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TW201441234A - Ｂｔｋ抑制劑 - Google Patents

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TW201441234A
TW201441234A TW103102352A TW103102352A TW201441234A TW 201441234 A TW201441234 A TW 201441234A TW 103102352 A TW103102352 A TW 103102352A TW 103102352 A TW103102352 A TW 103102352A TW 201441234 A TW201441234 A TW 201441234A
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trifluoromethyl
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TW103102352A
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Hao Wu
Ronald M Kim
Jian Liu
Xiao-Lei Gao
Sobhana Babu Boga
Deodialsingh Guiadeen
Joseph Kozlowski
Wen-sheng YU
Rajan Anand
Younong Yu
Oleg B Selyutin
Ying-Duo Gao
Shi-Lan Liu
Chun-Dao Yang
hong-jian Wang
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Merck Sharp & Dohme
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Abstract

本發明提供式I之布魯頓氏酪胺酸激酶(Bruton's Tyrosine Kinase，Btk)抑制劑化合物□或其醫藥學上可接受之鹽，或包含此等化合物之醫藥組合物，及其於療法之用途。特別地，本發明係關於Btk抑制劑化合物治療Btk介導之病症的用途。

Description

BTK抑制劑
本發明係關於Btk抑制劑化合物、包含此等化合物之醫藥組合物及其於療法中之用途。特定言之，本發明係關於Btk抑制劑化合物治療布魯頓氏酪胺酸激酶(Btk)介導之病症的用途。
B淋巴細胞活化在產生應變性免疫反應中是關鍵。阻礙B淋巴細胞活化為許多自體免疫疾病之特點且此免疫反應之調節因此具有治療重要性。最近，B細胞療法已在自體免疫疾病中獲得成功。用利妥昔單抗(Rituximab)(抗CD20療法)治療類風濕性關節炎(RA)患者為已接受之臨床療法。最近臨床試驗研究顯示用利妥昔單抗治療亦改善復發緩解型多發性硬化症(RRMS)及全身性紅斑性狼瘡症(SLE)患者的疾病症狀。此成功支持靶向B細胞免疫性之自體免疫疾病未來療法的潛力。
布魯頓氏酪胺酸激酶(Btk)為在B細胞及骨髓細胞中表現的Tec家族非受體蛋白激酶。良好確立Btk在藉由B細胞受體(BCR)及肥大細胞上之FcεR1之參與所活化的信號傳導路徑中之功能。此外，表明Btk作為Toll樣受體信號傳導中下游目標之功能。人類中Btk之功能突變導致稱為XLA之原發性免疫缺陷病，其特徵在於祖B細胞階段與前B細胞階段之間存在阻滯的B細胞發育缺陷。此導致人體內幾乎完全不存在B淋巴細胞，引起所有種類之血清免疫球蛋白顯著減少。此等發現支 持Btk調控自體免疫疾病中自體抗體之產生的關鍵作用。此外，Btk調控可藉由B細胞影響BCR誘導之促炎性細胞激素及趨化因子之產生，表明Btk在治療自體免疫疾病中之廣泛潛力。
藉由所報導之Btk在FcεR介導之肥大細胞活化中的調控作用，Btk抑制劑亦可顯示治療過敏反應的潛力[Gilfillan等人，Immunological Reviews 288(2009)第149頁-第169頁]。
此外，亦報導Btk涉及RANKL誘導之蝕骨細胞分化[Shinohara等人，Cell 132(2008)第794頁-第806頁]，且因此亦可對治療骨骼再吸收病症重要。
對功能異常B細胞起重要作用之其他疾病為B細胞惡性病。實際上，抗CD20療法有效用於臨床治療濾泡性淋巴瘤、彌漫性大B細胞淋巴瘤及慢性淋巴球性白血病[Lim等人，Haematologica,95(2010)第135頁-第143頁]。Btk在調控B細胞增殖及細胞凋亡中之報導作用亦表明Btk抑制劑在治療B細胞淋巴瘤中之潛力。由於慢性主動BCR信號傳導，Btk抑制看似尤其與B細胞淋巴瘤相關[Davis等人，Nature,463(2010)第88頁-第94頁]。
一些類別之Btk抑制劑化合物已描述為激酶抑制劑，例如咪唑并[1,5-f][1,2,4]三嗪化合物已在WO2005097800及WO2007064993中加以描述；咪唑并[1,5-a]吡嗪化合物已在WO2005037836及WO2001019828中描述為IGF-1R酶抑制劑。
所報導的一些Btk抑制劑對Src家族激酶無選擇性。已報導針對Src家族激酶之剔除(尤其針對雙重及三重剔除)存在顯著副作用，將此看作禁止開發對Src家族激酶無選擇性的Btk抑制劑。
Lyn缺乏小鼠及Fyn缺乏小鼠均展現模仿人類狼瘡性腎炎之表型的自體免疫性。此外，Fyn缺乏小鼠亦顯示顯著神經學缺陷。Lyn剔除小鼠亦顯示過敏樣表型，表明Lyn為藉由控制肥大細胞反應性及過敏 性相關特徵的IgE介導之過敏反應的廣泛負調控子[Odom等人，J.Exp.Med.,199(2004)第1491頁-第1502頁]。此外，Lyn剔除老齡小鼠產生嚴重脾腫大(髓性擴張)及散播性單核細胞性/巨噬細胞腫瘤[Harder等人，Immunity,15(2001)第603頁-第615頁]。此等觀測符合高反應性B細胞、肥大細胞及骨髓細胞，且提高Lyn缺乏小鼠中觀測到的Ig含量。雌性Src剔除小鼠因為濾泡發育及排卵減少而不孕[Roby等人，Endocrine,26(2005)第169頁-第176頁]。雙重剔除Src-/-Fyn-/-及Src-/-Yes-/-顯示對運動及呼吸有作用的嚴重表型。三重剔除Src-/-Fyn-/-Yes-/-在第9.5天死亡[Klinghoffer等人，EMBO J.,18(1999)第2459頁-第2471頁]。對於雙重剔除Src-/-Hck-/-，2/3小鼠在出生時死亡，存活小鼠產生骨硬化症、骨髓外造血、貧血、白血球減少症[Lowell等人，Blood,87(1996)第1780頁-第1792頁]。
因此，抑制Src家族激酶之多種或全部激酶的抑制劑同時可引起嚴重副作用。
本發明提供抑制Btk活性之化合物，其治療Btk介導之疾病及病症(尤其自體免疫疾病及發炎疾病)的用途，以及包含該等化合物及醫藥載劑之醫藥組合物。
本發明目標為提供布魯頓氏酪胺酸激酶(Btk)抑制劑化合物、包含此等化合物之醫藥組合物及其於療法中之用途。特定言之，本發明係關於Btk抑制劑化合物治療Btk介導之病症的用途。
更特定言之，本發明提供式I之Btk抑制劑化合物或其醫藥學上可接受之鹽
其中：A1、A2、A3及A4獨立地為C、CH、CR11或N且雙環系統E-G係選自由以下組成之群： R11係獨立地選自由以下組成之群：a)氘，b)H，c)鹵素，d)氰基，e)C2H3，f)-COOH， g)-CO2(1-6C)烷基，h)-CO(1-6C)烷基，i)-CONH(1-6C)烷氧基，j)-CONH(1-6C)烷基，k)-CON二(1-6C)烷基，l)(1-6C)烷基，m)(3-7C)環烷基，n)(1-6C)烷氧基，o)芳基，p)(1-5C)雜芳基，q)(2-6C)烯基，r)(2-6C)炔基，及s)(4-7C)雜環烷基，R11視情況經一或多個選自以下之基團取代：鹵素、(1-6C)烷基、(1-5C)烷氧基、羥基或側氧基；R12獨立地選自由以下組成之群：H、(1-3C)烷基、(1-3C)烷基NHC(O)、(1-3C)烷基OC(O)及(1-3C)烷基C(O)；R13係獨立地選自由以下組成之群：H及(1-4C)烷氧基；其中在芳族環K中B1為N或C(R7)；B2為N或C(R8)；B3為N或C(R9)；B4為N或C(R10)；R7為H、鹵素、OH、(1-3C)烷基、(1-6C)烷氧基、(3-6C)環烷氧基、(1-5C)雜環烷氧基、鹵基(1-3C)烷基或CN；其中R7可視情況經一個、兩個或三個鹵素、OH、(2-4C)炔基、-C(O)NH2、-C(O)OH或- C(O)(1-4C)烷基取代；R8為H、鹵素、OH、(1-3C)烷基、(1-6C)烷氧基、(3-6C)環烷氧基、(1-5C)雜環烷氧基、鹵基(1-3C)烷基或CN；其中R8可視情況經一個、兩個或三個鹵素、OH、(2-4C)炔基、-C(O)NH2、-C(O)OH或-C(O)(1-4C)烷基取代；R9為H、鹵素、OH、(1-3C)烷基、(1-6C)烷氧基、(3-6C)環烷氧基、(1-5C)雜環烷氧基、鹵基(1-3C)烷基或CN；其中R9可視情況經一個、兩個或三個鹵素、OH、(2-4C)炔基、-C(O)NH2、-C(O)OH或-C(O)(1-4C)烷基取代；R10為H、鹵素、OH、(1-3C)烷基、(1-6C)烷氧基、(3-6C)環烷氧基、(1-5C)雜環烷氧基、鹵基(1-3C)烷基或CN；其中R10可視情況經一個、兩個或三個鹵素、OH、(2-4C)炔基、-C(O)NH2、-C(O)OH或-C(O)(1-4C)烷基取代；其中在雜芳族環L中W為CH、N或S；X為C(R6a)、N、O或S；Y為C(R6)、N(R6b)、O或S；Z為C(R6a)、N或一鍵；R5為H、鹵素、氰基、(1-4C)烷基、(1-5C)烷氧基、(3-6C)環烷基、(3-6C)環烷氧基或-C(O)O(1-3C)烷基；其中R5可視情況經一個、兩個或三個鹵素、OH或(1-3C)烷氧基取代；或R5為芳基、(1-5C)雜芳基或(2-6C)雜環烷基，其中R5可視情況經鹵素、(1-6C)烷基或(1-3C)烷氧基取代；R6為H、鹵素、氰基、(1-6C)烷基或(1-6C)烷氧基；其中R6可視情況經一個、兩個或三個鹵素或氰基取代；R6a為H、(1-4C)烷基或(3-6C)環烷基； R6b為H、(1-3C)烷基、(3-6C)環烷基或-C(O)O(1-4C)烷基；或R5與R6一起可形成碳環或雜環5員至6員環，且視情況為不飽和環或芳族環；或R5與R6一起可形成(3-7C)環烯基或(2-6C)雜環烯基；各視情況經(1-3C)烷基或一或多個鹵素取代；Q為C=O、C(Rf)2或C=N(Rh)；T為C(Re)2、O、NRe或一鍵；U為C(Rd)2、O或NRd；V為C(Rg)2、O或一鍵；Rc、Rd、Re及Rf各自獨立地選自H、鹵素、(1-6C)烷基、羥基、(1-6C)烯基或-C(O)Rz，其中Rz係獨立地選自(1-5C)雜芳基、芳基及羥基；Rc、Rd、Re或Rf之任何烷基可視情況經羥基、-C(O)(1-3C)烷氧基或-C(O)OH取代；Rg係獨立地選自H、鹵素、(1-6C)烷基、(1-6C)烷氧基、鹵基(1-6C)烷基或羥基；Rn係獨立地選自H或CN；其限制條件為：1)X、Y及Z中至多2個原子可同時為雜原子；2)當選自X或Y之一個原子為O或S時，則Z為一鍵且選自X或Y之另一原子不可為O或S；3)當Z為CH或N時，則Y為C(R6)或N且X為CH或N；4)在環K中，B1、B2、B3及B4中至多兩者可為N；5)當Q為C(Rf)2時，則T為C(Re)；6)當T為NRe時，則Re不為鹵素；及7)當U為NRd時，則Rd不為鹵素。
在另一態樣中，本發明係關於具有式II之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，
其中：A1、A2、A3及A4獨立地為C、CH、CR11或N且雙環系統E-G係選自由以下組成之群： R11係獨立地選自由以下組成之群：a)氘，b)H，c)鹵素，d)氰基，e)C2H3，f)COOH，g)CO2(1-6C)烷基， h)CO(1-6C)烷基，i)CONH(1-6C)烷氧基，j)CONH(1-6C)烷基，k)CON二(1-6C)烷基，l)(1-6C)烷基，m)(3-7C)環烷基，n)(1-6C)烷氧基，o)(6-10C)芳基，p)(1-5C)雜芳基，q)(2-6C)烯基，r)(2-6C)炔基，及s)(4-7C)雜環烷基，R11視情況經一或多個選自以下之基團取代：鹵素、(1-6C)烷基、(1-5C)烷氧基、羥基或側氧基；R12獨立地選自由以下組成之群：H、(1-3C)烷基、(1-3C)烷基NHC(O)及(1-3C)烷基OC(O)；其中在芳族環K中B1為N或C(R7)；B2為N或C(R8)；B3為N或C(R9)；B4為N或C(R10)；R7為H、鹵素、OH、(1-3C)烷基、(1-3C)烷氧基或鹵基(1-3C)烷基、CN；任何烷氧基可視情況經一個、兩個或三個鹵素取代；R8為H、鹵素、OH、(1-3C)烷基、(1-3C)烷氧基或鹵基(1-3C)烷基、CN；任何烷氧基可視情況經一個、兩個或三個鹵素取代；R9為H、鹵素、OH、(1-3C)烷基、(1-3C)烷氧基或鹵基(1-3C)烷 基、CN；任何烷氧基可視情況經一個、兩個或三個鹵素取代；R10為H、鹵素、OH、(1-3C)烷基、(1-3C)烷氧基或鹵基(1-3C)烷基、CN；任何烷氧基可視情況經一個、兩個或三個鹵素取代；其中在雜芳族環L中W為CH或N；X為CH、N、O或S；Y為C(R6)、N、O或S；Z為CH、N或一鍵；R5為H、鹵素、氰基、(1-4C)烷基、(1-5C)烷氧基、(3-6C)環烷基或(3-6C)環烷氧基；R5之任何烷基、烷氧基、環烷基或環烷氧基可視情況經一個、兩個或三個鹵素取代；或R5為(6-10C)芳基、(1-5C)雜芳基或(2-6C)雜環烷基，其中該芳基或雜環烷基可視情況經鹵素、(1-6C)烷基、(1-3C)烷氧基取代；R6為H、鹵素、氰基、(1-6C)烷基或(1-6C)烷氧基，R6之任何烷基或烷氧基可視情況經一個、兩個或三個鹵素或氰基取代；或R5與R6一起可形成碳環或雜環5員至6員環，且視情況為不飽和環或芳族環；或R5與R6一起可形成(3-7C)環烯基或(2-6C)雜環烯基；各視情況經(1-3C)烷基或一或多個鹵素取代；Q為C=O或C(Rf)2；T為C(Re)2、O、NRe或一鍵；U為C(Rd)2、O或NRd；V為C(Rg)2、O或一鍵；Rc、Rd、Re及Rf各自獨立地選自H、鹵素、(1-6C)烷基及羥基；Rc、Rd、Re或Rf之任何烷基可視情況經羥基取代；Rg係獨立地選自H、鹵素、(1-6C)烷基、(1-6C)烷氧基、鹵基(1-6C)烷基及羥基； 其限制條件為：1)X、Y及Z中至多2個原子可同時為雜原子；2)當選自X、Y之一個原子為O或S時，則Z為一鍵且選自X、Y之另一原子不可為O或S；3)當Z為CH或N時，則Y為C(R6)或N且X為C或N；4)在環K中，B1、B2、B3及B4中至多兩者可為N；及5)當Q為C(Rf)2時，則T為C(Re)2。
本文所用之術語具有其慣用含義且該等術語之含義在其每次出現時獨立。儘管如此且除非另外規定，否則以下定義適用於整篇說明書及申請專利範圍中。化學名稱、常用名及化學結構可互換用於描述相同結構。若使用化學結構及化學名稱提及化合物，且結構與名稱之間存在分歧，則以結構為準。除非另外說明，否則不管術語單獨使用或與其他術語組合使用，此等定義均適用。因此，「烷基」之定義適用於「烷基」以及「羥基烷基」、「氟烷基」、「烷氧基」之「烷基」部分等。
除非另外指明，否則如本文及本發明全文所用之以下術語應理解為具有以下含義：鹵素意謂氟、氯、溴或碘。氟、氯或溴為較佳鹵素；氟或氯更佳。
如本文所用之術語「烷基」係指一個氫原子置換為一鍵的具有規定碳原子數之脂族烴基。在不同實施例中，烷基含有例如1至6個碳原子(1-6C)烷基或1至3個碳原子(1-3C)烷基。烷基之非限制性實例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、第二丁基、異丁基、第三丁基、正戊基、新戊基、異戊基、正己基、異己基及新己基。在一個實施例中，烷基為直鏈。在另一實施例中，烷基為分支鏈。
除非另外規定，否則「烷基」包括具有規定碳原子數之分支鏈 及直鏈飽和脂族烴基兩者(包括所有異構體)；例如「(1-6C)烷基」包括所有己基烷基及戊基烷基異構體以及正丁基、異丁基、第二丁基及第三丁基、正丙基及異丙基、乙基及甲基。「伸烷基」係指具有規定碳數且具有兩個末端鏈連接之分支鏈及直鏈飽和脂族烴基兩者(包括所有異構體)；舉例而言，術語「A-C4伸烷基-B」表示例如A-CH2-CH2-CH2-CH2-B、A-CH2-CH2-CH(CH3)-CH2-B、A-CH2-CH(CH2CH3)-B、A-CH2-C(CH3)(CH3)-B及其類似基團。
鹵烷基意謂具有所述碳原子數之分支鏈或未分支鏈烷基，其中一個至全部氫原子經鹵素置換；鹵素如本文所定義。適用於本發明之該等分支鏈或直鏈鹵烷基之實例包括(但不限於)經一或多個鹵基(例如氟、氯、溴及碘)獨立取代之甲基、乙基、丙基、異丙基、異丁基及正丁基。舉例而言，鹵基(1-3C)烷基意謂具有1、2或3個碳原子之分支鏈或未分支鏈烷基，其中至少一個氫原子置換為鹵素。「鹵烷基」之實例包括(但不限於)氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、1-氟乙基、2-氟乙基、2,2-二氟乙基、2,2,2-三氟乙基及全氟正丙基。
烷氧基意謂具有所述碳原子數之烷氧基，烷基部分具有與上文定義相同之含義，例如「烷氧基」係指經氧橋連接的具有指定碳原子數之直鏈或分支鏈烷基表示之烷基-O-基團；例如「(1-6C)烷氧基」包括-OCH3、-OCH2CH3、-OCH(CH3)2、-O(CH2)5CH3及其類似基團。
環烷氧基意謂具有所述碳原子數、具有與上文定義相同之含義、經環碳原子連接於環外氧原子的環烷基，諸如環丙氧基、環丁氧基或環戊氧基。「環烷氧基」係指由具有指定碳原子數且經氧橋連接之環烷基表示的環烷基-O-基團；例如「(3-6C)環烷氧基」包括-O-環丙基、-O-環丁基、-O-環戊基或-O-環己基。
雜環烷氧基意謂具有所述碳原子數及1-3個選自N、O及/或S、具有與上文定義相同之含義、經環碳原子連接於環外氧原子之雜原子的 環烷基。
除非另外明確註明僅「未經取代」或僅「經取代」，否則烷基未經取代或在各碳原子上經1至3個取代基取代。
烯基意謂具有所述碳原子數之分支鏈或未分支基團，其中雙鍵存在於兩個碳原子之間，諸如乙烯基、2-丙烯基、異丁烯基、2-丁烯基及正戊烯基。
炔基意謂具有所述碳原子數之分支鏈或未分支基團，其中參鍵存在於兩個碳原子之間，諸如乙炔基、丙炔基、2-丙炔基、正丁炔基、2-丁炔基、正戊炔基、異戊炔基、異己炔基或正己炔基。
術語「碳環」意謂具有規定碳原子數之烴環，該環為飽和、不飽和或芳族環。
術語「環烷基」意謂具有規定總環碳原子之環狀烷烴環；舉例而言，「(3-6C)環烷基」包括環丙基、環丁基、環戊基或環己基。
術語「雜環烷基」意謂具有規定碳原子數之環，該環為飽和、不飽和或芳族環。雜環烷基可為具有1-5個雜原子之4-8員單環或8-10員雙環。較佳2-5個碳原子，更佳3-5個碳原子及1-3個選自N、O及/或S之雜原子，其可經氮原子連接，或可行時經碳原子連接。較佳雜原子數為1或2。較佳雜原子為N或O。舉例而言，「(1-3C)雜環烷基」包括具有1-3個碳原子之雜環烷基，諸如哌啶、嗎啉、吡咯啶及哌嗪。雜環烷基包括(但不限於)(1-5C)雜環烷基、(1-6C)雜環烷基、(2-5C)雜環烷基、(2-6C)雜環烷基及(3-7C)雜環烷基。雜環烷基包括「雜環烯基」。雜環烯基意謂具有規定碳原子數之不飽和環。舉例而言，「(2-6C)雜環烯基」包括具有2、3、4、5或6個碳原子之雜環烯基。雜環烷基亦包括「雜芳基」。雜芳基為具有6-10個成員，及1-6個選自N、O或S之雜原子的5-6員單環芳族環或稠合雙環芳族環。較佳雜芳基為四唑基、咪唑基、噻二唑基、吡啶基、嘧啶基、三嗪基、噻唑基、噁唑 基、異噁唑基、吡唑基、噻二唑基、異噻二唑基、噻吩基、呋喃基、喹啉基、異喹啉基及吲哚基。
術語「雜環」及「雜環烷基」具有相同含義。
環烯基意謂具有所述碳原子數(較佳3-7個碳原子)及在至少兩個碳原子之間之雙鍵的環烷基。舉例而言，「(3-7C)環烯基」包括具有3、4、5、6或7個碳原子之環烯基。較佳環烯基為環戊烯基或環己烯基。
芳基意謂具有6-10個碳原子之芳族烴環，其可為單環芳族環或稠合雙環芳族環，諸如苯基、萘基、四氫萘基或茚基。較佳芳基為苯基。
二[烷基]胺基意謂經烷基二取代之胺基，其各自獨立地含有所述碳原子數且具有與上文定義相同之含義。較佳二[烷基]胺基為二甲基胺基。羥基烷基意謂經羥基取代之如上文定義之烷基。
環烷基(1-4C)烷基意謂具有1-4個碳原子且具有與上文定義相同含義之烷基，其經具有所述碳原子數且如上文定義之環烷基取代。
環烷氧基(1-4C)烷基意謂具有1-4個碳原子且具有與上文定義相同含義之烷基，其經具有所述碳原子數且如上文定義之環烷氧基取代。環烷氧基經環外氧鍵聯於烷基。
芳基(1-6C)烷基意謂具有1-6個碳原子且具有與上文定義相同含義之烷基，其經具有所述碳原子數且如上文定義之芳基取代。
雜芳基(1-6C)烷基意謂具有1-6個碳原子且具有與上文定義相同含義之烷基，其經具有所述碳原子數且如上文定義之雜芳基取代。
雜環烷基(1-6C)烷基意謂具有1-6個碳原子且具有與上文定義相同含義之烷基，其經具有所述碳原子數且如上文定義之雜環烷基取代。
烷氧基(1-6C)烷基意謂具有1-6個碳原子且具有與上文定義相同 含義之烷基，其經烷基部分具有所述碳原子數且如上文定義之烷氧基取代。「烷氧基烷基」之實例包括(但不限於)甲氧基甲基、1-甲氧基乙基、2-乙氧基乙基及1,1-二甲氧基乙基。
在取代基之定義中，當指出該取代基之「所有烷基」視情況經取代時，此亦包括烷氧基之烷基部分。
式I之環中的圓形指示環為芳族環或其具有所需雙鍵數來完成化合價。
視所形成之環而定，若T、U、W、X、Y或Z中存在氮，則其可攜帶氫。
術語「經取代」意謂指定原子上之一或多個氫經選自指定基團之基團置換，其限制條件為在現有狀況下不超過指定原子之正常化合價且取代產生穩定化合物。僅當該等組合產生穩定化合物時，才允許取代基及/或變數之組合。「穩定化合物」或「穩定結構」定義為足夠穩固從而以適用純度自反應混合物分離而繼續存在且調配為有效治療劑之化合物或結構。
術語「視情況經取代」意謂可經或可未經規定基團、自由基或部分取代。
術語醫藥學上可接受之鹽為此項技術所熟知。其可在本發明化合物之最終分離及純化期間獲得，或藉由使游離鹼官能基與適合礦物酸(諸如鹽酸、磷酸或硫酸)或有機酸(諸如抗壞血酸、檸檬酸、酒石酸、乳酸、順丁烯二酸、丙二酸、反丁烯二酸、乙醇酸、丁二酸、丙酸、乙酸、甲烷磺酸及其類似酸)反應分別獲得。酸官能基可與有機鹼或礦物鹼(如氫氧化鈉、氫氧化鉀或氫氧化鋰)反應。
本發明化合物包括化合物之前藥、水合物或溶劑合物。術語「鹽」、「溶劑合物」、「酯」、「前藥」及其類似術語之使用意欲同樣適用於本發明化合物之對映異構體、立體異構體、旋轉異構體、互變異 構體、位置異構體、外消旋體或前藥之鹽、溶劑合物、酯及前藥。
如本文所用之術語「有效量」係指式(I)、(II)、(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)、(Iai)、(Ibi)、(Ici)、(Idi)、(Ie)、(If)或(Ig)化合物及/或額外治療劑或其組合在向罹患BTK介導之疾病或病症之個體投與時有效產生所要治療、改善、抑制或預防作用的量。在本發明之組合療法中，有效量可指各單獨藥劑或作為整體之組合，其中所投與之所有藥劑之量一起為有效的，但其中組合之組成性藥劑可能不單獨以有效量存在。
「個體」為人類或非人類哺乳動物。在一個實施例中，個體為人類。
應注意，在本文正文、流程、實例及表中具有未滿足化合價之任何碳原子以及雜原子均假定具有足夠數目的氫原子來滿足化合價。
在多官能基之上述定義中，除非在取代基上用虛線另外規定，否則連接點在最後的基團處。取代基上之虛線將表示連接點。
本發明之態樣
在一個態樣中，本發明係關於式I或式II化合物，其中環K定義為：B1為C(R7)，B2為C(R8)，B3為C(R9)且B4為C(R10)；或B1為N，B2為N，B3為C(R9)且B4為C(R10)；或B1為N，B2為C(R8)，B3為N且B4為C(R10)；或B1為N，B2為C(R8)，B3為C(R9)且B4為N；或B1為C(R7)，B2為C(R8)，B3為N且B4為N；或B1為C(R7)，B2為N，B3為C(R9)且B4為N。
在另一態樣中，本發明係關於式I或式II化合物，其中環K定義為：B1為C(R7)，B2為C(R8)，B3為C(R9)且B4為C(R10)，且其中R7、R8、R9及R10各自為H、鹵素、(1-3C)烷基、(1-3C)烷氧基或鹵基(1- 3C)烷基；任何烷氧基可視情況經一個、兩個或三個鹵素取代。
在另一態樣中，本發明係關於式I或式II化合物，其中環L係選自由以下組成之群：苯基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、三嗪基、噻唑基、噁唑基、異噁唑基、吡唑基、咪唑基、噻二唑基及異噻唑基。
在另一態樣中，本發明係關於式I或式II化合物，其中環系統L係選自由以下組成之群：
在另一態樣中，本發明係關於式I或式II化合物，其中環L係選自由吡啶基、嘧啶基及噻唑基組成之群。在一較佳態樣中，環L為吡啶基。
在另一態樣中，本發明係關於式I或式II化合物，其中R5係選自由以下組成之群：氫、氟、氯、CN、環丙基、環丁基、氧雜環丁烷基、(1-3C)烷基、(1-5C)烷氧基及(1-5C)環烷氧基；其中該烷基、烷氧基、環烷基及環烷氧基視情況經一或多個鹵素取代。
在另一態樣中，本發明係關於式I或式II化合物，其中R5係選自由以下組成之群：氫、氟、甲基、乙基、丙基、環丙基、環丁基、環丙氧基及三氟甲基。
在另一態樣中，本發明係關於式I或式II化合物，其中R11係選自由以下組成之群：H、2H、F、Cl、Br、甲基、C2H3、乙基、環丙基及乙烯基。在一個實施例中，R11為H或鹵素。在另一實施例中，R11為鹵素。在一較佳實施例中，R11為F或Cl。
在另一態樣中，本發明係關於式I或式II化合物，其中A1-A4為C或N且雙環系統E-G係選自由以下組成之群
較佳地，R12為H。
在另一態樣中，本發明係關於式I或式II化合物，其中A1-A4為C或N且雙環系統E-G為
在本發明關於式I或式II化合物之一個態樣中，本發明係關於具有式Ia之化合物
或其醫藥學上可接受之鹽。
在本發明關於式I或式II化合物之另一態樣中，本發明係關於具有式Ib之化合物
或其醫藥學上可接受之鹽。
在本發明關於式I或式II化合物之另一態樣中，本發明係關於具有式Ic之化合物
或其醫藥學上可接受之鹽。
在本發明關於式I或式II化合物之另一態樣中，本發明係關於具有式Id之化合物
或其醫藥學上可接受之鹽。
在本發明關於式I或式II化合物之一個態樣中，本發明係關於具有式Iai之化合物
或其醫藥學上可接受之鹽。在一較佳實施例中，R6、R7及R8各自為氫。
在本發明關於式I或式II化合物之另一態樣中，本發明係關於具有式Ibi之化合物
或其醫藥學上可接受之鹽。
在本發明關於式I或式II化合物之另一態樣中，本發明係關於具有式Ici之化合物
或其醫藥學上可接受之鹽。
在本發明關於式I或式II化合物之另一態樣中，本發明係關於具有式Idi之化合物
或其醫藥學上可接受之鹽。
在本發明關於式I或式II化合物之另一態樣中，本發明係關於具有式1e之化合物
或其醫藥學上可接受之鹽。在式1e化合物之一個實施例中，R7、R8、R9及R10係獨立地選自H、鹵素或(1-3C)烷氧基；R11為H、鹵素或(1-3C)烷基，其中該烷基視情況經一個、兩個或三個鹵素取代； Rc為H或CH3；及Rd為H或CH3。
在本發明關於式Ie化合物之另一態樣中，本發明係關於具有式1f之化合物
或其醫藥學上可接受之鹽。
在本發明關於式Ie化合物之另一態樣中，本發明係關於具有式1g之化合物
或其醫藥學上可接受之鹽。
在本發明之上述態樣之一較佳實施例中，R11為鹵素。
本發明亦關於上文定義之本發明多個態樣中A1-A4、B1-B4、Q、T、U、V、W、X、Y、Z、R3、R4、R5、R6、R6a、R6b、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、Rc、Rd、Re、Rf、Rg、Rh及Rz及所有取代基之所有特定定義以任何組合出現於式I、II、Ia、Ib、Ic、Id、Ie、If、Ig、Iai、Ibi、Ici、Idi之Btk抑制劑化合物或其醫藥學上可接受之鹽之定義內的彼等化合物。
本發明化合物之非限制性實例包括：4-{8-胺基-3-[(6S,8aS)-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aR)-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-2-甲基-3-側氧基八氫咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(環丙氧基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-吡啶-2-基苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6S,8aR)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丁基吡啶-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(5-甲基-1,3-噻唑-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6S,8aR)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡 嗪-1-基}-N-吡啶-2-基苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6S,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aR)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6S,8aR)-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(二氟甲基)吡啶-2-基]-3-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-氰基吡啶-2-基)-3-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)-3-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(二氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-乙基吡啶-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)嘧啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(1,1-二氟乙基)吡啶-2-基]-3-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡 嗪-1-基}-2-甲基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氟-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-2-氟-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(1,1-二氟乙基)吡啶-2-基]-2-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(二氟甲基)吡啶-2-基]-2-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)-2-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)-2-甲基苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(3-氟氧雜環丁烷-3-基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(1-氟-1-甲基乙基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1R,6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氟-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1R,6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)-3-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1S,6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氟-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺； 4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-氰基吡啶-2-基)-2-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-氰基吡啶-2-基)-3-甲氧基苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-氰基吡啶-2-基)-2-甲基苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1S,6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)-3-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)-3-甲氧基苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7R,9aS)-4-側氧基八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氟-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7R,9aS)-4-側氧基八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7S,9aR)-4-側氧基八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-2-氯-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(環丙氧基)吡啶-2-基]-3-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(3S,9aS)-6-側氧基八氫-2H-喹嗪-3-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氟-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(3R,9aR)-6-側氧基八氫-2H-喹嗪-3-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氟-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1S,6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a] 吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1R,6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1S,6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1R,6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7R,9aS)-2-甲基-4-側氧基八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7S,9aR)-2-甲基-4-側氧基八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-1,1-二甲基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1R,6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)-3-甲氧基苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7R,9aR)-4-側氧基八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7R,9aS)-八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-基]咪唑并 [1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7S,9aR)-八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7S,9aS)-4-側氧基八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(2S,6S,8aR)-2-羥基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(2R,6R,8aS)-2-羥基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-(甲基胺基)-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-[(乙基胺甲醯基)胺基]-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1R,6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1S,6R,8aR)-1-甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1S,6R,8aR)-1-甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1R,6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7R,9aS)-2-(2-羥基乙基)-4-側氧基八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(2R,6S,8aR)-2-羥基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺； 4-{8-胺基-3-[(2S,6R,8aS)-2-羥基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(苯甲基氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(二氟甲氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(2S,6R,8aR)-2-羥基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(2R,6S,8aS)-2-羥基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(2R,6S,8aS)-2-羥基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(2S,6R,8aR)-2-羥基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aR)-3-側氧基四氫-1H-[1,3]噁唑并[4,3-c][1,4]噁嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(3R,7R,9aS)-3-甲基-4-側氧基八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(3E,6R,8aS)-3-(氰基亞胺基)八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；{3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]-1-(4-{[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]胺甲醯基}苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-8-基}胺基甲酸甲酯； 4-{8-胺基-3-[(7R,9aS)-2-乙基-4-側氧基八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7R,9aS)-2-(1-甲基乙基)-4-側氧基八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；{(7R,9aS)-7-[8-胺基-1-(4-{[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]胺甲醯基}苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基]-4-側氧基八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2-基}乙酸甲酯；4-{8-胺基-3-[(4aS,7R)-2-甲基-1-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(4aR,7S)-2-甲基-1-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7R,9aS)-4-側氧基-2-(吡啶-4-基羰基)八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；2-{(7R,9aS)-7-[8-胺基-1-(4-{[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]胺甲醯基}苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基]-4-側氧基八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2-基}-2-甲基丙酸；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1R,6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4- a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-1,1-二甲基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(3R,8aR)-6-側氧基六氫-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-3-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(4aS,7R)-1-側氧基六氫-3H-吡啶并[1,2-c][1,3]噁嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(4aR,7S)-1-側氧基六氫-3H-吡啶并[1,2-c][1,3]噁嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6S,8aR)-2,2-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-2,2-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1S,6R,8aS)-3-亞胺基-1-甲基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(1-羥基乙基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(1-羥基-1-甲基乙基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(1-甲氧基乙基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-2,2-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪 唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6S,8aR)-2,2-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7R,9aS)-4-側氧基-2-(吡啶-4-基羰基)八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；2-{[(4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}苯基)羰基]胺基}吡啶-4-甲酸甲酯；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[5-(三氟甲基)噠嗪-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7R,9aS)-4-側氧基-2-(苯基羰基)八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-異喹啉-3-基苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(3R,8aR)-6-側氧基六氫-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-3-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；{(7R,9aS)-7-[8-胺基-1-(4-{[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]胺甲醯基}苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基]-4-側氧基八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2-基}乙酸；4-{8-胺基-3-[(1S,6R,8aS)-1-乙烯基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1R,6R,8aS)-1-乙烯基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并 [3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(4aR,7R)-2-甲基-1-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氯-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-2,2-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(1,1-二氟乙基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-5-乙氧基-2-氟-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-[(~2~H_3_)甲氧基]-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[5-氰基-4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-羥基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；5-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]吡啶-2-甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[6-甲基-4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡 嗪-1-基}-3-(環丙氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[3-甲基-4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氰基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N~1~-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯-1,3-二甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[6-(1-甲基乙基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[6-環丁基-4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；2-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-5-{[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]胺甲醯基}苯甲酸；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(6-甲氧基吡啶-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-2-氟-5-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-2-氟-5-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-5-乙氧基-2-氟-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯 胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氟-5-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)-5-乙氧基-2-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)-5-乙氧基-2-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(環己氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(1-甲基乙氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(環丁氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(環戊氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(2,2-二甲基丙氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(環丙氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺； 4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(環丙氧基)-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(環丙氧基)-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(環丙氧基)-N-(4-環丙基吡啶-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(環丙氧基)-N-(4-環丙基吡啶-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(氮雜環丁烷-3-基氧基)-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-5-(環丙氧基)-2-氟-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-5-乙氧基-2-氟-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-5-乙氧基-2-氟-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(5-甲基-1,3-噻唑-2-基)苯甲醯胺；乙酸2-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并 [1,5-a]吡嗪-1-基}-5-{[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]胺甲醯基}苯酯；4-{8-(乙醯基胺基)-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-羥基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-羥基-N-(2-甲氧基乙基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-(5-甲基-1,3-噻唑-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-(5-甲基-1,3-噻唑-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氟-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氟-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氟-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氟-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氟-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-(5-甲基-1,3-噻唑-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氟-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-羥基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氟-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氟-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氟-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并 [1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)-3-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氟-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氟-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-5-乙氧基-2-氟-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-1H-咪唑-2-基苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[5-(三氟甲基)異噁唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[3-(三氟甲基)異噁唑-5-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(1,5-二甲基-1H-吡唑-3-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(3-乙基-1,2,4-噻二唑-5-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[3-(1-甲基乙基)-1,2,4-噻二唑-5-基]苯甲醯胺； 4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[1-環戊基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(5-環丙基-1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；2-{[(4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}苯基)羰基]胺基}-4-(三氟甲基)-1,3-噁唑-5-甲酸乙酯；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[1-乙基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲基-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氯-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氯-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯 胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-5-氯-2-氟-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-5-氯-2-氟-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氯-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氯-N-(5-甲基-1,3-噻唑-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氯-N-(5-甲基-1,3-噻唑-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-2-氟-5-甲基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-2-氟-5-甲基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(2-甲氧基乙氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(2-羥基乙氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(2-乙氧基乙氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-(5-甲基-1,3-噻唑-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-(5-甲基-1,3-噻唑-2-基)苯甲醯胺； 4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(丁-3-炔-1-基氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-甲基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]-5-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-乙基吡啶-2-基)-3-甲氧基苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-(4-甲氧基吡啶-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丁基吡啶-2-基)-3-甲氧基苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-(5-甲基吡啶-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]-5-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氯-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]-5-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)-3-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]-5-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氟-5-甲基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]-5-(三氟甲基) 咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(1,1-二氟乙氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氟-5-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-2-氯-5-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-2,2-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氟-5-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氟-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氟-5-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-(8-胺基-5-氟-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-乙氧基-5-氟-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺；4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-1,1-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-乙氧基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺；及4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-1,1-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-乙氧基-5-氟-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺， 或其醫藥學上可接受之鹽。
在本發明之一較佳實施例中，式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽係選自由以下組成之群：4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-1,1-二甲基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6S,8aR)-2,2-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-2,2-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-2,2-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-5-乙氧基-2-氟-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡 嗪-1-基}-3-氟-5-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氟-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]-5-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；及4-(8-胺基-5-氟-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-乙氧基-5-氟-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺。
本發明之具有式I或式II之Btk抑制劑化合物抑制Btk激酶活性。本發明之所有化合物均具有10μM或10μM以下之EC50。在另一態樣中，本發明係關於EC50小於100nM之式I化合物。在另一態樣中，本發明係關於EC50小於10nM之式I或式II化合物。
術語EC50意謂活體外最大作用之50%抑制所需的測試化合物濃度。
在另一態樣中，本發明係關於IC50小於100nM之式I或式II化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在另一態樣中，本發明係關於IC50小於10nM之式I或式II化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
術語IC50意謂活體外最大作用之50%抑制所需的測試化合物濃度。
BTK酶活性用LANCE(鑭系元素螯合物激發，Lanthanide Chelate Excite)TR-FRET(時差式螢光共振能量轉移，Time-resolved fluorescence resonance energy transfer)分析法測定。在此分析法中，各化合物之效能(IC50)使用下文所述之程序自11點(1：3連續稀釋；分析中最終化合物濃度範圍為1μM至0.017nM)滴定曲線測定。向黑色非結合表面Corning 384孔微定量盤(Corning目錄號3820)之各孔中分配5nL化合物(10μL最終分析體積中2000倍稀釋液)，隨後添加7.5μL含有10.18pg/μL(133.3pM)BTK酶(來自桿狀病毒轉染之Sf9細胞的重組蛋白：全長BTK，6HIS-標籤裂解)之1×激酶緩衝液(50mM Hepes 7.5、10mM MgCl2、0.01% Brij-35、1mM EGTA、0.05% BSA及1mM DTT)。在60分鐘化合物及酶培育後，藉由添加2.5μL含有8μM生物素標記「A5」肽(生物素-EQEDEPEGDYFEWLE-NH2)(SEQ ID NO：1)及100μM ATP之1×激酶緩衝液起始各反應。各孔中之10μL最終反應物由100pM hBTK、2μM生物素-A5-肽及25μM ATP組成。磷酸化反應進行120分鐘。藉由添加20μL含有偵測試劑(0.626nM LANCE-Eu-W1024-抗磷基酪胺酸抗體，PerkinElmer及86.8nM抗生蛋白鏈菌素結合之Dylight 650,Dyomics/ThermoFisher Scientific)之1×淬滅緩衝液(15mM EDTA、25mM Hepes 7.3及0.1% Triton X-100)立即淬滅反應。用偵測試劑培育60分鐘後，使用標準TR-FRET方案在PerkinElmer EnVision板讀取器上讀取反應板。簡言之，用337nm之雷射光源激發供體分子(Eu-螯合劑：抗磷基抗體)產生可轉移至Dylight-650受體分子之能量，只要此供體：受體對極為貼近即可。量測665nm(受體)及615nm(供體)之螢光強度且計算各孔之TR-FRET比(受體強度/供體強度)。藉由TR-FRET比值與(Log10)化合物濃度之4參數穩健擬合測定IC50值。
可在B細胞株(諸如Ramos細胞)或原生細胞分析(例如來自人類、猴、大鼠或小鼠之PBMC或全血或來自猴、大鼠或小鼠之分離脾細胞) 中測定Btk活性。量測抗IgM誘導之MIP1β產生(Ramos、PBMC、脾細胞)、H2O2誘導之Btk及PLCγ2磷酸化(Ramos細胞)，或原生B細胞上的抗IgM誘導之B細胞增殖或CD86表現(PBMC及脾細胞)，可研究Btk活性抑制。
在活化FcεR誘導之脫粒、細胞激素產生及CD63誘導之細胞表面表現後，亦可對人類、猴、大鼠或小鼠肥大細胞測定Btk活性之調控。
此外，可對CD14+單核細胞測定Btk活性之調控，該等單核細胞在用M-CSF處理後分化成蝕骨細胞且用RANKL活化。
Btk抑制劑之活性可在活體內投與後在大鼠脾細胞中研究。在典型實驗中，可在化合物投與3小時後對小鼠實施安樂死。可自經處理小鼠提取脾臟用於脾細胞分離。可將脾細胞接種於96孔培養板中且用抗IgM刺激，不再進一步添加化合物。可藉由CD19+脾細胞B細胞上之B細胞增殖、MIP1β產生或CD86表現來量測抗IgM誘導之B細胞刺激及Btk抑制劑對其之抑制。
亦可使用疾病發作後開始治療的治療方案，量測疾病評分，對骨骼破壞、軟骨破裂及關節組織學進行X射線分析，在小鼠膠原蛋白誘導之關節炎模型中研究Btk抑制劑之功效。
亦可使用被動皮膚過敏反應模型活體內研究Btk抑制劑對調控經活化之肥大細胞之功效。
可使用大鼠OVX模型研究Btk抑制劑對活體內骨骼再吸收之作用。在此模型中，卵巢切除動物產生可使用Btk抑制劑調控之骨質疏鬆症的症狀。
式I化合物可形成亦在本發明範疇內之鹽。除非另外指出，否則應理解本文中提及式(I)化合物包括提及其鹽。如本文所用之術語「鹽」表示與無機酸及/或有機酸形成之酸式鹽，以及與無機鹼及/或 有機鹼形成之鹼式鹽。此外，當式(I)化合物含有諸如(但不限於)吡啶或咪唑之鹼性部分及諸如(但不限於)羧酸之酸性部分時，可形成兩性離子(「內鹽」)且其包括於如本文所用之術語「鹽」中。在本發明之範疇內使用的此等酸式鹽及鹼式鹽為醫藥學上可接受(亦即無毒、生理學上可接受)之鹽。式(I)化合物之鹽可例如藉由使式(I)化合物與一定量(諸如等效量)之酸或鹼在諸如鹽沈澱之介質或水性介質中反應隨後凍乾形成。
例示性酸加成鹽包括乙酸鹽、抗壞血酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、反丁烯二酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、乳酸鹽、順丁烯二酸鹽、甲烷磺酸鹽、萘磺酸鹽、硝酸鹽、乙二酸鹽、磷酸鹽、丙酸鹽、水楊酸鹽、丁二酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽(toluenesulfonate/tosylate)及其類似鹽。此外，一般認為適於從鹼性醫藥化合物形成醫藥學上適用之鹽的酸例如由P.Stahl等人，Camille G.(編)Handbook of Pharmaceutical Salts.Properties,Selection and Use.(2002)Zurich：Wiley-VCH；S.Berge等人，Journal of Pharmaceutical Sciences(1977)66(1)1-19；P.Gould,International J.of Pharmaceutics(1986)33 201-217；Anderson等人，The Practice of Medicinal Chemistry(1996),Academic Press,New York；及The Orange Book(Food & Drug Administration,Washington,D.C.在其網站上)論述。此等揭示內容以引用的方式併入本文中。
例示性鹼式鹽包括銨鹽；鹼金屬鹽，諸如鈉鹽、鋰鹽及鉀鹽；鹼土金屬鹽，諸如鈣鹽及鎂鹽；與有機鹼(例如有機胺，諸如二環己胺、第三丁胺)形成之鹽；及與諸如精胺酸、離胺酸及其類似物之胺基酸形成之鹽。可用諸如低碳烷基鹵化物(例如甲基、乙基及丁基之氯化物、溴化物及碘化物)、硫酸二烷基酯(例如硫酸二甲酯、硫酸二 乙酯及硫酸二丁酯)、長鏈鹵化物(例如癸基、月桂基及硬酯醯基之氯化物、溴化物及碘化物)、芳烷基鹵化物(例如苯甲基溴及苯乙基溴)等之試劑使鹼性含氮基團四級化。
式I化合物可具有以一種以上形式結晶之能力，此為稱為多晶型現象之特徵，且應理解該等多晶型形式(「多晶型物」)在式I之範疇內。多晶型現象一般可作為對溫度或壓力或其兩者改變的反應產生且亦可由結晶過程中之變化引起。可藉由此項技術中已知的多種物理特徵(諸如x射線繞射圖、溶解度及熔點)辨別多晶型物。
式I化合物可含有不對稱或對掌性中心，且因此以不同立體異構形式存在。意欲式I化合物之所有立體異構形式以及其混合物(包括外消旋混合物)形成本發明之部分。此外，本發明涵蓋所有幾何異構體及位置異構體。舉例而言，若式(I)化合物併入雙鍵或稠合環，則順式及反式形式以及混合物皆涵蓋於本發明範疇內。
非對映異構混合物可基於其物理化學差異藉由熟習此項技術者熟知之方法(諸如藉由層析法及/或分步結晶)分離成其個別非對映異構體。對映異構體可如下分離：藉由與適當光學活性化合物(例如對掌性助劑，諸如對掌性醇或莫舍氏酸氯化物(Mosher's acid chloride))反應將對映異構混合物轉化為非對映異構混合物，分離非對映異構體且將個別非對映異構體轉化(例如水解)成相應純對映異構體。同樣，一些式I化合物可為滯轉異構體(例如經取代之聯芳基)且視為本發明之部分。對映異構體亦可藉由使用對掌性HPLC管柱分離。
式I化合物亦可能可以不同互變異構形式存在，且所有該等形式涵蓋於本發明範疇內。同樣，例如，該等化合物之所有酮基-烯醇及亞胺-烯胺形式均包括於本發明中。
本發明化合物(包括化合物之鹽、溶劑合物、酯及前藥以及前藥之鹽、溶劑合物及酯之彼等化合物)的所有立體異構體(例如幾何異構 體、光學異構體及其類似物)，諸如可由於多個取代基上的不對稱碳而存在之化合物，包括對映異構形式(其甚至可在不對稱碳不存在時存在)、旋轉異構形式、滯轉異構體及非對映異構形式均涵蓋於本發明範疇內，如同位置異構體一般。本發明化合物之個別立體異構體可例如實質上不含其他異構體，或可例如以外消旋體形式混雜或與所有其他或其他所選立體異構體混雜。本發明之對掌性中心可具有如IUPAC 1974 Recommendations所定義之S或R構型。術語「鹽」、「溶劑合物」、「酯」、「前藥」及其類似術語之使用意欲同樣適用於本發明化合物之對映異構體、立體異構體、旋轉異構體、互變異構體、位置異構體、外消旋體或前藥之鹽、溶劑合物、酯及前藥。
T.Higuchi及V.Stella,Pro-drugs as Novel Delivery Systems(1987)14 of the A.C.S.Symposium Series及Bioreversible Carriers in Drug Design,(1987)Edward B.Roche編，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press中提供前藥之論述。術語「前藥」意謂活體內轉換產生式(I)化合物或該化合物之醫藥學上可接受之鹽、水合物或溶劑合物之化合物(例如藥物前驅物)。該轉換可藉由多種機制(例如藉由代謝或化學過程)進行，諸如經由在血液中水解進行。T.Higuchi及W.Stella,「Pro-drugs as Novel Delivery Systems,」the A.C.S.Symposium Series之第14卷及Bioreversible Carriers in Drug Design,Edward B.Roche編，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press,1987提供前藥使用之論述。
具有式I之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物可形成水合物或溶劑合物。熟習此項技術者已知帶電化合物當用水凍乾時形成水合物質，或當在具有適當有機溶劑之溶液中濃縮時形成溶劑化物質。本發明化合物包括所列化合物之水合物或溶劑合物。
一或多種具有式I之本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽或溶 劑合物可以非溶劑化形式以及與醫藥學上可接受之溶劑(諸如水、乙醇及其類似物)形成之溶劑化形式存在，且預期本發明涵蓋溶劑化形式與非溶劑化形式。「溶劑合物」意謂本發明化合物與一或多個溶劑分子之物理締合。此物理締合涉及不同程度之離子鍵結及共價鍵結，包括氫鍵結。在某些情形下，例如當將一或多個溶劑分子併入至結晶固體之晶格中時，該溶劑合物將能夠分離。「溶劑合物」涵蓋溶液相與可分離之溶劑合物。適合溶劑合物之非限制性實例包括乙醇化物、甲醇化物及其類似物。「水合物」為溶劑分子為H2O之溶劑合物。
在式I化合物中，原子可展現其天然同位素豐度，或一或多個原子可人工增濃特定同位素，同位素與自然界主要存在之元素具有相同原子數，但原子質量或質量數不同於自然界主要存在之原子質量或質量數。本發明欲包括通式I化合物之所有適合同位素變化形式。舉例而言，氫(H)之不同同位素形式包括氕(1H)及氘(2H)。氕為自然界中存在的主要氫同位素。對氘進行增濃可產生某些治療優勢，諸如提高活體內半衰期或降低劑量要求，或可提供適用作表徵生物樣品之標準物的化合物。通式I中之同位素增濃化合物可藉由熟習此項技術者所熟知的習知技術或藉由與本文流程及實例中所述之方法類似的方法，使用適當同位素增濃試劑及/或中間物不經過度實驗來製備。
某些同位素標記之式I化合物(例如以3H及14C標記的化合物)可用於化合物及/或受質組織分佈分析。氚化(亦即3H)及碳-14(亦即14C)同位素因其容易製備及可偵測性而尤其較佳。此外，經較重同位素(諸如氘(亦即2H))取代可因代謝穩定性較高而提供某些治療優勢(例如活體內半衰期延長或劑量需要減少)，且因此在某些情況下可為較佳。同位素標記之式I化合物一般可藉由類似於下文流程及/或實例中所揭示程序之以下程序，藉由用適當同位素標記的試劑取代未經同位素標記的試劑來製備。
具有式I之化合物及其醫藥組合物可用於治療或預防由布魯頓酪胺酸激酶(Btk)介導之多種病狀、疾病或病症。該等病狀、疾病或病症包括(但不限於)：(1)關節炎，包括類風濕性關節炎、幼年型關節炎、牛皮癬性關節炎及骨關節炎；(2)哮喘及其他阻塞性氣管疾病，包括慢性哮喘、遲發型哮喘、氣管高反應、支氣管炎、支氣管哮喘、過敏性哮喘、內因性哮喘、外因性哮喘、塵埃性哮喘、成人呼吸窘迫症候群、復發性氣管阻塞及慢性阻塞性肺病，包括肺氣腫；(3)自體免疫疾病或病症，包括命名為單器官或單細胞型自體免疫病症者，例如橋本氏甲狀腺炎(Hashimoto's thyroiditis)、自體免疫性溶血性貧血、惡性貧血伴之自體免疫性萎縮性胃炎、自體免疫性腦脊髓炎、自體免疫性睪丸炎、古巴士德氏病(Goodpasture's disease)、自體免疫性血小板減少症(包括特發性血小板減少性紫癲)、交感性眼炎、重症肌無力、格雷夫氏病(Graves' disease)、原發性膽汁性肝硬化、慢性活動性肝炎、潰瘍性結腸炎及膜性腎小球病，命名為涉及全身性自體免疫病症者，例如全身性紅斑狼瘡、免疫性血小板減少性紫癜、類風濕性關節炎、休格連氏症候群(Sjogren's syndrome)、萊特氏症候群(Reiter's syndrome)、多發性肌炎-皮肌炎、全身性硬化症、結節性多動脈炎、多發性硬化症及大皰性類天疱瘡，及可為基於B細胞(體液)或基於T細胞之額外自體免疫疾病，包括科根症候群(Cogan's syndrome)、僵直性脊椎炎、韋格納肉芽腫病、自體免疫性脫髮、I型糖尿病或幼年發病型糖尿病，及甲狀腺炎；(4)癌症或腫瘤，包括消化道/胃腸道癌、結腸癌、肝癌、皮膚癌(包括肥大細胞腫瘤及鱗狀細胞癌)、乳癌及乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、淋巴瘤及白血病(包括(但不限於)急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、套細胞淋巴瘤、NHL B細胞淋巴瘤(例如前驅物B-ALL、邊緣區B細胞淋巴瘤、慢性淋巴球性白血病、瀰漫性大B細胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤(Burkitt lymphoma)、縱隔大B細胞淋巴瘤)、霍奇金淋巴瘤(Hodgkin lymphoma)、NK及T細胞淋巴瘤；TEL-Syk及ITK-Syk融合驅動腫瘤、骨髓瘤(包括多發性骨髓瘤)、骨髓增生性疾病、腎癌、肺癌、肌肉癌、骨癌、膀胱癌、腦癌、黑素瘤(包括口腔及轉移性黑素瘤)、卡波西肉瘤(Kaposi's sarcoma)、增生性糖尿病性視網膜病變，及血管生成相關病症(包括實體腫瘤)，及胰臟癌；(5)糖尿病，包括I型糖尿病及糖尿病併發症；(6)眼睛疾病、病症或病狀，包括眼睛自體免疫疾病、角膜結膜炎、春季結膜炎、葡萄膜炎(包括與貝賽特氏病(Behcet's disease)相關之葡萄膜炎及晶狀體誘發性葡萄膜炎)、角膜炎、疱疹性角膜炎、錐形角膜炎、角膜上皮營養不良、角膜白斑、眼天疱瘡、莫倫氏潰瘍(Mooren's ulcer)、鞏膜炎、格雷夫氏眼病(Grave's ophthalmopathy)、伏格特-小柳-原田三氏症候群(Vogt-Koyanagi-Harada syndrome)、乾燥性角膜結膜炎(乾眼病)、小水皰、虹膜睫狀體炎、肉狀瘤病、內分泌性眼病、交感性眼炎、過敏性結膜炎及眼部新生血管；(7)腸道發炎、過敏或病症，包括克羅恩氏病(Crohn's disease)及/或潰瘍性結腸炎、發炎性腸病、腹腔病、直腸炎、嗜酸性球性胃腸炎及肥大細胞增多症；(8)神經退化性疾病，包括運動神經元病、阿茲海默氏病(Alzheimer's disease)、帕金森氏病(Parkinson's disease)、肌肉萎縮性側索硬化、亨廷頓氏病(Huntington's disease)、大腦缺血或由創傷性損傷、撞擊、麩胺酸神經毒性或低氧引起之神經退化性疾病；中風、心肌缺血、腎缺血、心臟病發作、心肥大、動脈粥樣硬化及動脈硬化症、器官低氧中之缺血/再灌注損傷；(9)血小板凝集及與血小板活化相關之疾病或由血小板活化引起之疾病，諸如動脈硬化症、血栓形成、內膜增生及血管損傷後再狹窄；(10)與心血管疾病相關之病狀，包括再狹窄、急性冠脈症候群、心肌梗塞、不穩定型心絞痛、頑固性心絞痛、血栓溶解療法後 或冠狀動脈成形術後出現的阻塞性冠狀動脈血栓、血栓形成介導之腦血管症候群、栓塞性中風、血栓性中風、短暫性腦缺血發作、靜脈血栓形成、深靜脈血栓形成、肺栓塞、凝血障礙、散播性血管內凝血、栓塞性血小板減少性紫癜病、血栓閉塞性血管炎、與肝素誘導性血小板減少症相關之血栓病、與體外循環相關之血栓併發症、與儀器(諸如心臟或其他血管內導管術、主動脈內氣囊泵、冠狀動脈支架或心瓣膜)相關之血栓併發症、需要裝配義肢之病狀，及其類似疾病；(11)皮膚疾病、病狀或病症，包括異位性皮炎、濕疹、牛皮癬、硬皮病、搔癢及其他癢病；(12)過敏反應，包括全身性過敏反應、過敏性鼻炎、過敏性皮炎、過敏性蕁麻疹、血管性水腫、過敏性哮喘或對昆蟲叮咬、食物、藥物或花粉之過敏反應；(13)移植排斥，包括胰島移植排斥、骨髓移植排斥、移植物抗宿主疾病、器官及細胞移植排斥(諸如骨髓、軟骨、角膜、心臟、椎間盤、胰島、腎、肢、肝臟、肺、肌肉、肌母細胞、神經、胰臟、皮膚、小腸或氣管)及異種移植；(14)低級疤痕，包括硬皮病、增加之纖維化、疤痕瘤、術後疤痕、肺纖維化、血管痙攣、偏頭痛、再灌注損傷及心肌梗塞後。
本發明因此提供用於療法且尤其適用於治療由不當Btk活性所介導之疾病及病狀的式(I)化合物及其鹽、溶劑合物及生理性官能衍生物。
本文提及之不當Btk活性為偏離特定哺乳動物個體中所預期之正常Btk活性之任何Btk活性。不當Btk活性可採取例如活性異常提高，或Btk活性之定時及或控制偏差之形式。該不當活性可隨後例如由導致不當或非受控活化之蛋白激酶過度表現或突變產生。
在另一實施例中，本發明係針對調控、調節或抑制Btk以預防及/或治療與未經調控或不當Btk活性有關之病症的方法。
在另一實施例中，本發明提供一種治療罹患由Btk活性介導之病 症之哺乳動物的方法，其包含向該哺乳動物投與有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽、溶劑合物或生理性官能衍生物。
在另一實施例中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物或其生理性官能衍生物之用途，其用於製備用以治療由Btk活性所介導之病症的藥物。
在另一實施例中，該由Btk活性所介導之病症為哮喘。在另一實施例中，該病症為類風濕性關節炎。在另一實施例中，該病症為癌症。在另一實施例中，該病症為眼部結膜炎。
本發明之另一態樣提供一種治療由Fc受體信號傳導級聯(包括FceRI及/或FcgRI介導之脫粒)引起或與Fc受體信號傳導級聯(包括FceRI及/或FcgRI介導之脫粒)相關之疾病的方法，其作為治療或預防以該等Fc受體信號傳導級聯或脫粒之化學介體之釋放或合成為特徵、由該等Fc受體信號傳導級聯或脫粒之化學介體之釋放或合成所引起及/或與該等Fc受體信號傳導級聯或脫粒之化學介體之釋放或合成相關之疾病的治療方法。此外，已知Btk在基於免疫酪胺酸之活化基元(ITAM)信號傳導、B細胞受體信號傳導、T細胞受體信號傳導中起關鍵作用且為嗜中性白血球中整合素β(1)、β(2)及β(3)信號傳導之必需組分。因此，本發明化合物可用於調控Fc受體、ITAM、B細胞受體及整合素信號傳導級聯以及經此等信號傳導級聯引發之細胞反應。可調控或抑制之細胞反應之非限制性實例包括呼吸爆發(respiratory burst)、細胞黏著、細胞脫粒、細胞鋪展、細胞遷移、吞噬作用、鈣離子通量、血小板凝集及細胞成熟。
本發明之另一態樣在於式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其用於製造用以治療Btk介導之疾病或Btk介導之病狀的藥物。
本發明之另一態樣在於式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其用於製造用以治療T細胞起重要作用的慢性B細胞病症的藥 物。
在另一態樣中，本發明在於式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其用於製造用以治療Btk介導之疾病或病狀的藥物。此等用途包括(但不限於)治療由慢性活性B細胞受體信號傳導引起的B細胞淋巴瘤。
因此，本發明化合物可用於治療或預防疾病布魯頓氏酪胺酸激酶(Btk)介導之病症的療法中。如本文所用之Btk介導之病症或Btk介導之病狀意謂B細胞、肥大細胞、骨髓細胞或蝕骨細胞起核心作用之任何疾病病況或其他有害病狀。此等疾病包括(但不限於)免疫、自體免疫及發炎疾病、過敏、感染性疾病、骨骼再吸收病症及增生性疾病。
可使用本發明化合物治療或預防之免疫、自體免疫及發炎疾病包括風濕病(例如類風濕性關節炎、牛皮癬性關節炎、感染性關節炎、進行性慢性關節炎、變形性關節炎、骨關節炎、創傷性關節炎、痛風性關節炎、萊特氏症候群、多軟骨炎、急性滑膜炎及脊椎炎)、絲球體腎炎(具有或不具有腎病症候群)、古巴士德氏症候群(及相關絲球體腎炎及肺出血)、動脈粥樣硬化、自體免疫性血液病(例如溶血性貧血、再生障礙性貧血、自發性血小板減少、慢性特發性血小板減少性紫癜(ITP)及嗜中性白血球缺乏症)、自體免疫性胃炎及自體免疫性發炎性腸病(例如潰瘍性結腸炎及克羅恩氏病)、大腸急躁症、宿主抗移植物疾病、同種異體移植排斥反應、慢性甲狀腺炎、格雷夫氏病、休格連氏病、硬皮病、糖尿病(I型及II型)、活動性肝炎(急性及慢性)、胰臟炎、原發性膽汁性肝硬化症、重症肌無力、多發性硬化症、全身性紅斑狼瘡、牛皮癬、異位性皮炎、皮肌炎、接觸性皮炎、濕疹、皮膚曬傷、血管炎(例如貝賽特氏病)、ANCA相關及其他血管炎、慢性腎功能不全、史蒂芬-約翰遜症候群(Stevens-Johnson syndrome)、發炎性疼痛、特發性脂肪瀉、惡病質、肉狀瘤病、格- 巴二氏徵候群(Guillain-Barré syndrome)、葡萄膜炎、結膜炎、角結膜炎、中耳炎、牙周病、艾迪森氏病(Addison's disease)、帕金森氏病、阿茲海默氏病、糖尿病、敗血性休克、重症肌無力、肺間質纖維化、哮喘、支氣管炎、鼻炎、竇炎、肺塵埃沈著症、肺功能不全症候群、肺氣腫、肺纖維化、矽肺病、慢性發炎性肺病(例如慢性阻塞性肺病)及其他氣管發炎或阻塞性疾病。
可治療或預防之過敏尤其包括對食物、食物添加劑、殺蟲劑、塵蟎、花粉、動物材料及接觸過敏原過敏、I型過敏過敏性哮喘、過敏性鼻炎、過敏性結膜炎。
可治療或預防之感染性疾病尤其包括敗血症、敗血性休克、內毒素休克、革蘭氏陰性菌(Gram-negative bacteria)引起之敗血症、志賀桿菌病(shigellosis)、腦膜炎、腦型瘧疾、肺炎、肺結核、病毒性心肌炎、病毒性肝炎(A型肝炎、B型肝炎及C型肝炎)、HIV感染、細胞巨大病毒引起之視網膜炎、流感、疱疹、治療與嚴重燒傷相關之感染、感染引起之肌肉痛、感染繼發之惡病質及獸醫病毒感染，諸如慢病毒、山羊關節炎病毒、維斯那-梅迪病毒(visna-maedi virus)、貓科免疫缺乏病毒、牛免疫缺乏病毒或犬免疫缺乏病毒。
可治療或預防之骨骼再吸收病症尤其包括骨質疏鬆症、骨關節炎、創傷性關節炎、痛風性關節炎及與多發性骨髓瘤有關之骨骼病症。
可治療或預防之增生性疾病尤其包括非霍奇金淋巴瘤(尤其瀰漫性大B細胞淋巴瘤(DLBCL)及套細胞淋巴瘤(MCL)亞型)、成熟B細胞之B細胞慢性淋巴球性白血病及急性淋巴母細胞白血病(ALL)(尤其ALL)。
特定言之，式I化合物或醫藥學上可接受之鹽可用於治療由慢性活性B細胞受體信號傳導引起的B細胞淋巴瘤。
本文包括治療方法及/或醫藥組合物，其中至少一種式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽與至少一種其他額外治療活性劑組合投與。其他額外治療活性劑為抗發炎劑、免疫抑制劑或化學治療劑。抗發炎劑包括(但不限於)NSAID、非特異性及COX-2特異性環氧酶酵素抑制劑、金化合物、皮質類固醇、甲胺喋呤、腫瘤壞死因子受體(TNF)受體拮抗劑、免疫抑制劑及甲胺喋呤。
NSAID之實例包括(但不限於)布洛芬(ibuprofen)、氟比洛芬(flurbiprofen)、萘普生(naproxen)及萘普生鈉、雙氯芬酸、雙氯芬酸鈉與米索普魯斯托爾(misoprostol)之組合、舒林酸(sulindac)、奧沙普嗪(oxaprozin)、二氟尼柳(diflunisal)、吡羅昔康(piroxicam)、吲哚美辛(indomethacin)、依託度酸(etodolac)、非諾洛芬鈣(fenoprofen calcium)、酮洛芬(ketoprofen)、萘丁美酮鈉(sodium nabumetone)、柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine)、托美汀鈉(tolmetin sodium)及羥氯喹。NSAID之實例亦包括COX-2特異性抑制劑，諸如塞內昔布(celecoxib)、伐地昔布(valdecoxib)、盧米羅可(lumiracoxib)及/或依託昔布(etoricoxib)。
在一些實施例中，抗發炎劑為水楊酸酯。水楊酸酯包括(但不限於)乙醯水楊酸或阿司匹靈(aspirin)、水楊酸鈉及膽鹼及水楊酸鎂。
抗發炎劑亦可為皮質類固醇。舉例而言，皮質類固醇可為皮質酮、地塞米松(dexamethasone)、甲潑尼龍(methylprednisolone)、潑尼龍(prednisolone)、潑尼龍磷酸鈉或潑尼松(prednisone)。
在額外實施例中，抗發炎劑為金化合物，諸如硫代蘋果酸金鈉或金諾芬(auranofin)。
本發明亦包括抗發炎劑為代謝抑制劑的實施例，諸如二氫葉酸還原酶抑制劑，諸如甲胺喋呤；或二氫乳清酸去氫酶抑制劑，諸如來氟米特(leflunomide)。
本發明之其他實施例係關於組合，其中至少一種抗發炎劑為抗C5單株抗體(諸如艾庫組單抗(eculizumab)或培克珠單抗(pexelizumab))、TNF拮抗劑，諸如依那西普(entanercept)或英利昔單抗(infliximab)，其為抗TNFα單株抗體。
本發明之其他實施例係關於組合，其中至少一種活性劑為免疫抑制劑，諸如選自以下之免疫抑制化合物：甲胺喋呤、來氟米特、環孢靈(cyclosporine)、他克莫司(tacrolimus)、硫唑嘌呤(azathioprine)及黴酚酸嗎啉乙酯(mycophenolate mofetil)。
表現BTK之B細胞及B細胞前驅物已涉及於B細胞惡性疾病之病理學中，包括(但不限於)B細胞淋巴瘤、淋巴瘤(包括霍奇金氏淋巴瘤及非霍奇金氏淋巴瘤)、毛狀細胞淋巴瘤、多發性骨髓瘤、慢性及急性骨髓性白血病以及慢性及急性淋巴球性白血病。
已顯示BTK為B系淋巴樣細胞中Fas/APO-1(CD-95)死亡誘導信號傳導複合物(DISC)的抑制劑。白血病/淋巴瘤細胞之命運可能在於由DISC活化之卡斯蛋白酶(caspase)的反向促凋亡作用與涉及BTK及/或其受質之上游抗細胞凋亡調控機制之間的平衡(Vassilev等人，J.Biol.Chem.1998,274,1646-1656)。
亦已發現BTK抑制劑適用作化學增敏劑，且因此適用於與其他化學治療劑(尤其誘導細胞凋亡之藥物)組合。可與化學增敏BTK抑制劑組合使用之其他化學治療劑的實例包括I型拓撲異構酶抑制劑(喜樹鹼或拓朴替康(topotecan))、II型拓撲異構酶抑制劑(例如道諾黴素(daunomycin)及依託泊苷(etoposide))、烷基化劑(例如環磷醯胺、美法侖(melphalan)及BCNU)、微管蛋白定向劑(例如紫杉醇(taxol)及長春鹼(vinblastine))，及生物製劑(例如抗體，諸如抗CD20抗體、IDEC 8、免疫毒素及細胞激素)。
Btk活性亦與由染色體9及22之部分之移位引起的表現bcr-abl融合 基因之一些白血病有關。慢性骨髓性白血病中通常觀測到此異常。Btk經bcr-abl激酶構成磷酸化，該激酶起始阻止bcr-abl細胞中之細胞凋亡的下游存活信號。(N.Feldhahn等人，J.Exp.Med.2005 201(11)：1837-1852)。
對於在療法中使用，儘管式(I)化合物以及其鹽、溶劑合物及生理性官能衍生物可能可以化工原料形式投與，但活性成分可能呈醫藥組合物形式。因此，本發明進一步提供一種醫藥組合物，其包含式(I)化合物及其鹽、溶劑合物及生理性官能衍生物及一或多種醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑。式(I)化合物及其鹽、溶劑合物及生理性官能衍生物如上所述。載劑、稀釋劑或賦形劑必須在與調配物之其他成分相容的意義上是可接受的且對其接受者無害。根據本發明之另一態樣，亦提供一種製備醫藥組合物之方法，其包括混合式(I)化合物或其鹽、溶劑合物及生理性官能衍生物與一或多種醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑。
本發明之醫藥組合物可以每單位劑量含有預定量之活性成分的單位劑型存在。視所治療之病狀、投與途徑及患者之年齡、體重及病狀而定，此類單位可含有例如5μg至1g，較佳1mg至700mg，更佳5mg至100mg式(I)化合物。因此，該等單位劑量可每天投與一次以上。較佳單位劑量組合物為含有如上文所述之每日劑量或子劑量(每天投藥一次以上)或其適當分數之活性成分的彼等組合物。此外，該等醫藥組合物可藉由藥劑學技術中熟知之任何方法製備。
本發明之醫藥組合物可用於藉由適當途徑投與，例如藉由口服(包括經頰或舌下)、直腸、表面、吸入、經鼻、經眼、舌下、皮下、局部或非經腸(包括靜脈內及肌肉內)途徑及其類似途徑，均為供投與之單位劑型。該等組合物可藉由藥劑學技術中已知之任何方法製備，例如藉由使活性成分與載劑或賦形劑結合。劑型包括錠劑、糖衣錠、 分散液、懸浮液、溶液、膠囊、乳膏、軟膏、氣霧劑及其類似劑型。
在另一實施例中，本發明提供適於藉由口服途徑投與治療例如類風濕性關節炎的醫藥組合物。
在另一實施例中，本發明提供適於藉由經鼻途徑投與治療例如過敏性鼻炎的醫藥組合物。
在另一實施例中，本發明提供適於藉由吸入途徑投與治療例如哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)或急性呼吸窘迫症候群(ARDS)的醫藥組合物。
在另一實施例中，本發明提供一種適於藉由經眼途徑投與治療眼睛疾病(例如結膜炎)之醫藥組合物。
在另一實施例中，本發明提供一種適於藉由非經腸(包括靜脈內)途徑投與治療例如癌症之醫藥組合物。
對於非經腸投與，本發明之醫藥組合物可存在於單位劑量或多劑量容器中(例如預定量之注射液，例如在密封小瓶或安瓿中)，且亦可在冷凍乾燥(凍乾)條件中儲存，僅需在使用前添加無菌液體載劑(例如水)。
與該等醫藥學上可接受之助劑(例如標準參考文獻Gennaro,A.R.等人，Remington：The Science and Practice of Pharmacy(第20版，Lippincott Williams & Wilkins,2000，尤其參看第5部分：Pharmaceutical Manufacturing)中所述)混合，活性劑可壓縮成固體劑量單位(諸如藥丸、錠劑)或加工成膠囊或栓劑。藉助於醫藥學上可接受之液體，活性劑可呈溶液、懸浮液、乳液形式以液體組合物(例如注射製劑)形式或以噴霧(例如鼻噴霧)形式施用。
為了製備固體劑量單位，預期使用習知添加劑，諸如填充劑、著色劑、聚合黏合劑及其類似物。一般而言，可使用不干擾活性化合物之功能的任何醫藥學上可接受之添加劑。可與本發明活性劑一起以 固體組合物形式投與的適合載劑包括乳糖、澱粉、纖維素衍生物及其類似物或其混合物，其以適合量使用。對於非經腸投與，可使用含有醫藥學上可接受之分散劑及/或濕潤劑(諸如丙二醇或丁二醇)的水性懸浮液、等張生理食鹽水溶液及無菌可注射溶液。
適於口服之本發明醫藥組合物可以離散單位形式存在，諸如膠囊或錠劑；粉末或顆粒；於水性或非水性液體中之溶液或懸浮液；可食用發泡體或發泡劑；或水包油液體乳液或油包水液體乳液。
舉例而言，為了以錠劑或膠囊形式口服，活性藥物組分可與醫藥學上可接受之口服無毒惰性載劑(諸如乙醇、甘油、水及其類似物)組合。藉由將化合物碾碎成適合精細尺寸，且與類似碾碎之醫藥載劑(諸如可食用碳水化合物，例如澱粉或甘露糖醇)混合來製備粉末。亦可存在調味劑、防腐劑、分散劑及著色劑。
藉由如上文所述製備粉末混合物，且填充已形成之明膠外殼來製備膠囊。可在填充操作之前向粉末混合物中添加諸如膠態二氧化矽、滑石、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或固態聚乙二醇之滑動劑及潤滑劑。亦可添加諸如瓊脂-瓊脂、碳酸鈣或碳酸鈉之崩解劑或增溶劑以改良攝入膠囊時的藥物可用性。
此外，若需要或必要，亦可向混合物中併入適合黏合劑、潤滑劑、崩解劑及著色劑。適合黏合劑包括澱粉、明膠、天然糖(諸如葡萄糖或β-乳糖)、玉米甜味劑、天然及合成膠狀物(諸如阿拉伯膠(acacia)、黃蓍或海藻酸鈉)、羧甲基纖維素、聚乙二醇、蠟及其類似物。用於此等劑型之潤滑劑包括油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉及其類似物。崩解劑包括(但不限於)澱粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土、三仙膠(xanthan gum)及其類似物。例如藉由製備粉末混合物，粒化或擊壓，添加潤滑劑及崩解劑，且壓成錠劑來調配錠劑。藉由將適當碾碎之化合物與如上文所述之稀釋劑或基 劑，及視情況與黏合劑(諸如羧甲基纖維素、海藻酸鹽、明膠或聚乙烯吡咯啶酮)、溶液延遲劑(諸如石蠟)、再吸收促進劑(諸如四級鹽)及/或吸收劑(諸如膨潤土、高嶺土或磷酸二鈣)混合，製備粉末混合物。可藉由用黏合劑(諸如糖漿、澱粉糊、阿卡迪亞黏液(acadia mucilage)或纖維素材料或聚合材料之溶液)潤濕，且強制其通過篩網來粒化粉末混合物。作為粒化之替代方法，可使粉末混合物通過壓錠機，且結果為不完全成形之擊壓物碎成顆粒。藉助於添加硬脂酸、硬脂酸鹽、滑石或礦物油，可潤滑該等顆粒以防止其黏附於錠劑成型模上。接著將經潤滑之混合物壓縮成錠劑。本發明化合物亦可與自由流動之惰性載劑組合且未經粒化或擊壓步驟直接壓縮成錠劑。可提供透明或不透明保護塗層，該塗層由密封蟲膠塗層、糖或聚合材料塗層及拋光蠟塗層所組成。可向此等塗層中添加染料來區別不同單位劑量。
諸如溶液、糖漿及酏劑之口服液可製備成單位劑型，使得既定量含有預定量之化合物。可藉由將化合物溶解於經適當調味之水溶液中來製備糖漿，而酏劑藉由使用無毒醇類媒劑製備。可藉由將化合物分散於無毒媒劑中來調配懸浮液。亦可添加增溶劑及乳化劑(諸如乙氧基化異硬脂醇及聚氧化乙烯山梨糖醇醚)、防腐劑、風味添加劑(諸如薄荷油或天然甜味劑或糖精或其他人工甜味劑)及其類似物。
若適當，則用於口服之劑量單位組合物可經微膠囊化。亦可例如藉由將顆粒材料塗佈或包埋入聚合物、蠟或其類似物中來製備調配物，以延長或持續釋放。
式(I)化合物及其鹽、溶劑合物及生理性官能衍生物亦可以脂質體傳遞系統(諸如單層小微脂粒、單層大微脂粒及多層微脂粒)之形式投與。可自諸如膽固醇、硬脂胺或磷脂醯膽鹼之多種磷脂形成脂質體。
式(I)化合物及其鹽、溶劑合物及生理性官能衍生物亦可藉由使 用單株抗體作為個別載劑(上面偶合化合物分子)來傳遞。化合物亦可與用作可靶向之藥物載劑之可溶性聚合物偶合。該等聚合物可包括經軟脂醯基殘基取代之聚乙烯吡咯啶酮、哌喃共聚物、聚羥丙基甲基丙烯醯胺-酚、聚羥乙基天冬胺醯基醯胺酚或聚氧化乙烯聚離胺酸。此外，化合物可與一類適用於實現藥物控制釋放之生物可降解聚合物偶合，例如聚乳酸、聚(ε-己內酯)、聚羥基丁酸、聚原酸酯、聚縮醛、聚二氫哌喃、聚氰基丙烯酸酯及水凝膠之交聯或兩性嵌段共聚物。
用於吸入投與之劑型宜調配成氣霧劑或乾粉。
對於適於及/或適用於吸入投與之組合物，式(I)化合物或其鹽較佳為粒徑減小型，且更佳藉由微粉化獲得或可獲得尺寸減小型。尺寸減小(例如微粉化)化合物或鹽或溶劑合物的較佳粒徑由約0.5至約10μm(例如使用雷射繞射量測)之D50值定義。
例如供吸入投與之氣霧劑調配物可包含活性物質於醫藥學上可接受之水性或非水性溶劑中之溶液或精細懸浮液。氣霧劑調配物可以單一劑量或多劑量形式以無菌形式存在於密封容器中，其可採用濾筒或再填充物形式以用於霧化裝置或吸入器。或者，密封容器可為整體分配裝置，諸如欲容器之內容物排空時就拋棄的單劑量經鼻吸入器或裝配有計量閥之氣霧劑分配器(定劑量吸入器)。
當該劑型包含氣霧劑分配器時，該分配器較佳含有在壓力下的適合推進劑，諸如壓縮空氣、二氧化碳或有機推進劑(諸如氫氟碳(HFC))。適合HFC推進劑包括1,1,1,2,3,3,3-七氟丙烷及1,1,1,2-四氟乙烷。氣霧劑劑型亦可採用泵送噴霧器形式。加壓氣霧劑可含有活性化合物之溶液或懸浮液。此可能需要併入額外賦形劑(例如共溶劑及/或界面活性劑)來改良懸浮液調配物之分散特徵及均勻性。溶液調配物亦可能需要添加諸如乙醇之共溶劑。亦可併入其他賦形劑改質劑來改良例如調配物之穩定性及/或口味及/或細粒質量特徵(量及/或外形)。
對於適於及/或適用於吸入投與之醫藥組合物，醫藥組合物較佳為可吸入型乾粉組合物。此類組合物可包含粉末基劑，諸如乳糖、葡萄糖、海藻糖、甘露糖醇或澱粉；式(I)化合物或其鹽或溶劑合物(較佳粒徑減小型，例如微粉化型)；及視情況存在之效能改質劑，諸如L-白胺酸或另一胺基酸，及/或硬脂酸之金屬鹽，諸如硬脂酸鎂或硬脂酸鈣。可吸入型乾粉組合物較佳包含乳糖與式(I)化合物或其鹽之乾粉摻合物。乳糖較佳為例如單水合乳糖之乳糖水合物及/或較佳為吸入級及/或精細級乳糖。乳糖之粒徑較佳由90%或90%以上乳糖顆粒(以重量計或以體積計)直徑小於1000μm(例如10-1000μm，例如30-1000μm)，及/或50%或50%以上乳糖顆粒直徑小於500μm(例如10-500μm)來界定。乳糖之粒徑更佳由90%或90%以上乳糖顆粒直徑小於300μm(例如10-300μm，例如50-300μm)，及/或50%或50%以上乳糖顆粒直徑小於100μm來界定。視情況而言，乳糖之粒徑由90%或90%以上乳糖顆粒直徑小於100-200μm，及/或50%或50%以上乳糖顆粒直徑小於40-70μm來界定。較佳約3%至約30%(例如約10%)顆粒(以重量計或以體積計)的直徑小於50μm或小於20μm。例如(但不限於)適合吸入級乳糖為E9334乳糖(10%精細度)(Borculo Domo Ingredients,Hanzeplein 25,8017 J D Zwolle,Netherlands)。
尤其對於可吸入型乾粉組合物，可視情況將吸入投與之醫藥組合物併入複數個密封給藥容器(例如含有乾粉組合物)中，其以帶或條形式縱向安裝於適合吸入裝置內部。容器在需要時可破裂或剝離開且例如乾粉組合物之劑量可藉由吸入經裝置(諸如DISKUS®裝置(GlaxoSmithKline))投與。其他乾粉吸入器為一般技術者所熟知，且許多該等裝置市場有售，代表性裝置包括Aerolizer®(Novartis)、AirmaxTM(IVAX)、ClickHaler®(Innovata Biomed)、Diskhaler®(GlaxoSmithKline)、Accuhaler(GlaxoSmithKline)、Easyhaler®(Orion Pharma)、EclipseTM(Aventis)、FlowCaps®(Hovione)、Handihaler®(Boehringer Ingelheim)、Pulvinal®(Chiesi)、Rotahaler®(GlaxoSmithKline)、SkyeHalerTM或CertihalerTM(SkyePharma)、Twisthaler(Schering-Plough)、Turbuhaler®(AstraZeneca)、Ultrahaler®(Aventis)及其類似物。
可使用適於眼用之賦形劑將經眼投與之劑型調配成溶液或懸浮液。
經鼻投與之劑型宜調配為氣霧劑、溶液、滴劑、凝膠或乾粉。
適於藉由吸入投與之醫藥組合物包括可藉助於多種類型之定量加壓氣化噴霧劑、噴霧器或吹入器產生的精細微粒粉劑或霧劑。
對於適於及/或適用於經鼻投與之醫藥組合物，式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物可調配成用於自液體分配器傳遞之液體調配物。該等液體分配器可具有例如分配噴嘴或分配孔口，一旦將使用者施加之壓力施加至液體分配器之泵送機構後即可經該分配噴嘴或分配孔口分配定劑量之液體調配物。該等液體分配器一般具有多個定劑量之液體調配物的儲液器，一旦連續泵送致動後即可分配該等劑量。該分配噴嘴或孔口可經組態以便插入使用者鼻孔內，用以將液體調配物噴霧分配於鼻腔內。上述類型之液體分配器描述且說明於WO-A-2005/044354中，該案之全部內容以引入的方式併入本文中。分配器具有容納流體排出裝置之外殼，該流體排出裝置具有安裝於含有液體調配物之容器上的壓縮泵。該外殼具有至少一個手指可操作側板，其可相對於外殼向內活動以便用凸輪帶動外殼中之容器向上以使泵擠壓且泵送定劑量之調配物脫離泵桿穿過外殼之經鼻噴嘴。尤其較佳液體分配器為WO-A-2005/044354之圖30-圖40中說明之一般類型。
本發明進一步包括一種具有如上文所述之式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物，其與適於該組合物之封裝材料組合，該 封裝材料包括如上文所述使用組合物的使用說明。
以下為本發明化合物之代表性醫藥劑型的實例：
應瞭解，當本發明化合物與其他通常藉由吸入、靜脈內、經口或鼻內途徑投與之治療劑組合投與時，所得醫藥組合物可藉由相同途徑投與。
應理解，除上文特定提及之成分外，該等組合物亦可包括與所論述調配物類型有關的技術中習用之其他藥劑，例如適於口服之調配物可包括調味劑。
本發明化合物之治療有效量將視多種因素而定，包括例如動物之年齡及體重、需要治療之明確病狀及其嚴重程度、具有式I之特定化合物、調配物性質及投與途徑，且最終將在助理醫師或獸醫的判斷內。然而，用於治療與不當Btk活性相關之疾病或病狀的式(I)化合物之有效量一般將在每天每公斤接受者(哺乳動物)體重5μg至100mg之範圍內，且更一般在每天每公斤體重5μg至10mg之範圍內。此量可以每天單一劑量或更一般以每天若干次(諸如兩次、三次、四次、五次或六次)子劑量而使總每日劑量相同的形式提供。可以式(I)化合物本身之有效量的比例確定其鹽或溶劑合物之有效量。
一般非經腸投與需要的劑量低於更取決於吸收的其他投與方法。然而，用於人類之劑量較佳含有每公斤體重0.0001-25mg式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽。所要劑量可呈一個劑量或全天以適當間隔投與之多個子劑量，或在女性接受者之情況下，呈整個月經週期以適當每日間隔投與之劑量。女性與男性接受者之間的劑量以及投藥方案可不同。
本發明亦關於一種醫藥組合物，其包含與醫藥學上可接受之助 劑及視情況存在的其他治療劑混雜的式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽。就與組合物之其他成分相容且對其接受者無害的意義而言，助劑必須「可接受」。
本發明進一步包括一種醫藥組合物，其包含至少一種式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽與至少一種其他治療活性劑的組合。
本發明化合物及其鹽及溶劑合物，及其生理性官能衍生物可單獨採用或與用於治療與不當Btk活性相關的Btk介導之疾病及病狀之其他治療劑組合採用。因此，本發明之組合療法包含投與至少一種式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物或其生理性官能衍生物，及使用至少一種其他醫藥活性劑。式(I)化合物及其他醫藥活性劑可一起投與或單獨投與，且當單獨投與時，其可同時出現或以任何順序依序出現。將選擇式(I)化合物及其他醫藥活性劑的量及相對投與時序來實現所要組合治療作用。
為了治療發炎疾病、類風濕性關節炎、牛皮癬、發炎性腸病、COPD、哮喘及過敏性鼻炎，式I化合物可與一或多種其他活性劑組合，諸如：(1)TNF-α抑制劑，諸如英利昔單抗(Remicade®)、依那西普(Enbrel®)、阿達木單抗(adalimumab)(Humira®)、賽妥珠單抗(certolizumab pegol)(Cimzia®)及高利單抗(golimumab)(Simponi®)；(2)非選擇性COX-I/COX-2抑制劑(諸如吡羅昔康、雙氯芬酸、丙酸(諸如萘普生、氟比洛芬、非諾洛芬、酮洛芬及布洛芬)、芬那酯(fenamate)(諸如甲芬那酸(mefenamic acid)、吲哚美辛、舒林酸、依託度酸(etodolac)、阿紮丙宗(azapropazone)、吡唑啉酮(諸如苯基丁氮酮(phenylbutazone))、水楊酸酯(諸如阿司匹靈))；(3)COX-2抑制劑(諸如美洛昔康(meloxicam)、塞內考昔(celecoxib)、羅非考昔(rofecoxib)、伐地考昔(valdecoxib)及依託考昔(etoricoxib))；(4)用於治療類風濕性關節炎之其他藥劑，包括甲胺喋呤、來氟米特 (leflunomide)、柳氮磺胺吡啶、咪唑硫嘌呤、環孢靈、他克莫司(tacrolimus)、青黴胺(penicillamine)、布西拉明(bucillamine)、阿克他利(actarit)、米唑里賓(mizoribine)、氯苯紮利(lobenzarit)、環索奈德(ciclesonide)、羥氯喹、d-青黴素、金硫蘋果酸鹽、金諾芬或非經腸或口服金、環磷醯胺、里穆斯塔-B(Lymphostat-B)、BAFF/APRIL抑制劑及CTLA-4-Ig或其模擬物；(5)白三烯生物合成抑制劑、5-脂肪加氧酶(5-LO)抑制劑或5-脂肪加氧酶活化蛋白(FLAP)拮抗劑，諸如齊留通(zileuton)；(6)LTD4受體拮抗劑，諸如紮魯司特(zafirlukast)、孟魯司特(montelukast)及普侖司特(pranlukast)；(7)PDE4抑制劑，諸如羅氟司特(roflumilast)、西洛司特(cilomilast)、AWD-12-281(Elbion)及PD-168787(Pfizer)；(8)抗組織胺劑H1受體拮抗劑，諸如西替利嗪(cetirizine)、左西替利嗪(levocetirizine)、洛拉他定(loratadine)、地氯雷他定(desloratadine)、非索非那定(fexofenadine)、阿司咪唑(astemizole)、氮拉斯汀(azelastine)、左卡巴司汀(levocabastine)、奧洛他定(olopatidine)、美沙吡林(methapyrilene)及氯芬尼拉明(chlorpheniramine)；(9)α1-及α2-腎上腺素促效劑血管收縮擬交感神經劑，諸如環己丙甲胺、苯腎上腺素、苯丙醇胺、假麻黃素、萘唑啉鹽酸鹽、羥間唑啉鹽酸鹽、四氫唑啉鹽酸鹽、賽洛唑啉鹽酸鹽(xylometazoline hydrochloride)及乙基去甲腎上腺素鹽酸鹽；(10)抗膽鹼激導性劑，諸如異丙托溴銨(ipratropium bromide)、噻托溴銨(tiotropium bromide)、氧托溴銨(oxitropium bromide)、阿地溴銨(aclindinium bromide)、胃長寧(glycopyrrolate)、(R,R)-胃長寧、哌侖西平(pirenzepine)及替侖西平(telenzepine)；(11)β-腎上腺素受體促效劑，諸如間羥異丙腎上腺素、異丙基腎上腺素、異丙腎上腺素、沙丁胺醇(albuterol)、福莫特羅(formoterol)(尤其反丁烯二酸鹽)、沙美特羅(salmeterol)(尤其羥萘甲酸鹽)、特布他林(terbutaline)、奧西那林 (orciprenaline)、甲磺酸比托特羅(bitolterol mesylate)、非諾特羅(fenoterol)及吡布特羅(pirbuterol)，或甲基黃嘌呤，包括茶鹼及胺茶鹼、色甘酸鈉；(12)I型胰島素樣生長因子(IGF-1)模擬物；(13)糖皮質類固醇，尤其全身副作用減少的吸入糖皮質類固醇，諸如潑尼松、潑尼龍、氟尼縮松(flunisolide)、曲安奈德(triamcinolone acetonide)、倍氯美松雙丙酸酯(beclomethasone dipropionate)、布地奈德(budesonide)、丙酸氟替卡松(fluticasone propionate)、環索奈德(ciclesonide)及糠酸莫米他松(mometasone furoate)；(14)激酶抑制劑，諸如傑納斯激酶(Janus Kinases)(JAK 1及/或JAK2及/或JAK 3及/或TYK2)抑制劑、p38 MAPK及IKK2；(15)B細胞靶向生物製劑，諸如利妥昔單抗(Rituxan®)；(16)選擇性共同刺激調節劑，諸如阿巴西普(abatacept)(Orencia)；(17)介白素抑制劑，諸如IL-1抑制劑阿那白滯素(anakinra)(Kineret)及IL-6抑制劑塔西單抗(tocilizumab)(Actemra)。
本發明亦提供「三重組合」療法，其包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽以及β2-腎上腺素受體促效劑及抗發炎皮質類固醇。此組合較佳用於治療及/或預防哮喘、COPD或過敏性鼻炎。β2-腎上腺素受體促效劑及/或抗發炎皮質類固醇可如上文所述及/或如WO 03/030939 A1中所述。此類「三重」組合之代表性實例為式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽與組分Advair®(昔萘酸沙美特羅(salmeterol xinafoate)及丙酸氟替卡松)、Symbicort®(布地奈德及福莫特羅反丁烯二酸酯)或Dulera®(糠酸莫米他松及福莫特羅)之組合。
式I化合物可與一或多種抗癌劑組合來治療癌症。該等藥劑之實例可見於Cancer Principles and Practice of Oncology,V.T.Devita及S.Hellman(編輯)，第6版(2001年2月15日)，Lippincott Williams & Wilkins Publishers。基於藥物及所涉及之癌症的特定特徵，一般技術者將能夠辨別適用之藥劑組合。該等抗癌劑包括(但不限於)以下：(1) 雌激素受體調節劑，諸如乙茋酚(diethylstibestral)、他莫昔芬(tamoxifen)、雷諾昔芬(raloxifene)、艾多昔芬(idoxifene)、LY353381、LY117081、托瑞米芬(toremifene)、氟羥甲基睪酮(fluoxymestero)及SH646；(2)其他激素劑，包括芳香酶抑制劑(例如胺魯米特(aminoglutethimide)、四唑、阿那曲唑(anastrozole)、來曲唑(letrozole)及西美斯坦(exemestane))、促黃體素釋放激素(LHRH)類似物、酮康唑(ketoconazole)、乙酸戈舍瑞林(goserelin acetate)、亮丙瑞林(leuprolide)、乙酸甲地孕酮(megestrol acetate)及美服培酮(mifepristone)；(3)雄激素受體調節劑，諸如非那雄安(finasteride)及其他5α-還原酶抑制劑、尼魯米特(nilutamide)、氟他胺(flutamide)、比卡魯胺(bicalutamide)、里拉洛唑(liarozole)及乙酸阿比特龍(abiraterone acetate)；(4)類視黃素受體調節劑，諸如貝瑟羅汀(bexarotene)、維甲酸(tretinoin)、13-順-視黃酸、9-順-視黃酸、α-二氟甲基鳥胺酸、ILX23-7553、反-N-(4'-羥苯基)瑞汀醯胺及N-4-羧基苯基瑞汀醯胺；(5)抗增殖劑，諸如反義RNA及DNA寡核苷酸，諸如G3139、ODN698、RVASKRAS、GEM231及INX3001，及抗代謝物，諸如依諾他濱(enocitabine)、卡莫氟(carmofur)、替加氟(tegafur)、噴司他汀(pentostatin)、去氧氟尿苷(doxifluridine)、三甲曲沙(trimetrexate)、氟達拉濱(fludarabine)、卡培他濱(capecitabine)、加洛他濱(galocitabine)、阿糖胞苷十八烷基磷酸鹽(cytarabine ocfosfate)、水合福斯他賓鈉(fosteabine sodium hydrate)、雷替曲塞(raltitrexed)、帕替希德(paltitrexid)、乙嘧替氟(emitefur)、噻唑呋林(tiazofurin)、地西他賓(decitabine)、諾拉曲塞(nolatrexed)、培美曲塞(pemetrexed)、奈拉賓(nelzarabine)、2'-去氧-2'-亞甲基胞苷、2'-氟亞甲基-2'-去氧胞苷、N6-[4-去氧-4-[N2-[2(E),4(E)-十四碳二烯醯基]甘胺醯胺基]-L-甘油-B-L-甘露-庚哌喃糖基]腺嘌呤、阿匹立定(aplidine)、依特那斯汀 (ecteinascidin)、曲沙他濱(troxacitabine)、胺基喋呤(aminopterin)、5-氟脲嘧啶(5-flurouracil)、氟尿苷(floxuridine)、甲胺喋呤、亞葉酸(leucovarin)、羥基脲、硫鳥嘌呤(thioguanine)(6-TG)、巰嘌呤(mercaptopurine)(6-MP)、阿糖胞苷(cytarabine)、噴司他汀、磷酸氟達拉濱(fludarabine phosphate)、克拉屈濱(cladribine)(2-CDA)、天冬醯胺酶、吉姆他濱(gemcitabine)、阿拉諾新(alanosine)、苦馬豆素(swainsonine)、洛美曲索(lometrexol)、右雷佐生(dexrazoxane)、甲硫胺酸酶(methioninase)及3-胺基吡啶-2-甲醛硫縮胺基脲；(6)異戊二烯基-蛋白質轉移酶抑制劑，包括法呢基-蛋白質轉移酶(farnesyl-protein transferase；FPTase)、I型香葉草基香葉草基-蛋白質轉移酶(geranylgeranyl-protein transferase type I；GGPTase-I)及II型香葉草基香葉草基-蛋白質轉移酶(GGPTase-II，亦稱為Rab GGPTase)；(7)HMG-CoA還原酶抑制劑，諸如洛伐他汀(lovastatin)、辛伐他汀(simvastatin)、普伐他汀(pravastatin)、阿托伐他汀(atorvastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)及羅素他汀(rosuvastatin)；(8)血管生成抑制劑，諸如酪胺酸激酶受體Flt-1(VEGFR1)及Flk-1/KDR(VEGFR2)之抑制劑、源自表皮之生長因子抑制劑、源自纖維母細胞之生長因子抑制劑或源自血小板之生長因子抑制劑、MMP(基質金屬蛋白酶)抑制劑、整合素阻斷劑、干擾素-α、介白素-12、紅血球生成素(依泊亭-α(epoietin-α))、粒細胞-CSF(非格司亭(filgrastin))、粒細胞、巨噬細胞-CSF(沙格司亭(sargramostim))、聚硫酸戊聚糖、環加氧酶抑制劑、類固醇抗發炎藥、羧胺三唑、考布他汀A-4(combretastatin A-4)、角鯊胺(squalamine)、6-O-氯乙醯基-羰基)-煙黴醇、薩立多胺(thalidomide)、血管抑制素、肌鈣蛋白-1(troponin-1)、血管收縮素II拮抗劑、肝素、羧肽酶U抑制劑及針對VEGF之抗體、內皮抑制素、烏克瑞恩(ukrain)、豹蛙酶(ranpirnase)、IM862、乙醯基地拉林 (acetyldinanaline)、5-胺基-1-[[3,5-二氯-4-(4-氯苯甲醯基)苯基]甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲醯胺、CM101、角鯊胺、考布他汀、RPI4610、NX31838、硫酸化磷酸甘露五糖及3-[(2,4-二甲基吡咯-5-基)亞甲基]-2-吲哚啉酮(SU5416)；(9)PPAR-γ促效劑、PPAR-δ促效劑、噻唑啶二酮(諸如DRF2725、CS-011、曲格列酮(troglitazone)、羅格列酮(rosiglitazone)及吡格列酮(pioglitazone))、非諾貝特(fenofibrate)、吉非羅齊(gemfibrozil)、安妥明(clofibrate)、GW2570、SB219994、AR-H039242、JTT-501、MCC-555、GW2331、GW409544、NN2344、KRP297、NP0110、DRF4158、NN622、GI262570、PNU182716、DRF552926、2-[(5,7-二丙基-3-三氟甲基-1,2-苯并異噁唑-6-基)氧基]-2-甲基丙酸(USSN 09/782,856中所揭示)及(2R)-7-(3-(2-氯-4-(4-氟苯氧基)苯氧基)丙氧基)-2-乙基烷-2-甲酸(USSN 60/235,708及60/244,697中所揭示)；(9)具有固有多耐藥性之抑制劑，包括p-醣蛋白(P-gp)抑制劑，諸如LY335979、XR9576、OC144-093、R101922、VX853及PSC833(伐司撲達(valspodar))；(10)細胞增殖及存活信號傳導抑制劑，諸如EGFR抑制劑(例如吉非替尼(gefitinib)及埃羅替尼(erlotinib))、ERB-2抑制劑(例如曲妥珠單抗(trastuzumab))、IGF1R抑制劑(諸如MK-0646(達洛圖單抗(dalotuzumab)))、CD20抑制劑(利妥昔單抗)、細胞激素受體抑制劑、MET抑制劑、PI3K家族激酶抑制劑(例如LY294002)、絲胺酸/蘇胺酸激酶(包括(但不限於)Akt抑制劑，諸如WO 03/086404、WO 03/086403、WO 03/086394、WO 03/086279、WO 02/083675、WO 02/083139、WO 02/083140及WO 02/083138中所描述)、Raf激酶抑制劑(例如BAY-43-9006)、MEK抑制劑(例如CI-1040及PD-098059)及mTOR抑制劑(例如Wyeth CCI-779及Ariad AP23573)；(11)雙膦酸鹽，諸如依替膦酸鹽(etidronate)、帕米膦酸鹽(pamidronate)、阿侖膦酸鹽(alendronate)、利塞膦酸鹽(risedronate)、 唑來膦酸鹽(zoledronate)、伊班膦酸鹽(ibandronate)、因卡膦酸鹽(incadronate)或斯孟膦酸鹽(cimadronate)、氯屈膦酸鹽(clodronate)、EB-1053、米諾膦酸鹽(minodronate)、奈立膦酸鹽(neridronate)、吡利膦酸鹽(piridronate)及替魯膦酸鹽(tiludronate)；(12)γ-分泌酶抑制劑；(13)干擾受體酪胺酸激酶(RTK)之藥劑，包括c-Kit、Eph、PDGF、Flt3及c-Met之抑制劑；(14)干擾細胞週期檢查點之藥劑，包括ATR、ATM、Chk1及Chk2激酶之抑制劑及cdk及cdc激酶抑制劑且由7-羥基斯他菌素(7-hydroxystaurosporin)、夫拉平度(flavopiridol)、CYC202(Cyclacel)及BMS-387032特定例示；(15)BTK抑制劑，諸如PCI32765、AVL-292及AVL-101；(16)PARP抑制劑，包括依尼帕瑞(iniparib)、歐拉帕瑞(olaparib)、AGO14699、ABT888及MK4827；(16)ERK抑制劑；(17)mTOR抑制劑，諸如西羅莫司(sirolimus)、瑞達莫司(ridaforolimus)、坦羅莫司(temsirolimus)、依維莫司(everolimus)；(18)細胞毒性劑/細胞生長抑制劑。
「細胞毒性劑/細胞生長抑制劑」係指主要藉由直接干擾細胞功能引起細胞死亡或抑制細胞增殖或抑制或干擾細胞有絲分裂之化合物，包括烷基化劑、腫瘤壞死因子、嵌入劑、低氧活化化合物、微管抑制劑/微管穩定劑、有絲分裂驅動蛋白抑制劑、組蛋白脫乙醯基酶抑制劑、涉及有絲分裂進程之激酶的抑制劑、抗代謝物、生物反應調節劑、激素/抗激素治療劑、造血生長因子、單株抗體目標治療劑、拓撲異構酶抑制劑、蛋白酶體抑制劑及泛素連接酶抑制劑。
細胞毒性劑之實例包括(但不限於)瑟耐夫(sertenef)、惡病質素(cachectin)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、環磷醯胺、異環磷醯胺(ifosfamide)、氮芥(mechlorethamine)、美法侖、尿嘧啶氮芥(uracil mustard)、噻替派(thiotepa)、白消安(busulfan)、卡莫司汀(carmustine)、洛莫司汀(lomustine)、鏈脲佐菌素(streptozocin)、他索 納明(tasonermin)、氯尼達明(lonidamine)、卡鉑(carboplatin)、六甲蜜胺(altretamine)、達卡巴嗪(dacarbazine)、丙卡巴肼(procarbazine)、潑尼氮芥(prednimustine)、二溴衛矛醇(dibromodulcitol)、雷莫司汀(ranimustine)、福莫司汀(fotemustine)、萘達鉑(nedaplatin)、草酸鉑(oxaliplatin)、替莫唑胺(temozolomide)、庚鉑(heptaplatin)、雌莫司汀(estramustine)、甲磺丙胺(improsulfan tosilate)、氯乙環磷醯胺(trofosfamide)、尼莫司汀(nimustine)、二溴螺氯銨(dibrospidium chloride)、嘌嘧替派(pumitepa)、洛鉑(lobaplatin)、沙鉑(satraplatin)、甲基絲裂黴素(profiromycin)、順鉑(cisplatin)、伊洛福芬(irofulven)、右異環磷醯胺(dexifosfamide)、順-胺二氯(2-甲基-吡啶)鉑、苯甲基鳥嘌呤、葡磷醯胺、GPX100、四氯化(反,反,反)-雙-mu-(己-1,6-二胺)-mu-[二胺-鉑(II)]雙[二胺(氯)鉑(II)]、二吖嗪啶基精胺、三氧化二砷、1-(11-十二烷基胺基-10-羥基十一烷基)-3,7-二甲基黃嘌呤、柔紅黴素(zorubicin)、小紅莓(doxorubicin)、道諾黴素(daunorubicin)、艾達黴素(idarubicin)、蒽二酮(anthracenedione)、博來黴素(bleomycin)、絲裂黴素C(mitomycin C)、更生黴素(dactinomycin)、普卡黴素(plicatomycin)、比生群(bisantrene)、米托蒽醌(mitoxantrone)、吡柔比星(pirarubicin)、吡萘非特(pinafide)、戊柔比星(valrubicin)、氨柔比星(amrubicin)、抗新普拉通(antineoplaston)、3'-去胺基-3'-N-嗎啉基-13-去氧基-10-羥基洋紅黴素(3'-deamino-3'-morpholino-13-deoxo-10-hydroxycarminomycin)、蒽環黴素(annamycin)、加柔比星(galarubicin)、依利萘法德(elinafide)、MEN10755及4-去甲氧基-3-去胺基-3-氮丙啶基-4-甲基磺醯基-道諾黴素(4-demethoxy-3-deamino-3-aziridinyl-4-methylsulphonyl-daunorubicin)。
低氧活化化合物之實例為替拉紮明(tirapazamine)。
蛋白酶體抑制劑之實例包括(但不限於)雷克塔西汀(lactacystin)及 硼替佐米(bortezomib)。
微管抑制劑/微管穩定劑之實例包括長春新鹼(vincristine)、長春鹼(vinblastine)、長春地辛(vindesine)、長春利定(vinzolidine)、長春瑞濱(vinorelbine)、硫酸長春地辛(vindesine sulfate)、3',4'-二去氫-4'-去氧-8'-降長春花鹼、鬼臼毒素(podophyllotoxin)(例如依託泊苷(VP-16)及替尼泊苷(teniposide)(VM-26))、太平洋紫杉醇(paclitaxel)、多烯紫杉醇(docetaxol)、根黴素(rhizoxin)、多拉士他汀(dolastatin)、羥乙基磺酸米伏布林(mivobulin isethionate)、奧瑞斯達汀(auristatin)、西馬多丁(cemadotin)、RPR109881、BMS184476、長春氟寧(vinflunine)、克瑞托欣(cryptophycin)、脫水長春鹼(anhydrovinblastine)、N,N-二甲基-L-纈胺醯基-L-纈胺醯基-N-甲基-L-纈胺醯基-L-脯胺醯基-L-脯胺酸-第三丁基醯胺、TDX258、艾普塞隆(epothilone)(參看例如美國專利第6,284,781號及第6,288,237號)及BMS188797。
拓撲異構酶抑制劑之一些實例為拓朴替康、海卡胺(hycaptamine)、伊立替康(irinotecan)、魯比替康(rubitecan)、6-乙氧基丙醯基-3',4'-O-外-苯亞甲基-教酒菌素(6-ethoxypropionyl-3',4'-O-exo-benzylidene-chartreusin)、勒托替康(lurtotecan)、7-[2-(N-異丙胺基)乙基]-(20S)喜樹鹼、BNP1350、BNPI1100、BN80915、BN80942、磷酸依託泊苷(etoposide phosphate)、替尼泊苷、索布佐生(sobuzoxane)、2'-二甲基胺基-2'-去氧-依託泊苷、GL331、N-[2-(二甲基胺基)乙基]-9-羥基-5,6-二甲基-6H-吡啶并[4,3-b]咔唑-1-甲醯胺、阿蘇克林(asulacrine)、2,3-(亞甲二氧基)-5-甲基-7-羥基-8-甲氧基苯并[c]-菲啶鎓、5-(3-胺基丙基胺基)-7,10-二羥基-2-(2-羥乙基胺基甲基)-6H-吡唑并[4,5,1-de]吖啶-6-酮、N-[1-[2-(二乙基胺基)乙基胺基]-7-甲氧基-9-側氧基-9H-噻-4-基甲基]甲醯胺、N-(2-(二甲基胺基)乙基)吖啶-4-甲 醯胺、6-[[2-(二甲基胺基)乙基]胺基]-3-羥基-7H-茚并[2,1-c]喹啉-7-酮及地美司鈉(dimesna)。
有絲分裂驅動蛋白抑制劑之實例包括(但不限於)KSP抑制劑、MKLP1抑制劑、CENP-E抑制劑、MCAK抑制劑、Kif14抑制劑、Mphosph1抑制劑及Rab6-KIFL抑制劑。
「組蛋白脫乙醯基酶抑制劑」之實例包括(但不限於)伏立諾他(vorinostat)、曲古抑菌素A(trichostatin A)、奧克拉汀(oxamflatin)、PXD101、MG98、丙戊酸及斯克太德(scriptaid)。
「涉及有絲分裂進程之激酶的抑制劑」包括(但不限於)極光激酶之抑制劑、Polo樣激酶之抑制劑(PLK；尤其是PLK-1之抑制劑)、bub-1之抑制劑及bub-R1之抑制劑。「極光激酶抑制劑」之實例為VX-680。
「抗增殖劑」包括反義RNA及DNA寡核苷酸，諸如G3139、ODN698、RVASKRAS、GEM231及INX3001，及抗代謝物，諸如依諾他濱、卡莫氟、替加氟、噴司他汀、去氧氟尿苷、三甲曲沙、氟達拉濱、卡培他濱、加洛他濱、阿糖胞苷十八烷基磷酸鹽、水合福斯他賓鈉、雷替曲塞、帕替希德、乙嘧替氟、噻唑呋林、地西他賓、諾拉曲塞、培美曲塞、奈拉賓、2'-去氧-2'-亞甲基胞苷、2'-氟亞甲基-2'-去氧胞苷、N6-[4-去氧-4-[N2-[2,4-十四碳二烯醯基]甘胺醯胺基]-L-甘油-B-L-甘露-庚哌喃糖基]腺嘌呤、阿匹立定、依特那斯汀、曲沙他濱、胺基喋呤、5-氟脲嘧啶、氟尿苷、甲胺喋呤、亞葉酸、羥基脲、硫鳥嘌呤(6-TG)、巰嘌呤(6-MP)、阿糖胞苷、噴司他汀、磷酸氟達拉濱、克拉屈濱(2-CDA)、天冬醯胺酶、吉姆他濱、阿拉諾新、苦馬豆素、洛美曲索、右雷佐生、甲硫胺酸酶及3-胺基吡啶-2-甲醛硫縮胺基脲。
可與式I化合物組合用於癌症療法之適合藥劑之非限制性實例包括(但不限於)阿巴瑞克(abarelix)；阿地介白素(aldesleukin)；阿侖單抗 (alemtuzumab)；亞利崔托寧(alitretinoin)；安樂普利諾(allopurinol)；六甲蜜胺；阿米福汀(amifostine)；阿那曲唑；三氧化二砷；天冬醯胺酶；阿紮胞苷(azacitidine)；苯達莫司汀(bendamustine)；貝伐單抗(bevacuzimab)；貝瑟羅汀(bexarotene)；博來黴素；硼替佐米；白消安；卡魯睪酮(calusterone)；卡培他濱；卡鉑；卡莫司汀；西妥昔單抗(cetuximab)；苯丁酸氮芥；順鉑；克拉屈濱；曲沙他濱；環磷醯胺；阿糖胞苷；達卡巴嗪；更生黴素；放線菌素D(actinomycin D)；達肝素(dalteparin)；達貝汀α(darbepoetin alfa)；達沙替尼(dasatinib)；道諾黴素；迪蓋瑞克(degarelix)；地尼介白素(denileukin diftitox)；右雷佐生；多西他賽(docetaxel)；小紅莓；丙酸屈他雄酮(dromostanolone propionate)；艾庫組單抗(eculizumab)；埃利奧特氏B溶液(Elliott's B Solution)；艾曲波帕(eltrombopag)；表柔比星(epirubicin)；艾伯汀α(epoetin α)；埃羅替尼；雌莫司汀；磷酸依託泊苷；依託泊苷；依維莫司；西美斯坦；非格司亭(filgrastim)；氟尿苷；氟達拉濱；氟尿嘧啶(fluorouracil)；氟維司群(fulvestrant)；吉非替尼；吉姆他濱；吉妥珠單抗奧唑米星(gemtuzumab ozogamicin)；乙酸戈舍瑞林；乙酸組胺瑞林(histrelin acetate)；羥基脲；替坦異貝莫單抗(ibritumomab tiuxetan)；艾達黴素；異環磷醯胺；甲磺酸伊馬替尼(imatinib mesylate)；干擾素α-2a；干擾素α-2b；伊立替康；伊沙匹隆(ixabepilone)；拉帕替尼(lapatinib)；來那度胺(lenalidomide)；來曲唑；甲醯四氫葉酸(leucovorin)；乙酸亮丙瑞林(leuprolide acetate)；左旋咪唑(levamisole)；洛莫司汀；氮芥(meclorethamine)；氮芥(nitrogen mustard)；乙酸甲地孕酮(megestrol acetate)；美法侖；L-PAM；巰嘌呤；美司鈉(mesna)；甲胺喋呤；甲氧沙林(methoxsalen)；絲裂黴素C；米托坦(mitotane)；米托蒽醌；苯丙酸諾龍(nandrolone phenpropionate)；奈拉濱；尼羅替尼(nilotinib)；諾非單抗 (Nofetumomab)；奧法圖單抗(ofatumumab)；歐普維欣(oprelvekin)；草酸鉑；太平洋紫杉醇；帕利夫明(palifermin)；帕米德諾(pamidronat)；帕尼單抗(panitumumab)；帕唑帕尼(pazopanib)；培加酶(pegademase)；培門冬酶(pegaspargase)；聚乙二醇化非格司亭(Pegfilgrastim)；培美曲塞二鈉(pemetrexed disodium)；噴司他汀；哌泊溴烷(pipobroman)；普樂沙福(plerixafor)；普卡黴素(plicamycin)；光神黴素(mithramycin)；卟吩姆鈉(porfimer sodium)；普拉曲沙(pralatrexate)；丙卡巴肼；奎納克林(quinacrine)；拉布立酶(Rasburicase)；鹽酸雷諾昔芬(raloxifene hydrochloride)；利妥昔單抗；羅米地辛(romidepsin)；羅米司亭(romiplostim)；沙格司亭；沙格司亭；沙鉑；索拉非尼(sorafenib)；鏈脲佐菌素；順丁烯二酸舒尼替尼(sunitinib maleate)；他莫昔芬；替莫唑胺；坦羅莫司；替尼泊苷；睪內酯(testolactone)；硫鳥嘌呤；噻替派；拓朴替康；托瑞米芬；托西莫單抗(tositumomab)；曲妥珠單抗；維甲酸；尿嘧啶氮芥；戊柔比星；長春鹼；長春新鹼；長春瑞濱；伏立諾他；及唑來膦酸鹽。
熟習此項技術者將顯而易知，適當時，其他治療成分可以鹽(例如鹼金屬鹽或胺鹽)或酸加成鹽，或前藥，或酯(例如低碳烷基酯)，或溶劑合物(例如水合物)形式使用以使治療成分之活性及/或穩定性及/或物理特徵(諸如溶解度)最佳。亦應明確，適當時，治療成分可以光學純形式使用。
上文所提及之組合宜以醫藥組合物形式供使用，且因此包含如上文定義之組合以及醫藥學上可接受之稀釋劑或載劑的醫藥組合物表示本發明之另一態樣。此等組合在呼吸疾病方面尤其受到關注且便利地適合經吸入或鼻內傳遞。
該等組合之個別化合物可以各別或組合醫藥組合物形式依序或同時投與。該等個別化合物較佳將以組合醫藥組合物形式同時投與。 熟習此項技術者將容易瞭解已知治療劑的適當劑量。
一般合成
可藉由有機化學技術中熟知的方法製備本發明之8-胺基-咪唑并[1,5-a]吡嗪、4-胺基-咪唑并[1,5-f][1,2,4]三嗪、4-胺基-吡唑并[3,4-d]嘧啶及4-胺基-吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪衍生物。參看例如J.March,『Advanced Organic Chemistry』第4版，John Wiley and Sons。此等合成工序期間，可能必需及/或需要保護所關注之任何分子上的敏感性或反應性基團。此藉助於習知保護基實現，諸如T.W.Greene及P.G.M.Wutts『Protective Groups in Organic Synthesis』第3版，John Wiley and Sons,1999中所述者。保護基視情況在隨後便利階段使用此項技術中熟知之方法移除。
需要時，視情況使用習知技術(包括(但不限於)過濾、蒸餾、結晶、層析及其類似方法)分離且純化反應產物。可視情況使用習知方式(包括物理常數及光譜資料)表徵該等材料。
R5、Rc、Rd、Re及Rf具有上文所定義之含義的式I之8-胺基-咪唑并[1,5-a]吡嗪化合物可藉由流程I中所示之一般合成途徑製備。
可藉由在適合催化劑系統及溶劑(例如阮尼鎳(Raney-Nickel)乙醇)存在下氫化來實現3-氯吡嗪-2-甲腈(II)之還原，獲得(3-氯吡嗪-2-基)甲胺(III)。接著，此可與雙環羧酸(IV)反應。IV之反應可在諸如DMF、THF或DCM之溶劑中，在諸如DIPEA、N-甲基嗎啉、4-DMAP或三乙胺之鹼存在下及在諸如PyBOP、TBTU、EDCI或HATU之偶合試劑存在下進行，形成N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)醯胺(V)。可使用如磷醯氯之縮合試劑，在加熱條件下執行氯吡嗪(V)環化，得到8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪衍生物VI。隨後可使用溴或N-溴丁二醯亞胺，在如DCM或DMF之適合溶劑中，在適當溫度下完成溴化，獲得式VII化合物。可使用氨(氣體)，在異丙醇中，在高溫下，在壓力容器(>4atm)中，自式VII化合物製備8-胺基咪唑并[1,5-a]吡嗪衍生物(VIII)。可使用適當酸或頻哪醇酯(IX)，在適合鈀催化劑系統(例如雙(二苯膦基)二茂鐵氯化鈀(II)錯合物或肆(三苯膦)鈀(0))存在下，在如碳酸鉀、碳酸銫或磷酸鉀之無機鹼存在下，在如二噁烷與水之組合的適合溶劑系 統中，自式VIII化合物製備式I化合物。形成頻哪醇酯或使酸或頻哪醇酯與1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-8-胺偶合之鈀催化劑及條件為熟練有機化學人員所熟知-參看例如Ei-ichi Negishi(編輯)，Armin de Meijere(副編輯)，Handbook of Organopalladium Chemistry for Organic Synthesis,John Wiley and Sons,2002。如IV之雙環羧基化合物可容易使用流程中所說明之熟練有機化學人員熟知的方法製備。
多數此雙環羧基化合物可由常見起始物質2-甲基-5-吡啶甲酸甲酯(1)製備。流程II顯示化合物4及5之製備。藉由使用mCPBA氧化成N-氧化物，隨後用乙酸酐處理重排成乙酸酯，將化合物1轉化為2。接著用氰基硼氫化鈉使2中之吡啶環飽和，隨後在諸如TEA之鹼性條件下用CbzCl處理，用Cbz保護胺，且最終使用含氫氧化鈉之甲醇及水將乙酸酯水解獲得化合物3。接著用含氫氧化鋰之四氫呋喃及水處理化合物3，形成胺基甲酸酯，同時將酯水解成酸，獲得雙環酸化合物4。使用諸如TPAP/NMO之氧化條件將中間物3之羥基氧化成醛6。向醛中添加溴化甲基鎂獲得二級醇7，使用相同鹼性條件(含氫氧化鋰之四氫呋喃及水)將其轉化成胺基甲酸酯8。
將中間物2轉化成羥基甲基吡啶-5-甲酸酯5；接著可在氫化鈉作為鹼的情況下在THF中藉由2-溴乙酸乙酯對羥基進行烷基化獲得化合物9。上文所述使用氰基硼氫化鈉使吡啶環飽和之還原條件，隨後用鹼處理形成內醯胺，產生化合物10。最終，將甲酯水解成酸11。
流程IV顯示雙環酸15之製備。使用NBS將常見起始物質1溴化成苯甲基溴12。使用苯甲基溴使N-Cbz-甘胺酸甲酯烷基化成13。使用相同條件還原吡啶，隨後形成內醯胺，產生14且將酯水解成酸15。
使用合成流程V製備雙環酸19。使常見起始物質1與乙二酸乙酯在乙酸酐中在加熱下反應，獲得1,2-不飽和酯16。在乙酸中使用氫氧化鈀/碳作為催化劑氫化，將吡啶還原成哌啶17。當在甲醇中用諸如三乙胺之鹼處理17時，形成內醯胺18。藉由在甲醇中用甲醇鈉處理，將甲酯水解成反式雙環酸19。
流程VI說明雙環酸24之製備。用鈀催化，用溴化(4-乙氧基-4-側氧基丁基)鋅(II)對6-溴菸鹼酸甲酯20進行根岸偶合(Niggishi couple)，獲得化合物21。接著在乙酸中使用氰基硼氫化鈉將吡啶環還原成22，隨後藉由在甲苯中加熱閉環產生內醯胺23。酯水解獲得24。以與流程V及VI中所述類似之方式製備經取代之雙環酸19及24。
本發明範疇內亦包括例如因為組態或幾何異構產生的本發明Btk抑制劑化合物的所有立體異構形式。該等立體異構形式為對映異構體、非對映異構體、順式及反式異構體等。舉例而言，當使用氮雜環庚烷-2-甲酸作為胺基酸時，存在兩種對映異構體之混合物。在式I化合物或其鹽或溶劑合物之個別立體異構體的情形中，本發明包括實質上游離之上述立體異構體，亦即與其他立體異構體之締合小於5%，較佳小於2%且尤其小於1%。任何比例之立體異構體混合物(例如包含實質上等量之兩種對映異構體的外消旋混合物)亦包括於本發明範疇內。
對於對掌性化合物，藉以獲得純立體異構體之不對稱合成法為此項技術中所熟知，例如對掌性誘導合成、以對掌性中間物開始合成、對映選擇性酶促轉化、使用在對掌性介質上的層析分離立體異構體。該等方法描述於Chirality in Industry(A.N.Collins,G.N.Sheldrake及J.Crosby編，1992；John Wiley)中。同樣，此項技術中亦熟知合成幾何異構體之方法。
可呈游離鹼形式之本發明Btk抑制劑化合物可以醫藥學上可接受之鹽形式自反應混合物分離。亦可用有機酸或無機酸(諸如氯化氫、溴化氫、碘化氫、硫酸、磷酸、乙酸、丙酸、乙醇酸、順丁烯二酸、丙二酸、甲烷磺酸、反丁烯二酸、丁二酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸及抗壞血酸)處理式I之游離鹼獲得醫藥學上可接受之鹽。
本發明Btk抑制劑化合物亦可以非晶形固體形式存在。多種結晶形式亦為可能的。所有物理形式均包括於本發明範疇內。
溶劑合物之製備一般已知。因此，例如M.Caira等人，J.Pharmaceutical Sci.,93(3),601-611(2004)描述在乙酸乙酯以及水中製備抗真菌氟康唑(fluconazole)的水合物。E.C.van Tonder等人，AAPS PharmSciTech.,5(1)，第12節(2004)；及A.L.Bingham等人，Chem.Commun.603-604(2001)描述溶劑合物、半溶劑合物、水合物及其類似物的類似製備。典型非限制性方法涉及在高於環境溫度之溫度下將本發明化合物溶解於所要量之所要溶劑(有機物或水或其混合物)中，且以足以形成晶體之速率冷卻溶液，接著藉由標準方法分離該等晶體。諸如IR光譜分析之分析技術顯示呈溶劑合物(或水合物)形式之晶體中存在溶劑(或水)。
藉由以下實例說明本發明。
實例
以下實例為本發明之說明性實施例，不以任何方式限制本發明 之範疇。試劑市場有售或根據文獻中之程序製備。
質譜法：在使用流動注射之交替性正離子及負離子模式之Applied Biosystems API-165單四極桿質譜儀上記錄電噴霧光譜。質量範圍為120-2000Da且以0.2Da之步進速率掃描，且毛細管電壓設為5000V。使用N2氣體進行霧化。
LC-MS光譜儀(Waters)偵測器：PDA(200-320nm)；質量偵測器：ZQ；及溶離劑：A：具有0.05%三氟乙酸之乙腈，B：具有0.05%三氟乙酸之乙腈/水=1/9(v/v)。
方法A：LC-MS
方法B：LC-MS
樣品資訊：Easy-Access法：'1-Short_TFA_Pos'
方法資訊：B222 Column Agilent SBC(3.0×50mm,1.8μm)；流速1.0mL/min；溶劑A：H2O-0.1% TFA；溶劑B：MeCN-0.1% TFA；梯度表：0min：10% B，0.3min：10% B，1.5min：95% B，2.70min：95% B，2.76min：10% B
停止時間3.60min，後運行時間0.70min
方法C：LC-MS
樣品資訊：Easy-Access法：'1_Fast'
方法資訊：A330 Column Agilent Zorbax SB-C18(2.1×30mm,3.5μm)；流速2.0mL/min；溶劑A：H2O-0.1% TFA；溶劑B：MeCN-0.1% TFA；梯度表：0.01min：10% B，1.01min：95% B，1.37min：95% B，1.38min：10% B；停止時間1.7min，後運行時間=關
方法D：LC-MS
移動相：含0.1% TFA之MeCN及含0.1% TFA之水
管柱：Xterra 2.1×20mm 3.5μm IS或SunFire
流動速率=1.5mL/min
注射體積=5μL
管柱加熱器=50℃
運行時間=4min
流動速率=1.5mL/min
注射體積=5μL
梯度：
方法E：LC-MS
移動相：A：含0.1% TFA之MeCN，及B：含0.1% TFA之水
管柱：Xterra 2.1×20mm 3.5μm IS或SunFire
流動速率=1.5mL/min
注射體積=5μL
管柱加熱器=50℃
運行時間=2min
流動速率=1.5mL/min
注射體積=5μL
梯度：
方法F：LC-MS
Acquity UPLC BEH-C18(2.1×50mm,1.7μm)；流速1mL/min
1.4min內5%-100% MeCN
0.1% NH3
在管柱(50×10mm ID，5μm，Xterra Prep MS C18)上，在5 ml/min之流動速率下，注射體積500μl，在溫度下及在210nm UV偵測下進行製備型HPLC。
申請案全文中關於化學術語使用以下縮寫： HATU 六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基
Cbz 苯甲基氧基羰基
D 氘化氫
DMF N,N-二甲基甲醯胺
DCM 二氯甲烷
EA 乙酸乙酯
EtOAc 乙酸乙酯
DIPEA N,N-二異丙基乙基胺
THF 四氫呋喃
EtOH 乙醇
EDCI.HCl 1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽
4-DMAP 4-二甲基胺基吡啶
PyBOP 六氟磷酸O-苯并三唑-1-基-氧基-參(吡咯啶基)鏻
TBTU 四氟硼酸O-苯并三唑-1-基-N,N,N',N'-四甲基
HBr 溴化氫
HCl 氯化氫
HOAc 乙酸
POCl3 氧氯化磷
HPLC 高壓液相層析法
UPLC 超高效液相層析法
LiHMDS 六甲基二矽烷胺基鋰
MeOH 甲醇
DCM 二氯甲烷
n-BuLi 正丁基鋰
CO2 二氧化碳
NaHCO3 碳酸氫鈉
K3PO4 磷酸鉀
P(Cy)3 三環己基膦
Pd(OAc)2 乙酸鈀(II)
Na2SO4 硫酸鈉
Na2CO3 碳酸鈉
DAST 三氟化二乙胺基硫
Cs2CO3 碳酸銫
Et2O 乙醚
Na2S2O3 硫代硫酸鈉
Na2S2O4 亞硫酸氫鈉
NaCNBH3 氰基硼氫化鈉
NH4Cl 氯化銨
MgSO4 硫酸鎂
LiOH 氫氧化鋰
IPA 異丙胺
TFA 三氟乙酸
Cbz-Cl 氯甲酸苯甲酯
PE 石油醚
EA 乙酸乙酯
NaHMDS 六甲基二矽烷胺基鈉
10% Pd/C 10%鈀/碳
TEA 三乙胺
CDI 1,1'-羰基二咪唑
DMI 1,3-二甲基-2-咪唑啶酮
NBS N-溴丁二醯亞胺
i-PrOH 2-丙醇
K2CO3 碳酸鉀
Pd(dppf)Cl2 1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵氯化鈀(II)與二氯甲烷之錯合物
Et3N 三乙胺
2-BuOH 2-丁醇
LCMS 液相層析/質譜
MeCN 乙腈
NH3 氨氣
CD3I 三氘碘甲烷
CD3OD 四氘甲醇
CH3I 碘甲烷
CBr4 四溴化碳
Tris-HCl 參(羥基甲基)胺基甲烷鹽酸鹽
MgCl2 氯化鎂
NaN3 疊氮化鈉
DTT 二硫蘇糖醇
DMSO 二甲亞碸
IMAP 基於固定金屬離子親和力之螢光偏振
ATP 三磷酸腺苷
MnCl2 氯化錳(II)
DMA 二甲基乙醯胺
IPA 異丙醇
TPP 三苯膦
DIAD 偶氮二甲酸二異丙酯
DMB 2,4-二甲氧基苯甲基
DCE 二氯乙烷
DEAD 偶氮二甲酸二乙酯
ACN 乙腈
Ret.Time 滯留時間
RT(rt) 室溫
Aq 水溶液
EtOH 乙醇
MPLC 中壓液相層析法
Xantphos 4,5-雙(二苯膦基)-9,9-二甲基二苯并哌喃
X-phos 2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基聯苯
中間物 中間物1
(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮 (a)反-6-(乙醯氧基甲基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯
在室溫下，向6-(乙醯氧基甲基)菸鹼酸甲酯(75g，358.5mmol)於AcOH(1000mL)中之溶液中逐份添加NaBH3CN(45.2g，717mmol)。攪拌溶液隔夜。減壓濃縮反應混合物，且將殘餘物溶解於H2O(770mL)中，且使用NaHCO3水溶液將pH值調整至8。將所得混合物冷卻至0℃，向其中逐滴添加Cbz-Cl(122g，716mmol)。在室溫下攪拌混合 物隔夜且用DCM(2×500mL)萃取。有機層經Na2SO4乾燥且真空濃縮，且藉由矽膠管柱層析法(用含5%-30%乙酸乙酯之石油醚(60-90分數)溶離，製備型HPLC)純化殘餘物獲得反-6-(乙醯氧基甲基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯(42g，33.6%產率)。MS：M/Z(M+1)：349.9。滯留時間：1.053。
(b)反-6-(羥基甲基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯
向反-6-(乙醯氧基甲基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯(8.8g，25.2mmol)於MeOH(88mL)中之溶液中添加HCl(2.2ml，12M)。在回流下攪拌所得溶液隔夜且冷卻至室溫。真空移除溶劑之後，藉由層析法純化殘餘物獲得4.3g反-6-(羥基甲基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯。1HNMR(400MHz,CD3OD)δ=7.39(s,5H),5.15(s,2H),4.38-4.26(m,2H),3.73-3.67(m,4H),3.66-3.58(m,1H),2.97(br.s.,1H),2.48(tt,J=4.1,11.8Hz,1H),1.98-1.84(m,1H),1.78-1.57(m,1H)。
(c)(3S,6R)-6-(羥基甲基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯及(3R,6S)-6-(羥基甲基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯
用對掌性HPLC解析4.3g反-6-(羥基甲基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯，獲得兩種對映異構體。(儀器：Thar 200；管柱：AD 250mm×50mm，5μm；移動相：A：超臨界CO2，B：MeOH，A：B=85：15，在160ml/min下；管柱溫度：38℃；噴嘴壓力：100巴；噴嘴溫度：60℃；蒸發器溫度：20℃；調整器溫度：25℃；波長：220nm)相繼獲得1.3g(3S,6R)-6-(羥基甲基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯(E1)、1.1g(3R,6S)-6-(羥基甲基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯(E2)。
(d)(3S,6R)-1-((苯甲基氧基)羰基)-6-(羥基甲基)哌啶-3-甲酸
向(3S,6R)-6-(羥基甲基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯(1.0g，3.25mmol)於MeOH/H2O(6mL/3mL)中之混合物中添加單水合氫氧化 鋰(273mg，6.5mmol)。在25℃下攪拌反應混合物隔夜。真空濃縮混合物，藉由1N HCl酸化至pH 5-6，接著用EA萃取。將有機層用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥且真空濃縮，獲得(3S,6R)-1-((苯甲基氧基)羰基)-6-(羥基甲基)哌啶-3-甲酸(780mg，81.8%產率)。1HNMR(400MHz,CD3OD)：δ=7.32-7.40(m,5H),5.16(s,2H),4.30-4.36(m,2H),3.60-3.73(m,2H),2.93-3.02(m,1H),2.39-2.46(m,1H),1.89-1.97(m,2H),1.59-1.77(m,2H)。
(e)(6S,8aR)-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲酸
向(3S,6R)-6-(羥基甲基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯(2.7g，8.785mmol)於四氫呋喃/H2O(30mL)中之混合物添加LiOH(737mg，17.57mmol)。在室溫下攪拌混合物1小時。用乙酸乙酯(100mL)萃取反應混合物1次，且將水層凍乾獲得(6S,8aR)-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲酸(1.6g，100%產率)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：186.07。
(f)(6S,8aR)-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲醯胺
在0℃下，向(6S,8aR)-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲酸(1g，5.4mmol)於二氯甲烷(10mL)中之混合物中添加三乙胺(1g，5.4mmol)及氯甲酸異丁酯(590mg，4.32mmol)。在室溫下攪拌混合物2小時。逐份添加(3-氯-吡嗪-2-基)-甲胺(966mg，5.39mmol)，隨後添加另一份3當量三乙胺。在室溫下攪拌混合物3小時。真空濃縮反應混合物且用矽膠層析法(PE：THF=50%-100%)純化獲得(6S,8aR)-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲醯胺(230mg，14%產率)。
1HNMR(400MHz,DMSO-d6)：δ=8.64(d,J=6.4Hz,1 H),8.61(t,J=5.6Hz,1 H),8.44(d,J=6.0Hz,1 H),4.53-4.49(m,2 H),4.37(t,J =8.0Hz,1 H),3.92-3.88(m,1 H),2.91(J=12.0Hz,1 H),2.42-2.33(m,1 H),1.93(d,J=13.2Hz,1 H),1.86-1.81(m,1 H),1.63-1.52(m,1 H),1.30-1.23(m,1 H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：311.08。
(g)(6R,8aS)-6-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮
在0℃下，向(6S,8aR)-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲醯胺(290mg，0.932mmol)於CH3CN(5mL)中之混合物中添加POCl3(715mg，4.66mmol)。在30℃下攪拌混合物15小時。將反應混合物倒入冰水中，用NaHCO3鹼化且用二氯甲烷/丙-2-醇(3：1，30mL×3)萃取。將經合併之有機層用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，真空濃縮獲得(6R,8aS)-6-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(270mg，98%產率)。
1HNMR(400MHz,CDCl3)：δ=7.81(s,1H),7.71(d,J=5.6Hz,1 H),7.38(d,J=4.8Hz,1 H),4.49(t,J=8.0Hz,1 H),4.14-4.11(m,1 H),4.10-4.02(m,1 H),3.89-3.82(m,1 H),3.29-3.23(m,1 H),3.20-3.12(m,1 H),2.27-2.20(m,2 H),2.17-2.03(m,2 H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：293.07。
(h)(6R,8aS)-6-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮
向(6R,8aS)-6-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(270mg，0.922mmol)於DMF(3mL)中之混合物中添加1-溴-吡咯啶-2,5-二酮(181mg，1.015mmol)。在室溫下攪拌混合物1小時，接著用飽和碳酸氫鈉淬滅。用乙酸乙酯萃取所得混合物，且將經合併之有機層用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥且真空濃縮獲得(6R,8aS)-6-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(310mg，90%產率)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)：δ =8.47-8.46(d,J=4Hz,1 H),7.44-7.45(d,J=4Hz,1 H),4.46-4.40(m,2 H),3.98-3.95(m,1 H),3.88-3.83(m,2H),3.27-3.21(t,J=12Hz,1 H),2.07-2.04(d,J=12Hz,1 H),1.93-1.89(m,1 H),1.76-1.67(m,1 H),1.59-1.47(m,4 H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：371。
(i)(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮
在100℃下，在密封試管中攪拌(6R,8aS)-6-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(30mg，0.08mmol)於NH4OH/i-PrOH(3mL/3mL)中之混合物7小時。將反應混合物冷卻至室溫且真空濃縮獲得(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(10mg，35%產率)。MS(ESI)：M/Z(M+1)=352.03。
中間物2
(6S,8aR)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮 (a)(6R,8aS)-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲酸
向(3R,6S)-6-(羥基甲基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯(2.7g，8.785mmol)於四氫呋喃/H2O(1：1，30mL)中之混合物中添加LiOH(737mg g，17.57mmol)。在室溫下攪拌所得混合物1小時，且用乙酸乙酯(100mL)萃取。凍乾水層獲得(6R,8aS)-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲酸(1.6g，100%產率)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)：δ=12.62(s,1 H),4.36(t,J=8.4Hz,1 H),3.89-3.74(m,1 H),3.70- 3.63(m,1 H),2.90-2.84(m,1 H),2.37-2.29(m,1 H),2.07-2.03(m,1 H),1.85-1.82(m,1 H),1.55-1.40(m,1 H),1.37-1.22(m,1 H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：185.8。
(b)(6R,8aS)-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲醯胺
在0℃下，向(6R,8aS)-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲酸(150mg，0.810mmol)於二氯甲烷(5mL)中之混合物中添加三乙胺(344mg，3.24mmol)及氯甲酸異丁酯(116mg，0.851mmol)。在室溫下攪拌混合物2小時，向其中逐份添加(3-氯-吡嗪-2-基)-甲胺(145mg，0.810mmol)，隨後添加另一份3當量三乙胺。在室溫下再攪拌混合物3小時。真空濃縮反應混合物且藉由矽膠層析法(PE：THF=50%-100%)純化獲得(6S,8aS)-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲醯胺(40mg，16%產率)。MS(EI)：M/Z(M+1)：311.1。
(c)(6S,8aR)-6-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮
在0℃下，向(6R,8aS)-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲醯胺(60mg，0.205mmol)於CH3CN(3mL)中之混合物中添加POCl3(157mg，1mmol)。在30℃下攪拌混合物15小時。將反應混合物倒入冰水中，用固體NaHCO3鹼化且用二氯甲烷/丙-2-醇(3：1，20mL×3)萃取。將經合併之有機層用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，濃縮獲得(6S,8aR)-6-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(50mg，88%產率)。MS(EI)：M/Z(M+1)：293.00。
(d)(6S,8aR)-6-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮
向(6S,8aR)-6-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(50mg，0.17mmol)於DMF(3mL)中之混合物中添加1-溴-吡咯啶-2,5-二酮(34.2mg，0.192mmol)。在室溫下攪拌混合物1小時，且用飽和碳酸氫鈉淬滅。用乙酸乙酯萃取所得混合物，且將經合併之有機層用鹽水(10mL×3)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥且濃縮獲得(6S,8aR)-6-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(80mg，100%產率)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)：δ=8.47-8.46(d,J=4Hz,1 H),7.45-7.44(d,J=4Hz,1 H),4.46-4.40(m,2 H),3.98-3.95(m,1 H),3.88-3.83(m,2 H),3.27-3.21(t,J=12Hz,1 H),2.07-2.04(d,J=12Hz,1 H),1.93-1.89(m,1 H),1.76-1.67(m,1 H),1.60-1.47(m,1 H)。(ESI)：M/Z(M+1)：M/Z(M+3)372.9：(M+1)371=10：7.5
(e)(6S,8aR)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮
在100℃下，在密封試管中攪拌(6S,8aR)-6-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(80mg，0.215mmol)於NH4OH/i-PrOH(4mL/4mL)中之混合物7小時。將反應混合物冷卻至室溫且真空濃縮獲得粗產物，其藉由製備型TLC純化獲得(6S,8aR)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(20mg，27%產率)。MS(ESI)：M/Z(M+1)=352.03。
中間物3
(2S,5S)-2-(乙醯氧基甲基)-5-(1-溴-8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)-咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)哌啶-1-甲酸苯甲酯 (a)反-6-(乙醯氧基甲基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯
在室溫下，向6-(乙醯氧基甲基)菸鹼酸甲酯(75g，358.5mmol)於AcOH(1000ml)中之溶液中逐份添加NaBH3CN(45.2g，717mmol)。攪拌溶液隔夜。減壓濃縮反應混合物，且將殘餘物溶解於H2O(770ml)中，且使用NaHCO3水溶液將pH值調整至8。將所得混合物冷卻至0℃，向其中逐滴添加Cbz-Cl(122g，716mmol)。在室溫下攪拌混合物隔夜且用DCM(2×500mL)萃取。有機層經Na2SO4乾燥且真空濃縮。藉由矽膠管柱層析法(用含5%-30%乙酸乙酯之石油醚(60-90分數)溶離，製備型HPLC)純化殘餘物獲得反-6-(乙醯氧基甲基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯(42g，33.6%產率)。MS：M/Z(M+1)：349.9。滯留時間：1.053min。
(b)反-6-(羥基甲基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯
向反-6-(乙醯氧基甲基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯(8.8g，25.2mmol)於MeOH(88ml)中之溶液中添加HCl(2.2ml，12M)。在回流下攪拌所得溶液隔夜。此後，冷卻至室溫且真空移除溶劑，藉由矽膠層析法純化殘餘物獲得4.3g反-6-(羥基甲基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯。1HNMR(400MHz,CD3OD)δ=7.39(s,5H),5.15(s,2H),4.38-4.26(m,2H),3.73-3.67(m,4H),3.66-3.58(m,1H),2.97(br.s.,1H),2.48(tt,J=4.1,11.8Hz,1H),1.98-1.84(m,1H),1.78-1.57(m,1H)。
(c)(3S,6S)-6-(羥基甲基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯及(3R,6R)-6-(羥基甲基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯
用對掌性HPLC解析4.3g反-6-(羥基甲基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯獲得兩種對映異構體。(儀器：Thar 200；管柱：AD 250mm ×50mm，5μm；移動相：A：超臨界CO2，B：MeOH，A：B=85：15，在160ml/min下；管柱溫度：38℃；噴嘴壓力：100巴；噴嘴溫度：60℃；蒸發器溫度：20℃；調整器溫度：25℃；波長：220nm)相繼獲得1.3g(3S,6S)-6-(羥基甲基)-哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯、1.1g(3R,6R)-6-(羥基甲基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯。
(d)(3S,6S)-1-((苯甲基氧基)羰基)-6-(羥基甲基)哌啶-3-甲酸
向(3S,6S)-6-(羥基甲基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯(1.0g，3.25mmol)於MeOH/H2O(6mL/3mL)中之混合物中添加單水合氫氧化鋰(273mg，6.5mmol)。在25℃下攪拌反應混合物隔夜。真空濃縮混合物，用1N HCl酸化至pH 5-6，且用EA萃取。將有機層用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥且真空濃縮獲得(3S,6S)-1-((苯甲基氧基)羰基)-6-(羥基甲基)哌啶-3-甲酸(780mg，81.8%產率)。1HNMR(400MHz,CD3OD)：δ=7.32-7.40(m,5 H),5.16(s,2 H),4.30-4.36(m,2 H),3.60-3.73(m,2 H),2.93-3.02(m,1 H),2.39-2.46(m,1 H),1.89-1.97(m,2 H),1.59-1.77(m,2 H)。
(e)(2S,5R)-5-(((3-氯吡嗪-2-基)甲基)胺甲醯基)-2-(羥基甲基)哌啶-1-甲酸苯甲酯
向(3S,6S)-1-((苯甲基氧基)羰基)-6-(羥基甲基)哌啶-3-甲酸(0.78g，2.66mmol)於20mL DMF中之溶液中添加HATU(1.21g，3.2mmol)。在N2下攪拌30分鐘後，添加(3-氯-吡嗪-2-基)甲胺鹽酸鹽(0.48g，2.66mol)及Et3N(0.8g，7.98mmol)。在室溫下，在N2下，攪拌反應混合物12小時。將混合物分配於EA與水之間。用1N HCl及水洗滌有機層，經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠管柱層析法純化殘餘物獲得(2S,5R)-5-(((3-氯吡嗪-2-基)甲基)胺甲醯基)-2-(羥基甲基)哌啶-1-甲酸苯甲酯(0.7g，63.0%產率)。1HNMR(400MHz,CD3OD)：δ=8.50-8.54(m,1 H),8.35(d,J=2.4Hz,1 H),7.31-7.41(m,5 H), 5.16(s,2 H),4.63(s,2 H),4.34-4.38(m,1 H),4.21-4.25(m,1 H),3.72-3.77(m,1 H),3.63-3.67(m,1 H),3.01-3.07(m,1 H),2.46-2.54(m,1 H),1.80-1.93(m,3 H),1.61-1.71(m,1 H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：419.1。
(f)(2S,5R)-2-(乙醯氧基甲基)-5-(((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-胺甲醯基)哌啶-1-甲酸苯甲酯
向(2S,5R)-5-(((3-氯吡嗪-2-基)甲基)胺甲醯基)-2-(羥基甲基)哌啶-1-甲酸苯甲酯(500mg，1.2mmol)於4mL DCM中之混合物中添加乙醯氯(141mg，1.8mmol)及吡啶(190mg，2.4mmol)。在25℃下攪拌反應混合物隔夜。將混合物倒入NH4Cl水溶液中，且用DCM萃取。有機層經Na2SO4乾燥，真空濃縮且藉由急驟層析法純化獲得(2S,5R)-2-(乙醯氧基甲基)-5-(((3-氯吡嗪-2-基)甲基)胺甲醯基)哌啶-1-甲酸苯甲酯(240mg，43.6%產率)。1HNMR(400MHz,CD3OD)：δ=8.31-8.50(m,2 H),7.29-7.36(m,5 H),5.10-5.15(m,2 H),4.55-4.61(m,3 H),4.12-4.38(m,3 H),3.04-3.14(m,1 H),2.46-2.54(m,1 H),1.66-1.86(m,7 H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：461.0。
(g)(2R,5R)-2-(乙醯氧基甲基)-5-(1-溴-8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)哌啶-1-甲酸苯甲酯
使用與針對中間物19，步驟h之合成所述類似的程序，將(2S,5R)-2-(乙醯氧基甲基)-5-(((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-胺甲醯基)哌啶-1-甲酸苯甲酯(100mg，0.22mmol)轉化為標題化合物(90mg)。1HNMR(400MHz,CDCl3)：δ=7.34-7.38(m,5 H),7.10-7.14(m,1 H),6.90-6.99(m,1 H),6.74-6.76(m,1 H),6.43-6.50(m,2 H),5.11-5.23(m,2 H),4.65-4.71(m,3 H),4.18-4.39(m,3 H),3.88(s,3 H),3.80(s,3 H),2.98-3.24(m,2 H),1.81-1.98(m,7 H)。MS(ESI)：M/Z(M/M+2=1/1)652.1/654.1。
中間物4
(2R,5R)-2-(乙醯氧基甲基)-5-(1-溴-8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)-咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)哌啶-1-甲酸苯甲酯
使用與中間物19類似之程序，自SM製備標題化合物(90mg)。
1HNMR(400MHz,CDCl3)：δ=7.34-7.38(m,5 H),7.10-7.14(m,1 H),6.90-6.99(m,1 H),6.74-6.76(m,1 H),6.43-6.50(m,2 H),5.11-5.23(m,2 H),4.65-4.71(m,3 H),4.18-4.39(m,3 H),3.88(s,3 H),3.80(s,3 H),2.98-3.24(m,2 H),1.81-1.98(m,7 H)。MS(ESI)：M/Z(M/M+2=1/1)652.1/654.1。
中間物5
(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(a)(E)-6-(3-乙氧基-3-側氧基丙-1-烯-1-基)菸鹼酸甲酯
使含有2-側氧基乙酸乙酯(155g，0.76mol)及6-甲基菸鹼酸甲酯(50g，0.33mol)於300mL乙酸酐中之混合物的1L燒瓶在130℃下回流2天且真空濃縮。藉由矽膠層析法(溶離劑：20% EA/己烷)純化所得粗產物獲得(E)-6-(3-乙氧基-3-側氧基丙-1-烯-1-基)菸鹼酸甲酯(57g，242mol，73%產率)。LCMS資料：滯留時間=1.42min,m/z 236(M+H)+；1HNMR(CDCl3,500Hz)：9.24(1H,d,J=2Hz)；8.333(1H,dd J=6Hz)；7.20(1H,d,J=16Hz)；7.511(1H,d,J=8Hz)；7.042(1H, d,J=15.5Hz)；4.310(q,J=7Hz)；3.988(3H,s),1.366(3H,t,J=7Hz)。
(b)6-(3-乙氧基-3-側氧基丙基)哌啶-3-甲酸乙酯
向裝有含(E)-6-(3-乙氧基-3-側氧基丙-1-烯-1-基)菸鹼酸甲酯(10g)之乙酸(100mL)的500ml容器中添加氫氧化鈀/碳(20%，2.5g)。將容器裝載至ParShaker上且使混合物暴露於40psi之氫氣18小時。在氮氣流下過濾催化劑且用乙酸乙酯洗滌。接著真空濃縮濾液獲得6-(3-乙氧基-3-側氧基丙基)哌啶-3-甲酸甲酯。LCMS資料：滯留時間0.22min；m/z 244.3(M+H)+。
(c)3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸甲酯
在TEA(100ml，0717mol)與MeOH(500ml)之混合物中回流6-(3-乙氧基-3-側氧基丙基)哌啶-3-甲酸甲酯(103.5g，0.425mol)18小時且真空濃縮。藉由矽膠層析法(溶離劑：含3% 2N NH3之MeOH/DCM)純化殘餘物獲得順/反異構體3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸甲酯之混合物(94g，4/1比率)。LCMS資料：滯留時間1.07min；m/z 198(M+H)+。
(d)反3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸
將3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸甲酯(94g，477mmol)於甲醇(1000mL)中之溶液自室溫加熱至50℃。在加熱溶液時，一次性添加含25% NaOMe之甲醇(215mL，940mmol)。在50℃下攪拌反應混合物4.5小時且真空濃縮獲得固體。將此固體溶解於水(300mL)中，形成灰色固體。濾出此固體，且接著再濃縮濾液(在60℃下之水浴)獲得白色固體。將此60℃固體溶解於水(100mL)中且在冰浴中冷卻。一旦溶液達到5℃，逐滴添加6M HCl水溶液(165mL，990mmol)，同時保持溫度低於23℃。隨著繼續添加形成固體。攪拌此混合物約30分鐘，同時使溶液冷卻至5℃，接著將其過濾。用冷水洗滌經分離之固體，且接著 在氮氣吹拂下乾燥隔夜，獲得呈白色固體狀之對映異構體反3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸之混合物(66.44g，363mmol，76%產率)。LCMS資料：滯留時間0.92min；m/z 184.12(M+H)+。1HNMR(CDCl3,500MHz,ppm)：9.42(1H,br),4.38(1H,ddd,J=13.2,4.1,1.6Hz),3.44(1H,m),2.76(1H,t,J=12.7Hz),2.42(3H,m),2.24(2H,m),1.97(1H,ddd,J=13.2,6.8,3.3Hz),1.61(2H,m),1.23(1H,M)。
(e)(6R,8aS)3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸及(6S,8aR)3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸
在對掌性HPLC(IC管柱，4.6×150mm，50% IPA+TFA/CO2,2.5ml/min，100巴，35℃)上分離反3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸之兩種對映異構體，相繼獲得(6S,8aR)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸(E1，滯留時間=3.1min，>99% ee)、(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸(E2，滯留時間=4.2min，>99% ee)。
(f)(6R,8aS)-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲醯胺
向(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸(7.3g，39.8mmol)、(3-氯吡嗪-2-基)甲胺鹽酸鹽(7.89g，43.8mmol)及DIPEA(10.44ml，59.8mmol)於CH2Cl2(25ml)中之經攪拌經冷卻0℃混合物中添加HATU(15.91g，41.8mmol)，且在室溫下攪拌混合物1小時，且接著濃縮。藉由矽膠管柱層析法(Isco 240g矽膠)(用CH2Cl2/MeOH(50/1)溶離)純化殘餘物，獲得呈白色固體狀之(6R,8aS)-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲醯胺(11.15g，36.1mmol，91%產率)。LC-MS：滯留時間1.09min；m/z 309.11(M+H)+；1HNMR(CDCl3,500Hz)：8.38(1H,d,J=2Hz),8.25(1H,d,J=2Hz),7.37(1H,dd,J=4及4.5Hz),4.56-4.72(2H,m,1),4.29(1H,dd,J=13及4.5Hz),3.42-3.47(m,1),2.81(1H,t,J=13Hz),2.35(2H,t,J=8Hz),2.17-2.23(1H,m),2.04(1H,d,J=13.5Hz),1.94-1.96(1H,m),1.74-1.82(1H,m),1.55- 1.62(1H,m),1.16-1.24(1H,m)。
(g)(6R,8aS)-6-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮
向(6R,8aS)-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲醯胺(3228.2mg，10.46mmol)於乙腈(20ml)中之經攪拌經冷卻0℃混合物中添加POCl3(5.85ml，62.7mmol)，向其中添加DMF(0.810ml，10.46mmol)。在室溫下攪拌混合物隔夜，且將其倒入至冰水中，向其中添加粉末狀NaHCO3直至pH為約8。將混合物用DCM萃取，經MgSO4乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠管柱層析法(ISCO，40g)(用CH2Cl2/MeOH(25/1)溶離)純化殘餘物，獲得呈無色油狀之(6R,8aS)-6-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(1.9981g，6.87mmol，65.7%產率)。滯留時間1.15min；m/z 291.12(M+H)+；1HNMR(CDCl3,500Hz)：7.72(1H,d,J=4.5Hz),7.39(1H,d,J=5Hz),4.40-4.42(1H,m),3.62-3.67(1H,m),3.03-3.08(2H,m),2.11-2.51(8H,m),1.70-1.77(1H,m),1.39-1.46(1H,m)。
(h)(6R,8aS)-6-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮
向(6R,8aS)-6-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(1.9981g，6.87mmol)於乙腈(25ml)中之經攪拌混合物中添加NBS(1.468g，8.25mmol)，且在室溫下攪拌混合物1小時。反應物以飽和NaHCO3淬滅，用DCM萃取，乾燥且真空濃縮。藉由矽膠管柱層析法(ISCO金40g)(用CH2Cl2/MeOH(40/1)溶離)純化殘餘物，獲得呈白色固體狀之(6R,8aS)-6-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(2.2g，5.95mmol，87%產率)。滯留時間1.24min；m/z 368.97及370.98(M+H)+。
(i)(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮
在120℃下，在密封試管中加熱(6R,8aS)-6-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(2.2109g，5.98mmol)於100mL含2N NH3之2-丙醇中之經攪拌混合物24小時，且真空濃縮。藉由矽膠管柱層析法(ISCO，80g)(用CH2Cl2/MeOH(15/1)溶離)純化殘餘物，獲得呈白色固體狀之(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(2.04g，5.84mmol，98%產率)。滯留時間1.16min；m/z 350.0及352.0(M+H)+。
中間物6
(6S,8aR)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮
使用與中間物5(f-I)相同之步驟，使用(6S,8aR)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸(中間物5，步驟e)作為起始物質，製備標題化合物(6S,8aR)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮。
中間物7
4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-2-甲基-3-側氧基八氫咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺 (a)(3S,6R)-6-(甲氧基甲基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯
在室溫下，向(3S,6R)-6-(羥基甲基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲 酯(1.75g，5.69mmol)於二氯甲烷(18mL)中之溶液中添加N1,N1,N8,N8-四甲基萘-1,8-二胺(3.66g，17.08mmol)及Me3OBF4(2.52g，17.08mmol)。攪拌1小時後，添加NaHCO3飽和溶液且過濾，用二氯甲烷(200mL×3)萃取濾液，將經合併之有機層用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮獲得粗產物，將其藉由矽膠管柱層析法(PE：THF=50%-100%)純化，獲得(3S,6R)-6-(甲氧基甲基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯(1.5g，82%產率)。1HNMR(400MHz,CD3OD)：δ=7.41-7.27(m,5H),5.21-5.13(m,1H),5.10-5.03(m,1H),4.46(d,J=14.1Hz,1H),4.39(q,J=6.5Hz,1H),3.65-3.55(m,4H),3.49-3.42(m,1H),3.35-3.28(m,6H),3.18(dd,J=4.0,14.1Hz,1H),2.67(br.s.,1H),2.03-1.96(m,1H),1.90-1.74(m,2H),1.64-1.57(m,1H)。MS(EI)：M/Z(M+1)：322.16。
(b)(3S,6R)-1-((苯甲基氧基)羰基)-6-(甲氧基甲基)哌啶-3-甲酸
在室溫下攪拌(3S,6R)-6-(甲氧基甲基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯(1.54g，4.79mmol)及LiOH(0.605g，14.4mmol)於四氫呋喃/H2O(150mL，1：1)中之混合物2小時。用乙酸乙酯萃取反應混合物，且水層用1N HCl酸化，用乙酸乙酯(100mL×3)萃取。將經合併之有機層用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得(3S,6R)-1-((苯甲基氧基)羰基)-6-(甲氧基甲基)哌啶-3-甲酸(1.5g，100%產率)。1HNMR(400MHz,CDCl3)：δ=7.41-7.24(m,5H),5.24-5.18(m,1H),5.13-5.06(m,1H),4.56(d,J=14.1Hz,1H),4.43(d,J=5.3Hz,1H),3.55-3.43(m,2H),3.15(dd,J=4.0,14.1Hz,1H),2.67(br.s.,1H),2.10(s,1H),1.89-1.80(m,2H),1.72-1.63(m,1H)。MS(EI)：M/Z(M+1)：308.14
(c)(2R,5S)-5-(((3-氯吡嗪-2-基)甲基)胺甲醯基)-2-(甲氧基甲基)哌啶-1-甲酸苯甲酯
在室溫下攪拌(3S,6R)-1-((苯甲基氧基)羰基)-6-(甲氧基甲基)哌啶-3-甲酸(1.5g，4.88mmol)、(3-氯吡嗪-2-基)甲胺(0.875g，4.88mmol)、HATU(2g，5.4mmol)及三乙胺(1.97g，19.52mmol)於二氯甲烷(20mL)中之混合物12小時。濃縮混合物獲得粗產物，將其藉由矽膠管柱層析法(PE：EA=100%-60%)純化，獲得(2R,5S)-5-(((3-氯吡嗪-2-基)甲基)胺甲醯基)-2-(甲氧基甲基)哌啶-1-甲酸苯甲酯(2.0g，95%產率)。1HNMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.26(d,J=2.5Hz,1H),8.22(s,1H),7.26(s,6H),5.19-5.11(m,1H),5.07-5.01(m,1H),4.67(d,J=16.8Hz,1H),4.52-4.40(m,3H),3.63-3.57(m,1H),3.54-3.47(m,1H),3.36(s,3H),3.28(dd,J=3.4,14.9Hz,1H),2.63(br.s.,1H),2.18(d,J=12.8Hz,1H),1.93-1.75(m,2H),1.66(d,J=2.3Hz,1H)。MS(EI)：M/Z(M+1)：433.16。
(d)(2S,5R)-5-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)哌啶-1-甲酸苯甲酯
在0℃下，向(2R,5S)-5-(((3-氯吡嗪-2-基)甲基)胺甲醯基)-2-(甲氧基甲基)哌啶-1-甲酸苯甲酯(60mg，0.138mmol)於CH3CN(3mL)中之混合物中添加POCl3(106mg，0.69mmol)。在30℃下攪拌混合物15小時。將反應混合物倒入冰水中，用NaHCO3鹼化且用二氯甲烷/丙-2-醇(3：1，10mL×3)萃取。將經合併之有機層用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，濃縮，獲得(2S,5R)-5-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)哌啶-1-甲酸苯甲酯(57mg，98%產率)。
1HNMR(400MHz,CDCl3)：δ=7.72(s,1H),7.46(d,J=5.0Hz,1H),7.32-7.28(m,3H),7.20(d,J=4.8Hz,1H),7.14(br.s.,2H),4.96(s,2H),4.36(t,J=5.4Hz,1H),4.12(d,J=14.1Hz,1H),3.75-3.67(m,1H),3.64-3.56(m,2H),3.32-3.24(m,2H),2.47-2.36(m,1H),2.29-2.11(m,2H),1.76-1.67(m,1H)。MS(EI)：M/Z(M+1)：415.15。
(e)(2S,5R)-5-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)哌啶-1-甲酸苯甲酯
向(2S,5R)-5-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)哌啶-1-甲酸苯甲酯(1g，2.4mmol)於CH3CN(10mL)中之混合物中添加1-溴吡咯啶-2,5-二酮(0.5g，2.65mmol)。在室溫下攪拌混合物1小時。反應混合物以水淬滅且用二氯甲烷萃取。經合併之有機層用鹽水洗滌3次，經無水硫酸鈉乾燥且真空濃縮，獲得(2S,5R)-5-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)哌啶-1-甲酸苯甲酯(1.2g，產率100%)。1HNMR(400MHz,CDCl3)：δ=7.43(d,J=4.8Hz,1H),7.34-7.29(m,3H),7.18(d,J=4.8Hz,3H),4.99(s,2H),4.33(五重峰，J=5.8Hz,1H),4.06(dd,J=3.4,13.9Hz,1H),3.70(dd,J=6.3,9.8Hz,1H),3.64-3.60(m,1H),3.37(s,3H),2.77(s,2H),2.43-2.33(m,1H),2.28-2.19(m,1H),2.19-2.09(m,1H),1.74-1.65(m,1H)。MS(EI)：M/Z(M+1)：493.06。
(f)(2S,5R)-5-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)哌啶-1-甲酸苯甲酯
在100℃下，在密封試管中攪拌(2S,5R)-5-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)哌啶-1-甲酸苯甲酯(60mg，0.096mmol)於NH4OH/i-PrOH(3mL：3mL)中之混合物7小時。使反應混合物冷卻至室溫且真空濃縮，獲得(2S,5R)-5-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)哌啶-1-甲酸苯甲酯(40mg，89%產率)。MS(EI)：M/Z(M+1)：474.11。
中間物8
(1S,6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1-甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮 (a)(3R,6S)-6-(1-羥基乙基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯
在-78℃下，向(3R,6S)-6-甲醯基哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯(12.4g，40.7mmol)於無水THF(190mL)中之溶液中逐滴添加溴化甲基鎂(19ml，THF中3M)。在-78℃下攪拌反應混合物2小時且用NH4Cl水溶液淬滅。用DCM(100mL)及H2O(100mL)稀釋所得混合物，將有機層用鹽水(100mL)洗滌，經Na2SO4乾燥且真空濃縮。藉由矽膠管柱層析法(用PE/EA(100%-40%)溶離)純化粗產物，獲得(3R,6S)-6-(1-羥基乙基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯(6.5g，產率50.0%)。1HNMR(400MHz,CD3OD)：δ=7.41-7.26(m,5H),5.19-5.04(m,2H),4.51-4.42(m,1H),4.05-3.88(m,1H),3.55(br.s.,3H),3.10(d,J=9.8Hz,1H),2.66(br.s.,1H),1.99-1.82(m,3H),1.77-1.56(m,1H),1.19(d,J=6.0Hz,1H),1.08(d,J=6.0Hz,2H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：322.4。
(b)(6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲酸
向(3R,6S)-6-(1-羥基乙基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯(6.5g，20.2mmol)於THF/H2O(1/1，150ml)中之溶液中逐份添加單水合氫氧化鋰(1.7g，40.4mmol)。在25℃下，在N2下，攪拌所得溶液12小時。用HCl將反應物酸化至pH 5-6，接著藉由凍乾乾燥，獲得固體。藉由DCM萃取固體，接著真空濃縮有機層，獲得(6R,8aS)-1-甲基-3- 側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲酸(3g，產率75%)。1HNMR(400MHz,CD3OD)：δ=4.76(五重峰，J=6.9Hz,1H),4.29(五重峰，J=6.3Hz,1H),4.00(dtd,J=1.5,4.9,13.2Hz,1H),3.77-3.64(m,1H),3.31-3.27(m,1H),3.06-2.87(m,1H),2.53-2.36(m,1H),2.32-2.17(m,1H),2.04-1.93(m,1H),1.73(qd,J=3.3,12.5Hz,1H),1.68-1.45(m,2H),1.44-1.32(m,3H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：200.1。
(c)(6R,8aS)-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-1-甲基-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲醯胺
在5℃下，向(6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲酸(600mg，3.02mmol)於無水DCM(12mL)中之溶液中逐滴添加乙二醯二氯(1.15g,9.04mmol)，隨後添加DMF(3滴)。在30℃下攪拌反應混合物2小時，且藉由旋轉蒸發濃縮。將粗產物溶解於DCM(3ml)中，向其中添加(3-氯吡嗪-2-基)甲胺(594mg，3.32mmol)、TEA(640mg，6.04mmol)於DCM(10ml)中之溶液，且在30℃下攪拌所得混合物12小時。用DCM(20mL)及H2O(20mL)稀釋反應物，有機層用鹽水(20mL)洗滌，經Na2SO4乾燥且真空濃縮。藉由矽膠管柱層析法(用PE/THF(100%-40%)溶離)純化粗產物，獲得(6R,8aS)-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-1-甲基-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲醯胺(800mg，55.3%產率)。1HNMR(400MHz,CD3OD)：δ=8.55(d,J=2.5Hz,1H),8.36(d,J=2.5Hz,1H),4.77(五重峰，J=6.8Hz,1H),4.65(s,2H),4.30(五重峰，J=6.2Hz,1H),3.98-3.90(m,1H),3.78-3.70(m,1H),3.12-3.00(m,1H),2.51(ttd,J=4.1,12.1,16.0Hz,1H),2.19-2.07(m,1H),2.00(dd,J=3.5,13.1Hz,1H),1.81-1.66(m,2H),1.55-1.39(m,3H),1.35(d,J=6.5Hz,2H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：325.1。
(d)(6R,8aS)-6-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1-甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮
向(6R,8aS)-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-1-甲基-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲醯胺(700mg，2.16mmol)於無水乙腈(10mL)中之在冰水浴中冷卻的溶液中相繼添加POCl3(1.6g，10.77mmol)、DMF(160mg，2.16mmol)。在25℃下攪拌所得混合物12小時。將反應物倒入至冰水混合物中，用粉末狀碳酸氫鈉中和且用DCM(20mL×3)萃取。將有機層用鹽水(30mL)洗滌，經Na2SO4乾燥且真空濃縮，獲得(6R,8aS)-6-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1-甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(630mg，95%產率)。1HNMR(400MHz,CD3OD)：δ=8.26-8.20(m,1H),7.85(s,1H),7.39(d,J=5.0Hz,1H),4.84-4.76(m,1H),4.36(五重峰，J=6.2Hz,1H),4.07-3.97(m,1H),3.87(ddd,J=3.6,7.7,11.7Hz,1H),3.54-3.33(m,2H),2.30-2.14(m,1H),2.10-1.78(m,3H),1.77-1.54(m,1H),1.47-1.38(m,3H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：306.1。
(e)(6R,8aS)-6-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1-甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮
向(6R,8aS)-6-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1-甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(50mg，0.163mmol)於無水DMF(1mL)中之溶液中添加NBS(30.5mg，0.17mmol)，且攪拌所得混合物2小時，且將其倒入至冰-水(10mL)中。向經攪拌混合物中添加飽和NaHCO3，接著將其過濾，且將濾餅用乙酸乙酯(50mL)溶解，用H2O(30mL×10)洗滌。將有機層用鹽水(30mL)洗滌，經Na2SO4乾燥且真空濃縮，獲得(6R,8aS)-6-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1-甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(56mg，89.2%產率)。1HNMR(400MHz,CD3OD)：δ=8.21(d,J=5.0Hz,1H),7.36(d,J=5.3Hz,1H),4.82-4.79(m,1H),4.60(s,1H),4.01(d,J=10.5Hz,1H),3.86(ddd,J=3.6,7.9,11.8Hz,1H),3.33(br.s.,1H),2.22(d,J=14.1Hz,1H),1.96-1.85(m, 1H),1.83-1.77(m,1H),1.70(dt,J=3.4,12.5Hz,1H),1.39(d,J=6.5Hz,3H)。MS(ESI)：M/Z(M+2)：386.8。
(f)(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1-甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮
向(6R,8aS)-6-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1-甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(400mg，1.04mmol)於i-PrOH(4mL)中之溶液中添加氨水(4mL)，且在100℃下加熱所得混合物12小時且濃縮，獲得(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1-甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(400mg)。MS(ESI)：M/Z(M+2)：367.9；滯留時間：0.548min。
(g)(1S,6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1-甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮
藉由對掌性分離來分離(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1-甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(400mg，1.1mmol)，相繼獲得((1S,6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1-甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(滯留時間：7.46min)(100mg，52.6%產率)、((1R,6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1-甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(中間物9)。分離條件：儀器：Berger MultiGramTM SFC,Mettler Toledo Co,Ltd；管柱：AS 250mm×30mm,5μm；移動相：A：超臨界CO2，B：MeOH(0.05% NH4OH),A：B=73：27，在60ml/min下；管柱溫度：38℃；噴嘴壓力：100巴；噴嘴溫度：60℃；蒸發器溫度：20℃；調整器溫度：25℃；波長：220nm。
(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1-甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮：1HNMR(400MHz,CD3OD)：δ=7.59(d,J=5.0Hz,1H),6.98(d, J=5.0Hz,1H),4.60(br.s.,1H),4.35(t,J=6.1Hz,1H),3.97(dd,J=2.9,12.7Hz,1H),3.49-3.41(m,1H),3.27-3.16(m,1H),2.15(d,J=12.5Hz,1H),2.09-2.01(m,1H),1.91-1.79(m,1H),1.65-1.53(m,1H),1.45(d,J=6.3Hz,3H)。MS(ESI)：M/Z(M+2)：367.9。
中間物9
(1R,6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1-甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮
如中間物8，步驟g中所述，分離出作為峰2之(1R,6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1-甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮。(1HNMR(400MHz,CD3OD)：δ=7.58(d,J=5.0Hz,1H),6.98(d,J=5.3Hz,1H),4.60(br.s.,1H),3.97(d,J=8.5Hz,1H),3.89-3.78(m,1H),3.28-3.17(m,2H),2.20(d,J=13.6Hz,1H),1.88(d,J=13.8Hz,1H),1.82-1.75(m,1H),1.69(dt,J=3.4,12.5Hz,1H),1.38(d,J=6.5Hz,3H)。MS(ESI)：M/Z(M+2)：367.9。
中間物10E1及10E2
(7R,9aS)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮及(7S,9aR)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3- 基)六氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮 a)6-((2-乙氧基-2-側氧基乙氧基)甲基)菸鹼酸甲酯
在0℃下，向6-(羥基甲基)菸鹼酸甲酯(15.0g，89.7mmol)於四氫呋喃(300mL)中之溶液中一次性添加NaH(4.7g，10.4mmol，60%)。30分鐘後，向反應混合物中添加2-溴乙酸乙酯(14.9mL，134.6mmol)。將反應混合物加熱至70℃隔夜，且用飽和NaHCO3淬滅且用乙酸乙酯(150mL×3)萃取。將經合併之有機層用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮，獲得粗產物，將其藉由矽膠管柱層析法(EA：PE=10%-70%)純化，獲得6-((2-乙氧基-2-側氧基乙氧基)甲基)菸鹼酸甲酯(12.0g，53.1%產率)。1HNMR(400MHz,CDCl3)：δ=9.12(d,J=1.5Hz,1H),8.29(dd,J=8.2,2.1Hz,1H),7.60(d,J=8.0Hz,1H),4.79(s,2H),4.20-4.25(m,4H),3.93(s,3H),1.25-1.30ppm(m,3H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：253.9。
b)反-4-側氧基八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-甲酸甲酯
在0℃下，向6-((2-乙氧基-2-側氧基乙氧基)甲基)菸鹼酸甲酯(8.0g，31.6mmol)於AcOH(100ml)中之溶液中逐份添加NaBH3CN(6.0g，94.8mmol)，且在室溫下攪拌反應混合物隔夜。真空濃縮反應混合物且將殘餘物溶解於H2O(100ml)中，且用NaHCO3水溶液鹼化至pH 8。用EA(100mL×3)萃取反應混合物。有機層經Na2SO4乾燥且真空濃縮。將殘餘物溶解於MeOH(300ml)中，且使所得混合物回流4小時且真空濃縮獲得粗產物，將其藉由矽膠管柱層析法(THF：PE=10%-80%)純化，獲得反-4-側氧基八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-甲酸甲酯(2.55g，41.1%產率)。1HNMR(400MHz,CDCl3)：δ=4.85-4.97(m,1H),4.05-4.19(m,2H),3.96(dd,J=11.9,4.4Hz,1H),3.67(s,3H),3.50(dd,J=11.9,6.9Hz,1H),3.36(qd,J=7.3,4.1Hz,1H),2.52-2.62(m,1H),2.43(tt,J=12.0,3.8Hz,1H),2.18(dt,J=13.5,2.4Hz,1H),1.69- 1.82(m,1H),1.55-1.67(m,1H),1.33-1.46ppm(m,1H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：213.9。
c)反-4-側氧基八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-甲酸
向4-側氧基八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-甲酸甲酯(2.55g，12.0mmol)於四氫呋喃(100mL)中之溶液中添加單水合氫氧化鋰(1.0g)於H2O(24mL)中之溶液，且在室溫下，在N2氛圍下，攪拌反應混合物隔夜。真空蒸發有機層。用2M HCl將水層酸化至pH 2且凍乾，獲得粗反-4-側氧基八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-甲酸(2.2g，92.4%產率)，其未經純化即用於下一步驟。1HNMR(400MHz,D2O)：δ=3.86-4.01(m,2H),3.67(dd,J=11.2,3.4Hz,1H),3.51(dd,J=11.3,7.8Hz,2H),3.23-3.33(m,1H),2.90-2.99(m,1H),2.52-2.63(m,1H),2.11(d,J=10.0Hz,1H),1.82-1.92(m,1H),1.44-1.62ppm(m,2H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：199.9。
d)反-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-4-側氧基八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-甲醯胺
在室溫下攪拌反-4-側氧基八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-甲酸(2.2g，11.0mmol)、(3-氯吡嗪-2-基)甲胺鹽酸鹽(2.2g，3.70mmol)、HATU(6.3g，16.6mmol)及三乙胺(4.7mL，33.1mmol)於二氯甲烷(100mL)中之混合物4小時。反應混合物用水(150mL)稀釋且用二氯甲烷(50mL×3)萃取，且真空濃縮經合併之有機層獲得粗產物，將其藉由矽膠管柱層析法(THF：PE=10%-100%)純化，獲得反-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-4-側氧基八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-甲醯胺(2.1g，58.3%產率)。1HNMR(400MHz,CD3OD)：δ=8.54(d,J=2.4Hz,1H),8.34(d,J=2.3Hz,1H),4.74(dt,J=12.9,1.9Hz,1H),4.60-4.67(m,2H),4.11(s,2H),4.02(dd,J=11.9,4.3Hz,1H),3.56-3.65(m,2H),3.43-3.53(m,1H),2.67-2.76(m,1H),2.49(tt,J=11.8,3.7Hz,1H),2.05-2.15(m, 1H),1.77-1.88(m,2H),1.50ppm(dd,J=11.8,3.9Hz,1H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：325.1。
e)反-7-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮
在0℃下，向反-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-4-側氧基八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-甲醯胺(1.3g，4.0mmol)於無水二氯甲烷(100mL)中之溶液中添加二甲基甲醯胺(52μL，0.68mmol)、吡啶(3.25mL，40.0mmol)且隨後添加POCl3(1.82mL，20.0mmol)。在25℃下，在氮氣流下攪拌所得混合物5小時。將反應混合物倒入冰水混合物中，用粉末狀碳酸氫鈉中和且用DCM萃取。有機層用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥且真空濃縮，獲得粗產物。藉由矽膠管柱層析法(用(THF：PE=10%-100%)溶離)純化粗產物，獲得反-7-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮(0.40g，產率33.3%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.81(s,1H),7.72(dd,J=5.0,0.8Hz,1H),7.37(d,J=5.0Hz,1H),4.93(dt,J=13.3,2.1Hz,1H),4.20(d,J=4.0Hz,2H),4.07(dd,J=12.0,4.3Hz,1H),3.66(dd,J=12.0,6.0Hz,1H),3.52-3.60(m,1H),3.07-3.17(m,1H),2.78-2.89(m,1H),2.17-2.28(m,2H),1.92(dq,J=13.4,3.2Hz,1H),1.62-1.70ppm(m,1H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：307.1。
f)反-7-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮
向反-7-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮(0.40g，1.30mmol)於二甲基甲醯胺(4mL)中之溶液中添加N-溴丁二醯亞胺(0.26g，1.43mmol)且在25℃下，在氮氣流下攪拌2小時。反應物用NaHCO3水溶液(40mL)淬滅且用EA(20mL×3)萃取。相繼用水(10mL×5)、鹽水(10mL)洗滌經合併之有機相。有機相經 無水Na2SO4乾燥且真空濃縮，獲得反-7-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮(0.50g，產率100%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ=8.20(d,J=5.0Hz,1H),7.36(d,J=5.3Hz,1H),4.77-4.82(m,1H),4.15(s,2H),4.08(dd,J=11.5,4.0Hz,1H),3.58-3.75(m,3H),2.95(t,J=12.4Hz,1H),2.15-2.24(m,1H),1.94-2.03(m,1H),1.91(d,J=3.3Hz,1H),1.64-1.78ppm(m,1H)。MS(ESI)：M/Z(M/M+2=1/1)385.0/387.0。
g)反-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮
將反-7-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮(0.50g，1.30mmol)溶解於NH4OH(6mL)及i-PrOH(6mL)中且在110℃下，在密封試管中攪拌12小時。接著，冷卻且減壓濃縮反應物，獲得0.47g反-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮，其未經進一步純化即直接用於下一步驟中。MS(ESI)：M/Z(M/M+2=10/8)366.0/368.0。(R.T.：0.29)
h)(7R,9aS)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮
藉由對掌性分離(儀器：Berger MultiGramTM SFC,Mettler Toledo Co,Ltd；管柱：OD 250mm×30mm,5μm；移動相：A：超臨界CO2，B：MeOH，A：B=65：35，在50ml/min下；管柱溫度：38℃；噴嘴壓力：100巴；噴嘴溫度：60℃；蒸發器溫度：20℃；調整器溫度：25℃；波長：220nm)分離反-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮(0.47g，1.3mmol)，獲得化合物E1：((7R,9aS)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮(滯留時間=6.29min)，0.21g，44.7%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ=7.60(d,J=5.5Hz,1H),7.00 (d,J=5.0Hz,1H),4.80(dt,J=12.8,1.9Hz,1H),4.16(s,2H),4.09(dd,J=11.5,4.0Hz,1H),3.64-3.68(m,1H),3.57(br.s.,1H),3.22-3.30(m,1H),2.91(t,J=12.5Hz,1H),2.20(d,J=13.1Hz,1H),1.87-2.00(m,2H),1.67-1.77ppm(m,1H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：367.2。
(7S,9aR)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮
遵循中間物11之程序製備中間物10E2：((7S,9aR)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮(滯留時間=6.83min)，0.17g，36.1%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ=7.60(d,J=5.5Hz,1H),7.00(d,J=5.0Hz,1H),4.80(dt,J=12.8,1.9Hz,1H),4.16(s,2H),4.09(dd,J=11.5,4.0Hz,1H),3.64-3.68(m,1H),3.57(br.s.,1H),3.22-3.30(m,1H),2.91(t,J=12.5Hz,1H),2.20(d,J=13.1Hz,1H),1.87-2.00(m,2H),1.67-1.77ppm(m,1H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：367.2。
中間物11
1-溴-3-((7R,9aS)-八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-8-胺
在0℃下，向(7R,9aS)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮(80mg，0.22mmol)於10mL THF中之溶液中添加10M BH3.SMe2(0.11mL，1.09mmol)，且在室溫下攪拌隔夜。接著，用MeOH淬滅反應混合物且真空濃縮，獲得粗產物 (60mg，78.0%)，其未經純化即用於下一步驟中。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ=7.83(d,J=5.8Hz,1H),7.67(d,J=5.0Hz,1H),6.97(d,J=5.0Hz,1H),6.91(d,J=5.8Hz,1H),4.12(d,J=5.0Hz,1H),3.75(d,J=10.0Hz,1H),3.69-3.60(m,1H),3.51(t,J=10.5Hz,1H),3.10(t,J=10.5Hz,1H),2.89(d,J=9.5Hz,1H),2.61(d,J=10.8Hz,1H),2.38-2.16(m,2H),2.05-1.91(m,2H),1.61-1.47(m,2H),1.31-1.17(m,1H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：353.1。
中間物12
1-溴-3-((7S,9aR)-八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-8-胺
程序如中間物11中所示，藉由BH3.SMe2還原(7S,9aR)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮，獲得呈無色油狀之1-溴-3-((7S,9aR)-八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-8-胺(30mg，52.0%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ=7.83(d,J=5.8Hz,1H),7.67(d,J=5.0Hz,1H),6.97(d,J=5.0Hz,1H),6.91(d,J=5.8Hz,1H),4.12(d,J=5.0Hz,1H),3.75(d,J=10.0Hz,1H),3.69-3.60(m,1H),3.51(t,J=10.5Hz,1H),3.10(t,J=10.5Hz,1H),2.89(d,J=9.5Hz,1H),2.61(d,J=10.8Hz,1H),2.38-2.16(m,2H),2.05-1.91(m,2H),1.61-1.47(m,2H),1.31-1.17(m,1H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：353.1。
中間物13
(7R,9aS)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-4(6H)-酮 (a)6-(溴甲基)菸鹼酸甲酯
向6-甲基菸鹼酸甲酯(30g，197mmol)及NBS(52.7g，296mmol)於CCl4(300mL)中之溶液中添加AIBN(3g)。接著，將反應混合物加熱至80℃且攪拌隔夜。接著，冷卻且過濾反應混合物，且真空濃縮濾液獲得粗殘餘物。藉由矽膠管柱層析法(PE/EA=5/1)純化粗殘餘物，獲得6-(溴甲基)菸鹼酸甲酯(10g，產率22.2%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=9.17(d,J=1.5Hz,1H),8.30(dd,J=2.0,8.0Hz,1H),7.54(d,J=8.0Hz,1H),4.58(s,2H),3.96(s,3H)。
(b)6-((((苯甲基氧基)羰基)(2-甲氧基-2-側氧基乙基)胺基)甲基)菸鹼酸甲酯
向6-(溴甲基)菸鹼酸甲酯(10g，43mmol)及2-(((苯甲基氧基)羰基)胺基)乙酸甲酯(14.5g，65mmol)於DMF(200mL)中之溶液中添加K2CO3(29.6g，215mmol)。接著，在室溫下攪拌混合物隔夜。接著，將反應混合物倒入水中，且用EA(200ml×3)萃取。經合併之有機相用鹽水(500mL)洗滌，且經無水Na2SO4乾燥且過濾。真空濃縮濾液，且藉由矽膠管柱層析法(PE/EA=2/1)純化，獲得6-((((苯甲基氧基)羰基)(2-甲氧基-2-側氧基乙基)胺基)甲基)菸鹼酸甲酯(2.7g，產率16.8%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=9.11(dd,J=1.5,6.0Hz,1H),8.30-8.13(m,1H),7.47(d,J=8.0Hz,1H),7.35-7.25(m,5H),5.17(d,J=5.3Hz,2H),4.73(d,J=14.3Hz,2H),4.19-4.10(m,2H),3.95(d, J=1.8Hz,3H),3.74-3.61(m,3H)。
(c)(反)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2,7(6H)-二甲酸2-苯甲酯7-甲酯
在10℃下，向6-((((苯甲基氧基)羰基)(2-甲氧基-2-側氧基乙基)胺基)甲基)菸鹼酸甲酯(2.5g，6.7mmol)於AcOH(25mL)中之溶液中分部分添加NaBH3CN(1.3g，20mmol)。在室溫下攪拌溶液隔夜。減壓濃縮反應混合物獲得粗殘餘物。將殘餘物溶解於H2O(50ml)中且添加NaHCO3水溶液達到pH=8。接著用EA(50ml×3)萃取混合物。經合併之有機相用鹽水(100mL)洗滌，經無水Na2SO4乾燥且真空濃縮，獲得粗產物6-((((苯甲基氧基)羰基)(2-甲氧基-2-側氧基乙基)胺基)甲基)哌啶-3-甲酸甲酯(2.8g)。在70℃下，在氮氣流下攪拌含粗產物6-((((苯甲基氧基)羰基)(2-甲氧基-2-側氧基乙基)胺基)甲基)哌啶-3-甲酸甲酯(2.8g，7.9mmol)之MeOH(30mL)12小時。接著，真空濃縮混合物且藉由矽膠管柱層析法(PE/THF=1/1)純化殘餘物，獲得(反)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2,7(6H)-二甲酸2-苯甲酯7-甲酯(2g，產率74%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ=7.49-7.24(m,5H),5.16(d,J=3.3Hz,2H),4.86-4.78(m,1H),4.22-4.03(m,2H),3.98-3.87(m,1H),3.70(s,3H),3.43(d,J=8.8Hz,2H),2.69-2.56(m,1H),2.45(tt,J=3.9,12.1Hz,1H),2.15(d,J=13.1Hz,1H),1.81(dd,J=2.5,4.5Hz,1H),1.74-1.58(m,1H)。
(d)(反)-2-((苯甲基氧基)羰基)-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-甲酸
向(反)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2,7(6H)-二甲酸2-苯甲酯7-甲酯(1.2g，3.5mmol)於THF/H2O(1：1，20ml)中之溶液中逐份添加LiOH.H2O(290mg，7.0mmol)。在N2下，在25℃下攪拌所得溶液12小時。用HCl(1M)將反應物酸化至pH=5，且接著用DCM/i- PrOH(4/1，30mL×10)萃取。經合併之有機層用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得(反)-2-((苯甲基氧基)羰基)-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-甲酸(700mg，產率92.1%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ=7.46-7.27(m,5H),5.23-5.06(m,2H),4.25-4.16(m,1H),4.08-3.99(m,1H),3.87(dd,J=10.0,15.3Hz,1H),3.63(dd,J=2.9,12.4Hz,1H),3.02(t,J=12.7Hz,1H),2.80(tt,J=4.0,12.2Hz,1H),2.29(d,J=10.5Hz,1H),2.10-1.93(m,2H),1.77-1.52(m,2H)。
(e)(反)-7-(((3-氯吡嗪-2-基)甲基)胺甲醯基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯
在25℃下攪拌(反)-2-((苯甲基氧基)羰基)-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-甲酸(1.3g，3.9mmol)、(3-氯吡嗪-2-基)甲胺鹽酸鹽(840mg，4.7mmol)、HATU(2.2g，5.8mmol)及TEA(1.6g，15.6mmol)於DMF(20mL)中之混合物隔夜。接著，將反應混合物倒入水中，且用EA(50ml×3)萃取。經合併之有機相用鹽水(100mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，真空濃縮獲得粗殘餘物，將其藉由矽膠管柱層析法(PE/THF=1/3)純化，獲得(反)-7-(((3-氯吡嗪-2-基)甲基)胺甲醯基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯(600mg，產率35.3%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ=8.52(d,J=2.5Hz,1H),8.33(d,J=2.3Hz,1H),7.40-7.29(m,5H),5.15(br.s.,2H),4.77-4.67(m,1H),4.12(br.s.,1H),3.96-3.85(m,1H),3.48(br.s.,2H),2.71(t,J=12.5Hz,1H),2.52-2.36(m,1H),2.11-1.97(m,2H),1.90-1.71(m,2H)。
(f)(反)-7-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯
向(反)-7-(((3-氯吡嗪-2-基)甲基)胺甲醯基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯(0.5g，1.1mmol)於DCM(15mL) 中之溶液中添加DMF(13mg，0.18mmol)及吡啶(0.88mL，11mmol)。接著，在0℃向此溶液中添加POCl3(0.52mL，5.5mmol)且攪拌6小時。將反應混合物倒入冰-水混合物中，以粉末狀碳酸氫鈉中和，且用DCM(30mL×10)萃取。有機層用鹽水洗，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得(反)-7-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯(300mg，產率62.5%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ=8.18(d,J=4.5Hz,1H),7.85(s,1H),7.38(dd,J=3.6,5.6Hz,5H),7.33(dd,J=3.0,5.8Hz,1H),5.17(br.s.,2H),4.84-4.75(m,1H),4.19(br.s.,2H),3.99-3.84(m,1H),3.72(t,J=6.7Hz,1H),3.63(br.s.,2H),3.03-2.93(m,1H),2.23-2.16(m,1H),1.64(d,J=12.0Hz,1H),1.40(s,1H)。
(g)(反)-7-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯
向7-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯(300mg，0.68mmol)於DMF(6mL)中之溶液中添加N-溴丁二醯亞胺(146mg，0.82mmol)，且在25℃在N2下攪拌2小時。反應物用NaHCO3及H2O淬滅，且用EA(20mL×3)萃取。有機層用水(40mL×3)及鹽水洗，經無水Na2SO4乾燥，且濃縮，獲得(反)-7-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯(300mg，產率88.2%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ=8.19(dd,J=0.8,5.0Hz,1H),7.86(d,J=0.8Hz,1H),7.42-7.35(m,5H),5.19(br.s.,2H),4.83(ddd,J=2.0,4.0,13.1Hz,1H),4.21(br.s.,2H),4.01-3.89(m,1H),3.64(br.s.,2H),2.98(t,J=12.4Hz,1H),2.22(d,J=14.8Hz,1H),2.11-1.89(m,2H),1.66(d,J=8.0Hz,1H)。
(h)(7R,9aS)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫- 1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯
將(反)-7-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯(300mg，0.6mmol)溶解於NH4OH(7mL)及i-PrOH(7mL)中，且在100℃在密封試管中攪拌12小時。接著，冷卻反應物且減壓濃縮，獲得300mg(反)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯(粗)，其由對掌性HPLC純化，獲得(7R,9aS)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯(0.1g，33.3%)。(ESI)：M/Z(M+1)：M/Z(M+3)501：(M+1)499=10：8(條件：5-95AB_1.5min；R.T.：0.756)。對掌性HPLC條件為[儀器：Thar 80；管柱：AS 250mm×20mm，20μm；移動相：A：超臨界CO2，B：MeOH，A：B=55：45，以80ml/min；管柱溫度：38℃；噴嘴壓力：100巴；噴嘴溫度：60℃；蒸發器溫度：20℃；調整器溫度：25℃；波長：220nm]。
(i)(7R,9aS)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-4(6H)-酮
在室溫下攪拌含(7R,9aS)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯(100mg，0.2mmol)之HBr/HOAc(2mL)0.5小時。接著向反應混合物中添加異丙醇(5mL)且過濾。向水(20mL)中添加濾餅，且用固體NaHCO3調整至pH=9。接著用DCM/i-PrOH(3/1，10mL×3)萃取混合物。有機層用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥且真空濃縮，獲得(7R,9aS)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-4(6H)-酮(60mg，產率82.2%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ=7.57(d,J=5.3Hz,1H),7.00(d,J=5.0Hz,1H),4.86-4.71(m,1H),3.58-3.47(m,1H),3.43(d,J=4.3Hz,1H),3.29-3.14(m,2H),2.89-2.74(m,2H),2.16(d, J=13.6Hz,1H),2.00-1.85(m,2H),1.72-1.58(m,1H)。
中間物14
(7S,9aR)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-4(6H)-酮 (a)(7S,9aR)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯
將(反)-7-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯(300mg，0.6mmol)溶解於NH4OH(7mL)及i-PrOH(7mL)中，且在100℃下在密封試管中攪拌12小時。接著，冷卻反應混合物且減壓濃縮，獲得300mg(反)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯(粗)，其藉由對掌性HPLC純化，獲得(7S,9aR)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯(60mg，20%)。(ESI)：M/Z(M+1)：M/Z(M+3)501：(M+1)499=10：8(條件：5-95AB_1.5min；R.T.：0.760)。對掌性HPLC條件為[儀器：Thar 80；管柱：AS 250mm×20mm，20μm；移動相：A：超臨界CO2，B：MeOH，A：B=55：45，在80ml/min下；管柱溫度：38℃；噴嘴壓力：100巴；噴嘴溫度：60℃；蒸發器溫度：20℃；調整器溫度：25℃；波長：220nm]。
(b)(7S,9aR)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-4(6H)-酮
將(7S,9aR)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯(60mg，0.12mmol)溶解於HBr/HOAc(2mL)中且在室溫下攪拌0.5小時。向混合物中添加異丙醇(5mL)且過濾。向水(20mL)中添加濾餅，且用固體NaHCO3調整至pH=9。接著用DCM/i-PrOH(3/1，10mL×3)萃取混合物。有機層用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥且真空濃縮，獲得(7S,9aR)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-4(6H)-酮(40mg，產率90.9%)。(ESI)：M/Z(M+1)：M/Z(M+3)367：(M+1)365=10：8(條件：5-95AB_1.5min；R.T.：0.142)。
中間物15
(7R,9aS)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-甲基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-4(6H)-酮
向(7R,9aS)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-4(6H)-酮(200mg，0.55mmol)於甲醇(16mL)中之溶液中添加甲醛(37%，2.8mL)、NaBH3CN(340mg，5.48mmol)及HOAc(5.2mL)。接著，在25℃下攪拌混合物2小時。接著，將反應混合物添加至水(30mL)中且用固體NaHCO3調整至pH=9。接著用DCM(20mL×3)萃取混合物。有機層用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，真空濃縮，獲得(7R,9aS)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)2-甲基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-4(6H)-酮(0.1g，產率48.15%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ=7.57(d,J=5.3Hz,1H),6.99(d,J=5.0Hz,1H),4.83-4.75 (m,1H),3.19(d,J=16.6Hz,2H),3.07-2.95(m,2H),2.86(t,J=12.4Hz,1H),2.43(dd,J=7.3,12.0Hz,1H),2.35(s,3H),2.16(d,J=13.1Hz,1H),2.03-1.87(m,2H),1.76-1.58(m,1H)。
中間物16
(7S,9aR)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-甲基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-4(6H)-酮
向(7S,9aR)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-4(6H)-酮(200mg，0.55mmol)於甲醇(16mL)中之溶液中添加甲醛(37%，2.8mL)、NaBH3CN(340mg，5.48mmol)及HOAc(5.2mL)。在25℃下攪拌混合物2小時。接著，將反應混合物添加至水(30mL)中，且用固體NaHCO3調整至pH=9。用DCM(20mL×3)萃取混合物。有機層用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥且真空濃縮，獲得(7S,9aR)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)2-甲基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-4(6H)-酮(0.08g，產率38.5%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ=7.57(d,J=5.3Hz,1H),6.99(d,J=5.0Hz,1H),4.84-4.72(m,1H),3.65-3.51(m,1H),3.27-3.13(m,2H),3.07-2.94(m,2H),2.86(t,J=12.5Hz,1H),2.44(dd,J=7.5,12.3Hz,1H),2.35(s,3H),2.03-1.88(m,2H),1.76-1.60(m,1H)。
中間物17E1及17E2
(7S,9aS)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-喹嗪-4(6H)-酮，及(7R,9aR)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-喹嗪-4(6H)-酮 (a)6-(4-乙氧基-4-側氧基丁基)菸鹼酸甲酯
向6-溴菸鹼酸甲酯(7.2g，35.32mmol)於無水THF(200mL)中之溶液中相繼添加Pd(PPh3)4(1.92g，1.66mmol)、溴化(4-乙氧基-4-側氧基丁基)鋅(II)(100mL，49.99mmol)。在室溫下攪拌所得混合物隔夜。混合物用NH4Cl飽和水溶液及H2O(200mL)淬滅且用EA(35mL×3)萃取。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，獲得粗產物。藉由矽膠管柱層析法(用PE/EA(0-60%)溶離)純化粗產物，獲得呈淡黃色油狀之6-(4-乙氧基-4-側氧基丁基)菸鹼酸甲酯(5.4g，43%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=9.13(d,J=1.5Hz,1H),8.20(dd,J=2.3,8.0Hz,1H),7.39-6.98(m,1H),4.12(q,J=7.0Hz,2H),3.94(s,3H),2.96-2.72(m,2H),2.36(t,J=7.3Hz,2H),2.15-1.98(m,2H),1.25(t,J=7.2Hz,3H)。
(b)6-(4-乙氧基-4-側氧基丁基)哌啶-3-甲酸甲酯
在10℃下，向6-(4-乙氧基-4-側氧基丁基)菸鹼酸甲酯(5.4g，21.51mmol)於AcOH(60mL)中之溶液中添加NaBCH3(4.06g，64.54mmol)。在室溫下攪拌混合物隔夜。真空濃縮混合物。使用NaHCO3及H2O(150mL)將殘餘物鹼化至pH 7-8，且用DCM/i-PrOH(3：1)(25mL×3)萃取。經合併之有機層用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得呈黃色油狀之6-(4-乙氧基-4-側氧基丁基)哌啶-3-甲酸甲酯(5.3g，95.49%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=6.58(br.s.,1H),4.18-4.07(m,2H),3.74-3.61(m,3H),3.28-3.10(m,1H),2.99-2.83(m,2H),2.43-2.30(m,2H),2.04(s,3H),1.81-1.47(m,6H),1.32-1.21 (m,3H)。
(c)(外消旋)-6-側氧基八氫-1H-喹嗪-3-甲酸甲酯
使6-(4-乙氧基-4-側氧基丁基)哌啶-3-甲酸甲酯(5.3g，20.62mmol)於甲苯(80mL)中之溶液回流6小時。真空濃縮混合物且藉由製備型HPLC純化殘餘物，獲得呈黃色油狀之(反)-6-側氧基八氫-1H-喹嗪-3-甲酸甲酯(1.87g)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=5.04-4.95(m,1H),3.72-3.65(m,3H),3.34-3.21(m,1H),2.59-2.33(m,4H),2.21-2.11(m,1H),2.09-1.99(m,1H),1.89-1.77(m,2H),1.73-1.60(m,2H),1.60-1.48(m,1H),1.45-1.33(m,1H)。
(d)(反)-6-側氧基八氫-1H-喹嗪-3-甲酸
向(反)-6-側氧基八氫-1H-喹嗪-3-甲酸甲酯(1.8g，8.52mmol)於THF(20mL)及H2O(20mL)中之溶液中添加LiOH(0.89g，21.30mmol)。在室溫下攪拌混合物2小時。接著將混合物酸化至pH 5-6且分配於H2O(50mL)與DCM/i-PrOH(3：1)(15mL×3)之間。經合併之有機層用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得呈白色固體狀之(反)-6-側氧基八氫-1H-喹嗪-3-甲酸(0.92g，84.49%)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=5.08-4.98(m,1H),3.32-3.20(m,1H),2.58-2.40(m,3H),2.39-2.30(m,1H),2.18(d,J=13.1Hz,1H),2.08-1.98(m,1H),1.88-1.77(m,2H),1.73-1.62(m,2H),1.57-1.46(m,1H),1.44-1.35(m,1H)。
(e)(反)-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-6-側氧基八氫-1H-喹嗪-3-甲醯胺
在25℃下攪拌(反)-6-側氧基八氫-1H-喹嗪-3-甲酸(520mg，2.64mmol)、(3-氯吡嗪-2-基)甲胺鹽酸鹽(570mg，3.17mmol)、HATU(1.50g，3.95mmol)及TEA(0.79g，7.91mmol)於DCM(13mL)中之混合物隔夜。混合物用H2O(40mL)淬滅且用DCM(15mL×3)萃取。經合併之有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得粗產物。藉由 矽膠管柱層析法(用PE/THF(0-60%)溶離)純化粗產物，獲得呈淡黃色固體狀之(反)-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-6-側氧基八氫-1H-喹嗪-3-甲醯胺(0.7g，82.35%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=8.53-8.41(m,1H),8.33(d,J=2.5Hz,1H),6.96(br.s.,1H),5.08-4.88(m,1H),4.73-4.61(m,2H),3.40-3.26(m,1H),2.72-2.57(m,1H),2.47-2.28(m,3H),2.12-2.00(m,2H),1.89-1.77(m,4H),1.73-1.62(m,1H),1.58-1.47(m,1H)。
(f)(反)-7-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-喹嗪-4(6H)-酮
在0℃下，向(反)-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-6-側氧基八氫-1H-喹嗪-3-甲醯胺(1.16g，3.6mmol)於無水DCM(18mL)中之溶液中添加二甲基甲醯胺(44.7mg，0.61mmol)、吡啶(2.84g，36mmoL)，且隨後添加POCl3(2.71g，18.0mmol)。在0℃下攪拌所得混合物3小時。將反應物倒入冰水混合物中，用粉末狀碳酸氫鈉中和，且用DCM(10mL×3)萃取。有機層用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，且真空濃縮至乾燥。藉由矽膠管柱層析法(用PE/THF(0-80%)溶離)純化粗產物，獲得呈白色固體狀之(反)-7-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-喹嗪-4(6H)-酮(0.34g，31.1%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.85-7.74(m,2H),7.36(d,J=5.0Hz,1H),5.01(td,J=2.3,13.1Hz,1H),3.54-3.40(m,1H),3.15-2.99(m,1H),2.75-2.64(m,1H),2.53-2.32(m,2H),2.26-2.19(m,2H),2.17-2.07(m,1H),2.00-1.85(m,2H),1.82-1.70(m,1H),1.66-1.62(m,1H),1.59-1.52(m,1H)。
(g)(反)-7-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-喹嗪-4(6H)-酮
向(反)-7-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-喹嗪-4(6H)-酮(380mg，1.25mmol)於DMF(8mL)中之溶液中添加N-溴丁二醯亞胺(265.5mg，1.5mmol)，且在25℃下，在N2氣流下攪拌2小時。將反應物分配於H2O(35mL)與EA(10mL×3)之間。有機層用鹽水洗滌，經 無水Na2SO4乾燥且真空濃縮至乾燥，獲得呈淡黃色固體狀之(反)-7-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-喹嗪-4(6H)-酮(445mg，92.7%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.76(d,J=5.3Hz,1H),7.34(d,J=5.0Hz,1H),5.03-4.91(m,1H),3.45(dtd,J=2.6,6.2,11.8Hz,1H),3.08-2.95(m,1H),2.74-2.61(m,1H),2.50-2.32(m,2H),2.30-2.07(m,3H),1.98-1.83(m,2H),1.81-1.69(m,1H),1.66-1.62(m,1H),1.58-1.49(m,1H)。
(h)(反)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-喹嗪-4(6H)-酮
將(反)-7-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-喹嗪-4(6H)-酮)(355mg，0.92mol)溶解於NH4OH(5mL)及i-PrOH(5mL)中且在100℃下，在密封試管中攪拌12小時。接著，將反應物冷卻至室溫且減壓濃縮，獲得呈黃色固體狀之(反)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-喹嗪-4(6H)-酮(310mg，91.9%)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：365.7。
(i)(7S,9aS)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-喹嗪-4(6H)-酮
藉由SFC純化(反)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-喹嗪-4(6H)-酮，獲得呈黃色固體材料之(7S,9aS)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-喹嗪-4(6H)-酮(55mg，17.7%)(滯留時間=7.07min)。對掌性HPLC條件為[儀器：Thar 200；管柱：OJ 250mm×20mm，20μm；移動相：A：超臨界CO2，B：EtOH(0.05% NH3 H2O)，A：B=80：20，在70ml/min下；管柱溫度：38℃；噴嘴壓力：100巴；噴嘴溫度：60℃；蒸發器溫度：20℃；調整器溫度：25℃；波長：220nm。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.30(d,J=5.0Hz,1H),7.04(d,J=5.0Hz,1H),5.72(br.s.,2H),5.04-4.93(m,1H), 3.41(d,J=10.3Hz,1H),3.04-2.89(m,1H),2.66(t,J=12.3Hz,1H),2.47-2.31(m,2H),2.19-2.05(m,2H),2.03-1.91(m,2H),1.80-1.47(m,4H)。
(7S,9aS)-7-((3S)-8-胺基-1-溴-3,8a-二氫咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-喹嗪-4(6H)-酮(E2)
藉由SFC純化(反)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-喹嗪-4(6H)-酮，獲得呈黃色固體狀之(7S,9aS)-7-((3S)-8-胺基-1-溴-3,8a-二氫咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-喹嗪-4(6H)-酮(70mg，22.6%)(Rt=6.15min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.30(d,J=5.0Hz,1H),7.04(d,J=5.0Hz,1H),5.72(br.s.,2H),5.04-4.93(m,1H),3.41(d,J=10.3Hz,1H),3.04-2.89(m,1H),2.66(t,J=12.3Hz,1H),2.47-2.31(m,2H),2.19-2.05(m,2H),2.03-1.91(m,2H),1.80-1.47(m,4H)。
中間物18
(2R,5R)-2-(1-溴-8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-5-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯 (a)(S)-2-(苯甲基胺基)-3-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)丙酸甲酯
將(S)-2-(苯甲基胺基)-3-羥基丙酸甲酯(5g，23.9mmol)溶解於100mL CH2Cl2中。相繼添加NEt3(2.9g，28.7mmol)、催化量之DMAP(0.15g，1.2mmol)。反應混合物冷卻至0℃，且添加TBS-Cl(6.9g，25.09mmol)。接著使混合物升溫至室溫且攪拌隔夜。混合物用水(100mL)淬滅，且用CH2Cl2(100mL)萃取。有機層用飽和NH4Cl洗滌，經Na2SO4乾燥且濃縮，獲得(S)-2-(苯甲基胺基)-3-((第三丁基 二苯基矽烷基)氧基)丙酸甲酯(10.2g，95%)。LCMS：[M+H]+：448.13；滯留時間=2.01min、4min。未經任何進一步純化即原樣用於下一步驟。
(b)(R)-2-(苯甲基胺基)-3-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)丙-1-醇
向含(S)-2-(苯甲基胺基)-3-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)丙酸甲酯(5g，11.17mmol)之100mL THF中相繼添加MeOH(0.5ml)、含2.0M LiBH4之THF(6.7mL)。在室溫下攪拌反應混合物16小時，且接著藉由緩慢添加NH4Cl飽和水溶液(100mL)淬滅。混合物用EtOAc(3×100mL)萃取，經無水Na2SO4乾燥，過濾且濃縮，獲得(R)-2-(苯甲基胺基)-3-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)丙-1-醇(4.4g，94%)。LCMS：[M+H]+：422.20；滯留時間=1.22min。未經任何進一步純化即原樣用於下一步驟。
(c)((2R,5R)-4-苯甲基-5-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)嗎啉-2-基)甲醇
將(R)-2-(苯甲基胺基)-3-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)丙-1-醇(6g，14.3mmol)溶解於100mL甲苯中，添加(S)-(+)-表氯醇(1.58g，17.2mmol)，且隨後經30分鐘緩慢添加過氯酸鋰(1.82g，17.2mmol)。在室溫下攪拌反應物48小時。接著添加25mL甲醇鈉溶液(CH3OH中25重量%)，且攪拌混合物3天。添加NH4Cl飽和水溶液(100mL)，且用EtOAc(3×100mL)萃取產物。經合併之有機物用鹽水洗滌，經無水MgSO4乾燥，過濾且蒸發至乾燥，獲得粗產物，其藉由層析法(用含20%-50% EtOAc之己烷溶離)純化，獲得產物((2R,5R)-4-苯甲基-5-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)嗎啉-2-基)甲醇(2.6g，38%)。LCMS：[M+H]+：476.17；滯留時間=1.15min。
(d)(2R,5R)-5-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)-2-(羥基甲基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯
在20℃下將((2R,5R)-4-苯甲基-5-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)嗎啉-2-基)甲醇(4g，8.41mmol)溶解於100mL乙醇中，相繼添加BOC2O(2.2g，10.09mmol)、Et3N(0.86g，8.41mmol)。反應混合物用N2脫氣約10分鐘。緩慢添加Pd(OH)2(1.2g，1.68mmol)且再用N2脫氣10分鐘。用巴氏設備(Parr apparatus)在45-50psi H2O/N下氫化反應物(20小時)。接著用N2淨化混合物，經矽藻土墊過濾且用EtOH(200mL)沖洗。將濾液濃縮至乾燥，獲得殘餘物。將殘餘物溶解於EtOAc(200ml)中且用水(150mL×2)洗滌。有機相經MgSO4乾燥，過濾且真空濃縮，獲得粗產物，將其藉由矽膠管柱(使用含5%-20% MeOH之DCM)純化，獲得(2R,5R)-5-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)-2-(羥基甲基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(2.6g，64%)。LCMS：[M+H]+：486.11；滯留時間=1.43min，LC-MS方法E。
(e)(2R,5R)-5-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)-2-(((3-氯吡嗪-2-基)甲基)胺甲醯基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯
將(2R,5R)-5-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)-2-(羥基甲基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(2g，4.12mmol)溶解於100mL CH2Cl2中且冷卻至0℃。相繼添加TEMPO(0.13g，0.82mmol)、(二(乙醯氧)碘基)苯(2.65g，8.24mmol)。移除冰浴，且使反應物升溫至室溫且攪拌隔夜。混合物用200mL乙酸乙酯稀釋且用10% Na2S2O3、NaHCO3飽和水溶液及鹽水洗滌。有機相用Na2SO4乾燥，過濾且濃縮，獲得(2R,5R)-4-(第三丁氧基羰基)-5-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)嗎啉-2-甲酸(1.36g，66%)。LCMS：[M-H]+：498.23滯留時間=1.33min，LC-MS方法E。其未經任何進一步純化即原樣用於下一步驟。
將(2R,5R)-4-(第三丁氧基羰基)-5-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)嗎啉-2-甲酸(1.5g，3.0mmol)及(3-氯吡嗪-2-基)甲胺鹽酸鹽(0.54g，3.0mmol)溶解於100mL DMF中。在0℃下，向反應混合物中 添加Et3N(0.76g，6.0mmol)，隨後緩慢添加HATU(1.37g，3.6mmol)。在室溫下，在氮氣流下攪拌反應物1天，接著用飽和NaHCO3(100mL)淬滅且用EtOAc(2×150mL)萃取。經合併之有機層用水(200mL)、鹽水(200mL)洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且蒸發。對粗殘餘物進行管柱純化(使用20%-50% EtOAc/己烷)，獲得(2R,5R)-5-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)-2-(((3-氯吡嗪-2-基)甲基)胺甲醯基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(0.86g，46%)。LCMS：[M-Boc+H]+：525.25滯留時間=2.74min，LC-MS方法E。
(f)(2R,5R)-5-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)-2-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯
將(2R,5R)-5-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)-2-(((3-氯吡嗪-2-基)甲基)胺甲醯基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(1.2g，1.92mmol)溶解於乙腈：DMF之1：1(25mL)混合物中。在0℃下緩慢添加POCl3(0.613mL，6.72mmol)。在40℃下，在氮氣流下攪拌反應混合物45分鐘。在冰浴中冷卻反應物且將其倒入在冰浴中冷卻之氫氧化銨(40mL)溶液中。所得混合物用EtOAc(3×50mL)萃取，經無水Na2SO4乾燥，過濾且蒸發，獲得粗產物，將其藉由管柱(使用含20%-30% EtOAc/己烷)純化，獲得(2R,5R)-5-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)-2-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯產物1(0.57g，49%)。LCMS：[M-Boc+H]+：507.11；滯留時間=1.40min，LC-MS方法E。
(g)(2R,5R)-2-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-5-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯
在0℃下，向含(2R,5R)-5-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)-2-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(0.5g，0.82mmol)之10mL DMF中添加N-溴丁二醯亞胺(0.15g，0.82mmol)且在室溫下攪拌1小時。反應物用1M Na2S2O3(水)溶液(20mL)淬滅且用 EtOAc(3×25mL)萃取。有機相用Na2SO4乾燥且濃縮至乾燥，獲得產物(2R,5R)-2-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-5-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(0.496g，88%)。無需純化即用於下一步驟。LCMS：[M-Boc+H]+：587.04；滯留時間=1.42min，LC-MS方法E。
(h)(2R,5R)-2-(1-溴-8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-5-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯
將(2R,5R)-2-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-5-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(0.5g，0.729mmol)、(2,4-二甲氧基苯基)甲胺(0.25g，1.46mmol)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.283g，2.186mmol)溶解於20mL 1,4-二噁烷中，其在室溫下攪拌隔夜。再添加1當量(2,4-二甲氧基苯基)甲胺且加熱至50℃，且再攪拌隔夜。接著真空濃縮反應混合物，獲得粗(2R,5R)-2-(1-溴-8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-5-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(0.516g，87%)。LCMS：[M+H]+：818.31，滯留時間=1.28min，LC-MS方法E。
中間物19
(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴-5-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮
向(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(中間物6，5g，14.28mmol)於乙酸(50mL)中之經攪拌混合物中添加N-氯丁二醯亞胺(1.906g，14.28mmol)，且在80℃下攪拌混 合物1小時，濃縮反應混合物。藉由矽膠管柱層析法(ISCO，80g)(用5% MeOH(2N NH3)/二氯甲烷溶離)純化殘餘物，獲得呈白色固體狀之(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴-5-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(4.9g，12.74mmol，89%產率)。LCMS[M+H]+：實驗值386。
中間物20
7-(8-胺基-1-溴-咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-3-甲基-六氫-吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-4-酮 (a)(3R,6S)-6-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)哌啶-3-甲酸甲酯
在0℃下，在N2氛圍下，向(3R,6S)-6-(羥基甲基)哌啶-3-甲酸甲酯(0.1g，0.58mmol)於DMF(1.0mL)中之溶液中添加第三丁基氯二甲基矽烷(130.5mg，0.87mmol)及4H-咪唑(118mg，1.73mmol)。在20℃下攪拌所得混合物2小時。接著，反應混合物用H2O(3mL)淬滅且用乙酸乙酯(5mL×3)萃取，有機層用鹽水(10mL)洗滌，經Na2SO4乾燥且蒸發，獲得粗產物，其藉由急驟層析法(PE/THF=20%-60%)純化，獲得(3R,6S)-6-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)哌啶-3-甲酸甲酯(90mg，產率：54.2%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=3.66(s,3H),3.57(dd,J=3.8,9.8Hz,1H),3.40(dd,J=7.7,9.7Hz,1H),3.36-3.29(m,1H),2.70(t,J=11.5Hz,1H),2.58(tdd,J=3.6,7.3,10.6Hz,1H),2.45(tt,J=3.9,11.7Hz,1H),2.13-2.09(m,1H),1.64-1.56(m,1H),1.55-1.46(m,1H),1.21-1.08(m,1H),0.88(s,9H),0.04(s,6H)。
(b)(3R,6S)-6-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)-1-((R)-2-氯丙醯基)哌啶-3-甲酸甲酯
在0℃下，在N2氛圍下，向(3R,6S)-6-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)哌啶-3-甲酸甲酯(80mg，0.278mmol)於DCM(2mL)中之溶液中添加含三乙胺(0.078ml，0.556mmol)及2-氯丙醯氯(0.03ml，0.278mmol)之DCM(0.5mL)。在0℃下攪拌所得混合物40分鐘。反應混合物用甲醇(1mL)淬滅，且接著用DCM(5mL)及H2O(5mL)稀釋。有機層用鹽水(5mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，蒸發及藉由急驟層析法(PE/EA=20%-50%)純化，獲得(3R,6S)-6-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)-1-((R)-2-氯丙醯基)哌啶-3-甲酸甲酯(60mg，產率：57%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=5.04-4.90(m,1H),4.75(q,J=6.4Hz,1H),4.51(br.s.,1H),4.23(d,J=14.3Hz,1H),3.89-3.76(m,1H),3.68(s,3H),3.63(dd,J=4.6,10.2Hz,1H),3.55-3.49(m,1H),3.42(dd,J=4.1,14.4Hz,1H),2.81(dd,J=4.0,14.1Hz,1H),2.68(d,J=3.8Hz,1H),2.15-2.04(m,1H),2.03-1.95(m,1H),1.89-1.80(m,1H),1.63(dd,J=6.4,17.2Hz,4H),1.51(d,J=13.6Hz,1H),0.86(d,J=12.0Hz,9H),0.07-0.02(m,6H)。
(c)(3R,6S)-1-((R)-2-氯丙醯基)-6-(羥基甲基)哌啶-3-甲酸甲酯
在N2氛圍下，向(3R,6S)-6-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)-1-((R)-2-氯丙醯基)哌啶-3-甲酸甲酯(100mg，0.26mmol)於THF(2mL)中之溶液中添加氟化四丁基銨(83.01mg，0.32mmol)。攪拌所得混合物60分鐘。添加H2O(2mL)，且用乙酸乙酯(5mL×2)萃取混合物，有機層用鹽水(5mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，蒸發且藉由急驟層析法(PE/THF=20%-60%)純化，獲得(3R,6S)-1-((R)-2-氯丙醯基)-6-(羥基甲基)哌啶-3-甲酸甲酯(40mg，產率：57.7%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=5.00(q,J=6.3Hz,1H),4.85-4.56(m,1H),4.23(d,J=14.6 Hz,1H),3.99-3.78(m,1H),3.76-3.54(m,4H),3.40(dd,J=3.9,14.7Hz,1H),2.72(br.s.,1H),2.43-2.23(m,1H),2.08-1.99(m,1H),1.98-1.82(m,1H),1.68(d,J=6.5Hz,4H)。
(d)(3S,7R,9aS)-3-甲基-4-側氧基八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-甲酸甲酯
在0℃下，在N2氛圍下，向(3R,6S)-1-((R)-2-氯丙醯基)-6-(羥基甲基)哌啶-3-甲酸甲酯(260mg，0.99mmol)於無水THF(13mL)中之溶液中添加NaH(47.3mg，1.18mmol)。在20℃下攪拌所得混合物2小時。反應混合物用NaHCO3(5mL)飽和水溶液淬滅，用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，有機層用鹽水(10mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，蒸發且藉由急驟層析法(PE/THF=10%-60%)純化，獲得(3S,7R,9aS)-3-甲基-4-側氧基八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-甲酸甲酯(160mg，產率：71.4%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=4.90(ddd,J=2.0,4.1,13.0Hz,1H),4.18(q,J=6.9Hz,1H),3.91(dd,J=4.1,12.2Hz,1H),3.74(dd,J=3.0,12.0Hz,1H),3.69(s,3H),3.30-3.23(m,1H),2.67-2.55(m,1H),2.46(tdd,J=3.9,7.7,15.6Hz,1H),2.26-2.19(m,1H),1.77-1.65(m,3H),1.46(d,J=6.8Hz,3H)。
(e)(3S,7R,9aS)-3-甲基-4-側氧基八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-甲酸
在N2氛圍下，向(3S,7R,9aS)-3-甲基-4-側氧基八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-甲酸甲酯(170mg，0.75mmol)於THF(3.4mL)中之溶液中添加LiOH.H2O(63mg，1.5mmol)於H2O(0.85mL)中之溶液。在20℃下攪拌所得混合物12小時。接著蒸發混合物，且用H2O(2mL)溶解，用1M HCl酸化至pH 3-4。接著，藉由製備型HPLC分離混合物，獲得(3S,7R,9aS)-3-甲基-4-側氧基八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-甲酸(90mg，產率：56.4%)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=4.78(ddd,J=1.9,4.1,13.1Hz,1H),4.16(q,J=6.8Hz,1H),3.93(dd,J=4.3,12.3 Hz,1H),3.75(dd,J=2.8,12.3Hz,1H),3.38-3.32(m,1H),2.66(t,J=12.4Hz,1H),2.44-2.32(m,1H),2.27-2.16(m,1H),1.80-1.65(m,3H),1.39(d,J=6.8Hz,3H)。
(f)(3S,7R,9aS)-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-3-甲基-4-側氧基八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-甲醯胺
在0℃下，在N2氛圍下，向(3S,7R,9aS)-3-甲基-4-側氧基八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-甲酸(55mg，0.26mmol)於無水DCM(1mL)中之溶液中相繼添加含乙二醯二氯(0.068mL，0.77mmol)之DCM(0.5mL)、1滴DMF。在0℃下攪拌所得混合物2小時。蒸發反應混合物，用DCM(0.5mL)溶解，且在0℃下，在N2氛圍下，添加至(3-氯吡嗪-2-基)甲胺鹽酸鹽(56.1mg，0.31mmol)及三乙胺(0.079mL，0.57mmol)於DCM(1mL)中之溶液中，且在15℃下攪拌混合物12小時。接著，用DCM(5mL)及H2O(5mL)稀釋混合物。有機層用鹽水(5mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，蒸發，獲得粗產物，其接著藉由製備型TLC(PE/THF=1：1)純化，獲得(3S,7R,9aS)-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-3-甲基-4-側氧基八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-甲醯胺(55mg，產率：62.9%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=8.42(d,J=2.5Hz,1H),8.29(d,J=2.5Hz,1H),7.17(br.s.,1H),4.76-4.57(m,2H),4.16(q,J=6.9Hz,1H),3.92(dd,J=4.1,12.2Hz,1H),3.74(dd,J=2.5,12.0Hz,1H),3.37-3.25(m,1H),2.73(t,J=12.3Hz,1H),2.42(tt,J=4.0,11.8Hz,1H),2.18-2.03(m,2H),1.99-1.84(m,1H),1.79-1.68(m,2H),1.44(d,J=7.0Hz,3H)。
(g)(3R,7R,9aS)-7-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-3-甲基六氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮
在0℃下，向(3S,7R,9aS)-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-3-甲基-4-側氧基八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-甲醯胺(180mg,0.53mmol)於DCM (2.5mL)中之溶液中添加DMF(6.6mg，0.09mmol)、吡啶(0.43mL，5.31mmol)，且隨後添加含POCl3(0.25mL，2.66mmol)之DCM(0.5mL)，且在0℃下攪拌5小時。接著，將混合物倒入冰-NaHCO3水溶液(15mL)中，用乙酸乙酯(5mL×3)萃取，有機層用鹽水(5mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，蒸發，獲得粗產物，其接著藉由製備型TLC(PE/THF=1：1)純化，獲得(3R,7R,9aS)-7-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-3-甲基六氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮(120mg，產率：70.4%)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=7.80(s,1H),7.78(d,J=5.0Hz,1H),7.37(d,J=5.0Hz,1H),4.89(dd,J=3.5,13.1Hz,1H),4.22(q,J=6.8Hz,1H),4.03(dd,J=4.0,12.0Hz,1H),3.83(dd,J=2.3,12.3Hz,1H),3.50-3.43(m,1H),3.15-3.06(m,1H),2.86-2.75(m,1H),2.33-2.25(m,2H),1.99-1.86(m,2H),1.52(d,J=6.8Hz,3H)。
(h)(3R,7R,9aS)-7-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-3-甲基六氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮
在N2氛圍下，向(3R,7R,9aS)-7-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-3-甲基六氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮(120mg，0.374mmol)於無水DMF(5mL)中之溶液中添加NBS(73.2mg，0.411mmol)，且在10℃下攪拌90分鐘。LCMS顯示反應完全，接著將混合物倒入冰水(10mL)中，且用EA(10mL×3)萃取，有機層接著用H2O(10mL×8)、鹽水(10mL)洗滌，經Na2SO4乾燥且蒸發，獲得(3R,7R,9aS)-7-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-3-甲基六氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮(360mg，產率：86%)，其未經純化即直接用於下一步驟中。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=7.76(d,J=5.0Hz,1H),7.36(d,J=5.0Hz,1H),4.89-4.82(m,1H),4.22(q,J=6.7Hz,1H),4.03(dd,J=3.9,12.2Hz,1H),3.83(dd,J=2.1,12.2Hz,1H),3.48-3.40(m,1H),3.13-3.01(m,1H),2.84-2.74(m,1H),2.37-2.20(m,2H),2.00-1.84(m,2H),1.52 (s,3H)。
(i)(3R,7R,9aS)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-3-甲基六氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮
在100℃下，在30mL密封試管中加熱(3R,7R,9aS)-7-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-3-甲基六氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮(120mg，0.3mmol)於i-PrOH/NH4OH(3mL，1：1)中之混合物12小時。LCMS顯示反應完全，接著蒸發混合物，獲得粗產物，接著將其用H2O(10mL)溶解，用DCM/i-PrOH(10mL×3，3：1)萃取。有機層用鹽水(10mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，且蒸發，獲得(3R,7R,9aS)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-3-甲基六氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮(110mg，產率：96%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ=7.64(d,J=5.3Hz,1H),7.03(d,J=5.0Hz,1H),6.69(br.s.,2H),4.57(td,J=1.9,12.8Hz,1H),4.15(q,J=6.9Hz,1H),3.92(dd,J=4.1,12.2Hz,1H),3.74(dd,J=2.5,12.0Hz,1H),3.48(d,J=5.8Hz,1H),3.16(tdd,J=3.9,7.6,11.2Hz,1H),2.83(t,J=12.2Hz,1H),2.15-2.03(m,1H),1.84-1.71(m,3H),1.34(d,J=7.0Hz,3H)。
中間物21
反-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-甲基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1-酮 (a)6-乙烯基菸鹼酸甲酯
向6-溴菸鹼酸甲酯(10g，46.5mmol)於i-PrOH(100mL)中之溶液中添加乙烯基三氟硼酸鉀(12.4g，93mmol)、Et3N(14.1g，140mmol)及Pd(dppf)Cl2．DCM(1.1g)。在100℃下，在氮氣下攪拌混合物2 小時。TLC偵測到反應完全。濃縮混合物且藉由矽膠管柱層析法(用PE/EA=15/1溶離)純化殘餘物，獲得6-乙烯基菸鹼酸甲酯(7.2g，95%)。1H-NMR(CDCl3,400MHz)δ 3.94(s,3 H),5.55(d,J=12.0Hz,1 H),6.36(d,J=20.0Hz,1 H),6.85(dd,J=17.41,10.76Hz,1 H),7.39(d,J=8.22Hz,1 H),8.23(dd,J=8.22,2.35Hz,1 H),9.15(d,J=1.56Hz,1 H)。
(b)6-(2-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)乙基)菸鹼酸甲酯
向6-乙烯基菸鹼酸甲酯(7.2g，44.2mmol)於MeOH(50mL)中之溶液中添加(2,4-二甲氧基苯基)甲胺(14.7g，88.3mmol)及AcOH(50mL)。將混合物加熱至回流隔夜。濃縮混合物，用NaHCO3水溶液鹼化且用EA萃取。乾燥有機層且濃縮。藉由矽膠管柱層析法(用PE/EA=3/1溶離)純化殘餘物，獲得6-(2-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)乙基)菸鹼酸甲酯(4g，27%)。
(c)6-(2-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)乙基)哌啶-3-甲酸甲酯
向6-(2-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)乙基)菸鹼酸甲酯(3.6g，10.9mmol)於AcOH(80mL)中之溶液中添加NaBH3CN(2.74g，43.6mmol)。在室溫下攪拌混合物1小時，接著加熱至70℃且攪拌隔夜。蒸發溶劑，且將殘餘物溶解於MeOH中。用NaHCO3溶液使溶液鹼化且藉由矽膠管柱層析法(用DCM/MeOH=20/1溶離)純化，獲得6-(2-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)乙基)哌啶-3-甲酸甲酯(粗產物4.1g)。MS-ESI(m/z)：337(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：0.847min)。
(d)2-(2,4-二甲氧基苯甲基)-1-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-7-甲酸甲酯
向6-(2-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)乙基)哌啶-3-甲酸甲酯(4g，11.9mmol)於THF(130mL)中之溶液中添加CDI(3.8g，23.8mmol)。在70℃下攪拌混合物6小時。真空濃縮混合物且藉由矽膠管柱層析法 (用DCM/THF=30/1溶離)純化殘餘物，獲得反-(1g，產率45%)及順-(700mg，產率32%)2-(2,4-二甲氧基苯甲基)-1-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-7-甲酸甲酯。
對於反式異構體：
1H NMR(CD3OD,400MHz)δ 1.25-1.37(m,1 H),1.50-1.60(m,1 H),1.65-1.77(m,2 H),1.96-2.15(m,2 H),2.40-2.51(m,1 H),2.60(t,J=12.0Hz,1 H),3.11-3.25(m,3 H),3.67(s,3 H),3.79(s,6 H),4.40-4.56(m,2 H),4.76-4.86(m,1 H),6.38-6.51(m,2 H),7.20(d,J=8.0Hz,1 H)。
對於順式異構體：
1H NMR(CD3OD,400MHz)δ 1.41-1.51(m,2 H),1.58-1.71(m,2 H),1.85-1.94(m,1 H),2.12-2.19(m,1 H),2.56-2.62(m,1 H),2.69-2.75(m,1 H),3.03-3.18(m,3 H),3.62(s,3 H),3.72(d,J=2.74Hz,6 H),4.32-4.50(m,2 H),4.89-4.95(m,1 H),6.34-6.41(m,2 H),7.12(d,J=8.0Hz,1 H)。
(e)反-1-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-7-甲酸甲酯
在90℃下攪拌反-2-(2,4-二甲氧基苯甲基)-1-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-7-甲酸甲酯(600mg，1.6mmol)於TFA(4mL)中之溶液1小時。蒸發溶劑且殘餘物直接用於下一步驟中。MS-ESI(m/z)：213(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：0.912min)。
(f)反-2-甲基-1-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-7-甲酸甲酯
將反-1-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-7-甲酸甲酯(1.6mmol)於THF(30mL)中之溶液冷卻至0-5℃且逐份添加NaH(199mg，5.0mmol)。在室溫下攪拌混合物30分鐘，且接著添加MeI(706mg，5.0mmol)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜。反應物用H2O(0.5mL)淬滅且蒸發揮發物。殘餘物直接用於下一步驟中。
(g)反-2-甲基-1-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-7-甲酸
向反-2-甲基-1-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-7-甲酸甲酯(1.6mmol)於MeOH/THF/H2O(10mL/10mL/3mL)中之溶液中添加LiOH．H2O(83mg，2.0mmol)。在室溫下攪拌混合物2小時。蒸發揮發物且殘餘物直接用於下一步驟中。MS-ESI(m/z)：213(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：0.917min)。
(h)反-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-2-甲基-1-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-7-甲醯胺
向反-2-甲基-1-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-7-甲酸(1.6mmol)於DCM(20mL)中之溶液中添加(3-氯吡嗪-2-基)甲胺鹽酸鹽(356mg，2.0mmol)、EDC(477mg，2.5mmol)、HOBT(336mg，2.5mmol)及TEA(670mg，6.6mmol)，且在50℃下攪拌所得混合物隔夜。蒸發揮發物且藉由矽膠管柱層析法(用DCM/THF=3/1溶離)純化殘餘物，獲得反-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-2-甲基-1-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-7-甲醯胺(90mg，四個步驟：17%)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ 1.24-1.34(m,1 H),1.67-1.76(m,3 H),1.92-2.08(m,3 H),2.29-2.38(m,1 H),2.64(t,J=12.0Hz,1 H),2.87(s,3 H),3.12-3.21(m,3 H),4.59-4.69(m,3 H),6.89-7.01(m,1 H),8.24(d,J=4.0Hz,1 H),8.37(d,J=4.0Hz,1 H)。
(i)反-7-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-甲基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1-酮
向反-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-2-甲基-1-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-7-甲醯胺(100mg，0.3mmol)於MeCN(20mL)中之溶液中添加PCl5(185mg，0.9mmol)。在60℃下攪拌混合物1小時，接著在1小時期間分部分添加另一批PCl5(185mg，0.9mmol)，且在60℃下再攪拌反應混合物20分鐘。藉由LCMS偵測到反應完全。冷卻後，用 DCM及NaHCO3水溶液處理反應物溶液。分離有機層，乾燥且濃縮。藉由矽膠管柱層析法(用DCM/THF=5/1溶離)純化殘餘物，獲得反-7-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-甲基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1-酮(75mg，79%)。MS-ESI(m/z)：320(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：1.073min)。
(j)反-7-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-甲基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1-酮
向反-7-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-甲基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1-酮(75mg，0.24mmol)於DMF(1.5mL)中之溶液中添加NBS(46mg，0.26mmol)於DMF(0.5mL)中之溶液。在室溫下攪拌混合物1小時。用EA及水處理反應混合物，分離有機層，乾燥且濃縮。藉由矽膠管柱層析法(用DCM/THF=10/1溶離)純化殘餘物，獲得反-7-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-甲基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1-酮(75mg，95%)。MS-ESI(m/z)：400(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：1.205min)。
(k)反-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-甲基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1-酮
向30mL密封試管中添加反-7-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-甲基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1-酮(75mg，0.2mmol)於NH3/i-PrOH(4mL)中之溶液，且在100℃下攪拌混合物隔夜。濃縮混合物且藉由矽膠管柱層析法(用DCM/MeOH=30/1溶離)純化殘餘物，獲得標題化合物(55mg，73%)。MS-ESI(m/z)：379(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：0.934min)。
以順-2-(2,4-二甲氧基苯甲基)-1-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-7-甲酸甲酯為起始物質之相同程序獲得順-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-甲基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1-酮。MS-ESI (m/z)：379(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：0.954min)。
中間物22
3-(8-胺基-1-溴-咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-六氫-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-6-酮 (a)(R)-5-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-2-酮
向(R)-5-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-2-酮(25g，217.14mmol)於無水DMF(100mL)中之溶液中添加TBSCl(49.09g，325.72mmol)及4H-咪唑(44.35g，651.43mmol)。在25℃下攪拌混合物3小時。藉由添加水(100mL)淬滅混合物，接著用EtOAc(200mL×4)萃取混合物。經合併之有機層用鹽水(100mL×5)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得粗產物，將其使用矽膠管柱層析法(THF/PE=5%-30%)純化，獲得呈無色油狀之(R)-5-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-2-酮(43g，產率86.33%)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)=5.80(s,1H),3.76-3.64(m,1H),3.61(d,J=2.8Hz,1H),3.46-3.41(m,1H),2.37-2.32(m,2H),2.20-2.16(m,1H),1.74-1.70(m,1H),0.88(s,9H),0.06(s,6H)；(ESI)：M/Z(M+1)：230.1(LC-MS方法C；滯留時間：1.466)。
(b)(R)-5-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)-1-((R)-環氧乙烷-2-基甲基)吡咯啶-2-酮
在0℃下，向(R)-5-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-2-酮(16g，69.75mmol)於無水THF(500mL)中之溶液中逐份添加NaH(60%，3.07g，76.72mmol)。在25℃下攪拌混合物1小時，接著添加(S)-2-(氯甲基)環氧乙烷(7.74g，83.70mmol)且將混合物加熱至 80℃，再攪拌10小時。藉由在0℃下添加飽和NH4Cl(200mL)淬滅混合物，接著用EtOAc(100mL×4)萃取混合物，經合併之有機層用鹽水(100mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得粗產物，將其使用矽膠管柱層析法(THF/PE=5%-35%)純化，獲得呈無色油狀之(R)-5-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)-1-((R)-環氧乙烷-2-基甲基)吡咯啶-2-酮(4g，產率20%)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)=4.19(dd,J=2.8,14.8,1H),3.80-3.77(m,2H),3.60-3.56(m,1H),3.25-3.13(m,1H),3.08-3.00(m,1H),2.77(d,J=8.8Hz,1H),2.74-2.65(m,1H),2.49-2.41(m,1H),2.40-2.26(m,1H),2.23-2.08(m,1H),1.93-1.82(m,1H),0.87(s,9H),0.04(s,6H)；(ESI)：M/Z(M+1)：286.1(LC-MS方法C；R.T.：0.804)。
(c)(R)-5-(羥基甲基)-1-((R)-環氧乙烷-2-基甲基)吡咯啶-2-酮
向(R)-5-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)-1-((R)-環氧乙烷-2-基甲基)吡咯啶-2-酮(2.7g，9.46mmol)於無水THF(30mL)中之溶液中逐份添加TBAF(2.97g，11.35mmol)。在25℃下攪拌反應混合物2小時。藉由水(3mL)淬滅反應物，接著濃縮混合物獲得粗產物，將其使用矽膠管柱層析法(THF/PE=20%-100%)純化，獲得呈黃色油狀之(R)-5-(羥基甲基)-1-((R)-環氧乙烷-2-基甲基)吡咯啶-2-酮(1g，產率61.8%)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)=3.99(dd,J=2.8,14.8,1H),3.90-3.82(m,1H),3.80-3.74(m,1H),3.57-3.53(m,1H),3.07-3.04(m,1H),2.95-2.86(m,1H),2.77-2.75(m,1H),2.58-2.56(m,1H),2.45-2.41(m,1H),2.36-2.30(m,1H),2.22-2.13(m,1H),1.99-1.92(m,1H)；(ESI)：M/Z(M+1)：172.1(LC-MS方法C；R.T.：0.201)。
(d)(3R,8aR)-3-(羥基甲基)四氫-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-6(7H)-酮
向EtOH(30mL)中添加Na(1.93g，84.12mmol)且在25℃下攪拌混合物40分鐘，接著在0℃下添加(R)-5-(羥基甲基)-1-((R)-環氧乙烷- 2-基甲基)吡咯啶-2-酮(2.4g，8.18mmol)於無水EtOH(30mL)中之溶液。在25℃下攪拌混合物16小時。用1M HCl將混合物調整至pH=7且濃縮，獲得殘餘物，將其用DCM(100mL)稀釋且攪拌20分鐘。過濾混合物且濃縮濾液，獲得呈黃色油狀之粗產物(3R,8aR)-3-(羥基甲基)四氫-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-6(7H)-酮(2.4g，30%(3R,8aR)-3-(羥基甲基)四氫-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-6(7H)-酮，產率30%)，其立即用於下一步驟中。(ESI)：M/Z(M+1)：172.1(LC-MS方法C；R.T.：0.100)。
(e)(3R,8aR)-6-側氧基六氫-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-3-甲酸
向(3R,8aR)-3-(羥基甲基)四氫-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-6(7H)-酮(1.1g，6.43mmol)於丙酮(50mL)及飽和NaHCO3(15mL)中之溶液中添加TEMPO(50.2mg，0.321mmol)及NaBr(198.3mg，1.93mol)。接著，在0℃下，逐份添加1,3,5-三氯-1,3,5-三嗪-2,4,6-三酮(3g，12.85mmol)。在25℃下攪拌反應混合物12小時。藉由i-PrOH(20mL)淬滅反應物且再攪拌60分鐘。過濾混合物且用飽和NaHCO3將濾液鹼調整至PH=8。將其用DCM(100mL)萃取，用2M HCl將水層酸調整至PH=4。將其用DCM/i-PrOH(3：1，100mL×4)萃取，經合併之有機層用鹽水(30mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得呈黃色油狀之(3R,8aR)-6-側氧基六氫-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-3-甲酸(500mg，產率46%)，其立即用於下一步驟中。(ESI)：M/Z(M+1)：186.1(LC-MS方法C；R.T.：0.205)
(f)(3R,8aR)-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-6-側氧基六氫-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-3-甲醯胺
向(3R,8aR)-6-側氧基六氫-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-3-甲酸(600mg，3.24mmoL)於DCM(20mL)中之溶液中添加氯甲酸異丁酯(531mg，3.56mmol)及TEA(0.53mL，3.78mmol)，在0℃下攪拌混合物1 小時，接著在0℃下添加(3-氯吡嗪-2-基)甲胺鹽酸鹽(641mg，3.56mmol)及TEA(1.1mL，7.56mmol)。在25℃下攪拌混合物3小時。向混合物中添加水(20mL)及DCM(50mL)，接著分離混合物且用DCM(50mL×3)萃取水層，經合併之有機層用鹽水(20mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得粗產物，將其使用矽膠管柱層析法(MeOH/DCM=0-10%)純化，獲得呈透明油狀之(3R,8aR)-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-6-側氧基六氫-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-3-甲醯胺(300mg，產率29.8%)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)d=8.50(d,J=2.5Hz,1H),8.36(d,J=2.0Hz,1H),7.78(br.s.,1H),4.74(d,J=5.0Hz,2H),4.52(dd,J=3.1,13.4Hz,1H),4.23(dd,J=3.8,11.3Hz,1H),3.97(dd,J=3.0,11.0Hz,1H),3.75(dtd,J=4.0,7.3,10.8Hz,1H),3.30(t,J=11.0Hz,1H),2.86(t,J=12.3Hz,1H),2.60-2.43(m,2H),2.29-2.13(m,1H),1.70-1.54(m,1H)。
(g)(3R,8aR)-3-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)四氫-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-6(7H)-酮
在0℃下，向(3R,8aR)-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-6-側氧基六氫-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-3-甲醯胺(600mg，1.93mmol)於無水MeCN(15mL)中之溶液中添加PCl5(2g，9.65mmol)。在15℃下攪拌混合物15小時。將混合物倒入冰水中，用飽和NaHCO3鹼調整，接著分離，且水層用DCM(50mL×3)萃取，經合併之有機層用鹽水(20mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得粗產物，其使用矽膠管柱層析法(MeOH/DCM=0-10%)純化，獲得呈黃色固體狀之(3R,8aR)-3-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)四氫-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-6(7H)-酮(300mg，產率53%)。(ESI)：M/Z(M+1)：293.0(LC-MS方法C；R.T.：0.585)
(h)(3R,8aR)-3-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)四氫-1H-吡咯并 [2,1-c][1,4]噁嗪-6(7H)-酮
向(3R,8aR)-3-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)四氫-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-6(7H)-酮(300mg，1.02mmol)於無水MeCN(10mL)中之溶液中添加1-溴吡咯啶-2,5-二酮(219mg，1.23mmol)。在25℃下攪拌混合物1小時。藉由在0℃下添加水(10mL)淬滅混合物，接著用DCM/i-PrOH(3：1，30mL×4)萃取混合物，經合併之有機層用鹽水(10mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得呈黃色固體狀之(3R,8aR)-3-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)四氫-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-6(7H)-酮(320mg，產率84%)，其立即用於下一步驟中。(ESI)：M/Z(M+1)：370.8(LC-MS方法C；R.T.：1.133)。
(i)(3R,8aR)-3-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)四氫-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-6(7H)-酮
向(3R,8aR)-3-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)四氫-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-6(7H)-酮(300mg，0.807mmol)於NH3．H2O(4mL)中之溶液中添加i-PrOH(4mL)。在100℃下，在密封試管中攪拌混合物12小時。濃縮混合物，獲得呈黃色固體狀之粗產物(3R,8aR)-3-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)四氫-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-6(7H)-酮(250mg，產率88%)，其立即用於下一步驟中。(ESI)：M/Z(M+1)：351.8(LC-MS方法C；R.T.：1.239)。
中間物22a及22b
6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2,2-二甲基六氫吲哚嗪-3(2H)-酮 (a)5-(甲氧基羰基)-2-甲基吡啶1-氧化物
在室溫下攪拌6-甲基菸鹼酸甲酯(15g，99.34mmol)及m-CPBA(18.8g，109.3mmol)於DCM(100mL)中之溶液4小時。用200mL Na2SO3飽和水溶液及100mL NaHCO3飽和水溶液淬滅反應混合物。用EA(200mL×3)萃取所得混合物。經合併之EA層用鹽水洗滌且經Na2SO4乾燥。過濾且濃縮濾液。藉由矽膠管柱層析法(PE/EtOAc=5/1)純化殘餘物，獲得呈黃色固體狀之5-(甲氧基羰基)-2-甲基吡啶1-氧化物(12g，72%)。MS-ESI(m/z)：168.2(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：0.32min)。
(b)6-(羥基甲基)菸鹼酸甲酯
在0℃下，向5-(甲氧基羰基)-2-甲基吡啶1-氧化物(12g，72mmol)於DCM(50mL)中之溶液中逐滴添加TFAA(25mL)。在回流下攪拌混合物2小時。濃縮混合物且用NaHCO3飽和水溶液將殘餘物調整至pH 9。用EA萃取所得混合物。移除溶劑，且藉由矽膠管柱層析法(PE/EtOAc=1/1)純化殘餘物，獲得6-(羥基甲基)菸鹼酸甲酯(7g，58%)。MS-ESI(m/z)：168.2(M+1)+(LC-MS方法C；Rt：0.25min)。
(c)6-甲醯基菸鹼酸甲酯
在20℃下攪拌6-(羥基甲基)菸鹼酸甲酯(7g，37mmol)及MnO2(32.3g，372mmol)於DCM(200mL)中之混合物4小時。過濾混合物，且濃縮濾液。藉由矽膠管柱層析法(PE/EtOAc=5/1)純化殘餘物，獲得6-甲醯基菸鹼酸甲酯(6g，97%)。MS-ESI(m/z)：166.2(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：0.36min)。
(d)6-(1-羥基-3-甲氧基-2,2-二甲基-3-側氧基丙基)菸鹼酸甲酯
在室溫下，在氮氣氛圍下，向1-甲基-1H-咪唑(296mg，3.6mmol)及無水LiCl(303mg，7.2mmol)於DMF(150mL)中之經攪拌溶液中添加6-甲醯基菸鹼酸甲酯(6g，36mmol)及((1-甲氧基-2-甲基丙-1-烯-1-基)氧基)三甲基矽烷(9.4g，54mmol)，且攪拌所得混合物10小 時。藉由添加少量1N HCl水溶液淬滅反應物。用乙酸乙酯萃取產物兩次。用水及鹽水洗滌經合併之有機層，且蒸發至乾燥。藉由矽膠管柱層析法(PE/EtOAc=10/1)純化殘餘物，獲得呈黃色固體狀之6-(1-羥基-3-甲氧基-2,2-二甲基-3-側氧基丙基)菸鹼酸甲酯(5.2g，53.7%)。
MS-ESI(m/z)：268.0(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：0.888min)。
(e)6-(3-甲氧基-2,2-二甲基-1-((甲基磺醯基)氧基)-3-側氧基丙基)菸鹼酸甲酯
在冰浴下，向6-(1-羥基-3-甲氧基-2,2-二甲基-3-側氧基丙基)菸鹼酸甲酯(5g，18.7mmol)及TEA(3.78g，37.5mmol)於DCM(200mL)中之混合物中添加MsCl(5.15g，21mmol)。在室溫下攪拌混合物2小時。濃縮混合物且藉由矽膠管柱層析法(PE/EtOAc=10/1)純化殘餘物，獲得呈黃色固體狀之6-(3-甲氧基-2,2-二甲基-1-((甲基磺醯基)氧基)-3-側氧基丙基)菸鹼酸甲酯(4g，61.9%)。MS-ESI(m/z)：346.2(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：1.072min)。
(f)6-(3-甲氧基-2,2-二甲基-3-側氧基丙基)菸鹼酸甲酯
在室溫下，使6-(3-甲氧基-2,2-二甲基-1-((甲基磺醯基)氧基)-3-側氧基丙基)菸鹼酸甲酯(4g，11.6mmol)及Pd/C(4g)於MeOH(15mL)中之混合物氫化2小時。過濾混合物且濃縮濾液，藉由矽膠管柱層析法(DCM/THF=5/1)純化殘餘物，獲得6-(3-甲氧基-2,2-二甲基-3-側氧基丙基)菸鹼酸甲酯(2.4g，82.4%)。MS-ESI(m/z)：252.2(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：1.059min)。
(g)2,2-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸甲酯
向6-(3-甲氧基-2,2-二甲基-3-側氧基丙基)菸鹼酸甲酯(1.2g，4.78mmol)於AcOH(20mL)中之溶液中分部分添加NaCNBH3(1.5g，24mmol)。在60℃下攪拌混合物16小時。濃縮混合物，且藉由矽膠管柱 層析法(PE/THF=10/1)純化殘餘物，獲得2,2-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸甲酯(600mg，55.8%)。
MS-ESI(m/z)：226.0(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：0.918min)。
(h)2,2-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸
在15℃下攪拌2,2-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸甲酯(530mg，2.36mmol)及LiOH(495mg，11.8mmol)於MeOH/THF/H2O(5mL/5mL/2mL)中之混合物2小時。移除揮發物且使用1N HCl將混合物調整至pH 4。用DCM/i-PrOH(10/1)萃取所得混合物。經Na2SO4乾燥有機層。移除溶劑，獲得2,2-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸(500mg，100%)，其直接用於下一步驟中。MS-ESI(m/z)：212.0(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：1.032min)。
(i)N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-2,2-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲醯胺
向2,2-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸(500mg，2.4mmol)及(3-氯吡嗪-2-基)甲胺(509mg，2.83mmol)於THF(20mL)中之溶液中添加HATU(1.075g，2.8mmol)及TEA(596mg，5.9mmol)。在室溫下攪拌混合物4小時。減壓移除揮發物，且用DCM萃取剩餘混合物，經合併之有機層用水、鹽水洗滌且經無水Na2SO4乾燥。真空濃縮有機層且藉由矽膠管柱層析法(PE/THF=10/1)純化殘餘物，獲得N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-2,2-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲醯胺(700mg，88.3%)。MS-ESI(m/z)：337.2(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：0.935min)。
(j)6-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2,2-二甲基六氫吲哚嗪-3(2H)-酮
在60℃下攪拌N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-2,2-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲醯胺(700mg，2.08mmol)及PCl5(1.5g，7.3mmol)於 MeCN(40mL)中之混合物4小時。用NaHCO3飽和溶液淬滅混合物，且用EA萃取。用鹽水洗滌EA層，且經無水Na2SO4乾燥。過濾混合物，且濃縮濾液。藉由矽膠管柱層析法(DCM/THF=10/1)純化殘餘物，獲得6-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2,2-二甲基六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(350mg，52.8%)。MS-ESI(m/z)：319.2(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：1.04min)。
(k)6-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2,2-二甲基六氫吲哚嗪-3(2H)-酮
在15℃下攪拌6-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2,2-二甲基六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(200mg，0.63mmol)及NBS(145mg，0.82mmol)於DMF(5mL)中之混合物1小時。用水處理混合物且用EA萃取。用鹽水洗滌EA層，且經無水Na2SO4乾燥。過濾且濃縮濾液。藉由矽膠管柱層析法(PE/EtOAc=1/1)純化殘餘物，獲得6-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2,2-二甲基六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(200mg，79.9%)。MS-ESI(m/z)：398.9(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：1.105min)。
(l)6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2,2-二甲基六氫吲哚嗪-3(2H)-酮
在80℃下，在30mL密封試管中，攪拌6-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2,2-二甲基六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(200mg，0.5mol)於用NH3飽和之i-PrOH(10mL)中之溶液16小時。濃縮混合物且藉由製備型TLC純化殘餘物，獲得6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2,2-二甲基六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(180mg，94.3%)，其藉由SFC分離，僅獲得兩種反式異構體(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2,2-二甲基六氫吲哚嗪-3(2H)-酮及(6S,8aR)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2,2-二甲基六氫吲哚嗪-3(2H)-酮。
中間物23
4-(8-胺基-1-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)哌啶-2-甲酸 (a)異菸鹼酸乙酯
向異菸鹼酸(5g，40.65mmoL)於EtOH(50mL)中之懸浮液中逐滴添加濃硫酸(3.98g，40.65mmol)。逐滴添加後，在80℃下攪拌混合物15小時。在0℃下向此懸浮液中添加水且用NaHCO3調整至pH=6.5。用EA(150mL×3)萃取混合物，經合併之有機層用鹽水(100mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得異菸鹼酸乙酯(4g，產率67%)。1H NMR(300MHz，氯仿-d)δ=8.77(d,J=5.5Hz,2H),7.90-7.79(m,2H),4.41(q,J=7.2Hz,2H),1.41(t,J=7.2Hz,3H)。
(b)2-胺甲醯基異菸鹼酸乙酯
經10分鐘向異菸鹼酸乙酯(4g，26.46mmol)及濃H2SO4(2.6g，26.46mmol)於甲醯胺(32mL)中之溶液中各別且同時添加30% H2O2(4.5g，39.69mmol)及粉末狀FeSO4.7H2O(11g，39.69mmol)，有效攪拌且在冰浴中冷卻。完成添加後，移除冰浴且攪拌12小時。添加檸檬酸三鈉(52.8mL，1M)且藉由添加NaHCO3使混合物達到pH=8。用DCM(100mL×5)萃取混合物，經合併之有機層用鹽水(50mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得粗產物，其自EtOH再結晶，獲得2-胺甲醯基異菸鹼酸乙酯(1.3g，產率25%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ=8.85(dd,J=0.8,4.8Hz,1H),8.42(dd,J=0.9,1.6Hz,1H),8.26(br.s.,1H),8.02(dd,J=1.6,4.9Hz,1H),7.83(d,J=1.5Hz,1H),4.43-4.34(m,2H),1.36(t,J=7.2Hz,3H)。
(c)2-胺甲醯基哌啶-4-甲酸乙酯
使2-胺甲醯基異菸鹼酸乙酯混合物(1.3g，6.7mmol)在CH3OH(50mL)中形成漿料，接著添加HCl(0.56mL，6.7mmol)及PtO2(0.1g)。在攪拌下，在55psi下使混合物氫化22小時。過濾反應混合物且濃縮，獲得2-胺甲醯基哌啶-4-甲酸乙酯(1.3g，產率：97%)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=4.16(q,J=7.0Hz,2H),3.89(dd,J=2,6,12.9Hz,1H),3.45(d,J=11.3Hz,1H),3.14-3.00(m,1H),2.85-2.71(m,1H),2.53(d,J=14.1Hz,1H),2.24-2.11(m,1H),1.83-1.67(m,2H),1.49-1.36(m,1H),1.30-1.18(m,3H)。
(d)2-胺甲醯基哌啶-1,4-二甲酸1-苯甲酯4-乙酯
使2-胺甲醯基哌啶-4-甲酸乙酯(200mg，1mol)在二氯甲烷(4mL)中形成漿料且添加N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(387.5mg，3mmol)，隨後逐滴添加氯甲酸苯甲酯(179mg，1mmol)。在13℃下攪拌混合物1小時。蒸發反應混合物獲得粗產物，將其使用矽膠管柱層析法(PE/THF=100%-60%)純化，獲得2-胺甲醯基哌啶-1,4-二甲酸1-苯甲酯4-乙酯(170mg，產率51%)。1HNMR(400MHz，甲醇-d4)δ=7.43-7.23(m,5H),5.18-5.06(m,2H),4.52(t,J=6.0Hz,1H),4.19-4.03(m,2H),3.93-3.82(m,1H),3.51(t,J=11.7Hz,1H),2.68(五重峰，J=5.7Hz,1H),2.48-2.36(m,1H),2.20-2.09(m,1H),2.00(d,J=9.5Hz,1H),1.85-1.73(m,1H),1.29-1.20(m,3H)。
(e)2-氰基哌啶-1,4-二甲酸1-苯甲酯4-乙酯
將2-胺甲醯基哌啶-1,4-二甲酸1-苯甲酯4-乙酯(120mg，0.36mmol)溶解於吡啶(2mL)中。使混合物冷卻至0℃且逐滴添加SOCl2(254mg，2.16mmol)且在13℃下靜置12小時。濃縮反應混合物且將其分配於稀HCl與二氯甲烷之間。用二氯甲烷(20mL×3)萃取水層，經合併之有機層用鹽水(20mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得粗產物，其使用矽膠管柱層析法(PE/THF=100%-80%)純化，獲得 2-氰基哌啶-1,4-二甲酸1-苯甲酯4-乙酯(90mg，產率79%)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ=7.42-7.25(m,5H),5.29(d,J=3.3Hz,1H),5.19-5.05(m,1H),4.10(qq,J=7.1,10.7Hz,1H),3.93-3.80(m,1H),3.09(t,J=12.8Hz,1H),2.92-2.82(m,1H),2.33(dd,J=1.6,14.7Hz,1H),2.13-1.98(m,2H),1.66-1.53(m,1H),1.21(t,J=7.2Hz,3H)。
(f)1-((苯甲基氧基)羰基)-2-氰基哌啶-4-甲酸
向2-氰基哌啶-1,4-二甲酸1-苯甲酯4-乙酯(80g，0.253mmoL)於THF/H2O(1：1，4mL)中之溶液中添加LiOH.H2O(20mg，0.476mmol)。在13℃下攪拌混合物13小時。用DCM(10mL×1)萃取混合物，且水層用2M HCl酸化，用EA(5mL×5)萃取，經合併之有機層用鹽水(5mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得1-((苯甲基氧基)羰基)-2-氰基哌啶-4-甲酸(70mg，產率95%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ=12.56(br.s.,1H),7.44-7.25(m,5H),5.47(br.s.,1H),5.13(s,2H),4.09-4.03(m,1H),2.89(br.s.,1H),2.83-2.71(m,1H),2.20-2.09(m,1H),1.94(br.s.,1H),1.78-1.65(m,1H),1.40(dq,J=4.6,12.8Hz,1H)。
(g)4-(((3-氯吡嗪-2-基)甲基)胺甲醯基)-2-氰基哌啶-1-甲酸苯甲酯
向1-((苯甲基氧基)羰基)-2-氰基哌啶-4-甲酸(30mg，0.104mmol)於無水DCM(5mL)中之溶液中添加HATU(43.5mg，0.114mmol)、Et3N(31.56mg，0.312mmol)及(3-氯吡嗪-2-基)甲胺鹽酸鹽(20.5mg，0.114mmol)。在13℃下攪拌反應混合物12小時。藉由添加水(10mL)淬滅反應物，接著將其用DCM(10mL×3)萃取，經合併之有機層用鹽水(10mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得粗產物，其使用矽膠管柱層析法(PE/THF=100%-50%)純化，獲得4-(((3-氯吡嗪-2-基)甲基)胺甲醯基)-2-氰基哌啶-1-甲酸苯甲酯(40mg，產率93%)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=8.54(d,J=2.5Hz,1H),8.35(d,J=2.5 Hz,1H),7.44-7.31(m,5H),5.53(d,J=4.0Hz,1H),5.21(d,J=2.5Hz,2H),4.64(s,2H),4.25(d,J=13.1Hz,1H),2.87-2.84(m,1H),2.88-2.77(m,3H),2.16(d,J=12.5Hz,1H),2.02-1.91(m,2H),1.66(dq,J=4.8,12.9Hz,1H)。
(h)4-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-氰基哌啶-1-甲酸苯甲酯
在0℃下，向4-(((3-氯吡嗪-2-基)甲基)胺甲醯基)-2-氰基哌啶-1-甲酸苯甲酯(40mg，0.096mol)於CH3CN(3mL)中之混合物中添加POCl3(44mg，0.287mmol)及N,N-二甲基甲醯胺(催化量)。在17℃下攪拌混合物10小時。將反應混合物倒入冰水中，用NaHCO3鹼調整且用二氯甲烷(10mL×3)萃取。經合併之有機層用鹽水(5mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，濃縮，獲得4-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-氰基哌啶-1-甲酸苯甲酯(30mg，產率：79%)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=8.23(d,J=5.0Hz,1H),7.98(s,1H),7.84(s,1H),7.44-7.31(m,6H),5.63(t,J=3.6Hz,1H),5.26-5.17(m,2H),4.31(d,J=14.1Hz,1H),3.71-3.61(m,1H),2.31(dd,J=4.4,9.7Hz,2H),2.11(s,2H),1.78(dq,J=4.6,12.8Hz,1H)。
(i)4-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-氰基哌啶-1-甲酸苯甲酯
向4-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-氰基哌啶-1-甲酸苯甲酯(1.5g，3.78mmol)於CH3CN(20mL)中之混合物中添加1-溴-吡咯啶-2,5-二酮(0.74g，4.16mmol)。在15℃下攪拌混合物1小時。反應混合物用水淬滅，且用乙酸乙酯(100mL×3)萃取。經合併之有機層用鹽水(50mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥且蒸發，獲得4-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-氰基哌啶-1-甲酸苯甲酯(1.5g，產率84%)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=7.67(d,J=5.0Hz,1H),7.45-7.32(m,6H),5.67-5.41(m,1H),5.20(s,2H),4.35(br.s.,1H),3.52-3.38(m,1H),3.27(br.s.,1H),2.35(br.s.,1H),2.26-2.14(m,1H),2.11-1.88(m, 2H)。
(j)4-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-氰基哌啶-1-甲酸苯甲酯
密封試管中4-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-氰基哌啶-1-甲酸苯甲酯(900mg，1.90mmol)於NH3.H2O/i-PrOH(30mL，3：2)中之混合物。在100℃下攪拌混合物12小時。使反應混合物冷卻至9℃且濃縮，獲得4-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-氰基哌啶-1-甲酸苯甲酯(900mg，產率100%)。
MS(EI)：M/Z(M+1)：454.8。
(k)4-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)哌啶-2-甲酸
在100℃下攪拌4-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-氰基哌啶-1-甲酸苯甲酯(300mg，0.66mmol)於6M HCl(10mL)中之混合物3小時。濃縮反應混合物，獲得粗產物，其藉由SFC(管柱：OJ-H；共溶劑：IPA(0.05% DEA)；注射體積：2；總流量：2.5)純化，獲得(2S,4R)-4-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)哌啶-2-甲酸(30mg)、(2R,4S)-4-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)哌啶-2-甲酸(22mg)及(2R,4R)-4-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)哌啶-2-甲酸(25mg，總產率：34.4)。MS(EI)：M/Z(M+1)：340.0。
中間物24
(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1-乙烯基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮 (a)(3R,6S)-6-(1-羥基烯丙基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-乙酯
在-78℃下，向(3R,6S)-6-甲醯基哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-乙酯 (750mg，2.46mmol)於THF(50mL)中之溶液中添加C2H3MgBr(3.68mL，3.68mmol)，且在N2氛圍下攪拌3小時。將反應混合物倒入NH4Cl水溶液(30mL)中且用EA(50mL×3)萃取。真空濃縮有機層獲得殘餘物，其使用製備型TLC(PE：EA=1：1)純化，獲得呈無色油狀之產物(3R,6S)-6-(1-羥基烯丙基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-乙酯(340mg，產率41.5%)。1HNMR(400MHz，氯仿-d)：δ=7.39-7.31(m,5H),5.94-5.73(m,1H),5.42-5.00(m,5H),4.46-4.27(m,1H),4.16-4.01(m,1H),3.59(s,3H),2.62(br.s.,1H),2.14-1.87(m,2H),1.82-1.74(m,1H),1.62-1.53(m,1H)。
(b)(6R,8aS)-3-側氧基-1-乙烯基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲酸
在-78℃下向(3R,6S)-6-(1-羥基烯丙基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-乙酯(340mg，0.98mmol)於THF(5mL)中之溶液中添加1M LiOH.H2O(2.94mL，2.94mmol)且在20℃下在N2氛圍下攪拌3小時。TLC(PE：THF=1：1)顯示起始物質完全消耗。接著將反應混合物倒入水(50mL)中，用EA(50mL×2)洗滌。將水層酸化至PH=2，真空濃縮且用製備型HPLC純化，獲得呈無色油狀之(6R,8aS)-3-側氧基-1-乙烯基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲酸(160mg，產率77.4%)。1HNMR(400MHz，甲醇-d4)：δ=6.05-5.88(m,1H)，5.53-5.32(m,2H),5.09(dd,J=6.8,8.0Hz,0.5H),4.61(t,J=6.8Hz,0.5H),4.08-3.94(m,1H),3.81(ddd,J=3.5,8.2,11.9Hz,0.5H),3.44(ddd,J=3.6,7.0,11.0Hz,0.5H),3.07-2.91(m,1H),2.55-2.36(m,1H),2.25(d,J=15.3Hz,1H),2.00(qd,J=3.2,12.6Hz,1H),1.73-1.65(m,1H),1.65-1.53(m,1H),1.53-1.35(m,1H)。
(c)(6R,8aS)-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-3-側氧基-1-乙烯基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲醯胺
在0℃下，向(6R,8aS)-3-側氧基-1-乙烯基六氫-1H-噁唑并[3,4-a] 吡啶-6-甲酸(60mg，0.28mmol)於DCM(5mL)中之溶液中添加(COCl)2(54.1mg，0.43mmol)，且在20℃下，在N2氛圍下攪拌1小時。真空濃縮混合物獲得殘餘物，將其溶解於THF(2mL)中且隨後獲得(3-氯吡嗪-2-基)甲胺鹽酸鹽(76.7mg，0.43mmol)及Et3N(86.2mg，0.85mmol)。在20℃下攪拌混合物5小時。TLC(PE：THF=1：1)顯示起始物質完全消耗。接著，將反應混合物倒入水(10mL)中，用EA(10mL×2)萃取。真空濃縮有機層且用製備型TLC純化，獲得呈白色固體狀之(6R,8aS)-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-3-側氧基-1-乙烯基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲醯胺(30mg，產率31.4%)。1HNMR(400MHz，甲醇-d4)：δ=8.53(dd,J=1.0,2.5Hz,1H),8.34(d,J=2.0Hz,1H),6.04-5.88(m,1H),5.50-5.31(m,2H),4.65-4.57(m,3H),3.98-3.89(m,1H),3.83(ddd,J=3.4,8.2,11.8Hz,1H),3.50-3.42(m,1H),2.58-2.42(m,1H),2.10(dd,J=2.5,12.8Hz,1H),2.03-1.95(m,1H),1.77-1.63(m,2H),1.53-1.38(m,1H)。
(d)(6R,8aS)-6-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1-乙烯基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮
在0℃下，在冰水浴中，向(6R,8aS)-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-3-側氧基-1-乙烯基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲醯胺(150mg，0.45mmol)於無水乙腈(5mL)中之溶液中逐份添加POCl3(0.26mL，2.67mmol)及DMF(34μL)。在室溫下攪拌所得混合物12小時。將混合物倒入冰水混合物中，用粉末狀碳酸氫鈉(PH=8)中和，用二氯甲烷(50mL×3)萃取。真空濃縮有機層且用TLC(PE：THF=1：1)追蹤，用製備型TLC純化，獲得呈白色固體狀之(6R,8aS)-6-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1-乙烯基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(90mg，產率63.4%)。1HNMR(400MHz，氯仿-d)：δ=7.81(dd,J=0.8,2.5Hz,1H),7.73-7.67(m,1H),7.38(dd,J=2.8,5.0Hz,1H),6.01-5.83(m,1H), 5.60-5.35(m,2H),5.12-5.03(m,0.5H),4.61-4.54(m,0.5H),4.17-4.08(m,2H),3.85(ddd,J=3.6,7.8,11.9Hz,0.5H),3.50(ddd,J=3.5,5.6,11.5Hz,0.5H),3.30-3.19(m,1H),3.18-3.08(m,1H),2.29-2.22(m,1H),2.15-2.10(m,1H),1.82-1.74(m,0.5H),1.62-1.56(m,0.5H)。
(e)(6R,8aS)-6-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1-乙烯基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮
在20℃下，向(6R,8aS)-6-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1-乙烯基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(90mg，0.28mmol)於無水DMF(4mL)中之溶液中逐份添加N-溴丁二醯亞胺(55.3mg，0.31mmol)。在室溫下攪拌所得混合物1小時。將混合物倒入冰水混合物中，用二氯甲烷(15mL×3)萃取。真空濃縮有機層且用TLC(PE：THF=1：1)追蹤。使用急驟管柱純化殘餘物，獲得呈白色固體狀之(6R,8aS)-6-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1-乙烯基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(90mg，產率80.1%)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=8.23(d,J=5.0Hz,1H),7.90(d,J=5.3Hz,1H),7.37(d,J=5.0Hz,1H),7.18(d,J=5.0Hz,1H),6.00(ddd,J=6.5,10.6,17.3Hz,1H),5.59-5.40(m,2H),5.17(t,J=6.9Hz,1H),4.07-3.95(m,2H),3.38-3.34(m,2H),2.26-2.15(m,1H),1.97-1.85(m,1H),1.81-1.72(m,1H),1.72-1.60(m,1H)。
(f)(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1-乙烯基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮
在20℃下，向(6R,8aS)-6-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1-乙烯基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(100mg，0.25mmol)於i_PrOH(2mL)中之溶液中添加NH3.H2O(2mL，25.15mmol)。在50psi下，在110℃下，在100mL密封試管中，攪拌所得混合物10小時。 使混合物冷卻至室溫且真空濃縮，獲得呈白色固體狀之(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1-乙烯基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(80mg，產率84.1%)，其未經純化即用於下一步驟中。(ESI)：M/Z(M)378.0：(M+2)380.0=10：8(LC-MS方法C；R.T.：0.544)。
中間物25a及25b
7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吡啶并[1,2-c][1,3]噁嗪-1(3H)-酮 (a)6-(環氧乙烷-2-基)菸鹼酸甲酯
經15分鐘，向6-乙烯基菸鹼酸甲酯(20.1g，123mmol)於水/t-BuOH(200mL/100mL)中之溶液中分部分添加NBS(24.1g，136mmol)，且在40℃下攪拌混合物2小時。冷卻至5℃後，添加NaOH溶液(15mL水中5g)使反應混合物鹼化，且在此溫度下再攪拌30分鐘，接著在30分鐘期間再分部分添加NaOH溶液(15mL水中4.9g)。LCMS偵測到反應完全，且用EA及水處理混合物。濃縮有機層獲得粗產物，其未經進一步純化直接用於下一步驟中。MS-ESI(m/z)：180(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：0.323min)。
(b)6-(2-羥基乙基)菸鹼酸甲酯
向來自上述步驟之6-(環氧乙烷-2-基)菸鹼酸甲酯(123mmol)於EtOH(400mL)中之溶液中添加Pd/C(10g)及甲酸銨(31g，493mmol)。在室溫下，在氮氣保護下，攪拌混合物2小時。TLC偵測到反應完全。經矽藻土墊過濾懸浮液，且濃縮濾液。藉由矽膠管柱層析法(用PE/EA=1/3溶離)純化殘餘物，獲得6-(2-羥基乙基)菸鹼酸甲酯(10 g，兩個步驟：45%)。1H-NMR(CDCl3,400MHz)δ=3.08(t,J=5.67Hz,2 H),3.93(s,3 H),4.03(t,J=5.67Hz,2 H),7.25(d,J=8.0Hz,1 H),8.21(dd,J=8.02,2.15Hz,1 H),9.09(d,J=1.17Hz,1 H)。
(c)6-(2-羥基乙基)哌啶-3-甲酸甲酯
在0℃下，向6-(2-羥基乙基)菸鹼酸甲酯(8.9g，49.2mmol)於AcOH(120mL)中之溶液中添加NaBH3CN(9.3g，16.6mmol)。將混合物加熱至50℃且攪拌隔夜。藉由LCMS偵測到反應完全。蒸發溶劑，且用NaHCO3水溶液及EA處理殘餘物。產物在水相中，且直接用於下一步驟中。MS-ESI(m/z)：188(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：0.13min)。
(d)6-(2-羥基乙基)哌啶-1,3-二甲酸1-第三丁酯3-甲酯
向來自上述步驟之6-(2-羥基乙基)哌啶-3-甲酸甲酯(49.2mmol)於NaHCO3水溶液(500mL)中之溶液中添加Boc2O(32.2g，147.5mmol)及THF(80mL)。在室溫下攪拌混合物1小時。藉由LCMS偵測到反應完全。用EA萃取反應混合物。乾燥有機層且濃縮。藉由矽膠管柱層析法(用PE/EA=5/1溶離)純化殘餘物，獲得6-(2-羥基乙基)哌啶-1,3-二甲酸1-第三丁酯3-甲酯(8.5g，兩個步驟：60%)。1H-NMR(CDCl3,400MHz)δ 1.45(s,9 H),1.51-1.81(m,3 H),1.83-2.00(m,2 H),2.04-2.11(m,1 H),2.37-2.60(m,1 H),2.72-2.92(m,1 H),3.27-3.42(m,1 H),3.55-3.62(m,1 H),3.69(s,3 H),4.12-4.52(m,2 H)。
(e)1-側氧基八氫吡啶并[1,2-c][1,3]噁嗪-7-甲酸甲酯
向6-(2-羥基乙基)哌啶-1,3-二甲酸1-第三丁酯3-甲酯(6.5g，22.6mmol)於DCM(100mL)中之溶液中添加TEA(6.9g，67.9mmol)及MsCl(3.9g，34.0mmol)。在室溫下攪拌混合物2小時，接著加熱至60℃且攪拌隔夜。接著用DCM及水處理反應混合物。乾燥有機層且濃縮。藉由矽膠管柱層析法(用DCM/THF=5/1溶離)純化殘餘物，獲得 1-側氧基八氫吡啶并[1,2-c][1,3]噁嗪-7-甲酸甲酯(3.4g，71%)。
1H-NMR(CDCl3,400MHz)δ 1.30-1.42(m,1 H),1.54-1.64(m,1 H),1.75-1.87(m,3 H),2.12-2.21(m,2 H),2.44-2.53(m,1 H),2.74(t,J=12.0Hz,1 H),3.25-3.34(m,1 H),3.64-3.70(m,3 H),3.70-3.75(m,1 H),4.10-4.24(m,2 H),4.60-4.72(m,1 H)。
(f)1-側氧基八氫吡啶并[1,2-c][1,3]噁嗪-7-甲酸
向1-側氧基八氫吡啶并[1,2-c][1,3]噁嗪-7-甲酸甲酯(3.4g，16.0mmol)於THF/MeOH/H2O(30mL/30mL/10mL)中之溶液中添加LiOH．H2O(3.4g，80.0mmol)。在室溫下攪拌混合物2小時。藉由LCMS偵測到反應完全。用EA萃取混合物。水層用1M HCl酸化且用DCM萃取。乾燥且濃縮DCM層獲得產物，其未經進一步純化直接用於下一步驟中。MS-ESI(m/z)：200(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：0.21min)。
(g)N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-1-側氧基八氫吡啶并[1,2-c][1,3]噁嗪-7-甲醯胺
向1-側氧基八氫吡啶并[1,2-c][1,3]噁嗪-7-甲酸(3.13g，15.7mmol)於THF(100mL)中之溶液中添加(3-氯吡嗪-2-基)甲胺鹽酸鹽(2.8g，15.7mmol)、TEA(4.8g，47.2mmol)及HATU(6g，15.7mmol)。在室溫下攪拌混合物2小時。藉由LCMS偵測到反應完全。用DCM及水處理反應混合物，乾燥且濃縮有機層。藉由矽膠管柱層析法(用DCM/THF=5/1溶離)純化殘餘物，獲得N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-1-側氧基八氫吡啶并[1,2-c][1,3]噁嗪-7-甲醯胺(4.7g，92%)。1H-NMR(CDCl3,400MHz)δ 1.40-1.49(m,1 H),1.71-1.92(m,3 H),2.04-2.26(m,2 H),2.43-2.57(m,1 H),2.81-2.97(m,1 H),3.31-3.42(m,1 H),4.13-4.27(m,2 H),4.46-4.56(m,1 H),4.64(d,J=4.70Hz,2 H),8.29(d,J=2.35Hz,1 H),8.44(d,J=2.35Hz,1 H)。
(h)7-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吡啶并[1,2-c][1,3]噁嗪-1(3H)-酮
向N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-1-側氧基八氫吡啶并[1,2-c][1,3]噁嗪-7-甲醯胺(4.7g，14.5mmol)於MeCN(100mL)中之溶液中添加PCl5(6g，29.0mmol)。在60℃下攪拌混合物1.5小時。LCMS偵測到反應完全，且用DCM及水處理反應混合物。乾燥有機層且濃縮。藉由矽膠管柱層析法(用DCM/THF=5/1溶離)純化殘餘物，獲得7-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吡啶并[1,2-c][1,3]噁嗪-1(3H)-酮(2g，45%)。MS-ESI(m/z)：307(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：1.056min)。
(i)7-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吡啶并[1,2-c][1,3]噁嗪-1(3H)-酮
在0℃下，向7-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吡啶并[1,2-c][1,3]噁嗪-1(3H)-酮(2.23g，7.3mmol)於DMF(20mL)中之溶液中添加NBS(1.35g，7.6mmol)於DMF(10mL)中之溶液。在室溫下攪拌混合物1小時。藉由LCMS偵測到反應完全。將反應溶液倒入水(200mL)中且過濾。將固體用DCM溶解，乾燥且濃縮，獲得產物，其未經進一步純化直接用於下一步驟中。MS-ESI(m/z)：385(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：1.186min)。
(j)7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吡啶并[1,2-c][1,3]噁嗪-1(3H)-酮
將7-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吡啶并[1,2-c][1,3]噁嗪-1(3H)-酮(1.87g，4.8mmol)於NH3/i-PrOH(30mL)中之溶液添加至30mL密封試管中，且在110℃下攪拌混合物隔夜。濃縮反應混合物且藉由矽膠管柱層析法(用DCM/MeOH=50/1溶離)純化殘餘物，獲得7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吡啶并[1,2-c][1,3]環氧乙烷-1(3H)-酮(1.4g，80%)，其藉由SFC分離，僅獲得兩種反式異構 體。
SFC條件：「管柱：Chiralcel OJ-H 250×4.6mm I.D.；5μm；移動相：5%至40%含甲醇(0.05% DEA)之CO2；流動速率：2.35mL/min；波長：220nm」
對於(4aS,7R)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吡啶并[1,2-c][1,3]環氧乙烷-1(3H)-酮及(4aR,7S)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吡啶并[1,2-c][1,3]噁嗪-1(3H)-酮：1H-NMR(CDCl3,400MHz)δ 1.43-1.57(m,1 H),1.79-1.92(m,1 H),1.95-2.19(m,3 H),2.20-2.32(m,1 H),2.91(t,J=12.0Hz,1 H),3.02-3.10(m,1 H),3.37-3.55(m,1 H),4.09-4.34(m,2 H),4.53-4.69(m,1 H),5.93(br.s.,2 H),7.02(d,J=5.09Hz,1 H),7.27(d,J=5.09Hz,1 H)。
與製備(1S,3R)-3-(8-胺基-1-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1-異丙基環戊烷甲酸相同之程序獲得以下化合物：對於4-(8-胺基-3-((4aS,7R)-1-側氧基八氫吡啶并[1,2-c][1,3]噁嗪-7-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺：1H-NMR(CD3OD,400MHz)δ 1.55-1.71(m,1 H),1.85-2.05(m,3 H),2.20-2.35(m,2 H),3.18(t,J=12.52Hz,1 H),3.35-3.46(m,1 H),3.51-3.63(m,1 H),4.18-4.37(m,2 H),4.57(d,J=12.91Hz,1 H),7.04(d,J=6.26Hz,1 H),7.43(d,J=4.70Hz,1 H),7.76-8.00(m,3 H),8.17(d,J=8.22Hz,2 H),8.48-8.70(m,2 H)。
對於4-(8-胺基-3-((4aR,7S)-1-側氧基八氫吡啶并[1,2-c][1,3]噁嗪-7-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺：1H-NMR(CD3OD,400MHz)δ 1.55-1.71(m,1 H),1.85-2.05(m,3 H),2.20-2.35(m,2 H),3.18(t,J=12.52Hz,1 H),3.35-3.46(m,1 H),3.51-3.63(m,1 H),4.18-4.37(m,2 H),4.57(d,J=12.91Hz,1 H),7.04(d,J=6.26Hz,1 H),7.43(d,J=4.70Hz,1 H),7.76-8.00(m,3 H),8.17(d,J=8.22Hz,2 H),8.48-8.70(m,2 H)。
中間物26：
(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1,1-二甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮 步驟1：(3R,6S)-6-乙醯基哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯
在0℃下，向(3R,6S)-6-(1-羥基乙基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯(500mg，1.56mmoL)於無水DCM(20mL)中之溶液中逐份添加馬丁試劑(Martin's reagent)(990mg，2.33mmol)。在0℃至25℃下攪拌混合物3小時。藉由在0℃下緩慢添加15% Na2S2O3於飽和NaHCO3(20mL)中之溶液淬滅混合物，接著分離混合物且用DCM(50mL×4)萃取水層，經合併之有機層用鹽水(20mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得粗產物，其使用矽膠管柱層析法(EA/PE=5%-35%)純化，獲得呈無色油狀之(3R,6S)-6-乙醯基哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯(300mg，產率60.38%)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=7.44-7.27(m,5H),5.30-5.06(m,2H),4.80-4.57(m,1H),4.48(d,J=13.3Hz,1H),3.78-3.49(m,3H),3.24(d,J=14.1Hz,1H),2.58(br.s.,1H),2.24-1.99(m,5H),1.99-1.84(m,1H),1.63-1.51(m,1H)。
步驟2：(3R,6S)-6-(2-羥基丙-2-基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯
在-78℃下，向(3R,6S)-6-乙醯基哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯 (0.58g，1.82mmol)於無水THF(10mL)中之溶液中逐滴添加MeMgBr(乙醚中3M，1.82mL，0.564mmol)。在-78℃至25℃下攪拌反應混合物4小時。藉由飽和氯化銨(20mL)淬滅反應物，接著用EA(50mL×4)萃取混合物，經合併之有機層用鹽水(20mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得粗產物，其經矽膠管柱層析法(THF/PE=5%-40%)純化，獲得呈無色油狀之(3R,6S)-6-(2-羥基丙-2-基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯(200mg，產率32.83%)。(ESI)：M/Z(M+1)：336.2(LC-MS方法B；R.T.：4.316)。
步驟3：(6R,8aS)-1,1-二甲基-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲酸
向(3R,6S)-6-(2-羥基丙-2-基)哌啶-1,3-二甲酸1-苯甲酯3-甲酯(200mg，0.596mmoL)於THF/H2O(1：1，10mL)中之溶液中添加LiOH(28.56mg，1.19mmol)。在25℃下攪拌混合物3小時。用1M HCl將混合物酸調整至PH=1，且經凍乾機乾燥混合物，獲得粗產物，其藉由製備型HPLC純化獲得呈白色固體狀之(6R,8aS)-1,1-二甲基-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲酸(100mg，產率78.65%)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=3.78(dd,J=3.6,12.9Hz,1H),3.27(dd,J=3.4,11.7Hz,1H),2.89-2.79(m,J=12.3,12.3Hz,1H),2.32(tdd,J=4.0,7.9,15.8Hz,1H),2.09(d,J=11.8Hz,1H),1.73-1.63(m,1H),1.51-1.28(m,5H),1.24(s,3H)。
步驟4：(6R,8aS)-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-1,1-二甲基-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲醯胺
在0℃下，向(6R,8aS)-1,1-二甲基-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲酸(100mg，0.468mmol)於無水DCM(40mL)中之溶液中添加(COCl)2(158.9mg，0.469mmol)，接著添加DMF(一滴)且在25℃下攪拌混合物1.5小時。真空濃縮混合物，接著用DCM(5mL)稀釋，添 加至(3-氯吡嗪-2-基)甲胺鹽酸鹽(101.32mg，0.562mmol)、TEA(94.91mg，0.938mmol)於DCM(10mL)中之溶液中。在25℃下攪拌混合物3小時，藉由在0℃下添加水(10mL)淬滅混合物，接著用DCM(50mL×3)萃取混合物，經合併之有機層用1M HCl(10mL)、鹽水(20mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得呈無色油狀之(6R,8aS)-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-1,1-二甲基-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲醯胺(150mg，94.19%)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)d=8.46(d,J=2.5Hz,1H),8.34(d,J=2.5Hz,1H),6.94(br.s.,1H),4.78-4.60(m,2H),4.09(dd,J=4.1,12.7Hz,1H),3.26(dd,J=3.3,11.8Hz,1H)，3.08(dd,J=11.8,13.1Hz,1H),2.43(tt,J=4.1,11.7Hz,1H),2.16(d,J=12.5Hz,1H),1.86-1.70(m,2H),1.46(s,3H),1.44-1.38(m,1H),1.35(s,3H)。
步驟5：(6R,8aS)-6-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1,1-二甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮
在0℃下，向(6R,8aS)-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-1,1-二甲基-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-甲醯胺(180mg，0.531mmoL)於無水MeCN(5mL)中之溶液中逐滴添加POCl3(407.33mg，2.66mmol)。接著添加DMF(一滴)且在25℃下攪拌混合物15小時，將混合物倒入冰水中，用飽和NaHCO3(20mL)鹼調整，接著用EA(20mL×4)萃取混合物，經合併之有機層用鹽水(10mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得粗產物，其經矽膠管柱層析法(THF/PE=5%-50%)純化，獲得呈白色固體狀之(6R,8aS)-6-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1,1-二甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(80mg，產率46.94%)。(ESI)：M/Z(M+1)：321.0(LC-MS方法C；R.T.：0.643)。
步驟6：(6R,8aS)-6-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1,1-二甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮
向(6R,8aS)-6-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1,1-二甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(80mg，0.249mmoL)於無水MeCN(5mL)中之溶液中添加1-溴吡咯啶-2,5-二酮(53.27mg，0.299mmol)。在25℃下攪拌混合物2小時。藉由在0℃下添加H2O(10mL)淬滅混合物，接著用EA(20mL×4)萃取混合物，經合併之有機層用鹽水(10mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得呈黃色固體狀之(6R,8aS)-6-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1,1-二甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(85mg，產率85.28%)。(ESI)：M/Z(M+1)：399.0(R.T.：0.723)。
步驟7：(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1,1-二甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮
向(6R,8aS)-6-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1,1-二甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(85mg，0.212mmoL)於NH3H2O(4mL)中之溶液中添加i-PrOH(4mL)。在100℃下，在密封試管中攪拌混合物12小時。濃縮混合物，獲得呈黃色固體狀之粗產物(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1,1-二甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(80.87mg，產率100%)，其未經進一步純化。(ESI)：M/Z(M+1)：380.0(LC-MS方法C；R.T.：0.941)。
中間物27
1-溴-3-((1S,6R,8aS)-3-亞胺基-1-甲基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-8-胺 步驟1：(S)-1-((2S,5R)-5-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)哌啶-2-基)乙醇
向KOH(24mg，0.42mmol)於EtOH(4mL)中之溶液中添加(1S,6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1-甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(50mg，0.13mmol)。使混合物回流18小時。將混合物分配於DCM/i-PrOH(8mL×4)與H2O(40ml)之間。有機層經Na2SO4乾燥，過濾且真空濃縮，獲得呈黃色固體狀之(S)-1-((2S,5R)-5-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)哌啶-2-基)乙醇(33mg，71.7%)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=7.55(d,J=5.0Hz,1H),6.99(d,J=5.3Hz,1H),3.60-3.52(m,1H),3.28-3.22(m,1H),3.21-3.11(m,1H),2.87(t,J=11.4Hz,1H),2.52-2.42(m,1H),2.18-2.07(m,1H),1.92-1.77(m,2H),1.40-1.26(m,2H),1.23(d,J=6.5Hz,3H)。
步驟2：1-溴-3-((1S,6R,8aS)-3-亞胺基-1-甲基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-8-胺
在0℃下，向(S)-1-((2S,5R)-5-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)哌啶-2-基)乙醇(33mg，0.088mmol)於DMF(2mL)中之溶液中添加添加BrCN(10.27mg，0.097mmol)及NaHCO3(22.17mg，0.264mmol)。在室溫下攪拌混合物1小時。將混合物分配於DCM/i-PrOH(8mL×8)與H2O(40ml)之間。有機層經Na2SO4乾燥，過濾且真空濃縮，獲得呈黃色固體狀之1-溴-3-((1S,6R,8aS)-3-亞胺基-1-甲基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-8-胺(35mg，94.5%)。
中間物28
(7R,9aR)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-4(6H)-酮 步驟1：(順)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2,7(6H)-二甲酸2-苯甲酯7-甲酯
在10℃下，向6-((((苯甲基氧基)羰基)(2-甲氧基-2-側氧基乙基)胺基)甲基)菸鹼酸甲酯(2.5g，6.7mmol)於AcOH(25mL)中之溶液中分部分添加NaBH3CN(1.3g，20mmol)。在室溫下攪拌溶液隔夜。減壓濃縮反應混合物，獲得殘餘物。將殘餘物溶解於H2O(50ml)中，添加NaHCO3水溶液直至pH=8，用EA(50ml×3)萃取混合物。經合併之有機相用鹽水(100mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，真空濃縮，獲得粗產物6-((((苯甲基氧基)羰基)(2-甲氧基-2-側氧基乙基)胺基)甲基)哌啶-3-甲酸甲酯(2.8g)。在70℃下，在N2下攪拌6-((((苯甲基氧基)羰基)(2-甲氧基-2-側氧基乙基)胺基)甲基)哌啶-3-甲酸甲酯(2.8g，7.9mmol)於MeOH(30mL)中之混合物12小時。接著，真空濃縮混合物，藉由矽膠管柱層析法(PE/THF=1/1)純化殘餘物，獲得(順)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2,7(6H)-二甲酸2-苯甲酯7-甲酯(0.8g，產率30%)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=7.38-7.33(m,5H),5.16(d,J=3.2Hz,2H),4.85-4.80(m,1H),4.15-4.07(m,2H),3.95-3.93(m,1H),3.91-3.70(m,3H),3.44-3.42(m,2H),2.67-2.61(m,1H),2.47-2.44(m,1H),2.17-2.13(m,1H),1.82(s,1H),1.69-1.65(m,1H),1.62-1.42(m,1H)。
步驟2：(順)-2-((苯甲基氧基)羰基)-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡 嗪-7-甲酸
向(順)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2,7(6H)-二甲酸2-苯甲酯7-甲酯(0.8g，2.3mmol)於THF/H2O(1：1，16ml)中之溶液中逐份添加LiOH.H2O(200mg，4.6mmol)。在N2下，在25℃下攪拌所得溶液12小時。用HCl(1M)將反應物酸化至pH=5，接著用DCM/i-PrOH(4/1，30mL×10)萃取。經合併之有機層用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得(順)-2-((苯甲基氧基)羰基)-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-甲酸(700mg，產率92.1%)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=7.40-7.32(m,5H),5.16-5.14(m,2H),4.18-3.89(m,4H),2.94-2.74(m,2H),2.23-2.20(m,1H),1.93-1.89(m,1H),1.62-1.49(m,2H)。
步驟3：(順)-2-((苯甲基氧基)羰基)-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-甲酸
在25℃下攪拌(順)-2-((苯甲基氧基)羰基)-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-甲酸(0.7g，2.1mmol)、(3-氯吡嗪-2-基)甲胺鹽酸鹽(450mg，2.5mmol)、HATU(1.2g，3.1mmol)及TEA(0.85g，8.4mmol)於DMF(10mL)中之混合物隔夜。接著，將反應混合物倒入水中，用EA(50ml×3)萃取混合物。經合併之有機相用鹽水(100mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，真空濃縮，藉由矽膠管柱層析法(PE/THF=1/3)純化殘餘物，獲得(順)-7-(((3-氯吡嗪-2-基)甲基)胺甲醯基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯(440mg，產率45.8%)。
步驟4：順-(7S,9aS)-7-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯
在冰水浴中，向(7S,9aS)-7-(((3-氯吡嗪-2-基)甲基)胺甲醯基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯(1.32g，2.88mmol)於無水DCM(15mL)中之溶液中添加二甲基甲醯胺(35.77mg， 0.49mmol)、吡啶(2.27g，28.8mmoL)，隨後添加POCl3(2.16g，14.4mmol)。在20℃下攪拌所得混合物3小時。將混合物倒入冰水混合物中，用粉末狀碳酸氫鈉中和，用DCM(10mL×3)萃取。有機層用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，濃縮。藉由矽膠管柱層析法(用PE/THF(0-80%)溶離)純化粗產物，獲得呈白色固體狀之順-(7S,9aS)-7-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯(0.15g，11.8%)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=8.76(s,1H),7.81(s,1H),7.72(d,J=4.8Hz,1H),7.43-7.28(m,5H),5.62-5.53(m,1H),5.17(s,2H),4.99-4.86(m,1H),4.21(br.s.,1H),3.98-3.92(m,3H),3.60-3.49(m,1H),3.16-3.00(m,1H),2.89-2.70(m,1H),2.28-2.20(m,1H),2.08-2.01(m,1H),2.00-1.93(m,1H)。
步驟5：順-(7S,9aS)-7-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯
向外消旋-(7S,9aS)-7-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯(180mg，0.409mmol)於DMF(5mL)中之溶液中添加N-溴丁二醯亞胺(86.91mg，0.49mmol),在25℃下，在N2下攪拌1.5小時。將反應物分配於H2O(30mL)與EA(10mL×3)之間。有機層用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，濃縮，獲得呈淡黃色固體狀之順-(7S,9aS)-7-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯(166mg，78.6%)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=7.69(d,J=5.0Hz,1H),7.46-7.31(m,6H),5.17(s,2H),4.88(dd,J=2.3,13.1Hz,1H),4.29-4.16(m,1H),3.98-3.82(m,1H),3.78-3.74(m,1H),3.65-3.61(m,1H),3.60-3.46(m,2H),3.11-2.99(m,1H),2.90-2.71(m,1H),2.30-2.17(m,1H),1.71-1.51(m,2H)。
步驟6：順-(7S,9aS)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基 六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯
在100℃下，在密封試管中攪拌(7S,9aS)-7-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯(166mg，0.32mol)於NH4OH(6mL)及i-PrOH(4mL)中之溶液12小時。接著，減壓濃縮反應物，獲得呈黃色固體狀之順-(7S,9aS)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯(140mg，88.05%)。LCMS：滯留時間：0.692min,(M+H)+ m/z：498.9。
(a)(7R,9aR)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯
藉由SFC純化外消旋(7S,9aS)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯，獲得呈黃色固體狀之(7R,9aR)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯(38mg)(滯留時間=7.07min)。對掌性HPLC條件為[儀器：Thar 80；管柱：OD 250mm×20mm，10μm；移動相：A：超臨界CO2，B：EtOH(0.05% NH3H2O)，A：B=55：45，在80ml/min下；管柱溫度：38℃；噴嘴壓力：100巴；噴嘴溫度：60℃；蒸發器溫度：20℃；調整器溫度：25℃；波長：220nm]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=7.44-7.31(m,5H),5.47(br.s.,1H),5.16(s,2H),5.00-4.81(m,1H),4.20(d,J=7.8Hz,1H),3.93(br.s.,1H),3.77(d,J=4.0Hz,1H),3.64(d,J=4.3Hz,1H),3.52(br.s.,2H),3.06-2.94(m,1H),2.84-2.71(m,1H),1.64-1.52(m,2H)。
(b)(7R,9aR)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-4(6H)-酮
在20℃下攪拌(7R,9aR)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4- 側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-甲酸苯甲酯(38mg，0.076mmol)於HBr/AcOH(1.5mL)中之溶液40分鐘。用2-異丙氧基丙烷使混合物再結晶，收集固體且用NaHCO3飽和水溶液(30mL)洗滌，用DCM(7mL×3)萃取。有機層經Na2SO4乾燥，濃縮，獲得呈淡黃色固體狀之(7R,9aR)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-4(6H)-酮(6mg，21.5%)。
中間物29
(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴-5-氟咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮 步驟1：(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴-5-氟-6-甲氧基-5,6-二氫咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮
在250ml圓底燒瓶中，向(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(2.16g，6.17mmol)於MeOH(25ml)及乙腈(25ml)中之經攪拌混合物中添加1-氯甲基-4-氟-1,4-二氮鎓雙環[2.2.2]八(雙(四氟硼酸酯))(2.62g，7.40mmol)。在室溫下攪拌混合物隔夜，且接著濃縮。藉由矽膠管柱層析法(ISCO 80g)(用CH2Cl2/MeOH(10/1)溶離)純化殘餘物，獲得呈白色發泡固體狀之((6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴-5-氟-6-甲氧基-5,6-二氫咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(2.4g，6.00mmol，97%產率)。
步驟2：(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴-5-氟咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮
向20ml微波反應容器中裝入(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴-5-氟-6-甲 氧基-5,6-二氫咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(300mg，0.750mmol)於吡啶(8ml)中之混合物。在180℃下，在微波照射下攪拌混合物15分鐘，且接著濃縮。藉由矽膠管柱層析法(ISCO 80g)(用CH2Cl2/MeOH(20/1)溶離)純化殘餘物，獲得呈白色固體狀之(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴-5-氟咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(112mg，0.304mmol，40.6%產率)。LC-MS：C14H15BrFN5O，實驗值[M+H]+ 370.0。LC-MS方法E 滯留時間=0.91min。
中間物30
N-(4-(3-氟氧雜環丁烷-3-基)吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺 (a)3-(2-氯吡啶-4-基)氧雜環丁烷-3-醇
在-78℃下，向2-氯-4-碘吡啶(1.0g，4.18mmol)於無水THF(10mL)中之溶液中添加n-BuLi(3.34mL，8.35mmol)。在-78℃下攪拌混合物20分鐘。接著，在-78℃下添加氧雜環丁烷-3-酮(361mg，5.01mmol)且在-78℃下攪拌混合物50分鐘。混合物用飽和NH4Cl(10mL)淬滅且用乙酸乙酯(100mL×3)萃取。經合併之有機層用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得粗產物，其使用矽膠層析法(EA：PE=5%-40%)純化，獲得呈黃色固體狀之3-(2-氯吡啶-4-基)氧雜環丁烷-3-醇(620mg，產率86%)。(ESI)：M/Z(M+1)：352(條件：0-60AB_3MIN；R.T.：1.303)。
(b)2-氯-4-(3-氟氧雜環丁烷-3-基)吡啶
在-78℃下，向3-(2-氯吡啶-4-基)氧雜環丁烷-3-醇(650mg，3.50mmol)於二氯甲烷(10mL)中之溶液中添加DAST(847mg，5.25 mmol)。在-78℃下攪拌所得混合物3小時，且接著升溫至室溫，且再攪拌12小時。藉由添加飽和NaHCO3淬滅混合物且用二氯甲烷(50mL×3)萃取。經合併之有機層用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得粗產物，其使用矽膠層析法(EA：PE=10%-50%)純化，獲得呈黃色固體狀之2-氯-4-(3-氟氧雜環丁烷-3-基)吡啶(120mg，產率18%)。(ESI)：M/Z(M+1)：188.0(LC-MS方法C；R.T.：0.597)。
(c)N-(4-(3-氟氧雜環丁烷-3-基)吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
在氮氣流下，向2-氯-4-(3-氟氧雜環丁烷-3-基)吡啶(120mg，0.64mmol)及4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺(174mg，0.70mmol)於二噁烷(6mL)中之澄清溶液中相繼添加xant-Phos(催化量)、Pd(pddf)Cl2(催化量)。接著，將混合物加熱至100℃且攪拌12小時。接著使反應混合物冷卻至室溫且過濾。真空濃縮濾液且矽膠層析法(EA：PE=5%-40%)純化，獲得呈黃色固體狀之N-(4-(3-氟氧雜環丁烷-3-基)吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺(70mg，產率27%)。(ESI)：M/Z(M+1)：399.1(LC-MS方法C；R.T.：0.897)。
中間物31
N-(4-氰基吡啶-2-基)-3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺 (a)(4-氰基吡啶-2-基)胺基甲酸第三丁酯
在80℃下，在N2流下，攪拌2-氯異菸鹼腈(10g，72.2mmol)、胺基甲酸第三丁酯(10.15g，86.6mmol)、Cs2CO3(47g，144.4mmol)、 X-phos(4.3g，9.02mmol)及Pd(OAc)2(810mg，3.6mmol)於150mL1,4-二噁烷中之脫氣混合物2.5小時。混合物冷卻至室溫且過濾。真空濃縮濾液，獲得粗產物，將其藉由矽膠管柱層析法(PE：EA=20%-50%)純化，獲得(4-氰基吡啶-2-基)胺基甲酸第三丁酯(12.0g，產率：76%)。1HNMR(400MHz,CDCl3)：δ=9.14(br.s.,1H),8.46(dd,J=0.8,5.3Hz,1H),8.34(s,1H),7.16(dd,J=1.4,5.1Hz,1H),1.56(s,9H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：220.1。
(b)2-胺基異菸鹼腈
向(4-氰基吡啶-2-基)胺基甲酸第三丁酯(6.5g，29.6mmol)於60mL DCM中之溶液中添加20mL三氟乙酸。在室溫下攪拌反應物2小時，且接著真空濃縮至乾燥。添加NaHCO3水溶液(10mL)且用EA(20mL×3)萃取。有機層用鹽水(20mL)洗滌，經Na2SO4乾燥且真空濃縮，獲得3.5g粗產物化合物2-胺基異菸鹼腈。1HNMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.20(d,J=5.3Hz,1H),6.82(dd,J=1.0,5.3Hz,1H),6.69(s,1H),4.77(br.s.,2H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：120.1。
(c)4-溴-N-(4-氰基吡啶-2-基)-3-氟苯甲醯胺
在0℃下，向4-溴-3-氟苯甲酸(8.2g，37.7mmol)於80mL DCM中之溶液中添加乙二醯二氯(14.4g，113.1mmol)及8滴DMF。攪拌1小時後，真空濃縮混合物且將其溶解於70mL THF中，且在0℃下添加至化合物2-胺基異菸鹼腈(5.4g，45.3mmol)於90mL THF中之溶液中。在30℃下攪拌反應物12小時。過濾混合物，且真空濃縮濾液，獲得粗產物。藉由矽膠管柱層析法(PE：EA=20%-60%)純化粗產物，獲得4-溴-N-(4-氰基吡啶-2-基)-3-氟苯甲醯胺(4.7g，產率：39.2%)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)：δ=11.46(s,1H),8.67(d,J=5.1Hz,1H),8.48(s,1H),8.02(dd,J=2.0,9.7Hz,1H),7.94-7.86(m,1H),7.85-7.80(m,1H),7.66(dd,J=1.3,4.9Hz,1H).MS(ESI)：M/Z(M+2)： 320.9。
(d)N-(4-氰基吡啶-2-基)-3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
在90℃下，在N2流下，攪拌4-溴-N-(4-氰基吡啶-2-基)-3-氟苯甲醯胺(900mg，2.8mmol)、雙(頻哪醇根基)二硼(929mg，3.65mmol)、KOAc(824mg，8.4mmol)及Pd(dppf)Cl2(143mg，0.2mmol)於15mL 1,4-二噁烷中之脫氣混合物12小時。將混合物冷卻至室溫且添加H2O(10mL)。其接著用乙酸乙酯(15mL×3)萃取。有機層用鹽水(20mL)洗滌，經Na2SO4乾燥且真空濃縮，獲得粗產物，將其藉由矽膠管柱層析法(PE：EA=20%-80%)純化，獲得N-(4-氰基吡啶-2-基)-3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺(700mg，產率：68%)。1HNMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.72(s,1H),8.70(s,1H),8.48(dd,J=0.8,5.0Hz,1H),7.89(dd,J=5.8,7.8Hz,1H),7.66(dd,J=1.5,7.5Hz,1H),7.61(dd,J=1.4,9.4Hz,1H),7.32(dd,J=1.3,5.0Hz,1H),1.39(s,12H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：368.2。
中間物32
N-(4-氰基吡啶-2-基)-2-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺 (a)4-溴-N-(4-氰基吡啶-2-基)-2-氟苯甲醯胺
向4-溴-2-氟苯甲酸(3.03g，13.8mmol)於無水DMF(30mL)中之溶液中添加HATU(5.25g，13.8mmol)，且在30℃下攪拌30分鐘。相繼添加三乙胺(3.8g，37.8mmol)、2-胺基異菸鹼甲腈(1.5g，12.6mmol)。在30℃下攪拌混合物12小時。添加H2O(50mL)，且用乙酸乙 酯(50mL×3)萃取混合物。有機層用鹽水(20mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，蒸發且藉由急驟層析法(PE：EA=20%-60%)純化，獲得化合物4-溴-N-(4-氰基吡啶-2-基)-2-氟苯甲醯胺(1.56g，產率：39%)。1HNMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.71(s,1H),8.50(d,J=4.5Hz,1H),8.03(t,J=8.4Hz,1H),7.89(t,J=8.2Hz,1H),7.51(dd,J=1.6,8.4Hz,1H),7.46-7.42(m,1H),7.33(dd,J=1.4,5.1Hz,1H)。MS(ESI)：M/Z(M+2)：320.9。
(b) N-(4-氰基吡啶-2-基)-2-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
在90℃下攪拌4-溴-N-(4-氰基吡啶-2-基)-2-氟苯甲醯胺(1.2g，3.7mmol)、雙(頻哪醇根基)二硼(1.2g，4.8mmol)、KOAc(1.1g，11.2mmol)、Cy3P(84mg，0.3mmol)及Pd(OAc)2(67mg，0.3mmol)於30mL 1,4-二噁烷中之脫氣混合物12小時。將混合物冷卻至室溫且添加H2O(50mL)。用乙酸乙酯(50mL×3)萃取混合物。有機層用鹽水(50mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，真空濃縮，獲得粗產物，其接著藉由急驟層析法(PE：EA=20%-60%)純化，獲得化合物N-(4-氰基吡啶-2-基)-3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺(500mg，產率：38%)。1HNMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.72(s,1H),8.49(d,J=5.0Hz,1H),8.12(t,J=7.7Hz,1H),7.73(d,J=7.8Hz,1H),7.62(d,J=12.0Hz,1H),7.37(s,1H),7.31(d,J=4.0Hz,1H),1.36(s,12H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)+：368.2。
中間物33
N-(4-氰基吡啶-2-基)-3-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺 (a)4-溴-N-(4-氰基吡啶-2-基)-3-甲氧基苯甲醯胺
在室溫下，向2-胺基異菸鹼腈(1.4g，11.75mmol)於甲苯(60mL)中之溶液中添加Al(Me)3(5.87ml，11.75mmol)。攪拌30分鐘後，添加4-溴-3-甲氧基苯甲酸甲酯(2.88g，11.75mmol)。使反應物回流3小時。混合物用1N HCl淬滅且分配於H2O(45mL)與EA(10mL×3)之間。乾燥EA層，過濾，濃縮且藉由矽膠管柱層析法(PE：EA=0-60%)純化，獲得呈白色固體狀之4-溴-N-(4-氰基吡啶-2-基)-3-甲氧基苯甲醯胺(2.55g，65.38%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=8.69(s,1H),8.65(br.s.,1H),8.49(dd,J=0.8,5.0Hz,1H),7.69(d,J=8.0Hz,1H),7.51(d,J=2.0Hz,1H),7.33-7.29(m,2H),4.01(s,3H)。
(b) N-(4-氰基吡啶-2-基)-3-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
向4-溴-N-(4-氰基吡啶-2-基)-3-甲氧基苯甲醯胺(2.55g，7.68mmol)於二噁烷(50ml)中之溶液中添加4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-聯(1,3,2-二氧硼)(2.92g，11.52mmol)、KOAc(2.25g，23.04mmol)及Pd(dppf)Cl2(0.275g，0.38mmol)。用N2淨化混合物且在90℃下攪拌2小時。將混合物分配於H2O(85mL)與EA(20mL×3)之間。藉由矽膠管柱層析法(PE：EA=0-55%)純化EA層，獲得呈白色固體狀之N-(4-氰基吡啶-2-基)-3-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺(0.99g，344%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=8.83-8.63(m,2H),8.47(dd,J=0.8,5.0Hz,1H),7.78(d,J=7.5Hz,1H),7.45(d,J=1.3Hz,1H),7.39(dd,J=1.4,7.7Hz,1H),7.30(dd,J=1.3,5.0Hz,1H),3.93(s,3H),1.38(s,12H)。
中間物34
N-(4-氰基吡啶-2-基)-2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
遵循與中間物33相同之程序製備2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺(2.4g，9.19mmol)。在氮氣流下，向2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺(2.4g，9.19mmol)及2-氯異菸鹼腈(1.4g，10.11mmol)於二噁烷(50mL)中之澄清溶液中相繼添加xant-Phos(催化量)、Pd(pddf)Cl2(336mg，0.46mmol)。接著，將混合物加熱至100℃且攪拌12小時。接著，將混合物冷卻至室溫且過濾。真空濃縮濾液且使用矽膠層析法(EA：PE=5%-40%)純化，獲得呈黃色固體狀之N-(4-氰基吡啶-2-基)-2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺(1.4g，產率42%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ=8.58(s,1H),8.53(d,J=5.0Hz,1H),7.70-7.63(m,2H),7.50(d,J=7.3Hz,1H),7.43(dd,J=1.3,5.0Hz,1H),2.47(s,3H),1.36(s,12H)。
中間物35
2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺 (a)4-溴-2-甲基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在0℃下，向4-溴-2-甲基苯甲酸(5g，0.023mmol)於二氯甲烷(50mL)中之溶液中添加(COCl)2(8.85g，0.069mmol)。在室溫下攪拌混 合物2小時，且接著蒸發且溶解於四氫呋喃(100mL)中。在0℃下逐份添加4-(三氟甲基)吡啶-2-胺(7.5g，0.046mmol)。在80℃下攪拌反應混合物隔夜。使混合物冷卻至室溫且過濾，將濾液濃縮至乾燥，獲得4-溴-2-甲基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(6g，產率70%)。(ESI)：M/Z(M+1)：M/Z(M+3)361：(M+1)359(LC-MS方法C；R.T.：0.904)。
(b)2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在N2下，向4-溴-2-甲基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(3g，8.356mmol)及4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-聯(1,3,2-二氧硼)(2.5g，9.8mmol)於二噁烷(50mL)中之脫氣混合物中添加Pd(dppf)Cl2(催化量)及KOAc(2.45g，25mmol)。將混合物加熱至100℃且攪拌3小時。將反應混合物冷卻至室溫且真空濃縮，獲得粗產物，其使用矽膠層析法(PE：EA=100%-80%)純化，獲得2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(3g，產率88%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ=11.31(s,1H),8.63(d,J=5.3Hz,1H),8.52(s,1H),7.92(s,1H),7.59-7.47(m,4H),2.38(s,3H),1.31-1.27(m,13H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：407.1。
中間物36
(4-((4-環丙基吡啶-2-基)胺甲醯基)-3-氟苯基) 酸
向4-環丙基吡啶-2-胺(0.5g，3.7mmol)及4-硼-2-氟苯甲酸(0.7g，4.1mmol)於5mL DMF中之溶液中添加DIEA(0.95g，7.5mmol)。 在0℃下攪拌5分鐘後，添加HATU(1.56g，4.1mmol)，且在室溫下攪拌所得混合物隔夜，且接著在80℃下攪拌5小時。使反應混合物冷卻至室溫，且用水處理且用EA萃取。經合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥且真空濃縮，獲得粗殘餘物。藉由矽膠管柱層析法(EA/MeOH=20/1)純化殘餘物，獲得(4-((4-環丙基吡啶-2-基)胺甲醯基)-3-氟苯基)酸(0.7g，產率63.6%)。MS-ESI(m/z)：301(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：0.98min)。
中間物37
N-(4-環丙基吡啶-2-基)-2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺 (a)4-溴-2-甲基苯甲醯胺
在0℃下，向4-溴-2-甲基苯甲酸(8g，0.037mmol)於二氯甲烷(80mL)中之溶液中添加(COCl)2(9.4mL)。在室溫下攪拌混合物2小時，且接著真空蒸發至乾燥且溶解於二氯甲烷(80mL)中，且在0℃下添加至NH4OH(4.2g，0.09mmol)於二氯甲烷(20mL)中之溶液中。在25℃下攪拌反應混合物1小時且過濾。乾燥濾液，獲得4-溴-2-甲基苯甲醯胺(8g，產率100%)。(ESI)：M/Z(M+1)：M/Z(M+3)216：(M+1)214(LC-MS方法C；R.T.：0.647)。
(b)2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
在N2下，向4-溴-2-甲基苯甲醯胺(5g，0.023mmol)及4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-聯(1,3,2-二氧硼)(6.5g，0.025mmol)於二噁烷(100mL)中之脫氣混合物中添加Pd(dppf)Cl2(950mg，0.002 mmol)及KOAc(6.8g，0.069mmol)。將混合物加熱至100℃且攪拌3小時。將反應混合物冷卻至室溫且真空濃縮至乾燥，獲得粗產物，其使用矽膠層析法(PE：EA=100%-60%)純化，獲得2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺(3.6g，產率60%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ=7.66-7.59(m,1H),7.41(d,J=7.5Hz,1H),2.45(s,3H),1.40-1.33(m,12H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：262.1。
(c)N-(4-環丙基吡啶-2-基)-2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
在N2下，向2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺(3.5g，0.013mol)及2-氯-4-環丙基吡啶(2.3g，0.015mol)於二噁烷(60mL)中之脫氣混合物中添加Pd2(dba)3(614mg，0.65mmol)、Xant-phos(700mg，0.0013mol)及Cs2CO3(8.7g，0.026mmol)。在100℃下攪拌混合物13小時。將反應物冷卻至室溫且真空濃縮至乾燥，獲得粗產物，其使用矽膠層析法(PE：EA=100%-70%)純化，獲得N-(4-環丙基吡啶-2-基)-2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺(1.5g，產率30%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ=8.10(d,J=5.3Hz,1H),7.93(s,1H),7.70-7.63(m,2H),7.48(d,J=7.5Hz,1H),6.87(dd,J=1.4,5.4Hz,1H),2.46(s,4H),2.02-1.93(m,1H),1.36(s,15H),1.17-1.11(m,2H),0.90-0.83(m,2H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：379.2。
中間物38
6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-2-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑 (a)4-(三氟甲基)-2-乙烯基吡啶
在110℃下，在N2流下，攪拌2-氯-4-(三氟甲基)吡啶(10g，55.2mmol)、乙烯基三氟硼酸鉀(11g，82.8mmol)、Pd(dppf)Cl2(500mg)及K2CO3(15.2g，110.4mmol)於二噁烷(150mL)與H2O(15mL)之混合溶劑中的混合物1.5小時。使反應混合物冷卻至室溫，過濾且蒸發，獲得粗殘餘物。藉由矽膠管柱層析法(用PE：EA=10：1溶離)純化殘餘物，獲得4-(三氟甲基)-2-乙烯基吡啶(4.5g，47.4%)。MS-ESI(m/z)：174.0(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：0.94min)。
(b)4-(三氟甲基)吡啶甲醛
向4-(三氟甲基)-2-乙烯基吡啶(4.5g，25.8mmol)及OsO4(60mg，2.58mmol)於THF(50mL)中之溶液中添加NaIO4(11g，51.4mmol)。在室溫下攪拌所得混合物3小時。用H2O處理混合物且用EA萃取。EA層用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，且過濾。常壓蒸餾濾液，獲得粗產物4-(三氟甲基)吡啶甲醛，其直接用於下一步驟中。
MS-ESI(m/z)：176.2(M+1)+(Acq法：10-80AB_2min；滯留時間：0.24min)
(c)6-溴-2-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)-1H-苯并[d]咪唑
在冰浴中，向粗產物4-(三氟甲基)吡啶甲醛及4-溴苯-1,2-二胺(4.1g，22.7mmol)於THF(200mL)中之溶液中添加IBD(15g，45.3mmol)。在此溫度下攪拌混合物0.5小時。在減壓下移除溶劑且將殘餘物溶解於EA中。所得溶液用水(30mL×3)、鹽水洗滌，且經無水Na2SO4乾燥。減壓濃縮有機相，獲得磚紅色殘餘物，其藉由矽膠管柱層析法(PE：EtOAc=5：1)純化，獲得6-溴-2-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(4g，兩個步驟：45.1%)。
MS-ESI(m/z)：342.2(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：1.12min)
(d)6-溴-2-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲 基)-1H-苯并[d]咪唑
向6-溴-2-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(4g，9.3mmol)於無水THF(50mL)中之溶液中分部分添加含60% NaH(372mg，9.3mmol)之礦物油。添加完成後，在22℃下攪拌混合物10分鐘。向混合物中逐滴添加(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基矽烷(1.54g，9.3mmol)，且在22℃下再攪拌所得混合物2小時。混合物用水(50mL)處理且用EA(50mL×3)萃取。經合併之EA層用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析法(PE：EtOAc=10：1)純化粗產物，獲得6-溴-2-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑(4.38g，100%)。
MS-ESI(m/z)：473.9(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：1.38min)
(e)6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-2-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑
在110℃下，在氮氣流下，攪拌6-溴-2-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑(4.38g，9.3mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-聯(1,3,2-二氧硼)(2.6g，10.2mmol)、KOAc(2.23g，23.3mmol)、Pd2(dba)3(446mg，0.76mmol)及TCP(213mg，0.76mmol)於二噁烷(100mL)中之混合物2小時。冷卻至室溫後，過濾混合物，且真空濃縮濾液，獲得粗殘餘物，將其藉由矽膠管柱層析法(PE：EtOAc=10：1)純化，獲得標題產物(4.5g，93.2%)。
MS-ESI(m/z)：520.2(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：1.178min)
中間物39
N-(4-(二氟甲基)吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺 (a)2-溴-4-(二氟甲基)吡啶
在-78℃下，向2-溴異菸鹼醛(2g，10.752mmol)於二氯甲烷中之溶液中添加DAST(6.613g，32.257mmol)。混合物在2小時內緩慢升溫至室溫。用飽和碳酸氫鈉淬滅反應混合物且用二氯甲烷萃取。經合併之有機層用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥且蒸發，獲得2-溴-4-(二氟甲基)吡啶(2g，產率90%)。1HNMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.52-8.51(d,J=8.0Hz,1 H),7.63(s,1 H),7.40-7.38(d,J=8.0Hz,1 H),MS(ESI)：M/Z(M+1)=207.95。
(b) N-(4-(二氟甲基)吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
在N2氛圍下，向4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺(1.5g，6.07mmol)及2-溴-4-(二氟甲基)吡啶(1.515g，7.284mmol)於二噁烷中之脫氣混合物中添加Pd2(dba)3(催化量)、X-phos(催化量)及Cs2CO3(3.956g，12.141mmol)。在100℃下攪拌混合物隔夜。將反應混合物冷卻至室溫且過濾。濃縮濾液，且藉由矽膠純化殘餘物，獲得N-(4-(二氟甲基)吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺(1.8g，產率79%)。
1HNMR(400MHz,DMSO-d6)：δ=8.55-8.54(d,J=4Hz,1 H),8.39(s,1 H),8.02-8.00(d,J=8.0Hz,2 H),7.79-7.77(d,J=8.0Hz,2 H),7.34-7.33(d,J=4Hz,1 H),7.29-7.01(t,J=52Hz,1 H),1.30(s,12 H),MS(ESI)：M/Z(M+1)=375.16。
中間物40
N-(4-乙氧基吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
在N2氛圍下，向4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺(9.4g，38mmol)及2-氯-4-乙氧基吡啶(5g，31.7mmol)於二噁烷中之脫氣混合物中添加Brettphos-prePd(催化量)及Cs2CO3(12.3g，37.8mmol)。將混合物加熱至100℃且攪拌3.5小時。將反應混合物冷卻至室溫且過濾。濃縮濾液，且藉由矽膠(PE：EA=100%-30%)純化殘餘物，獲得N-(4-乙氧基吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺(8.8g，產率75%)。1HNMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.74(s,1 H),8.05-8.02(m,1 H),8.01(s,1 H),7.94-7.89(m,4 H),6.60-6.59(m,1 H),4.20-4.14(m,2 H),1.47-1.43(m,3 H),1.36(s,12 H),MS(ESI)：M/Z(M+1)=369.19。
中間物41
N-(4-(1,1-二氟乙基)吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺 (a)2-溴-N-甲氧基-N-甲基異菸鹼醯胺
向2-溴異菸鹼酸(40.4g，0.2mol)於200mL無水DMF中之溶液中分部分添加CDI(32.4g，0.2mol)。在N2氛圍下攪拌30分鐘後，添加N,O-甲基羥基胺鹽酸鹽(19.5g，0.2mol)且在室溫下，在N2氛圍下攪拌混合物隔夜。用水稀釋混合物且用EtOAc萃取。經合併之有機相用水及鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且真空濃縮，獲得粗殘餘物，將其藉由矽膠急驟層析法純化，獲得化合物2-溴-N-甲氧基-N-甲基異菸鹼醯胺(28g，產率57%)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)：δ=8.50(d,J=4.8Hz,1 H),7.79(s,1 H),7.59(d,J=4.8Hz,1 H),3.56(s,3 H),3.27(s,3 H)。MS(ESI)：M/Z(M/M+2=1/1)244.7/246.7。
(b)1-(2-溴吡啶-4-基)乙酮
在-78℃下，在N2氛圍下，向2-溴-N-甲氧基-N-甲基異菸鹼醯胺(27g，0.11mol)於200mL無水THF中之溶液中添加3M MeMgBr(44mL，0.132mol)。在-78℃下，在N2下攪拌混合物2小時，且接著用NH4Cl水溶液淬滅，且用EtOAc萃取。有機相用水及鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且真空濃縮，獲得粗殘餘物，其藉由矽膠急驟層析法純化，獲得1-(2-溴吡啶-4-基)乙酮(20g，產率：90.9%)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)：δ=8.59(d,J=4.8Hz,1 H),8.01(s,1 H),7.82(d,J=4.8Hz,1 H),2.61(s,3 H)。
(c)2-溴-4-(1,1-二氟乙基)吡啶
在0℃下，向1-(2-溴吡啶-4-基)乙酮(20g，0.1mol)於200mL DCM中之溶液中添加DAST(40.3g，0.25mol)。攪拌反應混合物隔夜，且緩慢倒入NaHCO3水溶液中，且用DCM萃取。有機相用水及鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且真空濃縮，獲得粗殘餘物，其藉由矽膠急驟層析法純化，獲得2-溴-4-(1,1-二氟乙基)吡啶(18.5g，產率：84.1%)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)：δ=8.56(d,J=5.2Hz,1 H),7.86(s,1 H),7.65(d,J=4.8Hz,1 H),2.00(t,J=19.2Hz,3 H)。MS (ESI)：M/Z(M/M+2=1/1)222.0/224.0。
(d)N-(4-(1,1-二氟乙基)吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
使用2-溴-4-(1,1-二氟乙基)吡啶製備N-(4-(1,1-二氟乙基)吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺。遵照中間物40之程序。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=8.73(s,1H),8.56(s,1H),8.38(d,J=5.3Hz,1H),7.97-7.89(m,4H),7.22(d,J=5.3Hz,1H),1.96(t,J=18.3Hz,3H),1.37(s,12H)。
中間物42
N-(4-環丙氧基吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺 (a)2-氯-4-環丙氧基吡啶
向2-氯吡啶-4-醇(1g，7.75mmol)於DMA(10ml)中之溶液中添加溴環丙烷(2.8g，23.2mmol)、NaI(1.16g，7.75mmol)及Cs2CO3(5g，15.5mmol)。在MW 170℃下攪拌混合物20分鐘，且接著在MW 180℃下攪拌30分鐘。用EA萃取反應混合物。乾燥有機層且濃縮。藉由急驟管柱層析法純化殘餘物，獲得300mg 2-氯-4-環丙氧基吡啶。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=8.19(d,J=5.8Hz,1H),7.02(d,J=2.0Hz,1H),6.87(dd,J=2.0,5.8Hz,1H),3.80(tt,J=3.0,6.0Hz,1H),0.91-0.75(m,4H)。
(b) N-(4-環丙氧基吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基) 苯甲醯胺
遵照中間物40之程序製備N-(4-環丙氧基吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=9.12(br.s.,1H),8.27(d,J=2.01Hz,1H),8.20(d,J=5.52Hz,1H),8.07(d,J=6.02Hz,1H),7.66(d,J=7.78Hz,1H),7.37(d,J=7.78Hz,1H),6.62-6.73(m,1H),6.42-6.49(m,1H),3.84-3.94(m,1H),1.37(s,12H),0.78-0.94(m,4H)。
中間物43
3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺 (a)4-溴-3-氟-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
向4-溴-3-氟苯甲酸(19.6g，90mmol)、4-(三氟甲基)吡啶-2-胺(16.2g，0.1mol)及TEA(50mL)於無水THF(300mL)中之攪拌溶液中逐份添加HATU(41.8g，0.11mol)。在室溫下攪拌反應混合物20小時，且在60℃下再攪拌40小時。真空濃縮所得混合物且藉由矽膠急驟層析法(EA/PE：5%至15%)純化殘餘物，獲得化合物4-溴-3-氟-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(26.8g，產率：82%)。
(b)3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在110℃下，在N2氛圍下，攪拌4-溴-3-氟-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(26.8g，74mmol)、雙(頻哪醇根基)二硼(22.6g，90mmol)、TCP(1.24g，4.44mmol)、Pd(dba)2(2.6g，4.44mmol)及 KOAc(21.8g，220mmol)於無水二噁烷(400mL)中之脫氣混合物隔夜。冷卻至室溫後，過濾所得混合物且真空濃縮，獲得粗殘餘物。藉由矽膠急驟管柱層析法(EA/PE：5%至20%)純化殘餘物，獲得3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(20g，產率：66%)。
中間物44
4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
此化合物以與中間物43中所述類似之方式製備，以4-(三氟甲基)吡啶-2-胺及4-溴苯甲酸為起始物質獲得標題化合物4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺。
中間物45
N-(4-(二氟甲基)吡啶-2-基)-3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺 (a)(4-(二氟甲基)吡啶-2-基)胺基甲酸第三丁酯
在90℃下，在N2流下，攪拌2-氯-4-(二氟甲基)吡啶(6.3g，38.5mmol)、胺基甲酸第三丁酯(5.4g，46.2mmol)、Cs2CO3(25g，77mmol)、X-phos(1.83g，3.85mmol)及Pd(OAc)2(430mg，1.925mmol)於40mL 1,4-二噁烷中之脫氣混合物2小時。真空濃縮混合物獲得粗產物，將其藉由矽膠管柱層析法純化，獲得(4-(二氟甲基)吡啶- 2-基)胺基甲酸第三丁酯(7.57g，產率：80.5%)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)：δ=10.11(s,1 H),8.38(d,J=5.2Hz,1 H),7.99(s,1 H),7.16(d,J=4.8Hz,1 H),7.07(t,J=55.2Hz,1 H),1.46(s,9 H)。
(b)4-(二氟甲基)吡啶-2-胺
向(4-(二氟甲基)吡啶-2-基)胺基甲酸第三丁酯(6.8g，27.8mmol)於40mL DCM中之溶液中添加20mL三氟乙酸。在室溫下攪拌反應物1小時，且接著真空濃縮。添加NaHCO3水溶液且用EA萃取。有機層用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，濃縮，獲得4g粗產物化合物4-(二氟甲基)吡啶-2-胺。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)：δ=8.00(d,J=5.2Hz,1 H),6.88(t,J=55.6Hz,1 H),6.56(d,J=5.6Hz,1 H),6.54(s,1 H),6.27(s,2 H)。
(c)4-溴-N-(4-(二氟甲基)吡啶-2-基)-3-氟苯甲醯胺
在0℃下，向4-溴-3-氟苯甲酸(5g，22.8mmol)於100mL DCM中之溶液中添加乙二醯二氯(8.7g，68.5mmol)及5滴DMF。攪拌1小時後，真空濃縮混合物且將其溶解於20mL THF中，且在0℃下添加至4-(二氟甲基)吡啶-2-胺(3.9g，27.36mmol)於30mL THF中之溶液中。在室溫下攪拌反應物30分鐘，且在80℃下攪拌隔夜。冷卻至室溫後，過濾混合物且真空濃縮濾液，獲得粗殘餘物，將其藉由矽膠管柱層析法純化，獲得4-溴-N-(4-(二氟甲基)吡啶-2-基)-3-氟苯甲醯胺(4.9g，產率：62.3%)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)：δ=11.26(s,1 H),8.56(d,J=4.8Hz,1 H),8.37(s,1 H),8.01(d,J=10.0Hz,1 H),7.78-7.90(m,2 H),7.35(d,J=5.2Hz,1 H),7.15(t,J=55.2Hz,1 H)。MS(ESI)：M/Z(M/M+2=1/1)：344.5/346.5。
(d) N-(4-(二氟甲基)吡啶-2-基)-3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
在90℃下，在N2流下，攪拌4-溴-N-(4-(二氟甲基)吡啶-2-基)-3-氟 苯甲醯胺(4.9g，14.2mmol)、雙(頻哪醇根基)二硼(5.4g，21.3mmol)、KOAc(4.2g，42.6mmol)及Pd(dppf)Cl2(1.04g，1.42mmol)於60mL 1,4-二噁烷中之脫氣混合物2小時。真空濃縮混合物獲得粗產物，其藉由矽膠管柱層析法純化，獲得N-(4-(二氟甲基)吡啶-2-基)-3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺(5.4g，產率：96.9%)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)：δ=11.25(s,1 H),8.56(d,J=4.8Hz,1 H),8.37(s,1 H),7.85(d,J=7.6Hz,1 H),7.74-7.79(m,2 H),7.35(d,J=5.2Hz,1 H),7.15(t,J=55.2Hz,1 H),1.31(s,12 H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：392.9。
中間物46
3-氟-N-(4-甲氧基吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
遵照針對中間物44所述之相同程序，獲得1g 3-氟-N-(4-甲氧基吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.72(brs,1 H),8.07(d,J=5.6Hz,1 H),8.00(d,J=2.0Hz,1 H),7.86(dd,J 1=5.6Hz,J 2=7.6Hz,1 H),7.59-7.66(m,2 H),6.64(dd,J 1=2.0Hz,J 2=6.0Hz,1 H),3.91(s,3 H),1.37(s,12 H)。
中間物47
N-(4-(1,1-二氟乙基)吡啶-2-基)-3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺 (d)(4-(1,1-二氟乙基)吡啶-2-基)胺基甲酸第三丁酯
遵照針對中間物44所述之程序，獲得4g N-(4-(1,1-二氟乙基)吡啶-2-基)-3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ=9.56(brs,1 H),8.60(s,1 H),8.36(d,J=5.2Hz,1 H),7.88(dd,J 1=6.0Hz,J 2=7.6Hz,1 H),7.67-7.76(m,2 H),7.24-7.25(m,1 H),1.96(t,J=18.4Hz,3 H),1.38(s,12 H)。
中間物48
3-氟-N-(4-甲基吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
遵照針對中間物44所述之程序，製備3-氟-N-(4-甲基吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=8.61(br,s.,1H),8.21(s,1H),8.14(d,J=5.0Hz,1H),7.91-7.82(m,1H),7.62(dd,J=8.8,15.8Hz,2H),6.92(d,J=4.5Hz,1H),2.41(s,3H),1.38(s,12H)；MS(APCI)：m/z(M+1)：357.2。
中間物49
N-(4-乙基吡啶-2-基)-3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
遵照中間物44之相同程序製備N-(4-乙基吡啶-2-基)-3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺。1H NMR(400MHz, CDCl3)：δ=8.81(s,1 H),8.24(s,1 H),8.12-8.11(d,J=4Hz,1 H),7.86-7.83(m,1 H),7.66-7.59(m,2 H),6.93-6.92(d,J=4Hz,1 H),2.73-2.67(m,2 H),1.38(s,12 H),1.30-1.26(t,J=8Hz,3 H),MS MS(EI)：M/Z(M+1)：371.19。
中間物50
3-氟-N-(吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
遵照中間物44之程序，製備3-氟-N-(吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺。1HNMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.64(brs,1 H),8.36(d,J=8.0Hz,1 H),8.28-8.30(m,1 H),7.86(dd,J 1=6.0Hz,J 2=7.6Hz,1 H),7.75-7.79(m,1 H),7.10(dd,J 1=0.8Hz,J 2=5.2Hz,1 H),7.08(dd,J 1=0.8Hz,J 2=5.2Hz,1 H),7.07-7.11(m,1 H),1.38(s,12 H)。
中間物51
3-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺 (a)3-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲酸
在40℃下，攪拌4-硼-3-甲氧基苯甲酸(500mg，2.55mmol)及頻哪醇(330mg，2.79mmol)於THF(5ml)及甲苯(5ml)中之溶液隔夜。冷卻後，將混合物分配於水中且用乙酸乙酯萃取三次。經合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，且真空濃縮。粗產物3-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲酸未經進一步純化即用於 下一步驟中。
(b)3-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯氯
向3-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲酸(700mg，2.52mmol)於DCM(20ml)中之溶液中添加2滴DMF，在冰水浴中將混合物冷卻至0℃，且隨後添加乙二醯二氯(629mg，5.03mmol)。在0℃下攪拌反應混合物2小時。真空濃縮溶劑，且粗產物3-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯氯直接用於下一步驟中。
(c)3-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
向3-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯氯(700mg，2.36mmol)於THF(50ml)中之溶液中添加4-(三氟甲基)吡啶-2-胺(574mg，3.55mmol)。在80℃下攪拌所得混合物隔夜。將混合物冷卻至室溫，真空濃縮揮發物且藉由矽膠層析法(石油醚/乙酸乙酯=3/1 v/v%)純化殘餘物，獲得標題化合物中間物51(546mg，三個步驟：54.8%)。MS-ESI(m/z)：423(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：1.26min)。
中間物52
2-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
此化合物以與針對中間物44所述類似之方式製備，以4-溴-2-氟苯甲酸為起始物質獲得標題化合物(74.3%)。
MS-ESI(m/z)：411(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：1.55min)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ=11.41(s,1H),8.66(d,J=5.1 Hz,1H),8.51(s,1H),7.84-7.66(m,1H),7.64-7.51(m,2H),7.45(d,J=10.2Hz,2H),1.29(s,12H)。
中間物53
2-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺 (a)4-溴-2-氯-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在室溫下，在氮氣保護下，向4-溴-2-氯苯甲酸甲酯(1.15g，7.1mmol)於甲苯(20ml)中之溶液中逐滴添加Me3Al(5ml，甲苯中2M，10mmol)。添加完成後，再攪拌混合物10分鐘，且添加4-(三氟甲基)吡啶-2-胺(1.76g，7.1mmol)。接著在回流下加熱所得混合物8小時。冷卻後，用水淬滅混合物，用乙酸乙酯萃取三次。經合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，且真空濃縮。藉由矽膠層析法(石油醚/乙酸乙酯=6/1 v/v%)純化殘餘物，獲得4-溴-2-氯-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(1.88g，67.6%)。
(b)2-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
此化合物以與中間物43步驟(b)中所述類似之方式製備，以6.8g 4-溴-2-氯-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺為起始物質獲得標題化合物中間物53(3.2g，47%)。
MS-ESI(m/z)：427(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：1.44min)。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ=8.63-8.46(m,2H),7.84-7.69(m,2H),7.58(s,1H),7.40(br.s.,1H),1.35(s,12H)。
中間物54
N-(5-乙基噻唑-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
此化合物以與針對中間物44所述類似之方式製備，以5-甲基噻唑-2-胺為起始物質獲得標題化合物中間物54。
中間物55
N-(4-異丙氧基吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺 (a)4-溴-N-(4-異丙氧基吡啶-2-基)苯甲醯胺
在N2下，用溶解於MeCN(5.0ml)中之4-溴苯甲醯氯(1.0g，4.47mmol)處理4-異丙氧基吡啶-2-胺(1.019g，6.70mmol)及DMAP(0.709g，5.81mmol)於MeCN(5.0ml)中之溶液，且在室溫下攪拌混合物隔夜。混合物用DCM稀釋且用水(×2)洗滌。用DCM洗滌水層，且經合併之有機物用鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)且濃縮，獲得奶白色固體。在40g管柱上在CombiFlash RF上(用0至20% EtOAc/己烷(24 CV)溶離)純化，獲得1.33g呈白色固體狀之標題化合物。m/z(M+2)+：237.01。
(b)N-(4-異丙氧基吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
用二噁烷(1.0ml)處理含有來自步驟a1之4-溴-N-(4-異丙氧基吡啶-2-基)苯甲醯胺(0.1g，0.298mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-聯(1,3,2-二氧硼)(0.083g，0.328mmol)及乙酸鉀(0.088g，0.895 mmol)之4ml小瓶，且用室內真空法使混合物脫氣，且用N2(×2)回填。在N2下，接著經注射器添加呈二噁烷(0.5ml)中之漿料形式的第2代X-phos預催化劑(0.047g，0.060mmol)，且接著在70℃下攪拌所得奶白色懸浮液2小時。混合物用EtOAc稀釋，過濾且濃縮。在12g管柱上在CombiFlash Rf上(用0至40% EtOAc/己烷溶離)純化，獲得70mg標題化合物中間物55。m/z(M+1)+：383.22。
中間物56
N-(4-氰基吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
此化合物以與中間物55中所述類似之方式製備，以2-胺基異菸鹼腈為起始物質獲得標題化合物(1.3g，99%)。
中間物57
3-乙氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺 步驟1：4-溴-3-乙氧基苯甲酸甲酯
在N2下，經注射器用碘乙烷(0.675g，4.33mmol)處理4-溴-3-羥基苯甲酸甲酯(1.0g，4.33mmol)及粉末狀碳酸鉀(0.658g，4.76mmol)於DMF(4.33ml)中之懸浮液，且在室溫下攪拌混合物2小時。反應物用水淬滅且用EtOAc(×2)萃取。經合併之EtOAc層用水(×2)及鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)且濃縮，獲得白色固體。用乙醚/己烷濕磨，隨後過濾，獲得910mg呈白色固體狀之標題化合物。1H NMR,500MHz,CDCl3,δ 7.62(d,J=8.2Hz,1H),7.55(d,J=1.7Hz,1H),7.52 (dd,J=8.2,1.8Hz,1H),4.19(q,J=6.9Hz,2H),3.94(s,3H),1.52(t,J=7.0Hz,3H)ppm。
步驟2：4-溴-3-乙氧基苯甲酸
相繼用溶解於水(4.5ml)中之LiOH(166mg，6.95mmol)、MeOH(4.5ml)處理來自步驟1之標題化合物4-溴-3-乙氧基苯甲酸甲酯(900mg，3.47mmol)於THF(9.0ml)中之溶液。接著在45℃下攪拌所得混合物2小時。蒸發溶劑，且用水稀釋殘餘物。用2N HCl將pH值調整至pH 6，且用EtOAc(×2)洗滌所得白色懸浮液。乾燥(MgSO4)有機層，且濃縮，獲得765mg呈白色固體狀之標題化合物。計算值m/z=245.0；實驗值m/z=247.0(M+2)。
步驟3：4-溴-3-乙氧基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在N2下，經注射器相繼用DMF(55.3μl，0.714mmol)、亞硫醯氯(1489μl，20.40mmol)處理來自步驟2之標題化合物4-溴-3-乙氧基苯甲酸(500mg，2.040mmol)於DCM(5982μl)中之懸浮液，且在35℃下攪拌混合物18小時。蒸發溶劑且將殘餘物與DCM及甲苯(×2)共同蒸發。接著用乙腈(5982μl)稀釋所得殘餘物，且用DMAP(324mg，2.65mmol)及4-(三氟甲基)吡啶-2-胺(364mg，2.244mmol)處理。接著在室溫下攪拌混合物3小時。蒸發溶劑且殘餘物用EtOAc稀釋且用水(×2)洗滌。經合併之有機物用鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)且濃縮。在CombiFlash RF MPLC上在40g管柱上(用0至20% EtOAc/己烷(25 CV)溶離)純化，獲得380mg呈白色固體狀之標題化合物。計算值m/z=389.1；實驗值m/z=391.0(M+2)。
步驟4：3-乙氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
將含有來自步驟3之標題化合物4-溴-3-乙氧基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(500mg，1.285mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基- 2,2'-聯(1,3,2-二氧硼)(359mg，1.413mmol)、PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(210mg，0.257mmol)及乙酸鉀(252mg，2.57mmol)之密封小瓶抽真空且用N2回填。接著經注射器添加二噁烷(6424μl)且再次將懸浮液抽真空且用N2回填。接著在室溫下攪拌混合物5分鐘，且接著在75℃下攪拌4.0小時(深色混合物)。用EtOAc稀釋混合物且過濾。濃縮濾液，獲得褐色油狀物。在CombiFlash RF MPLC上在40g管柱上(用0至20% EtOAc/己烷(40 CV)溶離)純化，獲得487mg標題化合物中間物5。計算值m/z=436.2；實驗值m/z=437.1(M+1)+。
中間物58
3-環丙氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺 步驟1：4-溴-3-環丙氧基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
用亞硫醯氯(4.54mL，62.2mmol)處理4-溴-3-環丙氧基苯甲酸(1.6g，6.22mmol)及DMF(0.169ml，2.178mmol)於DCM(40.0mL，0.156M)中之溶液，且在35℃下攪拌混合物18小時。蒸發溶劑，且使殘餘物與甲苯共沸(×2)。所得奶白色固體接著用乙腈(10mL)稀釋且用DMAP(0.988g，8.09mmol)處理。在室溫下攪拌混合物5分鐘，且添加4-(三氟甲基)吡啶-2-胺(1.211g，7.47mmol)。接著在35℃下攪拌混合物15小時。蒸發溶劑且殘餘物用DCM稀釋且用水(2)及鹽水洗滌。乾燥(MgSO4)且濃縮有機層，獲得奶白色固體。在Redi Sep Rf過濾管柱上在CombiFlash上(0-20%己烷/EtOAc)純化粗產物。收集適當溶離份且真空濃縮，獲得4-溴-3-環丙氧基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲 醯胺。LC-MS(ES,m/z)C16H12BrF3N2O2：401；實驗值403[M+H]+。
步驟2：3-環丙氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
向燒瓶中裝入含4-溴-3-環丙氧基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(2.19g，5.46mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-聯(1,3,2-二氧硼)(1.52g，6.0mmol)、乙酸鉀(1.6g，16.38mmol)、1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(ii)二氯甲烷錯合物(0.399g，0.1mmol)之二噁烷(35mL，0.156M)。使所得混合物脫氣且用氮氣淨化5分鐘且在78℃下攪拌隔夜。過濾混合物且真空濃縮。在Redi Sep Rf過濾管柱上在CombiFlash上(10% MeOH/DCM 0-3%)純化殘餘物，產生產物3-環丙氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺。LC-MS(ES,m/z)C22H24BF3N2O4：448；實驗值449[M+H]+。
中間物59
3-(環己氧基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在與中間物57相同之程序中，藉由在步驟1中用環己基溴置換碘乙烷，製備3-(環己氧基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺。LC-MS(ES,m/z)C25H30BrF3N2O4：490；實驗值：491[M+H]+。
中間物60
3-(新戊氧基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在與中間物57相同之程序中，藉由在步驟1中用新戊基溴置換碘乙烷，製備3-(新戊氧基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺。LC-MS(ES,m/z)C24H30BrF3N2O4：478；實驗值：479[M+H]+。
中間物61
3-環丁氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在與中間物57相同之程序中，藉由在步驟1中用環丁基溴置換碘乙烷，製備3-(環丁氧基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺。LC-MS(ES,m/z)C23H26BrF3N2O4：462；實驗值：463[M+H]+。
中間物62
3-異丙氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在與中間物57相同之程序中，藉由在步驟1、2中用異丙基溴置換碘乙烷，製備3-(異丙氧基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺。LC-MS(ES,m/z)C22H26BrF3N2O4：450；實驗值：451[M+H]+。
中間物63
3-(環戊氧基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在與中間物57相同之程序中，藉由在步驟1中用環戊基溴置換碘乙烷，製備3-(環戊氧基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺。LC-MS(ES,m/z)C24H28BrF3N2O4：476；實驗值：477[M+H]+。
中間物64
3-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-5-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)戊氧基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯
在與中間物57相同之程序中，藉由用3-溴氮雜環丁烷-1-甲酸第 三丁酯置換碘乙烷，製備3-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-5-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)戊氧基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯。LC-MS(ES,m/z)C27H33BrF3N3O6：563；實驗值：564[M+H]+。
中間物65
N-(5-氰基-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺 步驟1：4-溴-N-(5-氰基-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在室溫下攪拌6-胺基-4-(三氟甲基)菸鹼腈(1.086g，5.81mmol)、4-溴苯甲醯氯(1.0g，4.47mmol)及DMAP(0.709g，5.81mmol)於乙腈(14.88ml)中之溶液16小時。反應物用DCM稀釋且用水洗滌。乾燥(MgSO4)且濃縮有機層。自DCM(靜置)濕磨，隨後過濾，獲得1.59g呈微綠色/奶白色粉末狀之標題化合物。1H NMR,500MHz,CDCl3,δ8.91(s,1H),8.81(s,1H),7.91(d,J=8.4Hz,2H),7.71(d,J=8.2Hz,2H)ppm。
步驟2：N-(5-氰基-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
用1,4二噁烷(12ml)處理含有步驟1之標題化合物(4-溴-N-(5-氰基-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺)(500mg，1.351mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-聯(1,3,2-二氧硼)(515mg，2.026mmol)及乙酸鉀(398mg，4.05mmol)之圓底燒瓶，用室內真空法抽真空且用N2(×2)回填。在N2下，接著經注射器添加呈1,4-二噁烷(6ml)中之漿料形式的第2代XPHOS預催化劑(213mg，0.270mmol)，接著在80℃下攪拌所得奶白色懸浮液10小時。混合物用EtOAc稀釋，過濾且濃縮濾液。在CombiFlash Rf MPLC上，在80g管柱上(用0至10% EtOAc/己烷溶離)純化，獲得398mg呈奶白色固體狀之標題化合物中間物18。計算值m/z=417.1；實驗值m/z=418.2.(M+1)。
中間物66
3-氰基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺 步驟1：4-溴-3-氰基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
用亞硫醯氯(3.23ml，44.2mmol)處理4-溴-3-氰基苯甲酸(1.0g，4.42mmol)及N,N-二甲基甲醯胺(0.113g，1.548mmol)於DCM(22.12ml)中之懸浮液，且在35℃下攪拌混合物隔夜。濃縮混合物，用DCM稀釋且再次濃縮。將所得奶白色固體溶解於甲苯中且共沸(×2)。所得油狀物用MeCN(20ml)稀釋且用DMAP(0.703g，5.75mmol)處理。攪拌5分鐘後，添加4-(三氟甲基)吡啶-2-胺(0.789g，4.87mmol)且在60℃下攪拌混合物5小時。混合物用DCM稀釋且用水(×2)洗滌。乾燥(MgSO4)有機層，過濾且濃縮，獲得油狀物。在CombiFlash RF上，在120g管柱上(用0至20% EtOAc/己烷溶離)純化，獲得1.1g呈奶白色固體狀之標題化合物。計算值m/z=370.1；實驗值m/z=372.0(M+2)。
步驟2：3-氰基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
將含有來自步驟1之標題化合物4-溴-3-氰基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(100mg，0.270mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-聯(1,3,2-二氧硼)(137mg，0.540mmol)、PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(22.06mg，0.027mmol)及乙酸鉀(80mg，0.811mmol)之小瓶抽真空且用N2回填。接著經注射器添加乙腈(2702μl)且將懸浮液再次抽 真空且用N2(×2)回填。接著在室溫下攪拌混合物5分鐘，且接著在75℃下攪拌15小時。用EtOAc稀釋混合物且過濾。濃縮濾液，獲得粗黏性固體標題化合物。計算值m/z=335.0；實驗值m/z=336.0(M+1)。
中間物67
3-乙氧基-N-(1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺 步驟1：4-溴-3-乙氧基-N-(1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)苯甲醯胺
用HATU(8.53g，22.44mmol)處理來自步驟2之標題化合物中間物5，即4-溴-3-乙氧基苯甲酸(5.0g，20.40mmol)於DMF(102ml)中之溶液，且在室溫下攪拌混合物15分鐘。接著相繼添加1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-胺(3.37g，20.40mmol)、DIEA(7.13ml，40.8mmol)，且在室溫下攪拌混合物15小時。混合物用EtOAc稀釋且用水(×2)洗滌。有機層接著用鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)且濃縮，獲得油狀物。在CombiFlash RF MPLC上在24g管柱上(用0至20% EtOAc/己烷溶離)純化，獲得7.2g呈油狀之所要產物，其隨後固化。計算值m/z=392.1；實驗值m/z=394.0(M+2)。
步驟2：3-乙氧基-N-(1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
在N2氛圍下，向含有來自步驟1之標題化合物4-溴-3-乙氧基-N-(1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)苯甲醯胺(1000mg，2.55 mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-聯(1,3,2-二氧硼)(971mg，3.82mmol)、PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(208mg，0.255mmol)及乙酸鉀(751mg，7.65mmol)之密封圓底燒瓶中添加1,4-二噁烷(1.27E+04μl)。接著將所得懸浮液脫氣(×3)且用N2回填。接著在80℃下，在N2下攪拌混合物8小時。過濾混合物，且濃縮濾液。在CombiFlash RF上，在80g管柱上(用0至15% EtOac/己烷(80 CV)溶離)純化，獲得763mg呈油狀之標題化合物中間物30，其隨後固化。計算值m/z=439.2；實驗值m/z=440.2(M+1)。
中間物68
2-氟-5-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺 步驟1：4-溴-2-氟-5-甲氧基苯甲酸
經加料漏斗用亞氯酸鈉(893mg，9.87mmol)及磷酸二氫鈉(1030mg，8.58mmol)溶解於水(1.43E+04μl)中之溶液緩慢處理4-溴-2-氟-5-甲氧基苯甲醛(1000mg，4.29mmol)及2-甲基丁-2-烯(1362μl，12.87mmol)於t-BuOH(1.43E+04μl)中之溶液，且在室溫下攪拌混合物3小時。蒸發溶劑且所得白色固體用飽和Na2CO3(20ml)稀釋且用乙醚萃取。水層用1N HCl(pH=4)酸化且用EtOAc(×2)萃取。乾燥(MgSO4)且濃縮經合併之有機層，獲得940mg呈白色固體狀之標題化合物。計算值m/z=249.0；實驗值m/z 251.0(M+2)。
步驟2：4-溴-2-氟-5-甲氧基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
用亞硫醯氯(2755μl，37.7mmol)處理來自步驟1之標題化合物4- 溴-2-氟-5-甲氧基苯甲酸(940mg，3.77mmol)及DMF(102μl，1.321mmol)於DCM(9436μl)中之溶液且在35℃下攪拌混合物18小時。蒸發溶劑，且使殘餘物與甲苯共沸(×2)。所得奶白色固體接著用MeCN(9ml)稀釋且用DMAP(599mg，4.91mmol)處理。接著在室溫下攪拌混合物5分鐘，且添加4-(三氟甲基)吡啶-2-胺(749mg，4.53mmol)。接著在35℃下攪拌混合物15小時。蒸發溶劑且殘餘物用DCM稀釋且用水(×2)及鹽水洗滌。乾燥(MgSO4)且濃縮經合併之有機層，獲得奶白色固體。用乙醚/己烷濕磨，隨後過濾，獲得0.9g呈奶白色固體狀之標題化合物。濃縮濾液且再獲得0.3g標題化合物。計算值m/z=393.1；實驗值m/z 395.0(M+2)。
步驟3：2-氟-5-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在N2氛圍下，用1,4-二噁烷(5087μl)處理含有來自步驟2之標題化合物4-溴-2-氟-5-甲氧基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(200mg，0.509mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-聯(1,3,2-二氧硼)(194mg，0.763mmol)、乙酸鉀(150mg，1.526mmol)及PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(41.5mg，0.051mmol)之密封小瓶，且立即抽真空且用N2(×3)回填。接著在70℃下攪拌所得紅褐色混合物2小時。用EtOAc稀釋混合物且過濾。濾液用水及鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)且濃縮。在CombiFlash RF上，在40g管柱上(用0至30% EtOAc/己烷溶離)純化，獲得238mg呈白色固體狀之標題化合物中間物31。計算值m/z=440.2；實驗值m/z=441.2(M+1)。
中間物69
2-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
相繼用DMF(0.096ml，1.239mmol)、亞硫醯氯(2.58ml，35.4mmol)處理高壓燒瓶中的2-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲酸(1.0g，3.54mmol)於DCM(11.80ml)中之溶液，且在50℃下攪拌混合物20小時。濃縮混合物且使其與甲苯共沸(×2)。所得油狀物接著用MeCN(12ml)稀釋且用N,N-二甲基吡啶-4-胺(0.476g，3.89mmol)及DMAP(0.432g，3.54mmol)處理。接著在室溫下攪拌混合物20小時。蒸發溶劑且殘餘物用DCM稀釋且用水及鹽水(×2)萃取。乾燥(MgSO4)且濃縮有機層，獲得油狀物。在CombiFlash Companion MPLC上，在40g管柱上(用0至25% EtOAc/己烷溶離)純化，獲得273mg標題化合物中間物69，即2-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺。計算值m/z=426.6；實驗值m/z=427.26(M+1)。
中間物70
3-D3-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺 步驟1：4-溴-3-D3-甲氧基苯甲酸甲酯
在N2氛圍下，經注射器用碘甲烷-D3(205mg，1.415mmol)處理 4-溴-3-羥基苯甲酸甲酯(327mg，1.415mmol)及粉末狀碳酸鉀(215mg，1.557mmol)於DMF(1415μl)中之懸浮液，且在室溫下攪拌混合物2小時。反應混合物用水淬滅且用EtOAc(×2)萃取。經合併之EtOAc層用水(×2)及鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)且濃縮，獲得呈澄清油狀之標題化合物(335mg)，其結晶隔夜。計算值m/z=248.0；實驗值m/z=248.0(M)。
步驟2：4-溴-3-D3-甲氧基苯甲酸
相繼用溶解於水(1.5ml)中之LiOH(57.9mg，2.418mmol)、MeOH(1.5ml)處理來自步驟1之產物(300mg，1.209mmol)於THF(3.0ml)中之溶液。接著在45℃下攪拌所得混合物2小時。蒸發溶劑，且用水稀釋殘餘物。用1N HCl將pH值調整至pH 6，且用EtOAc(×2)洗滌所得白色懸浮液。乾燥(MgSO4)且濃縮經合併之有機層，獲得282mg呈白色固體狀之標題化合物。計算值m/z=234.0；實驗值m/z=236(M,M+2)。
步驟3：4-溴-3-D3-甲氧基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在N2下，經注射器相繼用DMF(32.4μl，0.419mmol)、亞硫醯氯(873μl，11.96mmol)處理來自步驟2之標題化合物2(280mg，1.196mmol)於DCM(5982μl)中之懸浮液，且在35℃下攪拌混合物15小時。蒸發溶劑且將殘餘物與DCM及甲苯(×2)共同蒸發。接著用乙腈(5982μl)稀釋所得殘餘物，且用DMAP(190mg，1.555mmol)及4-(三氟甲基)吡啶-2-胺(213mg，1.316mmol)處理。接著在室溫下攪拌混合物3小時。蒸發溶劑且殘餘物用EtOAc稀釋且用水(×2)洗滌。經合併之有機物用鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)且濃縮。在CombiFlash RF MPLC上在40g管柱上(用0至20% EtOAc/己烷(25 CV)溶離)純化所得殘餘物，獲得380mg呈白色固體狀之標題化合物。計算值m/z=378.1；實驗值m/z=380.1(M,M+2)。
步驟4：3-D3甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
將含有來自步驟3之標題化合物(365mg，0.965mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-聯(1,3,2-二氧硼)(270mg，1.062mmol)、PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(158mg，0.193mmol)及乙酸鉀(189mg，1.930mmol)之密封小瓶抽真空且用N2(×2)回填。接著經注射器添加1,4-二噁烷(4826μl)且再次將懸浮液抽真空且用N2回填。接著在室溫下攪拌混合物5分鐘，且接著在75℃下攪拌2.0小時(深色混合物)。用EtOAc稀釋混合物且過濾。濃縮濾液，獲得褐色油狀物。在CombiFlash RF MPLC上在24g管柱上(用0至20% EtOAc/己烷(30 CV)溶離)純化，獲得242mg標題化合物中間物70。計算值m/z=425.2；實驗值m/z=426.2(M+1)。
中間物71
3-羥基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺 步驟1：3-(苯甲基氧基)-4-溴-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在N2下，經注射器相繼用DMF(0.176ml，2.279mmol)、亞硫醯氯(4.75ml，65.1mmol)處理3-(苯甲基氧基)-4-溴苯甲酸(2.0g,6.51mmol)於DCM(13.02ml)中之懸浮液，且在35℃下攪拌混合物18小時。蒸發溶劑且將殘餘物與DCM及甲苯(×2)共同蒸發。接著用MeCN(25ml)稀釋所得殘餘物，且用DMAP(1.034g，8.47mmol)及4-(三氟甲基)吡啶-2-胺(1.161g，7.16mmol)處理。接著在室溫下攪拌混合物3小時。蒸發溶劑且殘餘物用EtOAc稀釋且用水(×2)洗滌。經合併之有機物用鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)且濃縮。接著在CombiFlash RF上在80 g管柱上(用0至15% EtOAc/己烷(30 CV)溶離)純化所得殘餘物，獲得2.4g呈白色固體狀之標題化合物。計算值m/z=451.2；實驗值m/z=453.2(M+2)。
步驟2：3-(苯甲基氧基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
將含有來自步驟1之標題化合物3-(苯甲基氧基)-4-溴-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(1310mg，2.90mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-聯(1,3,2-二氧硼)(811mg，3.19mmol)、PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(474mg，0.581mmol)及乙酸鉀(570mg，5.81mmol)之密封小瓶抽真空且用N2回填。接著經注射器添加1,4-二噁烷(1.45E+04μl)且再次將懸浮液抽真空且用N2回填。接著在室溫下攪拌混合物5分鐘，且接著在80℃下攪拌15小時(深色混合物)。用EtOAc稀釋混合物且過濾。濃縮濾液，獲得褐色油狀物，將其用水(×2)及鹽水洗滌且分離各層。乾燥(MgSO4)且濃縮經合併之有機層，獲得油狀物。在CombiFlash RF MPLC上在80g管柱上(用0至30% EtOAc/己烷(40 CV)溶離)純化，獲得0.869g標題化合物。計算值m/z=498.3；實驗值m/z=499.3(M+1)。
步驟3：3-羥基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
用10% Pd-C(0.256g，0.241mmol)處理來自步驟2之標題化合物3-(苯甲基氧基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(0.4g，0.803mmol)於乙酸乙酯(2.007ml)及MeOH(2.007ml)中之溶液，且在40psi下，在巴氏震盪器(Parrr Shaker)上氫解混合物隔夜。濾出催化劑且濃縮濾液，獲得標題化合物中間物71。計算值m/z=408.2；實驗值m/z=409.2(M+1)。
中間物72
5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)吡啶醯胺 步驟1：5-溴-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)吡啶醯胺
在N2下，經注射器用DMF(0.134mL，1.733mmol)及亞硫醯氯(3.61mL，49.5mmol)處理5-溴吡啶甲酸(1.0g，4.95mmol)於DCM(11.mL)中之懸浮液，且在35℃下攪拌混合物18小時。蒸發溶劑且將殘餘物與DCM及甲苯(×2)共同蒸發。所得殘餘物接著用MeCN(12.0ml)稀釋且用5-溴-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)吡啶醯胺(1.35g，3.90mmol，79%產率)及DMAP(0.786g，6.44mmol)處理。接著在室溫下攪拌混合物隔夜且蒸發。殘餘物用EtOAc稀釋且用水(×2)洗滌且分離各層。經合併之有機物用鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)且濃縮。在CombiFlash RF MPLC上在40g管柱上(用0至10% EtOAc/己烷(25 CV)溶離)純化所得殘餘物，獲得1.35g呈白色固體狀之標題化合物。計算值m/z=346.1；實驗值m/z=347.9(M+1)。
步驟2：5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)吡啶醯胺
將含有來自步驟1之標題化合物5-溴-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)吡啶醯胺(325mg，0.939mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-聯(1,3,2-二氧硼)(262mg，1.033mmol)、PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(153mg，0.188mmol)及乙酸鉀(184mg，1.878mmol)之密封小瓶抽真空且用N2回填。接著經注射器添加二噁烷(4695μl)且再次將懸浮液抽真空且用N2回填。接著在室溫下攪拌混合物5分鐘，且接著在80℃下攪拌4小時。用EtOAc稀釋混合物且過濾。濃縮濾液產生油狀物。在CombiFlash RF MPLC上，在40g管柱上(用0至30% EtOAc/己烷溶 離)純化，獲得175mg標題化合物5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)吡啶醯胺。
中間物73
3-環丙氧基-N-(1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺 步驟1：4-溴-3-環丙氧基-N-(1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)苯甲醯胺
用HATU(0.444g，1.167mmol)處理4-溴-3-環丙氧基苯甲酸(0.3g，1.167mmol)於DMF(6.0ml)中之溶液且在室溫下攪拌混合物15分鐘。接著相繼添加1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-胺(0.193g，1.167mmol)、DIEA(0.408ml，2.334mmol)，且在室溫下攪拌混合物15小時。LC-MS顯示起始物質完全消耗且形成所要產物。混合物用EtOAc稀釋且用水(×2)洗滌。有機層接著用鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)且濃縮，獲得粗油狀物。藉由MPLC ISCO Redi sep 24g管柱(0-30%己烷/EtOAc)純化粗產物，獲得產物4-溴-3-環丙氧基-N-(1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)苯甲醯胺。LC-MS(ES,m/z)C15H3BrF3N3O2：404；實驗值406[M+H]+。
步驟2：3-環丙氧基-N-(1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
向燒瓶中裝入含4-溴-3-環丙氧基-N-(1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)苯甲醯胺(0.38g，0.94mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-聯(1,3,2-二氧硼)(0.26g，1.03mmol)、乙酸鉀(0.27g，2.8 mmol)、1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯鈀(ii)二氯甲烷錯合物(0.07g，0.094mmol)之二噁烷(7.0ml，0.13M)。所得混合物用N2脫氣10分鐘，且在78℃下在密封試管中加熱18小時。混合物用EtOAc稀釋且用水洗滌。用EtOAc 1×萃取水層。有機物經MgSO4乾燥，過濾且真空濃縮，獲得深褐色殘餘物。在40g Redi Sep Rf過濾管柱上在CombiFlash上(0-40%己烷/EtOAc)純化粗產物，獲得產物3-環丙氧基-N-(1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺。LC-MS(ES,m/z)C21H25BF3N3O4：451；實驗值452[M+H]+。
中間物74
3-環丙氧基-N-(4-環丙基吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺 步驟1：4-溴-3-環丙氧基-N-(4-環丙基吡啶-2-基)苯甲醯胺
用亞硫醯氯(1.703ml，23.34mmol)處理4-溴-3-環丙氧基苯甲酸(0.6g，2.334mmol)及二甲基甲醯胺(0.063ml，0.817mmol)於二氯甲烷(12.0ml)中之溶液，且在35℃下攪拌混合物18小時。蒸發溶劑，且使殘餘物與甲苯共沸(×2)。所得奶白色固體接著用MeCN(10ml)稀釋且用DMAP(0.371g，3.03mmol)處理。在室溫下攪拌混合物5分鐘，且添加4-環丙基吡啶-2-胺(0.376g，2.80mmol)。接著在35℃下攪拌混合物15小時。LC-MS顯示所要產物為主要產物。蒸發溶劑且殘餘物用DCM稀釋且用水(2)及鹽水洗滌。乾燥(MgSO4)且濃縮有機層，獲得奶白色固體。在40g Redi Sep Rf過濾管柱上在CombiFlash上(0-40% 己烷/EtOAc)純化粗產物，獲得產物4-溴-3-環丙氧基-N-(4-環丙基吡啶-2-基)苯甲醯胺。LC-MS(ES,m/z)C18H17BrN2O2：373；實驗值375[M+H]+。
步驟2：3-環丙氧基-N-(4-環丙基吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
在與中間物73，步驟2相同之程序中，製備3-環丙氧基-N-(4-環丙基吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺。LC-MS(ES,m/z)C24H29BN2O4：420；實驗值421[M+H]+
中間物75
5-乙氧基-2-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺 步驟1：2-氟-5-羥基-4-碘苯甲酸
向500ml一頸圓底燒瓶中裝入含2-氟-5-羥基苯甲酸(11g，70.5mmol)之氨水(14.68ml，176mmol)及水(100mL)。攪拌混合物且將固體完全溶解且在冰水浴中冷卻至0℃。接著，在40分鐘內經滴液漏斗逐滴添加碘(17.88g，70.5mmol)及碘化鉀(12.87g，78mmol)於水(100ml)中之混合物。在室溫下攪拌所得反應混合物2小時。接著藉由HCl(濃)酸化混合物，將pH值調整至3且靜置隔夜。過濾固體且用水洗滌，獲得固體-氟-5-羥基-4-碘苯甲酸。LC-MS(ES,m/z)C7H4FIO3：282；實驗值281[M-H]-。
步驟2：2-氟-5-羥基-4-碘苯甲酸甲酯
向250ml一頸圓底燒瓶中裝入2-氟-5-羥基-4-碘苯甲酸(12g， 42.6mmol)以及新鮮製備的甲醇(100mL)與氯化亞碸(15.19g，128mmol)之混合物。接著在室溫下攪拌所得反應混合物15小時。藉由旋轉蒸發移除甲醇且將殘餘物分配於NaHCO3(飽和，100mL)與乙酸乙酯(200mL)之間。分離有機層，且用乙酸乙酯(3×)萃取有機層。經合併之有機相經MgSO4乾燥，過濾且濃縮。接著藉由MPLC(80g矽膠，含0至50%乙酸乙酯之己烷，18 CV)純化粗產物，獲得淡色固體產物2-氟-5-羥基-4-碘苯甲酸甲酯。LC-MS(ES,m/z)C8H6FIO3：296；實驗值297[M+H]+。
步驟3：5-乙氧基-2-氟-4-碘苯甲酸甲酯
向250ml一頸圓底燒瓶中裝入2-氟-5-羥基-4-碘苯甲酸甲酯(2.5g，8.44mmol)以及碳酸鉀(3.50g，25.3mmol)及DMF(15ml)。攪拌混合物，且接著經注射器在5分鐘內逐滴添加碘乙烷(1.976g，12.67mmol)。接著在室溫下攪拌所得反應混合物18小時隔夜。用乙酸乙酯(30mL)稀釋混合物，且將固體過濾且用乙酸乙酯(3×)洗滌。接著藉由旋轉蒸發濃縮濾液。藉由MPLC(80g矽膠，含0-20%乙酸乙酯之己烷，18 CV)純化殘餘物，獲得無色液體產物5-乙氧基-2-氟-4-碘苯甲酸甲酯。LC-MS(ES,m/z)C10H10FIO3：324；實驗值325[M+H]+。
步驟4：5-乙氧基-2-氟-4-碘苯甲酸
向250ml一頸圓底燒瓶中裝入5-乙氧基-2-氟-4-碘苯甲酸甲酯(2.700g，8.33mmol)以及水合氫氧化鋰(1.748g，41.7mmol)及MeOH(10ml)、THF(10.00ml)、水(5ml)。接著攪拌所得反應混合物，且在40℃油浴中加熱15小時隔夜。用水(20mL)稀釋混合物，且藉由HCl(濃)將pH值調整至2，接著用乙酸乙酯(3×)萃取。經合併之有機相用水洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且濃縮，獲得白色固體產物5-乙氧基-2-氟-4-碘苯甲酸。LC-MS(ES,m/z)C9H8FIO3：310；實驗值311[M+H]+。
步驟5：5-乙氧基-2-氟-4-碘-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
向100ml一頸圓底燒瓶中裝入5-乙氧基-2-氟-4-碘苯甲酸(1.00g，3.23mmol)以及CH2Cl2(8ml)，隨後裝入乙二醯二氯(0.546ml，6.45mmol)。攪拌混合物，同時添加一滴DMF來起始反應，且立刻形成氣泡。接著在室溫下攪拌所得反應物40分鐘直至無氣泡逸出。接著濃縮混合物。
向100ml一頸圓底燒瓶中裝入4-(三氟甲基)吡啶-2-胺(0.622g，3.84mmol)以及N,N-二甲基吡啶-4-胺(0.039g，0.320mmol)、THF(5mL)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.826g，6.39mmol)。攪拌混合物，且接著在5分鐘內逐滴添加先前製備之5-乙氧基-2-氟-4-碘苯甲醯氯(1.05g，3.20mmol)於THF(5mL)中之溶液。攪拌所得反應混合物，且在40℃油浴中加熱15小時隔夜。藉由鹼洗滌及萃取處理反應物，且藉由MPLC(120g矽膠，含0至60%乙酸乙酯之己烷，18 CV)純化粗產物，獲得產物5-乙氧基-2-氟-4-碘-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺。LC-MS(ES,m/z)C15H11F4IN2O2：454；實驗值455[M+H]+。1HNMR(500MHz,CDCl3,δ)；9.30(1H,d,J=14Hz),8.70(1H,s),8.50(1H,d,J=5Hz),7.73(1H,dd,J=6.0,3.0Hz),7.28(1H,d,J=11Hz),7.13(1H,dd,J=11,9.0Hz),7.08(1H,m),4.09(2H,q,J=16Hz),1.43(3H,t,J=16Hz)。
步驟6：5-乙氧基-2-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在N2氛圍下，用DMSO處理含有5-乙氧基-2-氟-4-碘-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(200mg，0.440mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-聯(1,3,2-二氧硼)(168mg，0.661mmol)、乙酸鉀(130mg，1.321mmol)及Pd(dppf)CH2Cl2(36.0mg，0.044mmol)之5ml微波反應小瓶，且立即抽真空且用N2(×3)回填。接著在60℃下攪拌所得 紅褐色混合物3小時。用乙酸乙酯(10mL)及水(4mL)稀釋混合物。分離有機層，且藉由乙酸乙酯(3x)萃取水層。經合併之有機相用水洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且濃縮。藉由MPLC(24g金管柱，含0至60%乙酸乙酯之己烷，18 CV)純化粗產物，獲得白色固體產物5-乙氧基-2-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺。LC-MS(ES,m/z)C21H23BF4N2O4：454；實驗值455[M+H]+。
中間物76
5-乙氧基-2-氟-N-(1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺 步驟1：5-乙氧基-2-氟-4-碘-N-(1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)苯甲醯胺
用HATU(1.507g，3.96mmol)處理5-乙氧基-2-氟-4-碘苯甲酸334660-61B(1.17g，3.77mmol)於DMF(10ml)中之溶液且在室溫下攪拌混合物15分鐘。接著相繼添加1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-胺(0.654g，3.96mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(1.315ml，7.55mmol)，且在室溫下攪拌混合物15小時。混合物接著用乙酸乙酯(50mL)稀釋，用NaHCO3(飽和，10mL)及水洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且濃縮。藉由MPLC(80g矽膠，含10%至60%乙酸乙酯之己烷，18 CV)純化粗產物，獲得產物5-乙氧基-2-氟-4-碘-N-(1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)苯甲醯胺。LC-MS(ES,m/z)C14H12F4IN3O2：457；實驗值458[M+H]+。
步驟2：5-乙氧基-2-氟-N-(1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
在N2氛圍下，用DMSO(15ml)處理含有5-乙氧基-2-氟-4-碘-N-(1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)苯甲醯胺(1500mg，3.28mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-聯(1,3,2-二氧硼)(1250mg，4.92mmol)、乙酸鉀(966mg，9.84mmol)及Pd(dppf)CH2Cl2(268mg，0.328mmol)之20ml微波反應小瓶，且立即抽真空且用N2(×3)回填。接著在60℃下攪拌所得紅褐色混合物3小時。用乙酸乙酯(50mL)及水(30mL)稀釋混合物。分離有機層，且藉由乙酸乙酯(3×)萃取水層。經合併之有機相用水洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且濃縮。藉由MPLC(80g金管柱，含0至60%乙酸乙酯之己烷，18 CV)純化粗產物，獲得白色固體產物5-乙氧基-2-氟-N-(1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺。LC-MS(ES,m/z)C14H12F4IN3O2：457；實驗值458[M+H]+。
中間物77
N-(4-環丙基吡啶-2-基)-5-乙氧基-2-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
以與中間物76相同之程序，使用4-環丙基-2-吡啶胺作為起始物質，製備N-(4-環丙基吡啶-2-基)-5-乙氧基-2-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺。LC-MS(ES,m/z)C14H12F4IN3O2：457；實驗值458[M+H]+。
中間物78
4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(5-(三氟甲基)噠嗪-3-基)苯甲醯胺 步驟1：(E)-2-(3,3,3-三氟-2-側氧基亞丙基)肼甲醯胺
向3,3-二溴-1,1,1-三氟丙-2-酮(22.50g，83.33mmol)於水(220mL)中之溶液中添加AcONa(27.33g，333.32mmol)，且將混合物加熱至80℃持續1.5小時。將反應混合物冷卻至室溫後，添加化合物3(7.50g，100.00mmol)。在室溫下攪拌混合物5小時後，藉由過濾收集沈澱物。乾燥固體後，獲得粗產物(E)-2-(3,3,3-三氟-2-側氧基亞丙基)肼甲醯胺(14.00g，77%)，其未經純化直接用於下一步驟中。
步驟2：(E)-3-((E)-(2-胺甲醯基亞肼基)甲基)-4,4,4-三氟丁-2-烯酸乙酯
在室溫下，在N2保護下，向(E)-2-(3,3,3-三氟-2-側氧基亞丙基)肼甲醯胺(8.26g，45.115mmol)於THF(100mL)中之溶液中添加2-(三苯基亞膦基)乙酸乙酯(15.7g，45.115mmol)。在室溫下攪拌溶液隔夜。減壓移除溶劑且將殘餘物溶解於第三丁基甲基醚中來移除不溶性物質，且所獲得之有機層經無水MgSO4乾燥且濃縮，獲得(E)-3-((E)-(2-胺甲醯基亞肼基)甲基)-4,4,4-三氟丁-2-烯酸乙酯(9.00g，79%)，其無需進一步純化。
步驟3：5-(三氟甲基)噠嗪-3(2H)-酮
將(E)-3-((E)-(2-胺甲醯基亞肼基)甲基)-4,4,4-三氟丁-2-烯酸乙酯(18.00g，71.146mmol)於濃HCl(100mL)中之溶液加熱至回流，持續 3小時。所得溶液藉由Na2CO3中和，且用DCM(200mL×3)萃取，有機層經無水MgSO4乾燥且濃縮。藉由管柱層析法(PE/EA=4/1)純化殘餘物，獲得呈白色固體狀之純5-(三氟甲基)噠嗪-3(2H)-酮(5.30g，45%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ ppm 13.61(br.s.,1 H),8.18(d,J=1.57Hz,1 H),7.36(s,1 H)；MS-ESI(m/z)：165.0(M+1)+ Acq方法0-60AB_2min_220&254.lcm(0.435min)。
步驟4：3-氯-5-(三氟甲基)噠嗪
在80℃下，將5-(三氟甲基)噠嗪-3(2H)-酮(2.00g，12.195mmol)及POCl3(9.33g，60.976mmol)於二噁烷(10mL)中之混合物加熱3小時。減壓移除揮發物，藉由添加飽和Na2CO3中和殘餘物，且用DCM(20mL×3)萃取混合物。所獲得之有機層用鹽水(20mL×3)洗滌，經無水MgSO4乾燥，真空濃縮。藉由管柱層析法(PE/EA=60/1)純化殘餘物，獲得呈黃色油狀之純產物3-氯-5-(三氟甲基)噠嗪(300mg，14%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ ppm 9.71(d,J=1.17Hz,1 H),8.53(d,J=0.78Hz,1 H)；MS-ESI(m/z)：183.1(M+1)+ Acq方法0-60AB_2min_220&254.lcm(1.032min)。
步驟5：4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(5-(三氟甲基)噠嗪-3-基)苯甲醯胺
根據製備4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)苯甲醯胺之程序製備該化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ ppm 12.01(s,1 H),9.46(s,1 H),8.70(s,1 H),8.05(d,J=7.83Hz,2 H),7.80(d,J=8.22Hz,2 H),1.29(s,12 H)；MS-ESI(m/z)：394.2(M+1)+ Acq方法10-80AB_2min_220&254.lcm(1.339min)。
中間物79
4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)苯甲醯胺
向4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺(400mg，1.62mmol)於t-BuOH(30mL)中之溶液中添加2-氯-4-(三氟甲基)嘧啶(593mg，3.24mmol)、Pd2(dba)3(45mg，0.049mmol)、X-phos(24mg，0.049mmol)及Cs2CO3(1.58g，4.86mmol)，且在N2保護下將混合物加熱至回流，持續2小時。添加水(30mL)及EtOAc(70mL)，有機層用鹽水(30mL)洗滌，經無水MgSO4乾燥，真空濃縮。藉由管柱層析法(PE/EA=6/1至4/1)純化粗產物，獲得呈黃色固體狀之4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)苯甲醯胺(500mg，79%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ ppm 11.53(br.S.,1 H),9.07(d,J=4Hz,1 H),7.94(d,J=8Hz,2 H),7.76(d,J=8Hz,2 H),7.71(d,J=4Hz,1 H),1.29(s,12 H)；MS-ESI(m/z)：394.2(M+1)+ Acq方法10-80AB_2min_220&254.lcm(1.282min)。
中間物80
N-(4-(1-甲氧基乙基)吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2- 基)苯甲醯胺 (a)2-氯-4-(1-甲氧基乙基)吡啶
向1-(2-氯吡啶-4-基)乙醇(100mg，0.64mmol)於DMF(2mL)中之溶液中添加NaH(18.27mg，0.76mmol)。接著，在25℃下向混合物中添加碘甲烷(135mg，0.95mmol)。在25℃下攪拌混合物隔夜。向混合物中添加水(30mL)且用EA(50mL)萃取。有機層用水(50mL×3)、鹽水(50mL)洗滌，經Na2SO4乾燥且蒸發。藉由TLC純化殘餘物，獲得2-氯-4-(1-甲氧基乙基)吡啶(40mg，產率36.7%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ=8.48-8.22(m,1H),7.45-7.42(m,1H),7.38-7.34(m,1H),4.51-4.25(m,1H),3.19(s,3H),1.36-1.29(m,3H)。
(b)N-(4-(1-甲氧基乙基)吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
根據用於製備N-(4-(2-羥基丙-2-基)吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺之程序製備該化合物。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=8.69-8.63(m,1H),8.36-8.32(m,1H),8.29(d,J=5.0Hz,1H),7.98-7.85(m,4H),7.11(d,J=4.0Hz,1H),4.36(d,J=6.5Hz,1H),3.30(s,3H),1.46(d,J=6.5Hz,3H),1.37(s,13H)。
中間物81
N-(4-(2-羥基丙-2-基)吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺 步驟1：2-(2-氯吡啶-4-基)丙-2-醇
在-78℃下，向2-氯-4-碘吡啶(2.0g，8.36mmol)於無水THF(20mL)中之溶液中添加n-BuLi(6.68mL，16.72mmol)。在-78℃下攪拌混合物20分鐘。接著，在-78℃下添加丙酮(969mg，16.72mmol)，且在-78℃下攪拌混合物50分鐘。混合物藉由飽和NH4Cl(20mL)淬滅且用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，經合併之有機層用鹽水(50mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得粗產物，其藉由矽膠層析法(EA：PE=5%-40%)純化，獲得呈黃色液體狀之2-(2-氯吡啶-4-基)丙-2-醇(630mg，產率44%)。LCMS方法：5-95AB_1.5min_220.lcm，滯留時間：0.567，(M+H)+ m/z：171.8。
步驟2：N-(4-(2-羥基丙-2-基)吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
在氮氣保護下，向2-(2-氯吡啶-4-基)丙-2-醇(630mg，3.68mmol)及4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺(911mg，3.68mmol)於二噁烷(40mL)中之澄清溶液中添加Cs2CO3(2.4g，7.368mmol)，且添加Pd(pddf)Cl2(催化量)。接著，將混合物加熱至100℃，攪拌12小時。冷卻至室溫後，過濾混合物且真空濃縮濾液，且藉由矽膠層析法(EA：PE=5%-40%)純化，獲得呈黃色液體狀之N-(4-(2-羥基丙-2-基)吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺(353mg，產率25%)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=8.60(s,1H),8.48(s,1H),8.28(d,J=5.3Hz,1H),7.97-7.88(m,4H),7.25(d,J=1.5Hz,1H),1.90(s,1H),1.62(s,6H),1.37(s,12H)。
中間物82
N-(4-(1-羥基乙基)吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺 步驟1：1-(2-氯吡啶-4-基)乙醇
在-78℃下，向2-氯-4-碘吡啶(500mg，2.09mmol)於無水THF(5mL)中之溶液中添加n-BuLi(1.67mL，4.18mmol)。在-78℃下攪拌混合物20分鐘。接著，在-78℃下添加乙醛(184mg，418mmol)，且在-78℃下攪拌混合物50分鐘。混合物藉由飽和NH4Cl(10mL)淬滅且用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，經合併之有機層用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得粗產物，其藉由矽膠層析法(EA：PE=5%-40%)純化，獲得呈黃色液體狀之1-(2-氯吡啶-4-基)乙醇(250mg，產率76%)。1H NMR(300MHz，氯仿-d)δ=8.38-8.24(m,1H),7.45-7.34(m,1H),7.30-7.20(m,1H),4.92(dd,J=3.0,6.2Hz,1H),2.71(d,J=3.4Hz,1H),1.60-1.44(m,3H)。
步驟2：N-(4-(1-羥基乙基)吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
根據用於製備N-(4-(2-羥基丙-2-基)吡啶-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺之程序製備該化合物。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=8.69-8.64(m,1H),8.38(s,1H),8.29-8.25(m,1H),7.95-7.86(m,5H),7.81(s,2H),7.61-7.42(m,1H),7.16(d,J=4.3Hz,1H),5.01-4.91(m,1H),3.49(s,2H),2.22-2.19(m,1H),1.66(br.s.,1H),1.54(d,J=6.8Hz,3H),1.36(d,J=4.0Hz,18H)。
中間物83
N-(異喹啉-3-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲醯胺
在0℃下，向4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲酸(232mg，0.936mmoL)於無水DCM(10mL)中之溶液中相繼添加(COCl)2(356mg，2.81mmol)、DMF(一滴)，且在25℃下攪拌混合物1.5小時。真空濃縮混合物，接著用DCM(5mL)稀釋，添加至異喹啉-3-胺(90mg，0.624mmol)、TEA(158mg，1.56mmol)於DCM(10mL)中之溶液中。在25℃下攪拌混合物3小時，藉由在0℃下添加水(10mL)淬滅混合物，接著用DCM(20mL×3)萃取混合物，經合併之有機層用1M HCl(5mL)、鹽水(10mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得粗產物，其藉由矽膠管柱層析法(EA/PE=10%-40%)純化，獲得白色固體(80mg，產率34.3%)。1H NMR(300MHz，氯仿-d)d=9.02(s,1H),8.87(s,1H),8.79(s,1H),8.01-7.86(m,6H),7.68(t,J=7.1Hz,1H),7.56-7.46(m,1H),1.38(s,12H)。
中間物84
3-(1,1-二氟乙基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺 步驟1：二乙酸(2-溴-5-(甲氧基羰基)苯基)亞甲酯
將CrO3(18.00g，180mmol)經30分鐘分部分添加至溶解於含有H2SO4(15mL)的AcOH(99mL)及Ac2O(102mL)中之4-溴-3-甲基-苯甲酸甲酯(13.8g，60mmol)中，冷卻至冰浴溫度。當冰浴終止時再攪拌混合物1小時。將反應混合物倒入冷水(900mL)中且劇烈攪拌30分鐘。藉由過濾收集沈澱之固體且用水(3×50mL)洗滌，獲得呈黃色固體狀之二乙酸(2-溴-5-(甲氧基羰基)苯基)亞甲酯(13.7g，產率60%)。M/Z(ESI)366.9796([M+Na]+。
步驟2：4-溴-3-甲醯基苯甲酸甲酯
在回流下，在含有H2SO4(1.5mL)之MeOH-H2O(1：1，120mL)中加熱4-溴-3-二乙醯氧基甲基-苯甲酸甲酯(13.7g，37.5mmol)30分鐘。反應混合物接著用H2O(300mL)稀釋且用EtOAc(3×50mL)萃取。經合併之萃取物用H2O(50mL)及鹽水(50mL)洗滌，接著經Na2SO4乾燥。藉由旋轉蒸發移除溶劑，獲得淡黃色油狀物。如1H NMR光譜所見，此為8.5：1比率之4-溴-3-甲醯基苯甲酸甲酯與二甲縮醛之混合物。將油狀物溶解於THF(90mL)及1N HCl(24mL)中，且在回流下加熱混合物直至如TLC所測定完全轉化為醛(Rf約0.9，DCM)。藉由旋轉蒸發移除THF，獲得呈白色固體狀之4-溴-3-甲醯基苯甲酸甲酯(8.4g，產率79%)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)=10.38(s,1H),8.54(d,J=2.3Hz,1H),8.10(dd,J=2.3,8.3Hz,1H),7.76(d,J=8.3Hz,1H),3.95(s,3H)。
步驟3：4-溴-3-(1-羥基乙基)苯甲酸甲酯
在-20℃下，向4-溴-3-甲醯基苯甲酸甲酯(1g，4.11mmol)於無水THF(15mL)中之溶液中逐滴添加MeMgBr(乙醚中3M，1.6mL，4.93mmol)。在-20℃至0℃下攪拌反應混合物1.5小時。藉由飽和氯化銨(20mL)緩慢淬滅反應物，接著用EA(20mL×3)萃取混合物，經合併之 有機層用鹽水(20mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得粗產物，其藉由矽膠管柱層析法(EA/PE=0%-25%)純化，獲得呈無色油狀之4-溴-3-(1-羥基乙基)苯甲酸甲酯(900mg，產率84.9%)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)=8.23(d,J=2.0Hz,1H),7.73(dd,J=2.0,8.3Hz,1H),7.56(d,J=8.3Hz,1H),5.22(dq,J=3.8,6.3Hz,1H),3.89(s,3H),2.49(d,J=3.8Hz,1H),1.48(d,J=6.5Hz,3H)。
步驟4：3-乙醯基-4-溴苯甲酸甲酯
在0℃下，向4-溴-3-(1-羥基乙基)苯甲酸甲酯(1g，3.86mmol)於無水DCM(20mL)中之溶液中逐份添加馬丁試劑(3.2g，7.72mmol)。在0℃至25℃下攪拌混合物2小時。藉由在0℃下緩慢添加15% Na2S2O3於飽和NaHCO3(30mL)中之溶液淬滅混合物，接著分離混合物且用DCM(50mL×2)萃取水層，經合併之有機層用鹽水(20mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得呈黃色油狀之3-乙醯基-4-溴苯甲酸甲酯(900mg，產率90.9%)。
步驟5：4-溴-3-(1,1-二氟乙基)苯甲酸甲酯
在-78℃下，在N2下，向3-乙醯基-4-溴苯甲酸甲酯(0.9g，3.50mmol)於無水DCM(20mL)中之溶液中逐滴添加DAST(1.13g，7.00mmol)。在0℃至25℃下攪拌混合物16小時。藉由在0℃下緩慢添加飽和NaHCO3(30mL)淬滅混合物，接著分離混合物且用DCM(50mL×2)萃取水層，經合併之有機層用鹽水(20mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得粗產物，其藉由矽膠管柱層析法(EA/PE=0%-15%)純化，獲得呈黃色固體狀之4-溴-3-(1,1-二氟乙基)苯甲酸甲酯(160mg，產率16.4%)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)d=8.26(d,J=1.2Hz,1H),7.94-7.87(m,1H),7.74(d,J=8.2Hz,1H),3.94(s,3H),2.06(t,J=18.4Hz,3H)。
步驟6：4-溴-3-(1,1-二氟乙基)苯甲酸
向4-溴-3-(1,1-二氟乙基)苯甲酸甲酯(190mg，0.680mmoL)於MeOH/H2O(3：1，8mL)中之溶液中添加NaOH(41mg，1.02mmol)。在25℃下攪拌混合物10小時。移除有機溶劑且用水(10mL)及EA(10mL)稀釋混合物，分離，且用1M HCl將水層酸調整至PH=1。經過濾收集白色固體且乾燥以獲得4-溴-3-(1,1-二氟乙基)苯甲酸(160mg，產率93.6%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)=8.06(s,1H),7.88(s,2H),2.04(t,J=19.2Hz,3H)。
步驟7：4-溴-3-(1,1-二氟乙基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在0℃下，向4-溴-3-(1,1-二氟乙基)苯甲酸(60mg，0.226mmol)於無水DCM(10mL)中之溶液中相繼添加(COCl)2(86mg，0.679mmol)、DMF(一滴)且在25℃下攪拌混合物1.5小時。真空濃縮混合物，接著用THF(10mL)稀釋，在0℃下向混合物中添加4-(三氟甲基)吡啶-2-胺(74mg，0.452mmol)於THF(1mL)中之溶液。在80℃下攪拌混合物16小時，接著藉由在0℃下添加水(10mL)淬滅，接著用DCM(50mL×3)萃取混合物，經合併之有機層用鹽水(20mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，獲得粗產物，其藉由矽膠管柱層析法(EA/PE=0%-35%)純化，獲得呈白色固體狀之4-溴-3-(1,1-二氟乙基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(75mg，81.5%)。
步驟8：3-(1,1-二氟乙基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在氮氣保護下，向4-溴-3-(1,1-二氟乙基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(90mg，0.22mmol)、KOAc(109mg，0.66mmol)及4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺(67mg，0.26mmol)於二噁烷(6mL)中之溶液中添加Pd(pddf)Cl2(催化量)。接著，將混合物加熱至100℃，攪拌3小時。冷卻至室溫後，過濾混合物且真空濃縮濾液，且藉由矽膠層析法(EA/PE=0%-20%)純化，獲得呈黃色固體狀 之3-(1,1-二氟乙基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(75mg，產率75%)。(ESI)：M/Z(M+1)：457.1(R.T.：1.328)。
中間物85
(2-羥基-4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基) 酸
在0℃下，向三氟(2-甲氧基-4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基)硼酸鉀(5g，12.43mmol)於二氯甲烷(10ml)中之經攪拌混合物中添加BBr3(22.38mmol，DCM中1.0M)，在0℃下攪拌所得反應混合物且使其升溫至室溫。過濾黃色沈澱物，用二氯甲烷洗滌且藉由在N2下抽吸乾燥，獲得(2-羥基-4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基)酸(4.25g，13.04mmol)，LCMS顯示[M+H]+為327。
中間物86
3-乙氧基-5-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺 步驟a)3-乙氧基-5-氟苯甲酸
將鈉(6.54g，285mmol)溶解於EtOH(150ml)中且濃縮，獲得白色固體。將固體溶解於DMSO(100ml)中，且接著添加3,5-二氟苯甲 酸(18g，114mmol)。在80℃下攪拌混合物12小時。將混合物冷卻至室溫，且接著使用2M HCl將混合物酸化至pH=5，用乙酸乙酯(50mL×3)萃取。經合併之有機層用鹽水(20mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，濃縮，獲得產物3-乙氧基-5-氟苯甲酸。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)d=7.44-7.33(m,2H),6.83(d,J=10.2Hz,1H),4.06(q,J=7.0Hz,2H),1.43(t,J=7.0Hz,3H)ppm。
步驟b)4-硼-3-乙氧基-5-氟苯甲酸
在-78℃下，在N2氛圍下，向3-乙氧基-5-氟苯甲酸(4g，21.72mmol)於THF(30ml)中之溶液中逐滴添加LDA(32.6ml，65.2mmol)。攪拌所得溶液15分鐘，隨後緩慢添加硼酸三異丙酯(4.90g，26.1mmol)。攪拌混合物30分鐘，且接著用1M HCl水解。用EA(20mL×3)萃取。有機層用水(10mL)、鹽水(10mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，濃縮，獲得粗產物。接著，藉由矽膠管柱層析法(用(THF：PE=10%-100%)溶離)純化粗產物，獲得呈白色固體狀之4-硼-3-乙氧基-5-氟苯甲酸(2.45g，10.75mmol，49.5%產率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)d=8.40(s,1H),7.21(s,1H),7.14(d,J=7.8Hz,1H),4.03(q,J=7.0Hz,2H),1.28(t,J=6.8Hz,3H)ppm。
步驟c)3-乙氧基-5-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲酸
在室溫下，在N2氛圍下，向4-硼-3-乙氧基-5-氟苯甲酸(2.45g，10.75mmol)於甲苯(50ml)中之溶液中一次性添加2,3-二甲基丁-2,3-二醇(1.397g，11.82mmol)。將所得溶液加熱至120℃且在此溫度下攪拌14小時。將混合物冷卻至室溫且濃縮，獲得粗產物。接著，藉由矽膠管柱層析法(用(THF：PE=10%-50%)溶離)純化粗產物，獲得3-乙氧基-5-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲酸。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)d=7.34(d,J=8.2Hz,1H),7.29(s,1H),4.07(q,J=6.7Hz,2H),1.46-1.31(m,15H)ppm。
步驟d)3-乙氧基-5-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在0℃下，向3-乙氧基-5-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲酸(300mg，0.967mmol)於無水DCM(10ml)中之溶液中相繼添加乙二醯氯(614mg，4.84mmol)、DMF(一滴)，且在20℃下攪拌混合物1.5小時。真空濃縮混合物，接著用THF(6ml)稀釋，且接著在0℃下向混合物中添加4-(三氟甲基)吡啶-2-胺(314mg，1.935mmol)。在80℃下攪拌混合物16小時。冷卻至室溫後，濃縮混合物獲得粗產物。藉由矽膠管柱層析法(用(EA：PE=1%-50%)溶離)純化粗產物，獲得3-乙氧基-5-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺。1H NMR(400MHz，氯仿-d)d=8.71-8.66(m,2H),8.47(d,J=5.0Hz,1H),7.31(d,J=5.0Hz,1H),7.18(s,1H),7.12(dd,J=0.9,8.2Hz,1H),4.10(q,J=6.9Hz,2H),1.46-1.38(m,15H)ppm。
中間物87E1及87 E2
(6S,8aR)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1,1-二甲基六氫吲哚嗪-3(2H)-酮，及(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1,1-二甲基六氫吲哚嗪-3(2H)-酮 步驟(a)2-(5-溴吡啶-2-基)-2-甲基丙酸甲酯
在氮氣下，將二異丙胺(18.05mL，127mmol)於四氫呋喃(360mL)中之溶液冷卻至-10℃，且用n-BuLi(50.7mL，127mmol，2.5M己烷)處理5分鐘。30分鐘後，將溶液冷卻至-78℃且用異丁酸甲酯 (12.93g，127mmol)處理。在-78℃下45分鐘後，經注射器添加2,5-二溴吡啶(20g，84mmol)於四氫呋喃(40mL)中之溶液，獲得亮黃色溶液。添加完成後，自冷卻浴移出反應物且升溫至室溫。在室溫下隔夜後，藉由添加NH4Cl水溶液(100mL)淬滅反應物，且用EtOAc萃取反應混合物。有機層經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠層析法(石油醚/EtOAc=90：10)純化粗產物，獲得呈澄清油狀之2-(5-溴吡啶-2-基)-2-甲基丙酸甲酯(18.7g，86%產率)。MS(ESI)m/z(M+H)+：260。(LC-MS方法C；滯留時間=1.114min)。
步驟(b)2-(5-溴吡啶-2-基)-2-甲基丙酸
在50℃下，攪拌2-(5-溴吡啶-2-基)-2-甲基丙酸甲酯(18.7g，72.4mmol)及NaOH(39.8ml，80mmol)於MeOH(180mL)中之溶液隔夜。TLC偵測到反應完全。減壓移除有機溶劑，殘餘物用EtOAc稀釋，用HCl酸化至pH=5，用EtOAc萃取，經Na2SO4乾燥，濃縮，獲得呈淡黃色油狀之2-(5-溴吡啶-2-基)-2-甲基丙酸(10g，56.5%產率)。MS(ESI)m/z(M+H)+：244。LC-MS方法C(滯留時間：0.875min)。
步驟(c)2-(5-溴吡啶-2-基)-2-甲基丙醯氯
在0℃下，向2-(5-溴吡啶-2-基)-2-甲基丙酸(1.1g，4.51mmol)於DCM(30mL)中之溶液中添加乙二醯氯(1.183mL，13.52mmol)及DMF(3.49μL，0.045mmol)。在室溫下攪拌混合物隔夜。藉由TLC偵測混合物，且真空濃縮，獲得黃色油狀物，其用於下一步驟中。
步驟(d)3-(5-溴吡啶-2-基)-1-重氮基-3-甲基丁-2-酮
將2-(5-溴吡啶-2-基)-2-甲基丙醯氯(11g，41.9mmol)於MeCN/THF(30mL，1：1)中之此溶液逐滴添加至2M TMS-重氮甲烷(41.9ml，84mmol)及Et3N(9.34mL，67.0mmol)於MeCN及THF之1：1溶液(70mL)中的冰水冷卻之溶液中。將所得黃色混合物升溫至環境溫度隔夜。減壓移除溶劑且將殘餘物溶解於EtOAc(50mL)中，且用 水(50mL)、NaHCO3(50mL)及鹽水(50mL)洗滌。經合併之有機相經MgSO4乾燥且濃縮，留下紅褐色膠狀物，藉由層析法(PE/AcOEt=10：1)純化，獲得3-(5-溴吡啶-2-基)-1-重氮基-3-甲基丁-2-酮。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=8.64(d,J=1.57Hz,1 H),7.78(dd,J=1.96,8.61Hz,1 H),7.24(d,J=8.61Hz,1 H),5.14(s,1 H),1.57(s,6 H)ppm。
步驟(e)3-(5-溴吡啶-2-基)-3-甲基丁酸甲酯
向(苯甲醯氧基)銀(1.025g，4.48mmol)及三乙胺(9.06g，90mmol)於MeOH(50mL)中之溶液中添加3-(5-溴吡啶-2-基)-1-重氮基-3-甲基丁-2-酮(6g，22.38mmol)於MeOH(150mL)中之溶液。在室溫下攪拌混合物隔夜。藉由LCMS及TLC偵測到完全，將混合物濃縮且用EtOAc稀釋，用NaHCO3飽和溶液洗滌且用矽膠層析法(120g，PE：THF=5：1)純化。獲得呈黃色油狀之3-(5-溴吡啶-2-基)-3-甲基丁酸甲酯。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=8.58(d,J=1.56Hz,1 H),7.75(dd,J=1.96,8.61Hz,1 H),7.27(d,J=6.26Hz,1 H),3.55(s,3 H),2.83(s,2 H),1.44(s,6 H)ppm。
MS(ESI)m/z(M+H)+：272。(LC-MS方法C；滯留時間=1.046min)。
步驟(f)6-(4-甲氧基-2-甲基-4-側氧基丁-2-基)菸鹼酸甲酯
在90℃下，在CO(50psi)氛圍下，攪拌3-(5-溴吡啶-2-基)-3-甲基丁酸甲酯(4g，14.70mmol)、Et3N(6.15mL，44.1mmol)、Pd(OAc)2(0.330g，1.470mmol)及DPPF(1.630g，2.94mmol)於MeOH(20mL)及DMF(60mL)中之混合物隔夜。藉由LCMS偵測，濃縮且用水稀釋，用EtOAc萃取，用水及鹽水洗滌，用矽膠層析法(40g，PE：EA=10：1)純化，獲得黃色油狀6-(4-甲氧基-2-甲基-4-側氧基丁-2-基)菸鹼 酸甲酯。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=9.13(s,1 H),8.16-8.29(m,1 H),7.36-7.49(m,1 H),3.94(s,3 H),3.53(s,3 H),2.88(s,2 H),1.40-1.56(m,6 H)ppm。
步驟(g)1,1-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸甲酯
在0℃下，向6-(4-甲氧基-2-甲基-4-側氧基丁-2-基)菸鹼酸甲酯(500mg，1.990mmol)於AcOH(15mL)中之混合物中添加NaCNBH3(375mg，5.97mmol)。在25℃下攪拌隔夜後，藉由TLC偵測反應，濃縮以移除溶劑，用NaHCO3溶液(pH=8)淬滅且用EtOAc(3次)萃取。乾燥且濃縮，獲得殘餘物。將其溶解於MeOH中且在70℃下攪拌隔夜。藉由TLC偵測反應，濃縮且使用矽膠層析法(20g，PE：THF=1：1)純化，獲得無色油狀1,1-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸甲酯。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=4.36(dd,J=3.72,13.11Hz,1 H),3.65-3.78(m,3 H),2.99(dd,J=2.93,11.93Hz,1 H),2.75(t,J=12.33Hz,1 H),2.36(tt,J=3.96,11.88Hz,1 H),2.15-2.28(m,3 H),1.75(dd,J=3.13,12.91Hz,1 H),1.57(dq,J=2.74,12.91Hz,1 H),1.22-1.33(m,1 H),1.16(s,3 H),1.02(s,3 H)ppm。
步驟(h)1,1-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸
在25℃攪拌1,1-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸甲酯(1.7g，7.55mmol)及LiOH．H2O(0.633g，15.09mmol)於MeOH(20mL)及水(7mL)中之混合物隔夜。藉由TLC偵測，濃縮且用1N HCl酸化至pH=3，且由DCM萃取，經Na2SO4乾燥且濃縮，獲得白色固體1,1-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸。
步驟(i)N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-1,1-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲醯胺
在室溫向1,1-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸(1.2g，5.68 mmol)於DMF(30mL)中之混合物中添加(3-氯吡嗪-2-基)甲胺鹽酸鹽(1.023g，5.68mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(2.202g，17.04mmol)及HATU(2.160g，5.68mmol)。在25℃攪拌隔夜後，反應物藉由TLC及LCMS偵測，用水淬滅且由DCM(3次)萃取，經Na2SO4乾燥且濃縮，獲得殘餘物。該殘餘物用矽膠層析法(40g，DCM：MeOH=20：1)純化，獲得呈白色固體之N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-1,1-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲醯胺(1.8g，94%產率)。MS(ESI)m/z(M+H)+：337。(LC-MS方法C；滯留時間=0.937min)。
步驟(j)6-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1,1-二甲基六氫吲哚嗪-3(2H)-酮
向攪拌之含N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-1,1-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲醯胺(1.1g，3.27mmol)之乙腈(20mL)中添加PCl5(2.040g，9.80mmol)，且在25℃攪拌混合物隔夜。其藉由TLC及LCMS偵測，用NaHCO3淬滅，用DCM萃取，經Na2SO4乾燥且濃縮，獲得呈黃色固體之6-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1,1-二甲基六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(1g，96%產率)。MS(ESI)m/z(M+H)+：319,(LC-MS方法C；滯留時間=0.950min)。
步驟(k)6-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1,1-二甲基六氫吲哚嗪-3(2H)-酮
向經攪拌之含6-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1,1-二甲基六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(1.4g，4.39mmol)之乙腈(30mL)中添加NBS(0.860g，4.83mmol)，且在25℃下攪拌混合物隔夜。其藉由LCMS偵測，用NaHCO3淬滅，用EtOAc萃取，經Na2SO4乾燥且濃縮，獲得6-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1,1-二甲基六氫吲哚嗪-3(2H)-酮。MS(ESI)m/z(M+H)+：399。Acq(LC-MS方法C；滯留時間=1.117min)。步驟(l)6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1,1-二甲基六氫吲哚 嗪-3(2H)-酮
將6-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1,1-二甲基六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(1.7g，4.27mmol)添加至經攪拌之含NH3．H2O(15mL，94mmol)之2-丙醇(15mL)中，且在110℃下攪拌混合物隔夜。其藉由LCMS偵測，濃縮，用DCM萃取，經Na2SO4乾燥且濃縮，獲得呈黃色固體狀之6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1,1-二甲基六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(1.6g，99%產率)。MS(ESI)m/z(M+H)+：380。(LC-MS方法C；滯留時間=0.854min)。
步驟(m)6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1,1-二甲基六氫吲哚嗪-3(2H)-酮
在以下條件下，藉由SFC分離來分離6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1,1-二甲基六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(1.5g，3.97mmol，外消旋)：管柱：Chiralpak AS-H 250×4.6mm I.D.，5μm；移動相：含乙醇(0.05% DEA)之CO2，5%至40%；流動速率：2.35mL/min；波長：220nm。獲得(6S,8aR)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1,1-二甲基六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(滯留時間=6.625)及(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1,1-二甲基六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(滯留時間=8.268)。
實例 實例1
4-(8-胺基-3-((6S,8aS)-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基)咪唑 并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺 (a)4-(8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)-3-((3S,6S)-6-(羥基甲基)哌啶-3-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
向乙酸((2S,5S)-5-(8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)-1-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)哌啶-2-基)甲酯(120mg，0.17mmol)於3mL MeOH中之溶液中添加NaOMe(46mg，0.85mmol)。在室溫下，在N2下，攪拌反應混合物3小時。將混合物倒入NH4Cl水溶液中，用DCM萃取。有機層經Na2SO4乾燥，且真空濃縮，獲得110mg粗產物4-(8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)-3-((3S,6S)-6-(羥基甲基)哌啶-3-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺，其直接用於下一步驟中。MS-ESI(m/z)：662.0(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：0.888min)。
(b)4-(8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)-3-((6S,8aS)-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]哌啶-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
向化合物4-(8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)-3-((3S,6S)-6-(羥基甲基)哌啶-3-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(110mg粗產物，0.17mmol)於2mL DCM中之溶液中添加羰基二咪唑(28mg，0.17mmol)及DMAP(5mg)，且在室溫下攪拌所得混合物3小時。混合物用DCM稀釋，用水及鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且真空濃縮，獲得110mg粗產物標題化合物4-(8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)-3-((6S,8aS)-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺，其直接用於下一步驟中。MS-ESI(m/z)：688.2(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：1.003min)。
(c)4-(8-胺基-3-((6S,8aS)-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基) 咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在90℃下，攪拌4-(8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)-3-((6S,8aS)-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(110mg粗產物，0.16mmol)於1mL三氟乙酸中之混合物2小時，且真空濃縮。藉由製備型HPLC純化後，獲得4-(8-胺基-3-((6S,8aS)-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(30mg，產率34.9%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ=8.63-8.66(m,2 H),8.19(d,J=6.8Hz,2 H),7.92(d,J=6.8Hz,2 H),7.86(d,J=6.0Hz,1 H),7.47(d,J=4.0Hz,1 H),7.05(d,J=6.0Hz,1 H),4.53(t,J=8.0Hz,1 H),3.98-4.08(m,3 H),3.69(s,1 H),3.52-3.56(m,1 H),2.34-2.46(m,2 H),2.18-2.23(m,1 H),1.78-1.82(m,1 H)。LCMS：LC-MS方法B；滯留時間：2.452min。(M+H)+ m/z：538.2。
實例2
4-(8-胺基-3-((6R,8aR)-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺 (a)4-(8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)-3-((6R,8aR)-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
向(2R,5R)-5-(8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)-1-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(羥基甲基)哌啶- 1-甲酸苯甲酯(40mg)於3mL MeOH中之混合物中添加NaOMe(54mg，1mmol)。在室溫下攪拌反應混合物24小時，且接著在40℃下，在N2下攪拌6小時。將混合物倒入NH4Cl水溶液中，用DCM(20mL)萃取。有機層經Na2SO4乾燥，且真空濃縮，獲得40mg粗產物4-(8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)-3-((6R,8aR)-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺，其直接用於下一步驟中。MS-ESI(m/z)：688.1(M+1)+(LC-MS方法C；滯留時間：1.068min)。
(b)4-(8-胺基-3-((6R,8aR)-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在90℃下，攪拌化合物4-(8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)-3-((6R,8aR)-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(40mg粗產物，0.06mmol)於1mL三氟乙酸中之混合物2小時，且真空濃縮。藉由製備型HPLC純化後，獲得4-(8-胺基-3-((6R,8aR)-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(2mg，產率25.6%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ=8.61-8.63(m,2 H),8.16(d,J=8.4Hz,2 H),7.90(d,J=8.0Hz,2 H),7.84(d,J=6.0Hz,1 H),7.44(d,J=4.8Hz,1 H),7.04(d,J=5.6Hz,1 H),4.51(t,J=8.0Hz,1 H),3.96-4.06(m,3 H),3.67(s,1 H),3.50-3.54(m,1 H),2.28-2.42(m,2 H),2.11-2.20(m,1 H),1.76-1.80(m,1 H)。LCMS：LC-MS方法B；滯留時間：2.455min。(M+H)+ m/z：538.2。
實例3
4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-2-甲基-3-側氧基八氫咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺 (a)(2S,5R)-5-(8-胺基-1-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)哌啶-1-甲酸苯甲酯
在N2下，向(2S,5R)-5-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)哌啶-1-甲酸苯甲酯(50mg，0.105mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-N-(4-三氟甲基-吡啶-2-基)-苯甲醯胺(41mg，0.105mmol)及K2CO3(44mg，0.316mmol)於二噁烷/H2O(6mL，3：1)中之脫氣混合物中添加Pd(dppf)Cl2。將混合物加熱至100℃持續1小時。將反應混合物冷卻至室溫且過濾。濃縮濾液，且藉由矽膠管柱層析法(PE：EA=100%-70%)純化殘餘物，獲得(2S,5R)-5-(8-胺基-1-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)哌啶-1-甲酸苯甲酯(55mg，產率：72%)。
MS(EI)：M/Z(M+1)：660.25。(條件：0-60AB_2MIN；R.T.：1.216)
(b)4-(8-胺基-3-((3R,6S)-6-(羥基甲基)哌啶-3-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在-78℃下，向來自步驟a之(2S,5R)-5-(8-胺基-1-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)哌啶-1-甲酸苯甲酯(300mg，0.455mmol)於二氯甲烷(3mL)中之混合物中添加BBr3(608.7mg，2.274mmol)。在-78℃下，攪拌混合物7小時。在-78℃下，用CH3OH淬滅反應混合物且用NaHCO3調整至鹼性pH 值。接著用二氯甲烷/丙-2-醇(3：1，50mL×5)萃取混合物。經合併之有機層用鹽水洗滌3次，經無水硫酸鈉乾燥且蒸發，獲得4-(8-胺基-3-((3R,6S)-6-(羥基甲基)哌啶-3-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(220mg，產率93%)。
MS(EI)：M/Z(M+1)：512.19。(條件：0-60AB_2MIN；R.T.：1.025)
(c)(2S,5R)-5-(8-胺基-1-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(羥基甲基)-N-甲基哌啶-1-甲醯胺
在0℃下，向4-(8-胺基-3-((3R,6S)-6-(羥基甲基)哌啶-3-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(70mg，0.137mmol)於四氫呋喃中之混合物中添加甲基胺基甲醯氯(12.8g，0.137mmol)及三乙胺(41.5g，0.411mmol)。在室溫下攪拌混合物3小時。濃縮反應混合物，獲得粗產物，其藉由製備型HPLC純化，獲得(2S,5R)-5-(8-胺基-1-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(羥基甲基)-N-甲基哌啶-1-甲醯胺(11.42mg，15%產率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ=8.64-8.60(m,2H),8.21-8.15(m,2H),7.87(d,J=8.3Hz,2H),7.81(d,J=6.0Hz,1H),7.46-7.43(m,1H),7.03(d,J=5.8Hz,1H),4.26(d,J=14.3Hz,1H),4.09-4.01(m,1H),3.84-3.77(m,1H),3.75-3.68(m,1H),3.59(d,J=3.5Hz,1H),3.53(dd,J=4.6,14.2Hz,1H),2.60(s,3H),2.33-2.19(m,2H),2.13-2.02(m,1H),1.75-1.64(m,1H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：569.22。
(d)4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-2-甲基-3-側氧基八氫咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在0℃下，向(2S,5R)-5-(8-胺基-1-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(羥基甲基)-N-甲基哌啶-1-甲醯胺(15mg，0.026mmol)於四氫呋喃中之混合物中添加SOCl2(15.56 mg，0.132mmol)。在室溫下攪拌混合物3小時。濃縮反應混合物獲得粗產物，其藉由製備型HPLC純化，獲得4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-2-甲基-3-側氧基八氫咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(4.66mg，32%產率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ=8.66-8.60(m,2H),8.20(d,J=8.3Hz,2H),7.94(d,J=5.8Hz,1H),7.87(d,J=8.3Hz,2H),7.45(d,J=4.5Hz,1H),7.09(d,J=5.8Hz,1H),5.04(t,J=8.7Hz,1H),4.52(t,J=8.5Hz,1H),4.30-4.15(m,2H),3.79-3.68(m,1H),3.67-3.58(m,1H),3.07-2.99(m,3H),2.33(d,J=12.3Hz,1H),2.22(dd,J=3.0,13.1Hz,1H),2.06-1.93(m,1H),1.90-1.77(m,1H)。MS(ESI)：M/Z(M+1)：551.21。
實例4
4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
向4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(224mg，0.571mmol)、磷酸三鉀(303mg，1.428mmol)及(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(100mg，0.286mmol)於1,4-二噁烷(8ml)及水(1ml)中之經攪拌混合物中添加Pd(dppf)Cl2(23.32mg，0.029mmol)。將混合物脫氣，用N2回填，且在80℃下攪拌3小時，且濃縮。藉由矽膠管柱層析法(ISCO，40g)(用DCM/MeOH(20/1)溶離)純化殘餘物，獲得呈黃色 固體狀之4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(125mg，0.233mmol，82%產率)。LCMS資料：LC-MS方法C；滯留時間1.21min；m/z 536.25(M+H)+；1H NMR(CDCl3,500Hz)：δ=8.98(1H,br s),8.76(1H,br,s),8.52(1H,d,J=5.5Hz),8.10(1H,d,J=8Hz),7.87(2H,d,J=8Hz),7.34(1H,d,J=5Hz),7.16(1H,d,J=5Hz),5.24(2H,br s),4.47(1H,d,J=14Hz),3.61-3.67(1H,m),3.04-3.16(2H,m),2.50((2H,t,J=9Hz),2.11-2.37(5H,m),1.70-1.77(1H,m),1.41-1.49(1H,m)。
實例5
4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-環丙氧基吡啶-2-基)苯甲醯胺
遵照針對實例4所述之程序，製備4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-環丙氧基吡啶-2-基)苯甲醯胺。LCMS資料：LC-MS方法C；滯留時間1.11min；m/z 524.33(M+H)+；1H NMR(CDCl3,500Hz)：8.26(1H,d,J=4Hz),8.09(1H,d,J=5.5Hz),8.08(2H,d,J=8Hz),7.82(2H,d,J=8Hz),7.32(1H,d,J=5.5Hz),7.11(1H,d,J=5Hz),6.74(1H,dd,J=5及2.5Hz),5.16(1H,br s),4.43(1H,d,J=14Hz),3.89-3.93(1H,m),3.59-3.65(1H,m),3.03-3.13(2H,m),2.47((2H,t,J=9Hz),2.09-2.39(5H,m),1.67-1.75(1H,m),1.39-1.47(1H,m),0.84-0.93(4H,m)。
實例6
4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(吡啶-2-基)苯甲醯胺
遵照針對實例4所述之程序，製備4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(吡啶-2-基)苯甲醯胺。LCMS資料：LC-MS方法E；滯留時間1.22min；m/z 468.29(M+H)+；1H NMR(CDCl3,500Hz)：δ=8.84(1H,br,s),8.44(1H,d,J=8.5Hz),8.35(1H,d,J=4Hz),8.09(2H,d,J=8Hz),7.85(2H,d,J=8Hz),7.82(1H,dd,J=9及7.5Hz),7.33(1H,d,J=5Hz),7.15(1H,d,J=5Hz),7.13(1H,dd,J=6.5及5.5Hz),5.28(1H,br s),4.47(1H,d,J=14Hz),3.61-3.66(1H,m),3.51(2H,br s),3.04-3.16(2H,m),2.49((2H,t,J=9Hz),1.41-2.36(7H,m)。
實例7
4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-環丁基吡啶-2-基)苯甲醯胺
遵照實例4中之標準程序，製備4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-3-側氧基八 氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-環丁基吡啶-2-基)苯甲醯胺。LCMS資料：LC-MS方法E；滯留時間1.16min；m/z 522.40(M+H)+；NMR(CDCl3,500Hz)：8.65(1H,br s),8.37(1H,d,J=8.5Hz),8.19(1H,br s),8.09(2H,d,J=8Hz),7.85(2H,d,J=8Hz),7.70(1H,dd,J=8.5及2.5Hz),7.34(1H,d,J=5Hz),7.18(1H,d,J=5Hz),5.16(1H,br s),4.47(1H,d,J=14Hz),3.61-3.66(2H,m),3.04-3.16(2H,m),2.51((2H,t,J=9Hz),1.41-2.51(7H,m)。
實例8
4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(5-甲基噻唑-2-基)苯甲醯胺
遵照針對實例4所述之標準程序，製備4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(5-甲基噻唑-2-基)苯甲醯胺。LCMS資料：LC-MS方法E；滯留時間1.24min；m/z 488.29(M+H)+；1H NMR(CDCl3,500Hz)：δ=8.13(1H,d,J=8Hz),7.87(1H,d,J=8Hz),7.34(1H,d,J=5Hz),7.17(1H,d,J=5Hz),7.09(1H,br s),4.47(1H,d,J=12Hz),3.49-3.70(2H,m),3.06-3.17(2H,m),1.37-2.53(9H,m)。
實例9
4-(8-胺基-3-((6S,8aR)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(吡啶-2-基)苯甲醯胺
遵照針對實例4所述之標準程序，製備4-(8-胺基-3-((6S,8aR)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(吡啶-2-基)苯甲醯胺。LCMS資料：LC-MS方法E；滯留時間1.05min；m/z 468.20(M+H)+；1H NMR(CDCl3,500Hz)：δ=8.84(1H,br,s),8.44(1H,d,J=8.5Hz),8.35(1H,d,J=4Hz),8.09(2H,d,J=8Hz),7.84(2H,d,J=8Hz),7.82(1H,dd,J=9及7.5Hz),7.32(1H,d,J=5Hz),7.15(1H,d,J=5Hz),7.13(1H,dd,J=6.5及5.5Hz),5.30(1H,br s),4.47(1H,d,J=14Hz),3.61-3.66(1H,m),3.04-3.15(2H,m),2.49((2H,t,J=9Hz),1.41-2.36(7H,m)。
實例10及11
4-(8-胺基-3-((6S,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺及4-(8-胺基-3-((6R,8aR)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺 (a)順-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸
向順-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸甲酯(163mg，0.826mmol)於四氫呋喃(4ml)中之經攪拌混合物中添加LiOH(0.826ml，1.653mmol)，且在室溫下攪拌混合物1小時。接著用1N HCl酸化混合物，且濃縮，獲得順-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸。LCMS資料：LC-MS方法E；滯留時間0.35min；m/z 184.11(M+H)+。
(b)順-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲醯胺
在℃下，向順-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲酸(151mg，0.826mmol)之經攪拌混合物中添加HATU(377mg，0.991mmol)。接著相繼添加含DIPEA(0.433ml，2.478mmol)之DMF(2ml)、(3-氯吡嗪-2-基)甲胺鹽酸鹽(164mg，0.909mmol)，且在室溫下攪拌混合物1小時，且濃縮。藉由矽膠管柱層析法(Isco 40g管柱)(用CH2Cl2/MeOH(30/1)溶離)純化殘餘物，獲得呈白色固體狀之順-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲醯胺(185mg，0.599mmol，72.5%產率)。LCMS資料：LC-MS方法E；滯留時間1.08min；m/z 309.10(M+H)+；1H NMR(CDCl3,500Hz)：δ=8.43(1H,t,J=4.5及2.5Hz),8.30(1H,br s),7.46(1H,br s),4.89-4.93(1H,m),4.52-4.57(m,2),3.57-3.59(m,1),,3.00(1H,br d,J=14.5Hz),2.71(1H,br s),2.30-2.72(4H,m),1.69-1.82(4H,m),1.49-1.55m,1)。
(c)順-6-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮
在0℃下，向順-N-((3-氯吡嗪-2-基)甲基)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-甲醯胺(180mg，0.583mmol)於乙腈(5ml)中之經攪拌混合物中添加POCl3(0.326ml，3.50mmol)。接著添加DMF(0.045ml，0.583mmol)，在室溫下攪拌混合物隔夜，且用冰水及固體NaHCO3淬滅。用DCM萃取混合物，且濃縮有機層。藉由矽膠管柱層析法(ISCO，40g管柱)(用CH2Cl2/MeOH(30/1)溶離)純化殘餘物，獲得呈黃色油狀之 順-6-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(10mg)。LCMS資料：LC-MS方法E；滯留時間1.14min；m/z 291.1(M+H)+。
(d)順-6-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮
向順-6-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(30mg，0.031mmol)於乙腈(5ml)中之經攪拌混合物中添加NBS(8.26mg，0.046mmol)，且在室溫下攪拌混合物1小時。反應物用飽和NaHCO3淬滅，用DCM萃取，乾燥且濃縮。藉由矽膠管柱層析法(ISCO，40g管柱)(30/1)純化殘餘物，獲得順-6-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(10mg，0.027mmol，87%產率)。LCMS資料：LC-MS方法E；滯留時間0.97min；m/z 369.98及370.99(M+H)+。
(e)順-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮
在100℃下，在密封試管中加熱順-6-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(10mg，0.027mmol)於15mL含2N NH3之2-丙醇中之經攪拌混合物隔夜且濃縮。藉由矽膠管柱層析法(ISCO，40g)(用CH2Cl2/MeOH(12/1)溶離)純化殘餘物，獲得呈白色固體狀之順-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(6mg，0.017mmol，63.3%產率)。LCMS資料：LC-MS方法E；滯留時間0.97min；m/z 350.0，及352.0(M+H)+。
(f)4-(8-胺基-3-((6S,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺及4-(8-胺基-3-((6R,8aR)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
向4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(16.80mg，0.043mmol)、順-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(15mg，0.043mmol)及磷酸三 鉀(45.5mg，0.214mmol)於1,4-二噁烷(8ml)及水(1ml)中之經攪拌混合物中添加Pd(dppf)CH2Cl2(3.50mg，4.28μmol)。將混合物脫氣，用N2回填，且在85℃下攪拌3小時。濃縮反應混合物且藉由矽膠管柱層析法(ISCO，40g，管柱)(用(DCM/含2N NH3之MeOH，30/1)溶離)純化殘餘物，獲得呈黃色固體狀之4-(8-胺基-3-((順)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(21.1mg，0.039mmol，92%產率)，其藉由對掌性HPLC(4.6×250mm ChiralCel AD，2.1mL/min，100巴，70% MeOH(0.2% DEAl/CO2，35 C.，第一峰滯留時間3.33min，第二峰5.24min))分離，相繼獲得4-(8-胺基-3-((6S,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(10.2mg，0.019mmol，48.6%產率)、4-(8-胺基-3-((6R,8aR)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(9.7mg，0.018mmol，46.2%產率)。4-(8-胺基-3-((6S,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺之光譜資料：LCMS資料：LC-MS方法E；滯留時間1.23min；m/z 536.2(M+H)+；1H NMR(CDCl3,500Hz)：9.14(1H,br s),8.76(1H,s),8.51(1H,d,J=5Hz),8.06(2H,d,J=8Hz),7.87(2H,d,J=8Hz),7.34(1H,d,J=5Hz),7.22(1H,d,J=5Hz),7.07(1H,d,J=5Hz),5.37(2H,br s),4.48(1H,d,J=14Hz),3.62-3.68(1H,m),3.42(1H,br s),3.21(1H,dd,J=13.5,4Hz),1.72-2.48(9H,m)。
4-(8-胺基-3-((6R,8aR)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺之光譜資料：LCMS資料：LC-MS方法E；滯留時間1.23min；m/z 536.2(M+H)+；1H NMR(CDCl3,500Hz)：9.11(1H,br s),8.76(1H,s),8.51(1H,d,J=5Hz),8.06(2H,d,J=8Hz),7.87(2H,d,J=8Hz),7.34(1H,d,J=5Hz), 7.22(1H,d,J=5Hz),7.08(1H,d,J=5Hz),5.34(2H,br s),4.48(1H,d,J=14Hz),3.62-3.68(1H,m),3.43(1H,br s),3.21(1H,dd,J=13.5,4Hz),1.72-2.52(9H,m)。
使用針對實例4所述之程序製備下表1中所述之實例。
實例76
4-(8-胺基-3-((6R,8aR)-3-側氧基六氫噁唑并[4,3-c][1,4]噁嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺 (a)(2R,5R)-5-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)-2-(8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)-1-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯
向含(2R,5R)-2-(1-溴-8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-5-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(0.25g，0.306mmol)及4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(0.144g，0.918mmol)於1,4-二噁烷(6ml)及水(0.2ml)中添加K3PO4(0.195g，14.63mmol)及Pd(pddf)Cl2(0.025g，0.031mmol)且在80℃下攪拌隔夜。用EtOAc稀釋反應混合物且經矽藻土過濾。用水(3×80mL)洗滌濾液。有機相經MgSO4乾燥且蒸發至乾燥。藉由管柱層析法(使用含30%-60% EtOAc之己烷)純化粗產物，獲得(2R,5R)-5-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)-2-(8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)-1-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(0.216g，70%)。LCMS：[M+H]+：1002.89，LC-MS方法A；滯留時間=2.86min。
(b)4-(8-胺基-3-((2R,5S)-5-(羥基甲基)嗎啉-2-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1- 基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
將(2R,5R)-5-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)-2-(8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)-1-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(0.5g，0.499mmol)溶解於3mL TFA及0.5mL H2O中。在80℃下加熱混合物3小時且濃縮。藉由管柱層析法(含3%-20% MeOH之DCM)純化殘餘物，獲得4-(8-胺基-3-((2R,5S)-5-(羥基甲基)嗎啉-2-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(204mg，80%)。LCMS：[M+H]+：514.07，LC-MS方法E；滯留時間=1.01min。
(c)4-(8-胺基-3-((6R,8aR)-3-側氧基六氫噁唑并[4,3-c][1,4]噁嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
將4-(8-胺基-3-((2R,5S)-5-(羥基甲基)嗎啉-2-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(12mg，0.023mmol)溶解於2mL二氯甲烷中，且在0℃下向其中添加N-乙基-N-異丙基丙-2-胺((9mg，0.070mmol)及1,1'-羰基二咪唑(3.8mg，0.023mmol)。攪拌混合物30分鐘且濃縮。使用逆相管柱(TFA：CH3CN：H2O系統)純化殘餘物，獲得4-(8-胺基-3-((6R,8aR)-3-側氧基六氫噁唑并[4,3-c][1,4]噁嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(6mg，48%)。LCMS：[M+H]+：818.31，LC-MS方法E；滯留時間=1.03min。
實例77
4-(8-胺基-3-((3R,7R,9aS)-3-甲基-4-側氧基八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在N2氛圍下，向(3R,7R,9aS)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-3-甲基六氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮(30mg，0.079mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(40mg，0.102mmol)及K2CO3(32.7mg，0.236mmol)於二噁烷/H2O(2mL，3：1)中之溶液中添加Pd(dppf)Cl2(6mg，0.008mmol)，且在90℃-100℃下攪拌90分鐘。將混合物冷卻至室溫，添加H2O(5mL)，且用EA(10mL×2)萃取混合物，蒸發有機層獲得粗產物，其藉由製備型HPLC分離，獲得4-(8-胺基-3-((3R,7R,9aS)-3-甲基-4-側氧基八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=8.68-8.62(m,2H),8.22(d,J=8.5Hz,2H),7.95-7.87(m,3H),7.47(d,J=5.0Hz,1H),7.07(d,J=6.0Hz,1H),4.84(dd,J=1.9,13.2Hz,1H),4.25(q,J=6.7Hz,1H),4.05(dd,J=4.3,12.3Hz,1H),3.87(dd,J=2.5,12.3Hz,1H),3.57(d,J=11.5Hz,1H),3.44-3.35(m,1H),3.10(t,J=12.4Hz,1H),2.36-2.27(m,1H),2.15(dq,J=4.4,12.6Hz,1H),2.06-1.87(m,2H),1.48(d,J=6.8Hz,3H)。LCMS：滯留時間：2.514 min，(M+H)+ m/z：566.4。
實例78
4-(8-胺基-3-((6R,8aS,E)-3-(氰基亞胺基)八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺 步驟1：(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-硫酮
在65℃下，攪拌(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(50mg，0.14mmol)及勞森試劑(Lawesson reagent)(31.76mg，0.079mmol)於甲苯/DCM(4mL/2ml)中之混合物3小時。LCMS顯示反應完全。真空濃縮混合物。藉由TLC(EA 100%)純化殘餘物，獲得呈黃色固體狀之(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-硫酮(25mg，47.89mmol)。 LCMS：滯留時間0.667min[M+H]+ m/z：365.8
步驟2：(E)-N-((6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-亞基)氰胺
用氰胺(3.77mg，0.089mmol)、Hg(Ac)2(17mg，0.053mmol)及TEA(7.2mg，0.07mmol)處理(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-硫酮(23mg，0.062mmol)於ACN(5mL)中之溶液。在80℃下攪拌反應混合物18小時。真空濃縮混合物。將殘餘物分配於NaHCO3飽和水溶液(30mL)及DCM(10mL×3)之間。經合併 之有機層經Na2SO4乾燥，過濾，濃縮且殘餘物藉由TLC(純EA)純化，獲得呈白色固體狀之(E)-N-((6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-亞基)氰胺(11mg，47.0%)。LCMS：滯留時間：0.579min，[M+H]+ m/z：373.8
步驟3：4-(8-胺基-3-((6R,8aS,E)-3-(氰基亞胺基)八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
向(E)-N-((6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-亞基)氰胺(11mg，0.029mmol)於二噁烷/H2O(0.8mL/0.2mL))中之溶液中添加化合物4(13.84mg，0.035mmol)、K2CO3(12.06mg，0.087mmol)及Pd(dppf)Cl2(1.04mg，0.002mmol)。用N2淨化混合物3次，且在90℃下攪拌1小時。將混合物分配於H2O(25mL)與EA(6mL×3)之間。有機層經Na2SO4乾燥，過濾，濃縮，藉由製備型HPLC純化，獲得呈白色固體狀之4-(8-胺基-3-((6R,8aS,E)-3-(氰基亞胺基)八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(7mg，39.75%)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=7.21(d,J=4.8Hz,1H),7.09(d,J=5.0Hz,1H),5.79(br.s.,2H),4.39(dd,J=3.1,13.4Hz,1H),3.85-3.72(m,1H),3.23-3.12(m,1H),3.08-2.90(m,3H),2.41(tdd,J=5.0,8.0,18.0Hz,1H),2.21-2.12(m,2H),1.89-1.75(m,2H),1.47(dd,J=3.6,11.9Hz,1H),LCMS：LC-MS方法B，滯留時間：2.262min。
實例79
(3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)-1-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-8-基)胺基甲酸甲酯
在0℃下，在N2氛圍下，向4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(40mg，0.075mmol)於DCM(2mL)中之溶液中添加三乙胺(15.1mg，0.15mmol)及氯甲酸甲酯(100mg，1.05mmol)。在10℃下攪拌所得混合物12小時。LCMS顯示反應未完全，在0℃下向混合物中緩慢添加氯甲酸甲酯(300mg，3.17mmol)，添加後，在10℃下攪拌混合物12小時。蒸發反應混合物獲得粗產物，藉由製備型HPLC分離，獲得(3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)-1-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-8-基)胺基甲酸甲酯。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ=11.36(s,1H),10.06(br.s.,1H),8.68(d,J=5.0Hz,1H),8.54(s,1H),8.18(d,J=8.0Hz,2H),8.06(d,J=8.3Hz,2H),7.54(d,J=4.8Hz,1H),7.13-6.94(m,1H),5.97(d,J=6.3Hz,1H),4.11(d,J=12.3Hz,1H),3.66(s,3H),3.51-3.48(m,1H),2.91(t,J=12.0Hz,1H),2.70-2.59(m,1H),2.24(t,J=7.7Hz,2H),2.19-2.10(m,1H),2.02(d,J=13.6Hz,1H),1.91(d,J=12.8Hz,1H),1.85-1.72(m,1H),1.60-1.49(m,1H),1.25(q,J=11.2Hz,1H)。LCMS：LC-MS方法B，滯留時間：3.014min，(M+H)+ m/z：594.4。
實例80
4-(8-胺基-3-((7R,9aS)-2-乙基-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在N2下，向4-(8-胺基-3-((7R,9aS)-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(30mg，0.055mmol)於甲醇(2mL)中之溶液中添加乙醛(12mg，0.11mmol)，及NaCNBH3(34.2mg，0.55mmol)，接著添加HOAc(0.1mL)。在25℃下攪拌混合物3小時。LCMS顯示反應完全，接著將混合物倒入H2O(10mL)中，用NaHCO3水溶液鹼化至pH=8，且用DCM(10mL×3)萃取混合物。蒸發有機層獲得粗產物，接著其藉由製備型HPLC分離，獲得4-(8-胺基-3-((7R,9aS)-2-乙基-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=8.64-8.59(m,2H),8.19(d,J=8.5Hz,2H),7.91-7.85(m,3H),7.44(d,J=4.8Hz,1H),7.07(d,J=5.8Hz,1H),4.10-3.95(m,2H),3.95-3.83(m,2H),3.50-3.39(m,1H),3.38-3.32(m,3H),3.30(br.s.,1H),3.12(t,J=12.5Hz,1H),2.30(d,J=13.6Hz,1H),2.16-1.98(m,2H),1.73-1.59(m,1H),1.41(t,J=7.3Hz,3H)。LCMS：LC-MS方法B，滯留時間：1.950min(M+H)+ m/z：579.4。
實例81
4-(8-胺基-3-((7R,9aS)-2-異丙基-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
根據用於製備4-(8-胺基-3-((7R,9aS)-2-乙基-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺之程序製備該化合物。
1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=8.66-8.59(m,2H),8.19(d,J=8.5Hz,2H),7.93-7.82(m,3H),7.45(d,J=4.5Hz,1H),7.07(d,J=6.0Hz,1H),4.09-3.93(m,2H),3.92-3.81(m,2H),3.70(td,J=6.7,13.3Hz,1H),3.49-3.37(m,1H),3.36-3.32(m,1H),3.29-3.23(m,1H),3.12(t,J=12.5Hz,1H),2.31(d,J=13.1Hz,1H),2.17-1.98(m,2H),1.65(d,J=12.3Hz,1H),1.43(dd,J=2.5,6.5Hz,6H)。LCMS：LC-MS方法B，滯留時間：1.950min(M+H)+ m/z：593.5。
實例82
2-((7R,9aS)-7-(8-胺基-1-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)- 基)乙酸
在0℃下，在N2下，向4-(8-胺基-3-((7R,9aS)-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(50mg，0.09mmol)於DMF(5mL)中之溶液中添加NaHCO3(15.3mg，0.18mmol)及溴乙酸甲酯(14mg，0.09mmol)，且攪拌混合物8小時。LCMS顯示反應完全，接著添加H2O(10mL)，且用乙酸乙酯(5mL×3)萃取混合物。蒸發有機層獲得粗產物，其藉由製備型HPLC分離，獲得2-((7R,9aS)-7-(8-胺基-1-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-基)乙酸甲酯(39mg，產率：69%)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=8.68-8.60(m,2H),8.21(d,J=8.3Hz,2H),7.94-7.86(m,3H),7.47(d,J=4.8Hz,1H),7.07(d,J=5.8Hz,1H),4.89(br.s.,1H),3.79(s,3H),3.76-3.68(m,1H),3.66(s,2H),3.63-3.50(m,2H),3.45-3.35(m,2H),3.08(t,J=12.4Hz,1H),2.90(dd,J=7.9,12.2Hz,1H),2.28(d,J=13.1Hz,1H),2.15-2.06(m,1H),2.00(d,J=13.3Hz,1H),1.84-1.70(m,1H)。LCMS：LC-MS方法B，滯留時間：2.160min，(M+H)+ m/z：623.4。
實例83及84
4-(8-胺基-3-((4aS,7R)-2-甲基-1-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-7-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺及4-(8-胺基-3-((4aR,7S)-2-甲基-1-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-7-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
向反-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-甲基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1-酮(55mg，0.14mmol)於二噁烷/水(2mL/0.5mL)中之溶液中添加4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(114mg，0.29mmol)、Na2CO3(46mg，0.44mmol)及Pd(PPh3)2Cl2(10mg)。在110℃下攪拌混合物2小時。冷卻後，過濾反應混合物，且藉由製備型HPLC直接純化濾液獲得反式混合產物，其藉由SFC分離獲得標題化合物。
SFC條件：「管柱：Chiralpak AS-H 150×4.6mm I.D.，5μm；移動相：含甲醇(0.05% DEA)之CO2，5%至40%流動速率：3mL/min波長：220nm」。
對於4-(8-胺基-3-((4aS,7R)-2-甲基-1-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-7-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺：1H NMR(CD3OD,400MHz)δ 1.56-1.70(m,1 H),1.84-2.11(m,3 H),2.17-2.29(m,2 H),2.89-3.03(m,4 H),3.31-3.37(m,3 H),3.42-3.50(m,1 H),4.58-4.68(m,1 H),7.04(d,J=8.0Hz,1 H),7.44(d,J=4.0Hz,1 H),7.87(d,J=8.0Hz,2 H),7.91(d,J=4.0Hz,1 H),8.19(d,J=8.0Hz,2 H),8.59-8.65(m,2 H)。
對於4-(8-胺基-3-((4aR,7S)-2-甲基-1-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-7-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
1H NMR(CD3OD,400MHz)δ 1.56-1.70(m,1 H),1.84-2.11(m, 3 H),2.17-2.29(m,2 H),2.89-3.03(m,4 H),3.31-3.37(m,3 H),3.42-3.50(m,1 H),4.58-4.68(m,1 H),7.04(d,J=8.0Hz,1 H),7.44(d,J=4.0Hz,1 H),7.87(d,J=8.0Hz,2 H),7.91(d,J=4.0Hz,1 H),8.19(d,J=8.0Hz,2 H),8.59-8.65(m,2 H)。
實例85
4-(8-胺基-3-((7R,9aS)-2-異菸鹼醯基-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-甲氧基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺 步驟1：4-(8-胺基-3-((7R,9aS)-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-甲氧基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在N2氛圍下，向(7R,9aS)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-4(6H)-酮(90mg，0.246mmol)、3-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(135mg，0.32mmol)及K2CO3(102mg，0.74mmol)於二噁烷/H2O(4mL，3：1)中之溶液中添加Pd(dppf)Cl2(14.6mg，0.02mmol)，且在90℃-100℃下攪拌60分鐘。TLC顯示反應完全，接著將混合物冷卻至室溫，且用H2O(5mL)稀釋，且用乙酸乙酯(10mL×3)萃取混合物。有機層用鹽水(10mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，且真空濃縮獲得粗產物，其藉由急驟層析法(DCM：MeOH=100%-80%)純化，獲得4-(8-胺基-3-((7R,9aS)-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-甲氧基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(110 mg，產率：76.9%)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=8.89(s,1H),8.73(s,1H),8.50(d,J=5.0Hz,1H),7.68(s,1H),7.63-7.56(m,2H),7.33(d,J=5.0Hz,2H),7.06(d,J=5.3Hz,1H),5.04(d,J=11.3Hz,1H),3.92(s,3H),3.62-3.41(m,4H),3.33(dd,J=4.9,13.2Hz,1H),3.16-3.04(m,1H),2.90-2.77(m,2H),2.30-2.17(m,2H),1.64(dt,J=8.0,12.4Hz,1H)。
步驟2：4-(8-胺基-3-((7R,9aS)-2-異菸鹼醯基-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-甲氧基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在0℃下，攪拌化合物4-(8-胺基-3-((7R,9aS)-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-甲氧基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(50mg，0.086mmol)、三乙胺(26mg，0.258mmol)及異菸鹼醯氯鹽酸鹽(15.3mg，0.086mmol)於DCM(2mL)中之混合物2小時，且接著在20℃-30℃下攪拌5小時。LCMS顯示反應未完全，接著添加異菸鹼醯氯鹽酸鹽(15.3mg，0.086mmol)，且攪拌混合物12小時。混合物用1mL甲醇淬滅，且蒸發以獲得粗產物，接著其藉由製備型HPLC分離，獲得化合物4-(8-胺基-3-((7R,9aS)-2-異菸鹼醯基-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-甲氧基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=8.86(d,J=6.0Hz,2H),8.68-8.63(m,2H),7.90-7.78(m,5H),7.70(d,J=7.8Hz,1H),7.50-7.46(m,1H),7.04(d,J=6.0Hz,1H),4.63-4.54(m,1H),4.42-4.29(m,1H),4.22-4.09(m,1H),3.99(s,3H),3.94-3.64(m,2H),3.57-3.38(m,2H),3.09(t,J=12.5Hz,1H),2.26(d,J=17.3Hz,1H),2.18-1.97(m,2H),1.89-1.59(m,2H)。LCMS：LC-MS方法B，滯留時間：2.347min，(M+H)+ m/z：686.4。
實例86
2-((7R,9aS)-7-(8-胺基-1-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-基)-2-甲基丙酸 步驟1：6-(溴甲基)菸鹼酸第三丁酯
向6-甲基菸鹼酸第三丁酯(10g，51.7mmol)於CCl4(100mL)中之溶液中添加NBS(11.9g，67.2mmol)及AIBN(1g)，且在N2氛圍下，在80℃-90℃下攪拌混合物12小時。將混合物冷卻至室溫，過濾且蒸發濾液獲得粗產物，其藉由急驟層析法(PE/EA=100%-80%)純化，獲得呈褐色固體狀之6-(溴甲基)菸鹼酸第三丁酯(3.6g，產率：25.7%)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=9.11(d,J=1.5Hz,1H),8.25(dd,J=2.1,8.2Hz,1H),7.50(d,J=8.8Hz,1H),4.58(s,2H),1.60(s,9H)。
(a)6-((((苯甲基氧基)羰基)(2-甲氧基-2-側氧基乙基)胺基)甲基)菸鹼酸第三丁酯
在0℃下，向化合物Cbz-甘胺酸甲酯(1.98g，8.8mmol)於無水THF(50mL)中之溶液中添加NaH(352mg，8.8mmol)，且攪拌15分鐘。接著，分部分添加6-(溴甲基)菸鹼酸第三丁酯(2g，7.4mmol)。添加後，在0℃下攪拌混合物5小時。接著，反應物用NH4Cl水溶液(20mL)淬滅，且用EA(20mL×3)萃取。有機層用鹽水(10mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，蒸發獲得粗產物，接著其藉由急驟層析法(PE/EA=100%-50%)純化，獲得呈油狀之6-((((苯甲基氧基)羰基)(2-甲氧基-2-側氧基乙基)胺基)甲基)菸鹼酸第三丁酯(2.5g，產率：81.4%)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=9.06(dd,J=1.6,7.2Hz,1H),8.24-8.10(m,1H),7.44(d,J=8.3Hz,1H),7.27-7.21(m,1H),5.21-5.13(m,2H),4.72(d,J=13.8Hz,2H),4.17(s,1H),4.09(s,1H),3.78-3.70(m,2H),3.63(s,1H),1.60(d,J=2.8Hz,9H)。
(b)反-(7S,9aR)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2,7(6H)-二甲酸2-苯甲酯7-第三丁酯
在10℃下，在N2下，向6-((((苯甲基氧基)羰基)(2-甲氧基-2-側氧基乙基)胺基)甲基)菸鹼酸第三丁酯(1g，2.4mmol)於HAc(10mL)中之溶液中添加NaCNBH3(455mg，7.2mmol)。添加後，在30℃-40℃下攪拌混合物12小時。LCMS顯示反應完全，接著蒸發混合物，用H2O(10mL)溶解，用NaHCO3水溶液鹼化至pH=8，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。有機層用鹽水(10mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，蒸發獲得粗產物，接著將其溶解於20mL甲醇中，且在N2下，在70℃-80℃下攪拌12小時。LCMS顯示反應完全。接著，蒸發混合物獲得粗產物，其藉由急驟層析法(PE/THF=100%-50%，220nm及254nm)純化，獲得反-(7S,9aR)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2,7(6H)-二甲酸2-苯甲酯7-第三丁酯(370mg，產率：79%)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=7.42-7.30(m,5H),5.16(d,J=6.3Hz,2H),4.98(d,J=13.6Hz,1H),4.13(br.s.,2H),3.84(d,J=10.3Hz,1H),3.48(br.s.,2H),2.81(dd,J=3.8,13.6Hz,1H),2.66(br.s.,1H),2.19(d,J=11.8Hz,1H),1.84-1.56(m,3H),1.42(s,9H)。
(c)反-(7S,9aR)-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-甲酸第三丁酯
在H2下，向反-(7S,9aR)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2,7(6H)-二甲酸2-苯甲酯7-第三丁酯(370mg，0.95mmol)於甲醇(10mL)中之溶液中添加Pd/C(90mg)，且在10℃下攪拌1.5小時。TLC顯示反應完全，且接著過濾混合物，且蒸發濾液，獲得產物反- (7S,9aR)-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-甲酸第三丁酯(200mg，產率：82.6%)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=4.98-4.88(m,1H),3.59-3.41(m,2H),3.32-3.20(m,2H),2.78-2.68(m,1H),2.55-2.44(m,1H),2.39-2.25(m,1H),2.17-2.08(m,1H),1.81-1.73(m,1H),1.62-1.53(m,1H),1.44(s,9H),1.40-1.34(m,1H)。
(d)反-(7S,9aR)-2-(1-甲氧基-2-甲基-1-側氧基丙-2-基)-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-甲酸第三丁酯
向化合物2-溴-2-甲基丙酸甲酯(3mL)中添加K2CO3(920mg)直至pH=8，且向混合物中相繼添加化合物反-(7S,9aR)-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-甲酸第三丁酯(340mg，1.34mmol)、DMF(1mL)，且接著在N2下，在60℃下攪拌混合物12小時。將反應混合物冷卻至室溫，且用H2O(20mL)稀釋，且用EA(10mL×3)萃取。有機層用鹽水(10mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，蒸發獲得粗產物，接著其藉由急驟層析法(PE/THF=100%-80%)純化，獲得呈白色固體狀之反-(7S,9aR)-2-(1-甲氧基-2-甲基-1-側氧基丙-2-基)-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-甲酸第三丁酯(310mg，產率：66%)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=4.92-4.80(m,1H),3.74-3.67(m,3H),3.52-3.42(m,1H),3.32-3.21(m,2H),2.96(ddd,J=1.8,4.5,12.0Hz,1H),2.52(t,J=12.4Hz,1H),2.40(dd,J=7.5,12.0Hz,1H),2.30(tt,J=3.8,12.0Hz,1H),2.16-2.07(m,1H),1.76-1.67(m,1H),1.64(d,J=4.0Hz,1H),1.59-1.54(m,1H),1.43(s,9H),1.33(d,J=8.0Hz,6H)。
(e)反-(7S,9aR)-2-(1-甲氧基-2-甲基-1-側氧基丙-2-基)-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-甲酸
向化合物反-(7S,9aR)-2-(1-甲氧基-2-甲基-1-側氧基丙-2-基)-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-甲酸第三丁酯(300mg，0.85mmol)於無水DCM(6mL)中之溶液中添加TFA(0.5mL)，且在15℃下攪拌3 小時。LCMS顯示反應完全，接著蒸發混合物，獲得呈油狀之粗產物反-(7S,9aR)-2-(1-甲氧基-2-甲基-1-側氧基丙-2-基)-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-甲酸(300mg，產率：118%)，其直接用於下一步驟中。LCMS方法：0-60AB_2min_ELSD，滯留時間：0.875min，(M+H)+ m/z：298.9。
(f)反-2-((7S,9aR)-7-(((3-氯吡嗪-2-基)甲基)胺甲醯基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-基)-2-甲基丙酸甲酯
在15℃下，攪拌反-(7S,9aR)-2-(1-甲氧基-2-甲基-1-側氧基丙-2-基)-4-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-甲酸(300mg，1mmol)、(3-氯吡嗪-2-基)-甲胺(217mg，1.2mmol)、HATU(570mg，1.5mmol)及TEA(0.56mL，4mmol)於無水DMF(5mL)中之混合物12小時。TLC顯示反應完全，接著用H2O(50mL)稀釋混合物，且用DCM(10mL×3)萃取混合物。有機層用鹽水(10mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，蒸發獲得粗產物，其藉由急驟層析法(PE/THF=100%-30%)純化，獲得呈油狀之反-2-((7S,9aR)-7-(((3-氯吡嗪-2-基)甲基)胺甲醯基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-基)-2-甲基丙酸甲酯(290mg，產率：68.4%)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=8.45(d,J=2.5Hz,1H),8.33(d,J=2.5Hz,1H),6.96-6.90(m,1H),4.90-4.83(m,1H),4.69(d,J=4.5Hz,2H),3.76-3.73(m,2H),3.72(s,3H),3.50-3.43(m,1H),2.98(dd,J=2.9,12.2Hz,1H),2.70(t,J=12.5Hz,1H),2.51-2.33(m,2H),2.11-2.03(m,1H),1.84(d,J=3.3Hz,1H),1.79-1.71(m,1H),1.56-1.47(m,1H),1.34(d,J=7.3Hz,6H)。
(g)反-2-((7S,9aR)-7-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-基)-2-甲基丙酸甲酯
向反-2-((7S,9aR)-7-(((3-氯吡嗪-2-基)甲基)胺甲醯基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-基)-2-甲基丙酸甲酯(290mg，0.68 mmol)於MeCN(15mL)中之溶液中分部分添加PCl5(285mg，1.37mmol)，添加後，使混合物升溫至15℃，且攪拌12小時。將反應物倒入冰NaHCO3水溶液(50mL)中，且用DCM(10mL×3)萃取。有機層用鹽水(10mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，蒸發獲得粗產物，其藉由急驟層析法(PE/THF=100%-10%)純化，獲得呈油狀之反-2-((7S,9aR)-7-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-基)-2-甲基丙酸甲酯(140mg，產率：50.7%)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=7.81(s,1H),7.72(d,J=5.0Hz,1H),7.37(d,J=5.0Hz,1H),4.92(dd,J=3.1,13.2Hz,1H),3.74(s,3H),3.51-3.36(m,3H),3.10-3.00(m,2H),2.83-2.74(m,1H),2.59(dd,J=6.8,12.0Hz,1H),2.26-2.18(m,2H),1.91-1.83(m,1H),1.78-1.66(m,1H),1.38(d,J=6.3Hz,6H)。
(h)反-2-((7S,9aR)-7-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-基)-2-甲基丙酸甲酯
在N2氛圍下，向反-2-((7S,9aR)-7-(8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-基)-2-甲基丙酸甲酯(140mg，0.35mmol)於無水DMF(3mL)中之溶液中添加NBS(74mg，0.41mmol)，且在15℃下攪拌60分鐘。LCMS顯示反應完全，接著將混合物倒入冰水(50mL)中，且添加0.5mL NaHCO3水溶液，且用EA(10mL×3)萃取混合物，有機層接著用H2O(5mL×8)、鹽水(10mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，且蒸發，獲得產物反-2-((7S,9aR)-7-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-基)-2-甲基丙酸甲酯(140mg，產率：82.6%)，其未經純化直接用於下一步驟中。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=7.72(d,J=5.0Hz,1H),7.36(br.s.,1H),4.87(d,J=13.3Hz,1H),3.73(s,3H),3.50-3.39(m,3H),3.02(dd,J=3.9,12.7Hz,2H),2.79-2.70(m,1H),2.58(dd,J=6.0,12.0 Hz,1H),2.30-2.14(m,2H),1.89-1.82(m,1H),1.78-1.68(m,1H),1.37(d,J=6.0Hz,6H)。
(i)2-((7R,9aS)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-基)-2-甲基丙酸甲酯
在90℃-100℃下，在30mL密封試管中加熱反-2-((7S,9aR)-7-(1-溴-8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-基)-2-甲基丙酸甲酯(100mg，0.206mmol)於i-PrOH/NH4OH(4mL，1：1)中之混合物12小時。LCMS顯示反應完全，接著蒸發混合物獲得粗產物，接著其藉由急驟層析法(MeOH：DCM=100%-90%)純化，獲得產物，該產物接著藉由SFC(儀器：Thar 80，管柱：AD 250mm×30mm，20μm，移動相：A：超臨界CO2，B：EtOH(0.05% NH3H2O)，A：B=45：55，在80ml/min下，管柱溫度：38℃，噴嘴壓力：100巴，噴嘴溫度：60℃，蒸發器溫度：20℃，調整器溫度：25℃，波長：220nm)分離，獲得2-((7R,9aS)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-基)-2-甲基丙酸甲酯(30mg，產率：62.6%)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=7.54(d,J=5.0Hz,1H),6.96(d,J=3.8Hz,1H),4.75(d,J=14.3Hz,1H),3.72(s,3H),3.51-3.43(m,1H),3.40-3.34(m,2H),3.23-3.13(m,1H),3.08(dd,J=4.3,12.3Hz,1H),2.85(t,J=12.4Hz,1H),2.61(dd,J=6.5,12.3Hz,1H),2.14(d,J=12.5Hz,1H),2.00-1.81(m,2H),1.79-1.66(m,1H),1.35(d,J=2.5Hz,6H)。
(j)2-((7R,9aS)-7-(8-胺基-1-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-基)-2-甲基丙酸甲酯
在N2氛圍下，向2-((7R,9aS)-7-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-基)-2-甲基丙酸甲酯 (30mg，0.064mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(32.8mg，0.084mmol)及K2CO3(26.5mg，0.192mmol)於二噁烷/H2O(2mL，3：1)中之溶液中添加Pd(dppf)Cl2(5mg，0.006mmol)，且在90℃-100℃下攪拌60分鐘。TLC顯示反應完全，接著將混合物冷卻至室溫，且用H2O(5mL)稀釋，且用EA(10mL×3)萃取混合物。有機層用鹽水(10mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，蒸發獲得粗產物，該粗產物接著藉由急驟層析法(MeOH：DCM=100%-90%)純化，獲得2-((7R,9aS)-7-(8-胺基-1-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-基)-2-甲基丙酸甲酯(40mg，產率：96%)。LC-MS方法C；滯留時間：0.715min；(M+H)+ m/z：651.0。
(k)2-((7R,9aS)-7-(8-胺基-1-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-基)-2-甲基丙酸
在-78℃下，在N2下，向2-((7R,9aS)-7-(8-胺基-1-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-基)-2-甲基丙酸甲酯(30mg，0.046mmol)於無水DCM(3mL)中之溶液中添加BBr3(0.92mL，0.92mmol)。添加後，使混合物升溫至室溫(25℃)且攪拌20小時。在-50℃下用2mL甲醇淬滅混合物，且蒸發獲得粗產物，該粗產物藉由製備型HPLC分離，獲得2-((7R,9aS)-7-(8-胺基-1-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-4-側氧基六氫-1H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2(6H)-基)-2-甲基丙酸。1H NMR(400MHz，乙腈-d3)δ=9.50(br.s.,1H),8.65-8.52(m,2H),8.19-8.06(m,2H),7.76(br.s.,2H),7.52(br.s.,1H),7.42(d,J=4.8Hz,1H),6.90(d,J=5.3Hz,1H),4.79(d,J=11.0 Hz,1H),3.80-3.45(m,3H),3.32(d,J=8.0Hz,1H),3.15(br.s.,1H),2.90(d,J=16.8Hz,3H),2.12(dd,J=2.4,4.9Hz,1H),1.91-1.82(m,1H),1.40(d,J=7.0Hz,7H)。LCMS：LC-MS方法B，滯留時間：2.017min，(M+H)+ m/z：637.4。
實例87
4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺 步驟1：1-溴-3-((6R,8aS)-八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-8-胺
在0℃下，在20mL施蘭克試管(Schlenk tube)中，向LiAlH4(23.8mg，0.63mmol)於THF(2.0mL)中之懸浮液中逐滴添加(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(200.0mg，0.57mmol)於THF(2.0mL)中之溶液。在40℃下攪拌4小時後，反應混合物用H2O(20mL)淬滅且用EtOAc(30mL×3)萃取。經MgSO4乾燥經合併之有機層。蒸發溶劑，隨後藉由製備型TLC(SiO2，EtOAc/Et3N=95/5)純化，獲得呈淺黃色固體狀之1-溴-3-((6R,8aS)-八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-8-胺(100mg，52.1%產率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ=7.67-7.58(m,1H),6.97-6.87(m,1H),6.59(br.S.,2H),3.13(d,J=10.6Hz,1H),2.98-2.90(m,1H),2.19(t,J=11.0Hz,1H),2.03(q,J=8.5Hz,1H),1.98-1.90(m,1H),1.83(br.S.,3H),1.71-1.58(m,2H),1.57-1.46(m,1H),1.38-1.24(m,2H),1.15(t,J=7.0Hz,1H)。
步驟2：4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在氮氣保護下，向1-溴-3-((6R,8aS)-八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-8-胺(50mg，0.15mmol)及4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(58.3mg，0.15mmol)於5mL二噁烷/H2O(4：1)中之溶液中添加K2CO3(61.7mg，0.45mmol)及Pd(dppf)Cl2(催化量，10mg)。接著，將混合物加熱至90℃持續2小時。接著，將混合物倒入水(30mL)中，且用EA(50mL×3)萃取。有機層用Na2SO4乾燥，真空濃縮且用製備型HPLC純化，獲得呈白色固體狀之4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(30mg，產率38.7%)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=8.67-8.54(m,2H),8.19(d,J=8.2Hz,2H),7.94-7.82(m,3H),7.45(d,J=4.7Hz,1H),7.10(d,J=5.5Hz,1H),3.97(br.S.,1H),3.82(br.S.,1H),3.72(br.S.,1H),3.55(d,J=11.0Hz,1H),3.19(br.S.,1H),2.36(d,J=10.2Hz,3H),2.18(d,J=8.6Hz,2H),2.11-1.67(m,4H)。
實例88
4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-甲氧基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
向500mL燒瓶中添加(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(10g，28.6mmol)、(2-甲氧基-4-((4-(三氟 甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基)三氟硼酸鉀(12.06g，30.0mmol)及PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(1.166g，1.428mmol)。燒瓶藉由真空進行脫氣且用N2再填充。接著添加K2CO3(2M，42.8ml，86mmol)及二噁烷(114ml)。在80℃下攪拌反應物總共16小時。冷卻後，分離水層且用EtOAc(50ml)萃取。合併有機層且用EtOAc(150ml)稀釋。該有機層經無水Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。藉由SiO2層析法(240g，CH2Cl2/MeOH 0%至10%)純化產物。獲得淡色固體產物(10.6g，65.9%)。1H NMR(500MHz,DMSO-D)δ=11.45(1H,br),8.70(1H,d,J=5Hz),8.58(1H,s),7.83(1H,s),7.75(1H,dd,J=9.0,1.0Hz),7.61(1H,d,J=5.0Hz),7.55(1H,d,J=5.0Hz),7.48(1H,d,J=8.0Hz),7.02(1H,d,J=5.0Hz),5.89(1H,br),4.11(1H,d,J=12,3.0Hz),3.87(3H,s),3.53(1H,m),3.17(1H,m),3.01(1H,t,J=12.0Hz),2.27(2H,m),2.17(1H,m),2.08(1H,d,J=12.5Hz),1.93(1H,dd,J=12.5,3.5Hz),1.76(1H,m),1.57(1H,m),1.40(1H,m)ppm。LC-MS：C28H26F3N7O3，實驗值[M+1]+：565.9，LC-MS方法B，滯留時間=1.59min。
實例89
4-(8-胺基-3-((1R,6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-甲氧基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在N2氛圍下，向(1R,6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3- 基)-1-甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(50mg，0.136mmol)、3-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(75mg，0.177mmol)及K2CO3(56.6mg，0.41mmol)於二噁烷/H2O(2mL，3：1)中之溶液中添加Pd(dppf)Cl2(10.0mg，0.013mmol)，且在90℃-100℃下攪拌60分鐘。LCMS顯示反應完全，接著使混合物冷卻至室溫，添加H2O(10mL)且用乙酸乙酯(10mL×2)萃取混合物。蒸發有機層獲得粗產物，該粗產物接著藉由製備型HPLC分離，獲得4-(8-胺基-3-((1R,6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-甲氧基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=8.63(d,J=7.8Hz,2H),7.87(d,J=6.0Hz,1H),7.83-7.75(m,2H),7.68(d,J=7.8Hz,1H),7.45(d,J=5.0Hz,1H),7.01(d,J=6.0Hz,1H),4.86-4.77(m,1H),4.10-4.03(m,1H),3.96(s,3H),3.87(ddd,J=3.5,7.8,11.7Hz,1H),3.45-3.35(m,2H),2.28(d,J=13.6Hz,1H),2.05-1.91(m,1H),1.87-1.79(m,1H),1.78-1.66(m,1H),1.40(d,J=6.5Hz,3H)。
LCMS：LC-MS方法B，滯留時間：2.516min，(M+H)+ m/z：582.4
實例90
4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-1,1-二甲基-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡 啶-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
向(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-1,1-二甲基四氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮(60mg，0.131mmol)及3-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(80mg，0.189mmol)於二噁烷(4.5mL)及水(1.5mL)中之溶液中添加K2CO3(65mg，0.473mmol)。用氮氣脫氣若干次後，添加Pd(dppf)Cl2(催化量)且反應物再用氮氣脫氣若干次，將混合物加熱至80℃且在氮氣下攪拌1小時。將其冷卻至20℃，用乙酸乙酯大規模稀釋，且經矽藻土過濾移除鈀。用乙酸乙酯洗滌濾餅，減壓濃縮經合併之濾液且藉由製備型HPLC純化，獲得呈白色固體狀之4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-1,1-二甲基-3-側氧基六氫-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-甲氧基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(56.23mg，產率72%)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)=8.63(d,J=8.0Hz,2H),7.88(d,J=6.0Hz,1H),7.82-7.76(m,2H),7.68(d,J=8.0Hz,1H),7.45(d,J=4.3Hz,1H),7.01(d,J=5.8Hz,1H),4.07(d,J=9.8Hz,1H),3.97(s,3H),3.54(dd,J=3.3,11.8Hz,1H),3.45-3.34(m,2H),2.28(d,J=12.8Hz,1H),1.99-1.86(m,2H),1.70(dd,J=3.1,12.4Hz,1H),1.50(s,3H),1.42(s,3H)；(ESI)：M/Z(M+1)：596.4。
實例91
4-(8-胺基-3-((3R,8aR)-6-側氧基六氫-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-3-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-甲氧基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
向(3R,8aR)-3-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)四氫-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-6(7H)-酮(50mg，0.142mmol)及3-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(66mg，0.156mmol)於二噁烷(4.5mL)及水(1.5mL)中之溶液中添加K2CO3(59mg，0.426mmol)。用氮氣脫氣若干次後，添加PdCl2(dppf)(催化量)且反應物再用氮氣脫氣若干次，將混合物加熱至80℃且在氮氣下攪拌1小時。將其冷卻至20℃，用乙酸乙酯大規模稀釋，且經矽藻土過濾移除鈀。用乙酸乙酯(10mL)洗滌濾餅，減壓濃縮經合併之濾液且藉由製備型HPLC純化，獲得呈白色固體狀之4-(8-胺基-3-((3R,8aR)-6-側氧基六氫-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-3-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-甲氧基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(13.96mg，產率20.8%)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=8.68-8.62(m,2H),7.95(d,J=5.8Hz,1H),7.85-7.76(m,2H),7.71(d,J=7.8Hz,1H),7.47(d,J=5.3Hz,1H),7.03(d,J=6.0Hz,1H),4.96(dd,J=3.3,11.0Hz,1H),4.42(dd,J=3.1,13.4Hz,1H),4.24(dd,J=4.0,11.3Hz,1H),3.99(s,3H),3.91(dtd,J=4.1,7.3,10.9Hz,1H),3.58(q,J=11.3Hz,2H),2.61-2.43(m,2H),2.33-2.22(m,1H),1.78-1.66(m,1H)；(ESI)：M/Z(M+H)+ m/z：568.4。
下表2中所述之實例使用針對實例88所述相同之化學品及相應中間物藉由鈴木偶合反應(Suzuki coupling reaction)製備。
實例115
4-(8-胺基-5-氯-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-5-乙氧基-2-氟-N-(1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)苯甲醯胺
在N2氛圍下，用二噁烷(10ml)及磷酸鉀(2M，1.300ml，2.60mmol)處理含有(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴-5-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(500mg，1.300mmol)、5-乙氧基-2-氟-N-(1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲醯胺(713mg，1.560mmol)及Pd(dppf)CH2Cl2(53.1mg，0.065 mmol)之5ml微波反應小瓶。將系統立即抽真空且用N2(×3)回填。接著在120℃下，使反應物暴露於微波照射40分鐘。混合物用乙酸乙酯稀釋，過濾且用乙酸乙酯洗滌。濃縮濾液且藉由MPLC(40g矽膠，含0至100%乙酸乙酯之己烷，12 CV，且接著為含0至10%甲醇之二氯甲烷，18 CV)純化殘餘物，獲得含有少量起始物質之產物(700mg)。接著再藉由逆相MPLC(130g C18，含0至100%乙腈之水)純化產物，獲得純產物4-(8-胺基-5-氯-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-5-乙氧基-2-氟-N-(1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)苯甲醯胺。LC-MS(ES,m/z)C28H27ClF4N8O3：634；實驗值：635[M+H]+。1HNMR(500MHz,CD3OD,δ)：9.49(1H,d,J=5.8Hz),7.36(1H,d,J=10.4Hz),7.17(1H,s),7.02(1H,s),4.42(1H,m),4.13(2H,m),3.98(1H,m),3.95(3H,s),3.67(1H,m),3.19(1H,t,J=12.0Hz),2.45(2H,m),2.33(2H,m),2.08(1H,m),2.08(1H,m),1.74(1H,m),1.48(1H,m),1.28(3H,t,J=7.0Hz)。
下表3中所述之實例使用針對實例115所述相同之化學品及相應中間物藉由鈴木偶合反應製備。
實例170
4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)苯甲醯胺 步驟1：4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)苯甲酸鋰
在壓力小瓶中，在二噁烷(10ml)及水(2ml)中混合碳酸鉀(1184mg，8.57mmol)、(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(1000mg，2.86mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲酸甲酯(823mg，3.14mmol)、1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)二氯甲烷錯合物(233mg，0.286mmol)，脫氣且在90℃下攪拌2小時。藉由急驟LC 40g管柱(B：10% MeOH，含0.1% NH3OH之CH2Cl2/A：CH2Cl2(梯度為0% B至40% B))分離產物，獲得4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)苯甲酸甲酯(860mg，2.121mmol)。LC-MS：LC-MS方法A，滯留時間=2.09min；MS實驗值(M)+m/z=406.23。
在四氫呋喃(40ml)及MeOH(5ml)及水(2ml)中混合4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)苯甲酸甲酯(860mg，2.121mmol)及氫氧化鋰(254mg，10.61mmol)，且在45℃下攪拌15小時。蒸發溶劑獲得4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲 哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)苯甲酸鋰(843mg，2.121mmol，100%產率)。
LC-MS：LC-MS方法A，滯留時間=1.88min；MS實驗值(M)+m/z=392.22。
步驟2：4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)苯甲醯胺
向3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-胺(19.01mg，0.126mmol)、HATU(47.8mg，0.126mmol)、4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)苯甲酸鋰(中間物20)(50mg，0.126mmol)於DMF(2ml)中之混合物中添加N,N-二異丙基乙胺(0.022ml，0.126mmol)且在0℃下攪拌30分鐘。
LC-MS顯示反應完全。藉由急驟LC在12g管柱上(B：10% MeOH，含0.1% NH3OH之CH2Cl2/A：CH2Cl2(梯度為0%B至40% B))分離產物，獲得4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基)苯甲醯胺(14.3mg，0.027mmol，21.67%產率)。LC-MS：LC-MS方法A，滯留時間=2.41min；MS實驗值(M)+m/z=525.26。
下表4中之實例遵照針對實例170所述之方法，在步驟2偶合中使用相應芳族胺來合成。
實例183
4-(8-胺基-5-氯-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)苯甲醯胺 步驟1：(4-((1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)胺甲醯基)苯基) 酸
向具有4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲酸(100mg，0.403mmol)之反應小瓶中添加1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-胺(66.6mg，0.403mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.141ml，0.806 mmol)、六氟磷酸(V)2-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基異(153mg，0.403mmol)，且在室溫下，在DMF(2ml)中攪拌15小時。在急驟LC上在12g管柱上(己烷/EtOAc)分離反應混合物，獲得(4-((1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)胺甲醯基)苯基)酸(112mg，0.358mmol，89%產率)。LC-MS：LC-MS方法A，滯留時間=2.72min；MS實驗值M+m/z=341.13。
步驟2：4-(8-胺基-5-氯-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)苯甲醯胺
在壓力小瓶中，在二噁烷(10ml)及水(2ml)中混合(6R,8aS)-6-(8-胺基-1-溴-5-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(50mg，0.130mmol)、4-((1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)胺甲醯基)苯基)酸(40.7mg，0.130mmol)、碳酸鉀(53.9mg，0.390mmol)、1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)二氯甲烷錯合物(10.62mg，0.013mmol)，脫氣且在90℃下攪拌2小時。藉由製備型HPLC分離產物，獲得4-(8-胺基-5-氯-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-N-(1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)苯甲醯胺3TFA(18mg，0.019mmol，14.38%產率)。LC-MS：LC-MS方法A，滯留時間=2.59min；MS實驗值(M)+m/z=573.32。
下表5中之實例遵照針對實例183所述之方法，在步驟1中使用相應芳族胺及苯甲酸來合成。所形成酸與溴中間物之鈴木偶合獲得產物。
實例199
4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-(2-甲氧基乙氧基)-N-(3-(三氟甲基)苯基)苯甲醯胺 步驟1：4-(8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-羥基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺
在裝有1,4-二噁烷(40ml)及水(10ml)之RBF中攪拌(2-羥基-4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)胺甲醯基)苯基)酸(1.303g，4.00mmol)、(6R,8aS)-6-(1-溴-8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)六氫吲哚嗪-3(2H)-酮(1.00g，2.00mmol)、磷酸鉀(1.061g，5.00mmol)及Pd(pddf)Cl2(0.163g，0.200mmol)。在氮氣氛圍下將反應混合物脫氣三次，且在85℃下加熱2小時，LCMS顯示50%轉化。向反應物中添加更多酸(1.00g)且在85℃下攪拌隔夜。過濾反應混合物且濃縮獲得粗產物，其藉由Isco(80g濾芯，含3% MeOH(2N氨水)之二氯甲烷)純化，獲得所要產物4-(8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-羥基- N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(0.627g，44.7%)，LCMS顯示M+H為702。
步驟2：4-(8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-(2-甲氧基乙氧基)-N-(3-(三氟甲基)苯基)苯甲醯胺
向20ml樣品小瓶中裝入含4-(8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-羥基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(25mg，0.036mmol)、碳酸銫(0.072mmol)及1-溴-2-甲氧基乙烷(5mg，0.036mmol)之二噁烷(1mL)，攪拌混合物且在80℃油浴中加熱隔夜。反應混合物與4-(8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-(2-甲氧基乙氧基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(27mg，0.036mmol，100%產率)繼續用於下一步驟。LC-MS：C40H41F3N6O6，實驗值[M+H]+：760。
步驟3：4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-(2-甲氧基乙氧基)-N-(3-(三氟甲基)苯基)苯甲醯胺
向步驟2之反應混合物、4-(8-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-(2-甲氧基乙氧基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(27mg，0.036mmol)中添加TFA(5ml)及三乙基矽烷(0.057ml，0.355mmol)，且在90℃下攪拌混合物2小時。將混合物旋轉蒸發至乾燥，藉由急驟層析法(Isco，10% M、N/D)純化，獲得4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-(2-甲氧基乙氧基)-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺(16mg，0.026mmol，73.9%產率)。LC-MS：C31H31F3N6O4，實驗值[M+H]+ 610。
下表6中所述之實例使用針對實例115所述相同之化學品及相應中 間物藉由鈴木偶合反應製備。
Btk酶活性分析法
BTK酶活性用LANCE(鑭系元素螯合物激發，Lanthanide Chelate Excite)TR-FRET(時差式螢光共振能量轉移，Time-resolved fluorescence resonance energy transfer)分析法測定。在此分析法中，各化合物之效能(IC50)使用下文所述之程序自11點(1：3連續稀釋；分析中最終化合物濃度範圍為1μM至0.017nM)滴定曲線測定。向黑色非結合表面Corning 384孔微定量盤(Corning目錄號3820)之各孔中分配5nL化合物(10μL最終分析體積中2000倍稀釋液)，隨後添加7.5μL含有5.09pg/μL(66.67pM)BTK酶(來自桿狀病毒轉染之Sf9細胞的重組蛋白：全長BTK，6HIS-標籤裂解)之1×激酶緩衝液(50mM Hepes 7.5、10mM MgCl2、0.01% Brij-35、1mM EGTA、0.05% BSA及1mM DTT)。在60分鐘化合物及酶培育後，藉由添加2.5μL含有8μM生物素標記「A5」肽(生物素-EQEDEPEGDYFEWLE-NH2)(SEQ ID：1)及100μM ATP之1×激酶緩衝液起始各反應。各孔中之10μL最終反應物由50pM hBTK、2μM生物素-A5-肽及25μM ATP組成。磷酸化反應進行120分鐘。藉由添加20μL含有偵測試劑(0.626nM LANCE-Eu- W1024-抗磷基酪胺酸抗體，PerkinElmer及86.8nM抗生蛋白鏈菌素結合之Dylight 650,Dyomics/ThermoFisher Scientific)之1×淬滅緩衝液(15mM EDTA、25mM Hepes 7.3及0.1% Triton X-100)立即淬滅反應。用偵測試劑培育60分鐘後，使用標準TR-FRET方案在PerkinElmer EnVision板讀取器上讀取反應板。簡言之，用337nm之雷射光源激發供體分子(Eu-螯合劑：抗磷基抗體)產生可轉移至Dylight-650受體分子之能量，只要此供體：受體對極為貼近即可。量測665nm(受體)及615nm(供體)之螢光強度且計算各孔之TR-FRET比(受體強度/供體強度)。藉由TR-FRET比值與(Log10)化合物濃度之4參數穩健擬合測定IC50值。
下表7提供本文所述實例之特定IC 50 值。根據上述分析法測定下文所述之IC 50 值。
[ 3 H]腺苷攝取分析法
化合物亦在使用下文所述方案之腺苷攝取功能細胞分析法中進行篩選。腺苷攝取抑制分析法可用於識別可能具有心血管消極副作用之化合物。
藉由使用基於PMT之輻射偵測儀器監測氚化腺苷在HeLa細胞(ATCC目錄號CCL-2)中之累積來測定腺苷攝取活性。在此分析法中，各化合物之效能(IC50)使用下文所述之程序自10點(1：3連續稀釋；分析中最終化合物濃度範圍為10μM至0.032nM)滴定曲線測定。向96孔CytoStar-T閃爍微定量盤(Perkin Elmer目錄號RPNQ0163)之各孔中添加含25000個HeLa細胞之100μL生長培養基(包含初代細胞培養基(Life Technologies目錄號11095-080)+10%(v/v)胎牛血清(FBS；Sigma Aldrich目錄號F2442))。在37℃下，在具有5%(v/v)CO2之潮濕氛圍下培育此等細胞隔夜。此後，移除生長培養基且置換為40μL分析培養基(包含亨克平衡鹽溶液(Hanks balanced salts solution，HBSS；Thermo Fisher目錄號SH30268.01)+5%(v/v)FBS)。將DMSO中之化合物儲備溶液在分析培養基中稀釋至2.5倍最終化合物濃度，維持0.25%(v/v)之恆定DMSO濃度。將40μL含化合物之分析培養基分配至Cytostar-T板之個別孔中，且將板在環境實驗室條件下培育30分鐘。在此培育後，向分析培養基中添加20μL 500nM[3H]腺苷(American Radiolabeled Chemicals Inc.目錄號ART0287)且在環境實驗室條件下再培育60分鐘。接著使用Perkin Elmer Topcount NXT微定量盤讀取器測定放射性標記累積量。簡言之，HeLa細胞黏附於Cytostar-T板底部，將[3H]腺苷攝取至此等細胞中，使放射性標記足夠近以激發板底部之閃爍體。藉由單PMT時差式符合計數捕捉此等事件。藉由每秒計數值 與(Log10)化合物濃度之4參數穩健擬合測定IC50值。一些實例在此腺苷攝取抑制分析中之效能列於表8中。一些實例在此分析中之效能仍未測定(表示為「ND」)。
<110> 美商默沙東藥廠將 劉喬瑟夫 克斯洛斯基羅南德 M 金索巴哈納 巴布 博加高孝雷迪歐戴斯 古耶登俞文勝歐樂吉 B 沙耶丁銀島 高拉傑 安納德永安 余吳顥劉世嵐楊純道王宏健
<120> BTK抑制劑
<130> 23376-WO-PCT2
<150> PCT/CN2013/070876
<151> 2013-01-23
<160> 1
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 15
<212> PRT
<213> 生物素標記「A5」肽
<400> 1

Claims (24)

  1. 一種式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽， 其中：A1、A2、A3及A4獨立地為C、CH、CR11或N且雙環系統E-G係選自由以下組成之群： R11係獨立地選自由以下組成之群：a)氘，b)H，c)鹵素， d)氰基，e)C2H3，f)-COOH，g)-CO2(1-6C)烷基，h)-CO(1-6C)烷基，i)-CONH(1-6C)烷氧基，j)-CONH(1-6C)烷基，k)-CON二(1-6C)烷基，l)(1-6C)烷基，m)(3-7C)環烷基，n)(1-6C)烷氧基，o)芳基，p)(1-5C)雜芳基，q)(2-6C)烯基，r)(2-6C)炔基，及s)(4-7C)雜環烷基，R11視情況經一或多個選自以下之基團取代：鹵素、(1-6C)烷基、(1-5C)烷氧基、羥基或側氧基(oxo)；R12獨立地選自由以下組成之群：H、(1-3C)烷基、(1-3C)烷基NHC(O)、(1-3C)烷基OC(O)及(1-3C)烷基C(O)；R13係獨立地選自由以下組成之群：H及(1-4C)烷氧基；其中在芳族環K中B1為N或C(R7)；B2為N或C(R8)；B3為N或C(R9)；B4為N或C(R10)； R7為H、鹵素、OH、(1-3C)烷基、(1-6C)烷氧基、(3-6C)環烷氧基、(1-5C)雜環烷氧基、鹵基(1-3C)烷基或CN；其中R7可視情況經一個、兩個或三個鹵素、OH、(2-4C)炔基、-C(O)NH2、-C(O)OH或-C(O)(1-4C)烷基取代；R8為H、鹵素、OH、(1-3C)烷基、(1-6C)烷氧基、(3-6C)環烷氧基、(1-5C)雜環烷氧基、鹵基(1-3C)烷基或CN；其中R8可視情況經一個、兩個或三個鹵素、OH、(2-4C)炔基、-C(O)NH2、-C(O)OH或-C(O)(1-4C)烷基取代；R9為H、鹵素、OH、(1-3C)烷基、(1-6C)烷氧基、(3-6C)環烷氧基、(1-5C)雜環烷氧基、鹵基(1-3C)烷基或CN；其中R9可視情況經一個、兩個或三個鹵素、OH、(2-4C)炔基、-C(O)NH2、-C(O)OH或-C(O)(1-4C)烷基取代；R10為H、鹵素、OH、(1-3C)烷基、(1-6C)烷氧基、(3-6C)環烷氧基、(1-5C)雜環烷氧基、鹵基(1-3C)烷基或CN；其中R10可視情況經一個、兩個或三個鹵素、OH、(2-4C)炔基、-C(O)NH2、-C(O)OH或-C(O)(1-4C)烷基取代；其中在雜芳族環L中W為CH、N或S；X為C(R6a)、N、O或S；Y為C(R6)、N(R6b)、O或S；Z為C(R6a)、N或一鍵；R5為H、鹵素、氰基、(1-4C)烷基、(1-5C)烷氧基、(3-6C)環烷基、(3-6C)環烷氧基或-C(O)O(1-3C)烷基；其中R5可視情況經一個、兩個或三個鹵素、OH或(1-3C)烷氧基取代；或R5為芳基、(1-5C)雜芳基或(2-6C)雜環烷基，其中R5可視情況經鹵素、(1-6C)烷基或(1-3C)烷氧基取代； R6為H、鹵素、氰基、(1-6C)烷基或(1-6C)烷氧基；其中R6可視情況經一個、兩個或三個鹵素或氰基取代；R6a為H、(1-4C)烷基或(3-6C)環烷基；R6b為H、(1-3C)烷基、(3-6C)環烷基或-C(O)O(1-4C)烷基；或R5與R6一起可形成碳環或雜環5員至6員環，且視情況為不飽和環或芳族環；或R5與R6一起可形成(3-7C)環烯基或(2-6C)雜環烯基；各視情況經(1-3C)烷基或經一或多個鹵素取代；Q為C=O、C(Rf)2或C=N(Rh)；T為C(Re)2、O、NRe或一鍵；U為C(Rd)2、O或NRd；V為C(Rg)2、O或一鍵；Rc、Rd、Re及Rf各獨立地選自H、鹵素、(1-6C)烷基、羥基、(1-6C)烯基或-C(O)Rz，其中Rz係獨立地選自(1-5C)雜芳基、芳基及羥基，Rc、Rd、Re或Rf之任何烷基可視情況經羥基、-C(O)(1-3C)烷氧基或-C(O)OH取代；Rg係獨立地選自H、鹵素、(1-6C)烷基、(1-6C)烷氧基、鹵基(1-6C)烷基或羥基；Rh係獨立地選自H或CN；限制條件為：1)X、Y及Z中多至2個原子可同時為雜原子；2)當選自X或Y之一個原子為O或S時，則Z為一鍵且選自X或Y之另一原子不可為O或S；3)當Z為CH或N時，則Y為C(R6)或N且X為CH或N；4)在環K中，B1、B2、B3及B4中多至兩者可為N；5)當Q為C(Rf)2時，則T為C(Re)2； 6)當T為NRe時，則Re不為鹵素；及7)當U為NRd時，則Rd不為鹵素。
  2. 一種式II化合物或其醫藥學上可接受之鹽， 其中：A1、A2、A3及A4獨立地為C、CH、CR11或N且雙環系統E-G係選自由以下組成之群： R11係獨立地選自由以下組成之群：a)氘，b)H，c)鹵素， d)氰基，e)C2H3，f)-COOH，g)-CO2(1-6C)烷基，h)-CO(1-6C)烷基，i)-CONH(1-6C)烷氧基，j)-CONH(1-6C)烷基，k)-CON二(1-6C)烷基，l)(1-6C)烷基，m)(3-7C)環烷基，n)(1-6C)烷氧基，o)(6-10C)芳基，p)(1-5C)雜芳基，q)(2-6C)烯基，r)(2-6C)炔基，及s)(4-7C)雜環烷基，R11視情況經一或多個選自以下之基團取代：鹵素、(1-6C)烷基、(1-5C)烷氧基、羥基或側氧基；R12獨立地選自由以下組成之群：H、(1-3C)烷基、(1-3C)烷基NHC(O)及(1-3C)烷基OC(O)；其中在芳族環K中B1為N或C(R7)；B2為N或C(R8)；B3為N或C(R9)；B4為N或C(R10)；R7為H、鹵素、OH、(1-3C)烷基、(1-3C)烷氧基或鹵基(1- 3C)烷基、CN；任何烷氧基可視情況經一個、兩個或三個鹵素取代；R8為H、鹵素、OH、(1-3C)烷基、(1-3C)烷氧基或鹵基(1-3C)烷基、CN；任何烷氧基可視情況經一個、兩個或三個鹵素取代；R9為H、鹵素、OH、(1-3C)烷基、(1-3C)烷氧基或鹵基(1-3C)烷基、CN；任何烷氧基可視情況經一個、兩個或三個鹵素取代；R10為H、鹵素、OH、(1-3C)烷基、(1-3C)烷氧基或鹵基(1-3C)烷基、CN；任何烷氧基可視情況經一個、兩個或三個鹵素取代；其中在雜芳族環L中W為CH或N；X為CH、N、O或S；Y為C(R6)、N、O或S；Z為CH、N或一鍵；R5為H、鹵素、氰基、(1-4C)烷基、(1-5C)烷氧基、(3-6C)環烷基或(3-6C)環烷氧基；R5之任何烷基、烷氧基、環烷基或環烷氧基可視情況經一個、兩個或三個鹵素取代；或R5為(6-10C)芳基、(1-5C)雜芳基或(2-6C)雜環烷基，其中該芳基或雜環烷基可視情況經鹵素、(1-6C)烷基、(1-3C)烷氧基取代；R6為H、鹵素、氰基、(1-6C)烷基或(1-6C)烷氧基，R6之任何烷基或烷氧基可視情況經一個、兩個或三個鹵素或氰基取代；或R5與R6一起可形成碳環或雜環5員至6員環，且視情況為不飽和環或芳族環；或R5與R6一起可形成(3-7C)環烯基或(2-6C) 雜環烯基；各視情況經(1-3C)烷基或經一或多個鹵素取代；Q為C=O或C(Rf)2；T為C(Re)2、O、NRe或一鍵；U為C(Rd)2、O或NRd；V為C(Rg)2、O或一鍵；Rc、Rd、Re及Rf各獨立地選自H、鹵素、(1-6C)烷基及羥基；Rc、Rd、Re或Rf之任何烷基可視情況經羥基取代；Rg係獨立地選自H、鹵素、(1-6C)烷基、(1-6C)烷氧基、鹵基(1-6C)烷基及羥基；限制條件為：1)X、Y及Z中多至2個原子可同時為雜原子；2)當選自X或Y之一個原子為O或S時，則Z為一鍵且選自X或Y之另一原子不可為O或S；3)當Z為CH或N時，則Y為C(R6)或N且X為C或N；4)在環K中，B1、B2、B3及B4中多至兩者可為N；及5)當Q為C(Rf)2時，則T為C(Re)2。
  3. 如請求項1之化合物，其中環K定義為：B1為C(R7)，B2為C(R8)，B3為C(R9)且B4為C(R10)；或B1為N，B2為N，B3為C(R9)且B4為C(R10)；或B1為N，B2為C(R8)，B3為N且B4為C(R10)；或B1為N，B2為C(R8)，B3為C(R9)且B4為N；或B1為C(R7)，B2為C(R8)，B3為N且B4為N；或B1為C(R7)，B2為N，B3為C(R9)且B4為N。
  4. 如請求項3之化合物，其中環K定義為：B1為C(R7)，B2為C(R8)，B3為C(R9)且B4為C(R10)，且其中R7、R8、R9及R10各為H、鹵素、(1-3C)烷基、(1-3C)烷氧基或鹵基(1-3C)烷基；任何烷氧基 可視情況經一個、兩個或三個鹵素取代。
  5. 如請求項1之化合物，其中環L係選自由以下組成之群：苯基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、三嗪基、噻唑基、噁唑基、異噁唑基、吡唑基、咪唑基、噻二唑基及異噻唑基。
  6. 如請求項5之化合物，其中該環系統L係選自由以下組成之群：
  7. 如請求項5之化合物，其中環L為吡啶基。
  8. 如請求項1之化合物，其中R5係選自由以下組成之群：氫、氟、氯、CN、環丙基、環丁基、氧雜環丁烷基、(1-3C)烷基、(1-5C)烷氧基及(1-5C)環烷氧基；其中該烷基、烷氧基、環烷基及環烷氧基視情況經一或多個鹵素取代。
  9. 如請求項8之化合物，其中R5係選自由以下組成之群：氫、氟、甲基、乙基、丙基、環丙基、環丁基、環丙氧基及三氟甲基。
  10. 如請求項1之化合物，其中R11係選自由以下組成之群：H、2H、F、Cl、Br、甲基、C2H3、乙基、環丙基及乙烯基。
  11. 如請求項10之化合物，其中R11為H、F或Cl。
  12. 如請求項1之化合物，其中雙環系統E-G係選自由以下組成之群：
  13. 如請求項12之化合物，其中雙環系統E-G為
  14. 如請求項1之化合物，其選自由以下組成之群：4-{8-胺基-3-[(6S,8aS)-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aR)-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-2-甲基-3-側氧基八氫咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(環丙氧基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-吡啶-2-基苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6S,8aR)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丁基吡啶-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(5-甲基-1,3-噻唑-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6S,8aR)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-吡啶-2-基苯甲醯胺； 4-{8-胺基-3-[(6S,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aR)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6S,8aR)-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(二氟甲基)吡啶-2-基]-3-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-氰基吡啶-2-基)-3-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)-3-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(二氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-乙基吡啶-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)嘧啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(1,1-二氟乙基)吡啶-2-基]-3-氟苯甲醯胺； 4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-2-甲基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氟-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-2-氟-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(1,1-二氟乙基)吡啶-2-基]-2-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(二氟甲基)吡啶-2-基]-2-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)-2-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)-2-甲基苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(3-氟氧雜環丁烷-3-基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(1-氟-1-甲基乙基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1R,6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氟-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1R,6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)-3-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1S,6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氟-N-[4-(三氟甲基) 吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-氰基吡啶-2-基)-2-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-氰基吡啶-2-基)-3-甲氧基苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-氰基吡啶-2-基)-2-甲基苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1S,6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)-3-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)-3-甲氧基苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7R,9aS)-4-側氧基八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氟-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7R,9aS)-4-側氧基八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7S,9aR)-4-側氧基八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-2-氯-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(環丙氧基)吡啶-2-基]-3-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(3S,9aS)-6-側氧基八氫-2H-喹嗪-3-基]咪唑并 [1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氟-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(3R,9aR)-6-側氧基八氫-2H-喹嗪-3-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氟-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1S,6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1R,6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1S,6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1R,6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7R,9aS)-2-甲基-4-側氧基八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7S,9aR)-2-甲基-4-側氧基八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-1,1-二甲基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1R,6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2- 基)-3-甲氧基苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7R,9aR)-4-側氧基八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7R,9aS)-八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7S,9aR)-八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7S,9aS)-4-側氧基八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(2S,6S,8aR)-2-羥基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(2R,6R,8aS)-2-羥基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-(甲基胺基)-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-[(乙基胺甲醯基)胺基]-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1R,6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1S,6R,8aR)-1-甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1S,6R,8aR)-1-甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺； 4-{8-胺基-3-[(1R,6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7R,9aS)-2-(2-羥基乙基)-4-側氧基八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(2R,6S,8aR)-2-羥基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(2S,6R,8aS)-2-羥基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(苯甲基氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(二氟甲氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(2S,6R,8aR)-2-羥基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(2R,6S,8aS)-2-羥基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(2R,6S,8aS)-2-羥基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(2S,6R,8aR)-2-羥基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aR)-3-側氧基四氫-1H-[1,3]噁唑并[4,3-c] [1,4]噁嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(3R,7R,9aS)-3-甲基-4-側氧基八氫吡啶并[2,1-c][1,4]噁嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(3E,6R,8aS)-3-(氰基亞胺基)八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；{3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]-1-(4-{[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]胺甲醯基}苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-8-基}胺基甲酸甲酯；4-{8-胺基-3-[(7R,9aS)-2-乙基-4-側氧基八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7R,9aS)-2-(1-甲基乙基)-4-側氧基八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；{(7R,9aS)-7-[8-胺基-1-(4-{[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]胺甲醯基}苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基]-4-側氧基八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2-基}乙酸甲酯；4-{8-胺基-3-[(4aS,7R)-2-甲基-1-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(4aR,7S)-2-甲基-1-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7R,9aS)-4-側氧基-2-(吡啶-4-基羰基)八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4- (三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；2-{(7R,9aS)-7-[8-胺基-1-(4-{[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]胺甲醯基}苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基]-4-側氧基八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2-基}-2-甲基丙酸；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1R,6R,8aS)-1-甲基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-1,1-二甲基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(3R,8aR)-6-側氧基六氫-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-3-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(4aS,7R)-1-側氧基六氫-3H-吡啶并[1,2-c][1,3]噁嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(4aR,7S)-1-側氧基六氫-3H-吡啶并[1,2-c][1,3]噁嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6S,8aR)-2,2-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-2,2-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基] 咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1S,6R,8aS)-3-亞胺基-1-甲基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(1-羥基乙基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(1-羥基-1-甲基乙基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(1-甲氧基乙基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-2,2-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6S,8aR)-2,2-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7R,9aS)-4-側氧基-2-(吡啶-4-基羰基)八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；2-{[(4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}苯基)羰基]胺基}吡啶-4-甲酸甲酯；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[5-(三氟甲基)噠嗪-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(7R,9aS)-4-側氧基-2-(苯基羰基)八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺； 4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-異喹啉-3-基苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(3R,8aR)-6-側氧基六氫-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-3-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；{(7R,9aS)-7-[8-胺基-1-(4-{[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]胺甲醯基}苯基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基]-4-側氧基八氫-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2-基}乙酸；4-{8-胺基-3-[(1S,6R,8aS)-1-乙烯基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(1R,6R,8aS)-1-乙烯基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(4aR,7R)-2-甲基-1-側氧基八氫-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-7-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氯-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-2,2-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(1,1-二氟乙基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并 [1,5-a]吡嗪-1-基}-5-乙氧基-2-氟-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-[(~2~H_3_)甲氧基]-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[5-氰基-4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-羥基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；5-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]吡啶-2-甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[6-甲基-4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(環丙氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[3-甲基-4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氰基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N~1~-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯-1,3-二甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[6-(1-甲基乙基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5- a]吡嗪-1-基}-N-[6-環丁基-4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；2-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-5-{[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]胺甲醯基}苯甲酸；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(6-甲氧基吡啶-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-2-氟-5-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-2-氟-5-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-5-乙氧基-2-氟-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氟-5-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺； 4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)-5-乙氧基-2-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)-5-乙氧基-2-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(環己氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(1-甲基乙氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(環丁氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(環戊氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(2,2-二甲基丙氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(環丙氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺； 4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(環丙氧基)-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(環丙氧基)-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(環丙氧基)-N-(4-環丙基吡啶-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(環丙氧基)-N-(4-環丙基吡啶-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(氮雜環丁烷-3-基氧基)-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-5-(環丙氧基)-2-氟-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-5-乙氧基-2-氟-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-5-乙氧基-2-氟-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并 [1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(5-甲基-1,3-噻唑-2-基)苯甲醯胺；乙酸2-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-5-{[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]胺甲醯基}苯酯；4-{8-(乙醯基胺基)-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-羥基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-羥基-N-(2-甲氧基乙基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-(5-甲基-1,3-噻唑-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-(5-甲基-1,3-噻唑-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氟-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氟-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氟-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氟-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氟-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-(5-甲基-1,3-噻唑-2-基)苯甲醯胺； 4-{8-胺基-5-氟-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-羥基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氟-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氟-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氟-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)-3-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氟-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氟-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-5-乙氧基-2-氟-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-1H-咪唑-2-基苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[5-(三氟甲基)異噁唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[3-(三氟甲基)異噁唑-5-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(1,5-二甲基-1H-吡唑-3-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5- a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(3-乙基-1,2,4-噻二唑-5-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[3-(1-甲基乙基)-1,2,4-噻二唑-5-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[1-環戊基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(5-環丙基-1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；2-{[(4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}苯基)羰基]胺基}-4-(三氟甲基)-1,3-噁唑-5-甲酸乙酯；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[1-乙基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲基-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5- a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氯-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氯-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-5-氯-2-氟-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-5-氯-2-氟-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氯-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氯-N-(5-甲基-1,3-噻唑-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氯-N-(5-甲基-1,3-噻唑-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-2-氟-5-甲基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5- a]吡嗪-1-基}-2-氟-5-甲基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(2-甲氧基乙氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(2-羥基乙氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(2-乙氧基乙氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-(5-甲基-1,3-噻唑-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-(5-甲基-1,3-噻唑-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(丁-3-炔-1-基氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-甲基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]-5-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-乙基吡啶-2-基)-3-甲氧基苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并 [1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-(4-甲氧基吡啶-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丁基吡啶-2-基)-3-甲氧基苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-(5-甲基吡啶-2-基)苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]-5-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氯-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]-5-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-(4-環丙基吡啶-2-基)-3-氟苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]-5-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氟-5-甲基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]-5-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-(1,1-二氟乙氧基)-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氟-5-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并 [1,5-a]吡嗪-1-基}-2-氯-5-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-2,2-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氟-5-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氟-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氟-5-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-(8-胺基-5-氟-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-乙氧基-5-氟-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺；4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-1,1-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-乙氧基-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺；及4-(8-胺基-3-((6R,8aS)-1,1-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-乙氧基-5-氟-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺。
  15. 如請求項1之化合物，其選自由以下組成之群：4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-1,1-二甲基-3-側氧基六氫[1,3]噁唑并[3,4-a]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6S,8aR)-2,2-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基] 咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-2,2-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-2,2-二甲基-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-5-乙氧基-2-氟-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-氟-5-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氯-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-甲氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；4-{8-胺基-5-氟-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯 胺；4-{8-胺基-3-[(6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基]-5-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基}-3-乙氧基-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]苯甲醯胺；及4-(8-胺基-5-氟-3-((6R,8aS)-3-側氧基八氫吲哚嗪-6-基)咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-基)-3-乙氧基-5-氟-N-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲醯胺。
  16. 如請求項1之化合物，其具有式1e 或其醫藥學上可接受之鹽。
  17. 如請求項16之化合物，或其醫藥學上可接受之鹽，其中R7、R8、R9及R10係獨立地選自H、鹵素或(1-3C)烷氧基；R11為H、鹵素或(1-3C)烷基，其中該烷基視情況經一個、兩個或三個鹵素取代；Rc為H或CH3；及Rd為H或CH3。
  18. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療布魯 頓氏酪胺酸激酶(Bruton's Tyrosine Kinase，Btk)介導之病症。
  19. 一種如請求項1之式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其用於製造用以治療布魯頓氏酪胺酸激酶(Btk)介導之病症之藥物。
  20. 如請求項19之用途，其中該Btk介導之病症係選自由以下組成之群：類風濕性關節炎、牛皮癬性關節炎、感染性關節炎、進行性慢性關節炎、變形性關節炎、骨關節炎、創傷性關節炎、痛風性關節炎、萊特氏症候群(Reiter's syndrome)、多軟骨炎、急性滑膜炎及脊椎炎、絲球體腎炎(具有或不具有腎病症候群)、自體免疫性血液病、溶血性貧血、再生障礙性貧血、自發性血小板減少及嗜中性白血球缺乏症、自體免疫性胃炎及自體免疫性發炎性腸病、潰瘍性結腸炎、克羅恩氏病(Crohn's disease)、宿主抗移植物疾病、同種異體移植排斥、慢性甲狀腺炎、格雷夫斯病(Graves' disease)、硬皮病、糖尿病(I型及II型)、活動性肝炎(急性及慢性)、胰臟炎、原發性膽汁性肝硬化症、重症肌無力、多發性硬化症、全身性紅斑狼瘡、牛皮癬、異位性皮炎、接觸性皮炎、濕疹、皮膚曬傷、血管炎(例如貝賽特氏病(Behcet's disease))、慢性腎功能不全、史蒂芬-約翰遜症候群(Stevens-Johnson syndrome)、發炎性疼痛、特發性脂肪瀉(sprue)、惡病質、肉狀瘤病、格-巴二氏徵候群(Guillain-Barré syndrome)、葡萄膜炎、結膜炎、角膜結膜炎、中耳炎、牙周病、肺間質纖維化、哮喘、支氣管炎、鼻炎、竇炎、肺塵埃沈著症、肺功能不全症候群、肺氣腫、肺纖維化、矽肺病、慢性發炎性肺病及慢性阻塞性肺病。
  21. 如請求項20之用途，其中該Btk介導之病症為類風濕性關節炎、牛皮癬性關節炎或骨關節炎。
  22. 一種醫藥組合物，其包含如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及一或多種醫藥學上可接受之賦形劑。
  23. 如請求項22之醫藥組合物，其進一步包含至少一種其他治療活性劑。
  24. 如請求項23之醫藥組合物，其中該其他治療活性劑為抗發炎劑、免疫抑制劑或化學治療劑。
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