SU1022988A1 - Стабилизированна урокиназа,обладающа тромболитической активностью,и способ ее получени - Google Patents
Стабилизированна урокиназа,обладающа тромболитической активностью,и способ ее получени Download PDFInfo
- Publication number
- SU1022988A1 SU1022988A1 SU792821712A SU2821712A SU1022988A1 SU 1022988 A1 SU1022988 A1 SU 1022988A1 SU 792821712 A SU792821712 A SU 792821712A SU 2821712 A SU2821712 A SU 2821712A SU 1022988 A1 SU1022988 A1 SU 1022988A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- urokinase
- acrylic acid
- activity
- stabilized
- copolymer
- Prior art date
Links
- 102000003990 Urokinase-type plasminogen activator Human genes 0.000 title claims abstract description 42
- 108090000435 Urokinase-type plasminogen activator Proteins 0.000 title claims abstract description 42
- 229960005356 urokinase Drugs 0.000 title claims abstract description 42
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 title description 4
- SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 2-(2-methoxy-5-methylphenyl)ethanamine Chemical compound COC1=CC=C(C)C=C1CCN SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 2-Propenoic acid Natural products OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims abstract description 17
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 230000002537 thrombolytic effect Effects 0.000 claims description 14
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 claims 1
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 abstract description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- 230000003024 amidolytic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 18
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 18
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 18
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 11
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 9
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 238000009739 binding Methods 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000013566 Plasminogen Human genes 0.000 description 2
- 108010051456 Plasminogen Proteins 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- ROOXNKNUYICQNP-UHFFFAOYSA-N ammonium persulfate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[O-]S(=O)(=O)OOS([O-])(=O)=O ROOXNKNUYICQNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 238000007334 copolymerization reaction Methods 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 2
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- RNIHAPSVIGPAFF-UHFFFAOYSA-N Acrylamide-acrylic acid resin Chemical compound NC(=O)C=C.OC(=O)C=C RNIHAPSVIGPAFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002126 Acrylic acid copolymer Polymers 0.000 description 1
- 206010051055 Deep vein thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 1
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 1
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000605403 Homo sapiens Plasminogen Proteins 0.000 description 1
- 108010093096 Immobilized Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 208000010378 Pulmonary Embolism Diseases 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 206010047249 Venous thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 229920006397 acrylic thermoplastic Polymers 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 238000007259 addition reaction Methods 0.000 description 1
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 description 1
- XIWMTQIUUWJNRP-UHFFFAOYSA-N amidol Chemical compound NC1=CC=C(O)C(N)=C1 XIWMTQIUUWJNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 229910001870 ammonium persulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 239000003405 delayed action preparation Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- FIGKGJVUYAFLBI-VIFPVBQESA-N methyl (2s)-2-[(2-acetamidoacetyl)amino]-6-aminohexanoate Chemical compound NCCCC[C@@H](C(=O)OC)NC(=O)CNC(C)=O FIGKGJVUYAFLBI-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 229920003229 poly(methyl methacrylate) Polymers 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- ISXSCDLOGDJUNJ-UHFFFAOYSA-N tert-butyl prop-2-enoate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)C=C ISXSCDLOGDJUNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 208000019553 vascular disease Diseases 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
- C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
- C12N9/6421—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from mammals
- C12N9/6424—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12N9/6456—Plasminogen activators
- C12N9/6462—Plasminogen activators u-Plasminogen activator (3.4.21.73), i.e. urokinase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
- C12N11/08—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer
- C12N11/082—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds
- C12N11/087—Acrylic polymers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
- C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12Y304/21073—Serine endopeptidases (3.4.21) u-Plasminogen activator (3.4.21.73), i.e. urokinase
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Abstract
1. Стабилизированна урокиназа . рбыей формулы тЛ-то1-То где Т - остаток сополимера акриламида и акриловой кислоты с молекул рным весом 10200 тыс. ед. и содержанием акриловой кислоты 1-20% NH-T урокиназа, обладающа тромболитйческой активностью . 2. Способ получени стабили.зи« рованной урокиназы по п. 1, о т л ич .аюцийс тем, что урокиназу при, температуре 0-25 С и рН В,0-8,3 подвергают взаимодействию с сополимером акриламида и акрило-вой кислой с молекул рным весом 10-200 тыс. ед. и содержанием акриловой кислоты 1-20%, предварите тьно обработанным карбодиимидом.
Description
to
IVD
СО
сх оо
Изобретение относитс к химикофармацевтической промышленности, а именно к синтезу биологически активных химических соединений, про вл ющих тромболитическую активность , в частности стабилизированной урокиназе .и способу ее получени . Описываемое соединение представл ет собой продукт св зывани урокиназы с синтетическим сополийером акриламида и акриловой кислоты .
Урокиназу используют в медицине как активатор плазминогена, поскольку она обладает хорошо выраженными тромболитическими свойствами . Урокиназу примен ют при лечении таких заболеваний как легочна тромбоэмболи , тромбозы глубоких вен, заболевани сосудов головного мозга, инфаркт миокарда. .;сццнако терапи нативной урокиназой осложн етс в св зи с ее инактивацией под действием ингибиторов кровки и эндогенных протеаз, а также из-за невозможности создани высокого локального содержани препарата в пораженном органе. При лечении урокиназой необходимо неоднократно вводить высокие дозы препарата . Преодолеть указанные выше трудности позвол ет св зывание ферментов с высокомолекул рными носител ми .
Известно производное урокиназн, которое получают следующим путем.; Урокиназу вшивают в полиакриламидный гель после обработки его (нитритом натри в кислой среде. Диазотированный таким способом носитель взаимодействует азосочетаНием с ферментом.
При этом образуетс водонерастворимое производное урокиназы, которое не может быть использовано в медицине tl3.
Известен способ получени ферментного препарата на основе пуллуланазы (КФ 3.2.1.40) путем ковалентного св зывани фермента с био-гелем ICM-100 (сополимер акрилами да и акриловой кислоты) с помощью карбодиимида. Дл получени иммобилизованного ферментного препарата частицы носител (размер 100200 меш) обрабатывают 30 мин Е кислой среде ( 4) раствором фермента дл .протекани адсорбции фермента на носитель, после чего в реакционную смесь добавл етс карбодиимид . Полученный продукт фильтруют и промывают дистиллированной водой и буферными растворами 2.
Одйако данный способ не дает возможности получить стабилизированную Урокиназу, которую можно было бы использовать дл медицинских целей, поскольку дл лечебных ферментных
препаратов наиболее благопри тной формой практического использовани вл етс растворима .Таким образом; использование в качестве носител водорастворимого сополимера акриламида и акриловой кислоты (мол.вес. 10-200 тыс. ед.) с содержанием последней 1-20%, а также Изменение условий процесса -привод т к получению нового соединени , обладаю.пего ценными свойствами.
Цель изобретени - получение нового препарата - стабилизированной урокиназы, обладаквдей пролонгированной тромболитической активностью,
повьаиенной термостабильностью, т.е. расширение ассортимента и№лобилизованных и стабилизированных ферментов медицинского назначени .
Поставленна .цель достигаетс
свойствами стабилизированной урокимазы обшей формулы
б
т-с- тда-тр
где Т - остаток сополимера акриламида и акриловой кислоты с молекул рным весом 10200 тыс. ед. и содержан1|ем акриловой кислоты 1-20%; урокиназа, обладающа тром болитической активностью. Способ получени стабилизированной урокиназы за-ключаетс в том, что Урокиназу при температуре и рН 8,0-8,3 подвергают взаимодействию с сополимером акрилалвида и акриловой кислоты с молекул рным ве- ; сом 10-200 тыс.ед. и содержанием акриловой кислоты 1-20%, предварительно обработанным карбодиимидом.
Присоединение урокиназы к синтетическому высокомолекул рному носителю проходит через стадию активации карбоксильных групп сополимера карбодиилдадом О
0« ,HHRi
-Ct t R.U«C«im,- T-C-0-Cl. . .
гдеT - указанный вьвие сополимер, a затем активированные карбоксильные группы носител реагируют с аминогруппами урокиназы
«
Т-С-О-С: -Ь H -N-Yp-
,
о
fl н н
- T-C-14H-Yp-f к-C-V
RI и R, 1 О
Способ осуществл етс следующим 6«; образом. Высокомолекул рный носитель - с полимер акриламида и акриловой кис лоты при слабощелочных значени х рН раствор ют в растворе фосфатного буфера, затем на холоду - 5-10 внос т в раствор определенное количество карбодиимида и через 20 м добавл ют раствор урокиназы. Реакц св зывани ведут 16 ч, после чего полученное производное урокиназы отдел ют от других веществ с .помонг гель-хроматографического метода. Полученный продукт представл ет собой урокиназу, хнг- чески св занн с синтетическим полимерным носителем . Продукт полностью сохран ет биологическую активность по высоко молекул рным субстрата1М (например, плазминоген), не тер ет каталитической активности при хранении в холодильнике () в растворимом виде в течение трех мес цев (в отличие от растворов кативного фермента ) , обладает повышенной терио стабильностью и пролонгированной тромболитической активностью. Синтез водорастворимого полимер ного носител осуществл ют известным способом - радикальной сополимеризапией мономеров в присутствии персульфата аммони в водном растворе з). Сополимериэацию ведут при 4 ч,,Обща концентраци Iмономеров в реакционной смеси составл ет 5 вес. %. Сополимер осг1ждают метанолом и .высушивают ацетоном Содержание акриловой кислоты в сополимере составл ет 3 вес.%, что вл етс оптимальным дл процесса получени фepмeнтвыk производных. Следует отметить, что увеличение содержани акриловой кислоты в сополи юре выше 20% не ведет к увеличению количества св занного белка , а низкое содержание акриловой кислоты в сополимере делает его био инертным. Пример 1. В4 мг 0,001 М фосфатного буфера (рН 8,3) раствор ют 20 мг.сополимера акриламида и акриловой кислоты с молекул рным весом 100000 ед. и содержанием акриловйй кислоты ,3%. Затем на холоду (4С) внос т в этот раствор 2,5 мг Д-этют-З-СЗ-диметиламинопропил )-карбодиимида и через 20 мин после этого приливают 1 мг раствора нативнсхй урокиназы в дистиллированной воде (250000 МЕ/мл). Реакцию св зывани ведут 16 ч, а затем отдел ют полученный препарат урокиназы , св занной с высококюлекул рным носителем, с помсмсью гель-хроматографии на колонне с сефадексом G-150. По кинетическим параметрам гидролиза низко1 4олекул рных субстратов, по- термостабильности по лученный препарат не уступает натиБНому ферменту. С носителем св зываетс до 80% йсходно го количества урокиназы, сохран ема эстеразна и амидоли ичёска активность 78-81%. Препарат не тер ет, каталитической активности по высокомолекул рньв .1 субстратам (плаэминоген), в системе in vitro с той же скоростью лизирует модельный тромб, как и препарат нативной урокиназы. В физиологических услови х при 37 С производное урокиназы с сополимером практически не тер ет своей каталитической активности 2 сут. Нативный фермент в этих услови х тер ет более 50% своей каталитической активности . Пример 2. Процесс проводитс аналогично примеру 1, за исключением того, что реакци сврзывани урокиназы с полимершгм носителем молекул рного .веса 10000 ед. и содержанием акриловой кислоты 1% осуществл етс в 0,1 М растворе фосфатного буфера при 25 С. В этоМ случае количество св занного с носителем фермента составл ет 53%, а сохран вша препаратсж эстеразна и смидолитическа активность 50-51%. Пример 3. Процесс проводитс аналогично примеру 1, за исклю чением того, что реакцию присоединени урокииазы-к сополимеру молекул рного веса 200000 ед. и содержанием акриловой кислоты 20% ведут в 1,0 М растворе фосфатного буфера при . С носителем св зываетс в этом случае 20% урокиназы от исходного общего количества фермента. Сохран ема препаратом эстеразна и амидолитическа активность 17%. Таким образом, производные урокиназы , полученные в примерах 1-3,содержат различное количество фермента , св занного с носителем, что объ сн етс важной ролью величины ионной силы раствора, завис щей от концентрации фосфатного буфера, при. проведении реакции св зывани . Все производные обладают тромболитичёской активностью, сравниваемой с таковой дл нативной урокиназы. КроМе того, как видно из примера, 1, полученные соединени обладают повышенной термостабильностью й-длительный срок сохран к т свою каталитическую активность. Тромболитические свойства стабилизированной урокиназы оцениваютс по скорости лизиса тромба в среде буфера рН 7,4 в присутствии человеческого плазминогена (1 мг/мл). npenapai нативной и св занной с сополимером урокиназы вз ты дл тромболизиса в соотношении, обеспечивающем их одинаковую эотеразную актив .ность по низкомолекул рному субстрату (метиловый эфир ацетилглициллизина ) .
Результаты проведенных экспериментов представлены в таблице, где tgcLпредставл ет-собой отношение прироста оптической плотности раствора (в результате деструкции при тромболиэисе нерастворимого фибринового .сгустка и переходе его фрагментов в раствор) к величине Промежутка времени, за который оно происходит и вл етс параметром, характеризующим скорость тромболизиса .
15
20
100
0,49
о
25
125
0,61 110 0,54 104 0,51
30
Таким образом, из результатов , приведенных в таблице, видно, что препараты ypoкинaзыJ, св занной с сополимером, даже превосход т по эффективности тромболитического дай стви нативный фермент. Повьхиенна термостабильность полученных производных урокиназы озвол ет ферменту сохран ть свою каталитическую активность более длительный период времени, чем нативному препарату, а это ведет, в свою очередь, к пролонгации тромболитического действи полученных производных урокиназы.
Синтез таких производных позвол ет получать, биологически активные препараты пролонгированного действи , пригодные дл терапевтического использовани . Варьирование количества фермента, св занного с носителем , в зависимости от значени величины Ионной силы раствора, в котором протекает реакци св зывани , удобно дл индивидуального дозировани препарата. Применение таких производных урокиназы в медицине открывает новые возможности дл эффективной борьбы с тромбозами , ведет к снижению расхода дорогосто щего ферментного препарата, облегчает его применение.
Claims (2)
- СТАБИЛИЗИРОВАННАЯ УРОКИНАЗА, ОБЛАДАЮЩАЯ ТРОМБОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ, И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ. (57) 1. Стабилизированная урокиназа общей формулыT-J-Wt-Tp где Т - остаток сополимера а~криламида и акриловой кислоты с молекулярным весом 10200 тыс. ед. и содержанием акриловой кислоты 1-20% NH-Tjj урокиназа, обладающая тромболитической активнос тью.
- 2. Способ получения стабилизированной урокиназы по π. 1, о т л ич.ающийся тем, что урокиназу при. температуре 0-25°С и pH ΐ,0-8,3 подвергают взаимодействию с сополимером акриламида и акрилоВой кислота с молекулярным весом 10-200 тыс. ед. и содержанием акриловой кислоты 1—20%, предварительно обработанным карбодиимидом.
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU792821712A SU1022988A1 (ru) | 1979-09-28 | 1979-09-28 | Стабилизированна урокиназа,обладающа тромболитической активностью,и способ ее получени |
| US06/183,093 US4349630A (en) | 1979-09-28 | 1980-08-27 | Heat-resistant water soluble urokinase derivative |
| DE3033030A DE3033030C2 (de) | 1979-09-28 | 1980-09-02 | Thermostabiles Derivat der Urokinase und Verfahren zu dessen Herstellung |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU792821712A SU1022988A1 (ru) | 1979-09-28 | 1979-09-28 | Стабилизированна урокиназа,обладающа тромболитической активностью,и способ ее получени |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU1022988A1 true SU1022988A1 (ru) | 1983-06-15 |
Family
ID=20851464
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU792821712A SU1022988A1 (ru) | 1979-09-28 | 1979-09-28 | Стабилизированна урокиназа,обладающа тромболитической активностью,и способ ее получени |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4349630A (ru) |
| DE (1) | DE3033030C2 (ru) |
| SU (1) | SU1022988A1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4564596A (en) * | 1983-05-10 | 1986-01-14 | Maximenko Alexandr V | Urokinase derivatives covalently bound to fibrinogen |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| HU184468B (en) * | 1981-07-17 | 1984-08-28 | Reanal Finomvegyszergyar | Process for preparing immobilized cholinesterase enzyme preparation |
| JPS5896026A (ja) * | 1981-10-30 | 1983-06-07 | Nippon Chemiphar Co Ltd | 新規ウロキナ−ゼ誘導体およびその製造法ならびにそれを含有する血栓溶解剤 |
| US4640835A (en) * | 1981-10-30 | 1987-02-03 | Nippon Chemiphar Company, Ltd. | Plasminogen activator derivatives |
| HU187153B (en) * | 1982-08-24 | 1985-11-28 | Reanal Finomvegyszergyar | Process for producing glucose-aminad enzyme-preparates |
| EP0109653A3 (en) * | 1982-11-17 | 1986-01-29 | Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. | Process for preparing urokinase complex |
| JPS60176586A (ja) * | 1984-02-21 | 1985-09-10 | Sanwa Kagaku Kenkyusho:Kk | 新規な修飾ウロキナ−ゼ、その製法並びにこれを含有する血栓溶解剤 |
| JPS61265090A (ja) * | 1985-05-17 | 1986-11-22 | Tanabe Seiyaku Co Ltd | 可逆溶解性固定化酵素 |
| US4892826A (en) * | 1988-10-11 | 1990-01-09 | Abbott Laboratories | Process for the preparation of urokinase derivatives |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| LU56634A1 (ru) * | 1968-08-02 | 1970-03-23 | ||
| US3625827A (en) * | 1968-09-27 | 1971-12-07 | Monsanto Co | Water-soluble polymer-enzyme products |
| US4106992A (en) * | 1971-09-24 | 1978-08-15 | Choay S.A. | Purification of urokinase |
| US3876501A (en) * | 1973-05-17 | 1975-04-08 | Baxter Laboratories Inc | Binding enzymes to activated water-soluble carbohydrates |
| GB1492937A (en) * | 1973-12-28 | 1977-11-23 | Beecham Group Ltd | Enzyme complexes and their use |
-
1979
- 1979-09-28 SU SU792821712A patent/SU1022988A1/ru active
-
1980
- 1980-08-27 US US06/183,093 patent/US4349630A/en not_active Expired - Lifetime
- 1980-09-02 DE DE3033030A patent/DE3033030C2/de not_active Expired
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 1. Capet-Antonini F.C., Tamenasse J., Kinetic Studies an SoltfcIc and Inso.Itd)Ie Urokinases, Can. J. Biochem,. 53, * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4564596A (en) * | 1983-05-10 | 1986-01-14 | Maximenko Alexandr V | Urokinase derivatives covalently bound to fibrinogen |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US4349630A (en) | 1982-09-14 |
| DE3033030C2 (de) | 1983-11-17 |
| DE3033030A1 (de) | 1981-04-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4055635A (en) | Fibrinolytic compositions | |
| US4446316A (en) | Dextran derivative of fibrinolysin | |
| US4902623A (en) | Plasminogen activator | |
| JPS5896026A (ja) | 新規ウロキナ−ゼ誘導体およびその製造法ならびにそれを含有する血栓溶解剤 | |
| DE1908290A1 (de) | Zur Fixierung von Proteinen verwendbares Mischpolymerisat | |
| SU1022988A1 (ru) | Стабилизированна урокиназа,обладающа тромболитической активностью,и способ ее получени | |
| JP2690944B2 (ja) | 組織プラスミノーゲンアクチベーター活性を有するタンパク質の高濃度溶液 | |
| RU2381238C2 (ru) | Способ получения глюкозочувствительных полимерных гидрогелей | |
| Maksimenko et al. | Water-soluble urokinase derivatives with increased affinity to the fibrin clot | |
| Foster | Preparation and properties of a soluble trypsin-dextran conjugate | |
| EP0624642B1 (en) | Novel thrombolytic agent, process for preparing same and its use for the preparation of a thrombi dissolving medicament | |
| US4564596A (en) | Urokinase derivatives covalently bound to fibrinogen | |
| US5376631A (en) | Fibrin(ogen) derivatives, process for their preparation and their use | |
| US4144131A (en) | Immobilization of enzymes on human tissue or erythrocytes | |
| JPS59118717A (ja) | プラスミノーゲン活性化剤 | |
| Torchilin et al. | [49] Immobilized enzymes for thrombolytic therapy | |
| Kim et al. | Immobilization of urokinase on agarose matrices | |
| O'Driscoll et al. | Gel entrapped L-asparaginase: kinetic behavior and antitumor activity. | |
| FR2504921A1 (fr) | Medicament nouveau constitue par un complexe aprotinine-plasmine et procede de preparation de ce nouveau complexe | |
| Torchilin et al. | Enzyme immobilization on heparin | |
| SU730694A1 (ru) | Модифицированный террилитином декстран, обладающий фибринолитической активностью | |
| SU1037683A1 (ru) | Способ получени модифицированной урокиназы | |
| Pişkin | Therapeutic potential of immobilized enzymes | |
| JPS60197626A (ja) | 血圧降下剤 | |
| DE1935711C3 (de) | Wasserunlösliches Protein. Ausscheidung aus: 1908290 |