TW201039836A

TW201039836A - Use of pterosin compounds for treating diabetes and obesity

Info

Publication number: TW201039836A
Application number: TW099102151A
Authority: TW
Inventors: Feng-Lin Hsu; Shing-Hwa Liu; Biing-Jiun Uang
Original assignee: Univ Taipei Medical; Univ Nat Taiwan; Nat Univ Tsing Hua
Priority date: 2009-01-26
Filing date: 2010-01-26
Publication date: 2010-11-16
Also published as: EP2389171A2; WO2010085811A9; JP5640019B2; US20100190732A1; TWI522109B; CA2749931A1; AU2010206549A1; CN102333528A; CA2749931C; KR20110125642A; EP2389171B1; CN102333528B; US8633252B2; AU2010206549A9; WO2010085811A2; AU2010206549B2; NZ594236A; KR101746867B1; JP2012515801A; EP2389171A4

Description

201039836 六、發明說明：【發明所屬之技術領域】本發明係關於式1之嚴素化合物於治療包括第IS和第η型糖尿病的用途。本發明亦揭示該蕨素化合物於治療肥胖的用途。【先前技術】嚴素化合物為存在於嚴類植物（Bracken)内的倍半萜類 jsesqmterpenoids)。已發現此家族的一些成員如先前所述 ❹ Ο 腫瘤活性，例如’描述於曰本專利案第63146839A2號，C7^w.

Pharm. BuU.\91%，26 ·. 2M6, Molecules 2(m，\3 .. 255。糖尿病為具有異常高血糖濃度之特徵的一種糖代謝性疾病。種不_型的糖尿病，亦即非騰島素依賴錢人型，亦稱為弟I，糖尿病，以及月夷島素依賴或幼兒型，亦稱為第工型糖尿病。弟II型糖尿病通常發生於成人且與肥胖具有高度關聯性。第陆ΐίίί人必需控制其飲食及鼓勵減重和運動。病患服用可增加島素，感性或刺激胰臟分泌胰島素的藥物。目前用於第π =病的藥物包括磺醯尿素類、美格耐德類（meglitinides)、雙胍類、 y坐燒二_ ’以及α糖卩侧，然而其具有許多限制，例口’副作用和高比例的繼發性藥物失效（secondaryfailure)。對昭 ^，第I型糖尿病患者相對其年齡和身高並無過重，且在幼年即。第ί型糖尿病患者終其—生必須藉由注射投與膜服投藥姨島素的研究，但是目前仍無有效的因此，仍亟需一種用於治療糖尿病（第J型和肥胖的另_物，較佳為較低副_及可被口服投藥。【發明内容】非可據許多蕨素化合物具有抗糖尿病和抗肥胖活㈣ 201039836 楚ττ因巧，在7方面’本發明提供一種用於治療糖尿病（第1型或療的H的方法’其包括將姐量的式1嚴素化合物投與至需治

盆〜各獨立為H、0Ra、胺基、鹵素、烧氧m基、烷硫基、烷胺基、烷基、烯基、炔基、_ (G) X、_〇_ (g X或Rb-0- ( G) x，Ra和Rb各獨立為Η、烷基、稀基、炔基 ^ =¾絲、芳基或雜芳基，G為單糖殘基，以及χ為m的整 Ϊ :以ft匕各獨立為H、〇Rc、胺基、雜、氰基、齒 L ίίί 基、鎌基、絲、職、炔基、芳基、雜 ί I絲、稀基、块基、環絲、雜環烧基、芳基或和其連接的兩個碳原子共同形擇性地含卜

同員環;或R6、R7和其連接的兩個碳原子共 ίΪ =^^_成選擇性地含1、2或3個雜原子的W (0)、C(S)、S(〇)、C〇H、C(RA，）g

Hi氧31為Λ、烷基或氰基以及仏為H、〇Ra、胺明=硫基、烷胺基、烷基、浠基或炔基。用:====鐵繼峨尿病以及將有丄月fl共:種用於治療肥胖的方法，其包括 “ΪΪ H物投與至有需要此治療的個體。本毛月的關亦包括任何上述嚴素化合物於 201039836 於製造治療肥胖之藥物的用途。下列明本發明的-或多項具體實施例。從更彰顯本發以及射請專利範隨件將可【實施方式】本領i否Ϊ此處使用之全部技術和科學名詞與熟習提及解者的意義相同。藉由引述併入本文内 ❹ 和本發明有關的^和'/=揭示和描述專利說明内所述及可能，包有於=的=二肩域技術麵胃知的複鋪職類和相等物。、 ‘ ’、括將本發明係有關—種用於治療糖尿病的方法，其包 >'置的式I蕨素化合物投與至有需要的個體··

_，"r2 Ο ^^中’^心鳴和仏各獨立為^韻^胺基^^烧 H基、烧硫基、烧胺基、烧基、稀基、快基、-⑹X、_0-⑹ =(G)x ’心和Rb各獨立為H、烷基、烯基、炔基、環烧 J ^環絲、絲或雜絲，G為單糖殘基，以及x為M的整 t垸祕基、烧硫基、燒胺基、絲、烯基、絲、芳基、雜 =、環烧基、雜環烧基、-⑹x、_〇_⑹碱Rd_〇_⑹χ， c^.Rd為Η、燒基、烯基、块基、環絲、雜環烧基、芳基或亦方土，或R5、R^和其連接的兩個碳原子共同形成選擇性地含^、 201039836 2或3、個雜原子的3_8員環；或Re%和其連接的兩個碳原子共同形成選擇性地含1、2或3個雜原子的3-8員環；或R7、r8和其的兩個碳原子共同形成選擇性地含1、2或3個雜原子的員壤；以及X為c (〇)、c (s)、s (0)、C0H、C (狄）或c jNRf)，艮和心’各獨立為η、烷基或氰基以及心為H、〇Ra、胺基、_素、烷氧羰基、烷硫基、烷胺基、烷基、烯基或炔基。 r Λ非Λ"!1?月否則名詞「烧基」指含1-20個碳原子（例如广8)的直鏈或支鏈單價烴。烷基的實施例包括，但不侷限於曱 ί 正ίί、異丙基、正丁基、異丁基’和第三丁基。名價_。Sd/二個碳原子（例如Q〜C8)的直鏈或支鏈雙去罝錐At眾子（例如C2〜Cl〇)及一或多個雙鍵的直鏈或美二。烯基的實例包括，但不侷限於乙職、丙烯價烴。'減的及—或多個三鍵的直鏈或支鏈單價或雙其但9不侷限 -R基團，其R可為Η、土烧基H。名^烧^^」指-0-C (〇) 環烧基、雜環烯基、芳基或' ;「、f基:，基、雜和_8 (R)-烷I團，i R ^⑽基」分別指-N⑻烷基 %域、雜環絲、雜環稀基、芳娜基%烧基、指-NRC(0)Ri基團，其尺和^土^^基。名巧「酿胺基」燒。名詞「雜環烧基」指具有」庚基、環辛基和金剛 ^ 或夕们雜原子（例如，〇、N、s 201039836 或Se)的單價或雙價非芳香族5〜8員員三環環狀系統。雜環燒基的實々貝又辰’或11〜14 略燒基、二纖、嗎但不舰於蝴、呢 /名《司芳基」‘單價6-碳單環、碳雙環 η :，但不侷限於苯基、萘基和葱基「2 «ist；； ;4°;! ；ι^ 的實例包括吼咬基、吱。南基、‘λ 糸統。雜芳基〇吩基、啥琳基、^朵基和嗔唾基。塞、經由糖芽㈤鍵相互連接及代夺一播1,殘基」於此處意指這些化合物_墙,__& ====。且各個糖可經由糖環上的許多不同位 ^唐讓於糖的立體化學而可具有及相同分子内可同時存在該兩種。雜胺笑除則此處所述烧基、稀基、快基、烧氧縣、 0 代:，取代分子部位。名詞「經心」=⑶ ==職可為相同或不同)。取代基的實例包: 美(例如’ f、ci、師〇、經基、胺基、氰基、石肖錢基、醯胺基、羧基、私錬基、烧、脲基、 ΐί 2基:硫脈基、硫氰酸基、石黃酿胺基、烧基、烯基、炔二烷乳f、芳基、雜芳基、環烷基和雜環烷基，其烷基、烯基、篡,ΓΛ_ί氧基:芳基、雜芳基、雜芳氧基、烧胺基、芳胺基、氧 i：H：二二硫代基（Η、石荒基、石夕烧基、烧硫基、芳硫基、烧確 ==、方磺醯基、醯胺基、胺醯基、胺硫醯基、脒基、硫脲基、 = fLS文基、、酿胺基、胍基、腺基、酿基、硫酸基、胺幾基（_c (〇) NH2)、羧基（_c〇〇H)，以及鲮酸醋其烷基、烯基、炔基、 7 201039836 烧氧基、芳基、雜菩其、t班甘3 基、環婦美、土衣基和雜環基可被進一步取代。環烷入基、雜環稀基、芳基和雜芳基亦可被相互融 ί在程中亦可為保護基。名詞「保護基二此Ϊ Α團或分二Πϊί或遮敝官能性以避免產生非預期反應的步财魏產歧紅倾訪婦除而展現 KsH性。賴基的實地括，但不舰於三乙魏基 (Fmoc)M —T减基（tBGe)、鮮氧基（CBZ)和®甲氧羰基越、合物包括該化合物本身，以及其可能存在的藏素化合物上的陽電荷基（例如胺基）舆 ί ί ίΓ!ϋ如鹽。適當陰離子包括氯化物、航物、硬化趟、二二^ϊ酸鹽、確酸鹽、檸檬酸鹽、甲硫酸鹽、三氟乙酸果酸?、甲苯磺酸鹽、酒石酸鹽、富馬酸鹽、楚糖酸鹽、乳酸鹽、戊二酸鹽和馬來酸鹽。同樣地，蕨的負電荷基（例如’甲酸鹽）與陽離子間亦可形成鹽。 ^虽_子包括納離子、鉀離子、鎮離子、_子，以及銨陽離 t，巧，四甲銨離子。該蕨素化合物亦包括含有四級氮原子的 ·-。則樂，實例包括酯及其他醫藥上可接受化合物，其在被投與時&產生活化的蕨素化合物。溶劑合物獅成於活性嚴素 5，與醫藥上可接受輔之間的複合物。醫藥上可接受溶劑的貫例包括水、乙醇、異丙醇、醋酸乙酯、醋酸和乙醇胺。在—具體實施例中，X係C (〇)或CH2，以及特別是C (〇)。在另一具體實施例中’ Rl、R2、R3和心各獨立為H、〇Ra、_ (G) x、-〇_ (g) x、Rb_〇_ (G) χ或烷基，其選擇性地被鹵素、 COORg、〇Rg ’ Rg為H、烷基、環烷基、雜環烷基或保護基取代。在又另一具體實施例中，Rs、、尺7和R8各獨立為Η、〇Rc、 -(G) x、-〇_ (G) (G) χ或烷基，其選擇性地被鹵素、 C(X)Rg、〇Rg ’心為Η、烷基、環烷基、雜環烷基或保護基取代。 201039836 特定而言，表1為本發明式i的範例蕨素化合物。

表1 化合物 X Ri r2 r3 R4 Rs r7 r8 1 c=o ch3 ch2oh H H H ch3 ch2ch2oh ch3 2 c=o H CHj H H H ch3 ch2ch2oh ch3 3 c=o ch3 H H H H ch3 ch2ch2oh ch3 4 oo H ch3 H OH H ch3 ch2ch2oh ch3 5 oo ch3 H H OH H ch3 ch2ch2oh ch3 6 C-0 ch3 H OH H H ch3 ch2ch2oh ch3 7 c=o ch3 ch3 H OH H ch3 ch2ch2oh ch3 8 c=o H ch3 H H H ch3 C2H4COOH ch3 9 c=o H ch3 H H H ch3 ch2ch2ci ch3 10 c=o H ch2oh H H H ch3 ch2ch2oh ch3 11 c=o ch3 ch3 H H H ch3 ch2ch2ci ch3 12 c=o ch3 ch3 H H H ch3 ch2ch2och3 ch3 13 c=o ch3 H H OH H ch3 ch2ch2ci ch3 14 c=o ch3 ch2oh H H H ch3 ch2ch2ci ch3 15 c=o ch3 ch2oh H OH H ch3 ch2ch2oh ch3 16 c=o ch3 ch2oh H OH H ch3 ch2ch2oh ch3 17 oo ch3 OH H H H ch3 ch2ch2oh ch3 18 c=o ch3 H H H H ch3 ch2ch2och3 ch3 19 c=o H ch3 H H H ch3 ch2ch2och3 ch3 20 oo ch3 H H H H ch2oh ch2ch2oh ch3 21 CO ch3 H H OH H ch3 CH (OH) CH2OH ch3 22 c=o ch3 ch3 H H OH ch3 ch2ch2ci ch3 23 c=o ch3 H H OH H ch3 ch2ch2oh ch2oh 24 c=o ch3 H H OH H ch2oh ch2ch2oh ch2oh 25 oo ch3 H H OH H ch2oh ch2ch2oh ch2oh 26 c=o ch2oh ch3 H H H ch3 ch2ch2och3 ch3 27 c=o ch3 ch3 OH H H ch3 ch2ch2oh ch2oh 28 oo ch3 ch3 H OH H ch2oh ch2ch2oh ch3 29 c=o ch2oh ch3 H OH H ch2oh ch2ch2oh ch3 30 c=o ch3 ch3 H H H ch3 ch2ch2oh ch3 31 c=o ch3 ch2oh H H H ch3 CH2CH20glu ch3 32 c=o ch3 ch2oh H H H ch3 CH2CH20glu ch3 33 oo ch3 CH2Oglu H H H ch3 CH2CH2OH ch3 34 c=o H ch3 H H H ch3 CH2CH20glu ch3 35 c=o ch3 H H H H ch3 CH2CH20gIu ch3 36 oo H ch3 OH H H ch3 CH2CH20gIu ch3 201039836 37 〇〇 ch3 H OH H H ch3 CH2CH20glu ch3 38 oo ch3 H H OH H ch3 CH2CH20glu ch3 39 c=o ch3 H H Oglu H ch3 CH2CH2OH ch3 40 c=o ch3 H Oglu H H ch3 CH2CH20glu ch3 41 c=o ch3 ch3 OH H H ch3 CH2CH2OH H 42 c=o ch3 ch3 H Oglu H ch3 ch2ch2oh ch3 43 oo ch3 ch3 H Oara H ch3 CH2CH2Ci ch3 44 c=o ch3 CH20glu H H H ch3 CH2CH20glu ch3 45 c=o ch3 ch2oh H OH H ch3 CH2CH20glu ch3 46 c=o ch2oh ch3 H OH H ch3 CH2CH2OH ch3 47 oo ch3 ch2oh H Oara H ch3 CH2CH20glu H 48 oo H ch3 H Oglu H ch3 CH2CH20glu ch3 49 c=o H ch3 H H H ch3 CH2CH2OCH3 ch3 50 c=o ch3 H H H H ch2oh CH2CH20glu ch3 51 c=o ch3 H H H OH ch3 CH2CH20glu ch3 52 c=o ch3 ch3 H H H ch3 CH2CH20glu ch3 53 c=o ch3 ch3 H Oara H ch3 CHOHCH2OH ch3 54 c=o ch3 ch3 H H Oglu ch3 ch2ch2oh ch3 55 oo ch3 ch3 H OH H 0-\ K3 H 56 oo ch3 H ch3 Oglu H ch3 ch2ch2oh ch3 57 oo ch3 H H H OH ch3 ch2ch2oh ch3 58 c=o ch3 ch2oh H H OH ch3 ch2ch2oh ch3 59 c=o ch3 ch2oh H OH H 0-\ 。〇 ch3 60 c=o ch3 ch3 H OH H ch3 ch2ch2och3 H 61 oo ch2oh H H OH H ch3 ch2ch2oh H 62 c=o ch2oh H H OH H ch2oh ch2ch2oh ch3 63 oo OH ch3 H OH H ch3 ch2ch2oh ch3 64 c=o OH ch3 H OH H ch2oh ch2ch2oh ch3 65 c=o ch3 ch3 H OH H ch3 ch2ch2ci ch3 66 c=o ch3 ch2oh H OH H ch3 ch2ch2oh ch2oh 67 ch2 ch3 H H H ch3 ch2ch2oh ch3 H 68 c=o ch3 H H H H ch2ch2oh ch3 H 69 c=o ch3 ch3 H OH H ch3 ch3 ch3 70 c=o ch3 OH H H H ch3 ch3 ch3 71 oo ch3 ch3 H H H ch3 CH2CH20glu ch3 72 oo ch3 ch3 H 4cou-glu H ch3 CH2CH2OH ch3 10 201039836 73 C=0 ch3 ch3 3glu H H ch3 ch2ch2oh ch3 74 〇〇 ch3 ch3 6cou-glu H H ch3 ch2ch2oh ch3 75 C=0 OH ch3 H OH H ch3 ch2ch2oh ch3 76 〇〇 H H H H H ch3 Br ch3 ΊΊ c=o COOEt H H H H ch3 Br ch3 78 C=0 COOEt ch3 H H H ch3 Br ch3 79 C-0 COOEt ch3 H H H ch3 C=C ch3 80 COH CH2OH ch3 H H H ch3 C=C ch3 81 COH ch2otes ch3 H H H ch3 C=C ch3 82 COH ch2otes ch3 H H H ch3 CH2CH2OH ch3 83 COH ch2otes ch3 H H H ch3 ch2ch2tipso ch3 84 C=0 ch2otes ch3 H H H ch3 ch2ch2tipso ch3 U 化合物76〜84指分別述於下列實例1中的合成化合物3〜11 U glu:葡萄糖；ara:阿拉伯糖 4cou-glu: 4-0-對香豆酸基-D-葡萄糖 3glu: 3-0-67-D-葡萄糖苷 6cou-glu: 6-0-對香豆酸基-D-葡萄糖 *碳原子與式中所示相同更特定而言，本發明式I的蕨素化合物為化合物1、4、5、7、10、 12、15、17、28、63 和 71-75。 ’ 又更特定而言，下列所示為本發明的某些蕨素化合物及其構造：

蕨苷Z(71) 角蕨苷B(72) 蕨素D 3-0-p-D-卩比喃葡萄糖苷(73) 11 201039836

角蕨苷C(74)

HO

OH

蕨素N(17) 2-烴基蕨素C(75) 蕨素D(7)

(2S，3S)蕨素C(5)

蕨素G(10) 蕨素X(28) 12 201039836 用於本發明的蕨素化合物可為分離型，即由合成法製備或富集自天然來源，例如，嚴類植物（Bracken )’如碗嚴科 (Demstoei/zYzV/ceae)和鳳尾蕨科這些植物的某些實例包括，但不侷限於刺柄碗蕨（£)⑼似toed如、栗蕨 (Histiopteris incisa)、無帶鱗复策{Microlepia speluncae)、赢象 { Pteridium aquilinum var. latiusculum )、戀大赢 i Pteridium fevolutum )、板氣 Q Hypolepis punctata )、木薇 i Ceratopteris //zfl/fciraz’tfey )、金釵鳳尾蕨以）、半邊羽裂鳳尾蕨（p如办 ❹ 必772述加）和箭葉胤尾蕨（尸纪咖e/wzyb/Twz’)。這些植物可被發現於 σ北縣烏來鄉和台北市大屯山。例如，此處所述的一些嚴素化合物（例如化合物1、7、28和Ή )為天然產物，可分離自天然來源。經分離的蕨素化合物係指含有至少40%化合物的製備物（以乾重計）。經分離化合物的純度可予以測定，例如，藉由管柱層析法、質譜法、高效液態層析法（HPLC)、核磁共振法（NMR)，或任何其他適當的方法。用於分離這些化合物的方法已為技術中所習知。參見例如 Takahashi 等人，烈卿加r•及以.2004,18 : 573 ; Sheridan 等人,

Med. 1999, 65 : 271 ; Nagao 等人，Mw她·〇« 及以.1989, 215 : 173 ; O Murakami 等人，CTzew. Ptor所· 1976, 24 ·· 2241 ;以及 Kuraishi 等人，户/⑽肌仇//，1985, 33 : 2305。亦可藉由化學合成製造這些化合物。非天然蕨素化合物可由天然物質轉換（參見例如

Banerji 等人，及的众奶，1974, 15 : 1369 ; Hayashi 等人，rera/i. 1991，33 : 2509 ;以及 McMorris 等人，《/ 〇多〇zew. 1992, 57 : 6876)或藉由技術中習知方法合成自原始物質。有助於合成該所欲蕨素化合物的合成化學轉化及保護基方法學（保護和去保護）已為技術中所習知，例如描述於R. Lar〇ck， ⑽·加似/，VCH 出版社（1989 ) ; T.W. Greene 和 P.G.M. Wuts，P赠_ 〇· /« 〇尽加.，第三版，John Wiley and Sons ( 1999 ); 13 201039836 L. Fieser 和 M. Fieser, F/以er公 /or 办„ j〇hn

Wiley and Sons ( 1994 );以及 L. Paquette 編輯，仏CJ；c/0. 0/办％ 0公.办《.，John Wiley and Sons ( 1995 )及其後版。所合成的蕨素化合物可由適當溶劑從反應混合物中予以分離，並選擇性地藉由快速管柱層析法、高效液態層析法、妗曰二或任何其他適當方法予以進一步純化。此處所述的蕨素化合物可含有非芳香族雙鍵及一或多個不對稱中心。因此’可為消旋物和消旋混合物、單鏡像異構物、個別非鏡像異構物、非鏡像異構混合物’以及順式-或反式異構型。本發明涉及全部此類的異構型。〇本發明之蕨素化合物亦可存在於製備自蕨類植物如碗蕨科和鳳尾蕨巧的蕨類產品内。這些植物的某些實例包括，但不侷限於納柄碗底（Dennstaedtia scandens)、栗氟（Histiopteris incisa)、無帶織mMicrolepia speluncae)、1茱 QPteridium aquilinufm latiusculum)、巒大跋（pteridium rev〇iutum)、姐策㈣^ punctata)、木1 (Ceratopteris thalictroides)、金 4又 lUiPteris 为，Z)、半邊羽裂鳳尾蕨（户妙W祕咖）和箭葉鳳尾蕨（竹抑 em7/〇rw·)。此處所述蕨類產品指任何產自至少一種上述品種太身、其部分如葉、花、根、軒、梗和果實的植物，或其=何= ^例^汁液杯末、顆粒、举取物、切片、濃縮物和沈殿物。特定而言，該蕨類產品係來自新鮮的全顆植物。可藉由^術領域中習知的任何標準方法或技術製備此處所述 =類植物的蕨類產品。下列為根據本發明蕨類萃取物之製劑的實蕨類萃取物的製備可利用Diai0n Hp 2〇 (1〇〇〜2〇〇網孔，三菱化學工 52=7^2()Ρ (75〜15G微米，三菱化學工#公司）、C_sil C 75 微米，Nacalai Tesque 公司）、矽膠板（6〇F_25〇，他也 14 201039836 ^司）上TLC (薄膜層析法），以及用作為遇熱顯色劑的1〇0/〇硫酸 /谷液進行管柱層析法。以曱醇（χ3 ’每次兩天）在室溫下萃取新鮮全顆植物。在45°C真空内蒸發溶劑之後可獲得殘留物。此殘留物被溶解於蒸餾水内然後以正己烷和醋酸乙酯成功地萃取出正己巧可=部分、醋酸乙酯可溶部分以及水可溶部分。以水_甲醇、乙醇之葡聚糖凝膠法（SephadexLH-20)、高多孔性聚苯乙稀凝膠法 (DmionHPJO’MCICHPJOP)凝膠管柱層析法（cc)進行該有機^容部分的洗提或以正己烧、苯、二氯和帽溶劑系統的 Ο 矽膠CC進行純化。藉由核磁共振（NMR)和質譜（MS)光譜分析以及實體數據確認經純化化合物的構造。型的糖尿病。根據本發明，式I之蕨素化合物可有效治療包括第χ型和第π 此處「第I型糖尿病」、「幼兒型糖尿病，或「瞌氪去仿韬剂她

^詞「治療」包括預防該特定疾病或病症，

尿病」乙詞通臂葡萄糖的消耗。啊我病症，或減輕伴隨特定症狀。例如，此處「治療糖改善胰島素敏感度，或增加 15 201039836 、此處「有效量」一詞指對個體可產生治療效應之單獨或結合一或多，^他活性劑的所需各活性劑數量。如熟習本領域技術者所知有效量視投藥途徑、所使用賦形劑及其他共用活性劑而不同。在本發明的具體實施例中，該蕨素化合物的口服劑量為從1〇至 250 mg^kg ’ 較佳為 25 至 200 mg/kg，更佳為 50 至 150 mg/kg，以及最佳為約lGGmg/kg。在本發明的另—具體實施例巾，該蕨素 =合，經由皮下注射、腹腔注射、肌肉注射或靜脈注射的投藥劑里為攸5至150 mg/kg，較佳為1〇至1〇〇，更佳為至 ’以及最佳為約3〇mg/kg。人醫療’可將—或多種此處所述賴素化合物混二ΓαΖ接，細卿成醫藥組合物。「可接受」意指該載劑必 ^二體性t相容（較佳為能穩定化該活性成分）且對更易溶複合物)作為辑== 鎮、纖郷體、硬脂酸二=注i:内、滑膜内、胸骨内、椎管内、病灶内以及 =====⑶的ΐ =劑之中可被運用者為甘露糖醇r林的;^:: 如=單&使=威菌，油作為落劑或懸浮介質⑷ 乙基化型的橄欖油或\ /同天然醫藥上可接受油例如特別指聚氡次崑麻油，如油酸的脂肪酸及其甘油脂衍生物 201039836 =製液亦可含長鏈醇稀釋劑 ❹ Ο 劑、膠可=型包括，但不侷限於錠載劑包括乳糖和玉米殿粉政齊和溶劑。用於旋劑的常用鎂。用於口服膠囊内的有用蘇般亦添加潤滑劑如硬脂酸。服投與水性懸浮劑或乳_釋^性^=，=殿粉。當懸浮劑的油相内。需要時，可二=解：的==及入性組合物以及可利用或技溶劑或分散劑==氟化破及/ 可預期的發ί有麵1之厥素化合物具有抗肥胖活性的非將右發明進—步提供—種用於治療肥胖的方法，並包括 •酸 it月式1之嚴素化合物投與至需其的個體甘油=固ίίτ方法可降低個體的血清脂(例如，肥胖適試驗初步判定蕨素化合物於治療糖尿病和的ίί彳t; 步於體崎_化合物於治療糖尿病和肥i 如% 士列:’可將该化合物投與至患有糖尿病或肥胖的動物（例 d U學、、基因突㈣高脂食物誘發糖尿病或肥胖的動物模 i藥i徑得其治療效應。根據結果，可浙出適當的劑量範圍及在不需進—步闡述之τ已認為上述描述已足_明本發明。 =揭了例僅作為說明之用途，並且在任何情況下對其 ===:藉由引述將全部的刊物包括此處所引證 17 201039836 實例1 :化合物1的合成 1.1 6·淡-5,7-二甲基-1-茚酮（3)

在CH2C12 (80毫升）中的A1C13 (20.2克，151.3毫莫耳）和3-丙醯氯（16.5克，129.7毫莫耳）之攪拌溶液中，於〇。〇以液漏斗逐滴加入40毫升0¾¾之溴二甲笨（2〇.〇克，1〇8.ι毫'莫耳）。將反應混合物加熱至室溫然後再攪拌12小時。以冰（2〇〇克') 及50毫升鹽酸（純）冷卻該反應混合物然後再授拌Μ分鐘。以醋酸乙酯（300毫升x2毫升）萃取粗反應混合物，以水（4〇〇毫升）、食鹽水（500毫升）清洗，乾燥（Na2SCXt)及在真空内濃縮。將純KbSO4 (165毫升）加入該粗化合物然後在90°C攪拌1 小時。反應混合物恢復至室溫之後，以水（400克）冷卻。粗反應混合物以醋酸乙酯（400毫升x2毫升）萃取，以水（500毫升）、食鹽水（500毫升）清洗，乾燥（NaS〇4)及在真空内濃縮。藉由矽膠管柱層析法（己烷/醋酸乙酯，12 : 1體積/體積）純化該粗產物而獲得固體的純化合物3 (10.1克，39.1%)。 1.2 6-溴-5,7-二甲基小氧茚-2-羧酸乙酯（4) 18 201039836

_將加入碳酸二乙酯（30·5毫升，251.04毫莫耳）之甲苯（loo 毫升^内的60%氫化鈉分散液（3.01克，125 5毫莫耳）加入所產生的^液中，並予以機械性地攪拌及回流。將甲苯（50毫升）中〇 2、上-印滿，（10.0克’ 41.8毫莫耳）於3小時期間缓慢加入回流冷、+。以笨（20毫升）清洗滴液漏斗及將反應混合物再回流ο: J、2。將该反應混合物緩慢加入飽和含水胃4匸1内。以醋酸乙酯將含水層萃取三次並以水清洗該混合醋酸乙酯萃取物，乾燥 (N，S〇4)，然後在真空中移除溶劑。藉由矽膠管柱層析法（己烷 /醋S欠乙g曰’ 15 ’ 1體積/體積）純化該粗產物而獲得固體的純化物 4 (11.5 克，88.4%)。 ’

^ 將滴液漏斗内固體氫化鈉（0.85克，35.4毫莫耳）的60%分散液於〇它下分成數部分加入乾燥THF (50毫升）内的化合物4 (5力克，16.1毫莫耳）攪拌溶液。將反應混合物加熱至室溫然後再攪拌1小時。在氬氣下於(TC逐滴加入Mel (2.0毫升，32.15毫莫I)。將反應混合物加熱至室溫然後攪拌5小時。於〇〇c下以飽 ^含水NHqCi溶液冷卻該反應混合物然後攪拌15分鐘。以醋酸乙 =(100毫升x2毫升）萃取該粗反應混合物，及以水（100毫升）、食鹽水（1〇〇毫升）清洗，乾燥（Na2S〇4)然後在真空内濃縮。藉 19 201039836 由石夕膠管柱層析法（己烧/醋酸乙酯，15 : 1體積/體積）進行純化而獲得純化合物5 (4.5克，86.5%)。 1.4 2,5,7-三甲基_1_氧_6·乙烯基茚_2_羧酸乙酯（6)

在密封管内於85°C的氬氣下加熱THF/H20 (9 : 1) (3毫升）内的乙烯基三氟硼酸鉀（0.186克，1.38毫莫耳）、Pdcl2 (〇〇33❹ 克，0.18 毫莫耳）、pph3 (0.073 克，〇·27 毫莫耳）、Cs2C03 (1.2 克’ 3·69毫莫耳）及化合物5 (0.3克，0.92毫莫耳）。在85°C將该反應混合物攪拌48小時’然後冷卻至室溫及以只2〇 (6毫升）稀釋f著以醋酸乙酯（30毫升）萃取，乾燥（Na2S〇4)然後在真空内;辰縮。藉由矽膠管柱層析法（Si〇2，石油醚洗提液内2至4% EtOAc)進行純化而獲得純化合物6 (〇·23克，92〇/〇)。 1.5 2-經甲基_2,5,7-三甲基_6_乙婦基節七酵⑺

ΤΗ^Γ〇8ίΪ= 下將遍（〇.212克，⑺毫莫耳）加入乾燥 (先升）内化合物6 (1.3克，4.77毫莫耳）的撥拌、、容存;5 將該反應混合物授拌3小時然後將加在’ r(Nato ) ί 溶液ΐ取，以食鹽水⑼毫升）清洗乾石油醚洗提4液内、ί至矽膠管柱層析法(Si〇2，至20/oEtOAc)進打純化而獲得膠黏漿液狀的 20 201039836 純化合物7 (0.88克，80%)。 1·6 2,5，％三甲基_2_三乙基珍烷氧甲基_6乙烯基節小醇⑻

於〇°C的氬氣下依續地將咪唑（0.5克，7 32毫莫耳）和ΤΗ> (0.6毫升，3.66毫莫耳）加入乾燥CH2Cl2内起始材料7(〇 85 Ο 3·66毫莫耳）的攪拌溶液然後在相同溫度下將反應混合物擾小％。以H2〇 ( 10毫升）稀釋該反應混合物接著以cH2cl2 (5〇古鹽水（25毫升）萃取’乾燥（Na2S〇4)然後在真空内濃縮$ 藉由管柱層析法（Si〇2，石油醚洗提液内5至1〇〇/〇 Et〇Ac)進一° 純化而獲得漿液狀的純化合物8 (0.85克，88%)。丁 I.7 6- (鼓乙基）_2,5,7·三甲基_2_三乙基發烷氧甲基節^醇（9 )

於〇°C的氬氣下緩慢地將（Cy) 2；BH (0.87克，4.91毫莫耳）加入乾燥THF内化合物8 (0.85克，2.45毫莫耳）的攪拌溶液。將反應混合物加熱至室溫然後攪拌12小時。於〇°c下以2當量 (6毫升）和氏〇2 (3毫升）冷卻該反應混合物然後授拌1 ^日寸。以醋酸乙酯（40毫升）萃取粗反應混合物，以水（1〇毫升）、食，水（10毫升）清洗，乾燥（NajO4)然後在真空内濃縮。藉由管柱層析法（Si〇2，石油醚洗提液内8至10% EtOAc)進行^ 化而獲得膠黏漿液狀的純化合物9 (0.72克，81%)。 L8 2,5,7-三甲基-2-三乙基矽烷氧甲基_6_ (2-三異丙基矽烷氡乙 21 201039836 基）-茚-1-酵（ίο)

於〇t：的氬氣下依續地將咪唑（0262凡。.〇， TIPSC^(0.45气升’ 2.11毫莫耳）加入乾燥CH2cl2内起始材料7 (0.7克’ 1.92 t莫耳）的觀溶液。將反應混合物加熱至室溫然，在室溫下游3小時。以H20 (1〇毫升）稀釋該反應混合物才妾者以CH2C12(30毫升）、食鹽水（10毫升）萃取，乾燥（Na2S〇4) 然後在真空喊縮。藉由管柱層析法（Si〇2，石㈣洗提液内2 至4%EtOAc)進行純化而獲得純化合物1〇 (〇 82克，82%)。 1立9 2 5,7-三甲基_2，三乙基械氧甲基_6_ (2三異丙基發烷氧己基）-節-1-網（11) 克，3.84毫莫耳）和〇

TES =〇°C的氬氣下將PDC( U5克，3.〇7毫莫耳)加入乾燥CH ，二物1G (0.8克，1.54毫莫耳）的攪拌溶液。將反應混合物加❹ 二^溫然後在室溫下攪拌4小時。於真空内濃縮該反應混合物。 =s柱層析法（Sl〇2，石油醚洗提液内1至3%EtOAc)進行吨化而獲得無色漿狀的純化合物9 (0.64克，81%)。 ’、 U0 6- (2-趣乙基）_2_趣甲基_2,5,7_三甲基_茚小酮（12)

將THF (〇.65克，2.47毫莫耳）内四正丁基氟化銨加入乾燥 22 201039836 THF内化合物11 (0.64克’ 1.23毫莫耳）的授拌溶液然後在室溫麟3小時。以氏0 (10毫升）、食鹽水（1〇毫升）稀釋反應混合物’乾燥（NhSO4 )然後在真空内濃縮。藉由管柱層析法（si〇2，石油醚洗提液内15至20% EtOAc)進行純化而獲得純化合物12 (0.26 克，85%)。實例2 :植物的萃取银底 QHypolepispunctata (Thunb·) Mett) 姬蕨係採集自台北縣的烏來鄉。於室溫下以Me〇H (2〇升）將姬蕨萃取三次而產生分層於正己烷-H2〇 (1 :丨）（15升乂3)之間的MeOH萃取物，提供正己烷可溶部分及h2〇可溶部分。h2〇可溶部分被分層於Et0AC-H20( 1:1 X L5升χ3 )之間而形成Et〇Ac 可=部分和H2〇可溶部分。將EtOAc可溶部分以Diai〇nHP_20凝膠官柱層析（cc)處理’以h2o洗提’逐漸增加MeOH，以產生 1-4區份。將區分2置入SephadexLH-20 CC，以95% EtOH洗提，而形成 2-1 〜2-2 區份。藉由 SephadexLH-20 CC (H20—MeOH)純化2-1區份，而獲得2-1-1〜2-1-3區份。藉由MCI凝膠CHp_2〇pCC (玛〇—MeOH)純化2-1-2部分獲得蕨素a (128毫克）。將區份 3置入矽膠CC，以(¾¾和MeOH逐漸洗提，而獲得3_1〜3-5區〇份。將3-2區份置入石夕膠CC，以CH2ClrMe〇H (9 : 1)展開，而獲知嚴素Z (790毫克）。將區份3〜4置入石夕膠cc，以EtOAc-正己烷（4: 1)洗提，而獲得蕨素1(24毫克）。將區分4置入Sephadex LH-20凝膠CC，以MeOH洗提，而產生兩區分。藉由MIC CHp_2〇p 凝膠CC (H2〇~^MeOH)與以EtOAc-正己烷（7 : 3)展開的矽膠 CC純化區分4_：ι，而獲得蕨素〇 (2〇亳克）。 U^^i{pteridiumrev〇iutum(Bl)Nakai) ^巒大蕨係收集自台北市大屯山。在室溫下以MeOH(20升x3) 萃取新鮮全顆巒大蕨（20公斤），而產生Me〇H萃取物，將有機溶劑蒸發後，對該萃取物進行Celite層析，接著以正己烷、CH2C12 23 201039836 和MeOH洗提’而獲得三個區分。將CH2CI2可溶部分置入]VICI CHP-20P 凝膠 CC，以 H20 和 MeOH (1 : 1—0 : 1)洗提，而獲得三個區分。以矽膠CC純化區分1，以CH2C12和MeOH ( 14 : 1) 洗’而獲传1-1〜1-3部分。將區分1-1置入梦膠CC (正己燒 -EtOAc=l : 2)和 ODS 凝膠 CC (CH3CN-H2O=20 : 80-^30 : 70)，而獲得(2S)-蕨素A (238毫克）、（3R)-蕨素D (38毫克）、（2R)-蕨素N (21毫克）、（2R,3R)-蕨素L (179毫克）和(2R)-蕨素G (73 毫克）。以矽膠CC純化區分1-2，以正己烷-EtOAc (1 : 2)洗提，並以ODS滅膠CC純化，以CH3CN洗提，而產生(3R)-嚴素Χ(2·2 毫克）和(2)-經基蕨素C (4.3毫克）。將區分2置入矽膠CC (正己烧-：EtOAc=l : 2)和HPLC-石夕層析（1〇微米，正己烧_ Et〇Ac=2 : 1—1 : 2)，而獲得(2S,3S)-蕨素 C ( 162 毫克）和(2R，3S)-蕨素 C ( 13 毫克）。 2.3其他品種上述萃取其他品種蕨菜包括刺柄碗蕨（&___ scandens)、泵 MAHistiopteris 、氮ψ螓H {Microlepia spehmcae)、{Pteridium aqumnum 猶.latiusculum)、木赢 {Ceratopteris thalictroides)、金鈦 H簾^〈Pteris fauriei、、年遂涵裂ΜΛΜ (Pteris dimidiata)和又羽氣尾KPteris ensif_is)的全顆植物並且確認其至少含有蕨素A、蕨素〗和蕨素z (數據未顯示）。實例3 ·第I型糖尿病小鼠的葡萄糖耐受性試驗將化合物1 (50mg/kg)以口服投與經鏈脲菌素（STZ)誘發的糖尿病小鼠。STZ_誘發糖尿病小鼠為習知的第τ型糖尿病（胰島素依賴）小鼠模式。參見，例如，Uu ΙΜ等人，編·^^ 2001 ; 307 : 81〜84 。兩小時之後，進行正常小鼠、STZ，發糖尿病小鼠和經化合物1治療STZ-小鼠的葡萄糖耐受性試驗。簡言之，全部小鼠接受 24 201039836 1克/公斤葡萄糖口服投與，在第3〇、6〇、，測定，些小鼠的血中葡萄糖濃度。正常域和犯:二在攝取葡萄糖3〇分鐘之後’血中葡萄糖濃声二丙二鼠 1 雜 sm +，在獅 t t糖喊壯升，且械__6Q麵之制完全被抑 Ο ❹ 14天另Ϊ Z匕Λ物1 口服投與瓜誘發糖尿病小鼠⑽mg/kg ) ::、45、75和105分鐘後，檢查血中葡萄糖濃度。圖= 誘私證明投與葡萄糖15分鐘之後，健康對照小鼠、犯-誘么糖尿病小既和經化合物1治療STZ_誘發 # 萄4萄農在檢，’ 糖浪度，反之經化合物丨治療STZ，發糖尿病小鼠在投盘鐘之後，則明顯地降低。這些經治療小鼠的血；搪浪度接近健康對照小鼠的濃度。因此，所述的結果證明化合物i 可明顯地降低STZ·誘發糖尿病小鼠的血巾葡萄糖濃度。列舉於 1的本發明其他蕨素化合物包括化合物7、72、73、74，於二中亦被證明具有相同的效果。、双“ 更特別地，投與化合物的小鼠，在血液檢查和病理評估中未發現有任何例如異常結果的不良效應（數據未顯示）。實例4:胰島素敏感性試驗根據五Χ/Λ MM.第39卷第2號第222〜229頁2007中所述的方法利用分化C2C12肌細胞（美國標準菌種中心；atcc) 進行胰島素敏感性試驗。簡言之，存在l〇0nM胰島素之下，以不同化合物1濃度與細胞共同培養，然後測定葡萄糖的攝取量。使用AMPK活化劑AICAR (5-胺基-4-甲龜胺咖坐核苦5’-石粦酸鹽，1 微克分子）作為陽性對照。圖2顯示其結果。凰 25 201039836 所述結果證明化合物1可明顯地增強C2C12肌細列舉於表1的本發明其他薇素化合物包括化《·姑《、74 ’於此檢測中亦被證明具有相同的效果。賞例5 ·葡萄糖消耗/攝取試驗根據知施/. 第39卷第2號第222〜挪頁2〇〇7中戶斤述的方法利用分化C2C12肌細胞（美國標準菌種中心；ATcc) 進行葡萄糖消耗/攝取試驗。簡言之，以〇 5⑽[14q2_DG將c2ci2 理2〇分鐘，然後與化合物培養1小時，俾藉由放射活性 j疋葡甸糖的攝取量。以三項試驗的平均士標準偏差表示全部的值。圖3顯示其結果。：* Ί ，此處所述結果證明化合物1可明顯地增強C2C12肌細胞的葡萄糖消耗/攝取量。因此，此處所述結果顯示化合物】可明顯，增強C2C12肌細胞的胰島素敏感性。列舉於表丨的本發明其他蕨素化合物包括化合物5、7、17、63、72、73、74，於^檢& 中亦被證明具有相同的效果。實例6 ·第四型葡萄糖運輪蛋白（Glut4)表現分析試驗

Glut4在胰島素誘發葡萄糖攝取以維持正常血糖濃度上，扮演重要角色。在此試驗中，將化合物1 (l〇〇mg/kg) 口服投與sTz_ 誘發糖尿病小鼠14天，然後根據说0<:/^ j. 1996，313 (Ptl ): 133〜140中所述方法’分析正常小鼠、STZ,發糖尿病小鼠及經化合物1治療STZ-小鼠之Glut4於比目魚肌的表現情形。簡言之，試驗結束時，在二乙醚麻醉之下以驅血法殺死該動物。從各動物切下比目魚肌並稱重。以細胞裂解液均質化該比目魚肌及離心，然後藉由西方墨點分析法測定Glut4蛋白的表現。圖4顯示其結果。因此，此處所述結果證明化合物i可於STZ_誘發糖尿病小鼠内顯著地使Glut4 (葡萄糖轉運蛋白4，胰島素調節葡萄糖轉運體）進入比目魚肌細胞膜的再分配情形予以復原。列舉於表1的本發明其他蕨素化合物包括化合物5、7、72、73、74亦被證明具有^ 26 201039836 同的效果。縣認為本發明喊素化合物可藉纟活化·4以降低糖尿病小鼠的血糖。實例7 :磷酸婦酵丙酮酸幾激酶（PEPCK)試驗已知PEPCK係一種控制肝臟内糖質新生的關鍵酶。在此試驗中，將化*合物1 (l〇〇mg/kg) 口服投與至STZ_誘發糖尿病小鼠14 天’然後根據 Bu//· 〇/Εψ. βίο· And Med. 1979, 87 : 568〜571 中所述方法分析正常小鼠、stz_誘發糖尿病小鼠及經化合物1治療STZ_ 小鼠之PEPCKmRNA於肝内的表現情形。簡言之，試驗結束時，〇在一乙醚麻醉之下以驅血法殺死該動物。從各動物切下肝臟並稱重。製備均質化的肝臟，藉由RT_PCR分析法測定PEPCKmRNA 的表達。圖5顯示其結果。據此，此處所述結果證明化合物丨可於STZ_誘發糖尿病小内明^抑制肝臟PEPCKmRNA的過度表現。列舉於表！的本發明其他蕨素化合物包括化合物7和73亦被證明具有相同的效果。實例8 :第II型糖尿病小鼠的葡萄糖耐受性試驗。糖巧病(胰島素抗性C57BL/6J-Leprdb/Leprdb;此處稱為db/db ) J既為第II型糖尿病的習知小鼠模式（參見例如2000 49 ·· 22〜31)。此試驗中，將化合物丨（1〇〇mg/kg/天）口服投盥至〇 db/db小鼠（Jacks〇n實驗室）達28天，或經由腹腔内（i.p.) 2射投與化合物1達21或28天（30mg/kg/天）。兩小時之後，如實例 1所+述，進行正常小鼠、db/db小鼠及經化合物1治療db/db小。的葡萄糖耐受性試驗。圖6至8顯示其結果。既獲得的結果證明化合物1明顯可改善db/db小鼠的葡萄糖性。又實例9 :第II型糖尿病小鼠的糖化血紅素（HbAlc)試驗在血流中，葡萄糖附著至血紅素而形成被稱為血紅素Ak HbAlc的「糖基化血紅素」分子。血中的葡萄糖越多，則血中广在越多的血紅素Ale或HbAlc。HbAlc試驗為在可控糖尿病之^ 27 201039836 目月〗最常用的一種檢查法。參見例如Care 2001，24 : 465〜471 。 ’ 此試驗中，將化合物1 ( l〇〇mg/kg/天）口服投與至此/此小鼠 (Jackson實驗室）達28天。接著，根據5W. 2005, 77:1391〜403 中所述的方法進行正常小鼠、db/db小鼠及經化合物1治療db/db 小鼠的HbAlc試驗。簡言之，試驗結束時，在二乙醚麻醉之下以驅血法殺死該動物。藉由離心從血液分離出血漿。藉由標準方法測量血液中的HbAlc。圖9顯示其結果。獲得的結果證明化合物1可明顯地降低db/db小氣的HbAlc 濃度。第II型糖尿病小鼠的HOMA-IR (穩態模型評估法_胰島試驗實例10 : 素抗性）根據作為體内胰島素敏感性替代指標的空腹血糖和空腹血漿胰島素濃度，藉由實驗數學公式表示H0MA_IR;胰島素抗性 HOM^V值：（HOMA-IR)=空腹胰島素（微單位/毫升）χ空腹血糖 (4莫耳/升）/22.5。參見例如所〇/仇"2007 3〇 . 2196〜2200 。 ’ . 此试驗中，將化合物1 ( l〇〇mg/kg/天）口服投與至dbMb小鼠 (Jackson實驗室）達28天。接著，根據伤〇/抑狀所5w//. 2〇〇7, 3〇: 21%〜2200中所述的方法進行正常小鼠、此她小鼠及經化合物i 治療db/db小鼠的HOMA-IR試驗。簡言之，利用小氣胰島素酶免，ELISA套組測定血㈣島素濃度。藉由穩態模型評估法 (HOMA)測量胰島素抗性。圖1〇顯示其結果。獲得的結果證明化合物！可明顯地降低此她小鼠的 ^)MA-IR濃度。^舉絲丨的本糾其倾素化合她括化合物 7和73於此檢測中亦被證明具有相同的效果。實例11 : AMPK磷酸化試驗 AMP-活化蛋白激酶（AMPK)為能量代謝的一種重要指標， 28 201039836 其可藉由低AMP/ATP比、運動、缺氧和營養缺乏而被活化。Thfi72 的麟酸化可導致AMPK的活化，其因而活化下游效應子包括乙酸基CoA羧化酶、HMG CoA還原酶、Glut4、葡萄糖<·鱗酸酶和 PEPCK以及分別調節脂肪酸β -氧化、膽固醇合成、葡萄糖運輸和糖合成。因此’ ΑΜΡΚ可被視為是一種用於代謝症候群和第η型糖尿病的分子標諸。在此試驗中’根據jEx:/?·Mo/. Med第39卷第2號第222〜229 頁2007中所述的方法利用分化C2C12肌細胞（美國標準菌種中 ^ 心，ATCC )進行AMPK鱗酸化試驗。簡言之，如實例1 ’將細胞與不同化合物1濃度（0、1、3、10和30微克分子）在37。(^下共同培養1小時，然後裂解細胞。以磷—AMPK特異抗體免疫偵測^ 細胞溶解物。各條帶的等同負載量證明其具有類似的ΑΜρκ強度。使用AMPK活化劑AICAR ( 5-胺基_4-曱醯胺咪唑核苷5'_鱗酸鹽，1微克分子）作為陽性對照。圖HA顯示其結果。因此’此處所述結果證明C2C12肌細胞與化合物1的培養可增加ΑΜΡΚα-亞單位以劑量依賴方式在Thr〗72的磷酸化。列舉於^ 1的本發明其他蕨素化合物包括化合物1、4、7、52、72、73和 74於此檢測中亦被證明具有相同的效果。

Ο 藉由化合物1活化ΑΜρκ伴隨著增加其下游受質、乙醯基c〇A 羧酸酶在Ser79的磷酸化（參見圖11B)。乙醯基c〇A羧酸酶的碟酸化和不活化將導致脂肪酸氧化作用的增加。外總之，這些初步結果認為本發明化合物可活化ΑΜρκ而調節碳水化合物（參見實例4所述的葡萄糖消耗/攝取試驗）和脂肪酸代謝（參見下列的實例12)的胰島素，以及可被視為是一種強效的抗糖尿病和抗肥胖劑。實例12 :血脂/膽固醇試轮根據先前述於心如53 (補充3): S215〜S219,2004中的方法準備作為第II型糖尿病模式的高脂飲食飼料（HFD)小鼠。此 29 201039836 ί Γ脂飲食㈤胞，美國印第安那州触m- !?仔卡脂肪）餵飼8週使誘發出第11型糖尿病。卿小 =物上⑽mg/kg) 口服治療28天;然後藉由e ^斤正常小鼠、HFD小鼠及經化合物i治療roD小氣的血、三酸甘油脂、高密度脂蛋白⑽l) _膽 Γ音3白瞒(LDL)-膽固醇的含量。® 12A顯示其結果。圖12B 醇/總細糾及ldl. _的比例。明化合物1可明顯地降低_小鼠的血脂及具有抗其他具髏實施例此專利說明書中的所揭露的全部特徵可以任何方於此ί利說明書中的每—種特性可被作為相同、等效或類^目的之另-特徵所取代。因此，除非另有說明露的母：；=徵僅為具有等效或類似特性的上位系列的-個實^ 徵，以及在ϊί:本= 種術和狀況。因此，其他具_亦在該；【圖式簡單說明】為達㈣本發明之目的示於關中者 =例。然而，應瞭解本發明並非僅舰該所示的二j 附圖中：以化發糖尿病小鼠表示與對照組比Μ ⑽ 肌細=以咖濃度處理⑽ 风、。果yo.05表不與對照組比較具有統計顯 30 201039836 著性。圖3為葡萄糖消耗/攝取試驗中以不同化合物1濃度處理 C2C12肌細胞（實例5)的結果。*户<〇〇5表示與對照組比較具有統計顯著性。圖4為葡萄糖運輪蛋白（Glut4)表現分析試驗中STZ-誘發糖尿病小鼠以化合物1 (100mg/kg/天）口服治療14天（實例6)的結^。*产0.05表示與對照組比較具有統計顯著性；以及#Ρ<0·05 表示與STZ_誘發糖尿病小鼠比較具有統計顯著性。 0 圖5為鱗酸烯醇丙酮酸羧激酶（PEPCK)試驗中STZ-誘發糖尿病小鼠以化合物1 (l〇〇mg/kg/天）口服治療14天（實例7)的結果。*/7<0.05表示與對照組比較具有統計顯著性。圖6為葡萄糖耐受性試驗中北/此小鼠以化合物i( l〇〇mg/kg/ 天）口服治療28天（實例8)的結果。圖7為葡萄糖耐受性試驗中db/db小鼠以化合物1 (3〇mg/kg/ 天）注射治療21天（實例8)的結果。圖8為葡萄糖耐受性試驗中此她小鼠以化合物1 (3〇mg/kg/ 天）注射治療28天（實例8)的結果。圖9為HbAlc (血紅素Ale)試驗中STZ-誘發糖尿病小鼠以〇化合物1 ( 10〇mg/kg/天）口服治療28天（實例9)的結果。*P<0.05 表示與對照組比較具有統計顯著性；以及#ρ<005表示與STZ-誘發糖尿病小鼠比較具有統計顯著性。圖10為HOMA-IR (穩態模型胰島素抗性指數）試驗中STZ-誘發糖尿病小鼠以化合物1 ( 1〇〇 mg/kg/天）口服治療28天（實例 10)的結果。* p<0.05表示與對照組比較具有統計顯著性；以及# p<0.05表示與STZ-誘發糖尿病小鼠比較具有統計顯著性。圖11為（A) AMP·活化蛋白激酶（AMpK)石粦酸化試驗，以及（B )乙醯基CoA羧酸酶（ACC )磷酸化試驗中以不同化合物1 濃度處理C2C12肌細胞（實例11)的結果。 31 201039836 圖12為（A)高脂飲食飼料（HFD)小鼠之血脂/膽固醇試驗，以及（B)高密度脂蛋白（HDL)-膽固醇/總膽固醇和低密度脂蛋白（LDL)-膽固醇/總膽固醇之比例的結果。*/?<0.05表示與對照組比較具有統計顯著性；以及#户<〇.〇5表示與HFD小鼠比較具有統計顯著性。 32

Claims

201039836 七、申請專利範圍： 1. 一種用於治療糖尿病的方法，其包括將有效量的式〗合物投與至有需要的個體： μ

r8

其中 ^、心、R3和仏各獨立為η、0Ra、胺基、鹵素、烷氧羰基、 =基、烧胺基、烧基 '稀基、炔基、⑹χ、_〇_⑹χ或1〇_ Ί彳Rb各獨立為H、烧基、烯基、炔基、環烧基、雜環烷基、芳基或雜芳基，G為單糖殘基，以及X為1-4的整數；烷^ R8各獨立為H、〇Rc、胺基、硝基、氰基、®素、

产^基、規胺基、烧基、烯基、絲、芳基、雜芳基、 m、雜基、⑹χ、_〇_⑹χ或Rd_〇_⑹X，各汉和 =R6m基、块基、基、雜環絲 '芳基或雜芳基； t子的3 8二t ^兩個碳原子共同形成選擇性地含1、2或3個貝展；或R6、R7和其連接的兩個碳原子丘_、以擇性地含1、2或3個雜原子的3_8員環；或R7 個奴原子制形賴擇性地含卜雜接的兩 x為c⑼、c⑻、s⑼、咖们&子的3·=，以及 Re和Re，各獨立為Η、烷基或以 e e，）或C (NRf)，燒氧，由烧硫基、烧胺基、：、烯i或块基呢、胺基、齒素、型糖尿ί申請專利範圍第1項之方法，其中該糖尿病係第！或第Π 201039836 ’其中X係c (〇)或ch2。 ’其中X係C (0)。 ’其中Ri、R2、R3和R4各獨 Rb-〇_ (G) x或烷基，其選擇、烧基、環烷基、雜環烷基， ’其中R5、R6、R7和R8各獨 Rd_Q_ (G) χ或烷基，其選擇、烧基、環烷基、雜環烷基， 3. 如申請專利範圍第1項之方法 4. 如申請專利範圍第3項之方法 5. 如申請專利範圍第4項之方法立為 H、〇Ra、- (G) x、-〇- (G) χ、性地被鹵素、C00Rg、ORg，心為η 或保護基取代。 6·如申請專利範圍第5項之方法立為 (G) χ、-〇- (G) χ、性地被鹵素、COORg、〇Rg，％為η 或保護基取代。蕨素化合物為化合物 7.如申請專利範圍第1項之方法，其中該 1-84其中之一者。 ' Λ 8. 如申請專利細第1項之方法，其中該蕨素化合物為化合物卜 4、5、7、10、12、15、17、28、63 和 71-75 其中之一者。 9. 如申請專利範圍帛1項之方法，其中該蕨素化合物係經由口服或注射予以投藥。 10. 如申凊專利範圍第1項之方法，其中該個體係肥胖。 —11.如申請專利範圍帛1項之方法，其中該蕨素化合物係一種經分離的威素化合物。為醫專概項之方法’其中素化合物經調配 ,13.如=請專利範圍第1項之方法，其中該蕨素化合物係存在於製備自碗蕨科娜）或鳳尾蕨科（竹饥知蕨類植物的蕨類產品内。 14.如申請專利範圍第π項之方法，其中該蕨類植物係選自以下構成的群組：刺柄碗蕨（/)?伽ei/如似mde似）、栗蕨（讯 incisa)、％帶鱗 H Q Microlepia speluncae)、H {pteridium aquilinum \览· latiusculum)、戀:KMi iPteridium revolutum)、姻_赢 201039836 {Hypolepispunctata)、水1 QCeratopteris thalictroides)、金致鳳尾，（/、半邊羽裂鳳尾蕨（竹和箭葉鳳尾歡{Pteris ensiformi)。 —種用於治療肥胖的方法’包括將有效量之如申請專利範圍第1項之式I蕨素化合物投與至有需要的個體。 16. 如申請專利範圍第15項之方法’其中該蕨素化合物為化合物1-84其中之一者。 17. 如申請專利範圍第15項之方法’其中該蕨素化合物為化合 ❹ 物卜 4、5、7、10、12、15、17、28、63 和 71-75 其中之一者。 18. 如申請專利範圍第15項之方法’其中該蕨素化合物係經由口服或注射予以投藥。 19·如申請專利範圍第15項之方法，其中該蕨素化合物係一種經分離的蕨素化合物。 20. 如申請專利範圍第15項之方法，其中該蕨素化合物經調配為醫藥組合物。 21. 如申請專利範圍第15項之方法，其中該蕨素化合物係存在於製備自碗蕨科或鳳尾蕨科蕨類植物的蕨類產品内。 22. 如申請專利範圍第21項之方法，其中該蕨類植物係選自以 Ο 下構成的群組：刺柄碗嚴（狀伽沉⑽办似）、栗嚴（所油·3 mcisa)、秦、帶鱗1良 QMicr〇iepia speiuncae)、n ctquilinum v班.latiusculmn)、煢大蒎{pteridimn rev〇lutum)、姬1 {Hypolepispunctata)、木1 {Ceratopteris thalictroides、、金铁萬^ 蕨（Pimi为wWez·)、半邊羽裂鳳尾嚴（尸妙&）和箭葉鳳尾 1 (yPteris ensiformi、。。 23. 如申請專利範圍第丨5項之方法，其足以降低t個體之血脂或膽固醇的含量。