-CH 2-、C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、C 3-C 5環烷基、C 3-C 5環烷基-C 1-C 2烷基、C 3-C 5環烷基-O-、C 3-C 5環烷基-CH 2-O-、哌𠯤-1-基、𠰌啉-4-基、經由其碳原子連接之3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-、3員至6員雜環烷基-CH 2-O-、C 1-C 3烷氧基-C 1-C 3烷基-、C 1-C 3烷氧基-C 2-C 3烷氧基-或C 1-C 4羥基烷基、C 1-C 4羥基烷基-O-，其中該C 3-C 5環烷基、C 3-C 5環烷基-C 1-C 2烷基、C 3-C 5環烷基-O-、C 3-C 5環烷基-CH 2-O-、3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-、3員至6員雜環烷基-CH 2-O-、哌𠯤-1-基、𠰌啉-4-基、C 1-C 3烷氧基-C 1-C 3烷基-、C 1-C 3烷氧基-C 2-C 3烷氧基-、C 1-C 4羥基烷基及C 1-C 4羥基烷基-O-基團視情況經鹵素、甲基或甲氧基取代一次、兩次或三次； R 5a表示氫或甲基； R 6a表示氫或甲基，或 R 5a及R 6a與其所連接之氮原子一起表示4員雜環，其中該雜環視情況經甲基取代； 或該化合物之N-氧化物、鹽、互變異構體或立體異構體，或該N-氧化物、互變異構體或立體異構體之鹽。
  3. 如請求項1或2之式(I)化合物，其中： A    表示選自以下之基團：
    Figure 03_image817
    ; X    表示N、C-H、C-F或C-Cl； Y    表示N或C-R 4a； Z    表示N或C-R 4b， 其中X、Y及Z中無一者或其中一者表示N； R 1b表示氫或氟； R 1c表示氫； R 1e表示氫； R 1f表示氫或氟； R 1g表示氫或氟； R 2表示C 1-C 3鹵烷基或C 1-C 3羥基烷基； R 3表示苯基，其中該苯基獨立地視情況經鹵素、甲基或C 1鹵烷基取代一或多次； R 4a表示氫、鹵素、C 1烷基、C 2烯基、C 3環烷基、4員雜環烷基或R 5aR 6aN-； R 4b表示氫、鹵素、C 1-C 4烷基、C 2-C 4烯基、C 1-C 3鹵烷基-CH 2-、C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、C 3-C 4環烷基、C 3-C 4環烷基-C 1-C 2烷基、C 3-C 4環烷基-O-、C 3-C 4環烷基-CH 2-O-、哌𠯤-1-基、𠰌啉-4-基、經由其碳原子連接之3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-、3員至6員雜環烷基-CH 2-O-、C 1-C 3烷氧基-C 2-C 3烷氧基-、C 1-C 4羥基烷基或C 1-C 4羥基烷基-O-，其中該C 3-C 4環烷基、C 3-C 4環烷基-C 1-C 2烷基、C 3-C 4環烷基-O-、C 3-C 4環烷基-CH 2-O-、3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-、3員至6員雜環烷基-CH 2-O-、哌𠯤-1-基、𠰌啉-4-基、C 1-C 3烷氧基-C 2-C 3烷氧基-、C 1-C 4羥基烷基及C 1-C 4羥基烷基-O-基團視情況經鹵素或甲基取代一次或兩次； R 5a表示氫或甲基； R 6a表示氫或甲基，或 R 5a及R 6a與其所連接之氮原子一起表示4員雜環； 或該化合物之N-氧化物、鹽、互變異構體或立體異構體，或該N-氧化物、互變異構體或立體異構體之鹽。
  4. 如請求項1至3中任一項之式(I)化合物，其中： A    表示：
    Figure 03_image819
    ； X    表示C-H、C-F； Y    表示N或C-R 4a； Z    表示N或C-R 4b； 其中Y及Z中無一者或其中一者表示N； R 1b表示氫或氟； R 1e表示氫； R 1f表示氫； R 1g表示氫或氟； R 2表示C 1-C 2鹵烷基； R 3表示苯基，其中該苯基獨立地視情況經鹵素或甲基取代一或多次； R 4a表示氫、鹵素或甲基； R 4b表示氫、鹵素、C 1-C 4烷基、C 1-C 3鹵烷基-CH 2-、C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、C 3環烷基、C 3環烷基-C 1-C 2烷基、C 3環烷基-O-、C 3環烷基-CH 2-O-、哌𠯤-1-基、𠰌啉-4-基、經由其碳原子連接之3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-或3員至6員雜環烷基-CH 2-O-、C 1-C 3烷氧基-C 2-C 3烷氧基-、C 1-C 4羥基烷基或C 1-C 4羥基烷基-O-， 或該化合物之N-氧化物、鹽、互變異構體或立體異構體，或該N-氧化物、互變異構體或立體異構體之鹽。
  5. 如請求項1之式(I)化合物，其為式(XXIII)化合物
    Figure 03_image821
    其中： X    表示C-H、C-F； Y    表示N或C-R 4a； Z    表示N或C-R 4b； 其中Y及Z中無一者或其中一者表示N； R 1b表示氫或氟； R 1e表示氫； R 1f表示氫； R 1g表示氫或氟； R 4a表示氫、鹵素或甲基； R 4b表示氫、鹵素、C 1-C 4烷基、C 1-C 3鹵烷基-CH 2-、C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3鹵烷氧基、C 3環烷基、C 3環烷基-C 1-C 2烷基、C 3環烷基-O-、C 3環烷基-CH 2-O-、哌𠯤-1-基、𠰌啉-4-基、經由其碳原子連接之3員至6員雜環烷基、吡咯啶-2-酮、哌啶-2-酮、𠰌啉-3-酮、4-甲基哌𠯤-2-酮、3員至6員雜環烷基-O-或3員至6員雜環烷基-CH 2-O-、C 1-C 3烷氧基-C 2-C 3烷氧基-、C 1-C 4羥基烷基或C 1-C 4羥基烷基-O-， 或該化合物之N-氧化物、鹽、互變異構體或立體異構體，或該N-氧化物、互變異構體或立體異構體之鹽。
  6. 如請求項1至4中任一項之式(I)化合物，其選自由以下組成之群： 4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺 ； (2S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺； 4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[5-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[5-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[5-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺； 4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[6-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[6-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[6-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺； 4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺； 4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； 4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[6-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[6-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[6-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺； 4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-[4-(6-氟-3-苯基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]丁醯胺； (2R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-[4-(6-氟-3-苯基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]丁醯胺； (2S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-[4-(6-氟-3-苯基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]丁醯胺； 4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-[4-(3-苯基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]丁醯胺； (2R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-[4-(3-苯基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]丁醯胺； (2S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-[4-(3-苯基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基]丁醯胺；及 4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[3-(6-氟吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[3-(6-氟吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[3-(6-氟吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺； N-{4-[7-(2,2-二氟乙氧基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2R)-N-{4-[7-(2,2-二氟乙氧基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2S)-N-{4-[7-(2,2-二氟乙氧基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； 4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； 4,4-二氟-N-{4-[5-氟-6-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2R)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-6-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2S)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-6-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺； 4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2R)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2S)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺； 4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-甲氧基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2R)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-甲氧基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2S)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-甲氧基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺； N-{4-[7-(環丙氧基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2R)-N-{4-[7-(環丙氧基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2S)-N-{4-[7-(環丙氧基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； N-{4-[7-(環丙基甲基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2- b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2R)-N-{4-[7-(環丙基甲基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2S)-N-{4-[7-(環丙基甲基)-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； N-{4-[7-氯-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； N-{4-[7-{[(2R)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2R)-N-{4-[7-{[(2R)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2S)-N-{4-[7-{[(2R)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； 4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2R)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2S)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺； 4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-(4-甲基哌𠯤-1-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺； N-(4-{7-[(2S)-1,4-二㗁烷-2-基甲氧基]-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基}吡啶-2-基)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2R)-N-{4-[7-{[(2 S)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2S)-N-{4-[7-{[(2 S)-1,4-二㗁烷-2-基]甲氧基}-5-氟-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； 4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[3-氟-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； 4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-{[氧雜環戊-2-基]甲氧基}-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺； 4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[2-氟-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[2-氟-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[2-氟-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； 4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-c]嗒𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-c]嗒𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-c]嗒𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； N-{4-[3-氯-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-c]嗒𠯤-6-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； 4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-(𠰌啉-4-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺； N-{4-[5-氯-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； N-(4-(6-氟-3-(吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基)-2-(4-氟苯基)-3-羥基丙醯胺； 4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[4-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[4-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[4-{[(3S)-氧雜環戊-3-基]氧基}-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； N-{4-[7-(2,2-二氟乙氧基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2R)-N-{4-[7-(2,2-二氟乙氧基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2S)-N-{4-[7-(2,2-二氟乙氧基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； N-{4-[4-(2,2-二氟乙氧基)-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2R)-N-{4-[4-(2,2-二氟乙氧基)-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2S)-N-{4-[4-(2,2-二氟乙氧基)-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； 4,4-二氟-2-(4-氟苯基)- N-{4-[6-甲氧基-3-(吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)- N-{4-[6-甲氧基-3-(吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)- N-{4-[6-甲氧基-3-(吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺； 4,4-二氟-2-(4-氟苯基)- N-{4-[7-甲基-3-(吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺； 4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[3-甲基-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[3-甲基-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[3-甲基-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； N-{4-[6-氯-3-(吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2R)- N-{4-[6-氯-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2S)-N-{4-[6-氯-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； 4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-(2-甲氧基乙氧基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2R)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-(2-甲氧基乙氧基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2S)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-(2-甲氧基乙氧基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺； 4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(哌𠯤-1-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(哌𠯤-1-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(哌𠯤-1-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}丁醯胺； 4,4-二氟-N-{4-[5-氟-3-(4-氟吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2R)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-3-(4-氟吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2S)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-3-(4-氟吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺； 4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-(2-羥基丙-2-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2R)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-(2-羥基丙-2-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2S)-4,4-二氟-N-{4-[5-氟-7-(2-羥基丙-2-基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺； 4,4-二氟-2-(4-氟苯基)- N-{4-[3-甲氧基-7-(吡啶-2-基)-5 H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[3-甲氧基-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)- N-{4-[3-甲氧基-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； 2-(4-氟苯基)-4-羥基 -N-(4-(3-(吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-2-基)-丁醯胺； N-{4-[3-(二氟甲氧基)-7-(吡啶-2-基)-5 H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2S)- N-{4-[3-(二氟甲氧基)-7-(吡啶-2-基)-5 H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2R)- N-{4-[3-(二氟甲氧基)-7-(吡啶-2-基)-5 H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； 4,4-二氟- N-{4-[5-氟-3-(5-氟吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2R)-4,4-二氟- N-{4-[5-氟-3-(5-氟吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2S)-4,4-二氟- N-{4-[5-氟-3-(5-氟吡啶-2-基)-1 H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-2-基}-2-(4-氟苯基)丁醯胺； 4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-[4-(3-嘧啶-2-基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)-2-吡啶基]丁醯胺； 4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[4-甲氧基-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； 4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-(4-{5-氟-3-(吡啶-2-基)-7-[四氫呋喃-2-基]-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基}吡啶-2-基)丁醯胺； (2R)-4,4-二氟-N-(4-{5-氟-7-[(2R)-氧雜環戊-2-基]-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基}吡啶-2-基)-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2R)-4,4-二氟-N-(4-{5-氟-7-[(2S)-氧雜環戊-2-基]-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基}吡啶-2-基)-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2S)-4,4-二氟-N-(4-{5-氟-7-[(2R)-氧雜環戊-2-基]-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基}吡啶-2-基)-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2S)-4,4-二氟-N-(4-{5-氟-7-[(2S)-氧雜環戊-2-基]-3-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基}吡啶-2-基)-2-(4-氟苯基)丁醯胺； 4,4,4-三氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2R)-4,4,4-三氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2S)-4,4,4-三氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡𠯤-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； 4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； 4,4,4-三氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2R)-4,4,4-三氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； (2S)-4,4,4-三氟-2-(4-氟苯基)-N-{4-[7-(吡啶-2-基)-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}丁醯胺； N-{4-[4-(環丙基甲氧基)-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2R)-N-{4-[4-(環丙基甲氧基)-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； (2S)-N-{4-[4-(環丙基甲氧基)-7-(吡啶-2-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-基]吡啶-2-基}-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)丁醯胺； 或該化合物之N-氧化物、鹽、互變異構體或立體異構體，或該N-氧化物、互變異構體或立體異構體之鹽。
  7. 一種製備如請求項1至4及6中任一項之通式(I)化合物之方法，該方法包含使通式(VII-A)之中間化合物：
    Figure 03_image823
    ， 其中A、X、Y及Z係如根據如請求項1至4中任一項之通式(I)化合物所定義， 與選自以下之醯化試劑反應： a)下式之羧酸
    Figure 03_image825
    ， b)下式之醯基鹵化物
    Figure 03_image827
    ， 其中Hal表示F、Cl或Br，或 c)下式之酸酐
    Figure 03_image829
    其中R 2及R 3係如根據如請求項1至4中任一項之通式(I)化合物所定義， 以得到通式(I)化合物：
    Figure 03_image831
    ， 其中R 2、R 3、A、X、Y及Z係如請求項1至4中任一項之通式(I)化合物所定義。
  8. 一種如請求項1至4及6中任一項之通式(I)化合物之用途，其用於治療或預防疾病。
  9. 如請求項8之通式(I)化合物之用途，其中該疾病為過度增生性疾病及/或對誘導細胞死亡具反應性之病症。
  10. 如請求項9之通式(I)化合物之用途，其中該過度增生性疾病及/或對誘導細胞死亡具反應性之病症為血液腫瘤、實體腫瘤及/或其轉移。
  11. 如請求項10之式(I)化合物之用途，其中該血液腫瘤為淋巴瘤及/或其轉移。
  12. 如請求項11之式(I)化合物之用途，其中該淋巴瘤係彌漫性大B細胞淋巴瘤及/或其轉移。
  13. 如請求項10之式(I)化合物之用途，其中該實體腫瘤係子宮頸腫瘤、肺腫瘤、結腸腫瘤及/或其轉移。
  14. 如請求項13之式(I)化合物之用途，其中該肺腫瘤為肺癌及/或其轉移。
  15. 如請求項13之式(I)化合物之用途，其中該結腸腫瘤為結腸直腸癌及/或其轉移。
  16. 一種醫藥組合物，其包含至少一種如請求項1至4及6中任一項之通式(I)化合物，以及至少一種醫藥學上可接受之賦形劑。
  17. 如請求項16之組合物，其用於治療血液學腫瘤、實體腫瘤及/或其轉移。
  18. 一種組合，其包含：一或多種第一活性成分，其選自如請求項1至4及6中任一項之通式(I)化合物；及一或多種第二活性成分，其選自化學治療抗癌劑及目標特異性抗癌劑。
  19. 一種通式(VII-A)之中間化合物或其鹽：
    Figure 03_image833
    ， 其中A、X、Y及Z係如請求項1至4中任一項之通式(I)化合物所定義。
  20. 一種通式(VII-A)化合物或其鹽之用途：
    Figure 03_image835
    ， 其中A、X、Y及Z係如請求項1至4中任一項之通式(I)化合物所定義，其係用於製備如請求項1至4及6中任一項之式(I)化合物。
  21. 一種通式(IX-Q)之中間化合物或其鹽：
    Figure 03_image837
    其中R 2、R 3、X、Y及Z係如請求項1至4中任一項之通式(I)化合物所定義，且Q表示氯、溴或碘，且PG表示保護基。
  22. 一種通式(IX-Q)化合物或其鹽之用途：
    Figure 03_image839
    ， 其中R 2、R 3、X、Y及Z係如請求項1至4中任一項之通式(I)化合物所定義，且Q表示氯、溴或碘，且PG表示保護基，其係用於製備如請求項1至4及6中任一項之式(I)化合物。
  23. 一種通式(IX-A)之中間化合物或其鹽：
    Figure 03_image841
    其中R 2、R 3、A、X、Y及Z係如請求項1至4中任一項之通式(I)化合物所定義且PG表示保護基。
  24. 一種通式(IX-A)化合物或其鹽之用途：
    Figure 03_image843
    ， 其中R 2、R 3、A、X、Y及Z係如請求項1至4中任一項之通式(I)化合物所定義且PG表示保護基，其係用於製備如請求項1至4及6中任一項之式(I)化合物。
  25. 一種製備如請求項1至4及6中任一項之通式(I)化合物之方法，該方法包含使通式(XIV-Q)之中間化合物：
    Figure 03_image845
    其中R 2、R 3、X、Y及Z係如請求項1至4中任一項之通式(I)化合物所定義，且Q表示氯、溴或碘， 與錫烷(諸如A-Sn(Bu) 3)、硼酸A-B(OH) 2或其硼酸酯在鈀催化劑存在下反應，其中A係關於通式(I)化合物所定義， 以製備通式(I)化合物。
  26. 一種通式(XIV-Q)之中間化合物或其鹽：
    Figure 03_image847
    其中R 2、R 3、X、Y及Z係如請求項1至4中任一項之通式(I)化合物所定義，且Q表示氯、溴或碘。
  27. 一種通式(XIV-Q)化合物或其鹽之用途：
    Figure 03_image849
    ， 其中R 2、R 3、X、Y及Z係如請求項1至4中任一項之通式(I)化合物所定義，且Q表示氯、溴或碘，其係用於製備如請求項1至4及6中任一項之式(I)化合物。
  28. 一種製備如請求項1至4及6中任一項之通式(I)化合物之方法，該方法包含使通式(XVII)之中間化合物：
    Figure 03_image851
    其中R 2、R 3、X、Y及Z係如請求項1至4中任一項之通式(I)化合物所定義，且T表示CF 3-C(O)-、甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或Ph-SO 2-，其中Ph可經鹵素、甲基或硝基取代一次、兩次或三次， 在Cacchi反應中，與適合的溴化物A-Br或碘化物A-I在鈀催化劑存在下反應，其中A係如通式(I)化合物所定義， 以製備通式(I)化合物或視情況在移除基團T之後製備通式(I)化合物。
  29. 一種通式(XVII)之中間化合物或其鹽：
    Figure 03_image853
    其中R 2、R 3、X、Y及Z係如請求項1至4中任一項之通式(I)化合物所定義，且T表示CF 3-C(O)-、甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或Ph-SO 2-，其中Ph可經鹵素或甲基-基團或硝基-基團取代一次、兩次或三次。
  30. 一種通式(XVII)化合物或其鹽之用途：
    Figure 03_image855
    ， 其中R 2、R 3、X、Y及Z係如請求項1至4中任一項之通式(I)化合物所定義，且T表示CF 3-C(O)-、甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或Ph-SO 2-，其中Ph可經鹵素、甲基或硝基取代一次、兩次或三次，其係用於製備如請求項1至4及6中任一項之式(I)化合物。
TW110127548A 2020-07-29 2021-07-27 經取代雜環化合物及其治療用途 TW202220987A (zh)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202063058237P 2020-07-29 2020-07-29
US63/058,237 2020-07-29
US202163181064P 2021-04-28 2021-04-28
US63/181,064 2021-04-28

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TW202220987A true TW202220987A (zh) 2022-06-01

Family

ID=77726431

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW110127548A TW202220987A (zh) 2020-07-29 2021-07-27 經取代雜環化合物及其治療用途

Country Status (4)

Country Link
US (1) US20230391769A1 (zh)
EP (2) EP4188930B1 (zh)
TW (1) TW202220987A (zh)
WO (1) WO2022023340A1 (zh)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA3128946A1 (en) 2019-02-07 2020-08-13 Bayer Aktiengesellschaft 3-amino-2-[2-(acylamino)pyridin-4-yl]-1,5,6,7-tetrahydro-4h-pyrrolo[3,2-c]pyridin-4-one as csnk1 inhibitors
EP4469457A4 (en) * 2022-01-27 2026-01-21 Broad Inst Inc CSNK1 SUBSTITUTE HETEROCYCLIC INHIBITORS
EP4565584A1 (en) * 2022-08-02 2025-06-11 Bayer Aktiengesellschaft 1h-pyrrolo[3,2-b]pyridine derivatives as irreversible inhibitors of mutant egfr for the treatment of cancer

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3966781A (en) 1970-12-17 1976-06-29 Merck Sharp & Dohme (I.A.) Corporation Deuteration of functional group-containing hydrocarbons
US5011472A (en) 1988-09-06 1991-04-30 Brown University Research Foundation Implantable delivery system for biological factors
GB0708141D0 (en) 2007-04-26 2007-06-06 Syngenta Participations Ag Improvements in or relating to organic compounds
WO2010046215A2 (en) * 2008-10-21 2010-04-29 Syngenta Participations Ag Diaza-indole derivatives and their use as fungicides
US8791162B2 (en) 2011-02-14 2014-07-29 Merck Sharp & Dohme Corp. Cathepsin cysteine protease inhibitors
US10428063B2 (en) 2015-01-28 2019-10-01 Bayer Pharma Aktiengesellschaft 4H-pyrrolo[3,2-C]pyridin-4-one derivatives

Also Published As

Publication number Publication date
US20230391769A1 (en) 2023-12-07
EP4188930B1 (en) 2024-10-23
EP4188930A1 (en) 2023-06-07
WO2022023340A1 (en) 2022-02-03
EP4509122A2 (en) 2025-02-19
EP4509122A3 (en) 2025-04-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2015299173B2 (en) 2-(morpholin-4-yl)-l,7-naphthyridines
JP6704398B2 (ja) ４Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−オン誘導体
JP6545199B2 (ja) ３−アミノ−１，５，６，７−テトラヒドロ−４ｈ−インドール−４−オン類
CN108699057B (zh) 5-取代的2-(吗啉-4-基)-1,7-萘啶
TWI849114B (zh) 4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮化合物
EP3168219B1 (en) Pyridone derivative having tetrahydropyranyl methyl group
CN112204009A (zh) 整合应激通路的调节剂
TWI785474B (zh) 用作選擇性Aurora A抑制劑的新型雜環化合物
CN104428299A (zh) 5-氮杂吲唑化合物及其使用方法
EP3921317A1 (en) 3-amino-2-[2-(acylamino)pyridin-4-yl]-1,5,6,7-tetrahydro-4h-pyrrolo[3,2-c]pyridin-4-one as csnk1 inhibitors
ES2927529T3 (es) Compuesto heterocíclico condensado
US11795172B2 (en) Substituted imidazo[1,2-b]pyridazines and [1,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazines as CaMKII inhibitors
TW202220987A (zh) 經取代雜環化合物及其治療用途
JP2019504826A (ja) ヘテロ−１，５，６，７−テトラヒドロ−４ｈ−インドール−４−オン類
WO2021198020A1 (en) 3-(anilino)-2-[3-(3-alkoxy-pyridin-4-yl]-1,5,6,7-tetrahydro-4h-pyrrolo[3,2-c]pyridin-4-one derivatives as egfr inhibitors for the treatment of cancer
EP3628669A1 (en) Novel compounds as nadph oxidase inhibitors
CA3201333A1 (en) N-[2-({4-[3-(anilino)-4-oxo-4,5,6,7-tetrahydro-1h-pyrrolo[3,2-c]pyridin-2-yl]pyridin-3-yl)oxy)ethyl]prop-2-enamide derivatives and similar compounds as egfr inhibitors for the treatment of cancer
EP4188928B1 (en) Substituted 1 h-pyrrolo[3,2-b]pyridin compounds and methods of use thereof
EP3514149B1 (en) Heterocyclic amide compound
EA046642B1 (ru) 4Н-ПИРРОЛО[3,2-с]ПИРИДИН-4-ОНОВЫЕ СОЕДИНЕНИЯ
HK40044910A (zh) 整合应激通路的调节剂