TW200934482A

TW200934482A - Compositions containing o-sulfate and o-phosphate containing aryl sulfonamide derivatives useful as β -amyloid inhibitors

Info

Publication number: TW200934482A
Application number: TW098100349A
Authority: TW
Inventors: David Zenan Li; Dane Springer; Sayed Elmarakby; Appavu Chandrasekaran; Anthony F Kreft Iii
Original assignee: Wyeth Corp
Priority date: 2008-01-11
Filing date: 2009-01-07
Publication date: 2009-08-16
Also published as: AR070120A1; WO2009089237A1; US20090181932A1; PA8811701A1; CL2009000019A1

Description

200934482 六、發明說明： L發明所肩技領域3 發明領域 5 - 10 15 ❿ 20 本發明係有關於含有作為yS -澱粉樣蛋白抑制劑之含 0-硫酸鹽及0-磷酸鹽之芳基磺醯胺衍生物的組成物。 I：先前技術1 發明背景本發明係有關於可用以治療阿滋海默氏症(Alzheimer，s disease)及/或癌之冷澱粉樣蛋白抑制劑的製法。冷-殿粉樣蛋白前媒蛋白質（APP)及Notch受體係藉早老素(Presenilin)依存性7 -分泌酶而進行膜内蛋白分解。藉 7* -分泌酶而進行APP之分裂可釋放業經涉及阿滋海默氏症以及多種其它病症、與該APP細胞内結構域之發病的澱粉樣蛋白-/5胜肽。該Notch受體之類似的經7_分泌盼媒介之分裂可釋放Notch細胞内結構域(NICD)。NICD可移位至核並活化可調節神經元細胞之產生、分化、及存活的基因之轉錄。因此，APP傳訊之部份作用及阿滋海默氏症（AD)業經描述成可藉APP及Notch之交互作用而媒介。迄今’數種小分子藥物業經描述成可抑制万殿粉樣蛋白產生。此等藥物包括，諸如美國專利US 6,878,742及US 6,610,734中所述之雜環狀磺醯胺化合物及，諸如us 7,300,951及US-2007-0254929-A1中所述之含氟-及三氟烷基之雜環狀磺醯胺化合物。又其它藥物包括US 7，166,622 中所描述之苯基磺醯胺、或US-2005-0171180中所描述之 3 200934482 藥物。最近，7分泌姆抑制劑(GSI)之用途業經描述成可藉減乂抗體產生而用以治療青光眼。例如見Η。。刪Aead抓 1〇4 1344 (2〇〇7)°GSl可影響用於治療特定癌形式之Notch 5 處理過程。本項技藝料可料抑御·祕樣蛋自、調節Notch 活性、及/或其它指數之替代化合物。【赛^明内笔^】發明概要 0 纟發明係描述—系列下文提供之式(I)及式(II)含〇_硫西夂鹽之芳基或雜芳基續醯胺衍生物、及〇_磷酸鹽衍生物。 :^些式包括可提供另外的投藥方式及經設計可提供更佳藥物動力學特性，例如吸收性、生體可用率及較長半衰期之前藥。 5 在一實施例中，這些化合物經調配成可作為得自app 之/3澱粉樣蛋白的抑制劑之藥學組成物。在另一實施例中，係提供使用文中提供之化合物及/或組成物以治療由於沒澱粉樣蛋白含量增加所引起的生理病症（例如AD、唐氏症候群(D〇vvn，s Syndrome))之方法。 ° 在又另一實施例中，這些化合物經調配成可用以治療與Notch處理過程相關之癌的藥學組成物。提供一種使用這些化合物以治療此等癌症之方法。在另一方面中，係描述藥學套組。該等套組具有一包括文中所述藥學組成物之容器。 200934482 之方^又另—方面中，係提供用於製備式⑴或式(η)化合物途及私自Μ實财式可《瞭解。較佳實施例之詳細說明提供含式邮化合物等化合物可用於抑制容易愛與=: ❹ 10 殺粉樣蛋白的其它疾病侵襄或羅患此等病症的=万澱粉樣蛋白產生。該等式1 ' 之可接受鹽及/或水合物，其中化°物包括其等之藥學上

π 0 〇-

or4_ 、or、4 ❿ 15 R1為經取代芳基或經取代雜芳基； R2及R3係獨立選自w 其下所組成之群組：CF3、經取㈣基、Q-c4烷基、經取代、、錄代本 (CF3)n(經取代^ ▲ (CF3)nCl.C4燒基、及當R2或R3為cf3時，‘」為1至3 ;但其限制條件為且一個並非未經取代之烷基； K·4及R4,係獨立撰6、 .... 選自以下所組成之群組.·Μ、（： r h 基、苯基、及苄基，龙^ 1 1丨々烷其中Μ為-選自鈉、鐘、舞、鎂及卸 200934482 之金屬離子；或可形成1生自C2 3 α，ω二賴構或兒茶紛付生物之環狀膦酸鹽結構。在-實施例中，該環狀結構係選自以下所組成之群組：

在式II中’點之半圓代表可供欲獨立如文中定義或—起連 ❽ 接以形成如所述環狀結構之r4m4，的選擇。在實施例中’ R】為可分別形成經取代苯基橫醯胺、 10經取代塞$ 4酿胺或經取代彳卜^基續醯胺之經取代苯基、經取代01吩或經取代„比咬基，且於該礙之s立體化學性具有該磺醯胺之氮原子。 1 該等藥學上可接受鹽為衍生自以下有機與無機鹼，諸如氫氧化納、碳酸氫鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣、氫氧化鎂、 15 氫氧化鐘、二乙醇胺、乙二胺及類似之已知可接受鹼的鹽類。 ® 文中使用之該名詞“烷基，，係兼指直鏈-及分支鏈飽和脂肪族經基。在一實施例中，烷基具有1至約8個碳原子（亦即 C!、c2、c3、c4、C5、C6、（：7或(：8)。在另一實施例中，烧基具有1至約6個碳原子（亦即C!、c2、C3、C4、C5或C6)。在 20 另一實施例中，烷基具有1至約4個碳原子（亦即Ci、C2、C3 及 c4)。文中使用之該名詞“環烷基”係指環狀、飽和脂肪族羥 6 200934482 基。在一實施例中，環烷基具有3至約8個碳原子（亦即Cs、 C4、C5、Q、C7或C8)。在另一實施例中，環烷基具有3至約6個碳原子（亦即C3、C4、C5或C6)。該等名詞“經取代烷基”及“經取代環烷基，，係分別指具 5 有或多種取代基’其包括，但不限於氫、鹵素、CN、OH、 N〇2、胺基、芳基、雜環狀、烷氧基、芳氧基、烷羰基、烷緩基、烷胺基、及芳硫基之烷基及環烷基。 ^ 如文中使用之該名詞“芳硫基，，係指S(芳基），其中之連接點係經由該硫原子且該芳基可如文中所述經取代。

- 1 Q 如文中使用，該名詞“烷氧基，，係指〇(烷基），其中之連接點係經由該氧原子且該炫基可如文中所述經取代。 ' 如文中使用，該名詞“芳氧基”係指0(芳基），其中之連接點係經由該氧原子且該芳基可如文中所述經取代。如文中使用，該名詞“烷羰基，，係指C(〇)〇(烷基），其中 15 之連接點係經由該羰基分子團之碳原子且該烷基可如文中 0 所述經取代。如文中使用，該名詞“燒叛基’’係指C(〇)〇(院基），其中之連接點係經由該羧基分子團之碳原子且該烷基可如文中所述經取代。 20 如文中使用，該名詞“烷胺基，，兼指第二及第三胺，其中之連接點係經由該氮原子且該烷基可如文中所述經取代。該等烷基可相同或不同。如文中使用，該名詞‘‘齒素，，係指（：1、加、？或1基團。如文中使用，該名詞“芳基，，係指，例如具有約6土至⑷固 7 200934482 碳原子之芳香族連接在一起之多一起之多芳香旌m

於：苯基、萘基、碳環狀系統，其可包括單一環或稠合或香旌1思4中該等稠合或連接環之至少。該等芳香基包括，但不限聯苯、蔥基、四氫萘基、菲基、茚、苯 5 并萘基、及苐基。 SX名3、、’£取代务基”係指經一或多種取代基取代之芳基，该等取代基包括鹵素、CN、OH、N〇2、胺基、烷基、環烧基、稀基、炔基、C,至C3全氟烧基、C,至Q全敦烧氧基、芳氧基、烷氧基(其包括_〇_(Ci至Clo烷基）或七-^丨至^。 10取代烷基)）、烷羰基（其包括-(：0-((：1至(：1()烷基）或_co_(Ci 至(：1()取代烧基）)，烷羧基（其包括_(：〇〇_((：1至（：1()烷基）或 -COO-(Ci至C1()取代烷基)）、-C(NH2)=N-OH、-S〇2-(Ci至c10 烧基）、-S〇2_(Ci至Ci〇取代烧基）、-0-CH2_芳基。合適的取代基亦包括烧胺基、芳硫基、芳基、及雜芳基，這些基團 15 本身可經取代。經取代芳基最好經1至約4個取代基取代。該名詞“烯基，，係兼指具有至少一個碳-碳雙鍵、及2至8個碳原子（較佳2至6個碳原子）之直鏈-及分支鏈烧基。“炔基”有意兼涵蓋具有至少一個碳-破三鍵、及2至8個碳原子(較佳2 至6個碳原子）之直鏈-及分支鏈烧基。 20 如文中使用，該名詞“雜環”或“雜環狀，，可交換使用以指穩定、飽和或部份不飽和3_至9_員單環或多環雜環狀環。該雜環狀環之主鏈具有破原子及—或多種雜原子，其括氮、氧、及硫原子。在〆實施例中，該雜環狀環之主鏈具有1至約4個雜原子。當該雜環狀環之主鏈含有氮或硫原 200934482 子’該等氮或硫原子可經氧化 ‘ 亦指多環狀環，其中_雜^ 1 ‘雜環”或“雜環狀” 子之芳A⑼A ，、德％係與具有約6至約14個碳原二狀環可經由-雜原子或碳原子而 5 0 10 15 ❹ 20 化學限制條件為所形成雜環狀環結構具 :…性。在一實施例中，該環之多環狀系統。 ^括具有2至5個 .各種雜環狀基團在本項技藝中係已知且包括，但不限於.含氧環、含氮環、含硫環、含 ^ 合雜原子之環、及其等之組合。雜;：、子之環、含稠 =限於：四氫料基、_基、2，氧基_基、舊絲、嗎似、硫鱗基、硫料㈣、㈣基、料基 γγ)κ基，基、二硫醇基、料醇基、二 =彻基、㈣基，基、苯并旅喃基、苯并口亏σ井基及β山基(xanthenyl) 〇如文中使用，該名詞“雜芳基，，係指穩定之含芳香族5- 至14-員單環或多環雜原子之環。該雜芳基環之主鍵具有碳原子及-或多個雜原子，其包括H、及硫原子。在一實施例中，該雜芳基環之主鏈含有丨至約4個雜原子。當該雜芳基環之主鏈含有氮或硫原子時，該等氮戋辟原。 :化::名詞“雜芳基，’亦指多環狀環:其::= = 與一方基環稠合。雜綠環可經由—雜原子或碳原子而連接至該芳基環，但其限制條件為所形成雜環狀環結構呈化學安定性。在-實施例中’該雜芳基環包括具有出個環之多環狀系統。 9 200934482 多種雜芳基在本項技藝中係已知且包括，但不限於：含氧環、含氮環、含硫環、含混合雜原子之環、含稠合雜原子之環、及其等之組合。雜芳基之實例包括’但不限於呋喃基、吼咯基、〇比唑基、咪唑基、三唑基、ο比啶基、塔 5 畊基（Pyridazinyl)、嘧啶基、吡畊基、三畊基、氮呼基 (azepinyl)、嘍吩基、二硫醇基、噚硫醇基、噚唑基、嘍唑基、’二哇基、4三D坐基、氧呼基（oxepinyl)、硫呼基 (thiepinyl)、二氮呼基、苯并吱喃基、吲α朶基、苯並唑基、

嘌啉啶基、哌喃吡咯基、異吲唑基、吲嵘哼唑基、苯并哼 Q 10 唾基、σ垄琳基、異σ奎琳基、苯并重氮基(benzodiazonyl)、萘啶基、苯并噻吩基、吡啶并吡啶基、吖啶基、咔唑基 (carbazolyl)、及嘌呤基環。如文中使用，該名詞“經取代雜環”及“經取代雜芳基” 係指具有一或多種取代基之雜環或雜芳基，該等取代基包 - 15 括鹵素、CN、OH、N02、胺基、烷基、環烷基、烯基、炔基、（^至(：3全氟烷基、（^至仏全氟烷氧基、芳氧基、烷氧基(其包括-〇-(CjC1()燒基）或-〇-(CjC1()取代烷基)）、烷幾〇基(其包括-0〇-((：1至(：1()烧基)或-(：0-((：1至(：1()取代烷基))，烧叛基（其包括-COCKCjC^烧基）或-COO-(C^C10取代燒 20 基)）、-c(nh2)=n-oh、-SO2-(CjC10 院基）、soHCjCw 取代烷基）、-Ο-CH2·芳基、烷胺基、芳硫基、芳基、及雜芳基，該等基團可選擇性經取代。經取代雜環或雜芳基可具有1、2、3或4個取代基。本發明者已發現本發明化合物中之至少一種可以以被 10 200934482 ❹ 10 15

20 稱為;^粉樣蛋白抑制劑之化合物的代謝產物形式在活體内產生〇US 6,610,734及US 7,300,95卜然而，非可預期地，當以合成方法製成該“代謝產物”並投與時，已發現其可作為前藥。一般相信在非經腸投藥後，該化合物可經不同方式代謝，藉以改善生體可用率。因此，預期該等式⑴及(„) 化合物亦較不容易藉在非經勝投藥後之各種代謝路徑而代謝，特別為母體化合物m之丨，2胺基醇之2领_ _酸化反應（見圖解I)以產生2_葡萄糖苷酸代謝產物。因此，預期這些化合物可增加適於有效治療之生體可用率且可限制副作用。該等質子化或陰離子硫M及魏麵該具有改良的水溶性且適於靜脈内藥物遞送。文中提供這些化合物之又其它用途及優點。 σ 在-實施例中，本發明該等化合物不含在活體内會與其等結合之生物材料。藉使用合成方法可輕易製傷此等]匕合物。或者，可自生物材料離析或純化該等化合合成法〇 ° 可使用下述方法、及合成有機技藝中已知之人成法戍熟悉本項技藝者已知之這些方法的變異以製備本$ 化合物。這些方法包括，但不限於下文所描述之方^該可根據下文圖解1中所述之方法以製借合物太備本發明第I型化 11 200934482 Ο

ιν 在惰性氣氛(諸如氤或氬）下，在合適冷溶劑（例如於ο °c下）中以市售氣磺酸或本項技藝中已知之其它磺化劑處理第m型磺醢胺醇以得到式IV化合物。用於合成第m型醇 5 之合適方法業經描述在以下專利案中：US 2004/198778及 © US 2003/013892 ;國際專利公開案第 w〇 2002/057252號； WO 2003/050063 ; W0 2003/103660 ;及2007年7月 16 日申請之美國專利申請案第60/959,675號。以作為金屬離子Μ之來源的鹼處理未經進一步純化之式IV化合物以得到式I硫 10 酸鹽。合適的鹼包括’例如碳酸氫鈉或其它有機或無機鹼。 ' 若必要’使用合適溶劑之組合以進行再晶化反應。可根據熟悉本項技藝者已熟知之方法製備本發明第Η 型化合物。示於圖解2中之最典型程序包括在合適有機或無機鹼存在下，使第III型磺醯胺醇與氣膦酸鹽衍生物或另一 15 膦酸化藥劑反應以得到第II型膦酸鹽。在一實施例中，該環狀璘酸鹽前藥為彩戈素(cycloSal)分子團[c Meier, Eur J 〇rg Chem，2006, 1081-1102]。這些化合物可以是一般烷基、芳基或環狀衍生物，其等可藉磷酸酶而水解性分裂以活體内產生該母體第ΠΙ型醇。 12 20 200934482 圖解2

若該R4或R4,基團為苄基取代基時，該化合物可經由氫化反應而脫除保護作用以得到該膦酸鹽II之質子化形式[L 5 J Silverberg 等人，〇rganic process Res and Dev” 2000, 4:34-42 卜 10

15 該R4及/或R4’基團可以是2,2,2-三氯乙基。可使用鋅-銅偶合法或熟悉本項技藝者已知之其它方法經由還原法而移除此種基團[GR Pettit等人，Anti-cancer Drug Design, 1995, 10, 299-309]。可使用離子交換法使本還原反應之金屬鹽產物轉化成具有合適金屬陽離子之陰離子填酸鹽衍生物。使用該等化合物之方法式（I)及（II)化合物為万澱粉樣蛋白產生之抑制劑且可進-步具有他她活性。在使用蛋白峰專—性分析之預備研究中，已證明代表性式⑴及(„)化合物具有蛋白酶活性之專一性抑制作用。因此，該等化合物可用於治療並預防其中 /5澱粉樣蛋白含量之調節可提供治療利益之各種病症。此 ^症尤其包括，例如澱祕蛋“管病、大腦殿粉樣蛋白血管病、全身性澱粉樣變性病、㈣海默氏症(AD _滅)型顿粉樣變性病的遺傳性大腦性出血 ^ 13 20 200934482 肌炎、唐氏症候群、輕度認知損傷(MCI)。該等化合物之投與數量最好足以緩和該等症狀及/或該病症之演變。在一實施例中，係提供治療患者之贅瘤的方法。該方法〇括對而要其治療之患者投與作為唯一活性藥劑之本發 5月化S物或於其療程中包括一或多種其它活性藥劑或其它療矢（j如;敦素療法、免疫療法、抗血管生成療法、挺定療法(例如針對癌標乾之治療物，諸如Gleevec®及其它酷胺酸激酶抑制劑、Velca_、Smem⑧）、及賴射處置）。該資瘤可以是▲•液學癌或固體腫瘤。響 10 在—實施例中，該固體腫瘤為纖維肉瘤、脂肉瘤、軟 . 骨肉瘤、骨肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、内皮肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴管内皮肉瘤、滑膜瘤、間皮瘤、尤恩氏瘤（Ewing，s tumor)、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、結腸癌、結腸直腸癌、腎臟癌、胰臟癌、骨癌、乳癌、卵巢癌、攝護腺癌、食道 . 15 癌、胃癌、口腔癌、鼻癌、咽喉癌、鱗狀細胞癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭狀癌、乳頭狀腺癌、囊腺癌、髓狀癌、由支氣管產生的癌、腎細胞癌、肝細胞〇瘤、膽道癌、絨毛膜癌、生殖細胞瘤、胚胎癌、威爾斯氏腫瘤（Wilms’tumor)、子宮頸癌、子宮癌、睪丸癌、小細胞 20 肺癌、膀胱癌、肺癌、上皮癌、神經膠質瘤、多形性神經膠母細胞瘤、星細胞瘤、神經管胚細胞瘤、顱咽管瘤、室管膜瘤、松果腺瘤、jk管母細胞瘤、聽神經瘤、募樹突膠質瘤、腦膜瘤、皮膚癌、黑色瘤、神經母細胞瘤或視網膜胚細胞瘤。 14 200934482 5 ❹ 10 15 ❹ 20 此外，可使用該等式(I)及(Η)化合物以產生可用於診斷與/5澱粉樣蛋白之異常含量或Notch活性相關之病症的試劑。例如該等式(I)及/或(II)化合物可用以產生能用於各種診斷分析之抗體。用於產生單株、多株、重組型、及合成抗體或其等之片段為熟悉本項技藝者所熟知。見，例如E. Mark and Padlin, “Humanization of Monoclonal Antibodies”， Chapter 4、The Handbook of Experimental Pharmacology, Vol. 113 ' The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, Springer-Verlag (June, 1994); Kohler and Milstein及其等之許多已知改良法；國際專利公開案第WO 86/01533號；英國專利申請公開案第GB2188638A ; Amit等人，Science, 233:747-753 (1986); Queen等人，Proc. Nat’l. Acad. Sci. USA， 86:10029-10033 (1989);國際專利公開案第 W090/07861 號；及Riechmann等人 ’ Nature, 332:323-327 (1988) ; Huse 等人’ Science, 246:1275-1281 (1988)，其等皆在此併入本案以為參考資料。或者，該等式⑴及/或(11)化合物本身可用於此等診斷分析中。不管所選用之試劑(例如抗體或式⑴化合物），合適的診斷方式，其包括，例如放射免疫分析法及酵素聯結免疫吸附分析法(ELISA)，為熟悉本項技藝者所熟知且並無受限。另外’可偵測/3澱粉樣蛋白產生之抑制劑的細胞性、無細胞及活體内篩選方法在本項技藝中係已知。此等分析法尤其可包括放射免疫分析法及酵素聯結免疫吸附分析法 (ELISA)，見’例如 P.D_ Mehta等人，Techniques in Diagnostic 15 200934482

Pathology，vol. 2, eds.，Bullock等人，Academic Press, Boston, 第99-112頁（1991)、國際專利公開案第WO 98/22493號、歐洲專利第0652009號、1；8 5,703,129及1；8 5,593,846，其等皆在此併入本案以為參考資料。合適活體外或活體内篩選分 5 析法之選擇並無受限。在一實施例中，係提供抑制患者體内之/3澱粉樣蛋白產生的方法且其包括對該患者遞送含式⑴及(Π)化合物之藥學組成物。在另一實施例中，係提供一種藉投與一具有式⑴或(II) ® 10 結構之化合物或其藥學上可接受鹽及/或水合物而增加可用於降低患者體内之/5澱粉樣蛋白含量之化合物的循環半衰期之方法。例如該式(I)化合物可以是該化合物5·氣-嘴吩 -2-磺酸[(lS，2R)-2-(3,5-二氟-笨基)_3,3,3_三氟羥甲基-丙基]-醯胺或該化合物5，-氣·N_[3,3,3_三氟_2_(三氟曱 ’ 15 基)-1_S_(經甲基）丙基]噻吩-2’-磺醯胺之前藥。在一實施例中，5-氣-嘍吩-2-磺酸[(lS，2R)-2-(3,5-二氟-苯基)-3,3,3-三氟 -1-經甲基-丙基]-醢胺具有以下結構： Ο

在一實施例中，5’-氣·N_[3,3,3_三氟_2_(三氟甲 20 基羥甲基）丙基]噻吩_2’·磺酿胺具有以下結構： 16 200934482

F3C、/CF

'3

OH 藥學組成物及調配物亦提供含有一或多種式⑴或（11)化合物或其等之組合的藥學組成物。 0 10 15 考慮到業經選擇欲治療之特定病症，可藉任何較佳方式而對患者投與文中所述之該等組成物。“患者，，意指已被視為罹患一或多種其中澱粉樣蛋白含量或Notch活性較佳經調節之病症或有罹患該等病症之危險的任何符合該條件的人。因此，該等含式(1)及(11)化合物之組成物可用於治療及/或預防許多人類病症。如文_使用，“預防，，涵蓋業麵鑑定為有罹患該病症之危險但尚未診斷出該病症之人及/ 或尚未顯示其任何症狀之人的症狀之預防。可藉任何合適遞送方式，尤其，例如口服、注射、吸入(其包括鼻内吸人及氣管内吸人）、經皮、靜脈内、皮下、肌内、舌下、顱内、硬膜外、氣管内、直腸、陰道内投藥而遞送或投與這些化合物。在一實施例中，係藉舍適的非經腸方式而遞送用於傳遞該等化合物之該等組成物。在另一實施例中配適於靜脈内遞送之該等組成物。該等化合物係與習知生理上可才 ’ 令之樂學載劑一起調齡。該等式（I)及（II)化合物中之—或冬 ^ ^ 4多種可選擇性與其它漆性藥劑混合。可藉熟悉本項技藝容載劑。例如合適的固者而輕易地選擇合適的生癦上可相體載劑尤其包括-或多種亦可作為 17 20 200934482 10 15 20 調味劑、潤滑劑、增溶劑、懸浮劑、填料、助滑劑、壓縮助劑、結合劑或錠劑分解劑或封包材料。在散劑中，該載劑為微細緻固體，其係與微細緻活性成份混合。在錠劑中，該活性成份係以合適比例與具有必要壓縮性質之載劑混合且以所欲雜及大傾實。料散财鍵難佳含有至高 99%該活性成份。合適的固體載劑包括，例如磷__ 酸二約、硬脂義、滑石、澱粉、糖（其包括乳糖及薦糖）、纖維素(其包括，例如微結晶狀纖維素、甲基纖維素、缓甲納）、聚乙烯°比略咬、低溶點臘、離子交換樹脂、 .f製備溶液、懸浮液、乳液 '糖聚及触 (知水、轉或M料學切接受液體載劑脂肪、Φ * 兩者之混合物、或藥學上可接受油或溶:乳::體栽劑可含有其它合適藥學添加物，諸如增安定劑或渗透調：、懸洋劑、増稠劑、黏性調整劑、的合適實例包括it用於^服及非經腸投藥之液體載劑衍生物之水、較佳為含有如上述添加物，例如纖維素醇及多_，例如ί 維钱溶液）、醇(其包括單經挪子油、土豆I王:醇)及其等之衍生物、及油(例如分館可―，諸如油酸二::: 投藥。 •液體載劑係以無菌液體形式用於非

G

Q 經腸習用、樂學纟域物之添加物可選擇性包括在該等 18 200934482 組成物内。此等組份包括，例如甜味劑或其它調味劑、著色劑、防腐劑、及抗氧化劑，例如維生素E、抗壞血酸、丁基化羥基甲苯(BHT)及丁基化羥基茴香醚(BHA)。可藉，例如肌肉、腹膜内或皮下注射而利用本身為無 5 菌溶液或懸浮液之液體藥學組成物。亦可靜脈内投與無菌溶液。口服投藥可以呈液體或固體組成物形式。當製成吸入劑時，最好使用式(I)及(II)化合物與合適藥學載劑製備呈適於藉霧化喷霧泵或藉用於灌氣法之乾散劑而遞送之流體單位劑量的該等藥學組成物。就作為氣溶膠 10 而言，該化合物係與氣態或液化推進劑，例如二氣二氟甲烷、二氧化碳、氮、丙烷等一起或若必要或較佳與常用組份，諸如共溶劑及潤濕劑一起調配且包裝在加壓氣溶膠容器内。例如亦提供在1、2或多次啟動時可遞送適於口或鼻内吸入之一定量劑量。最佳以丨或2次啟動遞送—劑量。然 15 而，可輕易地決定其它合適遞送方法。該藥學組成物較佳呈單位劑型，例如呈錠劑或膠囊形式。在此種形式中，該組成物再分成含合適量之該活性成份的單位劑量。該等單位劑型可以是包裝組成物，例如小袋裝散劑、小玻瓶、安瓿、預裝填之注射器或含有液體之 20小藥囊。該單位劑型本身可以是，例如膠囊或旋劑，或其可以是合適量之任何此等組成物呈包裝形式。八 θ如文中所述，式⑴及(11)化合物之治療上或預防上有用

量^可緩和該疾病（例如AD)之症狀或可避免錢之發作或更嚴重症狀之發作的化合物之用量。 S 19 200934482 在又另-實施例中，這些化合物係調配在可用於治療與Notch處理過程相關之癌的藥學組成物中。提供一種使用這些化合物以治療此等癌症之方法。化合物之有用量可根據該調配物及遞送方式而不同。 5例如口服之數量可高於當該化合物經調配用於注射或吸入的數量’以遞送生物學上相當量之該冑學M匕合物之個別劑1(亦即母一單位）最好在自約1微克/公斤至約1〇克/公斤之範圍内。然而’在特定實施例中，這些劑量可選自較低範圍，例如自約1微克/公斤至約2〇〇毫克/公斤、更佳1〇微克 ® 10 /公斤至約10毫克/公斤且最佳約100微克/公斤至約丨毫克/公斤。這些劑量最好以母日為基礎提供。然而，欲用於治療或預防特定認知缺陷或其它病症之劑量可藉主治醫師而主觀決定。所涉及之變數包括該特定認知缺陷、及受實驗者 (該名詞其係與“患者，’交換使用）之身材大小、年齡及反應模 - 15 式。例如根據文中所述化合物之活性特性及效力，每天約 130至約300毫克之起始劑量且每日劑量逐漸增加至每天約 1〇〇〇毫克可以使該患者得到所欲劑量。〇或者，為了避免該患者按每日為基準服用藥物之必要，較佳使用持續遞送裝置。“持續遞送，，之定義為延緩活 20 性藥劑，亦即式1及/或式11化合物之釋放，直到置於遞送環境後為止’繼而於稍後持續釋放該藥劑。熟悉本項技藝者知道合適的持續遞送裝置。合適的持續遞送裝置之實例尤其包括’例如水凝膠（US 5,266,325 ; 4,959,217 ;及 5,292,515)、諸如由 Alza(US 4,295,987及5,273,752)或Merck 20 200934482 (歐洲專利第314,206號)所述之渗透泵；疏水性薄膜材料，諸如甲基丙稀酸伸乙酯（EMA)及乙烯基乙酸伸乙酯 (EVA);生⑼再吸收聚合物系統（見，例如國際專利公開案 5,756，127 及酸酐或乳酸/ 第 WO 98/44964號、Bioxid and Cdl〇meda; us 5 ❹ 10 15 e 20 US 5,854,388);業經描述為由，例如聚醋、聚乙醇酸共聚物所組成之其它生物再吸收植入裝置（見，例如 US 5,817,343(Alkermes Inc·))，上述所有文件皆在此併入本案以為參考資料。就用於此等持縫遞送裝置而言可如文中所述調配該等化合物。在另一方面中，係提供用於遞送產物之藥學套組。該套組最好含有具有經調配適於所欲遞送方式之該化合物的包裝物或容器。例如該套組經設計用於藉吸入而投藥時，則其可含有含式(I)及/或（II)化合物之經調配適用於藉吸入而氣溶膠或喷霧遞送一預定劑量的懸浮液。該套組最好含有有關於給藥之使用說明及關於該活性藥劑之插頁。該套組可視需要進一步含有用於監測產物之循環含量的使用說明，及用於進行此等分析之材料，其包括，例如試劑、井培養孤(well plate)、容器、標誌物或標籤等。此等套組很容易以適於處置所欲指徵之方式進行包裝。例如該套組亦可含有噴霧泵或其它遞送裝置之使用說明。考慮到該所欲指徵及遞送方式，此等套組之其它合適組份可為熟悉本項技藝人輕易瞭解。該等劑量可每天、每週或每個月重複，費時預定時間或如所指定。在又另一實施例中，可使用本發明該等化合物中之一 21 200934482

或多種以監測使用具有’例如US 6,878,742及US 6,610,734 中所述之雜環狀磺醯胺化合物、及，諸如Us 7,300,951與 US-2007-0254929-A1中所述之含氟_及三氟烷基之雜環狀磺醯胺化合物之結構的T分泌酶抑制劑之治療物，該等專 5 利案皆在此併入本案以為參考資料。又其它藥物包括US 7，166,622中所述之笨基磺醯胺、或us-2005-0171180中所述之藥物’該等專利案皆在此併入本案以為參考資料。例如可使用本發明之化合物以監測具有以下結構之化合物的治療物：

其中： T係選自由CHO、C0R8，，、及c(〇h)Ri，，R2所組成之蛘組；Rr，及Rr’係獨立選自以下所組成之群組：氫、低碳烷基、經取代低碳烷基(鏈長為1至6個碳原子、較佳為丨至4個碳原 15子之烷基，其中經取代之定義如上文經取代烷基之定義）、 CF3、烯基、經取代烯基、炔基、及經取代炔基；I，係選自由氫、低碳烷基及經取代低碳烷基所組成之群組；仏係選自以下所組成之群組；（CFA烷基、（CF3)n(經取代烷基）、 (CF3)n烷基苯基、（CF3)n烷基(經取代苯基）、及(F)n環烷基， 20其中n=1至3; R5”係選自以下所組成之群組：氫、鹵素、CF3、稠合至Y之二烯（當Y=c時）。及稠合至γ之經取代二烯（當 Y=c時；W、Y及Z係獨立選自由(^、^，，及^^所組成之群組， 22 200934482 但其限制條件為w或Y或Z中之至少一種必需是C ; R6”係選自由氫、_素、低碳烷基、及經取代低碳烷基所組成之群組；X係選自由0、S、S02、及NR7”所組成之群組；r7，，係選自由氫、低碳烷基、經取代低碳烷基、节基、經取代苄基、苯基、及經取代苯基所組成之群組；及r8”係選自由低碳院基、CF3、苯基、及經取代苯基所組成之群組；或其藥學上可接受鹽、水合物或前藥。

在一實施例中，該欲監測之化合物為5-氯-噻吩-2-磺酸 [US，2R)-2-(3,5-二氟-苯基）_3,3,3_三氟-1-羥甲基-丙基]-醢胺。在一實施例中，本化合物具有以下結構：

F

在另一實施例中，該化合物為5，-氣-N-[3,3,3-三氟 -2-(三氟甲基)-l-S-(羥甲基）丙基]吩·2，_績醯胺。在一實施例中’本化合物具有以下結構：

15 當作為試劑及/或標準物時，該等化合物可，例如放射性 '螢光或比色標記物標記。在用於偵測代謝產物在一試樣中之存在的方法中，這些化合物中之一或多種可作為標準物’亦即用於比較目的。如文中使用，“試樣，，係指生物試樣，諸如自個體（其包括，但不限於：血漿、血清、腦脊 23 20 200934482 骑液、尿、淋巴、眼淚、唾液、及組織切片）或自活體外細胞培養成份離析之組織或流體、以及得自該環境之試樣。在另一實施例中，可使用該等代謝產物中之一或多種以產生可用以偵測該等G SI代謝產物在試樣中之存在的抗體或抗體群。該抗體最好為對該化合物具專—性之單株或多株抗體。在一較佳實施例中，此種抗體可選擇性地結合至該化合物並區分該代謝產物與母體化合物及其之其它代謝產物。如文中使用，該名詞“抗體”有意包括可以與塔那普給 10 (tanaPr〇ge〇及/其代謝產物進行專一性反應之其片段，例如

Fv片段及F(ab)2片段。可使用標準技術，其中該抗原為本發明之一衍生物，以製備對如文中所述之化合物具專一性之抗體。見，例如 Sambrook, Molecular Cloning ： A Laboratory Manual, Cold 15 Spring Harbor Press，Cold Spring Harbor, NY。可使用對如文中所述之化合物具位置專一性的該等多株及單株抗體以研發免疫分析或治療藥物監測（TDM)套組。此等分析可包括，但不限於：直接、抑制、競爭性或三明治式免疫分析法（sandwich immunoassay)(ELISA或其它分析系統）、RIA、 20 固相或液相分析法或自動化分析系統。若使用競爭性分析法，用於該抗體之競爭物可以是已結合至分析盤之如文中所述的化合物、或標記衍生物，例如氟標記衍生物、放射性標記衍生物或氚化衍生物。若必要’可使用一套組以幫助本發明該等方法。本發明之一套 200934482 、且可3有經合適標記之*蹤劑、抗及包裝材料1於 W物、使用說明、例如放射性、螢光或、己可以是任何合適標記，份可以呈料H‘，、'標記。若合適，該套組之該等組快速析程序之優點為可使用標準生物分析設備用不需二取=得:胸且可重現的一 ❹ 10 15 該代謝絲錢樣⑽如血 —實_巾__ 3量的分析套組。在該藥劑的結合競爭物試樣中之代謝產物取代結合至該結合解物之細但縣顯著地朵太實例以閣明本發明代表性化合物之製法。熟 2本項繼瞭解雖然在以下實财有描述特定試劑及條件，但疋這些觸及條件對本發明衫具限制性。實例1

(2S)-2-{[(5-氯I嗔吩基）續酿基]胺基}_44,4_三氣各(三氣甲基)丁基硫酸氫鈉鹽於〇 C在氮氣下以5分鐘一滴滴添加氣磺酸⑴.060毫升，0.90毫莫耳)至5-氣_n-[(1S)-3,3,3-三氟七(羥曱基)_2_(三氟甲基）丙基]嚷吩-2-確醯胺(0.175克’ 0.45亳莫耳)在乙酸乙酯（1.4毫升）中之攪拌溶液内。然後於〇°c下攪拌該混合物並 25 20 200934482 藉薄層層析法(TLC)及核磁共振(NMR)而監測。該反應在3〇分鐘内完成。於0°C下小心並緩慢地添加飽和水性碳酸氫鈉 (〇·30克，在μ毫升水中360毫莫耳）至該反應混合物並於〇 °C下攪拌該混合物，費時30分鐘，然後於室溫下攪拌3〇分 5 鐘。以乙酸乙酯（80毫升）稀釋該反應混合物。以無水硫酸鈉乾燥（烘箱乾燥）該乙酸乙酯混合物。藉過濾而移除固體。蒸發濾液以得到固體。自二氣甲烷及戊烷(8: 2)再晶化該固體以得到如白色固體之標題化合物(0.090克）。質譜(ES，[M-H]-)m/z 469.9。 0 高解析質譜測定法(HRMS) : C9H8C1F6N06S3，[M-H]- 之計算值：469.9028 ;實測值(ESI，[M-Η]-) : 469.9029 實例2

(2S’3R)-2-{[(5_氣噻吩基)磺醯基]胺基甲基戊基硫酸 15 氬納鹽於〇°C在氮氣下以5分鐘一滴滴添加氣磺酸(0.034毫升’ 0.50毫莫耳）至5-氣-N-[(lS，2S)-l-(羥曱基）-2-曱基丁基]-2-°塞吩磺醯胺(0.34毫莫耳)在乙酸乙酯（〇.8毫升）中之攪拌溶液内。然後於0°C下攪拌該混合物並藉TLC及NMR而監 20測。該反應在30分鐘内完成。添加碳酸氫鈉（0.170克，2.0 毫莫耳）至該反應混合物。於〇〇c下攪拌該混合物，費時1〇分鐘後，於0°C下緩慢添加水(0 75毫升）至該混合物。於室 200934482 溫下攪拌該反應混合物，費時15分鐘，並經乙酸乙酯（40毫升）稀釋。以無水硫酸鈉乾燥（烘箱乾燥）該乙酸乙酯混合物。過濾並蒸發以得到如白色固體之標題化合物(0.003克）。質譜(ES, [M-H]-) m/z 376.0 5 HRMS : C10H16ClNO6S3, [M-H]-之計算值：375.9750 ; 實測值(ESI, [M-Η]-) : 375.9751。實例3

10 (2S)-2-{[(5-氯-2-噻吩基）磺醯基]胺基}-3-乙基戊基硫酸氫納鹽以實質上如實例1中所述之相同方式自5-氯-N-[(lS)-2-乙基-1-(羥曱基）丁基]-2-噻吩磺醯胺製成標題化合物。獲得如白色固體之該產物。質譜(ES，[M-H]-) m/z 390.0 15 HRMS : CUH18C1N06S3, [M-H]-之計算值：389.9907 ; 實測值(ESI, [M-Η]-) : 389.9919。實例4

27 200934482 (2S，3S)-2-{[(4-氣苯基)磺醯基]胺基}-3-甲基戊基硫酸氫鈉鹽以實質上如實例2中所述之相同方式自4-氯 -N-((1S，2S)-1-羥曱基-2-甲基-丁基)-苯橫醯胺製成標題化合物。獲得如白色固體之該產物。 5 質譜：（ES, [M-H]-) m/z 370.1 HRMS : C12H18C1N06S2, [M-Η]-之計算值：370.0186 ; 實測值(ESI, [M-Η]-) : 370.0197。實例5

10 ((2S)-2-{[(4-氯苯基)磺醯基]胺基}-4,4,4-三氟-3-(三氟甲基) 丁基硫酸氫鈉鹽以實質上如實例2中所述之相同方式自4-氣 -N-[(lS)-3,3,3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟曱基）丙基]苯磺醯胺製成標題化合物。獲得如白色固體之該產物。 15 質譜(ES, [M-H]-) m/z 464 HRMS : CnHwClF^C^Ss，[M-H]-之計算值：463.9464 ; 實測值(ESI, [M-Η]-) : 463.9473。 28 20 200934482 實例6

(2S，3R)-2-{[(5-氯-2-嘍吩基> 磺醯基]胺基}-3-(3,5-三氟苯基)-4,4,4-三氟丁基硫酸氫鈉鹽 5 以實質上如實例2中所述之相同方式自5-氯 -N-[(lS，2R)-2-(3,5-二氟苯基）-3,3,3-三氟小(羥甲基）丙基] 嘍吩-2-磺醯胺製成標題化合物。獲得如白色固體之該產物。質譜(ES，[M-H]-)m/z514 HRMS ： CHHnCIFsNOeSa, [M+Na]+ 之計算值： 10 537.9253 ;實測值(ESI，[M+Na]+) : 537.9249。實例7·藥理學 A.沒殿粉樣蛋白活性 ❹ 在具有得自可穩定性表現人類澱粉樣蛋白前驅蛋白質 (APP)受體建構物，hAPP-REPNL751之中國倉鼠卵巢(CEO) 15 細胞之經調理培養基的電化學發光(ECL)分析中測定化合物降低A万40及A冷42(其等為点澱粉樣蛋白的最常見形式) 自APP(澱粉樣蛋白前驅蛋白質）產生之活性[Sughir，R•等人；J. Biolog. Chem (1992) 267: 256〇2_256〇8]。a召胜肽係藉可攜帶人類APP轉殖基因之細胞而以高含量分泌入細胞 20培養基内；測試化合物之調節其產生之能力。藉具有the 29 200934482

Meso Scale Discovery® (MSD®) ECL偵測系統之三明治免疫分析法而將該經調理培養基内之胜肽定量。使用MTS 鹽套組（含有四銼0^32〇1比111)化合物3-(4,5-二曱基嚷唾_2-基)-5-(3-羧基甲氧苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四銼内鹽；可藉歐 5 文氏試劑（Owen’s reagent)之生物還原作用而測定細胞之粒線體活性的MTS(a))以測定細胞代謝。本分析法由以下實驗程序組成. 1.降低Α β之分析法： a. 將I1APP-REPNL751CHO細胞接種入96井平皿内並培 10 育，直到達約60-70%群集率為止。 b. 移除培養基，清洗細胞並將新的無血清培養基 (Ultraculture)蓋在細胞上。 c. 稀釋化合物，然後添加至該細胞培養基。 d. 以化合物培育細胞，費時所指定時間。 ' 15 e•使塗鍵黴菌卵蛋白（Streptavidin)之Meso Scale

Discover (MSD)平皿(MSD標準Multi-Array™ 96平皿，cat·# P11SA-1)經TTBS(Tris-緩衝性鹽液，the Tween® 20試劑）清 ❹ 洗3次。 f. 自該等細胞移除20微升經調理培養基，並添加至經 20 TTBS預清洗的MSD®平皿。 g. 製備合成性A冷40及A yS 42之標準曲線稀釋液並添加至該等MSD®平皿。 h. 在1% MSD® Blocker A(合適濃度之生物素化6E10抗體，A^40、AyS42之债測抗體；及MSD釕化(ruthinylated) 30 200934482 標記抗體）内製備試劑混合物。 i. 將20微升試劑混合物分配至試樣平盟。 j. 於4°C在搖動下培育平皿。 k. 使平瓜經TTBS清洗3次。 5 ❹ 10 15 20 l. 母井添加150微升讀取緩衝劑(代3(1 buffer)(MSD Read Buffer T，cat#R92Tc_2，其係經蒸餾水製備丨次）。 m. 在2小時内在MSD盤式測讀器内讀取該等平皿。 2.MTS分析： a.將細胞接種入96井平皿内並培育，直到達約6〇_7〇% 群集率為止。 b. 移除培養基，清洗細胞並將新的無血清培養基 (Ultraculture)蓋在細胞上。 c. 稀釋細胞，然後添加至該細胞培養基。 d. 以化合物培育細胞，費時所指定時間。 e. 使用自動化裝置自該等細胞移除經調理培養基，並移至經TTBS預清洗之MSD平皿。 f. 在填酸鹽緩衝鹽液(PBS)内清洗細胞共兩次並將mts 溶液接種至該等細胞上。1小時後，於560奈米下在盤式測 0賣益上項取該專細胞以測定代謝活性。結果之分析：根據特定性能標準’其包括標準曲線之回歸係數、合適的信噪比、位於該標準曲線之範圍内的試樣信號等而接焚或拒絕接受這專分析。在進行分析前破定各組織之特定參數，且其等包括在該完整分析程序内。 31 200934482 將得自MTS and MSD ELISA之平皿資料轉移入 Microsoft Excel®試算表内以測定藉該等化合物引起之毒性、及抑制作用。使用LSW工具列Hill斜率模式42，以1/y 稱重（具有Hill斜率之一般s型曲線，a至d ; 5 y=(a-d)/(l+(x/c)Ab)+d)產生AyS之標準曲線。在使用如上述產生之標準曲線以將原始數值轉換/轉化成絕對A yj值（例如使用標準曲線自該等原始數值回推計算絕對A々值)後，使用LSW Hill斜率模式68(具有Hill斜率及Bmax至0 ; y=Bmax*(1 -(XΑη/(ΚΛη)+χΛη)之配位體_受體結合/s型）)以該 ❹ 1〇等八沒值在經媒劑處置之井内之平均數％表示抑制作用資料(所有值減掉背景）。檢查可證實分析性能之機載(〇nb〇ard) 對照組以確定澱粉樣蛋白在該分析之線型偵測範圍内，確定細胞係正確地表現並確定該MSD本身係根據品管（Qc)標 - 準而表現。 $ . 15 4,反應測定：抑制作用％ > 5 0 〇/〇可被視為本分析中之一正向反應或令人關注的結果；測定EC5〇測定值。 ⑬ 用於該yS澱粉樣蛋白之參考標準為： 2〇化合物：5IN-[(1S，2R)·2·乙基-4，M-三氣小(經甲基)丁基] ° 嘍吩冬磺醯胺（EC5〇 a /3 40=6Nm，EC5〇 α ^ 42=5nM) (2S)-2-經基·3-曱基-N-((1S)-1-甲基 _2_{[(ls)_3_ 甲基-2-側氧基_2,3,4,5_四氫孤3_节氣呼小基]胺基}-2-侧氧基乙基）丁醯胺（EC減石♦⑽咖， 32 200934482 Εϋ5〇αβ42=79ηΜ) Β·功能性Notch分析 5 ❹ • 10 15 ❹ 20 可在全細胞功能性Notch分析中測定化合物分裂Notch 之活性。其係為可測定化合物對Notch之S3(似r -分泌梅) 處理過程的影響之分析法。該分析法可測定S3分裂活性之抑制作用’其係藉報告基因之轉活化作用的降低而顯示：更詳細地’當藉r -分泌酚而分裂時，Notch之原構活性形式（具有細胞外結構域刪除作用）可釋放N〇 tch細胞内結構域 (NICD) ’其可轉活化藉HES啟動子而驅動之可溶性驗性磷酸酶(SEAP)基因。然後藉發光分析而偵測SEAP轉活化作用。該分析法係由以下實驗程序組成： 1.材料及方法：群：P8H6誘導性穩定細胞株係衍生自可穩定表現 Tet阻遏物、Notch (pZXl)及HES1-SEAP (pZX2)報告基因建構物之T-REx™ CHO-K1。使用 Wallace 1450® Victor Luminescence Counter以測定發光信號。所有其它材料及試劑皆具最高品質且皆在市面上有售。 (b)建構物描述： pZXl :具有於pcDNA5/TO載體之Hind ΙΙΙ/Xho位置選殖之經刪除除細胞外結構域的小鼠Notchl :對細菌而言，其具安比西林(Ampicillin)抗性，對細胞而言，其具潮黴素(hygromycin)抗性。 pZX2 :與於具有CMV啟動子之刪除作用 pcDNA3.1之Not I/Apa I位置選殖的報告基因SEAP—起之 33 200934482 小鼠HES1啟動子。 (c)程序：在經脫氧土黴素（doxycline)以0.2微克/毫升之最終誘導濃度增補之哈姆氏F12完全生長培養基（Ham’s F12 5 complete growth medium)内使P8H6細胞生長該培養基含有 10%胎牛血清(FBS)，具有少量的脫氧土黴素）、2mM L-麩醯胺酸、1毫克/毫升之潮黴素、1毫克/毫升之Geneticin®抗生素、10微克/毫升之殺稻瘦菌素(Blasticidin)及1%青微素-鏈黴素(Penicillin-Streptomycin)。以8000個/井，將該等細胞 © 1〇接種在96井組織培養平皿内。以 20Mm、6·7μΜ、2.2μΜ、741nM、247nM、82nM、 27nM、9nM及3nM之最終加工濃度稀釋試驗化合物在〇 2% 二甲基亞礙(DMSO)/25mM HEPES(4-(2-經乙基)-1-"底u井乙磺酸)緩衝劑中之溶液。然後添加稀釋化合物至96井組織培 — 15 養平皿内之P8H6細胞。就媒劑試樣而言，係添加相同體積之0.2% DMSO/25mM HEPES緩衝劑。於37°C在5% C〇2下培育細胞，費時48小時。 ® 根據製造商之指示’使用Clontech GreatEscAPe™ SEAP化學發光偵測套組以評估該等經調理培養基中之 20 δΕΑΡ含量。簡言之，使15微升經調理培養基與45微升該稀釋緩衝劑混合並於65°C下培育45分鐘。冷却後，添加分析緩衝劑並以CSPD®受質培育該試樣。在Wallace 1450 Victor發光計數器内測定發光。 2，結果之分析： 34 200934482 EC50為經估計可以以經NGt⑽發分泌之驗性麟酸梅 (SEAP)含量提供最大反應之5〇%減少的化合物濃度。若符合以下標準，-得自狀分析法之ec5g僅可用於:算平均數： 5 ❹ 10 15 ❹ 20 ⑷在可得到Notch活性％>6〇%之分析法中有一較低劑量（將較低劑量括入括號内）。 (b)在可得到Notch活性％<30%之分析法中有一較高劑量(將較高劑量括人括號⑴，且可獲得最大抑制作用（例如經數次給藥’特定化合物可獲得80%抑制作用（N〇tch活性％為〜20%)’因此2〇〇/。可被視為最大抑制作用）。在Microsoft® Excel格式内分析資料。使用自b〇至nsb模式(模式59)之S型抑制作用，藉線自旋波理論(lsw) 而計鼻EC%。各分析平皿含有適於該參考化人物$氯 N-[(lS，2R)-2-乙基-4,4,4-三敗-1-浪甲基）丁基]重吩_2_績醯胺之劑量反應曲線。本化合物在國際專利公開案第w〇 2004/092155號中有論述。以下數據並未示於該公開案内，但係提供在下文。本參考化合物之EC^必需在欲被接受之該分析平皿之150_350nM的範圍内。 3. Notch分析參考化合物： 5-氯-N-[(lS，2R)-2-乙基-4,4,4-三氣小(經曱基）丁基]嘍吩-2-磺醢胺(EC5Q=225nM)。 (2S)-2-經基-3-甲基-N-((1S)-1-甲基_2_{[(is)_3-曱基-2-側氧基-2,3,4,5-四氫-1H-3-苄氮呼-1-基]胺基卜2_側氧基乙基）丁醯胺(EC5〇=68nM)。本化合物在國際專利公開案 35 200934482 第WO 2002/47671中有論述，但是其數據並未顯示。使用該MSD ECL分析法以測定式（I)及(II)化合物之冷澱粉樣蛋白抑制活性。使用該安定轉移報告基因分析以測定Notch處理過程之抑制作用。見下表1 表1.化合物及生物學數據實例編號 C40* ηΜ C42* ηΜ Ν9319ΑΘ ηΜ 名稱 1 447 445 3005 (2S)_2_{[(5-氣1¾吩)續酿基]胺基}·4,4,4-三氟·3-(三象甲基)丁基硫酸納 2 15000 15000 NT (2S，3R)-2_{[(5_氣-2-嗜吩)續醯基]胺基}-3-甲基苯基硫酸鈉 3 243 234 NT (2S)-2- {[(5-氣-2-嘴吩)磺醯基]胺基} -3-乙基戊基硫酸鈉 4 15000 15000 NT (2S，3S)-2_{[(4_氣笨基)磺醯基]胺基}-3-甲基戊基硫酸鈉 5 4028 4147 NT (2S)-2-{[(4-氣笨基)績醯基]胺基}-4,4,4-三氟 -3-(三氟甲基）丁基硫酸鈉 6 1742 1288 NT (2S，3R)-2-{[(5-氣-2-嘍吩基)續醯基]胺基}-3-(3,5-二氟苯基)-4,4,4-=氟丁基硫酸鈉 ^ECso代表如藉電化學發光分析法而測定之a冷40/A /3 42的抑制作用（nM) eEDS0代表Notch之抑制作用（nM) NT :未測試本專利說明書中所列舉之所有公開案在此併入本案以 10 為參考資料。雖然本發明已參考特定實施例而說明，但是應該瞭解只要不違背本發明之精神，可以進行修飾。此等修飾有意涵蓋在附加申請專利之範圍内。【明式簡單明】 (無） 15 【主要元件符號說明】 (無） 36

Claims

200934482 七、申請專利範圍： 1. 一種包含藥學上可接受載劑及具有式I或式II結構之化合物或其藥學上可接受鹽及/或水合物之組成物： ο ο 0 II Η

ΟΜ ο 〇/ II ΗR「rNd ^OR'4 I N、

r3

r3

5 其中： , Ri為經取代芳基或經取代雜芳基； . R2及R3係獨立選自以下所組成之群組：CF3、經取代苯基、CrC4烷基、經取RCrQ烷基、（CFAQXU烷基、及(CF3)n(經取代Q-Q烷基），其中η為1、2或3 ;但 10 其限制條件為當R2或R3為CF3時，則另一個並非未經取代之烧基； ❿ 且 R4及R4,係獨立選自以下所組成之群組：Μ、CrC4 烧基、苯基、及苄基，其中Μ為一選自於由納、經、#5、 15 鎂及鉀所組成之群組之金屬離子；或 R4及R4,可一起以形成一選自由以下所組成之群組的環狀結構： 37 200934482

5 10 15 2. 如申請專利範圍第1項之組成物，其中R,為經取代苯基、經取代吡啶基或經取代噻吩基。 3. 如申請專利範圍第2項之組成物，其中&為經取代苯基或經取代嘍吩基，其等係經氯或氟基取代。 4. 如申請專利範圍第1至3項中任一項之組成物，其中R! 之位於該碳的S-立體化學性具有磺醯胺的氮原子。 5. 如申請專利範圍第1項之組成物，其中R2係選自由CF3 及(^-(：3烷基所組成之群組。 6. 如申請專利範圍第1項之組成物，其中R3係選自由CF3、 Q-C3烷基、及二氟苯基所組成之群組。 7. 如申請專利範圍第1至3項中任一項之組成物，其中該化合物具有式I，且Μ為鈉。 8. 如申請專利範圍第1項之組成物，其中該化合物係選自以下所組成之群組：（2S)-2-{[(5-氯-2-噻吩基)磺醯基]胺基}-4,4,4-三氟-3-(三氟甲基)丁基硫酸鈉； (2S,3R)-2-{[(5-氣-2-嘍吩基)磺醯基]胺基}-3-甲基戊基硫酸鈉；

(2S)-2-{[(5-氯-2-噻吩基)磺醯基]胺基}-3-乙基戊基硫酸鈉； 20 (2S,3S)-2-{[(4-氣苯基)磺醯基]胺基}-3-曱基戊基硫酸鈉； (2S)-2-{[(4-氯苯基)磺醯基]胺基}-4,4,4-三氟-3-(三氟曱基）丁基硫酸鈉； 38 200934482 及 (2S，3R)-2-{[(5-氯-2-嘍吩基）磺醯基]胺基}-3-(3,5-二氟苯基)-4,4,4-三氟丁基硫酸鈉。 9. 如申請專利範圍第1至3項中任一項之組成物，其中該組 5 成物經調配以用於靜脈内遞送。 10. —種具有式I或II結構之合成方法所製成的化合物： ο

7、or'4 Rl_n~N^ 0 II

〇〆卜Μ II Η ο Rl_n_NV^ ο

r3

r3 10

15 其中： Ri為經取代芳基或經取代雜芳基； R2及R3係獨立選自以下所組成之群組：CF3、經取代苯基、CVC4烷基、經取代心-匕烷基、（CFAC^Q烷基、及(CF3)n(經取代(^-(：4烷基），其中η為1、2或3 ;但其限制條件為當R2或R3為CF3時，則另一個並非未經取代之烷基；且 R4及R4,係獨立選自以下所組成之群組：Μ、CrC4 烷基、苯基、及苄基，其中Μ為一選自於由鈉、鋰、鈣、鎂及鉀所組成之群組之金屬離子；或 39 200934482 R4及R4,可一起以形成一選自由以下所組成之群組的環狀結構： ^

U·如申請專利範圍第10項之化合物，

基、經取代吡啶基或經取代嘴吩基。 I2.如申請專利範圍第11項之化合物，其中Ri為經取代苯美或經取代噻吩基，其中該取代基為氣或氟基。土 U-如申請專利範圍第10至12項中任一項之化合物，其中心 1〇之於該碳的S-立體化學性具有磺醯胺之氮原子。如申請專利範圍第10項之化合物，其中R2係選自由CF 及C|-C3烧基所組成之群組。如申請專利範圍第10項之化合物，其中&係選自由 Cp3、CrC3烷基、及二氟苯基所組成之群組。 15 .如申請專利範圍第1〇項之化合物，其中該化合物具有式 I，且Μ為鈉.。 ‘如申請專利範圍第10項之化合物，其中該化合物係選自从下所組成之群組：（2S)-2-{[(5-氯-2-嘍吩基)磺醯基]胺基}-4,4,4-三敗-3-(三氟甲基)丁基硫酸納； 2〇 (2S，3R)-2-{[(5-氣_2_n塞吩基)績酿基]胺基}-3-曱基戊基硫峻納； (2S)-2-{[(5-氯-2-嘍吩基)磺醯基]胺基}-3-乙基戊基硫酸鈉； (2S,3S)-2-{[(4-氣苯基)磺醯基]胺基}-3-甲基戊基硫酸鈉； 200934482 (2S)-2-{[(4-氯苯基）磺醯基]胺基}-4,4,4-三氟-3-(三氟甲基）丁基硫酸鈉；及 (2S，3R)-2-{[(5-氣-2-噻吩基）磺醯基]胺基}-3-(3,5-5 二氟苯基)-4,4,4-三氟丁基硫酸鈉。 18. —種如申請專利範圍第10至17項中任一項之化合物或其藥學上可接受鹽或水合物用以製備藥物之用途，該藥物可增加用於降低患者體内之/5澱粉樣蛋白含量之活性成份的循環半衰期，該化合物為該活性成份之前藥。 10 19.如申請專利範圍第18項之用途，其中該可用於降低患者體内之/3澱粉樣蛋白含量之活性成份係選自以下所組成之群組.5-氣-α塞吩-2-績酸[2-(3,5-二氣-苯基）-3,3,3_ 三氟-1-羥甲基-丙基]-醯胺及5’-氣-N-[3,3,3-三氟-2-(三氣甲基甲基）丙基]n塞吩-2’-績酿胺。 15 20.—種製備式I化合物之方法，該方法包括： (a) 使式III磺醯胺醇〇〇H II Η Rl_n_Nv^ 〇 R2/^R3 III 與氣磺酸反應； (b) 以鹼處理⑻之產物以得到式（I)硫酸鹽； 41 200934482 Ο

ΟΜ II Η R「rN ο

r3 其中： R!為經取代芳基或經取代雜芳基； R2及R3係獨立選自以下所組成之群組：CF3、經取 5 代苯基、CVQ烷基、經取代C丨-C4烷基、（CFACrC^烷基、及(CF3)n(經取RCrQ烷基），其中η為1、2或3 ;但其限制條件為當R2或R3為CF3時，則另一個並非未經取代之烧基；且 10 R4及R4,係獨立選自以下所組成之群組：Μ、C!-C4 烷基、苯基、及苄基，其中Μ為一選自於由鈉、鋰、鈣、鎂及鉀所組成之群組之金屬離子；或 15 R4及R4,可一起以形成一選自由以下所組成之群組的環狀結構：

21.如申請專利範圍第20項之方法，其中步驟(a)包括該溶劑乙酸乙酯。 22.如申請專利範圍第20項之方法，其中該鹼為碳酸氫鈉。 42 200934482 23.—種製備式II化合物之方法，該方法包括 (a)在鹼存在下使式III磺醯胺醇〇〇H I! Η R广异一 Ν、 Ο 'R3 III 與式(V)氣膦酸鹽反應 0 II CI- 1、or4 or4 (V) 以得到式（II)膦酸鹽化合物 0 R-S—K 0 0 II -卜r'4 OR4- /' 'R3 ❹ 其中： Ri為經取代芳基或經取代雜芳基； 10 R2及R3係獨立選自以下所組成之群組：cf3、經取代苯基、CVC4烷基、經取代(^-(：4烷基、（CFAQ.Q烷基、及(CF3)n(經取代(^-(：4烷基），其中η為1、2或3 ;但其限制條件為當R2或R3為CF3時，則另一個並非未經取代之烧基； 43 200934482 且 R4及R4,係獨立選自以下所組成之群組：Μ、CrC4 烧基、苯基、及苄基，其中Μ為一選自於由納、裡、I弓、鎂及鉀所組成之群組之金屬離子；或 R4及R4,可一起以形成一選自由以下所組成之群組的ί哀狀結構.

44 200934482 四、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：第（）圖。（無) (二) 本代表圖之元件符號簡單說明：五、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式： Ο 0 Π Η

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