TW200303745A

TW200303745A - Novel compounds

Info

Publication number: TW200303745A
Application number: TW091134147A
Authority: TW
Inventors: Desmond John Best; Gordon Bruton; Barry Sidney Orlek
Original assignee: Smithkline Beecham Plc
Priority date: 2001-11-27
Filing date: 2002-11-25
Publication date: 2003-09-16
Also published as: AR037427A1; US7045626B2; US20050085505A1; AU2002365511A1; ES2268133T3; EP1448552A1; DE60213450D1; EP1448552B1; WO2003045938A1; GB0128378D0; DE60213450T2; JP2005513036A; ATE334124T1

Description

200303745 A7 B7 五、發明說明（1 ) 本發明係關於可溶性人類CD23形成的新穎抑制劑，及其在治療與可溶性CD23(s-CD23)過量生產相關之健康狀況上的用途，該健康狀況如：自體免疫疾病及過敏。 5 CD23(低親和力IgE受體FceRII，Blast 2)是一個 45千道爾頓（kDa)第II類整體蛋白質，在不同成熟細胞的表面上表現，該細胞包括B及T淋巴細胞、巨噬細胞、天然殺手細胞、蘭格罕（Langerhans)細胞、單核白血球及血小板（Delespesse等人，/ίβν 49 10 [1991] 149-191)。在嗜伊紅血球上也有似CD23的分子（Grangett 等人，J Immunol, 143 [ 1989] 3580.3588)。CD23牽涉到免疫反應的調節（Delepesse 等人，Immunol Rev，125. [ 1992] 77-79)。人類的 CD23 顯示兩種分化調節異構形式一a及b，其只在内細胞 15 N-終端的胺基酸分化（Yokota等人，Cell，55_ [1988] 611-618)。在人體中，構成分子a異構形式只在B-淋巴細胞上被發現，其中由IL4引發的b類在所有能夠表現CD23的細胞上被發現。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製完整細胞鍵結的CD23(i-CD23)已知從細胞表面進 20 行切斷，導致許多良好界定之可溶性片斷（S-CD23)的形成，其是產生蛋白質水解情況之複雜序列的結果，其機構仍是了解不足（B our get等人，J Biol Chem, 269 [1994] 6927-6930)。雖然未被證實，假設是這些蛋白質水解情況的主要可溶性片斷（Mr 37、33、29及本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210 x297公釐） 200303745 Α7 Β7 五、發明說明（2) 25千道爾頓），其所有維持對卜CD23 —般的C-終端親醣蛋白（lectin)區域，後續經由37千道爾頓片斷的起初形成而發生（Letellier等人，./ 从〜，退[1990] 693-700)。另一個細胞内切斷的路徑導致一個穩定的 5 16千道爾頓片斷，是與^CD23在C-終端區域分化 (Grenier-Brosette 專人，Eur J I丨mnunol, 22 [1992] 1573-1577)。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製因於鍵結在人類i-CD23之薄膜的幾個活動，其所有顯示在IgE調節上扮演一個角色。該特別的活動 10包括：a)抗原呈現、b)IgE傳達之嗜伊紅血球細胞毒性、c)B細胞自導引到淋巴結及脾臟的未成熟中心及 d)IgE 合成的降低（downregulation)(Delespesse 等人， /idv. /m廳/?〇/，笠[1991] 149-191)。三個較高分子量的可溶性CD23片斷（Μι* 37 33及29千道爾頓）具有多功 15 能細胞活素性質，其顯示在IgE生產中扮演主要的角色。因此，S-CD23的過量形成牽涉到丨g£的過度生產’為如：外來氣喘、鼻炎（rhinitis)、過敏性結膜炎、濕疹、遺傳性過敏性皮膚炎及過敏性反應之過敏疾病的標記（Sutton 及 Gould，iVait/re，366. [ 1993] 421 -20 428) 〇歸因於S-CD23的其他生物活性包括b細胞生長的刺激及來自單核白血球之傳遞物釋出的引發。因此’ S-CD23的升咼程度在具有慢性淋巴白血病的病患血清中（Sarfati 等人，2± [1988] 94-98)及類 -4- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公釐） 200303745 A7 B7 五、發明說明（3) 風濕性關節炎病患的滑液中（Chomarat等人， Arthritis and Rheumatism,[1993] 234-242)被觀察到。許多來源建議CD23在發炎中的角色。首先， SCD23被報告鍵結到細胞外受體，當活化時其牽涉到 5 發炎的細胞傳達情況。因此，SCD23被報告直接活化單核白血球TNF、IL-1及IL-6的釋出（Armant等人， 180 冊，J. Exp. Med. 1005-101 1(1994))。CD23 被報告與B2-重新表現整合素（integrin)黏著分子、CDllb及 CD1 lc在單核白血球/巨噬細胞上互相作用（s. 10 Lecoanet-Henchoz 等人，Immunity, 3 冊；119-125(1995))，其引發N02_、過氧化氫及細胞活素（IL_ 1、IL-6及TNF)的釋出。最後，il-4或IFN引發 CD23的表現及其由人類單核白血球釋出為sCD23。將CD23受體鍵結於IgE/抗-IgE免疫受體錯合物或抗 15 CD23 mAb的薄膜接合反應（ligati〇n)活化camp及il_ 6的生產和凝血嗔烧B2的形成，說明cd23在發炎中的受體傳達角色。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製因為CD23的這些不同性質，抑制s_CD23形成的化合物必須具有兩倍的下列作用：a)藉著維持在B細胞 2〇表面上卜CD23的份量，增進IgE合成的負向回饋抑制，及b)抑制S-CD23之較高分子量可溶性片斷（Mr 37、33及29千道爾頓）的免疫刺激性細胞活素活動。另外，CD23切斷的抑制必須減輕sCD23引發之單核白血球的活化及調節劑的形成，因此減少發炎反應。 200303745 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製五、發明說明（4) 世界專利 W〇 99/06361(Abbott)及 W〇 00/12478 (Zeneca Limited)敘述一個範圍的化合物，其包括反氧月亏酸S旨（hydroxamate)續基及績Si胺基化合物，用做金屬蛋白質酶抑制劑的用途。世界專利 WO 99/38843(Darwin Discovery Limited) 揭示一個總類的化合物，用於治療由牽涉到CD23脫除之酵素所傳達的特別症狀，其涵蓋式（A)的化合物：

〇\/〇 B—stcRlR2)nN^ OH 10 15 20 (A) 其中B、R1及R2是選自一個範圍的有機基團。 PCT EPOl/05798(SmithKline Beecham p.l.c)揭示用於治療及預防由牽涉到CD23脫除之酵素所傳達症狀的化合物，其涵蓋式（B)的化合物：〇

(B) - 其中R是氫、烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基或雜環基；及R1是雙環基或雜雙環基。根據本發明，提供式（I)化合物： -6- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公釐） 200303745 A7 B7 五、發明說明（5 ) 〇 Q° I丄 Η 八〇

OH 5 (Ο 根據另一個觀點，本發明提供式⑴化合物用來生產治療或預防失調之藥物的用途，該失調如：過敏、過敏性氣喘、遺傳性之過敏性皮膚炎及其他遺傳性過敏性疾病，發炎失調及自體免疫疾病，其中牽涉到s-10 CD23的過度生產。在另個觀點中’本發明提供用來治療或預防失調的方法，該失調如··過敏、過敏性氣喘、遺傳過敏性皮膚炎及其他遺傳過敏性疾病；發炎失調及自體免疫疾病，其中牽涉到S-CD23的過度生產，該方法包含 15 式⑴化合物對需要彼之人類或非人類哺乳動物的施用。經濟部智慧財產局員工消f合作社印製本發明也提供用來治療或預防失調的醫藥組成物，該失調如··過敏、過敏性氣喘、遺傳過敏性皮膚炎及其他遺傳過敏性疾病；發炎失調及自體免疫疾病， 20其中牽涉到S-CD23的過度生產，其包含式⑴.化合物及為此之可選擇醫藥可接受載體。特別的發炎失調包括CNS失調，如：老人癡呆症、多重硬化症及多梗塞癡呆症、及中風及頭部外傷的發炎引發的後遺症。本纸張/、度相巾_家標準(cns)a找格⑵(U7 ) 200303745 A7 B7 五、發明說明（本發明人令人驚訝地發現：本發明的化合物為 CD23處理的高效力及選擇性抑制劑’具有極少或沒有做為基質金屬蛋白質酶之抑制劑的活性。要了解：式（I)化合物的醫藥可接受鹽類、溶解化物及其他1•樂可接受衍生物也包括在本發明中。式⑴化合物的鹽類包括例如：衍生自無機或有機酸的酸加成鹽類’如：鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫蛾酸鹽、對-甲笨磺酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽、醋酸鹽、三氟醋酸鹽、丙酸鹽、檸檬鹽、順丁烯二酸鹽、反丁烯二酸鹽、顏果S文鹽、丁一酸鹽、乳酸鹽、草酸鹽、酒石酸鹽及苯甲酸鹽。鹽類也可與鹼形成。此鹽類包括衍生自無機或有機驗的鹽類’例如：驗金屬鹽，如：納或鉀鹽；及有機胺鹽，如：嗎咁、哌嗉、二甲基胺或二乙基胺鹽類。 15 本發明的化合物可藉著任何適當習用之方法的使用來製備。在另一個觀點中，本發明提供製備如上定義之式 (I)化合物的方法’該方法包含· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 (a)式（II)化合物脫保護基： 20 0

I

0P (Π) 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210 x 297公爱 200303745 A7 B7 五、發明說明（7) 其中P是保護基，如：苄基、四氫吡喃基或對-甲氧基辛基、或 (b) 將式（III)化合物甲醯基化： s 〇 (III) 或 (c) 氧化式（X)化合物：

0H 15 經濟部智慧財產局8工消費合作社印製 (X) 式（II)、（III)及（X)的化合物是新穎的，並且形成本發明的另一個觀點。下列反應流程說明用來製備式⑴化合物的步驟。 20 反應流程 - 用來製備式（I)化合物的一個步驟顯示於流程1。硫醇（VIII)可從相對應之鹵化物製備，如：溴化物 (IX)，使用由 Choi 及 Yoon 在 Synthesis，1995，373 中敘述的方法，並且藉著在如三乙基胺之鹼的存在下， •9- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210 X 297公釐） 200303745 A7 B7 五、發明說明（8 與如：溴甲基酮的適當鹵甲基酮反應，轉化成（VII)。該酮（VII)可與適當的CM呆護羥基胺反應。例如·.當保護基（P)為苄基時，與〇-苄基羥基胺在標準條件下反應，可被用來製備肟（VI)，其可與例如：在醋酸中之硼氫化鈉或氰基硼氫化物的適當還原劑被還原成（V)。使用曱酸醋酸酐將（V)甲醯基化、續以間-氯基過苯甲酸氧化，產生（II)，其可在適當的條件下被脫保護基：

NaSH

10 15 MCPBA, EtOAc

Me2S.BCI3,笨曱醚

經濟部智慧財產局員工消費合作社印制农 20 流程1 式⑴化合物也可如流程2中敘述的製備。-酮（VII) 可與羥基胺在標準條件下反應，產生肟（XII)，其與如：在醋酸中之氰基硼氫化物的適當還原劑被還原，產生羥基胺（XI)，其可以甲酸醋酸酐處理被曱醯基化，續以碳酸鉀及甲醇，並且如先前流程1所敘述地被氧 10- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） 200303745 A7

化。

_nh()h 流程2 本發明之化合物可製備成異構物的混合物或各没的異構物。各別的異構物可以任何適當的方法製備，例如：各別的立體異構物可藉著特定立體化學合成從對掌基材開始，或藉著使用已知方法將對映異構物之湛合物或非對映異構物之混合物分離，如：對掌製備用 HPLC。例如：將消旋的式⑴化合物分離成單_對映異構物，可以轉化成如：〇-甲基扁桃酸衍生物的適當酯^ 15 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 20 生物來達成，續以使用標準色層分析步驟來分離及费後的脫保護基。在一個較佳的觀點中，本發明提供式（IA)化合物：

Ό

•·Ν， I OH 〇 (IA) 式（I)化合物可以使用敘述於流程3中敘述的驟、以純對掌形式製備。在式（IA)化合物的製備中例如：經適當保護的對掌胺基醇（XIXA)，可在例如: 笨基膦或三丁基膦與二-第三-丁基偶氮二羧酸酯或 11- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規袼（2ι〇χ297公釐） 200303745 Α7 Β7 五、發明說明（10) 乙基偶氮二緩酸酯組合的Mitsunobu條件下，被轉化成相對應的硫基醋酸（XVIIA)。硫基醋酸酯（XVIIIA)可就地轉化成硫醇，並且因此成為硫化物（XVIIA)。另外，在（XIXA)中的醇基圑可轉化成離開基團，如：甲苯 5 磺酸酯或溴化物，並且在如：氫氧化鈉之適當鹼存在下，與如：喳咁-3-基甲烷硫醇或硫基醋酸酯之適當硫基醋酸酯或硫醇反應，產生（XVIIA)。（XVIIA)氧化成砜（XVIA)可以如：MCPBA的適當氧化劑進行，續以脫保護基。在如：三氟醋酸或氯化氫之標準條件下，在二 10 氧陸圜中脫保護基產生（XVA)，其可被轉化成 (XIVA)，並且使用已建立的步驟，例如：間-氯基過笨甲酸，氧化成 oxaziridine(XIIIA)。Oxaziridine(XIIIA) 轉化成（ΠΙΑ)較佳地是使用鹽酸來進行。（ΠΙΑ)的甲醯化可使用標準甲醯化方法進行，例如：與甲酸-醋酸酐 15 的反應’。 ·

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

-12- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210 x297公釐） 200303745 Α7 Β7 五、4务明說明（11

.OH hco2h Ac20

(XVA) (XXA) 流程4 (IIIA) 5 流程3 用來製備純對掌形式之式（ΠΙΑ)化合物的另外步驟顯示於流程4中。對掌胺（XVA)可以氰甲基溴或氰甲基破烧基化，產生氰甲基胺（XXΑ)，使用由Tokuyama 等人在Synthesis，2000, 9 1299中敘述的方法將其轉化 10 成（IIIA)。另外，胺（XVA)可直接以苯醯基過氧化物氧化，產生苯si基羥基胺（XXlA)，如流程5所示，使用由 Plianstiel 在 J.〇rg. Chem.，1997, 62, 8104 中敘述的方法。後者化合物可以甲酸醋酸酐甲醯化並且然後脫保護，例如：在甲醇中用氨，產生（IA)。

^OH 15 經齊邹智慧財產局員1¾費合泎社印製 20

-13- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公釐） 200303745 A7 B7 五、發明說明（12) 流程5 式（III)化合物也可使用流程6中顯示的路徑製備。S享（XXIV)可以在例如THF中之硼的標準條件下，還原酮（VIII)而獲得。其中適當地，醇（XXIV)可以鹵 5 基醇（XXVI)與（XXV)反應來製備。氧化成砜（XXIII)可如前述地進行，續以使用曱烷磺醯氯及三乙基胺、或 Mitsunobu條件移除，產生（XXII)。經基胺加成到不飽和砜（XXII)產生（III)。

流程6 經濟部智慧財產局員X-消費合泎钍印製鹵甲基酮可以甲基酮的溴化獲得，使用在曱醇中 20 白勺漠，如 Gaudry 及 Marquet 在 Org· Synth” _1976, 55,24中敘述的。另外，溴甲基酮可從相對應的二偶氮酮、藉著使用標準方法與溴化氫的反應而獲得。式 (IX)化合物可以標準方法獲得，例如：將3-甲基-喳咁與N-溴基丁二亞醯胺在四氣化碳中溴化。含前趨物之 -14- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210 x297公釐） 200303745 A7 B7 13 五、發明說明 % σ林與N-溴基丁二亞醯胺的溴化較洼地在如：醋酸的酸存在下進行。另外，喳啡甲基_甲醇可使用標準鹵化步驟被轉化成式（IX)化合物，例如：使用五氣化磷或& Sik基氯，或轉化成甲石黃醯酯，續以在丙酮中的溴 5 化經處理。經保護的胺基醇前趨物為商業上可獲得的或可經由標準路徑製備，例如：從相對應的胺基酸，如·Η〇等人在 Tet· Lett., 1993, 34(41)，6513 中敘述的。適當的胺基酸衍生物可從氮丙啶前趨物製備，例 1〇如由 Nakaj_ 等人在 Bu„· s〇c α_ ㈣叫 1982, 55, 3049中敘述的。 ’ 其他的起始物及其他的試劑為商業上可獲得的或可以已熟知及習用的方法合成。較佳地，该化合物以大致為純的形式被單離。 15 如在此所述，可溶性人類CD23形成的抑制劑具有有用的醫療性質。較佳地，該活性化合物做為醫藥可接受組成物施用。 _ ' 經濟部智慧財產局員工消费合作社印製該組成物較佳地適合口服施用。然而，其可適人其他施用模式，例如：噴霧劑、氣霧劑的形式或其他用 20於吸入的習用方法，用來治療呼吸道失調；或非腸胃施用，用於遭受心臟衰竭的病患。其他另外的施用= 式包括舌下或皮下施用。 ' 該組成物可以是藥片、膠囊、粉末、微板、鍵劑、栓劑、可重組粉末或液態製劑的々八如：口服或 -15- 本纸張尺度適闬中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公麓） 200303745 A7 B7 五、發明說明（14) 消毒非腸胃用溶液或懸浮劑。為了獲得施用的一致性，較佳的是本發明的組成物為單位劑量的形式。 10 用於口服施用之單位劑量呈現形式可以是藥片及 $襄’並且可包含習用的輔劑，如：黏合劑，例如：糖漿、阿拉伯樹膠、明膠、山梨糖醇、山羊刺樹膠、或 K乙、J：布基四氬π比略酮，填充劑，例如：乳糖、糖、玉米澱粉、磷酸鈣、山梨糖醇或甘油；成片的潤滑劑，例如：硬脂酸鎂；崩解劑，例如··澱粉、聚乙烯基四氫吡嘻酮、殺粉二醇酸鈉或微結晶纖維素；或醫藥可接受濕潤劑，如：十二烷基硫酸鈉。 15 ，固態口服組成物可以攙合、填充或成錠的習用方法製備。使用大量填充劑的重覆攙合操作可用來分佈活性試劑到組成物中。此操作當然在此藝中為習知的。樂片可根據在一般醫藥實施中熟知的方法塗覆，特別是用腸内塗層。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 …口服液態製劑可以是例如:乳化物、糖漿或藥水的形式，或以在使用前用來與水或其他適當媒介的乾燥產品呈現。此類的液態製劑可包含習用的添加 2〇物，如:懸浮劑，例如:山梨糖醇、糖漿、甲基纖維素、明膠、羥乙基纖維辛、羧甲美 π , — 羧甲基緘維素、硬脂酸鋁膠、經虱化的可食用脂肪；乳化劑，例如：卵碌脂、單 ϋ山㈣醇㈣、或阿拉伯樹膠：非水溶性媒介物括可食用油)’例如:杏仁油、分餾的椰子油、 -16- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（21(> X 297公釐） 200303745 A7 _ _____B7 五、發明說: ' ~~ -- 油性酯類’如:甘油、丙二醇或乙基醇的酯類；防腐劑，例如：對-經基苯甲酸甲黯或丙醋、或山梨酸；及若理想的習用香味或色料劑。對於非腸胃施用，流體單位劑量是使用該化合物 )及經消毒的媒介物來製備，並取決於所用的濃度，可以是懸浮或溶解於媒介物中。在製備溶液當中，該化合物可能被溶解於水中用來注射，並且在填充到適當的小瓶或安瓿並封裝之前被過濾消毒。優越的是如：做為局部麻醉劑、防腐劑及緩衝劑的佐藥可溶解在媒介丨〇物中。為了增進穩定性，該組成物可在填充到小瓶之後被冷凍，並且在真空下移除水。非腸胃用懸浮物大致上可以相同的方式製備，除了該化合物是懸浮在媒介物令而非被溶解，並且消毒不可以過濾完成。該化合物可在懸浮於經消毒媒介物之前，以曝露於環氧乙 15烷被消毒。優越地，界面活性劑或濕潤劑被包括於組成物中’以加速化合物的均勻分佈。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本發明的組成物也可適當地以用於呼吸道的施用來呈現，如：嗅劑、或氣霧劑、或用於喷霧劑的溶液、或吹氣用的微細粉末，單獨或與如：乳糖的惰性載體組 2〇合。在此情況下，活性化合物的顆粒適當地具有半徑少於5 0微米’較佳地低於1 〇微米，例如：半徑範圍為卜50微米、1-1〇微米或ι_5微米。其中適當地，可包括小量的其他抗氣喘及支氣管擴張（bronchodilator)，例如：仿交感神經作用的胺類，如：異丙腎上腺素 -17- 本纸張尺度適闬中國國家標準(CNS)A4規格（210 x 297公爱） 200303745 Α7 Β7 五、發明說明（！6) (isopi enaline)、乙基兴丙腎上腺素（丨、沙丁胺醇（salbutamol)、去氧腎上腺素（pheilylephrjne)及麻黃素（ephednne);黃嘌呤（xailthine)衍生物，如：茶鹼 (theophylline)及氨茶驗（amin〇phyHme);及可體松固醇 5 類’如：潑尼松龍（Prednisolone);及腎上腺刺激素，如：ACTH。该組成物可包含從〇. 1重量％至99重量％的活性物貿’較佳地從10-60重量％，取決於施用的方法。用於吸入施用的較佳範圍是1〇-99〇/〇，特別是6〇_ 10 99%，例如：9〇、95 或 99%。微細粉末調配物可適當地以氣霧劑施用，以計量劑量或藉著適當的呼吸活化裝置。適當的計3：劑量氣霧劑調配物包含習用的推進劑，共溶液，如：乙醇；界面活性劑，如：油基醇；潤 15 /骨劑，如：油基醇；乾燥劑，如：硫酸鈣；及密度改質制’如：氣化鈉。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製用於喷霧劑的適當溶液為等滲透壓的溶液，可選擇地經緩衝，例如：在pH 4-7之間，包含高至2〇毫克/ 亳升的化合物，但更通常是〇」至1〇毫克/毫升，與 20標準的噴霧設備一起使用。有效份量取決於本發明之化合物的相對效力、被 ~療之失調的嚴重性及患者的體重。適當地，本發明〈化合物的單位劑量形式可包含從0丨至1 〇〇〇毫克的本發明化合物（經由吸入是0 001至10毫克），並且更 -18- ( 2 丨(）χ 297 公^-——--— 200303745 A7 B7 五、發明說明（Π ) -- 通常是從1至500毫克，例如：1至25毫克、或5至亳克。此組成物—天可施用從{至6次更通常疋k 2至4 -人，邊方式使得日劑量對一個7〇公斤成人是從1亳克至1克，並更特別是從5至5〇〇毫克。 5也就是約1.4XHT2毫克/公斤/天至丨4毫克/公斤/天的範圍，並且更特別的是約7xl〇々毫克/公斤/天至7毫克/公斤/天的範圍。下列的實例說明本發明，但不以任何方式限制之。 10

製劑1:3-乙酿基硫甲基喳啩方法A 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製步驟1:3-喳咁基甲醇一在乙醇（26〇毫升）的喳咁羧基螫（13.18克）被冷卻到〇°c，續以分部份地添加硼氫 15化鈉（1.62克）。溫度被維持在〇。(3 15分鐘，續以添加 6當量濃度的HC1(28毫升），在該期間反應溫度被維持在0-5°C之間。然後溶液以1莫耳濃度的NaOH中和。粗製反應混合物被汽提到乾，以移除乙醇，並且殘餘物在水及Et〇Ac之間分佈。然後Et〇Ac層被乾燥 20 (MgSCU)，並且被吸收在氧化矽膠上並色層分柝（快速氧化矽膠，逐步梯度：0-100% Et〇Ac/己烷），產生白色固體的次標題化合物（9.85克）。步驟2:3-氣甲基喳咁鹽酸鹽一 3-喳咁基曱醇（9.85克) -19- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規袼（210 x 297公釐） 200303745 A7 五、發明說明（18) 被溶解於乾燥笨（200毫升）中並且授掉，續以添加硫酸基虱(丨4.69毫升）。獲得立刻的黃色沉澱物。在室溫下 ί見拌破維持2小時。淺黃色固體被過渡，並且乾燥產生次標題化合物（13克）。 5 步驟3:3-乙醯基硫甲基喳唯—3'氯甲基喳咁鹽酸鹽卩.2 克）被溶解於丙酮（100毫升）中，續以添加硫基醋酸鉀 (丨，8克）’並且容許在室溫下隔夜攪拌。反應混合物被吸收在氧化矽膠上並色層分析（氧化矽膠，逐步梯 10度：〇00%醚/石油醚），產生橘色固體的標題化合物 (4.2 克卜丨H NMR S(DMS〇-d6): 8.85(1H, d, J=2 Ηζ)， 8.25(1H, d，J=2Hz)，8·01(1Η，d，J=8.4Hz)，7.95(1H, d， J=8.4Hz), 7.74(1H, t, J=8.4Hz)，7.61(1H, t，J=8.4Hz)， 4.33(2H, s)，2.38(3H，s)。 15

方法B 在CC14(50毫升）中的3-甲基喳咁（5克）以冰醋酸 (1·85毫升）、NBS(8.5克）及aibn(1.5克）處理。使用經濟部智慧財產局員工消費合作社印制衣 1 〇〇瓦鹵素燈將反應帶到回流，並且回流1 〇分鐘。再 20冷卻之後。添加Et〇Ac(60毫升）並且反應經由广堆疊的氧化矽過濾，濃縮成一半的體積，並且添加到溶解於DMF(150毫升）中的硫基醋酸鉀（1〇克）及碳酸鉀克）裡。然後反應以蒸發再濃縮到1 50毫升。在2小時之後，反應以EtOAc(300毫克）稀釋，並且以飽和碳酸 -20- 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210 X 297公釐） 200303745 A7 B7 五、發明說明（19) 氫鈉溶液及飽和鹽水（8x)洗滌。有機相被蒸發並且殘餘物被色層分析（氧化矽膠，逐步梯度：〇_5〇% 石油醚），產生標題化合物（3.1克）。 5實例MS)-〆-丨2·(3-°奎咁基曱烷磺醯基）-丨-(RP四氫吱喃-2 _基乙基卜7V-經基甲酿胺

步驟1: 1-(3-喳咁基甲烷磺醯基）_lee(R卜四氫呋喃-2_ 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製基卜1_氧代乙烷一在Me〇H(50毫升）中的3-乙醯基硫甲基喳咁（3.15克）溶液以在MeOH中的1莫耳濃度 Na〇H溶液處理15分鐘，續以添加（r)_2 —溴基乙醯基 15 四氫吱喃（2.8克）（歐洲專利540609-1八丨）。反應混合物在室溫下隔夜攪拌。反應混合物被蒸發到低體積，以Et〇Ac(50耄升）稀釋、以飽和碟酸氫鈉溶液（3〇毫升）、水（2x30毫升）、飽和鹽水（30毫升）、乾燥 (MgSCU)並且蒸發。殘餘物被快速色層分析（氧化石夕 20 膠’逐步梯度：30-50% Et〇Ac/己院），產生次標題化合物（4.16 克）。MS APCI (+ve 離子）288(MH+) ; NMR S(CDC13): 8·88(1Η，d，J=2Hz)，8.09(H，m)，7.76(1H, d， J=8.3Hz)，7·70(1Η，t，J = 8.3Hz)，7.54(1H，t, J = 7Hz), 4.45(1H, m), 4.20-3.60(2H，m) 3.91(2H, s), 3.30(2H, s), -21- 本纸張尺度適用屮國國家標準(CNS)A4規格（210 x 297公釐） 200303745 A7 ____ B7 五、發明說明（20 ) 2.25-1.83(4H, m) ° 步驟2: (RS)_2-(3-喳咁基甲烷磺醯基）_H(R)_四氫呋喃-2_基卜1-說基乙烧—在Me〇H(30毫升）中的卜(3-°奎 3 "林基甲烧磺基[丨-[(R)·四氫呋喃-2-基]-1-氧代乙烷 (IJ2克）以硼氫化鈉（〇2克）處理。在2〇分鐘之後，溶液被蒸發並且再溶解於Et〇Ac(3〇毫升）及飽和碳酸氫鈉溶液（20毫升）中。有機相被收集、以水（2〇毫升）、鹽水（20毫升）洗滌、乾燥（MgS〇4)並且蒸發。殘 10餘物被快速色層分析（氧化矽膠，逐步梯度：50-100% EtOAc/己烷），產生次標題化合物（1 22克）。MS APCI ( + ve 離子）290 MH+ ; i NMR 3(CDC13):8.90(1H，d， J=2Hz)，8.08(2H，m), 7.76(1H, d，J=8.3Hz)，7.70(1H, t， J = 8.3Hz), 7,54(1H，t，J=7Hz)，4.05-3,50(5H, m)， 15 2,60(3H, m)，1.85(4H，m) 〇經濟部智慧財產局員工消赀合作社印製步驟3: 2-(3- 4 σ林基曱烧石夤g蓉基四氫吱喃基卜（RS)-l-羥基乙烷一在乾燥MDC(20毫升）中的（rs)-2-(3-喳咐基曱坑績醯基）-丨-[([^)-四氫呋喃-2-基]-1-經 20 基乙烷（1.21克）溶液被冷卻到0 t ，續以添加 MCPBA(50%)(2.89克），並且容許在〇°C下攪拌30分鐘。反應混合物以10%Na2S〇4(10毫升）及飽和碳酸氫鈉溶液（1 0毫升）中止。MDC層被乾燥（MgS〇4)、蒸發、產生次標題化合物（1.27克）。MS APCI (+ve離子) -22- 本纸張尺度適用屮國國家標準(CNS)A4規格（210x297公釐） 200303745 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製五、發明說明（u) 322(MH+)，NMR δ CDC13: 8·88( 1 H, d，>2.4Hz), 8.32(1Η，d, J二2·4Ηζ), 8.11(1Η，d，J=8 4Hz), 7.86(1H, d, J = 8.4Hz)，7.78(1H, t, j=8.4Hz), 7.672(1H, t,』= 8Hz), 4.78-4.08(3H, m), 3.82(3H, m), 3.03(2H, m), 2.05-5 1 ‘62(4H，m)。步驟4: (E)-2_(3-4啩基甲烷績醯基卜〖-(r卜四氫呋喃- 2-基-乙稀一在乾燥MDC(50毫升）中的2-(3-。奎口林基甲烷石黃醯基）-l-[(R)_四氫呋喃-2-基]-(RS)-l -羥基乙烷 10 (丨，26克）以吡啶（0.48毫升）、4-二甲基胺基吡啶（5毫升) 及曱烷磺醯基氣（0.34毫升）處理。在15分鐘之後，混合物被容許到室溫，並且添加Et3N( 1.64毫升）。在15 分鐘之後，混合物以水（2x30毫升）、飽和鹽水（30毫升）、乾燥（MgS04)並且蒸發。殘餘物被快速色層分析 15 (氧化矽膠，逐步梯度：60-100% Et〇Ac/己烷），產生白色固體的次標題化合物（0.87克）。MS(APCI +ve離子） 304(MH+) ; 4 NMR S(CDC13): 8.81(1H，d，J=2Hz), 8·31(1Η，d，J=2Hz), 8.06(1H，d, J=8.4Hz), 7.85(1H, d, J = 8.4Hz), 7.74(1H, t, J-8.4Hz), 7.60-(lH, t, J=8Hz), 20 6.72(1H，t，J二 15Hz)，6.50(1H，t，J = 15Hz)，4.51(·Η，m)， 4.41(2H，s), 4·82(2Η，m)，2.18-1.41(4H, m)。步驟5: 丨2-(3-喳唯基甲烷磺醯基）-1-(R)-四氫呋喃-2- 基I乙基羥基胺一在THF(10毫升）中的（Ε)-2-(3-4σ林基 -23- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210 x 297公釐）

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甲烷嶒醯基>U(R)-四氫呋喃-2-基乙烯（0.86克）溶液以羥基胺（在水中的50%溶液，5毫升）處理，並且容許在室下攪拌1 5分鐘。溶液被蒸發，並且然後與 MeOH共沸，並且然後以Et〇H/曱笨，產生次標題化 5 合物（952 毫克）。MS(APCI +ve 離子）377(MH+)。步驟6: (S)-iV-[2-(3-4咁基甲烷磺醯基）“-…卜四氮咬喃-2-基乙基卜yy—羥基曱醯胺—經攪拌^[2_(3_喳唯基甲烷磺醯基四氫呋喃-2-基]乙基羥基胺（0 94克） 10以甲酸（6亳升）及醋酸酐（2毫升）處理，並且在室溫下靜置隔夜。反應混合物被蒸發，再溶解於甲醇中，並以IQCOWlj克）處理。在室溫下攪拌3〇分鐘之後，混合物被蒸發，並且殘餘物在MDC及水之間分佈，並且pH被調整7(2莫耳濃度的HC1)。MDC層被乾燥 15 (MSS〇4)並且蒸發，產生粗製消旋混合物，其以色層分析分離成單一非對映異構物。（經酸洗之氡化矽膠，逐步梯度：在MDC中的0-3% MeOH)。跑較慢的組份被收集並且再結晶，產生白色固體的標題化合物（〗6〇經濟部智慧財產局員工消費合作社印製毫克）。MS(APCI +ve 離子）365 (MH+)，在 353K 下的 20 'H NMR 5(DMSO-d6)： 9.756(1 H, bs), 8.88(1H, d? J=2Hz)，8.35(1H，d，J=2Hz)，7.88-8.30(3H，m)，7.78(1H， t，J = 7.2Hz)，7.66(1H，t，J=7.2Hz)，4.80-4.68(2H, ABq)， 3.95(1H, m), 3.1 0-3.82(3H, m), 1.50-2.03(4H, m) 〇 -24- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（21()Χ2(/7公爱） 200303745 Α7

生物測試方法步驟1:測試化合物抑制可溶性CD23釋出的能力，藉著使用下列步驟來研究。 5 RPMI 8866細胞薄膜CD23切斷活性試驗：來自PRMI 8866細胞的血漿薄膜為人類Epstem_ Barr病毒轉化B_細胞株（Sarfati等人，immun〇1〇gy 6〇 [1987] 539-547)表現高份量的CD23，使用水性萃取方法被純化。再懸浮於均質化緩衝液（2〇毫莫耳濃度的 10 HEPES pH 7·4，ΐ 50毫莫耳濃度的NaCl,丨.5毫莫耳濃經濟部智慧財產局員工消赀合作社印製度的MgCh，1宅莫耳濃度的DTT)的細胞，以n2氣穴作用在Parr高壓艙中打破，並且與其他薄膜混合的血漿薄膜部份，以在1〇,〇〇〇 Xg下離心回收。輕錠被再懸浮於0.2莫耳濃度磷酸鉀中，pH 7.2，每1-3克濕細 15胞使用2毫升，並且核錠被丟棄。該薄膜藉著分佈在 Dextran 500(6.4%重量/重量）及聚乙二醇（pEG) 5000(6.4%重量/重量）(ref)之間被再分開，在0 25莫耳濃度的蔗糖中，每10-1 5毫克薄膜蛋白質總共丨6克 [Morre 及 Morre，生物技術（BioTechniques) 7，946-20 957(1989)]。在1000 Xg下以簡單的離心做相分離，並且PEG(上層）相被收集，以20毫莫耳濃度的磷酸鉀緩衝液pH 7.4稀釋3-5倍，並且在1〇〇,〇〇〇 Xg下離心，以回收在該相中的薄膜。ί定劑被再懸浮在經叾粦酸鹽緩衝的食鹽水中，並且包括3-4倍的增強血漿薄膜 -25- 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x 297公釐） 200303745 A7 B7 五、發明說明（24 ) — 及一些其他細胞薄膜（例如·溶媒小體（丨ys〇s〇mes)、 Golgi)。薄膜被能整除地整分，並且儲存在_8〇ι。在 6.6% Dextran/PEG的部分產生增強|〇倍的血漿薄膜。 ) 經分開的薄膜在37°C下被培養高至4小時，產生 CD23的片斷，在以之非選擇性MMP抑制劑中止試驗 -後，例如：來自世界專利w〇95/3 1457([4-(N-羥胺基）_ 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 2-(R)-異丁基硫基笨基硫甲基）丁二基-(S)-苯基丙胺Si -Ν-甲基醯胺鈉鹽，根據世界專利w〇 1〇 99/05719之實例11中敘述的步驟製備5微莫耳濃度的製劑1，其以在0.2微米Durap〇re濾板（Μι出口沉幻上過濾而從薄膜中分離。從薄膜釋出的sCD23是使用來自鍵結位置（Bmduig SUe，Bmmugham，UK)的 EIA 工具組，或使用於MHM6抗-CD23 mAb[Rowe等人的 15 丨丨化 J. Cancer，29, 373-382(1982)]、或另一個抗_CD23 mAb的類似物，在三明治EIA中做為捕捉抗體。由〇·5彳政克薄膜蛋白質製成的可溶性CD23份量，在總體積30微升的磷酸鹽緩衝食鹽水中以eia測量，並與存在於不同抑制劑濃度製成的份量比較。抑制劑是在 20水或二甲基砜（DMS〇）溶液中製備，並且最後^Ms〇展度不超過2%。IC50是以配合曲線測定’為觀疚到抑制50%CD23 m農度，是相對於在無抑制劑培養的控制組之間SCD23的差別。 ° -26- 200303745

結果實例】的化合物顯示IC5。值為〇. 〇 6微莫耳濃度。 10 15 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 20 ^驟2:測試化合物抑制基質金屬蛋白質酶的能力，藉著使用下列步驟來研究。膠原蛋白酶抑制試驗：化口物作用為膠原蛋白酶抑制劑的效力是藉著 Cawston 及 Barrett(Anal 99，34〇_345，丨979) 的方法測定，在此併於本文為參考，#中被測試之I 毫莫耳濃度的抑制劑溶液或其稀釋物在37艺下，與來自複製之滑液纖維組織母細胞、從大腸桿菌（£ 中表現及純化（以150毫莫耳濃度的Tns，pH 7 6，包含15宅莫耳濃度的氣化鈣，〇〇5% 2⑻毫莫耳♦度的氯化鈉及〇〇2%疊氮化鈉）的膠原蛋白及人類重組膠原蛋白酶培養1 8小時。該膠原蛋白是經乙醯化3h種類i的牛膠原蛋白，以Cawst011及 MUrphy(Enzym〇l〇gy迎，198】中的方法）的方法製備。樣本被離心成沉積未消化的膠原蛋白，並且從試驗中移除之輻射活性傾析液的整數部份在輻射計數器上做水解的測量。在1毫莫耳濃度抑制劑或其稀釋物存在下的膠原蛋白酶活性，與缺乏抑制劑之控制組的活性比較，並且結果報告為影響50%膠原蛋白酶的漠度（IC50)。 -27- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210 X 297公釐） 200303745 A7 B7 26 五、發明說明結果在步“ 2中，貫例1的化合物顯示IC5〇值為100 微莫耳濃度。 5 一般的MMP抑制試驗基賢金屬蛋白質酶的抑制是以適當的基材使用螢光中止試驗測量。例如：MMP活性是使用經MMP活化 6J胰史白％測昼，根據Lark等人的c〇nnective Tissue 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 10 Res·以，52(1990)。MMP在室溫下於微滴板中培養，總體積為】〇〇微升，包含0 15莫耳濃度的Tns，15毫旲耳濃度的CaCh、PH 7.6(試驗緩衝液）；抑制劑的濃度问至100微莫耳濃度，不超過2%DMSO最終濃度[〇彳政莫耳浪度基材，如：用於MMP-1的SDP_ 15 丨 5 PI ’ 國際胜肽（pipHdes internati〇nai))。mmp 灌度疋 <丨〇 t微莫耳濃度，並且理論地以適當的基材測里，在螢光放射上在30分鐘内產生至少2〇倍增加。螢幂激發波長是355毫微米，放射波長是4〇〇-46〇毫 U米，並且貢料點被收集，產生斜率（螢光對時間的改 20變）。對每一個濃度的抑制百分比從時間零的斜率計异’並且IC50值是來自濃度相關的。MMIM、2、 7、9、1 3、14都以相同的方式試驗，使用對各酵素f告為有效的商業可得基材。酵素是從cwblochem 獲得，並且使用相同的胰蛋白酶活化。 -28- 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（21〇 χ 297公釐） 200303745 A7 B7 五、發明說明（27 ) 結果實例1的化合物顯示對於MMP-3的IC5()值為 >100微莫耳濃度，並且MMP-1 3為>6.0微莫耳濃度。 5 縮寫 Β η -午基 EtOAc —醋酸乙醋 h—小日夺 10 min—分鐘 MCPBA-間-氣基過氧基苯甲酸 MDC—二氯基甲烷 rt -室溫 THF—四氫吱喃經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 9 2 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210 x 297公釐）

Claims

200303745 A8 B8 C8 D8 \ 申請專利範圍經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1. 一種式（I)化合物 2.—種（IA)化合物·.

八〇 (I)

〇 I 〇 Ί 1 J II ^ II 〇 (IA) •丨N， I 0H 3. —種根據任何前述申請專利範圍之化合物的用途，用來生產治療或預防牽涉到S-CD23過量生產之失調的藥物。 4. 一種用來治療或預防牽涉到S-CD23過量生產之失調的方法，該方法包含根據申請專利範圍第1或2項任一項的化合物對需要彼之人類或非人類哺乳動物的施用。 5. —種用來治療或預防牽涉到S-CD23過量生產之失調的醫藥組成物，其包含根據申請專利範圍第1或2項任一項的化合物，及為此之可選擇醫藥可接受載體。_ 6. —種用來製備根據申請專利範圍第1或2項任一項之化合物的方法，該方法包含： (a) 式（II)化合物脫保護基： -30 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210 x 297公釐） 200303745 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 .0 ii (II) 、N〆 I OP 其中P是保護基圑，或 (b) 將式（III)化合物甲醯基化： .0 〇 I Η OH .〇經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 (III) 或（C)氧化式（X)化合物： OH (X) 7.—種式（II)化合物：其中P是保護基團。〇 II S、〇、n/^〇 I 0P (II) -31 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（21() X 297公釐） 200303745 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 8. —種式（III)化合物：〇 i (III) 9. 一種式（X)化合物：〇馨 i OH (X) 訂線經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 2 3 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210 X 297公爱） i i 200303745 (一）、本案指定代表圖爲：第_匱 (二）、本代表圖之元件代表符號簡單說明：

本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的_ 化學式：螬 , ·

OH 2-1 (I)