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TW201843161A - 作為抗菌劑之三環2-喹啉酮 - Google Patents

作為抗菌劑之三環2-喹啉酮 Download PDF

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TW201843161A
TW201843161A TW107115160A TW107115160A TW201843161A TW 201843161 A TW201843161 A TW 201843161A TW 107115160 A TW107115160 A TW 107115160A TW 107115160 A TW107115160 A TW 107115160A TW 201843161 A TW201843161 A TW 201843161A
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alkyl
mmol
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methyl
alkoxy
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TW107115160A
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English (en)
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吉爾勞姆 拉波引特
吾斯奴 米果
海恩茲 恩斯特 墨瑟
艾雷克斯 里夫金
柯林 凱斯 史奇普
薩拉 威廉斯
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瑞士商諾華公司
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Abstract

本發明係在醫藥化學領域中及係關於可用作抗細菌劑之化合物及其醫藥組合物。該等化合物可用作細菌旋轉酶活性及細菌感染之抑制劑，且具有式(I)之結構式：

Description

作為抗菌劑之三環2-喹啉酮
本發明係在醫藥化學領域中及係關於顯示抗菌活性之化合物及其醫藥組合物。該等化合物為細菌DNA旋轉酶活性之抑制劑，如本文資料證實。本發明亦關於用於治療哺乳動物之細菌感染之方法及關於使用該等化合物減少生物樣品中細菌數量之方法。
一些已知的抗微生物劑藉由作用於DNA旋轉酶及拓樸異構酶而抑制細菌DNA合成。DNA旋轉酶及拓樸異構酶IV均為由兩個蛋白質亞單位組成的II型拓樸異構酶，其充當A2 B2 異源四聚體。ATP酶域駐存於二聚體之一個多肽(在DNA旋轉酶中之GyrB，在拓樸異構酶IV中之ParE)上，然而，DNA裂解核心位於第二多肽(在DNA旋轉酶中之GyrA，在拓樸異構酶IV中之ParC)上。
旋轉酶之一些抗菌抑制劑(包括胺基香豆素，諸如新生黴素)作為藉由結合至GyrB中之ATP酶活性位點而能量轉導DNA旋轉酶之競爭性抑制劑起作用。相比之下，喹諾酮抗生素(諸如萘啶酮酸(nalidixic acid)、環丙沙星(ciprofloxacin)及莫西沙星(moxifloxacin))優先在裂解核心(GyrA及ParC)處結合該等酵素並防止DNA複製且因此阻止革蘭氏陽性細菌及革蘭氏陰性細菌中之細胞分裂。雖然第一位點耐藥性突變一般發生在gyrA中，但gyrB中之突變亦已證實減小該等已知喹諾酮之易感性。
細菌DNA合成抑制劑(例如氟喹諾酮)已用於治療原發性革蘭氏陰性感染且歷史上已達成良好臨床結果。存在關於喹諾酮類化合物之豐富知識，包括生物可利用性、組織分佈、PK/PD關係及光毒性。大多數已知的氟喹諾酮具有酮-酸官能性，或羧酸(環丙沙星及莫西沙星、左旋氧氟沙星(levofloxacin)、單環及雙環2-吡啶酮及4-吡啶酮)、羟胺(喹唑啉及三環異喹諾酮)或肼(喹唑啉酮)基團，其與DNA旋轉酶及拓樸異構酶活性有關且假設結合至活化複合體中之二價陽離子。大多數抑制劑亦具有連接至核心雜環之胺官能基，使得該等化合物具有兩性離子性。單環2-吡啶酮及4-吡啶酮(例如Ro-13-5478)抑制劑具有連接至苯基之此胺官能性。該等抑制劑之兩性離子性質涉及使用孔蛋白(porin)通道使得該等化合物滲入至革蘭氏陰性細胞中。
喹諾酮抗生素一直係高效性，但當前藥物之大規模發展(包括使用有效第二代喹諾酮，其已變成學名藥(例如環丙沙星))威脅其未來長期效用。喹諾酮耐藥性已經大範圍出現在醫院及社區。參見Tessier及Nicolau，Antimicrob. Agents Chemother . 54(6)，2887-89 (2013)。為與該等耐藥性菌株對抗，抗對於目前喹諾酮具耐藥性之細菌具活性之新穎旋轉酶抑制劑，尤其係保留抗對於已知喹諾酮具耐藥性之細菌之功效的靶向耐多重藥物性(MDR)病原體之抗生素將解決重要的未滿足的醫學需求。
本發明係關於具有對野生型及喹諾酮耐藥性細菌兩者之活性之抗菌化合物。其尤其關於具有對喹諾酮耐藥性細菌(包括例如綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa )之耐多重藥物性(MDR)菌株)之活性以及對野生型及喹諾酮耐藥性革蘭氏陽性病原體(包括甲氧西林(methicillin)耐藥性金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus ) (MRSA))之抗菌活性之化合物。本發明亦關於相較於人類拓樸異構酶II酶抑制作用具有在細菌拓樸異構酶IV與DNA旋轉酶酶抑制作用間之選擇性之化合物，提供與治療人類之細菌感染之活體內用途一致的治療指數。
本發明之化合物及其醫藥組合物係可用作抗菌劑；在不受理論約束下，據信其等充當旋轉酶抑制劑。本發明之化合物係可用於治療有此需要的個體(尤其係人類及其他哺乳動物)之細菌感染。該等化合物包括式(I)化合物：(I) 其中： Z1 係選自由O、S、NR1 及C(R1 )2 組成之群； Z2 係選自C(R1 )2 、O、-C(R1 )2 -C(R1 )2 -及連接Z1 與Z3 的鍵，限制條件是當Z2 為O，Z1 為C(R1 )2 時； Z3 為C(R1 )2 ； 其中R1 在每次出現時係獨立地選自H及C1 -C3 烷基，該烷基視需要經多達三個選自鹵基、羥基、C1 -C3 -烷氧基及CN取代； R3 係選自由H、-L1 -OR2 、-L1 -CN、-L1 -N(R2 )2 、-L1 -COOR2 、-L1 -CON(R2 )2 、-L1 -N(R2 )C(O)R2 、-L1 -N(R2 )C(O)OR、-L1 -SO2 R、-L1 -N(R2 )-SO2 -R及-L1 -SO2 -N(R2 )2 組成之群；其中各L1 為鍵或C1 -C4 直鏈或分支鏈伸烷基連接子； 各R獨立地係C1 -C4 烷基，該烷基視需要經一至三個選自鹵素、-OH、C1 -C4 烷氧基、CN、-NH2 、-NH(C1 -C4 烷基)、-N(C1 -C4 烷基)2 、-SO2 (C1 -C4 烷基)及側氧基之基團取代； 各R2 獨立地為H或C1 -C4 烷基，該烷基視需要經多達三個選自鹵素、-OH、C1 -C4 烷氧基、CN、-NR12 R13 、-SO2 R及側氧基之基團取代； 或在相同氮上的兩個R2 可共同形成4-6員雜環，該雜環視需要包含另一選自N、O及S之雜原子作為環成員且視需要經多達三個選自鹵素、-OH、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烷氧基、CN、-NR12 R13 及側氧基之基團取代； R4 係選自由H、鹵素、C1 -C6 烷基、C1 -C4 鹵烷基、-L2 -OR2 、-L2 -CN、-L2 -N(R2 )2 及-L2 -NR2 C(O)-R2 組成之群； 各L2 係獨立地選自鍵及二價直鏈或分支鏈C1 -C6 烷基； R5 係選自由H、鹵基、胺基、CN、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烷氧基及C1 -C4 鹵烷基組成之群； R6 係選自由H、鹵基、CN、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烷氧基及C1 -C4 鹵烷基組成之群； Y為式-NR7A R7B 之基團， 其中R7A 係選自由H、-C(O)R2 、-C(O)OR2 及C1 -C6 烷基組成之群，其視需要經多達兩個獨立選自下列之基團取代：鹵素、-OH、C1 -C4 鹵烷基、C1 -C4 烷氧基、側氧基、=N-OR2 、-N(R2 )2 、C3 -C7 環烷基、-COOR2 、-C(O)N(R2 )2 、-NR2 C(O)R2 、-NR2 C(O)OR及4-6員雜芳基或雜環基，該4-6員雜芳基或雜環基包含多達兩個選自N、O及S之雜原子作為環成員且視需要經多達兩個選自羥基、胺基、鹵素、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基及C1 -C4 烷氧基之基團取代； R7B 為-L3 -Q3 或C1 -C6 烷基，其視需要經多達兩個獨立選自下列之基團取代：鹵素、-OH、C1 -C4 鹵烷基、C1 -C4 烷氧基、側氧基、-N(R2 )2 、C3 -C7 環烷基、-COOR2 、-C(O)N(R2 )2 、-NR2 C(O)R2 、-NR2 C(O)OR及4-6員雜芳基或雜環基，該4-6員雜芳基或雜環基包含多達兩個選自N、O及S之雜原子作為環成員且視需要經多達兩個選自羥基、胺基、鹵素、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基及C1 -C4 烷氧基之基團取代， 其中L3 為鍵或直鏈或分支鏈C1 -C6 烷基連接子，且Q3 係選自吡啶基及包含一或兩個選自N、O及S之雜原子作為環成員之4-7員雜環基，且其中Q3 係視需要經多達三個選自鹵素、CN、-OH、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基、C1 -C4 烷氧基、側氧基、=N-OR2 、-N(R2 )2 、-COOR2 、-C(O)N(R2 )2 、-NR2 C(O)R2 、-NR2 C(O)OR之基團取代； 或R7A 及R7B 與其所連接的氮原子共同形成視需要包含另一個選自N、O及S之雜原子作為環成員之4-至7-員單環基或視需要包含另一或兩個選自N、O及S之雜原子作為環成員之6-10員雙環雜環基，其中由R7A 及R7B 與其所連接的氮原子共同形成的該單環或雙環雜環基係視需要經多達四個選自下列之基團取代：鹵素、-CN、羥基、苯基、側氧基、-OR9 、-N(R9 )2 、-COOR9 、-C(O)N(R9 )2 、C1 -C4 烷基、=C(R8 )2 、C1 -C4 鹵烷基、C1 -C4 烷氧基、側氧基、C3 -C6 環烷基及包含多達兩個選自N、O及S之雜原子作為環成員之4-6員雜芳基或雜環基， 其中該C1 -C4 烷基、C3 -C6 環烷基、苯基及4-6員雜芳基或雜環基各自係視需要經多達三個獨立選自鹵素、-CN、羥基、側氧基、-OR10 、=N-OR10 、-N(R10 )2 、-COOR10 、-N(R10 )-C(O)-O-(C1 -C4 烷基)、-C(O)N(R10 )2 、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基及C1 -C4 烷氧基之基團取代； R8 在每次出現時係獨立地選自由H、鹵基、CN、C1 -C4 烷氧基、C1 -C4 鹵烷基及C1 -C4 烷基組成之群，其視需要經羥基或胺基取代； R9 及R10 各自獨立地選自H及C1 -C4 烷基，其視需要經多達三個選自鹵素、-OH、C1 -C4 烷氧基、CN、-NR12 R13 、-SO2 R及側氧基之基團取代； 或在相同氮上的兩個R9 或兩個R10 可共同形成4-6員雜環，該4-6員雜環視需要包含另一選自N、O及S之雜原子作為環成員且視需要經多達三個選自鹵素、-OH、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烷氧基、CN、-NR12 R13 及側氧基之基團取代； 各R11 獨立地為氫或C1 -C4 烷基，其視需要經一或兩個選自鹵素、-OH、C1 -C4 烷氧基、CN、-NH2 、-NH(C1 -C4 烷基)、-N(C1 -C4 烷基)2 、-SO2 (C1 -C4 烷基)及側氧基之基團取代； 各R12 及R13 獨立地為氫或C1 -C4 烷基，其視需要經一或兩個選自鹵素、-OH、C1 -C4 烷氧基、CN、-NH2 、-NH(C1 -C4 烷基)、-N(C1 -C4 烷基)2 、-SO2 (C1 -C4 烷基)及側氧基之基團取代； 或R12 及R13 與其二者所連接的氮原子共同形成4-至6-員雜環基，其視需要包含另一選自N、O及S之雜原子作為環成員且視需要經一至三個選自OH、鹵素、側氧基、=N-OR11 、視需要經一至三個鹵原子或NH2 取代之C1 -C6 烷基、視需要經一或多個OH或C1 -C6 烷氧基取代之C1 -C6 烷氧基及-C(O)O-C1 -C6 烷基之取代基取代； 包括該等化合物之醫藥上可接受之鹽。下文描述本發明化合物之各種其他實施例。
該等化合物及包含其之醫藥組合物係可用於治療細菌感染或減小細菌感染之嚴重度。特定言之，本發明之化合物係可用於治療上呼吸道感染、下呼吸道感染、耳部感染、肺部及支氣管感染、泌尿道感染、腹腔內感染、心血管感染、血流感染、敗血症、CNS感染、皮膚及軟組織感染、GI感染、骨骼及關節感染、生殖器感染、眼部感染或肉芽腫性感染或減小該等疾病之嚴重度。該等化合物對一系列細菌(包括革蘭氏陽性菌及革蘭氏陰性菌)具有效性。
相關申請案之交叉參考
本申請案主張2017年5月5日申請之美國序列號62/501,990之優先權之效益，該案之內容以引用的方式併入本文中。
為達解釋本說明書之目的，除非另作指明，否則下列定義將適用，且在任何適當時候，以單數使用的術語亦包括複數，且反之亦然。 定義
除非文中另外指示或與內文明顯矛盾，否則本發明內容(尤其申請專利範圍內容)中所用的術語「一」、「一個」、「該」及類似術語係應解釋為包括單數及複數。
如本文中所使用，術語「鹵素」(或鹵基)係指氟、溴、氯或碘，特定言之氟或氯。經鹵素取代之基團及部分(諸如經鹵素取代之烷基(鹵烷基))可係單-、多-或全-鹵化。
如本文中所使用，除非另作指明，否則術語「雜原子」係指氮(N)、氧(O)或硫(S)。
如本文中所使用，術語「烷基」係指具有至多10個碳原子之完全飽和分支鏈或未分支烴部分。除非另作指明，否則烷基係指具有1至6個碳原子之烴部分(其可寫成C1 -C6 、或C1-6 烷基)或或者具有1至4個碳原子之烴部分。烷基之代表性實例包括(但不限於)甲基、乙基、正丙基、異丁基、正丁基、第二丁基、異丁基、第三丁基、正戊基、異戊基、新戊基、正己基、3-甲基己基、2,2-二甲基戊基、2,3-二甲基戊基、正庚基、正辛基、正壬基、正癸基及類似者。經取代之烷基為包含一或多個取代基替代對應的未經取代之烷基之氫原子(諸如一個、兩個或三個取代基，至多未經取代之烷基上的氫原子數)之烷基。若未另行指明，則烷基之適宜取代基可選自鹵素、CN、側氧基、羥基、胺基及C1 -C4 烷氧基。
如本文中所使用，術語「伸烷基」係指具有1至10個碳原子及兩個連接至其他部分之開放價之二價烷基。除非另外提出，否則伸烷基係指通常具有1至6個碳原子或或者1或4個碳原子之部分。伸烷基之代表性實例包括(但不限於)亞甲基、伸乙基、伸正丙基、伸異丙基、伸正丁基、伸第二丁基、伸異丁基、伸第三丁基、伸正戊基、伸異戊基、伸辛戊基、伸正己基、伸3-甲基己基、伸2,2-二甲基戊基、伸2,3-二甲基戊基、伸正庚基、伸正辛基、伸正壬基、伸正癸基及類似者。經取代之伸烷基為包含一或多個(諸如一個、兩個或三個)取代基之伸烷基；除非另作指明，否則適宜之取代基係選自上述針對烷基所列的取代基。
如本文中所使用，術語「鹵烷基」係指經一或多個如本文中所定義之鹵原子取代之如本文中所定義之烷基。鹵烷基可係單鹵烷基、二鹵烷基、三鹵烷基或多鹵烷基，包括全鹵烷基。單鹵烷基可在烷基中具有一個碘、溴、氯或氟。氯及氟較佳在烷基或環烷基上；氟、氯及溴常較佳在芳基或雜芳基上。二鹵烷基及多鹵烷基可在烷基中具有相同鹵原子或不同鹵原子之組合中之一或多者。通常，多鹵烷基包含至多12個、或10個、或8個、或6個、或4個、或3個、或2個鹵基。鹵烷基之非限制性實例包括氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、五氟乙基、七氟丙基、二氟氯甲基、二氯氟甲基、二氟乙基、二氟丙基、二氯乙基及二氯丙基。全鹵烷基係指所有氫原子經鹵原子置換之烷基，例如三氟甲基。
如本文中所使用，術語「烷氧基」係指烷基-O-，其中烷基係如上文所定義。烷氧基之代表性實例包括(但不限於)甲氧基、乙氧基、丙氧基、2-丙氧基、丁氧基、第三丁氧基、戊氧基、己氧基及類似者。通常，烷氧基具有1-6個碳，更通常係1-4個碳原子。
經取代之烷氧基為在烷氧基之烷基部分上包含一或多個，諸如一個、兩個或三個取代基之烷氧基。除非另作指明，否則適宜的取代基係選自上文針對烷基所列的取代基。
類似地，其他基團(例如「烷氧基烷基」、「烷氧基羰基」、「烷氧基羰基烷基」、「烷基磺醯基」、「烷基亞碸基」、「烷基胺基」或「鹵烷基」)之各烷基部分應具有如在「烷基」之上述定義中所述的相同含義。當以此種方式使用時，除非另作指明，否則烷基通常為1-4碳烷基且不再經除所命名部分外的基團取代。當該等烷基經取代時，除非另作指明，否則適宜的取代基為上述針對烷基命名之彼等。
如本文中所使用，術語「鹵烷氧基」係指鹵烷基-O-，其中鹵烷基係如上文所定義。鹵烷氧基之代表性實例包括(但不限於)氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、三氯甲氧基、2-氯乙氧基、2,2,2-三氟乙氧基、1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙氧基及類似者。
如本文中所使用，術語「環烷基」係指具有3-12個碳原子之飽和或不飽和非芳族單環、二環、三環或螺環烴基；環烷基可係不飽和的，及可稠合至可係飽和、不飽和或芳族之另一環，條件係環烷基之連接至受關注分子式之環原子為非芳族環。除非另外提出，否則環烷基係指具有介於3與12個之間的環碳原子或介於3與8之間的環碳原子之環狀烴基。通常，除非另作指明，否則環烷基為具有3-7個環原子之飽和單環狀環。
經取代之環烷基為經一個、或兩個、或三個或更多個取代基，多至未經取代之基團上的氫原子數取代之環烷基。通常，經取代之環烷基具有1-4個或1-2個取代基。除非另作指明，否則適宜的取代基係獨立地選自由鹵素、羥基、硫醇基、氰基、硝基、側氧基、C1 -C4 -烷基亞胺基、C1 -C4 -烷氧亞胺基、羥基亞胺基、C1 -C4 -烷基、C2 -C4 -烯基、C2 -C4 -炔基、C1 -C4 -烷氧基、C1 -C4 -硫烷基、C2 -C4 -烯基氧基、C2 -C4 -炔基氧基、C1 -C4 -烷基羰基、羧基、C1 -C4 -烷氧基羰基、胺基、C1 -C4 -烷基胺基、二-C1 -C4 -烷基胺基、C1 -C4 -烷基胺基羰基、二-C1 -C4 -烷基胺基羰基、C1 -C4 -烷基羰基胺基、C1 -C4 -烷基羰基(C1 -C4 -烷基)胺基、C1 -C4 -烷基磺醯基、C1 -C4 -烷基胺磺醯基及C1 -C4 -烷基胺基磺醯基組成之群，其中上述烴基(例如，烷基、烯基、炔基、烷氧基)各者可進一步經一或多個在每次出現時獨立選自上文所提出的「烷基」基團取代基清單之基團取代。環烷基之較佳取代基包括C1 -C4 烷基及上文針對烷基之所列的取代基。
例示性單環烴基包括(但不限於)環丙基、環丁基、環戊基、環戊烯基、環己基、環己烯基及類似者。例示性雙環烴基包括冰片基、吲哚基、六氫吲哚基、四氫萘基、十氫萘基、雙環[2.1.1]己基、雙環[2.2.1]庚基、雙環[2.2.1]庚烯基、6,6-二甲基雙環[3.1.1]庚基、2,6,6-三甲基雙環[3.1.1]庚基、雙環[2.2.2]辛基及類似者。例示性三環烴基包括金剛烷基及類似者。
類似地，其他基團(例如「環烷基氧基」、「環烷基烷基」或「鹵環烷基」)之各環烷基部分應具有如在上述「環烷基」定義中所述之相同含義。當用於該等術語中時，環烷基通常為未經取代或經1-2個基團取代之單環3-7個碳的環。當視需要取代時，該等取代基通常係選自C1 -C4 烷基及上文描述作為適於烷基之彼等。
如本文中所使用，術語「芳基」係指在環部分中具有6-10個碳原子之芳族烴基。通常，芳基為具有6-10個碳原子之單環、雙環或三環芳基，例如，苯基或萘基。另外，如本文中所使用，術語「芳基」係指可係單芳族環或稠合在一起的多芳族環之芳族取代基。非限制性實例包括苯基、萘基及四氫萘基，條件係四氫萘基係經該四氫萘基之芳族環的碳連接至受關注的式。
經取代之芳基為經1-5個(諸如一個、或兩個、或三個)獨立選自由以下組成之群之取代基取代之芳基：羥基、硫醇基、氰基、硝基、C1 -C4 -烷基、C2 -C4 -烯基、C2 -C4 -炔基、C1 -C4 -烷氧基、C1 -C4 -硫烷基、C2 -C4 -烯基氧基、C2 -C4 -炔基氧基、鹵素、C1 -C4 -烷基羰基、羧基、C1 -C4 -烷氧基羰基、胺基、C1 -C4 -烷基胺基、二-C1 -C4 -烷基胺基、C1 -C4 -烷基胺基羰基、二-C1 -C4 -烷基胺基羰基、C1 -C4 -烷基羰基胺基、C1 -C4 -烷基羰基(C1 -C4 -烷基)胺基、C1 -C4 -烷基磺醯基、胺磺醯基、C1 -C4 -烷基胺磺醯基及C1 -C4 -烷基胺基磺醯基，其中上述烴基(例如，烷基、烯基、炔基、烷氧基殘基)各者可進一步經一或多個在每次出現時獨立選自上文所列的作為烷基之適宜取代基之基團取代。
類似地，術語芳基當用作其他基團(例如「芳基氧基」或「芳基烷基」)之部分時應具有如在上述「芳基」定義中所描述的相同含義。
如本文中所使用，術語「雜環基」或「雜環狀」或「雜環」係指係飽和或部分飽和但非芳族之雜環基且較佳係單環狀環或多環狀環(就多環狀環而言，特定言之雙環狀、三環狀或螺環狀環)；及具有3至12個，更通常3至8個及最通常5或6個之環原子；其中一或多個，較佳一至四個，尤其一或兩個環原子為獨立選自O、S及N之雜原子(因此，其餘環原子係碳)。較佳地，雜環基具有一或兩個此等雜原子作為環原子，及通常該等雜原子彼此不直接連接。鍵結環(即連接至受關注式的環)較佳具有4至12個，尤其5至7個之環原子。雜環基可稠合至芳族環，條件係其在雜環基之非芳族的原子之處連接至受關注式。雜環基可經雜環基之雜原子(通常係氮)或碳原子連接至受關注式。雜環基可包括稠環或橋接環及螺環，及多環雜環基中僅一個環需要包含雜原子作為環。雜環之實例包括四氫呋喃(THF)、二氫呋喃、1,4-二噁烷、嗎啉、1,4-二噻烷、哌嗪、哌啶、1,3-二氧戊環、咪唑啶、咪唑啉、吡咯啉、吡咯啶、四氫哌喃、二氫哌喃、氧硫雜環戊烷、二硫雜環戊烷、1,3-二噁烷、1,3-二噻烷、氧硫雜環己烷、硫代嗎啉及類似者。
經取代之雜環基為獨立地經1-5個(諸如一個、或兩個、或三個)選自上文針對環烷基所述之取代基之取代基取代之雜環基。
類似地，用作其他基團(例如「雜環基烷基」)之部分之術語雜環基應具有如在上文「雜環基」定義中所述之相同含義。
如本文中所使用，術語「雜芳基」係指具有1至8個雜原子作為環成員之5-14員單環-或雙環-或三環-芳環體系；除非另作指明，否則該等雜原子係選自N、O及S。通常，本發明化合物中之雜芳基為5-10員環體系或5-7員環體系(例如，5-7員單環或8-10員雙環基團)。典型雜芳基包括2-或3-噻吩基、2-或3-呋喃基、1-、2-或3-吡咯基、1-、2-、4-或5-咪唑基、1-、3-、4-或5-吡唑基、2-、4-或5-噻唑基、3-、4-或5-異噻唑基、2-、4-或5-噁唑基、3-、4-或5-異噁唑基、3-或5-(1,2,4)-三唑基、4-或5-(1,2,3)-三唑基、1-或2-四唑基、2-、3-或4-吡啶基、3-或4-嗒嗪基、2-吡嗪基及2-、4-或5-嘧啶基。
術語「雜芳基」亦指其中的雜芳族環稠合至一或多個芳基、環烷基或雜環基環之基團，其中連接至受關注式之基團或連接點係在雜芳族環上。典型稠合雜芳基包括(但不限於)2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基、1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-異喹啉基、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基、2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并[b]噻吩基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噁唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并咪唑基及2-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基。
除非另作指明，否則經取代之雜芳基為包含一或多個選自上文描述作適於芳基之取代基之取代基之雜芳基。
術語「羥基」係指基團-OH。
如本文中所使用，術語「螺」包括具有一或兩個選自N、O及S之雜原子作為環成員之3-至6-環烷基或4-至6個原子的雜環狀環，其可視需要如所定義經取代，其中螺環係稠合至非芳族環之單碳原子上，使得兩個環所共有的碳原子成為螺環中心。Q為用於連接至螺環狀環之適宜取代基，例如H或C1 -C4 烷基。螺基之例示性實例為：、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、及，其中各結構中之虛線鍵表示非芳族環之與螺環基共享一個原子的鍵。
如本文中所使用，術語「醫藥上可接受之載劑」包括適用於醫藥組合物中之任何及所有溶劑、分散介質、塗料、界面活性劑、抗氧化劑、防腐劑(例如抗菌劑、抗真菌劑)、等滲劑、吸收延緩劑、鹽、防腐劑、藥物安定劑、結合劑、賦形劑、崩解劑、潤滑劑、甜味劑、調味劑、染料及類似者及其組合，如對於熟習此項技術者將為已知(參見例如Remington's Pharmaceutical Sciences，第18版，Mack Printing Company，1990，第1289-1329頁)。除任何習知載劑與該活性成分不相容以外，設想其於治療或醫藥組合物中之用途。
術語本發明化合物之「治療上有效量」係指將引起個體之生物或醫療反應(例如降低或抑制酶或蛋白質活性或改善症狀、緩解病況，減緩或延緩疾病進展或預防疾病等)的本發明化合物的量。在一非限制性實施例中，術語「治療上有效量」係指當本發明化合物投與至個體時可有效地(1)藉由減小或抑制旋轉酶之活性來至少部分緩解、抑制、預防及/或改善病況或病症或疾病；或減小或抑制旋轉酶之表現。在另一個非限制性實施例中，術語「治療有效量」係指本發明化合物之當投與個體時治療或改善該個體之細菌感染之量。
如本文中所使用，術語「個體」係指動物。通常，該動物為人類。個體亦指例如靈長類(例如，人類(男性或女性))、牛、綿羊、山羊、馬、犬、貓、兔、大鼠、小鼠、魚、鳥及類似者。在某些實施例中，該個體為靈長類動物。在一些實施例中，該個體為人類。
如本文中所使用，術語「抑制」係指減少或抑制既定病狀、症狀或病症或疾病或顯著降低生物活性或過程之基線活性。
如本文中所使用，在一實施例中，術語「治療」任何疾病或病症係指改善該疾病或病症(即減緩或阻止或減慢該疾病或其臨床症狀中之至少一者的發展)。在另一個實施例中，「治療」係指緩解或改善至少一種物理參數(包括彼等無法被患者識別的參數)。在又一個實施例中，「治療」係指以物理方式(例如穩定可識別症狀)或生理方式(例如穩定物理參數)或兩者調節該疾病或病症。在又一個實施例中，「治療」係指預防或延緩該疾病或病症的出現或發展或進展。
如本文中所使用，若個體將會在生物上、醫療上或生活品質上自治療獲益，則該個體係「需要」該治療。
如本文中所使用，除非文中另外指示或與內文明顯矛盾，否則本發明內文(尤其申請專利範圍內文)中所用的術語「一」、「一個」、「該」及類似術語係應解釋為包括單數及複數。
本文中描述本發明之各種實施例。應認識到，在各實施例中闡明的特徵可與其他所闡明特徵組合以提供其他實施例。下列所列舉的實施例具有代表性：
1. 一種式(I)之化合物：(I) 其中： Z1 係選自由O、S、NR1 及C(R1 )2 組成之群； Z2 係選自C(R1 )2 、O、-C(R1 )2 -C(R1 )2 -及連接Z1 與Z3 的鍵，限制條件是當Z2 為O，Z1 為C(R1 )2 時； Z3 為C(R1 )2 ； 其中R1 在每次出現時係獨立地選自H及C1 -C3 烷基，該烷基視需要經多達三個選自鹵基、羥基、C1 -C3 -烷氧基及CN取代； R3 係選自由H、-L1 -OR2 、-L1 -CN、-L1 -N(R2 )2 、-L1 -COOR2 、-L1 -CON(R2 )2 、-L1 -N(R2 )C(O)R2 、-L1 -N(R2 )C(O)OR、-L1 -SO2 R、-L1 -N(R2 )-SO2 -R及-L1 -SO2 -N(R2 )2 組成之群；其中各L1 為鍵或C1 -C4 直鏈或分支鏈伸烷基連接子； 各R獨立地為C1 -C4 烷基，該烷基視需要經一至三個選自鹵素、-OH、C1 -C4 烷氧基、CN、-NH2 、-NH(C1 -C4 烷基)、-N(C1 -C4 烷基)2 、-SO2 (C1 -C4 烷基)及側氧基之基團取代； 各R2 獨立地為H或C1 -C4 烷基，該烷基視需要經多達三個選自鹵素、-OH、C1 -C4 烷氧基、CN、-NR12 R13 、-SO2 R及側氧基之基團取代； 或在相同氮上的兩個R2 可共同形成4-6員雜環，該雜環視需要包含另一選自N、O及S之雜原子作為環成員且視需要經多達三個選自鹵素、-OH、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烷氧基、CN、-NR12 R13 及側氧基之基團取代； R4 係選自由H、鹵基、C1 -C6 烷基、C1 -C4 鹵烷基、-L2 -OR2 、OR2 、-L2 -CN、-L2 -N(R2 )2 及-L2 -NR2 C(O)-R2 組成之群； 各L2 獨立地選自鍵及二價直鏈或分支鏈C1 -C6 烷基； R5 係選自由H、鹵基、胺基、CN、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烷氧基及C1 -C4 鹵烷基組成之群； R6 係選自由H、鹵基、CN、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烷氧基及C1 -C4 鹵烷基組成之群； Y為式–NR7A R7B 之基團， 其中R7A 係選自由H、-C(O)R2 、-C(O)OR2 及C1 -C6 烷基組成之群，其視需要經多達兩個獨立選自下列之基團取代：鹵素、-OH、C1 -C4 鹵烷基、C1 -C4 烷氧基、側氧基、=N-OR2 、-N(R2 )2 、C3 -C7 環烷基、-COOR2 、-C(O)N(R2 )2 、-NR2 C(O)R2 、-NR2 C(O)OR及4-6員雜芳基或雜環基，該4-6員雜芳基或雜環基包含多達兩個選自N、O及S之雜原子作為環成員且視需要經多達兩個選自羥基、胺基、鹵素、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基及C1 -C4 烷氧基之基團取代； R7B 為-L3 -Q3 或C1 -C6 烷基，其視需要經多達兩個獨立選自下列之基團取代：鹵素、-OH、C1 -C4 鹵烷基、C1 -C4 烷氧基、側氧基、-N(R2 )2 、C3 -C7 環烷基、-COOR2 、-C(O)N(R2 )2 、-NR2 C(O)R2 、-NR2 C(O)OR及4-6員雜芳基或雜環基，該4-6員雜芳基或雜環基包含多達兩個選自N、O及S之雜原子作為環成員且視需要經多達兩個選自羥基、胺基、鹵素、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基及C1 -C4 烷氧基之基團取代， 其中L3 為鍵或直鏈或分支鏈C1 -C6 烷基連接子，且Q3 係選自吡啶基及包含一或兩個選自N、O及S之雜原子作為環成員之4-7員雜環基，且其中Q3 係視需要經多達三個選自鹵素、CN、-OH、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基、C1 -C4 烷氧基、側氧基、=N-OR2 、-N(R2 )2 、-COOR2 、-C(O)N(R2 )2 、-NR2 C(O)R2 、-NR2 C(O)OR之基團取代； 或R7A 及R7B 與其所連接的氮原子共同形成視需要包含另一個選自N、O及S之雜原子作為環成員之4-至7-員單環基或視需要包含另一或兩個選自N、O及S之雜原子作為環成員之6-10員雙環雜環基，其中由R7A 及R7B 與其所連接的氮原子共同形成的該單環或雙環雜環基係視需要經多達四個選自下列之基團取代：鹵素、-CN、羥基、苯基、側氧基、-OR9 、-N(R9 )2 、-COOR9 、-C(O)N(R9 )2 、C1 -C4 烷基、=C(R8 )2 、C1 -C4 鹵烷基、C1 -C4 烷氧基、側氧基、C3 -C6 環烷基及包含多達兩個選自N、O及S之雜原子作為環成員之4-6員雜芳基或雜環基， 其中該C1 -C4 烷基、C3 -C6 環烷基、苯基及4-6員雜芳基或雜環基各自係視需要經多達三個獨立選自鹵素、-CN、羥基、側氧基、-OR10 、=N-OR10 、-N(R10 )2 、-COOR10 、-N(R10 )-C(O)-O-(C1 -C4 烷基)、-C(O)N(R10 )2 、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基及C1 -C4 烷氧基之基團取代； R8 在每次出現時係獨立地選自由H、鹵基、CN、C1 -C4 烷氧基、C1 -C4 鹵烷基及C1 -C4 烷基組成之群，其視需要經羥基或胺基取代； R9 及R10 各自獨立地選自H及C1 -C4 烷基，其視需要經多達三個選自鹵素、-OH、C1 -C4 烷氧基、CN、-NR12 R13 、-SO2 R及側氧基之基團取代； 或在相同氮上的兩個R9 或兩個R10 可共同形成4-6員雜環，該4-6員雜環視需要包含另一選自N、O及S之雜原子作為環成員且視需要經多達三個選自鹵素、-OH、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烷氧基、CN、-NR12 R13 及側氧基之基團取代； 各R11 獨立地為氫或C1 -C4 烷基，其視需要經一或兩個選自鹵素、-OH、C1 -C4 烷氧基、CN、-NH2 、-NH(C1 -C4 烷基)、-N(C1 -C4 烷基)2 、-SO2 (C1 -C4 烷基)及側氧基之基團取代； 各R12 及R13 獨立地為氫或C1 -C4 烷基，其視需要經一或兩個選自鹵素、-OH、C1 -C4 烷氧基、CN、-NH2 、-NH(C1 -C4 烷基)、-N(C1 -C4 烷基)2 、-SO2 (C1 -C4 烷基)及側氧基之基團取代； 或R12 及R13 與其二者所連接的氮原子共同形成4-至6-員雜環基，其視需要包含另一選自N、O及S之雜原子作為環成員且視需要經一至三個選自OH、鹵素、側氧基、=N-OR11 、視需要經一至三個鹵原子或NH2 取代之C1 -C6 烷基、視需要經一或多個OH或C1 -C6 烷氧基取代之C1 -C6 烷氧基及-C(O)O-C1 -C6 烷基之取代基取代； 或其醫藥上可接受之鹽。
本文實例之各化合物為本發明化合物之特定實施例。
2. 如實施例1之化合物，其中R3 為H或COOR2 。
3. 如實施例1或2之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其中R5 為H或鹵素。在某些該等實施例中，R5 為H。
4. 如前述實施例中任一項之化合物，其中R6 為H或F；或其醫藥上可接受之鹽。在某些該等實施例中，R6 為F。
5. 如前述實施例中任一項之化合物，其中各R1 係獨立地選自H及甲基；或其醫藥上可接受之鹽。
6. 如前述實施例中任一項之化合物，其中R3 為H；或其醫藥上可接受之鹽。
7. 如實施例1至5中任一項之化合物，其中R3 為-COOH；或其醫藥上可接受之鹽。
8. 如前述實施例中任一項之化合物，其中R4 為H；或其醫藥上可接受之鹽。
9. 如實施例1至7中任一項之化合物，其中R4 為–CH2 -N(R2 )2 ；或其醫藥上可接受之鹽。在某些該等實施例中，R4 為–CH2 NH2 。
10. 如前述實施例中任一項之化合物，其具有式(II)：(II)； 或其醫藥上可接受之鹽。
在某些該等實施例中，R1 為甲基。在某些該等實施例中，R6 為F。
11. 根據實施例10之化合物，其中R7A 為H；或其醫藥上可接受之鹽。
12. 根據實施例10之化合物，其中R7A 及R7B 與其所連接的氮原子共同形成視需要包含另一個選自N、O及S之雜原子作為環成員之4-至7-員單環雜環基， 或視需要包含另一個或兩個選自N、O及S之雜原子作為環成員之6-10員雙環雜環基， 其中由R7A 及R7B 與其所連接的氮原子共同形成的該單環或雙環雜環基係視需要經多達三個選自以下之基團取代：鹵素、-CN、羥基、苯基、側氧基、-OR9 、-N(R9 )2 、-COOR9 、-C(O)N(R9 )2 、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基、C1 -C4 烷氧基、側氧基、C3 -C6 環烷基及包含多達兩個選自N、O及S之雜原子作為環成員之4-6員雜芳基或雜環基， 其中該C1 -C4 烷基、C3 -C6 環烷基、苯基及4-6員雜芳基或雜環基各自係視需要經多達三個獨立選自鹵素、-CN、羥基、側氧基、-OR10 、=N-OR10 、-N(R10 )2 、-COOR10 、-C(O)N(R10 )2 、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基及C1 -C4 烷氧基之基團取代； 或其醫藥上可接受之鹽。
13. 根據實施例1之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其中該化合物具有式(IV)：(IV) 其中， R1 在每次出現時獨立地為氫或甲基； R3 為氫、鹵基、C1-2 烷基或C1-2 鹵烷基； R4 為H或–CH2 NH2 ； R5 為H、Me或鹵基； Rc 及Rf 係獨立地選自氫及鹵基，或Rc 及Rf 與其所連接的原子共同形成環丙基環； Rd 及Re 各自獨立地選自由H、–NH2 、-CH2 NH2 、-CH2 NHCH3 、OH、CH2 OH、、、、、、、及組成之群。
14. 根據實施例1之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其中： R3 為氫、C1-2 烷基、C1-2 鹵烷基、CN、–C(O)OH、C(O)-O-(C1 -C4 烷基)或–S(O)2 -(C1 -C4 烷基)； Z1 為O或CH2 ； Z3 為CHR1 ； 各R1 獨立地為H或甲基； Y係選自：、、、、、、、、、 、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、及。
15. 如實施例1之化合物，其為式(VI)化合物：(VI) 其中， R1 為H、甲基、CH2 F、CH2 OH或CH2 OMe； R3 為氫或–COOR2 ； R2 為H或C1 -C4 烷基； R4 為氫或–CH2 NH2 ； Z1 為O或CH2 ； R5 為氫、Me或鹵基；及 R7A 及R7B 與其所連接的氮原子共同形成視需要包含另一個選自N、O及S之雜原子作為環成員之5-至6-員單環雜環基或視需要包含另一個選自N、O及S之雜原子作為環成員之6-10員二環雜環基， 其中由R7A 及R7B 與其所連接的氮原子共同形成的該單環或雙環雜環基係視需要經多達四個選自以下之基團取代：鹵素、-CN、羥基、苯基、側氧基、-OR9 、-N(R9 )2 、-COOR9 、-C(O)N(R9 )2 、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基、C3 -C6 環烷基及包含多達兩個選自N、O及S之雜原子作為環成員之4-6員雜芳基或雜環基， 其中該C1 -C4 烷基、C3 -C6 環烷基、苯基及4-6員雜芳基或雜環基各自係視需要經多達三個獨立選自鹵素、-CN、羥基、側氧基、-OR10 、=N-OR10 、-N(R10 )2 、-COOR10 、-N(R10 )-C(O)-O-(C1 -C4 烷基)、-C(O)N(R10 )2 、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基及C1 -C4 烷氧基之基團取代； 或其醫藥上可接受之鹽。
16. 如實施例15之化合物，其中該以–NR7A R7B 表示之基團係選自：、、及； 或其醫藥上可接受之鹽。
17. 一種醫藥組合物，其包含： 根據實施例1至16中任一項之化合物及 醫藥上可接受之載劑、佐劑或媒劑。在某些該等實施例中，該化合物係選自本文中之實例。
18. 根據實施例7之醫藥組合物，其進一步包含具有抗菌活性之另一治療劑。
19. 一種用於治療具有細菌感染之個體之方法，其包括： 對有此需要的該個體投與抗菌有效量之根據實施例1至16中任一項之化合物。
20. 如實施例19之方法，其中該細菌感染係包括至少一種選自由下列組成之群之細菌之感染：綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa )及其他假單胞桿菌屬(Pseudomonas species)、嗜麥芽窄食單胞菌(Stenotrophomonas maltophilia )、洋蔥伯克氏菌(Burkholderia cepacia )及其他伯克氏菌屬(Burkholderia species)、鮑氏不動桿菌(Acinetobacter baumannii )及其他不動桿菌屬(Acinetobacter species)、木糖氧化無色桿菌(Achromobacter xylosoxidans )、反硝化產鹼桿菌(Alcaligenes denitrificans )及其他無色桿菌屬(Achromobacteraceae )、弗氏檸檬酸桿菌(Citrobacter freundii )及其他檸檬酸桿菌屬(Citrobacter species)、空腸彎曲桿菌(Campylobacter jejuni )、肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae )、產酸克雷伯氏菌(Klebsiella oxytoca )及其他克雷伯氏菌屬(Klebsiella species)、陰溝腸桿菌(Enterobacter cloacae )、產氣腸桿菌(Enterobacter aerogenes )及其他腸桿菌屬(Enterobacter species)、大腸桿菌(Escherichia coli )、腸沙門氏菌(Salmonella enterica )及其他沙門氏菌屬(Salmonella species)、鼠疫桿菌(Yersinia pestis )、普通變形桿菌(Proteus vulgaris )及其他變形桿菌屬(Proteus species)、黏質沙雷氏菌(Serratia marscens )及其他沙雷氏菌屬(Serratia species)、摩氏摩根氏菌(Morganella morganii )及腸桿菌家族之其他成員、腦膜炎雙球菌(Neisseria meningitidis )、流感嗜血桿菌(Haemophilus influenzae )、卡他莫拉氏菌(Moraxella cattharallis )、脆弱擬桿菌(Bacteroides fragilis )、多形擬桿菌(Bacteroides thetaiotaomicron )及其他擬桿菌屬、多殺性巴氏桿菌(Pasteurella multicoda )及其他巴氏桿菌屬、土拉弗蘭西斯菌(Fransicella tularensis )、痢疾志賀氏菌(Shigella dysenteriae )及其他志賀氏菌、霍亂弧菌(Vibrio cholera )及其他弧菌屬、百日咳博德氏菌(Bordetella pertussis )及其他博德氏菌屬、幽門螺桿菌(Helicobactor pylori )及其他螺桿菌屬、嗜肺性退伍軍人桿菌(Legionella pneumophila )及空腸彎曲桿菌(Campylobactor jejuni )、金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis )及其他葡萄球菌屬、糞腸球菌(Enterococcus faecalis )、屎腸球菌(Enterococcus faecium )及其他腸球菌屬、肺炎鏈球菌(Streptococcus pneumoniae )、化膿鏈球菌(Streptococcus pyogenes )、無乳鏈球菌(Streptococcus agalactiae )及其他鏈球菌屬、炭疽芽孢桿菌(Bacillus anthracis )及其他芽孢桿菌屬、大消化鏈球菌(Peptostreptococcus magnus )及其他消化鏈球菌屬、難養芽胞梭菌(Clostridium difficile )及其他芽胞梭菌屬、單核細胞增多性李斯特菌(Listeria monocytogenes )及其他李斯特菌屬、及白喉棒狀桿菌(Corynebacterium diptheriae )及其他棒狀桿菌屬。
可藉由下文一般合成途徑、更詳細述於實例部分中之特定實例合成如實施例中所定義之化合物。實例中之反應圖說明用於製備所選擇的本發明化合物之方法，及可適於使用標準方法及可取得的起始物質合成本發明之其他化合物。可使用下列一般方法。本發明進一步包括本發明方法之任何變化形式，其中可在其任何階段得到的中間物產物係用作起始物質並實施其餘步驟，或其中起始物質係於反應條件下原位形成，或其中該等反應組分係以其鹽或光學純的物質之形式使用。
在該文本範圍內，不是本發明化合物之特定所需最終產物的組分之容易可移除的基團指定為「保護基」，該術語為熟習此項技術者所熟知。保護基之特性係其可(例如)藉由溶劑分解、還原、光解或或者在生理條件下(例如，藉由酶裂解)輕易地移除(即，不用進行非所欲二次反應)。藉由此等保護基保護官能基、保護基本身及其裂解反應係相關技術中熟知且述於標準參考著作，諸如J. F. W. McOmie，「Protective Groups in Organic Chemistry」，Plenum Press，London及New York 1973，T. W. Greene及P. G. M. Wuts，「Protective Groups in Organic Synthesis」，第三版，Wiley，New York 1999，「The Peptides」；第3卷(編者：E. Gross及J. Meienhofer)，Academic Press，London及New York 1981，「Methoden der Organischen Chemie」(有機化學之方法)，Houben Weyl，第4版，第15/I卷，Georg Thieme Verlag，Stuttgart 1974，H.-D. Jakubke及H. Jeschkeit，「Aminosäuren, Peptide, Proteine」(胺基酸、肽、蛋白質)，Verlag Chemie，Weinheim，Deerfield Beach，及Basel 1982，及Jochen Lehmann，「Chemie der Kohlenhydrate: Monosaccharide und Derivate」(碳水化合物：單醣及衍生物之化學)，Georg Thieme Verlag，Stuttgart 1974中。
可依熟習此項技術者已知的方法製備具有至少一個成鹽基團之本發明化合物之鹽。例如，可(例如)藉由用金屬化合物(諸如適宜有機羧酸之鹼金屬鹽，例如2-乙基己酸之鈉鹽)，用有機鹼金屬或鹼土金屬化合物(諸如對應之氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽，諸如氫氧化鈉或氫氧化鉀、碳酸鈉或碳酸鉀或碳酸氫鈉或碳酸氫鉀)，用對應之鈣化合物或用氨或適宜有機胺處理該等化合物形成具有酸基之本發明化合物之鹽，較佳使用化學計量含量或僅少量過量的成鹽試劑。可依常用方法(例如)藉由用酸或適宜陰離子交換試劑處理化合物獲得本發明化合物之酸加成鹽。可(例如)藉由(例如用弱鹼)中和鹽(諸如酸加成鹽)至等電點或藉由用離子交換劑處理形成本發明化合物之含有酸及鹼成鹽基團(例如游離羧基及游離胺基)之內部鹽。
可依熟習此項技術者已知的方法將鹽轉化為游離化合物。可(例如)藉由用適宜之酸處理來轉化金屬及銨鹽，及(例如)藉由用適宜之鹼性試劑處理來轉化酸加成鹽。
可根據本發明獲得的異構體之混合物可依熟習此項技術者已知的方法分離為個別異構體；非對映異構體可(例如)藉由在多相溶劑混合物間分配、再結晶及/或色譜分離(例如在矽膠上)或藉由(例如)在逆相管柱上之中等壓力液相層析來分離，及外消旋體可(例如)藉由與光學上純的成鹽試劑形成鹽及例如藉助於分段結晶或藉由在光學活性管柱材料上之層析分離可如此獲得的非對映異構體之混合物來分離。
中間物及最終產物可依標準方法(例如使用層析法、分佈法、(再-)結晶及類似者)處理且/或純化。
一般而言，下列適用於前後文中所提及的任何製程。
可在在熟習此項技術者已知的反應條件(包括明確提及之其等條件)下，於不存在或通常於存在溶劑或稀釋劑(包括(例如)對所使用且溶解其等的試劑惰性之溶劑或稀釋劑)，於不存在或存在觸媒、縮合或中和試劑(例如離交換劑，諸如陽離子交換劑，例如呈H+形式，端視反應及/或反應物之性質而定)下，在減小、正常或提高的溫度下，例如在約-100℃至約190℃溫度範圍內(包括(例如)約-80℃至約150℃)，例如在-80至-60℃、室溫、-20至40℃或回流溫度，在大氣壓下或在密閉容器中，在適當的情況下在壓力下，及/或在惰性氣氛中，例如在氬氣或氮氣氣氛下實施所有上述製程步驟。
在反應之所有階段，所形成的異構體之混合物可分離為個別異構體，例如非對映異構體或對映異構體，或分離為異構體之任何所需混合物，例如外消旋體或非對映異構體之混合物(例如類似於「另外製程步驟」下方所述之方法)。
可選自適於任何特定反應之其等溶劑的溶劑包括具體提及的其等溶劑或(例如)水、酯(諸如低碳數烷醇酸低碳數烷酯，例如乙酸乙酯)、醚(諸如脂族醚，例如乙醚)或環醚(例如四氫呋喃或二噁烷)、液態芳族烴(諸如苯或甲苯)、醇(諸如甲醇、乙醇或1-或2-丙醇)、腈(諸如乙腈)、鹵化烴(諸如二氯甲烷或氯仿)、醯胺(諸如二甲基甲醯胺或二甲基乙醯胺)、鹼(諸如雜環氮鹼，例如吡啶或N-甲基吡咯啶-2-酮)、羧酸酐(諸如低碳數烷酸酐，例如乙酸酐)、環狀、直鏈或分支鏈烴(諸如環己烷、己烷或異戊烷)、甲基環己烷或該等溶劑之混合物(例如水溶液)，除非在製程之描述中另有指示。該等溶劑混合物亦可用於例如藉由層析或分配之處理。
本發明之化合物(包括其鹽)亦可以水合物形式獲得，或其晶體可(例如)包括用於結晶之溶劑。可存在不同晶型。
本發明亦關於製程之其等形式，其中可在製程之任何階段作為中間物獲得的化合物用作起始物質且實施其餘製程步驟，或其中起始物質係在反應條件下形成或以衍生物形式(例如以受保護形式或以鹽形式)使用，或可藉由根據本發明之方法獲得的化合物係在製程條件下製備且在原位經進一步處理。
用於合成本發明化合物的所有起始物質、建構嵌段、試劑、酸、鹼、脫水劑、溶劑及觸媒為可商購獲得或可藉由熟習此項技術者已知的有機合成方法(Houben-Weyl 第4版1952，Methods of Organic Synthesis，Thieme，第21卷)製得。
術語「光學異構體」或「立體異構體」係指針對本發明之既定化合物可存在的各種立體異構構型中之任一者且包括幾何異構體。應明瞭，取代基可在碳原子對掌性中心之處連接。術語「對掌性」係指與其鏡像配對物非重合之分子，而術語「非對掌性」係指與其鏡像配對物重合之分子。因此，本發明包括化合物之對映異構體、非對映異構體或外消旋異構體。「對映異構體」為一對互為非重合鏡像之立體異構體。一對對映異構體之1:1混合物為「外消旋」混合物。該術語係用於適當情況下指定外消旋混合物。「非對映異構體」為具有至少兩個非對稱原子之立體異構體，但其等不互為鏡像。根據Cahn-lngold-Prelog R-S系統指定絕對立體化學結構。當化合物係純對映異構體時，可藉由R 或S 指定各對掌性碳的立體化學。絕對構型未知的解析化合物係可指定為(+)或(-)，端視其在鈉D線的波長下旋轉平面偏極光的方向(右旋或左旋)而定。文中所述之某些化合物包含一或多個非對稱中心或軸且因此可產生對映異構體、非對映異構體及可按照絕對立體化學定義為(R )-或(S )-的其他立體異構形式。
根據初始材料及程序之選擇，該等化合物可以可能異構體中之一種形式或呈其混合物(例如呈純光學異構體或呈異構體混合物(例如外消旋體及非對映異構體混合物))的形式存在，端視非對稱碳原子數目而定。本發明意欲包括所有該等可能立體異構體，包括外消旋混合物、非對映異構混合物及光學上純形式。光學活性(R )-及(S )-異構體可使用對掌性合成子或對掌性試劑來製備或使用習知技術來解析。若該化合物包含雙鍵，則該取代基可係E或Z構型。若該化合物包含經二取代之環烷基，則該環烷基取代基可具有順式-或反式構型。亦意欲包括所有互變異構形式。
可根據該等成分之物理化學差異，(例如)藉由層析及/或分步結晶將異構體之任何所得混合物分離成純或實質上純幾何或光學異構體、非對映異構體、外消旋體。
可藉由已知方法(例如，藉由使其非對映異構鹽(利用光學活性酸或鹼，並釋離該光學活性酸性或鹼性化合物獲得)分離)，將最終產物或中間物之任何所得外消旋體解析成光學鏡像異構體。特定言之，因此可使用鹼性基團將本發明化合物解析成其光學鏡像異構體，例如藉由分步結晶與光學活性酸(例如酒石酸、二苯甲醯酒石酸、二乙醯酒石酸、二-O,O'-對甲苯醯酒石酸、杏仁酸、蘋果酸或樟腦-10-磺酸)所形成的鹽。亦可使用對掌性吸附劑藉由對掌性層析(例如高壓液相層析(HPLC))解析外消旋產物。
另外，本發明化合物(包括其鹽)亦可以其水合物的形式來獲得或包括用於其結晶之其他溶劑。本發明化合物可固有地或藉由設計與醫藥上可接受之溶劑(包括水)形成溶劑化物；因此，本發明意欲包括溶劑化及非溶劑化形式。術語「溶劑化物」係指本發明化合物(包括其醫藥上可接受之鹽)與一或多種溶劑分子之分子複合體。此類溶劑分子係彼等醫藥技術中常用且已知對接受者無害者，例如水、乙醇及類似者。術語「水合物」係指其中溶解分子係水的複合體。
本發明化合物(包括其鹽、水合物及溶劑化物)可固有地或藉由設計形成多形體。
如本文中所使用，術語「鹽」係指本發明化合物之酸加成鹽或鹼加成鹽。「鹽」包括(特定言之)「醫藥上可接受之鹽」。術語「醫藥上可接受之鹽」係指保留本發明化合物之生物有效性及性質且通常在生物學上或其他方面係理想的鹽。在諸多情況下，本發明化合物可藉由存在的胺基及/或羧基或與其類似的基團形成酸式鹽及/或鹼式鹽。
可與無機酸及有機酸形成醫藥上可接受之酸加成鹽，例如乙酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、溴化物/氫溴化物、碳酸氫鹽/碳酸鹽、硫酸氫鹽/硫酸鹽、樟腦磺酸鹽、氯化物/氫氯化物、氯茶鹼鹽、檸檬酸鹽、乙烷二磺酸鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡萄糖酸鹽、尿甘酸鹽、馬尿酸鹽、氫碘化物/碘化物、羥乙磺酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、月桂硫酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、杏仁酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、萘酸鹽、萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、十八酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、磷酸鹽/磷酸氫鹽/磷酸二氫鹽、聚半乳糖醛酸鹽、丙酸鹽、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、磺基水楊酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽及三氟乙酸鹽。
可衍生鹽之無機酸包括(例如)鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸及類似者。
可衍生鹽之有機酸包括(例如)乙酸、丙酸、乙醇酸、草酸、馬來酸、丙二酸、琥珀酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、杏仁酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、磺基水楊酸及類似者。可與無機及有機鹼形成醫藥上可接受之鹼加成鹽。
可衍生鹽之無機鹼包括(例如)銨鹽及週期表之第I至XII列的金屬。在某些實施例中，該等鹽係衍生自鈉、鉀、銨、鈣、鎂、鐵、銀、鋅及銅；特別適宜的鹽包括銨鹽、鉀鹽、鈉鹽、鈣鹽及鎂鹽。
可衍生鹽之有機鹼包括(例如)一級胺、二級胺及三級胺、經取代之胺(包括天然經取代之胺)、環狀胺、鹼離子交換樹脂及類似者。某些有機胺包括異丙胺、苄星、膽鹼鹽(cholinate)、二乙醇胺、二乙胺、離胺酸、葡甲胺、哌嗪及緩血三胺。
可藉由習知化學方法自鹼性或酸性部分合成本發明之醫藥上可接受之鹽。通常，可藉由使此等化合物之游離酸形式與化學計量量的適當鹼(例如Na、Ca、Mg或K之氫氧化物、碳酸鹽、碳酸氫鹽或類似者)反應或藉由使此等化合物之游離鹼形式與化學計量量的適當酸反應來製備該等鹽。該等反應通常係於水中或有機溶劑中或兩者之混合物中進行。通常，若可行，則希望使用非水性介質，例如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈。其他適宜鹽之清單可見(例如)於「Remington's Pharmaceutical Sciences」，第20版，Mack Publishing Company，Easton, Pa.，(1985)及Stahl及Wermuth之「Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use」(Wiley-VCH，Weinheim, Germany，2002)中。
本文中所提供的任何化學式亦意欲表示本發明化合物之未標記形式及同位素標記形式。同位素標記化合物具有以本文中所提供的式描繪的結構，其中該結構之一或多個原子係富含或表示具有選定原子質量或質量數的同位素。可併入本發明化合物中之同位素之實例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟及氯之同位素，例如分別為2 H、3 H、11 C、13 C、14 C、15 N、18 F、31 P、32 P、35 S、36 Cl、125 I。本發明包括本發明之各種同位素標記化合物，例如彼等併入放射性同位素(例如3 H及14 C)者或彼等併入非放射性同位素(例如2 H及13 C)者。該等同位素標記化合物係用於代謝研究(利用14 C)、反應動力學研究(利用例如2 H或3 H)、偵測或成像技術(例如正子發射斷層攝影術(PET)或單光子發射電腦斷層攝影術(SPECT) (包括藥物或受質組織分佈分析))或放射性治療患者。特定言之，本發明之18 F標記化合物可係特別適用於PET或SPECT研究。通常，可藉由熟習此項技術者已知的習知技術或藉由與彼等隨附實例及製法中所述者類似的方法，使用適當同位素標記反應試劑代替先前使用的非標記反應試劑來製備本發明之同位素標記化合物。
另外，經較重同位素(特定言之氘(即2 H或D))之取代可提供源自更佳代謝安定性的一些治療優點，例如活體內半衰期增加或劑量要求降低或治療指數提高。應明瞭本文中之氘係視作本發明化合物之取代基。該較重同位素(明確言之氘)之濃度可由同位素濃化係數所定義。如文中所使用，術語「同位素濃化係數」意指具體同位素之同位素豐度與天然豐度之比例。若氘表示本發明化合物中之取代基，則該化合物之各標示氘原子具有至少3500 (各標示氘原子具有52.5%氘併入)、至少4000 (60%氘併入)、至少4500 (67.5%氘併入)、至少5000 (75%氘併入)、至少5500 (82.5%氘併入)、至少6000 (90%氘併入)、至少6333.3 (95%氘併入)、至少6466.7 (97%氘併入)、至少6600 (99%氘併入)或至少6633.3 (99.5%氘併入)的同位素濃化係數。
本發明之醫藥上可接受之溶劑化物包括彼等其中結晶溶劑可經同位素取代者，例如D2 O、d6 -丙酮、d6 -DMSO。
本發明之包含能夠充當氫鍵之供體及/或受體之基團之化合物能夠與適宜共晶體形成劑形成共晶體。可自本發明化合物藉由已知的共晶體形成程序製備該等共晶體。此等程序包括研磨、加熱、共昇華、共熔融或在溶液中使本發明之化合物與共晶體形成劑於結晶條件下接觸並單離由此形成的共晶體。適宜之共晶體形成劑包括WO 2004/078163中所述之彼等。因此，本發明進一步提供包含本發明化合物之共晶體。
除非於本文中另外指明或者前後文明顯相衝突，否則述於本文中之所有方法可以任何適宜順序進行。本文中所提供的任何及所有實例或示例性語言(例如，「諸如」)的使用係僅意欲更充分地闡述本發明且不限制原本主張之本發明之範圍。
在另一個態樣中，本發明提供一種包含本發明化合物及醫藥上可接受之載劑之醫藥組合物。可針對特定投與途徑(例如經口投與、非經腸投與及直腸投與等)調配該醫藥組合物。另外，可將本發明醫藥組合物製成固體形式(包括但不限於膠囊、錠劑、丸劑、粒劑、粉劑或栓劑)或液體形式(包括但不限於溶液、懸浮液或乳液)。該等醫藥組合物可經歷習知醫藥操作(例如滅菌作用)及/或可包含習知惰性稀釋劑、潤滑劑或緩衝劑及佐劑(例如防腐劑、安定劑、潤濕劑、乳化劑及緩衝劑等)。
通常，該等醫藥組合物係錠劑或明膠膠囊，其包含該活性成分連同下列成分： a)稀釋劑，例如乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露醇、山梨糖醇、纖維素及/或甘胺酸； b)潤滑劑，例如矽石、滑石、硬脂酸、其鎂鹽或鈣鹽及/或聚乙二醇；對錠劑而言，亦包含： c)黏合劑，例如矽酸鎂鋁、澱粉糊、明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉及/或聚乙烯吡咯啶酮；若需要： d)崩解劑，例如澱粉、瓊脂、海藻酸或其鈉鹽或發泡混合物；及/或 e)吸附劑、著色劑、調味劑及甜味劑。
可根據此項技術中之已知方法薄膜包覆或腸衣包覆該錠劑。
適用於經口投與之組合物包括有效量的呈錠劑、含片、水性或油性懸浮液、可分散性粉劑或粒劑、乳液、硬或軟膠囊或糖漿或酏劑形式的本發明化合物。可根據用於製造醫藥組合物技術中已知的任何方法製備欲口服用組合物且該等組合物可包含選自由甜味劑、調味劑、著色劑及防腐劑組成之群之一或多種試劑以提供醫藥上美觀可口的製劑。錠劑可包含活性成分與適用於製造錠劑之非毒性醫藥上可接受之賦形劑之混合物。此等賦形劑係(例如)惰性稀釋劑，例如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉；成粒劑及崩解劑，例如玉米澱粉或海藻酸；黏合劑，例如澱粉、明膠或阿拉伯樹膠；及潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石。該等錠劑係未經包覆或經已知技術包覆以延遲在胃腸道中的崩解及吸收並由此提供較長時間的持續作用。例如，可使用延時材料，例如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。可作為其中使活性成分與惰性固體稀釋劑(例如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土)混合的硬明膠膠囊或其中使活性成分與水或油介質(諸如花生油、液體石蠟或橄欖油)混合的軟明膠膠囊來呈現口服用調配物。
某些可注射組合物係水性等滲溶液或懸浮液，且自脂肪性乳液或懸浮液有利於製備栓劑。該等組合物可經滅菌及/或包含佐劑，諸如防腐劑、安定劑、潤濕劑或乳化劑、溶液促進劑、用於調節滲透壓的鹽及/或緩衝劑。另外，其等亦可包含其他具治療價值的物質。可根據習知混合、製粒或塗覆方法製備該等組合物，且其分別包含約0.1-75%或包含約1-50%的活性成分。
適用於經皮施用之組合物包括有效量的本發明化合物及適宜載劑。適用於經皮遞送之載劑包括能協助透過主體皮膚之可吸收藥理上可接受之溶劑。例如，經皮裝置係呈繃帶形式，其包括襯底構件、包含該化合物及視需要之載劑之儲集器、在延長時間段內以可控且預定速率將該化合物遞送至主體皮膚之可選控速屏障以及使該裝置固定至皮膚之構件。
適用於局部施用(例如施用至皮膚及眼睛)的組合物包括水溶液、懸浮液、軟膏、乳膏、凝膠或可噴灑調配物，例如經氣溶膠或類似者遞送。該等局部遞送系統將(特定言之)適合皮膚施用(例如，用於治療皮膚癌，例如，於防曬霜、洗劑、噴霧劑及類似者中之預防用途)。因此，其等特別適用於局部用途，包括此項技術中熟知的化妝品、調配物。其等可包含增溶劑、安定劑、滲透增強劑、緩衝劑及防腐劑。
如文中所使用，局部施用亦可關於吸入或鼻內施用。其等可在使用或不使用適宜推進劑的情況下自乾粉吸入器以乾粉形式(單獨或呈混合物形式，例如與乳糖之乾摻合物或混合的組分顆粒(例如與磷脂))或自加壓式容器、泵、噴霧器、霧化器以氣溶膠噴霧形式便利地遞送。
本發明另外提供包含本發明化合物作為活性成分之無水醫藥組合物及劑型，因為水可促進特定化合物之降解。
可使用無水或低水分含量成分及低水分或低濕度條件來製備本發明之無水醫藥組合物及劑型。可製備及儲存無水醫藥組合物使得保持無水性質。因此，使用已知用於防止曝露至水的材料封裝無水組合物以使其可包括在適宜處方套組中。適宜封裝之實例包括(但不限於)密封箔、塑膠、單位劑量容器(例如小瓶)、泡殼包裝及條帶包裝。
本發明另外提供醫藥組合物及劑型，其包含降低作為活性成分之本發明化合物之分解速率之一或多種試劑。該等試劑(文中稱作「安定劑」)包括(但不限於)抗氧化劑(例如抗壞血酸)、pH緩衝劑或鹽緩衝劑等。
本發明之化合物可與一或多種其他治療劑同時、或在該治療劑之前或之後投與。本發明之化合物可與其他藥劑分開地、藉由相同或不同投藥途徑、或呈相同醫藥組合物一起投與。
在一個實施例中，本發明提供一種產品，其包含呈適合在療法中同時、分開或依序使用之組合製劑之根據式(I)至(V)中任一式之化合物或其醫藥上可接受之鹽及至少一種其他治療劑。在一個實施例中，療法係預防或治療由旋轉酶活性介導之疾病或病症。呈組合製劑提供的產品包括包含在相同醫藥組合物中一起之根據式(I)至(V)中任一式之化合物或其醫藥上可接受之鹽及其他治療劑、或呈分開形式之根據式(I)至(V)中任一式之化合物或其醫藥上可接受之鹽及其他治療劑之組合物(例如，呈套組形式)。
在一個實施例中，本發明提供一種包含根據式(I)至(V)中任一式之化合物或其醫藥上可接受之鹽及另一治療劑之醫藥組合物。視需要，該醫藥組合物可包含醫藥上可接受之賦形劑(如上文所述)。
在一個實施例中，本發明提供一種包括兩種或更多種獨立醫藥組合物(其中至少一者包含根據式(I)至(V)中任一式之化合物或其醫藥上可接受之鹽)之套組。在一個實施例中，該套組包括用於分開保存該等組合物之裝置，諸如容器、分隔瓶(divided bottle)或分隔箔包裝(divided foil packet)。此種套組之一個實例係常用於錠劑、膠囊及類似者之包裝之泡殼包裝。
本發明之套組可用於投與不同劑型(例如，經口及非經腸)，用於在不同的劑量間隔下投與獨立組合物，或用於彼此滴定獨立組合物。為增進順服性，本發明之套組通常包括投藥指示。
在本發明之組合療法中，可由相同或不同製造商製造及/或調配本發明之化合物及其他治療劑。此外，本發明之化合物及其他治療劑可在以下時間一起帶至組合療法中：(i)在發放組合產品至醫師(例如就包含本發明化合物及其他治療劑之套組而言)之前；(ii)由醫師自身(或在醫師指導下)在投藥前不久；(iii)在患者自身中，例如在依序投與本發明化合物及其他治療劑期間。
因此，本發明提供一種式(I)至(V)之化合物於預防及/或治療由旋轉酶活性介導之疾病或病症之用途，其中製備該藥物以與另一治療劑投與。本發明亦提供一種另一治療劑於預防及/或治療由旋轉酶活性介導之疾病或病症之用途，其中該藥物係與根據式(I)至(V)中任一式之化合物或其醫藥上可接受之鹽一起投與。
本發明亦提供用於預防及/或治療由旋轉酶活性介導之疾病或病症之方法中之式(I)至(V)之化合物，其中製備該根據式(I)至(V)中任一式之化合物或其醫藥上可接受之鹽以與另一治療劑一起投與。本發明亦提供用於預防及/或治療由旋轉酶活性介導之疾病或病症之方法中之另一治療劑，其中製備該其他治療劑以與根據式(I)至(V)中任一式之化合物或其醫藥上可接受之鹽一起投與。本發明亦提供用於預防及/或治療由旋轉酶活性介導之疾病或病症之方法中之根據式(I)至(V)中任一式之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其中製備該根據式(I)至(V)中任一式之化合物或其醫藥上可接受之鹽以與其他治療劑一起投與。本發明亦提供用於預防及/或治療由旋轉酶活性介導之疾病或病症之方法中之另一治療劑，其中該其他治療劑係與根據式(I)至(V)中任一式之化合物或其醫藥上可接受之鹽一起投與。
本文中所述之化合物及組合物可組合一或多種充當免疫調節劑之治療劑(例如，共刺激分子之活化劑或免疫抑制分子之抑制劑或疫苗)使用或投與。程式化死亡1 (PD-1)蛋白為T細胞調節子之延伸CD28/CTLA4家族中的一個抑制成員(Okazaki等人(2002)Curr Opin Immunol 14: 391779-82；Bennett等人(2003)J. Immunol. 170: 711-8)。PD-1係表現於經活化之B細胞、T細胞及單核細胞上。PD-1為負面調節TCR信號之免疫抑制蛋白(Ishida, Y.等人(1992)EMBO J. 11: 3887-3895；Blank, C.等人(Epub 2006年12月29日)Immunol. Immunother. 56(5): 739-745)，且在慢性感染中上調。PD-1與PD-L1間之相互作用可充當免疫檢查點，此可導致(例如)浸潤淋巴細胞之減少、T-細胞受體介導之增殖之減少及/或由癌細胞或受感染細胞引起之免疫逃避(Dong等人(2003)J. Mol. Med. 81: 281-7；Blank等人(2005)Cancer Immunol. Immunother. 54: 307-314；Konishi等人(2004)Clin. Cancer Res. 10 : 5094-100)。免疫抑制可藉由抑制PD-1與PD-L1或PD-L2局部相互作用逆轉；該效應當在PD-1與PD-L2相互作用亦受阻斷時累加(Iwai等人(2002)Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA 99: 12293-7；Brown等人(2003)J. Immunol. 170: 1257-66)。可藉由結合至免疫抑制蛋白(例如，PD-1)或結合至調節抑制蛋白之結合蛋白(例如，PD-L1、PD-L2)達成免疫調節。
在一個實施例中，本發明之組合療法包括免疫調節劑，其為免疫檢查點分子之抑制分子之抑制劑或拮抗劑。在另一個實施例中，該免疫調節劑結合至自然地抑制免疫抑制檢查點分子之蛋白質。當組合抗菌化合物使用時，該等免疫調節劑可增強抗微生物反應，及因此增強相對於僅用抗菌化合物之治療之功效。
術語「免疫檢查點」係指在CD4及CD8 T細胞之細胞表面上的一群細胞。此等分子可有效地充當「制動器(brake)」來下調或抑制適應性免疫反應。免疫檢查點分子包括(但不限於)直接抑制免疫細胞之程式化死亡1(PD-1)、細胞毒性T-淋巴細胞抗原4 (CTLA-4)、B7H1、B7H4、OX-40、CD137、CD40及LAG3。可充當可用於本發明方法中之免疫檢查點抑制劑之免疫治療劑包括(但不限於) PD-L1、PD-L2、CTLA4、TIM3、LAG3、VISTA、BTLA、TIGIT、LAIR1、CD160、2B4及/或TGFR β之抑制劑。抑制分子之抑制可藉由在DNA、RNA或蛋白質層級下抑制進行。在一些實施例中，抑制核酸(例如，dsRNA、siRNA或shRNA)可用於抑制抑制分子之表現。在其他實施例中，抑制信號之抑制劑為多肽，例如，結合至抑制分子之可溶性配位體或抗體或其抗原結合片段。
「與...組合」旨在暗示該療法或治療劑必須在相同時間投與且/或調配以用於共同遞送，然而，此等遞送方法落在本文中所述之範疇內。該免疫調節劑可與本發明之一或多種化合物及視需要一或多種其他療法或治療劑同時、之前或之後投與。組合中之該等治療劑可以任何順序投與。在一些實施例中，用於組合中之濃度低於個別地使用之其等濃度。
在某些實施例中，本文中所述之抗菌化合物(例如，如本文中所述之式(I)至(V)之化合物，包括實施例1至17之其等化合物)係組合一或多種為PD-1、PD-L1及/或PD-L2之抑制劑之免疫調節劑投與。此每一抑制劑可係抗體、其抗原結合片段、免疫黏附素、融合蛋白或低聚肽。相關技術中已知此免疫調節劑之實例。
在一些實施例中，該免疫調節劑為選自MDX-1106、Merck 3475或CT- 011之抗-PD-1抗體。
在一些實施例中，該免疫調節劑為免疫黏附素(例如，包含稠合至恆定區(例如免疫球蛋白序列之Fc區)之PD-Ll或PD-L2之胞外或PD-1結合部分之免疫黏附素)。
在一些實施例中，該免疫調節劑為PD-1抑制劑，諸如AMP-224。
在一些實施例中，該免疫調節劑為PD-Ll抑制劑，諸如抗-PD-Ll抗體。
在一些實施例中，該免疫調節劑為選自YW243.55.S70、MPDL3280A、MEDI-4736、MSB-0010718C或MDX-1105之抗-PD-Ll結合拮抗劑。MDX-1105 (亦稱為BMS-936559)為述於WO2007/005874中之抗-PD-Ll抗體。抗體YW243.55.S70為述於WO 2010/077634中之抗-PD-Ll。
在一些實施例中，該免疫調節劑為納武單抗(nivolumab) (CAS登錄號：946414-94-4)。納武單抗之替代名稱包括MDX-1106、MDX-1106-04、ONO-4538或BMS-936558。納武單抗為特異性阻斷PD-1之全人類IgG4單株抗體。納武單抗(純系5C4)及特異性結合至PD-1之其他人類單株抗體揭示於US 8,008,449、EP2161336及WO2006/121168中。
在一些實施例中，該免疫調節劑為抗-PD-1抗體帕姆單抗(Pembrolizumab)。帕姆單抗(亦稱為蘭勃利單抗(Lambrolizumab)、MK-3475、MK03475、SCH-900475或KEYTRUDA®；Merck)為結合至PD-1之人類化IgG4單株抗體。帕姆單抗及其他人類化抗-PD-1抗體揭示於Hamid, O.等人(2013)New England Journal of Medicine 369 (2): 134-44、US 8,354,509、WO2009/114335及WO2013/079174中。
在一些實施例中，該免疫調節劑為彼地利單抗(Pidilizumab) (CT-011；Cure Tech)，即結合至PD1之人類化IgG1k單株抗體。彼地利單抗及其他人類化抗-PD-1單株抗體揭示於WO2009/101611中。
適用作用於本文中所揭示方法中之免疫調節劑之其他抗-PD1抗體包括AMP 514 (Amplimmune)及揭示於US 8,609,089、US 2010028330及/或US 20120114649中之抗-PD1抗體。在一些實施例中，抗-PD-L1抗體為MSB0010718C。MSB0010718C (亦稱為A09-246-2；Merck Serono)為結合至PD-L1之單株抗體。
在一些實施例中，該免疫調節劑為MDPL3280A (Genentech/Roche)，即結合至PD-L1之人類Fc最佳化IgG1單株抗體。MDPL3280A及結合至PD-L1之其他人類單株抗體揭示於美國專利第7,943,743號及美國公開案第20120039906號中。適用作用於本發明方法之免疫調節劑之其他抗-PD-L1結合劑包括YW243.55.S70 (參見WO2010/077634)、MDX-1105 (亦稱為BMS-936559)及揭示於WO2007/005874中之抗-PD-L1結合劑。
在一些實施例中，該免疫調節劑為AMP-224 (B7-DCIg；Amplimmune；例如，揭示於WO2010/027827及WO2011/066342中)，為阻斷PD1與B7-H1間相互作用之PD-L2 Fc融合可溶性受體。
在一些實施例中，該免疫調節劑為抗-LAG-3抗體，諸如BMS-986016。BMS-986016 (亦稱為BMS986016)為結合至LAG-3之單株抗體。BMS-986016及其他人類化抗-LAG-3抗體揭示於US 2011/0150892、WO2010/019570及WO2014/008218中。
在某些實施例中，本文中所揭示的組合療法包括共刺激分子或抑制分子之調節劑(例如共抑制配位體或受體)。在一個實施例中，共刺激分子之共刺激調節劑(例如促效劑)係選自OX40、CD2、CD27、CDS、ICAM-1、LFA-1 (CD11a/CD18)、ICOS (CD278)、4-1BB (CD137)、GITR、CD30、CD40、BAFFR、HVEM、CD7、LIGHT、NKG2C、SLAMF7、NKp80、CD160、B7-H3或CD83配位體之促效劑(例如，促效抗體或其抗原結合片段、或可溶融合)。
在另一個實施例中，本文中所揭示的組合療法包括為共刺激分子之免疫調節劑，例如，與包含CD28、CD27、ICOS及/或GITR之共刺激結構域之正信號相關聯之促效劑。
例示性GITR促效劑包括(例如) GITR融合蛋白及抗-GITR抗體(例如，二價抗-GITR抗體)，諸如，述於美國專利號：6,111,090、歐洲專利號：090505B1、美國專利號：8,586,023、PCT公開案號：WO 2010/003118及2011/090754中之GITR融合蛋白、或述於例如美國專利號：7,025,962、歐洲專利號：1947183B1、美國專利號：7,812,135、美國專利號：8,388,967、美國專利號：8,591,886、歐洲專利號：EP 1866339、PCT公開案號：WO 2011/028683、PCT公開案號：WO 2013/039954、PCT公開案號：WO2005/007190、PCT公開案號：WO 2007/133822、PCT公開案號：WO2005/055808、PCT公開案號：WO 99/40196、PCT公開案號：WO 2001/03720、PCT公開案號：WO99/20758、PCT公開案號：WO2006/083289、PCT公開案號：WO 2005/115451、美國專利號：7,618,632及PCT公開案號：WO 2011/051726中之抗-GITR抗體。
在一個實施例中，所使用的免疫調節劑為可溶性配位體(例如CTLA-4-Ig)、或結合至PD-L1、PD-L2或CTLA4之抗體或抗體片段。例如，抗-PD-1抗體分子可(例如)組合抗-CTLA-4抗體(例如易普利單抗(ipilimumab))投與。例示性抗-CTLA4抗體包括曲美目單抗(Tremelimumab) (可自Pfizer獲得的IgG2單株抗體，原名為替西木單抗(ticilimumab)，CP-675,206)；及易普利單抗(CTLA-4抗體，亦稱為MDX-010，CAS號477202-00-9)。
在一個實施例中，抗-PD-1抗體分子係在用如本文中所述之本發明化合物治療後投與。
在另一個實施例中，抗-PD-1或PD-L1抗體分子係組合抗-LAG-3抗體或其抗原結合片段投與。在另一個實施例中，抗-PD-1或PD-L1抗體分子係組合抗-TIM-3抗體或其抗原結合片段投與。又於其他實施例中，抗-PD-1或PD-L1抗體分子係組合抗-LAG-3抗體及抗-TIM-3抗體或其抗原結合片段投與。本文中所列舉抗體之組合可分開地(例如，呈獨立抗體)或聯結(例如，呈雙特異性或三特異性抗體分子)投與。在一個實施例中，投與包含抗-PD-1或PD-L1抗體分子及抗-TIM-3或抗-LAG-3分子、或其抗原結合片段之雙特異性抗體。在某些實施例中，本文中所列舉抗體之組合係用於治療如本文中所述之癌症(例如，實體腫瘤)。可在相關技術中已知的動物模型中測試前述組合之功效。例如，測試抗-PD-1及抗-LAG-3之協同效應之動物模型述於例如Woo等人(2012)Cancer Res. 72(4): 917-27)中。
可用於組合療法中之例示性免疫調節劑包括(但不限於)例如阿夫土珠單抗(afutuzumab) (可自Roche®獲得)；乙二醇化非格司亭(pegfilgrastim) (Neulasta®)；來那度胺(lenalidomide) (CC-5013，Revlimid®)；撒利多胺(thalidomide) (Thalomid®)、泊利度胺(actimid) (CC4047)；及細胞介素，例如，IL-21或IRX-2(人類細胞介素之混合物，包括介白素1、介白素2及干擾素γ (CAS 951209-71-5，可自IRX Therapeutics獲得))。
可組合本發明抗菌化合物使用的此等免疫調節劑之例示性劑量包括抗-PD-1抗體分子之約1至10 mg/kg (例如3 mg/kg)之劑量及抗-CTLA-4抗體(例如易普利單抗)之約3 mg/kg之劑量。
本發明抗菌化合物組合免疫調節劑使用之方法之實施例之實例包括此等：
i. 一種治療個體之細菌感染之方法，其包括對該個體投與式(I)化合物(包括如本文中所述之實施例1至17中之任一者)及免疫調節劑。
ii.如實施例i之方法，其中該免疫調節劑為共刺激分子之活化劑或免疫檢查點分子之抑制劑。
iii.如實施例i及ii中任一實施例之方法，其中該共刺激分子之活化劑為OX40、CD2、CD27、CDS、ICAM-1、LFA-1(CD11a/CD18)、ICOS(CD278)、4-1BB (CD137)、GITR、CD30、CD40、BAFFR、HVEM、CD7、LIGHT、NKG2C、SLAMF7、NKp80、CD160、B7-H3及CD83配位體中一或多者之促效劑。
iv.上述實施例i至iii中任一項之方法，其中該免疫檢查點分子之抑制劑係選自PD-1、PD-L1、PD-L2、CTLA4、TIM3、LAG3、VISTA、BTLA、TIGIT、LAIR1、CD160、2B4及TGFR β。
v. 如實施例i至iii中任一項之方法，其中該免疫檢查點分子之抑制劑係選自PD-1、PD-L1、LAG-3、TIM-3或CTLA4之抑制劑或其任何組合。
vi.如實施例i至v中任一項之方法，其中該免疫檢查點分子之抑制劑為結合至免疫檢查點分子之可溶性配位體或抗體或其抗原結合片段。
vii.如實施例i至vi中任一項之方法，其中該抗體或其抗原結合片段係來自IgG1或IgG4 (例如，人類IgG1或IgG4)。
viii.如實施例i至vii中任一項之方法，其中該抗體或其抗原結合片段係經改變(例如，突變)以增加或減少下列中之一或多者：Fc受體結合、抗體醣化、半胱胺酸殘基數、效應子細胞功能或補體功能。
ix.如實施例i至viii中任一項之方法，其中該抗體分子為對PD-1或PD-L1具有第一結合特異性及對TIM-3、LAG-3或PD-L2具有第二結合特異性之雙特異性或多特異性抗體分子。
x.如實施例i至ix中任一項之方法，其中該免疫調節劑為選自納武單抗、帕姆單抗或彼地利單抗之抗-PD-1抗體。
xi.如實施例i至x中任一項之方法，其中該免疫調節劑為選自YW243.55.S70、MPDL3280A、MEDI-4736、MSB-0010718C或MDX-1105之抗-PD-L1抗體。
xii.如實施例i至x中任一項之方法，其中該免疫調節劑為抗-LAG-3抗體分子。
xiii.如實施例xii之方法，其中該抗-LAG-3抗體分子為BMS-986016。
xiv.如實施例i至x中任一項之方法，其中該免疫調節劑為藉由注射(例如，皮下或靜脈內)例如每週一次或每2週、每3週或每4週一次以約1至30 mg/kg，例如，約5至25 mg/kg、約10至20 mg/kg、約1至5 mg/kg或約3 mg/kg之劑量投與的抗-PD-1抗體分子。
xv.如實施例xiv之方法，其中該抗-PD-1抗體分子係每隔一週以約10至20 mg/kg之劑量投與。
xvi.如實施例xv之方法，其中該抗-PD-1抗體分子，例如，納武單抗係每兩週以約1 mg/kg至3 mg/kg，例如，約1 mg/kg、2 mg/kg或3 mg/kg經靜脈內投與。
xvii.如實施例xv之方法，其中該抗-PD-1抗體分子(例如納武單抗)係以3-週時間間隔以約2 mg/kg之劑量經靜脈內投與。 使用方法
根據式I至V中任一式之呈游離形式或呈醫藥上可接受之鹽形式之化合物顯示有價值的藥理學性質，包括於細菌中抑制DNA旋轉酶活性以及充當抗菌劑。
根據一個實施例，本發明提供一種抑制個體之細菌DNA旋轉酶活性之方法，其對該個體投與式I至V之化合物或包含式I至V之化合物及醫藥上可接受之載劑、佐劑或媒劑之組合物。
根據另一個實施例，本發明提供一種減少個體之細菌數量之方法，其包括對該個體投與式I至V之化合物或包含式I至V之化合物及醫藥上可接受之載劑、佐劑或媒劑之組合物。
根據另一個實施例，本發明提供一種預防、治療或減輕個體之細菌感染之嚴重度之方法，其包括對該個體投與式I至V之化合物或包含式I至VI之化合物及醫藥上可接受之載劑、佐劑或媒劑之組合物。
根據另一個實施例，本發明之方法係可用於治療在獸醫領域中之患者，包括(但不限於)動物園動物、實驗室動物及農場動物，包括靈長類動物、齲齒動物及鳥類。該等動物之實例包括(但不限於)天竺鼠、倉鼠、沙鼠、大鼠、小鼠、兔、狗、貓、馬、豬、羊、牛、山羊、鹿、恆河猴、猴、絹毛猴(tamarinds)、猿類、佛佛、大猩猩、黑猩猩、紅毛猩猩(orangutans)、長臂猿類、鴕鳥、雞、火雞、鴨及鵝。
在另一個實施例中，本發明提供一種方法，其中意欲治療或預防的細菌感染之特徵係存在一或多種選自由下列組成之群之發酵性或非發酵性革蘭氏陰性細菌：綠膿桿菌及其他假單胞桿菌屬、嗜麥芽窄食單胞菌、洋蔥伯克氏菌及其他伯克氏菌屬、鮑氏不動桿菌及其他不動桿菌屬、木糖氧化無色桿菌、反硝化產鹼桿菌及其他無色桿菌屬、弗氏檸檬酸桿菌及其他檸檬酸桿菌屬、空腸彎曲桿菌、肺炎克雷伯氏菌、產酸克雷伯氏菌及其他克雷伯氏菌屬、陰溝腸桿菌、產氣腸桿菌及其他腸桿菌屬、大腸桿菌、腸沙門氏菌及其他沙門氏菌屬、鼠疫桿菌、普通變形桿菌及其他變形桿菌屬、黏質沙雷氏菌及其他沙雷氏菌屬、摩氏摩根氏菌及腸桿菌家族之其他成員、腦膜炎雙球菌、流感嗜血桿菌、卡他莫拉氏菌、脆弱擬桿菌、多形擬桿菌及其他擬桿菌屬、多殺性巴氏桿菌及其他巴氏桿菌屬、土拉弗蘭西斯菌、痢疾志賀氏菌及其他志賀氏菌、霍亂弧菌及其他弧菌屬、百日咳博德氏菌及其他博德氏菌屬、幽門螺桿菌及其他螺桿菌屬、嗜肺性退伍軍人桿菌及空腸彎曲桿菌。
在另一個實施例中，本發明提供一種方法，其中意欲治療或預防的細菌感染之特徵係存在一或多種選自由下列組成之群之發酵性或非發酵性革蘭氏陰性細菌：金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及其他葡萄球菌屬、糞腸球菌、屎腸球菌及其他腸球菌屬、肺炎鏈球菌、化膿鏈球菌、無乳鏈球菌及其他鏈球菌屬、炭疽芽孢桿菌及其他芽孢桿菌屬、大消化鏈球菌及其他消化鏈球菌屬、難養芽胞梭菌及其他芽胞梭菌屬、單核細胞增多性李斯特菌及其他李斯特菌屬、及白喉棒狀桿菌及其他棒狀桿菌屬。
根據另一個實施例，本發明包括對該個體投與一或多種除了本發明化合物外之另外治療性抗菌劑。
根據另一個實施例，本發明包括對該個體投與一或多種另外治療劑(呈連同該化合物一起的多種劑型之一部分或呈單獨劑型)，其中該一或多種另外治療劑包括選自天然青黴素、青黴素酶耐藥性青黴素、抗綠膿桿菌青黴素、胺基青黴素、第一代頭孢菌素(cephalosporin)、第二代頭孢菌素、第三代頭孢菌素、第四代頭孢菌素、卡巴盤尼姆(carbapenem)、頭黴素、單環內醯胺類、喹諾酮、氟喹諾酮、胺基糖苷、大環內酯、酮內酯、四環素、糖肽、鏈陽性菌素(streptogramin)、噁唑烷酮、利福平(rifamycin)或其他抗生素之抗生素。該等方法之個體可係人類。
根據另一個實施例，本發明包括對該個體投與一或多種另外治療劑(呈連同該化合物一起的多種劑型之一部分或呈單獨劑型)，其中該一或多種另外治療劑係選自天然青黴素(包括苄星青黴素G (Benzathine penicillin G)、青黴素G及青黴素V)、青黴素酶耐藥性青黴素(包括氯唑西林(Cloxacillin)、二氯唑西林(Dicloxacillin)、萘夫西林(Nafcillin)及苯唑青黴素(Oxacillin))、抗假單胞菌青黴素(包括羧苄青霉素(Carbenicillin)、美洛西林(Mezlocillin)、哌拉西林(Piperacillin)、哌拉西林/他唑巴坦(tazobactam)、替卡西林(Ticaricillin)及替卡西林/克拉維酸鹽(Clavulanate))、胺基青黴素(包括阿莫西林(Amoxicillin)、胺苄西林(Ampicillin)及胺苄西林/舒巴坦(Sulbactam))、第一代頭孢菌素(cephalosporin) (包括頭孢唑林(Cefazolin)、頭孢羥氨苄(Cefadroxil)、頭孢胺苄(Cephalexin)及頭孢拉啶(Cephadrine))、第二代頭孢菌素(包括頭孢克洛(Cefaclor)、頭孢克洛-CD、頭孢羥唑(Cefamandole)、頭孢尼西(Cefonacid)、頭孢羅齊(Cefprozil)、氯碳頭孢(Loracarbef)及頭孢呋辛(Cefuroxime))、第三代頭孢菌素(包括頭孢地尼(Cefdinir)、頭孢克肟(Cefixime)、頭孢哌酮(Cefoperazone)、頭孢噻肟(Cefotaxime)、頭孢泊肟(Cefpodoxime)、頭孢他啶(Ceftazidime)、頭孢布烯(Ceftibuten)、頭孢唑肟(Ceftizoxme)及頭孢曲松(Ceftriaxone))、第四代頭孢菌素(包括頭孢匹美(Cefepime)、頭孢洛林(Ceftaroline)及頭孢洛占(Ceftolozane))、頭黴素(Cephamycin) (包括頭孢替坦(Cefotetan)及頭孢西丁(Cefoxitin))、卡巴盤尼姆(包括亞胺培南(Imipenem)、多利培南(Doripenem)及美羅培南(Meropenem))、單環內醯胺類(monobactam) (包括氨曲南(Aztreonam)及卡蘆莫南(Carumonam))、喹諾酮(包括西諾沙星(Cinoxacin)、萘啶酮酸、噁喹酸(Oxolininc acid)及吡哌酸(Pipemidic acid))、氟喹諾酮(包括環丙沙星(Cirpofloxacin)、依諾沙星(Enoxacin)、加替沙星(Gatifloxacin)、格帕沙星(Grepafloxacin)、左旋氧氟沙星、洛美沙星(Lomefloxacin)、莫西沙星、诺氟沙星(Norfloxacin)、氧氟沙星(Ofloxacin)及司帕沙星(Sparfloxacin))、胺基糖苷(包括丁胺卡那黴素(Amikacin)、健大黴素(Gentamicin)、康黴素(Kanamycin)、新黴素、奈替米星(Netilmicin)、壯觀黴素(Spectinomycin)、鏈黴素(Streptomycin)、帕唑黴素(Plazomycin)及妥布黴素(Tobramycin))、大環內酯(包括阿奇黴素(Azithromycin)、克拉黴素(Clarithromycin)及紅黴素(Erythromycin))、酮內酯(包括泰利黴素(Telithromycin))、四環素(包括氯四環素(Chlortetracycline)、地美環素(Demeclocycline)、多西環素(Doxycycline)、米諾環素(Minocycline)、老虎黴素(Tigecycline)及四環素(Tetracycline))、糖肽(包括奧利萬星(Oritavancin)、替考拉寧(Teicoplanin)、達巴萬星(Dalbavancin)、特拉萬星(Telavancin)及萬古黴素(Vancomycin))、鏈陽性菌素(包括大幅普汀(Dalfopristin)/喹奴普丁(quinupristin))、噁唑烷酮(包括利奈唑胺(Linezolid))、利福平(包括利福布汀(Rifabutin)及立復黴素(Rifampin))及其他抗生素(包括桿菌肽(bactitracin)、氯黴素、克林達黴素(clindamycin)、異煙肼(isoniazid)、甲硝噠唑(metronidazole)、多黏菌素B (polymyxin B)、吡嗪醯胺及甲氧苄胺嘧啶/磺胺甲噁唑)。
根據另一個實施例，本發明提供一種預防、治療或減輕個體之細菌感染之嚴重度之方法，其中該待治療或預防之細菌感染係選自下列中之一或多者：上呼吸道感染、下呼吸道感染、耳部感染、肺部及支氣管感染、泌尿道感染、腹腔內感染、併發性泌尿道感染、併發性腹腔內感染、心血管感染、血流感染、敗血症、CNS感染、皮膚及軟組織感染、GI感染、骨骼及關節感染、生殖器感染、眼部感染或肉芽腫感染。
在另一個實施例中，該待治療之細菌感染係選自下列中之一或多者：咽炎、鼻竇炎、外耳道炎、中耳炎、支氣管炎、積膿症、肺炎、膀胱炎及腎盂腎炎、腎結石、前列腺炎、腹膜炎、透析相關性腹膜炎、內臟膿腫、心內膜炎、心肌炎、心包膜炎、輸血相關性敗血症、腦膜炎、腦炎、腦膿腫、骨髓炎、關節炎、生殖器潰瘍、尿道炎、陰道炎、宮頸炎、齒齦炎、結膜炎、角膜炎、眼內炎或發熱性中性白血球減少個體之感染。
根據另一個實施例中，本發明提供一種用於治療或預防個體之易感性細菌生物之方法，其中該方法進一步包括對該患者投與呈連同該化合物一起之多種劑型之一部分或呈獨立劑型之另外治療劑之步驟。
根據另一個實施例，本發明提供一種用於治療或預防個體之易感性細菌生物之方法，其中該方法進一步包括對該個體投與增加細菌生物對抗生素之易感性之藥劑之步驟。
根據本發明之另一個實施例，該等方法進一步包括對個體投與一或多種增加細菌生物對抗生素之易感性之另外治療劑之步驟。例如，在該情況下，本發明之化合物係與β-內醯胺(諸如單環β-內醯胺、青黴素、卡巴盤尼姆、頭黴素或頭孢菌素)一起投與。
根據本發明之另一個實施例，該等方法進一步包括對個體投與一或多種增加細菌生物對抗生素易感性之另外治療劑(包括生物膜抑制劑)之步驟。
在另一個實施例中，本發明之醫藥組合物及方法一般係可用於控制由下列生物引起的活體內細菌感染：綠膿桿菌及其他假單胞桿菌屬、嗜麥芽窄食單胞菌、洋蔥伯克氏菌及其他伯克氏菌屬、鮑氏不動桿菌及其他不動桿菌屬、木糖氧化無色桿菌、反硝化產鹼桿菌及其他無色桿菌屬、弗氏檸檬酸桿菌及其他檸檬酸桿菌屬、空腸彎曲桿菌、肺炎克雷伯氏菌、產酸克雷伯氏菌及其他克雷伯氏菌屬、陰溝腸桿菌、產氣腸桿菌及其他腸桿菌屬、大腸桿菌、腸沙門氏菌及其他沙門氏菌屬、鼠疫桿菌、普通變形桿菌及其他變形桿菌屬、黏質沙雷氏菌及其他沙雷氏菌屬、摩氏摩根氏菌及腸桿菌家族之其他成員、腦膜炎雙球菌、流感嗜血桿菌、卡他莫拉氏菌、脆弱擬桿菌、多形擬桿菌及其他擬桿菌屬、多殺性巴氏桿菌及其他巴氏桿菌屬、土拉弗蘭西斯菌、痢疾志賀氏菌及其他志賀氏菌、霍亂弧菌及其他弧菌屬、百日咳博德氏菌及其他博德氏菌屬、幽門螺桿菌及其他螺桿菌屬、嗜肺性退伍軍人桿菌、空腸彎曲桿菌、金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及其他葡萄球菌屬、糞腸球菌、屎腸球菌及其他腸球菌屬、肺炎鏈球菌、化膿鏈球菌、無乳鏈球菌及其他鏈球菌屬、炭疽芽孢桿菌及其他芽孢桿菌屬、大消化鏈球菌及其他消化鏈球菌屬、難養芽胞梭菌及其他芽胞梭菌屬、單核細胞增多性李斯特菌及其他李斯特菌屬、白喉棒狀桿菌及其他棒狀桿菌屬。
在另一個實施例中，本發明之醫藥組合物及方法一般係可用於控制由下列生物引起的活體內細菌感染：肺炎鏈球菌、化膿鏈球菌、糞腸球菌、屎腸球菌、金黃色葡萄球菌、炭疽芽孢桿菌、結核桿菌(Mycobacterium tuberculosis )及凝固酶陰性葡萄球菌(諸如表皮葡萄球菌及腐生性葡萄球菌(Staphylococcus saprophyticus ))。
因此，該等組合物及方法可用於控制、治療或減輕醫院內或非醫院內感染之進展、嚴重度或影響。
醫院內及非醫院內感染之實例包括(但不限於)上呼吸道感染、下呼吸道感染、耳部感染、肺部及支氣管感染、泌尿道感染、腹腔內感染、心血管感染、血流感染、敗血症、CNS感染、皮膚及軟組織感染、GI感染、骨骼及關節感染、生殖器感染或肉芽腫感染。特定細菌感染之實例包括(但不限於)咽炎、鼻竇炎、外耳道炎、中耳炎、支氣管炎、積膿症、肺炎、膀胱炎及腎盂腎炎、腎結石、前列腺炎、腹膜炎、透析相關性腹膜炎、內臟膿腫、心內膜炎、心肌炎、心包膜炎、輸出相關性敗血症、腦膜炎、腦炎、腦膿腫、骨髓炎、關節炎、生殖器潰瘍、尿道炎、陰道炎、宮頸炎、齒齦炎、結膜炎、角膜炎、眼內炎或發熱性中性白血球減少個體之感染。
更佳地，本發明之醫藥上可接受之組合物係經調配用於口服。
活性成分化合物之介於每天約0.01 mg/kg體重與約100 mg/kg體重之間，較佳介於每天0.5 mg/kg體重與約75 mg/kg體重之間之間且最佳介於每天約1 mg/kg體重與50 mg/kg體重之間之劑量水平係可用於單藥療法中以預防及治療由諸如下列之細菌引起的細菌感染：肺炎鏈球菌、化膿鏈球菌、糞腸球菌、屎腸球菌、肺炎克雷伯氏桿菌(Klebsiella pneumoniae )、腸桿菌屬(Enterobacter sps. )、變形桿菌屬(Proteus sps. )、綠膿桿菌、大腸桿菌(E. coli )、黏質沙雷氏菌、金黃色葡萄球菌、流感嗜血桿菌、炭疽芽孢桿菌、肺炎支原體、卡他莫拉氏菌、肺炎衣原體、嗜肺性退伍軍人桿菌、結核桿菌、幽門螺旋桿菌(Helicobacter pylori )及凝固酶陰性葡萄球菌(諸如表皮葡萄球菌)。
活性成分化合物之介於每天約0.01 mg/kg體重與約100 mg/kg體重之間，較佳介於每天0.5 mg/kg體重與約75 mg/kg體重之間且最佳介於每天約1 mg/kg體重與50 mg/kg體重之間之劑量水平係可用於單藥療法中以預防及治療由諸如下列之細菌引起的抗藥性細菌感染：甲氧西林耐藥性金黃色葡萄球菌、氟喹諾酮耐藥性金黃色葡萄球菌、萬古黴素中間物耐藥性金黃色葡萄球菌、利奈唑胺耐藥性金黃色葡萄球菌、青黴素耐藥性肺炎鏈球菌、大環內酯耐藥性肺炎鏈球菌、氟喹諾酮耐藥性肺炎鏈球菌、萬古黴素耐藥性糞腸球菌、利奈唑胺耐藥性糞腸球菌、氟喹諾酮耐藥性糞腸球菌、萬古黴素耐藥性屎腸球菌、利奈唑胺耐藥性屎腸球菌、氟喹諾酮耐藥性屎腸球菌、胺苄西林耐藥性屎腸球菌、大環內酯耐藥性流感嗜血桿菌、β-內醯胺耐藥性流感嗜血桿菌、氟喹諾酮耐藥性流感嗜血桿菌、β-內醯胺耐藥性卡他莫拉氏菌、甲氧西林耐藥性表皮葡萄球菌、氟喹諾酮耐藥性表皮葡萄球菌、大環內酯耐藥性肺炎支原體、異煙肼耐藥性結核桿菌、利福平耐藥性結核桿菌、甲氧西林耐藥性凝固酶陰性葡萄球菌、氟喹諾酮耐藥性凝固酶陰性葡萄球菌、糖肽中間物耐藥性金黃色葡萄球菌、萬古黴素耐藥性金黃色葡萄球菌、異型萬古黴素中間物耐藥性金黃色葡萄球菌、異型萬古黴素耐藥性金黃色葡萄球菌、大環內酯-林可醯胺-鏈陽性菌素耐藥性葡萄球菌、β-內醯胺耐藥性糞腸球菌、β-內醯胺耐藥性屎腸球菌、酮內酯耐藥性肺炎鏈球菌、酮內酯耐藥性化膿鏈球菌、大環內酯耐藥性化膿鏈球菌或萬古黴素耐藥性表皮葡萄球菌。
本發明之醫藥組合物每天約1至5次或或者以連續輸注方式投與。或，或者，本發明之組合物可以脈動方法投與。此投與可用作慢性或急性療法。可與載劑材料組合以產生單一劑型之活性成分的含量將依治療之主體及特定的投與模式而變。典型製劑包含約5%至約95%活性化合物(w/w)。較佳地，此類製劑包含約20%至約80%活性化合物。
在包括式I至VI之化合物及一或多種另外治療劑或預防性藥劑之組合之實施例中，該化合物及另外治療劑兩者應以常在單藥療法方案中投與的劑量之介於約10%與80%之間的劑量水平存在。
熟習此項技術者當明瞭，可能需要低於或高於上文所列舉的其等劑量之劑量。任何特定個體之特定給藥及治療方案將取決於主治醫師的判斷。
可藉由下文所顯示的一般合成途徑，利用更詳細述於實例部分中的特定實例來合成如實施例中所定義的化合物。實例部分中的反應流程圖說明用於製備所選擇的本發明化合物之方法，及可適合使用標準方法及可得起始材料合成本發明之另外化合物。可使用下列一般方法。反應圖 1. 製備在 Z1 -Z3 環上具有不同基團之化合物之一般方法。
可在Z1 、Z2 及Z3 位置處經反應圖1中所顯示的途徑引入具不同尺寸及取代基之多種環。此外，在C3位置的酯基可依習知方法修飾以在該位置處引入多種取代基。亦可水解該酯及藉由脫羧移除。溴化物可在C7處藉由金屬催化之偶合反應輕易引入胺。反應圖 2. 至三環核心之替代方法。
第二替代方法仰賴於丙二酸酯與醛縮合以形成三環核心。該方法無需調整縮合後C4處之氧化態。在C7處的胺可藉由SN Ar引入於芳基氟上，為用於反應圖1中之偶合方法作補充。 反應圖3. 改變R4 之一般方法。
使用該方法，可在C4-位置處引入三氟甲磺酸鹽且用作把柄以藉由金屬催化之偶合反應引入各種基團。可接著藉由已知方法進一步修飾在C4位置處引入的官能基，該等修飾之實例包含於下文實例中。 實例一般條件：
分析型HPLC條件如下：
(方法A)藉由高效液相層析(HPLC)使用UPLC Waters儀器(Milford, MA)表徵化合物及/或中間物。HPLC溶劑A為100%水(含0.1%三氟乙酸(TFA))及溶劑B為100%乙腈(含0.1% TFA)，來自EMD Chemicals Inc。儀器為Waters ACQUITY UPLC系統，其中1.2 mL/min流速；管柱Kinetex-C18, 2.6 um，2.1 x 50 mm，來自Phenomenex，管柱溫度：50℃；梯度：2-88%溶劑B歷時1.29分鐘或9.79分鐘時間；藉由在220 nm或254 nm之紫外光(UV)吸收偵測化合物。
(方法B)藉由高效液相層析(HPLC)在Waters ACQUITY H型UPLC系統上表徵化合物及/或中間物，其中0.55 mL/min流速；管柱BEH-C18，1.7 um，2.1 x 50 mm，來自Waters，管柱溫度：環境溫度；梯度(溶劑A為2 mM乙酸銨及0.1%甲酸於水中，溶劑B為0.1%甲酸於乙腈中)：5%溶劑B維持0.4分鐘，5-40%溶劑B歷時0.6分鐘，40-60%溶劑B歷時1.2分鐘，60-100%溶劑B歷時2.3分鐘然後100%溶劑B歷時3分鐘；藉由在236 nm之紫外光(UV)吸收偵測化合物。
(方法C)藉由高效液相層析(HPLC)在Agilent 1290 infinity RRLC系統上表徵化合物及/或中間物，其中1 mL/min流速；管柱ZORBAX SB C8，5 um，250 x 4.6 mm，來自Agilent，管柱溫度：環境溫度；梯度(溶劑A為0.1%甲酸於水中，溶劑B為0.1%甲酸於乙腈中)：10-30%溶劑B歷時25分鐘，30-100%溶劑B歷時5分鐘；然後100%溶劑B歷時5分鐘；藉由在238 nm之紫外光(UV)吸收偵測化合物。
在Waters ACQUITY UPLC系統上進行HPLC/質譜分析(LC/MS)並配備有ZQ 2000或SQD MS系統；管柱：Kinetex，來自Phenomenex，2.6 um，2.1 x 50 mm，管柱溫度：50℃；梯度：2-88% (或0-45%，或65-95%)溶劑B歷時1.29分鐘時間；流速1.2 mL/min。藉由Waters光電二極體陣列偵測器偵測化合物。所有質量係以質子化母離子之質量報告，分子量範圍150至850；錐電壓20V。
在公開取用Varian 400 NMR、Bruker 400 MHz及Bruker 500 MHz nmr分光計上運行NMR光譜。除非另作指明，否則在298K測量光譜且使用溶劑峰參照。
使用具有RediSep矽膠濾筒(Teledyne Isco，Lincoln, NE)或SiliaSep矽膠濾筒(Silicycle Inc.，Quebec City, Canada)之Combiflash Rf系統(Teledyne Isco，Lincoln, NE)或藉由使用矽膠(230-400網目)包裝材料之急驟管柱層析法或藉由使用Waters 2767樣品管理器，C-18逆相Sunfire管柱，30X50 mm，流速75 mL/min之HPLC，進行製備型分離。用於Combiflash Rf系統及急驟管柱層析的典型溶劑為二氯甲烷、甲醇、乙酸乙酯、己烷、庚烷、丙酮、氨水(或氫氧化銨)及三乙胺。用於逆相HPLC的典型溶劑為不同濃度之乙腈及水(含0.1%三氟乙酸或0.1%甲酸)。
下列實例意欲說明本發明而不應視作對本發明之限制。溫度以攝氏度提供。若沒有另外提及，則所有蒸發均在減壓下進行。藉由標準分析方法，例如，MS及NMR，證實最終產物、中間物及起始物質之結構。所使用的縮寫係彼等為相關技術習用者。若沒有定義，則該等術語具有其一般接受之含義。 縮寫： BiPy 2,2'-聯吡啶 br 寬 d 雙重 DCM 二氯甲烷 DCE 二氯乙烷 DMFN,N -二甲基甲醯胺 DMAP 4-二甲胺基吡啶 DMSO 二甲基亞碸 EDCI 1-乙基-3-(3’-二甲基胺基丙基)碳化二亞胺 EtOAc 乙酸乙酯 HPLC 高效液相層析法 LCMS 液相層析法及質譜法 MeOH 甲醇 MS 質譜法 m 多重 min 分鐘 ml 毫升 NMR 核磁共振 ppm 百萬分率 Rt 滯留時間 RT或rt 室溫 s 單 t 三重 THF 四氫呋喃 UPLC 超效液相層析法
參考隨後的實例，使用本文中所述的方法及相關技術中已知的其他方法合成本發明之化合物。
在適當的情況下，使用習知技術，諸如沉澱、過濾、結晶、蒸發、蒸餾及層析，可單離並純化較佳實施例之各種起始物質、中間物及化合物。除非另有說明，否則所有起始物質係從商業供應商獲得且無需進一步純化即可使用。可自化合物由已知的成鹽程序製備鹽。
應明瞭，根據較佳實施例之有機化合物可表現出互變異構現象。關於本說明書中之化學結構可僅表示可能互變異構形式中的一種，應明瞭，較佳實施例包括所描繪結構之任何互變異構形式。實例 1.1 ： (S)-10-((R)-3-(1- 胺基環丙基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-9- 氟 -3- 甲基 -5- 側氧基 -2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噁嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -6- 甲酸鹽酸鹽
依下列反應圖(程序A)製備標題化合物： (i).(S)-3-(2- 胺基丙氧基 )-4- 溴 -5- 氟 -2- 碘苯甲酸甲酯鹽酸 鹽 ：
將氫化鈉(0.41 g，10.3 mmol)添加至4-溴-5-氟-3-羥基-2-碘苯甲酸甲酯(3.50 g，9.34 mmol)含在無水DMF (10 mL)中之溶液及在室溫下攪拌所得混合物5分鐘。添加含在DMF (5 mL)中之(S)-4-甲基-1,2,3-噁噻唑啶-3-甲酸第三丁酯2,2-二氧化物(2.44 g，10.3 mmol)及在室溫下攪拌2小時。添加EtOAc，接著添加HCl 0.2N。分離相並用EtOAc進一步萃取水層。用水及鹽水洗滌已合併的有機層。在Na2 SO4 上乾燥有機相，過濾，濃縮。添加1,4-二噁烷(10 ml)及水(1.2 mL)，接著添加濃硫酸(3.6 mL)。在室溫下攪拌溶液30分鐘。用飽和NaHCO3 水溶液淬滅該混合物且用DCM萃取。濃縮已合併的有機萃取物以移除DCM且添加5 mL 4N HCl之二噁烷溶液。蒸發溶劑以得到對應於產物之米色固體(4.33 g，99%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.39 (s, 2H), 7.61 (d, J=8.4 Hz, 1H), 4.15–4.05 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.69 (s, 1H), 1.43–1.42 (d, J=6.8 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：434.2 [M+2]。(ii).(S)-8- 溴 -7- 氟 -3- 甲基 -3,4- 二氫 -2H- 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -5- 甲酸甲酯：
將Pd2 (dba)3 (0.92 g，1.00 mmol)、氧雜蒽膦(1.74 g，3.01 mmol)及碳酸銫(9.81 g，30.1 mmol)添加至(S)-3-(2-胺基丙氧基)-4-溴-5-氟-2-碘苯甲酸甲酯鹽酸鹽(4.70 g，10.0 mmol)含在無水二噁烷(45 ml)中之溶液。在80℃下攪拌該混合物過夜。添加水至該混合物且用DCM萃取漿液。在Na2 SO4 上乾燥已合併的有機萃取物，過濾，並在真空中濃縮。藉由矽膠層析(100%庚烷至100% EtOAc)純化粗物質，得到黃色固體(1.82 g，60%產率)，其包含少量的作為雜質的dba及des-溴產物。LCMS (m/z)：304.3 [M]。(iii).(S)-8- 溴 -7- 氟 -4-(3- 甲氧基 -3- 側氧基丙醯基 )-3- 甲基 -3,4- 二氫 -2H- 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -5- 甲酸甲酯：
將3-氯-3-側氧基-丙酸甲酯(3.26 g，2.56 mL，23.9 mmol)添加至(S)-8-溴-7-氟-3-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-5-甲酸甲酯(1.82 g，5.97 mmol)含在無水甲苯(30 mL)中之溶液。在60℃下攪拌該溶液1小時。蒸發溶劑且藉由矽膠層析(0-100% EtOAc/庚烷)純化粗物質以得到橙色油(1.75 g，73%產率)。LCMS (m/z)：406.3 [M+2]。(iv). (S)-10- 溴 -9- 氟 -7- 羥基 -3- 甲基 -5- 側氧基 -2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噁嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -6- 甲酸甲酯：
將碳酸銫(4.23 g，13.0 mmol)添加至(S)-8-溴-7-氟-4-(3-甲氧基-3-側氧基丙醯基)-3-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-5-甲酸甲酯(1.75 g，4.33 mmol)含在無水乙腈(40 mL)中之溶液。在60℃下攪拌漿液3小時。用水稀釋反應混合物且用1N HCl溶液酸化至pH 2-3。添加EtOAc，且分離相。用EtOAc萃取水層，且在Na2 SO4 上乾燥有機相，過濾及濃縮。藉由使用100%庚烷至80% EtOAc/庚烷的矽膠層析純化粗物質，得到淺黃色固體(1.16 g，72%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.93 (s, 1H), 7.54 (d, J=9.2 Hz, 1H), 4.93–4.89 (m, 1H), 4.64–4.60 (m, 1H), 4.25–4.22 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 1.21 (d, J=8.8 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：372.3 [M]。(v).(S)-10- 溴 -9- 氟 -3- 甲基 -5- 側氧基 -7-((( 三氟甲基 ) 磺醯基 ) 氧基 )-2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噁嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -6- 甲酸甲酯：
在0℃下，將三乙胺(949 mg，1.31 mL，9.38 mmol)及三氟甲磺酸酐(2.65 g，1.58 mL，9.38 mmol)添加至(S)-10-溴-9-氟-7-羥基-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(1.16 g，3.13 mmol)含在無水DCM (25 mL)中之溶液。在15分鐘後完成反應。蒸發溶劑且將粗物質用於下一步驟而無需進一步純化。得到對應於產物之深棕色油。LCMS (m/z)：503.9 [M]。(vi). (S)-10- 溴 -9- 氟 -3- 甲基 -5- 側氧基 -2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噁嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -6- 甲酸甲酯：
將粗製(S)-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-7-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯溶解於無水DMF (20 mL)中。在N2 沖洗下依序添加DPPP (0.39 g，0.94 mmol)、乙酸鈀(II) (0.11 g，0.47 mmol)及三乙基矽烷(908 mg，1.25 mL，7.81 mmol)。在60℃下攪拌反應混合物4小時。用EtOAc稀釋該粗製混合物且用水萃取。用水洗滌有機層，在Na2 SO4 上乾燥，然後過濾。蒸發溶劑，且藉由矽膠層析(0-60% EtOAc/庚烷)純化粗製殘餘物以得到黃色固體作為所需產物(797 mg，72%產率)，該產物存在一定量(約10%) des-溴產物。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.40 (s, 1H), 7.10 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 5.21–5.19 (m, 1H), 4.62–4.59 (m, 1H), 4.23–4.19 (m, 1H), 3.99 (s, 3H), 1.45 (d, J=6.8 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：358.2 [M+2]。(vii). (S)-10-((R)-3-(1-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 環丙基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-9- 氟 -3- 甲基 -5- 側氧基 -2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噁嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -6- 甲酸甲酯：
在微波小瓶中加入(S)-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(300 mg，0.84 mmol)及甲苯(10 mL)。添加(S)-(1-(吡咯啶-3-基)環丙基)胺基甲酸第三丁酯(286 mg，1.26 mmol)、RuPhos(79 mg，0.17 mmol)、RuPhos Pd G3(141 mg，0.17 mmol)及碳酸銫(823 mg，2.53 mmol)。將混合物加熱至90℃持續4小時。通過拋棄式過濾漏斗過濾粗製混合物且在減壓下蒸發揮發物。矽膠層析(0-100% EtOAc/庚烷)提供呈黃色固體之產物(221 mg，52%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.36 (s, 1H), 7.38–7.13 (m, 1H), 4.90 (d, J=6.2 Hz, 1H), 4.40 (d, J=11.1 Hz, 1H), 3.98 (d, J=9.5 Hz, 1H), 3.87–3.74 (m, 4H), 3.73–3.63 (m, 1H), 3.55 (q, J=8.7 Hz, 2H), 2.17–2.03 (m, 1H), 1.85 (s, 1H), 1.64 (quin, J=9.8 Hz, 1H), 1.45–1.33 (m, 9H), 1.25 (d, J=6.6 Hz, 3H), 0.64 (d, J=3.1 Hz, 4H)。LCMS (m/z)：502.5 [M+1]。(viii). (S)-10-((R)-3-(1-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 環丙基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-9- 氟 -3- 甲基 -5- 側氧基 -2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噁嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -6- 甲酸：
將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(566 mg，1.13 mmol)溶解於MeOH(12 mL)及水(3 mL)中。在室溫下添加氫氧化鋰水合物(189 mg，4.51 mmol)。在攪拌過夜後，用水稀釋混合物，且用1M HCl處理。用EtOAc萃取所得混合物，且用鹽水洗滌已合併的有機萃取物，在Na2 SO4 上乾燥，過濾，然後在減壓下濃縮。該產物無需進一步純化即可直接用於下一步驟中。LCMS (m/z)：488.5 [M+1]。(ix). (S)-10-((R)-3-(1- 胺基環丙基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-9- 氟 -3- 甲基 -5- 側氧基 -2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噁嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -6- 甲酸鹽酸鹽：
將粗製(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸溶解於DCM (5 mL)中且添加4N HCl之二噁烷溶液(5 mL)。在室溫下攪拌溶液2小時。添加Et2 O (5 mL)，過濾沉澱物且再用Et2 O洗滌以得到呈黃色固體之產物(434 mg，90%產率)。1 H NMR (400 MHz, 甲醇-d4) δ 8.70 (s, 1H), 7.31 (d, J = 13.5 Hz, 1H), 5.13 (q, J = 6.1 Hz, 1H), 4.53 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 4.08 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 3.99 (dt, J = 9.9, 6.9 Hz, 1H), 3.77 (dq, J = 18.2, 10.0, 8.8 Hz, 4H), 2.59 (dt, J = 16.7, 7.6 Hz, 1H), 2.17–2.06 (m, 1H), 1.70 (dt, J = 20.2, 10.1 Hz, 1H), 1.43 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.04–0.93 (m, 4H)。LCMS：tR = 2.87 min，m/z = 388.17 [M+1] (10分鐘運行，方法A)。
或者，可使用該程序移去Boc基團：(S)-10-((R)-3-(1-胺基環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸三氟乙酸鹽：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸(214 mg，0.44 mmol)溶解於DCM (5 mL)中且添加TFA (5 mL)。在室溫下攪拌溶液2小時。蒸發溶劑且在逆相HPLC上純化粗物質，得到呈黃色固體之產物(153 mg，68%產率)。LCMS：tR = 2.87 min，m/z = 388.17 [M+1] (10分鐘運行，方法A)。
或者，可使用下文所描繪的路徑(程序B)製備標題化合物： (i).(S)-1-(6- 溴 -2,3- 二氟苯氧基 ) 丙 -2- 胺：
將t-BuOK (12.1 g，107 mmol)添加至6-溴-2,3-二氟-苯酚(19.0 g，81.8 mmol)含在DMF (120 mL)中之溶液及在室溫下攪拌所得混合物15分鐘。添加(S)-4-甲基-1,2,3-噁噻唑啶-3-甲酸第三丁酯2,2-二氧化物(17.0 g，71.6 mmol)且在40℃下攪拌混合物4小時。完成後，用TBME稀釋混合物且將7.5%檸檬酸溶液添加至該混合物中。分離有機層且用鹽水洗滌。在Na2 SO4 上乾燥有機層，過濾，然後在減壓下濃縮以得到黃色油。在EtOAc (200 mL)中稀釋粗物質及在室溫下添加4N HCl/IPA (100 mL)。在室溫下攪拌混合物16小時。完成後，過濾該混合物且將固體溶解於H2 O (200 mL)中。用EtOAc洗滌溶液。用NaHCO3 水溶液鹼化水相並用EtOAc萃取。在Na2 SO4 上乾燥有機層然後在真空中濃縮以得到呈黃色油之(S)-1-(6-溴-2,3-二氟苯氧基)丙-2-胺(12.0 g，64%產率)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.28–7.19 (m, 1H), 6.81 (q, J = 9.1 Hz, 1H), 4.11 (dd, J = 9.0, 2.7 Hz, 1H), 3.83 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 3.43–3.30 (m, 1H), 1.15 (d, J = 6.6 Hz, 3H)。(ii). (S)-7,8- 二氟 -3- 甲基 -3,4- 二氫 -2H- 苯并 [b][1,4] 噁嗪：
在100℃下攪拌(S)-1-(6-溴-2,3-二氟苯氧基)丙-2-胺(12.0 g，45.1 mmol)、Pd(OAc)2 (607 mg，2.70 mmol)、氧雜蒽膦(1.57 g，2.70 mmol)、t-BuONa (8.89 g，92.4 mmol)含在甲苯(120 mL)中之混合物持續18小時。完成後，使反應冷卻至室溫且添加水及EtOAc。分離相並用EtOAc萃取水層。在Na2 SO4 上乾燥有機相，過濾，然後濃縮以得到呈棕色油之粗製產物。藉由矽膠層析使用10% EtOAc/庚烷作為洗脫劑純化該物質以得到呈黃色油之(S)-7,8-二氟-3-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪(5.20 g，62%產率)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 6.54 (ddd, J = 10.0, 9.1, 7.9 Hz, 1H), 6.25 (ddd, J = 9.0, 4.8, 2.3 Hz, 1H), 4.27 (dd, J = 10.5, 2.8 Hz, 1H), 3.78 (dd, J = 10.5, 8.2 Hz, 1H), 3.49 (tdd, J = 10.9, 5.5, 2.8 Hz, 1H), 1.19 (d, J = 6.4 Hz, 3H)。
(iii).(S)-5-溴-7,8-二氟-3-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪：將NBS (0.96 g，5.40 mmol)添加至(S)-7,8-二氟-3-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪(1.00 g，5.40 mmol)含在MeCN (10 mL)中之混合物，接著在室溫下攪拌持續12小時。完成後，用EtOAc稀釋反應且添加Na2 CO3 飽和水溶液。分離有機層並用Na2 CO3 飽和水溶液及鹽水洗滌。濃縮有機層且藉由矽膠層析使用作為洗脫劑之5% EtOAc/庚烷純化粗物質，得到(S)-5-溴-7,8-二氟-3-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪(639 mg，45%產率)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 6.89 (dd, J = 9.6, 7.4 Hz, 1H), 4.28 (dd, J = 10.5, 2.8 Hz, 1H), 3.79 (dd, J = 10.5, 8.1 Hz, 1H), 3.56 (dtt, J = 9.2, 6.5, 2.8 Hz, 1H), 1.26 (d, J = 6.4 Hz, 3H)。(iv). (S)-7,8- 二氟 -3- 甲基 -3,4- 二氫 -2H- 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -5- 甲醛：
在-78℃下，將n-BuLi (7.95 mL，19.9 mmol)添加至(S)-5-溴-7,8-二氟-3-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪(1.50 g，5.68 mmol)含在THF (15 mL)中之溶液。使混合物升溫至-40℃且在該溫度下攪拌1小時。然後，逐滴添加嗎啉-4-甲醛(2.74 g，23.9 mmol)。使該反應混合物升溫至室溫，接著攪拌30分鐘。完成後，添加4 mL 1M HCl及在室溫下再攪拌該混合物30分鐘。然後將該混合物倒入至EtOAc及NH4 Cl水溶液中。分離相，且用鹽水洗滌有機層，在無水硫酸鈉上乾燥，然後過濾。移除溶劑，得到殘餘物，藉由矽膠層析(5% EtOAc/庚烷)純化該殘餘物以得到呈淺黃色固體之產物(420 mg，35%產率)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 9.68 (s, 1H), 7.97 (br s, 1H), 6.91 (dd, J = 9.9, 7.8 Hz, 1H), 4.31 (dd, J = 10.5, 3.1 Hz, 1H), 3.81 (dd, J = 10.5, 7.6 Hz, 1H), 3.69 (qt, J = 6.7, 3.1 Hz, 1H), 1.28 (d, J = 6.5 Hz, 3H)。(v). (S)-9,10- 二氟 -3- 甲基 -5- 側氧基 -2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噁嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -6- 甲酸甲酯：
將(S)-7,8-二氟-3-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-5-甲醛(5.00 g，23.5 mmol)溶解於甲苯(240 mL)中。添加丙二酸二甲酯 (9.30 g，8.05 mL，70.4 mmol)、哌啶(4.00 g，4.64 mL，47.0 mmol)及乙酸(2.82 g，2.69 mL，46.9 mmol)且將混合物加熱至110℃持續5小時。完成後，使溶液冷卻至室溫且添加飽和NaHCO3 水溶液。分離相，並用EtOAc萃取水層。用鹽水洗滌有機層，然後在減壓下移除溶劑。在TBME (20 mL)中研磨粗製殘餘物30分鐘，過濾並添加10 mL EtOAc。在60℃下攪拌懸浮液2小時然後在室溫下攪拌過夜。收集固體以得到呈黃色固體之(S)-9,10-二氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(4.00 g，58%產率)。(vi). (S)-10-((R)-3-(1-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 環丙基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-9- 氟 -3- 甲基 -5- 側氧基 -2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噁嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -6- 甲酸甲酯：
將(S)-9,10-二氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(620 mg，2.07 mmol)及DIPEA (1.07 g，1.44 mL，8.27 mmol)添加至(1-(吡咯啶-3-基)環丙基)胺基甲酸(R)-第三丁酯(620 mg，2.63 mmol)含在DMSO (9 mL)中之溶液。然後加熱該溶液且在90℃下攪拌4小時。使該溶液冷卻至室溫，在此時間點後，黃色固體沉澱。慢慢地添加水(18 mL)及在室溫下攪拌該溶液1小時。過濾固體並用水(5 mL)洗滌以得到呈濕固體之產物(1.03 g)。LCMS：m/z = 502.21 [M+1]。
使用針對實例1.1所述之程序，製備下列化合物：
1 未進行水解(步驟viii)。2 未進行胺脫去保護基(步驟ix)。3 單一化合物，絕對立體化學未知。4 類似於實例1.5指定立體化學。5 非對映異構體之混合物。
HPLC方法A：特徵係在Waters ACQUITY UPLC系統上之高效液相層析(HPLC)，其中1.2 mL/min流速；管柱Kinetex-C18，2.6 um，2.1 x 50 mm，購自Phenomenex，管柱溫度：50℃；梯度：歷時9.29分鐘時間從2%-88% MeCN/含0.1% TFA之水(除非另作指明)；藉由在220 nm下之紫外光(UV)吸收偵測化合物。
HPLC方法B：特徵係在Waters ACQUITY H型UPLC系統上之高效液相層析(HPLC)，其中0.55 mL/min流速；管柱BEH-C18，1.7 um，2.1 x 50 mm，購自Waters，管柱溫度：環境溫度；梯度(溶劑A為含在水中之2 mM乙酸銨及0.1%甲酸，溶劑B為含在乙腈中之0.1%甲酸)：5%溶劑B維持0.4分鐘，歷時0.6分鐘從5%溶劑B變為40%溶劑B，歷時1.2分鐘從40%溶劑B變為60%溶劑B，歷時2.3分鐘從60%溶劑B變為100%溶劑B，然後，歷時3分鐘保持100%溶劑B；藉由在236 nm下之紫外光(UV)吸收偵測化合物。
HPLC方法C：特徵係在Agilent 1290 infinity RRLC系統上之高效液相層析(HPLC)，其中1 mL/min流速；管柱ZORBAX SB C8，5 um，250 x 4.6 mm，購自Agilent，管柱溫度：環境溫度；梯度(溶劑A為0.1%甲酸之水溶液，溶劑B為0.1%甲酸之乙腈溶液)：歷時25分鐘從10%溶劑B變為30%溶劑B，歷時5分鐘從30%溶劑B變為100%溶劑B，然後，歷時5分鐘保持100%溶劑B；藉由在238 nm下之紫外光(UV)吸收偵測化合物。實例 2 ： (S)-10-((R)-3-(1- 胺基環丙基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-9- 氟 -3-( 羥甲基 )-5- 側氧基 -2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噁嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -6- 甲酸甲酸鹽
依下列反應圖製備標題化合物：
(i). (S)-(1-(苄氧基)-3-羥基丙-2-基)胺基甲酸第三丁酯：將O -苄基-N -(第三丁氧基羰基)-L-絲胺酸(22.0 g，74.6 mmol)溶解於無水THF (500 mL)中且冷卻至0℃。在0℃下添加Et3 N (22.6 g，31.2 mL，224 mmol)及氯甲酸異丁酯(15.4 g，112 mmol)及在室溫下攪拌反應混合物1小時。在分開的燒瓶中，在0-5℃下，將硼氫化鈉(14.0 g，373 mmol)添加至水(500 mL)。將第一反應混合物慢慢地添加至冰冷的裝納NaBH4 水溶液之燒瓶及在室溫下攪拌該反應混合物16小時。用冷水淬滅該反應混合物並用EtOAc萃取。用水、鹽水洗滌有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到粗製殘餘物，藉由矽膠管柱層析(3-5%乙酸乙酯/己烷)純化該粗製殘餘物，得到呈黃色固體之所需產物(9.00 g，43%產率)。1 H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.29 (m, 5H), 4.61 (s, 2H), 3.75 (m, 1H), 3.6 (m, 2H), 3.5 (m, 2H), 1.45 (s, 9H)。
(ii). (4S)-4-((苄氧基)甲基)-1,2,3-噁噻唑啶-3-甲酸第三丁酯2-氧化物：將咪唑(12.3 g，182 mmol)溶解於DCM (250 mL)中且使溶液冷卻至0℃。逐滴添加含在DCM (38 mL)中之亞硫醯氯(6.47 g，54.5 mmol)及在室溫下攪拌所得懸浮液1小時。使反應混合物冷卻至-78℃，及歷時1小時時間添加(S)-(1-(苄氧基)-3-羥基丙-2-基)胺基甲酸第三丁酯(8.50 g，30.3 mmol)含在DCM (97 mL)中之溶液。在室溫下攪拌所得混合物16小時。通過矽藻土過濾該混合物並用DCM洗滌。用水、鹽水洗滌有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮，得到呈黃色膠之標題化合物(9.50 g，95%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。LCMS (m/z)：328.4 [M+2]。
(iii). (S)-4-((苄氧基)甲基)-1,2,3-噁噻唑啶-3-甲酸第三丁酯2,2-二氧化物：
將(4S)-4-((苄氧基)甲基)-1,2,3-噁噻唑啶-3-甲酸第三丁酯2-氧化物(9.50 g，29.0 mmol)溶解於MeCN (257 mL)中且冷卻至0℃。添加過碘酸鈉(31.5 g，145 mmol)、RuCl3 (0.06 g，0.29 mmol)，接著慢慢地添加水(176 mL)。在0℃下攪拌反應混合物30分鐘。用水稀釋該混合物且用EtOAc萃取。用水、鹽水洗滌有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到粗製殘餘物，將該殘餘物溶解於Et2 O中並通過二氧化矽墊過濾以得到呈白色固體之所需產物(8.00 g，80%產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.4 (m, 5H), 4.62–4.57 (m, 4H), 4.43 (m, 1H), 4.2 (m, 1H), 3.77–3.64 (m, 2H), 1.62 (s, 9H)。
(iv). (S)-3-(3-(芐氧基)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)丙氧基)-4-溴-5-氟-2-碘苯甲酸甲酯：在-10℃下，將氫化鈉(1.18 g，29.6 mmol)逐份添加至4-溴-5-氟-3-羥基-2-碘苯甲酸甲酯(9.20 g，24.7 mmol)含在無水DMF (552 mL)中之溶液。添加後，在室溫下再攪拌所得漿液15分鐘。在0℃下逐滴添加含在DMF (92 mL)中之 (S)-4-((苄氧基)甲基)-1,2,3-噁噻唑啶-3-甲酸第三丁酯2,2-二氧化物(7.12 g，24.7 mmol)及在室溫下攪拌混合物2小時。用冷水淬滅反應混合物，用1N HCl酸化並用EtOAc萃取。用水、鹽水洗滌有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮。將殘餘物溶解於DCM (60 mL)中且冷卻至0℃。添加4N HCl之二噁烷溶液(40 mL)並在室溫下攪拌反應混合物2小時。在真空下濃縮該反應混合物以得到粗製殘餘物，藉由矽膠層析(0-5% MeOH/DCM)純化該殘餘物，得到所需產物(3.80 g，46%產率)。1 H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.40 (m, 5H), 4.60 (s, 2H), 4.18–4.09 (m, 2H), 3.80–3.60 (m, 2H), 3.55 (m, 1H)。LCMS (m/z)：540.20 [M+2]。
(v). (S)-3-((苄氧基)甲基)-8-溴-7-氟-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-5-甲酸甲酯：將碳酸銫(6.88 g，21.2 mmol)添加至(S)-3-(3-(苄氧基)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)丙氧基)-4-溴-5-氟-2-碘苯甲酸甲酯(3.80 g，7.06 mmol)含在無水二噁烷(50 mL)中之溶液。添加Pd2 (dba)3 (0.32 g，0.35 mmol)、XantPhos (0.61 g，1.06 mmol)且在60℃下攪拌反應混合物16小時。通過矽藻土墊過濾粗製反應混合物且用過量的EtOAc洗滌。在真空下濃縮濾液以得到粗製殘餘物，藉由矽膠管柱層析(0-2%乙酸乙酯/己烷)純化該殘餘物，得到呈黃色固體之所需產物(2.20 g，76%產率)。LCMS (m/z)：412.24 [M+2]。
(vi). (S)-3-((苄氧基)甲基)-8-溴-7-氟-4-(3-甲氧基-3-側氧基丙醯基)-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-5-甲酸甲酯：將3-氯-3-側氧基-丙酸甲酯(2.78 g，20.5 mmol)添加至(S)-3-((苄氧基)甲基)-8-溴-7-氟-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-5-甲酸甲酯(2.10 g，5.12 mmol)含在無水甲苯(40 mL)中之溶液。添加後，在60℃下攪拌混合物6小時。用水淬滅反應混合物且用EtOAc萃取。用飽和NaHCO3 、鹽水洗滌有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到所需產物(2.40 g，92%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。LCMS (m/z)：512.24 [M+2]。
(vii). (S)-3-((苄氧基)甲基)-10-溴-9-氟-7-羥基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將碳酸銫(4.60 g，14.1 mmol)添加至(S)-3-((苄氧基)甲基)-8-溴-7-氟-4-(3-甲氧基-3-側氧基丙醯基)-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-5-甲酸甲酯(2.40 g，4.70 mmol)含在無水MeCN (40 mL)中之溶液。添加後，在60℃下攪拌混合物3小時。用冷水淬滅反應混合物，用1N HCl酸化至pH 3並用EtOAc萃取。在硫酸鈉上乾燥有機層，然後在真空下濃縮以得到粗製殘餘物，藉由用正戊烷研磨來純化該殘餘物，得到呈米色固體之所需產物(2.20 g，98%產率)。LCMS (m/z)：480.2 [M+2]。
(viii). (S)-3-((苄氧基)甲基)-10-溴-9-氟-5-側氧基-7-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將三乙胺(3.81 g，5.20 mL，37.7 mmol)添加至(S)-3-((苄氧基)甲基)-10-氯-9-氟-7-羥基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(2.00 g，4.18 mmol)含在DCM (40 mL)中之溶液。添加後，使該溶液冷卻至-78℃。在-78℃下逐滴添加三氟甲磺酸酐(5.30 g，18.8 mmol)並攪拌反應混合物10分鐘。在真空下濃縮該反應混合物以得到棕色膠 (2.50 g)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。LCMS (m/z)：612.2 [M+2]。
(ix). (S)-3-((苄氧基)甲基)-10-溴-9-氟-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-3-((苄氧基)甲基)-10-溴-9-氟-5-側氧基-7-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(2.50 g，4.09 mmol)溶解於無水DMF (100 mL)中且用氮氣脫氣5分鐘。添加DPPP (0.50 g，1.23 mmol)、Pd(II)OAc (0.14 g，0.61 mmol)且使反應混合物進一步脫氣5分鐘。使該反應混合物冷卻至0℃並逐滴添加三乙基矽烷(1.18 g，10.2 mmol)。在60℃下攪拌該反應混合物6小時。用冷水淬滅該反應混合物並用EtOAc萃取。用冷水、鹽水洗滌有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到粗製殘餘物，藉由矽膠管柱層析(0-30% EtOAc/己烷)純化該殘餘物，得到呈黃色固體之所需產物(1.20 g，64%產率)。1 H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.6 (s, 1H), 7.36 (d, J = 8.4, 1H), 7.33–7.26 (m, 5H), 5.20 (m, 1H), 5.00 (m, 1H), 4.58 (m, 2H), 4.30 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.73 (m, 2H)。LCMS (m/z)：464.2 [M+2]。
(x). (S)-3-((苄氧基)甲基)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(R)-(1-(吡咯啶-3-基)環丙基)胺基甲酸第三丁酯(0.29 g，1.29 mmol)及碳酸銫(1.00 g，3.25 mmol)添加至(S)-3-((苄氧基)甲基)-10-溴-9-氟-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.50 g，1.08 mmol)含在甲苯(10 mL)中之溶液，接著添加RuPhos (0.14 g，0.16 mmol)及RuPhos.PdG3 (0.08 g，0.16 mmol)。添加後，將反應混合物加熱至90℃持續5小時。通過矽藻土過濾粗製反應混合物並用過量的EtOAc洗滌。在真空下濃縮濾液以得到粗製殘餘物，藉由矽膠急驟層析(30-35% EtOAc/己烷)純化該殘餘物，得到呈橙色膠之所需產物(0.75 g)。LCMS (m/z)：608.26 [M+1]。
(xi). (S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-(羥甲基)-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將10%碳載鈀(50%(含在水中)，0.70 g)添加至(S)-3-((苄氧基)甲基)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.70 g，1.15 mmol)含在甲醇(10 mL)中之溶液。在室溫下於H2 氣氛(1 atm)下攪拌漿液3小時。通過矽藻土過濾反應混合物且在真空下濃縮以得到所需產物(0.45 g，75%產率)。LCMS (m/z)：518.2 [M+1]。
(xii). (S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-(羥甲基)-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-(羥甲基)-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.14 g，0.27 mmol)溶解於MeOH (2 mL)及水(2 mL)中。添加1M氫氧化鋰水溶液(0.80 mL，0.81 mmol)及在室溫下攪拌反應混合物2小時。用冷水稀釋該混合物，用1N HCl酸化至pH 4並用EtOAc萃取。在硫酸鈉上乾燥有機層並在真空下濃縮以得到呈黃色固體之所需產物(0.13 g，95%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。LCMS (m/z)：504.4 [M+1]。
(xiii). (S)-10-((R)-3-(1-胺基環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-(羥甲基)-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸化合物甲酸鹽：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-(羥甲基)-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸(0.13 g，0.25 mmol)溶解於DCM (2 mL)中且冷卻至0℃。添加4N HCl之二噁烷溶液(1 mL)並在室溫下攪拌反應混合物4小時。在真空下濃縮該反應混合物以得到粗製殘餘物，藉由製備型HPLC (甲酸緩衝液)純化該殘餘物，以得到呈黃色固體之所需產物(26.0 mg，25%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.25 (s, 1H), 7.52 (d, J = 12 Hz, 1H), 4.83–4.78 (m, 2H), 4.06–4.03 (m, 1H), 4.00–3.90 (m, 1H), 3.80–3.70 (m, 1H), 3.63–3.50 (m, 3H), 3.48–3.40 (m, 2H), 2.09–2.00 (m, 1H), 1.87–1.85 (m, 1H), 1.74–1.69 (m, 1H), 0.53–0.50 (m, 4H)。LCMS：tR = 1.36 min，m/z = 404.34 [M+1](3.5分鐘運行，方法B)。實例 3 ： (S)-10-((R)-3-(1- 胺基環丙基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-9- 氟 -3-( 甲氧基甲基 )-5- 側氧基 -2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噁嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -6- 甲酸甲酸鹽
依據下列反應圖製備標題化合物：
(i). (S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-(甲氧基甲基)-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-(羥甲基)-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.48 g，0.95 mmol)溶解於甲苯(10 mL)中且添加氧化銀(1.00 g，4.64 mmol)、碘甲烷(0.65 g，4.64 mmol)。添加後，將反應混合物加熱至40℃持續16小時。通過矽藻土過濾該粗製反應混合物並用過量的EtOAc洗滌。濃縮濾液以得到粗製殘餘物，其無需進一步純化即可用於下一反應中。LCMS (m/z)：532.26 [M+1]。
(ii). (S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-(甲氧基甲基)-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-(甲氧基甲基)-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.40 g，0.75 mmol)溶解於MeOH(5 mL)及水(5 mL)中。添加1M氫氧化鋰水溶液(2.25 mL，2.25 mmol)及在室溫下攪拌反應混合物2小時。用冷水稀釋該混合物，用1N HCl酸化至pH 4並用EtOAc萃取。在硫酸鈉上乾燥有機層，然後在真空下濃縮以得到呈黃色固體之所需產物(0.20 g，51%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。LCMS (m/z)：518.4 [M+1]。
(iii). (S)-10-((R)-3-(1-胺基環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-(甲氧基甲基)-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸：將((S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-(甲氧基甲基)-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸(0.20 g，0.39 mmol)溶解於DCM (1 mL)中且冷卻至0℃。添加4N HCl之二噁烷溶液(2 mL)並在室溫下攪拌反應混合物4小時。在真空下濃縮該反應混合物以得到粗製殘餘物，藉由製備型HPLC純化將該殘餘物純化，以得到呈黃色固體之所需產物(58.0 mg，36%產率)。1 H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.53 (s, 1H), 7.26 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 5.16–5.14 (m, 1H), 4.85–4.82 (m, 1H), 4.06–4.03 (m, 2H), 3.95–3.91 (m, 3H), 3.65–3.62 (m, 2H), 3.45 (s, 3H), 2.75–2.71 (m, 1H), 2.14–2.10 (m, 1H), 1.78–1.74 (m, 1H), 0.98–0.90 (m, 4H)。LCMS：tR = 1.49 min，m/z = 418.4 [M+1](3.5分鐘運行，方法B)。實例 4 ： (R)-10-((R)-3-(1- 胺基環丙基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-9- 氟 -3-( 氟甲基 )-5- 側氧基 -2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噁嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -6- 甲酸
依下列反應圖製備標題化合物：
(i). (R)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-(氟甲基)-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-(羥甲基)-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.20 g，0.39 mmol)溶解於MeCN(15 mL)中且冷卻至-40℃。添加全氟-1-丁磺醯氟(0.23 g，0.77 mmol)、Et3 N (0.16 g，0.21 mL，1.55 mmol)及Et3 N.3HF (124 mg，0.13 mL，0.77 mmol)及在室溫下攪拌反應混合物過夜。用乙酸乙酯稀釋該反應混合物且用飽和NaHCO3 溶液洗滌，在Na2 SO4 上乾燥，然後在真空下濃縮。藉由矽膠層析(30-35% EtOAc/己烷)純化粗製殘餘物，得到呈黃色固體之所需產物(0.16 g，80%產率)。LCMS (m/z)：520.55 [M+1]。
(ii).((R)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-(氟甲基)-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸：將(R)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-(氟甲基)-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.16 g，0.31 mmol)溶解於MeOH (3 mL)及水(1 mL)中。添加1M氫氧化鋰水溶液(0.92 mL，0.92 mmol)及在室溫下攪拌反應混合物2小時。用冷水稀釋該混合物，用1N HCl酸化至pH 4並用EtOAc萃取。在硫酸鈉上乾燥已合併的有機層，然後在真空下濃縮以得到呈黃色固體之所需產物(146 mg，94%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。LCMS (m/z)：506.52 [M+1]。
(iii). (R)-10-((R)-3-(1-胺基環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-(氟甲基)-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸：將((R)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-(氟甲基)-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸(146 mg，0.29 mmol)溶解於DCM (4 mL)中且冷卻至0℃。添加4N HCl之二噁烷溶液(2 mL)及在室溫下攪拌反應混合物4小時。在真空下濃縮該反應混合物以得到粗製殘餘物，藉由製備型HPLC純化將該殘餘物純化，得到呈黃色固體之所需產物(24.0 mg，20%產率)。1 H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.54 (s, 1H), 7.25 (m, 1H), 5.24–5.00 (m, 2H), 4.83–4.78 (m, 2H), 4.63 (m, 1H), 4.10–4.06 (m, 1H), 4.00–3.90 (m, 1H), 3.91–3.57 (m, 3H), 2.44 (m, 1H), 2.18 (m, 1H), 1.77 (m, 1H), 0.89 (m, 4H)。LCMS：tR = 1.50 min，m/z = 406.34 [M+1] (3.5分鐘運行，方法B)。實例 5 ： (S)-10-((R)-3-(1- 胺基環丙基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-9- 氟 -3- 甲基 -5- 側氧基 -2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噁嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -6- 甲腈三氟乙酸鹽
依下列反應圖製備標題化合物：
(i). (S)-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸：將LiOH.H2 O (1M水溶液，6.75 mL，6.75 mmol)添加至(S)-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.40 g，1.12 mmol)含在MeOH:H2 O (3:1，8 mL)中之溶液。在室溫下攪拌混合物3小時。完成後，在減壓下濃縮該混合物且用冷水稀釋，用1N HCl酸化至pH 2-3並用EtOAc萃取。用鹽水洗滌有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到所需產物(0.36 g，72%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。1 H NMR (400 MHz, DMSO) δ 14.18 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 7.78 (d, J=8.4 Hz, 1H), 5.09–5.06 (m, 1H), 4.72–4.69 (m, 1H), 4.33–4.30 (m, 1H), 1.33 (d, J=6.4 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：344.16 [M+2]。
(ii).(S)-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲醯胺：在氮氣下，將(S)-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸(0.36 g，1.07 mmol)、EDC.HCl (0.25 g，1.28 mmol)及HOBt (0.22 g，1.61 mmol)溶解於DMF (8 mL)中且允許在0至5℃下攪拌15分鐘。添加N -甲基嗎啉(0.54 g，5.35 mmol)及NH4 Cl (0.12 g，2.14 mmol)及在室溫下攪拌所得混合物2小時。完成後，用冰冷的水淬滅反應混合物及用EtOAc萃取。用水、鹽水洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到所需產物(0.30 g，77%產率)，其在無需任何進一步純化下即可直接用於下一步驟中。LCMS (m/z)：343.21 [M+2]。
(iii). (S)-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲腈：在0℃下，將(S)-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲醯胺(0.30 g，0.88 mmol)溶解於吡啶(3 mL)中。將三氟乙酸酐(0.92 g，4.41 mmol)慢慢地添加至上述溶液並在0℃下攪拌混合物1小時。用1N HCl淬滅反應混合物且藉由EtOAc萃取。在真空下濃縮已合併的有機層以得到粗製殘餘物，藉由矽膠層析(100%己烷至100% EtOAc)純化該殘餘物，得到所需產物(0.20 g，74%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.20 (s, 1H), 7.12 (d, J=7.6 Hz, 1H), 5.18 (m, 1H), 4.65–4.62 (m, 1H), 4.27–4.23 (m, 1H), 1.49–1.47 (m, 3H)。LCMS (m/z)：325.02 [M+2]。
(iv). (1-((R)-1-((S)-6-氰基-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-10-基)吡咯啶-3-基)環丙基)胺基甲酸第三丁酯：將RuPhos (43.0 mg，0.09 mmol)及RuPhos.PdG3 (26.0 mg，0.03 mmol)添加至含在甲苯(8 mL)中之(S)-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲腈(0.20 g，0.62 mmol)、(R)-(1-(吡咯啶-3-基)氯丙基)胺基甲酸第三丁酯(0.17 g，0.74 mmol)及Cs2 CO3 (0.51 g，1.55 mmol)。然後將反應混合物加熱至80℃持續5小時。完成後，通過矽藻土過濾反應漿液及用過量的EtOAc洗滌。在真空下濃縮有機層以得到粗製殘餘物，使用矽膠層析(25-75% EtOAc/己烷)純化該殘餘物得到呈淺黃色膠之所需產物(0.07 g，24%產率)。LCMS (m/z)：469.47 [M+1]。
(v). (S)-10-((R)-3-(1-胺基環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲腈：將(1-((R)-1-((S)-6-氰基-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-10-基)吡咯啶-3-基)環丙基)胺基甲酸第三丁酯(0.05 g，0.10 mmol)溶解於DCM (5 mL)中且冷卻至0℃。添加TFA (0.5 mL)並在室溫下攪拌反應混合物2小時。在真空下濃縮該反應混合物以得到粗製殘餘物，將該殘餘物溶解於水中並凍乾，得到所需產物(14.0 mg，35%產率)。1 H NMR (400 MHz, 甲醇-d4 ) δ 8.34 (s, 1H), 7.17 (d, J=13.6 Hz, 1H), 5.02–4.93 (m, 1H), 4.51–4.48 (m, 1H), 4.06–3.95 (m, 2H), 3.79–3.70 (m, 3H), 2.61–2.56 (m, 1H), 2.15–2.09 (m, 1H), 1.73–1.68 (m, 1H), 1.40–1.37 (m, 1H), 1.00–0.97 (m, 4H)。LCMS：tR = 1.43 min，m/z = 369.42 [M+1] (3.5分鐘運行，方法B)。實例 6.1 ： (S)-9- 氟 -3- 甲基 -10-((R)-3-(1-((2,2,2- 三氟乙醯基 )-l4- 氮烷基 ) 環丙基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噁嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -5- 酮三氟乙酸鹽
依下列反應圖製備標題化合物：
(i). (S)-4-乙醯基-8-溴-7-氟-3-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-5-甲酸甲酯：將(S)-8-溴-7-氟-3-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-5-甲酸甲酯(2.00 g，6.57 mmol)溶解於甲苯(20 mL)中。在室溫下逐滴添加乙醯氯(1.50 g，19.7 mmol)並在60℃下攪拌反應混合物4小時。用水淬滅該反應混合物，用NaHCO3 溶液中和並用EtOAc萃取。用鹽水洗滌有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到粗製殘餘物，藉由矽膠層析(0-50% EtOAc/己烷)純化該殘餘物，得到所需產物(1.70 g，75%產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) (2種旋轉異構體存在) δ 7.41 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.35–5.33 (m, 2H), 4.46–4.31 (m, 4H), 3.90 (d, J = 18.7 Hz, 6H), 2.27 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 1.99 (s, 3H), 1.39 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.17 (d, J = 7.1 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：348.2 [M+2]。
(ii). (S)-10-溴-9-氟-7-羥基-3-甲基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-5-酮：將(S)-4-乙醯基-8-溴-7-氟-3-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-5-甲酸甲酯(1.90 g，5.54 mmol)溶解於無水THF (80 mL)中且將反應混合物冷卻至-78℃。逐滴添加NaHMDS (1.0M之THF溶液，11.0 mL，11.0 mmol)並在-78℃下攪拌該反應混合物1小時。在-78℃下用水淬滅該反應混合物並在室溫下倒入至水中。用稀HCl酸化水層，過濾白色沉澱，用冷水洗滌，然後在真空下乾燥以得到所需產物(1.40 g，81%產率)。LCMS (m/z)：316.2 [M+2]。
(iii). 三氟甲磺酸(S)-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-7-基酯：將Et3 N (2.70 g，3.72 mL，26.8 mmol)添加至含在DCM (15 mL)中之(S)-10-溴-9-氟-7-羥基-3-甲基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-5-酮(1.40 g，4.45 mmol)，接著冷卻至-78℃。逐滴添加三氟甲磺酸酐(5.00 g，17.8 mmol)並在-78℃下攪拌反應混合物30分鐘。用EtOAc稀釋該反應混合物且用冷水、鹽水洗滌，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮，以得到粗製殘餘物，藉由矽膠層析(0-30% EtOAc/己烷)純化該殘餘物，得到所需產物(1.40 g，70%產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.23 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.87–6.79 (m, 1H), 5.16 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.25 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 1.48 (d, J = 6.7 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：448.2 [M+2]。
(iv). (S)-10-溴-9-氟-3-甲基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-5-酮：將三氟甲磺酸(S)-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-7-基酯(0.70 g，1.56 mmol)溶解於無水DMF (10 mL)中。添加DPPP (0.19 g，0.47 mmol)、Pd(II)OAc (0.05 g，0.23 mmol)及用氮氣使反應混合物脫氣5分鐘。添加三乙基矽烷(0.40 g，3.92 mmol)且在60℃下攪拌該反應混合物1小時。用冷水淬滅該反應混合物並用EtOAc萃取。用水、鹽水洗滌有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到粗製殘餘物，藉由矽膠管柱層析(0-35% EtOAc/己烷)純化該殘餘物，得到所需產物(0.30 g，64%產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.69–7.62 (m, 1H), 7.04 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.79 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 5.18–5.11 (m, 1H), 4.60 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 4.29–4.19 (m, 1H), 1.46 (d, J = 6.7 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：300.2 [M+2]。
(v). (1-((R)-1-((S)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-10-基)吡咯啶-3-基)環丙基)胺基甲酸第三丁酯：將(S)-10-溴-9-氟-3-甲基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-5-酮(73.0 mg，0.24 mmol)及甲苯(2 mL)加入微波小瓶中。添加(S)-(1-(吡咯啶-3-基)環丙基)胺基甲酸第三丁酯(83.0 mg，0.37 mmol)、RuPhos (23.0 mg，0.05 mmol)、RuPhos Pd G3 (41.0 mg，0.05 mmol)及碳酸銫(239 mg，0.74 mmol)。將混合物加熱至90℃持續4小時。通過拋棄式過濾漏斗過濾粗製混合物且在減壓下蒸發揮發物。矽膠層析(0-100% EtOAc/庚烷)得到呈黃色固體之產物(20.0 mg，18%產率)。LCMS (m/z)：444.5 [M+1]。
(vi). (S)-10-((R)-3-(1-胺基環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸三氟乙酸鹽：將(1-((R)-1-((S)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-10-基)吡咯啶-3-基)環丙基)胺基甲酸第三丁酯(20.0 mg，0.04 mmol)溶解於DCM (0.5 mL)中並添加TFA (0.5 mL)，接著在室溫下攪拌1小時。蒸發溶劑且在逆相HPLC上純化粗物質，得到呈黃色固體之產物(8.00 mg，27%產率)。1 H NMR (400 MHz, 甲醇-d4 ) δ 7.76 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 6.51 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 5.00 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 4.48 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 4.07 (dd, J = 11.3, 2.0 Hz, 1H), 3.79–3.49 (m, 4H), 2.48 (p, J = 7.4 Hz, 1H), 2.23–2.08 (m, 1H), 1.78 (dq, J = 12.3, 8.6 Hz, 1H), 1.41–1.29 (m, 3H), 1.04–0.90 (m, 4H)。LCMS：tR = 1.70 min，m/z = 344.4 [M+1](10分鐘運行，方法A)。
使用針對實例6.1所述的程序，製備下列化合物：
HPLC法：特徵係在Waters ACQUITY H型UPLC系統上之高效液相層析(HPLC)，其中0.55 mL/min流速；管柱BEH-C18，1.7 um，2.1 x 50 mm，購自Waters，管柱溫度：環境溫度；梯度(溶劑A為2 mM乙酸銨及0.1%甲酸之水溶液，溶劑B為0.1%甲酸之乙腈溶液)：歷時0.4分鐘維持5%溶劑B，歷時0.6分鐘從5%溶劑B變為40%溶劑B，歷時1.2分鐘從40%溶劑B變為60%溶劑B，歷時2.3分鐘從60%溶劑B變為100%溶劑B，然後歷時3分鐘保持100%溶劑B；藉由在236 nm下之紫外光(UV)吸收偵測化合物。實例 7.1 ： (3S)-7-( 胺基甲基 )-10-(3-( 胺基甲基 )-3- 氟吡咯啶 -1- 基 )-9- 氟 -3- 甲基 -2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噁嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -5- 酮三氟乙酸鹽
依下列反應圖製備標題化合物：
(i). (S)-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-7-甲腈：用氰化鋅(II) (34.9 mg，0.30 mmol)及肆三苯基膦鈀(66.0 mg，0.06 mmol)處理三氟甲磺酸(S)-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-7-基酯(255 mg，0.57 mmol)含在DMF (5.5 mL)中之溶液。將混合物加熱至80℃過夜。反應完成後，用NaHCO3 水溶液淬滅漿液且用EtOAc萃取。用飽和NaHCO3 水溶液、鹽水洗滌有機萃取物，在Na2 SO4 上乾燥，過濾，然後在減壓下濃縮。矽膠層析(0至60% EtOAc/庚烷)提供呈黃色固體之產物(132 mg，72%產率)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.35 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 5.16–5.07 (m, 1H), 4.65–4.55 (m, 1H), 4.20 (dd, J = 11.5, 2.3 Hz, 1H), 1.43 (d, J = 6.7 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：325.0 [M+2]。
(ii). ((1-((S)-7-氰基-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-10-基)-3-氟吡咯啶-3-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯：將(S)-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-7-甲腈(70.0 mg，0.22 mmol)及甲苯(2 mL)加入微波小瓶中。添加((3-氟吡咯啶-3-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯(110 mg，0.50 mmol)、RuPhos (20.0 mg，0.04 mmol)、RuPhos Pd G3 (36.0 mg，0.04 mmol)及碳酸銫(212 mg，0.65 mmol)。在90℃下加熱混合物過夜。通過拋棄式過濾漏斗過濾粗製混合物且在減壓下蒸發揮發物。矽膠層析(0-100% EtOAc/庚烷)提供呈黃色固體之產物(87.0 mg，87%產率)。LCMS (m/z)：461.2 [M+1]。
(iii). ((1-((S)-7-(胺基甲基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-10-基)-3-氟吡咯啶-3-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯：用Pd/C (10%乾重，50%水，118 mg，0.06 mmol)處理((1-((S)-7-氰基-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-10-基)-3-氟吡咯啶-3-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯(85.0 mg，0.18 mmol)含在2M NH3 之MeOH溶液(2.5 mL)中之混合物。將燒瓶部分抽空且用H2 回填5次，然後，在氫氣氣球下攪拌1小時。完成後，使反應混合物通過針筒過濾器，然後在減壓下濃縮，以得到呈黃色油之產物。LCMS (m/z)： 465.3 [M+1]。
(iv). (3S)-7-(胺基甲基)-10-(3-(胺基甲基)-3-氟吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-5-酮三氟乙酸鹽：將((1-((S)-7-(胺基乙基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-10-基)-3-氟吡咯啶-3-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯(86.0 mg，0.18 mmol)溶解於DCM (1 mL)中並添加TFA (1 mL)。然後，在室溫下攪拌混合物30分鐘。蒸發溶劑並在逆相HPLC上純化粗物質，得到呈黃色固體之產物(46.0 mg，42%產率)。1 H NMR (400 MHz, 甲醇-d4 ) δ 7.27 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 6.61 (s, 1H), 5.13–5.00 (m, 1H), 4.55 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 4.41 (s, 2H), 4.25–4.02 (m, 3H), 3.87–3.65 (m, 2H), 3.51 (ddd, J = 20.5, 8.1, 1.5 Hz, 2H), 2.47–2.07 (m, 2H), 1.40 (d, J = 5.8 Hz, 3H)。LCMS：tR = 1.02 min，m/z = 365.5 [M+1](10分鐘運行，方法A)。
使用針對實例7.1所述的程序，製備下列化合物： 1 未進行步驟(iii)
HPLC方法A：特徵係在Waters ACQUITY UPLC系統上之高效液相層析(HPLC)，其中1.2 mL/min流速；管柱Kinetex-C18，2.6 um，2.1 x 50 mm，購自Phenomenex，管柱溫度：50℃；梯度：歷時9.29分鐘時間2%-88% MeCN/具有0.1% TFA之水(除非另作指明)；藉由在220 nm下之紫外光(UV)吸收偵測化合物。
HPLC方法B：特徵係在Waters ACQUITY H型UPLC系統上之高效液相層析(HPLC)，其中0.55 mL/min流速；管柱BEH-C18，1.7 um，2.1 x 50 mm，購自Waters，管柱溫度：環境溫度；梯度(溶劑A為2 mM乙酸銨及0.1%甲酸之水溶液，溶劑B為0.1%甲酸之乙腈溶液)：歷時0.4分鐘維持5%溶劑B，歷時0.6分鐘從5%溶劑變為40%溶劑B，歷時1.2分鐘從40%溶劑B變為60%溶劑B，歷時2.3分鐘從60%溶劑B變為100%溶劑B，然後歷時3分鐘保持100%溶劑B；藉由在236 nm下之紫外光(UV)吸收偵測化合物。實例 8 ： 10-((R)-3-(1- 胺基環丙基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-9- 氟 -3- 甲基 -5- 側氧基 -2,3- 二氫 -1H,5H- 吡咯并 [3,2,1-ij] 喹啉 -6- 甲酸三氟乙酸鹽
依下列反應圖製備標題化合物：
(i). 2-胺基-4-溴-3-(3-((第三丁氧基羰基)胺基)丁-1-炔-1-基)-5-氟苯甲酸甲酯：在65℃下攪拌含在Et3 N (30 mL)中之2-胺基-4-溴-5-氟-3-碘苯甲酸甲酯(3.30 g，8.82 mmol)、丁-3-炔-2-基胺基甲酸第三丁酯(1.87 g，11.0 mmol)、碘化銅(I) (0.08 g，0.44 mmol)及雙(三苯基膦)氯化鈀(II) (0.62 g，0.88 mmol)之混合物持續2小時。接著，使混合物冷卻降溫，用乙酸乙酯稀釋，過濾，濃縮，然後藉由矽膠層析(從100%庚烷變為100%乙酸乙酯)純化，得到所需產物(2.95 g，85%產率)。LCMS (m/z)：417.4 [M+2]。
(ii). 2-胺基-3-(3-胺基丁-1-炔-1-基)-4-溴-5-氟苯甲酸甲酯：將4N HCl之二噁烷溶液(17.5 mL，69.8 mmol)添加至含在MeOH (20 mL)中之2-胺基-4-溴-3-(3-((第三丁氧基羰基)胺基)丁-1-炔-1-基)-5-氟苯甲酸甲酯(2.90 g，6.98 mmol)且在室溫下攪拌所得溶液3小時。蒸發溶劑，且所得粗製產物無需進一步純化即可直接用於隨後的步驟中。LCMS (m/z)：318.3 [M+2]。
(iii). 2-胺基-4-溴-3-(3-((第三丁氧基羰基)胺基)丁基)-5-氟苯甲酸甲酯：將氧化鈀(IV) (0.32 g，1.40 mmol)添加至2-胺基-3-(3-胺基丁-1-炔-1-基)-4-溴-5-氟苯甲酸甲酯(2.46 g，6.98 mmol)含在EtOH (20 mL)中之經脫氣之溶液。在氫氣氣氛下攪拌反應容器1.5小時。完成後，蒸發溶劑並添加THF (20 mL)，接著添加Et3 N (3.18 g，4.38 mL，31.4 mmol)及Boc酸酐(2.75 g，12.6 mmol)。在室溫下攪拌所得懸浮液1小時。接著過濾漿液，蒸發溶劑，然後藉由矽膠層析(從100%庚烷變為100%乙酸乙酯)純化粗物質，得到所需產物(1.72 g，65%產率)。LCMS (m/z)：421.3 [M+2]。
(iv). 4-溴-3-(3-((第三丁氧基羰基)胺基)丁基)-5-氟-2-碘苯甲酸甲酯：在-20℃下，將含在DCM (6 mL)中之2-胺基-4-溴-3-(3-((第三丁氧基羰基)胺基)丁基)-5-氟苯甲酸甲酯(500 mg，1.19 mmol)添加至經攪拌之四氟硼酸亞硝鎓(279 mg，2.39 mmol)之懸浮液。在該溫度下攪拌混合物1小時。蒸發DCM且將所得重氮鎓鹽立刻溶解於乙腈(12 mL)中。將二苯并-18-冠-6 (43.0 mg，0.12 mmol)及碘化鉀(990 mg，5.96 mmol)添加至該溶液。在室溫下攪拌該懸浮液30分鐘及然後在65℃下攪拌14小時。過濾該反應混合物並移除溶劑。藉由矽膠層析(從100%庚烷變為100%乙酸乙酯)純化粗製混合物，得到所需產物(228 mg，36%產率)。LCMS (m/z)：532.3 [M+2]。
(v). 3-(3-胺基丁基)-4-溴-5-氟-2-碘苯甲酸甲酯鹽酸鹽：將4-溴-3-(3-((第三丁氧基羰基)胺基)丁基)-5-氟-2-碘苯甲酸甲酯(300 mg，0.57 mmol)溶解於DCM/MeOH (4/4 mL)中及添加4N HCl之二噁烷溶液(1.42 mL，5.66 mmol)。在室溫下攪拌所得溶液2小時。蒸發溶劑且產物無需進一步純化即可用於下一步驟中。LCMS (m/z)：432.2 [M+2]。
(vi). 5-溴-6-氟-2-甲基-1,2,3,4-四氫喹啉-8-甲酸甲酯：將Pd2 (dba)3 (49.0 mg，0.05 mmol)、氧雜蒽膦(93.0 mg，0.16 mmol)及碳酸銫(701 mg，2.15 mmol)添加至3-(3-胺基丁基)-4-溴-5-氟-2-碘苯甲酸甲酯鹽酸鹽(251 mg，0.54 mmol)含在無水二噁烷(2 ml)中之溶液。在90℃下攪拌混合物過夜。過濾懸浮液然後在真空中濃縮。藉由矽膠層析(從100%庚烷變為40% EtOAc/庚烷)純化粗物質，得到產物(130 mg，80%產率)。LCMS (m/z)：304.3 [M]。
(vii). 5-溴-6-氟-1-(3-甲氧基-3-側氧基丙醯基)-2-甲基-1,2,3,4-四氫喹啉-8-甲酸甲酯：將3-氯-3-側氧基-丙酸甲酯(542 mg，3.97 mmol)添加至5-溴-6-氟-2-甲基-1,2,3,4-四氫喹啉-8-甲酸甲酯(300 mg，0.99 mmol)含在無水甲苯(4 mL)中之溶液，接著在60℃下攪拌1小時。蒸發溶劑且藉由凝膠層析(0-100% EtOAc/庚烷)純化粗物質，得到所需產物(399 mg，99%產率)。LCMS (m/z)：404.0 [M+2]。
(viii). 10-溴-9-氟-7-羥基-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-1H,5H-吡啶并[3,2,1-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將碳酸銫(753 mg，2.31 mmol)添加至5-溴-6-氟-1-(3-甲氧基-3-側氧基丙醯基)-2-甲基-1,2,3,4-四氫喹啉-8-甲酸甲酯(310 mg，0.77 mmol)含在乙腈(6 mL)中之溶液。在60℃下攪拌混合物1小時。用水淬滅反應混合物並用1N HCl溶液酸化以調整pH至2-3。添加EtOAc，然後，分離相。用EtOAc萃取水層，且在Na2 SO4 上乾燥有機層，過濾，然後濃縮。藉由矽膠層析(從100%庚烷變為100% EtOAc)純化粗物質，得到所需產物(285 mg，99%產率)。1 H NMR (400 MHz, 甲醇-d4 ) δ 7.79 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.28–5.19 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.36–3.29 (m, 1H), 3.15 (dd, J = 17.8, 4.9 Hz, 1H), 2.98 (ddd, J = 18.1, 13.8, 5.8 Hz, 1H), 2.24–2.14 (m, 1H), 1.96 (tt, J = 13.8, 5.0 Hz, 1H), 1.23 (d, J = 6.7 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：372.2 [M+2]。
(ix). 10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-7-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)-2,3-二氫-1H,5H-吡啶并[3,2,1-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：在0℃下，將三乙胺(246 mg，0.34 mL，2.43 mmol)及三氟甲磺酸酐(686 mg，0.41 mL，2.43 mmol)添加至10-溴-9-氟-7-羥基-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-1H,5H-吡啶并[3,2,1-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(300 mg，0.81 mmol)含在DCM (6 mL)中之溶液。在15分鐘後完成反應。蒸發溶劑，得到呈深棕色油之產物。LCMS (m/z)：502.2 [M]。
(x). 10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-1H,5H-吡啶并[3,2,1-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將粗製10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-7-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)-2,3-二氫-1H,5H-吡啶并[3,2,1-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(400 mg，0.80 mmol)溶解於無水DMF (4 mL)中。在N2 沖洗下按順序添加DPPP (99.0 mg，0.24 mmol)、乙酸鈀(II) (27.0 mg，0.12 mmol)及三乙基矽烷(232 mg，0.32 mL，1.99 mmol)。在60℃下攪拌反應混合物4小時。用EtOAc稀釋粗製混合物並用水萃取。用水洗滌有機層，在Na2 SO4 上乾燥，然後過濾。蒸發溶劑，且藉由矽膠層析(0-100% EtOAc/己烷)純化粗製殘餘物，以得到呈黃色固體之所需產物(141 mg，50%產率，2個步驟)，其中存在一定量des-溴產物。1 H NMR (500 MHz, 甲醇-d4 ) δ 8.52 (s, 1H), 7.59 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 5.40–5.23 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.21 (dd, J = 17.8, 4.9 Hz, 1H), 3.04 (ddd, J = 18.2, 13.8, 5.7 Hz, 1H), 2.30–2.23 (m, 1H), 2.11–1.97 (m, 1H), 1.30 (d, J = 6.7 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：356.2 [M+2]。
(xi). 10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-1H,5H-吡啶并[3,2,1-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-1H,5H-吡啶并[3,2,1-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(138 mg，0.39 mmol)及甲苯(4 mL)加入微波小瓶中。添加(S)-(1-(吡咯啶-3-基)環丙基)胺基甲酸第三丁酯(176 mg，0.78 mmol)、RuPhos (18.0 mg，0.04 mmol)、RuPhos Pd G3 (33.0 mg，0.04 mmol)及碳酸銫(381 mg，1.17 mmol)。將混合物加熱至100℃持續1.5小時。通過拋棄式過濾漏斗過濾粗製混合物並在減壓下蒸發揮發物。矽膠層析(0-100% EtOAc/庚烷)得到呈黃色固體之非對映異構體混合物(117 mg)。藉由SFC (管柱：AS 21 x 250 mm，CO2 /EtOH = 85/15，流速100 ml/min)進一步分離該混合物，以得到所需非對映異構體(未測定相對立體化學，55 mg，28%產率)。LCMS (m/z)：500.3 [M+1]。
(xii). 10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-1H,5H-吡啶并[3,2,1-ij]喹啉-6-甲酸：將10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-1H,5H-吡啶并[3,2,1-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(55.0 mg，0.11 mmol)溶解於MeOH (1 mL)及水(1 mL)中。在室溫下添加氫氧化鋰水合物(18.5 mg，0.44 mmol)。攪拌3小時後，用水稀釋混合物，且用1M HCl處理。用EtOAc萃取水層，且用鹽水洗滌有機萃取物，在Na2 SO4 上乾燥，過濾，然後在減壓下濃縮以得到所需產物。LCMS (m/z)：486.3 [M+1]。
(xi). (S)-10-((R)-3-(1-胺基環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸鹽酸鹽：將粗製(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸(12.0 mg，0.03 mmol)溶解於DCM (1 mL)中，然後添加4N HCl之二噁烷溶液(1 mL)。在室溫下攪拌所得混合物2小時。蒸發溶劑，藉由製備型HPLC純化(TFA緩衝液)將粗製殘餘物純化，得到所需產物(4.50 mg，36%產率)。1 H NMR (400 MHz, 甲醇-d4 ) δ 8.78 (s, 1H), 7.58 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 5.36–5.20 (m, 1H), 3.91–3.84 (m, 1H), 3.76 (td, J = 8.8, 3.6 Hz, 1H), 3.19 (q, J = 7.7 Hz, 1H), 3.09–2.94 (m, 3H), 2.84–2.72 (m, 1H), 2.27–2.15 (m, 2H), 1.99–1.82 (m, 2H), 1.37 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.97 (dd, J = 11.2, 4.3 Hz, 4H)。LCMS：tR = 2.19 min，m/z = 386.6 [M+1] (10分鐘運行，方法A)。實例 9.1 ： 9-((R)-3-(1- 胺基環丙基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-8- 氟 -2- 甲基 -4- 側氧基 -1,2- 二氫 -4H- 吡咯并 [3,2,1-ij] 喹啉 -5- 甲酸鹽酸鹽
依下列反應圖製備標題化合物：
(i). 2-胺基-4-溴-5-氟-3-(丙-1-炔-1-基)苯甲酸甲酯：在0℃下，將丙炔氣體(過量，未定量)鼓入2-胺基-4-溴-5-氟-3-碘苯甲酸甲酯(4.00 g，10.7 mmol)、碘化酮(I) (0.21 g，1.07 mmol)、(dppf)氯化鈀(II)二氯甲烷加成物(0.44 g，0.54 mmol)含在Et3 N (30 mL)及DMF (20 mL)中之混合物中持續10分鐘。密封該反應並在70℃下攪拌24小時。接著，使混合物冷卻降至室溫，通過矽藻土過濾，濃縮，然後藉由矽膠層析(從100%庚烷變為30%乙酸乙酯/庚烷)純化，得到所需產物(2.00 g，65%產率)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.56 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 6.36 (br s, 2H), 3.87 (s, 3H), 2.22 (s, 3H)。LCMS (m/z)：288.2 [M+2]。
(ii). 4-溴-5-氟-2-甲基-1H-吲哚-7-甲酸甲酯：將氯化鈀(II) (0.04 g，0.22 mmol)添加至含在乙腈(20 mL)中之2-胺基-4-溴-5-氟-3-(丙-1-炔-1-基)苯甲酸甲酯(2.50 g，8.74 mmol)且在回流下攪拌所得混合物3小時。使反應混合物冷卻降至室溫，蒸發溶劑，且藉由矽膠層析(從100%庚烷變為100%乙酸乙酯)純化所得粗製產物，得到所需產物(2.35 g，94%產率)。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.33 (s, 1H), 7.51 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 6.30 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 2.47 (s, 3H)。LCMS (m/z)：288.1 [M+2]。
(iii). 4-溴-5-氟-2-甲基吲哚啉-7-甲酸甲酯：將三乙基矽烷(4.47 g，6.14 mL，38.4 mmol)添加至4-溴-5-氟-2-甲基-1H-吲哚-7-甲酸甲酯(1.10 g，3.84 mmol)含在TFA (8 mL)中之懸浮液。在65℃下攪拌所得混合物1小時。完成後，使該混合物冷卻降至室溫，蒸發溶劑，且用EtOAc稀釋所得粗製產物並用NaHCO3 飽和溶液萃取。用水進一步洗滌有機層，在MgSO4 上乾燥，然後過濾。蒸發溶劑，得到所需產物(1.10 g，99%產率)。該產物無需進一步純化即可用於下一步驟中。LCMS (m/z)：290.2 [M+2]。
(iv). 4-溴-5-氟-1-(3-甲氧基-3-側氧基丙醯基)-2-甲基吲哚啉-7-甲酸甲酯：將3-氯-3-側氧基-丙酸甲酯(2.10 g，15.4 mmol)添加至4-溴-5-氟-2-甲基吲哚啉-7-甲酸甲酯(1.10 g，3.85 mmol)含在無水甲苯(16 mL)中之溶液。在60℃下攪拌混合物1小時。使該混合物冷卻降至室溫，用EtOAc稀釋並用NaHCO3 飽和溶液萃取。用水進一步洗滌有機層，在MgSO4 上乾燥，然後過濾。蒸發溶劑，且粗製產物無需進一步純化即可用於下一步驟中。LCMS (m/z)：390.3 [M+2]。
(v). 9-溴-8-氟-6-羥基-2-甲基-4-側氧基-1,2-二氫-4H-吡咯并[3,2,1-ij]喹啉-5-甲酸甲酯：將碳酸銫(3.77 g，11.6 mmol)添加至4-溴-5-氟-1-(3-甲氧基-3-側氧基丙醯基)-2-甲基吲哚啉-7-甲酸甲酯(1.50 g，3.85 mmol)含在乙腈(35 mL)中之溶液。在60℃下攪拌混合物1小時。用水淬滅反應混合物且用1N HCl溶液酸化以調整pH至2-3。添加EtOAc，然後分離相。用EtOAc萃取水層，且在Na2 SO4 上乾燥有機層，過濾，然後濃縮。粗製產物無需進一步純化即可用於下一步驟中。LCMS (m/z)：358.3 [M+2]。
(vi). 9-溴-8-氟-2-甲基-4-側氧基-6-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)-1,2-二氫-4H-吡咯并[3,2,1-ij]喹啉-5-甲酸甲酯：在0℃下，將三乙胺(0.57 g，0.79 mL，5.64 mmol)及三氟甲磺酸酐(1.59 g，0.95 mL，5.64 mmol)添加至9-溴-8-氟-6-羥基-2-甲基-4-側氧基-1,2-二氫-4H-吡咯并[3,2,1-ij]喹啉-5-甲酸甲酯(0.67 g，1.88 mmol)含在無水DCM (12 mL)中之溶液。15分鐘後完成反應。蒸發溶劑，得到呈深棕色油之產物。LCMS (m/z)：490.1 [M+2]。
(vii). 9-溴-8-氟-2-甲基-4-側氧基-1,2-二氫-4H-吡咯并[3,2,1-ij]喹啉-5-甲酸甲酯：將粗製9-溴-8-氟-2-甲基-4-側氧基-6-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)-1,2-二氫-4H-吡咯并[3,2,1-ij]喹啉-5-甲酸甲酯(918 mg，1.88 mmol)溶解於DMF (10 mL)中。在N2 沖洗下按順序添加DPPP (233 mg，0.56 mmol)、乙酸鈀(II) (63.3 mg，0.28 mmol)及三乙基矽烷(547 mg，0.75 mL，4.70 mmol)。在80℃下攪拌反應混合物1小時。用EtOAc稀釋粗製混合物並用水萃取。用水洗滌有機層，在Na2 SO4 上乾燥，然後過濾。蒸發溶劑，且藉由矽膠層析(0-100% EtOAc/己烷)純化粗製殘餘物，以得到呈黃色固體之所需產物(456 mg，73%產率)。LCMS (m/z)：342.2 [M+2]。
(viii). 9-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-8-氟-2-甲基-4-側氧基-1,2-二氫-4H-吡咯并[3,2,1-ij]喹啉-5-甲酸甲酯：將9-溴-8-氟-2-甲基-4-側氧基-1,2-二氫-4H-吡咯并[3,2,1-ij]喹啉-5-甲酸甲酯(280 mg，0.82 mmol)及甲苯(3 mL)加入微波小瓶中。添加(S)-(1-(吡咯啶-3-基)環丙基)胺基甲酸第三丁酯(279 mg，1.24 mmol)、RuPhos (19.2 mg，0.04 mmol)、RuPhos Pd G3 (34.4 mg，0.04 mmol)及碳酸銫(805 mg，2.47 mmol)。將混合物加熱至100℃持續1小時。通過拋棄式過濾漏斗過濾粗製混合物並在減壓下蒸發揮發物。矽膠層析(0-100% EtOAc/庚烷)，得到呈黃色固體之非對映異構體混合物(200 mg)。藉由SFC (管柱：X5 4.6 x 100 mm，CO2 /MeOH = 90/10，流速5 ml/min)分離非對映異構體混合物以得到所需非對映異構體(未測定相對立體化學，70 mg，17%產率)。LCMS (m/z)：450.5 [M+1]。
(ix). 9-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-8-氟-2-甲基-4-側氧基-1,2-二氫-4H-吡咯并[3,2,1-ij]喹啉-5-甲酸：將9-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-8-氟-2-甲基-4-側氧基-1,2-二氫-4H-吡咯并[3,2,1-ij]喹啉-5-甲酸甲酯(70.0 mg，0.14 mmol)溶解於MeOH(3 mL)及水(1 mL)中。在室溫下添加1M氫氧化鋰溶液(0.14 mL，0.14 mmol)。攪拌3小時後，用水稀釋混合物並用1M HCl處理。用EtOAc萃取所得混合物，且用鹽水洗滌有機萃取物，在MgSO4 上乾燥，過濾，然後在減壓下濃縮。產物無需進一步純化即可直接使用。LCMS (m/z)：472.5 [M+1]。
(x). 9-((R)-3-(1-胺基環丙基)吡咯啶-1-基)-8-氟-2-甲基-4-側氧基-1,2-二氫-4H-吡咯并[3,2,1-ij]喹啉-5-甲酸鹽酸鹽：將粗製9-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-8-氟-2-甲基-4-側氧基-1,2-二氫-4H-吡咯并[3,2,1-ij]喹啉-5-甲酸(67.0 mg，0.14 mmol)溶解於DCM (3 mL)中並添加4N HCl之二噁烷溶液(1 mL)。在室溫下攪拌混合物3小時。蒸發溶劑，且將粗製殘餘物溶解於最少量的MeOH中。添加乙腈得到懸浮液，藉由過濾收集，得到所需產物(29.0 mg，49%產率)。1 H NMR (400 MHz, 甲醇-d4 ) δ 8.59 (s, 1H), 7.35 (d, J = 14.3 Hz, 1H), 5.07–5.01 (m, 1H), 3.96–3.85 (m, 4H), 3.68 (dt, J = 9.8, 5.0 Hz, 1H), 3.49–3.42 (m, 1H), 2.66–2.61 (m, 1H), 2.13 (dt, J = 11.7, 5.9 Hz, 1H), 1.79–1.66 (m, 1H), 1.61 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.04–0.97 (m, 4H)。LCMS：tR = 1.81 min，m/z = 372.5 [M+1] (10分鐘運行，方法A)。
使用針對實例9.1所述的程序，製備下列化合物： 1 異構體混合物，在步驟viii下未進行SFC純化。
HPLC方法：特徵係在Waters ACQUITY H型UPLC系統上之高效液相層析(HPLC)，其中0.55 mL/min流速；管柱BEH-C18，1.7 um，2.1 x 50 mm，購自Waters，管柱溫度：環境溫度；梯度(溶劑A為2 mM乙酸銨及0.1%甲酸之水溶液，溶劑B為0.1%甲酸之乙腈溶液)：歷時0.4分鐘維持5%溶劑B，歷時0.6分鐘從5%溶劑B變為40%溶劑B，歷時1.2分鐘從40%溶劑B變為60%溶劑B，歷時2.3分鐘從60%溶劑B變為100%溶劑B，然後歷時3分鐘保持100%溶劑B；藉由在236 nm下之紫外光(UV)吸收偵測化合物。實例 10 ： (S)-10-((R)-3-(1- 胺基環丙基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-9- 氟 -3- 甲基 -5- 側氧基 -2,3- 二氫 -1H,5H- 吡啶并 [1,2,3-de] 喹噁啉 -6- 甲酸鹽酸鹽
依下列反應圖製備標題化合物：
(i). (R)-1-((2-溴-3-氟-6-硝基苯基)胺基)丙-2-醇：將K2 CO3 (17.32 g，125.3 mmol)添加至在0℃下之(S)-1-胺基丙-2-醇鹽酸鹽(12.50 g，112.6 mmol)含在DMF (200 mL)中之溶液並攪拌所得混合物10分鐘。添加2-溴-1,3-二氟-4-硝基苯(26.80 g，112.6 mmol)且在60℃下攪拌該混合物6小時。完成後，將該混合物倒入至冰冷的水中並用EtOAc萃取。用鹽水洗滌已合併的有機層，在Na2 SO4 上乾燥，然後在真空下濃縮，以得到呈黃色固體之(R)-1-((2-溴-3-氟-6-硝基苯基)胺基)丙-2-醇(27.00 g，82%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.07 (td, J = 10.4, 9.3, 7.2 Hz, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.68 (dd, J = 9.4, 7.1 Hz, 1H), 4.16 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 3.53 (ddd, J = 13.1, 6.1, 3.4 Hz, 1H), 3.36–3.19 (m, 1H),1.38 (d, J = 6.3 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：295.5 [M+2]。
(ii). (R)-1-((6-胺基-2-溴-3-氟苯基)胺基)丙-2-醇：將(R)-1-((2-溴-3-氟-6-硝基苯基)胺基)丙-2-醇(27.00 g，92.15 mmol)溶解於THF (80 mL)中且冷卻至0℃。添加錫(38.05 g，322.5 mmol)及4N HCl水溶液(83.00 mL，737.2 mmol)且使反應混合物回流2小時。完成後，使該反應混合物冷卻至室溫並通過矽藻土墊過濾。添加水及EtOAc至濾液，並分離相。用鹽水洗滌有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到呈無色膠之(R)-1-((6-胺基-2-溴-3-氟苯基)胺基)丙-2-醇(24.00 g，99%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 6.87–6.67 (m, 2H), 4.17 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 3.18 (dd, J = 13.0, 2.9 Hz, 2H), 2.90 (dd, J = 13.0, 8.7 Hz, 1H), 1.30 (dd, J = 9.0, 6.7 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：265.5 [M+2]。
(iii). (R)-N-(3-溴-4-氟-2-((2-羥基丙基)胺基)苯基)-4-甲基苯磺醯胺：將(R)-1-((6-胺基-2-溴-3-氟苯基)胺基)丙-2-醇(24.00 g，91.25 mmol)溶解於吡啶(240 mL)中，接著冷卻至0℃。添加p -TsCl (26.00 g，136.9 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物過夜。在真空下濃縮該反應混合物，用水稀釋並用EtOAc萃取。用NaHCO3 飽和水溶液、鹽水洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到粗製殘餘物，藉由矽膠層析(45% EtOAc/己烷)純化該殘餘物，得到呈白色固體之所需產物(20.00 g，52%產率)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.49 (s, 1H), 7.80–7.69 (m, 2H), 7.48–7.38 (m,1H), 7.41–7.25 (m, 2H), 6.80 (dd, J = 9.0, 7.8 Hz, 1H), 3.98 (ddt, J = 11.6, 7.7, 3.9 Hz, 1H), 3.00 (dd, J = 13.4, 2.7 Hz, 1H), 2.62 (dd, J = 13.5, 8.5 Hz, 1H), 2.55–2.45 (m, 1H), 2.43 (s, 3H), 1.49 (s, 1H),1.25 (d, J = 6.3 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：419.5 [M+2]。
(iv). (S)-5-溴-6-氟-2-甲基-1-甲苯磺醯基-1,2,3,4-四氫喹噁啉：在0℃下，將(R)-N-(3-溴-4-氟-2-((2-羥基丙基)胺基)苯基)-4-甲基苯磺醯胺(20.00 g，47.73 mmol)溶解於THF (150 mL)中。添加三苯基膦(18.85 g，71.94 mmol)，接著逐滴添加DIAD (12.59 g，62.35 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物6小時。用水稀釋該反應混合物並用EtOAc萃取。用NaHCO3 飽和水溶液、鹽水洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到粗製殘餘物，藉由矽膠層析(15% EtOAc/己烷)純化該殘餘物，得到呈白色固體之所需產物(15.00 g，78%產率)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.69 (dd, J = 9.0, 5.6 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.25 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 6.56 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 4.55–4.52 (m, 2H), 3.02 (dd, J = 11.5, 4.8 Hz, 1H), 2.74–2.66 (m, 1H), 2.43 (s, 3H), 1.13 (d, J = 6.9 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：401.5 [M+2]。
(v). (S)-5-溴-6-氟-2-甲基-1,2,3,4-四氫喹噁啉：將(S)-5-溴-6-氟-2-甲基-1-甲苯磺醯基-1,2,3,4-四氫喹噁啉(15.00 g，37.59 mmol)溶解於DCM (150 mL)中且在0℃下冷卻。逐滴添加濃H2 SO4 (15.00 mL，188.0 mmol)並在室溫下攪拌反應混合物2小時。將該混合物倒入至冰冷的水中並用EtOAc萃取。用NaHCO3 飽和水溶液、鹽水洗滌已合併的有機層，在Na2 SO4 上乾燥，然後在真空下濃縮以得到呈無色膠之(S)-5-溴-6-氟-2-甲基-1,2,3,4-四氫喹噁啉(7.500 g，91%產率)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 6.45–6.33 (m, 2H), 4.42–4.38 (m, 1H), 3.47 (ddt, J =8.6, 6.3, 3.2 Hz, 2H), 3.13 (dd, J = 11.4, 8.7 Hz, 1H), 1.30 (d, J = 6.3 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：247.5 [M+2]。
(vi). (S)-10-溴-9-氟-7-羥基-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-1H,5H-吡啶并[1,2,3-de]喹噁啉-6-甲酸乙酯：將三乙基甲烷三甲酸酯(8.05 g，34.7 mmol)添加至在DMF (17 mL)中之(S)-5-溴-6-氟-2-甲基-1,2,3,4-四氫喹噁啉(1.70 g，6.94 mmol)中且將反應物加熱至180℃持續6小時。將該反應混合物倒入冰冷水中並用EtOAc萃取。用水、鹽水洗合併的有機層，經硫酸鈉乾燥，在真空下濃縮得到粗製殘餘物，使用鹼性氧化鋁層析(15%甲醇氨於DCM中)純化該殘餘物，得到呈淺橙色固體之所需產物(0.95 g，35%產率)。LCMS (m/z)：387.5 [M+2]。
(vii). (S)-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-7-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)-2,3-二氫-1H,5H-吡啶并[1,2,3-de]喹噁啉-6-甲酸乙酯：將Et3 N (2.24 g，3.07 mL，22.20 mmol)添加至在DCM (20 mL)中之(S)-10-溴-9-氟-7-羥基-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-1H,5H-吡啶并[1,2,3-de]喹噁啉-6-甲酸乙酯(0.95 g，2.47 mmol)中，接著冷卻至-78℃。逐滴添加三氟甲磺酸酐(3.14 g，1.87 mL，11.10 mmol)且在-78℃攪拌反應混合物30分鐘。在減壓下濃縮該反應混合物得到所需產物(1.00 g)，其不經任何進一步純化直接用於下一步驟中。LCMS (m/z)：519.2 [M+2]。
(viii). (S)-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-1H,5H-吡啶并[1,2,3-de]喹噁啉-6-甲酸乙酯：將(S)-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-7-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)-2,3-二氫-1H,5H-吡啶并[1,2,3-de]喹噁啉-6-甲酸乙酯(1.00 g，1.93 mmol)溶解於無水DMF (5 mL)中且用氮氣脫氣5分鐘。添加DPPP (0.24 g，0.58 mmol)、Pd(II)OAc (65.0 mg，0.29 mmol)並用氮氣再將反應混合物脫氣5分鐘。使該反應混合物冷卻至0℃，添加三乙基矽烷(0.67 g，0.92 mL，5.80 mmol)且在65℃攪拌該反應混合物4小時。用冰冷水淬滅該反應混合物並用EtOAc萃取。用冷水、鹽水洗有機層，經硫酸鈉乾燥，然後在真空下濃縮得到粗製殘餘物，藉由矽膠層析(20-30% EtOAc於己烷中)純化該殘餘物得到所需產物(0.40 g，43%產率，2個步驟)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.32 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 6.85 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 5.38–5.36 (m, 1H), 4.96–4.94 (m, 1H), 4.59–4.41 (m, 2H), 3.53 (q, J = 13.7, 13.1 Hz, 2H), 1.41 (dd, J = 15.4, 6.6 Hz, 6H)。LCMS (m/z)：371.3 [M+2]。
(ix). (S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-1H,5H-吡啶并[1,2,3-de]喹噁啉-6-甲酸乙酯：將(S)-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-1H,5H-吡啶并[1,2,3-de]喹噁啉-6-甲酸乙酯(0.200 g，0.542 mmol)、(R)-(1-(吡咯啶-3-基)環丙基)胺基甲酸第三丁酯(0.183 g，0.813 mmol)及Cs2 CO3 (0.529 g，1.626 mmol)懸浮於甲苯(8 mL)中且用氮氣脫氣5分鐘。添加RuPhos (0.025 g，0.054 mmol)及RuPhosPdG3 (0.045 g，0.054 mmol)且將反應混合物加熱至90℃持續6小時。將該反應混合物倒入至水中並用EtOAc萃取。用鹽水洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到粗製殘餘物，藉由逆相層析(60-70% MeOH/水)純化該殘餘物得到呈黃色固體之所需產物(0.060 g，23%產率)。LCMS (m/z)：515.6 [M+1]。
(x). (S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-1H,5H-吡啶并[1,2,3-de]喹噁啉-6-甲酸：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-1H,5H-吡啶并[1,2,3-de]喹噁啉-6-甲酸乙酯(0.06 g，0.12 mmol)溶解於MeOH:H2 O混合物(3:1，8 mL)中。添加LiOH (1M水溶液，0.35 mL，0.35 mmol)並在室溫下攪拌反應混合物3小時。用冷水淬滅該反應混合物，用稀HCl酸化至pH 4，然後用乙酸乙酯萃取。在真空下濃縮有機層以得到呈黃色固體之所需產物(45.0 mg，79%產率)。LCMS (m/z)：487.5 [M+1]。
(xi). (S)-10-((R)-3-(1-胺基環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-1H,5H-吡啶并[1,2,3-de]喹噁啉-6-甲酸鹽酸鹽：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-1H,5H-吡啶并[1,2,3-de]喹噁啉-6-甲酸(45.0 mg，0.09 mmol)溶解於DCM (5 mL)中並添加4N HCl之二噁烷溶液(0.6 mL)。在室溫下攪拌混合物2小時。蒸發溶劑，並用EtOAc研磨粗製殘餘物得到呈黃色固體之所需產物(20.0 mg，57%產率)。1 H NMR (400 MHz, 甲醇-d4) δ 8.81 (s, 1H), 7.06 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 5.31 (s, 1H), 3.57 (t, J = 9.4 Hz, 2H), 3.32–3.29 (m, 2H), 3.20 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 2.86–2.77 (m, 1H), 2.24 (d, J =9.0 Hz, 1H), 1.85–1.75 (m, 1H), 1.44 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.10–0.98 (m, 4H)。LCMS：tR = 1.38 min，m/z = 387.4 [M+1] (3分鐘運行，方法B)。實例 11 ： (S)-10-((R)-3-(1- 胺基環丙基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-9- 氟 -3- 甲基 -5- 側氧基 -2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噻嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -6- 甲酸鹽酸鹽
依下列反應圖製備標題化合物：
(i). 甲磺酸(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)丙酯：將Et3 N (18.48 g，25.38 mL，182.6 mmol)添加至(S)-(1-羥基丙-2-基)胺基甲酸第三丁酯(20.0 g，114.1 mmol)含在DCM (100 mL)中之溶液且使所得混合物冷卻至0℃。逐滴添加甲磺醯氯(16.99 g，12.00 mL，148.3 mmol)並攪拌該混合物1小時。完成後，將該混合物倒入至冰冷的水中並用DCM萃取。用飽和NaHCO3 水溶液洗滌已合併的有機層，在Na2 SO4 上乾燥，然後在真空下濃縮以得到呈白色固體之甲磺酸(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)丙酯(28.00 g，97%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 4.71 (s, 1H), 4.28 (s, 1H), 4.21 (dd, J = 10.0, 4.3 Hz, 1H), 4.07–3.98 (m, 1H), 3.09 (s, 3H), 1.50 (s, 9H), 1.29 (d, J = 6.9 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：254.31 [M+1]。
(ii). 硫代乙酸(S)-S-(2-((第三丁氧基羰基)胺基)丙基)酯：在-78℃下，將硫代乙酸(3.61 g，47.4 mmol)及Cs2 CO3 (8.38 g，25.7 mmol)添加至甲磺酸胺基甲酸(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)丙酯(10.0 g，39.5 mmol)含在DMF (100 mL)中之溶液。使所得混合物慢慢地升至室溫並攪拌16小時。將反應混合物倒入至冰冷的水中且用EtOAc萃取。用水、鹽水洗滌已合併的有機層，在Na2 SO4 上乾燥，然後在真空下濃縮以得到呈無色膠之硫代乙酸(S)-S-(2-((第三丁氧基羰基)胺基)丙基)酯(7.18 g，78%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 4.59 (s, 1H), 3.92 (s, 1H), 3.09 (q, J = 7.1, 6.6 Hz, 2H), 2.30 (s, 3H), 1.50 (s, 9H), 1.23 (d, J = 6.7 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：234.33 [M+1]。
(iii). (S)-(1-巰基丙-2-基)胺基甲酸第三丁酯：將K2 CO3 (1.78 g，12.9 mmol)添加至硫代乙酸(S)-S-(2-((第三丁氧基羰基)胺基)丙基)酯(1.54 g，6.57 mmol)含在MeOH:水(1:1，20 mL)中之溶液並在室溫下攪拌所得混合物45分鐘。完成後，將該混合物倒入至水中且用EtOAc萃取。用水、鹽水洗滌已合併的有機層，在Na2 SO4 上乾燥，然後在真空下濃縮以得到呈無色膠之(S)-(1-巰基丙-2-基)胺基甲酸第三丁酯(1.00 g，82%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。LCMS (m/z)：192.29 [M+1]。
(iv). (S)-2-胺基-4-溴-3-((2-((第三丁氧基羰基)胺基)丙基)硫基)-5-氟苯甲酸甲酯：將2-胺基-4-溴-5-氟-3-碘苯甲酸甲酯(1.00 g，2.67 mmol)、(S)-(1-巰基丙-2-基)胺基甲酸第三丁酯(1.02 g，5.34 mmol)及DIPEA (1.52 g，2.04 mL，11.8 mmol)溶解於甲苯(20 mL)中並用氮氣脫氣5分鐘。添加XantPhos (247 mg，0.43 mmol)及Pd2 dba3 (195 mg，0.21 mmol)且加熱反應混合物至80℃持續6小時。用水淬滅該反應混合物並用EtOAc萃取。用水、鹽水洗滌有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮。藉由矽膠層析(10-15% EtOAc/己烷)純化粗製殘餘物，得到呈白色固體之所需產物(0.80 g，68%產率)。LCMS (m/z)：439.32 [M+2]。
(v). (S)-3-((2-胺基丙基)硫基)-4-溴-5-氟-2-碘苯甲酸甲酯：在-50℃下，將含在DCM (10 mL)中之(S)-2-胺基-4-溴-3-((2-((第三丁氧基羰基)胺基)丙基)硫基)-5-氟苯甲酸甲酯(1.00 g，2.29 mmol)添加至攪拌之NOBF4 (0.53 g，4.58 mmol)含在DCM (10 mL)中之溶液。在0℃下攪拌反應混合物1小時。形成重氮鎓鹽完成後，在真空下濃縮反應混合物且將粗製殘餘物溶解於MeCN(10 mL)中並冷卻至-30℃。將CuI (0.44 g，2.29 mmol)及碘(0.29 g，1.14 mmol)添加至重氮鎓鹽中並在0℃下攪拌該混合物1小時。用水淬滅該反應混合物並用EtOAc萃取。用飽和Na2 S2 O3 水溶液、鹽水洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮，以得到所需產物(0.520 g)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。LCMS (m/z)：450.09 [M+2]。
(vi). (S)-4-溴-3-((2-((第三丁氧基羰基)胺基)丙基)硫基)-5-氟-2-碘苯甲酸甲酯：將(S)-3-((2-胺基丙基)硫基)-4-溴-5-氟-2-碘苯甲酸甲酯(0.50 g，1.11 mmol)溶解於DCM (10 mL)中。添加Et3 N (0.23 g，0.31 mL，2.22 mmol)及(Boc)2 O (0.27 g，1.22 mmol)至反應混合物，接著攪拌3小時。將該混合物倒入至水中並用EtOAc萃取。用水、鹽水洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到粗製殘餘物，藉由矽膠層析(5-10% EtOAc/己烷)純化該殘餘物，得到呈白色固體之所需產物(0.35 g，57%產率)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.32 (s, 1H), 4.80 (s, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.17–3.13 (m, 3H), 1.46–1.37 (m, 12H)。LCMS (m/z)：550.21 [M+2]。
(vii). (S)-3-((2-胺基丙基)硫基)-4-溴-5-氟-2-碘苯甲酸甲酯鹽酸鹽：將(S)-4-溴-3-((2-((第三丁氧基羰基)胺基)丙基)硫基)-5-氟-2-碘苯甲酸甲酯(0.350 g，0.638 mmol)溶解於DCM (5 mL)中且冷卻至0℃。添加HCl之二噁烷溶液(4N，3.5 mL)並在室溫下攪拌反應混合物2小時。在真空下濃縮該反應混合物，用正戊烷研磨以得到呈白色固體之所需產物(0.230 g，80%產率)。1 H NMR (400 MHz, 甲醇-d4 ) δ 7.53 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.42 (dt, J =13.3, 6.6 Hz, 1H), 3.26 (dd, J = 13.6, 5.5 Hz, 1H), 3.11 (dd, J = 13.6, 8.0 Hz, 1H), 1.51 (d, J =6.5 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：450.09 [M+2]。
(viii). (S)-8-溴-7-氟-3-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噻嗪-5-甲酸甲酯：將Cs2 CO3 (0.727 g，1.425 mmol)添加至含在二噁烷(15 mL)中之(S)-3-((2-胺基丙基)硫基)-4-溴-5-氟-2-碘苯甲酸甲酯鹽酸鹽(0.360 g，0.743 mmol)且用氮氣使懸浮液脫氣5分鐘。添加XantPhos (0.064 g，0.111 mmol)及Pd2 dba3 (0.034 g，0.037 mmol)且將反應混合物加熱至90℃持續16小時。用水淬滅該反應混合物並用EtOAc萃取。用水、鹽水洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮。藉由矽膠層析(5-10% EtOAc/己烷)純化粗製殘餘物，得到呈黃色固體之所需產物(0.120 g，50%產率)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.18 (s, 1H), 7.49 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.85–3.78 (m, 1H), 3.01 (dd, J = 12.4, 2.7 Hz, 1H), 2.82 (dd, J = 12.4, 8.3 Hz, 1H), 1.43 (d, J =6.4 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：322.18 [M+2]。
(ix). (S)-(8-溴-7-氟-3-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噻嗪-5-基)甲醇：將(S)-8-溴-7-氟-3-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噻嗪-5-甲酸甲酯(0.140 g，0.437 mmol)溶解於甲苯(10 mL)中且冷卻至-78℃。將DIBAL (1M之甲苯溶液，0.875 mL，0.875 mmol)添加至攪拌之混合物且允許溫度歷時2小時達到室溫。完成反應後，用EtOAc (1 mL)淬滅混合物並慢慢地倒入至濕硫酸鈉漿液上。通過矽藻土墊過濾反應混合物，然後在真空下濃縮以得到所需產物(0.125 g，90%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.22 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.62 (s, 2H), 3.72–3.68 (m, 1H), 3.01 (dd, J = 12.4, 2.6 Hz, 1H), 2.83 (dd, J = 12.4, 8.3 Hz, 1H), 1.40 (d, J = 6.3 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：294.17 [M+2]。
(x). (S)-8-溴-7-氟-3-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噻嗪-5-甲醛：將(S)-(8-溴-7-氟-3-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噻嗪-5-基)甲醇(0.125 g，0.428 mmol)溶解於DMF (5 mL)中。在0℃下，將MnO2 (0.558 g，6.420 mmol)添加至反應混合物，接著在室溫下攪拌2小時。完成後，用EtOAc稀釋反應混合物並通過矽藻土墊過濾。用水淬滅濾液並用EtOAc萃取。用水、鹽水洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到呈黃色固體之所需產物(0.120 g，99%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 9.75 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 7.05 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.88 (s, 1H), 3.07–2.98 (m, 1H), 2.82 (dd, J = 12.7, 7.9 Hz, 1H), 1.45 (d, J = 6.4 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：292.15 [M+2]。
(xi). (S)-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噻嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-8-溴-7-氟-3-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噻嗪-5-甲醛(0.120 g，0.413 mmol)溶解於甲苯(5 mL)中。添加K2 CO3 (0.028 g，0.206 mmol)、丙二酸二甲酯(0.082 g，0.620 mmol)、哌啶(0.06 mL)及乙酸(0.06 mL)，然後在100℃下攪拌反應混合物16小時。完成後，用水淬滅該反應混合物並用EtOAc萃取。用水、鹽水洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到粗製殘餘物，藉由用乙醚研磨來純化該殘餘物，得到呈黃色固體之所需產物(0.080 g，52%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.34 (s, 1H), 7.41 (d, 1H), 5.90 (dq, J = 6.5, 3.3Hz, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.28 (dd, J = 13.6, 3.1 Hz, 1H), 3.14 (dd, J = 13.6, 3.2 Hz, 1H), 1.47 (d, J= 6.4 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：374.21 [M+2]。
(xii). (S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噻嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噻嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.080 g，0.215 mmol)、(R)-(1-(吡咯啶-3-基)環丙基)胺基甲酸第三丁酯(0.072 g，0.322 mmol)及Cs2 CO3 (0.175 g，0.537 mmol)懸浮於甲苯(3 mL)中並用氮氣脫氣5分鐘。添加RuPhos (0.015 g，0.032 mmol)及RuPhosPdG3 (0.026 g，0.032 mmol)且加熱反應混合物至80℃持續6小時。將該反應混合物倒入至水中並用EtOAc萃取。用鹽水洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空中濃縮以得到粗製殘餘物，藉由逆相層析(60-70% MeOH/水)純化粗製殘餘物，得到呈黃色固體之所需產物(0.100 g，90%產率)。LCMS (m/z)：518.6 [M+1]。
(xiii). (S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噻嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噻嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.100 g，0.193 mmol)溶解於MeOH:H2 O混合物(3:1，12 mL)中。添加LiOH (1M，含於水中) (0.580 mL，0.580 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物3小時。用冷水淬滅反應混合物，用稀HCl酸化至pH 4並用乙酸乙酯萃取。在真空下濃縮有機層以得到呈黃色固體之所需產物(0.090 g，92%產率)。LCMS (m/z)：504.47 [M+1]。
(xiv). (S)-10-((R)-3-(1-胺基環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噻嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸鹽酸鹽：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噻嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸(90.0 mg，0.18 mmol)溶解於DCM (2 mL)中並添加4N HCl之二噁烷溶液(1.00 mL)。在室溫下攪拌該混合物2小時。蒸發溶劑，及用EtOAc研磨粗製殘餘物，得到呈黃色固體之所需產物(20.0 mg，20%產率)。1 H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.87 (s, 1H), 7.57 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 5.85 (s, 1H), 3.57–3.20 (m, 6H), 2.86–2.77 (m, 1H), 2.25 (s, 1H), 1.84 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 1.48 (s, J = 6.5 Hz, 3H), 1.12–0.98 (m, 4H)。LCMS：tR = 1.38 min，m/z = 404.6 [M+1] (3分鐘運行，方法B)。實例 12.1 ： (S)-10-((R)-3-(1- 胺基環丙基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-8- 氟 -3- 甲基 -5- 側氧基 -2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噁嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -6- 甲酸三氟乙酸鹽
依下列反應圖製備標題化合物：
(i). 4-溴-2,6-二氟-3-羥基苯甲酸甲酯：將乙酸鈉(360 mg，4.39 mmol)及Br2 (956 mg，0.31 mL，5.98 mmol)添加至含在AcOH (20 mL)中之2,6-二氟-3-苯甲酸甲酯(750 mg，3.99 mmol)。在室溫下攪拌該混合物4小時。完成後，添加飽和硫代硫酸鈉溶液，接著添加水及EtOAc。分離相，且用水、鹽水洗滌有機層，在Na2 SO4 上乾燥，過濾，然後濃縮。藉由矽膠層析，使用100%庚烷至50% EtOAc/庚烷，純化粗製殘餘物，得到呈白色固體之產物(915 mg，86%產率)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.16 (dd, J = 8.8, 2.3 Hz, 1H), 5.45 (br s, 1H), 3.96 (s, 3H)。
(ii). (S)-4-溴-3-(2-((第三丁氧基羰基)胺基)丙氧基)-2,6-二氟苯甲酸甲酯：將氫化鈉(150 mg，3.75 mmol)添加至4-溴-2,6-二氟-3-羥基苯甲酸甲酯(910 mg，3.41 mmol)含在DMF (10 mL)中之溶液且在室溫下攪拌所得混合物5分鐘。添加 (S)-4-甲基-1,2,3-噁噻唑啶-3-甲酸第三丁酯2,2-二氧化物(889 mg，3.75 mmol)並在室溫下攪拌混合物2小時。添加EtOAc，接著添加飽和NH4 Cl水溶液。分離相並用EtOAc萃取水層。用水及鹽水洗滌已合併的有機層。在Na2 SO4 上乾燥有機相，過濾，濃縮。藉由矽膠層析，使用100%庚烷至40% EtOAc/庚烷，純化粗製殘餘物，得到呈白色固體之產物(1.39 g，96%產率)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.18 (dd, J = 8.8, 2.2 Hz, 1H), 4.05–3.98 (m, 3H), 3.94 (s, 3H), 1.45 (s, 9H), 1.36 (d, J = 6.6 Hz, 3H)。
(iii). (S)-8-溴-6-氟-3-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-5-甲酸甲酯：在室溫下，將TFA (5 mL)添加至(S)-4-溴-3-(2-((第三丁氧基羰基)胺基)丙氧基)-2,6-二氟苯甲酸甲酯(1.39 g，3.27 mmol)含在DCM (5 mL)中之混合物。15分鐘後，將殘餘物分配在DCM與飽和NaHCO3 水溶液之間。分離層且再次用DCM萃取水層。用鹽水洗滌已合併的有機萃取物，在Na2 SO4 上乾燥，然後在減壓下濃縮。將三乙胺(1.65 g，2.28 mL，16.3 mmol)添加至含在DMSO (5 mL)中之粗製產物，接著在50℃下攪拌30分鐘。完成後，用水淬滅反應混合物並用EtOAc萃取。用水、鹽水洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到呈黃色固體之所需產物(892 mg，90%產率)。LCMS (m/z)：304.3 [M]。
(iv). (S)-(8-溴-6-氟-3-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-5-基)甲醇：將(S)-8-溴-6-氟-3-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-5-甲酸甲酯(890 mg，2.93 mmol)溶解於甲苯(15 mL)中且冷卻至-78℃。將DIBAL (1M之甲苯溶液，10.24 mL，10.24 mmol)添加至攪拌之混合物並允許溫度歷時1小時達到室溫。完成後，用羅徹爾鹽(Rochelle salt)溶液淬滅該混合物且用EtOAc萃取。用鹽水洗合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮。藉由矽膠層析，使用100%庚烷至50% EtOAc/庚烷，純化粗製殘餘物，得到呈白色固體之產物(655 mg，81%產率)。LCMS (m/z)：276.2 [M]。
(v). (S)-8-溴-6-氟-3-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-5-甲醛：將(S)-(8-溴-6-氟-3-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-5-基)甲醇(448 mg，1.64 mmol)溶解於DMF (10 mL)中。添加MnO2 (825 mg，9.49 mmol)，接著在室溫下攪拌4小時。添加更多MnO2 (825 mg，9.49 mmol)，並攪拌反應過夜。用EtOAc稀釋混合物且通過矽藻土墊過濾。用水淬滅濾液並用EtOAc萃取。用水、鹽水洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮。藉由矽膠層析，使用100%庚烷至30% EtOAc/庚烷，純化粗製殘餘物，得到呈黃色固體之產物(448 mg，69%產率)。LCMS (m/z)：276.2 [M+2]。
(vi). (S)-10-溴-8-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-8-溴-6-氟-3-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-5-甲醛(0.45 g，1.64 mmol)溶解於甲苯(15 mL)中。添加丙二酸二甲酯(1.08 g，0.94 mL，8.17 mmol)、哌啶(0.42 g，0.48 mL，4.90 mmol)及乙酸(0.29 g，0.28 mL，4.90 mmol)且在110℃下攪拌反應混合物4小時。完成後，在真空下濃縮反應混合物以得到粗製殘餘物，藉由矽膠層析，使用100%庚烷至100% EtOAc純化該殘餘物，得到呈黃色固體之所需產物(0.54 g，93%產率)。LCMS (m/z)：358.3 [M+2]。
(vii). (S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡啶-1-基)-8-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-10-溴-8-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(250 mg，0.70 mmol)、(R)-(1-(吡咯啶-3-基)環丙基)胺基甲酸第三丁酯(238 mg，1.05 mmol)及Cs2 CO3 (686 mg，2.11 mmol)懸浮於甲苯(35 mL)中且用氮氣脫氣5分鐘。添加RuPhos (66.0 mg，0.14 mmol)及RuPhosPdG3 (117 mg，0.14 mmol)且加熱反應混合物至90℃持續6小時。在拋棄式漏斗上過濾該反應混合物並在真空下濃縮。藉由矽膠層析，使用100%庚烷至100% EtOAc，純化粗製殘餘物，得到呈黃色固體之所需產物(112 mg，32%產率)。LCMS (m/z)：502.6 [M+1]。
(viii). (S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-8-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-8-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.112 g，0.223 mmol)溶解於MeOH:H2 O混合物(3:1，6 mL)中。添加LiOH (0.075 g，1.786 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物過夜。用水淬滅該反應混合物，用1M HCl酸化並用乙酸乙酯萃取。在Na2 SO4 上乾燥有機層，過濾，然後在真空下濃縮以得到呈黃色固體之所需產物。LCMS (m/z)：488.6 [M+1]。
(ix). (S)-10-((R)-3-(1-胺基環丙基)吡咯啶-1-基)-8-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸三氟乙酸鹽：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-8-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸(105 mg，0.22 mmol)溶解於DCM (5 mL)中且添加4N HCl之二噁烷溶液(2.5 mL)。在室溫下攪拌混合物2小時。蒸發溶劑，且在利用TFA緩衝液之逆相HPLC上純化粗製殘餘物，得到呈黃色固體之所需產物(46.0 mg，40%產率)。1 H NMR (400 MHz, 甲醇-d4 ) δ 8.64 (s, 1H), 6.59 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 5.07 (q, J = 6.4 Hz, 1H), 4.44 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 4.01–3.87 (m, 2H), 3.76 (dd, J = 26.1, 7.3 Hz, 2H), 3.55–3.50 (m, 1H), 2.68–2.63 (m, 1H), 2.18–2.09 (m, 1H), 1.85–1.66 (m, 1H), 1.43 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.00 (d, J = 16.5 Hz, 4H)。LCMS：tR = 1.73 min，m/z = 388.5 [M+1] (10分鐘運行，方法A)。
使用針對實例12.1所述的程序，製備下列化合物： 1 在步驟ii時開始，使用4-溴-2-氟-3-羥基苯甲酸酯作為起始物質
HPLC方法A：特徵係在Waters ACQUITY UPLC系統上之高效液相層析(HPLC)，其中1.2 mL/min流速；管柱Kinetex-C18，2.6 um，2.1 x 50 mm，購自Phenomenex，管柱溫度：50℃；梯度：歷時9.29分鐘時間2%-88% MeCN/具有0.1% TFA之水(除非另作指明)；藉由在220 nm下之紫外光(UV)吸收偵測化合物。
HPLC方法B：特徵係在Waters ACQUITY H型UPLC系統上之高效液相層析(HPLC)，其中0.55 mL/min流速；管柱BEH-C18，1.7 um，2.1 x 50 mm，購自Waters，管柱溫度：環境溫度；梯度(溶劑A為2 mM乙酸銨及0.1%甲酸之水溶液，溶劑B為0.1%甲酸之乙腈溶液)：歷時0.4分鐘維持5%溶劑B，歷時0.6分鐘從5%溶劑B變為40%溶劑B，歷時1.2分鐘從40%溶劑B變為60%溶劑B，歷時2.3分鐘從60%溶劑B變為100%溶劑B，然後歷時3分鐘保持100%溶劑B；藉由在236 nm下之紫外光(UV)吸收偵測化合物。
實例 13.1 ： (S)-10-((R)-3-(1- 胺基環丙基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-8,9- 二氟 -3- 甲基 -5- 側氧基 -2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噁嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -6- 甲酸鹽酸鹽
依下列反應圖製備標題化合物：
(i). (S)-10-溴-9-氟-3-甲基-8-硝基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：在0℃下，將(S)-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(3.50 g，9.85 mmol)溶解於濃H2 SO4 (35 mL)中。添加KNO3 (1.04 g，10.4 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物1小時。將該反應混合物倒入至冰中並用EtOAc萃取。用飽和NaHCO3 、鹽水洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到呈黃色固體之所需產物(3.40 g，86%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。LCMS (m/z)：403.2 [M+2]。
(ii). (S)-10-溴-8,9-二氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-10-溴-9-氟-3-甲基-8-硝基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(3.40 g，8.47 mmol)溶解於DMF (15 mL)中。在0℃下慢慢地添加氟化四甲基銨(1.18 g，12.7 mmol)且在室溫下攪拌混合物16小時。將該反應混合物倒入至冰冷的水中並用EtOAc萃取。用水、鹽水洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到所需產物(1.93 g，61%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.68 (s, 1H), 5.19 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 4.60 (dd, J = 11.4, 1.2 Hz, 1H), 4.34–4.12 (m, 1H), 4.02 (s, 3H), 1.46 (d, J = 6.6 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：376.2 [M+2]。
(iii). (S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-8,9-二氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-10-溴-8,9-二氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.250 g，0.668 mmol)、(R)-(1-(吡咯啶-3-基)環丙基)胺基甲酸第三丁酯(0.302 g，1.330 mmol)及Cs2 CO3 (0.544 g，1.670 mmol)懸浮於甲苯(10 mL)中並用氮氣脫氣5分鐘。添加Ruphos (0.044 g，0.100 mmol)及PdG3 RuPhos (0.083 g，0.100 mmol)且在90℃下加熱反應混合物10小時。通過矽藻土墊過濾該反應混合物並用過量的EtOAc洗滌。在真空下濃縮有機層以得到粗製殘餘物，藉由逆相層析(60-70% MeOH/水)純化該殘餘物得到呈淺黃色固體之所需產物(0.190 g，54%產率)。LCMS (m/z)：520.6 [M+1]。
(iv). (S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-8,9-二氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-8,9-二氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.19 g，0.37 mmol)添加至MeOH:H2 O混合物(3:1，5 mL)中。添加LiOH.H2 O (1M之水溶液，1.10 mL，0.11 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物3小時。用冷水淬滅該反應混合物，用稀HCl酸化至pH 4並用乙酸乙酯萃取。在硫酸鈉上乾燥有機層且在真空下濃縮以得到呈黃色固體之所需產物(175 mg，94%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 14.26 (s, 1H), 5.12 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 5.03 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 4.41 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 4.00–3.75 (m, 5H), 2.27–2.23 (m, 1H), 2.03–2.01 (m, 1H), 1.55–1.52 (m, 1H), 1.50–1.39 (m, 9H), 1.41–1.35 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 1.28 (s, 2H), 0.93–0.87 (m, 1H), 0.82–0.79 (m, 1H)。LCMS (m/z)：506.5 [M+1]。
(vi). (S)-10-((R)-3-(1-胺基環丙基)吡咯啶-1-基)-8,9-二氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸鹽酸鹽：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-8,9-二氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸(0.175 g，0.349 mmol)溶解於DCM (3 mL)中。添加HCl-二噁烷(4M，2 mL)且在室溫下攪拌反應混合物2小時。在真空下濃縮該反應混合物以得到粗製殘餘物，用EtOAc研磨該殘餘物，得到呈黃色固體之所需產物(0.137 g，95%產率)。1 H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.83 (s, 1H), 5.14 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 4.54 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 4.07 (d, J = 11.5 Hz, 2H), 3.97–3.79 (m, 3H), 2.70–2.61 (m, 1H), 2.20–2.12 (m, 1H), 1.76 (q, J = 10.4 Hz, 1H), 1.47 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.08–0.99 (m, 3H)。LCMS：tR = 1.38 min，m/z = 406.3 [M+1] (10分鐘運行，方法B)。
使用針對實例13.1所述的程序，製備下列化合物： 1 單一非對映異構體，絕對立體化學未知。
HPLC方法：特徵係在Waters ACQUITY H型UPLC系統上之高效液相層析(HPLC)，其中0.55 mL/min流速；管柱BEH-C18，1.7 um，2.1 x 50 mm，購自Waters，管柱溫度：環境溫度；梯度(溶劑A為2 mM乙酸銨及0.1%甲酸之水溶液，溶劑B為0.1%甲酸之乙腈溶液)：歷時0.4分鐘維持5%溶劑B，歷時0.6分鐘從5%溶劑B變為40%溶劑B，歷時1.2分鐘從40%溶劑B變為60%溶劑B，歷時2.3分鐘從60%溶劑B變為100%溶劑B，然後歷時3分鐘保持100%溶劑B；藉由在236 nm下之紫外光(UV)吸收偵測化合物。實例 14 ： (S)-8- 胺基 -10-((R)-3-(1- 胺基環丙基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-9- 氟 -3- 甲基 -5- 側氧基 -2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噁嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -6- 甲酸鹽酸鹽
依下列反應圖製備標題化合物：
(i). (S)-8-胺基-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-10-溴-9-氟-3-甲基-8-硝基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.12 g，0.30 mmol)溶解於THF (5 mL)中且冷卻至0℃。添加錫(36.0 mg，0.30 mmol)及4M HCl (0.5 ml)並加熱反應混合物至45℃持續30分鐘。用冷水淬滅該反應混合物，用稀HCl酸化至pH 4並用乙酸乙酯萃取。在硫酸鈉上乾燥有機層，然後在真空下濃縮以得到呈米色固體之所需產物(0.11 g，98%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。LCMS (m/z)：359.1 [M+2]。
(ii). (S)-8-胺基-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-8-胺基-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.11 g，0.31 mmol)溶解於甲醇(12 mL)中且冷卻至0℃。添加H2 SO4 (3滴)並加熱該反應混合物至回流持續6小時。用冷水淬滅該反應混合物並用乙酸乙酯萃取。在硫酸鈉上乾燥有機層，然後在真空下濃縮以得到呈米色固體之所需產物(0.10 g，87%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。LCMS (m/z)：373.3 [M+2]。
(iii). (S)-8-胺基-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-8-胺基-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.080 g，0.215 mmol)、(R)-(1-(吡咯啶-3-基)環丙基)胺基甲酸第三丁酯(0.058 g，0.258 mmol)及Cs2 CO3 (0.175 g，0.539 mmol)懸浮於甲苯(10 mL)中且用氮氣脫氣5分鐘。添加BINAP (0.020 g，0.032 mmol)及Pd2 dba3 (0.029 g，0.032 mmol)並加熱反應混合物至110℃持續10小時。通過矽藻土墊過濾該反應混合物並用過量的EtOAc洗滌。在真空下濃縮有機層以得到粗製殘餘物，藉由製備型TLC，使用80% EtOAc/己烷，純化粗製殘餘物，得到呈黃色膠之所需產物(0.06 g，54%產率)。LCMS (m/z)：517.5 [M+1]。
(iv). (S)-8-胺基-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸：將(S)-8-胺基-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.06 g，0.12 mmol)添加至MeOH:H2 O混合物(3:1，5 mL)中。添加LiOH.H2 O (1M之水溶液，0.34 mL，0.35 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物2小時。用冷水淬滅該反應混合物，用稀HCl酸化至pH 4並用乙酸乙酯萃取。在硫酸鈉上乾燥有機層，然後在真空下濃縮以得到呈米色固體之所需產物(0.05 g，86%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。LCMS (m/z)：503.5 [M+1]。
(v). (S)-8-胺基-10-((R)-3-(1-胺基環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸：將(S)-8-胺基-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸(0.05 g，0.09 mmol)溶解於DCM (2 mL)中。添加HCl-二噁烷(4M，1 mL)且在室溫下攪拌反應混合物1小時。在真空下濃縮該反應混合物以得到粗製殘餘物，藉由用EtOAc研磨來純化該殘餘物，得到呈黃色固體之所需產物(12.0 mg，30%產率)。1 H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.92 (s, 1H), 5.08 (d, J=6.4 Hz, 1H), 5.04–5.00 (m, 1H), 4.41 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.03–4.00 (m, 1H), 3.95–3.92 (m, 1H), 3.77–3.74 (m, 2H), 2.36–2.34 (m, 1H), 2.07–2.04 (m, 1H), 1.77–1.75 (m, 1H), 1.42 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.81–.75 (m, 4H)。LCMS：tR = 1.34 min，m/z = 403.4 [M+1] (10分鐘運行，方法B)。實例 15 ： (S)-8- 胺基 -10-((R)-3-(1- 胺基環丙基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-9- 甲氧基 -3- 甲基 -5- 側氧基 -2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噁嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -6- 甲酸甲酸鹽
依下列反應圖製備標題化合物：
(i). (S)-10-溴-9-甲氧基-3-甲基-8-硝基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-10-溴-9-氟-3-甲基-8-硝基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.20 g，0.50 mmol)溶解於甲醇(4 mL)中且冷卻至0℃。在0℃下添加NaOMe (0.03 g，055 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物16小時。在真空下濃縮該反應混合物以得到粗製殘餘物，用EtOAc稀釋該殘餘物並用水洗滌。在硫酸鈉上乾燥有機層且在真空下濃縮以得到呈米色固體之所需產物(0.18 g，86%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。LCMS (m/z)：415.17 [M+2]。
(ii). (S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-甲氧基-3-甲基-8-硝基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-10-溴-9-甲氧基-3-甲基-8-硝基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.178 g，0.430 mmol)、(R)-(1-(吡咯啶-3-基)環丙基)胺基甲酸第三丁酯(0.116 g，0.517 mmol)及Cs2 CO3 (0.351 g，1.077 mmol)懸浮於甲苯(10 mL)中且用氮氣脫氣5分鐘。添加BINAP (0.040 g，0.064 mmol)及Pd2 dba3 (0.059 g，0.064 mmol)並加熱反應混合物至110℃持續16小時。通過矽藻土墊過濾該反應混合物並用過量的EtOAc洗滌。在真空下濃縮有機層以得到粗製殘餘物，藉由矽膠層析，使用100%庚烷至100% EtOAc作為洗脫劑，純化該殘餘物，得到呈淺黃色膠之所需產物(0.110 g，46%產率)。LCMS (m/z)：559.5 [M+1]。
(iii). (S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-甲氧基-3-甲基-8-硝基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-甲氧基-3-甲基-8-硝基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.110 g，0.197 mmol)添加至MeOH:H2 O混合物(3:1，5 mL)。添加LiOH.H2 O (1M之水溶液，0.59 mL，0.591 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物3小時。用水淬滅該反應混合物，用稀HCl酸化至pH 4並用乙酸乙酯萃取。在硫酸鈉上乾燥有機層，然後在真空下濃縮以得到呈米色固體之所需產物(0.100 g，93%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。LCMS (m/z)：545.6 [M+1]。
(iv). (S)-10-((R)-3-(1-胺基環丙基)吡咯啶-1-基)-9-甲氧基-3-甲基-8-硝基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸鹽酸鹽：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-甲氧基-3-甲基-8-硝基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸(0.10 g，0.18 mmol)溶解於DCM (2 mL)中。添加HCl-二噁烷(4M，1 mL)且在室溫下攪拌反應混合物1小時。在真空下濃縮該反應混合物以得到粗製殘餘物，用EtOAc研磨該殘餘物，得到呈黃色固體之所需產物(0.04 g，49%產率)。1 H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.36 (s, 1H), 5.21 (s, 1H), 4.61 (d, J = 11.6, 1H), 4.22–4.19 (m, 1H), 4.03–3.99 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.73 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 3.61–3.57 (m, 1H), 2.57–2.55 (m, 1H), 2.30 (dq, J = 13.4, 7.0 Hz, 1H), 1.96 (dt, J = 12.8 , 6.6 Hz, 1H), 1.49 (d, J = 5.9 Hz, 3H), 1.04 (br s, 4H)。LCMS (m/z)：445.5 [M+1]。
(v). (S)-8-胺基-10-((R)-3-(1-胺基環丙基)吡咯啶-1-基)-9-甲氧基-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酸鹽：將(S)-10-((R)-3-(1-胺基環丙基)吡咯啶-1-基)-9-甲氧基-3-甲基-8-硝基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸鹽酸鹽(0.22 g，0.05 mmol)溶解於甲醇/氨溶液(2M，4 mL)中。添加10% Pd/C (50%，含於水中，0.03 g，0.14 mmol)且在室溫下在1大氣氫壓力下攪拌反應混合物5小時。通過矽藻土墊過濾該反應混合物並用過量的MeOH洗滌。在真空下濃縮有機層以得到粗製殘餘物，藉由逆相製備型HPLC純化該殘餘物，得到呈淺黃色固體之所需產物(0.01 g，50%產率)。1 H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.98 (s, 1H), 5.10 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.41 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 3.98 (dd, J = 25.5, 9.7 Hz, 2H), 3.79 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 3.8–3.63 (m, 5H), 2.44–2.42 (m, 1H), 2.11–2.09 (m, 1H), 1.77 (q, J = 10.5 Hz, 1H), 1.43 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.86–0.82 (m, 4H)。LCMS：tR = 1.31 min，m/z = 415.5 [M+1] (10分鐘運行，方法B)。實例 16 ： (S)-10-((R)-3-(1- 胺基環丙基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-9- 甲氧基 -3- 甲基 -5- 側氧基 -2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噁嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -6- 甲酸甲酸鹽
依下列反應圖製備標題化合物：
(i). (S)-8-胺基-10-溴-9-甲氧基-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-10-溴-9-甲氧基-3-甲基-8-硝基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.200 g，0.484 mmol)溶解於乙醇(9 mL)及水(0.4 mL)中。加熱反應混合物至回流並添加連二硫酸鈉(0.421 g，2.421 mmol)。又攪拌該反應混合物4小時。完成後，在真空下濃縮該反應混合物，將殘餘物溶解於EtOAc中並用水萃取。用水、鹽水洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空中濃縮以得到呈米色固體之所需產物(0.160 g，86%產率)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.64 (s, 1H), 5.18 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 4.49 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 4.37–4.34 (m, 1H), 4.01(s, 3H), 3.98 (s, 3H), 1.45 (d, J = 6.7 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：415.5 [M+2]。
(ii). 四氟硼酸(S)-10-溴-9-甲氧基-6-(甲氧基羰基)-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-8-重氮鎓：於-10℃下，在DCM (5 mL)中稀釋BF3 .Et2 O (0.088 g，0.626 mmol)。逐滴添加含在DCM (5 mL)中之(S)-8-胺基-10-溴-9-甲氧基-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.160 g，0.417 mmol)且在-10℃下攪拌反應混合物5分鐘。添加亞硝酸第三丁酯(0.051 g，0.501 mmol)且在-10℃下攪拌反應混合物30分鐘及然後在0℃下攪拌20分鐘。反應完成後，傾倒DCM且用正戊烷及乙醚研磨殘餘物，得到所需產物(0.200 g，93%產率)。
(iii). (S)-10-溴-9-甲氧基-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將四氟硼酸(S)-10-溴-9-甲氧基-6-(甲氧基羰基)-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-8-重氮鎓(0.200 g，0.415 mmol)溶解於DMF (10 mL)中。在0℃下添加FeSO4 .7H2 O (0.138 g，0.498 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物30分鐘。用水淬滅該反應混合物並用EtOAc萃取。用鹽水洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到粗製殘餘物，藉由矽膠層析(20-30% EtOAc/己烷)純化該殘餘物，得到所需產物(0.070 g，52%產率)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.48 (s, 1H), 6.80 (s, 1H), 5.21 (s, 1H), 4.60 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.03–3.98 (m, 7H), 1.47 (d, J = 6.6 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：370.5 [M+2]。
(iv). (S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-10-溴-9-甲氧基-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.070 g，0.190 mmol)、(R)-(1-(吡咯啶-3-基)環丙基)胺基甲酸第三丁酯(0.086 g，0.380 mmol)及Cs2 CO3 (0.186 g，0.570 mmol)懸浮於甲苯(10 mL)中且用氮氣脫氣5分鐘。添加RuPhos (0.013 g，0.028 mmol)及RuPhosPdG3 (0.024 g，0.028 mmol)並加熱反應混合物至95℃持續5小時。通過矽藻土墊過濾該反應混合物並用過量的EtOAc洗滌。在真空下濃縮濾液以得到粗製殘餘物，藉由製備型TLC(60% EtOAc/己烷)純化該殘餘物，得到所需產物(0.050 g，51%產率)。LCMS (m/z)：514.59 [M+1]。
(v). (S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-甲氧基-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.050 g，0.097 mmol)溶解於MeOH:H2 O混合物(3:1，3.0 mL)中。添加LiOH.H2 O (1M之水溶液，0.292 mL，0.292 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物3小時。用冷水淬滅該反應混合物，用稀HCl酸化至pH 4並用EtOAc萃取。用鹽水洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮，以得到所需產物(0.050 g)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 14.78 (s, 1H), δ 8.78 (s, 1H), 6.78 (s, 1H), 5.17 (s, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.45 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 4.07 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.8–3.60 (m, 3H), 2.11–1.80 (m, 3H), 1.48 (s, 9H), 1.30 (d, 3H)。LCMS (m/z)：500.56 [M+1]。
(vi). (S)-10-((R)-3-(1-胺基環丙基)吡咯啶-1-基)-9-甲氧基-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酸鹽：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-甲氧基-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸(0.050 g，0.100 mmol)溶解於DCM (2 mL)中且冷卻至0℃。添加HCl-二噁烷(4M，0.600 mL)且在室溫下攪拌反應混合物2小時。在真空下濃縮該反應混合物以得到粗製殘餘物，藉由逆相製備型HPLC純化該殘餘物，得到呈黃色固體之所需產物(0.005 g，11%產率)。1 H NMR (400 MHz, 甲醇-d4 ) δ 8.44 (s, 1H), 7.03 (s, 1H), 5.10 (s, 1H), 4.51 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 4.10 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.78–3.58 (m, 4H), 2.19 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 1.93 (s, 1H), 1.40 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.96–0.86 (m, 4H)。LCMS：tR = 1.34 min，m/z = 400.5 [M+1] (10分鐘運行，方法B)。實例 17 ： (S)-10-((R)-3-(1- 胺基環丙基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-9- 氰基 -3- 甲基 -5- 側氧基 -2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噁嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -6- 甲酸三氟乙酸鹽
依下列反應圖製備標題化合物：
(i). (S)-9-胺基-10-溴-3-甲基-8-硝基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-10-溴-9-氟-3-甲基-8-硝基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.600 g，1.500 mmol)溶解於DMF (15 mL)中。添加碳酸銨(1.440 g，15.04 mmol)且在90℃下攪拌反應混合物5小時。完成後，將該反應混合物倒入至冰冷的水中，過濾黃色沉澱，然後在真空下乾燥以得到所需產物(0.550 g，93%產率)。LCMS (m/z)：400.21 [M+2]。
(ii). 四氟硼酸(S)-10-溴-6-(甲氧基羰基)-3-甲基-8-硝基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-9-重氮鎓：在-10℃下，將BF3 .Et2 O (0.40 g，2.83 mmol)溶解於DCM (15 mL)中。添加含在DCM (15 mL)中之(S)-9-胺基-10-溴-3-甲基-8-硝基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.75 g，1.88 mmol)且在-10℃下攪拌反應混合物5分鐘。添加亞硝酸第三丁酯(0.23 g，1.80 mmol)且在-10℃下攪拌反應混合物30分鐘並在0℃下攪拌20分鐘。反應完成後，傾倒DCM且用正戊烷及乙醚研磨殘餘物以得到所需產物(0.98 g，93%產率)。
(iii). (S)-10-溴-9-氰基-3-甲基-8-硝基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將四氟硼酸(S)-10-溴-6-(甲氧基羰基)-3-甲基-8-硝基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-9-重氮鎓(0.98 g，1.99 mmol)及CuCN (0.18 g，3.97 mmol)溶解於MeCN (20 mL)中且在50℃下攪拌反應混合物10分鐘。用水淬滅該反應混合物並用EtOAc萃取。用鹽水洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到粗製殘餘物，藉由凝膠層析(20-30% EtOAc/己烷)純化該殘餘物，得到所需產物(0.44 g，54%產率)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.52 (s, 1H), 5.29–5.34 (m, 1H), 4.73 (dd, J = 11.5, 1.0 Hz, 1H), 4.34–4.26 (m, 1H), 4.02 (s, 3H), 1.50 (d, J = 6.7 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：410.3 [M+2]。
(iv). (S)-8-胺基-10-溴-9-氰基-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-10-溴-9-氰基-3-甲基-8-硝基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.40 g，0.98 mmol)溶解於EtOH (20 mL)中且在90℃下加熱反應混合物。逐滴添加含在水(2 mL)中之Na2 S2 O4 (0.51 g，2.94 mmol)並在90℃下攪拌反應混合物10分鐘。在真空下濃縮該反應混合物，用水稀釋並用EtOAc萃取。用鹽水洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到粗製殘餘物，用正戊烷研磨該殘餘物，得到所需產物(0.15 g，36%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.93 (s, 1H), 6.99 (s, 2H), 4.92 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 4.45 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 4.07 (dd, J = 11.5, 2.5 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H), 1.26 (d, J = 6.6 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：380.2 [M+2]。
(v). 四氟硼酸(S)-10-溴-9-氰基-6-(甲氧基羰基)-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-8-重氮鎓：在-10℃下，將BF3 .Et2 O (0.084 g，0.592 mmol)溶解於DCM (3 mL)中。添加含在DCM (2 mL)中之(S)-8-胺基-10-溴-9-氰基-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.150 g，0.396 mmol)且在-10℃下攪拌反應混合物5分鐘。添加亞硝酸第三丁酯(0.062 g，0.592 mmol)並在-10℃下攪拌反應混合物30分鐘且然後在0℃下攪拌20分鐘。反應完成後，傾倒DCM，用正戊烷及乙醚研磨殘餘物，得到所需產物(0.110 g，90%產率)。
(vi). (S)-10-溴-9-氰基-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：在0℃下，將四氟硼酸(S)-10-溴-9-氰基-6-(甲氧基羰基)-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-8-重氮鎓(0.188 g，0.394 mmol)、FeSO4 .7H2 O (0.131 g，0.473 mmol)溶解於DMF (2 mL)中且在室溫下攪拌10分鐘。用水淬滅反應混合物並用EtOAc萃取。用鹽水洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到粗製殘餘物，藉由矽膠層析(20-30% EtOAc/己烷)純化，得到所需產物(0.050 g，35%產率)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.46 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 5.22 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 4.65 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.23 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.00 (s, 3H), 1.49 (d, J = 6.7 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：365.2 [M+2]。
(vii). (S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡啶-1-基)-9-氰基-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-10-溴-9-氰基-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.050 g，0.140 mmol)、(R)-(1-(吡咯啶-3-基)環丙基)胺基甲酸第三丁酯(0.062 g，0.226 mmol)及Cs2 CO3 (0.111 g，0.342 mmol)懸浮於甲苯(5 mL)中且用氮氣脫氣5分鐘。添加RuPhos (0.010 g，0.020 mmol)及RuPhosPdG3 (0.016 g，0.020 mmol)且在100℃下加熱反應混合物2小時。通過矽藻土墊過濾該反應混合物並用過量的EtOAc洗滌。在真空下濃縮濾液以得到粗製殘餘物，藉由利用60% EtOAc/40%己烷之製備型TLC純化該殘餘物，得到所需產物(0.050 g，58%產率)。LCMS (m/z)：509.3 [M+1]。
(viii). (S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氰基-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氰基-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.050 g，0.098 mmol)溶解於MeOH:H2 O混合物(3:1，3 mL)中。添加LiOH.H2 O (1M之水溶液，0.300 mL，0.300 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物3小時。用冷水淬滅該反應混合物，用稀HCl酸化至pH 4並用EtOAc萃取。在硫酸鈉上乾燥已合併的有機層，然後在真空下濃縮以得到所需產物(0.040 g)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。LCMS (m/z)：495.22 [M+1]。
(ix). (S)-10-((R)-3-(1-胺基環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氰基-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸三氟乙酸鹽：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氰基-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸(0.040 g，0.081 mmol)溶解於DCM (3 mL)中且冷卻至0℃。添加TFA (0.5 mL)並在室溫下攪拌反應混合物3小時。在真空下濃縮該反應混合物以得到粗製殘餘物，藉由用DCM及乙醚研磨該殘餘物，得到呈黃色固體之所需產物(0.032 g，76%產率)。1 H NMR (400 MHz, 甲醇-d4 ) δ 8.79 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 5.15 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 4.58 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 4.26–4.07 (m, 2H), 3.95–3.84 (m, 3H), 2.70–2.68 (m, 1H), 2.21–2.05 (m, 1H), 1.82–1.77 (m, 1H), 1.47 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.04–0.93 (m, 4H)。LCMS：tR = 1.33 min，m/z = 395.58 [M+1] (10分鐘運行，方法B)。實例 18 ： (S)-10-((R)-3-(1- 胺基環丙基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-9- 氯 -3- 甲基 -5- 側氧基 -2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噁嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -6- 甲酸鹽酸鹽
依下列反應圖製備標題化合物：
(i). (S)-10-溴-9-氯-3-甲基-8-硝基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將四氟硼酸(S)-10-溴-6-(甲氧基羰基)-3-甲基-8-硝基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-9-重氮鎓(0.450 g，0.912 mmol)、CuCl (0.108 g，1.095 mmol)溶解於MeCN (10 mL)中且在70℃下攪拌反應混合物10分鐘。用水淬滅該反應混合物並用EtOAc萃取。用鹽水洗滌有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到粗製殘餘物，藉由矽膠層析(20-30% EtOAc/己烷)純化該殘餘物，得到所需產物(0.280 g，59%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.81 (s, 1H), 4.92 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 4.46 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 4.07 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.00 (s, 3H), 1.49 (d, 3H)。LCMS (m/z)：418.6 [M+2]。
(ii). (S)-8-胺基-10-溴-9-氯-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-10-溴-9-氯-3-甲基-8-硝基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.20 g，0.52 mmol)溶解於EtOH (15 mL)中且在90℃下加熱混合物。添加含在水(2 mL)中之Na2 S2 O4 (0.41 g，2.35 mmol)並在90℃下攪拌反應混合物1小時。在真空下濃縮該反應混合物，用水稀釋並用EtOAc萃取。用鹽水洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮，得到所需產物(0.18 g，69%產率)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.28 (s, 1H), 5.25 (s, 1H), 4.68 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 4.28 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.00 (s, 3H), 1.29 (d, 3H)。LCMS (m/z)：388.61 [M+1]。
(iii). 四氟硼酸(S)-10-溴-9-氯-6-(甲氧基羰基)-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-8-重氮鎓：於-15℃下，在DCM (5 mL)中稀釋BF3 .Et2 O (0.09 mL，0.70 mmol)。添加含在DCM (5 mL)中之(S)-8-胺基-10-溴-9-氯-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.18 g，0.46 mmol)且在-15℃下攪拌反應混合物5分鐘。添加亞硝酸第三丁酯(0.07 mL，0.56 mmol)並在-15℃下攪拌反應混合物30分鐘然後在0℃下攪拌20分鐘。反應完成後，傾倒DCM，用正戊烷及乙醚研磨殘餘物，得到所需產物(0.180 g)。
(iv). (S)-10-溴-9-氯-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：在0℃下，將四氟硼酸(S)-10-溴-9-氯-6-(甲氧基羰基)-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-8-重氮鎓(0.180 g，0.463 mmol)、FeSO4 .7H2 O (0.154 g，0.556 mmol)溶解於DMF (5 mL)中且在室溫下攪拌混合物1小時。用水淬滅反應混合物並用EtOAc萃取。用鹽水洗滌有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到粗製殘餘物，藉由矽膠層析(20-30% EtOAc/己烷)純化該殘餘物，得到所需產物(0.050 g，29%產率)。LCMS (m/z)：374.6 [M+2]。
(v). (S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氯-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-10-溴-9-氯-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.040 g，0.103 mmol)、(R)-(1-(吡咯啶-3-基)環丙基)胺基甲酸第三丁酯(0.036 g，0.161 mmol)及Cs2 CO3 (0.104 g，0.322 mmol)懸浮於甲苯(4 mL)中且用氮氣脫氣5分鐘。添加RuPhos (0.008 g，0.016 mmol)及RuPhosPdG3 (0.0136 g，0.016 mmol)且在90℃下加熱反應混合物1小時。通過矽藻土墊過濾該反應混合物並用過量的EtOAc洗滌。在真空下濃縮有機層以得到粗製殘餘物，藉由製備型TLC純化該殘餘物得到所需產物(0.020 g，29%產率)。LCMS (m/z)：519.1 [M+1]。
(vi). (S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氯-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氯-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.015 g，0.028 mmol)溶解於MeOH:H2 O混合物(3:1，1.3 mL)中。添加LiOH.H2 O (1M，含於水中，0.086 mL，0.086 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物1.5小時。用冷水淬滅該反應混合物，用稀HCl酸化至pH 4並用EtOAc萃取。用鹽水洗滌有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到所需產物(0.017 g，87%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。LCMS (m/z)：504.98 [M+1]。
(vii). (S)-10-((R)-3-(1-胺基環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氯-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸)鹽酸鹽：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氯-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸(0.040 g，0.030 mmol)溶解於DCM (2 mL)中且冷卻至0℃。添加HCl之二噁烷溶液(4M，0.150 mL)並在室溫下攪拌反應混合物1小時。在真空下濃縮該反應混合物以得到粗製殘餘物，藉由用乙酸乙酯研磨來純化該殘餘物，得到所需產物(0.008 g，59%產率)。1 H NMR (400 MHz, 甲醇-d4 ) δ1 H NMR (400 MHz, 甲醇-d4) δ 8.84 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 5.18 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 4.63 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.22–4.19 (m, 1H), 3.67 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 3.62–3.58 (m, 2H), 3.51–3.42 (m, 1H), 2.68–2.59 (m, 1H), 2.25 (s, 1H), 1.90 (dd, J = 12.6, 8.0 Hz, 1H), 1.47 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.07–0.97 (m, 4H)。LCMS：tR = 1.37 min，m/z = 404.6 [M+1] (10分鐘運行，方法B)。實例 19.1 ： (S)-10-((R)-3-(1- 胺基環丙基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-8- 氯 -9- 氟 -3- 甲基 -5- 側氧基 -2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噁嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -6- 甲酸甲酸鹽
依下列反應圖製備標題化合物：
(i). (S)-10-溴-8-氯-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.20 g，0.56 mmol)溶解於DMF (5 mL)中。添加N -氯琥珀醯胺(0.22 g，1.68 mmol)且在室溫下攪拌所得懸浮液24小時。用冷水稀釋反應混合物並用EtOAc萃取。用水、鹽水洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到呈黃色固體之所需產物(0.18 g，81%產率)。1 H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.81 (s, 1H), 5.25–5.21 (m, 1H), 4.63 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.23–4.20 (m, 1H), 4.01 (s, 3H), 1.47 (d, J = 6.8 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：392.6 [M+1]。
(ii). (S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-8-氯-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：用氮氣使含在甲苯(5 mL)中之(S)-10-溴-8-氯-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.150 g，0.384 mmol)及碳酸銫(0.312 g，0.960 mmol)脫氣10分鐘。添加(R)-(1-(吡咯啶-3-基)環丙基)胺基甲酸第三丁酯(0.130 g，0.576 mmol)、RuPhos (0.027 g，0.058 mmol)及RuPhos Pd G3 (0.032 g，0.038 mmol)並在90℃下加熱反應混合物8小時。通過矽藻土墊過濾該粗製反應混合物且用過量的EtOAc洗滌。在真空下濃縮濾液以得到粗製殘餘物，藉由急驟層析(30-35% EtOAc/己烷)純化該殘餘物，得到呈黃色固體之所需產物(0.140 g，56%產率)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.78 (s, 1H), 7.26 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 5.19–5.17 (m, 1H), 4.42 (dd, J = 11.9, 6.7 Hz, 2H), 3.98 (s, 3H), 3.68–3.66 (m, 1H), 3.45–3.41 (m, 2H), 2.47–2.24 (m, 2H), 2.14–1.97 (m, 1H), 1.63 (s, 9H), 1.49–1.45 (m, 5H), 0.90–0.81 (m, 2H)。LCMS (m/z)：537.1 [M+1]。
(iii). (S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-8-氯-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-8-氯-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.09 g，0.17 mmol)溶解於MeOH (2 mL)及水(0.5 mL)中。添加1M氫化鋰水溶液(0.50 mL，0.50 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物2小時。用水稀釋該反應混合物，用1N HCl酸化至pH 4並用EtOAc萃取。在硫酸鈉上乾燥已合併的有機層，然後在真空下濃縮以得到呈黃色固體之所需產物(0.07 g，80%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。LCMS (m/z)：522.9 [M+1]。
(iv). (S)-10-((R)-3-(1-胺基環丙基)吡咯啶-1-基)-3-乙基-9-氟-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酸鹽：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-8-氯-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸(70.0 mg，0.13 mmol)溶解於DCM (1 mL)中且冷卻至0℃。添加HCl之二噁烷溶液(4M，2 mL)且在室溫下攪拌反應混合物2小時。完成後，在真空下濃縮該反應混合物以得到粗製殘餘物，藉由逆相製備型HPLC純化該殘餘物，得到呈黃色固體之所需產物(20.0 mg，35%產率)。1 H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.66 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 5.15–5.11 (m, 1H), 4.53 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 4.09 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 3.96 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 3.76–3.70 (m, 3H), 2.47–2.43 (m, 1H), 2.12–2.09 (m, 1H), 1.78–1.75 (m, 1H), 1.40–1.31 (m, 3H), 0.91–0.88 (m, 4H)。LCMS：tR = 1.38 min，m/z = 422.37 [M+1] (10分鐘運行，方法B)。 使用針對實例19.1所述的程序，製備下列化合物： 1 在步驟1中，使用(S)-10-溴-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯作為起始物質。
HPLC方法：特徵係在Waters ACQUITY H型UPLC系統上之高效液相層析(HPLC)，其中0.55 mL/min流速；管柱BEH-C18，1.7 um，2.1 x 50 mm，購自Waters，管柱溫度：環境溫度；梯度(溶劑A為2 mM乙酸銨及0.1%甲酸之水溶液，溶劑B為0.1%甲酸之乙腈溶液)：歷時0.4分鐘維持5%溶劑B，歷時0.6分鐘從5%溶劑B變為40%溶劑B，歷時1.2分鐘從40%溶劑B變為60%溶劑B，歷時2.3分鐘從60%溶劑B變為100%溶劑B，然後歷時3分鐘保持100%溶劑B；藉由在236 nm下之紫外光(UV)吸收偵測化合物。實例 20 ： (S)-8- 胺基 -10-((R)-3-(1- 胺基環丙基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-3- 甲基 -5- 側氧基 -2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噁嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -6- 甲酸
依下列反應圖製備標題化合物：
(i). (S)-10-溴-3-甲基-8-硝基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：在0℃下，將(S)-10-溴-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(300 mg，0.89 mmol)溶解於濃H2 SO4 (3 mL)中。慢慢地添加KNO3 (94.0 mg，0.93 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物1小時。將該反應混合物倒入至碎冰中並用EtOAc萃取。用飽和NaHCO3 溶液洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到呈黃色固體之所需產物(300 mg，88%產率)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 9.25 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 8.30 (s, 1H), 5.37–5.30 (m, 1H), 4.69 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 4.29 (dd, J = 11.5, 2.6 Hz, 1H), 4.02 (s, 3H), 1.48 (d, J = 6.7 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：383.15 [M+2]。
(ii). (S)-8-胺基-10-溴-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-10-溴-3-甲基-8-硝基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.300 g，0.783 mmol)溶解於甲醇(15 mL)及水(0.3 mL)中。添加連二亞硫酸鈉(0.681 g，3.916 mmol)且在60℃下攪拌反應混合物16小時。將該反應混合物倒入至冷水中並用EtOAc萃取。用鹽水洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到所需產物(0.220 g，79%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.71 (s, 1H), 6.70 (s, 1H), 6.12 (s, 2H), 4.91 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 4.41 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.10–3.96 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 1.24 (d, J = 6.9 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：353.17 [M+2]。
(iii). (S)-8-(((苄氧基)羰基)胺基)-10-溴-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-8-胺基-10-溴-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.220 g，0.623 mmol)及氯甲酸苄酯(0.321 g，1.869 mmol)溶解於甲苯(15 mL)中且在80℃下攪拌16小時。完成後，將該混合物倒入至冷水中並用EtOAc萃取。用飽和NaHCO3 溶液洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到粗製殘餘物，藉由矽膠管柱層析(15-20% EtOAc/己烷)純化該殘餘物，得到呈黃色固體之所需產物(0.220 g，72%產率)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.59 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.48–7.36 (m, 4H), 6.93 (s, 1H), 5.28 (s, 2H), 5.21 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 4.55 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 4.28–4.13 (m, 1H), 3.98 (s, 3H), 1.56–1.43 (m, 3H)。LCMS (m/z)：487.31 [M+2]。
(iv). (S)-8-(((苄氧基)羰基)胺基)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-8-(((苄氧基)羰基)胺基)-10-溴-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.220 g，0.450 mmol)、(R)-(1-(吡咯啶-3-基)環丙基)胺基甲酸第三丁酯(0.239 g，0.901 mmol)及Cs2 CO3 (0.367 g，1.127 mmol)懸浮於甲苯(20 mL)中且用氮氣脫氣5分鐘。添加RuPhos (0.031 g，0.067 mmol)及RuPhosPdG3 (0.056 g，0.067 mmol)且加熱反應混合物至80℃持續6小時。將該反應混合物倒入至水中並用EtOAc萃取。用鹽水洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到粗製殘餘物，藉由逆相層析(60-70% MeOH/水)純化該殘餘物，得到呈黃色固體之所需產物(0.120 g，42%產率)。LCMS (m/z)：632.71 [M+1]。
(v). (S)-8-(((苄氧基)羰基)胺基)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸：將(S)-8-(((苄氧基)羰基)胺基)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.120 g，0.189 mmol)溶解於MeOH:H2 O混合物(3:1，12 mL)中。添加LiOH.H2 O (1M之水溶液，0.569 mL，0.569 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物3小時。用水淬滅該反應混合物，用稀HCl酸化至pH 4並用乙酸乙酯萃取。在硫酸鈉上乾燥已合併的有機層且在真空下濃縮以得到呈黃色固體之所需產物(0.110 g，94%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。LCMS (m/z)：618.69 [M+1]。
(vi). (S)-8-胺基-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸：將(S)-8-(((苄氧基)羰基)胺基)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸(0.110 g，0.177 mmol)溶解於2M甲醇氨(10 mL)中。添加10% Pd/C (50%含於水中，0.177 g)且於室溫下在1大氣氫壓力下攪拌反應混合物4小時。完成後，通過矽藻土墊過濾該反應混合物，然後在真空下濃縮以得到所需產物(0.080 g，93%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。LCMS (m/z)：484.55 [M+1]。
(vii). (S)-8-胺基-10-((R)-3-(1-胺基環丙基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸：將(S)-8-胺基-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸(0.080 g，0.165 mmol)溶解於DCM (2 mL)中且冷卻至0℃。添加HCl-二噁烷(4M，0.8 mL)且在室溫下攪拌反應混合物2小時。在真空下濃縮該反應混合物以得到粗製殘餘物，藉由逆相製備型HPLC純化該殘餘物得到呈黃色固體之所需產物(0.014 g，24%產率)。1 H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.84 (s, 1H), 6.08 (s, 1H), 5.06 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 4.36 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.87–3.57 (m, 5H), 2.31–2.29 (m, 1H), 2.07–2.05 (m, 1H), 1.78 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 1.43 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.72 (d, J = 7.9 Hz, 4H)。LCMS：tR = 1.36 min，m/z = 384.44 [M+1] (10分鐘運行，方法B)。實例 21.1 ： (S)-10-((R)-3-(1- 胺基環丙基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-8- 氰基 -9- 氟 -3- 甲基 -5- 側氧基 -2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噁嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -6- 甲酸三氟乙酸鹽
依下列反應圖製備標題化合物：
(i). (S)-10-溴-9-氟-8-碘-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(1.50 g，4.21 mmol)溶解於DCM (7 mL)中且添加NIS (1.90 g，8.46 mmol)。使反應混合物冷卻至0℃，慢慢地添加H2 SO4 (7 mL)且在室溫下攪拌1小時。用冰冷的水稀釋該反應混合物並用EtOAc萃取。用鹽水洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到所需產物(1.50 g，74%產率)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.73 (s, 1H), 5.30–5.19 (m, 1H), 4.63 (dd, J = 11.4, 1.2 Hz, 1H), 4.23 (dd, J = 11.4, 2.5 Hz, 1H), 4.03 (s, 3H), 1.46 (d, J = 6.7 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：484.2 [M+2]。
(ii). (S)-10-溴-8-氰基-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-10-溴-9-氟-8-碘-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(200 mg，0.41 mmol)、氰化鋅(100 mg，0.82 mmol)及Zn粉(6.00 mg，0.10 mmol)溶解於DMA (5 mL)中且用氮氣脫氣5分鐘。添加1,1'-雙(二苯基磷基)二茂鐵(18.0 mg，0.03 mmol)、Pd2 (dba)3 (15.0 mg，0.02 mmol)且在130℃下利用微波輻射加熱反應混合物2小時。用冷水淬滅該反應混合物並用EtOAc萃取。用鹽水洗滌有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到粗製殘餘物，藉由矽膠層析(10-20% EtOAc/己烷)純化該殘餘物得到所需產物(60.0 mg，38%產率)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.65 (s, 1H), 5.27 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 4.72 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.31 (dd, J = 11.5, 2.5 Hz, 1H), 4.03 (s, 3H), 1.47 (d, J = 6.8 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：383.33 [M+2]。
(iii). (S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-8-氰基-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-10-溴-8-氰基-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.060 g，0.150 mmol)、(R)-(1-(吡咯啶-3-基)環丙基)胺基甲酸第三丁酯(0.046 g，0.204 mmol)及Cs2 CO3 (0.153 g，0.470 mmol)懸浮於甲苯(5 mL)中且用氮氣脫氣5分鐘。添加RuPhos (0.011 g，0.023 mmol)及RuPhosPdG3 (0.020 g，0.023 mmol)且加熱反應混合物至80℃持續4小時。通過矽藻土墊過濾該反應混合物並用過量的EtOAc洗滌。在真空下濃縮有機層以得到粗製殘餘物，藉由製備型TLC (100% EtOAc)純化該殘餘物，得到所需產物(0.050 g，60%產率)。LCMS (m/z)：527.56 [M+1]。
(iv). (S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-8-氰基-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-8-氰基-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.050 g，0.090 mmol)加入至MeOH:H2 O混合物(3:1，4 mL)中。添加LiOH.H2 O (1M之水溶液，0.3 mL，0.280 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物3小時。用冷水淬滅該反應混合物，用稀HCl酸化至pH 4並用EtOAc萃取。用鹽水洗滌有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到所需產物(0.045 g)，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。LCMS (m/z)：513.66 [M+1]。
(v). (S)-10-((R)-3-(1-胺基環丙基)吡咯啶-1-基)-8-氰基-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸三氟乙酸鹽：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-8-氰基-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸(0.050 g，0.080 mmol)溶解於DCM (2 mL)中且冷卻至0℃。添加TFA (0.4 mL)且在室溫下攪拌反應混合物1小時。在真空下濃縮該反應混合物以得到粗製殘餘物，用乙酸乙酯研磨該殘餘物，得到所需產物(0.032 g，88%產率)。1 H NMR (400 MHz, 甲醇-d4 ) δ 8.78 (s, 1H), 5.23–5.21 (m, 1H), 4.66 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 4.22 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 4.07–4.05 (m, 1H), 3.83–3.81 (m, 3H), 2.66–2.64 (m, 1H), 2.17–2.15 (m, 1H), 1.76–1.74 (m, 1H), 1.47 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.04 (d, J = 15.6 Hz, 4H)。LCMS：tR = 1.37 min，m/z = 413.49 [M+1] (10分鐘運行，方法B)。
使用針對實例21.1所述的程序，製備下列化合物： 1 在步驟1中，使用(S)-10-溴-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯作為起始物質。
HPLC方法：特徵係在Waters ACQUITY H型UPLC系統上之高效液相層析(HPLC)，其中0.55 mL/min流速；管柱BEH-C18，1.7 um，2.1 x 50 mm，購自Waters，管柱溫度：環境溫度；梯度(溶劑A為2 mM乙酸銨及0.1%甲酸之水溶液，溶劑B為0.1%甲酸之乙腈溶液)：歷時0.4分鐘維持5%溶劑B，歷時0.6分鐘從5%溶劑B變為40%溶劑B，歷時1.2分鐘從40%溶劑B變為60%溶劑B，歷時2.3分鐘從60%溶劑B變為100%溶劑B，然後歷時3分鐘保持100%溶劑B；藉由在236 nm下之紫外光(UV)吸收偵測化合物。實例 22 ： (S)-10-((R)-3-(1- 胺基環丙基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-9- 氟 -3,8- 二甲基 -5- 側氧基 -2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噁嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -6- 甲酸
依下列反應圖製備標題化合物：
(i). 甲基(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-8-氯-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸：用氮氣使(S)-10-溴-9-氟-8-碘-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.250 g，0.518 mmol)及碳酸銫(0.507 g，1.556 mmol)含在甲苯(10 mL)中之懸浮液脫氣10分鐘。添加三甲基硼肟(Trimethylboroxime) (0.025 g，0.245 mmol)、三環己基膦(0.021 g，0.077 mmol)及Pd2 dba3 (0.023 g，0.025 mmol)且加熱反應混合物至70℃持續9小時。通過矽藻土墊過濾該反應混合物且在減壓下蒸發揮發物。藉由矽膠層析(20-50% EtOAc/己烷)純化殘餘物得到呈黃色固體之所需產物。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.67 (s, 1H), 5.34–5.24 (m, 1H), 4.61 (dd, J = 16.4, 11.4 Hz, 1H), 4.26–4.16 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 2.55 (s, 3H), 1.46 (d, J = 6.7 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：372.17 [M+2]。
(ii). (S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3,8-二甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將甲基(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-8-氯-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸(0.137 g，0.370 mmol)、(R)-(1-(吡咯啶-3-基)環丙基)胺基甲酸第三丁酯(0.280 g，1.243 mmol)及Cs2 CO3 (0.607 g，1.863 mmol)懸浮於甲苯(10 mL)中且用氮氣脫氣5分鐘。添加RuPhos (0.043 g，0.093 mmol)及RuPhosPdG3 (0.077 g，0.093 mmol)且加熱反應混合物至70℃持續8小時。將該反應混合物倒入至水中並用EtOAc萃取。用鹽水洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到粗製殘餘物，藉由逆相層析(60-70% MeOH/水)純化該殘餘物，得到呈黃色固體之所需產物(0.118 g，62%產率)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.67 (s, 1H), 5.34–5.24 (m, 1H), 4.37–4.22 (m, 2H), 4.25–4.11 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 3.92–3.86 (m, 4H), 2.53 (s, 3H), 2.30–2.18 (m, 2H), 2.20–2.02 (m, 1H), 1.51–1.38 (m, 9H), 1.42–1.30 (m, 5H), 1.02 (dd, J = 6.6, 3.0 Hz, 2H)。LCMS (m/z)：516.6 [M+1]。
(iii). ((S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3,8-二甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3,8-二甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.118 g，0.373 mmol)溶解於MeOH:H2 O混合物(4:1，2.5 mL)中。添加LiOH.H2 O (1M之水溶液，0.500 mL，1.119 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物2小時。用水淬滅該反應混合物，用稀HCl酸化至pH 4並用乙酸乙酯萃取。在硫酸鈉上乾燥已合併的有機層，然後在真空下濃縮以得到呈黃色固體之所需產物，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。LCMS (m/z)：502.6 [M+1]。
(iv). (S)-10-((R)-3-(1-胺基環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3,8-二甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸：將((S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3,8-二甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸溶解於DCM (1 mL)中並冷卻至0℃。添加HCl之二噁烷溶液(4M，2 mL)且允許在室溫下攪拌反應混合物2小時。在真空下濃縮該反應混合物以得到粗製殘餘物，藉由逆相製備型HPLC純化粗製殘餘物，得到呈黃色固體之所需產物(0.045 g，33%產率)。1 H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.94 (s, 1H), 5.23–5.15 (m, 1H), 4.49–4.41 (m, 1H), 4.10–4.00 (m, 2H), 3.94–3.84 (m, 1H), 3.76–3.65 (m, 2H), 2.48 (s, 3H), 2.07–2.02 (m, 2H), 1.84–1.75 (m, 1H), 1.49 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.72–0.62 (m, 2H), 0.58–0.56 (m, 2H)。LCMS：tR = 1.40 min，m/z = 402.4 [M+1] (10分鐘運行，方法B)。實例 23 ： (S)-10-((R)-3-(1- 胺基環丙基 ) 吡咯啶 -1- 基 )-8- 乙基 -9- 氟 -3- 甲基 -5- 側氧基 -2,3- 二氫 -5H-[1,4] 噁嗪并 [2,3,4-ij] 喹啉 -6- 甲酸
依下列反應圖製備標題化合物：
(i). (S)-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-8-乙烯基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-10-溴-9-氟-8-碘-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(1.20 g，2.48 mmol)溶解於DMF (25 mL)中。添加K2 CO3 (1.03 g，7.46 mmol)及乙烯基二羥基硼酸(4.62 g，2.99 mmol)且用氮氣使懸浮液脫氣5分鐘。添加PdCl2 (dppf) DCM錯合物(0.11 g，0.12 mmol)並在70℃下加熱反應16小時。用水稀釋反應混合物並用EtOAc萃取。用鹽水洗滌已合併的有機層，在硫酸鈉上乾燥，然後在真空下濃縮以得到粗製殘餘物，藉由矽膠管柱層析(0-30% EtOAc/己烷)，得到所需產物(0.70 g，74%產率)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.79 (s, 1H), 6.90 (dd, J = 17.7, 11.6 Hz, 1H), 5.91–5.76 (m, 2H), 5.30–5.21 (m, 1H), 4.61 (dd, J = 11.5, 1.3 Hz, 1H), 4.22 (dd, J = 11.4, 2.5 Hz, 1H), 4.01 (s, 3H), 1.47 (d, J = 6.7 Hz, 3H)。LCMS (m/z)：384.2 [M+2]。
(ii). (S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯并-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-8-乙烯基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-10-溴-9-氟-3-甲基-5-側氧基-8-乙烯基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.500 g，1.308 mmol)、(R)-(1-(吡咯啶-3-基)環丙基)胺基甲酸第三丁酯(0.384 g，1.701 mmol)及Cs2 CO3 (1.3 g，3.926 mmol)懸浮於甲苯(15 mL)中且用氮氣脫氣15分鐘。添加RuPhos (0.092 g，0.196 mmol)及RuPhosPdG3 (0.164 g，0.196 mmol)且在75℃下加熱反應混合物2小時。通過矽藻土墊過濾該反應混合物且用過量的EtOAc洗滌。在真空下濃縮濾液以得到粗製殘餘物，藉由製備型TLC (70% EtOAc/己烷)純化該殘餘物，得到所需產物(0.670 g，97%產率)。LCMS (m/z)：528.6 [M+1]。
(iii). (S)-10-((R)-3-(2-((第三丁氧基羰基)胺基)丙-2-基)吡咯并-1-基)-8-乙基-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-9-氟-3-甲基-5-側氧基-8-乙烯基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.060 g，0.011 mmol)溶解於甲醇氨(2M，6 mL)中。添加10% Pd/C(50%含於水中，0.020 g)且於室溫下在氫氣氣氛(1 atm)下攪拌反應混合物1小時。通過矽藻土墊過濾該反應混合物，用過量的甲醇洗滌，然後在真空下濃縮以得到所需產物連同作為雜質之對應醯胺。該產物無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。LCMS (m/z)：530.61 [M+1]。
(iv). (S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-8-乙基-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸：將(S)-10-((R)-3-(2-((第三丁氧基羰基)胺基)丙-2-基)吡咯啶-1-基)-8-乙基-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸甲酯(0.052 g，0.098 mmol)添加至MeOH:H2 O混合物(3:1，4 mL)中。添加LiOH.H2 O (1M之水溶液，0.294 mL，0.294 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物2小時。將該反應混合物倒入至冰冷水中，用稀HCl酸化至pH 4並用EtOAc萃取。在硫酸鈉上乾燥已合併的有機層，然後在真空中濃縮以得到所需產物，其無需任何進一步純化即可直接用於下一步驟中。LCMS (m/z)：516.6 [M+1]。
(v). (S)-10-((R)-3-(1-胺基環丙基)吡咯啶-1-基)-8-乙基-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸：將(S)-10-((R)-3-(1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)吡咯啶-1-基)-8-乙基-9-氟-3-甲基-5-側氧基-2,3-二氫-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸(0.050 g，0.097 mmol)溶解於DCM (5 mL)中且冷卻至0℃。添加HCl之二噁烷溶液(4M，0.5 mL)且在室溫下攪拌反應混合物3小時。在真空下濃縮反應混合物以得到粗製殘餘物，其藉由逆相製備型HPLC純化以得到所需產物(0.007 g，17%產率)。1 H NMR (400 MHz, 甲醇-d4 ) δ 8.96 (s, 1H), 5.16 (s, 1H), 4.52 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.06 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 3.96 (s, 1H), 3.70 (d, J = 11.1 Hz, 3H), , 2.99 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 2.47–2.44 (m, 1H), 2.13–2.11 (m, 1H), 1.79–1.77 (m, 1H), 1.42 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.27 (q, J = 11.1, 7.7 Hz, 3H), 0.89 (br s, 4H)。LCMS：tR = 1.39 min，m/z = 416.6 [M+1] (10分鐘運行，方法B)。醫藥活性
可藉由下列活體外方法來評估本發明化合物之活性。活體外抗菌活性之評估
在35℃下，於環境空氣中，在Mueller-Hinton瓊脂板(MHA，Becton Dickinson，Franklin Lakes, NB)上自-80℃冷凍原液藉由過夜繼代培養細菌單離株，例外的是肺炎鏈球菌(S. pneumoniae )，其係在35℃下，於存在5% CO2 下，在血液瓊脂板(具有5%羊血之胰酶大豆瓊脂(Thermo Scientific，Waltham, MA))上生長過夜。下列品質控制及野生型菌株係從美國模式培養物保藏所(American Type Culture Collection，ATCC；Rockville, MD)獲得且依如下所示在Novartis菌株保藏所編碼：大腸桿菌ATCC 25922 (NB27001)、糞腸球菌ATCC 29212 (NB04001)、金黃色葡萄糖菌ATCC 49951 (NB01006)及肺炎鏈球菌ATCC 25922 (NB07001)。藉由在含環丙沙星之Mueller Hinton瓊脂上選擇而衍生自金黃色葡萄糖菌ATCC 49951的金黃色葡萄糖菌NB01006-AVR005攜帶導致gyrA (S84L)、grlA (S80F)及grlB (E471K)中胺基酸取代之突變。金黄色葡萄球菌NB01080為氟喹諾酮耐藥性臨床單離株，其具有在gyrA (S84L，E88G)及parC (S80F，E84K)中之胺基酸取代之。獲自皇后大學(Queen's University，Kingston, Ontario, Canada)的綠膿桿菌NB52019為野生型PAO1菌株。
根據臨床及實驗室研究所(Clinical and Laboratories Institute，CLSI)指導原則，藉由培養液微量稀釋法測定最低抑制濃度(MIC)。簡言之，將新製細菌過夜培養物再懸浮於無菌鹽水中，調整至0.5 McFarland濁度標準且接著稀釋，以得到約5x105 個菌落形成單位(CFU)/mL之最終接種物。在經陽離子調整之Mueller-Hinton培養液 (CAMHB；Becton Dickinson，Franklin Lakes, NJ；)中製備所有細菌懸浮液，例外的是肺炎鏈球菌，其係在補充有5%溶胞馬血(Hardy Diagnostics，Santa Maria, CA)的CAMHB中製備。在100%二甲亞碸(DMSO)中在100-倍的最高最終分析濃度下製備化合物之兩倍連續稀釋液；用無菌水1:10稀釋所得連續稀釋之化合物。將10 µL的藥物稀釋系列之10% DMSO溶液轉移至微量滴定孔且將90 µL細菌懸浮液接種至該等孔中。在環境空氣中於35℃下培育所有經接種之微量稀釋托盤20小時。在培育後，在微量滴定板讀取器中於600 nm下讀取分析板且目視檢查以證實具有OD值之MIC終點孔。化合物之阻止可見生長之最低濃度記錄為MIC(單位為µg/mL)。根據CLSI指導原則，藉由針對實驗室品質控制菌株測試環丙沙星或莫西沙星來監測該分析法之性能。表 2. 本發明化合物之抗菌活性 (µg/mL) ：C ≥ 32；32 ＞ B ≥ 1；1 ＞ A
註：包括環丙沙星(CIP)及莫西沙星(MOX)作為對照劑。記錄於表中針對對照之MIC值為來自至少35個分析法之模式值。
自前述當可明瞭，雖然本文中已出於例示目的對本發明之具體實施例進行說明，但可在不脫離本發明之精神及範圍下作出各種修改。因此，本發明除了受隨附專利申請範圍限制外不受限制。

Claims (20)

  1. 一種式(I)化合物：(I) 其中： Z1 係選自由O、S、NR1 及C(R1 )2 組成之群； Z2 係選自C(R1 )2 、O、-C(R1 )2 -C(R1 )2 -及連接Z1 與Z3 的鍵，限制條件是當Z2 為O，Z1 為C(R1 )2 ； Z3 為C(R1 )2 ； 其中R1 在每次出現時係獨立地選自H，及C1 -C3 烷基，其視需要經多達三個選自鹵基、羥基、C1 -C3 -烷氧基及CN取代； R3 係選自由H、-L1 -OR2 、-L1 -CN、-L1 -N(R2 )2 、-L1 -COOR2 、-L1 -CON(R2 )2 、-L1 -N(R2 )C(O)R2 、-L1 -N(R2 )C(O)OR、-L1 -SO2 R、-L1 -N(R2 )-SO2 -R及-L1 -SO2 -N(R2 )2 組成之群；其中各L1 為鍵或C1 -C4 直鏈或分支鏈伸烷基連接子； 各R獨立地為C1 -C4 烷基，視需要經一至三個選自鹵素、-OH、C1 -C4 烷氧基、CN、-NH2 、-NH(C1 -C4 烷基)、-N(C1 -C4 烷基)2 、-SO2 (C1 -C4 烷基)及側氧基(oxo)之基團取代； 各R2 獨立地為H，或C1 -C4 烷基，其視需要經多達三個選自鹵素、-OH、C1 -C4 烷氧基、CN、-NR12 R13 、-SO2 R及側氧基之基團取代； 或在相同氮上的兩個R2 可共同形成4-6員雜環，視需要包含另一選自N、O及S之雜原子作為環成員且視需要經多達三個選自鹵素、-OH、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烷氧基、CN、-NR12 R13 及側氧基之基團取代； R4 係選自由H、鹵基、C1 -C6 烷基、C1 -C4 鹵烷基、--L2 -OR2 、-L2 -CN、-L2 -N(R2 )2 及-L2 -NR2 C(O)-R2 ； 各L2 係獨立地選自鍵及二價直鏈或分支鏈C1 -C6 烷基； R5 係選自由H、鹵基、胺基、CN、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烷氧基及C1 -C4 鹵烷基組成之群； R6 係選自由H、鹵基、CN、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烷氧基及C1 -C4 鹵烷基組成之群； Y為式-NR7A R7B 之基團， 其中R7A 係選自由下列組成之群：H、-C(O)R2 、-C(O)OR2 ，及視需要經多達兩個獨立選自下列之基團取代之C1 -C6 烷基：鹵素、-OH、C1 -C4 鹵烷基、C1 -C4 烷氧基、側氧基、=N-OR2 、-N(R2 )2 、C3 -C7 環烷基、-COOR2 、-C(O)N(R2 )2 、-NR2 C(O)R2 、-NR2 C(O)OR及4-6員雜芳基或雜環基，該4-6員雜芳基或雜環基包含多達兩個選自N、O及S之雜原子作為環成員且視需要經多達兩個選自羥基、胺基、鹵素、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基及C1 -C4 烷氧基之基團取代； R7B 為-L3 -Q3 ，或視需要經多達兩個獨立選自下列之基團取代之C1 -C6 烷基：鹵素、-OH、C1 -C4 鹵烷基、C1 -C4 烷氧基、側氧基、-N(R2 )2 、C3 -C7 環烷基、-COOR2 、-C(O)N(R2 )2 、-NR2 C(O)R2 、-NR2 C(O)OR及4-6員雜芳基或雜環基，該4-6員雜芳基或雜環基包含多達兩個選自N、O及S之雜原子作為環成員且視需要經多達兩個選自羥基、胺基、鹵素、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基及C1 -C4 烷氧基之基團取代， 其中L3 為鍵或直鏈或分支鏈C1 -C6 烷基連接子，且Q3 係選自吡啶基及包含一或兩個選自N、O及S之雜原子作為環成員之4-7員雜環基，且其中Q3 係視需要經多達三個選自鹵素、CN、-OH、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基、C1 -C4 烷氧基、側氧基、=N-OR2 、-N(R2 )2 、-COOR2 、-C(O)N(R2 )2 、-NR2 C(O)R2 、-NR2 C(O)OR之基團取代； 或R7A 及R7B 與其所連接的氮原子共同形成視需要包含另一個選自N、O及S之雜原子作為環成員之4-至7-員單環基，或視需要包含另一或兩個選自N、O及S之雜原子作為環成員之6-10員雙環雜環基，其中由R7A 及R7B 與其所連接的氮原子共同形成的該單環或雙環雜環基係視需要經多達四個選自下列之基團取代：鹵素、-CN、羥基、苯基、側氧基、-OR9 、-N(R9 )2 、-COOR9 、-C(O)N(R9 )2 、C1 -C4 烷基、=C(R8 )2 、C1 -C4 鹵烷基、C1 -C4 烷氧基、側氧基、C3 -C6 環烷基及包含多達兩個選自N、O及S之雜原子作為環成員之4-6員雜芳基或雜環基， 其中該C1 -C4 烷基、C3 -C6 環烷基、苯基及4-6員雜芳基或雜環基各自視需要經多達三個獨立選自下列之基團取代：鹵素、-CN、羥基、側氧基、-OR10 、=N-OR10 、-N(R10 )2 、-COOR10 、-N(R10 )-C(O)-O-(C1 -C4 烷基)、-C(O)N(R10 )2 、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基及C1 -C4 烷氧基； R8 在每次出現時係獨立地選自由H、鹵基、CN、C1 -C4 烷氧基、C1 -C4 鹵烷基，及視需要經羥基或胺基取代之C1 -C4 烷基組成之群； R9 及R10 各自獨立地選自H，及C1 -C4 烷基，其視需要經多達三個選自鹵素、-OH、C1 -C4 烷氧基、CN、-NR12 R13 、-SO2 R及側氧基之基團取代； 或在相同氮上的兩個R9 或兩個R10 可共同形成4-6員雜環，視需要包含另一選自N、O及S之雜原子作為環成員且視需要經多達三個選自鹵素、-OH、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烷氧基、CN、-NR12 R13 及側氧基之基團取代； 各R11 獨立地為氫，或C1 -C4 烷基，其視需要經一或兩個選自鹵素、-OH、C1 -C4 烷氧基、CN、-NH2 、-NH(C1 -C4 烷基)、-N(C1 -C4 烷基)2 、-SO2 (C1 -C4 烷基)及側氧基之基團取代； 各R12 及R13 獨立地為氫，或C1 -C4 烷基，其視需要經一或兩個選自鹵素、-OH、C1 -C4 烷氧基、CN、-NH2 、-NH(C1 -C4 烷基)、-N(C1 -C4 烷基)2 、-SO2 (C1 -C4 烷基)及側氧基之基團取代； 或R12 及R13 與其二者所連接的氮原子共同形成4-至6-員雜環基，其視需要包含另一選自N、O及S之雜原子作為環成員且視需要經一至三個選自OH、鹵素、側氧基、=N-OR11 、視需要經一至三個鹵原子或NH2 取代之C1 -C6 烷基、視需要經一或多個OH或C1 -C6 烷氧基取代之C1 -C6 烷氧基，及-C(O)O-C1 -C6 烷基之取代基取代； 或其醫藥上可接受之鹽。
  2. 如請求項1之化合物，其中R3 為H或COOR2 。
  3. 如請求項1或2之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其中R5 為H或鹵素。
  4. 如前述請求項中任一項之化合物，其中R6 為H或F；或其醫藥上可接受之鹽。
  5. 如前述請求項中任一項之化合物，其中各R1 係獨立地選自H及甲基；或其醫藥上可接受之鹽。
  6. 如前述請求項中任一項之化合物，其中R3 為H；或其醫藥上可接受之鹽。
  7. 如請求項1至5中任一項之化合物，其中R3 為-COOH；或其醫藥上可接受之鹽。
  8. 如前述請求項中任一項之化合物，其中R4 為H；或其醫藥上可接受之鹽。
  9. 如請求項1至7中任一項之化合物，其中R4 為-CH2 -N(R2 )2 ；或其醫藥上可接受之鹽。
  10. 如前述請求項中任一項之化合物，其具有式(II)：(II)； 或其醫藥上可接受之鹽。
  11. 如請求項10之化合物，其中R7A 為H；或其醫藥上可接受之鹽。
  12. 如請求項10之化合物，其中R7A 及R7B 與其所連接的氮原子共同形成視需要包含另一個選自N、O及S之雜原子作為環成員之4-至7-員單環雜環基， 或視需要包含另一個或兩個選自N、O及S之雜原子作為環成員之6-10員二環雜環基， 其中由R7A 及R7B 與其所連接的氮原子共同形成的該單環或雙環雜環基視需要經多達三個選自以下之基團取代：鹵素、-CN、羥基、苯基、側氧基、-OR9 、-N(R9 )2 、-COOR9 、-C(O)N(R9 )2 、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基、C1 -C4 烷氧基、側氧基、C3 -C6 環烷基，及包含多達兩個選自N、O及S之雜原子作為環成員之4-6員雜芳基或雜環基， 其中該C1 -C4 烷基、C3 -C6 環烷基、苯基及4-6員雜芳基或雜環基各自視需要經多達三個獨立選自鹵素、-CN、羥基、側氧基、-OR10 、=N-OR10 、-N(R10 )2 、-COOR10 、-C(O)N(R10 )2 、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基及C1 -C4 烷氧基之基團取代； 或其醫藥上可接受之鹽。
  13. 如請求項1之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其中該化合物具有式(IV)：(IV) 其中， R1 在每次出現時獨立地為氫或甲基； R3 為氫、鹵基、C1-2 烷基或C1-2 鹵烷基； R4 為H或-CH2 NH2 ； R5 為H、Me或鹵基； Rc 及Rf 係獨立地選自氫及鹵基，或Rc 及Rf 與其所連接的原子共同形成環丙基環； Rd 及Re 各獨立地選自由H、-NH2 、-CH2 NH2 、-CH2 NHCH3 、OH、CH2 OH、、、、、、、及組成之群。
  14. 如請求項1之化合物或其醫藥上可接受之鹽， 其中： R3 為氫、C1-2 烷基、C1-2 鹵烷基、CN、-C(O)OH、C(O)-O-(C1 -C4 烷基)或-S(O)2 -(C1 -C4 烷基)； 各R1 獨立地為H或甲基； Y係選自由下列組成之群：、、、、、、、、、 、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、及。
  15. 一種式(VI)化合物：(VI) 其中， R1 為H、甲基、CH2 F、CH2 OH或CH2 OMe； R3 為氫或-COOR2 ； R2 為H或C1 -C4 烷基； R4 為氫或-CH2 NH2 ； Z1 為O或CH2 ； R5 為氫、Me或鹵基；及 R7A 及R7B 與其所連接的氮原子共同形成視需要包含另一個選自N、O及S之雜原子作為環成員之5-至6-員單環雜環基，或視需要包含另一個選自N、O及S之雜原子作為環成員之6-10員二環雜環基， 其中由R7A 及R7B 與其所連接的氮原子共同形成的該單環或雙環雜環基視需要經多達四個選自以下之基團取代：鹵素、-CN、羥基、苯基、側氧基、-OR9 、-N(R9 )2 、-COOR9 、-C(O)N(R9 )2 、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基、C3 -C6 環烷基，及包含多達兩個選自N、O及S之雜原子作為環成員之4-6員雜芳基或雜環基， 其中該C1 -C4 烷基、C3 -C6 環烷基、苯基及4-6員雜芳基或雜環基各自視需要經多達三個獨立選自以下之基團取代：鹵素、-CN、羥基、側氧基、-OR10 、=N-OR10 、-N(R10 )2 、-COOR10 、-N(R10 )-C(O)-O-(C1 -C4 烷基)、-C(O)N(R10 )2 、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基及C1 -C4 烷氧基； 或其醫藥上可接受之鹽。
  16. 如請求項15之化合物，其中該以-NR7A R7B 表示之基團係選自：、、及； 或其醫藥上可接受之鹽。
  17. 一種醫藥組合物，其包含： 如請求項1至16中任一項之化合物，及 醫藥上可接受之載劑、佐劑或媒劑。
  18. 如請求項17之醫藥組合物，其進一步包含具有抗細菌活性之另一治療劑。
  19. 一種用於治療具有細菌感染之個體之方法，其包括： 對有此需要的個體投與抗細菌有效量之如請求項1至16中任一項之化合物。
  20. 如請求項19之方法，其中該細菌感染係包括至少一種選自由下列組成之群之細菌之感染：綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa )及其他假單胞桿菌種(Pseudomonas species)、嗜麥芽窄食單胞菌(Stenotrophomonas maltophilia )、洋蔥伯克氏菌(Burkholderia cepacia )及其他伯克氏菌種(Burkholderia species)、鮑氏不動桿菌(Acinetobacter baumannii )及其他不動桿菌種(Acinetobacter species)、木糖氧化無色桿菌(Achromobacter xylosoxidans )、反硝化產鹼桿菌(Alcaligenes denitrificans )及其他無色桿菌科(Achromobacteraceae )、弗氏檸檬酸桿菌(Citrobacter freundii )及其他檸檬酸桿菌種(Citrobacter species)、空腸彎曲桿菌(Campylobacter jejuni )、肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae )、產酸克雷伯氏菌(Klebsiella oxytoca )及其他克雷伯氏菌種(Klebsiella species)、陰溝腸桿菌(Enterobacter cloacae )、產氣腸桿菌(Enterobacter aerogenes )及其他腸桿菌種(Enterobacter species)、大腸桿菌(Escherichia coli )、腸沙門氏菌(Salmonella enterica )及其他沙門氏菌種(Salmonella species)、鼠疫桿菌(Yersinia pestis )、普通變形桿菌(Proteus vulgaris )及其他變形桿菌種(Proteus species)、黏質沙雷氏菌(Serratia marscens )及其他沙雷氏菌種(Serratia species)、摩氏摩根氏菌(Morganella morganii )及腸桿菌科之其他成員、腦膜炎雙球菌(Neisseria meningitidis )、流感嗜血桿菌(Haemophilus influenzae )、卡他莫拉氏菌(Moraxella cattharallis )、脆弱擬桿菌(Bacteroides fragilis )、多形擬桿菌(Bacteroides thetaiotaomicron )及其他擬桿菌種、多殺性巴氏桿菌(Pasteurella multicoda )及其他巴氏桿菌種、土拉弗蘭西斯菌(Fransicella tularensis )、痢疾志賀氏菌(Shigella dysenteriae )及其他志賀氏菌種、霍亂弧菌(Vibrio cholera )及其他弧菌種、百日咳博德氏菌(Bordetella pertussis )及其他博德氏菌種、幽門螺桿菌(Helicobactor pylori )及其他螺桿菌種、嗜肺性退伍軍人桿菌(Legionella pneumophila )及空腸彎曲桿菌(Campylobactor jejuni )、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus )、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis )及其他葡萄球菌種、糞腸球菌(Enterococcus faecalis )、屎腸球菌(Enterococcus faecium )及其他腸球菌種、肺炎鏈球菌(Streptococcus pneumoniae )、化膿鏈球菌(Streptococcus pyogenes )、無乳鏈球菌(Streptococcus agalactiae )及其他鏈球菌種、炭疽芽孢桿菌(Bacillus anthracis )及其他芽孢桿菌種、大消化鏈球菌(Peptostreptococcus magnus )及其他消化鏈球菌種、難養芽胞梭菌(Clostridium difficile )及其他芽胞梭菌種、單核細胞增多性李斯特菌(Listeria monocytogenes )及其他李斯特菌種、及白喉棒狀桿菌(Corynebacterium diptheriae )及其他棒狀桿菌種。
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Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112362640B (zh) * 2020-10-11 2021-10-26 华中农业大学 一种猪链球菌c-di-AMP合成酶抑制剂的筛选方法及其应用
TW202322819A (zh) 2021-10-22 2023-06-16 大陸商江蘇恆瑞醫藥股份有限公司 含氮的四環化合物、其製備方法及其在醫藥上的應用
CN119390615A (zh) * 2024-10-31 2025-02-07 济南泺合医药技术有限公司 一种（s）-2-（（叔丁氧基羰基）氨基）丙基甲磺酸酯的合成方法

Family Cites Families (35)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB2116183B (en) 1982-03-03 1985-06-05 Genentech Inc Human antithrombin iii dna sequences therefore expression vehicles and cloning vectors containing such sequences and cell cultures transformed thereby a process for expressing human antithrombin iii and pharmaceutical compositions comprising it
JP4440344B2 (ja) 1996-08-16 2010-03-24 シェーリング コーポレイション 哺乳動物細胞表面抗原；関連試薬
US6111090A (en) 1996-08-16 2000-08-29 Schering Corporation Mammalian cell surface antigens; related reagents
JP2001520039A (ja) 1997-10-21 2001-10-30 ヒューマン ジノーム サイエンシーズ， インコーポレイテッド ヒト腫瘍壊死因子レセプター様タンパク質、ｔｒ１１，ｔｒ１１ｓｖ１およびｔｒ１１ｓｖ２
IL137409A0 (en) 1998-02-09 2001-07-24 Genentech Inc Novel tumor necrosis factor receptor homolog and nucleic acids encoding the same
IL147442A0 (en) 1999-07-12 2002-08-14 Genentech Inc Promotion or inhibition of angiogenesis and cardiovscularization by tumor necrosis factor ligand/receptor homologs
WO2004078163A2 (en) 2003-02-28 2004-09-16 Transform Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical co-crystal compositions of drugs such as carbamazepine, celecoxib, olanzapine, itraconazole, topiramate, modafinil, 5-fluorouracil, hydrochlorothiazide, acetaminophen, aspirin, flurbiprofen, phenytoin and ibuprofen
JP4511943B2 (ja) 2002-12-23 2010-07-28 ワイス エルエルシー Ｐｄ−１に対する抗体およびその使用
NZ543654A (en) 2003-05-23 2009-05-31 Wyeth Corp GITR ligand and GITR ligand-related molecules and antibodies and uses thereof
US20050048054A1 (en) 2003-07-11 2005-03-03 Shino Hanabuchi Lymphocytes; methods
EP1692318A4 (en) 2003-12-02 2008-04-02 Genzyme Corp COMPOSITIONS AND METHODS FOR DIAGNOSIS AND TREATMENT OF LUNG CANCER
GB0409799D0 (en) 2004-04-30 2004-06-09 Isis Innovation Method of generating improved immune response
EP1765402A2 (en) 2004-06-04 2007-03-28 Duke University Methods and compositions for enhancement of immunity by in vivo depletion of immunosuppressive cell activity
JP5238936B2 (ja) 2005-03-25 2013-07-17 ジーアイティーアール，インク． Ｇｉｔｒ結合分子およびその使用
EP2439273B1 (en) 2005-05-09 2019-02-27 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Human monoclonal antibodies to programmed death 1(PD-1) and methods for treating cancer using anti-PD-1 antibodies alone or in combination with other immunotherapeutics
HRP20151102T1 (xx) 2005-07-01 2015-11-20 E. R. Squibb & Sons, L.L.C. Humana monoklonska antitijela za ligand programirane smrti 1 (pd-l1)
EP1981969A4 (en) 2006-01-19 2009-06-03 Genzyme Corp ANTI-GITRANT ANTIBODIES FOR THE TREATMENT OF CANCER
PT2170959E (pt) 2007-06-18 2014-01-07 Merck Sharp & Dohme Anticorpos para o receptor humano de morte programada pd-1
EP2175884B8 (en) 2007-07-12 2017-02-22 GITR, Inc. Combination therapies employing gitr binding molecules
ES2639857T3 (es) 2008-02-11 2017-10-30 Cure Tech Ltd. Anticuerpos monoclonales para el tratamiento del tumor
US8168757B2 (en) 2008-03-12 2012-05-01 Merck Sharp & Dohme Corp. PD-1 binding proteins
EP2310508A1 (en) 2008-07-02 2011-04-20 Emergent Product Development Seattle, LLC Tgf-b antagonist multi-target binding proteins
AR072999A1 (es) 2008-08-11 2010-10-06 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se unen al gen 3 de activacion linfocitaria (lag-3) y los usos de estos
EA201170375A1 (ru) 2008-08-25 2012-03-30 Эмплиммьюн, Инк. Антагонисты pd-1 и способы их применения
AU2009288730B2 (en) 2008-08-25 2013-06-20 Amplimmune, Inc. Compositions of PD-1 antagonists and methods of use
CN102149820B (zh) 2008-09-12 2014-07-23 国立大学法人三重大学 能够表达外源gitr配体的细胞
SMT202500126T1 (it) 2008-12-09 2025-05-12 Hoffmann La Roche Anticorpi anti-pd-l1 e loro uso per potenziare la funzione dei linfociti t
ES2629337T3 (es) 2009-02-09 2017-08-08 Inserm - Institut National De La Santé Et De La Recherche Médicale Anticuerpos contra PD-1 y anticuerpos contra PD-L1 y usos de los mismos
CA3067609A1 (en) 2009-09-03 2011-03-10 Merck Sharp & Dohme Corp. Anti-gitr antibodies
GB0919054D0 (en) 2009-10-30 2009-12-16 Isis Innovation Treatment of obesity
JP2013512251A (ja) 2009-11-24 2013-04-11 アンプリミューン、インコーポレーテッド Ｐｄ−ｌ１／ｐｄ−ｌ２の同時阻害
CN105693861A (zh) 2009-12-29 2016-06-22 新兴产品开发西雅图有限公司 异二聚体结合蛋白及其应用
US20130108641A1 (en) 2011-09-14 2013-05-02 Sanofi Anti-gitr antibodies
US9624298B2 (en) 2011-11-28 2017-04-18 Merck Patent Gmbh Anti-PD-L1 antibodies and uses thereof
AR091649A1 (es) 2012-07-02 2015-02-18 Bristol Myers Squibb Co Optimizacion de anticuerpos que se fijan al gen de activacion de linfocitos 3 (lag-3) y sus usos

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