TARIFNAME FEMTOSANIYE LAZER KÜTLE SPEKTROMETRESININ KULLANILDIGI ISLENMIS GIDALARIN ANALIZI IÇIN BIR YÖNTEM Teknik Alan Bulus; farkli türdeki dokulara sahip islenmis gidalarin birbirinden ayirt edilmesi ve bayatlama/bozulma seviyesinin tayini için bir yöntem ve bu yöntemin uygulandigi bir Cihaz ile ilgilidir. Bulusa konu yöntem; femtosaniye (ts) atimli lazer sistemine baglanan lineer uçus zamanli kütle spektrometresinin (L-TOF-MS) bir arada kullanildigi cihazda gerçeklestirilmektedir. Teknigin Bilinen Durumu Kütle spektrometresi (MS) tekniginin kullanimi 19. yüzyilin baslarina dayanmakta olup, arastirmacilarin birtakim materyallerin karmasik yapilarina dair kapsamli bilgiler edinmesini mümkün kilmaktadir. Lazer 1960'larda kesfedildikten sonra ise, lazer iyonizasyon kütle spektrometri (LlMS) teknigi yaygin olarak kullanilmaya baslanmistir. Öncü kütle spektroskopi tekniklerinden lazer iyonizasyon kütle spektrometri (LIMS), biyolojik ve kimyasal numunelerin analiz edilmesi isleminde uygulanan hizli, belirgin ve güvenilir bir teknik olarak bilinmekte (Liu et al., 2010), materyallere ait özeliklerin anlasilmasinda kolayliklar saglamaktadir. LIMS ilk olarak mikrosaniye (ms) ve nanosaniye (ns) atimli lazerler kullanilarak uygulanmistir, ancak kaydedilen spektrumdaki iyon pikleri, ana iyonun oldukça etkin bir sekilde parçalanmasindan kaynaklanan bazi genis iyon pikleri elde edilmektedir. Femtosaniye (fs) lazer atimlari kullanilarak elde edilen kütle spektrumlarinda ise, özellikle kimyasallarda parçalanma/iyonlasma ve ayrisma sirasinda iyonik yogunluklarin yeterli olmasi ve ana iyonun kirilmadan elde edilebilmesi oldukça basarili yorumlarin yapilmasini 1998; K. W. Ledingham et al., 1995) Lazer temelli kütle spektroskopi arastirmalarinda, puls süresi iyon olusum mekanizmasini etkilemektedir. Femtosaniye lazer kütle spektrometresi (FLSM) teknigi, herhangi bir formda olan gaz, sivi veya kati materyallerin ve hatta herhangi bir formda olan biyolojik ürünlerin bilesimlerinin arastirilmasinda yaygin olarak olarak kullanilmaktadir. Literatürdeki çalismalar, fs lazer atimlari kullanilarak elde edilen iyon piklerinin, ayrilma ve parçalanma islemlerinin bir sonucu olarak ns veya daha kisa lazer atim sürelerinde kaydedilen kütle spektrumlarindaki desene kiyasla daha etkili oldugunu göstermektedir(Kilic et al., 1997; Kilic, et al., 1998; Smith, Ledingham, Singhal, et al., 1998). Darbeli lazer teknolojisinde meydana gelen son gelismeler, arastirmacilarin tek bir lazer darbesi dahilinde yüksek foton yogunluklari elde edebilmelerini olanakli kilmistir. Lazer esasina dayanan kütle spektrometri teknikleri; peptidler, proteinler vb. gibi büyük organik moleküler yapilar (Singhal, 2002) da dahil olmak üzere, kimyasal ve biyolojik numunelerin incelenmesinde essiz özelliklere sahiptir. Lazer esasina dayanan kütle spektrometresi teknigi, lazer-doku etkilesiminde tip alaninda, kanserli ve saglikli dokular gibi farkli doku numunelerinin birbirinden ayirt edilmesinde önemli bir uygulama hâline gelmistir. Son yillarda, birtakim karakteristik çalismalar için dokular üzerinde kütle spektroskopi arastirmalari gerçeklestirilmistir(Gündogdu, 2018; Gündogdu, Alptekin, Karabagli, Sahin, & Kilic, 2019; Gündogdu, Karabagli, Alptekin, Sahin, & Kiliç, 2019; Gündogdu & Kiliç, 2018).Kütle spektrometri tekniklerinin kullanildigi insanlar üzerinde gerçeklestirilen mevcut çalismalarda, dokularin kimyasal yapilarini tanimlayan önemli bilgiler saglandigi bilinmektedir (Compton, Reschke, Friend, Powell, 8: Vertes, 2015; Verbueken, Van de Vyver, Broe, & Grieken, 1986; Veselkov et al., 2014). Arastirmacilar, dokulari meydana getiren moleküllerin morfolojik karakteristiklerini belirlemek amaciyla çok sayida çalisma gerçeklestirmistir (Snedden & Parker, 1971). Geçtigimiz yillarda kütle spektroskopisinin kullanildigi et tanimlama çalismalari; bu alanda meydana gelen öncü gelismelerden biri hâline gelmis olup, dokulardan elde edilen kütle spektrumlari dahilindeki her bir iyon pikinin tespiti için yüksek hassasiyet saglandigindan güvenilir ve kesin sonuçlar ortaya koymaktadir. Gida güvenligi açisindan saglikli et ürünlerinin tüketimi de; güvenilir, hassas ve hizli bir analiz tekniginin kullanimi ile mümkündür. Teknigin bilinen durumunda et ürünlerinin tespiti için çesitli yöntemlerin kullanildigi bir çok çalisma bulunmaktadir. Lazer temelli kütle spektrometride analiz öncesinde numune hazirlama sürecinin olmamasi, hizli ve güvenilir sonuç vermesi, spektrumda düsük kütleli bölgede (kütle/yük 1-100 amu) analiz yapmanin mümkün olmasi bu teknigin en önemli avantajlari arasindadir (Black, Chevallier, & Elliott, 2016; Montowska, Alexander, Tucker, & Barrett, 2014; Sentandreu spektrometresi (RElMS) teknigi, oldukça yüksek dogruluk seviyeleri ile gida güvenligi Zhou et al., 2016). Yine teknigin bilinen durumunda, bazi et türleri lazer ablasyon elektrosprey kütle spektrometresi (LAESI-MS) kullanilarak analiz edilebilmekte ve akabinde et türlerinin tanimlanabilmesi için temel bilesen analizi (PCA) istatistiksel yaklasimi uygulanmaktadir (Zhou et al., 2016). Ancak; bu kütle spektroskopi tekniklerinini tamaminda oldukça kapsamli, kompleks ve uzun zaman alan ön numune hazirlama islemlerinin gerçeklestirilmesi gerekmektedir. Bu durum da, analiz süresini uzatmakta ve sürecin yavas islemesine sebebiyet vermektedir. Bu nedenle, mevcut tekniklerin hizli sonuç alinmasi gereken operasyonlar esnasinda kullanilmasi uygun degildir. Kütle spektrometresi kullaniminda, hizli buharlasmali iyonizasyon kütle spektrometresi (REIMS), lazer ablasyon elektrosprey kütle spektrometresi (LAESl-MS) ve matris destekli lazer desorpsiyon/iyonizasyon (MALDl) yöntemleri, dokularin tanimlanmasi ve karakterizasyonu için daha büyük moleküllerin (m/z 500) analiz edilmesinde kullanildigi bilinmektedir. Söz konusu olan bu yöntemler, büyük kütle bölgelerinin (m/z 500) elde edilebilmesi için kullanilmasi gereken tekniklerdendir. Ancak, lineer uçus zamanli kütle spektrometresi (L-TOF-MS) ile karsilastirildiginda, bu yöntemlerin karmasik oldugu ve patoloji Iaboratuvarlarinda gerçeklestirilen genel uygulamalarda degerlendirilebilmeleri için pahali sistemlere gerek oldugu bir gerçektir. Özellikle, söz konusu olan yöntemler için numunelerin hazirlanmasi süreci, dokularin iyonizasyon ve fragmantasyonu, ve dokularin buharlastirilmasinin gerçeklestirilebilmesi için karmasik protokolleri gerektirdiginden, bir numune üzerinde ciddi tehlikelere sebebiyet verebilmektedir. Mevcut çözümlerin konu hakkindaki yetersizligi nedeniyle, ilgili teknik alanda bir gelistirme yapilmasi kaçinilmaz bir sekilde gerekli görülmüstür. Söz konusu bulus; teknigin bilinen durumundaki dezavantajlarin giderildigi, femtosaniye lazer kütle spektrometresi (FLMS) ile gida analizi yapilmasi ve gida kalitesinin belirlenmesi için bir yöntem ile ilgilidir. Bulusun Kisa Açiklamasi ve Amaçlari Mevcut bulus, yüksek güçte bir femtosaniye (fs) atimli lazer sistemi ile birlikte kullanilan lineer uçus zamanli kütle spektrometresi (L-TOF-MS) vasitasiyla, kasap ürünlerinin ayrismali iyonlasmasini (DI) temel bir gida analiz yöntemi ile ilgilidir. Mevcut çalismada, çesitli gida dokularindan alinan veriler PCA teknigi kullanilarak analiz edilip yorumlanmaktadir. Mevcut çalismada, kütle spektrum deseninde yalnizca küçük kütle (m/z 60-100 amu) bölgesi piklerinin kullanilmasi bile, gida numunesinin belirgin bir biçimde tanimlanmasini mümkün kilmaktadir. Bu da, bulusta kullanilan teknigin oldukça etkili oldugunu ortaya koymaktadir. Bulusun bir amaci; islenmis gidalarin hassas, hizli ve güvenilir bir sekilde tayin edilmesidir. Bulus sayesinde, gidalarin tayini için herhangi bir numune hazirlama asamasi bulunmamakta ve dogrudan gida dokusundan analiz yapilabilmektedir. Gida numuneleri, bulusa konu yöntemin uygulandigi cihaz, gidanin bir numune giris valfi ile dogrudan yüksek vakum kosullari (10'5 mbar) saglayan kütle spektrometresi içerisine hizli bir sekilde transferini mümkün kilmakta olup, söz konusu gida numunesi mikro saniyeler gibi oldukça kisa bir süre zarfinda analiz edilebilmektedir. Tüm bilgiler, tek bir lazer atim süresi içerisinde elde edilmekte ve sonuç bilginin tamamina ulasilabilmektedir. Bulusun bir diger amaci; et ve et ürünlerinin bayatlik seviyesinin ve kalitesinin belirlenmesidir. Bulusun bir diger amaci; karisim halindeki et ve et ürünlerinin karisim oranlarinin hassas, hizli ve güvenilir bir sekilde belirlenmesidir. Bulusa konu yöntem ile, farkli hayvanlardan elde edilen et ürünlerinin (koyun eti, keçi eti, dana eti, domuz eti, at eti vb.) analizi hizli bir sekilde yapilarak hangi üründen hangi oranda bulundugu ve herhangi bir eskime-bozulma olup olmadigi ile son kullanma tarihinin bozulum sürecine uygun olup olmadigi tayin edilebilmektedir. Bulusun bir diger amaci; farkli gida dokularinin açik bir sekilde ayirt edilebilmesi için kullanici hatasindan bagimsiz bir gida analiz yöntemi saglanmasidir. Bulusa konu yöntem ile özellikle et ürünleri hizli ve hijyenik bir sekilde analiz edilebilmekte ve güvenilir gida tüketimi saglanmaktadir. Bulusu Açiklayan Sekillerin Tanimlari Sekil 1: Bulusa konu femtosaniye lazer kütle spektrometresi (FLMS) cihazinin sematik gösterimi. Sekil 2: A, B ve C'den elde edilen kütle spektrumlari (Bu analizde 6.84 - 1014 W/cmz'lik lazer yogunlugu kullanilmistir ve burada A: Kuzu eti, B: Sigir Eti-2, C: Sigir Eti-1'i ifade etmektedir.). Sekil 3: A, B ve D'den elde edilen kütle spektrumlari (Bu spektrumlar 1.8 W lazer darbe gücü kullanilarak, 800 nm'lik lazer dalga boyunda, 90 femtosaniye darbe süresi ile kaydedilmistir ve burada A: Kuzu eti, B: Sigir Eti-2, D: Kemik Sekil 4: Temel bilesen analizi (PCA) grafik çizimi için veri isleme is akisi. Sekil 5: CZHn+, CSHn+ iyonlarinin kullanildigi (a) temel bilesen analizi (PCA) ve (b) t-testi sonuçlari (burada A: Kuzu eti, B: Sigir Eti-2, C: Sigir Eti-Ti ifade etmektedir.). Sekil 6: Yalnizca C3Hn+ iyonlarinin kullanildigi (a) temel bilesen analizi (PCA) sonuçlari ve (b) iyonlarin dagilim grafigi (burada A: Kuzu eti, B: Sigir Eti-2, C: Sigir Eti-1'i ifade etmektedir.). Sekil 7: A, B ve D spektrumlarindan elde edilen temel bilesen analizi (PCA) sonuçlari (burada A: Kuzu eti, B: Sigir Eti-2, D: Kemik numunesini ifade etmektedir.). Bulusu Olusturan UnsurlarinlKisimlarinIParçalarin Tanimlari Bu bulusta kullanilan femtosaniye lazer iyonizasyon kütle spektrometresi (fs-LIMS) yöntemi ile kullanilan femtosaniye (fs) atimli lazer sistemine baglanan L-TOF_MS cihazinin daha iyi açiklanabilmesi için sekillerde yer alan parça ve kisimlar numaralandirilmis olup, her bir numaranin karsiligi asagida verilmektedir: 1. F3 lazer sistemi 2. Demet Bölücü 3. Lens Numune giris valfi Numune ablasyon odasi iyonizasyon çemberi Elektrostatik levhalar 997499" Serbest Uçus Tüpü 9. Dedektör .Bilgisayar tabanli dijital depolayici osiloskop 1 1 .Veri Analiz Sistemi Bulusun Ayrintili Açiklamasi Bulus, farkli türdeki dokulara sahip islenmis gidalarin birbirinden ayirt edilmesi ve bayatlama/bozulma seviyesinin tayini için bir yöntem ve bu yöntemin uygulandigi bir cihaz ile ilgilidir. Mevcut bulusta, yüksek vakum kosullarinda (--10'8 - --10'6 mbar numune basincinda), bir femtosaniye lazer iyonizasyon kütle spektrometresi (fs-LIMS) kullanilarak gida numune spektrumlarina ait femtosaniye lazer fragmantasyon/iyonizasyonu süreci gerçeklestirilmekte ve elde edilen kütle spektrumlari lineer uçus zamanli kütle spektrometresi (L-TOF-MS) kullanilarak islenmis gida ürünleri spektroskopik olarak analiz edilmektedir. Daha sonra veri boyutu temel bilesen (PCA) analizi yöntemiyle düsürülmekte ve farkli gida dokulari birbirinden ayirt edilmektedir. Bulusta temel bilesen analizi (PCA) sonuçlarina ek olarak t-testi kullanilabilmekte ve kütle spektrumlarindan elde edilen sonuçlar, istatistiksel bir islem olarak PCA yöntemi vasitasiyla açiklanmaktadir. T-test; PC1 ve PC2 eksenlerine bakilip numunelerin birbirinden ayirt edilip edilmemesine göre karar verilip gerektigi durumda ayirt etmenin derecesini ortaya koymak için yapilmaktadir. Bulusta, lazer sinyali görüntüleme ve spektrumlarin görüntülenerek kaydedilmesinde bilgisayar tabanli dijital depolayici osiloskop (10) kullanilmaktadir. Burada bilgisayar tabanli ifadesiyle, herhangi bir isletim sistemine sahip bilgisayar sistemi kastedilmektedir. Bulusta kullanilan cihaz; temel olarak bir femtosaniye (fs) lazer sistemi (1), bir vakum odasi ve veri toplama sistemlerinden meydana gelmektedir. iyonizasyon kaynagi olarak 200 nm-2000 nm dalgaboyu araliginda femtosaniye lazer sistemi (1) kullanilmaktadir. Bulusta kullanilan kütle spektrometresi cihazi; numune ablasyon odasi (5), m/z oranlarina sahip iyon sinyallerinin ölçülmesi ve kütle spektrumlarinin kaydedilmesi için dedektör, lazer sinyali görüntüleme ve kütle spektrumlarinin görüntülenerek kaydedilip analiz edilmesi için bilgisayar tabanli osikoskop, demet bölücü (2), vakum odasi, elektrostatik lensler içermektedir. Numune ablasyon odasinda (5), fs lazer sistemi (1) ile gida numunesinin doku etkilesimi saglanmaktadir. Bulusta, rotatif ve turbo vakum sistemleri kullanilmaktadir. Ayrica, lazerin ve elektrostatik levhalara (7) (iyon optikleri) uygulanan gerilimlerin kontrolünde, dedektör (9) ve kütle spektrometresinin vakum bilesenlerinde bir takim elektronikler kullanilmaktadir. Elektronikler, vakum pompasina ait bilesenler ve lazer iyonizasyon esnasinda kullanilan elektrostatik levhalara (7) verilen gerilim kaynaklarindan olusmaktadir. Sekil 1'de verilen elektrostatik levhalara (7) sirasiyla 5kV, 1kV,1OO kV seklinde gerilimler uygulanmaktadir ve bu esnasinda gerilim kaynaklari kullanilmaktadir. Ayni zamanda 9 numara ile verilen detektöre de gerilim kaynagi kullanilarak 1.82 kV uygulanmaktadir. Bulusa konu islenmis gidalarda farkli gida dokularinin birbirinden ayirt edilmesi ve bayatlama/bozulma seviyesinin tayini için yöntem; i. islenmis gida numunesinin/numunelerinin herhangi bir numune hazirlama islemine tabi tutulmadan yüksek vakum ortamina sahip numune ablasyon odasinda (5) femtosaniye (fs) lazer sisteminden (1) 3-10 cm'lik odak uzakligina sahip lens kullanilarak gönderilen 200-2000 nm dalga boyu araliginda birinci lazer demeti ile ablasyon yoluyla buharlastirilmasi, ii. Buhar formundaki numunenin numune giris valfi (4) araciligiyla iyonizasyon çemberine (6) sürülmesi, iii. 200-2000 nm dalga boyu araliginda ikinci lazer demeti araciligiyla buhar formundaki numunenin iyonlastirma sürecinin gerçeklestirilmesi, iv. Olusan iyonlarin elektrostatik lensler araciligiyla serbest uçus tüpünden (8) geçerek ivmelendirilmesi ve dedektöre gönderilmesi, v. Detektöre ulasan iyonlarin bilgisayar tabanli dijital depolayici osiloskop (10) ile görüntülenmesi ve bilgisayarda kaydedilmesi, vi. Kaydedilen verilerin temel bilesen analiz yöntemlerinden birisi ile ayirt edici bir sekilde veri analiz sisteminde (11) analiz edilmesi, Bulusta temel bilesen analiz yöntemlerinden Temel Bilesen Analizi (Principal Component Analysis, PCA) ve Faktör Analizi (Factor Analysis, FA) yararlanilarak veriler analiz edilmektedir. Her iki istatistiksel yaklasim da numunelerin birbirinden farkini ortaya koymakta kullanilan istatistiksel hesap yöntemleridir. Bayatlama süreci gidalarin kimyasinda olusan degisimle meydana gelmektedir ve kütle spektroskopinin temelinde bir madde içerisinde bulunan kimyasal yapiyi açiga çikartmaktadir. Bu kimyasal yapinin kütle spektrumundaki karekteristik özelligi belirlenerek, malzemedeki degisim oraninin zamana göre gelisim sürecine dayali olarak saptanabilmektedir. L-TOF-MS kütle spektrometresi kullanilarak Sekil 2 ile verilen kütle spektrumlari elde edilmektedir. Spektrumdaki her bir pik bir molekül degerine karsilik gelmektedir. Bu moleküllerin kütleleri m=at2+b denklemi ile saptanarak kimyasal yapinin kütle spektrumunda neyi ifade ettigi ortaya koyulmaktadir. Bulusta kullanilan fs lazer sistemi (1), 80-100 MHz'lik, tercihen 85 MHz'Iik tekrarlama 90 femtosaniye lazer atimi üretebilen bir osilatör lazer sistemidir ve 1-3 kHz'lik femtosaniye, tercihen 90 femtosaniye lazer atimi üreten bir güçlendirici fs lazer sistemini (1) pompalamak için kullanilmaktadir. Fs lazer sisteminin (1) 3.5 W atim gücü olup; fs lazer sisteminin (1) çikis gücü, dairesel nötral yogunluk filtresi ile kontrol edilmekte ve bir güç ölçer kullanilarak ölçülmektedir. Söz konusu fs lazer sistemi (1), doku ablasyonunu gerçeklestirmek amaciyla bir enerji kaynagi olarak ve çoklu foton uyarim ve ayrismali iyonlasma (Dl) islemleri vasitasiyla çikarilan malzeme buharindan iyon Bulusta, iyonlarin tespit edilmesi ve kütle spektrumlarinin uçus zamaninin bir fonksiyonu olarak elde edilmesi için bir lineer uçus zamanli kütle spektrometresi (L-TOF-MS) kullanilmaktadir. Sekil 2'de gösterilen her bir iyon için kütle/yük (m/z) oranini dönüstürmek üzere asagidaki denklem kullanilmaktadir: Söz konusu olan lineer uçus zamanli kütle spektrometresi (L-TOF-MS); bir numune giris valfi (4), bir iyon kaynagi, 120 cm uzunlugunda bir alansiz serbest uçus tüpü (8) ve serbest uçus tüpünün (8) ucuna sabitlenen ve iyon sinyalini görüntülemek, depolamak ve kisisel bir bilgisayar (PC) ortaminda analiz etme olanagini saglamak için dogrudan dört kanalli bir dijital depolama osiloskopuna baglanan bir mikro kanalli plaka (MCP) dedektörü (9) içermektedir. Çoklu foton ayrismali iyonlastirma (DI) islemi vasitasiyla üretilen pozitif iyonlar, iyonlasma bölgesinden elektrostatik lensler araciligiyla çikarilmakta, hizlandirilmakta ve çikarmada uygulanan bir elektrik alani ve elektrostatik lenslerin odaklanmasi vasitasiyla dedektör üzerine yönlendirilmektedir. Birinci elektrostatik levha (7) bir itici plaka olup, 4- 6 kV'Iuk bir voltajda tutulmaktadir. Ikinci ve üçüncü elektrostatik levhalar (7) ise sirasiyla , einzel lenslerdir (einzel mercegi). Vakum odasi içerisindeki arka plan basinci, numunenin uygulanmasindan önce «10'7 mbar ve deneyler esnasinda ..106 mbar civarinda bir numune basincinda kararli bir sekilde tutulmaktadir. ilaveten, kütle spektrometresine ait tüm parametreler, en iyi kütle ve uzay çözünürlügünü saglayacak sekilde belirlenmektedir. Bulusta kullanilan fs lazer sisteminde (1); demet bölücü (2), iki farkli islem için kullanilmak üzere lazer demetini istenilen oranda iki ayri kola bölünmesini saglamaktadir. Bu iki demetten birisi numunenin dokudan ablate edilmesi, dokunun buharlastirilmasi için kullanilmaktadir. Ikinci asamada ise, ikinci lazer demeti numunenin iyonlastirilmasi amaci ile kullanilmaktadir ve akabinde tespit asamalari ikinci lazer demeti vasitasiyla gerçeklestirilmektedir. Birinci lazer demeti, numunenin ablasyonu ya da buharlastirilmasi için numune ablasyon odasinda (5) bulunan doku üzerine odaklanmakta, ikinci lazer demeti ise vakum ortaminda iyonizasyon çemberi (6) içerisine sürülen numune üzerine odaklanmaktadir. Bu demetlerin enerjileri numune karakteristiklerine bagli olarak ayarlanmaktadir. Bulusta, islenmis gida numuneleri herhangi bir numune hazirlama islemine tabi tutulmadan yüksek vakum ortamina sahip numune ablasyon odasi (5) içine yerlestirilmekte ve birinci lazer kolundan çikan demet (Demet 1), materyallerin dokulardan kesilip çikarilabilmesi için 3-10 cm'lik odak uzakligina sahip lens (3) kullanilarak numune üzerine odaklanmaktadir. Ikinci lazer kolundaki demet (Demet 2), Demet 1 vasitasiyla üretilen numune plazmasini iyonize etmek için kullanilmaktadir. Bulusa konu yöntemde, fs lazer sistemi (1) ile gerçeklestirilen lazer iyonizasyonu, partikülleri dokudan yalnizca odaklanma noktasinda bulunan lazer spot hacmi içerisinde (~70 pm) gerçeklestirilmektedir. Bulusa konu yöntemde, analiz edilen gidaya iliskin tüm bilgilerin gösterilebilmesi için herhangi bir numune hazirlama prosedürüne gerek olmadan, lazer atimi vasitasiyla dogrudan dokunun kendisinden çikarilan/buharlastirilan çok küçük miktarlarda numune yeterli olmaktadir. Ayrica, lineer uçus zamanli kütle spektrometresi vasitasiyla daha düsük kütle bölgesi ile birbirinden ayirt edilebilir dokularin elde edilmesi mümkün olmaktadir. Bulusta, analiz edilen farkli numuneler, PCA istatistiksel yöntemi vasitasiyla m/z oranlarinin 100 amu'dan küçük kütle bölgesinde birbirinden ayirt edilmektedir. PCA yöntemi, farkli bilesenleri ayirt etmek amaciyla yaygin olarak kullanilan ve çok degiskenli analiz ve boyut indirgeme yöntemi olarak da bilinen tekniklerden biridir. T- testi istatistiksel yaklasimi ise, genel olarak birbirinden bagimsiz iki veri örnegine ait parametreler karsilastirmak üzere kullanilmaktadir. Bulusta, temel bilesen analizi (PCA) teknigi kullanilarak farkli gida numuneleri ayirt edilebilmektedir. Ancak, bazi durumlarda PCl ve PC2 eksenlerindeki gruplar arasinda birbirine yakin ya da iç içe geçmis yapilar gözlenmesi dolayisiyla t-testi, temel bilesen analizi (PCA) sonuçlarinin açiklanmasinda faydali olmaktadir. Temel bilesen analizi (PCA); öncelikle verilerden temel bilgiler alinmasi, ardindan temel bilgileri tutarak veri boyutunun sikistirilmasi ve bunlarin daha anlasilir hâle getirilmesi, degiskenlerin yapilarinin analiz edilmesi islem adimlarini içermektedir. Temel bilesen analizinde (PCA) temel bilesenler hesaplanmakta, ayrica; belirlenen temel bilesenler ile dokular arasindaki farklarin tanimlanabilmesi için de uygulanabilmektedir. Bulusa konu yöntemin ilk adiminda, analiz edilecek tüm dokular fs lazer sistemi (1) kullanilarak lazer iyonizasyonu/disosiyasyonunu elde etmek için lazer isinimina maruz birakilmaktadir. Bu noktada kusursuz bir temel bilesen analizi (PCA) için; lazer atim gücü, lazer odak uzakligi. lazer açisi gibi parametrelerinin ve vakum kosullarinin seçilmesi ve analiz esnasinda degismeden muhafaza edilmesine dikkat gösterilmesi gerekmektedir. Dolayisiyla, bulusta numune basinci da dahil olmak üzere, tüm parametreler sabit tutulmaktadir. Ikinci adim olarak, iyon veriminin belirlenebilmesi için kayit edilen her bir kütle spektrumu dikkatli bir sekilde analiz edilmektedir. Bu islenmemis kütle verileri, seçilen iyon piklerine ait iyon yogunluklari kullanilarak bir nxn veya bir nxm matrisinin olusturuldugu kütle spektrumlari dahilinde maksimum iyon pikine normalize edilmektedir. Temel bilesen analizi (PCA) fonksiyonu, sonuçlarin görüntülenebilmesi için alinan skor verisine uygulanmaktadir. Son olarak; elde edilen sonuçlar, Sekiller 5 ve 6'da gösterildigi gibi grafik formunda ortaya konmaktadir. Temel bilesen analizi (PCA) sonuçlari, ilgili grafiklerin çizilebilmesi için gerekli verileri saglamaktadir. Bu PCA grafiklerden iki farkli bilgi elde edilmektedir. Bu bilgilerden ilki, skor çizimi olarak adlandirilirken, ikincisi ise yükleme çizimidir. Skor çizimleri, analiz edilen gida numunelerinin arasindaki birtakim farkliliklari ortaya koyarken; yükleme çizimleri ise numuneler arasindaki söz konusu farklardan sorumlu olan verileri göstermektedir. Bulusun bir uygulamasinda; bulusa konu yöntem ile iki farkli türde sigir eti (B: Sigir Eti- 2, C: Sigir Eti-1) için elde edilen kütle spektrumlari arastirilmis ve her iki numune için de benzer kütle iyon pik yogunluklarinin elde edildigi görülmüstür. Kütle spektrumlarinda C2Hn, C3Hn iyon gruplari, benzer iyon yogunluklari göstermektedir, ancak temel bilesen analizi (PCA) teknigi; A: Kuzu eti, B: Sigir Eti-2 ve C: Sigir Eti-1 arasindaki farklari belirgin bir sekilde ortaya koymaktadir. A, B ve C kütle spektrumlarinin elde edilmesi için, yalnizca spektrumlarin düsük kütle bölgesinde yer alan C2Hn, C3Hn iyon gruplari kullanilarak iki boyutlu temel bilesen analizi (PCA) gerçeklestirilmis ve Sekil 5 ile Sekil 6'da temel bilesen analizi (PCA) istatistiklerinden elde edilen sonuçlari gösterilmistir. Sekil 5a, A, B ve C için olan temel bilesen analizinden (PCA) elde edilen sonuçlari göstermektedir. PCl eksenine göre; A, B ve C birbirlerinden açik bir sekilde ayirt edilebilmektedir. Ancak; Sekil 2'de de gösterildigi üzere, yalnizca benzer iyon yogunluklarini temsil eden CzHn+ ve CsHn+ iyon gruplarinin seçilmesi durumunda B ve C PC1 ekseninde birbirlerinden ayirt edilememektedir. Bu durumda ise t-testi uygulanmakta ve hipotez sonuçlarinda (Sekil 5b) da görüldügü üzere, bunlardan daha küçük bir alfa degeri (5105) elde edilmektedir. Bu dogrultuda; analiz edilecek gida numunelerinin, C2Hn* ve CßHn+ iyon gruplari kullanilarak kütle spektrumlari dahilinde temel bilesen analizi (PCA) istatistiklerinin uygulanmasi suretiyle birbirinden ayirt edilemedigi sonucuna varilmaktadir. Ancak, Sekil 5b'de belirtildigi üzere, 1 degerine sahip olan alfa durumunda 10'1 ila 10"4 alfa degerleri, anlamlilik düzeyleri için t-testinden faydalanilarak tanimlanabilmektedir. PC1 ekseninde A, B ve C açik bir sekilde birbirlerinden ayirt edilebilmekteyken; PCZ ekseninde B ve C numuneleri PCA ve t-test kullanilarak birbirlerinden ayirt edilebilmektedir. Ancak PC2 ekseninde B, C birbirinden ayirt edilebilmesine ragmen her ikisi de A'dan ayirt edilememektedir. Dolayisiyla burada yine t-testinin gerçeklestirilmesi gerekmektedir. B ve C için PC2 eksenine baktigimizda, birbirinden ayirt etmenin iyi olmasindan dolayi, bu eksen için B ve C numunelerine t-testinin gerçeklestirilmesine gerek olmamaktadir. Sekil 6'da görülen her bir nokta, lineer uçus zamanli kütle spektrometresi vasitasiyla A, B ve C'den elde edilen 10 adet kütle spektrumu verisini göstermekte olup; eksenler dolayisiyla gruplarin dagilimini belirten Sekil 6b'deki yükleme çizimlerinde gösterilen 45, 46, ve 47 oranlarina sahip 12 kütleli iyon pikleri ele alinmaktadir. Sekil 6b'de gösterildigi üzere A, B ve C; kuzu etinin sigir etinden farklilastirilmasi için ana iyon pikleri olan, m/z 36, 37, 38 ve 39 iyon piklerinden ötürü, Sekil 6a'da belirtilen temel bilesen analizi (PCA) sonuçlari kullanilarak birbirlerinden ayirt edilmistir. Sekil 7'de kuzu kemik numunesi (D), A ve B için temel bilesen analizi (PCA) sonuçlarina ait iki boyut (PCi ve PC2) gösterilmektedir. Tüm veriler, 90 femtosaniyede, 1 kHz'lik tekrarlama frekansinda ve 800 nm dalga boyunda 1.8 W lazer darbe gücü kullanilarak alinmis ve kaydedilmistir. Elde edilen istatistik sonuçlardan bazilari, Sekil 7'de de görülebilecegi üzere, PCi ve PCZ eksenlerinin A, B ve D'yi birbirlerinden ayirt edebilecegini göstermektedir. Grafik üzerinde yer alan her bir nokta, C1Hn+, C2Hn+, CsHn*, C4Hn*, C5Hn*, CeHn*, C7Hn+ ve m/z 93, toplamda 71 kütle/yük iyon pik yogunlugu dikkate alinarak belirlenmistir. Özellikle, Sekil 3'te gösterilen farkli türden kütle spektrumlari, Sekil 7'ye göre PC2 eksenlerinde ayirt edilebilmektedir. TR TR TR DESCRIPTION A METHOD FOR THE ANALYSIS OF PROCESSED FOOD USING A FEMTOSECOND LASER MASS SPECTROMETTER Technical Field Invention; It relates to a method for distinguishing processed foods with different types of textures and determining the level of staling/spoilage, and a Device to which this method is applied. The method subject to the invention; It is carried out in a device that combines a linear time-of-flight mass spectrometer (L-TOF-MS) connected to a femtosecond (ts) pulsed laser system. Known Status of the Technique The use of the mass spectrometry (MS) technique dates back to the early 19th century and enables researchers to obtain comprehensive information about the complex structures of some materials. After laser was discovered in the 1960s, the laser ionization mass spectrometry (LlMS) technique began to be widely used. Laser ionization mass spectrometry (LIMS), one of the leading mass spectroscopy techniques, is known as a fast, specific and reliable technique applied in the analysis of biological and chemical samples (Liu et al., 2010), and provides convenience in understanding the properties of materials. LIMS was first implemented using microsecond (ms) and nanosecond (ns) pulsed lasers, but the ion peaks in the recorded spectrum yield some broad ion peaks resulting from highly efficient fragmentation of the parent ion. In the mass spectra obtained using femtosecond (fs) laser pulses, the fact that the ionic densities are sufficient, especially during the disintegration/ionization and dissociation of chemicals, and the main ion can be obtained without breaking, have been very successful comments in 1998; K. W. Ledingham et al., 1995) In laser-based mass spectroscopy research, pulse duration affects the ion formation mechanism. Femtosecond laser mass spectrometry (FLSM) technique is widely used to investigate the composition of gaseous, liquid or solid materials in any form and even biological products in any form. Studies in the literature show that the ion peaks obtained using fs laser pulses are more effective compared to the pattern in the mass spectra recorded at ns or shorter laser pulse durations as a result of separation and fragmentation processes (Kilic et al., 1997; Kilic, et al., 1998). ; Smith, Ledingham, Singhal, et al., 1998). Recent advances in pulsed laser technology have enabled researchers to achieve high photon densities within a single laser pulse. Mass spectrometry techniques based on laser; peptides, proteins etc. It has unique properties in the examination of chemical and biological samples, including large organic molecular structures such as (Singhal, 2002). Laser-based mass spectrometry technique has become an important application in the field of medicine in laser-tissue interaction and in distinguishing different tissue samples such as cancerous and healthy tissues. In recent years, mass spectroscopy studies have been carried out on tissues for some characteristic studies (Gündogdu, 2018; Gündogdu, Alptekin, Karabağlı, Şahin, & Kılıç, 2019; Gündogdu, Karabağlı, Alptekin, Şahin, & Kılıç, 2019; Gündogdu & Kılıç, 2018) . It is known that existing studies conducted on humans using mass spectrometry techniques provide important information describing the chemical structures of tissues (Compton, Reschke, Friend, Powell, 8: Vertes, 2015; Verbueken, Van de Vyver, Broe, & Grieken, 1986; Veselkov et al. , 2014). Researchers have carried out many studies to determine the morphological characteristics of the molecules that make up tissues (Snedden & Parker, 1971). In recent years, meat identification studies using mass spectroscopy; It has become one of the pioneering developments in this field and provides reliable and precise results as high sensitivity is provided for the detection of each ion peak within the mass spectra obtained from tissues. Consumption of healthy meat products in terms of food safety; It is possible with the use of a reliable, sensitive and fast analysis technique. In the state of the art, there are many studies using various methods for the detection of meat products. The most important advantages of this technique are that there is no sample preparation process before analysis in laser-based mass spectrometry, it provides fast and reliable results, and it is possible to perform analysis in the low-mass region of the spectrum (mass/charge 1-100 amu) (Black, Chevallier, & Elliott, 2016; Montowska, Alexander, Tucker, & Barrett, 2014; Sentandreu spectrometry (RElMS) technique is associated with food safety with extremely high levels of accuracy Zhou et al., 2016). Again, in the state of the art, some meat types can be analyzed using laser ablation electrospray mass spectrometry (LAESI-MS), and then the principal component analysis (PCA) statistical approach is applied to identify meat types (Zhou et al., 2016). However; In all of these mass spectroscopy techniques, very comprehensive, complex and time-consuming preliminary sample preparation processes must be carried out. This situation prolongs the analysis time and causes the process to run slowly. For this reason, it is not appropriate to use existing techniques during operations that require rapid results. In the use of mass spectrometry, rapid evaporation ionization mass spectrometry (REIMS), laser ablation electrospray mass spectrometry (LAESl-MS) and matrix-assisted laser desorption/ionization (MALDl) methods are used to analyze larger molecules (m/z 500) for the identification and characterization of tissues. It is known to be used in making These methods are among the techniques that should be used to obtain large mass regions (m/z 500). However, compared to linear time-of-flight mass spectrometry (L-TOF-MS), it is a fact that these methods are complex and require expensive systems to be evaluated in general applications in pathology laboratories. In particular, the process of preparing samples for the methods in question can cause serious hazards to a sample, as it requires complex protocols to perform ionization and fragmentation of tissues, and evaporation of tissues. Due to the inadequacy of existing solutions on the subject, it has inevitably been deemed necessary to make a development in the relevant technical field. The invention in question; It is about a method for food analysis and determination of food quality with femtosecond laser mass spectrometry (FLMS), in which the disadvantages of the known state of the art are eliminated. Brief Description and Purposes of the Invention The present invention relates to a basic food analysis method of dissociative ionization (DI) of butcher products by means of linear time-of-flight mass spectrometry (L-TOF-MS) used in conjunction with a high power femtosecond (fs) pulsed laser system. In the current study, data obtained from various food tissues are analyzed and interpreted using the PCA technique. In the current study, even using only small mass (m/z 60-100 amu) region peaks in the mass spectrum pattern makes it possible to clearly identify the food sample. This reveals that the technique used in the invention is quite effective. One purpose of the invention is; It is the precise, fast and reliable determination of processed foods. Thanks to the invention, there is no sample preparation step for the determination of foods and analysis can be done directly from the food tissue. The device on which the method of the invention is applied enables the rapid transfer of food samples into the mass spectrometer, which provides high vacuum conditions (10'5 mbar) directly with a sample inlet valve, and the food sample in question is analyzed in a very short time such as microseconds. can be done. All information is obtained within a single laser pulse and the entire resulting information can be accessed. Another purpose of the invention; It is the determination of the staleness level and quality of meat and meat products. Another purpose of the invention; It is the precise, fast and reliable determination of the mixing ratios of mixed meat and meat products. With the method of the invention, meat products obtained from different animals (mutton, goat meat, veal, pork, horse meat, etc.) can be quickly analyzed to determine the content of the product in what proportion and whether there is any aging or spoilage, and its expiration date. It can be determined whether the date is suitable for the degradation process or not. Another purpose of the invention is; The aim is to provide a food analysis method that is independent of user error so that different food textures can be clearly distinguished. With the method of the invention, especially meat products can be analyzed quickly and hygienically and safe food consumption is ensured. Definitions of Drawings Explaining the Invention Figure 1: Schematic representation of the femtosecond laser mass spectrometry (FLMS) device subject to the invention. Figure 2: Mass spectra obtained from A, B and C (In this analysis, a laser intensity of 6.84 - 1014 W/cmz was used and where A: Lamb meat, B: Beef-2, C: Beef-1 expresses). Figure 3: Mass spectra obtained from A, B and D (These spectra were recorded using 1.8 W laser pulse power, at a laser wavelength of 800 nm, with a pulse duration of 90 femtoseconds, and where A: Lamb, B: Beef. 2, D: Bone Figure 4: Data processing workflow for principal component analysis (PCA) plotting Figure 5: (a) principal component analysis (PCA) and (b) t-test results using CZHn+, CSHn+ ions (here A). : Lamb meat, B: Beef-2, C: Beef-Ti.) Figure 6: (a) Principal component analysis (PCA) results using only C3Hn+ ions and (b) distribution graph of the ions (here A: Figure 7: Principal component analysis (PCA) results obtained from A, B and D spectra (where A: Lamb meat, B: Beef Meat-2, D: Refers to the bone sample.) Definitions of the Elements and Parts that Make Up the Invention In order to better explain the L-TOF_MS device connected to the femtosecond (fs) pulsed laser system used with the femtosecond laser ionization mass spectrometry (fs-LIMS) method used in this invention. The parts and parts in the figures are numbered and the equivalent of each number is given below: 1. F3 laser system 2. Beam Splitter 3. Lens Sample inlet valve Sample ablation chamber ionization circle Electrostatic plates 997499" Free Flight Tube 9. Detector. Computer based digital storage oscilloscope 1 1 . Data Analysis System Detailed Description of the Invention The invention relates to a method for distinguishing processed foods with different types of textures and determining the level of staling/spoilage, and a device where this method is applied. In the present invention, the femtosecond laser fragmentation/ionization process of food sample spectra is carried out using a femtosecond laser ionization mass spectrometer (fs-LIMS) under high vacuum conditions (--10'8 - --10'6 mbar sample pressure) and the resulting mass Processed food products are analyzed spectroscopically using spectra of linear time-of-flight mass spectrometry (L-TOF-MS). Then, the data size is reduced by principal component (PCA) analysis method and different food textures are distinguished from each other. In the invention, t-test can be used in addition to principal component analysis (PCA) results, and the results obtained from mass spectra are explained through the PCA method as a statistical process. T-test; It is done to determine the degree of discrimination when necessary by looking at the PC1 and PC2 axes and deciding whether the samples can be distinguished from each other. In the invention, a computer-based digital storage oscilloscope (10) is used for laser signal imaging and viewing and recording of spectra. By computer-based here, we mean a computer system with any operating system. The device used in the invention; It basically consists of a femtosecond (fs) laser system (1), a vacuum chamber and data acquisition systems. A femtosecond laser system (1) in the wavelength range of 200 nm-2000 nm is used as the ionization source. The mass spectrometer device used in the invention; It includes a sample ablation chamber (5), a detector for measuring ion signals with m/z ratios and recording mass spectra, a computer-based oscillator for laser signal imaging and imaging, recording and analysis of mass spectra, a beam splitter (2), a vacuum chamber, and electrostatic lenses. In the sample ablation chamber (5), tissue interaction of the food sample is achieved with the fs laser system (1). In the invention, rotary and turbo vacuum systems are used. In addition, some electronics are used in the vacuum components of the detector (9) and the mass spectrometer to control the voltages applied to the laser and electrostatic plates (7) (ion optics). It consists of electronics, components of the vacuum pump and voltage sources supplied to the electrostatic plates (7) used during laser ionization. Voltages as 5kV, 1kV, 1OO kV are applied to the electrostatic plates (7) shown in Figure 1, respectively, and voltage sources are used during this. At the same time, 1.82 kV is applied to the detector number 9 using a voltage source. The method for distinguishing different food textures from each other and determining the level of staling/spoilage in the processed foods subject to the invention; I. The processed food sample(s) are placed in the sample ablation chamber (5) with a high vacuum environment, without being subjected to any sample preparation process, in the wavelength range of 200-2000 nm, sent from the femtosecond (fs) laser system (1) using a lens with a focal length of 3-10 cm. evaporation by ablation with the first laser beam, ii. Driving the sample in vapor form into the ionization chamber (6) through the sample inlet valve (4), iii. Carrying out the ionization process of the sample in vapor form through the second laser beam in the wavelength range of 200-2000 nm, iv. Accelerating the formed ions through the free flight tube (8) through electrostatic lenses and sending them to the detector, v. Visualizing the ions reaching the detector with a computer-based digital storage oscilloscope (10) and recording them on the computer, vi. The recorded data is analyzed in a distinctive way in the data analysis system (11) with one of the principal component analysis methods. In the invention, the data is analyzed by using the principal component analysis methods Principal Component Analysis (PCA) and Factor Analysis (FA). Both statistical approaches are statistical calculation methods used to reveal the differences between samples. The staling process occurs with a change in the chemistry of foods, and on the basis of mass spectroscopy, it reveals the chemical structure within a substance. By determining the characteristic feature of this chemical structure in the mass spectrum, the rate of change in the material can be determined based on the development process over time. Using L-TOF-MS mass spectrometry, the mass spectra shown in Figure 2 are obtained. Each peak in the spectrum corresponds to one molecule. The masses of these molecules are determined by the equation m=at2+b and what the chemical structure represents in the mass spectrum is revealed. The fs laser system (1) used in the invention is an oscillator laser system that can produce 90 femtosecond laser pulses of 80-100 MHz, preferably 85 MHz, and a booster fs laser that produces 1-3 kHz femtosecond, preferably 90 femtosecond laser pulses. It is used to pump the system (1). The Fs laser system (1) has a pulse power of 3.5 W; The output power of the fs laser system (1) is controlled by a circular neutral density filter and measured using a power meter. The fs laser system (1) in question is used as an energy source to perform tissue ablation and to detect ions from the material vapor extracted through multi-photon excitation and dissociative ionization (Dl) processes. In the invention, it is a device for detecting ions and obtaining mass spectra as a function of flight time. linear time-of-flight mass spectrometry (L-TOF-MS) is used. The following equation is used to convert the mass/charge (m/z) ratio for each ion shown in Figure 2: Linear time-of-flight mass spectrometry (L-TOF-MS) in question; a sample inlet valve (4), an ion source, a 120 cm long field-free free flight tube (8) and a device fixed to the end of the free flight tube (8) that provides the opportunity to display, store and analyze the ion signal in a personal computer (PC) environment. It contains a microchannel plate (MCP) detector (9) that is connected directly to a four-channel digital storage oscilloscope. Positive ions produced through the multi-photon dissociation ionization (DI) process are removed from the ionization region through electrostatic lenses, accelerated, and directed onto the detector by an electric field applied during extraction and focusing of the electrostatic lenses. The first electrostatic plate (7) is a pusher plate and is kept at a voltage of 4-6 kV. The second and third electrostatic plates (7) are einzel lenses, respectively. The background pressure inside the vacuum chamber is stably maintained at a sample pressure of around «10'7 mbar before the application of the sample and ..106 mbar during the experiments. In addition, all parameters of the mass spectrometer are determined to provide the best mass and space resolution. In the fs laser system used in the invention (1); The beam splitter (2) allows the laser beam to be divided into two separate arms at the desired rate to be used for two different processes. One of these two beams is used to ablate the sample from the tissue and vaporize the tissue. In the second stage, the second laser beam is used to ionize the sample and then the detection stages are carried out by the second laser beam. The first laser beam focuses on the tissue in the sample ablation chamber (5) to ablate or vaporize the sample, and the second laser beam focuses on the sample driven into the ionization circle (6) in a vacuum environment. The energies of these beams are adjusted depending on the sample characteristics. In the invention, processed food samples are placed in the sample ablation chamber (5) with a high vacuum environment without being subjected to any sample preparation process, and the beam coming out of the first laser arm (Beam 1) is used with a lens with a focal length of 3-10 cm to cut and remove the materials from the tissues. (3) is used to focus on the sample. The beam in the second laser arm (Beam 2) is used to ionize the sample plasma produced through Beam 1. In the method subject to the invention, laser ionization performed with the fs laser system (1) is carried out within the laser spot volume (~70 pm), which removes the particles from the tissue only at the focusing point. In the method of the invention, very small amounts of samples extracted/evaporated directly from the tissue itself by laser pulse, without the need for any sample preparation procedure, are sufficient to display all the information about the analyzed food. Additionally, it is possible to obtain distinguishable tissues with a lower mass region by means of linear time-of-flight mass spectrometry. In the invention, different analyzed samples are distinguished from each other in the mass region of m/z ratios less than 100 amu by means of the PCA statistical method. PCA method is one of the techniques widely used to distinguish different components and also known as multivariate analysis and dimension reduction method. The t-test statistical approach is generally used to compare the parameters of two independent data samples. In the invention, different food samples can be distinguished by using the principal component analysis (PCA) technique. However, in some cases, close or intertwined structures are observed between groups on the PCl and PC2 axes, so t-test is useful in explaining the results of principal component analysis (PCA). Principal component analysis (PCA); It includes the process steps of first obtaining basic information from the data, then compressing the data size by keeping the basic information and making them more understandable, and analyzing the structures of the variables. In principal component analysis (PCA), principal components are calculated, and also; It can also be applied to identify the differences between the determined basic components and tissues. In the first step of the method subject to the invention, all tissues to be analyzed are exposed to laser irradiation to obtain laser ionization/dissociation using the fs laser system (1). At this point, for a perfect principal component analysis (PCA); laser pulse power, laser focal length. Care must be taken to select parameters such as laser angle and vacuum conditions and keep them unchanged during analysis. Therefore, in the invention, all parameters, including sample pressure, are kept constant. As a second step, each recorded mass spectrum is carefully analyzed to determine the ion yield. These raw mass data are normalized to the maximum ion peak within the mass spectra, from which an nxn or an nxm matrix is created using the ion intensities of the selected ion peaks. The principal component analysis (PCA) function is applied to the received score data to display the results. Finally; The results obtained are presented in graphical form as shown in Figures 5 and 6. Principal component analysis (PCA) results provide the necessary data to draw the relevant graphs. Two different information is obtained from these PCA graphs. The first of this information is called the score drawing, while the second is the loading drawing. While the score plots reveal some differences between the analyzed food samples; Loading plots show the data responsible for these differences between samples. In an embodiment of the invention; The mass spectra obtained for two different types of beef (B: Beef-2, C: Beef-1) with the method of the invention were investigated and it was observed that similar mass ion peak intensities were obtained for both samples. In the mass spectra, C2Hn, C3Hn ion groups show similar ion intensities, but principal component analysis (PCA) technique; It clearly reveals the differences between A: Lamb, B: Beef-2 and C: Beef-1. To obtain the A, B and C mass spectra, two-dimensional principal component analysis (PCA) was performed using only the C2Hn, C3Hn ion groups located in the low mass region of the spectra, and Figures 5 and 6 show the results obtained from the principal component analysis (PCA) statistics. The results are shown. Figure 5a shows the results from principal component analysis (PCA) for A, B and C. According to PCl axis; A, B and C can be clearly distinguished from each other. However; As shown in Figure 2, if only CzHn+ and CsHn+ ion groups representing similar ion intensities are selected, B and C cannot be distinguished from each other on the PC1 axis. In this case, t-test is applied and as seen in the hypothesis results (Figure 5b), a smaller alpha value (5105) is obtained. In this direction; It is concluded that the food samples to be analyzed cannot be distinguished from each other by applying principal component analysis (PCA) statistics within their mass spectra using C2Hn* and CßHn+ ion groups. However, as indicated in Figure 5b, in the case of alpha having a value of 1, alpha values of 10'1 to 10'4 can be defined using the t-test for significance levels. While A, B and C can be clearly distinguished from each other on the PC1 axis, on the PCZ axis Samples B and C can be distinguished from each other using PCA and t-test. However, although B and C can be distinguished from each other on the PC2 axis, both of them cannot be distinguished from A. Therefore, when we look at the PC2 axis for B and C, Since it is better to distinguish between each other, there is no need to perform a t-test on samples B and C for this axis. Each point in Figure 6 represents 10 mass spectrum data obtained from A, B and C by linear time-of-flight mass spectrometry. 12 mass ion peaks with ratios of 45, 46, and 47 shown in the loading plots in Figure 6b, which indicate the distribution of the groups due to the axes, are considered. A, B and C, as shown in Figure 6b; Due to the ion peaks at m/z 36, 37, 38 and 39, which are the main ion peaks to differentiate lamb from beef, they were distinguished from each other using the principal component analysis (PCA) results shown in Figure 6a. Figure 7 shows two dimensions (PCi and PC2) of the principal component analysis (PCA) results for lamb bone sample (D), A and B. All data were acquired and recorded using a laser pulse power of 1.8 W at 90 femtoseconds, a repetition frequency of 1 kHz, and a wavelength of 800 nm. Some of the statistical results obtained show that PCi and PCZ axes can distinguish A, B and D from each other, as can be seen in Figure 7. Each point on the graph was determined by taking into account the peak intensities of C1Hn+, C2Hn+, CsHn*, C4Hn*, C5Hn*, CeHn*, C7Hn+ and m/z 93, a total of 71 mass/charge ions. In particular, the different types of mass spectra shown in Figure 3 can be distinguished in the PC2 axes according to Figure 7.TR TR TR