TW202216119A

TW202216119A - 眼用活性醫藥成分輸送的固態環糊精複合物製備

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Publication number: TW202216119A
Application number: TW110124071A
Authority: TW
Inventors: 索爾斯坦羅夫特森; 伊納史帝芬生
Original assignee: 瑞士商歐庫利斯公司
Priority date: 2020-06-30
Filing date: 2021-06-30
Publication date: 2022-05-01
Also published as: US20230263907A1; WO2022003037A1; EP4171507A1

Abstract

本揭露係關於包含活性醫藥成分，特別地激酶抑制劑，與環糊精之固態複合物的眼用組合物，及該等眼用組合物在治療眼後眼部病狀中之用途。更確切地，本揭露係關於一種水性組合物，該水性組合物包含酪胺酸激酶抑制劑或其鹽與環糊精之藥物/環糊精複合物，其中該等複合物在該水性組合物中之複合效用(CE)大於0.01，較佳大於0.1，及/或該酪胺酸激酶抑制劑或其鹽之表皮生長因子受體(EGFR)之最大半抑制濃度(IC ₅₀)與血管內皮生長因子受體(VEGFR2)之最大半抑制濃度(IC ₅₀)之比大於2000，較佳大於5000。

Description

眼用活性醫藥成分輸送的固態環糊精複合物製備

本揭露係關於含有活性醫藥成分與環糊精之固態複合物的眼用組合物，及該等眼用組合物在治療眼後眼部病狀中之用途。

大部分眼部病狀能夠經過治療及/或管理來減少包括完全失明之負效應。為了戰勝此重要問題，世界衛生組織(World Health Organization，WHO)藉由了以截至2019年使世界的可避免視覺障礙減少25%為目標之行動計劃。WHO在努力地計劃減少諸如糖尿病性視網膜病變、青光眼及色素性視網膜炎之眼部病狀之影響，該等眼部病狀說明瞭世界範圍內的不可逆失明之大部分情況。然而，當前對眼部病狀之治療由於將有效劑量藥物輸送至眼中之靶組織的難度而受限制。

展望滴眼劑之局部投與係向眼進行藥物投與之較佳方式，此係因為與眼用藥物投與之其他途徑(諸如玻璃體內注射及植入物) (Le Bourlais, C., Acar, L., Zia, H., Sado, P.A., Needham, T., Leverge, R., 1998. Ophthalmic drug delivery systems—Recent advances. Progress in Retinal and Eye Research 17, 33-58)相比，滴眼劑便利且安全。藥物主要藉由自眼表面至眼及周圍組織中之被動擴散來傳輸，在眼及周圍組織中，根據菲克定律，藥物係藉由溶解之藥物分子之梯度而被迫進入眼中。至眼中之被動藥物擴散受三個主要障礙阻礙( Gan, L., Wang, J., Jiang, M., Bartlett, H., Ouyang, D., Eperjesi, F., Liu, J., Gan, Y., 2013. Recent advances in topical ophthalmic drug delivery with lipid-based nanocarriers. Drug Discov. Today 18, 290-297；Loftsson, T., Sigurdsson, H.H., Konradsdottir, F., Gisladottir, S., Jansook, P., Stefansson, E., 2008. Topical drug delivery to the posterior segment of the eye: anatomical and physiological considerations. Pharmazie 63, 171-179；Urtti, A., 2006. Challenges and obstacles of ocular pharmacokinetics and drug delivery. Adv. Drug Del. Rev. 58, 1131-1135)。

第一主要障礙為水性藥物溶解度。在先前已知之眼用組合物中，僅溶解之藥物分子可滲透穿過生物膜進入眼中。因此，眼用藥物在水性淚液中必須擁有足夠的溶解度。

第二主要障礙為淚液之快速回轉率及溶解之藥物分子之濃度的相應降低。在將滴眼劑(25至50 μl)施用至角膜前區域上之後，藥物溶液之較大部分自眼表面快速地排出且淚液體積返回至約7 μl之正常常駐體積。此後，淚液體積保持不變，但藥物濃度由於淚液回轉及角膜及非角膜藥物吸收引起之稀釋而降低。滴眼劑自表面區域排出之一級速率常數之值對於人類通常為在初始快速排出之後約1.5分鐘 ^-1。正常淚液回轉對於人類為約1.2 μl/分鐘，且局部應用之藥物之角膜前半衰期在1分鐘與3分鐘之間(Sugrue, M.F., 1989. The pharmacology of antiglaucoma drugs. Pharmacology & Therapeutics 43, 91-138)。

第三主要障礙為經由膜障(即角膜及/或結膜/鞏膜)之緩慢藥物滲透。藥物分子在其可被動地透過膜障之前必須自水性外部分割至膜中。結果為一般地，僅小百分比之所應用藥物劑量被輸送至眼組織中。大部分(50%至100%)之投與劑量將自鼻腔吸收至全身藥物循環中，此可造成各種副作用。

第四障礙為經投與以待輸送至眼之眼後段且治療眼後段之病狀的藥物分子可引起眼之眼前段中之嚴重副作用。

本揭露試圖藉由以下操作來幫助WHO的用於減少可避免視覺障礙之計劃：提供克服至眼中之被動藥物擴散之障礙的眼用組合，及在減少眼之眼前段中之副作用的同時提高藥物在眼之眼後段中之生物可用度。本揭露之一個目標為提供一種用於製備眼用組合物之方法，該方法藉由提高溶解性差的藥物之溶解度來克服被動藥物擴散之主要障礙。本揭露之另一目標為提供一種用於製備眼用組合物之方法，該方法提高藥物分子自水性外部至膜中之遷移速率以實現朝著眼之眼後段的對膜障之明顯更多被動滲透。提供治療眼後眼部病狀，同時減少副作用(特別在眼之眼前段中)之方法亦係本揭露之一目標。

已知環糊精增強疏水化合物之溶解度及生物可用度。在水溶液中，環糊精形成具有許多活性醫藥成分的包容複合物(inclusion complex)、非包容複合物及此等複合物之聚集體。申請人已意外地發現，包含活性醫藥成分之水性組合物中存在鹽及穩定劑實現眼用組合物中的活性醫藥成分的明顯較高濃度。

申請人亦意外地發現，本揭露之某些眼用組合物引起活性醫藥成分至眼之眼後段(即視網膜及相關組織)的明顯更高輸送。本揭露之解決方法達成活性藥物分子自水性外部至眼之膜中之遷移速率的顯著增加，以實現對膜障之明顯更多被動滲透。

眼用組合物中之活性醫藥成分之較高濃度可帶來更強副作用之風險，特別在眼之眼前段中。申請人意外地發現，展示血管內皮生長因子受體(vascular endothelial growth factor receptor，VEGFR2)與表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)之某一最大半抑制濃度(IC50)比的酪胺酸激酶抑制劑展現較少副作用，同時維持效用。

在第一態樣中，提供一種水性組合物，該水性組合物包含酪胺酸激酶抑制劑或其鹽與環糊精之藥物/環糊精複合物，藉此該等複合物在該水性組合物中之複合效用(complexation efficacy，CE)大於0.01、較佳大於0.1，且該酪胺酸激酶抑制劑或其鹽之血管內皮生長因子受體(vascular endothelial growth factor receptor，VEGFR2) 之最大半抑制濃度(IC50)為表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)之最大半抑制濃度2000倍，較佳為5000倍。

在第二態樣中，提供該水性組合物以用於視網膜疾病之局部治療。

在第三態樣中，提供一種方法以用於治療需要治療之受試者的眼之眼後段及/或眼前段之病狀之方法，該方法包含以將治療有效量之該酪胺酸激酶抑制劑輸送至該眼之該段或該等段的量將水性組合物局部應用於該受試者之眼表面，該水性組合物包含酪胺酸激酶抑制劑作為有效成分。

例示性實施例之另外態樣、特徵及優點將自隨後之詳細描述顯而易見。

本文中引用之專利、公開之申請案及科學文獻證實熟習此項技術者之知識且在相同程度上在此以全文引用之方式併入，如同每一者被確切且個別地指示為以引用方式併入。

如本文所使用，無論在技術方案之連接詞或主體中，術語「包含」應解釋為具有開放式意義。即，該等術語應與片語「至少具有」或「至少包括」同義地解釋。當在方法之情境中使用時，術語「包含」意味著方法至少包括列舉之步驟，但可包括額外步驟。當在組合物之情境中使用時，術語「包含」意味著組合物至少包括列舉之特徵或組分，但亦可包括額外特徵或組分。

術語「基本上由……組成」具有部分封閉之意義，即，該等術語不准許包括會實質上改變方法或組合物之基本特性之步驟或特徵或組分；例如，會明顯干擾本文中描述之化合物或組合物之所要性質的步驟或特徵或組分，即，方法或組合物限於規定之步驟或材料且不實質上影響方法或組合物之基礎及新穎特性的彼等步驟或材料。

術語「由……組成」及「組成」係封閉術語且僅允許包括列舉之步驟或特徵或組分。

如本文所使用，單數形式「一」及「該」具體亦涵蓋其指代之術語之複數形式，除非內容另有清楚指示。

術語「約」在本文中用於意謂近似地、在……附近、大致或左右。當術語「約」結合數值範圍使用時，該術語藉由延伸高於及低於所陳述之數值的邊界來修改彼範圍。一般地，術語「約」或「近似地」在本文中用於將高於及低於陳述值之數值修改20%之差量。

術語「溶解」或「實質上溶解」在本文中用於意謂固體在溶液中之溶解。當所得溶液澄清或實質上澄清時，可認為固體「溶解」或「實質上溶解」於溶液中。

術語「澄清」在本文中用於意謂半透明或微透明溶液。因此，「澄清」溶液具有根據ISO標準量測之≤100比濁計濁度單位(Nephelometric Turbidity Unit，NTU)、較佳≤50 NTU的濁度。

術語「實質上澄清」在本文中用於意謂半透明或微半透明溶液。因此，「實質上澄清」之溶液具有根據ISO標準量測之≤100比濁計濁度單位(Nephelometric Turbidity Unit，NTU)的濁度。

如本文所使用，術語「渾濁」或「實質上渾濁」或係指溶液具有根據ISO標準量測之大於100 NTU的濁度。

如本文所使用，術語「乳白的」或「實質上乳白的」係指溶液具有根據ISO標準量測之大於100 NTU、較佳大於200 NTU的濁度。

如本文所使用，變數之數值範圍之列舉意欲傳達該變數可等於該範圍內之任何值。因此，對於固有地離散之變數，變數可等於數值範圍之任何整數值，包括該範圍之端點。類似地，對固有地連續之變數，變數可等於數值範圍之任何實值，包括該範圍之端點。作為一實例，描述為具有在0與2之間的值之變數對於固有地離散之變數可為0、1或2，且對於固有地連續之變數可為0.0、0.1、0.01、0.001或任何其他實值。

在說明書及申請專利範圍中，單數形式包括複數個參照物，除非上下文另有清楚指示。如本文所使用，除非另外明確地指示，詞「或」係以「及/或」之「包括性」意義使用，而非以「任一/或」之「排他性」意義使用。

本文中所使用之技術術語及科學術語具有熟習本描述相關之技術者通常所理解之意義，除非另有定義。本文中參考熟習此項技術者已知之各種方法及材料。陳述藥理學及製藥學之一般原則之標準參考著作包括Goodman及Gilman之 The Pharmacological Basis of Therapeutics, 第10版, McGraw Hill Companies Inc., New York (2001)以及 Remington, The Science and Practice of Pharmacy, 第22版, Philadelphia (2013)。

如本文所使用，術語「基於組合物之體積的化合物X重量%」(亦縮寫為「% w/v」)對應於在100 mL組合物中引入的化合物X之量(以克計)。

如本文所使用，術語「微粒」係指直徑D ₅₀為1 μm或大於約500 μm之顆粒。術語「奈米顆粒」係指直徑D ₅₀小於1 μm之顆粒。

在例示性實施例中，可為D ₅₀之直徑為1 μm或大於約500 μm；且術語「奈米顆粒」係指D ₅₀小於約1 μm之顆粒。

如本文所使用，「眼部病狀」為影響或涉及眼、眼之多個部分或區域中之一者或諸如淚腺之周圍組織的疾病、病痛或其他病狀。一般地說，眼包括眼球及組織及流體，該等組織及流體構成眼球、眼周肌肉(諸如斜肌及直肌)、在眼球及諸如淚腺及眼瞼之周圍組織內或鄰近的視神經之部分。

如本文所使用，「眼前眼部病狀」為影響或涉及前(即眼前部)眼部區域或部位(諸如眼周肌肉、眼瞼、淚腺或位於晶狀體囊或睫狀肌之眼後壁前面的眼球組織或流體)的疾病、病痛或病狀。

因此，眼前眼部病狀主要影響或涉及以下各者中之一或多者：結膜、角膜、眼前房、虹膜、晶狀體或晶狀體囊及血管化或神經支配眼前眼部區域或部位之血管及神經。眼前眼部病狀在本文中亦認為擴展至淚器。特別地，分泌淚液之淚腺及其排泄管將淚液輸送至眼之表面。此外，此眼部病狀包括角膜之血管新生，包括與角膜炎症相關聯之角膜血管新生，包括單純疱疹角膜炎、帶狀疱疹角膜炎、細菌角膜感染、真菌角膜感染及角膜移植排斥。眼部病狀亦包括虹膜血管新生及血管新生性青光眼，其可與視網膜靜脈阻塞、糖尿病性視網膜病變、其他缺血性視網膜病變及頸動脈狹窄症相關聯。

此外，眼前眼部病狀影響或涉及眼後房，眼後方在視網膜後面，但在晶狀體囊之眼後壁前面。

「眼後眼部病狀」為主要影響或涉及眼後眼部區域或部位之疾病、病痛或病狀，眼後眼部區域或部位諸如視網膜或脈絡膜(在穿過晶狀體囊之眼後壁之平面眼後的位置中)、璃體、玻璃體房、視網膜、視神經(即視盤)及血管化或神經支配眼後眼部區域或部位之血管及神經。

因此，眼後眼部病狀可包括諸如例如以下各者之疾病、病痛或病狀：黃斑點退化(諸如非滲出性年齡相關之黃斑點退化及滲出性年齡相關之黃斑點退化，亦被稱為濕性或血管新生性年齡相關之黃斑點退化)；脈絡膜血管新生；厚脈絡膜病；息肉狀脈絡膜血管病變；急性斑點視神經視網膜病變；斑狀水腫(諸如囊狀斑狀水腫及糖尿病性斑狀水腫)；Behcet氏病、視網膜病、糖尿病性視網膜病變(包括增生型糖尿病性視網膜病變及糖尿病性斑狀水腫；亦為非增生型糖尿病性視網膜病變)；視網膜動脈閉塞性疾病；中央視網膜靜脈阻塞；分支視網膜靜脈阻塞；鐮狀細胞視網膜病；眼色素層炎視網膜疾病，亦稱為眼後眼色素層炎，包括與炎症相關聯之斑狀水腫及與炎症相關聯之血管新生；肉瘤病視網膜炎症；肉瘤病眼色素層炎；梅毒眼色素層炎；視網膜或視網膜血管中之全身性紅斑狼瘡相關炎症；視網膜脫落；增生型玻璃體視網膜病變；影響眼後眼部位或位置之眼外傷；由眼雷射治療造成或受眼雷射治療影響之眼後眼部病狀；由光動力療法造成或受光動力療法影響之眼後眼部病狀；雷射光凝；輻射視網膜病變；視網膜前膜病；分支視網膜靜脈阻塞；眼前缺血性視神經病變。

本發明描述關心且係關於用於至眼之局部藥物輸送到眼用組合物及用於治療眼後眼部病狀之方法。在較佳實施例中，眼用組合物用於治療由於例如以下各者中之眼血管生成及血管滲漏而出現或惡化之病理狀態：糖尿病性視網膜病變(包括背景糖尿病性視網膜病變、增生型及糖尿病性視網膜病變及糖尿病性斑狀水腫)；年齡相關之黃斑點退化(age-related macular degeneration，AMD) (包括新生血管性(濕性/滲出性) AMD、乾性AMD及地圖狀萎縮)；來自任何機制(即高度近視、外傷、鐮狀細胞疾病；眼組織漿菌症、血管狀痕、外傷性脈絡膜破裂、視神經之隱結及一些視網膜營養不良)之病理性脈絡膜新血管形成(choroidal neo vascularization，CNV)；來自任何機制(即，鐮狀細胞視網膜病、早產兒視網膜病變、伊爾斯病、眼缺血綜合症、頸動脈海綿竇瘺管、家族性滲出性玻璃體視網膜病變、血液高度黏稠症、自發性閉塞性小動脈炎、鳥槍彈樣視網膜脈絡膜病變、視網膜脈管炎、肉瘤病或弓蟲病)之病理性視網膜血管新生；眼色素層炎；視網膜靜脈阻塞(中央或分支)；眼外傷；手術誘發之水腫；手術誘發之血管新生；囊狀斑狀水腫；眼局部缺血；早產兒視網膜病變；滲出性視網膜病；鐮狀細胞視網膜病及/或新生血管性青光眼。 環糊精與活性醫藥成分之固態複合物

組合物包含固態複合物，該固態複合物包含活性醫藥成分及環糊精。包含活性醫藥成分及環糊精之複合物可被稱為「活性醫藥成分/環糊精複合物」或「藥物/環糊精複合物」。

組合物之固態複合物可為複合物聚集體。複合物聚集體可對應於複數個複合物之聚集體，特別為複數個包含活性醫藥成分及環糊精之包容及非包容複合物。

根據一個實施例，眼用組合物為微懸浮液(microsuspension)。術語「微懸浮液」意欲意味著包含懸浮於液相中之固態複合物微粒之組合物。

特別地，眼用組合物包含具有約0.1 μm至約500 μm、特別約1 μm至約100 μm、較佳1 μm至約50 μm之直徑D ₅₀的固態複合物。直徑D ₅₀可根據本文中描述之測試方法來量測。

為了形成具有藥物/環糊精複合物或聚集體之本發明組合物，使個別組分懸浮在水中，短暫地加熱，然後保持在中等溫度下進行攪拌給定時段。如此產生之組合物包含具有約0.1 μm至約500 μm、特別約1 μm至約100 μm、較佳1 μm至約50 μm之平均D ₅₀粒徑之藥物/環糊精複合物。在某些實施例中，組合物包含呈微粒的約70%至約99%之藥物及在水溶性奈米顆粒中的約1%至約30%之藥物、水溶性藥物/環糊精複合物及溶解之遊離藥物。微粒具有小於100 μm、較佳約1 μm至約50 μm之平均D ₅₀粒徑。在一例示性實施例中，組合物為包含約80%之藥物呈微粒之微懸浮液，且其中該等微粒具有約1 μm至約50 μm之平均直徑。

在一個實施例中，該等組合物包含直徑小於約100 μm之藥物/環糊精複合物聚集體。在此實施例中，該等組合物可包含呈微粒的約40%至約99%之藥物，及呈溶解之奈米顆粒、水溶性藥物/環糊精複合物及溶解之遊離藥物的約1%至約60%之藥物。微粒典型地具有約1 μm至約100 μm之平均直徑。在一例示性實施例中，該微懸浮液包含呈具有約1 μm至約50 μm之平均直徑之微粒的約80%之藥物，及呈水溶性奈米顆粒、水溶性藥物/環糊精複合物及遊離藥物的約20%之藥物。

在某些實施例中，當與已知的微懸浮液比較時，本揭露之微懸浮液可有利地具有溶解之活性藥劑濃度的約10倍至1000倍增加。

申請人已意外地發現，活性醫藥成分濃度之此高濃度可藉由使用呈鹽形式之藥物(視情況與螯合劑及界面活性劑組合，且視情況與下文描述之另外添加劑組合)有利地達成。

藥物/環糊精複合物之兩個最重要性質為該等複合物之化學計量及該等複合物之穩定性常數之數值。若m個藥物分子(D)與n個環糊精分子(CD)關聯以形成複合物(D _m/CD _n)，則得到以下總體平衡：

其中 K _m:n 為藥物/環糊精複合物之穩定性常數。藥物/環糊精複合物之化學計量及該等複合物之穩定性常數之數值經常自相-溶解度圖獲得，在該等圖中，監測隨添加至複合介質之總環糊精變化之藥物溶解度(第1圖)。若獲得A _L型(即，線性)相-溶解度圖，則可假設複合物對於環糊精為一階(方程式1中n = 1)且對於藥物為一階或更高階(m ＞=1)。在此情況下，溶解之藥物之總濃度( S _tot )等於表觀固有藥物溶解度(S ₀)與溶解之複合物中的藥物之濃度(m·[D _m/CD])的總和：

稀釋水溶液中的最一般類型之藥物/環糊精複合物為1:1 D/CD複合物。在此情況下，線性相-溶解度圖之斜率小於一且以下方程式可應用於計算穩定性常數( K _1:1 )：

與線性之正偏差(A _p型相-溶解度圖)暗示相對於環糊精之更高級複合物之形成。系統之化學計量可藉由利用二次模型之曲線配適來獲得。對此模型之良好配適可暗示1:2藥物/環糊精複合物之形成：

其中[CD]表示遊離環糊精之濃度。三階模型暗示1:3複合物等。此處假設連續複合，其中例如，1:2複合物在一個額外環糊精分子與現有1:1複合物形成複合物時形成。相-溶解度研究係在藥物飽和之水溶液中執行，其中更高階複合物聚集體之形成比在稀釋之不飽和溶液中可能性更大。A _N型分佈曲線已藉由複合介質之變化及環糊精分子及/或其複合物在較高環糊精濃度下之自關聯加以解釋。通常在含有諸如以下各者之水溶性環糊精衍生物之複合介質中觀測到A型相-溶解度圖：2-羥丙基-α-環糊精、2-羥丙基-β-環糊精、磺丁基醚β-環糊精及2-羥丙基-γ-環糊精。B型相-溶解度圖(第1圖)暗示可溶性差之複合物之形成，且通常在含有天然α-環糊精、β-環糊精及γ-環糊精之水性複合介質中觀測到該等圖。B _s型相-溶解度圖係在藥物/環糊精複合物在複合介質中具有有限溶解度時形成，其中曲線平台區指示總藥物溶解度，即固有藥物溶解度(S ₀)加上呈環糊精複合物之形式的藥物溶解度。曲線之上升部分可用數學方式處理為A型圖且先前描述之技術用於獲得關於複合物之表觀化學計量之資訊。在以B型曲線表明的較高環糊精濃度下之總藥物溶解度下降將藉由複合介質中之可用藥物的實現加以解釋。然而，在使用過量藥物時將經常觀測到此下降。除了形成之藥物/環糊精複合物不溶於複合介質外，B _i型曲線類似於B _s型。

固有溶解度(S ₀)應等於相-溶解度圖之Y-截距值。然而，此僅為傾向於在水溶液中聚集以形成可溶二聚物、三聚物及更高階聚集體之溶解性差之藥物的情況。因此，複合效用(complexation efficacy，CE)經常為用於比較不同環糊精之溶解作用效應之較佳量度。若線性相-溶解度圖之斜率小於一，則可根據以下方程式來計算CE (T. Loftsson, D. Hreinsdottir及M. Masson: The complexation efficiency, J. Incl. Phenom. Macroc. Chem.57, 545-552, 2007)：

其中[D/CD]為溶解之複合物之濃度，[CD]為溶解之遊離環糊精之濃度，且斜率為線性相-溶解度曲線之斜率。複合效率可用於計算D:CD莫耳比，D:CD莫耳比可與調配物體積之預期增加關聯：

天然環糊精及其衍生物以及其複合物已知全部形成聚集體，尤其在高藥物及環糊精濃度下。基於環糊精之溶解微粒由主客複合物組成，其中客體(例如，藥物)在水溶液中溶解性差(例如，小於1 mg/ml)，而主體(即天然環糊精)在主客複合物介質中之水性溶解度為客體之溶解度之10倍，但小於主體之溶解度。舉例而言，氫皮質酮在室溫下在純水中之溶解度為約0.1 mg/ml，且相同條件下的γ-環糊精之溶解度為約250 mg/ml。然而，氫皮質酮及γ-環糊精在氫皮質酮飽和之水性3% (w/v) γ-環糊精懸浮液中之溶解度分別為3 mg/ml及13 mg/ml (Phennapha Saokham, Thorsteinn Loftsson: γ-Cyclodextrin, International Journal of Pharmaceutics, 516, 278-292, 2017)。因此，客體(即氫皮質酮)之溶解度增大了30倍，而主體(即γ-環糊精)溶解度減小幾乎20倍。

人們認為本技術的輸送藥物穿過生物膜之能力取決於藥物分子形成環糊精複合物之能力，該能力隨著K值增大而增強(方程式1)。然而，具有較高K值之一些藥物不能根據此技術調配且輸送穿過生物膜，諸如自眼之表面進入眼中。已經發現，重要參數為複合效用(方程式5中之CE)。若CE非常低，則會難以獲得固態藥物/環糊精複合物。此外，具有低CE的藥物之固態藥物/環糊精複合物在含水介質中不穩定，藥物在含水介質中自複合物釋放以沉澱為純藥物。根據此技術之激酶抑制劑之成功開發的最佳CE大於約0.01，更佳大於約0.05，且最佳大於約0.1。 環糊精

組合物包含環糊精。組合物可包含環糊精之混合物。

亦被稱為環狀澱粉之環糊精係自澱粉之酶轉化產生。該等環糊精具有在內側疏水且在外側親水之環狀結構。由於環之兩親性質，已知環糊精增強疏水化合物之溶解度、穩定性及生物可用度。

環糊精為含有6個(α-環糊精)、7個(β-環糊精)及8個(γ-環糊精)葡萄哌喃糖單體之環狀寡醣，該等單體經由α-1,4-醣苷鍵連結。α-環糊精、β-環糊精及γ-環糊精為藉由澱粉之微生物降解形成之天然產物。甜甜圈形狀之環糊精分子的外表面係親水的，帶有大量羥基，但環糊精分子之中心空腔有點親油(Kurkov, S.V., Loftsson, T., 2013. Cyclodextrins. Int J Pharm 453, 167-180；Loftsson, T., Brewster, M.E., 1996. Pharmaceutical applications of cyclodextrins. 1. Drug solubilization and stabilization. Journal of Pharmaceutical Sciences 85, 1017-1025)。除了三種天然環糊精外，眾多水溶性環糊精衍生物亦已經合成且經測試作為藥物載體，包括環糊精聚合物(Stella, V.J., He, Q., 2008. Cyclodextrins. Tox. Pathol. 36, 30-42)。

環糊精增強疏水化合物之溶解度及生物可用度。在水溶液中，藉由將藥物分子或更經常地分子之親油部分帶入中心空腔中，環糊精與許多藥物形成包容複合物。此性質已被用於藥物配製及藥物輸送用途。已經審查了藥物/環糊精包容複合物之形成、該等複合物對藥物之物理化學性質的影響、該等複合物對藥物滲透生物膜之能力的影響及環糊精在醫藥產品中之使用(Loftsson, T., Brewster, M.E., 2010. Pharmaceutical applications of cyclodextrins: basic science and product development. Journal of Pharmacy and Pharmacology 62, 1607-1621；Loftsson, T., Brewster, M.E., 2011. Pharmaceutical applications of cyclodextrins: effects on drug permeation through biological membranes. J. Pharm. Pharmacol. 63, 1119-1135； Loftsson, T., Järvinen, T., 1999. Cyclodextrins in ophthalmic drug delivery. Advanced Drug Delivery Reviews 36, 59-79)。

環糊精及藥物/環糊精複合物能夠在水溶液中自集中以形成奈米及微米大小之聚集體及類微胞結構，該等結構亦能夠經由非包容複合及類微胞溶解使溶解性差之活性醫藥成分溶解(Messner, M., Kurkov, S.V., Jansook, P., Loftsson, T., 2010. Self-assembled cyclodextrin aggregates and nanoparticles. Int. J. Pharm. 387, 199-208)。一般地，親水性環糊精衍生物(諸如2-羥丙基-β-環糊精及2-羥丙基-γ-環糊精)及其複合物遊離地溶於水中。另一方面，天然的α-環糊精、β-環糊精及γ-環糊精在25℃下在純水中溶解度有限，或分別為129.5 ± 0.7 mg/ml、18.4 ± 0.2 mg/ml及249.2 ± 0.2 mg/ml (Sabadini E., Cosgrovea T.及do Carmo Egídio F., 2006. Solubility of cyclomaltooligosaccharides (cyclodextrins) in H ₂O and D ₂O: a comparative study. Carbohydr Res 341, 270-274)。環糊精複合物之溶解度可比純環糊精之溶解度高或低。已知環糊精複合物之溶解度有點隨著溫度升高而增大(Jozwiakowski, M. J., Connors, K. A., 1985. Aqueous solubility behavior of three cyclodextrins. Carbohydr. Res., 143, 51-59)。由於天然環糊精複合物之有限溶解度，天然環糊精大部分經常展示B _s型或B _i型相-溶解度圖(Brewster M. E., Loftsson T., 2007, Cyclodextrins as pharmaceutical solubilizers. Adv. Drug Deliv. Rev., 59, 645-666)。

在一較佳實施例中，環糊精為α-環糊精、β-環糊精、γ-環糊精或其組合。

在一特別較佳實施例中，環糊精為γ-環糊精。γ-環糊精在水中之溶解度比α-環糊精及β-環糊精之溶解度高。此外，γ-環糊精容易由淚液及腸胃道中之α-澱粉酶水解成葡萄糖及麥芽糖子單元。

本揭露之眼用組合物中之環糊精(典型地，γ-環糊精)的量可為基於組合物之體積的0.25 % (w/v)至40% (w/v)，特別為10 % (w/v)至30 % (w/v)，更佳為15% (w/v)至25% (w/v)重量環糊精。 活性醫藥成分

本發明組合物包含活性醫藥成分。

活性醫藥成分可被稱為「藥物」。在本揭露之上下文中，活性醫藥成分為眼用藥物，即在以足夠量向患有眼部病狀之患者投與時展現治療效果之化合物。

在某些實施例中，組合物可包含選自由以下各者組成之群之活性醫藥成分：激酶抑制劑，諸如阿法替尼、阿來替尼、安羅替尼、阿西替尼、BMS-794833 (N-(4-((2-胺-3-氯吡啶-4-基)氧基)-3-氟苯基)-5-(4-氟苯基)-4-氧-1,4-二氫吡啶-3-羧醯胺)、比美替尼、伯舒替尼、布加替尼、卡博替尼、西地尼布、考比替尼、克唑替尼、達沙替尼、多韋替尼、恩曲替尼、厄洛替尼、依維莫司、吉非替尼、依魯替尼、伊馬替尼、拉帕替尼、樂伐替尼、來他替尼、利尼伐尼、馬賽替尼、魯索替尼、莫替沙尼、來那替尼、尼洛替尼、尼達尼布、奧美替尼、奧安替尼、奧西替尼、帕瑞替尼、PD173074 (N-[2-[[4-(二乙胺)丁基]胺]-6-(3,5-二甲氧苯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基]-N'-(1,1-二甲基乙基)脲)、帕唑帕尼、帕納替尼、瑞戈菲尼、羅賽替尼、魯索替尼、司馬沙尼、司美替尼、索拉非尼、舒尼替尼、替西羅莫司、替沃紮尼、妥拉尼布、托法替尼、曲美替尼、凡德他尼、維莫非尼及ZM323881 (5-((7-苄氧基喹唑啉-4-基)胺)-4-氟-2-甲苯酚)。

例示性實施例中的以奈米微粒及微粒使用之活性醫藥成分可選自(但不限於)由以下各者組成之群：激酶抑制劑，諸如阿法替尼、阿來替尼、安羅替尼、阿西替尼、BMS-794833 (N-(4-((2-胺-3-氯吡啶-4-基)氧)-3-氟苯基)-5-(4-氟苯基)-4-氧-1,4-二氫吡啶-3-羧醯胺)、比美替尼、伯舒替尼、布加替尼、卡博替尼、西地尼布、考比替尼、克唑替尼、達沙替尼、多韋替尼、恩曲替尼、厄洛替尼、依維莫司、吉非替尼、依魯替尼、伊馬替尼、拉帕替尼、樂伐替尼、來他替尼、利尼伐尼、馬賽替尼、魯索替尼、莫替沙尼、來那替尼、尼洛替尼、尼達尼布、奧美替尼、奧安替尼、奧西替尼、帕瑞替尼、PD173074 (N-[2-[[4-(二乙胺)丁基]胺]-6-(3,5-二甲氧苯基)吡啶并 [2,3-d]嘧啶-7-基]-N'-(1,1-二甲基乙基)脲)、帕唑帕尼、帕納替尼、瑞戈菲尼、羅賽替尼、魯索替尼、司馬沙尼、司美替尼、索拉非尼、舒尼替尼、替西羅莫司、替沃紮尼、妥拉尼布、托法替尼、曲美替尼、凡德他尼、維莫非尼及ZM323881 (5-((7-苄氧基喹唑啉-4-基)胺)-4-氟-2-甲苯酚)。

諸如酪胺酸激酶抑制劑之蛋白質激酶抑制劑為酶抑制劑，該等酶抑制劑阻斷能夠將磷酸鹽基團添加至蛋白質且因此改變其功能之一或多種蛋白質激酶之動作。激酶抑制劑(Kinase inhibitor，KI)經常被用作抗癌藥物或消炎藥物。在眼科學中，激酶抑制劑可用於治療與微管病理學、提高之血管滲透性及眼內血管新生相關聯之疾病，包括年齡相關之黃斑點退化(age-related macular degeneration，AMD)、糖尿病性視網膜病變 (diabetic retinopathy，DR)及糖尿病性斑狀水腫(diabetic macular edema，DME)。酪胺酸激酶之生長因子受體之三個主要類型為表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)、血小板衍生之生長因子受體及血管內皮生長因子受體(vascular endothelial growth factor receptor，VEGFR)。VEGFR家族成員包括VEGFR1、VEGFR2及VEGFR3。在該等家族成員中，VEGFR2在調停血管內皮生長因子之生物效應時最重要，且VEGFR2之抑制劑與AMD、DR及DME之治療最相關。因此，如本文所使用，術語「酪胺酸激酶抑制劑」係指至少VEGFR受體之化合物抑制劑。

另一方面，抑制EGFR產生各種眼副作用，諸如角膜變薄及侵蝕。眼副作用主要與眼之眼表面及眼前區段(即眼前區段中之激酶抑制劑濃度)相關聯，而治療效果與視網膜(或眼之眼後區段)中之激酶濃度相關聯。

典型地，在本發明眼用溶液之一實施例中，酪胺酸激酶抑制劑對於VEGFR2比對EGFR可具有2000倍或更高之親和力以，從而以水性滴眼劑形式局部投與至眼。在一較佳實施例中，酪胺酸激酶抑制劑對於VEGFR2比對EGFR可具有5000倍或更高之親和力，從而以水性滴眼劑形式局部投與至眼。自Selleckchem (https://www.selleckchem.com/)、Tocris Bioscience (https://www.tocris.com/)及TargetMol (https://www.targetmol.com/)獲得的相關VEGFR抑制劑、VEGFR2及EGFR之IC ₅₀(nM)值及EGFR/VEGFR2 IC ₅₀(nM)比率之表給出如下：

激酶抑制劑	IC ₅₀	EGFR/VEGFR2比率
VEGFR2 (nM)	EGFR (nM)
阿克尼布	19	1000	53
艾爾特替尼	9.2	3300	360
安羅替尼	0.2	2000	10,000
阿西替尼	0.2	1000	5000
BFH772	3	10,000	3333
布立尼布	25	10,000	400
卡博替尼	0.035	1000	29,000
西地尼布	1	1600	1600
多韋替尼	13	2200	169
福瑞替尼	0.86	3000	3500
呋喹替尼	35	30,000	857
Ki8751	4	10,000	2500
樂伐替尼	4	6500	1625
利尼伐尼	1.4	50,000	36,000
莫替沙尼	3	3000	1000
尼達尼布	1.4	50000	36,000
奧安替尼	2.1	100,000	50,000
OSI-930	9	10,000	1000
帕納替尼	1.5	1000	700
瑞戈菲尼	4.2	1000	250
司馬沙尼	160	100,000	600
司曲替尼	5	5000	1000
索拉非尼	90	10,000	100
替沃紮尼	6.5	1000	150
凡德他尼	40	500	13
ZM 323881	2	50,000	25,000

在審查之26種激酶抑制劑中，十種具有大於2000之EGFR/VEGFR2 IC ₅₀比率，七種大於或等於至5000。

根據一較佳實施例，組合物可包含酪胺酸激酶抑制劑，該酪胺酸激酶抑制劑之表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)之最大半抑制濃度(IC ₅₀)與血管內皮生長因子受體(vascular endothelial growth factor receptor，VEGFR2)之最大半抑制濃度(IC ₅₀)之比大於2000，較佳大於5000。在某些較佳實施例中，組合物可包含鹽形式之該酪胺酸激酶抑制劑。

根據一較佳實施例，組合物可包含具有2至8之pKa之酪胺酸激酶抑制劑。

用於本揭露之組合物中之較佳酪胺酸激酶抑制劑為尼達尼布、卡博替尼、阿西替尼、安羅替尼、利尼伐尼及奧安替尼。最佳酪胺酸激酶抑制劑為尼達尼布、奧安替尼及阿西替尼。調配物給出如下：

尼達尼布
卡博替尼
阿西替尼
安羅替尼
利尼伐尼
奧安替尼

組合物可包含呈鹽形式之活性醫藥成分，即選自由以下各者組成之群的活性醫藥成分之無機或有機鹽：丙酸鹽、乙酸鹽、2,5-二羥苯甲酸鹽、檸檬酸鹽、丙二酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、苯甲酸鹽、順丁烯二酸鹽、甲基苯磺酸鹽、反丁烯二酸鹽、丁二酸鹽、酒石酸鹽、乳酸鹽、甘醇酸鹽、磷酸鹽、焦磷酸鹽、苯磺酸鹽、抗壞血酸鹽、氯化物、溴酸鹽、蘋果酸鹽、丙酸鹽、草酸鹽、異丁酸鹽、苯甲酸鹽、磺酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽及焦麩胺酸鹽，以及該等鹽之異構物。

較佳地，鹽係選自由以下各者組成之群：乙酸鹽、乳酸鹽、氯化物、蘋果酸鹽、乙磺酸鹽、順丁烯二酸鹽、天門冬酸鹽、鈉鹽、鉀鹽。

組合物可包含尼達尼布以作為遊離鹼或乙磺酸鹽(即乙烷磺酸鹽)或氯鹽或溴鹽，較佳作為乙磺酸鹽。

組合物可包含卡博替尼以作為遊離鹼或蘋果酸鹽或氯鹽，較佳作為蘋果酸鹽。

組合物可包含阿西替尼以作為遊離鹼或乙磺酸鹽或甲基苯磺酸鹽，較佳作為乙磺酸鹽。

組合物可包含奧安替尼以作為遊離酸或鈉鹽或鉀鹽。

最終(準備使用)組合物中之活性醫藥成分之濃度可為約0.1 mg/mL至約100 mg/mL，特別為約1 mg/mL至約50 mg/mL，更特別為約5 mg/mL至約30 mg/mL，作為遊離鹼或呈鹽形式。

在例示性實施例中，活性醫藥成分以約1 mg/mL至約50 mg/mL之濃度作為遊離鹼或呈鹽形式存在於最終組合物中。

當與根據已知方法製備之組合物相比時，組合物可具有約10倍至約1000倍的溶解之活性醫藥成分濃度之增加。

當活性醫藥成分呈鹽形式溶解時，當與最終組合物中之遊離鹼之溶解相比時，最終組合物中之濃度可增加至0.5至5 % (w/v)，較佳增加至1%至4 % (w/v)，更佳增加至1.0%至3.0% (w/v)。特別地，當活性醫藥成分結合螯合劑、界面活性劑及視情況其他賦形劑中之一或多者呈鹽形式溶解時，活性醫藥成分以0.5%至5 % (w/v)、較佳1%至4 % (w/v)、更佳1.0%至3.0% (w/v) (藥物之重量及溶液之體積)之濃度存在於最終組合物中。

特別地，組合物中的按重量計40%至98%、按重量計較佳50%至95%、按重量計更較佳60%至90%之活性醫藥成分可呈活性醫藥成分與環糊精之固態複合物的形式。固態複合物可包含活性醫藥成分之鹽及螯合劑。

特別地，組合物中的按重量計2%至60%、按重量計較佳5至50%、按重量計更佳10%至40%之活性醫藥成分可呈溶解形式。溶解形式包括溶解於液相中之未複合的活性醫藥成分，及溶解於液相中的活性醫藥成分與環糊精之複合物，以及由藥物/環糊精複合物聚集體組成之水溶性奈米顆粒。溶解形式可包括螯合劑。

組合物中的按重量計較佳小於5%、較佳小於2%且更較小於0.5%之活性醫藥成分可呈未複合的固態形式。因而，組合物可為實質上不含活性醫藥成分之固態未複合的顆粒。

在一個實施例中，組合物為微懸浮液且可包含呈微粒的約70%至約99%之活性醫藥成分及呈奈米顆粒的約1%至約30%之活性醫藥成分。更特別地，微懸浮液可包含呈微粒(該等微粒具有在固相中的平均D ₅₀為約0.1 μm至約500 μm、特別1μm至100μm、更佳1 μm至50 μm之顆粒)的約80%之活性醫藥成分，及呈奈米顆粒的約20%之活性醫藥成分。

在另一實施例中，微懸浮液可包含呈微粒的約40%至約99%之活性醫藥成分，及呈水溶性奈米顆粒或水溶性活性醫藥成分/環糊精複合物的約1%至約60%之活性醫藥成分。特別地，微懸浮液可包含呈微粒(該等微粒具有在固相中的平均D ₅₀為約1 μm至約100 μm之顆粒)的約80%至約90%之活性醫藥成分，及呈奈米顆粒或水溶性活性醫藥成分/環糊精複合物的約10%至約20%之活性醫藥成分。 聚合物

組合物可進一步包含聚合物。

特別地，該聚合物可為水溶性聚合物。此外，該聚合物可為表面活性聚合物。術語「表面活性聚合物」意欲意謂展現界面活性劑性質之聚合物。聚合物增強組合物之物理穩定性。因而，組合物在其包含聚合物時不太容易使固態複合物沉澱。聚合物因此可被視為聚合穩定劑。表面活性聚合物可例如包含接枝至親水性骨幹聚合物之疏水性鏈；接枝至疏水性骨幹之親水性鏈；或交替的親水性段與疏水性段。前兩個類型被稱作接枝共聚物，而第三類型被稱作嵌段共聚物。

在一個實施例中，組合物包含選自由以下各者組成之群之聚合物：聚氧乙烯脂肪酸酯；聚氧乙烯烷基苯基醚；聚氧乙烯烷基醚；纖維素衍生物，諸如烷基纖維素、羥烷基纖維素及羥烷基烷基纖維素；羧乙烯基聚合物，諸如卡波姆，例如Carbopol 971及Carbopol 974；聚乙烯聚合物；聚乙烯醇；聚乙烯吡咯啶酮；聚氧丙烯與聚氧乙烯之共聚物；泰洛沙伯；及其組合。

合適聚合物之實例包括但不限於聚乙二醇單硬脂酸酯、聚乙二醇二硬脂酸酯、羥丙基甲基纖維素、羥丙基纖維素、聚乙烯吡咯啶酮、聚氧乙烯月桂醚、聚氧乙烯辛基十二基醚、聚氧乙烯硬脂酸醚、聚氧乙烯肉豆蔻醚、聚氧乙烯油醇醚、山梨醇酯、聚氧乙烯十六基醚(例如，聚西托醇1000)、聚氧乙烯蓖麻油衍生物、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯(例如，Tween 20及Tween 80 (ICI Specialty Chemicals))；聚乙二醇(例如，卡波蠟3550及934 (Union Carbide))、聚氧乙烯硬脂酸鹽、羧甲基纖維素鈣、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥乙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、纖維素、聚乙烯醇(polyvinyl alcohol，PVA)、泊洛沙姆(例如，普郎尼克F68及FI08，其為氧化乙烯與氧化丙烯之嵌段共聚物)；泊洛沙胺(例如，泰特尼克908，亦被稱為泊洛沙胺908，其為自氧化丙烯及氧化乙烯至乙二胺之順序添加衍生的四官能嵌段共聚物(BASF Wyandotte Corporation, Parsippany, N.J.))；泰特尼克1508 (T-1508) (BASF Wyandotte Corporation)，氚核X-200，其為烷基芳基聚醚磺酸鹽(Rohm and Haas)；PEG衍生之磷脂、PEG衍生之膽固醇、PEG衍生之膽固醇衍生物、PEG衍生之維生素A、PEG衍生之維生素E、乙烯吡咯啶酮與乙酸乙烯鹽之隨機共聚物、其組合及溴化己二甲胺(hexadimethrine bromide，HDMBR)。

聚合物之較佳實例為泰洛沙伯(聚氧丙烯與聚氧乙烯之共聚物)、聚伸烷基乙二醇、羥烷基纖維素、羥烷基烷基纖維素及聚乙烯醇。

泰洛沙伯為具有甲醛及環氧乙烷之4-(1,1,3,3-四甲基丁基)酚聚合物。

更特別地，聚氧丙烯與聚氧乙烯之共聚物可為包含親水性嵌段(聚氧乙烯)-疏水性嵌段(聚氧丙烯)-親水性嵌段(聚氧乙烯)組態之三嵌段共聚物，亦被稱為泊洛沙姆。

在一個實施例中，本揭露之組合包含為泊洛沙姆之聚合物。泊洛沙姆可包括此項技術中已知的任何類型之泊洛沙姆。泊洛沙姆包括泊洛沙姆101、泊洛沙姆105、泊洛沙姆108、泊洛沙姆122、泊洛沙姆123、泊洛沙姆124、泊洛沙姆181、泊洛沙姆182、泊洛沙姆183、泊洛沙姆184、泊洛沙姆185、泊洛沙姆188、泊洛沙姆212、泊洛沙姆215、泊洛沙姆217、泊洛沙姆231、泊洛沙姆234、泊洛沙姆235、泊洛沙姆237、泊洛沙姆238、泊洛沙姆282、泊洛沙姆284、泊洛沙姆288、泊洛沙姆331、泊洛沙姆333、泊洛沙姆334、泊洛沙姆335、泊洛沙姆338、泊洛沙姆401、泊洛沙姆402、泊洛沙姆403、泊洛沙姆407、泊洛沙姆105苯甲酸鹽及泊洛沙姆182二苯甲酸鹽。

作為穩定劑特別有用之聚合物為泊洛沙姆。泊洛沙姆可包括此項技術中已知的任何類型之泊洛沙姆。泊洛沙姆包括泊洛沙姆101、泊洛沙姆105、泊洛沙姆108、泊洛沙姆122、泊洛沙姆123、泊洛沙姆124、泊洛沙姆181、泊洛沙姆182、泊洛沙姆183、泊洛沙姆184、泊洛沙姆185、泊洛沙姆188、泊洛沙姆212、泊洛沙姆215、泊洛沙姆217、泊洛沙姆231、泊洛沙姆234、泊洛沙姆235、泊洛沙姆237、泊洛沙姆238、泊洛沙姆282、泊洛沙姆284、泊洛沙姆288、泊洛沙姆331、泊洛沙姆333、泊洛沙姆334、泊洛沙姆335、泊洛沙姆338、泊洛沙姆401、泊洛沙姆402、泊洛沙姆403、泊洛沙姆407、泊洛沙姆105苯甲酸鹽及泊洛沙姆182二苯甲酸鹽。 螯合劑

組合物可進一步包含螯合劑。螯合劑對溶解及懸浮之固態環糊精/活性藥劑複合物之穩定性起作用。螯合劑使組合物穩定。該等螯合劑可溶解相反離子。該等螯合劑可使pH穩定至有限程度。

螯合劑之實例為二價及多價羧酸及該等羧酸之鹽。較佳實例為乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraacetic acid，EDTA)、2, 2'，2"-氮基三乙酸(nitrilotriacetic acid，NTA)、亞胺基二丁二酸(iminodisuccinic acid，IDS)、聚天冬胺酸、S,S-乙二胺-N,N'-二丁二酸(S,S-ethylenediamine-N,N'-disuccinic acid，EDDS)、甲基甘胺酸二乙酸(methylglycinediacetic acid，MGDA)、L-麩胺酸N,N-二乙酸、丁烯二酸、酒石酸、草酸、順丁烯二酸、蘋果酸、丁二酸及檸檬酸。EDTA因為其亦對pH穩定性起作用而為特別較佳為穩定劑。在一例示性實施例中，EDTA可為乙二胺四乙酸二鈉鹽。

組合物中之螯合劑之量基於組合物之體積按螯合劑之重量計可為0.1 % (w/v)至5% (w/v)，特別為0.3 % (w/v)至3% (w/v)，更特別為0.5 % (w/v)至2% (w/v)。 眼用可接受之介質

組合物包含眼用可接受之介質。術語「眼用可接受之介質」意欲意謂適合於組合物之眼用局部投與之介質，以致與眼及淚液相容。眼用可接受之介質較佳為液體。眼用可接受之介質尤其可包含至少60 % (w/v)之純化水。特別地，眼用可接受之介質不包含除水外之任何其他溶劑。

組合物將典型地具有在3.5至9、較佳4.5至7.5之範圍內的pH。組合物將典型地具有200至450毫滲透莫耳每千克(mOsm/kg)、更佳240至360 mOsm/kg之滲透壓。

根據一較佳實施例，眼用可接受之介質包含水及視情況選自由以下各者組成之群之添加劑：防腐劑、穩定劑、電解質、緩衝劑及其組合。

特別地，眼用可接受之介質可包含防腐劑。防腐劑可用於限制組合物中之細菌增生。

防腐劑之合適實例為亞硫酸氫鈉、硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、氯化苄烷銨、氯丁醇、乙汞硫柳酸鈉、乙酸苯汞、硝酸苯汞、羥苯甲酸甲酯、苯乙醇、山梨酸及其鹽，及其組合。較佳地，防腐劑為氯化苄烷銨。

基於組合物之體積以防腐劑之重量計，本揭露之組合物中之防腐劑的量可為0至1%，特別為0.001至0.5%，更特別為0.005至0.1%，甚至更特別為0.01至0.04%。在某些實施例中，組合物不含任何防腐劑。

在某些實施例中，眼用可接受之介質可包含用於使組合物等張之滲壓性調整劑。

合適滲壓性調整劑之實例包括氯化鈉、氯化鉀、甘露醇、右旋糖、甘油及其組合。較佳地，電解質為氯化鈉。

基於組合物之體積以滲壓性調整劑之重量計，本揭露之組合物中之滲壓性調整劑的量可為0.01%至5%。濃度範圍可取決於滲壓性調整劑之類型。對於如氯化鈉及氯化鉀之電解質，濃度範圍可為0.01%至0.9% (w/v)，而對於如甘露醇及右旋糖之非電解質，該範圍可為0.1%至5% (w/v)。 生產方法

可藉由以下操作來製備本發明組合物：將個別組分懸浮在水中，接著在封閉容器中在121℃下加熱約20分鐘以形成基本上澄清之溶液。然後，允許溶液冷卻至環境溫度，接著在22至23℃下在連續攪動下平衡。在平衡期間，用0.1 N鹽酸(HCl)水溶液及1.0 N氫氧化鈉(NaOH)水溶液將組合物之pH調整至約4.5至約7.5，且用蒸餾水來調整體積。 組合物之使用

本揭露之眼用組合物可用於治療眼部病狀，特別地眼後眼部病狀，更特別地用於治療由於例如以下各者中之眼血管生成及血管滲漏而出現或惡化之病理狀態：糖尿病性視網膜病變(包括背景糖尿病性視網膜病變、增生型糖尿病性視網膜病變及糖尿病性斑狀水腫)；年齡相關之黃斑點退化(age-related macular degeneration，AMD) (包括新生血管性(濕性/滲出性) AMD、乾性AMD及地圖狀萎縮)；來自任何機制(即高度近視、外傷、鐮狀細胞疾病；眼組織漿菌症、血管狀痕、外傷性脈絡膜破裂、視神經之隱結及一些視網膜營養不良)之病理性脈絡膜新血管形成(choroidal neo vascularization，CNV)；來自任何機制(即，鐮狀細胞視網膜病、早產兒視網膜病變、伊爾斯病、眼缺血綜合症、頸動脈海綿竇瘺管、家族性滲出性玻璃體視網膜病變、血液高度黏稠症、自發性閉塞性小動脈炎、鳥槍彈樣視網膜脈絡膜病變、視網膜脈管炎、肉瘤病或弓蟲病)之病理性視網膜血管新生；眼色素層炎；視網膜靜脈阻塞(中央或分支)；眼外傷；手術誘發之水腫；手術誘發之血管新生；囊狀斑狀水腫；眼局部缺血；早產兒視網膜病變；滲出性視網膜病；鐮狀細胞視網膜病及/或血管新生性青光眼。

眼用組合物可特別用於治療斑狀水腫。在此情況下，眼用組合物可以每天三次1滴組合物之量局部投與至眼。基於組合物之體積以激酶抑制劑之重量計，該組合物中之激酶抑制劑之量可為0.5至5 % (w/v)、較佳1至4 % (w/v)、更佳 1.0至3.0% (w/v)。

本揭露之組合物不需要如已知局部組合物一樣頻繁地投與。實際上，由於組合物中之活性醫藥成分之較高濃度及輸送之較長持續時間，活性醫藥成分在眼後段中之生物可用度顯著地增加，因此較低投與頻率西可能的，從而提高患者順從性。

本揭露亦覆蓋組合物作為滴眼劑溶液之使用，因此分別視指示及嚴重性而定，替代眼用注射溶液或除眼用注射溶液外，可投與該等溶液，由此顯著增強患者順從性及臨床結果。 量測方法

直徑

諸如活性醫藥成分與環糊精之固態複合物之顆粒之直徑可對應於顆粒之D ₅₀直徑。直徑D ₅₀亦被稱為粒徑分佈之中位直徑或中間值。直徑D ₅₀對應於累積分佈中之50%處的顆粒直徑之值。舉例而言，若D ₅₀為5 μm，則樣本中之顆粒之50%大於5 μm，且50%小於5 μm。直徑D ₅₀通常被用於表示一組顆粒之粒徑。

顆粒或複合物之直徑及/或大小可根據一般熟習此項技術者已知的任何方法來量測。舉例而言，直徑D ₅₀係藉由雷射繞射粒徑分析量測。一般地，存在有限數目個用於量測/評估環糊精/藥物顆粒或複合物直徑及/或大小之技術。特別地，一般熟習此項技術者知道，物理性質(例如粒徑、直徑、平均直徑、平均粒徑等)典型地使用此等有限的典型已知技術進行評估/量測。舉例而言，在Int. J. Pharm. 493 (2015), 86-95中描述了此等已知技術。另外，此等有限之已知量測/評估技術係如其他技術參考所證明在此項技術中已知的，該等其他技術參考諸如例如歐洲藥典(2.9.31藉由雷射繞射之粒徑分析，2010年1月)及Saurabh Bhatia, Nanoparticles types, classification, characterization, fabrication methods and drug delivery applications, 第2章, Natural Polymer Drug Delivery Systems, 第 33-94頁, Springer, 2016，該等其他技術參考亦以全文引用之方式併入本文中。

對於包含活性醫藥成分之複合物之粒徑，藉由根據歐洲藥典(Pharm. Eur.) 2.9.31的應用以下參數之雷射繞射粒徑分析來量測粒徑：

MasterSizer方法描述。
儀器	Malvern MasterSizer ^®3000 Hydro MV
軟體	Mastersizer v 3.70
顆粒類型	不透明顆粒(夫朗和斐近似)
分散劑	I型水
分散劑之折射率	1.33
背景量測持續時間	10秒
樣本量測持續時間	1秒
量測次數	15
遮蔽下限	2%
遮蔽上限	20%
量測模式	自動開始，穩定時間為0.2秒
攪拌器速度	1200 rpm
分析模型	通用
靈敏度	正常，「細粉末」模式打開
結果類型	容積分佈
樣本製備	藉由搖動之人工均質化
樣本大小	500μl
量測之間的清洗	用自來水沖洗三次，用II型水沖洗一次

根據歐洲藥典(Pharm. Eur.) 2.9.37來進行利用奧林帕斯BX43光學顯微鏡之樣本分析。在不同放大率(高達40x)下對1 μl的人工均質化之滴眼劑進行掃描。藉助於配備的奧林帕斯LC30數位相機及LCmicro ^®v2.2軟體來進行對顯微照片之處理。

固態複合物中之藥物的百分比及溶解之藥物的百分比

呈固態複合物之形式的藥物之量及溶解之藥物的量係藉由在22至23℃之溫度下以6000 rpm將組合物進行離心分離20至30分鐘而獲得。

溶解之藥物的量對應於如藉由高效能液相層析法量測的上澄液中之藥物的量。

呈固態複合物之形式的藥物之百分比係用以下公式獲得：

其中

「全部藥物」係在組合物中引入之藥物之總量，以mg/mL計；且

「溶解之藥物」係上澄液中之藥物之量，以mg/mL計。

溶解之藥物之百分比係用以下公式獲得：

%溶解之藥物= 100 - %藥物∈固態複合物

判定激酶抑制劑之VEGFR2及EGFR的IC ₅₀(nM)值

材料：

用酪胺酸激酶肽微陣列(PTK PamChips®)產品目錄# 86401及可自PamGene International BV (‘s-Hertogenbosch, the Netherlands) 購得之試劑來執行檢定。PamChip®肽陣列量測活性重組激酶磷酸化壓印在多個肽陣列上之特定肽的能力(參考文獻：PMID: 19344656)。PamChip含有自已知的人類磷酸化位點衍生之194個共價耦合肽。

抑制劑尼達尼布、卡博替尼蘋果酸鹽及阿西替尼來自SelleckChem (Houston, TX, USA)。

EGFR (C端片段，胺基酸H672至A1210)及VEGFR2 (C端片段，胺基酸D807至V1356)由Proqinase (Freiburg Germany)提供。哺乳動物蛋白質提取試劑(M-PER) (產品目錄號# 78501)、Halt磷酸酶抑制劑雞尾酒(產品目錄號# 78420)及不含EDTA的Halt蛋白酶抑制劑雞尾酒(產品目錄號# 87785)係自ThermoFisher Scientific (MA, USA)訂購。

方法：

將抑制劑溶解於DMSO中且在DMSO中稀釋至50x最終濃度。在哺乳動物蛋白質提取緩衝液(Mammalian Protein extraction buffer，M-PER)中稀釋重組激酶。對標準檢定混合液補充蛋白酶及磷酸酶抑制劑雞尾酒(1/100稀釋)且添加MgCl ₂以達到17.5 mM之最終濃度。藉由測試激酶之濃度範圍來判定最佳樣本輸入。

PamChip®檢定：

藉由PamGene (PMID: 30610604)在PamStation®-12上執行對kinome活性之量測。簡要地，用2% BSA阻斷緩衝液將PamChip®上之陣列培育30個循環(15分鐘)以防止非特定連結，接著用蛋白質激酶檢定緩衝液洗滌三次(專有資訊)。隨後，在單步反應中處理PamChip蛋白質酪胺酸激酶(protein tyrosine kinase，PTK)陣列，其中將約0.5 μg重組激酶分配至溶解於蛋白質激酶緩衝液及包括25 μM ATP及0.01% BSA之添加劑中的PTK陣列上(專有資訊)，補充4 μl蛋白質激酶(protein kinase，PK)-添加劑(PamGene International BV)、10 mM二硫蘇糖醇(DTT，Fluka, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA)及螢光異硫氰酸鹽(fluorescein isothiocyanate，FITC)標記之抗磷酸化酪胺酸抗體(PamGene International BV, ‘s-Hertogenbosch, The Netherlands)，達到40 μL之最終體積(檢定主混合液)。

將DMSO或激酶抑制劑添加至檢定混合液以得到2 %之最終DMSO濃度。抑制劑濃度自1 nM變為10 μM (對於VEGFR2)，對於EGFR 10 μM，對200 μM抑制劑進行測試。

藉由以下操作在檢定混合物之培育期間監測肽磷酸化：在不同曝光時間每隔2.5分鐘獲取影像，允許即時記錄反應動力學(單步反應)。在洗滌陣列後，再次在不同曝光時間偵測螢光。

信號量化：

使用BioNavigator 6.3軟體(PamGene International BV, ‘s-Hertogenbosch, The Netherlands)對每種肽之螢光信號強度進行分析，該軟體為統計分析及視覺化軟體工具(https://www.pamgene.com/en/bionavigator.htm)。在每一點周圍，計算區域背景。自信號強度減去此值，得到信號減背景(SigmBg)。為了信號量化，在每一時間點，計算SigmBg對暴露時間之斜率以便增大動態範圍。

計算IC50值：

使用每一化合物之洗滌後整合相對信號強度在Graphpad PRISM軟體(版本8.4.2，San Diago, CA, USA)中計算IC50值，以與DMSO對照物進行比較。對每一肽之相對信號強度使用非線性迴歸曲線配適模型以得到抑制劑-回應圖及IC50值。實例

以下實例僅以說明方式詳述且不應被解釋為在精神上或在範疇上受限制，材料及方法兩者之許多修改對熟習此項技術者將顯而易見。

實例1 將過量激酶抑制劑添加至含有各種量γ-環糊精的水。將形成之懸浮液置放在超音波浴中，該等懸浮液在超音波浴中在30℃下進行音波處理30分鐘。在冷卻至室溫(22至23℃)後，打開小瓶且將少量純藥物添加至培養基以促進藥物沉澱，然後在室溫下在搖動器(KS 15 A搖動器，EB Edmund Bühler GmbH，Germany)中在連續攪動下平衡7天。最後，以12000 rpm對懸浮液進行離心分離15分鐘(Heraeus Pico 17離心機，Thermo Fisher Scientific，Germany)，用Milli-Q水稀釋上澄液且藉由HPLC進行分析。

根據由Higuchi及Connors描述之方法(T. Higuchi, KA Connors: Phase-solubility techniques, Adv. Anal. Chem. Instrum. 4, 117-212, 1965)，執行相溶解度分析。根據藥物濃度對γ-環糊精(γCD)濃度曲線之初始線性部分之斜率來計算複合效率(complexation efficiency，CE) (方程式5)，假設藥物/γ-環糊精1:1複合物形成(即複合物中之激酶抑制劑與γ-環糊精之莫耳比(molar ration)為一比一)。結果在表1中示出。CE之範圍為自西地尼布之0.0578至帕唑帕尼及瑞戈菲尼之0.00002。觀察到，儘管西地尼布之S ₀較低，但西地尼布之CE高於多韋替尼。此對阿克尼布及阿西替尼同樣成立。表 1.一些激酶抑制劑在25℃下在純水中之計算溶解度(S)，在給定激酶抑制劑飽和之γ-環糊精水溶液中該等激酶抑制劑與天然γ-環糊精(γCD)之複合效用

激酶抑制劑	MW (Da)	水中之S (mg/mL) ^a	CE
阿克尼布	445.40	0.001	0.0004
阿西替尼	386.47	0.04	0.0002
西地尼布	450.51	0.2	0.0578
多韋替尼	392.43	0.4	0.0110
多韋替尼雙乳酸鹽	572.59	0.3 ^b	0.159
莫替沙尼	373.45	0.01	0.0052
帕唑帕尼	437.52	0.002	0.00002
瑞戈菲尼	482.82	0.0001	0.00002
	^a在pH 7及25℃下之計算溶解度(ACS，2020)。 ^b在pH 6.5下之實驗溶解度。

實例2

選擇六種VEGFR2抑制劑(即阿西替尼、利尼伐尼、卡博替尼、安羅替尼、奧安替尼及尼達尼布)，及在PamGene之酪胺酸(磷酸酪胺酸激酶(phosphotyrosine kinase)；PTK)陣列上該等抑制劑的基於酪胺酸PamChip之激酶活性概況以確認VEGFR2優於EGFR (ParmGene Int BV，Shertogenbosch，Netherlands)之抑制劑特異性。在來自兔子之角膜及視網膜組織溶胞產物中對選擇的VEGFR2抑制劑及特定EGFR抑制劑(作為對照)進行測試。為達到最佳，針對一個角膜及一個視網膜之未經處理之溶胞產物來測試6個不同濃度之每一抑制劑(跨100,000倍範圍)。隨後，針對角膜及視網膜之3種生物複製品測試一個選定濃度之每一抑制劑。總共10至12次PTK操作(每次操作由12個陣列組成)。結果在表2中示出:

表 2. 六種激酶抑制劑之VEGFR2及EGFR之實驗IC ₅₀(nM)值及EGFR/VEGFR2 IC50比率。

激酶抑制劑	IC50 (nM)	EGFR/VEGFR2 IC50比率	1 mM下之VEGFR2抑制(%)
VEGFR2	EGFR	角膜	視網膜
卡博替尼	12	＞100,000	＞8333	90.52	74.82
阿西替尼	14	＞100,000	＞7142	58.70	41.37
尼達尼布	9	~50,000	~5555	95.92	94.33

在重組檢定中，阿西替尼及卡博替尼為VEGFR之強效抑制劑，但不抑制EGFR。在角膜中，尼達尼布為最強效VEGFR2抑制劑，接著為卡博替尼及阿西替尼。在視網膜中，尼達尼布仍為最強效VEGFR2抑制劑且其他抑制劑展示類似的潛能。檢定之結果以圖形方式在第1圖中呈現。

最重要地，結果展示出較佳激酶抑制劑抑制VEGFR2，但對EGFR的抑制僅達到非常有限的程度，使得副作用減至最小。

實例3

表3展示含有多韋替尼遊離鹼或多韋替尼乳酸鹽之五種眼用調配物。使組分懸浮在水中且將形成之懸浮液在高壓釜中在121℃下加熱20分鐘。然後使懸浮液在22至23℃下在連續攪動下平衡7天。在平衡期間，用0.10 N鹽酸(HCl)水溶液或1.0 N氫氧化鈉(NaOH)水溶液將樣本調整至pH 6.5±0.1，且用純化水來調整體積。在達到平衡後，在經由0.45 mm膜過濾器過濾之前(即總多韋替尼濃度)及之後(即溶解之多韋替尼濃度)，藉由HPLC針對多韋替尼對懸浮液進行分析。當使用遊離鹼時，可包括在γ-環糊精聚集體中之多韋替尼之量相對較低或為0.3% (w/v)。

多韋替尼乳酸鹽之使用導致可分別溶解及懸浮之藥物的令人驚奇之顯著增加。藉由添加EDTA作為螯合劑及如泰洛沙伯之表面活性聚合物觀察到藥物溶解/懸浮之進一步顯著增強。如自表4可見，達成幾乎10倍之增加。

根據過濾之前及之後的多韋替尼濃度來計算固相分率。約60%至75%之多韋替尼在固態多韋替尼/γ-環糊精複合物微粒中，其中平均直徑(D ₅₀)小於10 μm，且25%至40%之藥物溶解為遊離藥物、藥物/γ-環糊精複合物或溶解之多韋替尼/γ-環糊精複合物奈米顆粒，其中直徑在60 nm與130 nm之間。藉由動態光散射及透射電子顯微鏡來判定粒徑。表 3. 多韋替尼滴眼劑調配物。

成分	濃度(% w/v)
DF1	DF2	DF3	DF4	DF5
多韋替尼	0.3	0.3			2.45
多韋替尼乳酸鹽			1.5	3.0	0.82 ^a
γ-環糊精	10	10	15.0	15.0	20
聚乙烯醇		0.25
羥丙基甲基纖維素	0.25	0.25
泊洛沙姆407	0.20	0.20	0.20	0.20	0.20
泰洛沙伯		0.10	0.10	0.10
依地酸二鈉(EDTA)	0.10	0.10	0.10	0.10	0.10
NaCl	0.58	0.58	0.55	0.0	0.13
0.1N HCl/ 1N NaOH	pH 6.0	pH 6.0	pH 6.0	pH 6.0	pH 6.0
純化水	添加100 ml	添加100 ml	添加100 ml	添加100 ml	添加100 ml
^a)0.82% (w/v)多韋替尼雙乳酸鹽(572.6 g/mol)對應於0.56% (w/v)多韋替尼鹼(392.4 g/mol)。

實例4 為了保持水性淚液中的溶解之激酶抑制劑之高濃度，激酶抑制劑之溶解必須在培養基稀釋後非常快速地進行。測試調配物為上文之DF3且參考調配物為包含阿克尼布之AF1 (下文之表4)。藉由在恆定攪拌速度下將調配物等分試樣直接添加至定義體積之水中來執行溶解測試。調配物/水比率(最終稀釋度)選擇係基於所使用之HPLC方法的量化極限及阿克尼布溶解度。選擇450倍之最終稀釋度。在將調配物添加至水之後的某一時間，自攪拌培養基取出約1 ml之樣本，經由0.45 μm過濾器進行過濾且轉移至HPLC小瓶以進行分析。如自第2圖可見，僅約7.5%之阿克尼布溶解，在約10分鐘時達到最大溶解，而約80%之多韋替尼在前5分鐘內溶解且在一小時內100%溶解。終末多韋替尼溶解較慢係歸因於水性溶解培養基之飽和。此外，溶解測試展示：在10分鐘後，阿克尼布之濃度降低，此可與形成之阿克尼布/γ-環糊精複合物之不穩定性及游離阿克尼布之沉澱有關。實際上，在10至30分鐘時在攪拌培養基中觀察到大的不溶性顆粒(薄片)之形成。此將藉由雷射散射資料來確認。阿克尼布之複合效用係測定為0.0004，而多韋替尼之複合效用係測定為0.011 (表1)。固態多韋替尼之快速溶解係藥物至眼中之有效局部輸送必不可少的。表 4. 阿克尼布鹽酸鹽參考滴眼劑(AF1)之組成。

組分		AF1
阿克尼布鹽酸鹽		2.0
γ-環糊精		6.0
EDTA		0.1
NaOH/HCl適量		pH 5.7
純化水適量		100 ml

實例5 表5提供含有西地尼布順丁烯二酸鹽之三種眼用調配物。西地尼布順丁烯二酸鹽之溶解度顯著大於遊離鹼且給出較高複合效用。藉由添加EDTA及如泰洛沙伯之聚合物來獲得對複合效用之進一步改良。充足之西地尼布溶解度及與γ-環糊精之複合效用係經由鹽、螯合劑及界面活性劑之組合而獲得，使得與使用遊離鹼相比，可使多得多的醫藥活性成分溶解/懸浮。如實例3中所描述地測定固相分率。約87%之西地尼布在固態西地尼布/γ-環糊精複合物微粒中，其中直徑小於10 μm，且約13%之藥物溶解為遊離藥物、藥物/γ-環糊精複合物或溶解之西地尼布/γ-環糊精複合物奈米顆粒，其中直徑小於200 nm。表 5. 西地尼布順丁烯二酸鹽滴眼劑之組成。

成分	濃度(% w/v)
CF1	CF2	CF3
西地尼布順丁烯二酸鹽	1.5	3.0	3.0
γ-環糊精	15.0	15.0	20.0
泊洛沙姆407	0.2	0.2
泰洛沙伯	0.1	0.1
聚乙二醇400			0.20
EDTA	0.1	0.1	0.05
NaCl	0.55	0.0	0.13
0.1N HCl/ 1N NaOH	pH 6.0	pH 6.0	pH 6.0
純化水	添加100 ml	添加100 ml	添加100 ml

實例6 下文之表6提供適合於本發明之以上西地尼布水性懸浮液之其他例示性眼用調配物之成分的清單及彼等成分之所要重量/體積百分比。藉由在121℃下進行熱壓處理20分鐘之前及之後測定調配物中之西地尼布濃度來評估化學穩定性。表 6. 西地尼布順丁烯二酸鹽滴眼劑之組成。

成分	濃度(% w/v)
CF4	CF5	CF6
西地尼布順丁烯二酸鹽	3.0	3.0	3.0
γ-環糊精	15.0	15.0	15.0
丙二醇	0.0	0.0	0.1
甘油	0.0	0.0	0.1
聚乙烯醇，30-70k	0.0	0.0	0.2
羥丙基甲基纖維素	0.0	0.0	0.1
泊洛沙姆407	0.0	0.0	0.1
EDTA	0.1	0.1	0.1
核黃素	0.0	0.1	0.1
L-精胺酸	0.0	0.0	0.1
NaCl	0.5	0.5	0.5
NaOH/HCl適量	pH 5	pH 5	pH 5
純化水適量至	100 ml	100 ml	100 ml
固態藥物分率(%)	69.1	72.7	72.5
降解之分率(%)	17.01	9.98	7.69

含有核黃素及聚合物之水性滴眼劑微懸浮液確實阻礙或防止加熱程序期間之藥物損失。研究調配物CF6之穩定性且結果在表7中示出。表 7. 在儲存3個月期間的CF6之藥物檢定。

月	藥物濃度(mg/ml)	藥物濃度(%)
平均值	SD	平均值	SD
5℃
0	30.56	1.54	101.87	5.12
1	30.46	1.59	101.54	5.30
2	31.24	0.24	104.12	0.81
3	30.74	1.46	102.47	4.87
25℃
0	31.18	0.57	103.91	1.86
1	30.30	0.06	100.98	0.16
2	30.25	0.19	100.81	0.59
3	30.05	0.05	100.15	0.20
40℃
0	30.84	0.40	102.81	1.35
1	29.26	0.11	97.52	0.35
2	27.02	0.16	90.06	0.53
3	26.28	0.37	87.59	1.22

實例7 在兔子中測試了上文之多韋替尼鹽調配物DF5及上文之西地尼布鹽調配物CF3，每種藥物使用8只兔子，每一時間點使用4只兔子。將一種滴眼劑(50 μl)投與至左眼，且在投與之後2小時及6小時量測藥物水準。量測角膜、水狀液、鞏膜、視網膜及玻璃樣液中之藥物濃度。使用Precellys演化珠粒均質機將所有眼組織樣本均質化，其中比率1:4之乙腈/甲醇混合物作為均質化溶劑(每毫克眼組織使用4 μL溶劑)。對均質物進行離心分離，且將上澄液進一步稀釋，之後進行樣本分析。已開發了逆相LC-MS/MS方法且其具備在代用基質中之標準範圍1-1000 pM的條件。左眼(即研究眼)中之多韋替尼及西地尼布濃度分別在表8及表9中示出。表 8. 在局部投與一滴3.0%多韋替尼/γ-環糊精滴眼劑水性微懸浮液之後2小時及6小時各種眼組織中之多韋替尼之濃度(以每公克微微莫耳計；pmol/g)。

組織	濃度(pmol/g)
2小時	6小時
角膜	134,000±41,200	91,400±50,800
水狀液	8.75±3.68	6.67±0.64
鞏膜	11,300±3,170	3,870±2,580
視網膜	79.4±14.5	63.8±16.2
玻璃樣液	4.76±1.15	3.27±3.08
角膜/視網膜比	1690	1430

表9. 在局部投與一滴3.0%西地尼布/γ-環糊精滴眼劑水性微懸浮液之後2小時及6小時各種眼組織中之西地尼布之濃度(以每公克奈克計；ng/g)。

組織	濃度(ng/g)
2小時	6小時
角膜	361,000±0000	114,000±27,500
水狀液	1,990±1880	64.9±18.3
鞏膜	25,000±8,050	4,430±1,250
視網膜	511±23.3	169±16.7
玻璃樣液	27.0±13.5	5.00±2.01
角膜/視網膜比	706	675

結果展示：角膜中之濃度比視網膜中高675倍至1690倍。當局部地應用時，角膜比視網膜更容易得到激酶抑制劑，且因此，角膜藥物濃度將始終比視網膜濃度高得多。激酶抑制劑之眼毒性主要與眼表面及眼前區段相關聯，且尤其與角膜中之EGFR相關聯，而治療效果與眼後區段相關聯，尤其與視網膜中之VEGFR2相關聯。激酶抑制劑對VEGFR2之親和力必須比對EGFR高超過2000倍且較佳高超過5000倍，以在水性滴眼劑中安全地局部投與至眼。

實例8 製備了參考水性多韋替尼(遊離鹼)及西地尼布(遊離鹼)滴眼劑微懸浮液，且如實例7所描述地在兔子中進行測試。3.0% (w/v)多韋替尼參考滴眼劑含有在純化水中之泰洛沙伯(0.3% w/v)及氯化鈉(0.8% w/v)。滴眼劑之pH為5.8，滲透性為290 mOsm/kg，且平均粒徑為6 μm。僅1.3%之多韋替尼在溶液中。3.0% (w/v)西地尼布參考滴眼劑含有在純化水中之泰洛沙伯(0.3% w/v)及氯化鈉(0.8% w/v)。該等滴眼劑之pH為5.9，滲透性為269 mOsm/kg，且平均粒徑為2 μm。僅1%之西地尼布在溶液中。將一種滴眼劑(50 μl)投與至左眼，且在投與之後2小時及6小時量測藥物水準。左眼(即研究眼)中之多韋替尼及西地尼布濃度分別在表10及表11中示出。表 10. 在局部投與一滴3.0%多韋替尼參考滴眼劑水性微懸浮液之後2小時及6小時各種眼組織中之多韋替尼之濃度(以每公克奈克計；ng/g)。

組織	濃度(ng/g)
2小時	6小時
角膜	1.474±744	1,425±1,356
水狀液	0.90±0.11	0.55±0.19
鞏膜	172±33.6	110±63.5
視網膜	22.2±5.7	32.5±8.7
玻璃樣液	1.38±0.00	0.23±0.00
角膜/視網膜比	66	44

表 11. 在局部投與一滴3.0%西地尼布參考滴眼劑水性微懸浮液之後2小時及6小時各種眼組織中之西地尼布之濃度(以每公克微微莫耳計；pmol/g)。

組織	濃度(pmol/g)
2小時	6小時
角膜	121,382±42,951	60,146±24,284
水狀液	62.0±18.3	43.0±5.7
鞏膜	7,394±1,512	3,008±2,089
視網膜	202±48.3	163±32.8
玻璃樣液	7,63±5,18	4.82±1.65
角膜/視網膜比	601	369

將使用呈鹽形式之活性醫藥成分時獲得的組織中之藥物濃度與使用遊離鹼獲得的藥物濃度相比較，顯而易見，在使用呈鹽形式之藥物時，顯著更多的藥物藉由被動擴散而遷移至膜中及靶組織(視網膜)。

實例9 表 12. 包含尼達尼布鹽之組合物

成分	% w/v
尼達尼布乙酸鹽、乳酸鹽、順丁烯二酸鹽、乙磺酸鹽或天門冬酸鹽	0.5或1.0或2.0或3.0
γ-環糊精	5至30
泊洛沙姆	0至2
泰洛沙伯	0至2
聚乙二醇	0至2
聚乙烯醇	0至2
羥丙基甲基纖維素	0至2
聚乙烯吡咯啶酮	0至5
羧甲基纖維素	0至2
溴化己二甲胺	0至2
EDTA	0至1
氯化鈉	0至0.8
氫氧化鈉/鹽酸	足以達成4至7.5之目標pH
純化水	添加100 ml

表 13. 包含卡博替尼鹽之組合物

成分	% w/v
卡博替尼乙酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽，	0.5或1.0或2.0或3.0
氯化物或天門冬酸鹽
γ-環糊精	5至30
泊洛沙姆	0至2
泰洛沙伯	0至2
聚乙二醇	0至2
聚乙烯醇	0至2
羥丙基甲基纖維素	0至2
聚乙烯吡咯啶酮	0至5
羧甲基纖維素	0至2
溴化己二甲胺	0至2
EDTA	0至1
氯化鈉	0至0.8
氫氧化鈉/鹽酸	足以達成4至7.5之目標pH
純化水	添加100 ml

表 14. 包含阿西替尼鹽之組合物

成分	% w/v
阿西替尼乙酸鹽、乳酸鹽、順丁烯二酸鹽或天門冬酸鹽	0.5或1.0或2.0或3.0
γ-環糊精	5至30
泊洛沙姆	0至2
泰洛沙伯	0至2
聚乙二醇	0至2
聚乙烯醇	0至2
羥丙基甲基纖維素	0至2
聚乙烯吡咯啶酮	0至5
羧甲基纖維素	0至2
溴化己二甲胺	0至2
EDTA	0至1
氯化鈉	0至0.8
氫氧化鈉/鹽酸	足以達成4至7.5之目標pH
純化水	添加100 ml

表 15. 阿西替尼滴眼劑之組成

成分	% w/v
阿西替尼遊離鹼	1
γ-CD	6
EDTA	0.1
NaCl	0.5
泊洛沙姆	0.5
泰洛沙伯	1.0
NaOH/順丁烯二酸	至pH 5
水	添加100%

表 16. 奧安替尼滴眼劑之組成

成分	% w/v
奧安替尼遊離酸	1
γ-CD	12
EDTA	0.1
NaCl	0.5
泊洛沙姆	0.5
NaOH/HCl	至pH 7.4
水	添加100%

實例10

在pH為2至11之水中測定奧安替尼遊離酸之相溶解度曲線。相溶解度曲線在下面給出。

實例11

藉由以下操作來判定奧安替尼在高壓釜中之穩定性：在玻璃小瓶中混合奧安替尼(遊離酸)、MQ水及NaOH，搖動該等玻璃小瓶三天，接著經由孔隙大小為0.45微米之過濾器過濾。然後將每一小瓶分成2個小瓶。對每一組之一個小瓶進行熱壓處理且藉由HPLC對所有樣本進行分析。結果在下面的表中給出。

奧安替尼在MQ水中之樣本，
樣本	pH	高壓釜之前(μg/ml)	高壓釜之後(μg/ml)	回收
1至29	7.4	60	64	107%
2至29	7.6	182	176	96%
3至29	7.8	321	316	98%

實例12 在pH 6下利用γ-環糊精之相溶解度篩選。將過量奧安替尼遊離酸添加至含有各種量γ-環糊精的水。在121℃下對形成之懸浮液進行熱壓處理15分鐘。在冷卻至室溫(22至23℃)後，打開小瓶且將少量純藥物添加至培養基以促進藥物沉澱，然後在室溫下在搖動器(KS 15 A搖動器，EB Edmund Bühler GmbH，Germany)中在連續攪動下平衡4小時。最後，以12000 rpm對懸浮液進行離心分離15分鐘(Heraeus Pico 17離心機，Thermo Fisher Scientific，Germany)，用Milli-Q水稀釋上澄液且藉由HPLC進行分析。

% (w/v) γCD	pH	奧安替尼溶解度(μg/ml)
0	6.3	4
5	6.1	14
10	6.2	17
15	6.0	12

實例12

阿西替尼之相溶解度研究。以各種濃度將阿西替尼、帕唑帕尼及瑞戈菲尼之遊離鹼與MQ水及γ-環糊精混合。根據γ-環糊精之%w/v測定溶解度。結果在下面給出。

阿西替尼遊離鹼之溶解度係在與γ-環糊精(γCD)及各種聚合物之混合物中測定。結果如下。

(其中HDMBR為溴化己二甲胺(藉由滴定為≥94%純，分子量為374 kDa)且調配物媒劑由純水中之0.1% (w/v) EDTA、0.02% (w/v)氯化苄烷銨及0.05% (w/v)氯化鈉組成)。

實例13

將阿西替尼遊離鹼與各種酸混合以測定阿西替尼遊離鹼之溶解度。將10 mg/ml阿西替尼與相等莫耳比之各種酸添加至含50 mg/ml γ-環糊精(γCD)之水。將形成之懸浮液在室溫下在搖動器(KS 15 A搖動器，EB Edmund Bühler GmbH，Germany)上在連續攪動下保持3天。最後，以12000 rpm對懸浮液進行離心分離15分鐘(Heraeus Pico 17離心機，Thermo Fisher Scientific，Germany)，用50%乙腈稀釋上澄液且藉由HPLC進行分析。結果如下。

酸	pKa	10 mg/ml阿西替尼 + 50 mg/ml γCD + 酸(1:1莫耳對阿西替尼)
pH	溶液中之阿西替尼，mg/ml	溶液中之γCD，mg/ml
乙酸	4.76	3.5	0.011	24
甲酸	3.75	2.8	0.055	21
乳酸	3.86	2.8	0.066	24
抗壞血酸	4.17	3.1	0.032	27
蘋果酸	3.51, 5.03	3.0	0.034	24
酒石酸	2.98, 4.34	2.7	0.071	22
順丁烯二酸	1.94, 4.34	2.3	0.169	25
鹽酸	-5.9	3.2	0.005	21
無	-	9.1	0.001	22

實施例：項目1. 一種水性組合物，包含以下各者之藥物/環糊精複合物： - 酪胺酸激酶抑制劑或其鹽，及 - 環糊精其中該等複合物在該水性組合物中之複合效用(CE)大於0.01，較佳大於0.1，及/或該酪胺酸激酶抑制劑或其鹽之表皮生長因子受體(EGFR)之最大半抑制濃度(IC ₅₀)與血管內皮生長因子受體(VEGFR2)之最大半抑制濃度(IC ₅₀)之比大於2000，較佳大於5000。項目2. 如項目1所述之水性組合物，其中該酪胺酸激酶抑制劑之pKa為2至8。項目3. 如項目1或2所述之水性組合物，其中該酪胺酸激酶抑制劑或其鹽係選自以下各者之群：安羅替尼、阿西替尼、卡博替尼、福瑞替尼、利尼伐尼、尼達尼布、奧安替尼、ZM323881，較佳為阿西替尼、奧安替尼及尼達尼布。項目4. 如項目1至3中任一項所述之水性組合物，其中該酪胺酸激酶抑制劑或其鹽係選自阿西替尼及尼達尼布。項目5. 如項目1至4中任一項所述之水性組合物，包含該酪胺酸激酶抑制劑之鹽，該鹽選自以下各者之群：乙酸鹽、氯酸鹽、乙磺酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、順丁烯二酸鹽、天門冬酸鹽。項目6.如項目1至4中任一項所述之水性組合物，其中該酪胺酸激酶抑制劑或其鹽為奧安替尼。項目7. 如項目6所述之水性組合物，其中該酪胺酸激酶抑制劑之鹽為鈉鹽或鉀鹽。項目8. 如項目1至7中任一項所述之水性組合物，其中該環糊精為γ-環糊精。項目9. 如項目1至8中任一項所述之水性組合物，進一步包含0.1 % (w/v)至5% (w/v)之螯合劑作為穩定劑。項目10. 如項目9所述之水性組合物，其中該螯合劑為二價或多價羧酸。項目11. 如項目10所述之水性組合物，其中該螯合劑係選自以下各者之群：乙二胺四乙酸(EDTA)、2,2',2"-氮基三乙酸(NTA)、蘋果酸、順丁烯二酸、丁二酸及檸檬酸。項目12. 如項目1至11中任一項所述之水性組合物，該水性組合物為包含該等環糊精與酪胺酸激酶抑制劑複合物之顆粒的微懸浮液，其中約5% (w/v)至約50% (w/v)之該酪胺酸激酶抑制劑在溶液中，作為溶解之遊離藥物或作為溶解之藥物/環糊精複合物，且約50% (w/v)至約95% (w/v)之該等酪胺酸激酶抑制劑在固態藥物/環糊精複合物顆粒中。項目13. 如項目1至12中任一項所述之水性組合物，該水性組合物為包含該等環糊精與酪胺酸激酶抑制劑複合物之顆粒的微懸浮液，且固相中之該等顆粒之平均大小D ₅₀為約0.1 μm至約500 μm，典型地，1 μm至50 μm。項目14. 如項目1至13中任一項所述之水性組合物，其中該組合物包含約0.25%至約40% (w/v)之環糊精，典型地，γ-環糊精。項目15. 如項目1至14中任一項所述之水性組合物，其中該組合物包含約0.1至5% (w/v)之表面活性聚合物。項目16. 如項目1至15中任一項所述之水性組合物，進一步包含選自以下各者之群的一或多種表面活性聚合物：泊洛沙姆、泰洛沙伯、聚烷二醇、羥烷基纖維素、羥烷基烷基纖維素及聚乙烯醇存在。項目17. 如項目1至16中任一項所述之水性組合物，進一步包含滲壓性調整劑。項目18.如項目17所述之水性組合物，其中該滲壓性調整劑包含氯化鈉。項目19.如項目18所述之水性組合物，其中該組合物包含0.01 % (w/v)至0.9% (w/v)之氯化鈉。項目20.如項目1至19中任一項所述之水性組合物，該水性組合物用於視網膜疾病之局部治療。項目21. 如項目1至19中任一項所述之水性組合物，該水性組合物用於治療眼之眼後段及/或眼前段之病狀。項目22. 如項目20所述之所使用之水性組合物，其中該病狀係選自以下各者之群：年齡相關之黃斑點退化(AMD)、糖尿病性視網膜病變(DR)、糖尿病性斑狀水腫(DME)、早產兒視網膜病變及病理性脈絡膜新血管形成(CNV)。項目23. 一種用於治療需要治療之受試者的眼之眼後段及/或眼前段之病狀之方法，該方法包含以將治療有效量之酪胺酸激酶抑制劑輸送至該眼之該段或該等段的量將如項目1至19中任一項所述之水性組合物局部應用於該受試者之眼表面，該水性組合物包含該酪胺酸激酶抑制劑作為有效成分。

無

現將參考某些實施例之圖式來描述本揭露之此等及其他特徵，該等實施例意欲說明本揭露，而非限制本揭露。

第1圖描繪不同類型的相溶解度圖，該圖為總藥物溶解度對存在於複合介質中之環糊精之量的曲線圖(T. Higuchi, KA Connors: Phase-solubility techniques, Adv. Anal. Chem. Instrum. 4, 117-212, 1965)。

第2圖描繪基於不同肽之角膜IC ₅₀圖。

第3圖描繪阿克尼布(AF1)及多韋替尼(DF3)調配物在水中之溶解曲線。

國內寄存資訊(請依寄存機構、日期、號碼順序註記) 無國外寄存資訊(請依寄存國家、機構、日期、號碼順序註記) 無

Claims

一種水性組合物，包含以下各者之藥物/環糊精複合物： -酪胺酸激酶抑制劑或其鹽，及 -環糊精，其中該等複合物在該水性組合物中之複合效用(CE)大於0.01，較佳大於0.1，及/或該酪胺酸激酶抑制劑或其鹽之表皮生長因子受體(EGFR)之最大半抑制濃度(IC ₅₀)與血管內皮生長因子受體(VEGFR2)之最大半抑制濃度(IC ₅₀)之比大於2000，較佳大於5000。
如請求項1所述之水性組合物，其中該酪胺酸激酶抑制劑之pKa為2至8。
如請求項1或2所述之水性組合物，其中該酪胺酸激酶抑制劑或其鹽選自以下各者之群：安羅替尼、阿西替尼、卡博替尼、福瑞替尼、利尼伐尼、尼達尼布、奧安替尼、ZM323881，較佳為阿西替尼、卡博替尼及尼達尼布。
如請求項1所述之水性組合物，其中該酪胺酸激酶抑制劑或其鹽係選自阿西替尼、奧安替尼及尼達尼布。
如請求項1所述之水性組合物，包含該酪胺酸激酶抑制劑之鹽，該鹽選自乙酸鹽、氯酸鹽、乙磺酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、順丁烯二酸鹽、天門冬酸鹽、鈉鹽、鉀鹽之群。
如請求項1所述之水性組合物，其中該環糊精為γ-環糊精。
如請求項1所述之水性組合物，進一步包含0.1 % (w/v)至5% (w/v)之螯合劑作為穩定劑。
如請求項7所述之水性組合物，其中該螯合劑係選自以下各者之群：乙二胺四乙酸(EDTA)、2,2',2"-氮基三乙酸(NTA)、蘋果酸、順丁烯二酸、丁二酸及檸檬酸。
如請求項1所述之水性組合物，該水性組合物為包含該等環糊精與酪胺酸激酶抑制劑複合物之顆粒的微懸浮液，其中約5% (w/v)至約50% (w/v)之該酪胺酸激酶抑制劑在溶液中，作為溶解之遊離藥物或作為溶解之藥物/環糊精複合物，且約50% (w/v)至約95% (w/v)之該等酪胺酸激酶抑制劑在固態藥物/環糊精複合物顆粒中。
如請求項1所述之水性組合物，該水性組合物為包含該等環糊精與酪胺酸激酶抑制劑複合物之顆粒的微懸浮液，且固相中之該等顆粒之平均大小D ₅₀為約0.1 μm至約500 μm，典型地，1 μm至50 μm。
如請求項1所述之水性組合物，其中該組合物包含約0.25%至約40% (w/v)之環糊精，典型地，γ-環糊精。
如請求項1所述之水性組合物，其中該組合物包含約0.1%至5% (w/v)之表面活性聚合物。
如請求項1所述之水性組合物，該水性組合物用於視網膜疾病之局部治療。
如請求項1所述之水性組合物，該水性組合物用於治療眼之眼後段及/或眼前段之病狀。
如請求項13所述之水性組合物之用途，其中該病狀係選自以下各者之群：年齡相關之黃斑點退化(AMD)、糖尿病性視網膜病變(DR)、糖尿病性斑狀水腫(DME)、早產兒視網膜病變及病理性脈絡膜新血管形成(CNV)。