SU1686361A1 - Method for estimation of functional activity of donor blood cells - Google Patents
Method for estimation of functional activity of donor blood cells Download PDFInfo
- Publication number
- SU1686361A1 SU1686361A1 SU884405783A SU4405783A SU1686361A1 SU 1686361 A1 SU1686361 A1 SU 1686361A1 SU 884405783 A SU884405783 A SU 884405783A SU 4405783 A SU4405783 A SU 4405783A SU 1686361 A1 SU1686361 A1 SU 1686361A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- functional activity
- lymphocytes
- large granular
- cells
- histamine
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 16
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 title claims abstract description 9
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 title claims description 4
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 16
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N serotonin Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CCN)=CNC2=C1 QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- UCTWMZQNUQWSLP-UHFFFAOYSA-N adrenaline Chemical compound CNCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 UCTWMZQNUQWSLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 7
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 claims description 6
- 229940076279 serotonin Drugs 0.000 claims description 6
- 230000003915 cell function Effects 0.000 claims description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 abstract description 6
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 abstract description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 abstract description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 230000000093 cytochemical effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 230000000035 biogenic effect Effects 0.000 description 3
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WFZKRNIMSVDNBU-UHFFFAOYSA-N Creatinine sulfate mixture with serotonin Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O.C[NH+]1CC(=O)N=C1N.C1=C(O)C=C2C(CC[NH3+])=CNC2=C1 WFZKRNIMSVDNBU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- PPZMYIBUHIPZOS-UHFFFAOYSA-N histamine dihydrochloride Chemical compound Cl.Cl.NCCC1=CN=CN1 PPZMYIBUHIPZOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000645 histamine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- ATADHKWKHYVBTJ-UHFFFAOYSA-N hydron;4-[1-hydroxy-2-(methylamino)ethyl]benzene-1,2-diol;chloride Chemical compound Cl.CNCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 ATADHKWKHYVBTJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к медицине, в частности к иммунологии и переливанию крови. и может быть использовано дл оценки функциональной активности больших гранул рных лимфоцитов (5 гл). Целью изобретени вл етс повышение точности способа Способ заключаетс в определении суммарного коэффициента аминосодержани (СКА) больших гранул рных лимфоцитов цитохимическими методами и.если величина СКА находитс в интервале от 2,1 до 3 6, БГЛ считают функционально активными, а кровь донора пригодной дл трансфузииThis invention relates to medicine, in particular to immunology and blood transfusion. and can be used to assess the functional activity of large granular lymphocytes (5 hl). The aim of the invention is to improve the accuracy of the method. The method consists in determining the total amine content ratio (SKA) of large granular lymphocytes by cytochemical methods and if the SKA value is in the range from 2.1 to 3-6, BHL is considered functionally active, and donor blood is suitable for transfusion
Description
Изобретение относитс к медицине, в час- к клинической иммунологии и трансфу- зионной терапии, и может быть использовано при переливании крови больным.The invention relates to medicine, in part to clinical immunology and transfusion therapy, and can be used in the transfusion of patients.
Цель изобретени упрощение и повышение точности способа за счет расширени спектра оценки функций клеток.The purpose of the invention is to simplify and improve the accuracy of the method by expanding the spectrum of evaluation of cell functions.
Способ осуществл етс следующим образом .The method is carried out as follows.
Из 10-15 мл гепаринизированной венозной крови человека получают суспензию лимфоцитов методом центрифугировани в градиенте плотности фиколл-гипака. Концентрацию лимфоцитов довод т до 2 -106 клеток в 1 мл среды 199 и по 0,2 мл разливают в четыре пробирки, после чего провод т инкубирование при 37° С в течение 40 мин. При этом в первой (контрольной) пробирке содержатс интактные лимфоциты, во вторую пробирку перед инкубированием добавл ют 0,2 мл М раствора гидрохлорида адреналина , в третью пробирку - 0,2 мл 10 М раствора креатининсульфата серотонина,в четвертую - 0,2 мл 10 М раствора гидрохлорида гистамина. После инкубации все четыре пробы подвергают центрифугированию, из осадков готов т мазки, последние фиксируют реактивом Севки (12 мл 40%-ного раствора формалина, 50 мл 5%-ного раствора двухро- мовокислого кали , 20 мл 1 М раствора уксуснокислого натри , до 100 мл дистиллированной воды) в течение 16-18 ч. Фиксированные мазки 1,5 ч отмывают в дистиллированной воде, .затем 30 мин окрашивают по методу Романовского . В готовых мазках определ ют раздельным подсчетом процентное содержание (по отношению к общему количеству лимфоид- ных клеток) БГЛ, имеющих гранулы фиолетового цвета - адреналинсодержащие. оранжевого цвета - серотонинсодержащие, красного цвета - гистаминсодержащие. По результатам определени рассчитывают СКАFrom 10-15 ml of human heparinized venous blood, a suspension of lymphocytes is obtained by centrifuging in a ficoll-hypaqua density gradient. The concentration of lymphocytes was adjusted to 2 -106 cells in 1 ml of medium 199 and 0.2 ml was poured into four tubes, followed by incubation at 37 ° C for 40 minutes. In the first (control) tube, intact lymphocytes are contained, 0.2 ml of M solution of adrenaline hydrochloride is added to the second test tube before incubation, 0.2 ml of 10 M serotonin creatinine sulfate solution is added to the third test tube, 0.2 ml in the fourth test tube M solution of histamine hydrochloride. After incubation, all four samples are centrifuged, smears are prepared from the sediments, the latter are fixed with Sevka reagent (12 ml of 40% formalin solution, 50 ml of 5% potassium bicaric acid, 20 ml of 1 M sodium acetate solution, up to 100 ml of distilled water) for 16-18 hours. Fixed smears are washed for 1.5 hours in distilled water, then stained for 30 minutes using the Romanovsky method. In the finished smears, the percentage (relative to the total number of lymphoid cells) BGL having purple-colored granules - adrenaline-containing is determined by separate calculation. orange - serotonin-containing, red - histamine-containing. According to the results of the determination, SKA is calculated.
СКА Кадр + Keep Кгист.SKA Frame + Keep Digger.
ьs
ЬB
оabout
CTJCTJ
JO (А) ОJO (A) O
где К - коэффициент, характеризующий количественное соотношение БГЛ дл каждого способа инкубировани в присутствии тестируемых биогенных аминов. В свою очередьwhere K is a coefficient characterizing the proportion of BGL for each method of incubation in the presence of the tested biogenic amines. In turn
с 4-с -г +а -г with 4-s + a-g
К TO
аbut
а с +сг +а г где а - процент БГЛ, несущих гранулы адреналина; с - процент БГЛ, несущих гранулы серотонина; г - процент БГЛ, несущих гранулы гистамина. В числителе - результаты определени дл лимфоцитов, инкубированных с одним из биогенных аминов; в знаменателе - показатели дл интактных лимфоцитов. Значени СКА в интервале от 2,1 до 3,6 говор т о пребывании натуральных киллеров в состо нии функциональной активности. СКА 2,0 расцениваетс как показатель насыщени гранул рного аппарата натуральных киллеров у данного субьекта биогенными аминами, а СКА 3,7 свидетельствует об истощении аминосодержащих гранул.a c + cg + a g where a is the percentage of BGL carrying adrenaline granules; c - the percentage of BGL carrying serotonin granules; g - the percentage of BGL carrying histamine granules. In the numerator, the determination results for lymphocytes incubated with one of the biogenic amines; in the denominator, indicators for intact lymphocytes. The values of SKA in the range from 2.1 to 3.6 speak about the presence of natural killers in the state of functional activity. SKA 2.0 is regarded as an indicator of the saturation of the granular apparatus of natural killers in a given subject with biogenic amines, and SKA 3.7 indicates a depletion of amine-containing granules.
Пример. Проведено исследование функциональной активности больших гранул рных лимфоцитов в крови 43 доноров в процессе консервации, у 60% проб исходна функциональна активность, выраженна в значени х СКА, находилась в интервале от 2,1 до 3,6. Исследовани повтор ли каждые 3 дн. Было показано, что в течение 6 дн. от момента забора крови СКА наход тс в этом же интервале, а после 6 дн. консервации принимал значени выше 3,6 или ниже 2,1. В эти же сроки начинал статистически достоверно снижатьс и процент жизнеспособных клеток с 87±2,3 до 75±1,9%, определ емый в пробе с трипановым синим.Example. The study of the functional activity of large granular lymphocytes in the blood of 43 donors in the preservation process, in 60% of the samples, the initial functional activity, expressed in terms of SKA, was in the range from 2.1 to 3.6. The study was repeated every 3 days. It has been shown that within 6 days. from the time of blood collection, the SKA is in the same interval, and after 6 days. preservation values of greater than 3.6 or lower than 2.1. At the same time, the percentage of viable cells began to statistically reliably decrease from 87 ± 2.3 to 75 ± 1.9%, which is determined in a sample with trypan blue.
В 24% проб исходна функциональна активность выражалась в величинах СКА больше 3,6, а в 16% - меньше 2,1. В этих пробах исходный процент жизнеспособныхIn 24% of samples, the initial functional activity was expressed in terms of SKA values greater than 3.6, and in 16% - less than 2.1. In these samples, the initial percentage of viable
клеток статистически достоверно был ниже (79±2,1%) и начинал снижатьс после 3 дн. консервации.cells were statistically significantly lower (79 ± 2.1%) and began to decrease after 3 days. conservation.
Таким образом, суммарный коэффициент аминосодержани , отражающий функциональную активность больших гранул рных лимфоцитов, может служить критерием при контроле клеток крови доноров в процессе консервации и при значени х от 2,1 до 3,6 показывает пригодность крови к трансфузии .Thus, the total amine content ratio, reflecting the functional activity of large granular lymphocytes, can serve as a criterion in monitoring donor blood cells during the preservation process and, at values from 2.1 to 3.6, shows the suitability of the blood for transfusion.
Фомула изобретени Способ определени функциональной активности клеток крови доноров путем исследовани больших гранул рных лимфоцитов , отличающийс тем, что, с целью повышени точности за счет расширени изучени спектра функций клеток и упрощени способа, лимфоциты инкубируют параллельно в средах, содержащие адреналин, серотонин, гистамин и не содержащие их, в течение 40 мин при 37РС, далее пробы центрифугируют , из каждого осадка готов т мазок , обрабатывают по методу Севки,The invention method of determining the functional activity of blood cells of donors by examining large granular lymphocytes, characterized in that, in order to increase accuracy by expanding the study of the spectrum of cell functions and simplifying the method, lymphocytes are incubated in parallel in media containing adrenaline, serotonin, histamine and containing them, for 40 min at 37PC, then the samples are centrifuged, a smear is prepared from each precipitate, processed by the Sevka method,
определ ют в каждом количество больших гранул рных лимфоцитов, содержащих адреналин , серотонин и гистамин, вычисл ют процент клеток, содержащих моноамины во всех исследованных мазках, рассчитываютdetermine in each the number of large granular lymphocytes containing adrenaline, serotonin and histamine, calculate the percentage of cells containing monoamines in all the smears examined, calculate
суммарный коэффициент аминосодержани и при его значении от 2,1 до 3,6 определ ют клетки функционально активными.the total coefficient of amino content and, when its value is from 2.1 to 3.6, the cells are determined functionally active.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU884405783A SU1686361A1 (en) | 1988-04-05 | 1988-04-05 | Method for estimation of functional activity of donor blood cells |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU884405783A SU1686361A1 (en) | 1988-04-05 | 1988-04-05 | Method for estimation of functional activity of donor blood cells |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU1686361A1 true SU1686361A1 (en) | 1991-10-23 |
Family
ID=21366897
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU884405783A SU1686361A1 (en) | 1988-04-05 | 1988-04-05 | Method for estimation of functional activity of donor blood cells |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU1686361A1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2522270C2 (en) * | 2010-03-05 | 2014-07-10 | Б. Браун Мельзунген Аг | System and method of control of at least one blood parameter |
-
1988
- 1988-04-05 SU SU884405783A patent/SU1686361A1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Н. Kawai, A Kamljata, M. Katou, A. Jabuhava. J. Mlyagava, T Akabauc. Juductlon of lymphoklneactivated killer and natural killer dll activities from cryopreserved lymphocytes. Transfusion 1988. v 28. № 6. p. 531-535. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2522270C2 (en) * | 2010-03-05 | 2014-07-10 | Б. Браун Мельзунген Аг | System and method of control of at least one blood parameter |
| RU2526141C2 (en) * | 2010-03-05 | 2014-08-20 | Б. Браун Мельзунген Аг | Monitoring system and method for time period monitoring and processes of blood characteristics monitoring |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Grant et al. | The proteins of normal urine | |
| Pierce et al. | α-1 Antitrypsin phenotypes determined by isoelectric focusing of the cysteine-antitrypsin mixed disulfide in serum | |
| US3859049A (en) | Blood reference standard and process for blood gas test | |
| US3607695A (en) | Hemoglobinopathy controls | |
| Rendel et al. | Variants of ovine alkaline serum phosphatases and their association with the RO blood groups | |
| CN111693711B (en) | A method for the simultaneous detection of 103 antibiotic residues in fresh eggs by ultra-high pressure liquid chromatography-tandem mass spectrometry | |
| Tucker et al. | The M‐L blood group system and its influence on red cell potassium levels in sheep | |
| Foxwell et al. | Identification of cyclophilin as the erythrocyte ciclosporin-binding protein | |
| EP0049478B1 (en) | Multi-purpose blood diluent | |
| CN110987553B (en) | Erythrocyte treatment reagent and application thereof | |
| SU1686361A1 (en) | Method for estimation of functional activity of donor blood cells | |
| Frendo et al. | Taurine in human blood platelets | |
| CN107153121B (en) | Glycosylated hemoglobin, hemoglobin detection kit and its detection method | |
| US4414336A (en) | Method for preparing sample for use in endotoxin test | |
| Haining et al. | Photohemolysis. The comparative behavior of erythrocytes from patients with different types of porphyria | |
| McNelly et al. | Glomerular basement membrane width and proteinuria in the aging hamster kidney | |
| Nakache et al. | Relationship between deformability of red blood cells and oxygen transfer: a modelized investigation | |
| Rutherford et al. | An evaluation of the acidified glycerol lysis test | |
| Tasaki et al. | Permeability of the squid axon membrane to several organic molecules | |
| RU2012331C1 (en) | Solution for preserving of enzyme treated erythrocyte used in isoserological reactions | |
| Orr-Ewing et al. | Streptothrix corallinus in the estimation of vitamin B1 | |
| Holland et al. | Effects of diazonium salts on erythrocyte fragility and cholinesterase activity | |
| EP0049161A2 (en) | Method for preparing sample for use in endotoxin test and kit for preparing said sample | |
| Hamasaki et al. | Inhibition of chloride binding to the anion transport site by diethylpyrocarbonate modification of band 3 | |
| French et al. | Repair in vivo of the Surface Structure of the Guinea Pig Erythrocyte |