TW201903154A

TW201903154A - 溶瘤病毒療法及免疫療法

Info

Publication number: TW201903154A
Application number: TW107113504A
Authority: TW
Inventors: 鈴木正崇; 蕭亞曼達羅斯威; 卡洛琳波特; 渡部紀宏; 馬康Ｋ布萊納
Original assignee: 美國貝勒醫學院
Priority date: 2017-04-21
Filing date: 2018-04-20
Publication date: 2019-01-16
Also published as: KR20190138311A; US11896634B2; AU2025203355A1; JP7260173B2; KR102830905B1; NZ758626A; CN110785180B; AU2018254566B2; US10716818B2; US20190374589A1; CN110785180A; JP7620994B2; SG11201909749PA; JP2020517635A; KR20240093758A; WO2018195427A3; US20200323932A1; AU2018254566A1; JP2023082108A; TWI799411B

Abstract

本發明係有關一種癌症之組合療法，其利用(i)溶瘤病毒；(ii)包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒；及(iii)包含對癌細胞抗原有特異性之嵌合抗原受體(CAR)的至少一個細胞。在特定實施例中，該包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒包含編碼IL-12及/或拮抗劑抗PD-L1抗體之核酸。

Description

溶瘤病毒療法及免疫療法

本發明至少關於細胞生物學、分子生物學、免疫學、病毒學及醫學之領域，包括癌症治療。在特定實施例中，本發明係關於涉及使用溶瘤病毒療法及免疫療法之組合治療。

頭頸部之鱗狀細胞癌 (HNSCC) 之溶瘤病毒療法 HNSCC係全球發生率第六高之癌症。對局部晚期、復發性及轉移性HNSCC之治療常常受不利的功效與毒性比之限制且患有轉移性疾病之患者之中值存活期保持小於一年(Zandberg及Strome, Oral Oncology (2014) 50: 627-632)。因為HNSCC係在身體之表面處或接近身體之表面呈現之局部疾病，所以其易受初始瘤內注射腺病毒載體(Ad)影響以促使局部且甚至全身性抗腫瘤免疫反應(Liu等人, Nature Clinical Practice Oncology (2007) 4: 101-117)。編碼治療性轉殖基因之條件複製型Ad (OncAd)或複製缺陷型Ad之若干臨床試驗已顯示用於HNSCC之Ad基因療法之安全性及可行性，但未能顯示總存活率改善，因為密集型局部治療即使與化療/放射療法組合時亦不預防向遠端部位轉移(Liu等人，前述)。OncAd通常瘤內投與且很難重新靶向轉移的腫瘤(Koksi等人, Molecular Therapy: The Journal of the American Society of Gene Therapy (2015) 23:1641-1652)。具有表現免疫調節分子之輔助病毒依賴型 Ad (HDAd) 之 OncAd 腺病毒類載體(Ad)可以感染一系列惡性細胞且表現較高含量之裂解抗原及免疫原性轉殖基因，使其作為癌症基因療法之藥劑很有吸引力 (Cerullo等人, Advances in Cancer Research (2012) 115, 265-318)。OncAd在癌細胞中選擇性複製且係癌症基因療法之臨床試驗中之常用Ad類載體。然而，OncAd對轉殖基因之編碼能力有限(約1.5 kb)。輔助病毒依賴型Ad (HDAd)不含病毒編碼序列，實現高達34 kb之負荷能力用於在單個載體中插入多個轉殖基因(Suzuki等人, Human Gene Therapy (2010) 21; 120-126)。因為HDAd載體DNA編碼封裝信號，OncAd複製機制在轉殖基因(trans )中起在感染腫瘤細胞內複製及封裝OncAd及HDAd之作用，導致溶瘤病毒及由HDAd編碼之轉殖基因之多個產生及釋放循環(combinatorial adenoviral vectors: CAd-VEC; Farzad等人, Molecular Therapy - Oncolytics (2014) 1, 14008)。CAR T 細胞療法最近表現癌細胞抗原導向嵌合抗原受體(chimeric antigen receptor，CAR)促進了T細胞作為用於癌症療法之藥劑之用途(綜述於Kershaw等人, Nature (2013) 13: 525-541中)。CAR修飾之T細胞顯示出對血液惡性病之治療之前景(Garfall等人, The New England Journal of Medicine (2015) 373:1040-1047)，但在治療實體腫瘤中不太有效，其可能部分地由於實體腫瘤微環境之高免疫抑制性性質所致(Quail等人, Nature Medicine (2013) 19:1423-1437)。由於腫瘤部位之免疫抑制性機制，儘管有一個或兩個共刺激胞內域之表現，但CAR T細胞無法擴增且長期存留。本發明提供一種對有效癌症療法，包括組合癌症療法之長期需求之解決方案。

在一個態樣中，本發明提供一種治療癌症方法，其包含向個體投與： (i)溶瘤病毒； (ii)包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒；及 (iii)包含對癌細胞抗原有特異性之嵌合抗原受體(CAR)的至少一個細胞。亦提供(i)溶瘤病毒、(ii)包含編碼免疫調節因子之核酸的病毒及(iii)包含對癌細胞抗原有特異性之嵌合抗原受體(CAR)的至少一個細胞之組合，用於治療癌症之方法中。亦提供(i)溶瘤病毒、(ii)包含編碼免疫調節因子之核酸的病毒及(iii)包含對癌細胞抗原有特異性之嵌合抗原受體(CAR)的至少一個細胞在用於治療癌症之方法中所使用之藥物之製造中的用途。亦提供一種治療癌症之方法，其包含向個體投與： (i)溶瘤病毒；及 (ii)包含對癌細胞抗原有特異性之嵌合抗原受體(CAR)的至少一個細胞。亦提供(i)溶瘤病毒及(ii)包含對癌細胞抗原有特異性之嵌合抗原受體(CAR)的至少一個細胞之組合，用於治療癌症之方法。亦提供(i)溶瘤病毒及ii)包含對癌細胞抗原有特異性之嵌合抗原受體(CAR)的至少一個細胞在治療癌症之方法中所使用之藥物之製造中的用途。在一些實施例中，包含CAR之細胞對溶瘤病毒有特異性。亦提供一種治療癌症之方法，其包含向個體投與： (i)溶瘤病毒；及 (ii)對溶瘤病毒有特異性之至少一個免疫細胞。亦提供(i)溶瘤病毒及(ii)對溶瘤病毒有特異性之至少一個免疫細胞之組合，用於治療癌症之方法。亦提供(i)溶瘤病毒及(ii)對溶瘤病毒有特異性之至少一個免疫細胞在治療癌症之方法中所使用之藥物之製造中的用途。在一些實施例中，溶瘤病毒係溶瘤腺病毒(OncAd)。在一些實施例中，溶瘤病毒衍生自腺病毒5 (Ad5)。在一些實施例中，溶瘤病毒編碼E1A蛋白，相比於由Ad5編碼之E1A蛋白，其顯示與Rb蛋白之結合降低。在一些實施例中，溶瘤病毒編碼缺少胺基酸序列LTCHEACF (SEQ ID NO:52)之E1A蛋白。在一些實施例中，溶瘤病毒編碼包含胺基酸序列SEQ ID NO:34或由其組成或基本上由其組成之E1A蛋白。在一些實施例中，溶瘤病毒包含具有用於一或多個轉錄因子之一或多個結合位點的核酸。在一些實施例中，溶瘤病毒包含具有用於STAT1之一或多個結合位點的核酸。在一些實施例中，包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒係輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)。在一些實施例中，免疫調節因子選自：效應子免疫反應之促效劑或免疫調節反應之拮抗劑。在一些實施例中，包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒包含編碼IL-12及/或拮抗劑抗PD-L1抗體之核酸。在一些實施例中，包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒包含編碼能夠催化無毒因子轉化成細胞毒性形式之酶的核酸。在一些實施例中，酶選自：胸苷激酶、胞嘧啶脫胺酶、硝基還原酶、細胞色素P450、羧肽酶G2、嘌呤核苷磷酸化酶、辣根過氧化酶及羧酸酯酶。在一些實施例中，包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒包含編碼胸苷激酶之核酸。在一些實施例中，包含對癌細胞抗原有特異性之CAR的至少一個細胞係T細胞。在一些實施例中，CAR包含能夠特異性結合於HER2之抗原結合域。在一些實施例中，CAR包含包含以下之抗原結合域： VL域，其包含： LC-CRD1：SEQ ID NO:10； LC-CRD2：SEQ ID NO:11； LC-CRD3：SEQ ID NO:12；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:13； HC-CRD2：SEQ ID NO:14； HC-CRD3：SEQ ID NO:15；或 VL域，其包含： LC-CRD1：SEQ ID NO:18； LC-CRD2：SEQ ID NO:19； LC-CRD3：SEQ ID NO:20；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:21； HC-CRD2：SEQ ID NO:22； HC-CRD3：SEQ ID NO:23；或 VL域，其包含： LC-CRD1：SEQ ID NO:26； LC-CRD2：SEQ ID NO:27； LC-CRD3：SEQ ID NO:28；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:29； HC-CRD2：SEQ ID NO:30； HC-CRD3：SEQ ID NO:31；或 VL域，其包含： LC-CRD1：SEQ ID NO:57； LC-CRD2：SEQ ID NO:58； LC-CRD3：SEQ ID NO:59；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:60； HC-CRD2：SEQ ID NO:61； HC-CRD3：SEQ ID NO:62。在一些實施例中，CAR包含包含以下之抗原結合域：包含與SEQ ID NO:16具有至少75%、80%、85%、90%、95%或更大序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成的VL，及包含與SEQ ID NO:17具有至少75%、80%、85%、90%、95%或更大序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成的VH；或包含與SEQ ID NO:24具有至少75%、80%、85%、90%、95%或更大序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成的VL，及包含與SEQ ID NO:25具有至少75%、80%、85%、90%、95%或更大序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成的VH；或包含與SEQ ID NO:32具有至少75%、80%、85%、90%、95%或更大序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成的VL，及包含與SEQ ID NO:33具有至少75%、80%、85%、90%、95%或更大與序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成的VH；或包含與SEQ ID NO:63具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成的VL，及包含與SEQ ID NO:64具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成的VH。在一些實施例中，方法另外包含： (a)自個體分離至少一個細胞，且在特定實施例中該細胞係免疫細胞； (b)修飾該至少一個細胞以表現或包含對癌細胞抗原有特異性之CAR或編碼對癌細胞抗原有特異性之CAR之核酸， (c)視情況擴增經修飾的至少一個細胞，及； (d)向個體投與經修飾的至少一個細胞；在特定實施例中在投與時經修飾的細胞與一或多種其他用於癌症療法之藥劑一起提供至個體。在一些實施例中，治療癌症之方法包含： (a)自個體分離至少一個細胞； (b)修飾該至少一個細胞以表現或包含對癌細胞抗原有特異性之CAR或編碼對癌細胞抗原有特異性之CAR之核酸， (c)視情況擴增經修飾的至少一個細胞，及； (d)向個體投與經修飾的至少一個細胞。在一些實施例中，治療癌症之方法包含： (a)自個體分離免疫細胞； (b)藉由包含以下之方法生成或擴增對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞之群體：藉由在呈現溶瘤病毒之肽之抗原呈現細胞(antigen presenting cell，APC)存在下培養來刺激免疫細胞，及； (c)向個體投與對溶瘤病毒有特異性之至少一個免疫細胞。在一些實施例中，癌症選自頭頸癌、鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC)、子宮頸癌(cervical carcinoma，CC)、口咽癌(oropharyngeal carcinoma，OPC)、胃癌(gastric carcinoma，GC)、肝細胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)及肺癌。本發明亦提供溶一種編碼包含胺基酸序列SEQ ID NO:34或由其組成或基本上由其組成之E1A蛋白的溶瘤腺病毒(OncAd)。本發明亦提供一種包含具有用於STAT1之一或多個結合位點之核酸的溶瘤腺病毒(OncAd)。在一些實施例中，OncAd包含與SEQ ID NO:51具有至少60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或更大序列一致性之核酸序列或因密碼子簡併結果產生之等效序列。亦提供一種包含與SEQ ID NO:55具有至少60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或更大序列一致性之核酸序列或因密碼子簡併結果產生之等效序列的OncAd。在一些實施例中，OncAd編碼包含胺基酸序列SEQ ID NO:34或由其組成或基本上由其組成之E1A蛋白。本發明亦提供一種包含編碼IL-12及/或拮抗劑抗PD-L1抗體之核酸的輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)。在一些實施例中，HDAd另外包含編碼能夠催化無毒因子向細胞毒性形式之轉化之酶的核酸。在一些實施例中，酶選自：胸苷激酶、胞嘧啶脫胺酶、硝基還原酶、細胞色素P450、羧肽酶G2、嘌呤核苷磷酸化酶、辣根過氧化酶及羧酸酯酶。在一些實施例中，HDAd另外包含編碼胸苷激酶之核酸。在HDAd核酸編碼IL-12及抗PD-L1抗體之情況下，相應表現序列可能由或可能不由相同調節序列調節。在此類HDAd核酸編碼IL-12及抗PD-L1抗體二者之情況下，在HDAd核酸上之定位可具有任何適合組態，諸如在5'至3'方向編碼IL-12之核酸區域位於編碼抗PD-L1抗體之核酸區域之上游或下游本發明亦提供一種包含包含以下之抗原結合域的嵌合抗原受體(CAR)： VL域，其包含： LC-CRD1：SEQ ID NO:10； LC-CRD2：SEQ ID NO:11； LC-CRD3：SEQ ID NO:12；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:13； HC-CRD2：SEQ ID NO:14； HC-CRD3：SEQ ID NO:15；或 VL域，其包含： LC-CRD1：SEQ ID NO:18； LC-CRD2：SEQ ID NO:19； LC-CRD3：SEQ ID NO:20；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:21； HC-CRD2：SEQ ID NO:22； HC-CRD3：SEQ ID NO:23；或 VL域，其包含： LC-CRD1：SEQ ID NO:26； LC-CRD2：SEQ ID NO:27； LC-CRD3：SEQ ID NO:28；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:29； HC-CRD2：SEQ ID NO:30； HC-CRD3：SEQ ID NO:31；或 VL域，其包含： LC-CRD1：SEQ ID NO:57； LC-CRD2：SEQ ID NO:58； LC-CRD3：SEQ ID NO:59；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:60； HC-CRD2：SEQ ID NO:61； HC-CRD3：SEQ ID NO:62。在一些實施例中，CAR包含包含以下之抗原結合域：包含與SEQ ID NO:16具有至少75%、80%、85%、90%、95%或更大序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成的VL，及包含與SEQ ID NO:17具有至少75%、80%、85%、90%、95%或更大序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成的VH；或包含與SEQ ID NO:24具有至少75%、80%、85%、90%、95%或更大序列一致性之胺基酸序列或由其組成的VL，及包含與SEQ ID NO:25具有至少75%、80%、85%、90%、95%或更大序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成的VH；或包含與SEQ ID NO:32具有至少75%、80%、85%、90%、95%或更大序列一致性之胺基酸序列或由其組成的VL，及包含與SEQ ID NO:33具有至少75%、80%、85%、90%、95%或更大序列一致性之胺基酸序列或由其組成的VH；或包含與SEQ ID NO:63具有至少75%、80%、85%、90%、95%或更大序列一致性之胺基酸序列或由其組成的VL，及包含與SEQ ID NO:64具有至少75%、80%、85%、90%、95%或更大序列一致性之胺基酸序列或由其組成的VH。本發明亦提供視情況分離之一種核酸或複數種核酸，其編碼根據本發明之溶瘤腺病毒(OncAd)、輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)或嵌合抗原受體(CAR)。本發明亦提供包含根據本發明之溶瘤腺病毒(OncAd)、輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)、嵌合抗原受體(CAR)或核酸或複數種核酸的細胞。本發明亦提供一種醫藥組合物，其包含根據本發明之溶瘤腺病毒(OncAd)、輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)、嵌合抗原受體(CAR)；核酸或複數種核酸或細胞，其可與醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑、賦形劑或佐劑相關聯或包含於其中。本發明亦提供一種治療癌症之方法，其包含向個體投與根據本發明之溶瘤腺病毒(OncAd)、輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)、嵌合抗原受體(CAR)、核酸或複數種核酸、細胞或醫藥組合物。本發明亦提供根據本發明之溶瘤腺病毒(OncAd)、輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)、嵌合抗原受體(CAR)、核酸或複數種核酸、細胞或醫藥組合物用於治療癌症之方法。本發明亦提供根據本發明之溶瘤腺病毒(OncAd)、輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)、嵌合抗原受體(CAR)、核酸或複數種核酸、細胞或醫藥組合物在用於治療癌症之藥劑之製造中的用途。在一些實施例中，根據本發明之各個態樣，癌症選自頭頸癌、鼻咽癌(NPC)、子宮頸癌(CC)、口咽癌(OPC)、胃癌(GC)、肝細胞癌(HCC)及肺癌。本發明亦提供一種部件之套組，其包含預定量之根據本發明之溶瘤腺病毒(OncAd)、輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)、嵌合抗原受體(CAR)、核酸或複數種核酸、細胞或醫藥組合物。

本發明關注多種用於治療癌症之治療劑之組合使用。特定言之，(i)溶瘤病毒、(ii)提供免疫調節因子之病毒及(iii)對癌細胞抗原有特異性之攜帶CAR的免疫細胞(諸如T細胞)組合用作癌症療法。相比於僅使用藥劑中之任一者時得到之效果，治療劑經組合提供改善治療效果。在某些實施例中，三種治療劑中之至少兩者以添加劑方式起作用來治療癌症，而在其他實施例中三種不同治療劑中之至少兩者協同地起作用來治療癌症。不希望受任何特定理論束縛，認為改善的治療效果係藉由組合溶瘤病毒療法之有利特性(例如實體腫瘤之有效治療)與CAR-T細胞療法(例如彌漫性/轉移性癌症之有效治療)且結合提供CAR-T細胞增殖及活性之有利免疫環境來達成。溶瘤病毒 本發明利用溶瘤病毒。溶瘤病毒及其治療癌症之用途綜述在，例如Chiocca及Rabkin Cancer Immunol Res (2014) 2(4): 295-300中，其以全文引用的方式併入本文中。溶瘤病毒在癌細胞中複製且導致癌細胞之裂解。通常其對癌細胞之選擇性優於非癌細胞；例如溶瘤病毒通常優先於非分裂細胞在分裂細胞中複製。溶瘤病毒因此適用於選擇性殺滅癌細胞且破壞腫瘤，而不對正常非癌細胞/組織造成實質破壞。溶瘤病毒療法與若干優勢特性相關。溶瘤病毒通常靶向若干致癌路徑且使用細胞毒性之多個機制，使產生抗性之機會降到最低。如上所指出，因為溶瘤病毒在腫瘤中選擇性複製且係非致命性的，其顯示最小毒性。由於病毒之複製，隨時間推移腫瘤中之病毒劑量亦增加，且亦可在基因上操控溶瘤病毒以提高安全性，例如藉由工程化對藥物之敏感度。存在兩個主要類別之溶瘤病毒： (i)在癌細胞中優先自然複製之病毒，且由於對固有抗病毒傳信之較高敏感度或對致癌傳信路徑之依賴性，其在人體內通常係非致命性的，該等病毒包括：自主小病毒、黏液瘤病毒(myxoma virus，MYXV；痘病毒)、新城雞瘟(Newcastle disease virus，NDV；副黏病毒)、呼腸孤病毒(reovirus)及塞內加谷病毒(Seneca valley virus，SVV；小RNA病毒)；及 (ii)在基因上操控之病毒，例如在正常非癌細胞之複製中所要求之基因中之突變/缺失，其包括腺病毒(Ad)、單純疱疹病毒(herpes simplex virus，HSV)、痘瘡病毒(vaccinia virus，VV)及水泡性口炎病毒(vesicular stomatitis virus，VSV；棒狀病毒)；或在基因上操控用作疫苗載體之病毒，其包括麻疹病毒(measles virus，MV；副黏病毒)、脊髓灰白質炎病毒(poliovirus，PV；小RNA病毒)及VV (痘病毒)。基因操控可包括插入/更改功能序列以提供增強的對癌細胞之選擇性、安全性，及/或改變病毒向性。舉例而言，溶瘤病毒可經基因工程化以引入僅允許病毒在靶細胞中轉譯之組織特異性的內部核糖體入口部位(internal ribosome entry site，IRES)，及/或引入miRNA/miRNA反應元素(miRNA response element，MRE)；健康細胞或某些組織與腫瘤細胞之間之差異miRNA表現允許病毒自健康細胞/組織解靶。溶瘤病毒亦可經工程化來將病毒基因組之轉錄置於細胞或組織特異性的調節區之控制下，諸如啟動子/強化子(例如腫瘤細胞特異性啟動子)。在一些實施例中，根據本發明之溶瘤病毒可包含用於此用途之一或多個修飾。病毒亦可經修飾以用於轉導靶向，例如經由修飾病毒受體/包衣蛋白質來靶向腫瘤細胞及/或解靶健康細胞/組織。溶瘤病毒可以此方式投與以最小化在個體內之抗溶瘤病毒反應(例如藉由抗病毒抗體中和)及在肝中之嵌合作用且最大化腫瘤傳遞，如前述Chiocca及Rabkin之文章中所描述。舉例而言，溶瘤病毒可在細胞載體中投與，例如在間質基質細胞、骨髓衍生的抑制劑細胞(myeloid-derived suppresser cell，MDSC)、神經幹細胞、T細胞、細胞介素誘導的殺手細胞或照射的腫瘤細胞中，或可以奈米粒子形式塗佈。在一些實施例中，本發明之溶瘤病毒係或衍生自，例如，腺病毒(Ad)、單純疱疹病毒(HSV)、痘瘡病毒(VV)、水泡性口炎病毒(VSV)；自主小病毒、黏液瘤病毒(MYXV)、新城雞瘟(NDV)、呼腸孤病毒、塞內加谷病毒(SVV)麻疹病毒病毒、反轉錄病毒、流感病毒、辛得比斯病毒(Sindbis virus，SINV)或痘病毒。在一些實施例中，溶瘤病毒不為痘瘡病毒。在一些實施例中，溶瘤病毒不為JX-594痘瘡病毒。如本文中所使用，「衍生自」指代病毒之溶瘤病毒包含指代病毒所擁有之核酸序列或胺基酸序列。在一些實施例中，「衍生自」指代病毒之溶瘤病毒包含指代病毒所擁有之一或多個基因。在一些實施例中，「衍生自」指代病毒之溶瘤病毒編碼由指代病毒編碼之一或多個蛋白質。在一些實施例中，衍生自指代病毒之溶瘤病毒可包含編碼指代病毒之一或多個功能元素的核酸序列。「功能元素」可能例如轉錄調節子(例如啟動子/強化子)、轉錄後加工之調節子、轉譯調節子、轉錄後加工之調節子、反應元素、重複序列或病毒蛋白質。在一些實施例中，衍生自指代病毒之溶瘤病毒可包含指代病毒之一或多個基因或由指代病毒編碼之蛋白質。在一些實施例中，本發明之溶瘤病毒係腺病毒(OncAd)或衍生自腺病毒(OncAd)。OncAd在例如Larson等人, Oncotarget. (2015) 6(24): 19976-19989中綜述，其以全文引用的方式併入本文中。在一些實施例中，OncAd係或衍生自物種A、B、C、D、E、F或G人類腺病毒(亦即HAdV-A、HAdV-B、HAdV-C、HAdV-D、HAdV-E、HAdV-F或HAdV-G)。在一些實施例中，OncAd係或衍生自物種C人類腺病毒。在一些實施例中，OncAd係或衍生自Ad5、Ad2、Ad1、Ad6或Ad57。在一些實施例中，OncAd係條件複製型腺病毒(或CRAd)。在一些實施例中，OncAd具有降低的感染非癌細胞、在非癌細胞中複製及/或溶解非癌細胞之能力(相比於感染相等癌細胞、在相等癌細胞中複製及/或溶解相等癌細胞之能力)，例如由於衍生出OncAd之腺病毒之基因修飾。在一些實施例中，溶瘤病毒包含對一或多個蛋白質編碼序列之修飾。在一些實施例中，修飾改變所編碼蛋白質之產生或活性。在一些實施例中，修飾係蛋白質之截斷或缺失。在一些實施例中，OncAd包含對腺病毒早期蛋白質之修飾。在一些實施例中，修飾編碼E1A蛋白之區域。在一些實施例中，OncAd編碼相比於野生型E1A蛋白具有降低的結合於Rb蛋白之能力的E1A蛋白(例如由衍生出OncAd之腺病毒編碼之E1A)。在一些實施例中，OncAd編碼缺少胺基酸序列LTCHEACF (SEQ ID NO:52)之E1A蛋白。編碼缺少胺基酸序列LTCHEACF (SEQ ID NO:52)之E1A蛋白之OncAd之實例係顯示於SEQ ID NO:55中之Onc5/3Ad2E1Δ24。在一些實施例中，溶瘤病毒編碼包含與SEQ ID NO:34具有至少80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或具有100%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成的E1A蛋白。在一些實施例中，溶瘤病毒包含提供用於一或多個轉錄因子之一或多個結合位點的核酸序列。在一些實施例中，轉錄因子係活化轉錄因子(亦即轉錄活化子)。用於一或多個轉錄因子之一或多個結合位點較佳提供在編碼一或多個功能元素(例如病毒蛋白質)之核酸序列之上游(亦即5'以後)。在一些實施例中，轉錄因子係相比於在相當的非癌細胞(例如衍生自相同組織/細胞類型之非癌細胞)中在癌細胞中具有增加的表現或增加的活性之轉錄因子。本文中，「表現」可指基因表現或蛋白質表現。基因表現可藉由熟習此項技術者已知之各種手段量測，例如藉由利用定量即時PCR (quantitative real-time PCR，qRT-PCR)或基於報導子的方法來量測mRNA之含量。類似地，蛋白質表現可藉由此項技術中熟知之各種方法量測，例如藉由基於抗體的方法，例如藉由西方墨點法、免疫組織化學、免疫細胞化學、流式細胞測量術、ELISA、ELISPOT或基於報導子的方法。包含用於一或多個轉錄因子之一或多個結合位點的OncAd之實例係ICOVIR15，其描述於Rojas等人2010 Mol Ther 18 1960-1971中，其全部內容以引用之方式併入本文中。ICOVIR15包含用於轉錄因子E2F之8個結合位點。在一些實施例中，溶瘤病毒包含用於轉錄因子之一或多個結合位點，該轉錄因子之基因表現或蛋白質表現或在細胞中之活性回應於由免疫細胞產生或表現之因子而上調。在一些實施例中，由免疫細胞產生或表現之因子可能為由效應子免疫細胞(例如CD8+細胞毒性T淋巴球(cytotoxic T lymphocyte，CTL)、CD4+ T輔助1 (T_H 1)細胞、天然殺手(natural killer，NK)細胞或天然殺手T (NKT)細胞)產生之至少一種細胞介素/趨化因子或在效應子免疫細胞之細胞表面表達之蛋白質。在一些實施例中，本發明之溶瘤病毒包含用於STAT轉錄因子之一或多個結合位點。在一些實施例中，溶瘤病毒包含用於STAT1之一或多個結合位點。本文中所描述之ICOSTAT OncAd具有用於STAT1之8個結合位點，且已知STAT1由IFNγ上調。在特定實施例中，ICOSTAT用於癌症治療尤其有效，因為宿主對癌細胞之免疫反應將促進溶瘤病毒當場複製。在一些實施例中，溶瘤病毒包含用於STAT1之多於一個結合位點，例如用於STAT1之至少2、3、4、5、6、7、8、9或10個結合位點。在一些實施例中，用於STAT1之結合位點可包含TTCCGGGAA (SEQ ID NO:53)或TTCTCGGAA (SEQ ID NO:54)之序列或由其組成或主要由其組成。在一些實施例中，本發明之溶瘤病毒包含序列TTCCGGGAA (SEQ ID NO:53)或TTCTCGGAA (SEQ ID NO:54)之一或多個複本。在一些實施例中，根據本發明之溶瘤病毒包含與SEQ ID NO:51具有至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或具有100%序列一致性之核酸序列或因密碼子簡併結果產生之等效序列或由其組成或基本上由其組成。在一些實施例中，根據本發明之溶瘤病毒包含與SEQ ID NO:55具有至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或具有100%序列一致性之核酸序列或因密碼子簡併結果產生之等效序列或由其組成或基本上由其組成。在一些實施例中，根據本發明之溶瘤病毒編碼與由如下溶瘤病毒編碼之蛋白質相同的蛋白質，該溶瘤病毒包含顯示於SEQ ID NO:55中之核酸、由其組成或基本上由其組成。在一些實施例中，根據本發明之溶瘤病毒編碼與由如下溶瘤病毒編碼之蛋白質相同的蛋白質，該溶瘤病毒包含顯示於SEQ ID NO:51中之核酸、由其組成或基本上由其組成。包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒 本發明利用包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒。病毒充當傳遞免疫調節因子之載體。在某些實施例中，病毒包含編碼多於一個免疫調節因子之核酸。可使用能夠將編碼免疫調節因子之核酸引入細胞中之任何病毒(例如初級人類免疫細胞)。適合病毒包括γ反轉錄病毒屬(例如鼠類白血病病毒(murine Leukemia virus，MLV)衍生的載體)、慢病毒、腺病毒腺相關病毒、痘瘡病毒及疱疹病毒，例如如Maus等人, Annu Rev Immunol (2014) 32:189-225或Morgan及Boyerinas之Biomedicines 2016 4, 9中所描述，其均以全文引用之方式併入本文中。在一些實施例中，包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒係或衍生自：腺病毒、慢病毒、反轉錄病毒或疱疹病毒。在一些實施例中，包含編碼至少一個免疫調節因子之核酸的病毒係包含編碼至少一個免疫調節因子之核酸的溶瘤病毒。較佳選擇根據本發明之由包含編碼免疫調節因子之核酸的病毒編碼之免疫調節因子，來輔助對個體之癌症之免疫反應，尤其細胞介導的免疫反應。在一個實施例中，免疫調節因子提供用於效應子免疫細胞(例如CTL、T_H 1細胞、NK細胞或NKT細胞)之活化、募集、增殖、活性及/或存活之有利條件。在一些實施例中，免疫調節因子可為效應子免疫反應之促效劑，例如促進效應子免疫細胞之活化、募集、增殖、活性及/或存活之細胞介素或趨化因子(例如IL-2、IL-7、IL-17、IL-12、IL-21、IL-15、MIP-1α或RANTES)、用於共刺激受體之促效劑抗體(例如4-1BB、OX40、CD28、CD27、ICOS、CD30或GITR)或用於共刺激受體之配位體(例如4-1BBL、OX40L、CD80、CD86、CD70、ICOSL、CD30L或GITRL)。在一些實施例中，效應子免疫反應之促效劑可為免疫檢查點抑制劑之拮抗劑或用於免疫檢查點抑制劑之配位體之拮抗劑，例如對PD-L1、PD-L2、PD-1、CTLA-4、LAG-3、TIM-3、Gal-9、TIGIT、VISTA或BTLA之拮抗劑抗體，或作為效應子免疫反應之拮抗劑之細胞介素/趨化因子之拮抗劑，例如TGFβ (亦即拮抗劑抗TGFβ抗體或可溶性/誘餌TGFβ受體)。在一些實施例中，效應子免疫反應之促效劑可為用於嚙合且拉攏旁路效應子免疫細胞(諸如T細胞及NK細胞)的分子。在一些實施例中，免疫調節因子可為免疫調節反應之拮抗劑，例如促進免疫調節細胞(諸如調節T細胞(Tregs))及/或骨髓衍生的抑制細胞(MDSC)之活化、募集、增殖、活性及/或存活之細胞介素/趨化因子之拮抗劑，例如CCL9、CXCL10、CCL20、CCL22。在一些實施例中，包含編碼免疫調節因子之核酸的病毒可能另外包含另外編碼功能序列之核酸。舉例而言，病毒可包含編碼用於降低感染細胞之生長/增殖/存活之蛋白質；或用於使感染細胞對給定藥劑之治療敏感之蛋白質；或用於干擾腫瘤結構以輔助免疫細胞浸潤之蛋白質(例如用於分解腫瘤基質之酶)的核酸。在一些實施例中，包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒另外包含編碼能夠催化無毒因子轉化成細胞毒性形式之酶的核酸。酶可催化無毒前藥向其活性細胞毒性形式之轉化。酶/前藥系統在此項技術中已熟知且包括Malekshah等人Curr Pharmacol Rep. (2016) 2(6): 299-308中所描述之該等，其以全文引用之方式併入本文中。無毒前藥、其活性細胞毒性形式及能夠催化無毒前藥向其活性細胞毒性形式轉化之酶之實例顯示於Malekshah等人之圖2中。在一些實施例中，包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒另外包含編碼胸苷激酶、胞嘧啶脫胺酶、硝基還原酶、細胞色素P450、羧肽酶G2、嘌呤核苷磷酸化酶、辣根過氧化酶及/或羧酸酯酶之核酸。舉例而言，病毒可包含編碼胸苷激酶之核酸用於使表現病毒之細胞對更昔洛韋(ganciclovir，GCV)、阿昔洛韋(aciclovir，ACV)及/或伐昔洛韋(valaciclovir)之治療敏感。病毒可包含編碼胞嘧啶脫胺酶之核酸，用於使表現病毒之細胞對5-氟胞嘧啶(5-FC)之治療敏感，該5-氟胞嘧啶(5-FC)由胞嘧啶脫胺酶轉化為5-氟尿嘧啶(5-FU)。病毒可包含編碼硝基還原酶之核酸用於使表現病毒之細胞對CB1954、硝基CBI-DEI及/或PR-104A之治療敏感。病毒可包含編碼細胞色素P450之核酸用於使表現病毒之細胞對氧氮磷雜環類(oxazaphosphorine)(例如環磷醯胺或異環磷醯胺)之治療敏感。病毒可包含編碼羧肽酶G2之核酸用於使表現病毒之細胞對氮芥類藥物(例如CMDA或ZD2767P)之治療敏感。病毒可包含編碼嘌呤核苷磷酸化酶之核酸用於使表現病毒之細胞對6-甲基嘌呤2-去氧核糖苷及/或氟達拉濱(fludarabine)(例如6-甲基嘌呤-2'-去氧核糖苷(MeP-dR)、2-F-2'-去氧腺苷(F-dAdo)或阿拉伯呋喃糖基-2-F-腺嘌呤單磷酸(F-araAMP)之治療敏感。可包含編碼辣根過氧化酶之核酸用於使表現病毒之細胞對吲哚-3-乙酸(IAA)之治療敏感。病毒可包含編碼羧酸酯酶之核酸用於使表現病毒之細胞對伊立替康(irinotecan)之治療敏感。在一些實施例中，病毒可包含編碼生長因子之拮抗劑之核酸。在一些實施例中，病毒可為輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)。HDAd在例如Rosewell等人, J Genet Syndr Gene Ther (2011) Suppl 5:001中綜述，其以全文引用之方式併入本文中。 HDAd不含病毒蛋白質編碼序列，且因此具有用於轉導所關注之編碼序列之大能力(至多37 Kb)。HDAd係非整合的，且能夠獨立於細胞週期有效地轉導各種細胞類型且介導長期轉殖基因表現而無慢性毒性。 HDAd僅包含基因組複製(倒置終端重複區(inverted terminal repeat，ITR))及衣殼化(4)所要求之順式作用病毒元素，且因此依賴於輔助病毒來繁殖。當細胞由輔助病毒及HDAd感染時，輔助病毒複製機制以反式作用來複製且封裝HDAd。在本發明之特定實施例中，溶瘤病毒係OncAd且包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒係HDAd，且OncAd及HDAd能夠在癌細胞中共感染且複製。 HDAd對OncAd之輔助之依賴性提供高度局域化的免疫調節因子之表現。亦即，因為HDAd僅能夠在與OncAd共感染之細胞中傳播，且繼而因為OncAd在癌細胞中之複製具有選擇性，由HDAd編碼之因子之表現受限於癌細胞/組織，副作用降到最低。另外，因為OncAd及HDAd有效地靶向且感染腫瘤細胞，在該等細胞中免疫調節因子之表現可以變化通常免疫抑制性腫瘤微環境以提供促進效應子免疫細胞之活化、募集(亦即腫瘤穿透/浸潤)、增殖、活性及/或存活之條件。特定言之，在本發明之上下文中，其中治療方法利用使用CAR-T細胞、由HDAd編碼之免疫調節因子之表現，提供增強的CAR-T細胞之活化、募集、增殖、活性及/或存活。在本文中之特定實施例中，包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒係包含編碼IL-12p70、HSV-1胸苷激酶及拮抗劑抗PD-L1微型抗體之核酸的HDAd。在一些實施例中，根據本發明之包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒編碼IL-12。在一些實施例中，包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒包含編碼與SEQ ID NO:35具有至少75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性之胺基酸序列的核酸。在一些實施例中，根據本發明之包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒編碼PD-1/PD-L1傳信之拮抗劑。在一些實施例中，PD-1/PD-L1傳信之拮抗劑係抗PD-L1抗體。在一些實施例中，抗PD-L1抗體包含抗原結合域，該抗原結合域包含包含以下之VL域： LC-CRD1：SEQ ID NO:39； LC-CRD2：SEQ ID NO:40； LC-CRD3：SEQ ID NO:41；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:42； HC-CRD2：SEQ ID NO:43； HC-CRD3：SEQ ID NO:44。在一些實施例中，抗PD-L1抗體包含VL，其包含與SEQ ID NO:45具有至少75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或具有100%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成；及VH，其包含與SEQ ID NO:46具有至少75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或具有100%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成。在一些實施例中，包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒包含編碼與SEQ ID NO:38具有至少75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性之胺基酸序列的核酸。在一些實施例中，根據本發明之包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒包含編碼胸苷激酶之胺基酸序列。在一些實施例中，包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒包含編碼與SEQ ID NO:36具有至少75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性之胺基酸序列的核酸。在一些實施例中，根據本發明之包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒包含與SEQ ID NO:50具有至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或具有100%序列一致性之核酸序列或因密碼子簡併結果產生之等效序列或由其組成或主要由其組成。嵌合抗原受體 ( CAR ) 及 CAR 表現細胞 本發明利用包含嵌合抗原受體(CAR)之免疫細胞。嵌合抗原受體(CAR)係提供抗原結合及免疫細胞活化功能之重組受體。CAR結構及工程化綜述在例如Dotti等人, Immunol Rev (2014) 257(1)中，其以全文引用之方式併入本文中。CAR包含連接於細胞膜錨定區之抗原結合區及信號傳導區。視情況存在之鉸鏈區可提供抗原結合區與細胞膜錨定區之間之分離，且可充當可撓性連接子。 CAR之抗原結合區可基於對CAR所靶向之抗原有特異性之抗體之抗原結合區或能夠結合該目標之其他媒介物。舉例而言，CAR之抗原結合域可包含用於尤其結合於目標蛋白質之抗體之互補決定區(complementarity-determining region，CDR)或完全輕鏈及重鏈可變區胺基酸序列的胺基酸序列。CAR之抗原結合域可靶向基於其他蛋白質:蛋白質相互作用，諸如配位體:受體結合，之抗原；例如已使用基於IL-13之抗原結合域研發出IL-13Rα2靶向之CAR (參見例如Kahlon等人2004 Cancer Res 64(24): 9160-9166)。本發明之CAR包含對癌細胞抗原有特異性之抗原結合區。CAR之抗原結合區可以任何適合格式提供，例如scFv、Fab等。在一些實施例中，CAR之抗原結合區包含癌細胞抗原結合scFv或由其組成。癌細胞抗原係由癌細胞表現之抗原。癌細胞抗原可為任何肽/多肽、糖蛋白、脂蛋白、聚糖、糖脂、脂質或其片段。癌細胞抗原之表現可與癌症相關聯。癌細胞抗原可由癌細胞非正常地表現(例如癌細胞抗原可表現為異常定位)，或可由癌細胞表現為異常結構。癌細胞抗原可能能夠引發免疫反應。在一些實施例中，抗原在癌細胞之細胞表面表現(亦即癌細胞抗原係癌細胞表面抗原)。在一些實施例中，本發明之與雙特異性抗原結合多肽結合之抗原之部分顯示於癌細胞之外表面上(亦即胞外)。在一些實施例中，抗原錨定至細胞膜，例如經由跨膜域或其他膜錨點(例如脂質錨點，諸如GPI錨點)。在一些實施例中，癌細胞抗原在癌細胞之細胞表面表現(亦即在細胞膜中或在細胞膜上表現)但可在細胞內表現(亦即在相當非癌細胞內表現)。癌細胞抗原可為癌症相關抗原。在一些實施例中，癌細胞抗原係其表現與癌症之症狀之發展、進展及/或嚴重度相關之抗原。癌症相關抗原可能與癌症之病因或病理相關，或可能由於癌症而非正常地表現。在一些實施例中，抗原係其表現藉由癌細胞上調之抗原(例如在RNA及/或蛋白質含量方面)，例如相比於藉由相當的非癌細胞(例如衍生自相同組織/細胞類型之非癌細胞)之表現量。在一些實施例中，癌症相關抗原可能優先由癌細胞表現，且不由相當的非癌細胞(例如衍生自相同組織/細胞類型之非癌細胞)表現。在一些實施例中，癌症相關抗原可為突變致癌基因或突變腫瘤抑制基因之產物。在一些實施例中，癌症相關抗原可為過度表現細胞蛋白質、由致癌病毒產生之癌症抗原、癌胚抗原或細胞表面糖脂或糖蛋白之產物。癌細胞抗原由Zarour HM, DeLeo A, Finn OJ等人之Categories of Tumor Antigens綜述。在Kufe DW, Pollock RE, Weichselbaum RR等人, 編輯. Holland-Frei Cancer Medicine. 第6版. Hamilton (ON): BC Decker; 2003中。癌細胞抗原包括癌胚抗原：CEA、不成熟層黏連蛋白受體、TAG-72；癌病毒抗原，諸如HPV E6及E7；過度表現蛋白質：BING-4、鈣啟動氯化物通道2、週期蛋白-B1、9D7、Ep-CAM、EphA3、HER2/neu、端粒酶、間皮素、SAP-1，存活；癌症睪丸抗原：BAGE、CAGE、GAGE、MAGE、SAGE、XAGE、CT9、CT10、NY-ESO-1、PRAME、SSX-2；譜系限制抗原：MART1、Gp100、酪胺酸酶、TRP-1/2、MC1R、前列腺特異性抗原；突變抗原：β-連環蛋白、BRCA1/2、CDK4、CML66、纖維結合蛋白、MART-2、p53、Ras、TGF-βRII；轉譯後改變抗原：MUC1、個體基因型抗原：Ig、TCR。其他癌細胞抗原包括熱休克蛋白70 (heat-shock protein 70，HSP70)、熱休克蛋白90 (HSP 90)、葡萄糖調節蛋白78 (GRP78)、波形蛋白、核仁素、胎腺泡胰臟蛋白(FAPP)、鹼性磷酸酶胎盤類2 (ALPPL-2)、唾液酸結合免疫球蛋白樣凝集素-5、應力誘導磷蛋白1 (STIP1)、蛋白質酪胺酸激酶7 (PTK7)及親環蛋白B。在一些實施例中，癌細胞抗原係HER2。在一些實施例中，本發明之CAR包含能夠特異性結合於HER2之抗原結合域。在一些實施例中，CAR包含包含能夠特異性結合於HER2之抗體之CDR的抗原結合域。在一些實施例中，CAR包含包含能夠特異性結合於HER2之抗體之VL區及VH區的抗原結合域。在特定實施例中，，表現CAR之細胞包含各靶向不同癌細胞抗原之兩個獨立CAR，且在特定態樣中CAR中之至少一者靶向HER2。在一些情況下，CAR有對兩種不同癌細胞抗原之雙特異性，其中之一可為HER2。在一些實施例中，CAR包含抗原結合域，其包含包含以下之VL域： LC-CRD1：SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:26或SEQ ID NO:57； LC-CRD2：SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:27或SEQ ID NO:58； LC-CRD3：SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:28或SEQ ID NO:59；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:29或SEQ ID NO:60； HC-CRD2：SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:30或SEQ ID NO:61； HC-CRD3：SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:62。在一些實施例中，CAR包含抗原結合域，其包含包含以下之VL域： LC-CRD1：SEQ ID NO:10； LC-CRD2：SEQ ID NO:11； LC-CRD3：SEQ ID NO:12；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:13； HC-CRD2：SEQ ID NO:14； HC-CRD3：SEQ ID NO:15。在一些實施例中，CAR包含抗原結合域，其包含包含以下之VL域： LC-CRD1：SEQ ID NO:18； LC-CRD2：SEQ ID NO:19； LC-CRD3：SEQ ID NO:20；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:21； HC-CRD2：SEQ ID NO:22； HC-CRD3：SEQ ID NO:23。在一些實施例中，CAR包含抗原結合域，其包含包含以下之VL域： LC-CRD1：SEQ ID NO:26； LC-CRD2：SEQ ID NO:27； LC-CRD3：SEQ ID NO:28；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:29； HC-CRD2：SEQ ID NO:30； HC-CRD3：SEQ ID NO:31。在一些實施例中，CAR包含抗原結合域，其包含： VL域，其包含： LC-CRD1：SEQ ID NO:57； LC-CRD2：SEQ ID NO:58； LC-CRD3：SEQ ID NO:59；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:60； HC-CRD2：SEQ ID NO:61； HC-CRD3：SEQ ID NO:62。在一些實施例中，CAR包含抗原結合域，其包含如下的輕鏈可變區(VL)：包含與SEQ ID NO:16、24、32或63具有至少75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或具有100%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成。在一些實施例中，CAR包含抗原結合域，其包含如下的重鏈可變區(VH)：包含與SEQ ID NO:17、25、33或64具有至少75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或具有100%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成。在一些實施例中，CAR包含抗原結合域，其包含如下的VL：包含與SEQ ID NO:16具有至少75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或具有100%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成；及VH：包含與SEQ ID NO:17具有至少75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或具有100%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成。在一些實施例中，CAR包含抗原結合域，其包含如下的VL：包含與SEQ ID NO:24具有至少75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或具有100%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成；及VH：包含與SEQ ID NO:25具有至少75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或具有100%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成。在一些實施例中，CAR包含抗原結合域，其包含如下的VL：包含與SEQ ID NO:32具有至少75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或具有100%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成；及VH：包含與SEQ ID NO:33具有至少75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或具有100%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成。在一些實施例中，CAR包含抗原結合域，其包含如下的VL：包含與SEQ ID NO:63具有至少75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或具有100%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成；及VH：包含與SEQ ID NO:64具有至少75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或具有100%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成。在一些實施例中，本發明之CAR包含抗原結合區，其包含根據本發明之抗體/抗原結合片段或由其組成或基本上由其組成。細胞膜錨定區設置於抗原結合區與CAR之傳信區之間。細胞膜錨定區為CAR錨定至表現CAR細胞之細胞膜作準備，其中抗原結合區在胞外空間中且傳信區在細胞內。適合跨膜域包括衍生自CD28、CD3-ζ、CD4或CD8的跨膜區。在一些實施例中，細胞膜錨定區包含與SEQ ID NO:4具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成。 CAR之傳信區允許T細胞之活化。CAR傳信區可包含CD3-ζ之胞內域之胺基酸序列，其提供基於免疫受體酪胺酸之活化基元(immunoreceptor tyrosine-based activation motif，ITAM)用於CAR表現T細胞之磷酸化及活化包含其他含ITAM的蛋白質之序列之傳信區亦應用於CAR中，諸如包含FcγRI之含ITAM的區的域(Haynes等人, 2001 J Immunol 166(1):182-187)。包含衍生自CD3-ζ之胞內域之傳信區的CAR通常稱為第一代CAR。在一些實施例中，細胞膜錨定區包含與SEQ ID NO:6具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成。 CAR之傳信區亦可包含衍生自共刺激分子之傳信區之共刺激序列，以輔助在與目標蛋白質結合時CAR表現T細胞之活化。適合共刺激分子至少包括CD28、OX40、4-1BB、ICOS及CD27。具有包括其他共刺激序列之傳信區的CAR通常稱為第二代CAR。在一些情況下CAR經工程化以提供不同胞內傳信路徑之共刺激。舉例而言，與CD28共刺激相關之傳信優先活化磷脂醯肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase，P13K)路徑，而4-1BB介導的傳信經由TNF受體相關因子(TNF receptor associated factor，TRAF)轉接器蛋白。因此CAR之傳信區有時含有衍生自多於一個共刺激分子之傳信區之共刺激序列。包含具有多個共刺激序列之傳信區的CAR通常稱為第三代CAR。在一些實施例中，本發明之CAR包含一或多個共刺激序列，其包含如下的胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成：包含以下、由以下組成或基本上由以下組成或衍生自以下：CD28、OX40、4-1BB、ICOS及CD27中之一或多者之胞內域之胺基酸序列。在一些實施例中，細胞膜錨定區包含與SEQ ID NO:5具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成。視情況存在之鉸鏈區可提供抗原結合域與跨膜域之間之分離，且可充當可撓性連接子。鉸鏈區可為允許結合部分在不同方向上定向之可撓性域。鉸鏈區可衍生自IgG1或免疫球蛋白之CH₂ CH₃ 區。在一些實施例中，本發明之CAR包含包含如下的胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成的鉸鏈區，該胺基酸序列包含以下、由以下組成或基本上由以下組成或衍生自以下：IgG1或免疫球蛋白之CH₂ CH₃ 區之鉸鏈區之胺基酸序列。在一些實施例中，細胞膜錨定區包含與SEQ ID NO:9具有至少85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成。在一些實施例中，CAR包含與SEQ ID NO:1、2、3或56具有至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或具有100%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成。本發明亦提供包含或表現根據本發明之CAR的細胞。亦提供包含或表現編碼本發明之CAR之核酸的細胞。CAR工程化成T細胞可在用於轉導及擴增之培養期間活體外(in vitro )進行，諸如發生在過繼T細胞療法之T細胞之擴增期間。用於工程化免疫細胞以表現CAR之方法為熟習此項技術者所已知且描述在例如Wang及Rivière Mol Ther Oncolytics. (2016) 3:16015中，其以全文引用之方式併入本文中。應瞭解，「至少一個細胞」涵蓋複數個細胞，例如此類細胞之群體。包含或表現根據本發明之CAR的細胞可為真核細胞例如哺乳動物細胞。哺乳動物可為人類或非人類哺乳動物(例如兔、天竺鼠、大鼠、鼠或其他嚙齒類動物(包括嚙齒目中之任何動物)、貓、狗、豬、綿羊、山羊、牛(cattle)(包括牛(cow)，例如奶牛，或牛目中之任何動物)、馬(包括馬目中之任何動物)、驢及非人類靈長類)。在一些實施例中，細胞可能來自或可能已獲自人類個體。在CAR表現細胞待用於個體之治療時，細胞可來自待使用CAR表現細胞治療之個體(亦即細胞可為自體的)，或細胞可來自不同個體(亦即細胞可為同種異體的)。細胞可為免疫細胞。細胞可為造血來源之細胞，例如嗜中性球、嗜伊紅血球、嗜鹼性球、樹狀細胞、淋巴球或單核球。淋巴球可為例如T細胞、B細胞、NK細胞、NKT細胞或先天性淋巴樣細胞(innate lymphoid cell，ILC)或其前驅體。細胞可表現例如CD3多肽(例如CD3γ、CD3ε、CD3ζ或CD3δ)、TCR多肽(TCRα或TCRβ)、CD27、CD28、CD4或CD8。在一些實施例中，細胞為T細胞。在一些實施例中，T細胞為CD3+ T細胞。在一些實施例中，T細胞為CD3+、CD8+ T細胞。在一些實施例中，T細胞為細胞毒性T細胞(例如細胞毒性T淋巴球(CTL))。 CAR T細胞之用途與其可系統地投與且將處理原發及轉移的腫瘤之優勢相關(Manzo等人, Human Molecular Genetics (2015) R67-73)。在一些實施例中，細胞為抗原特異性T細胞。在本文中之實施例中，「抗原特異性」T細胞係回應T細胞對其具有特定性之抗原或表現該抗原的細胞而顯示T細胞之某些功能特性的細胞。在一些實施例中，該等特性係與效應子T細胞，例如細胞毒性T細胞相關之功能特性。在一些實施例中，抗原特異性T細胞可例如回應T細胞對其具有特定性之抗原或包含/表現T細胞對其具有特定性之抗原的細胞，而顯示以下一或多種特性：例如對包含/表現T細胞對其具有特定性之抗原的細胞之細胞毒性；增殖；IFNγ表現；CD107a表現；IL-2表現；TNFα表現；穿孔蛋白表現；顆粒酶表現；顆粒溶素表現；及/或FAS配位體(FASL)表現。抗原特異性T細胞包含TCR，當其藉由適當MHC分子呈現時即能夠識別T細胞對其具有特定性之抗原之肽。抗原特異性T細胞可為CD4+ T細胞及/或CD8+ T細胞。在一些實施例中，T細胞對其具有特定性之抗原可為病毒之肽或多肽，例如腺病毒、巨細胞病毒(Cytomegalovirus，CMV)、埃-巴二氏病毒(Epstein-Barr virus，EBV)、人類乳頭狀瘤病毒(human papilloma virus，HPV)、流感病毒、麻疹病毒、B型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)、C型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)、人類免疫缺乏病毒(human immunodeficiency virus，HIV)、淋巴球性脈絡叢腦膜炎病毒(lymphocytic choriomeningitis virus，LCMV)或單純疱疹病毒(HSV)。對病毒之抗原有特異性之T細胞在本文中可稱作病毒特異性T細胞(virus-specific T-cell，VST)。VST可為CD4+ T細胞(例如T_H 細胞)及/或CD8+ T細胞(例如CTL)。對特定病毒之抗原有特異性的T細胞可稱為對相關病毒有特異性；例如，對腺病毒之抗原有特異性的T細胞可稱為腺病毒特異性T細胞或「AdVST」。病毒特異性T細胞於產生CAR-T細胞之用途係與如下優勢相關：儘管原生T細胞在輸注之後可能具有有限的長期存留性，衍生自記憶隔室之病毒特異性T細胞(VST)及經基因修飾的VST已顯示在幹細胞移植受體中輸注之後存留超過10年(Cruz等人, Cytotherapy (2010) 12:743-749)。舉例而言，表現GD2.CAR之VST已顯示在輸注之後長期存留且在具有低腫瘤負荷之患者中產生完全腫瘤反應(Sun等人, Journal for Immunotherapy of Cancer (2015) 3:5及Pule等人, Nature Medicine (2008) 14: 1264-1270)。在一些實施例中，包含/表現CAR之細胞係病毒特異性T細胞(VST，例如病毒特異性CD4+ T細胞(例如T_H 細胞)及/或病毒特異性CD8+ T細胞(例如CTL)。在一些實施例中，CAR表現細胞為腺病毒特異性T細胞(AdVST)、巨細胞病毒特異性T細胞(CMVST)、埃-巴二氏病毒特異性T細胞(EBVST)、流感病毒特異性T細胞、麻疹病毒特異性T細胞、B型肝炎病毒特異性T細胞(HBVST)、C型肝炎病毒特異性T細胞(HCVST)、人類免疫缺乏病毒特異性T細胞(HIVST)、淋巴球性脈絡叢腦膜炎病毒特異性T細胞(LCMVST)、單純疱疹病毒特異性T細胞(HSVST)或人類乳頭狀瘤病毒特異性T細胞(HPVST)。在一些實施例中，包含/表現CAR之細胞為例如如本文中所描述之溶瘤病毒特異性免疫細胞(例如溶瘤病毒特異性T細胞)。本發明之任何細胞可包括在可能均質或可能不均質之細胞之分離群體中。在特定實施例中，細胞群體具有大部分之作為對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞及/或表現CAR的細胞。在該細胞群體中之細胞可包含溶瘤腺病毒(OncAd)、輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)、嵌合抗原受體(CAR)及/或編碼OncAd、HDAd及/或CAR中之一或多者之核酸或複數種核酸。在特定實施例中，細胞群體具有至少70、75、80、85、90、91、92、93、94、95、96、97、98或99%之包含溶瘤腺病毒(OncAd)、輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)、嵌合抗原受體(CAR)及/或編碼OncAd、HDAd及/或CAR中之一或多者之核酸或複數種核酸的細胞。溶瘤病毒特異性免疫細胞 本發明之態樣提供溶瘤病毒特異性免疫細胞(在本文中亦稱為對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞)。溶瘤病毒特異性免疫細胞表現/包含能夠識別溶瘤病毒之抗原之肽的受體(例如當藉由MHC分子呈現時)。免疫細胞可能由於編碼此抗原受體之內源性核酸之表現，或由於已經工程化以表現此受體而表現/包含此類受體。在一些實施例中，溶瘤病毒特異性免疫細胞可為造血來源之細胞，例如嗜中性球、嗜伊紅血球、嗜鹼性球、樹狀細胞、淋巴球或單核球。淋巴球可為例如T細胞、B細胞、NK細胞、NKT細胞或先天性淋巴樣細胞(ILC)或其前驅體。細胞可表現例如CD3多肽(例如CD3γ、CD3ε、CD3ζ或CD3δ)、TCR多肽(TCRα或TCRβ)、CD27、CD28、CD4或CD8。在一些實施例中，溶瘤病毒特異性免疫細胞為T細胞，例如CD3+ T細胞。在一些實施例中，T細胞為CD3+、CD4+ T細胞。在一些實施例中，T細胞為CD3+、CD8+ T細胞。在一些實施例中，T細胞為T輔助細胞(T_H 細胞))。在一些實施例中，T細胞為細胞毒性T細胞(例如細胞毒性T淋巴球(CTL))。溶瘤病毒特異性免疫細胞(例如溶瘤病毒特異性T細胞)可對如本文中所描述之溶瘤病毒有特異性。亦即，溶瘤病毒特異性免疫細胞可對本文中所描述之溶瘤病毒之一或多個抗原有特異性。用於生成/擴增對所關注抗原及/或所關注病毒有特異性之免疫細胞之群體的方法在此項技術中已熟知，且描述在例如Wang及Rivière Cancer Gene Ther. (2015) 22(2):85-94中，其以全文引用的方式併入本文中。此類方法可涉及使免疫細胞(例如外周血液單核細胞(peripheral blood mononuclear cell，PBMC)、外周血液淋巴球(peripheral blood lymphocyte，PBL)、腫瘤浸潤性淋巴球(tumor-infiltrating lymphocyte，TIL))之異質群體與所關注抗原之一或多個肽或包含/表現抗原/肽的細胞接觸。包含/表現抗原/肽之細胞可能由於經包含/編碼抗原之病毒感染、由抗原/其肽之細胞吸收或表現抗原/其肽而變得如此。呈現典型地在抗原呈現細胞之細胞表面之MHC分子之情況下。可根據熟習此項技術者所熟知之方法將包含/表現抗原/肽之細胞的與抗原之肽接觸(「脈衝」)。抗原肽可提供在肽混合物(對應於一或多個抗原)之庫中，其可以被稱為pepmix。pepmix之肽可能例如為長度為8至20胺基酸之重疊肽，且可覆蓋相關抗原之全部或部分胺基酸序列。在包含對肽有特異性之受體的免疫細胞之群體中之細胞可在識別由抗原呈現細胞(APC)呈現之抗原之肽之後，在適當共刺激信號之情況下活化(且經刺激以增殖)。應瞭解，「對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞」涵蓋複數細胞，例如此類細胞之群體。此類群體可活體外及/或離體(ex vivo )產生/擴增。在一些實施例中，對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞對溶瘤腺病毒(OncAd)，例如如本文中所描述之OncAd有特異性。在一些實施例中，對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞對OncAd之抗原有特異性。在一些實施例中，抗原為或衍生自：OncAd蛋白質，例如由早期基因(例如E1 (例如E1A、E1B)、E2 (例如E2A、E2B)、E3或E4)編碼之蛋白質、由晚期基因(例如L1、L2、L3、L4或L5)編碼之蛋白質、由IX編碼之蛋白質或由IVa2編碼之蛋白質。在一些實施例中，抗原為或衍生自OncAd六鄰體及/或五鄰體。在根據本發明之各個態樣之一些實施例中，對病毒有特異性之免疫細胞可藉由包含以下之方法產生/擴增(或可能係藉由包含以下之方法產生/擴增的)：藉由在呈現該病毒之肽之抗原呈現細胞(APC)存在下培養來刺激免疫細胞之群體。在一些實施例中，對根據本發明之溶瘤病毒有特異性之免疫細胞藉由採用以下物質的方法製備：包含對應於人類腺病毒3六鄰體之重疊肽之混合物的PepMix，及/或包含對應於人類腺病毒5五鄰體之重疊肽之混合物的PepMix。在一些實施例中，溶瘤病毒特異性免疫細胞表現/包含CAR，例如如本文中所描述之CAR。溶瘤病毒特異性免疫細胞可經工程化，例如藉由具有編碼CAR之核酸之溶瘤病毒特異性免疫細胞之轉染/轉導，以表現CAR。本發明之組合 本發明之態樣包括包含/採用(i)溶瘤病毒；(ii)包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒；及(iii)包含對癌細胞抗原有特異性之嵌合抗原受體(CAR)的至少一個細胞的組合物及方法。亦提供包含/採用(i)溶瘤病毒；及(ii)包含對癌細胞抗原有特異性之嵌合抗原受體(CAR)的至少一個細胞的組合物及方法(亦即未必亦採用包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒)。亦提供包含/採用(i)溶瘤病毒；及(ii)對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞的組合物及方法。在一些實施例中，根據本文所描述之各種態樣，包含/表現CAR之細胞對所採用之溶瘤病毒有特異性(例如包含對溶瘤病毒之抗原有特異性之抗原受體(例如TCR))。亦即在一些實施例中，溶瘤病毒與包含/表現CAR之細胞之特異性匹配。藉助於實例，在一些實施例中，溶瘤病毒為腺病毒，且包含/表現CAR之CAR表現細胞為腺病毒特異性T細胞。類似地，在本文中所描述之各種態樣中，溶瘤病毒與對該溶瘤病毒(亦即相同溶瘤病毒)有特異性之免疫細胞組合使用。如本文中所提及之「組合」涵蓋包含該組合之組分的產品及組合物(例如醫藥組合物)。「組合」亦涵蓋採用該組合之組分的治療方案。在一些實施例中，組合之組分在獨立組合物中提供。在一些實施例中，在一個組合物中提供組合之多於一個組分。在一些實施例中，組合之組分在一個組合物中提供。類似地，在一些實施例中，分別投與組合之組分。在一些實施例中，組合之組分與該組合之另一組分一起投與。在一些實施例中，組合之組分一起投與。藉助於說明，在包含溶瘤病毒、包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒及包含對癌細胞抗原有特異性之CAR的至少一個細胞的組合的實例中，該溶瘤病毒及該包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒可一起投與，且包含對癌細胞抗原有特異性之CAR的至少一個細胞可單獨地投與(例如後續)。組合之組分一起投與的投與可為如下文中所描述之同時投與。組合之組分分別投與的投與可為如下文中所描述之同時投與或依序投與。在組合之組分分別投與之情況下，獨立組分之投與可能或可能不經由相同投與途徑。功能特性 本發明之藥劑可參考一或多個功能特性來定義。可針對功能特性，例如藉由如實驗實例中所描述之分析，來評估藥劑。類似地，本發明之組合及方法可參考一或多個功能特性及/或作用來定義，且可針對此類特性/作用，例如藉由如實驗實例中所描述之分析，來評估。在一些實施例中，根據本發明之溶瘤病毒可具有以下功能特性中之一或多者： · 在癌細胞中複製及/或引起癌細胞之細胞殺滅之能力； · 相比於在癌細胞中複製及/或引起癌細胞之細胞殺滅之能力，降低的在非癌細胞中複製及/或引起非癌細胞之細胞殺滅之能力； · 相比於此項技術中已知一或多個溶瘤病毒之能力，相當的或提高的引起癌細胞之細胞殺滅之能力； · 輔助輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)之複製之能力； · 相比於此項技術中已知一或多個溶瘤病毒之能力，相當的或提高的在癌細胞中複製之能力。在一些實施例中，根據本發明之包含對癌細胞抗原有特異性之嵌合抗原受體(CAR)的細胞可具有以下功能特性中之一或多者： · 結合HER2之能力； · 結合於HER2表現細胞之能力； · 引起HER2表現細胞之細胞殺滅能力； · 相比於引起HER2表現細胞之細胞殺滅的能力，降低的引起不表現HER2之細胞之細胞殺滅的能力。在一些實施例中，溶瘤病毒、包含編碼免疫調節之核酸之病毒及包含對癌細胞抗原有特異性之CAR的至少一個細胞之組合可具有以下功能特性中之一或多者： · 相比於藉由單獨使用該等組分中之任一者或藉由組合使用該等組分中之任兩者引起癌細胞之細胞殺滅的能力，提高的引起癌細胞之細胞殺滅的能力。 · 相比於藉由單獨使用該等組分引起癌細胞之細胞殺滅的能力，協同(亦即超加性)的引起癌細胞之細胞殺滅的能力。在一些實施例中，溶瘤病毒與包含對癌細胞抗原有特異性之CAR的至少一個細胞之組合可具有以下功能特性中之一或多者： · 相比於藉由單獨使用任一組分引起癌細胞之細胞殺滅的能力，提高的引起癌細胞之細胞殺滅能力。 · 相比於藉由單獨使用該等組分引起癌細胞之細胞殺滅的能力，協同(亦即超加性)的引起癌細胞之細胞殺滅的能力。在一些實施例中，溶瘤病毒與對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞之組合可具有以下功能特性中之一或多者： · 相比於藉由單獨使用任一組分引起癌細胞之細胞殺滅的能力，提高的引起癌細胞之細胞殺滅能力。 · 相比於藉由單獨使用該等組分引起癌細胞之細胞殺滅的能力，協同(亦即超加性)的引起癌細胞之細胞殺滅的能力。引起癌細胞之細胞殺滅之能力之分析可藉由對癌細胞之數目/活力之分析來例如活體外評估。引起癌細胞之細胞殺滅之能力之分析亦可在適當模型中活體內分析，例如藉由對癌細胞之數目、腫瘤尺寸/體積及/或癌細胞之數目之一些其他關聯(例如癌症之疾病進展、症狀之嚴重度等)的分析。治療性應用 本發明之態樣尤其關注溶瘤病毒、包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒及包含對癌細胞抗原有特異性之嵌合抗原受體(CAR)的至少一個T細胞在個體之癌症之治療中的用途。相應地，本發明提供治療癌症之方法，其包含向個體投與溶瘤病毒；包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒；及包含對癌細胞抗原有特異性之嵌合抗原受體(CAR)的至少一個T細胞。本發明亦提供溶瘤病毒；包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒；及包含對癌細胞抗原有特異性之嵌合抗原受體(CAR)的至少一個T細胞；用於治療癌症之方法。亦提供溶瘤病毒；包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒；及包含對癌細胞抗原有特異性之嵌合抗原受體(CAR)的至少一個T細胞在用於治療癌症之藥劑之製造中的用途。本發明亦提供治療癌症之方法，其包含向個體投與：(i)溶瘤病毒；及(ii)包含對癌細胞抗原有特異性之嵌合抗原受體(CAR)的至少一個細胞。亦提供(i)溶瘤病毒；及(ii)包含對癌細胞抗原有特異性之嵌合抗原受體(CAR)的至少一個細胞用於治療癌症之方法。亦提供(i)溶瘤病毒；及ii)包含對癌細胞抗原有特異性之嵌合抗原受體(CAR)的至少一個細胞在治療癌症之方法中所使用之藥物之製造中的用途。本發明亦提供治療癌症之方法，其包含向個體投與：(i)溶瘤病毒；及(ii)對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞。亦提供(i)溶瘤病毒；及(ii)對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞用於治療癌症之方法。亦提供(i)溶瘤病毒；及(ii)對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞在治療癌症之方法中所使用之藥物之製造中的用途。亦提供用於治療癌症之方法，其包含向個體投與本發明之OncAd、HDAd、CAR、核酸/複數種核酸、細胞及醫藥組合物。亦提供本發明之OncAd、HDAd、CAR、核酸/複數種核酸、細胞及醫藥組合物用於治療癌症之方法。亦提供本發明之OncAd、HDAd、CAR、核酸/複數種核酸、細胞及醫藥組合物在用於治療癌症之藥劑之製造中的用途。『治療』可為癌症之發展或進展之減輕、癌症之症狀之緩解或癌症之病變之減輕。癌症之治療或緩解可有效地預防癌症之進展，例如預防病況之惡化或減慢更嚴重疾病狀態之發展之速率。在一些實施例中，治療或緩解可引起癌症之改善，例如癌症之症狀之減輕或癌症之嚴重度/活性之一些其他關聯之減輕。癌症之預防可指預防病況之惡化或預防癌症之發展，例如預防早期癌症發展為晚期。在一些實施例中，治療可針對降低個體之癌細胞之數目或包含癌細胞之組織之量。在一些實施例中，治療可針對降低個體之至少一個腫瘤之尺寸及/或預防其生長。在一些實施例中，治療包含向個體投與根據本發明之溶瘤病毒。在一些實施例中，治療可包含向個體投與包含或編碼根據本發明之溶瘤病毒之細胞或細胞之群體。在一些實施例中，治療包含向個體投與根據本發明之溶瘤病毒及編碼免疫調節因子之病毒。在一些實施例中，治療可包含向個體投與包含或編碼根據本發明之溶瘤病毒及/或編碼免疫調節因子之病毒的細胞或細胞之群體。在一些實施例中，治療可包含修飾細胞或細胞之群體以包含/表現根據本發明之CAR。在一些實施例中，治療可包含向個體投與經修飾以包含/表現本發明之CAR之細胞或細胞之群體。在一些實施例中，治療針對向個體提供具有對癌細胞抗原之特異性之免疫細胞或免疫細胞之群體，例如藉由投與根據本發明之CAR表現細胞或生成根據本發明之CAR表現細胞。在一些實施例中，治療可包含向個體投與對根據本發明之溶瘤病毒有特異性之免疫細胞/免疫細胞之群體。在一些實施例中，治療針對向個體提供具有對溶瘤病毒之特異性之免疫細胞/免疫細胞之群體。在一些實施例中，治療可包含生成/擴增對根據本發明之溶瘤病毒有特異性之免疫細胞之群體。在一些實施例中，治療可包含向個體投與根據本發明之對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞/免疫細胞之群體，其經修飾以包含/表現根據本發明之CAR。在一些實施例中，治療針對向個體提供具有對溶瘤病毒之特異性且亦具有對癌細胞抗原之特異性的免疫細胞/免疫細胞之群體。在一些實施例中，治療可包含生成/擴增對根據本發明之溶瘤病毒有特異性之免疫細胞之群體，及修飾細胞或細胞之群體以包含/表現根據本發明之CAR。待治療的個體可為任何動物或人類。個體較佳為哺乳動物，更佳為人類。個體可為非人類哺乳動物，但更佳為人類。個體可為男性或女性或任何性別。個體可為患者。個體可已診斷患有需要治療之癌症，可懷疑患有此癌症，或可處於發展此癌症之風險下。在一些實施例中，待治療之癌症包含表現癌細胞抗原，例如如本文中所描述之癌細胞抗原(例如HER2)之細胞。在一些實施例中，細胞在細胞表面表現癌細胞抗原(例如HER2)。在一些實施例中，待治療之癌症包含表現CAR對其有特異性之癌細胞抗原的細胞在一些實施例中，CAR包含癌細胞抗原結合域，且待治療之癌症包含表現癌細胞抗原的細胞，例如在細胞表面表現癌細胞抗原的細胞。在一些實施例中，癌症過度表現癌細胞抗原。癌細胞抗原之過度表現可藉由偵測癌細胞抗原之表現量來測定，該癌細胞抗原之表現量大於藉由相等非癌細胞/非腫瘤組織之表現量。在一些實施例中，癌症為表現HER2之癌症，例如在細胞表面表現HER2之癌症。在一些實施例中，癌症過度表現HER2。HER2之過度表現可藉由偵測HER2之表現量測定，其大於藉由相等非癌細胞/非腫瘤組織之HER2之表現量在一些實施例中，根據本發明之待治療的個體經選擇用於在藉由自個體獲得之癌細胞或腫瘤之癌細胞抗原之表現/過度表現之偵測的基礎上治療。給定癌細胞抗原之表現可藉由任何適合手段測定。表現可為基因表現或蛋白質表現。基因表現可例如藉由偵測編碼癌細胞抗原之mRNA測定，例如藉由定量即時PCR (qRT-PCR)。蛋白質表現可例如藉由偵測癌細胞抗原測定，例如藉由基於抗體的方法，例如藉由西方墨點法、免疫組織化學、免疫細胞化學、流式細胞測量術或ELISA。根據本發明之待治療/防止之癌症可為任何不希望有的細胞增殖(或任何藉由不希望有的細胞增殖顯示自身之疾病)、贅瘤或腫瘤。癌症可為良性或惡性且可為原發或次級(轉移性)。癌症可為耐藥性(最初或在治療之後)及/或癌症可為復發性。贅瘤或腫瘤可為細胞之任何異常生長或增殖且可位於任何組織中。癌症可屬於衍生自例如的腎上腺腺體、腎上腺髓質、肛門、闌尾、膀胱、血液、骨骼、骨髓、大腦、乳房、盲腸、中樞神經系統(包括或不包括大腦)、小腦、子宮頸、結腸、十二指腸、子宮內膜、上皮細胞(例如腎上皮)、膽囊、食管、膠細胞、心臟、回腸、空腸、腎、淚腺、喉、肝、肺、淋巴、淋巴結、淋巴母細胞、上頜骨、縱隔、腸系膜、子宮肌層、鼻咽、腸網膜、口腔、卵巢、胰腺、腮腺、周邊神經系統、腹膜、胸膜、前列腺、唾液腺、乙狀結腸、皮膚、小腸、軟組織、脾、胃、睪丸、胸腺、甲狀腺、舌、扁桃體、氣管、子宮、外陰、白血球的組織/細胞。待治療/防止之癌症可為任何種類之癌症，其包括以下中之任一者：急性淋巴母細胞白血病(acute lymphoblastic leukemia，ALL)、急性骨髓白血病(acute myeloid leukemia，AML)、腎上腺皮質癌、AIDS相關癌症(例如卡堡氏(Kaposi)肉瘤、AIDS相關淋巴瘤、原發CNS淋巴瘤)、肛門癌、闌尾癌、星形細胞瘤、皮膚之基底細胞癌、膽管癌症(例如膽管癌)、膀胱癌、骨癌(例如尤文氏(Ewing)肉瘤、骨肉瘤、惡性纖維組織細胞瘤)、腦腫瘤、乳癌、支氣管腫瘤、伯基特(Burkitt)淋巴瘤、類癌腫瘤、原發灶不明癌、心臟腫瘤、中樞神經系統癌症(例如非典型畸胎樣/桿狀腫瘤、胚胎腫瘤、生殖細胞腫瘤、原發CNS淋巴瘤)、子宮頸癌、脊索瘤、慢性淋巴球性白血病(chronic lymphocytic leukemia，CLL)、慢性骨髓性白血病(chronic myelogenous leukemia，CML)、慢性骨髓增生贅瘤、結腸直腸癌、顱咽管瘤、皮膚T細胞淋巴瘤(例如蕈樣黴菌病、塞紮里(Sézary)症候群)、乳腺管原位癌(ductal carcinoma in situ，DCIS)、子宮內膜癌(子宮癌)、室管膜瘤、食道癌、敏感性神經胚細胞瘤、顱外生殖細胞腫瘤、性腺外生殖細胞腫瘤、眼睛癌症(例如眼內黑素瘤、視網膜胚細胞瘤)、輸卵管癌症、骨骼之惡性纖維組織細胞瘤、膽囊癌、胃(gastric/stomach)癌、胃腸類癌腫瘤、胃腸基質瘤(gastrointestinal stromal tumor，GIST)、卵巢生殖細胞腫瘤、睪丸癌、妊娠期滋養層疾病、毛細胞白血病、頭頸癌、心臟腫瘤、肝細胞(肝)癌、組織細胞增多症、蘭格漢氏(Langerhans)細胞、霍奇金氏(Hodgkin)淋巴瘤、下咽癌、胰島細胞腫瘤(胰臟神經內分泌腫瘤)、腎(腎細胞)癌、喉癌、乳頭狀瘤症、白血病、唇及口腔癌症、肺癌(非小細胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)及小細胞肺癌(small cell lung cancer，SCLC))、淋巴瘤、男性乳癌、黑素瘤、梅克爾(Merkel)細胞癌、間皮瘤、轉移性癌症、轉移性、具有隱性原發之鱗狀頸癌、涉及NUT基因之中線癌、口腔癌、多發性內分泌瘤症候群、多發性骨髓瘤/漿細胞贅瘤、蕈樣黴菌病、骨髓發育不良症候群、骨髓發育不良/骨髓增生贅瘤、骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、急性骨髓白血病(AML)、鼻腔及鼻竇癌、鼻咽癌、神經母細胞瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、口部癌、唇及口腔癌、口咽癌、骨肉瘤、卵巢癌、胰臟癌、乳頭狀瘤症、副神經節瘤、鼻竇癌、鼻腔癌、副甲狀腺癌、陰莖癌、咽部癌、嗜鉻細胞瘤、垂體腫瘤、漿細胞贅瘤/多發性骨髓瘤、胸膜肺母細胞瘤、妊娠及乳癌、原發性腹膜癌、前列腺癌、直腸癌、復發性癌症、視網膜胚細胞瘤、橫紋肌肉瘤、唾液腺癌、血管腫瘤、子宮肉瘤、皮膚癌、小腸癌、皮膚之鱗狀細胞癌、T細胞淋巴瘤、咽喉癌、胸腺瘤、胸腺癌、甲狀腺癌、腎盂及尿管之移行細胞癌、尿道癌、陰道癌、外陰癌或威爾姆斯(Wilms)腫瘤。在一些實施例中，待治療之癌症為以下中之一或多者：鼻咽癌(NPC；例如埃-巴二氏病毒(EBV)-陽性NPC)、子宮頸癌(CC；例如人類乳頭狀瘤病毒(HPV)-陽性CC)、口咽癌(OPC；例如HPV-陽性OPC)、胃癌(GC；例如EBV-陽性GC)、肝細胞癌(HCC；例如B型肝炎病毒(HBV)-陽性HCC)、肺癌(例如非小細胞肺癌(NSCLC))及頭頸癌(例如來源於唇、口腔、鼻、鼻竇、咽或喉之組織之癌症，例如頭頸部鱗狀細胞癌(HNSCC))。在一些實施例中，癌症與病毒相關或由病毒引起。在一些實施例中，癌症為EBV-陽性癌症。在一些實施例中，癌症為HPV-陽性癌症。在一些實施例中，癌症為以下中之一者：頭頸癌、鼻咽癌(NPC)、口咽癌(OPC)、子宮頸癌(CC)、胃癌(gastric/stomach cancer/carcinoma)或肺癌。醫學治療之方法亦可涉及活體內、離體及過繼免疫治療，其包括使用自體及/或異源細胞或不朽化細胞株之方法。投藥投藥較佳以「治療有效量」，此為足以顯示對個人之效益。所投與之實際量及投藥之速率與時程將視所治療疾病之性質及嚴重度而定。例如對劑量之決定等治療處方屬於全科醫師及其他醫生之責任，且通常考慮待治療之病況、個別患者之病況、傳遞部位、投藥方法及醫師已知之其他因素。上文所提及之技術及方案之實例可見於Remington's Pharmaceutical Sciences, 第20版, 2000, 出版社Lippincott, Williams & Wilkins。根據本發明之病毒、CAR、核酸及細胞可配製為用於臨床用途之醫藥組合物或藥劑且可包含醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑、賦形劑或佐劑。組合物可經配製用於局部、非經腸、全身、腔內、靜脈內、動脈內、肌內、鞘內、眼內、結膜內、瘤內、皮下、皮內、經口或經皮投藥途徑，其可包括注射或輸注。適合調配物可包含無菌或等張介質中之病毒、CAR、核酸或細胞。藥劑及醫藥組合物可在流體，包括膠凝形式中配製。流體調配物可經配製用於藉由注射或輸注(例如經由導管)投與至人類或動物身體之所選擇的區域。溶瘤病毒及/或包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒可經配製用於瘤內投與。在一些實施例中，方法可包含瘤內投與溶瘤病毒及/或包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒。包含CAR之細胞及/或對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞可經配製用於靜脈內投與。在一些實施例中，方法可包含靜脈內投與包含CAR之細胞及/或對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞。本發明之組合之組分(例如根據本發明之溶瘤病毒、包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒、包含對癌細胞抗原有特異性之CAR的至少一個T細胞、對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞)可同時或依序投與。本發明亦涵蓋同時或依序投與本發明之OncAd、HDAd、CAR、核酸/複數種核酸、細胞及醫藥組合物。同時投與係指一起投與藥劑，例如作為含有藥劑之醫藥組合物(亦即組合製劑)或彼此緊接地且視情況經由相同投與途徑，例如投與至相同動脈、靜脈或其他血管。在特定實施例中，溶瘤病毒與包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒可在組合製劑中同時投與。在某些實施例中，在同時投與兩種或更多種藥劑時可經由不同投與途徑投與。在一些實施例中，同時投與係指同時或在例如1小時、2小時、3小時、4小時、5小時、6小時、8小時、12小時、24小時、36小時或48小時內投與。依序投與係指在單獨投與藥劑中之另一個之給定時間間隔之後投與藥劑中之一或多者。不要求兩種藥劑藉由相同途徑投與，儘管在一些實施例中投與途徑相同。時間間隔可為任何時間間隔，包括幾小時、天、週、月或年。在一些實施例中，依序投與係指由以下中之一者之時間間隔分隔開的投與：至少10分鐘、30分鐘、1小時、6小時、8小時、12小時、24小時、36小時、48小時、3天、4天、5天、6天、1週、2週、3週、1個月、6週、2個月、3個月、4個月、5個月、或6個月。在一些實施例中，治療可另外包含其他治療性或預防性干預，例如化學療法、免疫療法、放射療法、手術、接種疫苗及/或激素療法。此類其他治療性或預防性干預可在本發明所涵蓋之療法之前、期間及/或之後進行，治療性或預防性干預之傳遞可經由與本發明之療法不同之投與途徑進行。化學療法與放射療法分別係指使用藥物或電離輻射治療癌症(例如使用X射線或γ射線之放射療法)。藥物可為化學實體，例如小分子藥物、抗生素、DNA嵌入劑、蛋白質抑制劑(例如激酶抑制劑)或生物製劑，例如抗體、抗體片段、核酸或肽適體、核酸(例如DNA、RNA)、肽、多肽或蛋白質。藥物可配製為醫藥組合物或藥物。調配物可包含一或多種藥物(例如一或多種活性劑)，與一或多種醫藥學上可接受之稀釋劑、賦形劑或載劑一起。化學療法可藉由一或多種投與途徑，例如非經腸、靜脈注射、經口、皮下、皮內或瘤內來投與。化學療法可根據治療方案投與。治療方案可為化學療法投與之預定時間表、規劃、流程或排程，其可由醫師或醫療人員制定且可定製以適合需要治療之患者。治療方案可指示以下各項中之一或多者：向患者投與之化學療法之類型；各藥物或輻射之劑量；投與之間之時間間隔；各治療之長度；若存在，任何治療假期之數目及性質等。對於協同療法可提供指示如何投與各藥物之單個治療方案。化學治療藥物及生物製劑可選自：烷基化劑，諸如順鉑、卡鉑、甲基二(氯乙基)胺、環磷醯胺、苯丁酸氮芥、異環磷醯胺；嘌呤或嘧啶抗代謝物，諸如硫唑嘌呤或巰嘌呤；生物鹼及萜類，諸如長春花生物鹼(例如長春新鹼(vincristine)、長春鹼(vinblastine)、長春瑞賓(vinorelbine)、長春地辛(vindesine))、鬼臼毒素(podophyllotoxin)、依託泊苷(etoposide)、替尼泊苷(teniposide)、紫杉烷，諸如太平洋紫杉醇(paclitaxel)(TaxolTM)、多西他賽(docetaxel)；拓樸異構酶抑制劑，諸如I型拓樸異構酶抑制劑喜樹鹼(camptothecins)、伊立替康(irinotecan)及拓朴替康(topotecan)，或II型拓樸異構酶抑制劑安吖啶(amsacrine)、依託泊苷、磷酸依託泊苷(etoposide phosphate)、替尼泊苷；抗腫瘤抗生素(例如蒽環類抗生素)，諸如放線菌素(dactinomycin)、小紅莓(doxorubicin)(AdriamycinTM)、表柔比星(epirubicin)、博萊黴素(bleomycin)、雷帕黴素(rapamycin)；抗體類藥劑，諸如抗PD-1抗體、抗PD-L1抗體、抗TIM-3抗體、抗CTLA-4、抗4-1BB、抗GITR、抗CD27、抗BLTA、抗OX43、抗VEGF、抗TNFα、抗IL-2、抗GpIIb/IIIa、抗CD-52、抗CD20、抗RSV、抗HER2/neu (erbB2)、抗TNF受體、抗EGFR抗體、單株抗體或抗體片段，實例包括：西妥昔單抗(cetuximab)、帕尼單抗(panitumumab)、英利昔單抗(infliximab)、巴利昔單抗(basiliximab)、貝伐單抗(bevacizumab)(Avastin®)、阿昔單抗(abciximab)、達利珠單抗(daclizumab)、吉妥珠單抗(gemtuzumab)、阿侖單抗(alemtuzumab)、利妥昔單抗(rituximab)(Mabthera®)、帕利珠單抗(palivizumab)、曲妥珠單抗(trastuzumab)、依那西普(etanercept)、阿達木單抗(adalimumab)、尼妥珠單抗(nimotuzumab)；EGFR抑制劑，諸如埃羅替尼(erlotinib)、西妥昔單抗及吉非替尼(gefitinib)；抗血管生成劑，諸如貝伐單抗(Avastin®)；癌症疫苗諸如西普魯塞-T (Sipuleucel-T)(Provenge®)。其他化學治療藥物可選自：13-順-視黃酸、2-氯去氧腺苷、5-阿紮胞苷5-氟尿嘧啶、6-巰嘌呤、6-硫代鳥嘌呤、阿布拉生(Abraxane)、Accutane®、放線菌素-D Adriamycin®、Adrucil®、Afinitor®、Agrylin®、Ala-Cort®、阿地介白素(Aldesleukin)、阿侖單抗、愛甯達(ALIMTA)、亞利崔托寧(Alitretinoin)、Alkaban-AQ®、Alkeran®、全-反視黃酸、α干擾素、六甲蜜胺、胺甲喋呤、阿米福汀(Amifostine)、胺麩精(Aminoglutethimide)、阿那格雷(Anagrelide)、Anandron®、阿那曲唑(Anastrozole)、阿糖胞苷、Aranesp®、Aredia®、Arimidex®、Aromasin®、Arranon®、三氧化二砷、天冬醯胺酶、ATRA Avastin®、阿紮胞苷、BCG、BCNU、苯達莫司汀(Bendamustine)、貝伐單抗、貝瑟羅汀(Bexarotene)、BEXXAR®、比卡魯胺(Bicalutamide)、BiCNU、Blenoxane®、博萊黴素、硼替佐米(Bortezomib)、白消安(Busulfan)、Busulfex®、甲醯四氫葉酸鈣、Campath®、Camptosar®、喜樹鹼-11、卡培他濱(Capecitabine)、Carac™、卡鉑、卡莫司汀(Carmustine)、Casodex®、CC-5013、CCI-779、CCNU、CDDP、CeeNU、Cerubidine®、西妥昔單抗、苯丁酸氮芥、順鉑、檸膠因子、克拉屈濱(Cladribine)、皮質酮、Cosmegen®、CPT-11、環磷醯胺、Cytadren®、Cytarabine Cytosar-U®、Cytoxan®、達克金(Dacogen)、放線菌素、阿法達貝汀(Darbepoetin Alfa)、達沙替尼(Dasatinib)、道諾黴素(Daunomycin)、道諾比星(Daunorubicin)、鹽酸道諾比星(Daunorubicin Hydrochloride)、脂質道諾比星(Daunorubicin Liposomal)、DaunoXome®、地卡特隆(Decadron)、地西他濱(Decitabine)、Delta-Cortef®、Deltasone®、地尼介白素(Denileukin)、迪夫托斯(Diftitox)、DepoCyt™、地塞米松(Dexamethasone)、醋酸地塞米松、磷酸鈉地塞米松、地塞松(Dexasone)、右雷佐生(Dexrazoxane)、DHAD、DIC、迪歐戴克(Diodex)、多西他賽、Doxil®、小紅莓、脂質小紅莓、Droxia™、DTIC、DTIC-Dome®、Duralone®、Eligard™、Ellence™、Eloxatin™、Elspar®、Emcyt®、表柔比星、阿法依泊汀(Epoetin Alfa)、艾必妥(Erbitux)、埃羅替尼、歐文菌屬L-天冬醯胺酶(Erwinia L-asparaginase)、雌莫司汀(Estramustine)、Ethyol Etopophos®、依託泊苷、磷酸依託泊苷、Eulexin®、依維莫司(Everolimus)、Evista®、依西美坦(Exemestane)、Faslodex®、Femara®、非格司亭(Filgrastim)、氟尿苷、Fludara®、氟達拉濱、Fluoroplex®、氟尿嘧啶、氟甲睾酮、氟他胺(Flutamide)、醛葉酸、FUDR®、氟維司群(Fulvestrant)、吉非替尼、吉西他濱(Gemcitabine)、吉妥珠單抗奧佐米星(Gemtuzumab ozogamicin)、Gleevec™、Gliadel® Wafer、戈舍瑞林(Goserelin)、粒細胞群落刺激因子、顆粒球巨噬細胞群落刺激因子、Herceptin®、甲氟烯索(Hexadrol)、Hexalen®、六甲蜜胺、HMM、Hycamtin®、Hydrea®、Hydrocort Acetate®、氫化可的松(Hydrocortisone)、酮磷酸鈉氫化可的松、丁二酸鈉氫化可的松、磷酸鹽氫化可的松、羥脲、布突默單抗(Ibritumomab)、替伊莫單抗(Ibritumomab Tiuxetan)、Idamycin®、艾達黴素(Idarubicin)、Ifex®、IFN-α、異環磷醯胺、IL-11、IL-2、甲磺酸伊馬替尼(Imatinib mesylate)、咪唑甲醯胺、干擾素α、干擾素α-2b (PEG結合)、介白素-2、介白素-11、Intron A® (干擾素α-2b)、Iressa®、伊立替康、異維甲酸(Isotretinoin)、伊沙匹隆(Ixabepilone)、Ixempra™、門冬醯胺酶、Lanacort®、拉帕替尼(Lapatinib)、L-天冬醯胺酶、LCR、來那度胺(Lenalidomide)、來曲唑(Letrozole)、甲醯四氫葉酸、瘤可寧(Leukeran)、Leukine™、亮丙立德(Leuprolide)、醛基長春鹼(Leurocristine)、Leustatin™、脂質阿糖胞苷(Liposomal Ara-C)、Liquid Pred®、洛莫司汀(Lomustine)、L-PAM、L-溶肉瘤素、Lupron®、Lupron Depot®、Matulane®、麥克戴克(Maxidex)、甲基二(氯乙基)胺、甲基二(氯乙基)胺鹽酸鹽、Medralone®、Medrol®、Megace®、甲地孕酮(Megestrol)、乙酸甲地孕酮、美法侖(Melphalan)、巰嘌呤、美司鈉(Mesna)、Mesnex™、甲胺喋呤、甲胺喋呤鈉、甲基潑尼龍(Methylprednisolone)、Meticorten®、絲裂黴素(Mitomycin)、絲裂黴素-C、米托蒽醌(Mitoxantrone)、M-Prednisol®、MTC、MTX、Mustargen®、莫司汀(Mustine)、Mutamycin®、Myleran®、Mylocel™、Mylotarg®、Navelbine®、奈拉濱(Nelarabine)、Neosar®、Neulasta™、Neumega®、Neupogen®、Nexavar®、Nilandron®、尼魯胺(Nilutamide)、Nipent®、氮芥(Nitrogen Mustard)、Novaldex®、Novantrone®、奧曲肽(Octreotide)、乙酸酯奧曲肽、Oncospar®、Oncovin®、Ontak®、Onxal™、奧普瑞秦(Oprevelkin)、Orapred®、Orasone®、奧沙利鉑(Oxaliplatin)、太平洋紫杉醇、蛋白質結合太平洋紫杉醇、帕米膦酸鹽(Pamidronate)、帕尼單抗、Panretin®、Paraplatin®、Pediapred®、PEG干擾素、培門冬酶、派非格司亭(Pegfilgrastim)、PEG-INTRON™、PEG-L-天冬醯胺酶、培美曲塞(PEMETREXED)、噴司他汀(Pentostatin)、苯丙胺酸氮芥(Phenylalanine Mustard)、Platinol®、Platinol-AQ®、潑尼松龍(Prednisolone)、潑尼松(Prednisone)、Prelone®、丙卡巴肼、PROCRIT®、Proleukin®、具有卡莫司汀植入物Purinethol®之Prolifeprospan 20、雷諾昔芬(Raloxifene)、Revlimid®、Rheumatrex®、Rituxan®、利妥昔單抗(Rituximab)、Roferon-A® (干擾素α-2a)、Rubex®、紅比黴素鹽酸鹽(Rubidomycin hydrochloride)、Sandostatin® Sandostatin LAR®、沙格司亭(Sargramostim)、Solu-Cortef®、Solu-Medrol®、索拉非尼(Sorafenib)、SPRYCEL™、STI-571、鏈脲菌素(Streptozocin)、SU11248、舒尼替尼(Sunitinib)、Sutent®、他莫昔芬(Tamoxifen)、Tarceva®、Targretin®、Taxol®、Taxotere®、Temodar®、替莫唑胺(Temozolomide)、坦羅莫司(Temsirolimus)、替尼泊苷、TESPA、沙力度胺(Thalidomide)、Thalomid®、TheraCys®、硫鳥嘌呤、Thioguanine Tabloid®、硫代磷醯胺、Thioplex®、噻替派(Thiotepa)、TICE®、Toposar®、拓朴替康、托瑞米芬(Toremifene)、Torisel®、托西莫單抗(Tositumomab)、曲妥珠單抗、Treanda®、維甲酸(Tretinoin)、Trexall™、Trisenox®、TSPA、TYKERB®、VCR、Vectibix™、Velban®、Velcade®、VePesid®、Vesanoid®、Viadur™、Vidaza®、長春鹼、硫酸長春鹼、Vincasar Pfs®、長春新鹼、長春瑞賓、長春瑞賓酒石酸鹽、VLB、VM-26、伏立諾他(Vorinostat)、VP-16、Vumon®、Xeloda®、Zanosar®、Zevalin™、Zinecard®、Zoladex®、唑來膦酸、佐林紮(Zolinza)、Zometa®。在本發明之實施例中，其中採用編碼能夠催化無毒因子轉化成細胞毒性形式之酶的核酸/病毒，方法可另外包含投與用於酶之前藥基質。前藥可與編碼能夠催化無毒因子轉化成細胞毒性形式之酶的核酸/病毒之投與同時或依序投與。在一些實施例中，前藥選自更昔洛韋(GCV)、阿昔洛韋(ACV)及/或伐昔洛韋，例如其中核酸/病毒編碼胸苷激酶。在一些實施例中，前藥為5-氟胞嘧啶(5-FC)，例如其中核酸/病毒編碼胞嘧啶脫胺酶。在一些實施例中，前藥選自CB1954、硝基CBI-DEI及/或PR-104A，例如其中核酸/病毒編碼硝基還原酶。在一些實施例中，前藥為氧氮磷(例如環磷醯胺或異環磷醯胺)，例如其中核酸/病毒編碼細胞色素P450。在一些實施例中，前藥為氮芥類藥物(例如CMDA或ZD2767P)，例如其中核酸/病毒編碼羧肽酶G2。在一些實施例中，前藥為6-甲基嘌呤2-去氧核糖苷及/或氟達拉濱(例如6-甲基嘌呤-2'-去氧核糖苷(MeP-dR)、2-F-2'-去氧腺苷(F-dAdo)或阿拉伯呋喃糖基-2-F-腺嘌呤單磷酸(F-araAMP))，例如其中核酸/病毒編碼嘌呤核苷磷酸化酶。在一些實施例中，前藥為吲哚-3-乙酸(IAA)，例如其中核酸/病毒編碼辣根過氧化酶。在一些實施例中，前藥為伊立替康，例如其中核酸/病毒編碼羧酸酯酶。可提供多個劑量之本發明之藥劑(例如病毒(OncAd、HdAd)、CAR、核酸/複數種核酸、載體、細胞、組合物、組合、前藥)。劑量之一或多個或各個可伴隨著同時或依序投與另一治療劑。多個劑量可由預定時間間隔分隔開，其可選擇為以下中之一者：1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23或更多個小時或1、2、3、4、5、6、7、、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、或31天或1、2、3、4、5或6個月。藉助於實例，可每7天、14天、21天或28天(加或減3、2或1天)給藥一次。過繼轉移 在本發明之實施例中，治療之方法包含免疫細胞之過繼轉移。過繼細胞轉移(ACT)一般係指自個體獲得細胞(例如免疫細胞)之方法，通常藉由抽取血液樣品且自其中分離細胞。隨後通常將細胞以一定方式處理或改變，且隨後投與相同個體(過繼轉移屬於自體細胞)或不同個體(過繼轉移屬於同種異體細胞)。治療通常針對向個體提供具有特定所需特徵之細胞之群體，或增加具有此類特徵之細胞在該個體內出現之頻率。在本發明中，可出於向個體引入細胞或細胞之群體及/或增加個體之細胞或細胞之群體之頻率的目的進行過繼轉移。在一些實施例中，自其分離細胞之個體係投與經修飾的細胞之個體(亦即過繼轉移屬於自體細胞)。在一些實施例中，自其分離細胞之個體係與投與經修飾的細胞之個體不同的個體(亦即過繼轉移屬於同種異體細胞)。 T細胞之過繼轉移描述在例如Kalos及June 2013, Immunity 39(1): 49-60中，其以全文引用之方式併入本文中。NK細胞之過繼轉移描述在例如Davis等人2015, Cancer J. 21(6): 486-491中，其以全文引用之方式併入本文中。細胞可為例如嗜中性球、嗜伊紅血球、嗜鹼性球、樹狀細胞、淋巴球或單核球。淋巴球可為例如T細胞、B細胞、NK細胞、NKT細胞或先天性淋巴樣細胞(ILC)或其前驅體。在一些實施例中，細胞為T細胞。在一些實施例中，T細胞為CD3+ T細胞。在一些實施例中，T細胞為CD3+、CD4+ T細胞。在一些實施例中，T細胞為CD3+、CD8+ T細胞。在一些實施例中，T細胞為T輔助細胞(T_H 細胞))。在一些實施例中，T細胞為細胞毒性T細胞(例如細胞毒性T淋巴球(CTL))。在一些實施例中，T細胞為病毒特異性T細胞。在一些實施例中，T細胞對EBV、HPV、HBV、HCV或sHIV有特異性。在一些實施例中，細胞為如本文中所描述之對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞。相應地，在一些實施例中，方法包含向個體投與對溶瘤病毒有特異性的至少一個免疫細胞。在一些實施例中，本發明之方法包含生成/擴增對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞之群體，及向個體投與對溶瘤病毒有特異性之至少一個免疫細胞。在一些實施例中，方法包含： (a)自個體分離免疫細胞； (b)藉由包含以下之方法生成或擴增對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞之群體：藉由在呈現溶瘤病毒之肽之抗原呈現細胞(APC)存在下培養來刺激免疫細胞，及； (c)向個體投與對溶瘤病毒有特異性之至少一個免疫細胞。在一些實施例中，用於產生對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞的方法步驟可包含以下各項中之一或多者：自個體採集血液樣品；自血液樣品分離PBMC；生成/擴增對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞之群體(例如藉由在包含/表現溶瘤病毒之抗原/肽之細胞(例如APC)存在下培養PBMC)；在活體外或離體細胞培養中培養對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞；收集對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞；將對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞與佐劑、稀釋劑或載劑混合；向個體投與經修飾的細胞。本發明亦提供治療個體之癌症方法，其包含投與包含對癌細胞抗原有特異性之嵌合抗原受體(CAR)的至少一個細胞。結合本發明之此特性，在一些實施例中，方法另外包含用於產生包含對癌細胞抗原有特異性之嵌合抗原受體(CAR)的至少一個細胞的步驟。CAR可為第一代、第二代或第三代或後續代CAR。CAR可包含例如一、兩、三個或更多個共刺激域。在一些實施例中，方法包含：修飾獲自個體之至少一個細胞以表現或包含本發明之CAR；視情況擴增經修飾的至少一個細胞；及向個體投與經修飾的至少一個細胞。在一些實施例中，方法包含： (a)自個體分離至少一個細胞； (b)修飾至少一個細胞以表現或包含根據本發明之CAR或編碼根據本發明之CAR之核酸； (c)視情況擴增經修飾的至少一個細胞，及； (d)向個體投與經修飾的至少一個細胞。在一些實施例中，如本文中所描述，包含/表現對癌細胞抗原有特異性之CAR的細胞為對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞。在一些實施例中，方法包含修飾對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞以表現或包含本發明之CAR；視情況擴增經修飾的對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞；及向個體投與經修飾的對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞。在一些實施例中，方法包含： (a)自個體分離免疫細胞； (b)藉由包含以下之方法生成或擴增對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞之群體：藉由在呈現溶瘤病毒之肽之抗原呈現細胞(APC)存在下培養來刺激免疫細胞； (c)修飾對溶瘤病毒有特異性之至少一個免疫細胞以表現或包含根據本發明之CAR或編碼根據本發明之CAR之核酸； (d)視情況擴增經修飾的對溶瘤病毒有特異性之至少一個免疫細胞，及； (e)向個體投與經修飾的對溶瘤病毒有特異性之至少一個免疫細胞。經修飾的根據本發明之至少一個細胞可根據熟習此項技術者所熟知之方法來修飾以包含/表現CAR。修飾可包含核酸轉移用於經轉移核酸之永久或短暫表現。可使用任何適合基因工程化平台來修飾根據本發明之細胞。用於修飾細胞之適合方法包括使用基因工程化平台，諸如γ反轉錄病毒載體、慢病毒載體、腺病毒載體、DNA轉染、轉位子類基因送遞及RNA轉染，例如如Maus等人, Annu Rev Immunol (2014) 32:189-225中所描述，其以引用之方式併入在上文中。在一些實施例中，用於產生包含對癌細胞抗原有特異性之嵌合抗原受體(CAR)的至少一個細胞的方法步驟可包含以下各項中之一或多者：自個體採集血液樣品；自血液樣品分離及/或擴增至少一個細胞；在活體外或離體細胞培養中培養至少一個細胞；向至少一個細胞中引入如本文中所描述之CAR或編碼如本文中所描述之CAR之核酸，由此修飾至少一個細胞；擴增至少一個經修飾的細胞；收集至少一個經修飾的細胞；將經修飾的細胞與佐劑、稀釋劑或載劑混合；向個體投與經修飾的細胞。在一些實施例中，該方法可另外包含處理細胞以誘導/加強CAR或編碼CAR之核酸之表現。舉例而言，核酸可包含控制元件，可回應特定藥劑之處理來誘導上調核酸之CAR表現。在一些實施例中，治療可為活體內，藉由向已經投與本發明之經修飾的細胞之個體投與藥劑。在一些實施例中，治療可為離體或活體外，藉由向離體或活體外培養物中之細胞投與藥劑。熟習此項技術者能夠確定用於根據本發明之細胞之過繼轉移的適當試劑及程序，例如參照Dai等人, 2016 J Nat Cancer Inst 108(7): djv439，其以全文引用的方式併入本文中。在一相關態樣中，本發明提供製備經修飾的細胞的方法，該方法包含向細胞中引入根據本發明之CAR或編碼根據本發明之CAR之核酸，由此修飾至少一個細胞。該方法較佳係在活體外或離體進行。組合物 / 產品 / 套組本發明亦提供如本文中所描述之溶瘤病毒，其視情況經分離。亦提供編碼溶瘤病毒之核酸，其視情況經分離。亦提供包含溶瘤病毒或包含編碼溶瘤病毒之核酸的細胞，其視情況經分離。本發明亦提供如本文中所描述之包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒，其視情況經分離。亦提供編碼該病毒之核酸，其視情況經分離。亦提供包含病毒或包含編碼病毒之核酸的細胞，其視情況經分離。本發明亦提供如本文中所描述之嵌合抗原受體(CAR)，其視情況經分離。亦提供編碼CAR之核酸，其視情況經分離。亦提供包含CAR或包含編碼CAR之核酸的細胞，其視情況經分離。本發明亦提供包含本發明之溶瘤病毒、包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒、嵌合抗原受體、核酸/複數種核酸或細胞的組合物。根據本發明之溶瘤病毒、包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒、嵌合抗原受體、核酸/複數種核酸或細胞可配製為醫藥組合物用於臨床用途且可包含醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑、賦形劑或佐劑。本發明之組合可呈單一組合物提供，或可呈包含組合之組分的複數個組合物提供。根據本發明，亦提供用於產生醫藥學上適用組合物的方法，此類產生方法可包含選自以下之一或多個步驟：分離如本文中所描述之溶瘤病毒、包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒、嵌合抗原受體、核酸/複數種核酸或細胞；及/或將如本文中所描述之溶瘤病毒、包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒、嵌合抗原受體、核酸/複數種核酸或細胞與醫藥學上可接受之載劑、佐劑、賦形劑或稀釋劑混合。舉例而言，本發明之另一態樣係關於調配或產生用於治療癌症之藥物或醫藥組合物之方法，方法包含：藉由將如本文中所描述之溶瘤病毒、包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒、嵌合抗原受體、核酸/複數種核酸或細胞與醫藥學上可接受之載劑、佐劑、賦形劑或稀釋劑混合來配製醫藥組合物或藥物。本發明亦提供包含根據本發明之溶瘤病毒、包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒、嵌合抗原受體、核酸、細胞或組合物中之一或多者的部件之套組。在一些實施例中，套組可具有至少一個容器，容器具有預定量之本發明之溶瘤病毒、包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒、嵌合抗原受體、核酸/複數種核酸或細胞或根據本發明之組合物。套組可具有含有本發明之組合之個別組分的容器或可具有含有本發明之組合之組分之組合的容器。套組可提供溶瘤病毒、包含編碼免疫調節因子之核酸的病毒、CAR、核酸細胞或組合物以及向患者投與用以治療特定癌症之說明書。溶瘤病毒、包含編碼免疫調節因子之核酸的病毒、CAR、核酸/複數種核酸、細胞或組合物可經配製以適合於注射或輸注至腫瘤或血液。在一些實施例中，套組可包含用於產生根據本發明之細胞的材料。舉例而言，套組可包含用於修飾細胞以表現或包含根據本發明之病毒或抗原/其肽、CAR或核酸/複數種核酸的材料或用於向細胞中引入根據本發明之病毒或抗原/其肽或核酸/複數種核酸的材料。套組可包含用於產生對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞的材料；例如，套組可包含溶瘤病毒之一或多個抗原之pepmix。在一些實施例中，套組可另外包含至少一個容器，容器具有預定量之另一治療劑(例如抗感染藥劑或化學療法藥劑)。在此類實施例中，套組亦可包含第二藥物或醫藥組合物，使得兩種藥劑或醫藥組合物可同時或分別地投與，使得其提供癌症之組合治療。治療劑亦可經配製以適合於注射或輸注至腫瘤或血液。序列一致性 出於確定兩個或更多個氨基酸或核酸序列之間之百分比一致性之目的的成對及多個序列比對可以熟習此項技術者所已知之各種方式達成，例如，使用供公開使用的電腦軟體，諸如ClustalOmega (Söding, J. 2005, Bioinformatics 21, 951-960)、T-coffee (Notredame等人2000, J. Mol. Biol. (2000) 302, 205-217)、Kalign (Lassmann and Sonnhammer 2005, BMC Bioinformatics, 6(298))及MAFFT (Katoh及Standley 2013, Molecular Biology and Evolution, 30(4) 772-780軟體。當使用此類軟體時，較佳使用預設參數，例如空隙罰分及延伸罰分。序列 *** 本發明包括所描述之態樣及較佳特性之組合，當此組合為明顯不容許或明確地避免時除外。本文中所用之各部分標題僅出於組織目的而不應理解為限制所描述之主題。現將藉助於實例、參考附圖來說明本發明之態樣及實施例。對熟習此項技術者而言，其他態樣及實施例將顯而易見。本文中所提及之所有文獻均以引用之方式併入本文中。在整個本說明書，包括隨後之申請專利範圍中，除非本文另有規定，否則「包含(comprise)」一詞及變化形式(諸如「包含(comprises/comprising)」)應理解為暗示包涵所述整體或步驟或整體或步驟之群但不排除任何其他整體或步驟或步驟或整體或步驟之群。應注意，除非上下文明確另外指定，否則如本說明書及隨附申請專利範圍中所用之單數形式「一(a/an)」及「該(the)」包括複數個指示物。範圍可在本文中表示為「約」一個特定值及/或至「約」另一特定值。當表述此類範圍時，另一實施例包含自一個特定值及/或至另一特定值。類似地，當值藉由使用先行詞「約」表示為近似值時，應理解特定值形成另一實施例。亦明確地設想所揭示之核酸序列之反向互補序列。經編號之本發明之陳述 以下編號段落(段落)之後描述本發明之特定態樣及實施例： 1.一種治療癌症之方法，其包含向個體投與： (i)溶瘤病毒； (ii)包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒；及 (iii)包含對癌細胞抗原有特異性之嵌合抗原受體(CAR)的至少一個細胞。 2.如段落1之方法，其中溶瘤病毒為溶瘤腺病毒(OncAd)。 3. 如段落1或段落2之方法，其中溶瘤病毒衍生自腺病毒5 (Ad5)。 4. 如段落1至3中任一項之方法，其中溶瘤病毒編碼E1A蛋白，相比於由Ad5編碼之E1A蛋白，該E1A蛋白顯示與Rb蛋白之結合降低。 5. 如段落1至4中任一項之方法，其中溶瘤病毒編碼缺少胺基酸序列LTCHEACF (SEQ ID NO:52)之E1A蛋白。 6. 如段落1至5中任一項之方法，其中溶瘤病毒編碼包含胺基酸序列SEQ ID NO:34或由其組成之E1A蛋白。 7. 如段落1至6中任一項之方法，其中溶瘤病毒包含具有用於一或多個轉錄因子之一或多個結合位點之核酸。 8. 如段落1至7中任一項之方法，其中溶瘤病毒包含具有用於STAT1之一或多個結合位點之核酸。 9. 如段落1至8中任一項之方法，其中包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒係輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)。 10. 如段落1至9中任一項之方法，其中免疫調節因子選自：效應子免疫反應之促效劑或免疫調節反應之拮抗劑。 11. 如段落1至10中任一項之方法，其中包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒包含編碼IL-12及/或拮抗劑抗PD-L1抗體之核酸。 12. 如段落1至11中任一項之方法，其中包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒包含編碼胸苷激酶之核酸。 13. 如段落1至12中任一項之方法，其中包含對癌細胞抗原有特異性之CAR的至少一個細胞係T細胞。 14. 如段落1至13中任一項之方法，其中CAR包含能夠特異性結合於HER2之抗原結合域。 15. 如段落1至14中任一項之方法，其中CAR包含包含以下之抗原結合域： VL域，其包含： LC-CRD1：SEQ ID NO:10； LC-CRD2：SEQ ID NO:11； LC-CRD3：SEQ ID NO:12；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:13； HC-CRD2：SEQ ID NO:14； HC-CRD3：SEQ ID NO:15；或 VL域，其包含： LC-CRD1：SEQ ID NO:18； LC-CRD2：SEQ ID NO:19； LC-CRD3：SEQ ID NO:20；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:21； HC-CRD2：SEQ ID NO:22； HC-CRD3：SEQ ID NO:23；或 VL域，其包含： LC-CRD1：SEQ ID NO:26； LC-CRD2：SEQ ID NO:27； LC-CRD3：SEQ ID NO:28；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:29； HC-CRD2：SEQ ID NO:30； HC-CRD3：SEQ ID NO:31。 16. 如段落1至15中任一項之方法，其中CAR包含包含以下之抗原結合域：包含與SEQ ID NO:16具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成之VL，及包含與SEQ ID NO:17具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成之VH；或包含與SEQ ID NO:24具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成之VL，及包含與SEQ ID NO:25具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成之VH；或包含與SEQ ID NO:32具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成之VL，及包含與SEQ ID NO:33具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成之VH。 17. 如段落1至16中任一項之方法，其中方法另外包含： (a)自個體分離至少一個細胞； (b)修飾該至少一個細胞以表現或包含對癌細胞抗原有特異性之CAR或編碼對癌細胞抗原有特異性之CAR之核酸， (c)視情況擴增經修飾的至少一個細胞，及； (d)向個體投與經修飾的至少一個細胞。 18. 如段落1至17中任一項之方法，其中癌症選自：頭頸癌、鼻咽癌(NPC)、子宮頸癌(CC)、口咽癌(OPC)、胃癌(GC)、肝細胞癌(HCC)及肺癌。 19. 一種溶瘤腺病毒(OncAd)，其編碼包含胺基酸序列SEQ ID NO:34或由其組成之E1A蛋白。 20. 一種溶瘤腺病毒(OncAd)，其包含具有用於STAT1之一或多個結合位點之核酸。 21. 如段落20之OncAd，其中OncAd包含與SEQ ID NO:51具有至少60%序列一致性之核酸序列或因密碼子簡併結果產生之等效序列。 22. 一種輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)，其包含編碼IL-12及/或拮抗劑抗PD-L1抗體之核酸。 23. 如段落22之HDAd，其中HDAd另外包含編碼胸苷激酶之核酸。 24. 一種嵌合抗原受體(CAR)，其包含包含以下之抗原結合域： VL域，其包含： LC-CRD1：SEQ ID NO:10； LC-CRD2：SEQ ID NO:11； LC-CRD3：SEQ ID NO:12；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:13； HC-CRD2：SEQ ID NO:14； HC-CRD3：SEQ ID NO:15；或 VL域，其包含： LC-CRD1：SEQ ID NO:18； LC-CRD2：SEQ ID NO:19； LC-CRD3：SEQ ID NO:20；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:21； HC-CRD2：SEQ ID NO:22； HC-CRD3：SEQ ID NO:23；或 VL域，其包含： LC-CRD1：SEQ ID NO:26； LC-CRD2：SEQ ID NO:27； LC-CRD3：SEQ ID NO:28；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:29； HC-CRD2：SEQ ID NO:30； HC-CRD3：SEQ ID NO:31。 25. 如段落24之CAR，其中CAR包含包含以下之抗原結合域：包含與SEQ ID NO:16具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成之VL，及包含與SEQ ID NO:17具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成之VH；或包含與SEQ ID NO:24具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成之VL，及包含與SEQ ID NO:25具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成之VH；或包含與SEQ ID NO:32具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成之VL，及包含與SEQ ID NO:33具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成或基本上由其組成之VH。 26. 一種核酸，其視情況經分離或人造，其編碼如段落19至21中任一項之溶瘤腺病毒(OncAd)、如段落22或段落23之輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)或如段落24或段落25之嵌合抗原受體(CAR)。 27. 一種細胞，其包含如段落19至21中任一項之溶瘤腺病毒(OncAd)、如段落22或段落23之輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)、如段落24或段落25之嵌合抗原受體(CAR)或如段落26之核酸，視情況其中該細胞為人造且不天然存在。 28. 一種醫藥組合物，其包含如段落19至21中任一項之溶瘤腺病毒(OncAd)、如段落22或段落23之輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)、如段落24或段落25之嵌合抗原受體(CAR)、如段落26之核酸或如段落27之細胞及醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑、賦形劑或佐劑。 29. 一種治療癌症之方法，其包含向個體投與如段落19至21中任一項之溶瘤腺病毒(OncAd)、如段落22或段落23之輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)、如段落24或段落25之嵌合抗原受體(CAR)、如段落26之核酸、如段落27之細胞或如段落28之醫藥組合物。 30. 如段落19至21中任一項之溶瘤腺病毒(OncAd)，如段落22或段落23之輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)、如段落24或段落25之嵌合抗原受體(CAR)、如段落26之核酸、如段落27之細胞或如段落28之醫藥組合物，其用於治療癌症之方法。 31. 一種如段落19至21中任一項之溶瘤腺病毒(OncAd)，如段落22或段落23之輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)、如段落24或段落25之嵌合抗原受體(CAR)、如段落26之核酸、如段落27之細胞或如段落28之醫藥組合物之用途，其用於用於治療癌症之藥劑之製造中。 32. 如段落29至31中任一項之方法、用法或用途，其中癌症選自：頭頸癌、鼻咽癌(NPC)、子宮頸癌(CC)、口咽癌(OPC)、胃癌(GC)、肝細胞癌(HCC)及肺癌。 33. 一種部件之套組，其包含預定量之如段落19至21中任一項之溶瘤腺病毒(OncAd)、如段落22或段落23之輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)、如段落24或段落25之嵌合抗原受體(CAR)、如段落26之核酸、如段落27之細胞或如段落28之醫藥組合物。實例在以下實例中，本發明者描述新穎HER-2特異性CAR及CAR-T細胞、溶瘤腺病毒及輔助病毒依賴型腺病毒之生成功能表徵。實例 1 ： HER2- 特異性 CAR-T 細胞 1.1 HER2 特異性 CAR 構築體及 CAR-T 細胞之生成 製備HER2結合CAR構築體。簡言之，編碼用於抗HER2抗體純系C5、E4、F1或A3之scFv (亦即藉由連接子序列接合之VL域及VH域)的DNA選殖到CAR構築體主結構中，該CAR構築體主結構包含5'信號肽(signal peptide，SP)及CD28跨膜(transmembrane，TM)及胞內域序列以及3' CD3ζ胞內域序列。三個HER2結合CAR構築體示意性地表示在圖1A中。 HER2特異性CAR-T細胞如圖1B中所圖示地生成。簡言之，藉由菲科爾(Ficoll)密度梯度離心來自血液樣品中分離人類PBMC。藉由在IL-2存在下使用抗CD3(OKT3)/抗CD28刺激來處理細胞以促進T細胞活化及增殖，且將細胞使用編碼HER2 CAR構築體之反轉錄病毒轉導。藉由在100 IU/mL重組人類IL-2存在下培養擴增T細胞，且轉導後6天冷凍。HER2特異性CAR構築體轉導的T細胞藉由活體外培養容易地擴增(參見例如圖14)。將T細胞解凍且在100 IU/mL之重組人類IL-2存在下擴增5天且用於活體外/活體內實驗及表現型分析。1.2 HER2 特異性 CAR-T 細胞之表徵 1.2.1 表面標記物及 HER2 CAR 之表現 使用編碼用於抗HER2抗體純系E4之scFv之HER2 CAR構築體轉導之T細胞利用流式細胞測量術表徵不同細胞表面分子之表現。經擴增的HER2特異性CAR T細胞使用螢光標記單株抗體在4℃下染色30分鐘。活/死亡細胞之區分藉由在染色(BD Pharmingen)中包括7AAD來達成。根據製造商之說明書使用Gallios流式細胞儀及Kaluza軟體(BD Bioscience)分析染色的細胞。結果顯示於圖2及圖3中。在經轉導的細胞上偵測到強烈的HER2-CAR之表面表現(圖2)。圖3顯示使用HER2(E4)-CAR轉導之T細胞之表徵之結果。表現HER2(E4)-CAR之CD3+細胞、CD4+細胞及CD8+細胞顯示出相比於未經轉導的細胞，具有增加的PD-1、LAG-3及TIM-3之表現且具有降低的CCR7之表現量(圖3)。1.2.2 細胞殺滅活性 在細胞殺滅分析中，針對其活體外殺滅HER2表現癌細胞之能力來分析HER2-CAR-T細胞。在第一實驗中，HER2陰性MDA細胞株之細胞(陰性對照)、穩定表現HER2之MDA細胞(MDA-HER2；陽性對照)、咽鱗狀細胞癌細胞株FaDu或頭頸部鱗狀癌細胞株SCC47細胞使用鉻-51 (⁵¹ Cr)標記，且與未經轉導的T細胞(NT)或表現指定CAR之HER2-CAR-T細胞以效應子:靶細胞之比20:1一起共培養4小時。在離心之後，使用液體閃爍計數器計數細胞培養基中之⁵¹ Cr含量。結果顯示於圖4A中；顯示出HER2-CAR-T細胞殺滅HER2表現癌細胞。當使用效應子:靶細胞之比10:1進行實驗時獲得類似結果。藉由流式細胞測量術確認HER2在MDA-HER2、FaDu及SCC47上之表現。簡言之，將細胞使用螢光標記單株抗HER2抗體或同型對照抗體在4℃下染色30分鐘。活/死亡細胞之區分藉由在染色(BD Pharmingen)中包括7AAD來達成。根據製造商之說明書使用Gallios流式細胞儀及Kaluza軟體(BD Bioscience)分析染色的細胞。結果顯示於圖4B中；確認MDA細胞不表現HER2，而MDA-HER2、FaDu及SCC47表現HER2。在另一實驗中，將經基因修飾之以表現螢火蟲螢光素酶(ffLuc)之FaDu及SCC47細胞接種在24孔盤之孔中，且與HER2(C5)-CAR-T細胞、HER2(E4)-CAR-T細胞或HER2(F1)-CAR-T細胞以效應子:靶細胞之比1:5一起共培養3天，且使用讀盤器(Life Technologies)來量測ffLuc活性。結果顯示於圖5中；顯示出HER2-CAR-T細胞殺滅HER2表現癌細胞，如由ffLuc活性(相對光單位，RLU)之降低所證明。當使用效應子:靶細胞之比1:20進行實驗時獲得類似結果。實例 2 ： OncAd 構築體 2.1 OncAd 構築體之生成 使用重組DNA技術製備編碼溶瘤腺病毒之新穎構築體。在特定實施例中，在修飾已知病毒時產生OncAd。舉例而言，編碼來自腺病毒5之E1A蛋白之區域，諸如缺少涉及與Rb蛋白之結合之序列LTCHEACF (SEQ ID NO:52)之區域，替換為編碼來自腺病毒2之E1A蛋白之序列，其同樣缺少序列LTCHEACF (SEQ ID NO:52)。圖6中所顯示之ICOSTAT由例如Rojas等人2010 Mol Ther 18 1960-1971中所揭示之ICOVIR15製備。簡言之，編碼用於轉錄因子E2F之結合位點之八個複本的ICOVIR15之區替換為編碼用於轉錄因子STAT1之結合位點之八個串聯複本的區。ICOSTAT之序列顯示於SEQ ID NO:51中。顯示於SEQ ID NO:55中且示意性地表示在圖12中之Onc5/3Ad2E1Δ24 (在本文中亦稱為「Onc5/2E1Δ24」)藉由使用重組DNA技術製備。Onc5/3Ad2E1Δ24具有與例如Fueyo等人2000 Oncogene 19:2-12 (以全文引用之方式併入本文中；在Fueyo等人之文章中Onc5Δ24亦稱為「Δ24」)中所揭示之Onc5Δ24類似之結構，但不同之處在於Onc5/3Ad2E1Δ24編碼缺少序列LTCHEACF (SEQ ID NO:52)之來自腺病毒2型(Ad2)之E1A蛋白而非缺少序列LTCHEACF (SEQ ID NO:52)之來自腺病毒5型(Ad5)之E1A蛋白。2.2 細胞殺滅活性 所選溶瘤腺病毒或如在實例2.1中生成之ICOSTAT殺滅癌細胞之能力可例如藉由MTS分析來分析。簡言之，將人類肺泡基底上皮腺癌細胞株A549細胞、FaDu細胞、SCC47細胞或非癌WI-38人類肺纖維母細胞或ARPE-19人類視網膜著色上皮細胞之細胞接種在96孔盤之孔中且用不同量之輔助病毒依賴型非複製腺病毒(HDAd；作為陰性對照)、所選溶瘤腺病毒(例如實例2.1中所描述之Onc5/3Ad2E1Δ24)或上文實例2.1中所描述之ICOSTAT感染。可培養細胞4天，例如且隨後可向各孔中添加MTS試劑(Promega)，在37℃下培育細胞2小時。可藉由使用讀盤器量測在490 nm下之吸光度分析活細胞。讀數可使用各類型之未處理細胞之讀數正規化(亦即未處理細胞=100%細胞活力)，且缺少細胞之孔將視為0%。在特定實施例中，所選溶瘤病毒能夠以劑量依賴型方式殺滅癌細胞。在特定實施例中，相比於藉由病毒之癌細胞之殺滅之水準，所選溶瘤病毒亦展現較低水準之非癌細胞(諸如WI-38及ARPE-19細胞)之細胞殺滅。圖7A至圖7F顯示，ICOSTAT能夠以劑量依賴型方式殺滅癌細胞(亦即A549、FaDu及SCC47細胞)(圖7A至圖7C及圖7F)，且相比於癌細胞之殺滅之水準，展現出較低水準之非癌細胞WI-38及ARPE-19細胞之細胞殺滅(圖7D及圖7E)。圖13A至圖13D顯示，Onc5/3Ad2E1Δ24能夠以劑量依賴型方式殺滅癌細胞(亦即FaDu及SCC47細胞)(圖13A及圖13b)，且相比於癌細胞之殺滅之水準，展現較低水準之非癌WI-38及ARPE-19細胞之細胞殺滅(圖13C及圖13D)。2.3 輔助輔助病毒依賴型腺病毒 (HDAd) 之能力 所選溶瘤腺病毒或如在實例2.1中生成之ICOSTAT輔助輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)之複製之能力可藉由使用OncoAd及HDAd共感染癌細胞且測定病毒複本數來分析。簡言之，將FaDu或SCC47細胞接種在24孔盤中且用每一細胞10個病毒粒子單獨感染HDAd或感染OncAd+HDAd (以OncAd:HDAd之比1:10)。在感染後48小時收集細胞，萃取DNA，且藉由定量即時PCR使用Bio-Rad iQ5即時PCR偵測系統(Bio-Rad)及Applied Biosystems SYBR綠色PCR主混合物(Life Technologies)分析HDAd及Onc.Ad載體複本(95℃下10分鐘且隨後45個循環之95℃下10 s、60℃下15 s及72℃下30 s)。使用針對GAPDH偵測之複本數來正規化複本數。在特定實施例中，所選溶瘤病毒能夠充分複製自身及HDAd。圖8A及圖8B顯示，發現ICOSTAT (在圖式中命名「Onc5/3AdicoSTAT」)能夠複製自身(圖8A)及HDAd (圖8B)。2.4 在癌細胞中 IFNγ 對 ICOSTAT 之複製之影響 分析IFNγ處理對ICOSTAT OncAd之複製之影響。簡言之，在24孔盤中接種FaDu及SCC47細胞，且將細胞用每細胞10 vp之所選溶瘤病毒或ICOSTAT感染，感染後3小時將細胞培養基替換為含有或不含有10 ng/mL重組IFNγ之培養基，且在感染後24小時及48小時再次將細胞培養基替換為具有/不具有10 ng/mL重組IFNγ之新鮮培養基。在感染後3小時、24小時、48小時及72小時收集細胞，自細胞提取DNA，藉由定量即時PCR分析病毒複本數且使用針對GAPDH偵測之複本數來正規化。圖9A及圖9B顯示，在存在或不存在IFNγ之情況下，ICOSTAT能夠在FaDu細胞及SCC47細胞中複製。實例 3 ： 輔助病毒依賴型 Ad (HDAd) 構築體 3.1 HDAd 構築體及生成 使用重組DNA技術製備編碼輔助病毒依賴型腺病毒之新穎構築體。命名為HDAdIL-12_TK_PD-L1 之所得構築體之編碼序列示意性地表示在圖10A中。HDAdIL-12_TK_PD-L1含有編碼用於以下之表現卡匣之序列：(i)人類IL-12p70 (編碼α及β鏈之序列)、(ii) HSV-1胸苷激酶及(iii)包括HA標籤之抗PD-L1微型抗體(包含例如在WO 2016111645 A1中所描述之抗PD-L1純系H12_gl之CDR)。三個編碼序列各具有其自身polyA信號序列。如Farzad等人Oncolytics 2014 1: 14008中所描述地製備含有由CMV啟動子(HDAdeGFP)驅動之EGFP轉殖基因之HDAd HDΔ28E4EGFP構築體。 HDAd「HDIL12_PDL1」含有編碼人類IL-12p70蛋白及衍生自YW243.55.S70 (阿特珠單抗)之抗PD-L1微型抗體之序列。此構築體之抗PD-L1微型抗體由融合有人類IgG1之鉸鏈、CH2及CH3區之YW243.55.S70之scFv及C端HA標籤組成(如在例如Tanoue等人Cancer Res. (2017) 77(8):2040-2051中所描述)。3.2 經編碼的蛋白之表現 使用質體HDAd載體轉染癌細胞，且在轉染後48小時收集培養基樣品來分析經轉染細胞之細胞培養基中之IL-12p70及抗PD-L1微型抗體含量。培養基中之IL-12p70含量使用BD細胞介素多重分析珠粒陣列系統(BD Biosciences)根據製造商之說明書來量測。結果在圖10B中顯示。發現相比於經HDIL-12_PD-L1構築體轉染的細胞，經HDAdIL-12_TK_PD-L1 構築體轉染的細胞產生較高含量之IL-12p70。細胞培養基中之抗PD-L1微型抗體之分泌藉由西方墨點分析使用抗HA抗體偵測(偵測經加HA標籤之微型抗體)。圖10C顯示，經HDAdIL-12_TK_PD-L1 構築體轉染之細胞向細胞培養基中分泌抗PD-L1微型抗體。在另一實驗中，使用不同構築體轉染細胞並在轉染後8小時，將細胞培養基替換為含有10 ng/ml 更昔洛韋(GCV)的培養基。隨後每24小時將細胞培養基替換為含有10 ng/ml的培養基，且在7天之後，使用結晶紫(Crystal Violet)溶液將孔染色以顯露活細胞。結果顯示於圖10D中，且確認經HDAdIL-12_TK_PD-L1 構築體轉染的細胞表現胸苷激酶。在其他實驗中，使用HDAdIL-12_TK_PD-L1 、 HDAd_PD-L1 (參見例如Tanoue等人，前述)或對照的編碼eGFP之HDAd (參見Farzad等人，前述)活體外感染A549、FaDu或SCC47細胞(根據條件n=4孔)。將細胞在不存在更昔洛韋下培養48小時，或在感染後8小時更換培養基且之後每24小時更換為含有10 ng/ml更昔洛韋的培養基。藉由ELISA分析細胞培養上清液中之IL-12分泌，且藉由西方墨點法使用抗HA抗體分析抗PD-L1微型抗體之分泌(抗PD-L1微型抗體包含C端HA標籤)。在實驗結束時使用結晶紫溶液將孔染色以顯露活細胞。結果顯示於圖21A至顯示於圖21C中，且確認在所分析之不同癌細胞株中表現由HDAd編碼之轉殖基因。3.3 確認抗 PD-L1 微型抗體與 PD-L1 結合藉由ELISA分析由HDAdIL-12_TK_PD-L1 編碼之抗PD-L1微型抗體結合於PD-L1之能力。簡言之，將Immulon 2高結合96孔盤(VWR)塗佈500奈克/孔之重組人類PD-L1 (BioVision)。在使用含PBS-T之3% BSA阻斷盤之後，添加A549細胞之連續稀釋細胞培養基，該等A549細胞已經編碼GFP之質體(pGFP；陰性對照)、編碼Tanoue等人前述文章中所描述之抗PD-L1微型抗體之質體(pPDL1微型Tanoue)或編碼由HDAdIL-12_TK_PD-L1 編碼之抗PD-L1微型抗體之質體(pPDL1微型)轉染且4℃下培育24小時。由10微克/孔開始連續稀釋的抗人類PD-L1抗體(BioLegend)用作陽性對照(PDL1 IgG)。在使用PBS-T洗滌盤之後，添加經HRP標記之抗人類IgG (用於PD-L1微型及PDL1微型Tanoue)或經HRP標記之抗鼠IgG (BioRad；用於PD-L1 IgG及Iso IgG)用於偵測，且在室溫下培育1小時。隨後將盤顯色，且使用Tecan讀取器(TECAN)來量測在450 nm下之吸光度。結果在圖11中顯示。發現包含抗PD-L1抗體純系H12之CDR的抗PD-L1微型抗體以劑量依賴型形式結合人類PD-L1，相比於結合Tanoue等人前述文章中所描述之抗PD-L1微型抗體之親合力，具有相當的(或更大)親合力。實例 4 ： 活體內癌症治療之分析 在鼠異種移植腫瘤模型中活體內顯示用(1)所選溶瘤病毒+HDAdIL-12_TK_PD-L1 +HER2-CAR-T與(2) ICOSTAT+HDAdIL-12_TK_PD-L1 +HER2-CAR-T之組合治療之抗癌效果。在第一實驗中，將1×10⁶ FaDu細胞在PBS中皮下注射至NSG雄性小鼠中。在12天之後，將1×10⁸ 病毒粒子(1)溶瘤病毒與HDAdIL-12_TK_PD-L1 或(2) ICOSTAT+HDAdIL-12_TK_PD-L1 以OncAd:HDAd之比1:20瘤內注射。在第二實驗中，0.5×10⁶ FaDu細胞原位地注射至NSG雄性小鼠中。在6天之後，將1×10⁸ 病毒粒子(1)溶瘤病毒與HDAdIL -12_TK_PD-L1 或(2) ICOSTAT+HDAdIL-12_TK_PD-L1 以OncAd:HDAd之比1:20瘤內注射。在兩個實驗中，在投與病毒粒子3天之後，靜脈內投與1×10⁶ HER2-CAR T細胞。在兩個實驗中，包括如下對照情況：監測腫瘤尺寸且使用式：寬度² ×長度×0.5計算腫瘤體積。發現使用溶瘤病毒、HDAdIL-12_TK_PD-L1及HER2 CAR-T (測試情況1)之組合，相比於單獨使用藥劑中之任一者(情況8、10或11)或相比於使用三種藥劑中之兩個(情況3、4及6)，具有提高的抗腫瘤效果。類似地，發現使用ICOSTAT、HDAdIL-12_TK_PD-L1及HER2 CAR-T (測試情況2)之組合，相比於單獨使用藥劑中之任一者(情況9、10或11)或相比於使用三種藥劑中之兩個(情況3、5及7)，具有提高的抗腫瘤效果。當使用SCC47細胞及A549細胞確立異種移植腫瘤時觀測到類似結果。實例 5 ： HER2 特異性 CAR-T 細胞之抗癌活性之活體內分析 活體內研究在FaDu細胞衍生之頭頸部鱗狀細胞癌之異種移植模型中HER2特異性CAR-T細胞(參見上文實例1)之抗癌活性。簡言之，向NSG雄性小鼠原位地注射0.5×10⁶ FaDu細胞。9天之後，將小鼠經由尾部靜脈注射經基因修飾以表現螢火蟲螢光素酶之1×10⁶ T細胞，其未經HER2-CAR構築體轉導，或注射1×10⁶ 螢火蟲螢光素酶表現T細胞，其已經C5、F1或A3 CAR構築體轉導。在實驗中包括在第9天不對小鼠注射T細胞的對照情況。監測隨時間推移小鼠之螢光素酶活性(且因此投與的T細胞之數目及分佈)、體重、存活率。藉由腹膜內注射D-螢光素(每鼠1.5 mg)且10分鐘之後使用IVIS成像儀(Xenogen)獲得小鼠之圖像來監測螢光素酶活性。圖15A及圖15B顯示在注射螢光素酶表現T細胞(亦即未經轉導的T細胞或HER2特異性CAR-T細胞)之後第0、4、7、14、28、42、56及70天獲得之圖像(天數係指在注射ffLuc T細胞之後之天數)。顯示系統地輸注T細胞遷移原位腫瘤之部位。在7天之後未經修飾以表現HER2特異性CAR之T細胞不可偵測。相比之下，HER2特異性CAR-T細胞在整個實驗中存留且保持可偵測。圖15C顯示在實驗過程中受到不同處理之小鼠之存活百分比。發現投與HER2特異性CAR-T細胞提高存活率。在一獨立實驗中，將NOD錫特γ (NOD scid gamma，NSG)小鼠經由尾部靜脈注射1×10⁶ 螢火蟲螢光素酶表現T細胞，其未經HER2-CAR構築體轉導，或注射1×10⁶ 螢火蟲螢光素酶表現T細胞，其已經C5、F1或A3 CAR構築體轉導。如上所述監測螢光素酶活性，亦監測隨時間推移小鼠之體重。實驗之結果顯示於圖16A至圖16C中。發現在NSG小鼠中C5 CAR-T細胞非特異地擴增(圖16A)。觀測到在經投與HER2特異性CAR-T細胞之NSG小鼠中無顯著體重減輕(圖16C)。實例 6 ： 溶瘤病毒、 HDAd 病毒及 HER2 特異性 CAR-T 細胞之組合之抗癌活性之活體內分析 在FaDu細胞衍生之頭頸部鱗狀細胞癌之異種移植模型中活體內研究溶瘤病毒、HdAd及HER-特異性CAR-T細胞療法之組合之抗癌活性。簡言之，向NSG雄性小鼠原位地注射0.5×10⁶ FaDu細胞。6天之後，將一組小鼠隨後瘤內注射Onc5/3Ad2E1Δ24 (實例2.1中所描述之)與實例3.1中所描述之HDAdIL-12_TK_PD-L1 之組合(此OncAd與HdAd之組合在本文中稱為「CAdtrio 」)。總共投與1×10⁷ 病毒粒子，以1:10之Onc5/3Ad2E1Δ24:HDAdIL-12_TK_PD-L1 之比。三天之後，將小鼠經由尾部靜脈注射經工程化以表現螢火蟲螢光素酶之1×10⁶ T細胞，其已經對應於純系F1之HER2特異性CAR構築體轉導。將已經投與CAdtrio 之對照組之小鼠經由尾部靜脈注射未經HER2-CAR構築體轉導1×10⁶ 螢火蟲螢光素酶表現T細胞，且另一對照組之小鼠不投與CAdtrio 也不注射T細胞。監測隨時間推移小鼠之螢光素酶活性、體重及存活率。在實驗中在使用F1.CART細胞之前，其由流式細胞測量術表徵，且結果顯示於圖17A至圖17C中。發現細胞包含72.5% CD4+細胞及CD8+細胞。測定87%之細胞在細胞表面表現HER2 CAR。39%之細胞為CCDR7+CD45RO+，且59.2%之細胞為CCR7-CD45RO+。活體內分析溶瘤病毒、HDAd病毒及HER2特異性CAR-T細胞之組合治療癌症之治療功效的實驗之結果顯示於圖18A至圖18D中。發現Onc5/3Ad2E1Δ24、HDAdIL-12_TK_PD-L1 及F1.CART之組合比單獨用F1.CART細胞治療提高存活率。在其他實驗中，研究兩種不同的Onc5/3Ad2E1Δ24比HDAdIL-12_TK_PD-L1 之比。簡言之，向NSG雄性小鼠原位地注射0.5×10⁶ 經修飾以表現螢火蟲螢光素酶之FaDu細胞。在6天之後，將小鼠瘤內注射： (i) 1×10⁷ 病毒粒子之CAdtrio ，以1:10之Onc5/3Ad2E1Δ24:HDAdIL-12_TK_PD-L1 之比； (ii)1×10⁷ 病毒粒子之CAdtrio ，以1:20之Onc5/3Ad2E1Δ24:HDAdIL-12_TK_PD-L1 之比； (iii)1×10⁸ 病毒粒子之CAdtrio，以1:10之Onc5/3Ad2E1Δ24:HDAdIL-12_TK_PD-L1 之比；或 (iv)1×10⁸ 病毒粒子之CAdtrio，以1:20之Onc5/3Ad2E1Δ24:HDAdIL-12_TK_PD-L1 之比。三天之後，將小鼠經由尾部靜脈注射1×10⁶ 未經F1 CAR構築體轉導之T細胞(不表現螢火蟲螢光素酶)。隨時間推移藉由如上所述之螢光素酶活性之分析監測癌症，亦監測小鼠之體重。實驗之結果顯示於圖19A至圖19C中。經投與Onc5/3Ad2E1Δ24與HDAdIL-12_TK_PD-L1 之比1:10之小鼠相比於經投與Onc5/3Ad2E1Δ24與HDAdIL-12_TK_PD-L1 之比1:20之通常具有較少螢光素酶表現FaDu細胞，且經投與1×10⁸ 病毒粒子之CAdtrio 之小鼠相比於經投與1×10⁷ 病毒粒子之CAdtrio 之小鼠通常具有更少螢光素酶表現FaDu細胞(圖19B)。實例 7 ： 溶瘤病毒、 HDAd 病毒及更昔洛韋 (GCV) 之組合之抗癌活性之活體內分析 在FaDu細胞衍生之頭頸部鱗狀細胞癌之異種移植模型中活體內研究溶瘤病毒及HdAd (編碼胸苷激酶)(亦即CAdtrio )結合更昔洛韋(GCV)之組合之抗癌活性。藉由向小鼠之側腹皮下注射FaDu細胞確立異位FaDu腫瘤。隨後將小鼠瘤內注射1×10⁸ 病毒粒子之CAdtrio ，以1:10之Onc5/3Ad2E1Δ24:HDAdIL-12_TK_PD-L1 之比。隨後在注射CAdtrio 之後第2、3、4、5、7、10、14、17及21天將一組小鼠(n=5)腹膜內注射10 mg/kg之更昔洛韋。在第2、7、14及21天自小鼠收集血液樣品且藉由ELISA分析IL-12表現。在整個實驗中監測腫瘤體積。在第22天藉由定量即時PCR分析測定自腫瘤提取之DNA中之Onc.Ad及HDAd載體複本數，且使用針對GAPDH偵測之複本數正規化。實驗之結果顯示於圖20A至圖20D中。在第22天更昔洛韋(GCV)治療並未顯著影響Onc.Ad載體複本數(圖20A)，但顯著降低HDAd載體複本數(圖20B)。亦發現GCV治療提高腫瘤控制(圖20C)，但不顯著影響血液中之IL-12之含量(圖20D)。實例 8 ： 生成溶瘤病毒特異性 T 細胞及 HER- 特異性 CAR 表現溶瘤病毒特異性 T 細胞 8.1 溶瘤病毒特異性 T 細胞 之生成及表徵 如下製備腺病毒特異性T細胞(AdVST)及活化T細胞(ATC)。在組織培養盤之孔上藉由添加0.5 ml之1:1000稀釋之1 mg/mL抗體來塗佈抗CD3 (純系OKT3)及抗CD28促效劑抗體，且在37℃下培育2至4小時或在4℃下培育隔夜。根據標準菲科爾帕克方法(Ficoll-Paque method)將PBMC與獲自健康供體之血液樣品分離。ATC ：藉由在經抗CD3/CD28促效劑抗體塗佈之盤上在補充有10 ng/ml IL-7及5 ng/ml IL-15之CTL細胞培養基(含有50% Advanced RPMI、50% Click's培養基、10% FBS、1% GlutaMax、1% Pen/Strep)中培養來刺激1×10⁶ PBMC (在2 ml之細胞培養基中)。將細胞保持在37℃下在5% CO₂ 氛圍中。次日，將1 ml之細胞培養基替換為含有20 ng/ml IL-7及10 ng/ml IL-15之新鮮CTL培養基。保持培養ATC，且隨後收集且用於實驗或低溫保存5至7天。AdVST ：藉由在經抗CD3/CD28促效劑抗體塗佈之盤上在補充有10 ng/ml IL-7及100 ng/ml IL-15之CTL細胞培養基中培養來刺激1×10⁶ PBMC (在2 ml之細胞培養基中)。向孔中添加20 μl之200倍稀釋之腺病毒特異性六鄰體Pepmix (JPT目錄號PM-HAdV3)或五鄰體PepMix (JPT目錄號PM-HAdV5)。將細胞保持在37℃下在5% CO₂ 氛圍中。在向細胞饋入CTL培養基48小時之後，添加IL-7及IL-15至最終濃度10 ng/ml IL-7及100 ng/ml IL-15。8.2 CAR 表現溶瘤病毒特異性 T 細胞 之生成 在第3天，以0.125×10⁶ 細胞/毫升之濃度在含有10 ng/ml IL-7及100 ng/ml IL-15之CTL細胞培養基中再懸浮AdVST。藉由將經1:100稀釋之重組人纖維蛋白片段(Clontech)在PBS中在37℃下培育2至4小時或在4℃下培育隔夜來製備經重組人纖維蛋白片段塗佈之盤。用CTL培養基洗滌孔，向孔中添加1 ml之HER2特異性CAR反轉錄病毒之反轉錄病毒上清液，且將盤以2000g離心1.5小時。在離心步驟結束時抽吸反轉錄病毒上清液，且向盤之孔中添加2 ml之AdVST懸浮液(亦即0.25×10⁶ 細胞)。將盤以400g離心5分鐘，且在37℃下在5% CO₂ 氛圍中培育。在48小時之後(亦即在第6天)抽吸細胞培養基且將其替換為含有10 ng/ml IL-7及100 ng/ml IL-15之CTL細胞培養基。在第9天收集細胞且用於實驗或低溫保存，或進行第二刺激以擴增CAR表現AdVST (參見實例8.3)。8.3 AdVST 及 CAR-AdVST 之擴增 視需要，藉由如下進一步刺激來擴增AdVST及CAR表現AdVST。 Pepmix脈衝式自體ATC用作APC，且K562cs細胞(參見例如Ngo等人, J Immunother. (2014) 37(4):193-203)用作共刺激細胞。在刺激培養物中AdVST或CAR-AdVST:ATC:K562cs細胞之最終比為1:1:3-5。在CTL培養基中再懸浮AdVST或CAR-AdVST至0.2×10⁶ 細胞/毫升之濃度。將1×10⁶ ATC使用10 μl之200倍稀釋之腺病毒特異性六鄰體Pepmix (JPT目錄號PM-HAdV3)或五鄰體PepMix (JPT目錄號PM-HAdV5)在37℃下培育30分鐘。隨後在30Gy下照射且收集ATC。在100Gy下照射3至5×10⁶ 個K562cs細胞。隨後在總體積5 ml之CTL培養基中混合ATC及K562cs細胞，且添加20 ng/ml IL-7及200 ng/ml IL-15，向24孔盤之孔中添加1 ml之此混合物且向孔中添加1 ml之AdVST懸浮液或CAR-AdVST懸浮液。將細胞保持在37℃下在5% CO₂ 氛圍中。在3至4天之後視需要添加細胞培養基，且在6至7天之收集後經擴增之AdVST或CAR-AdVST細胞用於實驗。實例 9 ： 溶瘤病毒、 HDAd 、 溶瘤病毒特異性 T 細胞及 CAR 表現 溶瘤病毒特異性 T 細胞 之組合之抗癌活性之活體內分析 在FaDu細胞衍生之頭頸部鱗狀細胞癌之異種移植模型中活體內研究溶瘤病毒、HDAd、溶瘤病毒特異性T細胞及CAR表現溶瘤病毒特異性T細胞之不同組合之抗癌活性。簡言之，向NSG雄性小鼠原位地注射0.5×10⁶ 經工程化以表現螢火蟲螢光素酶之FaDu細胞。在6天之後將幾組小鼠瘤內注射： (i)1×10⁷ 病毒粒子之CAdtrio ，以1:10之Onc5/3Ad2E1Δ24:HDAdIL-12_TK_PD-L1 之比；或 (ii) 1×10⁷ 病毒粒子之Onc5/3Ad2E1Δ24。三天之後，將小鼠經由尾部靜脈注射： (a) 1×10⁶ AdVST，或 (b) 1×10⁶ 經抗HER2 CAR純系F1 (如實例8中所描述製備之)轉導之AdVST。在實驗中在使用AdVST及F1.CAR-AdVST之前，其由流式細胞測量術表徵，且分析之結果顯示於圖22A至圖22B及圖23A至圖23C中。隨時間推移藉由如上所述之螢光素酶活性之分析監測癌症，亦監測小鼠之體重。實驗之結果顯示於圖24A至圖24D中。在經CAdtrio +HER2特異性CAR表現AdVST之組合處理之小鼠(亦即處理組(i)(b))中觀測到最大水準之腫瘤控制。

現將參考附圖論述說明本發明之原理之實施例及研究。圖 1A 及圖 1B. 圖1A顯示表示HER2特異性CAR構築體之實例之示意性表示。圖1B顯示用於轉導T細胞以製備HER2特異性CAR-T之方案之實例之示意圖。圖 2. 顯示在經指定HER2-CAR構築體轉導之T細胞上之HER2-CAR、CCR7、CD45RO及PD-1之表現的圖，如藉由流式細胞測量術所測定。圖 3. 顯示在經抗HER2純系E4 CAR構築體轉導之後之CD4及CD8 T細胞上之HER2-CAR、CCR7、CD45RO、PD-1、LAG-3及TIM-3之表現的圖，如藉由流式細胞測量術所測定。圖 4A 及圖 4B. 圖4A係顯示藉由抗HER2純系C5、E4及F1 CAR-T細胞(或未經轉導的(NT)細胞)之MDA細胞(不在細胞表面表現HER2；陰性對照)、MDA-HER2細胞(在細胞表面表現HER2陽性對照)、FaDu及SCC47細胞之活體外細胞的殺滅條形圖，如藉由⁵¹ Cr釋放分析所測定。圖4B顯示表明HER2在MDA-HER2細胞上、FaDu及SCC47細胞上表現但不在MDA細胞表現的圖，如藉由流式細胞測量術所測定。圖 5. 顯示藉由抗HER2純系C5、E4及F1 CAR-T細胞(或未經轉導的(NT)細胞)之經基因修飾以表現螢火蟲螢光素酶(ffLuc)的FaDu及SCC47細胞之活體外細胞殺滅的條形圖，如藉由ffLuc活性分析所測定。資料呈現為平均值±SD (n=4)。*P ＜ 0.001。圖 6. 圖6顯示ICOSTAT溶瘤腺病毒構築體之實例之序列的示意性表示。圖 7A 至圖 7F. 顯示在用指定濃度之病毒粒子(Vp)感染之後ICOSTAT溶瘤腺病毒殺滅A549細胞(圖7A及圖7F)、FaDu細胞(圖7B)、SCC47細胞(圖7C)、WI-38細胞(圖7D)及ARPE-19細胞(圖7E)之能力的圖，如藉由MTS活力分析所測定。包括輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)作為對照情況。圖 8A 至圖 8B. 顯示ICOSTAT溶瘤腺病毒複製且充當輔助病毒用於複製輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)之能力的條形圖，如藉由利用定量即時PCR之複本數分析所測定。命名為「Onc5/3AdicoSTAT」之病毒為ICOSTAT。「+HD」指示ICOSTAT與HDAd之共感染。圖 9A 及圖 9B. 顯示在細胞培養基中在存在或不存在10 ng/ml IFNγ之情況下ICOSTAT溶瘤腺病毒在FaDu細胞(圖9A)及SCC47細胞(圖9B)中之複製的圖。圖 10A 至圖 10D. 圖10A係HDAdIL-12_TK_PDL1 構築體之示意性表示。圖10B係顯示藉由經指定輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)構築體轉染之細胞來生成IL-12p70的條形圖。圖10C係顯示藉由經HDAd構築體轉染之細胞生成抗PD-L1微型抗體之西方墨點法的照片。圖10D係展示藉由經HDAd構築體轉染之細胞生成HSV胸苷激酶之孔的照片。圖 11. 顯示PD-L1微型抗體對重組人類PD-L1之親合力之ELISA分析的圖，該分析使用A549細胞之連續稀釋細胞培養基，該等A549細胞已經編碼GFP之質體(pGFP；陰性對照)、編碼Tanoue等人前述文章中所描述之抗PD-L1微型抗體之質體(pPDL1微型Tanoue)或編碼由HDAdIL-12_TK_PD-L1 編碼之抗PD-L1微型抗體之質體(pPDL1微型)轉染。連續稀釋抗人類PD-L1抗體用作陽性對照(PDL1 IgG)。圖 12A 及圖 12B. Onc5/2E1Δ24溶瘤腺病毒構築體之實例(圖12A)及編碼Onc5/2E1Δ24溶瘤腺病毒構築體之質體(圖12B)之序列的示意性表示。圖 13A 至圖 13D. 顯示在使用指定濃度之病毒粒子(Vp)感染之後Onc5/3Ad2E1A溶瘤腺病毒殺滅FaDu細胞(圖13A)、SCC47細胞(圖13B)、WI-38細胞(圖13C)及ARPE-19細胞(圖13D)之能力的圖，如藉由MTS活力分析所測定。包括輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)作為對照情況。圖 14. 顯示在使用指定CAR構築體轉染之後在指定天數之活體外細胞培養之後HER2特異性CAR T細胞之數目的圖。圖 15A 至圖 15C. 顯示在原位FaDu細胞衍生之頭頸部鱗狀細胞癌模型中過繼轉移螢光素酶表現T細胞之抗癌活性之活體內分析之結果的圖像及圖。15A及圖15B顯示在輸注細胞指定天數之後在小鼠內未經轉導的螢光素酶表現T細胞(NT)及表現表現C5、F1或A3 HER2特異性CAR之螢光素酶表現T細胞的細胞之數目及位置。圖15C顯示在輸注細胞指定天數之後在不同處理組中存活個體之百分比。亦顯示其中小鼠未經投與T細胞之陰性對照情況(-)。圖 16A 至圖 16C. 顯示在NSG小鼠中過繼轉移T細胞之活體內分析之結果的圖像及圖。圖16A顯示在輸注細胞指定天數之後在小鼠內未經轉導的螢光素酶表現T細胞(NT)及表現表現C5、F1或A3 HER2特異性CAR之螢光素酶表現T細胞的細胞之數目及位置。圖16B顯示在輸注細胞指定天數之後不同組之小鼠之腹面總通量(單位為光子每秒；p/s)的量測值。圖16C顯示在輸注細胞指定天數之後在不同處理組中之小鼠之重量，表示為第0天之體重之百分比。圖 17A 至圖 17C. 顯示藉由流式細胞測量術表徵用於CAdtrio 與過繼轉移T細胞之組合之抗癌活性之活體內分析的實驗的F1 HER2特異性CAR T細胞的結果的散佈圖及直方圖。圖17A顯示在F1.CAR-T群體內CD4+ T細胞及CD8+ T細胞之百分比。圖17B顯示在細胞表面表現HER2 CAR之百分比細胞。圖17C顯示在F1.CAR-T群體內表現CCR7及/或CD45RO之細胞之百分比。圖 18A 至圖 18D. 顯示在原位FaDu細胞衍生之頭頸部鱗狀細胞癌模型中CAdtrio 及過繼轉移T細胞之組合之抗癌活性之活體內分析之結果的圖像及圖。圖18A顯示在輸注細胞指定天數之後在小鼠內未經轉導的螢光素酶表現T細胞(NT)及表現F1 HER2特異性CAR之螢光素酶表現T細胞的細胞之數目及位置，右上數字(Y軸標記為總通量)係「CAR T細胞注射後天數」。下方2個數字係「CAdtrio 注射後天數」。圖18B顯示在投與CAdtrio 指定天數之後不同組之小鼠之腹面總通量(單位為光子每秒；p/s)的量測值。圖18C顯示在投與CAdtrio 指定天數之後在不同處理組中之小鼠之重量，表示為第0天之體重之百分比。圖18D顯示在投與CAdtrio 指定天數之後在不同處理組中存活個體之百分比。亦顯示小鼠不投與CAdtrio 或T細胞之陰性對照情況(-)。圖 19A 至圖 19C. 顯示在原位FaDu細胞衍生之頭頸部鱗狀細胞癌模型中不同比之Onc5/3Ad2E1Δ24:HDAdIL-12_TK_PD-L1 與過繼轉移HER2特異性CAR T細胞之組合之抗癌活性之活體內分析的結果的圖像及圖。圖19A顯示在投與CAdtrio 指定天數之後在小鼠內螢光素酶表現FaDu細胞之數目及位置。圖19B顯示在投與CAdtrio 指定天數之後不同組之小鼠之腹面總通量(單位為光子每秒；p/s)的量測值。圖19C顯示在投與CAdtrio 指定天數之後在不同處理組中之小鼠之重量，表示為第0天之體重之百分比。圖 20A 至圖 20D. 顯示在異位FaDu細胞衍生之頭頸部鱗狀細胞癌模型中Onc5/3Ad2E1Δ24及HDAdIL-12_TK_PD-L1 及更昔洛韋(GCV)之組合之活體內分析之結果的條形圖及圖。圖20A及圖20B顯示經投與Onc5/3Ad2E1Δ24及HDAdIL-12_TK_PD-L1 (CAdtrio )之組合之小鼠在具有或不具有GCV處理之情況下在感染後第22天腫瘤中Onc5/3Ad2E1Δ24 (圖20A)及HDAdIL-12_TK_PD-L1 (圖20B)之GAPDH正規化複本數。圖20C顯示經投與Onc5/3Ad2E1Δ24及HDAdIL-12_TK_PD-L1 (CAdtrio)之組合之小鼠在具有或不具有GCV處理之情況下在注射CAdtrio 指定天數之後之以mm³ 為單位的腫瘤體積。圖20D顯示在具有或不具有GCV處理之情況下在注射CAdtrio 指定天數之後獲得之血液樣品藉由ELISA分析偵測之IL-12含量。圖 21A 至圖 21C. 顯示在存在或不存在更昔洛韋(GCV)之情況下培養的經不同HDAd病毒感染之癌細胞株中之轉殖基因表現之分析的結果的條形圖及圖像。圖21A顯示如藉由ELISA所測定之細胞培養上清液中之IL-12之含量。圖21B顯示如藉由西方墨點法偵測之細胞培養上清液中之抗PD-L1微型抗體。圖21C顯示在實驗結束時藉由結晶紫(Crystal Violet)染色偵測之活細胞。圖 22A 及圖 22B. 顯示實例9之實驗中使用之腺病毒特異性T細胞(AdVST)藉由流式細胞測量術表徵之結果的散佈圖。圖22A顯示在AdVST群體內CD4+ T細胞及CD8+ T細胞之百分比。圖22B顯示在AdVST群體內表現CCR7及/或CD45RO之細胞之百分比。圖 23A 至圖 23C. 顯示實例9之實驗中使用之經F1.CAR轉導之AdVST藉由流式細胞測量術表徵之結果的散佈圖及直方圖。圖23A顯示在經轉導之群體內CD4+ T細胞及CD8+ T細胞之百分比。圖23B顯示在細胞表面表現HER2 CAR之百分比細胞。圖23C顯示在F1.CAR-AdVST群體內表現CCR7及/或CD45RO之細胞之百分比。圖 24A 至圖 24D. 顯示腺病毒特異性T細胞(AdVST)、經F1.CAR轉導之AdVST、經F1.CAR轉導之AdVST與Onc5/3Ad2E1Δ24之組合及經F1.CAR轉導之AdVST與Onc5/3Ad2E1Δ24+HDAdIL-12_TK_PD-L1 (「CAdtrio 」)之組合之抗癌活性之活體內分析的結果的圖像及圖。圖24A顯示在小鼠內在投與CAdtrio 指定天數之後螢光素酶表現FaDu細胞之數目及位置。圖24B顯示在投與CAdtrio 指定天數之後不同組之小鼠之腹面總通量(單位為光子每秒；p/s)的量測值。圖24C顯示在投與CAdtrio 指定天數之後在不同處理組中之小鼠之重量，表示為第0天之體重之百分比。圖24D顯示在投與CAdtrio 指定天數之後在不同處理組中存活個體之百分比。對於圖24B，*P ＜0.04，**P ＜0.07，***P ＜0.02。對於圖24C，*P＜0.01，**P＜0.04，***P＜0.02。對於圖24D，*P=0.03，**P=0.02。

Claims

一種治療癌症之方法，其包含向個體投與： (i)溶瘤病毒； (ii)包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒；及 (iii)包含對癌細胞抗原有特異性之嵌合抗原受體(CAR)之至少一個細胞。
一種(i)溶瘤病毒、(ii)包含編碼免疫調節因子之核酸的病毒、及(iii)包含對癌細胞抗原有特異性之嵌合抗原受體(CAR)之至少一個細胞之組合，其用於治療癌症之方法中。
一種(i)溶瘤病毒、(ii)包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒及(iii)包含對癌細胞抗原有特異性之嵌合抗原受體(CAR)之至少一個細胞之用途，其用於製造治療癌症之方法所使用之藥物。
一種治療癌症之方法，其包含向個體投與： (i)溶瘤病毒；及 (ii)包含對癌細胞抗原有特異性之嵌合抗原受體(CAR)之至少一個細胞。
一種(i)溶瘤病毒及(ii)包含對癌細胞抗原有特異性之嵌合抗原受體(CAR)之至少一個細胞之組合，其用於治療癌症之方法。
一種(i)溶瘤病毒及(ii)包含對癌細胞抗原有特異性之嵌合抗原受體(CAR)之至少一個細胞之用途，其用於製造治療癌症之方法所使用之藥物。
如請求項1或請求項4之方法、如請求項2或請求項5之組、或如請求項3或請求項6之用途，其中該包含CAR之細胞對溶瘤病毒有特異性。
一種治療癌症之方法，其包含向個體投與： (i)溶瘤病毒；及 (ii)對該溶瘤病毒有特異性之至少一個免疫細胞。
一種(i)溶瘤病毒及(ii)對該溶瘤病毒有特異性之至少一個免疫細胞之組合，其用於治療癌症之方法。
一種(i)溶瘤病毒；及(ii)對該溶瘤病毒有特異性之至少一個免疫細胞之用途，其用於製造治療癌症之方法所使用之藥物。
如請求項1至10中任一項之方法、組合或用途，其中該溶瘤病毒係溶瘤腺病毒(OncAd)。
如請求項1至11中任一項之方法、組合或用途，其中該溶瘤病毒衍生自腺病毒5 (Ad5)。
如請求項1至12中任一項之方法、組合或用途，其中該溶瘤病毒編碼E1A蛋白，其所顯示與Rb蛋白之結合性比由Ad5編碼之E1A蛋白降低。
如請求項1至13中任一項之方法、組合或用途，其中該溶瘤病毒編碼缺少胺基酸序列LTCHEACF (SEQ ID NO:52)之E1A蛋白。
如請求項1至14中任一項之方法、組合或用途，其中該溶瘤病毒編碼包含胺基酸序列SEQ ID NO:34或由其組成之E1A蛋白。
如請求項1至15中任一項之方法、組合或用途，其中該溶瘤病毒包含具有用於一或多個轉錄因子之一或多個結合位點之核酸。
如請求項1至16中任一項之方法、組合或用途，其中該溶瘤病毒包含具有用於STAT1之一或多個結合位點之核酸。
如請求項1至7或11至17中任一項之方法、組合或用途，其中該包含對癌細胞抗原有特異性之CAR之至少一個細胞係T細胞。
如請求項1至7或11至18中任一項之方法、組合或用途，其中該CAR包含能夠特異性結合於HER2之抗原結合域。
如請求項1至7或11至19中任一項之方法、組合或用途，其中該CAR包含抗原結合域，其包含： VL域，其包含： LC-CRD1：SEQ ID NO:10； LC-CRD2：SEQ ID NO:11； LC-CRD3：SEQ ID NO:12；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:13； HC-CRD2：SEQ ID NO:14； HC-CRD3：SEQ ID NO:15；或 VL域，其包含： LC-CRD1：SEQ ID NO:18； LC-CRD2：SEQ ID NO:19； LC-CRD3：SEQ ID NO:20；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:21； HC-CRD2：SEQ ID NO:22； HC-CRD3：SEQ ID NO:23；或 VL域，其包含： LC-CRD1：SEQ ID NO:26； LC-CRD2：SEQ ID NO:27； LC-CRD3：SEQ ID NO:28；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:29； HC-CRD2：SEQ ID NO:30； HC-CRD3：SEQ ID NO:31；或 VL域，其包含： LC-CRD1：SEQ ID NO:57； LC-CRD2：SEQ ID NO:58； LC-CRD3：SEQ ID NO:59；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:60； HC-CRD2：SEQ ID NO:61； HC-CRD3：SEQ ID NO:62。
如請求項1至7或11至20中任一項之方法、組合或用途，其中該CAR包含抗原結合域，其包含：包含與SEQ ID NO:16具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成之VL，及包含與SEQ ID NO:17具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成之VH；或包含與SEQ ID NO:24具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成之VL，及包含與SEQ ID NO:25具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成之VH；或包含與SEQ ID NO:32具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成之VL，及包含與SEQ ID NO:33具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成之VH；或包含與SEQ ID NO:63具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成之VL，及包含與SEQ ID NO:64具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成之VH。
如請求項1至3或11至21中任一項之方法、組合或用途，其中該包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒係輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)。
如請求項1至3或11至22中任一項之方法、組合或用途，其中該免疫調節因子選自：效應子免疫反應之促效劑或免疫調節反應之拮抗劑。
如請求項1至3或11至23中任一項之方法、組合或用途，其中該包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒包含編碼IL-12及/或拮抗劑抗PD-L1抗體之核酸。
如請求項1至3或11至24中任一項之方法、組合或用途，其中該包含編碼免疫調節因子之核酸之病毒包含編碼能夠催化無毒因子轉化成細胞毒性形式之酶之核酸。
如請求項25之方法、組合或用途，其中該酶選自：胸苷激酶、胞嘧啶脫胺酶、硝基還原酶、細胞色素P450、羧肽酶G2、嘌呤核苷磷酸化酶、辣根過氧化酶及羧酸酯酶。
如請求項1至26中任一項之方法、組合或用途，其中該治療癌症之方法包含： (a)自個體分離至少一個細胞； (b)修飾該至少一個細胞以表現或包含對癌細胞抗原有特異性之CAR或編碼對癌細胞抗原有特異性之CAR之核酸， (c)視情況擴增該經修飾的至少一個細胞，及； (d)向個體投與該經修飾的至少一個細胞。
如請求項1至27中任一項之方法、組合或用途，其中該治療癌症之方法包含： (a)自個體分離免疫細胞； (b)藉由包含以下之方法生成或擴增對溶瘤病毒有特異性之免疫細胞之群體：在呈現該溶瘤病毒之肽之抗原呈現細胞(APC)存在下培養，刺激該等免疫細胞，及； (c)向個體投與對該溶瘤病毒有特異性之至少一個免疫細胞。
如請求項1至28中任一項之方法、組合或用途，其中該癌症選自：頭頸癌、鼻咽癌(NPC)、子宮頸癌(CC)、口咽癌(OPC)、胃癌(GC)、肝細胞癌(HCC)及肺癌。
一種溶瘤腺病毒(OncAd)，其編碼包含胺基酸序列SEQ ID NO:34或由其組成之E1A蛋白。
一種溶瘤腺病毒(OncAd)，其包含具有STAT1之一或多個結合位點之核酸。
一種溶瘤腺病毒(OncAd)，其包含與SEQ ID NO:51具有至少60%序列一致性之核酸序列或因密碼子簡併結果產生之等效序列。
一種溶瘤腺病毒(OncAd)，其包含與SEQ ID NO:55具有至少60%序列一致性之核酸序列或因密碼子簡併結果產生之等效序列。
一種輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)，其包含編碼IL-12及/或拮抗劑抗PD-L1抗體之核酸。
如請求項34之HDAd，其中該HDAd另外包含編碼能夠催化無毒因子轉化成細胞毒性形式之酶之核酸。
如請求項34或請求項35之HDAd，其中該酶選自：胸苷激酶、胞嘧啶脫胺酶、硝基還原酶、細胞色素P450、羧肽酶G2、嘌呤核苷磷酸化酶、辣根過氧化酶及羧酸酯酶。
一種嵌合抗原受體(CAR)，其包含抗原結合域，其包含： VL域，其包含： LC-CRD1：SEQ ID NO:10； LC-CRD2：SEQ ID NO:11； LC-CRD3：SEQ ID NO:12；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:13； HC-CRD2：SEQ ID NO:14； HC-CRD3：SEQ ID NO:15；或 VL域，其包含： LC-CRD1：SEQ ID NO:18； LC-CRD2：SEQ ID NO:19； LC-CRD3：SEQ ID NO:20；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:21； HC-CRD2：SEQ ID NO:22； HC-CRD3：SEQ ID NO:23；或 VL域，其包含： LC-CRD1：SEQ ID NO:26； LC-CRD2：SEQ ID NO:27； LC-CRD3：SEQ ID NO:28；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:29； HC-CRD2：SEQ ID NO:30； HC-CRD3：SEQ ID NO:31；或 VL域，其包含： LC-CRD1：SEQ ID NO:57； LC-CRD2：SEQ ID NO:58； LC-CRD3：SEQ ID NO:59；及VH域，其包含： HC-CRD1：SEQ ID NO:60； HC-CRD2：SEQ ID NO:61； HC-CRD3：SEQ ID NO:62。
如請求項37之CAR，其中該CAR包含抗原結合域，其包含：包含與SEQ ID NO:16具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成之VL，及包含與SEQ ID NO:17具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成之VH；或包含與SEQ ID NO:24具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成之VL，及包含與SEQ ID NO:25具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成之VH；或包含與SEQ ID NO:32具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成之VL，及包含與SEQ ID NO:33具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成之VH；或包含與SEQ ID NO:63具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成之VL，及包含與SEQ ID NO:64具有至少75%序列一致性之胺基酸序列或由其組成之VH。
一種核酸或複數種核酸，其視情況經分離或人造，其編碼如請求項30至33中任一項之溶瘤腺病毒(OncAd)、如請求項34至36中任一項之輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)或如請求項37或請求項38之嵌合抗原受體(CAR)。
一種細胞，其包含如請求項30至33中任一項之溶瘤腺病毒(OncAd)、如請求項34至36中任一項之輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)、如請求項37或請求項38之嵌合抗原受體(CAR)或如請求項39之核酸或複數種核酸。
一種醫藥組合物，其包含如請求項30至33中任一項之溶瘤腺病毒(OncAd)、如請求項34至36中任一項之輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)、如請求項37或請求項38之嵌合抗原受體(CAR)、如請求項39之核酸或複數種核酸或如請求項40之細胞，及醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑、賦形劑或佐劑。
一種治療癌症之方法，其包含向個體投與如請求項30至33中任一項之溶瘤腺病毒(OncAd)、如請求項34至36中任一項之輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)、如請求項37或請求項38之嵌合抗原受體(CAR)、如請求項39之核酸或複數種核酸、如請求項40之細胞、或如請求項41之醫藥組合物。
如請求項30至33中任一項之溶瘤腺病毒(OncAd)、如請求項34至36中任一項之輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)、如請求項37或請求項38之嵌合抗原受體(CAR)、如請求項39之核酸或複數種核酸、如請求項40之細胞或如請求項41之醫藥組合物，其用於治療癌症之方法。
一種如請求項30至33中任一項之溶瘤腺病毒(OncAd)、如請求項34至36中任一項之輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)、如請求項37或請求項38之嵌合抗原受體(CAR)、如請求項39之核酸或複數種核酸、如請求項40之細胞或如請求項41之醫藥組合物之用途，其用於製造治療癌症之藥劑。
如請求項42之方法、如請求項43之OncAd、HDAd、CAR、核酸或複數種核酸、細胞或醫藥組合物或如請求項44之用途，其中該癌症選自：頭頸癌、鼻咽癌(NPC)、子宮頸癌(CC)、口咽癌(OPC)、胃癌(GC)、肝細胞癌(HCC)及肺癌。
一種部件之套組，其包含預定量之如請求項30至33中任一項之溶瘤腺病毒(OncAd)、如請求項34至36中任一項之輔助病毒依賴型腺病毒(HDAd)、如請求項37或請求項38之嵌合抗原受體(CAR)、如請求項39之核酸或複數種核酸、如請求項40之細胞或如請求項41之醫藥組合物。