TW202134245A

TW202134245A - 稠合三環雜環化合物及其用途

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Publication number: TW202134245A
Application number: TW109142953A
Authority: TW
Inventors: 馬克Ｄ羅森; 羅伯特Ａ二世葛來莫; 威廉Ｊ吉爾福德; 偉鈴梁
Original assignee: 美商邊際分析公司
Priority date: 2019-12-05
Filing date: 2020-12-04
Publication date: 2021-09-16
Also published as: WO2021113633A1; EP4069699A1; US20230038929A1

Abstract

本發明提供PIKfyve及/或PI3激酶之抑制劑之化合物，並因此適用於治療可藉由抑制PIKfyve而治療之神經性疾病。本發明亦提供含有此等化合物之醫藥組合物，及使用此等化合物之治療方法。

Description

稠合三環雜環化合物及其用途

本發明提供化合物，其等係磷酸肌醇激酶抑制劑，特定言之FYVE型含指狀物之磷酸肌醇激酶(「PIKfyve」)抑制劑，並因此適用於治療中樞神經系統疾病。本發明亦提供含有此等化合物之醫藥組合物及製備此等化合物之方法。

磷酸肌醇激酶(PIK)催化磷脂酸肌醇(該磷脂酸肌醇係真核細胞膜之組分)及稱為磷酸肌醇之相關磷脂質之磷酸化。該等磷酸肌醇參與調節多種細胞過程，包括細胞增殖、存活、細胞支架組織、囊泡運輸、葡萄糖轉運及血小板功能。Fruman等人，「Phosphoinositide Kinases」，Ann. Review. Biochem. 1998, 67, 481-507。磷脂酸肌醇之磷酸化衍生物藉由將蛋白複合物募集至細胞膜及胞內體膜來調節細胞支架功能、膜運輸及受體傳訊。

FYVE型含指狀物之磷酸肌醇激酶(PIKfyve；亦稱為磷脂酸肌醇-3-磷酸酯5-激酶III型或PIPKIII)係具有脂質及蛋白激酶活性之經普遍表現之PIK。在其作為脂質激酶之能力中，該酶使胞內體磷脂酸肌醇及磷脂酸肌醇-3-磷酸酯(PI3P)中之D-5位置磷酸化以產生相應之5-磷酸酯磷脂類似物。Shisheva等人，Cell Biol. Int. 2008, 32(6), 591。在細胞膜中發現PI3P，及該PI3P在蛋白質運輸、蛋白質降解及自噬中發揮作用。Nascimbeni等人，FEBS J. 2017, 284, 1267-1278。PIKfyve調節內膜穩態並在自早期胞內體生體合成胞內體載體囊泡中發揮作用。在表現PIKfyve顯性陰性或siRNA之細胞中觀測到擴大之胞內體/溶酶體結構。Ikonomov等人，J. Biol. Chem. 2001, 276(28), 26141-26147；Rutherford等人，J. Cell Sci. 2006, 119, 3944-3957。PIKfyve活性之抑制增加PI3P含量、刺激自噬並改善運動神經元健康。PIKfyve產生之磷酸化肌苷位於各種細胞膜及胞器中，其與內溶酶體轉運、內膜穩態及自早期胞內體生體合成胞內體載體囊泡(ECV)/多胞體(MVB)之各種PIKfyve功能一致。另外，PIKfyve係內吞-空泡途徑及核遷移必需的。因此，PIKfyve有助於維持胞內體及溶酶體之適當形態。

在哺乳動物細胞中，PI3P含量係由PIKfyve及磷脂酸肌醇3,5-雙磷酸酯5-磷酸酶(FIG4)之交互活性調節。Zolov等人，「In vivo, PIKfyve generates PI(3,5)P2, which serves as both a signaling lipid and the major precursor for PI5P」，Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2012, 109(43), 17472-17477。通常，FIG4位於複合物中內溶酶體囊泡之細胞質表面上。PIKfyve之抑制將模擬FIG4之過表現，藉此增加PI3P之含量、刺激自噬並改善運動神經元健康。多種疾病係與FIG4缺陷(諸如有害之FIG4突變或FIG4功能減弱)相關，並因此適合作為用PIKfyve抑制劑治療之標靶疾病，包括肌肉萎縮性脊髓側索硬化症(ALS)、原發性側索硬化症(PLS)、夏馬杜三氏病(Charcot-Marie-Tooth) (包括4J型(CMT4J))及尤尼斯-瓦隆症候群(Yunis-Varon syndrome)。

與FIG4缺陷相關聯之例示性疾病係肌肉萎縮性脊髓側索硬化症(ALS)、原發性側索硬化症(PLS)、夏馬杜三氏病(包括4J型(CMT4J))、尤尼斯-瓦隆症候群、多小腦迴畸型(包括伴有癲癇之多小腦迴畸型)、顳枕部多小腦迴畸型、匹克症(Pick’s disease)、帕金森氏症(Parkinson’s disease)、路易氏體帕金森氏症(Parkinson’s disease with Lewy bodies)、路易氏體失智症、路易氏體疾病、額顳葉型失智症、聚麩醯胺及核內包涵體之神經元核包涵物之疾病、馬理斯科及平野氏體之疾病(disease of Marinesco and Hirano bodies)、阿茲海默症(Alzheimer’s disease)、神經系統退化症、海綿狀神經系統退化症、自噬、周邊神經病變、腦白質病、運動神經病變、感覺神經病變，Bharadwaj等人，Hum. Mol. Genet. 2016, 25(4), 682-692。

PIKfyve抑制劑適用於一定範圍之神經疾病，諸如tau蛋白病(tauopathies) (包括(但不限於)阿茲海默症、進行性核上神經麻痺症、皮質基底症候群、額顳葉型失智症及慢性創傷性腦病)、創傷性腦損傷(TBI)、大腦局部缺血、ALS、額顳葉型失智症(FTD)、格林-巴雷症候群(Guillain-Barré Syndrome)、慢性發炎脫髓鞘性多發神經病變、多發性硬化症、CMT、溶酶體貯積症(包括(但不限於)法布瑞氏症(Fabry’s disorder)、高雪氏症(Gaucher’s disorder)、尼曼匹克症C型(Niemann Pick C disease)、戴-薩克斯病(Tay-Sachs disease)及IV型黏脂質症)，及數種類型之神經病。使用PIKfyve抑制劑干預之其他治療標靶包括杭丁頓氏舞蹈症(Huntington’s disease)及精神異常(諸如ADHD、思覺失調症、情感疾患，包括(但不限於)重度憂鬱症、I型躁鬱症及II型躁鬱症)。Gardiner等人，「Prevalence of carriers of intermediate and pathological polyglutamine disease-associated alleles among large population-based cohorts」，JAMA Neurol. 2019, 76(6), 650-656；PCT公開案第WO2016/210372號；美國公開案第US2018/0161335號。

在一些態樣中，本文描述之化合物抑制PI3K，包括PI3K之各種同功型，諸如PI3Kα、β、δ及/或γ。PI3K (亦稱為磷酸肌醇3-激酶或磷脂酸肌醇3-激酶)係涉及細胞功能(諸如細胞生長、增殖、分化、運動、存活及胞內運輸)之酶之家族。PI3K抑制劑適合作為一定範圍之疾病狀態(包括，例如，中樞神經系統疾病)中之潛在治療劑。

在第一態樣中，本發明係關於式(I)化合物：

(I) 其中： R¹ 係H、C_1-4 烷基或-NR^a R^b ；其中R^a 係H或C_1-4 烷基；及 R^b 係-L-R^c ；其中L係鍵、-C(O)-、-C(O)O-或-C_1-4 伸烷基-；及 R^c 係苯基、單環環烷基、單環雜環烷基或單環雜芳基，其中各苯基、環烷基、雜環烷基或雜芳基視需要經一、二或三個R^d 取代基取代；其中各R^d 取代基獨立地係C_1-4 烷基、C_1-4 烯基、C_1-4 炔基、-O-C_1-4 烷基、鹵基、氰基、硝基、疊氮基、鹵基-C_1-4 烷基、-O-C_1-4 -鹵烷基、-NR^g R^h 、-NR^g C(=O)R^h 、-NR^g C(=O)NR^g R^h 、-NR^g C(=O)OR^h 、=NOR^g 、-NR^g S(=O)_1-2 R^h 、-NR^g S(=O)_1-2 NR^g R^h 、=NSO₂ R^g 、-C(=O)R^g 、-C(=O)OR^g 、-OC(=O)OR^g 、-OC(=O)R^g 、-C(=O)NR^g R^h 、-OC(=O)NR^g R^h 、-OR^g 、-SR^g 、-S(=O)R^g 、-S(=O)₂ R^g 、-OS(=O)_1-2 R^g 、-S(=O)_1-2 OR^g 、-S(=O)_1-2 NR^g R^h 、苯基、-C_1-4 烷基-苯基、單環環烷基、-C_1-4 烷基-環烷基、單環雜環烷基或單環雜芳基；其中R^d 之各苯基、單環環烷基、單環雜環烷基或單環雜芳基視需要經一、二或三個取代基R^e 取代；其中各R^e 取代基獨立地係C_1-4 烷基、C_1-4 烯基、C_1-4 炔基、鹵基、氰基、硝基、疊氮基、-OH、鹵基-C_1-4 烷基、-O-C_1-4 烷基或-O-C_1-4 -鹵烷基； R^g 及R^h 各獨立地係H或C_1-4 烷基； R² 及R³ 連同其等結合之氮一起形成單環雜環烷基，視需要經一、二或三個R^j 取代基取代；其中各R^j 取代基獨立地係C_1-4 烷基、-OH、-NR^k R^l 、鹵基、鹵基-C_1-4 烷基、-O-C_1-4 烷基或-O-C_1-4 -鹵烷基；其中R^k 及R^l 各獨立地係H或C_1-4 烷基；及 R⁴ 及R⁵ 各獨立地係H、C_1-4 烷基、鹵基、-OH或-OC_1-4 烷基，其中各烷基視需要經-NR^m Rⁿ 取代；其中R^m 及Rⁿ 各獨立地係H或C_1-4 烷基，或R^m 及Rⁿ 連同其等結合之氮一起形成單環雜環烷基，視需要經一或兩個R^o 取代基取代；其中各R^o 取代基獨立地係C_1-4 烷基、-OH、-OC_1-4 烷基、鹵基、氰基或-NR^p R^q ；其中R^p 及R^q 各獨立地係H或C_1-4 烷基；或其醫藥上可接受之鹽。

在第二態樣中，本發明係關於一種醫藥組合物，其包含式(I)化合物(或本文描述之其實施例中之任一者)，或其醫藥上可接受之鹽，及醫藥上可接受之賦形劑。

在第三態樣中，本發明係關於抑制有需要個體中之PIKfyve及/或PI3激酶之方法，其包括向該個體投與有效量之式(I)化合物(或本文描述之其實施例中之任一者)，或其醫藥上可接受之鹽，或包含式(I)化合物(或本文描述之其實施例中之任一者)，或其醫藥上可接受之鹽之醫藥組合物。

在第四態樣中，本發明係關於一種治療可藉由抑制有需要個體中之PIKfyve及/或PI3激酶活性治療之疾病之方法，其包括向有需要個體投與式(I)化合物(或本文描述之其實施例中之任一者)，或其醫藥上可接受之鹽，或包含式(I)化合物(或本文描述之其實施例中之任一者)，或其醫藥上可接受之鹽之醫藥組合物。

在第四態樣中，本發明係關於式(I)化合物(及本文描述之其任何實施例)，或其醫藥上可接受之鹽，其用作藥劑。在一項實施例中，式(I)化合物及/或其醫藥上可接受之鹽之用途係用於治療可藉由抑制PIKfyve及/或PI3激酶治療或與PIKfyve及/或PI3激酶活性相關聯之疾病。

在第五態樣中係式(I)化合物(或本文描述之其實施例中之任一者)，或其醫藥上可接受之鹽之用途，其用於製造在PIKfyve或PI3K有助於疾病之病理學及/或症狀之哺乳動物中治療該疾病之藥劑。

相關申請案之交叉參考

本申請案主張2019年12月5日申請之美國臨時申請案第62/944,222號，及2020年6月8日申請之美國臨時申請案第63/036,228號之優先權，其等中之各者之揭示內容係以全文引用之方式併入本文中。

除非另有說明，否則本說明書及申請專利範圍中使用之下列術語係出於本發明之目的定義且具有下列含義。

「烷基」意謂一至六個碳原子之直鏈飽和單價烴基或三至六個碳原子之分支鏈飽和單價烴基，例如，甲基、乙基、丙基、2-丙基、丁基(包括所有異構形式)、戊基(包括所有異構形式)，及類似物。

除非另有說明，否則「伸烷基」意謂一至六個碳原子之直鏈飽和二價烴基或三至六個碳原子之分支鏈飽和二價烴基，例如，亞甲基、伸乙基、伸丙基、1-甲基伸丙基、2-甲基伸丙基、伸丁基、伸戊基，及類似物。

「烷基磺醯基」意謂-SO₂ R基團，其中R係如上文定義之烷基，例如，甲基磺醯基、乙基磺醯基，及類似物。

「胺基」意謂-NH₂ 。

「烷氧基」意謂-OR基團，其中R係如上文定義之烷基，例如，甲氧基、乙氧基、丙氧基或2-丙氧基、正、異或第三丁氧基，及類似物。

「烷氧基烷基」意謂經如上文定義之烷氧基(在一項實施例中，一或兩個烷氧基)取代之一至六個碳原子之直鏈單價烴基或三至六個碳之分支鏈單價烴基，例如，2-甲氧基乙基、1-、2-或3-甲氧基丙基、2-乙氧基乙基，及類似物。

「烷氧基羰基」意謂-C(O)OR基團，其中R係如上文定義之烷基，例如，甲氧基羰基、乙氧基羰基，及類似物。

「醯基」意謂-COR基團，其中R係烷基、鹵烷基或環烷基，例如，乙醯基、丙醯基、環丙基羰基，及類似物。當R係烷基時，該基團在本文中亦稱為烷基羰基。

「環烷基」意謂三至十個碳原子之環形飽和單價烴基，其中一或兩個碳原子可經側氧基置換，例如，環丙基、環丁基、環戊基或環己基，及類似物。

「羧基」意謂-COOH。

「鹵基」意謂氟、氯、溴或碘；在一項實施例中，氟或氯。

「鹵烷基」意謂經一或一至五個鹵素原子(在一項實施例中，氟或氯)取代之如上文定義之烷基，包括彼等經不同之鹵素取代者，例如，-CH₂ Cl、-CF₃ 、-CHF₂ 、-CH₂ CF₃ 、-CF₂ CF₃ 、-CF(CH₃ )₂ ，及類似物。當烷基僅經氟取代時，其在本發明中可稱為氟烷基。

「鹵基烷氧基」意謂-OR基團，其中R係如上文定義之鹵烷基，例如，-OCF₃ 、-OCHF₂ ，及類似物。當R係其中烷基僅經氟取代之鹵烷基時，其在本發明中可稱為氟烷氧基。

「羥基烷基」意謂經一或兩個羥基取代之一至六個碳原子之直鏈單價烴基或三至六個碳之分支鏈單價烴基，條件係若存在兩個羥基，則其等可不在相同碳原子上。代表性實例包括(但不限於)羥甲基、2-羥基乙基、2-羥基丙基、3-羥基丙基、1-(羥甲基)-2-甲基丙基、2-羥基丁基、3-羥基丁基、4-羥基丁基、2,3-二羥基丙基、1-(羥甲基)-2-羥基乙基、2,3-二羥基丁基、3,4-二羥基丁基及2-(羥甲基)-3-羥基丙基。其他實例包括(但不限於) 2-羥基乙基、2,3-二羥基丙基及1-(羥甲基)-2-羥基乙基。

「雜環基」意謂4至10個環原子之飽和或不飽和單價單環或雙環基團(稠合雙環或橋接雙環)，其中一或兩個環原子係選自N、O及S(O)_n 之雜原子，其中n係0至2之整數，剩餘環原子為C。另外，雜環基環中之一或兩個環碳原子可視需要經-CO-基團置換。更具體言之，術語雜環基包括(但不限於)氧雜環丁烷基、吡咯啶基、哌啶基、高哌啶基、2-側氧基吡咯啶基、2-側氧基哌啶基、嗎啉基、哌嗪基、四氫哌喃基、硫嗎啉基、六氫吡咯并[1,2-a]吡嗪-6(2H)-酮-基、四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡嗪-3(5H)-酮-基、5,6,7,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-基、3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-基，及類似物。當雜環基環不飽和時，其可含有一或兩個環雙鍵，條件係該環不為芳族的。

^「雜環基烷基」意謂-(伸烷基)-R基團，其中R係如上文定義之雜環基環，例如，四氫呋喃基甲基、哌嗪基甲基、嗎啉基乙基，及類似物。

「雜環胺基」意謂4至8個環原子之飽和或不飽和單價單環基團，其中一或兩個環原子係選自N、O或S(O)_n 之雜原子，其中n係0至2之整數，剩餘環原子為C，條件係該等環原子中之至少一者係N。另外，雜環胺基環中之一或兩個環碳原子可視需要經-CO-基團置換。當雜環胺基環不飽和時，其可含有一或兩個環雙鍵，條件係該環不為芳族的。

「雜環胺基烷基」意謂-(伸烷基)-R基團，其中R係如上文描述之雜環胺基。

「雜芳基」意謂5至10個環原子之單價單環或雙環芳族基團，其中一或多個(在一項實施例中，一、二或三個)環原子係選自N、O及S之雜原子，剩餘環原子為碳。代表性實例包括(但不限於)吡咯基、噻吩基、噻唑基、咪唑基、呋喃基、吲哚基、異吲哚基、噁唑基、異噁唑基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹啉基、異喹啉基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基、三唑基、四唑基，及類似物。

如本文使用之「哺乳動物」意謂家養動物(諸如狗、貓及馬)及人類。在一項實施例中，哺乳動物係人類。

術語「鹽」或「醫藥上可接受之鹽」係指來源於此項技術中熟知的各種有機及無機相對離子之鹽。醫藥上可接受之酸加成鹽可用無機酸及有機酸形成。可形成鹽之無機酸包括(例如)鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸，及類似物。可形成鹽之有機酸包括(例如)乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、馬來酸、丙二酸、琥珀酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、桂皮酸、苦杏仁酸、甲磺酸、乙磺酸、對甲苯磺酸、水楊酸，及類似物。醫藥上可接受之鹼加成鹽可用無機及有機鹼形成。可形成鹽之無機鹼包括(例如)鈉、鉀、鋰、銨、鈣、鎂、鐵、鋅、銅、錳、鋁，及類似物。可形成鹽之有機鹼包括(例如)一級、二級、三級胺、經取代之胺(包括天然生成之經取代之胺)、環胺、鹼性離子交換樹脂，及類似物，特別諸如異丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺及乙醇胺。在一些實施例中，醫藥上可接受之鹼加成鹽係選自銨、鉀、鈉、鈣及鎂鹽。應瞭解醫藥上可接受之鹽無毒。合適之醫藥上可接受之鹽之另外資訊可參見Remington’s Pharmaceutical Sciences，第17版，Mack出版公司，Easton, PA, 1985，其係以引用之方式併入本文中。

「側氧基」意謂=(O)基團及「羰基」意謂＞C(O)基團。

「可選」或「視需要」意謂後續描述之事件或狀況可能但不一定發生，且該描述包括其中該事件或狀況發生之情況及其中該事件或狀況不發生之情況。例如，「視需要經烷基取代之雜環基」意謂該烷基可能存在但不一定存在，且該描述包括其中該雜環基經烷基取代之情況及其中該雜環基未經烷基取代之情況。

如本文使用之片語「非經腸投與」及「非經腸地投與」意謂除腸內及局部投與外之投與模式，通常藉由注射，且包括(但不限於)靜脈內、肌內、動脈內、鞘內、囊內、眶內、心內、皮內、腹膜內、經氣管、皮下、表皮下、關節內、囊下、蛛網膜下、椎管內及胸骨內注射及輸注。

本文採用片語「醫藥上可接受」以係指在合理之醫學判斷範圍內，彼等適用於與人類及動物之組織接觸但無過度毒性、刺激、過敏反應或其他問題或併發症，與合理之收益/風險比相稱之化合物、材料、組合物及/或劑型。

如本文使用之片語「醫藥上可接受之賦形劑」或「醫藥上可接受之載劑」意謂醫藥上可接受之材料、組合物或媒介物，諸如液體或固體填充劑、稀釋劑、賦形劑、溶劑或囊封材料。在可與調配物之其他成分相容且對病患無害之意義上，各載劑必須為「可接受」的。可用作醫藥上可接受之載劑之一些實例包括：(1)糖類，諸如乳糖、葡萄糖及蔗糖；(2)澱粉，諸如玉米澱粉及土豆澱粉；(3)纖維素及其衍生物，諸如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素及乙酸纖維素；(4)粉狀黃蓍膠；(5)麥芽；(6)明膠；(7)滑石；(8)賦形劑，諸如可可脂及栓劑蠟；(9)油，諸如花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油及豆油；(10)二醇，諸如丙二醇；(11)多元醇，諸如甘油、山梨醇、甘露醇及聚乙二醇；(12)酯類，諸如油酸乙酯及月桂酸乙酯；(13)瓊脂；(14)緩衝劑，諸如氫氧化鎂及氫氧化鋁；(15)海藻酸；(16)無熱原水；(17)等滲鹽水；(18)林格氏溶液；(19)乙醇；(20)磷酸酯緩衝溶液；及(21)醫藥調配物中採用之其他無毒可相容物質。

疾病之「治療(Treating或treatment)」包括： (1)預防該疾病，例如，使該疾病之臨床症狀在可曝露於或易患該疾病但仍未經歷或顯示該疾病之症狀之哺乳動物中不發展； (2)抑制該疾病，例如，阻止或減少該疾病或其臨床症狀之發展；或 (3)緩解該疾病，例如，使該疾病或其臨床症狀消退。

「治療有效量」意謂當向哺乳動物投與以治療疾病時，足以治療該疾病之式(I)化合物(或本文描述之其實施例中之任一者)之量。該「治療有效量」將取決於化合物、疾病及其嚴重性及待治療之哺乳動物之年齡、體重等而變化。

在一些情況下，本文描述之化合物可以非鏡像異構物、鏡像異構物或其他立體異構形式存在。除非明確指示特定立體化學或異構形式，否則所有對掌性、非鏡像異構、外消旋形式(呈個別形式及其混合物)係於本發明之範圍內。含有不對稱取代之原子之本發明之化合物可以光學活性、光學富集、光學純或外消旋形式分離。此項技術中熟知製備光學活性形式之方法，諸如藉由離析材料。立體異構物之分離可藉由層析術或藉由形成非鏡像異構物並藉由重結晶或層析術或其任何組合分離進行。(Jean Jacques、Andre Collet、Samuel H. Wilen，「Enantiomers, Racemates and Resolutions」, John Wiley and Sons, Inc., 1981，以引用之方式併入本文中)。立體異構物亦可藉由立體選擇性合成獲得。

某些式(I)化合物(或本文描述之其實施例中之任一者)及/或其醫藥上可接受之鹽可以互變異構物及/或幾何異構物存在。所有可能之互變異構物及順式與反式異構物(呈個別形式及其混合物)係於本發明之範圍內。例如，如下文顯示之吡唑互變異構物係等同結構。一種此結構之繪示意欲包含兩種結構。

另外，如本文使用，儘管僅列舉一些實例，但術語烷基包括該烷基之所有可能之異構形式。此外，當環形基團(諸如雜芳基、雜環基)經取代時，其等包括所有位置異構物。

式(I)化合物之醫藥上可接受之鹽(或本文描述之其實施例中之任一者)係於本發明之範圍內。另外，本文描述之化合物包括該等化合物或其醫藥上可接受之鹽之水合物及溶劑合物。

本發明亦包括式(I)化合物(或本文描述之其實施例中之任一者)及/或其醫藥上可接受之鹽之前藥。術語前藥意欲表示共價結合之載劑，當向哺乳動物個體投與該前藥時，其等可釋放式(I)之活性成分(或本文描述之其實施例中之任一者)。該活性成分之釋放活體內發生。前藥可藉由熟習此項技術者已知的技術製備。此等技術一般修飾給定化合物中之適當官能基。然而，此等經修飾之官能基活體內或藉由例行性操作再生原始官能基。式(I)化合物(或本文描述之其實施例中之任一者)之前藥包括其中羥基、胺基、羧基或相似基團係經修飾之化合物。前藥之實例包括(但不限於)酯類(例如，式(I)化合物中羥基或胺基官能基之乙酸酯、甲酸酯及苯甲酸酯衍生物)、胺甲酸酯(例如，N,N-二甲胺基羰基))、醯胺類(例如，三氟乙醯基胺基、乙醯基胺基，及類似物)，及類似物。式(I)化合物(或本文描述之其實施例中之任一者)及/或其醫藥上可接受之鹽之前藥亦於本發明之範圍內。

本發明亦包括式(I)化合物(或本文描述之其實施例中之任一者)及/或其醫藥上可接受之鹽之多型形式(非晶型及結晶)及氘化形式。

在一些實施例中，本文揭示之化合物係以不同富集之同位素形式(例如，以² H、³ H、¹¹ C、¹³ C及/或¹⁴ C之含量富集)使用。在一項特定實施例中，該化合物係在至少一個位置中經氘化。此等氘化形式可藉由美國專利第5,846,514及6,334,997號中描述之程序製得。如美國專利第5,846,514及6,334,997號中描述，氘化可改善代謝穩定性及或效用，因此增加藥物作用之持續時間。

除非另有說明，否則本文繪示之結構意欲包括僅在一或多個同位素富集之原子之存在下不同之化合物。例如，除由氘或氚置換氫或由¹³ C-或¹⁴ C-富集之碳置換碳外之具有本發明結構之化合物亦於本發明之範圍內。

本發明之化合物視需要於構成此等化合物之一或多個原子含有非自然比例之原子同位素。例如，該等化合物可經同位素諸如例如氘(² H)、氚(³ H)、碘-125 (¹²⁵ I)或碳-14 (¹⁴ C)標記。使用² H、¹¹ C、¹³ C、¹⁴ C、¹⁵ C、¹² N、¹³ N、¹⁵ N、¹⁶ N、¹⁶ O、¹⁷ O、¹⁴ F、¹⁵ F、¹⁶ F、¹⁷ F、¹⁸ F、³³ S、³⁴ S、³⁵ S、³⁶ S、³⁵ Cl、³⁷ Cl、⁷⁹ Br、⁸¹ Br及¹²⁵ I之同位素取代全部經審慎考慮。本發明之化合物之所有同位素變化，無論是否放射性，均包含於本發明之範圍內。

在某些實施例中，本文揭示之化合物之¹ H原子中之一些或所有已經² H原子置換。含氘化合物之合成方法係此項技術中已知且包括(僅藉助於非限制性實例)下列合成方法。

氘取代之化合物係使用諸如描述於以下中之各種方法合成：Dean, Dennis C.編；Recent Advances in the Synthesis and Applications of Radiolabeled Compounds for Drug Discovery and Development。[In：Curr., Pharm. Des., 2000；6(10)] 2000，第110頁；George W.；Varma, Rajender S. The Synthesis of Radiolabeled Compounds via Organometallic Intermediates, Tetrahedron, 1989, 45(21), 6601-21；及Evans, E. Anthony. Synthesis of radiolabeled compounds, J. Radioanal. Chem., 1981, 64(1-2), 9-32。

氘化起始材料容易獲得且經受本文描述之合成方法以提供含氘化合物之合成。大量含氘試劑及建構組元可自化學品供應商(諸如Aldrich Chemical Co)購買獲得。

在一項態樣中係式(I)化合物：

在一些實施例中，R¹ 係-NR^a R^b 。在一些實施例中，R¹ 係H。在一些實施例中，R¹ 係C_1-4 烷基。在一些實施例中，R¹ 係甲基。

在一些實施例中，R^a 係H。在一些實施例中，R^a 係C_1-4 烷基。在一些實施例中，R^a 係甲基。

在一些實施例中，L係鍵。在一些實施例中，L係-C(O)-或-C(O)O-。在一些實施例中，L係-C_1-4 伸烷基-。在一些實施例中，L係亞甲基或伸乙基。

在一些實施例中，R^c 係視需要經取代之苯基。在一些實施例中，R^c 係視需要經取代之單環環烷基。在一些實施例中，R^c 係視需要經取代之環丙基、環丁基、環戊基或環己基。在一些實施例中，R^c 係視需要經取代之環丙基。在一些實施例中，R^c 係視需要經取代之單環雜環烷基。在一些實施例中，R^c 係視需要經取代之吡咯啶基、四氫呋喃基、哌啶基、嗎啉基或哌嗪基。在一些實施例中，R^c 係視需要經取代之單環雜芳基。在一些實施例中，R^c 係視需要經取代之吡咯、咪唑、吡唑、三唑、四唑、呋喃、噁唑、異噁唑、噻唑、異噻唑、吡啶、嘧啶、吡嗪或噠嗪。在一些實施例中，R^c 係視需要經取代之吡唑、咪唑、吡啶或嘧啶。在一些實施例中，R^c 係視需要經取代之吡唑。在一些實施例中，各R^c 視需要經一或兩個R^d 取代基取代。

在一些實施例中，各R^d 取代基獨立地係C_1-4 烷基、C_1-4 烯基、C_1-4 炔基、-O-C_1-4 烷基、鹵基、氰基、硝基、疊氮基、鹵基-C_1-4 烷基、-O-C_1-4 -鹵烷基、-NR^g R^h 、-NR^g C(=O)R^h 、-NR^g C(=O)NR^g R^h 、-NR^g C(=O)OR^h 、=NOR^g 、-NR^g S(=O)_1-2 R^h 、-NR^g S(=O)_1-2 NR^g R^h 、=NSO₂ R^g 、-C(=O)R^g 、-C(=O)OR^g 、-OC(=O)OR^g 、-OC(=O)R^g 、-C(=O)NR^g R^h 、-OC(=O)NR^g R^h 、-OR^g 、-SR^g 、-S(=O)R^g 、-S(=O)₂ R^g 、-OS(=O)_1-2 R^g 、-S(=O)_1-2 OR^g 、-S(=O)_1-2 NR^g R^h 、苯基、-C_1-4 烷基-苯基、單環環烷基、-C_1-4 烷基-環烷基、單環雜環烷基或單環雜芳基，其中R^d 之苯基、單環環烷基、單環雜環烷基及單環雜芳基各視需要經一或兩個取代基R^e 取代。在一些實施例中，各R^d 取代基獨立地係C_1-4 烷基、鹵基-C_1-4 烷基、苯基、-C_1-4 烷基-苯基、吡啶基、噻吩基、環烷基或-C_1-4 烷基-環烷基，其中該苯基、吡啶基及噻吩基各視需要經一或兩個取代基R^e 取代。在一些實施例中，各R^d 取代基獨立地係甲基、乙基、異丙基、-CF₃ 、-OCH₃ 、-OCF₃ 、苯基、吡啶基、噻吩基、苯甲基、環丙基、環丁基、環戊基、環丙基甲基、環丁基甲基或環戊基甲基，其中R^d 之苯基、環烷基及雜芳基各視需要經一或兩個取代基R^e 取代。

在一些實施例中，各R^e 取代基獨立地係C_1-4 烷基、鹵基、鹵基-C_1-4 烷基、-O-C_1-4 烷基或-O-C_1-4 -鹵烷基。在一些實施例中，各R^e 取代基獨立地係甲基、-CF₃ 、氟、氯、-OCH₃ 或-OCF₃ 。在一些實施例中，各R^d 取代基獨立地係甲基、乙基、異丙基、-CF₃ 、苯基、吡啶基、噻吩基、苯甲基、環丙基、環丁基、環戊基、環丙基甲基、環丁基甲基或環戊基甲基，其中各R^e 獨立地係甲基、-CF₃ 、氟、氯、-OCH₃ 或-OCF₃ 。

在一些實施例中，R^g 及R^h 各獨立地係H或甲基。

在一些實施例中，R² 及R³ 連同其等結合之氮一起形成吡咯啶、哌啶、哌嗪、嗎啉、硫嗎啉或硫嗎啉-1,1-二氧化物，各視需要經一、二或三個R^j 取代基取代。在一些實施例中，R² 及R³ 連同其等結合之氮一起形成嗎啉，視需要經一或兩個R^j 取代基取代。

在一些實施例中，各R^j 取代基獨立地係甲基、羥基、-OCH₃ 、鹵基、-CF₃ 或-OCF₃ 。

在一些實施例中，R^k 及R^l 各獨立地係H或甲基。

在一些實施例中，R⁴ 及R⁵ 各為H。在一些實施例中，R⁴ 及R⁵ 中之一者係H及另一者係C_1-4 烷基、鹵基、-OH或-OC_1-4 烷基，其中各烷基視需要經-NR^m Rⁿ 取代。在一些實施例中，R⁴ 及R⁵ 中之一者係H及另一者係-OH、鹵基或-OCH₃ 。在一些實施例中，R⁴ 及R⁵ 中之一者係H及另一者係經-NR^m Rⁿ 取代之C_2-3 烷基。

在一些實施例中，R^m 及Rⁿ 各獨立地係H或C_1-4 烷基。在一些實施例中，R^m 及Rⁿ 各為甲基。在一些實施例中，R^m 及Rⁿ 連同其等結合之氮一起形成單環雜環烷基，視需要經一或兩個R^o 取代基取代。在一些實施例中，R^m 及Rⁿ 連同其等結合之氮一起形成吡咯啶、哌啶、哌嗪、嗎啉、硫嗎啉或硫嗎啉-1,1-二氧化物，各視需要經一或兩個R^o 取代基取代。在一些實施例中，R^m 及Rⁿ 連同其等結合之氮一起形成吡咯啶、哌啶、哌嗪或嗎啉，各視需要經一或兩個R^o 取代基取代。

在一些實施例中，各R^o 取代基係C_1-4 烷基。在一些實施例中，R^p 及R^q 各獨立地係H或甲基。

在一些實施例中，式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽係式(II)化合物：

(II) 其中 R^b2 係吡唑、苯基、吡啶基或嘧啶基，各視需要經一或兩個選自C_1-4 烷基、苯基及吡啶基之取代基取代，其中該苯基及吡啶基取代基視需要經甲基、-CF₃ 、氟、氯、-OCH₃ 、-OCF₃ 或苯基取代； R⁵² 係H或-C_2-3 -伸烷基-NR^m2 Rⁿ² ；其中R^m2 及Rⁿ² 各獨立地係H或甲基，或R^m2 及Rⁿ² 連同其等結合之氮一起形成吡咯啶、哌啶、哌嗪或嗎啉，各視需要經甲基取代；或其醫藥上可接受之鹽。

在一些實施例中，R^b2 係吡唑，視需要經甲基、-CF₃ 、氟、氯、-OCH₃ 、-OCF₃ 或苯基取代。

在一些實施例中，式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽係式(III)化合物：

(III) 其中 R^d3 係(a)甲基、乙基、異丙基、-CF₃ 、-OCH₃ 、或-OCF₃ ，或(b)苯基、苯甲基、環丙基、環丁基、環戊基、環丙基甲基、環丁基甲基、環戊基甲基、噻吩基或吡啶基，其中該苯基、苯甲基，各視需要經一或兩個獨立地選自甲基、氟、氯、-CF₃ 、-OCH₃ 及-OCF₃ 之取代基取代；或其醫藥上可接受之鹽。

在一些實施例中，化合物係選自彼等表1中者之化合物：表1：

化合物#	化學名稱	結構
1	N-(3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
2	N-苯甲基-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺
3	N-(4-嗎啉基苯并呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)苯甲醯胺
4	7-(2-(二甲胺基)乙氧基)-4-嗎啉基-N-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
5	4-嗎啉基-2-((3-苯基-1H-吡唑-5-基)胺基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-7-醇鹽酸鹽
6	4-嗎啉基-N-(3-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
7	N-(3-(4-甲基吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
8	N-(3-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺
9	4-嗎啉基-N-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺
10	4-嗎啉基-N-(3-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺
11	N-(1,5-二甲基-1H -吡唑-3-基)-N-甲基-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺
12	N-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺
13	8-(2-(二甲胺基)乙基)-4-嗎啉基-N-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺
14	4-嗎啉基-N-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)-8-(2-(吡咯啶-1-基)乙基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺
15	N-(3-(2-氟苯基)-1H-吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
16	N-(3-(3-氟苯基)-1H-吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
17	N-(3-(3-氯苯基)-1H-吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
18	4-嗎啉基-N-(3-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
19	N-(3-(3,4-二氟苯基)-1H-吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
20	4-嗎啉基-N-(4-苯基-1H-咪唑-2-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
21	4-嗎啉基-N-苯乙基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺
22	(4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)胺甲酸苯酯鹽酸鹽
23	7-(3-(二甲胺基)丙氧基)-4-嗎啉基-N-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
24	4-嗎啉基-7-(2-嗎啉基乙氧基)-N-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
25	4-嗎啉基-7-(3-嗎啉基丙氧基)-N-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
26	4-嗎啉基-N-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)-7-(2-(吡咯啶-1-基)乙氧基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
27	4-嗎啉基-N-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)-7-(3-(吡咯啶-1-基)丙氧基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
28	7-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙氧基)-4-嗎啉基-N-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
29	7-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙氧基)-4-嗎啉基-N-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
30	7-甲氧基-4-嗎啉基-N-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
31	4-嗎啉基-N-(3-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
32	N-(3-(5-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
33	N-(3-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
34	N-(3-(3-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
35	4-嗎啉基-N-(3-(3-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
36	(S)-N-(1-環丙基乙基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺
37	4-嗎啉基-N-苯基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺
38	4-嗎啉基-N-(吡啶-4-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺
39	4-嗎啉基-N-(吡啶-3-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺
40	4-嗎啉基-N-(吡啶-2-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺
41	4-嗎啉基-N-(嘧啶-4-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺
42	4-嗎啉基-N-(嘧啶-2-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺
43	4-嗎啉基-N-(嘧啶-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺
44	N-([1,1'-聯苯]-4-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺
45	N-([1,1'-聯苯]-3-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺
46	N-([1,1'-聯苯]-2-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺
47	N-(1,5-二甲基-1H-吡唑-3-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺
48	4-嗎啉基-N-(3-(鄰甲苯基)-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺
49	4-嗎啉基-N-(3-(間甲苯基)-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺
50	4-嗎啉基-N-(3-(對甲苯基)-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺
51	8-溴-4-嗎啉基-N-(5-苯基-1H-吡唑-3-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺
52	4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶
53	N-(3-環丙基-1H -吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
54	N-(3-(環丙基甲基)-1H -吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
55	N-(3-環丁基-1H -吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
56	N-(3-(環丁基甲基)-1H -吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
57	4-嗎啉基-N-(3-(三氟甲基)-1H -吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
58	N-(3-苯甲基-1H -吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
59	N-(3-環戊基-1H -吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
60	4-嗎啉基-N-(3-(噻吩-2-基)-1H -吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
61	4-嗎啉基-N-(3-(噻吩-3-基)-1H -吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
62	N-(3-乙基-1H -吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
63	N-(3-異丙基-1H -吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽
64	N-(3-(環戊基甲基)-1H -吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺

及其醫藥上可接受之鹽。治療方法、投與及醫藥組合物

一般而言，本發明之化合物將以治療有效量藉由發揮相似效用之藥劑之可接受之投與模式中之任一者投與。式(I)化合物之治療有效量可介於自約0.01至約500 mg/kg病患體重/天之範圍內，其可以單劑量或多劑量投與。在一項實施例中，劑量將係約0.1至約250 mg/kg/天。在另一實施例中，該劑量將係約0.5至約100 mg/kg/天。合適之劑量可為約0.01至約250 mg/kg/天、約0.05至約100 mg/kg/天，或約0.1至約50 mg/kg/天。於此範圍內，該劑量可為約0.05至約0.5、約0.5至約5或約5至約50 mg/kg/天。關於經口投與，組合物可以含有約1.0至約1000毫克活性成分，尤其約1.0、5.0、10、15、20、25、50、75、100、150、200、250、300、400、500、600、750、800、900及1000毫克活性成分之錠劑之形式提供。本發明之化合物(即，活性成分)之實際量將取決於多種因素，諸如待治療之疾病之嚴重性、個體之年齡及相對健康、利用之化合物之效價、投與途徑及形式，及其他因素。

一般而言，本發明之化合物將以醫藥組合物形式藉由下列途徑中之任何一者投與：經口、全身(例如，透皮、鼻內或由栓劑)，或非經腸(例如，肌內、靜脈內或皮下)投與。較佳之投與方式係使用可根據痛苦程度調整之便利之每日劑量方案經口投與。組合物可採取錠劑、丸劑、膠囊、半固體、粉末、持續釋放調配物、溶液、懸浮液、酏劑、噴霧劑，或任何其他適當之組合物之形式。

醫藥組合物可使用一或多種醫藥上可接受之載劑(包含賦形劑及助劑)調配。該調配物可取決於選擇之投與途徑而經修飾。該等醫藥組合物亦可包括呈游離鹼形式或醫藥上可接受之鹽形式之本文描述之化合物。

調配醫藥組合物之方法可包括用一或多種惰性、醫藥上可接受之賦形劑或載劑調配本文描述任何化合物，以形成固體、半固體或液體組合物。固體組合物可包括(例如)粉末、錠劑、可分散顆粒及膠囊，及在一些態樣中，固體組合物進一步含有無毒、輔助物質，例如潤濕劑或乳化劑、pH緩衝劑，及其他醫藥上可接受之添加劑。或者，本文描述之組合物可凍乾或呈粉末形式，以便在使用前使用合適媒劑(例如，無菌無熱原水)復原。可將活性成分包埋於(例如)藉由凝聚技術或藉由界面聚合製備之微膠囊(例如，分別為羥甲基纖維素或明膠微膠囊及聚-(甲基丙烯酸甲酯)微膠囊)、膠體藥物遞送系統(例如，脂質體、白蛋白微球、微乳液、奈米顆粒及奈米膠囊)或巨乳液中。

可將醫藥組合物及調配物滅菌。滅菌可藉由通過無菌過濾進行過濾完成。

本文描述之醫藥組合物可經調配以呈注射物投與。用於注射之調配物之非限制性實例可包括於油性或水性媒介物中之無菌懸浮液、溶液或乳液。合適之油性媒介物可包括(但不限於)親脂性溶劑或媒介物，諸如脂肪油、合成脂肪酸酯或脂質體。水性注射懸浮液可含有增加懸浮液黏度之物質。該懸浮液亦可含有合適之穩定劑。注射物可經調配用於單次快速注射或連續輸注。

關於非經腸投與，化合物可結合醫藥上可接受之非經腸媒介物調配成單位劑量可注射形式(例如，溶液、懸浮液、乳液)。此等媒介物固有地可為無毒且非治療性。媒介物可為水、鹽水、林格氏溶液、右旋糖溶液及5%人類血清白蛋白。亦可使用非水性媒介物(諸如非揮發性油及油酸乙酯)。可使用脂質體作為載劑。該媒介物可含有少量添加劑，諸如增強等滲性及化學穩定性之物質(例如，緩衝劑及防腐劑)。

亦可製備持續釋放製劑。持續釋放基質之實例可包括聚酯、水凝膠(例如，聚(2-羥基乙基-甲基丙烯酸酯)或聚(乙烯基醇))、聚乳酸、L-麩胺酸及γ乙基-L-麩胺酸鹽之共聚物、不可降解之乙烯-乙酸乙烯酯、可降解之乳酸-乙醇酸共聚物，諸如LUPRON DEPO^TM (即，由乳酸-乙醇酸共聚物及乙酸亮丙瑞林(leuprolide acetate)構成之可注射微球)，及聚-D-(-)-3-羥基丁酸。

本文描述之組合物之醫藥調配物可藉由混合化合物及醫藥上可接受之載劑、賦形劑及/或穩定劑製備以用於儲存。此調配物可為凍乾調配物或水溶液。可接受之載劑、賦形劑及/或穩定劑可在使用之劑量及濃度下對受體無毒。可接受之載劑、賦形劑及/或穩定劑可包括緩衝劑，諸如磷酸鹽、檸檬酸鹽及其他有機酸；抗氧化劑，包括抗壞血酸及甲硫胺酸；防腐劑，多肽；蛋白質，諸如血清白蛋白或明膠；親水性聚合物；胺基酸；單醣、雙醣，及其他碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合劑，諸如EDTA；糖類，諸如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨醇；成鹽相對離子，諸如鈉；金屬錯合物；及/或非離子表面活性劑或聚乙二醇。

本發明之化合物可與用於預防、治療、控制、改善或降低適用本發明之化合物之疾病或病症之風險之一或多種其他組合藥劑(例如，一、二或三種其他藥物)組合用於治療方法中。在一些實施例中，藥物組合在一起比藥物單獨更安全或更有效。在一些實施例中，本文揭示之化合物及一或多種組合藥劑具有不會不利影響彼此之互補活性。此等分子可以針對預期目的有效之量組合存在。因此，此等其他藥物可藉由常用途徑及以常用量，與本發明之化合物同時或循序投與。在一些實施例中，當本發明之化合物與一或多種其他藥物同時使用時，該等藥劑係在單一醫藥組合物中以單位劑型一起投與。因此，本發明之醫藥組合物亦包括彼等除本發明之化合物外亦含有一或多種其他活性成分者。本發明之化合物與第二活性劑之重量比可變化且將取決於各成分之有效劑量。一般而言，將使用各者之有效劑量。在一些實施例中，組合療法包括其中本發明之化合物及一或多種其他藥物分別投與之療法，及在一些情況下，兩種或更多種藥劑按照不同、重疊之時間表投與之療法。亦審慎考慮當與一或多種其他活性成分組合使用時，本發明之化合物及其他活性成分可以比其等單獨使用時之劑量更低之劑量使用。在一些實施例中，該組合藥劑係減少ALS之症狀之藥物。在一些實施例中，該組合藥劑係選自NAD補充劑(諸如菸鹼醯胺核糖苷，以商品名Basis®或Tru Niagen®提供)、維生素B₁₂ (口服或注射)、格隆溴銨(glycopyrrolate)、阿托品(atropine)、東莨菪鹼(scopolamine)、巴氯芬(baclofen)、替紮尼定(tizanidine)、墨西律定(mexiletine)、SSRI、苯二氮卓類(benzodiazepine)、紐德斯塔(Neudexta)、利魯唑(riluzole)及依達拉奉(edaravone)，及其組合。

本發明之化合物、醫藥組合物及方法可適用於治療個體，諸如(但不限於)哺乳動物、人類、非人類哺乳動物、家養動物(例如，實驗室動物、家養寵物或家畜)、非家養動物(例如，野生動物)、狗、貓、嚙齒類動物、小鼠、倉鼠、奶牛、鳥、雞、魚、豬、馬、山羊、綿羊或兔。在較佳實施例中，本發明之化合物、醫藥組合物及方法適用於治療人類。

本文描述之化合物、醫藥組合物及方法可適合用作治療劑，例如可向有需要個體投與之治療。個體中之治療效應可藉由減少、抑制、緩解或根除疾病狀態，包括(但不限於)其症狀獲得。患有疾病或病症，或易患或開始患有疾病或病症之個體中之治療效應可藉由減少、抑制、預防、緩解或根除該病症或疾病，或病症前或疾病前狀態獲得。

在實踐本文描述之方法中，可向有需要個體投與治療有效量之本文描述之化合物或醫藥組合物，通常用於治療及/或預防病症或其進展。醫藥組合物可影響個體之生理學，諸如免疫系統、發炎反應，或其他生理影響。治療有效量可取決於疾病之嚴重性、個體之年齡及相對健康、使用之化合物之效價，及其他因素而廣泛變化。

治療(Treat及/或treating)可係指成功治療或改善疾病或病症之任何指標。治療可包括(例如)減少、延遲或緩解疾病或病症之一或多種症狀之嚴重性，或其可包括降低病患經歷疾病、缺陷、疾患或不利病症之症狀，及類似物之頻率。本文中可使用治療以係指導致疾病或病症之一定程度之治療或改善且可審慎考慮針對該目標之一定範圍之結果(包括(但不限於)完全預防該病症)之方法。

預防及類似表述可係指在病患中預防疾病或病症。例如，若處於感染疾病風險下之個體用本發明之方法治療且以後不再感染該疾病，則該疾病在該個體中已經預防至少一段時間。

治療有效量可為化合物或其醫藥組合物或活性組分足以向投與該組合物之個體提供有利效應或另外減少有害之無益事件之量。治療有效劑量可為投與其產生一或多種所需或期望(例如，有利)效應之劑量，此投與在給定時間週期內發生一或多次。精確劑量可取決於治療目的且可由熟習此項技術者使用已知技術確定。

考慮到待治療之疾患、個別病患之病症、遞送化合物或醫藥組合物之位點、投與方法及從業者已知的其他因素，可用於療法中之本文描述之化合物或醫藥組合物可經調配並以與良好之醫學實務一致之方式建立劑量。該等化合物或醫藥組合物可根據本文描述之製備說明書製備。

一般技術者應瞭解向有需要個體投與之本文描述之醫藥組合物或化合物之量、持續時間及頻率取決於數種因素，包括(例如但不限於)個體之健康、病患之特定疾病或病症、病患之特定疾病或病症之等級或程度、向或已向個體投與之另外治療劑，及類似物。

本文描述之方法、化合物及醫藥組合物可用於向有需要個體投與。通常，化合物或醫藥組合物之投與可包括投與途徑，投與途徑之非限制性實例包括靜脈內、動脈內、皮下、硬膜下、肌內、顱內、胸骨內或腹膜內。另外，醫藥組合物或化合物可藉由另外之投與途徑，例如，藉由吸入、經口、真皮、鼻內或鞘內投與向個體投與。

本發明之醫藥組合物或化合物可在首次投與中，及在一或多次另外投與中向有需要個體投與。該等一或多次另外投與可在首次投與後數分鐘、數小時、數天、數週或數月內向有需要個體投與。該等另外投與中之任何一者可在首次投與後少於21天、或少於14天、少於10天、少於7天、少於4天或少於1天內向有需要個體投與。該等一或多次投與可發生超過每天一次、超過每週一次，或超過每月一次。化合物或醫藥組合物可以21天、14天、10天、7天、4天之週期，或在一至七天內每天向有需要個體投與。

本文提供之化合物、醫藥組合物及方法可適用於治療個體之複數種疾病或病症或預防疾病或病症，或有需要個體之其他治療應用。在一項態樣中，本發明係關於治療有需要個體之由PIKfyve活性介導之神經性疾病之方法，其包括向該個體投與有效量之如本文描述之化合物或醫藥組合物。在一些實施例中，該疾病係與FIG4缺陷相關聯。

在一些實施例中，神經性疾病係肌肉萎縮性脊髓側索硬化症(ALS)、原發性側索硬化症(PLS)、夏馬杜三氏病(CMT；包括4J型(CMT4J))及尤尼斯-瓦隆症候群、自噬、多小腦迴畸型(包括伴有癲癇之多小腦迴畸型)、顳枕部多小腦迴畸型、匹克症、帕金森氏症、路易氏體帕金森氏症、路易氏體失智症、路易氏體疾病、額顳葉型失智症、聚麩醯胺及核內包涵體之神經元核包涵物之疾病、馬理斯科及平野氏體之疾病、tau蛋白病、阿茲海默症、神經系統退化症、海綿狀神經系統退化症、周邊神經病變、腦白質病、運動神經病變、感覺神經病變、包涵體疾病、進行性核上神經麻痺症、皮質基底症候群、慢性創傷性腦病、創傷性腦損傷(TBI)、大腦局部缺血、格林-巴雷症候群、慢性發炎脫髓鞘性多發神經病變、多發性硬化症、溶酶體貯積症、法布瑞氏症、高雪氏症、尼曼匹克症C型、戴-薩克斯病及IV型黏脂質症、神經病變、杭丁頓氏舞蹈症、精神異常、ADHD、思覺失調症、情感疾患、重度憂鬱症、憂鬱症、I型躁鬱症或II型躁鬱症。

在一些實施例中，神經性疾病係ALS、FTD、阿茲海默症、帕金森氏症、杭丁頓氏舞蹈症或CMT。在一些實施例中，該神經性疾病係ALS。

在一些實施例中，神經性疾病係tau蛋白病，諸如阿茲海默症、進行性核上神經麻痺症、皮質基底症候群、額顳葉型失智症或慢性創傷性腦病。

在一些實施例中，神經性疾病係溶酶體貯積症，諸如法布瑞氏症、高雪氏症、尼曼匹克症C型、戴-薩克斯病或IV型黏脂質症。

在一些實施例中，神經性疾病係精神異常，諸如ADHD、思覺失調症，或情感疾患，諸如重度憂鬱症、憂鬱症、I型躁鬱症或II型躁鬱症。

在一些態樣中係治療有需要個體中由PI3K活性介導之疾病之方法，其包括向該個體投與有效量之如本文描述之化合物或醫藥組合物。在一些實施例中，該PI3K係PI3K同功型，諸如PI3Kα、β、δ及/或γ。在一些實施例中，該疾病係神經性疾病。

本發明進一步提供用於藉由療法治療人體或動物體之方法中之本文揭示之任何化合物。療法可由本文揭示之任何機制，諸如抑制、減少本文揭示之疾病或減少本文揭示之疾病之進展。本發明進一步提供用於預防或治療本文揭示之任何病症本文揭示之任何化合物。本發明亦提供本文揭示之任何化合物或其醫藥組合物用於針對本文揭示之任何病症獲得本文揭示之任何臨床結果。本發明亦提供本文揭示之任何化合物在製造用於預防或治療本文揭示之任何疾病或病症之藥劑中之用途。實例

給出式(I)化合物及中間物之下列製備使得熟習此項技術者可更清楚瞭解並實踐本發明。其等不應視為限制本發明之範圍，而僅作為其說明及代表。

用於製備此等化合物之起始材料及試劑可自商業供應商諸如Aldrich Chemical Co., (Milwaukee, Wis.)、Bachem (Torrance, Calif.)或Sigma (St. Louis, Mo.)購買獲得，或藉由熟習此項技術者已知的方法遵循參考文獻諸如Fieser and Fieser’s Reagents for Organic Synthesis，第1至17卷(John Wiley and Sons, 1991)；Rodd’s Chemistry of Carbon Compounds，第1至5卷及增刊(Elsevier Science Publishers, 1989)；Organic Reactions，第1至40卷(John Wiley and Sons, 1991)、March’s Advanced Organic Chemistry, (John Wiley and Sons，第4版)及Larock’s Comprehensive Organic Transformations (VCH Publishers Inc., 1989)中闡述之程序製備。此等方案僅說明可合成本發明之化合物之一些方法，且可對此等方案作出各種修飾並將參考本發明向熟習此項技術者給出建議。該等起始材料及中間物，及反應之最終產物可視需要使用習知技術，包括(但不限於)過濾、蒸餾、結晶、層析術及類似物分離並純化。此等材料可使用習知方式，包括物理常數及光譜資料表徵。

除非另有相反規定，否則本文描述之反應在大氣壓下，在自約-78℃至約150℃，或自約0℃至約125℃之溫度範圍內或在約室溫(或周圍溫度) (例如，約20℃)下發生。

本文描述之式(I)及子式之化合物及物質(包括彼等其中如本文定義之取代基)可如下文說明並描述製備。

除非另有說明，否則所有試劑均可使用而無需進一步純化。¹ H NMR光譜係在CDCl₃ 、DMSO-d₆ 或CD₃ OD中在室溫下在Bruker 300 MHz儀器上獲得。當偵測超過一種構形異構物時，報導最豐富構形異構物之化學位移。¹ H NMR光譜之化學位移係以百萬分率(ppm)記錄在殘餘溶劑之內標之δ標尺上。將分裂模式設計為s，單重態；d，雙重態；t，三重態；q，四重態；m，多重態；br，寬。下文描述LC-MS條件： LCMS管柱：Agilent Zorbax XDB C18 4.6×50 mm，3.5 µm 流動相：溶劑A：水(具有0.1%甲酸) 溶劑B：MeOH 流動速率： 1.0 mL/min，運行時間： 2 min梯度(20%至90% B)，然後3 min @ 90% B，溫度： 30℃ HPLC管柱：Agilent SB-C18 4.6×150 mm，3.5 µm 流動相：溶劑A：水(具有0.02% TFA) 溶劑B：MeOH 流動速率： 1.0 mL/min，運行時間： 0.5 min @ 10% B，9.5 min梯度(10%至90% B)，然後10 min @ 90% B，溫度： 30℃ 製備型LC管柱：Phenomenex Luna 5u 100A，21.2×250 mm，5 µm 流動相：溶劑A：水溶劑B：MeOH 流動速率： 10 mL/min，運行時間： 1 min @ 20% B，30 min梯度(20%至80% B)，然後10 min @ 90% B，溫度：周圍溫度

文本中使用下列縮寫：PE =石油醚，EA或EtOAc =乙酸乙酯，DMSO =二甲亞碸，DMF = N,N-二甲基乙醯胺，MeOH =甲醇，DCM =二氯甲烷，TFA =三氟乙酸，TLC =薄層層析術，DME = 1,2-二甲氧乙烷。

實例1：N-(3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽。

步驟A：2-溴-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶。將2-氯-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶(2 g，6.9 mmol)於HBr/AcOH (33重量%於乙酸中，30 mL)中之溶液加熱至回流，歷時3.5 h。該反應混合物用飽和NaHCO₃ 水溶液淬滅並將pH調整至8。該水溶液用DCM/MeOH (15/1，3 x 50 mL)萃取。合併之有機相經無水Na₂ SO₄ 乾燥，過濾，並濃縮以提供2.19 g呈黃色固體之粗產物，其無需進一步純化即可直接用於下一步驟中。LC-MS (ESI+)：m/z 335/337 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, DMSO-d₆ ) δ 8.68 (dd, J = 4.8, 1.5 Hz, 1H), 8.60 (dd, J = 7.5, 1.5 Hz, 1H), 7.62 (dd, J = 7.5, 1.8 Hz, 1H), 4.08-3.95 (m, 4H), 3.88-3.78 (m, 4H)。

步驟B：5-胺基-3-(4-氟苯基)-N,N-二甲基-1H-吡唑-1-磺醯胺。在0℃下向3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-胺(300 mg，1.69 mmol)於THF (5 mL)中之溶液添加NaH (100 mg，2.54 mmol)。在該溫度下將該溶液攪拌1 h。向上文懸浮液添加二甲胺磺醯氯(315 mg，2.20 mmol)。添加飽和NH₄ Cl水溶液且該水溶液用乙酸乙酯(3 x 50 mL)萃取。合併之有機相經無水Na₂ SO₄ 乾燥，過濾，並濃縮。殘餘物藉由矽膠管柱層析術以20% EtOAc/PE至33% EtOAc/PE之梯度溶析純化以提供5-胺基-3-(4-氟苯基)-N,N-二甲基-1H-吡唑-1-磺醯胺(310 mg，1.09 mmol)。LC-MS：m/z 285 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, CDCl₃ ) δ 7.74 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 7.07 (t, J = 8.7 Hz, 2H), 5.70 (s, 1H), 4.85 (s, 2H), 3.03 (s, 6H)。

步驟C：3-(4-氟苯基)-N,N-二甲基-5-((4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)胺基)-1H-吡唑-1-磺醯胺。在微波條件下將2-溴-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶(60 mg，0.18 mmol)、5-胺基-3-(4-氟苯基)-N,N-二甲基-1H-吡唑-1-磺醯胺(61.2 mg，0.22 mmol)、Cs₂ CO₃ (134.4 mg，0.41 mmol)、Pd(OAc)₂ (4.2 mg，0.018 mmol)及Xantphos (10.2 mg，0.018 mmol)於DMF/1,4-二噁烷(7/1，5 mL)中之溶液加熱至90℃，歷時30 min。直接濃縮該反應混合物並藉由矽膠管柱層析術以2% MeOH/DCM至3% MeOH/DCM之梯度溶析純化以提供呈黃色固體之3-(4-氟苯基)-N,N-二甲基-5-((4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)胺基)-1H-吡唑-1-磺醯胺(58.6 mg，0.11 mmol)。LC-MS：m/z 539 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, CDCl₃ ) δ 8.81 (s, 1H), 8.59 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 8.49 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.89-7.86 (m, 2H), 7.46-7.40 (m, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.15 (t, J = 8.7 Hz, 2H), 4.18-4.12 (m, 4H), 3.91-3.85 (m, 4H), 3.09 (s, 6H)。

步驟D：向3-(4-氟苯基)-N,N-二甲基-5-((4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d] 嘧啶-2-基)胺基)-1H-吡唑-1-磺醯胺(58.6 mg，0.11 mmol)於DCM (2 mL)中之溶液添加HCl/Et₂ O (1 mL)。將該反應物攪拌2 h並使大量固體沈澱。濃縮並於MeOH/Et₂ O (1/20，2 mL)中形成漿液後，獲得呈白色固體之N-(3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽(35 mg，0.08 mmol)。LC-MS：m/z 432 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, DMSO-d₆ ) δ 9.94 (s, 1H), 8.78 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.64 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.86 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 7.60-7.56 (m, 1H), 7.31 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 6.66 (s, 1H), 4.12-4.05 (m, 4H), 3.88-3.82 (m, 4H)。

實例2：N-苯甲基-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺。

向2-溴-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶(60 mg，0.18 mmol)於EtOH (30 mL)中之溶液添加Et₃ N (36 mg，0.36 mmol)及苯甲胺(20 mg，0.18 mmol)。在微波條件下將該反應物加熱至120℃，歷時50 min。直接濃縮該反應混合物且所得殘餘物藉由矽膠管柱層析術以2% MeOH/DCM至3% MeOH/DCM之梯度溶析純化以提供呈灰白色固體之N-苯甲基-4-嗎啉基苯并呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺(25 mg，0.07 mmol)。LC-MS (ESI+)：m/z 362 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, CDCl₃ ) δ 8.52 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 8.50 (dd, J = 7.8, 1.8 Hz, 1H), 7.39-7.27 (m, 6H), 5.42-5.31 (m, 1H), 4.67 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 4.05-4.01 (m, 4H), 3.82-3.79 (m, 4H)。

實例3：N-(4-嗎啉基苯并呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)苯甲醯胺。

步驟A：N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-嗎啉基苯并呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺。向2-溴-4-嗎啉基苯并呋喃并[3,2-d]嘧啶(300 mg，0.89 mmol)於EtOH (20 mL)中之溶液添加(2,4-二甲氧基苯基)甲胺(300 mg，1.79 mmol)及Et₃ N (272 mg，2.69 mmol)。在微波條件下將該反應物加熱至120℃，歷時60 min。直接濃縮該反應混合物且所得殘餘物藉由矽膠管柱層析術以1% MeOH/DCM至3% MeOH/DCM之梯度溶析純化以提供N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-嗎啉基苯并呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺(188 mg，0.44 mmol)。LC-MS：m/z 422 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, CDCl₃ ) δ 8.50 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.38 (dd, J = 7.5, 1.8 Hz, 1H), 7.36-7.32 (m, 2H), 6.47 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.42 (dd, J = 8.4, 2.4 Hz, 1H), 5.33-5.28 (m, 1H), 4.57 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 4.08-4.05 (m, 4H), 3.85-3.82 (m, 7H), 3.79 (s, 3H)。

步驟B：4-嗎啉基苯并呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺。將N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-嗎啉基苯并呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺(183 mg，0.43 mmol)於TFA (5 mL)中之溶液加熱至60℃，歷時1 h。添加飽和NaHCO₃ 水溶液以將pH調整至9。該水溶液用MeOH/DCM (1/15，3 x 10 mL)萃取。合併之有機相經無水Na₂ SO₄ 乾燥，過濾，並濃縮以提供粗4-嗎啉基苯并呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺(200 mg，0.74 mmol)，其無需進一步純化即可直接用於下一步驟中。LC-MS：m/z 272 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, CDCl₃ ) δ 8.53 (dd, J = 4.8, 1.8 Hz, 1H), 8.38 (dd, J = 7.5, 1.8 Hz, 1H), 7.37 (dd, J = 7.8, 4.8 Hz, 1H), 4.76 (s, 2H), 4.08-4.05 (m, 4H), 3.86-3.81 (m, 4H)。

步驟C：在室溫下向4-嗎啉基苯并呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺(20 mg，0.07 mmol)及K₂ CO₃ (25 mg，0.18 mmol)於CH₃ CN中之懸浮液添加苯甲醯氯(20 mg，0.14 mmol)。在室溫下將該反應混合物攪拌整夜。該反應混合物用H₂ O (5 mL)淬滅且該水溶液用MeOH/DCM (1/15，3 x 10 mL)萃取。合併之有機相經無水Na₂ SO₄ 乾燥，過濾，並濃縮。所得殘餘物藉由製備型TLC純化以提供呈白色固體之N-(4-嗎啉基苯并呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)苯甲醯胺(23 mg，0.06 mmol)。LC-MS：m/z 376 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, CDCl₃ ) δ 8.60-8.58 (m, 1H), 8.54-8.49 (m, 2H), 7.94 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 7.61-7.46 (m, 3H), 4.20-4.10 (m, 4H), 3.89-3.86 (m, 4H)。

實例4：7-(2-(二甲胺基)乙氧基)-4-嗎啉基-N-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽。

步驟A：2-氯-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶6-氧化物。在0℃下使用加料漏斗向2-氯-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶(5 g，3.45 mmol)及尿素過氧化氫(8.1 g，17.24 mmol)於CCl₄ (150 mL)中之溶液滴加TFA (6.5 mL，17.24 mmol)。添加後，將該反應物加熱至回流整夜。將該反應混合物冷卻至室溫後，添加飽和NaHCO₃ 水溶液以將pH調整至8。將所得雙相混合物轉移至分液漏斗。將層分離，且水相用DCM (5 × 50 mL)萃取。合併之有機相經無水Na₂ SO₄ 乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。所得殘餘物藉由矽膠管柱層析術以2% MeOH/DCM至4% MeOH/DCM之梯度溶析純化以提供呈淺黃色固體之2-氯-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶6-氧化物(420 mg，1.37 mmol)並回收2 g 2-氯-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶。LC-MS (ESI+)：m/z 307/309 (M⁺ )。

步驟B：2,7-二氯-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶。將2-氯-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶6-氧化物(420 mg，1.37 mmol)於POCl₃ (15 mL)中之溶液加熱至110℃，歷時3 h。直接濃縮該反應混合物以移除過量之POCl₃ 。向所得殘餘物添加飽和NaHCO₃ 水溶液以將pH調整至8。該水溶液用MeOH/DCM (1/20，3 × 20 mL)萃取。合併之有機相經無水Na₂ SO₄ 乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。所得殘餘物藉由矽膠管柱層析術以20% EtOAc/PE至33% EtOAc/PE之梯度溶析純化以提供160 mg呈白色固體之目標化合物及2,9-二氯異構物之混合物。LC-MS (ESI+)：m/z 325/327 (MH⁺ )。

步驟C：2-((2-氯-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-7-基)氧基)-N,N-二甲基乙胺。在0℃下向來自步驟B之混合物(80 mg，0.25 mmol)於THF (30 mL)中之溶液添加NaH (20 mg，0.5 mmol)。在0℃下攪拌20 min後，添加2-(二甲胺基)乙醇(33 mg，0.37 mmol)於THF中之溶液。添加後，將該反應混合物升溫至室溫並攪拌2 h。該反應混合物用飽和NH₄ Cl水溶液淬滅。該水溶液用EtOAc (3 x 20 mL)萃取。合併之有機相經無水Na₂ SO₄ 乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。所得殘餘物藉由矽膠管柱層析術以20% EtOAc/PE至33% EtOAc/PE之梯度溶析純化以提供呈白色固體之目標化合物(49 mg，0.13 mmol，上點)。LC-MS (ESI+)：m/z 378/380 (MH⁺ )。¹ HNMR (300 MHz, CDCl₃ ) δ 8.30 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.55 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 4.16- 4.08 (m, 4H), 3.91-3.84 (m, 4H), 2.83 (t, J = 5.1 Hz, 2H), 2.45 (s, 6H)。

步驟D：5-胺基-N,N-二甲基-3-苯基-1H-吡唑-1-磺醯胺。在0℃下向3-苯基-1H-吡唑-5-胺(300 mg，1.88 mmol)於THF (5 mL)中之溶液添加NaH (100 mg，2.82 mmol)。在0℃下攪拌1 h後，向該溶液添加二甲胺磺醯氯(315 mg，2.20 mmol)。該反應混合物用飽和NH₄ Cl水溶液淬滅。該水溶液用乙酸乙酯(3 x 50 mL)萃取。合併之有機相經無水Na₂ SO₄ 乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。所得殘餘物藉由矽膠管柱層析術以20% EtOAc/PE至33% EtOAc/PE之梯度溶析純化以提供標題化合物(300 mg，1.13 mmol)。LC-MS：m/z 267 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, CDCl₃ ) δ 7.79-7.76 (m, 2H), 7.42-7.35 (m, 3H), 5.75 (s, 1H), 4.84 (s, 2H), 3.03 (s, 6H)。

步驟E：5-((7-(2-(二甲胺基)乙氧基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)胺基)-N,N-二甲基-3-苯基-1H-吡唑-1-磺醯胺。在微波條件下將2-((2-氯-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-7-基)氧基)-N,N-二甲基乙胺(35 mg，0.09 mmol)、5-胺基-N,N-二甲基-3-苯基-1H-吡唑-1-磺醯胺(37 mg，0.14 mmol)、Cs₂ CO₃ (76 mg，0.23 mmol)、Pd(OAc)₂ (2 mg，0.01 mmol)及Xantphos (5 mg，0.01 mmol)於DMF/1,4-二噁烷(7/1，4 mL)中之溶液加熱至95℃，歷時60 min。該反應物用H₂ O (10 mL)稀釋並用乙酸乙酯(3 x 15 mL)萃取。合併之有機相經無水Na₂ SO₄ 乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。所得殘餘物藉由二氧化矽管柱層析術以自1% MeOH /DCM至2% MeOH /DCM之梯度溶析純化以提供呈白色固體之標題化合物(39 mg，0.06 mmol)。LC-MS (ESI+)：m/z 608 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, CDCl₃ ) δ 8.77 (s, 1H), 8.31 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 7.48-7.39 (m, 3H), 7.32 (s, 1H), 6.94 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.53 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 4.13-4.07 (m, 4H), 3.93-3.86 (m, 4H), 3.07 (s, 6H), 2.79 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 2.37 (s, 6H)。

步驟F：向5-((7-(2-(二甲胺基)乙氧基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)胺基)-N,N-二甲基-3-苯基-1H-吡唑-1-磺醯胺(39 mg，0.06 mmol)於DCM (2 mL)中之溶液添加HCl/Et₂ O之溶液(1 mL)。在室溫下將該反應物攪拌2 h。直接濃縮該反應混合物並使所得殘餘物於MeOH/Et₂ O (1/20，5 mL)中形成漿液以提供呈白色固體之標題化合物(37 mg，0.07 mmol)。LC-MS (ESI+)：m/z 501 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, CD₃ OD) δ 8.54 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.53-7.44 (m, 3H), 7.22 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.49 (s, 1H), 4.32-4.27 (m, 4H), 3.96-3.88 (m, 4H), 3.70-3.63 (m, 2H), 3.37-3.30 (m, 2H), 3.03 (s, 6H)。

實例5：4-嗎啉基-2-((3-苯基-1H-吡唑-5-基)胺基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-7-醇鹽酸鹽。

步驟A：7-(苯甲氧基)-2-氯-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶。在0℃下向2,7-二氯-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶(150 mg，0.46 mmol)於THF (30 mL)中之溶液添加NaH (92 mg，2.3 mmol)。在0℃下將該混合物攪拌20 min。向該反應混合物添加苯基甲醇(60 mg，0.56 mmol)於THF中之溶液。添加後，將該反應混合物升溫至室溫並攪拌2 h。該反應混合物用飽和NH₄ Cl水溶液淬滅。該水溶液用乙酸乙酯(3 x 20 mL)萃取。合併之有機相經無水Na₂ SO₄ 乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。所得殘餘物藉由矽膠管柱層析術以10% EtOAc/PE至20% EtOAc/PE之梯度溶析純化以提供呈白色固體之標題化合物(110 mg，0.28 mmol)。LC-MS (ESI+)：m/z 397/399 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, CDCl₃ ) δ 8.33 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.50-7.31 (m, 5H), 6.95 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.49 (s, 2H), 4.13-4.10 (m, 4H), 3.89-3.86 (m, 4H)。

步驟B：5-((7-(苯甲氧基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)胺基)-N,N-二甲基-3-苯基-1H-吡唑-1-磺醯胺。在微波條件下將7-(苯甲氧基)-2-氯-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶(100 mg，0.25 mmol)、5-胺基-N,N-二甲基-3-苯基-1H-吡唑-1-磺醯胺(101 mg，0.38 mmol)、Cs₂ CO₃ (165 mg，0.51 mmol)、Pd(OAc)₂ (6 mg，0.03 mmol)及Xantphos (15 mg，0.03 mmol)於DMF/1,4-二噁烷(7/1，2.4 mL)中之溶液加熱至95℃，歷時60 min。在減壓下直接濃縮該反應混合物。所得殘餘物藉由矽膠管柱層析術以1% MeOH/DCM至2% MeOH/DCM之梯度溶析純化以提供呈淺黃色固體之5-((7-(苯甲氧基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)胺基)-N,N-二甲基-3-苯基-1H-吡唑-1-磺醯胺(62 mg，0.09 mmol)。LC-MS (ESI+)：m/z 627 (MH⁺ )。¹ HNMR (300 MHz, CDCl₃ ) δ 8.78 (s, 1H), 8.34 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.90 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 7.52-7.32 (m, 9H), 6.95 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.50 (s, 2H), 4.15-4.10 (m, 4H), 3.93-3.88 (m, 4H), 3.08 (s, 6H)。

步驟C：5-((7-羥基-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)胺基)-N,N-二甲基-3-苯基-1H-吡唑-1-磺醯胺。向5-((7-(苯甲氧基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)胺基)-N,N-二甲基-3-苯基-1H-吡唑-1-磺醯胺(62 mg，0.09 mmol)於MeOH/DCM (1/4，5 mL)中之溶液添加Pd/C (10 mg)及然後使用氣球以H₂ 鼓泡2 h。過濾後，在減壓下直接濃縮該反應混合物。所得殘餘物藉由矽膠管柱層析術以1% MeOH/DCM至2% MeOH/DCM之梯度溶析純化以提供呈白色固體之標題化合物(31 mg，0.06 mmol)。LC-MS (ESI+)：m/z 537 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, CDCl₃ ) δ 8.81 (s, 1H), 8.39 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.90 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 7.46-7.40 (m, 3H), 7.30 (s, 1H), 6.91 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.12-4.07 (m, 4H), 3.92-3.87 (m, 4H), 3.08 (s, 6H)。

步驟D：向5-((7-羥基-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)胺基)-N,N-二甲基-3-苯基-1H-吡唑-1-磺醯胺(31 mg，0.06 mmol)於DCM (2 mL)中之溶液添加HCl/Et₂ O之溶液(1 mL)。在室溫下將該反應混合物攪拌2 h。直接濃縮該反應混合物並將所得殘餘物漿化於MeOH/Et₂ O (1/20，5 mL)中以提供呈白色固體之標題化合物(18.2 mg，0.04 mmol)。LC-MS (ESI+)：m/z 430 (MH+)。¹ H NMR (300 MHz, CD₃ OD) δ 8.36 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.52-7.43 (m, 3H), 6.95 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 4.31-4.25 (m, 4H), 3.92-3.87 (m, 4H)。

實例6：4-嗎啉基-N-(3-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽。

步驟A：3-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-胺。向3-側氧基-3-(吡啶-2-基)丙腈(1 g，6.84 mmol)及聯胺(513 mg，10.24 mmol，99%)於EtOH (35 mL)中之溶液添加兩滴AcOH。將該反應物加熱至80℃，歷時5 h。在減壓下直接濃縮該反應混合物。所得殘餘物藉由矽膠管柱層析術以20% EtOAc/PE至33% EtOAc/PE之梯度溶析純化以提供呈白色固體之3-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-胺(630 mg，3.9 mmol)。LC-MS (ESI+)：m/z 161 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, DMSO-d₆ ) δ 11.9 (brs, 1H), 8.53 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.78-7.76 (m, 2H), 7.26-7.22 (m, 1H), 5.93 (s, 1H), 4.82 (brs, 2H)。

步驟B：5-胺基-N,N-二甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-1-磺醯胺。在0℃下向3-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-胺(630 mg，3.94 mmol)於THF (5 mL)中之溶液添加NaH (315 mg，7.88 mmol)。在0℃下攪拌1 h後，向該溶液添加二甲胺磺醯氯(676 mg，4.72 mmol)。該反應混合物用飽和NH₄ Cl水溶液淬滅。該水溶液用乙酸乙酯(3 x 50 mL)萃取。合併之有機相經無水Na₂ SO₄ 乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。所得殘餘物藉由矽膠管柱層析術以20% EtOAc/PE至33% EtOAc/PE之梯度溶析純化以提供標題化合物(310 mg，1.16 mmol)。LC-MS (ESI+)：m/z 268 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, CDCl₃ ) δ 8.59 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.72 (td, J = 7.8, 1.8 Hz, 1H), 7.25-7.22 (m, 1H), 6.11 (s, 1H), 4.89 (brs, 2H), 3.02 (s, 6H)。

步驟C：N,N-二甲基-5-((4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)胺基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-1-磺醯胺。在微波條件下將2-溴-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶(60 mg，0.18 mmol)、5-胺基-N,N-二甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-1-磺醯胺(53 mg，0.21 mmol)、Cs₂ CO₃ (146 mg，0.45 mmol)、Pd(OAc)₂ (2.4 mg，0.01 mmol)及Xantphos (10 mg，0.01 mmol)於DMF/1,4-二噁烷(7/1，2.4 mL)中之溶液加熱至90℃，歷時40 min。在減壓下直接濃縮該反應混合物。所得殘餘物藉由矽膠管柱層析術以1% MeOH /DCM至2% MeOH /DCM之梯度溶析純化以提供呈白色固體之標題化合物(70 mg，0.13 mmol)。LC-MS (ESI+)：m/z 522 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, CDCl₃ ) δ 8.80 (s, 1H), 8.71-8.69 (m, 1H), 8.59-8.54 (m, 2H), 8.09 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.61 (t, J = 1.8 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.46-7.42 (m, 1H), 7.32-7.25 (m, 1H), 4.17-4.14 (m, 4H), 3.91-3.88 (m, 4H), 3.09 (s, 6H)。

步驟D：向N,N-二甲基-5-((4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基) 胺基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-1-磺醯胺(70 mg，0.13 mmol)於DCM (2 mL)中之溶液添加HCl/Et₂ O之溶液(2 mL)。在室溫下將該反應物攪拌2 h。直接濃縮該反應混合物並將所得殘餘物於MeOH/Et₂ O (1/20，5 mL)中形成漿液以提供呈白色固體之標題化合物(40.7 mg，0.1 mmol)。LC-MS (ESI+)：m/z 415 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, DMSO-d₆ ) δ 10.23 (s, 1H), 8.55 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 8.71 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.65 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 8.30-8.24 (m, 2H), 7.70-7.68 (m, 1H), 7.63-7.59 (m, 1H), 6.98 (s, 1H), 4.08-4.01 (m, 4H), 3.86-3.79 (m, 4H)。

實例7：N-(3-(4-甲基吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽。

步驟A：3-(4-甲基吡啶-2-基)-3-側氧基丙腈。在0℃下向4-甲基吡啶甲酸甲酯(900 mg，5.95 mmol)及無水乙腈(367 mg，8.93 mmol)於THF (45 mL)中之溶液滴加NaHMDS (4.5 mL，8.9 mmol)。添加後，將該反應混合物升溫至室溫並在室溫下攪拌0.5 h。該反應混合物用飽和NH₄ Cl水溶液淬滅並用EtOAc (3 x 20 mL)萃取。合併之有機相經無水Na₂ SO₄ 乾燥，過濾，並濃縮。殘餘物藉由二氧化矽管柱層析術以20% EtOAc/PE至33% EtOAc/PE之梯度溶析純化以提供3-(4-甲基吡啶-2-基)-3-側氧基丙腈(780 mg，4.87 mmol)。¹ H NMR (300 MHz, CDCl₃ ) δ 8.53 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.37 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 4.37 (s, 2H), 2.46 (s, 3H)。

步驟B：標題化合物係如實例6中描述製備，在步驟A中使用3-(4-甲基吡啶-2-基)-3-側氧基丙腈。LC-MS (ESI+)：m/z 429 (MH+)。¹ H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10.22 (s, 1H), 8.85 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 8.65-8.59 (m, 2H), 8.24 (s, 1H), 7.69-7.59 (m, 2H), 6.96 (s, 1H), 4.04-4.01 (m, 4H), 3.82-3.79 (m, 4H), 2.61 (s, 3H)。

實例8：N-(3-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺。

在23℃下將三氟乙酸(25.8 mL，337 mmol)添加至2-氯-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶(WO2011/021038；4.9 g，16.9 mmol)、3-胺基-5-甲基吡唑(2.80 g，28.7 mmol)及iPrOH (25 mL)之混合物。加熱該混合物並在120℃下攪拌12 h。容許冷卻該混合物並添加至飽和Na₂ CO₃ 水溶液(100 mL)。該混合物用1:1 THF:EtOAc (100 mL x 2)萃取及乾燥並濃縮合併之有機相。殘餘物藉由製備型HPLC (Xtimate C18 10 μ 250 mm x 50 mm管柱；水(10 mM NH₄ HCO₃ )：ACN；B%：20至50%)純化以產生標題化合物。¹ H NMR (400 MHz CDCl₃ ): δ 8.47-8.52 (m, 1H), 8.33-8.38 (m, 1H), 7.33-7.38 (m, 1H), 5.97 (s, 1H), 3.99-4.07 (m, 4H), 3.78-3.84 (m, 4H), 2.25 (s, 3H)。MS (ESI) 352.1 [MH]⁺ 。

實例9：4-嗎啉基-N-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺。

標題化合物係使用3-胺基-5-苯基吡唑以類似於實例8之方式製備。¹ H NMR (400 MHz CDCl₃ ): δ 8.59-8.64 (m, 1H), 8.44-8.50 (m, 1H), 7.79-7.84 (m, 2H), 7.44-7.47 (m, 3H), 7.27-7.42 (m, 2H), 6.30 (m, 1H), 4.08-4.26 (m, 4H), 3.87-3.95 (m, 4H)。MS (ESI) 414.1 [MH]⁺ 。

實例10：4-嗎啉基-N-(3-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺。

標題化合物係使用3-胺基-5-(吡啶-4-基)吡唑以類似於實例8之方式製備。¹ H NMR (400 MHz, CDCl₃ ): δ 8.63-8.66 (m, 2H), 8.61-8.62 (m, 1H), 8.45-8.46 (m, 1H), 7.70-7.71 (m, 2H), 7.47-7.49 (m, 1H), 7.27-7.28 (m, 1H), 6.20 (s, 1H), 4.13-4.14 (m, 4H), 3.88-3.90 (m, 4H)。MS (ESI) 415.1 [MH]⁺ 。

實例11：N-(1,5-二甲基-1H-吡唑-3-基)-N-甲基-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺。

標題化合物係使用N,1,5-三甲基-1H-吡唑-3-胺以類似於實例8之方式製備。粗產物使用矽膠(DCM:MeOH 100:0至96:4)層析以提供經純化之化合物。¹ H NMR (400 MHz, CDCl₃ ): δ 8.51 (dd, J = 4.4, 0.7 Hz, 1H), 8.44 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.35 (dd, J = 7.4, 5.1 Hz, 1H), 6.54 (s, 1H), 4.06 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 3.86 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 3.73 (s, 3H), 3.66 (s, 3H), 2.30 (s, 3H)。MS (ESI) 380.2 [MH]⁺ 。

實例12：N-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺。

在氬下將2-氯-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶(75 mg，0.26 mmol)、1-甲基-1H-咪唑-2-胺鹽酸鹽(41 mg，0.31 mmol)、碳酸銫(252 mg，0.774 mmol)、乙酸鈀(15 mg，0.064 mmol)、外消旋BINAP (40 mg，0.064 mmol)及DMF (1.3 mL)合併於密封管中並在200℃下攪拌3 h。容許冷卻該反應混合物及然後層析(C18 SiO₂ (10:90至100:0 ACN/H₂ O及0.1% TFA))以提供標題化合物。¹ H NMR (400 MHz, DMSO): δ 8.61 (dd, J = 4.8, 1.7 Hz, 1H)；8.43-8.45 (m, 1H), 7.53 (dd, J = 7.6, 4.8 Hz, 1H), 7.10 (s, 1H), 6.79 (s, 1H), 3.91 (dd, J = 5.7, 3.6 Hz, 4H), 3.76 (t, J = 4.6 Hz, 4 H), 3.48 (s, 3H)。MS (ESI) 352.2 [MH]⁺ 。

實例13：8-(2-(二甲胺基)乙基)-4-嗎啉基-N-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺。

步驟A：(E)-2-氯-8-(2-乙氧基乙烯基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶。將8-溴-2-氯-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶(CAS # 1268241-78-6 (參見WO2017/029514、WO2017/029521、WO2017/029519、WO2015/121657)；500 mg，1.35 mmol)、肆(三苯膦)鈀(156 mg，0.135 mmol)、(E)-2-(2-乙氧基乙烯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷(402 mg，0.43 mmol)、Na₂ CO₃ (315 mg，3.0 mmol)、DME (8 mL)及H₂ O (2 mL)之混合物攪拌加熱至75℃，歷時12 h。容許將該混合物冷卻至室溫並用DCM (2 x 30 mL)萃取。合併之有機相用水及鹽水循序洗，然後乾燥(Na₂ SO₄ )並濃縮。將殘餘物層析(SiO₂ ，0:100至30:70 EtOAc/己烷)以提供標題化合物。MS (ESI) 414.1[MH]⁺ 。

步驟B：將(E)-2-氯-8-(2-乙氧基乙烯基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶(290 mg，0.80 mmol)、THF (10 mL)及4 M HCl (2.75 mL)之混合物加熱至回流，歷時1.5 h。容許將該反應混合物冷卻至室溫並倒入飽和NaHCO₃ 水溶液(20 mL)內。該混合物用EtOAc (3x)萃取並合併有機相，用鹽水洗，然後乾燥(Na₂ SO₄ )並濃縮。將此材料(270 mg)溶解於DCM (5 mL)中並添加二甲胺之2 M THF溶液(0.53 mL，1.06 mmol)。將該溶液維持在室溫下，歷時20 min，然後添加三乙醯氧基硼氫化鈉(224 mg，1.06 mmol)並在室溫下將該混合物攪拌90 min。將該混合物倒入飽和NaHCO₃ 內並用DCM (2x)萃取。乾燥(Na₂ SO₄ )並濃縮合併之有機相。在氬下此殘餘物(290 mg)與3-胺基-5-苯基吡唑(153 mg，0.96 mmol)、[(2-二-環己基膦基-3,6-二甲氧基-2’,4’,6’-三異丙基-1,1’-聯苯)-2-(2’-胺基-1,1’-聯苯)]甲磺酸鈀(II) (BrettPhos Pd G3，91 mg，0.10 mmol)、二環己基(2’,4’,6’-三異丙基-3,6-二甲氧基-[1,1’-聯苯]-2-基)膦(54 mg，0.10 mmol)、第三丁醇鈉(92 mg，0.96 mmol)及二噁烷(4 mL)合併於乾燥反應管中。該混合物用氬鼓泡，然後密封並攪拌加熱至100℃，歷時18 h。容許將該混合物冷卻至室溫，然後用DCM稀釋並用水洗。將水層分離並用DCM萃取，然後乾燥(Na₂ SO₄ )並濃縮合併之有機相。將殘餘物層析(SiO₂ ，0:100至30:70 MeOH/DCM)以提供標題化合物。¹ H NMR (400 MHz, DMSO): δ 12.59 (br s, 1H), 8.44 (s, 1H), 7.76 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.42 (s, 2H), 3.99 (s, 4H), 3.78 (s, 4H), 2.91 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 2.57 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 2.21 (s, 6H)。MS (ESI) 485.3 [MH]⁺ 。

實例14：4-嗎啉基-N-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)-8-(2-(吡咯啶-1-基)乙基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺。

標題化合物係以類似於實例13之方式製備，在步驟B中使用吡咯啶代替二甲胺：¹ H NMR (400 MHz, DMSO): δ 8.45 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 7.42 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.31 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 3.99 (t, J = 4.6 Hz, 4H), 3.78 (t, J = 4.6 Hz, 4H), 2.95 (t, J = 7.3 Hz, 2 H), 2.75 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 2.53 (s, 4H), 1.68 (s, 4H)。MS (ESI) 511.4 [MH]⁺ 。

表2中之化合物係使用類似於彼等參考例示性方法中描述者之方法製備。表2：

實例	化學名稱	結構	*實例方法	資料
15	N-(3-(2-氟苯基)-1H-吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽		1	LC-MS：m/z 432 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, DMSO-d₆ ) δ 10.02 (s, 1H), 8.72 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 8.65 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.92 (t, J = 3.9 Hz, 1H), 7.62-7.57 (m, 1H), 7.42-7.28 (m, 3H), 6.73 (s, 1H), 4.12-4.06 (m, 4H), 3.87-3.80 (m, 4H)。
16	N-(3-(3-氟苯基)-1H-吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽		1	LC-MS：m/z 432 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, DMSO-d₆ ) δ 9.98 (s, 1H), 8.82 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 8.64 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 7.66-7.57 (m, 3H), 7.50-7.46 (m, 1H), 7.17 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.72 (s, 1H), 4.11-4.06 (m, 4H), 3.88-3.82 (m, 4H)。
17	N-(3-(3-氯苯基)-1H-吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽		1	LC-MS：m/z 448 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, CD₃ OD) δ 8.61 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.54 (dd, J = 7.8, 1.5 Hz, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.59-7.55 (m, 2H), 7.42-7.33 (m, 2H), 6.44 (s, 1H), 4.25-4.18 (m, 4H), 3.85-3.82 (m, 4H)。
18	4-嗎啉基-N-(3-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽		1	LC-MS：m/z 482 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, DMSO-d₆ ) δ 9.97 (s, 1H), 8.81 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 8.64 (dd, J = 4.8, 1.8 Hz, 1H), 8.13-8.09 (m, 2H), 7.69 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 8.61 (dd, J = 7.5, 4.8 Hz, 1H), 6.73 (s, 1H), 4.09-4.04 (m, 4H), 3.84-3.81 (m, 4H)。
19	N-(3-(3,4-二氟苯基)-1H-吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽		1	LC-MS：m/z 450 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, DMSO-d₆ ) δ 9.99 (s, 1H), 8.82 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 8.64 (dd, J = 4.8, 1.5 Hz, 1H), 7.88-7.80 (m, 1H), 7.61-7.46 (m, 3H), 6.66 (s, 1H), 4.07-4.01 (m, 4H), 3.83-3.76 (m, 4H)。
20	4-嗎啉基-N-(4-苯基-1H-咪唑-2-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽		1	LC-MS：m/z 414 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, DMSO-d₆ ) δ 8.82 (dd, J = 7.8, 1.8 Hz, 1H), 8.68 (dd, J = 4.8, 1.8 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.72 (s, 1H), 7.66 (dd, J = 7.5, 4.8 Hz, 1H), 7.54-7.49 (m, 2H), 7.43-7.40 (m, 1H), 4.12-4.06 (m, 4H), 3.87-3.81 (m, 4H)。
21	4-嗎啉基-N-苯乙基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺		2	LC-MS (ESI+)：m/z 376 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, CDCl₃ ) δ 8.53 (dd, J = 4.8, 1.8 Hz, 1H), 8.44 (dd, J = 7.8, 1.8 Hz, 1H), 7.39-7.20(m, 6H), 4.11-4.07 (m, 4H), 3.87-3.84 (m, 4H), 3.75-3.68 (m, 2H), 2.95 (t, J = 7.2 Hz, 2H)。
22	(4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)胺甲酸苯酯鹽酸鹽		3	LC-MS：m/z 392 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, CDCl₃ ) δ 10.00 (s, 1H), 8.78-8.71 (m, 2H), 7.60-7.54 (m, 1H), 7.44-7.39 (m, 2H), 7.30-7.20 (m, 3H), 4.40-4.25 (m, 4H), 3.90-3.77 (m, 4H)。
23	7-(3-(二甲胺基)丙氧基)-4-嗎啉基-N-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽		4	LC-MS (ESI+)：m/z 515 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, CD₃ OD) δ 8.48 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.73 ( d, J = 6.9 Hz, 2H), 7.53-7.44 (m, 3H), 7.12 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 4.58 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 4.31-4.24 (m, 4H), 3.95-3.88 (m, 4H), 3.45-3.36 (m, 2H), 2.96 (s, 6H), 2.36-2.29 (m, 2H)。
24	4-嗎啉基-7-(2-嗎啉基乙氧基)-N-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽		4	LC-MS (ESI+)：m/z 543 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, CD₃ OD) δ 8.54 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.74 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 2H), 7.56-7.44 (m, 3H), 7.22 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.49 (s, 1H), 4.32-4.25 (m, 4H), 4.11-4.07 (m, 2H), 3.93-3.83 (m, 6H), 3.76-3.73 (m, 2H), 3.68-3.64 (m, 3H), 3.47-3.32 (m, 3H)。
25	4-嗎啉基-7-(3-嗎啉基丙氧基)-N-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽		4	LC-MS (ESI+)：m/z 557 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, DMSO-d₆ +D₂ O) δ 8.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.50-7.46 (m, 2H), 7.40-7.38 (m, 1H), 7.06 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.69 (s, 1H), 4.47 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 4.12-4.07 (m, 4H), 4.00-3.96 (m, 2H), 3.83-3.75 (m, 6H), 3.30-3.27 (m, 4H), 3.13-3.06 (m, 2H), 2.31-2.19 (m, 2H)。
26	4-嗎啉基-N-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)-7-(2-(吡咯啶-1-基)乙氧基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽		4	LC-MS (ESI+)：m/z 527 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, DMSO-d₆ +D₂ O) δ 8.65 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.15 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.48-7.45 (m, 2H), 7.40-7.35 (m, 1H), 7.13 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.71 (s, 1H), 4.72 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 4.11-4.05 (m, 4H), 3.85-3.83 (m, 4H), 3.66-3.58 (m, 4H), 3.18-3.08 (m, 2H), 2.08-1.86 (m, 4H)。
27	4-嗎啉基-N-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)-7-(3-(吡咯啶-1-基)丙氧基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽		4	LC-MS (ESI+)：m/z 541 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, DMSO-d₆ ) δ 8.61 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.49-7.44 (m, 2H), 7.38-7.34 (m, 1H), 7.03 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.72 (s, 1H), 4.46 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 4.08-4.03 (m, 4H), 3.83-3.79 (m, 4H), 3.58-3.54 (m, 2H), 3.32-3.29 (m, 2H), 3.05-3.02 (m, 2H), 2.22-2.17 (m, 2H), 2.03-2.01 (m, 2H), 1.90-1.86 (m, 2H)。
28	7-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙氧基)-4-嗎啉基-N-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽		4	LC-MS (ESI+)：m/z 556 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, DMSO-d₆ +D₂ O) δ 8.64 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.48-7.44 (m, 2H), 7.37-7.32 (m, 1H), 7.08 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.71 (s, 1H), 4.73 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 4.07-4.01 (m, 4H), 3.85-3.79 (m, 4H), 3.72-3.53 (m, 8H), 2.83-2.79 (m, 5H)。
29	7-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙氧基)-4-嗎啉基-N-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽		4	LC-MS (ESI+)：m/z 570 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, CD₃ OD) δ 8.47 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 7.52-7.41 (m, 3H), 7.12 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 4.62 (t, J = 6.0 Hz, 2H ), 4.31-4.25 (m, 4H), 3.95-3.91 (m, 4H), 3.87-3.84 (m, 6H), 3.63-3.59 (m, 4H), 3.03 (s, 3H), 2.45-2.37 (m, 2H)。
30	7-甲氧基-4-嗎啉基-N-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽		4	LC-MS (ESI+)：m/z 444 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, CD₃ OD) δ 8.41 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 7.52-7.41 (m, 3H), 7.07 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.46 (s, 1H), 4.31-4.23 (m, 4H), 4.07 (s, 3H), 3.93-3.88 (m, 4H)。
31	4-嗎啉基-N-(3-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽		6	LC-MS (ESI+)：m/z 415 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, DMSO-d₆ ) δ 10.16 (s, 1H), 9.24 (s, 1H), 8.89 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 8.78 (d, J = 5.1 Hz, 2H), 8.64 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 8.02-7.98 (m, 1H), 7.62-7.58 (m, 1H), 6.76 (s, 1H), 4.09-4.01 (m, 4H), 3.86-3.79 (m, 4H)。
32	N-(3-(5-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽		7	LC-MS (ESI+)：m/z 429 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, DMSO-d₆ ) δ 10.18 (s, 1H), 9.11 (s, 1H), 8.88 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.71 (s, 1H), 8.65-8.63 (m, 1H), 7.62-7.58 (m, 1H), 6.76 (s, 1H), 4.09-4.01 (m, 4H), 3.82-3.79 (m, 4H), 2.55 (s, 3H)。
33	N-(3-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽		7	LC-MS (ESI+)：m/z 429 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, DMSO-d₆ ) δ 10.26 (s, 1H), 8.83 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 8.65 (dd, J = 4.8, 1.5 Hz, 1H), 8.32-8.26 (m, 1 H), 8.14 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.66-7.59 (m, 2H), 7.02 (s, 1H), 4.09-4.01 (m, 4H), 3.86-3.79 (m, 4H), 2.75 (s, 3H)。
34	N-(3-(3-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽		7	LC-MS (ESI+)：m/z 444 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, CD₃ OD) δ 8.72-8.70 (m, 1H), 8.65 (dd, J = 4.8, 1.5 Hz, 1H), 7.67 (dd, J = 8.1, 4.8 Hz, 1H), 7.44-7.39 (m, 1H), 7.30 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.02 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.49 (s, 1H), 4.39-4.31 (m, 4H), 3.94-3.91 (m, 4H), 3.87 (s, 3H)。
35	4-嗎啉基-N-(3-(3-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺鹽酸鹽		7	LC-MS (ESI+)：m/z 498 (MH⁺ )。¹ H NMR (300 MHz, CD₃ OD) δ 8.73-8.71 (m, 1H), 8.64 (dd, J = 7.8, 1.8 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.69-7.59 (m, 3H), 7.36 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.58 (s, 1H), 4.31-4.28 (m, 4H), 3.94-3.91 (m, 4H)。
36	(S)-N-(1-環丙基乙基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺		2	¹ H NMR (CDCl₃ ) δ 8.26 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 7.12 (dd, 1H), 3.80 (br s, 4H), 3.59 (d, 4H), 3.25 (m, 1H), 1.04 S(d, 3H), 0.35 (m, 1H), 0.0-0.25 (m, 3H)；LCMS (M+H)：341 m/z。
37	4-嗎啉基-N-苯基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺		12	¹ H NMR (CDCl₃ ) δ 8.56 (d, 1H), 8.5 (d, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.41 (m, 1H), 7.35 (m, 2H), 7.04 (m, 1H), 4.11 (br s, 4H), 3.88 (dd, 4H)；LCMS (M+H)：348.15 m/z。
38	4-嗎啉基-N-(吡啶-4-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺		12	¹ H NMR (CDCl₃ ) δ 9.4 (s, 1H), 9.12 (d, 2H), 8.68 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 7.55 (m, 1H), 7.45 (d, 2H), 4.1 (寬，4H), 3.94 (d, 4H)。
39	4-嗎啉基-N-(吡啶-3-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺		12	¹ H NMR (DMSO-d₆ ) δ 9.54 (s, 1H), 8.93 (d, 1H), 8.63 (dd, 1H), 8.5 (d, 1H), 8.28 (d, 1H), 8.12 (d, 1H), 7.58 (dd, 1H), 7.33 (dd, 1H), 4.02 (d, 4H), 3.82 (dd, 4H)；LCMS (M+H)：349.1 m/z。
40	4-嗎啉基-N-(吡啶-2-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺		12	¹ H NMR (DMSO-d₆ ) δ 9.33 (s, 1H), 8.63 (d, 1H), 8.50 (dd, 1H), 8.39 (d, 1H), 7.78 (dd, 1H), 7.58 (dd, 1H), 6.97 (dd, 1H), 4.03 (d, 4H), 3.82 (dd, 4H)；LCMS (M+H)：349.1 m/z。
41	4-嗎啉基-N-(嘧啶-4-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺		12	¹ H NMR (DMSO-d₆ ) δ 10.1 (寬，1H), 8.74 (s, 1H), 8.64-8.35 (m, 4H), 7.61 (dd, 1H), 4.05 (m, 4H), 3.82 (m, 4H)；LCMS (M+H)：350.1 m/z。
42	4-嗎啉基-N-(嘧啶-2-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺		12	¹ H NMR (DMSO-d₆ ) δ 9.95 (s, 1H), 8.65-8.35 (m, 4H), 7.58 (dd, 1H), 7.0 (dd, 1H), 4.02 (m, 4H), 3.79 (m, 4H)；LCMS (M+H)：350.1 m/z。
43	4-嗎啉基-N-(嘧啶-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺		12	¹ H NMR (DMSO-d₆ ) δ 9.70 (s, 1H), 9.22 (s, 2H), 8.74 (s, 1H), 8.56 (dd, 1H), 7.58 (t, 1H), 4.03 (m, 4H), 3.83 (m, 4H)；LCMS (M+H)：350.1 m/z。
44	N-([1,1'-聯苯]-4-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺		12	¹ H NMR (DMSO-d₆ ) δ 9.49 (s, 1H), 8.62 (dd, 2H), 7.92 (d, 2H), 7.66 (m, 5H), 7.45 (dd, 2H), 7.28 (dd, 1H), 4.03 (m, 4H), 3.83 (m, 4H)；LCMS (M+H)：424.2 m/z。
45	N-([1,1'-聯苯]-3-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺		12	¹ H NMR (DMSO-d₆ ) δ 9.48 (s, 1H), 8.63 (d, 1H), 8.47 (m, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.7-7.1 (m, 9H), 4.04 (m, 4H), 3.82 (m, 4H)；LCMS (M+H)：424.1 m/z。
46	N-([1,1'-聯苯]-2-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺		12	¹ H NMR (DMSO-d₆ ) δ 8.56 (d, 1H), 8.40 (d, 1H), 7.99 (br s, 1H), 7.90 (m, 1H), 7.55-7.35 (m, 6H), 7.29 (m, 2H), 7.19 (m, 1H), 3.86 (m, 4H), 3.73 (m, 4H)；LCMS (M+H)：424.2 m/z。
47	N-(1,5-二甲基-1H-吡唑-3-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺		12	¹ H NMR (CDCl₃ ) δ 8.9 (d, 1H), 8.8 (d, 1H), 7.8 (m, 1H), 7.55 (br s, 1H), 6.9 (s, 1H), 4.45 (m, 4H), 4.25 (m, 4H), 4.05 (s, 3H), 2.65 (s, 3H)；LCMS (M+H)：366.15 m/z。
48	4-嗎啉基-N-(3-(鄰甲苯基)-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺		7	¹ H NMR (CDCl₃ ) δ 8.55 (m, 2H), 7.5 (m, 1H), 7.4 (d, 1H), 7.3 (s, 3H), 6.5 (s, 1H), 4.2 (m, 4H), 3.8 (m, 4H), 2.5 (s, 3H)；LCMS (M+H)：428.1 m/z。
49	4-嗎啉基-N-(3-(間甲苯基)-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺		7	¹ H NMR (DMSO-d₆ ) δ 12.5 (s, 1H), 9.6 (d, 1H), 7.8-7.5 (m, 4H), 7.4 (m, 1H), 7.3 (m, 1H), 4.0 (m, 4H), 3.8 (m, 4H), 2.5 (s, 3H)；LCMS (M+H)：428.2 m/z。
50	4-嗎啉基-N-(3-(對甲苯基)-1H-吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺		7	¹ H NMR (丙酮-d₆ ) δ 8.7 (br s, 1H), 8.61 (d, 1H), 7.74 ( m, 2H), 7.57 (t, 1H), 7.24 (d, 2H), 4.10 (m, 4H), 3.88 (m, 4H), 2.35 (s, 3H)；LCMS (M+H)：428.2 m/z。
51	8-溴-4-嗎啉基-N-(5-苯基-1H-吡唑-3-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-胺		1	¹ H NMR (CDCl₃ ) δ 8.6 (s, 2H), 7.9 (m, 2H), 7.5-7.2 (m, 3H), 6.0 (s, 1H), 4.2 (m, 4H), 3.8 (m, 4H)；LCMS (M+H)：492/494 m/z。

*此表中之化合物通常根據該表中認定之方法，替換適當之起始材料製備。

實例52：4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶。

將2-氯-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶(75 mg，0.26 mmol)、10% Pd/C (82 mg)及甲酸銨(98 mg，1.5 mmol)之混合物攪拌於甲醇(1 mL)中直至觀測到完全轉化。使該反應混合物濾過矽藻土並濃縮濾液。粗材料經受逆相層析術(C₁₈ ，SiO₂ )，用於水中之10至100% MeCN溶析，以提供標題化合物(32 mg，44%)。

在本文指示之情況下，下表中之化合物係使用類似於彼等上文描述之例示性方法6中描述者之方法製備。實例53至63使用之受保護之3-胺基吡唑可購買或根據例示性方法6之步驟A及B自適當之β-酮腈製備。該等β-酮腈係藉由乙腈陰離子與適當之酯根據以下中發現之方法反應製備：Nani, R. R., Reisman, S. E. (2013). α-Diazo-β-ketonitriles: Uniquely Reactive Substrates for Arene and Alkene Cyclopropanation. Journal of the American Chemical Society, 135(19), 7304-7311。最終化合物係藉由2-溴-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶與受保護之3-胺吡唑在步驟C中概述之條件下反應，接著根據例示性方法6之步驟D脫保護獲得。表3：

實例 #	化學名稱	結構	實例方法	LC-MS、NMR資料
53	N -(3-環丙基-1H -吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d ]嘧啶-2-胺鹽酸鹽	HCl	6	LC-MS (ESI+)：m/z 378 (MH⁺ )。¹ HNMR (300 MHz, CD₃ OD) δ8.71-8.66 (m, 2H), 7.65-7.61 (m, 1H), 5.83 (s, 1H), 4.27-4.22 (m, 4H), 3.91-3.86 (m, 4H), 2.05-2.00 (m, 1H), 1.20-1.11 (m, 2H), 0.89-0.84 (m, 2H)。
54	N -(3-(環丙基甲基)-1H -吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d ]嘧啶-2-胺鹽酸鹽	HCl	6	LC-MS (ESI+)：m/z 392 (MH⁺ )。¹ HNMR (300 MHz, CD₃ OD) δ 8.74-8.67 (m, 2H), 7.63 (dd, J = 7.8, 5.1 Hz, 1H), 6.10 (s, 1H), 4.27-4.22 (m, 4H), 3.92-3.86 (m, 4H), 2.64 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 1.09-1.03 (m, 1H), 0.65-0.57 (m, 2H), 0.32-0.27 (m, 2H)。
55	N -(3-環丁基-1H -吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d ]嘧啶-2-胺鹽酸鹽	HCl	6	LC-MS (ESI+)：m/z 392 (MH⁺ )。¹ HNMR (300 MHz, CD₃ OD) δ 8.70-8.67 (m, 2H), 7.63 (dd, J = 7.8, 5.1 Hz, 1H), 6.07 (s, 1H), 4.31-4.25 (m, 4H), 3.92-3.88 (m, 4H), 3.68-3.54 (m, 1H), 2.49-2.41 (m, 2H), 2.34-2.12 (m, 3H), 2.09-1.97 (m, 1H)。
56	N -(3-(環丁基甲基)-1H -吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d ]嘧啶-2-胺鹽酸鹽	HCl	6	LC-MS (ESI+)：m/z 406 (MH⁺ )。¹ HNMR (300 MHz, CD₃ OD) δ 8.69-8.67 (m, 2H), 7.63 (dd, J = 7.8, 5.1 Hz, 1H), 5.98 (s, 1H), 4.28-4.22 (m, 4H), 3.93-3.88 (m, 4H), 2.92-2.80 (m, 2H), 2.73-2.63 (m, 1H), 2.16-2.12 (m, 2H), 1.99-1.76 (m, 4H)。
57	4-嗎啉基-N -(3-(三氟甲基)-1H -吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d ]嘧啶-2-胺鹽酸鹽	HCl	6	LC-MS (ESI+)：m/z 406 (MH⁺ )。¹ HNMR (300 MHz, DMSO-d₆ ) δ 10.18 (s, 1H), 8.94 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 8.62 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 7.58 (dd, J = 7.8, 5.4 Hz, 1H), 6.24 (s, 1H), 4.05-4.01 (m, 4H), 3.86-3.80 (m, 4H)。
58	N -(3-苯甲基-1H -吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d ]嘧啶-2-胺鹽酸鹽	HCl	6	LC-MS (ESI+)：m/z 428 (MH⁺ )。¹ HNMR (300 MHz, CD₃ OD) δ 8.67-8.64 (m, 2H), 7.62 (dd, J = 7.5, 5.1 Hz, 1H), 7.34-7.24 (m, 5H), 5.96 (s, 1H), 4.26-4.19 (m, 4H), 4.07 (s, 2H), 3.92-3.86 (m, 4H)。
59	N -(3-環戊基-1H -吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d ]嘧啶-2-胺鹽酸鹽	HCl	6	LC-MS (ESI+)：m/z 406 (MH⁺ )。¹ HNMR (300 MHz, DMSO-d₆ ) δ 11.80 (s, 1H), 9.10 (s, 1H), 8.60-8. 48 (m, 2H), 7.56-7.52 (m, 1H), 6.45 (s, 1H), 4.08-3.95 (m, 4H), 3.90-3.79 (m, 4H), 3.10-2.98 (m, 1H), 2.10-1.90 (m, 2H), 1.72-1.62 (m, 6H)。
60	4-嗎啉基-N -(3-(噻吩-2-基)-1H -吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d ]嘧啶-2-胺鹽酸鹽	HCl	6	LC-MS (ESI+)：m/z 420 (MH⁺ )。¹ HNMR (300 MHz, CD₃ OD) δ 8.72 (dd, J = 4.8, 1.5 Hz, 1H), 8.65 (dd, J = 5.1, 1.8 Hz, 1H), 7.67 (dd, J = 7.8, 4.8 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.17 (dd, J = 5.1, 3.9 Hz, 1H), 6.34 (s, 1H), 4.40-4.31 (m, 4H), 3.96-3.91 (m, 4H)。
61	4-嗎啉基-N -(3-(噻吩-3-基)-1H -吡唑-5-基)吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d ]嘧啶-2-胺鹽酸鹽	HCl	6	LC-MS (ESI+)：m/z 420 (MH⁺ )。¹ HNMR (300 MHz, DMSO-d₆ ) δ 8.75 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 8.68-8.66 (m, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.68-7.57 (m, 3H), 6.68 (s, 1H), 4.16-4.03 (m, 4H), 3.90-3.81 (m, 4H)。
62	N -(3-乙基-1H -吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d ]嘧啶-2-胺鹽酸鹽	HCl	6	LC-MS (ESI+)：m/z 366 (MH⁺ )。¹ HNMR (300 MHz, CD₃ OD) δ 8.80-8.60 (m, 2H), 7.62-7.60 (m, 1H), 6.00 (s, 1H), 4.26-4.21 (m, 4H), 3.90-3.81 (m, 4H), 2.77 (q, J = 7.5 Hz, 2H), 1.33 (t, J = 7.5 Hz, 3H)。
63	N -(3-異丙基-1H -吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d ]嘧啶-2-胺鹽酸鹽	HCl	6	LC-MS (ESI+)：m/z 380 (MH⁺ )。¹ HNMR (300 MHz, CD₃ OD) δ 8.80-8.60 (m, 2H), 7.62-7.60 (m, 1H), 6.00 (s, 1H), 4.26-4.21 (m, 4H), 3.92-3.85 (m, 4H), 3.11-3.06 (m, 1H), 1.35 (d, J = 6.9 Hz, 6H)。
64	N -(3-(環戊基甲基)-1H -吡唑-5-基)-4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d ]嘧啶-2-胺

生物實例1：PIKfyve之抑制

在桿狀病毒表現系統中表現為N端GST融合蛋白(265 kDa)之全長人類重組PIKFYVE係自Carna Biosciences (日本，神戶)獲得。激酶受質係藉由將螢光標記之磷脂酸肌醇3-磷酸酯(PI3P)與二氧磷基-L-絲胺酸(PS)以1:10比率在50 mM HEPES緩衝劑pH 7.5中混合並音波處理製備。

激酶反應如下以20 mL之總體積組裝於384孔盤(Greiner)中。將激酶蛋白預先稀釋於包含25 mM HEPES (pH 7.5)、1 mM DTT、2.5 mM MgCl₂ 及2.5 mM MnCl₂ ，及0.005% Triton X-100之分析緩衝劑中，並分配至384孔盤(每孔10 µL)內。將測試化合物連續預先稀釋於DMSO中並藉由聲學分配(Labcyte Echo)添加至蛋白質樣本。在所有樣本中，DMSO之濃度等於1%。所有測試化合物係在12種濃度下測試。阿匹莫德(Apilimod)用作參考化合物並在各分析盤中以相同方式測試。將對照樣本(0%抑制、缺乏抑制劑、僅DMSO)及100%抑制(缺乏酶)一式四份組裝並用於計算在化合物之存在下之抑制%。反應藉由添加以ATP補充之10 µL 2x PI3P/PS受質開始。酶之最終濃度係2 nM，ATP之最終濃度係10 mm，及PI3P/PS受質之最終濃度係1 µm (PI3P)。容許激酶反應在室溫下進行3 h。培養後，該等反應藉由添加50 mL終止緩衝劑(100 mM HEPES，pH 7.5、0.01% Triton X-100、20 mM EDTA)淬滅。在微流電泳儀器(Caliper LabChip® 3000，Caliper Life Sciences/Perkin Elmer)上分析終止之盤。量測PI(3)P受質及PI(3,5)P產物峰之相對螢光強度之變化。將各測試樣本之活性測定為產物與總和之比率(PSR)：P/(S+P)，其中P係產物之峰高度，及S係受質之峰高度。抑制百分比(P_inh )使用下列方程式確定： P_inh = (PSR_0%inh - PSR_化合物 )/(PSR_0%inh - PSR_100%inh )*100 其中PSR_化合物係在化合物之存在下之產物/總和比率，PSR_0%inh 係在缺乏化合物時之產物/總和比率，及PSR_100%inh 係在缺乏酶時之產物/總和比率。為測定測試化合物之IC₅₀ (50%抑制)，%-inh cdata (P_inh 相比於化合物濃度)係由四參數S型劑量反應模型使用XLfit軟體(IDBS)擬合。

本發明之某些化合物之IC₅₀ 值提供於下表4中。表4：

實例	PIKfyve IC₅₀ (nM)	實例	PIKfyve IC₅₀ (nM)
1	473	33	261
2	＞10,000	34	303
3	＞10,000	35	1540
4	68	36	＞10000
5	17	37	439
6	251	38	＞10000
7	573	39	2180
8	2200	40	2770
9	23	41	＞10000
10	185	42	＞10000
11	＞10000	43	＞10000
12	＞10000	44	356
13	143	45	3980
14	2320	46	3870
15	108	47	4320
16	129	48	515
17	129	49	38
18	1630	50	398
19	2180	51	862
20	4750	52	＞10000
21	988	53	2090
22	6400	54	2600
23	20	55	1280
24	61	56	1790
25	14	57	5900
26	82	58	831
27	16	59	1290
28	46	60	37
29	3	61	26
30	163	62	7850
31	1090	63	1850
32	825

生物實例2：PI3K同功型之抑制

使用表5中顯示之酶製劑。表5：

分析名稱	催化子單元	調節子單元	表現宿主
PI3Kα (p110α/p85α)	全長N端FLAG標誌之人類p110α	全長，人類(無標誌) p85α	SF9細胞(桿狀病毒)
PI3Kβ (p110β/p85α)	全長N端GST標誌之人類p110β	全長，人類(無標誌) p85α	SF9細胞(桿狀病毒)
PI3Kδ (p110δ/p85α)	全長N端GST標誌之人類p110δ	全長，人類(無標誌) p85α	SF9細胞(桿狀病毒
PI3Kγ (p120γ)	全長N端His標誌之人類p120γ	無	SF9細胞(桿狀病毒)

激酶受質係藉由螢光標記之磷脂酸肌醇4,5-磷酸酯(PIP2)與二氧磷基-L-絲胺酸(PS)以1:20比率在50 mM HEPES緩衝劑pH 7.5中混合並音波處理製備。

激酶反應如下以20 mL之總體積組裝於384孔盤(Greiner)中。將激酶蛋白預先稀釋於包含50 mM HEPES (pH 7.5)、0.012% CHAPS、1 mM DTT、10 mM Na₃ VaO₄ 、10 mM β-GP、3 mM MgCl₂ 及40 mM NaCl₂ 之分析緩衝劑中，並分配至內384孔盤(10 µL每孔)內。將測試化合物連續預先稀釋於DMSO中並藉由聲學分配(Labcyte Echo)添加至蛋白質樣本。在所有樣本中，DMSO之濃度等於1%。所有測試化合物係在12種濃度下測試。將對照樣本(0%抑制、缺乏抑制劑、僅DMSO)及100%抑制(缺乏酶)一式四份組裝並用於計算在測試化合物之存在下之抑制%。反應藉由添加以ATP補充之10 µL PIP2/PS受質開始。酶之最終濃度係0.5 nM (PI3Kα)、1 nM (PI3Kβ)、10 nM (PI3Kγ)及0.25 nM (PI3Kδ)。ATP之最終濃度係90 µm (PI3Kα)、60 µm (PI3Kβ)、100 µm (PI3Kγ)及90 µm (PI3Kδ)。PIP2/PS受質之最終濃度係1 µm (PIP2)。容許激酶反應在室溫下進行3 h。培養後，該等反應藉由添加50 mL終止緩衝劑(100 mM HEPES，pH 7.5、0.01% Triton X-100、20 mM EDTA)淬滅。在微流電泳儀器(Caliper LabChip® 3000，Caliper Life Sciences/Perkin Elmer)上分析終止之盤。量測PI(4,5)P受質及PI(3,4,5)P產物峰之相對螢光強度之變化。將各測試樣本之活性測定為產物與總和之比率(PSR)：P/(S+P)，其中P係產物之峰高度，及S係受質之峰高度。抑制百分比(P_inh )使用下列方程式確定： P_inh = (PSR_0%inh - PSR_化合物 )/(PSR_0%inh - PSR_100%inh )*100 其中PSR_化合物係在化合物之存在下之產物/總和比率，PSR_0%inh 係在缺乏化合物時之產物/總和比率，及PSR_100%inh 係在缺乏酶時之產物/總和比率。為測定測試化合物之IC₅₀ (50%抑制)，%-inh cdata (P_inh 相比於化合物濃度)係由四參數S型劑量反應模型使用XLfit軟體(IDBS)擬合。

生物實例3：HEK/TDP存活分析

用含有TDP-43 Q331K突變之質粒轉染永生化人類胚腎293T (HEK 293T)，導致與ALS病患生物相關之細胞死亡增加。將細胞死亡量測為ATP (其指示代謝活性細胞)之量減少，其由發光Cell-Titer-Glo® (CTG)試劑定量。評估化合物在此模型中相較於無治療組之CTG變化。訊息增加指示存活(救援)改善及訊息減少指示存活降低。細胞救援係以96孔形式用八種不同濃度之測試化合物歷時48小時，一式六份量測。使用Promega Cell-Titer-Glo®發光細胞存活率分析以定量ATP (其指示代謝活性細胞) (參見方案：https://www.promega.com/-/media/files/resources/protocols/technical-manuals/101/celltiterglo-2-0-assay-protocol.pdf?la=en)。發光訊息係使用PerkinElmer EnVision或Molecular Devices SpectraMax偵測。

化合物在給定劑量下對細胞存活率之效應係使用三步驟程序確定。首先，吾人使用每個盤上之六個未處理之孔作為對照，計算Cell Titer-Glo發光值之Hedge's g。其次，因為針對各化合物劑量對進行多次實驗性試驗，所以後設分析此等結果以產生效應量之單一估算。最後，收集來自所有化合物劑量對之值以使用Stephens, M.(False discovery rates:a new deal, Biostatistics, 18 [2], 2017, 275-294)之經驗貝葉斯框架進行多項假設測試，針對量測之效應及相關s值產生可靠區間。簡而言之，此方法計算各實驗之局部假符號率(local false sign rate)。類似於Efron, B.(Size, power and false discovery rates, Ann. Statist. 35 [4], 2007, 1351-1377)之局部假發現率(local false discovery rate)，此值衡量各效應之符號之可信度(而不是各效應非零之可信度)。若吾人以更大絕對局部假符號率估算所有效應之符號，則先前數字中報導之s值係誤差之預期分數，類似於Storey, JD (The positive false discovery rate: a Bayesian interpretation and the q-value, Ann. Statist. 31 [6] 2003, 2013-2035)之q值定義。產生大於3之帶符號log s值之化合物視為命中。此臨限值由各別校準實驗測定，其中Cell Titer-Glo®係在由未處理之細胞構成之空白盤中量測，以評定分析中固有之雜訊。資料呈現為自劑量反應曲線獲得之最大救援效應。

生物實例4：iPSC MN存活分析

將來自具有已知SOD1 A4V突變之ALS病患之纖維母細胞重新編程為誘導性多能幹細胞(iPSC)及然後分化為運動神經元。在培養中，相較於來源於健康個體在應激狀態(缺乏營養素之培養基，Hank’s緩衝鹽溶液HBSS)下之運動神經元，來源於ALS病患之運動神經元顯示死亡率增加。SOD1存活缺陷與ALS病患生物學之子組相關且用作適用於測定化合物誘導之存活救援之基於細胞之模型。細胞救援係遵循超過兩種不同濃度之各化合物歷時六天以超過一式四份以96孔形式量測，以確保統計檢定力＞0.8之研究。細胞用GFP報導子轉導並一天一次成像以追蹤存活。廣譜凋亡蛋白酶抑制劑用作陽性對照。

基於顯微術影像之讀數：細胞用GFP報導子轉導並一天一次以藍色雷射成像來追蹤存活。使用之成像器包括Biotek Cytation 5及Thermo Fisher EVOS Auto FL 2。所有影像均經受由滾動帽背景扣除及對比度調整構成之統一處理。顯微術影像使用Verge專有之軟體分析。細胞係由其等形狀識別且各細胞係在各孔之影像及時間點上追蹤。存活係自Kaplan-Meier曲線視覺評定。細胞之存活係使用混合效應Cox回歸建模並測試，其中將各孔建模為隨機效應，並將組(對照/治療)建模為規定效應。治療與對照之間之風險比係於該Cox回歸內估算，其中1.0之值表示無變化，值＞1.0指示存活應治療而降低，及值＜1.0指示存活應治療而增加。表7中將資料呈現為在各種濃度下量測之風險比分數之最大降低。

本發明之某些化合物之IC₅₀ 值提供於下表6中。表 6 ：

實例	PI3Kα IC₅₀ (nM)	PI3Kβ IC₅₀ (nM)	PI3Kδ IC₅₀ (nM)	PI3Kγ IC₅₀ (nM)
8	161	306	23.9	2610
9	144	＞10000	75	＞10000
10	117	1310	37	582
11	244	7030	278	4668
12	1640	6540	1890	＞10000
21	158	243	37.4	1410
22	802	2700	464	＞10000
36	77	749	77	2650
37	67	1040	41	7280
38	8740	5820	1490	＞10000
39	82	370	60	677
40	102	1190	66	2040
47	82	2630	54	1870
55	16	315	7	206
56	47	937	24	1540

細胞存活資料提供於下表7中。表 7 ：

實例	IPSC-C9 (風險比)	IPSC-SOD1 (風險比)	HEK/TDP (uM，最大救援劑量)
9	0.65	0.81	0.2
10	0.96	1.04	0
11	0.99	1.1	0
14	0.9	0.96	0.19
37	0.99	1.03	0.1
43	1.06	1.1	0.34
47		1.1	0
49	1.2	1.03	0.13
61	0.542

出於清楚及瞭解之目的，已藉助於說明及實例相當詳細地前述揭示內容。因此，應瞭解上文描述旨在說明而非限制。因此，本發明之範圍不應參考上文描述確定，而是應參考下列隨附申請專利範圍，連同此等申請專利範圍賦予之等同物之完整範圍確定。

Claims

一種式(I)化合物，
(I) 其中： R¹ 係H、C_1-4 烷基或-NR^a R^b ；其中R^a 係H或C_1-4 烷基；及 R^b 係-L-R^c ；其中L係鍵、-C(O)-、-C(O)O-或-C_1-4 伸烷基-；及 R^c 係苯基、單環環烷基、單環雜環烷基或單環雜芳基，其中各苯基、環烷基、雜環烷基或雜芳基視需要經一、二或三個R^d 取代基取代；其中各R^d 取代基獨立地係C_1-4 烷基、C_1-4 烯基、C_1-4 炔基、-O-C_1-4 烷基、鹵基、氰基、硝基、疊氮基、鹵基-C_1-4 烷基、-O-C_1-4 -鹵烷基、-NR^g R^h 、-NR^g C(=O)R^h 、-NR^g C(=O)NR^g R^h 、-NR^g C(=O)OR^h 、=NOR^g 、-NR^g S(=O)_1-2 R^h 、-NR^g S(=O)_1-2 NR^g R^h 、=NSO₂ R^g 、-C(=O)R^g 、-C(=O)OR^g 、-OC(=O)OR^g 、-OC(=O)R^g 、-C(=O)NR^g R^h 、-OC(=O)NR^g R^h 、-OR^g 、-SR^g 、-S(=O)R^g 、-S(=O)₂ R^g 、-OS(=O)_1-2 R^g 、-S(=O)_1-2 OR^g 、-S(=O)_1-2 NR^g R^h 、苯基、-C_1-4 烷基-苯基、單環環烷基、-C_1-4 烷基-環烷基、單環雜環烷基或單環雜芳基；其中R^d 之各苯基、單環環烷基、單環雜環烷基或單環雜芳基視需要經一、二或三個取代基R^e 取代；其中各R^e 取代基獨立地係C_1-4 烷基、C_1-4 烯基、C_1-4 炔基、鹵基、氰基、硝基、疊氮基、-OH、鹵基-C_1-4 烷基、-O-C_1-4 烷基或-O-C_1-4 -鹵烷基； R^g 及R^h 各獨立地係H或C_1-4 烷基； R² 及R³ 連同其等結合之氮一起形成單環雜環烷基，視需要經一、二或三個R^j 取代基取代；其中各R^j 取代基獨立地係C_1-4 烷基、-OH、-NR^k R^l 、鹵基、鹵基-C_1-4 烷基、-O-C_1-4 烷基或-O-C_1-4 -鹵烷基；其中R^k 及R^l 各獨立地係H或C_1-4 烷基；及 R⁴ 及R⁵ 各獨立地係H、C_1-4 烷基、鹵基、-OH或-OC_1-4 烷基，其中各烷基視需要經-NR^m Rⁿ 取代；其中R^m 及Rⁿ 各獨立地係H或C_1-4 烷基，或R^m 及Rⁿ 連同其等結合之氮一起形成單環雜環烷基，視需要經一或兩個R^o 取代基取代；其中各R^o 取代基獨立地係C_1-4 烷基、-OH、-OC_1-4 烷基、鹵基、氰基或-NR^p R^q ；其中R^p 及R^q 各獨立地係H或C_1-4 烷基；或其醫藥上可接受之鹽。
如請求項1之化合物，其中R¹ 係-NR^a R^b 。
如請求項1或請求項2之化合物，其中R^a 係H。
如請求項1或請求項2之化合物，其中R^a 係C_1-4 烷基。
如前述請求項中任一項之化合物，其中L係鍵。
如請求項1至4中任一項之化合物，其中L係-C(O)-或-C(O)O-。
如請求項1至4中任一項之化合物，其中L係-C_1-4 伸烷基-。
如請求項8之化合物，其中L係亞甲基或伸乙基。
如請求項1至8中任一項之化合物，其中R^c 係視需要經取代之苯基。
如請求項1至8中任一項之化合物，其中R^c 係視需要經取代之單環環烷基。
如請求項10之化合物，其中R^c 係視需要經取代之環丙基、環丁基、環戊基或環己基。
如請求項11之化合物，其中R^c 係視需要經取代之環丙基。
如請求項1至8中任一項之化合物，其中R^c 係視需要經取代之單環雜環烷基。
如請求項13之化合物，其中R^c 係視需要經取代之吡咯啶基、四氫呋喃基、哌啶基、嗎啉基或哌嗪基。
如請求項1至8中任一項之化合物，其中R^c 係視需要經取代之單環雜芳基。
如請求項15之化合物，其中R^c 係視需要經取代之吡咯、咪唑、吡唑、三唑、四唑、呋喃、噁唑、異噁唑、噻唑、異噻唑、吡啶、嘧啶、吡嗪或噠嗪。
如請求項16之化合物，其中R^c 係視需要經取代之吡唑、咪唑、吡啶或嘧啶。
如請求項16之化合物，其中R^c 係視需要經取代之吡唑。
如請求項1至18中任一項之化合物，其中各R^c 視需要經一或兩個R^d 取代基取代。
如請求項1至19中任一項之化合物，其中各R^d 取代基獨立地係C_1-4 烷基、C_1-4 烯基、C_1-4 炔基、-O-C_1-4 烷基、鹵基、氰基、硝基、疊氮基、鹵基-C_1-4 烷基、-O-C_1-4 -鹵烷基、-NR^g R^h 、-NR^g C(=O)R^h 、-NR^g C(=O)NR^g R^h 、-NR^g C(=O)OR^h 、=NOR^g 、-NR^g S(=O)_1-2 R^h 、-NR^g S(=O)_1-2 NR^g R^h 、=NSO₂ R^g 、-C(=O)R^g 、-C(=O)OR^g 、-OC(=O)OR^g 、-OC(=O)R^g 、-C(=O)NR^g R^h 、-OC(=O)NR^g R^h 、-OR^g 、-SR^g 、-S(=O)R^g 、-S(=O)₂ R^g 、-OS(=O)_1-2 R^g 、-S(=O)_1-2 OR^g 、-S(=O)_1-2 NR^g R^h 、苯基、-C_1-4 烷基-苯基、單環環烷基、-C_1-4 烷基-環烷基、單環雜環烷基或單環雜芳基，其中R^d 之苯基、單環環烷基、單環雜環烷基及單環雜芳基各視需要經一或兩個取代基R^e 取代。
如請求項20之化合物，其中各R^d 取代基獨立地係C_1-4 烷基、鹵基-C_1-4 烷基、苯基、-C_1-4 烷基-苯基、吡啶基、噻吩基、環烷基或-C_1-4 烷基-環烷基，其中該苯基、吡啶基及噻吩基各視需要經一或兩個取代基R^e 取代。
如請求項21之化合物，其中各R^d 取代基獨立地係甲基、乙基、異丙基、-CF₃ 、-OCH₃ 、-OCF₃ 、苯基、吡啶基、噻吩基、苯甲基、環丙基、環丁基、環戊基、環丙基甲基、環丁基甲基或環戊基甲基，其中R^d 之苯基、環烷基及雜芳基各視需要經一或兩個取代基R^e 取代。
如請求項22之化合物，其中各R^d 取代基獨立地係甲基、乙基、異丙基、-CF₃ 、苯基、吡啶基、噻吩基、苯甲基、環丙基、環丁基、環戊基、環丙基甲基、環丁基甲基或環戊基甲基，其中各苯基、苯甲基、環丙基、環丁基、環戊基、環丙基甲基、環丁基甲基或環戊基甲基視需要經一或兩個取代基R^e 取代，其中各R^e 獨立地係甲基、-CF₃ 、氟、氯、-OCH₃ 或-OCF₃ 。
如請求項1至22中任一項之化合物，其中各R^e 取代基獨立地係C_1-4 烷基、鹵基、鹵基-C_1-4 烷基、-O-C_1-4 烷基或-O-C_1-4 -鹵烷基。
如請求項24之化合物，其中各R^e 取代基獨立地係甲基、-CF₃ 、氟、氯、-OCH₃ 或-OCF₃ 。
如請求項1至20中任一項之化合物，其中R^g 及R^h 各獨立地係H或甲基。
如請求項1之化合物，其中R¹ 係H。
如請求項1之化合物，其中R¹ 係C_1-4 烷基。
如前述請求項中任一項之化合物，其中R² 及R³ 連同其等結合之氮一起形成吡咯啶、哌啶、哌嗪、嗎啉、硫嗎啉或硫嗎啉-1,1-二氧化物，各視需要經一、二或三個R^j 取代基取代。
如請求項29之化合物，其中R² 及R³ 連同其等結合之氮一起形成嗎啉，視需要經一或兩個R^j 取代基取代。
如前述請求項中任一項之化合物，其中各R^j 取代基獨立地係甲基、羥基、-OCH₃ 、鹵基、-CF₃ 或-OCF₃ 。
如請求項1至30中任一項之化合物，其中R^k 及R^l 各獨立地係H或甲基。
如前述請求項中任一項之化合物，其中R⁴ 及R⁵ 各為H。
如請求項1至32中任一項之化合物，其中R⁴ 及R⁵ 中之一者係H及另一者係C_1-4 烷基、鹵基、-OH或-OC_1-4 烷基，其中各烷基視需要經-NR^m Rⁿ 取代。
如請求項34之化合物，其中R⁴ 及R⁵ 中之一者係H及另一者係-OH、鹵基或-OCH₃ 。
如請求項34之化合物，其中R⁴ 及R⁵ 中之一者係H及另一者係經-NR^m Rⁿ 取代之C_2-3 烷基。
如請求項34或請求項36之化合物，其中R^m 及Rⁿ 各獨立地係H或C_1-4 烷基。
如請求項37之化合物，其中R^m 及Rⁿ 各為甲基。
如請求項34或請求項36之化合物，其中R^m 及Rⁿ 連同其等結合之氮一起形成單環雜環烷基，視需要經一或兩個R^o 取代基取代。
如請求項39之化合物，其中R^m 及Rⁿ 連同其等結合之氮一起形成吡咯啶、哌啶、哌嗪、嗎啉、硫嗎啉或硫嗎啉-1,1-二氧化物，各視需要經一或兩個R^o 取代基取代。
如請求項39之化合物，其中R^m 及Rⁿ 連同其等結合之氮一起形成吡咯啶、哌啶、哌嗪或嗎啉，各視需要經一或兩個R^o 取代基取代。
如請求項39至41中任一項之化合物，其中各R^o 取代基係C_1-4 烷基。
如請求項39至41中任一項之化合物，其中R^p 及R^q 各獨立地係H或甲基。
一種式(II)化合物，
(II) 其中 R^b2 係吡唑、苯基、吡啶基或嘧啶基，各視需要經一或兩個選自C_1-4 烷基、苯基及吡啶基之取代基取代，其中該苯基及吡啶基取代基視需要經甲基、-CF₃ 、氟、氯、-OCH₃ 、-OCF₃ 或苯基取代； R⁵² 係H或-C_2-3 -伸烷基-NR^m2 Rⁿ² ；其中R^m2 及Rⁿ² 各獨立地係H或甲基，或R^m2 及Rⁿ² 連同其等結合之氮一起形成吡咯啶、哌啶、哌嗪或嗎啉，各視需要經甲基取代；或其醫藥上可接受之鹽。
如請求項44之化合物，其中R^b2 係吡唑，視需要經甲基、-CF₃ 、氟、氯、-OCH₃ 、-OCF₃ 或苯基取代。
一種式(III)化合物，
(III) 其中 R^d3 係(a)甲基、乙基、異丙基、-CF₃ 、-OCH₃ 、或-OCF₃ ，或(b)苯基、苯甲基、環丙基、環丁基、環戊基、環丙基甲基、環丁基甲基、環戊基甲基、噻吩基或吡啶基，其中該苯基、苯甲基各視需要經一或兩個獨立地選自甲基、氟、氯、-CF₃ 、-OCH₃ 及-OCF₃ 之取代基取代；或其醫藥上可接受之鹽。
一種選自表1化合物中之任一者之化合物，及其醫藥上可接受之鹽。
一種醫藥組合物，其包含如請求項1至47中任一項之化合物及/或其醫藥上可接受之鹽及醫藥上可接受之賦形劑。
一種在有需要個體中抑制之PIKfyve及/或PI3激酶之方法，其包括向該個體投與有效量之如請求項1至47中任一項之化合物，或如請求項48之醫藥組合物。
一種治療有需要個體中與PIKfyve活性及/或PI3激酶活性相關聯之神經性疾病之方法，其包括向該個體投與有效量之如請求項1至47中任一項之化合物，或如請求項48之醫藥組合物。
如請求項50之方法，其中該疾病係與PIKfyve活性相關聯。
如請求項50之方法，其中該疾病係肌肉萎縮性脊髓側索硬化症(ALS)、原發性側索硬化症(PLS)、夏馬杜三氏病(Charcot-Marie-Tooth) (CMT；包括4J型(CMT4J))及尤尼斯-瓦隆症候群(Yunis-Varon syndrome)、自噬、多小腦迴畸型(包括伴有癲癇之多小腦迴畸型)、顳枕部多小腦迴畸型、匹克症(Pick’s disease)、帕金森氏症(Parkinson’s disease)、路易氏體帕金森氏症(Parkinson’s disease with Lewy bodies)、路易氏體失智症、路易氏體疾病、額顳葉型失智症、聚麩醯胺及核內包涵體之神經元核包涵物之疾病、馬理斯科及平野氏體之疾病(disease of Marinesco and Hirano bodies)、tau蛋白病(tauopathy)、阿茲海默症(Alzheimer’s disease)、神經系統退化症、海綿狀神經系統退化症、周邊神經病變、腦白質病、包涵體病、進行性核上神經麻痺症、皮質基底症候群、慢性創傷性腦病、創傷性腦損傷(TBI)、大腦局部缺血、格林-巴雷症候群(Guillain-Barré Syndrome)、慢性發炎脫髓鞘性多發神經病變、多發性硬化症、溶酶體貯積症、法布瑞氏症(Fabry’s disorder)、高雪氏症(Gaucher’s disorder)、尼曼匹克症C型(Niemann Pick C disease)、戴-薩克斯病(Tay-Sachs disease)及IV型黏脂質症、神經病變、杭丁頓氏舞蹈症(Huntington’s disease)、精神異常、ADHD、思覺失調症、情感疾患、重度憂鬱症、憂鬱症、I型躁鬱症或II型躁鬱症。
如請求項50之方法，其中該疾病係ALS、FTD、阿茲海默症、帕金森氏症、杭丁頓氏舞蹈症或CMT。
如請求項50之方法，其中該疾病係ALS。
如請求項50之方法，其中該疾病係tau蛋白病，諸如阿茲海默症、進行性核上神經麻痺症、皮質基底症候群、額顳葉型失智症或慢性創傷性腦病。
如請求項50之方法，其中該疾病係精神異常，諸如ADHD、思覺失調症，或情感疾患，諸如重度憂鬱症、憂鬱症、I型躁鬱症或II型躁鬱症。
如請求項50之方法，其中該疾病係與PI3K活性相關聯。
如請求項57之方法，其中該PI3K係PI3Kα、PI3Kβ、PI3Kδ及/或PI3Kγ。
一種如請求項1至47中任一項之化合物，其用作藥劑。
如請求項59之化合物，其中該化合物係用於治療可藉由抑制PIKfyve及/或PI3激酶而治療之神經性疾病。
一種如請求項1至47中任一項之化合物之用途，其用於製造藥劑，供治療個體中由PIKfyve或PI3K造成該神經性疾病之病理學及/或症狀之神經性疾病。