TW200412977A - Methods of reducing incidence of stillborn pigs by using progesterone receptor antagonist - Google Patents

Description

200412977 (1) 玖、發明說明 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於一種用來催生懷孕母豬同步開始分娩及 減少死產小豬之方法。更特別者，本發明係關於一種使用 黃體酮受體拮抗劑，例如RU · 3 8 5 4 8 6，使懷孕母豬在可預 測時數內開始生產之方法。 【先前技術】 生產仔豬作業之利潤爲每年每隻母豬生產頭數之直接 函數。減少死亡率，特別是在生產前後及斷奶前，可改善 生產效率與利潤率。新生仔豬易染低體溫症，低血糖症， 及被母豬壓到（1)。此外，產出至少一死產豬仔的母豬本 身具有高於沒有死產的母豬2 4 %之死亡率（2 )。 催生可增加監督更多豬仔之生產，從而減少出生死亡 豬仔之（死產）數目，降低母豬死亡的風險，且有助於有 一大窩小豬之母豬與小豬較少者之交叉養育，以及減少於 一起管理之豬群之斷奶時間與哺乳期之差異（3)。在產期 催生母豬時小豬之存活率與精力最高（1)5但是如果在交 配後第11 3天之前或預產日2到3天後就會有所減損（3) 〇 母豬催生計劃之目的係用來使大多數處理動物在有生 產倉物時之時間內開始分娩。已有數種藥學方法用來催生 母豬。在美國，最普遍是用肌肉內注射合成前列腺素f 2-α (P G F2 〇; dinoprost trometh amine, Lutalyse®，或 (2) (2)200412977

Estrumate)。在美國，Lutalyse®爲目前唯一 FDA核準用 於母豬催生之物質。第一胎小豬之生出可在催產後2到 44小時之間發生（1，3 )。有較窄之分娩開始時間窗口使人 們可監督更多生產且可能改善小豬之存活率。 有數位硏究人員已硏究過使用PGF2a於18到24小 時後接著施以不同量之催產劑來嚐試使其同步分娩（1，3 )。 不過，劑量大於20到3 0IU之催產劑可能誘發某些母豬子 宮痙攣。此轉而會因爲小豬生出且能自行呼吸之前臍帶破 裂而增加死產小豬發生率。基於此一理由，一般是不建議 催產劑之給藥除非至少有一小豬已生出且在給藥後一直有 監視分娩的進展。 因爲黃體酮係市面上不能去取得者且黃體酮在美國目 前不允許用在任何動物物種，所以慣例上不用黃體酮來延 後分娩之開始。不過，美國專利第4,870,066號有述及使 用黃體酮與雌激素來使母豬之分娩開始延後及同步。 β-受體拮抗劑「痩肉精」（clenbuterol) (150微克） 給待產母豬（在生產頭一隻小豬之前）服用，可對子宮發揮 收縮抑制作用（tocolytic )且延後分娩長達15小時。瘦 肉精爲子宮鬆弛劑且可能有益於減輕難產（3 )。有一分娩 催生方案爲在早上9點服用10毫克PGF2a以啓始分娩， 及在下午4點給沒有生出任何小豬之母豬施用1 5 0微克痩 肉精。於隔日早晨，再施以1 0 IU催產素與1 .5毫克痩肉 精以再起始催生沒有小豬之母豬（])。 愛波司坦（Epostane)爲3β-羥基類固醇脫氫酶之競爭 (3) (3)200412977 性抑制劑。愛波司坦據報導對母豬（3)和綿羊（4)可降低黃 體酮之周圍水平且可誘導分娩之開始。從口服（5或1 0毫 克/千克體重）到頭隻小豬出生之間隔爲約34小時（3)而到 頭隻小羊出生之間爲約3 3小時。美國專利4，8 7 0，0 6 8述 及愛波司坦對於母豬催生之用途。 已有報導到使用兩種β-拮抗劑，心得安（propranolol) 與卡拉羅carazolol於母豬之催生者。卡拉羅似乎對豬有 較好效力，但是其原因則不淸楚（5 )。卡拉羅 （c a r a ζ ο 1 ο 1) 爲一種非選擇性β-拮抗劑，對βΐ與β2受體略有較強親 和力（6)。卡拉羅之薄膜穩定潛力比心得安較低1 3倍，因 此應該不會發生心臟壓制（cardiosuppressive)效應 （6)。 卡拉羅缺乏內在的擬交感神經活性（6)。

Alpha-2腎上腺素能受體也可調節子宮收縮性。（X-2 激動劑塞拉畊 （xylazine)會造成在豬乏情期中子宮肌層 收縮力的劑量相關性增加，而 α-2拮抗劑艾杜DM ( idazoxan)和育亨賓（yohimbine)可阻斷這種效果（7)。自 D. saxatilis (8)的根部所分離出的類三®糖苷（triterpenoid glycoside)達沙辛 （dalsaxin)，可增加子宮收縮（8)。此 回應會因心得安 （propanolol)而增加，且會被阿替美唑 (atipamezole)，一種子宮痙攣原，所實質地減低（8)。有 推測達沙辛 （dalsaxin) 係經由刺激後-結合化〇5卜 j u n c t i ο n a 1) α · 2受體以增強子宮收縮，大槪是經由抑制血 漿膜之腺苷酸環化酶（a d e n ya t e c yc 1 a s e)及隨後減少細胞內 cAMP而促成者（8)。美國專利第5,3 69，128號述及一種由 (4) 200412977 給用一有效劑量之P G F α-2接著施用一有效劑量的腎上腺 素能激動劑對母豬催生及促使同步生產之方法。

抗黃體酮劑RU-3 8，4 8 6據報導可極爲有效地強化子宮 頸擴張，同時減少血液中的黃體酮濃度。經報導在懷孕後 第111日及112日給母豬服用4毫克/公斤體重的RU-3 8,4 8 6可有效催產（9)。不過，並不淸楚RU-3 8,4 6 8是否 會減少死產數目。也有報導”子宮頸擴張劑”普瓜美哄 (proquamezine)，一種具平滑肌鬆弛性質之啡噻（口井 )(phenothiazine)衍生物，可經靜脈內給豬施用（10)。也有 述及含二苯丙哌Π定（fenpiprane)和二苯丙醯_ D定 (fenpipramide)之製劑（10)。

美國專利第 4,62 6,5 3 1號描述使用抗助孕素 (antigestagen)(例如，抗黃體酮（antiprogesterone)如 RU-3 8，4 86)與前列腺素（prostaglandin)對於人類人工流產之用 途。歐洲專利第 446 1 24 號述及抗擬助孕素藥 (antiprogestomimetic)之製備及對於家畜分娩同步化之用 途。不過，並不淸楚抗孕酮藥（antiprogestin)之給藥是否 可減少豬仔死產。 W0 0054 766 A1槪括地述及用來促進動物之生產產量 之藥劑與方法。不過，W0 0054766 A1沒有揭示出RU-3 8，48 6得給用可以減少懷孕母豬之死產。 【發明內容】 本發明提供一種在可預測時數內催生懷孕養豬之方法 -7- (5) 200412977 。本方法包括用黃體酮受體拮抗劑給懷孕母豬服用。本方 法所用之一較佳黃體酮受體拮抗劑爲化合物RU 3 8 4 8 6。 黃體酮受體拮抗劑之給藥方式可有兩或更多次給用或 可單次給藥。在一較佳具體實例中，黃體酮受體拮抗劑係 用一有效量單次給懷孕母豬服用以在約2 0到2 5小時以後 催生及減少死產小豬的數目。

給藥可經由任何合適途徑包括肌肉內，陰道內或口服 途徑。 【實施方式】 發明詳細說明 本發明係提供一種經由給用黃體酮受體拮抗劑在可預 測時數內催生懷孕養豬之方法。

根據本發明，黃體酮受體拮抗劑之給藥可有效啓動內 分泌，生理學，及機械變化致使於可預測之時間內起始母 豬生產。根據本發明，生產開始之可預測時間爲約1 0小 時到約2 4小時，且較佳爲約1 2小時到約2 2小時。不受 限於任何特定理論之下，經推測由黃體酮受體拮抗劑所誘 導之變化包括黃體酮受體在卵巢及子宮之阻斷，血漿中黃 體酮濃度之初始增加，接著爲隨著卵巢上黃體退化時之快 速減少’與血液中黃體酮濃度減少同步之子宮收縮之逐漸 減少’血液中之鬆弛激素濃度之增加，以及子宮頸之同步 擴張。 根據本發明，黃體酮受體拮抗劑給懷孕母豬服用可以 -8- (6) (6)200412977 於可預測時數內催生其生產。此外，黃體酮受體拮抗劑之 給藥可減少生出死亡小豬之數目。因此，本方法提供分娩 時便利人類之監督與協助之機會，且對改善生產豬仔作業 之產量與利潤具有重要性。 在此所用”黃體酮受體拮抗劑”係指一種化合物或藥 劑，其可抑制黃體酮受體之活性。可用於本發明方法中的 黃體酮受體拮抗劑包括，但不限定於，11-(4-二甲胺基-苯基 ）-17-羥基 -13-甲基 -17-丙 -1 ·炔基 -1，2,6,7,8，11512，13，14，15，16，17-十二氫-環戊烷并[3]菲-3-酮，可於 ’’RU 3 8 4 8 6 ”，’’RU4 8 6 "或 ”CP161，2 5 8 ” 或美服 培酮（” Mifepristone”）名稱下取得； 1 1 - (4 -乙醯基·苯 基）-17-羥基-13-甲基-17-(1，1，2,2,2-五氟-乙基）-l52,6,7,8，ll512，13，14，15516，17-十二氫-環戊烷并[a]菲-3-酮，可於"ZK23 02 1 1 ”名稱下取得；11-(4-二甲胺基-苯基）_ 17- 羥 基 -17-(3- 羥 基-丙 基 ）-13- 甲 基 -152,6,758，11，12,13，14515516517-十二氫-環戊烷并[&]菲-3-酮，其名稱可爲"ZK9 8299’，，也叫奧納司酮 （ ，’onapristone，，） ；，，ZK98774 ” ；，"ZK 1 3 73 1 6，，； 11-(4-乙 醯基-苯基）-17-羥基-13-甲基-17-丙·卜炔基_ 1，2,6,758511，12，13，14，15，16，17-十二氫-環戊烷并1>]菲-3- 酮，可在’’ZK 1 1 2 993 ”名稱下取得；4-(17-甲氧基-17-甲 氧基甲基-13-甲基-3-酮基-2,3,6 5 7,8，11，12，13, 14，15，16，17-十二氫-1}1-環戊烷并[3]菲-1卜基）-苯甲醛肟， 可在” J 8 6 7 ” 名稱下取得；1 3 -甲基-7 5 8，9 51 1，1 2，〗3 51 4，1 5，1 6， (7) 200412977 17-十氫-6H-環戊烷并[a]菲-3，17-二醇，可在”195 6 ”名稱下 取得；3-FUoi*o- 5 -( 252,4 -tri 甲基-1，2-二氫-奎琳-6-基）-苯 腈，可在，，LG- 1 2 0 8 3 0 ”名稱下取得；1，2·二氫-2,2(4-三甲 基-6-苯基奎琳，可在"LGOO 1 44 7 ”名稱下取得； ’’ L G 1 2 0 7 5 3，，；，，0 R G 3 3 6 2 8，，； 1 1- (4 -二甲胺基-苯基）-1 7 -羥

基-17-(3 -羥基-丙基）-13 -甲基-1，256,758511512，13，14，15，16, 17·十二氫·環戊烷并[a]菲-3-酮，可在’’ΖΚ-9 8 2 99’’或 "onapristone”名稱下取得；禮樂酮（lilopristone) (11-(4-DJ甲基胺基-苯基）-17-羥基-17-(3-羥基-丙烯基）-13-甲基-l，25657585ll512513514515516517-十二氫-環戊烷并[a]菲-3-酮），及其功能可作爲黃體酮受體拮抗劑之這些化合物的 鹽和衍生物或類似物，。 本發明一較佳之黃體酮受體拮抗劑爲RU3 848 6。二或 更多種黃體酮受體拮抗劑之組合也可用於本發明之中。

根據本發明，黃體酮受體拮抗劑係給至少交配；!丨2天 後之懷孕母豬施用。黃體酮受體拮抗劑之給藥方式可藉由 二或更多次之給藥或一次給藥之方式給用。例如，黃體酮 受體拮抗劑可兩次給藥，每劑約〇 · 〇 〇 1到約1 5毫克/公斤 體重，較佳者每劑約1到6毫克/公斤體重，更佳每劑約4 毫克/公斤體重。第一次劑量可在生出頭一胎小豬之預期 時間前的3 0 - 4 0小時投入，隨後之第二次劑量是在生出頭 一胎小豬之預期時間前的9 -1 5小時投入。 在一較佳具體實例中，黃體酮受體拮抗劑係以一次給 4方式fe藥。此一次給樂係在頭一隻小緒出生前約2 0到 -10- (8) 200412977 25小時前進行。在一次給藥中拮抗劑用量通常爲約0·00Ι 毫克到約1 5毫克/公斤體重範圍內。較佳地，在一次給藥 中的拮抗劑用量約0.001毫克到約15毫克/公斤體重，或 更佳者，約8毫克/公斤體重。

黃體酮受體拮抗劑可與藥學上可接受之載劑一起給藥 。藥學上可接受之載劑包括溶劑，分散介質，等張劑及類 似物。載劑可爲液體，半固體，例如糊狀物，或固體載劑 。載劑之例子包括油，水，食鹽水溶液，糖，凝膠，脂質 ，微脂粒，樹脂，多孔型基質，黏合劑，塡充劑，塗佈劑 ’防腐劑，及類似物，或彼等之組合。本發明方法所用載 劑包括之材料爲可使其中所含或混合之黃體酮受體拮抗劑 緩慢持久釋放者。

黃體酮受體之給用可透過多種不同途徑達成，例如經 由肌肉內，靜脈內，皮下，透皮，陰道內，或口腔等途徑 。較佳給藥途徑爲肌肉內，陰道內或口服。給藥可用適合 於達成有效率地傳送受體拮抗劑之方式完成，包括注射， 植入，陰道內置入持久釋放裝置例如凝膠，乳膏，糊狀物 ’矽酮製成之任何固體或半固體基質裝置（例如Cue-Mate或PRID) ’人造或合成材料，或等效物，其中包含 著任何黃體酮受體拮抗劑。 下面的實施例係示範說明，但決非限制，本發明。 實施例1 目的 -11 - (9) (9)200412977 本硏究目的爲測定黃體酮受體拮抗劑CPI 61，2 5 8之給 藥對黃體酮濃度，於第Π 2日第一次試驗品給藥到生出第 一胎豬仔的時間，於第二次試驗品給藥到生出第一胎豬仔 的時間，以及出生時小豬之狀況（活胎，死產，木乃伊） 寺之影響。 實驗動物 a. 品種/品系：雜交第一產母豬。 b· 初始體重（到達時）：約18 0-25 0公斤。 c. 姓別：雌，懷孕約104天。 c· 原產地：Scott Wilson，Prairie View Farms， Wisconsin。 d · 識別：耳牌。 管理 a · 飼鶴法：分娩前：約3公斤/頭/日，早上一半 ，下午一半。產後：任意（每天減量約10-20%)。 b · 供水方法··奶頭給水器任意給水。 c .住所：建築物6 0 8 W之生產條板箱，內部尺寸爲 19.5英吋x6英尺11英吋。 d·環境的控制：恆溫控制通風。 e •食物：每餐爲1 7 %蛋白質玉米+大豆粉飼料，P L 1 7 -12- (10) (10)200412977 試驗材料 CP161.258，Sigma Chemical Co，25 毫克 / 耄升無囷水 中，批號 110K1203 及 30K1542，期限 06/2002。 設計 說明 動物頭數 T1 無藥物控制 10 丁 2 第112日與113日，4毫克/公斤，口腔給藥 10 程序： 動物。購買2 0頭懷孕雜種母豬，且在懷孕約第 102-107天時，送到Terre Haute。將此等動物置於建築物 6 0 8 W之生產用條板箱中。編號爲T2之動物平均爲195 公斤體重。將動物（母豬及小豬）在產後4 8小時或在交 配後第1 1 6日安樂死。此硏究中沒有斷奶前死亡率之估計 數。 飮食。從頭到尾用同樣飼料餵食，p L 1 7，含約1 7 % 粗蛋白質。不過’將生產前餵食數量限制爲約3公斤/頭/ 曰。產後則任意餵食。 動物之隨機分組。根據預產日排列動物且隨機分成 各兩動物的處理組內。 試驗品給藥。編號爲T!之動物不給藥試驗品或稀 釋劑。處理組T2,試驗品經用5〇%丙二醇與水稀釋到濃 (11) 200412977 度爲25毫克/毫升，且冷凍儲存（2-8 °C )。在早上血液 樣本收集後，將試驗品經口給藥。用量約3 0毫升以傳送 4毫克/公斤體重之劑量。給完試驗品後讓動物服用約3 0 毫升的水。

血液樣品。在第1 1 2日與Π 3日早上7 : 3 0試驗品給 藥前，自所有動物（包括T1與T2 )收集血液樣品。此外 ，在第1 1 2日與1 1 3日下午1 : 3 0開始收集PM血液樣品 。隨後幾天（大於或等於114日）早上7: 30與下午1: 3 0收集額外之血液樣品。最後一次血液樣品是在生產完 全結束後收集。所有血液樣品（7毫升）是用鈉肝磷脂血 液貯存器收集。所有血液樣品均在收集後2小時內冷凍， 離心機分離，且分離出血漿。每一樣品取一液份送到康乃 爾獸醫診斷實驗室（Cornell Veterinary Diagnostic Lab) 用RIA做黃體酮分析。

早產/晚產。在第1 1 2日試驗品給藥前開始生產之動 物（例如至少生出一頭小豬）由該硏究排除且不再使用試 驗品。在第1 1 2日接受試驗品後開始生產的動物，則在第 1 1 3日給用試驗品前不配給任何試驗品。如果動物在第 1 1 4日前開始生產，則最後血液樣品係在生產結束後收集 。到第1 1 6日早上沒有生產的動物其數値設定爲96小時 數據/分析。此硏究中所測量之反應變數爲：懷胎後 第]1 2日之第一次投藥到生出頭一胎小豬之時數，懷胎後 第Π 3日之第二次投藥到生出頭一胎小豬之時數，出生時 -14- (12) 200412977 活的（生下來是活的）小豬之數目，死產（外觀正常之小 豬但出生時已死），以及木乃伊（較同窩出生者爲小，生 出時已腐敗）。諸變數係用混合模式分析法（混合SAS 程序）分析’其區塊爲隨機效果及處理爲固定效果。用重 覆度量混合模式分析法分析黃體酮濃度，其區塊爲隨機效 果且處理爲固定效果。

結果 在給用試驗品後沒有觀察到任何不良行爲反應。有一 τ 1之動物（1 7 8 )到第1 1 6日沒有生產（沒有小豬數據） ，且有一 T2之動物（1 8 3 )在給用試驗品前生產（已由所 有分析中排除）。

表2列出第1 1 2日餵藥到開始生產的時間，第1 1 3曰 餵藥到開始生產的時間，以及出生小豬之狀態。在懷孕 1 12日與1 13日給用黃體酮受體拮抗劑CP161，2 5 8，劑量 爲4毫克/公斤體重可將由第一次試驗品給藥到開始分娩 之時間減少一半。C P 1 6 1，2 5 8之給藥也減少動物之間在生 出頭一胎小豬的時間上之差異。 約40%(4/10)無藥物對照組係在第114日生產（圖1 )，而其他則直到約第1 1 6日才生產。相反地，處理組 T2之動物有45°/。（4/9)在第一次處理後的隔天即生產。所 有剩餘的T2動物則在第1 1 4日生產（圖1 )。 用CP161，258處理之出生死亡小豬（死產）數目（平 均=0.1小豬/窩）低於無藥物對照組者（平均=1 .0小豬/窩 -15 - (13) 200412977 ;表 1 )。 表3與表4列出血漿中黃體酮之濃度。以CP161，258 給藥之動物，在分娩前約2 4小時前，其血漿中黃體酮之 濃度高於無藥物對照組者。這種反應與黃體酮受體拮抗劑 阻斷由卵巢黃體之黃體酮釋放之負面回饋調節之假設一致

結論 CP161，25 8誘導更多同步分娩開始 （Μ%在1天內， 100%在2天內）且顯著減少死產小豬數目（約〇·9頭/窝） 。沒有觀察到不良行爲反應。分娩前24小時期間內，黃 體酮濃度在以CP 161，2 5 8處理的動物內之値高於無藥物對 照組之動物。

這些數據顯示經口給用黃體酮受體拮抗劑， CP161，2 5 8，可以安全又有效的使分娩同步，降低死產， 及可潛在地顯著降低斷奶前之死亡率。斷奶前之死亡率在 本硏究中沒有測量，因爲動物在分娩後3夭都安樂死之故 -16- (14) 200412977 表1 · 處理之生產數據。數據點數目係列出在每一平均 數旁邊的括號之內（SD =標準偏差；CL = 9 5 %信賴限値） T1-無藥物對照 T2-4毫克/公斤體 重 CP161,258 第 1 12+113 日 平均標準誤差 整體處理效果 時數，第】12 曰第一次投藥 到頭胎出生：tSD 76士26(10) 36土】5(9) 7.0 Ρ = .0009 下/上CL 62/91 21/52 時數，第1]3 曰第二次投藥 到頭胎出生:tSD 52±26(Ji2L·^ 36士]5(9) 7.0 Ρ = . 12 下/上 CL 38/67___ 21/52 小豬數據： 活胎 9.8 8.9(9) 1 .1 Ρ = .58 死產 木乃伊 1 〇(9) 〇·1*(9) 0.2 Ρ = .02 i · U-— 0.2 (9J__一 0(9) 0.1 Ρ = .21

-17- (15) 200412977 表 2.每一動物之反應變數。 動物 處理 第一次處理到 生出活小豬 出生時死掉 木乃伊胎 第一胎時數 數目 (死產） 185 T1 47.0 8 1 0 175 T1 47.4 12 0 0 180 T1 48.0 4 2 0 176 T1 54.4 10 2 0 181 T1 72.0 13 1 1 189 T1 89.3 8 2 0 184 T1 94.0 15 1 0 178 T1 96.0 193 T1 96.0 12 0 0 190 T1 120.0 6 0 1 187 T2 17.3 14 0 0 179 T2 18.0 7 1 0 191 T2 23.0 12 0 0 188 T2 27.3 12 0 0 192 丁 2 46.0 5 0 0 186 T2 47.0 9 0 0 177 T2 47.4 9 0 0 182 丁 2 48.0 7 0 0 174 T2 54.4 5 0 0

-18- (16) 200412977 表3 · 依處理及時間之血漿中黃體酮之平均濃度（毫微 克/毫升）。每一平均値所用値係在括號中。差値之SE ( 標準誤差）係在〇. 9到1 .3之間。 取樣時間 T1=無藥物控制 T2 = CP 1 6 1 ?25 8 -4 13.3(7) 14.2(2) -3 1 3 ‘(Κ9) 14.5(5) -2 1 1 ·6ί9) _ 14.0* (8) -1 9.7 (9) 12.3 * (9) 0 6.2 (9) 7.5(9) 1 2.3Γ9) 1.5(9) *每列之平均値之差値 P < · 〇 5 °

表4.每一動物於每一取樣時間之血液中黃體酮濃度。 (時間=相對於生產時間之取樣時間；例如’ ”時間〇 ’ 表示在緊接於生產前取樣，，，時間1 ”爲生產結束後1 2小 時內取樣，pfirst =黃體酮初始濃度之共變異’p4 —血 漿中黃體酮濃度毫微克/毫升）° -19- (17)200412977 樣品 動物 1 1 74 2 174 3 1 74 4 1 74 5 1 74 6 1 74 7 1 75 8 1 75 9 1 75 10 1 75 11 175 12 1 75 13 1 76 14 1 76 15 176 16 1 76 1 7 176 18 1 76 19 1 77 20 177 2 1 1 77 22 1 77 23 1 77 24 1 77 25 179 26 1 79 27 1 79 28 179 29 179 30 179 3 1 1 80 32 1 80 33 1 80 34 1 80 3 5 1 80 trt 2 2 2 2 2 2 1 1 1 1 1 1 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 1 1 1 1 1 時間 -4 ο -2 -1 0 1 -4 -3 -2 -1 0 1 -4 -3 -2 -1 0 1 -4 -3 -2 -1 0 1 -4 -3 -2 -1 0 1 -2 ρ f i r s t 15.25 15.25 15.25 15.25 15.25 15.25 15.84 15.84 15.84 15.84 15.84 15.84 10.60 10.60 10.60 10.60 10.60 10.60 15.28 15.28 15.28 15.28 15.28 15.28 15.47 15.47 15.47 15.47 15.47 15.47 12.50 12.50 12.50 12.50 12.50 P4 15.25 13.88 17.27 13.88 5.62 0.82 15.84 17.93 13.14 12.07 5.35 1.15 10.60 9.30 7.8 1 10.90 4.91 1.0 1 15.28 13.89 15.46 9.45 1.62 15.47 18.89 13.37 I. 95 12.50 12.25 II. 66 8.14 -20- 200412977 (18) 3 6 1 80 1 3 7 18 1 1 3 8 18 1 1 3 9 18 1 1 40 18 1 1 4 1 18 1 1 42 18 1 1 43 1 82 2 44 1 82 2 45 1 82 2 46 1 82 2 47 1 82 2 48 1 82 2 49 1 84 1 5 0 1 84 1 5 1 1 84 1 52 1 84 1 5 3 1 84 1 54 1 84 1 5 5 1 85 1 5 6 1 85 1 5 7 1 85 1 5 8 1 85 1 59 1 85 1 60 1 85 1 6 1 1 86 2 62 1 86 2 63 1 86 2 64 1 86 2 65 1 86 2 6 6 1 86 2 6 7 1 87 2 68 1 87 2 69 1 87 2 70 1 87 2 7 1 1 87 2 72 1 87 2 -2 -1 0 1 -4 3 -2 -1 0 1 -4 -3 -2 -1 0 1 -4 3 -2 -1 0 1 η •2 0 -3 12.50 0. 46 1 1 .2 1 14 • ] 1 11 • 2 1 13.03 11 .2 1 8· 93 1 1 • 2 1 5 . 48 11 .2 1 4. 89 11 .2 1 1 . 0 1 13.49 13.49 13 .49 14 .66 13 .49 13.96 13 .49 7. 63 13.49 4. 95 13.49 4. 50 13 , .30 15 .57 13.30 15 .24 13, .30 11 .69 13 , ,30 4. 80 13.30 5 · 47 13.30 0· 92 10. .43 10. .43 10 .43 10. .43 8. 54 10. .43 6· 29 10, .43 4. 5 7 10, .43 1 · 57 16. .68 16. .68 16 • 68 16. 68 15 • 17 16. ,68 8. 18 16. ,68 9. 4 1 16. ,68 1 .64 10. .92 10. • 92 10. .92 10 • 92 10. .92 10 .70 10. ,92 5 . 64 1 0· • 92 1 · 11 -21 - 200412977 (19) 73 1 88 2 74 1 88 2 75 1 88 2 76 1 88 2 77 18 8 2 78 1 8 8 2 79 1 89 1 80 1 89 1 8 1 1 89 1 82 1 89 1 83 1 89 1 84 1 89 1 85 190 1 86 190 1 87 1 90 1 88 190 1 89 190 1 90 190 1 9 1 1 9 1 2 92 1 9 1 2 93 1 9 1 2 94 191 2 95 191 2 96 1 9 1 2 97 1 92 2 98 192 2 99 192 2 100 192 2 101 192 2 102 192 2 103 193 1 104 193 1 105 193 1 106 193 1 107 193 1 108 193 1 -4 .2 -1 0 1 -4 3 -2 -1 0 1 -4 -3 -2 -1 0 1 -4 -2 0 1 -4 -3 -2 0 1 -4 -2 0 1 17.76 17.76 17.76 17.76 17.76 17.76 15.53 15.53 15.53 15.53 15.53 15.53 11.56 11.56 11.56 11.56 11.56 11.56 8.27 8.27 8.27 8.2 7 8.27 8.27 14.93 14.93 14.93 14.93 14.93 14.93 14.81 14.81 14.81 14.81 14.81 14.81 17.76 16.70 7.17 0.79 12.81 13.26 12.62 14.13 6.87 4.82 12.08 9.77 14.07 13.73 8.54 6.73 8.27 5.76 2.05 14.93 12.42 13.76 8.12 1.34 11.64 12.51 12.80 5.13 4.25 2.44 -22- (20) (20)200412977 實施例2 目的 本硏究之目的爲證實在第1 1 2日及1 1 3日給用劑量爲 4毫克/公斤體重的黃體酮受體拮抗劑C P 1 6 1，2 5 8的影響， 測定於第1 13日一次給用8毫克/公斤體重CP161，2 5 8的 影響，與測定在第1 1 3天給用豬鬆弛素對於從給藥到第一 胎出生的時間之影響，以及小豬出生狀況（活胎，死產， 木乃伊）。 實驗動物 a. 品種/品系：雜交第一產母豬。 b . 初始體重（到達時）：約1 8 0 - 2 5 0公斤。 c. 姓別：雌，懷孕約1 04天。 c. 原產地： Scott Wilson, Prairie View Farms， Wisconsin。 d · 識別：耳牌。 管理 a· 飼餵法：分娩前：約3公斤/頭/日，早上一半，下 午一半。產後：任意（每天減量約10-20%)。 b . 供水方法：奶頭給水器任意給水。 c. 住所：建築物608W之生產條板箱，內部尺寸爲19.5 英吋X 6英尺n英吋。 d · 環境的控制：恆溫控制通風。 -23- (21) (21)200412977 e· 食物：每餐爲17%蛋白質玉米+大豆粉飼料，PL17 ° 試驗材料 CP161.258，Sigma Chemical Co，25 毫克 / ¾ 升丙一酉孚 ，批號U0K1203及30K1542，期限02/2002。豬用鬆弛 激素，Univ. of IL5 3 0 0 0 U/毫克，批號 62，期限 06/2002 。0.9%無菌食鹽水，Abbott Laboratories，批號 58-570-DK，期限 2001/11 月 /1 日。 設計： 處理 說明 動物數目 T1 無藥物對照 15 T2 第112及113日，4毫克/公斤 CP161，258， 8 AM， 口月g 15 T3 第1 13日，8毫克/公斤 CP161，258， 8 AM， 口月艮 15 T4 第1 13日，1 200 IU鬆弛激素， 8 AM，下腿部肌肉內 15 步驟： 動物。 購買60頭懷孕雜種母豬，且在懷孕約102-107天時，送到 Terre Haute。此等動物係置於建築物 60 8 E之懷孕用條板箱。將20頭在懷孕約第108日之動物 -24- (22) 200412977 稱重後置於生產用條板箱內。使用此體重司 給用量（T2與T3 )。 飮食。從頭到尾用同樣飼料饌食， 1 7 %粗蛋白質。不過，將生產前餵食量限制 /曰。產後則任意饌食。 動物隨機分組。根據預產日排列動衫 四頭動物之處理組內。 試驗品給藥。編爲T1之動物不給用 劑。對於處理組T2及T3，試驗品經稀釋S 中的濃度25毫克/毫升，且冷凍儲存（2-8 < 對處理組T2與T3，將動物圈住且用 經口給用試驗品。給藥量約3 0毫升以輸送 重之劑量（T2，第1 1 2日及1 1 3日），或 第1 1 3日）以傳送8毫克/公斤體重之劑量 的每週中混合及使用一約440毫升之容器 或T3之動物也喝下約3 0毫升自來水以確俱 〇 豬用鬆弛激素係在第一天使用時稀釋右 水到1 200 U/毫升之濃度。將稀釋的豬用鬆 有鎖之冰箱內且只在進行注射時取出。鬆引 T4)係在任一腿大腿下部用18號，1.5吋長 升注射器肌肉內給藥。 在本硏究中，幾乎每天都是在早上7: 間進行給藥。 :計算試驗品之 PL1 7，其含約 爲約3公斤/頭 1且隨機分在各 試驗品或稀釋 I於50%丙二醇 〉C) 〇 6〇毫升注射器 4毫克/公斤體 60毫升（T3， 。在3週硏究 。每一編到T2 〖試驗品的吞下 :無菌生理食鹽 丨弛激素存放於 激素（1毫升-針筒接上3毫 30 到 8 ·· 30 之 -25- (23) (23)200412977 早產。 任何在第112日前開始生產（亦即至少生 出一頭小豬）之動物均由本硏究中排除。 在第1 1 2日接受試驗品後，但是在第1 1 3日給用試驗 品之前開始生產之編號T 2之動物，不在接受額外給用試 驗品。不過，彼等動物仍留在硏究中且收集其小緖出生時 間之數據。 將在第1 1 3日試驗品接受之前即開始生產之τ 3或τ 4 動物從硏究中排除。 生產失敗。將在懷胎後第1 1 7日早上仍沒有生產之任 何母豬從硏究排除以放置其他動物到生產條板箱中。即使 沒有生產，仍將從處理到生出頭胎小豬的時間訂定爲120 小時（最久等待時間）。這些動物所生出的活的，死產及 木乃伊小豬之數字都由分析中刪除。 小豬。 此硏究中所測量之反應變數爲：第一次處 理到頭胎小豬出生之時間，出生時活的（生下來是活的） ，死產（外觀正常之小豬但出生時已死），以及木乃伊（ 較同窩出生者爲小，生出時已腐敗）等的小豬數目。沒有 處理（沒有鐵印，沒有剪乳牙，沒有個別作記號），但在 出生後2天內沒有安樂死的動物，將其臍帶剪成約2 · 5吋 長。 數據/分析。 本硏究所測量之反應變數爲：在第 1 1 2日給藥到生出頭胎小豬之時間，在第1 1 3日給藥到生 出頭胎小豬之時間，出生時活的（生下來是活的）’死產 (外觀正常之小豬但出生時已死），以及木乃伊（較同_ -26- (24) (24)200412977 出生者爲小，生出時已腐敗）等小豬的數目。用混合模式 分析法分析數據，其區塊爲隨機效果且將處理視爲固定效 果（混合S A S程序）。 結果 在投藥於任何處理後沒有立即觀察到任何不良行爲反 應。有從8頭動物所得之一些或全部數據由分析中排除。 從硏究中排除動物或數據的理由如下：接受試驗品前即生 產，難產，及生產失敗（表5)。所報導的母豬難產發生率 佔全部生產之7到1 5 %，最高發生率係發生於雜交第一產 母豬之情況中 （Straw等人，JAVMA, 2000)。本硏究所觀 察到的難產發生率（6%)與先前在Terre Haute的硏究中所 觀察到的及公開之發生率水平相似。豬平均體重爲1 92 公斤。 表6列出每一處理從在第1 1 2日及第1 1 3日投藥到開 始分娩的平均時間及小豬數據。與無藥物控制組比較之下 ，以劑量爲4毫克/公斤體重的黃體酮受體拮抗劑 CP161，258在第112日與第113日投藥（T2)，可提前分 娩的開始時間且可改善動物之間的開始一致性。在第1 1 2 日與第113日接受4毫克/公斤CP161，258之T2動物中有 54%(7/13)在第113日開始生產，其他31%(4/13)在第114 曰開始。這些數據與硏究7821P-60-01-153所觀察之資料 相當接近，於其中有44%處理動物在第1 ] 3日開始生產且 其餘56%在第114日開始生產。 -27- (25) (25)200412977 ( 〇 · 4頭/窩）死產數於數據上而非統計上，低於 T1之無藥物對照組。死產豬數（0.9頭/窩）顯著低於同樣處 理之先前硏究。T2之木乃伊總發生率高於T 1。不過，這 可能完全是機會使然：依據這些小豬之實體大小，已在分 娩前死在子宮一個月以上。 在第1 13日一次給藥8毫克/公斤體重CP 161，25 8可 減少生出頭一胎小豬之時間（表6 =平均數，及表7 =個別 動物數據）。特定言之，T 1 -無藥物控制組之動物有 4 0%(6/15)在第1 14日開始生產。相較下，在第n3日接 受8毫克/公斤體重CP161，25 8之動物有85%(u/13)在第 1 1 4日開始生產（圖2 )。其餘2/1 3之T3動物需要比其 他大部份T3動物較長時間開始生產（49及96小時）的 可能理由包括：a) 口腔吸收可能與接受相同處理之其他動 物不同；b)這兩頭動物在從注射器注射後沒有吞下所有試 驗品（總體積約60毫升）；或者c)這兩頭對試驗品具有 較低反應性，顯示可預期動物間對反應有生物學上的變異 如同T2所觀察到的，τ3與無藥物對照組比較所減少 的死產數是數據上，而非統計上者。 在第113日給用1 200 υ豬用鬆弛激素ΙΜ，對生出頭 胎小豬的時間’活胎數目，或死產數沒有有利效果（表6 結論 -28- (26) 200412977 此等數據證實黃體酮受體拮抗劑CP161，2 5 8改善了分 娩開始之同步性：有70%在給藥後24到27小時開始生產 ，且85 %在一次給藥8毫克/公斤體重後的21到35小時 開始生產。此~ C P 1 6 1，2 5 8劑量在數値上，與無藥物對照 組（0 · 6頭/窩）比較，可減少死產數。豬用鬆弛激素沒有 效果。

這些數據暗示黃體酮受體拮抗劑可安全與有效地同步 化分娩，減少死產，及促使大部份生產可獲得監督。總而 言之，這些事項可顯著降低斷奶前之死亡率及改善生產豬 仔作業之利潤。

-29- (27) 200412977 表5·具有不完整數據之動物（不符合進入要求或硏究^ 完全者）。 處理 動物 理由 Τ1-無藥物對照 463 在第1] 7日前沒有生產（對於處理到頭 胎小豬之時間設定爲1 20小時） T2-CP161，258 D 112+113 440 難產 T2-CP161，258 D 1 12+113 480 難產 T3-CP161.258 D 113 456 接受試驗品前開始生產 T3-CP161?258 D 1 13 470 接受試驗品前開始生產 T4-鬆弛激素 441 難產（活胎，死產，木乃伊數字不完整） T4-鬆弛激素 488 難產（活胎，死產，木乃伊數字不完整） Τ4-鬆弛激素 448 接受試驗品前開始生產

-30- (28) 200412977 表6 · 按處理別之生產數據。數據點的數目係在每一平 均數旁邊的括號內（每列內T2，T3，及T4之平均値係與 T1比較。其他比較則無關聯。SD =標準偏差；CL = 95%信 賴界限）。 丁1_無藥物控制 Τ2-4毫克/ 公斤體重 CP161,258 D 112+113 T3-8毫克/ 公斤體重 CP161,258 D 113 丁4-1200U P鬆弛激素 平均 標準誤差 整體處理 P< 時數第112日 給藥到生出頭 胎小豬±SD (第1]2日） 77±31 (15) (第112日） 45±26a(13) (第]13日） 33士20 (13) (第113日） 56±26 (13) 7.0 P=.0004 下/上CL 64/91 30/59 18/48 41/70 時數，113日 給藥到生出頭 胎小豬±SD (第]13曰） 53土31 (]5) (第112曰） 45±26b(13) (第113曰） 33±20c(13) (第113曰） 56±26d(13) 7.0 P-.1099 下/上CL 40/67 30/59 18/48 41/70 小豬數據： 活胎 7.9(14) 9.2(13) 8.6 (13) 6.4(12) 1.0 P=.08 死產 1.1 (14) 0.7(13) 0.5(13) 1.6(12) 0.3 P=.ll 木乃伊 〇(14) 0.4* (13) 0.2 (13) 0.3(12) 0.13 P=.18

a T]與T2配對比較，P<.〇〇l。其他比較沒有意義因爲試 驗品係於第1 1 3日給T3施用。 T1與T2配對比較，P<.38 T1與T3配對比較，P<.〇4 T1與T4配對比較，P<.77 -31 - (29) (29)200412977 表 7. 每一動物之反應變數。（=缺失數據-沒有生產 或因難產而生產不完全）。 動物 處理. 時數，頭次處理到頭胎小豬 活胎 死產 木乃伊 439 1 46.3 13 0 0 449 1 46.7 5 3 0 494 1 47.3 8 5 0 471 1 51.8 4 0 0 472 1 53.7 12 0 0 482 1 57.8 5 0 0 452 1 61 11 0 0 444 1 70.2 10 2 0 467 1 70.5 7 0 0 442 1 75.6 5 1 0 490 1 82.5 7 0 0 457 1 1 18.4 11 3 0 484 1 119 4 1 0 463 1 120 477 1 136.2 9 0 0 -32- (30)200412977 動物 處理 時數，頭次處理到頭胎小豬 活胎 死產 木乃伊 450 2 22.5 8 1 0 438 2 24.5 13 1 0 489 2 26.4 10 0 2 468 2 28.6 9 1 1 493 2 28.9 7 0 1 479 2 32.1 9 1 0 466 2 33.6 10 1 0 485 2 45.7 10 0 0 460 2 46 2 1 0 446 2 46.3 12 1 0 475 2 49.1 6 1 0 459 2 96.3 13 1 0 453 2 101 11 0 1 461 3 21.2 6 0 0 491 3 23.7 13 0 1 481 3 24.4 12 0 0 465 3 24.5 6 2 1 486 3 24.7 10 0 0 447 3 25.1 7 1 0 474 3 25.2 10 0 1 476 3 25.3 10 0 0 443 3 26.3 14 1 0

-33- (31) (31)200412977 436 3 27.1 11 0 0 492 3 34.4 4 0 0 454 3 49 6 2 0 45 1 3 93.8 3 1 0 464 4 10.9 6 5 2 445 4 25.3 3 0 0 487 4 34.2 8 1 0 495 4 47.4 4 2 0 483 4 48.5 9 1 1 469 4 49.2 1 0 0 478 4 49.7 14 2 0 462 4 51 4 1 0 441 4 69.9 437 4 74.9 6 2 0 455 4 77.2 6 1 0 458 4 82.4 9 2 0 473 4 106.3 7 2 0 【圖式簡單說明】 圖1爲一條形圖表顯示出給用 4毫克/公斤體重 CP 1 6 1,25 8後依懷孕日數生產之動物百分比。 圖2爲一條形圖表顯示出給用8毫克/公斤體重 CP16 1，2 5 8後依懷孕日數生產之動物百分比。 -34-

Claims (1)

1. (1) (1)200412977 拾、申請專利範圍 1 . 一種懷孕母豬之催生方法，其使得在可預測時數內 生出第一胎小豬，其中該方法係減少死產小豬之發生率， 該方法包括以黃體酮受體拮抗劑給予懷胎至少1 1 2天之懷 孕母豬服用。 2 ·根據申請專利範圍第1項之方法，其中該可預測時 數爲約12到約22小時。 3 .根據申請專利範圍第1項之方法，其中該黃體酮受 體拮抗劑係選自下列所組成之群組中者：r U 3 8 4 8 6， ZK23 02 1 1， ZK9 8299， ZK98774， ZK 1 3 7 3 1 6, ZK 1 1 2993, J867， J956， LGOO 1 447, LG120753， ORG33628，美月艮培酬 (mifepristone )，奧納司酮（onapristone)，禮樂酮 lilopristone及彼等之組合。 4 ·根據申請專利範圍第1項之方法，其中該黃體酮受 體拮抗劑爲RU3 84 8 6。 5 ·根據申請專利範圍第1項之方法，其中該黃體酮受 體拮抗劑係透過單次給藥方式給用。 6.根據申請專利範圍第1項之方法，其中該黃體酮受 體拮抗劑係透過至少兩次的給藥而給用。 7 ·根據申請專利範圍第5項之方法，其中該黃體酮受 體拮抗劑在該單次給藥中之劑量爲約0.0 0 1到約1 5毫克/ 公斤體重。 8 ·根據申請專利範圍第5項之方法，其中該黃體酮受 體拮抗劑在該單次給藥中之劑量爲約8毫克/公斤體重。 -35- (2) (2)200412977 9.根據申請專利範圍第5項之方法，其中該單次給藥 係在生出第一胎小豬前約20-25小時完成。 I 〇 .根據申請專利範圍第6項之方法，其中該黃體酮 受體拮抗劑的給用量爲每次給用約0.001到約15毫克/公 斤體重。 II ·根據申請專利範圍第6項之方法，其中該黃體p 受體拮抗劑的給用量爲每次給用約4毫克/公斤體重。 1 2 ·根據申請專利範圍第6項之方法，其中該黃體酮 受體拮抗劑係透過兩次給藥而給用，其中第一次給藥係在 生出頭一胎小豬前約3 0 - 4 0小時實施，且該第二次給藥係 在生出頭一胎小豬前約9至1 5小時實施。 1 3 ·根據申請專利範圍第1項之方法，其中該黃體酮 受體掊抗劑係經肌肉內，靜脈內，皮下，陰道內或口腔而 給用。 1 4 ·根據申請專利範圍第1 3項之方法，其中該黃體酮 受體拮抗劑係與一藥學上可接受之載劑給藥。 1 5 · —種懷孕母豬之催生方法，其使得在可預測時數 內生出第一胎小豬，其中該方法係減少死產小豬之發生率 ，該方法包括給予懷胎至少1 1 2天之懷孕母豬單次施用 RU3 84 8 6。 -36·