TW200811194A - Antifungal agents - Google Patents

Description

200811194 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本务月係關於新穎的安麻吩金（enfumafungin)衍生物及 八酉市上可接雙之鹽、其合成、及其作為（1，3)-P-D-葡聚 糖合成酶之抑制劑之用途。本發明化合物及其醫藥上可接 文之鹽以及包含本發明化合物及其醫藥上可接受之鹽的醫 市組合物可用於治療真菌感染及相關病症及病症。 【先前技術】 真菌感染當前仍系嚴重的健康問題。醫院引起的真菌疾 病之發生率繼續上升。嚴重的醫院内全身性真菌感染（例 如念珠菌病麯黴病、組織胞漿菌病、酵母病及球孢子菌 病）¥見於經:化學治療後的中性白細胞減少症患者及其他 具有免疫抑制現象的腫瘤患者、由HIV感染所引起的後天 性免疫不全症候群（AIDS)所導致的免疫力缺乏患者、及重 症監護患者。全身性真菌感染在白血病患者中引起約25% 的感染相關死亡。由念珠菌類引起的感染係醫院源性血流 感染之第四大原因。在彼等接受肺、胰腺、肝移植患者 中’嚴重真菌感染可引起5-10%之死亡率。因此，對於所 有王身〖生真囷病而s仍經常發生治療失敗的情況。繼發抗 藥性亦會出現。當前仍愈發需要有效的抑制真菌感染之新 穎療法。 安麻吩金係一種在與歐洲杜松活葉片有關之赫馬内生菌 (Hcmnonema sp·)之發酵中產生的半縮醛三萜烯（u s. 5,756,472; Pelaez f A ^ Systematic and Applied M9480.doc 200811194

Microbiology，23:333-343, 2000; Schwartz 等人，JACS， 122:4882-4886, 2000; Schwartz, R.E., Expert Opinion on

Therapeutic Patents，11(11):1761-1772, 2001)。安麻吩金系 若干具有活體外抗真菌活性之三萜苷之一。安麻吩金及其 他抗真菌類三萜苷類之抗真菌作用方式據測定係藉由其對 於（1，3)-β-ϋ-葡聚糖合成酶之特異性作用而抑制真菌細胞 壁黏多糖合成（Onishi 等人，Antimicrobial Agents and Chemotherapy，44:368-377，2000 ; Pelaez等人，Systematic and Applied Microbiology，23:333_343，2000)。l，3-p-D-葡 聚糖合成酶一直係引人注意的抗真菌藥物作用耙標，此乃 因其存在於許多致病真菌中，其可提供寬廣的抗真菌範圍 且不具有哺乳動物複本，且就此而論，該等化合物具有很 少或不具有基於機理之毒性。 【發明内容】 本發明係關於新穎的安麻吩金衍生物。該等化合物或醫 藥上可接受之鹽可用於抑制（1，3)-β-ϋ-葡聚糖合成酶抑制 劑，且因此可用於預防或治療由包括（但不限於）麯黴、隱 球菌屬、念珠菌屬、白黴屬、放線菌屬、組織胞聚菌屬、 皮膚癣菌、鱗斑黴屬、鐮胞菌、卡氏肺囊蟲之多種病原體 引起的真菌感染。尤其，本發明包括一化合物式IV-1A ··

119480.doc 200811194 或其醫藥上可接受之鹽，其中·. R選自由氫、cvcv烷基、及經^·。3·烷氧基取代之 烧基組成之群； R選自由氫、Cl-C0-烷基、及C3_C8_環烷基組成之群； R8選自由（VCV烷基及經（^{3-烷氧基取代之Ci_C6_烷基組 成之群；且 R9選自由氫及cKC6_烷基組成之群。 在本發明一實施例中，R6選自由下列組成之群：氫、 ch3、ch2ch3、ch2ch2och3、ch2ch2ch2och3、及 CH2CH2CH2CH3 ’且所有其他變量係按前文定義。 在本發明另一實施例中，R7選自由下列組成之群：氫、 CH3、CH^CH3、及環丁基，且所有其他變量係按前文定 義。 在本發明另一實施例中，R8選自由下列組成之群： ch3、ch2ch3、ch2ch2ch3、ch(ch3)2、ch2ch(ch3)2、 CH2CH2OCH3、CH2CH2OCH2CH3、ch2ch2ch2ch3、及 C(CH3)3，且所有其他變量係按前文定義。 在本發明另一實施例中，該化合物係選自由下列組成之 群： (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-(乙醯氧基）-2-[(2S)-2-胺基-2,3-二甲基丁氧基]-8-[(lR)-l，2-二甲基丙 基]-l，6a，8，10a-四甲基-6-氧代-l，3,4,6,6a，7,8,9，10, 10&，1013，11，12，12&_十四氫-211-1，4&_(亞曱基氧基亞曱基）荔-7-甲酸， 119480.doc 200811194 (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-(乙醯氧基）_ 2-[(28)-2-曱胺基-2,3-二甲基丁氧基]-8-[(111)-152-二甲基丙 基]，1，6&，8，10&-四甲基-6-氧代-1，3,4,6,6&57,8,9，10, 10&，1013，11，12，12&-十四氫_211_1，4&-(亞曱基氧基亞甲基）篇_ 7-甲酸， (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-(乙醯氧基）-2-[(28)-2-二曱胺基-2,3-二甲基丁氧基]-8-[(1化)-1，2-二曱基 丙基]-l，6a，8，10a-四曱基-6-氧代-l，3,4,6,6a，7,8,9, 10，10a，10b，ll，12，12a-十四氫 _2H-l，4a-(亞曱基氧基亞曱 基）1-7-曱酸， (lS，2R53R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-乙醯氧基-2-[[(2R)-2-胺基-2,3-二曱基丁基]氧基]-8-[(lR)-l，2-二甲基丙 基]-1，6&，8，10&-四曱基-6-氧代-1，3,4,6,6&，7,8,9，10，10乱， 1013，11，12，12&-十四氫-211-1，4&-(亞甲基氧基亞甲基）荔-7_曱 酸， (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-乙醯氧基-2-[[(2R)-2-曱胺基-2,3-二曱基丁基]氧基]-8-[(lR)-l，2-二甲基 丙基]-l，6a，8，10a-四甲基-6-氧代-l，3,4,6,6a，7,8,9，10，10a， 10b，ll，12，12a-十四氫-2H-l，4a_(亞曱基氧基亞甲基）蕉-7-甲 酸，及 (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R510aR，10bR，12aR)-3·乙醯氧基-2-[[(2R)-2-二甲胺基-2,3-二甲基丁基]氧基]-8-[(lR)-l，2_二曱 基丙基]-l，6a，8，10a-四甲基-6-氧代-l，3,4,6,6a，7,8,9，10, 10&，101>，11，12，12&-十四氫-211-1，4&-(亞甲基氧基亞曱基）荔- 119480.doc -9- 200811194 7-甲酸， 及其醫藥上可接受之鹽。 在本發明另一實施例中，該化合物係（ls，2R，3R，4aR， 6aS’7R，8R5l〇aR，1〇bR，i2aR)_3-(乙醯氧基）-2q(2S) 2 二甲 胺基_2,3_二曱基丁氧基1-84(111)-1,2-二甲基丙基]_ l，6a，8，l〇a_w f 基_6_ 氧代 _13,4,66a，7 12，12a-十四氫(亞甲基氧基亞甲基）窟-7_曱酸或其 醫藥上可接受之鹽。 本發明亦包括含有一本發明化合物之醫藥組合物及製備 忒等組合物之方法。本發明進一步包括治療或預防真菌感 木之方法，該方法包括單獨地或與一第二治療藥劑結合地 投予本發明化合物或組合物。 本I明其他實施例、態樣及特徵於隨後闡述、實例及隨 附申明專利範圍中進一步加以描述或應可自其中明顯看 出0 【實施方式】 本發明係關於化合物如上文所述式IV_1A及其醫藥上可 接又之鹽。該等化合物可用作（l，3)j-D·葡聚糖合成酶抑 ^在本發明一實施例中，該等化合物系表a中所列示 之彼等： 119480.doc 200811194 表a 〇 Η Ύί ^ 1 R〆 IV-1A 實例 β泛 b1 113 Η H ch3 ch3 114 ch3 ch3 ch3 ch3 124 Η H ch2ch2ch3 ch3 125 ch3 ch3 CH2CH2CH3 ch3 129 Η H ch(ch3)2 ch3 127 Η H ch2ch3 ch3 128 ch3 ch3 ch2ch3 ch3 130 ch3 ch3 CH(CH3)2 ch3 136 ch3 ch3 ch2ch(ch3)2 ch3 140 ch2ch3 ch2ch3 CH2CH3 ch3 154 ch3 ch3 CH2CH2CH2CH3 ch3 155 ch3 ch3 ch2ch2och3 ch3 156 H H ch2ch2och3 ch3 158 H H ch2ch2och2ch3 ch3 160 ch2ch3 H ch2ch2och3 ch3 白色念珠菌葡聚糖合成酶（GS) IC5〇用於實例114-52毫微克/ 毫升 白色念珠菌GS IC5〇用於實例128-60毫微克/毫升 在本發明另一實施例中，該等化合物系表b中所列示之 -11 - 119480.doc 200811194 彼等： 表b 〇 〇Υ0Η:

實例 153 ch3 ch3 ch(ch3)2 CH3 157 Η H c(ch3)3 H 151 Η H CH(CH3)2 ch3 152 ch3 H CH(CH3)2 ch3 162 ch2ch3 H ch(ch3)2 ch3 167 ch2ch2och3 H ch(ch3)2 ch3 168 ch2ch2ch2och3 H CH(CH3)2 ch3 169 ch2ch2ch3 H CH(CH3)2 ch3 170 H K> CH(CH3)2 ch3 159 ch2ch3 ch2ch3 CH(CH3)2 ch3 白色念珠菌GS IC5〇用於實例153-18毫微克/毫升 白色念珠菌GS IC50用於實例151-11毫微克/毫升 白色念珠菌GS IC5〇用於實例152-9毫微克/毫升 在本發明另一實施例中，該等化合物係表c中所列示之 彼等： 12· 119480.doc 200811194 表c

^OH

實例 β互 βζ 150 ch3 ch3 CH(CH3)2 ch3 161 Η H C(CH3)3 H 148 Η H CH(CH3)2 ch3 149 ch3 H CH(CH3)2 ch3 163 ch2ch3 H CH(CH3)2 ch3 164 ch2ch3 ch2ch3 ch(ch3)2 ch3 165 ch2ch3 H CH(CH3)2 ch3 166 ch2ch2ch2ch3 H CH(CH3)2 ch3 171 H K> ch(ch3)2 ch3 白色念珠菌GS IC5〇用於實例150-14毫微克/毫升 白色念珠菌GS IC50用於實例148-13毫微克/毫升 白色念珠菌GS IC5〇用於實例149-13毫微克/毫升 本發明另一實施例係一式IV-1化合物：

或2，且R 係^-山烷基。 此實施例之一態樣係一式IV-1化合物，其中R13係-CH3 -13- 119480.doc 13 200811194 m係 0，R”tCH3，R9係-CH(CH3)2，R6係 Η 或-CH3，且 R7 係Η或-CH3。 本發明另一實施例係一式IV-la化合物：

其中R6係Η或_CH3，且R7係Η或-CH3。 此實施例之一態樣係一式IV-la化合物，其中R6係Η 或-ch3，且 r7係-CH3。 此實施例之另一態樣係一式IV-la化合物，其中R6係-CH3， 且 R7係-CH3。 本發明另一實施例係一式IV-lb化合物：

其中R6係Η或-CH3，且R7係Η或-CH3。 此實施例之一態樣係一式IV-lb化合物，其中R6係Η 或-CH3，且 R7係-CH3。 此實施例另一態樣任一式IV-lb化合物，其中R6係-CH3， 且 R7係-CH3。 本發明另一實施例係一式IV-1A化合物，其中該變量係 如表J中所定義： H9480.doc -14- 200811194

_ 麵觀 釋1 ->5?· ' -ν· λ Zi； " / MM： J-1 Η Π ch3 ch3 J-2 ch3 ch3 ch3 ch3 J-3 Η Η ch3 正丙基 J-4 乙基 乙基 ch3 ch3 J-5 ch3 ch3 ch3 正丙基 J-6 Η 異丙基 ch3 ch3 J-7 Η Η ch3 異丙基 J-8 乙基 乙基 ch3 正丙基 J-9 Η Η ch3 乙基 J-10 ch3 cn3 ch3 乙基 J-11 ch3 ch3 ch3 異丙基 M2 Η ch3 ch3 ch3 1-13 Η CF3CH2 ch3 正丙基 J-14 Η H ch3 異丁基 J-15 ch3 ch3 ch3 異丁基 J-16 Η H 乙基 乙基 J-17 Η H ch3 CH20-(異丙基） J-18 ch3 CH3 ch3 CH20·(異丙基) J-19 乙基 乙基 ch3 乙基 J-20 正丙基 正丙基 ch3 乙基 J-21 Η ch3 環丙基 J-22 Η H 環丁基 J-23 Η ch3 cr8r9= \ J-24 ch3 ch3 cr8r9= V 另一實施例係一式1¥-1人化合物，其中118係（：11((：113)2, 119480.doc -15- 200811194 R9係CH3，R6係Η或CH3，且…係η或Ch3。 本發明其他實施例包括下列各項··（a)一種組合物，其包 含一式IV-1A、iv-l、IV-ia或IV_lbt合物及一載劑、佐 劑、或媒劑，(b)—種醫藥組合物，其包含一式Ιν]a、iV-1、IV-la或IV-lb化合物及一醫藥上可接受之載劑、佐 劑、或媒劑，（c) (b)之醫藥組合物，其進一步包含一第二 治療藥劑；（d) (c)之醫藥組合物，其中該第二治療藥劑係 嗤、多稀、嗓呤或嘧啶核苷酸抑制劑、紐莫康定 (pneumocandin)或棘球白素衍生物、蛋白質延伸因子抑制 劑、甲设質抑制劑、甘露聚糖抑制劑、殺菌/防滲（Βρι)蛋 白質產品、或免疫調節劑；（e) (d)之醫藥組合物，其中該 弟一 ’口療藥劑係依曲康嗤（itraconazole)、酮康嗤 (ketoconazole)、咪康嗤（mic〇naz〇le)、氟康唑 (fluconazole)、伏立康唑（v〇ric〇naz〇le)、泊沙康唑 (posaeonazole)、兩性黴素 B(amph〇tericin B)、氟胞嘧啶 (flucytosine),阿尼芬淨（anidUlafungin)、米卡芬淨 (micafungin)、或卡泊芬淨（caSp0fungin);⑴一醫藥組合， 其係（1)一式IV-1A、IV-1、IV-la或^:^化合物及（2)一第 二治療藥劑，其中該式IV-1A、ΙΛΜ、IV_la4IV_lb化合 物及該第二治療藥劑各皆以能使該組合有效治療或預防真 菌/細菌感染之量採用；（g) (f)之組合，其中該第二治療藥 劑係唑、多烯、嘌呤或嘧啶核苷酸抑制劑、紐莫康定或棘 球白素衍生物、蛋白質延伸因子抑制劑、甲殼質抑制劑、 甘露聚糖抑制劑、殺菌/防滲（BPI)蛋白質產品、或免疫調 119480.doc -16- 200811194 節劑；（h) (g)之組合，其中 晒康咬、咪i 劑係依曲康唾、 *Β Λ ;上、伏立康唑、泊沙康唑、兩性黴

素B、亂胞嘧啶、阿尼芬淨 M -種在有其需要之個p ^、或卡泊芬淨，·⑴ (1，3)仙·㈣糖合成酶之方 法該方法包括對該個體投予有效量之一式iv_ia、iv_ ㈠_ 七化合物；⑴一種在有其需要之個體中治 療或預防真菌威毕之方土 σ 旦…τν木之方去’該方法包含對該個體投予有效 里之一式IV-lA、IV-l、TVlmr -la或1¥_11>化合物，·（k) (j)之方 法，其中該式IV-1A、iv 1 τν 1 a 、化合物係依序 地或同時地與一有效抑制真菌/細菌感染之第二治療率劑 組合投予；⑴«之方法，其中㈣：治療藥㈣^ 烯…票呤或錢核芽酸抑制劑、紐莫康定或棘球白素衍生 物、蛋白質延伸因子抑制劑、甲殼質抑制劑、甘露聚糖抑 制劑、殺菌/防滲（BPI)蛋白質產品、或免疫調節劑；⑽ ⑴之方法’其中該第二治療藥劑係依曲康嗤、_康唾、味 康嗤、就康唾、伏立康唾、泊沙康。坐、兩性黴素B、氟胞 嘲咬、阿尼芬淨、米卡芬淨、或卡泊芬淨；⑻一種在有其 需要之個體中抑制（1，3)仙_葡聚糖合成酶之方法，該方 法包括對該個體投予—（b)、⑷、⑷、或⑷之組合物或 ⑴、（g)或（h)之組合之醫藥組合物；及（〇) 一種在有其需要 之個體中治療或預防真菌感染之方法，該方法包括對該個 體投予一⑻、⑷、⑷、或⑷之醫藥組合物或⑴、⑷或 (h)之組合。 另一實施例包括上文所確定實施例之任一個之水合物。 119480.doc • 17 - 200811194 本發明亦包括一種如下本發明化合物，其可：（i)用於 (a)在有其需要之個體中抑制（1，3)-β-ϋ-葡聚糖合成酶或（b) 治療或預防真菌感染；（ii)用作用於該等用途之醫藥；或 (iii)用於製備用於該等用途之醫藥。在該等用途中，本發 明該等化合物可視情況依序地或同時地與一或多種有效抑 制真菌/細菌感染之治療劑相組合的方式使用。

本發明另外實施例包括上文（a)-(〇)中給出的醫藥組合 物、組合及方法及前面段落中給出的用途，其中其所採用 的本發明化合物係上文所述該等化合物之實施例或態樣之 一之化合物。在所有該等實施例及下文所闡述之彼等中， 該化合物當適宜時可視情況以醫藥上可接受之鹽形式或水 合物形式使用。 本發明化合物（包括醫藥上可接受之鹽及/或水合物形式） 具有抗微生物（例如抗真菌）活性或預期具有此等抑制酵母 及真菌之活性，該等酵母及真菌包括（但不限於）：支頂孢 屬（Acremonium)、腐化米黴菌（Absidia)(例如傘狀犁頭黴 (Absidia corymbifera)、鍵格孢菌（Alternaria)、麯徽 (Aspergillus)(例如棒麯黴（Aspergillus clavatus)、黃麴黴 (Aspergilius flavus)、煙麯黴（Aspergillus fumigatus)、構 巢麯黴（Aspergillus nidulans)、黑麯黴（Aspergillus niger)、土麯黴（人8卩61名111\^161^118)、及花斑麯黴 (Aspergillus versicolor))、平臍蠕孢屬（Bipolaris)、芽生菌 屬（Blastomyces)(例如皮炎芽生菌（Blastomyces dermatitidis))、 芽生裂殖菌屬（Blastoschizomyces)(例如頭狀芽生裂殖菌屬 119480.doc -18 - 200811194

(Blastoschizomyces capitatus))、念珠菌屬（Candida)(例如 白假絲酵母（Candida albicans)、光滑念珠菌（Candida glabrata )(光滑球擬酵母菌（Torulopsis glabrata))、高裏假 絲酵母（Candida guilliermondii)、乳酒念珠菌（Candida kefyr).、克魯斯氏念珠菌（Candida krusei)、葡萄牙念珠菌 (Candida lusitaniae)、近平滑假絲酵母(Candida parapsilosis)、 偽熱帶念珠菌（Candida pseudotropicalis)、類星形念珠菌 (Candida stellatoidea)、熱帶假絲酵母（Candida tropicalis)、產朊假絲酵母（Candida utilis)、解脂假絲酵母 (Candida lipolytica)、無名假絲酵母（Candida famata)及皺 落假絲酵母(Candida rugosa))、分支孢子菌屬（Cladosporium) (例如卡裹翁氏分支孢子菌（Cladosporium carrionii)及毛髮 狀分支孢子菌（Cladosporium trichloides))、球孢子菌屬 (Coccidioides)(例如粗球抱子菌（Coccidioides immitis))、 隱球菌屬（Cryptococcus)(例如新型隱球菌（Cryptococcus neoformans))、彎孢黴屬（Curvularia)、小克銀漢黴屬 (Cunninghamella)(例如雅致小克銀漢黴（Cunninghamella elegans))、皮膚癖菌（Dermatophyte)、外瓶黴屬 (Exophiala)(例如皮炎外瓶黴（Exophiala dermatitidis)及斯 平尼弗外瓶柄黴（Exophiala spinifera))、表皮癣菌屬 (Epidermophyton)(例如絮狀表皮癬菌（Epidermophyton floccosum))、產色芽生菌屬（Fonsecaea)(例如佩德囉索氏 著色芽生菌（Fonsecaea pedrosoi))、鐮胞菌（Fusariuni)(例如 茄病鐮刀菌（Fusarium solani))、地絲菌屬（Geotrichum)(例 119480.doc -19- 200811194

如念珠地絲菌屬（Geotrichum candiddum)及棒狀地絲菌屬 (Geotrichum clavatum))、組織胞漿菌屬（1^8忱口1&811^)(例如 笑膜組織胞漿菌英膜變種（Histoplasma capsulatum var. capsulatum))、鱗斑黴屬 （Malassezia)(例如糠秕馬拉色氏 徽菌（Malassezia furfur))、小抱子菌屬（|^0(：]：〇8卩〇1：11111)(例如 犬小孢子菌（Microsporum canis)及石膏樣小孢子菌 (Microsporum gypseum))、白黴屬（Mucor)、副球孢子菌屬 (Paracoccidioides)(例如巴西副球孢子菌（Paracoccidioides brasiliensis))、青黴菌（Penicillium)(例如馬尼弗氏青黴菌 (Penicillium marneffei))、瓶黴菌屬（Phialophora)，瓶形酵 母（Pityrosporum ovale)、肺囊赢（Pneumocystis)(例如卡氏 肺囊蟲（Pneumocystis carinii))、假性阿利什利菌 (Pseudallescheria)(例如波氏假阿利什菌（Pseudallescheria boydii))、根黴菌（Rhizopvis)(例如小孢根黴菌根足根酶變 種（Rhizopus microsporus var. rhizopodiformis)及稻根黴菌 (Rhizopus oryzae))、酵母屬（Saccharomyces)(例如釀酒酵 母(Saccharomyces cerevisiae))、足放線病菌屬 (Scedosporium)(例如病梨孢足放線病菌（Scedosporium apiosperum))、帚黴屬（Scopulariopsis)、孢子絲菌屬 (Sporothrix)(例如申氏孢子絲菌（Sporothrix schenckii))、 木黴屬（Trichoderma)、發癖菌（例如鬚瘡癖菌（Trichophyton mentagrophytes)及紅色發癬菌（Trichophyton rubrum))、及 毛孢子菌屬（Trichosporon)(例如阿氏絲孢酵母 (Trichosporon asahii)、白吉爾氏毛孢子菌（Trichosporon 119480.doc -20- 200811194 beigelii)及皮膚毛孢子菌（Trichosporon cutaneum))。本發 明化合物亦可用於治療由原生動物（例如弓漿蟲屬 (Toxoplasma)、隱孢子蟲屬（(：1^卩|〇3?〇1^以11111)、利什曼原 蟲屬（Leishmania)、錐蟲屬（Tripanosoma)、梨形鞭毛蟲屬 (Giardia)及毛滴蟲屬（Trichomonas)引起的感染。本發明化 合物不僅用於抑制可引起全身性人類病原真菌感染之有機 體’而且用於抑制可引起淺表真菌感染的諸如木黴及其他 念珠菌之有機體。本發明化合物對於抑制黃麴黴、煙麯 黴、白假絲酵母、近平滑念珠菌、新型隱球菌、釀酒酵 母、及鬚瘡癖菌尤其有效。 由於其具有抗真菌活性，式A化合物可用於治療及/ 或預防多種發生於下列部位中表面的、表皮的、皮下的、 及全身性的真菌感染：皮膚、眼睛、毛髮、指甲、口腔黏 膜月腸道、支氣管、肺、心内膜、腦、腦脊膜、泌尿 裔、陰道部、口腔、眼、身體組織、腎、支氣管、心臟、 二耳^、骨、鼻腔、副鼻竇腔、脾、肝、皮下組織、淋巴 &月腸道、關節、肌肉、鍵、肺間質漿細胞、血液等 等。 1 口此纟發明化合物可用於預防或治療多種感染疾病， 如皮真囷病(例如發癖菌病、癖菌病、或癬感染)、運動 ::曱溝炎、花斑癖、紅癬、擦爛、真菌尿布濕疹、念 =陰炎、念珠菌陰莖頭炎、外耳炎、念珠菌病(皮膚 冬+膜的）、悛性黏臈念珠菌病（例如真菌性口炎及陰道 心珠病）、隱球菌病、地黴病、毛抱子菌病、麵徽病、 119480.doc 200811194 月黴病、鐮刀菌病、接合菌、病、孢子絲菌病、著色真菌 病、球孢子菌病、組織胞漿菌病、酵母病、類球孢子菌 病、假黴樣真菌病、足分枝菌病、真菌性角膜炎、耳真菌 病、肺囊蟲病、及真菌血症。本發明化合物亦可用作預防 劑來防止全身性的及局部的真菌感染。舉例而言，用作預 防劑之用途可在免疫妥協患者（例如八1〇8患者、接受癌症 療法之患者或移植患者）之預防感染中作為一選擇性内臟 去污染用藥法之部分。在抗生素治療期間對真菌過度生長 之預防在一些疾病綜合徵或醫源性狀態中亦可能適用。 可與本發明化合物結合使用之唑類的實例包括（但不限 於）：氟康唑、伏立康唑、依曲康唑、酮康唑、咪康唑、 雷夫康唑（raviiC〇naz〇le)、乙氧苯烯唑（det〇c〇naz〇le)、克 黴唑（clotrimazole)、及泊沙康唑。可與本發明化合物結合 使用之多；fcfp類化合物之實例包括（但不限於）：兩性黴素 B、製黴菌素、其脂質體形式及其脂質形式，例如 Abelcet、AmBisome、及Amphocil。可與本發明化合物結 合使用之嘌呤或嘧啶核苷酸抑制劑之實例包括（但不限 於）·氟胞哺咬或多氧黴素（polyxins)，例如尼柯黴素類 (nikkomycines)，尤其係尼柯黴素2或尼柯黴素又。可與本 發明化合物結合使用之另一類治療劑包括甲殼質抑制劑。 可與本發明化合物結合使用之延伸因子抑制劑之實例包括 (但不限於）··糞殼菌素及其類似物。可與本發明化合物結 合使用之紐莫康定或棘球白素衍生物之實例包括包括（但 不限於)··限包括（但不限於）：睫狀真菌素（eilofungin)、阿 119480.doc -22- 200811194 尼分淨、米卡芬淨、及卡泊芬淨。可與本發明化合物結合 使用之甘露聚糖抑制劑之實例包括（但不限於）帕裏達黴素 (predamycin)。可與本發明化合物結合使用之殺菌/渗透性 誘導（BPI)蛋白質產物之實例包括（但不限於）χΜρ·97及 ΧΜΡ·127。可與本發明化合物結合使用之免疫調節劑實例 包括（但不限於):干擾素（例如IL-1、IL-2、IL-3及IL-8)、 防衛素（defensines)、他克莫司（tacr〇Hmus)& g_csf(粒細 胞集落刺激因子）。 • 如本文所用，術語”烧基，，指具有處於特定範圍内之許多 個碳原子的任何直鏈或具支鏈的鏈烷基。因此，舉例而 口 Ci·6烧基（或”CVC6烧基’’）指所有己基燒基及戊基烧 基同分異構體以及正丁基、異丁基、第二丁基及第三丁 基、正丙基及異丙基、乙基及曱基。如另一實例，”〇14烧 基”指正丁基、異丁基、第二丁基及第三丁基、正丙基及 異丙基、乙基及曱基。 術語”烷氧基，，指-0-烷基，其中烷基按上文定義。 _ 術語π環烷基"指具有特定範圍内之多個碳原子之任何環 狀烷烴環。因此，例如，"C3·6環烷基"（或” C3_C6環烷基，，) 指環丙基、環丁基、環戊基、及環己基。 除非另有明確相反說明，諸如”Cl-CV，之所有範圍皆涵蓋 ^ 在内。 本文所定義之多種環烷基環系統之任一種皆可連接至該 化合物位於任一環原子（即任一碳原子或任一雜原子）處之 其餘部分，前提條件係可生成穩定的化合物。適合的5 $ 119480.doc -23- 200811194 員雜芳香族環包括（但不限於）：吡啶基、吡咯基、吡嗓 基、嘴淀基、噠嗪基、三嗪基、噻吩基、呋喃基、咪唑 基、吡唑基、三唑基、四唑基、噁唑基、異噁唑基、噁二 唑基、噁三唑基、噻唑基、異噻唑基、及噻二唑基。適合 的3-至6-員雜環基包括（但不限於）：氮雜環丁基、六氫他 定基馬琳基、硫嗎琳基、四氩嗟嗤基、異四氫嗓唾基、 噁唑烷基、異噁唑烷基、吡咯啶基、咪唑烷基、哌嗪基' 四氫呋喃基、四氫噻吩基、咄唑啶基、六氫嘧啶基、噻嗪 燒基（thiazinanyl)、硫代氮雜環庚烷基、硫代二氮雜環庚 烷基、二硫代氮雜環庚烷基、氮雜環庚烷基、二氮雜瓖庚 烷基、噻二嗪烷基（thiadiazinanyl)、四氫吡喃基、四氫硫 °比喃基、及二氧雜環己烷基。 一 ”穩定的”化合物係一可進行製備及分離且其結構及性 貝可在一足以容許將該化合物用於本文所闡述目的（例如 治療性地或預防性地投予個體）之時段内保持不變或可使 其基本保持不變的化合物。 作為對取代基及取代方式進行選擇的結果，某些本發明 化合物可具有不對稱中心且可作為立體異構體混合物形式 存在、或作為單獨非對映體、或旋光對映體形式存在。除 非另外指日月，該等化合物之所有同分異構形式(無論係： 離的或呈混合物形式的）皆涵蓋於本發明範圍内。本發明 範圍亦涵盍所缘示本發明化合物之互變異構形式。 當任一可變部分在任一構成部分中或在式iv_ia中或在 描繪及描述本發明化合物之其他化學式中出現一次以上 119480.doc -24- 200811194 時，其在每次出現時之定義與其所有其他次出現時之定義 無關。並且，取代基及/或可變部分之組合僅在該等組合 可導致產生穩定的化合物時才可存在。 本發明化合物亦可用於準備及執行抗真菌化合物之篩選 分析:舉例而言，本發明化合物可用於分離突變體，其係 更具效力之抗真菌化合物的極佳篩選工具。 / 斤有本發明化合物可呈醫藥上可接受之鹽形式或水合物 形式（當適當時）投藥。術語"醫藥上可接受之鹽"指一具有 與母體化合物接近之療效且適於投予患者之鹽。適合㈣ 匕括：加成皿其可㈤如」藉由將一本發明化合物溶液與 一醫樂上可接受之酸（例如氫氯酸、硫酸、乙酸、三氟乙 酸、及苯甲酸）溶液相混合而形成。許多本發明化合物載 有酸性部分’在該情況下其適宜的醫藥上可接受之鹽可包 括鹼金屬鹽（例如鈉或鉀鹽）、鹼土金屬鹽（例如鈣或^ 鹽）、及與適合的有機配體形成的鹽（例如四級銨鹽）。並 且，當一酸（-COOH)或醇基存在時，可採用醫藥上可接受 之酯對該化合物之溶解度或水解特性進行調節。 又 與本發明化合物有關之術語”投藥（administration)”及其 I化形式（例如’’投予（administering)”化合物）意指提供該化 合物或該化合物之前藥給需要治療之個體。當與一或多種 其他活性劑（例如可用於治療真菌/細菌感染之其他抗真菌/ 抗細菌劑）相組合投予本發明化合物或其一前藥時，”投藥” 及其變化形式皆應理解為包括同時地及依序地供應該化合 物或前藥及其他藥劑。 H9480.doc -25- 200811194 如本文所用，術語"組合物"欲涵蓋包含特定成份之產品 、 任打精由直接或間接地合併該等特定成份而得到的產 品° 醫藥上可接受的”意指醫藥組合物之成份必須彼此可協 共存且不會對其接受者有傷害。 如本文所用術語”個體或本文稱為，，患者”）指係治療、 觀察或實驗對象的動物，較佳係哺乳動物，最佳係人類。 如本文所用術語”有效量，，指研究者、獸醫、醫生或其他 臨床醫師預計可在組織、系統、動物或人類中引起生物學 或醫學反應的活性化合物或醫藥劑之數量。在一實施例 中’該有效量係一減輕擬治療疾病或病症之症狀的”治療 上有效量”。在另一實施例中，該有效量係一預防擬預防 疾病或病症之症狀的或減輕發生可能性的"預防有效量，，。 該術語在本文中亦包括足以抑制（1，3)_卜仏葡聚糖合成酶 並藉此引起所預計之反應的活性化合物之量（即，，，抑制有 效里）。當該活性化合物（即活性成份）呈鹽形式投予時， 對活性成份之1的引用係針對該化合物之游離酸或游離鹼 形式。 為抑制（1，3)-β-〇-葡聚糖合成酶或預防或治療真菌感染 之目的，本發明化合物（視情況呈鹽或水合物形式）可藉由 任一可引起該活性劑與該藥劑之作用位點相接觸的方式投 予。其可藉由任一能夠與藥物製劑結合使用之慣用方式作 為單獨治療藥劑或呈與治療劑相結合之形式投予。其可單 獨投予，但通常其係隨一基於所選投藥途徑及標準醫藥規 119480.doc -26- 200811194 範所選擇的醫藥載劑而投予。本發明化合物可（例如）以包 含有效量之該化合物及醫藥上可接受之習‘用無毒載劑、佐 劑及媒劑之醫藥組合物的單位劑量形式經口、非經腸（包 括皮下注射、靜脈内注射'肌内注射、胸骨内注射或輸注 技術）、藉由吸入（例如來自計量劑量吸入器及乾粉吸入器 之經鼻或經口腔喷霧劑及氣霧劑）、藉由噴灑器經眼、經 局部、透皮、或經直腸投予。適於口服投藥之液體製劑 (例如懸浮液、糖漿劑、酏劑及諸如此類）可根據業内已知 技術進行製備且可採用任何慣用介質（例如水、乙二醇、 油脂、醇類及諸如此類）。適於口服投藥之固體製劑（例如 粉劑、丸劑、膠囊及錠劑）可根據業内已知技術進行製備 且可採用諸如澱粉、糖、高嶺土、潤滑劑、結合劑、崩解 劑及諸如此類等固體賦形劑。非經腸組合物可根據業内已 知技術進行製備且通常採用無菌水作為載劑及視情況其他 成份（例如溶解度辅佐劑）。可注射溶液可根據業内已知方 法進行製備，其中該載劑包括一鹽水溶液、一葡萄糖溶液 或一包含鹽水及葡萄糖之混合物的溶液。對適合用於製備 本發明醫藥組合物之方法及適合在該等組合物中使用之成 伤的進 步闡述參見·· Remingtoi^s Pharmaceutical

Sciences ’ 弟 19版 ’ a· R· Gennaro編輯，Mack Publishing 公司，1995年。 本發明化合物可以單次劑量或以分次劑量以每天〇.〇〇1 至1000¾克/公斤哺乳動物（例如人類）體重之劑量範圍經口 投予。較佳劑量範圍係以單次劑量或以分次劑量經口投予 119480.doc -27- 200811194 之每天(ΜΠ至则毫克/公斤體重。另—較佳劑量範圍系以 單次劑量或以分次劑量經口投予之m⑽毫克/公斤體 重。對於口服投藥，該等組合物可用針對症狀對劑量進行 調節的包含1.0至500毫克活性成分（尤其包含丄、5、、 15 、 2〇 、 25 、 50 、 75 、 100 、 150 、 200 、 250 ' 3〇〇 、 400 、

及500毫克活性成分）之錠劑或膠囊形式提供給擬治療患 者。針對任一特定患者之具體劑量水平及劑量頻率可有所 不同且取決於多種因素，包括所採用具體化合物之活性、 該化合物之代謝穩定性及作用時長、年齡、體重 '總體健 康狀況、性別、膳食、投藥方式及時間、排泄速度、藥物 組合、特定病症之嚴重度、及接受治療之宿主。 本發明亦涵蓋製造式I化合物之方法。本發明化合物可 根據以下反應圖及實例或其變化形式自起始物安麻吩金製 得。除非另外指明’所有變量係按上文定義。安麻吩金係 一種由赫馬内生菌（Hormonema sp·)(按照布達佩斯條約 (Budapest Treaty)儲存在美國典型培養物保藏中心之菌種 保藏物中並指定索取號ATCC 74360)真菌株產生的天然產 物，其係自採集於Navalquejigo(馬德裏（Madrid)省，Spain) 之未經鑑別灌木的活葉中分離出來，如美國專利第 5,756,472號中所闡述，該專利案之全部内容皆以引用的方 式併入本文中。 119480.doc • 28 - 200811194 反應圖1

H2S〇4 MeOH 反應圖2

Li/NH^

可變部分R6、R7、R8及R9係如上文所定義或係適宜的前 體基團。 119480.doc -29- 200811194 反應圖3

EDCI = N-乙基-N’-(3-二甲胺基丙基）碳二亚胺 可變部分R8及R9係如上文所定義或係適宜的前體基團。 本發明化合物之抗真菌活性可藉由多種業内已知分析驗 證，舉例而言，在肉湯微稀釋分析中藉助其葡聚糖合成抑 制活性（IC5G)、最低抑菌濃度（MIC-100)或抑制酵母之最小 顯著抑制濃度（MIC-80)及抑制絲狀黴菌及皮膚真菌之最小 有效濃度（MEC)、或小鼠（TOKA)中之活體内抗念珠菌活性 來驗證。據觀察，本發明化合物在<0.03-32微克/毫升之範 圍内可抑制念珠菌生長或在<0.03-32微克/毫升之範圍内可 得到抑制煙麯黴之MEC。 葡聚糖合成酶抑制作用 化合物葡聚糖合成酶抑制活性之活體外評估係在96孔式 119480.doc -30- 200811194 聚合分析中進行量測。每孔包含100微升0.5 mM(6000至 8000 dpm/ 毫微莫耳）的 3H-UDPG、50 mM HEPES pH 7.5(8丨8111&)、10%^¥/¥甘油（8丨§111&)、1.5毫克/毫升的牛血 清白蛋白（Sigma A 9647· Lot 44H0190)、25 mM KF (Fisher) ^ 1 mM EDTA(Gibco Ultrapure) x 25 μΜ GTP-γ-S、在22°C下於60分鐘培養期間足以提供3至6毫微莫耳結 合量之酵素、及自於100% DMSO中經3倍連續稀釋之各孔 添加之測試化合物（1微升/孔）。藉由添加100微升20%的三 氯乙酸使反應停止。冷束分析板至少10分鐘，藉由在GF/C 板（Packard Unifilter®-96)上過濾來採集沉澱的葡聚糖，利 用Packard Filtermate Harvester用水循環洗滌5次（每次循環 約1毫升/孔）。添加40微升/孔的閃燦液（Packard Ultima Gold TM-XR)並在一 Wallac Beta計數器中以最高計數模式 (top-counting mode)在大約4〇%之效率下對密封的分析板 進行計數。 將儲備溶液以10毫克/毫升儲存於-20°C之DMSO中。對 於各新穎的酵素製劑，所執行的初始滴定係以1毫克/毫升 開始，其係在DMSO中稀釋1〇倍微升至50微升）而製得。 取4 0微升此儲備溶液置於一圓底9 6孔微量滴定板的之弟12 列中。向同一行内之第1列至第11列中添加40微升DMSO， 並自第12列取20微升移至第11列，依此類推（在每次轉移 前混合4次），3倍連續稀釋十次。不自第2列轉移測試化合 物至第1列中。隨後將自所有12種稀釋液取雙份各1微升轉 移至96孔Bioblock 1 · 1毫升分析板（j?isherbrand)之側壁上以 119480.doc -31- 200811194 形成兩列。 由結果進行製表’並減去標準分析板背景值，並將淨值 轉置黏貼至Prism文檔中，最終化合物濃度使用毫微克/毫 升計算。在Prism軟體中使用兩次測定的平均值並使用 Prism的曲線擬合程式（S形劑量效應非線性回歸）進行製 措由以下製私自白色念珠_ (Candida albican s)MY 105 5 製備的葡聚糖合成酶（GS)實施常規分析：在3下劇烈振 盪下，在10公升YPD培養基（每公升10克酵母抽提物、2〇 克胰蛋白腺、20克葡萄糖）中培養MY 1〇55。藉由離心法收 集細胞，洗滌沉澱並冷凍於-70°C下直至進行破裂處理為 止。取解/東之沉澱塊在4 °C下用等容積之破碎緩衝液（5〇

mM HEPES pH 7.4 ’ 10% 甘油，1 EDTA，1 mM PMSF，1 mMDTT)及其4倍重量之〇·5毫米經酸洗滌的玻璃 珠振盪2小時。在40χ放大率下目測評估破碎程度。對於近 平滑念珠菌（C· parapsilosis)菌株，將振盪過程延長至3小 時以便達袁大化破裂程度。經低速離心去除細胞碎片後， 上清液在100,000xg下離心60分鐘，以自細胞質組份中分 離膜及核糖體。用破裂緩衝液在相同離心條件下進一步洗 滌膜兩次，且最終以25至30毫克/毫升蛋白質（Bi〇rad)懸浮 於破碎緩衝液中，在_7(TC下進行儲存。在下藉由在萃 取緩衝液（50 mM NaP04 ΡΗ 7.5，〇·ΐ M KC卜ο」μ檸檬酸 納，2〇% 甘油，5 μΜ GTPf s，1 mM DTT，1 mM PMSF，3微克/毫升胃蛋白酶抑制素）加上〇·25% W1中以$ 119480.doc -32- 200811194 毫克/毫升之蛋白質濃度輕緩地混合60分鐘，萃取膜之GS 活性，隨後在100,000xg下離心60分鐘。離心後，自硬質 層（其上面通常帶有少量膠狀未經提取之膜）構成之沉澱中 移出澄清上清液。 藉由5倍稀釋於捕集缓衝液（50 mM HEPES pH 7.5，10 mM KF，ImM EDTA，2毫克/毫升 BSA)加上 2·5 mM UDPG 及10 μΜ ΟΤΡ-γ-S中立即開始捕集。在25°C下培養60至90 分鐘，藉由低速離心（3,000xg，10分鐘）收穫葡聚糖。用洗 滌緩衝液（50 mM HEPES，20%甘油，1 mM EDTA)加上 2.5 mM UDPG及5 μΜ GTP-y-S對軟沉殿洗滌3次，一次無 UDPG，並用Dounce均化器懸浮於約5體積PE萃取缓衝液 (50 mM HEPES，30%甘油，lmMEDTA，20pMGTP-y-S，0.4% CHAPS，0.08%膽固醇半琥珀酸酯）中。懸浮液 在-70°C下冷凍過夜，並隨後在100,000xg下沉澱10分鐘實 施。 靈敏度試驗 向96孔板之各孔中添加100微升適宜的測試介質（實例： 包含0.165莫耳MOPS+3克/公升麩胺醯胺但不含碳酸氫鈉 之RPMI-1640 ;或包含0.165莫耳]^〇?8+3克/公升麩胺醯 '胺、不含碳酸氫鈉但含3.2% DMSO之RPMI-1640 ;或包含 0.33莫耳MOPS+6克/公升麩胺醯胺、不含碳酸氫鈉但含用 於該板之6.4% DMSO之2X ΙΙΡΜΙ-1640，最終血清濃度為 50%) 〇 酵母 119480.doc 33- 200811194 以10毫克/毫升之濃度將测試化合物溶解於DMSO中，並 稀釋（1:78)於不含DMSO或含1.92% DMSO或含5.12% DMSO的適宜測試介質中。實例：添加25微升10毫克/毫升 之化合物儲備溶液至1925微升包含0.165莫耳MOPS+3克/ 公升麩胺醯胺、不含碳酸氫鈉但含1.92% DMSO之RPMI-1640中。所達成的測試化合物濃度為128微克/毫升且 DMSO濃度為3.2%。向適宜測試介質板之各行第一孔中加 入100微升該化合物儲備溶液（128微克/毫升）。橫過該板至 柱11對化合物連續兩倍稀釋（列12係生長對照孔）並丟棄最 末100微升，得到64至0.06微克/毫升之化合物濃度。對於 帶有皮膚真菌之板，該最末100微升係置於一第二板之第 一行中並連續兩倍稀釋而得到64至0.00004微克/毫升之化 合物濃度。將兩性黴素B及卡泊芬淨（對照化合物）製備成 一以10毫克/毫升存於DMSO中之儲備溶液且其係按照上文 針對測試化合物所闡述在微量滴定板中進行製備。 在針對酵母之微量肉湯稀釋分析中，藉由對薩布羅 (Sabouraud)右旋糖瓊脂（SDA)上的酵母培養物實施劃線 法，在35-37°C下培養24-48小時，之後選擇1個特徵性菌 落，並轉染至新鮮板且在相同條件下培養來選擇念珠菌、 新型隱球菌（MY2062)及釀酒酵母（MY2255)。自再生長部 分中選擇3至5個菌落並懸浮於5毫升無菌生理鹽水（BBL) 中，並用Dade/Behring濁度計（較佳OD值為0.06至0·12)加 以調節以配合0·5 McFarland標準之濁度。此可得到一約1· 5x106 CFU7毫升之濃度。將接種物進一步稀釋（1:1000)於 119480.doc •34- 200811194 包含0.165莫耳MOPS+3克/公升麩胺醯胺、不含碳酸氫鈉 但含3·2% DMSO之RPMI-1640中。然後用100微升/孔之此 培養物稀釋液對先前用存於包含〇·165莫耳MOPS + 3克/公 升之麵胺醯胺、不含碳酸氫鈉但含3·2% DMSO的RPMI-1640中之測試化合物滴定的分析板實施接種。此可得到一 5x1 〇2至2.5x103 CFU/毫升之最終有機體濃度及32至0.03微 克/毫升之最終化合物濃度。另外，亦用經0·22微米之 Express PLUS Millipore過濾系統過濾兩次的熱滅活（在55 C下1小時）小鼠血清對白色念珠菌（MY1055)進行測試。將 此標準化懸浮液稀釋（1:1〇〇〇)至小鼠血清中。隨後用100微 升/孔之此培養物稀釋液對先前用存於包含莫耳 MOPS + 6克/公升麩胺醯胺、不含碳酸氫鈉但含64()/。dmSO 的2Χ RPMI-1 640中之藥物滴定的分析板進行接種。此得到 一 5xl〇2至2.5xlO3 CFU/毫升之最終有機體濃度及32至0.03 微克/毫升之最終化合物濃度及50%的小鼠血清。在35-37 C下培養分析板，並於第24小時讀取念珠菌之MIC，於48 小時時讀取新型隱球菌之MIC。 絲狀真菌 在針對絲狀真菌煙麯黴（MF5668)及皮膚癬菌鬚瘡癣菌 (MF7004)之微量肉湯稀釋分析中，在使用該等微生物前於 薩布羅右旋糖瓊脂（SDA)斜面培養基上培養7天培養，煙麯 黴之培養溫度為35-37r，鬚瘡癖菌之培養溫度為3(rc。 藉由添加5毫升無菌生理鹽水至斜面培養基並隨後用一懸 有存於鹽水中之孢子（分生孢子）之無菌達克龍拭子輕輕刮 119480.doc -35 - 200811194 擦儲備斜面培養基之表面製備絲狀真菌之接種物。隨後將 各孢子懸浮液轉移至另一試管，並用Dade/Behring濁度計 加以調節以配合0.5 McFarland標準之濁度，該濁度計針對 煙麯黴（A· fumigatus)之較佳OD值為0.06-0.09，針對皮膚 癣菌鬚瘡癬菌（T. mentagrophytes)之較佳OD值為0·13-0·17。此得到一約1-5χ106 CFU/毫升之濃度。用一血球計 數器對各培養物懸浮液計算孢子數以確保獲得正確的接種 物。將此標準化煙麯黴懸浮液稀釋（1:500)至包含0·165莫 耳MOPS+3克/公升之麩胺醯胺、不含碳酸氫鈉但含3.2% DMSO之RPMI-1640中。將此針對鬚瘡癖菌之標準化的懸 浮液稀釋（1:500)至包含0.165莫耳MOPS+3克/公升之麩胺 醯胺、不含碳酸氫鈉之RPMI-1640中。隨後用100微升/孔 之此稀釋液對先前用存於包含0.165莫耳MOPS+3克/公升 麩胺醯胺、不含碳酸氫鈉但含3.2% DMSO之RPMI-1640或 包含0.165莫耳M0PS+3克/公升麩胺醯胺、不含碳酸氫鈉 之RPMI-1640中之測試化合物滴定的分析板進行接種。另 外，亦用經0.22微米GP Express PLUS Millipore過濾系統 過濾一次的熱滅活人類血清對煙麯黴（MF5668)進行測試。 將此標準化的懸浮液稀釋（1:500)至人血清中。隨後用100 微升/孔之此培養物稀釋液對先前經存於包含〇·33莫耳 MOPS + 6克/公升麩胺醯胺、不含碳酸氫鈉之2Χ RPMI-1640 中之測試化合物滴定的分析板進行接種。在35°C下對板實 施培養，並於第48小時針對煙麯黴對MIC進行讀數，及在 30°C下對板實施培養並於第96小時針對皮膚癣菌鬚瘡癖菌 119480.doc -36- 200811194 對MIC進行讀數。 在上述測試中’在〇·5 MeFarland樣品上實施活細胞計數 以驗也CFU/晕升。在鹽水中製得具有ο」McFarland之連續 稀釋液（1:10)。將1〇〇微升各稀釋液（1〇4、1〇5、1〇6)塗至薩 布羅右旋糖瓊脂（SDA)板上，並在35°C或30°C下實施24至 48或96(皮膚真菌）小時培養。經培養後，對菌落進行計數 亚記錄。亦針對各有機體實施生長對照及無菌對照。第12 列為生長對照且不包含測試化合物。H行未經有機體或測 試化合物接種，其用作針對各板之無菌對照。 所有測試化合物之最低抑菌濃度（MIC_1〇〇)據測定係與 不含測試化合物之生長對照相比較無可見生長之最低化合 物？辰度。生長之最小顯著抑制（MIC-8〇)顯示係不含測試化 合物的生長對照之生長抑制的8〇%。對於麯黴及皮膚癣菌 須瘡癖菌，最小有效濃度（MEC)係根據宏觀的及微觀的菌 絲近似形態確定。 活體内抗念珠菌活性 在DB A/2小鼠中藉由向其侧部尾靜脈中靜脈内注射〇·2毫 升包含3.0><1〇4(：1711之白色念珠菌]^¥1〇55之接種誘導一散 佈的念珠菌感染。於攻擊後15至3〇分鐘内開始治療。用測 忒化口物1)腹腔注射（每天兩次共2天）或2) 口服（每天兩次 共2天）對小鼠實施處理。對於各投藥途徑及稀釋劑，皆包 括一適宜的假處理對照組。 在實施攻擊四天後，使用無菌技術取出經無痛致死小鼠 (4-5/組）之腎，實施稱重並置於包含5毫升無菌鹽水之無菌 119480.doc -37- 200811194

壶* Pak衣中。在該等袋中對腎實施均質化，用越水進; ==等分試樣鋪板於_上。在3“對板實T

數。將妹至48小時針對白色念珠菌cfu對其實施計 數將^-療_對腎之CFU/克的平均數與假處理對照之 平句數進仃比較。百分比滅菌藉由無可檢測酵母之小鼠數 ^示’其中因稀釋方案之最低檢出量係5轉母細胞/對 腎。對於自成對腎未回收到可檢測酵母之個別小鼠的數 據，向Microsoft Excei電子數據表公s[L〇gi〇 ((5χ原始計 數）/成對腎重量）]中填人9.8,以便該等計數可係—小於最 低檢出量（49細胞/對腎）之計數。 用學生檢測法（Student’s t-test)(雙尾，不成對）將成對腎 之平均loglO酵母CFU/克與假處理對照相比較。在p=〇〇5 專級日守έ忍為對比係顯著的。在攻擊後第4天時，計算經處 理組成對腎之CFU/克相對於對照組的平均百分比減小。當 將劑$及CFU皆以log 10數值範圍表示時，線性趨勢典型係 明顯的。隨後用逆回歸（2)來估計ED9〇值及£099值，該兩值 係定義為可將CFU數/器官分別減小90及99%之劑量（毫克/ 公斤）。 本發明化合物具有小於500 nM之GS IC5〇及<0.03-32微克/ 毫升（例如0.03-8微克/毫升）之MIC-100。本發明化合物具 有<0.03-32微克/毫升（例如0.03-4微克/毫升）之範圍的MIC-80及<0.03-32微克/毫升（例如0.03-2微克/毫升）之MEC。至 於散佈的念珠菌感染之活性’化合物應將腎的CFU/克降低 超過1 loglO單位（與假處理對照相比較），可將01711/克降低 119480.doc -38- 200811194 2 loglO單位之化合物尤其可用。以下實例僅用於闡明本發 及〃貝踐不應將該等實例理解為對本發明範圍及精神 進行限制。 中間體1 (1S，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，l〇aR，10bR512aR)-3-(Ufft*)_ 8"*[(1R)el，2e 二曱基丙基]-2_ 羥基-l，6a，8，l〇a-四甲基· 1，3’4’6’63’7,8,9，10，1(^，101)，11，12，12卜十四氫_2札1，4卜（亞 甲基氧基亞甲基）荔_7_甲酸苄基酯

向一燒瓶内充入安麻吩金（16克，22·5毫莫耳）及三乙基 矽烷（120毫升），並對混合物實施攪拌直至發生完全溶解。 加入三氟乙酸（180毫升），並在室溫下對溶液實施1〇分鐘攪 拌。加入甲苯（150毫升），並蒸發掉溶劑，剩餘一直接使用 之固體。 用苄基溴（16毫升）及碳酸氫鈉（2 8克）對一上文所得固體 (22.5¾莫耳）溶於DMF(200毫升）之溶液實施處理。將混合 物加熱至70°C保持48小時。使反應混合物冷卻至室溫，並 隨後穿過矽藻土墊對其過濾。用二氯曱烷、曱苯、及曱醇 洗滌該矽藻土。將所得溶液濃縮成一油狀殘餘物，藉由急 驟層析法（矽膠，100〇/〇二氯甲烷至92:8二氯甲烷··甲醇）實 119480.doc -39- 200811194 施純化，提供白色粉末狀苄基酯。 向一上文所得固體（11毫莫耳）溶於曱苯（5〇〇毫升）之溶液 中添加樟腦磺酸（4·2克），並將該混合物在川它下加熱約J 小時。將反應物冷卻至室溫，並添加α比啶（2Q毫升）。在減 壓下對反應混合物濃縮並藉由急驟層析法（石夕膠，1 〇〇%二 氯曱烧至98:2一氣甲烧··甲醇至95:5 CH2CI2:甲醇）對殘餘 物實施純化得到標題化合物，為一白色固體（6.2克）。ljj NMR (400MHz，CDC13, ppm) δ 0.71-0.74 (m，6H)，0.78 (d, J=6.83Hz, 3H), 0.80-0.84 (m? 6H)5 1.15 (s, 3H)5 1.16-1.21 (m，1H)，1·23 (s，3H)，1·25-1·29 (m，1H)，1·33·1·63 (m， 7H)，1.70-1.82 (m，3H)，1.89 (m，1H)，1.98-2.06 (m, 1H)， 2.08 (s，3H)，2.09-2.16 (m，1H)，2.33-2.39 (m，1H)，2·87 (s， 1H)，3·32 (d，J=4.69Hz，1H)，3·34 (br· S，1H)，3.43 (m，2H)， 3.81 (d，J=11.91 Hz，1H)，4·96 (d，J=12.25Hz，1H)，5·12 (d， J=12.25Hz，1H)，5·39 (d，J=5.81Hz，1H)，5·66-5·74 (m，1H)， 及 7·35 (s，5H)。

中間體2 (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-8-[(lR>i，2_ 二 曱基丙基]-2,3-(二羥基）-1，6&，8，1(^-四甲基-1，3,4,6,6&，7,8, 9，1〇，1〇^1〇匕，11，12，12丑-十四氫-211_1，4&-(亞甲基氧基亞甲 基）荔-7-甲酸苄基酯

H9480.doc 200811194 向一（lS，2R，3R，4aR，6aS，7R58R，10aR，10bR，12aR)-3-(乙醯 氧基）_8-[(lR)〜l，2_二甲基丙基μ2-羥基-l，6a，8，10a-四甲基_ 1，3,4,6,6&，7,8,9，10，10&，1013，11，12，12&-十四氫-211-1，4冱-(亞 甲基氧基亞甲基）荔-7-甲酸苄基酯（中間體1，1.2毫莫耳； 750¾克）溶於甲醇（3〇耄升）之溶液中添加碳酸卸（I%毫 克）。在室溫下對反應混合物實施約16小時擾拌。在減壓 下將反應物濃縮至約10毫升，並用二氯甲烧加以稀釋。用 水及飽和的NaCl溶液對該溶液實施洗滌，並隨後經無水硫 酸納實施乾燥。將溶劑蒸發掉，得到白色固體狀標題化合 物（700毫克）。4 NMR (400MHz，CDC13, ppm) δ 0·72 (s， 3Η)，G.73 (d，3Η)，0.78 (d，J=6.87Hz，3Η)，0.80 (s，3Η)， 〇·81 (d，卜6·70Ηζ，3Η)，1·14 (s，3Η)，1·14-1·21 (m，2Η)5 1·23 (s，3Η)，1·24_1.27 (m，1Η)，1·47 (m，6Η)，1.69-1.82 (m，3Η)，1·84-1·93 (m，1Η)，1·99-2·06 (m，1Η)，2.07-2.15 (m，1Η)，2.28-2.35 (m，1Η)，2.87 〇，1Η)，3·15 (d， J=8.95Hz，1H)，3.32 (d，J=11.92Hz，1H)，3.37-3.46 (m，2H)， 3·71 (d，J=11.98Hz，1H)，4.57 (m，1H)，4·98 (d，J=12.25Hz， 1H)，5.13 (d，J=12.25Hz，1H)，5.37-5.41 (m，1H)，及 7.36 (m5 5H) 〇 中間體3 (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-8-[(lR)-l，2-二 甲基丙基]-2-(羥基）_3-(甲氧基）-l，6a，8，10a-四曱基- 1，3,4,6,6&，7,8,9，10，10&，101)，11，12，12&-十四氫-211_1，4&-(亞 甲基氧基亞甲基）荔-7-甲酸苄基酯 U9480.doc -41- 200811194

向一經攪拌的（ls，2R，3R，4aR，6aS，7R，8Rl〇aRi〇bR 歸)-8-[(叫1>2.二甲基丙基]·2,3仁經基）16&8秦四 甲基-l，3,4,6,6a，7,8,9，l〇，i〇a，i〇b，ll，12，12a-十四氫 _2Η_ l，4a-(亞曱基氧基亞甲基）篇甲酸苄基酯（♦間體$， 毫莫耳；150毫克）溶於二氯甲烷之溶液（8毫升）中添加甲醇 (800微升）及三氟甲磺酸〇 〇2毫莫耳）。在室溫下將反應混 合物攪拌約16小時。添加三乙胺（4〇〇微升）並在減壓下蒸發 掉/谷劑。藉由急驟層析法（石夕膠，9〇: 1〇至8〇:2〇庚烧··乙酸 乙酉曰）對殘餘物實施純化以提供標題化合物（122毫克）。Ijj NMR (400MHz，CDC13, ppm) δ 0·71 -0.74 (m，6H)，0·78 (d， J=6.83Hz，3H)，0·8〇·0·83 (m，6H)，1·15 (s，3H)，1·16-1·21 (m5 1H)5 K23 (s5 3H), 1.24-1.29 (m? 2H), 1.32-1.53 (m? 4H), 1.56-1.62 (m> 1H)? i.7〇.i.8l (m? 3H), 1.87-1.95 (m? 1H)? 1.99-2.04 (m? 1h)5 2.07-2.16 (m5 1H)5 2.30 (d, J=2.25Hz，1H)，2.40-2.47 (m，1H)，2.88 (s，1H)，3.18 (d， J=8.88Hz，1H)，3.31 (d，J=11.76Hz，1H)5 3.40-3.42 (m，2H)， 3.43 (s，3H)，3.77 (d，J=11.81Hz，1H)，4·09-4·19 (m，1H)， 4·98 (d，1H)，5.12 (d，1H)，5.39-5.43 (m，1H)，及 7.32-7.39 (m，5H) 〇 中間體3 (替代方法） 119480.doc -42 - 200811194 在室溫下’伴隨機械攪拌向一安麻吩金（9〇〇克’ ΐ26·9 毫莫耳）存於846毫升甲苯中之漿液-次性加入

Et3SlH(2G2.2毫升’ 1269.5毫莫耳）。然後快速逐滴添加三 氟乙酸(202.4毫升’ 2627 8毫莫耳)。三氟乙酸添加一經完 成’即在室溫下對所得琥拍色溶液實施2.5小時攪拌。隨 後將TFA/甲苯溶液濃縮至乾燥…添加新鮮的甲苯⑽-刚 毫升並將混合物再次濃縮至乾燥。將甲苯汽提程序再 重複兩次。隨後在-高真空線上對該粗製固體實施乾燥過 夜’得到12G克紫掠色固體。此物f無需純化即繼續用於 下一步驟中。

伴隨機械攪拌向-上文固體（12〇克粗製材料，約126.9毫 莫耳）溶於MeOH(1.27公升）之溶液中快速逐滴添加H2s〇4 (31.2毫升，585.3毫莫耳）。添加一經完成後，即使所得溶 液升溫至651並對其實施4.5小時擾拌。在該反應期間， 沉澱出一白色固體。將反應物冷卻至室溫，並藉由過濾分 離出該白色固體。隨後用Me〇H(2X200毫升）&CH3CN (2x200耄升）對該固體實施洗滌。經乾燥後，回收得到 47.91克白色固體。 按下述自初始濾液及隨後洗出液中分離出額外物質。藉 由真空蒸發使總液體體積減小至1/3。添加過量的水，沉 澱出一紫白色固體。對該固體過濾，用3:7 Me〇H :水 (2xl〇〇毫升）及CH3CN(2xl00毫升）實施洗滌，並實施乾 燥，得到一額外7.30克產物，呈褐色白色固體狀。產物之 合併產率為55.21克（86.5%)。 119480.doc -43- 200811194 伴隨機械攪拌將此產物（55·21克，109·8毫莫耳）、 NaHC03(147.5克，1756·8毫莫耳）及苄基溴（65.29毫升， 549.0¾莫耳）合併於550¾升DMF中。使混合物升溫至65 °C，並對其實施4.5小時攪拌。在真空中將]〇]^〇?去除，並 將所得粗製物溶解於1公升3:2之水/Me〇H中。將混合物劇 烈攪拌2-3小時。在此時間内，生成褐白色固體。該沉澱 物過濾，並用另外的3:2之水/MeOH(2x250毫升）洗滌。隨 後用庚烷對該固體漂洗，並經抽吸脫水至最初乾燥度。隨 後將所回收白色固體轉移至重結晶盤，並置於真空烘箱中 在30°C下保持4小時，得到52.2克白色固體。 按下述自水·.MeOH及庚烷濾液中分離出額外物質。用 EtOAc對合併的溶液萃取。經Na2SCu對合併的Εϊ〇α〇洗出 液實施乾燥，並濃縮至乾燥。藉由Si〇2層析法（3:7 EtOAc^DCM)對所得物質實施純化，得到一額外5·42克產 物，為白色固體。中間體3之合併產率為57.6克（885%)。 中間體8 2-異丙基-2-甲基-1-[(4-甲苯基）磺醯基】氮丙啶

119480.doc -44- 200811194 以ίο克份向此反應混合物中添加苯基三曱基三溴化銨（91 ·4 克，0· 1 eq)。在該添加期間使溫度升高至26。〇。在室溫下 將反應混合物攪拌2天。將反應混合物濃縮低至約最初體 積之15%，然後過濾，用〗公升乙腈洗滌固體。對有機液 相濃縮，並將殘餘物溶解於2·5公升Et〇Ac*。用水對所得 溶液洗滌兩次，經MgS〇4乾燥，並濃縮，得到一固體。在 大矽藻土塞子上用梯度洗脫液5%至25%的Et〇Ac/庚烷對粗 製物實施純化，得到317克固體2-異丙基-2-甲基曱 苯基）績酸基]氮丙咬。 中間體9

1· TsCI/Et3N CH2CI2 2. MsCI / ΕίβΝ ch2ci2

(2S)-2-異丙基-2-甲基-1-丨(4-甲苯基）磺醯基】氮丙啶 (a)將NaBH4(94.5克，2.498莫耳）充入含有54〇毫升乾燥 THF之5公升三頸燒瓶中。用冰浴對此溶液實施冷卻。將 L-a-Me-Val-OHM克，〇·572莫耳）添加至此溶液中。在& 下對此混合物實施20分鐘攪拌，隨後經一 35小時之時段 逐滴加入一 H2S〇4(66.7毫升，L252莫耳）溶於16〇毫升乾燥 乙醚之溶液。在冰浴中對反應混合物實施丨小時攪拌，隨 後使其升溫至室溫過夜。CH2Cl2/MeOH(70/30)中之TLC表 明反應完成。用冰浴對反應物實施冷卻，並藉由經45分鐘 緩慢添加250毫升MeOH使反應物停止反應。然後在室溫下 119480.doc -45- 200811194 將混合物攪拌15分鐘，隨後緩慢添加Na〇H(5N，7⑽毫 升）。用一蒸餾頭裝備該燒瓶，並用一加熱夾套將其加熱 至100°c。藉由蒸餾將揮發物（bp<10(rc)去除。將所得混 合物加熱至loot(内部溫度）保持3小時，然後使之冷卻至 室溫。加入水（1公升），並用CH2C12(6x5〇〇毫升）對該混合 物萃取。經Na2S〇4對合併的有機層乾燥，過濾及濃縮，得 到呈黃色油狀胺基醇產物（64·2克）。NMR (400 MHz， CDC13) δ ppm 0.87 (d, 1=6.93 Hz, 3 H) 0.91 (d? J-6.93 Hz, 3 H) 0.95 (s，3 Η) 1·57 _ 1·68 (m，1 Η) 3·30 (d，J=l〇.3o Hz， 1 Η) 3·34 (d，1=10.30 Hz，1 H)。 (b)用冰浴對一來自上文之胺基醇（32克，273·5毫莫耳） 溶於乾燥CH2C12(1.7公升）之溶液實施冷卻，並添加 EtsN(198毫升，1422毫莫耳）。經3小時之時段逐滴添加對-甲苯磺醯氯（62.5克，328.2毫莫耳）溶於CH2C12(250毫升）之 溶液。移除冰浴，並在室溫下對該溶液實施攪拌過夜。在 冰浴中對該混合物實施冷卻，並先添加Et3N(61_6毫升， 442毫莫耳）再逐滴添加甲磺醯氯（4〇毫升，516·8毫莫耳）。 對反應混合物實施4小時攪拌，同時保持溫度低於丨2 〇c。 向該混合物中先添加水（600毫升），再添加鹽水（35〇毫 升）°用CH2C12(3x500毫升）對水層萃取。合併的有機層經 NajO4乾燥，並過濾及濃縮。粗產物經矽膠墊 烧：5/95 ’然後10/90)純化，得到呈白色固體狀氮丙咬（36 克）。H NMR (400 MHz，CDC13) δ ppm 0·94 (d，J=6.78 Hz， 3 Η) 0·98 (d，J=6.78 Hz，3 H) 1.44 _ 1.53 (m，1 H) 1.59 (s， 119480.doc -46 - 200811194 3 Η) 2.20 (s，1 Η) 2·42 (s，3 Η) 2.60 (s，1 Η) 7.30 (d5 J=7.90 Ηζ，2 Η) 7·83 (d，J=7_90 Ηζ，2 Η) 〇 中間體10

依照實例148中針對使用中間體8之製程’可用中間體9 置換中間體8以生成中間體10。 實例 實例1 (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-(乙醯氧基 2-(2-胺基乙氧基）-8-[(lR)-l，2-二甲基丙基]-1，6&，8，1〇^四 甲基-l，3,4,6,6a，7,8,9，10，10a，10b，ll，12，12a-十四氫 _2H- l，4a-(亞曱基氧基亞甲基）荔-7-甲酸

a) (lS?2R,3R54aR56aS,7R,8R510aR5l〇bR,12aR)-8-[(iR). 1，2-二曱基丙基]-3-(甲氧基）-2-(烯丙氧基）-1，6&，8，1〇心四甲 基1’3,4,6,6&，7,8,9，10，1〇3，101>，11，12，12&-十四氮-211-14& (亞甲基氧基亞甲基）蕉-7-甲酸苄基酯 向一經冷卻的中間體3(611毫克；1〇25毫莫耳）溶於二甲 119480.doc -47- 200811194 基曱酿胺（9毫升）之溶液中添加氫化納（328毫克；8·2毫莫 耳）及烯丙基溴（355微升）。在室溫下對反應物實施16小時 攪拌。藉由TLC分析法來判斷反應是否結束。對反應内含 物濃縮，並對殘餘物實施急驟層析法（矽膠；80··20庚烷： 乙酸乙酯）。經純化的物質（529毫克）。 b) (lS,2R,3R54aR56aS57R58R,10aR510bR,12aR)-8-[(lR)-1，2~ —曱基丙基]-3-(甲氧基）-2-(2-氧代乙氧基）-1，6a，8,10a_ 四曱基_1，3,4,6,6&，7,8,9，10，1(^，1013，11，12，12&-十四氫.2^ l，4a-(亞甲基氧基亞甲基）荔-7-甲酸苄基酯 將上文所得材料（529毫克）溶解於丙酮（6.8毫升）及水（〇.8 毫升）中。添加四氧化锇（4%溶液；531微升；〇.〇8毫莫耳） 及4-甲基嗎琳N-氧化物（196毫克），並在室溫下對反應物實 施16小時攪拌。藉由TLC分析法來判斷反應是否結束。添 加弗洛裏西（Fl〇risil)(550毫克）用亞硫酸氫鈉（55〇毫克）， 並在室溫下對反應溶液實施丨小時攪拌。反應内含物經矽 藻土墊過濾並進行濃縮。將殘餘物溶解於四氫呋喃（12毫 升）中並添加水（3毫升）及高碘酸鈉（49〇毫克）。在室溫下對 反應溶液實施2小時攪拌，並藉由TLC分析來判定反應是 否結束。添加水（5毫升）並用乙酸乙酯對水相實施三次洗 務。有機相經硫酸鎂乾燥並濃縮 Γ 。對殘餘物實施急驟層析

119480.doc -48- 200811194 四甲基-1，3,4,6,6&，7,8,9，10，10迎，101^11，12512&-十四氫_211-l，4a-(亞甲基氧基亞甲基）荔_7_甲酸苄基酯

向一得自實例1之化合物（b)(0.373克，〇·59毫莫耳）溶於 異丙醇（33毫升）之溶液中添加乙酸銨（2·8克，35毫莫耳）。 添加氰基硼氫化鈉（0.55克，8.23毫莫耳），並在回流溫度 (100 °C )下於氮氣下對混合物實施擾拌。1小時後，TLC (10%甲醇於DCM中）顯示反應完成。蒸發掉溶劑，並用碳 酸氫鈉（40毫升）對混合物加以稀釋。用二氯曱烧（3 χ2〇毫 升）萃取該溶液。合併的有機層用鹽水（2〇毫升）洗滌，經硫 酸納乾燥並實施蒸發。藉由管柱層析法（SepPack，1〇克， 矽膠）用二氯甲烷/甲醇作為洗脫液對粗製物實施純化，獲 得期望化合物（94·6毫克)。 d)(lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，l〇aR，l〇bR，l2aR)-8-[(lR)- 1，2-二甲基丙基](乙醯氧基）_2_(2_胺基乙氧基tih』， 1〇a_四甲基 _1，3,4,6,6、7,8,9，1〇，1(^，1〇13，11，12，：^_十四氫-2H-l，4a-(亞甲基氧基亞甲基）篇巧·甲酸苄基酯 向、、二攪拌的得自實例1之化合物（c)(0.095克，〇·15毫莫 耳）溶於^酸（13毫升）之溶液中添加對甲基苯續酸（〇〇72 克〇.3笔莫耳）’並在約110°c下對該溶液實施60分鐘加 …、在減壓下將溶劑蒸發#，添加甲苯⑽毫升)至殘餘物 中^並在真空中去除揮發物。所得黃色油狀物用乙酸乙醋 (毛升）進仃稀釋，並用碳酸氫納（2X10毫升）及鹽水（⑺毫 升）實施洗;:條。用乙醅厂， 人 乙自日（3 10耄升）萃取水層，並經硫酸 鈉對合併的有機層f % 、降 6木’並實施蒸發。藉由管柱層析 119480.doc -49- 200811194 法（SepPack，2克，石夕膠）使用二氯甲烧/甲醇作為溶劑對粗 製油狀物實施純化，產生標題化合物（33.6毫克）。 e) (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-(乙酿 氧基）-2_(2-胺基乙氧基）-8-[(1化)-1，2-二甲基丙基]_1，6&，8, 10a-四甲基-1，3,4,6,6&，7,8,9，10，10&，101>，11，12，12&_十四氯_ 211-1，4&-(亞甲基氧基亞甲基）荔-7-甲酸 將一得自實例1之化合物（d)(0.034克，0.05毫莫耳）溶於 甲醇（5毫升）之溶液用氮氣淨化若干次，隨後添加氫氧化把 (0.06克）。將該溶液置於氫氣氣氛下並實施約3小時攪拌， 直至藉由TLC分析判定反應已結束。混合物穿過短石夕藻土 墊過濾，並用甲醇及二氯甲烷對該墊實施洗滌。蒸發掉溶 劑，得到標題化合物，為白色固體，0.022克。C34H55N06 之計算值·· 573 ;觀測值：574 (M+H)+。4 NMR (4〇〇 MHz，曱醇-d4) δ ppm 0·77 (s，3H)，0.78 (d，J=7.22 Hz 3H)，0·83 (s，3H)，〇·87 (d，J=6.64Hz，3H)，〇.9i (d， 卜6·69Ηζ，3H)，1·18 (s，3H)，1.22 (s5 3H)，1.24-1.90 (m， 13H)，1.93(s，6H)，2.06(s，3H)，2.08,2.13(m，lH)，2.16- 2·26(ιη，1Η)，2·40-2·49(ηι51Η)，2·82-2·88(πι，1Η)，3·〇5-3·12(ιη，2Η)，3·17-3·23(ιη，1Η)，3·34-3·40(πι，ιΗ)，341-3.50(m，2H)，3.72-3.81(m，2H)，3.84-3.93 (m，lH)，5.45· 5.50(m，lH)，且 5.72-5.84 (m，lH)。 實例47 (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-(乙醯氧基）_ 2-(2-胺基乙氧基）_8-[(111)-1，2-二甲基丙基]_1，6&，8，1〇心四 119480.doc -50- 200811194 甲基-6-氧代-1，3,4,6,6&，7,8,9，10，1〇3，101>，11，12，12&-十四氫-

2H-l，4a-(亞曱基氧基亞甲基）蕉-7-曱酸 Η 向一實例1(260毫克；0.41毫莫耳）溶於二曱基甲醯胺（50 毫升）之溶液中添加吼啶（1·325毫升）及氯甲酸苄基酯（U7 微升）。在室溫下對反應物實施1小時授拌，並藉由TLC分 析判斷反應是否結束。向該反應溶液中添入水（2〇〇毫升）及 乙酸乙_(200毫升）。用乙酸乙酯洗滌水相兩次。將有機相 合併，用飽和NaCl溶液實施洗滌，經硫酸鈉乾燥，並濃縮 之。對殘餘物實施急驟層析（梦膠；9 9:1二氯甲烧：甲 醇）。 以中間體6 (c)中所闡述方式使用三氧化鉻（0.68克）及二 甲基吨峻（0.66克）對上文所得經保護胺基衍生物（117克）實 施氧化步驟，獲得期望烯酮（32毫克）。 將上文所得烯酮（32毫克）溶解於甲醇（4毫升）中，並加入 乙酸（15微升）及氫氧化鈀（25毫克）。確保在氫氣氣氛（氣室） 及至溫下對反應混合物實施1小時攪拌。藉由TLC分析法 來判斷反應是否結束。反應内含物經石夕藻土墊過濾、，並濃 縮濾液，得到呈乙酸鹽形式之標題化合物（25·3毫克）。 C34H53N07 之計异值：587 ;觀測值：588 (Μ+Η)+。4

NMR (400 ΜΗζ，甲醇-d4) δ ppm 0.77-0.81 (m，3 Η)，〇·8ΐ (s，3 H)，0·86-0·92 (m，6 H)，0·97 (d，J=6.69 Hz，3 H)，l.U 119480.doc -51 - 200811194 (s，3 Η), 1.15-1.37 (m，3 Η), 1.37-1.61 (m，4 Η)，1·72 (S，3 H)5 1.73-1.83 (m5 2 H), 1.84-1.94 (m? 2 H)? 2.03-2.06 (m5 1 H)，2.07 (s，3 H)，2,20 (s，3 H)，2.22-2.30 (m，1 H)，2.42_ 2.54 (m，1 H)，2.71 (s，1 H)，3·08·3·16 (m，3 H)，3·25 (d， J=8.83 Hz，1 H)，3.40 (d，J=11.76 Hz，1 Η), 3·46-3·57 (m，2 H)，3.75-4.00 (m，3 H)，5.76 (d，J=2.64 Hz，1 H)，及5.78- 5.89 (m，1 Η) o 實例49 (lS，2R，3R54aR，6aS，7R58R，10aR，10bR，12aR)-3-(乙醯氧基）_ 2-(2-甲基胺基乙氧基）-8-[(11〇_1，2-二甲基丙基]-1，6&，8, 10a-四甲基-6-氧代-l，3,4,6,6a，7,8,9，10510a，10b，ll512，l2a-十四氫-2H-l，4a-(亞甲基氧基亞甲基）荔-7-曱酸

向一實例47中所闡述化合物（1〇〇毫克；〇15毫莫耳）溶於 甲醇（6毫升）之溶液中添加低聚甲醛（4·6毫克；〇15毫莫耳） 及碳酸氫鈉（19毫克）。在室溫下對反應溶液實施4〇分鐘攪 拌，然後加熱至60°C並實施1小時攪拌。將反應溶液冷卻 至室溫，並加入氫氧化鈀（80毫克）及乙酸（3〇微升）。確保 在氫氣氣氛及室溫下對反應混合物實施1小時攪拌。該反 應混合物經矽藻土墊過濾，並濃縮濾液。對殘餘物實施急 驟層析（矽膠；95:5二氯甲烷··甲醇），產生呈乙酸鹽形式 119480.doc -52- 200811194 之標題化合物（27毫克）。CmHhNO7之計算值：602 ;觀測 值：603 (M+H)+。4 NMR (400 MHz，甲醇-d4) δ ppm 〇·78 (d，卜7·17 Ηζ，3 Η), 0·82 (s5 3 Η)，0·84-0·94 (m，6 Η)，〇·97 (d，J=6.64Hz，3H)，l.ll(s，3H)，1.15-1.58(m，5H)，1.65- 1.71 (m，1 Η)，1·73 (s，3 Η)，1.75-1.89 (m，2 Η)，1·90 (s，3 Η)，1·91-1·98 (m，1 Η)，2·07 (s，3 Η)，2·08-2·13 (m，1 Η)， 2.19-2.31 (m, 1 Η), 2.39-2.51 (m, 1 Η), 2.63 (s, 3 Η), 2.65- 2.71 (m，1 Η), 3.02-3.09 (m，2 Η)，3·09 (s，1 Η)，3.23 (d， JU8 Ηζ，1 Η), 3·39 (d，J=11.96 Ηζ，1 Η)，3·45-3·60 (m，2 Η)，3·73-3.84 (m，3 Η)，3.88-3.96 (m，1 Η)，5·76 (d5 J=2.49 Ηζ，1 Η)，及 5·78-5·87 (m，1 Η) 〇 實例50 (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-(乙醯氧基）_ 2·(2-二甲基胺基乙氧基）-8_[(1R)]，2_二甲基丙基 l〇a-四曱基—6-氧代-i53,4,6,6a，7,859，10，10a，10b，ll，12，12a_ 十四氫-2H-l，4a-(亞甲基氧基亞甲基）窟-7-甲酸

其作為實例49之副產物（5毫克）分離出來，並轉化為乙 酸鹽。C36H57N〇7之計算值：616 ;觀測值·· 617 (M+H)+。 !H NMR (400 MHz，甲醇-d4) δ ppm 0.78 (d，J=7.22 Hz，3 H)，0·81 (s，3 H)，〇.85-0·92 (m，6 H)，0_97 (d，J=6.74 Hz, 3 H)，1·11 (s，3 H)，1.14-1.37 (m5 3 H)，1·36-1·58 (m，3 H)， 119480.doc -53- 200811194 1.65-1.71 (m，1 H)，1.72 (s，3 H)，1.82-1.92 (m，3 Η)，1·94 (s，3 H)，2.07 (s，3 H)，2·08-2·12 (m，1 H)，2·20-2·29 (m，i H)，2.41-2.50 (m，J=20.26 Hz，1 H)，2.65-2.72 (m，7 H)， 2.98-3.15 (m，3 H)，3·23 (d，J=8.98 Hz，1 H)，3.40 (d J=11.91 Hz，1 H)，3.49-3.56 (m，2 H)，3.74-3.86 (m，2 H)， 3.93-4.03 (m，1 H)，5·76 (d，J=2.59 Hz，1 H)，及 5·78-5·89 (m，1 Η) 0 實例113 _ (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-(乙醯氧基 > 2-(2-胺基-2-甲基丙氧基）-8-[(lR)-l，2-二甲基丙基； 10a-四甲基-6-氧代 _l，3,4,6,6a，7,8,9，10，10a，10b，ll，l2，12a- 十四氫-2H-l，4a-(亞甲基氧基亞甲基）蕉-7-甲酸

(30毫升）之溶液中添加氫化鈉（10克；6〇%分散液，25,3毫 莫耳）及1-苯磺醯基-2,2·二甲基_氮丙啶（2.67克；12·5毫莫 耳）。將反應混合物加熱至7〇 t並實施〗小時攪拌；藉由 TLC分析法來判斷反應是否結束。將反應物冷卻至室溫， 並添加乙酸乙酯（1〇〇毫升）、甲醇（1〇毫升）及水（5〇毫升）。 用乙酸乙酯洗滌水相兩次。將有機相合併，經硫酸鎂乾 燥’並濃縮。對殘餘物實施急驟層析（矽膠；9〇:1〇庚烷： 乙酸乙酯），產生一白色固體（175克）。 119480.doc -54- 200811194 (b)將一份此純化物（800毫克）溶解於二甲基甲醯胺（加 毫物，並將溶液冷來至_7n：。向反應溶液中添加氣（2〇 克），並經1.5小時之時段加入金屬鈉（足以維持藍色卜在 c下對該反應溶液實施2小時攪拌，並隨後使其升溫至氮 回流溫度保持30分鐘。判斷反應結束，並緩慢加入甲醇 U5毫升）。然後使反應物升溫至〇ct，並加入水毫升）。 用乙酸乙酯（75毫升）對水相實施三次洗滌；將有機相合 併，經硫酸鎂乾燥，並濃縮，得到一白色固體（114克卜。 對所得胺基衍生物施加與實例47中所闡述之彼等相似的 條件，以獲得標題化合物。CwHhNO7之計算值·· 675 ;觀 測值：676 (M+H)+。iH NMR (400 MHz，甲醇_d4) § 卯瓜 〇·78 (d，3 H)，0·82 (s，3 H)，0.86-G.90 (m，6 H)，〇·9〇-0·95 (m，1 H)，0·97 (d5 3 H)，(s，3 η)，1.12-1.29 (m，2 H)， 130 (s，3 H)，1.32 (s，3 H)，1·39_1·59 (m5 3 H)，1.72 (s，3 H)，1.74-1.83 (m，2 H)，1.84-L96 (m，2 H)，2·06 (s，3 H)， 2.07-2.11 (m，1 H)，2.20-2.29 (m，1 H), 2.44-2.51 (m，i H)， 2.65-2.72 (m，1 H)，3.11 (s，1 H)，3.27 (d，1 H)，3·42 (d， J=12.18 Hz，1 H)，3.52-3.55 (m，1 H)，3·57-3·67 (m，3 H)， 3.85 (d，1 H)，5.77 (d，1 H)，及 5.82-5.90 (m，1 H)。 實例114 (18,211，311，4&11，6&8,711，811，10&11，1(^11，12&11)-3-(乙醯氧基）_ 2-(2-二胺基-2-甲基丙氧基）_8-[(111)-1，2-二甲基丙基]_1，6&， 8，10a_ 四甲基-6-氧代-i，3,4,6,6a，7,8,9，10，10a，10b，ll，i2, 12a-十四氫-2H-l，4a-(亞甲基氧基亞甲基）窟-7-甲酸 119480.doc -55- 200811194

使用貝例113巾所闡述化合物及低聚甲用與實例中 所闡述相似的方式製備標題化合物。c38H6iN〇7之計算 值：643 ;觀測值：644 (M+H)+。lH NMR (4〇〇 ΜΉζ，甲 醇-d4) δ PPm 0.76-0.83 (m，6 η)，0·84-〇·95 (m，6 Η)，〇·95_ 0.99 (m, 3 Η)5 1.11 (s5 3 Η), 1.14-1.23 (m5 1 Η)5 1.23-1.32 (m，2 Η)，1·33 (s，3 Η)，1·34-1·42 (m，1 Η)，1·43 (s，3 Η), 1.46-1.59 (m，2 Η)，1·72 (s，3 Η)，1·73,1·93 (m，2 Η), 2·07 (s，3 Η)，2.08-2.13 (m，1 Η)，2·19-2·29 (m，1 Η)，2.44-2.54 (m，1 Η)，2·64-2·73 (m, 1 Η), 2·80 (s，6 Η)，3.11 (s，1 Η)， 3·38-3·49 (m，1 Η)，3·50-3·58 (m，1 Η)，3·68-3·77 (m，1 Η)， 3·78-3·91 (m，3 Η)，4·20·4·42 (m，1 Η)，5.76 (d，J=2.59 Ηζ， 1Η)，及 5·79·5·91 (m，1 Η)。 實例113(替代實例） (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-(乙醯氧 基）-2_(2-胺基-2-甲基丙氧基）-8-[(lR)-l，2-二甲基丙基]-1，6&，8，1(^-四甲基-6-氧代_1，3,4,6,6&，7,8,9，10510壮，1013，11， l2，l2a-十四氫-2H-l，4a-(亞甲基氧基亞甲基）篇甲酸（J-1)

119480.doc -56· 200811194 (a)向含中間體3(1.5克；2·5毫莫耳）之二甲基甲醯胺（3〇 毫升）溶液中添加氫化鈉（1·〇克；6〇%分散液，25.3毫莫耳） 及1-苯磺醯基-2,2_二甲基-氮丙啶（2_67克；12.5毫莫耳）。 將反應混合物加熱至7(rc並實施i小時攪拌；藉由TLc分 析法來判斷反應是否結束。將反應物冷卻至室溫，並添加 乙酸乙酯（100毫升）、甲醇（1〇毫升）及水（5〇毫升）。用乙酸 乙酯洗滌水相兩次。將有機相合併，經硫酸鎂乾燥，並濃 縮。對殘餘物實施急驟層析（矽膠；90:10庚烷：乙酸乙 酯），產生白色固體（1·75克）。 (b) 將一份此純化物（8〇〇毫克）溶解於二甲氧基乙烷（2〇 毫升）中，並將溶液冷凍至_7(rc。向反應溶液中添加氨（2〇 克）’並以1.5小時時間添加金屬鈉（足以維持藍色）。在_6〇 C下對忒反應溶液實施2小時授拌，並隨後使其升溫至氨 回流溫度保持30分鐘。判斷反應結束，並緩慢加入曱醇 (15¾升）。然後使反應物升溫至〇。〇，並加入水毫升）。 用乙酸乙醋（75毫升）對水相實施三次洗滌；將有機相合 併，經硫酸鎂乾燥，並濃縮，得到白色固體。 (c) 向得自步驟（b)之白色固體溶於乙酸（1〇〇毫升）之攪 拌溶液中添加p-Ts〇H-H2〇(〇.93克），並在113。(：下對反應 混合物實施1.5小時加熱。然後，將反應混合物冷卻至室 /里’並在減壓下条發掉乙酸。將殘餘物溶解於EtQAc(2〇〇 耄升）中，並用飽和NaHC03溶液（100毫升）小心洗滌。用 EtOAc(2xl〇〇毫升）再萃取水相。合併的有機溶液經無水 MgSCU乾燥。過濾及蒸發溶劑後，分離出期望產物，為白 119480.doc -57- 200811194 色固體（0.87克）。 W向得自步驟（c)之胺（0·81克，138毫莫耳）溶於丙嗣 (24¾升）之攪拌溶液中添加水（12毫升）、亳升）、 NaHC03(1.18 克，14 毫莫耳）、及CBz_〇Su(〇 41克，i 65 毫 . 莫耳）。在室溫下對反應混合物實施攪拌過夜。在真空7 蒸發掉溶劑，將殘餘物分配於Et〇Ac(8〇毫升）與水（4〇毫升） 之間。分離出水相並用EtOAc(2x3〇毫升）萃取。合併的有 機溶液經無水MgS〇4乾燥，過濾，並藉由蒸發去除溶劑， _ €得呈淡黃色固體狀期望產物（1.14克）。藉由急驟層析法 用MeOH/DCM(l-5%)作為洗脫液對此固體實施純化，產生 呈淡白色固體狀期望產物（〇.74克）。 (e)向1公升燒瓶中加入心〇3(9 63克，％毫莫耳）及二氯 甲烷（450意升）。將混合物冷卻至-糾它（内部溫度），並以 單份加入3,5-二甲基咄唑（9.24克，％毫莫耳）。在_2〇艺下 對該混合物實施1小時加熱。單份添加溶於二氯甲烷（3〇毫 _ 升）之按上文步驟（d)中所述製備的經CBz保護之胺（U0 克’ 2· 1 8宅莫耳），並對反應物實施加溫過夜。用飽和 NaHC〇3溶液對反應混合物實施洗滌。分離出有機層，並 • 用二氣甲烷（2x200毫升）對合併的水性部分實施再萃取。 經MgSCU對合併的有機部分實施乾燥。藉由過濾去除乾燥 " 劑，並小心地蒸發掉溶劑（水浴溫度<25。〇，剩下一棕色 固體。將此固體快速溶解於二氯曱烷中，並裝載至一用於 純化的急驟層析柱中。藉由急驟層析法用EtOAc/庚烷（lO-SO /。）作 為洗脫 液對此 固體實 施純化 。去除 溶劑後 ，將 殘餘 119480.doc -58- 200811194 物溶解於Et〇Ac(30〇毫升）中。用i N Hcl(2xl5〇毫升）對有 機溶液實施洗滌。經MgS〇4對該有機溶液實施乾燥，過濾 以去除該乾燥劑’並蒸發掉溶劑’產生呈淡白色固體狀 望化合物（0.34克）。 ’ (f)向一得自上文步驟（e)之12_酮中間體（H7克，〇 笔莫耳）溶於甲醇（20毫升）之溶液中加、H〇Ac(〇17毫升）及 20%的濕Pd(OH)2/C(0.17克）。藉由通過氮氣對該溶液實施5 刀鐘脫氣。用氣氣對燒航實施淨化，並在氣室壓力下對反 應物實施氫化。約30分鐘後，穿過一矽藻土薄層對混合物 過濾。將溶劑蒸發掉並將殘餘物溶解於小體積二氯甲烷 中’並藉由矽膠層析法（5 g管柱）純化之。該洗脫液係一 1%至7.5%之MeOH於二氯甲烷中之梯度。分離出期望之 胺，為一淺黃色固體（0.15克）。C36H57N07之計算值·· 675 ;觀測值：676 (M+H)+。4 NMR (400 MHz，甲醇-d4) δ ppm 0.78 (d5 3 Η), 0.82 (s, 3 Η), 0.86-0.90 (m? 6 Η), 0.90-0.95 (m，1 Η), 0·97 (d，3 H)，1·11 (s，3 H)，1.12-1.29 (m，2 H)，1.30 (s，3 H)，1·32 (s，3 H)，1.39-1.59 (m，3 H)， 1.72 (s5 3 H)，1.74-1.83 (m，2 H)，1.84-1.96 (m，2 H)，2·〇6 (s5 3 H)，2.07-2.11 (m5 1 H)，2·20-2·29 (m，i H)，2·44-2·51 (m，1 H)，2.65-2.72 (m，1 H)，3·11 (s，1 H)，3.27 (d，1 H)， 3.42 (d, 1=12.18 Hz5 1 H), 3.52-3.55 (m? 1 H), 3.57-3.67 (m，3 H)，3.85 (d，1 H)，5·77 (d，1 H)，及 5.82-5.90 (m，1 H)。 實例114(替代實例） 119480.doc -59- 200811194 (18,2115311，4&11，6七8,711，811，10认，1(^11512旺11)-3_(乙醯氧基）-2-(2-二胺基-2-甲基丙氧基）-8-[(lR)-l，2·二甲基丙基]_ 1，6&，8，10&-四甲基-6-氧代-1，3,4,6,6&，758,9，10，10&，1013，11， 12，12&-十四氫-211-1，4&_(亞甲基氧基亞曱基）荔_7_甲酸(^2)

向一得自實例113之胺基化合物（60毫克，0.089毫莫耳） 溶於MeOH(4毫升）之溶液中加入低聚甲醛（9毫克）及 NaHC〇3(14毫克），並在60°C下對該混合物實施le5小時加 熱。然後將反應混合物冷卻至室溫，並加入乙酸（〇 〇6毫 升）及Pd(OH)2_C(20%濕的，60毫克）。對該混合物實施脫 氣’並在室溫下於氣室壓下對其實施氫化過夜。穿過一石夕 藻土薄層對混合物過濾’蒸發掉溶劑並藉由石夕膠層析法（5 g管柱）用存於DCM中之MeOH(2.5-15%)洗脫對殘餘物實施 純化，產生呈淡黃色固體狀之期望產物（4〇毫克）。 C38H61N07 之計算值：643 ;觀測值·· 644 (M+H)+。4 NMR (400 MHz，甲醇-(14)8 ?卫|11〇.76-〇.83 (111，6 11)，0.84- 0-95 (m? 6 H)? 0.95-0.99 (m5 3 H)5 l.n (8? 3 H)5 1.14-1.23 (m，1 H)，1·23-1·32 (m，2 H)，1·33 (s，3 H)，1.34-1.42 (m，1 H)，1·43 (s，3 H)，1·46_1·59 (m，2 H)，1.72 (s，3 H)，1·73_ 1.93 (m，2 H)，2.07 (s，3 H)，2.08-2.13 (m，1 H)，2.19-2.29 (m，1 H)，2.44-2.54 (m，1 H)，2·64-2.73 (m，1 H)，2·80 (s，6 119480.doc -60 - 200811194 Η), 3.11 (S, 1 Η), 3.38-3.49 (m, ι H), 3.50-3.58 (m, 1 H), 3-68-3.77 (m，1 H)，3.78-3.91 (m, 3 h)，4.20-4.42 (m，1 H), 5.76 (d，j=2.59 Hz，1H)，及 5.79_5 91 (m，i H)。 用與實例113中所述相似之方法自中間體3及一經適當取 ^的乳丙唆製備表3中所述化合物。用與實例⑴中所述相 方法可對所得胺基衍生物實施烷基化步驟。

124/J-3 n-Pr

表3藏擺 (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8 R，10aR，10bR，12aR)-3-(乙醯氧基)-2_(2-胺基-2-甲基戍氧基)-8-[(lR)-1，2-二甲基丙基]-l，6a，8, 10&-四甲基-6-氧代-1，3,4, 6,6a，7,8,9510，10a， 101^，11，12，12&-十四氫-2H-l，4a-(亞甲基氧基亞 曱基)蕉-7-曱酸 雜_ 644 (M+H)+ 0·75-0·83 (m，6H)， 0·86·0·94 (m，6 Η)， 0.95-1.00 (m? 6 Η), 1.01-1.09 (m，2 Η)，1.11 (s5 3 Η)，1.12-1.26 (m，5 Η)，1.28-1.32 (m，5 Η)， 1.32-1.69 (m，8 Η)，1.72 (s53H)? 1.74-2.03 (m5 4 H)，2.06(s，3H)，2.07-2.12 (m, 2 H), 2.19-2.32 (m，2 H)，2.43-2.64 (m， 2 H)，2.65-2.73 (m，l H)53.11(s，1H)，3.34-3.44 (m? 1 H), 3.45-3.56 (m，2 H)，3.56-3.63 (m， 1 H)，3.63-3.72 (m，1 H)，3.72-3.79 (m，1 H)， 3.80-3.95 (m，1 H)， 119480.doc •61- 200811194

Ex；/cpd -, :^卜’:二乂 -Ά - r::v τ . -二-丄 .-1. Λ rjv： ，. =/ 'r * ^rv- V f:¥ : jr卜 r! 'r .'C-, * 變.韻 'y - ~7>f * 'is' · ：' _議 %Jlr If % % 含' ； g藤濟賴#賴 5麵編霸M, 5·75-5·78 (m，1 H)，及 5.78-5.89 (m? 1 Η). 125/J-5 n-Pr Me Me Me (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8 R510aR，10bR，12aR)-3-乙醯氧基)-2-(2-二甲胺 基-2-曱基戊氧基)各 (1吵1，2-二甲基丙基]-，6a，8，10a-四甲基-6-氧 代-l，3,4,6,6a，7,8,9，10， 10a，10b，ll，12，12a-十四 氫-2H-l，4a-(亞甲基氧 基亞甲基)蕉-7-甲酸 〇4〇Η65 Ν〇7之 計算值： 671; 觀測值 672 (Μ+Η). 0.74-0.83 (m5 6H)? 0·85-0·91 (m，6H)5 0.93-1.08 (m5 6H)? 1.11 (s，3H)，1.13-1.39 (m， 6H)51.41 (s5 3H)51.43-L70(m53H)5 1.71 (s, 3H)，1.73-1.93 (m，4H)， 1.95(s，3H)，2.07(s， 3H)，2.08(s，lH)，2.17-2.34 (m? 1H)5 2.46-2.56 (m5 1H)，2.64-2.73 (m， 1H)，2.82 (m，7H)，3.11 (s，lH)，3.44(d， J=11.96Hz，lH)，3.48-3.58 (m，2H)，3.66-3.76 (m，1H)，3.78-3.88 (m， 2H)? 3.90-3.99 (m31H)? 5.74-5.78 (m，1H)，及 5.78-5.93 (m，1H). 127/J-9 Et Me H Η (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8 R，10aR，10bR，12aR)-3-(乙醯氧基)-2-(2-胺基-2-曱基丁氧基)-8·[(lR)-I，2-二甲基丙基]-l，6a，8, 10a·四曱基-6-氧代-1，3， 45656a，758,9，10，10a，10b， 11，12，12&-十四氫-211- l，4a-(亞曱基氧基亞甲 基)荔-7-曱酸 C37H59 Ν〇7之 計算值: 629; 觀測值: 630 (Μ+Η)+ 0.78 (d, J=7.22Hz5 3H), 0.81 (s，3H)，0.86-0.90 (m5 6H)5 0.96-0.98 (m? 6H)，Ul(s，3H)，1.17-1.23(m，lH)，1.26(d， J=2.88Hz，3H)，1.29-1.71 (m? 8H), 1.72 (s, 3H)，1.72-1.80 (m，2H)， 1.86-1.91 (m? 1H), 1.92 (s，3H)，2.04-2.11 (m， 4H)，2.19-2.28 (m，1H)， 2.48 (dd5 J=13.15, 7·15Ηζ，1H)，2.68 (m， 1H)，3.11 (s，lH)，3.41 (d，J=11.81Hz，lH)， 3.51-3.59 (m, 3H), 3.61-3.76 (m52H)5 3.85 (d，J=lL91Hz，lH)， 119480.doc -62- 200811194

- · m •V ' r .r； * s-; / · ϊ'»- ’ {.'·〆· RiV : i ' X»--..-. ’ fc- r. -；： …卜…:麵 ，二气!U 1 d、v 〇，-· , Ά 十， ，游 1 j·*·、 減麵㊈ (400MHzH'\ ,〆卜 ” ，乂二 ί 士 ，ν ； :·贿緩満以/ 5.76 (d, J=2.29 Ηζ，1Η)， 及5.78-5.89 (m，1Η). 128/J- 10 Et Me Me Me (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8 R，10aR，10bR，12aR)-3-(乙醯氧基)-2-(2-二甲胺 基-2-甲基丁氧基)-8-[(1R)-1，2-二曱基丙基]-1加，8，10丑-四甲基-6-氧 代4,3,4,6,6a，7,8,9，10， 10a，10b，ll，12，12a-十四 氫-2H-l，4a-(亞甲基氧 基亞曱基)篇-7-甲酸 C39H63 Ν〇7之 計算值： 657; 觀測值： 658 (Μ+Η)+ 0.75-0.83 (m5 6H)5 0.84-1.05 (m512H)5 1.11 (s，3H)，1.12-1.35 (m，6H)，1.37 (s，3H)， 1.39-1.70 (m，3H)， 1.70-1.73 (m，3H)， 1.73- 1.92(m，4H)，1.95 (s，3H)，2.04- 2.12 (m， 3H)，2.18-2.28 (m，1H)， 2.45-2.72 (m，2H)， 2.78- 2.83 (m56H)5 3.11 (s，1H)，3.34-3.49 (m，2 H)，3.49-3.60 (m，1H)， 3.69-3.95 (m，4H)，5.76 (d，J=2.64Hz，1H)，及 5.79- 5.91 (m, 1H). 129/J-7 i-Pr Me H H (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8 R，10aR，10bR，12aR)-3-(乙酿氧基)-2-(2-胺基· 2,3-二曱基丁氧基)-8-[(1R)-1，2-二曱基丙基]-l，6a，8，10a-四曱基-6-氧 代-l，3,4,6,6a/7,8,9，10， 10a，10b，ll，12，12a-十四 氫-2H-l，4a-(亞甲基氧 基亞甲基)荔-7-甲酸 C3bH61 N〇7之 計算值: 643; 觀測值: 644 (M+H)+ 0.78 (d，J=7.17Hz，3H)， 0·82 (s，3H)，0.87-0.90 (m，6H)，0.93-1.03 (m， 9H)，l.ll(s，3H)，U7 (d，J=1.17Hz，3H)， 1.28-1.72 (m5 5H), 1.73 (s，3H)，1/76-1.88 (m， 3H)，1.90(s，3H)，1.91-2.03 (m，3H)，2·05 (s， 3H)，2.24-2.30 (m，1H)， 2·51 (d，J=24.75Hz， 1H)，2.65-2.71 (m， 1H)，3.09 (s51H)， 3.24-3.30 (m，1H)，3.40 (m，1H)，3.48-3.60 (m， 3H)，3.64-3.71 (m，1H)， 3.78- 3.91 (m，1H)， 5.76-5.80 (m，1H)及 5.79- 5.88 (m? 1H). 130/J- 11 i-Pr Me Me Me ;(lS，2R，3R54aR，6aS，7R， 8R，10aR，10bR，12aR)-3- C40H65 N〇7之 0.71 (d，Ι=7·22Ηζ，3H)， 10.74 (s, 3H)? 0.78-0.85 119480.doc -63- 200811194

Ex>/cpd R™ ： -.JL''- ·'” Γ· * ，·‘ 1-. = • > V - * '^ϊ riiy ‘（，>r ； r·.- -r ' ' * ·. • .“W:·.·*··-/' 二--.^：v -Λ ·Ά "V.，i ί R1 ： 乂 y ^ v;l' •'•L* i. n t Ί ： WiS霸 冷_, 議__, 觀00—勝，^麟·' * 一 ‘ ·* * ，一 4 V 乂 每，〆 * ， (乙醯氧基)-2-(2-二曱胺 基-2,3-二甲基丁氧基)-8-[(lR)-l，2-二甲基丙 基]-l,6a，8，10a-四甲基-6-氧代-l，3,4,6,6a，7,8,9， 10，10a，10b，ll，12，12a-十 四氫·2Η-1，4&-(亞甲基 氧基亞甲基)荔-7-甲酸 計算值： 671; 觀測值： 672 (M+H)+ (m，6H)，0.89 (d5 J=6.69Hz? 3H), 0.92-1.02 (m，6H)，1.03 (s， 3H)，1.06-1.16 (m，3 H)，1.19-1.63 (m，5H)， 1.64 (s? 3H)? 1.65-1.83 (m，4H)，1.84 (s，3H)， 2.00 (s，3H)，2.13-2.24 (m，2H)，2.28-2.48 (m， 2H)，2·56·2·64 (m，1H)， 2.70-2.76 (m，7H)，3.03 (s，1H)，3·20 (d， J=3.71Hz? 1H), 3.36 (d, J=11.96Hz3 1H)?3.40-3.51 (m，2H)，3.61-3.73 (m，2HX 3.81-3.91 (m， 1H)，5.66-5.69 (m，1H)， 及5.69-5.79 (m，1H)· 136/J- 15 i-Bu Me Me Me (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R， 8R，10aR，10bR，12aR)-3· (乙醯氧基)-2-(2-二甲胺 基-2,4-二甲基戊氧基)-8-[(lR)-l，2-二曱基丙 基]-l，6a，8，10a-四甲基-6-氧代-l，3,4,6,6a，7,8,9, 10，10a，10b，ll，12，12a-十 四氫-2H4,4a-(亞甲基 氧基亞曱基)荔-7-甲酸 C41H67 湯7之 計算值: 685; 觀測值: 686 (M+H)+ 0.78 (d5 J=7.22Hz, 3H)5 0.81 (s，3H)，0.87-0·92 (m，6H)，0·97 (d， J=6.69Hz，3H)，0.99-1.06(m，6H)，1·11 (s， 3H)，1.28-1.35 (m，3H)， 1.43 (s? 3HX 1.44-1.71 (m，5H)，1.72 (s，3H)， 1.74-1.89 (m? 4H)? 1.91 (s，3H)，2·07 (s，3H)， 2·08-2·11 (m，1H)， 2.21-2.29 (m，1H)， 2·45-2·56 (m，1H)， 2.67-2.71 (m，8H)，3.11 (s，1H)，3.33-3.36 (m， 1H)，3.43 (d， J=11.91Hz51H)?3.50-3.58 (m5 2H), 3.66-3.98 (m，3H)，5.74-5.77 (m， 1H)，及5.78-5.89 (m， 1H)· 119480.doc -64- 200811194

Ex./cpd 二V , :wni ί*’ ： 31 :^ - 'ν' - κ. :R? :Ύ_ UT \ l ^r ^ __ 誠U 谷應 •>"«-1«^ -〇« ，名·》〆、^»'· ·»»*···/ k ‘ K ^vts · , yvC ^·~ »、 、·糊嫌剛勝 r * -* %/λ.Ϊ Λί ’ π * 〆；/<'- 4 令 ^ d4^mrn 140/J- 19 Me Et Et Et (lS，2R，3R54aR56aS，7R， 8R，10aR，10bR，12aR)-3-(乙醯氧基)-2-(2-二乙胺 基-2-甲基丁氧基)-8-[(1R)-1，2-二甲基丙基]-l，6a，8，10a-四曱基-6·氧 代-l，3,4,6,6a，7,8,9，10， 10a，10b，ll，12，12a-十四 氫-2H-l，4a-(亞曱基氧 基亞曱基)篇-7-曱酸 C41H67 N〇7之 計算值： 685; 觀測值： 686 (M+H)+ 0.78(d，J=7.22Hz，3H)， 0·81 (s，3Η)，0·87 (s， 3Η)，0.88-0.93 (m，6Η)， 0.97(d，J=6.69Hz，3H)， 1.11 (s，3H)，1.13(d， J=2.54Hz，3H)，1.15 (s， 3H)，1.26-1.32 (m，2H)， 1.36-1.47 (m，2H)， 1.49-1.59 (m? 3H), 1.59-1.72 (m? 3H)51.73 (s，3H)，1.75-1.80 (m， 2H)，1.82-1,99 (m，3H)， 2.05 (s，3H)，2.20-2.31 (m，1H)，2.39-2.50 (m， 1H)，2.67 (d， J=12.01Hz，lH)，2.78-2.95 (m，5H), 3.09 (s， lH)，3.16(d，J=8.88 Hz，1H)，3.40 (d， J=ll,71Hz，lH)，3.52 (s，2H)，3.57 (d， J=9.76Hz，1H)，3·75 (d， J=9.81Hz，2H)，5.74 (s， 1H)，及5.77-5.85 (m， 1H). 實例148 (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，l〇aR，l〇bR，12aR)-3-(乙醯氧基）-2-[(28)-2-胺基_2,3-二甲基丁氧基]_8_[(111)-1，2-二甲基丙 基]-l，6a，8，10a-四曱基-6·氧代-l，3,4,6,6a，7,859510，10a，10b， ll，l2，l2a-十四氫-2H-l，4a-(亞甲基氧基亞甲基）篇_7_甲酸 65· 119480.doc 200811194

步驟 1 : (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-8· [(1R)_1，2-二甲基丙基]-2-[[(2S)-2,3-二甲基-2-[(對-甲苯基 磺醯）胺基]丁基]氧基]-3-(曱氧基）-l，6a，8，10a-四曱基-1，3,4,6,6&，7,8,9，10，10&，101)，11，12，12&-十四氫-21^1，4&-(亞 甲基氧基亞曱基）篇-7-甲酸节基酉旨 向一經攪拌的（lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR， 12aR)-8-[(lR)-l，2-二甲基丙基]-2-(羥基）-3-(甲氧基）一 1，6&，8，1(^_四甲基-153,4,6、6&，7,8,9，10，10&，101)，11，12，12汪-十 四氫-2H-l，4a-(亞甲基氧基亞甲基）荔_7_甲酸苄基酯（3〇2 克，51毫莫耳）溶於無水二甲氧基乙烷（4〇〇毫升）之溶液中 加入18-冠-6(33·7克，127.5毫莫耳）及2-異丙基_2•曱基小 [(心曱苯基）磺醯基]氮丙啶（21.4克，84·6毫莫耳，166當 1 )。在氮氣氛下對該混合物實施1 〇分鐘攪拌，直至所有 固體溶解。經一約30分鐘之時段逐份（約i克份）加入氫化鉀 (30%於油中’ 17.0克，127.5毫莫耳，25當量）。完成該添 加後，在室溫下對所得懸浮液實施約3小時攪拌。藉由逐 滴加入甲醇（40毫升）小心地對反應物實施驟冷。然後用水 (300¾升）對反應混合物實施稀釋，並用e⑴八彳3〇〇毫升）萃 取。用水（2x200毫升）對有機溶液實施洗滌，並經無水 MgS〇4實施乾燥。藉由過濾去除乾燥劑，並在減壓下去除 119480.doc -66 - 200811194 有機溶劑’獲得呈非對映體混合物形式之期望化合物（67.4 克）。藉由在石夕膠（0-15% EtOAe/庚烷）上實施層析法分離該 等非對映體，得到較快流出的同分異構體，（1S，2R，3R， 4aR,6aS,7R,8R,10aR，10bR,12aR) -8- [(ir)_i，2_ 二甲美丙 基]_2-[[(2R)-2,3-二甲基-2-[(對-曱苯基石黃醯）胺基]丁基]氧 基]_3-(曱氧基）-l，6a，8，10a_四曱基 1〇1)，11，12，12&_十四氫-211-1，4&-(亞曱基氧基亞甲基）篇-7_曱 酸苄基酯，及較慢流出的同分異構體，（ls，2R，3R，4aR， 6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR) -8- [(IRWa二甲基丙基 [[(2S) _2,3_二曱基-2-[(對_甲苯基磺醯）胺基]丁基]氧基]_3_ (甲氧基）-l，6a，8，10a-四甲基-l，3,4,6,6a，7,8,9，10，10a，10b， 1 l，12，12a·十四氫-2H-l，4a-(亞甲基氧基亞甲基）篇_7_甲酸 >基酉旨。 步驟2: (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-2- [[(2S)· 2-胺基·2,3-二甲基丁基]氧基]-8-[(lR)-l，2·二甲基丙基]-3-(甲氧基）-l，6a，8，10a-四甲基-l，3,4,6,6a，7,8,9，10，10a，10b，ll， 12，12&-十四氫-211-1，4&-(亞甲基氧基亞曱基）蕉-7-曱酸 經約20分鐘向保持於-35至-50°C (浴溫度）之液態氨（約 400 毫升）中加入（lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR， 12aR)-8-[(lR)-l，2-二甲基丙基]-2-[[(2S)-2,3-二甲基-2-[(對-甲苯基磺醯）胺基]丁基]氧基]-3-(曱氧基）-l，6a，8，l〇a-四甲基-1，3,456,6&，7,8,9，10，10&，1013，11，12，12&-十四氫-21^ l，4a-(亞曱基氧基亞曱基）荔_7_甲酸苄基酯（18.21克，21.60 毫莫耳）溶於二甲氧基乙烷（300毫升）之溶液。經約30分鐘 119480.doc -67- 200811194 之時段，㈣氨溶液中加入金屬鈉(40克，以〇·2克份添 加，在添加前經庚烷快速洗滌），同時確保反應溫度保持 於約_35。(：（浴溫度）。對深藍色反應混合物實施約3小時攪 拌。藉由TLC(50%存於庚烷中之Et〇Aci1〇%存於dcm中 之MeOH)之分析指一不完全反應，故經約1〇分鐘之時段按 上文所述加入金屬鈉（1.〇克，分成〇·5克份）。對反應物實 施再2小時攪拌，由此藉由TLC及LC-MS分析法判斷反應 已70成。藉由小心地先加入異丙醇（丨〇毫升，經約丨5分鐘 逐滴加入）再加入1:1異丙醇_Me〇H(8〇毫升，經3〇分鐘）及 MeOH(40毫升，經30分鐘）使反應停止。對反應混合物實 施1小時攪拌，隨後經15分鐘加入水（15毫升）。使氨蒸發掉 並隨後向該反應物中加入水（3〇〇毫升）。用£{〇八〇(3><350毫 升）對該混合物萃取。有機溶液經無水MgS04乾燥。去除 乾燥劑，並蒸發掉溶劑，得到一白色固體（7·96克）。水性 溶液用鹽水（400毫升）實施處理，並用二氯曱烷（3χ300毫 升）實施再萃取。對合併的二氯曱烷萃取液實施乾燥 (MgS〇4)、過濾及蒸發，獲得額外白色固體（4.53克）。 (lS52H53R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-2-[[(2S)-2-f*-2,3·二曱基丁基]氧基]-8-[(lR)-l，2-二甲基丙基]-3-(甲氧 基）_l，6a，8，10a-四曱基-l，3,4,6,6a，7,8,9，10，10a，10b，ll，12, 12a·十四氫_2H_l，4a-(亞甲基氧基亞曱基）篇·7-甲酸之合併 產率為12.49克，其直接用於下一步驟中。 步驟3 : (18,211531154311，638,711，811，10&11，1(^11，12狂1〇-3-乙醯 氧基-2-[[(2S)-2-胺基-2,3-二甲基丁基]氧基]-8-[(lR)-l，2-二 n9480.doc • 68 - 200811194 曱基丙基]-l，6a，8，10a-四曱基-l，3,4,6,6a，7,8,9，10，10a，10b， ll，12，12a-十四氫-2H-l，4a-(亞甲基氧基亞甲基）篇甲酸 向一經攪拌的（lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，l〇aR，l〇bR， 12aR)-2-[[(2S)-2-胺基-2,3-二甲基 丁基]氧基]1，2_ 二甲基丙基]_3_(甲氧基）-l，6a，8，10a-四曱基 _i，3,4,6,6a， 7,8,9，1〇，1〇&，1〇1>，11，12，12&-十四氫-211-1，4卜（亞甲基氧基亞 甲基）篇-7·甲酸（12.39克，約20.61毫莫耳）溶於乙酸（97〇毫 升）之溶液中加入p-TsOH_H2〇(9.7克）並在n〇°c下對混合物 實施5小時加熱。然後，將反應混合物冷卻至室溫，並在 減壓下蒸發掉乙酸。將殘餘物溶解於Et〇Ac(400毫升）中並 用飽和NaHCCb溶液（400毫升）小心地實施洗滌。水相用 EtOAc(3x250毫升）實施再萃取。合併的有機溶液經無水 NajO4實施乾燥。過濾及溶劑蒸發後，分離出期望產物， 為一淡黃色固體（5·61克）。用10%存於DCM中之MeOH (4x250毫升）對水性溶液實施再萃取，經Na2s〇4對合併的 有機層實施乾燥，過濾並蒸發掉溶劑，獲得期望產物（4 49 克）。合併的（lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-乙 醯氧基·2·[[(28)_2·胺基-2,3-二甲基丁基]氧基 1，2-二甲基丙基]-l，6a，8，10a-四甲基 _i，3,4,6,6a，7,8,9，l〇, 10a,10b,11,12,12 a-十四氫-2H-1，4 a-(亞甲基氧基亞甲基）篇 7-甲酸產物（10.1克）直接用於下一步驟中。 步驟4 : (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-乙醯 氧基-2-[[(2S)-2-[(节氧基）羰基]胺基_2,3_二曱基丁基]氧 基]_8-[(1尺)-1，2-一甲基丙基]_1，6&，8，1〇狂_四甲基_1，3,4,6,63 119480.doc -69- 200811194 7,8,9，10，1(^，101>，11，12，12&-十四氫-211-1，4旺-(亞甲基氧基亞 甲基）荔-7-甲酸 向一經攪拌的（lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR， l2aR)-3_乙醯氧基-2_[[(2S)_2-胺基_2,3_二甲基丁基]氧基]· 8-[(lR)-l，2-二甲基丙基]_i，6a，8，10a-四曱基-l，3,4,6,6a，7,8, 9，10，.1〇3，101>，11，12，12&_十四氫-211-1，4&-(亞甲基氧基亞甲 基）篇-7-甲酸（9.68克，15.4毫莫耳）溶於丙酮（270毫升）之溶 液中加入水（55毫升）、MeOH(130毫升）、NaHC03(12.9克， 128耄莫耳）、及CBz-OSu(5.06克，20.3毫莫耳）。在室溫下 對反應混合物實施攪拌過夜。在真空中蒸發掉溶劑，將殘 餘物分配於EtOAc(350毫升）與水（250毫升）之間。分離出水 相，並用EtOAc(2x250毫升）萃取。經無水Na2S04對合併的 有機溶液實施乾燥，過濾，並藉由蒸發去除溶劑，獲得呈 淡黃色固體狀期望產物（13.97克）。藉由急驟層析法用 EtOAc/庚烷（10-25%)作為洗脫液對此固體實施純化，產生 呈白色固體狀之（lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，, 12aR)-3-乙醯氧基-2_[[(2S)_2-[(苄氧基)羰基]胺基-2,3-二曱 基丁基]氧基]-8-[(111)-1，2-二曱基丙基]_1，6&，8，1(^-四曱基_ 1，3,4,6,6&，7,8,9，10，10&，101)，11，12，12&-十四氫，211_1，4&-(亞 甲基氧基亞甲基）荔-7-甲酸（8·61克）。 步驟 5 : (18,211，311，4&11，6&8,711，811510&11，10七11，12&11)-3-乙醯 氧基-2-[[(2S)-2-[(苄氧基）羰基]胺基-2,3-二甲基丁基]氧 基PS-IXIR)-；!，〕·二甲基丙基]-7-(氧代亞甲基）-1，6&，8，10&-四 甲基-1，354,656&，7,8,9，10，10&，101>，11，12，12&-十四氫-21^1，4&- 119480.doc -70 - 200811194 (亞甲基氧基亞甲基）荔 向一（lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-乙醯 氧基-M[(2S)-2-[(苄氧基）羰基]胺基·2,3·二甲基丁基]氧 基]-8-[(lR)-l，2-二甲基丙基]-1，6已，8，10心四曱基_ . 1，3,4,6加，758,9，10，1(^，1013，11，12，12心十四氩-211-1，4&-(亞 甲基氧基亞曱基）篇-7-曱酸（8.41克，11毫莫耳)溶於二氯曱 燒（500毫升）之溶液中以單份加入N_乙基_N，_(3_二曱胺基丙 基）碳化二亞胺（17.0克，110毫莫耳）。在室溫下於氮氣氛 _ 下對反應混合物實施40小時攪拌直至所有起始物皆已消 耗。用水（3x200毫升）對反應混合物實施洗滌，並經無水 NajCU實施乾燥。藉由過濾去除乾燥劑，並蒸發掉溶劑， 剩下呈淡黃色固體狀（lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，l〇aR，l〇bR， 12aR)-3·乙醯氧基-2_[[(2S)-2_[(节氧基）幾基]胺基-2,3·二曱 基丁基]氧基]-8-[(1Κ>1，2-二甲基丙基]-7-(氧代亞甲基）-l，6a，8，10a_四甲基-l，3,4,6,6a，7,8,9，10，10a，10b，ll，12，12a- + 四氫-2H-l，4a·(亞曱基氧基亞甲基）篇（8.15克)，直接用於下 一步驟中。 步驟 6 : (18,211，311，4&11，6&85711，811，10&11，1(^11，12&11)-3-乙醯 氧基-2-[[(2S)-2-[(苄氧基）羰基]胺基-2,3-二甲基丁基]氧 基]-8-[(lR)_l，2-二曱基丙基]-l，6a，8，10a·四甲基-l，3,4,6,6a， * 7,8,9，10，10&，1(^，11，12，12&-十四氫-211-1，4&-(亞曱基氧基亞 甲基）窟曱醯胺 向一 250毫升壓力反應器中加入（lS，2R，3R，4aR，6aS，7R， 811，10&11，1(^11，12&11)-3-乙醯氧基-2_[[(28)-2-[(苄氧基）羰 I19480.doc -71- 200811194 基]胺基-2,3-二甲基丁基]氧基]二甲基丙基]_7-(氧代亞甲基）-l，6a，8，10a_ 四曱基-l，3,4,6,6a，7,8,9，10，l〇a， 1〇七，11，12，12&-十四氫-211-1，4&_(亞甲基氧基亞甲基）窟（8.〇 克，1〇·7毫莫耳）及二氯甲烷（85毫升）。將該反應器冷卻至 約-60°C並加入液態氨（約1〇〇毫升）。將該反應器密封，並 在室溫下對反應物實施約68小時攪拌，在此時段内將壓力 增大至98 psi。當反應結束時，小心地減除壓力，並在室 溫下使氨氣蒸發2小時。用二氯甲烷（4〇〇毫升）對反應混合 物實施稀釋，用水（3x150毫升）實施洗滌，並經Na2S04實 施乾燥。藉由過濾去除乾燥劑並蒸發掉溶劑，得到呈黃色 固體狀（lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-乙醯 氧基-2-[[(2S)-2-[(苄氧基）魏基]胺基_2,3_二甲基丁基]氧 基]-8-[(1ΙΙ)-1，2·二甲基丙基]-l，6a，8，10a-四曱基 _l，3,4,6,6a， 7,8,9，10，10&，101)，11，12，12&-十四氫-211-1，4&-(亞甲基氧基亞 曱基）為-7-曱臨胺（7.85克）。產物直接用於下一步驟中。 步驟7 : (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-乙醯 氧基-2-[[(2S)-2-[(苄氧基）羰基]胺基-2,3-二甲基丁基]氧 基]-8-[(lR)-l，2-二甲基丙基]-1，6&，8，10&-四曱基-6-氧代· 1，3,4,6,6&，7,8,9，10，10&，101^，11，12，12&_十四氫_211_1，4&-(亞 甲基氧基亞甲基）窟-7-曱醯胺 向一 1公升燒瓶中加入Cr〇3(14.76克，148毫莫耳，45當 量’在一真空乾燥器中經P2〇5乾燥3天）及二氯甲烧（8〇〇毫 升）。將混合物冷卻至-20 °C (内部溫度）並以單份加入3,5_二 甲基σ比峻（14 · 19克，148毫莫耳，45當量）。在-20 °C下對該 119480.doc -72- 200811194 混合物實施1小時攪拌。以單份加入一（ls，2R，3R，4aR， 6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)_3-乙醯氧基-2-[[(2S)-2_[(苄氧 基）羰基]胺基-2,3-二甲基丁基]氧基j•二曱基丙 基]_l，6a，8，10a-raf*-i，3,4,6,6a，7,8,9，10，10a，10b，ll，12, 12a-十四氫-2H-l，4a-(亞甲基氧基亞甲基）荔_7-甲醯胺（2 5〇 克，3.28¾莫耳）溶於二氯曱烷（15〇毫升）之溶液，並使反 應混合物溫度升高過夜。約19小時後，丙酮浴液之溫度達 約15°C。將反應混合物轉移至一 2公升燒瓶中，並用飽和 NaHC〇3溶液（約400毫升）使反應停止。分離出有機層並用 飽和NaHC〇3溶液（2x300毫升）實施洗滌。用二氯甲烷 (2x3 00毫升）對合併的水性部分實施再萃取。合併的有機 部分經NazSO4實施乾燥。藉由過濾去除乾燥劑並蒸發掉溶 劑，剩下一棕色固體。將此固體迅速溶解於二氯曱烷（約 2x 1 5宅升）申，並快速裝載至一用於純化之矽膠急驟層析 柱上。梯度始於5%的存於庚烧中之EtOAc，且產物經45% 的存於庚烷中之EtOAc洗脫。去除溶劑後，將殘餘物溶解 於EtOAc(500毫升）中。有機溶液用1 n HCl(2xl50毫升）及 水（100耄升）實施洗滌。經Na2S〇4對該有機溶液實施乾 燥，過濾以去除乾燥劑並蒸發掉溶劑，產生呈淡黃色固體 狀（lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，l〇aR，10bR，12aR)-3-乙醯氧基- 2-[[(2S)-2-[(苄氧基）羰基]胺基_2,3-二甲基丁基]氧基]_8_ [(1Κ)]，2_二曱基丙基]-l，6a，8，10a_四曱基冬氧代_ 1，3,4,6,6&，7,8,9，1〇，1(^，1013，11，12，12心十四氫_211_1，4卜（亞 甲基氧基亞曱基）蕉甲醯胺（2 36克）。 119480.doc -73- 200811194 步驟8 : (lS，2R，3R，4aR56aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-6^ 氧基-2-[[(2S)-2-[(苄氧基）幾基]胺基_2,3-二甲基丁基]氧 基]-8-[(13^)-1，2-二甲基丙基]_1，6&，8，10巳-四甲基-6-氧代· 1，3,4,6,6&，7,8,9，10，10&，1013，11，12，12&-十四氫-211-1，4&_(亞 甲基氧基亞甲基）荔-7-甲酸 向一經快速攪拌的溶於CH3CN(90毫升）/KF(198毫克， 2.2毫克/毫升）/112〇(0.9毫升1%)溶液的（18,211，311，4&11，6以， 7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-乙醯氧基-2，[[(2S)-2-[(节氧基） 羰基]胺基-2,3-二甲基丁基]氧基]-8-[(1R)_l52_二曱基丙 基]-1加，8，10&-四甲基-6_氧代_1，3,4,6,6&，7,8,9，10，1〇&，1〇13, ll，12，12a_十四氫-2H-l，4a-(亞曱基氧基亞甲基）篇_7·甲醯 胺（2.18克，2.68毫莫耳）溶液中加入1；_：611〇>10(1.59毫升， 13.4毫莫耳，5當量）。在室溫下對混合物實施1小時擾拌。 在真空中去除溶液，並藉由急驟層析法於矽膠（洗脫液： EtOAc及庚烷）上對殘餘物實施純化，產生呈白色固體狀 (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-乙醯氧基·2- [[(2S)-2-[(苄氧基）羰基]胺基-2,3-二甲基丁基]氧基]·8_ [(111)-1，2-二甲基丙基]-1，6&，8，10&_四甲基-6-氧代· l,3,4,6,6a,7,8,9,10,10a,10b，ll，12，12a-十四氫-2H-l，4a-(亞 甲基氧基亞甲基）1-7-甲酸（1.66克）。 步驟9 : (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，l〇aR，l〇bR，12aR)-3-乙 酷氧基-2-[[(2S)-2·胺基-2,3·二甲基 丁基]氧基]_8-[(ir)-i，2-二曱基丙基]-1，6&，8，10&-四甲基-6-氧代-1，3,4,6,68,7,8,9, 10,10a, 1 Ob, 11,12’ 12a-十四氮-2H- l，4a-(亞甲基氧基亞甲 119480.doc -74- 200811194 基）1-7-曱酸 向一（lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-乙醯 氧基-2-[[(2S)-2-[(节氧基）羰基]胺基_2,3_二甲基丁基]氧 基]-8-[(111)-1，2_二甲基丙基]_1，6狂，8，1〇8_四甲基-6_氧代_ 1,3,4,6,6&,7,8,9,10，10&，101>，11，12，12&-十四氫_211-1，4&-(亞 甲基乳基亞甲基）篇-7-甲酸（ΐ·〇6克，1.37毫莫耳）溶於甲醇 (5 0毫升）及EtOAc(50毫升）之溶液中加入h〇Ac(0.5〇毫升）及 20%濕Pd(OH)2/C(5 00毫克）。藉由通過氮氣對該溶液實施5 分鐘脫氣。用氫氣對燒瓶實施淨化，並在氣室壓力下對反 應物實施氫化。約2 5分鐘後，穿過一石夕藻土薄層對混合物 過濾。將溶劑蒸發掉並將殘餘物溶解於小體積二氯曱烷 中，藉由矽膠層析法（10 g管柱；用2%至10%的存於二氯甲 烷中之MeOH洗脫）實施純化，得到淡黃色固體（〇 83克）。 將一份該固體（0.76克）溶解於二氯甲烷（300毫升）中，並用 飽和NaHCCh溶液（2x50毫升）及水（50毫升）洗滌之。然後經 NazSO4對有機溶液實施乾燥。經過濾及濃縮後，獲得呈淺 黃色固體狀（lS，2R，3R，4aR，6aS，7R58R，10aR，10bR，12aR)-3-乙醯氧基-2-[[(2S)-2-胺基-2,3-二甲基丁基]氧基]-8_[(lR)· l52_ ,一甲基丙基]-1，6a，8，10a-四甲基-6-氧代-1，3，4,6,6a， 7,8,9，10，1〇&，1〇13，11，12，12&-十四氫-211-1，4&-(亞甲基氧基亞 甲基）篇-7-甲酸（0.71克）。 轉化成富馬酸鹽： 向一（lS，2R,3R，4aR，6aS，7R，8R，l〇aR，l〇bR，12aR)-3-乙醯 氧基-2_[[(2S)-2-胺基-2,3-二甲基丁基]氧基]•二 119480.doc -75- 200811194 曱基丙基]·ι，6^8，ι〇^四甲基_6_氧代 10&，1013，11，12，12&-十四氫_211_154心（亞甲基氧基亞甲基）藶_ 7-曱酸（0·71克）溶於二氯甲烷（50毫升）之溶液中加入富馬酸 (63.8宅、克）浴於]\/16〇11(50毫升）之溶液。在室溫下對該溶液 實施1小時攪拌，並隨後在真空中去除該溶劑。將殘餘物 溶解於CH3CN(6毫升）及Η2〇(7毫升）中。在一乾冰-丙酮浴 中對其實施冷凍後，對其實施低壓凍乾過夜，得到呈淺黃 色固體狀（lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-乙 醯氧基-2-[[(2S)-2-胺基-2,3-二甲基 丁基]氧基]-8_[(1R)-1，2-二甲基丙基]-1，6&，8，10&-四甲基-6-氧代-1，3,4,6,6旺，7,8,9，10, 1〇&，1013，11，12，12&-十四氫-211-1，4&-(亞甲基氧基亞甲基）篇-7-甲酸（富馬酸鹽）(0.75 克）。4 NMR (CD3OD，600MHz， ppm) δ 0.77 (d，J=7.2 Hz，3H)，0·80 (s，3H)，0·87 (s5 3H)， 0.87 (d，J=6.7 Hz，3H)，0·94 (d，J=6.9 Hz，3H)，0·95 (d， J=6.4 Hz，3H)，0·99 (d，J=6.9 Hz，3H)，1·09 (s，3H)，1.18 (s， 3H)，1·26_1·56 (m，5H)，1.65-1.80 (m，3H)，1.70 (s，3H)， 1.83-1.95 (m, 3H), 2.04 (s? 3H), 2.05-2.11 (m? 1H)5 2.18-2.27 (m，1H), 2·48 (dd，J=13.2, 7·2 Hz，1H)，2.64-2.70 (m， 1H)，3.09 (s，1H), 3·27 (d，J=8.7 Hz，1H)，3_39 (d，J=12 Hz， 1H)，3.50 (dd，J=12，1.8 Hz，1H)，3·53 (d，J=12 Hz，1H)， 3.55 (d，J=10 Hz，1H)，3.84 (d，J=10 Hz，1H)，3.84 (d，J=12 Hz，1H)，5.74 (d，J=2.6 Hz，1H)，5·76_5·82 (m，1H)，6.64 (s， 1H) 〇 質譜：（ESI) m/z = 644.5 (M+H)。 119480.doc -76- 200811194 實例149 (18,211，311，4&11，638,711，811，10&11，101>11，12&11)-3-(乙醯氧基）· 2-[(2S)-2-甲胺基-2,3-二甲基丁 氧基]-8-[(lR)-l，2·二曱基丙 基]-l，6a，8，10a_ 四甲基-6-氧代·1，3,4,6,6α，758,9，10，10α，101>，

11，12，12&-十四氫-211-1，4&-(亞甲基氧基亞甲基）篇-7-甲酸 步驟 1 : (18,211，311，4&11，6&8,711，811，10&11，1(^11，12&11)-3-乙醯 氧基-2-[[(2S)-2-[苄基（甲基）胺基]-2,3-二曱基丁基]氧基]-8-[(1R)-1,2- 一 曱基丙基]-l，6a，8，10a-四甲基-6-乳代·» 1，3,4,6,6&，7,8,9，10，10&，101>，11，12，12&-十四氫-211-1，4旺-(亞 甲基氧基亞曱基）荔-7-甲酸 向一（lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-乙醯 氧基 _2-[[(2S)-2-胺基-2,3-二甲基 丁基]氧基]-8-[(lR)_l，2-二 甲基丙基]-1，6&，8510&-四曱基-6-氧代-1，3,4,6,6冱，758,9，10, 10&，1013，11，12，123_十四氫-211-1，4壮-(亞曱基氧基亞曱基）篇-7-甲酸（2·00克，3.11毫莫耳）溶於MeOH(240毫升）之溶液中 加入HOAc(1.12毫升）、苯甲醛（14·5毫升）及NaCNBH3(3.6〇 克）。將混合物加熱至6〇°C保持3小時，並隨後在室溫下實 施5小時攪拌。加入另外的NaCNBH3(1.80克）及37%的存於 水中之甲駿（3 ·0毫升），並在室溫下對混合物實施攪拌過 夜。在真空中去除溶劑並將殘餘物溶解於EtOAc(400亳升） 119480.doc -77- 200811194 中。用飽和NaHC〇3溶液（3χΐ〇〇毫升）及水（150毫升）對溶液 實施洗滌。有機溶液經NajO4乾燥並藉由過濾去除乾燥 劑。在真空中去除溶劑及苯甲醛，在一小急驟層析柱上藉 由層析法（20克矽膠管柱；先用二氯曱烷再用50%的存於庚 烷中之EtOAc洗脫）對殘餘物實施純化，產生（1s，2R，3r， 4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-乙醯氧基-2-[[(2S)-2- [苄基（甲基）胺基]-2,3-二曱基丁基]氧基]·8_[(1ΙΙ)-ί，2_二甲 基丙基]-1，6&，8，10卜四甲基-6-氧代-1，3,4,6,6&，7,8,9，10，1〇、 1013，11，12，12&-十四氫-211-1，4&_(亞甲基氧基亞甲基）篇-7-甲 酸（1.49克）。 步驟2 : (lS，2R，3R，4aR56aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-乙醯 氧基-2-[[(2S)-2-甲胺基 _2,3_二甲基 丁基]氧基]-8-[(lR)-l，2-二曱基丙基]-1，6及，8，10已-四曱基_6-氧代-1，3,4,6,6&，7,8,9, 10，10&，101)，11，12512&-十四氫-211-1，4&-(亞甲基氧基亞甲 基）1-7-甲酸 向一（lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-乙醯 氧基_2-[[(2S)-2·[苄基（甲基)胺基]-2,3-二甲基丁基]氧基]-8-[(lR)-l，2-二甲基丙基]-l，6a，8，10a-四甲基-6-氧代-1，3,4,6,6&，7,8,9，1〇，1(^，1〇七，11，12，12&-十四氫-211_1，4及_(亞 甲基氧基亞甲基）1-7-甲酸（1.29克，1.73毫莫耳）溶於甲醇 (120毫升）之溶液中加入HOAc(5.4毫升）及20%濕Pd(OH)2/ C(1.82克）。藉由通過氮氣對該溶液實施5分鐘脫氣。用氫 氣對燒瓶實施淨化，並在氣室壓力下對反應物實施氫化。 約90.分鐘後，穿過一矽藻土薄層對混合物過濾。蒸發掉溶 119480.doc -78· 200811194 劑並藉由石夕膠層析法（10 g管柱；用一 2%至1〇0/〇的Me〇H於 二氯甲烷中之梯度洗脫）對殘餘物實施純化，得到一淺黃 色固體。將該固體溶解於二氯甲烷（3〇〇毫升）中並用飽和 NaHC〇3溶液（3x100毫升）及水（5〇毫升）洗滌之，並經 NaeCU對有機溶液實施乾燥。經過濾及濃縮後，分離出呈 淺黃色固體狀（lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-乙醯氧基-2-[[(2S)·2-甲胺基_2,3-二甲基丁基]氧基]-8- [(1R)-1，2-二曱基丙基]_l56a，8，1〇a·四曱基-6-氧代- 1，3,4,6,6这，7,8,9，10，10&，101^11，12，12&-十四氫-211-1，4&-(亞 曱基氧基亞甲基）荔-7-甲酸（1·22克）。 轉化成富馬酸鹽： 向一（lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，l〇aR，l〇bR，12aR)-3-乙醯 氧基-2-[[(2S)-2-甲胺基-2,3-二甲基丁基]氧基卜8_[(1R)el，2_ 二甲基丙基]_l，6a，8，10a-四甲基·6_氧代 10狂，101)，11，12，12&-十四氫_211-1，4卜（亞曱基氧基亞曱基）蕉-7-甲酸（1·14克）溶於甲醇（20毫升）及二氯甲烷（5毫升）之溶 液中加入富馬酸（100毫克）。在室溫下對該溶液實施工小時 攪拌’並隨後在真空中去除該溶劑。將殘餘物溶解於 CH3CN(7毫升）及H2〇(7毫升）中。在一乾冰_丙酮浴中對其 實施冷凍後’對其實施低壓凍乾過夜，得到呈白色固體狀 (lS,2R,3R’4aR，6aS，7R,8R,10aR，l〇bR，l2aR)-3-乙酿氧基-2_ [[(2S)·2·甲胺基_2,3-二甲基丁基]氧基二甲基 丙基 >1，6Μ，1(^ 四曱基 i 氧代十35456,6a，7,8,9，i〇，i〇a， 101>，11，12，12&-十四氫-211-1，43_(亞甲基氧基亞甲基）蕉_7-曱 119480.doc -79- 200811194 酸（富馬酸鹽）（1.24克）。1HNMR(CD3OD，600MHz，ppm)δ 0.77 (d，J=7.3 Hz，3H)，0·80 (s，3H)，0·87 (d，3H，局部模 糊），0.88 (s，3H)，0.95 (d，J=6_8 Hz，3H)，0·97 (d，J=6.9 3H)，1.00 (d，J=7.0 Hz，3H)，1·09 (s，3H)，1.21 (s，3H)， 1.27-l,56(m，5H)，1.70(s，3H)，1.65-1.80 (m，3H)，1.84-1·95 (m，3H)，2.05 (s，3H)，2.08-2.16 (m，1H)，2·18-2·28 (m，lH)，2.51(dd，J=13.2,7.1Hz，lH)，2.59(s，3H)，2.64-2·69 (m，1H)，3.09 (s5 1H)，3.32 (d，J=8.8 Hz，1H)，3·41 (d5 J=11.9 Hz, 1H)? 3.50 (dd5 J=12, 1.9 Hz5 1H)? 3.53 (d3 J=12 Hz，1H)，3.66 (d，J=10.9 Hz，1H)，3·83 (d，J=11.9 Hz，1H)， 3.86 (d，J=10.8 Hz，1H)，5.75 (d，J=2.6 Hz，1H)，5·76-5·82 (m，1H)及 6·65 (s，1H)。 質譜：（ESI) m/z = 657.6 (M+H)。 實例150 (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-(乙醯氧 基）-2-[(2S)-2-二甲胺基-2,3-二甲基丁 氧基]-8-[(lR)-l，2-二 甲基丙基]-1，6α，8，10α-四曱基-6-氧代-l，3,4,6,6a，7,8,9，10, 10&，10\11，12，12&-十四氫_211-1，4&-(亞甲基氧基亞甲基）窟-7-甲酸

向一（lS，2R，3R54aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR512aR)-3-乙醯 119480.doc -80- 200811194 氧基-2-[[(2S)-2-胺基-2,3-二甲基丁基]氧基]-8-[(lR)-l，2-二 甲基丙基]_l，6a，8，10a-四曱基-6-氧代-i，3,4,6,6a，7,8,9, l〇，l〇a，l〇b，ll，12，12a-十四氫-2H-l，4a_(亞曱基氧基亞甲 基）荔-7-甲酸（1.66克）溶於MeOH(10毫升）及CH3CN(50毫升） 之溶液中加入HOAc(0.64毫升）、HCHO(37%於H2〇中， 8.2毫升）及NaCNBH3(480毫克）。在室溫下對混合物實施15 小時攪拌。LC-MS表明反應已完成。然後，在真空中去除 溶劑，並將殘餘物溶解於二氯曱烷（300毫升）。用飽和 NaHC03溶液（3X 100毫升）及水（1〇〇毫升）對溶液實施洗條。 有機溶液經NazSCU乾燥。過濾及濃縮後，藉由層析法在一 小矽膠急驟層析柱上用溶於二氯曱烷之MeOH(2-10%)洗脫 對殘餘物實施純化，產生（lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，l〇aH， 10bR，12aR)_3-(乙醯氧基）-2-[(2S)-2_二甲胺基-2,3-二甲基 丁 氧基]-8-[(l R) -1，2 - 一 甲基丙基]-l56a，8,10a·四甲基-6-氧 代-1，3,4,6,6&，7,8,9，10，10&，1013，11，12，12&-十四氫-211-1，4狂- (亞曱基氧基亞甲基）荔-7-曱酸（1.59克）。 轉化成富馬酸鹽： 向一（18,211，311，4&11，6&8,711，811，10&11，10七11，12&11)-3_(乙醯 氧基）-2-[(2S)-2-二甲胺基_2,3-二甲基丁 氧基]冬[(1R)-1，2- 二甲基丙基]-1，6α，8，10α-四甲基氧代 el，3,4,6,6a，7,8,9，1〇, 10&，1013，11，12，123-十四氫-2沁1，4&_(亞甲基氧基亞甲基）篇_ 7-甲酸（1.43克，2·22毫莫耳）溶於Me〇H(1〇〇毫升）之溶液中 加入富馬酸（0.10克）。在室溫下對混合物實施1小時攪拌， 並隨後在真空中去除溶劑。將殘餘物溶解於CH3CN(7毫升） 119480.doc •81 · 200811194 及H2〇(10毫升）中。在一乾冰-丙酮浴中對其實施冷凍後， 對其實施低壓凍乾過夜，得到呈淺黃色固體狀 (lS、2R,3R,4aR，6aS?7R’8R,10aR510bR，12aR)-3-(乙酿氧基）_ 2-[(2S)-2-二曱胺基-2,3-二甲基丁 氧基]-8-[(1化)-1，2-二甲基 丙基]-l，6a，8，10a-四甲基-6-氧代-l，3,4,6,6a，7,8,9，10，10a， 10b，ll，12，12a-十四氫-2H-l，4a-(亞曱基氧基亞曱基）窟甲 酸(富馬酸鹽）（l·49克）。1HNMR(CD3OD5 600MHz，ppm)δ 0.77 (d，J-7·2 Hz，3H)，0.80 (s，3H)，0.87 (d，J=6.7 Hz， 3H)，0.89 (s，3H)，0.95 (d，J=6.8 Hz，3H)，1·〇3 (d，J=7.〇 Hz，3H)，1·04 (d，J=7.0 Hz，3H)，1.09 (s，3H)，1.24 (s，3H)， 1.26-1.56 (m? 5H), 1.70 (s5 3H)5 1.65-1.80 (m, 3H)5 1.84- 1.95 (m，3H)，2.06 (s，3H)，2.18-2.32 (m，2H)，2.50 (dd， J=13.2，7·2 Hz，1H)，2.63-2.69 (m，1H)，2.84 (s，6H)，3.09 (s，1H)，3·29-3·32 (d, 1H，局部模糊），3.42 (d，J=lL9Hz 1H)，3.50 (dd，J=12，1.9 Hz, 1H)，3.53 (d，J=12 Hz，1H) 3·74 (d，J=11.6 Hz，1H)，3.76 (d，J=11.6 Hz，1H)，3.95 (d J=11.7 Hz，1H)，5.74 (d，J=2.6 Hz，1H)，5·75-5·81 (m，1H) 及 6.65 (s5 1H)。 質譜：（ESI) m/z = 672.6 (M+H)。 實例 151_153 以下化合物係使用類似於前文實例中所闡述之彼等的方 法製備： 119480.doc -82· 200811194

151

R1 = H

R11 = H (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-乙醯氧基-2-[[(2R)-2-胺基-2,3-二曱基丁基]氧基]-8-[(lR>-l，2-二甲基丙基]-1，6&，8，1(^-四曱基-6-氧代-1，3,4,6,6&，7,8,9，10，1(^，1013，11，12，12&-十四氫_2H-l，4a-(亞甲基氧基亞曱基)荔-7-曱酸(富馬酸鹽） !H NMR (CD3OD, 600MHz, ppm) δ 0.77 (d? J=7.3 Hz? 3H)? 0.80 (s5 3H)? 0.87 (d, J=6.6 Hz, 3H)，0·87 (s5 3H)，0.95 (d，J=6.8 Hz, 3H)，0.96 (d，J=7.0 Hz，3H)，1.00 (d， J=7.0 Hz，3H)，1.09 (s，3H)，1·19 (s，3H)，1.26-1.56 (m，5H)，1.70 (s，3H)，1.65-1.80 (m，3H)，1.83-1.95 (m，3H)，1.98-2.07 (m，1H)，2.04 (s，3H)，2·18-2·27 (m，1H)，2.48 (dd，J=13.2, 7·1 Hz，1H)，2.64-2.70 (m，1H)，3.09 (s5 1H)，3.28 (d，1H，局部模糊)， 3.39 (d，J=12 Hz，1H)，3.50 (dd，J= 12, 2·0 Hz，1H)，3.53 (d，J=12 Hz，1H)，3·69 (s5 2H)，3.85 (d，J=12 Hz，1H)，5.75 (d，J=2.6 Hz，1H)，5·79-5·85 (m，1H)，6·64 (s，1H)· 質譜··（ESI) m/z = 644.5 (M+H)· 152 R] = Me (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-乙醯氧基-2- • Rn = H [[(2R)-2-甲胺基-2,3-二曱基丁基]氧基]-8_[(1R)-1，2-二曱基丙 基]-l，6a，8，10a-四曱基-6-氧代-l，3,4,6,6a，7,8,9，10，10a，10b，ll， 12，12a-十四氫-2H-l，4a-(亞曱基氧基亞曱基)篇-7-曱酸（富馬酸 鹽） 119480.doc 83- 200811194 4 NMR (CD3OD，500MHz，ppm) δ 0·79 (d，J=7.3 Hz，3H)，0·82 (s，3H)，0·89 (d， 3H, partially obscured)，0.90 (s，3H)，0.97 (d，J=6.8 Hz，3H)，1.01 (d，J=6.9 Hz，3H)， 1.03 (d5 J=6.8 Hz，3H)，1，12 (s，3H)，1.17 (s，3H)，1.28-1.59 (m，5H)，1.73 (s，3H)， 1.67-1.83 (m，3H)，1，85-1·98 (m，3H)，2.07 (s，3H)，2.18-2.29 (m，2H)，2.52 (dd， J=13.2, 7·1 Hz，1H)，2.62 (s，3H)，2.66-2.72 (m，1H)，3.11 (s，1H)，3.34 (d，J=8,9 Hz， 1H)，3·42 (d5 J=11.9 Hz，1H)，3.52 (dd，11.5, 1.8 Hz，1H)，3.57 (d5 J=11.4 Hz, . 1H)，3.78 (s，2H)，3·85 (d，J=11.9 Hz，1H)，5·80 (d，J=2.5 Hz，1H)，5.81-5.89 (m，1H) and 6.67 (s, 1H). 質譜：（ESI)m/z = 658.7 (M+H). 153 RJ = Me Rii = Me (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-乙醯氧基-2-[[(2R)-2-二曱胺基-2,3-二曱基丁基]氧基]-8-[(lR)-l，2-二甲基 丙基]-l，6a，8，10a-四甲基-6-氧代-l53,456,6a，7,8,9，10，10a，10b， ll，12，12a-十四氫-2H-l，4a-(亞甲基氧基亞甲基)篇-7-甲酸（富 馬酸鹽） lU NMR (CD3OD? 600MHz, ppm) δ 0.77 (d, J=7.2 Hz, 3H)5 0.80 (s? 3H), 0.87 (d, J=6.6 Hz，3H)，0.90 (s，3H)，0·95 (d，J=6.8 Hz，3H)，1.04 (d，J=6.7 Hz，3H)，1.06 (d， J=6.8 Hz，3H)，1.09 (s，3H)，1,14 (s，3H)，1·27-1·56 (m，5H)，1.70 (s，3H)，1·65-1·80 (m，3H)，1.84-1.95 (m，3H)，2·06 (s5 3H)，2.19-2.26 (m，1H)，2.36-2.44 (m，1H)，2.49 (dd，J=13.2, 7·1 Hz, 1H)，2.63-2.69 (m5 1H)，2.80 (s，6H)，3.09 (s，1H)，3.27 (d，J=8.9 Hz，1H)，3.42 (d，J=11·8 Hz，1H)，3·46 (dd，J=12, 1·8 Hz，1H)，3.53 (d，J=12 Hz，1H)， 3.70 (d，J=11.9 Hz，1H)，3.77 (d，J=11.6 Hz，1H)，3.90 (d，J=11.7 Hz，1H)，5.74 (d， J=2.6 Hz, 1H)，5.77-5.83 (m，1H)及6·65 (s，1H)· 質譜：（ESI) m/z = 672.6 (M+H)·_ 實例 154-171 實例15心171 (上文定義）可按照與上文所述製程相似之製 程利用獲得所需取代基之必需中間體進行製備。 119480.doc -84-

Claims (1)

1. 200811194 十、申請專利範圍： 1· 一種式IV-1A化合物：

   或其醫藥上可接受之鹽其中： R6選自由氫、cvcv烷基及經^-心·烷氧基取代之cvcv 烧基組成之群； R7選自由氫、CkCV烷基及C3-C8-環烷基組成之群； R8選自由CVCV烷基及經CVCV烷氧基取代之CVCV烷基 組成之群；且 R選自由氫及Ci-Cr烧基組成之群。 2·如請求項！之化合物，其中R6選自由氫、cH3、ch2CH3、 CH2CH2〇CH3、CH2CH2CH2OCH3ACH2CH2CH2CH3 組成 之群。 3·如請求項1之化合物，其中R7選自由氫、ch3、ch2CH3 及環丁基組成之群。 4·如請求項i之化合物，其中R8選自由ch3、CH2CH3、 CH2CH2CH3、CH(CH3)2、CH2CH(CH3)2、ch2ch2och3、 CH2CH2〇CH2CH3、CH2CH2CH2CH3 及 c(ch3)3 組成之群。 5·如請求項1之化合物，其中r9選自由氫及CH3組成之群。 6·如請求項1之化合物，其選自由下列化合物組成之群： (1 S,2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-(乙醯氧 119480.doc 200811194 基）-2-[(2S)-2-胺基-2,3-二曱基丁 氧基]二曱 基丙基]·1，6α，8，10&-四甲基-6-氧代-l，3,4,6,6a，7,8,9，10, 10牡，101)，11，12，12&-十四氫-211-1，4&_(亞甲基氧基亞甲基 (methanooxy methano))篇-7-甲酸， (1 S，2R,3R，4aR，6aS，7R,8R, 1 OaR，1 ObR，12aR)-3-(乙醯氧 基）-2-[(28)_2-曱胺基-2,3-二甲基丁氧基]-8-[(1尺)-1，2-二 甲基丙基]-l，6a，8，10a-四甲基-6-氧代-l，3,4,6,6a，7,8,9，l〇, 10a，10b，ll，12，12a-十四氫-2H-l，4a-(亞甲基氧基亞甲 基）荔-7-曱酸， (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-(乙醯氧 基）-2-[(2S)-2-二甲胺基-2,3-二甲基丁 氧基]-8_[(ir)_i，2_ 二甲基丙基]-1，6&，8，10&-四甲基-6-氧代-1，3,4,6,6&，7, 8,9，10，10a，10b，ll，12，12a_十四氫-2H-l，4a-(亞甲基氧基亞 甲基）篇-7-甲酸， (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-乙醯氧基_ 2-[[(211)-2-胺基-2,3_二曱基丁基]氧基]-8-[(1汉)-1，2-二曱 基丙基]-1，6a，8,10a_ 四甲基-6-氧代-1，3，4,6,6a，7,8,9,10, 10a，10b，ll，l2，12a-十四氫_2H-l，4a-(亞甲基氧基亞曱 基）蕉-7-曱酸， (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-乙醯氧基-2_[[(2R)-2-甲胺基-2,3·二曱基 丁 基]氧基]-8-[(lR)_l，2-二 曱基丙基]-l，6a，8，10a_四甲基-6-氧代-l，3,4,6,6a，7,8,9，10, 10a，10b，ll，12，12a-十四氫-2H-l，4a-(亞甲基氧基亞甲 基)為-7 -甲酸，及 119480.doc -2- 200811194 (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR，12aR)-3-乙醯氧基-2-[[(2R)-2-二甲胺基-2,3·二曱基 丁基]氧基]·8·[(1Ι〇_1，2-二甲基丙基]-l，6a，8，10a-四甲基-6-氧代-l，3,4,6,6a，7,8,9, 10，10找，1013，11，12，12&-十四氫-211-1，4&-(亞甲基氧基亞甲 基）篇-7-甲酸， 及其醫藥上可接受之鹽。 7.如請求項6之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其係

   (lS，2R，3R，4aR，6aS，7R，8R，10aR，10bR512aR)-3-(乙醯氣 基）-2-[(28)-2-二甲胺基-2,3_二甲基丁氧基卜8-[(1尺)-1，2- 二甲基丙基]-l，6a，8，10a-四曱基-6-氧代 10’10&，1013511，12，12及-十四氫-211-1，4&_(亞曱基氧基亞甲 基）為-7-甲酸。 8. —種醫藥組合物，其包含如請求項丨之化合物及醫藥上 可接受之載劑、佐劑或媒劑。 9·如請求項8之醫藥組合物，其進一步包含選自由下列組 成之群的第二治療藥劑：嗤、多烯、嗓呤或㈣核皆酸 抑制劑、紐莫康定(pneum〇candin)或棘球白素衍生物、 蛋白質延伸因子抑制劑及免疫調節劑。 -種醫藥組合物’其係由如請求項i之化合物與醫藥」 可接受之载劑、佐劑或媒劑合併而製得。 種之化合物在製造用於治療哺乳動 染之藥物之用途。 @〜 12. -種用於治療哺乳動物真菌感染之方法， 該哺乳動物投予有效量之請求項1之化合物 該方法包括對 119480.doc 200811194 如明求項12之方法，其進一步包括投予一選自由下列組 成之群的第二治療藥劑··唾、多烯K或㈣核㈣ 抑制劑、紐莫康定或棘球白素衍生物、蛋白質延伸因子 抑制劑及免疫調節劑。 14. 一種式IV-1化合物 〇 °^0H=

   其中 R6選自由氫、cvcv烷基及經Ci_C3_烷氧基取代之Ci_C6_ 烷基組成之群； R7係選自由氫、q-cv烷基、及ever環烷基組成之群； R選自由CVCV烷基及cvc”烷氧基取代之Ci，c6_烷基 組成之群；且 R選自由氫及Ci-C：6-烧基組成之群； • 瓜為0、1或2，且R13為CVC4烧基。 15·如請求項14之化合物，其具有式IV-1，其中係_ci^， m為 0，R8 係·CH3，且 R9 係 _CH(CH3)2。 • 16·如請求項15之化合物，其中R6係H或-CH3且R7係H或 , -CH3 〇 17·如請求項W之化合物，其中該化合物具有式IV_la: 119480.doc -4- 200811194

   其中R6係Η或-cn3，且R7係Η或-CH3。 0 18·如請求項Π之化合物，其中R6係Η或-CH3，且R7係_CH3。 19·如請求項18之化合物，其中R6係-CH3，且R7係-CH3。 2〇·如請求項16之化合物，其中該化合物具有式IV-lb :

   其中R6係Η或·CH3，且R7係Η或-CH3。 21·如請求項2〇之化合物，其中R6係Η或·CH3，且R7係-CH3。 22·如請求項21之化合物，其中以係/出，且化7係_CH3。

   119480.doc I 200811194 七、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明: 八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：

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