TW200812968A

TW200812968A - Novel crystalline forms 2 639

Info

Publication number: TW200812968A
Application number: TW096123276A
Authority: TW
Inventors: Soren Andersen; Carl-Gustav Sigfridsson; Fredrik Zetterberg; Carl-Johan Aurell; Caroline Eriksson
Original assignee: Astrazeneca Ab
Priority date: 2006-07-04
Filing date: 2007-06-27
Publication date: 2008-03-16
Also published as: CL2007001938A1; AR061751A1

Description

200812968 九、發明說明：【發明所屬之技術領域】本發明提供6-(4-{[(节磺醯基）胺基]羰基}六氫吼啶基>5-氰基-2-甲基煙鹼酸乙酯之新穎結晶型式、其作為藥劑之用途、包含彼等之組合物及製備彼等之方法。【先前技術】血小板黏結及凝集係動脈血栓症中之起始事件。雖然血小板黏結至内皮下表面之過程可能在修復受損血管壁方面發揮重要作用，然而由此引發之血小板凝集可能突然導致極其重要的血管床之急性血栓形成型閉塞，此導致高發病率事件（例如心肌梗塞及不穩定型心絞痛）。用以預防或減輕該等病症之干預手段（例如血栓溶解及血管成形術）之成功程度亦被血小板介導之閉塞或重閉塞所損害。止血係由血小板凝集、凝血及纖維蛋白溶解作用之間之緊密的平衡來控制。病理條件下之血栓形成（例如，動脈粥樣硬化斑塊破裂）最初係由血小板黏結、活化及凝集所引發。此不僅導致血小板栓塞的形成，而且亦導致外部血小板膜上帶負電荷之磷脂之暴露，此促進血液凝結。抑制起始血小板检塞之積聚將有望減少血检形成及減少心血管事件之數目’此由（例如）阿司匹林（Aspirin)之抗血栓形成作用所證實（BMJ 1994; 308: 81-106 Antiplatelet Trialists，

Collaboration. Collaborative overview of randomised trials of antiplatelet therapy, I： Prevention of death, myocardial infarction，and stroke by prolonged antipalatelet therapy in 121551.doc 200812968 various categories of patients) 〇血小板活化/凝集可由多種不同激動劑所誘導。然而，必須活化不同的細胞内信號傳導途徑以獲得完全血小板凝集’其經由G-蛋白Gq 、G12/i3 及 Gi 介導（Platelets，AD Michelson 編輯，ElsevierScience 2002，ISBN012-493951-1; 197-213 ·· D Woulfe等人，Signal transduction during the initiation, extension, and perpetuation of platelet plug formation)。在血小板中，G·蛋白偶聯受體P2Y12(先前亦稱為血小板P2T、P2Tae、或P2Yeye受體）經由G彳傳送信號，使得細胞内cAMP降低及完全凝集（Nature 2001; 409: 202-207 G Hollopeter等人，Identification of the platelet ADP receptor targeted by antithrombotic drugs)。自緻密顆粒釋放之ADP會正反饋於該P2Y12受體以使得能夠達成完全凝集。氯吡格雷（clopidogrel)之臨床使用提供該ADP-P2Y12反饋機制之關鍵作用的臨床證據，氣吡格雷為一種噻吩並吡啶前藥，其活性代謝物選擇性地且不可逆地結合於該P2Y12 受體，此已於一些臨床試驗中展示可有效地在有風險之患者中降低心血管事件之風險（1^11〇61 1996;348:1329-39: CAPRIE Steering committee，A randomised，blinded，trial of clopidogrel versus aspirin in patients at risk of ischaemic events (CAPRIE); N Engl J Med 2001; 345 (7): 494-502): The Clopidogrel in Unstable Angina to prevent Recurrent Events Trial Investigators. Effects of clopidogrel in 121551.doc 200812968 addition to aspirin in patients with acute coronary syndromes without ST-segment elevation.) 〇在該等研究中氯吡格雷療法之臨床益處伴同有臨床出血率之提高。公開發表的數據表明與噻吩並吡啶相比較，可逆的P2Y12拮抗劑可在提供高臨床益處之同時降低出血之風險（Sem Thromb Haemostas 2005; 31 (2): 195-204, van Giezen & RG Humphries. Preclinical and clinical studies with selective reversible direct P2Y12 antgonists) o 因此，本發明之一目的係提供作為抗血栓形成劑之有效、可逆及可選擇性P2Y12-拮抗劑。在藥物組合物之調配中，重要的是原料藥係呈可方便地加以處理及加工之形式。不僅自獲得商業上可行的製造方法之觀點來看，而且自隨後製造包括該活性化合物之醫藥調配物之觀點來看，此皆具有重要性。而且，在經口藥物組合物之製造中，重要的是在投與患者之後提供可靠、可重複且血漿濃度分佈曲線穩定的藥物。活性組份之化學穩定性、固態穩定性及”存架壽命”亦係十分重要之因素。原料藥及包含其之組合物，應能有效保存一段相當長的時間，而且該活性成份不會在物理化學特性（例如，其化學組成、密度、吸水性及溶解度）方面展示顯著改變。非晶形物質在此方面可能存在問題。舉例而言，該等物質通常更難以處理及調配，其溶解度不可靠，且常常更不 121551.doc 200812968 穩定。因此’在製造商業上可行並且醫樂上可接受的藥物組合物中’重要的是盡可能地提供1實質結晶及穩定形式之藥物0 【發明内容】現在吾人已驚奇地發現本發明之結晶型式係可逆且具選擇性的P2Y12拮抗劑。本發明之化合物出人意料地展示有益特性，該等有益特性使其尤其適宜用於治療下文闡釋之疾病/病症。該專有益特性之實例係高效能、高選擇性、及有利的治療窗。【實施方式】本發明之第一態樣係：在第一實施例中，6-(4-{[(苄磺醯基）胺基]羰基}六氫吡啶-1-基）·5 -氰基-2-甲基煙鹼酸乙酯之型式I，其具有以下 XRPD-峰：〇 3.54 α-值，A (埃）相對強度，％ 7.12 18.63 19.64 因此，本發明之第一態樣之該第一實施例之特徵為在大約為 24.9、12.4、4.76、4.52、4.09及 2.65 埃（A) 值處呈現XRPD-峰。本發明之第一態樣之該第一實施例之特徵亦為在如下大 121551.doc 200812968 約 2-θ(°)3.54、7.12、18.63、19.64、21.71 及 33.85 處具有 XRPD-峰。本發明之第一態樣之第二實施例，6-(4-{[(苄磺醯基）胺基]幾基}六氫σ比唆-1-基）·5 -氰基-2-甲基煙驗酸乙g旨之型式 I具有以下XRPD-峰：角度 2-θ° d-值，埃相對強度，％ 3.54 24.9 " 1〇〇 7.12 ^ 12.4 14 13.39 6.6 5 14.07 6.3 4 14.76 ' 6.0 4 18.32 4.84 4 18.63 4.76 9 ~ 19.64 4.52 6 20.79 4.27 4 21.71 4.09 33.85 2.65 2 41.14 2.19 2 因此，本發明之第一態樣之該第二實施例之特徵為大約在 24·9、12.4、6.6、6.3、6.0、4.84、4.76、4.52、4.27、 4.09、2.65 及 2·19 埃（A)D-值處具有 XRPD-峰。〇本發明之第一態樣之該第二實施例之特徵亦可係在如下大約 2-θ(°)3·54、7.12、13.39、14.07、14.76、18.32、 18.63、19.64、20.79、21.71、33.85 及 41.14 處具有 xRpd_ 峰。. 本發明之第一態樣之第三實施例，6-(4-{[(苄磺醯基）胺基]羰基}六氫吼啶-1-基）-5-氰基-2-甲基煙鹼酸乙酯之型式 I具有以下XRPD-峰： 121551.doc -10- 200812968 角度 2-θ° d-值，人 (埃）相對強度，％ 3.54 24.9 100 7.12 12.4 14 10.69 8.3 1 13.39 6.6 5 14.07 6.3 4 14.76 6.0 4 17.89 4.95 2 18.32 4.84 4 18.63 4.76 9 19.31 4.59 3 19.64 4.52 6 20.11 4.41 1 20.56 4.32 3 20.79 4.27 4 21.23 4.18 2 21.51 4.13 4 21.71 4.09 11 23.17 3.84 3 23.38 3.80 2 24.07 3.69 1 25.08 3.55 3 26.26 3.39 2 26.56 3.35 1 26.80 3.32 2 27.81 3.20 1 28.53 3.13 2 33.85 2.65 2 41.14 2.19 2

Ο 因此，本發明之第一態樣之該第三實施例之特徵為大約在 24.9、12.4、8.3、6.6、6.3、6.0、4.95、4.84、4.76、 4.59、4.52、4.41、4.32、4.27、4.18、4.13、4.09、3.84、 3.80、3.69、3.55、3.39、3.35、3.32、3.20、3.13、2.65及 2.19埃（A)D-值處具有XRPD-峰。本發明之第一態樣之該第三實施例之特徵為在如下大約 2-θ°3.54、7.12、10_69、13.39、14.07、14.76、17.89、 18.32、 18.63、 19.31 、19.64、20.11 、20.56、20.79、 121551.doc -11 - 200812968 21.23、21·51、21.71、23.17、23.38、24.07、25.08、 26·26、26.56、26.80、27.81、28.53、33.85 及 41.14 處具有 XRPD 峰。本發明之第一態樣之第四實施例，6-(4_{[(苄磺醯基）胺基]羰基}六氫π比啶-1-基）-5-氰基-2-甲基煙鹼酸乙酯之型式 I係根據本發明之第一態樣之任一前述實施例來表徵，其中具有最大相對強度之XRPD峰位於大約24.9人（埃）之d-值處。本發明之第一態樣之第五實施例，6-(4-{[(苄磺醯基）胺基]羰基}六氫吡啶-1-基）-5-氰基-2-甲基煙鹼酸乙酯之型式 I之特徵為具有基本上如圖1中所展示之XRPD-譜。本發明之另一（第二）態樣係： 6·(4_{[(苄磺醯基）胺基]羰基}六氫u比啶-丨-基兴％氰基-2_ 曱基煙鹼酸乙酯之型式II，在第一實施例中具有以下 XRPD 峰：角度 2-θ° d-值，人 (埃）相對強度，％ 6.76 13.1 100 10.00 8.8 5 14.39 6.2 "— 19.08 4.65 20.37 4.36 2Α~ — 因此，本發明之第二態樣之該第一實施例之特徵為大約在 13·1、8·8、6.2、4.65 及 4_36 埃（A)D_ 值處呈現 xRPD- 峰0 本發明之第二態樣之該第一實施例，[6-(4-{[(苄磺醯基）胺基]羰基}六氫吡啶-1-基）-5-氰基-2-甲基煙鹼酸乙酯之型 121551.doc -12- 200812968 式II之特徵亦為在如下大約1。·。。、丨 19.08及 20.37處具有 xrpd峰。 ·、在本發明之第二態樣之第_ 示—只施例中，6-(4-{吖竿戌基）胺基]幾基}六氫口比咬-^基）& 只醯 ^ ^ π g . 氰基-2_甲基煙鹼酸乙妒型式11具有以下XRPD峰：自曰角度 2-Θ0 —-——-—------ 6J6 ^ Γαοο 相對強度，％二一削 : 5 — 3 ~ 13.40 — 14.39 6.6 ^- Γ 14?76 i 19Ό8 Ϊ9Α3 ~ 〇«^ Γ 60 ^ ^— 4.56 —^' 6 [1 4 — ^ i 20.37 2L60 25A6 --—---- 因此，本發明之 4.36 ^ 4ΤΪ -Ϊ5Γ—- --~~—^J 第二態樣之該| ^ 5 L___ 3ZZII^^ 丨二實施例之特徵為 Ο Ο 大約在 13.1、8.8、6.6、6·2、6.0、4.65、4.56、4.36、4·ΐι 及 3·50埃（A)D-值處呈現XRPD-峰。本發明之第二態樣之該第二實施例，[6-(4_{[(苄石黃醯基）胺基]羰基}六氫吡啶-1-基）-5-氰基_2_曱基煙鹼酸乙酯之型式II之特徵為在如下大約2-θ(°)6·7ό、10·00、13·40、 14.39、14.76、19.08、19.43、20.37、21.60 及 25.46 處具有 XRPD 峰。在本發明之第二態樣之第三實施例中，6_(4-{[(笮磧醯基）胺基]羰基}六氫吡啶-1-基）-5-氰基曱基煙鹼酸乙酉曰之型式II具有以下XRPD峰： 121551.doc -13- 200812968

3.21埃（A)D-值處呈現xrPD-峰。 Q 本發明之第二態樣之該第三實施例，[6-(4-{[(苄磺醯基）胺基]¥厌基}六氫-基）-5 -氰基-2·甲基煙驗酸乙g旨之型式II之特徵為在如下大約2_θ(0)6·76、9.51、9.68、10.00、 13.40、13.55、14.18、14.39、14.76、19·08、19.43、 20.37、21.60 > 22-90、23.27、24.63、24.89、25.46、 25.74及27.73處具有XRPD峰。本發明之第二態樣之第四實施例，6-(4-{[(苄磺醯基）胺基]羰基}六氫0比啶_1_基）-5·氰基-2-曱基煙鹼酸乙酯之型式 121551.doc -14- 200812968 II係根據本發明之第二態樣之任一前述實施例進行表徵，其中具有最大相對強度之XRPD峰係位於大約為131人（埃）之d-值處。本發明之其他態樣之第五實施例，[6_(4_{[(苄磺醯基）胺基]羰基}六氫吼啶-1-基）-5-氰基-2-甲基煙鹼酸乙酯之型式 II之特徵為具有基本上如圖2中所示之xrpd譜。本發明之另一態樣係一種製備上述結晶型式I之方法，該方法包括以下步驟： a) 在環境溫度下或藉由回流，將化合物6-(4_{[(苄磺醯基）胺基]羰基}六氫吡啶-1-基）_5_氰基-2_甲基煙鹼酸乙酯溶解或懸浮於乙酸乙酯中； b) 視情況將自a)獲得之溶液予以透明過濾； c) 使溶解或懸浮於自步驟a)或步驟b)獲得之溶液或懸浮液中之物質結晶化，且此乃視情況在冷卻至室溫過程中進行； d) 將所獲得之結晶產物過濾並分離。本發明之再一態樣係一種製備上述結晶型式〗〗之方法，該方法包括以下步驟： a) 於環境溫下或藉由回流將化合物6_(4_{[(苄磺醯基）胺基] 羰基}六氫吼啶-1-基）-5-氰基-2-曱基煙鹼酸乙酯溶解或懸浮於氯仿或四氫呋喃中； b) 視情況將自步驟a)獲得之溶液予以透明過濾； c) 使溶解或懸洋於自步驟勾或步驟b)獲得之溶液或懸浮液中之物質結晶化，且此乃視情況在冷卻至室溫過程中進 121551.doc -15- 200812968 行； d) 視情況添加諸如乙醇之非溶劑； e) 將所獲彳于之結晶產物過濾並分離。 6_(4·{[(节續酿基）胺基懷基}六氫扯咬小基氰基_2_甲基煙驗酸乙s旨之結晶型式之另外特徵可係具有—個或多個下文列舉之額外性質·· 其任一實施例 *對於型式I’亦即對於本發明之第一態樣具有：

Ο (I)當藉由熱重分析法來表徵時，在自25。〇達2阶範圍内，出現大約〇.8%之重量損失，及/或 (Π)當在流動氮氣下於帶有針孔的封閉杯中以1〇口分鐘之力‘、、、速率藉由差示掃描熱量測定法表徵時，溶融溫度（Tm)開始於約194充及/或相關熔融吸熱為約96 J/g ;及/或 (III)當儲存於80% RH(環境）時，吸附少於〇2%的濕氣。 *對型式II，亦即對本發明之第二態樣，其任一實施例具有： ⑴當藉由熱重分析法來表徵時，在自25達2〇5它範圍内’出現大約0.2%之重量損失，及/或 (II)當在流動氮氣下於帶有針孔的封閉杯中以1〇。〔： /分鐘之加熱速率藉由差示掃描熱量測定法表徵時，熔融溫度 (Tm)開始於約193°C及/或相關熔融吸熱為約1〇5 j/g。藥理學數據藉由使用來自經P2轉染之CHO-細胞的細胞膜進行體 121551.doc -16- 200812968 外分析可量測P2Yi2受體之功能抑制，方法如下。經2-Me-S-ADP誘導的P2Y12信號之功能抑制：將5微克膜稀釋於200微升之200 mM NaC卜1 mM MgCl2、50 mM HEPES (pH 7·4)、0.01% BSA、30微克/毫升皂苷及 10 μΜ

GDP中。將ECso濃度之激動劑（二磷酸2-甲基-硫代-腺苷）、所需濃度之測試化合物及〇·1 pCi 35S-GTPyS添加至此。使反應於30°C下進行45分鐘。然後使用細胞收穫器將樣品轉移至GF/B過濾器上，並以沖洗緩衝液（5〇 Tris (pH 7·4)、5 mM MgCl2、50 mM NaCl)洗滌。然後過濾器為閃爍體所覆蓋，並計數為過濾器所保留之35S-GTPYS數目。最大活性係在該激動劑存在時所測定之值而最小活性係在無該激動劑時所測定之值，該等值係在減去非專一性活性之測定值後之值。在各種濃度下化合物之作用係根據以下方程式 y=A+((B-A)/(l+((C/x)AD))) 及所推算之IC50繪示，其中 A係该曲線之底部平穩段，亦即最終的最小y值 B係該曲線平穩段之頂部，亦即最終的最大丫值 C係位於該曲線中部之X值。當a+b = 1〇〇時，此代表i〇g ec50 值。 D係傾斜因素。 X係最初已知的X值。 y係最初已知的y值。當在所闡釋之經2-Me-S-ADP誘導的P2Y12信號之功能抑 121551.doc 17· 200812968 制分析法中測試時，在約4 _或以下濃度下，本發明之化合物具有活性。本發明之化合物可充當P2Yu受體拮抗劑且因此可用於治療。m據本發明之另—態樣，提供—種本發明之化合物以用於治療。 •在另恶樣中，提供本發明之化合物之用途，其係用於製造用以治療血小板凝集失調症之藥劑。在本發明之又一 Ο

悲樣中，提供本發明之化合物之用途，其用於製造用以抑制P2Y”受體之藥劑。 /等化a物係用於治療，尤其辅助治療，具體而言，彼等顯不可用作·血小板活化、凝集及去顆粒抑制劑、血小板解凝集促進劑、抗血栓形成劑或用於治療或預防：不穩定型心絞痛、冠狀動脈成形術（PTCA)、心肌梗塞、外周血私浴解、動脈粥樣硬化之原發性動脈血栓形成併發症，例如血形成性或栓塞性中風，短暫性局部缺血發作、外周血官疾病 '有或沒有血栓溶解之心肌梗塞、由介入動脈粥樣硬H病導致之動脈併發症’例#血管成形術、動脈内膜切除術、血管内支架放置、冠狀動脈及其他血管移植手術，手術或機械損傷之血栓形成併發症，例如，意外或手術創傷後的組織補救，整形外科手術，包括皮膚及肌瓣，、具有彌散性血栓形成/血小板消耗成份之病症，例如，彌散性血管内凝血、血栓形成性血小板減少性紫癜、溶血性尿毒癥候群、敗血病之血栓形成併發症、成人呼吸窘迫症候群、抗磷脂症候群、肝素誘導的血小板減少症及 121551.doc -18- 200812968 、”=功/子癇，或靜脈血栓形成，例如深度靜脈血栓形成靜脈阻塞性疾病、血液學病症，例如，骨髓組織增生 t疾病，包括血小板增多症、鐮狀細胞病；或用於預防體内機械誘發的血小板活化，例如，心肺分流術及體外膜式人工氧合法（預防小血栓））、體外機械誘發的血小板活化， Ο

Q J如用於保存血液製品，例如血小板濃縮品，或旁路閉 :例如，在腎透折及血漿去除術中，繼發於血管損傷/ 例^，血管炎、動脈炎、腎小球腎炎、炎性腸病及器S移植排斥）之血栓形成，例如偏頭疼等病症、雷諾氏現象、其中血小板可能促成血管壁中基本炎症性疾病過程之病症，例如，動脈粥樣化斑形成/進展，狹窄/再狹窄及用於其他炎性症狀，例如，哮喘病，I中血小板及企小板源因子參與免疫疾病過程。祀據本發明，進_步提供本發明之化合物之用途，其係用於製造-種用以治療上述疾病之藥劑。具體而言，本發明之化合物係用於治療心肌梗塞、血栓形成性中風、短暫 ί!局錢血發作、外周Α管疾病及^絞痛，尤其是不穩定型心絞痛。本發明亦提供-種治療上述疾病之方法，該方法匕括向患有此一疾病之患者投與治療有效量之本發明化合物。 x 在另—態樣中，本發明提供一種醫藥組合物，該醫藥組合物包括本發明之化合物與醫藥上可接受之佐劑、稀釋劑及/或載劑之組合。該等化合物可以溶液、懸浮液、氫氟烧氣溶膠及乾粉調 121551.doc -19- 200812968 配物形式局部投與(例如投與至肺及/或氣道 0 ’例如’以錠劑、丸劑、膠囊、糖漿、粉劑或顆粒齊^ 式經口投與’或以無菌非經腸溶液或懸浮液形式以㈣腸方式投與，或經皮下投與，或以检劑形式經直腸皮投與。 … 本發明之化合物可單獨或作Α 干倒4作為醫樂組合物（包括本發明之化合物與醫藥上可接受之稀又 < 稀釋劑、佐劑或載劑之組合） Ο Ο 投與。尤其較佳者係不包含可宴广匕3」導致不良反應（例如過敏反應）之物質之組合物。、本發明之化合物之乾粉調配物及壓力氫氟烧氣溶膠可藉由經口或鼻吸人投與。對於吸人法，合意的是該化合物係磨碎的。本發明之化合物亦可借助乾粉吸人器投與。該吸入器可係單劑量或多劑量吸人器，且可係呼吸啟動乾粉吸入器。種可能性係將磨碎的化合物與一載劑物（例如，單糖、二糖或多糖，糖醇或另一多元醇）相混合。適宜的載劑包括糖及澱粉。或者該磨碎的化合物可由另一種物質所包衣。亦可將該粉末混合物分配入硬質明膠膠囊中，每一膠囊含有期望劑量之該活性化合物。另種可忐性係將該磨碎的粉末加工成球體，該球體在吸入過程中分解。可將該球形化粉末填充入多劑量吸入器 (例如’彼稱為Turbuhaler®者）之藥物儲器中，其中一劑量早元計量患者所吸入之期望劑量）。利用該系統，將含或不含載劑物之活性化合物遞送至患者。 121551.d〇( -20- 200812968 包括本發明之化合物之醫藥組合物可方便地係用於經口投與之錠劑、丸劑、膠囊、糖漿、粉劑或顆粒劑；無菌非經腸或皮下注射溶液、用於非經腸投與之懸浮液或用於直腸投與之栓劑。對於經口投與，該活性化合物可與佐劑或載劑（例如，乳糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、澱粉（例如馬鈴薯澱粉、玉米澱粉或支鏈澱粉）、纖維素衍生物）、黏結劑（例如明膠或聚乙烯基吡咯啶酮）及潤滑劑（例如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、聚乙二醇、蜂蠟、石蠟及諸如此類）相摻和，且然後壓製成錠劑。如需包衣錠劑，可將由以上闡釋之方法所製備之片心以濃糖溶液（其可包含（例如）阿拉伯樹膠、明膠、滑石粉、鈦白及諸如此類）包衣。或者，可將該錠劑以溶解於易於揮發之有機溶劑或水性溶劑中之適宜聚合物進行包衣。為製備軟明膠膠囊，該化合物可與（例如）植物油或聚乙二醇相摻和。硬明膠膠囊可包含該化合物之顆粒，其使用任一以上提及用於錠劑之賦形劑（例如乳糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、澱粉、纖維素衍生物或明膠）。亦可將該藥物之液體或半固體調配物填充至硬明膠膠囊中。用於口服施藥之液體配製物可係呈糖漿或懸浮液之型式，舉例而言，包含該化合物之溶液，其餘部分係糖及乙醇、水、甘油與丙二醇之混合物。視情況而定，該等液體配製物可包含著色劑、矯味劑、糖精及作為增稠劑之羧甲基纖維素或為業内熟習此項技術者所知之其他賦形劑。 121551.doc -21 - 200812968 將使用下述非限制性實例對本發明予以進一步闡釋。實例一般實驗程序質譜記錄於裝備電喷霧介面之Finnigan LCQ Duo離子陷阱質譜儀（LC-ms)上或記錄於由使用LC-Agilent 1100 LC系統之WatersZQ組成之LC-ms系統上。在一於400之1H頻率下運作之Varian Mercury VX 400波譜儀及分別在400、500及600之1H頻率下運作之Varian (" UNITY plus 400、500及600波譜儀上實施1H NMR量測。以該溶劑作為内標，以ppm給出化學位移。使用Biotage石夕膠 40S、40M、12i 或 Merck矽膠 60(0·063·0·200 毫米）實施層析。使用標準玻璃管柱或塑料管柱或在Biotage Horizon系統上實施急驟層析。在Waters YMC-ODS AQS_3(120 A， 3x500毫米）或在 Waters Delta Prep Systems上使用 Kromasil C8 10微米管柱實施HPLC分離在微波反應器中實施之反應可在 Personal Chemistry Smith Creator、Smith合成器或 Ο

Emrys Optimizer中實施。

在帶有Bragg-Brentano幾何結構並裝備一 VANTEC-1位 : 置敏感檢測器（PSD)之D8 Advance繞射儀（Bruxer AXS - GmbH，Karlsruhe，Germany)上實施 XRPD實驗。使用經鎳過濾的Cu Κα放射。將大約10毫克該等樣品置於一零背景固持件（矽晶體）上。使用連續掃描模式，以〇_〇 17。之步長及0.5秒之步時在範圍1-50。2Θ内收集數據。應用一可變 (V20)發散狹縫及一 12毫米之偵測狹縫，此相當於一 3.47° 121551.doc -22- 200812968 寬之偵測窗。用或不用内標對樣品進行測試。（展示於圖1 及2中之繞射圖係不用内標）。所用縮寫詞列表：縮寫解釋 br 廣義值 BSA 牛血清白蛋白， d 雙重 DMF 二甲基甲醯胺〇 DMSO 二甲基亞砜 EtOAc 乙酸乙酯 EtOH 乙醇 HOBt 1-羥基苯并三唑 Hz 赫兹 J 偶聯常數 m 多重 MeOH 甲醇 O MHz 百萬兆 mL 毫升： MS 質譜； q 四重 r.t. 室溫 s 單線 t 三重 TBTU 四氟硼酸>1-[(111-1，2,3-苯并三唑-1-基 121551.doc -23· 200812968 氧）（二甲胺基）-亞甲基]-N-甲基甲銨 THF 四氫呋喃實例1 6-(4·{[(~續醯基）胺基]羰基}六氩比咬基）_5-氰基甲基煙鹼酸乙酯於室溫下，將6-氯-5-氰基-2-甲基煙鹼酸乙酯（47.5克， 211毫莫耳）及三乙胺（58·36克，577毫莫耳）存於Et〇H (3 14毫升）中之溶液添加至經攪拌之N_(苄磺醯基）六氫〇比啶-4·甲醯胺（53.55克，189.7毫莫耳，參見比較實例2(b)) 與EtOH(10〇t升）之混合物中，並將該混合物加熱至i〇〇t (浴液溫度，在40分鐘内，20-100°C，100°C下15分鐘，然後冷卻至室溫）15分鐘。添加KHS04(142.93克，存於900毫升水中）溶液以使產物沉澱析出。濾出該沉澱物並以水 (2x250毫升）洗滌，給出87克粗產物（84%純）。將該粗產物在5 0% EtOH(1200毫升）中調成漿液並於5〇°C (浴液溫度）下加熱2小時45分鐘，然後於室溫下過夜攪拌。過濾給出粗產物，該粗產物藉由在50°C下以25% EtOH(1600毫升）攪拌 2小時，隨後於50°C下以20% EtOH (1000毫升）攪拌2小時予以進一步洗滌，（嘗試藉由使用一 50% EtOH/水溶液純化該物質但沒有成功，乃因其溶解該產物過多）。將經上述洗滌後所得固體（89%純）溶解於700毫升70°C之EtOAc中，並將該溶液於室溫下放置過夜以結晶。濾出晶體並以 EtOAc(200毫升）洗滌，乾燥後給出呈橙色固體（微細針狀）形式之純6-(4-{[(苄磺醯基）胺基]羰基}-六氫吼啶-1-基）_5- 121551.doc -24- 200812968 氰基-2·甲基煙鹼酸乙酯。產率：54·94克。使用Et〇Ac& 母液中重結晶固體又給出10.50克。產率65.44克（73%)。該產物亦可自CHC13中結晶。 NMR (400 MHz5 CDC13): δ 1.38 (3Η5 t, J=7.0 Ηζ)5 1.77- L91 (4Η，m)，2.37-2.44 (1Η，m)，2.73 (3Η，s)，3.10-3.17 (2H，m)，4.33(2H，q，J=7.0Hz)，4.64-4.68 (4H，m)，7.36-7·41 (5H，m)，8.36 (1H，s)。 MS m/z ： 471 (M+l) 〇

Ο

EtOAc中結晶所得之產物（型式〗）之特徵為在χ_射線粉末繞射（XRPD)量測中’於詳述於下表1中之約“及相對強度值處存在峰，且自製漿/在CHC13中結晶獲得之產物（型式H)之特徵闡述於下表2中。型式π亦可如下製備·· 將只例1中（粗產物）82克（174 3毫莫耳）在回流下（67。〇 )溶解於300毫升無水四氫咬喃（挪）中。將所得溶液保溫透明過遽並使之在冷卻至室溫過程中結晶。在室溫下，將300 毫升乙醇緩慢添加至溫和授拌之結晶漿液中。Μ小時後，濾出該晶體。以乙醇洗務該晶狀產物並在真空中於40 °C下乾燥。產量：7〇克。穩定型式）。若以2-甲基則產生型式I與II之混合該程序給出結晶型式11(熱力學四氫呋喃代替以上程序中之THF，物。

121551.doc -25- 200812968 11.59 7.6 0.6 13.39 6.6 5 14.07 6.3 4 14.29 6.2 0.9 14.76 6.0 4 16.98 5.2 0.2 17.89 4.95 2 18.32 4.84 4 18.63 4.76 9 19.31 4.59 3 19.64 4.52 6 20.11 4.41 1 20.56 4.32 3 20.79 4.27 4 21.23 4.18 2 21.51 4.13 4 21.71 4.09 11 22.33 3.98 0.6 ^ Λ Z丄丄/ 3.84 3 23.38 3.80 2 24.07 3.69 1 25.08 3.55 3 25.73 3.46 0.4 26.26 3.39 2 26.56 3.35 1 26.80 3.32 2 27.34 3.26 0.3 27.81 3.20 1 28.53 3.13 2 28.82 3.09 0.6 29.34 3.04 0.8 29.87 2.99 0.9 30.29 2.95 0.8 31.25 2.86 0.6 31.74 2.82 0.5 32.59 2.75 0.9 33.85 2.65 2 34.38 2.61 0.7 35.16 2.55 0.4 35.65 2.52 0.2 36.26 2.48 0.5 37.49 2.40 0.4 38.42 2.34 0.4 38.76 2.32 0.3 40.02 2.25 0.6 40.91 2.20 0.8 41.14 2.19 2 43.80 2.07 0.4 44.33 2.04 0.5 44.88 2.02 0.4 121551.doc -26- 200812968 表1 . 6-(4-{[(>續酿基）胺基]幾基}六鼠σ比咬-1 -基）-5-氣基· 2-甲基煙鹼酸乙酯之型式I之XRPD峰

角度 2-θ° d-值，人(埃）相對強度，％ 6.76 13.1 100 9.51 9.3 2 9.68 9.1 2 10.00 8.8 5 12.30 7.2 0.4 13.40 6.6 3 13.55 6.5 1 13.74 6.4 0.8 14.18 6.2 1 14.39 6.2 6 14.76 6.0 4 15.19 5.8 0.4 16.22 5.5 0.3 18.02 4.92 0.6 18.79 4.72 0.5 19.08 4.65 6 19.43 4.56 5 20.37 4.36 24 21.60 4.11 3 22.20 4.00 0.8 22.90 3.88 2 23.27 3.82 1 23.95 3.71 0.8 24.63 3.61 2 24.89 3.57 2 25.46 3.50 3 25.74 3.46 3 26.06 3.42 0.6 26.97 3.30 0.5 27.28 3.27 0.8 27.73 3.21 2 28.49 3.13 0.7 31.43 2.84 0.3 34.30 2.61 0.9 41.45 2.18 0.9 表2 : 6-(4-{[(苄磺醯基）胺基]羰基}六氫吼啶-1-基）-5-氰基-2-甲基煙鹼酸乙酯之型式II之XRPD峰該等結晶型式之特徵進一步係存在下文所列之一個或以 121551.doc -27- 200812968

上之額外性質： (i) 對於型式I ⑴當藉由熱重分析表徵時，自自25°C達205°C範圍

表徵時，熔融溫度（Tm)開無溶融吸熱為約96 J/g ;及/或吸收少於0.2%之濕 (ΙΠ)當儲存於80% RH (環境）時，度。

(i) 對於型式II (I)當藉由熱重分析表徵時，自25。〇達2〇5〇c範圍内’出現大約0.2%之重量損失，及/或 (Π)當在流動氮氣下，於帶有針孔的封閉杯中，以 10°c /分鐘之加熱速率藉由差示掃描熱量測定法表徵時，熔融溫度（Tm)開始於約193°c及/或相關熔融吸熱為約105 J/g。對照實例2 N- ~確酿基）六氮11比咬_ 4 ·甲酿胺 (a) 4-{[(苄確醯基）胺基】擬基}六氩《比咬-1-甲酸第三丁西旨在氮氣氣氛中於室溫下，將三乙胺（591克，5840毫莫耳）添加至1-(第三-丁氧羰基）六氫吡啶-4-甲酸（448克， B54 毫莫耳）、LiCl (23.1 克，545 毫莫耳）及 TBTU(657 g， 2046毫莫耳）存於THF(3000毫升）中之經攪拌懸浮液中。15 121551.doc -28- 200812968 小時後’添加1_苯基甲燒續醯胺(352克，存於丨扇毫升 THF中’ 2056宅莫耳）溶液並過夜持續㉟拌m下移除溶劑以給出一稠的米灰色漿液（體積約2500毫升）。添加 Et〇AC(3500毫升），隨後添加HC1水溶液（I960毫升3·6 M HC1及1960毫升水）。移除水相且以2x1500毫升1 M HC1洗滌有機相。將該有機相冷卻至，得到H〇m沉澱，濾出該沉澱。在真空中移除大部分溶劑以給出一稠的米灰色漿液。添加EtOH(50%，4000毫升）且攪拌該漿液h5小時。濾出沉澱產物，以50%£1〇11(500毫升+2\1500毫升）洗滌並在一真空爐中於25°C下乾燥，得到白色固體狀4^苄磺醯基）胺曱醯基]六氫吡啶·1_甲酸第三丁酯。產量584克（78〇/〇)。 'H NMR (400 MHz, CDC13): δ 1.46 (9Η, s), 1.54-1.61 (2H, m)，1·70_1·74 (2H，m)，2·19_2·27 (1H，m)，2·68_2·75 (2H， m)，4.07-4.12 (2H，m)，4·66 (2H，s)，7.32-7.41 (5H，m)， 7.54 (1H，br s)。 (b) N-(苄確醯基）六氩”比啶甲醯胺在氣氣下，將4-[(节石黃酿基）胺甲隨基]六氫π比σ定甲酸第三丁酯（583克，1524毫莫耳）懸浮於甲酸（3000毫升）中，並將反應液攪拌20分鐘。反應液發泡，乃因產生氣體，使用甲酸（500毫升）從反應容器壁上洗掉泡沫。2小時後發泡停止且反應液澄清並餘下少許固體。過夜攪拌該反應液並在真空中移除2500毫升甲酸。添加水（1〇〇〇毫升）並將反應液過濾。蒸發該澄清溶液並添加水（3000毫升）。使用飽和氫氧化銨水溶液（共添加390毫升，pH自3· 10變為 121551.doc -29- 200812968 6.1〇)以中和該酸性溶液’且在終點時（pH=6i〇)形成大量產物沉澱。過夜攪拌該混合物且濾出該沉澱，並以水 (1000毫升)洗滌。在真空爐中於2rc下乾燥，得到白色粉末狀N-(节磺醯基）六氫吡啶_4_甲醯胺。產量372 4克 (87%) 〇 H NMR (400 MHz, DMSO- d6)： δ 1.60-1.72 (2H5 m), 1.75- 1.84(2H，m)，2.10-2.19(lH，m)，2.77-2.87 (2H，m)，3.10-3.18 (2H，m)，4·23 (2H，s)，7.18-7.28 (5H，m)，8·17 (1H，br s) 〇【圖式簡單說明】圖1展示以闞釋於”一般實驗程序"下之方法獲得之6-(4_ {[(节磺醯基）胺基]羰基丨六氫。比啶-1-基）-5-氰基-2-甲基煙驗酸乙S旨型式I之XRPD繞射圖。圖2展示以相同方法獲得之6_(4-{[(苄磺醯基）胺基]羰基} 六氫吡啶-1-基）氰基-2-曱基煙鹼酸乙酯型式Π之XRPD 繞射圖。 121551.doc

Claims

200812968 十、申請專利範圍： 1· 一種6H{[(苄磺醯基）胺基]羰基丨六氫吼啶-丨·基氰基甲基煙鹼酸乙酯之型式I，其特徵在於在大約為 24 Q λ 1 ^ 12·4、4.76、4.52、4·09 及 2.65 埃（A)D-值處呈現 XRPD-峰。 2·如請求項1之該物質之結晶型式I，其特徵在於在大約為 24.9、12.4、6.6、6·3、6·0、4·84、4·76、4.52、4.27、 4·09、2.65及 2.19埃（A)D-值處呈現 XRPD-峰。 3·如請求項1之該物質之結晶型式I，其特徵在於在大約為 24·9、12·4、8.3、6.6、6.3、6.0、4.95、4.84、4.76、 4.59、4.52、4·41、4.32、4.27、4.18、4.13、4.09、 3·84、3.80、3.69、3.55、3.39、3·35、3·32、3·20、 3·13、2.65 及 2·19 埃（A)D-值處呈現 XRPD-峰。 4.如請求項丨之該物質之結晶型式I，其特徵在於具有實質如圖1中所示之XRPD-譜。 5· 一種6_(4-{[(苄確醯基）胺基]羰基}六氫。比唆-丨_基）-5_氰基-2-曱基煙鹼酸乙酯之型式π，其特徵在於在大約為 13·1、8·8、6·2、4.65及4.3 6埃（入)0_值處呈現又1^〇-峰。 6·如請求項5之該物質之結晶型式II，其特徵在於在大約為 13·1、8.8、6.6、6.2、6.0、4.65、4·56、4·36、4·11 及 3·5〇埃（A)D-值處呈現XRPD·峰。 7·如請求項5之該物質之結晶型式II，其特徵在於在大約為 13.1、9·3、9·1、8·8、6.6、6.5、6·2、6.2、6.0、4.65、 4.56、4.36、4.11、3.88、3.82、3·61、3·57、3·50、3.46 121551.doc 200812968 及3·21埃（A)D-值處呈現XRPD·峰。 8·如請求項5之該物質之結晶型式„，其特徵在於具有實質如圖2中所示之XRPD_譜。 9. 一種製備如請求項1至4中任一項之化合物之方法，其包括以下步驟： μ a) 於環境溫度下或藉由回流，將該化合物苄磺醯基）胺基]羰基}六氫吡啶-丨-基）^—氰基曱基煙鹼酸乙酯溶解或懸浮於乙酸乙酯中； b) 視情況將自a)中獲得之溶液予以透明過渡； c) 使溶解或懸浮於自步驟a)或步驟b)獲得之溶液或懸浮液中之该物質結晶化，且此乃視情況在冷卻至室溫過程中進行；句將所獲之結晶產物過遽並分離。 1 〇· —種製備如請求項5至8中任一項之化合物之方法，其包括以下步驟： a) 於環境溫度下或藉由回流，將該化合物苄磺醯基）胺基]羰基}六氫吡啶-1-基）-5-氰基-2-曱基煙鹼酉夂乙西日》谷解或懸浮於氯仿或四氫吱喃中； b) 視情況將自a)中獲得之溶液予以透明過濾； C)使溶解或懸浮於自步驟a)或步驟b)獲得之溶液或懸浮液中之該物質結晶化，且此乃視情況在冷卻至室溫過程中進行； d) 視情況添加非溶劑，例如乙醇； e) 將所獲之結晶產物過濾並分離。 121551.doc 200812968 •種W藥組合物’其包括如請求項1至8中任-項之化合物與醫m受的佐劑、稀釋劑及域載劑之組合。 12·如請求項1至8中任-項之化合物，其係用於治療。 13· —種如睛求項丨至8中任一項之化合物之用途，其係用於製造用以治療血小板凝集失調症之藥劑。 14. 一種如請求項1至8中任一項之化合物之用途，其係用於製造用以抑制P2Y12受體之藥劑。

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