TW200918075A - Compositions and methods for modulating endophthalmitis using fluoroquinolones - Google Patents

Description

200918075 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於使用氟喹諾酮調節眼内炎之組合物及方 法。另外，本發明係關於使用氟喹諾酮治療或控制導致眼 内炎之眼睛或眼部感染之組合物及方法。 【先前技術】 身體與其環境之間的界面較大’且由此存在許多由環境 致病性病原體侵入之潛在機會。眼睛之外部組織構成此界 面之部分’且由此眼睛及其周圍組織亦易受致病性微生物 攻擊’該等微生物之侵入及無控生長引起各種類型之眼部 感染’導致炎症’諸如眼瞼炎、結膜炎或角膜炎，其若未 經治療，則可導致視力嚴重受損。引起眼部感染之常見微 生物類型為病毒、細菌及真菌。此等微生物可直接侵入眼 睛表面’或經外傷或手術滲透至眼球中，或因全身性疾病 而經a流或淋巴系統傳遞至眼睛中。微生物可攻擊眼結構 之任何部分，包括結膜、角膜、葡萄膜、玻璃體、視網膜 及視神經。眼睛或眼部感染可引起嚴重疼痛、眼睛中或眼 睛周圍組織腫脹及發紅，以及視力模糊及減退。 體内之先天級聯在外來病原體侵入開始後不久活化。白 血球（嗜中性白血球、嗜伊紅血球、嗜鹼白血球、單核細 胞及巨噬細胞）被吸引至感染部位，試圖經由吞噬作用消 除外來病原體。白血球及一些受影響之組織細胞由病原體 活化以合成及釋放前發炎性細胞激素，諸如IL_丨p、 IL-5、IL-6、IL-8、TNF-α(腫瘤壞死因子 _α)、GM_CSF(粒 133566.doc 200918075 細胞-巨噬細胞群落刺激因子）及MCP-1 (單核細胞趨化蛋 白-1)。此等釋放之細胞激素接著進一步將更多免疫細胞吸 引至受感染部位，增強免疫系統之反應以防護宿主抵抗外 來病原體。舉例而言，IL-8及MCP-1分別為嗜中性白血球 及單核細胞之有效化學引誘劑及活化劑，而GM-CSF延長 此等細胞存活且增加其對其他前發炎性促效劑之反應。 TNF-ct可活化兩種類型之細胞且可刺激IL_8及MCP-1自其 進一步釋放。IL-1及TNF-α為T及B淋巴細胞之有效化學引 誘劑，該等T及B淋巴細胞經活化以產生對抗外來病原體之 抗體。 儘管發炎反應為自感染部位清除病原體所必需的，但延 長或活性過度之發炎反應可破壞周圍組織。舉例而言，炎 症引起受感染部位處之血管擴張以增加流向該部位之血 流。由此，此等擴張血管變得滲漏。延長之炎症後，滲漏 血管可在周圍組織中產生嚴重水腫且使周圍組織之適當功 能受損（參見’例如V.W.M. van Hinsbergh，職乂

Thrombosis, and Vascular Biology , 卷，。 另外’損傷部位處巨噬細胞之持續主導性存在使得由此等 細胞持續產生毒素（諸如反應性氧物質）及基f降解酶（諸如 基質金屬蛋白酶）’其對病原體與宿主組織均有害。因 此，應控制延長或活性過度之炎症以限㈣身體之不良損 害且加速身體之恢復過程。 眼内炎為眼内腔（亦即，眼睛之前房及後房）及周_織 之炎症。#多數狀況下，可由細菌、真菌、病毒或寄生蟲 133566.doc 200918075 引起之感染觸發此炎症。術後眼内炎為眼内炎之最常見種 類且由白内障、青光眼或視網膜手術或放射狀角膜切開術 後細菌感染所引起。與眼内炎相關之最常見細菌為表皮葡 萄球菌。其他葡萄球菌

、鏈球菌（汾repiococcws)及假單胞菌 屬亦已在眼内炎病例中發現。非感染性眼 内炎可為白内障手術後對眼睛之穿透性損傷所致或保留原 生物質所致。血行性眼内炎係由經血流擴散且沈降於眼睛 中之感染引起。在未及時治療之情況下，眼内炎可引起視 力損失。 糖皮質激素（本文中亦稱作"皮質類固醇"）表示一系列發 炎病狀（包括急性炎症）之最有效臨床治療之一。然而，類 固醇藥物可具有威脅患者整體健康之副作用。 已知某些糖皮質激素與此類別中之其他化合物相比具有 升高眼^(”I0P”）之更大潛力。舉例而言，已知作為極有 效之眼y炎劑之潑尼龍（prednis()lQne)比具有中等眼睛消 人活！生之氟米龍（flu〇r〇meth〇1〇ne)具有升高之更大趨 勢亦已知與局部眼部使用糖皮質激素相關之I〇p升高之 危險隨時間增加。換言之，慢性（亦即’長期）使用此等藥 :9加IOP顯者升高之危險。不同於需要約數週之短期療 :二與眼晴前部之外表面之物理外傷或感染相關之急性眼 症目艮目月後部之感染及炎症可需要延長時段之治 一般約數月或# '、 加IOP升古 時 皮質類固醇之此長期使用顯著增 ο之危險。另外，亦已知使用皮質類固醇以劑量 133566.doc 200918075 間依賴性方式增加白内障形成之危 即使令斷皮質類固醇療法，其仍可 長期投與糖皮質激素亦 J猎由抑制腸道鈣吸收且抑制骨 形成而導致藥物誘導 月貝疏鬆症。長期投與糖皮質激素 之其他不良副作用包括古 一 一 括同血I、咼血糖症、高脂質血症 旨含量增加）及高膽固醇血症（膽固醇含量辦加），

此係歸因於此等藥物對身體代謝過程之影響。 因此’不斷需要提供調節眼内炎之改良醫藥化合物、組 口，及方4 #而要提供治療或控制引起眼内炎之感染的 醫藥化合物、組合物及方法。 【發明内容】 叙而5 ’本發明提供使用氟喹諾酮調節眼内炎之組合 物及方法。

依賴性方式及持續時 險。一旦白内障顯現 進展。 在-態樣中，本發明提供使用新穎^^諾酮調節眼内炎 之組合物及方法。 在另一態樣中，該眼内炎係選自由術後眼内炎、創傷後 眼内炎、非感染性眼内i、全眼球炎、血行性眼内炎及其 組合組成之群。全眼球炎為眼睛之所有膜層(包括眼内結 構）之炎症。 在另一態樣中，本發明提供包含具有式1之氟伽或 其鹽之組合物及使用具有式丨之氟料酮或其鹽調節眼内 炎之方法， 133566.doc 200918075

其中R係選自由以下各基組成之群：氫、未經取代之低碳 烷基、經取代之低碳烷基、環烷基、未經取代之c5_c24芳 基、經取代之CrC24芳基、未經取代之cs-C24雜芳基、經 取代之Cs-C24雜芳基及可於活體中水解之基團；R2係選自 由以下各基組成之群：氫、未經取代之胺基及經—或兩個 低碳烷基取代之胺基；R3係選自由以下各基組成之群： 氫、未經取代之低碳烷基、經取代之低碳烷基、環烷基、 未經取代之低碳烷氧基、經取代之低碳烷氧基、未經取代 之CVC24芳基、經取代之Q-C24芳基、未經取代之C5_C24雜 芳基、經取代之CrC24雜芳基、未經取代之C5_c24芳氧 基、經取代之Cs-C24芳氧基、未經取代之C5_C24雜芳氧 基、經取代之Cs-C：24雜芳氧基及可於活體中水解之基團； X係選自由鹵素原子組成之群；Y係選自由CH2、〇、s、 SO、S〇2及NR4組成之群，其中R4係選自由氫、未經取代 之低碳烷基、經取代之低碳烷基及環烷基組成之群；且z 係選自由乳及兩個氫原子組成之群。 在又一態樣中，本發明提供使用具有式〗之氟喹諾_或 其鹽治療或控制個體之可導致眼内炎之感染的組合物及方 133566.doc •10· 200918075 法。 在又—態樣中’該眼内炎係由細菌、病毒、真菌或原生 動物所引起之感染所致。 在又一態樣中，該眼内炎係由對眼睛之物理損傷或外傷 所致。 在又—態樣中’本發明提供調節個體之眼内炎之方法。 該方法包含將有效量之具有式I之氟喹諾酮或其鹽投與該 個體以調節該眼内炎。 在又—態樣中，本發明提供調節個體之眼内炎之方法。 该方法包含將有效量之具有式I之氟喹諾酮或其鹽局部或 眼内投與該個體以調節該眼内炎。 本發明之其他特徵及優勢自以下實施方式及申請專利範 圍及隨附圖式將變得顯而易見。 【實施方式】 如本文所用之術語”控制”包括減輕、改善、緩解及預 防。

如本文所用之術語"低碳烷基"意謂可未經取代或經取代 之CVCb直鏈或支鏈飽和脂族烴單價基團。該基團可經鹵 素原子（F、c卜仏或丨）部分或完全取代。低碳烷基之非限 制性實例包括曱基、乙基、正丙基、！·曱基乙基(異丙 基）正了基、正戊基、二甲基乙基（第三丁基）及其類 ，基團。其可縮寫成"Alk"。較佳地，低碳烷基包含m'〇個 厌原子更佳地，低碳烧基包含1 - 5個碳原子。 如本文所用之術語，，低碳烷氧基"意謂可未經取代或經取 I33566.doc 200918075 代之q-Cb直鏈或支鏈飽和脂族烷氧基單價基團。該基團 可經鹵素原子(f、α、汾或1}部分或完全取代。低碳烷氧 基之非限制性實例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、i-甲 基乙氧基(異丙氧基)、正丁氧基、正戊氧基、第三丁氧基 及其類似基團。較佳地，低碳烷氧基包含"ο個碳原子。 更佳地’低碳院氧基包含1 _5個碳原子。

術語，，環烧基”意謂僅由碳及氫原子組成之可包含一或多 個稠環或橋環、較佳3員至7員單環之穩定脂族飽和3員至 15員。單環或多環單價基團。環烷基之其他例示性實施例包 括員至1 0員雙環。除非另有規定否則環烧基環可在產 二疋、’·。構之任何;ε厌原子上連接，且若經取代，則可在產 生敎結構之任何合適碳原子上經取代。例示性環烧基包 2壤丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基、環辛基、 %壬基二壞癸基、降宿基、金剛烷基、四氫萘基(萘滿）、 1十II奈基、雙環[2·2·2]辛基、！·甲基環丙基、2_甲基環 戊基、2-甲基環辛基及其類似基團。 如本文㈣之術語”芳基”意謂芳族碳環單價或二價基 團。在—些實施例中，芳基具有5至24個數目之碳原子且 ^有車環（例如苯基或伸苯基）、多個稠環⑼如萘基或葱 土）或多個橋環（例如聯苯）。除非另有規定，否則芳環可在 產生穂定結構之任何合適碳原子上連接，且若經取代，則 可在產生穩定結構之任何合適碳原子上經取代。芳基之非 ^制性實例包括苯基、蔡基、葱基、菲基、二氨節基、節 基、聯苯及其類似基團。其可縮寫成”Ar，，。較佳地，芳基 133566.doc 200918075 包含5]伟碳原子m芳基包含 術語”雜芳基"意謂彳包含—或多個祠 炭班原子。 ::成多㈣或二價基團。在—些實施例中，雜芳農 =有5-24個成員，較佳為5員至7員單環或7員至㈣雜^ 二雜芳基在環中可具有-至四個獨立地選自氮、：及 硫之雜原子1中任何硫雜原子可視情況經氧化且任何氮 雜原子可視情況經氧化或經季録 M ^ ^ -r ^ . 陈非另有規定，否則

” ^產生穩定結構之任何合適雜原子或碳原子上連 接，且若經取代，則可在產生敎結構之任何合適雜原子 或碳原子上經取代。雜芳基之非限龍㈣包括咳。南基、 嗟吩基、料基、°惡°坐基、㈣基、咪唾基"比唾基、異 。惡嗤基、異嗟峻基。惡二哇基、三唾基、四唾基、嗟二唑 基…比咬基、嚷嘻基、哺咬基…比嗪基、三嗓基”引嗪 基、氮雜吲嗪基、吲哚基、氮雜吲哚基、=氮雜吲哚基、 二氫吲哚基、」氫氮雜吲哚基、異吲哚基、氮雜異吲嗓 基、苯并呋喃基、呋喃并吡啶基、呋喃并嘧啶基、呋喃并 。比嗪基、呋喃并噠嗪基、二氫苯并呋喃基、二氫呋喃并吡 咬基、二氫呋喃并嘧啶基、苯并噻吩基、噻吩并吡咬基、 噻吩并嘧啶基、噻吩并吡嗪基' 噻吩并噠嗪基、二氫笨并 噻吩基、二氫噻吩并吡啶基、二氫噻吩并嘧啶基、吲唑 基、氮雜吲唑基、二氮雜吲唑基、笨并咪唑基、咪唑并呢 啶基、笨并噻唑基、噻唑并吡啶基、噻唑并嘧咬基、笨并 嗔峻基、苯并噁嗪基、苯并噁嗪酮基、噁唑并D比啶基、喔 嗤并嘧啶基、苯并異噁唑基、嘌呤基、咣基、氮雜咣基、 133566.doc -13- 200918075 喹嗪基、喹啉基、二氫喹啉基、四氫喹啉基、異喹啉基、 二氫異喹啉基、四氫異喹啉基、啐啉基、氮雜唓啉基、酞 η秦基、氮雜酜嗓基、嗜嗤琳基、氮雜啥。圭琳基、喧嗟琳 基、I雜㈣聽Κ基、二氫&。定基、四氫峰咬基、 嗓咬基"卡峻基“丫 η定基、啡嘻基、啡嘆嗓基及啡嗯嘻基 及其類似基團。 f 糖皮質激素（”GC")W於治療過敏性及慢性發炎疾病或 治療由感染所致之炎症的最有效藥物之一。然而，如上文 所提及’以GC長期治療通常與以下眾多不良副作用相 關：諸如糖尿病、骨質疏鬆症、高血壓、青光眼或白内 障。此等副作用如同其他生理表現一樣，為造成該等疾病 之基因異常表現之結果。最近十年之研究已提供關於對 GC反應性基因之表現的崎導作用之分子基礎的重要見 解。GC藉由與細胞質Gc受體（”GR")結合而發揮其基因缸 作用。GC與GR結合誘導GC_GR複合物移位至細胞二中、，且 在此處其由陽性(轉錄活化)或陰性(轉錄抑制)調節 調節基因轉錄。已不斷有證據表明 ' w< 百利作用血 不良作用為此兩種機制之無差別表現量之結果換丄，、 其以類似有效程度發揮作用。儘管尚不可：確定= 性發炎疾病中之作用的最關鍵態樣，但已有證 ^ GC對細胞激素合成之抑制作用尤為重要。明可能 機制抑制發炎疾病中相關之若干細胞激素的轉^轉錄抑制 胞激素包括IL-Ιβ(介白素]p)、乩_2、扎3 '，該等細 —瘤壞死因子_α)、—(球細皰二二:落 133566.doc 200918075 刺激因子）；且抑制將炎性細胞吸引至炎症部位之趨化激 素的轉錄，該等趨化激素包括IL_8、rantes、Mdl(單 $細胞趨化蛋白_υ、Mcp_3、Mcp_4、ΜπΜα(巨嗤細胞 人！·生蛋白-1 α)及嗜酸性粒細胞趨化因子（⑶min)。ρ丄 Barnes，c/π 如·，第 94卷，557_572 (1998)。另一方面， 有況服力之證據表明為對nf_kB前發炎性轉錄因子具抑制 乍用之蛋白貝的ΙκΒ激酶之合成係由GC增加。此等前發炎 轉錄因子調節編碼許多發炎性蛋白之基因的表現，該等 《性蛋白為諸如細胞激素、發炎性酶、黏附分子及發炎性 又體S· Wissink等人，尬>/·五《如咖0/ ,第12卷，第3

號，354-363 (1998) ; PJ. Barnes及 M. Karin，iVew 丑邮.y 細.，第336卷，1066_1〇77 (1997)β因此，針對不同基因 之G C之轉錄抑制與轉錄活化功能產生炎性抑制之有利作 用。另一方面，類固醇誘導之糖尿病及青光眼似乎由GC 對造成此等疾病之基因的轉錄活化作用而產生。乩 〇 Schkke等人，P/2arwac〇/ 以以，第 96卷，23 43 (2〇〇2)。 因此，儘管由GC轉錄活化某些基因產生有利作用，但由 相同％轉錄活化其他基因可產生不當副作用。因此，極 f要提供在無GC療法之不當副作用的情況下調節炎症之 谱藥化合物、組合物及方法。 一般而言，本發明提供使用氟喹諾_調節眼内炎之組人 物及方法。 σ 在一態樣中，本發明提供使用新穎氟喹諾酮調節眼内广 之組合物及方法。 九 133566.doc 15 200918075 在另一態樣中，該眼内炎係選自由術後眼内炎、創傷後 眼内炎、非感染性眼内《、全眼球炎、血行性眼内炎及其 組合組成之群。 在另一態樣中，本發明提供包含具有式丨之氟喹諾_或 其鹽之組合物及使用具有式丨之氟喹諾酮或其鹽調節眼内 炎之方法， Ο 〇

其中R1係選自由以下各基組成之群：1、未經取代之低碳 烷基、經取代之低碳烷基、環烷基、未經取代之C5_CM芳 基、經取代之Cs-C24芳基、未經取代之c：5_C24雜芳基、經 取代之Cs-C：24雜芳基及可於活體中水解之基團；R2係選自 由氫、未經取代之胺基及經一或兩個低碳烷基取代之胺基 組成之群；R3係選自由以下各基組成之群：氫、未經取代 之低碳烷基、經取代之低碳烷基、環烷基、未經取代之低 碳烷氧基、經取代之低碳烷氧基、未經取代之C5_c24芳 基、經取代之Q-C24芳基、未經取代之c：5_C24雜芳基、經 取代之Cs-C24雜芳基、未經取代之C5_C24芳氧基、經取代 之C5 C24^•氧基、未經取代之Cj-C24雜芳氧基、經取代之 Cs-C24雜芳氧基及可於活體中水解之基團；X係選自由函 133566.doc -16- 200918075 素原子組成之群’ γ係選自由CH2、〇、s、so、s〇2及NR4 組成之群’其中R4係選自由氫、未經取代之低碳烷基、經 取代之低呶烷基及環烷基組成之群；且Z係選自由氧及兩 個氫原子組成之群。 在又一態樣中，調節眼内炎之本發明組合物包含具有式 Π之氟喹諾酮家族之成員或其鹽，

/、中R R、乂、丫及2具有如上文所揭示之含義；且調節 炎症之本發明方法使用該氟喹諾酮。 在又一態樣中，本發明提供包含具有式I或式丨！之氟喹諾 酮或其鹽之組合物及使用具有式〗或式π之氟喹諾酮或其鹽 治療或控制個體之眼内炎或引起該眼内炎之感染的方法。 在一態樣中，R1係選自由以下各基組成之群：氫、Ci_ cs(或替代地c^-C3)經取代及未經取代之烷基、C3_Ciq(或替 代地C3-C5)環烷基、c5-C14(或替代地c6-C14，或C5-C1()，或 C6-C1())經取代及未經取代之芳基、c5_c14(或替代地C6_ CM’或C5-C1G，或C6-C1G)經取代及未經取代之雜芳基及可 於活體中水解之基團。在一實施例中，R1係選自由 C5(或替代地Ci-C3)經取代及未經取代之烷基組成之群。 133566.doc •17- 200918075 在另一態樣中，R2係選自由未經取代之胺基及經一或兩 個^弋5(或替代地Cl_C3)烷基取代之胺基組成之群。 在又一態樣中，R3係選自由以下各基組成之群：氫、 C〗-C5(或替代地Ci_C3)經取代及未經取代之烷基、c3_ Cio(或替代地C^C：5)環烷基、C〗-C5(或替代地Cl_c3)經取代 及未經取代之烷氧基、C5_Ci4(或替代地c6_Ci4 ,或c5_ c10，或C6_C1G)經取代及未經取代之芳基、C5_C1权或替代 r 地C6_Cl4，或C5_C10 ’或C6-C10)經取代及未經取代之雜芳 1 基及C5_Cl4(或替代地C6-C14，或CVC,。，或c6_ClQ)經取代 及未經取代之芳氧基。在一實施例中，R3係選自由C3_ Cl〇(或替代地C3_c5)環烷基組成之群。 在又一態樣中’ X係選自由C1、F及Br組成之群。在一實 施例中，X為C1。在另一實施例中，χ為F。 在又一態樣中，γ為CH2。在又一態樣中，z包含兩個氫 原子。 Y為NH，Z為Ο，且X為C1。 本發明之組合物進一步包含醫藥學上可 I 在又一態樣中 在另一態樣中 接受之載劑。 具有式I之化合物家族之一些非限制性成員展示於表1 中。表1中未列出之家族之其他化合物亦適合於所選情 133566.doc -18- 200918075 表1 一些所選氟喹諾酮 化合物 R1 R2 R3 X Y z 1 Η H ch3 C1 ch2 2H 2 Η nh2 ch3 C1 ch2 2H 3 Η nh2 環丙基 C1 ch2 2H 4 Η NH(CH3) 環丙基 C1 ch2 2H 5 Η n(ch3)2 環丙基 C1 ch2 2H 6 ch3 nh2 環丙基 C1 ch2 2H I 7 c2h5 nh2 環丙基 C1 ch2 2H 8 Η nh2 環丙基 F ch2 2H 9 Η nh2 環丙基 Br ch2 2H 10 Η NH(C2H5) 環丙基 Cl ch2 2H 11 Η NH(C3H7) 環丙基 F ch2 2H 1 12 Η nh2 環戊基 Cl ch2 2H 13 Η nh2 環丙基 Cl ch2 〇 14 Η nh2 環丙基 F ch2 0 15 Η nh2 環丙基 Br ch2 0 16 Η nh2 環丙基 Cl CH(C2H5) 0 17 ch3 nh2 環丙基 Cl ch2 0 18 ch3 NH(CH3) 環丙基 Cl ch2 19 ch3 n(ch3)2 環丙基 Cl ch2 0 20 ch3 NH(C3H7) 環丙基 Cl ch2 0 21 ch3 NH(C2Hs) 環丙基 Cl ch2 0 22 ch3 N(CH3)(C2H5) 環丙基 Cl ch2 0 23 H nh2 環丙基 Cl NH 0 24 ch3 NH(CH3) 環丙基 Cl NH 0 25 H 2H 環丙基 Cl NH 0 在一實施例中，本發明之組合物中所包括及本發明之方 法中所使用之氟喹諾酮甲酸具有式III。 133566.doc -19- 200918075 ο ο

在另一實施例中，本發明之組合物中所包括及本發明之 方法中所使用之氟喹諾酮甲酸具有式IV、式V或式VI。

在其他實施例中，本發明之組合物中所包括及本發明之 方法中所使用之氟喹諾酮甲酸具有式VII或式VIII。 133566.doc -20- (VII) 200918075

I

(VIII) …、T•姐，且不I咧之方法使用 一或多種該等化合物。 心樣中’本發明之組合物包含具有式！、式Η或式 。物中之一者之對映異構體之混合⑼，且本發明之 方法使用該混合物。 本文中所揭不之氟喹諾酮可由美國專利及 5,385，_中所揭示之方法製造，該等專利以引用的方式併 入本文中。 在又一態樣中，本發明提供調節個體之眼内炎之方法。 該方法包含將有效量之具有式〗、式π、式ΙΠ、式ιν、式 V、式VI、式VII或式VIII之氟喹諾酮或其鹽投與該個體以 調節該眼内炎。 在又一態樣，本發明提供治療或控制個體之眼内炎或引 起該眼内炎之感染的方法。該方法包含將有效量之具有式 I33566.doc 2】 200918075 I、式II、式III、式IV、式v、式VI、式νπ或式VIII之氟喹 諾酮或其鹽投與該個體以治療或控制該眼内炎或引起該眼 内炎之感染。 在又-態樣中，該感染係由細菌、病毒、真菌、原生動 物或其組合引起。

在又一態樣中，本發明提供調節伴隨眼睛手術之發炎反 應之組合物及方法，其中該組合物包含具有式I、式II、式 III、式IV、式V、式¥1、式VII或式之氟啥諾酮中之一 者’且該方法使用該組合物。該眼睛手術之非限制性實例 包括白内手術、青光眼手術、視網膜手術及放射狀角膜 切開術。 〜、樣中纟發明提供治療或控制個體之眼内炎或 引起該眼内炎之感染的組合物及方法，該等組合物及方法 與包含至少-種用於治療或控制該眼内炎之先前技術糖皮 質激素之組合物相比引起較低程度之至少-種不良副作 用。

在-態樣中，該至少一種不良副作用之程度係 :活體外測定。舉例而言，該至少-種不良副作用之J 物行細胞培養且測定與該副作用相關之: 物I己之含1來敎。該等生物標記可包括參與導 :作用之生物化學級聯或為該生物化學級聯之產物的蛋： 質（例如酶）、脂質、糖及^ 物的蛋白 法於下文進-步揭示。”表性活體外測試方 在又一態樣中，該至少-種不良副作用係選自由青光 133566.doc -22- 200918075 眼、白内障、高血壓、高血糖症、高脂質血 含中 1 °亥至少—種不良副作用之程戶将/ 先將該組合物投與該個體且存在於該個體中之二百 定。在另一實施例中，該至少一 、’、天測 ^ 種不良副作用之

百先將該組合物投與該個體且存在於該個體中之後f 4天 測定。在又-實施例中，該至少—種不良副作用之程度係 在首先將該組合物投與該個體且存在於該個體中之後⑽ 天測定。或者，該至少—^ >C * ό,Ι 7Z- ^ 主^種不良副作用之程度係在首先將 該等化合物或組合物投與該個體且存在於該個冑中之後約 2個月、3個月、4個月、5個月或6個月測定。 在另-態樣中，將該至少-種用於治療、控制、減輕或 改善相同病狀之先前技術糖皮質激素以足以在大致相同逝 去時間後與本發明之組合物對該病狀產生等效有利作用之 劑量及頻率投與該個體。 在又一態樣中’該至少一種先前技術糖皮質激素係選自 由以下各者組成之群：21-乙醯氧孕烯醇酮（2卜 acetoxypregnenolone)、阿氯米松（aici〇metasone)、阿爾孕 酮（algestone)、安西縮松（anicinonide)、倍氣米松 (beclomethasone)、倍他米松（betamethasone)、布地奈德 (budesonide)、氯潑尼松（chl〇roprednisone)、氣倍他索 (clobetasol)、氣倍他松（cl〇betasone)、氯可托龍 (clocortolone)、氣潑尼醇（cloprednol)、皮質固酮 (corticosterone)、皮質酮（cortisone)、可的伐0生 133566.doc •23· 200918075 (cortivazol)、地夫可特（deflazacort)、地索奈德 (desonide)、去經米松（desoximetasone)、地塞米松

(dexamethasone)、雙氟拉松（diflorasone)、雙 It 米松 (diflucortolone)、雙氟潑尼 S旨（difluprednate)、甘草次酸 (enoxolone)、氟紮可松（fluazacort)、氟氯奈德 (flucloronide)、氟米松（flumethasone)、氟尼縮松 (flunisolide)、丙 _ 化氟新龍（fluocinolone acetonide)、醋 酸氟輕鬆（fluocinonide)、丁基氟可丁（fluocortin butyl)、 氟可龍（fluocortolone)、氟米龍、醋酸氟培龍（fluperolone acetate)、醋酸 I 潑尼定（fluprednidene acetate)、氟潑尼龍 (fluprednisolone)、氟氫縮松（flurandrenolide)、丙酸氣替 卡松（fluticasone propionate)、搭基縮松（formocortal)、哈 西縮松（halcinonide)、 丙酸鹵貝他索（halobetasol propionate)、鹵米松（halometasone)、醋酸鹵潑尼松 (halopredone acetate)、氫可他奈特（hydrocortarnate)、氫 皮質酮（hydrocortisone)、氣替潑諾（loteprednol etabonate) 馬潑尼 _ (mazipredone)、曱經松 (medrysone)、甲潑尼松（meprednisone)、曱潑尼龍 (methylprednisolone)、糠酸莫米松（mometasone furoate)、 帕拉米松（paramethasone)、潑尼卡 S旨（prednicarbate)、潑尼 龍、25-二乙基胺基-醋酸潑尼龍、潑尼龍磷酸鈉、潑尼 松、潑尼瓦爾（prednival)、潑尼立定（prednylidene)、利美 索龍（rimexolone)、替可的松（tixocortol)、曲安西龍 (triamcinolone)、曲安奈德（triamcinolone acetonide)、苯曲 133566.doc • 24- 200918075 安西龍（triamcinolone benet〇nide)、己曲安西龍 (tdameinolonehexacetonide)、其生理學上可接受之鹽其 組合及其混合物。在-實施例中，該至少一種先前技術糖 皮質激素係選自由地塞米松、潑尼松、潑尼龍、曱潑尼 龍、甲羥松、曲安西龍、氣替潑諾、其生理學上可接受之 鹽、其組合及其混合物組成之群。在另一實施例中，該至 少一種先前技術糖皮質激素為眼部使用可接受的。 測試1 :由具有式IV之化合物及莫西沙星抑制人類THp_ 1單核細胞中LPS誘導之細胞激素表現 實驗方法 人類THP-1單核細胞（ATCC TIB 2〇2)係購自美國菌種保 存中心（American Type Culture c〇llecti〇n)(Manassas, Virginia)且於37 C下在具有5% C〇2之潮濕恆溫箱中維持於 補充有 ΙΟ/ό 胎牛血清（"FBS"，Invitrogen, Carlsbad, California)、100 U/mL 青黴素（invitrogen， Carlsbad, California)及 100 pg/rnL 鏈黴素（invitrogen, Carlsbad,

California)之 RPMI 1640 培養基（Invitr〇gen，Carlsbad， California)中。將THP-1細胞在含有10%透析血清之RPMI 1 640培養基中預培養24小時。將細胞在24孔盤中接種於含 有2°/。透析血清之RPMI 1640培養基（購自Hyclone，Loga， Utah)中且用媒劑（DMSO，二曱亞石風），l〇 pg/mL LPS (Sigma Aldrich，St. Louis，Missouri)，0.1、1、1〇 或 30 pg/mL莫西沙星（Neuland Laboratories，Hyderabad，India)， 0.1、1、10或30 pg/mL具有式IV之化合物（本文中亦稱作 133566.doc -25- 200918075 ” BOL-303224-A” ’ Bausch & Lomb Incorporated,

Rochester, New York)，10 Hg/inl LPS + 0·1、1、1〇或3〇 pg/mL 莫西沙星’或 l〇 pg/ml LPS + 0.1、1、1〇 或 3〇 pg/mL具有式IV之化合物處理18小時。一式三份進行各處 理。 多工液相芯片檢測系統（Multiplex Luminex) 使用多工珠粒技術分析樣本’該技術利用微球體作為供 免疫檢定用之固體載體且允許自各樣本分析所有細胞激素 (D.A. Vignali, J. Immunol. Methods，% 243 4 > 243-255 (2000)) ^根據製造商說明書量測十六種細胞激素。簡言 之，在4°C下將50 μί培養基樣本與抗體塗覆之捕捉珠粒一 起培育隔夜。在室溫下將經洗務之珠粒與生物素標記之抗 人類細胞激素抗體一起進一步培育2小時，接著與抗生蛋 白鏈菌素-藻紅素一起培育30分鐘。使用Luminex 200™ (Luminex, Austin，Texas)及 Beadview 軟體 1·〇 版（Upstate Cell Signaling Solutions，Temecula，California)分析樣本。 已知濃度之重組人類細胞激素之標準曲線係用於將螢光單 位（中值螢光強度）轉換成以pg/mL為單位之細胞激素濃 度。僅標準曲線之線性部分用於量化細胞激素濃度，且在 螢光讀數超出標準曲線之線性範圍之情況下，進行適當稀 釋以確保濃度處於曲線之線性部分中。 細胞代謝功能 藉由AlamarBlue檢定測定細胞代謝能力（J_ 〇，；8士11等 人，F五似乂，第267卷，5421-5426 (2000))。簡言之，在 133566.doc -26- 200918075 移除培養基後，於37°c下在具有5% c〇2之潮濕恆溫箱中將 細胞與 1. 1〇 稀釋之 AlamarBlue 溶液Camar⑴〇, California) —起培育3小時。藉由在53〇_56〇 _下激發且在 590 nm下發射來以螢光測定法讀取培養盤。相對螢光單位 ("RFU")係用於測定細胞生存力。 資料分析及統計學 將所有細胞激素濃度（pg/mL)表示成平均值士標準差。使 用單因子ANOVA，以使用媒劑對照或LPS處理作為參考之 唐那氏事後比較測試（Dunnett's post-hoc comparison test) 來進行比較各組之間處理之作用的統計分析。對於所有檢 定而言，將；7 $ 0.05預定為統計顯著性之標準。 結果 如藉由AlamarBlue檢定所量測，未發現處理中之任一者 對細胞代謝活性產生統計顯著影響（數據未示）。測定來自 此荨各個處理組之培養基中之細胞激素含量之研究的總體 結果概述於表2中。在來自THP-1單核細胞之培養基中可镇 測到檢定中的16種細胞激素中之14種含量巨大，其中除 EGF及IL-7以外之所有細胞激素受影響^ THP-1單核細胞 暴露於1 0 pg/mL LPS歷時1 8小時導致14種可偵測細胞激素 中有13種顯著增加；THP-1單核細胞培養基中之vegf之量 亦增加，但該增加未達到統計顯著性。 133566.doc •27· 200918075 表2 在人類THP-1單核細胞中由莫西沙星及具有式IV之化合 物抑制LPS刺激之細胞激素產生的概述

細胞激素 由莫西沙星抑制， 以pg/mL為單位 由具有式IV之化合物抑 制，以pg/mL為單位 0.1 1 10 30 0.1 1 10 30 弗拉塔凱(Fractalkine) G-CSF X X X X GM-CSF X X IL-12p40 X X X X IL-Ια X X X X X IL-Ιβ X X IL-lra X X X X X IL-6 X X X X IL-8 X X IP-10 X X MCP-1 X MIP-la X X RANTES VEGF X X X 註解：”ΧΠ表示在特定濃度下顯著抑制。 莫西沙星與具有式IV之化合物均顯著抑制ΤΗΡ-1單核細 胞中LPS誘導之細胞激素產生。對於莫西沙星而言，在1 pg/ml下對於 IL-12p40，在 10 pg/ml下對於 IL-lra及 IL-6， 且在 30 pg/ml下對於 G-CSF、GM-CSF、IL-la、IL-Ιβ、IL-8、IP-10及MIP-la觀測到顯著抑制作用（表1)。對於具有式 IV之化合物而言，在0.1 pg/ml下對於IL-la，在1 pg/ml下 對於 G-CSF、IL-lra 及 IL-6，且在 30 pg/ml 下對於〇]\4-CSF、IL-12p40、IL-Ιβ、IL-lra、IL-8、IP-10、MCP-1 及 133566.doc -28- 200918075 MIP_ 1 a觀測到顯著抑制作用（表2)。莫西沙星抑或具有式 IV之化合物均不改變LPS刺激之RANTES或弗拉塔凱之產 生。 此研究中所偵測之細胞激素可分成四個不同反應組。第 一組包括此等氟喹諾酮對其無顯著功效之彼等細胞激素 (RANTES及弗拉塔凱）。第二組細胞激素包括gm_CSF、 IL-Ιβ、IL-8、IP_i〇、MCIM&MIp_la。對於此等細胞激 素而言’莫西沙星與具有式IV之化合物（圖中標記為B0L_ 303224-A)在LPS刺激後具有類似影響（圖1(a)至圖1(f))。第 二組細胞激素包括 G-CSF、IL-Ια、IL-lra、IL-6及 VEGF， 其為具有式IV之化合物對其展示比莫西沙星更佳之效能的 彼等細胞激素（圖2(a)至圖2(e))。最後，第四組細胞激素為 莫西沙星對其比具有式IV之化合物更有效之彼等細胞激素 且僅由IL-12p40組成（圖3)。 就具有式IV之化合物而言，在極低濃度下觀測到顯著細 胞激素抑制作用。舉例而言，在低至i 〇〇 ng/mL下對IL-1 a

且在1000 ng/mL下對G-CSF、IL-lra及IL-6觀察到具有式IV 之化合物之顯著抑制作用。此等濃度恰當地處於局部投藥 後預測眼睛浪度以下（K.W· Ward等人，《/. P/iarmaco/. 77zer. ’第23卷，243-256 (2007))。因此，可獲得由此細胞 激素抑制概況產生之臨床效益。 測s式2 ·紐西蘭（New Zealand)白兔之預防性眼内炎模型中 四種抗生素調配物之功效評估 介紹 133566.doc •29- 200918075 此項研究之目的在於評估四種抗生素調配物在治療紐西 蘭白兔之細菌性眼内炎中之功效。 材料及方法 測試物品 四種抗生素調配物在此研究中使用且鑑別如下： .BOL-303224-A(0.6%懸浮液） • Quixin®(0.5%左旋氧敗沙星（Levofloxacin)) .Vigamox®(0.5%莫西沙星） ….Zymar®(0.3%加替沙星（Gatifloxacin)) 將測試物品儲存於室溫下且提供時即使用。具有相關安 全資訊之材料安全數據表（MSDS)或包裝插頁為各測試物 品而提供。生理食鹽水用作陰性對照物品且以與抗生素調 配物相同之方式投與。關於測試物品及對照物品之其他資 訊展示於表3中。 表3 物品 描述 ------- —......—·.....土 0.6%懸浮液(6 mg/mL) ; Bausch & Lomb，批號037931

Quixin® ..............—:.....................................................................................................-.........................................-.............................-....................g................... 左方疋氧鼠沙星眼用溶液，0.5%(5 mg/mL) ; Vistakon® ——一———-—........................................Pharmaceuticals，LLC，批號 108020，有效期 04/09

Vigamox® 瞄..........................................——....-——......-—-----------------------------------—........ ------- 鹽酸莫西沙星眼用溶液，〇.5〇/0作為基劑(5mg/mL) ; Alcon 加替沙星眼用溶液’ 〇·3%(3 mg/mL) ; Allergan, Inc，批號 —..............................-.........4812ii有效期12/08，及批號48517，有效期01/09 0.9%氣化納注射液usp ; B. Braun Medical Inc，批號 --^J6L〇12，有效期09/08 ,及批號J7D025，有致期〇4/〇$ 細菌接種體 133566.doc -30· 200918075

抗一甲氧苯青黴素（Methicillin)之金黃色葡萄球菌 (沿即，义⑽，菌株 atcc Shu (MicroBiologics Power™ ⑷⑽叫他邮，批號 49643i， 有效期(H/09,計數/小球：2.6 x 1〇8)，係用於誘導細菌性 眼内炎。金黃色葡萄球g以;東乾小球形式供給且在水合之 前冷藏（2-8°〇儲存。MSDS與金黃色葡萄球菌一起供給。 緩衝水（APHA)(Remel Corp.，批號 472492 ,有效期 9/11/〇7 ’批號54〇843，有效期仏咖）係用作水合液。平 衡鹽溶液（BSS)(B. Braun Medica卜批號J6N〇n，有效期 10/08)係用於製備供接種用之金黃色葡萄球菌之懸浮液。 在接種每一天如下製備金黃色葡萄球菌之懸浮液：使凍 乾之金黃色葡萄球菌小球及水合液達到室溫。 :至三個小球置放於小瓶中之10mL水合液中。 蓋且在34-38X：下培育30分鐘以確保完全水合。培育後， 使經水合之物質渦旋以達成均質懸浮液及有機體之均等分 布。此懸浮液在製備當天用作接種體。 各接種體對群落形成單位（CFU)而言列舉如下：用 製備連續1:10(初始體積：最終體積）稀釋液，且用胰酶大 豆瓊脂（TSA)製造稀釋液之雙重傾注盤（1毫升/盤）。將盤在 3〇-35。(：下培育29_47小時且接著計數。接種體之所得濃度 為 3.5X107 CFU/mL(對於組冬〇、2 9><1〇7 CFu/m以對於組 D-F)及 3.3xl〇7 CFU/mL(對於組 G-I)。 各接種體之劑量體積（25 μί)列舉如下 將〇·〇25 mL接種 體置放於9.975 mL BSS中。用BSS製備連續1:1()稀釋液 133566.doc 31 - 200918075 且用TSA製造稀釋液之雙重傾注盤（1毫升/盤）。將盤在3〇_ 35°C下培育29-47小時且接著計數。接種體之所得濃度為 2_5Xl〇5 CFU/劑（對於組 A-C)、7.5xl05 CFU/劑（對於組 D-F) 及 4.1xi〇5 CFU/劑（對於組（M)。 以下來自方案之偏差在接種體列舉期間出現：對於首次 稀釋而言’將〇.025 mL接種體置放於9 975 mL BSS中；方 案規定將1.0 mL接種體置放於1 45 mL BSS中。在30-35°C 下培育所製備之盤；方案規定將在34_38°c下培育盤。此 等偏差對研究結果無影響。 測試系統 動物 五十一隻雌性紐西蘭白兔係獲自The Rabbit s〇urce (Ramona，California)。動物在給藥時為9_15週齡且稱重 1.6-2.5 kg。方案規定動物在給藥時將至少稱重2 〇

結果無影響。由耳標及籠卡鑑別動物。 動物飼養 到達後，即檢查動物以確保其為健康的且在置於研究中 之前檢疫10天。在檢疫期結束時， 康參數及任何解剖學眼部異常。 再次檢查動物之一般健 將動物圈養於個別懸掛的不鱗鋼籠中 序進行圈養及衛生消毒。 根據國内操作程 每曰向動物提供Teklad認證全球高纖維兔

Harlan Teklad提供膳食認證及分析。 取难兔膳食。由賣方 未進行除由製造商提 133566.doc •32- 200918075 :::等分析以外之分析。向動物隨意提供自來水。已知 ,、、、7木物存在於水中且未進行除由當地供水管理區所提供 及如國内操作程序中所規定 疋^後4分析以外之額外分析。 根據國内操作程序監測璟音 β 』衣J兄參數。研究室溫為70-73T， 具有57-86%相對濕度。 預處理檢查 置於研究之前’每隻動物經歷預處理眼部檢查(狹縫燈

及間接檢眼鏡檢查）。根據McD_ld 系統對觀測 心刀且使用標準化數據收集表記錄。置於研究之接受桿準 如下：結膜充血及腫脹，計分m於瞳孔反應，計分 為〇物示瞳孔反應為正常的(計分=0)或在檢眼鏡檢查 前用擴瞠劑使暖孔擴大（計分=3));對於所有其他觀測變 數，計分為0。 處理組 ，處理組描述於表T2_lt。如下在三個階段中進行研究： 首先接種組A-C(BOL-303224-A、Zymar®及生理食鹽水）中 之動物；八天後接種組D_F(Quixin®、Vigam〇x@&未經處 理）中之動物；且第一組之後三十三天接種組〇_ I(Quixm®、Vigamox®及生理食鹽水）中之動物。 在各階段中處理之前，將動物稱重且隨機分配至經排定 以供處理之組中，其中一者例外：接種第一組後八天，在 使動物隨機分至組〇及E(Quixin®及vigam〇x®)中之後將組F 動物（未經處理之對照）添加至研究中。方案指示在各階段 中將動物稱重且隨機分至處理組中。由於組F動物之重量 133566.doc -33- 200918075 類似於組D及E動物之重量，故此偏差對研究結果無影 響。根據經修改之拉丁方（Latin square)使動物隨機分至處 理組中。 抗生素給藥 f 在眼内接種之前及之後用適當物品（抗生素或生理食鹽 水）處理組A-E及G-I中之動物之右眼。經由正排量移液管 以50微升/劑之體積局部投與物品。每隻右眼在接種前以 1 5分鐘時間間隔接受四個劑量之物品（在·6〇分鐘、_45分 鐘、-30分鐘及-15分鐘）且在接種後以6小時時間間隔接受 五個劑量之物品（接種後即刻及在6小時、12小時、1 8小時 及24小時）。記錄每次劑量投與之時間。組F動物之右眼在 接種之前及之後保持未經處理。

方案規定抗生素或生理食鹽水之劑量將在以下時間範圍 内給與：接種前時間間隔之士3分鐘；接種後即刻（無範 圍）；及接種後時間間隔6小時或稍後之±5分鐘。一些時間 間隔下之實際時間範圍大於彼等規定範圍。大部分劑量： 以下範圍内給與：接種前時„隔之±4分鐘；接種後即刻 至5分鐘；接種後時間間隔6小時及24小時之士5分鐘 種後時間間隔12小時及18小時之±3〇分 接種後即刻之給藥時間間隔而言，由於接種及抗 係於單獨房間中由不同人M進行以 =—藥 m ^ ^ m X 守…、圉’因此時間範 圍稍有增加。給藥時間範圍之偏差 響。 對研九結果無明顯影 禁食 133566.doc -34· 200918075 在眼内給藥前至少一小時使組A-E及G-Ι中之動物禁食。 記錄禁食之起始時間及眼内給藥之時間。組F中之動物在 給藥前未禁食。方案規定在眼内給藥前至少兩小時將使所 有動物禁食。此偏差對研究結果無影響。 麻醉 眼内給藥前，將動物稱重且以靜脈内注射0· 1 mg/kg劑量 之氯胺嗣（ketamine)/甲苯噻嗪（xylazine)混合液（π叫胤 氯胺酮，23 mg/mLf苯噻嗪）使之麻醉。 眼用製劑 眼内給藥刖將鹽酸丙美卡因（pr〇paracaine hydrochloride) 〇·5%(1-2滴）傳遞至每隻右眼。 眼内給藥程序 第1天，每隻動物在右眼中接受金黃色葡萄球菌接種體 之25-μί眼内注射液。使用連接有川號“/]吋針之Hamiit〇n 注射器給與眼内注射液。方案規定將使用3〇號χ5/8吋針給 與眼内注射液。亦規定所收集之資料將包括給藥注射器重 量但°亥荨/主射器在注射期間不稱重。此等偏差對研究結 果無影響。使眼内注射液經瞼緣至中心前房隅中。 用無菌棉簽或結膜壓緊在注射部位之上來施加注射後即 玄J £塞。1 4次注射後注意到少量滲漏，如下··組a，2983 號及2969號；組B，2967號及2953號；組D，3326號、 3329號、3340號及3334號；組e，3091號；組F , 3078號及 3088號；組G ’ 3524號及3552號；組Η，3537號。記錄每 ••人庄射之時間。為維持無菌，接種及抗生素給藥係於單獨 I33566.doc -35- 200918075 房間中由不同人員進行。 死亡率/發病率 母天兩次觀測動物之死亡率/發病率。 體重 以隨機方式且於眼内給藥之前將動物稱重。 眼部觀測 在投與最後劑量之抗生素或生理食鹽水後，第2天針對

每隻動物之雙眼進行狹縫燈眼部觀測（包括結膜、角膜及 虹膜觀測）及間接檢眼鏡檢查（後段觀測）。亦觀測組D_j動 物之眼睛的瞳孔反應、房水閃光、細胞閃光及晶狀體不透 月度。方案未規定將觀測眼睛之瞳孔反應、房水閃光、細 胞閃光及晶狀體不透明度。此偏差提供更多評估資料，且 其對研究結果無不良影響。對各種所描述症狀（眼瞼炎、 虹膜炎、結膜炎、角膜水腫及角膜浸潤）使用〇至3或〇至4 之嚴重度分級來對眼睛發現計分。方案規定將對各種症狀 使用0至3之嚴重度分級來對眼睛發現計分但對於一歧眼 睛症狀而言’使用0至4之分級對發現計分。此偏差對研究 結果無影響。#隻眼睛之最高可能總計分為27(不包括對 瞳孔反應、房水閃光、細胞閃光及晶狀體不透明度之

分）。前段及後段之眼部檢查及臨床評估 :D 於表T2-2中。 卞刀系統展示 安樂死 死 以 24小時臨床眼部檢查完成後，以靜脈内注射 溶液對動物施以安樂死。根據已確立之國内操作：：施 133566.doc -36- 200918075 安樂死。 驗屍 女樂死後，在無菌條件下自每隻右眼收集房水及玻璃體 液以測定此等組織中活細菌之數目。分別使用则虎％叶針 及21號1对針收集房水及玻璃體液樣本。記錄所收集樣本 之體積。藉由使各玻璃體液樣本三次穿過25號針使之液化 (在生物安全櫥中進行）。觀測一個玻璃體液樣本（組E， 3336號）中之血液。 細菌列舉 如下測定房水及玻璃體液樣本中之細菌計數：對於各樣 本而5 ，用無菌磷酸鹽緩衝液製成⑺倍稀釋液（初始體 積.最終體積=1:10、1:100、1:1000及 1:1〇〇〇〇)。將各稀 釋液式一伤（1毫升/盤）塗於TSA上，且接著將盤在3〇_ 35 C下培育46-48小時。對各盤上之群落計數，且計算雙 份盤之計數的平均值。以小於3〇〇個細菌群落/盤稀釋用於 計算各樣本中之細菌數。將活的金黃色葡萄球菌有機體之 數目（CFU)表示成10底對數。使用vitek(Bi〇Merieux)自動 微生物鑑別系統使具有異常細菌計數之樣本盤經受物種鑑 別。 以下來自方案之偏差在列舉期間出現：用於塗盤之樣本 稀釋比率為1:10、1:1〇〇、1:1〇〇〇及1:1〇〇〇〇;方案規定比 率將為1:1、1:10、1:100及1:1〇〇〇。塗盤中所使用之tsa係 由Remel Corp供給；方案規定TSa將由Difco供給。將樣本 盤在30-35 °C下培育46-48小時；方案規定將樣本盤在34_ 133566.doc -37- 200918075 。使具有異常細菌計數之樣本盤經受物 示將進行微生物㈣。料偏差對研究 值組之總眼部嚴重度計分計算描述性統計（平均 )僅藉由目測來評估其餘數據。 動物福利聲明

▲進錢研究以評估測試物品在治療細菌性眼内炎中之功 w索進ϋ研究之替代方法；然而’為適當評估測試 勿：之功⑧，需要全身測試系統。此研究遵守所有國内動 “田利政束且由實驗動物管理及使用委員會 •mal Care and Use Committee)批准。 結果 死亡率 研九中不存在任何動物之不定期死亡。

38°C下培育48小時 種鑑別；方案未指 結果無影響。 統計分析 眼部觀測 平均總眼部嚴重度計分呈現於表T2-3中。組之間的一般 差異如下.用BOL_303224-A(組B)處理之眼睛具有比用 Zymar<S(組 C)、Quixin®(組 D及 H)、Vigamox®(組 EAI)、生 理食鹽水（組A及G)處理之眼睛或未經處理之眼睛（組〇更 低之總計分。Zymar®、Quixin®、vigam〇)^及生理食鹽水/ 未、、’_處理、.且之間的總計分差異不明朗，此主要歸因於此等 、’且内之了隻性。以7 5χ 1〇5 接種之眼睛似乎具有比以 4_1Xl〇5 CFU接種且施以類似處理（Quixin®、Vigam〇x®或生 133566.doc -38- 200918075 理食鹽水/未經處理）之眼睛更高之總計分。 個別動物之眼部觀測呈現於表T2_4中。由於所有左眼看 似正常’因此未展示未經處理之左眼的觀測。在所有右眼 中觀測炎症之跡象；所有組中一般觀察之異常包括結膜充 血及腫脹；角膜損傷（無角膜翳）；房水閃光及細胞閃光； 虹膜涉入；及前房隅中之血纖維蛋白。在除組b(b〇l_ 303224-A)以外之所有組之右眼中頻繁觀察到結膜流出 物在組B中未觀測到結膜流出物。在除組g_j(4.1 χ丨〇5 CFU-接種組)以外之所有組之右眼中頻繁觀察到不良瞳孔 反應，在組G-I中瞳孔反應大多數為正常的。眼睛之後段 在以2.5Χ105 CFU(組A_C)接種之18隻眼睛中之17隻中或在 以7.5xl〇5 CFU(組D-F)接種之15隻眼睛中之Μ隻中皆不可 見，但其在以4.1χ1〇5 CFU(組G_I}接種之18隻眼睛中之μ 隻中可見。 細菌列舉 房水及玻璃體液樣本中之細菌計數展示於表T2_5中。如 下在房水樣本十發現活細菌：#25xl〇5 CFU(組A)接種之 全部6隻經生理食鹽水處理之眼睛；以41χ1〇5 cfu(組⑺ 接種之6隻經生理食鹽水處理之眼睛中之2隻；3隻未經處 理之眼睛（組F)中之2隻；及以4·1χ105 CFU(組H)接種之石隻 經Qubdn®處理之眼睛中之2隻。在來自經生理食鹽水處二 之眼睛之樣本當中，一者（組G，3551號）具有超過3χΐ〇6 CFU之經計异細菌計數；此高於接種體中之計數。自此樣 本生長之盤-群落經鑑別為兩種污染物種（陰溝腸桿菌 133566.doc -39- 200918075 (心㈣6α咖c/0_e)及產氣腸桿菌（細㈣^⑽ ⑻⑺以⑽幻）。排除受污染之樣本，在來自兩隻未經處理眼 睛（，、且F)之房水樣本中發現最高細菌計數丨％及135(分別 也l〇gio(CFU)-2.29及2.13)。為了比較，注射於此等眼睛 中之細菌計數（l〇g10(CFU))為5.88。 在來自其餘經生理食鹽水處理、未經處理或經Quixin® 處理之眼睛的房水樣本中或在經〇.6% a(組 B)、Zymar®(組C)或vigam〇x®(組E及I)處理之任何眼睛中 皆未發現活細g。在任何玻_液樣本巾未發現活細菌。 結論 此研究之目的在於評估四種抗生素調配物在治療紐西蘭 白兔之細菌性眼内炎中之功效。總之，如由眼部發現所指 不2.5x10至7·5χ1〇5 CFU金黃色葡萄球菌眼内注射至兔 眼中在接種24小時内誘發眼内炎。眼部發現表明b〇l_

J 3 03224-A(具有式1¥之化合物）比其他商業抗生素產品或生 理食鹽水/無處理更有效地控制與眼内炎相關之眼睛炎 症，尤其結膜流出物。接種後24小時所收集之玻璃體液樣 本不3有/舌細自’無淪眼睛接受抗生素處理與否。接種後 24小時所收集之多數房水樣本不含有活細菌，包括來自未 接受抗生素處理之五隻眼睛的樣本。對於未接受抗生素處 理之九：眼睛而言，房水樣本含有活的但呈大體上減少之 群的金黃色葡萄球g。細菌計數中之—些減少可歸因於兔 免疫系統本身且歸因於所選細菌種類金黃色葡萄球菌，該 細菌在性質上更厭氧之環境中可能不活躍。 I33566.doc 200918075 表 T2-1 處理組 組 編號 局部抗生素處理 (右眼） 劑量體細菌給藥金黃色葡萄球菌ATCC 積 （右眼） 33591劑量體積 驗屍 A 6 生理食鹽水 50 pL 眼内 25 μί 第2天 B 6 0.6% BOL-303224-A 50μΙ> 眼内 25 μίν 第2天 C 6 Zymar®(0.3 %加替沙 5 0 pL 星） 眼内 25 μί 第2天 D 6 Quixin®(0.5 %左旋 氧氟沙星） 50 pL 眼内 25 pL 第2天 E 6 Vigamox⑧(0.5%莫西 50pL 沙星） 眼内 25 μίν 第2天 F 3 未經處理 N/A 眼内 25 μΐ 第2天 G 6 生理食鹽水 50 μΐ 眼内 25 μί 第2天 Η 6 Quixin®(0.5% 左旋 氧氟沙星） 50 pL 眼内 25 pL 第2天 I 6 Vigamox®(0.5〇/i)莫西 沙星） 50 pL 眼内 25 μί 第2天 表 T2-2 臨床眼部計分系統 前段： 結膜充血 0=正常。可呈現蒼白至微粉紅色而無周緣充血（除12:00 及6:00位置處外），易於觀測到瞼結膜及球結膜之血 管。 1=主要侷限於瞼結膜之豐富微紅色，具有一些周緣充 血但主要侷限於4:00至7:00及11:00至1:00位置之眼睛 133566.doc -41 - 200918075 下部分及上部分。 2=瞼結膜鮮紅色，伴隨覆蓋周緣區域之周長至少π%的 周緣充血。 3=暗牛肉紅色，具有球結膜與瞼結臈充血連同顯著周 緣充血且結膜上存在瘀斑。瘀斑一般主要沿瞬膜及 上臉結膜分布。 結膜腫脹 0=正常或結膜組織無腫脹 1=超出正常之腫脹而無眼瞼外翻（易於藉由注意上眼瞼 及下眼瞼如正常眼睛中一樣定位而瞭解）；腫脹一般 在内眢附近之下盲囊中開始。 2=下㈣及上眼驗之正常接近對#*良之腫脹；主要 侷限於上眼瞼使得在初始階段中，眼瞼之接近不良 由上眼瞼部分外翻開始。在此階段中，腫脹一般侷 限於上眼瞼，在下盲囊中具有一些腫脹。 3=明確具有基本上相當之上眼瞼及下眼瞼部分外翻之 腫脹。此可易於藉由查看動物正面且注意眼瞼位置 來觀測；若眼睛邊緣不相接，則外翻已發生。 4=上目艮驗外翻明冑，下眼瞼外翻車交不明顯。難以縮回 眼臉且難以觀測到周緣區域。 結膜流出物 將流出物定義為發白、灰色沈澱物。 0=正常，無流出物。 1=超出正常且存在於眼睛之内部上而非眼驗或眼臉絨 133566.doc •42· 200918075 毛上之流出物。 ^於觀察到大量流出物且已聚集於眼臉及眼驗域毛 机出物已溢出眼瞼以潤濕大體上處於眼睛周圍之 膚上之絨毛。 虹膜涉入 〇正常虹骐而無血管之任何充血。 1=Γ級t管而非三級血管之最小充血。-般為均-在12.00至i:〇〇或6:〇〇位置處可具有較高強 又右偏限於此區域，則三級金管必定大體上充 血〇 2 =

C 角膜 0 = 2: 虹^及-級血營中等充血，虹膜基質輕微腫脹 、表面呈現輕微皺褶，通常最主要接近3 :00及 9:00位置）。 —* 'in τχ —, —、、血皆顯著充血，虹膜基質顯著腫 、。虹膜呈現皺褶 a 上、 J件酼則房隅中出血（眼前房出 J&L ) 〇 正常角膜。 —些透明度損失。僅上皮 下佔& # 皮及/或别一半基質受累及。 下伙結構明顯可导， 中等透明度損失 些混濁可顯而易見。 明， 失。混濁—路延伸至内皮。以漫射照 失。 〜、見，然而可存在一些細節損 133566.doc -43- 200918075 3累及基質之整個厚度。以漫射照明，下伏結構僅極 少可見（仍可觀測到閃光 '虹膜、瞳孔反應、晶狀 體）。 累及基貝之整個厚度。以漫射照明，下伏結構不可 見。 角膜累及之表面積 0=正常 1= 1-25%面積之基質混濁 2= 26-50% 3= 51-75% 4= 76-100% 角膜翳（角膜血管形成） 〇=無角膜翳 1=血官形成存在，但血管尚未侵入整個角膜周界。 2=血管已侵入整個角膜表面周圍2 mm或更多。 後段： 0=正常眼睛而無玻璃體混濁。 1 =玻璃體混濁，能夠觀測到視神經及視網膜血管。 2=玻璃體混濁，有困難但仍能觀測到主要血管及視神 經。 3=玻璃體混濁，僅能觀測到視神經邊界，其邊界模 糊。 4=玻璃體混濁，不能觀測到視神經。 其他變數：（自總嚴重度計分排除之計分） I33566.doc -44 - 200918075 瞳孔反應 〇=正常瞳孔反應。 1=遲緩或不完全瞳孔反應。 2 =無瞳孔反應。 3=由於藥理學阻斷而無瞳孔反應。 房水閃光 0=無 1= 1 + r ^ 1 2= 2+ 3= 3 + 4= 4 + (血纖維蛋白） 細胞閃光 0=無 1 = 1 + 2= 2 + 3= 3 + (、 4= 4 + 晶狀體（觀測白内障之晶狀體） 0=晶狀體透明。 1=前部（皮質/囊）。 2=核。 3=後部（皮質/囊）。 4= 赤道。 133566.doc -45- 200918075 表 T2-3 平均總眼睛嚴重度計分 局部抗生素處理 總嚴重度計分 組 (右眼） 平均值 標準差 N A 生理食鹽水 10.0 1.4 6 B 0.6% BOL-303224-A 6.7 1.4 6 C Zymar®(0.3%加替沙星） 9.0 1.1 6 D Quixin®(0.5%左旋氧氟沙星） 10.0 3.7 6 E Vigamox®(0.5%莫西沙星） 10.8 4.0 6 F 未經處理 13.0 1.7 3 G 生理食鹽水 9.7 3.1 6 Η Quixin®(0.5%左旋氧氟沙星） 8.5 1.4 6 I Vigamox®(0.5%莫西沙星） 8.3 1.8 6 表 T2-4 眼部觀測（接種後24 J 丨、時） 局部處理： 生理食鹽水 接種體劑量(金黃色葡萄 球菌）： 2.5 X 105 CFU 觀測計分(右眼） 組 A A A A A A 動物編號： 2971 2983 2968 2954 2969 2982 結膜流出物 3 1 2 2 0 1 結膜充血 3 3 3 3 3 3 結膜腫脹 2 1 1 2 1 2 角膜 1 1 1 1 1 1 角膜累及之表面積 1 1 1 1 1 1 角膜翳（角膜血管形成） 〇 〇 0 0 0 0 133566.doc -46- 200918075 虹臈累及 -....................- ...............................··.··· 2 2 2 2 2 2 後段 NV 0 NV NV NV NV 總嚴重度計分 12 9 10 11 8 10 金黃色葡萄球菌=金黃色葡萄球菌ATCC 33591。NV =不可 見。 註解：對於觀測計分之關鍵解釋，參見表T2-2。未記錄時 孔反應、房水閃光、細胞閃光及晶狀體之計分。 表T2-4(續）

眼部觀測（接種後24小時）

0.6% BOL-303224-A

2.5 X 105 CFU

見 組 動物編號： Β 2962 Β 2952 結膜流出物 結膜充血 結膜腫脹 角膜 角膜累及之表面積 虹膜累及 後段 總嚴重度計分 觀測計分(右眼） Β 2967 Β 2978 Β Β 2979 2953 角膜翳（角膜血管形成） 3 3 3 3 3 3 1 2 1 1 1 2 0 1 1 1 0 ..... ... 0 0 1 1 1 0 0 0 ------- 0 0 0 0 0 1 2 1 1 2 1 NV .................... NV NV NV NV NV 5 9 7 7 6 6 黃色 葡萄球菌ATCC 33591 。NV =不 133566.doc -47- 200918075 3主解.對於觀測計分之關鍵解釋，參見表T2-2。未記錄瞳 孔反應、房水閃光、細胞閃光及晶狀體之計分。 表T2-4(續） 眼部觀測（接種後24小時） 局部處理： Zymar®(0.3%加替沙星） 接種體劑量(金黃色葡萄球菌）： 2.5 χΙΟ5 CFU 觀測計分(右眼） 組 C C C C C C 動物編號： 2997 2950 2976 2998 2970 2980 結膜流出物 1 1 0 1 1 1 結膜充血 3 3 3 3 3 3 結膜腫脹 2 2 1 1 1 1 角膜 1 0 1 1 1 1 角膜累及之表面積 2 0 2 1 1 1 角膜翳（角膜血管形成） 0 0 0 0 0 0 虹膜累及 2 2 2 1 2 2 後段 NV NV NV NV NV NV 總嚴重度計分 11 8 9 8 9 9 金黃色葡萄球菌=金黃色葡萄球菌ATCC 33591。NV =不可 見。 註解：對於觀測計分之關鍵解釋，參見表Τ2-2。未記錄曈 孔反應、房水閃光、細胞閃光及晶狀體之計分。 133566.doc -48- 200918075 表Τ2-4(續） 眼部觀測（接種後24小時） 局部處理 接種體劑量(金黃色葡萄跋銪、；

Quixin®(0.5%左旋氧氟沙星）

7.5 X 1〇5 CFU 觀測計分(右眼) D D D D D D 3326 3330 3333 3329 3340 3334 角膜累及之表 總嚴重度計分 2 2 0 0 0 2 3 3 3 3 3 3 1 2 1 1 0 2 1 1(1) 1 0 0 2 2 4' 2 0 0 3 0 0 0 0 0 0 1 1 2 2 1 1 —........... 1 2 2 1 1 2 2(2) 3(2) 2(2) 1(2) 2(2) 3(2) 2 2 2 3 2 2 0 0 0 0 0 0 ------------------------ NV NV NV NV 0 NV -- 11 14 9 7 5 14 色葡 萄球菌ATCC 33591 〇 氺 =自钱 組 動物編號： 結膜流出物 結膜充血 結膜腫脹 角膜 瞳孔反應* 房水閃光< 細胞閃光 虹膜累及 晶狀體μ 後段 之關鍵解釋，參見表Τ2_2 (1) 圓錐形角膜之焦點區 (2) 前房隅内之血纖維蛋白 133566.doc -49- 200918075 表4(續） 眼部觀測（接種後24小時）

Vigamox®(〇.5%莫西沙星） 7.5 X 1〇5 CFU 局部處理：

觀測計分(右眼) 組 E E E E E E 動物編號： --__ 3338 3091 3336 3327 3335 3325 結膜流出物 ·，·.·~··—·—_____ 0 2 0 2 2 2 結膜充血 ..............-·.···~~ 3 3 3 3 3 3 結膜腫脹 1 2 0 3 3 3 角膜 1 2 0 1 1 1 角膜累及之表面積 1 4 0 3 2 1 角蜞翳（角膜血管形成） 0 0 0 0 0 0 瞳孔反應* 2 2 1 1 1 2 房水閃光* 1 1 1 2 1 3 細胞閃光* 1(,) 2(1) 2 3 2(1 2) 4(3) 虹膜累及 2 3 2 2 1 NV 晶狀體* 0 0 0 0 0 NV 後段 NV NV NV NV NV NV 總嚴重度計分 8 16 5 14 12 10 133566.doc -50- 1 金黃色葡萄球菌=金黃色葡萄球菌ATCc 33591。*=自總嚴 重度計分排除之計分。NV=不可見。註解：對於觀測計分 之關鍵解釋，參見表T2-2。 2 前房隅内之血纖維蛋白 3 前房隅内之彌漫全身性血纖維蛋白 200918075 表Τ2-4(續） 眼部觀測（接種後24小時）

接種體劑色葡葙珑荦): 7.5 X 105 CFU 角膜累及之表面籍 .........................___.· 角膜翳（角膜血管形成） ....................................._...... __ 瞳孔反應* ............................. 觀測計分(右眼） F F F 3078 3088 3089 2 1 2 3 3 3 3 2 3 2 1 2 2 2 2 0 0 0 1 2 2 2 1 2 4(1) 2(1) 3⑴ 2 2 2 0 0 0 NV ····-·-______ NV NV 14 11 14 組 動物編號： 結膜流出物 ....................................一· 結膜充血 結膜腫脹 角獏 房水閃光* 細胞閃光11 f膜累及 晶狀體* 後段 總嚴重度計分 重度汁刀排除之計分。NV=不可見。註解：對於觀測計分 之關鍵解釋，參見表2。 (1)前房隅内之血纖維蛋白 133566.doc •51 - 200918075 表Τ2-4(續） 眼部觀測（接種後24小時） 局部處理： 生理食鹽水

接種體劑量(金黃色葡萄球菌）: 4.1 X 105 CFU 觀測計分(右眼) 組 G G G G G G 動物編號： 3524 3548 3535 3552 3550 3551 結膜流出物 0 2 1 2 0 0 結膜充血 3 3 3 3 3 3 結膜腫脹 2 3 1 4 1 1 角膜 1 1 1 1 0 1 角膜累及之表面積 1 1 2 2 0 1 角膜翳（角膜血管形成） 0 0 0 0 0 0 瞳孔反應* 0 1 0 0 0 0 房水閃光* 1 2 2 1 1 1 細胞閃光* 2⑴ 2(2) 3(2) 1(2) 〇(3) 2(2) 虹膜累及 2 2 2 2 1 2 晶狀體* 0 0 0 0 0 0 後段 NV 0 0 NV 0 0 總嚴重度計分 9 12 10 14 5 8 金黃色葡萄球菌=金黃色葡萄球菌ATCC 33591。*=自總嚴 重度計分排除之計分。NV=不可見。註解：對於觀測計分 之關鍵解釋，參見表T2_2。 (1) 前房隅内之中等量企纖維蛋白及前房積膿 (2) 前房隅内之中等量企纖維蛋白 (3) 前房隅内之少量血纖維蛋白 133566.doc •52· 200918075 表Τ2-4(續） 眼部觀目丨丨Γ妓括你，/1 ,丨、□古、

結膜充血 〇 0 2 0 0 結膜腫脹 _----------------- 2 0 1 2 3 1 3 2 3 2 角膜 ..........—...................... 1 0 1 1 1 1 角膜累及之表面穑 2 0 1 1 1 1 用膜翳（角膜血管形成） 0 0 0 0 0 0 瞳孔反應* 0 0 2 1 1 0 房水閃光* 1 1 1 1 1 1 細胞閃光* I⑴ 0 I⑴ 2(2) 1 3(¾ 虹膜累及 1 1 2 2 1 2 晶狀體* -........ 後段 0 0 0 0 0 0 NV 0 NV 0 0 0 總嚴重度計分 9 —丨-丨—" 6 9 10 8 9 結膜流出物 ................. 金黃色葡萄球菌=金黃色葡萄球菌ATCC 33591。* =自總嚴 重度計分排除之計分。N V ~ T -r a ^ . T刀-不可見。註解：對於觀測計分 之關鍵解釋，參見表T2-2。 (1) 前房隅内之少量血纖維蛋白 (2) 前房隅内之中等量血纖維蛋白 133566.doc -53. 200918075 表Τ2-4(續） 眼部觀測（接種後24小時） 局部處理 接種體劑 觀測計分(右眼） 組 動物編號： I 3553 I 3538 I 3539 I 3536 I 3545 I 3542 結膜流出物 0 0 0 2 0 0 結膜充血 3 3 3 3 3 3 結膜腫脹 1 2 2 2 2 1 角膜 0 1 0 1 1 1 角膜累及之表面葙 ............................. 0 1 0 1 1 1 角膜翳（角膜血管形成、 ..............——______ 0 0 0 0 0 0 瞳孔反應* ............................................... 0 0 0 1 0 0 房水閃光* 1 1 1 1 1 1 細胞閃光* .........................····. 1 2⑴ 1⑴ 3 3 虹臈累及 2 2 2 2 2 2 晶狀體* 0 0 0 0 0 0 後段 0 0 0 0 0 0 總嚴重度計分 6 9 7 11 9 8

Vigamox®(0.5°/。莫西沙星） 4.1 X 10s CFU 金Η色葡萄球菌=金黃色葡萄球菌atcc 33591。* =自總嚴 重度計分排除之計分。 °主解.對於觀測計分之關鍵解釋，參見表Τ2-2。 (1)前房隅内之中等量血纖維蛋白 133566.doc -54· 200918075 表 T2-5 房水及玻璃體液樣本中之細菌計數 每一樣本之活細菌(金黃色葡萄球菌)之計數

局部 兔 接種體(25-μί) 房水 玻璃體液 組 處理 編號 CFU⑴ Logio (CFU) CFU⑴ Logio (CFU) CFU(1) Logio (CFU) A 生理食鹽水 2971 2.5x10s 5.40 5 0.70 0 N/A 2983 2.5x10s 5.40 5 0.70 0 N/A 2968 2.5χ105 5.40 10 1.00 0 N/A 2954 2.5χ105 5.40 15 1.18 0 N/A 2969 2.5x10s 5.40 30 1.48 0 N/A 2982 2.5x10s 5.40 10 1.00 0 N/A

B 0.6% BOL-303224-A 2962 2.5x10s 5.40 0 N/A 0 N/A 2952 2.5x10s 5.40 0 N/A 0 N/A 2967 2.5x10s 5.40 0 N/A 0 N/A 2978 2.5x10s 5.40 0 N/A 0 N/A 2979 2.5 xlO5 5.40 0 N/A 0 N/A 2953 2.5x10s 5.40 0 N/A 0 N/A C Zymar® 2997 2.5x10s 5.40 0 N/A 0 N/A (0.3%加替沙星） 2950 2.5x10s 5.40 0 N/A 0 N/A 2976 2.5x10s 5.40 0 N/A 0 N/A 2998 2.5x10s 5.40 0 N/A 0 N/A 2970 2.5x10s 5.40 0 N/A 0 N/A 2980 2.5x10s 5.40 0 N/A 0 N/A

金黃色葡萄球菌=金黃色葡萄球菌ATCC 33591。CFU=群落 形成單位。N/A=不適用。 (1)經調整用於連續稀釋之雙重盤之平均計數 133566.doc -55- 200918075 表Τ2-5(續） 房水及玻璃體液樣本中之細菌計數 每一樣本之活細菌(金黃色葡萄球菌)之計數

局部 兔 接種體(25-μί) 房水 玻璃體液 組 處理 編號 CFU⑴ Logio (CFU) CFU(1) Logio (CFU) CFU(1) Logio (CFU) D Quixin® 3326 7.5x10s 5.88 0 N/A 0 N/A (0.5%左旋氧氟沙 星） 3330 7.5x10s 5.88 0 N/A 0 N/A 3333 7.5x10s 5.88 0 N/A 0 N/A 3329 7·5χ105 5.88 0 N/A 0 N/A 3340 7.5χ105 5.88 0 N/A 0 N/A 3334 7.5χ105 5.88 0 N/A 0 N/A E Vigamox® 3338 7.5x10s 5.88 0 N/A 0 N/A (0.5%莫西沙星） 3091 7.5χ105 5.88 0 N/A 0 N/A 3336 7.5χ105 5.88 0 N/A 0 N/A 3327 7.5χ105 5.88 0 N/A 0 N/A 3335 7.5x10s 5.88 0 N/A 0 N/A 3325 7.5χ105 5.88 0 N/A 0 N/A F 未經處理 3078 7.5x10s 5.88 0 N/A 0 N/A 3088 7.5x10s 5.88 195 2.29 0 N/A 3089 7.5χ105 5.88 135 2.13 0 N/A

金黃色葡萄球菌=金黃色葡萄球菌ATCC 33591。CFU=群落 形成單位。N/A=不適用。 (1)經調整用於連續稀釋之雙重盤之平均計數 133566.doc 56· 200918075 表Τ2-5(續） 房水及玻璃體液樣本中之細菌計數 每一樣本之活細菌(金黃色葡萄球菌)之計數

局部 兔 接種體(25_μί) 房水 玻璃體液 組 處理 編號 CFU(,) Logio (CFU) CFU(1) Logio (CFU) CFU(1) Logio (CFU) G 生理食鹽水 3524 4.1x10s 5.61 0 N/A 0 N/A 3548 4.1x10s 5.61 0 N/A 0 N/A 3535 4.1x10s 5.61 0 N/A 0 N/A 3552 4.1x10s 5.61 20 1.30 0 N/A 3550 4.1x10s 5.61 0 N/A 0 N/A 3551 4.1xl05 5.61 n/a(2) n/a(2) 0 N/A Η Quixin® 3540 4.1x10s 5.61 0 N/A 0 N/A (0.5%左旋氧氟 沙星） 3537 4.1x10s 5.61 0 N/A 0 N/A 3546 4.1x10s 5.61 5 0.70 0 N/A 3523 4.1x10s 5.61 0 N/A 0 N/A 3533 4.1xl05 5.61 5 0.70 0 N/A 3547 4.1xl05 5.61 0 N/A 0 N/A I Vigamox® 3553 4.1xl05 5.61 0 N/A 0 N/A (0.5%莫西沙星） 3538 4.1xl05 5.61 0 N/A 0 N/A 3539 4.1xl05 5.61 0 N/A 0 N/A 3536 4.1xl05 5.61 0 N/A 0 N/A 3545 4.1x10s 5.61 0 N/A 0 N/A 3542 4.1x10s 5.61 0 N/A 0 N/A

金黃色葡萄球菌=金黃色葡萄球菌ATCC 33591。CFU=群落 形成單位。N/A=不適用。 (1) 經調整用於連續稀釋之雙重盤之平均計數 (2) 受腸桿菌種污染之樣本 133566.doc -57- 200918075 本文中所揭示之氟啥諾酮化合物可調配成供局部、經 皮下或王身投與之醫藥組合物以調節眼内炎或治療或 工 （D亥眼内^之感染。如可Φ熟f醫藥調配技術者所 確定’該組合物包含供投藥用之具有式j、式π、式m、式 式VI式VII或式VIII之氟啥諾酮化合物或其鹽 及醫藥學上可接受之載劑。舉例而言，此項技術中已知之 各種醫藥學上可接受之載劑可用於調配溶液、乳液、懸浮 液' 分散液、軟膏、凝膠、膠囊或錠劑。具有式I、式Π、 式m、式IV、式V、式力、式VII或式vm之氟喹諾酮化合 物或其鹽尤其適合於治療或控制由微生物引起之眼内炎或 非感染性眼内炎。該氟喹諾酮或其鹽經調配成溶液、軟 膏、乳液、懸浮液、分散液或凝膠。 在貫知1例中’本發明之局部組合物包含水溶液或水性 懸 '子液。通常’使用純水或去離子水。組合物之pH值係藉 由添加任何生理學上可接受之調整pH值之酸、鹼或緩衝液 來調整以處於約3至約8 · 5 (或替代地，約4至約7.5，或約4 至約6.5，或約5至約6 5)之範圍内。酸之實例包括乙酸、 硼酸、檸檬酸、乳酸、磷酸、鹽酸及其類似物，且鹼之實 例包括氫氧化鈉、氫氧化鉀、緩血酸胺、THAM(參羥甲基 胺基曱烧）及其類似物。鹽及緩衝液包括檸檬酸鹽/右旋 糖、碳酸氫鈉、氯化銨及前述酸與鹼之混合物。pH緩衝液 係由使用者引入組合物中以維持穩定的pH值且改良產品耐 受性。在一些實施例中，pH值處於約4至約7.5之範圍内。 各種pH值之生物緩衝液可例如自sigma-Aldrich購得。本發 133566.doc -58· 200918075 月之組合物可具有處於約5至約⑽，刪厘泊（㈣如〇心， >”）或mPa.s(或替代地，約1〇至約5〇，_，或約ι〇至約 2〇，_，或約10至約1〇，咖，或㈣至约！，000,或約100 至約1〇,〇〇〇，或約1〇〇至約20，_，或約1〇〇至約5〇，_， 或灼500至約1〇 〇〇〇 ’或約5〇〇至約2〇，_邛)之範圍内的 度。 ，另-實施例中，本發明之局部組合物包含軟膏、乳液 或乳β (諸如水包油乳液）、或凝膠。 軟膏-般使用以下各者來製備：⑴油脂性基劑，亦 即由不揮發性油或煙短成之基劑，諸如白凡士林或礦物 油，或（2)吸收性基劑，亦即，由可吸收水之無水物質組成 之基劑’例如無水羊毛脂。通常，油脂性或吸收性基劑形 成之後，添加活性成份（化合物）至得到所要濃度之量。 礼膏為油/水礼液。其係由通常包含不揮發性油、烴及 〆、物（諸如蠟、凡士林、礦物油及類似物）之油相（分散 相）及包含水及任何水溶性物f (諸如外加鹽）之水相（連續 相）、，且成。兩相係藉由使用乳化劑來穩定，該乳化劑為例 如表面活丨生劑’諸如十二烷基硫酸鈉；親水性膠體，諸如 阿拉伯膠g黏土、維格姆（概8·)及其類似物。—旦乳液 形成’通常以達成所要濃度之量添加活性成份（化合物）。 # # M it自油脂性基劑、水或乳液-懸浮液基劑之基 劑將在基劑中形成基質之膠凝劑添加至基劑中，增加其 黏度膠凝劑之實例為經丙基纖維素、丙烯酸聚合物及其 類似物。通當，；, ’、 ^ 在添加膠凝劑之前的某時刻將活性成份 133566.doc -59· 200918075 (化合物）以所要濃度添加至調配物中。 本文中所揭示之併入本發明組合物中之氟喹諾酮化合物 之里並不關鍵，，辰度應處於足以允許將調配物以將傳遞所 要量之化合物至所要治療部位之量即時施用於受影響組織 區域且提供所要治療作用之範圍内。在本發明之一些實施 例中，組合物包含處於約0 0001重量％至1〇重量％(或替代 地，約0.001重量。至約重量5%，或約〇 〇1重量％至約5重 里/〇，或約0 · 0 1重量。至約2重量❶，或約〇 〇丨重量％至約工 重量％，或約0.01重量％至約〇 7重量％，或約〇 〇1重量％至 約0.5重量％)之範圍内之濃度的氟喹諾酮。 此外，本發明之局部組合物可含有以下各者中之一或多 者：防腐劑、界面活性劑、包括額外藥劑之佐劑、抗氧化 劑、張力調節劑、黏度調節劑及其類似物。 防腐劑當其分配於單一或多劑量容器中時可用於抑制產 物之微生物污染，且可包括：第四銨衍生物（氣苄烷銨 (Benzakonium chloride)、氣化苄基銨、溴化十六烷基甲基 敍、氯化十六烧基吼錠）、苄索氯銨（benzeth〇nium chl〇nde)、有機汞化合物（硫柳汞（Thimerosal)、乙酸笨基 汞、墙酸苯基汞）、對羥基笨曱酸曱酯及對羥基苯甲酸丙 酯、β-苯乙醇、苄醇、苯乙醇、苯氧基乙醇及其混合物。 視所選防腐劑而定，此等化合物係以有效濃度使用，通常 為約0.005%至約5%(以重量計）。所使用之防腐劑之量應足 以使溶液為物理上穩定的；亦即，不形成沈澱物且有效抗 菌。 133566.doc 60· 200918075 本發明組合物之組份（包括具有式j、式π、式ιπ、式 Ιν、式V、式^、式νπ或式VIII之氟啥諾酮）之溶解度可 由組合物中之界面活性劑或其他適當補溶劑或溶解度增強 劑來增強，該等溶解度增強劑係如環糊精，諸如α_環糊 #、β_環糊精及γ·環糊精之經丙基、經乙基、葡萄糖基、 麥芽糖基及麥芽三糖基衍生物。在_實施例中，組合物包 含請至2曜丙基♦環糊精；或者，1%至15%(或2%至 經丙基-P-環糊精。輔溶劑包括聚山梨醇㈣例如聚山 梨醇醋20、60及80)、聚氧乙稀/聚氧丙稀界面活性劑⑽如 P1u酿以勝^助及咖^環糊精^肪酸甘油 二醋、甘油、聚乙二醇、諸如辛苯昔醇40㈣。xynoi 40)及 泰洛沙泊之其他增溶劑或熟習此項技術者已知 之其他試劑及其混合物。所使用之溶解度增強劑之量將視 t合財氟料酮之量而I較多溶解度增強劑用於較大 置之氣圭諾酮。通常’視成份而定，溶解度增強劑係以 〇.〇1重量％至2〇重量％(或者〇1重量％至5重量％ 量%至2重量%)之量使用。 孩1重 ，用黏度增強劑以提供具有高於僅水溶液之黏度的黏度 發明組合物可需要增加由目標組織吸收活性化合物或 U加於其中之〉帶塑吐M ’ 烯醇 …’。該等黏度增強劑包括(例如)聚乙 乙稀。比咯啶_、 素甲基纖維 此項技術基纖維素、經丙基纖維素或熟習 至10重量之其他試劑。該等試劑通常以〇.01重量％ ❶（或者0·1重量°/。至5重量％，或0·丨重量％至2重量 133566.doc -61 · 200918075 %)之量使用。 合適之界面活性劑包括聚乙烯吡咯啶酮、聚乙烯醇、聚 乙二醇、乙二醇及丙n他界面活性劑為聚山梨醇醋 (諸如聚山梨醇醋80(聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酿）、聚 山梨醇醋60(聚氧乙烯脫水山梨糖醇單硬脂酸醋）、9聚山: 醇醋20(聚氧乙烯脫水山梨糖醇單月桂酸酿)，通常已知： 商品名為Tween® 80、Tween⑧60、Tween® 2〇)、泊洛沙姆 (poloxamer)(氧化乙烯與氧化丙烯之合成嵌段聚合物Y諸 如通常已知其商品名為Pluronic®之彼等者；例如piumd， F127 或 Plunge® F108)，或保麗視明（p〇1〇xamine)(與乙二 胺連接之氧化乙烯與氧化丙烯之合成嵌段聚合物，諸如通 常已知其商品名為Tetronic®之彼等者；例如Tetr〇nic<g 15〇8 或Tetronic® 908等），其他非離子型界面活性劑，諸如 Bdj®、Myrj®及具有約丨2個或12個以上碳原子（例如約^個 至約24個碳原子）碳鏈之長鏈脂肪醇（意即油醇、十八烷 醇十四院一十一院己醯醇等）。界面活性劑幫助局 部調配物在窄通道之表面上散布。 在一態樣中，可需要在本發明之組合物中包括至少另一 種消炎劑。較佳之消炎劑包括熟知之非類固醇消炎藥 ("NSAID”）。 NSAID之非限制性實例為：胺基芳基羧酸衍生物（例如 恩芬那酸（enfenamic acid)、依託芬那醋（et〇fen_e)、氟 芬那酸（flufenamic acid)、異尼辛（is〇nixin)、甲氯芬那酸 (eclofenamic acid)、甲芬那酸（mefenamic acid)、尼氟酸 133566.doc -62- 200918075 (niflumic acid)、他尼氟酯（ulniflumate)、特羅芬那酯 (terofenamate)、托芬那酸（t〇ifenamic acid))、芳基乙酸衍 生物（例如醋氯芬酸（aceclofenac)、 阿西美辛 (acemetacin)、阿氯芬酸（aici〇fenac)、胺芬酸（arnfenac)、 哌胺托美丁（amtolmetin guacil)、溴芬酸（bromfenac)、丁 苯羥酸（bufexamac)、桂美辛（cinmetacin)、氣吡酸 (clopirac)、雙氣芬酸納（diclofenac sodium)、依託度酸 (etodolac)、聯苯乙酸（feibinac)、芬克洛酸（fenclozic acid)、务替酸（fentiazac)、葡美辛（glucametacin)、異丁芬 酸（ibufenac)、。引哚美辛（indomethacin)、三苯唑酸 (isofezolac)、伊索克酸（isoxepac)、氣那 〇坐酸（lonazolac)、 曱嗪酸（metiazinic acid)、莫苯唑酸（mofezolac)、奥沙美辛 (oxametacin)、吡拉唑酸（pirazolac)、丙谷美辛 (proglumetacin)、舒林酸（suiindac)、噻拉米特 (tiaramide)、托美；·丁（tolmetin)、托培辛（tropesin)、佐美酸 (zomepirac))、芳基丁酸衍生物（例如丁丙二苯肼 (bumadizon)、布替布务（butibufen)、芬布芬（fenbufen)、 聯苯丁酸（xenbucin))、芳基羧酸類（例如環氣茚酸 (clidanac)、酮咯酸（ketorolac)、替諾立定（tinoridine))、芳 基丙酸衍生物（例如阿明洛芬（alminoprofen)、苯噁洛芬 (benoxaprofen)、柏莫洛芬（bermoprofen)、布氣酸（bucloxic acid)、卡洛芬（carprofen)、非諾洛芬（fen〇pr〇fen)、氟諾洛 芬（flunoxaprofen)、氟比洛芬（flurbipr〇fen)、布洛芬 (ibuprofen)、異 丁普生（ibupr〇xam)、吲哚洛芬 -63 - 133566.doc 200918075 (indoprofen)、酮洛芬（ketoprofen)、洛索洛芬 (loxoprofen)、萘普生（naproxen)、°惡丙 σ秦（oxaprozin)、口比 酮洛务（piketoprofen)、。比洛芬（pirpr〇fen)、普拉洛芬 (pranoprofen)、丙替嗓酸（pr〇tizinic acid)、舒洛芬 (suprofen)、σ塞洛芬酸（tiaprofenic acid)、希莫洛芬 (ximoprofen)、紮托布洛芬（zait〇pr〇fen))、°比嗤類（例如二 苯米唑（difenamizole)、依匹唑（epiriz〇le))、二氫吡唑酮類 (例如阿紮丙宗（apazone)、苯匹派龍（benzpiperylon) '非普 拉宗（feprazone)、莫非布宗（mofebutazone)、嗎拉宗 (morazone)、經布宗（oxyphenbutazone)、苯基 丁氮綱 (phenylbutazone)、哌布宗（pipebuzone)、異丙安替比林 (propyphenazone)、雷米那酮（ramifenazone)、琥布宗 (suxibuzone)、σ塞林布他宗（thiazolinobutazone))、水揚酸 衍生物（例如醋胺沙洛（acetaminosalol)、阿司匹靈 (aspirin)、貝 諾酉旨(benorylate)、 演水楊醇 (bromosaligenin)、乙醯水楊酸約、二氟尼柳（diflunisal)、 依特柳醋（etersalate)、芬度柳（fendosal)、龍膽酸（gentisic acid)、乙二醇水揚酸酯、咪唑水楊酸酯、離胺酸乙醯水楊 酸S旨、馬沙拉嗓（mesalamine)、嗎琳水楊酸S旨、水楊酸1-萘自旨、奥沙拉唤（olsalazine)、帕沙米特（parsalmide)、乙酿 水揚酸笨酯、水楊酸苯酯、醋水楊胺（salacetamide)、水揚 醯胺鄰乙酸、水楊基硫酸、雙水楊酯（salsalate)、柳氮磺 胺°比π定（sulfasalazine))、α塞嗪叛醢胺類（例如安°比昔康 (ampiroxicam)、屈 °惡昔康（droxicam)、伊索昔康 133566.doc -64- 200918075 (isoxicam)、氯諾昔康（i〇rnoxicam)、吡羅昔康 (piroxicam)、替諾昔康（ten〇xicam))、ε_乙醯胺基己酸、S-(5·-腺苷）-L-曱硫胺酸、3_胺基_4_羥基丁酸、阿米西群 (amixetrine)、卞達酸（bendazac)、节達明（benzydamine)、 α-沒藥醇（α-bisabolol)、布可隆（bucolome)、聯苯°比胺 (difenpiramide)、地他唑（ditaz〇ie)、依莫法宗 (emorfazone)、非普地醇（fepradinol)、瓜（甘菊）奠 (guaiazulene)、萘 丁美嗣（nabuinet；〇ne)、尼美舒利 (nimesulide)、奥沙西羅（oxacepr〇i)、瑞尼托林 (paranyline)、哌立索唑（perisoxai)、普羅喹宗 (proquazone)、超氧化物歧化酶、替尼達普（tenidap)、齊留 通（zileuton)、其生理學上可接受之鹽、其組合及其混合 物。在一實施例中，NSAID為雙氣芬酸、氟比洛芬 (furbiprofen)或酮咯酸。 其他非類固醇消炎劑包括環加氧酶II型選擇性抑制劑， 諸如基内昔布（celecoxib)及依託度酸（etodolac) ; PAF(血小 板活化因子）结抗劑，諸如阿帕泛（apafant)、貝帕泛 (bepafant)、米諾帕泛（min〇pafant)、紐帕泛（nupafant)及莫 地帕泛（modipafam) ; PDE(磷酸二酯酶）IV抑制劑，諸如西 洛司特（anflo)、托巴茶鹼（t〇rbafylline)、咯利普蘭 (rolipram)、非明司特（⑴aminast) 、〇比拉米特 (piclarmlast)、西潘茶鹼（cipamfylHne)及羅敦司特 (roflumilast);細胞激素產生抑制劑，諸如nf_kB轉錄因子 抑制劑，或熟習此項技術者已知之其他消炎劑。在一實施 133566.doc 65· 200918075 例中#類固醇消炎劑為塞内昔布。 :包括於本發明之組合物中之消炎料 將基於所選試劑及治療中之炎症類型而變。在將本j度 組合物施用於所乾向之組織後，濃度將足以減輕、二療： =皮：組織之炎症。該等濃度通常處於約量; —(或替代地，約。_01重量％至約 〇·°5重量%至約1重”。’或約。-重量%至約。.5重量= 範圍内。 ㈧之 提供以下實例以進-步說明用於治療、減輕、改善或預 防感染及其發炎性後遺症之本發明之非限制性組合物及製 備該組合物之方法。 實例1 :溶液 ~~----- 量(重量％) 具有式IV之化合物 ~ __ 0.2 羥丙基甲基纖維素("HPMC") 0.5 氣苄烷銨("BAK”） 0.01 Pluronic®F127 0.1 EDTA 0.1 NaCl 0.25 磷酸鹽緩衝液(0.05 Μ，pH = 5.0) 足量至100 在處於50°c至60°c範圍内之溫度下，將適當比例（上表中 所示）之Pluronic® F127添加至配備有攪拌機構之無菌不鑛 鋼夾套容器中之磷酸鹽緩衝液中。將所得緩衝溶液加熱至 6TC至75°C。在約66°C之溫度下，將適當量之BAK添加至 緩衝溶液中’同時攪拌三至十分鐘。在75°C之溫度下，將 133566.doc •66- 200918075 適當量之具有式ιν之化合物經三至五分鐘之時段添加至容 器之内容物中，同時繼續混合。接著將EDTA及NaCl添加 至混合物中，同時在75°C下再繼續混合五分鐘。將所得混 合物冷卻至25°C至30°C。將最終組合物封裝於適當容器 中〇 實例2 :溶液 類似於實例1之程序的程序用於製備此溶液。 成份 量(重量％) 具有式IV之化合物 0.35 甘露糖醇 4.5 氣苄烷銨("BAK") 0.005 聚山梨醇酯80 0.1 EDTA 0.05 乙酸鈉 0.03 乙酸 0.04 純水 足量至100

實例3 :溶液 類似於實例1之程序的程序係用於製備具有以下組成之 此溶液。 成份 量(重量％) 具有式IV之化合物 0.2 地塞米松 0.1 羥丙基曱基纖維素(”HPMCn) 0.5 阿來西定(Alexidine) 0.01 Brij®界面活性劑 0.1 EDTA 0.1 檸檬酸鹽緩衝液(0.02 Μ檸檬酸鈉，pH = 5.0) 足量至100 133566.doc -67- 200918075 實例4 :溶液 類似於實例1之程序的程序係用於製備具有以下組成之此 溶液。 成份 量(重量％) 表1之化合物8 0.3 塞内昔布 0.15 丙二醇 0.5 阿來西定 0.01 泰洛沙泊 0.1 EDTA 0.1 檸檬酸鹽缓衝液(0.02 Μ檸檬酸鈉，pH = 5) 足量至100 實例5 :懸浮液 類似於實例1之程序的程序係用於製備具有以下組成之 此溶液。 成份 量(重量％) 具有式IV之化合物 0.3 曲安西龍，微米化USP 0.2 羥乙基纖維素 0.25 BAK 0.01 泰洛沙泊 0.05 EDTA 0.01 NaCl 0.3 Na2S04 1.2 硫酸及/或NaOH 足量以供pH值調整至5.5 檸檬酸鹽緩衝液(0.02 Μ檸檬酸鈉，pH = 5.0) 足量至100 實例6 :乳液 實例1之程序之修改係用於製備具有下表中所示之組成 的此乳液。 133566.doc -68- 200918075 在50°C至60°C之溫度下以對應於下表中所示之比例的量 將聚山梨醇酯60(Tween® 60)添加至配備有攪拌機構之第一 無菌不鏽鋼夾套容器中之水中。將所得水溶液加熱至6 1°C 至75°C。在66°C之溫度下，將苄醇（防腐劑）添加至水溶液 中，同時混合三至十分鐘。在75°C之溫度下，將適當量之 具有式IV之化合物及氯替潑諾經三至五分鐘之時段添加至 亦配備有攪拌機構之第二無菌容器中之Miglyol油中，同 時繼續攪拌。將脫水山梨糖醇單硬脂酸酯及十六烷基十八 烷醇添加至油混合物中。將所得油混合物加熱至處於62°C 至75°C之範圍内的溫度。接著在66°C之溫度下經三至五分 鐘之時段將油混合物在劇烈混合下添加至第一容器中之水 溶液中。將硫酸鈉及硫酸及/或氫氧化鈉添加至混合物中 以將pH值調整至5.5。將所得組合物冷卻至35°C至45°C且 藉由與高剪切乳化劑混合或使其穿過均化器來均化。將組 合物進一步冷卻至25°C至30°C。將最終組合物封裝於適當 容器中。 成份 量(重量％) 具有式IV之化合物 0.5 氣替潑諾 0.2 聚山梨醇酯60 1 脫水山梨糖醇單硬脂酸酯(乳化劑） 1.5 十六烧基十八烷醇(乳化穩定劑） 1.5 苄醇 0.5 Miglyol 油 14.5 Na2S04 1.2 硫酸及/或NaOH 足量以供pH值調整至5.5 純水 足量至100 133566.doc -69- 200918075 通常，乳液中所使用之油為非刺激性潤膚油。其說明性 而非限制性實例包括礦物油、植物油及已知組成之重組植 物油。該油之更具體而非限制性實例可選自由花生油、芝 麻油、棉籽油及中鏈（〇6至cy甘油三酯（例如Migly〇1中性 油 810、812、818、829、840 等，購自 HuIs America Inc ) 組成之群。所使用之典型乳化劑可選自由脫水山梨糖醇單 硬脂酸酯及聚山梨醇醋組成之群。較佳地，乳化劑為非離 子型。乳化劑可以組合物之重量計15%至65%之量及較佳 以組合物之重量計3%至5%之量使用。乳液之疏水相可為 以組合物之重量計15%至25%之量及較佳以組合物之重曰 計18%至22%之量。 董 實例7 :乳液 類似於實例6之程序的程序係用於製備具有以 此乳液。 取之

表1之化合物13 曲安西龍，微米化USP 聚山梨醇酯60

_^水山梨糖醇單硬脂酸酯 十六烷基十八烷醇

純水 足量以供pH值調整至5.5

i33566.doc -70- 200918075 實例8 :軟膏 類似於實例1之程序的程序係用於製備具有以下組成之 此溶液。 成份 量(重量％) 具有式IV之化合物 0.3 白凡士林USP 50 丙二醇 5 甘油 5 Tween® 20 2 維生素E 1 BAK 0.1 礦物油 足量至100 實例9 :軟膏 類似於實例1之程序的程序係用於製備具有以下組成之 此溶液。 成份 量(重量％) 具有式VI之化合物 0.3 地塞米松 0.15 白凡士林USP 50 丙二醇 5 甘油 5 Tween® 20 2 維生素E 1 維生素D 0.5 BAK 0.1 礦物油 足量至100 133566.doc -71 - 200918075 實例1 〇 :錠劑 將下表中所示之成份在諸如帶式換合器之摻合人 於一起。亦可使用熟習粉末混合技術者所熟知之其他類: 摻合器。在適合於製造醫藥錠劑之條件下將混 過製錠機。 项廷牙 成份 具有式IV之化合物

糖皮質激素及本發明氟喹諾嗣之副作用之比較 糖皮質激素療法之最常見的不良作用之—為類固醇糖尿 病。此不良病狀之原因為藉由誘導自蛋白質降解所產生之 游離胺基酸之葡糖新生及代謝中所涉及之肝酶轉錄來刺激 肝中之葡糖新生（糖皮質激素之異化作用）。肝中異化代謝 之關鍵酶為酪胺酸胺基轉移酶（，，ΤΑΤ") ^此酶之活性可自 經處理之大鼠肝癌細胞之細胞培養物以光度法測定。因 此，可藉由量測此酶之活性來將由糖皮質激素引起之葡糖 新生與本文中所揭示之氟喹諾酮之葡糖新生相比較。舉例 而言，在一程序中，將細胞用測試物質（氟喹諾酮或糖皮 質激素）處理24小時，且接著量測ΤΑΤ活性。接著比較所選 氟喹諾酮及糖皮質激素之ΤΑΤ活性。其他肝酶可替代τατ 使用，諸如磷酸烯醇丙_酸羧激酶、葡萄糖_6_磷酸酶或果 糖-2,6-雙磷酸酶。或者，可直接量測動物模型中之血糖含 133566.doc -72- 200918075 量且比較用糖皮質激素對所選病狀治療之個 喹諾酮對同-病狀治療之彼等個別個體。 。用 糖皮質激素療法之另—不_ έ士罢也i +艮結果為GC誘導之白内障。 化合物或組合物之白内隆& V, , 門丨草生成潛力可藉由量化該化合物或 組合物對活體外鉀離子穿過a 牙幻日日狀體細胞（諸如哺乳動物晶 狀體上皮細胞）膜之通量的影響來確定。該離子通量可由 (例如）電生理學技術或離子流成像技術（諸如使用螢光染 料）來測定。測定化合物或組合物之白内障生成潛力之例 不性活體外方法係揭示於美國專利申請公開案 2004/02 195 12中，該公開案以引用的方式併入本文中。 糖皮質激素療法之又一不良結果為高企壓。可直接量測 且比較用糖皮質激素及本發明之氟喹諾酮對發炎病狀治療 之類似匹配之個體的血壓。 糖皮質激素療法之又一不良結果為個體之眼内壓（"I〇p") 升咼。可直接量測且比較用糖皮質激素及本發明之氟喹諾 酮對病狀治療之類似匹配之個體的IOP。 儘管上文已描述本發明之特定實施例，但熟習此項技術 者應瞭解，可在不脫離如隨附申請專利範圍中所定義之本 發明之精神及範疇的情況下對其作出許多等效處理、修 改、替代及變更。 【圖式簡單說明】 圖1(a)至圖1(f)分別展示莫西沙星（m〇xifl〇xacin)及具有 式IV之化合物（”b〇L-303224-A")對THP-1單核細胞中LPS 刺激之 GM-CSF、IL-Ιβ、IL-8、IP-10、MCP-1 及 ΜΙΡ-1α 產 133566.doc •73- 200918075 生的影響。 圖2(a)至圖2(e)分別展示莫西沙星及具有式IV之化合物 對 THP-1 單核細胞中 LPS刺激之 G-CSF、IL-l(x、IL-lra、 IL-6及VEGF產生的影響。 圖3展示莫西沙星及具有式IV之化合物對THP-1單核細 胞中LPS刺激之IL-12p40產生的影響。

133566.doc -74-

Claims (1)

1. 200918075 十、申請專利範圍： 1. 一種包含有效量之具有式I、式II、式III、式IV、式V、 式VI、式VII或式VIII之氟喹諾酮或其鹽之組合物的用 途，其係用於製造供調節眼内炎用之藥劑： Ο 0 OR1

   X R3 (l) ο ο

   NHo X R3 o o

   (II) (III) 133566.doc (IV) 200918075

   其中R1係選自由以下各基組成之群：氫、未經取代之低 碳烷基、經取代之低碳烷基、環烷基、未經取代之C5-C24芳基、經取代之C5-C24芳基、未經取代之C5-C24雜芳 133566.doc -2- 200918075 基、經取代之Cs-C24雜芳基及可於活體中水解之基團； R2係選自由氫、未經取代之胺基及經—或兩個低碳烷 基取代之胺基組成之群； R3係選自由以下各基組成之群：A、未經取代之低碳 烷基、經取代之低碳烷基、環烷基、未經取代之低碳烷 氧基、經取代之低碳烷氧基、未經取代之C5_C24芳基、 經取代之Cs-C24芳基、未經取代之C5_C24雜芳基、經取代 之Cs-C24雜芳基、未經取代之C^C24芳氧基、經取代之 Q-C24芳氧基、未經取代之C^C24雜芳氧基、經取代之 CyC24雜芳氧基及可於活體中水解之基團； X係選自由鹵素原子組成之群； γ係選自由CH2、〇、s、SO、S〇2及NR4組成之群，其 中R4係選自由氫、未經取代之低碳烷基、經取代之低碳 烧基及環烷基組成之群；且 z係選自由氧及兩個氫原子組成之群。 2. 如β求項1之用途，其中該眼内炎係選自由術後眼内 ^ 創傷後眼内炎、非感染性眼内炎、全眼球炎、血行 性眼内炎及其組合組成之群。 3. 如叫求項1之用途，其中該眼内炎包含感染之結果。 4. 如清求項1之用途，其中R1係選自由以下各基組成之 君_ * 气 •乳、C丨-C：5經取代及未經取代之烷基、C3_Cl()環烷 土 經取代及未經取代之芳基、c5-c14經取代及未 Ί取代之雜芳基及可於活體中水解之基團；R2係選自由 未Ί取代之胺基及經一或兩個Ci_c5烷基取代之胺基組成 133566.doc 200918075 之群；且R3係撰白 ,,„ , 、由以下各基組成之群：氫、（VCs經取 代及未經取代 紹 土、C3-C】〇環烷基、Ci-Cs經取代及未 經取代之烷氧基、 經取代及未經取代之芳基、c5- C14經取代及未經取 讲， 代之雜方基及CS-C丨4經取代及未經取 方氧基。 5·如請求項1之用途， 群。 再中R係選自由C3_C10環烷基組成之 6·如請求項1之用途，其中X為C卜 如明求項6之用途，其中Y為CH2。 8. 如：求項6之用途，其中z包含兩個氫原子。 9. 如5月求項1之用途，其中Y為NH，Z為〇,且X為C1。 10. 如請束*! 、之用途，其中該氟喹諾酿！或其鹽以該組合物 之重量計以約0.0001 %至10%之量存在。 1 1 .如5奮采^ 1¾ ! 、之用途，其中遠組合物進一步包含非類固醇 消炎藥。 12_種包含有效量之具有式IV之氟喹諾酮或其鹽之組合物 的用途’其係用於調節眼内炎：

   (IV) 13. =::2之用途’其中該眼内炎包含眼晴或眼部感染 133566.doc 200918075 14. 如請求項丨3之用途，龙 藥。 /、中该樂劑係用於局部或眼内投 15. 如請求項I3之用途，且中 中β亥眼内火包含感染之後遺症。 16· -種包含有效量之具有式ιν之㈣諾酮或其鹽之組合物 的用途’其係用於治療或控制導致眼内炎之眼睛或眼部 感染· 0

   νη2 17. —種包含有效量之具有式VI之氟喹諾酮或其鹽之組合物 的用途，其係用於調節眼内炎：

   (VI) 18. —種包含有效量之具有式IV之氟喹諾酮或其鹽之組合物 的用途’其係用於治療或控制導致眼内炎之眼睛或眼部 感染· 133566.doc (VI)200918075 ο ο OH

   ο Cl Δ • 19. 一種具有式I、式II、式III、式IV、式V、式VI、式VII或 . 式VIII之氟喹諾酮之用途，其係用於製備調節個體之炎 症的藥劑。 C ' 20. —種包含具有式I、式II、式III、式IV、式V、式VI、式 VII或式VIII之氟喹諾酮之醫藥組合物，其中該氟喹諾酮 係以有效調節眼内炎之量存在。 21.如請求項20之醫藥組合物，其中該眼内炎包含眼部感染 之後遺症。 133566.doc