TW200908986A - Novel triazene compounds for the treatment of cancer - Google Patents

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200908986 九、發明說明： ^ J^ir ^ 發明領域 本發明係關於新穎三氮烯化合物、其製備方法、包含 5 該等化合物之藥學組成物及其用於人類之癌症疾病治療上 之用途。比較已知之三氮稀化合物，新穎三氮浠化合物之 特點為改良之治療幅員，換言之具有高抗腫瘤活性及較少 副作用。

I：先前技術:J 1〇 發明背景 1970年代已經對三氮烯類之細胞抑制活性及用於治療 癌症疾病之可能做過徹底調查研究。但由於此等細胞抑制 副作用及毒性且屬於烷化劑，故未層廣泛用於對抗癌症。 只有一項例外為達卡巴景（dacarbazin) (DTIC)，達卡巴景為 15 一甲基-三氮烯基-咪唑-羧醯胺(MTIC)之前驅藥，主要係用 於對抗黑素瘤（Montgomery JA (1976)癌症治療報告6〇, 205-211) 〇 由於達卡巴景對光敏感且特別由於其副作用其中以鳴 心、β區吐及白企球減少症及血小板減少症特別值得一提， 2〇已經合成大量芳基院基三氮烯類針對於發展更強而有力且 更佳耐受性的三氮烯類(Montgomery JA (1976)癌症治療報 告60:125-134 ; Derry E. V. Wilman&PhyllisM.Goddard;J.

Med_ Chem. 1980. 23, 1052-1024)。儘管有此等嘗試努力， 達卡巴景及泰左羅米（temozolomid)(用於神經膠母細胞瘤 200908986 之治療）至目前為止仍然只是臨床上使用之三氮烯類或三 氮烯前驅藥。 THOMAS A. CONNORS, PHYLLIS M. GODDARD, KANTI MERAI, WALTER C. J· ROSS 及 DERRY E. V, 5 WILMAN ;生化藥理學，25期，Ml-246頁。派嘉蒙出版社 (Pergamon Press) 1976年說明抗癌作用之結構上的要求。當 攜帶有三氮烯之基團為咪唑基團時，該等化合物不安定可 能自生分解。若咪唑基團係由不同基團所置換，特別係由 載有芳香族化合物之基團所置換，則三氮烯之安定性提高 10而未改變其活性。但嘗試利用結構-作用關係來發展出用於 腫瘤治療上之新穎的且於治療上更具有活性之三氮烯類而 努力，已經顯示抗腫瘤作用之差異與芳香族三氮烯模型化 合物之物理化學性質並無交互關係。進一步困難為依據取 代基而定，形成具有不同性質之烷化劑。於接受試驗之化 15 合物中未見治療指數的改良。 克服所選用之三氮烯之耐受性問題之一項方 於如御観，781。經由導人強力極性 於三氮烯衍生物之水中溶解度不僅獲得顯著改良，同時於 物質的快速排池方面也獲得顯著改良。前述典型副作用， 20特別為造血系統之抑制可顯著減低。但是須付出對排泄器 S亦即肝臟及腎臟有相當大代謝負荷的代價。由於對長期 投藥之耐受性問題，可耐受之劑量範圍有限制，因此此類 化合物之高度具有展望之治療潛力無法付諸實施。但因此 等二氮烯類具相當高的細胞抑制活性，雖言如此可具有用 200908986 於對抗癌症的價值，但限制條件為須減低或甚至消除前述 副作用。 其它有關二氮烯之文件如下’為求完整說明於此處： DE 1768720、W091/17753及 W02004/106258 A1 (同樣與三 5氮烯衍生物用於腫瘤之治療相關）、EP-A-0627325 (有關三 氮浠類用作為染料之用途）、EP-A-0037948及ΕΡ-Α-0 071 9〇1 (有關二氮稀基化合物之製法）、及f. Schmidt et al; J. Med_ Chem. 1994, 37, 3812-3818 (有關與胜肽鍵結之U-二 院基-3-醯基三氮烯類之抗腫瘤作用）。 10 【發明内容】 目的： 如此’本發明之目的係找出具有減低的毒性及改良的 活性之細胞抑制三氮烯衍生物俾讓該等化合物可供用於人 類之治療方面，特別係用於人類癌症疾病之治療。 15 發明說明 發明人發現具有高細胞抑制活性及毒性顯著減低之新 賴三氮稀基化合物。如此本發明提供式（1)化合物：

⑴ 其中 R1及R2為相同或相異且各自分別選自於由下列所組成 之組群： 200908986 -視需要可經取代之烷基， -視需要可經取代之烯基， -視需要可經取代之芳基， -視需要可經取代之烷基芳基； 5 R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9及R10為相同或相異且各 自分別選自於由下列所組成之組群： -氫， -1¾ 素， _氰基， 10 -硝基， _缓基， -胺基羰基， -磺酸基團（-so3h)， _胺基續酿基* 15 -視需要可經取代之烷基， -視需要可經取代之烷氧基， -視需要可經取代之烯基， -視需要可經取代之芳基， -視需要可經取代之烷基芳基； 20 R11為視需要可經取代之烷二基或視需要可經取代之 稀二基： R12為氫及R13為視需要可經取代之烷基或羥基，或 R13為氫及R12為視需要可經取代之烷基或羥基，或 R12及R13各自為烷基，其中該等烷基中之至少一者具有 200908986 至少一個取代基，或 R12及R13與其鍵結之氮原子共同形成飽和或不飽和視 需要可經取代之5至8員環，其視需要可含有額外雜原子； 及 5 X1係選自於由下列所組成之組群： _單鍵， -叛基， -硫， -氧， 10 -亞風基， -石風基， -偶氮及 -含1至6個碳原子之視需要可經取代之飽和或不飽和 脂肪族二價基， 15 或其藥學上可接受之鹽。 C實施方式3 較佳實施例之詳細說明 於通式（1)中，R1及R2為相同或相異且各自分別選自於 由下列所組成之組群： 20 -視需要可經取代之烷基， -視需要可經取代之烯基， -視需要可經取代之芳基，及 -視需要可經取代之烷基芳基。 於本發明之整個範圍内，亦即也關聯其它組群之取代 200908986 基（其中於適用時如於R12及R13之情況可包括額外的可 能），視需要可經取代之烷基較佳包括： 含1至8個且較佳含1至6個碳原子之直鏈或分支烷基、 含3至8個且較佳5或6個碳原子之環烷基或含丨至4個碳原子 5且可由環烷基所取代之烷基，各自視需要可載有較佳係選 自於由下列所組成之組群之1個至3個取代基：羥基、鹵素 及吼基。此處且屬於本發明之範圍，鹵素包括氟 '氯、淳 及填’較佳為氟或氯。此外，一個或多個且較佳為1至3個 碳原子可由含氮、氧或硫之類似雜基團所置換。如此特別 10表示例如烷基基團中之一個或多個亞甲基可由NH.、0或S 所置換。 含1至8個碳原子之烷基之實例包括曱基、乙基、正丙 基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基、第三丁基、正 戊基、異戊基、第二戊基、第三戊基、2-曱基丁基、正己 15基、1-曱基戊基、2-甲基戊基、3-曱基戊基、4-曱基戊基、 1- 乙基丁基、2-乙基丁基、3-乙基丁基、l，i-二甲基丁基、 2,2-二曱基丁基、3,3-二甲基丁基、1-乙基-1_甲基丙基、正 庚基、1-曱基己基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-曱基己基、 5-甲基己基、1-乙基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、4-乙 2〇 基戊基、1,1-二甲基戊基、2,2-二甲基戊基、3,3-二甲基戊 基、4,4-二甲基戊基、1-丙基丁基、正辛基、1-甲基庚基、 2- 曱基庚基、3-曱基庚基、4-甲基庚基、5-甲基庚基、6-曱 基庚基、1-乙基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己 基、5-乙基己基、1,1-二甲基己基、2,2-二甲基己基、3,3- [S] 10 200908986 二甲基己基、4,4-二甲基己基、5 5_二甲基己基、卜丙基戊 基、2-丙基戊基等。較佳為含心個碳原子之基團特別 為甲基、乙基及正丙基。以曱基為最佳。 經由以一個或多個類似雜基團諸如〇…_s_或-NH_置 5換所形成之烧基之實例較佳為其中一個或多個亞甲基已經 由-〇-置換來形成醚基，諸如甲氧基甲基、乙氧基甲基、2_ 曱氧基伸乙基等。根據本發明，多喊基也含括於烧基之定 義。 含3至8個碳原子之環烷基較佳包括：環丙基、環丁基、 10環戊基、環己基、環庚基、環辛基等。較佳為環丙基、環 丁基、環戊基及環己基。藉類似雜基團置換亞曱基而由環 烷基所形成之雜環烷基為例如5或6員雜環基諸如四氫呋喃 基、吡咯啶基、哌啶基或四氫哌喃基其視需要可稠合芳香 環等。 15 含1至8個碳原子之經鹵原子取代之線性或分支烷基之 實例特別包括： 氟曱基、二氟甲基、三氟曱基、氣曱基、二氯甲基、 二亂甲基、漠甲基、·一廣曱基、二漠甲基、1-氟乙基、1_ 氣乙基、1-〉臭乙基、2-氟乙基、2-氣乙基、2-演乙基、1,2-2〇 —氣乙基、1,2-二氯乙基、1,2-二漠·乙基、2,2,2-三氟乙基、 七乱乙基、1-氟丙基、1-氣丙基、1-';臭丙基、2-氟丙基、2-乳丙基、2-漠丙基、3 -氣丙基、3 -氣丙基、3 -漠丙基、1,2-二氟丙基、1,2-二氯丙基、1,2-二溴丙基、2,3-二氟丙基、 2,3-二氯丙基、2,3-二溴丙基、3,3,3-三氟丙基、2,2,3,3,3- 11 200908986 五氟丙基、2-氟丁基、2-氯丁基、臭丁基、4_氟丁基、4_ 氣丁基、4-漠 丁基、4,4,4-> 氣丁基、2,2,3,3,4,4,4-七氟丁基、 全氟丁基、2-氟戊基、2-氯戊基、2-溴戊基、5_氟戊基、5_ 氣戊基、5-溴戊基、全氟戊基、2-IL己基、2-氣己基、2-漠 5己基、6-氟己基、6-氯己基、6_溴己基、全氟已基、2-氟庚 基、2-氣庚基、2-溴庚基、氟庚基、氯庚基、7-溴庚基、 全氟庚基等。 經羥基取代之烷基之實例包括含1至3個羥基之前述烷 基，諸如經基甲基、2-經基乙基、3-經基丙基等。 10 於本發明之整體範圍内，視需要可經取代之烯基較佳 包括： 含2至8個碳原子之直鏈或分支鏈烯基及含3至8個碳原 子之環烯基，其視需要可經以較佳含有1至3個取代基諸如 羥基、i素或烷氧基之取代基取代。其實例包括乙烯基、 15 1-甲基乙烯基、丙烯基、1-丁烯基、異戊烯基、環丙烯基、 環丁烯基、環戊烯基、環己烯基。以乙烯基及丙烯基為佳。 於本發明之整體範圍内，視需要可經取代之芳基較佳 包括： 含6至14個碳原子（其中不含取代基之碳原子）之芳香族 20 烴基及含選自於S、0、N所組成之組群之至多3個雜原子之 5員至10員芳香族雜環基，其可為單環或雙環且<較佳經以 選自於羥基、鹵素、氰基、烷基、醯基及烷氧基中之1至3 個取代基取代。至於烷基及鹵素之定義，可參考前述定義 及舉例說明。 12 200908986 於此處及於下文中，作為芳基之取代基之烷氧基例如 包括.透過乳原子而鍵結至芳基之前述炫1基，諸如含至多6 個碳原子之線性或分支燒氧基’諸如甲氧基、乙氧基、正 丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、第二丁氧基、 5第三丁氧基、正戊氧基、異戊氧基、第二戊氧基、第三戊 氧基、2-甲基丁氧基、正己氧基、異己氧基、第三己氧基、 第二己氧基、2-甲基戊氧基'3-甲基戊氧基、丨_乙基丁氧基、 2-乙基丁氧基、1,1- 一甲基丁氧基、2,2-二甲基丁氧基、3 3_ 二甲基丁氧基、1-乙基-1-曱基丙氧基等。較佳為曱氧基、 10乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、第 二丁氧基、第三丁氧基等。 此處及下文中，作為芳基之取代基之醯基包括：脂肪 族醯基、芳香族醯基諸如C1至C6烧醯基諸如甲醯基、乙醯 基、丙醯基、丁醯基、異丁醢基、戊醯基、異戊醯基、特 15戊酿基、己醯基專，以及C6至C10芳醢基諸如苯甲醯基、 曱苯甲醯基、二甲苯甲醯基等。 含6至14個碳原子之芳香族烴基例如包括：苯基、萘 基、和基及葱基其視需要可經取代。以苯基為佳。 雜芳香族基團例如包括吡啶基、吡啶基沁氧化物、嘧 20啶基、嗒啡基、吡讲基、噻吩基、呋喃基、吡咯基、吡唑 基、咪唑基、嘍唑基、噚唑基或異噚唑基、吲哚啡基、吲哚 基、苯并(b)噻吩基、苯并(b)呋喃基、吲唑基、喳啉基、異 喳啉基、嘹啶基、喳唑啉基。較佳為5或6員芳香族雜環例 如吡啶基、吡啶基N-氧化物、嘧啶基、嗒啡基、呋喃基及 13 200908986 嘍吩基。 於本發明之整體範圍内，視需要可經取代之烷基芳基 較佳包括： 如前文說明之含1至8個且較佳含丨至4個碳原子之直鏈 或分支烷基其係如前文說明經以芳基取代。較佳芳芙烷某 為苄基。 土土 特佳R1及R2各自分別為烷基且較佳為相同（較佳）或相 異及各自分別為含1至6個，較佳1至4個更佳個碳原子 之直鍵或分支烧基，較佳為線性炫《基。R1及、其 10或乙基。R1及R2最佳為甲基。 ：甲土 於通式（1)中 R9及R1g為相 f、R4、R5、R6、R7、r8 同或相異且各自分別選自於由下列所組成之組群： -氫， _鹵素， 15 ·乳基， -硝基， -羧基， -胺基羰基， -磺酸基團（-S〇3H)， 20 -胺基磺醯基， -視需要可經取代之烷基， -視需要可經取代之烷氧基 -視需要可經取代之烯基， -視需要可經取代之芳基， 200908986 -視需要可經取代之烷基芳基。 至於該等取代基之定義及其較佳定義可參考前文就有 關R1及R2之定義之相對應取代基所做的註解。此外，於本 發明之整體範圍内，胺基羰基較佳表示胺基曱醯基 5 (t^NCO-)或一 或二-烷基胺基羰基(H(烷基)NCO-或（烷 基hNCO-) ’其中有關烷基之定義，可參考前文說明，也包 括視需要可經取代之烧基。此外，於本發明之整體範圍内， 胺基磺醯基特別表示胺基磺醯基(H2N-S〇2_)或一-或二_烧 基胺基〜酿基(烧基)2N-S〇2 ’其中有關烧基之定義可參考前 10述說明，也包括視需要可經取代之烷基。視需要可經取代 之烷氧基包括如前文舉例說明為芳基之取代基之炫氧基， 其視需要也較佳由1至3個較佳係選自於鹵素、經基及氛美 所組成之組群之取代基所取代。 較佳R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9及Ri。係選自於： 15 -氫， -鹵素， _氰基， _確基， -羧基， 2〇 -胺基羰基， -磺酸基團（-S03H)， -胺基項醯基， _視需要可經取代之烧*基，及 _視需要可經取代之炫氧基。 15 200908986 更佳 R3、R4、R5、R6、R7、R8、R\R10 係選自於： -鹵素，及 -視需要可經取代之烷氧基。 5 較佳基團R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9及R10中之至少 6個且更佳至少7個表示氫。較佳全部基團R3、R4、R5、r6、 R7、R8 ' R9及R1()皆表示氫。 通式（1)之R11為視需要可經取代之烷二基或視需要可 經取代之烯二基。視需要可經取代之烷二基較佳為含有丨至 10 7個，較佳1至6個，更佳1至4個碳原子之二價直鏈或分支烷 一基，其視需要可搞帶選自於由經基、鹵素及氰基所組成 之組群中之1至3個取代基。值得一提者為下列實例：亞甲 基、1，2-乙二基、乙_U_二基、伸丙基、丙_u_二基、 丙-1,2-二基、丙 _2,2-二基、1，4-伸丁基、丁-L2-二基、丁],3_ 戊-2,4-二基、3-甲基-戊 二基、丁-2,3-二基、戊-i，5-二基、 -2,4-二基及己—丨乂二基。較佳經取代之烷二基為經羥基取 代之烷二基。視需要可經取代之烯二基較佳為含有2至7 個’較佳2至6個’更佳2至4個碳原子之二價直鏈或分支婦 -基’其視需要可攜帶選自於由歸、_素及氰基所組成

一提之較佳實例： 基、己-3-烯-1，6-二 乙烯-1，2_二基、丙烯-1，！-二基、丙烯-1，2- 丁-1-烯-1，4-二基、丁小烯]'二基、 ;、丁-1，3-二烯_】，4_二基、戊二 二基及己-2,4-二烯-丨，6_二基。 16 200908986 於本發明之範圍内，Rn特佳知二基，更佳為含⑴ 個碳原子之院二基’又更佳為丨，2乂二基(碼CH2 )或i 3_ 丙工基卿仰仰2·)。R"為最佳丨，2_乙二基( CHAW)。 於式⑴中，X1係選自於由下列所組成之組群： •單鍵， -Μ 基(-CO-) ’ -硫(-S-)， -氧(-〇-) ’ -亞楓基(-SO-) ’ 10 -楓基(-S〇2-) ’ -偶氮(_Ν=Ν·)及 -含1至6個碳原子之視需要可經取代之飽和或不飽和 脂肪族二價基。 於本發明之範圍内，χ1表示之含1至6個碳原子之視需 15要可經取代之飽和或不飽和脂肪族基團包括：如上定義之 視需要玎經取代之烧二基、如上定義之視需要可經取代之 烯二基、及炔二基。χ〗較佳為含至多4個碳原子且較佳至多 2個碳原子之烷二基、烯二基或炔二基諸如亞甲基(-CHr)， 其視需要町經以經基取代(例如-CH(OH)-)。 20 以其中χ1為羰基(-c〇-)之通式（1)化合物為最佳。 於本發明之範圍内，通式（1)之R12及R13基係選自於下 列變化： 1)R12為氫及R13為視需要可經取代之烷基或羥基，或 R13為氫及R12為視需要可經取代之烷基或羥基。 17 200908986 1) 所述之變化例為相當。係與R12或R13中之一個取代基 為氫而另一個取代基為視需要可經取代之烷基或羥基之情 況相對應。 2) R12及R13各自為炫基，其中該等烧基中之至少一者具 5 有至少一個取代基，或 3) R12及R與其鍵結之氮原子共同形成飽和或不飽和 視需要可經取代之5至8員環，其視需要可含有額外雜原子。 變化例Π ： 前文所述變化例1)為於本發明範圍之較佳變化例。更 10 佳於此變化例之範圍内： R12為氫及R13為經取代之烷基，或 R13為氫及R12為經取代之烧基。 此處烷基包括含1至8個較佳1至6個碳原子之直鏈或分 支烷基’含3至8個且較佳5或6個碳原子之環烷基或含1至4 15個碳原子其可由環烷基取代之烷基。至於烷基之可能之實 例，可參照前文對R1及R2所述之實例。特佳烷基於此處為 C1至C6且較佳為C1至C5烷基其可為直鏈或分支，諸如且特 別為甲基、乙基、丙基、2_甲基丙基、丁基諸如正丁基、 2-甲基丁基、3-甲基丁基、戊基諸如正戊基、或正己基。該 20等烷基係經以至少一個取代基取代。烷基之較佳取代基為 含有一個或多個雜原子較佳選自於：N、〇、s、鹵素、諸 如Cl、F、Br及I之雜原子之極性官能基。於Ri2&Rl3之定義 中，烷基之取代基特別包括： 下式基團： 18 200908986 v2 014 _X—R ，其中 X2係選自於由下列所組成之組群： _幾基， -亞ί風基及 5 -諷基及 R14係選自於由下列所組成之組群： _搜基， -視需要可經取代之胺基及 -視需要可經取代之烷氧基。 10 較佳X2為羰基及R14為羥基。 當R14為羥基時，取代基-X2R14為羧基。當R14為視需要 可經取代之胺基時，取代基-X2R14例如為-CONH2換言之於 R14=胺基之情況下為胺基曱醯基，或於R14=烷基胺基或二 烷基胺基之情況下-X2R14為一-或二-烷基胺基羰基。當R14 15 為視需要可經取代之烷氧基時，取代基-X2R14於R14=烷氧基 之情況下為烷氧基羰基，換言之酯基。於R12及R13之定義 中，烷基之取代基較佳含有至少一個式-X2R14基且較佳含有 一或二個式-X2R14基。 除了較佳存在的-X2R14基之外，於R12及R13定義中之烷 20 基之進一步較佳取代基包括下列取代基： _脈基， -Μ基(-SH)， -烷基硫基諸如特別為甲硫基， -胺基(-ΝΗ2)， 19 200908986 -一-烧基胺基或二-烧基胺基’ -醯基胺基，其中醯基特別係如前文定義， -飽和、不飽和或芳香族、單環或雙環、視需要可經取 代之雜環基諸如前文說明之視需要可經取代之雜芳香族 5 基，較佳為咪唑基諸如咪唑-5-基、1H-吲嵘基諸如 1H-吲嵘-3-基， -如前文所述之視需要可經取代之芳基，特別為苯基、 羥基苯基諸如4-羥基苯基、烷氧基苯基諸如甲氧基苯基， _經基， 10 -如前文說明之烷氧基。 於R12及R13定義中之烷基較佳具有一個或多個取代 基，其中較佳至少一個取代基為-X2R14基。 於前述變化例1)之較佳形式中： R12為氫及R13為式H2N-A化合物之基團A，或 15 R13為氫及R12為式H2N-A化合物之基團A，其中 A為正式由天然或合成胺基酸、天然或合成胺基酸衍生 物或多胺基酸或多胺基酸衍生物裂解一個胺基(-N Η 2)所衍 生之基團。 用於舉例說明之目的： 20 若胺基酸Η2Ν-Α例如為甘胺酸：

，則A=R12或R13為下式基團： 20 200908986

更佳為根據本發明化合物，其中A為從胺基酸或胺基酸 衍生物裂解胺基正式衍生之基團[須澄清由胺基酸正式裂 解胺基並非表示由視需要可存在之醯胺基(H2N-CO-)裂解 5 胺基，反而表示裂解鍵結至除了氫或碳以外並未攜帶額外 取代基之碳原子之胺基。換言之，由天冬醯胺藉裂解胺基 所形成之相對應基團R12或R13為：

2 (箭頭指示結合位置）]。 又更佳，基團A係由下列胺基酸組群裂解H2N基所形 -丙胺酸，對應於R12或R13為經以羧基取代之乙基之情 況， -精胺酸(較不佳），對應於R12或R13為經以羧基及胍基 15 取代之丁基之情況， -天冬醯胺，對應於R12或R13為經以胺基羰基 (carbamoyl)或缓基取代之乙基之情況， -天冬酸，對應於R12或R13為經以兩個羧基取代之乙基 之情況， 21 200908986 -半胱胺酸(較不佳），對應於R12或R13為經以硫基(-SH) 及缓基取代之乙基之情況， _麵胺’對應於R12或R13為經以胺基幾基(carbam〇yl)或 竣基取代之丙基之情況， 5 _麩胺酸，對應於R12或R13為經以兩個羧基取代之丙基 之情況， -甘胺酸，對應於其中R12或Ru為經以羧基取代之曱基 之情況， -組胺酸，對應於其中R12或Rl3為經以羧基或咪唑基取 1〇 代之乙基之情況， -異白胺酸，對應於其中Rl2或Rl3為經以羧基取代之2_ 曱基丁基之情況， -白胺酸，對應於其中R12或R13為經以羧基取代之3_甲 基丁基之情況， 15 _離胺酸’對應於其巾Rl2或R13為經以m基及胺基取代 之正戊基之情況，此處結合可透過無基相鄰之胺基進行： h2n^^^Yco〇h 、 （箭頭指示鍵結線或結合位置） 或透過端末胺基進行：

COOH NH2 ^ (诸頭指示鍵結線或結合位 20 置），故對應之式（1)化合物如下： 22 200908986

hkA H2N COOH 5 /等翻於有多於d目胺基之其它驗性胺基酸）， 胺酸對應於其中Rl2或R13為經以竣基及甲硫基取 代之正丙基之情況， 苯丙胺^ ’對應於Rl2或R13為經以叛基及苯基取代之 乙基之情況， -絲胺酸，對應於Rl2或Rl3為經以羧基及祕取代之乙 10基之情況， 23 200908986 -蘇胺酸，對應於R12或R13為經以羧基及苯基取代之正 丙基之情況， -色胺酸，對應於R12或R13為經以羧基及吲嵘基取代之 乙基之情況， 5 -酪胺酸，對應於R12或R13為經以羧基及羥基苯基取代 之乙基之情況，及 -纈胺酸，對應於其中R12或R13為經以羧基取代之2-甲 基苯基之情況， 或其衍生物諸如特別為酯類或醯胺類對應於其中R14 10 為烷氧基或視需要可經取代之胺基之情況；或其衍生物或 多胺基酸，係經由藉胜肽鏈接一個或多個額外胺基酸至前 文或後文說明之胺基酸而形成。 由其中藉正式裂解胺基形成基團R!2或R!3之額外胺基 酸化合物或其衍生物包括：肌酸(較不佳）、肌酸酐、牛磺酸、 15或其衍生物或多胺基酸，係經由藉胜肽鏈接一個或多個額 外胺基酸至前文或後文說明之胺基酸而形成。也較佳為所 =月之非蛋白質生成性胺基酸諸如：4_胺基丁酸(gaba)、l_ 回絲胺酸(2-胺基-4-羥基丁酸）、鳥胺酸(2,5_二胺基戊二 酸）、L-(+)-瓜胺酸(N5_胺基羰基)_L_鳥胺酸、5_羥基色胺酸 20 (5-HTP)、β_丙胺酸(3_胺基丙酸）、β_甲基胺基-丙胺酸、D_ 缔胺酸、D·丙賊、D_麵職及2,6•二胺基庚二酸。 别述胺基酸化合物η2ν·α之衍生物特別為藉經基官能 置換氳原子所形成者。 極佳為根據本發明之化合物，其巾基團Α係由胺基酸甘 24 200908986 胺酸及其衍生物及組胺酸及其衍生物之組群正式裂解h2n 基所衍生。 最佳為根據本發明之化合物，其中基團A係經由從下列 胺基酸或胺基酸衍生物之組群裂解H2N基所衍生： 甘胺酸： 10 0

OH NK 對應於R12或R13= 又 h2c

OH 甘胺醯胺：

(2-胺基-乙醯胺），對應於R12或R13= 甘胺酸乙酯：

(胺基-乙酸乙酯），對應於R12或R13= 25 200908986

組胺酸： κ N、/C、

C

OH HC II I 、n-ch nh2 Η

? OH 對應於R12或R13: Η N、/C、

-CH

HC ίί 或組胺醯胺： N-

HC Η, OΆη2

n，ch nh2 H (2-胺基-3-(lH-咪唑-4-基）-丙醯 胺），對應於R12或R13-H.

HC 尸丫 c2、c

NH 2

fCH 10 除了甘胺酸例外，全部胺基酸皆含有非對稱碳原子。 根據本發明化合物其中R12或R13為基團A其係由天然胺基 酸正式裂解胺基所形成者，因而具有胺基酸之天然組態（L 組態）。此點對於藉從胺基酸衍生物、多胺基酸及多胺基酸 衍生物正式裂解胺基所形成之化合物亦為真。但根據本發 26 200908986 明，也包括其中胺基酸具有非天然D組態之情況，諸如D_ 丙胺酸、D-麵胺酸等。 較佳根據本發明之化合物其中胺基酸H2N-A具有L组 態或其中R12或R13表示此種胺基酸之基團A ;以及較佳為其 5 中潛在之胺基酸衍生物、多胺基酸及多胺基酸衍生物係衍 生自具有L組態之胺基酸H2N-A之該等化合物。 - 有鑑於其水中溶解度較佳’進一步較佳為化合物其中 基團R12或R13係經由從具有至少兩個羧基之酸性胺基酸諸 如天冬酸、麩胺酸正式裂解NH2基所形成之化合物。由此觀 10點使用含經基胺基酸例如蘇胺酸亦屬較佳。 變化例2 : ^於前述變化例2)中，其M12及R13各自為烧基，其中該 等烧基中之至少-者具有至少一個取代基，較佳為一個或 二個取代基，較佳可參照前文對r々r2或對變化例^中之 .15 Rl2或Rl3所列舉找基之定義及實例。如此，縣之取代基 包括於R1及R2定義中對「視需要可經取代之烧基」所列舉 之實例，諸如經基、函素及氰基。此外，變化例2)中之烧 基可能之取代基也包括前述變化例υ中對Ri2及Rn所列舉 之實例諸如 2〇 -胍基， -Μ 基(-SH)， -烷基硫基諸如特別為甲硫基， -胺基(-ΝΗ2)， -一-烷基胺基或二-烷基胺基， 27 200908986 -醯基胺基，其中醯基特別係如前文定義， -飽和、不飽和或芳香族、單環或雙環、視需要可經取 代之雜環基諸如4文5兒明之視需要可經取代之雜芳香族 基，較佳為11 米°坐基諸如咪唑基、1H-吲嵘基諸如 5 1H-吲嵘-3-基， -如前文所述之視需要可經取代之芳基，特別為苯基、 羥基苯基諸如4-羥基苯基、烷氧基苯基諸如甲氧基苯基， -經基， -如前文說明之烷氧基，及 10 -下式基： _w?_r14 ，其中X2及R14係如前文定義，以及特別也包 括由胺基酸NH2_A正式裂解nh2所得之基團。 變化例3): 15 20 ,於前述變化例3)中，其中Rl2及RI3與其鍵結之氮原子共 同心成飽和或不飽和、視f要可練代之5至8貞環其視需 要二有，雜原子，由R12及R13及其鍵結之氮原子所組成 之可此之％系較佳包括5或6員視需要可經取代之環諸如旅 咬-1-基、味淋-4·基、硫味琳斗基、♦各咬小基、十坐咬冬 &^唾料基、2·縣♦各咬小基（普林基__、3- ==基财丨•或4_膝普林基)等。以普林 基及羥基-普林基為特佳。 根，本發明特佳之三氮稀化合物為其…及^各自為 :土讀含1至6個碳原子之烧基特佳為甲基之該等化合 物。 28 200908986 6根據本發明之特佳三氮烯化合物為其中R3、R4、r5、 R、R、R8、R9及R〗。各自為氫之化合物。 根據本發明之特佳三氣稀化合物為其中 合物。 5 根據本發明之特佳三氮稀化合物為反 基，較佳為含1至6個碳原子之線狀二基，特亞^ (-CPV)或乙]，2·二基。 根據本發明之特佳三氮烤化合物為其中於伸苯基上之 R1 10 基團X1及基團 ，Ν=Ν-Ν R2 係彼此位於對位。 根據本發明之特佳三氮稀化合物為其中於伸苯基上之 Ο

1〇、 13

R 基團X1及基團

R 係彼此位於對位。

特佳根據本發明為式(2)化合物： R

ν=ν-ν R1 特佳根據本發明為式（1)或(2)化合物其中： R1及R2各自為烷基， R3、R4、R5、R6、R'mR〗。各自為氫， R為烷二基 29 (2) 15 200908986 R12為氫及R13為式H2N-A化合物之基團A或 R13為氫及R12為式H2N-A化合物之基團A，其中 A為藉由天然或合成胺基酸、天然或合成胺基酸衍生物 或多胺基酸或多胺基酸衍生物裂解胺基(-NH2)所衍生之基 5 團，及 X1為羰基(-CO-)。 最佳為選自由下列所組成之組群之化合物：

(實例4)

(實例2)

(實例5) 30 200908986

OH

Ο

及 31 200908986

或其藥學上可接受之鹽。 較佳化合物進一步包括下列化合物：

(實例9之自由態酸)

(實例7之自由態酸)及

(實例8) 10 及其藥學上可接受之鹽。 32 200908986 \n (於此等結構式中，式I之結構元素例如表示二曱基 胺基，換言之以單線表示之甲基，此乃熟諳技藝人士眾所 周知之標示方法。同理， 表示亞甲基（-ch2-)之縮寫標 示法）。 5 進一步較佳為根據本發明之式（1)化合物其中 R12為氫及R13為經取代之烷基，或 R13為氫及R12為經取代之烷基，其中 經取代之烷基為具有至少一個磺酸基、磺酸酯基或磺 醯胺基之烷基。就此方面而言特佳為其中於R12或R13定義中 ίο 之經取代之烷基化合物為下式基團： H2

/C、c/S〇3H H2 其係衍生自牛磺酸(2-胺基乙磺酸）。 含有鹼性基之根據本發明之三氮烯化合物可呈其於藥 學上可接受之酸之藥學上可接受之鹽形式使用，諸如於無 機酸類、羧酸類及磺酸類所形成之鹽，諸如與下列酸所形 15 成之鹽：氫氯酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、磷酸、酒石酸、 甲磺酸、羥乙磺酸、乙尿酸（乙醯基甘胺酸）、順丁烯二酸、 丙酸、反丁烯二酸、甲苯磺酸、苯磺酸、三氟乙酸、萘-1，5-二磺酸、水楊酸、苯甲酸、乳酸、蘋果酸、3-羥基-2-萘曱 酸、檸檬酸或乙酸。 20 含有酸性基之根據本發明之三氮烯化合物可呈其於藥 33 200908986 學上可接受之鹼之藥學上可接受之鹽形式使用，諸如與驗 金屬氫氧化物或驗土金屬氫氧化物所生成之鹽諸如 NaOH、KOH、Ca(OH)2、Mg(OH)2等，與胺化合物所生成 之鹽，諸如乙基胺、二乙基胺、三乙基胺、乙基二異丙基 胺、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、曱基葡萄糖胺、二環 己基胺、一甲基胺基乙醇、普羅卡因（pr〇caine)、二苄基胺、 N-曱基-咮琳、精胺酸、離胺酸、伸乙基二胺、甲基底 啶、2-胺基-2-甲基-1-丙醇、2_胺基_2·曱基“，、丙二醇、2_ 胺基-2-羥基-甲基_ι，3_丙二醇(TRjs)等。 根據本發明化合物之水中溶解度或於生理食鹽水之溶 解度如此視需要也包括根據本發明化合物之活性可能受鹽 形成之顯著影響㈣受抗娜子之之顯著影響。例如 化合物

15 -、有於25 c水τ之浴解度約為4克/ 升，而TRIS鹽具有於抑之水中溶解度約為⑽克/升。 根據本發明化合物之水巾轉度或於生理食鹽水之溶 解度如此視需要也包括根據本發明化合物之活性於某此情 況I也顯絲決於化合物本身之基本結構。例如實胸 化口物出乎息外地具有 c〇n^/4. 、至M(25C)之極佳水中溶解度為 克/升，㈣於實例4a)化合物之溶解度(4克/升），即使前 34 20 200908986 者只多—個亞曱基。 根據本發明化合物之高度水中溶解度並非絕對具有關 鍵重要性，原因在於物質之主要部分於血流中可能係呈與 蛋白質結合的形式。反而通常重要地物質已識別為體内轉 5 運系統之酶基質。就本發明而言，所謂之OAT(有機陰離子 轉運子）及OATP(有機陰離子轉運子蛋白質）推定特別重 要。但對陰離子不具有100%特異性。其中一個實例為毛地 黃毒素。胜肽轉運子也被討論為可辨識胺基酸或胺基酸醯 胺基之相關吸收與排泄機轉。 10 使用2-胺基-2-羥基-甲基-1，3-丙二醇(TRIS)及鈉鹽對提 高本發明化合物之水中溶解度背景為較佳。 依據結構式而定，當存在有非對稱碳原子時，根據本 發明化合物可呈立體異構形式（對映異構物、非對映異構物) 存在。因此本發明也包括對映異構物或非對映異構物及其 15 混合物之使用。對映異構純質形式視需要可藉習知光學分 割方法獲得，諸如經由與旋光性化合物反應而藉其非對映 異構物之分段結晶獲得。當根據本發明化合物係呈互變異 構形式出現時，本發明也包括全部互變異構形式之使用。 本發明進一步係關於一種製備式（1)化合物之方法，包 20 含下述步驟： 式（3)化合物： 35 200908986

或其鹽特別其鈉、鉀或鈣鹽， 與式(4)化合物反應

5 其中R1至R13及X1係如前文定義。 三氮烯化合物（3)之製備可以類似於DE 1793115 A1所 述製備方法進行，經由重氮化潛在胺基化合物，其又係由 相對應之硝基化合物還原獲得。如下反應圖舉例說明使用 {2-[4-(4-[(1Ε)-3,3-二曱基-1-三氮烯基]-苯甲醯基)-苯氧基]-10 丙醯基胺基}乙酸之實例之製備方法： H3C :n-n=n h3c

步驟1

ο

ο〜

36 200908986

所示各步驟屬於本身已知之反應類型（福立列克拉福 (Friedel Crafts))醯化反應、硝基之氫化或還原反應、重氮化 反應、醯胺化反應及皂化反應）且可以本身已知之方式進 5 行。經由於藥學上可接受之鹼反應，獲得相對應之鹽。替 代甘胺酸甲酯，於步驟5也可使用下式：

其它胺基化合物特別也可使用其它胺基酸或其衍生 物。 10 類似於前述反應圖，始於苯氧基乙酸，其於步驟2中於 福立列克拉福反應中與對硝基苯甲醯氯反應，獲得 37 200908986

{2-[4-(4-[(1Ε)-3,3-二甲基三氮烯基]-苯甲蕴基)苯 氧基]-乙醯基胺基}乙酸及其鹽。

至於一苯乙烯衍生物，其中xi=_ch=ch，例如可參考 5 W02004A06358。額外起始化合物之製備係說明於DE 1793115 A1 ’ 已述於DE 2147781 A1 及DE 1768720 A1。 至於較佳反應條件，可參照實例。 類似US 20070135424 A(例如中間物24)，羥肟酸衍生物 其中R12及R13中之一者為氫而另一者為羥基例如可經由該 10 酸：

其隨後可經由與三氟乙酸反應而轉成相對應之羥肟 酸，例如： 38 200908986

根據本發明使用之若干中間物為新穎且藉其貢獻之結 構元素來對終產物之性質做出貢獻。如此，本發明亦係關 於新穎中間物，諸如特別為式(3’）：

其中X為2至6，較佳為2及其鹽類。 本發明進一步係關於式（1)化合物用作為藥物之用途， 以及式（1)化合物用於製備藥物特別為癌症治療藥物之用 途。 10 根據本發明化合物例如可用於治療下列各類型腫瘤： 腺癌、葡萄膜黑素瘤、急性白血病、聽神經瘤、壺腹癌、 肛門癌、星狀細胞瘤、基底層瘤、胰癌、結締組織腫瘤、 膀耽癌、支氣官癌、非小細胞支氣管癌、乳癌、伯基特氏 (Burkitt’s)淋巴瘤、體癌、卡伯（CUP)症候群、大腸癌、小 15 腸癌、卵巢癌、子宮内膜癌、室管膜瘤、各類上皮癌、歐 文氏(Ewing’s)腫瘤、胃腸腫瘤、膽囊癌、膽囊癌瘤、子宮 癌、子宮頸癌、神經膠母細胞瘤、婦科腫瘤、頸、鼻及耳 腫瘤、血液腫瘤、多毛細胞白血病、尿道癌、皮膚癌、腦 39 200908986 腫瘤（神經膠瘤）、腦腫瘤轉移、睪丸癌、腦垂腺腫瘤、類癌、 卡波西氏肉瘤、喉癌、生殖細胞腫瘤、骨癌、大腸直腸癌、 頭/頸腫瘤（頸、鼻及耳區之腫瘤）、大腸癌、顱咽管瘤、口 腔及嘴唇癌、肝癌、肝腫瘤轉移、白血病、眼瞼腫瘤、肺 5癌、淋巴腺癌（何杰金氏/非何杰金氏）、淋巴瘤、胃癌、惡 性黑素瘤、惡性腫瘤、胃腸道之惡性瘤、乳癌、直腸癌、 髓母細胞瘤、黑素瘤、腦膜瘤、梅克爾（Merkel)細胞癌、何 杰金氏病、簟狀肉芽腫病、鼻癌、神經瘤、神經母細胞瘤、 腎癌、腎細胞癌、非何杰金氏淋巴瘤、寡樹突神經膠瘤、 10食道癌瘤、溶骨癌瘤及成骨癌瘤、骨肉瘤、卵巢癌、胰癌 瘤、陰莖癌、聚細胞瘤、頭及頸之鱗狀細胞癌瘤、攝護腺 癌、咽癌、直腸癌瘤、視網膜母細胞瘤、陰道癌、甲狀腺 癌、許博格(Schneeberg)肺病、食道癌、脊椎瘤、τ細胞淋 巴瘤（蕈狀肉芽腫）、胸腺瘤、管癌瘤、眼部腫瘤、尿道癌、 15泌尿系統腫瘤、尿路上皮癌、女陰癌、疣、軟部腫瘤、軟 部肉瘤、威爾姆氏腫瘤、子宮頸癌瘤及舌癌。特別參考例 如於W02007061978 (第16頁第22行至第18頁第2行）或 US2007135424A1 (第9頁左攔，章節122)之癌症類別表單， 二案可視為本發明揭示之一部分。本發明化合物也可用於 20其它適應症，諸如於US2007135424A1章節123至142所述。 根據本發明之化合物特佳係用於乳癌、腸癌或黑素瘤 之治療。 根據本發明之化合物特佳用於乳癌之治療。 本發明進-步係關於式⑴化合物組合至少另一種化學 40 200908986 治療劑用於癌症之治療。 如此本發明化合物也可組合癌症或腫瘤治療上之其它 化學治療劑及/或組合於化學治療期間連同該等化學治療 劑一起投予之藥物使用。可組合使用之化學治療劑及化學 5 治療中所使用之其它藥物之實例例如可參考 W02007061978標頭「組合治療」（第23頁第1行至第30頁第 18行）或US2007135424A1(章節153至171)，相關内容全文以 引用方式併入此處。 本發明進一步係關於包含至少一種式（1)化合物連同至 10 少一種藥理上可接受之載劑、輔劑物質或溶劑之藥學組成 物。此等添加劑為習知藥學載劑、輔劑物質或溶劑。所述 藥學組成物例如適合用於吸入投予或用於靜脈、腹内、肌 肉、陰道内、頰内、經皮、皮下、經黏膜、經口、經直腸、 穿皮、局部、皮内、胃内或皮膚内投予且係呈例如丸劑、 15 錠劑、腸衣錠、膜衣錠、層狀錠、用於口服、皮下或皮膚 投予之延遲調配物（特別係呈硬膏劑型）、長效調配物、糖衣 錠、栓劑、膠漿劑、軟膏劑、糖漿劑、吸入用粉劑、粒劑、 栓劑、乳液劑、分散液劑、微囊、微米級調配物、奈米級 調配物、微脂粒調配物、膠囊劑、腸衣膠囊劑、散劑、吸 20 入用粉末、微晶調配物、吸入用喷霧劑、散劑、滴劑、鼻 用滴劑、鼻用喷霧劑、氣霧劑、安瓿劑、溶液劑、果汁劑、 懸浮液劑、乳液劑、輸注溶液劑或注射溶液劑等劑型。 根據本發明化合物可呈藥學組成物形式投予，藥學組 成物包含多種習知用於製藥目的之有機或無機載劑及/或 41 200908986 輔助性材料，特別係用於固體 庶糖、澱粉、甘s ’、 I，諸如賦形劑（諸如 素、滑石、磷酸钲山私 礼搪、《萄糖、纖維 唯♦、宝_ '巧、奴酸鈣）、黏結劑（諸如纖唯辛、甲且 准素、备丙基^ 、纖，准素甲基纖 ;聚乙二醇、^素聚丙基魏D定綱、明勝、阿拉伯膠、 …、糖、澱粉）、崩散劑 Μ纖維素、幾_素·、：:其水解殺粉、幾 :納、碳醆氧納、物、擰檬， 如硬脂酸鎂、、取^ ” π動劑及潤滑劑（諸 薄荷腦、甘胺:/硫酸月桂醋納^緯味劑(諸如檸檬醆、 10 15 20 酸氫鈉、對羥苯尹酸 U如”酸鈉、亞硫 如檸檬醆、捭浐酸 ’本甲酸丙酯)、安定劑(諸 心才豕酸鈉、乙酸、及得白 群之多羧醆類#‘ 疋崔W斯（Titriplw)族 又_諸如二伸乙某r脸 (諸如甲基纖 夂(DTpA))、懸浮劑 稀釋劑(諸如> ^ 』硬知酸鋁）、分散劑、 水、有機溶劑）、蜂蠟、可 軟石蠟等。 ^ 了可脂、聚乙二醇、白 液體藥物劑型諸如溶液劑、 含液體载劑I u 〜液劑及膠漿劑習知包 戰齊丨堵如水及/或藥學上可接受 體調配物冰h入 又之有機洛劑。此等液 匕物也包含pH調節劑、乳化劑或分 藏劑、濕澗釦 次刀政劑、緩衝劑、保 味劑。組二!=二?織維素)，劑· 同之渗透壓"、、°之組成物可具有與血液相 边&。組成物之相等滲透壓可藉# 藥學上可p ^歧用iUt納或其它 J接芰之化學劑調整，諸如葡萄糖、 酒石醆鈉、π 麥牙糖、硼酸、 丙二醇或其它無機可溶性物質 質。液體相+ 負次有機可溶性物 髖、、且成物之黏度可使用藥學上可接& 予j接文之增稠劑諸如 42 200908986 甲基纖維素調整。其它適當增稠劑例如包括黃膠、羧甲基 纖維素、羥丙基纖維素、卡博莫（carbomer)等。增稠劑之較 佳濃度將取決於所選用之化學劑。藥學上可接受之保藏劑 可用來延長液體組成物之壽命。適合使用节醇，但同樣也 5 可使用多種保藏劑諸如對羥苯曱酸酯、硫柳汞、氣丁醇或 氯化节烧鐵。 發現二伸乙基三胺五乙酸(DTPA)為用於根據本發明之 化合物諸如特別為實例2a)化合物之固體或液體藥學調配 物之適當安定劑。 10 活性成分例如可以由0.01毫克/千克至500毫克/千克體 重之單位劑量投予，例如每曰高達1次至4次。但劑量可隨 病人年齡、體重及情況、病情嚴重度或投藥模式增減。 本發明藉下列實例說明其進一步細節。此等實例僅供 舉例說明之用，熟諳技藝人士可擴大至額外其它請求專利 15 化合物之特定實例。 實例： 起始製備： 盥備例1 : 起始化合物

之製備係根據如下反應圖進行： 43 20 200908986 Ο,Ν^

-CO Cl - A\Ch

-OCHUH C1CH，CH，C1 O.N'

-co-

-〇ch2co2h

Na,SH.O H，N-

-co-

-OCH.CO^H 1. hcih2o 2. NaNO, 'f

Cl N,

-co-

-och2co2h

Na,C03 H2OaHN(CH3)2 (CH3)2N-N=N- -co- -0CH2C02Na 全部起始物料皆為眾所周知且於文獻上有詳細記載 全部合成產物之NMR光譜皆符合結構式。

階段I o2n

CO

och2co2h MW: 301: C15H11N06 0.5 mol 102克對硝基苯甲醯氯(0.55莫耳）溶解於300毫升二氯 44 200908986 甲烷於〇-5°C徐緩以攪拌逐滴添加至235克氣化鋁於1升/ 氯乙烷之懸浮液。7 6克苯氧基乙酸分成數份導入5 °C之$ # 内。然後於l〇°C進行攪拌4小時及於室溫攪拌10小時。 後續處理： 600毫升二氯乙烷經蒸餾出，添加600毫升石油英。然 後混合物倒至2升冰/水上。水相經分離，所得結晶產物以 抽吸過遽，以水洗滌及乾燥。 產率：100克；m.p_ : 186°C，白色產物。

階段II

MW: 271; C15H13N04; Lit.: Houben Weyl 11/1 p. 417 0.5 mol 320克I於1升乙醇回流沸騰伴以攪拌。35〇克硫化鈉及 350毫升水之溶液小心逐滴添加至其中（強力放熱，吸收硫 15化氫）。然後進行沸騰2小時。讓反應混合物於室溫靜置約 10小時。 後續處理： 醇經過濾出，殘餘物以3升熱水伴以攪拌萃取，趁熱以 抽吸過濾出。濾液以冰醋酸酸化，所得產物以抽吸過濾出， 20 以水洗滌，再度以抽吸過濾及乾燥。 純化：由乙醇 產率：200克=74%，微黃色產物； M_p. : 172°C。 45 200908986 階段III : (CH3)2N-N=N 〇CH2C02Na MW: 349; C17H16N3〇4Na 0.1 mol 5 6.9克亞硝酸鈉於20毫升水之溶液於Ot：以攪拌逐滴添 加至27.1克II，350毫升水及10.4克濃鹽酸(37%)之溶液，又 於〇°C攪拌15分鐘。所得重氮鏘鹽溶液於〇-5°C以攪拌逐滴 添加至置於容器内15克碳酸鈉及10克45%水性二甲基胺溶 液及50毫升水之溶液。 10 後續處理： 反應混合物維持冷卻，所得鹽以抽吸過濾及由水中再 結晶。 純化： 由水中再結晶。溶解度：1克於25毫升水。產率：10 15克=28%，嗶嘰色；酸之m.P. : 160。(：。經由將鹽溶解於水及 以乙酸沉澱而獲得該酸。 盥備例2 : 笨氧基丙醯基起始化合物

20 之製備係以說明書中反應圖所示方式進行。 46 200908986 步驟1 : 下列材料係以指示量使用：

酴及丙稀酸乙S旨導人於裝配有熱元素及架空授掉哭之 5升三頸玻璃瓶内。加入崔頓B，於回流⑽。c)下加㈣小 日夺。TLC顯示仍然存在有小量紛。反應組成物如後^明 後續處理。移開丙烯酸⑽1餘物溶解於乙酸乙/，以 水性氮氧化_%则財叫）絲及#水碰納 脫水。脫水後之有機層經濃縮獲得殘餘物。雜_㈣〇 10 升W濃鹽酸’回流加熱24小時。檢驗 TLC，反應組成物冷卻至25t。固體經過❹及以水 徹底洗滌。產物於烤爐内於3〇°c減壓乾燥隔夜。 產率：450克（27%理論值） 純度(HPLC) : 98.32% (另外’根據如下反應圖經由潛在腈之皂化反應也可製 備產物： 47 15 200908986

〇 步驟2 : 下列材料以指示量使用： 數量 分子量 莫耳 當量 4-硝基苯曱酸 300克 167 1.796 1 亞石黃酸氣 1.5升 119 20.62 11.5 DMF 0.05毫升 133.3 5.4 3 二氣乙烷 12_5 升 166 1.687 0.94 A1C13 720克 步驟1產物 280克 己烧 8升 冰水 15升 5 4-硝基苯甲酸，亞磺醯氯及DMF置於3升4頸玻璃瓶 内，於78°C回流加熱2小時。藉反應混合物之澄清監視反應 終點。反應結束時溶液變澄清。於減壓下移出亞磺醯氯。 加入二氯乙烷（1升），進行蒸發獲得呈固體形式之4-硝基苯 曱醯氯。固體溶解於二氯乙烷（1升）。二氯乙烷（10升）導入 10 20升玻璃瓶内及冷卻至0°C。於〇-5°C添加氣化鋁。然後於 〇-5°C逐滴添加如上製備之4-硝基苯甲醯氣溶解於二氯乙 烷。苯氧基丙酸於0.5°C逐份添加至反應組成物及於25°C攪 拌隔夜。檢驗TLC，反應組成物於己烷（8升）及冰水（15升) 之混合物内淬熄。組成物經攪拌，固體經過濾出。產物以 己烧洗滌及乾燥。 48 15 200908986 產率：400克(70%理論值） 純度：92.8%藉HPLC。 步驟3 : 下列材料係以指示用量使用： 數量 分子量 莫耳 當量 步驟2產物 400克 315 1.26 1 Na2S 400克 78 5.13 4 乙醇 4升 水 1升 得自步驟2之產物攝取於乙醇及冷卻至0°C。於l〇-15°C 逐滴添加硫化鈉水溶液，於25°C攪拌隔夜。去除乙醇，於 減壓下加水(4升）。添加乙酸調整pH至6。濾液之pH以乙酸 調整至3，以乙酸乙酯（3升）進行萃取。有機層經脫水及濃縮 10 獲得殘餘物。 產率：168克 純度：>70%藉HPLC。 使用230克得自步驟2之產物製備類似批料。 產率：108克 15 純度：66.1%藉HPLC。 以上二批產物經混合及由乙醇再結晶。 組合產率：110克（19_3%理論值） 純度：95.6%藉HPLC。 步驟4 : 20 下列材料係以指示數量使用： 49 200908986 數量 分子量 莫耳 當量 步驟3產物 110克 285 0.3859 1 濃鹽酸 130毫升 36.5 1.31 3.4 水 2升 NaN02 30克 69 0.04347 1.12 Na2C〇3 67.5 克 106 0.6367 1.65 二甲基胺(40%) 混合得自步驟3之產物，水(2升）及濃鹽酸冷卻至〇°C ° 亞硝酸鈉溶解於水（150毫升）及於0-5°C添加，攪拌30分鐘。 於另一個玻璃瓶内，碳酸鈉溶解於水（160毫升）；加入 5 二甲基胺，混合物冷卻至0°C。鈉重氮鍇鹽於〇-5。(：徐緩添 加至如上製備之溶解，攪拌1小時。檢驗TLC，反應完成。 反應組成物之pH以乙酸調整至3’以乙酸乙酯（1.2升）進行萃 取。有機層以水(200毫升x2)洗滌，以無水硫酸鈉脫水及濃 縮獲得固體。 10 粗產物產率：109.5克 純度：84.7%。 粗產物藉管柱層析術純化(2〇%thF於乙酸乙酿）。 產率：85克(64·6%理論值） 純度：93.3%藉册〇：。 15 製備例2之產物具有由124.5。(：至125.8。(：之熔點。 第19圖顯示所得化合物之1H-NMR光譜。 實例1 : 50 200908986

(如上反應圖之步驟5): 下列材料係以指示數量使用： 數量 分子量 莫耳 當量 步驟4產物 85克 341.36 0.249 1 EDC HC1 52_5 克 191.7 0.274 1.1 HOBT 8克 甘胺酸甲酯HC1 31.23 克 125.8 0.249 0.99 TEA 75.89 克 101 0.7514 3 DCM 850毫升 5 得自步驟4之產物溶解於DCM及冷卻至10°c。HC1及 HOBT添加至EDC，攪拌30分鐘。於10°C添加甘胺酸甲西旨， 於27°C攪拌隔夜。檢查TLC，發現反應完成。加水（1升）， 分離該層。有機層以硫酸鈉脫水及濃縮獲得殘餘物。 粗產物產率：110克 10 純度：91.3%藉HPLC。 粗產物進一步藉管柱層析術純化（10%乙酸乙酯於己 烷）。 產率：89克（86%理論值） 純度：95.4%藉HPLC。 15 產物為具有熔點104.0°C至105.0°C之桃色粉末。於質譜 51 200908986 觀察得主峰於413.5 (Μ+l)。 第1圖顯示實例1化合物之1 H-NMR光譜(400 MHz)。 第2圖顯示實例1化合物之13C-NMR光譜（100 MHz)。 實例2 :

(如上反應圖之步驟6): 下列材料係以指示數量使用： 數量 分子量 莫耳 當量 步驟5產物 89克 412 0.2157 1 LiOH H20 9.5克 41.96 0.2264 1.05 THF 890毫升 水 178毫升 步驟5產物、THF及水經混合及冷卻至〇°c。於〇°C分成 10 數份添加氫氧化鋰(4.5克），攪拌20分鐘。檢驗TLC ’尚未 開始反應。加入額外一批氫氧化鋰(4.5克），及攪拌30分鐘。 檢查TLC發現反應已經開始。反應組成物維持1小時，檢驗 TLC。保有極小量酶基質。又加入一批氫氧化鋰(0.5克）。 於30分鐘後檢查TLC，酶基質已經消失。於減壓下去除 15 THF，殘餘物以乙酸乙酯（2升）稀釋。pH調整至5-6 ’獲得澄 清溶液。以水(2〇〇毫升X 2)洗蘇，接著以硫酸納脫水及濃縮 獲得殘餘物。 52 200908986 產率：72克 粗產物進一步藉管柱層析術純化(DCM/曱醇）。 產率：46克（53.5%理論值） 純度：95.9%。 5 產物為黃色吸濕性固體。於質譜觀察得主峰於399.1 (M+1)。 第3圖顯示實例2化合物之1H-NMR光譜(400 MHz)。 實例2a)

10 碳酸鈉（1.49克，〇·0140莫耳）於水(3.75毫升）之溶液添加 至7克實例2所得產物。乙酸乙酯（50毫升）添加至其中及進行 攪拌。所得產物與四氫呋喃（100毫升)於室溫(25。〇攪拌隔 夜（約12小時）。固體經過濾出及以二氯甲烷(5〇毫升)及乙酸 乙酯（100毫升）洗滌。固定於5(TC於減壓下乾燥隔夜（約12 15 小時），獲得實例2化合物之鈉鹽。 產率：5.7克(56%理論值） 純度HPLC : 97.4%。 產物為微橙色結晶性粉末。出乎意外地於室溫(25。匸） 具有極佳水中溶解度500克/升，特別係遠高於實例如)化合 物之水中溶解度，即使具有多一個亞甲基亦如此。 第4圖顯不實例2a)所得化合物之ih nmr光譜（4〇〇 53 200908986 MHz-D20)。 第5圖顯示實例2a)所得化合物之13C-NMR光譜（100 MHz — d6-DMSO)。 實例3 5 始於製備例1以甘胺酸乙酯開始製備，以類似實例1之 方式獲得下述化合物，呈黃色粉末，具有純度>95% ' (HPLC)。

第6圖顯示實例3所得化合物之HPLC結果。 10 實例4 始於實例3，以類似實例2之方式獲得下述化合物：

黃色固體；純度(HPLC)>99%;熔點130.7°C至131.2°C。 第7圖顯示實例4所得化合物之1H-NMR光譜(400 MHz 15 —d6-DMSO)。 第8圖顯示實例4所得化合物之13C-NMR光譜（100 MHz -d6-DMSO)。 實例4a) 54 200908986 經由與碳酸鈉反應，以類似實例2a之方式獲得實例4化 合物之納鹽。 其為乳酪色粉末，具有熔點253.2°C至253.9°C。 第9圖顯示實例4a)所得化合物之W-NMR光譜（400 5 MHz — D20)。 第10圖顯示實例4a)所得化合物之13C-NMR光譜（100 MHz —d6-DMSO)。 經由與其它鹼諸如TRIS(參（羥甲基）-胺基甲烷或2-胺 基-2-(羥曱基)-丙-1,3-二醇）反應，可以類似方式獲得實例4 10 化合物之其它鹽類。 TRIS鹽於室溫具有比鈉鹽顯著更高的水中溶解度(250 克/升，比較鈉鹽相當於60倍因數），此外於0.9%氯化鈉具有 顯著鹽析效應。 實例5 15 始於製備例1使用組胺醯胺，以類似實例1之方式獲得 下述化合物，呈黃色粉末，純度>95%(HPLC):

第11圖顯示實例5所得化合物之HPLC結果。 實例6 20 始於甘胺醯胺，以類似實例1之方式獲得下述化合物， 呈淺褐色粉末，純度>95%(HPLC): 55 200908986

第12圖顯示實例6所得化合物之Η P L C結果。 實例7

(4-胺基曱醯基-2-{3-[4-(4-[(1Ε)-3,3-二甲基-1-三氮烯 基]-苯甲醯基）-苯氧基]-丙醯胺基}-丁酸鈉鹽）之製備如 下，該製法係始於

(3-{4-{4-[(1Ε)-3,3-二曱基-1-三氮烯基]-苯甲醯基}-苯 10 氧基}-丙酸）： 於具有加熱元件口袋及攪拌器之一升三頸圓底瓶内， (3-{4-{4-[(1Ε)-3,3-二甲基-1-三氮烯基]-苯甲醯基}-苯氧 基}-丙酸）（40克，0.1173莫耳)作為起始化合物，HOBt (3.7 克，0.0274莫耳）及二噚咄（300毫升）添加至冰水浴。以5至6 56 200908986 小時時間’ DCC (40.66克，0.1970莫耳）於二噚咄（100毫 升）之溶液逐滴添加至其中，藉此將溫度維持於2〇°c至 25°C。於具有加熱元件口袋及攪拌器之另一個2升三頸圓 底瓶内’ L-麩胺（43_20克，0.2956莫耳）及飽和碳酸氫鈉溶 5液（432毫升）添加至冰水浴。如上製備之二噚汕溶液添加 至其中’於10。(：至l5t：攪拌16小時。藉TLC(薄層層析術) (MDC:ME0H ’ 1:1)監視反應的起點。經16小時後，TLC顯 不起始化合物已經完全反應。使用鹽酸（1.5N)將反應混合物 之pH調整至6.8，反應混合物於5〇°c於減壓下濃縮。添加水 10 (200毫升）至殘餘物，於25。(：攪拌。懸浮液經過濾，濾液之 pH使用鹽酸（丨·5Ν)調整至3 〇8。反應混合物以乙酸乙酯（2〇〇 毫升）萃取及分離各相。有機層以硫酸鈉（25克)脫水。有機 層以無水氨清洗2小時(形成橡膠狀殘餘物），上清液經過濾 出。殘餘物以THF:Et0Ac混合物（1:卜1〇〇毫升）清洗及傾析 15出處理程序重複5次（於本次處理後，殘餘物為活動性固 體）’然後進行過渡。粗產物固體於乙醇（1〇〇毫升)維持回流 (78°C至8(TC)。熱懸浮液經過澹，渡液冷卻至抓歷2小時。 2小時後’料祕_、，據餅⑴❹轉於水⑽毫升）。 溶液之阳使用鹽酸（1.洲調整至3.〇,及以乙酸乙酿⑽毫 2〇升）進行萃取。分離各相，有機層以水(6〇毫升)洗務。有機 層以硫酸鈉(2〇克)脫水，加入碳酸納(2_6克)於水(8毫升)之 溶液。THF(120毫升)添加至其中及持續攪拌2小時。縣浮液 經過滤及於5(TC於VTD(減壓托盤式乾燥器）内乾燦财 時。分析乾燥後產物。 57 200908986 產率：11_2克（19.44%理論值） 獲得化合物，呈微橙色粉末，熔點18l.(TC至182.5°C。 於25°C之水中溶解度約為400克/升。 經由與相對應之鹼諸如TRIS替代碳酸鈉反應，可以類 似方式獲得其它鹽類。 第13圖顯示實例7所得化合物之ih_Nmr光譜。 第14圖顯示實例7所得化合物之i3c_N]V[R光譜。 實例爸

nh2 10 之製備如下’該製法係始於 〇

〇 ONa (實例2a化合物)）： 附有加熱元件及授拌器之5·〇升三頸圓底瓶設於冰水 浴上。實例2a)化合物(200克，〇.476莫耳）及水(2 〇升）添加至 15其中。反應混合物撲1拌至獲和'澄清溶液，溶液之pH使用1.5N 鹽酸調整至3.5。然後加入乙酸乙酿（2.〇升）。反應混合物攪 掉30分鐘萃取自由態酸，分離各層，洗務水(1〇升)添加至 有機層（亦即乙酸乙醋層）。有機層以硫酸鈉（1〇〇克）脫水及 58 200908986 於5(TC於減壓下濃縮，接著添加二氯甲烧（1 〇升）至殘餘 物。反應物質移至附有加熱元件及授拌器之2G升三頸圓底 瓶。反應物質使用冰浴冷卻至〇t：至rc。然後加入 EDC.HC1(1-乙基3-(3-二曱基-胺基丙基）曱二醯二亞胺 5 -109·5克’ 0·5714莫耳）’接著於〇°C至5°C加入H0BT(11克， 0.17莫耳）。通入乾氨氣2小時，然後藉TLC (MDC:MEOH=8:2)檢查反應混合物是否存在有起始化合 物。反應混合物於低於50 C溫度減壓下濃縮至乾。添加乙 酸乙酯（1.0升）及水（1.0升）至殘餘物，分離各層。添加洗滌 10水（丨·0升）至有機層。有機層以硫酸鈉（1〇〇克)脫水及於5〇°c 於減壓下濃縮。添加異丙醇（8〇〇毫升）至殘餘物（8〇克），混 合物加熱至80°C獲得澄清溶液。溶液徐緩冷卻至2yc。產 物經過濾出及以異丙醇（50毫升）洗滌。產物於5〇〇c於VTD 乾燥12小時。 15 產率：56克(29_6%理論值） 獲得化合物，呈黃至橙色固體，熔點145yc至 147.(TC。於室溫於DMSO之溶解度為833克/升。 第15圖顯示實例8所得化合物之ih_Nmr光譜。 第16圖顯示實例8所得化合物之nc_NMR光譜。 20 實例9 : 下式化合物：

Η 59 200908986 之製備如下’始於製備例2化合物： Ο

牛磺酸(5.5克’ 0.044莫耳)及4N氫氧化鈉（1.76克氫氧化 鈉於11毫升水）導入5〇毫升圓底瓶内，攪拌獲得澄清溶液。 5溶液於50°C藉減壓蒸發濃縮獲得白色殘餘物。殘餘物於 58°C重複使用甲醇(2xl〇〇毫升）汽提。 如上製備之牛續酸之納鹽及甲醇(750毫升）導入連接至 架空攪拌器且有一個加熱元件口袋之又一個2升三頸圓底 瓶内。2-乙氧基-1_乙氧羰基-1，2-二氫喳琳([[0()，16.31克， 10 0.066莫耳)添加至其中’於25 C授掉(形成澄清溶液）。製備 例2化合物（15克，0_044莫耳)添加至其中，於25〇c授拌48小 時。藉薄層層析術(TLC) (MDC:MEOH 8:2)監視反應之進 行。於48小時後，TLC顯示起始化合物已經完全反應。反 應混合物於50 C於減壓下濃縮獲得紅黃色固體。 15 粗產物溶解於甲醇（150毫升），以30分鐘時間徐緩添加 甲基第三丁基醚(MTBE，1500毫升）。所得固體經過濾出及 以ΜΤΒΕ(1〇〇毫升）洗蘇。產物於耽於真空托盤式乾燥器 (VTD)乾燥12小時然後分析。 獲待產物呈撥色粉末。於室溫於水中溶解度為666克/ 20 升。 產率：12.5克(60.46%理論值） 200908986 第Π圖顯示實例9所得化合物之1h_nmr光譜。 第以圖顯示實例9所得化合物之uC nmr光^普。 II理活性試驗： 全部實驗皆係於維持動物有經過控制之照明及溫度之 標準條件下，使麟裸鼠進行。動物自由給水及飼料。

乳房腫瘤（MAXF 401)經皮下植人1Q週齡裸鼠之背 部。使用測微計測量個別腫瘤之體積 腫瘤尺寸係根據式 W/2 (此處a為腫瘤之最大直捏及b為縱軸)計算。當腫瘤體 積增加至80-120立方毫米時，動物隨機分配為試驗組每 10 組6頭。 試驗化合物（呈鈉鹽）溶解於食鹽水溶液，加入5。/。庫索 (KluCe_基丙基纖維素）來將全部試驗化合物溶解於相同 載劑。以相當於350毫克/千克比較化合物（根據de Π93Η5Α之實例30)之劑量藉腹内注射投予化合物。此劑量 15濃度係對應於於試驗條件下比較性化合物獲得腫瘤體積發 育的50%縮小劑量選用。注射量10毫升/千克體重。只接受 載劑之動物用作為對照組。試驗化合物以5週時間每週兩次 投藥至計劃治療。腫瘤體積及體重每週檢驗兩次，以腫瘤 大小對體重之比求出腫瘤體積。當對照組之腫瘤體積達到 2〇需要犧牲動物的尺寸來符合動物保護規範時結束試驗。 基於使用試驗化合物處理之動物之相對腫瘤體積比較 只接受載劑處理之對照組之腫瘤體積，求出T/C值用作為抗 腫瘤活性指標（此處τ/c指標表示接受治療動物與未接受治 療動物之腫瘤尺寸之比。比值愈小則活性愈大。100%表示 200908986 無活性：腫瘤大小相等）。 如表1所示，於試驗條件下，實例2及實例4之物質具有 改良的抗腫瘤活性。使用兩種衍生物治療4週以内觀察到顯 著腫瘤緩解。此外，組成物之对受性良好。比較對照組， 5 接受物質處理組動物於整個試驗期間並無任何死亡率。

第20圖顯示使用裸鼠於MAXF 401異種移植片研究模 型中，實例4化合物之鈉鹽（實例4a)與TRIS鹽之抗腫瘤活性 之比較。如前文說明，進行腫瘤之皮下植入及腫瘤體積之 62 200908986 測定。前述試驗物質之鹽類以水性溶液劑形式以所述劑量 每週兩次藉腹内注射投予歷4週時間。該圖顯示試驗化合物 之抗腫瘤活性亦即τ/c值隨著時間之經過之劑量相依性曲 線。 5 當投予400毫克/千克實例4化合物之鈉鹽時 ，經4週治 療後達到T/C值為12，投予5〇〇毫克/千克鹽後，於治療3週 以内達成το全缓解。另一方面，相同物質以36〇、4⑻及 毫克/千克鈉鹽之等莫耳劑量，呈TRIS鹽投予，入 量皆觀察到完全緩解。此等結果顯示就生物利：二：劑 10種鹽不同。可能鈉鹽與TRIS鹽之抗腫瘤作用差5兩 ^ 友共可歸因於 貫例4化合物投予不同鹽後之尖峰濃度不同之故。 、 額外活佳資料： 獲得試驗化合物（鈉鹽）之額外藥理活性資料 适性之選揉性： 15 20 之抗腫瘤 第21圖顯示實例2a物質（鈉鹽）用於不同腫瘤 活性之選擇性。 實例2 a物質（鈉鹽）之抗腫瘤活性係於異種移植片 小組進行試驗。為了達成此項目的，衍生自攝護腺癌瘤 宮癌、肺癌、胰癌、膀胱癌及「頭及頸」癌之人踵瘤異種 移植片植入裸鼠體内。植入及腫瘤體積之測定係如前文說 明進行。使用每組5頭至8頭動物。試驗物質以所述气田 納鹽呈水性溶液劑每週兩次藉腹内注射投予。 呈 所使用之腫瘤異種移植片、所使用之劑量、治療期及 觀察得之抗腫瘤活性之分類摘述於下表2。 63 200908986 表2 : 異種移植片 组織 劑量範圍 [毫克/千克] 實例2a) 治療期 [曰] 最大功效 BXF 1218 膀胱 450-540 7* 抑制 <50% n. s. CXF 280 大腸 450-540 28 緩解*** HNXF 536 頭頸 450-540 28 抑制<50%** LXFL529 肺 450-540 10* 抑制<50%* MAXF 401 乳房 300-540 28 緩解*** MEXF 462 黑素瘤 100-540 28 緩解*** MEXF 276 黑素瘤 450-540 21* 抑制 >50%*** PAXF 1657 胰 450-540 21* 無抗腫瘤活性n.s. PRXF 22RV1 攝護腺 450-540 28 抑制<50%** PRXF DU145 攝護腺 385-590 28 抑制>50%** UXF 1138 子宮 450-540 21* 抑制>50%** (*一旦個別動物之腫瘤體積>1500平方毫米則結束對照組，N=5_8 ;統計上 顯著· n.s_ ·與對照組無顯著差異，* : ρ<〇.〇5 ; **ρ<〇.〇1 ; : p>〇.〇〇5)。 5 第21圖之略圖顯示抗腫瘤作用之劑量相依性及不同腫

瘤之不同反應。〇%抗腫瘤作用係對應於對照組之腫瘤生 長，而100%係相當於接受治療之腫瘤完全緩解。試驗物質 之抗腫瘤活性係以下述順序遞增：MEXF 462 >> CXF 280〜 MAXF 401 > UXF 1138 〜MEXF 276 〜PRXF 22RV1 〜 10 PRXF DU 145 > LXFL 529 〜HNXF536 > BXF 1218 〜PAXF 1657 °結果顯示特別於腫瘤類型包括黑素瘤、乳癌及大腸 癌’試驗物質具有顯著（亦即誘導緩解)及特異性抗腫瘤作 用。 64 200908986 第22圖顯示實例2a物質用於乳房腫瘤（maxf 401-異種 移植片於裸鼠）之抗腫瘤作用之劑量相依性。 實例2a物質（納鹽）之抗腫瘤活性係使用裸鼠於 MAXF-401異種移植片腫瘤模型進行研究。腫瘤之皮下植入 5及腫瘤體積之測定係如前文說明進行。試驗物質以所述劑 里呈納鹽呈水性溶液劑母週藉腹内注射兩次投予經歷4週 時間。該圖顯示隨著時間之經過試驗物質之抗腫瘤作用之 劑量相依性的進行，以T/C值表示。測得3〇〇毫克/千克為臨 界值’ 450毫克/千克為ED50及500毫克/千克為抗腫瘤作用 10之ED90。於最高劑量，觀察得接受治療之腫瘤緩解。物質 於所使用之劑量範圍而ί受性良好。 第23圖顯示於大腸癌異種移植片研究模型中實例2&物 質（鈉鹽）之抗腫瘤作用。 藉此於裸鼠之CXF280異種移植片研究模型測定實例 15 2a物質之抗腫瘤活性。如前文說明進行腫瘤之皮下植入與 腫瘤體積之測定。以所述劑量呈鈉鹽形式作為水性溶液劑 藉腹内注射每週兩次投予試驗物質歷4週時間。使用每組8 頭動物。投予450、500或540毫克/千克實例2a化合物之劑量 後，對全部使用劑量皆觀察得顯著抗腫瘤作用，於高劑量 2〇 組腫瘤生長完全被抑制且誘導腫瘤之緩解至消失。ED20、 ED50及ED90劑量外推至330、390及490毫克/千克活性物 質。於所使用之劑量範圍’物質之耐受性良好，且不會造 成動物的顯著體重減輕。 下表3顯示於黑素瘤異種移植片研究模型中，另外兩種 65 200908986 選用之化合物於下文稱作為實例6化合物及實例7化合物與 實例2a化合物之抗腫瘤作用之比較。 於裸鼠之MEXF 462異種移植片腫瘤模型測定化合物 之抗腫瘤活性。腫瘤之皮下植入，及腫瘤體積之測定係如 5 前文說明進行。使用每組各8頭動物。 根據實例7及實例2a之試驗物質以等莫耳劑量呈水性 溶液劑劑型每週兩次藉腹内注射投予歷4週時間。等莫耳量 之實例8化合物呈5% DMSO溶液每週兩次藉腹内注射投予 歷經所述時間。 10 於治療期間，抗腫瘤作用隨著時間之進行，以試驗起 點時之腫瘤體積的百分比表示，顯示於表3。 表3 : 時間 對照 實例2a化合物 (300毫克/千克） 實例7化合物 (350毫克/千克） 實例8化合物 (285毫克/千克） [曰] 平均值 SD 平均值 SD 平均值 SD 平均值 SD 0 100 0 100 0 100 0 100 0 3 593 149 316 109 278 75 293 90 7 1126 381 240 144 172 45 369 115 11 2441 700 187 230 73 15 174 91 14 166 245 49 13 134 63 18 83 112 24 13 107 69 21 67 113 6 8 151 189 25 40 87 2 3 172 247 28 30 73 0.3 0.8 271 434 66 200908986 由於腫瘤體積過大為了醫學倫理理由對照組於11曰後 結束。於處理組使用等莫耳劑量處理，實例2a化合物觀察 得部分緩解，實例7化合物觀察得完全缓解及實例8化合物 觀察得腫瘤的生長顯著減慢。發現全部物質於所使用之劑 5量範圍之耐受性良好，全部接受治療之動物皆觀察得體重 顯著增高。 總結言之’發現根據本發明化合物或其藥學組成物為 具有改良之治療範圍及較低副作用之強力抗腫瘤藥物。 實例2 (腎方面耐受性” 10 使用DE 1793115A實例30之比較性化合物或使用根據 本發明實例2 a之化合物以相當於4 5 〇毫克備用組成物之等 莫耳劑量濃度經腹内注射，如前文說明處理載有腫瘤之小 鼠。對照組根據每週兩次之治療方案只使用載劑處理。 於28日之處理期結束時，對小鼠進行屍體剖檢。接受 15備用組成物處理組動物，觀察腎臟之巨觀變化(腫脹、局部 變色）’而另一個治療組只接受得自實例2£1之物質及對照組 之腎臟維持未見任何病理變化。試驗組之全部動物腎臟藉 手術移出，根據標準方法固定於福馬林，埋入石蠛内且接 χΗΕ染色處理。試驗組之組織切片進行組織學試驗結果摘 20 述於表4 : 表4 : 組成物 急性單一細胞壞死 病灶性管狀壞死 對照 0/6 0/6 DE Π93115Α之實例30化合物 4/9 3/9 實例2a化合物 0/9 0/9 67 200908986 使用比較性化合物處理組動物觀察得腎臟有顯著病灶 性管狀壞死。使用根據本發明化合物處理之動物腎臟未見 壞死變化。如此強調投予比較性化合物造成腎臟組織學方 面的改變，因而限制比較性化合物長期用作為抗腫瘤劑， 5 且驗證根據本發明化合物具有絕佳耐受性輪廓資料。 L圖式簡單說明3 第1圖顯示實例1化合物之1H-NMR光譜(400 MHz)。 第2圖顯示實例1化合物之"C-NMR光譜（100 MHz)。 第3圖顯示實例2化合物之1H-NMR光譜(400 MHz)。 10 第4圖顯示實例2a)所得化合物之^-NMR光譜（400 MHz — D20)。 第5圖顯示實例2a)所得化合物之13C-NMR光譜（100 MHz-d6-DMSO)。 第6圖顯示實例3所得化合物之HPLC結果。 15 第7圖顯示實例4所得化合物之W-NMR光譜(400 MHz -d6-DMSO)。 第8圖顯示實例4所得化合物之13C-NMR光譜（100 MHz —d6-DMSO)。 第9圖顯示實例4a)所得化合物之^-NMR光譜（400 20 MHz —D20)。 第10圖顯示實例4a)所得化合物之13C-NMR光譜（100 MHz-d6-DMSO)。 第11圖顯示實例5所得化合物之HPLC結果。 第12圖顯示實例6所得化合物之HPLC結果。 68 200908986 第13圖顯示實例7所得化合物之W-NMR光譜。 第14圖顯示實例7所得化合物之13C-NMR光譜。 第15圖顯示實例8所得化合物之W-NMR光譜。 第16圖顯示實例8所得化合物之13C-NMR光譜。 5 第17圖顯示實例9所得化合物之^-NMR光譜。 第18圖顯示實例9所得化合物之I3C-NMR光譜。 第19圖顯示製備例2化合物之1 H-NMR光譜。 第20圖顯示於實例4化合物之鈉鹽與相對應之TRIS鹽 之比較中乳房腫瘤（MAXF 401)之腫瘤退行。 10 第21圖顯示實例2 a化合物用於不同腫瘤之抗腫瘤活性 之選擇性。 第22圖顯示實例2a化合物用於乳房腫瘤（MAXF 401異 種移植片移植於裸鼠）之抗腫瘤作用之劑量相依性。 第23圖顯示實例2a化合物於大腸癌異種移植片研究模 15 型中之抗腫瘤作用。 【主要元件符號說明】 (無） 69

Claims (1)

1. 200908986 十、申請專利範圍： 1. 一種式（1)化合物：

   其中 5 R1及R2為相同或相異且各自分別選自於由下列所 組成之組群： -視需要可經取代之烷基， -視需要可經取代之烯基， -視需要可經取代之芳基， 10 -視需要可經取代之烷基芳基； R3、R4、R5、R6、R7、r8、R9ARl〇為相同或相異且 各自分別選自於由下列所組成之組群： -氫， _鹵素， 15 -氰基， _梢基， _羧基， -胺基域基’ -磺酸基團（-S03H)， 20 -胺基續酸基， -視需要可經取代之烷基， 70 200908986 -視需要可經取代之烷氧基， -視需要可經取代之烯基， -視需要可經取代之芳基， -視需要可經取代之烷基芳基； 5 R11為視需要可經取代之烷二基或視需要可經取代 之烯二基： R12為氫及R13為視需要可經取代之烷基或羥基，或 R13為氫及R12為視需要可經取代之烷基或羥基，或 R12及R13各自為烷基，其中該等烷基中之至少一者 10 具有至少一個取代基，或 R12及R13與其鍵結之氮原子共同形成飽和或不飽和 視需要可經取代之5至8員環，其視需要可含有額外雜原 子；及 X1係選自於由下列所組成之組群： 15 -單鍵， _幾基， -硫， -氧， -亞礙基（sulfoxy)， 20 - 風基， -偶氮及 -含1至6個碳原子之視需要可經取代之飽和或不飽 和脂肪族基團， 或其藥學上可接受之鹽。 71 200908986 2. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中 R12為氫及R13為經取代之烷基，或 R13為氫及R12為經取代之烷基。 3. 如申請專利範圍第2項之化合物，其中 5 經取代之烷基為含有至少一個下式基之烷基 v2 d14 _X_R ，其中 X2係選自於由下列所組成之組群： _罗炭基， -亞礙基及 10 - ί風基及 R14係選自於由下列所組成之組群： _經基， -視需要可經取代之胺基及 -視需要可經取代之烷氧基。 15 4.如申請專利範圍第1、2或3項中任一項之化合物，其中 R12為氫及R13為式Η2Ν-Α化合物之基團Α，或 R13為氫及R12為式Η2Ν-Α化合物之基團Α，其中 Α為由天然或合成胺基酸、天然或合成胺基酸衍生 物或多胺基酸或多胺基酸衍生物裂解一個胺基(-N Η 2)所 20 衍生之基團。 5.如申請專利範圍第1至4項中任一項之化合物，具有式 (2): 72 200908986

   R12-·- (2) 〇 6·如申請專利範圍第丨至5項中任一項之化合物，其中 R1及R2各自為烷基， R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9及R1。各自為氫， 5 R11為烷二基， R為虱及R13為式HW-A化合物之基團A或 R為鼠及R12為式H2N-A化合物之基團a，其中 A為藉由自天然或合成胺基酸、天然或合成胺基酸 衍生物或多胺基酸或多胺基酸衍生物裂解胺基(_ N H 2)所 衍生之基團，及 X1為羰基(-CO-)。 7.如申請專利範圍第1至6項中任一項之化合物，其係選自 於由下列所組成之組群：

   73 15 200908986 ο

   (實例1) (實例5) (實例6) (實例3) HO 74 200908986

   或其藥學上可接受之鹽。 8_ —種製備如申請專利範圍第1至7項中任一項之式（1)化 合物之方法，包含下述步驟： 式（3)化合物：

   或其鹽與式(4)化合物反應 75 (3), 200908986

   Λ你如申請專利範圍第1至7項中 —項之定義。 9·如申請專利範圍第⑴項中任一項之式⑴化合物，其係 用作為藥物。 種如申凊專利範圍第1至7項中任一項之式⑴化合物 用於製備癌病之治療用藥物之用途。 76