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TW201138819A - Anti-angiogenesis therapy for the treatment of ovarian cancer - Google Patents

Anti-angiogenesis therapy for the treatment of ovarian cancer Download PDF

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TW201138819A
TW201138819A TW100105846A TW100105846A TW201138819A TW 201138819 A TW201138819 A TW 201138819A TW 100105846 A TW100105846 A TW 100105846A TW 100105846 A TW100105846 A TW 100105846A TW 201138819 A TW201138819 A TW 201138819A
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cancer
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Inventor
Jakob Dupont
Cornelia Irl
Original Assignee
Genentech Inc
Hoffmann La Roche
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Description

201138819 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明大體係關於人類疾病及病理病狀之治療。更特定 而言，本發明係關於單獨或與其他抗癌療法組合用於治療 卵巢癌之抗血管新生療法。 本申請案主張2011年2月4曰申請之美國臨時申請案第 61/43 9,819號、2010年6月30曰申請之美國臨時申請案第 61/3 60,059號、2010年6月3日申請之美國臨時申請案第 61/3 51,231號及2010年2月23日申請之美國臨時申請案第 61/3 07,09 5號的優先權及權益’其說明書以全文引用之方 式併入本文中。 【先前技術】 癌症仍為對人類健康的最致命威脅之一。在美國，每年 有將近130萬新患者患上癌症’且其為繼心臟病之後的第 二主要死亡原因，每4例死亡中約佔1例。對於罹患卵巢癌 及腹膜癌之女性，在初始手術診斷、分期以及細胞減量術 (cytoreduction)後，對於罹患晚期上皮卵巢癌及腹膜原發 癌之女性的標準主要全身性化學療法由以下組成：以鉑與 紫杉烧組合（通常為卡# (carboplatin)與太平洋紫杉醇 (paclitaxel))進行之化學療法。參見例如McGuire WP等 A * Cyclophosphamide and cisplatin compared with paclitaxel and cisplatin in patients with stage III and stage IV ovarian cancer. N Eng J Med 334:1-6，1996 ; Piccart MJ等人， Randomized intergroup trial of cisplatin-paclitaxel versus 154268.doc 201138819 cisplatin-cyclophosphamide in women with advanced epithelial ovarian cancer: three-year results. J Natl Cancer Inst 92:699-708, 20003 ； Alberts DS^ A 5 Improved therapeutic index of carboplatin plus cyclophosphamide versus cisplatin plus cyclophosphamide: final report by the Southwest Oncology Group of a phase III randomized trial in stages III and IV ovarian cancer. J Clin Oncol 10:706-17, 1992 ; du Bois A 等人，d randomized clinical trial of cis plat in/pac lit axel versus carboplatin/paclitaxel as first-line treatment of ovarian cancer. J Natl Cancer Inst Sep.3;95.(17):1320.-9. 95:1320，2003 ; Ozols RF等人， Phase III trial of carboplatin and paclitaxel compared with cisplatin and paclitaxel in patients with optimally resected stage III ovarian cancer: a Gynecologic Oncology Group study. J Clin Oncol 21:3194-200，2003 ;及 Swenerton K 等人，Cisplatin-cyclophosphamide versus carboplatin-cyclophosphamide in advanced ovarian cancer: a randomized phase III study of the National Cancer Institute of Canada C/i«z.ca/ 7Wa/i Grow/?· J Clin Oncol 10:718-26，1992。雖然 美國在患者管理方面已取得進展，但對於所有診斷出之婦 科惡性病而言，此疾病仍有高病例死亡率（fatality to case ratio)。據估計，在2004年，已診斷出25,580例新病例且 16,090名女性死於該疾病。#名#/如Jemal A等人，Cawcer CA Cancer J Clin 54:8-29, 2004。主要治 154268.doc -4- 201138819 療策略需要加以改良。 血管新生為重要細胞事件，其中血管内皮細胞增殖、修 剪（prune)及改組以自先前存在之血管網狀結構形成新血 管。存在以下極有說服力的證據：血管供應之形成對正常 及病理增殖過程而言必不可少（Folkman及Klagsbrun 235:442-447(1987))。氧及營養素之傳遞以及分解 代謝產物之移除在多細胞生物體中發生之大部分生長過程 中表示限速步驟。 雖然誘導新血管被認為是腫瘤血管新生之主要方式，但 新近資料指示一些腫瘤可藉由徵用（co-opt)現存宿主無管 來生長。所徵用之血管結構隨後退化，導致腫瘤退化，該 腫瘤退化最終由在腫瘤邊緣處缺氧誘導之血管新生所逆 轉。Holash等人，284:1994-1998 (1999)。 正常及異常血管新生之一種關鍵正調節劑為血管内皮生 長因子（VEGF)-A。VEGF-A屬於包括 VEGF-B、VEGF-C、 VEGF-D、VEGF-E、VEGF-F 及 P1GF之基因家族。VEGF-A 主要結合至兩種高親和力受體酪胺酸激酶（即VEGFR-l(Flt-l)及 VEGFR-2(Flk-l/KDR))上，後者為 VEGF-A 之血 管内皮細胞促有絲分裂信號之主要傳遞素。另外，神經菌 毛素-1已識別為肝素結合性VEGF-A同功異型物之受體且 可在血管形成中起作用。 VEGF除作為血管新生及血管發生中之血管新生因子之 外亦作為多效性生長因子在其他生理過程中展現多重生物 效應，諸如内皮細胞存活、血·管滲透性及血管擴張、單核 154268.doc 201138819 細胞趨化性及飼流入。Ferrara及Davis-Smyth( 1997)(同 上）。此外，研究已報導VEGF對少數非内皮細胞類型（諸如 視網膜色素上皮細胞、胰管細胞及施旺氏細胞（Schwann cell))有促有絲分裂作用。Guerrin等人，J. Cell Physiol. 164:385-394 (1995) ; Oberg-Welsh 等人，Mol. Cell.
Endocrinol. 126:125-132 (1997) ; Sondell 等人，j.
Neurosci. 19:5731-5740 (1999)。VEGF表現在大部分惡性 病中上調且VEGF之過度表現常與許多實體腫瘤之較晚期 階段及較不良預後相關。 由於卵巢癌仍為最致命的威脅之一，所以需要用於患者 之額外癌症治療。本發明解決此等及其他需要，如將在對 下列揭示内容進行評述之後所顯而易見。 【發明内容】 提供抗VEGF拮抗劑用於治療卵巢癌之用途。舉例而 言’提供抗VEGF抗體有效治療罹患新近診斷出、先前未 經治療之卵巢癌、輸卵管癌或原發性腹膜癌或鉑敏感性復 發性（或先前經治療）卵巢癌 '原發性腹膜癌或輸卵管癌的 用途。提供來自貝伐單抗（bevacizumab)(AVASTIN®)與化 學療法方案組合治療罹患新近診斷出、先前未經治療之 期（經次最佳及宏觀最佳減積術（debulk))及IV期上皮卵巢 癌、原發性腹膜癌或輸卵管癌之個體（例如女性）的隨機化 ΠΙ期臨床試驗的資料（實例丨）^亦提供來自貝伐單抗 (AVASTIN®)與化學療法方案組合治療罹患新近診斷出、 具有高風險之I期及Ila期（3級或僅透明細胞癌）及Ilb-IV期 154268.doc 201138819 上皮卵巢癌、輸卵管癌或原發性腹膜癌之個體（例如女性） 之隨機化III期臨床試驗的資料’該等個體已進行初始手術 且在疾病惡化之前不會考慮行細胞減量手術（實例2) β亦提 供來自安慰劑對照、隨機化、多甲心ΠΙ期研究的資料，該 研究評估貝伐單抗（15 mg/kg，第1天，每21天一次）與卡鉑 (曲線下面積[AUC]4，第1天，每21天一次）及吉西他濱 (gemcitabine)(l〇〇〇 mg/m2’ 第 1天及第 8 天，每 21 天一次） 組合投藥對罹患鉑敏感性復發性上皮卵巢癌、原發性腹膜 癌或輸卵管癌之女性的功效及安全性（實例3) ^該等化學療 法方案包括紫杉烷療法（例如太平洋紫杉醇或多烯紫杉醇 (docetaxel))、基於翻之化學療法（例如卡麵）或吉西他濱及 其組合。該等試驗之成果展示提供抗VEGF抗體（例如貝伐 早抗）在與化學療法組合且繼續作為維持療法時可向卵巢 癌患者提供具統計顯著性及臨床意義之益處。 在同步及維持治療中使用貝伐單抗治療罹患先前未經治 療及復發性印巢癌之人類個體的臨床研究中所獲得之結果 展不如由無惡化存活期（PFS)所評估之功效尤其在與以化 學治療劑單獨進行之治療的pFS資料相比時為正性的。在 6»床3式驗中於同步治療中接受貝伐單抗與紫杉烧療法（例 如太平洋紫杉醇或多烯紫杉醇）及基於鉑之化學療法（例如 卡、）或基於鉑之化學療法（例如卡鉑）及吉西他濱之組合以 及接受貝伐單技^hi 之維持療法的個體相較於經紫杉院療法 (例如太平洋紫杉醇或多烯紫杉醇）及基㈣自之化學療法（例 卡自）單獨或基於麵之化學療法（例如卡鉑）及吉西他濱單 154268.doc 201138819 獨治療之個體而言無惡化存活期延長β 因此’本發明提m錢患有先前未n療或復發性 卵巢癌之患者的方法，纟包含使患者接受如下治療方案· 將至少-種化學療法與有效量之抗VEGF抗體投藥組合， 且接著投與抗VEGF抗體用於維持療法，其中在該治療 下’患者之無惡化存活期延長。將化學療法與抗〃卿投 藥組合且接著投與抗贿維持療法之治療方案有效延長 患者之無惡化存活期（PFS)。 在某些貫施例中，PFS相較於對
…、π κ π i徊月.丄“，|1SJ 月、2個月、2.9個月、3個月、3 8個月、4個月、6個月、7 個月、8個月、9個月、4、約2年、約3年等。在一實施 财’PFS(例如，在將化學療法與抗vegf投藥組合且接 者投與抗VEGF維持療法之治療方案下）相較於對照延長約 2.9個月至3.8個月。在一實施例中，㈣(例如，在將化學 療法與抗VEGF投藥組合且接著投與抗乂咖維持療法之治 療方案下）相較於對照延長至少約38個月。在另一實施^ 中，如，在將化學療法與抗VEGF^藥組合且接著 投與抗VEGF維持療法之治療方案下）相較於對照延長約2·3 :在，實施例巾，(例如’在將化學療法與抗 VE叫樂組合且接著投與^egf維持療法之治療方案 下）相較於對照延長約6個月。 ’、八 根據本發明可使用展現抗癌活性之任何化學治療劑。在 =實施例中，化學治療劑係選自由以下組成之群·院基 劑、抗代謝物、葉酸類似物、㈣類似物1吟類似物 154268.doc 201138819 及相關抑制劑、長春花（vinea)生物驗、表鬼臼毒素、抗生 素、L-天冬酿胺酶、拓撲異構酶抑制劑、干擾素、始配位 錯合物、紫杉燒、經蒽二酮取代之腺、甲基肼射物、腎 上腺皮質抑制劑、腎上腺類固醇、孕酮、雌激素、抗雖激 素劑、雄激素、抗雄激素劑、吉西他濱及促性腺激素釋放 激素類似物。在某些實施例中，化學治療劑為例如紫杉 烧、太平洋紫杉醇、多烯紫杉醇、太平洋紫杉醇蛋白結合 粒子（例如Abraxane®)、吉西他濱、鉑類似物、卡鉑或其 組合。兩種或兩種以上化學治療劑可以混合液（e〇cktaii)形 式用於與抗VEGF抗體投藥組合投與，例如紫杉烷及鉑類 似物或吉西他濱及鉑類似物。在一實施例中，其為卡鉑及 太平洋紫杉醇。在一實施例中，其為卡鉑及多烯紫杉醇。 在另一實施例中，其為吉西他濱及卡鉑。 本發明治療之臨床益處可由例如無惡化存活期（PFS)之 持續時間、至治療失敗為止之時間、客觀反應率及反應持 續時間來量測。 亦提供套組。在一實施例中，提供用於治療人類患者之 先前未經治療之卵巢癌的套組，其包含含抗VEGf抗體組 合物之包裝及用於將抗VEGF抗體組合物與紫杉烧療法及 卡始組合使用繼而進行抗VEGF維持療法之說明，其中該 專說明敍述接受紫杉烧療法及卡銘療法與貝伐單抗之串者 的無惡化存活期為14.1個月，風險比為〇 717(p值 <0.0001)。在另一實施例中，提供用於治療人類患者之先 前未經治療之卵巢癌的套組，其包含含抗VEgF抗體組合 154268.doc 201138819 物之包裝及用於將抗VEGF抗體組合物與太平洋紫杉醇及 卡鉑組合使用繼而進行抗VEGF維持療法之說明，其中該 等說明敍述接受太平洋紫杉醇、卡鉑及抗VEGF抗體之患 者的無惡化存活期為18.3個月，風險比為0.79。在某些實 施例中，套組包含抗VEGF抗體，該抗VEGF抗體具有包含 下列胺基酸序列之重鏈可變區： EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASGYTFT NYGMNWVRQA PGKGLEWVGW INTYTGEPTYAADFKRRFTF SLDTSKSTAY LQMNSLRAED TAVYYCAKYP HYYGSSHWYF DVWGQGTLVT VSS (SEQ ID No. 1) 及包含下列胺基酸序列之輕鏈可變區： DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCSASQDIS NYLNWYQQKP GKAPKVLIYF TSSLHSGVPS RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ YSTVPWTFGQ GTKVEIKR (SEQ ID No. 2)。在某些實施例中，套組中的抗VEGF 抗體為貝伐單抗。在某些實施例中，套組係用於具有III期 或IV期卵巢癌之患者。 因此，本發明之特徵為藉由提供說明指導罹患例如卵巢 癌之人類個體接受抗VEGF抗體之治療以便延長該個體之 無惡化存活期、降低該個體癌症復發風險或提高該個體存 活可能性的方法。在一些實施例中，該方法進一步包含提 供接受至少一種化學治療劑之治療的說明。在一些實施例 中，該方法進一步包含提供接受至少兩種化學治療劑之治 療的說明。在某些實施例中，抗VEGF抗體之治療與化學 治療劑之治療同步及依序進行。在某些實施例中，如由指 導方法所指示治療個體。 154268.doc 201138819 其包含推廣抗VEGF抗體 本發明亦提供一種推廣方法 之投與以用於治療人類個體之例如印巢癌。在—些實施例 中’該方法進-步包含推廣至少—種化學治療劑之投與。 在本發明之某些實施例中，投與抗乂咖抗體與投與化學 治療劑同步及依序進行。可藉由任何可利用之方式進行推 廣。在-些實施例中，推廣係藉由抗赠抗體之市售調 配物附帶的藥品說明書來達成。推廣亦可藉由化學治療劑 之市售調配物附帶的藥品說明書來達成。推廣可藉由與醫 師或健康照護提供者進行書面或口頭交流來達成。在一些 實施例中，推廣係藉由藥品說明書來達成，其中包裝說明 書提供接受抗VEGF抗體與至少一種化學治療劑之同步療 法及抗VEGF抗體之維持療法的說明。在一些實施例中 推廣之後用抗VEGF抗體及一或多種化學治療劑治療個 體，繼而進行抗VEGF抗體之維持療法。 本發明提供一種商業方法’其包含銷售一種抗VEGF抗 體’其係與至少一種化學治療劑組合繼而進行抗VEGf維 持療法來用於治療人類個體之例如卵巢癌以便延長無惡化 存活期或降低個體之癌症復發可能性或提高個體之存活可 能性。在一些實施例中，銷售之後用抗VEGF抗體及化學 治療劑治療個體，繼而進行抗VEGF維持療法。在一些實 施例中’該方法進一步包含銷售兩種或兩種以上化學治療 劑以供與抗VEGF抗體組合使用繼而進行抗VEGF維持療 法。在一些實施例中’銷售之後用抗VEGF抗體及化學治 療劑治療個體，繼而進行抗VEGF維持療法。 154268.doc -11· 201138819 亦提供一種商業方法，其包含銷售一種化學治療劑，其 係與抗VEGF抗體組合繼而進行抗VEGF維持療法來治療人 類個體之例如卵巢癌以便延長無惡化存活期或降低個體之 癌症復發可能性或提高個體之存活可能性。在一些實施例 中，銷售之後用化學治療劑與抗VEGF抗體之組合繼而進 行抗VEGF維持療法來治療個體。亦提供一種商業方法， 其包含銷售兩種或兩種以上化學治療劑，其係與抗VEGF 抗體組合繼而進行抗VEGF維持療法來治療人類個體之例 如卵巢癌以便延長無惡化存活期或降低個體之癌症復發可 能性或提高個體之存活可能性。在一些實施例中，銷售之 後用化學治療劑與抗VEGF抗體之組合繼而進行抗VEGF維 持療法來治療個體。 在本發明之各方法中，抗VEGF抗體可替代為VEGF特異 性拮抗劑，例如如下所述之VEGF受體分子或嵌合VEGF受 體分子。在某些實施例中，抗VEGF抗體為貝伐單抗。抗 VEGF抗體或其抗原結合片段可為單株抗體、嵌合抗體、 完全人類抗體或人類化抗體。適用於本發明方法中之例示 性抗體包括貝伐單抗（AVASTIN®)、G6抗體、B20抗體及 其片段。在某些實施例中，抗VEGF抗體具有包含下列胺 基酸序列之重鏈可變區： EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASGYTFT NYGMNWVRQA PGKGLEWVGW INTYTGEPTY AADFKRRFTF SLDTSKSTAY LQMNSLRAED TAVYYCAKYP HYYGSSHWYF DVWGQGTLVT VSS (SEQ ID No. 1) 及包含下列胺基酸序列之輕鏈可變區： 154268.doc 201138819 DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCSASQDIS NYLNWYQQKP GKAPKVLIYF TSSLHSGVPS RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ YSTVPWTFGQ GTKVEIKR (SEQ ID No. 2). 抗體或其抗原結合片段亦可為缺乏Fc部分、F(ab')2、 Fab或Fv結構之抗體。 在一實施例中，該治療為VEGF特異性拮抗劑（例如抗 VEGF抗體）與至少一種化學治療劑之組合，繼而進行 VEGF拮抗劑維持療法。在一實施例中，該治療為VEGF特 異性拮抗劑（例如抗VEGF抗體）與兩種或兩種以上化學治療 劑之組合，繼而進行抗VEGF維持療法。 本發明方法或用途中之每一者可針對包括（但不限於）以 下之癌症的治療來實踐：癌瘤、淋巴瘤、母細胞瘤、肉瘤 及白血病。該等癌症之更特定實例包括卵巢癌、卵巢原發 性腹膜癌、卵巢輸卵管癌、鱗狀細胞癌、小細胞肺癌、非 小細胞肺癌、肺腺癌、肺鱗狀細胞癌、腹膜癌、肝細胞 癌、胃腸癌、胰臟癌、神經膠母細胞瘤、子宮頸癌、肝 癌、膀胱癌、肝腫瘤、乳癌、結腸癌、結腸直腸癌、子宮 内膜或子宮癌、唾液腺癌、腎癌、肝癌、前列腺癌、腎 癌、外陰癌、曱狀腺癌、肝癌、胃癌、黑素瘤及各種類型 之頭頸癌。在一些實施例中，個體具有先前未經治療之卵 巢癌°在一些實施例中，個體具有新近診斷出且先前未經 治療之卵巢癌。在一些實施例中，個體具有新近診斷出且 先前未經治療之III期（經過次於最佳及宏觀最佳減積術）及 IV期上皮卵巢癌、原發性腹膜癌或輸卵管癌。在一些實施 154268.doc •13· 201138819 例中，個體具有鉑敏感性復發性上皮卵巢癌、原發性腹膜 癌或輸卵管癌。 上述態樣中之每一者可進一步包括監測個體之癌症復 發。可例如藉由評估無惡化存活期（pFS)或總存活期（〇s) 或客觀反應率（ORR)來達成監測。在一實施例中，在開始 治療後評估PFS。 視疾病類型及嚴重度而定，抗VEGF抗體（例如貝伐單 抗）之較佳劑量在本文中有所描述，且可在約1 pg/kg至約 5〇 mg/kg之範圍内，最佳為約5 mg/kg至約15 mg/kg’包括 (但不限於）5 mg/kg、7.5 mg/kg、1〇 mg/kg或 15 mg/kg。投 藥頻率將視疾病類型及嚴重度而不同。對於經若干天或更 長時間重複投藥而言，視病狀而定，持續治療直至癌症得 以治療或達成所需治療作用為止，如由本文所述或此項技 術中已知之方法所量測。在—實例中，每週一次、每兩週 一次或每三週一次，以約5 mg/kg至約15 mg/kg之劑量範圍 (匕括（但不限於）5 mg/kg、7 5 mg/kg、叫心或b :g’kg)投與本發明之抗VEGF抗體。然而，其他給藥方案 '適用本發明療法之進展易於藉由習知技術及檢測法來 ，J在本發明之某些實施例中，提供抗VEGF療法作為 寺療法在其他實施例中，提供抗VEGF療法持續至少 月（包括同步抗VEGF療法與化學療法，及抗vegf維 ’療法）纟其他實施例中’提供抗VEGF療法持續至少Η :月（包括同步抗VEGF療法與化學療法，及抗vegf維持 154268.doc • 14· 201138819 在上述各態樣之其他實施例中，局部或全身（例如經口 或靜脈内）投與VEGF特異性拮抗劑，例如抗乂£(31?抗體。 在其他實施例中，治療之一態樣為在單方療法中使用 VEGF特異性拮抗劑或為維持VEGF特異性拮抗劑治療期之 單方療法，例如在延長治療階段或維持療法中，其係由臨 床醫師所評定或如本文所述。在某些實施例中，給與抗 VEGF維持療法持續至少7至22_期。在其他實施例中， 給與抗VEGF維持療法持續至少7至18個週期。 在其他實施例中，VEGF#異性结抗劑之治療與額外抗 癌療法組合，該額外抗癌療法包括（但不限於）手術、放射 線療法、化學療法、分化療法、生物療法 '免疫療法、血 管新生抑制劑、細胞毒性劑及抗增殖化合物。VEGF特異 性拮抗劑之治療亦可包括上述類型之治療方案之任何組 在—實施例中，化學治療劑與vegf特異性抬抗劑 同步投與’繼而進行抗彻”持療法。在—些實施例 中’兩種或兩種以上介 上化學治療劑與VEGF特異性拮抗劑同 步投與，繼而進行抗VEGF維持療法。 w ^ ^括額外H療法之實施例中’可在投與VEGF特異
性拮抗劑之前、期簡rL ’ 彳如同時）或之後進一步用額外抗癌 療法治療個體。在一竇始 貫施例令，可單獨或與抗癌療法一起 特異性拮抗_騎持療法。 申咬專利他特徵及優勢將由下列[實施方式]、圖式及 申印專利範圍而變得顯而易見。 【實施方式】 154268.doc 201138819 ι·定義 術語「VEGF」或「VEGF-Α」係用於指示具有165個胺 基酸之人類血管内皮細胞生長因子及相關之具有121個、 145個、189個及206個胺基酸之人類血管内皮細胞生長因 子（如由例如 Leung等人，Science，246:1306 (1989)及Houck 等人，Mol. Endocrin·，5:1806 (1991)所述），以及其天然 存在之對偶基因及經加工形式。VEGF-A屬於包括VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E、VEGF-F 及 P1GF 之基因 家族。VEGF-A主要結合至兩種高親和力受體酪胺酸激酶 (即 VEGFR-l(Flt-l)及 VEGFR-2(Flk-l/KDR))，後者為 VEGF-A之血管内皮細胞促有絲分裂信號之主要傳遞素。 另外，神經菌毛素-1已識別為肝素結合性VEGF-A同功異 型物之受體且可在血管形成中起作用。術語「VEGF」或 「VEGF-A」亦係指來自非人類物種（諸如小鼠、大鼠或靈 長類動物）之VEGF。有時，來自特定物種之VEGF係由術 語諸如人類VEGF hVEGF或鼠類VEGF mVEGF來指示。術 語「VEGF」亦用以指示包含具有165個胺基酸之人類血管 内皮細胞生長因子之胺基酸8至109或1至109之多肽截短 形式或片段。在本申請案中，對任何該等形式之VEGF 之提及可例如以「VEGF(8-109)」、「VEGF(1-109)」或 「VEGF105」來識別截短」的天然VEGF之胺基酸位置 係如天然VEGF序列中所指示進行編號。舉例而言，截短 的天然VEGF中之胺基酸位置17(甲硫胺酸）亦為天然VEGF 中之位置17(甲硫胺酸）。截短的天然VEGF對KDR及Flt-1 154268.doc •16· 201138819 受體之結合親和力與天然VEGF相當。 「抗VEGF抗體」為以足夠親和力及特異性結合至VEGF 之抗體。所選抗體通常對VEGF具有結合親和力，例如， 抗體可以1〇〇 nM至1 pM之Kd值結合hVEGF。舉例而言， 可藉由基於表面電漿子共振之檢測法（諸如BIAcore檢測 法，如PCT申請公開案第WO 2005/012359號中所述）、酶 聯免疫吸附檢測法（ELISA)及競爭檢測法（例如RIA)測定抗 體親和力。在某些實施例中，本發明之抗VEGF抗體可用 作靶向及干擾涉及VEGF活性之疾病或病狀的治療劑。同 樣，抗體可接受其他生物活性檢測法，例如以評估其作為 治療劑之有效性。該等檢測法在此項技術中已知且視目標 抗原及抗體之預期用途而定。實例包括HUVEC抑制檢測 法；腫瘤細胞生長抑制檢測法（例如如WO 89/06692中所 述）；抗體依賴性細胞毒性（ADCC)及補體介導之細胞毒性 (CDC)檢測法（美國專利5,500,362);及促效活性或造血檢 測法（參見WO 95/27062) »抗VEGF抗體通常不會結合至諸 如VEGF-B或VEGF-C之其他VEGF同系物，亦不會結合至 諸如P1GF、PDGF或bFGF之其他生長因子。 「VEGF拮抗劑」係指能夠中和、阻斷、抑制、消除、 降低或干擾VEGF活性（包括其與一或多個VEGF受體之結 合）的分子。VEGF拮抗劑包括抗VEGF抗體及其抗原結合 片段、特異性結合至VEGF從而螯合其而使其不能結合至 一或多個受體的受體分子及衍生物、抗VEGF受體抗體及 VEGF受體拮抗劑，諸如VEGFR酪胺酸激酶之小分子抑制 154268.doc -17- 201138819 劑0 「天然序列」多肽包含與源自自然界之多肽具有相同胺 基酸序列之多肽。因此，天然序列多肽可具有來自任何哺 乳動物的天然存在多肽之胺基酸序列。該天然序列多肽可 由自然界分離’或可藉由重組或合成方法製備。術語「天 然序列」多肽特定包涵多肽之天然存在之截短或分泌形式 (例如胞外域序列）、多肽之天然存在之變異體形式（例如不 同剪接形式）及天然存在之對偶基因變異體》 多肽「變異體」意謂與天然序列多肽具有至少約80〇/〇胺 基酸序列一致性之生物活性多肽。該等變異體包括例如在 多肽之N末端或C末端添加或缺失一或多個胺基酸殘基之 多肽。通常，變異體與天然序列多肽具有至少約8〇%胺基 酸序列一致性’更佳具有至少約90%胺基酸序列一致性且 甚至更佳具有至少約95%胺基酸序列一致性。 術語「抗體」係以最廣泛意義使用且包括單株抗體（包 括全長或完整單株抗體）、多株抗體、多價抗體、多特異 性抗體（例如雙特異性抗體）及抗體片段（參見下文），只要 其展現所需生物活性即可。 在本說明書及申請專利範圍通篇中，免疫球蛋白重鍵中 的殘基之編號為如Kabat等人，Sequences of Proteins of Immunological Interest，第 5 版。Public Health Service，
National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991)中之 EU 索引的編號，該文獻係以引用的方式明確併入本文中。 「如Kabat中之EU索引」係指人類igGl EU抗體之殘基編 154268.doc •18- 201138819 號。 本發明之「Kd」或「Kd值」在一實施例中係如由下列 檢測法所述藉由以抗體之Fab型式及VEGF分子進行的放射 性標記VEGF結合檢測法（RIA)來量測：藉由在一系列未經 標記之VEGF滴定液存在下，用最低濃度之經125ι標記之 VEGF( 109)平衡Fab，接著用塗有抗Fab抗體之板捕捉結合 之VEGF來量測Fab對VEGF之溶液結合親和力（Chen等人， (1999) J· Mol Bio丨 293:865-88 1)。在一實例中，為建立檢 測條件’將微量滴定板（Dynex)以50 mM碳酸鈉（pH 9.6)中 之5 pg/ml之捕獲抗-Fab抗體（Cappel Labs)塗佈隔夜，且隨 後在室溫下（約23°C)以PBS中之2%(w/v)牛血清白蛋白阻斷 2至5小時。在非吸附板（Nunc #269620)中，將100 pM或26 pM[125I]VEGF(l09)與相關Fab(例如Fab-12)之連續稀釋液 混合（Presta等人，（1997) Cancer Res. 57:4593-4599)。接 著培育相關Fab隔夜；然而培育可持續65小時以確保達到 平衡。此後，將混合物轉移至捕捉板中’在室溫下培育1 小時。接著移除溶液且用PBS中之0.1 °/〇 Tween-20洗滌該板 8次》當該等板乾燥後，添加150微升/孔閃爍體 (MicroScint-20; Packard)，且將板以 Topcount γ 計數器 (Packard)計數十分鐘。選擇提供小於或等於20%最大結合 之各Fab濃度用於競爭性結合檢測。根據另一實施例，Kd * 或Kd值係藉由使用表面電漿子共振檢測法，使用 BIAcoreTM-2000 或 BIAcpreTM-3000(BIAcore，Inc.，Piscataway， NJ)在25°C下以固定化hVEGF(8-109) CM5晶片在約10個回 154268.doc •19· 201138819 應單位（RU)下來量測。簡言之，根據供應商之說明書用#-乙基二甲基胺基丙基）碳化二亞胺鹽酸鹽（EDC)及#-羥基丁二醯亞胺（NHS)活化羧曱基化聚葡萄糖生物感測器 晶片（CM5，BIAcore Inc.)。將人類VEGF以10 mM乙酸鈉 (pH 4.8)稀釋成5 pg/ml(約0.2 μΜ)，之後以5微升/分鐘流速 注射，以達成約1 〇個回應單位（RU)之偶合蛋白。在注射人 類VEGF後，注射1 Μ乙醇胺以阻斷未反應之基團。為進行 動力學量測，在25°C下以約25微升/分鐘之流速注射Fab於 含0.05% Tween 20之PBS(PBST)中的兩倍連續稀釋液（0.78 nM至500 nM)。使用簡單的1:1朗繆爾結合模型（one-to-one Langmuir binding model，BIAcore Evaluation軟體版本 3.2) 藉由同時擬合締合及解離感測器圖譜來計算締合速率（k〇n) 及解離速率（kQff)。平衡解離常數（Kd)係計算為比率 koff/kon。參見例如 Chen，Y.等人，（1999) J. Mol Biol 293:865-881。若藉由上述表面電漿子共振檢測法測得締合 速率超過106 M·1 S·1，則締合速率可藉由使用螢光淬滅技 術來測定，該螢光淬滅技術量測如在光譜儀（諸如裝備有 停流器之分光光度計（Aviv Instruments)或8000系列SLM-Aminco分光光度計（ThermoSpectronic))中用經擅:拌之光析 管所量測於PBS(pH 7.2)中之20 nM抗VEGF抗體（Fab形式） 在遞增濃度之人類VEGF截短形式（8-109)或小鼠VEGF存在 下於25。(：下之螢光發射強度（激發=295 nm ;發射=340 nm，16 nm帶通）的增加或減少。 「阻斷」抗體或抗體「拮抗劑」為抑制或降低所結合之 154268.doc -20· 201138819 抗原之生物活性的抗體《舉例而言，VEGF特異性结抗劑 抗體結合VEGF且抑制VEGF誘導血管内皮細胞增殖或誘導 血管滲透性之能力》在某些實施例中，阻斷抗體或拮抗劑 抗體完全或實質上抑制抗原之生物活性。 除非另外指示，否則表述「多價抗體」在本說明書通篇 中用以表示包含三個或三個以上抗原結合位點之抗體。舉 例而言，多價抗體經工程改造以具有三個或三個以上抗原 結合位點’且一般不為天然序列IgM或IgA抗體。 「抗體片段」僅包含完整抗體之一部分，一般包括完整 抗體之抗原結合位點且因此保留結合抗原之能力。由本發 明定義所涵蓋之抗體片段之實例包括：（i)具有VL、CL、 VH及CH1結構域之Fab片段；（ii) Fab，片段，其為在CH1結 構域之C末端處具有一或多個半胱胺酸殘基之Fab片段； (iii)具有VH及CH1結構域之Fd片段；（W)具有VH及CH1結 構域且在CH1結構域之C末端處具有一或多個半胱胺酸殘 基之Fd·片段；（v)具有抗體之單臂之VL及VH結構域的Fv片 段；（vi)由VH結構域組成之dAb片段（Ward # 乂，Nature 341，544-546 (1989)) ; (vii)分離之 CDR 區；（viii) F(ab，）2 片 段’其為在絞鏈區包括兩個由二硫橋鍵連接之Fab，片段的 一價片段，（ix)單鏈抗體分子（例如單鏈Fv ; scFv)(Biid事
乂，Science 242:423-426 (1988);及 Huston#乂，PNAS
(USA) 85:5879-5883 (1988)) ; (X)具有兩個抗原結合位點且 在同一多肽鏈中包含連接至輕鏈可變域（VL)之重鏈可變域 (VH)的「微型雙功能抗體」（參見例如Ep 4〇4,097 ; WO 154268.doc •21 · 201138819 93/11161 ;及 Hollinger#乂，Proc. Natl. Acad. Sci. USA， 90:6444-6448 (1993)) ; (xi)包含一對串聯 Fd 區段（VH-CH1-VH-CH1)的「線性抗體」，該等Fd區段連同互補輕鏈多肽 一起形成一對抗原結合區（Zapata等人，Protein Eng. 8(10):1057-1062 (1995);及美國專利第 5,641，870號）。 如本文所用之術語「單株抗體」係指自實質上均質之抗 體群體獲得之抗體’亦即構成此群體之個別抗體除可少量 存在之可能天然存在之突變外為相同的。單株抗體對單個 抗原具有高度特異性。此外，與通常包括針對不同決定子 (抗原決定基）之不同抗體的多株抗體製劑不同，各單株抗 體係針對抗原上之單個決定子。修飾語「單株」不應解釋 為需要藉由任何特定方法產生抗體。舉例而言，根據本發 明待使用之單株抗體可藉由最初由Kohler等人，Nature 256:495 (1975)所描述之融合瘤方法來製備，或可藉由重 組DNA方法（參見例如美國專利第4,816,567號）來製備。舉 例而言，「單株抗體」亦可使用clacks〇n等人，N^ure 352:624-628 (1991)或 Marks #A，j.M〇l.Bi〇1.222:581- 5 97 (1991)中所述之技術自噬菌體抗體文庫中分離。 「Fv」片段為含有完全抗原識別及結合位點之抗體片 段。該區域由一冑重鏈可變域及一個輕鏈可變域緊密締合 之二聚體組成，該締合在性f上可為共價的，例如在S. 中。在此組態中，各可變域之三個CDR相互作用以在Vh_ vL二聚體表面上界定抗原結合位點。六個cdr或其子集共 同對抗體賦予抗原結合特異性。即使單個可變; 154268.doc •22· 201138819 (或僅包含對抗原具有特異性之三個CDR的半個Fv)亦具有 識別與結合抗原之能力，但其親和力通常低於整個結合位 點。 如本文所用之「抗體可變域」係指包括互補決定區 (CDR ;亦即CDR1、CDR2及CDR3)及構架區（FR)之胺基酸 序列的抗體分子之輕鏈及重鏈部分。VH係指重鏈之可變 域。VL係指輕鏈之可變域。根據本發明中所使用之方法， 分配給CDR及FR之胺基酸位置可根據Kabat(Sequences of Proteins of Immunological Interest(National Institutes of Health，Bethesda, Md.，1987及1991)定義。抗體或抗原結合 片段之胺基酸編號亦係根據Kabat之編號。 如本文中所用，術語「互補決定區」（CDR ;亦即 CDR1、CDR2及CDR3)係指為抗原結合所必需存在之抗體 可變域之胺基酸殘基。各可變域通常具有三個識別為 CDR1、CDR2及CDR3之CDR區。各互補決定區可包含來 自如Kabat所定義之「互補決定區」之胺基酸殘基（亦即， 輕鏈可變域中之大致殘基24-34(Ll)、50-56(L2)及89-97(L3)及重鏈可變域中之大致3 1-35(H1)、50-65(H2)及 95-102(H3) ； Kabat # Λ } Sequences of Proteins of Immunological Interest，第 5版。Public Health Service， National Institutes of Health, Bethesda, MD. (1991))及/或 彼等來自「高變環」之殘基（亦即，輕鏈可變域中之大致 殘基26-32(Ll)、50-52(L2)及91-96(L3)及重鏈可變域中之 大致 26-32(Η1)、53-55(H2)及 96-101(H3) ; Chothia及 Lesk 154268.doc -23- 201138819 J. Mo丨.Biol. 196:901-917 (1987))» 在某些情況下，互補 決定區可包括來自根據Kabat所定義之CDR區及高變環的 胺基酸。舉例而言，抗體4D5之重鏈的CDRH1包括胺基酸 26至 35 ° 「構架區」（下文中為FR)為除CDR殘基以外之彼等可變 域殘基。各可變域通常具有四個識別為FR1、FR2、FR3及 FR4之FR 〇若根據Kabat定義CDR，貝ij輕鏈FR殘基位於大 致殘基 1-23(LCFR1)、35-49(LCFR2)、57-88(LCFR3)及 98_ 107(LCFR4)處，且重鏈FR殘基位於重鏈殘基中之大致殘 基 1-30(HCFR1)、36-49(HCFR2)、66-94(HCFR3)及 103-113(HCFR4)處。若CDR包含來自高變環之胺基酸殘基，則 輕鏈FR殘基位於輕鏈中之大致殘基1-25(LCFR1)、33-49(LCFR2)、53-90(LCFR3)及 97-107(LCFR4)處，且重鏈 FR殘基位於重鏈殘基中之大致殘基1-25(HCFR1)、33-52(HCFR2)、56-95(HCFR3)及102-113(HCFR4)處。在一些 情況下，當CDR包含來自如Kabat所定義之CDR及高變環 的胺基酸時，FR殘基將經相應地調整。舉例而言，當 CDRH1包括胺基酸H26-H35時，重鏈FR1殘基在位置1-25 處且FR2殘基在位置36-49處。 「Fab」片段含有輕鏈之可變域及恆定域及重鏈之可變 域及第一恆定域（CH1)。F(ab’)“^體片段包含一對Fab片 段，該等Fab片段通常藉由其間的鉸鏈半胱胺酸共價連接 於接近其羧基末端處。此項技術中亦已知抗體片段之其他 化學偶合。 154268.doc • 24· 201138819 「單鏈Fv」或「scFv」抗體片段包含抗體之vH及vL結構 域’其中此專結構域存在於單一多狀鍵中。Fv多狀通常進 一步包含介於VH與VL結構域之間的多肽連接子，其使得 scFv能夠形成用於抗原結合之所需結構。關於對scFv之評 述’參見 Pluckthun，The Pharmacology of Monoclonal Antibodies ’ 第 113 卷，Rosenburg 及 Moore 編，8卩1^11居61·-Verlag，New York，第 269-315 頁（1994)»
術語「微型雙功能抗體」係指具有兩個抗原結合位點之 小抗體片段’該等片段包含在同一多狀鍵（Vh及VL)中連接 至輕鏈可變域（VL)之重鏈可變域（VH) ^藉由使用過短而無 法使同一鏈上兩個結構域之間配對的連接子，該等結構域 被迫與另一鏈之互補結構域配對且產生兩個抗原結合位 點。微型雙功能抗體更充分描述於例如EP 404,097 ; WO 93/11161 ;及 Hollinger 等人，Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90:6444-6448 (1993)中。 表述「線性抗體j係指Zapata等人，pr〇tein Eng.， 8(10):1057-1062 (1995)中所述之抗體。簡言之，此等抗體 包含一對串聯Fd區段（VH-CH1-VH-CH1)，其與互補輕鏈多 肽一起形成一對抗原結合區。線性抗體可為雙特異性或單 特異性的。 本文之單株抗體特定包括「嵌合」抗體（免疫球蛋白）， 其中一部分重鏈及/或輕鏈與源自特定物種或屬於特定抗 體類或子類之抗體中的相應序列相同或同源，而該（該等） 鏈之其餘部分與源自另一物種或屬於另一抗體類或子類之 154268.doc -25- 201138819 抗體中的相應序列相同或同源；以及該等抗體之片段，〇 要其展現出所需生物活性即可（美國專利第4,816,567號； 及 Morrison 等人，proc· NaU· Acad· Sci· USA 81:6851_ 6855 (1984))。 非人類（例如鼠類）抗體之「人類化」形式為含有源自非 人類免疫球蛋白之最小序列的嵌合抗體。在很大程度上， 人類化抗體為人類免疫球蛋白（接受體抗體），其中來自接 受體之高變區的殘基經來自諸如小鼠、大鼠、兔或非人類 靈長類動物之非人類物種（供體抗體）之高變區的具有所需 特異性、親和力及能力之殘基置換。在一些情況下，人類 免疫球蛋白之Fv構架區（FR)殘基經相應非人類殘基置換。 此外，人類化抗體可包含接受體抗體或供體抗體中未見之 殘基。進行此等修飾以進一步改善抗體效能。通常，人類 化抗體將包含至少一個且通常兩個可變域之實質上全部内 容，其中所有或實質上所有高變環對應於非人類免疫球蛋 白之高變環，且所有或實質上所有FR區為人類免疫球蛋白 序列之FR區。人類化抗體視情況亦將包含免疫球蛋白恆定 區（Fc)之至少一部分’通常人類免疫球蛋白之恆定區之至 少一部分。關於其他細節’參見jones事乂，Nature 321:522-525 (1986)； Riechmann#X > Nature 332:323-329 (1988) ’ 及 Presta，Curr. .Op. Struct· Biol. 2:593-596 (1992)。 「人類抗體」為具有與人類所產生之抗體之胺基酸序列 相對應的胺基酸序列及/或使用本文所揭示之任何製造人 154268.doc •26· 201138819 類抗體之技術製得的抗體。人類抗體之此定義尤其排除包 含非人類抗原結合殘基之人類化抗體。人類抗體可使用此 項技術中已知之各種技術來製備。在一實施例中，人類抗 體係選自噬菌體文庫，其中該噬菌體文庫表現人類抗體 (Vaughan等人 ’ Nature Biotechnology 14:309-314 (1996). Sheets等人，Proc. Natl. Acad. Sci. 95:6157-6162 (1998); Hoogenboom 及 Winter，J. Mol. Biol” 227:381 (1991); Marks 專人，J. Mo丨.Biol·，222:581 (1991))。亦可藉由將 人類免疫球蛋白基因座引入轉殖基因動物中來製得人類抗 體’該轉殖基因動物為例如内源性免疫球蛋白基因已部分 或完全去活之小鼠。一旦激發，則觀察到人類抗體產生， 其在各方面均密切地類似於人類中所見，包括基因重排、 組裝及抗體譜系。此方法係描述於例如美國專利第 5,545,807 號；第 5,545,806 號；第 5,569,825 號；第 5,625，126號；第5,633,425號；第5,661，016號及下列科學 出版物中：Marks 等人，Bio/Technology 10: 779-783 (1992) ; Lonberg 等人，Nature 368: 856-859 (1994); Morrison，Nature 368:812-13 (1994) ; Fishwild 等人， Nature Biotechnology 14: 845-51 (1996) I Neuberger,
Nature Biotechnology 14: 826 (1996) ; Lonberg及 Huszar， Intern. Rev. Immunol. 13:65-93 (1995)。或者，可經由使 產生針對目標抗原之抗體的人類B淋巴細胞永生化來製備 人類抗體（該等B淋巴細胞可自個體回收或可經活體外免 疫）。參見例如 Cole 等人，Monoclonal Antibodies and 154268.doc -27- 201138819
Cancer Therapy, Alan R. Liss，第 77頁（1985) ; Boerner 等人，J. Immunol·, 147 (1):86-95 (1991);及美國專利第 5,750,373 號。 「親和力成熟」抗體為在一或多個CDR中具有一或多處 變化之抗體，該或該等變化使得該抗體針對抗原之親和力 相較於不具有彼或彼等變化之親本抗體而言得到改良。較 佳之親和力成熟抗體對目標抗原具有奈莫耳或甚至皮莫耳 之親和力。親和力成熟抗體係藉由此項技術中已知之程序 製備。Marks等人，Bio/Technology 10:779-783 (1992)描述 藉由VH及VL結構域改組實現親和力成熟。CDR及/或構架 殘基之隨機突變誘發係由以下來描述：Barbas等人，proc
Nat· Acad. Sci，USA 91:3809-3813 (1994); Schier等人，
Gene 169:147-155 (1995) ; Yelton 等人，j· Immun〇1· 155:1994-2004 (1995) ; Jackson 等人，j· immunol. 154(7):3310-9 (1995);及 Hawkins 等人，j· M〇|· Bi〇1. 226:889-896 (1992)。 抗體之「功能性抗原結合位點」為能夠結合目標抗原之 位點。抗原結合位點之抗原結合親和力未必與產生抗原結 合位點之親本抗體一樣強，但結合抗原之能力須可使用已 知用於評估抗體與抗原之結合的多種方法中之任一者來量 測。此外，本文中之多價抗體之各抗原結合位點之抗原結 合親和力無須在數量上相同。對於本文中之多聚抗體，功 能性抗原結合位點之數目可使用如美國專利申請公開案第 200501862G8號之實例2中所述之超離心分析來評估。根據 154268.doc -28- 201138819 此分析方法’組合不同比率之目標抗原與多聚抗體且在假 定不同數目之功能性結合位點下計算複合物之平均分子 量°將此等理論值與所獲得之實際實驗值相比較，以估計 功能性結合位點之數目。 具有指定抗體之「生物特徵」的抗體為具有該抗體之一 或多種生物特徵的抗體，可由該等生物特徵區分結合至相 同抗原之其他抗體。 為篩選會與相關抗體所結合抗原上之抗原決定基結合之 抗體’可進行常規交叉阻斷檢測法，諸如Antibodies，a Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, Harlow及David Lane編（1988)中所述之檢測法。 「物種依賴性抗體」為對來自第一哺乳動物物種之抗原 的結合親和力比對來自第二哺乳動物物種之該抗原同系物 的結合親和力更強的抗體。通常，物種依賴性抗體「特異 性結合至」人類抗原（亦即，結合親和力值不大於約 lxio'7 μ，較佳不大於約ΐχ10-8厘且最佳不大於約1χ1〇·9 Μ) ’但其對來自第二非人類哺乳動物物種之抗原同系物的 結合親和力比其對人類抗原之結合親和力弱至少約50倍或 至少約500倍或至少約1000倍。物種依賴性抗體可為如上 定義之各種類型抗體中之任一者，但通常為人類化或人類 抗體。 如本文所用之「抗體突變體」或「抗體變異體」係指物 種依賴性抗體之胺基酸序列變異體，其中物種依賴性抗體 之一或多個胺基酸殘基已經過修飾。該等突變體必須與物 154268.doc •29· 201138819 種依賴性抗體具有小於100%之序列一致性或相似性。在 一實施例中，抗體突變體的胺基酸序列將與物種依賴性抗 體之重鏈或輕鏈可變域之胺基酸序列有至少75%、更佳至 少80%、更佳至少85%、更佳至少90%且最佳至少95%胺基 酸序列一致性或相似性。關於此序列之一致性或相似性在 本文中係定義為在比對序列及必要時引入空隙以達成最大 序列一致性百分比後，候選序列中與物種依賴性抗體殘基 一致（亦即，相同殘基）或相似（亦即，基於共同側鏈特性來 自相同組的胺基酸殘基，參見下文）的胺基酸殘基之百分 比。可變域外之抗體序列中任何N-末端、C-末端或内部之 延長、刪除或插入均不應視為會影響序列一致性或相似 性。 為延長含有本發明胺基酸序列之抗體或多肽的半衰期， 可如例如美國專利5,739,277中所述，將後援性受體結合抗 原決疋基連接至抗體（尤其抗體片段）^舉例而言，可將編 碼後援性受體結合抗原決定基之核酸分子同框連接至編碼 本發明多肽序列之核酸以便由經工程改造之核酸分子表現 之融合蛋白包含後援性受體結合抗原決定基及本發明多肽 序列。如本文所用’術語「後援性受體結合抗原決定基」 係指IgG分子（例如IgGi、IgG2、IgG3或IgG4))之Fc區中負責 延長IgG分子之活體内血清半衰期的抗原決定基（例如
Ghetie等人 ’ Ann. Rev. Immunol· 18:739-766 (2000)，表 1)。在Fc區中具有取代且血清半衰期延長之抗體亦描述於 WO 00/42072、WO 02/060919 ; Shields 等人，j. Bi〇里 154268.doc -30· 201138819
Chem. 276:6591-6604 (2001) ; Hinton, J. Biol. Chem 279:6213-6216 (2004)中。在另一實施例中，血清半衰期亦 可例如藉由連接其他多肽序列而得以延長。舉例而言，適 用於本發明方法中之抗體或其他多肽可連接至血清白蛋白 或血清白蛋白中結合至FcRn受體之一部分或連接至血清白 蛋白結合肽以使血清白蛋白結合至抗體或多肽，例如該等 多狀序列係揭示於WO 01/45746中。在一實施例中，待連 接之血清白蛋白肽包含胺基酸序列DICLPRWGCLW。在另 一實施例中，Fab之半衰期係藉由此等方法得以延長。關 於血凊白蛋白結合肽序列办·參名Dennis等人，j. βμ
Chem. 277:35035-35043 (2002)。 「嵌合VEGF受體蛋白」為具有源自至少兩種不同蛋白 質（其中至少一者為VEGF受體蛋白）之胺基酸序列的VEGF 受體分子。在某些實施例中，嵌合VEGF受體蛋白能夠結 合至VEGF且抑制VEGF生物活性。 分離」之抗體為自其天然環境之組分識別及分離及/ 或回收之杬體。其天然環境之污染組分為會干擾抗體之診 斷或治療用途的物質，且可包括酶、激素及其他蛋白質或 非蛋白質溶質。在某些實施例中，該抗體將⑴經純化為如 藉由Lowry方法所測定大於％重量％之抗體，且最佳大於 99重量％之抗n ;⑺經純化至足卩藉由利用旋杯式序列測 定儀獲得Ν-末端或内部胺基酸序列之至少15個殘基的程 度；或（3)藉由SDS-PAGE使用考馬斯藍（c〇〇massie bIue)或 銀木劑’在還原條件率非還原條件下經純化至具有均質 J54268.doc -31 - 201138819 性。由於抗體之天然環境之至少一種組分將不存在，所以 分離之抗體包括原位處於重組細胞内之抗體。然而，分離 之抗體通常將藉由至少一個純化步驟來製備。 「片段」意謂較佳含有參考核酸分子或多肽之整體長度 之至少 10%、20%、30%、40% ' 50%、60%、70〇/〇、80%、 90%、95%或95%以上的多肽或核酸分子之一部分。片段 可含有10個、20個、30個、40個、50個、60個、70個、80 個、90個或100個、200個、300個、400個、500個、600個 或600個以上核苷酸，或10個、20個、30個、40個、50 個、60個 ' 70個、80個、90個、100個、120個、140個、 160個、180個、190個、200個或200個以上胺基酸。 「抗血管新生劑」或「血管新生抑制劑」係指直接或間 接抑制血管新生、血管發生或不當血管滲透性之小分子量 物質、聚核苷酸、多肽、分離之蛋白、重組蛋白、抗體或 其結合物或融合蛋白。應瞭解，抗血管新生劑包括結合血 管新生因子或其受體且阻斷血管新生因子或其受體之企管 新生活性的彼等抗血管新生劑。舉例而言，抗血管新生劑 為如本說明書通篇中所定義或此項技術中所知之針對血管 新生劑之抗體或其他拮抗劑，例如（但不限於）針對VEGF-A或VEGF-A受體（例如KDR受體或Fit-Ι受體）之抗體、 VEGF捕獲劑（VEGF-trap)、抗PDGFR抑制劑（諸如 GleevecTM(曱續酸伊馬替尼（Imatinib Mesylate)))。抗金管 新生劑亦包括天然血管新生抑制劑，例如血管抑制素、内 皮抑制素等。參見例如Klagsbrun及D'Amore，Annu. Rev. 154268.doc -32- 201138819
Physiol., 53:217-39 (1991)； Streit A Detmar, Oncogene, 仏3172·3179 (2GG3)(例如，表3列出對惡性黑素瘤之抗血 管新生療法广 Ferrara及Alita丨〇, Nature Medicine 5:1359- 1364 (1999) , Τοηιηι等人，〇nc〇gene，22:6549 6556 (2〇〇y (例如，表2列出已知抗血管新生因子）；及.加j.
Clni· 〇ne〇l·’ 8:2〇〇·2〇6 (2〇〇3)(例如表⑼出用於臨床試 驗中之抗jk管新生劑）。 「維持」劑量在本文中係指在治療期内或在治療期之後 向患者投與之治療劑之—或多個劑量。通常，維持劑量係 以隔開之治療時間間隔投與，諸如大致每週-次、大致每 兩週一次、纟彡每三週一次或大致每四週一次。在一實施 例中’維㈣量係如本文圖1(延長療法卜^或^或㈣ 中所描繪。 「存活」係指保持存活之患者，且包括無惡化存活期 (PFS)及總存活期(〇s)。存活期可藉由卡本-麥爾法 (Kaplan-Meier meth〇d)來評估，且使用分層對數等級檢驗 (strat^ed log-rank test)計算存活期之任何差異。 無心化存活期（PFS)」係指自治療（或隨機化）至最初疾 病惡化或死亡的時間。在本發明之―態樣中，㈣可藉由 實體腫瘤反應評估準則（RespGnse EvaiuatiQn C心^ in Md Tu膽s ’ RECIST)評定。在本發明之一態樣中，pFs 可藉由CA-125含量作為惡化決定因素來評定。 「總存活期」係指患者自治療開始或自初始診斷後保持 存活持續確定時段，諸如⑴年、約15年、約2年、約3 15426S.doc •33· 201138819 年、約4年、約5年、約10年等。在本發明之研究中，用於 存活期分析之事件為由任何原因造成的死亡。 「延長存活期」或「提高存活可能性」意謂經治療之患 者相對於未經治療之患者（亦即，相對於未經vegf特異性 拮抗劑（例如VEGF抗體）治療之患者），或相對於對照治療 方案(諸如僅以化學治療劑(諸如印巢癌照護標準中所用之 化學治療劑）的治療）的PFS及/或仍之延長。舉例而古，延 長之PFS為患者自治療開始或自初始診斷開始相較於對照 (例如未經相同VEGF特異性拮抗劑治療之患者）而言在癌症 未復發下保持存活的時間，例如維持確定時段，諸如Μ 個月、2個月、2·3個月、2 9個曰 月2.9個月、3個月、3 8個月、相 f、6個月、7個月、8個月、9個月、牌、約2年、約3年 等。在一實施例中，PFS相較 权於對照延長約2.9個月至3.8個 月。在一實施例中’ 々日权於對照延長至少約3.8個月。 在另一實施例中，PFS延長約 1固月在一實施例中， PFS相較於對照延長約6個月。 ,& 在某些實施例中，在治療開 始後或在初始診斷後，監測存“ 仔居期持續至少約1個月、2個 月、4個月、6個月、9個月 人王ν約1年或至少約2年哎？ 少約3年或至少約4年或至少 名 /門3年或至少約1 〇年等。 風險比（HR)為對事件率之統 凡°卞學疋義。出於本發明之目 的，風險比經定義為表示在任 ♦桃t a 17特疋時間點實驗組中事件 之機率除以對照組中事件之機率。 …、惡化存活期分析中> 風險比」為兩條無惡化存 -.Λ , ^ A 仔活期曲線之間差異的概述，表 不治療在追蹤時段内相較於 衣 “、、的死亡風險之降低。 154268.doc •34· 201138819 :語：同步」在本文中用以指示投與兩種或兩種以上治 括=中至少一部分投藥時間重疊。因此，同步投藥包 的辂“止杈與一或多種其他藥劑後繼續投與-或多種藥劑 的給樂方案。 °療法」意明在療時段過程期間僅包括用於治療癌 症或腫瘤之單一治療劑的治療方案。使用VEGF特異性拮 抗劑之單療法意謂在治療時段期間在不存在額外抗癌療法 下投與VEGF特異性拮抗劑。 「維持療法」意謂經給與以減少疾病復發或惡化之可能 !·生的’α療方案。可提供維持療法持續任何時間長短，包括 延長之時段直至個體終生。維持療法可在初始療法之後提 供或聯合初始或額外療法一起提供。用於維持療法之剩量 可不同且可包括與用於其他類型療法之劑量相比降低之劑 量》在本發明之某些實施例中’維持療法係在同步完成化 學療法與5個抗VEGF#法週期後提供持續至少16個週期。 在本發明之其他實施例中’維持療法係在同步完成化學療 法與6個抗VEGF療法週期後提供持續至少12個週期。在一 實施例中’維持療法係如圖丨、圖2、圖8或圖丨丨中所描 繪。 術語「癌症」及「癌性」係指或描述哺乳動物中通常以 不受調控之細胞生長為特徵的生理病狀。此定義中包括良 性及惡性癌症以及休眠腫瘤或微轉移。癌症之實例包括 (但不限於）癌瘤、淋巴瘤、母細胞瘤、肉瘤及白血病。該 等癌症之更特定實例包括印巢癌、印巢原發性腹膜癌、= 154268.doc -35- 201138819 巢輸卵管癌、鉑敏感性復發性上皮卵巢癌、原發性腹膜癌 或輸卵管癌、鱗狀細胞癌、肺癌（包括小細胞肺癌、非小 細胞肺癌、肺腺癌及肺鱗狀細胞癌）、腹膜癌、肝細胞 癌、胃癌（包括胃腸癌）、胰臟癌、神經膠母細胞瘤、子宮 頸癌、肝癌、膀胱癌、肝腫瘤、乳癌、結腸癌、結腸直腸 癌、子·宮内膜或子宮癌、唾液腺癌、腎癌、肝癌、前列腺 癌、外陰癌、甲狀腺癌、肝癌及各種類型之頭頸癌，以及 B細胞淋巴瘤（包括低級/濾泡性非霍奇金氏淋巴瘤（non_ Hodgkin’s lymphoma，NHL);小淋巴細胞性（SL)NHL ;中 級/濾泡性NHL ;中級彌漫性NHL ;高級免疫母細胞性 NHL ;高級淋巴母細胞性NHL ;高級小無核裂細胞性 NHL;巨大腫瘤（bulky disease)型NHL;套細胞淋巴瘤； AIDS相關淋巴瘤；及瓦爾登斯特倫氏巨球蛋白血症 (Waldenstrom’s Macroglobulinemia));慢性淋巴細胞性白 血病（CLL);急性淋巴母細胞性白血病（ALL);毛細胞白金 病；慢性骨髓母細胞性白血病；及移植後淋巴組織增生病 症（PTLD)，以及與母斑細胞病相關之異常血管增殖、水腫 (諸如與腦腫瘤相關之水腫）及梅格斯氏症候群（Meigs· syndrome) 〇 「轉移」意謂癌症自其原發部位擴散至身體之其他位 置。癌細胞可離開原發腫瘤，滲透至淋巴及血管中，經由 血流循環且在體内其他位置處之正常組織内的遠端病灶 (轉移）中生長》轉移可為局部或遠端的。轉移為—連續過 程，視自原發腫瘤離開、經由血流行進且停留在遠端部位 154268.doc -36· 201138819 之腫瘤細胞而定。在新部位，細胞建立血液供應且可生長 以形成危及生命之塊狀物。腫瘤細胞内之刺激分子路徑與 抑制分子路徑調控此現象，且遠端部位中腫瘤細胞與宿主 細胞之間的相互作用亦為重要的。 「個體」意謂哺乳動物，包括（但不限於）人類或非人類 甫扎動物，諸如牛、馬、犬、綿羊或貓。較佳，個體為人 類β患者亦為本文中之個體。個體通常為雌性。 對於本發明之方法，術語「指導」個體意謂以任何方式 (但較佳以書面方式，諸如以藥品說明書或其他書面推廣 材料形式）提供關於可適用療法、藥物、治療、治療方案 及其類似者的說明。 ' 對於本發明之方法，術語「推廣」意謂以任何方式（包 括書面方式，諸如以藥品說明書形式）提供、公佈、出售 或描述特定藥物、藥物組合或治療儀器治療。推廣在本文 中係扣推廣用於適應症（諸如卵巢癌治療）之治療劑（諸如 VEGF拮抗劑，例如抗VEGF抗體或化學治療劑），該推廣 已由食品與藥物管理局（Food and Drug Administration , FDA)批准，此係由於已證明其與個體群體中之統計顯著 性治療功效及可接受之安全性相關。 〃 銷售」在本文中用以描述推廣、出售或分配產品 (例如藥物）。銷售特定包括包裝、登廣告及 化為目的之任何商業活動。 個體「群體」係指諸如在臨床試驗中，或在FDA批准用 :特定適應症（諸如卵巢癌療法）後由腫瘤學家看來罹患癌 154268.doc -37- 201138819 症之個體群。 術語「抗癌療法」係指適用於治療癌症之療法。抗癌治 療劑之實例包括（但不限於）例如手術、化學治療劑、生長 抑制劑、細胞毒性劑、用於放射線療法之藥劑、抗血管新 生劑、細胞凋亡劑、抗微管蛋白劑及其他治療癌症之藥 劑，諸如抗HER-2抗體、抗CD20抗體、表皮生長因子受體 (EGFR)拮抗劑（例如酪胺酸激酶抑制劑）、HER1/EGFR抑制 劑（例如埃羅替尼（erl〇tinib)(Tarceva®))、血小板衍生生長 因子抑制劑（例如Gleevec™(曱磺酸伊馬替尼））、c〇x_2抑制 劑（例如赛利克西（celecoxib))、干擾素、細胞激素；結合 至下列一或多個目標之拮抗劑（例如中和抗體）：ErbB2、
ErbB3、ErbB4、PDGFR-β、BlyS、APRIL、BCMA或 VEGF 受體，TRAIL/Ap〇2 ;及其他生物活性及有機化學劑等。 其組合亦包括於本發明中。 如本文中所用之術s吾「細胞毒性劑」係指抑制或阻止細 胞功能及/或造成細胞破壞之物質。該術語意欲包括放射 性同位素（例如，At211、I131、I丨25、Y90、Re186、Re188、
Sm153、Bi212、P32及Lu之放射性同位素）；化學治療劑；及 毒素，諸如細菌、真菌、植物或動物來源之小分子毒素或 酶促活性毒素，包括其片段及/或變異體。 「化學治療劑」為適用於治療癌症之化合物。化學治療 劑之實例包括適用於治療癌症之化合物。化學治療劑之實 例包括烧基化劑，諸如嚷替派（thiotepa)及CYTOXAN®環 磷醯胺（cyclosphosphamide);磺酸烷酯，諸如白消安 154268.doc • 38 · 201138819 (busulfan)、英丙舒凡（improsulfan)及保釋芬（piposulfan); 氮丙°定，諸如苯。坐多巴（benzodopa)、卡波酿i (carboquone)、 米特多巴（meturedopa)及尤利多巴（uredopa);乙稀亞胺及 曱基三聚氰胺，包括六甲蜜胺（altretamine)、三伸乙基三 聚氰胺、三伸乙基罐S盘胺（trietylenephosphoramide)、三伸 乙基硫代構醢胺（triethiylenethiophosphoramide)及三經曱 基三聚氰胺（trimethylolomelamine); 多聚乙醯 (acetogenin)(尤其布拉他辛（bullatacin)及布拉他辛酮 (bullatacinone));喜樹驗（camptothecin)(包括合成類似物 拓朴替康（topotecan));苔蘚抑素（bryostatin);卡利斯達汀 (c ally statin) ; CC-1065(包括其阿多來新（adozelesin)、卡折 來新（carzelesin)及比折來新（bizelesin)合成類似物）；自念 珠藻環肽（cryptophycin)(尤其自念珠藻環肽1及自念珠藻環 狀8);海兔毒素（dolastatin);多卡米辛（duocarmycin)(包括 合成類似物 KW-2189及 CB1-TM1);艾權素（eleutherobin); 盤克斯達汀（pancratistatin);沙考的汀（sarcodictyin);海 綿抑素（spongistatin);氮茶，諸如苯丁酸氮芬 (chlorambucil)、萘氮芥（chlornaphazine)、氯填酿胺 (cholophosphamide)、雌莫司汀（estramustine)、異環破醢 胺（ifosfamide)、氮芥（mechlorethamine)、氮芥氧化物鹽酸 鹽、美法命（melphalan)、新氛芥（novembichin)、膽固醇苯 乙酸氮芥（phenesterine)、潑尼莫司汀（prednimustine)、曲 洛填胺（trofosfamide)、尿密咬氮1齐（uracil mustard);亞硝 基脲（nitrosurea)，諸如卡莫司汀（carmustine)、氯腺黴素 154268.doc -39- 201138819 (chlorozotocin)、福莫司；丁（f〇temUstine)、洛莫司 丁 (lomustine)、尼莫司 '汀（nimustine)及拉窗司；丁 (ranimnustine);抗生素，諸如烯二炔抗生素（例如刺孢黴 素（calicheamicin) ’尤其刺孢黴素γ1Ι及刺孢黴素ωΙ1(參見 例如 Agnew，Chem Inti· Ed. Engl” 33: 183-186 (1994)); 達米辛（dynemicin)，包括達米辛A;雙膦酸鹽，諸如氣屈 膦酸鹽（clodronate);艾斯帕米辛（eSperamicin);以及新制 癌菌素發色團及相關色蛋白烯二炔抗生素發色團）、阿克 拉徽素（aclacinomysin)、放線菌素（actinomycin)、奥斯拉 黴素（authramycin)、重氮絲胺酸、博萊黴素（bleomycin)、 放線菌素C 、卡拉比辛（carabicin)、洋紅黴素 (carminomycin)、嗜癌菌素（carzinophilin)、克羅米辛 (chromomycinis)、更生黴素（dactinomycin)、道諾黴素 (daunorubicin)、地托比星（detorubicin)、6-重氮-5-側氧基-L-正白胺酸、ADRIAMYCIN® 小紅每（doxorubicin)(包括 N-嗎啦基-小紅莓、氰基（N-嗎琳基）-小紅莓、2-°比η各#基-小 紅莓及去氧小紅每）、表柔比星（epirubicin)、依索比星 (esorubicin)、黃膽素（idarubicin)、麻西羅黴素 (marcellomycin)、絲裂黴素（諸如絲裂黴素C)、黴酚酸 (mycophenolic acid)、諾加黴素（nogalamycin)、橄欖黴素 (olivomycins)、培洛黴素（pepl〇myCin)、潑非黴素 (potfiromycin)、嘌呤黴素（puromycin)、奎那黴素 (quelamycin)、羅多比星（rodorubicin)、鏈黑菌素 (streptonigrin)、鏈脲黴素（streptozocin)、殺結核菌素 -40- 154268.doc 201138819 (tubercidin)、烏苯美司（ubenimex)、 新制癌菌素 (zinostatin)、佐柔比星（zorubicin);抗代謝物，諸如曱胺 嗓呤（methotrexate)及5-氟尿，。定（5-FU);葉酸類似物，諸 如迪諾特寧（denopterin)、曱胺°業°令、蝶羅吟 (pteropterin)、三曱曲沙（trimetrexate);。票吟類似物，諸如 氟達拉濱（fludarabine)、6-疏基嘌吟、°塞咪嘌吟 (thiamiprine)、硫鳥嘌呤；嘧啶類似物，諸如安西他濱 (ancitabine)、阿紮胞苷（azacitidine)、6-氮雜尿苷、卡莫氟 (carmofur)、阿糖胞苦（cytarabine)、雙去氧尿皆 (dideoxyuridine)、去氧氟尿苷（doxifluridine)、依諾他濱 (enocitabine)、氟尿苷（Hoxuridine);雄激素，諸如二甲睾 調（calusterone)、丙酸屈他雄酮（dromostanolone)、環硫雄 醇（epitiostanol)、美雄烧（mepitiostane)、睾内 S旨；抗腎上 腺素，諸如胺魯米特（aminoglutethimide)、米托坦 (mitotane)、曲洛司坦（trilostane);葉酸補充劑，諸如夫羅 林酸（frolinic acid);乙醯葡醛酯；醛磷醯胺醣苷；胺基乙 醯丙酸；伊利盧拉（eniluracil);安。丫咬（amsacrine);倍思 塔布（bestrabucil);比生群（bisantrene);艾達曲克 (edatraxate);得弗伐胺（defofamine);地美可辛 (demecolcine);地。丫酿（diaziquone);艾弗利散 (elfornithine);依利醋録（elliptinium acetate);埃坡黴素 (epothilone);依託格魯（etoglucid);硝酸鎵；經腺；香益 多糖（lentinan);羅尼達寧（lonidainine);類美登素 (maytansinoids)，諸如美登素（maytansine)及安絲菌素 154268.doc -41 - 201138819 (ansamitocins);丙脎月宗（mitoguazone) > 米托蒽酿 (mitoxantrone)；莫比達摩（mopidanmol);硝拉維林 (nitraerine);喷司他丁（pentostatin);凡那明（phenamet); 0比柔比星（pirarubicin);洛索蒽酿（losoxantrone);足葉草 酸（podophyllinic acid) ; 2-乙醢肼；丙卡巴耕（procarbazine); PSK® 多醣複合物（JHS Natural Products, Eugene, OR);雷 佐生（razoxane);根瘤菌素（rhizoxin);西佐喃（sizofiran); 鍺螺胺（spirogermanium);細交鍵孢菌鋼酸（tenuazonic acid);三亞胺酿（triaziquone) ; 2,2’，2”-三氯三乙胺；單端 抱黴浠族毒素（trichothecenes)(尤其T-2毒素、弗納庫林 A(verracurin A)、桿抱菌素 A(roridin A)及胺癸叮 (anguidine));胺基曱酸醋；長春地辛（vindesine);達卡巴 0秦（dacarbazine);甘露莫司；丁（mannomustine);二溴甘露 醇（mitobronitol);二漠衛矛醇（mitolactol) ; 0底泊溴烧 (pipobroman);甲托辛（gacytosine);阿拉伯糖苦（「Ara-C」）；環磷醯胺；噻替派；紫杉醇類（taxoid)，例如 TAXOL® 太平洋紫杉醇（Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, N.J.)、ABRAXANE®不含十六醇聚氧乙烯醚的 太平洋紫杉醇之經白蛋白工程改造奈米粒子調配物 (American Pharmaceutical Partners, Schaumberg, Illinois) 及TAXOTERE®多稀紫杉醇（Rh0ne-Poulenc Rorer，Antony， France);克羅南布（chloranbucil) ; GEMZAR® 吉西他濱； 6-硫代鳥嘌呤；酼基嘌呤；曱胺喋呤；鉑類似物，諸如順 銘（cisplatin)、奥赛力1白（oxaliplatin)及卡始；長春驗 154268.doc -42- 201138819 (vinblastine);翻；依託泊普（etoposide)(VP-16);異環填 醢胺（ifosfamide);米托蒽酿；長春新驗（vincristine); NAVELBINE®長春瑞賓（vinorelbine); 諾凡特龍 (novantrone);替尼泊武（teniposide);依達曲沙 (edatrexate)；柔紅黴素（daunomycin)；胺基蝶0令 (am in op ter in); 希羅達（xeloda); 伊班膦酸鹽 (ibandronate);伊立替康（Camptosar，CPT-11)(包括伊立替 康與5-FU及甲酿四氫葉酸（leucovorin)之治療方案）；拓撲 異構酶抑制劑RFS 2000 ;二氟甲基鳥胺酸（DMFO);類視 色素，諸如視黃酸；卡培他濱（capecitabine);康柏斯達汀 (combretastatin);甲酿四氫葉酸（LV);奧賽力銘，包括奧 赛力銘治療方案（FOLFOX);拉帕替尼（lapatinib) (Tykerb®) ; PKC-α、Raf、H-Ras、EGFR(例如埃羅替尼 (Tarceva®))及VEGF_A之抑制劑，其減少細胞增殖；及上 述任一者的醫藥學上可接受之鹽、酸或衍生物。 此定義中亦包括抗激素劑，其用以調控或抑制對腫瘤之 激素作用，諸如抗雌激素劑及選擇性雌激素受體調節劑 (SERM)， 包括例如他莫昔芬（tamoxifen)(包括 NOLVADEX®他莫昔芬）、雷諾昔酚（raloxifene)、曲洛昔芬 (droloxifene)、4-經基他莫昔芬、曲沃昔芬（trioxifene)、雷 洛昔芬鹽酸鹽（keoxifene)、LY117018、奥那司銅 (onapristone)及 FARESTON-托瑞米芬（FARESTON-toremifene);芳香酶抑制劑，其抑制調控腎上腺中雌激素 產生之芳香酶，諸如4(5)·咪唑、胺魯米特、MEGASE®醋 154268.doc • 43· 201138819 酸曱地孕酮（megestrol acetate)、AROMASIN® 依西美坦 (exemestane)、弗米斯坦（formestanie)、法屈0坐（fadrozole)、 RIVISOR®伏羅。坐（vorozole)、FEMARA® 來曲0坐（letrozole) 及ARIMIDEX®安美達錠（anastrozole);及抗雄激素劑，諸 如氟他胺（flutamide)、尼魯胺（nilutamide)、比卡魯胺 (bicalutamide)、亮丙瑞林（leuprolide)及戈舍瑞林 (goserelin);以及曲沙他濱（troxacitabine)(l，3-二氧戊環核 苷胞嘧啶類似物）；反義寡核苷酸，尤其是抑制異常細胞 增殖中所涉及之信號轉導路徑中的基因表現者，諸如PKC-α ' Ralf及H-Ras ;核糖核酸酶，諸如VEGF表現抑制劑（例 如ANGIOZYME®核糖核酸酶）及HER2表現抑制劑；疫苗， 諸如基因療法疫苗，例如ALLOVECTIN®疫苗、 LEUVECTIN® 疫苗及 VAXID® 疫苗；PROLEUKIN® rlL-2 ; LURTOTECAN®拓撲異構酶1抑制劑；ABARELIX® rmRH ;及上述任一者之醫藥學上可接受之鹽、酸或衍生 物。 術語「細胞激素」為由一個細胞群體釋放的作為細胞内 介體作用於另一細胞的蛋白質之通用術語。該等細胞激素 之實例為淋巴介質、單核球激素及傳統多肽激素。細胞激 素包括生長激素，諸如人類生長激素、N-甲硫胺醯基人類 生長激素及牛生長激素；副曱狀腺激素；甲狀腺素；胰島 素；胰島素原；鬆弛素；鬆弛素原；醣蛋白激素，諸如促 濾泡激素（FSH)、促甲狀腺激素（TSH)及促黃體激素（LH); 表皮生長因子；肝生長因子；纖維母細胞生長因子；促乳 154268.doc • 44- 201138819 素；胎盤生乳素；腫瘤壞死因子-α及腫瘤壞死因子_β ;苗 勒氏抑制物質（mullerian-inhibiting substance);小鼠促性 腺激素相關肽；抑制素，·活化素；血管内皮生長因子；整 合素，血小板生成素（TPO)，神經生長因子，諸如ngf_ α，血小板生長因子；轉型生長因子（TGF)，諸如TGF-α及 TGF-β ;類胰島素生長因子-I及類胰島素生長因子;紅 血球生成素（EPO)，骨生成誘導因子；干擾素，諸如干擾 素-a、干擾素-β及干擾素_γ ;群落刺激因子（CSF)，諸如巨 嗔細胞-CSF(M-CSF);粒細胞-巨噬細胞-CSF(GM-CSF); 及粒細胞-CSF(G-CSF);介白素（IL)，諸如 IL-1、IL-Ia、 IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL- 10、IL-11、IL-12 ;腫瘤壞死因子，諸如TNF_a或TNFp ; 及其他包括LIF及套組配位體（KL)之多肽因子。如本文所 用之術語細胞激素包括來自天然來源或來自重組細胞培養 物之蛋白質及天然序列細胞激素之生物活性等效物。 「生長抑制劑」在本文使用時係指活體外及/或活體内 抑制細胞生長之化合物或組合物。因此，生長抑制劑可為 顯著降低處於S期之細胞百分比的生長抑制劑。生長抑制 劑之實例包括阻斷細胞週期進程（除S期外之其他位置）之 樂劑’諸如誘導G1停滞及M期停滯之㈣卜經典的m期阻 斷劑包括長春化屬（長春新鹼及長春驗）、TAXOL®及拓撲 異構酶（_Q)n抑制劑，諸如小紅每、㈣比星、道諾徽 素苦及博萊黴素。使叫亭滞之彼等藥劑亦意外 (P er)引起S期停滯’例如DNA烧化劑，諸如他莫西 154268.doc -45- 201138819 芬、強的松（prednisone)、達卡巴嗪、氮芥、順鉑、曱胺嗓 吟、5-氟尿响咬及ara-C。其他資訊可見於The Molecular
Basis of Cancer, Mendelsohn 及 Israel 編，第 1章，「Cell cycle regulation, oncogenes, and antineoplastic drugs」， Murakami等人，（WB Saunders: Philadelphia，1995)尤其第 13頁中。 本申請案中所用之術語「前藥」係指醫藥活性物質之前 驅物或衍生形式’其對腫瘤細胞之細胞毒性相較於母體藥 物而言較小且能夠經酶促活化或轉化為更具活性之母體形 式。參見例如Wilman，厂ζ·« Career C/ze則
Biochemical Society Transactions，14，第 375-382 頁 615th Meeting Belfast (1986);及 Stella等人，「iVo 办叹 π
Chemical Approach to Targeted Drug Delivery, Δ Directed
Drug Delivery, Borchardt 等人，（編），第 247-267 頁，
Humana Press (1985)。本發明之前藥包括（但不限於）含碌 酸根之前藥、含硫代碌酸根之前藥、含硫酸根之前藥、含 肽之前藥、經D-胺基酸修飾之前藥、糖基化前藥、含卜内 醯胺之前藥、含視情況經取代之苯氧基乙醯胺之前藥或含 視情況經取代之苯乙醯胺之前藥、5_氟胞嘧啶及其他5•氟 尿嘧啶核苷前藥，其可轉化為更具活性之細胞毒性游離藥 物。可衍生成用於本發明之前藥形式的細胞毒性藥物之實 例包括（但不限於）上文所述之彼等化學治療劑。 放射線療法」意謂使用定向γ射線或P射線誘發對細胞 之足夠破壞作用以限制其正常發揮作用之能力或破壞全部 154268.doc •46· 201138819 細胞。應瞭解，廿馆姑你Λ1t 此項技術中已知多種確定治療劑量及持續 夺1方式以單次投藥形式提供典型治療且典型劑量在 每日10至200單位（戈雷（Gray))之範圍内。 降低或抑制」意謂引起較佳20%或20%以上，更佳 5〇% 或 5〇% 以上，及最佳 75%、85%、90%、95% 或 95% 以 上ϋ減少的能力。降低或抑制可關於所治療之病症症 狀、轉移或微轉移之存在或尺寸m廇之尺寸、休眠 腫瘤之存在或尺寸或血管新生病症中血管之尺寸或數目。 術。靜脈内輸注」係指經超過約5分鐘，較佳經約3 〇 鐘至90刀鐘之時段將藥物引入動物或人類患者之靜脈 内，但根據本發明，或者㈣小時或短於1G小時施以靜脈 内輸注。 術語「靜脈内快速注射」5戈「靜脈内推注」係指將藥物 :與動物或人類之靜脈内以使身體在約15分鐘或短於"分 鈿内，較佳在5分鐘或短於5分鐘内接受該藥物。 術語「皮下投與」係指藉由自藥物容器相對緩慢持續地 傳遞來將藥物引人動物或人類患者之皮膚τ，較佳引入皮 膚與下伏組織之間的袋囊内。該袋囊可藉由向上且遠離下 伏組織捏起或提拉皮膚而形成。 術語「皮下輸注」係指藉由自藥物容器相對緩慢持續地 定時段（包括（但不限於）3G分鐘或短於3〇分鐘，或90 分鐘或短於90分鐘)而將藥物引入動物或人類患者之皮膚 下，較佳引入皮膚與下伏組織之間的袋囊内。視情況，可 藉由皮下植入藥物傳遞栗來進行輸注，該藥物傳二係植 I54268.doc -47- 201138819 入於動物或人類患者之皮膚下’其中該泵傳遞預定量之藥 物維持預定時段，諸如30分鐘、90分鐘或在治療方案之持 續時間跨度内的時段。 術語「皮下快速注射」係指在動物或人類患者皮膚下投 與藥物’其中快速注射藥物傳遞較佳短於約15分鐘，更佳 短於5分鐘且最佳短於60秒。較佳在皮膚與下伏組織之間 的袋囊内投藥，其中該袋囊係例如藉由向上且遠離下伏組 織捏起或提拉皮膚而形成。 病症」為受益於抗體之治療的任何病狀u此包括慢性 及急性病症或疾病’包括使哺乳動物易患所述病症之彼等 病理病狀。本文中待治療之病症之非限制性實例包括癌 症；良性及惡性腫瘤；白血病及淋巴惡性病；神經元、神 經膠質、星形細胞、下丘腦及其他腺性、巨噬細胞、上 皮、基質及囊胚腔病症；及發炎性、血管新生及免疫病 症0 術語「治療有效量」係指有效治療哺乳動物之疾病或病 症的藥物量。在癌症之狀況下，治療有效量之藥物可減少 癌細胞之數目；減小腫瘤尺寸；抑制（意即以一定程度減 慢且較佳中止）癌細胞浸潤至周邊器官中；抑制（意即以一 定程度減慢且較佳中止）腫瘤轉移；以一定程度抑制腫瘤 生長；及/或以一定程度減輕與病症相關之一或多個症 對於藥物可阻止生長及/或殺死現有癌細胞而言，藥 物可為細胞生長抑制劑及/或細胞毒性劑。對於癌症療 法，活體内功效可例如藉由評定存活持續時間、無惡化存 154268.doc -48· 201138819 活期（PFS)持續時間、無惡化存活期（PFS)之延長、反應率 (RR)、反應持續時間及/或生活品質來量測。 「治療」係指用於需要治療者（包括已罹患病症者）的治 療性治療。 「預防性治療」係指預防病症之治療。 詞語「標記」在本文中使用時係指直接或間接結合至多 肽之可偵測化合物或組合物。標記本身可偵測（例如放射 性同位素標記或螢光標記），或在酶標記之狀況下可催化 可偵測之受質化合物或組合物之化學變化。 II.抗VEGF抗體及拮抗劑 本文提供抗VEGF拮抗劑用於治療卵巢癌之用途。企管 新生為導致實體腫瘤侵襲及轉移的主要過程之_。血管新 生信號傳導路徑可藉由自腫瘤細胞釋放血管新生促進劑 (諸如企管内皮生長因子（VEGF))至局部微環境中而引發。 存在日益積累之證據證明血管新生在卵巢癌疾病預後及可 月b進展及預後中起作用。參見例如Y〇neda j等人，
Expression of angi〇genesis_reiated genes and pr〇gressi〇n of human ovarian carcinomas in nude mice. J Natl Cancer Inst 90:447-54，1998 ; Nakanishi Y等人，77ze vascular endothelial growth factor and transforming growth factor-beta associates with angiogenesis in epithelial ovarian cancer. Int J Gynecol Pathol 16:256-62, 1997 \ Gasparini G 等人，Prognostic and predictive value of tumour angiogenesis in ovarian carcinomas. Int J Cancer 154268.doc •49- 201138819 69:205-11，1996 ; Hollingsworth HC等人，rwmor in advanced stage ovarian carcinoma. Am J Pathol 147:33-41，1995 ; Paley 等尺，Vascular endothelial growth factor expression in early stage ovarian carcinoma. Cancer 80:98-106，1997 ; Alvarez AA 等人，77ze significance of angiogenesis in epithelial ovarian carcinoma. Clin Cancer Res 5:587-91, 1999 i Gasparini G. The rationale and future potential of angiogenesis inhibitors in neoplasia. Drugs 58:1 7-38，1999 ; van Hinsbergh VW 等 人，Angiogenesis and ant i-angio genes is: perspectives for the treatment of solid tumors. Ann Oncol 10 SuppI 4:60-3, 1999 ； Malonne A 5 Mechanisms of tumor angiogenesis and therapeutic implications: angiogenesis inhibitors. Clin Exp Metastasis 17:1-14, 1999 ; Folkman J. Tumor angiogenesis: therapeutic implications. N Eng J Med 285:1182-6, 1971 ; Kim KJ等人，/«/»·〜·"·〇« 0/ vwcw/ar
endothelial growth factor-induced angiogenesis suppresses tumour growth in vivo. Nature 362:841-4, 1993 » 及 ^Luo JC 專尺，Differential inhibition of fluid accumulation and tumor growth in two mouse ascites tumors by an anti vascular endothelial growth factor/permeability factor
Cancer Res 58:2594-600，1998 ° (i) VEGF抗原 用於產生抗體之VEGF抗原可為例如VEGF165分子以及 154268.doc • 50- 201138819 VEGF之其他同功異型物或其含有所需抗原決定基之片 段。其他適用於產生本發明之抗VEGF抗體的VEGF形式為 熟習此項技術者所顯而易知。 人類VEGF係藉由首先使用牛VEGF cDNA作為雜交探針 篩選自人類細胞製備之cDNA文庫而獲得。Leung等人， (1989) Science, 246:1306。一種所識別之cDNA由此編碼與 牛VEGF具有大於95%同源性的具有165個胺基酸之蛋白 質；此具有165個胺基酸之蛋白質通常稱作人類 VEGF(hVEGF)或VEGF165。人類VEGF之促有絲分裂活性 係藉由使人類VEGF cDNA在哺乳動物宿主細胞中表現而 得以證實。經以人類VEGF cDNA轉染之細胞條件化之培 養基促進毛細血管内皮細胞之增殖，而對照細胞則無此作 用。Leung等人，（1989) Science，同上。 儘管可自天然來源分離及純化血管内皮細胞生長因子以 用於後繼治療用途，但該蛋白質在濾泡細胞中的濃度相對 較低且在精力及費用方面之成本較高而使得回收VEGF經 證明不具有商業利益。因此，進一步試圖經由重組DNA技 術選殖及表現VEGF。（參見例如Ferrara, Laboratory Investigation 72:615-618 (1995)及其中引用之參考文獻）。
VEGF係在多種組織中以由替代RNA剪接產生之多種均 二聚形式（每個單體121、145、165、189及206個胺基酸）表 現。VEGF121為不結合肝素之可溶性有絲分裂原；較長形 式之VEGF以逐漸愈高之親和力結合肝素。VEGF之肝素結 合形式可在羧基末端藉由纖維蛋白溶酶裂解以釋放VEGF 154268.doc -51 - 201138819 之可擴散形式。在纖維蛋白溶酶裂解後所識別之羧基末端 狀之胺基酸序列為Argi i〇-Alani。以均二聚體形式分離之 胺基末端「核心」蛋白質VEGF(l-llO)以與完整VEGF丨65均 二聚體相比類似之親和力結合中和單株抗體（諸如稱作 4.6.1及3·2E3.1·1之抗體）及VEGF受體之可溶性形式。 亦已識別出若干在結構上與VEGF相關之分子，包括胎 盤生長因子（PIGF)、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D及 VEGF-E。Ferrara 及 Davis-Smyth (1987) Endocr. Rev.同上； Ogawa 等人，J. Biological Chem. 273:31273-31281 (1998); Meyer等人，EMBO J·，18:363-374(1999)。受體 酪胺酸激酶Flt-4(VEGFR-3)已經識別為VEGF-C及VEGF-D 之受體。Joukov 等人，EMBO. J. 15:1751(1996) ; Lee 等 人，Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93:1988-1992(1996)； Achen等人，（1998) Proc. Natl· Acad. Sci. USA 95:548-553。VEGF-C已經展示涉及淋巴血管新生之調控。Jeltsch 等人，Science 276:1423-1425(1997)。 (ii)抗VEGF抗體 適用於本發明方法中以治療卵巢癌之抗VEGF抗體包括 以足夠親和力及特異性結合至VEGF且可降低或抑制VEGF 之生物活性的任何抗體或其抗原結合片段。抗VEGF抗體 通常不會結合至諸如VEGF-B或VEGF-C之其他VEGF同系 物，亦不會結合至諸如PIGF、PDGF或bFGF之其他生長因 子。 在本發明之某些實施例中，抗VEGF抗體包括（但不限 154268.doc -52- 201138819 於）與由融合瘤ATCC HB 10709產生之單株抗VEGF抗體 A4.6.1結合相同抗原決定基的單株抗體；根據Presta等 人，（1997) Cancer Res. 57:4593-4599產生之重組人類化抗 VEGF單株抗體。在一實施例中，抗VEGF抗體為「貝伐單 抗（BV)」，亦稱作「rhuMAb VEGF」或「AVASTIN®」。 AVASTIN®在某些國家可購得。其包含突變型人類IgGl構 架區及來自阻斷人類VEGF與其受體結合之鼠類抗hVEGF 單株抗體A.4.6.1之抗原結合互補決定區》貝伐單抗之約 93%胺基酸序列（包括大部分構架區）係源自人類IgGl，立 約7%之序列源自鼠類抗體A4.6.1。 貝伐單抗及其他人類化抗VEGF抗體進一步描述於2005 年2月26曰頒佈之美國專利第6,884,879號中。其他抗體包 括如PCT公開案第WO 2005/012359號、PCT公開案第WO 2005/044853號及美國專利申請案60/991,302中所述之G6或 B20系列抗體（例如G6-31、B20-4.1)，該等專利申請案之内 容係以引用方式明確併入本文中。關於其他抗體參見美國 專利第 7,060,269號、第 6,582,959號、第 6,703,020號；第 6,054,297 號；WO 98/45332 ； WO 96/30046 ； WO 94/ 10202 ; EP 0666868B1 ;美國專利申請公開案第 2006009360號、第20050186208號、第 20030206899號、第 20030190317號、第 20030203409號及第 20050112126 號； 及 Popkov 等人，Journal of Immunological Methods 288: 149-164 (2004)。其他抗體包括結合至人類VEGF上之功能 性抗原決定基的抗體，該功能性抗原決定基包含殘基 F17、M18、D19、Y21、Y25、Q89、191、K101、E103及 154268.doc -53- 201138819 (：104或者包含殘基？17、丫21、（)22、丫25、〇63、183及 Q89。 在本發明之一實施例中，抗VEGF抗體具有包含下列胺 基酸序列的重鏈可變區： EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASGYTFT NYGMNWVRQA PGKGLEWVGW INTYTGEPTY AADFKRRFTF SLDTSKSTAY LQMNSLRAED TAVYYCAFCYP HYYGSSHWYF DVWGQGTLVT VSS (SEQ ID No. 1) 及包含下列胺基酸序列之輕鏈可變區：
DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCSASQDIS NYLNWYQQKP GKAPKVLIYF TSSLHSGVPS RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ YSTVPWTFGQ GTKVEIKR (SEQ ID No. 2)。 本發明之「G6系列抗體」為源自根據PCT公開案第WO 2005/012359號之圖7、24-26及34-35中任一者之G6抗體或 G6衍生抗體序列的抗VEGF抗體，該公開案之整個揭示内 容係以引用方式明確併入本文中。亦參見PCT公開案第 WO 2005/044853號，其整個揭示内容係以引用方式明確併 入本文中。在一實施例中，G6系列抗體結合至人類VEGF 上包含殘基 F17、Y21、Q22、Y25、D63、183 及 Q89 之功 能性抗原決定基。 本發明之「B20系列抗體」為源自根據PCT公開案第WO 2005/012359號之圖27-29中任一者之B20抗體或B20衍生抗 體序列的抗VEGF抗體，該公開案之整個揭示内容係以引 用之方式明確併入本文中。亦參見PCT公開案第WO 2005/044853號及美國專利申請案60/991，302，此等專利申 154268.doc •54- 201138819 請案之内容係以引用之方式明確併入本文中。在一實施例 中，B20系列抗體結合至人類VEGF上包含殘基F17、 M18、D19、Y21、Y25、Q89、191、K101、E103 及 C104 之功能性抗原決定基。 本發明之「功能性抗原決定基」係指抗原中積極促成與 抗體之結合的胺基酸殘基。抗原之積極促成殘基中任一者 之突變（例如，藉由丙胺酸或同系物突變所致之野生型 VEGF突變）將妨礙抗體之結合使得抗體之相對親和力比率 (IC50突變型VEGF/IC50野生型VEGF)大於5(參見WO 2005/0123 59之實例2)。在一實施例中，相對親和力比率係 藉由溶液結合噬菌體呈現ELISA來測定。簡言之，在4°C下 用PBS中濃度為2 pg/ml之待測試抗體之Fab形式塗佈96孔 Maxisorp 免疫板（NUNC)隔夜，且用 PBS、0.5% BSA 及 0.05% Tween 20(PBT)在室溫下阻斷2小時。首先在室溫下 將噬菌體呈現hVEGF丙胺酸點突變體（殘基8-109形式）或野 生型hVEGF(8-109)於PBT中之連續稀釋液在塗有Fab之板 上培育15分鐘，且用PBS、0.05% Tween 20(PBST)洗滌 板。用於PBT中1:5000稀釋之抗Μ13單株抗體辣根過氧化 酶（Amersham Pharmacia)結合物偵測結合之嗟菌體，用 3,3，，5,5，-四曱基聯苯胺（丁1\43，幻46经&&以&?61'7 1^53, Gaithersburg，MD)受質顯影約5分鐘，用1.0 M H3P04淬滅 且在450 nm下以分光光度方式讀數。IC50值之比率 (IC50，ala/IC50，wt)表示結合親和力降低之倍數（相對結 合親和力）。 154268.doc -55- 201138819 (iii) VEGF受體分子 已識別出兩種VEGF受體’即Flt-1(亦稱作VEGFR-1)及 KDR(亦稱作 VEGFR-2)。Shibuya等人，（1990) Oncogene 8:519-527 ; de Vries等人，（1992) Science 255:989-991 ; Terman等人 ’（1992) Biochem. Biophys. Res. Commun. 187:1579-1586。各VEGF家族成員對各受體之特異性不 同，但VEGF-A結合至Flt-1及KDR兩者。神經菌毛素-1已 經展示為選擇性VEGF受體，能夠結合肝素結合性VEGF同 功異型物（Soker 等人，（1998) Cell 92:735-45)。Flt-I 及 KDR均屬於受體酪胺酸激酶（Rtk)家庭^ RTK包含一大家 族具有不同生物活性之跨膜受體。目前，已識別出至少十 九（19)種不同RTK子家族。受體酪胺酸激酶（RTK)家族包括 對於多種細胞類型之生長及分化而言關鍵之受體（Yarden及 Ullrich (1988) Ann. Rev. Biochem. 57:433-478 ; Ullrich及 Schlessinger (1990) Cell 61:243-254)。RTK之固有功能在 配位體結合後得以活化，使得受體及多個細胞受質磷酸 化，且隨後產生多種細胞反應（Ullrich及Schlessinger (1990) Ce丨丨61:203-212)。因此，受體酪胺酸激酶介導之信 號轉導係由與特定生長因子（配位體）進行細胞外相互作用 而引發，通常繼之以受體二聚化，刺激内在蛋白酪胺酸激 酶活性及受體轉磷酸化。由此形成細胞内信號轉導分子之 結合位點且使得與廣泛細胞質信號傳導分子形成促進適當 細胞反應（例如細胞分裂 '分化、代謝效應、細胞外微環 境變化）之複合物（參見Schlessinger及Ullrich (1992) 154268.doc •56- 201138819
Neuron 9:1-20)。在結構上，Flt-l及KDR具有細胞外域中 之七個類免疫球蛋白結構域、單個跨膜區及由激酶插入結 構域插入之共同酪胺酸激酶序列。Matthews等人，（1991) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88:9026-9030 ; Terman等人， (1991) Oncogene 6:1677-1683 。 特異性結合至VEGF之VEGF受體分子或其片段可在本發 明方法中用以結合至及螯合VEGF蛋白，從而防止其信號 傳導。在某些實施例中，VEGF受體分子或其VEGF結合片 段為可溶形式，諸如sFlt-Ι。受體之可溶形式對VEGF蛋白 質結合至VEGF之生物活性發揮抑制作用，從而防止其結 合至其呈現於目標細胞表面上的天然受體。亦包括VEGF 受體融合蛋白，其實例描述如下。 嵌合VEGF受體蛋白為具有源自至少兩種不同蛋白質之 胺基酸序列的受體分子，其中至少一種蛋白質為VEGF受 體蛋白（例如flt-l今KDR受體），該嵌合VEGF受體蛋白能夠 結合至VEGF且抑制VEGF之生物活性。在某些實施例中， 本發明之嵌合VEGF受體蛋白由僅源自兩種不同VEGF受體 分子之胺基酸序列組成；然而，可將包含flt-l及/或KDR受 體之細胞外配位體結合區之1、2、3、4、5、6或全部7個 類Ig結構域的胺基酸序列連接至來自其他無關蛋白質（例如 免疫球蛋白序列）之胺基酸序列。組合類Ig結構域之其他胺 基酸序列易於為一般技術者所顯而易知。嵌合VEGF受體 蛋白之實例包括例如可溶性Flt-1/Fc、KDR/Fc或FLt-1/KDR/Fc(亦稱作VEGF捕獲劑）（參見例如PCT申請公開案 154268.doc -57- 201138819 第 WO 97/44453 號）。 本發明之可溶性VEGF受體蛋白或嵌合VEGF受體蛋白包 括未經由跨膜結構域固定至細胞表面的VEGF受體蛋白。 因而，包括嵌合受體蛋白之VEGF受體之可溶形式雖然能 夠結合至VEGF且使VEGF去活’但不包含跨膜結構域且因 此一般不與表現該分子之細胞的細胞膜締合。 III.抗VEGF抗體之治療用途 本發明涵蓋抗血管新生療法，一種旨在抑制為提供營養 素以支持腫瘤生長所需之腫瘤血管形成的新穎癌症治療策 略。由於血管新生包含在原發腫瘤生長與轉移中，因此本 發明所提供之抗血管新生治療能夠抑制腫瘤在原發部位之 贅生性生長，以及預防腫瘤在繼發部位處之轉移，從而容 許由其他治療劑攻擊腫瘤。另外，卵巢癌與高含量之循環 血管内皮生長因子（VEGF)有關，VEGF為一種與腫瘤生長 及擴散有關之蛋白質。對具有卵巢癌之女性的研究已展示 高含量VEGF與較差預後之間的相關性（AWarez A等人， 1999 Clin Cancer Res·; 5:587-591 ; Yamamoto s等人， 1997 Br J Cancer; 76:1221-1227)。 特定而言，在一實施例中，本發明提供一種治療診斷有 (視情況新近診斷有）先前未經治療之卵巢癌之患者的方 法，其包含對患者進行如下治療方案，該治療方案將至少 化學療法與同步投與有效量之抗VEGF抗體組合，繼而進 灯抗VEGF維持療法。在本發明之某些實施例中患者具 有ΙΠ期（經次最佳及宏觀最佳減積術）或…期上皮印巢癌、 154268.doc •58· 201138819 原發性腹膜癌或輸卵管癌.在其他實施例中，患者具有i 期及Ila期（3級或僅透明細胞癌）或IIb_IV期上皮卵巢癌 '輸 印管癌或原發性腹膜癌。在另一實施例中，本發明提供— 種治療診斷有復發性或先前經治療之印巢癌之患者的方 法，其包含對患者進行如下治療方案，該治療方案將至少 化學療法與同步投與有效量之抗VEGF抗體組合，繼而進 行抗VEGF維持療法。 組合療法 本發明之特徵在於使用至少一種VEGF特異性拮抗劑與 一或多種額外抗癌療法之組合’繼而進行抗vegf維持療 法。抗癌療法之實例包括（不限於）手術、放射線療法、生 物療法、免疫療法、化學療法或此等療法之組合。另外， 、，田胞毋性劑、杬血管新生劑及抗增殖劑可與vegf特異性 拮抗劑組合使用。 在某些態樣中，本發明提供一種治療印巢癌之方法，其 係藉由向易患或診斷有先前未經治療之卵巢癌或復發性印 巢癌之患者投與有效量之抗VEGF抗m多種化學治 療劑而達成。多種化學治療劑可用於本發明之組合治療$ 法中。所涵蓋之化學治療劑之例示性及非限制性清單係提 供於本文中之「定義」下或描述於本文中。 、 在實例中，本發明之特徵在於使用VEGF特異性拮抗 劑與一或多種化學治療劑（例如混合液）或其任何組合7 ^ 某些實施例中’化學治療劑為例如紫杉烷、太平洋紫杉 醇、多稀紫杉SI、太平洋紫杉醇蛋白結合粒子（例= 154268.doc •59_ 201138819
Abraxane®)、轴類似物、卡翻、吉西他濱或其組合療法。 在實施例中，化學治療劑為卡始及太平洋紫杉醇或多婦 i杉醇。在另一實施例中，化學治療劑為卡鉑及吉西他 濱°組合投藥包括使用各別調配物或單個醫藥調配物進行 同時投藥，以及以任-次序連續投藥，其中較佳存在兩種 (或所有）活性劑同時發揮其生物活性之時段繼而以vegf特 異性拮抗劑進行維持療法，例如如圖j、圖2或圖8或圖u 中所概述了根據製造商說明書或如由熟練專業人員憑經 驗所判定來使用該等化學治療劑之製備及給藥時程。化學 療法之製備及給藥時程亦描述於Chemotherapy service
Ed., M. C. Perry, Williams & Wilkins, Baltimore, Md. (1992)中。可在投與VEGF特異性拮抗劑之前或之後或可與 其同時給與化學治療劑。在本發明之某些實施例中，給藥 時程及量係如圖1、圖2或圖8或圖11中所述。 在一些其他態樣中，適於與本發明抗體用於組合腫瘤療 法的其他治療劑包括涉及腫瘤生長之其他因子（諸如 EGFR、ErbB2(亦稱作 Her2)、ErbB3、ErbB4 或 TNF)之拮抗 劑。有時’可宜亦向患者投與一或多種細胞激素。在一實 施例中’ VEGF抗體與生長抑制劑共同投與。舉例而言， 可首先投與生長抑制劑，繼而投與VEGF抗體。然而，亦 涵蓋同時投與VEGF抗體或首先投與vegf抗體。生長抑制 劑之適合劑量為目前使用之劑量，且可因生長抑制劑與抗 VEGF抗體之組合作用（協同作用）而減少。 本文之調配物亦可含有一種以上為治療特定適應症所需 154268.doc -60 - 201138819 之活性化合物，較佳為彼此無不利影響之具有補充活性的 活性化合物。舉例而言，可能需要在一種調配物中進一步 提供結合至EGFR、VEGF(例如結合VEGF上不同抗原決定 基之抗體）、VEGFR、ErbB2(例如Herceptin®)之抗體或另 一用於腫瘤學適應症之抗體。或者或另外，組合物可包含 細胞毒性劑、細胞激素、生長抑制劑及/或小分子VEGFR 拮抗劑。該等分子適當地以有效達成預定目的之量組合存 在。在某些實施例中，VEGF拮抗劑（例如抗VEGF抗體）為 用於卵巢癌之治療。在某些實施例中，VEGF拮抗劑（例如 抗VEGF抗體）與卡鉑及太平洋紫杉醇組合，繼而進行抗 VEGF維持療法。在某些實施例中，VEGF拮抗劑（.例如抗 VEGF抗體）與順鉑及太平洋紫杉醇組合，繼而進行抗 VEGF維持療法。在某些實施例中，VEGF拮抗劑（例如抗 VEGF抗體）與卡鉑及多烯紫杉醇組合，繼而進行抗VEGF 維持療法。在某些實施例中，VEGF拮抗劑（例如抗VEGF 抗體）與卡鉑及吉西他濱組合，繼而進行抗VEGF維持療 法。 在某些態樣中，適於與本發明抗體用於組合癌症療法的 其他治療劑包括其他抗血管新生劑。許多抗血管新生劑已 經識別且在此項技術中為已知的，包括Carmeliet及Jain (2000)所列之抗血管新生劑。在一實施例中，本發明之抗 VEGF抗體與另一 VEGF拮抗劑或VEGF受體拮抗劑（諸如 VEGF變異體、可溶性VEGF受體片段、能夠阻斷VEGF或 VEGFR之適體、中和抗VEGFR抗體、低分子量VEGFR酪 154268.doc -61 - 201138819 胺酸激酶抑制劑及其任何組合）組合使用。或者或另外， 可向患者共同投與兩種或兩種以上抗Vegf抗體。 為預防或治療疾病，VEGF特異性拮抗劑之適當劑量將 視如上文所定義之待治療疾病之類型、疾病之嚴重程度及 病程、VEGF特異性拮抗劑係出於預防性目的抑或治療性 目的而投與、先前療法、患者臨床病史及對Vegf特異性 拮杬劑之反應以及主治醫師之考慮而定。VEgf特異性拮 抗劑係在某時或在一系列治療中適當投與患者。在組合療 法方案中，本發明之VEGF特異性拮抗劑與一或多種抗癌 療劑以治療有效或協同量投與。如本文所用之治療有效 量為共同投與VEGF特異性拮抗劑與一或多種其他治療劑 或投與本發明組合物使得如上文所述之癌症得以減輕或抑 制之量。治療協同量為VEGF特異性拮抗劑與一或多種其 他治療劑協同或顯著減輕或消除與特定疾病相關之病狀或 症狀或延長無惡化存活期所需之量。 VEGF特異性拮抗劑與—或多種其他治療劑可以一定量 同時或依序投與且維持-定時段，該量及時段足以減輕或 消除腫瘤、休眠腫瘤或微轉移之出現或復發。vegf特異 性拮抗劑可作為維持療法投與以防止或降低腫瘤復發之可 能性或延長患者之無惡化存活期。 如般技術者所瞭解，化學治療劑或其他抗癌劑之適當 劑量-般大致為在臨床療法中例如在化學治療劑單獨投與 或與其他化學治療劑組合投與之情況下已使用之劑量。劑 量將視治療之病狀而變化。投與治療之醫師將能判定用於 154268.doc •62- 201138819 個別個體之適當劑量β 除上述治療方案之外，可對患者進行放射線療法。 在某些實施例中’所投與之VEGF抗體為完整裸抗體。 然而’ VEGF抗體可與細胞毒性劑結合。在某些實施例 • 巾，結纟之抗體及/或其所結合之抗原係由細胞内化，使 .#結合物殺死其所結合之癌細胞的治療功效提高。在一實 施例中，細胞毒性劑靶向或干擾癌細胞中之核酸。該等細 胞毒性劑之實例包括類美登素、刺抱黴素、核糖核酸酶及 DNA核酸内切酶。 本發明之特徵亦為藉由提供說明來指導罹患卵巢癌之人 類個體接受抗VEGF抗體之治療以便延長無惡化存=期、 降低該個體之癌症復發風險或提高該個體之存活可能性的 方法。在一些實施例中，該方法進一步包含提供接受至少 一種化學治療劑之治療繼而進行抗VEGF維持療法的說 明。在一些實施例中，該方法進一步包含提供接受兩種或 兩種以上化學治療劑之治療繼而進行抗VEGF維持療法的 說明。抗VEGF抗體之治療可與化學治療劑之治療同步進 行。在某些貫施例中’如由指導方法所指示來治療個體。 藉由在使用或不使用化學治療劑下投與抗VEGF抗體來治 療卵巢癌可持續直至癌症復發或死亡為止。在本發明之某 些實施例中’患者在化學治療劑同步療法之後以抗vegf 療法治療至少16個週期。在本發明之其他實施例中，患者 在化學治療劑同步療法之後以抗VEGF療法治療至少12個 週期。 154268.doc -63- 201138819 本發月進步提供一種推廣方法，其包含推廣抗VEGF 4體之杈與以用於治療人類個體之卵巢癌。在一些實施例 s方法進一步包含推廣至少一種化學治療劑之投與繼 而進行抗VEGF維持療法。在—些實施例中，$方法進一 步Ο 3推廣兩種或兩種以上化學治療劑之投與繼而進行抗 VEGF維持,療法。&VEGF抗體之投與可與化學治療劑之投 與同步進行。可藉由任何可利用之方式進行推廣。在一些 實細例中該推廣係藉由抗VEGF抗體之市售調配物附帶 之藥品說明書來達成。該推廣亦可藉由化學治療劑之市售 調配物附帶之藥品說明書來達成。推廣可藉由與醫師或健 康照護提供者進行書面或口頭交流來達成。在一些實施例 中，該推廣係藉由藥品說明書來達成，其中該藥品說明書 提供接受以抗VEGF抗體進行之卵巢癌療法的說明。在另 一貫施例中，藥品說明書包括實例1或實例2或實例3下之 一些或所有結果。在一些實施例中，在該推廣之後在使用 或不使用化學治療劑下用抗VEGF抗體治療個體。 本發明提供一種商業方法，其包含銷售用於治療人類個 體之印巢癌的抗VEGF抗體以延長個體無惡化存活時間、 降低個體之癌症復發可能性或提高個體之存活可能性。在 一些實施例中，該方法進一步包含銷售與抗Vegf抗體組 合使用之化學治療劑繼而進行抗VEGF維持療法。在—此 實施例中，銷售之後在使用或不使用化學治療劑下用抗 VEGF抗體治療個體，繼而進行抗VEGF維持療法。在_此 實施例中’該方法進一步包含銷售兩種或兩種以上與抗 154268.doc -64- 201138819 VEGF抗體組合使用之化學治療劑繼而進行抗維持療 法。在一些實施例中，銷售之後在使用或不使用化學治療 劑下用抗VEGF抗體治療個體，繼而進行抗VEGF維持療 法。 亦提供一種商業方法，其包含銷售與抗vegf抗體組合 用於療人類個體之卵巢癌的化學治療劑以便延長該個體 之無惡化存活時間、降低個體之癌症復發可能性或提高個 體之存活可此性。在一些實施例中，銷售之後用化學治療 劑與抗VEGF抗體之組合治療個n，繼％進行抗vegf維持 療法。亦提供一種商業方法，其包含銷售兩種或兩種以上 與抗VEGF抗體組合的化學治療劑繼而進行抗維持療 法來治療人類個體之即巢癌以便延長該個體之無惡化存活 時間、降低個體之癌症復發可能性或提高個體之存活可能 在二貫施例中，銷售之後用化學治療劑與抗vEGF 抗體之組合治療個體，繼而進行抗VEGF維持療法。
Iv劑量及持續時間 VEGF特異性拮抗劑組合物將以符合良好醫療實踐之方 式調配、給藥及投與。在此背景下考慮之因素包括所治療 之特定病症、所治療之特㈣體、個別患者之臨床病狀、 病症之起因 '藥劑之傳遞部位、投藥方法、投藥時程及從 業醫生已知之其他因素。待投與之VEG_異性括抗劑的 「治療有效量」將取決於該等考慮，且為預防、改善或治 療或穩定癌症；延長至、化為止之時間（無惡化存_ = 持續時間）或治療或預防腫瘤 '休眠腫瘤或微轉移之出現 I54268.doc •65· 201138819 或復發所需的最低量。VEGF特異性拮抗劑無須（但視情況） 與一或多種當前用於預防或治療癌症或預防或控制產生癌 症之風險的藥劑一起調配。該等其他藥劑之有效量視調配 物中存在的VEGF特異性拮抗劑之量、病症或治療之類型 以及上述其他因素而定。此等藥劑一般以與上文所用之相 同劑量及投藥途徑使用，或劑量為迄今所用劑量的約i % 至 99%。 視疾病類型及嚴重程度而定，不管是例如藉由一或多次 各別投藥抑或藉由連續輸注，約1 丨〇〇 mg/kg(例如 0.1-20 mg/kg)之VEGF特異性拮抗劑為向患者投與之初始 候選劑量。視上述因素而定，典型日劑量可能在約i pg/kg 至約100 mg/kg或100 mg/kg以上之範圍内。尤其合意之劑 量包括例如 5 mg/kg、7.5 mg/kg、10 mg/kg及 15 mg/kg。對 於經數日或更長時間之重複投藥而言，視病狀而定，持續 治療直至如由上文所述或此項技術中已知之方法所量測癌 症得以治療為止。然而，其他給藥方案可適用。在一實例 中’若VEGF特異性拮抗劑為抗體’則以約5 mg/kg至約15 mg/kg(包括（但不限於）5 mg/kg、7.5 mg/kg、1〇 mg/kg或 15 mg/kg)之劑量範圍每週一次、每兩週一次或每三週一次投 與本發明抗體。本發明療法之進展易於藉由習知技術及檢 測法來監測《在其他實施例中，該給藥方案與化學療法方 案（包括（但不限於）一或多種化學治療劑）組合用作第一線 療法來治療先前未經治療之印巢癌’繼而進行維持療法。 在其他實施例中’該給藥方案與化學療法方案（包括（但不 154268.doc -66- 201138819 限於）一或多種化學治療劑）組合用 乍第—線療法來治療復 發性印巢癌，繼而進行維持療法。關μ a 于潦/去關於適合劑量之其他資 訊係提供於下文之實例中。 、療法之持續時間將持續長達如醫學上所指示之久或直至 達成所需治療效果（例如本文所述的效果）即可。在某些實 施例中，VEGF特異性拮抗劑療法持⑸個月、2個月、、—4個 月、6個月、8個月、1〇個月、i年、2年、3年、*年、5年 或持續數年直至個體終生之時段。在某些實施例中，抗 VEGF療法在與化學治療劑進行同步抗vegf治療後持續至 少16個週期。在其他實施例中’抗VEGF療法在與化學治 療劑進行同步抗VEGF治療後持續至少12個週期。 根據已知方法，諸如以快速注射形式靜脈内投與或藉由 Λ定時段連續輸注，藉由肌肉内、腹膜内、腦脊髓内、 皮下、關節内、滑膜内、鞘内腔、經口 '表面或吸入途徑 向個體（例如人類患者）投與本發明之VEGF特異性拮抗劑。 若廣泛副作用或毒性與VEGF拮抗作用相關，則尤其需要 局部投與。亦可將離體策略用於治療應用。離體策略涉及 用編瑪VEGF拮抗劑之聚核苷酸轉染或轉導獲自個體之細 胞°接著使經轉染或轉導之細胞返回至個體體内。該等細 胞可為多種類型中之任一種，包括（不限於）造血細胞（例如 月髓細胞、巨噬細胞、單核細胞、樹突狀細胞、T細胞或b 細胞）、纖維母細胞、上皮細胞、内皮細胞、角質細胞或 肌細胞。 舉例而言，若VEGF特異性拮抗劑為抗體’則藉由任何 154268.doc •67· 201138819 適合方式，包括非經腸、皮下、腹膜内、肺内及鼻内投與 抗體’且右為局部免疫抑制性治療所需，則藉由病變内投 藥來投與抗體。非經腸輸注包括肌肉内、靜脈内、動脈 内、腹膜内或皮下投藥。另外’適當地藉由脈衝輸注來投 與抗體’尤其以劑量漸降之抗體。給藥較佳藉由注射進 行，最佳藉由靜脈内或皮下注射進行，在某種程度上視投 藥為短暫投藥抑或長期投藥而定。 在另一實例中’當病症或腫瘤位置允許時，例如藉由直 接注射局部投與VEGF特異性拮抗劑化合物，且注射可週 期性地重複。VEGF特異性拮抗劑亦可向個體全身傳遞或 直接傳遞至腫瘤細胞，例如傳遞至腫瘤或在手術切除腫瘤 後傳遞至腫瘤床以預防或減少例如休眠腫瘤或微轉移之局 部復發或轉移。 或者，可將含有編碼VEGF特異性拮抗劑之核酸序列的 抑制性核酸分子或聚核苷酸傳遞至個體内之適當細胞。在 某些實施例中，核酸可導引至腫瘤自身。 可藉由任何適於所用載體之方式將核酸引入細胞中。許 多該等方法在此項技術中為熟知的（Sambrook等人，同 上；及 Watson 等人，Recombinant DNA，第 12 章，第 2 版，Scientific American Books，1992)。基因傳遞之方法之 實例包括脂質體介導之轉染、電穿孔、磷酸鈣/DEAE聚葡 萄糖法、基因搶及顯微注射。 V.醫藥調配物 根據本發明使用之抗體之治療調配物係藉由將具有所需 154268.doc -68 · 201138819 純度之抗體與視情況選用之醫藥學上可接受之載劑、賦形 劑或穩定劑（Remington，s pharmaceutical ^印如第^ 版，〇sol，A.編（1980))混合而以凍乾調配物或水溶液形式 製備供儲存»可接受之㈣、朗劑或穩定劑在所用劑 量及濃度下對接受者無毒且包括緩衝液，諸如磷酸鹽、擰 檬I鹽及其他有機酸；抗氧化劑，包括抗壞血酸及甲硫胺 酸；防腐劑(諸如氣化十八基二甲基苯甲基銨；氣化六經 季錄氣化笨甲烴叙、苄索氣敍；苯紛、丁醇或苯甲醇； 對羥基苯甲酸烷酯，諸如對羥基笨曱酸曱酯或對羥基苯甲 酸丙醋；兒茶酚；間苯二酚；環己醇；3_戊醇；及間曱 酚）；低分子量（少於約1〇個殘基）多肽；蛋白質，諸如血清 白蛋白、明膠或免疫球蛋白；親水性聚合物，諸如聚乙稀 比咯啶酮，胺基酸，諸如甘胺酸、麩醢胺酸、天冬醢胺、 組胺酸、精胺酸或離胺酸；單醣、三膽及其他碳水化合 物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合劑，諸如edta ; 糖’諸如蔗糖、甘露糖醇、海藻糖或山梨糖醇；形成鹽之 抗衡離子，諸如鈉；金屬複合物（例如Zn-蛋白複合物）； 及/或非離子界面活性劑，諸如TWEENtm、plur〇nicstm 或聚乙二醇（PEG)。較佳之;束乾抗VEGF抗體調配物係描述 於WO 97/〇侧t，肖文獻以引用之方式明確併入本文 中。 視情況，調配物含有醫藥學上可接受之鹽（通常為例如 氯化鈉且較佳處於約生理濃度下）β視情況，本發明之調 配物可含有醫藥學上可接受之防腐劑。在—些實施例中， 154268.doc -69- 201138819 防腐劑濃度在0.1%至2.0%(通常v/v)之範圍内。適合防腐劑 包括醫藥技術中已知的防腐劑。苯曱醇、苯酚、間曱酚、 對羥基苯甲酸甲酯及對羥基苯曱酸丙酯為防腐劑之實例。 視情況’本發明之調配物可包括濃度為〇 005%至〇 02。/〇之 醫藥學上可接受之界面活性劑。 通常’貝伐單抗係在1 00 mg及400 mg無防腐劑之一次性 小瓶中供應於治療用途以傳遞4 mi或16 ml貝伐單抗（25 mg/ml)。在240 mg α，α·海藻糖脫水物、23.2 mg磷酸鈉（磷 酸一氫鈉，單水合物）、4.8 mg磷酸鈉（磷酸氫二鈉，無 水）、1.6 mg聚山梨醇酯20及注射用水uSP中調配1〇〇 mg產 物。在960 mg α，α-海藻糖脫水物、92.8 mg填酸鈉（磷酸二 氫鈉，單水合物）、19.2 mg鱗酸鈉（填酸氫二鈉，無水）、 6*4 mg聚山梨醇酯2〇及注射用水usp中調配4〇〇 mg產物。 亦參見貝伐單抗之標籤。 本文之調配物亦可含有一種以上為治療特定適應症所需 之活性化合物，較佳為彼此無不利影響之具有補充活性的 ’舌性化合物。舉例而言，可能需要在一種調配物中進一步 提供結合至EGFR、VEGF(例如結合VEGF上之不同抗原決 疋土的抗體）、VEGFR或ErbB2(例如Herceptin®)之抗體。 或者或另外，該組合物可包含細胞毒性劑、細胞激素、生 長抑制劑及/或小分子VEGFR拮抗劑。該等分子係適當地 以有效達成預定目的之量組合存在。 亦可例如藉由凝聚技術或藉由界面聚合將活性成分裹入 刀別於膠狀藥物傳遞系統（例如脂質體、白蛋白微球體、 154268.doc 201138819 微乳液、奈米粒子及奈米膠囊）中或於巨乳液中所製備之 微膠囊中，例如羥基曱基纖維素或明膠微膠囊及聚_(曱基 丙烯酸甲酯）微膠囊。該等技術揭示於Remingtt)n,s
Pharmaceutical Sciences第 16版，〇s〇l，α·編（1980)中。 可製備持續釋放製劑。持續釋放製劑之適合實例包括含 有抗體之固體疏水性聚合物的半透性基質，該等基質呈成 型物品形式，例如薄膜或微膠囊。持續釋放基質之實例包 括聚酯、水凝膠（例如聚（2-羥基乙基-甲基丙烯酸酯）或聚 (乙烯醇））、聚乳酸交酯（美國專利第3,773,919號）、L_麩胺 酸與γ乙基-L-麩胺酸酯之共聚物、不可降解性乙烯-乙酸乙 烯酯、可降解性乳酸-乙醇酸共聚物（諸如lUPR〇n DEPOTtm(由乳酸_乙醇酸共聚物及乙酸亮丙瑞林構成的可 注射微球體））及聚-D-(-)-3-羥丁酸。雖然聚合物（諸如乙烯_ 乙酸乙烯酯及乳酸-乙醇酸）能夠使分子釋放持續1〇〇多天， 但某些水凝膠釋放蛋白質持續較短時間。在囊封之抗體長 時間保留於體内日寺，其因暴露於37。〇之水分而可能變性或 聚集’從而導致生物活性喪失及可能之免疫原性變化。視 所涉及之機制而定’可設計出合理策略以實現穩定化。舉 幻而。若發現聚集機制為經由硫基-二硫化物互換形成 ^子間S.S鍵’則可藉由修飾氫硫基殘基、由酸性溶液来 乾控制水分含量、使用適當添加劑及研發特定聚合物基 質組合物來達成穩定化。 用於活體内投藥之調配物應無菌。其易於藉由經無菌過 濾膜進行過濾來實現。 154268.doc -71 - 201138819 νι治療功效 本發明治療之主要優勢在於對人類患者產生顯著抗癌作 用而不引起顯著毒性或副作用的能力，使得患者總體受益 於治療。本發明治療之功效可藉由通常用於評估癌症治療 之各種終點來量測，包括（但不限於）腫瘤退化、腫瘤重量 或尺寸縮小、至惡化為止之時間、存活持續時間、無惡化 存活期、總反應率、反應持續時間及生活品質。由於本發 明之抗血管新生劑靶向腫瘤血管結構而未必靶向贅生性細 胞自身，所以其代表一類獨特的抗癌藥，且因此可使用藥 物臨床反應之獨特量度及定義。舉例而言，在2維分析中 腫瘤縮小50%以上為表示反應之標準截止值。然而，本發 明之抗VEGF抗體可抑制轉移性擴散而不使原發腫瘤縮 小，或可僅發揮腫瘤穩定（tumouristatic)作用。因此，視情 況使用其他測定抗血管新生療法功效之方法，包括例如量 測血管新生之血漿或尿標記物及經由放射顯影量測反應。 在另一實施例中，本發明提供延長易患或診斷有癌症之 人類患者之無惡化存活期的方法。至疾病惡化為止之時間 係疋義為自投與藥物直至疾病惡化或死亡之時間。在一較 佳實施例中，與未用抗VEGF抗體維持療法之治療相比， 使用抗VEGF抗體及一或多種化學治療劑的本發明之組合 治療繼而進行抗VEGF維持療法使無惡化存活期顯著延長 至少約1個月、2個月、2.3個月、2.9個月、3 〇個月、3 8個 月，較佳約1至約6 · 1個月。在一實施例中，以貝伐單抗及 紫杉烷療法（例如多烯紫杉醇或太平洋紫杉醇）及卡鉑治療 154268.doc •72· 201138819 繼而進行抗VEGF維持療法之患者相較於對照而言以月計 之 PFS 中值（95% CI)增加 3,8個月（0.717(0.625，0.824)，其 中單側p值（對數秩）<0.001)。在另一實施例令，接受單獨 太平洋紫杉醇及卡鉑之患者與接受太平洋紫杉醇、卡鉑及 抗VEGF抗體繼而進行抗VEGF維持療法之患者之間以月計 之中值PFS的差（95% CI)為2.3個月，其tHR=〇79ap值 (對數秩檢驗）為0.0010。 VII抗體產生 ⑴多株抗體 多株抗體較佳藉由多次皮下（sc)或腹膜内（ip)注射相關抗 原及佐劑而在動物中產生。適於使用雙功能或衍生化試劑 將相關杬原結合至在待免疫之物種中具免疫原性之蛋白質 上，例如匙孔螺血氰蛋白、血清白蛋白、牛甲狀腺球蛋白 或大豆胰蛋白酶抑制劑，該雙功能或衍生化試劑為例如順 丁烯二醯亞胺苯甲醯基硫代丁二醯亞胺酯（經由半胱胺酸 殘基結合）、N-羥基丁二醯亞胺（經由離胺酸殘基）' 戊二 酿、丁二酸肝、SOCIAR^onr，其中續以不同烧 基。 藉由將例如100 Pg或5 Μ蛋白質或結合物（分別對兔或小 鼠）與3體積之弗氏完全佐劑（Freund，s _plete adj謂叫組 合且在多個部位皮内注射該溶液使動物對抗原、免疫原性 結合物或衍生物免疫。一個月後，藉由在多個部位皮下注 射於弗氏完全佐劑中的1/5至1/1〇原始量之肽或結合物來使 動物增強免疫^ 7至14天後對動物進行放血且分析血清之 154268.doc •73· 201138819 抗體力價。使動物增強免疫直至力價平穩。動物較佳經相 同抗原之結合物（但該抗原結合至不同签_白哲 來㈡負及/或經不同 交聯劑結合）增強免疫。結合物亦可在重組細胞培養物中 以蛋白融合物形式產生。同樣，諸如明礬之聚集劑適用於 增強免疫反應。 ^ (ii)單株抗體 產生本文之單株抗體之各種方法在此項技術中可得。舉 例而言’單株抗體可使用首次由Kohler等人，Nature 256:495 (1975)描述之融合瘤方法或藉由重組dNa方法（美 國專利第4,816,567號）製得。 在融合瘤方法中，如上文所述使小鼠或諸如倉鼠或獼猴 之其他適當宿主動物免疫以引發產生或能夠產生將特異性 結合至用於免疫之蛋白質之抗體的淋巴細胞。或者，可於 活體外使淋巴細胞免疫。接著使用適當融合劑（諸如聚乙 二醇）使淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，形成融合瘤細胞 (Goding, Monoclonal Antibodies: Principles and Practice » 第 59-103 頁（Academic Press, 1986))。 接種由此製備之融合瘤細胞，且使其在較佳含有一或多 種抑制未融合之親本骨髓瘤細胞生長或存活之物質的適合 培養基中生長。舉例而言，若親本骨髓瘤細胞缺乏次黃嘌 呤鳥嘌呤磷核糖基轉移酶（HGPRT或HPRT)，則用於融合瘤 之培養基通常將包括次黃嘌呤、胺基蝶呤及胸苷（HAT培養 基），該等物質會阻止HGPRT缺乏細胞之生長。 較佳之骨髓瘤細胞為有效融合，使所選抗體產生細胞穩 154268.doc -74· 201138819 定大量產生抗體且對諸如HAT培養基之培養基敏感之骨髓 瘤細胞。其中較佳之骨髓瘤細胞株為鼠類骨髓瘤細胞株， 諸如源自購自 Salk Institute Cell Distribution Center，San Diego, California USA之 MOPC-21 及 MPC-11 小鼠腫瘤及購 自 American Type Culture Collection，Rockville，Maryland USA之SP-2或X63-Ag8-653細胞之細胞株。人類骨髓瘤及 小鼠·人類異源骨髓瘤（heteromyeloma)細胞株亦已經描述 用於產生人類單株抗體（Kozbor，J. Immun〇i.，133:3001 (1984); Brodeur等人，Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications，第 51-63 頁（Marcel Dekker， Inc., New York，1987)) ° 就針對抗原之單株抗體產生來分析培養融合瘤細胞之培 養基。較佳，藉由免疫沈澱法或藉由活體外結合檢測法， 諸如放射免疫檢測法（RIA)或酶聯免疫吸附檢測法（ELISA) 來測定由融合瘤細胞產生的單株抗體之結合特異性。 在識別產生具有所需特異性、親和力及/或活性之抗體 的融合瘤細胞後，可將該等純系藉由限制性稀釋程序次選 殖且藉由標準方法培養（G〇ding, M〇n〇cl〇nal Antib〇dies: Principles and Practice，第 591〇3 頁（—icpress， 1986))。適用於此目的之培養基包括例如d_mem或 1640培養基。此外，融合瘤細胞可以腹水腫瘤形式活體内 生長於動物令。 藉由習知免疫球蛋白純化程序使由次純系分泌之單株抗 體與培養基、腹水或血清適當分離，該等純化程序為諸如 154268.doc •75· 201138819 蛋白質A-瓊脂糖、羥磷灰石層析、凝膠電泳、透析或親和 層析。 易於使用習知程序（例如’藉由使用能夠特異性結合至 編碼單株抗體重鏈及輕鏈之基因的寡核苷酸探針）分離編 碼單株抗體之DNA且定序。融合瘤細胞用作該DNA之較佳 來源。分離後，可將DNA置於表現載體中，接著將該表現 載體轉染至不另外產生免疫球蛋白之宿主細胞（諸如大腸 桿菌細胞、猿COS細胞、中國倉鼠卵巢（CH〇)細胞或骨髓 瘤細胞）中，使得單株抗體在重組宿主細胞内合成。抗體 之重組製備將更詳細地描述於下文中。 在另一實施例中，抗體或抗體片段可自使用McCafferty 等人，Nature, 348:552-554 (1990)中所述之技術產生的抗 體噬菌體文庫中分離出。Clackson等人，Nature，352:624- 628 (1991)及 Marks 等人，J. Mol· Biol·，222:581-597 (1991)分別描述使用噬菌體文庫分離鼠類及人類抗體。後 續出版物描述藉由鍵改組（Marks等人，Bio/Technology， 10:779-783 (1992))以及聯合感染及活體内重組作為構築極 大噬菌體文庫之策略（Waterhouse等人，Nuc. Acids. Res.， 21:2265-2266 (1993))來產生高親和力（奈米範圍）人類抗 體。因此’該等技術為用於分離單株抗體之傳統單株抗體 融合瘤技術之可行性替代。 DNA亦可例如藉由用人類重鏈及輕鏈恆定域之編碼序列 取代同源鼠類序列（美國專利第4,816,567號；Morrison等 人，Proc. Natl Acad. Sci. USA, 81:6851 (1984))，或藉由 154268.doc -76· 201138819 將免疫球蛋白編碼序列共價接合至所有或一部分非免疫球 蛋白多肽之編碼序列上而得以修飾。 通常’該等非免疫球蛋白多肽取代抗體之恆定域，或取 代抗體之一抗原結合位點之可變域，以產生包含對一抗原 具有特異性之一抗原結合位點及對不同抗原具有特異性之 另一抗原結合位點的嵌合二價抗體。 (iii)人類化及人類抗體 人類化抗體具有一或多個自非人類來源引入之胺基酸殘 基。此等非人類胺基酸殘基通常稱為「輸入」殘基，其通 常係取自「輸入」可變域。人類化可基本上遵循Winter及 合作者之方法（Jones等人，Nature，321:522-525 (1986); Riechmann等人，Nature，332:323-327 (1988) ; Verhoeyen 等人，Science，239:1534-1536 (1988))，藉由用齧齒動物 CDR或CDR序列取代人類抗體之相應序列來進行i因此， 該等「人類化」抗體為嵌合抗體（美國專利第4,816,567 號）’其中實質上近似完整之人類可變域已由源自非人類 物種之相應序列取代。實際上’人類化抗體通常為一些 CDR殘基及可能之一些FR殘基由來自齧齒動物抗體中之類 似位點之殘基取代的人類抗體。 欲用於製備人類化抗體之人類可變域之備選者（輕鍵與 重鏈）對降低抗原性極其重要。根據所謂「最佳擬合（best-fit) 」 法 ’在整個已知 人類可變域序 列文庫 中筛選齧齒動 物抗體之可變域序列。接著’將最接近於齧齒動物序列之 人類序列視作人類化抗體之人類框架（FR)(Sims等人，J. 154268.doc -77- 201138819
Immunol., 151:2296 (1993) ; Chothia等人，j. Mol. Biol., 196:901 (1987))。另一方法使用自具有特定輕鏈或重鏈子 群之所有人類抗體之共同序列獲得的特定構架。若干不同 人類化抗體可使用相同構架（Carter等人，Proc. Natl. Acad. Sci. USA，89:4285 (1992) ; presta等人，j· Immnol·， 151:2623 (1993)) ° 更重要的是，在保留對抗原之高親和力及其他有利生物 特性之情況下使抗體人類化。為達成該目標，根據一較佳 方法’藉由使用親本及人類化序列之三維模型分析親本序 列及各種概念上之人類化產物的方法來製備人類化抗體。 三維免疫球蛋白模型通常可得且為熟習此項技術者所熟 悉。可獲得說明及呈現所選擇之候選免疫球蛋白序列之可 能二維構形結構的電腦程式。對該等呈現之檢查允許分析 殘基在候選免疫球蛋白序列起作用之過程中可能的作用， 亦即分析影響候選免疫球蛋白結合其抗原之能力的殘基。 以此方式，FR殘基可選自接受序列及輸入序列且與接受序 列及輸入序列組合以便達成所需抗體特徵，諸如對目標抗 原之親和力增加。一般而言，CDR殘基直接且最大程度地 實質上影響抗原結合。 人類化抗VEGF抗體及其親和力成熟變異體係描述於例 如20〇5年2月26日頒佈之美國專利第6,884 879號中。 現有可能產生轉殖基因動物（例如小鼠），其能夠在免疫 後’在不產生内源性免疫球蛋白下產生人類抗體之完全譜 系。舉例而言’已描述在嵌合及生殖系突變小鼠中之抗體 154268.doc •78- 201138819 重鏈接合區（jh)基因的同種接合子缺失會導致對於内源抗 體產生的完全抑制。將人類生殖系免疫球蛋白基因陣列轉 移至此等生殖系突變小鼠中將會在抗原激發後引起人類抗 體產生。參見例如 Jakobovits等人，Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90:2551 (1993) ; Jakobovits等人，Nature, 362:255- 258 (1993) ; Bruggermann等人 ’ Year in Immun〇，7:33 (1993);及 Duchosal等人，Nature 355:258 (1992)。 或者，可使用噬菌體呈現技術（McCafferty等人，Nature 348:552-553 (1990))在活體外自未免疫供體之免疫球蛋白 可變（V)域基因譜系產生人類抗體及抗體片段。根據此技 術，將抗體V結構域基因同框選殖至絲狀嗟菌體之主要或 次要鞠蛋白基因（諸如Μ13或fd)中，且以功能性抗體片段 之形式呈現於嗟菌體粒子之表面上。由於該絲狀粒子含有 噬菌體基因組之單股DNA複本，所以基於抗體功能特性之 選擇亦對編碼展現彼等特性之抗體的基因進行選擇。因 此，噬菌體模擬B細胞之一些特性。噬菌體呈現可以多種 形式進行，關於其評述參見例如Johnson, Kevin S.及 Chiswell, David J., Current Opinion in Structural Biology 3:564-571 (1993)。若干V基因區段來源可用於噬菌體呈 現。Clackson等人 ’ iVaiwre，352/624-628 (1991)自源自經 免疫小鼠之脾的V基因隨機組合小文庫中分離出一群不同 之抗噁唑酮抗體。可構築未經免疫之人類供體之V基因譜 系且針對一群不同抗原（包括自體抗原）之抗體可基本上遵 循由 Marks 等人，J· Mol. Biol· 222:581-597 (1991)或 154268.doc 79· 201138819
Griffith等人，EMBOJ. 12:725·734⑽3)所述之技術來分 離。亦參見美國專利第5,565,332號及第5,573,9〇5號。 如上所述，人類抗體亦可由活體外活化8細胞產生（參見 美國專利5,567,61〇及5,229,275)。人類單株抗veGF抗體係 描述於1998年3月24日頒佈之美國專利第5,73〇,977號中。 (iv)抗體片段 已開發出各種技術用於產生抗體片段。傳統上’此等片 段係經由蛋白水解消化完整抗體而獲得（參見例如
Morimoto等人，Journal of Biochemical and Biophysical Methods 24:107-117 (1992)及 Brennan 等人，Science， 229:81 (1985))。然而，該等片段現可由重組宿主細胞直接 產生。舉例而言’抗體片段可自以上所討論之抗體噬菌體 文庫中分離出。或者，可自大腸桿菌直接回收Fab，_SH片 段且使其以化學方式偶合以形成F(ab，）2片段（Carter等人， Bio/Technology 1 〇: 163-167 (1992))。根據另一方法， F(ab’）2片段可自重組宿主細胞培養物中直接分離出。產生 抗體片段之其他技術將為熟習此項技術者所顯而易知。在 其他實施例中’所選抗體為單鏈Fv片段（scFv)。參見WO 93/16185 。 (W)其他胺基酸序列修飾 涵蓋本文所述之抗體之胺基酸序列修飾。舉例而言，可 能需要改良抗體之結合親和力及/或其他生物特性。抗體 之胺基酸序列變異體係藉由將適當核苷酸變化引入抗體核 酸中或藉由肽合成來製備。此等修飾包括例如抗體胺基酸 154268.doc -80 - 201138819 序列内之殘基缺失及/或插入及/或取代。進行缺失、插入 及取代之任何組合以獲得最终構築體，其限制條件為該最 終構築體具有所需特徵。胺基酸變化亦可改變抗體之轉譯 後過程，諸如改變糖基化位點之數目或位置。 用於識別抗體中某些為較佳突變誘發位置之殘基或區域 的適用方法稱為「丙胺酸掃描突變誘發」，.如cunningham 及Wells Science，244:1081-1085 (1989)所述。此處，殘基 或目標殘基之群（例如帶電殘基’諸如arg、asp、his、lys 及glu)得以識別且經中性或帶負電胺基酸（最佳為丙胺酸或 聚丙胺酸）置換以影響胺基酸與抗原之相互作用。接著， 藉由在取代位點處或為取代位點引入其他變異體以改進彼 等對取代表現功能敏感性之胺基酸位置。因此，雖然引入 胺基酸序列變異之位點為預定的，但突變之性質本身無需 預定。舉例而言，為分析既定位點處之突變效能，在目標 密碼子或區域處進行ala掃描或隨機突變誘發，且針對所需 活性篩選所表現之抗體變異體。 胺基酸序列插入物包括長度在一個殘基至含有一百個或 一百個以上殘基之多肽範圍内的胺基及/或羧基末端融合 物，以及具有單個或多個胺基酸殘基之序列内插入物。末 端插入物之實例包括具有N末端曱硫胺醯基殘基之抗體或 與細胞毒性多肽融合之抗體。抗體分子之其他插入變異體 包括抗體之N末端或c末端與酶（例如，對於ADEpT而言）或 延長抗體之血清半衰期之多肽的融合物。 另一類型變異體為胺基酸取代變異體。該等變異體在抗 154268.doc • 81 · 201138819 體分子中具有至少一個經不同殘基替換之胺基酸殘基。最 受關注之取代突變誘發位點包括高變區，且亦涵蓋FR改 變。 對抗體生物特性之實質修飾可藉由選擇取代來實現，該 等取代在其維持以下之作用方面顯著不同：（a)取代區域中 多肽主鏈之結構，例如片狀或螺旋構形；（b)分子在目標位 點處之電荷或疏水性；或（c)側鍵體積β胺基酸可根據其側 鏈特性之相似性進行分組（A. L. Lehninger，Biochemistry， 第二版，第 73-75 頁，Worth Publishers，New York (1975)): (1) 非極性：Ala(A)、Val(V)、Leu(L)、Ile(I)、pro(p)、 Phe(F)、Trp(W)、Met(M) (2) 不帶電極性：Gly(G)、Ser(S)、Thr(T)、Cys(C)、 Tyr(Y)、Asn(N)、Gln(Q) (3) 酸性：Asp(D)、Glu(E) (4) 鹼性：Lys(K)、Arg(R)、His(H) 或者’天然存在之殘基可基於共同側鍵特性進行分組： (1) 疏水性：正白胺酸、Met、Ala、Va卜Leu、Ile ; (2) 中性親水性：Cys、Ser、Thr、Asn、Gin ; (3) 酸性：Asp、Glu ; (4) 驗性：His、Lys、Arg ; (5) 影響鏈定向之殘基：Gly、Pro ; (6) 芳族：Trp、Tyr、Phe。 非保守取代將需要將此等類別中之一者之成員換成另— 類別。 154268.doc -82 · 201138819 通常亦可用絲胺酸取代任何不涉及維持抗體之適當構形 之半胱胺酸殘基以改良分子之氧化穩定性且防止異常交 聯。相反’可在抗體中添加半胱胺酸鍵以改良其穩定性 (尤其在抗體為諸如Fv片段之抗體片段的情況下）。 尤其較佳之取代變異體類型涉及取代親本抗體（例如， 人類化抗體或人類抗體）之一或多個高變區殘基。一般而 言’選擇用於進一步研究之所得變異體與產生其之親本抗 體相比具有改良之生物特性。產生該等取代變異體之適當 方法涉及使用噬菌體呈現進行親和力成熟。簡言之，使若 干高變區位點（例如6-7個位點）突變以在各位點處產生所有 可能之胺基取代。由此產生之抗體變異體以單價方式自絲 狀噬菌體粒子以與包裝於各粒子中之M13之基因ΠΙ產物的 融合物形式呈現。接著針對如本文所揭示之生物活性（例 如結合親和力）篩選噬菌體呈現之變異體。為識別用於修 飾之候選间變區位點，可進行丙胺酸掃描突變誘發以識別 顯著促成抗原結合之高變區殘基。或者或另外，有利地分 析抗原-抗體複合物之晶體結構以識別抗體與人類vegf之 間的接觸點。該等接觸殘基及鄰近殘基為根據本文所詳述 之技術進行取代的候選者。在產生此等變異體後，如本文 所述對變異體組進行篩選，且可在—或多個相關檢測法中 選擇具有優良特性之抗體用於進一步研究。 另犬請之抗體胺基酸變異體改變抗體之原始糖基化型 態。改變意謂使抗體中所見之—或多個碳水化合物部分缺 失及/或添加在抗體中不存在之-或多個糖基化位點。 154268.doc -83 - 201138819 抗體之糖基化通常為N-連接型或〇-連接型β N_連接型係 指碳水化合物部分連接至天冬醯胺殘基之側鏈。三肽序列 天冬醢胺-X-絲胺酸及天冬酿胺-X-蘇胺酸（其中X為除脯胺 酸以外之任何胺基酸）為碳水化合物部分與天冬醯胺側鏈 之酶促連接的識別序列。因此’多肽中此等三肽序列中任 一者之存在產生潛在糖基化位點。〇_連接型糖基化係指糖 N-乙醢半乳胺糖、半乳糖或木糖中之一者連接至經基胺基 酸’最常見為絲胺酸或蘇胺酸，但亦可使用5 _經基脯胺酸 或5-羥基離胺酸。 在抗體中添加糖基化位點宜藉由改變胺基酸序列，以使 其含有上述三肽序列中之一或多者來實現（對於N_連接型 糖基化位點）。該改變亦可藉由在原始抗體之序列中添加 一或多個絲胺酸或蘇胺酸殘基或用一或多個絲胺酸或蘇胺 酸殘基進行取代來實現（對於〇-連接型糖基化位點）。 在抗體包含Fc區之情況下，可改變其所連接之碳水化合 物。舉例而言’具有連接至抗體Fc區之缺乏岩藻糖之成熟 碳水化合物結構的抗體係描述於美國專利申請案第us 2003/0157108 A1號（Presta，L)中。亦參見US 2004/0093621 Al(Kyowa Hakko Kogyo Co” Ltd)。在連接至抗體 Fc 區之 碳水化合物中具有對分N-乙醯葡糖胺（GlcNAc)之抗體可在 WO 03/011878(Jean-Mairet等人）及美國專利第 6,602,684號 (Umana等人）中進行參考。在連接至抗體以區之寡醣中具 有至少一個半乳糖殘基之抗體係報導於W〇 97/30087(Patel 等人）中。關於具有連接至FC區之經改變碳水化合物的抗 I54268.doc •84- 201138819 體，亦參見WO 98/58964(Raju，S·)及WO 99/22764(Raju， S.) ° 可需要就效應功能來修飾本發明之抗體，以便例如增強 抗體之抗原依賴性細胞介導之細胞毒性（ADCC)及/或補體 依賴性細胞毒性（CDC)。此可藉由將一或多個胺基酸取代 引入抗體之Fc區中來達成《或者或另外，可將半胱胺酸殘 基引入Fc區中，藉此允許在此區域中形成鏈間二硫鍵。由 此產生之均二聚抗體可具有改良之内化能力及/或增強之 補體介導之細胞殺死及抗體依賴性細胞毒性（ADCC)。參 見 Caron 等人，J. Exp Med. 176:1191-1 195 (1992)及 Shopes, B. J. Immunol. 148:2918-2922 (1992) ° 抗腫瘤活 性增強之均二聚抗體亦可如Wolff等人，Cancer Research 53:2560-2565 (1993)中所述使用異雙功能（heterobifunctional) 交聯劑來製備。或者，具有雙重Fc區之抗體可經工程改造 且可藉此具有增強之補體溶解及ADCC能力。參見
Stevenson 等人，Anti-Cancer Drug Design 3:219-230 (1989) 〇 WO 00/42072(Presta，L.)描述在人類效應細胞存在下 ADCC功能得以改良之抗體，其中該等抗體在其fc區中包 含胺基酸取代。較佳，ADCC改良之抗體在Fc區之位置 298、333及/或334(Eu殘基編號）處包含取代。較佳，改變 之Fc區為包含此等位置中之一者、兩者或三者處之取代或 由其組成之人類IgGl Fc區。該等取代視情況與增強ciq結 合及/或CDC之取代組合》 154268.doc •85- 201138819 C1 q結合及/或補體依賴性細胞毒性（CDC)改變之抗體係 描述於WO 99/51642、美國專利第6，194,551B1號、美國專 利第6,242，195B1號、美國專利第6,528,624B1號及美國專 利第6,53 8，124號（10113(^6等人）中。該等抗體在卩(：區之胺 基酸位置 270、322、326、327、329、313、333 及 / 或 334 (Eu殘基編號）中之一或多者處包含胺基酸取代。 為延長抗體之血清半衰期，可將結合後援性受體之抗原 決定基併入抗體（尤其抗體片段）中，例如，如美國專利 5,739,277中所述。如本文所用，術語「結合後援性受體之 抗原決定基」係指IgG分子（例如IgG!、IgG2、IgG3或IgG4) 之Fc區中負責延長IgG分子之活體内血清半衰期的抗原決 定基。 與新生兒Fc受體（FcRn)之結合得以改良且半衰期延長之 抗體係描述於 WO 00/42072(Presta，L.)及 US 2005/ 〇〇14934Al(Hinton等人）中。此等抗體包含具有一或多處改 良F c £與F cRn之結合之取代的F c區。舉例而言，F c區可在 位置 238、250、256、265、272、286、303、305、307、 311 、 312 、 314 、 317 、 340 、 356 、 360 、 362 、 376 、 378 、 380、382、413、424、428或43 4(Eu殘基編號）中之一或多 者處具有取代。FcRn結合得以改良之較佳之包含FC區之抗 體變異體在Fc區之位置307、380及434(Eu殘基編號）中之 一、二或三者處包含胺基酸取代。在一實施例中，抗體具 有307/434突變》 亦涵蓋具有三個或三個以上（較佳四個）功能性抗原結合 154268.doc • 86 - 201138819 位點之經工程改造抗體（美國申請案第US 2002/0004587 A1 號（Miller 等人））。 編碼抗體之胺基酸序列變異體之核酸分子係藉由此項技 術已知之多種方法製備。該等方法包括（但不限於）自天然 來源分離（在天然存在之胺基酸序列變異體之狀況下），或 藉由對早期製備之變異體或抗體之非變異型式進行寡核苷 酸介導（或定點）之突變誘發、PCR突變誘發及卡匣突變誘 發來製備》 (y)免疫結合物 本發明亦係關於包含本文所述之抗體結合至細胞毒性劑 (諸如化學治療劑、毒素（例如細菌、真菌、植物或動物來 源之酶促活性毒素或其片段）或放射性同位素（亦即放射性 結合物））的免疫結合物。 上文已描述適用於產生該等免疫結合物之化學治療劑。 可使用的酶促活性毒素及其片段包括白喉A鏈、白喉毒素 之非結合活性片段、外毒素A鏈（獲自綠膿桿菌 蓖麻毒素a鏈、相思豆毒素a 鏈、蒴蓮根毒素A鏈、α-帚麴菌素（aipha_sarcin)、油桐蛋 白（d/ewme·? protein)、康乃馨蛋白、美洲商陸蛋白 (P/zyio/acfl flwerzcawa protein)(PAPI、PAPII 及 PAP-S)、苦 瓜抑制劑、麻瘋樹毒蛋白、巴豆毒蛋白、肥皂草 (sapaonaria officinalis)抑制劑、重組植物毒素（gel〇nin)、 有絲分裂素、侷限麴菌素、酚黴素、伊諾黴素（en〇mycin) 及黴菌毒素。多種放射性核種可用於產生放射性結合抗 154268.doc -87 · 201138819 1 1 ' Ίη ^ 90YA186Re 〇 抗體與細胞毒性劑之έ士人Α 劑之、、、σ合物可使用多種雙功能蛋白偶合 劑製得’該等蛋白偶合劑為諸如Ν_ 丁二酿亞胺基_3_(2_0比 咬基二硫基）丙酸酿（SPDP)、£胺基硫雜環戊烧（ΙΤ)、酿亞 胺自曰之雙功能何生物(諸如二亞胺代己二酸二曱酯鹽酸 鹽）、活性酯（諸如辛二酸二丁二醯亞胺酯）、醛（諸如戊二 醛）、雙疊氮基化合物（諸如雙（對疊氮基苯甲醯基）己二 胺）、雙-重氮鹽衍生物（諸如雙_(對重氮鹽苯曱醯基乙二 胺）、二異氰酸酯（諸如曱笨2,6_二異氰酸酯）及雙活性氟化 合物（諸如i，5-二氣-2,4_二硝基苯）。舉例而言’萬麻毒素 免疫毒素可如Vitetta等人，238: 1〇98 (1987)中所 述來製備。碳14標記之1·異硫氰氧基苯曱基_3_曱基二伸乙 二胺五乙酸（MX-DTPA)為一種用於使放射性核苷酸結合至 抗體的例示性螯合劑。參見W〇 94/11026。 在另一實施例中’抗體可結合至用於腫瘤預靶向的「受 體」（諸如抗生蛋白鏈菌素），其中將抗體-受體結合物投與 患者，繼而使用清除劑將未結合之結合物自循環中移除， 且接著投與結合至細胞毒性劑（例如，放射性核苷酸）的 「配位體」（例如，抗生物素蛋白）。 (vi)免疫脂質體 本文所揭示之抗體亦可調配成免疫脂質體。含有抗體之 脂質體係藉由此項技術中已知之方法來製備，諸如Epstein 等人，Proc. Natl. Acad. Sci. USA，82:3688 (1985); Hwang等人，Proc. Natl Acad. Sei. USA，77:4030 (1980); 154268.doc 88 _ 201138819 及美國專利第4,485,045號及第4,544,545號中所述之方法。 循環時間延長之脂質體係揭示於美國專利第5,013,556號 中。 尤其適用之脂質體可藉由用包含磷脂醯膽鹼、膽固醇及 PEG衍生之磷脂醯乙醇胺（PEG-ΡΕ)之脂質組合物進行逆相 蒸發法來產生。脂質體經具有確定孔徑之過濾器擠壓以產 生具有所需直徑之脂質體。本發明抗體之Fab’片段可經由 二硫化物交換反應而結合至如Martin等人，J. Bio丨.Chem. 257: 286-:288 (1982)中所述之脂質體。在脂質體内視情況 含有化學治療劑（諸如小紅莓）^參見Gabizon等人，j.
National Cancer Inst· 81(19)1484 (1989) ° IX.製品及套組 在本發明之另一實施例中，提供一種含有適用於治療如 上所述之病症之物質的製品。該製品包含容器、標籤及藥 品說明書。適合容器包括例如瓶子、小瓶、注射器等。容 器可由諸如玻璃或塑膠之多種材料形成。該容器容納有效 治療病狀之組合物且可具有無菌入口孔（例如該容器可為 具有可由皮下注射針刺穿之塞子的靜脈内溶液袋或小 瓶）。該組合物中之至少一種活性劑為抗VEGF抗體。容器 上或與容器締合之標籤指示組合物係用於治療所選病狀。 該製品可進-步包含第二容器包含醫藥學上可接受之 緩衝液，諸如磷酸鹽緩衝生理食鹽水、林格氏溶液 (Ringer，s Mu—及右旋糖溶液。其可進一步包括就商業 及使用者觀點而言合意之其他物質，包括其他緩衝液、稀 154268.doc •89- 201138819 釋劑、過濾、器、針及注射器。另夕卜該製品包含含使用說 明之藥品說明t，包括例如指導組合物之使用者向患者投 與抗VEGF抗體組合物及化學治療劑（例如紫杉院、太平洋 紫杉醇、多烯紫杉醇、太平洋紫杉醇蛋白結合粒子（例如 偷3臟,、始類似物、卡在白、吉西他；賓或其組合），繼 而進行抗VEGF維持療法。藥品說明書可視情況含有實例i 或實例2或實例3中所發現之一些或所有結果。 VEGF特異性拮抗劑可單獨包裝或與其他抗癌心療性化 合物組合包裝成套組《該套組可包括輔助向患者投與單位 劑量之視情況選用之組件，諸如用於使粉末形式復原之小 瓶、注射用注射器、定製之1¥傳遞系統、吸入器等。另 外單位劑量套組可含有用於製備及投與組合物之說明。 在某些實施例中，該等說明包含使用說明，包括例如指導 組合物之使用者向患者投與抗VEGF抗體組合物及化學治 療劑（例如紫杉烷、太平洋紫杉醇、多烯紫杉醇、太平洋 兔杉醇蛋白結合粒子（例如Abraxane®)、始類似物、卡 鉑、吉西他濱或其組合）’繼而進行抗VEGf維持療法。該 等說明可視情況含有實例丨或實例2或實例3中所發現之一 些或所有結果。該套組可製造成用於一名患者之單次使用 單位劑量、用於特定患者之多次使用劑量（在恆定劑量下 或其中個別化合物之效能可因療法進程而改變）；或套組 可含有適於投與多名患者之多個劑量（「整體包裝」）。套 組組件可裝配於紙箱、發泡包裝、瓶子、管及其類似者 中。 154268.doc •90· 201138819 材料寄存 下列融合瘤細胞株已依據布達佩斯協定（Budapest Treaty)之條款由美國菌種保存中心（American Type Culture Collection ’ ATCC)，Manassas，VA，USA寄存： 抗體名稱 ATCC編號 寄存時間 A4·6.1 ATCC HB-10709 1991 年 3 月 29 日 下列實例僅意欲說明本發明之實踐而非以限制方式提 供。本文中引用之所有專利及科學文獻之揭示内容係以全 文引用的方式明確併入本文中。 實例 實例1·在新近診斷有先前未經治療之ΙΠ期（經次最佳及宏 親最佳減積術）或IV期上皮卵巢癌、腹膜原發癌或輸卵管 癌之女性中卡銘及太平洋紫杉醇加上安慰劑相對於卡鉑及 太平洋紫杉醇加上同步貝伐單抗繼而安慰劑相對於卡鉑及 太平洋紫杉醇加上同步及延長貝伐單抗的ΠΙ期試驗 提供III期隨機化研究之結果以評估用於罹患婦科腫瘤學 國際聯合會（International Federation of Gynecologic
Oncology，FIGO)III期及IV期上皮卵巢癌、腹膜原發癌或 輸卵管癌之患者的新治療計劃。主要目標包括確定6個週 期準療法（卡始及太平洋紫杉醇）加上5個同步週期之貝伐 單抗[II組]與單獨6個週期標準療法口組]相比是否延長新近 診斷有III期（有任何大體殘存疾病）及1¥期上皮印巢癌、腹 膜原發癌或輸卵管癌之女性的無惡化存活期（pFS)之持續 時間；及確定6個週期之標準療法（卡鉑及太平洋紫杉醇）加 154268.doc •91 · 201138819 上5個同步週期之貝伐單抗加上延長16個週期之貝伐單抗 [工工以且]與6個週期之標準療法tI組]相比是否延長新近診^ 有III期（有任何大體殘存疾病）及…期上皮卵巢癌、腹膜原 發癌或輸卵管癌之女性的無惡化存活期。 GOG-01 82-ICON5為比較標準療法（卡鉑及太平洋紫杉 醇）與四個研究組（併有吉西他濱、拓朴替康及脂質體小= 莓’其與太平洋紫杉醇及卡鉑組合或依序投與）的五組隨 機化臨床試驗。全世界的主要卵巢癌臨床試驗團隊參與此 研究。此國際協作提供以適時方式增加大量患者的難得機 會，其有助於在預期隨機化試驗中同時評估多種藥劑。在 國際參與下，每年增加超過！，名患者，且該試驗在起 動四年内達到其指定增加目標。 雖然GOG-0182-ICON5之結果有助於建立用於羅患晚期 卵巢癌及腹膜原發癌之先前未經治療之患者的最佳化學療 法，但下一代臨床試驗將研究分子靶向療法聯合化學療法 之影響。詳言之，當前在罹患此等腫瘤之女性中對生長因 子k號轉導抑制劑及抗血管新生劑作為單一藥劑以及與化 學治療藥物組合進行試驗。❹此等㈣在人類癌症實驗 模型中已展示具有抑制細胞作用且與化學療法展示協同作 用。在此III期試驗中，評估活性生物劑與標準化學治療性 療法組合加上或減去單個藥劑之延長投藥與單獨標準化學 治療性療法相比對罹患晚期疾病之患者之結果的影響。 貝伐單抗為鼠類抗人類VEGF單株抗體之重組人類化型 式’稱作rhuMAb VEGFe貝伐單抗已進人作為單一藥劑用 154268.doc •92· 201138819 以對具有實體腫瘤之患者誘導腫瘤生長抑制作用及與細胞 毒性化學療法組合用以延遲具有轉移性實體腫瘤之患者的 至疾病惡化為止之時間的臨床研發中。參見例如Presta LG 等人，Humanization of an anti-vascular endothelial growth
factor monoclonal antibody for the therapy of solid tumors and other disorders. Cancer Res 57:4593-9, 1997。在羅患、 復發性上皮卵巢癌及腹膜原發癌之患者中貝伐單抗之兩個 單一藥劑試驗結果已公開。參見例如Burger RA等人’ Phase II trial of bevacizumab in persistent or recurrent epithelial ovarian cancer or primary peritoneal cancer: a Gynecologic Oncology Group study. J Clin Oncol 25(33): 5165-5171，2007 ;及 Cannistra SA 等人，尸Ziase // 办 〇/ Bevacizumab in Patients with Platinum Resistant Ovarian Cancer or Primary Peritoneal Serous Cancer. J Clin Oncol 25(33):5 180-86, 2007。GOG(GOG-O170-D)利用兩個協同主 要功效終點：依照NCI RECIST準則之臨床反應及無惡化 存活至少6個月之患者的比例。62名參與者接受15 mg/kg 貝伐單抗每21天一次直至臨床或放射照相證據顯示疾病惡 化或產生不可接受之毒性為止。罹患復發性卵巢癌之患者 的原發疾病特徵為典型的，且約43%患者被認為最初具有 鉑抗性。觀察到21%反應率，且40%患者之無惡化存活期 達到至少6個月，中值PFS為4.7個月，相比而言，基於先 前對具有類似臨床特徵之群體進行的細胞毒性劑陰性Π期 試驗的歷史對照之中值PFS為1.8個月。Genentech AVF 154268.doc -93- 201138819 2949檢查在疾病惡化及不良事件可能性方面有較高風險概 況之患者’僅承§忍被視為最初或其次具有翻抗性且先前已 接受2或3種細胞毒性方案的患者。此等合格性差異最終被 解釋為AVF群體中較高程度之㈣性、較多數量之先前方 案及略差之日常體能狀態概況。以與G〇G丨7〇_d中所用相 同之貝伐單抗劑量及時程治療四十四名患者。記錄顯示力· 個患者（16。/。)有反應，且十二個患者（27%)之無惡化存活期 . 為至少6個月。 在此研究中，選擇兩個實驗組與標準細胞毒性化學療法 (太平洋紫杉醇及卡鉑）進行比較：一者併入5個週期之貝伐 單抗（同步貝伐單抗），且另一者在完成太平洋紫杉醇及卡 鉑之化學療法後再使用16個週期之貝伐單抗（延長之貝伐 單抗）。投藥及劑量於圖1及2中指示。卡鉑（AUC)給藥之卡 佛特公式（Calvert Formula): 總劑量（毫克）=目標AUC(以毫克/毫升/分鐘計）*[GFR(以 毫升/分鐘計）+25]。 研究之主要終點之統計設計係基於9〇%檢驗力（p〇wer)來 偵測PFS風險比（HR)S〇.77(中值PFS移位：14.0個月（歷史 性）8.2個月）。初步分析比較在各貝伐單抗組中相對於 對照的研究者評定之PFS(分析1+RECIST(參見例如
Therasse等人 ’ J Natl. Cancer Inst·，92:205-16, 2000)，整 體臨床惡化或CA-125 ;或分析2 + RECIST或整體臨床惡 化’檢查CA-125)。患者之基線臨床特徵見於表。患者 之基線外科-病理特徵見於表2中。 154268.doc • 94· 201138819 合格患者：經組織學診斷有上皮卵巢癌、腹膜原發癌或 輸印管癌；FIGO ΠΙ期（有任何大體（宏觀或明顯）殘存疾病） 或FIGO IV期（在完成初始腹部手術時以手術方式確定）且 有可用於組織學評估之適當組織的患者。所需最小程度之 手術為提供用於組織學評估之組織且確定及記錄主要部位 及分期之腹部手術以及盡最大努力使腫瘤減積的手術。若 進行額外手術，則應根據G〇G外科程序手冊（G〇G Surgieal
Procedures Manual) (https://www.gog.fccc.edu/manuals/pdf/ surgman.pdf)中所述之適當卵巢癌或腹膜癌手術進行。然 而，外科醫生無需進行GOG外科程序手冊之此部分中所含 的所有項目。彼等罹患m期癌症之患者在完成此初始手術 後的任何殘存腫瘤植入物之最大直徑不大於丨cm將被定義 為最佳」所有其他患者將被定義為「次最佳」。在手術 後成像研究中可量測之疾病不為合格性所需。 具有下列組織學上皮細胞類型之患者合格：毁液性腺 癌、子宮内膜樣腺癌、黏質腺癌、未分化癌、透明細胞腺 癌、混合上皮癌、移行細胞癌、惡性勃倫納氏腫瘤 (Brenner s Tumor)或非特異性腺癌（aden〇carcin〇ma n〇t otherwise specified，N.〇，S·)。然而，腫瘤之組織學特徵 須與原發性苗勒氏上皮腺癌相容。患者可具有共同存在之 原位輸卵管癌，只要侵襲性腫瘤之原發起源為卵巢、腹膜 或輸卵管即可。 患者須充分具有以下： (1)骨髓功能：絕對嗜中性白血球計數（ANC)大於或等於 154268.doc •95· 201138819 1，500個/微升，相當於常見不良事件毒性準則v3 〇 (CTCAE)l級。此ANC不能由粒細胞群落刺激因子誘導或 支持。 (2) 血小板大於或等於1〇〇,〇〇〇個/微升（CTCAE 0-1級）。 (3) 腎功能：肌酸酐Sl.5x規定正常值上限（ULN)，CTCAE 1 級0 (4) 肝功能： (a) 膽紅素小於或等於uxULlSKCTCAE 1級）。 (b) SGOT及鹼性磷酸酶小於或等於2.5xULN(CTCAE 1級）。 (c) 神經功能：神經病（感覺及運動）小於或等於ctcae 1 級。 (5) 凝血參數：使得國際標準化比值（INR)£1 5(或若患者正 服用穩定劑量之治療劑華法林（warfarin)來處理靜脈栓塞 (包括肺血栓栓塞），則INR處於抗凝目標值範圍内（in_range !NR) ’通常介於2與3之間）的PT ’且ρττ〈正常值上限的^ 倍》 (6) GOG曰常體能狀態為〇、丄或〗之患者。 ()患者須在出於诊斷、分期及細胞減量之組合目的而進行 初始手術後1週至12週内參與。 (8) 具有可量測及非可量測疾病之患者合格。患者可有或可 無癌症相關症狀。 (9) 4合部分7.0中所規^之參與前要求的患者。 (10) 准許發佈個人健康資訊之經批准知情同意書及授權委 託書須由患者或監護人簽名。 154268.doc -96- 201138819 ⑼在此試驗中患者可在任何時候如所指示接受最低有效 劑量之印巢雌激素+/·孕綱替代療法來控制絕經期症狀，作 不可在方案指導療法時或在疾病㈣之前接受孕酮來處理 厭食症^ 不合格患者：當前診斷有僅經手術治療之交界性上皮印 巢腫瘤（先前為「低度惡性潛能腫瘤」）或復發性侵襲性上 皮卵巢癌、原發性腹膜癌或輪印管癌(諸如罹患u期或_ 錢上皮卵巢癌或輸”癌之患者）不合格。之前診斷有 父界性腫瘤且以手術方式切除而隨後出現無關之新侵襲性 上皮印巢癌、腹膜原發癌或輸卵管癌的患者合格，限制條 件為其之前未接受針對任何印巢腫瘤之化學療法。 排除之前已接受針對腹腔或骨盆之任何部分之放射線療 法的患者。准許之前針對偈限性乳癌、頭頸癌或皮膚癌進 仃的放射線治療，限制條件為該治療在登記之前已完成三 年以上，且患者保持無復發性或轉移性疾病。 排除之前針對任何腹部或骨盆腫瘤接受化學療法（包括 針才印巢癌、原發性腹膜癌或輸印管癌接受新辅助化學療 法）之患者。患者之前可針對揭限性乳癌接受輔助化學療 法’限制條件為該治療在登記之前已完成三年以上且患者 保持無復發性或轉移性疾病。 众已接文任何靶向療法（包括（但不限於）疫苗、抗體、酪胺 文激酶抑制劑）或激素療法來處理上皮_巢癌或腹膜原發 癌的患者。 除非下列所有條件皆符合，否則排除有同時存在之原發 154268.doc •97- 201138819 性子宮内膜癌或有原發性子宮内膜癌之既往病史的患者： 刀期不大於I-B，僅有淺表子宮肌層侵襲而無血管或淋巴 管侵襲；&分化不良亞型’包括乳頭狀漿液性、透明細胞 或其他FIGO 3級病變。 除如上所述之非黑素瘤皮膚癌及其他特定惡性病外，排 除罹患其他侵襲性惡性病且有任何證據表明另一癌症在過 去的五年内存在或先前癌症治療對此方案療法有禁忌的患 者。 需要非經腸抗生素之罹患急性肝炎或活動性感染之患 者。 有嚴重未癒合傷口、潰瘍或骨折之患者。此包括在28天 内有腹瘺、胃腸穿孔或腹腔内膿腫之病史。切口二期癒合 有肉芽形成且無筋膜裂開或感染跡象之患者合格但需要每 週一次進行傷口檢查。 有活動性出血或有高出血風險之病理病狀（諸如已知出 血性病症、凝血病或涉及大血管之腫瘤）的患者。 在身體檢查時有CNS疾病（包括原發性腦腫瘤、未以標 準醫學療法控制之癲癇發作、任何腦轉移）之病史或跡象 或在此研究之治療首日之前的六個月内有腦血管意外 (C VA、中風）、短暫性缺血性發作（TIA)或蛛網膜下出血之 病史的患者。 罹患臨床顯著性心血管疾病之患者。此包括： 不受控制之高血壓，定義為收縮壓 >丨50 mm Hg或舒張壓 >90 mm Hg ;在登記前有心肌梗塞或不穩定型心絞痛<6個 154268.doc • 98- 201138819 月；紐約心臟協會（New York Heart Association，ΝΥΗΑ)ΙΙ 級或II級以上充血性心臟衰竭；需要藥物處理之嚴重心律 不整。此不包括心室速率受控制之無症狀性心房顫動； CTCAE 2級或2級以上周邊血管疾病（未以手術處理且無永 久性缺陷的缺血之至少短暫（<24小時）發作）；有六個月内 的CVA病史。 已知對中國倉鼠卵巢細胞產物或其他重組人類或人類化 抗體有過敏性之患者。 罹患臨床顯著性蛋白尿之患者。尿蛋白應藉由尿蛋白-肌酸酐比率（UPCR)來篩選。已發現UPCR與24小時尿收集 物中排泄的蛋白質之量直接相關。參見例如Ginsberg JM等 人，Use of single voided urine samples to estimate quantitative proteinuria. N Engl J Med 309:1543-6, 1983 \ Rodby RA等人，The urine protein to creatinine ratio as a predictor of 24-hour urine protein excretion in type 1 diabetic patients with nephropathy. The Collaborative Study Grow/?. Am J Kidney Dis 26:904-9，1995 ; Schwab SJ 等 人，Quantitation of proteinuria by the use of protein-to- creatinine ratios in single urine samples. Arch Intern Med 147:943-4, 1987 i Steinhauslin FAWauters JP. Quantitation of proteinuria in kidney transplant patients: accuracy of the urinary protein/creatinine ratio. Clin Nephrol 43:110-5, 1995 ; Wilson DM及 Anderson RL. for the quantitative assessment of proteinuria from a 154268.doc •99- 201138819 random urinalysis sample. Am J Clin Pathol 100:419-24, 1993 ;及 Zelmanovitz T等人，/Voiu’wwr/a b j"7/ the screening and diagnosis of overt diabetic nephropathy. Diabetes Care 21:1076-9，1998。特定而言，1.0之UPCR等 效於在24小時尿收集物中有1 ·0公克蛋白質。患者須具有 <1.0之UPCR方允許參與該研究。 在貝伐單抗/安慰劑療法（週期2)首日之前28天内有或預 期有如以下所定義之侵襲性程序的患者：大外科程序、開 放式活組織檢查或顯著創傷性損傷。在研究過程期間預期 有大外科程序。此包括（但不限於）在疾病惡化前進行之腹 部手術（剖腹術或腹腔鏡檢查），諸如結腸吻合術或腸造口 術逆轉、間隔性或二次細胞減量手術或二次探查手術。在 貝伐單抗/安慰劑療法（週期2)首日之前7天内進行核心活組 織檢查（Core biopsy) 〇 GOG日常體能等級為3級或4級之患者。 姓娠或哺乳之患者。 18歲以下之患者。 之前已接受任何抗VEGF藥物療法（包括貝伐單抗）的患 者。 有月腸梗阻之臨床症狀或體征且需要非經腸水合作用 及/或營養的患者。 有在醫師看來不能參與研究之其他病史或病狀的患者。 在此研究中使用由實體腫瘤反應評估準則（REC 1st)委員 會建議之國際準則來評估反應及進展❶參見例如Therasse 154268.doc •100- 201138819 P#A 5 New guidelines to evaluate the response to treatment in solid tumors. European Organization for Research and Treatment of Cancer, National Cancer Institute of the United States, National Cancer Institute of Canada. J Natl Cancer Inst 92:205-16，2000。在 RECIST準則中僅使用腫 瘤病變之最大直徑（一維量測）的變化。 CA-125作為進行性疾病之生物標記物：CA-125(—種腫 瘤相關醣蛋白抗原）之血清含量在80%罹患上皮卵巢癌之患 者中升高。參見例如Bast等人，N. Engl. J. Med. 309:88307，1983。經常頻繁監測CA-125以驗證對療法之反 應、殘存疾病之存在及作為復發之早期跡象。然而，CA-125並非完全為腫瘤所特有，且可在多種良性病狀中升 高，諸如子宮内膜異位症、子宮肌瘤及盆腔炎；對於絕經 前女性情況尤其如此。另外，CA-125含量可能與腫瘤反應 不一致而有偽陽性及偽陰性趨勢；生物劑對此等不準確性 的影響尚不清楚。儘管如此，患者及醫師之標準操作為將 治療後CA-125逐漸上升解釋為復發性或進行性疾病之跡 象，且將基於CA-125作出治療決策。當前隨機化試驗將採 用保守方式僅在完成初始化學療法之後基於CA-125之連續 升高（除處理實體腫瘤之其他標準定義以外）定義進行性疾 病。參見例如 Guppy等人，Oncologists，7:437043，2002 ; Rustin等人，J. Clin. Oncol. 19:4054-7，2001 ; Rustin，J. Clin. Oncol.，21:187-93，2003 ; Rustin等人，Clin. Cancer Res. 10:3919-26，2004 ;及 Rustin 等人，J Natl. Cancer 154268.doc -101 - 201138819
Inst·，96:487-8，2004。在一實例中，若符合下列三個條件 中之一者’則僅在完成細胞毒性化學療法後之時段期間基 於血清CA-125確定進展：1)治療前ca-125升高且CA-125 經校正之患者須在相隔至少一週的兩個時刻展示Ca_ 125大 於或等於正常上限值的兩倍的跡象；或2)治療前CA-125升 尚且CA-125未經校正之患者須在相隔至少一週之兩個時刻 展示CA-125大於或等於最低值之兩倍的跡象；或3)治療前 CA-125處於正常範圍内之患者須在相隔至少一週之兩個時 刻展示CA-125大於或等於正常上限值之兩倍的跡象。 結果 研究結果表明貝伐單抗在與化學療法組合且繼續作為維 持療法時有效治療第一線卵巢癌。此組合有效延長pFS。 初步安全性評估識別出如先前研究中所指出的貝伐單抗相 關性不良事件（AE)。對PFS之初步分析表明無惡化存活期 (月）中值為10.3個月（圖2之I組中），相比而言圖2之in組中 無惡化存活期中值為14.1個月。HR(95% CI)在圖2之I組中 為0.908(0.795，1·〇4) ’其中單側p值（對數秩）為〇〇8，相比 而 έ ’ HR(95〇/o CI)在圖 2 之 III 組中為 0.717(0.625， 0.824) ’其中單側p值（對數秩）<〇 〇〇1。參見圖5。該差異具 有顯著性。治療方案一般耐受良好且不良事件（包括GI穿 孔）類似於先前貝伐單抗研究。參見圓3及圓4。此為在此 群體中展現益處之第一抗血管新生療法。圖6說明使用CA-125作為惡化決定因素的結果^ [A-125為高分子量醣蛋白 上由單株抗體（OC-125)識別之抗原決定子，該〇c_125係使 154268.doc •102- 201138819 用卵巢癌細胞株作為免疫原而產生。CA 125已作為監測罹 患上皮卵巢癌及其他癌症之患者的血清標記物而經評估。 參見例如參考文獻 Gyn Oncol 38:373, 1990 ; Gyn Oncol 38:181, 1990 ； Amer J Ob Gyn 160:667, 1989 ； Amer J Ob . Gyn 159:873, 1988 ； Amer J Ob Gyn 159:341, 1988 ； Ob
Gyn 72:159，1988 ;及 Gyn Oncol 36:299, 1990 及本文中之 描述。圖7說明I組相較於III組之子群分析。 表1 :基線臨床特徵 特徵 I組 II組 III組 CP CP+BEV CP+BEV^BEV (n=625) (n=625) (n=623) 中值年齡(範圍） 60(25-86) 60(24-88) 60(22-89) 人種，n(%) 非西班牙白種人 526(84) 519(83) 521(84) 亞洲人 41⑺ 37⑹ 39(6) 非西班牙黑種人 25⑷ 28(5) 27⑷ 西班牙人 2K3) 28(5) 25⑷ 其他列出之人種 8(1) 5(<1) 4(<1) GOG PS，n(%) 0 311(50) 315(50) 305(49) 1 272(44) 270(43) 267(43) 2 42(7) 40(6) 51(8) 表2 :基線手術-病理特徵 特徵，</。） I組 II組 III組 CP CP+BEV CP+BEV^BEV (n=625) (n=625) (n=623) 分期/殘存尺寸 III期，最佳(宏觀） 218(35) 205(33) 216(35) III期，次最佳 254(41) 256(41) 242(39) 154268.doc -103- 201138819 IV期 153(25) 164(26) 165(27) 組織學 漿液性 543(87) 523(84) 525(84) 子宮内膜樣 20(3) 15(2) 25⑷ 透明細胞 11(2) 23⑷ 18(3) 黏質 8(1) 5(<1) 8(1) 腫瘤等級 3a 412(66) 435(70) 430(69) 2 94(15) 77(12) 92(15) 1 33(5) 28⑷ 16(3) 未說明/待定 86(14) 85(14) 85(14) 實例2.在罹患上皮卵巢癌之患者中的標準化學療法（卡鉑及 太平洋紫杉醇）加上貝伐單抗之隨機化兩組多中心婦科癌 症組間試驗 提供III期隨機化研究（ICON7)之結果以評估卡鉑及太平 洋紫杉醇之標準化學療法加上貝伐單抗的安全性及功效。 主要終點在於確定標準化學療法加上貝伐單抗在與單獨標 準化學療法相比時是否會改善如下女性的無惡化存活期 (PFS)，該等女性新近診斷出且經組織學證實有高風險之 婦科學及產科學國際聯合會（International Federation of Gynaecology and Obstetrics，FIG0)I 期及 Ila 期（3級或僅透 明細胞癌）及FIGO Ilb-IV期（所有等級及所有組織學類型） 上皮卵巢癌、輸卵管癌或原發性腹膜癌且已進行初始手術 (減積細胞減量手術或活組織檢查（若患者罹患FIGO IV期 疾病））且在疾病惡化前不考慮行細胞減量手術。次要終點 包括總存活期（OS)、反應率、反應持續時間、無生物惡化 時間間隔（由CA 125或PFIBI0增加來定義）、安全性及生活 154268.doc -104- 201138819 品質。ICON7為比較標準療法（卡鉑及太平洋紫杉醇）與併 有貝伐單抗及太平洋紫杉醇與卡始之組合之一研究組的兩 組隨機化臨床試驗（參見圖總共有1528名合格女性參與 該試驗。 貝伐單抗為鼠類抗人類VEGF單株抗體之重組人類化型 式，稱作rhuMAb VEGF。貝伐單抗已進入作為單一藥劑用 以對具有貫體腫瘤之患者誘導腫瘤生長抑制作用及與細胞 毒性化學療法組合用以延遲具有轉移性實體腫瘤之患者的 至疾病惡化為止之時間的臨床研發t。參見例如presta 等尺，Humanization of an anti,scular end〇theUai ^〇wth factor monoclonal antibody f〇r the therapy of solid tumors 仍d Cancer Res 57:4593-9，1997 0 患者選擇 ICON7包括新近珍斷出且經組織學證實有高風險之㈣。 I期及Ila期（3級或僅透明細胞癌）及FIG〇 nb_iv期（所有等 級及所有組織學類型）上皮卵巢癌、輸卵管癌或原發性腹 膜癌且已進行初始手術(減積細胞減量手術或活組織檢查 (若患者罹患FIG〇 IV期疾病）)且在疾病惡化之前將不會考 慮行細胞減量手術的患者。有可量測及非可量測疾病之患 者合格。若患者滿足如下所述之所有納入準則且不滿足排 除準則中之-者，則料其有參加此試驗的資格： 患者納入準則： •女性年齡218歲 •藉由自疾病部位按最小需求進行核心活组織檢查而經 154268.doc -105- 201138819 組織學證實（單獨細胞學不足以診斷） 0上皮卵巢癌 〇原發性腹膜癌（須為乳頭狀漿液性組織學類型）或 〇輸卵管癌 •且符合表3中之準則 罹患任-期透明細胞癌之患者因與此亞型有關之較差預 後而合格。僅經手術治療之先前早期上皮印巢癌或輸印管 癌患者在料出㈣骨盆復發時合格，只要在疾病惡化之 前未計劃再行間隔性細胞減量術療法即可。 出於此試驗之目的，透明細胞癌係定義為存在25〇%透 明細胞成分或由當地病理學家報導為透明細胞癌。 表3:組織學合格準則 FIGO 合格 10 分期 1級 2級 3級 la 否E 否£ 是 lb 否E 否E 是 Ic 否E 否E 是 Ila 否E 否E 是 15 lib 是 是 是 lie 是 是 是 III 是 是 是 IV 是 是 是 等級係指1級（分化良好）' 2級（中度分化）及3級（分化不 良）。 E=排除合格而與FIG0分期無關之透明細胞癌患者 •患者應已由有處理卵巢癌經驗之外科醫生在達成根據 154268.doc •106· 201138819 GCIG 會議共同聲明（GCIG conferenee consensus
Statement)最大限度外科細胞減量術之目的下進行外 科減積術。在疾病惡化之前須無計劃之外科減積術。 〇初始外科減積術不適宜之ΠΙ期及IV期疾病患者仍合 格，限制條件為 患者有組織學診斷且 _預期在疾病惡化前不行減積手術 〇患者應能夠在細胞減量手術後八週内開始全身性治 療。右患者被隨機分至研究組中，且若研究者決定 在手術後4週内開始化學療法，則須省去貝伐單抗 首次給藥。 〇兔'患者進行兩次手術’例如進行初始手術以移除認 為是良性囊腫者，且接著進行第二次婦科手術以對 卵巢腫瘤進行正式分期及最大限度減積，則第二次 手術曰期記錄為手術日期；首次全身性治療在此曰 期後八週内開始。診斷日期係記錄為診斷出卵巢癌 之初始手術的日期。 • ECOG日常體能狀態（PS)〇-2 •預期壽命>12週 •適當骨髓功能（檢查/計算手術後血液的所有參數）（在 隨機化前28天内） 〇絕對嗜中性白血球計數（ANC)kl.5xl09個/公升 〇血小板（PLT)^lOOxlO9個/公升 〇血紅素（Hb)^9g/dl(可在輸血後） 15426B.doc -107· 201138819 •適當凝血參數（檢查/計算手術後血液的所有參數）（在 隨機化前28天内） 〇活化凝血酶原時間（APTT)幺1.5XULN;或 〇國際標準化比值（INR)S1.5(若患者接受華法林治 療，則必須進行INR量測） •適當肝功能（檢查/計算手術後血液的所有參數）（在隨 機化前28天内）
〇血清膽紅素（BR)S1.5xULN 〇血清轉胺酶<2.5xULN •針對蛋白尿之尿液量測試紙<2+。若尿液量測試紙 22+ ’則24小時尿須在24小時内顯示;g蛋白質 •適當腎功能，定義為血清肌酸酐$2 〇 mg/dl或$177 μπιο1/1。 患者排除準則： •非上皮卵巢癌，包括惡性混合型苗勒氏腫瘤 •交界性腫瘤（低度惡性潛能腫瘤） •計劃進行腹膜内細胞毒性化學療法 •之前針對印巢癌進行全身性抗癌療法（例如化學療 法、單株抗體療法、酪胺酸激酶抑制劑療法或激素療 法） ’、 •在貝伐單抗之預期首次給藥之前4週内進行手術（包括 開放式活組織檢查）（考慮到在化學療法之首個週期中 可省去貝伐單抗） •在自研究治療開始之後58週時段期間有任何計劃之手 154268.doc -108* 201138819 術（治療54週加上另外4週以清除貝伐單抗） •不受控制之高血壓（記錄患者在休息5分鐘後且處於坐 姿時的血壓量測值）（儘管進行抗高血壓療法，但Bp持 續升南 > 150/100 mmHg) •先前對腹部或骨盆有任何放射線療法 •在貝伐單抗之潛在首次給藥前4週期間有顯著創傷性 損傷 •有腦轉移或脊髓壓迫症之病史或臨床懷疑。在懷疑腦 轉移之狀況下，必須進行腦CT/MRI(在隨機化前4週 内）。在懷疑脊髓壓迫症之狀況下，必須進行脊髓 MRI(在隨機化前4週内）。 •在神經檢查時有中樞神經系統（CNS)疾病之病史或跡 象，例如不受控制之癲癇發作（除非已用標準醫學療 法充分治療） •先前在隨機化前六個月内有腦血管意外（CVA)、短暫 性缺jk性發作（TIA)或蛛網膜下出血（§αη) •在研究期間及之後至少六個月㈣願意使用適當避孕 措施（口服避孕藥、子宮内避孕器或障壁避孕法聯合 殺精子膠凍或進行絕育手術）的育齡期女性 •姓娠或哺乳女性 •先前暴露於小鼠CA 125抗體 •在參加此試驗前30天内經任何其他研究藥劑治療或參 與另一 床試驗中 •在隨機化前5年内有除印巢癌以外之惡性病，例外為 154268.doc 201138819 如下文所說明之經充分治療之原位子宮頸癌及/或基 底細胞皮膚癌及/或早期子宮内膜癌。患者在5年多前 可月b已針對其他惡性病（例如乳癌或結腸直腸癌）（若診 斷出）接受先前輔助化學療法而無後繼復發跡象。 •除非符合描述子宮内膜癌之所有下列準則，否則排除 有同時存在之原發性子宮内膜癌或有原發性子宮内膜 癌既往病史之患者： 〇分期Sib 0僅有淺表子宮肌層侵襲 〇無淋巴血管侵袋 0非分化不良（亦即不為3級或乳頭狀漿液性或透明細 胞） 已头對貝伐單抗及其賦形劑或化學療法（包括十六醇 t氧乙稀)過敏 •有未癒合傷口、潰瘍或骨折。切口二期癒合有肉芽形 成且無筋膜裂開或感染跡象之患者合格，但需要每三 週一次進行傷口檢查 •有血栓性或出血性病症之病史或跡象 •有&a床顯著性心企管疾病，包括 〇在隨機化後6個月内有心肌梗塞或不穩定型心絞痛 〇紐約心臟協會（NYHA)k2級充血性心臟衰竭（chf) 0雖然服用藥物但控制較差之心律不整（有速率控制 型心房顫動之患者合格） 〇等級23之週邊血管疾病（亦即有症狀且干擾日常生 154268.doc •110· 201138819 活活動[ADL]，需要修正或修訂） •當前或最近（在第1週期治療前10天内）長期使用阿司匹 靈（aspirin)>325毫克/天（低劑量阿司匹靈（<325毫克/ 天）在與貝伐單抗加上化學療法一起使用時似乎不會 增加3-4級出血風險，因此在此試驗方案中不禁止有 動脈血栓栓塞事件風險之患者使用預防性低劑量阿司 匹靈） •當前或最近（在週期1治療前1 〇天内）為達成治療目的使 用全劑量之口服或非經腸抗凝劑或溶血栓劑（血管暢 通者例外’在該狀況下INR須維持在1 5以下） •預先存在感覺或運動神經病22級 •有以下跡象：任何其他疾病、代謝功能障礙，身體檢 查結果或實驗室結果對研究藥物之使用有所禁忌或使 患者處於治療相關性併發症之高風險下的疾病或病狀 有合理懷疑。 且在第一年中大約第9
六週一次對患者進行臨床評定及CA 及CA 125量測。在試驗第二 在三個及六個化學療法週期後 個月及第12個月時’或在12他| .:二. 154268.doc -111- 201138819 及第二年，每三個月一次董 上尬 , T〜者進行評定及CA 125量測。 在第四及第五年，每六個--^ ΓΑ 19<：. -人對患者進行臨床評定及 CA 125量測。此後，評定每 母平進仃一次。僅基於CA 125準 則之進展係用CT掃描驗嫩 ^ , 掃描驗…此結果呈陰性，則在懷疑臨 床惡化時重複進行。 在出現由療程界定之疾症s 佚届心化跡象後，在試驗中的追蹤 第一段五年期間每六個月一次 人隨访患者之存活期及對印巢 癌之後繼治療，且此後每年一次。 在治療期間進行；t期身體檢查及常規血液檢驗以監測患 者安全性。在每個化學療法週期開始時每六週一次使用 EORTC QLQ C-3〇+〇V_28&Eq_5D問卷評定生活品質（q〇l) 直至第一年結束且接著每三個月—次直至針對惡化之治療 開始為止或直至第二年結束。所有在隨機化後仍存活三年 之患者完成另一 QoL表格。在研究治療及追蹤時段期間記 錄不良事件及醫學資源使用。 結果 研究結果表明貝伐單抗在與化學療法組合且繼續作為維 持療法持續總共12個月時間時有效治療第一線卵巢癌。此 組合有效延長無惡化存活期（PFS)。對PFS之初步分析表明 化學療法組（CP)中PFS中值為16.0個月，相比而言，化學 療法加上貝伐單抗組（€卩87.5 + )中？？8中值為18.3個月，其 中P值（對數秩檢驗）為0.0010。風險比（HR)(95% CI)為 0.79(0.68 ; 0.91)。差異具顯著性。PFS分析概述於圖9及 10中。 154268.doc -112· 201138819 基線特徵如下： 表4 : 基線特徵-人口統計 CP (N-764) CPB7.5+ (N=764) 年齡：平均值(SD) 56.7(10.6) 56.5(10.4) 人種：白種人(％) 737(96%) 730(96%) 曰常體能狀態(ECOG) 〇(%) 333(44%) 307(41%) K%) 375(49%) 391(52%) 2(%) 54(7%) 55(7%) 表5 : 基線特徵-彡P巢癌病史 CP (N=764) CPB7.5+ (N=764) 癌症來源 卵巢(上皮)(％) 667(87%) 673(88%) 輸卵管(％) 29(4%) 27(4%) 原發腹膜(％) 56(7%) 50(7%) 多位置(％) 12(2%) 14(2%) FIGO分期 I 期(％) 65(8%) 54(7%) II 期(％) 80(11%) 83(11%) III 期(％) 522(68%) 523(68%) IV 期(％) 97(13%) 104(14%) 154268.doc 113- 201138819 表6 : 基線特徵-印巢癌病史 CP (N=764) CPB7.5+ (N=764) 分化程度 1 級(％) 56(7%) 41(5%) 2 級(％) 142(19%) 175(23%) 3 級(％) 556(74%) 538(71%) 組織學亞型 漿液性(％) 529(69%) 525(69%) 黏質(％) 15(2%) 19(2%) 子宮内膜樣(％) 57(7%) 60(8%) 透明細胞(％) 60(8%) 67(9%) 其他(％) 55(7%) 53(7%) 混合型(％) 48(6%) 40(5%) 表7 : 基線特徵-卵巢癌手術 CP (N=764) CPB7.5+ (N=764) 進行減積手術：是(％) 747(98%) 751(98%) 減積手術結果：最佳(°/〇) 552(74%) 559(74%) 手術與首次試驗治療之間的時間[天數]:平均 值(SD) 35.6(10.2) 35.9(9.9) 對貝伐單抗之不良事件的初步評定與先前研究一致。 表8 :不良事件（AE)之概覽 CP (N=763) CPB7.5+ (N=746) 有嚴重AE之患者 154(20.2%) 279(37.4%) 有3/4/5級AE之患者 385(50.5%) 479(64.2%) 中止任何治療之患者 98(12.8%) 293(39.3%) 因AE中止任何治療之患者 68(8.9%) 162(21.7%) 所有死亡者 131(17.2%) 107(14.3%) 所有相關死亡者 1(0.1%) 5(0.7%) 並非因惡化死亡者 16(2.1%) 19(2.5%) 154268.doc -114- 201138819 實例3.在罹患鉑敏感性復發性卵巢癌、原發性腹膜癌或輸 卵管癌之患者中卡鉑及吉西他濱加上貝伐單抗之III期多 中心、隨機化、盲法、安慰劑對照試驗 上皮卵巢癌（EOC)及其組織學及臨床等效物、原發性腹 膜癌（PPC)及輸卵管癌在美國以每年約25,000例之發病率 出現且每年導致約14,000例死亡。由於該疾病趨於在早期 無症狀，所以大部分患者最初即存在有晚期（III期或IV期） 疾病。儘管EOC、PPC及輸卵管癌對許多化學治療劑（尤其 紫杉烷及鉑化合物）敏感，但僅20%-30%存在有III期或1ν 期疾病之患者存活5年。有鉑敏感性復發性癌症（定義為自 基於鉑之化學療法方案完成開始超過6個月疾病復發）的患 者對化學療法有較高初始反應率；然而，此等患者不被認 為可治癒。最近，美國食品與藥物管理局（FDA)批准吉西 他濱化學療法與卡鉑組合用於復發之鉑敏感性疾病。卡1白 及吉西他濱使得有鉑敏感性疾病之患者的無惡化存活期 (PFS)與經單獨卡鉑治療之患者相比具統計顯著性。參見 例如 Pfisterer，Plante M，Vergote I等人，Gewcz’iaMwe 尸’“5 Carboplatin compared with carboplatin in patients platinum-sensitive recurrent ovarian cancer: an interg^ouP trial of the AGO-OVAR, the NCIC CTG, and the EORTC GCG. J. Clin Oncol，2006;24:469$707 〇 血管新生在EOC產生及後繼進展中似乎為重要因素e Yoneda及同事（1998)證實在EOC異種移植模型中，腫瘤生 長速率與血管密度成正比且惡性腹水產生（與EOC不良結 154268.doc -115- 201138819 果有關之特徵）與血管内皮生長因子（VEGF)之表現有關。 參見例如 Yoneda J, Kuniyasu H, Crispens MA 等人， Expression of angiogenesis-related genes and progression of human ovarian carcinomas in nude mice. J Natl Cancer Inst. 1998年3月18曰；90:44f 54。其他研究已證實EOC中的 VEGF表現與微血管密度有關。此外，研究已展示在EOC 中由免疫組織化學測定之CD31(—種血管内皮標記物）表現 密度與存活率呈反相關。 此實例描述評估與卡鉑（曲線下面積[AUC]4，第1天，每 21天一次）及吉西他濱（1000 mg/m2，第1天及第8天，每21 天一次）組合投與貝伐單抗（15 mg/kg，第1天，每21天一 次）對罹患鉑敏感性復發性上皮卵巢癌、原發性腹膜癌或 輸卵管癌之女性之功效及安全性的安慰劑對照、隨機化、 多中心III期研究。經約2.5年時間招募約480名患者。患者 經隨機化以接受卡鉑及吉西他濱加上安慰劑治療相對於卡 鉑及吉西他濱加上貝伐單抗治療。另外，在隨機化時，藉 由始敏感性疾病（自最後一次基於始之治療起6-1 2個月復發 相對於自最後一次基於鉑之治療起>12個月復發）及針對復 發性上皮卵巢癌、原發性腹膜癌或輸卵管癌之細胞減量手 術（進行手術相對於未進行手術）將患者分層。 患者 | 484名女性1:1隨機化至兩個治療組中之一者中： A期(週期1-6 ; 1個週期= 三週） B期(直至疾病惡化=三 週為止） 第1組 化學療法+安慰劑 安慰劑 第2組 Avastin+化學療法 Avastin 154268.doc •116· 201138819 研究由下文所示之兩個組組成。亦參見圖11。 •第1組：卡鉑（AUC 4，IV)及吉西他濱（1〇〇〇 mg/m2)化學療 法（6個週期直至2〇個週期），繼而安慰劑 •第2組：Avastin(15 mg/kg，ό個週期直至10個週期）與卡鉑 及吉西他濱化學療法（6個週期直至1〇個週期）組合，繼而繼 續單獨使用Avastin(l 5 mg/kg)直至疾病惡化為止 根據卡佛特公式使用估算的腎小球過濾率（GFR)計算卡 鉑劑量以達到濃度X時間之目標AUC ;例如，為達成此處 之目的，認為GFR等於肌酸酐清除率。卡翻（Auc)給藥之 卡佛特公式： 總劑量（毫克）=目標AUC(以毫克/毫升/分鐘計）X[GFR(以毫 升/分鐘計）+25] 肌酸酐清除率可根據規定準則來計算。 患者選擇 上皮卵巢癌、PPC或輸彡卩管癌自基於鉑之化學療法後>6 個月復發（首次復發）之患者將有參與此研究之資格。其他 特定納入及排除準則列於下文中。 患者納入準則： 患者須符合下列準則而有資格參加研究： •簽名知情同意書表格 •年齡218歲 •組織學記錄之卵巢癌、原發性腹膜癌或輸卵管癌在基於鉑 之化學療法後>6個月復發 •患者須有復發性上皮卵巢癌、原發性腹膜癌或輸卵管癌。 154268.doc -117- 201138819 此須為上皮卵巢癌、原發性腹膜癌或輸卵管癌首次復發。 •合格組織學細胞類型之實例包括：漿液性腺癌、子宮 内膜樣腺癌、黏質腺癌、未分化癌、透明細胞腺癌、 移行細胞癌、惡性勃倫納氏腫瘤或非特異性腺癌 •之前未在復發性背景下進行化學治療 •根據經修改之RECIST有可量測之疾病，其中至少一個病 變可以至少一個尺寸（所記錄之最長尺寸）準確量測 •各可量測病變在藉由習知技術、CT及磁共振成像（MRI)量 測時須為20 mm，或在藉由螺旋式CT量測時須為1〇 mm。 •距先前放射線療法或手術及自先前放射線療法或手術恢復 超過28天 • ECOG日常體能狀態〇或1 •使用有效避孕措施（對於育齡期女性） •能夠遵照研究及追蹤程序 患者排除準則 符合下列任何準則之患者排除參加研究。 •疾病特異性排除 〇先前針對復發性印巢，癌、原發性腹媒癌或輸印管癌 進行化學療法治療：激素療法（亦即孕_、雌激素、 抗雌激素劑、芳香酶抑制劑）將不視作先前化學療法 了案。伴隨之抗贅生性抗激素療法（包括他莫西芬、 芳香酶抑制劑等）不允許患者參加研究治療。可給與 低劑量（生理性）雌激素激素替代療法（hrt)。 〇有腹瘺 '胃腸穿孔或腹内膿腫之病史 154268.doc •118· 201138819 〇㈣梗阻之臨床症狀或體征以要非經腸水合作 用、非經腸營養或管灌食物之患者 〇有未由穿刺術或新近外科程序闡明之腹部游離空氣 (abdominal free air)之跡象的患者 •一般醫學排除 〇預期壽命<12週 〇當前、最近（第i週期第丨天前4週内）或計劃參加實驗 藥物研究 〇篩選臨床實驗室值 粒細胞計數<1500個/微升 血小板計數<1 〇〇,〇〇〇個/微升 血色素<8_5 g/dL(血色素可由輸血或紅血球生成素 或其他批准之造血生長因子支持） 血清膽紅素>2·〇χ正常上限值（ULN) 鹼性碟酸酶、天冬胺酸轉胺酶（AST)及/或丙胺酸 轉胺酶（ALT)>2.5xULN(對於肝轉移患者AST、 ALT>5xULN) 血清肌酸酐21.6 國際標準化比值（INR)>1.5及/或活化部分凝血活酶 時間（aPTT)>1.5xULN(除接受抗凝療法之患者以 外） 對於服用全劑量華法林之患者’ INR處於抗凝目 標值範圍内（通常為2至3)，且PTT<ULN之1.2倍 〇在第1週期第1天前5年内有患其他惡性病之病史，例 154268.doc •119- 201138819 卜為有可忽略之轉移或死亡風險之腫瘤，諸如經適 田控制之皮膚基底細胞癌或鱗狀細胞癌或原位子宮 頸癌 0有任何其他疾病、代謝功能障礙，身體檢查結果或 臨床實驗室結果對研究藥物之使用有所禁忌或可能 影響對結果的解釋或使患者處於治療併發症之高風 險下的疾病或病狀有合理懷疑 貝伐單抗特異性排除 〇有全身性使用貝伐單抗（Avastin®)或其他VEGF或 VEGF受體乾向劑之歷史 〇控制不當之高血壓（定義為在服用抗高血壓藥物後收 縮血壓>150 mmHg及/或舒張血壓〉1〇〇 mm Hg) 0有间血壓危象或高血壓性腦病之先前病史 〇紐約心臟協會Π類或更高類別之CHF 〇在第1週期第1天（首次貝伐單抗/安慰劑輸注當天）之 前6個月内有心肌梗塞或不穩定型心絞痛病史 〇在參加研究前6個月内有中風或TIA之病史 〇已知CNS疾病’例外為經治療之腦轉移 經治療之腦轉移係定義為在治療後無惡化或出血 之跡象且不持續需要地塞米松（dexamethasone)， 如在篩選期間由臨床檢查及腦成像（MRI或CT)所 確定°此等轉移不可位於腦幹、中腦、腦橋、髓 質或柔腦膜中。對腦轉移之治療可包括全腦放射 線療法（WBRT)、放射線手術刀、LINAC或等效 154268.doc -120- 201138819 物）或如由治療醫師認為適當之組合。將排除cns 轉移”里在第1天前3個月内進行之神經外科切除或 腦活組織檢查治療的患者。 〇有顯著血管病（例如主動脈瘤、主動脈剝離）之病史 〇在第1週期第！天前6個月内有新近周邊動脈血检症 〇在第1週期第1天前丨個月内有咯血（每次發作y/2茶 匙量鮮紅血液）病史 〇有出血素質或顯著凝血病（在不存在治療性抗凝下） 之跡象 〇在第1週期第1天前28天内進行大外科程序、開放式 活組織檢查或有顯著創傷性損傷或在研究過程期間 預期需要大外科程序 〇在第1週期第1天前7天内進行核心活組織檢查或其他 小外科程序’不包括置放血管通路裝置 〇嚴重未癒合之傷口；活動性潰瘍；或未經治療之 骨折 〇在篩選時有蛋白尿’如由在篩選時UPCR^l.O所證實 〇已知對貝伐單抗之任何組分過敏 〇姓娠（妊娠測試陽性）或哺乳 •育齡期患者須使用有效避孕措施。 此研究OCEANS招募與實例收⑽_ s)及實例 2(ICON7)不同之患者群體，有先前經治療之舶敏感性卵巢 癌的女性有參加此試驗的資格。罹患卵巢癌之女性可接受 基於鉑之化學療法作為第一線治療。在接受基於鉑之化學 154268.doc -121 - 201138819 療法最後次給藥與疾病復發之間的時間可用於幫助確定 對下-線治療中所用之化學療法的選擇m癌在完成 初始基於翻之化學療法後超過六個月㈣，則女性患有 始敏感！·生」#巢癌。若印巢癌在完成初始基於麵之化學 療法後六個月内復發，則認為其為「鉑抗性」印巢癌。 結果 在羅患_巢癌之女性中貝伐單抗加上化學療法之此m期 研九達到其主要終點。研究目的在於評估標準化學療法加 上貝伐單抗，繼而單獨延長使用貝伐單抗直至疾病惡化為 止相較於單獨化學療法對先前經治療之印巢癌女性的功效 及安全性。該研究展示貝伐單抗加上化學療法，繼而繼續 單獨制貝料抗直至疾病惡化為止相較於單獨化學療法 會延長有先前經治療（復發性）之鉑敏感性卵巢癌之女性在 無疾病惡化下存活之時間（無惡化存活期或PFS)。PFS係定 義為自隨機化至如由研究者所確定疾病惡化或因任何原因 而死亡（無論何者首先出現）之時間。pFSi主要終點係由 該研究之研究者評$。可量測疾病係在整個研究過程中由 研究者使用經修改RECIST(Therasse等人，2〇〇〇)例如每9週 一次評定。參見例如 Therasse p，Arbuck SG，Eisenh咖r 它N 蓴 K，New guidelines to evaluate the response to treatment in solid tumors. J Natl Cancer Inst 2000；92:205-1。次要終點包括總存活期（0S)、反㈣、反應持續時間 及安全性。未觀察到新安全性研究結果且不良事件與先前 對貝伐單抗之關鍵試驗中所觀察到之不良事件一致。 154268.doc •122· 201138819 【圖式簡單說明】 圖1描输實例1中所述之卵巢癌試驗之研究設計； 圖2描繪使用貝伐單抗（BEV)或安慰劑及各種化學療法之 卵巢癌試驗之研究設計的圖式； 圖3描繪圖2中所述試驗之選定不良事件； 圖4描繪圖2中所述試驗的由治療階段引發之選定不良事 件； 圖5描繪圖2中所述試驗之j組（arm)、π組及ΙΠ組的由研 究者評定之無惡化存活期（PFS); 圖6描繪圖2中所述試驗之I組及III組的ρρS值以及使用 CA-125標記作為惡化決定因素的結果； 圖7描繪圖2中所述試驗之III組中之患者相對於I組中之 患者的子群分析； 圖8描繪實例2中所述卵巢癌試驗之研究設計； 圖9描繪圖8中所述試驗之無惡化存活期（pfs)分析的概 述。「CP」對應於圖8中之Α組。「CPB7.5+」對應於圖8中 之B組； 圖10描繪來自圖8中所述試驗之PFS結果的圖示。「CP」 對應於圖8中之A組。「CPB7.5+」對應於圖8中之B組；及 圓11描繪實例3中所述卵巢癌試驗之研究設計。 154268.doc • 123· 201138819 序列表 <110>美商建南德克公司 <120>治療卵巢癌之抗-血管新生療法 <130> P4411R1 <140> 100105846 <141> 2011-02-22 <150> 61/307,095 <151> 2010-02-23 <150> 61/351,231 <151> 2010-06-03 <150> 61/360,059 <151> 2010-06-30 <150> 61/439,819 <151> 2011-02-04 <160> 2 <210> 1 <211> 123 <212> PRT <2·Ι3>人工序列 <220> <223〉合成序列 <400〉 1 GIu Val Gin Leu Val Giu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly 15 10 15
Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr 20 25 30
Asn Tyr Gly Met Asn Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu 35 40 45
Giu Trp Val Gly Trp He Asn Thr Tyr Thr Gly Giu Pro Thr Tyr 50 55 60
Ala Ala Asp Phe Lys Arg Arg Phe Thr Phe Ser Leu Asp Thr Ser 65 70 75
Lys Ser Thr Ala Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Giu Asp 80 85 90
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys Tyr Pro His Tyr Tyr Gly Ser 95 100 105
Ser His Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 110 115 120
Val Ser Ser <210〉 2 <211> 108 <212〉 PRT <213>人工序列 <220〉 <223〉合成序列 <400> 2
Asp He Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val 15 10 15
Gly Asp Arg Vat Thr lie Thr Cys Ser Ala Ser Gin Asp lie Ser 20 25 30 154268-序列表.doc 201138819
Asn Tyr Leu Asn Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys 35 40 45
Val Leu He Tyr Phe Thr Ser Ser Leu His Ser Gfy Val Pro Ser 50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie 65 70 75
Ser Ser Leu Gin Pro G!u Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Gin 80 85 90
Tyr Ser Thr Val Pro Trp Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu 95 100 105 lie Lys Arg .2- 154268·序列表.doc

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  1. 201138819 七、申請專利範園： 1. -種抗VEGF抗體之用途，供製造用於治療診斷有印巢 癌患者之治療方案的藥物，其中該治療方案包括將化學 療法與有效量之該藥物投與组合，繼而進行抗vegf維 持療法’其中該治療方案之該化學療法包括投與至少一 種化學治療劑，且其中該治療方案有效延長該患者之無 惡化存活期。 2. 如請求項i之用it，其中該化學治療劑為紫杉院 (taxane)、太平洋紫杉醇（paclitaxei)、多烯紫杉醇 (d〇Cetaxel)、太平洋紫杉醇蛋白結合粒子（例如 Abraxane®)、鉑類似物、卡鉑（carb〇piatin)、吉西他濱 (gemcitabine)或其組合。 3. 如凊求項1之用途，其中該治療方案之該化學療法包含 投與紫杉烷及卡鉑。 4·如凊求項1之用途，其中該治療方案之該化學療法包含 投與卡鉑及吉西他濱。 5, 如請求項1之用途，其中該患者經診斷患有先前未經治 療之卵巢癌。 6. 如請求項1之用途，其中該患者經診斷患有復發性卵巢 癌。 7·如請求項1之用途，其中該抗VEGF抗體結合之抗原決定 基與由融合瘤ATCC HB 10709產生之單株抗VEGF抗體 Α4·6.1結合之抗原決定基相同。 8.如請求項丨之用途，其中該抗VEGF抗體為人類化抗體》 154268.doc 201138819 9. 如請求項8之用途，其中該抗VEGF抗體為人類化A4.6.1 抗體或其片段。 10. 如請求項8之用途，其中該抗VEGF抗體為貝伐單抗 (bevacizumab) 〇 11 ·如請求項1之用途，其中該抗VEGF抗體為貝伐單抗且該 治療方案之該化學療法包含投與卡培他濱及太平洋紫杉 醇或多烯紫杉醇。 12. 如請求項1之用途，其中該抗VEGF抗體為貝伐單抗且該 治療方案之該化學療法包含投與卡鉑及吉西他濱。 13. 如請求項1之用途，其中該患者在與另一未經該抗VEGF 維持療法治療之患者相比時，無惡化存活期延長至少約 3.8個月或長於3.8個月。 14. 如請求項8之用途，其中該抗VEGF抗體具有包含下列胺 基酸序列之重鏈可變區： EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASGYTFT NYGMNWVRQA PGKGLEWVGW INTYTGEPTY AADFKRRFTF SLDTSKSTAY LQMNSLRAED TAVYYCAKYP HYYGSSHWYF DVWGQGTLVT VSS (SEQ ID No. 1) 及包含下列胺基酸序列之輕鏈可變區： DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCSASQDIS NYLNWYQQKP GKAPKVLIYF TSSLHSGVPS RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ YSTVPWTFGQ GTKVEIKR (SEQ ID No. 2) » 15. —種用於治療人類患者之先前未經治療之卵巢癌的套 組，其包含含有抗VEGF抗體組合物之包裝及指示將該 抗VEGF抗體組合物與紫杉烧療法及卡翻組合使用繼而 154268.doc 201138819 進行抗VEGF維持療法之說明書，其中該等說明書敍述 接受紫杉烷療法及卡鉑療法及貝伐單抗之患者的無惡化 存活期為14.1個月，其中風險比為0.717(p值<〇.〇〇〇1)。 16.如請求項15之套組，其中該抗VEGF抗體具有包含下列 胺基酸序列之重鏈可變區： EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASGYTFT NYGMNWVRQA PGKGLEWVGW INTYTGEPTYAADFKRRFTF SLDTSKSTAY LQMNSLRAED TAVYYCAKYP HYYGSSHWYF DVWGQGTLVT VSS (SEQ ID No. 1) 及包含下列胺基酸序列之輕鏈可變區： DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCSASQDIS NYLNWYQQKP GKAPKVLIYF TSSLHSGVPS RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ YSTVPWTFGQ GTKVEIKR (SEQ ID No· 2)。 17·如請求項15之套組，其中該抗VEGF抗體為貝伐單抗。 18. 如請求項15之套組，其中該患者患有III期或IV期卵巢 癌。 19. 一種指導罹患卵巢癌之人類個體的方法，該方法包括提 供說明’指導其接受用抗VEGF抗體及同步化學療法， 繼而接受抗VEGF維持療法，來治療卵巢癌，以延長該 患者之無惡化存活期。 20. 如請求項19之方法，其中該等說明進一步包括提供說 明’指導其接受使用至少兩種化學治療劑之治療。 21. —種推廣方法，其包括推廣將抗VEGF抗體與化學療法 同步投與，繼而進行抗VEGF維持療法，來治療人類個 體之卵巢癌，以延長該患者之無惡化存活期。 154268.doc 201138819 22·如s青求項21之方法，其中贫 该方法進一步包括推廣投與至 少兩種化學治療劑。 23·如请求項21之方法，其中令』 〒°亥推廣法係藉由包裝說明書達 成，其中該包裝說明書提供說明，指導其接受使用抗 VEGF抗體之癌症治療。 24. 如s青求項21之方法，其中該 推贗去係藉由該抗VEGF抗 體之市售調配物附帶之包裝說明書達成。 25. 如請求項21之方法，其中該推廣法係藉由該等化學治療 劑之市售調配物附帶之包裝說明書達成。 ， 26. 如請求項21之方法，其中呤格 照護提供者進行書面藉由與醫師或健康 27. 如請求項21之方法，其中該推廣法係藉由與醫師或健康 照護提供者進行口頭交流來達成。 ^ 28. =t:21之！法，其中繼該推廣法之後，使用該抗 GF抗體及該專化學治療 則F維持療法。 體’繼而進行抗 29. ΓΓ業方法，其包括銷售與化學療法同步使用繼而進 維持療法之抗乂咖抗體療法，來治療人類個 I9巢癌，以延長該患者之無惡化存活期。 體愈化：Γ之方法’其中該銷售之後，由該抗vEGg 療法同步使用’繼而進行抗VEGF維持療法， 來治療該個體。 31:219、21或29中任—項之方法，其中該化學治療 劑為兔杉燒、太平洋紫杉醇、多烯紫杉醇、太平洋紫杉 154268.doc 201138819 醇蛋白結合粒子（例如Abraxane®)、鉑類似物、卡鉑、吉 西他濱或其組合。 32. 如請求項19至30中任一項之方法，其中該抗vegf抗體 為貝伐單抗。 33. 如請求項i之用途，其中該治療方案之該化學療法包含 才又與太平洋紫杉醇及卡翻。 34. 如請求項丨之用途，其中該抗VEGF抗體為貝伐單抗且該 治療方案之該化學療法包含投與太平洋紫杉醇及卡鉑。 3 5 ·如吻求項1之用途，其中該患者在與另一未經抗vegF抗 體治療之患者相比時，無惡化存活期延長至少約2 3個月 或長於2.3個月。 3 6. —種用於治療人類患者之先前未經治療之卵巢癌的套 組’其包含含有抗VEGF抗體組合物之包裝及指示將該 抗VEGF抗體組合物與太平洋紫杉醇及卡鉑組合使用繼 而進行抗VEGF維持療法之說明書，其中該等說明書鼓 述接受太平洋紫杉醇、卡鉑及抗VEGF抗體之患者的無 惡化存活期為18.3個月，其中風險比為0.79。 154268.doc
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014025813A1 (en) * 2012-08-07 2014-02-13 Genentech, Inc. Combination therapy for the treatment of glioblastoma
US10208355B2 (en) 2014-07-14 2019-02-19 Genentech, Inc. Method of treatment for glioblastoma by administering a VEGF antagonist
US10456470B2 (en) 2013-08-30 2019-10-29 Genentech, Inc. Diagnostic methods and compositions for treatment of glioblastoma
US10617755B2 (en) 2013-08-30 2020-04-14 Genentech, Inc. Combination therapy for the treatment of glioblastoma

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8268314B2 (en) 2008-10-08 2012-09-18 Hoffmann-La Roche Inc. Bispecific anti-VEGF/anti-ANG-2 antibodies
US9527925B2 (en) 2011-04-01 2016-12-27 Boehringer Ingelheim International Gmbh Bispecific binding molecules binding to VEGF and ANG2
LT3485903T (lt) 2011-09-23 2023-02-27 Mereo Biopharma 5, Inc. Vegf/ dll4 surišantys agentai ir jų panaudojimas
MX365139B (es) 2012-03-13 2019-05-24 Hoffmann La Roche Uso de una terapia combinada de bevacizumab y paclitaxel en el tratamiento de cáncer de ovario epitelial resistente al platino, carcinoma de las trompas de falopio resistente al platino, o carcinoma peritoneal primario resistente al platino.
CN104428315B (zh) 2012-07-13 2017-09-29 罗氏格黎卡特股份公司 双特异性抗‑vegf/抗‑ang‑2抗体及其在治疗眼血管疾病中的应用
PL3105246T3 (pl) 2014-02-10 2021-11-29 Merck Patent Gmbh Ukierunkowane hamowanie tgf beta
WO2015152409A1 (ja) * 2014-04-04 2015-10-08 大鵬薬品工業株式会社 タキサン系化合物を含有する抗腫瘍剤及び抗腫瘍効果増強剤
EP3139956A4 (en) * 2014-05-07 2017-11-29 Medimmune, LLC Methods of using anti-ang2 antibodies
US9840553B2 (en) 2014-06-28 2017-12-12 Kodiak Sciences Inc. Dual PDGF/VEGF antagonists
CA2966216A1 (en) * 2014-11-14 2016-05-19 Genentech, Inc. Predicting response to a vegf antagonist
CN116440279A (zh) 2015-09-17 2023-07-18 伊缪诺金公司 包含抗folr1免疫缀合物的治疗组合
AU2016326609B2 (en) 2015-09-23 2023-03-09 Mereo Biopharma 5, Inc. Methods and compositions for treatment of cancer
TW201713360A (en) * 2015-10-06 2017-04-16 Mayo Foundation Methods of treating cancer using compositions of antibodies and carrier proteins
CN108712911A (zh) 2015-12-30 2018-10-26 科达制药股份有限公司 抗体及其缀合物
US10618969B2 (en) 2016-04-06 2020-04-14 Mayo Foundation For Medical Education And Research Carrier-binding agent compositions and methods of making and using the same
EP3272771A1 (en) * 2016-07-22 2018-01-24 Centre National De La Recherche Scientifique Treatment for use for preventing metastasis in a subject exposed to cancer treatment inducing p38 activation
WO2019169341A1 (en) 2018-03-02 2019-09-06 Kodiak Sciences Inc. Il-6 antibodies and fusion constructs and conjugates thereof
US20220064274A1 (en) * 2018-03-26 2022-03-03 Shanghai Yile Biotechnology Co., Ltd. Use of probdnf regulator in b cell-related diseases
US11912784B2 (en) 2019-10-10 2024-02-27 Kodiak Sciences Inc. Methods of treating an eye disorder
AU2022233742A1 (en) * 2021-03-10 2023-09-28 Canariabio Inc. Use of oregovomab and bevacizumab, paclitaxel, carboplatin for treatment of brca-wild type platinum sensitive recurrent
CN115814076A (zh) * 2021-07-01 2023-03-21 江苏先声药业有限公司 抗人vegf抗体与化药联用在制备治疗卵巢癌的药物中的应用
WO2023196153A1 (en) * 2022-04-04 2023-10-12 Merck Sharp & Dohme Llc Methods for treating cancer, an infectious disease or an infection using a combination of a tigit antagonist, a pd-1 antagonist, and a vegf antagonist

Family Cites Families (64)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US991302A (en) * 1910-03-28 1911-05-02 Frederick G Hepburn Waste-supporter.
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
US4485045A (en) 1981-07-06 1984-11-27 Research Corporation Synthetic phosphatidyl cholines useful in forming liposomes
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4544545A (en) 1983-06-20 1985-10-01 Trustees University Of Massachusetts Liposomes containing modified cholesterol for organ targeting
US5567610A (en) 1986-09-04 1996-10-22 Bioinvent International Ab Method of producing human monoclonal antibodies and kit therefor
IL85035A0 (en) 1987-01-08 1988-06-30 Int Genetic Eng Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same
JP3040121B2 (ja) 1988-01-12 2000-05-08 ジェネンテク，インコーポレイテッド 増殖因子レセプターの機能を阻害することにより腫瘍細胞を処置する方法
GB8823869D0 (en) 1988-10-12 1988-11-16 Medical Res Council Production of antibodies
DE3920358A1 (de) 1989-06-22 1991-01-17 Behringwerke Ag Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung
US5013556A (en) 1989-10-20 1991-05-07 Liposome Technology, Inc. Liposomes with enhanced circulation time
US5229275A (en) 1990-04-26 1993-07-20 Akzo N.V. In-vitro method for producing antigen-specific human monoclonal antibodies
US5625126A (en) 1990-08-29 1997-04-29 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5661016A (en) 1990-08-29 1997-08-26 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes
DK0814159T3 (da) 1990-08-29 2005-10-24 Genpharm Int Transgene, ikke-humane dyr, der er i stand til at danne heterologe antistoffer
US5545806A (en) 1990-08-29 1996-08-13 Genpharm International, Inc. Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5633425A (en) 1990-08-29 1997-05-27 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
ES2113940T3 (es) 1990-12-03 1998-05-16 Genentech Inc Metodo de enriquecimiento para variantes de proteinas con propiedades de union alteradas.
US6582959B2 (en) * 1991-03-29 2003-06-24 Genentech, Inc. Antibodies to vascular endothelial cell growth factor
US20030206899A1 (en) 1991-03-29 2003-11-06 Genentech, Inc. Vascular endothelial cell growth factor antagonists
WO1994004679A1 (en) 1991-06-14 1994-03-03 Genentech, Inc. Method for making humanized antibodies
US5565332A (en) 1991-09-23 1996-10-15 Medical Research Council Production of chimeric antibodies - a combinatorial approach
WO1993011161A1 (en) 1991-11-25 1993-06-10 Enzon, Inc. Multivalent antigen-binding proteins
EP1514934B1 (en) 1992-02-06 2008-12-31 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Biosynthetic binding protein for cancer marker
US5573905A (en) 1992-03-30 1996-11-12 The Scripps Research Institute Encoded combinatorial chemical libraries
DK1975181T3 (da) 1992-10-28 2011-06-06 Genentech Inc Anvendelse af vaskulære endothelcelle-vækstfaktor-antagonister
PL174494B1 (pl) 1992-11-13 1998-08-31 Idec Pharma Corp Kompozycja farmaceutyczna do leczenia chłoniaka z limfocytów B i sposób wytwarzania kompozycji farmaceutycznej do leczenia chłoniaka z limfocytów B
US5635388A (en) 1994-04-04 1997-06-03 Genentech, Inc. Agonist antibodies against the flk2/flt3 receptor and uses thereof
IL117645A (en) 1995-03-30 2005-08-31 Genentech Inc Vascular endothelial cell growth factor antagonists for use as medicaments in the treatment of age-related macular degeneration
US5641870A (en) 1995-04-20 1997-06-24 Genentech, Inc. Low pH hydrophobic interaction chromatography for antibody purification
US5739277A (en) 1995-04-14 1998-04-14 Genentech Inc. Altered polypeptides with increased half-life
PT1516628E (pt) 1995-07-27 2013-09-24 Genentech Inc Formulação de proteína liofilizada isotónica estável
US5730977A (en) 1995-08-21 1998-03-24 Mitsui Toatsu Chemicals, Inc. Anti-VEGF human monoclonal antibody
GB9603256D0 (en) 1996-02-16 1996-04-17 Wellcome Found Antibodies
US6100071A (en) 1996-05-07 2000-08-08 Genentech, Inc. Receptors as novel inhibitors of vascular endothelial growth factor activity and processes for their production
US6884879B1 (en) 1997-04-07 2005-04-26 Genentech, Inc. Anti-VEGF antibodies
US20020032315A1 (en) * 1997-08-06 2002-03-14 Manuel Baca Anti-vegf antibodies
ATE501170T1 (de) 1997-04-07 2011-03-15 Genentech Inc Verfahren zur herstellung humanisierter antikörper durch randomisierte mutagenese
JP3957765B2 (ja) 1997-04-07 2007-08-15 ジェネンテク・インコーポレイテッド 抗ｖｅｇｆ抗体
ATE296315T1 (de) 1997-06-24 2005-06-15 Genentech Inc Galactosylierte glykoproteine enthaltende zusammensetzungen und verfahren zur deren herstellung
AU759779B2 (en) 1997-10-31 2003-05-01 Genentech Inc. Methods and compositions comprising glycoprotein glycoforms
US6194551B1 (en) 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
US6242195B1 (en) 1998-04-02 2001-06-05 Genentech, Inc. Methods for determining binding of an analyte to a receptor
JP2002510481A (ja) 1998-04-02 2002-04-09 ジェネンテック・インコーポレーテッド 抗体変異体及びその断片
US6528624B1 (en) 1998-04-02 2003-03-04 Genentech, Inc. Polypeptide variants
US6602684B1 (en) 1998-04-20 2003-08-05 Glycart Biotechnology Ag Glycosylation engineering of antibodies for improving antibody-dependent cellular cytotoxicity
ES2694002T3 (es) 1999-01-15 2018-12-17 Genentech, Inc. Polipéptido que comprende una región Fc de IgG1 humana variante
US6703020B1 (en) 1999-04-28 2004-03-09 Board Of Regents, The University Of Texas System Antibody conjugate methods for selectively inhibiting VEGF
EP1240337B1 (en) 1999-12-24 2006-08-23 Genentech, Inc. Methods and compositions for prolonging elimination half-times of bioactive compounds
EP2857516B1 (en) 2000-04-11 2017-06-14 Genentech, Inc. Multivalent antibodies and uses therefor
ES2727425T3 (es) 2000-12-12 2019-10-16 Medimmune Llc Moléculas con semividas prolongadas, composiciones y usos de las mismas
MXPA04001072A (es) 2001-08-03 2005-02-17 Glycart Biotechnology Ag Variantes de glicosilacion de anticuerpos que tienen citotoxicidad celulares dependiente de anticuerpos incrementada.
ATE430580T1 (de) 2001-10-25 2009-05-15 Genentech Inc Glycoprotein-zusammensetzungen
US20040093621A1 (en) 2001-12-25 2004-05-13 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd Antibody composition which specifically binds to CD20
US7361740B2 (en) 2002-10-15 2008-04-22 Pdl Biopharma, Inc. Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis
WO2005000900A1 (en) 2003-05-30 2005-01-06 Genentech, Inc. Treatment with anti-vegf antibodies
US20050106667A1 (en) 2003-08-01 2005-05-19 Genentech, Inc Binding polypeptides with restricted diversity sequences
WO2005044853A2 (en) 2003-11-01 2005-05-19 Genentech, Inc. Anti-vegf antibodies
SV2006002143A (es) * 2004-06-16 2006-01-26 Genentech Inc Uso de un anticuerpo para el tratamiento del cancer resistente al platino
US20060009360A1 (en) 2004-06-25 2006-01-12 Robert Pifer New adjuvant composition
KR101364276B1 (ko) * 2004-09-03 2014-02-20 제넨테크, 인크. 인간화 항-베타７ 길항제 및 그의 용도
US20070166388A1 (en) 2005-02-18 2007-07-19 Desai Neil P Combinations and modes of administration of therapeutic agents and combination therapy
CN103554215B (zh) * 2007-10-30 2016-06-15 健泰科生物技术公司 通过阳离子交换层析进行的抗体纯化
RU2531948C2 (ru) 2008-11-22 2014-10-27 Дженентек, Инк. Антиангиогенная терапия, применяемая для лечения рака молочной железы

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014025813A1 (en) * 2012-08-07 2014-02-13 Genentech, Inc. Combination therapy for the treatment of glioblastoma
EP3446709A1 (en) * 2012-08-07 2019-02-27 F. Hoffmann-La Roche AG Combination therapy for the treatment of glioblastoma
US10456470B2 (en) 2013-08-30 2019-10-29 Genentech, Inc. Diagnostic methods and compositions for treatment of glioblastoma
US10617755B2 (en) 2013-08-30 2020-04-14 Genentech, Inc. Combination therapy for the treatment of glioblastoma
US10208355B2 (en) 2014-07-14 2019-02-19 Genentech, Inc. Method of treatment for glioblastoma by administering a VEGF antagonist

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