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TW201627498A - 用於純化及培養幹細胞的孔洞結構及其製造方法、幹細胞純化裝置及使用其的幹細胞純化方法、以及幹細胞培養裝置及使用其的幹細胞培養方法 - Google Patents

用於純化及培養幹細胞的孔洞結構及其製造方法、幹細胞純化裝置及使用其的幹細胞純化方法、以及幹細胞培養裝置及使用其的幹細胞培養方法 Download PDF

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TW201627498A
TW201627498A TW104102575A TW104102575A TW201627498A TW 201627498 A TW201627498 A TW 201627498A TW 104102575 A TW104102575 A TW 104102575A TW 104102575 A TW104102575 A TW 104102575A TW 201627498 A TW201627498 A TW 201627498A
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TW
Taiwan
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substrate
stem cell
stem cells
plga
silk
Prior art date
Application number
TW104102575A
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Inventor
樋口亞紺
Original Assignee
國立中央大學
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Publication date
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    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
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Abstract

本發明提供一種用於純化及培養幹細胞的孔洞結構。此孔洞結構包含基材，且基材具有複數個孔洞，其中孔洞的孔徑為8~50微米。基材的材料為聚胺基甲酸酯纖維(PU)時，孔洞的孔徑為約11微米。基材的材料為硝化纖維素(Nitrocellulose)時，孔洞的孔徑為約8微米。基材的材料為尼龍纖維(Nylon)時，孔洞的孔徑為約11微米。基材的材料為動物絲(silk)時，PLGA層與由動物絲(silk)製成的基材所形成的孔洞結構(PLGA/silk)之孔徑為約11微米。一種用於分離幹細胞的孔洞結構的製造方法、一種幹細胞純化裝置及使用其的幹細胞純化方法、以及一種幹細胞培養裝置及使用其的幹細胞培養方法亦揭露於此。

Description

用於純化及培養幹細胞的孔洞結構及其 製造方法、幹細胞純化裝置及使用其的幹細胞純化方法、以及幹細胞培養裝置及使用其的幹細胞培養方法
本發明係關於一種孔洞結構，特別是關於一種用於純化及培養幹細胞的孔洞結構及其製造方法、一種幹細胞純化裝置及使用其的幹細胞純化方法、以及一種幹細胞培養裝置及使用其的幹細胞培養方法。
對於利用幹細胞的再生醫學來說，人類成人幹細胞，包含人類成人脂肪誘導幹細胞(hADSCs)及人類骨髓誘導幹細胞(hBMScs)，被認為比人類胚胎幹細胞(hESCs)和人體誘導多能幹細胞(hiPSCs)具有更多幹細胞的吸引來源。這是因為人類成人幹細胞不產生像是人類胚胎幹細胞所伴隨而來的倫理問題。
當人類胚胎幹細胞和人體誘導多能幹細胞被認為是在臨床應用中使用時，人類胚胎幹細胞和人體誘導多能幹細胞呈現高度分化能力，以從這些多能幹細胞建立的腫瘤的產生的關鍵問題。此外，目前相當高的成本問題，使得人類胚胎幹細胞和人體誘導多能幹細胞的無異物培養難以實現。相較於人類成人脂肪誘導幹細胞及人類骨髓誘導幹細胞，人類胚胎幹細胞和人體誘導多能幹細胞的細胞培養維護的高昂成本對於人類胚胎幹細胞和人體誘導多能幹細胞的臨床應用而言是嚴重的障礙。
雖然人類成人脂肪誘導幹細胞及人類骨髓誘導幹細胞可望用於在再生醫學，特別是用於細胞療法和組織工程中，但是相對於人類胚胎幹細胞和人體誘導多能幹細胞，人脂肪誘導幹細胞及人類骨髓誘導幹細胞的較少分化能力和較少的多能性是關鍵問題。這些缺陷的原因之一源於人類成人脂肪誘導幹細胞及人類骨髓誘導幹細胞的異質性。人類成人脂肪誘導幹細胞及人類骨髓誘導幹細胞是不均質細胞，但包含具有不同的分化能力而成為多個特定譜系的細胞。
一般來說，從脂肪組織利用細胞純化裝置，純化具有高多能性和高純度的人類成人脂肪誘導幹細胞可改善利用自體人類成人脂肪誘導幹細胞的細胞治療和組織工程應用中的效率。因此，目前亟需一種新的用於純化及培養細胞的孔洞結構及其製造方法。
有鑑於現有技術所面臨的問題，本發明揭露一種新穎的用於純化及培養幹細胞的孔洞結構及其製造方法，其所製成之幹細胞純化裝置及幹細胞培養裝置具有較高的純化高多能性和高純度的人類成人脂肪誘導幹細胞的效率，以降低整體的幹細胞純化及培養成本。
本發明之一態樣在於提供一種用於純化及培養幹細胞的孔洞結構。此孔洞結構包含基材。基材具有複數個孔洞，其中基材的孔洞的孔徑為8~50微米，且基材的材料包含動物絲、改質纖維素、聚酯纖維、聚胺酯纖維或其組合。
根據本發明之實施例，基材的材料為聚胺酯纖維時，孔洞的孔徑為約11微米，其中聚胺酯纖維包含聚胺基甲酸酯纖維(polyurethane,PU)。
根據本發明之實施例，基材的材料為改質纖維素時，孔洞的孔徑為約8微米，其中改質纖維素包含硝化纖維素(Nitrocellulose)。
根據本發明之實施例，基材的材料為聚酯纖維時，孔洞的孔徑為約11微米，其中聚酯纖維包含尼龍纖維(Nylon)。
根據本發明之實施例，基材的材料為動物絲(silk)時，更包含一丙交酯-乙交酯共聚物(poly(lactide-co-glycolic acid),PLGA)層，位於由動物絲製成的基材的表面上，且PLGA層與由動物絲(silk)製成的基材所形成的孔洞結構(PLGA/silk)之孔徑為約11微 米，其中PLGA層係由一共聚物所構成，共聚物具有如化學式(I)所示的結構： 其中，x及y各自獨立為一整數，令使該共聚物的分子量為60,000~110,000。
根據本發明之實施例，上述生物絲包含蠶絲、蜘蛛絲或其組合。
本發明之另一態樣在於提供一種用於分離幹細胞的孔洞結構的製造方法。此製造方法包含提供一基材，基材具有複數個孔洞，其中基材的該些孔洞的孔徑為8~50微米，且基材的材料包含動物絲、改質纖維素、聚酯纖維、聚胺酯纖維或其組合。
根據本發明之實施例，基材的材料為聚胺酯纖維時，孔洞的孔徑為約11微米，其中聚胺酯纖維包含聚胺基甲酸酯纖維(polyurethane,PU)。
根據本發明之實施例，基材的材料為改質纖維素時，孔洞的孔徑為約8微米，其中改質纖維素包含硝化纖維素(Nitrocellulose)。
根據本發明之實施例，基材的材料為聚酯纖維時，孔洞的孔徑為約11微米，其中聚酯纖維包含尼龍纖維(Nylon)。
根據本發明之實施例，基材的材料為動物絲(silk)時，更包含將基材浸於丙交酯-乙交酯共聚物 (poly(lactide-co-glycolic acid),PLGA)溶液中，以使PLGA溶液在基材之表面上形成一PLGA層。其中基材具有複數個孔洞，且PLGA層與由動物絲(silk)製成的基材所形成的孔洞結構(PLGA/silk)之孔徑為約11微米。PLGA溶液係由PLGA及一第一有機溶劑所配製而成，PLGA具有如化學式(I)所示的結構： 其中，x及y各自獨立為一整數，令使該共聚物的分子量為60,000~110,000。
根據本發明之實施例，上述生物絲包含蠶絲、蜘蛛絲或其組合。
根據本發明之實施例，上述第一有機溶劑為二甲基亞碸(DMSO)。
根據本發明之實施例，上述PLGA溶液PLGA的二甲基亞碸(DMSO)溶液，且PLGA的濃度為3~15wt%。
根據本發明之實施例，上述方法更包含將基材浸於PLGA溶液中，於-20℃下持續24小時。
根據本發明之實施例，上述方法更包含將PLGA層與由動物絲(silk)製成的基材所形成的孔洞結構(PLGA/silk)浸於第二有機溶劑中，於-20℃持續3天，且每日更換第二有機溶劑2次，以得到中間結構。
根據本發明之實施例，上述第二有機溶劑為75 v/v%的乙醇水溶液。
根據本發明之實施例，上述方法更包含將中間結構置於通風環境中風乾3天；以及置於真空環境中乾燥24小時，即得到孔洞結構(PLGA/silk screen)。
本發明之又一態樣在於提供一種幹細胞純化裝置。此幹細胞純化裝置包含第一基板、第二基板以及上述的孔洞結構。第一基板具有第一開口。第二基板具有第二開口。孔洞結構夾置於第一基板及第二基板之間。
本發明之再一態樣在於提供一種幹細胞純化方法。此幹細胞純化方法包含以下步驟。提供初期細胞混合液。將初期細胞混合液注入上述之幹細胞純化裝置的第一基板的第一開口中，且由第二基板的第二開口流出滲透液。將幹細胞純化裝置上下倒置，將清洗液注入第二基板的第二開口中，且由第一基板的第一開口洗脫出還原液。
根據本發明之實施例，上述提供初期細胞混合液之步驟更包含利用膠原蛋白酶分解脂肪組織，其中初期細胞混合液包含人類脂肪誘導幹細胞。
根據本發明之實施例，上述滲透液包含人類脂肪誘導幹細胞。
根據本發明之實施例，上述還原液包含人類脂肪誘導幹細胞。
根據本發明之實施例，上述清洗液為一細胞培養液。
本發明之更一態樣在於提供一種幹細胞培養裝置。此幹細胞培養裝置包含容器、細胞培養液以及上述之孔 洞結構。容器具有容置空間。細胞培養液盛裝於容器的容置空間內。孔洞結構浸於細胞培養液中，其中孔洞結構的表面上具有複數個幹細胞。
根據本發明之實施例，上述容器為一培養皿。
本發明之另一態樣在於提供一種幹細胞培養方法。此幹細胞培養方法包含以下步驟。將初期細胞混合液利用上述之孔洞結構過濾純化。將孔洞結構浸於細胞培養液中，其中孔洞結構的表面上具有複數個幹細胞。
根據本發明之實施例，上述諸幹細胞包含人類脂肪誘導幹細胞。
100、330、530‧‧‧孔洞結構
110、210‧‧‧基材
112‧‧‧孔洞
120‧‧‧共聚物層
201‧‧‧第一結構
202‧‧‧第二結構
220‧‧‧共聚物溶液
230‧‧‧有機溶劑
240‧‧‧真空環境
300‧‧‧幹細胞純化裝置
310‧‧‧第一基板
312‧‧‧第一開口
320‧‧‧第二基板
322‧‧‧第二開口
410、610‧‧‧初期細胞混合液
420‧‧‧滲透液
430‧‧‧清洗液
440‧‧‧還原液
500‧‧‧幹細胞培養裝置
510‧‧‧容器
512‧‧‧容置空間
520‧‧‧細胞培養液
1、2、3‧‧‧步驟
第1圖係根據本發明之實施例所繪示的一種用於純化及培養幹細胞的孔洞結構的上視圖；第2A~2B圖係根據本發明之實施例所繪示的一種用於純化及培養幹細胞的孔洞結構的製造方法之步驟示意圖；第3圖係根據本發明之實施例所繪示的一種幹細胞純化裝置的爆炸圖；第4圖係根據本發明之實施例所繪示的一種幹細胞純化方法的步驟示意圖；第5圖係根據本發明之實施例所繪示的一種幹細胞培養裝置的爆炸圖；以及第6圖係根據本發明之實施例所繪示的一種幹 細胞培養方法的步驟示意圖。
接著以實施例並配合圖式以詳細說明本發明，在圖式或描述中，相似或相同的部分係使用相同之符號或編號。在圖式中，實施例之形狀或厚度可能擴大，以簡化或方便標示，而圖式中元件之部分將以文字描述之。可瞭解的是，未繪示或未描述之元件可為熟習該項技藝者所知之各種樣式。
本文所使用之術語僅是用於描述特定實施例之目的且不意欲限制本發明。如本文所使用，單數形式"一"(a、an)及"該"(the)意欲亦包括複數形式，除非本文另有清楚地指示。應進一步瞭解，當在本說明書中使用時，術語"包含"(comprises及/或comprising)指定存在所述之特徵、整數、步驟、運作、元件及/或組份，但並不排除存在或添加一或多個其它特徵、整數、步驟、運作、元件、組份及/或其群組。本文參照為本發明之理想化實施例(及中間結構)之示意性說明的橫截面說明來描述本發明之實施例。如此，吾人將預期偏離該等說明之形狀之由於(例如)製造技術及/或容差的改變。因此，不應將本發明之實施例理解為限於本文所說明之特定區域形狀，而將包括起因於(例如)製造之形狀改變，且該等圖中所說明之區域本質上為示意性的，且其形狀不意欲說明設備之區域的實際形狀且不意欲限制本發明之範疇。
為解決傳統幹細胞純化裝置及幹細胞培養裝置無法提高純化高多能性和高純度的人類成人脂肪誘導幹細胞的效率，並且會產生提高幹細胞純化及幹細胞培養成本的問題，本發明之實施例所提供一種用於純化及培養幹細胞的孔洞結構及其製造方法，其所製成之幹細胞純化裝置及幹細胞培養裝置具有較高的純化高多能性和高純度的人類成人脂肪誘導幹細胞的效率，以降低整體的幹細胞純化及培養成本。
第1圖係根據本發明之實施例所繪示的一種用於純化及培養幹細胞的孔洞結構的上視圖。在第1圖中，用於純化及培養幹細胞的孔洞結構100包含基材110。基材110具有複數個孔洞112，其中基材110的孔洞112的孔徑為8~50微米，且基材110的材料包含動物絲、改質纖維素、聚酯纖維、聚胺酯纖維或其組合。
根據本發明之實施例，基材110的材料為聚胺酯纖維時，孔洞112的孔徑為約11微米，其中聚胺酯纖維包含聚胺基甲酸酯纖維(polyurethane,PU)。在可達到預期的幹細胞純化及培養的前提下，以聚胺基甲酸酯纖維製作的基材110上的孔洞112的孔徑可為8~20微米，其中又以孔洞112的孔徑為約11微米時，幹細胞純化及培養的效果為最佳。
根據本發明之實施例，基材110的材料為改質纖維素時，孔洞112的孔徑為約8微米，其中改質纖維素包含硝化纖維素(Nitrocellulose)。在可達到預期的幹細胞純 化及培養的前提下，以硝化纖維素製作的基材110上的孔洞112的孔徑可為5~15微米，其中又以孔洞112的孔徑為約8微米時，幹細胞純化及培養的效果為最佳。
根據本發明之實施例，基材110的材料為聚酯纖維時，孔洞112的孔徑為約11微米，其中聚酯纖維包含尼龍纖維(Nylon)。在可達到預期的幹細胞純化及培養的前提下，以尼龍纖維製作的基材110上的孔洞112的孔徑可為8~20微米，其中又以孔洞112的孔徑為約11微米時，幹細胞純化及培養的效果為最佳。
根據本發明之實施例，基材110的材料為動物絲(silk)時，更包含一丙交酯-乙交酯共聚物(poly(lactide-co-glycolic acid),PLGA)層120，位於由動物絲製成的基材110的表面上，且PLGA層120與由動物絲(silk)製成的基材110所形成的孔洞結構(PLGA/silk)100之孔徑為約11微米。在可達到預期的幹細胞純化及培養的前提下，以PLGA層120與由動物絲製作的基材110上的孔洞112的孔徑可為8~20微米，其中又以孔洞112的孔徑為約11微米時，幹細胞純化及培養的效果為最佳。
其中PLGA層120係由一共聚物所構成，共聚物具有如化學式(I)所示的結構： 其中，x及y各自獨立為一整數，令使該共聚物的分子量為 60,000~110,000。
根據本發明之實施例，上述生物絲包含蠶絲、蜘蛛絲或其組合。
第2A~2B圖係根據本發明之實施例所繪示的一種用於純化及培養幹細胞的孔洞結構的製造方法之步驟示意圖。此製造方法包含形成第一結構，以及移除第一結構中的第一有機溶劑後乾燥，即得到孔洞結構。
此製造方法包含提供一基材，該基材具有複數個孔洞，其中該基材的該些孔洞的孔徑為8~50微米，且該基材的材料包含動物絲、改質纖維素、聚酯纖維、聚胺酯纖維或其組合。
根據本發明之實施例，基材的材料為聚胺酯纖維時，孔洞的孔徑為約11微米，其中聚胺酯纖維包含聚胺基甲酸酯纖維(polyurethane,PU)。在可達到預期的幹細胞純化及培養的前提下，以聚胺基甲酸酯纖維製作的基材上的孔洞的孔徑可為8~20微米，其中又以孔洞的孔徑為約11微米時，幹細胞純化及培養的效果為最佳。
根據本發明之實施例，基材的材料為改質纖維素時，孔洞的孔徑為約8微米，其中改質纖維素包含硝化纖維素(Nitrocellulose)。在可達到預期的幹細胞純化及培養的前提下，以硝化纖維素製作的基材上的孔洞的孔徑可為5~15微米，其中又以孔洞的孔徑為約8微米時，幹細胞純化及培養的效果為最佳。
根據本發明之實施例，基材的材料為聚酯纖維 時，孔洞的孔徑為約11微米，其中聚酯纖維包含尼龍纖維(Nylon)。在可達到預期的幹細胞純化及培養的前提下，以尼龍纖維製作的基材上的孔洞的孔徑可為8~20微米，其中又以孔洞的孔徑為約11微米時，幹細胞純化及培養的效果為最佳。
在第2A圖中，形成第一結構201。基材210的材料為動物絲(silk)時，將基材210浸於丙交酯-乙交酯共聚物(poly(lactide-co-glycolic acid),PLGA)溶液220中，以使丙交酯-乙交酯共聚物(poly(lactide-co-glycolic acid),PLGA)溶液220在基材210之表面上形成PLGA層(圖未繪示)。基材210具有複數個孔洞，且PLGA層與由動物絲(silk)製成的基材所形成的第一結構201之孔徑為約11微米。在可達到預期的幹細胞純化及培養的前提下，以PLGA層與動物絲製成的基材上的孔洞的孔徑可為8~20微米，其中又以孔洞的孔徑為約11微米時，幹細胞純化及培養的效果為最佳。
PLGA溶液220係由PLGA及一第一有機溶劑所配製而成，PLGA具有如化學式(I)所示的結構： 其中，x及y各自獨立為一整數，令使該共聚物的分子量為60,000~110,000。
根據本發明之實施例，上述生物絲包含蠶絲、蜘蛛絲或其組合。根據本發明之實施例，第一有機溶劑為二 甲基亞碸(DMSO)。根據本發明之實施例，共聚物溶液為丙交酯-乙交酯共聚物(poly(lactide-co-glycolic acid),PLGA)的二甲基亞碸(DMSO)溶液，且丙交酯-乙交酯共聚物的濃度為3~15wt%。根據本發明之實施例，共聚物溶液為丙交酯-乙交酯共聚物(poly(lactide-co-glycolic acid),PLGA)的二甲基亞碸(DMSO)溶液，且丙交酯-乙交酯共聚物的濃度為3、5、10或15wt%。
在第2A圖中，形成第一結構201的步驟1包含將基材210浸於PLGA溶液220中，於-20℃下持續24小時。接著，移除第一結構201中的第一有機溶劑的步驟2包含將第一結構201浸於第二有機溶劑230中，於-20℃持續3天，且每日更換第二有機溶劑230二次，以得到中間結構。根據本發明之實施例，上述第二有機溶劑為75 v/v%的乙醇水溶液。
在第2B圖中，步驟3包含將第二結構202置於通風環境(圖未繪示)中風乾3天；以及置於真空環境240中乾燥24小時，即得到孔洞結構(PLGA/silk screen)100，如第1圖所示。
第3圖係根據本發明之實施例所繪示的一種幹細胞純化裝置的爆炸圖。在第3圖中，幹細胞純化裝置300包含第一基板310、第二基板320以及孔洞結構330。第一基板310具有第一開口312。第二基板320具有第二開口322。孔洞結構330夾置於第一基板310及第二基板320之間。
第4圖係根據本發明之實施例所繪示的一種幹細胞純化方法的步驟示意圖。此幹細胞純化方法包含以下步驟。提供初期細胞混合液。將初期細胞混合液注入上述之幹細胞純化裝置的第一基板的第一開口中，且由第二基板的第二開口流出滲透液。將幹細胞純化裝置上下倒置，將清洗液注入第二基板的第二開口中，且由第一基板的第一開口洗脫出還原液。根據本發明之實施例，上述提供初期細胞混合液之步驟更包含利用膠原蛋白酶分解脂肪組織，其中初期細胞混合液包含人類脂肪誘導幹細胞。
在第4圖之(a)中，將初期細胞混合液410注入幹細胞純化裝置300的第一基板310的第一開口312中，經由孔洞結構330的過濾純化後，由第二基板320的第二開口322流出滲透液420。根據本發明之實施例，滲透液420包含人類脂肪誘導幹細胞。
在第4圖之步驟1中，將幹細胞純化裝置300上下倒置，即第二基板320位在第一基板310之上，且第一基板310的第一開口312朝下，及第二基板320的第二開口322朝上。
在第4圖之(b)中，將清洗液430注入第二基板320的第二開口322中，且由第一基板310的第一開口312洗脫出還原液440。根據本發明之實施例，清洗液430為一細胞培養液。根據本發明之實施例，還原液440包含人類脂肪誘導幹細胞。
第5圖係根據本發明之實施例所繪示的一種幹 細胞培養裝置的爆炸圖。在第5圖中，幹細胞培養裝置500包含容器510、細胞培養液520以及孔洞結構530。容器510具有容置空間512。根據本發明之實施例，容器510為一培養皿。細胞培養液520盛裝於容器510的容置空間512內。孔洞結構530浸於細胞培養液520中，其中孔洞結構530的表面上具有複數個幹細胞(圖未繪示)。
第6圖係根據本發明之實施例所繪示的一種幹細胞培養方法的步驟示意圖。此幹細胞培養方法包含以下步驟。提供將初期細胞混合液利用上述之孔洞結構過濾純化。將孔洞結構浸於細胞培養液中，其中孔洞結構的表面上具有複數個幹細胞。
在第6圖的(a)中，將初期細胞混合液610利用孔洞結構530過濾純化。接著，在第6圖的(b)中，將孔洞結構530浸於細胞培養液520中，其中孔洞結構530的表面上具有複數個幹細胞(圖未繪示)。根據本發明之實施例，上述諸幹細胞包含人類脂肪誘導幹細胞。
根據本發明之實施例，用於純化及培養幹細胞的孔洞結構具有較高的純化高多能性和高純度的人類成人脂肪誘導幹細胞的效率，以降低整體的幹細胞純化及培養成本。根據本發明之實施例，幹細胞培養裝置係將孔洞結構夾置於上下二基板之間，且藉由上下翻轉的步驟，可用於分離及純化目標幹細胞。根據本發明之實施例，待分離及純化目標幹細胞之後，目標幹細胞會附著於孔洞結構之表面上，此時可直接將表面具有目標幹細胞的孔洞結構浸於細胞培養 液中，以持續培養目標幹細胞，且提升目標幹細胞的生長能力及多能性。
雖然本發明之實施例已揭露如上，然其並非用以限定本發明，任何熟習此技藝者，在不脫離本發明之精神和範圍內，當可做些許之更動與潤飾，因此本發明之保護範圍當以後附之申請專利範圍所界定為準。
100‧‧‧孔洞結構
110‧‧‧基材
112‧‧‧孔洞
120‧‧‧共聚物層

Claims (20)

  1. 一種用於純化及培養幹細胞的孔洞結構，包含：一基材，具有複數個孔洞，其中該基材的該些孔洞的孔徑為8~50微米，且該基材的材料包含動物絲、改質纖維素、聚酯纖維、聚胺酯纖維或其組合，該基材的材料為聚胺酯纖維時，該些孔洞的孔徑為約11微米，其中該聚胺酯纖維包含聚胺基甲酸酯纖維(polyurethane,PU)，該基材的材料為改質纖維素時，該些孔洞的孔徑為約8微米，其中該改質纖維素包含硝化纖維素(Nitrocellulose)，該基材的材料為聚酯纖維時，該些孔洞的孔徑為約11微米，其中該聚酯纖維包含尼龍纖維(Nylon)，該基材的材料為動物絲(silk)時，更包含一丙交酯-乙交酯共聚物(poly(lactide-co-glycolic acid),PLGA)層，位於由動物絲製成的該基材的表面上，且該PLGA層與由動物絲(silk)製成的該基材所形成的該孔洞結構(PLGA/silk)之孔徑為約11微米，其中該共聚物層係由一共聚物所構成，該共聚物具有如化學式(I)所示的結構： 其中，x及y各自獨立為一整數，令使該共聚物的分子量為60,000~110,000。
  2. 如請求項1所述之孔洞結構，其中該生物絲包含蠶絲、蜘蛛絲或其組合。
  3. 一種用於分離幹細胞的孔洞結構的製造方法，包含：提供一基材，該基材具有複數個孔洞，其中該基材的該些孔洞的孔徑為8~50微米，且該基材的材料包含動物絲、改質纖維素、聚酯纖維、聚胺酯纖維或其組合，該基材的材料為聚胺酯纖維時，該些孔洞的孔徑為約11微米，其中該聚胺酯纖維包含聚胺基甲酸酯纖維(polyurethane,PU)，該基材的材料為改質纖維素時，該些孔洞的孔徑為約8微米，其中該改質纖維素包含硝化纖維素(Nitrocellulose)，該基材的材料為聚酯纖維時，該些孔洞的孔徑為約11微米，其中該聚酯纖維包含尼龍纖維(Nylon)，該基材的材料為動物絲(silk)時，更包含將該基材浸於一丙交酯-乙交酯共聚物(poly(lactide-co-glycolic acid),PLGA)溶液中，以使該PLGA溶液在該基材之表面上形成一PLGA層，其中該PLGA層與由動物絲(silk)製成的該基材所形成的該孔洞結構(PLGA/silk)具有複數個孔洞，且孔徑為約11微米，該PLGA溶液係由PLGA及一第一有機溶劑所配製而成，該PLGA具有如化學式(I)所示的結構： 其中，x及y各自獨立為一整數，令使該共聚物的分子量為60,000~110,000；以及移除該第一有機溶劑後乾燥，即得到該孔洞結構。
  4. 如請求項3所述之製造方法，其中該生物絲包含蠶絲、 蜘蛛絲或其組合。
  5. 如請求項3所述之製造方法，其中該第一有機溶劑為二甲基亞碸(DMSO)。
  6. 如請求項3所述之製造方法，其中該PLGA溶液中PLGA的濃度為3~15wt%。
  7. 如請求項3所述之製造方法，更包含將該基材浸於該PLGA溶液中，於-20℃下持續24小時。
  8. 如請求項3所述之製造方法，更包含將該PLGA層與由動物絲(silk)製成的該基材所形成的該孔洞結構(PLGA/silk)浸於一第二有機溶劑中，於-20℃持續3天，且每日更換該第二有機溶劑2次，以得到一中間結構。
  9. 如請求項8所述之製造方法，其中該第二有機溶劑為75 v/v%的乙醇水溶液。
  10. 如請求項8所述之製造方法，更包含將該中間結構置於一通風環境中風乾3天；以及置於一真空環境中乾燥24小時，即得到該孔洞結構。
  11. 一種幹細胞純化裝置，包含：一第一基板，具有一第一開口；一第二基板，具有一第二開口；以及如請求項1~2任一項所述之孔洞結構，夾置於該第一基板及該第二基板之間。
  12. 一種幹細胞純化方法，包含：提供一初期細胞混合液；將該初期細胞混合液注入如請求項11所述之幹細胞 純化裝置的該第一基板的該第一開口中，且由該第二基板的該第二開口流出一滲透液；以及將該幹細胞純化裝置上下倒置，將一清洗液注入該第二基板的該第二開口中，且由該第一基板的該第一開口洗脫出一還原液。
  13. 如請求項12所述之幹細胞純化方法，其中提供該初期細胞混合液之步驟更包含利用一膠原蛋白酶分解一脂肪組織，其中該初期細胞混合液包含人類脂肪誘導幹細胞。
  14. 如請求項12所述之幹細胞純化方法，其中該滲透液包含人類脂肪誘導幹細胞。
  15. 如請求項12所述之幹細胞純化方法，其中該還原液包含人類脂肪誘導幹細胞。
  16. 如請求項12所述之幹細胞純化方法，其中該清洗液為一細胞培養液。
  17. 一種幹細胞培養裝置，包含：一容器，具有一容置空間；一細胞培養液，盛裝於該容器的該容置空間內；以及如請求項1~2任一項所述之孔洞結構，浸於該細胞培養液中，其中該孔洞結構的表面上具有複數個幹細胞。
  18. 如請求項17所述之幹細胞培養裝置，其中該容器為一培養皿。
  19. 一種幹細胞培養方法，包含：將一初期細胞混合液利用如請求項1~2任一項所述之孔洞結構過濾純化；以及 將該孔洞結構，浸於一細胞培養液中，其中該孔洞結構的表面上具有複數個幹細胞。
  20. 如請求項19所述之幹細胞培養方法，其中該些幹細胞包含人類脂肪誘導幹細胞。
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