TW201026696A - Monocarbams - Google Patents

Description

201026696 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於單環卡汴（Monocarbam)化合物及其作為動 物（包括人類）之抗細菌劑的用途。本發明亦關於製備化合 物之方法、適用於製備化合物之中間物及含有化合物之醫 藥組合物。本發明進一步包括藉由向有治療需要之個體投 與化合物或組合物來治療疾病（例如細菌感染）之方法。 【先前技術】 單環卡汴為一類合成單環β-内醯胺抗細菌劑’其突出特 徵在於Ν-1位置上具有經取代之磺醯基胺基羰基活化基 團。Squibb Institute for Medical Research 之工作者 Cimarusti, C. M.及R.B. Sykes已在此領域中進行早期研 究：Monocyclic β-lactam antibiotics· Med. Res· Rev. 4: 17-20，1984。單環卡汴先前亦已在1988年9月7日公開之EP 0281289中論述。本文所引用之此等及全部文獻以全文引 用的方式完全併入本文中。 儘管不限於本發明，但咸信本發明之單環卡汴經由使用 鐵載體單環β-内醯胺（monobactam)與鐵載體單環卡;卞之共 輊物而在細菌中發揮鐵吸收機制。Barbachyn，M. R., Tuominen, T. C.: Synthesis And Structure-Activity Relationships of Monocarbams Leading to U-78608. Journal of Antibiotics第 XLIII卷第 9期：1199-1203, 1990。因此，至 少大體而言，單環卡汴之活性及作用機制一般為已知的， 儘管本發明並不受任何理論約束或限制。 144665.doc 201026696 隨著抗性有機體的出現日益增加且為改良安全性，以及 其他原因’對諸如單環卡汴之新穎抗生素存在持續需要。 【發明内容】 本發明係關於某些式⑴化合物、其製備及適用之中間 物其醫藥組合物’及以其治療及預防細菌感染之方法。 在許多實施例中，該等化合物具活性且有效對抗對其他抗 生素具抗性之有機體。 詳言之，本發明係關於一種式⑴化合物：

或其醫藥學上可接受之鹽；其中： 為經1至3個選自由鹵基、羥基、（Cl_c6)烷氧基、_NR7R8、 -C(=0)NR7R8組成之群的取代基取代之（Ci_c6)烷基，及3至 7員雜環，其中獨立地為氫或（Ci_c6)烷基，其中該 雜環含有1至3個獨立地選自〇、N或S之雜原子； R2為氫或甲基； R3為氫或甲基； R4為視情況經1至3個獨立地選自F或C1之取代基取代的 氫、氘或甲基； 144665.doc 201026696 R5為視情況經1至3個獨立地選自F或Cl之取代基取代的 氫、氘或甲基； R6為 Η或-C(=〇)〇H;且 X為 C(H)、C(F)、C(C1)或 N。 在一實施例中，式⑴化合物具有式（ΙΑ): R5

或其醫藥學上可接受之鹽。在一實施例中’ R4為視情況經 1至3個選自F或C1之取代基取代的曱基。在另一實施例 中’ R4為氫。在另一實施例中，R5為視情況經1至3個選自 F或C1之取代基取代的甲基。在另一實施例中，R5為氫。 在另一實施例中，R6為_C(=0)0H。在另一實施例中，R6 為氫。在另一實施例中，X為C(F)。在另一實施例中，χ 為 C(H) » 在另一實施例中’ X為C(C1)。在另一實施例中，χ為 N。在另一實施例中，R2為氫。在另一實施例中，為甲 基。在另一實施例中，R3為氫。在另一實施例中，R3為甲 基。 在另一實施例中，R2為氫；R3為氫；R4為甲基；故5為甲 144665.doc -6 - 201026696 基；R6為-C(=：0)0H ;且又為C(H)。另外，在另—實施例 中，Rl為經1至3個選自由齒基、羥基、-Nh2、_c(=〇)NH2 成之群的取代基取代之（C^C6)焼基，及3至7員雜環，其 中該雜環含有1至3個獨立地選自〇、N*s之雜原子。或 者，在另一實施例中，Ri為經1至3個鹵基取代之广C6)烷 基。或者’在另一實施例中’ R】為經1至3個經基取代之 (CA)烧基。或者，在另—實施例中，R1為經⑴個·2 取代之(CVQm基。或者，在另—實施例中，Ri為經_c㈣卿 ::之(Cl二6)烷基。或者’在另-實施例中，R1為3至7員 雜環，其中該雜環含有1至3個獨 殉立地選自Ο、N或S之雜原 子。 在一特定實施例中，本發明為：

或其醫藥學上可接受之鹽。 在另-特定實施例中，本發明為:

144665.doc 201026696 或其醫藥學上可接受之鹽。 在另一特定實施例中，本發明為：

OH

或其醫藥學上可接受之鹽。 在另一特定實施例中，本發明為：

OH

或其醫藥學上可接受之鹽。 在另一特定實施例中，本發明為：

OH

或其醫藥學上可接受之鹽。 在另一實施例中，式I化合物具有式（IB): 144665.doc 201026696

OH

(IB) ❹ 其中R1係選自由以下組成之群： 、ΟΗ OH Λ〜「

、OH

OH ,N、

、OH

,OH V^cf3 γγ ， OH νγΝΗ2 ^

❹ ο ,ΟΗ

、0 ,

δΗ OH 、〇H，\八|^，、九〇、，及

、OH

OH 及其醫藥學上可接受之鹽。 在一實施例中，本發明為如下式（IB)化合物，其中R1係 144665.doc 201026696 選自由以下組成之群：

OH

、OH ΌΗ

OH

OH

OH 、〇H ’ 1 ’ 及 及其醫藥學上可接受之鹽。 在另一實施例中，本發明為如下式（IB)化合物，其中R1 係選自由以下組成之群： 〇

T

0 ，及

❹ 及其醫藥學上可接受之鹽。 在另一實施例中，本發明為如下式（IB)化合物，其中R1 係選自由以下組成之群： 'CF, ，及 及其醫藥學上可接受之鹽 144665.doc •10- 201026696 在另一實施例中，本發明為如下式（IB)化合物，其中Ri 係選自由以下組成之群： \<0、，及、九。、， 及其醫藥學上可接受之鹽。 Ο 在-實施例中，本發明之化合物的醫藥學上可接受之鹽 為鉀鹽或鈉鹽。 在一實施例中，本發明之化合物的醫藥學上可接受之鹽 為雙卸鹽或雙鈉鹽》 在另一實施例中，本發明為一種醫藥組合物，其包含上 文所述之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可 接受之載劑。 ❿；在另一實施例中，本發明為一種治療哺乳動物之細菌感 染的方法’其包含向該哺乳動物投與一定量的有效治療細 菌感染之式⑴化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一特定 . 冑施例中’細菌感染具抗性或易感性。在另-特定實施例 . 中，細菌感染具MDR(多重抗藥性）。在一實施例中，細菌 * Μ係選自由以下組成之群：呼吸道感染、囊腫性纖維化 $者之肺部感染、複雜性泌尿道感染、燒傷感染、創傷感 杂/血液感染、複雜性皮膚及軟組織感染、指甲感染、耳 感染、醫學裝置所致之感染、導管所致之感染、醫院型感 144665.doc -11- 201026696 染肺炎（noscomial pneumonia)、呼吸器相關肺炎（VAP)、社 區型感染肺炎（CAP)、菌血症、熱水浴皮瘳（hot-tub rash)(皮炎）及人類放射狀角膜切開術之術後感染。在另一 實施例中，細菌感染係選自由以下組成之群：醫院型感染 肺炎、呼吸器相關肺炎（VAP)、複雜性UTI(泌尿道感染）、 複雜性皮膚及皮膚結構感染，及菌血症。在另一實施例 中’細菌感染為燒傷感染。在另一實施例中，細菌感染為 囊腫性纖維化患者之肺部感染。 本發明亦關於一種治療綠膿桿菌（PwWomowa5 aerwghow)、大腸桿菌（心c〇/z_)、克雷伯氏菌屬 (尺/eh/e/Zo species)或不動桿菌屬species)所 致之感染的方法’其包含將治療有效量之式⑴化合物或其 醫藥學上可接受之鹽投與有此需要之哺乳動物個體。在一 特定實施例中，感染係由綠腺桿菌所致。 本發明亦關於一種治療對多尼培南（doripenem)、美羅培 南（meropenem)或娘拉西林（piperaciUin)具抗性之綠膿桿菌 所致感染的方法’其包含將治療有效量之式⑴化合物或其 醫藥學上可接受之鹽投與有此需要之哺乳動物個體。 本發明亦關於一種組合物，其包含式⑴化合物或其醫藥 學上可接受之鹽’及另一選自由β_内醯胺、胺基醣苷、多 黏菌素（polymyxin)、青黴素及林可醯胺（Hnc〇samide)組成 之群的抗細菌劑。在一實施例中，另一抗細菌劑為選自由 以下組成之群的β-内醯胺：頭孢菌素（cephalosp〇rin)、碳 青黴烯（carbapenem) ’及β_内醯胺酶抑制劑或卜内醯胺/β_ 144665.doc -12- 201026696 内醯胺酶抑制劑組合。在另—實施例中，另一抗細菌劑係 選自由以下組成之群：克林達黴素（clindamycin)、^硝噠 唑（metronidazoie)、亞胺培南（imipenem)、美羅培南多 尼培南、厄他培南（ertapenem)、頭孢替坦（cef〇tetan)、頭 孢吼肟（cefepime)及頭孢匹羅（cefpir〇me)，或第三代頭孢 菌素。在-特定實施例中’另一抗細菌劑為頭孢吡肟。在

另-實施例中，另-抗細菌劑為美羅培南。在組合物之另 一實施例中，化合物為：

或其醫樂學上可接受之睡。太扣人私5 j恢又心盟。在組合物之另—實施例中，化

合物為：

0H

X >nh2 或其醫藥學上可接受之鹽。在組合物之另—實施例中，化 合物為： 144665.doc 13· 201026696

OH

或其醫藥學上可接受之鹽。在組合物之另一實施例中，化 合物為：

0H

或其醫藥學上可接受之鹽。在組合物之另一實施例中，化 合物為：

0H

或其醫藥學上可接受之鹽。 在另一實施例中，組合物為上文所示之特定化合物之 一，且另一抗細菌劑為頭孢吡肟。 在另一實施例中，組合物為上文所示之特定化合物之 一，且另一抗細菌劑為美羅培南。 144665.doc -14- 201026696 本發明亦關於一種錯合物或螯合物，其包含式（i)化合物 或其醫藥學上可接受之鹽作為配位體及鐵（+3)陽離子，其 中配位體與鐵陽離子之比率分別為約1:1至約3 :1。在一實 施例中，比率為約3 :1。 本發明包括處理人體或非人類動物體，例如以對抗或治 療（包括預防）細菌感染之方法，該方法包含向個體投與適 用或有效量之本發明化合物，包括其生理學上可接受之鹽 或溶劑合物且包括組合物。 本發明之化合物必要時亦可與其他活性成份組合以獲得 針對一種以上病狀或生物標靶之組合療法。舉例而言，本 發明之化合物可與其他抗感染劑或增強抗感染劑之功效或 其他性質的藥劑（例如流出抑制劑）組合。 式（I)化合物適用於治療罹患諸如細菌感染之病症的患 者。 可經本發明之式（I)化合物、醫藥組合物及方法治療之細 菌感染包括以下所致之細菌感染：鲍氏不動桿菌 (Acinetobacter 、不動桿菌屬、脆弱擬桿菌 /ragz7z'i)、差異檸1 檬酸桿菌 Avenwi)、弗氏擰樣酸桿菌/rew«山7)、產氣腸 桿菌aerogewes)、陰溝腸桿菌 c/oacae)、大腸桿菌、β-内醯胺酶陰性流感嗜血桿菌 {Haemophilus influenzae β-lactamase negative)、 β-内酿胺 酶陽性流感嗜血桿菌（//aemop/n'/w·? /«//wewziif β-lactamase positive)、產酸克雷伯菌（A7e6iz'e//a 、肺炎克雷伯 144665.doc -15- 201026696 氏菌pwewmora/ae)(包括編碼超廣效β-内酿胺酶 (下文稱為「ESBL」）之肺炎克雷伯氏菌）、嗜肺性退伍軍 人桿菌、β-内醢胺酶陰性卡他莫 拉菌（Moraxe"a caiarr/zah··? β-lactamase-negative)、β-陽性 卡他莫拉菌（MoriZJce//<2 caiarr/za/z's β-positive)、摩氏摩根 菌(Morganella morga«z'z·)、腦膜炎雙球菌（ATeisieria meningitidis)、普雷沃氏菌屬（Prevotella spp.)(及表現 ESBL以及對當前可用之頭抱菌素、頭黴素（cephamycin)及 β-内醯胺/β-内醢胺酶抑制劑組合賦予抗性之AmpC型β-内 醯胺酶的腸内菌科（五成員）、奇異變形桿 菌（/Voiewj mirafti//·?)、綠腹桿菌、沙氏桿函/志賀桿產 {Salmonella/Shigella) ' 及黏質沙雷氏菌 marcescens) 0 在一實施例中，式（I)化合物可用於治療多種醫院型及社 區型感染，諸如呼吸道感染（包括囊腫性纖維化患者之肺 部感染）、複雜性泌尿道感染、燒傷感染、創傷感染、金 液感染、複雜性皮膚及軟組織感染、指甲及耳感染、醫學 裝置（例如導管等）所致之感染、醫院型感染肺炎（包括呼吸 器相關肺炎（VAP))、社臨裂感染肺炎（CAP)、菌血症、「熱 水浴皮齊」（皮炎），及人類放射狀角膜切開術之術後感染 (下文稱為「感染」）。 在一實施例中，感染孫選自由以下組成之群：醫院型感 染肺炎、呼吸器相關肺炎、複雜性泌尿道感染、複雜性皮 膚及皮膚結構感染，及菌血症。 -16- 144665.doc 201026696 在一實施例中，本發明之組合物包含治療有效量之本發 明式（I)化合物。 本發明亦關於包含一或多種式（I)化合物與至少一種其他 成份之任何組合的本發明組合物（下文稱為「本發明之組 合物」）。 至少一種其他成份之非限制性實例包括雜質（例如未精 製之式（I)化合物中所存在之中間物）、如下文所論述之活

性劑或醫藥劑（例如另一抗細菌劑）、醫藥學上可接受之賦 形劑或一或多種溶劑（例如，如本文所論述之醫藥學上可 接受之載劑）。 適於投與有此需要之患者（例如人類）之本發明組合物在 本文中亦稱為「本發明之醫藥組合物」。 投與本發明之化合物（下文稱為「活性化合物」）可由能 夠將該等化合物傳遞至作用部位的任何方法來實現。該等 方法包括經口途徑、+ - 4t & 十一扣腸内途徑、非經腸注射（包括 靜脈内、皮下、肌肉内、 血管内或輸注）、局部投藥及直 腸投藥。在一特定實祐你丨+ t _ 貫施例中，投樂方法為靜脈内投藥。 醫藥組合物可例如呈如 王如下形式·適於作為錠劑、膠囊、 丸劑、散劑、持續釋放难 調配物、溶液、懸浮液經口投藥； 適於作為無菌溶液 '懸 軟膏魏錄非㈣注射；適於作為 g '，或適於作為栓劑直腸投藥。醫藥組 合物可呈適於單次投與 ^ ^ ^ ^ 搰確劑量之單位劑型。醫藥組合物 入你.啤元劑及作為活性成份之本發明化 合物。此外’醫藥組合 切了包括其他藥劑或醫藥劑、載 144665.doc 201026696 劑、佐劑等。 例不性非經腸投藥形4包括#性化合物於&菌水溶液 (例如丙二醇或右旋糖水溶液）中之溶液或懸浮液。必要 時’此等劑型可經適當缓衝。 適合之醫藥載劑包括惰性稀釋劑或填充劑、水及各種有 機溶劑。必要時，醫藥組合物可含有其他成份，諸如調味 劑黏0劑、賦形劑及其類似物《因此，對於經口投藥， 含有諸如擰檬酸之各種賦形劑的錠劑可與諸如澱粉、海藻 酸及某些複合矽酸鹽之各種崩解劑及諸如蔗糖、明膠及阿 拉伯膠之黏合劑一起使用。另外，諸如硬脂酸鎂、月桂基 硫酸鈉及滑石之潤滑劑通常適用於達成製錠目的。類似類 型之固體組合物亦可用於軟性及硬性填充之明膠膠囊中。 因此，較佳物質包括乳糖（lact〇se/miik sugar)及高分子量 聚乙一酵。當水性懸浮液或醜劑欲經口投與時，其中之活 性化合物可與各種甜味劑或調味劑、著色劑或染料，及必 要時與乳化劑或懸浮劑以及諸如水、乙醇、丙二醇、甘油 或其組合之稀釋劑組合。 用特定量之活性化合物製備各種醫藥組合物之方法為熟 習此項技術者所知或顯而易見。舉例而言，參看

Remington’s Pharmaceutical Sciences，Mack Publishing

Company, Easter, Pa.，第 15版（1975)。 待投與之式（I)化合物的最低量為治療有效量。術語「治 療有效量」意謂防止哺乳動物（例如人類）之細菌感染發 作、減輕細菌感染之症狀、中止細菌感染之進程及/或消 144665.doc -18 * 201026696 除細菌感染的化合物量。 通常’本發明之式（I)化合物的成人有效給藥時程為單次 劑量約50 mg至約3000 mg式（I)化合物；在另一實施例中， ‘ 有效單次劑量為約100 mg至約2000 mg。在另一實施例 中，有效單次劑量為約800 mg至約1000 mg。通常，劑量 每曰分1至4次給與。在一實施例中，劑量每曰分3次給 與。在一些狀況下，可能有必要使用此等界限外之劑量。 ❹ 本發明之式⑴化合物可與一或多種其他藥劑或醫藥劑 (「其他活性劑」）組合投與。式（I)化合物與另一活性劑的 此組合使用可為同時、獨立或依序使用。 在一實施例中，另一活性劑為抗細菌劑。 在一實施例中，抗細菌劑為β-内醯胺。β_内醯胺之非限 制性實例包括·頭孢菌素（例如頭抱U比將、頭孢他咬 (ceftazidime)、頭孢匹羅、頭孢妥侖匹酯（cefdit〇ren pivoxil，Spectracef®)、頭抱派酮（cefoperazone)、頭抱他 ❿ 啶、頭孢地尼Oefdinir)、頭孢噻肟（cef〇taxime)、頭孢泊 將（cefpodoxime)、頭抱嗟吩（cephalothin)、頭跑克洛 (cefaclor)或頭孢克肟（cefixime))、頭黴素（例如頭孢替 • 坦）、碳青黴烯（例如亞胺培南、美羅培南、厄他培南、多 尼培南）、β-内醯胺酶抑制劑及β_内醯胺/β_内醯胺酶抑制 劑組合（諸如舒巴坦（sulbactam)、克拉維酸（ciavulanic acid)、他唑巴坦（tazobactam)及哌拉西林組合他唑巴坦 (Zosyn®))，及硫培南（sulopenum)。 在另一實施例中，抗細菌劑可選自：胺基醣苷（例如阿 144665.doc -19- 201026696 米卡星（amikacin)、慶大黴素（gentamicin)、康黴素 (kanamycin)、新黴素（neomycin)、奈替米星（netilmicin)、 巴龍黴素（paromomycin)、紅鏈黴素（rhodostreptomycin)、 鏈黴素（streptomycin)、托普黴素（tobramycin)、安普黴素 (apramycin)等）、多黏菌素（例如多黏菌素B、黏菌素 (colistin))、氣喧諾酮（fluoroquinolone)(諾氟沙星 (norfloxacin)、環丙沙星（ciprofloxacin)、左氧敗沙星 (levofloxacin，Levaquin®)、莫西沙星（moxifloxacin， Avelox®)或依諾沙星（enoxacin))、青黴素（例如阿莫西林 (amoxicillin)、胺比西林（ampicillin)等），及林可醯胺（例如 克林達徽素 '林可黴素（lincomycin)等）。 在另一實施例中，另一抗細菌劑係選自：甲硝噠唑、醣 肽（例如萬古黴素（vancomycin)、達巴萬星（dalbavancin)、 特拉萬星（telavancin)、奥利萬星（oritivancin))、n惡0坐咬酮 (例如利奈。坐胺（linezolid))、脂肽（例如達托黴素 (daptomycin))，及四環素（tetracycline)(包括甘胺醯環素 (gyleylcycline)，例如泰格環黴素（tigecycline))。 其他抗細菌劑之其他非限制性實例可見於Walsh及 Wright, C/zem/ca/ 105(2):391-394 (2005);及 Bush 等人，Cwrrewi Qpiwz’cm MicroWo/ogy 7:466-476 (2004) 中。 在一實施例中，另一抗細菌劑與本發明之化合物或醫藥 學上可接受之鹽組合使用以降低抗性頻率。實例包括頭孢 吡肟、頭孢匹羅、亞胺培南、美羅培南、厄他培南、多尼 144665.doc -20· 201026696 培南硫培南、頭孢他啶、哌拉西林/他唑巴坦、環丙沙 星左氧氟4星、莫西沙星、多黏菌素3及泰格環徽素。 在f -實施例中，另—抗細g劑可為與本發明之化合物 或醫藥學j可接受之鹽組合使用以治療腹腔内感染之標準 抗厭氧菌藥物。實例包括克林達黴素、甲確建嗤、亞胺培 南、美羅培南、多尼培南、厄他培南、頭抱替坦、頭抱咐 肟、頭孢匹羅及第三代頭孢菌素。 在另-實施例中，另一抗細菌劑可為與本發明之化合物 或醫藥學上可接受之鹽組合用於經驗療法以處理綠腹桿菌 及所有腸内菌的可接受之抗革蘭氏陽性藥劑。實例包括萬 古黴素、利奈㈣、達托黴素、達巴萬星、特㈣星及奥 利萬星。 长 ❹ 在實施例中或夕種其他活性劑當使㈣係在投斑 式⑴化合物之前投與°在另—實施例中…或多種其絲 性劑當使用時係在投與式⑴化合物之後投與。以 例中，一或多種其他活性劑番由 大致同時投與。 ^時係岐與式⑴化合物 與另-活性劑可由適用於投與該另一活性劑之任何途徑投 在一實施例中’ 一或多種复灿1 t 夕種其他活性劑存在於本發明 藥組合物中。因此’在另-實施例中，本發明係關於—種 用進-步包含-或多種其他活性 人二 療患者的方法。 货月醫樂組合物治 應瞭解，本文中任何章節之炉 ‘嘁及子標題係為方便讀者 144665.doc -21 · 201026696 會 且並非限制性的。舉例而士 例而s [發明内容]中之標的物不 僅僅由於其置於彼章節中^具有特殊地位。 除非另外彳日不’否則本文獻中所用之語言及術語應以其 為熟習相關技術者所理解的最廣泛合理之解釋給出。此 外’在將標的物(例如在既定分子位置處之取代)表述為選 自可能性物質之群的描述及中請專利範圍中，該表述特定 而言意欲包括所述群的任何子組。在存在多個可變位置或 取代基的狀況下’亦涵蓋群或可變子組之任何組合。 除非另外規^，否則以下縮寫具有以下含義：「[」意謂 「公升」’「mL」意謂「毫升」，「则丨」意謂「莫耳」， mmol」意明「毫莫耳」，「Ac」意謂「乙醯基」，「仙」 意明本基」，Bz」意謂「苄醯基」，「Dcm」或 「ch2ci2」意謂「二氣曱烷」，「DMS〇」意謂「二曱亞 颯」，「MIC」意謂「最低抑菌濃度」，「MS」意謂「質譜分 析」（本文中所有樣品皆由LCMS電噴法（使用乙腈、水、 甲酸混合物進行梯度溶離）或探針Apci方法分析）， 「LCMS」意謂「液相層析質譜分析」，「NMR」意謂「核 磁共振光譜分析」（除非另外指示’否則本文中所有樣品 皆在瓦里安儀器（Variail instrunient)上以4〇〇 mHz運作）， 「THF」意謂「四氫呋喃」，「spp.」意謂「屬」，且 「cfu」意謂「群落形成單位」。 如本文所用之術語「（Cl_C6)烷基」係指長度為1至6個碳 原子之直鏈或分支鏈烴基（例如甲基、乙基、正丙基、異 丙基）。 144665.doc -22. 201026696 除非另外指示，否則如本 用 指含有-或多個… 雜環烧基」係 自氧佳一至四個雜原子（各較佳選 ㈣-二Γ的非芳族環基。本發明之雜環烧基亦可包 基之實例mm)部分取代之㈣。㈣族雜環烧 基、氮呼基、二基、=丁一略… 基、氡雜捲 、 ，2,3,6-四虱吡啶基、環氧乙烷 魯 u基、四氫°夫味基、四氫料基、四氫派味 環己μ $土、Ν-嗎琳基、Ν-硫代嗎琳基、氧硫雜 袁己坑基、〇比咯啉基、 基、二氧雜環己院灵叫 味基、4Η-派喃 二氫略喃基、二氫祕環戊院基、坐琳基、 .. —虱噻％基、二氫呋喃基、吡唑啶基、咪唑 琳基、咪嗤啶基、3_氮 鼠雜雙環[3丄0]己基、3-氮雜雙環 卜0則、啥嗪基”昆録、M二氧雜螺[4 5]癸基、 1，4·一氧雜螺[4 41壬其 , .]壬基、二氧雜螺[4.3]辛基及M_二氧 雜螺[4.2]庚基β ^ 除非另外指示，否貝丨丨* 士 + 人 否則如本文所用之術語「雜芳基」係指 3 雜原子（較佳為氧、硫及氮）、較佳-至四個 雜原子的芳族環。5至6員雜芳基之實例為㈣基、建嗪 基、Ρ米α坐基、啼 ’、 土、0比唑基、三唑基、0比嗪基、四唾 基、口夫喃基、〇 案办| w %基、異噁唑基、噻唑基、噁唑基、旦噻 唾基、料基、三嗓基、噪呤基m 呋咕基。 $ 術”。*環」包括雜芳基環及雜環烷基環以及含有零個 或零個以上雙鍵的非芳族雜環。 144665.doc -23· 201026696 除非另外顯見或指示，否則本發明之化合物及申請專利 範圍中之術語「化合物」包涵任何醫藥學上可接受之睡戋 溶劑合物及任何非晶形式或晶體形式或互變異構體，不管 在上下文中有無特定表述。類似地，表述對含有所述化合 物之任何物質或組合物（例如含有化合物之外消旋混合物 之鹽、互變異構體、差向異構體、立體異構體、不純：合 物等的组合物）為開放式的。 式⑴化合物可以非溶劑化及溶劑化形式存在。因此，應

瞭解，本發明之化合物亦包括如下文所論述之水合物及溶 劑合物形式》

與本發明之組合物相關的術語「溶劑」包括有_ (例如甲醇、乙醇、異丙醇、乙酸乙醋、二氯甲垸及… 呋喃）及水。一或多種溶劑可以非化學計量之量存在，4 如作為痕量雜質存在；或以足轉解本發明化合物之過$ 的量存在。或者’以本發明化合物之量計，—或多種幻 可以化學計量之量’例如0 5:1、1:1或2:1之莫耳比存在。 、術°° '合劑合物」在本文中用於描述溶劑與溶質之間5 刀散劑（dispersion means)與分散相之間非共價或易可逆白 -且合。應瞭解，溶劑合物可呈固體、漿液（例如懸浮液^ 分散液）或溶液之形式。溶劑之非限制性實例包括乙醇、 甲醇丙醇、乙腈、二甲醚、乙醚、四氫呋喃、二氣甲福 及水田此溶劑為水時，使用術語r水合物』。 、當前公認之有機水合物分㈣統為定義孤位水合物或ϋ <水。物之分類系統，參看K r M〇rris之p〇iym〇rphisn 144665.doc -24- 201026696 in Pharmaceutical Solids(H. G. Brittain編，Marcel Dekker， 1995)。孤位水合物為藉由插入有機分子使水分子彼此孤 立而不直接接觸的水合物。在通道水合物中，水分子處於 晶格通道中’在該等通道中該等水分子緊挨著其他水分 • 子。 當溶劑或水緊密結合時，複合物將具有明確定義之化學 計量，與濕度無關。然而，當溶劑或水弱結合時（如在通 φ 道溶劑合物及吸濕性化合物中），水/溶劑含量將視濕度及 乾燥條件而定。在此等狀況下，將以非化學計量為準。 除非另外指示，否則如本文所用之術語「醫藥學上可接 受之鹽」包括化合物中可存在之酸性或鹼性基團之鹽。性 質上呈鹼性之化合物能夠與各種無機酸及有機酸形成多種 鹽可用於製備此等鹼性化合物之醫藥學上可接受之酸加 成鹽的酸為形成無毒酸加成鹽之酸。該等化合物可形成例 如硫酸鹽、磷酸鹽、檸檬酸鹽、乙酸鹽、甲苯磺酸鹽、丁 • 三酸鹽、苯續酸鹽、甲續酸鹽 '乳酸鹽及鹽酸鹽。驗性鹽 可為—7G或二元的。在一較佳實施例中，鹽為反丁烯二酸 鹽。 • 除非另外指不’否則如本文中在使用本發明化合物之情 • 料所用之術語「治療」意謂逆轉、減緩、抑制此病症或 病狀之一或多種症狀的進程。 。本文所用之術語「患者」係指哺乳動物，諸如人類、 ° 馬豬乳牛及其類似者。在一實施例中，患者 144665.doc -25- 201026696 除非另外指示，否則術語「醫藥組合物」係指呈適於有 效投與個趙之任何形式的活性化合物，例如該化合物與至 少一種醫藥學上可接受之載劑的混合物。 除非另外指示，否則術語「醫藥學上可接受之載劑」係 才曰可與醫藥组合物中之化合物一起投與個體之物質。載劑 不應破壞化合物之藥理活性’且當以足以傳遞治療量之化 合物的劑量投與時應無毒。 術賦形劑」意謂與式⑴化合物組合製備醫藥組合物 或口服藥物劑型的惰性物質。術語「醫藥學上可接受之賦⑩ 形劑」意謂該賦形劑必須與組合物中之其他成份相容且對 其接受者無害。基於預期劑型來選擇醫藥學上可接受之賦 形劑。

本發明之化合物具有不對稱中心且因此可以不同對映 構形式及非對映異構形式存在。本發明包括所有光學異 =及立體異構體及其所有比率之混合物，及所有醫藥組 及可使用或含有其之治療方法。儘管本申請案中所例 ==可以特定立體化學構型描緣，但亦可預見' Μ中心具有相反立體化學之化合物或其混合物 上述者可以混合物形式在尤 ^ 小式存在或以任何組份富集至任何3 二：某-位置處未指定立體化學時，此意欲涵蓋任一才 型或任何比率之混合物。 本發明之化合物包括其醫 藥。「醫藥學上可接受之衍生 何醫藥學上可接受之鹽、酯、 藥學上可接受之衍生物或前 物或前藥」意謂化合物之任 酯之鹽或其他衍生物，其在 I44665.doc •26· 201026696 投與接受者之後即能夠（直接或間接）提供本發明之化合物 或其代謝物或殘餘物。本發明之尤其有利之衍生物及前藥 為如下衍生物及前藥：當將化合物投與患者時增加此等化 . 合物之生物可用性（例如，經由使得經口投與之化合物更 有效地吸收至血液中），增強母體化合物至既定生物代謝 區之傳遞，增大溶解度以允許藉由注射投藥，改變代謝作 用或改變排泄速率。 φ 式⑴化合物可展現多晶型現象。可藉由在各種條件下使 本發明之化合物結晶來製備多晶型式⑴化合物。舉例而 δ，可使用各種溶劑（包括水）或不同溶劑混合物用於再結 晶；在不同溫度下結晶；在結晶期間使用自極快冷卻變至 極慢冷卻之各種冷卻模式。亦可藉由加熱本發明之化合物 或使其熔融，繼而逐步或快速冷卻來獲得多晶型物。可藉 由固體探針NMR光譜分析、汛光譜分析、差示掃描熱量測 定、粉末X射線繞射或其他此類技術來確定多晶型物的存 ❹在。 本發明包括其中一或多個氫原子、碳原子或其他原子經 其不同同位素置換之化合物。此等化合物可適用作代謝藥 . 物動力學研究及結合檢定中之研究及診斷工具。若非一戈 多個原子經具有與自然界中主要發現之原子質量或質量數 不同之原子質量或質量數的原子置換，此等經同位素標記 之化α物與彼等式⑴化合物相同。可併入本發明化合物中 之同位素的實例包括氫、碳、氮、氧及硫之同位素，分別 諸如（但不限於）2H、A、％、％、％、18〇、17〇及3^。 144665.doc •27- 201026696 同位素的本發明式

含有此等原子之上述同位素及/或其他 (I)化合物處於本發明之範疇内。某些〗 化合物（例如其中併有諸如3h及14c之放 一般可藉由用易得之經同位素標記試劑替代未經同位素 標記試劑進行流程及/或實例中所揭示及下文所述之程序 來製備本發明之經同位素標記化合物。 術語「保護基」係指可附接至官能基且在稍後階段加以 移除以顯露完整官能基的適合化學基團。適於各種官能基 之保s蔓基的實例描述於t. w· Greene及P. G. M. Wuts，

Protective Groups in Organic Synthesis ’ 第 2版，John Wiley and Sons (1991及以後之版本）；L. Fieser及m. Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John

Wiley and Sons (1994);及 L. Paquette編，Encyclopedia of

Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995)中。除非另外指示，否則如本文所用之術語「經基 保護基」包括Ac、Bz及為熟習此項技術者所熟悉之各種羥 基保護基，包括Greene中所提及之基團。 下文所提供之實例及製備進一步說明並例示本發明之化 合物及製備此等化合物之方法。應瞭解，本發明之範疇不 144665.doc -28- 201026696 以任何方式受以下實例及製備之範疇限制。 上文及下文所引用之全部專利、專利申請案、公開案、 測試方法、文獻及其他材料以全文引用的方式併入本文 中0 【實施方式】 如上文所指出，在一實施例中，本發明係關於如上所述 之式（I)化合物及其醫藥學上可接受之鹽。為方便讀者，在 【發明内容】中及本文其他地方描繪式⑴化合物之結構。 一般製備方法 本發明之化合物可根據本文中之非限制性描述、流程及 貫例’結合熟習此項技術者之知識來製備。

流程A R5

可如流程MC中所概述來製備本發明之化合物。可在 周圍溫度下，於諸如甲醇之溶劑中，使如&_也，K.等 144665.doc -29- 201026696 人，Bioorganic & Medicinal Chem·，（2007)，15, 6716及 Yamamoto, H.等人，Bioorganic and Medicinal Chem.， (2002), 10, 1535中所述而製備之通式I化合物（流程A)與通 式II之羥胺（如2007年6月14日公開之WO 2007/065288中所 述而製備）反應約2小時，形成式III之羧酸。可藉由在周圍 溫度下，於諸如二氯甲烷之溶劑中，在諸如二環己基碳化 二亞胺或二異丙基碳化二亞胺之偶合試劑存在下，使式III 化合物與N-羥基丁二醯胺反應來製備式IV之活化酯。可藉 由在周圍溫度下，於鈀/碳存在下，在約兩個至四個大氣 壓之氫氣下，於諸如甲醇、乙醇、四氫呋喃、甲苯或乙酸 (有時需要其二元組合）之溶劑中，經由氫解脫除相應的經 N-苄氧羰基（Cbz)保護之化合物的保護基來產生如Waulte, S.R.等人，J. Org. Chem (1986)，51, 3133 ; Paloma，C·等 人，J. Org. Chem. (1997)，62，2070 ; Lall，M.S.等人，J. Org. Chem. (2002), 67, 1536及Chhabra, S.R.等人，J. Org. Chem. (2002), 67, 4017所述而製備之式V化合物。若在乙 酸存在下進行氫化，則中間物胺基氮雜環丁酮可分離成乙 酸鹽且隨後在諸如三乙胺之鹼存在下於諸如甲醇、乙醇或 乙腈之溶劑中與式IV化合物反應，形成通式VI之醯胺。當 在氫化中未使用乙酸時，一旦藉由過濾移除催化劑，所產 生之胺基氮雜環丁酮即可就地與式IV化合物反應，產生式 VI之醯胺。 144665.doc -30· 201026696

流程B

可如流程B中所概述來製備式χι之三唑酮。以市售麴酸 (Kojic acid)(CAS編號：501-30-4)為起始物，可以如 1988 年2月19日公開之EP 0281289中所述之五個步驟來製備化 合物VII »在周圍溫度下’於諸如二氯曱烧或四氫咬喃之 Φ 溶劑中’ VII與光氣或光氣等效物（諸如羰基二咪唑）反應產 生化合物VIII。在諸如40°C與6CTC之間的高溫下，於諸如 四氫呋喃之溶劑中’化合物VIII與式IX之一級胺反應產生 • 通式x化合物。可藉由在諸如氫氧化鈉或氫氧化if之驗存 在下’於回流下在水中反應使式X化合物環化，形成式XI 化合物。或者，在一些狀況下，可藉由在微波照射所產生 之約150°c下，於N-三甲基矽烷基-N-曱基三氟乙醯胺 (MSTFA)中使式X化合物反應來實現類似環化反應。 144665.doc •31- 201026696 流程c

R5R4+r6

β 浐中所概述來實現化合物VI與XI之偶合及本發 明化合物的最終建構。可藉由首先在約401下於四氫呋喃 中使式XI化合物與過量MSTFA反應一至兩小時，繼而在真 空下移除四氫呋喃、過量MSTFA及副產物來實現VI與XI偶 合產生通式XII化合物。獨立地，可在下於二氣甲烧中 使式VI化合物與氣磺醯基異氰酸酯（CSI)反應約45分鐘。 可接著將式化合物之加合物再溶解於四氫咬喃中’且向 144665.doc -32- 201026696 此混合物中添加式¥1化纟物與CSI反應所得之加合物。在 (TC下將此兩種組份攪拌約兩小時，繼而在周圍溫度下攪 摔至多18小時，產生通式χπ化合物。或者，可如下實現 • 此偶合反應：將如上文所述而製備之CSI加合物與式幻化 合物混合，該式XI化合物可藉由在約140。(：下於催化量之 氯化三甲基矽烷（TMS_C1)存在下與過量六甲基二矽烷胺化 物（HMDS)反應而矽烷化。在冷卻至周圍溫度後，可將此 參 物質溶解於諸如二氣甲烷之溶劑中且與CSI加合物混合， 從而產生式XII化合物。可藉由在周圍溫度下且於諸如鈀 黑之鈀催化劑存在下，在由四氫呋喃及乙酸組成之二元溶 劑系統中，於兩個大氣壓與四個大氣壓之氫氣之間進行反 應來自式XII化合物移除苄基保護基。移除催化劑及溶劑 後，在周圍溫度下，於諸如二氣甲烷之溶劑中，用諸如三 氟乙酸之酸處理粗物質來移除第三丁氧基羰基保護基及第 三丁醋（若含於R6中）。可接著藉由使用Cl 8樹脂，以由乙 • 腈及水組成、經曱酸緩衝之梯度移動相進行逆相層析來純 化本發明之粗物質（XIII)。可接著自式χπι化合物藉由用 碳酸氫鈉之水溶液處理，繼而凍乾來產生具有通式χιν之 鈉鹽。若第二酸性位存在於R6(諸如叛酸）中，則可遵循相 同程序，但在凍乾之前添加第二當量之碳酸氫鈉來產生式 XIV之雙鈉鹽。 在未進一步詳述之情況下，咸信熟習此項技術者可使用 上述描述最大程度地實施本發明。以下詳細實例描述如何 製備各種化合物及/或進行本發明之各種方法，且欲視為 144665.doc •33- 201026696 僅說明性的， 、、不以任何方式對上述揭示内容作限制。

及技術的適當變化。 内容作限制。 物與反應條件

有產物皆在表徵或用於後續化學過程之前加以乾燥。核磁 共振（NMR)㈣之化學料轉考自所u化溶劑之剩餘 峰值的百萬分率（ppm，δ)表示。 實例1 製備 2-({【（1Ε)-1-(2-胺基 _1，3_噻唑-4-基）-2-{【(3S)-l-({[4- 乙基-3-(5-羥基-4-側氧基_1，4_二氩吡啶_2_基）_5_側氧 基·4,5-二氫-；ιη-1，2,4-三唑-ΐ_基】磺醯基}胺甲醯基）_2_侧氧 基氮雜環丁烷-3-基】胺基}-2-側氧基亞乙基]胺基}氧基） 甲基丙酸（1)。

化合物1係由流程1至6中描繪及下文詳述之程序製備。 144665.doc -34· 201026696 流程1

O C3 步驟1.製備4,5-雙（节氧基）"比唆-2-甲酸苄酯（C4)。 A.製備5-(苄氧基）-2-(經基甲基）-4//-派喃-4-酮（C1)。將 5-羥基-2-(羥基甲基）-4/f-哌喃酮（3〇〇 g，2.ii m〇i)溶解 於甲醇（9 L)中且用碳酸鉀（439 g ’ 3.18 mol)處理，繼而緩 慢添加苄基氣（433 g，3.42 mol)。在65。(：下攪拌反應混合 物8小時。冷卻至室溫後，將其再攪拌16小時，接著在真 空中濃縮至稠糊狀物。將此殘餘物冷卻至1 〇。〇且用冰水稀 # 釋’從而產生沈澱物，藉由過濾收集該沈澱物，得到呈固 體狀之 C1。產量：325 g，1.40 mo卜 66%。4 NMR (400 MHz, DMSO-J5) δ 4.29 (s, 2H), 4.94 (s, 2H), 6.32 (s, 1H), 7.33-7.42 (m，5H)，8_17 (s，1H)。 . B.製備5-(苄氧基）-4-側氧基-4if-哌喃-2-曱酸（C2)。將 氧化鉻（VI)(64.6 g，〇·646 mol)於水（90 mL)中之溶液冷卻 至-5°C且用濃硫酸（56 mL)逐滴處理。將其再用水（40 mL) 稀釋’且接著逐滴添加至Cl(100 g，0.43 mol)於丙酮（4.5 L)中之冷（_5°C)溶液中。在20°C下攪拌反應混合物3小時， 144665.doc -35· 201026696 接著經由矽藻土墊過濾。濃縮濾液，得到殘餘物，用己烷 洗務該殘餘物，得到C2。產量：8〇 g，〇.325 mQl，％%。 NMR (400 MHz, DMSO-^) δ 4.97 (s, 2Η), 6.93 (s, 1H), 7.34_7.42 (m，5H), 8.37 (s，1H)。 C. ‘備5-(^氧基）-4-側氧基-1，4_二氫。比咬_2_曱酸 (C3)。將 C2(100 g’ 0.406 mol)與氫氧化鍵水溶液（25%，j L)之混合物在高壓蚤中授拌1小時，且接著在大氣壓下於 83°C下加熱7小時。歷經約18小時緩慢冷卻後，用濃鹽酸 將反應混合物酸化至pH 3。藉由過濾收集所得沈澱物，用 水洗滌，且溶解於飽和碳酸氫鈉水溶液中。用二氣曱统洗 滌溶液’接著用濃鹽酸酸化。藉由過渡收集所得固體，用 水洗滌且在50°C下乾燥，得到C3。產量：85 g，0.347 mo卜 85%。NMR (400 MHz，DMSO〇 δ 5·17 (s, 2H)， 7.17 (br s，1Η)，7.33-7.49 (m，7Η)。 D. 製備C4。將苄基氯（105.6 mL，0.918 mol)添加至 C3(90 g，0.367 mol)於二曱基甲醢胺（1.25 L)中之溶液 中。添加碳酸鉀（124.8 g，0.903 mol)，且在80°C下攪拌混 合物16小時。冷卻至室溫後，用冰水處理反應物，且藉由 過濾收集所得固體且藉由矽膠層析來純化’得到C4。產 量·· 50 g，0.118 mol，32%。MS m/z 426 (M+1)。NMR (400 MHz, DMSO-c/6) δ 5.32 (s, 6H), 7.33-7.46 (m, 15H), 7.76 (s, 1H)，8.37 (s，1H)。 144665.doc -36· 201026696 流程2

步驟2.製備5-(4,5-雙（苄氧基）咐啶-2-基）_1,3,4-喔二 唑-2(3H)-酮（C6)。 A. 製備4,5-雙（苄氧基）吡啶-2-甲醯肼（C5)。將單水合肼 (47_5 mL，978 mmol)經 10 分鐘逐滴添加至 C4(20 g，47.0 mmol)於甲酵（100 mL)中之懸浮液中。將所得混合物加熱 至65 °C歷時2小時，接著冷卻至室溫且在真空下過滤。用 曱醇洗滌所收集之固體，得到呈白色固體狀之C5。產量： 15.4 g，44.1 mmol，94% 〇 LCMS m/z 350.1 (M+1)。 NMR (400 MHz, OMSO-d6) δ 4.47 (d, J=4.6 Hz, 2H), 5.30 (s, 2H), 5.32 (s, 2H), 7.31-7.48 (m5 10H), 7.67 (s, 1H), 8.23 (s，1H)，9.65 (t, 7=4.5 Hz, 1H)。

B. 製備5-[4,5-雙（苄氧基）吼啶-2·基]-1，3,4-噁二 唑-2(3/〇-酮（C6)。將羰基二咪唑（97%，2.87 g，17.2 mmol)添加至 C5(5.00 g，14.3 mmol)於四氫吱喃（75 mL)中 之懸浮液中。在室溫下攪拌反應混合物3小時，在此期 間，白色懸浮液變成均質溶液，且接著變成白色懸浮液。 藉由過濾收集固體且用四氫呋喃（3x5 mL)洗滌，得到呈白 色固體狀之 C6。產量：4.92 g，13.1 mmol，92%。LCMS 144665.doc •37· 201026696 m/z 376.1 (M+l) 〇 'H NMR (400 MHz，DMSO〇 δ 5.31 (s’ 2H), 5.33 (s, 2H), 7.32-7.48 (m, 10H), 7.56 (s, 1H), 8.38 (s, 1H)，12.64 (br s，1H)。 流程3

步驟3·製備5-(4,5-雙（苄氧基）D比啶_2-基）-4-乙基-2H-1，2,4-三唑-3(4H)-酮（C8)。 A.製備1-(3,4-雙（苄氧基）吡啶甲醯基）_4_乙基胺脲（C7)。 在 5 C 下’向 C5(0.75 g/0.215 mol)於 5 mL N，N-二甲基甲醯 胺中之溶液中緩慢添加229 mg(3.22 mmol)異氰酸乙酯於5 mL四氫吱喃中之溶液，且在室溫下攪拌所得混合物2小 時’屆時’以維持溫度低於丨5 之速率將反應混合物轉移 至含有於10 mL四氫呋喃中之〇16i g(〇 〇〇32 m〇l)單水合肼 的溶液中° 一旦添加，即在室溫下攪拌所得混合物1小 時，屆時，將混合物傾倒入5〇 mL冰水中，從而形成沈澱 物’藉由過濾收集該沈澱物且在真空中乾燥，從而得到呈 白色固體狀之C7。LCMS m/z 421 (M+1)。4 NMR (400 MHz, CDCL3〇 δ 1.25 (t，《7=6.2 Hz，3H)，4.25 (br. d，2H), 5.24 (br. s, 4H), 7.31-7.46 (m, 10H), 7.55 (br. s, 1H), 8.18 (s, 1H) 〇 144665.doc 201026696 B.製備5-(4,5-雙（苄氧基）吡啶-2-基）-4-乙基-2H-1，2,4-三唑-3(4H)-酮（C8)(環化方法 1)。向 0.42 g(0.999 mmol)C7 之經攪拌溶液中添加8當量（0.448 g/7.99 mmol)溶解於2 mL 水中之氫氧化鉀，且將所得混合物加熱回流歷時24小時， 屆時，在真空中將反應混合物濃縮至乾。接著藉由管柱層 析（矽膠，於乙酸乙酯中之3%至5%甲醇）純化粗產物，從 而產生 0.683 g(46%)化合物 C8。LCMS 403.3 (M+1)。 !H NMR (400 MHz, CDCL3-〇?6) δ 1.26 (t, J=7.3 Hz, 3H), 4.26 (q, J=6.6 Hz, 2H), 5.24 (s, 4H), 7.29-7.47 (m, 10H), 7.57 (s, 1H)，8.16 (s，1H), 9.86 (br. s, 1H)。 流程4

C10 步驟4.製備（3^)-3-胺基氮雜環丁-2-酮（CIO)。 將[(35)-2-側氧基氮雜環丁烷-3-基]胺基曱酸苄酯（C9， 13.37 g，60.7 mmol)與經脫氣之乙醇（500 mL)及甲苯（125 mL)混合。關於C9之合成，參看M.J. Miller等人， 1983，39，2571-2575 及 M.S. Lall 等人， •/owma/ 〇/ Orgawic C/iemisir少，2002， 67, 1536-1547。對反 應混合物進行音波處理，直至所有固體溶解為止，接著用 氮氣淨化。添加鈀/碳（10%，4.45 g)，且在15 psi下於帕爾 震盡器（Parr shaker)上將反應混合物氫化1小時。在氮氣下 144665.doc -39- 201026696 藉由經矽藻土過濾而移除鈀，且用經脫氣之乙醇沖洗。使 含有C10之濾液與C12直接進行偶合反應，步驟4B。產 量：假定定量。將來自類似實驗之物質濃縮至乾，獲得 NMR數據：NMR (400 MHz, DMSO-c/6) δ 2.12 (br s 2Η), 2.78 (dd, J=5.1, 2.3 Hz, 1H), 3.31 (dd, J=5.3, 5.3 Hz 1H), 3.97 (m, 1H), 7.69 (br s, 1H) ° 流程5

步驟5.製備2-({[(lZ)-l-{2-[(第三丁氧基羰基）胺 基]-1,3-噻唑-4-基}-2-側氧基-2-{[(3<S)-2-側氧基氮雜環丁 烷-3-基]胺基}亞乙基]胺基}氧基）-2-甲基丙酸第三丁醋 (C13)。 A.製備2-[({(1Ζ)-1-{2-[(第三丁氧基羰基）胺基]-1，3_噻 峻-4-基}-2-[(2,5-二側氧基。比哈咬-1-基）氧基]-2-側氧基亞 乙基}胺基）氧基]-2-曱基丙酸第三丁酯（C12)。將1-羥基〇比 144665.doc •40- 201026696 咯啶-2,5-二酮（#-羥基丁二醯亞胺，8.84 g，76.8 mmol)添 加至（2Z)-{2-[(第三丁氧基羰基）胺基]-l，3-噻唑-4-基}[(2-第三丁氧基-1，1-二甲基-2-側氧基乙氧基）亞胺基]乙酸 • (C11，30 g，70 mmol)於二氣甲烷（400 mL)中之懸浮液 • 中。關於C11之合成，參看K. Yamawaki等人，

Mec/icina/ C/iembiry 2007，以，6716-6732。將混合物 冷卻至0°C，添加二環己基碳化二亞胺（97%，15.6 φ g，73.3 mmol)，且在〇°C下攪拌反應物30分鐘，接著在室 溫下攪拌3小時。經由矽藻土過濾混合物且在真空中濃 縮’得到呈白色固體狀之C12。產量：36.17 g，68.7 mmo卜 98%。LCMS w/z 527.2 (M+1)。4 NMR (400 MHz， CDC13) δ 1.43 (s, 9H), 1.54 (s, 9H), 1.61 (s, 6H), 2.91 (br s, 4H), 7.50 (s, 1H)，8.31 (br s, 1H)。 B.製備C13。用化合物C12(26.6 g，50.6 mmol)處理 Cl0(5_23 g，60.7 mmol)於乙醇/曱苯中之溶液（900 mL，步 Φ 驟4中所獲得之溶液），且在減壓下將反應混合物經1小時 緩慢濃縮至其原始體積的三分之一。在35t於氮氣下，將 所得懸浮液攪拌約丨8小時。在真空中移除溶劑，得到粗產 • 物’將該粗產物在真空下乾燥30分鐘。使所得固體分配於 1:1乙酸乙醋/四氫呋喃（1 L)與碳酸氫鈉水溶液（500 mL)之 間。需要另加水來溶解分離期間所觀察到的固體。用1 : i 乙酸乙酯/四氫呋喃（2x300 mL)萃取水層，且過濾經合併之 有機層並在真空中濃縮。將粗固體用3:2乙酸乙酯/庚烷（6〇 mL)濕磨30分鐘，且藉由在用庚烷沖洗下過濾來收集固 144665.doc -41 · 201026696 體，得到呈白色固體狀之C13。產量：22.08 g，44.4 mmo卜 88%。LCMS m/z 498.6 (M+1)。NMR (400 MHz， CD3〇D) δ 1.47 (s, 9H), 1.52 (s, 6H), 1.54 (s, 9H), 3.39 (dd, J=5.7, 2.5 Hz, 1H), 3.65 (dd, J=5.5, 5.5 Hz, 1H), 5.10 (dd, J=5.3, 2.5 Hz, 1H)，7.34 (s，1H)。 流程6

C13 OBn

〇

OH 144665.doc -42· 201026696 步驟 6.製備 2-({[(1Ε)-1-(2-胺基-1,3-噻唑-4-基）-2-{[(3S)-l-({[4-乙基-3-(5-羥基-4-側氧基-1，4-二氫吼啶-2-基）-5-側氧基-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基]磺醯基}胺曱醯 基）-2-側氧基氮雜環丁烷-3-基]胺基}-2-側氧基亞乙基]胺 基}氧基）-2-曱基丙酸（1)。 A. 製備 C14(偶合方法 1)。向 C8(180 mg/0.45 mmol)於 3 mL四氫呋喃中之經攪拌溶液中添加6.0當量N-三甲基矽烷 基-N-曱基三氟乙醯胺（MSTFA，艾德利奇安瓿（Aldrich ampoule))，從而形成淡黃色溶液，在室溫下攪拌該溶液45 分鐘。接著在減壓下濃縮混合物且在45°C下於真空（高真 空）下加熱1小時。獨立地，向溶解於4 mL二氣曱烷中且冷 卻至 0°C 之 0.223 g(0.45 mmol)C13 中添加 0.082 g(0.58 mmol/0.051 mL)氯磺醯基異氰酸酯，且在0°C下攪拌所得 溶液30分鐘。屆時，將四氫吱喃（3 mL)添加至C8之加合物 中，且經由套管將所得溶液引入CSI反應物中。在0°C下攪 拌所得溶液1小時，接著恢復至室溫且在減壓下濃縮。藉 由管柱層析（矽膠，於庚烷中之45%至60%乙酸乙酯）淨化 粗物質，從而得到332 mg呈混合物形式之C14，其未經另 外純化即向前進行反應。LCMS m/z 1003.2 (M-1)。 B. 製備化合物1。將溶解於20 mL甲醇中之0.190 g(0.19 mmol)C14置於帕爾瓶（Parr bottle)中，且用氮氣對溶液進 行脫氣。接著添加鈀黑（0.063 g)，且在室溫下於13 psi氫 氣氛圍下攪動混合物40分鐘（由LCMS分析反應完成）。接 著經由矽藻土過濾反應混合物且在真空中濃縮至乾。接著 144665.doc •43· 201026696 將物質以粗物質形式溶解於10 mL二氣甲烷中。接著向此 溶液中添加10 mL三氟乙酸，且在室溫下攪拌所得混合物2 小時，屆時在真空中濃縮反應混合物。接著藉由製備型 HPLC(Symmetry C8，具有0.1%甲酸改質劑之3%至23〇/〇乙 腈水溶液）純化粗產物（1)。在真空中濃縮至乾後，收集到 約 5 mg 1。LCMS m/z 669.4 (M+1)。NMR (400 MHz， CD3OD) δ 1.0-1.2 (m, 6H), 1.3-1.5 (br. s, 5H), 3.97 (d, J=6.8 Hz, 2H), 4.88 (br. s, 1H), 6.81 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.99 (s，1H)，9.05 (d, J=4.2 Hz，1H)。 實例2 製備 2_({[(1Z)-1_(2-胺基 _l，3-噻唑-4-基 [2·(二甲基胺基）己基]·3_(5_羥基_4_側氧基_14二氩吡啶_ 2-基）-5-側氧基_4,5-二氫三唑-1-基}磺醢基）胺甲 醢基】-2-側氧基氮雜環丁烷_3-基}胺基）_2侧氧基亞乙基】胺 基}氧基）-2-甲基丙酸（2)。

2 化合物2係由流程7中描繪及下文詳述之程序製備。 144665.doc 201026696 流程7

步驟1.製備胺基-1，3_噻唑-4-基）-2-({(3S)-l-[({4-[2-(二甲基胺基）乙基]_3_(5_羥基-4_侧氧 基-1,4-二氫。比啶-2-基）-5-側氧基-4,5-二氫-1H-1,2,4-三 。坐-l-基}續醯基）胺甲醯基]_2_側氧基氮雜環丁烷_3_基）胺 基）-2-侧氧基亞乙基]胺基}氧基）_2_曱基丙酸（2)及非對映 異構性二醇混合物（實例1 〇)。 A.製備C16。以與實例1中製備C14類似之方式使用偶 合方法1來製備化合物C15。lcms 991 8 (M+1)。1h >iMR (400 MHz, DMSO〇 δ 1.33-1.39 (m，9H)，1.41-1.45 (br. s, 6H), 3.32-3.38 (m, 1H), 6.67 (t, J=8.2 Hz, 1H), 4.67 (m, 1H), 4.85-4.92 (m, 1H), 4.98 (d, J=5.8 Hz, 1H), 5.26 (d, J=9.3 Hz, 2H), 5.73-5.86 (m, 1H), 7.27-7.49 (m, 10H), 7.58 (s’ 1H)，8.31 (s，1H)，8.99 (d, J=9.34 Hz, 1H)。向 C15(0.30 g/0.3 mmol)於5 mL 9:1丙酮/水中之經攪拌溶液中添加 144665.doc •45· 201026696 0.138 g(1.18 mmol)N-曱基嗎琳-N-氧化物（MMO)，繼而添

加0.746 g(0·09 mmol)四氧化餓’且在室溫下授拌所得混合 物16小時。接著再添加NMO及四氧化锇，且再授拌混合物 24小時’屆時由LCMS分析反應完成。經由石夕藻土過漁反 應物，在真空中濃縮，接著藉由管柱層析（二氧化石夕；於 庚烷中之30%至100%乙酸乙酯，接著轉換至於二氣甲烧中 之3%至7%甲醇）純化’從而收集到〇.302 g Cl6。LCMS w/zlOSlJiM+lp^NMROOOMHz’DMSOOsiW-1·38 (m，9H), 1.42 (s，6H)，3.20-3.26 (m，2H)，3.31-3.37 (m，1H)，3.58-3.69 (m，2H)，3.94-4.11 (m，2H)，4.49-4.58 (m，1H)，4.89 (br. s，1H)，4.94 (dd，J=5.4 Hz，J=i〇.；i Hz, 1H)，5.24-5.29 (m，4H)，7.27-7.48 (m, l〇H), 7.52 (s 1H) 8·31 (s，1H)，8.98 (d，J=8.7 Hz，1H)。接著以與針對實例 i 中C14製備化合物1所述類似的方式來脫除此物質之保護 基’以製備實例1 〇。 B.製備C17。將溶解於8 mL 3:1二噁烷/水中之 C1S(0.486 g，0·48 mmol)置於火焰乾燥燒瓶中，且接著向 此混合物中添加過碰酸鈉（0.311 g，1.43 mm〇i)及四氧化蛾 (0.025 g，0.003 mmol)’且在室溫下攪拌所得混合物16小 時（由LCMS分析反應完成）。接著使反應混合物分配於飽 和碳酸氫鈉與乙酸乙酯之間。用飽和鹽水洗滌有機層，經 硫酸鈉乾燥，過濾且在真空中濃縮至乾。接著藉由管柱層 析（妙膠，於庚烧中之30%至100%乙酸乙酯，接著轉換至 於二氣曱烷中之3%至7〇/〇曱酵）純化粗產物，從而收集到 144665.doc -46· 201026696 0.230 g C17，由1H NMR分析其似以水合物形式存在。 LCMS m/z 1019.9 (M+l) 〇 lU NMR (4〇〇 MHz, CD3〇D) δ 1.38-1.56 (m, 24H), 3.72 (t, J=4.7 Hz, 1H), 3.84 (t, J=4.1 . Hz, 1H), 3.89-3.56 (m, 1H), 4.16-4.22 (m, 2H), 4.45 (t, J=5.3 Hz, 1H), 4.72-4.78 (m, 1H), 5.00-5.09 (m, 1H), 5.19- 5.29 (m, 4H), 7.19-7.49 (m, l〇H), 7.77 (s, 1H), 8.11 (s, 1H)，8.22 (d，J=9.4 Hz，1H)。 ❿ C·製備C18及化合物2。向C17(1.22 g，uo _〇1)於1〇 mL四氫呋喃中之經攪拌溶液中添加二甲胺（〇〇98 g, i2 mmol)及3當量冰醋酸（0.215 mL，3.59 mmol)，且在室溫下 攪拌所得溶液2小時。接著添加三乙醯氧基硼氫化鈉（〇532 g，2.51 mmol)，且在室溫下攪拌所得混合物18小時。使反 應混合物分配於飽和碳酸氫鈉與乙酸乙酯之間，用飽和鹽 水洗滌有機層，經硫酸鈉乾燥，過濾且在真空中濃縮至 乾。藉由管柱層析（矽膠’於庚烷中之3〇%至1〇〇〇/。乙酸乙 ❿ Ss，接著轉換至於二氣甲烷中之5%至1〇%曱醇）純化粗產 物，從而收集到 0.340 g C18。LCMS w/z 1048.9 (M+1)。 H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 1.38-1.54 (m, 24Η), 2.44 (s, 1H), 2.85 (s, 6H), 3.40 (br. s, 1H), 3.71-3.77 (m, 1H), 3.90 (t, J-6.0 Hz, 1H), 4.46 (br. s, 2H), 5.03 (s, 2H), 5.18-5.26 (m, 4H), 7.20-7.35 (m, 9H), 7.40 (d, J=7.0 Hz, 2H), 7.65 (s, 1H)，8.21 (s’ 1H)。接著以與針對實例1之化合述類似 的方式，藉由脫除保護基及HPLC純化而自C18製備化合物 2。LCMS w/z 712.5 (M+1)。4 NMR (400 MHz，DMSO〇 144665.doc 47· 201026696 δ 1.39 (s，6H)，2.50 (s，6H)，3.30-3.45 (m，假定 3H，由水 峰遮蔽），3.68 (m，1H)，4.37 (m，2H), 6.70 (s，1H)，7·31 (br s, 2H), 7.42 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 8.98 (d, J=7.0 Hz, 1H), 9.99 (br s, 1H), 10_88 (br s，1H)。 實例3 製備 2-({【(lZ)-l-(2-胺基-1，3-噻唑-4-基）-2-({(3S)-l-[({4-[(2Λ)-2,3-二羥基丙基]-3-(5-羥基-4-側氧基-1，4-二氩吡啶-2-基）-5-側氧基-4,5_二氩-1丑-I，2,4·三嗤- l-基}項酿基）胺甲 醢基卜2-侧氧基氮雜環丁烷-3-基}胺基）-2-側氧基亞乙基]胺 基}氧基）-2-甲基丙酸二鈉鹽（3)。

化合物3係由流程8至1〇中描繪及下文詳述之程序製備。 144665.doc 48· 201026696

流程8

OBn

步驟1.製備5-[4,5-雙（苄氧基）B比啶_2_基]_4_[(2及)-2,3-二 經基丙基]-2,4-二氫-3/ί-1，2,4-三》坐-3-酮（C20)。 Α.製備2-{[4,5-雙（节氧基）》比啶_2_基]艘基}-iV-[(2i〇-2,3- 二羥基丙基]肼曱醯胺（C19)。將（2i〇-3-胺基丙-l，2-二醇 (0.291 g ’ 3.19 mmol)添加至 C6(1.0 g，2.66 mmol)於四氫 呋喃（50 mL)中之懸浮液中，且將混合物加熱至6<rc歷時 2 0小時。冷卻至室溫後，過滤懸浮液，且用四氫π夫蜂（3 X 5 mL)洗務固體，得到呈白色固體狀之C19。產量：1.07 g， 2.29 mmol，86% 〇 LCMS w/z 467.2 (M+1)。4 NMR (400 MHz, DMSO-J6) δ 2.93 (m, 1Η), 3.19 (m, 1H), 3.27 (m, 2H), 3.44 (m, 1H), 4.53 (t, J=5.8 Hz, 1H), 4.77 (d, 7=4.8 Hz, 1H), 5.33 (s, 4H), 6.31 (t, /=5.5 Hz, 1H), 7.31-7.48 (m, 10H), 7.69 (s, 1H), 8.01 (br s, 1H), 8.28 (s, 1H), 10.04 (br s, 1H) 〇 144665.doc 49- 201026696 B.製備C20。將C19(3.00 g，6.43 mmol)於氫氧化鉀水 溶液（1.6 Μ ’ 40.2 mL ’ 64.3 mmol)中之溶液在i〇〇°c下加 熱13小時’此後將該溶液冷卻至〇〇c，用水（1〇〇 mL)稀釋 及用濃鹽酸酸化至pH 7。過濾所得固體且用水（3 xl〇 mL) 洗膝’得到C20 ’其受約30%水解產物4,5-雙（苄氧基）β比 啶-2-甲酸污染。產量：2.66 g，<5.93 mmol，<92%。 LCMS m/z 449.2 (M+1)及336.1 (M+1，針對水解產物）。]Η NMR (400 MHz, DMSO-A) δ 3.28 (m，2Η)，3.70 (m, 1Η) 4.05 (dd，一半 ABX圖案，/=13.7，5.0 Hz，1H)，4.12 (dd 一半 ABX 圖案，J=13.7, 8.0 Hz，1H)，4.61 (v br s，1H), 5,〇1 (br s，1H)，5.28 (s, 2H)，5.31 (s, 2H), 7.32-7.48 (m, 1〇jj) 7.58 (s，1H)，8.32 (s，1H)，12.03 (br s，1H)。水解產物之所 選峰值：5.29 (s)，7.70 (s)，8.28 (s)。 144665.doc 50- 201026696

流程9

步驟2.製備2-({[(1Ζ)-1-{2-[(第三丁氧基羰基）胺 基]-1，3-噻唑-4-基}-2-({(35>l-[({4-[(2i?)-2,3-二羥基丙 基]-3-(5 -經基-4-側氧基-1,4 -二氯吼咬-2-基）-5-側氧基- 4,5-二氫-17/-1,2,4-三唑-l-基}磺醯基）胺甲醢基]-2-側氧基氮雜 環丁烷-3-基}胺基）-2-侧氧基亞乙基]胺基}氧基）-2-甲基丙 酸第三丁酯（C22)。 A.製備 2-({[(1Ζ)-2-({(35>1-[({3-[4,5-雙（苄氧基）吼 144665.doc 51 - 201026696 咬-2-基]-4-[(2/?)-2,3-二羥基丙基]-5-側氧基-4,5-二氫-1仏 1,2,4-三。坐-l-基}磺醯基）胺曱醯基]·2_側氧基氮雜環丁 炫-3-基}胺基）-1-{2-[(第三丁氧基羰基;)胺基μ!，〉噻唑_4_ 基卜2-側氧基亞乙基]胺基}氧基）-2-甲基丙酸第三丁酯 (C21)。用2,2,2·三氟甲基-ΛΚ三甲基矽烷基）乙醯胺 (MSTFA ’ 98。/。’ ΐ〇·2 mL，53.7 mmol)處理 C20(4.00 g， 8.92 mmol)於四氫呋喃5 mL)中之混合物。攪拌45分鐘 後，在60°C下於真空中濃縮淺黃色乳狀混合物1小時，接 著在60°C下於真空下乾燥1.5小時。在另一燒瓶中，將 C13(4.88 g，9,81 mmol)於二氣曱烷（32 mL)中之懸浮液冷 卻至0°C ’用異氰酸酯基硫醯氣（氯磺醯基異氰酸酯， 95°/。’ 0.929 mL ’ 1〇·7 mmol)逐滴處理，且在冰冷卻下授 拌30分鐘。將自C20而得之物質溶解於四氫呋喃（8 mL) 中’冷卻至〇°C。接著經由套管將經冰冷卻之含C13反應混 合物轉移至此溶液中。在〇。(：下攪拌1小時，接著在室溫下 授拌1，5小時後’用甲酵（5 mL)使反應混合物中止反應，挽 拌10分鐘且在真空中濃縮。藉由矽膠層析（梯度：於庚烷 中之40%至100%乙酸乙酯，接著於乙酸乙酯中之〇%至12〇/〇 甲醇）純化殘餘物，得到呈固體狀之C21。產量：3.85 g， 3.66 mmo卜 41%。LCMS m/z 1051.4 (M+1)。NMR (400 MHz，DMSO-A) δ 1.38 (s，9H)，1.39 (s，6H)，1.46 (s, 9H)， 3.3 (由 HOD 信號遮蔽），3.66 (m，1Η)，3.70 (dd，7=6.3, 6.3

Hz, 1H), 4.00-4.13 (m, 2H), 4.56 (m, 1H), 4.93 (m, 2H), 5.29 (s, 2H), 5.30 (s, 2H), 7.25 (s, 1H), 7.31-7.50 (m, 10H), 144665.doc -52- 201026696 7.57 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 9.02 (d, J=8.5 Hz, 1H), H.84 (br s, 1H)。 Γ B.製備 C22。將 C21(0.460 g，〇_438 mm〇1)於四氫咬喃 (10 mL)及乙酸（0.1 mL)中之溶液用氮氣（3x)進行脫氣及沖 洗’且用把黑（134 mg)處理。在室溫下於36 psi氫氣下， 使用帕爾震盪器將混合物氫化4小時（由LCMS分析完成完 成）。經由酸洗纖維素粉末過濾樣品且用THF洗滌，得到淡 紅色濾液’在真空中將其濃縮至乾，從而得到0.382 g(100%)紅色固體。LCMS w/z 871.8 (M+1)。NMR (500 MHz, DMSO-A) δ 1.39 (s，9Η)，1.40 (s，6Η)，1.46 (s，9Η)， 3.29 (m，2Η)，3.39 (dd，《7=6.3, 3.3 Ηζ，1Η)，3·65 (HOD團塊 遮蔽信號），3·71 (m，1H，據估計），3_94 (m，2H,據估計）， 4.92 (m, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 9.01 (d，*7=8.0 Hz，1H)，11.82 (br s，1H)。 流程10

-53- 144665.doc 201026696 步驟 3.製備 2·({[(1Ζ)-1-(2-胺基-1,3-噻唑-4-基）-2-({(3S)-l-[({4-[(2及)-2,3-二羥基丙基]_3_(5_ 羥基-4-侧氧 基-1，4-二氫吡啶-2-基）-5·側氧基-4,5-二氫-1//-1，2,4-三 唑-l-基}磺醯基）胺曱醯基]-2-側氧基氮雜環丁烷-3-基}胺 基）-2-側氧基亞乙基]胺基}氧基）-2-甲基丙酸二鈉鹽（3)。 A.製備化合物3。將三氟乙酸（π mL)添加至C22(2.54 g ’ 2.91 mmol)於13 mL二氣甲烷中之經冷卻溶液中。 在室溫下攪拌反應混合物2小時，且接著經由鐵氟龍套管 (teflon cannula)緩慢轉移至含有186 mL 2:1庚烷/甲基第三 丁基謎（MTBE)混合物之另一圓底燒瓶中，從而產生細沈 澱物。藉由過濾收集固體，用庚烷/MTBE(2:1)洗滌且在真 空中乾燥，從而得到1.82 g(88%)呈玫瑰色固體狀的3之三 氟乙酸鹽。接著藉由使用採用RediSep Rf C18管柱（130 g)、負載粗三氟乙酸鹽於二曱亞硬（1.5 mL)中之溶液的iseo Rf層析系統以兩個批次進行逆相層析來純化一份此物質 (2_42 g)。梯度為5%至30%水（0.1%曱酸）/乙腈（〇.1%甲 酸）。在15%至18%乙腈下，產物離開管柱》彙集溶離份且 在減壓下移除溶劑，從而得到0.847 g(35%)呈白色固體狀 之物質。在甲醇中對固體進行音波處理（4次），且移除溶劑 (以移除甲酸）。1H NMR證實游離形式之產物帶有最低量的 曱酸。LCMS m/z 715.0 (M+1)。4 NMR (500 MHz, DMSO-A) δ 1.42 (s，3H)，1.43 (s, 3H)，3.28 (m，2H)，3.38 (dd，/=6.3, 3.4 Hz, 1H)，3.65 (m，1H)，3.70 (m，1H), 3.95 (br d, J=6.5 Hz, 2H), 4.91 (m, 1H), 6.79 (s, 1H), 7.36 (s, 144665.doc •54· 201026696 !H)，8.01 (s，1H)，9.03 (d，《7=8.3 Hz，1H)。在 0°C 下，向 1.20 g(l.65 mmol)游離形式之酸於3〇 mL去離子水中之漿 液中緩慢添加0.277 g(3.30 mmol)溶解於6 mL去離子水中 之碳酸氫納（在添加碳酸氫鈉溶液後，固體完全溶解）。接 著冷凍及凍乾所得溶液’從而得到1.12 g呈淺粉色親液膠 體狀之二鈉鹽。LCMS m/z 715.6 (M+1)。NMR (500 MHz，D20) δ 1.31 (s，3H)，1.32 (s，3H)，3_44 (dd，W ABX, J=12.1 Hz, 4.8 Hz, 1H), 3.48 (dd, */2 ABX, J=11.8 Hz, 4.0 Hz, 1H), 3.65 (dd, J=7.3 Hz, 3.3 Hz, 1H), 3.73-3.92 (m, 3H), 4.90 (dd, J=3.2 Hz, 3.2 Hz, 1H), 6.79 (s, 1H), 6.97 (s, 1H)，7.72 (s，1H)。 實例4 製備 2-({[(lZ)-2-{[(3S)-l-({【4-(2-胺基-2-側氧基乙基）-3-(5-羥基-4-側氧基·ι，4·二氩《Λ啶-2-基）-5-側氧基-4,5-二氫-1/Γ-1，2,4-三嗤-1·基】續殖基}胺甲雄基）_2_侧氣基氮雜環丁 φ 烷基I胺基}-1·(2-胺基-1,3-噻唑-4-基）-2-側氧基亞乙基j 胺基}氧基）-2-甲基丙酸二鈉鹽（4)。

144665.doc -55· 201026696 化合物4係由流程11至13中描繪及下文詳述之程序製 備0 流程11

OBn

C24 步驟1.製備{3-[4,5-雙（苄氧基）《*比啶-2-基]-5-側氧 基-1，5-二氫-4//-1，2,4-三唑-4-基}乙腈（024)。 A.製備2-{[4,5-雙（苄氧基比啶-2-基]羰基}-ΛΓ-(氰基甲 基）肼曱醯胺（C23)。將胺基乙腈（0.11 g，1.92 mmol)及三 乙胺（0.162 g ’ 1.60 mmol)經1分鐘逐滴添加至C6(0.60 g， 1.6 mmol)於四氫呋喃（5 mL)中之懸浮液中，且將混合物加 熱至55°C歷時20小時。再添加胺基乙腈（0108 g，丨92 mmol)及三乙胺（〇·162 g，1.60 mmol)，且在55。(：下繼續加 熱20小時。用冰浴冷卻至〇。(：後，過濾懸浮液，且用四氫 呋喃洗滌固體，且在真空下乾燥，得到呈固體狀之C23。 產量：0.550 g ’ 1.27 mmol，79%。LCMS m/2 430.3 144665.doc -56- 201026696 (Μ-l)。4 NMR (400 MHz, DMSO〇 δ 4.00 (d，〜 ， *5 Hz, 2H)，5.33 (s，2H)，5.34 (s，2H)，7.30-7.48 (m，1〇Η)，7 7〇 1H)，8.27 (s，1H)，8.38 (br s，lH), 10.18 (br s，1H)。 ’ B.製備C24(環化方法2)。將2,2,2-三氟i-甲某以〜 土-vv三甲 基矽烷基）乙醯胺（MSTFA，98%，8 mL，37 μ "mmol)與 C23(0.310 g，0.728 mmol)在微波管中合併，曰 且加熱至 150 °C歷時15分鐘。將此過程重複六次，總共合併2 δ所

用C23。將反應物合併且在真空中濃縮，且藉由石夕膠層析 (梯度：於庚烷中之30%至50%乙酸乙酯）純化殘餘物，得 到呈固體狀之C24。產量：1.1 g，2·66 mmol，52%。 LCMS w/z 414.2 (M+1)。4 NMR (400 MHz, DMSO-A) δ 5.17 (s, 2H), 5.32 (s, 2H), 5.34 (s, 2H), 7.29-7.50 (m, 10H), 7.64 (s，1H)，8.36 (s，1H)，12.34 (s, 1H)。

144665.doc 57- 201026696 流程12

C13 OBn

OBn

步驟2.製備2-({[(lZ)-l-{2-[(第三丁氧基羰基）胺 基]-1，3·噻唑-4-基}-2-{[(3幻-1-({[4-(氰基曱基）-3-(5-羥 基-4側氧基-1，4-二風。比σ定-2-基）-5-侧氧基-4,5 -二風-1 1，2,4-三唑-1-基]磺醯基}胺曱醯基）-2-側氧基氮雜環丁 烷-3-基]胺基卜2-側氧基亞乙基]胺基}氧基）-2-甲基丙酸第 三丁醋（C26)。 144665.doc -58- 201026696 A•製備 2-({[(1Ζ)-2-({(35·)_1-[({3-[4,5-雙（节氧基）》比 啶-2-基]_4_(氰基甲基）_5_側氧基-4,5-二氫-1/M，2,4-三 °坐-l-基}磺醯基）胺曱醯基]-2-側氧基氮雜環丁烷-3-基}胺 • 基[(第三丁氧基羰基）胺基]-1，3-噻唑-4-基}-2-側氧 • 基亞乙基]胺基}氧基）-2-曱基丙酸第三丁酯（C25)。根據針 對實例3中合成C21之一般程序來製備化合物C25，不同之 處在於使用C24替代C20。藉由矽膠層析（梯度··於庚烷中 φ 之35%至75%乙酸乙酯）純化粗物質，得到C25。產量： 164 g，1.61 mmol，21°/〇。此物質未經進一步純化即用於 下一步驟。LCMS m/z 1〇16 5 (M+1)。 B.化合物C%。根據針對實例3中合成C22之一般程序 來製備化合物C26,不同之處在於使用C25替代C21，且在 25 psi下將反應物氫化15小時，得到呈棕色固體狀之 09。產量：〇.635 g，0.759 mm〇1，98%。LCMS 所/z 836.3 (M+1)。 144665.doc •59· 201026696 流程13

Ο

• HCOOH Ο ^ONa

步驟3.製備4。 八.製備2-({[(12)-2-{[(35>1-({[4-(2-胺基-2-側氧基乙 基）-3-(5 -經基-4-側氧基-1,4 -二氮°比β定-2-基）-5 -側氧基-4,5-二氫-1//-1,2,4-三唑-1-基]磺醯基}胺曱醯基）-2-側氧基氮雜 環丁烷-3-基]胺基}-1-(2-胺基-1,3-噻唑-4-基）-2-側氧基亞 乙基]胺基}氧基）-2-曱基丙酸（C27)。根據針對實例3中合 144665.doc -60- 201026696 成3之一般程序來製備化合物cu，不同之處在於使用〔μ 替代C22。又，與使用實例3中所用之沈澱技術相對比，藉 由蒸發二氟乙酸/二氯曱烷溶液來產生化合物4之粗三氟乙 酸鹽。將粗產物溶解於二甲亞颯中至1〇〇 mg/inL濃度，過 ;慮’且藉由製備型HPLC(管柱：Waters Symmetry C8，5 μιη ’ 30x50 mm ;溶劑A : 〇. 1%曱酸水溶液；溶劑b :於乙 腈中之0.1¾曱酸。梯度：3%至22% B)純化。將屬於所要 產物之溶離份合併，冷卻至_78。〇且凍乾，得到呈粉色固 體狀之C27。產量：0.078 g，0.11 mm〇l，12%。LCMS m/z 698.9 (M+l) ° ιΗ NMR (400 MHz, DMSO-J6) δ 1.38 (br s, 6H), 3.33 (m, 1H), 3.65 (m, 1H), 4.61 (s, 2H), 4.88 (m, 1H), 6.74 (br s, 1H), 7.03 (br s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 8_99 (d，《7=7.42 Hz, 1H)。 B.製備 4。將 C27(78 mg，0.11 mmol)於乙腈（5 mL)與水 (45 mL)之混合物中的溶液冷卻至〇°C，且添加碳酸氫鈉 (18.8 mg，0.224 mraol)。在0°C下劇烈攪拌混合物1〇分 鐘。接著將懸浮液冷卻至-78°C (使用乾冰/丙酮浴）且凍 乾，得到呈粉色固體狀之4。產量：0.079 g，0.106 mmo卜 95%。NMR (400 MHz, DMSO〇 δ 1.42 (s，3H)， 1.50 (s, 3Η)，3-3.5 ppm由水峰遮蔽，3.78 (m，1Η)，4.57 (d， J=16.4 Hz, 1H), 4.72 (d, /=16.4 Hz, 1H), 5.15 (m, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.99 (br. s, 1H), 7.18 (br s, 3H), 7.38 (br s, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.81 (s, 1H) e 實例5 144665.doc .61 - 201026696 製備 2-({[(1Ζ)-1-(2-胺基-1，3·噻唑-4-基）-2-({(3^_1-[({4-[(2 tS") - 2，3 -二經基丙基]-3 _( 5 -經基-4 -側氧基-1，4 -二氮0it咬_ 2-基）-5-側氧基-4,5-二氫-1丑-1，2,4-三唑-l-基}磺醢基）胺甲 醢基]-2_側氧基氮雜環丁烷-3-基}胺基）-2-侧氧基亞乙基】胺 基}氧基）-2-甲基丙酸二鈉鹽（5)。

化合物5係由流程14至1 6中描繪及下文詳述之程序製 備。 流程14 OBn

OBn

步驟1.製備5-[4,5-雙（苄氧基比啶-2-基]-4-[(25>2,3-二 144665.doc -62- 201026696 羥基丙基]-2,4-二氫^ 三唑_3_綱（(：29)。 A_製備2 {[4,5-雙（节氧基）π比啶_2_基]羰基卜… 2’3-二羥基丙基]肼甲醯胺（C28)。根據針對實例3中合成 . ⑶之一般程序來製備化合物C28, *同之處在於使用 • (2lS>3_胺基丙-1，2_二醇替代（2及)_3-胺基丙_l52_二醇。獲得 呈黃色固體狀之化合物C28。藉由在真空中自滤液移除溶 劑來獲得更多產物，得到黃色固體（8 58 g)，將其在四氣 ❹ °夫$(5() mL)製漿，加熱至回流接著過渡，得到第二批 C28 C28之合併產量為16 73 g，35 88以则^，9〇〇/〇 〇 LCMS W/z 467.2 (M+l) 〇 NMR (500 MHz, DMSO-^) δ 2.91 (m，1H)，3.20 (m，ih)，3.28 (m，2H)，3.44 (m, 1H)， 5.31 (s, 2H), 5.32 (s, 2H), 6.49 (m, 1H), 7.31-7.48 (m, l〇H)，7.69 (s，1H), 8.25 (s, ih)。 B.製備C29。根據針對實例3中合成C2〇之一般程序來 製備化合物C29，不同之處在於使用[μ替代C19。將粗產 ❿ 物與甲醇（100 mL) 一起加熱，過濾熱混合物，且將濾液濃 縮至20 mL。错由過濾收集所得固體，得到C29。產量：

150 mg，0.334 mmo卜 22〇/0。LCMS 心 449 2 (M+1)。lH NMR (400 MHz，DMSO〇 δ 3·28 (m, 2H)，3.70 (m，1H)， 4.09 (t, J=5.8 Hz, 1H), 5.01 (d? J=5 4 Hz 1H)； 5 2η (Sj 2H)，5.31 (s，2H)，7.32-7.49 (m，1〇H)，7 58 (s，1H), 8 32 (s， 1H)，12.03 (br s，1H)。 144665.doc •63· 201026696 流程15

C13 OBn

步驟2·製備2-({[(1Ζ)-1-{2-[(第三丁氧基羰基）胺 基]-1，3-噻唑-4-基}_2-({(35)·1-[({4·[(25)-2,3-二羥基丙 基]-3-(5 -經基-4-側氧基-1，4·二氮吼®定-2-基）-5 -側氧基_4,5· 二氫-lif-l，2,4-三唑-l-基}磺醯基）胺曱醯基]-2-側氧基氮雜 環丁烷-3-基}胺基）-2-側氧基亞乙基]胺基}氧基）-2-甲基丙 144665.doc •64· 201026696 酸第三丁酯（C31)。 A·製備 2-(^(12)-2-(((35)-14((3^4,5-雙（苄氧基）》比 啶-2-基]-4_[(2*S>2,3-二羥基丙基]-5-側氧基-4,5-二氫-1丑一 . 1，2,4-三唑- l-基}磺醯基）胺曱醢基]-2-側氧基氮雜環丁 烷-3-基}胺基）-1-{2-[(第三丁氧基羰基）胺基]-1，3-噻唑-4-基}-2-側氧基亞乙基]胺基}氧基）·2-曱基丙酸第三丁酯 (C30)。根據針對實例3中合成C21之一般程序來製備化合 _ 物C30，不同之處在於使用C29替代C20。用曱醇使反應物 中止反應且在真空中濃縮後，藉由矽膠層析（梯度：於庚烷 中之25%至100°/〇乙酸乙酯，接著於乙酸乙酯中之〇%至7% 甲醇）純化殘餘物’得到呈固體狀之C30。產量：5.41 g， 5_14 mmo卜 53% 〇 LCMS w/z 1051.7 (M+1)。4 NMR (400 MHz, OUSO-d6) δ. 1.38 (s, 9H), 1.40 (s, 3H), 1.40 (s, 3H), 1.46 (s, 9H), 3.28 (m, 2H), 3.39 (dd, J=6A, 3.2 Hz, 1H), 3.68 (m, 2H), 4.03 (m, 1H), 4.11 (m, 1H), 4.92 (m5 1H), φ 5.28 (s, 2H), 5.30 (s, 2H), 7.25 (s, 1H), 7.31-7.50 (m, 10H), 7.58 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 9.00 (d, J=8.3 Hz, 1H)。 Β·製備C31。根據針對實例3中合成C22之一般程序來 製備化合物C31 ’不同之處在於使用C30替代C21，且在25 psi下將反應物氫化1.5小時，得到呈紅色固體狀之C31。產 量：3.49 g，4.00 mmo卜 95%。LCMS m/z 871.6 (M+1)。 144665.doc -65· 201026696 流程16

步驟 3.製備 2-({[(1Ζ)-1-(2-胺基-1,3-噻唑 _4·基）-2_ ({(35)-1-[({4-[(2*5)-2,3-二羥基丙基]-3-(5-羥基-4-側氧 基-1,4-二氫吡啶-2-基）-5-側氧基-4,5-二氫-1/ί-1,2,4-三 唑-l-基}磺醯基）胺甲醯基]-2-側氧基氮雜環丁烷-3-基}胺 基）-2-側氧基亞乙基]胺基}氧基）-2-甲基丙酸二鈉鹽（5)。 A_ 製備 2-({[(1Ζ)-1-(2-胺基-1,3-噻唑-4-基）-2-({(35)-1-[({4-[(25>2,3-二羥基丙基]-3-(5-羥基-4-側氧基-1,4-二氫 144665.doc •66- 201026696 吡啶-2-基）-5-側氧基-4,5-二氫-1/M，2,4-三唑- l-基}磺醯 基）胺甲醯基]-2-侧氧基氮雜環丁烷-3-基}胺基）_2_側氧基 亞乙基]胺基}氧基）-2-甲基丙酸C32。根據針對實例3中合 • 成3之一般程序來製備化合物C32，不同之處在於使用C31 . 替代C22。將粗產物溶解於二曱亞硬中至1〇〇 mg/mL濃 度’過濾，且藉由製備型HPLC(管柱：Waters Symmetry C8，5 μπι，30x5 0 mm ;溶劑A : 0.1%甲酸水溶液；溶劑 ❹ B :於乙腈中之〇‘1%甲酸。梯度：3%至23% B)純化。在保 持水浴<30°C下，於真空中濃縮屬於所要產物之溶離份’ 得到固體。將此固體溶解於乙腈（10 mL)與水（1〇〇 mL)之混 合物中’冷卻至-78°C且凍乾，得到呈粉色固體狀之C32。 產量：0.155 g，0.217 mmol，9%。LCMS w/z 715.2 (M+1)。H NMR (500 MHz, DMSO-<i6) δ 1.42 (s，3H)，1·43 (s, 3H), 3.27 (m, 2H), 3.37 (dd, 7=6.1, 3.1 Hz, 1H), 3.65 (m, 1H), 3.70 (m, 1H), 3.95 (m, 2H), 4.91 (m, 1H), 6.81 (s, Φ 1H)> 7 37 (s5 1H), 8.01 (s, 1H), 9.04 (d, /=8.3 Hz, 1H) ° HPLC 分析：Hewlett Packard 1100 ;管柱：Waters

Symmetry C8，5 μΜ，4 6x5〇 難；流動速率：i 2 mL/min;溶劑A: 〇·1%曱酸水溶液；溶劑B:於乙腈中之 0.1%曱酸，梯度：經6分鐘，5%至1〇〇% B ;注射體積· 15 PL ;積測：254 nm ;滯留時間：3 46油。 B.製備化合物5。根據針對合成實例4合成4之一般程序 g，0.204 mmol，97%。 來製備化合物S，不同之處在於使用⑶替代⑶，得到呈 粉色固體狀之5。產量：〇.155 144665.doc -67- 201026696 LCMS w/z 715.2 (Μ+l)。4 NMR (500 MHz，D20) δ 1·40 (s，3H)，1.42 (s，3H)，3.49 (dd，一半 ABX圖案，J=12.2, 4.9 Hz, 1H)，3.57 (dd，一半 ABX圖案，《/=12.2，3.7 Hz，1H)， 3.74 (m, 1H), 3.88 (m, 1H), 3.98 (m, 3H), 5.03 (m, 1H), 6.90 (s, 1H)，7.02 (s, 1H), 7.80 (s，1H)。HPLC分析：

Hewlett Packard 1100 ;管柱：Waters Symmetry C8，5 · μΜ ’ 4_6x50 mm ;流動速率：1.2 mL/min ;溶劑 A : 0.1% 甲酸水溶液；溶劑B :於乙腈中之01〇/o甲酸；梯度：經6分 鐘’ 5%至100% B ;注射體積：15吣；债測：254 nm ;滯 © 留時間：3.44 min。 實例6 製備 2-({[(1Ζ)-1-(2-胺基-1，3_噻唑 _4基）.Lap。4 [“3_ (5-羥基-4-側氧基-1,4-二氩吡啶_2_基）_4_[(2Λ) 2羥基丙 基】-5-側氧基-4,5-二氫-1开-1，2,4-三唑_；!_基}磺醯基）胺甲醢 基1-2-側氧基氮雜環丁烷-3-基丨胺基）_2•側氧基亞乙基】胺 基}氧基）-2-甲基丙酸二鈉鹽（6)。 〇

化合物6係由流程17至19中描繪及下文詳述之程序製 備。 144665.doc 68 . 201026696 流程17 OBn

OBn HO 、NH2

OBn 、N

HO OBn

步驟1.製備5·[4,5·雙（苄氧基）吨啶基]·4_[(27?)_2_經 基丙基]_2,4_二氮- 3/f-1，2,4 -二唾·3_酿j(C34)。 鲁 A.製備2-{[4,5-雙（节氧基）《比啶·2_基]幾基卜τν_[(2及)_2_ 經基丙基]肼甲醯胺（C33)。根據針對實例3中合成C19之一 般程序來製備化合物C33，不同之處在於使用（2及）_丨·胺基 丙-2_醇替代（2i〇-3-胺基丙-l，2-二醇，且將反應物加熱6〇 小時’得到呈白色固體狀之C33。產量：4.54 g，10.1 mmol > 84% 〇 LCMS m/z 451.2 (M+l) 〇 lu NMR (400 MHz, DMSO-J6) δ 1.00 (d, J=6.2 Hz, 3H), 2.91 (m, 1H), 3.01 (m, 1H), 3.61 (m, 1H), 4.64 (d, J=4.7 Hz, 1H), 5.33 (br s, 4H), 6.28 (dd, J=5.8 Hz, 1H), 7.31-7.49 (m, 10H), 7.69 (s, 1H), 7.93 (brs, 1H),8.28(S, 1H), 9.97 (br s, 1H) 〇 B·製備C34。根據針對實例3中合成c2〇之一般程序來 臬備化口物C34 ’不同之處在於使用替代。過濾固 體後，使其自甲醇m 50 mL)中再結晶，獲得經合併之兩批 C34。產量：36.5 g，84 4 ， . s δ4·4 mmo卜 74%。LCMS w/z 433.6 144665.doc •69- 201026696 (Μ+l)。'H NMR (400 MHz, DMSO〇 δ 0.98 (d，J=6.3 Hz， 3H)，3.81 (m，1H)，3.96 (dd，一半 ABX 圖案，/=13.3，5.3 Hz, 1H), 4.05 (dd, 一半 ABX圖案，·7=13·3，7.4 Hz，1H), 4.84 (d, J=5.1 Hz, 1H), 5.28 (s, 2H), 5.31 (s, 2H), 7.32-7.49 (m, 10H), 7.59 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 11.96 (br s, 1H)。 流程18

步驟2.製備2-({[(1Ζ)-1-{2-[(第三丁氧基羰基）胺 基]-1,3-噻唑-4-基}-2-({(35)-l-[({3-(5-羥基-4-側氧基-l，4-二氫D比啶-2-基）-4-[(2π)-2-羥基丙基]-5-側氧基-4,5-二 氫-1//-1,2,4-三唑-l-基}磺醯基）胺曱醯基]-2-側氧基氮雜環 144665.doc -70- 201026696 丁烷-3-基}胺基）-2-側氧基亞乙基]胺基}氧基）_2_甲基丙酸 第三丁酯（C36)。 A.製備 2-({[(1Ζ)-2-({(3幻-1-[({3-[4,5·雙（苄氧基）〇比 . 咬-2-基]-4-[(2Λ)-2-經基丙基]-5-侧氧基- 4,5-二氫-1//~1,2,4_ . 三。坐-1-基}續醯基）胺曱醯基]-2-側氧基氮雜環丁烧_3-基} 胺基）-卜{2-[(第三丁氧基幾基）胺基]_ι，3-嗓唾_4-基}_2-側 氧基亞乙基]胺基}氧基）-2-甲基丙酸第三丁酯（C35)。用氣 ❹ 化三甲基石夕烧（0.002 mL ’ 0.012 mmol)處理C34(l g，2.31 mmol)於 1，1，1，3,3,3-六曱基二矽氮烷（2.54 mL，u 6 mmol) 中之懸浮液’且在140°C下加熱混合物2小時。接著將黃色 溶液冷卻至室溫且在真空中濃縮，得到黃色膠狀物。在另 一燒瓶中’在0°C於氮氣下，用羰基胺磺醯氣（0.211 mL， 2.31 mmol)處理 C13(1.15 g，2.31 mmol)於二氣曱烷（2 mL) 中之懸浮液，且在〇〇C下攪拌1.5小時。混合物變成均質溶 液。用二氯甲烷（2 mL)處理自C34而得之物質，且將所得 〇 黃色溶液冷卻至-40°c並在氮氣下攪拌。經由注射器將經 冰冷卻之含C13反應混合物轉移至此溶液中。在_4〇t下攪 拌混合物30分鐘，經！小時升溫至室溫，且在室溫下攪拌2 '丨時藉由添加曱醇（5 mL)使混合物中止反應，在真空中 _ 移除'谷劑’且藉由矽膠層析（梯度：於乙酸乙酯中之〇%至 30/〇甲醇）純化粗物質，得到呈固體狀之C35。產量：丨42

g，1.37 mmo卜 59%。LCMS w/z 1035.7 (M+1)。4 NMR (400 MHz, DMSO-^) δ 0.95 (d5 J=5.8 Hz, 3H), 1.33-1.43 (m, 15H), 1.46 (s, 9H), 3.40 (m,lH), 3.71 (m, 1H), 3.77 (m, 144665.doc -71 - 201026696 1H)，3.95 (m，1H)，4.〇6 5·29 (s，2H), 5.31 (s，2H) 7.60 (s，lH)，8.36 (S，1H)，’ s，lH)。 ’ (m, 1H), 4.84 (d, J=5A Hz, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.31-7.51 (m, 10H), 9.02 (d, J=8.3 Hz, 1H), 11.85 (br B·製備CM。稂赭紅如办 很據針對實例3中合成C22之一般程序來 製備化合物C36 ’不同之處在於使用C35替代C21，且在25 psi下將反應物氫化1.5小時，得到呈紅色固體狀之C36。產 量：3.84 g，4.49 mmol ’ 88¾。LCMS w/z 853.0 (M-1)。 流程19

〇

144665.doc -72- 201026696 步驟 3.製備 2-({[(1Ζ)-1-(2-胺基-1，3-噻唑-4-基）-2-({(35>1-[({3-(5-幾基-4-側氧基- l，4-二氫"比咬 _2_ 基）_4· [(2及）-2-羥基丙基]-5-側氧基-4,5-二氫-1开-1，2,4-三唑-1_基} . 磺醯基）胺T醯基]-2-側氧基氮雜環丁烷-3-基}胺基）_2_側 . 氧基亞乙基]胺基}氧基）-2-甲基丙酸二鈉鹽（6)。 A.製備 2-({[(lZ)-1-(2-胺基-1,3-»塞唾-4-基）-2-({(35)-1-[({3-(5-羥基-4-側氧基-1，4-二氫》比啶_2-基）-4-[(2/?)-2-羥基 ❹ 丙基]_5_側氧基-4,5-二氫-l//-l，2,4-三唑-l-基}磺醯基）胺曱 酿基]-2-側氧基氮雜環丁烷_3_基丨胺基）_2_側氧基亞乙基] 胺基}氧基）-2-甲基丙酸C37。根據針對實例3中合成3之一 般程序來製備化合物C37，不同之處在於使用C36替代 C22。將粗產物溶解於二曱亞礙中至1〇〇 mg/mL濃度，過 滤’且藉由製備型.HPLC(管柱：Waters Symmetry C8，5 μιη，3 0x50 mm ;溶劑A : 0.1 %曱酸水溶液；溶劑B :於乙 腈中之0.1%曱酸；梯度：6%至26% B)純化。在真空中濃 粵 縮屬於所要產物之溶離份，得到固體，將其溶解於乙腈 (10 mL)與水（1〇〇 mL)之混合物中，冷卻至_78°C且凍乾， 得到呈粉色固體狀之C37。產量：0.130 g，0.186 mmol， d6) δ 0.97 (d, /=6.1 Hz, 3H), 1.43 (s, 3H), 1.43 (s, 3H), 3.38 (dd, J=6.3, 3.2 Hz, 1H), 3.69 (dd, J=6A, 6.1 Hz, 1H), 3.78 (m, 1H), 3.86 (m, 1H), 4.91 (m, 1H), 6.83 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 9.08 (d, 7=8.3 Hz, 1H) ° B_製備6。根據針對實例4合成4之一般程序來製備化合 144665.doc -73- 201026696 物6，不同之處在於使用C37替代C27，且將起始物質〔37 溶解於甲醇（20 mL)中，進行音波處理5分鐘，且在真空中 濃縮。將此過程重複三次，隨後進行反應。獲得呈粉色固 體狀之化合物6。產量·· 〇.15〇 g，〇 2〇2 mmol，96%。 LCMS m/z 699.8 (M+l) 〇 ln NMR (400 MHz, DMSO-i/6) δ 0.95(d，*/=5_3Hz，3H)，1.41(s，3H)，1.49(s,3H)，3.3〇- 3.40 (m，1H，假定；由水峰遮蔽;）3·82 (m，1H)，3 97 (m， 3H)，5.11 (m，1H)，6.78 (s，1H)，7.19 (br s，1H)，7.36 (s， 1H)，7·88 (s，1H)。 實例7 製備 2-({[(lZ)-l-(2胺基 _1，3_嗔吐-4-基） 羥基 -4-側氧基 -1，4-二 氩吡啶 -2-基 ）-4-[(25>2-羥基丙 基]-5-側氧基-4,5-二氫-1丑·1，2,4-三唑-l-基}磺醢基）胺甲醢 基]-2-側氧基氮雜環丁烷-3-基}胺基）-2-側氧基亞乙基]胺 基}氧基）-2-甲基丙酸二鈉鹽（7)。

化合物7係由流程20至22中描繪及下文詳述之程序製 備0 144665.doc -74· 201026696 流程20

步驟1.製備5-[4,5-雙（苄氧基）吡啶_2_基]-4-1(2^)-2-羥基 丙基]-2,4-二氣-3//~1，2,4-三°坐-3-網（(^39)。 A. 製備2-{[4,5-雙（苄氧基）η比咬_2_基]叛基卜^_[(2s)_2_經 基丙基]肼曱醯胺（C38)。根據針對實例3中合成C19之一般 程序來製備化合物C38，不同之處在於使用（Μ) — 〗 —胺基 丙-2-醇替代（2i〇-3-胺基丙十2_二醇，且將反應物加熱12 • 小時，得到呈白色固體狀之C38。產量：12.56 g，27.88 mmol，87〇/〇 〇 LCMS w/z 451.6 (M+l) 〇 NMR (400 MHz, DMSO-^) δ 1.00 (d, y=6.2 Hz, 3H), 2.91 (m, 1H), 3.01 (m, * m)，3 61 (m，1H)，4 65 (d，>4.7 Hz，1H)，5·33 (s’ 4H)， 6.28 (dd，>5.8 Hz，1H)，7 317 料（m，蘭)，7 69 (s，间 7-93 (br s, 1H),8.28 (s, 1H), 9.99 (br s, 1H) 〇 B. 製備C39。根攄斜盤杳，丄 針對實例3中合成C20之一般程序來製 備化合物C39 ’不同之虑少 爻處在於使用C38替代C19,且將反應 匆力…18小時’ 4到呈紅色固體狀之C39。產量：4.25 144665.doc -75- 201026696 g，9.82 mmol，95%。LCMS m/z 433.3 (Μ+l)。4 NMR (400 MHz, DMSO-J6) δ 0.98 (d, /=6.3 Hz, 3H), 3.85 (m, 1H), 3.98 (m, 1H), 4.07 (m, 1H), 5.28 (s, 2H), 5.31 (s, 2H), 7.31-7.49 (m, 11H)，7.60 (s, 1H), 8.32 (s, 1H)。 流程21

步驟2.製備2-({[(1Ζ)-1-{2_[(第三丁氧基羰基）胺 基]-1,3-噻唑-4-基}-2-({(35>1·[({3-(5-羥基-4-側氧基-1,4-二氫。比啶-2-基）-4-[(2S)-2-羥基丙基]-5-側氧基-4,5-二 氫-1//-1,2,4-三唑-l-基}磺醯基）胺曱醯基]-2-側氧基氮雜環 144665.doc -76- 201026696 丁烷-3-基}胺基）·2-側氧基亞乙基]胺基}氧基）-2-曱基丙酸 第三丁酯（C41)。 A.製備 2-({[(lZ)-2-({(3<S)-l-[({3-[4,5_ 雙（苄氧基）比 啶-2-基]-4-[(2<S)-2-羥基丙基]-5-側氧基-4,5-二氫-1^-1,2,4-三唑-l-基}磺醯基）胺甲醯基]-2-侧氧基氮雜環丁烷-3-基} 胺基）-1-{2-[(第三丁氧基羰基）胺基]_ι，3-噻唑-4-基}-2-側 氧基亞乙基]胺基}氧基）-2-甲基丙酸第三丁酯（C40)。根據 針對實例6中合成C35之一般程序來製備化合物C40，不同 之處在於使用C39替代C34。藉由添加甲醇（3 mL)使混合物 中止反應後’在真空中移除溶劑，且藉由矽膠層析（梯 度：於乙酸乙酯中之0%至3%甲醇）純化粗物質，得到呈黃 色固體狀之 C40。產量：〇.71 g，〇 685 mmol，44%。 LCMS m/z 1035.6 (M+l) 〇 ]H NMR (400 MHz, OMSO-d6) δ 0.96 (d, ·7=6.2 Hz，3H)，1.38-1.47 (m，假定 24H)，3.40 (dd, •/=6.2，3.1 Hz，1H)，3.71 (m，1H), 3 78 (m，1H)，3 95 (m， Φ 1H)，4.07 (m，1H)，4.83 (d，*/=5.5 Hz，1H)，4.91 (m，1H)，

s，1H)。

接著丙酮預洗滌， 藻土經1 N鹽酸水溶液、接著去離子水、 ，且接著乾燥）進行過濾。獲得呈紅色固 144665.doc -77- 201026696 體狀之化合物 C41。產量：0.630 g，0.7 mmol，100%。 LCMS m/z 855.1 (M-1)。 流程22

步驟 3·製備 2-({[(1Ζ)-1-(2-胺基-I，3-噻唑 _4_ 基 羥基 -4- 側氧基 -1，4- 二氫 。比啶 -2- 基 ）-4-[(25)-2-羥基丙基]_5_側氧基_4,5_二氫4//-1,2,4-三唑-1-基} 磺醯基）胺曱醯基]-2-側氧基氮雜環丁烷-3-基}胺基）-2-側 氧基亞乙基]胺基}氧基）_2·曱基丙酸二鈉鹽（7)。將 C41(0.630 g’ 0.76 mmol)於二氯甲炫（0.5 mL)中之溶液冷 卻至〇°C ’且用三氟乙酸（3.4 mL)處理。將混合物升溫至室 溫且攪拌18小時；接著將反應混合物緩慢地逐滴添加至甲 基-第三丁基醚（10 mL)與庚烷（20 mL)之攪拌溶液中。過濾 所得固體’在真空中乾燥，溶解於二甲亞颯（1 mL)中且經 由逆相層析（RediSep RF C18管柱，65 g ;溶劑A : 〇.1〇/0甲 酸水溶液；溶劑B :於乙腈中之0.1%曱酸；梯度：5%至 144665.doc •78- 201026696 25。/。B)純化。在真空中濃縮屬於所要產物之溶離份，得到 固體。在甲醇中對該固體進行音波處理且移除溶劑（此進 行4次），得到呈白色固體狀之游離形式物質。產量·· 0.103

g，0.147 mmol，19%。LCMS w/z 699.0 (M+1)。4 NMR (500 MHz, DMSO-<i6) δ 0.95 (d, /=6.1 Hz, 3H), 1.43 (s, 3H), 1.44 (s, 3H), 3.38 (dd, J=6.5, 3.3 Hz, 1H), 3.70 (dd, J=6.1, 6.1 Hz, 1H), 3.77 (m, 1H), 3.86 (m5 2H), 4.91 ( m, φ 1H), 6.82 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 9.06 (d, /=8.8 Hz, 1H)。將游離形式之合併批料（0.676 g，0.92 mmol)與 10 mL去離子水一起置於圓底燒瓶中。將懸浮液在冰浴中 冷卻至0°C，且向此混合物中（逐滴）添加〇.1 54 g碳酸氫鈉 於1.0 mL水中之溶液。攪拌懸浮液，直至所有固體溶解為 止。接著冷凍及凍乾溶液，從而得到0.680 g呈淺粉色固體 狀之化合物 7。LCMS m/z 699.6 (M+l)。4 NMR (500 MHz, O20-d6) δ 1.01 (d, J=8.5 Hz, 3H), 1.32 (d, J=6.0 Hz, φ 6H), 3.61-3.70 (m, 2.5H), 3.77 (dd, ABX, J=18.5 Hz, 4.0 Hz, 0.5H), 3.88 (t, J=8.0 Hz, 1H), 4.90 (dd, J=7.5 Hz, 4.5 Hz, 1H), 6.80 (s, 1H)，6.93 (s，1H), 7.71 (s，1H)。 實例8 製備 2-({[(lZ)-l-(2-胺基-1，3-噻唑-4-基）-2，（{(3S)-l-【({4-[(1,5-二甲基-1H-吡唑-3-基）甲基]-3-(5-羥基-4-侧氧基-1，4-二氩吡啶-2_基）-5_側氧基-4,5-二氩·1Η-1，2,4-三唑-1-基}磺 醢基）胺甲醯基卜2_侧氧基氮雜環丁烷-3-基}胺基）-2-側氧基 亞己基】胺基}氧基）-2-甲基丙酸（8)。 144665.doc •79· 201026696 ο

8 化合物8係由流程23中描繪及下文詳述之程序製備。 流程23

C13 OBn

144665.doc -80- 201026696 A.製備C43(偶合方法2)。以與針對實例1中製備C8所述 類似的方式來製備化合物C42，從而得到0.67 g(0.72 mmol)呈白色固體狀之三唑酮C42。LCMS w/z 483.4 (M+1)。在23°C於氮氣下，用氣化三甲基矽烷（一滴’ m pL，0.001 mmol)處理 C42(0.100 g，0.207 mmol)於六甲基 二石夕烧胺化物（0.227 mL，1.04 mmol)中之懸浮液。在 140°C下加熱混合物2小時；加熱後，反應物即變成澄清棕 色溶液。將混合物冷卻至室溫且在高真空下保持1小時， 從而產生棕色玻璃狀物質。獨立地，在〇°C於氮氣下，用 氣磺醯基異氰酸酯（0.019 mL，0.207 mmol)處理C13(0.103 g，0.207 mmol)於二氣甲烷（0.1 mL)中之懸浮液且攪拌， 直至混合物變得均質為止（約5分鐘）。在0 °C下攪拌溶液1.5 小時。用DCM(0.2 mL)處理經矽烷化之三唑啉酮（〇·2〇7 mmol)，將棕色溶液冷卻至-4(TC且在氮氣下授拌。接著經 由注射器將所製備之胺磺醯氯溶液（0.1 mL，0.207 mmol) 轉移至由C42製備之複合物中，且在-4(TC下攪拌混合物30 分鐘，經1小時升溫至室溫且在室溫下攪拌2小時。藉由添 加曱醇（0.5 mL)使混合物中止反應，在真空中移除溶劑， 且藉由管柱層析（矽膠，於二氣甲烷中之5%曱醇）純化粗物 質，得到 0.050 g(22%)C43。LCMS m/z 1085· 1 (M+1)。 NMR (400 MHz, DMSO-^6) δ 1.34-1.48 (m, 24Η), 2.06-2.10 (m, 1H), 2.25-2.28 (m, 1H), 3.40-3.44 (m, 1H), 3.55 (s, 1H), 4.92 (br. s, 1H), 5.20-5.63 (m, 4H), 5.56-5.63 (m, 1H), 7.25 (d, J=4.9 Hz, 1H), 7.28-7.50 (m, 10H), 7.58 (s, 1H), 144665.doc -81 · 201026696 8.33 (s, 1Η)，9·01 (br. s，2H)。 B.製備 2-({[(lZ)-l-(2-胺基 _1，3-噻唑基）_2-({(3S)-l-[({4-[(l,5-二甲基-1H-吡唑-3-基）甲基]_3_(5_羥基_4_侧氧 基_1，4-二氫°比咬-2 -基）-5-側氧基-4,5 -二氫_ιΗ-1,2,4 -三 。坐- l-基}績酿基）胺甲酿基]-2-側氧基氮雜環丁院_3_基}胺 基）-2-側氧基亞乙基]胺基}氧基）-2-曱基丙酸（8)。以與針 對實例1中化合物1所述類似的方式脫除化合物C43之保護 基且進行HPLC純化，從而得到0.015 g(9%)呈粉色固體狀 之化合物 8。LCMS w/z 748.9 (M+1)。4 NMR (500 MHz，❹ DMSO-^) δ 1.41 (s, 3H), 1.41 (s, 3H), 2.39 (s, 1H), 3.55 (s, 3H), 3.67 (m, 1H), 3.91 (dd, J=6.3, 6.3 Hz, 1H), 5.05 (m, 1H), 5.58 (s, 2H), 6.73 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.34 (br s, 1H), 7.80 (s5 1H), 9.10 (d, j=8.〇 Hz, 1H), 11.85 (s, 1H) 〇 其他實例9至30展示於下表騎，且與上述實例類似地， 使用環化方法1(實例1步驟祀所述）或環化方法2(實例4步驟 斤述）結合偶合方法1(實例丨步驟6A所述）或偶合方法 2(實例4步驟1B所述）來製備。 〇 144665.doc •82· 61 02 1X 20 ¢3 •-屮 HJ 4»L I of § 5 I w 0.76 (t, J=7.5 Hz, 3H), 1.42 (br s, 6H), l.5l (m, 2H), 3.37 (dd, J=6.2, 3.3 Hz, lH), 3.69 (dd, J=6.6, 6.6 Hz, lH), 3.94 (t, J=7.5 Hz, 2H), 4.91 (m, lH), 6.81 (s, lH), 7.34 (s, lH), 8.01 (s, lH), 9.06 (d, J=7.9 Hz, lH) 1.43 (s, 6H), 3.28 (m, 2H), 3.38 (m, 1H), 3.65 (m, 1H), 3.70 (dd, J=6.2, 6.2 Hz, 1H), 3.93 (m, 2H), 4.91 (m, 1H), 6.82 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 9.06 (d, J=7.9 Hz, 1H) ； 715.5 (M+l) IUPAC名稱 2-({[(lZ)-l-(2-胺基-l，3-噻唑-4-基)-2-{[(3S)-l-({[3-(5-羥基-4-側氧基-l，4-二鼠°比°定-2-基)-5-側氧基-4-丙基-4,5-二氫-lH-l，2,4-三唑-I-基]磺醢基}胺曱 醢基)-2-側氧基氮雜環丁烷-3-基]胺基}-2-側氧基亞乙基]胺 基}氧基)-2-甲基丙酸 1 2-({[(lZ)-l-(2-胺基-1，3-噻唑-4-基)-2-{[(3S)-l-({[4-(2,3-二羥基 丙基)-3-(5-經基-4_側氧基-1，4-二ISJσ比tί定-2-基)-5-側乳基-4,5· 二氫·1Η-1，2,4-三唑小基]磺醯 基}胺甲醯基)-2-側氧基氮雜環 丁烧-3·基]胺基}-2-側氧基亞乙 基]胺基}氧基)-2-甲基丙酸 結構 d 〇 Ν，0 Η (^Ύ〇Η W 0 ^-NYN、Sz>O、 0 CM -Uo' r° Λ XV° V° 工 z— z 〇 工 環化方 法、偶 合方法 I λ 1—^ On 0 I44665.doc -83 · 20 (I-s) r9p ί (HrsJessod •(HZMJq) οε·卜。(Hrs) 900.9 ZHI ίβ 90·9 *(HI iq) 009·$ Xhi f日)ει·寸 XHrq巨) οοί.ε Xil镩#·^-®κι>·^ϊ# 96日)9ετ-π.ε Χηζ 巨)6001 6 (Hz 巨)00ζ;二(Ηεβ)6εΊ 26(ΗεΜ)οοο :^脊糊茫 ο (Ιί) ςο寸卜：(ΗΐΜ) SOOZHI ^os.z/(H's) 68.9 XHrs) 寸γ^(η<ν，ζη 17·ς=ί"0Ιιη·寸 ί I 虿 9ν9·9=ΓΡΡ)<Ν6.ε ΧΗ<ΝΝΗ 寸·ς=Ί) 99·ε t(HI (ΖΗ 9 V9_9=f》ρ) 6S ί 寸 巨)6Γ£ ΧΗεβ)9Γ I .(Ηε egg.I tH9^ss<二日)ιη£·Ι -ζζ·ί :迴喹IF^QoslAt) 邈肊'fB--(N-(f^{^缕59 亞 硪碱¥-3-{硪^3-£-^卜蛑耱 Ί^^ί#-3-(砩饍®-集{蚴饍努 【砩-I-fiT -寸-iI-HI-Ί ΜΛ寸 -(砩«0砩-1-^^fd-寸-硪龢軍 • sl(^lCSJ-^d2。^·^4v^^¥ -寸-砩澈-9)-£】})-1-(8^}-3-(硪 -寸-?ώΑ 二-砩集ά-Ι-(ΖΙ)】}Η ®--(N-(蝴龢{硪鍥【硪0辟硪碱 ¥3-(砩鍩{蝴-ε-^hfi 赛 Ί 硪 碱革-3-【硪鳕6-鍥(砩饍资{硪 碱蓴-又砩-<N-^f Ί 寸二-硪 减 ί#4-^^ά-ε-【^ο(械锘 蝴οΜ)ά_ 寸})H-(SS)-<N-(砩 -t-fe^-s-f^d-HZsvz: Θ

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< 所選峰值：1.42 (br s, 6H)，| 3.36 (m, 1H), 3.48 (t, J=5.3 Hz, 2H), 3.70 (dd, J=6.2, 6.2 Hz, 1H), 3.97 (m, 2H), 4.14 (m, 1H), 4.91 (m, 1H), 6.78 (br s, 1H), 7.34 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 9.02 (d, J=7.8 Hz, 1H) 1.00 (s, 6H), 1.42 (s, 6H), 3.37 (m, 1H), 3.69 (dd, J=6.2, 6.2 Hz, 1H), 3.96 (s， 2H), 4.91 (m, 1H), 6.75 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 8.98 (d, J=8.6 Hz, 1H) ； 713.2 (M+l) 2-({[(tZ)-l-(2-胺基-1,3-噻唑-4-基)-2-({(3S)-l-[({3-(5-羥基-4-側氧基二氮吼13定-2-基)-5-側氧基~4- [(2R)-四氮σ夫β南-2-基 甲基]-4,5-二氫-1Η-1，2Λ三唑_ 1-基}磺醢基)胺甲醢基]-2-側氧 基氮雜環丁烷-3-基}胺基>2-側 氧基亞乙基]胺基}氧基)-2-甲 基丙酸 Ν §砩i i 5婕叟 A砩ι3矿资鴒朗 〇 D χ/ό Η J A CM )=\ 〇=< Z 工 '入 x )==° 弋Λ C4 <N <N <N

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6CNI οε 144665.doc •93- 201026696 生物性質 在一些實施例中，本發明之化合物對細菌展現乾向且有 效之活性。因此，本發明之化合物可用於例如治療及/或 預防人類及動物體内之病原性細菌所致的多種疾病。 下表1展示針對綠膿桿菌、肺炎克雷伯氏菌及鮑氏不動 桿菌之指定菌株的活體外MIC數據。菌種保存中心之菌株 1045-06對包括碳青黴烯、胺基醣苷及氟喹諾酮之數類已 知抗微生物劑具抗性’而菌株1000-02及3 1 67對頭孢菌素 具抗性。菌株PA0200為實驗室菌株PAOl之衍生物’其缺 乏功能性MexAB-oprM流出泵。所列化合物對全部三種此 等篩選菌株具有高活性，證實其對革蘭氏陰性細菌性病原 體的廣泛活性。

表1 :實例1至3〇之MIC 實例 號 針對綠膿桿菌 1045-06之 MIC(mg/mL) 針對肺炎 克雷伯氏菌 1000-02之 MIC(mg/mL) 針對鲍氏 不動桿菌3167之 MIC(mg/mL) 針對綠膿桿菌 PA0200 Mex AB-oprM KO 之 MIC(mg/mL) 1 N.T. N.T. N.T. <0.0625 2 N.T. N.T. N.T. 0.1881 3 0.5 0.5 0.5 N.T. 4 0.5 1 1 N.T. 5 0.25 0.5 0.5 N.T. 6 0.25 0.5 1 N.T. 7 0.25 0.25 1 N.T. 8 32 8 >64.0 N.T. 9 N.T. N.T. N.T. <0.0625 144665.doc • 94- 201026696

Ο 10 N.T. N.T. N.T. 0.251 11 N.T. N.T. N.T. 16 12 2 2 16 N.T. 13 0.25 0.25 16 N.T. 14 0.5 0.06 2 N.T. 15 0.5 0.5 4 N.T. 16 0.5 0.5 2 N.T. 17 0.25 0.25 1 N.T. 18 2 1 ------- 8 N.T. 19 0.5 0.25 __ 2 N.T. 20 0.5 0.25 2 N.T. 21 4 32 >64.0 N.T. 22 0.5 0.5 2 N.T. 23 0.5 0.25 1 N.T. 24 0.5 0.25 2 N.T. 25 0.5 0.5 4 N.T. 26 0.5 0.125 2 N.T. 27 1 1 2 N.T. 28 2 0.5 4 N.T. 29 2 0.5 >64 N.T. 30 0.5 8 1 N.T. Ν.Τ. =未測試 144665.doc -95- 1 值表示2個MIC測定值之平均值。 下表2展示與頭抱"比肪（指定為治療綠膿桿菌所致之細菌 感染的頭孢菌素抗生素）、亞胺培南（用於治療綠膿桿菌所 致之感染的碳青黴烯抗生素）及比較實例A( 1988年9月7曰 公開之EP 0281289中之實例23)相比的數種本發明化合 201026696 物。 表2:針對綠膿桿菌之活體外及活體内比較 OH X p: 化合物 結構(R1) Ρα 1091-05 MIC (mg/mL) RTIPD50 對比 Pa 1091-05 (mg/kg) (95%信賴區間） Pa MIC901 頭孢吡肟 2 22 64 亞胺培南 … 0.5 1.04 >64 比較實例A -ch3 0.5 >150] 1 實例15 0.5 >70.8 1 實例6 OH 0.125 32.7(23.7至 42_0) 1 實例7 0Η 0.125 15.7(8.455.22.96) 1 實例3 6η 0.125 20.6(8.7 至32.52) 1 實例5 OH 0.125 18.6(8.94 至28.29) 1 實例4 、/γΝΗ2 0 0.125 25.0(24.8 至 25.2) 1 7數據係來自先前實驗 144665.doc •96- 1 91臨床分離株 201026696 表2展示在鼠類呼吸道感染模型中針對綠膿桿菌ι〇91_〇5 之功效而評估的本發明化合物之結果。對於此模型，在相 對於激發之-4日及-1日，分別經口給與15〇 111§/]^及1〇〇 mg/kg環填醯胺（cyclophosphamide)對C3H/HeN小鼠進行免 疫抑制。用異氟醚（isoflurane)(氧氣中5%)麻醉小鼠，且經 由鼻内滴注以40 pL體積將細菌接種原給與各小鼠（每隻小 鼠約2.8X 1 03 cfu)。用經由皮下注射投與之化合物對小鼠進 行給藥’皮下注射在激發後四小時開始，且持續兩天BID @ 療法。在十日内追蹤致死率，且測定5〇%保護劑量 (PD50)。包括關於已知單環卡汴原型之解釋性評論。比較 實例A( 1988年9月7日公開之EP 0281289中之實例23b)在此 模型中通常具有21〇〇 mg/kg之pd50。然而’在此模型中評 估所例示之本發明單環卡汴，且許多者相較於比較實例A 顯示更佳功效，例如實例4(25.0 mg/kg)、實例6(32.7 mg/kg)、實例 5(18.6 mg/kg)、實例 3(20.6 mg/kg)及實例 7(1 5·7 mg/kg)。 PDsq為化合物保護小鼠免遭致命感染之能力的量度。由 此’在此研究中’較低值指示改良之功效。由於針對化合 物實例3、實例6、實例4、實例7及實例5所計算之95%信 賴區間（預測實際值將處於95%信賴度内的範圍）不與針對 比較實例A所測定之PDw值相一致，因此可推斷此等化合 物相對於比較實例A更顯著有效。鑒於針對所用病原體（綠 腹桿菌1091-05)的MIC類似，此結果為出乎意料的。重要 的是’在此等臨床前活體内模型中之效能預測針對此等類 型感染之臨床功效的結果。 144665.doc •97·

Claims (1)

1. 201026696 七、申請專利範圍： 1. 一種式（I)化合物，

   或其醫藥學上可接受之鹽；其中： R1為經1至3個選自由齒基、羥基、（Ci_c6)烷氧基、 _NR R、-c(=〇)nr7R8組成之群的取代基取代之（c丨-c6) 烷基，及3至7員雜環，其中R7及R8獨立地為氫或（C1_C6) 烧基’其中該雜環含有丨至3個獨立地選自〇、N或S之雜 原子； R2為氫或曱基； ❹ r3為氫或甲基； R4為視情況經1至3個獨立地選自F或C1之取代基取代 的氫、氘或甲基； * R5為視情況經1至3個獨立地選自F或C1之取代基取代 的氫、氘或曱基； r6 為 Η或-C(=0)〇H ;且 X為 C(H)、C(F)、C(C1)或 N。 2.如請求項1之化合物，其具有式（ΙΑ): 144665.doc 201026696

   或其醫藥學上可接受之鹽。 3· 求項丨或2之化合物’或其醫藥學上可接受之鹽，其 R2為氫； R3為氫； R4為曱基； r5為甲基； R6為-C(=〇)〇h ;且 x為 C(H)。 4. 如請求項1或2之化合物，或其醫藥學上可接受之鹽，其 中R1為經1至3個選自由鹵基、羥基、-NH2、-C卜(^Νη 組成之群的取代基取代之（Cl-C0)烷基，及3至7員雜環，' 其中該雜環含有1至3個獨立地選自Ο、N或S之雜原子。 5. 如請求項1之化合物，其為：

   144665.doc 201026696 或其醫藥學上可接受之鹽。 6.如請求項1之化合物，其為： OH

   ® 7.如請求項1之化合物，其為：

   或其醫藥學上可接受之鹽。 _ 8.如請求項1之化合物，其為： OH

   或其醫藥學上可接受之鹽。 9.如請求項1之化合物，其為： 144665.doc 201026696 OH

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   或其醫藥學上可接受之鹽。 10.如請求項1之化合物，其為式（IB): OH

   (旧) 其中R1係選自由以下組成之群： 、〜I，、〜〇，、〜Ο ’、^ΧΟΗ, ζ VVnn- V^〇f3 、〜一， h ， ，x ΪΗ， 、八乂，\〜〇、，νγ"Η2，’ cy^ 、〜Ί，S^OH， 144665.doc -4- 201026696

   ，及其醫藥學上可接受之鹽。 11. 一種醫藥組合物，其包含如請求項1至10中任一項之化 合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可接受之載 _ 劑。 12. 如請求項1至10中任一項之化合物或醫藥學上可接受之 鹽的用途，其係用於製造抗細菌藥物。

   144665.doc 201026696 四、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明： ❿ 五、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：

   144665.doc